DK161253B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af syn-isomere alkyloximderivater af 7-aminothiazolylacetamidocephalosporansyre - Google Patents

Description

DK 161253 B

- i -

Opfindelsen angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte syn-isomere alkyloximderivater af 7-ami-nothiazolylacetamidocephalosporansyre med den i krav l's indledning angivne almene formel I, og fremgangsmåden iføl-5 ge opfindelsen er karakteriseret ved det i krav l's kendetegnende del anførte.

Som acylgruppe, som kan være repræsenteret ved R', skal nævnes acetyl, propionyl, n-butyryl og isobutyryl. Blandt 10 alkyl- eller cycloalkylgrupper repræsenteret ved R skal nævnes methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, tert.-butyl, pentyl, cyclopropyl, cyclobutyl eller cyclopentyl .

o 15 Blandt værdierne af R skal nævnes methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, sec.-butyl, tert.-butyl, vinyl, propenyl, butenyl, ethynyl eller propargyl.

Blandt værdierne af A skal især nævnes et ækvivalent natri-20 urn, kalim, lithium, calcium eller magnesium. Blandt de organiske baser, som kan repræsenteres ved A, skal nævnes trimethylamin, triethylamin, methylamin, propylamin, N,N--dimethylethanolamin eller tris-(hydroxymethyl)-aminome-than, arginin eller lysin.

25

Opfindelsen angår specielt en fremgangsmåde til fremstilling af: - produkterne med formlen I, hvor R betegner gruppen -ch2-s-r' 30 hvor R' betegner enten en acylgruppe med 2-4 carbonato- mer eller 2-methyl-l,3,4-thiadiazolyl eller 1-methylte-trazolyl, produkterne med formlen I, hvor R betegner en alkylgrup-pe med 1-5 carbonatomer eller en cycloalkylgruppe med 35 3-5 carbonatomer, 2 produkterne med formlen I, hvor R betegner en methyl- - 2 -

DK 161253 B

gruppe, R betegner gruppen ch2-s-r' hvor R' betegner acetyl, 2-methyl-l,3,4-thiadiazolyl eller 1-methyltetrazolyl, og A betegner et hydrogenatom, 2 - produkterne med formlen I, hvor R betegner en methyl-5 gruppe, R betegner gruppen ch2-s-r' hvor R' betegner acetyl, 2-methyl-l,3,4-thiadiazolyl eller 1-methyltetrazolyl, og A betegner et hydrogenatom eller et ækvivalent alkalimetal, jordalkalimetal eller 10 magnesium eller af en amineret organisk base, 2 - produkterne med formlen I, hvor R betegner en methyl-gruppe, R betegner methyl eller isopropyl, og A betegner et hydrogenatom, og 2 - produkterne med formlen I, hvor R betegner en methyl- 15 gruppe, R betegner gruppen -ch2-s-r' hvor R' betegner en acylgruppe med 2-4 carbonatomer, og A betegner et hydrogenatom eller et ækvivalent alkalimetal .

20

Blandt produkterne med den almene formel I skal især nævnes de nedenfor i eksemplerne beskrevne produkter og navnlig 7--((2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl)-amino)-3--((l-methyltetrazol-5-yl)-thiomethyl)-ceph-3-em-4-carboxyl-25 syre, 7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl)-amino)-3--((2-methyl-l,3,4-thiadiazol-5-yl)-thiomethyl)-ceph-3-em--4-carboxylsyre, 3-acetylthiomethyl-7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxy-3 0 iminoacetyl)-amino)-ceph-3-em-4-carboxylsyre, 7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl)-amino)--3-i sopropy1ceph-3-em-3-carboxylsyre, 7-((2-(2-amino-4-thiazolyl):-2-methoxyiminoacetyl)-amino)--3-methylceph-3-em-4-carboxylsyre, 35 7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl)-amino)-3- -((l-methyltetrazol-5-yl)-thiomethyl)-ceph-3-em-4-carboxyl- - 3 -

DK 161253 B

syre, syn-isomer, 7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl)-amino )-3--((2-methyl-l,3,4-thiadiazol-5-yl)-thiomethyl)-ceph-3-em-4--carboxylsyre, syn-isomer, 5 3-acetylthiomethyl-7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxy-iminoacetyl)-amino)-ceph-4-em-4-carboxylsyre, syn-isomer, 7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl)-amino )-3--isopropylceph-3-em-4-carboxylsyre, syn-isomer, 7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl)-amino)-3-10 -methylceph-3-em-4-carboxylsyre, syn-isomer, 3-acetylthiomethyl-7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl ) -amino ) -ceph-3-em-4-carboxylsyre som fremstillet efter fremgangsmåden i eksempel 6, natriumsaltet af 7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyimi-15 noacetyl)-amino)-3-((2-methyl-l,3,4-thiadiazol-5-yl)-thiomethyl )-ceph-3-em-4-carboxylsyre, syn-isomer, natriumsaltet af 7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyimi-noacetyl)-amino )-3-((l-methyltetrazol-5-yl)-thiomethyl)-ceph-3-em-4-carboxylsyre, syn-isomer, 20 natriumsaltet af 3-acetylthiomethyl-7-((2-(2-amino-4-thia-zolyl)-2-methoxyiminoacetyl)-amino)-ceph-3-em-4-carboxylsyre, syn-isomer, og det krystallinske natriumsalt af 3-acetylthiomethyl-7-((2--(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl)-amino)-ceph-3-25 -em-4-carboxylsyre, syn-isomer.

Det vil forstås, at de ovennævnte produkter med formlen I kan eksistere: - enten i den ved formlen I angivne form 30 - eller i form af produkter med formlen Iz 35 - 4 -

DK 161253 B

H

A

S NH O

\—/ I

, Γ Vi

L2 o^-*yV

co2A

2 hvor R, R og A har samme betydning som ovenfor.

10

Fremgangsmåden til fremstilling af produkterne med formlen I er ifølge opfindelsen ejendommelig ved det i krav l's kendetegnende del anførte.

15 I en foretrukket udførelsesform for fremgangsmåden behandler man produktet med formlen II med et funktionelt derivat af syren med formlen III såsom anhydridet eller syrechlori-det, idet anhydridet kan være dannet in situ ved indvirkning af isobutylchlorformiat eller dicyclohexylcarbodiimid 20 på syren. Man kan ligeledes benytte andre halogenider eller også andre anhydrider dannet in situ ved indvirkning af andre alkylchlorformiater, et dialkylcarbodiimid eller et andet dicycloalkylcarbodiimid. Man kan ligeledes benytte andre syrederivater såsom syreazidet, syreamidet eller en 25 aktiveret syreester dannet f.eks. med hydroxysuccinimid, p-nitrophenol eller 2,4-dinitrophenol. I det tilfælde, hvor omsætningen af produktet med formlen II sker med et halogenid af syren med den almene formel III eller med et anhydrd dannet med et isobutylchlorformiat, arbejder man 30 fortrinsvis i nærværelse af et basisk middel.

Som basisk middel kan man f.eks. vælge et alkalimetalcarbo-nat eller en tertiær organisk base såsom N-methylmorpholin, pyridin eller en trialkylamin såsom triethylamin.

Den eventuelle omdannelse af produkterne med formlen 1' til 35

DK 161253B

- 5 - produkter med formlen I1' har til formål at erstatte sub-11 stituenten R med et hydrogenatom og, når A' ikke er et hydrogenatom, at erstatte A' med et hydrogenatom.

5 Til dette formål behandler man produktet med formlen 1' med et middel til sur hydrolyse, når R betegner en ved sur hydrolyse let eliminerbar gruppe, og A' betegner et hydrogenatom eller en ved sur hydrolyse let eliminerbar gruppe.

10 Man behandler produktet med formlen 1' med et hydrogenoly-semiddel, Når R betegner en ved hydrogenolyse let eliminerbar gruppe, og A' betegner et hydrogenatom eller en ved hydrogenolyse let eliminerbar gruppe.

15 Man behandler produktet med formlen 1' med et middel til sur hydrolyse og med et hydrogenolysemiddel, når en af sub-1' stituenterne R eller A' betegner en ved sur hydrolyse let eliminerbar gruppe, og den anden substituent betegner en ved hydrogenolyse let eliminerbar gruppe.

20

Som middel til sur hydrolyse, som man eventuelt underkaster produkterne med formlen I', kan nævnes myresyre, trifluor-eddikesyre eller eddikesyre. Disse syrer kan anvendes i vandfri tilstand eller i vandig opløsning. Man kan lige-25 ledes benytte et system af zink og eddikesyre.

Man benytter fortrinsvis et middel til sur hydrolyse såsom vandfri trifluoreddikesyre eller vandig myre- eller eddikesyre til eliminering af de grupper tert.-butoxycarbonyl el-30 ler trityl, som R kan betegne, eller grupperne benzhy-dryl, tert.-butyl eller p-methoxybenzyl, som A* kan betegne.

Man benytter fortrinsvis systemet zink plus eddikesyre 35 til eliminering af den trichlorethylgruppe, som R og A' kan betegne.

- 6 -

DK 161253 B

Man benytter fortrinsvis et hydrogenolysemiddel såsom hydrogen i nærværelse af en katalysator til eliminering af i ' dibenzyl og carbobenzyloxy, som R kan betegne, og benzyl, 1 · som R og A' kan betegne.

5

Produkterne med formlen 1' eller I'' kan omdannes til salte efter gængse metoder. Saltdannelsen kan f.eks. opnås ved indvirkning på disse syrer af en mineralsk base såsom f.eks. natrium- eller kaliumhydroxid eller natriumbicarbo-10 nat eller af et salt af en substitueret eller usubstitueret aliphatisk carboxylsyre såsom diethyleddikesyre, ethylhex-ansyre eller specielt eddikesyre.

De foretrukne salte af de ovennævnte syrer er natriumsalte-15 ne.

Saltdannelsen kan ligeledes opnås ved indvirkning af en organisk base såsom triethylamin eller diethylamin. · 20 Til fremstilling af saltene kan solvaterne af de frie syrer ligeledes benyttes som udgangsprodukter i stedet for de frie syrer.

Denne saltdannelse udføres fortrinsvis i et opløsningsmid-25 del eller en blanding af opløsningsmidler såsom vand, ethylether, methanol, ethanol eller acetone.

Saltene opnås i amorf eller krystallinsk form efter de benyttede reaktionsbetingelser.

30

De krystallinske salte fremstilles fortrinsvis, idet man omsætter de frie syrer med et af de ovennævnte aliphatiske carboxylsyrers salte, fortrinsvis med natriumacetat.

35 Ved fremstillingen af et natriumsalt udføres reaktionen i et passende organisk opløsningsmiddel såsom f.eks. methanol, hvilket opløsningsmiddel kan indeholde en lille mængde

DK 161253 B I

Den syre, som benyttes til hydrolyse af saltene af produk- 1 · - 7 - i vand.

terne med formlen I', hvor R betegner en ved sur hydroly-5 se let eliminerbar gruppe, er fortrinsvis myresyre. Man kan imidlertid benytte trifluoreddikesyre eller eddikesyre.

