SE505256C2 - Nya 7-amino cefalosporinderivat med en kvaternär ammoniogrupp samt förfarande för framställning därav - Google Patents

Description

505 256 alkynyl, eventuellt substituerad cykloalkyl, cykloalkenyl eller en O- eller S-haltig 5-ledad heterocyklisk ring, som är substituerad med oxo-grupper; R3 är väte eller alkyl; R4 är väte, acyloxialkyl, acyltioalkyl, eventuellt substituerad pyridinioalkyl, eventuellt substituerad hetero- cyklyltioalkyl, alkyl, halogen, hydroxi eller eventuellt substituerad “tiazolioalkyl; och R5 är karboxi eller skyddad karboxi; med det förbehållet att R5 är C00- när R4 är even- tuellt substituerad pyridinioalkyl eller eventuellt sub- stituerad tiazolioalkyl; och den streckade linjen anger antingen enfenkel- eller dubbelbindning.

Europeiska patentansökan 13 762, publicerad den 6 augusti 1980, överensstämmer därmed och har en liknande beskriv- ning.

De amerikanska patenten 4 381 299 (beviljat 26 april 1983), 4 331 665 (beviljat 25 maj 1982) och 4 332 798 (beviljat 1 juni 1982), vilka vardera baserar sig på moderansökningar till amerikanska patentet 4 390 534, har liknande beskriv- ningar.

B) Europapatentansökningen 62 321, som publicerades den 13 oktober 1982, avslöjar cefem-föreningar med formeln al '-cous____' ä ä ni àfiz f / ' 0 \\ vari R1 är amino eller skyddad amino; R2 är en eventuell substituerad lägre alifatisk kolvätegrupp eller cyklo- alkenyl; och gruppen med formeln f\ 1 \ "4í(3 I äf 505 256 är en eventuell substituerad beterocyklisk katjongrupp, som innehåller mer än en kväveatom; och farmaceutiskt godtagbara salter därav. Som mellanprodukter avslöjas även föreningar med formeln s nl-å ä; š-coua-fl-T p S ¿R2 67--N ll/ \\ ' ~\ I 4 caz N\®/ . 3 __ vari R1 och R2 har ovan angivna betydelser, R4 är en skyddad karboxylgrupp och X- är en syragrupp.

C) Europapatentansökningen 74 653, som publicerades den 23 mars 1983, avslöjar cefem-föreningar med formeln C009 _ ' 1 vari R är amino eller skyddad amino; R2 är en eventuellt substituerad lägre alifatisk kolväte- grupp, cyklo(lägre1alkyl) eller cyklo(lägre alkenyl); R3 är lägre alkylamino, N-skyddad(lägre alkyl)amino, di(lägre alkyl)amino, sulfo(lägre alkyllamino, hydroxi- (lägre a1ky1)am1no, N-skyddad hydroxi(lägre alkyl)amino, acyloxi(lägre alkyl), (lägre alköxi)(1ägre alkoxi)(lägre' alkyl), d1(lägre alkyl)amino(lägre alkyl), (lägre alkyl)- tio(lägre alkyl), (lägre alkyl)tio, lägre alkoxiq (lägre alkoxi)(lägre alkoxi), hydroxi(lägre alkoxi), acylllägre alkyl), hydroxi(lägre alkyl)tio, di(lägre alkyl)amino(lägre 505 256 alkyl)tio, N-haltig omättad 5-ledad heterocyklisk grupp, N-haltig omättad 5-ledad heterocyklyltio eller N-haltig omättad 5- eller 6-ledad heterocyklylt1o(lägre alkyl), som kan vara substituerad med 1ämp1iga substituenter: och R4 är väte eller lägre alkyl; är ett salt därav.

D) Amerikanska patentet 4 332 800, som beviljades den 1 juni 1982, avslöjar bl.a. föreningar med formeln V -CÖNH S ' Lås/N ai 32 æjjQ-cflï i se vari R1 är amino eller skyddad amino; R2 är lägre alkyl och X är väte eller karbamoyl.

E) Europapatentansökningen 47 977, som publicerades den 24 mars 1§82, avslöjar cefem-föreningar med formeln (0) f,m Am- r-fi -coua_-f s z-az )/'_' / 0 _ cnzn :we I vari m är 0 eller 1; Am är eventuellt substituerad amino; T är en tiadiazolylgrupp (bunden till de andra grupperna via två av sina kolatomer); R2 är väte, even- tuellt substituerad alkyl, cykloalkyl eller eventuellt substituerad karbamoyl; och R1 är en eventuellt substituerad 505 256 tiazolio-, eventuellt substituerad pyrazolio-, tri(lägre alkyl)ammonio- eller pyridiniogrupp med formeln RI _@,./ \ c --. b R vari Ra är substituerad lägre alkyl [šubstituenten är cykloalkyl, fenyl, hydroxi, alkoxi, halogen, cyano, karba- moyl, karboxyl eller sulfq], lägre alkenyl eller karboxi- substituerad lägre alkenyl, lägre alkyltio eller karboxi- substituerad lägre alkyltio, amino eller monosubstituerad amino jšubstituenten är lägre alkyl, lägre alkanoyl eller aminobensensulf0ñyl], di(lägre alky1)amino, substituerad karbamoyl.[substituenten är lägre alkyl, hydroxi(lägre alkyl), lägre alkoxi, hydroxi eller cyanQ], di(lägre alkyl)- karbamoyl, tiokarbamoyl, cykloalkyl, fenyl, hydroxi, lägre alkoxi, halogen, (lägre alkoxi)karboñyl, lägre alkanoyloxi, lägre alkanoyl, karboxyl, sulfo, cyano, nitro eller hydroxi- sulfo(lägre alkyl); Rb är väte eller karbamoyl eller har samma betydelse som Ra; och Rc är väte eller har samma betydelse som Ra; och salter därav.

Ehuru europapatentansökningen 25 017, som publicerades den 11 mars 1981, formellt icke är relaterad till ovan angivna europapatentansökan har den en liknande beskrivning.

F) Europapatentansökningen 30 630, som publicerades den 24 juni 1981, avslöjar 3-vinyl-cefem-föreningar med for- meln 1 S ' a - A- cona-u-I/ g N 2 \ca-cn2 R 505 256 vari R1 är en eventuellt skyddad aminosubstituerad hetero- cyklisk grupp, som även kan innehålla halogen, eller en grupp med formeln 3 R SO2BN vari R3 är lägre alkyl; R2 är karboxi eller skyddad karboxi; och A är lägre alkylen, som kan innehålla en substituent, som utgöres av amino, skyddad amino, hydroxi, oo eller en grupp med formeln =N~0R4, där R4 är väte, cyklo(lägre alkenyl), lägre alkynyl, lägre alkenyl [eventuellt substi- tuerad med karboxi eller skyddad karboxil, lägre alkyl -[eventuellt skyddad med en eller flera karboxi, skyddad karboxi, amino, skyddad amino, cyano, fosfono, skyddad fosfono eller en heterocyklisk grupp, som i sin tur kan vara substituerad]; och salter därav.

Denna ansökan avslöjar specifikt föreningar med formeln ^ com / an/“um I = s/ \on' ä* / C008 -cn vari OR4 är metoxi, karboximetoxi, tert-butoxikarbonyl- metoxi eller 1-tert-butoxikarbonyletoxi.

G) Brittiska patentet 1 399 086, som publicerades den 25 juni 1975, innehåller en generisk beskrivning innefattande ett mycket stort antal.cefak:qpæhma:. med formeln *fiiíïïïf C008 505 256 möjliga betydelserna för R3 exemplifierar ansökningen endast föreningar, vari R3 är väte, klor eller vinyl.

I) Amerikanskap patentet 4 307 233, som beviljades den 22 december 1981, avslöjar bl.a. 3-vinylcefalosporinderi- vat med formeln S cona-à/ . vari Rs bl.a. kan vara alkyl, vinyl, cyanometyl eller en skyddsgrupp såsom 2-metoxiprop-2-yl och R3 och R4 är alkyl- grupper (eventuellt substituerade med hydroxi, alkoxi, amino, alkylamino eller dialkylamino) eller fenylgrupper eller R3 och R4 tillsammans med den kväveatom till vilken de är bundna kan utgöra en mättad heterocyklisk ring med S- eller 6 led, eventuellt innehållande en annan heteroatom, som utgöres av N, O eller S, och eventuellt sübstituerad med en alkylgrupp. Föreningarna är användbara som mellan- produkter vid framställning av 3-tiovinylcefalosporinderi- vat. Det finns icke något avslöjande eller antydan om en S-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl-grupp i stället för 2-amino- tiazol-4-yl-substituenten eller om en ¿kvaternär ammonio- substituerad propenylgrupp som 3-substituent. Den publice- rade brittiska patentansökningen 2 051 062 överensstämmer därmed och har en liknande beskrivning.

J) Europapatentansökningen 53 S37, som publicerades den 9 jdni 1982, avslöjar bl.a. 3-vinylcefalosporinderivat med formeln 505 256 _ l \ E, áoun j n få? \ _ se /f-J' / 2 2'/°\°§°“S Rs Rs _c,,_N/“: “a vari R: och R: är lika eller olika och är väte eller alkyl eller tillsammans bildar en alkylengrupp innehållande 2 eller 3 kolatomer, R: är en syraskyddande grupp, R2 är en syraskyddande grupp såsom en ester, R3 och R4 är lika eller olika och är väte, alkyl (eventuellt substituerad med hydroxi, alkoxi, amino, alkylamino eller dialkylamino) eller fenyl eller R3 och R4 tillsammans med den kväveatom till vilken de är bundna bildar en mättad heterocyklisk ring med 5 eller 6 led, eventuellt innehållande en annan heteroatom, som utgöres av N, O eller S, och eventuellt substituerad med en alkylgrupp. Föreningarna är använd- bara som mellanprodukter vid framställning av 3-tiovinyl- cefalosporinderivat. Det finns icke något avslöjarude eller an- tydan om en 5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl-grupp i stället för 2-aminotiazol-4-yl-substituenten eller om en Äkvaternär ammonio-substituerad propenylgrupp som 3-substituent.

Amerikanska patentet 4 423 214 överensstämmer därmed och har en liknande beskrivning.

K) Europapatentansökan 53 074, som publicerades den 2 juni 1982, avslöjar generiskt ett stort antal 3-vinylcefalo- sporinderivat med formeln 505 256 vari R°1a (1 en av flera utföringsformer) kan vara °CO° N š_ /Ls : \°R n: 5 vari RS bl.a. kan vara väte, alkyl, vinyl, cyanometyl, en oximskyddande grupp såsom trityl, etc. eller en grupp med formeln ' -c-coon°5 ¿/// \\\-b _ s R R 5 vari Ras och Rbs är lika eller olika och kan vara väte, alkyl eller tillsammans en alkylengrupp med 2 eller 3 kol- atomer och Res är väte eller en syraskyddande grupp; R°2a är väte eller en syraskyddande grupp såsom metoximetyl; Ro (i en av flera utföringsformer) kan vara en metylgrupp, som är substituerad med en 5- eller 6-ledad aromatisk heterocyklisk ring, som innehåller en enda heteroatom, såsom 2- eller 3-pyridiyl, 2- eller 3-tienyl eller 2- eller 3-furyl; och R3 är en grupp med formeln R4SO20- vari R¿ kan vara alkyl, trihalometyl eller eventuellt substituerad fenyl.

Dessa föreningar anges vara mellanprodukter vid framställ- ning av föreningar, vari 3-substituenten är en grupp med formeln RO -cH=c-s1í' 11 505 256 vilka uppges ha antibakteriell aktivitet.

Ehuru detta patent innefattar den möjligheten att R° är en metylgrupp, som är substituerad med en N-haltig heterocyklisk ring, både i mellanprodukterna och slut- produkterna (ochrsåledes ger en heterocyklylsubstituerad propenylgrupp), utlär det endast att den heterocykliska ringen är bunden via en av sina kolatomer. Det finns så- ledes ingen antydan om en lkvaternär ammoniosubstituerad propenylgrupp. Hänvisningen exemplifierar Ro i mellan- produkterna och slutprodukterna endast som metyl. Vidare måste både i mellanprodukterna och slutprodukten propenyl- gruppen innehålla en andra substituent (-O3SR4 respektive -SR). Det finns icke heller något avslöjande eller an- tydan om en 5-aminoÅ1,2,4-tiadiazol-3-yl-grupp i stället för 2-aminotiazol-4-yl-substituenten.

L) Europapatentansökningen 53 538, som publicerades den 9 juni 1982, avslöjar bl.a. 3-vinylcefalosporinmellan- produkter med formeln (0) z 0 c som: / Å Å å: s ”_” / 52!! s OR o// 'ÜHQ coon vari n är 0 eller 1, RS är väte, alkyl, vinyl, cyanometyl eller en oxim-skyddande grupp och R3 är halogen. Det finns icke något avslöjande eller antydan om en S-amino-1,2,4- tiadiazol-3-yl-grupp i stället för 2-aminotiazol-4-yl- substituenten och icke något avslöjande eller antydan om en 3-halo-1-propen-1-yl-substituent i 3-ställningen. 12 505 256 Fullständig beskrivning Föreliggande ansökan avser nya cefalosporinderivat, som är potenta antibakteriella medel. Närmare bestämt avser uppfinningen föreningar med formeln N * Q Z I - ' | 'u j e lmL s J! \°R2 " / n-cn-cnz-nëo vari R1 är väte eller en konventionell aminoskyddande grupp, R2 är väte, en rak- eller grenkedjig alkylgrupp innehållande en 1-4 kolatomer, en cykloalkyl- eller cykloalkenylring innehållande 3-6 kolatomer eller en grupp med formeln R4 R4 | 3 | _ 3 coon Rs Rs X ïå -f-COOH r R5 vari R3 är väte, lägre alkyl eller karboxyl, X är halogen, hydroxi eller lägre alkoxi och R4 och RS vardera oberoende av varandra är väte, metyl eller etyl eller R4 och Rs till- sammans med den kolatom till vilken de är bundna kan vara en cykloalkylidenring innehållande 3-5 kolatomer och GD -NEEQ är en ¿kvaternär ammoniogruPP: Och ogiftiga farmaceutiskt godtagbara salter och fysiologiskt hydrolyserbara estrar därav. Inom ramen för uppfinningen innefattas även solvat 13 505 256 (inklusive hydrat) av föreningarna med formeln I, liksom de tautomera formerna av föreningarna med formeln I, exem- pelvis 2-iminotiazolin-4-yl-foren av 2-aminotiazol-4-yl- gruppen.

Enligt en annan aspekt avser denna uppfinning ett förfaran- de för framställning av föreningarna med formeln I och vissa mellanprodukter vid deras framställning.

Såsom visas i strukturformeln har föreningarna med formel I-”syn"- eller "Z"-konfigurationsmed avseende på alkoxi- iminogruppen. På grund av att föreningarna är geometriska isomerer kan även viss mängd av "anti"-isomeren vara när- varande. Denna uppfinning innefattar föreningar med formel I, som innehåller minst 90% av ”syn”-isomeren. Företrädes- vis är föreningarna med formeln I "syn"-isomerer, som är väsentligen fria från motsvarande "anti"-isomerer.

Förutom geometriska isomerer, som är möjliga med avseende på alkoxiiminogruppen, bildar föreningarna med formeln I (och mellanprodukterna med formlerna VIII och IX) även geometriska (cis- och trans-)isomerer runt propenylgruppens dubbelbindning. Både cis ("Z")~ och trans (“E“)-isomererna av dessa föreningar faller speciellt inom ramen för denna uppfinning.

De ogiftiga farmaceutiskt godtagbara salterna av före- ningarna med formeln I innefattar salter med mineralsyror såsom klorvätesyra, bromvätesyra, fosforsyra och svavel- syra eller med organiska karboxylsyror eller sulfonsyror- såsom ättiksyra, trifluorättiksyra, citronsyra, myrsyra, maleinsyra, oxalsyra, bärnstenssyra, bensoesyra, vinsyra, fumarsyra, mandelsyra, askorbinsyra, äppelsyra, metan- sulfonsyra, bensensulfonsyra, p-toluensulfonsyra och andra syror, som är kända och användes inom pancillfia.och cefalo- sporinområdet. Framställningen av dessa syraadditionssalter utföres medelst konventionell teknik. 14 505 256 Exempel på fysiologiskt hydrolyserbara estrar av före- ningarna med formel I innefattar indanyl-, ftalidyl-, metoximetyl-, acetoximetyl-, pivaloyloximetyl-, glycyl- oximetyl-, fenylglycyloximetyl- och S-metyI-2-oxo-1,3- dioxolen-4-ylmetylestrar och andra fysiologiskt hydrolyser- bara estrar, som är kända och användes inom penicillin och cefalosporinområdet. Dylika estrar framställes medelst inom tekniken känd konventionell teknik.

Föreningarna med formeln I, vari R1 är väte, uppvisar hög antibakteriell aktivitet mot olika grampositiva och gram- negativa bakterier och är användbara vid behandling av bakterieinfektioner hos djur, inklusive människa. Före- ningarna med formeln I kan beredas för parenteralt_bruk på konventionellt sätt under användning av kända farma- ceutiska bärare och excipienter och kan föreligga i enhets- doseringsform eller i multidoseringsbehållare. Kompositio- nerna kan föreligga"i form av lösningar, suspensioner eller emültioner i oljehaltiga eller vattenhaltiga vehiklar och kan innehållar konventionella dispergering-, suspenderings- eller stabiliseringsmedel. Kompositionerna kan ävaiföre- ligga i form av ett torrt pulver för rekonstituering för användning, exempelvis med sterilt pyrogenfritt vatten.

Föreningarna med formel I kan även beredas som supposito- rier under utnyttjande av konventionella suppositoriebaser, såsom kakaosmör eller andra glycerider. Föreningarna enligt denna uppfinning kan, om så önskas, administreras i kombi- nation: med andra antibiotika såsom penicilliner eller andra cefalosporiner. ' När kompositionerna föreligger i enhetsdoseringsform inne- håller de företrädesvis från cirka 50 till cirka 1500 mg av den aktiva beståndsdelen med formelrl. Doseringen av föreningarna med formeln I är beroende av sådana faktorer som patientens vikt och ålder liksom av sjukdomes speciella natur och svårighetsgrad och avgöres av läkaren. Doseringen vid behandling av en vuxen människa ligger emellertid van- ligen inom intervallet från cirka 500 till 5000 mg per dag, 505 256 beroende på administreringsfrekvensen och -sättet. Vid intramuskulär eller intravenös administrering till en vuxen människa är det normalt tillräckligt med en total dos av från cirka 750 till cirka 3000 mg per dag, i av- delade doser, ehuru högre dagsdoser av vissa av föreningarna kan vara önskvärda när det gäller Pseudomonas-infektioner.

Den 'kvaternära ammoniogruppen med formeln G -DEEQ kan vara acyklisk, cyklisk eller en kombination av dessa och kan innehålla en eller flera ytterligare heteroatomer, som utgörs av kväve, svavel och syre.

Ett exempel på en acyklisk 'kvaternär ammoniogrupp är en grupp med formeln vari R6, R7 och R8 kan vara lika eller olika och exempel- vis kan vara lägre alkyl eller substituerad lägre alkyl, i vilken substituenterna exempelvis är halogen, amino med det förbehållet att aminogruppen ej kan föreligga på end-kolatom, hydroxi med det förbehållet att hydroxi- gruppen ej kan föreligga på endfkolatom, lägre alkoxi med det förbehållet att alkoxigruppen icke kan föreligga på enüfl-kolatom, lägre alkyltio, lägre alkylamino, di- (lägre alkyl)amino, karbamoyl, lägre alkenyl, fenyl(lägre alkyl), fenyl eller substituerad fenyl (vari substituen- terna exempelvis kan vara halogen, hydroxi, amino, lägre alkylamino, di(lägre alkyl)amino, acylamino, lägre alkyl, lägre alkyltio, lägre alkoxi eller liknande). 16 505 256 Exempel på cykliska Ékvaternära ammoniogrupper är full- ständigt omättade monocykliska heterocykliska ringsystem och bicykliska heterocykliska ringsystem, där minst en N-haltig ring är fullständigt omättad. Lämpliga cykliska kvaternäfa; ammonioringsystem innefattar exempelvis så- dana med formlerna 9 9 ~ 9 g, / * , fra/f ä? “ . nät w _.. 10 =-~ 10 . '-' R R _? ('43 -N -N 'N""'N 9 l +~“° - | -+-«° . I gfl-R s:*ÄR10 :*<\R10 S RIU Rs Rs '“ “ ß 10 . "HI 1° u* f *w W 0 310 @)\\5// -S 9 g1° \ n” . n” .

/I ,/N' n CB |® -u/ ' . I i /íL . s 1:9 310 çu/ n n k - o 9 i 17 'SUS 256 och iixnmae, var: 1:9 och n” a: 111m ene: ämm aan exempelvis är väte, halogen,amino, lägre alkyl, lägre alkenyl, lägre alkyltio, karboxi, hydroxi, lägre alkoxi, (lägre a1koxi)(lägre alkyl), ha1o(lägre alkyl), hydrcxi- (lägre alkyl), amino(1ägre alkyl), (lägre alky1)amino(1ägre alkyl), d1(1ägre alky1)amino(lägre alkyl), lägre alkylamino, di(1ägre a1ky1)amino, karboxi(lägre alkyl), karboxi(lägre alkyl)amino, karboxi(lägre alky1)tio, karbamoyl, N-(lägre a1ky1)karbamoyl, formylamino, acylamino, acyloxi, fenyl, pyridyl, amidino, guanidino och liknande. Då strukturen hos den heterocykliska ringen så medge? kan R9 och R1° tillsammans vara en alkylengrupp innehållande 3-5 kolatomer, exempelvis propylen.

Exempel på kombinerade acykliska/cykliska Ãkvaternära ammoniogrupper innefattar exempelvis sådana med formeln _ 6 1; ~ @/\| 12 9 12 -g n , -n -a-R , m' En Rn/ \/ *n/ \/s 12 312 -ai: f 9 ~ f ç' . o - ä! s Ö n/"\__J n/\_J ' -u N- (lower) alkyl , - /\_./ 3,/ all 18 505 256 och liknande, vari R11 exempelvis är lägre alkyl, (lägre alkoxi) (lägre alkyl), hydroxiüägre alkyl) med det för- behållet att hydroxi ej kan föreligga på end-kolatom, karboxi(lägre alkyl), aminollägre alkyl) med det förbe- hållet att amino ej kan föreligga på en d-kolatom lägre alkenyl, halo(lägre alkyl), allyl och liknande och R12 exempelvis är väte, hydroxi, halogen, lägre alkyl, hydroxi (lägre alkyl), (lägre alkoxi)(lägre alkyl), halo(lägre alkyl), amino(lägre alkyl), lägre alkoxi, lägre alkyltio, lägre alkenyl, amino, lägre alkylamino, di(lägre alkyl) amino, acylamino, acyloxi, karbamoyl, amidino(lägre aíkyl), fenyl, pyridyl, amidino, guanidino och liknande.

Föredragna kvaternära ammoniogrupper är sådana med form- lerna' 13 14 vari R , R och B15 är lika eller olika och är lägre alkyl, lägre alkenyl, amino(lägre alkyl) med det förbe- hållet att amino ej kan föreligga på end-kolatom eller hydroxi(lägre alkyl) med det förbehållet att hydroxigruppen ej kan föreligga på en om -kolatom 1116 är väte, lägre alkyl, lägre alkoxi, lägre alkyltio, amino, lägre alkylamino, di(1ägre alkyUamino, formylamino, 19 505 256 (lägre alkanoyl)am1no, karboxi, hydroxi, karboxi(lägre alkyl), karbox1(lägre alkyl)tio, hydroxi(lägre alkyl), halo(lägre alkyl), amino(lägre alkyl), (lägre alkoxi) (lägre alkyl), karbamoyl eller N-(lägre alky1)karbamoyl eller R16 kan representera en tvåvärd alkylengrupp med 3-5 kolatomer; R17 är lägre alkyl, (lägre alkoxi)(lägre alkyl), halo (lägre alkyl), allyl, hydroxi(lägre alkyl) med det för- behållet att hydroxigruppen icke föreligger påGK-kolatomen, amino(lägre alkyl) med det förbehållet att aminogruppen icke föreligger på.a-kolatomen eller?fenyl(lägre alkyl); R18 är väte, lägre alkyl, lägre alkoxi, (lägre alkoxi) (lägre alkyl), lägre alkyltio, amino, lägre alkylamino, di(lägre alkyl)amino, karboxi, hydroxi, karboxi(lägre alkyl), hydroxi(lägre alkyl), amino(lägre alkyl), formyl- amino, lägre alkanoylamino, karbamoyl eller N-(lägre alkyl)karbamoy1; n är ett heltal från 1 till 3; Z är CH2 eller, när n är 2, kan Z även vara S, 0 eller N-R19, där R är väte eller lägre alkyl; och n2° och n” ar lika eller olika och är väte, lägre alkyl, lägre alkoxi, lägre alkyltio, amino, lägre alkylamino, di(lägre alkyl)amino, karboxi, hydroxi, hydroxi(lägre alkyl), amino(lägre alkyl), (lägre alkox1)(lägre alkyl), karboxi(lägre alkyl), karboxi(lägre alkyl)amino, lägre alkanoylamino, karboxi(lägre alkanoyl)amino, karbamoyl eller N-(lägre alkyl)karbamoyl.

