DD236735A5 - Verfahren zur herstellung von cephalosporinverbindungen - Google Patents

Abstract

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von Cephalosporinverbindungen der allgemeinen Formel I, worin R1 und R2 die in der Beschreibung angegebenen Bedeutungen besitzen und NQ eine quaternaere Ammoniogruppe bedeutet, sowie der Salze, Solvate, Hydrate und Ester davon. Dabei setzt man eine in geeigneter Weise substituierte 3-Propenylcephalosporinverbindung mit einem Amin der allgemeinen Formel QN um. Die erfindungsgemaess erhaltenen Verbindungen sind in der Medizin brauchbar und stellen wirksame antibakterielle Mittel dar. Formel I

Description

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Anwendungsgebiet der Erfindung

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von Cephalosporinverbindungen. Diese Verbindungen werden in der Medizin verwendet und dienen zur Behandlung von bakteriellen Infektionen.

Charakteristik der bekannten technischen Lösungen

A) Die US-PS 4390534 beschreibt Cephem- und Cephamverbindungen der allgemeinen Formel

CONH-

R¹ eine Aminogruppe oder geschützte Aminogruppe bedeutet; ~

R² für Wasserstoff, Acyl, gegebenenfalls substituiertes Aryl, substituiertes Alkyl, Alkenyl, Alkinyl, gegebenenfalls substituiertes Cycloalkyl, Cycloalkenyl- oder einen O- oder S-enthaltenden ögliedrigen heterocyclischen Ring, der mit einer oder mehreren

Oxogruppen substituiert ist, steht; R³ ein Wasserstoffatom oder Alkylgruppe bedeutet; R⁴ für Wasserstoff, Acyloxyalkyl, Acylthioalkyl, gegebenenfalls substituiertes Pyridinioalkyl, gegebenenfalls substituiertes

Heterocyclylthioalkyl, Alkyl, Halogen, Hydroxy oder gegebenenfalls substituiertes Thiazolioalkyl steht; und R⁵ eine Carboxygruppe oder eine geschützte Carboxygruppe bedeutet; mit der Maßgabe, daß R⁵ für COO'steht, wenn R⁴ für gegebenenfalls substituiertes Pyridinioalkyl oder gegebenenfalls substituiertes Thiazolioalkyl steht; und die gestrichelte

Linie eine Einfach- oder eine Doppelbindung bedeutet

Die EP-A-13762 ist äquivalent dazu, ihr Offenbarungsgehalt ist ähnlich.

In den US-PS 4381 299,4331 665 und 4332798, die zu Stammanmeldungen der US-PS 4390534 gehören, haben einen ähnlichen Offenbarunginhalt.

B) Die Europäische Patentanmeldung 62321 beschreibt Cephemverbindungen der allgemeinen Formel:

¹CH-,-N ©

R¹ eine Aminogruppe oder eine geschützte Aminogruppe bedeutet;

R² eine gegebenenfalls substituierte, niedrig-aliphatische Kohlenwasserstoffgruppe oder eine Cycloalkenylgruppe bedeutet; und der Rest der Formel:

ein gegebenenfalls substituiertes heterocyclisches Kation bedeutet, das mehr als ein Stickstoffatom enthält; und deren pharmazeutisch verträgliches Salz. Darüber hinaus werden Zwischenprodukte der allgemeinen Formel:

beschrieben, worin R¹ und R² die oben angegebenen Bedeutungen besitzen, R⁴ eine geschützte Carboxylschutzgruppe bedeutet und X" für einen Säurerest steht.

C) Die Europäische Patentanmeldung 74653 betrifft Cephemverbindungen der allgemeinen Formel:

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eine Aminogruppe oder eine geschützte Aminogruppe bedeutet;

für eine gegebenenfalls substituierte, niedrigaliphatische Kohlenwasserstoffgruppe, Cycioniedrigalkyl- oder Cycloniedrigalkenylgruppe steht;

R³ für Niedrigalkylamino-, eine geschützte N-Niedrigalkylamino-, Diniedrigalkylamino-, Sulfoniedrigalkylamino-, Hydroxyniedrigalkylaminogruppe, eine geschützte N-Hydroxyniedrigalkylamino-, Acyloxyniedrigalkyl-, Niedrigalkoxyniedrigalkoxyniedrigalkyl-, Diniedrigalkylaminoniedrigalkyl-, Niedrigalkylthioniedrigalkyl-, Niedrigalkylthio-, Niedrigalkoxy-, Niedrigalkoxyniedrigalkoxy-, Hydroxyniedrigalkoxy-, Acylniedrigalkyl-, Hydroxyniedrigalkylthio-, Diniedrigalkylaminoniedrigalkylthio-, eine N-enthaltende, ungesättigte 5gliedrige heterocyclische Gruppe, N-enthaltendes, ungesättigtes 5gliedriges Heterocyclicthio- oder N-enthaltendes, ungesättigtes 5- oder 6gliedriges heterocyclisches Thioniedrigalkyl, das mit einem oder mehreren geeigneten Substituenten substituiert sein kann, steht; und

R⁴ ein Wasserstoffatom oder eine Niedrigalkylgruppe bedeutet; oder ein Salz davon.

D) Die US-PS 4332800 beschreibt unter anderem Verbindungen der allgemeinen Formel:

—CONH-

R¹ eine Aminogruppe oder eine geschützte Aminogruppe bedeutet;

R² eine Niedrigalkylgruppe und X ein Wasserstoffatom oder eine Carbamoylgruppe bedeuten.

E) Die Europäische Patentanmeldung 47977 betrifft Cephemverbindungen der allgemeinen Formel:

ONH-

COO"

mfürO oder 1 steht;

Am eine gegebenenfalls substituierte Aminogruppe bedeutet;

T eine Thiadiazolyleinheit (die über zwei Kohlenstoff atome an die anderen Gruppen gebunden ist) bedeutet; R² für Wasserstoff, gegebenenfalls substituiertes Alkyl, Cycloalkyl oder gegebenenfalls substituiertes Carbamoyl steht; und R¹ für gegebenenfalls substituiertes Thiazolio, gegebenenfalls substituiertes Pyrazolio, Triniedrigalkylammonio oder Pyridinio der allgemeinen Formel:

steht, worin

R^a für substituiertes Niedrigalkyl (wobei der Substituent Cycloalkyl-, Phenyl-, Hydroxy-, Alkoxy-, Halogen-, Cyano-, Carbamoyl-Carboxyl- oder Sulfo ist), Niedrigalkenyl- oder carboxysubstituiertes Niedrigalkenyl, Niedrigalkylthio oder carboxysubstituiertes Niedrigalkylthio, Amino- oder monosubstituiertes Amino (wobei der Substituent Niedrigalkyl, Niedrigalkanoyl oder Aminobenzensulfonyl ist), Diniedrigalkylamino, substituiertes Carbamoyl (wobei der Substituent

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Niedrigalkyl, Hydroxyniedrigalkyl, Niedrigalkoxy, Hydroxy oder Cyano ist), Diniedrigalkylcarbamoyl, Thiocarbamoyl, Cycloalkyl, Phenyl, Hydroxy, Niedrigalkoxy, Halogen, Niedrigalkoxycarbonyl, Niedrigalkanoyloxy, Niedrigalkanoyl,

Carboxyl, Sulfo, Cyano, Nitro oder Hydroxysulfoniedrigalkyl steht; R^b für Wasserstoff oder Carbamoyl steht oder diegleiche Bedeutung wie R^a besitzt; und R^c für Wasserstoff steht oder die gleichen Bedeutungen wie R^a besitzt;

und deren Salze.

Die Europäische Patentanmeldung 25017 besitzt einen ähnlichen Offenbarungsgehalt, obwohl keine formale Beziehung besteht.

F) Die Europäische Patentanmeldung 30630 beschreibt 3-Vinylcephemverbindungen der allgemeinen Formel:

R — A—CONH

CH=CH.

R¹ eine gegebenenfalls geschützte, amino-substituierte heterocyclische Gruppe, die auch ein Halogenatom aufweisen kann, oder eine Gruppe der Formel:

bedeutet, worin

eine Niedrigalkylgruppe bedeutet;

eine Carboxy- oder geschützte Carboxygruppe bedeutet; und

eine Niedrigalkylengruppe bedeutet, die einen Substituenten aufweisen kann, der ausgewählt ist unter Amino, geschütztem Amino, Hydroxy, Oxo und einer Gruppe der Formel ON OR⁴, in der R⁴ für Wasserstoff, Cycloniedrigalkenyl, Niedrigalkinyl, Niedrigalkenyl (das gegebenenfalls durch eine Carboxy- oder geschützte Carboxygruppe substituiert ist), Niedrigalkyl (das gegebenenfalls durch eine oder mehrere Carboxy-, geschützte Carboxy-, Amino-, geschützte Amino-, Cyano-, Phosphono-, geschützte Phosphono- und eine heterocyclische Gruppe substituiert sein kann, welche ihrerseits wieder substituiert sein kann); und deren Salze

Die erwähnte Anmeldung beschreibt spezifisch die Verbindungen der Formel:

H.

_C0NH

¹H=CH.

COOH

OR⁴ für Methoxy, Carboxymethoxy, tert.-Butoxycarbonylmethoxy oder i-tert.-Butoxycarbonylethoxy steht.

G) Die GB-PS 1 399086 enthält eine allgemeine Offenbarung, die eine große Zahl Cephalosporinverbindungen der Formel:

COOH

umfaßt, worin

R ein Wasserstoffatom oder eine organische Gruppe bedeutet,

R^a eine etherbildende, monovalente organische Gruppe bedeutet, die über ein Kohlenstoffatom an den Sauerstoff gebunden ist,

or

steht und P eine organische Gruppe bedeutet. Gemäß einer Ausführungsform kann P unter anderem eine Vinylgruppe der Formel:

-CH=C

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bedeuten, in der

R³ und R⁴ unabhängig voneinander für ein Wasserstoffatom, eine Nitril- oder Niedrigalkoxycarbonylgruppe oder einen substituierten oder unsubstituierten aliphatischen, cycloaliphatischen, araliphatischen oder aromatischen Rest stehen. Die 5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl-Gruppe ist jedoch nicht als Substituent R genannt. Es wird auch nicht erwähnt, daß P eine quaternäre, ammoniosubstituierte Propenylgruppe sein kann. Die US-PS 3971778 und die dazugehörigen Ausscheidungsanmeldungen 4024133, 4064346, 4033950, 4079178, 4091 209, 4092477 und 4093803 enthalten einen ähnlichen Offenbarungsgehalt.

H) Die Europäische Patentanmeldung 88385 beschreibt Verbindungen der allgemeinen Formel:

:onh

R¹ eine (unsubstituierte) Thiadiazolylgruppe bedeutet; R² für Carboxyniedrigalkyl oder geschütztes Carboxyniedrigalkyl steht; R³ ein Wasserstoffatom, ein Halogenatom oder eine Niedrigalkenylgruppe bedeutet; und

R⁴ eine Carboxy- oder geschützte Carboxygruppe bedeutet. Obwohl der 1 -Propenylrest als Bedeutung für R³ aufgezählt ist, sind nur solche Verbindungen beispielhaft erwähnt, worin R³ für Wasserstoff, Chlor oder Vinyl steht.

I) Die US-PS 4307233 beschreibt unter anderem 3-Vinylcephalosporinderivate der allgemeinen Formel:

H,

N r

JJ

-C-

CONH

OR'

fl

COOH

R⁶ unter anderem für Alkyl, Vinyl, Cyanomethyl oder eine Schutzgruppe, wie 2-Methoxyprop-2-yl steht und R³ und R⁴ Alkylgruppen (die gegebenenfalls durch Hydroxy, Alkoxy, Amino, Alkylamino oder Dialkylamino substituiert sind) oder Phenylgruppen bedeuten, oder zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen gesättigten, 5- oder 6giiedrigen heterocyclischen Ring bilden können, der gegebenenfalls ein weiteres Heteroatom, ausgewählt unter N, O und S enthalten kann und der gegebenenfalls durch eine Alkylgruppe substituiert ist. Diese Verbindungen sind als Zwischenprodukte für die Herstellung von 3-Thiovinylcephalosporinderivaten brauchbar. Es wird nicht beschrieben oder vorgeschlagen, eine 5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl-Einheit anstelle des 2-Aminothiazol-4-yl-Substituenten oder eine durch eine quaternäre Ammoniogruppe substituierte Propenyleinheit als 3-Substituent zu verwenden. Die veröffentlichte britische Patentanmeldung 2051 062 ist als Äquivalent dazu und hat einen ähnlichen Offenbarungsgehalt.

J) Die Europäische Patentanmeldung 53537 beschreibt unter anderem 3-Vinylcephalosporinderivate der allgemeinen Formel:

CONH

'CH=CH-N

COOR-

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Rl und R5, die gleich oder verschieden sind, Wasserstoff oder Alkyl bedeuten oder zusammen eine Alkylengruppe mit 2 oder 3 Kohlenstoffatomen bilden,

Rg eine Säureschutzgruppe bedeutet,

R₂ eine Säureschutzgruppe, beispielsweise einen Ester bedeutet,

R₃ und R₄, die gleich oder verschieden sind, ein Wasserstoffatom, eine Alkylgruppe (gegebenenfalls durch Hydroxy, Alkoxy, Amino, Alkylamino oder Dialkylamino, substituiert ist) oder eine Phenylgruppe bedeuten oder zusammen mit dem Stickstoffatom an das sie gebunden sind, einen gesättigten 5- oder 6gliedrigen heterocyclischen Ring bilden, der gegebenenfalls ein unter N, 0 und S ausgewähltes weiteres Heteroatom aufweisen kann und der gegebenenfalls durch eine Alkylgruppe substituiert ist. Diese Verbindungen sind als Zwischenprodukte für die Herstellung von 3-Thiovinylcephalosporinderivaten brauchbar. Es wird jedoch nicht beschrieben oder vorgeschlagen, eine 5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl-Einheit anstelle des 2-Aminothiazol-4-yl-Substituenten oder eine durch eine quaternäre Ammoniogruppe substituierte Propenylgruppe als 3-Substituenten zu verwenden.

Die US-PS 4423214 ist das Äquivalent hierzu und besitzt einen ähnlichen Offenbarungsgehalt.

K) Die Europäische Patentanmeldung 53074 beschreibt in allgemeiner Form eine große Zahl von 3-Vinylcephalosporinderivaten der allgemeinen Formel:

R»_la-NH

COOR⁰

I

CH=C-R"

2a

Ria (in einer von mehreren Ausführungsformen) für einen Rest der Formel:

C-CO-

steht, in der

R₅ unter anderem für Wasserstoff, Alkyl, Vinyl, Cyanomethyl, eine Oximschutzgruppe, wie Trityl und dergleichen, oder einen Rest der Formel:

-C-COOR

steht, in der

Rl und R^ die gleich oder verschieden sein können, für Wasserstoff, Alkyl oder zusammen für einen Alkylenrest mit 2 bis 3 Kohlenstoffatomen stehen und

R₅ ein Wasserstoffatom oder eine Säureschutzgruppe bedeutet; R_2a ein Wasserstoffatom oder eine Säureschutzgruppe, wie Methoxymethyl bedeutet; R⁰ (eine von mehreren Ausführungsformen) für eine Methylgruppe steht, die durch einen 5- oder 6gliedrigen, aromatischen heterocyclischen Ring substituiert sein kann, der ein einzelnes Heteroatom enthält, wie 2- oder 3-Pyridyl, 2- oder 3-Thienyl

oder2-oder3-Furyl; und R₃ einen Rest der Formel:

R₄SO₂O-

bedeutet, worin

R₄ eine Alkyl-, Trihalomethyl- oder eine gegebenenfalls substituierte Phenylgruppe bedeutet.

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Diese Verbindungen sind Zwischenprodukte für die Herstellung von Verbindungen mit antibakterieller Aktivität, bei denen der 3-Substituent einen Rest der Formel:

-CH=C-SR

bedeutet.

Obwohl gemäß dieser Patentanmeldung R⁰ sowohl bei den Zwischenprodukten als auch bei den Endprodukten ein N-enthaltender, heterocyclischer Ring sein kann (wodurch sich eine heterocyclisch-substituierte Propenylgruppe ergibt), lehrt diese Anmeldung lediglich, daß der heterocyclische Ring über eines seiner Kohlenstoffatome gebunden ist. Somit wird eine durch eine quaternäre Ammoniogruppe substituierte Propenyieinheit nicht umfaßt. In dieser erwähnten Patentanmeldung ist R⁰ sowohl bei den Zwischenprodukten als auch bei den Endprodukten beispielhaft lediglich als Methylgruppe beschrieben. Weiterhin muß sowohl bei den Zwischenprodukten als auch bei den Endprodukten die Propenylgruppe einen zweiten Substituenten aufweisen (-O₃SR⁴ oder-SR). Es wird auch weder offenbart noch vorgeschlagen, eine 5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl-Einheit anstelle des 2-Aminothiazol-4-yl-Substituenten zu verwenden.

L) Die Europäische Patentanmeldung 53538 beschreibt unter anderem 3-Vinylcephalosporin-Zwischenverbindungen der allgemeinen Formel:

CONH

H=CH-R-

COOH

η für 0 oder 1 steht,

R⁵ ein Wasserstoffatom, eine Alkyl-, Vinyl-, Cyanomethyl- oder eine Oximschutzgruppe bedeutet und

R³ ein Halogenatom bedeutet. Es wird nicht offenbart oder vorgeschlagen, eine 5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl-Einheit anstelle des 2-Aminothiazol-4-yl-Subs.tituenten oder einen 3-HaIo-I -propen-1 -yl-Substituenten in 3-Stellung zu verwenden.

Ziel der Erfindung

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, Verfahren zur Herstellung von neuen Cephalosporinderivaten zu schaffen, welche wirksame antibakterielle Mittel darstellen. Diese Verbindungen zeigen eine größere Wirksamkeit als entsprechende bekannte Verbindungen, einschließlich derjenigen, die in den oben erwähnten Patentanmeldungen und Patentschriften beschrieben sind.

Darlegung des Wesens der Erfindung

Die Erfindung befaßt sich mit 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-(substituiertes lminoacetamido]-3-[3-(quatemäre-Ammonio)-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-carboxylaten. Die Aufgabe der Erfindung besteht darin, Verfahren zur Herstellung von solchen Verbindungen aus geeigneten substituierten Vorläufern herzusteilen. Diese Verbindungen kommen als antibakterielle Mittel zur Bekämpfung von Infektionen bei Mensch und Tier zur Anwendung. Die Erfindung befaßt sich mit neuen Cephalosporinderivaten der allgemeinen Formel I

R¹HN'

CONH

OR

CH=CH-CH₂-N^Q

COC

R¹ ein Wasserstoffatom oder eine übliche Aminoschutzgruppe bedeutet,

R² ein Wasserstoffatom, eine geradkettige oder verzweigte Alkylgruppe mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, eine Cycloalkyl- oder Cycloalkenylgruppe mit 3 bis 6 Kohlenstoffatomen,

oder einen Rest der allgemeinen Formeln:

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-C-CH=CH-R"R⁵

R⁴

C-COOH 5

-C-C=C-R³ R⁵

COOH

oder

bedeutet, worin

R³ ein Wasserstoffatom, eine Niedrigalkyl- oder Carboxylgruppe bedeutet, X für ein Halogenatom, eine Hydroxy- oder Niedrigalkoxygruppe steht und

R⁴ und R⁵ jeweils unabhängig voneinander ein Wasserstoffatom, eine Methyl- oder Ethylgruppe bedeutet oder zusammen mit dem Kohlenstoffatom an das sie gebunden sind, einen Cycloalkylidenring mit 3 bis 5 Kohlenstoffatomen bilden, und

θ -N=Q

eine quaternäre Ammoniogruppe bedeutet;

oder deren nicht-toxische, pharmazeutisch verträgliche Salze, Solvate, Hydrate oder physiologisch hydrolysierbare Ester. Die Erfindung umfaßt auch die Solvate (einschließlich der Hydrate) der Verbindungen der allgemeinen Formel I sowie deren tautomere Formen, zum Beispiel die 2-lminothiazolin-4-yl-Form der 2-Aminothiazol-4-yl-Gruppe.

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der allgemeinen Formel I und sie befaßt sich auch mit den Zwischenprodukten für deren Herstellung.

Wie aus der Strukturformel ersichtlich ist, besitzen die Verbindungen der Formel I bezüglich der Alkoxyiminogruppe syn- oder Z-Konfiguration. Da die Verbindungen geometrische Isomere darstellen, können sie auch teilweise als anti-Isomeres vorliegen. Die Erfindung umfaßt Verbindungen der Formel I, welche wenigstens zu 90% aus den syn-lsomeren bestehen. Vorzugsweise sind die Verbindungen der Formel I syn-lsomere, welche im wesentlichen frei von den entsprechenden anti-Isomeren sind. Neben den aufgrund der Alkoxyiminogruppe möglichen geometrischen Isomeren, bilden die Verbindungen der Formel I (und die Zwischenverbindungen der Formeln VIII und IX) auch geometrische Isomere (eis und trans) aufgrund der in der Propenylgruppe vorliegenden Doppelbindung. Die Erfindung umfaßt spezifisch sowohl die eis (Z) als auch die trans (E) Isomeren dieser Verbindungen.

Die nicht-toxischen, pharmazeutisch annehmbaren Salze der Verbindungen der allgemeinen Formel I umfassen Salze mit Mineralsäuren, wie Chlorwasserstoff-, Bromwasserstoff-, Phosphor- und Schwefelsäure, oder mit organischen Carbon- oder Sulfonsäuren, wie Essig-, Trifluoressig-, Citronen-, Ameisen-, Malein-, Oxal-, Bernstein-, Benzoe-, Wein-, Fumar-, Mandel-, Ascorbin-, Äpfel-, Methansulfon-, Benzolsulfon-, p-Toluolsulfonsäure sowie weitere Säuren, die auf dem Penicillin- und Cephalosporingebiet bekanntermaßen zur Anwendung kommen. Die Herstellung dieser Säureadditionssalze erfolgt mitteis üblicher Methoden.

Beispiele physiologisch hydrolysierbarer Ester der Verbindungen der allgemeinen Formel I sind Indanyl-, Phthalidyl-, Methoxymethyl-, Acetoxymethyl-, Pivaloyloxymethyl-, Glycyloxymethyl-, Phenylglycyloxymethyl-, 5-Methyl-2-oxo-1,3-dioxolen-4-ylmethylester sowie weitere physiologisch hydrolysierbare Ester, die auf dem Penicillin- und Cephalosporingebiet bekanntermaßen zur Anwendung kommen. Diese Ester werden mittels üblicher Methoden hergestellt.

Die Verbindungen der Formel I, worin R¹ ein Wasserstoffatom bedeutet, besitzen eine hohe antibakterielle Aktivität gegenüber verschiedenen gram-positiven und gramnegativen Bakterien. Sie sind zur Behandlung von bakteriellen Infektionen bei Mensch und Tier brauchbar. Die erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel I können zur parenteral en Anwendung in üblicherweise unter Verwendung bekannter pharmazeutischer Träger und Exzipientien formuliert werden. Sie können in Einheitsdosisform oder in Mehrfachdosierungsbehältern angeboten werden. Die Mittel können in Form von Lösungen, Suspensionen oder Emulsionen in öligen oder wäßrigen Trägern vorliegen und können übliche Dispersions-, Suspendier-oder Stabilisierungsmittel enthalten. Die Mittel können auch in Form eines Trockenpulvers vorliegen, das bei Gebrauch zum Beispiel mit sterilem, pyrogenfreiem Wasser rekonstituiert wird. Die Verbindungen der Formel I können auch als Suppositorien unter Verwendung üblicher Suppositorienbasen, wie Kakaobutter oder andere Glyceride, formuliert werden. Falls gewünscht, können die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit anderen Antibiotika, wie Penicillinen oder Cephalosporinen, verabreicht werden.

Wenn die Mittel in Einheitsdosisformen dargeboten werden, enthalten sie vorzugsweise ungefähr 50 bis ungefähr 1 500mg Aktivmaterial der Formel I. Die Dosierung der Verbindungen der Formel I hängt von verschiedenen Faktoren wie dem Gewicht und dem Alter des Patienten sowie der Art und der Schwere der Erkrankung ab und bleibt der Beurteilung des Arztes überlassen. Die Dosierung bei Erwachsenen liegt jedoch üblicherweise im Bereich von ungefähr 500 bis ungefähr 5000 mg pro Tag in Abhängigkeit von der Häufigkeit und der Art der Verabreichung. Bei intramuskulärer oder intravenöser Verabreichung an Erwachsene ist eine Gesamtdosis von ungefähr 750 bis ungefähr 3000 mg pro Tag in unterteilten Dosen normalerweise ausreichend. Im Falle von Pseudomonas-Infektionen können jedoch bei einigen der Verbindungen auch höhere Tagesdosen erwünscht sein.

-11- 748 32 Die quaternäre Ammoniogruppe der Formel

Θ -N=Q

kann acyclisch, cyclisch oder eine Kombination aus beidem sein und kann ein oder mehrere weitere Heteroatome enthalten, die ausgewählt sind unter Stickstoff, Schwefel und Sauerstoff.

Ein Beispiel für eine acyclische quaternäre Ammoniogruppe ist der Rest der Formel

R⁶, R⁷ und R⁸, die gleich oder verschieden sein können, beispielsweise für eine Niedrigalkyl- oder eine substituierte Niedrigalkylgruppe, wobei die Substituenten zum Beispiel Halogen, Amino mit der Maßgabe, daß sich die Aminogruppe nicht an einem a-Kohlenstoffatom befindet, Hydroxy mit der Maßgabe, daß sich die Hydroxygruppe nicht an einem a-Kohlenstoffatom befindet, Niedrigalkoxy mit der Maßgabe, daß sich die Alkoxygruppe nicht an einem a-Kohlenstoffatom befindet, Niedrigalkylthio, Niedrigalkylamino, Diniedrigalkylamino, Carbamoyl, Niedrigalkenyl, Phenylniedrigalkyl, Phenyl oder substituiertes Phenyl (wobei die Substituenten beispielsweise Halogen, Hydroxy, Amino, Niedrigalkylamino, Diniedrigalkylamino, Acylamino, Niedrigalkyl, Niedrigalkylthio, Niedrigalkoxy oder dergleichen sein können, stehen.

Beispiele cyclischer quaternärer Ammoniogruppen sind voll ungesättigte, monocyclische heterocyclische Ringsysteme und bicyclische heterocyclische Ringsysteme, in denen wenigstens ein N-enthaltender Ring voll ungesättigt ist. Geeignete cyclische quaternäre Ammonioring-Systeme umfassen beispielsweise diejenigen der Formeln:

ίο '

und dergleichen, wobei R⁹ und R¹⁰, die gleich oder verschieden sein können, beispielsweise für Wasserstoff, Halogen, Amino, Niedrigalkyl, Niedrigalkenyl, Niedrigalkylthio, Carboxy, Hydroxy, Niedrigalkoxy, Niedrigalkoxyniedrigalkyl, Haloniedrigalkyl, Hydroxyniedrigalkyl, Aminoniedrigalkyl, Niedrigalkylaminoniedrigalkyl, Diniedrigalkylaminoniedrigalkyl, Niedrigalkylamino, Diniedrigalkylamino, Carboxyniedrigalkyl, Carboxyniedrigalkylamino, Carboxyniedrigalkylthio, Carbamoyl, N-Niedrigalkylcarbamoyl, Formylamino, Acylamino, Acyloxy, Phenyl, Pyridyl, Amidino, Guanidino und dergleichen, stehen können. Wenn es aufgrund der Struktur des heterocyclischen Rings möglich ist, können R⁹ und R¹⁰ zusammen für eine Älkylengruppe mit 3 bis 5 Kohlenstoffatomen, z. B. eine Propylengruppe, stehen.

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Beispiele kombinierter acyclischer/cyclischer quaternärer Ammoniogruppen sind:

JO-

12

.12

12

N ~ Niedrigalkyl,

und dergleichen, worin

R¹¹ beispielsweise für Niedrigalkyl, Niedrigalkoxyniedrigalkyl, Hydroxyniedrigalkyl mit der Maßgabe, daß sich die Hydroxygruppe nicht an einem α-Kohlenstoffatom befindet, Carboxyniedrigalkyl, Aminoniedrigalkyl mit der Maßgabe, daß sich die Aminogruppe nicht an einem α-Kohlenstoffatom befindet, Niedrigalkenyl, Haloniedrigalkyl, Allyl und dergleichen, stehen kann und

R¹² beispielsweise für Wasserstoff, Hydroxy, Halogen, Niedrigalkyl, Hydroxyniedrigalkyl, Niedrigalkoxyniedrigalkyl, Haloniedrigalkyl, Aminoniedrigalkyl, Niedrigalkoxy, Niedrigalkylthio, Niedrigalkenyl, Amino, Niedrigalkylamino, Diniedrigalkyiamino, Acylamino, Acyloxy, Carbamoyl, Amidinoniedrigalkyl, Phenyl, Pyridyl, Amidino, Guanidino und dergleichen, stehen kann.

Bevorzugte quaternäre Ammoniogruppen sind die Reste der Formeln:

R¹³ U¹⁴

-N

17

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R¹³, R¹⁴ und R¹⁵, die gleich oder verschieden sein können, eine Niedrigalkyl-, Niedrigalkenyl-, Aminoniedrigalkylgruppe mit der Maßgabe, daß die Aminogruppe sich nicht am a-Kohlenstoffatom befindet, oder eine Hydroxyniedrigalkylgruppe mit der Maßgabe, daß sich die Hydroxygruppe nicht am a-Kohlenstoffatom befindet, bedeuten;

R¹⁶ ein Wasserstoffatom, eine Niedrigalkyl-, Niedrigalkoxy-, Niedrigalkylthio-, Amino-, Niedrigalkylamino-, Diniedrigalkylamino-, Formylamino-, Niedrigalkanoylamino-, Carboxy-, Hydroxy-, Carboxyniedrigalkyl-, Carboxyniedrigalkylthio-, Hydroxyniedrigalkyl-, Halogenniedrigalkyl-, Aminoniedrigalkyl-, Niedrigalkoxyniedrigalkyl-, Carbamoyl- oder N-Niedrigalkylcarbamoylgruppe oder eine divalente Alkylgruppe mit 3 bis 5 Kohlenstoffatomen bedeutet.

