NL8004943A - Werkwijze voor de bereiding van een geneesmiddel en nieuwe alkyl-aximverbindingen van 7-aminothiazolyl- -aceetamido-cefalosporaanzuur. - Google Patents

Description

Korte aanduidingj Werkwijze voor de bereiding van een geneesmiddel en nieuwe alkyl-aximverbindingen van 7-afflinothiazolyl- aceetamido-cefalosporaanzuur. ______________ 805092/Ar/cd

De uitvinding heeft betrekking op een werkwijze voor de bereiding van een geneesmiddel die gekenmerkt is doordat men als werkzaam bestanddeel een nieuwe alkyloximverbinding van 7-ami&o-thia-zolyl-aceetamidocefalosporaanzuur met de algemene formule 1 van het 5 formuleblad, waarin fi een groep -Cïïg-S-R' voorstelt, waarbij R* een acylgroep met 2-4 koolstofatomen, een 2-methyl 1,5,4-thiadiazolyl-groep of een 1-methyltetrazolylgroep voorstelt, R^ een waterstofatoom,

Rg een verzadigde alkylgroep met 1-4 koolstofatomen, en A een waterstofatoom, een equivalent van een alkalimetaal, aardalkalimetaal, ^0 magnesium of een organische stikstofbase, en de golflijn aangeeft, dat de groep ORg zich in de synstand bevindt in een voor geneeskundige doeleinden geschikte toedieningsvorm brengt.

Als acylgroep voor de groep R· kunnen genoemd worden de acetyl-, propionyl, nAbutyryl- of isobutyrylgroep# 15 Als betekenissen van Rg kunnen genoemd worden methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, sec.butyl of tert.butyl.

Tan de betekenissen van A kunnen in het bijzonder genoemd worden een equivalent van natrium, kalium, lithium, calcium of magnesium; van de organische stikstofbasen kunnen genoemd worden tri-20 methylamine, triethylamine, methylamine, propylamine, Ν,ϋ-dimethyl-ethanol amine of tris(hydroxy-methyl)aminomethaan, arginine of lysine.

De uitvinding heeft ook betrekking op een werkwijze voor de bereiding van de verbindingen met de algemene formule 1,waarin de 25 groep OR2 zich in de syn-stand bevindt volgens op zichzelf voor analoge verbindingen bekende wijze.

De uitvinding heeft eveneens in het bijzonder betrekking — op een werkwijze voor de bereiding van de verbindingen met formule 1, waarin A een waterstofatoom, een equivalent van een alkalimetaal, 30 aardalkalimetaal, magnesium of een organische stikstofbase voorstelt.

Als bijzondere voorkeursverbindingen met de algemene for-* mule 1, kunnen de hierna in de voorbeelden beschreven verbindingen genoemd worden, in het bijzonder} -2- 7-(/2-(2 -amino-4-thiazolyl) 2-methoxy-imino-acetyl/amino) 5-/(1-methyl- tetrazol-5-yl)thiomethyl/ cef-3-em-4-carbonzuur, syn-isomeer; 7-(/2-(2-amino-4-thiazolyl) 2-methoxy-imino-acetyl/ amino) 3-/(2-methyl-1,3» 4-thiadiazol-5-yl)thiomethyl·/ cef-3-em-4-carbonzuur, 5 syn-isomeer; 3-acetylthiomethyl-7-(/2-(2-amino-4-thiazolyl)2-methoxy-imino-acetyl/ amino) cef-3-em-4-carbonzuur, ayn-isomeer; 3- acetyl-thiomethyl-7-(/2-(2-amino-4-thiazolyl)2-methoxy-imino-acetyl/ amino) cef-3-em-4-carbonzuur, zoals verkregen op de in voorbeeld 10 III» trap B beschreven wijze.

Het natriumzout van 7- (/2-(2 -amino-4-thiazolyl)2-methyl-imino-acetyl/amino) 3-/2-methyl-1,3y4-thiadiazol-5-yl)thiomethyl/ cef-3-em-4-carbonzuur, syn-isomeer;

Het natriumzout van 7-(/2-(2-amino-4-thiazolyl)2-methoxy-15 imino-aeetyl/amino) 3-/(1-methyltetrazol-5-yl)thiomethyl/cef-3-em- 4- carbonzuur, syn-isomeer.

Het natriumzout van 3-acetylthiomethy1-7-(/2-(2-amino- 4-thiazolyl)2-methoxy-imino-acetyl/amino) cef-3-em-4-carbonzuur, syn-isomeer; 20 en het kristallijne natriumzout van 3-acetylthiomethyl 7-(/2-(2-amino-4-thiazoly1)2-me thoxyiminoace tyl/amino) cef-3-em-4-carbonzuur, syn-isomeer.

Volgens een bepaalde werkwijze der uitvinding bereidt men de verbindingen met formule 1 syn-isomeer door behandeling van een.

25 verbinding met formule 2 van het formuleblad, waarin R de eerdergenoemde betekenis bezit en A4 een waterstofatoom of een gemakkelijk door zure hydrolyse of hydrogenolyse te verwijderen groep voorstelt, met een zuur met formule 3 syn-isomeer van het formuleblad of een funktioneel derivaat daarvan, waarin R4^ een gemakkelijk door zure 30 hydrolyse of hydrogenolyse te verwijderen groep voorstelt en Rg de eerdergenoemde betekenissen bezit, onder vorming van een verbinding met formule 4 van het formuleblad, syn-isomeer, welke verbinding men met formule 4 behandelt met een middel voor zure hydrolyse of een middel voor hydrogenolyse of met beide middelen, afhankelijk van de 35 betekenissen van R*^ en Af, onder vorming van een verbinding met formule 1, overeenkomende met een verbinding met formule 1, waarin A een waterstofatoom voorstelt en R en Rg de eerdergenoemde betekenissen bezitten, en eventuele omzetting van de verbindingen met formule 1f 8004943 -3- ·* j_.

volgens gebruikelijke methoden, onder vorming van de verbindingen met formule 1, waarin A een equivalent van een alkalimetaal, aardalkalimetaal, magnesium of een organische stikstofbase Voorstelt.

Volgens een voorkeursuitvoeringsvorm van de werkwijze 5 behandelt men de verbinding met formule 2 met een funktioneel derivaat van het zuur met formule 3, zoals het anhydride of zuurchloride, waarbij het anhydride in situ.igevormd kan worden door inwerking van isobutyl-chloorformiaat of dicyclohexylcarbodiimide op het zuur. Men kan tevens gebruik maken van andere halogeniden of andere anhydriden, die in situ ge-10 vormd worden door inwerking van andere alkyl-chloorformiaten, een dialkyl-carbodiimide of een ander dicycloalkylcarbodiimide. Tevens kan men gebruik maken van andere zuurderivaten, zoals het azide, amide of een aktieve ester, die bijvoorbeeld gevormd kan worden met hydroxysuccinimide, para-nitrofenol of 2,4-dinitrofenol. Wanneer de reaktie van de verbinding met 15 formule 2 uitgevoerd wordt onder toepassing van een halogenide van het • zuur met de algemene formule 3 of een met behulp van isobutylchloorformi-aat gevormd anhydride, werkt men bij voorkeur in aanwezigheid van een basisch middel.

Als basisch middel kan men bijvoorbeeld gebruik maken van 20 een alkalimetaalcarbonaat, of een tertiaire organische base, zoals N-methylmorfoline, pyridine of een trialkylaraine, zoals triethylamine·

De eventuele omzetting van de verbindingen met formule k in verbindingen met formule 1' heeft tot doel om de substituent R'^ te vervangen door een waterstofatoom, en, wanneer A' geen waterstofatoom is, 25 A' te vervangen door een waterstofatoom.

Hiertoe behandelt men de verbinding met formule 4 met behulp van een zuur hydrolysemiddel, wanneer R'^-een gemakkelijk door zure hydrolyse te verwijderen groep, en A* een waterstofatoom of een gemakkelijk door zure hydrolyse te verwijderen groep voorstelt.

30 Men behandelt de verbinding met formule k met een hydro- genolysemiddel, wanneer R'^ een gemakkelijk door hydrogenolyse te verwijderen groep en A' een waterstofatoom of een gemakkelijk door hydrogenolyse te verwijderen groep voorstelt.

Men behandelt de verbinding met formule k met een zuur 35 hydrolysemiddel en een hydrogenolysemiddel, wanneer een van de substitu-enten R’^ en A' een gemakkelijk door zure hydrolyse te verwijderen groep

»2 β Ρ· f . I T

- w V ·3 α en de andere substituent een gemakkelijk door hydrogenolyse te verwijderen groep voorstelt.

Jf-

Als zuur hydrolysemiddel, waarmee men de verbindingen met formule if eventueel behandelt, kunnen genoemd worden mierezuur, tri-5 fluorazijnzuur of azijnzuur. Deze zuren kunnen toegepast worden in water-vrije vorm of in een waterige oplossing. Tevens kan men gebruik maken van de kombinatie zink-azijnzuur.

Bij voorkeur gebruikt men een zuur hydrolysemiddel, zoals watervrij trifluorazijnzuur of waterige oplossingen van mierezuur of azijn-10 zuur ter verwijdering van de tert.butoxycarbonylgroep of tritylgroep, die de groep kan voorstellen, of de benzhydryl-, tert.butyl- of para-methoxybenzylgroep, die A' kan voorstellen.

Bij voorkeur gebruikt men de combinatie van zink en azijnzuur voor de verwijdering van de trichloorethylgroep, die R'^ en A’ 15 kunnen voorstellen.

Men gebruikt bij voorkeur een hydrogenolysemiddel, zoals waterstof in aanwezigheid van een katalysator, ter verwijdering van de di-benzyl- en carbobenzyloxygroepen, die R’^ kan voorstellen, en de benzyl-groep, die R1^ en A' kunnen voorstellen.

20 De verbindingen met formule k of 11 kunnen volgens ge bruikelijke methoden omgezet worden in zouten. De zouten kunnen bijvoorbeeld bereid worden door deze zuren te laten reageren met een anorganische base, zoals bijvoorbeeld natriumhydroxyde of kaliurahydroxyde of natriumbicarbonaat, of een zout van een al dan niet gesubstitueerd alifatisch 25 carbonzuur, zoals diethylazijnzuur, ethyl-hexaanzuur of, in het bijzonder azijnzuur.

Aan de natriumzouten van de eerdergenoemde zuren wordt de voorkeur gegeven.

De omzetting in zouten kan tevens uitgevoerd worden met 30 behulp van een organische base, zoals triethylamine of diethylamine.

Voor de bereiding van de zouten kunnen eveneens de sol-vaten van de vrije zuren toegepast worden als uitgangsprodukten in plaats van de vrije zuren.

De zoutvorming wordt bij voorkeur uitgevoerd in een op-35 losmiddel of een mengsel van oplosmiddelen, zoals water, ethylether, methanol, 8004943 ·* * -5- ethanol of aceton.

Afhankelijk van de toegepaste reaktieomstandigheden worden de zouten in amorfe of kristallijne vorm verkregen.

De kristallijne zouten worden bij voorkeur bereid door . 5 reaktie van de vrije zuren met een van de eerdergenoemde zouten van ali-fatische carbonzuren, bij voorkeur natriumacetaat.

Bij de bereiding van eén natriumzout wordt de reaktie uitgevoerd in een geschikt organisch oplosmiddel, zoals bijvoorbeeld methanol, dat kleine hoeveelheden water kan bevatten.

10 De uitvinding heeft zeer in het bijzonder betrekking op een werkwijze voor de bereiding van de verbindingen met formule 1, waarin de groep Oï^ zich in de s^n-stand bevindt, onder toepassing van verbindingen met formule 3, waarin de groep OR^ zich eveneens in de syn-stand bevindt.

