SE466205B - 7-/2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-(substituerad) iminoacetamid/-3-/3-(kvaternaer ammonio)-1-propen-1-yl/-3-cefem-4-karboxylater - Google Patents

Description

.466 205 alkynyl, eventuellt substituerad cykloalkyl, cykloalkenyl eller en O- eller S-haltig 5-ledad heterocyklisk ring, som är substituerad med oxo-grupper; R är väte eller alkyl; R4 är väte, acyloxialkyl, acyltioalkyl, eventuellt substituerad pyridinioalkyl, eventuellt substituerad hetero- cyklyltioalkyl, alkyl, halogen, hydroxi eller eventuellt substituerad ttiazolioalkyl; och Rs är karboxi eller skyddad karboxi: med det förbehållet att RS är C00- när R4 är even- tuellt substituerad pyridinioalkyl eller eventuellt sub- stituerad tiašolioalkyl; och denïstreckade linjen anger antingen en enkel- eller dubbelbindning.

Europeiska patentansökan 13 762, publicerad den 6 augusti 1980, överensstämmer därmed och har en liknande beskriv- ning.

De amerikanska patenten 4 381 299 (beviljat'26 april 1983), 4.331»äáäfibexiljatmlânmaå¿&%&2æáoohæ%r332æ%9&&wbemilfiat:sf 1 junñf?982f» vifikaïvärderäßfiaserar sfigfpäwmcderansökhingar till amerikanska patentet 4 390 534, har liknande beskriv- _ ningar.

B) Europapatentansökningen 62 321, som publicerades den 13 oktober 1982, avslöjar cefem-föreningar med formeln RI fi-CONHí-Q N Én: f-'N / \ f ' * oas) CH2-fiisqvz Q vari R1 är amino eller skyddad amino; R2 är en eventuell substituerad lägre alifatisk kolvätegrupp eller cyklo- alkenyl; och gruppen med formeln f\ 1 \ '“N(D I \\f 466 205 är en eventuell substituerad heterocyklisk katjongrupp, som innehåller mer än en kväveatom; och farmaceutiskt godtagbara salter därav. Som mellanprodukter avslöjas även föreningar med formeln s nl--7éÉï:%¥--fi-coNa-----T// //N N N s ÃR: // / CH __)IQ'\\ - vari R1 och R2 har ovan angivna betydelser, R4 är en skyddad karboxylgrupp och X- är en syragrupp.

C) Europapatentansökningen 74 653, som publicerades den 23.mans»198B@äausLöjarfloeåemefönemingan=maäfifiorelnmrf" N _ S 1 _Äš--c-coNn-- få» åk: °¿_,L / cnïu/ coß " “ vari R1 är amino eller skyddad amino; R2 är en eventuellt substituerad lägre alifatisk kolväte- grupp, cyklo(lägre~alkyl) eller cyklo(lägre alkenyl); R3 är lägre alkylamino, N-skyaaaa(1ägre a1ky1)amin°, di(lägre alkyl)amino, sulfo(lägre alkyl)amino, hydroxi- (lägre alkyl)amino, N-skyddad hydroxi(lägre alkyl)amino, acy1oxi(lägre alkyl), (lägre alköxi)(lägre alkoxi)(lägre~ alkyl), ai(1ägre a1ky1)am1no(1ägre alkyl), (lägre a1ky1)- tio(lägre alkyl), (lägre alkyl)tio, lägre alkoxi, (lägre alkoxi)(lägre alkoxi), hydroxi(lägre alkoxi), acylllägre alkyl), hydroxi(lägre alkyl)tio, di(lägre alkyl)amino(lägre 466 205 a1kyl)tio, N-haltig omättad 5-ledad heterocyklisk grupp, N-haltig omättad 5-ledad heterocyklyltio eller N-haltig omättad 5- eller 6-ledad heterocyklyltio(lägre alkyl), som kan vara substituerad med lämpliga substituenter; och R4 är väte eller lägre alkyl; är ett salt därav.

D) Amerikanska patentet 4 332 800, som beviljades den 1 juni 1982, avslöjar bl.a. föreningar med formeln gl__t :oNH--;:1/wQ-__CH? m6 f vari RF-änamino«eLlen~skgddadflamtmmæuáïämrläggeuælhglmm~» ~ ochflX>är%väteuelienwkanfiamøylfiisf E) Europapatentansökningen 47 977, som publicerades den 24 mars 1982, avslöjar cefem-föreningar med førmeln (0) g m Am-T-fi-coNn-_-( *f 1 o-nz /P- / 0 _ cnzn 1 cooe vari m är 0 eller 1; Am är eventuellt substituerad amino; T är en tiadiazolylgrupp (bunden till de andra grupperna via tvâ av sina kolatomer); R2 är väte, even- tuellt substituerad alkyl, cykloalkyl eller eventuellt substituerad karbamoyl; och-R1 är en eventuellt substituerad 466 205 tiazolio-, eventuellt substituerad pyrazolio-, tri(1ägre alkyl)ammonio- eller pyridiniogrupp med formeln RI @/\ -- N -” b vari Ra är substituerad lägre alkyl [substituenten är cykloalkyl, fenyl, hydroxi, alkoxï, halogen, cyano, karba- moyl, karboxyl eller sulfoj, lägre alkenyl eller karboxi- substituerad lägre alkenyl, lägre alkyltio eller karboxi- substituerad lägre alkyltio, amino eller monosubstituerad amino jšubstituenten är lägre alkyl, lägre alkanoyl eller aminobensensulfonylf, di(lägre alkyl)amino, substituerad karbamoyl [šubstituenten är lägre alkyl, hydroxi(lägre alkyl), lägre alkoxi, hydroxi eller cyanqf, di(lägre alkyl)- karbamoyl, tiokarbamoyl, cykloalkyl@¿fenyl,,hgdnoxi@;lägnew“ alkoxi, naiogenf* .uägrefiaikaxukarwfig »Mägreïfiarnanešmaxffffï"' lägre alkanóyl,_karboxyl, sulfo, cyano, nitro eller hydroxi- sulfo(lägre alkyl); Rb är väte eller karbamoyl eller har samma betydelse som Ra; och Rc är väte eller har samma betydelse som Ra; och salter därav.

Ehuru europapatentansökningen 25 017, som publicerades den 11 mars 1981, formellt icke är relaterad till ovan angivna europapatentansökan har den en liknande beskrivning.

F) Europapatentansökningen 30 630, som publicerades den 24 juni 1981, avslöjar 3-vinyl-cefem-föreningar med for- meln I R - A- comz-fl-I/ ---N 1/ S \ca-ca2 °§ R2 466 205 vari R1 är en eventuellt skyddad aminosubstituerad hetero- cyklisk grupp, som även kan innehålla halogen, eller en grupp med formeln ' R S02HN vari 123 är lägrejlkyl; RZ är karbaxi anar skygagaa karboxi; och A är lägre alkylen, som kan innehälla en substituent, som utgöres av amino, skyddad amino, hydroxi, oxo eller en grupp med formeln =N~OR4, där R4 är väte, cyklo(lägre alkenyl), lägre alkynyl, lägre alkenyl [eventuellt substi- tuerad med karboxi eller skyddad karboxif, lägre alkyl [eventuellt skyddad med en eller flera karboxi, skyddad karboxi, amino, skyddad amino, cyano, fosfono, skyddad fosfono eller en heterocyklisk grupp, som i sin tur kan vara substitueradlfiqoohmsalteràdärama" ar-i i of Denna ansökan avslöjar specifikt föreningar med formeln S HZN N --comæ___r_l/ / \on4 å'- / C003 =CH vari OR4 är metoxi, karboximetoxi, tert-butoxikarbonyl- metoxi eller 1-tert-butoxikarbonyletoxi.

G) Brittiska patentet 1 399 086, som publicerades den 25 juni 1975, innehåller en generisk beskrivning innefattande ett mycket stort antal uaälomnüneni næd formeln F,|c\cO-NH B ' _ Å\\\ORa //' COO8 ” 466 205 vari R är väte eller en organisk grupp, Ra är en företrande envärd organisk grupp, som är bunden till syret via en kol- atom, B är >S eller >S -90 och P är en organisk grupp.

Enligt den utföringsform kan P bl.a. vara en vinylgrupp med formeln ' -CH=C __ R4 vari R3 och R4 oberoende av varandra kan vara väte, nitril, lägre alkoxikarbonyl eller en substituerad eller osubsti- tuerad alifatisk, cykloalifatisk, aralifatisk eller aroma- tisk grupp. 5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl-gruppen är emeller- tid icke identifierad som en möjlig R-substituent och det finns.ickelnågot,avslöjanderellenaantydan.om~attiRakan,@f“ - vara en» kuaternäræammonïosubstitueredflpropenylgrupfiüaDe 3 “f*~ amerikanska patenten 3971 778 och de därur avdelade paten- ten 4 024 133, 4 024 137, 4 064 346, 4 033 950, 4 079 178, 4 091 209, 4 092 477 och 4 093 803 har liknande beskriv; ningar.

H) Europapatentansökningen 88 385, som publicerades den 14 september 1983, avslöjar föreningar med formeln s nl-í-cona-ff ß-N 3 Ånz å' / R 84 2 vari R1 är osubstituerad tiadiazolyl; R är karboxi(lägre- alkyl) eller skyddad karboxi(lägre alkyl); R3 är väte, halogen eller lägre alkenyl: och R4 är karboxi eller - skyddad karboxi. Ehuru 1-propenyl anges som en av de 466 205 möjliga betydelserna för R3 exemplifierar ansökningen endast föreningar, vari R3 är väte, klor eller vinyl.

I) Amerikanskap patentet 4 307 233, som beviljades den 22 december 1981, avslöjar bl.a. 3-vinylcefalosporinderi* vat med formeln ' vi \ ?g---coNH--__(S .' 3 H s \ s f ~ / /R 2 on 0 vari R5 bl.a. kan vara alkyl, vinyl, cyanometyl eller en skyddsgrupp såsom 2-metoxiprop-2-yl och R3 och R4 är alkyl- grupper (eventuellt substituerade med hydroxi,-alkoxi, amino, alkylamino eller dialkylaminolfeller fenglgnuggergellerfikêw seufa4 or-i-:iismms-a- mea-z-:faen:;flï-aëfwafaäf- bundna kan utgöra en mättad heterocyklisk ring_med 5- eller 5 led, eventuellt innehållande en annan heteroatom, som utgöres av N, O eller S, och eventuellt substituerad med en alkylgrupp. Föreningarna är användbara som mellan- produkter vid framställning av 3-tiovinylcefalosporinderi- vat. Det finns icke något avslöjande eller antydan om en -amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl-grupp i stället för 2-amino- tiazol-4-yl-substituenten eller om en ¿kvaternär-ammonio- substituerad propenylgrupp som 3-substituent. Den publice- rade brittiska patentansökningen 2 051 062 överensstämmer därmed och har en liknande beskrivning.

J) Europapatentansökningen 53 537, som publicerades den 9 juni 1982, avslöjar bl.a. 3-vinylcefalosporinderivat med formeln 466 205 S _coua / _ N / 3 N / _ H s o-c-coon° //_ “WH-Näs /\5 0 a Rb KZZO R 5 coon: vari R: och Rb är lika eller olika och är väte eller alkyl eller tillsammans bildar en alkylengrupp innehållande 2 eller 3 kolatomer, R: är en syraskyddande grupp, R2 är en syraskyddande grupp såsom en ester, R3 och R4 är lika eller olika och är väte, alkyl (eventuellt substituerad med hydroxi, alkoxi, amino, alkylamino eller dialkylamino) eller fenyl eller R3 och R4 tillsammans med den kväveatom till vilken de är bundna bildar en mättad heterocyklisk ring med 5 eller 6 led, eventuellt innehållande en annan heteroatom, som utgöres av N, O eller S, och eventuellt substituerad med en alkylgruppx Eöreningannaaänsanvänds,¿@~ bara*som*melIanproduktër~vídnframstälfningwavflSfltiovinyïßf cefalosporinderivat. Det finns icke något avslöjande eller' an- tydan om en 5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl-grupp i stället för 2-aminotiazol-4-yl-substituenten eller om en Hkvaternär ammonio-substituerad propenylgrupp som 3-substituent.

Amerikanska patentet 4 423 214 överensstämmer därmed och har en liknande beskrivning.