Disse syrer kan benyttes vandfrie eller i vandig opløsning.

Som det hydrogenolysemiddel, hvormed man behandler saltene 11 10 af produkterne med formlen I, hvor R betegner en ved hy-drogenolyse let eliminerbar gruppe, kan nævnes hydrogeneringskatalysator.

Indvirkningen af produktet med formlen V på produktet med 15 formlen IV udføres fortrinsvis i en blanding af vand og acetone, men man kan ligeledes benytte et andet vandigt opløsningsmiddel såsom en blanding af vand og dioxan, vand og tetrahydrofuran eller vand og ethanol.

20 Reaktionen udføres fortrinsvis i nærværelse af en stødpude, som holder en svagt sur pH-værdi i miljøet, såsom en blanding af surt natriumphosphat og natriumbicarbonat, men man kan ligeledes arbejde uden stødpude.

25 Produkterne med den almene formel I har en meget god antibiotisk aktivitet, dels på grampositive bakterier såsom stafylokokker og streptokokker og navnlig på penicillinresistente stafylokokker, dels på gramnegative bakterier, navnlig på coliforme bakterier, Klebsiella, Salmonella og 30 Proteus.

Disse egenskaber gør disse farmaceutisk acceptable produkter egnede til at anvendes som medikamenter ved behandlingen af lidelser hidrørende fra følsomme kim og navnlig til 35 behandlingen af staphylococci såsom septicami hidrørende fra stafylokokker, ondartet staphylococci i ansigtet eller på huden, pyodermitis, septiske eller subpurante sår, an- - 8 -

DK 161253 B

thrax, phlegmone, erysipel, primitiv eller efter influenza optrædende akut staphylococci, brochophenumoni og pulmonære suppurationer.

5 Disse farmaceutisk acceptable produkter kan ligeledes anvendes som medikamenter i behandlingen af colibacillose og beslægtede infektioner, ved infektioner hidrørende fra Proteus, Klebsiella og Salmonella og andre lidelser fremkaldt af gramnegative bakterier.

10

De farmaceutisk acceptable produkter med formlen I kan anvendes til fremstilling af farmaceutiske produkter, der som aktiv bestanddel indeholder i det mindste et af disse produkter og navnlig et af dem med syn-struktur.

15

Blandt disse produkter skal især nævnes sådanne, der . som aktiv bestanddel indeholder i det mindste et af de farmaceutisk acceptable produkter med formlen I, hvor A betegner et hydrogenatom, et ækvivalent alkalimetal, jordalkalimetal 20 eller magnesium eller af en amineret organisk base.

Specielt skal nævnes de farmaceutiske produkter, der som aktiv bestanddel indeholder i det mindste et af de farmaceutisk acceptable produkter med formlen I, 25 - hvor R betegner gruppen -ch2-s-r' hvor R' betegner enten en acylgruppe med 2-4 carbonato-mer eller 2-methyl-l,3,4-thiadiazolyl eller 1-methylte-trazolyl, 30 - hvor R betegner en alkylgruppe med 1-5 carboatomer eller en cycloalkylgruppe med 3-5 carbonatomer, og 2 - hvor R betegner methyl, R betegner methyl eller isopropyl, og A betegner et hydrogenatom, og navnlig de farma- 2 ceutisk acceptable produkter med formlen I, hvor R be-35 tegner en methylgruppe, R betegner gruppen -ch2-s-r' hvor R' betegner acetyl, 2-methyl-l,3,4-thiadiazolyl el- - 9 -

DK 161253 B

ler 1-methyltetrazolyl, og A betegner et hydrogenatom eller et ækvivalent alkalimetal, jordalkalimetal eller magnesium eller et ækvivalent af en amineret organisk base.

5

Specielt skal nævnes de farmaceutiske produkter, der som aktiv bestanddel indeholder i det mindste et af produkterne 2 med formlen I, hvor R betegner en methylgruppe, R betegner gruppen 10 -ch2-s-r·

hvor R' betegner en acylgruppe med 2-4 carbonatomer, og A

betegner et hydrogenatom eller et ækvivalent alkalimetal, 2 og specielt blandt disse sådanne produkter, hvor gruppen R er i syn-stillingen.

15

Man kan nævne de farmaceutiske produkter, der som aktiv bestanddel indeholder i det mindste et af følgende produkter: 7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl)-amino )-3-'-((l-methyltetrazol-5-yl)-thiomethyl)-ceph-3-em-4-carboxyl-20 syre, 7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl)-amino)-3--((2-methyl-l,3,4-thiadiazol-5-yl)-thiomethyl)-ceph-3-em-4--carboxylsyre, 3-acetylthiomethyl-7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxy-25 iminoacetyl)-amino)-ceph-3-em-4-carboxylsyre, 7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl)-amino)--3-isopropylceph-3-em-4-carboxylsyre, 7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl)-amino)--3-methylceph-3-em-4-carboxylsyre, 30 7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl)-amino)- -3-((l-methyltetrazol-5-yl)-thiomethyl)-ceph-3-em-4-carb-oxylsyre, syn-isomer, 7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl)-amino)--3-((2-methyl-l,3,4-thiadiazol-5-yl)-thiomethyl-ceph-3-em-35 -4-carboxylsyre, syn-isomer, 3-acetylthiomethyl-7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxy-iminoacetyl)-amino)-ceph-3-em-4-carboxylsyre, syn-isomer, - 10 -

DK 161253 B

7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl)-amino)-3--isopropylceph-3-em-4-carboxylsyre, syn-isomer, 7-((2-( 2-amino-4-thiazolyl) -2-methoxyiminoa'cetyl) -amino) -3--methylceph-3-em-4-carboxylsyre, syn-isomer, 5 3-acetylthiomethyl-7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl) -amino )-ceph-3-em-4-carboxylsyre, fremstillet i eksempel 6, natriumsaltet af 7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl )-amino)-3-((2-methyl-l,3,4-thiadiazol-5-yl)-thio-10 methyl)-ceph-3-em-4-carboxylsyre, syn-isomer, natriumsaltet af 7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyimi-noacetyl)-amino)-3-((l-methyltetrazol-5-yl)-thiomethyl)--ceph-3-em-4-carboxylsyre, syn-isomer, natriumsaltet af 3-acetylthiomethyl-7-((2-(2-amino-4-thia-15 zolyl)-2-methoxyiminoacetyl)-amino)-ceph-3-em-4-carboxylsyre, syn-isomer, og det krystallinske natriumsalt af 3-acetylthiomethyl-7-((2--(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl)-amino)-ceph-3--em-4-carboxylsyre, syn-isomer.

20

Disse produkter kan indgives ad oral, rektal, parenteral, intramuskulær vej eller lokalt i topisk applikation på huden og slimhinderne.

25 De kan være faste eller flydende og kan foreligge i de i den humane medicin gængs benyttede farmaceutiske former såsom f.eks. uoversukrede eller oversukrede tabletter, gelatinekapsler, granulater, stikpiller, injektionspræparater, - pomade, creme og gele. De kan fremstilles efter de gængse 30 metoder. Den eller de aktive bestanddele kan inkorporeres deri sammen med i disse farmaceutiske produkter normalt benyttede tilsætningsstoffer såsom talkum, gummiarabicum, lactose, stivelse, magnesiumstearat, kakaosmør, vandige eller ikke-vandige bærestoffer, fedtstoffer af animalsk eller 35 vegetabilsk oprindelse, paraffinderivater, glycoler, diverse fugte-, dispergerings- eller emulgeringsmidler samt konserveringsmidler .

- 11 -

DK 161253 B

Den indgivne dosis varierer efter den behandlede lidelse, den pågaeldede patient, indgiftsmåden samt det pågældende produkt. Den kan f.eks. ligge mellem 0,250 og 4 g pr. dag ad oral vej hos mennesker med det i eksempel 4, 6 eller 10 5 beskrevne produkt eller mellem 0,500 g og 1 g 3 gange om dagen ad intramuskulær vej eller intravenøst.

Produkterne med formlen II, hvor R betegner gruppen -ch2-s-r' 10 og som er hidtil ukendte, kan fremstilles ved udvekslingsreaktion ud fra 7-aminocephalosporansyre. Et eksempel på en sådan præparation er angivet nedenfor i den eksperimentelle del.

15 Produkterne med formlen III fremstilles, idet man omsætter thiourinstof med et produkt med formlen B

ClCEL-C-C-CO^alc " " 2 (B) O N' A-OR^ 20 2 hvor R har samme betydning som ovenfor, og alc betegner en alkylgruppe med 1-4 carbonatomer, til opnåelse - efter behandling med en base - af et produkt med formlen c NH2

A

S N

\=/ · (e) \ ^C09alc Ϊ 30 ? 2

OR

som man behandler med et funktionelt derivat af en ved sur hydrolyse eller ved hydrogenolyse let eliminerbar gruppe til opnåelse af et produkt med formlen D

35 - 12 -

DK 161253 B

1» NH-R' Λ S\ t 0» \=/ ^C02al c 5

II

N

I 2 DRr 11 2 hvor R , R og alc har samme betydning som ovenfor, hvil-10 ket produkt man behandler med en base og derefter med en syre til opnåelse af de ønskede produkter med formlen II.

Et eksempel på en sådan præparation er angivet nedenfor i den eksperimentelle del.

15 Man får produkterne med formlen III med syn-konfiguration, når indvirkningen af thiourinstof på produkterne med formlen B ledes enten i et vandigt opløsningsmiddel såsom vandig acetone eller vandigt ethanol eller ved stuetemperatur, idet man omsætter en praktisk taget støkiometrisk mængde 20 thiourinstof og i en forholdsvis kort tid af størrelsesordenen 1-3 timer, eller når alle ovennævnte betingelser er forenet.

De opnåede produkter C s syn-konfiguration kan derefter be-25 vares i produkterne D og III.

Produkterne med formlen B fremstilles ved indvirkning af diazomethan eller tilsvarende alkylhalogenider eller -sulfater på gamma-chlor-alpha-oxyiminoacetyleddikesyreethyl-30 ester, som beskrevet i J. of Medicinal Chemistry 1973, 16^ (9), 978.

Produkterne med formlen IV fremstilles ved indvirkning af en syre med formlen III 35

DK 161253 B

- 13 - NH-R+, Λ ^/C02h (iii)

N

i 2 or r 1' 2 hvor R og R har samme betydning som ovenfor, på 7-amino- 10 cephalosporansyre, hvilken reaktion eventuelt efterfølges af en sur hydrolyse eller en hydrogenolyse. Et eksempel på en sådan præparation er angivet nedenfor i den eksperimentelle del.

15 På samme måde som ovenfor fås produkterne med formlen IV ved syn-konfiguration ved indvirkning på 7-aminocephalospo-ransyre" af produkterne med formlen III med syn-konfiguration, som er opnået på den ovenfor beskrevne måde.

20 Produkterne med formlen III fremstilles, idet man omsætter et funktionelt derivat af chloracetylgruppen, fortrinsvis chloreddikesyreanhydrid eller et halogenid, på produktet C, hvilken reaktion efterfølges af en behandling med en base og derefter med en syre.