Speciellt föredragna kvaternära ammoniogrupper är N- (lägre alkyl)pyrrolidin1o (och speciellt N-metylpyrroli- dinio), tri(lägre alkyl)ammonio(bch speciellt trimetyl- mmM,WfiüMM,mmwflMmm,mmflmm@Wfimm, karbamoylpyridinio, amino(lägre alkyl)pyridinio, karboxi- pyridinio, hydroxi(lägre alkyl)pyridinio, N-(lägre alkyl)- karbamoylpyridinio, lägre alkylenpyridinio, 2-metyltia- zollo øch z-amlno-s-:lazoloß .s-cjpyrlalnlo. 505 256 I föreningarna med formel I är speciellt föredragna be- tydelser för R2 lägre alkyl (och speciellt metyl), cyklo- alkyl med 3-5 kolatomer. 1-karbcxicykloalk-1-yl med 3-S kolatomer, allyl, propargyl och karboxi(1ägre alkyl) (och speciellt 2-karboxiprop-2-yl). De mest föredragna föreningarna enligt uppfinningen är 1) 2) 3) 4) ) 6) 7) 8) 9) ) 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metcxiimino- acetamidq]-3-[3-(trimetylammonio)-1-propen-1-yL]-3- cefem-4-karboxylat, 7-12-(5-amino-å,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimino- acetamidq]-3-Å3-(1-metylpyrrolidinio)-1-propen-1-yl7- 3-cefem-4-karboxilat, 7-[2-(S-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminof- acetamidq]-3-[É-pyridinio-1-propen-1-yl]-3-cefem-4- karboxylat, 7-1?-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiímino- acetamidq]-3-[3-(3-aminopyridinio)-1-propen-1-yl]-3- cefem-4-karboxylat, 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimino- acetamidq]-3-[3-(3-formylaminopyridinio)-1-propenf1- yl]-3-cefem-4-karboxylat, _ 7-12-(S-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimino- acetamidq]-3-[§-(3-aminometylpyridinio)-1-propen-1* yl]-3-cefem-4-karboxylat, 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metøxiimino- acetam1dq]-3-[§-(3-karbamoylpyridinio)-1-propen-1- ylf-3-cefem-4-karboxylat, _ 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimino- acetamidq]-3-[3-(4-karbamoylpyridinio)-1-propen-1- yl]-3-cefem-4- karboxylat, 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimino- acetamidq]-3-[3-(2-metyltiazolio)-1-propen-1-yl]-3- cefem-4-karboxylat, 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimino- acetamidq]-3-[3-(2-amino-5-tiazololl,5-q]pyridinio)- 1-propen-1-yl7-3-cefem-4-karboxylat, 11) 12) 13) 14) ) 16) 17) 18) 19) ) 21) 22) 21 505 256 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxi1mino- acetam1dQ7-3-[3-(4-hydroximetylpyridinio)-1-propen- 1-yL]-3-cefem-4-karbøxylat, 7-12-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metox1imino- acetam1dq]-3-[§-(3-hydroximetylpyridinio)-1-propen-1- yl]-3-cefem-4-karboxylat, 7-12-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metox1imino- acetamidq]-3-[ä-k4-(N-metylkarbamoyllPyridinio)-1- propen-1-yL]-3-cefem-4-karboxylat, 7-17-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimino- acetamidQ]-3-[3-(2,3-propylenpyridinio)-1-propen-1-y1]- 3-cefem-4-karboxylat, 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-etoxiimino- acetamidq]-3-[3-(4-karbamoylpyridinio)-1-propen-1- yL]-3-cefem-4-karboxylat, 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-cyklopenty1oxi- iminoacetamidq]-3-[§-(4-karbamoylpyridinio)-1-propen- 1-yl]-3-cefem-4-karboxylat,_ 7-[Q-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-a11y1oxiimino- acetamidq]-3-[§-(4-karbamoylpyridinio)-1-propen-1-yl/- 3-cefem-4-karboxylat, _ 7-12-(s-amino-1,2,4-tiaaiazéi-3-y1)-2-propargy1ox1- iminoacetamidq]-3-[3-(4-karbamoylpyridinio)-1-propen- 1-yl]-3-cefem-4-karboxylat, 7-1?-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)~2-metoxiimino- acetamidq]-3-[3-(4-karboxipyridinio)-1-propen-1-y1]- 3-cefem-4-karboxylat, 7-(2-(5-amino-1,2,4-tiadiazo1f3-yl)-2-etox1iminoacet- am1dq]-3-[3-(4-karboxipyridinio)-2-propen-1-yL]-3- cefem-4-karboxylat, 7-12-(S-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxi1m1noacet- amidq]-3-[3-(3-karboximetylpyridinio)-1-propen-1-yL]- 3-cefem-4-karboxylat och 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- am1aq]-3-lä-(4-karbøximetyltiopyriainio)-1-propen-1- y1]~3-cefem-4-karboxylat. 22 505 256 Det numreringssystem som användes i föreliggande samman- hang för de olika reaktanterna, mellanprodukterna och slutprodukterna är följande: Arabisk siffra Bokstav (i förekommande fall) (1 förekommande fall) [Romersk siffra] - Den romerka»siffran anger huruvida föreningen är en slutprodukt (I) eller en mellanprodukt eller annan reak- tant (alla övriga romerska siffror). De arabiska siffrorna_ och bokstäverna användes ej i sådana fall där den över- gripande klassen (familjen) av föreningar avses.

Den arabiska siffran anger den speciella betydelsen av substituenten R2. Om den speciella R2-gruppen i fråga 5 innehåller en karboxylgrupp, som är skyddad medelst en konventionell karboxylskyddande grupp, användes ett prim- tecken (') efter den arabiska siffran för att ange detta faktum. Om karboxylgruppen är oskyddad användes ej något primtecken. Ett primtecken användes även med den generiska R2-substituenten-(dvs R2') när man generiskt avser en R2- grupp, som innehåller en skyddad karboxylgrupp.

Bokstaven i slutet av föreningens nummer avser den speciella betydelsen av den kvaternära ammoniogruppen (9 -NšQ Av bekvämlighetsskäl anges nedan de arabiska siffror och bokstäver som tillskrivs vissa av de föredragna R2-grupperna och kkvaternära ammoniogrupperna.

'Ai-abisk ' siffra ~ 1:2 1 = metyl 2 = etyl 3 = allyl 4 = '_ propargyl = cyklopentyl Bokstav A B C D E F G H I J K L M N O P Q 23 sus 256 9 -flë-ï 1-metylpyrrolidinio pyridinio 2-amino-S-tiazololï.S-Q]-pyridinio trimetylammonio 3-aminopyridinio 3-formylaminopyridinio 3-karbamoylpyridinio 4-karbamoylpyridinio 3-aminometylpyridinio 2-metyltiazolio- 3-hydroximetylpyridinio 4-hydroximetylpyridinio 4-(N-metylkarbamoyl)pyridinio 4-karboxipyridinio 2,3-propylenpyridinio 3-karboximetylpyridinio 4-karboximetyltiopyridinio Vid den preliminära utvärderingen av föreningarna enligt denna uppfinning bestämdes värdena på den minsta inhibe- 'rande koncentrationen (MIK) för föreningarna medelst den tvâfaldiga agarserieutspädningsmetoden i Mueller-Hinton- agar med avseende på 32 stammar av testorganismer i sex grupper. De geometriska medelvärdena för de MIX-värden som fastställdes vid dessa försök återges i tabell 1. 24 505 256 Tabell 1 °l' Före- Konfin. Geometriskt medelvärde av MIK (pa/ml) nina v1a áubbe - . nr bindning 40+)-10 40+)-10 (0-)-10 40-)-10 40-I-11 40-)-111 (51 (5) (5) (5) (5) (J) 1-10 0/z-1/1 0.20 0.10 - 0.05 0.15 0.23 2.4 1-11 0/2-1/1 0.19 0.35 0.029 0.05 0.11 1.4 1-10 - 0 0.20 0.40- 0.010 0.044 0.11 ,1.0 1-10 0/z-1/4 0.35 0.00 0.05 0.11 0.35 3.5 1-1c 0 0.10 0.20 0.0011 0.033 0.001 3.0 1-10 0/z-1/1 0.01 1.4 0.10 0.20 0.40 2.4 1-10 0/2-10/1 0.30 0.53 0.05 0.010 0.20 1.3- 1-10 _ 0 0.20 0.40 0.0094 0.029 0.10 1.4 1-10 0 0.15 0.40 0.0094 0.033 0.099 1.2 1-10 0 0.20 0.35 0.0094 0.093 '0.10 1.1 1-10 0 0.20 0.40 0.013 0.043 0.10 0.91 1-11 0 0.00 1.0 0.10 0.20 0.09 3.1 1-10 0 0.11 0.35 0.025 0.010 0.15 1.0 T 1-10 0 0.35 0.00 0.029 0.044 0.20 3:5 1-10 0 0.20 0.01 0.029 0.000 0.15 2.0 _ 1-10 _ 0 0.35 0.10 0.029 0.10 0.11 2.3 1-10 0/z-1/1 1.2 1.0 0.013 0.000 0.30 5.1 1-10 0 0.11 0.35 0.029 0.033 0.11 14 1-20 0 0.20 0.40 0.014 0.051 0.15 1:4 1-za 0 1.2 2.1 0.010 0.11 0.05 4.1 1-20 2' 1.4 3.1 0.044 0.15 0.09 10 1-30 0 0.29 0.40 0.051 0.10 0.52 1.9 " 1-40 0 0.20 0.40 0.000 0.11 0.00 2.0 1-50 0 0.13 0.40 0.20 0.40 2.1 4.2 1-10 0 0.0 1.0 0.01: 0.001 0.34 14 1-10 0 0.1 0.92 0.0095 0.044 0.23 14 zs 505 256 (G+)-Ia (GH-Ib (G-)-Ia Penicillin-känslig §¿ aureus (5 stammar) Penicillin-reslstent §¿ aureus (5 stammar) Cefalotin-känslig §¿~ggl¿ (2 stamar), §l¿ gneumoniae (1 stam) och g§¿ mirabilis (2 stammar) Cefalotin-resistent §¿ ggli (3 stammar) och §l¿ Eneumoniae (2 stammar) !¿'morganii (1 stam), §n§¿ cloacae (2 stammar) och §g¿¿ marcescens (2 stammar) (G-)-III §§¿ aeruginosa (7 stammar) _, . _ (G-)-Ib (G-)-II Tabell 2 nedan ger skyddsdosensó (PDSO) hos möss för-ett antal av föreningarna med formel I med avseende på utvalda mikroorganismer. Tabell 3 ger blodnivåerna av olika före- ningar med formel I vid intramuskulär administrering av testföreningarna till möss vid en dosering av 20 mg/kg. ¶¿bè11.2 PDSO (mg/kg) .. .. .V .' §¿;aureus " §. coli ' P..aerfiginosa Förening nr *Smith 'Juhl A9 43A I-18 0,44 0,028 7,7 I-1B 0,65 0,072 ET I-1C 0,22 0,013 ET I-1G 0,96 0,021 5,92 I-1H 0,39 0,015 3,9 I-1J 0,35 0,029 ET I-1K 0,53 ET BT I-1M 0,96 ET ET I-1N 2,0 ET ET I~10 0,26 0,17 ET 1-2N 5,0 ET ET ET== ej testad 27. 505 256 /5 z» =-~ I. n. flgfl 5 RR: O//F-u / Cflgfil COOCEÜIÜ: Na! e: KI C521 cooca (rn) 2 P (Ph) 3 P (Plfls Conn- s _ V z íf *Q v: N r-N / Q S ' \°*2 o// az» mn 3 COXÜ (P51: base fw °°"“"_fs~ n s / \°R2 ÄF- n / fliPfPh) 3 ' Oxfi (PXÛZ lClClizCim 505 256 » M CONH '/s VIII I cs-cacnzcz. ooca (Ph 7 2 ° Na: eller KI N- i? com: / s ß š N 2 /f-l "/ H2 S \°R _ c/ ca-cncazz' ' :x oocnmz), an ' \R| Qz-:N (sekundär amin) X1 (tert- ' ' _ S iår; (7 K com I n amirfi n* S) 0112 I ÅF” / a-cacnz-u/ - coocnum), \n' 'x i” TS ,e - /' 6 a T cava- Ås Ba §\oa2 :f ngn - _xn J s-cacaz-EQ oqcn (va) z 29 505 256 avblockering N '----con -___ 5 ' ÅÅÃÅ 8 1 - ngn 5 OR: á-n / Q -cscaz-Nggb qgå Reaktionsschema 1a visar två alternativa vägar att gå från förening IX till förening XII. Den direkta vägen, som utnyttjar en tertiär amin (XI), är tillämpbar på fram- ställningen av samtliga föreningar med formel I. Den in- direkta vägen, via förening X, utnyttjar en sekundär amin som reaktant och 'kvaterniseras i efterföljande steg. Den sekundära aminen RR'NH,kan vara acyklisk (exempelvis di- metylamin) eller cyklisk (exempelvis pyrrolidin) och detta in- direkta förfarande är därför lämpligt för framställning av föreningar med formel I, där den 'kvaternära ammonio- gruppen är acyklisk eller 'blandat' acyklisk/cyklisk. Denna indirekta väg är icke lämplig för framställning av före- ningar med formel I, vari det kvarternära kvävet är i en fullständigt omättad heterocyklisk ring (exempelvis pyridinio, tiazolio, 2-amino-S-tiazolo[Ä,5-qfpyridinio och liknande). åèakfiànssehèma 1b 11 e g... 505 256 ®'“'" s nu fl / cxzcl . _ ooc acw, NaI eller KI s.

Qcn-m-fll/ _ 04"- N / az: XIV coocnmz), Punnï* »mn 3 9 C00CB(Ph)2 bas: Q» *f xv: ca-v (Pb) 3 ' ooc acw, 31 505 256 C1Cfl2C8O Genus-f s . xvn Ä-N / n-cacazci oocnmn, _' Q- Girard-reagens T eller HCI Hzn--w/ Ä xvzn 0/- N / ca-cacazcl coocxumnz såsom i schema 1§ I VIII Reaktionsschema 1b är en variation av reaktionsschema 1a genom att 7-aminogruppen 1 utgângsmaterialet (II) är skyddad som en Schiffsk bas under de flesta av reaktions- stegen och den önskade 7-sidokedjesyran tillsättes senare under syntesen. I övrigt är det allmänna förfarandet det- samma.

(J5 32 2556 - Reaktšbnsschema 1c CBICH-CH2Cl CO0CH(Ph)2 Q§I eller KI ca=N Ö s ¿7__Ji\\1;;J\\cn=ca-cuzï C00CH(Ph)2 (sekudår amin) XX C00CB(Ph)2 Qffl-*P-rs N XXI ¿ár_ 1' coocn(Pn)2 yö <âï;:3>>-en-n í"s GÅV-N\\1;;J\*cn-cncnz-a1:3 \_ RI / XVII XIX QEEN XI (tertiär " amin) aa 595 256 ® 0 cn-cacnz-naq XXII 9 cco N'¿CYler1ng mad III m f: ämm I/s N \.

S/ ORZ /År-N 1,/ CD ° ca-caca -någ 6 2 coo I Ill N 2 21 Reaktionsschema 1c är en ytterligare variation av reak- tionsschema 1b. I reaktionsschemana 1a och 1b är kvater- niseringen av 3-sidokedjan det sista steget, medan 1 reaktionsschema 1c det sista steget är en acyleríng av 7-aminogruppen. Förhållandet mellan reaktionsschema 1a, 1b och 1c visas 1 följande flödesschema. -1 34 505 256 Kvaterniserizxg 1. 'Avbloclærm lb < 7-N-acylering 1c Förening I a: s 1 Q o """° qnö S05 256 I reaktionsschema 1a, 1b och 1c har benshydrylgruppen visats som föredragen karboxylskyddsgrupp. Det torde inses av fackmannen att andra karboxylskyddsgrupper, vilka är välkända inom tekniken, kan användas. Den acylerande syran III kan användas i form av ett derivat såsom sin syrahalid, aktiverad ester, blandsyraanhydrid, etc., vilka samtliga är väl kända inom tekniken. Vi föredrar att utnyttja den i form av sin syraklorid. Den acylerande syran III kan även ha sin aminogrupp skyddad med någon av de vanliga aminoskyddsgrupperna, exempelvis N-trityl, N-formyl eller liknande. Den bas som användes för omvandling-av fosfonium- jodiden (VI eller XV) för erhållande av fosforyliden (VII eller XVI) kan vara Na0H, Na2CO3, IRA-410 (OH-)-harts, IRA(C03_)-harts} eller liknande eller en blandning därav.

Den kloracetaldehyd som användes för omvandling av fosforyr liden VII till 3-klorpropeny1-3-cefem-föreningen VIII (eller förening XVI till förening XVII) kan vara den kommersiellt tillgängliga 40-50 %-iga vattenlösningen, en destillerad lösning (exempelvis 70%) eller den vattenfria aldehyden.

Vi har funnit att förening VIII, framställd från förening VII (schema 1a), typiskt hade ett Z:E-förhållande av cirka 2:1 vid propenyldubbelbindningen. Förening VIII, framställd från förening XVIII (schema 1b), var å andra sidan typiskt nästan uteslutande Z-isomeren. Skillnaden kan icke ligga i den använda vägen utan i de betingelser som utnyttjas vid Wittig-reaktionen (VII till VIII eller XVI till XVII).

Vi har även funnit att användningen av ett lämpligt silyl- reagens, såsom N,0-bis(trimetylsilyl)acetamid, i Wittig- reaktionen (VII till VIII i schema 1a och XVI till XVII i schema 1b) orsakade en förbättring av utbytena av och renheten hos VIII och XVII. Reaktionen utföres företrädes- vis med 2-5 ekvivalenter av silylreagenset. När klorprope- nylcefemföreningen (VIII) omsattes med NaI i aceton för erhållande av jodpropenylcefemföreningen (IX) isomerise- rades dubbelbindningen i propenylgruppen från Z till E under joderingen. En kort reaktionsperiod bibehöll konfi- 37 ; ses 256 Reakthmuæxâænn 2 n . fi com: s I N ~,' N _ gym/L s/ \°R2 / cn-cn-caz: *nu ' ' oocn mn, I I -fi coma--f _ N n .__ / XXIV gÄm/L g/N \ 2 o; ca-ca-caz: coocu (vn) 2 RLAW W” ß u __u _ 8/ \°R2 04 / n-ca-cnznsq coocaum), Reduftion g t: CONB-_-(s p _ O COOCH (Plflz 38 505 256 Avbiækermg u g _ S JL-I ä com: -1/ I azu S \on2 '_ N / Q . 0/1 n-caznaq m9 Reaktionsschema 2, som återges i schematisk kortfattad form ovan, liknar reaktionsschema 1a med undantag av att förening XXIII (ekvivalent med förening IX i reaktions- schema 1a) omvandlas till sin S-oxid före kvaternisering.

Föreningen XXV reduceras därefter och den resterande delen av reaktionsschema 2 är som reaktionsschema 1a. I reaktions- schema 2 är det föredraget att skydda aminogruppen på 7-_ sidokedjan med en känd aminoskyddsgrupp, såsom trityl- gruppen.

De acylerande syrorna med formel III i föreliggande samman- hang är antingen kända föreningar eller kan lätt framställas medelst publicerade förfaranden. Europapatentet 7 470, som publicerades den 12 oktober 1983 (ansökan publicerad 6 februari 1980), exemplifierar framställningen av före ningar med formel III, vari R2 är metyl, etyl, propyl och isopropyl. Amerikanska patentet 4 390 534, vartill hänvisas i vår redogörelse för teknikens ståndpunkt ovan, åskådlig- gör framställningen av en mångfald föreningar med formel III, vari R2 exempelvis är cyklopentyl, 2-cyklopenten-1-yl, allyl, 2-propynyl, 1-tert. butyloxikarbonyl-1-metyletyl, 1-tert. butyloxikarbonyl-1-cyklopentyl, 1-etoxikarbonyl-1- metyletyl, tert. butyloxikarbonylmetyl, 1-tert. butyloxi-x karbonyl-2-metylpropyl, trityl och liknande. 1 UI N c nian s on: 39 505 256 Förening II häri (7-amino-3-klormetyl-3-cefem-4-karboxylat), som användes som utgångsmaterial i reaktionsschema 1a, 1b och 1c, är en känd förening.

De tertiära aminerna med formel XI (och de sekundära ami- nerna RR'NH), som användes vid framställning av de kvater- nära ammonioföreningarna enligt denna uppfinning, är an- tingen kända föreningar eller kan lätt framställas av fackmannen. Många av aminerna är kommersiellt tillgängliga.

Föreliggande uppfinning avser även ett förfarande för fram- ställning av föreningar med formeln cmæ--T/S lå-N/ cmß vari R1 är väte eller en konventionell aminoskyddsgrupp, R2 är väte en rak- eller grenkedjig alkylgrupp med 1-4 kol- atomer, en cykloalkyl- eller cykloalkenylring med 3-6 kol- atomer eller en grupp med formeln 4 4 R R COOH I 3 ' = 3 -C-CH=CH-R , -ï-C-C-R , eller äs -Q -C-COOH r vari R3 är väte, lägre alkyl eller karboxyl, X är halogen, hydroxi eller lägre alkoxi och R4 och RS vardera oberoende av varandra är väte, metyl eller etyl eller R4 och Rs till- sammans teddaaleolatcxn till vilken de är bundna kan vara en 40 505 256 cykloalkylidenríng med 3-5 kolatomer och vari 9 -N:::Q är en kvaternär ammoniogruPP: Och ogiftiga farmaceutiskt godtagbara salter och fysiologiskt hydrolyserbara estrar därav, vilket förfarande innebär att man omsätter en före- ning med formeln o I! s -T-c-coma--f \ 2' / / l \ B23” S'/N OR 0 cnfcficazz coosl vari R2' har samma betydelse som R2 eller är en grupp med formeln cooal R* elkn' I X 5 där X, R4 och Rs har ovan angivna betydelser, B1 är en konventionell karboxylskyddsgrupp, B2 är väte eller en konventionell aminoskyddsgrupp, Z är klor, brom eller jod och m är 0 eller 1, med en tertiär amin QÉEEN (eller i tur och ordning med en sekundär amin RR'NH och en före- ning med formeln R"Z) och, om m är 1, reducerar sulfoxiden på konventionellt sätt och därefter avlägsnar samtliga blockeringsgrupper medelst konventionella metoder.

Föreliggande uppfinning avser även ett förfarande för framställning áv föreningar med formeln 41 505 256 | JJ ka, 9 . a-ca-cs:-nggq m? 1 vari R är väte eller en konventionell aminoskyddsgrupp, R2 är väte en rak- eller grenkedjig alkylgrupp med 1-4 kolatomer, en cykloalkyl- eller cykloalkenylring med 3-6 kolatomer eller en grupp med formeln R 3 llï 3 COOH -('|IšCH=CH-R p -ÉÉEC -íC-R , eller R R X ¥4 -?šCOOH : R _ vari R3 är väte, lägre alkyl eller karboxyl, X är halogen, hydroxi eller lägre alkoxi och R4 och Rs vardera oberoende av varandra är väte, metylaeller etyl eller R4 och R5 tillsammans med den kolatom till vilken de är bundna kan vara en cykloalkylidenring med 3-5 kolatomer och CD -NEEEQ är en kvaternär ammoniogrupp, och ogiftiga farmaceutiskt godtagbara salter och fysiologiskt hydrolyserbara estrar därav, vilket förfarande innebär att man acylerar en förening med formeln 42 505 256 s ' - “2“"""'( //"'“ / ~ 0 CHICHCH2-NEEQ C00 XXII med en syra med formeln C--C008 vrf :i 2 Å /N \ 2' :HN s °R n: eller med ett acylerande derivat av nämnda syra, vari R har samma betydelse som R2 eller är en grupp med formeln cooal n eller vari X, R4 och Rs har ovan angivna betydelser, B1 är en konventionell karboxylskyddsgrupp och BZ är väte eller en konventionell aminoskyddsgrupp.

Reaktionerna utföres i ett vattenfritt organiskt lösnings- medel såsom dimetylsulfoxid, hexametylfosforamid, metylen- klorid, kloroform, etyleter, hexan, etylacetat, tetrahydro- furan, acetonitril och liknande eller blandningar av dylika lösningsmedel. Reaktionerna utföres lämpligen vid en tempe- ratur av från cirka -10°C till cirka +50°C; vi föredrar 43 505 256 normalt att utföra reaktionerna vid rumstemperatur. Under kvatërniseringssteget bör åtminstone en mol av den tertiära aminen användas per mol av förening IX, XIV] XXIII eller XXIV; vi.föredrar normalt att utnyttja från cirka 25% till 100% överskott av den tertiära aminen.

Karboxylskyddsgrupper, som är lämpliga för användning som B1 vid reaktionerna ovan, är välkända för fackmannen och innefattar aralkylgrupper såsom bensyl, p-metoxibensyl, p-nitrobensyl och difenylmetyl (benshydryl); alkylgrupper såsom t-buty1r-haloalkylgrupper såsom 2,2,2-trikloretyl, och andra karboxylskyddsgrupper, som beskrives i littera- turen, exempelvis i brittiska patentet 1 399 086. Vi före- drar att utnyttja karboxylskyddsgrupper, som lätt kan av- lägsnas genom behandling med syra. Speciellt föredragna karboxylskyddsgrupper är benshydryl- och t-butylgrupperna.

Aminoskyddsgrupper, som är lämpliga för användning som B2, är även väl kända inom tekniken och innefattar trityl- gruppen och acylgrupper såsom kloracetyl, formyl och tri- kloretoxikarbonyl. Aminoskyddsgrupper, som lätt kan avlägs- nas genom behandling med syra, exempelvis tritylgruppen, föredras.

När cefalosporinkärnan användes i form av 1-oxiden (m ='1) framställes 1-oxider medelst kända förfaranden såsom oxida- tion med m-klorperbensoesyra, perättiksyra, natriumwolframat, etc. 1-oxiden kan därefter reduceras medelst kända förfaran- den, exempelvis reduktion av motsvarande alkoxisulfonium- salt med jodidjon i vattenhaltigt medium. Alkoxisulfonium- saltet själv kan lätt framställas genom behandling av 1- oxiden med exempelvis acetylklorid.

Enligt en annan aspekt avser denna uppfinning nya mellan- produkter med formeln 44 505 256 ' lTâ-coNa-fs az" S j* \oa2 Ä / o cn-cacazz coon XXVIII vari Z är klor, brom eller jod, R2 är väte, en rak- eller grenkedjig alkylgrupp med 1-4 kolatomer, en cykloalkyl- eller cykloalkenylring med 3-6 kolatomer eller en grupp " med formeln - F É COOH -c-cH=cH-R3 . -ï-cäc-R3 , eller Is s R R X ?4 -?-COOH RS vari R3 är väte, lägre alkyl eller karboxyl, X är halogen, hydroxi eller lägre alkoxi och R4 och R5 vardera oberoende av varandra är väte, metyl eller etyl eller R4 och Rs till- sammans med den kolatom till vilken de är bundna kan vara en cykloalkylidenring med 3-5 kolatomer, och salter och estrar därav. Föreningar som även innefattas är sådana med formeln XXVIII, där amino- och/eller karboxylgrupperna är skyddade medelst konventionella aminoskydds- respektive karboxylskyddsgrupper.

