DE3630857A1

DE3630857A1 - Carbapenem-antibiotika, verfahren zu deren herstellung und diese verbindungen enthaltende pharmazeutische mittel

Info

Publication number: DE3630857A1
Application number: DE19863630857
Authority: DE
Inventors: Alain Martel; Carol Bachand
Original assignee: Bristol Myers Co
Current assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 1985-09-11
Filing date: 1986-09-10
Publication date: 1987-03-19
Anticipated expiration: 2006-09-11
Also published as: JPS6261980A; AR242577A1; SE8603798D0; GB8621759D0; CS656786A2; MY102957A; GB2180238B; US4665169A; HU198491B; AT396472B; DK433586A; NZ217519A; GB2180238A; DD252605A1; CH669381A5; ZA866638B; FI81803C; IL79969A0; BE905415A; ZW16186A1

Description

Die Erfindung betrifft Carbapenem-Antibiotika, bei denen der Substiuent in 2-Stellung folgende Formel besitzt:

Dabei stehen n für 0, 1, 2 oder 3; m für 1 oder 2 und O für 1 oder 2. R bedeutet eine C₁-C₆-Alkyl-, Allyl-, Propargyl-, Carboxymethyl-, Cyanomethyl- oder Aralkylrest. Die Aryleinheit des Aralkylrestes ist eine Phenyl- oder Heteroarylgruppe, während die Alkyleinheit eine C₁-C₆-Alkylgruppe ist. Der die Sulfoniumgruppe aufweisende heterocyclische Ring kann gewünschtenfalls an einem Ringkohlenstoffatom oder an Ringkohlenstoffatomen durch eine oder zwei C₁-C₆-Alkylgruppen substituiert sein.

Verschiedene β-Lactamderivate, die den nachstehend gezeigten Carbapenemkern enthalten, sind in der Literatur beschrieben. Diese Carbapenemderivate sollen als antibakterielle Mittel und/oder β-Lactamase-Inhibitoren nützlich sein.

Die "frühen" Carbapenem-Verbindungen waren Naturprodukte. Dazu zählt beispielsweise Thienamycin der folgenden Formel

Diese Verbindung erhält man durch Fermentation von Streptomyces cattleya (US-PS 39 50 357). Thienamycin ist ein außergewöhnlich wirksames Breitband-Antibiotikum, das insbesondere gegenüber verschiedenen Pseudomonas Spezien ausgezeichnet wirksam ist. Diese Organismen sind außergewöhnlich resistent gegenüber β-Lactam-Antibiotika.

Verbindungen der Formel: worin R⁵, R⁶ und R⁷ unabhängig voneinander ein Wasserstoffatom oder einen der folgenden, gegebenfalls substituierten Reste bedeuten: Alkyl, Alkenyl, Alkinyl, Cycloalkyl, Cycloalkenyl, Cycloalkenylalkyl, Cycloalkylalkyl, Aryl, Aralkyl, Heteroaryl oder Heteroaralkyl sind in der US-PS 42 35 920 beschrieben.

Zu den in dieser US-PS 42 35 920 beschriebenen Verbindungen gehört die folgende: worin A ein pharmazeutisch verträgliches Anion bedeutet. Das oben beschriebene quaternäre Aminderivat ist auch beschrieben in Recent Advances in Chemistry of β-Lactam-Antibiotics, Royal Society of Chemistry, London, 1981, Seiten 240-254. Danach beträgt die durchschnittliche antibakterielle Aktivität dieser Verbindung etwa 1/2 bis 2/3 derjenigen von Thienamycin. In der europäischen Patentanmeldung 21 082 sind Verbindungen der allgemeinen Formel worin der Rest der an die Aminostickstoffgruppe von Thienamycin gebunden ist, eine mono- oder polycyclische, ein Stickstoff-Atom enthaltende heterocyclische Gruppe bedeutet und R für ein Wasserstoffatom oder einen der folgenden, gegebenenfalls substituierten Reste steht: Alkyl, Aryl, Alkenyl, Heterocyclylalkenyl, Aralkenyl, Heterocyclylalkyl, Aralkyl, -NR₂, COOR, CONR₂, -OR oder CN.

In der europäischen Patentanmeldung 40 408 sind Verbindungen der folgenden Formel beschrieben, worin R¹ für H, Methyl oder Hydroxy steht und R₅₁ eine monovalente organische Gruppe bedeutet, wozu unter anderem eine heterocyclische Alkylgruppe zählt.

In der europäischen Patentanmeldung 38 869 sind Verbindungen der folgenden Formel offenbart, worin R⁶, R⁷ und R⁸ unabhängig voneinander ein Wasserstoffatom oder eine der folgenden, gegebenenfalls substituierten Gruppen bedeuten: Alkyl, Alkenyl und Alkinyl mit 1 bis 10 Kohlenstoffatomen; Cycloalkyl, Cylcloalkylalkyl und Alkylcycloalkyl mit 3 bis 6 Kohlenstoffatomen im Cycloalkylring und 1 bis 6 Kohlenstoffatomen in den Alkyleinheiten; Aryl, wie Phenyl; Aralkyl, Aralkenyl und Aralkinyl, wobei die Aryleinheit ein Phenylrest ist und der aliphatische Teil 1 bis 6 Kohlenstoffatome aufweist; Heteroaryl, Heteroaralkyl, Heterocyclyl und Heterocyclylalkyl. Bei dem Substituent oder den Substituenten der oben genannten Reste kann es sich um folgende handeln: dabei sind bezüglich der oben aufgeführten Substituenten an den Resten R⁶, R⁷ und R⁸ die Gruppen R¹ und R² unabhängig voneinander ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Wasserstoff; Alkyl, Alkenyl und Alkinyl mit 1 bis 10 Kohlenstoffatomen; Cycloalkyl, Cycloalkylalkyl mit Alkylcycloalkyl mit 3 bis 6 Kohlenstoffatomen in dem Cycloalkylring und 1 und 6 Kohlenstoffatomen in den Alkyleinheiten; Aryl, beispielsweise Phenyl; Aralkyl, Aralkenyl und Aralkinyl, wobei die Aryleinheit eine Phenylgruppe ist und der aliphatische Teil 1 bis 6 Kohlenstoffatome aufweist; Heteroaryl, Heteroaralkyl, Heterocyclyl und Heterocyclylalkyl, wobei das Heteroatom oder die Heteroatome in den oben aufgeführten heterocyclischen Einheiten 1 bis 4 Sauerstoff-, Stickstoff- oder Schwefelatome sind und wobei die mit den genannten heterocyclischen Einheiten assoziierten Alkyleinheiten 1 bis 6 Kohlenstoffatome aufweisen; man vergleiche auch die europäischen Patentanmeldungen 1 627, 1 628, 10 317, 17 992, 37 080, 37 081 und 37 082.

Auf der Gordon Research Conference on Medicinal Chemistry in New London, New Hampshire vom 2. bis 6. August 1982 wurde eine Druckschrift verteilt, in der verschiedene Carbapenem- Antiobiotika beschrieben sind. Zu den auf Seite 9 dieser Druckschrift beschriebenen Verbindungen gehört die Carpapenem- Verbindung der folgenden Formel:

Obiges Carbapenem-Derivat ist auch auf Seite 145 der europäischen Patentanmeldung 38 869 und auf Seite 252 der europäischen Patentanmeldung 17 992 erwähnt.

In der US-PS 43 09 346 sind Carbapenemderivate offenbart, die in 2-Stellung einen Substituenten der allgemeinen Formel

-SR⁸

aufweisen, wobei R⁸ unter anderem eine Heteroaralkylgruppe bedeutet, bei der das Heteroatom bzw. die Heteroatome in der Heteroaralkylgruppe 1 bis 4 Sauerstoff-, Stickstoff- oder Schwefelatome sind. Sulfoniumgruppen, wie sie bei den erfindungsgemäßen Verbindungen vorliegen, werden jedoch nicht erwähnt.

In der europäischen Patentanmeldung 10 317 (vergleiche auch die US-PS 42 32 036) sind Carbapenemverbindungen der allgemeinen Formel beschrieben, worin R° für H oder -SR⁸ steht; R¹, R⁶, R⁷ und R⁸ bedeuten unabhängig voneinander ein Wasserstoffatom (R¹ steht nicht für Wasserstoff) oder eine der nachfolgend aufgeführten, gegenbenenfalls substituierten Gruppen: Alkyl, Alkenyl und Alkinyl mit 1 bis 10 Kohlenstoffatomen; Cycloalkyl, Cycloalkylalkyl und Alkylcycloalkyl mit 3 bis 6 Kohlenstoffatomen im Cycloalkylring und 1 bis 6 Kohlenstoffatomen in den Alkyleinheiten; Phenyl; Aralkyl, Aralkenyl und Aralkinyl, wobei die Aryleinheit eine Phenylgruppe ist und die Alkylkette 1 bis 6 Kohlenstoffatome aufweist; Heteroaryl, Heteroaralkyl, Heterocyclyl und Heterocyclylalkyl. Der Substituent oder die Substituenten der oben aufgeführten Gruppen sind ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus: Amino-, Mono-, Di- und Trialkylamino, Hydroxy, Alkoxy, Mercapto, Alkylthio, Phenylthio, Sulfamoyl, Amidino, Guanidino, Nitro, Chlor, Brom, Fluor, Cyano und Carboxy. Bei den Heteroatomen der oben genannten heterocyclischen Einheiten handelt es sich um 1 bis 4 Sauerstoff-, Stickstoff- und/oder Schwefelatome. Die Alkyleinheiten der oben genannten Substituenten besitzen 1 bis 6 Kohlenstoffatome.