25

Nedenstående eksempler illustrerer fremgangsmåden ifølge opfindelsen.

30 35

Eksempel 1« 7-( (2-(2-tritylamino-4-thiazolyl )-2-methoxyiminoacetyl)-amino )-3- -((2-methyl-1.3.4-thiadiazol-5-yl)-thiomethyl)-oeph-3-em-4-carboxyl-

14 DK 161253 B

££re.

Man blander 2,5 g natriumsalt af 2-(2-tritylamino-4-thia-5 zolyl)-2-methoxyiminoeddikesyre med 40 ml methylenchlorid og 5 ml 2 N saltsyre. Man dekanterer, vasker med vand, tørrer og inddamper.

Den rå syre opløses i 30 ml tørt tetrahydrofuran. Man tilsætter 0,7 g dicyclohexylcarbodiimid, omrører 45 minutter ved stuetemperatur, suger det dannede dicyclohexylurinstof fra, afkøler til -5°C 10 og tilsætter en opløsning af 0,895 g 7-amino-3-((2-methyl-l,3,4--thiadiazol-5-yl)-thiomethyl)-ceph-3-em-4-carboxylsyre i 10 ml vand og 0,9 ml triethylamin, som i forvejen er afkølet til 0°C. Man lader genantage stuetemperatur i løbet af 1 time 30 minutter, uddriver tetrahydrofuranet, tilsætter 40 ml methylenchlorid, vasker med for-15 tyndet saltsyre og derefter med vand, tørrer og inddamper til tørhed.

Man opløser resten i 8 ml dioxan og tilsætter dråbevis 3 ml mættet natriumbicarbonatopløsning, omrører 30 minutter, filtrerer, vasker med ether, får 0,554 g udgangsprodukt i form af natriumsaltet, uddriver dioxanet, optager i methylenchlorid, vasker med 1 IT 20 saltsyre og derefter med vand, tørrer og inddamper til tørhed. Man udriver med ether, suger fra, vasker og får 1,9 g råprodukt.

Man omrører dette produkt i 5 ml ethylacetat, tilsætter 5 ml ether, rører om, suger fra og vasker. Der fås 1,47 g delvis renset produkt, som man opløser i 2 ml methylenchlorid og fælder 25 med 25 ml ether. Efter frasugning og vaskning får man 1,4 g af det forventede produkt.

Der fås således 7-((2-(2-tritylamino-4-thiazolyl)-2-methoxy-iminoacetyl)-amino )-3-((2-methy1-1,3,4-thiad iazol-5-yl)-thiomethyl)--ceph-3-em-4-carboxylsyre, som har syn-konfiguration.

30 Natriumsaltet af 2-(2-tritylamino-4-thiazolyl)-2-methoxy- iminoeddikesyre, syn-isomer, der benyttes som udgangsprodukt i eksempel 1, fremstilles som følger:

Trin A: γ-chlor-a-methoxyiminoacetyleddikes.yreethylester.

Man anbringer 22,5 g γ-chlor-a-oxirainoacetyleddikesyreethyl-35 ester i 100 ml methylenchlorid.

Man anbringer på et isbad og tilsætter langsomt under omrøring en frisk opløsning af diazomethan (med en styrke på 21,6 g pr, liter), nemlig 275 ml. Man lader henstå 5 minutter i kontakt og ødelæ/ ger overskuddet af diazomethan ved hjælp af lidt aluminium-

is DK 161253 B

oxid* Man inddamper og renser derefter ved eluering på silicagel med methylenchlorid. Der fås 11,93 g af det forventede produkt.

Trin B: 2-(2-amlno-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoeddikesyreethylester. Man anbringer 1 g γ-chlor-a-methoxyiminoacetyleddikesyre- 5 ethylester, 3 ml absolut ethanol og 0,42 g formalet thiourinstof sammen. Man omrører ved stuetemperatur ca. 2 timer. Man fortynder med 60 ml ether, og det opnåede hydrochlorid krystalliserer ud, og man omrører, suger fra, vasker, tørrer og får 685 mg hydrochlorid* Man opløser i 4 ml vand ved 50°C, tilsætter kaliumacetat indtil en 10 pH-værdi på 6, og den frigjorte amin krystalliserer. Man afkøler, suger fra, vasker med vand, tørrer cg får 270 mg af det forventede produkt. Smp, 161°C,

Det opnåede produkt har syn-konfiguration.

li.M.R.spektrum (CDClj,60 ΜΊζ): 15 ppm: 4,0 (li-OCHj), 6,7 (proton i thiazolring).

Trin C: 2-(2-tritylamino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoeddikesyre-ethylester.

4,6 g produkt fremstillet ifølge forrige trin opløses ved 30°C i 92 ml methylenchlorid. Man afkøler til -10°C, tilsætter 2,9 20 ml triethylamin, afkøler yderligere til -35°C, tilsætter i løbet af 15 minutter 6,1 g tritylchlorid, lader genantage stuetemperatur, dvs. i alt 2 timer 30 minutter. Man vasker med vand og derefter med 0,5 li saltsyre og med natriumacetat i vand. Man tørrer, inddamper, optager i ether, inddamper igen, opløser i methanol, tilsætter vand 25 og ether, lader krystallisere, suger fra, vasker med ether og får 6,15 g af det forventede produkt. Smp. 120°c,

Det opnåede produkt har syn-konfiguration.

Trin D: latriumsaltet af 2-(2-tritylamino-4-thiazolyl)-2-methox.v-30 iminoeddikesyre.

7,01 g ester fremstillet i trin B opløses i 35 ml dioxan.

Man opvarmer til 110°C på oliebad og tilsætter i løbet af 5 minutter 9 ml 2 N natriumhydroxid opløsning og lader henstå 30 minutter til tilbage svaling under omrøring, liatriumsaltet krystalliserer.

35 Man afkøler, suger fra, vasker med dioxan og derefter med ether og får et første udbytte på 5,767 g salt. Man inddamper moderopløsnin-gen og får et andet udbytte på 1,017 g eller i alt 6,784 g natriumsalt.

Det opnåede produkt har syn-konfiguration.

16 DK 161253 B

Eksempel 2.

7—((2-(2-amin.o-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl)-amino )-3-( (2--me tbyl-1.3.4-thiad iaz ol-5 -vi) -thiomethy1) -ceph-3-em-4 -carboxylsyre. De 1,4 g produkt fra eksempel 1 opvarmes under omrøring i 5 5 ml 50$’s vandig myresyre til 57°C i 15 minutter. Man tilsætter 5 ml vand, afkøler til stuetemperatur, suger fra, tilsætter 5 ml ethanol, inddamper til tørhed, udriver resten med 5 ml ethanol, suger fra, vasker med ethanol og med ether og får 0,687 mg råprodukt.

10 Produktet opløses i 7 ml vand og 0,2 ml triethylamin, man suger fra, skyller og syrner med 0,2 ml 50^’s myresyre. Man rører om, suger fra og vasker med alkohol og med ether. Der fås et første udbytte på 0,275 g.

Analyse: ®17%7®5®7^4,0,5 CgH^OH

15 beregnet: Cfo 59,25 Hfo 3,66 W° 17,80 23,28 fundet: 39,3 3,5 17,9 23,1

Det opnåede produkt har syn-konfiguration.

1T.M.B.spektrum (DMS0,60 MHz): ppm: 3,85 (If-OCH^), 6,76 (proton i thiazolring) 20

Eksempel 3.

7-((2-(2-tritylamino-4-thiaz oly1)-2-me th oxyiminoacety1)-amino)--5-( (l-methyltetrazol-5-vl)-thiometh.vl)7-ceph-5-em-4-oarboxylsyre.

Man benytter 2,33 g natriumsalt af 2-(2-tritylamino-4-thia-25 zolyl)-2-methoxyiminoeddikesyre, og idet man arbejder som i eksempel 1, får man den rå syre, som man opløser i 30 ml methylenchlorid.

Man tilsætter 0,7 g dicyclohexylcarbodiimid og lader henstå 50 minutter ved stuetemperatur under omrøring og under indifferent gas. Man frasuger det dannede dioyclohexylurinstof, afkøler til -5°C og 30 tilsætter på én gang en opløsning af 0,854 g 7-amino-3-((l-methyl-tetrazol-5-yl)-thiomethyl)-eeph-3-em-4-carboxylsyre i 10 ml methylenchlorid og 0,75 ml triethylamin. Man lader genantage stuetemperatur, tilsætter 1 ml eddikesyre, suger fra efter 10 minutter, vasker med vand tilsat saltsyre, tørrer, inddamper, optager i 8 ml dioxan 35 og tilsætter 2,5 ml mættet natriumbicarbonatopløsning. Man frasuger natriumsaltet af udgangstritylsyren og skyller med en blanding af ether og dioxan (1:1) og derefter med ether. Man uddriver dioxanei optager i methylenchlorid og vasker med vand tilsat saltsyre, tørrer og inddamper. Man udriver med ether, suger fra, vasker med ether og får 2,29 g råprodukt. Man omrører derpå produktet 1 time ved 10°C.

17 DK 161253B

1 ethanol, auger fra, vasker med ether og får 1,42 g renset produkt«

Det opnåede produkt har syn-konfiguration.

Eksempel 4.

5 7-( (2-(2-amino-4-thiazolyl)-2--methoxyiminoaoetyl)-amino )-5-( (l-me-thyltetrazol-5-yl)-thiomethyl)-oeph-3-em-4 -carboxylsyre.

Man anbringer 1,4 g produkt fremstillet i eksempel 3 i 5 ml 50^’s vandig myresyre i et vandbad ved 55°C, Efter 15 minutters forløb tilsætter man 5 ml vand, afkøler, suger fra, inddamper filtratet 10 efter at have tilsat 5 ml ethanol. Man optager i 5 ml ethanol, udri ver, suger fra, vasker med ethanol og med ether, suger fra, tørrer, udriver med en blanding af metbylenchloria og ether (l:l), suger fra, vasker og får 0,557 g rent produkt.

Analyse: ^6^17^5^9^ CgH^OH

15 beregnet: C# 38,19 W° 3,77 fl# 23,58 Si 18,00 fundet: 38,1 3,9 22,5 17,7

Det opnåede produkt har syn-konfiguration.

N.M.R.spektrum (DMS0,60 MHz): ppm: 3,83 (N/OCH^), 6,73 (proton i thiazolring) 20

Eksempel, 5.

3-acetylthiomethyl-7-( (2-(2-tritylamino-4-thiazolyl)-2-methoxyimino>--acetylamino)-oeph-3-em-4-carboxyleyre.

Ud fra 3,1 g natriumsalt af 2-((2-tritylamino-4-thiazolyl)-25 -2-methoxyimino)-eddikesyre i 40 ml methylenchlorid og 6,5 ml 2 N saltsyre fremstiller man som i eksempel 1 den tilsvarende syre.