R¹⁷ für eine Niedrigalkyl-, Niedrigalkoxyniedrigalkyl-, Halogenniedrigalkyl-, Allyl-, Hydroxyniedrigalkylgruppe mit der Maßgabe, daß sich die Hydroxygruppe nicht am a-Kohlenstoffatom befindet, eine Aminoniedrigalkylgruppe mit der Maßgabe, daß sich die Aminogruppe nicht am a-Kohlenstoffatom befindet, oder für eine Phenylniedrigalkylgruppe steht;

R¹⁸ ein Wasserstoffatom, eine Niedrigalkyl-, Niedrigalkoxy-, Niedrigalkoxyniedrigalkyl-, Niedrigalkylthio-, Amino-, Niedrigalkylamino-, Diniedrigalkylamino-, Carboxy-, Hydroxy-, Carboxyniedrigalkyl-, Hydroxyniedrigalkyl-, Aminoniedrigalkyl-, Formylamino-, Niedrigalkanoylamino-, Carbamoyl- oder eine N-Niedrigalkylcarbamoylgruppe bedeutet;

η für eine ganze Zahl von 1 bis 3 einschließlich, steht;

Z für CH₂ oder, wenn η für 2 steht, auch für S, O oder N-R¹⁹ steht, wobei R¹⁹ ein Wasserstoffatom oder eine Niedrigalkylgruppe bedeutet; und

R²⁰ und R²¹, die gleich und verschieden sein können, ein Wasserstoffatom, eine Niedrigalkyl-, Niedrigalkoxy-, Niedrigalkylthio-, Amino-, Niedrigalkylamino-, Diniedrigalkylamino-, Carboxy-, Hydroxy-, Hydroxyniedrigalkyl-, Aminoniedrigalkyl-, Niedrigalkoxyniedrigalkyl-, Carboxyniedrigalkyl-, Carboxyniedrigalkylamino-, Niedrigalkanoylamino-, Carboxyniedrigalkanoylamino-, Carbamoyl- oder eine N-Niedrigalkylcarbamoylgrüppe bedeutet.

Besonders bevorzugte quaternäre Ammoniogruppen sind N-Niedrigalkylpyrrolidinio (insbesondere N-Methylpyrrolidinio), tri-Niedrigalkylammonio (insbesondere Trimethylammonio), Pyridinio, Aminopyridinio, Formylaminopyridinio, Carbamoylpyridinio, Aminoniedrigalkylpyridinio, Carboxypyridinio, Hydroxyniedrigalkylpyridinio, N-Niedrigalkylcarbamoylpyridinio, Niedrigalkylenpyridinio, 2-Methylthiazolio und 2-Amino-5-thiazolo-[4,5-c]pyridinio.

Der Substituent R² in den erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel I steht besonders bevorzugt für Niedrigalkyl (insbesondere Methyl), Cycloalkyl mit 3 bis 5 Kohlenstoffatomen, 1-Carboxycycloalk-i-yl mit 3 bis 5 Kohlenstoffatomen, Allyl, Propargyl und Carboxyniedrigalkyl (insbesondere 2-Carboxyprop-2-yl). Die bevorzugtesten erfindungsgemäßen Verbindungen

a) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(trimethylammonio)-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-carboxylat,

b) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(1 -methylpyrrolidinio)-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-carboxylat,

c) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-pyridinio-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-carboxylat,

d) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(3-aminopyridinio)-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-carboxylat,

e) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(3-formylaminopyridinio)-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-carboxylat,

f) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(3-aminomethylpyridinio)-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-carboxylat,

g) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(3-carbamoylpyridinio)-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-carboxylat,

h) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(4-carbamoylpyridinio)-1-propen-1-yl]-3-

cephem-4-carboxylat, i) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(2-methylthiazolio)-1-propen-1-yl]-3-

cephem-4-carboxylat, j) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(2-amino-5-thiazolo[4,5-c]pyridinio)-1-propen-1-yl]-3-

cephem-4-carboxylat, k) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(4-hydroxymethylpyridinio)-1-propen-1-yl]-3-

cephem-4-carboxylat, I) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(3-hydroxymethylpyridinio)-1-propen-1-yl]-3-

cephem-4-carboxylat, m) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(4-N-methylcarbamo,ipyridinio)-1-propen-1-yl]-3-

cephem-4-carboxylat, n) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(2,3-propylenpyridinio)-1-propen-1-yl]-3-

cephem-4-carboxylat, o) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-ethoxyiminoacetamido]-3-[3-(4-carbamoylpyridinio)-1-propen-1-yl]-3-

cephem-4-carboxylat, p) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-myclopentyloxyimino-acetamido]-3-[3-(4-carbamoylpyridinio)-1-propen-1-yll-3-

cephem-4-carboxylat, q) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-allyloxyiminoacetamido]-3-[3-(4-carbamoylpyridinio)-1-propen-1-yl]-3-

cephem-4-carboxylat, r) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-propargyloxyiminoacetamido]-3-[3-(4-carbamoylpyridinio)-1-propen-1-yl]-3-

cephem-4-carboxylat, s) 7-[2-(5-Amino-l,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(4-carboxypyridinio)-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-carboxylat,

-15- 748·

t) 7-[2-(5-Amino_:1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-ethoxyiminoacetamido]-3-[3-(4-carboxypyridinio)-1-propen-1-yl]-3-

cephem-4-carboxylat, u) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(3-carboxymethylpyridinio)-1-propen-1-yl]-3-

cephem-4-carboxylat, und ν) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(4-carboxymethylthiopyridinio)-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-carboxylat,

Im Rahmen der vorliegenden Erfindung wird folgende Numerierung für die verschiedenen Reaktanten, Zwischenprodukte un Endprodukte verwendet:

[römischeZahl]—["arabische Zahl 1 ["Buchstabe 1

[(fallsangebracht) J [ (falls angebracht)]

Die römische Zahl gibt an, ob es sich bei der Verbindung um ein Endprodukt [I] oder ein Zwischenprodukt oder um weitere Reaktanten [alle anderen römischen Zahlen] handelt. Die arabischen Zahlen und die Buchstaben kommen dann nicht zur Anwendung, wenn die Gesamtklasse (Genus) der Verbindungen gemeint ist.

Die arabische Zahl gibt die entsprechende Bedeutung des Substituenten R² an. Wenn die betreffende R²-Gruppe eine Carboxylgruppe enthält, die durch eine übliche Carboxylschutzgruppe geschützt ist, wird ein Strichindex (') nach der arabischer Zahl verwendet, um diese Tatsache anzuzeigen. Kein Strichindex wird verwendet, wenn die Carboxylgruppe ungeschützt vorliegt. Ein Strichindex wird auch beim Substituenten R² verwendet (d. h. R²'), wenn in allgemeiner Form eine R²-Gruppe, die eine geschützte Carboxylgruppe aufweist, bezeichnet werden soll.

Der Buchstabe am Ende der Bezeichnung der Verbindung bezieht sich auf die entsprechende Bedeutung der quaternären Ammoniogruppe

Θ -N=Q.

Zum besseren Verständnis sind einige der arabischen Zahlen und die Buchstaben, die einigen der bevorzugten R²-Gruppen ur quaternären Ammoniogruppen zugeordnet sind, nachstehend aufgeführt.

Arabische Zahl	= Methyl
1	Ethyl
2	Allyl
3	= Propargyl
4	= Cyclopentyl
5	©
	-N=Q
Buchstabe	1-Methyl pyrrolidino
A	Pyridinio
B	2-Amino-5-thiazolo[4,5-c]pyridinio
C	Trimethylammonio
D	3-Aminopyridinio
E	3-Formylaminopyridinio
F	3-Carbamoyl pyridinio
G	4-Carbamoy I pyridinio
H	3-Aminomethy I pyridinio
1	2-Methylthiazolio
J =	3-Hydroxymethylpyridinio
K	4-Hydroxymethylpyridinio
L	4-(N-Methylcarbamoyl)pyridinio
M	4-Carboxy pyridinio
N =	2,3-Propylenpyridinio
O	3-Carboxymethy I pyridinio
ρ	4-Carboxymethylthiopyridinio
Q

Für die Primärbewertung der erfindungsgemäßen Verbindungen wurden die minimalen Hemmkonzentrationen (MHK) mittels der zweifach Reihen-Agarverdünnungsmethode in Mueller-Hinton Agar gegenüber 32 Testorganismusstämmen in sechs Gruppen bestimmt. Die geometrischen Mittelwerte der in diesen Versuchen bestimmten MHK-Werte sind in Tabelle 1 zusammengestellt.

	Konfigura	Geometrisches Mittel der MHK-Werte	(G-H)-Ib	(G-Ha	(G-)-lb	-16-	(G-Hl	748 32
Tabelle 1	tion an der	(mcg/l)	(5)	(5)	(5)		(5)
Verbin	Doppelbin	(G + )-la	0,70	0,05	0,15		0,23
dung	dung	(5)	0,35	0,029	0,05		0,17
Nr.	E/Z= 1/1	0,26	0,40	0,016	0,044	0,11	(G-HIl
	E/Z=7/1	0,13	0,80	0,05	0,11	0,35	(7)
I-1A	E	0,20	0,20	0,0071	0,033	0,087	2,4
1-1A	E/Z= 1/4	0,35	1,4	0,10	0,26	0,46	1,4
1-1B	E	0,10	0,53	0,05	0,076	0,26	1,6
I-IB	E/Z=1/1	0,61	0,40	0,0094	0,029	0,10	3,5
I-1C	E/Z= 10/1	0,30	0,40	0,0094	0,033	0,099	3,8
1-1D	E	0,20	0,35 '	0,0094	0,033	0,10	2,4
1-1D	E	0,15	0,40	0,013	0,043	0,10	1,3
1-1E	E	0,20	1,6	0,10	0,20	0,69	1,4
1-1F	E	0,20	0,35	0,025	0,076	0,15	1,2
1-1G	E	0,80	0,80	0,029	0,044	0,20	1,4
1-1H	E	0,17	0,61	0,029	0,088	0,15	0,97
1-11	E	0,35	0,70	0,029	0,10	0,17	3,1
1-1J	E	0,26	1,6	0,013	0,066	0,30	1,6
1-1K	E	0,35	0,35	0,029	0,033	0,11	3,5
I-1L	E/Z=7/1	1,2	0,40	0,014	0,057	0,15	2,6
1-1M	E	0,17	2,1	0,016	0,11	0,35	2,3
1-1N	E	0,20	3,1	0,044	0,15	0,69	5,7
1-10	E	1,2	0,40	0,057	0,10	0,52	14
I-2H	Z	1,4	0,46	0,066	0,11	0,60	1,4
I-2N	E	0,23	0,40	0,20	0,46	2,1	4,7
I-2N	E	0,26	1,6	0,013	0,087	0,34	10
I-3H	E	0,13	0,92	0,0095	0,044	0,23	1,9
I-4H	E	0,8			2,6
I-5H	E	0,7		4,2
1-1P				14
1-1Q			14

(G+ )-la: Penicillin-sensitiver S. aureus (5 Stämme)

(G+)-lb: Penicillin-resistenterS.aureus(5Stämme)

(G-)-la: Cephalothin-sensitiverE.coli (2 Stämme), Kl. pneumoniaeO Stamm) und Pr. mirabilis (2 Stämme) (G-)-lb: Cephalothin-resistenteE. coli (3 Stämme) und Kl. pneumoniae (2 Stämme) (G-)-ll: M. morganii (1 Stamm), Ent. cloacae (2 Stämme) und Ser. marcescens (2 Stämme) (G-)-lll: Ps. aeruginosa (7 Stämme)

Die nachfolgende Tabelle 2 zeigt die Schutzdosis₅₀ (PD₅₀) bei Mäusen für mehrere Verbindungen der Formel I gegenüber ausgewählten Mikroorganismen. In Tabelle 3 sind Blutspiegelwerte verschiedener Verbindungen der Formel I bei intramuskulärer Verabreichung der Testverbindungen an Mäuse in einer Dosierung von 20 mg/kg zusammengestellt.

Tabelle 2	Verbindung	PD50 (mg/kg)	E. coli	P. aeruginosa
	Nr.	S. aureus	Juhl	A9843A
		Smith	0,028	7,7
	0,44	0,072	NT
	0,65	0,013	NT
	0,22	0,021	5,92
	0,96	0,015	3,9
	0,39	0,029	NT
	0,35	NT	NT
	0,53	NT	NT
	0,96	NT	NT
	2,0	0,17	NT
	0,26	NT	NT
-1B	5,0
-1B
-1C
-1G
-1H
-U
-1K
-1M
-1N
-10
-2N

-π- 74832

Tabelle 3	Verbindung	r ^max
	Nr.	(mcg/mli
	17
	21
	20
	23
	19
	24
	20
	24
	28
	22
	19
	27
	22
-1B
-1C
-1D
-1H
-U
-1K
-IM
-1N
-10
-2N
-3H
-4H
-5H

Ti« (Min)

AUC (meg h/ml)

21 32 19 16 16 14 23 19 32 20 47 22 32

11 18 11 14 9,7 14 14 18 17 12 25 16 18

Die Erfindung betrifft Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der Formel I. Die bevorzugten Verfahren sind nachfolgend in den Reaktionsschemata 1 a, 1 b und 1 c gezeigt, während ein alternatives Verfahren im Reaktionsschema 2 dargestellt ist. Die Abkürzung „Ph" bedeutet eine Phenylgruppe. Der-CH(Ph)₂-ReSt ist demnach die Benzhydrylgruppe, welche eine bevorzugte Carboxyl-Schutzgruppe ist. Wenn R² eine Carboxylgruppe aufweist, ist es wünschenswert, die Carboxylgruppe mit einer üblichen Carboxyschutzgruppe, wie dert-Butylgruppezu schützen. Y bedeutet ein Chlor-, Brom- oder Jodatom.

-18- 748 32

Reaktionsschema la

II

COOCH(Ph).

-C-COOH

N»?

III

Il

N N

CONH

COOCH(Ph)

NaI oder KI

C CONH

OR

2

COOCH(Ph)₂

-19- 748 32

^H2^N' S

JJ

CONH

OR'

COOCHI

Base

CONH

CH=P(Ph]

COOCH(Ph)

ClCH₂CHO

C N

CONH-

oir

VIII

CH=CHCH₂Cl

COOCH(Ph]

NaI oder KI

-20- 748 32

IX

H₂N S

XII

conh

oir ¹V

Il

N N

CH=CHCH₂I

COOCH(Ph)

HN 'R'

(sekundäres Amin)

CONH-

tertiäres Amin)

"CH=CHCH--

COOCH(Ph)

R- Ϊ

CONH

CH=CHCH₂-N=Q COOCH(Ph).

37 Deblockierung

CONH

COO

-21- 748 32

Das Reaktionsschema 1 a zeigt zwei alternative Möglichkeiten um von der Verbindung IX zur Verbindung XlI zu gelangen. Der direkte Weg unter Verwendung einestertiären Amins (Xl) ist bei der Herstellung a Her Verbindungen der Formel I anwendbar. Der indirekte Weg über die Verbindung X verläuft unter Verwendung eines sekundären Amins, wobei die Quaternisierung in der anschließenden Stufe erfolgt. Das sekundäre Am in RR'N H kann acyclisch (z.B. Dimethylamin) oder cyclisch (z.B. Pyrrolidin) sein. Der indirekte Weg ist für die Herstellung derjenigen Verbindungen der Formel I geeignet, in der die quaternä re Am moniogruppe acyclisch oder „gemischt" acyclisch/cyclisch ist. Der indirekte Weg ist nicht geeignet zur Herstellung der Verbindungen der Formel I, in der das quaternäre Stickstoffatom sich in einem voll ungesättigten heterocyclischen Ring (z. B. Pyridinio, Thiazolio, 2-Amino-5-thiazolo[4,5-c]pyridinio und dergleichen befindet.

Reaktionsschema Ib II

CH-N

XIII

0OCH(Ph)₂

NaI oder KI

CH=N

XIV

CCOCH(Ph)₂

P(Ph)

P(Ph)₃

CH=N·

,Θ

XV

H₂P(Ph)₃ COOCH(Ph)-

Base

^N>^CH=

P(Ph),

COOCH(Ph).

-22- 748 32

XVI

ClCH₂CHO

CHCH₂Cl

Girard Reagens T oder HCl

COOCH(Ph)

XVIII

AJi

-COOH 2

III

VIII

wie in Schema la

Das Reaktionsschema 1 b ist eine Variation der im Schema 1 a gezeigten Reaktion insofern, als die 7-Aminogruppe des Ausgangsmaterials (II) über die meisten Reaktionsstufen hinv/eg als Schiffsche Rase geschützt ist und die gewünschte 7-Seitenkettensäure später angefügt wird. Im übrigen ist das allgemeine Verfahren ähnlich.

Reaktionsschema Ic

C Η« Ν

CH=CH-CH₂Cl

COOCH(Ph)

NaI oder KI

CH=N

CH=CH-CH₂I

COOCH(Ph)

-23- 748 32

XVII

XIX

HN'

V (sekundäres Amin)

CH=N 1 r^

XX

J=CHCH₂-N

COOCH(Ph)R¹

R" Y Q=N

XI

(tertiäres Amin

:H=N-

XXI

/Γ

• Ν

H=CHCH

COOCH(Ph)

-24- 748 32

XXII

COO

N-Acylierung mit III

\ 2

OR

'CONH

CH=CHCH₂-N^Q

COO

Das Reaktionsschema 1 c ist eine weitere Variation des im Schema 1 b beschriebenen Reaktionsverlaufs. In den Reaktionsschemata 1 a und 1 b erfolgt die Quaternisierung der 3-Seitenkette in der letzten Stufe, während im Reaktionsschema 1 c die letzte Stufe die Acylierung der 7-Aminogruppe ist. Das Verhältnis der Reaktionsschemata 1 a, 1 b und 1 c zueinander ist in der nachfolgenden Übersicht gezeigt.

la \/

Cl COOCH(Ph).

Ib Ic

VIII

7-N-Acylierung

=CHCH₂CX COOCH(Ph)-

Ib

XVIII

Γ^Κ^

CHCH₂C1

COOCH(Ph).

-25- 278 32

la Ib ,

Quaternis ierung Deblockierung

lc

Verbindung I

7- N-Acylierung lc

Quaternisierung Deblockierung

COO

XXII

In den Reaktionsschemata 1 a, 1 b und 1 c ist die Benzhydrylgruppe als bevorzugte Carboxylschutzgruppe gezeigt. Es ist für den Fachmann jedoch offensichtlich, daß auch andere bekannte Carboxylschutzgruppen verwendet werden können. Die acylierende Säure III kann in Form eines Derivats eingesetzt werden, wie beispielsweise als Säurehalogenid, aktivierter Ester, gemischtes Säureanhydrid und dergleichen. Diese Formen sind alle bekannt. Vorzugsweise verwendet man ein Säurechlorid. Die Aminogruppe der acylierenden Säure III kann auch mit einer der üblichen Aminoschutzgruppen, z. B. N-Trityl, N-Formyl oder dergleichen, geschützt sein. Die Base zur Umwandlung des Phosphoniumjodids (Vl oder XV) in das Phosphorylid (VII oder XVI) kann NaOH, Na₂COa, IRA-410(OH~)-Harz, IRA(CO₃ ⁼)-Harz oder dergleichen oder eine Mischung davon sein. Der zur Umwandlung des Phosphorylids VII in die S-Chlorpropenyl-S-cephem-Verbindung VIII (oder der Verbindung XVI in die Verbindung XVII) verwendete Chloracetaldehyd kann die im Handel erhältliche 40 bis 50%ige wäßrige Lösung, eine destillierte Lösung (z.B. 70%) oder der wasserfreie Aldehyd sein.

Es wurde gefunden, daß die aus der Verbindung VII hergestellte Verbindung VIII (Schema 1 a) an der Propenyldoppelbindung typischerweise ein Z:E-Verhältnis von ungefähr 2:1 besitzt. Dagegen besteht die aus der Verbindung XVIII hergestellte Verbindung VIII (Schema 1 b) typischerweise nahezu ausschließlich aus den Z-Isomeren. Der Unterschied ist nicht unbedingt auf den Herstellungsweg zurückzuführen, sondern kann auf den in der Wittig-Reaktion (VII to VIII oder XVI zu XVII) angewandten Bedingungen beruhen. Es wurde außerdem gefunden, daß die Verwendung eines geeigneten Silylreagens, wie N,0-bis(Trimethylsilyl)acetamid, bei der Wittigreaktion (VII to VIII in Schema 1 a und XVI zu XVII im Schema 1 b) zu einer Verbesserung der Ausbeute und der Reinheit von VIII und XVII führt. Die Reaktion wird vorzugsweise mit 2 bis 5 Äquivalenten des Silylreagens durchgeführt. Wenn Chlorpropenylcephem (VIII) mit Natriumiodid in Aceton zu Jodpropenylcephem (IX) umgesetzt wird, wird während der Jodierung die Doppelbindung der Propenylgruppe von Z zu E isomerisiert. Bei einer kurzen Reaktionszeit wird die Konfiguration der Ausgangsverbindung VIII weitgehend erhalten, während eine lange Reaktionszeit hauptsächlich zum E-Isomeren der Verbindung IX führt. Eine zu lange Reaktionszeit bei hoher Temperatur liefert jedoch die Verbindung IX in geringerer Reinheit. Bei einer Reaktionszeit von 10 Minuten bei 25⁰C und 2 Stunden bei 5⁰C erhält man reines IX in guter Ausbeute. Wenn man dem Reaktionsschema Ic folgt, wurde gefunden, daß man bei der Jodierung der Verbindung XIV mit NaJ eine reinere Verbindung erhält, wenn man die Acetoniösung mit CCI₄ verdünnt, sobald die Jodierung im wesentlichen beendet ist und wenn der zur Isomerisierung führende Teil der Reaktion in der Aceton-CCI₄-Mischung durchgeführt wird. Wenn man die Jodierung des Chlorpropenylcephems (XVII) zum Jodpropenylcephem (XIX) mit Kaliumiodid in DMF durchführt, erfolgt die Isomerisierung der Doppelbindung von Z nach E so schnell wie die Jodierung. Die gesamte Reaktion ist innerhalb von 45 Minuten bei Raumtemperatur beendet, wobei man reines XIX ohne Verdünnung mit CCI₄ während der Reaktion erhält

Die Verbindung XII wird normalerweise ohne Reinigung deblockiert. Das Endprodukt (I) wird durch

Umkehrphasensäulenchromatographie unter Verwendung einer Glassäule, die mit einer Waters' Associates PrepPAK-500/Cis-Packung (cartridge) gefüllt ist, gereinigt.

Reaktionsschema 2

CONH

CH=CH-CH₂I

XXIII

COOCH(Ph)

R¹-

-26- 748 32

N.

Il

CONK

-N

^OR²

CH=CH-CH₂I

COOCH(Ph)

XXIV

CONH-

R^HN^S^" ^N~-²

H=CH-CH₂N=Q

XXV

COOCH(Ph)

Reduktion

-CONH-

CH=CH-CH₂N=Q

XXVI

COOCH(Ph),

Deblockierung

¹J

C· Il

CONH

'CH=CH₂N=Q

COC

-27- 748 32

Das oben in Kurzform dargestellte Reaktionsschema 2 ist dem Reaktionsschema 1 a ähnlich, wobei man jedoch die Verbindung XXIII (entsprechend der Verbindung IX, Reaktionsschema 1 a) vor der Quaternisierung in das S-Oxid überführt. Die Verbindung XXV wird anschließend reduziert und der verbleibende Teil des Reaktionsschemas 2 entspricht dem Reaktionsschema 1 a.

Gemäß dem Reaktionsschema 2 ist es bevorzugt, die Aminogruppe der 7-Seitenkette mit einer bekannten Aminoschutzgruppe, wie derTritylgruppe, zu schützen.

Die acylierenden Säuren der Formel III sind entweder bekannt, oder können leicht gemäß publizierten Verfahren hergestellt

werden. Das Europäische Patent 7470 (die Anmeldung wurde am 6. Februar 1980 veröffentlicht), erläutert beispielhaft die

Herstellung der Verbindungen der Formel III, worin R² für Methyl, Ethyl, Propyl und Isopropyl steht, Die bei der obigen Diskussion des Standes der Technik bereits erwähnte US-PS 4390534 veranschaulicht die Herstellung einer Vielzahl von Verbindungen der Formel III, worin R² beispielsweisefür Cyclopentyl^-Cyclopenten-i-yl, Allyl, 2-Propinyl, i-tert.-Butyloxycarbonyl-1-methylethyl, i-tert.-Butyloxycarbonyl-i-cyclopentyl, i-Ethoxycarbonyl-i-methylethyl^ert.-Butyloxycarbonylmethyl, 1-tert-

Butyloxycarbonyl-2-methylpropyl, Trityl und dergleichen, steht.

Die Verbindung Il (T-Amino-S-chlormethyl-S-cephem^-carboxylat), die in den Reaktionsschemata 1 a, 1 b und 1 c als

Ausgangsmaterial verwendet wird, ist eine bekannte Verbindung.

Die tertiären Amine der Formel Xl (und die sekundären Amine RR'NH), die für die Herstellung der erfindungsgemäßen

quaternären Ammonioverbindungen verwendet werden, sind entweder bekannte Verbindungen oder können leicht hergestellt werden. Viele dieser Amine sind im Handel erhältlich.

Die Erfindung betrifftauch ein Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der allgemeinen Formel I:'

N r-C

,JUV.

CONH

CE=CH-CH₂-N=Q

COC

R¹ ein Wasserstoffatom oder eine übliche Aminoschutzgruppe bedeutet,

R² ein Wasserstoffatom, eine geradkettige oder verzweigte Alkylgruppe mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, eine Cycloalkyl- oder

Cycloalkenylgruppe mit 3 bis 6 Kohlenstoffatomen,

oder einen Rest der allgemeinen Formeln:

-C-CH-CH-R"

COOH

-C-C=C-R* 15

oder

C-COOH 5

bedeutet, worin

R³ ein Wasserstoffatom, eine Niedrigalkyl- oder Carboxylgruppe bedeutet, X für ein Halogenatom, eine Hydroxy- oder Niedrigalkoxygruppe steht und

R⁴ und R⁶ jeweils unabhängig voneinander ein Wasserstoffatom, eine Methyl- oder Ethylgruppe bedeutet oder zusammen mit dem Kohlenstoffatom an das sie gebunden sind, einen Cycloalkylidenring mit 3 bis 5 Kohlenstoffatomen bilden, und

θ -N=Q.

eine quaternäre Ammoniogruppe bedeutet;

und der nicht-toxischen, pharmazeutisch verträglichen Salze und physiologisch hydrolysierbaren Ester davon, das dadurch

gekennzeichnet ist, daß man eine Verbindung der allgemeinen Formel:

'„ N.

CONH

S ^ ^N0R²'

CH=CH-CH₂?

COOB"

-28- 748

R²' die gleichen Bedeutungen besitzt wie R² oder für einen Rest der Formeln:

,1 JU

COOB'

oder

COOB"

steht, worin X, R⁴ und R⁵ die oben angegebenen Bedeutungen besitzen, B¹ eine übliche Carboxyl-Schutzgruppe bedeutet, B² ein Wasserstoffatom oder eine übliche Aminoschutzgruppe bedeutet, Z für ein Chlor-, Brom- oder Jodatom steht und m für Null oder 1 steht, mit einem tertiären Amin der Formel Q=N (oder nacheinander mit einem sekundären Amin der Formel RR'NH und einer Verbindung der Formel R"Z) umsetzt und, falls m für 1 steht, das Sulfoxid in üblicherweise reduziert und anschließend alle Schutzgruppen in üblicherweise entfernt.

Die Erfindung betrifft auch ein Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der Formel I:

R¹HN

Λ ß

CONK

Ν*²

CH=CHCH₂-N=Q

COO*

R¹ ein Wasserstoffatom oder eine übliche Aminoschutzgruppe bedeutet, R² ein Wasserstoffatom, eine geradkettige oder verzweigte Alkylgruppe mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, eine Cycloalkyl- oder Cycloalkenylgruppe mit 3 bis 6 Kohlenstoffatomen, oder einen Rest der allgemeinen Formeln:

COOH

-C-C=

-R"

oder

bedeutet, worin R³ ein Wasserstoffatom, eine Niedrigalkyl- oder Carboxylgruppe bedeutet, X für ein Halogenatom, eine Hydroxy- oder Niedrigalkoxygruppe steht und

R⁴ und R⁵ jeweils unabhängig voneinander ein Wasserstoffatom, eine Methyl- oder Ethylgruppe bedeutet oder zusammen mit dem Kohlenstoffatom an das sie gebunden sind, einen Cycloalkylideniing mit 3 bis 5 Kohlenstoffatomen bilden, und

Θ -N=Q.

-29- 748 32

eine quaternäre Ammoniogruppe bedeutet;

und der nicht-toxischen, pharmazeutisch verträglichen Salze und physiologisch hydrolysierbaren Ester davon, daß dadurch gekennzeichnet ist, daß man eine Verbindung der allgemeinen Formel:

COO

mit einer Säure der allgemeinen Formel:

CH-CHCH₂-N= Q

COOH

oder einem acylierenden Derivat davon, worin R²'die gleichen Bedeutungen besitzt wie R² oder für einen Rest der Formeln:

COOB^-

oder

-C-COOB¹

steht, worin X, R⁴ und R⁵ die oben angegebenen Bedeutungen besitzen, B¹ eine übliche Carboxylschutzgruppe bedeutet und B² ein Wasserstoffatom oder eine übliche Amino-Schutzgruppe bedeutet, acyliert.