In der britischen Patentanmeldung 21 19 371 A sind Carbapenem- Antibiotika beschrieben, die durch den nachstehend gezeigten, in 2-Stellung befindlichen Substituenten der Formel charakterisiert sind. Dabei bedeutet A einen Cyclopentylen-, Cyclohexylen- oder C₂-C₆-Alkylenrest, der gegebenenfalls durch ein oder mehrere C₁-C₄-Alkylgruppen substituiert ist. Der Rest steht für einen quaternisierten, ein Stickstoffatom enthaltenden aromatischen Heterocyclus.

In der britischen Patentanmeldung 21 22 196 A sind Carbapenem- Antibiotika beschrieben, die durch den folgenden Substituenten der Formel charakterisiert sind, der sich in 2-Stellung befindet. Dabei bedeutet A einen Cyclopentylen-, Cyclohexylen- oder C₂-C₆-Alkylenrest, der gewünschtenfalls durch eine oder mehrere C₁-C₄-Alkylgruppen substituiert ist. R⁵ bedeutet entweder (a) eine gewünschtenfalls substituierte aliphatische, cycloaliphatische, cycloaliphatisch-aliphatische, araliphatische, heteroaraliphatische oder heterocyclylaliphatische Gruppe oder eine gewünschtenfalls substituierte Aryl-, Heteroaryl- oder Heterocyclylgruppe oder (b) eine divalente Phenylen- oder C₁-C₄-Alkylengruppe, die mit dem Rest so verbunden ist, daß eine überbrückte polycyclische Gruppe gebildet wird. Der Rest steht für einen quaternisierten, einen Stickstoffatom enthaltenden, nicht-aromatischen Heterocyclus.

In der britischen Patentanmeldung 21 28 187 A sind Carbapenem-Antibiotika beschrieben, die durch einen Substituenten der folgenden Formel charakterisiert sind, der sich in 2-Stellung befindet. In dieser Formel bedeutet A eine geradkettige oder verzweigte C₁-C₆-Alkylengruppe. R⁵ bedeutet eine gewünschtenfalls substituierte aliphatische, cycloaliphatische, cycloaliphatisch- aliphatische, araliphatische, heteroaraliphatische oder heterocyclyl-aliphatische Gruppe oder eine gewünschtenfalls substituierte Aryl-, Heteroaryl- oder Heterocyclylgruppe. Der Rest steht für einen, ein Stickstoffatom enthaltenden aromatischen Heterocyclus, der über ein Ringkohlenstoffatom an die Alkylengruppe A gebunden ist und durch den Substituenten R⁵ quaternisiert ist.

Die britische Patentanmeldung 21 18 183 A offenbart Carbapenem-Antibiotika, die durch einen Substituenten der folgenden Formel charakterisiert sind, welche sich in 2-Stellung befinden. Dabei bedeutet A eine verzweigtkettige oder gerade C₂-C₆- Alkylengruppe. R¹⁰ und R¹¹ stehen unabhängig voneinander für eine gewünschtenfalls substituierte aliphatische, cycloaliphatische, cycloaliphatisch-aliphatische, heterocyclyl- aliphatische oder heteroaliphatische Gruppe oder eine gewünschtenfalls substituierte Aryl-, Heterocyclyl- oder Heteroarylgruppe. R¹⁰ und R¹¹ können auch zusammen mit dem S⊕-Atom, an das sie gebunden sind, einen gewünschtenfalls substituierten, ein Schwefelatom enthaltenden heterocyclischen Ring bilden. Im Beispiel 1 dieser GB-PS 21 18 183 A ist das Carbapenem-Antibiotikum der folgenden Formel beschrieben, das sich von dem erfindungsgemäßen Verbindungen darin unterscheidet, daß die heterocyclische Gruppe des Substituenten in 2-Stellung an die Ethylengruppe über die Sulfoniumgruppe gebunden ist.

Obgleich eine Vielzahl von Carbapenem-Derivaten in der Literatur beschrieben sind, besteht immer noch ein Bedürfnis nach neuen Carbapenem-Derivaten, die hinsichtlich des Aktivitätsspektrums, der Wirksamkeit, der Stabilität und/oder der toxischen Nebenwirkungen besser sind als die bekannten Derivate.

Erfindungsgemäß werden neue Carbapenem-Derivate bereitgestellt, die sich dadurch auszeichnen, daß sie in 2-Stellung einen Substituenten der nachfolgenden Formel aufweisen, worin n für 0, 1, 2 oder 3; m für 1 oder 2 und o für 1 oder 2 stehen und R eine C₁-C₆-Alkyl-, Allyl-, Propargyl-, Carboxymethyl-, Cyanomethyl- oder Aralkylgruppe bedeutet, wobei die Aryleinheit der Aralkylgruppe eine Phenyl- oder Heteroarylgruppe ist und die Alkyleinheit eine C₁-C₆-Alkylgruppe ist, wobei der die Sulfoniumgruppe enthaltende heterocyclische Ring gewünschtenfalls an einem Ringkohlenstoffatom oder an Ringkohlenstoffatomen durch eine oder zwei C₁-C₆-Alkylgruppen substituiert sein kann.

Erfindungsgemäß werden insbesondere Carbapenem-Derivate der folgenden Formel (I) bereitgestellt, worin
R² ein Wasserstoffatom oder eine übliche, leicht entfernbare Carboxylschutzgruppe bedeutet,
B ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe bedeutet,
n für 0, 1, 2 oder 3,
m für 1 oder 2 und
o für 1 oder 2 stehen und
R eine C₁-C₆-Alkyl-, Allyl-, Propargyl-, Carboxymethyl-, Cyanomethyl- oder Aralkylgruppe bedeutet, wobei die Aryleinheit des Aralkylrestes eine Phenyl- oder eine 5-6-gliedrige Heteroarylgruppe und die Alkyleinheit eine C₁-C₆-Alkylgruppe bedeuten,
wobei der die Sulfoniumgruppe enthaltende heterocyclische Ring gewünschtenfalls an einem Ringkohlenstoffatom oder an Ringkohlenstoffatomen durch eine oder zwei C₁-C₆- Alkylgruppen substituiert sein kann.

Erfindungsgemäß umfaßt sind auch die pharmazeutisch verträglichen Salze und die physiologisch hydrolysierbaren Ester der Verbindungen der allgemeinen Formel (I).

Die erfindungsgemäße Verbindungen der allgemeinen Formel (I) sind wirksame antibakterielle Agentien, die sich durch ihre außerordentlich hohe Aktivität gegenüber gram-negativen Spezies auszeichnen. Dies trifft insbesondere für Pseudomonas Spezien zu. Die erfindungsgemäßen Verbindungen sind ferner Zwischenverbindungen zur Herstellung derartiger Agentien.

Gegenstand der Erfindung sind auch Verfahren zur Herstellung der oben beschriebenen, neuen Carbapenem-Derivate sowie pharmazeutische Mittel, welche die biologisch aktiven Carbapenem-Derivate gegebenenfalls zusammen mit pharmazeutisch verträglichen Trägern und/oder Verdünnungsmitteln enthalten.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen der allgemeinen Formel (I) enthalten den Carbapenem-Kern Sie können somit auch als 1-Carba-2-penem-3-carbonsäure- Derivate bezeichnet werden. Es ist ferner möglich, den erfindungsgemäßen Verbindungen folgende Basisstruktur zuzuordnen und sie als 7-Oxo-1-azabicyclo(3.2.0)-hept-2-en- 2-carbonsäure-Derivate zu bezeichnen. Erfindungsgemäß sind alle Verbindungen umfaßt, bei denen die Protonen in 5,6- Stellung zueinander sowohl cis als auch trans stehen können. Die Stereochemie der bevorzugten Verbindungen ist derart, daß sie - wie auch Thienamycin - 5R,6S-Konfiguration besitzen (trans-Konfiguration).

Die erfindungsgemäßen Verbindungen der allgemeinen Formel (I) können in der 1-Stellung (B = Wasserstoff) unsubstituiert sein oder durch eine Methylgruppe substituiert sein. Der Methylsubstituent kann sowohl α- als auch β-Konfiguration besitzen. Erfindungsgemäß sind alle einzelnen α- und β- Isomere sowie die Mischungen davon umfaßt. Die am meisten bevorzugten Verbindungen, die in 1-Stellung substituiert sind, besitzen β-Konfiguration.

Der Hydroxyethylsubstituent in der 6-Stellung des Carbapenem-Kerns besitzt vorzugsweise die absolute Konfiguration 5R, 6S, 8R.

Der bei den erfindungsgemäßen Verbindungen in 2-Stellung befindliche Substituent ist ein 4-6-gliedriger heterocyclischer Ring, der eine funktionelle Sulfoniumgruppe enthält. Dieser Ring ist über ein Kohlenstoffatom entweder an eine Alkylengruppe oder direkt an das Schwefelatom gebunden, welches an den Carbapenem-Kern angeknüpft ist.