Denne syre opløses i 30 ml methylenchlorid. Man tilsætter 0,8 g di-cyclohexylcarbodiimid og omrører 1 time 30 minutter i et bad af vand og is. Man frasuger det dannede dicyelohexylurinstof, afkøler til 30 -5°c og tilsætter på én gang en opløsning af 1,1 g 7-amino-3-acetyl- thiomethylceph-3-em-4-carboxylsyre i 13 ml methylenchlorid og 0,9 ml triethylamin ved 0°C, Man lader genantage stuetemperatur, tilsætter 1 ml eddikesyre, frasuger det uopløselige materiale, vasker med vand tilsat saltsyre og derefter med vand, inddamper, optager resten 35 i dioxan, tilsætter 3,5 ml mættet natriumbicarbonatopløsning, suger fra efter 30 minutters forløb, vasker med en blanding af dioxan og ether og får 0,64 g af det i begyndelsen benyttede natriumsalt af tritylsyren. Man uddriver dioxanet, optager i 30 ml methylenchlorid og vasker med vand tilsat saltsyre (10 ml vand og 10 ml 2 N saltsyre) og med vand og inddamper, Man udriver med 25 ml ether, v

18 DK 161253B

suger fra, vasker og får 1,89 g råprodukt.

Man genudfælder to gange ved opløsning i 3 ml ethylacetat og tilsætning af 25 ml ether. Der fås 0,89 g af det forventede produkt.

5 Det opnåede produkt har syn-konfiguration.

7-amino-3-acetylthiomethylceph-3-em-4-earboxylsyre, der benyttes som udgangsmateriale i eksempel 5» fremstilles som følger.·

Han anbringer 5,44 g 7-aminocephalosporarsyre og 50 ml vand tilsat Vfo hydroquinon under indifferent gas, Man omrører og tilsæt-10 ter 1,7 g natriumbicarbonat, og efter opløsning tilsætter man 3 g kaliumthioacetat. Man omrører 3 timer ved 60°0, afkøler og syrner med eddikesyre. Man omrører ved stuetemperatur, suger fra, vasker, tørrer og får 4*9 g af det forventede produkt.

15 Eksempel 6.

3-acetylt hiomethy 1-7-( (2-(2-amino-4-thiazol.yl) -2-methoxyiminoaoet.yl) -amino)-oeph-3-em-4-carboxylsyre.

Det i eksempel 5 opnåede produkt omrøres 15 minutter i et bad ved 55°C med 5 ml 50$’s vandig myresyre. Man tilsætter 5 ml vand, 20 afkøler til stuetemperatur, suger fra, sætter 5 ml ethanol til filtratet og inddamper til tørhed. Man findeler med 5 ml ethanol og får i to udbytter 440 mg produkt, som man opløser i 6 ml 50$'s vandig acetone. Man tilsætter 20 mg aktivkul, suger fra og uddriver delvis acetonen. Der fås efter frasugning 0,265 g rent produkt.

25 Analyse: 0,25 CE^COCH^ beregnet: C# 41,39 3,83 H# 14,41 S# 19,78 fundet: 41,2 3,8 14,4 19,8

Det opnåede produkt har syn-konfiguration.

H.M.R.spektrum (DMS0,6C MHz): 30 3,83 (I-0CH3), 6,73 (proton i thiazolring)

Eksempel 7.

7-( (2-(2-trit,vlamino-4 -thiazolyl) -2-methoxyiminoaoet.yl) -amino) -3--isopropylceph-3-em-4-carboxylsyre-tert.-butylester.

35 Man anbringer 1,65 g natriumsalt af ((2-tritylamino-4-thia zolyl )-2-methoxyimino)-eddikesyre som angivet i eksempel 1.

Restsyren opløses i 25 ml tørt methylenchlorid. Man tilsætter 0,71 g dioyclohexylcarbodiimid, omrører 10 minutter på et bad af iskoldt vand og tilsætter 0,965 g tert.-butylester af 7-amino--3-isopropylceph-3-em-4-carboxylsyre. Man lader henstå 2 timer under

19 DK 161253 B

omrøring ved stuetemperatur, frasuger dicyclohexylurinstoffet, vasker med vand (10 ml)indeholdende 2 ml 2 U saltsyre, med vand og derefter med 10 ml vand indeholdende 5 ml mættet natriumbicarbonat-opløsning. Man tørrer og inddamper til tørhed. Man opløser resten i 5 ether, suger fra, vasker med isopropylether og får 1,66 g af det forventede produkt.

Det opnåede produkt har syn-konfiguration.

Eksempel 8.

10 7-( (2-fe-amino-4-thiazol.vl)-2-methox.yiminoacetyl)-amino)-5--isoprop.vl- ceph-5-em-4-carboxylsyre,

De 1,66g produkt fra eksempel 7 omrøres 15 minutter ved stuetemperatur med 6 ml trifluoreddikesyre. Man tilsætter 60 ml isopro-pylether, suger fra, vasker med isopropylether og får 0,825 g pro-15 dukt i form af trifluoreddikesyresalt.

Man opløser dette produkt i 6 ml vand og 4 ml acetone. Man tilsætter 0,2 ml pyridin og uddriver acetonen. Der fås et første udbytte på 0,2J2 g.

Man inddamper filtratet, optager i 3 ml vand og isolerer 20 yderligere 0,194 g af samme produkt eller i alt 0,426 g.

Analyse: c16Hig05N5S2,0,25 CH^COCH^ beregnet: C$ 46,23 H$ 4,88 15,41 Sg 14,10 fundet: 46,1 4,7 15,5 14,1

Det opnåede produkt har syn-konfiguration.

25 ΙΓ.Μ.Η.spektrum (DMS0, 60 MHz): ppm 3,83 (N-0CH5), 6,78 (proton i thiazolring).

Eksempel 9.

7-( (2-(2-trit.vlamino-4-thiazol.vl)-2-methox.vlminoacet.vl)-amino)-3-30 .-methyloeph-3-em-4-carboxylsyre-tert.-butylester.

Man benytter 2,3 g natriumsalt af 2-((2-tritylamino-4-thia-zolyl)-2-methoxyimino)-eddikesyre som angivet i eksempel 1.

Den resterende rå syre opløses i 30 ml methylenchlorid, og man tilsætter 1,1 g dicyclohexyloarbodiimid og efter 5 minutters 35 forløb 1,35 g tert.-butylester af 7-aminodesacetoxycephalosporan-syre. Man omrører 2 timer, suger fra, vasker med vand, med vand syrnet med saltsyre, atter med vand og endelig med en mættet natrium-bicarbonatopløsning, tørrer, inddamper, optager i ether, suger fra, inddamper til tørhed og får 2,8 g rent produkt. Det opnåede produkt har syn-konfiguration.

20 DK 161253 B

Eksempel 10.

7-( (2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl)-amino)-3-methvl- | oeph-3-em-4-carboxylsyre.

2,3 g produkt fremstillet i eksempel 9 tilsættes 8 ml tri-5 fluoreddikesyre. Man omrører 15 minutter ved stuetemperatur og til- . sætter 80 ml isopropylether. Man omrører, suger fra og vasker med isopropylether. Der fås 1,12 g produkt i form af salt af trifluor-eddikesyre. Man optager produktet i 10 ml ethanol ved 40°C. Man foretager krystallisation ved tilsætning af 0,2 ml pyridin, afkøler 10 til 10°C, suger fra, vasker med ethanol og med ether og får 0,531 g rent produkt.

Analyse: ci4Hi5°5H5S2'0'25 C^OH

beregnet: Gfo 42,6 H/0 4,06 H# 17,13 S fo 15,68 fundet: 42,2 3,9 16,6 15,5 15 Det opnåede produkt har syn-konfiguration.

KT.M.R.spektrum (DMS0,60MHz): ppm: 3,85 (U-OCH^), 6,78 (proton i thiazol^ing)

Eksempel 11.

20 7-( (2-(2-tri ty lamino-4-thiazoly;i)-2-methoxyiminoacetyl)-amino )- -3-( (l-methyltetrazol-5-yl)-thiomethyl)-ceph-5-em-4-carboxylsyre.

Man blander 2,7 g 3-acetoxymethyl-7-((2-(2-tritylamino-4--thiazolyl)-2-methoxyiminoacety1)-amino)-ceph-3-em-4-carboxylsyre, 0,624 g mononatriumphosphat, 1,51 g natriumbicarbonat, 1,32 g 1-me-25 thyl-5-mercaptotetrazol, 40 ml vand og 20 ml acetone. Man lader henstå en nat ved 48°C og 1 time ved 60°C, Efter rensning får man det forventede produkt som syn-isomer og identisk med det i eksempel 3 beskrevne.

30 Eksempel 12.

7-((2-(2-amino-4-thiazolylV2-methoxyiminoaoetyl)-amino )-5-( (l-me-th.vltetrazol-5-yl )-thiomethyl) -ceph-5-em-4 -carboxylsyre.

Ud fra 1,7 g 3-acetoxymethyl-7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)--2-methoxyiminoacetyl)-amino)-ceph-3-em-4-carboxylsyre, 0,624 g mo-35 nonatriumphosphat, 1,51 g natriumbicarbonat, 1,32 g l-methyl-5-mer-captotetrazol, 40 ml vand og 20 ml acetone, og idet man lader henstå natten over ved 48°C og 1 time ved 60°C, får man det forventede produkt som syn-isomer og identisk med det i eksempel 4 beskrevne.

3-acetoxymethyl-7-( (2-(2-tritylamino-4-thia.zolyl)-2-methoxy-

2i DK 161253 B

iminoacetyl)-amino)-ceph-3-em-4-carboxylsyre, syn-isomer, der benyttes som udgangsprodukt i eksempel 11, og 3-acetoxymethy1-7-((2-(2--amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl)-amino)-ceph-3-em-4-carboxyl-syre, syn-isomer, der benyttes som udgangsprodukt i eksempel 12, 5 fremstilles som følger: a) 5-acetoxymethyl-7-((2-(2-tritylamino-4-thiazolyl)-2-methoxy-iminoacetyl)-amino )-ceph-3-em-4-carboxylsyre.

Man anbringer 3,06g natriumsalt af 2-(2-tritylamino-4-thia-zolyl)-2-methoxyiminoeddikesyre i 65 ml methylenchlorid og 6,5 ml 10 2 N saltsyre, vasker med vand, tørrer og inddamper til tørhed, hvor ved man kvantitativt får den frie syre.

Den opnåede frie syre opløses i 30 ml tørt methylenchlorid. Man tilsætter 0,78 g dicyclohexylcarbodiimid og omrører 1 time ved stuetemperatur. Man frasuger det dannede dicyclohexylurinstof, af-15 køler til -10°C og tilsætter en opløsning af 1,01 g 7-aminocephalo-sporansyre i 13 ml methylenchlorid og 0,9 ml triethylamin. Man lader genantage stuetemperatur, tilsætter 1 ml eddikesyre, suger fra, vasker med vand tilsat saltsyre og med vand, tørrer, inddamper til tørhed, optager i 10 ml dioxan og tilsætter 1 ml vand og 3 ml mæt-20 tet natriumbicarbonatopløsning. Man omrører, suger fra, vasker og inddamper til tørhed. Kan optager i methylenchlorid, vasker med 10 ml vand og 5 ml 1 I saltsyre, dekanterer, vasker med vand, tørrer, findeler i ether og får 1,747 g råprodukt, som man renser ved opløsning i ethylacetat efterfulgt af udfældning med ether. Der fås 25 1,255 g rent produkt.