K) Europapatentansökan S3 074, som publicerades den 2 juni 1982, avslöjar generiskt ett stort antal 3-vinylcefalo- sporinderivat med formeln 466 205 vari R°1a (i en av flera utföringsformer) kan vara N I fi-C0- I N g/JLS \\\ vari R5 bl.a. kan vara väte, alkyl, vinyl, cyanometyl, en*oximskyddande grupp såsom trityl, etc. eller en grupp med formeln -c-coon°5' R R 5 saøanonššxafiarïkänenæëææufæfiaßaaxffäflsvarafväfë;* alkyl eller_til1sammans en alkylengrupp med 2 eller 3 kol- atomer och Res är väte eller en syraskyddande grupp; Roza RO (i en av flera utföringsformer) kan vara en metylgrupp, som är substituerad med en 5- eller 6-ledad aromatisk heterocyklisk ring, som innehåller en enda heteroatom, såsom 2- eller 3-pyridiyl, 2- eller 3-tienyl eller 2- eller 3-furyl; och R3 är en grupp med formeln R4SO2O- vari R4 kan vara alkyl, trihalometyl eller eventuellt substituerad fenyl.

Dessa föreningar anges vara mellanprodukter vid framställ- ning av föreningar, vari 3-substituenten är en grupp med formeln R° _ ” -CH=C-SR 11 466 205 vilka uppges ha antibakteriell aktivitet.

Ehuru detta patent innefattar den möjligheten att Ro är en metylgrupp, som är substituerad med en N-haltig heterocyklisk ring, både i mellanprodukterna och slut- produkterna (och således ger en heterocyklylsubstituerad propenylgrupp), utlär det endast att den heterocykliska ringen är bunden via en av sina kolatomer. Det finns så- ledes ingen antydan om en Lkvaternär ammoniosubstituerad __ propenylgrupp. Hänvisningen exemplifierar Ro i mellan- produkterna och slutprodukterna endast som metyl. Vidare måste både i mellanprodukterna och slutprodukten propenyl- gruppen innehålla en-andra substituent (-O3SR respektive -SR). Det finns icke heller något avslöjande eller an- tydan om en 5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl-grupp i stället för 2-aminotiazol-4-yl-substituenten.

L) Europapatentansökningen,53i538,fsom-phhliceradesfdln~ 9~ jun.i,,f.1:9=a2.«,1 avsiwaj-afi-f ba". afa, a-v~i~ny~rcefærosporimëifiänJ* »produkter med formeln (mn 4 som: / w i / ßgN s OR o//Ä ”cflfls ' coon vari n är 0 eller 1, R5 är väte, alkyl, vinyl, cyanometyl eller en oxim-skyddande grupp och R är halogen. Det finns icke något avslöjande eller antydan om en 5-amino-1,2,4- tiadiazol-3-yl-grupp i stället för 2-aminotiazol-4-yl- substituenten och icke något avslöjande eller antydan om en 3-halo-1-propen-1-yl-substituent i 3-ställningen. 12 466 205 Fullständigubeskrivning Föreliggande ansökan avser nya cefalosporinderivat, som är potenta antibakteriella medel. Närmare bestämt avser uppfinningen föreningar med formeln ' couflfjs, ' e d: n=ca-cxz-NEEQ ï N l RlHN'l\~$f, \\OR? Öâ , ' C069 vari R1 är väte eller en konventionell aminoskyddande grupp, R2 är väte, en rak- eller grenkedjig alkylgrupp innehållande en 1-4 kolatomer, en cykloalkyl- eller cykloalkenylring innehållande 3-6 kolatomer eller en g;upp,med fcrmelnmn .ga-P ' ak '~ ' i “gl- ' ; " f' , I , ..., .

RS RS X ?4 -C-COOH 1 Is R vari R3 är väte, lägre alkyl eller karboxyl, X är halogen, hydroxi eller lägre alkoxi och R4 och R5 vardera oberoende av varandra är väte, metyl eller etyl eller R4 och R5 till- sammans med den kolatom till vilken de är bundna kan vara en cykloalkylidenring innehållande 3-5 kolatomer och G> -NEEQ är en :kvaternär ammoniogrupp, och ogiftiga farmaceutiskt godtagbara salter och fysiologiskt hydrolyserbara estrar därav. Inom ramen för uppfinningen innefattas även solvat 13 466 205 (inklusive hydrat) av föreningarna med formeln I, liksom de tautomera formerna av föreningarna med formeln I, exem- pelvis 2-iminotiazolin-4-yl-formen av 2-aminotiazol-4-yl- gruppen.

Enligt en annan aspekt avser denna uppfinning ett förfaran- de för framställning av föreningarna med formeln I och vissa mellanprodukter vid deras framställning.

Såsom visas i strukturformeln har föreningarna med formel I “syn"- eller "Z"-konfiguration med avseende på alkoxi- iminogruppen. Pâ grund av att föreningarna är geometriska isomerer kan även viss mängd av "anti"-isomeren vara när- varande. Denna uppfinning innefattar föreningar med formel I, som innehåller minst 90% av "syn"-isomeren. Företrädes- vis är föreningarna med formeln I "syn"-isomerer, som är väsentligen fria från motsvarande "anti"-isomerer.

Förutom\geometriskaäfsomerery»som'ârWmöjIïga'médiavseende på alkoxiiminogruppen, bildar föreningarna med formeln I (och mellanprodukterna med formlerna VIII och IX) även geometriska (cis- och trans-)isomerer runt propenylgruppens dubbelbindning. Både cis ("Z“)- och trans ("E“)-isomererna av dessa föreningar faller speciellt inom ramen för denna uppfinning.

De ogiftiga farmaceutiskt godtagbara salterna av före- ningarna med formeln I innefattar salter med mineralsyror såsom klorvätesyra, bromvätesyra, fosforsyra och svavel- syra eller med organiska karboxylsyror eller sulfonsyror. såsom ättiksyra, trifluorättiksyra, citronsyra, myrsyra, maleinsyra, oxalsyra, bärnstenssyra, bensoesyra, vinsyra, fumarsyra, mandelsyra, askorbinsyra, äppelsyra, metan- sulfonsyra, bensensulfonsyra, p-toluensulfonsyra och andra syror, som är kända och användes inom paiicillin- och cefalo- sporinomrâdet. Framställningen av dessa syraadditionssalter utföres medelst konventionell teknik. 14 466 205 Exempel på fysiologiskt hydrolyserbara estrar av före- ningarna med formel I innefattar indanyl-, ftalidyl-, metoximetyl-, acetoximetyl-, pivaloyloximetyl-, glycyl- oximetyl-, fenylglycyloximetyl- och 5-metyl-2-oxo-1,3- dioxolen-4-ylmetylestrar och andra fysiologiskt hydrolyser- bara estrar, som är kända och användes inom penicillin och cefalosporinomrâdet. Dylika estrar framställes medelst inom tekniken känd konventionell teknik..

Föreningarna med formeln I, vari R1 äï väte, uppvisar hög antibakteriell aktivitet mot olika grampositiva och gram- negativa bakterier och är användbara vid behandling av bakterieinfektioner hos djur, inklusive människa. Före- ningarna med formeln I kan beredas för parenteralt bruk på konventionellt sätt under användning av kända farma- ceutiska bärare och excipienter och kan föreligga i enhets- doseringsform eller i multidoseringsbehållare. Kompositio- nerna kan föreliggari form av lösningar, suspensionem.eller:. emültionentinoïäehaltïgäšelïerfivarflenhaltfigaflveflíkíarfoch*' “ kan innehâllar konventionella dispergering-, suspenderings- eller stabiliseringsmedel. Kompositionerna kan ävauföre- ligga i form av ett torrt pulver för rekonstituering för användning, exempelvis med sterilt pyrogenfritt vatten.

Föreningarna med formel I kan även beredas som supposito- rier under utnyttjande av konventionella suppositoriebaser, såsom kakaosmör eller andra glycerider. Föreningarna enligt denna uppfinning kan, om så önskas, administreras i kombi- nation: med andra antibiotika såsom penicilliner eller andra cefalosporiner.

När kompositionerna föreligger i enhetsdoseringsform inne- håller de företrädesvis från cirka 50 till cirka 1500 mg av den aktiva beståndsdelen med formelrl. Doseringen av föreningarna med formeln I är beroende av sådana faktorer som patientens vikt och ålder liksom av sjukdomes speciella natur och svårighetsgrad och avgöres av läkaren. Doseringen vid behandling av en vuxen människa ligger emellertid van- ligen inom intervallet från cirka 500 till 5000 mg per dag, 'S 466 205 beroende på administreringsfrekvensen och -sättet. Vid intramuskulär eller intravenös administrering till en vuxen människa är det normalt tillräckligt med en total dos av från cirka 750 till cirka 3000 mg per dag, i av- delade doser, ehuru högre dagsdoser av vissa av föreningarna kan vara önskvärda när det gäller Pseudomonas-infektioner.

Den kvaternära ammoniogruppen med formeln GD .__ -NEEQ kan vara acyklisk, cyklisk eller en kombination av dessa och kan innehålla en eller flera ytterligare heteroatomer, som utgörs av kväve, svavel och syre.

Ett exempel på en acyklisk 'kvaternär ammoniogrupp är en grupp med formeln ' A vari R6, R7 och R8 kan vara lika eller olika och exempel- vis kan vara lägre alkyl eller substituerad lägre alkyl, i vilken substituenterna exempelvis är halogen, amino med det förbehållet att aminogruppen ej kan föreligga på ena-keletem, nydrexi med det förbehållet ett hyareài- gruppen ej kan föreligga på enu-kolatom, lägre alkoxi med det förbehållet att alkoxigruppen icke kan föreligga på enük-kolatom, lägre alkyltio, lägre alkylamino, di- (lägre alkyl)amino, karbamoyl, lägre alkenyl, fenyl(lägre alkyl), fenyl eller substituerad fenyl (vari substituen- terna exempelvis kan vara halogen, hydroxi, amino, lägre alkylamino, di(lägre alkyl)amino, acylamino, lägre alkyl, lägre alkyltio, lägre alkoxi eller liknande). 16 466 205 Exempel på cykliska Ikvaternära~ammoniogrupper är full- ständigt omättade monocykliska heterocykliska ringsystem och bicykliska heterocykliska ringsystem, där minst en N-haltig ring är fullständigt omättad. Lämpliga cykliska kvaternäfa- ammonioringsystem innefattar exempelvis så- dana med formlerna 17 466 205 och liknande, vari R9 och R10 är lika eller olika och exempelvis är väte, halogen,amino, lägre alkyl, lägre alkenyl, lägre alkyltio, karboxi, hydroxi, lägre alkoxi, (lägre alkoxi)(lägre alkyl), halo(lägre alkyl), hydroxi- (lägre alkyl), amino(lägre alkyl), (lägre alkyl)amino(lägre alkyl), di(lägre a1kyl)amino(lägre alkyl), lägre alkylamino, di(lägre alkyl)amino, karboxi(lägre alkyl), karboxi(lägre alky1)amino, karboxi(lägre alkyl)tio, karbamoyl, N-(lägre alky1)karbamoyl, formylamino, acylaminp, acyloxi, fenyl, _ pyridyl, amidino, guanidino och liknande. Då strukturen hos den heterocykliska ringen så medger kan R9 och R10 tillsammans vara en alkylengrupp innehållande 3-5 kolatomer, exempelvis propylen.

Exempel på kombinerade acykliska/cykliska Äkvaternära ammoniogrupper innefattar exempelvis sådana med formeln R1 466 205 18 och liknande, vari Rn exempelvis är lägre alkyl, (lägre alkoxi) (lägre alkyl) , hydroxiüägre alkyl) med det för- behållet att hydroxi ej kan föreligga på en aL-kolatom, karboxiflägre alkyl) , amino(lägre alkyl) med det förbe- hållet att amino ej kan föreligga på en d-kolatom, lägre alkenyl, halo(lägre alkyl), allyl och liknande och R12 exempelvis är väte, hydroxi, halogen, lägre alkyl, hydroxi (lägre alkyl) , (lägre alkoxi) (lägre alkyl) , ha1o(lägre alkyl), aminfllägre alkyl), lägre alkoxi, lägre alkyltio, lägre alkenyl, amino, (lägre alkylamino, di-(lägre alkytl) amino, acylamino, acyloxi, karbamoyl, amidinoflägre alkyl) , fenyl, pyridyl, amidino, guanidino och liknande.