15 De uitvinding heeft tevens betrekking op een variante uitvoeringsvorm van de werkwijze voor de bereiding van de verbindingen met formule 1 en zouten daarvan, waarin R en Rg de eerdergenoemde betekenissen bezitten, en overeenkomende met een verbinding met formule 1, waarin R^ en A elk een waterstofatoom voorstellen en R en R^ de eerdergenoemde beteke-20 nissen bezitten, welke werkwijze tot kenmerk heeft, dat men een zout van een verbinding met formule waarin R'^ een gemakkelijk door zure hydrolyse te verwijderen groep voorstelt, behandelt met een zuur onder vorming van een verbinding met formule 1, ofwel een zout van een verbinding met formule 4, waarin R’^ een gemakkelijk door hydrogenolyse te verwijderen 25 groep voorstelt, behandelt met een hydrogenolysemiddel, onder vorming van een zout van een verbinding met formule 1.

De voor de hydrolyse van de zouten van de verbindingen met formule b, waarin R'^ een gemakkelijk door zure hydrolyse te verwijderen groep voorstelt, toegepaste zuur, is bij voorkeur mierenzuur. Men kan 30 echter tevens gebruik maken van trifluorazijnzuur of azijnzuur. Deze zuren kunnen in watervrije vorm of in een waterige oplossing toegepast worden.

Voor de hydrogenolyse van de zouten van de verbindingen met formule waarin R'^ een gemakkelijk door hydrogenolyse te verwijderen __ groep voorstelt, kan men bijvoorbeeld gebruik maken van katalytische hydro-35 genering.

De uitvinding heeft eveneens betrekking op een variante uitvoeringsvorm van de werkwijze voor de bereiding van de verbindingen met formule 1', welke tot kenmerk heeft dat men een verbinding met formule 2, 8 0 0 A 9 4 3 -6- waarin R en A’ de eerdergenoemde betekenissen bezitten, behandelt met een zuur met formule 3a synisomeer of een funktioneel derivaat van dit zuur, waarin de eerdergenoemde betekenissen bezit, onder vorming van een verbinding met formule 6 van het formuleblad, die men behandelt met thioureum 5 en eventueel, afhankelijk van de betekenis van A', met een zuur hydrolyse-middel of een hydrogenolysemiddel, onder vorming· van een verbinding met de vormule 1'.

De reaktie van het zuur met formule 2 met het zuur met formule 3a wordt uitgevoerd onder dezelfde omstandigheden als voor de 10 reaktie van het zuur met formule 2 met het zuur met formule 3 ·

De reaktie van thio-ureum met de verbinding met formule 6 wordt bij voorkeur uitgevoerd in neutraal of zuur milieu. Dit type reaktie is beschreven door MASAKI (JACS 90, 4508 (1968)).

De uitvinding heeft tevens betrekking op een werkwijze 15 voor de bereiding van verbindingen met formule 1 van het formuleblad, waarin A een waterstofatoom of een equivalent van een alkalimetaal, aardalkalimetaal, magnesium of een organische stikstofbase voorstelt, overeenkomende met de verbindingen met de algemene formule 1, waarin R een groep -CH^-S-R' voorstelt, waarin R' een acylgroep met 2-4-koolstofatomen, een 2-methyl-20 1,3,4-thiadiazolylgroep of een 1-methyltetrazolylgroep voorstelt, door behandeling van een verbinding met formule 7 van het formuleblad, waarin R,, de eerdergenoemde betekenissen bezit met een verbinding met formule 5 van het formuleblad, waarin R' de eerdergenoemde betekenis bezit, onder vorming van een verbinding met formule 1', syn-isomeer, die men eventueel 25 omzet in een zout onder vorming van verbindingen met formule 1 waarin A een equivalent van een alkalimetaal, aardalkalimetaal, magnesium of een organische stikstofbase voorstelt.

De reaktie van de verbinding met formule 5 met de verbinding met formule 7 wordt bij voorkeur uitgevoerd in een mengsel van 30 water en aceton, doch men kan tevens gebruik maken van een mengsel van water met een ander oplosmiddel, zoals dioxan, tetrahydrofuran of ethanol.

De reaktie wordt bij voorkeur uitgevoerd in aanwezigheid van een buffer, waardoor in het milieu een enigszins zure pH wordt gehandhaafd, zoals een mengsel van zuur natriumfosfaat en natriumbicarbonaat, 35 doch men kan tevens zonder buffer werken.

8004943 ' t -7-

De omzetting van verbindingen met formule 1' in zouten kan uitgevoerd worden volgens de eerder beschreven gebruikelijke methoden.

De uitvinding heeft in het bijzonder betrekking op een 5 werkwijze voor de bereiding van de verbindingen met formule 1, waarin de groep 0S2 zich in de syn-stand bevindt, waarbij men uitgaat van verbindingen met formule 7» waarin de groep 0&2 zich in de syn-stand bevindt.

De verbindingen met de algemene formule 1, met de syn-10 configuratie, bezitten een zeer goede antibiotische werking, zowel ten opzichte van gram-positieve bacteriën, zoals stafylococcen, streptococcen en in het bijzonder tegen penicilline-resistente stafylococcen, als ten opzichte van gram-negatieve bacteriën, in het bijzonder colibacillen, Klebsiella, Salmonella en Proteus.

15 Op grond van deze eigenschappen kunnen deze farmacologi sch aanvaardbare verbindingen toegepast worden als geneesmiddelen voor de bestrijding van aandoeningen tengevolge van ziektekiemen, in het bijzonder door stafylococcen veroorzaakte aandoeningen, zoals septicemie, kwaadaardige aandoeningen van het gezicht of de huid, 20 pyodemitis9 septische of etterende wonden, anthrax, phlegmonen, exe-sipelas, spontaan of na griep optredende acute stafylococciën, longontstekingen en longetteringen.

Deze farmacologisch aanvaardbare produkten kunnen tevens toegepast worden als geneesmiddelen voor de behandeling van Coli-25 bacillosen en daarmee gepaard gaande infekties, infekties met Proteus, Klebsiella en Salmonella en andere door gram-negatieve bacteriën veroorzaakte aandoeningen.

De farmacologisch aanvaardbare verbindingen met formule 1 syn-isomeer kunnen toegepast worden voor de bereiding van geneesmid-50 delen, die als werkzaam bestanddeel tenminste een van deze verbindingen bevatten*

Zeer in het bijzonder kunnen de samenstellingen genoemd worden, die als werkzaam bestanddeel tenminste een van de volgende farmacologisch aanvaardbare verbindingen met formule 1 bevatten: 8004943 -8- 7-ί/“2-(2 -amino-4-thiazolyl)-2-methoxy-imino-acetyl7amino) 3-/~(1-methyl-tetrazol-5-yl)thiomethyl7 cef-3-em-4-carbonzuur, s^n-isomeer, 7-ί/“2-(2 -amino-thiazolyl)2-methoxy-imino-acetyl7amino) 3”/”(2-methyl-1,3, 4-thiadiazol-5-yl)thiomethyl7 cef-3-em-4-carbonzuur, sjrn-isoraeer, 5 3**acetylthiomethyl-7-^/~ 2-(2-amino-4-thiazolyl)2-methoxyimino-acetyl7 amino) cef-3-em-4-carbonzuur, sjn-isomeer, 3-acetylthiomethyl-7-^/”2-(2-amino-4-thiazolyl)2-methoxy-iraino-acetyl7 amino) cef-3-em-4-carbonzuur, zoals verkregen op de in voorbeeld II Trap B beschreven wijze; 10 het natriumzout van 7-£/”2-(2-amino-4-thiazolyl)2-methoxyimino-aeetyl7 amino) 3-/”(2-methyl-1,3,4,-thiadiazol-5-yl)thiomethyl7cef-3-em-4-carbon-zuur, sgn-isomeer, het natriumzout van 7-^/”2-(2-amino-4-thiazolyl)2-methoxy-ïmino-acetyl7 amino) 3-/”(1-methyltetrazol-5-yl)thiomethyl7 cef-3-em-4-carbonzuur, 15 s^n-isomeer, het natriumzout van 3-acetylthiomethyl-7-£/~2-(2-amino-4-thiazolyl) 2-methoxyimino-acetyl7amino) cef-3-eo-4-carbonzuur, sjn-iaomeer, en het kristallijne natriumzout van 3-acetylthiomethy1-7-( /”2-(2-amino-4-thiazolyl)2-methoxy-imino-acetyl7amino) cef-3-em-4-carbonzuur, sffa-isomeer» 20 Deze samenstellingen kunnen oraal, rectaal, parenteraal, intramusculair of door plaatselijk aanbrengen op de huid en de slijmvliezen toegediend worden.

De samenstellingen kunnen vast of vloeibaar zijn en de voor toediening van geneesmiddelen aan mensen gebruikelijke vormen bezit-25 ten, zoals bijvoorbeeld tabletten, dragees, capsules, poeders, supposi-toria, injekteerbare preparaten, zalven, crèmes, geleien. Ze kunnen bereid worden volgens de gebruikelijke methoden. De werkzame bestanddelen kunnen in de preparaten opgenomen worden met gebruikelijke excipièntia, zoals talk, arabische gom, lactose, zetmeel, magnesiumstearaat, cacao-boter, 30 al dan niet waterige dragers, vetten van dierlijke of plantaardige oorsprong, paraffineverbindingen, glycolen, verschillende bevochtigingsmiddelen, dispergeermiddelen of emulgatoren en conserveermiddelen.

35 8004943 -9-

De toegediende dosis hangt af van de behandelde aandoening, de patiënt, de wijze van toediening en de toegepaste verbinding· Bijvoorbeeld kan de dosis voor het in Voorbeeld II, Trap B of Voorbeeld III, Trap B beschreven produkt tussen 0,250 en 4 g per dag bij orale toediening 5 aan mensen of tussen 0,500 en 1 g, driemaal per dag, bij intramusculaire of intraveneuze toediening bedragen.

De uitvinding verschaft tevens als nieuwe industriële produkten de verbindingen met formule 11 van het formuleblad, waarin E de eerdergenoemde betekenissen bezit, die toegepast kunnen worden voor de 10 bereiding van de eerderbeschreven verbindingen met formule 1*.

De verbindingen met formule 2, waarin E een groep -CHg^S-E' voorstelt, die niet bekend zijn, kunnen bereid worden door een uitwisselingsreaktie uitgaande van 7-amino-cefalosporaanzuur. Een voorbeeld van een dergelijke bereiding is in het nog volgende experimentele gedeelte 15 toegelicht·

De verbindingen met formule 3 worden bereid door reaktie van thio-ureum met een verbinding met formule 8 van het formuleblad, waarin #2 de eerdergenoemde betekenissen bezit en alc een alkylgroep met 1-4 koolstof atomen voorstelt, waarbij men na behandeling met een base een verbin-20 ding met formule 9 van het formuleblad verkrijgt, die men behandelt met een funktioneel derivaat van een gemakkelijk door zure hydrolyse of hydrogeno-lyse te verwijderen groep onder vorming van een verbinding met formule 10 van het formuleblad, waarin B'^, B^ en alc de eerdergenoemde betekenissen bezitten, welke verbinding men behandelt met een base en vervolgens met 25 een zuur onder vorming van de gewenste verbindingen met formule 2. Een voorbeeld van een dergelijke bereiding is gegeven in het hiernavolgende experimentele gedeelte.

Men verkrijgt de verbindingen met formule 3 ®et de syn-configuratie, wanneer de reaktie van thioureum met de verbindingen met 30 formule 8, ofwel wordt uitgevoerd in een waterig oplosmiddel, zoals waterige aceton of waterige ethanol ofwel bij kamertemperatuur onder toepassing van een vrijwel stoechiometrische hoeveelheid thioureum en gedurende een tamelijk korte tijd van ongeveer 1 tot 3 uren, ofwel onder toepassing van een combinatie van de eerdergenoemde omstandigheden· 35 De syn-configuratie van de verkregen verbindingen met for mule 9 kan vervolgens behouden worden voor de verbindingen met formule 10 8004943 -10- βη formule 3.