Die die Sulfoniumgruppe enthaltende 4-6-gliedrige heterocyclische Gruppe kann gewünschtenfalls an einem Ringatom oder an mehreren Ringatomen durch eine oder zwei C₁-C₆- Alkylgruppen substituiert sein. Derartige bevorzugte, substituierte Ringe besitzen die nachstehend gezeigten Formeln: und

Der Substituent R des Schwefel-enthaltenden heterocyclischen Ringes kann eine gerade oder verzweigtkettige C₁-C₆-Alkyl-, vorzugsweise C₁-C₄-Alkyl-, und insbesondere bevorzugt C₁-C₂-Alkyl-, Allyl-, Propargyl-, Carboxymethyl-, Cyanomethyl- oder Aralkylgruppe sein. Die Aryleinheit der Aralkylgruppe kann eine Phenyl- oder eine 5-6-gliedrige Heteroarylgruppe sein. Der hier benutzte Ausdruck "Heteroaryl" bezeichnet einen aromatischen Ring mit 1 bis 3 Heteroatomen, wobei es sich unabhängig voneinander um Sauerstoff-, Stickstoff- und Schwefelatome handeln kann. Die Alkyleinheit der Aralkylgruppe ist eine gerade oder verzweigtkettige C₁-C₆-Alkyl-, vorzugsweise C₁-C₄-Alkyl- und insbesondere bevorzugt C₁-C₂-Alkylgruppe. Als Beispiele geeigneter Heteroarylgruppen kann man die Thienyl- und Furylgruppe nennen.

Die Verbindungen der allgemeinen Formel (I) können in folgenden "Formen" vorliegen:

Dabei besitzen B, n, m, o und R die zuvor angegebenen Bedeutungen. R^2′ stellt eine übliche, leicht entfernbare Carboxylschutzgruppe dar und X^- ist ein Gegenion. Bei den biologisch aktiven Endprodukten wählt man das Gegenion derart aus, daß man für eine therapeutische Anwendung geeignete pharmazeutisch verträgliche Salze erhält. Stellen die Verbindungen der allgemeinen Formel (I) Zwischenverbindundungen dar, dann kann X^- auch ein toxisches Ion sein. Um in diesem Fall ein aktives Endprodukt für eine therapeutische Verwendung zu erhalten, kann man anschließend das toxische Ion entfernen oder durch ein pharmazeutisch verträgliches Ion ersetzen.

Mit dem Ausdruck "übliche, leicht entfernbare Carboxylschutzgruppe" wird eine bekannte Estergruppe bezeichnet, die zur Blockierung einer Carboxylgruppe während der nachstehend beschriebenen chemischen Reaktion eingesetzt wird und die gewünschtenfalls nach Verfahren entfernt werden können, welche zu keiner merkbaren Zersetzung des übrigen Teils des Moleküls führen. Dazu zählen beispielsweise chemische oder enzymatische Hydrolyse, Behandlung mit chemischen Reduktionsmitteln unter milden Bedingungen, Bestrahlung mit UV-Licht und katalytische Hydrierung. Derartige Esterschutzgruppen sind beispielsweise: Benzhydryl, Allyl, p-Nitrobenzyl, 2-Naphthylmethyl, Benzyl, Trichlorethyl, Silyl, wie Trimethylsilyl, Phenacyl, p-Methoxybenzyl, Acetonyl, o-Nitrobenzyl, 4-Pyridylmethyl und C₁-C₆-Alkyl, wie Methyl, Ethyl oder t-Butyl. Dazu gehören auch Schutzgruppen, die unter physiologischen Bedingungen hydrolysiert werden. Dazu zählen Pivaloyloxymethyl-, Acetoxymethyl-, Phthalidyl-, Idanyl- und Methoxymethylgruppen. Besonders vorteilhafte Carboxylschutzgruppen sind die p-Nitrobenzylgruppe, die durch katalytische Hydrierung leicht entfernt werden kann, und die Allylgruppe, die mit einem Katalysator aus einer Mischung aus einer Palladiumverbindung und Triphenylphosphin in einem aprotischen Lösungsmittel, beispielsweise Tetrahydrofuran, Diethylether, Methylenchlorid, Ethylacetat und Acetonitril, leicht entfernt werden kann.

Die oben genannten pharmazeutisch verträglichen Salze sind nicht-toxische Säureadditionssalze. Dazu gehören Salze mit Mineralsäuren, wie Chlorwasserstoff-, Bromwasserstoff-, Iodwasserstoff-, Phosphor- und Schwefelsäure, sowie Salze mit organischen Säuren, wie Malein-, Essig-, Zitronen-, Bernstein-, Benzoe-, Wein-, Fumar-, Mandel-, Ascorbin-, Milch-, Glucon- und Äpfelsäure.

Die Verbindung der allgemeinen Formel (I), worin R² ein Wasserstoffatom, eine anionische Ladung oder eine physiologisch hydrolysierbare Estergruppe bedeutet, sowie die pharmazeutisch verträglichen Salze davon, sind nützliche antibakterielle Wirkstoffe. Die übrigen Verbindung der allgemeinen Formel (I) sind wertvolle Zwischenverbindungen, welche in die oben genannten biologisch aktiven Verbindungen überführt werden können.

Erfindungsgemäß bevorzugt sind die Verbindungen der folgenden allgemeinen Formel: worin B, R und R² die oben angegebenen Bedeutungen besitzen, sowie die pharmazeutisch verträglichen Salze und physiologisch hydrolysierbaren Ester davon. Innerhalb dieser Verbindungsgruppe bedeutet der Substituent R vorzugsweise eine C₁-C₆- Alkylgruppe, insbesondere eine Methylgruppe.

Am meisten bevorzugt sind die Verbindungen der folgenden Formel worin B ein Wasserstoffatom oder eine β-Methylgruppe bedeutet, sowie die pharmazeutisch verträglichen Salze und Ester davon.

Die Carbapenem-Derivate der allgemeinen Formel (I) stellt man aus den Ausgangsverbindungen der folgenden allgemeinen Formel (III) her, worin B und R^2′ die oben angegebenen Bedeutungen besitzen. Die Verbindungen der allgemeinen Formel (III) sind beispielsweise in den europäischen Patentanmeldung 38 869 und 54 917 beschrieben und können nach den dort erläuterten allgemeinen Verfahren hergestellt werden.

Ein Verfahren zur Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen der allgemeinen Formel (I), das von den Ausgangsverbindungen der allgemeinen Formel (III) ausgeht, ist im nachstehenden Reaktionsschema zusammengefaßt: L = übliche Abgangsgruppe

Ein bevorzugtes und alternatives Verfahren zur Herstellung der Verbindung der allgemeinen Formel (I), das von den Ausgangsverbindungen der allgemeinen Formel (III) ausgeht, ist im nachfolgenden Reaktionsschema gezeigt:

Bei dem ersten oben gezeigten Reaktionsschema geht man von einer Verbindung der allgemeinen Formel (III) aus, die man mit einem inerten, organischen Lösungsmittel, wie Methylenchlorid, Acetonitril oder Dimethylformamid, mit etwa einer äquimolaren Menge einer Verbindung R⁰-L, beispielsweise p-Toluolsulfonsäureanhydrid, p-Nitrobenzolsulfonsäureanhydrid, 2,4,6-Triisopropylbenzolsulfonsäureanhydrid, Methansulfonsäureanhydrid, Trifluormethansulfonsäureanhydrid, Diphenylchlorphosphat, Toluolsulfonylchlorid, p-Brombenzolsulfonylchlorid oder dergleichen, umsetzt. L ist dabei die entsprechende Abgangsgruppe, z. B. Toluolsulfonyloxy, p-Nitrobenzolsulfonyloxy oder Diphenoxyphosphinyloxy, oder eine andere Abgangsgruppe, die nach üblichen Verfahren eingeführt werden kann und im Stand der Technik gut bekannt ist. Die Umsetzung zur Einführung der Abgangsgruppe in die 2-Stellung der Zwischenverbindung (III) führt man vorteilhafterweise in Gegenwart einer Base, beispielsweise Diisopropylethylamin, Triethylamin, 4-Dimethylaminopyridin oder dergleichen, bei einer Temperatur von etwa -20° bis +40°C, vorzugsweise bei etwa 0°C durch. Die Abgangsgruppe L der Zwischenverbindung (IV) kann auch ein Halogenion sein. In diesem Fall führt man diese Gruppe ein, indem man die Zwischenverbindung (III) mit einem Halogenierungsmittel, beispielsweise Ø₃PCl₂, Ø₃PBr₂, (ØO)₃PBr₂, Oxalylchlorid oder dergleichen, in einem Lösungsmittel, beispielsweise CH₂Cl₂, CH₃CN, THF oder dergleichen, in Anwesentheit einer Base, beispielsweise Diisopropylethylamin, Triethylamin, 4-Dimethylaminopyridin oder dergleichen, umsetzt. Die Zwischenverbindung (IV) kann man gewünschtenfalls isolieren. Man setzt sie jedoch üblicherweise ohne weitere Isolierung oder Reinigung in der nächsten Stufe ein.

Die Zwischenverbindung (IV) überführt man dann gemäß einer üblichen Verdrängungsreaktion in die Zwischenverbindung (II). Die Zwischenverbindung (IV) kann man somit mit etwa einer äquimolaren Menge eines Thiols der folgenden Formel worin n, m und o die oben angegebenen Bedeutungen besitzen, in einem inerten organischen Lösungsmittel, beispielsweise Dioxan, Dimethylformamid, Dimethylsulfoxid oder Acetonitril und in Gegenwart einer Base, beispielsweise Diisopropylethylamin, Triethylamin, Natriumhydrogencarbonat, Kaliumcarbonat oder 4-Dimethylaminopyridin umsetzt. Die Temperatur für diese Verdrängungsreaktion ist nicht kritisch. Man arbeitet vorteilhafterweise bei einer Temperatur von etwa -40°C bis 25°C. Am zweckmäßigsten führt man die Umsetzung unter Kühlen bei beispielsweise etwa 0°C bis -10°C durch.