Die Reaktionen werden in einem nicht-Wäßrigen, organischen Lösungsmittel, wie Dimethylsulfoxid, Hexamethylphosphoramid, Methylenchlorid, Chloroform, Ethylether, Hexan, Ethylacetat, Tetrahydrofuran, Acetonitril und dergleichen oder Mischungen derartiger Lösungsmittel, durchgeführt. Zweckmäßigerweise führt man die Reaktionen bei einer Temperatur von ungefähr -10⁰C bis ungefähr +50⁰C durch; normalerweise ist Raumtemperatur bevorzugt. Für die Quaternisierung verwendet man wenigstens ein Mol tertiäres Amin pro Mol der Verbindungen IX, XIX, XXIII oder XXIV. Vorzugsweise verwendet man einen ungefähr 25 bis 100%igen Überschuß an tertiärem Amin.

Die Carboxyl-Schutzgruppen, die zur Verwendung als B¹ in obigen Reaktionen geeignet sind, sind dem Fachmann bekannt und umfassen Aralkylgruppen, wie Benzyl, p-Methoxybenzyl- p-Nitrobenzyl und Diphenylmethyl(benzhydryl); Alkylgruppen, wie t-Butyl; Haloalkylgruppen, wie 2,2,2-Trichlorethyl und weitere, in der Literatur beschriebene (z.B. in der GB-PS 1 399086) Carboxylschutzgruppen. Vorzugsweise verwendet man Carboxyl-Schutzgruppen, die sich durch Behandlung mit einer Säure leicht entfernen lassen. Besonders bevorzugte Carboxyl-Schutzgruppen sind die Benzhydryl- und t-Butylgruppe.

Die Amino-Schutzgruppen, die zur Verwendung als B² geeignet sind, sind ebenfalls bekannt und umfassen die Tritylgruppe und Acylgruppen, wie Chloracetyl, Formyl und Trichlorethoxycarbonyl. Vorzugsweise verwendet man Aminoschutzgruppen, die sich leicht durch Behandlung mit einer Säure entfernen lassen, z. B. die Tritylgruppe.

Wenn man dasCephalosporingerüst in Form des 1-Oxids (m = 1) einsetzt, wird das 1-Oxid anhand bekannter Verfahren, wie Oxidation mit m-Chlorperbenzoesäure, Peressigsäure, Natriumwolframat und dergleichen, hergestellt. Das 1-Oxid kann anschließend mittels bekannter Verfahren, z.B. Reduktion des entsprechenden Alkoxysulfoniumsalzes mit Jodidionen in wäßrigem Medium, reduziert werden. Das Alkoxysulfoniumsalz selbst ist leicht durch Behandlung des 1-Oxids, mit beispielsweise Acetylchlorid, herzustellen.

Gegenstpnd der Erfindung sind auch neue Zwischenverbindungen der allgemeinen Formel XXVIII:

H-N

CH=CHCH₂Z

COOH

XXVIII

-30- 748 32

worin Z ein Chlor-, Brom- oder Jodatom bedeutet, R² ein Wasserstoffatom, eine geradkettige oder verzweigte Alkylgruppe mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, einen Cycloalkyl-oder Cycloalkenylring mit 3 bis 6 Kohlenstoffatomen oder einen Rest der Formel:

I ·, f COOH

-C-CH=CH-R-³ , -C-C=C-R³ ,

oder

R⁴ '

-C-COOH ,

bedeutet, in denen

R³ ein Wasserstoffatom, eine Niedrigalkyl- oder Carboxylgruppe bedeutet,

X für ein Halogenatom, eine Hydroxy- oder Niedrigalkoxygruppe steht und

R⁴ und R⁵ jeweils unabhängig voneinander ein Wasserstoffatom, eine Methyl-oder Ethylgruppe bedeutet oder zusammen mit dem Kohlenstoffatom an das sie gebunden sind, einen Cycloalkylidenring mit 3 bis 5 Kohlenstoffatomen bilden, und deren Salze und Ester.

Umfaßt werden auch Verbindungen der Formel XXVIII, in der die Amino- und/oder Carboxylgruppen durch übliche Amino-, oder Carboxylschutzgruppen geschützt sind

Weiter betrifft die Erfindung neue Zwischenprodukte der allgemeinen Formel XXlX:

XXIX E=CHCH₂Z COOR²²

R²² -ein Wasserstoffatom oder eine übliche Carboxyl-Schutzgruppe bedeutet und R²³, R²⁴ und R²⁵, die gleich oder verschieden sein können, ein Wasserstoffatom, eine Hydroxy-, Niedrigalkyl- oder

Niedrigalkoxygruppe bedeuten und

Z für ein Chlor-, Brom-oder Jodatom steht; oder deren Salze, Solvate, Hydrate oder Ester. Weiter betrifft die Erfindung neue Zwischenverbindungen der allgemeinen Formel XXII:

XXII CH-CH-CH₂-N=O

eine quaternäre Ammoniogruppe bedeutet, oder deren Salze, Ester, Solvate oder Hydrate.

Im Rahmen der vorliegenden Erfindung bedeuten die Ausdrücke Acylamino und Acyloxy eine acylierte Amino- oder acylierte Hydroxygruppe, wobei die Acyleinheit für Niedrigalkanoyl, (z. B. Formyl, Acetyl, Propionyl, Butyryl, Isobutyryl, Isovaleryl, usw.), Aroyl (z. B. Benzoyl, usw.) Niedrigalkansulfonyl, (z. B. Mesyl, Ethansulfonyl, usw.) oder Arylsulfonyl (z. B. Benzensulfonyl, Tosyl,

usw.) steht.

Die Ausdrücke „Niedrigalkyl", „Niedrigalkoxy", „Niedrigalkylthio" (oder dergleichen) bedeuten geradkettige oder verzweigte Alkyl-, Alkoxy-, Alkylthio- (oderdergleichen)-Gruppen mit1 bis 6 Kohlenstoffatomen, einschließlich. In gleicherweise bedeuten die Ausdrücke Niedrigalkenyl und Niedrigalkinyl Alkenyl- oder Alkinylgruppen mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen.

-31- 748 32

Beispiel 1

ΓΤΪ

CONH

OCH.

I-1A

*Z/E=1/1

7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(1-methylpyrrolidinio)-1-propen-1-yl]-3-cephem-4- . carboxylat (I-1A)

Zu einer Lösung von Diphenylmethyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-(3-iodo-1-propen-1-yl)-3-cephem-4-carboxylat(IX-1)(Z/E = 2/1,150 mg, 0,21 mMol) in Ethylacetat (2 ml) gibt man unter Rühren auf einmal eine Lösung von 1 Methylpyrrolidin (36mg, 0,42mMoi) in Ethylacetat (1 ml). Die Mischung wird 15 Minuten gerührt und anschließend mit Isopropylether (10ml) verdünnt, wobei sich ein Niederschlag bildet, der abfiltriert wird. Eine Mischung aus dem Feststoff (130mg), Ameisensäure (1 ml) und konzentrierter HCI (0,1 ml) rührt man bei Raumtemperatur. Nach einer Stunde wird die Reaktionsmischung unter vermindertem Druck eingeengt, mit Wasser (20 ml) verdünnt und filtriert. Die wäßrige Lösung wird über eine Umkehrphasensäule gegeben (mit PrepPAK-öOO/Cis-cartridge, 100 ml gefüllt) und mit Wasser und 10% CH₃OH eluiert. Die gewünschten Fraktionen werden gesammelt, im Vakuum auf ein geringes Volumen eingeengt und gefriergetrocknet, wobei man 13mg (12%) der Titelverbindung (MA) (Z/E = 1/1) erhält (Schmelzpunkt > 28O⁰C (Zersetzung).

KBr

cm

-1

3400, 1760, 1660, 1610.

max

Phosphatpuffer (pH 7) ..

λ nm ν

max

.D-O 2,31 (4H, m,

0 Δ

ppm

m, 2-H & N

1 cm

236 (372), 288

322) .

, 3,12 (3Η, s, N-CH₃), 3,6 (5Η,

)_f 3,79 (IH, s, 2-H), ' 4,1 (2H, d,

Beispiel 2

J=8,. CH₂N), 4,2 (3H, s, OCH₃), 5,36 (IH, d, J=4,5, 6-H), 5,95 (3H, m, 7-H & 3-CH=CH), 6,66 (1/2H,'d, J=IO, 3-CHcis), 7,0 (1/2H, d, J=16, 3-CH trans).

CONH

I-1B

742-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-pyridinio-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-carboxylat(l-1B) Eine Mischung von Diphenylmethyl^-^-fS-amino-i^^-thiadiazol-S-yD^-methoxyiminoacetamidoJ-S-O-iodo-i-propen-i-yD-S-cephem-4-carboxylat(IX-1)(E,716mg,1 mMol), Pyridin (158 mg, 2 mMol) in Dimethylsulfoxid (DMSO)(I ml) wird eine Stunde bei

-32- 748 32

Raumtemperatur gemischt. Zu der Mischung gibt man Ethylacetat (20ml) wobei sich ein Niederschlag abscheidet (620mg). Dieser wird zu Ameisensäure (6ml) gegeben, die Natriumbisulfite (60 mg) enthält. Die Mischung wird 30 Minuten bei 40°C gerührt und anschließend zur Trockene eingeengt. Den Rückstand löst'man in H₂O (40 ml) und filtriert eine geringe Menge unlöslicher Bestandteile ab. Die wäßrige Lösung gibt man auf eine Umkehrphasensäule (PrepPAK-500/C₁₃,100 ml) eluiert mit H₂O (300 ml) und 5% wäßrigem CH₃OH(800ml) und überwacht das Eluat mittels UV (254nm) und HPLC. Die das gewünschte Produkt enthaltenden Fraktionen (5%-wäßriges CH₃OH) werden vereinigt, auf ein geringes Volumen eingeengt und lyophilisiert, wobei man 40 mg (8%) der Titelverbindung (1-1 B) erhält

Schmelzpunkt > 200⁰C (Zersetzung). . .

IR

KBr cm

-1

3350, . 1760, 1660, 1600

max

UV

1 s-Phosphatpuffer (pH 7) (E^Xo' ) 240 (352),258.

•χ nm 1 cm

max

290 (469).

366), 267 (279),

NMR

D-O+DMSO-d, 3,74 (2H, br-s, 2-H), 4,20 (3H,

Z D

ppm

Beispiel 3

s,-OCH₃), 5,92 (IH, d, J=4,5, 7-H), 6,15 (IH, m, 3-CH=CH), 7,04 (IH, d, J=16, 3-CH trans), "8,2 (.2H, m, Py-H_{3 5}), 8,62 (IH, m, Py-H₄), 8,97 (2H,'m, Py-H₂^₆).

CONH

OCH.

ι—Cn—ν-ii.

ry/ \

I-1B

*Z/E=4/1

7-[2-(5-Amino-1,2,-4-thiadia2ol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-pyridinio-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-carboxylat (1-1 B)

DieChlorpropenyl-Verbindung Diphenylmethyl^-^-fS-Amino-I^Athiadiazol-S-yO^-methoxyiminoacetamidol-S-O-chloro-ipropen-1-yl)-3-cephem-4-carboxylat (VMl-I) (Z, 937mg, 1,5mMol) gibt man unter Rühren zu einer Lösung von Pyridin (237mg 3mMol)in DMSO (3 ml), die NaJ (11 mg, 0,075 mMol) enthält. Man läßt die Mischung bei Raumtemperatur über Nacht im Dunkeln stehen. Man verdünnt die Mischung mit Ethylacetat (30 ml) um einen Niederschlag abzuscheiden, der abfiltriert wird, mit Ethylacetat (1 OmI) gewaschen und getrocknet wird, wobei man 350 mg der blockierten Verbindung erhält. Den Niederschlag behandelt man 30 Minuten bei 40⁰C mit Ameisensäure (3,4ml), die Natriumbisulfit (34mg) enthält. Nach Entfernen der Ameisensäure reinigt man den Rückstand durch Umkehrphasensäulenchromatographie (gefüllt mit PrepPAK-500/C₁₈ cartridge, 100 ml), wobei man mit 5%igem wäßrigem CH₃OH eluiert. Die gemäß HPLC-Analyse, das gewünschte Produkt enthaltenden Fraktionen werden vereinigt, unter vermindertem Druck verdampft und lyophilisiert, wobei man 41 mg (5,5%) der Titelverbindung (1-1 B) (Z/E = 4/1) erhält. Schmelzpunkt >200°C (Zersetzung).

_33- 748

IR : KBr -1 3300, 1760, 1660, 1600. max

UV : Phosphatpuffer (pH 7) _{nm (£}1% _}. (237 (386), max I cm (377), 258 (369),

265 (347), 280 (311).

NMR : .D-O 3,45 & 3,76 (jeweils IH, d, J=16, 2-H) , 4,18 ppm (3H, s, OCH₃), 5,34 (3H, m, CH=CH-CH₂ & .6-H),.5,92 (IH, d, J=4,5, 7-H), 6,58 (4/5H, d, J=Il, 3-CH eis), 7,03 (1/5H, d, J=16, 3-CH trans), 8,12 (2H, rn, Py-H_{3 5}), 8,56 (IH, m, Py-H₄), 8,82 (2H, m, Py-H₂ ^).

Beispiel 4

S • CONH—j fS

.CH=CHCII, -

I-1C *E

7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido] 3-[3-(2-amino-5-thiazolo[4,5-c]pyridinio)-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-carboxylat (I-1C)

Eine Lösung von Diphenylmethyl 7-[2-(5-amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-(3-iodo-1-propen-1-yl)-3-cephem-4-carboxylat (IX-1) (Ε-Isomer, 714mg, 1 mMol), 2-Aminothiazolo[4,5-c]pyridin [hergestellt gemäß dem Verfahren von T.Takahashietal., Pharm. Bull (Japan), 2,34/1954)] und trockenem DMSO(I ml) wird 1 Stunde bei Raumtemperatur gerührt. Zu der Reaktionsmischung gibt man Ethyiacetat (20 ml), wobei man ein gelbes Pulver erhält (710 mg). Zu dem Pulver (710 mg) gibt man Ameisensäure (7ml) und Natriumbisulfit (70mg). Man rührt die Mischung 30 Minuten bei 40-45⁰C. Nach dem Verdampfen wird der Rückstand mit H₂O (40ml) verrieben. Unlösliche Bestandteile werden abfiltriert und das Filtratwird an einer Umkehrphasensäule (PrepPAK-500/C₁₈,100ml) mit H₂O und 10% CH₃OH als Eluierungsmittel chromatographiert. Die das gewünschte Produkt enthaltenden Fraktionen werden vereinigt, das Lösungsmittel wird unter vermindertem Druck entfernt. Lyophilisierung ergibt das gewünschte Produkt (1-1 C) als farbloses amorphes Pulver in Form des Ε-Isomeren. Ausbeute 110mg (19%)

Schmelzpunkt > 200⁰C (Zersetzung).

. ^ivoj. _cin χ 3300, 1760, 1660, 1630, 1600. max

UV : .Phosphatpuffer (pH 7) _/ril%

λ ^P nm (E. * ) 245 (499),

max I cm

285 (286).

NMR : _β —-~₆™_{2W 3f86 (3Hi Sf}__{OCH3)f4f98 (1Hf df J=4i5i}

^PPm 6-H), 5,2 (2H, m, CH=CH-CH₂), 5,57

(IH, m, 3-CH=CH), 5,96 (IH, m, 7-H), 7,16 (IH, d, J=16, 3-CH trans), 8,36 & 8,45 (jeweils IH, d, J=7, Py-H), 8,92 (IH, s, Py-H).

-34- 748 32

Beispiel 5

Ν · j—C

N^ S^ N)CH.

• CONH

CH=CH-CH₂-N(CH₃)₃

C00^v

I-1D

*Z/E = 1/1

742-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-rnethoxyiminoacetamido]-3-(3-trirnethylamrnonio-1-propen-1-yl)-3-cephern-4-carboxylat(MD)

Zu einer Lösung von Diphenylmethyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-(3-jod-1-propen-1-yl)-3-cephem-4-carboxylat (IX-1) (Z/E = 2/1,490 mg 0,68 mMol) in Ethylacetat (14ml) gibt man auf einmal eine 0,1 M Trimethylaminlösung in Ether (13,6ml). Die Mischung wird 10min gerührt und zur Trockene verdampft, der Rückstand wird mit Ether (20ml) verrieben. Der erhaltene Feststoff (490mg) wird in Trifluoressigsäure (0,2ml), die einen Tropfen Anisol enthält, gegeben. Nach 90minütigem Rühren wird die Mischung unter vermindertem Druck zur Trockene eingeengt und der ölige Rückstand wird mit Ether verrieben (20 ml). Der erhaltene Niederschlag wird abfiitriertund in H₂O (20 ml) gelöst. Geringe Mengen an unlöslichen Bestandteilen werden entfernt und die wäßrige Lösung wird über eine Ci8-Umkehrphasensäule (gefüllt mit PrepPAK-500/C_ls-Patrone, Waters, 30 ml) gegeben und mit Wasser eluiert. Die die gewünschte Verbindung enthaltenden Fraktionen werden vereinigt, auf ein geringes Volumen eingeengt und Iyophiiisiert, wobei man 30 mg (9,2%) der Titelverbindung (J-TD) (Z/E = 1 /1) als farbloses amorphes Pulver erhält. Schmelzpunkt: > 150^CC (Zersetzung).

KBr -1

3300, 1770, 1670, 1605.

Phosphatpuffer (pH 7) iriax

^nm

236 (389), 287 (343).

Beispiel 6

^D2°

NMR: 5^D2° 3,45 und 3,7 (IH, d, J=16, 2-H); 3,81 (1H,

PP^m

s, 2-H); 4,1 (2H, d, J=8, -

H₂N); 4,21 (3H,

s, OCH₃); 5,39 (1H, d, J=4,5, 6-H); 5,95 (2H, m, 3-CH=CH und 7-H); 6,61 (1/2H, d, J=11, 3-CH eis); 7,05 (1/2H, d, J=16, 3-CH trans) .

CH=CHCH₂-

CCXT

Ι-ΪΕ

*E

742-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetaiTiido]-3-[3-(3-arninopyridinio)-1-propen-1-yl]-3-cephern-4-carboxylat (1-1 E)

Man gibt Diphenylmethyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-(3-jod-1-propen-1-yl)-3-cephem-4-carboxylat (IX-1) (E, 716mg, 1 mMol) unter Rühren zu einer Lösung von 3-Aminopyridin (188mg, 2mMole) in DMSO (1 ml). Man rührt die Mischung 1 h und verdünnt mit Ethylacetat (20 ml). Der erhaltene Niederschlag wird abfiltriert, mit Ethylacetat gewaschen und getrocknet, wobei man 520mg eines gelben Pulvers erhält. Eine Mischung aus dem Pulver (500mg), Ameisensäure (5ml) und Natriumbisulfit (50mg) wird bei 40⁰C 30min gerührt. Die Mischung wird im Vakuum eingeengt, in H₂O (40 ml) gelöst und unlösliche Bestandteile werden entfernt. Die wäßrige Lösung wird an einer Umkehrphasensäule (gefüllt mit

-35- 748 32

PrepPAK-500/C₁₃,100ml) Chromatographien, wobei man mit 7,5%igem wäßrigem CH₃OH eluiert. Die das gewünschte Produkt enthaltenden Fraktionen werden verdampft und lyophilisiert, wobei man die Titelverbindung (1-1 E) (7 mg, 1,4%) erhält. Schmelzpunkt: > 185⁰C (Zersetzung).

KBi — 1 ^Vmax ^Cm 3400, μ765, 1675, 1620, 1600.

> UV: _APhosphatpuffer (pH 7) 1%

max ^{nm (E}1 cm^{) 246 (4O3)}' ·

290 (468) .

NMR: 6°2° 3,72 (2H, m, 2-H) ; 4,14 (3H, s, OCH₃); '5,35 (3H, m, (S-H und CH=CH-CH₂); 5,9 (1H, d, J=4,5, 7-H); 6,1 (1H, m, 3-CH=CH); 7,05 (1H, A₁ J=16, 3-CH₇ trans); 8,1 (1H, m, Py-H₅); 8,54 (1H, br-s, Py-Hg); 8,68 (1H, m, Py-H₄); 9,4 (1H, m, Py-H₂) .

Behandlung von IX-1 (716mg, 1 mMol) mit 3-t-Butoxycarbonyiaminopyridin (324mg, 2mMole) in ähnlicher Weise wie oben beschrieben ergibt 12mg (2,3%) an I-1E.

Beispiel7

COC

I-1E *2/E = 1/1

7-[2-(5-Amino-1,2_f4-thiadiazol-3-yi)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(3-amino-1-pyridinio)-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-carboxylat (1-1 E)

Man rührt eine Mischung von Diphenylmethyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-(3-jod-1-propen-1-yl)-3-cephem-4-cargoxylat (IX-1) (Z/E = 2/1, 500mg, 0,7mMol) und 3-Aminopyridin (66mg, 0,7mMol) in Dimethylsulfoxid (1 ml) 20 min bei Raumtemperatur. Man verdünnt die Mischung mit Ethylacetat (10 ml) und Ether (10 ml), filtriert den erhaltenen Niederschlag ab, wäscht ihn mit Ether (10ml) und trocknet ihn. Dasquaternisierte Salz läßt man in Ameisensäure (3ml), die konzentrierte HCI (0,3ml) enthält, und rührt 1,5h bei Raumtemperatur. Die Mischung wird bei " vermindertem Druck zur Trockene eingeengt. Der Rückstand wird in 2% HCI (10 mi) gelöst und filtriert. Die wäßrige Phase wird an einer Umkehrphasensäule (PrepPAK-500/C_ia, 100 ml) Chromatographien. Nach dem Waschen mit Wasser (500 ml) wird die ' Säule mit 5%igem wäßrigem CH₃OH eluiert. Die die Titelverbindung enthaltenden Fraktionen werden vereinigt, im Vakuum eingeengt und gefriergetrocknet, wobei man 15 mg (4,2%) der Titelverbindung (1-1 E) (Z/E = 1/1) als farbloses, amorphes Pulver erhält. Schmelzpunkt: > 160⁰C (Zersetzung).

KBr —1 ^{IR: v} _mav ^cm 3400, 1765, 1675, 1620, 1600.

_{ÜV A}Phosphatpuffer (pH 7) _nm ^1%^ ^ ₍₄₃₄₎ ^

287 (333) .

NMR: 6^°^d6^+D2° 3,73 (2H, m) ; 4,14 (3H, s, OCH₃);

5,35 (3H, m, 6-H und CH-CH-CH₂); 6,0 (2H, m, 7-H und 3-CH-CH); 6,6 (1/2H, d, J=11, 3-CH eis); 7,05 (1/2H, d, J=16, 3-CH trans); 8,08 (1H, m, Py-H₅); 8,6 (2H, m,

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Beispiel 8

CONH

NHCHO

I-1F

*E

7-[2-(5-Amino-1,2Athiadiazol-3-yl)-2-methoxyimiπoacetamidol·3-[3-(3-forrτly.laminopyridinio)-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-carboxylat(l-IF)

Man rührt eine Mischung von Diphenylmethyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyimihoacetamido]-3-(3-jod-1-propen-1-yl)-3-cephem-4-carboxy!at (IX-1) (E, 716mg, 1 mMol) und 3-Formylaminopyridin (hergestellt gemäß dem Verfahren von N.Enomoto et al'., Bull. Chem. Soc. Japan, 45, 2665 [1972]) (244mg, 2mMole) in DMSO (2ml) 1 h bei Raumtemperatur und gießt in Ethylacetat (200ml).

Der Niederschlag wird abfiltriert, gründlich mit Ethylacetat gewaschen und getrocknet. Eine Mischung des quaternisierten Salzes (500mg) mit Natriumbisulfit (50mg) in HCOOH (5ml) wird 80min bei 40-50⁰C gerührt und anschließend im Vakuum zur Trockene eingeengt. Der Rückstand wird in Wasser (40ml) gelöst, mit NaHCO₃ neutralisiert und anschließend wird unlösliches Material abfiltriert. Das klare Filtrat wird an einer Umkehrphasensäule (PrepPAK-5.00/C₁₈,100 ml) mit Wasser und 5% CH₃OH, 10% CH₃OH, 20% CH₃OH und 30% CH₃OH chromätographiert. Die die gewünschte Verbindung enthaltenden Fraktionen werden vereinigt, im Vakuum konzentriert und lyophilisiert, wobei man 16 mg (2,9%) der Titel verbindung (1-1 F) (E) als gelbbraunes Pulver erhält. Schmelzpunkt: > 17O⁰C (Zersetzung).

IR:

v^KBr cm"¹ max

3340<br), 1760, 1670, 1620(br), 1590.

UVi

(pH 7)

J CIU

248 (362), 290 (474).

NMR: 6^D2°^+NaHCO3 ppm

3,68 (2H, br, 2-H); 4,15 (3H, s, OCH₃); 5,91 (1H, d, J=4,5, 7-H) ; 6,25 (1H, m, CH=CH-CH₂); 6,98 (1H, d, J=16, 3-CH trans); 8,8 - 7,9 (4H, m, Py-H); 9,38 (1H, br, NaCHO).

Beispiel 9

CONH

OCH.

CH=CHCH₂-

COC

CONH.

I-1G

*E

carboxylat (1-1 G)

Zu einer Lösung von Diphenylmethyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-(3-jod-1-propen-1-yl)-3-, cephem-4-carboxylat(IX-1) (E, 716 mg, 1 mMol) in DMSO (2 ml) gibt man Nikotinamid (244mg,2mMole) und rührt die Mischung 1,5 h bei Umgebungstemperatur. Anschließend gießt man unter Rühren in Ethylacetat (200 ml). Der erhaltene Niederschlag wird abfiltriert. Das quaternisierte Salz (500mg) wird in HCOOH (5ml) in Gegenwart von Natriumbisulfit (50mg) gelöst und die Mischung wird unter Rühren 40 min auf 40-50⁰C erhitzt und anschließend zur Trockene verdampft. Der Rückstand wird in Wasser (40 ml) gelöst, unlösliche Bestandteile werden abfiltriert und mit einer geringen Menge Wasser gewaschen. Das Filtrat und das

-37- 748 32

Waschwasser werden vereinigt und an einer Umkehrphasensäule (PrepPAK-SOO/C-ia, 10OmI) chromatographiert. Man eluiert nacheinander mit Wasser, 5%igem, 20%igem und 20%igem wäßrigem CH₃OH, vereinigt die das gewünschte Material enthaltenden Fraktionen, konzentriert im Vakuum und unterwirft einer Gefriertrocknung, wobei man 21 mg (3,8%) der Titelverbindung (I-IG) (E) als gelbes Pulver erhält. Schmelzpunkt: > 175⁰C (Zersetzung).

IR: V_n.,,. cm 334O(br), 1760, 1670, 1600.

max

_m>. ^osphatpuffer (pH 7) _nm ^il^, _{235 {}^ _

274 (sh, 405), 290 (446).

NMR: _δ-₂^^τ^^αΛ^3 3,68 (2H, br, 2-H) ;

^PPItl 5,32 (1H, d, J=4,5, 6-H); 5,45 (1H, d, J=7, CH=CH-CH₂); 5,88 (1H, d, J=4,5, 7-H); 6,15 (1H, d-t, J=16 und 7, : 3-CH=CH); 7,00 (1H, d, J=16, 3-CH trans); 8,23 (1H, m, Py-H₅); 9,03 (2H, m,

^Py"^H4 und 6^' ⁹'^{34 i1H}< ^s< ^-H₂). Beispiel 10

N— τ— C CONH

Fl

'CH=CHCH.,-N^v \\_C0NH.

H₂N" ^S' "OCH. <y \>^ ^n-CaLn₂-IT y-UüNHj

I-lH *E

7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetarnido]-3-[3-(4-carbamoylpyridinio)-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-carboxylat(l-IH)

Zu einer Lösung von Diphenylmethyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamidoy-3-(3-jod-1-propen-1-yl)-3-cephem-4-carboxylat (IX-I) (E, 716mg, 1 mMol) in trockenem DMSO (2 ml) gibt man unter Rühren Isonikotinamid (244mg, 2mMol). Die Mischung wird 1 h bei Raumtemperatur gerührt und anschließend in Ethylacetat (200ml) gegossen. Der erhaltene Niederschlag wird abfiltriert, gründlich mit Ethylacetat gewaschen und getrocknet. Eine Mischung des quaternisierten Materials (400mg) mit Natriumbisulfit (40mg) in HCOOH (4ml) erhitzt man unter Rühren 1 h auf 40-50⁰C und verdampft unter vermindertem Druck anschließend zur Trockene. Der rohe Feststoff wird in Wasser (40 ml) gelöst. Nach dem Abfiltrieren von unlöslichem Material wird das Filtratan einer.Umkehrphasensäule (gefüllt mit PrepPAK/C₁₃,100ml) chromatographiert, wobei man Wasser und 5%iges, 10%iges, 20%iges und 30%iges wäßriges CH₃OH als Eluierungsmittel verwendet. Die die gewünschte Verbindung enthaltenden Fraktionen werden vereinigt, verdampft und lyophilisiert, wobei man 21 mg (3,8%) der Titelverbindung (1-1 H) als schwach-gelbes Pulver erhält. Schmelzpunkt: > 18O⁰C (Zersetzung).

IR: v^KBr cm"¹ 334O(br), 1760, 1670, 1600. max

-38- 748 32

- _APhosphatpuffer (pH 7) " max

_(ΕΛ% _{} 222 (362)/} 1 cm

285 (452).

NMR: 6^D2^O+NaHCO3 ppm

Beispiel 11

3,68 12H, br, 2-H); 4,15 (3H, s, OCH₃); 5,33 (1H, d, J=4,5, 6-H) ; 5,46 (2H, d, J=7, CH=CH-CH₂); 5,90 (1H, d, J=4,5, 7-H) ; 6,17 (1H, d-t, J= 1.6 und 7, 3-CH=CH); 7,02 (1H, d, J=16, 3-CH trans); 8,43 und 9,09 (jeweils 2H, d, J=7, Py-H).