De verbindingen met formule 6 worden bereid door reaktie van diazomethaan of overeenkomstige alkylhalogeniden of alkylsulfa-ten met ethyl-y-chloor-a-oxyimino-acetylacetaat, beschreven in 5 J. of Medicinal Chemistry, 1975» 1£ (?)» 278·

De verbindingen met formule 7 worden bereid door reaktie van een zuur met formule 3» waarin en Hg de eerdergenoemde betekenissen bezitten, met 7-aminocefalosporaanzuur, eventueel gevolgd door een zure hydrolyse of hydrogenolyse, Sen voorbeeld van een der-10 gelijke bereiding is gegeven in het hiernavolgende experimentele gedeelte.

De verbindingen met formule 7 net de syn-configuratie worden verkregen door reaktie van de op de eerder beschreven wijze verkregen verbindingen met formule 3 met de syn-configuratie met 15 7-aminocefalosporaanzuur.

De uitvinding wordt toegelicht door de hiernavolgende niet-beperkende voorbeelden.

Voorbeeld I, Trap Ai 7-(/2-(2-tritylamino-4-thiazolyl)-2-methoxy-imino-acetyl/aminoj 3-/2-methyl-1,3,4-thiadiazol-5-yl)thiomethyl/ 20 cef-3-em-4-carbonzuur.

Men mengt 2,5 g van het natriumzout van 2-(2-tritylamino- 4-thiazolyl)2-methoxyiminoazijnzuur met 40 cm^ methyleenchloride 3 en 5 cm 2 ÏT zoutzuur. Men decanteert, wast met water, droogt en concentreert.

25 Men lost het ruwe zuur op in 30 cm droge tetrahydrofuran.

Men voegt 0,7 g dicyclohexylcarbodiimide toe, roert 45 min. bij kamertemperatuur, filtreert het gevormde bicyclohexylureurn af, koelt tot -5°C en voegt een oplossing van 0,895 g 7-amin*-3-/(2-methyl- 3 1,3,4-thiadiazol-5-yl)thiomethyl/ cef-3-em-4-carbonzuur in 10 cnr 30 water en 0,9 cm^ triethylamine toe (vooraf gekoeld tot 0°C). Men laat de temperatuur in 1 uur en 30 min. stijgen tot kamertemperatuur, 3 dampt de tetrahydrofuran af, voegt 40 cm methyleenchloride toe, wast met verdund zoutzuur, vervolgens met water, droogt en dampt in tot droog.

35 Men loet het residu op in 8 cm^ dioxan en voegt druppels gewijs 3 cm^ van een verzadigde natriumbicarbonaatoplossing toe, roert 30 min., filtreert, wast met ether, verkrijgt 0,554 g van het uitgangsprodukt in de vorm van het natriumzout, dampt de dioxan af, neemt op in methyleenchloride, wast met 1N zoutzuur, vervolgens 40 met water, droogt en dampt in tot droog. Men wrijft het produkt fijn 8004943 f · -ilia ether, filtreert, wast en verkrijgt 1,9 g ruw produkt.

x 3

Men roert dit produkt in 5 cnr ethylacetaat, voegt 5 cm' ether toe, roert, filtreert en wast. Men verkrijgt 1,47 g gedeelte-lijk gezuiverd produkt, dat men oplost in 2 cnr methyleenchloride en 5 neerslaat met 25 cm^ ether. Na filtreren en wassen verkrijgt men 1,4 g van het gewenste produkt.

Men verkrijgt aldus 7- (/2-(2 -tri tylamino-4-thi azolyl) 2-methoxyimino-ace tyl/amino) 3-/(2-methyl-1,3,4-thiadiazol-5-yl)thio-methyl/ cef-3-em-4-carbonzuur met de syn-configuratie,, 10 Trap Bs 7-^/2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxy-iminoacetyl/amino) 3-/(2-methyl-1,3,4-thiadiazol-5-yl)thiomethyl/cef-3-em-4-carbonzuur.

Men verhit de in trap A verkregen 1,4 g produkt 15 min. onder roeren in 5 cm^ 5Q$'s waterig mierezuur op 57°G· Men voegt x 3 5 cnr water toe, koelt tot kamertemperatuur, filtreert, voegt 5 cm' 3 15 ethanol toe, concentreert tot droog, wrijft het residu fijn in 5 cm' ethanol, filtreert, wast met ethanol en ether en verkrijgt 0,687 mg ruwe produkt.

3 3

Men lost het produkt op in 7 cm water en 0,2 cm triethyl-amine, filtreert, wast en zuurt aan met 0,2 cm^ 30°J>*a mierezuur. Men 2o roert, filtreert, wast met alcohol en ether. Men verkrijgt een eerste hoeveelheid van 0,275 g·

Analyses C^H^O^S^ (0,5 StOH) (jé) berekend C 39,25 H 3»66 Ή 17,80 S23,28 gevonden 39,3 3,5 17,9 23,1 25 Het produkt bezit de syn-configuratie.

NMR (DMSO, 60 MHz) ppms 3,85 (N-OCHj) 6,76 (proton van de thiazool-ring).

Het als uitgangsprodukt in trap A toegepaste natriumzout van 2-(2-tritylamino-4-thiazolyl)2-methoxyimino-azijnzuur, syn-isomeer, 30 wordt bereid als volgts

Trap As Ethyl-Y-chloor-a-methoxyiminoacetylacetaats

Men brengt 22,5 g ethyl-y-chloor-a-oximino-acetylacetaat 3 in 100 cm methyleenchloride.

Men plaatst het geheel in een ijsbad en voegt langzaam 55 onder roeren 275 cm^ van een verse oplossing van diazomethaan (21,6 g/liter) toe. Men laat 15 min. reageren en breekt de overmaat diazomethaan met een beetje aluminiumoxyde af. Men concentreert, en zuivert vervolgens door elueren op siliciumdioxyde met behulp van methyleenchloride. Men verkrijgt 11,93 g van het gewenste produkt.

40 fjjrap bj EThyl-2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetaat. o Λ Λ /. Ω Λ τ 3 -12-

Men mengt 1 g ethyl-Y-chloor-a-methoxyiminoacetylacetaat, 3 car absolute ethanol en 0,42 g fijngemalen thioureum. Men roert ongeveer 2 uur bij kamertemperatuur. Men verdunt met 60 cnr ether, waarbij het verkregen ohloorhydraat uitkristalliseert, roert, fil- 5 treert, wast, droogteen verkrijgt 685 mg ohloorhydraat. Men lost dit 3 o op in 4 cnr water van 50 C en voegt kaliumacetaat toe tot een ρΞ van 6, waarbij het vrijgemaakte amine uitkristalliseert. Men koelt, filtreert, wast met water, droogt en verkrijgt 270 mg van het gewenste produkt. Smeltpunt 161°C.

Het verkregen produkt bezit de eyn-configuratie.

NMR (CEClj 60 MHz) ppm* 4»Q (H-QCHj), 6,7 (proton van de thiazool-ring).

Trap Cs Ethyl 2-(2-tritylamino-4-thiazolyl)2-methoxyiminoacetaat.

Men lost 4» 6 g van het in de voorafgaande trap verkregen 15 produkt bij 30°C op in 92 cm'* methyleenchloride. Men koelt tot -10°G, 3 o voegt 2,9 cm triethylamine toe, koelt opnieuw tot -35 C, voegt in 15 min. 6,1 g tritylchloride toe en laat de temperatuur gedurende in totaal 2 u. 30 min. stijgen tot kamertemperatuur. Men wast met water, vervolgens met 0,5 I zoutzuur en tenslotte met natriumacetaat 20 in water. Men droogt, concentreert, neemt op in ether, concentreert opnieuw, lost op in methanol, voegt water en ether toe, laat uitkristalliseren, filtreert, wast met ether en verkrijgt 6,15 g van het gewenste produkt. Smeltpunt 120°C.

Het verkregen produkt bezit de syn-configuratie.

25 Trap D* Natriumzout van 2-(2-tritylamino-4-thiazolyl)2-methoxy-iminoazijnzuur.

Men lost 7»01 g van de in trap B verkregen ester op in 35 cm^ dioxan. Men verhit op 110°C in een oliebad, voegt in 5 min.

3 9 cm 2N natriumhydroxyde-oplossing toe en kookt 30 min. onder roe-50 ren onder terugvloeikoeling. Het natriumzout kristalliseert uit.

Men koelt, filtreert, wast met dioxan, vervolgens met ether en verkrijgt een eerste hoeveelheid van 5»7^7 g zout. Men concentreert de moederoplossing en verkrijgt een tweede hoeveelheid van 1,017 g, d.w.z, in totaal 6,784 g van het natriumzout.

55 Het verkregen produkt bezit de syn-configuratie.

Voorbeeld II* Trap Ai 7- (/2-(2 -tri tylamino-4-thi azolyl)-2-me thoxy-iminoacetyl/amino) 3-/(1- methyltetrazol-5-yl) thiomethyl/cef-3-em- 4-carbonzuur.

Men gebruikt 2,33 g van het natriumzout van 2-(2-trityl-40 amino-4-thiazolyl)2-methoxyiminoazijnzuur, en tewerk gaande als in 8004943 -13- trap A van voorbeeld I, verkrijgt men het ruwe zuur, dat men oplost 3 in 50 cm methyleenchloride. Men voegt 0,7 g dicyclohexylcarbodiimide toe, en roert 50 min. bij kamertemperatuur onder een inert gas. Men filtreert het gevormde dieye1ohexylureum af, koelt tot -5°C en 5 voegt in een keer een oplossing van 0,854 g 7-amino-3-/(1-iaethylte-trazol-5-yl)thiomethyl/cef-5-em-4-carbonzuur in 1Q cm^ methyleenchloride en 0,73 cm^ triethylamine toe. Men laat de temperatuur stij- 3 gen tot kamertemperatuur, voegt 1 cur azijnzuur toe, filtreert na 10 min, wast met water, waaraan zoutzuur is toegevoegd, droogt, 3 3 10 concentreert, neemt op in 8 cnr dioxan en voegt 2,5 cnr van een verzadigde natriumbicarbonaatoplossing, toe. Men filtreert het verkregen natriumzout af, wast met een mengsel van etherdioxan (1-1) en vervolgens met ether. Men dampt het dioxan af, neemt op in methyleenchloride, wast met water, waaraan zoutzuur is toegevoegd, 15 droogt en concentreert. Men wrijft fijn in ether, filtreert, wast met ether en verkrijgt 2,29 g ruw produkt. Men roert het produkt vervolgens 1 uur bij 10°C in ethanol, filtreert, wast met ether en verkrijgt 1,42 g gezuiverd produkt.

Het verkregen produkt bezit de syn-configuratie.

20 Dit produkt kan men ook als volgt bereiden*

Men mengt 2,7 g 3-acetoxymethyl-7*4/2-(2-tritylamino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl/amino)cef-3-em-4-carbonzuur, 0,624 g mononatriumfosfaat, 1,51 S natriumbicarbonaat, 1m32 g 1-methyl-5- 3 3 mercaptotetrazool, 40 cnr water en 20 cnr aceton. Men laat 1 nacht 25 staan bij 48°C en verwarmt 1 uur op 60°C. Na zuivering verkreeg men het gewenste pyn-isomeer, dat identiek is aan de hierboven beschreven verbinding.

Het bij deze bereidingsvariant gebruikte 3-acetoxymethyl- 7-(/2-(2-tritylamino-4-thiazolyl)-2-methoxyimino-acetyl/amino) cef-30 3-em-4-carbonzuur, syn-isomeer bereid wordt als volgt*

Men brengt 3,06 g natriumzout van 2-(2-tritylamino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoazijnzuur in 65 cm methyleenchloride en 6,5 car 2N zoutzuur, wast met water, droogt en dampt in tot droog, waarbij men het vrije zuur kwantitatief verkrijgt.