Det opnåede produkt har syn-konfiguration.

b) 3-acetoxymeth.vl-7-( (2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl)--amino)-ceph-5-em-4-carboxylsyre.

0,975 g af det ovenfor opnåede produkt omrøres 10 minutter 30 ved 55°C i 4 ml 50$'s vandig myresyre. Man tilsætter 4 ml vand, suger fra og inddamper til tørhed under vakuum. Man findeler i 2 ml ethanol, suger fra og vasker med ethanol og derefter med ether og får 0,428 g rent produkt.

Det opnåede produkt har syn-konfiguration.

35 N.M.R.spektrum (DMS0,60 MHz)s ppm: 2,03 (-CO-OH^), dublet 9,58, J = 8 Hz (C0UH), 6,76 (proton i thiazolring)

DK 161253 B

22

Eksempel 13* 3-acetylthiomethyl-7-( (2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoaoetyl)--amino)-oeph-3-em-4-carboxylsyre, syn-isomer.

Man opløser 4,55 g 3-acetoxymethyl-7-((2-(2-amino-4-thia-5 2olyl)-2-methoxyiminoacetyl)-amino)-ceph-3-em-4-carboxylsyre, syn--isomer , 1,7 g kaliumthioacetat, 2 g afvandet mononatriumphosphat . og 20 ml destilleret vand. ilan opvarmer til 70°C i 1 time 30 minutter. Man syrner med 2 ml myresyre og ekstraberer med 4 gange 60 ml methylacetat (man frasuger et uopløseligt materiale).

10 Man vasker den organiske opløsning med vand, tørrer og ind- damper, til tørhed. Man opløser den opnåede rest i 20 ml acetone' tilsat 10$ vand. Man tilsætter 0,5 g aktivkul. Man omrører 5 minutter, frasuger aktivkullet, vasker det med acetone tilsat 10$ vand og inddamper filtratet til tørhed. Resten behandles med absolut 15 ethanol, man suger fra og vasker med ethanol og derefter med ether. Rer fås 1,9 g produkt, som er rent ved tyndtlagschromatografi, U.M.R.spektrum (DMS0, 60 MHz): 3,85 (H-OCH^), 6,75 (proton i thiazolring)

Produktet er identisk med det i eksempel 6 fremstillede.

20

Eksempel 14.

Hatriumsaltet af 7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl)--amino )-5-((2-methyl-1,3«4-thiadiazol-5-yl)-thiomethyl)-ceph-3-em--4-carboxylsyre. syn-isomer.

25 Til en opløsning af 2,3 g 7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)-2- -methoxyiminoacetyl)-amino )-3-((2-methyl-l,3,4-thiadiazol-5-yl)--thiomethyl)-ceph-3-em-4-carboxylsyre, syn-isomer, fremstillet ifølge eksempel 2 i 5 ml acetone, sætter man en vandig natriumbicarbonat-opløsning til opnåelse af en pH-værdi på 7. Man tilsætter 0,4 g 30 dyrekul, rører om i 5 minutter, frasuger kullet og vasker med vandig acetone (1:1).

Man tilsætter 50 ml ethanol til det affarvede filtrat og inddamper til tørhed under vakuum ved 30°C. Man optager resten i 5 ml ethanol, udriver krystallerne, suger fra, vasker med ethanol 35 og derefter med ether og får 1,3 g af det forventede produkt.

23 DK 161253 B

Analyse: beregnet: Na fo 4,18 fundet: 4,70 U.V.spektrum (ethanol): 5 max 235 nm = 360 ε = 19,800 265 nm =322 ε = 17.700 vendepunkt 280 nm =295 10 U.V.spektrum (ethanolisk N/10 saltsyre): vendepunkt 218 nm E^ " 244 max 266-267 nm eJ =406 ε = 22.300 vendepunkt 280 nm = 363 15

Eksempel 15.

Natriumsaltet af 7-( (2-(2-amino-4-thiazol.yl)-2-methox.yiminoacet.yl)--amino )~3-( (l-meth.yltetrazol~5~yl)~thiometh.yl)-ceph-3-em-4-carboxylsyre. syn-isomer.

20 Man anbringer 3,35 g 7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxy- iminoacetyl)-amino)-3-((l-methyltetrazol-5-y1)-thiomethyl)-ceph-3--em-4-carboxylsyre, syn-isomer, fremstillet ifølge eksempel 4 i 7 ml methanol og 7 ml 1 I! vandig natriumbicarbonatopløsning. Man omrører 5 minutter ved stuetemperatur, frasuger uopløseligt materiale og 25 skyller 2 gange med en blanding af methanol og vand (1:1).

Man tilsætter under omrøring først 85 ml ethanol, og natriumsaltet krystalliserer, og man tilsætter derpå 170 ml ether, rører om i 10 minutter, suger fra, vasker med ethanol og ether (1:1) og derefter med ether og tørrer. Der fås 3,26 g af det forventede pro-30 dukt.

Produktet renses som følger:

Man opløser saltet ovenfor i 40 ml vand, tilsætter 0,6 ml eddikesyre til opnåelse af en pH-værdi på 6,8-7, fortynder med ethanol og uddriver opløsningsmidlerne under formindsket tryk ved 35 en temperatur unde'r 35°C. Man optager i ethanol til eliminering af vandet og inddamper til tørhed.

Resten optages i 16 ml methanol, hvorefter man fortynder med 160 ml acetone. Saltet krystalliserer. Man omrører 5 minutter, suger fra og vasker med acetone og derefter med ether.

Per fås 2,3 g af det forventede produkt, oc2^ = -13,5° +1°

2« DK 161253 B

(1$, vand).

Analyse: beregnet: Na$ 4,31 fundet: 4,8 5

Eksempel

Natriums alt et af 3-acetylthiomethyl-7-( (2-(2-amino-4-thiazol.yl)--2-methoxyiminoacetyl)-amino)-ceph-3-em-4-carboxylsyre, syn-isomer. Man anbringer ved stuetemperatur 4,5 g 3-acetylthiomethyl-10 -7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl)-amino)-ceph-3- -en-4-carboxylsyre, syn-isomer, fremstillet ifølge eksempel 6, i Q ml methanol og 9 ml 1 M opløsning af natriumbicarbonat i vand, luan omrører 5 minutter ved stuetemperatur, frasuger det uopløselige materiale, skyller med en blanding af methanol og vand (1:1) og til-15 sætter under omrøring 110 ml ethanol, Natriunsaltet krystalliserer. Man fortynder med 220 ml ether, rører om, suger fra, vasker med en blanding af ethanol og ether (1:1) og derefter med ether, tørrer og får det forventede produkt.

Natriumsaltet renses som følger: 20 Man opløser produktet i 40 ml vand og indstiller pH-vr-rdien på 6,8-7 ved tilsætning af nogle dråber eddikesyre. Man fortynder med 100 ml ethanol og uddriver derefter opløsningsmidlerne under formindsket tryk ved en temperatur under 35°C. Man optager koncentratet, findeler 2 gange med 50 ml ethanol og inddamper til tørhed 25 anden gang, Man opløser resten i 15 ml methanol, frafiltrerer uopløseligt materiale og f ortyader derefter methanolopløsningen i 150 ml acetone.

Natriumsa.ltet krystalliserer, og man omrører 5 minutter, hvorpå man suger fra og vasker med acetone og derefter med ether.

30 Man tørrer under formindsket tryk. Ner fås 1,8 g af det forventede produkt, a2^ = -31° +2° (0,6¾vand).

Analyse: beregnet: Na$ 4,65 fundet: 4,9 35 N.Y.spektrum (ethanol): max 255 nm E^ = 419 vendepunkt 260 nm = 343 vendepunkt 300 nm E·^ = 122

25 DK 161253 B

U.V.spektrum (ethanolisk 11/10 saltsyre): vendepunkt 230 nm E^ = 280 max 263 nm E* =391 ε = 19.700 5

Eksempel 17.

Mlkrokr.ystalllnsk natriumsalt af 3-acetylthiomethyl-7-( (2-(2-amino--4 -thlazol.vl)-2-methoxyiminoacetyl)-amino)-ceph-3-em-4 -carboxylsyre, syn-isomer.

10 Man omrører 471,5 mg 3-acetylthiomethyl-7-((2-(2-amino-4- -thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl)-amino)-ceph-3-em-4-carboxylsyre, syn-isomer, fremstillet ifølge eksempel 6, med 1,5 ml 1 li opløsning af vandfrit natriumacetat i vandfrit methanol. Man tilsætter 0,5 ml ethanol, frasuger en smule uopløseligt materiale og tilsætter 2 ml 15 ethanol. Eatriumsaltet krystalliserer. Man suger fra, vasker med methanol og tørrer i tørreskab ved 45°C under vakuum.

Der fås 0,25 g ikke-hygroskopisk salt.

Analyse: beregnet: Nafo 4,66 20 fundet: 4,6

Eksempel 18.

3-acet.vlthiometh.yl-7-( (2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacet.yl)--amino)-ceph-3-em-4-carboxylsyre, syn-isomer.

25 Trin A: 3-aoetylthiomethyl-7-((2-(2-chloracetamido-4-thiazolyl)-2--methoxyiminoacetyl)-amino)-ceph-3-em-4-carboxylsyre, syn-isomer.

Man anbringer 15,3 g 2-(2-chloracetamido-4-thiazolyl)-2--methoxyiminoeddikesyre, syn-isomer, i 80 ml methylenchlorid. Ved 5°C tilsætter man 8 ml triethylamin. Ved 0°C og under nitrogenatmosfæ-30 re indfører man 3,8 ml thionylchlorid og 26 ml methylenchlorid. Man lader henstå 15 minutter ved 0°C og tilsætter derpå 7 ml triethyl- .....amin. Man indfører ved 0°C under nitrogenatmosfære 14,4 g 7-amino- -3-acetylthiomethylceph-3-em-4-carboxylsyre i 100 ml methylenchlorid og 14 ml triethylamin. Man lader temperaturen stige til 20°C igen 35 og omrører derefter 1 time. Denne opløsning destilleres til tørhed under vakuum ved 30-35°C. Man opløser resten i 250 ml vand, filtrerer gennem aktivkul og tilsætter 50 ml 2 U saltsyre. Man frasuger udfældningen og vasker med vand. Det opnåede råprodukt suspenderes i 80 ml ethanol. Ved 5°C tilsætter man 7 ml triethylamin. Man tilsætter på én gang under omrøring ved 5°C 15 ml 4 N svovlsyre. Pro-

26 DK 161253 B

duktet krystalliserer efter 15 minutters forløb. Man suger fra, vasker med ethanol ved udrivning og derefter med ether, tørrer under vakuum og får det forventede produkt.