CONH

CH=CHCH₂-N / \

COC

I-II

carboxylat (1-11)

Eine Mischung von Diphenylmethyl-7-[2-(5-amino-1,2,4thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-(3-jod-1-propen-1-yl)-3-cephem-4-carboxylat (IX-D (E, 716mg, 1 mMol) und 3-(t-Butyloxycarbonylaminomethyl)-pyridin (516mg,2mMole) in DMSO (2ml) rührt man 30min bei Umgebungstemperatur. Die Mischung wird in Ethylacetat (200ml) gegossen, der Niederschlag wird abfiltriert, gründlich mit Ethylacetat gewaschen und getrocknet. Eine Mischung aus quaternisiertem Salz (500 mg), Natriumbisulfit (50 mg) in HCOOH (5 ml) wird 80 min bei 40-50⁰C gerührt und anschließend bei vermindertem Druck zur Trockene verdampft. Derfeste Rückstand wird in Wasser (40ml) gelöst und die Mischung wird mit NaHCO₃ neutralisiert. Unlösliches Material wird abfiltriert und das Filtratwird auf einer Umkehrphasensäule (gefüllt mit PrepPAK-500/C₁₃,100 ml) chromatographiert, wobei man nacheinander mit Wasser, 5%igem, 10%igem, 20%igem und 30%igem wäßrigem Methanol eluiert. Die die gewünschte Verbindung enthaltenden Fraktionen werden vereinigt, verdampft und lyophilisiert, wobei man 10mg (1,8%) der Titelverbindung (1-11) (E) als braun-gelbes Pulver erhält.

^KBr

cm

338O(br), 1760, i65O(sh), 162O(sh).

^{(PH 7)}

nm

235 (sh, 260), 286 (370).

NMR· ₆ ^D2^O+NaHCO3 . ppm

³'⁶⁸ (^2H' ^br' ²~^H) '* ⁴'^{16 (3H}' ^s' 6,98 (1H, d, J=16, 3-CH trans); 8,05 (1H, m, Py-H₅); 8,50 (1H, m, Py-H₄); 8,80 (2H, m, Py-H_ Λ .

-39- 748 32

Beispiel 12

jTT *

jTT

I-lH *E

7^2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(4-carbarnoYlpyridinio)-1-propen-1-yl]-3-cephem-3-carboxyiat(l-IH)

Eine Mischung von Diphenylmethyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-(3-jod-1-propen-1-yl)-3-cephem-4-carboxylat (IX-I) E-isomer, 4,1 g, 5,7mMole)und Isonikotinamid (1,4g, 11 mMole) in trockenem DMSO (6ml) wird 2h bei Raumtemperatur gerührt, wobei man die Reaktion mittels TLC (Silikagelplatte, CHCI₃:CH₃OH = 3:1) verfolgt. Die Reaktionsmischung wird mit Ethylacetat (100ml) verdünnt, wobei sich ein gelbes gummiartiges Material abscheidet, das mit Ameisensäure (40 ml) und Natriumbisulfit (390 mg) 30 min.bei 45 ⁰C behandelt wird. Die erhaltene Lösung wird zur Trockene eingeengt. Der Rückstand wird in H₂O (100 ml) gelöst, unlösliche Bestandteile werden abfiltriert. Das Filtrat und das Waschwasser werden vereinigt und auf eine Umkehrphasensäule (PrepPAK-500/Ci₈,120 ml) gegeben. Die Säule wird mit H₂O eluiert. Das Eluat wird in300ml-Fraktionen gesammelt und mittels UV (254nm) und HPLC (Lichrosorb RP-18,4 χ 300mm, 0,01 M Ammoniumphosphatpuffer, pH 7,2, enthaltend 20% CH₃OH) überprüft. Die Fraktionen 4 und 5 werden vereinigt und auf ein geringes Volumen eingeengt. NachLyophilisierung erhält (250 mg) (8,1 %) der Titelverbindung 1-TH, Schmelzpunkt: >180°C (Zersetzung). '

Die Auswertung der Spektren ergibt, daß das Produkt mit dem gemäß Beispiel 10 erhaltenen Produkt identisch ist. Herstellung des Hydrochlorids.

Zu einer Suspension der Verbindung 1-1H (98mg, 0,18mMol) in CH₃OH (Tml)gibt man 10%HCl (0,1 ml). Manrührttlie Mischung 5 min. Zu der erhaltenen gelben Lösung gibt man Aceton (100ml), wobei sich ein Niederschlag bildet, der abfiltriert wird, mit Aceton (2 χ 10 ml) gewaschen und im Vakuum getrocknet wird. Man erhält das Hydrochlorid von 1-1H als farbloses Pulver. Ausbeute 88mg (79%). Schmelzpunkt: >190°C (Zersetzung). .

IR: v^KBr cm"¹ 3300, 1770, 1680, 1620..

Phosphatpuffer (pH 7) ^ _(E1% _{} 2}27 (385),

max 1 cm

^m 286 (374).

NMR: δ 2 2,32 (1H, s, Aceton-H); 3,79 (2H, br-s, 2-H) ;

^PPItl 4,17 (3H, s, OCH₃); 5,34 (1H, d, J=4,5, 6-H) ; 5,49 (2H, d, 3=1, CH=CH-CH₂); 5,93 (1H, d, J=4,5, 7-H); 6,28 (1H, d-t, J=16 und 7, 3-CH=CH); 7,15 (1H, d, J=16', 3-CH); 8,43 und 9,1 (jeweils 2H, d, J=7, Py-H).

CONH-r S

I-U *E

7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-rnethoxyiminoacetamido]-3-[3-(2-methylthiazolio)-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-caroxylat (I-U)

-40- 748 32

Zu einer Mischung von Diphenylmethyl-7-[2-{5-amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-(3-jod-1-propen-1-yO-S-cephem^-carboxylat (IX-I) (E, 714mg, 1 mMol) und 2-Methylthiazol (hergestellt gemäß dem Verfahren von R. P. Kurkjy, E. V. Brown, J. Am. Chem.Soc, 74,5778 [1952]) (198 mg, 2 mMole) in trockenem CH₂CI₂ (10 ml) gibt man bei -20^CAgBF₄ (90%ig, 217 mg, 1 mMol). Die Mischung wird 30 min bei Raumtemperatur gerührt und dann filtriert. Der Niederschlag wird mit 10% CH₃OH-CHCI₃ (3 x 20ml) extrahiert. Die vereinigten Extrakte werden mit Kochsalzlösung (2 χ 5ml) gewaschen, über MgSO₄ getrocknet und zur Trockene eingeengt, wobei man einen gelben Rückstand erhält, der mit Isopropylether verrieben wird. Abfiltrieren liefert 350 mg des quatemisierten Produkts. Eine Mischung aus diesem Feststoff, Natriumbisulfit (35 mg) und Ameisensäure (3,5ml) wird 30min bei 40°C gerührt. Die Mischung wird zur Entfernung von Ameisensäure eingeengt und der Rückstand wird mit H₂O (40 ml) verdünnt. Geringe Mengen unlöslicher Bestandteile werden abfiltriert. Das Filtratwird auf eine Umkehrphasensäule (PrepPAK-500/C₁₈,100ml) gegeben. Die Säule wird nacheinander mit H₂O (200ml), 5%igem wäßrigem CH₃OH (400ml) und 10%igem wäßrigem CH₃OH (300ml) eluiert. Die das gewünschte Produkt enthaltenden Fraktionen werden auf der Grundlage einer HPLC-Analyse (Lichrosorb RP-18, 4 x 300mm, 0,01 M Ammoniumphosphatpuffer, pH 7,2, enthaltend 20% CH₃OH) vereinigt. Die vereinigten Lösungen werden auf ein geringes Volumen eingeengt und lyphilisiert, wobei man 40 mg (7,7%) der Titelverbindung (1-1 J) (E) erhält

Schmelzpunkt: >195°C (Zersetzung).

KBr -1 v cm max

3300, 1760, 1660, 1600.

Phosphatpuffer (pH 7) max

nm (E

1% 1 cm

238 292

(442) , (42f).

„_._ .D-O+DMSO-d.* NMR: 5 2 6

ppm

Beispiel 14

3,06 (3H, s, Thiazol-CH₃); 3,74 (2H, br-s, 2-H); 4,19 (3H, s_f OCH₃); 5,92 (1H, d, J=4,5, 7-H) ; 6,1 (1 H, m, 3-CH=CT!) ; 5,8 (TH, d, J=I 6, 3-CH trans); 8,04 und 8,23 (jeweils 1H, d, J=4, Thiazol-H).

COKH

I-1L

*E

7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetarnido]-3-[3-(4-hydroxyrnethyipyridinio)-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-carboxylat (I-1L)

Eine Mischung von Diphenyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-(3-jod-1-propen-1-yl)-3-cephem-4-cargoxylat (IX-I) (Ε-Isomeres) 1,07g, 1,5mMol), 4-Hydroxymethylpyridin (818mg, 7,5mMol) in CH₃CN (4,5ml) und CH₃OH (3 ml) rührt man 1 h bei Raumtemperatur unter Stickstoffatmosphäre. Nach dem Verdampfen des Lösungsmittels wird der ölige Rückstand mit Isopropylether verriegen, abfiltriert und mit einer Mischung aus Isopropylether und Methanol (3:1, 10 mi/gewaschen, wobei man 1,28 g des quaternisiertenCephemesters als gelbes Pulver erhält. Eine Lösung des quatemisierten Esters (1,25g) und Natriumbisulfit (600mg) in 85%iger HCOOH (10ml) rührt man 1 h bei Raumtemperatur unter Stickstoffatmosphäre. Nach Zugabe von 85%iger HCOOH (5 ml) wird die Mischung eine weitere Stunde unter den gleichen Bedingungen gerührt. Man gibt Toluol zu und verdampft die Reaktionsmischung azeotrop unter vermindertem Druck. Der Rückstand wird mit Aceton verrieben, wobei man 1,17g des rohen Formats der Titelverbindung erhält. Eine Suspension dieser Verbindung (1,15g) in Wasser (100 ml) wird zur Entfernung von unlöslichen Bestandteilen filtriert. Diese werden mit Wasser (10ml x 2) gewaschen. Das Filtrat und die Waschwässer werden vereinigt und einer Umkehrphasensäulenchromatographie unterzogen. Die Säule, die mit einem Material gefüllt war, das aus einer PrepPAK-500/C^-Säulenpatrone, Waters, 60 ml, entnommen wurde, wird nacheinander mit Wasser, 5%igem Methanol und 10%igem Methanol entwickelt. Man vereinigt die die gewünschte Verbindung enthaltenden Fraktionen, engt unter vermindertem Druck ein und erzeugt durch Zugabe von Aceton einen Niederschlag. Man erhält auf diese Weise 100 mg der Titel verbindung (1-1 L) als schwach-gelbes Pulver. Zu einer Suspension des Pulvers (90mg) in Methanol (9ml) gibt man 1 M HCI in CH₃OH (0,5ml), rührt die Mischung bei Raumtemperatur und engt im Vakuum ein. Zu dem Konzentrat gibt man Isopropanol, wobei 77 mg des Hydrochlorids der Titelverbindung als schwach-gelbes Pulver ausfallen. Schmelzpunkt: >190°C (Zersetzung).

cm

1775, 1670, 1635, 1530.

^ÜV: Λ

er (pH 7)

_(226(χ)) ,

264 (sh, 16300)

NMR: 6^D2° 3,83 (2H₁ br, 2-CH); 4,17 (3H, s, OCH₃); Ppm

Beispiel 15

5,06 (2H, s,

; 5,36 (1H, d, J=4,5 Hz,

6-H); 5,41 (2H, d, J=7 Hz, CH=CH-CH₂); 5,94 (1H, d, J=4,5 Hz, 7-H); 6,36 (1H, d-t, J=16 und 7 Hz, CH=CHCH₂); 7,13 (1H, d, J=16 Hz CH-CH-CH₂); 8,08 und 8,83 (jeweils 2H, d, J=7 Hz, Py-H).

N ^p

.,O

-CONH-

⁰⁰A

"CH=CHCH₂ -N^ %C

ONH-

I-2H

*E

7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-ethoxviminoacetamido]-3-[3-(4-carbamoylpyridinio)-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-carboxylat (I-2H)

Zu einer Lösurig von 200mg 7-Amino-3-[3-(4-carbamoylpyridinio)-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-carboxylathydrochlorid (E-Isomeres) in 5ml 50%igem, wäßrigem Aceton gibt man portionsweise 190mg 2-Ethoxyi.mino-2-(5-amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-acetylchloridhydrochlorid (hergestellt gemäß dem in der japanischen Patentpublikation (Kokai) 57-24389 (2/9/82) beschriebenen Verfahren). Die Mischung wird mit 2 N Na₂CO₃ (ungefähr 1 ml) auf pH 6,5-7,0 eingestellt. Die Reaktionsmischung wird 1 h bei 10⁰C gerührt, mit 1 N HCI auf pH 2 angesäuert und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wird abfiltriert und das Filträt wird an einer HP-20-Säule Chromatographien, die nacheinander mit 500 ml Wasser und 25%igem wäßrigem Isopropanol eluiertwird. Die das gewünschte Produkt enthaltenden Fraktionen werden vereinigt und unter vermindertem Druck verdampft. Der ölige Rückstand wird mit Isopropanol (20ml) behandelt, wobei man 263mg (93%) der Titelverbindung (I-2H) erhält. Schmelzpunkt: 170⁰C (Zersetzung).

Zu einer Suspension von 225 mg (0,4OmMoI) des obigen Zwitterions in-10ml Methanol gibt man 1 ml 1 N HCI in CH₃OH. Die Mischung wird 30 min bei Raumtemperatur gerührt. Die Lösung wird filtriert und unter vermindertem Druck eingeengt. Zum Rückstand werden 15ml Isopropylalkohol gegeben, der erhaltene Niederschlag wird abfiltriert und im Vakuum getrocknet, wobei man die Titelverbindung in Form des Hydrochlorids erhält. Ausbeute 146mg (57%). Schmelzpunkt: 160⁰C (Zersetzung). Reinheit: 65% (geschätzt).

-42- 748 32

KBit — 1 IR: v cm 3300, 1780, 1680, 1620.

ILL »Λ.

_{ÜV: λ}Phosphatpuffer (pH 7) ^ _(£)

288 (22800).

NMR: 6^D2° 1,44 (3H, t, J=7Hz, OCH₂-CH₃); 3,74 (2H, ^Ppm br. s, .2-H); 4,45 (2H, q, J=7Hz,

Beispiel 16

₂₃

5,3 6 (1H, 'd, J=4,5Hz, 6-H) ; 5,4 6 (2H, d, J=7H₂, 3-CH=CH-CH₂); 5,9 2 (1H, d, J=4,5Hz, 7-H); 6,20 (1H, m, 3-CH=CH); 7,04 (1H, d, J=16Hz, 3-CH=CH); 8,43 (2H, d, J=7Hz, Py-H_A);9,10 (2H, d, J=7Hz, Py-H_ß).

carboxylat (1-1 H) (E-lsomeres)

Dieses Beispiel zeigt die Herstellung der Verbindung 1-1H gemäß den letzten Stufen des Reaktionsschemas 1 a oder 1 b, wobei die Zwischenverbindung Benzhydryl-T-ß-lS-amino-I^Athiadiazol-S-yD-a l-propen-1-yl]-3-cephem-4-carboxylat-format (XXVII-IH) isoliert wird.

A. Benzhydryl-y-^-fAmino-i^^-thiadiazol-S-yO-Z-methoxyirninoacet cephem^-carboxylatformat (Ε-Isomeres) (XXVII-1 H)

Eine Lösung von XH-1.H(Y® = )®,£-Jsomer) (34g, Reinheit 75%) in einer Mischung aus Aceton und Methanol (1/1,20OmI) wird auf eine Amberilte IRA-410-Säule (FormBtform; 340ml) gegeben. Die Säule wird mit dem gleichen Lösungsmittelsystem eluiert. Die erste Fraktion (1 L) wird auf ungefähr 100 ml eingeengt und der braune Rückstand wird mit Isopropylether (400 ml) verrieben. Das erhaltene Pulver wird abfiltriert und im Vakuum getrocknet, wobei man 29g (Reinheit 75%, bestimmt mittels HPLC) der Titelverbindung XXVII-1 H (Ε-Isomeres) als braunes Pulver erhält; Schmelzpunkt: >150°C (Zersetzung).

IR: v^KBr cm"¹ 3300, 1780, 1680, 1630, 1600.

max

» ^(El^%c_m» ^{232 <186)}·

NMR: ₅Aceton-a₆/CH₃OH-d₄(1/1) 4,₀ (₃H, s, OCH,); 5,26 ppm —J

(1H, d, J=4,5Hz, 6-H);

5,43 (2H, d, J=7Hz, CH₂N⁺); 5,99 (1H, d, J=4,5Hz, 7-H); 6,5 (1H, m, 3-CH=CH); 6,92 (1H, S, CHPh₂) ; 7,1 (1H, d, J=16Hz, 3-CH); 7,35 ,(1OH, m·, Ph-H) ; 8,36 (1H, s, HCOO); 8,46 und 9,12 (jeweils 2H, d, J=8Hz, Py-H).

B. 7-[2-(5-Amino.-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-rnethoxyirnino-acetamido]-3-[3-(4-carbamoyl-1-pyridinio)-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-carboxylat (1-1 H) (E-lsomeres)

Eine Mischung von XXVII-1 H (Ε-Isomeres) aus Stufe A (29g, Reinheit 75%) und 85%iger Ameisensäure (290ml) wird 2 h bei Raumtemperatur gerührt. Verdampfen der Mischung ergibt ein braunes Öl, das mit Aceton (500 ml) verrieben wird. Das Pulver wird abfiltriert, mit Aceton (2 x 100 ml) gewaschen und im Vakuum getrocknet, wobei man 24 g (Reinheit 50%, bestimmt mittels HPLC) der rohen Titelverbindung erhält. Derbraune Feststoff wird zweimal mit 2 N HCI (11 und 0,5I) behandelt. Die wäßrigen Extrakte werden vereinigt und auf eine Säule gegeben, die mit Diaion HP-20 (1,51) gefüllt ist. Die Säule wird mit Wasser (81) gewaschen und mit30%igem CH₃OH (51) eluiert. Die das gewünschte Produkt enthaltenden Fraktionen werden auf ungefähr 30 ml eingeengt. Das Konzentrat wird mit Aceton (200 ml) behandelt, wobei man einen Niederschlag erhält, der abfiltriert und im

Vakuum getrocknet wird. Man erhält 10,1 g (Reinheit 85%) der Titelverbindung'(Zwitterionen-Form) als gelbes Pulver. Zu einer Suspension dieses Produkts in CH₃OH (100ml) gibt man NHCI in CH₃OH (55ml) bei Raumtemperatur und rührt die Mischung 30 min. Zur Entfernung unlöslicher Bestandteile wird die erhaltene klare Lösung filtriert, auf ungefähr 50 ml eingeengt und mit Isopropanol (200 ml) zur Bildung eines Niederschlags versetzt. Das erhaltene Pulver wird isoliert, mit Isopropanol (50 ml) gewaschen und im Vakuum getrocknet, wobei man 10,5 g (Reinheit 85%) der Titelverbindung 1-1H (Ε-Isomeres) (HCI-SaIz) erhält. Schmelzpunkt: >180°C (Zersetzung). Schwach-gelbes Pulver.

Beispiel 17

carboxylat (1-1 H) (E-Isomeres)

Dieses Beispiel erläutert die Herstellung der Verbindung 1-1H gemäß den letzten Stufen der Reaktionsschemata 1 a oder 1 b, wobei die Zwischenverbindung XXVII-1H (als Format) nicht isoliert wird.

Eine Lösung von IX-I (Ε-Isomeres) (27,6g, 38,5mMol) und Isonikotinamid (22,8g, 187mMol) in einer Mischung aus CH₃Cn (120ml) und CH₃OH (100ml) wird unter einer Stickstoffatmosphäre 1 h bei Raumtemperatur gerührt. Nach dem Verdampfen der organischen Lösungsmittel wird der ölige Rückstand mit Isopropylether verrieben, wobei man 50,5g einer Mischung aus quatemisiertem Salz und Isonikotinamid erhält. Eine Lösung dieser Mischung (50,3g) und Natriumbisulfit (16g) in 85%iger HCOOH (160 ml) wird 40 min bei Raumtemperatur und anschließend unter N₂1 h bei 4O⁰C gerührt. Die Mischung wird im Vakuum verdampft. Der ölige Rückstand wird mit Toluol (50 ml) vermischt, azeotrop verdampft und mit Aceton ,(400 ml verrieben, wobei man 27,8 g der rohen Titelverbindung erhält. Dieses Material wird zweimal mit 2 NHCI (11 und 0,51) behandelt. Die sauren Extrakte werden vereinigt und auf eine Säule mit HP-20-Harz (1,51) gegeben. Die Säule wird mit Wasser (91) und 30%igem Methanol (101) eluiert. Die die gewünschte Verbindung enthaltenden Fraktionen werden vereinigt und konzentriert, wobei man ein gelbes Öl erhält, das mit Aceton (300 ml) verriegen wird. Man erhält 9,35 g der Titelverbindung als Zwitterion.

Zu einer Suspension dieses Produktes (9,3g) in CH₃OH (180ml) gibt man 1 NHCI in CH₃OH (55ml), wobei man eine klare Lösung erhält. Die Lösung wird auf ungefähr 100 ml eingeengt und mit Isopropanol verdünnt, wobei 9,50g (Reinheit 75%) der Titelverbindung 1-1H (Ε-Isomeres) als Hydrochlorid ausfallen. Schwach-gelbes, amorphes Pulver. Schmelzpunkt: >195 ⁰C (Zersetzung).

Beispiel 18

742-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyirninoacetamido]-3-[3-(4-carbämoylpyridinio)-1-propen-1-yl]-3-cephern-4-carboxylat(MH) (£-lsomeres)

Dieses Beispiel erläutert die letzte Stufe (7-N-Acyiierung) gemäßBeaktionsschema 1 c zur Herstellung deT Verbindung 1-TH. Zu einer eisgekühlten Suspension von 7-Amino-cephem-hydrochlorid XXII-H (Ε-Isomeres) (5,0g, 12,6mMol) in 50%igem wäßrigem Aceton (100ml) gibt man Natriumbicarbonat in kleinen Portionen. Während der Reaktion wird der pH der Mischung mittels eines pH-Meters verfolgt. Zu der kalten neutralisierten Lösung (pH ungefähr 7) gibt man 2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetyl-chlorid-hydrochlorid (4,02g, 15,6mMol) in kleinen Portionen während 1 h. Der pH der Mischung wird durch gelegentliche Zugabe von Natriumbicarbonat im Bereich von 6,8-7,5 gehalten. Die Reaktion wird auch mittels TLC verfolgt. Nachdem die Verbindung XXII-H vollständig verbraucht ist, wird die Mischung durch Zugabe von 2 N Chlorwasserstoffsäure auf pH 3 angesäuert. Die Mischung wird filtriert, und das Filtrat wird unter vermindertem Druck eingeengt. Der Rückstand wird mit Aceton (400 ml) verdünnt, wobei sich ein Niederschlag abscheidet, der abfiltriert wird. Man erhält 9,59g der rohen Titelverbindung als leicht gelbes Pulver. Die Reinheit beträgt 40%, geschätzt mittels HPLC. Eine Suspension des Rohrprodukts (9,5g) in 2 N Chlorwasserstoffsäure (150 ml) wird filtriert und das Filtrat wird dann einer Säule mit HP-20-Harz (500 ml) adsorbiert. Nach dem Waschen mit Wasser (1,51) wird die Säule mit 25%igem wäßrigem Isopropy!alkohol eluiert. Das Eluatwird in 100ml-Fraktionen aufgefangen. Die gewünschten Fraktionen werden vereinigt, mit 2 N Chlorwasserstoffsäure (10 ml) angesäuert und eingeengt. Man verreibt den öligen Rückstand mit Isopropy !alkohol (200 ml) und filtriert den Niederschlag ab. Nach dem Trocknen über Phosphorpentoxid erhält man 5,18g derTitelverbindung 1-1H (E-lsomeres) Hydrochlorid als gelbes, amorphes Pulver. Schmelzpunkt: >190°C (Zersetzung). Geschätzte Reinheit: 75%.

Beispiel 19 Reinigung und Kristallisierung der Verbindung 1-1H (E-Isomeres)

Die Verbindung 1-1H in Form des Hydrochlorids, erhalten gemäß Beispiel 16, ist ein schwach-gelbes, amorphes Pulver mit einer Reinheit von 85%.

Verfahren 1

6g des 85%igen Hydrochlorids löst man in 20 ml H₂O und filtriert die Lösung durch eine Celitschicht. Das bernsteinfarbene Filtrat (pH 2) gibt man über eine Umkehrphasensäule (gefüllt mit PrepPAK-500/Ci_S-Patrone, Waters; 120 ml), die mit Wasser eluiert wird. Das Eluat sammelt man in 120ml-Fraktionen, wobei man mittels HPLC* den Fortgang verfolgt. Die Fraktionen 3 bis 5 werden vereinigt und auf etwa 10 ml eingeengt. Man fällt mit Aceton (100 ml), wobei man 3,3g 1-1H in Form des Zwitterions (schwach-gelbes, amorphes Pulver; geschätzte Reinheit 95%) erhält.

Zu einer Suspension des95%igen Pulvers (3,2g) in CH₃OH (32 ml) gibt man NHCI in CH₃OH (18ml)Xind rührt die Mischung bei Raumtemperatur, bis eine klare Lösung erhalten wird. Die Lösung wird filtriert und das Filtrat wird auf ungefähr 10 ml eingeengt. Zum Konzentrat gibt man Isopropanol (100 ml), wobei sich ein schwach-gelber Niederschlag abscheidet, der abfiltriert, mit Isopropanol (5 ml) gewaschen und getrocknet wird. Man erhält 2,6g des HCI-Salzes (amorphes Pulver; geschätzte Reinheit 95%).

Eine Lösung des95%igen Hydrochlorids (Ig) in Wasser (4 ml) wird mit NaHCO₃ (200 mg) auf pH 6,5 eingestellt und 30 min gerührt. Die während des Rührens abgeschiedenen Kristalle werden abfiltriert, mit Wasser gewaschen (2 χ 5 ml) und im Vakuum getrocknet, wobei man 710 mg 1-1H (in Form des Zwitterions) in Form von schwach-gelben Prismen erhält. Schmelzpunkt: >185°C (Zersetzung).

fiemäß der Mikroanalyse handelt es sich um das Trihydrat.

-44- 748

cm

1780, 1695, 1660, 1630, 1610.

UV:

max

U) 227 (22000), 290 (23000).

NMR: δ

DMS0-d,-+D_0 b Z

5,61 (1H, d,

3,45 (2H, br, s, 2-H); 3,9 (3H, s, OCH₃); 4,99 (1H, d, J=4,5 Hz, 6-H) ; 5,16 (2H, d, J=7Hz, CH₃N⁺ J=4,5 Hz, 7-H); 5,8 (1H, d-t, J=16 und 7Hz, 3-CH=CH); 6,93 (1H, d, J=16Hz, 3-CH); 8,18 und 8,89 (jeweils 2H, d, J=7Hz, Py-H).

Analyse für C2iH2oNi	jO6S2	3H2O:	H	N	S
	C		4,38	18,72	10,71
ber.:	42,	14	4,35	18,86	11,00
gel:	42,	41

* Säule, Lichrosorb RP-18,4 χ 300mm: Mobile Phase, 0,OTM Phosphatpuffer (pH7,21/CH₃OH = 85/13: Detection, Uv (254nm).

Verfahren 2

Wenn kristallines 1-1H, erhalten gemäß Verfahren 1, vorliegt, ist es möglich, die kristalline Zwitterionen-Form von 1-1H direkt aus dem rohen 1-1 H-Hydrochlorid durch Animpfen mit einigen Kristallen des reinen 1-1H zu erhalten.

Eine Lösung des€5%igen Hydrochlorids (250mg) in Wasser (1 ml) wird mit Kohle-behandelt Die Lösung wird mit NaHCO₃ (60 mg) auf pH 6,5 eingestellt und mit Kohle entfernt. Das Filtrat wird mit einigen der gemäß Verfahren 1 erhaltenen Kristalle angeimpft und über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Die abgeschiedenen Kristalle werden abfiltriert, mit Wasser gewaschen (2 χ 2 ml) und bei vermindertem Druck getrocknet, wobei man 170 mg (Rückgewinnung 80%) 1-1H in Form schwach-gelber Prismen (Zwitterionen-Form) erhält. Schmelzpunkt: > 185°C (Zersetzung). Dieses Produkt ist identisch mit dem gemäß Verfahren

1 erhaltenen Produkt (gemäßlR, UV, NMR).

Die kristalline Zwitterionen-Form der Verbindung 1-1H ist in Wasser schwach löslich (6 mg/ml in Kochsalzlösung bei 23⁰C).

Beispiel 20 · .

J¹V

CONH

CH=CH-CH₂-

I-1K

*E

7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(3-hydroxymethylpyridinio)-1-propenyl]-3-cephem-4-carboxylat (1-1 K) (E-Isomeres) ·

A. Diphenylmethyl-y-^-fB-amino-i^^-thiadiazol-S-yO-Z-methoxyiminoacetarnidöl-S-tS-lS-hydroxyrnethylpyridiniol-ipropenyl]-3-cephem-4-carboxylatjodid (Ε-Isomeres) (XII-1 K)

Zu einer Lösung von IX-I (Ε-Isomeres, 1,79g, 2,5mMol) in 2,5ml CH₃OH und 7,5ml CH₃CN gibt man 3-Hydroxymethylpyridin (545mg, 5mMol) und rührt die Mischung 3h bei Raumtemperatur. Die Reaktionsmischung gießt man unter heftigem Rühren in Ethylacetat (100ml). Der erhaltene Niederschlag wird abfiltriert, mit einem geringen Volumen Ethylacetat gewaschen und getrocknet, wobei man 2,06g (100%) derTitelverbindung XII-1 K als braungelbes Pulver erhält. Schmelzpunkt: 170-180"C (Zersetzung).

KBr max

-1

cm ' 1780, 1725, 1675, 1615, 1530, 1385, μ225, 1040, 750, 700.

max

in nm (E

1% 1 cm

) 290 (196

-45- 748

NMR: δ (DMSCHD₂O) in ppm 3,7 (2H, br.s, 2-H); 3,91 (3H,

s, OCH₃); 4,70 (2H, s, Py-CH₂-OH); 5,28 (2H, m, , . ' CH₂-N⁺); 5,23 (1H, d, J=5Hz, '

6-H); 5,90 (1H, d, J=5Hz, 7-H) ; 6,34 (1H, m, 3-CH=CH); 6,86 (1H, d, J=IOHz, 3-CH);/ 6,89. (1H, S, CHPh₂); 7,35 (TOH, m, Ph-H); 7,9-8,9 (4H, m, Py-H).