Die Quaternisierung des Ringschwegfelatoms in der heterocyclischen Gruppe in 2-Stellung der Zwischenverbindung (II) führt man durch, indem man die Zwischenverbindung (II) in einem inerten organischen Lösungsmittel mit mindestens einem Äquivalent (bis zu etwa 50%-igem molaren Überschuß) eines Alkylierungsmittels der Formel

R-X′

umsetzt, worin R die oben angegebenen Bedeutungen besitzt und X′ eine übliche Abgangsgruppe, beispielsweise Halogen (Chlor, Brom oder Iod, vorzugsweise Iod) oder eine Sulfonatestereinheit, beispielsweise Mesylat, Tosylat oder Triflat, bedeutet. Geeignete, nicht-reaktive organische Lösungsmittel sind beispielsweise: Chloroform, Methylenchlorid, Tetrahydrofuran, Dioxan, Aceton, Dimethylsulfoxid und Dimethylformamid. Die Temperatur für die Alkylierungsreaktion ist nicht kritisch. Man arbeitet vorzugsweise bei Temperaturen von etwa 0°C bis etwa 40°C. Am zweckmäßigsten führt man die Umsetzung bei Raumtemperatur durch.

Die Zwischenverbindung (I′) besitzt ein Gegenion X′ (leitet sich vom eingesetzten Alkylierungsmittel ab), das damit assoziiert ist. Dieses Gegenion kann zu diesem Zeitpunkt oder in einer späteren Stufe, z. B. nach der Deblockierung, durch ein anderes Gegenion, beispielsweise ein Gegenion, das pharmazeutisch verträglicher ist, nach üblichen Verfahren ersetzt werden. In alternativer Weise kann das Gegenion während der Deblockierungsstufe entfernt werden.

Die Deblockierungsstufe zur Entfernung der Carboxylschutzgruppe R^2′ aus der Zwischenverbindung (I′) führt man gemäß üblichen Verfahren durch. Dazu zählt beispielsweise Solvolyse, chemische Reduktion oder Hydrierung. Setzt man eine Schutzgruppe, beispielsweise eine p-Nitrobenzyl-, Benzyl-, Benzhydryl- oder 2-Nephthylmethylgruppe ein, die durch katalytische Hydrierung entfernt werden kann, dann behandelt man die Zwischenverbindung (I′) in einem geeigneten Lösungsmittel, beispielsweise Dioxan-Wasser- Ethanol, Tetrafuran-wäßriges Dikaliumhydrogenphosphat-, Isopropanol oder dergleichen, bei einem Wasserstoffdruck von 1 bis 4 Atmosphären in Gegenwart eines Hydrierkatalysators, beispielsweise Palladium-auf-Kohle, Palladiumhydroxyd, Platinoxid oder dergleichen bei einer Temperatur von 0 bis 50°C während eines Zeitraumes von etwa 0,24 bis 4 h. Bedeutet R^2′ beispielsweise eine o-Nitrobenzylgruppe, dann kann man für die Deblockierung auch die Fotolyse einsetzen. Schutzgruppen wie die 2,2,2-Trichlormethylgruppe kann man mittels milder Reduktion mit Zink entfernen. Die Allylschutzgruppe kann man mit einem Katalysator entfernen, der eine Mischung aus einer Palladiumverbindung und Triphenylphosphin aufweist, wobei man in einem aprotischen Lösungsmittel, beispielsweise Tetrahydrofuran, Diethylether oder Methylenchlorid, arbeitet. In ähnlicher Weise kann man andere übliche Carboxylschutzgruppen nach Verfahren entfernen, die dem Fachmann bekannt sind. Wie bereits oben ausgeführt, kann man Verbindungen der allgemeinen Formel (I′), worin R^2′ eine physiologisch hydrolysierbare Estergruppe, beispielsweise Acetoxymethyl, Phthalidyl, Indanyl, Pivaloyloxymethyl, Methoxymethyl etc. bedeutet, direkt an den Wirt verabreichen, ohne eine Deblockierung durchführen zu müssen, da diese Ester in vivo unter physiologischen Bedingungen hydrolysiert werden.

Bei einer Variante obigen Verfahrens entfernt man die Carboxylschutzgruppe von der Zwischenverbindung (II) vor der Quaternisierung. Somit entfernt man die Carboxylschutzgruppe, wie dies oben beschrieben ist, wobei man die entsprechende freie Carbonsäure erhält. Diese freie Säure quaternisiert man dann mit einem Alkylierungsmittel R-X′, wobei man das gewünschte quaternisierte Produkt der Formel (I) erhält. Ist die von den Schutzgruppen befreite Zwischenverbindung quaternisiert, dann kann man als Lösungsmittel Wasser oder ein nicht-reaktives organisches Lösungsmittel sowie Mischungen davon einsetzen. Beispiele geeigneter Lösungsmittel sind Wasser, organische Lösungsmittel, wie Chloroform, Methylenchlorid, Tetrahydrofuran, Dioxan, Aceton, Dimethylsulfoxid und Dimethylformamid, Mischungen aus Wasser und organischem Lösungsmittel, wie Wasser-Aceton oder Wasser- Dimethylformamid. Die Temperatur für die Quaternisierungsreaktion ist nicht kritisch. Man arbeitet zweckmäßigerweise bei einer Temperatur von etwa -40°C bis etwa Raumtemperatur. Am zweckmäßigsten führt man die Umsetzung bei etwa 0°C durch.

Bei dem oben gezeigten zweiten (und bevorzugten) Verfahren setzt man eine Zwischenverbindung der allgemeinen Formel (IV) worin B, L und R^2′ die oben angegebenen Bedeutungen besitzen,
mit einer Thiolverbindung der allgemeinen Formel (VII) worin n, m, o, R und X⊖ die oben angegebenen Bedeutungen besitzen, in einem inerten Lösungsmittel und in Gegenwart einer Base zu einer Carbapenem-Verbindung der Formel (I′) um. Gewünschtenfalls entfernt man die Carboxylschutzgruppe R^2′, wobei man die entsprechende deblockierte Verbindung der Formel (I′) oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon erhält.

Bei diesem Verfahren setzt man eine Zwischenverbindung der folgenden Formel ein, die, wie bereits ausgeführt, beispielsweise in den europäischen Patentanmeldungen 38 869 und 54 917 beschrieben ist. Diese Verbindung kann man nach den dort erläuterten allgemeinen Verfahren herstellen. L bedeutet eine übliche Abgangsgruppe (in der europäischen Patentanmeldung 38 869 "X" bezeichnet). Dazu gehören folgende Gruppen: Chlor, Brom, Iod, Benzolsulfonyloxy, p-Toluolsulfonyloxy, p-Nitrobenzolsulfonyloxy, Methansulfonyloxy, Trifluormethansulfonyloxy, Diphenoxyphosphinyloxy und Di-(trichlorethoxy)phosphinyloxy. Die bevorzugte Abgangsgruppe ist die Diphenoxyphosphinyloxygruppe.

Die Zwischenverbindung der allgemeinen Formel (IV) stellt man im allgemeinen in situ her, indem man eine Zwischenverbindung der allgemeinen Formel (III) mit einem geeigneten Acylierungsmittel R°-L umsetzt. Die bevorzugte Zwischenverbindung (IV), worin L eine Diphenoxyphosphinyloxygruppe bedeutet, kann man herstellen, indem man den Ketoester III in einem inerten organischen Lösungsmittel wie Methylenchlorid, Acetonitril oder Dimethylformamid, mit etwa 1 äquimolaren Menge Diphenylchlorphosphat in Gegenwart einer Base, beispielsweise Diisopropylethylamin, Triethylamin, 4-Dimethylaminpyridin oder dergleichen, bei einer Temperatur von etwa -20°C bis etwa +40°C, vorzugsweise bei etwa 0°C, umsetzt. Die Zwischenverbindung (IV) kann man gewünschtenfalls isolieren. Man setzt sie jedoch zweckmäßigerweise ohne Isolierung und Reinigung als Ausgangsverbindung bei diesem Verfahren ein.

Die Carbapenem-Zwischenverbindung (IV) setzt man mit einer Thiolverbindung der folgenden Formel um, worin n, m, o und R die zuvor angegebenen Bedeutungen besitzen und X⊖ ein Gegenion darstellt. Die Umsetzung führt man in einem inerten Lösungsmittel, beispielsweise Acetonitril, Acetonitril-Dimethylformamid, Tetrahydrofuran, Tetrahydrofuran-H₂O, Acetonitril-H₂O, Dimethylacetamid, Dimethylacetamid-H₂O oder Aceton, in Gegenwart einer Base durch. Die Art der Base ist nicht kritisch. Geeignete Basen sind: Natriumhydroxyd, Diisopropylethylamin, 1,8-Diazabicyclo[5.4.0]undec- 7-en, 1,5-Diazabicyclo[4.3.0]non-5-en und Tri-(C₁-C₄)alkylamin, wie Triethylamin, Tributylamin oder Tripropylamin. Die Umsetzung kann man innerhalb eines weiten Temperaturbereichs durchführen, beispielsweise von -15°C bis Raumtemperatur. Vorzugsweise arbeitet man bei einer Temperatur von etwa -15°C bis +15°C, am meisten bevorzugt bei etwa 0°C.