Enligt ytterligare en annan aspekt avser denna uppfinning nya mellanprodukter med formeln 45 0 5 2 5 6 323 ' s E24 CH=N----T/I F-N ' 325 // / ca-cacazz 0 CO0R22 _ XXIX vari R22 ärfväte eller en konventionell karboxylskydds- grupp och nu, 1124 och 1:25 är lika eller olika och är väte, hydroxi, lägre alkyl eller lägre alkoxi, eller ett salt, solvat, hydrat eller ester därav.

Enligt ännu en aspekt avser denna uppfinning nya mellan- produkter med formeln ”f-“f j/-w / - . e ca-cn-caz-usq CCKDCD XXII vari -qi-š-IQ är en kvaternär ammoniogruppf eller ett salt, ester, solvat eller hydrat därav.

Med uttrycken "acylamino' och "acyloxi' avses i föreliggande sammanhang en acylerad amino- eller acylerad hydroxigrupp, där acylresten är lägre alkanoyl (exempelvis formyl, acetyl, propionyl, butyryl, isobutyryl, isovaleryl, etc.), aroyl (exempelvis bensoyl, etc.), lägre alkansulfonyl (exempelvis mesyl, etansulfonyl, etc.) eller arylsulfonyl (exempelvis bensensulfonyl, tosyl, etc.). 46 505 256 Med uttrycken 'lägre alkyl', 'lägre alkoxi' och 'lägre alkyltio' (eller liknande) avses rak- eller grenkedjiga alkyl-, alkoxi- respektive alkyltiogrupper (eller lik- nande) med 1-6 kolatomer. Likaledes avser uttrycken ”lägre alkenyl” och 'lägre alkynyl" alkenyl- respektive alkynylgrupper med 2-6 kolatomer.

Uppfinningen âskådliggöres närmare medelst följande ut- föringsexempel.

Exempel 1 JNL coma--ï/ Q uzu _ ,_ Q sß' \OCHB OÄ n :ß u-ca-cuz/-rzo en, I-LA *Z/EI1/1 7-[2- (s-amino-1 ,2 ,4-e1aa1a'=a1-H3-y1)-z-metoxlminoacetamiaøj- 3-[3-(1-metylpyrrolidinio)-1-propen-1-yl]-3-cefem-4-karboxy- 'lat (I~1A) ' Till en lösning av 150 mg (0,21 mol) difenylmetyl-7-[ë- (5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetamidq]-3- (3-jod-1-propen-1-yl)-3-cefem-4-karboxylat (IX-1) (Z/E = 2/1) i 2 ml etylacetat sattes en lösning av 36 mg (0,42 mol) 1-metylpyrrolidin i 1 ml etylacetat i en portion under omröring. Blandningen omrördes 15 minuter och späddes med 10 ml isopropyleter för bildning av en fällning, som tillvaratogs genom filtrering. En blandning av det fasta materialet (130 mg), 1 ml myrsyra och 0,1 ml koncentrerad HCI omrördes vid rumstemperatur. Efter 1 timme koncentre- rades reaktionsblandningen under reducerat tryck, späddes med 20 ml vatten och filtrerades. Vattenlösningen fick 47 505 256 passera en reversfaskolonn (fyllning från en patron av PrepPAK-5001018, 100 ml), eluering med vatten och 10% CH3OH. De önskade fraktionerna tillvaratogs och koncen- trerades i vakuum till en liten volym och frystorkades för erhållande av 13 mg (12%) av den i rubriken angivna föreningen (I-1A) (Z/E=1/1) med en smp. överstigande 280°C (sönderdelning). m nä: cm* 3400, flso, 1660, 1610.

Uv :fßfatbuffert (PH 7) nm m" y 236 (372), 285 (322). max 1 cm -H nun; :D2° 2,31 ma, m, Nf- "), 3,12 (311, s, N-cn3), 3,6 (514, PPN _ H _ m, ZTH a )y s, 2_H)' 4,1 d, Jë8, C§2N), 4,2 (3H, s, OCH3), 5,36 (1H, d, J=4,5, 6-H), 5,95 (3H, m, 7-H & 3-CH=C§), 6,66 (1/2H, d, J=10, 3-CH cis), 7,0 )1/28, d, J=16, 3-CH trans). coNa--fi/s V' \0ca3 Å_N / ca:ca-cn2?© _ cooe I-18 en 48 505 256 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetamidq]- 3-éë-pgridinio-1-progen-1-glz-3-cefem-I-karboxylat (I-13) En blandning av 716 mg (1 mmol) difeny1metyl-7-[2-(5-amino- 1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetamidq]-3-(3-jod-1- propen-1-yl)-3-cefem-4-karboxylat (IX-1) (E) och 158 mg (2 mmol) pyridin i 1 ml dimetylsulfoxid (DMSO) omrördes 1 timme vid rumstemperatur. Till blandningen sattes 20 ml etylacetat för utfällning av 620 mg av ett fast material, som sattes till 6 ml myrsyra innehållande 60 mg natrium- b1su1fit. ßlananingen omrördes so-minuter vid 4o°c øch koncentrerades till torrhet. Återstoden upplöstes i 40 ml vatten och viss mängd olösligt material avlägsnades. Vâtten- fasen applinerades på en reversfaskolonn (PrepPAK-500/C18, 100 ml) och eluerades med 300 ml vatten och 800 ml av en 5 %-ig vattenlösning av metanol och eluatet övervakades medelst UV (254 nm) och HPLC. De fraktioner (SS-ig vatten- lösning av metanol) som innehöll den önskade produkten kombinerades, koncentrerades till en liten volym och lyofiliserades för erhållande av 40 mg (8%) av den i rub- riken angivna föreningen (I-18) med en smp. överstigande 200°C (sönderdelning).

In = 0:2: cm" aaso, 1160, 1660, 1eoo. ¿fosfatbuffert (pä 7) hm (E18 max I cm) 240 (352), 258 (366), 267.(279), 290 (469).

UV : nux= c:5g*“"5°'°s a,74 (za, br-S, 2-H). 4,20 (an, s, øcg3), ,92 (1a, a, a=4,s, 7-H). s,1s (1n, m, 3-ca=cg), 1,o4 (1a, a, a=1s, 3-en trans), 8,2 (23, m, Py-H3'5), 8,62 (18, m, Py- n4>. 8,91 (za, m, Py-azls). 49 505 256 Ü Q s/ \ocg3 04"" :ß ca-ca-cnzçuç/ \> I-IB i 2-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidq]-3-[3-pyridinio-1-propen-1-yl]-3-cefem-4-karboxylat EI-13) 937 mg (1,5 mmol) difenylmetyl-8-[7-(5-amino-1,2,4-tiadia- zol-3-yl)-2-metoxiiminoacetamidq]-3-(3-klor-1-propen-1- yl)-3-cefem-4-karboxylat (VIII-1) (Z) sattes till en om- rörd lösning av 237 mg (3 mmol) pyridin i 3 ml DMSO inne- hållande 11 mg (0,07S mmol) Nal. Blandningen späddes med ml etylacetat för att separera fällningen, som där- efter tillvaratogs genom filtrering, tvättades med 10 ml etylacetat och torkades för erhållande av 350 mg av den blockerade produkten. Fällningen behandlades med 3,4 ml myrsyra innehållande 34 mg natriumbisulfit under 30 minu- ter vid 40°C. Efter avlägsnande av myrsyran renades åter- stoden medelst reversfaskolonnkromatografi (fyllning från en patron PrepPAK-500/C18, 100 ml) genom eluering med en %-ig vattenlösning av metanol. De fraktioner som inne- höll den önskade produkten kombinerades på basis av HPLC- analys, indunstades under reducerat tryck och lyofilisera- des för erhållande av 41 mg (5,5%) av denfirrubriken an- givna föreningen (I-18) (Z/E = 4/1). Smp. överstigande 200°C (sönderdelning). 50 505 256 väg; cm'1 ssoo, 1160, 1660, 1600. Äfoafatbuffert (pH 7) max ) 237 (386), 250 (377), 258 (369), 265 (347), 280 (311). nm (E}§cm 8°2° ppm 3,45 & 3,76 (värdera 1H, d, J=16, 2-H), 4,18 (3H, s, OCH3), 5,34 (38, m, CH=CB-CH2 G 6-H), ,92 (1H, d, J=4,5, 7-H), 6,58 (4/SH, d, J=11, 3-CH cis), 7,03 (1/SH, d, J=16, 3-CH trans), 8,12 (ZH, m, Py-H3'5), 8;56 (1H, m, Py-H4), 8,82 (ZH, m, Py-H ).

NMR : 216 Exemgel 4 S 1/ w I Är-N af' G) J CHICHCII - I wa 2 'L 'I si' NH CONH 2 I-IC *E 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- flrfidvl-êfêf +-'=ffi1ê=°1°ß»Sfvfmffêêivßëflfvmvevf 1-y;]-3-cefem~4-karboxylat'(I-1c) ° _ ' " En omrörd lösning av 714 mg (1 mmol) difenylmetyl-7-[7- (S-amino-1,2,4-tiadiazøl-3-yl)-2-metoxiiminoacetamidqj- 3-(3-jod-1-propen-1-yl)-3-cefem-4-karboxylat (IX-1) (E- isomer), 2-aminotiazolo[1,S-q]pyri§in_(framställd medelst förfarandet enligt T. Takahashl et al., Pharm. Bull- (Japan), 2, 34 (1964)) och 1 m1-tørrnnnso hö11s 1 timme s1 595 256 vid rumstemperatur. Till reaktionsblandningen sattes 20 ml etylacetat för erhållande av 710 mg av ett gult pulver. 7 ml myrsyra och 70 mg natriumbisulfit sattes till pulvret (700 mg) och blandningen omrördes 30 minuter vid 40-45°C.

Efter indunstning triturerades återstoden med 40 ml vatten.

Olösligt material avfiltrerades och filtratet kromatogra- ferades på en reversfaskolonn (PrepPAK-500/C18, 100 ml) med vatten och 10 %-ig metanol som elueringsmdel. De frak- tioner som innehöll den önskade produkten kombinerades och lösningsmedlet avlägsnades under reducerat tryck. Lyofili- sering gav den-önskade produkten (I-1C) som ett färglöst amorft pulver av E-isomeren. Utbyte 110 mg (19%). Smp. överstigande 200°C (sönderdelningâ. m = cm* 3300, 1760, 1660, 1630, 16oo. _ osfatbuffert (pH 7) 1% uv . Išax mm (21 cm) 245 (499), 265 (266). mm = s:::°'d6*°z° 3,66 (an, s, ocg3), 4,96 (m, a, .n 4,5, 6-11), 5,2 (zu, m, cnæn-cgz), ,57 (m, m, a-cmcg), s,96(1u, m, 1-11), 1,16 (111, d, J=16I s-cn trans), 8,36 & 8,45 (vardera 1H, d, J=7, Py- H), 8,92 (1H, s, Py-H).

S I J! n Conn I/ I , _ uZNL s \ocn3 n / cn-ca-cszg (cn3) 6669 3 I'19 *Z/E I 1/1 505 256 52 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-y1)-2-metoxiiminoacet- amidq]-3-(3-trimetylammonio-1-propen-1-yl)-3-cefem-4- karboxylat (I-1D) Till en lösning av 490 mg (0,68 mmol) difenylmetyl-7-[2- (5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetamidqj-3- (3-jod-1-propen-1-yl)-3-cefem-4-karboxylat (IX-1) (Z/E = 2/1) i 14 ml etylacetat sattes 13,6 ml av en 0,1 M trimetyl- aminlösning i eter i en portion. Blandningen omrördes 10 minuter och indunstades till torrhet och återstoden tri- T- turerades med 20 ml eter. Det erhållna fasta materialet (490 mg) sattes till 0,2 ml trifluorättiksyra, som inne- höll en droppe anisol. Efter 1,5 timmars omröring indunsta- des blandningen till torrhet under reducerat tryck och den resterande oljan triturerades med 20 ml eter. Den er- hållna fällningen tillvaratogs genom filtrering och upp- löstes i 20 ml vatten. Visst olösligt material avlägsnades och vattenlösningen eluerades på en C18-reversfaskolonn (fyllning från en patron PrepPAK-S00/C18, Waters, 30 ml) under användning av vatten som elueringsmedel. Fraktioner, som innehöll den önskade föreningen, kombinerades och koncentrerades till en liten_vo1vm och lyofiliserades för erhållande av 30 mg (9,2%) av den i rubriken angivna före- ningen (I-1D) (Z/E = 1/1) som ett färglöst amorft pulver med en smp. överstigande 150°C (sönderdelning).

IR UV = såå; cm71 3330, 1710, 1670, 16os.

NEX _ :D20 ppm Äfosfatbuffert (pH 7) 1% nm (E1 cm) 236 (389), 287 (343). 3,45 & 3,7 (1H, d, J=16, 23), 3,81 (1H, s, GD z-H), 4,1 d' J=8| s' d' J=4|5| m' i d, 7,05 (1/2H, d, j=16, 3-CH trans). s: 505 256 1-12 t: 7-[ä-(S-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidq]-3-[3-(3-aminopyridinio)-1-propen-1-yL]-3-cefem-4- karboxylat (I-1E) 716 mg (1 mmol) difenylmety1-7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol- 3-yl)-2-metoxiiminoacetamidQ]-3-(3-jod-1-propen-1-yl)-3- cefem-4-karboxylat (IX-1) (E) sattes till en omrörd lös- ning av 188 mg (2 mmol) 3-aminopyridin i 1 ml DMSO. Bland- ningen omrördes 1 timme och späddes med 20 ml etylacetat.

Den erhållna fällningen tillvaratogs genom filtrering, tvättades med etylacetat och torkades för erhållande av 520 mg av ett gült pulver. En blandning av S00 mg av pulv- ret, 5 ml myrsyra och S0 mg natriumbisulfit omrördes 30 minuter vid 40°C. Blandningen koncentrerades i vakuum, upp- löstes i 40 ml vatten och filtrerades för avlägsnande av olösligt material. Vattenlösningen kromatograferades på en reversfaskolonn (fyllning av PrepPAK-500/C18, 100 ml) med en 7,5 %-ig vattenlösning av metanol. De fraktioner som innehöll den önskade föreningen indunstades och lyo- filiserades för erhållande av den i rubriken angivna före- ningen (I-1E) (7 mg, 1,4%), smp. överstigande 185°C (sönder- delning. ss 505 256 den erhållna fällningen tilivaratogs genom filtrering, tvättades med 10 ml eter och torkades. Det kvaternise- rade saltet upplöstes i 3 ml myrsyra innehållande 0,3 ml koncentrerad HC1 och omrördes 1,5 timmar vid rums- temperatur. Blandningen koncentrerades till torrhet under reducerat tryck. Återstoden upplöstes 110 ml 2% HC1 och filtrerades. Vattenskiktet kromatograferades på en revers- faskolonn (PrepPAK-500/C18, 100 ml). Efter tvättning med 500 ml vatten eluerades kolonnen med en 5 %-ig vatten- lösning av metanol. De fraktioner som innehöll den i rub- riken angivna föreningen kombinerades, koncentrerades 1 vakuum och frystorkades för erhållande av 15 mg (4,2%) av den i rubriken angivna föreningen (I-1E) (Z/E = 1/1) som ett färglöst amorft pulver. Smp. överstigande 160°C (sönderdelning).

KBr -1 IR : vmax Cm 3400, 1765, 1675, 1620, 1600. uv = lfæfatlmffert (PH 7) mn (Elgcm) 244 (434). 287 (333). max mm = 8°"s°'ds*°2° 3,73 (za, m), 4,14:(33, s, ocus), s,3s ppm (3H, m, e-n a. czwcn-cgz), 6,9 (za, m, 7-11 a 3-ca=c_g), 6,6 (1/211, d, J=11, 3-cn cis), 7,os (vad, J=1s, 3,cn m, PY_HJ,6)I 914 m' mkengg 1 s u ( ([13 , nzu s/ \oca3 oåpu / cn-cacazc-:DÖ cocf) 3 S6 505 256 7-(2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidq]-3-[3-(3-formylaminopyridinio)-1-propen-1-yl]-3- cefem-4-karboxylat (I-1F).

En blandning av 716 mg (1 mml) difenylmetyl-7-[2-(5- amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetamidq]-3- (3-jod-1-propen-1-yl)-3-cefem-4-karboxylat (IX-1) (E) och 244 mg (2 mmol) 3-formylaminopyridin (framställd medelst förfarandet enligt N. Enomoto 3E_§l., Bull.

Chem. Soc. Japan, 22, 2665 (1972)) i 2 ml DMSO omrördes i rumstemperatur 1 timme och hälldes i 200 ml etylacetat.

Fällningen tillvaratogs genom filtrering, tvättades väl med etylacetat och torkades. En blandning av 500 g av kvaterniserade saltet och S0 mg natriumbisulfit i 5 ml HCOOH omrördes 80 minuter vid 40-50°C och indunstades till torrhet i vakuum. Aterstoden upplöstes i vatten (40 ml), neutraliserades med natriumvätekarbonat och filtrerades för avlägsnande av olösligt material. Det klara filtratet kromatograferades på en reversfaskolonn, PrepPAK-500/C18 (100 ml) med vatten och 5% metanol, 10% metand¶,20% metanol och 30% metanol. De fraktioner som innehöll den önskade föreningen kombinerades, koncentre- rades i vakuum och lyofiliserades för erhållande av 16 mg (2,9%) av den i rubriken angivna föreningen (I-1F) (E) som ett brunfärgat pulver. Smp. överstigande 170°C (sönder- delning).

In = 1:2: cm°1 344o(br), 1760, 1610, 1s2o(br), 1590. uv = J-fåïfatlmffert (PH "mn (sPcm) 21a (428), 248 (362), 290 (4749. una . 6“2°*Na“°°3 3,68 (za, br, 2-H), 4,15 (sn, s, ocn3), PP” 5,91 (1n, a, J=4,s, 1-a), s,2s (1a. m, cmcg-cnz). 6,98 (m, a, J=16, a-cn trans), 8,8-7,9 (4H, m, Py-H), 9,38 (1n, br, uncgo). s? 505 256 Exempel 9 u U :ouu ~ r's dlL~ §\\ I _ GD cows: 32); 5/ ocg: N z ClillCflCflz-N l \ . coda '- I-16 0: 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidq]-3-[3-(3-karbamoylpyridinio)-1-propen-1-yl]-3-cefem- 4-karboxylat (I-1G) Till en lösning av 716 mg (1 mmol) aifeny1mety1-7-[ë-(s- amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetamidq]-3-(3- jod-1-propen-1-yl)-3-cefem-4-karboxylat (IX-1) (E) i 2 ml DMSO sattes 244 mg (2 mmol) nikotinamid och blandningen omrördes 1,5 timmar vid omgivningens temperatur och häll- des i 200 ml etylacetat under omröring. Den erhållna fäll- ningen tillvaratogs genom filtrering. Det kvaterniserade saltet (500 mg) upplöstes i 5 ml HCOOH i närvaro av 50 mg natriumbisulfit och blandningen upphettades 40 minuter vid 40-50°C under omröring och;indunstades till torrhet. Ater- stoden upplöstes i 40 ml vatten och ett olösligt fast material avfiltrerades och tvättades med en liten mängd vatten. Filtratet och tvättvätskan kombinerades och kromatograferades på en reversfaskolonn, PrepPAK-S00/C18 (100 ml). Efter eluering med vatten och i tur och ordning en 5 S-ig vattenlösning, 10 %-ig 201%-ig-vattenlösning av metanol kombinerades de fraktioner som innehöll det önska- de materialet, koncentrerades i vakuum och frystorkades för erhållande av 21 mg (3,8%) av den i rubriken angivna föreningen (I-1G) (E) som ett gult pulver. Smp. över- stigande 175°C (sönderdelning). 505 256 IR NMR : PPN Exempel 10 I-IH 1-[2- (s-ammo- 3-[Ef(4fikarbamoy1pyridinio)-1-p;epen- miylat (1-111) fåascfatbuffert (pH 7) mn 8°z°*“a“°°3 3,68 (za, br, z-m, fi---- CONH NÄL. N\æ1l3 U! UI Jåíucnnf* aa-xocbr), 1160, 1570, 1600. 8 cm) 235 (326), 274 (Sk, 405), 290 (446). 4,15 (3H, s, OCH3), ,32 (1H, d, J=4,5, 6-H), 5,45 (1H, a, J=7, clwcn-cgz), 5,88 (m, d, a= 4,5, 7-H), 6,15 (1H, d-t, J=16 & 7, 3-CH=CI_i_), 7,00 HH, d, J=16, 3-CH trans), 8,23 (1H, m, Py-H5), 9,03 (ZH, m, Py-H4&6), 9,34 (1H, s, Py-H2).

J* \ .

Q 1' / ca-cacaz- C009 r' f* fm, 1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetamidqj- 1-y1J -3-á-cefem-4fkarb- Till en omrörd lösning av 716 mg (1 mmol) difenylmetyl-7- [2-(5-amino-1,2,4 3-(3-jod-1-propen- 2 ml torr DMSO sat ningen omrördes 1 -tiadiazol-šêyl)-2-metoxiiminoacetamidq]- 1-yl)-3-cefem-4-karboxylat (IX-1) (E) i tes 244 mg (2 mmol) isonikotinamid. Bland- timme vid rumstemperatur och hälldes där- 60 505 256 7-[2-(S-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidq]-3-[§-(3-aminometylpyridinio)-1-propen-1-yl7-3-cefem- 4-karboxylat (I-11) En blandning av 716 mg (1 mmol) difenylmetyl-7-[2-(5- amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetamidq]-3- (3-jod-1-propen-1-yl)-3-cefem-4-karboxylat (IX-1) (E) och 516 mg (2 mmol) 3-(t-butyloxikarbonylaminometyl)- pyridin i 2ml DMSO omrördes 30 minuter vid omgivningens temperatur. Blandningen hälldes i 200 ml etylacetat och fällningen tillvaratogs genom filtrering, tvättades-väl med etylacetat och torkades. En blandning av det kvater- niserade saltet (500 mg) och 50 mg natriumbisulfit i 5 ml HCOOH omrördes 80 minuter vid 40-50°C och indunstades till torrhet under reducerat tryck. Det resterande fasta materialet upplöstes i 40 ml vatten och blandningen neutra- liserades med natriumvätekarbonat. Olösligt material av- filtrerades och filtratet kromatograferades på en revers- faskolonn (fyllning från en PrepPAK-500/C18-patron, 100 ml), varvid eluering skedde i tur och ordning med en 5 8-ig, %-ig, 20 %-ig och 30 %-ig vattenlösning av metanol. De fraktioner°som innehöll den önskade föreningen kombinera- des, industades och lyofiliserades för erhållande av 10 mg (1,8%) av deniirrubriken angivna föreningen (I-11) (E) som ett brunfärgat pulver. in = fiâí cm'1 33ao(br), 1760, 1sso(sk), 1s2o(sx). uv = Iš§:fàtb“ff°rt (PH 7) (n}*cm) zas (sk, zso), zss (310). nun = c°2°*"““°°a 3,68 (zu, br, 2-H), 4,16 (aa. s, ocn3), PP” 6,98 (1a, a, J=1s, 3-ca trans), a,os (18, m, Py-H5), 8,50 (13, m, Py-H4), a,so (zu, m, Py-n2'6). 61 505 256 Exemgel 12 H f couu-__|/ s "zymí kæaa J'- N co/oe cgcacazäøwouflz 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidQ]-3-[É-(4-karbamoylpyridinio)-1-propen-1-yl]-3- cefem-4-karboxylat 11-1H) \ En blandning av 4,1 g (5,7 mmol) difenylmetyl-7-[2-(5- amino-1)2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetamidq7-3- (3-jod-1-propen-1-yl)-3-cefem-4-karboxylat (IX-1) E- isomer) och 1,4 g (11 mmol) isonikotinamid i 6ml torr DMSO omrördes 2 timmar vid rumstemperatur under över- vakning medelst TLC (silikagelplatta, CHCl3:CH3OH = 3:1).

Reaktionsblandningen späddes med 100 ml etylacetat för separation av ett gult gummi, som behandlades med š0fml-myr- syra och 390 mg natriumbisulfit vid 4S°C under 30 minuter.

Den erhållna lösningen koncentrerades till torrhet. Ater- stoden upplöstes i 100 ml vatten och olösligt material av- lägsnades genom filtrering. Kombinationen av filtrat och vattentvättvätska applicerades"på toppen av en kolonn inne- hållande reversfasfyllning (PrepPAK-500/C18, 120 ml).

Kolonnen eluerades med vatten. Eluatet tillvaratogs i fraktioner om 300 ml och övervakades medelst UV (254 nm) och HPLC (Lichrosorb RP-18, 4 x 300 mm, 0,01 M ammonium- fosfatbuffert; pH 7,2 innehållande 20% metanol). Frak- tionerna nr. 4 och S kombinerades och koncentrerades till en liten volym. Lyofilisering gav 250 mg (8,1%) av den 1 rubriken angivna förening I-1H med en smp. överstigande 180°C (sönderdelning). 62 505 256 Spektra visade att produkten var identisk med den som erhölls enligt exempel 10.

Framställning av hydrokloriden - Till en suspension av 98 mg (0,18 mmol) av förening I-18 i 1 ml metanol sattes 0,1 ml 19 %-ig saltsyra och blandningen omrördes 5 minu- ter. Till den erhållna gula lösningen sattes 100 ml ace- ton för bildning av en fällning, som tillvaratogs genom filtrering, tvättades med 2 x 10 ml aceton och torkades i vakuum för erhållande av hwhækloridsaltet av I-1H som ett färglöst pulver. Utbyte 88 mg (79%). Smp. överstigande 190°C (sönderdelning).

KB! -1 Is : vmax cm 3300, 1770, 1680, 1620. _ fosfatbuffert (pH 7) 1% UV _ Åhax nm (E1 cm) 227 (385), 286 (374). nun = §°2° 2,32 (1n, S, aceton-H), 3,79 (za, br-s, PP” 2-H), 4,17 an, s, ocn3), 5,34 (1n, d, J=4,s, s-u), 5,49 (za, d, J=7, cfhcn-cgz). 5,93 (111, a, a=4,s, 1-H), 6,28 (1n, a-t, J=1s 4 7, 3-cn=cg), 7,15 (1n; a, Jfi1s, 3-cg), s,43 a 9,1 (vardera 2H, d, J=7, Py-H).