35 Men lost het verkregen vrije zuur op in 30 cm'* droge methyleenchloride. Men voegt 0,78 g dicyclohexylcarbodiimide toe en roert 1 uur bij kamertemperatuur. Men filtreert het gevormde di- eyclohexylureum af, koelt tot -10°C, voegt een oplossing van 1,01 g 3 3 7-aminocefaloeporaanzuur in 13 cm methyleenchloride en 0,9 cm 40 triethylamine toe. Men laat de temperatuur stijgen tot kamertempera- 8001943 -14- tour, voegt 1 cm^ azijnzuur toe, filtreert, wast met water, waaraan zoutzuur is toegevoegd en vervolgens met water, droogt, dampt in tot droog, neemt op in 10 ml dioxan, en voegt 1 cm^ water en 3 cm'* verzadigde natriumbicarbonaatoplossing toe. Men roert, centrifugeert, wast 5 en dampt in tot droog. Men neemt op in methyleenchloride, wast met 3 3 1Q cm water en 5 cm 1N zoutzuur, decanteert, wast met water, droogt, wrijft fijn in ether en verkrijgt 1,747 g ruw produkt, dat men zuivert door oplossen in ethylacetaat, gevolgd door neerslaan met ether. Men verkrijgt 1,255 g zuiver produkt.

Het verkregen produkt bezit de syn-configuratie.

Trap_B : 7-(/ 2-amino-4-thiazolyl) ^^methoxy-imino-acetylj amino) S-Z^l-methyl-tetrazol-S-yl) thiomethyl7 cef-3-em

Men brengt 1,4 g van het in trap A bereide produkt in 5 cm3 50$'s waterige mierezuur in een waterbad op 55°C. Na 15 min. voegt men 5 cm3 water toe, koelt, filtreert, en concentreert het filtraat na hieraan 5 cm3 ethanol te hebben toegevoegd. Men neemt op in 5 cm3 alcohol, wrijft fijn, filtreert, wast met ethanol en vervolgens met ether, filtreert, droogt, neemt op in een mengsel van methyleenchloride en ether (1-1), filtreert en verkrijgt 0,557 g zuiver produkt.

8004943 -15-

Analyse : (0,5 EtOH)

Berekend : C% 38,19 H# 3,77 U 23,58 S>% 18,00

Gevonden : 38,1 3,9 22,5 17,7

Het produkt bezit de syn-configuratie.

5 RMN (DMSO, 60 MHz) p.p.m. : 3,83 (N-OCH^) 6,73 (proton van de thiazoolring). VOORBEELD III : TRAP A : 3-acetylthiomethyl-7-^/~2-(2-trityl^ino-^-thia-zolyl) 2-methoxyimino7acetylaminoI cef-3-em-4-carbonzuur.

Uitgaande van 3,1 g natriumzout van 2-/ (2-tritylamino-4-thiazolyl) 2-methoxy-imino7azi jnzuur in 40 cv? methyleenchloride en 6,5 3 10 cm 2N zoutzuur, bereidt men op de in Voorbeeld I beschreven wijze het 3 overeenkomstige zuur. Men lost dit zuur op in 30 cm methyleenchloride, voegt 0,8 g dicyclohexylcarbodiimide toe en roert 1 uur 30 minuten in een water-ijsbad. Men filtreert het gevormde dicyclohexylureura af, koelt tot -5°C en voegt in één keer een oplossing van 1,1 g 7-amino 3-acetylthio- 3 3 15 methyl-cef-3-em-4-carbonzuur in 13 cm methyleenchloride en 0,9 cm tri-ethylamine (van 0°C) toe. Men laat de temperatuur stijgen tot kamertemperatuur, voegt 1 cm^ azijnzuur toe, filtreert de onoplosbare stoffen af, wast met water, waaraan zoutzuur is toegevoegd en vervolgens met water, concentreert, neemt het residu op in dioxan, voegt 3,5 cm^ van een ver-20 zadigde natriumbicarbonaatoplossing toe, filtreert na 30 minuten, wast met een mengsel van dioxan en ether en verkrijgt 0,64 g van het oorspronke- 3 lijke natriumzout. Men dampt de dioxan af, neemt op in 30 cm methyleenchloride, wast met water, waaraan zoutzuur is toegevoegd (10 cm^ water en 10 cm^ 2N zoutzuur), vervolgens met water en concentreert. Men wrijft fijn 25 met 25 cv? ether, filtreert, wast en verkrijgt 1,89 g ruw produkt.

Men herkristalliseert tweemaal door oplossen in 3 cm^ ethylacetaat en toevoeging van 25 cm^ ether. Men verkrijgt 0,89 g van het gewenste produkt.

Het produkt bezit de syn-configuratie.

30 Het als uitgangsverbinding in Trap A toegepaste 7-amino 3-acetyl-thiomethyl-cef-3-em-4-carbonzuur wordt bereid als volgt:

Men brengt 5,44 g 7-amino-cefalosporaanzuur en 50 cm^ water van 1% hydrochinon onder een inert gas. Men roert en voegt 1,7 g natriumbicarbonaat toe, en voegt vervolgens na oplossen 3 g kaliumthio-35 acetaat toe. Men roert 3 uren bij 60°C, koelt en zuurt aan met azijnzuur.

8004943 -16-

Men roert bij kamertemperatuur, filtreert, wast, droogt en verkrijgt 4,9 g van het gewenste produkt.

THAP B : 3-acetylthiomethyl-7- Ê/~2-(2 -amino-^-thiazolyl)2-methoxy-imino-acetyl7amino? cef-3-em-4-carbonzuur.

5 - Men roert het in Trap A verkregen produkt 15 minuten in een bad van 55°C met 5 cm^ 50#’s waterig mierezuur, Men voegt 5 cm^ water toe, koelt tot kamertemperatuur, filtreert, voegt 5 cm^ alcohol aan het filtraat toe en concentreert tot droog. Men maakt het produkt fijn in 5 cm^ alcohol en verkrijgt in twee keer 440 mg produkt, dat men oplost 10 in 6 cm^ 5056*s waterige aceton. Men voegt 20 mg gasroet toe, filtreert en dampt de aceton gedeeltelijk af. Na filtreren verkrijgt men 0,265 g zuiver produkt.

Analyse: C^H^O^S^ (0,25 CH^COCH^

Berekend : C% 41,39 Wé 3,83 Wé 14,41 19,7& 15 Gevonden : 41,2 3,8 14,4 19,8

Het produkt bezit de sjrn-c on figuratie.

NMR (DMSO 60 MHz) 3,83 (N-OCH^); 6,73 (proton van de thiazoolring). VOORBEELD IV : 7-fΓ2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxy-imino-acetyl7amino ^ 3-/"(l-methyltetrazol-5-yl)thiomethyl7cef-3-em-4-carbonzuur. 20 Uitgaande van 1,7 g 3-acetoxymethyl ?“£/"*2-(2-amino-4- thiazolyl)-2-methoxyimino-acetyl7amino^-cef-3-em-4-carbonzuur, 0,624 g mononatriumfosfaat, 1,51 g natriumbicarbonaat, 1,32 g 1-methyl 5-mercapto-tetrazool, 4o cm3 water en 30 cm3 aceton, dat men 1 nacht laat staan bij 48°C en 1 uur verwarmt op 60°C, verkrijgt men het gewenste syn-isomeer, 25 dat identiek is aan de in Voorbeeld II, Trap B beschreven verbinding.

8004943 -17-

Het als uitgangsprodukt gebruikte 3-acetoxymethyl-7-[f 2-(2 -amino-^-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl7amino]cef-3-em-4-carbon-zuur, syn-isomeer, wordt als volgt bereid:

Men roert 0,975 g van het hierboven verkregen produkt 5 10 minuten bij 55°0 in ^ cm3 50$'s waterig mierezuur. Men voegt k cm3 water toe, filtreert, en dampt onder verminderde druk in tot droog· Men wrijft fijn in 2 cm3 ethanol, filtreert, wast met ethanol en vervolgens met ether en verkrijgt 0,^28 g zuiver produkt.

Het verkregen produkt bezit de syn-configuratie.

10 NMR (DMS0, 60 MHz) p.p.m.: 2,03-(C-CH-,), doublet 9»5δ, II 2 0 J = 8 Hz (C0NH); 6,76 (proton van de thiazoolring).

VOOBBEELD V : 5-ac e tylthiome thyl-7-^/~2-(2 -amino-^—thiazolyl-2-methoxy-irainoacetyl7amino -cef-3-em-4-carbonzuur, syn-isomeer.

15 Men bereidt een oplossing van k,55 g 3-acetoxymethyl-7- {/“2-(2-amino-4-thiazolyl)2-methoxyiminoacetyl7amino^-cef-3-em-if-carbon-zuur, syn-isoraeer, 1,7 g kaliumthioacetaat, 2 g gedehydrateerd mono-natriumfosfaat en 20 cm3 gedestilleerd water. Men verwarmt 1 uur en 30 minuten op 70°C. Men zuurt aan met 2 cm3 mierenzuur en extraheert met 2) vier maal 60 cm3 methylacetaat, waarbij men onopgeloste stof affiltreert.

8004943 -18-

Men wast de organische oplossing met water, droogt en dampt in tot droog· Men lost het verkregen residu op in 20 cm3 aceton met 10# water. Men voegt 0,5 g aktieve kool toe. Men roert 5 minuten, filtreert de kool af, wast met aceton met 10# water en dampt het filtraat in tot 5 droog. Men behandelt het residu met absolute ethanol, filtreert, wast met alcohol en vervolgens met ether en verkrijgt 1,9 g zuiver produkt.

NMR (DMSO, 60 MHz) 3,85 (N-OCH^); 6,75 (proton van de thiazoolring)·

Het produkt is identiek aan het in Voorbeeld VI verkregen produkt.

10 VOORBEELD VI : Natriumzout van 7-£/~2-(2-amino-4-thiazolyl)2-methoxyimino-acetyl7amino! 3-/** (2-methyl-1,3 Λ,-thiadiazol-5-yl)thio-methyl7cef-3-em-4-carbonzuur, syn-isomeer.

Aan een oplossing van 2,3 g 7"T/^2-(2Zamino-4-thiazolyl) 2-methoxy-iainoacetyl7amino]-3-/~(2-methyl-1,3, Wthiadiazol-5-yl)thio-15 methyl7cef-3-em-4-carbonzuur, syn-isomeer, bereid volgens Voorbeeld I,

Trap B in 5 cm3 aceton, voegt men een waterige natriumbicarbonaatoplossing toe tot een pH van 7 is verkregen. Men voegt 0,4 g beenderkool toe, roert 5 minuten, filtreert de kool af en wast met 50#’s waterige aceton.

Men voegt 50 cm3 ethanol aan het ontkleurde filtraat toe, 20 en dampt onder verminderde druk bij 30°C in tot droog. Men neemt het residu op in 5 cm3 ethanol, wrijft de kristallen fijn, filtreert, wast met ethanol en vervolgens met ether en verkrijgt 1,3 g van het gewenste produkt.

Analyse : Na : Berekend 4,18#, gevonden 4,70#.

25 Ultraviolet Spectrum_in_ethanol£

Max. 235 nm = 3&> . 19.800 265 nm =322 ,17.700 ' Λ

Buiging 280 nm E^ = 295 in 0,1 N zoutzuuroplossing in ethanol.

30 Buiging 218 nm E^j = 244

Max. 266-267 nm έ] = 4θ6 .22.300 Λ '

Buiging 280 nm E^ = 3^3« 35 8004943 -19- νΟΟΚΒΐτπτ,ρ νιχ» Natriumzout van 7-£/*2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxy- imino-acetyl7amino)-3-/"(1-methyl-tetrazol-5-vl)thiomethyl7 cef-3-em-4-carbonzuur, syn-isomeer.

Men brengt 3*35 g 7-C/~2-(2-amino-3-thiazolyl)2-methoxy-5 imino-acetyl7amino^-3-/”(1-methyl-tetrazol-5-yl)thiomethyl7cef-3-eo-4-carbonzuur, syn-isomeer, bereid volgens Voorbeeld II, Trap B, in 7 cm3 methanol en 7 cm3 van een molaire waterige oplossing van natriumbicarbonaat* Men roert 5 minuten bij kamertemperatuur, filtreert de onopgeloste deeltjes af, en wast deze tweemaal met een mengsel van gelijke delen methanol en 10 water.