Das durch Umsetzung des Thiols mit der Zwischenverbindung (IV) erhaltene Carbapenem-Produkt besitzt ein dazugehöriges Gegenion (z. B. (C₆H₅O)₂PO₂ ^-, Cl^- oder das mit dem quaternisierten Thiol assoziierte Anion), das man zu diesem Zeitpunkt durch ein anderes Gegenanion ersetzen kann, beispielsweise ein Anion, das pharmazeutisch besser verträglich ist. Man verfährt dabei gemäß üblichen Verfahren. In alternativer Weise kann man das Gegenion während der anschließenden Deblockierungsstufe entfernen. Bilden die quaternisierten Carbapenem-Verbindung und das Gegenion ein unlösliches Produkt, dann kristallisiert dieses Produkt aus, solbald es gebildet ist, und man kann es als solches abfiltrieren.

Nach Bildung des gewünschten Carbapenem-Produkts kann man die Carboxylschutzgruppe R^2′ der Verbindung (I′) gewünschtenfalls nach üblichen Verfahren, beispielsweise Solvolyse, chemische Reduktion oder Hydrierung, entfernen. Kann man die Schutzgruppe durch katalytische Hydrierung leicht entfernen, wie das beispielsweise bei der p-Nitrobenzyl-, Benzyl-, Benzhydryl- oder 2-Naphthylmethylgruppe der Fall ist, dann behandelt man die Zwischenverbindung (I′) in einem geeigneten Lösungsmittel, beispielsweise Dioxan-Wasser-Ethanol, Tetrahydrofuran-Diethylether-Puffer, Tetrahydrofuran-wäßriges Dikaliumhydrogenphosphat-Isopropanol oder dergleichen, bei einem Wasserstoffdruck von 1 bis 4 Atmosphären in Gegenwart eines Hydrierkatalysators, beispielsweise Palladium-auf-Kohle, Palladiumhydroxyd, Platinoxid oder dergleichen, bei einer Temperatur von 0 bis 50°C während eines Zeitraums von 0,24 bis 4 h. Handelt es sich bei dem Rest R^2′ um eine Gruppe wie die o-Nitrobenzylgruppe, dann kann man für die Deblockierung sich auch der Fotolyse bedienen.

Schutzgruppen wie die 2,2,2-Trichlorethylgruppe, kann man durch milde Reduktion mit Zink entfernen. Die Allylschutzgruppe kann man entfernen, indem man einen Katalysator einsetzt, der eine Mischung aus einer Palladiumverbindung und Triphenylphosphin aufweist, wobei man in einem geeigneten aprotischen Lösungsmittel, beispielsweise Tetrahydrofuran, Methylenchlorid oder Diethylether, arbeitet. In ähnlicher Weise kann man andere übliche Carboxylschutzgruppen nach Verfahren entfernen, die im Stand der Technik beschrieben sind. Ist bei den Verbindungen der allgemeinen Formel (I′) der Rest R^2′ ein physiologisch hydrolysierbarer Ester, beispielsweise eine Acetoxymethyl-, Phthalidyl-, Indanyl-, Pivaloyloxymethyl- oder Methoxymethylester etc., dann kann man diese Verbindung direkt an den Wirt verabreichen, ohne vorher eine Deblockierung durchzuführen, da diese Ester in vivo unter physiologischen Bedingungen hydrolysiert werden.

Die quaternären Thiolzwischenverbindungen kann man herstellen, indem man ein geschütztes Thiol der folgenden Formel worin P eine übliche Thiolschutzgruppe bedeutet, in einem inerten organischen Lösungsmittel, beispielsweise Diethylether, Dichlormethan, Methylenchlorid, Dioxan, Benzol, Xylol, Toluol oder Mischungen davon, mit einem geeigneten Alkylierungsmittel der Formel

R-X′

worin R die oben angegebenen Bedeutungen besitzt und X′ eine übliche Abgangsgruppe wie Halogen (Chlor, Brom oder Iod, vorzugsweise Iod), oder eine Sulfonatestereinheit, beispielsweise Mesylat, Tosylat oder Triflat bedeutet, umsetzt. Die Temperatur für die Alkylierungsreaktion ist nicht kritisch. Vorzugsweise arbeitet man bei Temperaturen von etwa 0°C bis etwa 40°C.

Die Schutzgruppe P ist eine übliche Thiolschutzgruppe. Es kann sich dabei beispielsweise um Schutzgruppen handeln, die im Kapitel 6 von "Protective Groups in Organic Synthesis, Theodora W. Greene, John Wiley and Sons, New York, Seiten 193-217, beschrieben sind. Geeignete Thiolschutzgruppen sind beispielsweise die folgenden: Thiolether, wie Benzyl, 4-Methylbenzyl, 3,4-Dimethylbenzyl, p-Methoxybenzyl, o-Hydroxybenzyl, p-Hydroxybenzyl, Acetoxybenzyl, p-Nitrobenzyl oder Diphenylmethyl und Thioester, wie Acetyl, Benzoyl oder Thiobenzoyl. Eine bevorzugte Schutzgruppe ist die Acetylgruppe, die man durch Behandeln mit einer wäßrigen Base vor der Umsetzung mit der Zwischenverbindung (IV) entfernt.

Wie auch bei den anderen β-Lactam-Antibiotika kann man die Verbindungen der allgemeinen Formel (I) nach bekannten Verfahren in pharmazeutisch verträgliche Salze überführen, die für die Zwecke der vorliegenden Erfindung den nicht als Salzen vorliegenden Verbindungen im wesentlichen äquvalent sind. So kann man beispielsweise eine Verbindung der allgemeinen Formel (I), worin R² eine anionische Ladung bedeutet, in einem geeigneten inerten Lösungsmittel lösen. Anschließend gibt man ein Äquivalent einer pharmazeutisch verträglichen Säure hinzu. Das gewünschte Säureadditionssalz kann man nach üblichen Verfahren gewinnen, beispielsweise durch Präzipitieren mit einem Lösungsmittel, Lyophilisieren usw.

Verschiedene Verbindungen, die unter die allgemeine Formel (I) fallen, können in Form von optischen Isomeren sowie als epimere Mischungen davon vorliegen. Erfindungsgemäß sind alle derartigen optischen Isomere und Epimerenmischungen umfaßt. So kann beispielsweise der Hydroxyethylsubstituent in 6-Stellung entweder R- oder S-Konfiguration besitzen. Die resultierenden Isomere sowie die Epimerenmischungen davon sind erfindungsgemäß umfaßt.

Eine Verbindung der Formel (I), worin R² ein Wasserstoffatom oder ein anionische Ladung bedeutet, sowie ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon kann auch nach üblichen Verfahren in eine entsprechende Verbindung überführt werden, worin R² eine übliche Carboxylschutzgruppe bedeutet. Eine Verbindung der Formel (I) wiederum, worin R² eine übliche Carboxylschutzgruppe bedeutet, kann in eine entsprechende Verbindung, worin R² ein Wasserstoffatom, eine anionische Ladung oder eine physiologisch hydrolysierbare Estergruppe bedeutet, oder in ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon überführt werden.

Die erfindungsgemäßen Carbapenem-Derivate der allgemeinen Formel (I), worin R² ein Wasserstoffatom, eine anionische Ladung oder eine physiologisch hydrolysierbare Carboxylschutzgruppe bedeutet, sowie die pharmazeutisch verträglichen Salze davon sind wirksame Antibiotika, die gegenüber verschiedenen gram-positiven und gram-negativen Bakterien wirksam sind. Diese Verbindungen können beispielsweise als Tierfutterzusätze zur Wachstumsförderung, als Konservierungsmittel für Nahrungsmittel, als Bakterizide für industrielle Anwendungen, beispielsweise in Farben auf Wasserbasis und im Waschwasser von Papiermühlen zur Inhibierung des Wachstums schädlicher Bakterien, und als desinfizierende Wirkstoffe zur Zerstörung bzw. Inhibierung des Wachstums schädlicher Bakterien auf medizinischen und zahnmedizinischen Geräten eingesetzt werden. Sie sind jedoch insbesondere zur Behandlung von Infektionserkrankungen bei Mensch und Tier geeignet, welche durch gram-positive oder gram-negative Bakterien hervorgerufen werden.

Die erfindungsgemäßen pharmazeutisch wirksamen Verbindungen können alleine eingesetzt werden oder können in Form von pharmazeutischen Mitteln zur Anwendung kommen. Diese pharmazeutischen Mittel enthalten gegebenenfalls neben dem Carbapenem-Wirkstoff einen pharmazeutisch verträglichen Träger und/oder ein pharmazeutisch verträgliches Verdünnungsmittel. Die Verbindungen können auf vielfältige Weise verabreicht werden. Von besonderem Interesse sind die orale, topische und parenterale (z. B. intravenöse oder intramuskuläre Injektion) Verabreichung. Die pharmazeutischen Mittel können in fester Form, beispielsweise als Kapseln, Tabletten, Pulver etc., oder in flüssiger Form, beispielsweise als Lösungen, Suspensionen oder Emulsionen, vorliegen. Mittel für Injektionszwecke (bevorzugter Verabreichungsweg) können in Form einer Einzeldosis in Ampullen oder in Mehrfachdosisbehältern bereitgestellt werden und können Formulierungsagentien, wie Suspendier-, Stabilisierungs- und Dispergiermittel, enthalten. Die Mittel können in einer Form vorliegen, die als solche verabreicht werden. Sie können jedoch auch in Pulverform zur Rekonstitution mit einem geeigneten Träger, wie sterilem Wasser, zum Zeitpunkt der Verabreichung vorliegen.