. N--ïrfi conn T' JL \ 2-11 / * Q - nzn søf ocns of ca-cncaz- C009 ,,3,_T¿¶_ sa 505 256 7-12-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidq7-3-[3-(2-metyltiazolio)-1-propen-1-yl7-3-cefem- 4-karbogylat (I-1J) r111 en blandning av 714 mg (1 nnol) a1feny1nety1-7-¿ë- (5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoàiiminoacetamidQ]-3- (3-jod-1-propen-1-yl)-3-cefem-4-karboxylat (IX-1) (E) och 198 mg (2 mmol) 2-metyltiazol [framställd medelst förfarandet enligt R. P. Kurkjy, E. V. Brown, J. Am.

Chem. Soc., 11, 5778 (1952L] i 10 ml torr CH2Cl2 Sattes A§Br4 (renhet 90%, 217 ng, 1 nnoI1 vid -zo°c. alandningen omrördes 30 minuter vid rumstemperatur och filtrerades.

Fällningen extraherades med 3 x 20 ml 10% CH30H-CHCI3.

De kombinerade extrakten tvättades med 2 x 5 ml salt- lösning, torkades över magnesiumsulfat och indunstades till torrhet för erhållande av en gul återstod, som tri- turerades med isopropyleter och filtrerades för erhållande av 350 mg av den kvaterniserade produkten. En blandning av detta fasta material, 35 mg natriumbisulfit och 3,5 ml myrsyra omrördes 30 minuter vid á0°C. Blandningen koncentrerades för avlägsnande av myrsyran och återstoden späddes med 40 ml vatten. Viss mängd olösligt material avlägsnades genom filtrering. Filtratet applicerades på en reversfaskolonn (PrepPAR-500/C18, 100 ml). Kolonnen eluerades med 200 ml vatten, 400 ml av en 5 %-ig vatten- lösning avmetanol och 300 ml av en 10 %-ig vattenlösning av metanol i tur och ordning. De fraktioner som innehöll den önskade produkten poolades på basis av HPLC-analys (Lichrosorb RP-18, 4 x 300 mm, 0,01 M ammoniumfosfatbüffert pH 7,2 innehållande 20% metanol). Den kombinerade lösningen koncentrerades till en liten volym och lyofiliserades för erhållande 40 mg (7,7%) av den i rubriken angivna före- ningen (I-1J) (E). Smp. överstigande 19500 (sönderdel- ning). ' 64 505 256 m = v22: auf' saoo, 1760, 1sso, 1soo. (421). man = Glššgwusæds .3,os (an, s, :1am1-cg3), 3,74 (za, br-sy s; (18, d' J=4ysy 631 m; -- Gps d) J=16' trans)| 8,04 G 8,23 (vardera 1H, d, J=4, f tiazol-Q).

Exempel 14 S ”TE CONR-íf || N - es aznf§s / kan: / CHsCHC>81P 82°a C V I-IL 'E ' 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metox1iminoacet- =m1d§7-?f13-<4+h¥fif°*1@@fYlP¥r1ê4fl49>f1-P#°Penf1-¥L7f?- cefemfidekarboxylat'(1-1L)." ' ' ' “ ' ' En blandning av 1,07 g (1,5 mmol) difenyl-7-[É-(5-amino- 1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetamidq]-3-(3-jod- 1-propen-1-yl)-3-cefem-4-karboxylat (IX-1) (E-isomer)| 818 mg (7,5 mmol) 4-hydroximetylpyridin 1 4,5 ml CH3CN och 3 ml metanol omrördes vid rumstemperatur 1 timme under kväveatmosfär. Efter avlägsnande av lösningsmedlen genom indunstning triturerades den resterande oljan med isopropyleter, tillvaratogs genom filtrering och tvätta- des med 10 ml av en 3:1-blandning av isopropyleter och ss 505 256 metanol för erhållande 1,28 g av den kvaterniserade cefemestern som ett gult pulver. En lösning av den kvaterniseradê estern (1,25 g) och 600 mg natriumbi- sulfit i 10 ml 85 S-ig HCOOB omrördes 1 timme vid rums- temperatur under kväveatmosfär. Efter tillsats av S ml 85 S-ig HCOOH omrördes blandningen under samma betingel- ser ytterligare 1 timme. Toluen tillsattes och reaktions- blandningen indunstades azeotropiskt under reducerat tryck. Återstoden triturerades med aceton för erhållande av 1,17 g av det råa formiatet av den i rubriken angivna Tföreningen. En suspension av denna förening (1,15 g) i 100 ml vatten filtrerades för avlägsnande av olösligt material, som tvättades med 2 x 10 ml vatten. Filtratet och tvättvätskorna kombinerades och underkastades revers- faskolonnkromatografi. Kolonnen, som var fylld med fyll- ningen från en(prepPAK-500/C18-patron (Waters) 60 ml), framkallades i tur och ordning med vatten, 5 %=ig meta- nol och 10 %-ig metanol. De fraktioner som innehöll den önskade föreningen kombinerades, koncentrerades under reducerat tryck och utfälldes genom tillsats av aceton för erhållande av 100 mg av den i.rubriken angivna före- ningen (I-1L) som ett blekgült'pulver. Till en suspension av pulvret (90 mg) i 9 ml metanol sattes 0,5 ml 1N HCl i metanol och blandningen omrördes vid rumstemperatur och koncentrerades i vakuum. Till koncentratet sattes isopropanol för utfällning av 77 mg av hydrokloriden av den i rubriken angivna föreningen som ett blekgult pulver.

Smp. överstigande 190°C (sönderdelning). rn = väg; cm'1, 1775, 1670, 1635, 1s3o.

UV _ fosfatbuffert (pH 7) ' *max nn te), 230 (zzsoo). 264 (sn, 16300) una 8D2° ppm 3,83 (23, br. 2-CH), 4,17 (3H, s, OCH3), ,06 (zu, s, 2) gzon), 5,36 (1n, d, J=4,s Hz, 6-H), 5,41 (zn, d, J=7 Hz, cH=cH-cgz). ,94 (1n, a, a=4,s az, 1-a), s,36_11n, a-t, 66 505 256 J=1s och 7 az, cuægcnz), 7,13 (m, a, J-1s Hz, C§=CH-CH2), 8,08 och 8,83 (vardera ZH, d, ag? Hz; Py-n)o Exempel 15 fm \ s Conny “ ÄÄca-:caCHENO-CONH; ' cxfa " __- 1-zu 'E 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-etoxiiminoacetamidq7- 3-13-(4-karbamoylpyridinio)-1-propen-1-yl]-3-cefem-4-karb- oxylat (I-23) ' Till en lösning av 200 mg 7-amino-3-[3-(4-karbamoylpyridi- nio)-1-propen-3-yl]-3-cefem-4-karboxylat-hydroklorid (E- isomer) i 5 ml av en 50 %-ig vattenlösning av aceton sattes portionsvis 190 mg 2-etoxiimino-2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol- 3-yl)acetylklorid-hydroklorid (framställd medelst det för- farande som beskrives i den publicerade japanska patent- ansökningen (Kokai) 57-24389 (2/8/82)) och blandningen in- ställdes på pH §,5-7,0 med 2 N natriumkarbonat (cirka 1 ml).

Reaktionsblandningen omrördes vid 10°C under 1 timme, sur- gjordes till pH 2 med 1 N saltsyra och indunstades 1 vakuum. återstoden filtrerades och filtratet,kromatograferades på en kolonn av BP-20, som eluerades i tur och ordning med 500 ml vatten och en 25 %-ig vattenlösning av isopropanol.

De fraktioner som innehöll den önskade produkten kombinera- des och indunstades under reducerat tryck. Den oljiga åter- stoden behandlades med 20 ml isopropanol för erhållande av 263 mg (93%) av denii rubriken angivna föreningen (I-23). 67 505 256 Smp. 170°C (sönderdelning).

Till en omrörd suspension av 225 mg (0,40 mmol) av ovan angivna zwitterjon i 10 ml metanol sattes 1 ml 1 N salt- syra 1 metanol och blandningen-omrördes 30 minuter vid rumstemperatur. Lösningen filtrerades och koncentrerades under reducerat tryck. Till återstoden sattes 15 ml iso- propylalkohol och den erhållna fällningen tillvaratogs genom filtrering och torkades i vakuum för erhållande av den i rubriken angivna föreningen som dess hydroklorid.

Utbyte 146 mg (57%). Smp. 160°C (sönderdelning). Upp- skattad renhet 65%.

In = väg: cm'1, 3330, 1780, 1680, 1620.

UV : lígífatbuffert (pH 7) nm (¿), 227 (223O0)' 288 (zzaoo). nun = c°2° 1,44 (sn, t, J=7 az, ocaz-c§3). 3,74 (zu, PP” br. s, 2-H), 4,45 (zu, q, J=7 Hz, ocgz-cn3), s,36 (1a, a, J=41s nz, 6-H), 5,46 (zu, d, af? az, 3-cn=cs-cgz), 5,92 (13, a, J=4,s Hz, 7-H1, 6,2o (1n, m, 3-cu=cg), 1,04 (1n, a, J=16 Hz, 3-c§=cn), s,43 (za, a, J=7 Hz, .Py-HA), 9,10 (za, a, a=7 az, Py-aa). nxegggl 16 ' 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)~2-metoxiiminoacet- awidsi-Bffêf < fkfifbwïlvvfifliniv) -?-P=.f°P cefemsd-karboxylat“(I*1Hï (E-isomer) \ ' ' ' 0 Detta exempel visar framställning av förening I-18 via det sista stegen av reaktionsschema 1a eller 1b, där mellanprodukten benshydryl-7-[?-(5-amino-1,2,4-tiadiazol- 3-yl)~2-mtoxiiminoacetamidq]-3-[3-(4-karbamoylpyridinio)- 1-propen-1-yl]-3-cefem-4-karboxylat-formiat (XXVII-1H) 68 505 256 isoleras.

A. Benshydryl-7-[?-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2- metoxiiminoacetamidqj-3-[3-(4-karbamoyl-1-pyridinio)-1- propen-1-yl]-3-cefem-4-karboxylat-formiat (Eëisomer) zxxvrx-1u) V En lösning av 34 g (758 renhet) XII-1H (fa = fa, E-isomer) i 200 ml av en 1:1-blandning av aceton och metanol appli- cerades på en kolonn av Amberlite. IRA-410 (formiatform 340 ml). Kolonnen eluerades med samma lösningsmedelssystem.

Den första fraktionen (1 liter) indunstades till cirka 100 ml av volymen och den bruna återstoden triturerades med 400 ml isopropyleter. Det erhållna pulvret tillvara- togs genom filtrering och torkades i vakuum för erhållande av 29 9 (75% renhet medelst HPLC) av den i rubriken angivna föreningen XXVII-1H (E-isomer) som ett brunt pulver med en smp. överstigande 150°C (sönderdelning).

KBr -1 IR : Q cm max 3300, 1780, 1680, 1630, 1600. uv = Aâšïn nm (E'* ) 282 (186).

NHR : Jššâton-de/CH3OH-d4(1/I? ¿,° (3H' S' OCE3), 5,26, (1H, d, J=4,5 H2, 6-H), 5,43 (2H, d, J=7 az, cgzrf), 5,99 (m, d, J=4,5 Hz, 7-H), 6,5 (1H, m, 3-CH=C§), 6,92 (1H, s, C§Ph2), 7,1 (1H, d, J=16 Hz, 3*C§), 7,35 (1on, m, vn-g), s,3s (1a, S, gcoo), 8,46 & 9,12 (28 vardera, d, J=8 Ez, Py-H).

B. 7-lä-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amido]fi3-[3-(4-karbamoylfi1-oyridinio)-1-propen-1-yl]-3 cefem~4-karbogylat (I-1H) (Eflisomer)~ï En blandning av 29 g (75% renhet) XXVII-1H (E-isomer) från 69 505 256 steg A och 290 ml 85 %-ig myrsyra omrördes 2 timmar vid rumstemperatur. Indunstning av blandningen gav en brun olja, som triturerades med 500 ml aceton. Pulvret till- varatogs genom filtrering, tvättades med 2 x 100 ml aceton och torkades i vakuum för erhållande av 24(g (508 renhet enligt HPLC) av denii rubriken angivna föreningen som råprodukt. Det bruna fasta materialet behandlades två gånger med 1 liter och 0,5 liter 2 N HCl. De vatten- haltiga extrakten kombinerades och infördes på en kolonn fylld med Diaion HP=20 (1,5 l). Kolonnen tvättades med 8"l_vatten och eluerades med 5 1 3@_%-ig metanol. Den fraktion som innehöll den önskade produkten indunstades till cirka 30 ml. Koncentratet behandlades med 200 ml aceton för erhållande av en fällning, som tillvaratogs genom filtrering och torkades i vakuum för erhållande av 10,1 g (8S% renhet) av den i rubriken angivna före- ningen (zwitterjon-form) som ett gult pulver. Till en suspension av denna produkt i 100 ml metanol sattes 1 N HCl i 55 ml metanol vid rumstemperatur och blandningen omrördes 30 minuter. Den erhållna klara lösningen filtre- rades för avlägsnande av olösligt material, koncentrera- des tillca 50ml av volymen och utfälldes med 200 ml iso- propanol. Det erhållna pulvret tillvaratogs, tvättades med 50 ml isopropanol och torkades i vakuum för erhållande av 10,5 g (858 renhet) av den i rubriken angivna före- ningen I-18 (E-isomer) (HCl-salt) med en smp. över- stigande 180°C (sönderdelning). Blekgult pulver. z-nšempg' 1 i 11 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- wiflël-ßfßf<4f1=##b@m°>r1PY¥1@#fl1P>-f1-P=F°P=f=f1-¥U-=- oefem-4-karboxylat (I-1H) (B-isomer) " ' ' “ Detta exempel visar framställningen av förening I-1H via de sista stegen i reaktionsschema la eller 1b, där mellanprodukten XXVII-1H (formiatet) gi isoleras. 70 505 256 En lösning av 27,6 g (38,S mmol) av IX-1 (E-isomer) och 22,8 g (187 mmol) isonikotinamid i en blandning av 120 ml CH3CN och 100 ml metanol omrördes 1 timme vid rums- temperatur under kväveatmosfär. Efter avdrivning av de organiska lösningsmedlen triturerades den oljiga åter- stoden med isopropyleter för erhållande av 50,5 g av en blandning av det kvaterniserade saltet och isonikotin- amid. En lösning av blandningen (S0,3 9) och 16 g natrium- bisulfit i 160 ml 85 8-ig HCOOH omrördes 40 minuter vid rumstemperatur och därefter 1 timme vid 40°C under kväve.

Blandningen indunstades i vakuum. Den resterande oljan blandades med 50 ml toluen, indunstades azeotropiskt och triturerades med 400 ml aceton för erhållande av 27,8 g av den i rubriken angivna föreningen som en råprodukt.

Detta material behandlades två gånger med 2 N HCI (1 l och 0,5 1). Syraextrakten kombinerades och applicerades på en kolonn av HP-20-harts (1,5 1). Kolonnen eluerades med 9 l vatten och 10 l 30 %-ig metanol. De fraktioner som innehöll den önskade föreningen kombinerades och koncentrerades för erhållande av en gul olja, som tritu- rerades med 300 ml aceton för erhållande av 9,35 g av zwitterjonformen av den i rubriken angivna föreningen; Till en suspension av produkten (9,3 g) i 180 ml metanol sattes 1 N HCl i metanol (55 ml) för erhållande av en klar lösning. Lösningen koncentrerades i cirka 100 ml och späddes med isopropanol för utfällning av 9,50 g (ren- het 75%) av den i rubriken angivna föreningen I-1H (B- isomer) som sin hydroklorid. Blekgult amorft pulver med en snp. överstigande 195°C (sönderdelning).. new- 1' ia 7-/2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amwfßfß-ßfkafbam°vlvwriflvfl°r-1+Pf°Pe:=*1+YV-2-f cefenfláflkarboxylat (I-18) (E-isomer)' Detta exempel visar framställningen av föreningen I-1H 71 505 256 via sista steget (7-N-acylering) i reaktionsschema 1c.

Till en iskyld suspension av 5,0 g (12,6 mmolJ av 7-amino- cefemhydrokloriden XXII-H (E-isomer) i 100 ml av en S0 8-ig vattenlösning av aceton sattes natriumbikarbonat i små por- tioner. Blandningen pH-värde övervakades medelst en pH- mätare under reaktionen. Till den kalla neutraliserade lösningen (pH cirka 7) sattes 4,0 g (15,6 mmol) 2-(5- amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetyklorid-hydro- klorid i små portioner under en tidsrymd av 1 timme och reaktionsblandningens pH-värde hölls inom intervallet 6,8- 7,5 genom tillsats alltefter behov av natriumbikarbonat.

Reaktionen övervakades även medelst tlc. Efter det att all förening XXII-H hade förbrukats surgjordes bland- _ ningen till pH 3 genom tillsats av 2 N klorvätesyra. Bland- ningen filtrerades och filtratet koncentrerades under redu- cerat tryck. Aterstoden späddes med 400 ml aceton för separation av fällningen, som tillvaratogs genom filtre- ring, varvid man erhöll 9,59 g av den i rubriken angivna föreningen som en råprodukt i form av ett ljusgult pulver.

Uppskattad renhet 40% enligt HPLC. En suspension av rå- produkten (9,5 g) i 150 ml 2 N klorvätesyra filtrerades och filtratet adsorberades på en kolonn av 500 ml HP-20- harts. Efter tvättning med 1,5 l vatten eluerades kolonnen med en 25 %-ig vattenlösning av isopropylalkohol och elua- tet tillvaratogs i 100 ml fraktioner. De önskade frak- tionerna poolades, surgjordes med 10 ml 2 N klorvätesyra och koncentrerades. Den resterande oljan triturerades med 200 ml isopropylalkohol och fällningen tillvaratogs genom filtrering. Efter torkning över fosforpentoxid erhölls ,18 g av hydrokloriden av den i rubriken angivna före- ningen X-18 (E-isomer) som ett gult amorft pulver. Smp. överstigande 190°C (sönderdelning). Uppskattad renhet 75%. 72 505 256 gšgmpgl 19 Rening och kristallisation av förening I-1H (E-isomer) Förening I-1H-hydroklorid, som erhölls i exempel 16, var ett blekgult amorft pulver med en renhet av 85%.

Förfarande 1 6 g av hydrokloriden med en renhet av 85% upplöstes i 20 ml vatten och filtnaades genom en celite-dyna. Det bärnsstens: färgade filtratet (pH 2) fick passera en reversfaskolonn (fyllning från en prepPAK-500/C18-patron, Waters; 120 ml), som eluerades med vatten. Eluatet tillvaratogs i 120 ml fraktioner under övervakning medelst HPLC. Fraktionerna 3-5 kombinerades och koncentrerades i cirka 10 ml och ut- fälldes medelst 100 ml aceton för erhållande av 3,3 g av zwitterjonformen av I-18 (blekgult amorft pulver; uppskattad renhet 95%). _ Till en suspension av pulvret med en renhet aw 95% (3,2 g) i 32 ml metanol sattes 1 N HCl i 18 ml metanol och bland- ningen omrördes vid rumstemperatur till dess en klar lös- ning erhölls. Lösningen filtrerades och filtratet koncentre- rades till cirka 10 ml. Till koncentratet sattes 100 ml isopropanol för separation av en blekgul fällning, som tillvaratogs genom fitrering, tvättades med 5 ml isopropa- nol och torkades för erhållande av 2,6 g av HCl-saltet (amorft pulver; uppskattad renhet 95%).

En lösning av hydrokloriden med en renhet av 95% (1 g) i 4 ml vatten inställdes på pH 6,5 med 200 mg natriumväte- karbonat och omrördes 30 minuter. De kristaller som sepa- rerade under omröring tillvaratogs genom filtrering, tvättades med 2 x 5 ml vatten och torkades i vakuum för erhållande av 710 mg av I-1H (zwitterjonform) som blek- 74 505 256 torkades under reducerat tryck för erhållande av 170 mg (80% utvinning) av blekgula prismor av I-18 (zwitterjon- form)'med en smp. överstigande 185°C (sönderdelning), som var identisk med den som erhölls medelst förfarande 1 (vilket kunde visas genom IR, UV och NHR).

Den kristallina zwitterjonformen av förening I-1H var ringa löslig i vatten (6 mg/ml i saltlösning vid 23°C).

Exemggl 20 S NF--íTï@\ CONB---T 8203 ' n G /"-n 1' _- 32* s /N OCR: 0/ Gå CB-CB-Cßz I-1! *E 7-[ä-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidq]-3-[3-(3-hydroximetylpyridinio)-1-propenyl]-3fcefem- 4-karboxylat (I-1K) (E-isomer)' “ ' A. Difenylmetyl-7-[7-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2- metoxiiminoacetamidq]-3-[3-(3-hydroximetylpyridinio)-1- propenylj-3-cefem-4fkarboxylat-jodid (E-isomer)_ (XII-HK) ' ' " “ * Till en lösning av 1,79 g (2,5 mmol) IX-1 (E-isomr) i 2,5 ml metanol och 7,5 ml CH3CN sattes 545 mg (5 mmol) 3-hydroximetylpyridin och blandningen omrördes 3 timmar vid rumstemperatur. Reaktionsblandningen hälldes i 100 ml etylacetat under kraftig omröring. Den erhållna fällningen tillvaratogs genom filtrering, tvättades med en liten volym etylacetat och torkades för erhållande av 2,06 g (100%) av den i rubriken angivna förening XII-1K som ett brun- färgat pulver. Smp. 170-180°C (sönderdelning). 505 256 (nar) 1 =m'1 1vao, 1725, 1615, 1515, 1530, 1355, 1225, 1o4o, vso, voo.

IR : Ûmax A (c a ou) 1 n 121* 1 290 (196). max 2 5 m 1 cm 2 NMR 8 (DMSO + D20) i ppm 3,7 (ZH, br.s, 2-H), 3,91 (3H, s, OCH3), 4,70 (2H, s, Py-C§2- ou), 5,28 (zu, m, cuz-N*), 5,23 (1H, d, J=5HZ, 6-H), 5,90 (1H, Ö, J=5Hz, 7-H), 6,34 (1H, m, - 3-CH=C§);P6,86 (1H, d, J=16 Hz, 3-CH), 6,89 (1H, S, CHPh2)| 7,35 (TÛH, m, Ph"H)y 7,9"8,9 (Åfl: m: Py-H).

B. 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimino- acetamidq]-3-[3-(3-hydroximetylpyridinio)f1fpropenyl]- 3-cefem-4-karboxylat (I~1K) (E-isomer)' '*' En blandning av 2,0 g (2,4 mmol) XII-1K (E-isomer) och 1 g natriumbisulfit i 10 ml 85 %-ig HCOOH omrördes 2 timmar vid rumstemperatur. Reaktionsblandningen koncentre- rades till cirka 5 ml under reducerat tryck. Den oljiga återstoden hälldes i 100 ml aceton under kraftig omröring.

Fällningen tillvaratogs genom filtrering, tvättades med en liten mängd aceton och torkades för erhållande av 1,1 g av ett brunfärgat pulver, som renades genom kolonnkromato- grafi (under användning av fyllningen från en PrepPAK- S00/C18-patron (Waters)) för erhållande av 283 mg (22%) av I-1K som ett amorft pulver. Pulvret kristalliserades ur 48 svavelsyra och aceton för erhållande av 144 mg av den i rubriken angivna föreningen I-1K som färglösa nålar. smp. 155-1sa°c (sönaeraelning). 1 1775, 1saosn, 1sso, 1630, 1225, 1045, 850.

IR : V (KBr) i cm- mäX 76 505 256 1% UV 1 cm I (fosfatbuffert, pH 7) 1 nm (E max 1 236,5 (233) 275 sh, (280), 292,5 (330).

NMR : §(D20) 1 ppm 3,75 (28, s, 2-H), 4,18 (3H, s, OCH3), 4,97 (za, S, Py-cgzon), 5,35 (1H, a, J=4az, 6-H), 5,43 (za, a, J=6,suz, cnz-N*), 5,92 (1n, a, J=4az, 7-H), 6,16 (1H, a-t, J=16nz, J=6,snz, 3-cn=cg-), 6,91 (1n, d, J=16uz, 3-ca), 6,13 (1n, d-d, J=sHz, J=6Hz, vy-H), 3,60 (1H, d, J=a,nz, py=H), a,s4 (1n, a, J=6az, Py- H), 8,90 (1H, s, Py-H).

Exempel 21 s _ N I ü coun F” _ Ä L N /f-N / ' 3 Q 8 N 5,/ \\°cg3 0/ cncn-cn¿- ouacaz 2 cooe _ 1-in *B _ 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-(Z)-metoxiimino- acetamidq]-3-[3-(4-N-metylkarbamcylpyridinicl-1fpropenyl]- 3-cefem-4-karboxylat (I-1M) (E-isomer) '“ '“ ' En blandning av 450 mg (0,62 mmol) difenyl-7-[É-(5-amino- 1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetamidq]-3-(3-jod-1- propenyl)-3-cefem-4-karboxylat (IX-1) (B-isomer) och 215 mg (1,58 mmol) 4-N-metylkarbamoylpyridin [framställd medelst förfarandet enligt M. Samejima, Yakugaku Zasshi, QQ, 1706 (1960)J i 2 ml acetonitril omrördes S timmar vid rumstempe- ratur under kväveatmosfär. Blandningen indunstades under reducerat tryck och återstoden triturerades med eter för erhållande av 530 mg av det kvaternära saltet. En bland- ning av det fasta materialet och 150 mg natriumbisulfit 71 505 256 i 2 ml 85 S-ig myrsyra omrördes 4 timmar och upphettades därefter 30 minuter vid 40°C. Blandningen indunstades under reducerat tryck. Aterstoden triturerades med aceton och râprodukten tillvaratogs genom filtrering. Ráprodukten kromatograferades på en kolonn av HP-20 (1,5 x 18 cm) och kolonnen eluerades med vatten och en 30 %-ig vattenlös- ning av metanol. Det metanoliska eluatet indunstades under reducerat tryck och återstoden frystorkades för erhållande av 140 mg av ett amorft pulver, som ytterligare renades medelst HPLC (kolonn: Lichrosorb RP-18, lösningsmedel: % metanol) och eluatet från HPLC frystorkades för erhållande av 60 mg (18%) av den i rubriken angivna pro- dukten I-1M. Smp. 180-183°C (sönderdelning). Uppskattad renhet: 80%. 1 m = v (mar) 1 cm' 1760, 1660, 1600. ma! UV : Ämax (fosfatbuffert, pH 7) i nm (C) 230 (22100), 286 (22100).