Trin B: 5-aoetylthiomethyl-7-( (2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methox.v-5 iminoaoetyl)-amino)-ceph-5-em-4-carboxylsyre, syn-isomer.

Man suspenderer 5,48 g syre opnået i trin Å ovenfor i 10,6 ......ml vand og 912 mg thiourinstof. Ved 20°C tilsætter man 1 g kalium- bicarbonat. Efter opløsning omrører man 6 timer ved ca. 20°0 under nitrogenatmosfære. Den gummiagtige udfældning begynder efter ca.

10 1 time 50 minutter. Man tilsætter da 50 ml vand og 5 ml myresyre.

Han afkøler til 5°C. Man suger fra og vasker med vand indeholdende 10$ myresyre. Man afkøler til 5°C. og opløser resten i 50 ml vand indeholdende triethylamin. Ved 5°C tilsætter man 5 ml myresyre, og man frasuger udfældningen og vasker ved udrivning med vand indehol-15 dende myresyre. Man eliminerer den mørkebrune gummi. De vandige faser forenes og behandles med aktivkul. Man får en lysegul opløsning, som man mætter med ammoniumsulfat. Man frasuger udfældningen, udriver med vand, suger fra., vasker med vand og får en udfældning A.

Moderludene mættes med ammoniumsulfat, hvilket giver en ud-20 fældning, som man suger fra og vasker 5 gange med vand, hvorved man får en udfældning B.

Udfældningerne A og B forenes. Man optager i ethanol, omrører 1 time ved 20°C og lader henstå 16 timer ved 0°C, Man suger fra, vasker med ethanol og med ether, tørrer under vakuum og får det for-25 ventede produkt i form af syn-isomeren. Produktet er identisk med det i eksempel 6 og 18 opnåede, 2-(2-chloracetamido-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoeddikesyre, syn-isomer, der benyttes som udgangsprodukt i eksempel 18, fremstilles som følger: 30 a) 2-(2-chloracetamido-4-thiazolyl)-2-methox.viminoeddikesyreethyl-ester, syn-isomer.

Man indfører 45,8 g 2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyimino-eddikesyreetfcylester, syn-isomer, i 200 ml methylenchlorid. Man de-stillerer 20 ml deraf til tørring, afkøler til 10°C og tilsætter 35 50 ml pyridin. Man tilsætter 41 g monochloreddikesyreanhydrid og op varmer svagt indtil opløsning. Man lader henstå 6 timer ved 20°0 under nitrogenatmosfære, tilsætter 5 ml vand, omrører og hælder i 500 ml iskold 2 II saltsyre. Man dekanterer, ekstraherer med methylenchlorid, vasker med vand, med natriumbicarbonat, med vand, tørrer, behandler med aktivkul, inddamper og tilsætter 500 ml isopropyl-

27 DK 161253 B

ether. Produktet krystalliserer, 'fan inddamper indtil opnåelse af en tyk pasta, isafkøler, suger fra, vasker ned isopropylether, tørrer og får 45,4 g produkt, Smp. 113°C.

Per fås en ren prøve ved omkrystallisation af en "blanding 5 af methylenchlorid og isopropylether. Smp. 118°C.

H.I.I.R.spektrum (CDCL,, 60 MHz): 0 (d) (£) X 0 10 1 (c) (a)

If” ^ °-CH2-CH2

(e) N

c \och3 (b) (a) Triplet centreret om 1,38 ppm J = 7 liz 15 (b) Singulet 4,05 ppm (c) Kvadruplet centreret om 4,44 ppm J = 7 Hz (d) Singulet 4,33 ppm (e) Singulet 7,27 ppm (f) Singulet 9,95 ppm 20 2-(2-chloracetanldo-4-thia.zol.yl )-2-methoxyiminoeddikesyre, syn- -isomer.

Man indfører 46 g af produktet opnået i trin a) ovenfor i 230 ml absolut ethanol. Man tilsætter ved 20°C og under nitrogenatmosfære 30 ml rent natriumhydroxid. Produktet opløses, og natrium 25 saltet begynder at krystallisere, og derefter størkner milieuet. Efter 16 timers forløb suger man fra og vasker. "Det opnåede salt opløses i vand, og man isafkøler, tilsætter 100 ml 2 Ir saltsyre, mætter med natriumchlorid og ekstraherer med ethylacetat tilsat 10$ ethanol. Man tørrer, behandler med aktivkul, destillerer under 30 vakuum, medbringer vandet ved hjælp af benzen, optager i methylenchlorid, destillerer til tørhed, optager i methylenchlorid, isafkø-ler, suger fra, vasker, tørrer og får 34,5 g af det forventede produkt, Smp. ca. 200°C, Lian- renser produktet ved omkrystallisation af en blanding af acetone og isopropylether.

35 Analyse: CqHqO^H^CIS - 277,68 beregnet: C# 34,60 H# 2,90 1$ 15,13 01% 12,77 S£ 11,55 fundet: 34,8 2,8 14,8 12,6 11,5

28 DK 161253 B

If. M.R. spektrum (DMSO, 60 MHz): o (b) ^ ^ j H-'-i^C-CrlpCl

5 C02K

IV'" (d) . 1

H

^001¾ (a) 10 (a) Singulet 3,92 ppm (Id) Singulet 4,38 ,pm (c) Singulet oa. 5 ppm (d) Singulet 7,58 ppm 15 (e) Singulet 12,6 ppm

Bles emne 1 19.

Man fremstiller et injektionspræparat efter recepten: - 7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyimino- 20 acetyl)-amino )-3-((l-methyltetrazol-5-yl)- -thiomethyl)-ceph-3-em-4-carboxylsyre 500 mg - sterilt vandigt tilsætningsstof ad 5 ml

Eksempel 2,0.

25 Man fremstiller et injektionspræparat efter recepten: - 3-acetylthiomethy1-7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)- -2-methoxyiminoacetyl) -amino )-ceph-3 -em-4-carti-oxylsyre 500 mg - sterilt vandigt tilsætningsstof ad 5 ml 30

Eksempel 21.

Man fremstiller et injektionsprseparat efter recepten; - natriumsaltet af 3-acetylthiomethyl-7-((2-(2--amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl)- 35 -amino)-ceph-3-em-4-carboxylsyre 500 mg - sterilt vandigt tilsætningsstof ad 5 ml

29 DK 161253 B

Eksempel 22.

Kan fremstiller gelatinekapsler efter recepten: - 7_((2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl)--amino)-3-((l-methyltetrazol-5-yl)-thiomethyl)-ceph- 5 -3-em-4-carboxylsyre 250 mg - tilsætningsstof til dannelse af en gelatinekapsel på 400 mg

Eksempel 23.

Man fremstiller gelatinekapsler eft^r recepten: 10 - 3-acetyl1?hiomethyl-7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)- -2-methoxyiminoacetyl)-amino)-ceph-3-em-4-carboxylsyre 250 mg - tilsætningsstof til dannelse af en gelatinekapsel på 400 mg 15 Farmakologisk undersøgelse af produkterne.

A) Aktivitet in vitro.

Metode med fortyndinger i væskeformet milieu.

Man fremstiller en række glas, hvori man fordeler samme mængde sterilt næringsmilieu. I hvert glas fordeler man voksende 20 mængder af det produkt, som skal undersøges, hvorefter hvert glas podes med en bakteriestamme.

Efter inkubation i 24 eller 48 timer i varmeskab ved 37°0 vurderes vækstinhiberingen ved gennemlysning, hvilket gør det muligt at bestemme de minimale inhiberende koncentrationer (HIG), ud -25 trykt i pg/ml.

Der fås følgende resultater: 30 35

30 DK 161253 B

Produkt ifølge eksempel 2.

Stammer MIC i μ8/ιη1 _ 24 h 48 h 5 Staphylococcus aureus ATCC 6 538 penicillinfølsom 1 1

Staphylococcus aureus UC 1 128 penicillinresistent 2 2

Staphylococcus aureus exp. nr. 54 146 2 2

Streptococcus pyogenes A 561 <10,02 <0,02 10 ^ ^

Streptococcus faecalis 5 432 1 2

Streptococcus faecalis 99 P 74 2 5

Bacillus subtilis ATCC 6 633 0,6 1

Escherichia coli tetracyclinfølsom ATCC 9 637 0,6

Escherichia coli tetracyclinresistent 15 ATCC 11 303 0,1 0,2

Escherichia coli exp. T02gBg 0,4 0,4

Escherichia coli gentamicinresistent tobramycin R 55 123 D 0,4 0,4

Klebsiella pneumoniae exp, 52 145 0,05 0,1 20 Klebsiella pneumoniae 2 536 gentamicin.- resistent 0,6 1

Proteus mirabilis (indol-) A 235 0,2 0,2

Salmonella typhimurium 420 0,6 0,6

Enterobacter cloacae 681 40 40 25 Providencia du 48 25

Serratia gentamicinresistent 2 532 1 1 30 35

31 DK 161253 B

Produkt ifølge eksempel 4«

Stammer „ «P Lm/sL·- _ 24 h 48 h

Staphylococcus aureus ATCC 5 638 penicillin-5 følsom 1 1

Staphylococcus aureus UC 1 128 penicillinresistent 2 2

Staphylococcus aureus exp. nr. 54 146 2 2

Streptococcus pyogenes A 561 / 0,02 .^.0,02 10 Streptococcus faecalis 5 432 2 2

Streptococcus faecalis 99 P 74 2 10

Bacillus subtilis ATCC 6 633 2 5

Escherichia coli tetracyclinfølsom ATCC 9 637 0,4 0,4

Escherichia coli tetracyclinresistent 15 ATCC 11 303 0,05 0,05

Escherichia coli exp. T02gBg 0,2 0,2

Escherichia coli gentamicinresistent tobramycin R 55 123 D 0,2 0,2

Klebsiella pneumoniae exp. 52 145 0,02 0,02 20 Klebsiella pneumoniae 2 536 gentamisir.- resistent 0,4 0,6

Proteus mirabilis (indol-) A 235 0,05 0,05

Proteus vulgaris (indol+) A 232 3 20

Salmonella typhimurium 420 0,2 0,2

Enterobacter cloacae 681 20 20

Providencia Du 48 22

Pseudomonas 3 935 exp. SO 20 40

Serratia gentamicinresistent 2 532 1 1 30 35

32 DK 161253 B

Produkt ifølge eksempel 6

Stammer -£- MIC i ug/ml _ 24 h 48 h

Staphylococcus aureus ATCC 6 538 penicillinfølsom 2 2 5

Staphylococcus aureus UC 1 128 penicillin.resistent 5 5

Staphylococcus aureus exp.