Men voegt onder roeren eerst 85 cm3 ethanol toe, waarbij het natriumzout uitkristalliseert en voegt vervolgens 170 cm3 ether toe, roert 10 minuten, filtreert, wast met ethanol-ether (1-1), vervolgens met ether en droogt. Men verkrijgt 3*26 g van het gewenste produkt.

15 Men zuivert het produkt als volgtί

Men lost het zout op in 40 cm3 water, voegt 0,6 cm3 azijnzuur toe om de pH op 6,8-7 te brengen, verdunt met ethanol en dampt de oplosmiddelen onder verminderde druk bij een temperatuur beneden 35°C af. Men neemt op in ethanol ter verwijdering van het water en dampt in 20 tot droog.

Men neemt het residu op in 16 cm^ methanol en verdunt vervolgens met 160 cm3 aceton, waarbij het zout uitkristalliseert. Men roert 5 minuten, filtreert en wast met aceton en vervolgens met ether.

Men verkrijgt 2,3 g van het gewenste produkt.

25 /J- "13*5° + 1 (a 1% in water).

Analyse: Na : Berekend 4,31$, gevonden 4,8$.

VOORBEELD VIII: Natriumzout van 3-acetyl-thiomethyl-7- j/"2-(2 -amino-4- thiazolyl)-2-methoxy-imino-acetyl7amino jcef-3-em-4-carbon-zuur, syn-isomeer.

30 Men brengt 4,5 g 3-acetylthiomethyl-7- É/"2-(2 -amino-4- thiazolyl)-2-methoxyimino-acetyl7amino)cef-3-em-4-carbonzuur, syn-isomeer, bereid volgens Voorbeeld III, Trap B, bij kamertemperatuur in 9 cm3netha-nol en 9 cm3 van een molaire oplossing van natriumbicarbonaat in water.

Men roert 5 minuten bij kamertemperatuur, filtreert de onoplosbare deel-35 tjes af en wast met een mengsel van methanol en water (1—1)- Men voegt 8004943 -20- onder roeren 110 cm3 ethanol toe, waarbij het natriumzout uitkristalliseert, Men verdunt met 220 cm3 ethylether, roert, filtreert, en wast met een mengsel van ethanol en ether (1—1) en vervolgens met ether. Men droogt en verkrijgt het gewenste produkt.

5 Het verkregen natriumzout wordt als volgt gezuiverd.

Men lost het produkt op in 40 cm3 water en brengt de pH

op 6,8-7 door toevoeging van enkele druppels azijnzuur. Men verdunt met 100 cm3 ethanol en dampt de oplosmiddelen onder verminderde druk bij een temperatuur beneden 35°C af. Men wrijft het concentraat tweemaal fijn met 10 50 cm3 ethanol en dampt het na de tweede maal in tot droog. Men lost het residu op in 15 cm3 methanol, filtreert de onopgeloste stoffen af, en verdunt de oplossing vervolgens met 150 cm3 aceton.

Het natriumzout kristalliseert uit en men roert 5 minuten filtreert, en wast met aceton en vervolgens met ether. Men dampt onder 15 verminderde druk in tot droog, en verkrijgt 1,8 g van het gewenste produkt.

/~ fêP = -31° + 2 (a 0,6# in water).

D **

Analyse : Na = Berekend 4,65#, Gevonden 4,9 #.

Ultraviolet_Spectrum:

In ethanol : Max. 235 nm = 419 20

Buiging 260 nm = 343 1

Buiging 300 na = 122 In 0,1N zoutzuuroplossing in ethanol: 25 Buiging 230 nm E^ = 280

Max. 263 nm e\ = 391 . = 19.700.

VOORBEELD IX : Microkristallijn natriumzout van 3-acetylthiomethvl-7-f/~2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyimino-acetyl7amino cef-3-em-30 4-carbonzuur, syn-isomeer.

Men roert 471,5 mg 3-acetylthioraethyl-7-^/~2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyimino-acetyl7amino^ cef-3-em-4-carbonzuur, syn-isomeer, bereid volgens Voorbeeld III, Trap B, met 1,5 cm3 van een moalire oplossing van watervrij natriumacetaat in watervrije methanol. Men voegt 0,5 cm3 etha-35 nol toe, filtreert een geringe hoeveelheid onoplosbare stoffen af, en voegt 2 cm3 ethanol toe, waarbij het natriumzout uitkristalliseert. Men 80 0 49 A3 filtreert, wast met methanol en droogt vervolgens onder vacuum in een stoof bij 45°C.

-21-

Men verkrijgt 0,25 g niet-hygroscopisch zout.

Analyse· Na : Berekend 4,66$, Gevonden 4,6$.

5 VOORBEELD X : 3-acetyl thiomethyl-7··^ Γ2-(2-amino-4-thiazolyl)2-methoxy-imino-acetyl7amino]cef-3~em-4-carbonzuur, syn-isomeer.

Trap A : 3-acetylthiomethyl-7-^/~2-(2-cMooraceetamido-4-thia2olyl)2^ methoxyimino-acetyl7aminoIcef-3~em-4-carbonzuur,_syn-isomeer.

Men brengt 15,3 g 2-(2-chlooraceetamido-4-thiazolyl)2-10 methoxyimino-azijnzuur, syn-isomeer in 80 cm3 methyleenchloride. Bij 5°c voegt men 8 cm3 triethylamine toe. Bij 0°C onder stikstof voegt men 3,8 cm3 thionylchloride en 26 cm3 methyleenchloride toe. Men laat 15 minuten staan bij 0°C en voegt vervolgens 7 cm3 triethylamine toe. Bij 0°C en onder stikstof voegt men 14,4 g 7-amino-3-acetylthiomethyl-cef-3-em-4-15 carbonzuur in 100 cm3 methyleenchloride toe en 14 cm3 triethylamine* Men laat de temperatuur stijgen tot 20°C en roert vervolgens 1 uur. Men dampt de oplossing in tot droog onder verminderde druk bij 30-35°C. Men lost het residu op in 250 cm3 water, behandelt het met kool en voegt 50 cm3 2N zoutzuur toe. Men filtreert het neerslag af en wast met water. Men 20 suspendeert het verkregen ruwe produkt in 80 cm3 ethanol. Bij +5°G voegt men 7 cm3 triethylamine toe. Men voegt in een keer onder roeren bij +5°C 15 cm3 4N zwavelzuur toe, waarna het produkt na 15 minuten uitkristalliseert. Men filtreert, wast met ethanol door fijn wrijven en vervolgens met ether, droogt onder vacuum en verkrijgt het gewenste produkt.

25 Trap B £ 3-acetylthi ome thyl-7-£/~2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyimino-acetylTamino? cef-3-em-4-carbonzuur, syn-isomeer.

Men suspendeert 5,48 g van het in de voorafgaande trap A verkregen zuur in 10,6 cm3 water en 912 mg thioureum. Bij 20°C voegt men 1 g kaliumbicarbonaat toe. Na oplossen roert men 6 uren bij 20°C onder 30 stikstof. Na ongeveer 1 uur 30 minuten begint zich een gomachtig neerslag te vormen. Men voegt dan 30 cm3 water en 3 cm3 mierenzuur toe. Men koelt tot 5°C, filtreert, en wast met water dat 10$ mierenzuur bevat. Men verwijdert de donkerbruine gom. Men verzamelt de waterige fasen en behandelt__ ze met kool. Men verkrijgt een lichtgele oplossing, die men verzadigt met 35 8 0 0 4 9 A 3 -22- ammoniurasulfaat, Men filtreert het neerslag af, wrijft het fijn met water, filtreert, wast met water en verkrijgt een neerslag A.

Men verzadigt de moederlogen met ammoniumsulfaat, filtreert het daardoor verkregen neerslag af, wast driemaal met water en ver-5 krijgt het neerslag B. Men verzamelt de neerslagen A en B. Men neemt op in ethanol, roert 1 uur bij 20°C en laat 16 uren staan bij 0°C. Men filtreert, wast met ethanol en vervolgens met ether, droogt onder verminderde druk en verkrijgt het gewenste syn-isomeer, Het produkt is identiek aan het in Voorbeeld III, Trap B en Voorbeeld V verkregen produkt.

10 Het als uitgangsverbinding in Voorbeeld X toegepaste 2-(2-chlooraceetamido-4-thiazolyl)2-methoxyimino-azijnzuur, syn-isomeer, wordt als volgt bereid: a) 2-(2-chlooraceetamido-4-thiazolyl)2-methoxyimino-azijn-zure ethylester, syn-isomeer.

15 Men neemt 45,8 g 2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyimino- azi jnzure ethylester, syn-isomeer, op in 200 cm3 methyleenchloride. Men dampt 20 cm3 af om te drogen, koelt tot 10°C en voegt 50 cm3 pyridine toe. Men voegt 41 g monochloorazijnzuuranhydride toe en verwarmt zachtjes tot het is opgelost. Men laat 6 uren bij 20°C onder stikstof staan, voegt 5 20 cm3 water toe, roert en giet uit in 300 cm3 ijskoude 2N zoutzuuroplossing. Men decanteert, extraheert met methyleenchloride, wast met water, natriumbicarbonaat en vervolgens weer met water, droogt, leidt het over aktieve kool, concentreert en voegt 300 cm3 isopropylether toe. Het produkt kristalliseert uit. Men concentreert tot een dikke pasta is verkregen, 25 koelt sterk af, filtreert, wast met isopropylether, droogt en verkrijgt 45,4 g produkt. Smeltpunt : 113°C.

Men verkrijgt een zuiver monster door herkristallisatie in een mengsel van methyleenchloride en isopropylether. Smeltpunt : 118°C. NMR (CDCl^ 60 MHz) 0 ^ 30 H-N-C-CH-C1 t ^

SM

\,_ƒ (c) (a) H-' "-C 0-CH--CH.

(e) » d -5 35 ' 0CH3 (b) a) triplet met centrum bij 1,38 p.p.m. J = 7 Hz.

b) singulet 4,05 p.p.m.

8004943 -23- c) quadruplet met centrum bij 4,44 p.p.m. J = 7H.Z.

d) singulet 4,33 p.p.m* e) singulet 7,27 p.p.m.

f) singulet 9,95 p.p.m.

5 b) 2-(2-chlooraceetsmido-^-thiazolyl)-2-methox^imino- azijnzuur, syn-isomeer.

Men brengt 46 g van het in de voorgaande trap a) verkregen produkt in 230 cm3 absolute ethanol. Men voegt bij 20°C onder stikstof 30 cm3 zuivere natronloog toe. Het produkt lost op, het natriumzout 10 begint uit te kristalliseren en vervolgens stolt het milieu tot een massa. Na 16 uren filtreert en wast men. Men lost het verkregen zout op in water, koelt, voegt 100 cm3 2N zoutzuur toe, verzadigt met natriumchloride en extraheert met ethylacetaat, dat 10$ ethanol bevat. Men droogt, leidt over kool, destilleert onder verminderde druk, verwijdert het water met 15 benzeen, neemt op in methyleenchloride, dampt in tot droog, neemt opnieuw op in methyleenchloride, koelt, filtreert, wast, droogt en verkrijgt 34,5 g van het gewenste produkt met een smeltpunt van ongeveer 200°C. Men zuivert het produkt door herkristallisatie in een mengsel van aceton en isopropylether.

20 Analyse: CgHgO^N CIS = 277,68

Berekend: C% 34,60 H$ 2,90 N$ 15,13 Cl$ 12,77 S$ 11,53 Gevonden: 34,8 2,8 14,8 12,6 11,5

N.M.B. (DMS0 60 MHz) ^ j Q

H-N-C-CH.C1 * π., · C0.H (c) (d)H r 2

N

0CH3 (a) a) singulet 3,92 p.p.m.

30 b) singulet 4,38 p.p.m.

c) singulet ongeveer 5 p.p.m.

d) singulet 7,58 p.p.m.

e) singulet 12,6 p.p.m.