NMR : MDZO) i ppm 3,08 (3H, s, CONHCg3), 3,72 (2H, s, 2-H), 4,16 (33, s, OCHB), 5,35 (1H, d, J=4,5Hz), 6-H), 5,95 (1H, d, J=4,5Hz, 7-H), 7,00 (1H, d, J=16Hz, 3-CH), 8,35 (2H, d, J-6Hz, pyridin-H), 9,05 (2H, d, J=16Hz, pyridin-H).

Exeæel 22 lill J” com; . Q nzu s bena C009 cs-ca-cnz-Q-coon I-IH *E/2 I 7/I 78 505 256 7-(2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidq]-3-[3-(4-karboxipyridinio)-1-propenyl]-3-cefem-4- karboxylat (I-1N) Till en omrörd suspension av 340 mg (2,8 mmol) isonikotin- syra i 3,5 ml torr DMF sattes 0,7 ml (2,8 mmol) N,0-bis- (trimetylsilyl)acetamid under kväveatmosfär. Till den er- hållna klara lösningen sattes 720 mg (1 mmol) difenylmetyl- 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetamidq]- 3-(3-jod-1-propenyl)-3-cefem-4-karboxylat (IX-1) (E-isomer) i en portion och den röda lösningen omrördes 1,5 timmar - vid rumstemperatur. Reaktionsblandningen sattes droppvis till en omrörd mättad natriumkloridlösning (S0 ml), som innehöll 150 mg natriumtiosulfat. Den gula fällningen till- varatogs genom filtrering, tvättades med vatten och torka- des för erhållande 722 mg av ett blekgult pulver. Pulvret (700 mg) och natriumbisulfit (70 mg) upplöstes i 5 ml 85 %-ig myrsyra och'lösningen fick stå 1,5 timmar vid rumstemperatur. Blandningen suspenderades i 50 ml toluen och koncentrerades. Aterstoden triturerades med 70 ml ace- ton och fällningen isolerades genom filtrering för er- hållande av 421 mg_av ett gult pulver. Detta råa pulver (400 mg) suspenderades i 2 ml vatten och till suspensionen sattes natriumbikarbonat. Den erhållna mörka lösningen adsorberades på en kolonn innehållande S0 ml fyllning från en PrepPAK/C18-patron (Water's System 500) och kolonnen eluerades med 200 ml vatten. Eluatet fraktionerades i tio"fraktioner (20 ml vardera) och de önskade fraktionerna (fraktionerna nr. 4-7) kombinerades, surgjordes till pH 3 med 2N klorvätesyra och koncentrerades. Återstoden tri- turerades med 30 ml aceton och fällningen tillvaratogs genom filtrering för erhållande av 201 mg (37%) av den i rubriken angivna föreningen I-1N som ett gult pulver.

E/2 = 7/1; 80% renhet. Smp. överstigande 189°C (sönder- delning). 79 505 256 n: : vmx (xsr) 1 om" 1710, 1sss, 1soo.

UV : Ämax (fosfatbuffert, pH 7= 1 nm (å) 227 (22S00), 290 (22100).

NHR : “D20 + NaHCO3) i ppm 3,7 (28, br.s), 4,15 (BH, s), ,32 (1H, d, J=4H2), 5,39 (2H, d, J=6H2), 6,14 (18, d-t, J=15,5 och GHZ), 7,03 (18, Ö, J=15,5Hz), 8,31 (ZH, d, J=7Hz), 8,94 (2H, d,_J=7Hz).

Exemgel 23 com: ---( s s/ N n; f'- n / azca-cn? cooe I-10 *E 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-(Z)-metoxiimino- acetamidq]-3-[3-(2,3-cyklopentenopyridinio)fjfpropenylj-_ 3-cefem-4-karboxylat (I-10)~(E-isomer) ' Å ^ En blandning av 450 mg (0,62 mmol) difenylmety1-7-[2- (5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetam1dq]- 3-(3¿jod-1-propenyl)-3-cefem-4-karboxylat (IX-1) (E- isomer) och 217 mg (1,83 mmol) 2,3-cyklopentenopyridin i 2 ml acetonitril omrördes under kväveatmosfär 4 timmar vid rumstemperatur. Efter indunstning under reducerat tryck triturerades blandningen med eter för erhållande av 560 mg av det Ükvaternära saltet. En blandning av det fasta materialet och 2 ml 85 %-ig myrsyra omrördes 3 timmar under kväve vid rumstemperatur och upphettades därefter 30 minuter vid 40°C. Blandningen indunstades under reducerat tryck och triturering av återstoden gav 391 mg râprodukt, som renades genom kromatografi på en 80 505 256 kolonn av HP-20 (1,5 x 18 cm). Kolonnen eluerades med vatten och en 30 8-ig vattenlösning av metanol. Avdriv- ning av det metanoliska eluatet under reducerat tryck, följt av frystorkning gav 160 mg av ett amorft pulver, som :enades ytterligare medelst HPLC (kolonn: Lichrosorb, lösningsmedel:10% metanol). Eluatet från HPLC frystorka- des för erhållande av 50 mg (15%) av den i rubriken an- givna produkten I-10. Smp. överstigande 190°C (sönder- delning). Uppskattad renhet: 75%.

IR = u (kbr) 1 cm'1 nes, 1670, 1eoo. _ max ' UV : )max (fosfatbuffert, pH 7) i nm (E) 235 (2000O), 283 (25000).

NMR : 6(D2O + NaHCO3) i ppm 2,2-2,6 (2H, m, -CH2-), 3,1- 3,6 m' f s' ,33 d' J=4fsnzf 5190 d' J=4p5Hz| 6,75 (18, d, J=16Hz, 3-CH), 7'65-8|2 m' Exempel 24 Jmfimgiís 52" 5/ ° / ca-cn-cn 9 I 2 008 I-28 ís a1 505 256 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiad1azol-3-yl)~2-(z)-etoxiimino- acetamidq]-3-[3-(4-karboxipyridinio)-1-propenyl]-3- cefem-4-karboxylat (I-ZN, E-isomer) och 7-¿ä-(s-amino-1,2,4-ciadiazoi-3-yl)-2-(z)-etox11m1no- acetamidq]-3-[3-(4-karboxipyridinio)-1-propenyll-3f cefem-4-karboxylat (I-2N, Z-isomer) \ Till en kyld blandning av 1,0 ml (4,12 mmol) BSA och 506 mg (4,12 mmol) isonikotinsyra sattes 1,0 g (1,37 mmol) IX-2 (från förberedningsexempel 21) och blandningen omrördes 2 timmar vid rumstemperatur under kväve. Bland- ningen hälldes i 20 ml 10 %-ig Na2S203 för utfällning av 1,3 g av det kvaternära saltet, som tillvaratogs genom filtrering, tvättades med vatten och torkades. En bland- ning av det fasta materialet och 0,3 g natriumbisulfit i ml 98 %-ig myrsyra upphettades 1 timme vid 40°C och in- dunstades under reducerat tryck. Aterstoden triturerades med aceton och filtrerades för erhållande av 900 mg rå- produkt (E-propenylisomer:Z-propenylisomer = 2:1). Sepa- ration av isomererna utfördes medelst HPLC (kolonn: Lichrosorb, lösningsmedel, 15% metanol). De snabbrörliga fraktionerna från HPLC tillvaratogs, indunstades under reducerat tryck och frystorkades för erhållande av 44 mg (utbyte 6%) av E-propenylisomeren av I-2N. De långsammare fraktionerna gav 32 mg íutbyte 4%) av Z-propenylisomeren av I-2N vid ett liknande förfarande.

I-2N, E-isomer smp. >zoo°c 1söna.) -1 u txnræ 1 cm 1765, 1sso, 1620, 1380.

IR UV jmax (vatten 1 nm (8) 228 (22200), 291 (23600). 82 505 256 una = Stnzo) 1 ppm 1,45 (sa, c, J=saz, ca2cg3), 3,72 (23, s, 2-H), 4,45 (28, q, CQZCHB), ,40 (1n, a, a=4nz, 6-a). 5,90 (13, d, J=4n=, 7-H), 7,05 (1n, a, J=15az, 3-CH), 8,30 (ZH, d, J=6Hz, Py-H), 8,95 '(2H, a, J=snz, Py-H).

I-ZN, Z-isome; smp= >2oo°c (söna.) IR ; Qmax (KBr) i Ciif1-v1760; "1660(sk), 1620, 1370.

UV : Åmax (fosfatbuffert, pH 7) i nm (¿) 225 (22400), 275 (Sh, 16000). nun = Stbzo) 1 ppm 1,45 (35, c, J=7uz, cn2c§3), 3,50 (1u, a, J=17nz, 2-H), 3,15 (1a, a, J=17nz, 2-H), 5,38 (1n, a, J=4az, 6-H), 5,55 (1a, a, J=4nz, 7-H), 5,52 (1n, a, J=11nz, 3-ca), 8,35 (zu, a, J=enz, Py-H), 8,92 (2H, d, J=6Hz, Py-H).

Exegggl 25 41,8 M1 .~. . , 828 S/N \9 94'- / ç8-CB-C82-©.'ç0p|g2 _08:-CHIC82 C005) " I-38 *E aa 505 256 7-12-(amino-1,2,5-tiadiazol-3-yl)-2-(propen-3-yloxiimino)- acetamidq]-3-[3-(4-karbamoylpyridinio)-1-propenyl]-3-cefem- 4-karboxylat (I-3H) (E-isomer) Till en lösning av 35 mg (0,08 mol) 7-amino-3-[3-(4-karba- moylpyridinio)-1-(E)-propenyL]-3-cefem-4-karboxylat-hydro- klorid i 2 ml av en 50 %-ig vattenlösning av aceton sattes 52 mg 2-[B-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)]-2-(propen-3-yloxi- imino) ace ty lk lor id-hydrok lorid (fr ån f örberedningsexempel ) och-blandningen inställdes på pH 6,5-7,0 med 2N natrium- karbonat. Blandningen omrördes 1 timme vid rumstemperatur; surgjordes till pH 2 med 1N klorvätesyra och koncentrerades under reducerat tryck. Återstoden kromatograferades på en kolonn av HP-20-harts, som eluerades med 300 ml vatten och % CH3OH-H20. De fraktioner som innehöll produkten kombi- nerades ochfindunstades under reducerat tryck. Återstoden, 73 mg, renades på en kolonn av reversfasbärare, som uttogs ur en PrepPAK-S00/C18-kolonn (Waters, 30 ml). Kolonnen eluerades i tur och ordning med vatten, 5% metanol, 10% metanol och 20% metanol. De fraktioner som innehöll produk- ten kombinerades och lyofiliserades får erhållande av 26 mg (62%) av den i rubriken angivna produkten I-3H. Smp. 160°C (sönderdelning). 1 in = v (xßr) 1 cm" 34oo, 1765, 1sso, 1sos, 1400. max Ä (føsfatbuffert, pH 7) i nm ¶6) 226 (24600), 288 UV max (22800).

NHR : 8 (D20) i ppm 3,75 (ZH, s, 2-H), 5,41 (1H, d, J=5Hz, s-H), s,so (4a, m, cnzu* a ca=cg2), V ,98 (1H, d, J=5Hz, 7-H), 6,20 (1H, m, 3-CH=C§), 7,09 (1H, Ö, J=17H2, 3-CH), 8,59 (2H, d, J=7H2, Py-H), 9,16 (2H, d, J=7Hz, Py-H). w 32"/l1~s/l!ÉL\ïa då 84 505 256 Exempel 26 C088- s .

I-_ N f n. g / \ n? _ 1Ä4n .E 2C55C8 7-1?-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-propargyloxiimino- acetamidq]-3-[3-(4-karbamoylpyridinio)-1-propenyl]f3- cefem-4-karboxylat (I-4H) (E-isomer) Till en lösning av 86 mg (0,19 mmol) 7-amino-3-[3-(4- karbamoylpyridinio)-1-(E)-propenyL]-3-cefem-4-karboxylat- hydroklorid (XXII-H) i 2 ml av en 50 %-ig vattenlösning av aceton sattes 63 mg 2-propargyloxiimino-2-(5-amino- 1,2,4-tiaaiazol-3-y1)-acecylkloria-hydrøkloria (från förberedningsexempel 26). Suspensionen hölls vid pH 6,5- 7,0 med 2N natriumkarbonat och omrördes 1 timme vid rums- temperatur. Reaktionsblandningen surgjordes till pH 2 med 1N klorvätesyra och koncentrerades 1 vakuum. Åter- stoden späddes med 30 ml vatten, neutraliserades med natriumvätekarbonat och filtrerades. Filtratet överfördes till toppen av en kolonn, som var packad med reversfas- bärare (30 ml), som hade uttagits ur en PrepPAK-500/18- patron (Waters). Kolonnen eluerades 1 tur och ordning med vatten, 5% metanol) 10% metanol och 20% metanol. De fraktioner som innehöll produkten kombinerades och lyo- filiserades för erhållande av 13 mg (12%) av den i rub- riken angivna produkten I-4H. Uppskattad renhet 70%.

Smp. 160°C. 1 In = 0 (nar) 1 cm' 3400, 2120, 11ss, 1sao, 1610. måX 2-5» as 505 256 (fosfatbuffert, pH 7) 1 nm (E) 229 (24000) 288 (21200).

UV : lmax man = unzo) 1 ppm 3,78 (za, s, z-u), 5,15 (za, d, J=1nz, -cgz-cšcn), 5,40 (m, d, J=snz, s-m; ,50 (zu, m, cg-N ), 5,98 (m, d, J=5nz, 7-11), 6,20 (m, m, 3-cn=cg), 7,05 (m, d, J=17az, a-cg), 0,50 (za, d, J=7nz, Py-m, 9,16 (zu, d, J=7az, Py-u).

Exegggl 27 - Û / cH-Ca-CaÉNÖ- comaz de -_ x-sn *z 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-cyklopentyloxiimino- acetåmido]-3-[3-(4-karbamoylpyridinio)-1-propenyl]-Bfcefemf 4-karboxylat (I-SH) (E-isomer) » Till en omrörd lösning av 139 mg (0,31 mmol 7-amino-3-[3- (4-karbamoylpyridinio)-1-propenyl]-3-cefem-4-karboxylat- hydroklorid i 3,5 ml av en 50 %-ig vattenlösning i ett is- kylbad sattes portionsvis 120 mg 10,44 mmol) 2-(5-amino- 1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-cyklopentyloxiiminoacetylklorid- hydroklorid (frân förberedningsexempel 27). Blandningen inställdes på pH 6,5-7,0 med 2N natriumkarbonat (0,9 ml) och omrördes 1 timme vid 10°C. Reaktionsblandningen sur- gjordes till pH 2 med 1N HCl och indunstades under reducerat tryck. Aterstoden kromatograferades på en kolonn av HP-20- harts (20 ml) och eluerades i tur och ordning med 300 ml vatten och 30% CH3OH-H20. De fraktioner som innehöll pro- dukten kombinerades och koncentrerades 1 vakuum. Åter- stoden behandlades med 60 ml aceton för erhållande av 111 mg (83%) av den i rubriken angivna föreningen I-SH. 86 505 256 Smp. 160°C (sönderdelninq). Uppskattad :enhet 70%. 1 xn = v¿ax (nar) cm' sann, 1170, 1sao, 1605, 1s3o.

UV : ämnc (fosfatbuffert, pH 7) 1 nm (5) 224 (23300), 286 124600). una = 6(nuso-ds) 1 ppm 1,70 (sa, br.s, H-(] ). 4,68 (1u, n sms, w), s,os nu, a, J=sHz, o 6-H), 5,30 (zu, m, cn2N*), 5,67 (1n, d-d, J=5Hz & 7Hz, 7-H), 6,20 (1H, m, 3-cn=c§>, 7,oa (1n, a, J=1vn=, 3-ca), 8,34 (za, d, J=7nz, Py-H), 9,11 (zu, d, J=7Hz, Py-H), 9,38 (1H, d, J=7Hz, 7-NH). __ Exemggl 28 CBZCOOH s u---T- couu- ...W/' . uznJLs/I' ocu, ä'- u :p *cæcazçø - c 1-1? 'E 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetamidqf- 3-[3-(3-karboximetylpyridinio)-1fp;9psny;]-Qfcçfepfdfkatt-_ qgylat (I-1P) (E-isomer) ' " "' ' ' '* “ A. Difeny1mety1-7-[2-(S-amino-1,2,4-tiad1azo1-3-yl)-2- metøxiimipoacetamidq]-3-[3-(3-kgrbpxtyetylpyrtfliq;o)f1f propegy;1-3-cefem-4-karbcxylat (XII-TP¿tjpdid,'E-isomer) Till en suspension av 0,89 g (5 mmol) 3-karboximety1pyridin- hydroklorid 1 10 ml CH2C12 sattes 4,97 ml (18 mmol) 505 256 av .

N,0-bis(trimetylsilyl)acetamid och blandningen omrördes vid rumstemperatur till dess en klar lösning erhölls. Till lösningen sattes 1,79 g (2,5 mol) IX-1 och blandningen fick stå vid rumstemperatur. Efter 3 timmar tillsattes 3 ml metanol till den kylda blandningen och lösningen indunstades i vakuum för erhållande av en olja, som tri- turerades med etylacetat för erhållande av 2,28 g av den i rubriken angivna föreningen XII-1P som ett brunfärgat pulver. Smp. 161°C (sönderdelning).

In = vma¿'(xsr> 1 cm'1 1780, 1720, 1s7s;f1s3o, 1530, 1385, 1225, 1045, vss, voo.

UV : Ä _ 1% max (C2H5OH) 1 nm (E1 cm) 295 (188).

W NMR : 8(DMSO + D20) i ppm 3,70 (2H, br.S, 2-H), 3,90 (SH, S, OCH3 & Py-CHZCO), 5,25 (3H, m, -cnzu* 2 6-H), 5,92 (1u, d, J=4,snz, 7-H), 6,35 (1a, m; 3-cn=cg-), 6,90 (1n, a, J=1eaz, 3-ca), 6,92 (1n, S, cnpnzx; 7,35 (1on, m, Ph-H), 8,8-9,0 (4n, m, o B. 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimino- acetamidq]-3-[3-(3-karboximetylpyridiniolf1fpropeny1Zf 3-cefem-4-karboxylat (I-1Pï E-isomer “'*'~ En blandning av 2,28 g XII-1P (jodid) och 1,1 g natrium- bisulfit i 10 ml 85 %-ig HCOOH omrördes 2 timmar vid rums- temperatur. Reaktionsblandningen koncentrerades till cirka S ml under reducerat tryck. Den oljiga återstoden triture- rades med 100 ml aceton för erhållande av 1,22 g råprodukt, som renades medelst kolonnkromatografi (HP-20, 420 ml) för erhållande av 533 mg av den i rubriken angivna föreningen I-1P (38% utgående från IX-1) som ett blekgult amorft pulver. Smp. 165°C (sönderdelning). 505 256 xx = v¿ax (nar) 1 cm'1 111o, 1s1o, 1600, 1530, 1325, 1140. 1040. uv = Amax (fosfatbuffert, pa s,2r 1 nm (a}*cm; 234 (314), 277 sk (ssofi, 290 (402).

NMR = guao + NaHco3) 1 ppm 3,78 (za, s, 2-H), 3,92 (za, : S, d' sLg4 (zu, a, J=e,snz, -cnz-N*), _ .97 (1H, d, J=4Hz, 7-H), 6,20 (1n, a-t, J=1s 2 s,snz, 3-cu=cg), 7108 (1H|;1' d, J=16Hzy 8,11 (18, d-d, J=8 & 7Hz, Py-H5), 8|53 d' J=8Hzy (1H. d, J=7az, Py-H6), 8,86 (1a, s, Py-H2).

Exeggel 29 s NF--IT-E CONH;J:;:1/I L u . Q nzn sf' \\ocn3 'I ca-ca-ca2-n¿ï:Éš}-s.ca2c°°g coåa " :-19 fz 7-1?-(S-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidq]-3-13-(4-karboximeçy1tiopy;;d2niç)-1fp;qpepy;]-3f cefem-4-karboxylat (I+1Q) (E-isomer) “" Difenylmetyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazo1-3-y1)- 2-metoxi1minoacetamidq]-3-13-(4-karboximetyltiof pyridinio)-l-propenyL]-3fcefçmf§-figrbqxylafi_(XIIf1Q¿ jodid,4E-isomer ' ~ ' ' ' ' 3' " 2 A. as v 505 256 Till en suspension av 0,88 9 (S mmol) 4-karboximetyltio- pyridin i 10 ml CH2Cl2 sattes S ml (18 mmol) N,0-bis(tri- metylsilyl)-acetamid och blandningen omrördes vid rums- temperatur till dess en klar lösning erhölls. Till lös- ningen sattes 1,79 g (2,5 mmol) IX-1 (E-isomer) och bland- ningen fick stå vid rumstemperatur. Efter 3 timmar sattes 3 ml metanol till den kalla blandningen och lösningen in- dunstades i vakuum för erhållande av en oljig återstod, som triturerades med etylacetat för erhållande av 2,43 g av den i rubriken angivna föreningen XII-1Q (jodid) som ett brunfärgat pulver: Smp. 155°C (sönderdelning). 1 In = 9 (xßr) 1 cm' 1780, 1720, 1670, 1625, 1525, max 1385, 1225, 1115, 1040, 755, 700. . 1% Uv )max (czusou) 1 nm (E1 cm) 312 (299). (sn, S, ocn3), 5,07 (zu, m, cnz-n*), 5,23 (1a, a, J=snz, s-n), 5,90 (1n, a, J_snz,,7-n), 6,29 (1n, m, 3-ca=cg), 6,81 (1n, a, J=1snz, 3-ca), 6,91 (18, s, CHPh2), 7,35 (10H, m, Ph-H), 7,88 & 8,58 (vardera 2H, d, J=6Hz, Py-H).

B. 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimino- acetamidq]-3-[3-(4-karboximetyltiopyridiniol-1-. propenylj-3-cefem-4-karboxylat (I-lg) (E-isomer) En blandning av 2,43 g av XII-10 (jodid) och 1,1 g natrium- bisulfit i 10 ml 85 %-ig HCOOH omrördes 2 timmar vid rums- temperatur. »Reaktionsblandningen koncentrerades till cirka S m1 under reducerat tryck. Den oljiga återstoden triturerades med 100 ml aceton, filtrerades och torkades för erhållande av 1,39 g råprodukt, som renades medelst kolonnkromatografi 90 505 256 (HP-20, 20 ml) för erhållande av 577 mg av den i rubriken angivna föreningen I-10 (398 utgående från IX-1) som ett blekgult amorft pulver. Smp. 188°C ísönderdelning). 1 In = vmax (nar) 1 cm' 1765, 1610, 1625, 1530, 1380, 1110, 1oas. s uv = Amax (fosfatbuffert, pa 6,2) 1 nm (E: cm) 234 (4591, 310 (678).

NHR f S (D20 + NaHC03) i ppm 3,79 (2H, br.s, 2-H), 4,10 (2H, s, S-CH2), 4,23 (3H, s, OCH3), 5,25 (2H, d, J=6,5Hz, cuz-N*1, 5,39 (1H, a, J=4,onz, 6~H), 5,97 (1H, d, J=4Hz, 7-H), 6,18 (1H, d-t, J=15,5Hz a 6,5Hz, 3-c11=c_r_1_), 7,05 (111, d, J=15,5 H2, 3-CH), 7,84 & 8,55 (vardera 28, d, J=7Hz, Py-H).

N ^ cows r's “Ä :ng . à s»f" ocg ¿¿""" «”' ca-ca-c Sá? 2 3 °¿9 så \._. c - :'13 'E/2.' 7/1 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidü-ß-ß- WWflYlPYrNl 1 karboxylatflsulfat (I-1A,'suIfatï " " ' A. Difeny1mety1-7-[2-(5-amino-1;2,4-tiadiazol-3-y1)-2- metoxiiminoacetamidq]-3-[3-(1-mety1pyrre1i§ini9)f1- grogenygz-3-cefem-4-karboxylat (XII-1A, jodid)' 1 91 505 256 Till en kall lösning av 21,5 g (30 mmol) difenylmetyl-7- [2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metox1iminoacetamidq7- 3-(3-jod-propenyl)-3-cefem-4-karboxylat (IX-1) (frân för- beredningsexempel 14) i 300 ml etylacetat sattes droppvis en lösning av 2,55 g (30 mol) 1-metylpyrrolidin i 30 ml etylacetat under 1 timme vid -5 till 0°C under omröring.

Efter omröring ytterligare 10 minuter tillvaratogs den erhållna fällningen genom filtrering och tvättades med 200 ml kloroform för erhållande av 23,0 g (9S,8%) av den i rubriken angivna föreningen (IX-1A, jodid) med en smp. överstigande 175°C (sönderdelning).

In = 0 (xßry 1 cm'1 3300, 1780, 1730, 1685, 1615.

IBEX uv 1 (cznson) 1 nm (E1*Cm) 218 (435)) 295 (188).

IIIBX B. Difenylmetyl-7-/2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2- metoxiiminoaoetamidq]-3f[3-(1$metylpyrrolidinio1-1f propenvll-3-cefem-4-karboxylat^(XII-1A; klorid) 23 g (28,7 mmol) av föreningen XII-1A (jodid) upplöstes i 230 ml av en 1:1:blandning av aceton och metanol och applicerades på en kolonn av Mflæmlíüe: IRA-410 (klorid- form, 230 ml), som förbehandlades med samma blandlösnings- medel. Kolonnen framkallades med lösningsmedlet och de fraktioner som innehöll den önskade föreningen kombine- rades och koncentrerades till en oljig återstod, som triturerades med 300 ml etylacetat för erhållande av 17,9 g (87,7%) av den i rubriken angivna föreningen (XII-1A, klorid) med en smp. av 190°C (sönderdelning). 1 In = 0 (xßr) 1 em' 3300, 1100, 1600, 1620. 1 tczasou) 1 nm 1:1* 1 220 (369), 290 (2321.