nr. 54 146 2 2

Streptococcus pyogenes A 561 _^0,02 ^.0,02 10 Streptococcus faecalis 5 432 5 5

Streptococcus faecalis 99 B 74 5 7*40

Bacillus suhtilis ATCC 6 633 1 2

Escherichia coli tetracyclin- følsom ATCC 9 637 0,6 0,6

Escherichia coli tetracyclin-15 resistent ATCC 11 303 0,1 0,1 20 25 30 35

33 DK 161253 B

Produkt ifølge eksempel 6

Stammer -c- MIC i ug/ml _ 24 fa 48 h

Escherichia coli exp. 0,4 0,4 5

Escherichia coli gentamicin- resistent, tobramycin R 55 125 D 0,6 0,6

Klebsiella pneumoniae exp. 52 145 0,1 0,1

Klebsiella pneumoniae 2 536 1Q gentamicinresistent 1 2

Proteus mirabilis (indol-) A 235 0,05 0,1

Proteus vulgaris (indol+) A 232 5 10

Salmonella typhimurium 420 0,4 0,4 15 Enterobacter cloacae 681 10 20

Providencia Du 48 10 10

Serratia gentamicinresistent 2 532 1 2 20 25 30 35

DK 161253 B

34

Produkt ifølge eksempel 10

Stammer MIC i ug/ml _ 24 h 48 b

Staphylococcus aureus ATCC 6 538 5 penicillinfølaom 20 40

Staphylococcus aureus UC 1 128 penicillinresistent 40 40

Staphylococcus aureus exp.

nr. 54146 40 40 10 Streptococcus pyogenes A 561 0,05 0,05

Streptococcus faecalis 5 432 20 740

Streptococcus faecalis 99 P 74 20 740

Bacillus subtilis ATCC 6 633 20 7 40 15

Escherichia coli tetracyclin- følsom ATCC 9 637 0,6 0,6

Escherichia coli tetracyclin- resistent ATCC 11 303 0,2 0,2 20 25 30 35

35 DK 161253 B

Produkt ifølge eksempel 10

Stammer MIC 1 ug/ml _ 24 h 48 h

Escherichia coli exp. T026B6 0,4 0,6 5

Escherichia coli gentamicin- resistent, tobramycin B 55 123 D 0,6 0,6

Klebsiella pneumoniae exp. 52 145 0,1 0,1

Klebsiella pneumoniae 2 536 10 gentamicinresistent 0,6 2

Proteus mirabilis (indol-) A 235 0,1 0,2

Proteus vulgaris (indol+) A 232 3 20

Salmonella typhimurium 420 0,6 0,6 15 Providencia Du 48 25

Serratia gentamicinresistent 2 532 5 10 20 25 30 35

36 DK 161253 B

Produkt ifølge eksempel 16.« MIC i ug/ml

Stammer — __ 24 h 48 h

Staphylococcus hvid pathogen 69 396 2 2 5 Staphylococcus hvid 21 976 3 5

Staphylococcus gylden 68 666 3 5

Escherichia coli 73 316 0,2 0,2

Escherichia coli 72 806 1 1 10 Escherichia coli 69 916 0,4 0,4

Escherichia coli 69 886 0,6 1

Escherichia coli 68 696 0,4 0,4

Escherichia coli 68 956 0,4 0,4 15

Escherichia coli 21 976 0,6 0,6

Escherichia coli 19 976 0,6 0,6 B) Eksperimentel infektion med Escherichia coli ®0ggBg.

Man undersøger virkningen af produkterne ifølge eksempel 6 og 10 på en eksperimentel infektion af Escherichia ooli på mus.

Man inficerer hold på 10 hanmus med en gennemsnitsvægt på 22 g ved intraperitoneal injektion af 0,5 ml af en 24 timer gammel kultur 25 i nærings "bouillon med stammen Escherichia coli iDOggBg fra Pasteur--instituttet fortyndet til 1:5,5 med destilleret vand.

Man indgiver en bestemt mængde af produktet ved subkutan injektion eller oralt 1 time, 5 timer og 24 timer efter injektionen. Man iagttager dødeligheden i 8 dage.

30 Resultaterne er som følger: 35

37 DK 161253 B

φ d d > c o o o O O o

(D Φ hO Η Η Η Η Η H

Η Χί cd \ \ ^ >

d T3 O LA IS- o vO

Φ Cfl H

> d · o e oo to X)

VD

to •d h

LA

Λ H

O

N

A

O' H

LA

Λ , .

d AH H

CL) IS-+5 <J· «Η

Φ A

•d co

Φ A

Λ tc o

•h rA

i—*

Φ Λ H

nd

S A Q A

o

A

A

Sj·

A

A

I-! <1-

A

0

IA

£! O -4- Η H t°i

H H A

1 p p P P P

w p s d £ d £ -p d Ri CC Cd CO A) H d -t- -P -p -p •H -P 2 d d P 3 to d 5 s' x x x

Χ}·γ: X A A A A A

d φ a d d d d d (h>3 cq cq w ω ω cq φ

I he I I I VO UC

H £1 H t0 H tC Η H

Sr K H £ Si H £ 8H SO

Ifism <H Φ <Η Φ <H (D tic H h to •Η ftO *H ftH -H ftA Ή ftS -H £

E ·> £ ~ £ - £ A

H +) (DO -p φ Ο P Φ Ο P Φ ΙΑ P Φ H

ο X v X w XV X m ~ x ft - u d^JX ?x X d-XX d^O d£0 P -d φ χΐ Φ xf φ αφ xJ φ

d Ο IA OIA O IA Ο X O CQ X

Ο ΡΦ in Φ ί-ι Φ £h Φ dP!

X, ft tOVD ft tOVO ft tOVD ft tC A ft Φ TA

38 DK 161253 B

Φ

Ti

S

φ o o o o o

^ β HH Η Η H

Φ Φ bC \ \ \ \ \

H Ti Cd IS CQ CM CM tS

k -d Φ CO > 2 ·

O SCO

bO

Ό CM

M3 bO

Ti H

m Λ

CM

O

IS

£

H

j· m Λ β

03 IS CM H CM

-P -i «Η Φ Λ

ti CO H

03 CM rC

b£ O •h m H

03 ,β H

Ti is in

Π CM

O

tn

H

Λ O.

CM

Λ

H

<r

CM

O

tn

,2 Ό CM H

H

CM

I -P -P

Μ β £ +3 cd cd

«Η -P -P ·Ρ "P "P

•Η 2 2 Η Η Η bo X X cd cd cd ·η ,ο ,ο ft ft ft S 03 2 2 o o o

H > IQ CO

Q3 03 03 03 Q3

bO bO bO bO bC

SObO ISO SO bO tSO 80

«hHS «HHbO 'HHS «HHbO <HH

•Η H S ·Η H S *H

Η ΙΓ\ Η H lf\ Η H bO

+3 03 CM -P031O -P 03 CM -P Φ in +3 03 S

Λ P, - ^ Pi » -« ft ' Λ Pi * &

2 60 2 S O 2 S O 2 S O 2fiH

Ti 03 Ti Φ Όθ> ΤίΦ Ti 03 o co x owx orax o ra x o a x

k ^ ft y i, x ^ v; ^ ,X

cu φ tn cmcDm eu φ m [ft φ tn ft mm

39 DK 161253 B

C) Eksperimentel infektion med Klebsiella pneumoniae.

Man undersøger virkningen af produkterne ifølge eksempel 4 og 6 på en eksperimentel infektion med Klebsiella pneumoniae på mus. Man inficerer hold på 10 hanmus med en gennemsnitsvægt på 21 g 5 ved intraperitoneal injektion af 0,5 ml af en kultur i nærings -bouillon af stammen Klebsiella pneumoniae 52 145 fortyndet til 1/1000 med destilleret vand.

Man indgiver ad subkutan vej en bestemt mængde af produktet 30 minutter, 4 timer, 8 timer, 24 timer og 32 timer efter injektio-10 nen.

Man iagttager dødeligheden i 10 dage.

Resultaterne er som følger: 15 20 25 30 35

40 DK 161253 B

Φ

TS

P

Φ > P h£

Φ Φ «J O O O O O O

ι—ΐ'ΰ'ϋ i—I rH iH iH i—! rH

P \ \ \ \ \ \ Φ w · o σ·\ o o o o

ί> P O rH i—I rH rH

O g H

tø

T3 H

in

O

m si H cn P si

Φ H

-p o

<H

Φ τ3 si φ

si CO H

tø <1-

•H

i-1 Φ Λ T) s id m

Q

Λ

C\i H

in o in si h co

OJ

-3- -et- vjD vo VO

r^w pH Η H r-i φ φ φ φ φ

Di ft P< Pr p< ε s £ s ε φ φ φ φ φ to w ω ω to

M X

Φ Φ Φ Φ Φ (D Φ Φ Φ φ tø tø tø tø tø

rH i—i rH i—1 i—I

S S tø S tø S $

Vitø <H E <H G *H tø Ή Η £ ·Η ·Η Ή £ ·Η in in tø Η ·ΡΗ -Ρ CM -Ρ C\i -Ρ IT. -Ρ £ ο Ρ Ρ Ο 30 30 30 3 Η -Ρ τ> τ3 τ3 τ3 τ3 ρ οχ οχ οχ οχ οχ ' '"S.

Ο ρ ρ ρ ρ ρ ·.: W CP in CP in CP in cp in cpm 'i:

« DK 1612 5 3 B

D) Eksperimentel infektion med Klebsiella pneumoniae.

Man undersøger virkningen af produkterne ifølge eksempel 14 og 16 på en eksperimentel infektion af Escherichia coli på mus.

Man inficerer hold på 10 hanmus med en gennemsnitsvægt på 21,5 g 5 ved intraperitoneal injektion af 0,5 ml af en 24 timer gammel kultur i næringsnilieu af stammen Klebsiella pneumoniae 52 145 fortyndet til 1/1000 med destilleret vand.

Man indgiver en bestemt mængde af produktet ad subkutan vej 1 time, 5 timer og 24 timer efter injektionen, 10 Man iagttager dødeligheden i 10 dage.

Resultaterne er som følger: 15 20 25 30 35

42 DK 161253 B

CD

"d fi

CD

> £ b£ O O O O O O O O O O O

H r-i r~i r-i r-i i—I ι-i iH i—1 i—I

J-i O MD O'i O O O cn "o "o "o

QJCQ· r-i r-i r-i HHH

> s o

O BH

hC

Ti

• H

IN

ha

T? H

'.ΟΡΟ T?

• Γ-! CM

LO

hO

xi

• CM H

. <f r-i ί-1 Φ p to.