B. y-K-lS-Amino-I.Z^-thiadiazol-S-ylJ^-methoxyiminoacetarnidoJ-S-tS^S-hydroxyrnethylpyridiniol-i-propenyll-S-cephem^- carboxylat (1-1 K) (E-lsomeres)

Eine Mischung von XII-IK (Ε-Isomeres, 2,0g, 2,4mMole) und Natriumbisulfit (1 g) in 85%iger HCOOH (10 ml) rührt man 2 h bei Raumtemperatur. Die Reaktionsmischung wird unter vermindertem Druckauf ca. 5 ml eingeengt. Der ölige Rückstand wird unter heftigem Rühren in Aceton (100ml) gegossen. Der Niederschlag wird abfiltriert, mit einer geringen Menge Aceton gewaschen und getrocknet, wobei man 1,1 g eines gelbbraunes Pulvers erhält. Dieses wird mittels Säulenchromatographie gereinigt (unter Verwendung einer Füllung von PrepPAK-500/C_1B-Patronen [Waters]). Man erhält 283mg (22%) 1-1K als amorphes Pulver. Kristallisierung des Pulvers aus 4N H₂SO₄ und Aceton liefert 144mg der Titelverbindung 1-1K in Form farbloser Nadeln. Schmelzpunkt: 185-188⁰C (Zersetzung).

IR: - v^KBr cm"¹ 1775, 168Osh, 1660, 1630, 1.225, 1045, max

850.

ITV. 3 tPhosphatpuffer, ρΉ 7) ₁₉.

^uv· max . nm (EJ.°_cm) 236,5 (283),

275 sh (280),

292,5 (330). NMR: δ (D₂O) in ppm 3,75 ₍₂h, s, 2-H); 4,18 (3H, s,

. OCH₃); 4,9 7 (2H, S, Py-CH₂OH); 5,35 (1H, d, J=4Hz, 6-H); 5,43 (2H, d, J=6,5Hz, CH₂-N⁺); 5,92 (1H, d, J=Hz, 7-H); 6,18 (1H, d-t, J=16Hz, J=6,5Hz, 3-CH=CH-); 6,97 (1H/ d, J=16Hz, 3-CH); 8,13 (1H, d-d, J=8Hz, J=6Hz, Py-H); 8,60 (1H, d, J=8Hz, Py-H); 8,84 (1H, d, J=6Hz, Py-H); .8,90 (1H, s, Py-H).

-46- 748 32

Beispiel 21 <

XJ

CONH

OCH.

CH=CH-CH₂-

COC

onhch-

I-IM

cephem-4-carboxylat (1-1 M) (E-lsomeres)

Eine Mischung von Diphenylmethyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-(3-jod-1-propenyl)-3-cephem-4-carboxylat (IX-1) (E-lsomeres, 450mg, 0,62 mMol) und 4-N-Methylcarbamoylpyridin (hergestellt gemäß dem Verfahren von M.Samejima, Yakugaku Zasshi, 80,1706 [1960]) (215mg, 1,58mMole) in Acetonitril (2ml) wird unter Stickstoffatmosphäre 5h bei Raumtemperatur gerührt. Man verdampft die Mischung bei vermindertem Druck und verreibt den Rückstand mit Ether, wobei man 530 mg des quaternären Salzes erhält. Eine Mischung aus diesem Feststoff und Natriumbisulfit (150mg) in 85%iger Ameisensäure (2ml) wird 4h gerührt und anschließend 30min auf 40°C erhitzt. Die Mischung wird bei vermindertem Druck verdampft. Der Rückstand wird mit Aceton verrieben und das Rohprodukt wird abfiltriert. Das Rohprodukt wird an einer HP-20-Säule (1,5 x 18cm) chromatographiert. Die Säule wird mit Wasser und 30%igem wäßrigem Methanol eluiert. Das methanolische Eluat wird unter vermindertem Druck verdampft und der Rückstand wird gefriergetrocknet, wobei man 140mg eines amorphen Pulvers erhält, das mittels HPLC weitergereinigt wird (Säule: Lichrosorb RP-18; Lösungsmittel: 15%iges CH₃OH). Das HPLC-Eluatwird gefriergetrocknet, wobei man 60mg (18%) der Titelverbindung 1-1M erhält. Schmelzpunkt: 180-183°C (Zersetzung). Geschätzte Reinheit: 80%.

UV:

max

cm"¹ 1760, 1660, 1600.

(pH

max

230 (22100), 286 (22100).

NMR:

δ (D₂O)

in ppm

Beispiel 22

3,08 (3H, s, (2H, S, 2-H)

CONHCH₃); 3,72

4,16 (3H, s, OCH₃); 5,35 (1H„ d, J=4,5Hz, 6-H); 5,95 (1H, d, J=4,5Hz, 7-H); 7,00 (.1H, d, J= 16Hz, 3-CH); 8,35 (2H, d, J=6Hz, Pyridin-H); 9,05 (2H, d, J=16Hz, Pyridin-H).

CONH

OCH.

I-IN

ooh

COO¹

*E/Z = 7/1

7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-{4-carboxypyridinio)-1-propenyl]-3-cephem-4-carboxylat (I-IN)

Zu einer Suspension von Isonikotinsäure (340mg, 2,8mMole) in trockenem DMF (3,5ml) gibt man unter Rühren und unter Stickstoffatmosphäre N,O-Bis-(trimethylsilyl)-acetamid (0,7 ml, 2,8 mMole). Zu der erhaltenen klaren Lösung gibt man auf einmal Diphenylmethyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-(3-jod-1-propenyl)-3-cephem-4-carboxylat (IX-1) (Ε-isomer, 720 mg, 1 mMol). Die rote Lösung wird 1,5 h bei Raumtemperatur gerührt. Die Reaktionsmischung tropft man unter Rühren zu einer gesättigten Natriumchlorid lösung (50 ml), die Natriumthiosuifat (150mg) enthält. Der gelbe Niederschlag

-47- 748 32

wird abfiltriert, mit Wasser gewaschen und getrocknet, wobei man 722 mg eines schwach-gelben Pulvers erhält. Das Pulver (700mg) und Natriumbisulfit (70mg) werden in 85%iger Ameisensäure (5ml) gelöst. Die Lösung läßt man 1,5h bei Raumtemperatur stehen. Die Mischung wird in toluol (50 ml) suspendiert und konzentriert. Der Rückstand wird mit Aceton (70 ml) verrieben und der Niederschlag wird abfiltriert, wobei man 421 mg eines gelben Pulvers erhält. Dieses rohe Pulver (400mg) suspendiert man in Wasser (2ml) und zu dieser Suspension gibt man Natriumbicarbonat. Die erhaltene dunkle Lösung wird an einer mit PrepPAK/Cia-Patrone (Water's System 500) gefüllten Säule (50 ml) adsorbiert. Die Säule eluiert man mit Wasser (200ml). Das Eluat wird in 10 Fraktionen (jeweils 20ml) aufgefangen und die gewünschten Fraktionen (Fraktionen 4-7) werden vereinigt, mit2N Chlorwasserstoffsäure auf pH 3 angesäuert und eingeengt. Der Rückstand wird mit Aceton (30 ml) verrieben. Abfiltrieren des Niederschlags liefert 201 mg (37%) der Titelverbindung 1-1N als gelbes Pulver. E/Z = 7/1; Reinheit 80%. Schmelzpunkt: >189°C (Zersetzung).

^KBr max

cm

-1

1770, 1665, 1600.

UV: Λ (Phosphatpuffer, pH 7) in nm (S)

HlclX

227 (22500), 290 (22100).

NMR: δ (D₂O+NaHCO₃) in ppm

Beispiel 23

CONH

OCI

I-

3,7 (2H, br.s); 4,15 (3H, s) ; 5,32 (1H, d, J=4Hz); 5,39 (2H, d, J=6Hz); 6,14 (1H, d-t, J=15,5 und 6Hz); 7,03 (IH, d, J=15,5Hz); 8,31 (2H, d, J=7Hz); 8,9-4 (2H, d, J= 7Hz),

*E

7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-(Z)-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(2,3-cyclopentenopyridinio)-1-propenyl]-3-cephem-4-carboxylat (1-10) (E-Isomeres)

Eine Mischung von Diphenylmethyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-(3-jod-1-propenyl)-3-cephem-4-carboxylat (IX-1) (E-Isomeres, 450mg, 0,62mMol) und 2,3-Cyclopentenopyridin (217 mg, 1,83mMol) in Acetonitril (2 ml) rührt man unter Stickstoff atmosphäre 4 h bei Raumtemperatur. Nach dem Verdampfen unter vermindertem Druck verreibt man die Mischung mit Ether, wobei man 560mg des quaternären Salzes erhält. Eine Mischung dieses Feststoffes mit85%iger Ameisensäure (2 ml) wird unter Stickstoff 3 h bei Raumtemperatur gerührt und anschließend 30 min auf 40⁰C erhitzt. Die Mischung verdampft man bei vermindertem Druck. Verreiben des Rückstandes liefert 391 mg Rohprodukt, das durch Chromatographie an einer HP-20-Säule (1,5 χ 18cm) gereinigt wird. Die Säule wird mit Wasser und 30%igem wäßrigem Methanol eluiert. Verdampfen des methanolischen Eluats bei vermindertem Druck und anschließendes Gefriertrocknen liefert '.üOmg eines amorphen Pulvers, das weiter mittels HPLC gereinigt wird (Säule: Lichrosorb; Lösungsmittel: 10%iges CH₃OH). Das HPLC-Eluat wird gefriergetrocknet, wobei man 50 mg (15%) der Titelverbindung 1-10 erhält. Schmelzpunkt: >190°C (Zersetzung). Geschätzte Reinheit: 75%.

-48- 748 32

IR: v^KBr cm"¹ max

1765, 1670, 1600.

UV: Λ (Phosphatpuffer, pH 7) in nrn (ί) 235 (20000) ,

IHcIX

283 (25000).

NMR:. δ (D₂O+NaHCO₃) in ppm

Beispiel 24

CONH

2,2-2,6 (2H, m, '-₃ 3,1 - 3,6 (4H, m, -CH₂-); 3,72 (2H, s, 2-H); 4,17 (3H, 3H, OCH₃); 5,33 (1H, d, J=4,5Hz, 6-H); 5,90 (1H, d, J=4,5Hz, 7-H); 6,75 (1H, d, J=16Hz, 3-CH); 7,65 - 8,2 (3H, m, Pvridin-H).

CH=CH-CH₂-l// V)-COOH

I-2N

7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-(Z)-ethoxyiminoacetamido]-3-[3-(4-carboxypyridinio)-1-propenyl]-3-cephem-4-carboxylat (I-2N, E-Isomeres)

7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-(Z)-ethoxyiminoacetamido]-3-[3-(4-carboxypyridinio)-1-propenyl]-3-cephem-4-carboxylat (I-2N, Z-Isomeres)

Zu einer gekühlten Mischung von BSA (1,0 ml, 4,12 mMole) und Isonikotinsäure (506mg, 4,12 mMole) gibt man IX-2 (hergestellt gemäß Herstellungsbeispiel 21 )(1,Og, 1,37 mMol) und rührt die Mischung unter Stickstoff 2 h bei Raumtemperatur. Man gießt die Mischung in 10%iges Na₂S₂O₃ (20ml), wobei 1,3g des quaternären Salzes ausfallen, das abfiltriert, mit Wasser gewaschen und getrocknet wird. Eine Mischung dieses Feststoffes und Natriumbisulfid (0,3g) in Ameisensäure (98%, 5ml) wird 1 h auf 40⁰C erhitzt und unter vermindertem Druck verdampft. Den Rückstand verreibt man mit Aceton. Abfiltrieren liefert 900 mg des Rohprodukts (E-Propenylisomeres:Z-Propenylisomeres = 2:1). Die Auftrennung des Isomeren erfolgt mittels HPLC (Säule: Lichrosorb; Lösungsmittel: 15%ige CH₃OH). Die schneller laufenden Fraktionen werden gesammelt, unter vermindertem Druck verdampft und gefriergetrocknet, wobei man das E-Propenylisomere von I-2N erhält (44mg; Ausbeute 6%). Auf ähnliche Weise liefern die langsamer laufenden Fraktionen das Z-Propenylisomere von I-2N (32 mg; Ausbeute 4%)

I-2N, E-isomer: Schmelzpunkt: >200⁰C (Zersetzung).

IR:

UV: NMR:

KBr max

cm

-1

1765, 1660, 1620, 1380.

λ (Wasser) in nm (Z) 228 (22200, 291 (23600).

ΙΠ3.Χ

δ (D₂O) in ppm 1,45 (3H₇ t, J=6Hz, CH₂CH₃); 3,72

(2H, s, 2-H); 4,45 (2H, q, CH₂CH₃ 5,40 (1H, d, J=4Hz, 6-H); 5,90 (1H, d, J=4Hz, 7-H); 7,05 (1H, d, J=15Hz, 3-CH); 8,30 (2H, d, J=6Hz, Py-H); 8,95 (2H, d, J=SHz, Py-H).

-49- 748 32

Ι-2Ν, Z-isomer:

Schmelzpunkt: >200°C (Zersetzung).

IR: v^KBr cm"¹

ΙΓ13.Χ

1760, 1660{sh), 1620, 1370

UV: Λ (Phosphatpuffer, pH 7) in nm (£) 225 (224ΟΟ),

ΓΩ.3.Χ *-

275 (sh, 16000).

NMR: δ

in ppm 1,45 (3H, t, J=7Hz, CH₂CH₃);

3,50 (1H, d, J=17Hz, 2-H); 3,75 (1H, d, J=17Hz, 2-H); 5,38 (1H, d, J=4Hz, 6-H); 5,95 (1H, d, J=4Hz, 7-H); 6,62 (1H, d, J=11Hz, 3-CH); 8,35 (2H, d, J=6Hz, Py-H); 8,92 (2H, d, J=6Hz, Py-H).

Beispiel 25

CH=CH-CH--2

I-3H

*E

7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-(propen-3-yl-oxy-imino)-acetamido]-3-[3-(4-carbamoylpyridinio)-1-propenyl]-3-cephem-4-carboxylat (I-3H) (E-Isomeres)

Zu einer Lösung von 35mg (0,08MoI) 7-Amino-3-[3-(4-carbamoylpyridinio)-1-(E)-propenyl]-3-cephem-4-carboxylathydrochlorid in 2ml 50%igem wäßrigem Aceton gibt man 52 mg 2-[5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl]-2-(propen-3-yl-oxyimino)-acetylchlorid-hydröchlorid (gemäß Herstellungsbeispiel 25) und stellt den pH der Mischung mit 2N Na₂COa auf 6,5-7,0 ein. Die Mischung wird 1 h bei Raumtemperatur gerührt, mit 1N HCI auf pH 2 angesäuert und unter vermindertem Druck eingeengt. Der Rückstand wird dann einer Säule mit HP-20-Harz chromatographiert, die mit 300ml Wasser und 30%igem CH₃OH-H₂O eluiert wird. Die das Produkt enthaltenden Fraktionen werden vereinigt und unter vermindertem Druck verdampft. Der Rückstand (73 mg) wird mittels einer Umkehrphasensäule deren Träger einer PrepPAK-500/Ci_S-Patrone (Waters, 30 ml) entnommen wurde, gereinigt. Die Säule wird nacheinander mit Wasser, 5%igem CH₃OH, 10%igem CH₃OH und 20%igem CH₃OH gereinigt. Die das Produkt enthaltenden Fraktionen werden vereinigt und lyophilisiert, wobei man 26mg (62%) der Titelverbindung I-3H erhält. Schmelzpunkt: 160°C (Zersetzung).

IR:

^KBr

IHäX

cm

3400, 1765, 1680, 1605, 1400.

UV: λ (Phosphatpuffer, pH 7) in nm (£)

ΪΤ13.Χ

226 (24600), 288 (22800).

BNR:

δ (D₂O) in ppm 3,75 (2H, s, 2-H); 5,41 (1H, d,

J=5Hz, 6-H); 5,50 (4H, m, -CH₂N⁺ und CH=CH₂); 5,98 (1H, d, J=5Hz, 7-H); 6,20 (1H, m, 3-CH=CH); 7,09 (1H, d, J=17Hz, 3-CH); 8,50 (2H, d, J=7Hz, Py-H); 9,16 (2H, d, J=7Hz, Py-H). " . '

-50- 748 32

Beispiel 26

CONH

I-4H

carboxyiat (I-4H) (E-lsomeres)

Zu einer Lösung von 86mg (

carboxylathydrochlorid (XXlI-H) in 2ml 50%igem wäßrigem Aceton gibt man 63 mg 2-Propargyloxyimino-2-(5-amino-1,2,4-thiadiazol-S-yD-acetylchlorid-hydrochlorid (gemäß Herstellungsbeispiel 26). Die Suspension wird mittels 2N Na₂CO₃ bei pH 6,5-7,0 gehalten und anschließend 1 h bei Raufntemperatur gerührt. Die Reaktionsmischung wird mit 1N HCI auf pH 2 angesäuert und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wird mit 30 ml Wasser verdünnt, mit NaHCO₃ neutralisiert und filtriert. Das Filtratwird auf eine Säule gegeben, die mit einem einer PrepPAK-SOO/C^-Patrone (Waters) entnommenen Umkehrphasenträger (30ml) gefüllt war. Die Säule wird nacheinander mit Wasser, 5%igem CH₃OH, 10%igem CH₃OH und 20%igem CH₃OH eluiert. Die das Produkt enthaltenden Fraktionen werden vereinigt und lyophilisiert, wobei man 13 mg (12%) der Titelverbindung I-4H erhält. Die . geschätzte Reinheit ist 70%. Schmelzpunkt: 160⁰C.

IR:

KBr

max

cm

-1

3400, 2120, 1765, 1680, 1610.

UV: λ (Phosphatpuffer, pH 7) in nm (Z)

229 (24000), 288 (21200),

NMR.:

in ppm 3,78 (2H, s, 2-H); 5,15 (2H, d, J=IHz, -CH₂-C=CH); 5,40 (1H, d, J=5Hz, 6-H); 5,50 (2H, m, CH-N⁺); 5,98 (1H, d, J=5Hz, 7-H); 6,20 (1H, m, 3-CH=CH); 7,05 (1H, d, J=17Hz, 3-CH); 8,50 (2H, d, J=7Hz, Py-H); 9,16 (2H, d, J=7H, Py-H).

Beispiel 27

N ; p-C

JJK

CONH

CH=CH-CH₂-N^/ \y_ CONH₂

I-5H

*E

7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadίazol-3-yl)-2-cyclopentyloxy-iminoacetamido]-3-[3-(4-carbamoylpyridinio)-1-propenyl3-3-cephem-4-carboxyiat (I-5H) (E-lsomeres)

Zu einer Lösung von 139mg (0,31 mMol) 7-Amino-3-[3-(4-carbamoylpyridinio)-1-propenyl]-3-cephem-4-carboxylathydrochlor-id in 3,5ml 50%igem wäßrigem Aceton gibt man unter Eiskühlen und unter Rühren portionsweise 120 mg (0,44mMol) 2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-cyclopentyloxyiminoacetylchlorid-hydrochlorid (gemäß Herstellungsbeispiel 27). Die Mischungg wird mit2N Na₂CO₃ (0,9 ml) auf pH 6,5-7,0 eingestellt und 1 h bei 10⁰C gerührt. Die Reaktionsmischung säuert man dann mit 1N HCI auf pH 2 an und verdampft sie unter vermindertem Druck. Der Rückstand wird an einer Säule mit HP-20-Harz(20ml) chromatographiert und nacheinander mit 300ml Wasser und 30%igem CH₃OH-H₂O eluiert. Die das Produkt enthaltender Fraktionen beahandelt man mit 60 ml Aceton, wobei man 111 mg (83%) der Titelverbindung I-5H erhält. Schmelzpunkt: 16O⁰C (Zersetzung). Geschätzte Reinheit: 70%. ;.

-51- 748

IR: v*™;· cm 3400, 1770, 1680, 1605, 1530.

ΠΙα.Χ

^{UV: A}™ = ^ (Phosphatpuffer, ^pH 7) in run (S) 224 (23300) ,

286 (24600).

NMR: δ (DMSO-dg) in ppm 1,70 (8H, br.s, Η-/Π );

H 4,68 (1H, br.s.

5,05 (1H, d, J=5Hz, 6-H); 5,30 (2H, m, CH₃N⁺); 5,67 (1H, d-d, J=5Hz und 7Hz, 7-H); 6,20 (1H, m, 3-CH=CH); 7,08 (1H, d, J=17Hz, 3-CH); 8,34 (2H, d, J=7Hz, Py-H); 9,11 (2H, d, J=7Hz, Py-H); 9,38 <1H, d_T J=7Hz, 7-NH)

Beispiel 28

CONH-T Τ >1 CH₂COOH

I-1P *£

carboxylat (1-1 P) (E-Isomeres)

A. Diphenylmethyl-y-K-fB-Amino-I^Athiadiazol-S-ylJ^-methoxyiminoacetamidol-S-IS-IS-carboxymethylpyridinioJ-i- propenyll-S-cephem^-carboxylat (XII-1P, Jodid, E-Isomeres)

Zu einer Suspension von S-Carboxymethylpyridin-hydrochlorid (0,-9g, 5mMole) in 10ml CH₂CI₂ gibt man N,O-Bis-(trimethylsilyl)-acetamid (4,97ml, 18mMole). Man rührtdie Mischung bei Raumtemperatur, bis man eine klare Lösung erhält. Zu dieser Lösung gibt man IX-I (1,79g, 2,5mMole) und läßt die Mischung bei Raumtemperatur stehen. Nach 3h gibt man 3ml CH₃OH zu der gekühlten Mischung und verdampft die Lösung im Vakuum, wobei man ein Öl erhält, das mit Ethylacetat verrieben wird. Dies ergibt 2,85 g der Titel verbindung XIi-I P als gelbbraunes Pulver. Schmelzpunkt: 161°C (Zersetzung).

-52- 748 32

IR: v^KBr cm"¹ max

1780, 1720, 1675, 1630, 1530, 1385, 1225, 1045, 755, 700.

UV: Λ (C₀H₁-OH) in nm (e]^% ) 295 (188).

max 2b 1 cm

NMR: δ (DMSOh-D₂O) in ppm 3,70 (2H, br.S, 2-H) ; 3,90

(5H, S, OCH₃ und Py-CH₂CO); 5,25 (3H, m, -CH₂N⁺ und 6-H) ; 5,92 (1H, d, J=4,5Hz, 7-H) ; 6,35 (1H, m, 3-CH=CH-) ; 6,90 (1H, d, J=16Hz, 3-CH); 6,92 (IH, S, CHPh₂); 7,35 (10H, m, Ph-H); 8,8 - 9,0 (4H, m, Py-H).

B. y-ta-

carboxylat (MP] (E-lsomeres)

Eine Mischung von XIl-IP (Jodid) (2,28g) und Natriumblsulfit (1,1 g)in 85%iger HCOOH (10ml) rührtman 2h bei Raumtemperatur. Die Reaktionsmischung engt man unter vermindertem Druck auf ca. 5 ml ein. Der ölige Rückstand wird mit Aceton (100ml) verrieben, wobei man 1,22g des Rohprodukts erhält, das mittels Säulenchromatographie (HP-20,420ml) gereinigt wiTd. Manerhält 533mg der Titelverbindung i-1P (38% aus iX-1) als schwach-gelbes, amorphes Pulver. Schmelzpunkt: 165⁰C (Zersetzung).

1770, 1670, 1600, 1530, 1385, 1140, 1040.

_λPhosphatpuffer (pH 6,2) max

I cm

₂₃₄

277sh (390), 290 (402).

NMR: δ (D₂OH-NaHCO₃) in ppm

3,78 (2H, s, 2-H); 3,92 (2H, s, Py-CH₂CO); 4,22 (3H, s, OCH₃); 5,40 (1H, d, J=4Hz, 6-H); 5,44 (2H, d, J=6,5Hz, -CH₂-N⁺); 5,97 (1H, d, J=4Hz, 7-H) ; 6,20 (TH, d-t, J=16 und 6,5Hz, 3-CH=CH); 7,08 (1H, d, J=16Hz, 3-CH); 8,11 (1H, d-d, J=8 und 7Hz, Py-H₅); 8,53 (1H, d, J=8Hz, Py-H₄); 8,82 (1H, d, J=7Hz, Py-H₆); 8,86 (1H, s, Py-H₂).

-53- 748 32

Beispiel 29

CONH

& V^ CH=CH-CH--

-CH₂COOH

I-IQ

*E

carboxylat (1-1 Q) (E-Isomeres)

A. Diphenylmethyl-y-^-fB-amino-i^^-thiadiazol-S-yO^-methoxyiminoacetamidol-S-P-l^carboxymethylthiopyridiniol-ipropenyl]-3-cephem-4-carboxylat (XII-1Q, Jodid, E-Isomeres)

Zu einer Suspension von 4-Carboxymethylthiopyridin (0,88g,5mMol)in 10 ml CH₂CI₂ gibt man N^-Bis-ftrimethylsilyll-acetamid (5ml, 18mMole) und rührt die Mischung bei Raumtemperatur, bis man eine klare Lösung erhält. Zu der Lösung gibt man IX-1 (E-Isomeres 1,79g, 2,5mMole) und läßt die Mischung bei Raumtemperatur stehen. Nach 3h gibt man 3ml CH₃OH zu der kalten Mischung und verdampft die Lösung im Vakuum, wobei man einen öligen Rückstand erhält, der mit Ethylacetat verrieben wird. Dies liefert 2,43g der Titelverbindung XII-1Q (Jodid) als gelbbraunes Pulver

Schmelzpunkt: 155⁰C (Zersetzung).

KBr max

cm"¹ 1780, 1720, 1670, 1625, 1525, 1385, 1225, 1115, 1040, 755, 700.

^{ÜV: A}max <^C2^H5^{OH) in}

<^E?^%cm>

312 (299) .

NMR: δ (DMSO-dg+D₂O) in ppm 3,70 (2H, br.s, 2-H); 3,93

(3H, s, OCH₃); 5,07 (2H, m, CH₂-N⁺); 5,23 (1H, d, J=5Hz, 6-H); 5,90 (1H, d, J=5Hz, 7-H); 6,29 (1H, m, 3-CH=CH); 6,87 (1H, d, J=16Hz, 3-CH); 6,91 (1H, s, CHPh₂); 7,35 (1OH, m, Ph-H); 7,88 und 8,58 (jeweils 2H, d, J=6Hz, Py-H).

B. 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(4-carboxymethylthiopyridinio)-1-propenyl]-3-cephem-4-carboxylat (I-1Q) (E-Isomeres)

Eine Mischung von XII-1 Q (Jodid, 2,43g) und Natriumbisulfit (1,1 g) in 85%iger HCOOH (1OmI) rührt man 2 h bei Raumtemperatur. Die Reaktionsmischung engt man unter vermindertem Druck auf ca. 5 ml ein. Der ölige Rückstand wird mit Aceton (100 ml) verrieben, filtriert und getrocknet, wobei man ein Rohprodukt (1,39g) erhält, das mittels Säulenchromatographie (HP-20,20 ml) gereinigt wird. Man erhält 577 mg der Titelverbindung 1-10.(39% aus IX-1) als schwach-gelbes, amorphes Pulver. Schmelzpunkt: 188⁰C (Zersetzung).

-54- 748 32

IR: v^KBR cm"¹ 1765, 1670, 1625, 1530, 1380, 1110, max

1035.

„, > Phosphatpuffer (pH 6,2) ₁ g. ^U max nm (E.]°_cm) 234 (459),

310 (678) .

NMR: δ (D₂O+NaHCO₃) in ppm 3,79 (2H, br.s., 2-H); 4,10

(2H, s, S-CH₂); 4,23 (3H, s, OCH₃); 5,25 (2H, d, J=6,5Hz,

CH₂-N⁺); 5,39 (1H, d, J=4,0Hz, 6-H); 5,97 (1H, d, J=4Hz, 7-H) ; 6,18 (1H, d-t, J=15,5Hz und 6,5Hz, 3-CH=CH); 7,05 (1H, d, J=15,5Hz, 3-CH); 7,84 und 8,55 (jeweils 2H, d, J=7Hz, Py-H).

Beispiel 30

CONH

OCH.

OH=CH-CH₂-N

I-1A

*E/Z 7/1

carboxylatsulfat (1-1A, Sulfat)

A. Diphenylmethyl-7-[2-(5-amiπo-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-{1-methylpyrrolidin!o)-1-propeπyl]-3-cephem-4-carboxylat (XII-1 A, Jodid)

In eine kalte Lösung von Diphenylmethyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-(3-jodpropenyl)-3-cephem-4-carboxylat (IX-1) gemäß Herstellungsbeispiel 14(21,5g, 30 mMole) in Ethylacetat (300 ml) tropft man eine Lösung von 1-Methylpyrrolidin (2,55g, 3OmMoIe) in Ethylacetat (30ml) während 1 h unter Rühren bei -5-O⁰C. Nach weiterem 10minütigem Rühren wird der erhaltene Niederschlag abfiltriert und mit Chloroform (200ml) gewaschen, wobei man 23,0g (95,8%) der Titelverbindung (IX-1 A, Jodid) erhält. Schmelzpunkt: > 175°C (Zersetzung).

ΓΠ.3.Χ

cm

3300, 1780, 1730, 1685, 1615.

(C₀H₁-OH) in nm (e'° ) δ ο 1 cm

218 (435, 295 (188).

B. Diphenylmethyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetam^dol·3-[3-(1-methylpyrrolidinio)-1-propenyl]-3-cephem-4-carboxylat (XII-IA, Chlorid)

Man löst die Verbindung XII-1 A (Jodid) (23 g, 28,7 mMole) in einer Mischung aus Aceton und Methanol (1:1, 230 ml) und gibt die Mischung auf eine Amberlite IRA-410-Säule (Chloridform, 230 ml), die mit dem gleichen Lösungsmittelgemisch vorbehandelt war. Die Säule wird mit dem Lösungsmittel entwickelt und die die gewünschte Verbindung enthaltenden Fraktionen werden vereinigt und zu einem öligen Rückstand eingeengt, der mit Ethylacetat (300ml) verrieben wird. Man erhält 17,9g (87,7%) der Titelverbindung (X1I-1A, Chlorid). Schmelzpunkt: 190⁰C (Zersetzung).

-55- 748 32

KBr max

cm

-1

3380, 1780, 1680, 1620.

^{ÜV: A}max ^{C2^H5^OH) in nm (E=] ^% _cm)

220 (369) , 290 (232).

C. 7-[2-(5-amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(1-methylpyrrolidinio)-1-propenyl]-3-cephem-4-carboxylatsulfat (1-1A, Sulfat)

Eine Mischung der Verbindung XII-1A (Chlorid; 17,8g, 25mMole) in 85%iger Ameisensäure (178ml) wird unter Stickstoffatmosphäre 2 h bei Raumtemperatur gerührt. Man verdampft die Mischung im Vakuum und verreibt den öligen Rückstand mit Aceton, wobei man 9,80g der rohen Verbindung 1-1A erhält. Einengen des Filtratsund der Acetonwaschwässer ergeben weitere 2,95 g an rohem 1-1A. Die zwei Rohproduktchargen werden vereinigt und mit 2N HCI (11 und 0,51) extrahiert. Die vereinigten Extrakte werden an Diaion HP-20-Harz(1,5l-Säule) adsorbiert. Die Säule wird mit Wasser und 30%igem wäßrigem Methanol eluiert. Die Fraktionen werden vereinigt und im Vakuum verdampft, wobei man einen öligen Rückstand erhält, der nacheinander mit Isopropanol (200ml) und Aceton (200ml) verrieben wird. Man erhält 7,09g eines scwach-gelben Pulvers. Dieses Material (6,80g) löst man in Wasser (20ml) und unterwirft es dann einer Säulenchromatographie, wobei die Säule mit PrepPAK-500/C₁₈-Patrone (90 ml) gefüllt war. Als Eluierungsmittel verwendet man Wasser und 10%iges wäßriges Methanol. Das Eluatwird in 20ml-Fraktionen gesammelt, wobei man mittels HPLC (Säule, NucleocilSSC-ODS-262,8 χ 100mm; mobile Phase, 0,01 M Phosphatpuffer (pH7,2)/CH₃OH = 90:10; Detektion, UV (254nm) verfolgt. Die Fraktionen 4 bis 10 werden vereinigt, unter vermindertem Druck verdampft und lyophilisiert, wobei man 2,28g eines gelben Pulvers (E/Z = 7/1, Reinheit 70%) erhält [Charge 1]. Die Fraktionen 11 bis 85 werden in der gleichen Weise wie oben beschrieben aufgearbeitet, wobei man 3,27 g eines gelben Pulvers (E/Z = 5/1, Reinheit 70%) erhält [Carge 2]. Ein Teil der Charge 1 (1,0g) wird durch erneute Chromatographie an einer PrepPAK-500/C₁₈ Patrone (90ml)-Packung gereinigt. Die Säule wird nacheinander mit Wasser und 5%igem wäßrigem Methanol eluiert. Das die gewünschte Verbindung enthaltende Eluatwird eingeengt und lyophilisiert, wobei man 638 mg (E/Z = 7/1, Reinheit 80%) eines gelben Pulvers erhält. Ein weiterer Teil der Charge 1 (1,14g) wird in dergleichen Weise aufgearbeitet, wobei man 880mg (E/Z = 7/1, Reinheit 80%) eines gelben Pulvers erhält. Die beiden gereinigten Proben werden vereinigt und ein Teil davon (1,45g) wird in 1N Schwefelsäure (5 ml) gelöst. Die Lösung verdünnt man unter Rühren mit Aceton (315ml). Abfiltrieren des cremefarbenen Niederschlages liefert 1,48g derTiteiverbindung (1-1A, Sulfat) (E/Z = 7/1, Reinheit 80%). Schmelzpunkt: > 185°C (Zersetzung).

KBt* — 1 IR: v"™~ cm 3380, 3000, 1765, 1675, 1630, 1535,

Kl ei λ.

13 90, 1115.

^UV:' A^osphatpuffer (pH 7) _{nm (ξ)}

^ _(199ΟΟ)# 291,5 (22500)

: δ (D₂O+NaHCO₃) in ppm 2,36 (4H, br.,

3,15 (3H, s

3,62 (5H, br., 2-H und N

3,83 (1H, br., 2-H); 4,13 (2H, d, J=8Hz, CH₂N⁺); 4,22 (3H, s, OCH₃); 5,39 (1H, d, J=4,5Hz, 6-H); 5,96 (1H, d, J=4,5Hz, 7-H); 6,00 (1H, m, 3-CH=CH); 6,67 (1/8H, d, J=IOHz, 3-CH, eis); 7,04 (7/8H, d, J=16Hz, 3-CH, trans).

-56- 748

I-ID *E/2 10/1

A. Diphenylmethyl-T-tZ-tS-amino-i^^-thiadiazol-S-yO^-methoxyiminoacetamidol-S-tS-trimethylamrnonio-i-propenylJ-S-cephem-4-carboxylat (XXI-I D, Jodid)

Zu einer Lösung von 13,0g (19mMole) Diphenylmethyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-(3-jodpropenyll-S-cephem-^carboxylat (IX-1, aus Herstellungsbeispiel 10) in 38ml trockenem Ethylacetat gibt man 1,75ml (19,1 mMole) 1,1 N Trimethylamin in Ethylacetat bei -5°Cund rührt die Mischung 1 h bei —5°C. Der erhaltene Niederschlag wird abfiltriert, mit CHCI₃ gründlich gewaschen und getrocknet, wobei man 12,5g (88%) derTiteiverbindung (XIi-ID) in Form des Jodids erhält.

IR: v^KBr cm"¹ 3300, 1765, 1720, 1665.

UV: A (C₀H^OH) in nm [Z) 300 (18400).

B. Diphenylmethyl^-^-iB-amino-i^^-thiadiazol-S-yO^-methoxyiminoacetamidol-S-fS-trirnethylammonio-i-propenyll-S-cephem-4-carboxylat (XII-ID, Chlorid)

Das Jodid (Xll-1 D, 12,5 g) wird in 60 ml CH₃OH-Aceton (1:1 !gelöst und über eine mit einem lonenaustauscherharz [IRA-410 (CD, 125 ml] gefüllte Säule gegeben. Die Säule wird mit 300 ml CH₃OH-Aceton (1:1) eluiert. Das Eluatwird im Vakuum verdampft und mit 300ml Isopropylether verrieben, wobei man 10,4g (91 %) des quaternären Salzes (Xll-1 D, Chlorid) erhält.

IR: ν cm 3300, 1765, 1710, 1665.

in 3.x

UV: λ (C₀H₁-OH) in nm (£) 298 (15100).

C. y-^-iS-Amino-i^^-thiadiazol-S-yll^-methoxyiminoacetamidol-S-P-trirnethylammonio-i-propenyU-S-cephem^- carboxylat (1-1D, Sulfat, E-Isomeres)

Eine Lösung von 10,4g (16,OmMoIe) Xll-1 D (Chlorid) in 20,8 ml 85 %iger Ameisensäure läßt man 3 h bei Raumtemperatur stehen und engt sie dann im Vakuum ein. Der Rückstand wird mit 210ml Isopropanol behandelt, der Niederschlag wird abfiltriert. Der Feststoff (10,1 g) wird mit 210 ml Wasser verrieben und mit Natriumbicarbonat neutralisiert. Man filtriert die Suspension ab und chromatographiert das Filtratan einer HP-20-Säule (300 ml), die nacheinander mit Wasser (1 000 ml), 10%igem CH₃OH (200 ml) und 30%igem CH₃OH (150 ml) eluiert wird. Die das gewünschte Produkt enthaltenden Fraktionen werden vereinigt und unter vermindertem Druck eingeengt. Den Rückstand reinigt man durch Umkehrphasenchromatographie. Die Säule ist mit dem Inhalt einer PrepPAK-500/Cis-Patrone (Waters, 200 ml) gefüllt. Man eluiert nacheinander mit Wasser (600 ml) und 30%igem CH₃OH (200ml), und konzentriert anschließend die das gewünschte Produkt enthaltenden Fraktionen, wobei man 2,52g (18%) der Titelverbindung erhält. Eine Lösung des Zwitterions (1,5g) in 1N H₂SO₄(OmI) gibt man portionsweise zu 300 ml Aceton, filtriert den erhaltenen Niederschlag ab und trocknet ihn. Die Ausbeute an 1-1 D-Sulfat beträgt 1,42 g (80%). Das Verhältnis E/Z ist ungefähr 10/1, bestimmt mittels HPLC.

-57- 748 32

IR:

cm

— 1

3380, 1765, 1665

uv· A^phosP^hatP^uffer (p^{h 7}> imax

293 (22400).

NMR: δ (D₂O) in ppm 3,25 (9H, s, N⁺-CH₃); 3,94 (2H,. s,

2-H); 4,14 (2H, d, J=7Hz, CH₃N ⁺ ); 4,23 (3H, s, 0-CH₃); 5,42 (1H, d, J=4,5Hz, 6-H); 6,00 (1H, d, J=4,5Hz , 7-H); 6,23 (1H, d-t, J=7 und 16Hz, 3-CH=CH); 7,23 (IH, d, J=15Hz, 3-CH).

Beispiel 32

CONH

CH=CH-CH₂-N

COC

CONH-

I-IH

*E

7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(4-carbamoylpyridinio)-1-propenyl]-3-cephem-4-carboxylat (1-1H, E-Isomeres)

Zu einer Mischung von 7-Amino-3-[3-(4-carbamoylpyridinio)-1-(E)-propenyl]-3-cephem-4-carbonsäure-hydrochlorid (XXII-H, 397 mg, 1 mMol) und NaHCO₃ (168mg, 2 mMole) in wäßrigem DMF (Wasser, 3,5 ml und DMF, 7,5ml) gibt man Benzotriazol-1-yl-2-(5-amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetat (479mg, 1,5mMole) (aus Herstellungsbeispiel 28). Man rührt die Mischung 3,5 h bei Raumtemperatur. Die Reaktionsmischung wird mit3N HCI auf pH 3-4 eingestellt und mit 200 ml Aceton verdünnt. Es bildet sich ein Niederschlag, der abfiltriert wird. Das Rohprodukt löst man in einem geringen Volumen an wäßrigem THF. Die Lösung wird mit NaHCO₃ auf pH 6,8 eingestellt, zur Entfärbung mit Kohle behandelt, auf ca. 1 ml eingeengt und mit einigen Kristallen an kristallinen 1-1H angeimpft. Man rührt über Nacht und filtriert den kristallinen Niederschlag ab, wobei man die Titelverbindung 1-1H (Zwitterion) erhält. Ausbeute 83 mg (16%). Schmelzpunkt: >185°C (Zersetzung). Die physikalischchemischen Daten dieser Verbindung sind identisch mit denjenigen der gemäß Beispiel 10 erhaltenen Verbindung.

Herstellungsbeispiel 1 Diphenylmethyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-chloromethyl-3-cephem-4-carboxylat (IV-1) Zu einer Suspension von 2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoessigsäure (III-1) (2,1 g, 1OmMoI) in trockenem CH₂CI₂ (50 ml) gibt man unter Rühren PCI₅ (2,09g, 1OmMoI) bei -30X und rührt die Mischung 20 min bei -15 bis -20X. Zu dieser Säurechloridlösung gibt man bei -30^cC eine Lösung von Diphenylmethyl^-amino-S-chloromethyl-S-cephem^-carboxylathydrochlorid(ll)(4,5g, 10mMol) in CH₂CI₂(50ml), die N,O-Bis-(tnmethylsilyl)-acetsmid (10g, 50mMol) enthält. Nach Istündigem Rühren bei -10°C engt man die Mischung zur Entfernung des CH₂CI₂ ein und verdünnt mit Ethylacetat (200 ml). Die Mischung wird nacheinander mit 10%igem wäßrigem NaHCO₃ (2 χ 40ml), H₂O (2 χ 20ml) und Kochsalzlösung (10ml) gewaschen und über MgSOa getrocknet. Das Lösungsmittel wird im Vakuum verdampft und der erhaltene ölige Rückstand (10g) wird in CHCI₃ (20ml) gelöst und an Silikagel (Wako-Gel C-200,100g enthaltend 10ml 1/1,5M pH7 Phosphatpuffer) unter Verwendung von 1-3% CH₃OH-CHCI₃ chromatographiert. Die die Titelverbindung enthaltenden Fraktionen werden verdampft, wobei man 5,7 g (95%) IV-1 als gelbes, amorphes Pulver erhält. Schmelzpunkt: > 140⁰C (Zersetzung).

-58- 748

IR:

^KBr

cm

-1

3300, 1780, 1720, 1680, 1620.

.UV: A

EtOH

max

NMR:

nm (£)

.DMSO-d,. 3 6

max

2 45 (1800), 280 (9900).

3,53 (2H, ABq, 2-H) ; 3,94 (3H, s, OCH₃); 4,42 (2H, s, 3-CH₂); 5,22 (1H, d, J=4,5, 6-H); 5,92 (1H, d-d, J=4,5 und 6, 7-H); 6,93 (1H, s, CHPh₂); 7,36 (1OH, m, Ph-H); 8,1 (2H, br-s, NH₂); 9,58 (1H, d, J=6, 7-NH).

Herstellungsbeispiel 2 Diphenylrnethyl-y-^-iB-amino-i^^-thiadiazol-S-yO^-methoxyiminoacetamidol-S-jodmethyl-S-cephem^-carboxylat (V-1) Eine Mischung von IV-I aus Herstellungsbeispiel 1 (5,7g, 9,5mMol) und NaJ (4,3g, 29mMol) in trockenem Aceton (50ml wird 5 min bei Raumtemperatur gerührt. Man engt die Mischung unter vermindertem Druck ein und schüttelt das erhaltene Öl mit einer Mischung aus Ethylacetat (100ml) und H₂O (10ml) aus. Die organische Schicht wird abgetrennt und nacheinander mit 10%igem Gew./Vol. Natriumthiosulfatund Kochsalzlösung gewaschen. Nach dem Trocknen wird das Ethylacetat im Vakuum entfernt, wobei man 6,1 g (93%) der Titelverbindung (V-1) als gelbes, amorphes Pulver erhält. Schmelzpunkt: >120°C (Zersetzung).

IR:

KBr max

UV: λ

EtOH max

cm"¹ 3300, 1780, 1725, 1680, 1620.

nm (£) 245 (17000) , 282 (12000).

³'⁹⁴ (3H, s, OCH₃);

^{NMR: 6}ppm°^{d6 3}'^{72 (2H}'

4,23 (2H, s, 3-CH₂); 5,21 (1H, d, J=4,5, 6-H); 5,89 (1H, d-d, J=4,5 und 6, 7-H); 6,94 (1H, s, CHPh₂); 7,35 (1OH, m, Ph-H); 8,12 (2H, br-s, NH₃); 9,65 (1H, d, J=6, 7-NH).

Herstellungsbeispiel 3

Diphenylmethyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-triphenylphosphoniomethyl-3-cephern-4-carboxylat-jodid (VM)

Eine Mischung aus V-1 aus Herstellungsbeispiel 2 (690mg, 1 mMol) und Triphenylphosphin (786mg, 3mMol) in Ethylacetat (20 ml) rührt man über nach bei Raumtemperatur. Der ausgeschiedene Feststoff wird isoliert, mit Ethylacetat (2 χ 10 ml) gewaschen und getrocknet, wobei man 950mg (100%) des Phosphoniumjodids VI-1 erhält. Schmelzpunkt: 186°C (Zersetzung).

-59- 748

IR: v^KBr cm"¹ 3300, 1780, 1710, 1680, 1610. max

UV: A^Et0H nm (I) 268 (15000), max

275 (13000),

300 (7300).

DMSO-d^

^{NMR: 5}ppm ^{6 3}'⁵² (2H' ^br"^s' ^2H)' ³'⁹⁴ <^3H' ^s' ^oc§₃)'·

5,34 (1H, d, J=4,5, 6-H); 5,9 (IH, m,

7-H) ; 6,3 (1H, s) ; 7,3 (10H, m, Ph-H); 7,8 (15H, m, Ph-H)

Herstellungsbeispiel 4

Diphenylmethyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[(triphenylphosphoranvliden)-methyl]-3-cephem-4-carboxylat (VII-1)

Eine Mischung aus VI-1 aus Herstellungsbeispiel 3 (952mg, 1 mMol), Amberlite IRA-410 (OH~-Form, 500mg) und N NaOH (4ml) in CH2CI2 (1OmI) rührt man 1 h bei Raumtemperatur. Man filtriert die Mischung, trocknet die abgetrennte organische Schicht über MgS04 und engt unter vermindertem Druck ein. Das erhaltene Ol wird mit Ethylacetat verrieben und der gebildete gelbe Niederschlag wird abfiltriert, wobei man 740mg (90%) der Titelverbindung VII-1 erhält. Schmelzpunkt: >180°C (Zersetzung).

IR: v^KBr cm"¹ 3400, 1750, 1630. max

UV: A^Et0H nm (Z) 268 (12000),

ΓΠ3.Χ

276 (10000), 284 (23000).

Herstellungsbeispiel 5

Diphenylmethyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-(3-chloro-1-propen-1-propen-1-yl)-3-cephem-4-carboxylat (VIII-I)

Zu einer Lösung von VII-1 aus Herstellungsbeispiel 4 (6,9g, 8,4mMol) gibt man MgSO₄ (3g) und 40%igen Chloracetaldehyd (810 mg, 8,4mMol). Die Mischung wird 1,5h bei Raumtemperatur gerührt und anschließend filtriert. Das Filtrat wird von einer Silikagelsäule (Wako-Gel C-200,10Og enthaltend 1OmI 1/1,5Μ Phosphatpuffer) unter Verwendung von CHCI₃ und CHCI₃, das CH₃OH enthält, eluiert. Die das gewünschte Produkt enthaltenden Fraktionen (0,5-1 % CH₃OH-CHCI₃) werden im Vakuum verdampft, wobei man 1,6 g (30%) der Titel verbindung Vl 11-1 als gelbes, amorphes Pulver erhält. Dieses Pulver ist eine Mischung der Z-und Ε-Isomeren bezüglich desChlorpropenylrestes (Z/E = 2/1, mittels NMR). Schmelzpunkt: >130°C (Zersetzung).

^{IR: v}m=t ^cm 3300, 1780, 1725, 1680, 1620.

Iu dX

UV: A^?^H nm U) 240 (20000),

286 (12000).

NMR: 6^°"^d6^+D2° 3,56 und 3,8 (m, 2-H) ; 3,94 (3H, s,

OCH₃); 4,16 (d, J=7,5, CH₂Cl); 5,26 (1H, d, J=4,5, 6-H); 5,87 (1H, d, J=4,5, 7-H); 6,28 (2/3H, d, J=11, 3-CH cis-H); 6,72 (1/3H, d, J=16, 3-CH trans-H); 6,81 (2/3H, s, CHPh₂); 6,92 /1/3H, s, CHI 7,4 (10H, m, Ph-H).

-60- 748 32

Herstellungsbeispiel 6 Diphenylmethyl-7-benzylidenamino-3-[(triphenylphosphoranyliden)-methyl]-3-cephem-4-carboxylat (XVI) Zu einer Lösung von Diphenylmethyl-T-benzylidenamino-S-Ktriphenylphosphoniol-methyll-S-cephem-^carboxylatjodid (XV) [hergestellt gemäß dem Verfahren der veröffentlichten japanischen Patentanmeldung (Kokai) 56-86187 (7/31/81)] (60g, 7OmMoI) in CH₂CI₂ (350ml) gibt man N NaOH (140ml) und Amberlite IRA-410 (OH-Form, 35g) bei 5⁰C. Die Mischung wird 1 h bei 5⁰C gerührt und filtriert. Die organische Schicht wird abgetrennt, über MgSO₄ getrocknet, auf ein Volumen von ca. 100 ml eingeengt und mit Ethylacetat (500 ml) zur Bildung eines Niederschlags versetzt. Der erhaltene gelbe Feststoff wird abfiltriert und im Vakuum getrocknet, wobei man 48g (94%) der Titelverbindung XVI erhält. Schmelzpunkt: 195-198⁰C (Zersetzung).

IR: v^ cm ' 1770, 1620.

Herstellungsbeispiel 7 Diphenylmethyl-y-benzylidenamino-S-fS-chloro-i-propen-i-yll-S-cephem^-carboxylat (XVII) Zu einer Lösung von XVI aus Herstellungsbeispiel 6 (2,9g, 4mMol) in einer Mischung aus CH₂CI₂ (40 ml) und H₂O (10 ml) gibt man unter Rühren bei Raumtemperatur wasserfreien Chloracetaldehyd (800 mg). Zu dieser Mischung gibt man während 1 h in drei Portionen weitere 800 mg Chloracetaidehyd, wobei man den pH der Mischung durch Zugabe von N NaOH zwischen 6 und 9 hält. Nach 15min wird die wäßrige Schicht abgetrennt und die organische Schicht über MgSO₄ getrocknet. Verdampfen des Lösungsmittels liefert ein rotes Öl, das in einer Mischung aus Ethylacetat und Isopropylether (1 /2,80 ml) gelöst wird. Die Lösung wird nacheinander mit gesättigtem wäßrigem NaHCO₃ (10 ml) und H₂O (10 ml) gewaschen. Nach dem Trocknen über MgSO₄ erhält man durch Entfernen des Lösungsmittels 3,3g eines gelben Öls. Eine Lösung des Öls in CH₂CI₂ (50 ml) wird unter Verwendung von Silikagel (12g, Wako-Gel C-200) enthaltend 1 /1,5 M Phosphatpuffer (1,2 ml, pH 6,4) filtriert. Das Silikagel wäscht man mit CH₂CI₂ (50 ml). Das Filtrat und die Waschwässer werden vereinigt und zur Trockene eingeengt. Der Rückstand wird mit η-Hexan verrieben, wobei man 1,7g (80%) der Titelverbindung (XVII) als gelbes Pulver erhält. Aus dem NMR-Spektrum ist ersichtlich, daß der Chlorpropenylrest Z-Konfiguration besitzt

Schmelzpunkt: >50°C (Zersetzung).

IR: v^KBr cm"¹ 3400, 1775, 1720, 1630. max

UV: A^Et0E nm (£) 253 (11ΟΟΟ), 258 (11000),

max \

265 (1OOOO), 273 (8300), 281 (7000), 290 (6300).

NMR: 6^DMSO"^d6 3,63 (2H, br-s, 2-H); 4,0 (2H, m, ppm

CH₂-Cl); 5,42 (2H, m, 6-H und 3-CH=CH); 5,72 (1H, d, J=4,5, 7-H); 6,27 (1H, d, J=11, 3-CH); 6,85 (1H, S, CHPh₂); 7,33 (1OH, m Ph-H).

Herstellung von wasserfreiem Chloracetaldehyd

Man gibt unter Rühren wasserfreies Calciumchlorid zu einer gekühlten Lösung von 50%igem wäßrigem Chloracetaldehyd (50 ml), um eine Auftrennung in zwei Schichten zu erzielen. Die Cloracetaldehydhadrat-Schicht/1/ (obere Schicht) wird abgetrennt und mit CHCI₃ (100ml) verdünnt, mit MgSO₄ (20g) vermischt, 5min unter Rückfluß erhitzt und filtriert. Das Lösungsmittel und Wasser werden azeotrop entfernt (Sdp. 56-64°C)/2/ und der Rückstand wird destilliert, wobei man wasserfreien Chloracetaldehyd/3/ erhält. Sdp. 70-82°C/760mm.

IR: v^Film cm"¹ 1720

max

1 R.P.Kurkjy, E.V.Brown, J. Amer. Chem. Soc, 74, 5778 (1952).

2 S.Trippett, D/M. Walker, J. Chem. Soc, 1961,1266.

3 H.O.House,V.K.Jones,G.A.Frank,J.Org.Chem.,29,3327(1964).

Herstellungsbeispiel 8 Diphenylmethyl^-amino-S-tS-chloro-i-propen-i-yll-S-cephem^-carboxylat (XVIII) Eine Lösung von XVII aus Herstellungsbeispiel 7 (180 mg, 0,34mMol) in Ethylacetat (10 ml) gibt man bei 5°C zu einer Lösung von Girard T-Reagens [(CarboxymethyD-trimethylammoniumchlorid-hydrazid] (251 mg, 1,5mMol) in CH₃OH (10ml), die Essigsäure (0,25ml) enthält. Nach 30minütigem Rühren bei 5⁰C wird die Mischung zur Entfernung des CH₃OH eingeengt und anschließend mit Ethylacetat (20 ml) versetzt. Die Ethylacetatlösung wird nacheinander mit H₂O (2 χ 5 ml), gesättigtem wäßrigem NaHCO₃ (5ml) und Kochsalzlösung (5ml) gewaschen und über MgSO₄getrocknet. Verdampfen des Lösungsmittels liefert 145mg (97%) der Titelverbindung XVIII (Z-Isomeres) als gelbes Pulver. Schmelzpunkt: > 100⁰C (Zersetzung).

-61- 748 32

IR: ν cm 3400, 1770, 1720.

UV: A^Et0H nm (£) 252 (3700), 258 (3800), 260 (4000),

ITl 3.x

274 (4000), 285 (4000)..

Herstellungsbeispiel 9 Diphenylmethyl-y-^-IB-amino-i^^-thiadiazol-S-yO^-methoxyiminoacetarnidoJ-S-iS-chloro-i-propen-i-ylJ-S-cephem^-

carboxylat(VIIM)

Eine Mischung von 2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoessigsäure (ill-1) (10,1 g, 5OmMoI) und PCI₅ (10,4g, 5OmMoI) in trockenem CH₂CI₂ (100 ml) rührt man 2 h bei -7 bis -15°C. Die klare Lösung gießt in n-Hexan (500 ml), wobei sich ein Niederschlag bildet. Die organische Schicht wird abdekantiert und der verbleibende Feststoff mit η-Hexan (100 ml) verrieben. Der gelbe Niederschlag wird abfiltriert und im Vakuum getrocknet, wobei man 12,5g (99%) des Säurechlorids erhält. Schmelzpunkt: 8O⁰C (Zersetzung).

IR: v^Nu^^Ql cm"¹ 1770

max

Das Säurechlorid (25mg, 0,1 mMol) gibt man unter Rühren bei Raumtemperatur zu einer Lösung von XVIII (Z-Isomeres) aus Herstellungsbeispiel 8 (44mg, 0,1 mMol) in trockenem CH₂CI₂ (5ml). Nach 30min wird die Mischung unter vermindertem Druck eingeengt und mit Ethylacetat (20ml) und gesättigtem wäßrigem NaHCO₃ (5ml) verdünnt. Die organische Schicht wird mit gesättigtem wäßrigem NaHCO₃ (5ml), Kochsalzlösung (5ml), 10%iger HCI (5ml) und Kochsalzlösung (5ml) gewaschen. Man trocknet das Lösungsmittel bei MgSO₄ und engt anschließend zurTrockene ein, wobei man das Produkt in Form eines gelben Schaums erhält. Der Schaum wird durch Säulenchromatographie an Silikagel (Wako-Gel C-200,1 g, enthaltend 0,1 ml 1/1,5M Phosphatpuffer pH 6,4) und Eluierung mit CH₂CI₂OH (100:1) gereinigt. Man erhält 31 mg (50%) der Titelverbindung VIII-1 (Z-Isomeres) als gelbes Pulver

Schmelzpunkt: >150°C (Zersetzung).

KB T — 1 IR: ν cm 3400, 1775, 1720, 1675, 1630.

Ill Cl Λ.

UV: λ^°^Η nm (£ ) 240 (17000), 280 (10 000).

NMR: δ°^°"^ά6 3,6 (2H, m, 2-H); 3,92 (3H, s, O-CH3);

4,0 (2H, m, CH₂Cl); 5,27 (2H, m, 6-H und 3-CH=CH); 5,83 (1H, d-d, J=4,5 und 10, 7H); 6,25 (1H, d, J=11, 3-CH); 6,83 (1H, s, CHPh₂); 7,33 (1OH, m, Ph-H); 8,0 (2H, br-s, NH₂); 9,57 (1H, d, J=1O, 7-NH). Herstellungsbeispiel 10

carboxylat(IX-i)

Eine Lösung von VIII-1 aus Herstellungsbeispiel 5 (Ζ/Ε = 2/1, 480mg, 0,77mMol) in trockenem Aceton (10ml), das NaJ (346mg, 2,3 mMol) enthält, wird 30 min bei Umgebungstemperatur gerührt. Die Reaktionsmisnhu ng verdampft man unter vermindertem Druck. Das erhaltene Öl wird zwischen Ethylacetat (50ml) und Wasser (10ml) verteilt. Die obere Schicht wird nacheinander mit 10%iger Gew./Vol. wäßriger Natriumthiosulfatlösung (10ml) und Kochsalzlösung (10ml) gewaschen und über MgSO₄ getrocknet. Verdampfen des Lösungsmittels liefert 540mg (98%) der Titelverbindung IX-1 (Z/E = 1/1) als rötlichen, amorphen Feststoff. Schmelzpunkt: > 120⁰C (Zersetzung).

UV: A^Et0H nm (E) 240 (21000), 290 (12000).

IU 3.Χ

-62- 748 32

NMR: δ^°^+Ε>2° 3,67 (2Η, ItI, 2-Η) ; 5,29 (1Η, d, J=4,5,

6-Η); 5,95 (1Η, d, J=4,5, 7-Η) ; 6,27 (1/2Η, d, J=11, 3-CH eis); 6,72 (1/2H, d, J=16, 3-CH trans); 6,87 und 6,96 (jeweils 1/2H, s, CHPh₂); 7,4.(1OH, m, Ph-H).