UV max 1 cm 92 505 256 c 7-[2- (s-am1no-1 , z , vtnaiazoi-a-yn -z-mecaxiimino- &Cet&miåQ]'3'Ä3°(1-metylpyrrolidinio)-1-propenyl]-3- cefem-4-karboxylatsulfat (I-1A, sulfat En blandning av 17,8 g (25 mmol) av föreningen XII-1A (klorid) i 178 ml 85 %-ig myrsyra omrördes 2 timmar vid rumstemperatur under kväveatmosfär. Blandningen indunsta- des i vakuum och den ojiga återstoden triturerades med aceton för erhållande av 9,80 g rå I-1A. Koncentrering av filtratet ochacetontvättvätskornagav ytterligare 2,95 g rå I-1A. Två satser av râmaterialet~kombinerades och extraherades med 1 1 respektive 0,5 l 2N klorväte- syra. De kombinerade extrakten adsorberades på en 1,5 1 kolonn av Diaion HP-20-harts, som eluerades med vatten och en 30 %-ig vattenlösning av metanol. De önskade frak- tionerna tillvaratogs och indunstades i vakuum till en oljig återstod, som triturerades med 200 ml isopropanol och 200 ml aceton i tur och ordning för erhållande av 7,09 g av ett ljusgult pulver. Detta material (6,80 g) upplöstes i 20 ml vatten och underkastades därefter kolonn- kromatografi över fyllningen från en PrepPAK-500/C18-kolonn (90 ml) under användning av vatten och en 10 8-ig vatten- lösning av metanol som elueringsmedel. Eluatet tillvara- togs i 20 ml fraktioner under övervakning medelst HPLC. jflolonn, Nucleocil SSC-ODS-262, 8 x 100 mm; mobil fas, 0,018 fosfatbuffert (pH 7,2)/CH30H = 90:10; detektering, UV (254 nmL]. Fraktionerna 4-10 kombinerades, indunstades under reducerat tryck och lyofiliserades för erhållande av 2,28 g av ett gult pulver (E/2 = 7/1, 70% renhet) (sats 1). Fraktionerna 11-85 upparbetades på samma sätt som beskrivits ovan för erhållande av 3,27 g av ett gult pulver (E/Z = 5/1, 70% renhet) (sats 2). En portion av sats 1 (1,0 g) renades genom återkromatografering på fyll- ningen från en PrepPAK-500/C18-patron (90 ml). Kolonnen eluerades i tur och ordning med vatten och en 5 %-ig vattenlösning av metanol. Det eluat som innehöll den önskade föreningen koncentrerades och lyofiliserades för f; 93 505 256 erhållande 638 mg (E/Z = 7/1, 80% renhet) av ett gult pulver. Ytterligare en portion av sats 1 (1,14 g) uppar- betades på samma sätt för erhållande av 880 mg (E/2 = 7/1, 80% renhet) av ett gult pulver. De två renade pro- verna kombinerades och en portion (1,45 g) upplöstes i ml 1N svavelsyra. Lösningen späddes med 315 mg aceton under omröring. Den krämiga fällningen tillvaratogs genom filtrering, varvid man erhöll 1,48 g av den i rubriken angivna föreningen (I-1A, sulfat) (E/Z = 7/1, 80% renhet) med en smp. överstigande 185°C (sönderdelning). -f :- 1 :ne = »max (xsr1 1 cm' 33so, 3ooo, 1765, 1615, 1630, 1535, 1390, 1115. uv = lmåx (fosfatbuffert, pn 7 1 1 nm (61 236 1199001, 291,5 1225001.

H nun = ¿(o2o + Nanco31 1 ppm 2,36 (4n, br.,-N: | 1, 3,15 (sn, S, ca :N 1, 3,62 (sa, brl, 2-H och an: | 1, 3,63 (1a, br., 2-H1, 4,13 (zu, d, J=suz, ca2Nï1, 4,22 (33, s, ocna), ,39 (1n, d, J=4,5nz, 6-H1, 5,96 (13, a, J=4,5Hz, 7-H). 6.00 (1H, m, 3-cn=cg1, 6,67 (1/BH, d, J= 1oHz, 3-ca, cis), 7,04 (7/sa, d, J=16Hz, 3-CH, trans). 94 505 256 Exemggl 31 ' S f com: l/ JL J r-Ü / . Q 523 5 OCR: då CBICH-C32-N(CB3)3 6669 I-in *E/2 ' 10/1 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidq]-2-[3-trimetylammonio-1-propenyl]-3-cefem-4- karboxylat (I-1D) A. Difenylmetyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)- 2-metoxiiminoacetamidq]-3-(3-trimetylammonio-1- Qrppenyl)-3-cefem-4-karboxylat (XII-1D, jodid) Till en lösning av 13,0 g (19 mmol) difenylmetyl-7-[ï- (5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxíiminoacetamidq]- 3-(3-jodpropenyl)-3-cefem-4-karboxyiat (IX-1, från för- beredningsexempel 10) i 38 ml torrt etylacetat sattes 1,75 ml (19,1 mmol) 1,1N trimetylamin i etylacetat vid -S°C och blandningen omrördes 1 timme vid -S°C. Den er- hållna fällningen avfiltrerades, tvättades väl med CHCI3 och torkades för erhållande av 12,5 g (88%) av den i rubriken angivna föreningen (XII-1D) som jodiden. 1 m = v (nar) 1 cm' ssoo, 1165, 1720, 1665. ma!! UV Ämax (C2E50H) 1 nm (8) 300 (18400).

B. Difenylmetyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2- m°fi°X11m1fl°a°=*am4fl@?-3ffl3ft¥#m§#Yl=mm@fl1°-1fPr9P@vYl1- 3-cefem¥4-karbogylat'(XII-ïD,'klorid) C\" ' ' à 12,5 g av jodiden XII-1D upplöstes 1 60 ml metanol-aceton 95 505 256 (1:1) och fick passera en kolonn av jonbytarharts (IRA-410 (Cl_), 125 ml). Kolonnen eluerades med 300 ml metanol- aceton (1:1) och eluatet indunstades i vakuum och triture- rades med 300 ml isopropyleter för erhållande av 10,4 g (91%) av det'"kvaternära saltet (XII-1D, klorid). 1 u (man 1 cm' 3300, 1165, 1110, 1665.

IR max uv xmaxxcznson) 1 mn u.) :se nswo).

C. 7-Z?-(S-amino-1,2L5-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimino- acetamidq]-3-[3-trimetylammonio-1-propenyl]-3-cefem- 4-karboxylat (I-1D, sulfat, E-isomer) En lösning av 10,4 g (16,0 mmol) XII-1D (klorid) i 20,8 ml 85 %-ig myrsyra fick stå 3 timmar vid rumstemperatur och koncentrerades i vakuum. Aterstoden behandlades med 210 ml isopropanol och fällningen avfiltrerades. Det fasta materia- let (10,1 g) triturerades med 210 ml vatten och neutrali- serades med natriumbikarbonat. Suspensionen avfiltrerades och filtratet kromatograferades på en kolonn av HP-20 (300 ml), som eluerades 1 tur och~ordning med 1000 ml- vatten, 200 ml 10 %-ig metanol och 150 ml 30 %-ig metanol.

De fraktioner som innehöll den önskade produkten kombine- rades och koncentrerades under reducerat tryck. Aterstoden renades medelst reversfaskromatografi. Kolonnen packades med fyllningen från en PrepPAK-S00/C18-kolonn, (Waters, 200 ml). Eluering i tur och ordning med 600 ml vatten och 200 ml 30 %-ig metanol, följt av koncentrering av de frak- tioner som innehöll den önskade produkten, gav 2,S2 g (18%) av den i rubriken angivna föreningen. En lösning av zwitterjonprodukten (1,5 g) i 5 ml 1N svavelsyra sattes portiosvis till 300 ml aceton och den erhållna fällningen filtrerades och torkades. Utbytet av I-1D-sulfat var 1,42 g (80%). Förhållande E/Z var approximativt 10/1 räknat på HPLC. n Q 96 505 256 rn = vmax (nar) 1 cm'1 saao, 1165, 1665. uv = lmax rføsfatbuffert, pa 7), 1 nm (e) 237 (19soo), 293 (22400). nn = 8(n2o) 1 ppm 3,25 (en, S, N*-CH3), 3,94 (za, s, 2-H), 4,14 (zu, a, J=7Hz, cn2N*), 4,23 (an, s, o-cn3). 5,42 (1a, a, J=4,snz, 6-H), e,oo (1n, a, J=4,snz, 1-H), 6,23 (1n, a-1;, a=1 1 1sn=, 3-ca=cg), 7,23 f (1n, a, J=1sHz, 3-ca).

Exempel 32 s IIÃÉ--11-ä CONH:;[I:ïï,' I/ . G, /"\ 82” s,,N \\°ca3 _ ca-ca-ca,-&<;g:>-cows: c I-IB *E 7-[Q-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidq]-3-[3-(4-karbamoylpyridinio)-1fpropenyl]f3-çefemf§- karboxylat (I-1H, E-isomer) V ' '* » '“ Till en blandning av 397 mg (1 mmol) 7-amino-3-[3-(4- karbamoylpyridinio)-1-(E)-propenyl/-3-çefem-4-karboxylsyra- hydroklorid (XXII-H) och 168 mg (2 mmol) natriumbikarbonat i vattenhaltig DMF (3,5 ml vatten och 7}5 ml DMF) sattes 479 mg (1,5 mmol) bensotriazol-1-yl-2-(5-amino-1,2,4- tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetat (från förberednings- exempel 28). Blandningen omrördes 3,5 timmar vid rumstempera- tur. Reaktionsblandningen inställdes på pH 3-4 med 3N HCl och späddes med 200 ml aceton för erhållande av en fällning, som tillvaratogs genom filtrering. Ráprodukten upplöstes i en liten volym vattenhaltig THF ochåösningen inställdes på pH 6,8 med natriumvätekarbonat, behandlades 91 505 256 med avfärgande kol, koncentrerades till cirka 1 ml och försattes med groddkristaller av kristallin I-13. Efter omröring över natten tillvaratogs den kristallin fäll- ningen genom filtrering för erhållande av den i rubriken angivna föreningen I-18 (zwitterjonform). Utbyte 83 mg ' (16%). Smp. överstigande 185°C (sönderdelning). Fysikalisk/ kemiska data för denna produkt var identiska med de för föreningen enligt exempel 10.

Förberedningsexempel 1 Defenylmetyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxi- iminoacetamidqj-3-klormetyl-3-cefem-4-karoboxylat (IV-1) Till en omrörd suspension av 2,1 g (10 mmol) 2-(5-amino- 1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoättiksyra (III-1) i 50 ml torr CH2Cl2 sattes 2,09 9 (10 mmol) PCl5 vid -30°C och blandningen omrördes 20 minuter vid från -15 till -20°C.

Till ovan angivna syrakloridlösning sattes en lösning av 4,5 g (10 mmol) difenylmetyl-7-amino-3-klormetyl-3-cefem- 4-karboxylat-hydroklorid (II) i 50 ml CH2Cl2, som innehöll 1o g (so mmol) n,o-51s-(cr1mety1s11y1)acetam1a, vid -3o°c.

Efter omröring 1 timme vid -10°C, koncentrerades blandningen för avlägsnande av CH2Cl2 och späddes med 200 ml etylacetat.

Blandningen tvëttades i tur och ordning med 2 x 40 ml av en 10 %-ig vattenlösning av natriumvätekarbonat, 2 x 20 ml vatten och 10 ml saltlösning och torkades över magnesium- sulfat. Lösningsmedlet avdrevs i vakuum och den erhållna oljiga återstoden (10 g) upplöstes i 20 ml CHCl3 och kromatograferades på en silikagelkolonn (Wako-gel C-200, 100 g innehållande 10 ml 1/1,5 M fosfatbuffert pH 7) under användning av 1 - 3 % etanol-CBCI3. De fraktioner som innehöll den i rubriken angivna föreningen indunstades för erhållande av 5,7 g (95%) av IV-1 som ett gult amorft pulver. Smp. överstigande 140°C (sönderdelning). 98 505 256 In = vxfir cm" 3300, 1700, 1120, 1600, 1620. uv lššgfinm (0) 245 (1000), 200 (9900). nun = 8gg:°'ds 3,53 (za, Aßq, 2-u), 3,94 (an, s, ocg3), 4,42 (zu, S, a-cnz), s,22 (1n, a, J=4,s, s-H), 5,92 <1n, a-a, a=4,s 2 s, 1-a), 6,93 (1H, s. cgvhz), 7,36 (100). m, Ph-H). 0,1 (29. br-S, NH2), 9,58 (1H, d, J=6, 7-NH).

Pörberedningsexempel 2 Difenylmetyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadia2ol$3-yl)f2-_ metoxiiminoacetamidgz-3-jpdmetyl-3-cefem-4ekarboxylat (V-1) En blandning av 5,7 g (9,5 mmol) av IV-1 från förberednings- exempel 1 och 4,3 g (29 mmol) NaI i 50 ml torr aceton om- rördes 5 minuter vid rumstemperatur. Blandningen koncent- rerades under reducerat tryck och den erhållna oljan skakades med en blandning av 100 ml etylacetat och 10 ml vatten. Det organiska skiktet aeparerades och tvättades i tur och ordning med 10 %-igt (vikt/volym) natriumtio- suifat och saltlösning. Efter torkning avlägsnades etyl- acetatet i vakuum, varvid man erhöll 6,1 g (93%) av den i rubriken angivna föreningen (V-1) som ett gult amorft pulver med en smältpunkt överstigande 120°C (sönderdelç ning).

Ia = väg; cm'1 3300, 1700, 1725, 1ss0, 1620. uv = Äfiâgn nm (0) 245 (17000), 202 412000). nun = 6§::°'°s 3,72 (za, Anq, 2-n). 3,94 (an, S, ocn3), 4,23 (za, S, 3-cnz), 5,21 (13, a, a=4,s, s-n), s,s9 (1a, a-a, J=4,s 0 s, 1-H), 6,94 (1n, S, cgvnz), 1,35 (10a, m, Ph-s), 0,12 (28, br-s, NH2), 9,65 (13, d, J=6, 7-NH). 99 505 256 Förberedningsexempel 3 Difenylmetyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2- metoxiiminoacetamidq]-3-trifenylfosfoniometyl-3-cefem- 4-karboxylatjodid (VI-1 _ En blandning av 690 mg (1 mmol) av V-1 från förberednings- exempel 2 och 786 mg (3 mmol) trifenylfosfin i 20 ml etyl- acetat omrördes vid rumstempratur över natten. Det fasta material som utföll tillvaratogs, tvättades med 2 x 10 ml etylacetat och torkades, varvid man erhöll 950 mg (1008) 1? av fosfoniomjodiden VI-1. Smp. 186°C (sönderdelning).

IR : ÉÉ; cm'1 3300, 1700, 1710, 1600, 1610. ston Uv = Amax mm (5) 268 115000), 275 113000), 300 17300). |34 d] J=4|5| 519 m' 6,3 8); 7|3 m] Ph-H)y 7|8 m' una = $E::°'ds 3,52 (zu, br-e, zu), 3,94 (au, e, ocg3), Förberedningsexempel 4 Difenylmetyl-7-[ï-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxi- mifl°=°<flt=m1ë°7-3-f (tféfenvlfßifwêflïliêeflëweflrllfßfçefem- 4-karboxylat (VII-1ï '“ ' ' " En blandning av 952 mg (1 mmol) av VI-1 från förberednings- exempel 3, soo mg mneeaiuef :RA-410 10n'-form) een 4 m1 1u natriumhydroxid i 10 ml CHZCI2 omrördes 1 timme vid rums- temperatur. Blandningen filtrerades och det separerade organiska skiktet torkades över magnesiumsulfat och koncent- rerades under reducerat tryck. Den erhållna oljan triturera- des med etylacetat och den erhållna gula fällningen till- varatogs genom filtrering för erhållande av 740 mg (90%) av den i rubriken angivna föreningen VII-1. Smp. överstigande 1ao°c (sönaeraeininq). 100 505 256 In 3 V33: cm'1 max 3400, 1760, 1630. uv = lššgnnm 161 266 1120001, 216 1100001, 304 123000).

Förberedningsexempel 5 Difenylmetyl-7-[7-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxi- iminoacetamidq]-3-(3-klor-1-propen-1-yl)-3-cefem-4fkarboxy- lat (VIII-1) ' ' " Till en lösning av 6,9 g (8,4 mmol) VII-ïrfrån förberednings- exempel 4 sattes 3 g magnesiumsulfat och 810 mg (8,4 mmol) 40 %-ig kloracetaldehyd. Blandningen omrördes 1,5 timmar vid rumstemperatur och filtrerades därefter. Filtratet eluerades på silikagel (Wakogel C-200, 100 g innehållande ml 1/1,5 M fosfatbuffert) under användning av CHCI3 och CHCI3 innehållande metanol. De fraktioner som innehöll den önskade produkten (0,5-1% metanol-CHCI3) indunstades i vakuum för erhållande av 1,6 g (30%) av den i rubriken an- givna föreningen VIII-1 som ett gult amorft pulver, som var en blandning av Z- och E-isomererna med avseende på klorpropenylgruppen (Z/E=2/1 enligt NMR). Smp. överstigande 130°C (sönderdelning).

In = våg: cm'1 3300, 1700, 1125, 1660, 1620. uv = lâšga max (6) 240 120000), 206 112000). nun = ;:::°'d6*°2° 3,56 3 3,3 cm, 2-31, 3,94 (an, S, ocnz). 4,16 10, J=v,s, cgzci), 5,26 (1n, a, J=4,s, 6-n), s,a1 (1n, a, a=4,s, 1-31, 6,20 (2/su, a, a=11, 3-eg cis-H1, 6,12 (1/sa, a, a=16, 3-eg trans-a1, 6,61 (2/3n, s, cgphz), 6,92 (1/33, s, cgrhz), 1,4 110a, m, Ph-a). 101 505 256 Egr eredningsexempel 6 Difenylmetyl-7-bensylidenamino-3-[Ttrifenylfosforanyli- den)netylz-3-cefem-4-karboxylat (XVI) Till en lösning av 60 g (70 mmol) difenylmetyl-7-bensyli- denamino-3-lïtrifenylfosfonio)metyl]-3-cefem-4-karboxylat- jodid (XV) [framställd medelst förfarandet enligt den publicerade japanska patentansökningen (Kokai) 56-86187 (7/31/81L] i 350 ml CH2Cl2 sattes 140 ml 1N natriumhydr- and een as g :mbefrite Ina-uu (crf-form) vid s°c. Bland- ningen omrördes 1 timme vid 5°C och filtrerades. Det or- ganiska skiktet separerades, torkades över magnesiumsulfat, koncentrerades till en volym av cirka 100 ml och utfälldes med 500 ml etylacetat. Det erhållna gula fasta materialet tillvaratogs genom filtrering och torkades i vakuum för erhållande 48 g (94%) av den i rubriken angivna föreningen XVI med en smp. av 195-198°C (sönderdelning).

Br -1 m . vâaxcm 1770, 1620.

Förberedningsexempel 7 Difeflvlmefivl-V-beflsvlifisflamiflêfßf Ufklflfifl fwavsfë-ï fw. - _ 3-cefem-4-karboxylat'(XVII)' ' ' * 5' ' Till en omrörd lösning av 2,9 g (4 mmol) XVI från för- beredningsexempel 6 i en blandning av 40 ml CH2Cl2 och ml vatten sattes 800 mg vattenfri kloracetaldehyd vid rumstemperatur. Till blandningen sattes ytterligare 800 mg kloracetaldehyd i tre portioner under en tidsrymd av 1 timme medan blandningens pH-värde hölls mellan 6 och 9 genom tillsats av 1N natriumhydroxid. Efter 15 minuter avlägsnades vattenskiktet och det organiska skiktet torka- des över magnesiumsulfat. Avdrivning av lösningsmedlet gav en röd olja, som upplöstes i 80 ml av en 1:2-blandning av etylacetat och isopropyleter. Lösningen tvättades i 102 505 ~ 256 tur och ordning med 10 ml av en mättad vattenlösning av natriumvätekarbonat och 10 ml vatten. Efter torkning över magnesiumsulfat gav avlägsnande av lösningsmedlet 3,3 g av en gul olja. En lösning av oljan i 50 ml CHZCIZ filtre- rades med hjälp av silikagel (12 g, Wakogel C-200) inne- hållande 1/1,5 M fosfatbuffert (1,2 ml, pH 6,4) och silika- gelen tvättades med 50 ml CH2Cl2. Filtratet och tvätt- vatskorna kombinerades och indunstades till torrhet. Ater- stoden triturerades med n-hexan för erhållande av 1,7 g (80%) av den i rubriken angivna föreningen (XVII) som ett gult pulyer. NMR-spektrum visade att klorpropenylgruppen hade Z-konfiguration. Smp. överstigande 50°C (sönderdelning).

KB! -1 IR = umaxcm 3400, 1775, 1720, 1630. uv = Jššgfl nm (5) 253 (1100o), 258 (11000), 265 (1o00o), 273 (8300), 281 (7000), 290 (6300). nun = 6g:fi°'ds 3,63 (zu, br-S, 2-ny; 4,0 (zu, m, cgz-cl), ,42 (zu, m, s-n 4 3-ca=cg), 5,72 (1n, a, J=4,s, 1-ax, 6,21 (1n, a, J=11, 3-ca), 6,05 (1n, S, cgvnzæ, 4,33-(10a, m, Ph-H).

Framställning_av vattenfriklgracetaldehyd vattenfri kalciumklorid sattes till en kyld lösning av S0 ml av en 50 %-ig vattenlösning av kloracetaldehyd under omröring i syfte att separera den i tvâ skikt.

Kloracetaldehydhydratskiktet(1)(det övre skiktet) separe- rades och späddes med 100 ml CHCI3, blandades med 20 g magnesiumsulfat, upphettades till återflöde under 5 minu- ter och filtrerades. Lösningsmedlet och vattnet avlägs- nades azeotropiskt (kokpunkt S6-64°C) (2) och återstoden destillerades för erhållande av vattenfri kloracetaldehyd (3), kokpunxt 10-a2°c/160 mm. 103 505 256 In = vflåšmcfff11vzo. (1) R.P. Xurkjy, E. V. Brown, J. Amer. Chem. Soc., 11, S778 (1952). (2) S. Trippett, D. M. Walker, J. Chem. Soc., 1961 1266. (3) H. 0. House, V. K. Jones, G. A. Frank, J. Org, Chem., 22, 3327 (1964).

Förberedningsexempel 8 Difenylmety1-7-amino-3-(3-klor-1-propen-1-yl)-3-cefem-4- karboxylat (RVIII) En lösning av 180 mg (0,34 mmol) XVII från förberednings- exempel 7 i 10 ml etylacetat sattes till en lösning av 251 mg (1,5 mmol) Girard reagens T [Ykarboximetyl)- trimetylammoniumkloridhydrazin] i 10 ml CH30H innehållande 0,25 ml ättiksyra vid 5°C. Efter omröring 30 minuter vid °C koncentrerades blandningen för avlägsnande av metano- len och 20 ml etylacetat tillsattes därefter. Etylacetat- lösningen tvättades i tur och ordning med 2 x 5 ml vatten, ml av en mättad vattenlösning av natriumvätekarbonat och ml saltlösning och torkades över magnesiumsulfat. Av- drivning av lösningsmedlet gav 145 mg (97%) av den i rub- riken angivna föreningen XVIII (Z-isomer) som ett gult pulver. Smp. överstigande 100°C (sönderdelning).

KB: -1 IR : Vmax cm 3400, 1770, 1720. uv lfišgfi nm (E) 252 (3700), zss (saoo), zso (4000), 274 (4000)l 285 (4000). 104 505,256 Förberedningsexempel 9 n1feny1mecy1-7-¿7-(S-amino-1.2.4-tiaaiazol-3-y1)-z-metøx1- iminoacetamidq]-3-(3-klor-1-propen-1-yl)-3-cefem-4- karboxylat (VIII-1) En blandning av 10,1 g (50 mmol) 2-(5-amino-1,2,4-tiadia- zol-3-yl)-2-metoxiiminoättiksyra (III-1) och 10,! 9 (50 mmol) Pcls 1 1oo ml torr cazclz omröraes vid -7 :111 -1s°c under 2 timmar. Den klara lösningen hälldes i 500 ml n-hexan för erhållande av en fällning. Det organiska sëiktet kasse- rades genom dekantering och det kvarvarande fasta materialet triturerades med 100 ml n-hexan. Den gula fällningen till- varatogs genom filtrering och torkades i vakuum för er- ' hållande av 12,5 g (99%) av syrakloriden med en smp. av 80°C (sönderdelning).

IR : v::å°1 cm 1 1770. mg (0,1 mmol) av syrakloriden sattes till en lösning av 44 mg (0,1 mmol) av XVIII (Z-isomer) från förberednings- exempel 8 i 5 ml torr CH2Cl2 vid rumstemperatur under om- röring. Efter 30 minuter koncentrerades blandningen under reducerat tryck och späddes med 20 ml etylacetat och 5 ml av en mättad vattenlösning av natriumvätekarbonat. Det organiska skiktet tvättades med 5 ml av en mättad vatten- lösning av natriumvätekarbonat, 5 ml saltlösning, 5 ml %-ig saltsyra och 5 ml saltlösning. Lösningsmedlet torkades över magnesiumsulfat och lösningen indunstades till torrhet för erhållande av produkten som ett gult skum. Skummet renades medelst silikagelkolonnkromatografi (Wakogel C-200, 1 g innehållande 0,1 ml 1/1,5 M fosfat- buffert pH 6,4) genom eluering med en 100:1-blandning av CH2Cl2 och metanol för erhållande_av 31 mg (50%) av den i rubriken angivna föreningen VIII-1 (2-isomer) som ett gult pulver. Smp. överstigande 150°C (sönderdelning). ."\ 105 505 256 IR väg; cm" 3400, 1775, 1720, 1675, 1630. uv = )fi::“ um ts) 240 (17ooo). 230 (1oooo1. man = 6°"s°'ds 3,6 (za, m, 2-H), 3,92 (aa, s, o-cn3), ppm 4,0 (zu, m, cg2c11, 5,27 (za, m, 6-H a 3-cH=cg), 5,33 (1a, a-a, J=4,s a 10, 7-H1, 6,25 11n, a, J=11, 3-eg), 6,83 11a, S, cgphz), 7,33 (1oH, m, Ph-H). 8,0 (2H, br-s. nn2>, 9,57 <1n, a, a=1o, 7-nn).

Förberedningsexempel 10 Difenylmetyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxi- iminoacetamidQ]-3-(3-jod-1-propen-1-yl)-3-cefem-4-karhoxylat (Ix-1) “ En lösning av 480 mg (0,77 mmol) VIII-1 från förberednings- exempel S (Z/E = 2/1) 1 10 ml torr aceton innehållande 346 mg (2,3 mmol) Nal omrördes 30 minuter vid omgivningens temperatur. Reaktionsblandningen indunstades under redu- cerat tryck. Den erhållna oljan fördelades mellan S0 ml etylacetat och 10 ml vatten. Det övre skiktet tvättades i tur och ordning med 10 ml av en 10 S-ig (vikt/volym) vattenlösning av natriumtiosulfat och 10 ml saltlösning och torkades över magnesiumsulfat. Avdrivning av lösnings- medlet gav 540 mg (98%) av den i rubriken angivna föreningen IX-1 (Z/E = 1/1) som ett rödaktigt amorft fast material med en smp. överstigande 120°C (sönderdelning).