Föredragna kvaternära ammoniogrupper är sådana med form- lerna .§f3 e , i 315 v 1:17 Q R17 - ___ 1 9 N I )n _N / I ,/' z 1,ÄI\ - S 21 , E18 R; R vari R13, R14 een R15 är lika eller elike een är lägre alkyl, lägre alkenyl, amino(lägre alkyl) med det förbe- hållet att amino ej kan föreligga på enOK-kolatom eller hydroxiüägre alkyl) med det förbehållet att hydroxigruppen ej kan föreligga på en om -ko1atom; n16 är väte, lägre e1ky1, 1ägre elkexi, lägre alkyltie, _ amino, lägre alkylamino, di (lägre alkyflamino, formylamino, 19 466 205 (lägre alkanoyl)amino, karboxi, hydroxi, karboxi(lägre alkyl), karboxi(lägre alkyl)tio, hydroxi(lägre alkyl), halo(lägre alkyl), amino(lägre alkyl), (lägre alkoxi) (lägre alkyl), karbamoyl eller N-(lägre alky1)karbamoyl eller R16 kan representera en tvåvärd alkylengrupp med* 3-5 kolatomer; n" är lägre elkyl, (lägre elkexl) (lägre alkyl), hele (lägre alkyl), allyl, hydroxi(lägre alkyl) med det för- behâllet att hydroxigruppen icke föreligger pålä-kolatomen, aminoïlägre alkyl) med det förbehâllët att aminogruppenï' icke föreligger på «-kolatcmen eller feny1(lägre alkyl); R18 är väte, lägre alkyl, lägre alkoxi, (lägre alkoxi) (lägre alkyl), lägre alkyltio, amino, lägre alkylamino, di(lägre alkyl)amino, karboxi, hydroxi, karboxi(lägre alkyl), hydroxi(lägre alkyl), amino(lägre alkyl), formyl- amino, lägre alkanoylamino, karbamoyl eller N-(lägre alkyl)karbamoyl; n är ett heltal från 1 till 3; Z där eller,,.~.-._ när är. »'24 - - ZA: . ävemf-'fvaralfSí-.,' 10i~efllïèeuf~ “ N-R19, där R19 är väte eller lägre alkyl: och är lika eller olika och är väte, lägre alkyl, lägre alkoxi, lägre alkyltio, amino, lägre alkylamino, dí(lägre alkyl)amino, karboxi, hydroxi, hydroxi(lägre alkyl), amino(lägre alkyl), (lägre alkoxi)(lägre alkyl), karboxi(lägre alkyl), karboxi(lägre alkyl)amino, lägre alkanoylamino, karboxi(lägre alkanoyl)amino, karbamoyl eller N-(lägre alkyl)karbamoyl.

Speciellt föredragna .kuaternära ammoniogrupper är N- (lägre alkyl)pyrrolidinio (och speciellt N-metylpyrroli- dinio), tri(lägre alkyl)ammonio(bch speciellt trimetyl- ammonio), pyridinio}, aminopyridinic, formylaminopyridinio, karbamcylpyridinio, amino(lägre alkyl)pyridinio} karboxi- pyridinio, hydroxi(lägre alky1)pyridinio, N-(lägre alkyl)- karbamoylpyridinio, lägre alkylenpyridinio, 2-metyltia- zolio och 2-amino-5-tiazololfi,5-q]pyridinio. 466 205 I föreningarna med formel I är speciellt föredragna be- tydelser för R2 lägre alkyl (och speciellt metyl), cyklo- alkyl med 3-5 kolatomer, 1-karboxicykloalk-1-yl med 3-5 kolatomer, allyl, propargyl och karboxillägre alkyl) (och speciellt 2-karboxiprop-2-yl).

De mest föredragna föreningarna enligt uppfinningen är 1) 2) 3) 4) ) 6) 7) 8) 9) ) 7-[É-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimino- acetamidq]-3-[â-(trimetylammonio):]-propen-1-yl]-3- cefem-4-karbox§lat, _ 7-[ä-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimino- acetamidq]-3-L3-(1-metylpyrrolidinio)-1-propen-1-yl7- 3-cefem-4-karboxilat, 7-12-(5-amino-1,2,4-tiadiäzol-Bfyl)-2-metoxiimino:- acetamidqj-3-13-pyridinio-1-propen-1-yl]-3-cefem-4- karboxylat, 7-12-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiímino- acetamido] :3;:Å3;=f.»(;3f.-aminop§g¿rfidiniof:):- ,-:-+:1 cefem4f~karboxyIäfi$ ' 7-12-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimino- acetamidQ]-3-[3-(3-formylaminopyridinio)-1-propen-1- yl]-3-cefem-4-karboxylat, 7-12-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimino- acetamidq]-3-[§-(3-aminometylpyridinio)-1-propen-1* yl]-3-cefem-4-karboxylat, 7-[Y-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimino- acetamidq]-3-[§-(3-karbamoylpyridinio)-1-propen+1- yl]-3-cefem-4-karboxylat, 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimino- acetamidq]-3-[3-(4-karbamoylpyridinio)-1-propen-J- yL7-3-cefem-4- karboxylat, 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimino- acetamidq]-3-[3-(2-metyltiazolio)-1-propen-1-yl]-3- cefem-4-karboxylat, 7-12-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimino- acetamidq]-3-[§-(2-amino-5-tiazo1o[Z,5-q]pyridinio)- 1-propen-1-yl7-3-cefem-4-karboxylat, 11) 12) 13) ) 16) 17); 18) 19) ) 21) 22) 21 466 205 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimino- acetamidq]-3-[3-(4-hydroximetylpyridinio)-1-propen- 1-yL]-3-cefem-4-karboxylat, 7-12-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimino- acetamidq]-3-[3-(3-hydroximetylpyridiñio)-1-propen-1- yl]-3-cefem-4-karboxylat, ' 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimino- acetamidq]-3-[É-k4-(N-metylkarbamoyl)pyridinio)-1- propen-1-y17-3-cefem-4-karboxylat, 7-[2-(5-amino-1,2:Ä-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimino- acetamidQ]-3-[É-(2,3-propylenpyridinio)-1-propen-1-yL]- 3-cefem-4-karboxylat, 7-(2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-etoxiimino- acetamidQ]-3-[3-(4-karbamoylpyridinio)-1-propen-1- yl]-3-cefem-4-karboxylat, 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-cyklopentyloxi- iminoacetamidq7-3-[3-(4-karbamoylpyridinio)-1-prbpen- 1ryl]~3ecefem-4-karboxylatfw- 7-[2*fi5-aminø-1;2}4-tiaåíazbï-3-yï)¿Z4äIïyIoXíímïno-“ acetamidq]-3-[ä-(4-karbamoylpyridinio)-1-propen-1-yl/- 3-cefem-4-karboxylat, 7-12-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-prcpargy1oxi- iminoacetamidQ]-3-j3-(4-karbamoylpyridinio)-1-propen- 1-yl]-3-cefem-4-karboxylat, 7-(2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimino- acetamidq]-3-[3-(4-karboxipyridinio)-1-propen-1-yL]- 3-cefem-4-karboxylat, " I 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-etoxiiminoacet- amidq]-3-Z3-(4-karboxipyridinio)-2-propen-1-yl]-3- cefem-4-karboxylat, 7-12-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidq]-3-[3-(3-karbcximetylpyridinio)-1-propen-1-yL]- 3-cefem-4-karboxylat och 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)~2-metoxiiminoacet- amiaqj-:s-[s- wkarboxime tyltiopyridinio) -1-propen-1- yl]-3-cefem-4-karboxylat. 1 22 466 205 Det numreringssystem som användes i föreliggande samman- hang för de olika reaktanterna, mellanprodukterna och slutprodukterna är följande: Bokstav [Romersk siffra] - Arabisk siffra (i förekommande fall) (i förekommande fall) Den romerka»siffran anger huruvida föreningen är en slutprodukt (I) eller en mellanprodukt eller annan reak- ' tant (alla övriga romerska siffror). De arabiska siffrorna och bokstäverna användes ej i sådana fall där den över- gripande klassen (familjen) av föreningar avses.

Den arabiska siffran anger den speciella betydelsen av substituenten R2. Om den speciella R2-gruppen i fråga f innehåller en karboxylgrupp, som är skyddad medelst en konventionell karboxylskyddande grupp, användes ett prima ~ teckenr(')-eftenfidenfärahiskatsåfifráäwfiötíattäamgesdeftä ~ faktum. Om karboxylgruppen är oskyddad användes ej något primtecken. Ett primtecken användes även med den generiska R2-substituenten (dvs RZI) när man generiskt avser en R2- grupp, som innehåller en skyddad karboxylgrupp.

Bokstaven i slutet av föreningens nummer avser den speciella betydelsen av den kvaternära ammoniogruppen -NEQ Av bekvämlighetsskäl anges nedan de arabiska siffror och bokstäver som tillskrivs vissa av de föredragna R2-grupperna och ïkvaternära ammoniogrupperna.

Arabisk siffra R2 1 = metyl 2 = ~ etyl P 3 = allyl 4 = propargyl = cvk1nnan+"1 23 466 205 GJ Bokstav -N EQ 1-metylpyrrolidinio = pyridinio = 2-amino-5-tiazolo[3,5-Q]-pyridinio = trimetylammonio ' = 3-aminopyridinio = 3-formylaminopyridinio = 3-karbamoylpyridinio = 4-karbamoylpyridinio = 3-aminometylpyfídinio 2-metyltiazolio = 3-hydroximetylpyridinio = _ 4-hydroximetylpyridinio = 4-(N-metylkarbamoyl)pyridinio = 4-karboxipyridinio = 2,3>propylenpyridinio = ~ 3-karboximetylpyridinio = 4fka:boximetyLtiopyridimhoß.= 066.205 24 Tabell 1 Före- Konfifl, Geometriskt medelvärde av MIK (pc/ml) ninq vid dubbe - - 'nr bindning (G+)".Iñ (G+)“Ib (G')"Ifl (G')"Ib (G-PHII (G")°III (5) (5) (57 (5) (5) (J) :-10 0/z-1/1 0.25 0.70 - 0.05 0.15 _' 0.23 2.4 1-10 0/z-7/1 0.13 0.35" 0.029 0.05 0.17 'ï.4 1-10 - 0 0.20 0.40 0.015 0.044 0.11 1.5 1-10 0/z-1/4 0.35 0.00 0.05 0.11 0.35 3.5 1-1c 0 0.10 0.20 -0.0071 0.033 0.007 3.0 1-10 0/z=1/1 0.51 1.4 0.10 0.25 0.45 2.4 1-10 0/z=10/1 0.30 0.53 0.05 0.075 0.25 1.0 1-10 0 0.20 0.40 0.0094 0.029 0.10 1.4 1-10 0 0.15 0.40 0.0094 0.033 1.2 1-1s¶_ ¶.0? 3 0.20 _¿_0135, ._0.0004f 000.030. .' «¿¶;,1,40i, 14fiy*ï0¥ f040'*0MæmHmux0%¶wfi0 Wbmf" I-11 0 0.00 1.5 0.10 0.20 0.59 3.1 1-10 0 0.17 0.35 0.025 0.075 0.15 1.5 ' I-10 0 0.35 0.00 0.029 0.044 0.20 3.5 I-10 0 0.25 0.51 0.029 0.000 0.15 2.5 9 _ 1-10 0 0.35 0.70 0.029 0.10 0.17 2.3 1-10 0/z-7/1 1.2 1.5 0.013 0.055 0.30 5.7 I-10 0 0.17 0.35 0.020 0.033 0.11 14 I-20 0 0.20 0.40 0.014 0.057 0.15 1:4 1-20 0 1.2 2.1 0.015 0.11 0.35 4.7 1-20 z' 1.4 3.1 0.044 0.15 0.59 10 1-30 0 0.23 0.40 0.057 0.10 0.52 1.9 ' 1-40 0 0.25 0.45 0.055 0.11 0.50 2.5 1-50 0 0.13 0.40 0.20 0.45 2.1 4.2 1-10 0 0.0 1.5 0.013 0.007 -0.34 14 I-10 0 0.7 0.92 0.0095 0.044 0.23 14 (G+)-Ia (G+)-Ib (G-)-Ia (G-)-Ib (G-)-II (G-)-Iíï = 466 205 Penicillin-känslig §¿ aureus (5 stammar) Penicillin-resistent §¿ aureus (5 stammar) Cefalotin-känslig §¿ coli (2 stammar), Kl. gneumoniae (1 stam) och gr; mirabilis (2 stammar) i Cefalotin-resistent E. coli (3 stammar) och q__ Kl. Eneumoniae (2 stammar) §¿ morganii (1 stam), Ent; cloacae (2 stammar) och Ser. marcescens (2 stammar) _______,,__ Ps. aeruginosa (7 stammar)T Tabell 2 nedan ger skyddsdosensó (PDSO) hos möss för«ett antal av föreningarna med formel I mikroorganismer. ningar med formel I vid intramuskulär administrering av testföreningarna till möss vid en dosering av 20 mg/kg. :fabrèirzs _ Pastor» (nga/kg) ., _. .. 2 S. aureus 'E. coli P, aernginosa Förening nr 'Smith Juhl ' A9843A I-1B 0,44 0,028 7,7 I-1B 0,65 0,072 ET I-1C 0,22 0,013 ET I-1G 0,96 0,021 5,92 I-1H 0,39 0,015 3,9 I-1J 0,35 0,029 ET I-1K 0,53 ET ET I-1M 0,96 ET ET I-1N 2,0 ET ET I-10 0,26 0,17 ET 1-2N 5,0 ET* ET ET== ej testad med avseende på utvalda Tabell 3 ger blodnivåerna av olika före- Förening nr' I-1B I-1C I-1D I-1H I-1J I-1K I-1M I-1N I-10 I-2N I-3H I-4H I-5H Enligt en annan,aspekt1awsen»densamuppfinningyfönfaranäenw“ för framsfiä-nning- avf=-ï.f«öfenin~qarha mea-='ff6fi11eII“'*I*-."De dragna förfarandena återges i re 1c nedan, 26 cmäX lllfllfll 17 21 23 19 24 24 28 22 19 27 22 -1 tionsschema 2. Förkortningen "Ph" ledes är -CH(Ph)2 -gruppen benshydrylgruppen, föredragen karboxylskyddande grupp. När R2 T1/2 AUc _1531 (gg hr/ml) 21 11 32 18 19 11 16 14 16 9,7 14 _14 23 '14 19 18 32 17 zo 12 47 25 22 16 32 18 före- aktionsschema 1a, 1b-och medan ett alternativt förfarande visas i reak- anger fenylgruppen. Så- som är en innehåller en karboxylgrupp är det önskvärt att skydda karboxylgruppen med en konventionell karboxylskyddande grupp såsom t- butylgruppen. Y betecknar k Éeaktionsschema'1a “fä S “f 04 *N / cnzcl coocnma), HZN-Ääk -Wr-E-COOH \ u N / \0R2 lor, brom eller jod.