Herstellungsbeispiel 11 Diphenylmethyl-7-[2-(5-arnino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-rnethoxyirninoacetamido]-3-(3-jod-1-propen-1-yl)-3-cephem-4-

carboxylatdX-1)

Eine Mischung von VIII-1 (Z-lsomeres) aus Herstellungsbeispiel 9 (5,6g, 9mMol) und NaJ (4g, 27mMol) in trockenem Aceton (100ml) rührt man 1,5h bei Raumtemperatur. Die Mischung wird verdampft und das erhaltene Öl wird mit Ethylacetat (90ml) verdünnt. Die Ethylacetatschicht wird mit 10%iger Gew./Vol. wäßriger Natriumthiosulfatlösung (10ml) und H₂O (10ml) gewaschen. Entfernen des getrockneten (MgSO₄) Lösungsmittels liefert ein gelbes Öl, das durch Verreiben mit Isopropylether fest wird. Abfiltrieren des Feststoffs liefert 4,3 g (67%) der Titel verbindung IX-1 als Ε-Isomeres. Schmelzpunkt: > 165°C (Zersetzung).

IR:

ITl 3.x

cm

— 1

3400, 1780, 1725, 1680, 1610.

UV:

ΓΠ3.Χ

ran (E) 240 (18000), 297 (11000).

NMR: ö"^lUÖW~^cl6^+D2^O 3,90 (3H, s, OCH₃); 5,25 (1H, m,

6-H); 5,95 (1H, m, 7-H); 6,72 (d, J=16, 3-CH trans); 6,96 (1H, s, CH-Ph₂); 7,4 (10H, m, Ph-H).

Herstellungsbeispiel 12 Benzhydryl^-amino-S-fS-chloro-i-propen-i-yll-S-cepherrM-carboxylat (Z-lsomeres) (XVIII) Verbindung XVIII ist die gemäß den Reaktionsschemata 1 b und 1 c verwendete Zwischenverbindung. A. Benzhydryl-T-benzylidenamino-S-triphenylphosphoniomethyl-S-cephem^-carboxylatchlorid (XV) Zu einer Suspension von Benzhydryl-7-amino-3-chloromethyl-3-cephem-4-carboxylat-hydrochlorid (Il Hydrochlorid (200g, 0,44MoI) in CH₂CI₂ (940ml) gibt man 1 N NaOH (440ml) bei Raumtemperatur. Die Mischung wird 10min geschüttelt und die organische Schicht wird abgetrennt. Zu der organischen Schicht gibt man MgSO₄ (75 g) und Benzaldehyd (51 g, 0,48MoI) und läßt die Mischung 3h stehen. Man filtriert die Reaktionsmischung und wäscht die unlöslichen Bestandteile mit CH₂CI₂ (200 ml). Man vereinigt das Filtrat und die Wasch wasser und gibt dazu Tri phenyl phsoph in (126 g, 0,48MoI). Man engt die Mischung auf ungefähr 400ml ein und läßt 4 Tage stehen. Das erhaltene viskose Öl wird mit Ethylacetat (11) verdünnt und verrieben, wobei man nach dem Abfiltrieren und Trocknen im Vakuum dieTitelverbindung XV als blaßgelbes, kristallines Pulver erhält. Ausbeute 322g ;J6%). Schmelzpunkt: 185-19O⁰C (Zersetzung).

IR:

TCRy ΙΏ3Χ

cm

1780, 1720, 1630.

UV: A^CH2^C12 nm (£)

max

260 (24100).

B. Benzhydryl^-benzylidenamino-S-Ktriphenylphosphoranylidenl-methyll-S-cephem^-carboxylat (XVI)

Eine Mischung von XV (322 g, 0,42 Mol) und 5 N Na₂CO₃ (252 ml) in CH₂CI₂ (1,61) wird 15 min bei Raumtemperatur kräftig gerührt. Die organische Schicht wird abgetrennt, über MgSO₄ getrocknet und auf ungefähr 500ml eingeengt. Das Konzentrat gibt man unter rühren zu Aceton (11), wobei man ein schwach-gelbes, kristall in es Pulver erhält, das abfiltriert wird. Man erhält 237 g (78%) XVI. Schmelzpunkt: 195-198°C (Zersetzung).

-63- 748

VS?

cm

"¹

Ϊ7 70, 1620.

UV:

NMR:

A^CH2^C12 nm (S) 254 (23000), 389 (22000). max

CT)CI δ^υ 3 2,56 und 3,16 (2Η, ABq); 5,00 (1Η, d,

J=4Hz), 5,23 (1H, d, J=4Hz); 5,47 (1H, d, J=22Hz); 6,95 (1H, s); 7,2 - 7,8 (30H, m); 8,55 (1H, s).

C. Benzhydryl-7-amino-3-[chloro-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-carboxylat-hydrochlorid (Z-Isomeres) XVIII-Hydrochlorid)

Zu einer unter Rückfluß siedenden Lösung von XVI (214g, 0,294MoI) und N.O-Bis-ftrimethylsiiyO-acetamid (4OmI, 0,15MoI) in trockenem CH₂CI₂ (2,9I) tropft man unter Rühren während 15min eine 50%ige Lösung von Chloracetaldehyd (93g, 0,59MoI) in CHCI₃. Nach 30minütigem Stehenlassen engt man die Mischung zur Trockene ein. Zum öligen Rückstand gibt man CH₂CI₂ (1,51), Girard-ReagensT(99g, 0,59MoI) und 10%ige wäßrige HCI (300ml). Man rührt die Mischung 1 h bei Raumtemperatur. Die organische Schicht wird mit Wasser (200ml) und gesättigter Kochsalzlösung (200ml) gewaschen, über MgS(Xj getrocknet, mit Kohle (5g) behandelt und filtriert. Das Fitlrat wird auf -10°C gekühlt und mit 1 N HCI in CH₃OH (300ml) behandelt. Die Mischung wird 30 min bei Raumtemperatur gerührt und auf ungefähr 300 ml eingeengt. Das Konzentrat wird mit Ethylacetat (400 ml) verdünnt und mit einigen Kristallen des XVIII-Hydrochlorids angeimpft. Nach 2 h werden die ausgeschiedenen Kristalle abfiltriert, mit Ethylacetat (200 ml) gewaschen und im Vakuum getrocknet, wobei man 74g (53%) der Titelverbindung XVIII in Form des Hydrochlorids erhält. Schmelzpunkt: > 185⁰C (Zersetzung). Blaß-gelbe Nadeln.

IR:

^KBr max

cm

"¹

2830, 1780, 1720.

UV:

NMR:

^Et0H max

nm (E) 286 (8800).

„DMSO-d,-

O D

ppm

3,73 (2H, br, 2-H); 3,97 (2H, m, CHCl); 5,22 (1H, d, J=4,5Hz, 6-H); 5,37 (1H, d, J=4,5Hz, 7-H); 5,77 (1H, m, 3-CH=CH); 6,45 (1H, d, J=HHz, 3-CH); 6,88 (1H, s, CHPh₀); 7,33 (1OH, br, s, Ph-H).

AnSIySeTOrC₂₃H₂IN₂O₃SCI-HCI:

Ber.: 57,87

Gef.: 57,62

4,65

4,53

5,87

5,70

6,72

6,64

Cl

14,85

14,89

Herstellungsbeispiel 13 Benzhydryl-y-p-IS-amino-i^^-thiadiazol-S-yO^-methoxyiminoacetarnidol-S-CS-chlor-i-propen-i-yn-S-cephem^-carboxylat (Z-Isomeres) (VIlI-I) Zu einer Lösung von XVIII (Z-Isomeres) (20g, 42 mMol) in CH₂CI₂ (420 ml), die N,O-Bis-(trimethylsilyl)-acetamid (34ml, 125mMol) enthält, gibt man während 30min bei -10 bis 0^οη. in drei Portionen 2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetylchlorid-hydrochlorid (15,2g, 59mMol). Die Mischung wird 30min bei 0-5⁰C gerührt und unter vermindertem Druck eingeengt. Der braune ölige Rückstand wird in Ethylacetat (420ml) gelöst und die Lösung wird nacheinander mit g'esättigtem wäßrigem NaHCO₃ (3 χ 15ml), gesättigtem wäßrigem NaCI (15ml), 10%iger HCI (15ml) und gesättigtem wäßrigem NaCI (15ml) gewaschen und auf ungefähr 50ml eingeengt. Zu dem Konzentrat gibt man n-Heptan (200ml), wobei man 28,5g (Reinheit 90%) der Titelverbindung VIII-1 (Z-Isomeres) als farbloses Pulver erhält. Schmelzpunkt: > 150⁰C (Zersetzung).

_64_ 748

IR: ν cm ' 3400, 1780, 1720, 1680, 1620. max

UV: A^Et0H nm (£) 240 (20000), 283 (12000). max

NMR: 5^Acetond_{5 3 fi (2R}^ _{m 2}-H); 3,95 (3H, s, OCH,); ppm —j

4,0 (2H, m, CH₂Cl); 5,32 (1H, d,

J=4,5Hz, 6-H); 5,62 (1H, m, 3-CH=CH);

6,03 (1H, d, J=4,5Hz, 7-H); 6,32 (1H,

d, J=11Hz, 3-CH); 6,87 (1H, s, CHPh₃); 7,33 (10H, br, s, Ph-H).

Herstellungsbeispiel 14 BenzhydrYl-742-(5-amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetarnido]-3-[3-jod-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-carboxylat

(E-lsomeres)(IX-1)

Eine Mischung von VIIl-I (Z-lsomeres) 28,5g, Reinheit 90%) und Natriumiodid (19g) in trockenem Aceton (420ml) rührt man 10min bei Raumtemperatur und läßt 2 h bei 5⁰C stehen. Die Mischung konzentriert man unter vermindertem Druck. Zu dem Rückstand gibt man Ethylacetat (420ml) und 10%ige Gew./Vol. wäßrige Natriumthiosulfatlösung (30ml) und schüttelt die Mischung. Die organische Schicht wird mit Wasser (30ml) gewaschen, über MgSO₄ getrocknet und auf ungefähr 50ml verdampft. Das Konzentrat verdünnt man mit n-Heptan (200ml), wobei man 30,6g (Reinheit 95%) der Titelverbindung IX-I (Ε-Isomeres) als gelbes Pulver erhält. Schmelzpunkt: >120°C (Zersetzung).

KT4y 1 v*™ cm 3400, 1780, 1725, 1680, 1620.

XU. a. X ₊

^nm <£) 306 (15000).

NMR: 6^^ton"^d6 3,71 (2H, m, 2-H); 3,97 (3H, s, OCH₃);

4,0 (2H, d, J=8Hz, CIT₂I); 5,26 (1H, d, J=4,5Hz, 6-H); 6,03 (1H, d-d, J=4,5 und 8Hz, wird zum Duplett J=4,5Hz durch Zugabe von D„0, 7-H); 6,32 (1H, d-t, J=15 und 8Hz, 3-CH=CH); 6,79 (1H, d, J=15Hz, 3-CH); 6,98 (1H, s, CHPh₂); 7,35 (1OH, m, Ph-H); 7,63 (2H, br, s, verschwindet durch Zugabe von D₂O, NH₂); 8,52 (1H, d, J=8Hz, verschwindet durch Zugabe von D„0, 7-NH).

Herstellungsbeispie' 15

Benzhydryl-7-[2-(5-amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(4-carbarnoyl-1-pyridinio)-1-propen-1-yl]-3-

cephem-4-carboxylat-jodid

(E-lsomeres)(XII-1H)

Zu einer Suspension von IX-I (Ε-Isomeres) (30,5g) und Isonikotinamid (26g, 212mMol) in CH₃CN (120mi) gibt man CH₃OH (100ml), bis die Mischung klarwird. Die Mischung wird 2h unter Stickstoffatmosphäre bei Raumtemperatur gerührt und anschließend unter vermindertem Druck auf ungefähr 100ml eingeengt. Den halbfesten Rückstand verreibt man mit lsopropylether(200ml). Das Lösungsmittel wird abdekantiert und das zurückbleibende gelbe Pulver wird mit einer Mischung aus Isopropylether und CH₃OH (3/1, 120 ml) gewaschen. Das Pulver wird abfiltriert und im Vakuum getrocknet, wobei man 36g (Reinheit 75%, geschätzt mittels HPLC) der Titelverbindung XII-1H (Ε-Isomeres) als schwach-gelbes Pulver erhält. Schmelzpunkt: >150°C (Zersetzung).

-65- 748 32

IR:

UV:

NMR:

^KBr

IUcIX

^Et0H max

cm

3300, 1780, 1720, 1680, 1620.

-m (e]^{% H}) 1 cm

282 (170).

6^DMS0~^d6 3,72 (2H, m, 2-H); 3,90 (3H, s, OCH,);

ppm ₊ -J

5,25 (3H, m, 6-H und CH₃N ); 5,9 (1H, d-d, J=4,5 und 8Hz, wird zum Duplett J=4,5Hz durch Zugabe von D₃O, 7-H); 6,35 (1H, m, 3-CH=CH); 6,89 (1H, s, CHPh₂); 6,9 (1H, d, J=16Hz, 3-CH); 7,35 (1OH, m, Ph-H); 8,06 (2H, br, s, verschwindet durch Zugabe von D₂ s, verschwindet durch Zugabe von

NH₂); 8,21 (2H, br,

NH₂); 8,36 und 9,07 (jeweils 2H, d, J=6Hz, Py-H); 9,57 (1H, d, J=8Hz, verschwindet

durch Zugabe von D~0, 7-NH). Herstellungsbeispiel 16 BenEhydryl-7-benzylidenamino-3-[3-chloro-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-carboxylat (XVII) (Z-Isomeres) Zu einer eisgekühlten Mischung der kristallinen 7-Aminocephem-Zwischenverbindung XVIII (Z-Isomeres) 13,4g, 28mMol) und Benzaldehyd (3,3g, 31 mMol) in Ethylacetat (150ml) tropft man während 20 min 0,5N Natriumhydroxid (56ml, 28 mMol), wobei man die Temperatur der Reaktionsmischung unterhalb von 10⁰C hält. Die Mischung wird unter Kühlen weitere 15 min gerührt und die organische Schicht wird abgetrennt, mit gesättigtem wäßrigem Natriumbicarbonat (100ml χ 2) gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Zu der getrockneten Lösung gibt man eine geringe Menge Kohle und filtriert die Mischung. Das Filtrat wird zur Trockene eingeengt. Der ölige Rückstand wird in Tetrachlorkohlenstoff (50 ml) gelöst und erneut eingeengt. Dieses Verfahren wird dreimal wiederholt, wobei man die Mischung mittels Umkehrphasen-TLC verfolgt, um sicher zu sein, daß das 7-Aminocephalosporin-Ausgangsmaterial vollständig in die Schiffsche Base überführt wird. Entfernen des Lösungsmittels im Vakuum liefert 16,45g der Titelverbindung XVII (Z-Isomeres) als blaß-gelbes Pulver (geschätzte Reinheit 85%; Schmelzpunkt: 74⁰C [Zersetzung]). Dieses Pulver wird in der nächsten Stufe ohne weitere Reinigung eingesetzt.

IR:

UXaX.

cm

1780, 1725, 1635.

UV: A^CH2^C12 nm (E^1% ) 257 (400).

max

NMR:

1 cm 6,18 (1H, d, J=11Hz).

Herstellungsbeispiel 17 Benzhydryl-7-Benzylidenamino-3-[3-(4-carbamoyl-1 -pyridinio)-1 -propen-1 -yl]-3-cephem-4-carboxylat-jodid (XXI-H) (E-

Isomeres)

Zu einer gekühlten Mischung von 3-Chlorpropenylcephem XVII (Z-Isomeres) (16,4g) in Aceton (5 ml) tropft man während 10 min unter Stickstoffatmosphäre eine Lösung von Natriumiodid (6,3g, 42 mMol) in Aceton (30 ml). Die Mischung rührt man bei Raumtemperatur. Die Reaktion wird auf der Grundlage des UV-Absorptionsverhältnisses [E,¹^(255nm)/E_l ¹°^/^(320nm)] verfolgt. Wenn das Verhältnis einen Wert unterhalb von 1,30 erreicht (nach 45 min), verdünnt man die Mischung mit Tetrachlorkohlenstoff (400ml) und läßt bei Raumtemperatur stehen. Wenn das Verhältnis kleiner als 1,10 wird (nach 3 h), engt man die Mischung auf die Hälfte des Volumens ein. Das Filtrat behandelt man mit einer geringen Menge Kohle und Diatomeenerde und filtriert. Den Filterkuchen wäscht man mit einer 1:1-Mischung (100ml) aus Methylenchlorid und Tetrachlorkohlenstoff. Man vereinigt das Filtrat und die Waschwässer und gibt dazu eine Lösung von Isonikotinamid (3,5g, 28,7 mMol) in Dimethylformamid (20ml). Die Mischung wird unter vermindertem Druck konzentriert. Das Konzentrat läßt man 1,5 h bei Raumtemperatur stehen und wäscht es mit Isopropylether (100ml x 3). Der braune halbfeste Rückstand wird in Methylenchlorid (50ml) gelöst. Zu der Lösung tropft man unter Rühren Ethylacetat (1,51). Der erhaltene Niederschlag wird abfiltriert und mit Ethylacetat (200 ml) gewaschen. Nach dem Trocknen über Phosphorpentoxid im Vakuum erhält man 17g der Titelverbindung XXI-H (Ε-Isomeres). Gelbes amorphes Pulver. Schmelzpunkt: 150-155⁰C (Zersetzung). Geschätzte Reinheit mittels NMR 80%.

-66- 748

IR: v^KBr cm"¹ 1775, 1725, 1690, 1635. max

UV: A^CH2^C12 nm (z]^% J 258 (335), max -I cm

298 (255) .

NMR: Sp^°^d6 3,4 - 3,8 (2H, br.); 5,35 (2H, br.);

5,41 (1H, d, J=4Hz); 5,73 (1H, d, J=4Hz); 6,93 (1H, s); 6,97 (1H, d, J=16Hz); 7,3 - 7,5 (Ϊ5Η, br. s); 8,40 (2H, d, J=6,5Hz) ; .9,15 (2H, d, J=6,5Hz).

Herstellungsbeispiel 18 y-Amino-S-fS-^-carbamoyl-i-pyridiniol-i-propen-i-yll-S-cephem^-carboxylat (XXII-H) (E-lsomeres) Zu einer Suspension des quaternisierten Cephems XXI-H (17g) in 85%iger Ameisensäure (25 ml) tropft man konzentrierte Salzsäure (5 ml). Die Mischung wird 1,5 h bei Raumtemperatur gerührt und mit einer geringen Menge Kohle behandelt. Man filtriert und wäscht mit 85%iger Ameisensäure (5ml). Das Filtrat und die Waschwässer werden vereinigt und unter Rühren in Aceton (11) gegossen. Abfiltrieren des gebildeten Niederschlags liefert 9,52g des gelben Rohprodukts. Zu einer Suspension des Rohprodukts (9,5g) in Wasser (50 ml) gibt man eine geringe Menge Kohle und filtriert. Das Filtrat tropft man unter Rühren zu Isopropylaikohol (700 ml). Der ausgefallene Niederschlag wird abfiltriert, mit einer geringen Menge Methanol (30 ml) gewaschen und getrocknet, wobei man 7,58g der Titelverbindung XXII-H (Ε-Isomeres) als Hydrochlorid erhält. Schwach-gelbes Pulver. Geschätzte Reinheit mittels UV 85%

Schmelzpunkt: 173-188°C (Zersetzung).

IR: v^KBr cm"¹ 1795, 1680, 1620, 1575, 1540. max

UV: A^hosphatpuffer (pH 7) _nm 1% " _{2g4 (45?)>} max I cm

NMR: 5^D2^O+DC1 3,82 (2H, s); 5,17 (1H, d, J=5Hz); ^Ppm 5,33 (2H, d, J=7Hz); 5,43 (1H, d,

J=5Hz); 6,37 (1H, d-t, J=16 und 7Hz);. 7,23 (1H, d, J=16Hz); 8,34 (2H, d, J=7Hz); 9,00 (2H, d, J=7Hz).

Herstellungsbeispiel 19

a-fB-Amino-i^^-thiadiazol-S-yll^-methoxyiminoacetylchlorid-hydrochlorid (Hl-I als Säurechlorid-hydrochlorid)

A. 2-Cyano-2-methoxyiminoacetamid

Zu einer Mischung von a-Cyanoacetamid (252g, 3MoI) und Natriumanitrit (414g, 6MoI) in Wasser (600ml) gibt man unter Rühren bei 5-10⁰C während 1,5 h Essigsäure (371 ml, 10MoI). Man rührt die Mischung weitere 1,5h und stellt den pH mit 6 N NaOH auf 8,5 ein. Zu der Mischung gibt man bei 15-20⁰C Dimethylsulfat (568ml, 6MoI) und rührt die Mischung 1,5h bei 45⁰C. Den pH der Reaktionsmischung stellt man mit 6N NaOH auf 8,5 ein und läßt bei 5°C über Nacht stehen, wobei sich ein Niederschlag abscheidet, der abfiltriert, mit kaltem Wasser und an der Luft getrocknet wird. Man erhält 292g (77%) der Titelverbindung als braune Nadeln. Schmelzpunkt: 170-172⁰C. _;:.

IR: v^KBr cm"¹ 3400, 3180, 172O(sh), 1715, 1690, . max

1615, 1570

UV: Λ^Η2° nm (Z) 238,5 (8290),

^max 268 (sh, 3870).

NMR: 6^DMS°"^d6 4,20 (3H, S, OCH^); 7,85 (2H, br, NH,). ppm j

H	N
3,97	33,06
3,75	32,51

-67- 748 32

Analyse für C₄H₅N₃O₂:

Ber.: 37,80

Gef.: 37,43

B. 2-Methoxyiminopropandinitril

Eine Mischung von 2-Cyano-2-methoxyiminoacetamid (88,9g, 0,7MoI), Natriumchlorid (70g) und Phosphoroxychlorid (97ml, 1,05MoI) in trockenem 1,2-Dichlorethan (350 ml) erhitzt man unter Rühren 16 h unter Rückfluß. Unlösliche Bestandteile filtriert man durch ein Dicalit-Bett ab und wäscht mit Dichlorethan. Das Filtrat und die Waschwässer werden vereinigt und unter Rühren in Eiswasser (1,51) gegossen, um überschüssiges Phosphoroxychlorid zu zersetzen. Die organische Phase wird mit 10%igem NaHCO₃(500ml), Wasser (500ml χ 3) und gesättigter NaCI-Lösung (500ml) gewaschen und über IVIgSO₄getrocknet Das Filtrat wird unter vermindertem Druck destilliert, wobei man 61,5g (81 %) der Titelverbindung erhält. Sdp. 62°C/24mm Hg (Lit., Sdp. 47^l8^oC/12mmHg).

if^{iger Film cm}~¹ 3020, 2960, 2245, 2020,

1530, 1455, 1080.

NMR: 6^^X3 4,35 (3H, S, OCH₃).

C. 2-Cyano-2-methoxyiminoacetamidiniumacetat

Zu einer Lösung von Ammoniumchlorid (28,4g, 0,53MoI) in 28%igem wäßrigem Ammoniak (355ml) und Ethanol (180ml) tropft man unter Rühren bei —15 bis —10⁰C während 30min eine Lösung von 2-Methoxyiminopropandinitril (58,0g, 0,53MoI) in Ethanol (120nil). Man rührt die Mischung über Nacht bei -10⁰C und anschließend einen Tag bei Umgebungstemperatur (20 bis 25⁰C). Man verteilt die Reaktionsmischung zwischen Wasser (350ml) und CH₂CI₂ (350ml), sättigt die wäßrige Phase mit Natriumchlorid und extrahiert erneut mit CH₂CI₂ (300ml). Die organischen Extrakte werden vereinigt, über MgSO₄ getrocknet und im Vakuum verdampft. Eine Lösung des Rückstandes in Ethylacetat (1,6I) wird mit Essigsäure auf pH 3-4 eingestellt, um die Titelverbindung in kristalliner Form auszufällen. Die Kristalle werden abfiltriert und mit Ethylacetat gewaschen. Ausbeute 67,6g (69%). Schmelzpunkt: 152-154°C (Zersetzung). (Lit. Schmelzpunkt: 150-155°C [Zersetzung]).

IR: v^KBr cm"¹ 3160, 2900, 2360, 2235, 2000, 1665, max

1555, 1495, 1415.

UV: \^Et0H _{nm (ε)} 243 (8500),

265 (sh, 5380), 305 (sh, 1400).

NMR: 6^DMSO~^d6 1,88 (3H, s, CH^COOH); 4,15 (3H, s, ppm — ό

OCH₃); 7,60 (4H, br.).

Analyse für C₄H₆N₄O · CH₃COOH:

CHN Ber.: 38,71 5,41 30,09

Gef.: 38,71 5,59 29,51

D. 2-{5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetonitrü

Zu einer Suspension von 2-Cyano-2-methoxyiminoacetamidiniumacetat (125g, 0,672 Mol) in CH₃OH (1,251) tropft man bei -10°C Triethylamin (234ml, 1,68MoI) und anschließend Br₂ (41,6ml, 0,806MoI) während 20min bei -15 bis -1O⁰C. Man rührt die Mischung 20 min. Zu der Mischung tropft man während 1 h bei -15 bis -10⁰C eine Lösung von KSCN (78,3g, 0,806 Mol) in CH₃OH (550 ml). Nach 1 stund igem Rühren bei 0—5⁰C wird die Mischung in Eiswasser (121) zur Bildung eines kristallinen Niederschlages gegossen. Der Niederschlag wird abfiltriert, mit Wasser gewaschen und an der Luft getrocknet, wobei man 120g (98%) der Titelverbindung erhält. Schmelzpunkt: 263-265⁰C (Zersetzung). Der Schmelzpunkt der so hergestellten Verbindung ist ungefähr 60°Chöheralsderinder Literatur* (Schmelzpunkt: 210-215⁰C [Zersetzung]) angegebene Schmelzpunkt. Die Elementaranalyse und die Spektraldaten stimmen jedoch mit der Struktur überein.

-68- 748 32

IR: ν"";; cm"¹ 3435, 3260, 3120, 2960, 2245, 2020,

1630, 1545, 1455, 1415.

UV: Λ^°^Η nm (Z) 248 (13300),

max

310 (3470).

NMR: 6^DMSO"^d6 4,21 (3H, s, 0CH.J; 8,30 (2H, br. NH.,).. ppm ό ζ

Analyse für C₅H₅N₅OS:

C HNS

Ber.: 32,78 2,75 38,23 17,50

Gel: 32,76 2,51 38,02 17,50

E. 2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoessigsäure(lll-1)

Eine Mischung von 2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl-2-methoxyiminoacetonitril (18,3 g, 0,1 Mol) in 4 N NaOH (250 ml (erhitzt man unter Rühren 3 h auf 50-55°C. Die Reaktionsmischung wird mit H₃PO₄ auf pH 1 eingestellt und mit Ethylacetat (100 ml) gewaschen, mit NaCI gesättigt und dreimal mit einer Mischung aus Ethylacetat und Tetrahydrofuran (3:1, 2 χ 300ml und 1 = 200ml) extrahiert. Die Extrakte werden vereinigt, über MgSO₄ getrocknet und unter vermindertem Druck eingeengt. Der Rückstand wird mit Isopropylether verrieben, wobei man blaßgelbe Kristalle der Titelverbindung erhält. Ausbeute 16,8g (83%). Schmelzpunkt: 184-185⁰C (Zersetzung). (Lit.* Schmelzpunkt: 180-182°C [Zersetzung]).

IR: v^iV"" cm"¹ 3460, 3260, 3140, 1725, 1620, 1605,

uLclX

1545.

UV: Λ^Η2° nm (Z) 234 (13200),

^maX' 288 (sh, 3620)-.

F. 2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetylchlorid-hydrochlorid

Zu einer Suspension von 2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoessigsäure (III-1) (40,4g, 0,2 Mol) in trockenem CH₂CI₂ (400 ml) gibt man auf einmal bei -50⁰C PCI₅ (41,6g, 0,2MoI). Man rührt die Mischung 4h bei -20 bis -5°C und gießt sie in eine Mischung aus n-Heptan und Isopropylether (2:1, 21). Der gelbe Niederschlag wird abfiltriert, mit dem gleichen Lösungsmittelgemisch gewaschen und mit KOH unter vermindertem Druck getrocknet. Man erhält 46,0g (90%) des Säurechlorids.

IR: v^Nu=>^o1 cm"¹ 1775 max \ι id.

* Japan Kokai 57-158769, veröffentlicht am 30. Sept. 1982, Fujisawa (brit. Anm. 6.3.81)

Herstellungsbeispiel 20

CONH

COOCH(Ph)₂

VIII-2 *Z

carboxylat (VIII-2, Z-Isomeres)

-69- 748 32

Zu einer Mischung von N,O-Bis-(trimethylsiIyI(-acetamid (2,3 ml, 9 mMol) und kristallinem Diphenylmethyl-7-amino-3-[3-chloroi-tZl-propen-i-yll-S-cephem^-carboxylat-hydrochlorid (XVIII) (1,338g, 2,8mMol) (aus Herstellungsbeispiel 12) in Methylenchlorid (10ml) gibt man unter Rühren bei -10⁰C portionsweise 2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-(Z)-ethoxyiminoacetylchlorid-hydrochlorid (800mg, 2,95mMol). Man läßt die Mischung 2h bei 0⁰C stehen. Die Mischung wird mit Ethylacetat (200 ml) verdünnt, mit Wasser gewaschen und unter vermindertem Druckeingeengt. Verreiben des Rückstandes mit Isopropylether liefert die Titelverbindung VIII-2 als amorphes Pulver. Ausbeute 1,70g (95%). Schmelzpunkt: >150°C (Zersetzung).

^KBr max

cm

"¹

3300, 1780, 1720, 1690, 1380, 1220.

UV: λ(°2^Η5^ΟΗ) nm (i) 285 (11000).

max

NMR:

ppm

Herstellungsbeispiel 21

1,26 (3H, t, J=7Hz, CH₂CH₃); 4,25 (2H, q, J=7Hz, CH₂CH₃); 5,90 (1H, d-d, J=4 und 8Hz, 7-H); 6,26 (1H, d, J=11Hz, 3-CH); 6,85 (1H, s, CHPh₂); 9,53 (1H, d, J=8Hz, 7-NH).