Die zu verabreichende Dosis hängt größtenteils von der eingesetzten Verbindung, der Formulierung, dem Verabreichungsweg, der Art und dem Zustand sowie dem speziellen Situs und dem zu behandelnden Organismus ab. Die Wahl der besonders bevorzugten Dosierung und der Verabreichungsart wird dem therapierenden Arzt überlassen. Die erfindungsgemäßen Verbindungen werden jedoch im allgemeinen parenteral oder auch oral an Säuger (Mensch und Tier) in einer Menge von 5 bis 200 mg/kg/Tag verabreicht. Die Verabreichung führt man im allgemeinen in mehreren Dosen, beispielsweise 3 bis 4 mal täglich, durch.

Zur Erläuterung der ausgeprägten antibakteriellen Breitband- Aktivität der erfindungsgemäßen Carbapeneme sind nachstehend verschiedene biologische Daten für die derzeit bevorzugten erfindungsgemäßen Verbindungen aufgeführt.

In Vitro Aktivität

Die in Beispiel 1 hergestellte Carbapenem-Verbindung zeigt nach Lösen in Wasser und Verdünnen mit einer Nährlösung bei den in der folgenden Tabelle aufgeführten Mikroorganismen die folgende minimale Hemmkonzentration [Minimum Inhibitory Concentration, M.I.C.] in µg/ml, ermittelt nach vorheriger Inkubation über Nacht bei 37°C und Verdünnen im Reagenzglas.

In Vitro antibakterielle Aktivität von Carbapenem-Derivaten

Blutspiegelwerte

Zur Bestimmung der Blutspiegelwerte verwendet man Mäuse (2 Gruppen). Jede Gruppe besteht aus 4 Mäusen mit einem Gewicht von 20 g. Vor dem Verabreichen der Testsubstanz (5-10 min) erhält eine der Gruppen eine i. p. Injektion eines Dipeptidase-Inhibitors (BCH-1) in einer Menge von 10 mg/kg. In Zeitabständen von 10, 20, 30, 40, 45, 60 und 90 min nach der intramuskulären Verabreichung der Verbindung von Beispiel 1, entnimmt man Blutproben von jeder Maus und bestimmt die biologische Aktivität indem man Test-Plattenkulturen mit B. subtilis ATCC 6633 verwendet.

Rückgewinnung aus dem Urin

Man verwendet 2 Mäusegruppen, um die Urinproben auszuwerten. Jede Gruppe bestand aus vier Mäusen mit einem Gewicht von 20 g. 5 bis 10 Min. vor der Verabreichung der Testsubstanz erhielt eine der Gruppen Dipeptidase-Inhibitor (BCH-1) in einer Konzentration von 10 mg/kg i. p. gespritzt. Nach der Verabreichung der Testsubstanz wurden die Tiere einzeln in Käfige zur Bestimmung des Stoffwechsels gesetzt und der Urin wurde in 0 bis 3 und 3 bis 6 Stunden-Intervallen gesammelt und dabei eisgekühlt. Die Tiere fasteten über Nacht; nur eine Dextrose-Aminosäurelösung wurde ad libitum von 1 h vor dem Verabreichen der Testsubstanz bis zu 6 h lang während der Uringewinnung gegeben. Die biologische Aktivität der Urinprobe wurde mit Test-Plattenkulturen bestimmt, die B. subtilis ATCC 6633 enthielten.

In Vivo Aktivität

Herstellung der Challenge

Man überimpft mit einer Impföse aus einer aufgetauten Stamm-suspension 9 ml BHI-Nährlösung mit P. aeruginosa A9843a und inkubiert bei 37°C 18 h lang. Aus einer 18 h Kultur gibt man 0,5 ml auf 20 ml BHI-Nährlösung und inkubiert 3 h lang bei 37°C und unter ständigem Schütteln. Von der geschüttelten, beimpften Kultur stellt man eine 1 : 10 000 Verdünnung in 0.4% Hog Magenmuzin her. Die Mäuse wurden i. p. mit 0,5 ml Bakteriensuspension infiziert (entspricht 6,0 × 10⁴ lebensfähigen Bakterien/Maus).

Bestimmung der 50%-Schutzdosis/PD₅₀:

Man verabreichte infizierten Mäusen i. m. die Verbindung aus Beispiel 1 in verschiedenen Dosierungen unmittelbar nach der Infektion und wiederum 2 h nach der Infektion. Jede Maus erhielt 0,2 ml intramuskulär. In einem Zeitraum von 5 Tagen nach der Infektion wurde die Zahl der toten Tiere ermittelt sowie der PD₅₀-Wert der Verbindung durch Schätzen des 50%-Endpunktes mittels der Varianzanalyse bestimmt.

Der PD₅₀-Wert (i. m.) beträgt 0,71 mg/kg.

Es folgen Beispiele zur Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindung. Die folgenden Beispiele dienen der beispielhaften Erläuterung der vorliegenden Erfindung, wobei sie nicht als limiertend zu verstehen sind.

Beispiel 1

(5R,6S)-6-(1R-Hydroxyethyl)-7-oxo-3-(1-methyl-4- thiatetrahydrothiopyranium)-1-azabicyclo[3.2.0]-hept-2-en- 2-carboxylat

A. 4-Mercapto-1-methyl-tetrahydrothiopyraniumtriflat

Man behandelt eine kalte (Eisbad), wässrige Lösung (4 ml) von 4-Acetylthio-1-methyl-tetrahydrothiopyraniumtriflat [4-Acetylthio- tetrahydrothiopyran (1,1 g; 6,25 mmol) quaternisiert man mit 1,1 ml Methyltriflat in Methylenchlorid bei 0°C, wobei man das entsprechende quaternisierte Derivat erhält (2,16 g; 6,34 mmol; 98,6%)] (500 mg; 1,47 mmol) mit einer 1 M NaOH-Lösung (2 ml; 2 mmol). Man rührt die Mischung etwa 1 h bis kein Ausgangsmaterial im TLC (Umkehrphasen-Kieselgel) mehr sichtbar ist (TLC = Dünnschichtchromatogram). Den pH-Wert der stark basischen Lösung bringt man mit 10% HCl auf pH = 7,5. Das Thiol verwendet man für die folgende Kopplungsreaktion mit einem Enolphosphat.

B. p-Nitrobenzyl (5R,6S)-6-(1-R-hydroxyethyl)-7-oxo-3- (1-methyl-4-thia-tetrahydrothiopyranium-diphenylphosphat)- 1-azabicyclo[3.2.0]hept-2-en-2-carboxylat

Eine aus p-Nitrobenzyl-(5R-hydroxyethyl)-3,7-dioxo-1- azabicyclo[3.2.0]hept-2-en-3-carboxylat (174 mg; 0,500 mmol), Diisopropylethylamin (105 µl; 0,603 mmol) und Diphenylchlorophosphat (124 µl; 0,598 mmol) in 4 ml Acetonitril bei 0°C (1 h) hergestellte Enolphosphatlösung behandelt man mit kaltem 4-Mercapto-1-methyl-tetrahydrothiopyraniumtriflat (aus 500 mg des korrespondierenden 4-Acetyl-thioderivats). Man gibt ca. 20 ml kaltes Acetonitril hinzu bis man eine Phasenmischung erhält. Man rührt die Lösung 2 h bei 0°C, läßt sie 18 h bei -78°C stehen und rührt wieder 4 h bei 0°C; dabei wird der pH-Wert durch Zugabe von wässriger NaHCO₃ auf pH = 7,8 fixiert. Man verdampft das Acetonitril bei niedriger Temperatur (≦ωτ 15°C), wobei man eine wässrige Fraktion und ein zähes Präzipitat erhält. Die wässrige Fraktion gibt man auf ein Umkehrphasen-Silicagelsäule (2,5 × 8 cm int.). Die Polarität des Eluierungsmittels erhöht man mit CH₃CN. Das entstehende zähe Präzipitat löst man schließlich in (≈10% CH₃CN/H₂O) und gibt es über eine Säule. Man eluiert die Titelverbindung mit einer Mischung aus 15% + 30% CH₃CN in H₂O. Man verdampft das Acetonitril im Hochvakuum 1 h lang bei 0 bis 5°C. Durch Lyophilisation der wässrigen Fraktion erhält man ein gelbes Pulver (240 mg; 67%).

IR (Nujol): ν_max: 1772 (s, β-lactam C=0) und 1595 (s, CO₂ ^-)
[cm^-1]

¹H-NMR (80 MHz, D₂O)δ: 8,28; 8,17; 7,68; 7,57 (4H, m, aromatische H); 7,57-7,11 (1OH, m, arom. H); 5,39 (2H, b.s., O-CH₂-); 4,45-4,10 (2H, m, H-1′ und H-5); 3,95-3,00 (7H, m, CH₂-4, CH₂-S⁺ CH₂, S-CH); 2,88; 2,87 (3H, 2s, ⁻S⁺-CH₃); 2,75-1,75 (4H, m, CH ₂CH-CH₃) und (3H, d, J=6,4, CH₃)

Beispiel 2

(5R,6S)-6-(1R-Hydroxyethyl)-4R-methyl-3-(1-methyl-4- thiatetrahydrothiopyranium)-7-oxo-1-azabicyclo[3.2.0]-hept-2- en-2-carboxylat

A. Herstellung von 4-Acetylthio-1-methyltetrahydrothiopyranium- trifluormethansulfonat

Zu einer gekühlten (5°C) Lösung von 4-Acetylmercaptotetrahydrothiopyran (1,91 g; 10,9 mmol) in 20 ml Dichlormethan tropft man während 30 Min. Methyltrifluormethansulfonat (1,3 ml, 11,5 mmol). Man entfernt das Lösungsmittel im Vakuum, wobei man 3,85 g (≦λτ100%) Titelverbindung als Öl mit den folgenden Werten erhält:

¹H-NMR(D₂O) [ppm] δ: 2,14-3,79 (m, 8H, Ringprotonen); 2,39 (s, 3H, COCH₃); 2,93 (s, 3H, SCH₃) und 5,46 (s, 1H, CHS)

Dieses Öl wird so weiterverarbeitet.