VOORBEELD XI : 35 Men bereidt een injekteerbaar preparaat met de onder staande samenstelling: 8004943 -24- 7-ί/“2-(2 -amino-4-thiazolyl)-2-methoxyimino-acetyl7amino)—3—/”(1-methyl-tetrazol-5-yl)thiomethyl7cef-3-em-4-carbonzuur 500 mg

Waterig steriel excipient, aanvullen tot 5 cm3

VOORBEELD XII

5 Men bereidt een injekteerbaar preparaat met de onder staande samenstelling: - 3-acetylthiomethyl-7-^/~2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyimino-acetyl7 amino)cef-3-em-4-carbonzuur 500 mg - waterig steriel excipient, q.s.p. 5 cm3

10 VOORBEELD XIII

Men bereidt een injekteerbaar preparaat met de onderstaande samenstelling: - Natriumzout van 3-acetylthiomethyl-7- ί/"2-(2 -amino-4-thiazolyl)2-methoxy- imino-acetyl7amino ^ cef-3-em-4-carbonzuur 500 mg 15 - Waterig steriel excipient, q.s.p. 5 cm3

VOORBEELD XIV

Men bereidt capsules met de onderstaande samenstelling: - 7-f/'2-(2 -amino-4-thiazolyl)-2-methoxyiminoacetyl7amino)-3-/”(1-methyl- tetrazol-5-yl)thiomethyl7cef-3-em-4-carbonzuur 250 mg 20 - Excipiens q.s. voor een capsule van 400 mg

VOORBEELD XV

Men bereidt capsules met de onderstaande samenstelling: - 3-acetylthiomethyl-7-£Γ2-(2-amino-4-thiazolyl)2-methoxyiminoacetyl7 amino}cef-3-em-4-carbonzuur 250 mg 25 - Excipiens q.s. voor een capsule van 400 mg

Farmacologisch onderzoek van de verbindingen.

A) Werkzaamheid in_vitro:

Methode met behulp van verdunningen in vloeibaar milieu. Men verdeelt eenzelfde hoeveelheid steriel voedingsmedium 30 in een reeks buisjes. Men verdeelt toenemende hoeveelheden van het te onderzoeken produkt over de buisjes en ent vervolgens elk buisje met een bacteriestam.

Na een incubatie van 24 of 48 uren in een stoof bij 37°C wordt de remming van de groei bepaald door doorlichten, waardoor de mini-35 male remmende concentraties (M.R.I.) uitgedrukt in^ig/cm3 bepaald kunnen worden.

De verkregen resultaten zijn vermeld in Tabel A tot en met E.

8004943

”25 - Tabel A : Produkt van voorbeeld-1, trap B

+--:--s~==-——--M.R.C. in pg/ml.

Stammen 24 uur j 48 uur u.------------------------------------—;--------1 ( Staphylococcus aureus ATCC 6 538 Pen-£ev*eiige: 1 : 1 /

{ I I

( Staphylococcus aureus UC 1 128 Pen-R^sistent :2 :2/ i----------------------------------------.......-------:--------j ( Staphylococcus aureus exp. n°54l46....... : 2 : 2 ) (----------------------------------------------------------------) ( ::) ( Streptococcus pyogenes A 561............... : ^0,02 : =(.0,02 ) (-----------------------------------------------------------------) ( ::) ( Streptococcus faecalis 5 432............... : 1 : 2 ) (---------------------------------------------- : ) ( ::) ( Streptococcus faecalis 99 F 74............. : 2 : 5 ) I Γ” * ! ( Bacillus subtilis ATCC 6 633............... : 0,6 : 1 ) (---------------------------------------------- : ) ( Escherichia Coli gevoellg^Tetracycline : : ) ( ATCC 9 637................................. : 0,6 : 0,6 ) I----------------------------------------------,--------:--------, ( Escherichia Coli Resistönt Tetracycline : : ) ( ATCC 11 303................................ : 0,1 : 0,2 ) (----------------------------------------------:-----------------) ( ::) ( Escherichia Coli Exp. TO^^Bg............... : 0,4 : 0,4 ) ( : ; ; ) ( Escherichia Coli Resistant Gentamicine, : : ) ( Tobramycine R 55 123 D..................... : 0,4 : 0,4 ) (----------------------------------------------*--------:--------) ( ::) ( Klebsiella pneumoniae Exp. 52 145.......... : 0,05 : 0,1 ) {----------------------------------------------- : ) ( ::) ( Klebsiella pneumoniae 2 536 Résistent Genta- : · : ) ( micine*..........*......................... : 0,6 : 1 ) (----------------------------------------------------------------) ( ::) ( Proteus mirabilis (indol-) A 235........... : 0,2 : 0,2 ) (----------------------------------------------------------------) ( ::) { Salmonella typhimurium' 420................. : 0,6 : 0,6 ) ____ <------------------------------------------------------------«*=4= ( ::) ( Enterobacter cloacae 681................... : 40 : 40 ) {---------------------------------------------- ) ( ::) ( Providencia Du 48.......................... : 2 : 5 ) (---------------------------------------------- ) ( ::) ( Serratia Resistant Gentamicine 2 532....... : 1 : 1 )

j_:_:_L

-26 - - --------- - - —---- __ _ , >τ—------JM.R.C. in

; STA Μ Μ ii H

24 uur I 48 uur (--------------------------------------------:--------:--------) ( : : ) ( Staphylococcus aureus ATCC 5 638 Penvevoelig : 1 :1) (-------------------------------------------------------;--------) ( : : ) ( Staphylococcus aureus UC 1 128 Pen-Resistent :2 :2) (----------------------------------------------;--------;--------) ( -::) ( Staphylococcus aureus exp. n° 54 146....... : 2 : 2 ) (----------------------------------------------:--------:--------) ( : / : / } ( Streptococcus pyogenes A 561............... : ^ 0,02 : 4 0,02 ) (----------------------------------------------:--------:--------) ( ::) ( Streptococcus faecalis 5 432............... : 2 : 2 ) (-------------------------------------------------------:-------) ( : : ) ( Streptococcus faecalis 99 F 74............. : 2 : 10 ) (-------------------------------------------------------;--------) ( ::) ( Bacillus subtilis ATCC 6 633................ : 2 : 5 ) (----------------------------------------------·*--------·--------) ( C voor · ) ( Escherichia Coli gevoelig/ Té'tracycline : : ) ( ATCC 9 637......;.......................... : 0,4 : 0,4 ) (-------------------------------------------------------:--------) ( ::) ( Escherichia Coli Resistent Tétracycline : : ) ( ATCC 11 303................................ · : 0,05 : 0,05 ) (-------------------------------------------------------:--------) ( ::) ( Escherichia Coli Exp. Τξ^Β^................ : 0,2 : 0,2 ) ( " : i ) ( Escherichia Coli Resistant Gentamicine, : : ) ( Tobramycine R 55'123 D .................... *· 0#2 : 0,2 ) (----------------------------------------------: ) ( ::) ( Klebsiella pneumoniae Exp. 52 145.......... : 0,02 : 0,02 ) (-------------------------------------------------------:--------) ( .::) ( Klebsiella pneumoniae 2 536 Resistent Genta- : .: ) ( micine..................................... : 0,4 : 0,6 ) (----------------------------------------------*--------5--------) ( · 5 > ( Proteus mirabilis (indol-) A 235........... : 0,05 : 0,05 ) (-------------------------------------------------------:--------) ( ::) ( Proteus vulgaris (indol+) A 232............ : 3 : 20 ) {--------------------------------------------------------:--------) ( ::) ( Salmonella typhimurium 420................. : 0,2 : 0,2 ) <----------------------------------------------:--------:--------) ( ::) ( Enterobacter cloacae 681................... : -20 : 20 ) (—.------------------------------------------: ) ( ::) ( Providencia Du 48.......................... :2 :2) (----------------------------------------------: ) ( ::) ( Pseudomonas 3 935 Exp. SG.................. : 20 : 40 )

--*ï-1-!-Γ-1 π i ί I

ο I i I 1 1 ί oj ί 1 ' ' I

D) oil in1 I I I I I I tr.

•HC| 131 οι οι O O' Ο ί Οι O. Ο I ^

Si! rai - I 8! 8! s ! J ? ! ? w * .

ε c ί \ loo, , v- . ί I ' , I ί ο ·η ί to I >>r I 1 ί ί λ A 1 1 -È-8,1 a! ί ί ! ! , A ; Λ, I ί

Hi -si ί......t.....!.....ϊ"λ'.....·.....y"··'""··;........

> g I u ! 3 1 Ol o| O I O j o ! O I ιλ] O , ‘Λ ° °! «! 3 « I 4- 4· ; ,0,0, , f , -I a1—ί -i—-I 1-L·^ Λ'-J—I-

g-l I I I I I (N I I i t I I

2! j b ί · ί ί ί ο ί ί ί . ί j ^ ' £ 3 I I I I ·· I I I 1 *·! * <N I if) I (N I OI uni Ol Ml oi oi

p *» ί η I co ' I j I v// I I v I i I I

Shi si ® ί ί I ί ν/ι ί /\i ί

>^ I \l I I I I I I NI I I I

Til ¢)01 ,, ,, ,, ,, ,« ,, ,, II ,, ·, ·« I, ·· ·· II ·· ·· ·· ·· ft II If II ·· ·· <· ·· ·· |i

Η ή I =LI , I I I I I I I I . I

3 2! fli INI I I I I I

£ %! -h! u ί ί j « ο ί j j j «> j hi ο μ ι 131 I I 1*1 I I * *

P O 1 .1 3 I Μ I ΙΛ I (NI Ο I in I ΙΛ I Η | Ο O

Pi ο I ΟΙ I I , I I · I I I I 1 A «ί-! i ! I v!_ !.....I.....j.......j.......j , 1 S| ί ” ϋ ί" l \.....i.....j.....i.....i.....Γ j ' ί I l 'rt I π I · 1 t i ♦ I * I · * · k * 3? ί 4-»ι · I »i «I 'I ·Ι · I · *

^ t P. I in ί ·ι · i 'I *1 * I ' I * I

I I £ ί Η I · I «I * I t I » · I o ' ' I tol St «I *1 «I *1 'I 0 » I £ ' ' j ij I · j »| ♦ I »1 * I £ * 1 H * 1 j £ j pi j lO I · I »1 · I ‘I Ή · I H·, I Si ii *i · I · j Tl'! P'! I fUl £ I Hl *1 * I · · ^ « >i · I I I 0 I I * I · I ·Ι Ί >1 1 ϋ < 1 ,,1 I co I Αί 1 *=5* I »1 *1 *1 * I Ο < I S * _ u! I η ί I m I «I · i · · I . I g . I IH · ! , I m I co ί ί * I . I ^ I . ί μ . I -3 « ί ίί I IlNlol · I » I Γ- I · I 4J · I «U · .

Ξι i <o I hi gi η ί (N I ι mi vy < I H * |

Mi | I 1 liDlnl-MimiH·! ·!