CONH

CH=CH-CH₂-I

IX-2

COOCH(Ph)

*A Mischung von E- und Z-Isomeren

Eine Mischung von VIII-2 (1,90g, 3mMol) (aus Herstellungsbeispiel 20) und Natriumiodid (1,4g, 9mMol) in Aceton (20ml) rührt man 10 min bei Raumtemperatur und läßt dann 3 h bei 5⁰C stehen. Die Mischung wird unter vermindertem Druck verdampft, mit Ethylacetat (100ml) verdünnt, mit 10%igem Natriumthiosulfat und Wasser gewaschen und unter vermindertem Druck verdampft. Verreiben des Rückstandes mit Isopropylether liefert 1,82 g (84%) der Titelverbindung IX-2 als schwach-braunes, amorphes Pulver.

^KBr max

cm"¹ 3290, 1770, 1720, 1670, 1530, 1370, 1220.

UV: A<^C2^H5^OH) max

Herstellungsbeispiel 22

nm

,1

_cm

) 304 (199).

ONH.

CH=CH-CH.

COOCH(Ph)₂

XXI-H Jodid *E

Diphenylmethyl-7-benzylidenamino-3-[(E)-3-(4-carbamoylpyridinio)-1-propenyl]-3-cephem-4-carboxylat (XXI-H Jodid) (E-Isomeres)

-70- 748 32

Zu einer gekühlten Lösung des 3-Chloropropenylcephems (XVII, Z-Isomeres, 42,8g, 9OmMoI) (aus Herstellungsbeispiel 16) in trockenem DMF (80 ml) gibt man auf einmal KJ (20g, 12OmMoI). Man rührt die Mischung bei Raumtemperatur. Die Reaktion wird mittels des UV-Absorptionsverhä!tnisses [E₁ ¹^ (255nm)/E_l ¹°^/^_l (320nm)] verfolgt. Wenn das Verhältnis kleiner als 1,10 wird (nach 45min), wird die Mischung mit 800ml Methylenchlorid verdünnt, zweimal mit Aktivkohle (4g) behandelt und filtriert. Den Filterkuchen wäscht man mit 100 ml CH₂CI₂. Man vereinigt das Filtrat und die Waschwässer und gibt Isonikotinamid (14,64g) zu und engt die Mischung unter vermindertem Druck ein. Man bewahrt das Konzentrat 1,5 h bei Raumtemperatur auf und wäscht mit einer Mischung aus Toluol und n-Heptan (1:1, 600 ml). Der braune halbfeste Rückstand wird in CH₂CI₂ (100 ml) gelöst. Zu der Lösung tropft man unter heftigem Rühren Ethylacetat (3I). Nach dem Trocknen über P₂O₅ im Vakuum erhält man 57,37g (88%) der quatemisierten Titelverbindung XXI-H als Jodid. Gelbes amorphes Pulver. Schmelzpunkt: 150-155⁰C (Zersetzung). Dieses Produkt ist identisch mit dem durch Jodierung mit NaJ erhaltenen Produkts (Herstellungsbeispiel 17).

Herstellungsbeispiel 23 HCl

¹ I

CH=CH-CH₂-Cl COOCH(Ph)₂

XVIII *Z

Diphenylmethyl-7-amino-3-(3-chloro-1-propenyl)-3-cephem-4-carboxylat-hydrochlorid (Z-Isomeres) (XVIII, Hydrochlorid)

Eine 25%ige Lösung von Chloracetaldehyd (69g, 0,22 mMol) in CHCI₃ gibt man bei -10⁰C in einer Portion zu einer Lösung von XVI (80g, 0,11 Mol) in CH₂CI₂ (1,11), die N,O-Bis-(trimethylsilyl)-acetamid (16,2 ml, 0,06MoI) enthält. Man läßt die Mischung über Nacht bei 5°C stehen. Die Mischung wird auf ca. 0,31 eingeengt, mit einem Lösungsmittelgemisch aus Ethylacetat und lsopropylether(1/2, 0,6I) verdünnt, mitSilikagel (Wako-Gel C-100, 60g) behandelt und über ein Dicalit-Bett filtriert. Der Filterkuchen wird mit dem gleichen Lösungsmittelsystem (0,21) gewaschen. Die vereinigten Filtrate und Waschwässer werden auf ca. 0,21 eingeengt, mit Garard-Reagens T (60g, 0,26MoI) und 4 N HCI (220 ml) behandelt und mit einigen Kristallen von XVIII-Hydrochlorid angeimpft. Nach 3stündigem Rühren filtriert man die ausgeschiedenen Kristalle ab, wäscht sie mit Wasser (0,5I) und Ethylacetat (0,5I) und trocknet im Vakuum, wobei man 37 g (70%) der Titelverbindung XVIII-Hydrochlorid erhält. Schmelzpunkt: > 185⁰C (Zersetzung). Blaßgelbe Nadeln. Dieses Produkt ist identisch mit dem gemäß Herstellungsbeispiel 12 erhaltenen Produkt.

Herstellungsbeispiel 24 HCl

CH=CH-CH₂-Cl

XVIII *Z

Diphenylmethyl-7-amino-3-(3-chloro-1 -propenyO-S-cephem^-carboxylat-hydrochlorid (Z-Isomeres) (XVIII, Hydrochlorid)

Zu einer Lösung von Chloracetaldehyd (25%ige Lösung in CHCI₃,628 mg, 2 mMol) in CH₂CI₂ (10 ml) gibt man bei 5°C nacheinander N,O-Bis-(trimethylsilyl)-acetamid (0,135ml, 0,5mMol) und XVI (728mg, 1 mMol). Man läßt die Mischung über Nacht bei 5°C stehen. Die Mischung wird verdampft und mit einer Mischung aus Ethylacetat und Isopropylether (1/2,10ml) verdünnt. Man filtriert die unlöslichen Bestandteile ab und engt das Filtrat auf ca. 5ml ein. Da.^c Konzentrat wird mit 4 N HCI (2 ml) behandelt, mit XVIII-Hydrochlorid angeimpft und 1 h bei Raumtemperatur gerührt. Die Kristalle werden abfiltriert, mit Ethylacetat (10ml) und Wasser (10 ml) gewaschen und im Vakuum getrocknet, wobei man 384 mg (80%) der Titel verbindung XVIII-Hydrochlorid erhält. Schmelzpunkt: >185°C (Zersetzung). Blaß-gelbe Nadeln. Dieses Produkt ist identisch mit dem gemäß Herstellungsbeispiel 12 erhaltenen Produkts.

Herstellungsbeispiel 25

2-(5-Amino-1 ^^-thiadiazol-S-yO^-lpropen-S-yl-oxyiminoJ-acetylchlorid-hydrochlorid (III-3 als Säurechlorid-hydrochlorid

A. Methyl^-fB-t-butoxycarbonylamino-i^^-thiadiazol-S-yO^-ipropen-S-yloxyiminoJ-acetat Eine Mischung von 685mg (3,37 mMol) N-(Propen-3-yloxy)-phthalimid (hergestellt gemäß dem Verfahren von E. Grochosaki & J. Jurczak, Synthesis 1976, 682) und 175mg (3,35mMol) Hydrazinhydrat in 5ml C₂H₅OH rührt man 1 h bei Raumtemperatur. Man filtriert den ausgeschiedenen Niederschlag ab und vereinigt das Filtrat und die Waschwässer. Zu der Lösung gibt man 967 mg (3,37mMol) Methyl-2-(5-t-butoxycarbonylamino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-oxoacetat. Man läßt die Mischung 1 h bei Raumtemperatur stehen und engt an einem Rotationsverdampfer ein. Den Rückstand reinigt man durch Chromatographie an Silikagel. Die Säule wird mit n-Hexan/Ethylacetat (4:1) eluiert und die das Hauptprodukt enthaltenden Fraktionen werden vereinigt und unter vermindertem Druck eingeengt. Ausbeute 514mg (46%). Schmelzpunkt: 83-86⁰C.

-71-748

IR: v^KBr cm"¹ 3100, 1745, 1710, 1610.

ΙΠ3.Χ

UV: A^(C2^H5^OH) nm (E) 223 (9700),

^max 2 42 (10000).

fenci )

NMR: _δ^^3^; 1,55 (9H, s, BOC-H); 4,40 (2H, d, ppm

-J=5Hz, 0-CH₀); 5,21 (2H, m, CH₉=CH) ;· 5,90 (1H, m, -CH=CH₂); 9,50 (1H, br.s,

NH)

B. 2-(5-t-Butoxycarbonylamino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-(propen-3-yloxyimino)-essigsäure

Eine Lösung von 770mg (2,3mMol) Methyl^-fS-t-butoxycarbonylamino-i^^-thiadiazol-S-yD^-ipropen-S-yl-oxyiminol-acetat und 3,5 ml einer 2 N NaOH-Lösung (7,OmMoI) in 15 ml CH₃OH erhitzt man 30 min unter Rückfluß. Die Reaktionsmischung wird im Vakuum eingeengt und mit 10 ml Ethylacetat-H₂O (1:1) verdünnt. Die wäßrige Schicht wird abgetrennt, mit 6 N HCI auf pH angesäuert und mit Ethylacetat (2 χ 10ml) extrahiert. Die Ethylacetatlösung wird über MgSO₄ getrocknet und am Rotationsverdampfer eingeengt, wobei man 596 mg (81 %) der Titelverbindung erhält. Schmelzpunkt: 134—135°C (Lit./I/: Schmelzpunkt: 135-136°C).

IR: _v(^NuJ^o1) _cm-¹ 3150, 1745, 1710, 1550.

ΙΠ3.Χ

C. 2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-(propen-3-yl-oxyimino)-essigsäure (lll-3)/1/

Eine Lösung von 570mg (1,74mMol) 2-(5-t-Butoxycarbonylamino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-(propen-3-yloxyimino)-essigsäure in 6ml Trifluoressigsäure läßt man 1 h bei Umgebungstemperatur stehen. Verdampfen der Mischung und anschließendes Verreiben mit 30 ml Isopropylether liefert 376 mg (95%) der Titelverbindung. Schmelzpunkt: 109°C (Zersetzung).

IR: v^^jol) cm"¹ 3180, 1710, 1545, 1460.

Ul clX

UV: A^(C2^H5^OH) nm (E) 245 (13500).

max

NMR:

ppm

5,20 (2H, m, CH=CH); 6,0 (1H, m, CH=CH₉).

1 Japan Kokai 57-112396(13.7.82., Fujisawa)

Brit. Anm. 7935538 (12.10.79). D. 2-(5-Amino-1 ^^-thiadiazol-S-yll^-fpropen-S-yl-oxyiminoJ-acetylchlorid-hydrochlorid Eine Lösung von 350mg (1,54mMol) III-3 und 410mg (1,97mMol) Phosphorpentachlorid in Dichlormethan (5ml) rührt man 1 h bei 25°C. Man gießt die Reaktionsmischung in 60 ml η-Hexan und filtriert den Niederschlag ab. Ausbeute 323 mp.

Herstellungsbeispiel 26

2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-propargyloxyiminoacetylchlorid (III-4 als Säurechloridhydrochlorid

A. Methyl-2-(5-t-butoxycarbonylamino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-propargyloxyiminoacetat

Eine Suspension von 870mg (4,32mMol) N-Propargyloxyphthalimid/1/ und 200mg (4,OmMoI) Hydrazinhydrat in 5ml Ethanol rührt man 1 h bei 25°C und filtriert. Man vereinigt das Filtrat und die Waschwässer und gibt dazu 1,0g (3,86mMol) Methy|-2-(5-tbutoxycarbonylamino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-oxoacetat/2/. Man läßt die Lösung 1 h stehen und engt unter vermindertem Druck ein. Reinigung mittels Silikagel-Chromatographie und anschließendes Verdampfen liefert 319mg (27%) der Titelverbindung. Schmelzpunkt: 72-75°C.

-72- 748

IR: v^KBr cm"¹ 3200, 2380, 1745, 1710, 1610. mx

UV: A^(C2^H5^OH) nm (ε) 235 (12200).

max

NMR: ö(^DMS0-^d ₆> 1,56 (9H, s, BOC-H); 3,55 (1H₇ t, ppm

J=2Hz, C=CH); 4,85 (2H, d, J=2Hz,

-CH₂-CSCH); 8,9 (1H, br.s, NH).

1 Handelsprodukt, Aldrich.

2 I.Csendes et al., J. Antibiotics 36,1020(1983).

B. 2-(5-t-Butoxycarbonylamino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-propargyloxyiminoessigsäure Eine Lösung von 490mg (1,4mMol) Methyl-2-(5-t-butoxycarbonylamino-1,2,4-thiadia2ol-3-yl)-2-propargyloxyiminoacetat und 2,2ml einer 2 N wäßrigen NaOH-Lösung (4,4mMol) in 14ml CH₃OH erhitzt man 30min unter Rückfluß. Die Reaktionsmischung wird unter vermindertem Druck eingeengt und mit 10 ml Ethylacetat-H₂O (1:1) versetzt. Die abgetrennte wäßrige Schicht wird mit 6 N HCI auf pH 2 angesäuert und mit Ethylacetat extrahiert (2 x 10 ml). Trocknen über MgSO₄ und anschließendes Verdampfen der organischen Schicht liefert 149mg (89%) der Titelverbindung. Schmelzpunkt: 135°C (Zersetzung).

IR: y(Nujol) _cm-1 3350, Π20, 1670, 1550.

lUclX

UV: X^(C2^H5^OH) nm (ε) 233 (11500). max

NMR: _ö(^DMS°-^d ₆) ί 55 (_{9H s B}0C-H); 3,55 (1H, t, ppm

J=2Hz, CscH); 4,89 (2H, d, J=2Hz,

CH₂C=CH); 9,0 (1H, s, NH).

C. 2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-propargyloxyiminoessigsäure (lll-4)/3/ Eine Lösung von 410mg (1,26mMol) 2-(5-t- Butoxycarbonylamino-i^^-thiadiazol-S-yD^-propargyloxyiminoessigsäure in 5ml Trifluoressigsäure läßt man 1 h bei 25°C stehen. Eindampfen und anschließendes Verreiben des Rückstandes mit 25ml Isopropylether ergibt 204mg (72%) der Titelverbindung. Schmelzpunkt: 156-158°C (Zersetzung).

.. „ cm"¹ 3300, 2480,. 1730, 1610.

IU CiX

UV: A^(C2^H5^OH) nm (E) 234 (12000).

max

NMR: ₆(^DM-SOd₆) ^_{52 (1R}^ ^ _{J=2Hz f C}=CE) ; 4,86

(2H, d, J=2Hz, CH₂-C=CH); 8,10 (2H, br.S, NH₂)

3 Japan Kokai 57-112396 (13.7.82, Fujisawa)

BHt. Anm. 7935538 (12.10.79). D. 2-(5-Amino-1,2,4-thiadia7ol-3-yl)-2-propargyloxyiminoacetylchlorid-hydrochlorid Eine Mischung von ". 5 mg (0,07 mMol) iii-4 und 182 mg (0,88 mMol) Phosphorpentachlorid in Dichlormethan (2 ml) rührt man 1 h bei -5⁰C. Die Reaktionsmischung wird in 30 ml η-Hexan gegossen und der Niederschlag wird abfiltriert. Ausbeute 65mg (34%).

^{IR: v}max^J^^{; cm}~¹ ^0.

-73- 748 32

Herstellungsbeispiel 27

2-(5-Amino-1 ^^-thiadiazol-S-ylJ^-cyclopentyloxyiminoacetylchlorid-hydrochlorid (III-5 als Säurechlorid-hydrochlorid

A. Methyl-2-(5-t-butoxycarbonylamino-1 ^^-thiadiazol-S-yll^-cyclopentytoxyiminoacetat .

Eine Suspension von 860mg (3,7mMol) N-fCyclopentyloxyl-phthalimid/i/ und 185mg (3,7mMol) Hydrazinhydrat in 5ml C₂H₅OH rührt man 1 h bei Umgebungstemperatur und filtriert. Das Filtrat und die Waschwässer werden vereinigt und zu 1,06g (3,7mMol) Methyl-2-(5-t-butoxycarbonylamino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-oxoacetat/2/ gegeben. Man läßt die Lösung 1 h bei Raumtemperatur stehen und engt dann im Vakuum ein. Der Rückstand wird mittels Silikagel-Säulenchromatographie gereinigt. Eluierung mit n-Hexan/-Ethylacetat (4: Hund anschließendes Verdampfen liefert die Titelverbindung. Ausbeute 906 mg (81 % ). Schmelzpunkt: 115-118⁰C.

IR: v^KBr cm"¹ 3200, 1745, 1710, 1550. max

UV: A^(C2^H5^OH) nm (£) 217 (1800), ^max 252 (7600).

NMR: 6^(CDC13⁾ 1,51 (9H, s, BOC-H); 1,60 (8H, br.s, ppm

~(Zi^); 3,88 (3H, s, OCH₃); 4,90 (IH, br.s, Xl^{); 8}'^{70 (1H}' ^br-^s'

1 U. S. Patent 3971778 (27.7.76; Glaxo),

Brit. Anm. 49255 (25.10.72)

2) I.Csendesetal., J. Antibiotics 36, 1020(1983)

B. 2-(5-t-Butoxycarbonylamino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-cyclopentyloxyiminoessigsäure Eine Lösung von 500mg (1,34mMol) Methyl-2-(5-t-butoxycarbonylamino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-cyclopentyloxyiminoacetat und 2N NaOH-Lösung (2ml, 4mMol) in 15ml CH3OH erhitzt man 30min unter Rückfluß. Man verdampft die Reaktionsmischung und gibt 10 ml Ethylacetat-H₂O (1:1) zu der Lösung. Die wäßrige Schicht wird abgetrennt, mit 6 N HCI auf pH 2 angesäuert und mit Ethylacetat extrahiert (2 χ 10 ml). Die organische Schicht wird mit Kochsalzlösung gewaschen, über MgSO₄ getrocknet und unter vermindertem Druck eingeengt, wobei man 377 mg (78%) der Titelverbindung erhält. Schmelzpunkt: 185°C (Zersetzung).

IR: v^KBr cm"¹ 3160, 1710, 1550.

IU 3.X

UV: A^(C2^H5^OH) nm (E) 238 (13300).

max NMR: s^(D^^S0) 1,51 (9H, s, BOC-H); 1,70 (8H, br.s,

Γλ ^Η

H-/ ) ; 4,82 (1Η, m,

C. 2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-cyclopentyloxyiminoessigsäure (ΙΙΙ-5, Z-lsomeres)/3/ Eine Lösung von 348mg (0,97mMol) 2-(5-t-Butoxycarbonylamino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-cyclopentyloxyiminoessigsäure in 2mlTrifluoressigsäure läßt man 1 h bei Raumtemperatur stehen. Die Reaktionsmischung engt man unter vermindertem Druck ein. Der Rückstand wird mit 5 ml Isopropylether und 10 ml Hexan verrieben, wobei man 215 mg (86%) der Titelverbindung erhält.

Schmelzpunkt: 162-165⁰C (Zersetzung) (Lit/3/: Schmelzpunkt 160-165⁰C (Zersetzung)].

- 74 - 748 32

^cm~^{1 3290}' ³²⁰⁰' 1710, 1615, 1600.

UV: A^(C2^H5^OH) nm (£) 238 (13300). max

^{NMR: 6S}°"^{d6) 1}'¹⁷ - 2,10 (8H_f m); 4,60 - 4,98 (1H,

m) ; -8,22 (2H, s) .

3 Japan Kokai 57-158769 (30.9.82, Fujisawa)

Brit. Anm. 8107134(6.3.81)

D. 2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-cyclopentyloxyiminoacetylchlorid-hydrochlorid Eine Lösung von 190 mg (0,74 m Mol) III-5 und 219mg (1,OmMoI) Phosphorpentachlorid in Dichlormethan (5ml)rührtman1hbei Raumtemperatur. Die Lösung gießt man in 50ml η-Hexan. Der ausgeschiedene Niederschlag wird abfiltriert. Ausbeute 122mg (60%).

α."¹ ,760.

Herstellungsbeispiel 28 Benzotriazol-1-yl-2-(5-amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetat

Eine Mischung von 1-Hydroxybenzotriazol (2,7g, 2OmMoI) und Dicyclohexylcarbodiimid (4,12g, 2OmMoI) in 65ml DMF rührt man bei Raumtemperatur. Nach 15min gibt man unter Rühren bei 0⁰C III-1 (4,04g, 2OmMoI) zu und rührt dann weitere 3h. Die Reaktionsmischung wird zur Entfernung des unlöslichen Harnstoffs filtriert und der Filterkuchen wird mit einem geringen Volumen DMF gewaschen. Das Filtrat und die Wasch wasser werden vereinigt und in 800 ml Eiswassergegossen. Der Niederschlag wird abfiltriert, wobei man 5,24g (82%) der Titelverbindung als schwach-graues Pulver erhält. Schmelzpunkt: 189-192T (Zersetzung)!

IR: v^KBr cm"¹ 1815, 1620, 1540, 1415, 1090, 1060, max

1005, 945, 865, 740.

UV: A^(C2^H5^OH) nm (E^1% _cm) 246 (580),

^max 283sh (228) .

Claims (4)

Erfindungsanspruch: R1 ein Wasserstoffatom oder eine übliche Aminoschutzgruppe bedeutet, R2 ein Wasserstoff atom, eine geradkettige oder verzweigte Alkylgruppe mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, eine Cycloalkyl- oder Cycloaikenylgruppe mit 3 bis 6 Kohlenstoffatomen, oder einen Rest der allgemeinen Formeln: COOH -C-CH=CH-R , έ5 C-C ' -1 oder :-cooH , bedeutet, worin R3 ein Wasserstoffatom, eine Niedrigalkyl- oder Carboxylgruppe bedeutet, X für ein Halogenatom, eine Hydroxy- oder Niedrigalkoxygruppe steht und R4 und R5 jeweils unabhängig voneinander ein Wasserstoffatom, eine Methyl- oder Ethylgruppe bedeutet oder zusammen mit dem Kohlenstoffatom an das sie gebunden sind, einen Cycloalkylidenring mit 3 bis 5 Kohlenstoffatomen bilden, und θ -N=Q eine quaternäre Ammoniogruppe bedeutet; und der nicht-toxischen, pharmazeutisch verträglichen Salze und physiologisch hydrolysierbaren Ester davon, gekennzeichnet dadurch, daß man eine Verbindung der allgemeinen Formel: CONH H=CH-CH2Z COOB' R2 die gleichen Bedeutungen besitzt wie R2 oder für einen Rest der Formeln: COOB- oder -C-COOB' steht, worin

1*

steht, worin X, R⁴ und R⁵ die oben angegebenen Bedeutungen besitzen, B¹ eine übliche Carboxylschutzgruppe bedeutet und B² ein Wasserstoffatom oder eine übliche Amino-Schutzgruppe bedeutet,
umsetzt.
2. Verfahren nach Punkt 1 zur Herstellung der Verbindungen der Formel I, worin

ausgewählt ist unter

,13

,14

.16

\ 2'

OR

oder einem acylierenden Derivat davon, worin R² die gleichen Bedeutungen besitzt wie R² oder für einen Rest der Formeln:

COOB'

oder

-C—COOB

-2- 748 32

X, R⁴ and R⁵ die oben angegebenen Bedeutungen besitzen,

B¹ eine übliche Cyrboxyl-Schutzgruppe bedeutet,

B² ein Wasserstoffatom oder eine übliche Aminoschutzgruppe bedeutet,

Z für ein Chlor-, Brom-oder Jodatom steht und

m für Null oder 1 steht,

mit einem tertiären Amin der FormeJ Q=N (oder nacheinander mit einem sekundären Amin der Formel RR'NH und einer Verbindung der Formel R"Z) umsetzt und, falls m für 1 steht, das Sulfoxid in üblicherweise reduziert und anschließend alle Schutzgruppen in üblicherweise entfernt, oder daß man eine Verbindung der allgemeinen Formel:

CH=CHCH₂-N=Q

COO

mit einer Säure der allgemeinen Formel:

N W- C COOH

Il

fi

3-cephem-4-carboxylat, k) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(4-hydroxymethylpyridinio)-1-propen-1-yl]-3-

cephem-4-carboxylat, I) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(3-hydroxymethylpyridinio)-1-propen-1-yl]-3-

cephem-4-carboxylat, m) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(4-N-methylcarbamoylpyridinio)-1-propen-1-yl]-3-

cephem-4-carboxylat, n) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(2,3-propylenpyridinio)-1-propen-1-yl]-3-cephem-

3. Verfahren nach Punkt 2 zur Herstellung der Verbindung der Formel I, worin

R² eine Niedrigalkylgruppe, Cycloalkylgruppe mit 3 bis 5 Kohlenstoffatomen, 1-Carboxycycloalk-i-yl mit 3 bis 5 Kohlenstoffatomen, Allyl-, Propargyl- oder eine Carboxyniedrigalkylgruppe bedeutet.

4. Verfahren nach Punkt 3 zur Herstellung folgender Verbindungen a-v:

a) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(trimethylammonio)-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-carboxylat,

b) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(1-methylpyrrolidinio)-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-carboxylat,

c) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-pyridinio-1-propen-1-yl)-3-cephem-4-carboxylat,

d) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(3-aminopyridinio)-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-carboxylat,

e) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(3-formylaminopyridinio)-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-carboxylat,

f) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(3-aminomethylpyridinio)-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-carboxylat,

g) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(3-carbamoylpyridinio)-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-carboxylat,

h) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(4-carbamoylpyridinio)-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-

carboxylat, i) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(2-methylthiazolio)-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-

carboxylat, j) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(2-amino-5-thiazolo[4,5-c]pyridinio)-1-propen-1-yl]-

-3- 748

R¹³, R¹⁴ und R^1S, die gleich oder verschieden sein können, eine Niedrigalkyl-, Niedrigalkenyl-, Aminoniedrigalkylgruppe mit der Maßgabe, daß die Aminogruppe sich nicht am «-Kohlenstoffatom befindet, oder eine Hydroxynidrigalkylgruppe mit der Maßgabe, daß sich die Hydroxygruppe nicht am «-Kohlenstoffatom befindet, bedeuten; R¹⁶ ein Wasserstoffatom, eine Niedrigalkyl-, Niedrigalkoxy-, Niedrigalkylthio-, Amino-, Niedrigalkylamino-, Diniedrigalkylamino-, Formylamino-, Niedrigalkanoylamino-, Carboxy-, Hydroxy-, Carboxyniedrigalkyl-, Carboxyniedrigalkylthio-, Hydroxyniedrigaikyl-, Halogenniedrigalkyl-, Aminoniedrigalkyl-, Niedrigalkoxyniedrigalkyl-, Carbamoyl- oder N-Niedrigalkylcarbamoylgruppe oder eine divalente Alkylgruppe mit 3 bis 5 Kohlenstoffatomen bedeutet.

R¹⁷ für eine Niedrigalkyl-, Niedrigalkoxyniedrigalkyl-, Halogenniedrigalkyl-, Allyl-, Hydroxyniedrigalkylgruppe mit der Maßgabe, daß sich die Hydroxygruppe nicht am a-Kohlenstoffatom befindet, eine Aminoniedrigalkylgruppe mit der Maßgabe, daß sich die Aminogruppe nicht am a-Kohlenstoffatom befindet, oder für eine Phenylniedrigalkylgruppe steht; R¹⁸ ein Wasserstoffatom, eine Niedrigalkyl-, Niedrigalkoxy-, Niedrigalkoxyniedrigalkyl-, Niedrigalkylthio-, Amino-, Niedrigalkylamino-, Diniedrigalkylamino-, Carboxy-, Hydroxy-, Carboxyniedrigalkyl-, Hydroxyniedrigaikyl-, Aminoniedrigalkyl-, Formylamino-, Niedrigalkanoylamino-, Carbamoyl- oder eine N-Niedrigalkylcarbamoylgruppe bedeutet; η für eine ganze Zahl von 1 bis 3 einschließlich, steht; Z für CH₂ oder, wenn η für 2 steht, auch für S, O oder N-R¹⁹ steht, wobei R₁₉ ein Wasserstoffatom oder eine Niedrigalkylgruppe bedeutet; und R²⁰ und R²¹, die gleich und verschieden sein können, ein Wasserstoffatom, eine Niedrigalkyl-, Niedrigalkoxy-, Niedrigalkylthio-, Amino-, Niedrigalkylamino-, Diniedrigalkylamino-, Carboxy-, Hydroxy-, Hydroxyniedrigaikyl-, Aminoniedrigalkyl-, Niedrigalkoxyniedrigalkyl-, Carboxyniedrigalkyl-, Carboxyniedrigalkylamino-, Niedrigalkanoylamino-, Carboxyniedrigaikanoylamino-, Carbamoyl- oder eine N-Niedrigalkylcarbamoylgruppe bedeutet.

4-carboxylat, o) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-ethoxyiminoacetamido]-3-[3-(4-carbamoylpyridinio)-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-

carboxylat, p) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-cyclopentyloxyiminoacetamido]-3-[3-(4-carbamoylpyridinio)-1-propen-1-yl]-3-

CR: ihem-4-carboxyla?, q) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-allyloxyiminoacetamido]-3-[3-(4-carbamoylpyridinio)-1-propen-1-yl-]-3-cephem-4-

carboxylat, r) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-propargyloxyiminoacetamido]-3-[3-(4-carbamoylpyridinio)-1-propen-1-yl]-3-

cephem-4-carboxylat, s) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(4-carboxypyridinio)-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-

carboxylat, t) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-ethoxyiminoacetamido]-3-[3-(4-carboxypyridinio)-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-

carboxylat, u) 7-[2-(5-Amino-1,2,4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyimino-acetamido]-3-t3-(3-carboxymethylpyridinio)-1-propen-1-yl]-3-

cephem-4-carboxylat, und v) 7-[2-(5-Amino-1,2-4-thiadiazol-3-yl)-2-methoxyiminoacetamido]-3-[3-(4-carboxymethylthiopyridinio)-1-propen-1-yl]-3-cephem-4-carboxylat.