II III 27 '466 205 N C , cona /s w ~~ 'à w H2" 5 \R2 o//L-N / cnzcl ¶ coocatnnz _- f' NaI or KI s N c--coNa---r / i 'à _ r n s ' \o 2 /f-N / z" R o cazz v coocs (rn) 2 P (Ph) 3 hpfvuø: _ _ M VI base - » S NÄT” E CONH --T _ VI I H2 s / \°R2 oàp" / n-runn3 - oocnmuz CICHZCHO 466 205 26 ' s çïfi ----CONB--|' VIII a .As \°R2 JF- / ca-cacazcl oocs (Ph ) 2 T Nal eller KI Hflï Q ä XI (tert- coNH- s I iår ' aminÜ n OR A N / s-éacaz-n/ t coocntrh), \n' Å --- cows- azu S /N xn (sekundär amin) \°R2 29 466 205 avblockering ¶/ N /}óí':Éš' '----cows-_____T/'f 8219 5 \\\oR2 - cçl--N _/, E - GB _ Doe =CHCH2 -)r:._-Q Reaktionsschéma«1a'visarftvâ'aIternativawvâgar«att:gig från förening IX till förening XII. Den direkta vägen, som utnyttjar en tertiär amin (XI), är tillämpbar på fram- ställningen av samtliga föreningar med formel I. Den in- direkta vägen, via förening X, utnyttjar en sekundär amin som reaktant och 'kvaterniseras i efterföljande steg. Den sekundära aminen RR'NH,kan vara acyklisk (exempelvis di- metylamin) eller cyklisk (exempelvis pyrrolidin) och detta in- direkta förfarande är-därför lämpligr för framställning av föreningar med formel I, där den 'kvaternära ammonio- gruppen är acyklisk eller "blandat" acyklisk/cyklisk. Denna indirekta väg är icke lämplig för framställning av före- ningar med formel I, vari det kvarternära kvävet är i en fullständigt omättad heterocyklisk ring (exempelvis pyridinio, tiazolio, 2-amino-5-tiazolo[Z,5-cjpyridinio och liknande). Éeaktionsschema 1b II <::$-C80 466 205 3° ' s w _ ©'°H'""-K _- xzn o¿_" / cazcl oocxunnz NaI eller KI coocntpn), P (Pm3 æ xv OÄP" / a21>u>1n3 coocaum), basï G -f ca=n- xv: 04"” / ca-rtrrn3 C00CH(Ph)2 31 466 205 XVII N f' H-cncnzcl - oocn(Pn)2 s Girard-reagens T eller HC1 S.

HZN XVIII o N cn=cncnzç1 coooxfpnyz N -C008 zzzrlz \§ E III z sf \°Rz VIII I såsom i schema 1§ Reaktionsschema 1b är en variation av reaktionsschema 1a genom att 7-aminogruppen i utgångsmaterialet (II) är skyddad som en Schiffsk bas under de flesta av reaktions- stegen och den önskade 7-sidokedjesyran tillsättes senare under syntesen. I övrigt är det allmänna förfarandet det- samma. 466 205 32 Reakttbnsschema 1c S CH=N" /r/h O CH CH CBZCI C0OCH(Ph)2 ._ Nal eller KI //"" / 0 ca=cn-cuzz C00CH(Ph)2 ,,,¿~ R¿¿¶.

H~< I _R XXI Q (__-_ (sekundär amin) 1,6 H=CHCH2 -QIE Q COOCH(Ph)2 XVII XIX QEEN XI (tertiär " amin) 33 466 205 cu-cncxz Éa-Q XXII «wC> D ' N=aCYlering meg III Reaktionsschema 1c är en ytterligare variation av reak- tionsschema 1b. I reaktionsschemana 1a och 1b är kvater- niseringen av 3-sidokedjan det sista steget, medan i reaktionsschema 1c det sista steget är en acyleríng av 7-aminogruppen. Förhållandet mellan reaktionsschema 1a, 1b och 1c visas i följande flödesschema. w 466 205 - 34 ' r- / / cazc: n n coocnufh), n, 1G :r-T- fi-cøns? s . JL /ln N i L ' 4 5 a n 5 \ 2 / ' IV coocn mn 2 XIII 0 ”a” cooczuvh), 1. 1:: I” JN' - iv-*N-'aglerüø 19' I ' :za S on: o - 11; _21 / 0 ca-anazcl vm xvn: ' æoæam), Kvaternisering Kvaterniséring ä; 'Avblockerfing le Avblockering < 7-N-acylering ___________._.__ a: s .. _ '° f ø Fcrenmg I 0 -Nm (m6 XXII 466 205 I reaktionsschema 1a, 1b och 1c har benshydrylgruppen visats som föredragen karboxylskyddsgrupp. Det torde inses av fackmannen att andra karboxylskyddsgrupper, vilka är välkända inom tekniken, kan användas. Den acylerande syran III kan användas i form av ett derivat såsom sin syrahalid, aktiverad ester, blandsyraanhydrid, etc., vilka samtliga är väl kända inom tekniken. Vi föredrar att utnyttja den i form av sin syraklorid. Den acylerande syran III kan även ha sin aminogrupp skyddad med någon av de vanliga aminoskyddsgrupperna, exempelvis N-trityl, N-formyl eller liknande. Den bas som användes för omvandling av fosfonium- jodiden (VI eller XV) för erhållande av fosforyliden (VII eller xvl) kan vara Neon, Ne2co3, :mA-mo (off-herre, IRA(CO3_)-harts} eller liknande eller en blandning därav.

Den kloracetaldehyd som användes för omvandling av fosforyë liden VII till 3-klorpropenyl-3-cefem-föreningen VIII (eller förening XVI till förening XVII) kan vara den kommersiellt tillgängliga 40-5&'%-iga vattenlösninEnyléhflåeßtïlliäadä lösning ÅexempeIvís“70%) eller den vattenfria aldehyden.

Vi har funnit att förening VIII, framställd från förening VII (schema 1a), typiskt hade ett Z:E-förhållande av cirka 2:1 vid propenyldubbelbindningen. Förening VIII, framställd från förening XVIII (schema 1b), var å andra sidan typiskt nästan uteslutande Z-isomeren. Skillnaden kan icke ligga i den använda vägen utan i de betingelser som utnyttjas vid wittig-reektienen (vn till vill eller xvl till xvll).

Vi har även funnit att användningen av ett lämpligt silyl- reagens, såsom N,0-bis(trimetylsilyl)acetamid, i Wittig- reaktionen (VII till VIII i schema 1a och XVI till XVII i schema 1b) orsakade en förbättring av utbytena av och renheten hos VIII och XVII. Reaktionen utföres företrädes- vis med 2-5 ekvivalenter av silylreagenset. När klorprope- nylcefemföreningen (VIII) omsattes med NaI i aceton för erhållande av jodpropenylcefemföreningen (IX) isomerise- rades dubbelbindningen i propenylgruppen från Z till E under joderingen. En kort reaktionsperiod'bibehöll konfi- 36 466 205 gurationen hos moderföreningen VIII i stor utsträckning, medan en lång reaktionsperiod primärt gav E-isomeren av förening IX.

En alltför lång reaktionstid vid hög tempe- ratur ger emellertid föreningen IX med låg renhet. Vi har funnit att cirka 10 minuter vid 25°C och vid 5°C ger ren IX i gott utbyte. Vid utnyttj reaktionsschema 1c har vi funnit att man vid förening XIV med NaI erhåller en renare förening om aceton- lösningen spädes med CCI4, när joderingen är fullbordad, och isomeriseringšdelen av reakti föres i aceton-CC14-blandningen. propenylcefemföreningen (XVII) till jodpropen ningen (XIX) utfördes med KI i DME skedde iso av dubbelbindningen från Z till E lika snabbt skedde. 45 rumstemperatur för erhållande av ren XIX utan med CCl4_under reaktionens förlopp.

Hela reaktionen fullbordades inom 2 timmar ande av jodering av i huvudsak onen"üt- Vid jodering av klor- ylcefemföre- meriseringen som joderingen minuter vid spädning Förening¿XIfiÉavblockéradeshnormalibutanwreningfocäåshufiwI produkten (I) renades medelst reversfaskolonn under utnvttjande av en glaskolonn innehâllan material som avlägsnades från en Waters? Asso PAK-500/C18-patron. kromatografi de det fyll- ciates Prep- 37 ' 466 2Û5 Reaktionsschara 2 S N fi-- som; mfl I N "v " _ 31- 5 / \oR2 / 33143432 1 XX! II _ ' ooc ' zur-m: s N c com: / “Å :l J ¿ “ RI- S/N \on2 o/p / cn-ca-CH-zt HIV coocaunuz V ,I ' com; Inn/E 'LE 1:e 916 R - _ S/ \oa2 04- / B-cn-cnznaq mv coocnufiuz Reduftion s com: / l . :e 9 / cn-cn-cnzßq m: coocs (rn) 2 ”H I ä \=_ /z=n N \\ F 466 205 38 Awbhuàsrflgy N --- com: - s JL I! g I I H2” s \on2 "_ N f Q . Ä H-cnznso - , m9..

Reaktionsschema 2, som återges i schematisk kortfattad -form ovan, liknar reaktionsschema 1a med undantag av att förening XXIII (ekvivalent med förening IX i reaktions- schema 1a) omvandlas till sin S-oxid före kvaternisering.

Föreningen XXV reduceras därefter och den resterande delen av reaktionsschema 2 är som reaktionsschema 1a. I reaktions- schema 2Lärwdet~förednagetwattiskyddægænfiflxpnmçænapägß-än sidokedjan med en kändfaminoskyddsgrüpp,'sääom“ÉrityI-'* gruppen. _ De acylerande syrorna med formel III i föreliggande samman- hang är antingen kända föreningar eller kan lätt framställas medelst publicerade förfaranden. Europapatentet 7 470, som publicerades den 12 oktober 1983 (ansökan publicerad 6 februari 1980), exemplifierar framställningen av före ningar med formel III, vari R2 är metyl, etyl, propyl och isopropyl. Amerikanska patentet Q 390 534, vartill hänvisas i vår redogörelse för teknikens ståndpunkt ovan, åskådlig- gör framställningen av en mångfald föreningar med formel III, vari R2 exempelvis är cyklopentyl, 2-cyklopenten-1-yl, allyl, 2-propynyl, 1-tert. butyloxikarbonyl-1-metyletyl, 1-tert. butyloxikarbonyl-1-cyklopentyl, 1-etoxikarbonyl-1- metyletyl, tert. butyloxikarbonylmetyl, 1-tert. butyloxi-d> karbonyl-2-metylpropyl, trityl och liknande. 39 466 205 Förening II häri (7-amino-3-klormetyl-3-cefem-4-karboxylat), som användes som utgângsmaterial i reaktionsschema 1a, 1b och 1c, är en känd förening.

De tertiära aminerna med formel XI (och de sekundära ami- nerna RR'NH), som användes vid framställning av de kvater- nära ammonioföreningarna enligt denna uppfinning, är an- tingen kända föreningar eller kan lätt framställas av fackmannen,.Många av aminernagär kommersiellt tillgängliga.