B. Herstellung von 4-Mercapto-1-methyl-tetrahydrothiopyraniumtrifluormethansulfonat

Man tropft zu einer gekühlten (5°C) Lösung aus 4-Acetylthio- 1-methyltetrahydrothiopyranium-trifluormethansulfonat (3,35 g; 9,83 mmol) in 32 ml deoxygeniertem Wasser eine Lösung aus 1 M NaOH (10,8 ml; 10,8 mmol). Nach einstündigem Rühren bei 0°C stellt man den pH-Wert mit 1 N HCl auf pH = 7,5 ein. Man lyophilisiert die Lösung, wobei man das erwünschte Thiol und eine Mischung von Salzen erhält. Das Produkt wird so verwendet, ohne weiter gereinigt zu werden.

¹H-NMR (D₂O) [ppm]: 2,0-4,0 (m, 11 H); 2,90 (s, 3H, SCH₃) und 1,9 (s, 3H, CH₃CO^-)

C. Herstellung von (5R, 6S) p-Nitrobenzyl-6-(1¹R-hydroxyethyl)- 4R-methyl-3-(1-methyl-4-thiatetrahydrothiopyranium)- 7-oxo-1-azabicyclo[3.2.0]hept-2-en-2-carboxyl-diphenylphosphat

Zu einer gekühlten (5°C) Lösung von frisch zubereitetem (5R,6S) p-Nitrobenzyl-3-diphenyl-phosphat-4R-methyl-7- oxo-1-azabicyclo[3.2.0]hept-2-en-2-carboxylata (3,27 g; 5,5 mmol) in N,N-Dimethylformamid (20 ml) gibt man unter N₂-Atmosphäre eine Suspension aus 1-Methyl-4-mercaptotetrahydrothiopyranium- trifluormethan-sulfonat (2,7 g; 9,0 mmol) in 10 ml N,N-Dimethylformamid und daraufhin N,N-Diisopropylethylamin (1,57 ml; 9,0 mmol).

Nach einstündigem Rühren bei 5°C verreibt man die Mischung mit einem Ether/Petrolether-Gemisch (1 : 1, 210 ml) und verdünnt die ölige Phase mit einem Wasser-Acetonitril- Gemisch (8 : 1; 210 ml). Man wäscht die Lösung mit (2× 100 ml) Ether und gibt die wässrige Phase auf eine Umkehrphasensäule (mit 200 g µBondapak C18 Silicagel), wobei man zuerst mit 500 ml Wasser eluiert und dann mit einer Mischung von Acetonitril-Wasser (10%, 20%, 30%; je 500 ml). Nach dem Gefriertrocknen erhält man 2,4 g (58,6%) der Titelverbindung.

IR (Nujol) [cm^-1] ν_max: 1765 (CO-Lactam); 1705 (CO-Ester)

¹H-NMR(Aceton-d₆) [ppm] δ: 1,2 (d, 6H, CH ₃CHOH und CH_3-4); 2,12-3,32 (m, 4H); 3,10 (s, 3H, SCH₃); 3,37-4,55 (m, 9H); 5,42 (q, J=14 Hz, CH ₂Ar); 6,89-8,34 (m, ArH).

a Man stellt diese Verbindung in der üblichen Weise her, wobei man von (5R,6S)p-Nitrobenzyl-6-(1¹R-Hydroxyethyl)- 3,7-dioxo-4R-methyl-1-azabicyclo[3.2.0]heptan-2- carboxylat ausgeht, das Enolphosphat wird jedoch durch Einengen der Reaktionsmischung im Vakuum isoliert, wobei man mit einer Ethyl/Acetat-Ether (1 : 1) Mischung verdünnt und mit Wasser wäscht. Nach dem Trocknen über wasserfreiem Magnesiumsulfat, Behandeln mit Kohle und Entfernen des Lösungsmittels im Vakuum erhält man quantitativ die reine Verbindung.

D. Herstellung von (5R,6S)-6(1¹R-Hydroxyethyl)-4R-methyl-3- (1-methyl-4-thiatetrahydrothiopyranium)-7-oxo-1-azabicyclo [3.2.0]hept-2-en-2-carboxylat

Zu einer gekühlten (5°C) Lösung aus (5R,6S)p-Nitrobenzyl-6- (1¹R-hydroxyethyl)-4R-methyl-3-(1-methyl-4-thiatetrahydropyranium)- 7-oxo-1-azabicyclo[3.2.0]hept-2-en-2-carboxyldiphenylphosphat (2,40 g; 3,23 mmol) in 240 ml Tetrahydrofuran und 0,05 m Phosphatpuffer (240 ml; pH=7,0) gibt man 240 ml Ether und 10% Pd/C (2,4 g). Man hydriert die Mischung in einem Paar-Apparat 1 h bei 45 psi H₂ und 15°C. Dann filtriert man die Lösung durch Glasfaserpapier und wäscht den Katalysator mit 25 ml Wasser. Die wässrige Phase des Filtrats wäscht man mit 2× 100 ml Ether und legt ein Vakuum an, um jeglichen Überrest an organischem Lösungsmittel zu entfernen. Man reinigt das Produkt mittels Umkehrphasen-Chromatographie an einem µBondapak C-18 Silicagel (100 g), wobei man als Eluierungsmittel Mischungen von Acetonitril-Wasser verwendet (%CH₃CN-H₂O, Menge in ml: 0%, 500 ml; 2%, 500 ml; 4%, 500 ml; 10%, 250 ml), wobei man 1,08 g unreines Produkt erhält.

Nach der Lyophilisation reinigt man das Produkt und eine 0,020 g Probe aus einem anderen Experiment, (in welchem man von 0,067 mmol des Esters ausgeht), über HPLC (HPLC-Daten: C₁₈-Bondapak-Gel mit 5% CH₃CH-H₂O bei 4 ml/Min.; R.I. Detektor). Man erhält 329 mg.

Das Produkt reinigt man erneut mittels Umkehrphasen-Silicagel- Chromatographie (15 g µBondapak C-18), Eluierungsmittel Wasser und anschließend 2% Acetonitril-Wasser, wobei man 225 mg (19,1%) Titelverbindung in Form eines weißen Feststoffes nach Lyophilisation erhält.

UV (H₂O): λ_max: 298 nm (9581)

IR (Nujol) [cm^-1]: ν_max: 1750 (CO β-Lactam); 1590 (CO Carboxylat)

¹H-NMR(D₂O) [ppm]: δ: 1,21 (d, J=7,25 Hz, 3H, CH₃-3); 1,30 (d, J=6,37 Hz, 3H, CH ₃CHOH); 1,92-2,64 (m, 4H, Thiopyranyl-Protonen); 2,94 (s, 3H, S-CH₃); 3,15-3,78 (m, 7H); 4,19-4,37 (m, 2H);

Die Halbwertzeit in einem biologischen Puffer (pH=7,4) beträgt 30 h.

Beispiel 3

Gemäß dem allgemeinen Verfahren aus Beispiel 1, kann man die folgenden Verbindungen herstellen, indem man geeignete Ausgangsstoffe verwendet.

Beispiel 4

Nach der im Beispiel 2 beschriebenen Arbeitsweise stellt man aus den geeigneten Ausgangsverbindungen die folgenden Verbindungen her:

Claims

1. Verbindungen der allgemeinen Formel worin
R² ein Wasserstoffatom oder eine übliche, leicht entfernbare Carboxylschutzgruppe bedeutet,
B ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe bedeutet,
n für 0, 1, 2 oder 3,
m für 1 oder 2 und
o für 1 oder 2 stehen und
R eine C₁-C₆-Alkyl-, Allyl-, Propargyl-, Carboxymethyl-, Cyanomethyl- oder Aralkylgruppe bedeutet, wobei die Aryleinheit des Aralkylrestes eine Phenyl- oder eine 5-6-gliedrige Heteroarylgruppe und die Alkyleinheit eine C₁-C₆-Alkylgruppe bedeuten,
wobei der die Sulfoniumgruppe enthaltende heterocyclische Ring gewünschtenfalls an einem Ringkohlenstoffatom oder an Ringkohlenstoffatomen durch eine oder zwei C₁-C₆- Alkylgruppen substituiert sein kann,
sowie die pharmazeutisch verträglichen Salze und die physiologisch hydrolysierbaren Ester davon.

2. Verbindungen nach Anspruch 1 der dort wiedergegebenen Formel, worin R eine C₁-C₆-Alkylgruppe bedeutet, sowie die pharmazeutisch verträglichen Salze und physiologisch hydrolysierbaren Ester davon.