Eh I j C_)l ·—ί I · I in 1 VI I CD I ^ · I Η · i . I U I I ft I I I I g<? · ι c 1 1 y-\ I HI U I I < I in I cnl i > »&o · I «1 · gi ι <t; ι d ι ο ι ι ι ι ι -ι-i * ι η · ι S i I I ι WI ίο ι col Ul w’l « · ι

Si i co ι to ι to ι 01 -hi -hi U i cj « 1 h · 1 i! I 31 si si si hi hi hi I . I to·;

HI j 0 1 0 1 ϋ I tO I SI SI <1 f. · I μ) · I

ml ί μι μι μι cni οι υι ι «& · ι « · ι I Ρ I 31 SI οι οι 01 to 1 «* I I *i

I si SI SI >1 I si SI HI H « I Η · I

t ι ι I Q< I HI HI HI Η ι | Η · I

I 10 I CO I co I . ι I I -HI 0 · j 0 · I

I 31 31 31 WI CD I CD 1 -SI U*l U'l

I Ü1 Ol Ol 31 SI SI Λ I 'I * I

I oi oi Ol 01 Ol 01 31 S.| SMI

I 0 1 ο ι ο I ο I ο I ο I to I Hr» I HOI

I ΟΙ ΟΙ Ol 01 01 01 I Λ Μ I Λ Μ I

I 01 01 01 01 Ol 01 si OM>l O I

I HI Η I HI ο I Ο 1 Ο I 3 1 Η I Η Η I

I >il >il >1 I -Ol HI HI H| μσ\ΐ μ<-(1 I ^1 -r. ι Λ I Οι I O4 I Ol, 1 HI ¢) I 0 1

I η, ι Οι ι Cu I 0 1 0 1 0 1 H| Λ U I Λ U I

ι Si <öi si μι μ ι μι oi oui ooi

| jj | Jj I Hl HI· HI HI SI tOHI W Η I

I W « WI CO I Wj CD I CD J Ml W<j W<| _ - iw» sL* W S_» w« w w w w «W» W 'WW*, 8004943 ~ΤΤΓ^ Γ"5 i—1—i—i.......Γ'Γ~ ι a I I I I I I I I .

Φ J «3 » Ο I OlOl O^OlOlOiOiOlO

s .51 l**i * ; * ! ?! * | ? ! * \ - j - 111 J ! ! ! · Λ! ! A| ! ! a! /\ c "8 ** ,·· ·· t.......1.....ι........ι.......1,.....ι.....t ι......f.......

8·$!“. SOI o'gi o m ] ο ι o; o. g| o ° 1 .-1-°1 ! ! ! λ! : Λ ! ! Λ! Λ σ I «a· 1 φ ! hi I Η I "t ' ί* 1 '

fn S ». I η I fcf I v , I * | I I

_ +· ' ΟΙ Ο I Ο I NjO ο I Oj Ο! Ol M

5ö 3! a ι ι ι ι m t η ι

Sn· <1^1 it <i ι ι

p «β β I I . I III K I I

4· Η ΛΙ » n ι ti ·' ·* ·· " " " »» *· M ** " " '* *’ V· ·· " ” " ·· *· ·* “ * « f I I' «II*

g-g ö 1 vo 1 η o 1^ 5 1 I

fi o * Oi 9 ! o j O 1 Ο Η Ο ΙΛ O ! o 1 O i h *i *: sr 1 II 1 H! 1

J* I II I I I I I

...... i-*4-.· Μ «. «« Μ μ «. I· ·* <1 H ·· M «· It If If If ·· " »♦ M S. ............. *· >

* * I I ! J I ! I

ι ι l I I 1 t · I · d! t »i * * ι * ι « ι · OO^x » ,|* |l I · I ' I « I · I · I · ^ δο » · I · βι · I I * I · 1 · I · ,Η « I · I · φι * I * J 'I »| *1 ·

* P . j . I · I Ü I * I · J · I · I * I

u . I Φ · I I I I » I · « I « I * I · « · i c · ι * j if * 'I * ’ι * ι * ι

> < ι ·Η · I · I C ι I I · ι I «I · | N

W ·|ϋ·Ι «|3J| · I · j «I · | · · I m ι ( Ή · I * ι 4J ι If 'I I 1 I| · I in

„ . j g · ι in I w ι · ι ♦ I ι ι «ι · I

u « I (d · I *J* I Hi ΙΛ I *ί ‘I · I · I M

. Ι 4J · I Η ι to t Ml Ml «I . I . I

*3 «|C*1 i Φ » I M j M j «I · I ·|φ

«; #|Φ ·ΙΜΐΗι|.Ι™ ij · I · I C

3 VOf C> · ι ιΛ I * ri I . 'I · I · 1 H

S Ml ,·! ^ ^ ;ι ·Ι ·1ϋ

VD( +> · I »1 M»i ι Ο ι · j · I H

!mj . C · 1 ft in ι I II «7* j N ι . i . ι g

Ο I C · I K I «I H + I h | . | C

E-< l Η · I Ml Μ · I Ol HI I co I · I -P

I WQI I I I Ό I Ol gi VO I · · I c . I -HI ¢1 (!) . j Cl IÖ { Ö } { . j 5 ft I W M | Cl C ι I H J c η I Φ I · l Ü XI ·0 Μ I HI Η ι I ‘-'I H P | c 1 . |

HI Μ H j C j C » 1 w S I Ol · I 4J

.1 .^1 ,« H' ωι £ Η ι Η ιΛ I g i . § ♦ j η w Η ο I -5Γ I «

H| Htn I C 3* Η I Η Λ } H| I H

01 0 I 0 I O ·I HI y 01 SI W

u I U Μ ι ci c»l ΛΊ jo >71 I Q H

I I & I ft * I tnl Hj g| j w

Cl COI 'I PI HI , 0| cι^φ

HI HCI cl «J I I HI Cl C| 4-) I HI M

j-l rC Η I Hj Η. E I > Η, ϋ I 01

Ο I 1 ϋ Ο I Η H · · H, ci Cl C

HI Η >ι I ¢) I Φ ι I , W W Ο I Λ I 0 1 H

U I HE I HI H 0 3 C C ! oi Ό I +J

t) ι u d I w MCI ¢1 I ot Ol (,) Hi C

£ \ & P I Λ I Λ H 1 HI HI g 5 I >| P

01 O ,Q I ΦΙ O o I 01 pi H. jj | q I P

W WO Η Η Η I Ml PI Ci j. | φ wi WIHI MI « Η I Ml P* W j β j £ | w _1— _ I I —I- I_!_ι - I -J— ι 8004943 - 29 “

Tabel_D : Produkt van voorbeeld VIII

I' ‘ ~ ___ M.R.C. in μ§/ϋΐ1 STAMMEN ~ ~ 24 uur 48 uur ( r-;-< ( Staphylococcus wit pathogeen 69396 : 2 : 2 ) ( ' . " ‘ 1 1 ' !·”" ’ ....

( Staphylococcus wit 21 976 : 3 : 5 ) (-, -—------) ( Staphylococcus geelbruin 68 666 :3.5 ) (-;—-5-) ( Escherichia Coli 73 316 : 0,2 : 0,2 ) (-:---a---) ( Escherichia Coli 72 306 :1:1 ) (--a-1-) ( Escherichia Coli 69 916 : 0,4 : 0,4 ) (-a---!-) ( Escherichia Coli 69 8S6 : 0,6 : 1 ) (-;-i--:-- ( Escherichia Coli 68 696 : 0,4 : 0,4 ) (_,_- _.) ( Escherichia Coli 68 93° : 0,4 : 0,4 ) ?_\_ ;_ -) ( Escherichia Coli 21 976 : 0,6 : 0,6 ) (-:-*-) ( Escherichia Coli 19 976 : 0,6 : 0,6 ) (_:_:_) B ) Experimentele_infektie_met Escherichia Coli TO^Bg.

Men heeft de werking van de produkten van Voorbeeld III, trap B bij een experimentele infektie van Escherichia Coli bij muizen onderzocht. Groepen van 10 mannelijke muizen met een gemiddeld gewicht van 5 22 g werden geïnfekteerd door middel van een intraperitoneale injektie van 0,5 cm3 van een 24 uur oude kweek in een kweekbouillon van de stam Escherichia Coli van het Instituut Pasteur, tot l/5,5 d.e verdund met gedestilleerd water.

Een bepaalde hoeveelheid van de onderzochte verbinding werd 10 1, 5 en 24 uur na de injektie door onderhuidse injektie of per os toegediend.

De sterfte werd gedurende 8 dagen bepaald.

De resultaten zijn vermeld in tabelE.

8 0 0 A 9 4 3 -30-

a) ό | ! ! I I

ό I i · i J

call I I *

Φ O to | I t I I I

>«ioi οι οι o I o;

£ £ ^ ! X j χ{ X ! \ ! XI

! °| ** » «I ^ i ° J

° B <D I { I . j I } ........................... ·· ·· ·· ".........* ·· ·.* cl I I I ! !

^Si I » I

CD. I I 1 I * 0.4 .. .· .« .· ·· .· .· ............ ·· ·· ·· ·· .......... *· "U| I I I I ·

ml · -Hl J I J

3" " " ί.........i....... i* ! J

it I I I 1

Sj j ί \ H i i 3 J I } { { } si ! H ! ! ί ! 3*Γ " *’ ί.........i....... ” i........Ϊ j‘ £r! ί i <n ί η ί ί

^1 I I ί I I

p '\ " ί ï i i }

«s co ί ί ί I I I

C CM I I I I I I

H O j j j { { ! ϊ ^ ί I I I ‘ ω p I I » -h| +» ί i i i j j

co in I I I I I I

cm ί ί I I I I

o j j j ! } I

fA || * * I I

*! ! ί ! ί j

vr ί I I I J J

CM I I I I I I

* · ·· ·· ·· ·. ·· ·· ........ ·· ·· ·· ·· ·· ·· ·· ·· ·· ·· ·· ·· ·· *· UJj 3 I I I I I }

--11 I ! ! HI I I

.21 ~ ί ί I HI I ί ril ·» ·· ·· ·· ·· ·· ·· ·· ·· ·· ·· ·· ·· ·· ·· ·· .......* ·· ·· ·· ··

EhI I I I I I I

oil I I j I

cn ί I I I I I

I O I Ή Ή I HI j

3 I H I I · I

a!.....!.........!.........!.........j.........ί.

u ί ί ί ί J * cell I I J }

I nj Η I I I I

>G I . I »| ·Ι · I O

V 101 O I 01 01 Φ Ή ί ί j j j ·| . ί . ί -ί · I · j 01 ! 1 HO j » I W l .. w I w 51+3 I ί - ! « ^ ϊ . .. > --·........ V£D.......iffl" - ” " ...........” I G_Q.fi.

§•0 0 0.

, S h h o

I £ +- H U

1 cö dO CÖ eg eg n) e niM bo mM bo <aM bo I >Όβ > Ό η >ΌΕ I *—I m Γ~1 ΐ~Λ ι—4 +* Φ Ο -Ρ ω -Η +» Φ CM +» φ κΛ I ο χ α» * Λί α> ·> ^ # « Λ! ω * I υ 3 -Q Ο 3ίΟ 3 ΡΟ 3 Ρ Ο

. C Oh -d h -Ok -DG

I α o o * ο ο x oow ο ο x

-1 h O h O ho h O

j « n. a > m IJ s. — —· —* '—· *— — — ^ * 1 —* — ’ —’ - 1 *— —* 8004943 ——y —

Ο) I I I I I J

0) >3 I I I I I 1 Λ

-3 I ΟΙ ΟΙ ΟΙ Ο! Ο I O

Gft I rH I rH I Η I rH ! rl | r-l 0)0¾) , \ , \ I \ I \ I > I > 5; _ j? I ο I σ>ι οι ο I οι o * S ^ ! J !

fH N 0) I

0) -H T3 I I I

SO I I I · O s rH I I II I I . I I j.....j.....I.....I.......

Γ" ώ £. " " i.....i.....i* " I i

^ =i I rH I I I I

in J I I I < 1 p i.....i.....i.....i.....i.....i.....

s I I I I f t

_ I rH I I I I I

I I ' ! ^ I I I I I I .....

ss ......I.....].....;..........*

$ ! M! ! ' I I

I I I I I I

CD ----- «, #« «* It »« M ·· «· ·· I* *· ·· ·· M ·· ·· ·· ·· ··

C i3 I t I I I I

o) co ' ^ ! j j ! I

£. * ! ! ! ! « I

P| I. — ,, „ „ ,, ,· Η >· ·· ·· »· ·· «· ·· ·· ·· ·· ·· ·· ·* 03 - I I I I I !

+3 I in t I I I I

w VO i I I I I

, I j j i I

“ j.....*,.....*,.....'* " " M ” i.......

cm I η I I I ! !