Föreliggande uppfinning avser även ett förfarande för fram- ställning av föreningar med formeln l . _ coma- s t "T = 313” 5 °R2 N lf a=ca-cn2É;ë§Q;_ vari R1 är väte eller en konventionell aminoskyddsgrupp, R2 är väte en rak- eller grenkedjig alkylgrupp med 1-4 kol- atomer, en cykloalkyl- eller;cykloalkenylring med 3-6 kol- atomer eller en grupp med formeln 1:4 1:4 coon -c-cH=cH-R3 , -cf-cšc-RB , eller lås Rs x 4 -C-COÛH I vari R3 är väte, lägre alkyl eller karboxyl, X är halogen, hydroxi eller lägre alkoxi och R4 och R5 vardera oberoende av varandra är väte, metyl eller etyl eller R4 och R5 till- sammans lieddíenlcolatcrra tillvilken de är bundna kan vara en Ö|| 1 40 _466 -205 cykloalkylidenring med 3-5 kolatomer och vari 9 ' ' -NI-EQ är en kvaternär ammoniogrupp, och ogiftiga farmaceutiskt' godtagbara sàlter och fysiologiskt hydrolyserbara estrar därav, vilket förfarande innebär att man omsätter en före- ning med formeln w CH=CHCH2Z CO0Bl vari,R2"har.sammazbetydelse«somfRÉIelleriärfienagrupggmedef fbrmeln coosl M eller I -C-COOBI X RS där X, R4 och Rs har ovan angivna betydelser, B1 är en konventionell karboxylskyddsgrupp, B2 är väte eller en konventionell aminoskyddsgrupp, Z är klor, brom eller jod och m är 0 eller 1, med en tertiär amin QÉEEN (eller i tur och ordning med en sekundär amin RR'NH och en före- ning med formeln R“Z) och, om m är 1, reducerar sulfoxiden på konventionellt sätt och därefter avlägsnar samtliga blockeringsgrupper medelst konventionella metoder.

Föreliggande uppfinning avser även ett förfarande för framställning áv föreningar med formeln nl n' SJ k, , 41 466 205 $ s-cs-caz -n;=_Q^ C069 vari R1 är väte eller en konventionell aminoskyddsgrupp, R2 är väte en rak- eller grenkedjig alkylgrupp med 1-4 kolatomer, en cykloalkyl- eller cykloalkenylring med 3-6 kolatomer eller en grupp med formeln Å 124 R4 coon -<||:šcH=cn-R , -ígšcšc-R? , e11er R R Xx, f* _ -fšcoon , R vari R3 är väte, lägre alkyl eller karboxyl, X är halogen, hydroxi eller lägre alkoxi och R4 och Rs vardera oberoende av varandra är väte, metylaeller etyl eller R4 och RS tillsammans med den kolatom till vilken de är bundna kan vara en cykloalkylidenring med 3-5 kolatomer och E+) -N 'í-EQ är en kvaternär ammoniogrupp, och ogiftiga farmaceutiskt godtagbara salter och fysiologiskt hydrolyserbara estrar därav, vilket förfarande innebär att man acylerar en förening med formeln 466 205 42 O ca-cscaz-Nssq coo 9 xxn med en syra med formeln _ š-coos szxu Å N \ 21 s/ °R n: eller med ett acylerafide derivat av namnda syra, vari R; har samma betydelse som R2 eller är en grupp med formeln coosl ' k* eller l vari X, R4 och R5 har ovan angivna betydelser, B1 är en konventionell karboxylskyddsgrupp och B2 är väte eller en konventionell aminoskyddsgrupp.

Reaktionerna utföres i ett vattenfritt organiskt lösnings- medel såsom dimetylsulfoxid, hexametylfosforamid, metylen- klorid, kloroform, etyleter, hexan, etylacetat, tetrahydro- furan, acetonitril och liknande eller blandningar av dylika lösningsmedel. Reaktionerna utföres lämpligen vid en tempe- ratur av från cirka -10°C till cirka +50°C; vi föredrar “B 466 205 normalt att utföra reaktionerna vid rumstemperatur. Under kvatërniseringssteget bör åtminstone en mol av den tertiära aminen användas per mol av förening IX, XIV) XXIII eller XXIV; vi.föredrar normalt att utnyttja från cirka 25% till 100% överskott av den tertiära aminen.

Karboxylskyddsgrupper, som är lämpliga för användning som B vid reaktionerna ovan, är välkända för fackmannen och innefattar aralkylgrupper såsom bensyl, p-metoxibensyl, p-nitrobensyl och difenylmetyl (benshydryl); alkylgrupper såsom t-butyl; haloalkylgrupper såsom 2,2,2-trikloretyl, och andra karboxylskyddsgrupper, som beskrives i littera- _ turen, exempelvis-i brittiska patentet 1 399 086. Vi före- drar att utnyttja karboxylskyddsgrupper, som lätt kan av- lägsnas genom behandling med syra. Speciellt föredragna karboxylskyddsgrupper är benshydryl- och t-butylgrupperna.

Amïnoskyddsgrupper, som är lämpliga;fiörßanvändninqfisåI%B2,øi»" är: även var." kända inom tekniken barr-innefattar trityl- gruppen och acylgrupper såsom kloracetyl, formyl och tri- kloretoxikarbonyl. Aminoskyddsgrupper, som lätt kan avlägs- nas genom behandling med syra, exempelvis tritylgruppen, föredras.

När cefalosporinkärnan användes i form av 1-oxiden (m ='1) framställes 1-oxider medelst kända förfaranden såsom oxida- tion med m-klorperbensoesyra, perättiksyra, natriumwolframat, etc. 1-oxiden kan därefter reduceras medelst kända förfaran- den, exempelvis reduktion av motsvarande alkoxisulfonium- salt med jodidjon i vattenhaltigt medium. Alkoxisulfoni - Enligt en annan aspekt avser denna uppfinning nya mellan- produkter med formeln 466 205 '- 44 ' //ëïf-wr--ë-CONH----1//S HZN S7/N \ 2 64 I/I °R ca-cncn z coon 2 XXVIII vari Z är klor, brom eller jod, R2 är väte, en rak- eller __grenkedjig alkylgrupp med 1-4_ko1atomer, en cyklpalkyl- eller cykloalkenylring med 3-É kolatomer eller en grupp med formeln 'F n coon -c-cH=cH-R3 , -9-cïëšc-R3 , _ eller 5 R R x -çi-"coorr" " Rs vari R3 är väte, lägre alkyl eller karboxyl, X är halogen, hydroxi eller lägre alkoxi och R4 och R5 vardera oberoende av varandra är väte, metyl eller etyl eller R4 och R5 till- sammans med den kolatom till vilken de är bundna kan vara en cykloalkylidenring med 3-5 kolatomer, och salter och estrar därav. Föreningar som även innefattas är sådana med formeln XXVIII, där amino- och/eller karboxylgrupperna är skyddade medelst konventionella aminoskydds- respektive karboxylskyddsgrupper.

Enligt ytterligare en annan aspekt avser denna uppfinning nya mellanprodukter med formeln “S 466 205 E23 s R24 cH-N-fl-f F-N ' ¿Û '// ca-cncazz R o coonzz xxzx -f __ vari R22 är väte eller en konventionell karboxylskydds- grupp och R23, R24 och R25 är lika eller olika och är väte, hydroxi, lägre alkyl eller lägre alkoxi, eller ett salt, solvat, hydrat eller ester därav.

Enligt ännu en aspekt avser denna uppfinning nya mellan- produkter med formeln ' Ä-N/~. e» cH=cn»cn2-Nasa <»°@ XXII vari Å:kÉEÉQ är en kvaternär ammoniogrupp, eller ett salt, ester, solvat eller hydrat därav.

Med uttrycken "acylamino" och 'acyloxi" avses i föreliggande sammanhang en acylerad amino- eller acylerad hydroxigrupp, där acylresten är lägre alkanoyl (exempelvis formyl, acetyl, propionyl, butyryl, isobutyryl, isovaleryl, etc.), aroyl (exempelvis bensoyl, etc.), lägre alkansulfonyl (exempelvis mesyl, etansulfonyl, etc.) eller arylsulfonyl (exempelvis bensensulfonyl, tosyl, etc.), W 466 205 “S Med uttrycken “lägre alkyl", “lägre alkoxi" och "lägre alkyltio" (eller liknande) avses rak- eller grenkedjiga alkyl-, alkoxi- respektive alkyltiogrupper (eller lik- nande) med 1-6 kolatomer. Likaledes avser uttrycken "lägre alkenyl" och "lägre alkynyl" alkenyl- respektive alkynylgrupper med 2-6 kolatomer.

Uppfinningen âskâdliggöres närmare medelst följande ut- föringsexempel¿_ Exempel 1 I-1A *Z/E81/1 7-[É-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetamidq7- 3-[3-(1-metylpyrrolidinio)-1-propen-1-yl]-3-cefem-4-karboxy- llat (I-1Ä) ' Till en lösning av 150 mg (0,21 mmol) difenylmetyl-7-[ï- (5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetamidq]-3- (3-jod-1-propen-1-yl)-3-cefem-4-karboxylat (IX-1) (Z/E = 2/1) i 2 ml etylacetat sattes en lösning av 36 mg (0,42 mmol) 1-metylpyrrolidin i 1 ml etylacetat i en portion under omröring. Blandningen omrördes 15 minuter och späddes med 10 ml isopropyleter för bildning av en fällning, som tillvaratogs genom filtrering. En blandning av det fasta materialet (130 mg), 1 ml myrsyra och 0,1 ml koncentrerad HCl omrördes vid rumstemperatur. Efter 1 timme koncentre- rades reaktionsblandningen under reducerat tryck, späddes med 20 ml vatten och filtrerades. Vattenlösningen fick 41 466 205 passera en reversfaskolonn (fyllning från en patron av PrepPAK-5007C18, 100 ml), eluering med vatten och 10% CHBOH. De önskade fraktionerna tillvaratogs och koncen- trerades i vakuum till en liten volym och frystorkades för erhållande av 13 mg (12%) av den i rubriken angivna föreningen (I-1A) (Z/E=1/1) med en smp. överstigande 280°C (sönderdelning).

In nä: cm” 34oo, 1760, 1660, 1610. uv :Psfatbuffert (PH 7) nm m" ; 236 (372), zas (322). max 1 cm -H nun; :D2° 2,31 (4H, m, :(- '), 3,_12 (an, s, N-cH3),_3,6 (511, PPm H >e-_ m' 8 )' s' 2"'H)| 411 _d, J'=8, cgzn), 4,2 (3H, s, ocH3), 5,36 (m, d, J=4,5, ,6-H)._,_ 5,95. (3H,, m... .7-H..& 3.-cH,=,cr_1)__.,,_M..,5,,56 - , (Y/ZflßäääïJ#10wJ3#CHüc%s%%ä7¥&%%¶fZflüšáïfimäföjam” 3-CH trans).

Ekempel 2 _ s NIlÅ\ |['§"""“'CONH---1* Q H2 s/-N \0cn3 ' N / cfl=cn-cn2â@ cooe " I-IB :E 48 466 205 7-[Q-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetamidqf- 3-[3-pyridinio-1-prgpén-1-yl]-3-cefem-4-karboxylat (I-1B) En blandning av 716 mg (1 mmol) difenylmetyl-7-[É-(5-amino- 1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetamidq]-3-(3-jod-1- propen-1-yl)-3-cefem-4-karboxylat (IX-1) (E) och 158 mg (2 mmol) pyridin i 1 ml dimetylsulfoxid (DMSO) omrördes 1 timme vid rumstemperatur. Till blandningen sattes 20 ml etylacetat för utfällning av 620 mg av ett fast material, som sattes till 6 ml myrsyra innehållande 60 mg natrium- bisulfit. Blandningen omrördes 30 minuter-vid 40°C och koncentrerades till torrhet. Återstoden upplöstes i 40 ml vatten och viss mängd olösligt material avlägsnades. Vàtten- fasen applinerades på en reversfaskolonn (PrepPAK-500/C 100 ml) och eluerades med 300 ml vatten och 800 ml av en 5 %-ig vattenlösning av metanol och eluatet övervakades medelst UV (254 nm) och HPLC. De fraktioner (5%-ig vatten- _ lösning av metanol) som innehöll den önskade produkten 18' kombineraäesh koncentrerades till en liten volym och IgfiïfifimmhäfiämmmäflmüäæwfiWm%fiw%mwäm$@mfi%fi»¶;6 riken angivna föreningen (I-1B) med en smp. överstigande 200°C (sönderdelning).

IR = väg: cm'1 3350, 1760, 1660, 1600.

Uv = fiââífatbuffeft (PH 7) nm (E}%Cm) 240 (352), 256 (366), 267 (279), 290 (469).