3. Verbindungen nach Anspruch 1 oder 2 der dort angegebenen Formel, worin
B eine Wasserstoffatom bedeutet,
sowie die pharmazeutisch verträglichen Salze und physiologisch hydrolysierbaren Ester davon.

4. Verbindungen nach Anspruch 1 oder 2 der dort angegebenen Formel, worin
B eine Methylgruppe bedeutet,
sowie die pharmazeutisch verträglichen Salze und physiologisch hydrolysierbaren Ester davon.

5. Verbindungen der folgenden allgemeinen Formel worin
R² ein Wasserstoffatom oder eine übliche leicht entfernbare Carboxylschutzgruppe bedeutet,
B ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe bedeutet, und
R eine C₁-C₆-Alkyl-, Allyl-, Propargyl-, Carboxymethyl-, Cyanomethyl oder Aralkylgruppe bedeutet, wobei die Aryleinheit der Aralkylgruppe eine Phenylgruppe oder eine 5-6-gliedrige Heteroarylgruppe und die Alkyleinheit eine C₁-C₆-Alkylgruppe bedeuten,
sowie die pharmazeutisch verträglichen Salze und physiologisch hydrolysierbaren Ester davon.

6. Verbindungen nach Anspruch 5 der dort angegebenen Formel, worin
R eine C₁-C₆-Alkylgruppe bedeutet,
sowie die pharmazeutisch verträglichen Salze und physiologisch hydrolysierbaren Ester davon.

7. Verbindungen nach Anspruch 5 oder 6 der dort angegebenen Formel, worin
B ein Wasserstoffatom bedeutet,
sowie die pharmazeutisch verträglichen Salze und physiologisch hydrolysierbaren Ester davon.

8. Verbindungen nach Anspruch 5 oder 6 der dort angegebenen Formel, worin
B eine Methylgruppe bedeutet,
sowie die pharmazeutisch verträglichen Salze und physiologisch hydrolysierbaren Ester davon.

9. Verbindungen der allgemeinen Formel worin R² ein Wasserstoffatom oder eine übliche leicht entfernbare Carboxylschutzgruppe bedeutet, und
B ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe bedeutet,
sowie die pharmazeutisch verträglichen Salze und physiologisch hydrolysierbaren Ester davon.

10. Verbindungen nach Anspruch 9 der dort angegebenen Formel worin
B ein Wasserstoffatom bedeutet,
sowie die pharmazeutisch verträglichen Salze und physiologisch hydrolysierbaren Ester davon.

11. Verbindungen nach Anspruch 9 der dort angegebenen Formel worin
B eine Methylgruppe bedeutet,
sowie die pharmazeutisch verträglichen Salze und physiologisch hydrolysierbaren Ester davon.

12. Verbindungen nach Anspruch 11, wobei
B die β-Methylgruppe bedeutet,
sowie die pharmazeutisch verträglichen Salze und physiologisch hydrolysierbaren Ester davon.

13. Verbindung nach Anspruch 10, nämlich:
(5R,6S)-6-(1R-Hydroxyethyl)-7-oxo-3-(1-methyl-4-thiatetrahydrothiopy-ranium)- 1-aza-bicyclo[3.2.0]-hept-2-en- 2-carboxylat.

14. Verbindung nach Anspruch 10, nämlich:
(5R,6S)-6-(1R-Hydroxyethyl)-4R-methyl-7-oxo-3-(1-methyl- 4-thiatetrahydrothiopyranium)-1-azabicyclo[3.2.0]hept- 2-en-2-carboxylat.

15. Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der allgemeinen Formel (I) worin
R² ein Wasserstoffatom oder eine übliche, leicht entfernbare Carboxylschutzgruppe bedeutet,
B ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe bedeutet,
n für 0, 1, 2 oder 3,
m für 1 oder 2 und
o für 1 oder 2 stehen und
R eine C₁-C₆-Alkyl-, Allyl-, Propargyl-, Carboxymethyl-, Cyanomethyl- oder Aralkylgruppe bedeutet, wobei die Aryleinheit des Aralkylrestes eine Phenyl- oder eine 5-6-gliedrige Heteroarylgruppe und die Alkyleinheit eine C₁-C₆-Alkylgruppe bedeuten,
wobei der die Sulfoniumgruppe enthaltende heterocyclische Ring gewünschtenfalls an einem Ringkohlenstoffatom oder an Ringkohlenstoffatomen durch eine oder zwei C₁-C₆-Alkylgruppen substituiert sein kann, sowie der pharmazeutisch verträglichen Salze und der physiologisch hydrolysierbaren Ester davon, dadurch gekennzeichnet, daß man
a) eine Zwischenverbindung der allgemeinen Formel worin
B die oben angebenen Bedeutungen besitzt und
R²′ eine übliche, leicht entfernbare Carboxylschutzgruppe bedeutet,
in einem inerten organischen Lösungsmittel mit einem Reagens umsetzt, das in der Lage ist, eine übliche Abgangsgruppe L in die 2-Stellung der Zwischenverbindung (III) einzuführen, zu einer Zwischenverbindung der allgemeinen Formel (IV) worin
B und R²′ die oben angegebenen Bedeutungen besitzen und
L eine übliche Abgangsgruppe darstellt,
umsetzt,
b) die Zwischenverbindung der allgemeinen Formel (IV) in einem inerten organischen Lösungsmittel und in Gegenwart einer Base mit einem Thiol der allgemeinen Formel worin
n, m und o die oben angegebenen Bedeutungen besitzen und die ein Schwefelatom enthaltende heterocyclische Gruppe gewünschtenfalls an einem Ringkohlenstoffatom oder an Ringkohlenstoffatomen durch eine oder zwei C₁- C₆-Alkylgruppen substituiert sein kann, zu einer Zwischenverbindung der allgemeinen Formel (II) worin
B, R²′, n, m und o die oben angegebenen Bedeutungen besitzen,
umsetzt,
c) die Zwischenverbindung der allgemeinen Formel (II) in einem inerten organischen Lösungsmittel mit einem Alkylierungsmittel der allgemeinen Formel R-X′worin
R die oben angegebenen Bedeutungen besitzt und
X′ eine übliche Abgangsgruppe darstellt,
zu einer quaternisierten Verbindung der allgemeinen Formel (I′) worin
B, R²′, n, m, o und R die oben angegebenen Bedeutungen besitzen, wobei der die Sulfoniumgruppe enthaltende heterocyclische Ring gewünschtenfalls an einem Ringkohlenstoffatom oder an Ringkohlenstoffatomen durch eine oder zwei C₁-C₆-Alkylgruppe substituiert ist, umsetzt,
und gewünschtenfalls die Carboxylschutzgruppe R^2′ entfernt, wobei man die gewünschte deblockierte Verbindung der allgemeinen Formel (I) oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz oder einen physiologisch hydrolysierbaren Ester davon erhält.

16. Verfahren nach Anspruch 15, dadurch gekennzeichnet, daß man die Quaternisierung nach Entfernen der Carboxylschutzgruppe R^2′ durchführt.

17. Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der allgemeinen Formel (I) worin
R² ein Wasserstoffatom oder eine übliche, leicht entfernbare Carboxylschutzgruppe bedeutet,
B ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe bedeutet,
n für 0, 1, 2 oder 3,
m für 1 oder 2 und
o für 1 oder 2 stehen und
R eine C₁-C₆-Alkyl-, Allyl-, Propargyl-, Carboxymethyl-, Cyanomethyl- oder Aralkylgruppe bedeutet, wobei die Aryleinheit des Aralkylrestes eine Phenyl- oder eine 5-6-gliedrige Heteroarylgruppe und die Alkyleinheit eine C₁-C₆-Alkylgruppe bedeuten,
wobei der die Sulfoniumgruppe enthaltende heterocyclische Ring gewünschtenfalls an einem Ringkohlenstoffatom oder an Ringkohlenstoffatomen durch eine oder zwei C₁-C₆- Alkylgruppen substituiert sein kann, sowie der pharmazeutisch verträglichen Salze und der physiologisch hydrolysierbaren Ester davon, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Zwischenverbindung der allgemeinen Formel (IV) worin
B und L die oben angegebenen Bedeutungen besitzen, und
R^2′ ein übliche, leicht entfernbare Carboxylschutzgruppe bedeutet,
in einem inerten Lösungsmittel und in Gegenwart einer Base mit einem Thiol der allgemeinen Formel worin
n, m, o und R die oben angegebenen Bedeutungen besitzen und der die Sulfoniumgruppe enthaltende heterocyclische Ring gewünschtenfalls an einem Ringkohlenstoffatom oder an Ringkohlenstoffatomen durch eine oder zwei C₁-C₆-Alkylgruppen substituiert ist, zu einer Verbindung der allgemeinen Formel (I′) worin
B, R^2′, n, m, o und R die oben angegebenen Bedeutungen besitzen, wobei der die Sulfoniumgruppe enthaltende heterocyclische Ring gewünschtenfalls an einem Ringkohlenstoffatom oder an Ringkohlenstoffatomen durch eine oder zwei C₁-C₆-Alkylgruppen substituiert ist,
umsetzt und gewünschtenfalls die Carboxylschutzgruppe R^2′ entfernt und die gewünschte deblockierte Verbindung der allgemeinen Formel (I′) oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz oder einen physiologisch hydrolysierbaren Ester davon erhält.

18. Pharmazeutisches Mittel, enthaltend mindestens eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 14 gegebenenfalls zusammen mit einem pharmazeutisch verträglichen Träger und/oder Verdünnungsmittel.