VKBI cm-1 3300, 1780, 1720, 1680, 1620.

IR max uv = Afišga cm'1 1:) 24o (21ooo1, 290 (12ooo). nun = ;°"S°'°2° 3,67 (za, m, 2-H), 5,29 (1a, a, J=4,s, ppm 6-H), 5,95 (18, d, J=4,5, 7-H), 6,27 (1/2H, d, J=11, 3-CH cis), 6,72 (1/2H, d, J=16, 3fCH trans), 6,87 & 6,96 (vardera 1/23, S, C§Ph2), 7,4 (10H, m, Ph-H). 106 505 256 Förberedningsexemgel 11 01feny1me:y1-1-[2-15-amlno-1,2,4-tiaaiazoi-3-yl)-2-met°x1- 1minoacetamido]-3-(3-jod-1-propen-1-yl)-3-cefem-4-karboxylat (Ix-1) 4 En blandning av 5,6 g (9 mmol) VIII-1 (Z-isomer) från för- beredningsexempel 9 och 4 g (27 mmol) NaI 1 100 ml torr aceton omrördes 1,5 timmar vid rumstemperatur. Blandningen indunstades och den resterande oljan späddes med 90 ml, etylacetat. Etylacetatskiktet tvättades med 10 ml av en %-ig (vikt/volym) vattenlösning av natriumtiosulfat och 10 ml vatten. Avlägsnande av det över magnesiumsulfat torkade lösningsmedlet.gmren gül olja, som solidifierade genom triturering med isopropyleter. Filtrering av fäll- ningen gav 4,3 g (67%) av den i rubriken angivna före- ningen IX-1 som E-isomer. Smp. överstigande 165°C (sönder- delning).

In = väg: cm'1 3400, 1700, 1725, 1580, 1510. uv ššgfl nm (5) 240 118000), 291 (11000í. nun = :°"S°'de*°2° 3,90 (au, S, ocn3), 5,25 (10, m, 5-a), ppm 5,95 (1H, m, 7-H). 6,72 (d, J=16, 3-CH trans)| s] m; Ph-'H)o Förberedningsexempel 12 Benshydryl-7-amino-3-[3-klor-1-propen-1-yl]-}-cefem-4- karboxylat (2-isomer) (XVIII) "'“ ' Förening XVIII är den gemensamma mellanprodukt som utnyttjas i reaktionsschema 1b och 1c. 108 505 256 r -1 in . egg: om 1770, 1620. uv = :gšclz mn (e) 254 1230cc). 389 (zzooo). mm = :mms 2,56 1. 3,16 (zu, Aag), s,oo (m, a, J=4 az), ppm 5,23 (1H, d, J=4 Hz), 5,47 (1H, d, J=22 Hz), 6|95 5)] 7|2-7|8 m)| 5,0 C. Benshydryl-7-amino-3-[klor-1-propen-1-yl]-3-cefem-4- karboxylat-hydroklorid (Z-isomer) (XVIII-hydroklorid) Till en åtlqpskolønde lösning av 214 g (0,294 mol) XVI och 40 ml (O,15 mol) N,O-bis-(trimetylsilyl)acetamid i 2,9 l torr CH2Cl2 sattes droppvis under omröring 93 g (0,59 mol) av en 50 %-ig lösning av kloracetaldehyd i CHCI3 under en tidsrymd av 15 minuter. Efter det att blandningen hade fått stå 30 minuter koncentrerades den till torrhet.

Till den resterande oljan sattes 1,5 l CH2Cl2, 99 g (0,59 mol) Girard reagens T och 300 ml av en 10 %-ig vatten- lösning av saltsyra och blandningen omrördes 1 timme vid rumstemperatur. Det organiska skiktet tvättades med 200 ml vatten och.med 200 ml av en mättad natriumkloridlösning, torkades över magnesiumsulfat, behandlades med 5 g träkol och filtrerades. Filtratet kyldes till -10°C och behandla- des med 300 ml 1N klorvätesyra i metanol. Blandningen om- rördes 30 minuter vid rumstemperatur och koncentrerades till en volym av cirka 300 ml. Koncentratet späddes med 400 ml etylacetat och försattes med groddkristaller av XVIII-hydroklorid. Efter 2 timmar tillvaratogs de av- skilda kristallerna genom filtrering, tvättades med 200 ml etylacetat och torkades i vakuum för erhållande av 74 g (53%) av den i rubriken angivna föreningen XVIII som dess hydroklorid med en smp. överstigande 185°C (sönderdelning).

Blekgula nålar. m :_ vä; cm" 2830, 1730, 1120. 109 505 256 vv = Aâšga um (ey zas (asoo). 6 3,73 (38, br, S, 2-H), 3,97 (2H, m, C§2C1), ppm 5,22 (1H, d, J=4,5 Hz, 6-H), 5,37 (18, d, J=4,S Hz, 7-H), 5,77 (18, m, 3-CH=C§), 6,45 (1H, d, J=11H2, 3-CE), 6,88 (1H, S, C§Ph2), 7133 br' s' Ph-g).

Analys beräknat för C23H21N2O3SCl'HCl: C, 57,87; H, 4,65; N, 5,87; S, 6,72; " Cl, 14,85.

Funnet: C, 57,62; H, 4,53; N, 5,70; S, 6,64; Cl, 14,89.

Förberedningsexempel 13 Benshydryl-7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxi- iminoacetamidqj-3-[3-klor-1-propen-1-yL]-3-cefemfi4-karboxy- lat (Z-isomer) (VIII-1) Till en omrörd lösning av 20 g (42 mmol) XVIII (2-isomer) i 420 ml CH2Cl2 innehållande 34 ml (125 mmol) N,0-bis- trimetylsilyl)acetamid sattes 15,2 g (59 mmol) 2-(5-amino- 1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetylklorid-hydroklorid i 3 portioner under en tidsrymd av 30 minuter vid från -1o :111 o°c. aiananingen ømrördes so minuter vid o-s°c och koncentrerades under reducerat tryck. Den resterande bruna oljan upplöstes i 420 ml etylacetat och lösningen tvättades i tur och ordning med 3 x 15 ml av en mättad vattenlösning av natriumvätekarbonat, 15 ml av en mättad vattenlösning av natriumklorid, 15 ml 10 8-ig saltsyra och 15 ml av en mättad vattenlösning av natriumklorid och koncentrerades till en volym av cirka 50 ml. Till koncentra- tet sattes 200 ml n-heptan för erhållande av 28,5 g (90% renhet) av den i rubriken angivna föreningen VIII-1 (Z- isomer) som ett färglöst pulver. Smp. överstigande 1S0°C (sönderdelning). 110 505 256 In = \§:§ 6m'1 3400, 1100, 1130, 1600, 1620. uv = Aššgfl um (6) 240 (2000p1,2a3 (1z00o). nun = ;a°°t°“'d6 3,6 (zu, m, 2-H), 3,96 (au, s, ocgsa, ppm 4,0 (za, m, cg2c1), s,3z (10, 0, a=4,s H2, 6-a), s,62 (10, m, 3-ca-eg), 6,03 (1n, a, J=4,s az, 1-0), 6,32 (10, a, J=11 Hz, 3-ca), 6,87 (1H, s, cgphz), 7,33 (10H, br, s, Ph-H). _., í Förberedningsexempel 14 Benshydryl-7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxi- iminoacetamidQ]-3-[3-jod-1-propen-1-yl]-3-cefem-§-karboxy- lat (E-isomer) (IX-1) En blandning av 28,5 g (90% renhet) av VIII-1 (Z-isomer) och 19 g natriumjodid i 420 ml torr aceton omrördes 10 minuter vid rumstemperatur och fick stå 2 timmar vid +5°C.

Blandningen koncentrerades under reducerat tryck. Till åter- stoden sattes 420 ml etylacetat och 30 ml av en 10%-ig (vikt/volym) vattenlösning av natriumtiosulfat och bland- ningen skakades. Det organiska skiktet tvättades med 30 ml vatten, torkades över magnesiumsulfat och indunstades till en volym av cirka 50 ml. Koncentratet späddes med 200 ml n-heptan för erhållande av 30,6 g(95% renhet) av den i rubriken angivna föreningen IX-1 (E-isomer) som ett gult pulver med en smp. överstigande 120°C (sönderdelning).

In = vxßí cm°' 3400, 1100, 1725, 1600, 1620. _ ston uv . :bax nm (6) 306 (1s000). nun = 5a°°t°“°d6 3,11 (zu, m, 2-n), 3,91 (3a, S, oc§3), ppm 4,0 (23, d, J=8 Hz, C§2I), 5,26 (TH, d, J=4|5 Hz d-d, J=4|5 G 111 505 256 8 Hz, ëndradestill dublett J=4,S Hz med D20, 7-H), 6,32 (1H, d-t, J=15 G 8 Hz, 3-CH=C§), 6,79 (1H, d, J=15 Hz, 3-Cg), 6,98 (1H, s, C§Ph2), 7,35 (108, m, Ph-H), 7,63 (2H, br, s, försvann med D20, N§2), 8,52 (1H, d, J=8 Hz, för- svann med D20, 7-Ng).

Förberedningsexempel 15 Benshydryl-7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimino- acetamidQ]-3-[3-(4-karbamoyl-1-pyridinio)-1-propen-1-yl7-3- çefem-4-karbogylat-jodid (E-isomer) (XII-1H)« Till en suspension av 30,5 g IX-1 (E-isomer) och 26 g (212 mmol) isonikotinamid och 120 ml CH3CN sattes 100 ml CHBOH till dess blandningen blev klar. Lösningen omrördes 2 timmar under kväveatmosfär vid rumstemperatur och kon- centrerades till cirka 100 ml under reducerat tryck. Det resterande halvfasta materialet triturerades med 200 ml isopropyleter. Lösningsmedlet avlägsnades genom dekate- ring och det resterande gula pulvret tvättades med 120 ml av en 3 : 1-blandning av isopropyleter och metanol. Pulvret tillvaratogs genom filtrering och torkades i vakuum för erhållande av 36 g (758 renhet uppskattat genom HPLC) av den i rubriken angivna föreningen XII-18 (E-isomer) som ett ljusgult pulver med en smp. överstigande 150°C (sönderdelning).. ' Kßr -1 IR : V Cm max 3300, 1780, 1720, 1680, 1620. uv = 3:3” nm (z}*cm) 252 (170). nnn.= &°"s°'d6 3,72 (za, m, 2-a), 3,90 (sn, S, ocg3), ppm 5,25 (sa, m, s-a a cg2n*), 5,9 (1n, a-a, J=4,5 Q 8 Hz, ändrades till en dublett: J=4,5 Hz vid D20 tillsats, 7-H), 6,35 (1H, m, 3-cn=cg), 5,89 (1n, S, cgphz), 5,9 (1a, S, J=1s az, 3-eg), 1,35 (1on, m, vn-a), 112 505 256 8,06 (2H, br, s, försvann vid D20, N§2), 3,21 (ZH, br, s, försvann vid D20 - tillsats, NH2), 8,36 I 9,07 (vardera 2H, d, J=6 Hz, Py-H), 9,57 (1H, d, J=8 Hz, försvann vid D20 - tillsats, 7-NH).

Förberedningsexempel 16 Benshydryl-7-bensylidénamino-3-{3rklor-1-propen-1-yl]-3- cefem-4-karboxylat (XVII) (Z-isomer) Till en iskyld,blandning av 13,4 g (28 mmol) av den kristal- lina 7-amino-cefem-mellanprodukten XVIII (Z-isomer) och 3,3 g (31 mmol) bensàldehyd i 150 ml etylacetat sattes droppvis 56 ml (28 mmol) 0,5N natriumhydroxid under en tidsrymd av 20 minuter för att hålla reaktionsblandningens temperatur under 10°C. Blandningen omrördes under kylning ytterligare 15 minuter och det organiska skiktet separera- des, tvättades med 2 x 100 ml av en mättad vattenlösning av natriumbikarbonat och torkades över magnesiumsulfat.

Till den torkade lösningen sattes en liten mängd träkol och blandningen filtrerades. Filtratet koncentrerades till torrhet. Den resteradewoljan upplöstes i'50 ml kol- tetraklorid och koncentrerades ånyo. Detta förfarande upp- repades tre gånger och blandningen övervakades medelst reversfas-TLC för att bekräfta att all utgångs-7-amino- cefalosporin hade omvandlats till den Schiffska basen.

Avlägsnande av lösningsmedlet i vakuum gav 16,45 g av den i rubriken angivna föreningen XVII (Z-isomer) som ett blekgult pulver (uppskattad renhet 85%) med en smp. av 74°c'(sönaerae1n1ng). Proaukten använaes 1 efterföl- jande steg utan rening.

In = våg: em'1 1180, 1125, 1635.

Aggšclz nu (s'* ) 251 (400).

UV 1 cm nun = °°°13 s,1s (1a, a, J=11 az). ppm -f 113 505 256 Eörberedningsexempel 17 Benshydryl-7-bensylidenamino-3-[§-(4-karbamoyl-1-pyridinio)- 1-propen-1-ylZ-3-cefem-4-karbogylat-jodid (XXI-H) (E-isomer) Till en kyld blandning av 16,4 g av 3-klorpropeny1cefem- föreningen XVII (Z-isomer) i 5 ml aceton sattes droppvis en lösning av 6,3 g (42 mmol) natriumjodid i 30 ml aceton under 10 minuterfunder kväveatmosfär och blandningen om- rördes vid rumstemperatur. Reaktionen övervakades genom matning av uv-ebedrprioneförhai1ender ¿h1* (zss nm)/ 1 cm E1%cm (320 nmL]. När detta förhållande nådde ett värde under 1,30 (efter 45 minuter) späddes blandningen med 400 ml koltetraklorid och fick stå vid rumstemperatur. när förhållandet nådde err värde under 1,10 (efter 3 rimmar) koncentrerades blandningen till halva sin volym. Koncentra- tet behandlades med en liten mängd träkol och diatomacêjord och filtrerades. Filterkakan tvättades med 100 ml av en 1:1-blandning av metylenklorid och koltetraklorid. Till den kombinerade lösningen av filtratwoch tvättvätskor sattes en lösning av 3,5 9 (28,7 mmol) isonikontinamid i 20 ml dimetylformamid och blandningen koncentrenades under reducenat tryck. Koncentratet fick stå 1,5 timmar vid rumstemperatur och tvättades med 3 x 100 ml isopropyl- eter. Den resterande bruna halvfasta substansen upplöstes i S0 ml metylenklorid och lösningen sattes droppvis under omröring till 1,5 l etylacetat. Den erhållna fällningen tillvaratogs genom filtrering och tvättades med 200 ml etylacetat. Efter torkning över fosforpentoxid i vakuum erhölls 17 g av den i rubriken angivna förening XXI-H (E-isomer). Gult amorft pulver. Smp; 150-155°C (sönder- delning). Uppskattad renhet 80% enligt NHR. m3 rn = i em 1715, 1725, 1690, 1635. uv lå: C12 um (n}*cm) zss (sas) 293 (ass). 114 505 256 mm = J°"s°'ds a,4-s,a (za, un), 5,25 (za, ma), 5,41 ppm (18, d, J=4 Hz), 5,73 (1B, d, J=4 Hz), 6,93 un, s), 5,97 (m, a, J=1s az), 7,3- 1,5 (1511, br. s), a,4o (zu, a, a=s,s az), 9,15 (za, a, a=s,5 m).

Förberedningsexempel 18 7-amino-3-[3-(4-karbamoyl-1-pyridinio)-1-propen-1-yl]-3- cefem-4-karboxylat (XXII-H) (E-isomer) Till en suspension av 17 g av den lkvaterniserade cefem- föreningen XXI-H i 25 ml 85 %-ig myrsyra sattes droppvis ml koncentrerad klorvätesyra och blandningen omrördes 1,5 timmar vid rumstemperatur och behandlades med en liten mängd träkol. Blandningen filtcerades och tvättades med ml 85 %-ig myrsyra. Filtratet kombinerades med tvätt- vätskan och_hälldes i 1 1 aceton under omröring. Den er- hållna fällningen tillvaratogs genom filtrering för er- hållande av 9,52 g av en gulfärgad råprodukt. Till en sus- pension av råmaterialet (9,5 g) i 50 ml vatten sattes en liten mängd träkol och blandningen filtrerades. Filtratet sattes droppvis under omröring till 700 ml isopropylalko- hol. Den erhållna fällningen tillvaratogs genom filtrering, tvättades med en liten mängd metanol (30 ml) och torkades för erhållande av 7,58 g av den i rubriken angivna före- ningen XXII-H (E-isomer) som hydrokloriden. Ljusgult pul- ver. Uppskattad renhet 85% enligt UV. Smp. 173-188°C (sönderdelning). n = vfâg; cm* 1795, 1680, 1620, 1575, 1540.

UV xfosfatbuffert (pH 7)nm (E1% ) 294 (457). max 1 cm 115 505 256 una = c°2°*°°1 3,52 (za, 5), 5,11 (15, a, J-5 az), ppm 5,33 (28, d, J=7 Hz), 5,43 (1H, d, J=5 az), 5,31 (1n, a-t, a=1s a 1 az), 1,23 (1u, a, a=1s az), a,34 (za, a, a=1 az), 9,oo (za, a, a=v az).

Förberedninqsexempel 19 2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetylklorid- gydroklorid (III-1_§9m sin gyraklorid-hydroklorid A. 2-cyano-2-metoxiiminoacetamid Till en omrörd blandning av 252 g (3 mol) «-cyanoacet- amid och 414 g (6 mol) natriumnitrit i 600 ml vatten sattes 371 ml (10 mol) ättiksyra vid 5-10°C under 1,5 timmar. Bland- ningen omrördes ytterligare 1,5 timmar och inställdes=på pH 8,5 med 6N natriumhydroxid. Till blandningen sattes ses m1 (6 mal) aimetyisuifat via 15-2o°c och biananingen omröraes 1,5 timmar vid 45°c. neaxtionsblandningen inställ- aeetpa pn a,s med en nacriumnyaroxia och fick sta vid s°c 'över natten för separation av fällningen, som tillvaratogs genom filtrering, tvättades med kallt vatten och lufttorka- des för erhållande av 292 g 177%) av den i rubriken angivna föreningen som bruna nålar med en smp. av 170-172°C.

KB: -1 IR Vmax cm 3400, 3180, 1720(sh), 1715, 1690, 1615, 1570. uv AF 3 um 1:) 238,5 (3290), zsa (sk, 3810). nun :; 8°"S°'ds 4,20 (an, s, ocn3), 7,35 (zu, br. N52). ppm Analys beräknat för C¿H5N3O2: C, 37,80; H, 3,97; N, 33,06_ runne:= c, 31,43; n, 3,75; N, 32,51. 116 505 256 B. 2-metoxiiminopropandinitril En omrörd blandning av 88,9 g (0,7 mol) 2-cyano-2-metoxi- iminoacetamid, 70 g natriumklorid och 97 ml (1,05 mol) fosforoxiklorid i 350 ml torr 1,2-dikloretan åtloppskoka- des 16 timmar. Det olösliga materialet avfiltrerades genom en dicalite-dyna och tvättades med dikloretan. Filtratet och tvättvätskan kombinerades och hälldes under omröring i 1,5 l isvatten för sönderdelning av överskottet av fos- foroxiklorid. Den organiska fasen tvättades med 500 ml %-ig natriumbikarbonat, 3 x 500 ml vatten och SOQ.ml av en mättad natriumkloridlösning och torkades över magne- siumsulfat. Filtratet destillerades under reducerat tryck för erhållande av 61,5 9 (81%) av den i rubriken angivna föreningen,rsom kokade vid 62°C/24 mm Hg. (Litteraturvärde kokpunkt 47-4s°c/12 mm ag).

IR = všïïskefilm cm'1 3o2o, 2960, 2245, 2020, 1530, 1455; 1oao. nun = ¿°°°13 4,3s (sn, s, ocn3).

PP” av _ C. 2-cyano-2-metoxiiminoacetamidiniumacetat Till en lösning av 28,4 g (0,53 mol) ammoniumklorid i 355 ml av en 28 %-ig vattenlösning av ammoniak och 180 ml etanol sattes droppvis en lösning av 58,0 g (0,S3 mol) 2-metoxiiminopropandinitri1 i 120 ml metanol vid -15 till -10°C under en tidsrymd av 30 minuter under omröring. Bland- ningen omrördes vid -10°C över natten ochfdärefter vid om- givningens temperatur (20-2S°C) under en dag. Reaktions- blandningen fördelades mellan 350 ml vatten och 350 ml CH2Cl2 och vattenfasen mättades med natriumklorid och extraherades ånyo med 300 ml CHZCI2. De organiska extrakten kombinerades, torkades över magnesiumsulfat och indunstades i vakuum. En lösning av återstoden i 1,6 1 etylacetat in- ställdes på pH 3-4 med ättiksyra'för utfällning av den i rubriken angivna föreningen som kristaller, vilka till- 117 505 256 varatogs genom filtrering och tvättades med etylacetat.

Utbyte 67,6 9 (69%). Smp. 152-4°C (sönderdelnång).[iittera- turvärde: smp. 150-1S5°C (sönderdelningL2.

:R = våg: cm'1 3160, zsoo, zsso, 2235, zooo, 1665, 1sss, 1495, 1415. uv = zššgfl nm (a) 243 (ssoo), zss (sk, ssao), :os (sk, 1400).

NMRñ SDMso-ds 1,88 (311, s, cgzšcoon), 4,15 (311, s, ocn3), ppm 7,60 (4H, br.).

Analys beräknat för C4H6N4O'CH3C0OH: C, 38,71; H, 5,41; N, 30,09 Funnet: C, 38,71; H, 5,59; N, 29,51.

D. 2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimino- acetonitril Till en suspension av 125 g (0,672 mol) 2-cyano-2-metoxi- iminoacetamidiniumacetat i 1,25 1 metanol sattes dropp- vis 234 m1 (1,sa mol) crietyiamin vid -10°c øcnaaarefter 41,6 ml (0,806 mol) brom under 20 minuter vid -15 till -10°C och blandningen omrördes 20 minuter. Till bland- ningen sattes droppvis en lösning av 78,3 g (0,806 mol) KSCN i 550 ml metanol under 1 timme vid -15 till -10°C.

Efter omröring vid 0-5°C under 1 timme hälldes blandningen i 12 l isvatten för bildning av en kristallin fällning, som tillvaratogs genom filtrering, tvättades med vatten och lufttorkades för erhållande av 120 g (98%) av den i rub- riken angivna föreningen. Smp. 263-5°C (sönderdelning).

Smp. för den framställda föreningen är cirka 60°C högre än den smp. som anges i litteraturen (Japanska publice- rade patentansökan Kokai S7-158769; 210-1$°C (sönderdelning)) men våra spektral- och mikroanalysdata är i överensstämmelse med strukturen. 118 505 256 In = våg: cm" 3435, 3260, 3120, 2960, 2245, 0020, 1630, 1s4s, 14ss, 141s.

UV 1:22” nm (4) 240 (13300), 310 (3470).

Nan = 8°“s°'d6 4,21 (sn, s, ocn3). 8.30 (za, br. Nnz).

PPN Analys beräknat för CSHSNSOS: C, 32,78; H, 2,75; N, 38,23; S, 17,50.

Funnet: C, 32,76; H, 2,51; N, 30,02; A, 17,50. 1 E. 2-(S-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoättik- syra (III-1) En blandning av 18,3 g (0,1 mol) 2-(S-amino-1,2,4-tiadia- zol-3-yl-2-metoxiiminoacetonitril) i 250 ml 4N natrium- hydroxid upphettades 3 timmar vid 50-55°C under omröring.

Reaktionsblandningen inställdes på pH 1 med fosforsyra och tvättades med 100 ml etylacetat, mättades med natrium- klorid och extraherades tre gånger med en blandning av etylacetat och tetrahydrofuran (3:1, 2 x 300 ml och 1 x 200 ml). Extrakten kombinerades, torkades över magnesium- sulfat och koncentrerades under reducetatrtryck. Åter- stoden triturerades med isopropyleter för erhållande av blekgula kristaller av den i rubriken angivna syran. Ut- byte 16,8 g (83%). Smp. 184-185°C (sönderdelning). (Litte- raturvärde;(japanska publicerade patentansökningen Kokai sv-1ss1s9; smp. 100-1a2°c (sönderae1n1ng)).

KBr -1 IR : Vmax Cm 3460, 3260, 3140, 1725, 1620, 1605) 1545.

UV ägg: nm (2) 234 (13200), zss (sk, 3620). 119 505 256 F. 2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetyl- klorid-hydroklorid Till en suspension av 40,4 g (0,2 mol) 2-(S-amino-1,2,4- tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoättiksyra (III+1) i 400 ml torr CHZCI2 sattes 41,6 g (0,2 mol) PCl5 i en portion vid -so°c. slamdmimgcm cmröracs 4 timmar via -zo-cin -s°c och hälldes i 2 l av en 2:1-blandning av n-heptan och iso- propyleter. Den gula fällningen tillvaratogs genom filtre- ring, tvättades med samma lösningsmedelsblandning och tor- kades med kaliumhydroxid under reducerat tryck för err hållande av 46,0 g (90%) av den i rubriken angivna syra- kloriden.

IR = vfnäfl cm” 1775.

Förberedningsexempel 20 com: I/ N “ fi _ RZNJLSJ u\ cf-n / ca-ca-csz-ci Än, CO0CB(Ph)2 VIII~2 Ål Difenylmetyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-(Z)- etoxiiminoacetamidq]-3-13-klorf1-propenyl]f3-cefem-Qf __ karboxylat (VIII-2, Z-isomer) Till en blandning av 2,3 ml (9 mmol) N,0-bis(trimetyl- silyllacetamid och 1,338 g (2,8 mmol) 7-amino-3-[3-klor- 1-(2)-propen-1-yl]-3-cefem-4-karboxylat-hydroklorid (XVIII: från förberedningsexempel 12) i 10 ml metylenklorid sattes 800 mg (2,95 mmol) 2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2- (Z)-etoxiiminoacetylklorid-hydroklorid portionsvis under omr-öring via -1o°c ccn mamamimgcm fick sta 2 timmar via 0°C. Blandningen späddes med 200 ml etylacetat, tvättades 120 505 256 med vatten och indunstades under reducerat tryck. Tritu- rering av återstoden med isopropyleter gav den i rubriken angivna produkten VIII-2 som ett amorft pulver. Utbyte 1,10 g (ess). smp. överstigande 1so°c (sßnaeraelninq). m u (nar) 1 cm"1aa3o, 1780, 1120, 1690, 13ao, 1220. ma!! uv = Ämax (cznsou) 1 mn (a) zas 111000). nun = s(DMso-dö) 1 ppm 1,26 (3H, t, J=7nz, cazcga), 4,25 (2H, q, J=7Hz, C§2CH3), 5,90 (1H;- d-d, J=4 a 8Hz, 7-H), 6,26 (13, d, J=11Hz, 3-CH), 6,85 (1H, s, cHPh2); 9,53 (1H, d, J=8nz, 7-NH).