NMR, sD2°*DMS°'d6 3,74 (zu, br-S, 2-H), 4,20 (3H, S, ocg3), PPm ,92 d, J=4ysy m, 812 m' m' I H4), 8,97 (2H, m, Py-HZIG). - vuxna-ex.. 49 466 205 Exempel 3 Nf--]ï-fi----CONH- S N N g H2" 5/ \°CH3 Oå-N / 'cn-cH-cazç 7 \ I-lB i z/E-4/1 7-12-(5-amino-1,2,Q-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidq]-3-13-pyridinio-1-propen-1-ylf-3-cefem-4-karboxylat EI-1B) 937 mg (1,5 mmol) difenylmetyl-8-[2-(5-amino-1,2,4-tiadia- zol-3-yl)-2-metoxiiminoacetamidqzsß-(3:hLom-&-propenm@--»-3 yli-3-cefem-4Jßarboxylatäävïflï-Tfiïfizlfsæfifiesfififlfkënwom-ëf rörd lösning av 237 mg (3 mmol) pyridin i 3 ml DMSO inne- hållande 1l mg (0,075 mmol) NaI. Blandningen späddes med ml etylacetat för att separera fällningen, som där- efter tillvaratogs genom filtrering, tvättades med 10 ml etylacetat och torkades för erhållande av 350 mg av den blockerade produkten. Fällningen behandlades med 3,4 ml myrsyra innehållande 34 mg natriumbisulfit under 30 minu- ter vid 40°C. Efter avlägsnande av myrsyran renades åter- stoden medelst reversfaskolonnkromatografi (fyllning från en patron PrepPAK-500/C18, 100 ml) genom eluering med en %-ig vattenlösning av metanol. De fraktioner som inne- höll den önskade produkten kombinerades på basis av HPLC- analys, indunstades under reducerat tryck och lyofilisera- des för erhållande av 41 mg (5,5%) av denfirrubriken an-. givna föreningen (I-1B) (Z/E = 4/1). Smp. överstigande 200°C (sönderdelning). 50 466 QÛ5 IR = våg; am'1 3300, 1760, 1660, 16oo.

Uv = §â§:fatb“ff°ft (PH 7) am (E}*cm) 237 (366), 250 (377), 256 (369), 265 (347), zao (311).

NMR = 8920 3,45 6 3,76 (vardera 1n, d, J=16, 2-H), 4,18 Ppm (3H, S, ocn3), 5,34 (3H, m, cn=cn-cnz 3 6-H), ,92 (1n, 6, J=4,5, 7-H), 6,56 (4/sn, 6, J=11, 3-CH cis), 7,03 (1/SH, d, J=16, 3-CH trans), 8,12 (zu, m, Py-H3'5), 6,56 (1n;'m, Py-H4), a;a2 (ZH, m] Py"H2,6)o Exemgel 4 Nl-u-fi-ïconn- N ..

I-lC 7-[2-(5-amina-1,z,4-tiaaiazal-3-y1)-2-mat6xiimin6acat- affäidê? '37137 f ?famifl°f5ftia 2°19ß e sffëfPlffífiifëifl #1 'PIPPGIP 1-llZ-3-cefemfié-karbdxylat {I*1C) En omrörd lösning av 714 mg (1 mmol) difenylmetyl-7-[2- (5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)~2-metoxiiminoacetamidq7- 3-(3-jod-1-propen-1-yl)-3-cefem-4-karboxylat (IX-1) (E- isomer), 2-aminotiazolo[Z,5-qjpyridin (framställd medelst förfarandet enligt T. Takahashi gt;¿l., Pharm. Bull (Japan), 2, 34 (1954)) och 1 m1~t6rr~nnso n611a 1 timma 2o;~-.;; « ._ - vid rumstemperatur. 466 205 Till reaktionsblandningen sattes 20 ml etylacetat för erhållande av 710 mg av ett gult pulver. 7 ml myrsyra och 70 mg natriumbisulfit sattes till pulvret (700 mg) och blandningen omrördes 30 minuter vid 40-45°C.

Efter indunstning triturerades återstoden med 40 ml vatten.

Olösligt material avfiltrerades och filtratet kromatogra- ferades på en reversfaskolonn (PrepPAK-500/C18, 100 ml) -sering gav den önskade produkten (I-1C) som ett fäfšlöst 6 amorft pulver av E-isomeren. Utbyte 110 mg (19%). överstigande 200°C (sönderdelningà.

JKBI cm71 na max ssoo, 1760, 1660, 1630, 1600.

Uv = fåïfatbuffert (PH 7) mn (zfcm) 245 (499), 265 (286). nun = :ïâwfïç *D29 3,86. (sats, ocg3_),,_,,,4.,,.9.a(_.,,,(111...-.a...-:.»a=,..W t ' 4fi,'s,;,16--H:)sf,:,, pznëgwm,;s-P ,57 m] 3_CH=Cg)| m; Z-H)/ d] 8,36 & 8,45 (vardera 1H, d, J=7, Py- H)] s' fixèmgëi s 205 - ï 52 466 205 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidq]-3-(3-trimetylammonio-1-propen-1-yl)-3-cefem-4- karboxylat (I-1D) Till en lösning av 490 mg (0,68 mmol) difeny1metyl-7-[ë- (5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetamidqf-3- (3-jod-1-propen-1-yl)-3-cefem-4-karboxylat (IX-1) (z/E = 2/1) i 14 ml etylacetat sattes 13,6 ml av en 0,1 M trimetyl- höll en droppe anisol. Efter 1,5 timmars omröring indunsta- des blandningen till torrhet under reducerat tryck och den resterande oljan triturerades med 20 ml eter. Den er- hållna fällningen tillvaratogs genom filtrering och upp- löstes i 20 ml vatten. Visst olösligt material avlägsnades och vattenlösningen eluerades på en C18-reversfaskolonn (fyllning_från.en.patron»RnepPA&-5Q&¿C¿¿¿¿flatens¶fi3Q»mE%a > ~undërfanvändningáavuvatïxufinanmieluerfngsmeäeïivFräktfonerá som innehöll den önskade föreningen, kombinerades och_ koncentrerades till en liten volym och lyofiliserades för erhållande av 30 mg (9,2%) av den i rubriken angivna före- ningen (I-1D) (Z/E== 1/1) som ett färglöst amorft pulver med en smp. överstigande 150°C (sönderdelning).

IR = våg; cmq 333o-,177o, 1670, 1605. _ fosfatbuffert (pH 7) 1% uv . lmax mn m1 cm) 236 (389), 287 (343). nun = sD2° 3,45 a 3,7 (m, a, J=16, zn), 3,81 (m, s, PPN (3 2-H), 4,1 (2H, d, J=8, -C§2N), 4,21 (3H, s, OCH3), 5,39 (1H, d, J=4,5, 6-H), 5,95 (2H, m, 3-cn=cg s. 7-11), 6,61 (1/211, d, J=11, 3,-cH cis), 7,05 (1/2H, d, j=16, 3-CH trans).

SJ 466 205 ëšemgel 6 I-IE IE -1 l 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidQ]-3-[3-(3-aminopyridinio)-1-propen-1-yl]-3-cefem-4- karboxylat (I-1E) 716 mg (1 mmol) difenylmetyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol- 3-yl)-2-metoxiiminoacetamido]-3-(3-jod-1-propen-1-yl)-3- cefem-4-karboxylat.(IX-1) (E) sattes till en~omrönd.lösz»+ - ninggavaífißïmgq(ikmmolïfi3-amïnop§nidïnnï°4¿mfifflnâdüëBland-*f ningen omrördes 1 timme och späddes med 20 ml etylacetat.

Den erhållna fällningen tillvåratogs genom filtrering, tvättades med etylacetat och torkades för erhållande av 520 mg av ett gült pulver. En blandning av 500 mg av pulv- ret, 5 ml myrsyra och 50 mg natriumbisulfit omrördes 30 minuter vid 40°C. Blandningen koncentrerades i vakuum, upp- löstes i 40 ml vatten och filtrerades för avlägsnande av, olösligt material. Vattenlösningen kromatograferades på en reversfaskolonn (fyllning av PrepPAK-500/C18, 100 ml) med en 7,5 %-ig vattenlösning av metanol. De fraktioner som innehöll den önskade föreningen indunstades och lyo- filiserades för erhållande av den i rubriken angivna före- ningen (I-1E) (7 mg, 1,4%), smp. överstigande 185°C (sönder- delning. 2QL«f 54 466 205 In = 1:2: cm" 3400, 1765, 1675, 1620, 1600. uv ëšgífatbuffeft (PH 7) nn (E:%cm) 24sÅ(4o3), 290 (468). una = sD2° 3,72 (za, m, 2-HJ, 4,14 (an, S, ocH3), 5,35 PP” (sn, m, 6-H & cH=cH-cgz), 5,9 (1n, d, J=4,s,~ 7-H), 6,1 (1n, m, 3-cH=cg), 1,05 (1H, a, J=1s, 3-CH, trans), 8,1 (1H, m, Py-H5), 8,54 (1H, br-s, Py-H6), 8,68 (1H, m, Py-HÄ), 9,4 (1H, m, Py-H2).

Behandling av IX-1 (716 mg, 1 mmol) med 324 mg (2 mmol) 3-t-butoxikarbonylaminopyridin medelst ett förfarande liknande det ovan beskrivna gav 12 mg (2,3%) av I-1EJ Exemgel 7 1-18 I 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidQ7-3-[3-(3-amino-1-pyridinio)-1-propenf1-yl7f3-cefem- 4-kafbónyiat7(I#1E)_ 'I e ' ' ' ' "D" ':_ En blandning av soo mg (0,7 mmol) aifeny1nety1-7-¿ë-(s- amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetamidq]-3- (3-jod-1-propen-1-yl)-3-cefem-4-karboxylat (IX-1) (Z/E= 2/1) och 66 mg (0,7 mmol) 3-aminopyridin i 1 ml dimetyl- sulfoxid omrördes 20 minuter vid rumstemperatur. Bland- ningen späddes med 10 ml etylacetat och 10 ml eter och DD 466 205 den erhållna fällningen tillvaratogs genom filtrering, tvättades med 10 ml eter och torkades. Det kvaternise- rade saltet upplöstes i 3 ml myrsyra innehållande 0,3 ml koncentrerad HCl och omrördes 1,5 timmar vid rums- temperatur. Blandningen koncentrerades till torrhet under reducerat tryck. Återstoden upplöstes i10 ml 2% HCl och filtrerades. Vattenskiktet kromatograferades på en revers- faskolonn (PrepPAK-500/C18, 100 ml). Efter tvättning med 500 ml vatten eluerades kolonnen med en 5 %-ig vatten- lösning av metanol. De fraktioner som innehöll den i rub- riken angivna föreningen kombinerades, koncentrerades i vakuum och frystorkades för erhållande av 15 mg (4,2%) av den i rubriken angivna föreningen (I-1E) (Z/E = 1/1) som ett färglöst amorft pulver. Smp. överstigande 160°C (sönderdelning). _ KBr In = vmax om” 3400, 1765, 1675, 1620, 16oo.

UV _ ¿f0sfatbuffert (pH 7) ' max- ' NMR =“ SDMS°*IA'ÖK6"*'D'2Ö"Ä 3,73 (zu, m), 4,14'(3H, s, ocns), 5,35 ppm _ (an, m, 6-11 a. cæcu-cgz), 6,0 (zn, m, 7-H & 3-CH=C§), 6,6 (1/2H, d, J=11, m| m; 9y4 m' Exempel 8 a N cows ---I/ “Hem z N * (9 / \oca3 OJ'- / caæncaz- mm , *clip 244.. (-43,4).,.. 232.., (rsssyuw S6 466 205 7-12-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidQ]-3-[3-(3-formylaminopyridinio)~1-propen-1-y1]-3- cefem-4-karboxylat (I-1F).

En blandning av 716 mg (1 mmol) difenylmetyl-7-[2-(5- amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetamidq]-3- (3-jod-1-propen-1-yl)-3-cefem44-karboxylat (IX-1) (E) och 244 mg (2 mmol) 3-formylaminopyridin (framställd medelst förfarandet enligt N. Enomoto g§_al., Bull.

Chem. Soc. Japan, gå, 2665 (1972)) i 2 ml DMSO omrördes i rumstemperatur 1 timme och hälldes i 200 ml etylacetat.

Fällningen tillvaratogs genom filtrering, tvättades väl med etylacetat och torkades. En blandning av 500 g av kvaterniserade saltet och 50 mg natriumbisulfit i 5 ml HCOOH omrördes 80 minuter vid 40-SOOC och indunstades till torrhet i vakuum. Aterstoden upplöstes i vatten (40 ml), neutraliserades med natriumvätekarbonat och filtrerades för avlägsnande av olösligt material. Det klara filtratet kromatograferades på en reversfaskolonn, PrepPAK-500/CT8_(J00 ml) med vatten och-5% metanol, 10%; zænæuaflg3äßäïmetafluü§och%3ä%ßmetänoIitüeßfraktionerïsomfiäïf'° innehöll den önskade föreningen kombinerades, koncentre- rades i vakuum och lyofiliserades för erhållande av 16 mg (2,9%) av den i rubriken angivna föreningen (I-1F) (E) som ett brunfärgat pulvêr. Smp. överstigande 170°C (sönder- delning).