ΙΌ I I I J J I

I II·*·* , i.....ί.....i.....i.....j.....j

Vi Ο I I I I I I

rH ^

C5 «I d I rH I I I I

<$\ p I I I t I I

ί &1 co > * * ! ! ! cnj ί ί i i i * »- ·· ·· ·· ·· ·· M ♦* ·♦ H ·· ·· ·♦ ·· ·· ·· ·* ·· ** *♦ ' I ‘ 1 to bo bo s e bo a a in in bo rH cm cm m a « « · ·

Ο Ο Ο O rH

Η X K W HI

in in in m in

> i> H H

H H r* t> r*

•Ö Ό Ό 'Ö tJ

rH rH rH rH ί—1 0) Q) 03 03 03 0) (J) 0) 03 0) £i & rQ & ,Ο

?H U SH M U

o o o o o o o o o o > >· > > > c c c c c (βω <βω <βω (β< (βω > > > > > Ο. Ο. Q. Ο. Q- +> σ ο +>σ f ρ. η3? Ο Al h ϋ h ,¾ *Η * Ο 3 +* 3+* 3 +» 3 +· 3+3 C Τί Ti nö · Ό χΙ cd ο Μ OW Ο ^ ΟΗ Ο*™1 γΗ !4 Μ μ Μ J4 ΗΗ Μ Μ ^ Μ pq PM Μ pH Μ PM!-* j ΡΜ Μ Ρη 1-1 Φ bo w-'v/'N/-'. v-vp/-^ 'ti cd c Pc-a o o o o o o o 2>0 o O O O T-v-r-r-r-v- r*

(dc-S y v- r* v X X X X X X X

ηφο > X X X O O 0' (T» O O O

^ NH O vOO^O v* r* vvt*

CU Ή V

>3 0, o a -ö Φ60

Tied t-ti V_______ ,

Obo 'tied .— '^ϋ-___1.__. ___ J» Q) bfl ^

-öcd V- OJ

tnti ____________________________ d)b0 ‘ ™ ^ · in

rH

V

ti m c«- ti ti ΓΛ c o Q5

-P

Ch - _____..................—-------— - ---------—------I I -----—.............

g Φ +» ti CO r- I m . ü>! h3« ------------

CV BI

C5 FQI O

<c | en 1 *i ti *-

O

m _______ ______

2 CM

vo ^j·________ .-

MM Μ M

MM Μ M

Μ Μ Μ Μ Μ Μ Μ Μ M

> > > >>>>> > 'Ö'ti'ti O'ti'Ö'O'ti'ti

rH rH rH rH rH rH rH rH rH

0) 05 0) 0) φ Φ Φ Φ Φ 0) φ 0) ΦΦΦΦΦ Φ

X X X X X X X X X

ft ft ft ft ft ft ft ft ft

O O O OOOOO O

O O O OOOOO o > > > >>>>>· >

C C Π CCCGC G

cd cd cd cdcdcdcdcd cd > > > >>>>> > -Pbo +* +5¾) +» +5 -pbo-p -Pbo +5

O ,*B Ptf bo ΛΒ A! bD fti pp e ft! bD fti S J*i tiO

o ti ti S ti ti E ti t ti ti S ti ti E

G fl ιΛ Ό fl ιη Ό T3 bC Ό η Ό Όΐη T3 cd oo o h o cm om οΒΟΟΟγη ocm on rH ft *· ft · ft « ft ·> ft ft *· ft * ft * ft »·

pq Ph O G O PhO ft O fL, rH (ft O fft O (ft O (ft O

8004943 -33- C) Experimentele infektie met Klebsiella pneumoniaei

Men heeft de werking van de verbindingen van Voorbeeld II, Trap B en Voorbeeld III op een experimentele infektie met Klebsiella pneumoniae bij muizen onderzocht. Groepen van 10 mannelijke muizen met een 5 gemiddeld gewicht van 21 g werden geinfekteerd door middel van een intra-peritoneale injektie van 0,5 cm3 van een kweek in een voedingsbouillon van de stam Klebsiella pneumoniae 521^5, tot 1/I000ste verdund met gedestilleerd water.

Een bepaalde hoeveelheid van de verbindingen werd een 10 half uur, uren, 8 uren, 2b uren en 30 uren na de injektie onderhuids toegediend.

De sterfte werd gedurende 10 dagen genoteerd· De resultaten zijn vermeld in Tabel F.

D) Experimentele infektie met Klebsiella_pneumoniae£ 15 Men heeft de werking van de verbindingen van Voorbeeld

Vl en VIII op een experimentele infektie met Klebsiella pneumoniae bij muizen bestudeerd. Groepen van 10 mannelijke muizen met een gemiddeld gewicht van 21,5 g werden geinfekteerd door intraperitoneale injektie van 0,5 cm3 van een 2b uren oude kweek in een voedingsmedium van de stam 20 Klebsiella pneumoniae 5215^, tot 1/I000ste verdund met gedestilleerd water.

Een bepaalde hoeveelheid van de verbindingen werd 1, 5 en 2b uren na de injektie onderhuids toegediend·

De sterfte werd gedurende 10 dagen genoteerd. De resultaten zijn vermeld in Tabel G.

25 8004843

Claims (14)

1. Werkwijze voor de bereiding van een geneesmiddel met het kenmerk, dat men als werkzaam bestanddeel tenminste een farmacologisch aanvaardbare verbinding met formule 1 van het formuleblad, waarin R een groep -O^-S-R' voorstelt, waarin R' een acylgroep met 2- 4 koolstofatomen, en 2-methyl-1,3,4-thiadiazolylgroep, of een 1-methyltetrazolylgroep voorstelt, R^ een waterstofatoom, R2 een verzadigde alkylgroep met 1-4 koolstofatomen en A een waterstofatoom, een equivalent van een alkalimetaal, aardalkalimetaal, magnesium-of een organische stikstofbase, en de golflijn aangeeeft, dat de groep 0R£ zich in de synstand bevindt, in een voor geneeskundige doeleinden geschikte toedieningsvorm brengt.

2. Werkwijze volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat men als werkzaam bestanddeel 7-(/2-(2-amino-4-thiazolyl)-2-methoxyimino-acetyl7amino)-3-/~(1-methyl-tetrazol-5-yl)-thiomethyl7 cef-3-em-4- carbonzuur, syn-isomeer toepast.

3. Werkwijze volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat men als werkzaam bestanddeel 7-(/”2-(2 -amino-4-thiazolyl)-2-methoxyimino-acetyl7amino)-3-/r(2-methyi-l,3,4-thiadiazol-5-y)thiomethyl7 cef- 3- em-4-carbonzuur, syn-isomeer toepast.

4. Werkwijze volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat men als werkzaam bestanddeel 3-acetylthiomethyl-7-f/”2-(2-amino-4-thizolyl) 2-methoxyiminoacetyl7amino) cef-3-em-4-carbonzuur syn-isomeer toepast.

5. Werkwijze volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat men als werkzaam bestanddeel het natriumzout van7-(/*"2-(2-amino-4-thiazolyl) 2-methoxyimino-acetyl7 amino) 3-/”(2-methyl-1,3,4-thiadiazol-5-yl) thiomethyl7 cef-3-em-4-carbonzuur, syn-isomeer, toepast.

6. Werkwijze volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat men als werkzaam bestanddeel het natriumzout van 7-(/r2-(2-cmiino-4-thiazolyl) 8004943 -35 _ 2- methoxyimino-acetyl7amino) 3-Γ(1-methyl-tetrazol-5-yl)thiomethyl 7cef-3-em-4-carbonzuur, syn-isomeer, (,-toepast.

7. Werkwijze volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat men als werkzaam bestanddeel het natriumzout van 3-acetylthiomethyl-7-(/r2-(2-amino-4-thiazolyl)2-methoxyiminoacetyl7amino)cef-3-em-4-carbon-zuur, syn-isomeer, toepast,

8. Werkwijze volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat men als werkzaam bestanddeel het kristallijne natriumzout van 3-acetylthio-methyl-7- f/"2-(2 -amino-4-thiazolyl)2-methoxyimino-acetyl7amino)cef- 3- em-4-carbonzuur, syn-isomeer, toepast.

9. Gevormd geneesmiddel, verkregen onder toepassing van de werkwijze volgens conclusie 1-8.

10. Werkwijze voor de bereiding van 7-aminothiazolyl-aceetamido-cefalosporaanzuurverbindingen, met het kenmerk, dat men een verbinding met formule 1 van het formuleblad, syn-isomeer, waarin R, R', R-|, R2r A en de golflijn de in conclusie 1 genoemde betekenissen bezitten, bereidt op voor analoge verbindingen bekende wijze.

11. Werkwijze voor de bereiding van 7-aminothiazolyl-aceetamido-cefalosporaanzuurverbindingen, met het kenmerk, dat men een verbinding met formule 1 van het formuleblad, syn-isomeer waarin R, R*, R·]/ R2' ^ en de *n conclusie 1 genoemde betekeriissen be zitten, bereidt door behandeling van een verbinding met formule 2 van het formuleblad, waarin R de in conclusie 1 genoemde betekenis bezit en A’ een waterstofatoom of een gemakkelijk door zure hydrolyse of hydrogenolyse te verwijderen groep voorstelt, met een zuur met formule 3, syn-isomeer van het formuleblad of een funktioneel deri-vaat daarvan, waarin R* een gemakkeJijk door zure hydrolyse of hydrogenolyse te verwijderen groep voorstelt en R2 de in conclusie 1 vermelde betekenis bezit, onder vorming van een verbinding met formule 4 van het formuleblad, syn-isomeer, de verbinding met formule 4 behandelt met een zuur hydrolysemiddel, een hydrogenolysemiddel 8004943 -36- of met beide middelen, afhankelijk van de betekenissen van R'^ en van A', onder vorming van een verbinding met formule V, syn-isomeer vereenkomende met een verbinding met formule 1, waarin A een waterstofatoom voorstelt en R en R2 de in conclusie 1 genoemde betekenissen bezitten, en de verbindingen met formule V, eventueel omzet in een zout onder vorming van verbindingen met formule A, waarin A een equivalent van een alkalimetaal, aardalkalimetaal, magnesium of een organische stikstofbase voorstelt.

12. Werkwijze voor de bereiding van verbindingen met formule 1", en zouten daarvan, zoals gedefinieerd in conclusie 11,met het kenmerk, dat men een zout van een verbinding met formule 4 waarin R'-j een gemakkelijk door zure hydrolyse te verwijderen groep voorstelt, behandelt met een zuur, onder vorming van een verbinding met formule 1', ofwel een zout van een verbinding met formule 4 waarin R'^ gemakkelijk door hydrogenolyse te verwijderen groep voorstelt, behandelt met een hydrogenolysemiddel onder vorming van een zout van een verbinding met formule 1'.

13. Werkwijze voor de bereiding van verbindingen met formule 1' en zouten daarvan, zoals gedefinieerd in conclusie 11, met het kenmerk, dat men een verbinding met formule 2 van het formuleblad, zoals gedefinieerd in conclusie 11, behandelt met een zuur met formule 3a of een funktioneel derivaat daarvan, waarin R2 de in conclusie 1 genoemde betekenis bezit, onder vorming van een verbinding met formule 6 van het formuleblad, die men behandelt met thio-ureum en eventueel, afhankelijk van de betekenis van A', met een zuur hy-drolysemiddel of een hydrogenolysemiddel onder vorming van een verbinding met formule 1', die men eventueel omzet in een zout.

14. Werkwijze voor de bereiding van verbindingen met formule 1, van het formuleblad, waarin de substituenten de in conclusie 1 genoemde betekenis bezitten, met het kenmerk, dat men een verbinding met formule 7 van het formuleblad, waarin R2 de in conclusie 1 genoemde betekenissen bezit, behandelt met een verbinding met formule 8004943 “ 37 - 5 van het formuleblad, waarin R' de bovengenoemde betekenis bezit, onder vorming van een verbinding met formule 1', syn-isomeer die men eventueel omzet in een zout onder vorming van verbindingen met formule 1, waarin A een equivalent van een alkalimetaal, aardalkalimetaal, magnesium of een organische stikstofbase voorstelt. 8004943