Förberedningsexempel 21 a ' ß com: / s (1 'H .'. - I: s, _\?. 0/1'- / ca-cn-cnz-x czns coocnma), Difeny1metyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-(Z)- etoxiiminoacetamidq]-3-13-jod-1-propenyl]-3-cefem-4-karb- oxylat (IX-2) En blandning av 1,90 g (3 mmol) VIII-2 (från förberednings- exepel 20) och 1,4 g (9 mmol) natriumjodid i 20 ml aeeton omrördes 10 minuter vid rumstemperatur och fick därefter stå 3 timmar vid S°C. Blandningen indunstades under redu- cerat tryck, späddes med 100 ml etylacetat, tvättades med S-ig natriumtiosulfat och vatten och indunstades under reducerat tryck. Triturering av återstoden med isopropyl- 121 5015 256 eter gav 1,82 g (84%) av den i rubriken angivna produkten IX-2 somnett ljusbrunt amorft pulver. 1 In = 0¿ax (nar) 1 cm' 3290, 1170, 1120, 1670, 1530, 1310, 1220. uv .= :max (c2H50H> 1 nm 1n}*cm1 304 1109).

Förberedningsexempel 22 -<:::>>'CHIN"1“"1 /Vs . fa oy-J' /. ca-cn-cnz? /_\ ONE, COOCH(Ph)2 Difenylmetyl-7-bensylidenamino-3-(TE)-3-(4-karbamoyl- pyridinio)-1-propenyl]-3-cefem-4-karboxylat (XXI-H jodid) (E4isomer) Till en kyld lösning av 42,8 g (90 mmol) av 3-klorpropenyl- cefemföreningen (XVII, Z-isomer) (från förberedningsexem- pel 16) i 80 ml torr DMF sattes 20 g (120 mmol) XI i en portion och blandningen omrördes vid rumstemperatur. Reake tionen övervakades medelst UV-absorptionsförhållandet 1É:%c- (255 nm)/ E:%cm (320)). När förhållandet understeg 1,10 (efter 45 minuter) späddes blandningen med 800 ml metylenklorid, behandlades med 4 g aktivt kol och filtre- rades. Filterkakan tvättades med 100 ml CHZCI2. Till kombi- nationen av filtrat och tvättvätskor sattes 14,64 g iso- nikotinamid och blandningen koncentrerades under reducerat tryck. Koncentratet hölls 1,5 timmar vid rumstemperatur och tvättades med 600 ml av en 1:1-blandning av toluen och n-heptan. Det resterande bruna halvfasta materialet upplöstes i 100 ml CH2Cl2 och lösningen sattes droppvis 122 505 256 till 3 l etylacetat under kraftig omröring. Efter tork- ning över P205 i vakuum erhölls 57,37 g (88%) av den kvatergigeraaé' i rubriken angivna produkten XXI-H som jodiden. Gult amorft pulver. Smp. 150-1S5°C (sönderdel- ning). Denna produkt var identisk med den som erhölls genom jodering med NaI (föräeredningsexempel 17).

Pörberedningsexempel 23 s aci- n2N---I/_ _ ._- N ' 04 / cu-cn-cnz-ci coocn (Ph) 2 xv1I1_ *z Difenylmetyl-7-amino-3-(3-klor-1-propenyl)-3-cefem-4- karboxylat-hydroklorid (Z-isomer) (XVIII, hydroklorid) En 25 %-ig lösning av 69 9 (0,22 mmol) kloracetaldehyd i CHCl3 sattes till en lösning av 80 g (0,11 mol) XVI v i 1,1 1 CH2Cl2 innehållande 16,2 ml (0,06 mol) N,0-bis- (trimetylsilyl)acetamid vid -10°C i en portion och bland- ningen fick stå över natten vid 5°C. Blandningen koncent- rerades till cirkà 0,3 l, späddes med ett blandlösnings: medel av etylacetat och isopropyleter (1/2, 0,6 1), be- handlades med silikagel (Wakogel C-100, 60 g) och filtre- rades genom en dicalite-dyna. Filterkakan tvättades med samma lösningsmedelssystem ( 0,2 l) Kombinatet av filtrat och tvättvätska koncentrerades till cirka 0,2 1, behand- lades med Girard reagens T (60 g, 0,26 mol) och 220 ml 4N HCl och försattes med några groddkristaller av XVIII- hydroklorid. Efter omröring 3 timmar tillvaratogs de er- hållna kristallerna genom filtrering, tvättades med 0,5 l vatten och 0,5 l etylacetat och torkades i vakuum för erhållande av 37 g (70%) av den i rubriken angivna XVIII- 123 SUS 256 hydrokloriden med en smp. vid >185°C (áönderdelning). Blek- gula nálaralbenna produkt var identisk med den som erhölls 1 förberedningsexempel 12.

Förberedn ingsexempel 2 4 s-cgl-azn--f s .- N " då /I CBICB-CB:-C1 ' C00CH(Ph)2 Y XVIII *Z Difenylmety1-7-amino-3-(3-klor-1-propenyl)-3-cefem-4- karboxylat-hydroklorid (Z-isomer) (XVIII, hydroklorid Till en lösning av 628 mg (2 mmol) kloracetaldehyd (25 %-ig lösning i CHCl3) i 10 ml CHZCI2 sattes 0,135 ml (0,5 mmol) N,0-bis(trimetylsilyl)acetamid och 728 mg (1 mmol) XVI i tur och ordning vid 5°C. Blandningen fick stå över natten vid 5°C. Blandningen indunstades och späddes med en blandning av etylacetat och isopropyl- eter (1/2, â0 ml). Olösligt material avlägsnades genom filtering och filtratet koncentrerades till cirka 5 ml.

Koncentratet behandlades med 2 ml 4N HC1, försattes med groddkristaller av XVIII-hydroklorid och omrördes 1 timme vid rumstemperatur. Kristallerna tillvaratogs genom filtre- ring, tvättades med 10 ml etylacetat och 10 ml vatten'och torkades i vakuum för erhållande av 384 mg (80%) av den i rubriken angivna XVIII-hydrbklorfldazmed en smp. av >18S°C (sönderdelning). Blekgula nålar. Denna produkt var iden- tisk med den som erhölls i förberedningsexempel 12. 124 505 256 Förberedningsexempel 25 2-(S-amino-1,2,4-tiadiazo1-3-y1)-2-(propen-3-yloxiimino)- acetylklorid-hydroklorid (III-3 som dess syrakloridhydro- klorid) A. Metyl-2-(5-t-butoxikarbonylamino-1,2,4-tiadiazol-3- y1)-2-(propen-3-yloxiimino)acetat En blandning av 685 mg (3,37 mmol) N-(propen-3-yloxi)- ftalimid lframställdfmedelst förfarandet enligt E.

Grochosaki & J. Jurczak, Synthesis 1976 682] och 175 mg (3,35 mmol) hydrazinhydrat i 5 ml etanol omrördes 1 timme vid rumstemperatur. Den erhållna fällningen avfiltrerades och filtratet och tvättvätskorna kombinerades. Till lös- ningen sattes 967 mg (3,37 mmol) metyl-2-(5-t-butoxi- karbonylamino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-oxoacetat och bland- ningen fick stå 1 timme vid rumstemperatur och koncentrera- des medelsten rotationsindunstare. Återstoden renades medelst silikagelkromatografi. Kolonnen eluerades med n-hexan/etylacetat (4:1) och de fraktioner som innehöll huvudprodukten kombinerades och indunstades under reduce- rat tryck. utbyte 514 mg (46%). smp. as-ss°c. 1 In = Q (nar) 1 em' 3100, 1745, 1710, 1610; ma!! uv )hax (cznsoa) 1 nm te) 223 (9700), 242 410000). nun = ;(cnc13) 1 ppm 1,55 (sn. s. soc-H). 4,4u (zu, a, J=sHz, o-cflz). 5,21 (za, m, c§2=cn), S190 m; -cë=CH2,| brus' NH).

B. 2-(5-t-butoxikarbonylamino-1,2,4-tiadiazol-3-y1)-2- iprgpen-3-yloxiimino)ättiksyra1) En lösning av 770 mg (2,3 mmol metyl-2-(5-t-butoxikarbonyl- 125 505 256 amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-(propen-3-yloxiimino)acetat och 3,5 ml av en ZN natriumhydroxidlösning (7,0 mmol) i ml metanol âtloppskokades 30 minuter. Reaktionsbland- ningen koncentrerades i vakuum och späddes-med 10 ml av en 1:1-blandning av etylacetat och vatten. Vattenskiktet separerades, surgjordes till pH 2 med 6N saltsyra och extraherades med 2 x 10 ml etylacetat. Etylacetatlösningen torkades över magnesiumsulfat och koncentrerades medelst en rotationsindunstare för erhållande av 596 mg (81%) av den i rubriken angivna föreningen. Smp. 134-135°C (littera- turvârde1): smp. 135-136°C.

(Nujol) i cm* 3150, 1745, 1710, 1sso.

IR : Vmax UV : Ämax (CZHSOH) i nm (E) 223 (11000), 242 (11300).

J=SHZ| I mp cgfcn), 6,0 (m, m, cycnz). 1) I. Csendes, et al., J. Antibiotics, §§, 1020 (1983).

C. 2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-(propen-3fyloxi-g imino)~ättiksyra'(III-3)1) En lösning av 570 mg (1,74 mmol) 2-(5-t-butoxikarbonyl- amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-(propen-3-yloxiimino)ättik- syra i 6 ml trifluorättiksyra fick stå 1 timme vid om- givningens temperatur. Indunstning följt av triturering med 30 ml isopropyleter gav 376 mg (95%) av den i rubriken angivna föreningen. Smp. 109°C (sönderdelning). 1 In = *max (uujol)-1 cm' 3180, 1710, 1545, 1460. uv = xmax (cznson) 1 nm (s) 245 (nsoo). nun = :wusø-as) 1 ppm 4,77 (za, a, J=saz, o-cnz), s,2o (zu, m, cg=ca), 6,0 (m, m, cgæaz). 126 505 256 1) Japan Kokai S7-112396 (7/13/82, Fujisawa) Brit. ansök. 7935533 (10/12/79).

D. 2-(S-amino-1,2,4-tiadiazo1-3-y1)-2-(propen-3-y1oxi- imino)-acetylklorid-hydroklorid En lösning av 350 mg (1,S4 mmol) av III-3 och 410 mg (1,97 mmol) fosforpentaklorid i 5 ml diklormetan omrördes 1 timme vid 25°C. Reaktionsblandningen hälldes i 60 ml n-hexan och fällningen avfiltrerades. Utbyte 323 mg. 1765.

IR : Q (Nuiol) i cm-1 mäX Färberedningsexempel 26 2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-propargylokiiminoacetyl kloridfhydroklorid (III-4 som sin syraklorid-hydroklorid) A. Metyl-2-(5-t¥butoxikarbonylamino-1,2,4ftiadiazol-3- yl)-2-propargyloxiiminoacetatA 1 I H A. ._ En suspension av 870 mg (4,32 mmol) N-propargyloxiftalimid1) och 200 mg (4,0 mmol) hydrazinhydrat i 5 ml etanol omröides 1 timme vid 25°C och filtrerades. Till kombinationen av filtrat och tvättvätskor sattes 1,0 g (3,86 mmol) metyl-2- (S-t-butoxikarbonylamino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-oxoacetat Lösningen fick stå 1 timme och koncentrerades under reduce- rat tryck. Rening medelst silikagelkromatografi, följt av industning, gav 319 mg (27%) av den i rubriken angivna produkten med smp. 72-75°c. 2) 1 IR : Vmax (Kßr) 1 cm- 3200, 2380, 1745, 1710, 1610.

UV : Ähax (CZHSOH) 1 nm (8) 235 112200). _? Sumso-dö) i ppm 1,56 (911, s. soc-n), 3,55 (111, t, J=2Hz, cacn), 4,85 (za, d, J=2nz, 127 505 256 1) Kommersiellt tillgänglig, Aldrich. 2) I. Csendes et al., J. Antibiotics gg, 1020 (1983).

B. 2-(S-t-butoxikarbonylamino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2- propargyloxiiminoättiksyra En lösning av 490 mg (1,4 mmol) metyl-2-(5-t-butoxikarbonyl- amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-propargyloxiiminoacetat och 2,2 ml av en 2N vattenlösning av natriumhydroxid (4,4 mmol) i 14 ml metanol åtloppskokades 30 minuter. Reak- tionsblandningen koncentrerades under reducerat tryck och en 1:1-blandning av etylacetat och vatten sattes till lös- ningen. Det separerade vattenskiktet surgjordes till pH 2 med 6N saltsyra och extraherades med 2 x 10 ml etylacetat.

Torkning över magnesiumsulfat, följt av indunstning av det organiska skiktet, gav 149 mg (89%) av den i rubriken an- givna produkten med smp. 135°C (sönderdelning). 1 In = vhax (uujoly 1 cm' 3350, 1720, 1s1o, 1sso. üv 5 lmax (cznson) 1 nm (e) 233 (11soo). ë J=2Hz| d; J=2Hzp Cgzcšßfn: 9:0 (1fll S: NH).

C. 2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-propargyloxiimino- ättiksyra (III¥4)3) ' ' En lösning av 410 mg (1,26 mol) 2-(5-t-butoxikarbonyl- amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-propargyloxiiminoättiksyra 1 s~m1 tr1f1uora:t1ksyra fick sta 1 timme via 2s°c. In- dunstning följt av triturering av återstoden med 25 ml isopropyleter gav 204 mg (72%) av den i rubriken angivna föreningen. Smp. 156-158°C (sönderdelning). 128 505 256 xn 1 qaax (uujol) 1 cm" ssoo, 2480, 1730, 1610. uv = :max 1c2n5ou> 1 mm 1:) 234 112000). nun 1 g(nnso-a6) 1 ppm 3,52 (1a, 1, a=2nz,<:asacu), 4,ss (2111 d' J=2Hz| (za, br.s, Nnz). 2 3) Japan Kokai 57-112396 (7/13/82, Fujisawa) Brit. ansök. 7935538 (10/12/79). _- ._ D. 2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-propargyloxiimino- acetylklorid-hydroklorid En blandning av 175 mg (0,07 mol) av III-4 och 182 mg (0,88 mmol) fosforpentaklorid i 2 ml diklormetan omrördes 1 timme vid -5°C. Reaktionsblandningen hälldes i 30 ml n-hexan och fällningen avfiltrerades. Utbyte 65 mg (34%). 1 xx = Q (nujøl) 1 cm' 1170. ma!! Förberedningsexempel 27 2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-cyk1openty1oxiimino- acetylklorid-hydroklorid (IIIQS som sin syrakloridfhydro- klorid) “ ' “ A. Mety1-2-(5-t-butoxikarbonylamino-1¿2,§-tiaoia;o1*3- y1)-2-cyklopentyloxiiminoacetat En suspension av 860 mg (3,7 mmöl) N-(cyklopentyloxi)- fta11m1a') och 1as mg (3,1 mmola nyaraz1nnyara: 1 s ml etanol omrördes 1 timme vid omgivningens temperatur och filtrerades. Filtratet och tvättvätskorna kombinerades och sattes till 1,06 g (3,7 mmol) metyl-2-(5-t-butoxi- karbonylamino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-oxoacetatz). Lös- ningen fick stå 1 timme vid rumstemperatur och koncentre- rades i vakuum. Återstoden renades medelst silikagel- kolonnkromatografi. Eluering med en 4:1-blandning av- '15 129 505 256 n-hexan och etylacetat, följt av indunstning, gav den 1 rubriken angivna produkten i ett utbyte av 906 mg (81%) och med amp. 115-11a°c. 1 In = vmax (xsr) 1 cm 3200, 1745, 1710, 1sso. uv = lhax (cznson) 1 nm te) 217 (1800), 252 (7600).

NMR : &(CDCl3) i ppm 1,51 (9H, s, BOC-H), 1,60 (8H, br.s, - HG ), 3,88 (gu, s, 00143). 4,90 ' 3 (1n, br.s, )<:] 1, 8,70, (1n, br.s, O NH). 1) U.S. Patent 3 971 778 (7/27/76; Glaxo), Brit. ansök. 49255 (10/25/72). 2) I. Csendes et al., J. Antibiotics åâ, 1020 (1983).

B. 2-(5-t-butoxikarbonylamino-1,2,4-tiadiazol-3fyl)f2f gxklopentyloxiiminoättiksyra En lösning av 500 mg (1,34 mmol) metyl-2-(5-t-butoxi- karbonylamino-1,2;4-tiadiazol-3-yl)-2-cyklopentyloxiimino- acetat och 2 ml av en 2N natriumhydroxidlösning (4 mmol) i 15 ml metanol åtloppskokades 30 minuter. Reaktionsbland- ningen indunstades och 10 ml av en 1:1-blandning av etylacetat och vatten sattes till lösningen. Vattenskiktet separerades, surgjordes till pH 2 med GN saltsyra och extra- herades med 2 x 10 ml etylacetat. Det organiska skiktet tvättades med saltlösning, torkades över magnesiumsulfat och koncentrerades under reducerat tryck för erhållande av 377 mg (78%) av den i rubriken angivna föreningen med smp. 1ss°c (sönaeraelning). 130 505 256 0 (xxx) 1 cm" 3100, 1110, 1ss0.

IR IBEX UV : Ähax (CZHSOH) 1 nm (E) 238 (13300). una = ;(0Mso) 1 ppm 1,51 (sa, s, soc-a), 1,70 (su, br.s, H 0-<2] 1, 4,02 110. m. >< 11 O C. 2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-cyklopentyloxiimino- ättiksyra (III-5, Z-isomer)3) I hd 1' En lösning av 348 mg (0,97 mmol 2-(5-t-butoxikarbonylamino- 1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-cyklopentyloxiiminoättiksyra i 2 ml trifluorättiksyra fick stå 1 timme vid rumstemperatur. Reak- tionsblandningen koncentrerades under reducerat tryck. Åter- stoden triturerades med 5 ml isopropyleter och 10 ml hexan för erhållande 215 mg (86%) av den i rubriken angivna före- ningen. Smp. 162-165°C (sönderdelning) (litteraturvärde3): smp. 160-165°C (sönderde1ning)). 1 in = umax (uujo11 1 cm' 3290, 3200, 1110, 1615, 1600. uv 3 lmax tczason) 1 nm 12) 238 113300). m), 8,22 (2H, S). 3) Japan Kokai 57-158769 (9/30/82, Fujisawa) Brit. ansök. 0101134 (3/s/01). ' 0. 2-15-amino-1,2,4-tiaaiazol-3-yl)f2-¿ykiqpapty1°x1- iminoacetylklorid-hydroklorid " En lösning av 190 mg (0,74 mmol) III-5 och 219 mg (1,0 mmcl) fosforpentaklorid i S ml diklormetan omrördes 1 timme vid rumstemperatur. Reaktionsblandningen hälldes i 50 ml n-hexan. Den erhållna fällningen tillvaratogs 131 505 256 genom filtrering. Utbyte 122 mg (60%). 1 rn = Q (uuj°1) 1 cm' 1160. maX Förberedningsexempel 28 Bensotriazol-1-yl-2-(S-amino-1,2,4-tiadiazo1-3-y1)-2- metoxiiminoacetat En blandning av 2,7 g (20 mmol) 1-hydroxibensotriazol och 4,12 gf(20 mmol) dicyklohexylkarbodiimid i 65 ml DMF om- rördes vid rumstemperatur. Efter 15 minuter sattes 4,04 g (20 mmol) av III-1 sattes till den omrörda blandningen vid 6°C och omröringen fortsattes 3 timmar. Reaktionsblandningen filtrerades för avlägsnande av den olösliga karbamiden och filterkakan tvättades med en liten volym DMF. Filtratet och tvättvätskorna kombinerades och hälldes i 800 ml is- vatten. Fällningen tillvaratogs genom filtrering, varvid man erhöll 5,24 g (82%) av den i rubriken angivna före- ningen som ett ljusgrâtt pulver. Smp. 189-192°C (sönder- delning).

In = omax (Kax) 1 =m'1 1815, 1620, 1540, 1415, 1090, 1oso, 1oos, 945, ass, 740. uv = Anax 1c2H5oH1 1 nm 1z}*cm) 246 (sec), zassk 1228).

Claims (3)

505 256 m PATENTKRAV

1. Föreningar med formeln “zu-f s xxx: JP' cn-cs-cafnšo coca 9 vari , -N =-_IQ är en kvartär ammoniogrupp med formeln 9 en" ' É-w e f u 'Ii-lit l - ) ' .I o ps s ._ 17 e I 5 -àícnzhl eller 2 all ^ vari B13, B14 och B15 är lika eller olika och är lägre alkyl, lägre alkenyl, aminoflägre alkyl) med det förbehållet att amino ej kan föreligga på a-kolatom, eller hydroxiflägre alkyl) med det förbehållet att hydroxigruppen ej kan föreligga på en a-kolatom; 10 B16 är väte, lägre alkyl, lägre alkoxi, lägre alkyltio, amino, lägre alkylairaino, di(lägre alkyDamino, formylamino, lägre alkanoylamino, karboxi, hydroxi, karboxiflägre alkyl), karboxiflägre a1kyl)tio, hydroxiflägre alkyl), halo(lägre alkyl), aminoflägre alkyl), (lägre alkoxi)(lägre alkyl), karbamoyl eller N-(lägre al- kyl)karbamoy1 eller E16 är en tvåvärd alkylengrupp med 3-5 kolatomer; 15 E17 är lägre alkyl, (lägre alkoxi)(lägre alkyl), halo(lägre alkyl), allyl, hydroxi- 10 15 20 25 (33 505 256 (lägre alkyl) med det förbehållet att hydroxigruppen ej kan föreligga på a- kolatomen, aminoflägre alkyl) med det förbehållet att arninogruppen ej kan föreligga på a-kolatomen, eller fenyl(lägre alkyl); 1:18 är väte, lägre älkyl, lägre äneeri, (lägre äneexnaägre älkyn, (lägre älkyntie, amino, (lägre alkyl)amino, di(lägre alkyDamino, karboxi, hydroxi, karboxiflägre alkyl), hydroxi(lägre alkyl), aminoflägre alkyl), formylamino, (lägre alkanoyl)- amino, karbamoyl eller N-(lägre alkyl)karbamoy1; n är ett heltal från 1 till 3; Z är CHZ eller, när n är 2, kan Z även vara S, O eller N-Rlg, där B19 är väte eller lägre alkyl; och B20 och B21 är lika eller olika och är väte, lägre alkyl, lägre alkoxi, (lägre alkyDtio, amino, lägre alkylamíno, diflägre alkyDamino, karboxi, hydroxi, hydroxi(lägre alkyl), aminoflägre alkyl), (lägre alkoxi)(lägre alkyl), karboxiflägre alkyl), karboxiflägre alkyhamino, (lägre alkanoyDamino, karboxiflägre alkanoyl)- amino, karbamoyl eller N-(lägre alkylkarbamoyl); och salter, estrar, solvat och hydrat därav.

2. Föreningar enligt krav 1, kännetecknade därav, att gruppen 'N _-=_"-_ Q är 1-metylpyrrolidinio, pyridinio, Z-aInino-ö-tiazolo[4,5-c]pyridinio,trimetylammonjoß-aminopyridinioß-formylami- nopyridinio, ß-karbamoylpyridinio, 4_-karbamoylpyri dinio, ß-aminometylpyridinio, 2-metyltiazolio, 3-hydroximetylpyridinio, fll-hydroximetylpyridinio, 4-(N-mety1- karbamoyl)pyridinio, 4-karboxipyridinio, 2,3-propylenpyridinio, 3-karboximetyl- pyridinio eller 4-karboximetyltiopyridinio.

3. Förfarande för frarnställnjng av föreningar med formeln XI -r--r m j/ '_13 Cll-CI-'CBZQISO 0 m9 sus zsel we Q 10 vari -N-I-Z Q är en kvartär ammoniogmpp med den i kravet 1 angivna bety- delsen,>eller ett salt, ester, solvat eller hydrat därav, kännetecknat därav, att man omsätter en förening med formeln I -®_m I med en förening med formeln II s :zum-r 'pr-fl / cazci II coastal, för erhållande av en förening med formeln III s a III o "I" coocs m) , därefter omsätter föreningen med formeln III med natriumj odid eller kaliumjodid för erhållande av en förening med formeln IV Crr-g, ma, IV därefter omsätter föreningen med formeln IV med trifenylfosfin eller omsätter föreningen med formeln III med trifenylfosfin för erhållande av en förening med formeln V F55' 505 256 O* ' *° fl / gm), V ma, därefter omsätter föreningen med formeln V med en bas för erhållande av en förening med formeln VI Ü e» CÜ, a VI Én (m, därefter omsätter föreningen med formeln VI med CICHZCHO för erhållande av en förening med formeln VII BIN coocncnn, därefter omsätter föreningen med formeln VII med natriumjodid eller kaliumj odid för erhållande av en förening med formeln VIII -u---r's 4 o -cnzx VIII ooocnttu, därefter omsätter föreningen med formeln VIII med en sekundär amin R HN < , där R och R' vardera är metyl eller tillsammans bildar pyrrolidin, RI fór erhållande av en förening med formeln IX 505 256 mk s . _ can -1/ ) IX r- X cooca un) 2 därefter omsätter föreningen IX med R"Y, där R" är en tertiår amin Q :N och Y är klor, brom eller jod, för erhållande av en förening med formeln X cooca m) , eller omsätter föreningen VIII med en tertiâr amin QšN, fór erhållande av föreningen X, därefter behandlar föreningen X med Girards reagens T eller HCl för erhållande av förening XI och, om så önskas, omvandlar den fria syran till ett salt, ester, solvat eller hydrat därav.