N r-i

^ iJ H

Ό o ro Æ L- t;

•H

r-i Æ

CD

T5 O ro

IS N

P

P

to i—’ ir, o to

P H

O

CO

Λ

CM

ve ^-4- d o Ή

P

Psi CD CD CD CD <D CD <D CD CD CD

CDhOhOhOhOhOhO hDhOhOhO

“Η H r-ι r-i H r-i H r-' |—i Η H

fi iS>i tS ^ S ^ S'T tS -=^ Sco Svo Svd Svo Svo •Η Ν’. I—I Nr-) Nr—I Ni—I Nr-) Nr—I Nr—) Nr—I Nr—I Nr—) •Η ·Η ·Η ·Η ·Η ·Η ·Η ·Η ·Η ·Η

-ΗΗΗΗΗΗΗΗΗΗ Η Ρ CD bO Ρ CD Ρ CD PC Ρ CD . -PCD -PCDhO-PCD Ρ Φ hO Ρ Φ PCD

P ~ fthp ft Ρϋ ft £ ft hO Ρ4 ft S ,*! ft PC Pd ft dseseess seeps p e pse pe pee ps

P Ti Φ LO Ti Φ Ti CD CO. -d CD TJCDhCTiCDlOTlCD TJCDlOTiCD TiCDhC

d OCQO OtQH O W CM OWCO O CQ S OCQO O W r-i O CO CM OCQlO, O W 6 dPd-dPd-dPd-dPd-dPd

bd ft φ O P) (DO Pi (DO ft Φ O Pi (Dr! P) (DO P) (DO P) (DO Pi (DO ft φ H

Claims (18)

1 I hvor A betegner et hydrogenatom eller et ækvivalent alkalimetal, jordalkalimetal eller magnesium eller et ækvivalent af en amineret organisk base svarende til forbindelserne med den almene formel I, hvor R betegner gruppen 5 CH2-S-R' hvor R' betegner enten en acylgruppe med 2-4 carbonatomer eller gruppen 2-methyl-l,3,4-thiadiazolyl eller gruppen 1- -methyltetrazolyl, og hvor A har samme betydning som A , behandler en forbindelse med formlen IV 10 NII-R1 A i ' : \=/ / dy) syn-isomer ζ ITH^ · 15. j i 1 N 'Νγ!ίίχίΗ2-0-0-0Η5 ‘OR2 oo2h . ® 1 i' i · 2 hvor R betegner hydrogen eller R , idet R og R har 20 samme betydning som ovenfor, med en forbindelse med formlen V R'-SH (V) hvor R" har samme betydning som ovenfor, til opnåelse af forbindelserne med formlen I'A 25 X·# » u I syn-isomer c .

30 I A—A A (I*) ί .* 0^=*-* 0RZ CII2-S-R« C021I som man eventuelt omdanner til salt til opnåelse af forbin-35 delserne med formlen 1^, hvor A^" betegner et ækvivalent alkalimetal, jordalkalimetal eller magnesium eller et ækvivalent af en amineret organisk base, og at man, når R1 be- 1 ' DK 161253 B - 47 - tegner R , underkaster indvirkning af et surt hydrolyserende eller hydrogenolyserende middel til eliminering af _ 1' gruppen R

1. Analogifremgangsmåde til fremstilling af syn-isomere alkyloximderivater af 7-aminothiazolylacetamidocephalospo-ransyre med den almene formel I f2 5 Ai p Vs. . 111 10 \-f^SVSvj i os2 I C02A 15 hvor R betegner enten en gruppe -ch2-s-r' hvor R' betegner enten en acylgruppe med 2-4 carbonatomer eller gruppen 2-methyl-l,3,4-thiadiazolyl eller gruppen 1- -methyltetrazolyl, eller R betegner en alkylgruppe med 1-5 20 carbonatomer eller en cycloalkylgruppe med 3-5 carbonato-2 mer, R betegner en mættet eller umættet alkylgruppe med 1-4 carbonatomer, A betegner et hydrogenatom, et ækvivalent alkalimetal, jordalkalimetal eller magnesium eller et ækvivalent af en amineret organisk base, kendetegnet 25 ved, at man a) behandler en forbindelse med formlen II VN_ 30 (ii) ' C02A' hvor R har samme betydning som ovenfor, og A' betegner et hydrogenatom eller en ved sur hydrolyse eller ved hydroge- 35 DK 161253B - 44 - nolyse let eliminerbar gruppe, med en syre med formlen III ΜΉ-R λ' 5 \ / 8 syn-isomer \--/ . ^OH (III)

2. Analogifremgangsmåde ifølge krav 1, kendeteg net ved, at man fremstiller forbindelserne med formlen I1' og deres salte, hvilke forbindelser med formlen I'1 og 2 salte svarer til forbindelserne med formlen I, hvor R og R har den i krav 1 angivne betydning, og A betegner et hydro-10 genatom, et ækvivalent alkalimetal, jordalkalimetal eller magnesium eller et ækvivalent af en amineret organisk base.

3. Analogifremgangsmåde ifølge krav 1, kendeteg -net ved, at man fremstiller forbindelser med formlen I, 15 hvor R betegner en gruppe -ch2-s-r' hvor R' betegner enten en acylgruppe med 2-4 carbonatomer eller gruppen 2-methyl-l,3,4-thiadiazolyl eller gruppen 1--methyltetrazolyl. 20

4. Analogifremgangsmåde ifølge krav 1, kendeteg -net ved, at man fremstiller forbindelser med formlen 111, hvor R betegner en gruppe -CH„-S-R1 25 1 hvor R' betegner enten en acylgruppe med 2-4 carbonatomer eller gruppen 2-methyl-l,3,4-thiadiazolyl eller gruppen 1--methyltetrazolyl.

5. Analogifremgangsmåde ifølge krav 1, kendeteg -30 net ved, at man fremstiller forbindelser med formlen I, hvor R betegner en alkylgruppe med 1-5 carbonatomer eller en cycloalkylgruppe med 3-5 carbonatomer.

6. Analogifremgangsmåde ifølge krav 1, kendeteg 35 net ved, at man fremstiller forbindelser med formlen I, 2 hvor R betegner methyl, R betegner gruppen -ch2-s-r' DK 161253 B - 48 - hvor R' betegner acetyl, 2-methyl-l,3,4-thiadiazolyl eller 1-methyltetrazolyl, og A betegner et hydrogenatom eller et alkalimetalatom.

7. Analogifremgangsmåde ifølge krav 1, kendeteg net ved, at man fremstiller forbindelser med formlen 2 111, hvor R betegner methyl, R betegner gruppen -ch2-s-r' hvor R' betegner acetyl, 2-methyl-l,3,4-thiadiazolyl eller 10 1-methyltetrazolyl.

8. Analogifremgangsmåde ifølge krav 1, kendeteg - net ved, at man fremstiller forbindelser med formlen I, 2 hvor R betegner methyl, R betegner methyl eller isopropyl, 15 og A betegner et hydrogenatom.

9. Analogifremgangsmåde ifølge krav 1, kendeteg net ved, at man fremstiller forbindelser med formlen I, 2 hvor R betegner methyl, R betegner en gruppe 20 -CH2-S-R' hvor R' betegner en acylgruppe med 2-4 carbonatomer, og A betegner et hydrogenatom eller et ækvivalent alkalimetal.

10. Analogifremgangsmåde ifølge krav 1, kendeteg- 25 net ved, at man fremstiller forbindelser med formlen 2 I'', hvor R betegner methyl, og R betegner en gruppe -ch2-s-r' hvor R' betegner en acylgruppe med 2-4 carbonatomer.

10. OR2 eller med et funktionelt derivat af denne syre, i hvilken 1' formel III R betegner en ved sur hydrolyse eller ved hy- 2 drogenolyse let eliminerbar gruppe, og R har samme betydning som ovenfor, til opnåelse af et produkt med formlen 1'

11. Analogifremgangsmåde ifølge krav 1, kendeteg net ved, at man fremstiller 7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)--2-methoxyiminoacetyl)-amino)-3-((2-methyl-l,3,4-thiadia-zol-5-yl)-thiomethyl)-ceph-3-em-4-carboxylsyre, syn-isomer.

12. Analogifremgangsmåde ifølge krav 1, kendeteg net ved, at man fremstiller 7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)~ -2-methoxyiminoacetyl)-amino)-3-((1-methyltetrazol-5-yl)- - 49 - -thiomethyl)-ceph-3-em-4-carboxylsyre, syn-isomer. DK 161253 B

13. Analogifremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at man fremstiller natriumsaltet af 7-((2-(2--amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl)-amino )-3-((2-me- 5 thyl-1,3,4-thiadiazol-5-yl)-thiomethyl)-ceph-3-em-4-carb-oxylsyre, syn-isomer.

14. Analogifremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at man fremstiller natriumsaltet af 7-((2-(2- 10 -amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl)-amino )-3-((1-me-thyltetrazol-5-yl)-thiomethyl)-ceph-3-em-4-carboxylsyre, syn-isomer.

15. Analogifremgangsmåde ifølge krav 1, kendeteg-15 net ved, at man fremstiller det amorfe natriumsalt af 3- -acetylthiomethyl-7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl )-amino)-ceph-3-em-4-carboxylsyre, syn-isomer.

15 NH-Rl' Λ i (i-) syn-isomer ' . s ! 5^0 \)R2 co2a’ 25 hvilken forbindelse med formlen I1 man behandler med et middel til sur hydrolyse, med et hydrogenolysemiddel eller 11 med begge disse midler alt efter værdierne af R og af A1 til opnåelse af et produkt med formlen I,f NH« 30 i sAi -0 \ / I ‘ (I») syn-isomer —\ -

35 I ^ V—'-Τ'* 002H DK 161253 B - 45 - svarende til et produkt med formlen I, hvor A betegner et 2 hydrogenatom, og R og R har samme betydning som ovenfor, hvilke forbindelser med formlen I *' man omdanner til salte, hvis dette ønskes, til opnåelse af produkterne med formlen 5 I, hvor A betegner et ækvivalent alkalimetal, jordalkalime-tal eller magnesium eller et ækvivalent af en amineret organisk base, eller b) til fremstilling af produkterne med formlen I1' f2 10 cT5* Q ujl syn-isomer J (ln) 15. g JR 0E <f T ccyi og deres salte, i hvilken formel I1', R og R^ har samme betydning som ovenfor og svarende til en forbindelse med 2 20 formlen I, hvor A betegner et hydrogenatom, og R og R har samme betydning som ovenfor, enten omsætter en syre med et 1 · salt af en forbindelse med formlen I', hvor R betegner en ved sur hydrolyse let eliminerbar gruppe, til opnåelse af et produkt med formlen I1', eller man omsætter et hydroge- 25 nolysemiddel med et salt af et produkt med formlen I', hvor 1 · R betegner en ved hydrogenolyse let eliminerbar gruppe, til opnåelse af et salt af en forbindelse med formlen I1', eller c) til fremstilling af forbindelserne med formlen I n 30 -i NH-IT syn-isomer Ar ίΐ 1 Ύ-f Ί I 0j^ M VS^N'CII2-S-Ri oe2 ov1; DK 161253B - 46 -

16. Analogifremgangsmåde ifølge krav 1, kendeteg-20 net ved, at man fremstiller det krystallinske natriumsalt af 3-acetylthiomethyl-7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)-2--methoxyiminoacetyl)-amino)-ceph-3-em-4-carboxylsyre, syn-isomer.

17. Analogifremgangsmåde ifølge krav 1, kendeteg net ved, at man fremstiller 3-acetylthiomethyl-7-((2-(2--amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl)-amino)-ceph-3-em--4-carboxylsyre, syn-isomer, og det tilsvarende krystallinske natriumsalt. 30

18. Analogifremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at man fremstiller det amorfe natriumsalt af 3--acetylthiomethyl-7-((2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl ) -amino )-ceph-3-em-4-carboxylsyre, syn-isomer, og 35 det tilsvarende krystallinske natriumsalt.