Br -1 IR : VK cm max 3440(br), 1760, 1670, 1620(br), 1590. fiv : Äfosfatbuffert (pH 7) max nm (E}%cm) 218 (428), 248 (362), 290 (474).

NMR : ¿D2O+NaHCO3 3,68 (2H, br, 2-H), 4,15 (3H, S, ocH3), PP” 5,91 (1H, a, J=4,s, 7-H), 6,25 (1H, m, cH=cg-caz), 6,98 (xn, a, J=1s, 3-cn trans), 8,8-7,9 (4H, m, Py-H), 9,38 (1H, br, Nncgo). ä "l 4 6 6 2 0 5 Exempel 9 :z som: /s JL ñ | , (9 com: H21: s/ \ocH å_ / CH=CHCH - / \ I-IG lg 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidq]-3-[3-(3-karbamoylpyridinio)-1-propen-1-yl]-3-cefem- 4-karboxylat (I-1G) Till en lösning av 716 mg (1 mmol) difenylmetyl-7-[2-(5- amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetamidq]-3-(3- jod-1-propen-1-yl)-3-cefem-4-karboxylat (IX-1) (E) i 2 ml DMSO sattes 244 mg (Z mmol) nikotinamid och hlandningenn omrördesnï¿ïstimmarfiwfidflomgivningensvtempëratnråocflfiäälfiäf'"' des i 200 ml etylacetat under omröring. Den erhållna fäll- ningen tillvaratogs genom filtrering. Det kvaterniserade saltet (500 mg) upplöstes i 5 ml HCOOH i närvaro av 50 mg natriumbisulfit och blandningen upphettades 40 minuter vid 40-SOOC under omröring och;indunstades till torrhet. Ater- stoden upplöstes i 40 ml vatten och ett olösligt fast material avfiltrerades och tvättades med en liten mängd vatten. Filtratet och tvättvätskan kombinerades och kromatograferades på en reversfaskolonn, PrepPAK-500/C18 (100 ml). Efter eluering med vatten och i tur och ordning en 5 %-ig vattenlösning, 10 %-ig 201%viglvattenlösning av metanol kombinerades de fraktioner som innehöll det önska- de materialet, koncentrerades i vakuum och frystorkades för erhållande av 21 mg (3,8%) av den i rubriken angivna föreningen (I-1G) (E) som ett gult pulver. Smp. över- stigande 175°C (sönderdelning). 20f S8 466 205 In uäší cm" 334o(br). 17so, 1svo, 1600. uv = Rfgífatbfifeft *PH 7* mn (Efcm) 2351326), 214 (sk, 405), 290 (446). nun = 8D29*NaH°°3 3,68 (zu, br, 2-H), 4,15 (au, S, øcH3), PP” 5,32 (15, a, J=4,5, 6-H), 5,45 (1n, d] J=7| d' J: 4,5, 1-H), 6,15 (12, d-t, J=1s 2 7, ~f “_- 3-'cH=C§)] d] J=16' Exemgel 10 I-IH *E 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimimoacetamidq7- 3-Zäf(4-karbamoylpyridimio)-1fprepen-1-yL]-3-cefem-4fkarb- ggylat (I-1H) ' ' _ 5<\ ' 5 ' 5 Till en omrörd lösning av 716 mg (1 mmol) difenylmety1-7- (2-(5+am1no-1,2,4-tiaaiazol-a;y1)-2-met°xi1minoacetamiaq7- 3-(3-jod-1-propen-1-yl)-3-cefem-4-karboxylat (IX-1) (E) i 2 ml torr DMSO sattes 244 mg (2 mmol) isonikotinamid. Bland- ningen omrördes 1 timme vid rumstemperatur och hälldes där- zoaH~ 39 466 205 efter i 200 ml etylacetat. Den erhållna fällningen till- varatogs genom filtrering, tvättades väl med etylacetat och torkades. En omrörd blandning av det kvaterniserade materialet (400 mg) och 40 mg natriumbisulfit 1 4 ml HCOOH upphettades 1 timme vid 40-50°C och indunstades till torrhet under reducerat tryck. Det fasta råmateria- let upplöstes i 40 ml vatten. Efter filtrering av olös- ligt material kromatograferades filtratet på en revers- faskolonn (fyllning av PrepPAK/C18, 100 ml) under använd- ning av vatten och en 5 %-ig, 10 %-ig, 20 %-ig och 30 %-ig vattenlösning av metanol som elueringsmedel. De fraktio- ner som innehöll den önskade föreningen kombinerades, in- dunstades och lyofiliserades för erhållande av 21 mg (3,8%) av den i rubriken angivna föreningen (I-1H) (E) som ett blekgult pulver. Smp. överstigande 180°C (sönderdelning) Br -1 IR : VK cm max 3340(br), 1760, 1670, 1600. Äfosfatbuffert (pH 7) UV ma!! NMR = P2°*NaHC°3 3,68 (zu, br, 2-H),4,1s (an, s, pcn3), PP” 5,33 (mfa, J=4,s, s-H), 5,46 (za, a, .:r=7, cfwca-cgz), 5,90 (m, a, J=4,s, v-m, 6,17 (m, a-t, J=1s a. 7, s-crficg), 7,02 (m, a, J=1s, s-cn transr, 8,43 a 9,09 (vardera 2H, a, J=7, Py-H). axaagai (1 s N ---coua- ca m: I 'I fi “f t 2 _2 mig» "wa Ä o/-N / cn-cncazâz/ \ coca _ I-II :E 3 mn (a.}¿fšcmglš.fl z22~~ (362, .zas__-,,«.(4sz~)'. m . 23%-“- 60 466 205 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidq]-3-[É-(3-aminometylpyridinio)-1-propen-1-yLY-3-cefem- 4-karboxylat (I-1I) En blandning av 716 mg (1 mmol) difenylmetyl-7-[2-(5- amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetamidq7-3- (3-jod-1-propen-1-yl)-3-cefem-4-karboxylat (IX-1) (E) och 516 mg (2 mmol) 3-(t-butyloxikarbonylaminometyl)- pyridin i 2ml DMSO omrördes 30 minuter vid omgivningens temperatur. Blandningen hälldes i 200 ml etylacetat och fällningen tillvaratogs genom filtrering, tvättades väl med etylacetat och torkades. En blandning av det kvater- niserade saltet (500 mg) och 50 mg natriumbisulfit i 5 ml ncoon omrördss so minufisr vid 4o-so°c och inaunstades till torrhet under reducerat tryck. Éet resterande fasta materialet upplöstes i 40 ml vatten och blandningen neutra- liserades med natriumvätekarbonat. Olösligt material av- filtrerades_och filtratet kromatograferades pâ en revers- fasko1onn.(fyllning.från en PrepPAK-500/C18špatron”s100 mhkuflvarvfiääeluéringåskedüeaïituntdensofiflñfingämedfienwïïfièïgä*f- T0 %-ig, 20 %-ig och 30 %-ig vattenlösning av metanol. De fraktioner šom innehöll den önskade föreningen kombinera- des, industades och lyofiliserades för erhållande av 10 mg (1,8%) av denjirrubriken angivna föreningen (I-1I) (E) som ett brunfärgat pulver.

IR = wKBf sm* sssowr), 1160, 16so(s1<), 162o(s1<). lllâX _ fosfatbuffert (pH 7) 1% ' Uv . *max (E1 cm) 235 (sk, 260), 286 (310). nun = s°2°*"aH°°3 3,68 (zn, br, z-n), 4,16 (an, s, ocn3), PP” 6,98 (m, a, J=16, s-cn trans), 8,05 m) m| 8180 m] 4)' 2,6* 466 205 Exempel 12 ts N u fi com: l/ /J\\ /I n\\ /L" N af' * G9 azn s ocn3 of ca-cncxz- som: C009 W 7-[Q-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidq]-3-[3-(4-karbamoylpyridinio)-1-propen-1-yl]-3- cefem-4-karboxylat (I-1H) \ En blandning av 4,1 g (5,7 mmol) difeny1mety1-7-[ï-(5- amino-112,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetamidg7-3- (3-jod-1-propen-1-yl)-3-cefem-4-karboxylat (IX-1) E- isomer) och 1,4 g (11 mmol) isonikotinamid.i.6ml torn, DMSO¥omröfdesâ2Etimazflvïdflrümstemperatmnuunder?öveñwfi-”" vakning medelst TLC (silikagelplatta, CHCl3:CH OH = 3:1). _ 3 Reaktionsblandningen späddes med 100 ml etylacetat för separation av ett gult gummi, som behandlades med 40 ml myr- syra och 390 mg natriumbisulfit vid 45°C under 30 minuter.

Den erhållna lösningen koncentrerades till torrhet. Åter- stoden upplöstes i 100 ml vatten och olösligt material av- lägsnades genom filtrering. Kombinationen av filtrat och vattentvättvätska appliceradesfpå toppen av en kolonn inne- hållande reversfasfyllning (PrepPAK-500/C18, 120 ml).

Kolonnen eluerades med vatten. Eluatet tillvaratogs i fraktioner om 300 ml och övervakades medelst UV (254 nm) och HPLC (Lichrosorb RP-18, 4 x 300 mm, 0,01 M ammonium- fosfatbuffert; pH 7,2 innehållande 20% metanol). Frak- tionerna nr. 4 och 5 kombinerades och koncentrerades till en liten volym. Lyofilisering gav 250 mg (8,1%) av den i rubriken angivna förening I-1H med en smp. överstigande 180°C (sönderdelning).

ZQQ 62 466 205 Spektra visade att produkten var identisk med den som erhölls enligt exempel 10.

Framställning av hydrokloriden - Till en suspension av 98 mg (0,18 mmol) av förening I-1H i 1 ml metanol sattes 0,1 ml 19 %-ig saltsyra och blandningen omrördes 5 minu- ter. Till den erhållna gula lösningen sattes 100 ml ace- ton för bildning av en fällning, som tillvaratogs genom filtrering, tvättades med 2 x 10 ml aceton och torkades i vakuum för erhållande av hyhxkloridsaltet av I-1H som ett färglöst pulver.-Utbyte 88 mg (79%). Smp. överstigande 190°C (sönderdelning).

IR = Kßr '1 “max cm 3300, 1770, 1680, 1620. _ fosfatbuffert (pH 7) 1% UV . Åmax nm (E1 cm) 227 (385), 286 (374).

D O Nàm = 5* 2 2,32 (1H, s, acetQn-Hm 3,79 (213, br-s., .t ' 92"* " zëffr Sa-,;34:%¿.-'Jrfl-rfm; i 6-H), 5,49 (2H, d, J=7, CH=CH-CÉ2), 5,93 (1H, ' d, J=4,5, 7-H), 6,28 (1H, d-t, J=16 & 7, a-cxficg), 7,15 (1H,: d, Jfi1s, s-cg), 8,43 a 9,1 (vardera 2H, d, J=7, Py-H).

Exempel 13 s .~ n u--- cona w 1 If . v nznks/ \ocn_,_ o N / cæcncnz? we JU n3c s_ _ I-IJ *E 2o._, 63 466 205 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidq]-3-[3-(2-metyltiazolio)-1-propen-1-yl]-3-cefem- 4-karboxylat (I-1J) Till en blandning av 714 mg (1 mmol) difenylmetyl-7-Z2- (5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetamidQ]-3- (3-jod-1-propen-1-yl)-3-cefem-4-karboxylat (IX-1) (E) och 198 mg (2 mmol) 2-metyltiazol [framställd medelst förfarandet enligt R. P. Kurkjy, E. V. Brown, J. Am.

Chem. Soc., 12, 5778 (1952L] i 10 ml torr CH2Cl2 Sattes _ AgBF4 (renhet 90%, 217 mg, 1 mmolT vid -20°C. Blandningen omrördes 30 minuter vid rumstemperatur och filtrerades.

Fällningen extraherades med 3 x 20 ml 10% CH3OH-CHCI3.

De kombinerade extrakten tvättades med 2 x 5 ml salt- lösning, torkades över magnesiumsulfat och indunstades till torrhet för erhållande av en gul återstod, som tri- turerades med isopropyleter och filtrerades för erhållande av 350 mg av den kvaterniserade produkten. En blandning av detta fasta material, 35 mg natriumbisuliit odb 3¿åf¿ _. m1 myrsyra anfördes so minurerivid 40°c§ Blandnïngenß koncentrerades för avlägsnande av myrsyran och återstoden späddes med 40 ml vatten. Viss mängd olösligt material avlägsnades genom filtrering. Filtratet applicerades på en reversfaskolonn (PrepPAK-500/C18, 100 ml). Kolonnen eluerades med 200 ml vatten, 400 ml av en 5 %-ig vatten- lösning avmetanol och 300 ml av en 10 %-ig vattenlösning av metanol i tur och ordning. De fraktioner som innehöll. den önskade produkten poolades på basis av HPLC-analys (Lichrosorb RP-18, 4 x 300 mm, 0,01 M ammoniumfosfatbüffert pH 7,2 innehållande 20% metanol). Den kombinerade lösningen koncentrerades till en liten volym och lyofiliserades för erhållande 40 mg (7,7%) av den i rubriken angivna före- ningen (I-1J) (E). Smp. överstigande 19500 (sönderdel- ning). ~ I '15 64 466 205 In = wâšš cm*1 asoo, 1760, 1660, 1soo. av _ lfosfatbuffert (pH 7) 1% max Hm (E1 cm) 238 (442), 292 (421). una = 6§å§*D“S°'ds .3,os (an, S, tiazol-c§3), 3,74 (za, br-s, 2-H), 4,19 (su, S, ocn3), 5,92 <1H, a, J=4,s, 7-H), 6,1 (1H, m, '- 3"CH=C_I'_I)r 6:8 UH: d; J=16, 3"'CH träns), 8,04 & 8,23 (vardera 1H, d, J=4, t* -f tiazol-§). ~ Exempel 14 X CH:'CHC_HZ@ EZ 03 ccxfiï '_ ~ 1-1L fa - 7-[É-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amiW-.Bffß- fêfhydrßilvetylpyfiëåfliê) f1-Pr°P«_=-I=f1-YU-B- cefem-4-karboxylat'(I-1L)." ' En blandning av 1,07 g (1,5 mmol) difeny1-7-jÉ-(5-amino- 1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetamidqf-3-(3-jod- 1-propen-1-yl)-3-cefem-4-karboxylat (IX-1) (E-ísomer), 818 mg (7,5 mmol) 4-hydroximetylpyridin i 4,5 ml CH3CN och 3 ml metanol omrördes vid rumstemperatur 1 timme under kväveatmosfär. Efter ävlägsnande av lösningsmedlen genom indunstning triturerades den resterande oljan med isopropyleter, tillvaratogs genom filtrering och tvätta- des med 10 ml av en 3:1-blandning av isopropyleter och .” 466 205 metanol för erhållande 1,28 g av den kvaterniserade cefemestern som ett gult pulver. En lösning av den kvaterniseradé estern (1,25 g) och 600 mg natriumbi- sulfit i 10 ml 85 %-ig HCOOH omrördes 1 timme vid rums- temperatur under kväveatmosfär. Efter tillsats av 5 ml 85 %-ig HCOOH omrördes blandningen under samma betingel- ser ytterligare 1 timme. Toluen tillsattes och reaktions- blandningen indunstades azeotropiskt under reducerat tryck. Återstoden triturerades med aceton för erhållande av 1,17 g av det råa formiatet av den i rubriken angivna föreningen. En suspension av denna förening (1,15 g) i 100 ml vatten filtrerades för avlägsnande av olösligt material, som tvättades med 2 x 10 ml vatten. Filtratet och tvättvätskorna kombinerades och underkastades revers- faskolonnkromatografi. Kolonnen, som var fylld med fyll- ningen från enïprepPAK-500/C18-patron (Waters) 60 ml), framkallades i tur och ordning med vatten, 5 %ïig meta- nol och 10 %-ig metanol. De fraktioner som innehöll den önskade föreningen kombinerades, koncentrerades under , reducenatfltryck?ocmmutfëlldesagenomfitilwsatsåawmacetona~% för erhållande av 100 mg av den i.rubriken angivna före- ningen (I-1L) som ett blekgült pulver. Till en suspension av pulvret (90 mg) i 9 ml metanol sattes 0,5 ml 1N HCl i metanol och blandningen omrördes vid rumstemperatur och koncentrerades i vakuum. Till koncentratet sattes isopropanol för utfällning av 77 mg av hydrokloriden av den i rubriken angivna föreningen som ett blekgult pulver.

Smp. överstigande 190°C (sönderdelning).

IR = gââí cm'1, 1775, 1670, 1635, 1530.

UV _ Afosfatbuffert (pH 7) ' max nm (6), 230 122600), 264 (sh, 16300) NMR : 8D2° ppm 3,83 (zu, br. 2-CH), 4,17 (3H, s, ocH3), ,06 (2H, s, 2) gzofl), 5,36 (1H, d, J=4,s Hz, 6-H), 5,41 (23, d, J=7 Hz, cH=cH-cgz), ,94 (1n, a, J=4,5 az, 7-H), 6,36 g1n, a-t, ZQJÜ 66 466 205 J=16 och 7 Hz, CH=C§CH2), 7,13 (1H, d, J=16 Hz, C§=CH-CH2), 8,08 och 8,83 (vardera 2H, d, J=7 Hz, Py-H).

Exempel 15 N CONH I I H ä _ - o HZNLS/N \oczns f N' :Qcrwcncaz-NÖ-couaz I-za *E 7-[Y-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-etoxiiminoacetamidq7- 3-[3-(4-karbamoylpyridinio)-1-propen-1-yl]-3-cefem-4-karb- oxylat (I-2H) f Till en lösning av 200 mg 7-amino-3-!§-(4-karbamoylpyridi- nio)-1-propen-13yl]-3-cefem-4-karboxylat-hydroklorid (E- isomer) i 5 ml av en 50 %-ig vattenlösning av aceton sattes portionsvis 190 mg 2-etoxiimino-2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol- 3-yl)acetylklorid-hydroklorid (framställd medelst det för- farande som beskrives i den publicerade japanska patent- ansökningen (Kokai) 57-24389 (2/8/82)) och blandningen in- ställdes på pH 6,5-7,0 med 2 N natriumkarbonat (cirka 1 ml).

Reaktionsblandningen omrördes vid 10°C under 1 timme, sur- gjordes till pH 2 med 1 N saltsyra och indunstades i vakuum. Återstoden filtrerades och filtratet kromatograferades på en kolonn av HB-20, som eluerades i tur och ordning med 500 ml vatten och en 25 %-ig vattenlösning av isopropanol.

De fraktioner som innehöll den önskade produkten kombinera- des och indunstades under reducerat tryck. Den oljiga åter- stoden behandlades med 20 ml isopropanol för erhållande av 263 mg (93%) av denïi rubriken angivna föreningen (I-2H). 20M 466 205 Smp. 17000 (sönderdelning).

Till en omrörd suspension av 225 mg (0,40 mmol) av ovan angivna zwitterjon i 10 ml metanol sattes 1 ml 1 N salt- syra i metanol och blandningen omrördes 30 minuter vid rumstemperatur. Lösningen filtrerades och koncentrerades under reducerat tryck. Till återstoden sattes 15 ml iso- propylalkohol och den erhållna fällningen tillvaratogs genom filtrering och torkades i vakuum för erhållande av den i rubriken angivna föreningen som dess hydroklorid.

Utbyte 146 mg (57%). Smp. 160°C (sönderdelning). Upp- - skattad renhet 65%.

IR = Våg: cm'1, 333o, 178o, 1680, 1620.

Uv = )f°sfatb“ffert (PH 7) nm (2), 227 122300), 288 maX 122800).

NMR = 8D2° 1,44 (sn, t, J=7 Hz, ocnz-cg3), 3,74 (zu, PP” bnr.ai4z-un, 4,4s;42na qi aaawaan acgifqgšgfl i” ,36 (in, d, J=415 Hz, 6-H), 5,46 (zu, a, Jf? Hi, a-icxkcn-cgz), 5,92 (m, d, J=4,5 Hz, 7-H), 6,20 (1n, m, 3-cn=cg), 7,04 (1H, 8, J=16 Hz, 3-cg=cH), 8,43 (zu, a, J=7 Hz, Py-HA), 9,10 (2H, d, J=7 Hz, Py-HB).

Exempel 16 ' 7-[ä-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amIdQJ-ßffêf fl-kfirbafrwylpyridifliw -1-Pf°P8fl-?-¥1Jf.3- 4 cefem-4-karboxylat (I-1H)“(E-isomer) xt ' ^ ' Detta exempel visar framställning av förening I-1H via det sista stegen av reaktionsschema 1a eller 1b, där mellanprodukten benshydryl-7-[É-(5-amino-1,2,4-tiadiazol- 3-yl)-2-metoxiiminoacetamidqf-3-13-(4-karbamoylpyridinio)- 1-propen-1-yl]-3-cefem-4-karboxylat-formiat (XXVII-1H) 68 _46s 205 isoleras.

A. Benshydryl-7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol*3?yl)-2- metoxiiminoacetamidq]-3-[3-(4-karbamoyl-1-pyridinio)-1- propen-1-yl]-3-cefem-4-karboxylat-formiat (E-isomer) (xxvII-1H) ' ' En lösning av 34 g (75% renhet) XII-1H (fa = fin E-isomer) i 200 ml av en 1:1-blandning av aceton och metanol appli- cerades på en kolonn avlmterlüef IRA-410 (formiatform 340 ml). Kolonnen eluerades med samma lösningsmëdelssystem.

Den första fraktionen (1 liter) indunstades till cirka 100 ml av volymen och den bruna återstoden triturerades med 400 ml isopropyleter. Pet erhållna pulvret tillvara- togs genom filtrering och torkades i vakuum för erhållande av 29 g (75% renhet medelst HPLC) av den i rubriken angivna föreningen XXVII-1H (E-isomer) som ett brunt pulver med en smp. överstigande 150°C (sönderdelning). 1R”“:"“â:§ï?°“¿?¿:sunnffimaøäf°@saïwwæan%%¶em@$va',.,~» ' V ÃEtOH 1% UV : max nm (E ) 282 (186).

NHR : íaceton-d6/CH3OH-d4(1/V) 4,0 (33, ppm s, øcg3), 5,26, (1H, d, J=4,5 Hz, 6-H), 5,43 (2H, d, J=7 Hz, c§2N*), 5,99 (1n, a, J=4,s Hz, 7-H), 6,5 (1n, m, 3-cn=cg), 6,92 (1n, s, cgphz), 7,1 (13, d, J=16 Hz, sflcg), 7,35 (10H, m, Ph-§), 8,36 (1H, s, §C0O), 8,46 & 9,12 (2H vardera, d, J=8 Hz, Py-H).

B. 7-lä-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidq]-3-[3-(4-karbamoyl-1-pyridinio)-1-propen-1-yl]-3- cefem~4-karbogylat (I-1H) IE En blananing av 29 g (vsæ renhet) xxvzz-1n (E-išømer) från 466 205 steg A och 290 ml 85 %-ig myrsyra omrördes 2 timmar vid rumstemperatur. Indunstning av blandningen gav en brun olja, som triturerades med 500 ml aceton. Pulvret till- varatogs genom filtrering, tvättades med 2 x 100 ml aceton och torkades 1 vakuum för erhållande av 24(g (50% renhet enligt HPLC) av denii rubriken angivna föreningen som råprodukt. Det bruna fasta materialet behandlades två gånger med 1 liter och 0,5 liter 2 N HCl. De vatten- haltiga extrakten kombinerades och infördes på en kolonn fylld med Diaion HP=20 (1,5 l). Kolonnen tvättades med 8"l vatten och eluerades med 5 l 30 å-ig metanol. Den f fraktion som innehöll den önskade produkten indunstades till cirka 30 ml. Kqncentratet behandlades med 200 ml aceton för erhållande av en fällning, som tillvaratogs genom filtrering och torkades i vakuum för erhållande av 10,1 g (85% renhet) av den i rubriken angivna före- ningen (zwitterjon-form) som ett gult pulver. Till en suspension av denna produkt i 100 ml metanol sattes 1 N HCl i 55 ml metanol vid rumstemperatur och blandningen omrördesi30»ndnuteru Demferhållnämklamæålöñingénvfiïfifië-@»~ rades för avlägsnande av“oIösligt material, koncentrera- des tilljca 50 ml av volymen och utfälldes med 200 ml iso- propanol. Det erhållna pulvret tillvaratogs, tvättades med 50 ml isopropanol och torkades i vakuum för erhållande av 10,5 g (85% renhet) av den i rubriken angivna före- ningen I-1H (E-isomer) (HCl-salt) med en smp. över- stigande 180°C (sönderdelning). Blekgult pulver.

Exempel-17 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- flmidaffßffêf fëfkflrbflllwylpvriëëniê) -1-P¥°Pef=+1-Y1J-3- cefem-4-karboxylat (I-1H) IE-isomer) ” Detta exempel visar framställningen av förening I-1H via de sista stegen i reaktionsschema 1a eller 1b, där mellanprodukten XXVII-1H (formiatet) ei isoleras. 20k, 70 (466 205 En lösning av 27,6 g (38,5 mmol) av IX-1 (E-isomer) och 22,8 g (187 mmol) isonikotinamid i en blandning av 120 ml CH3CN och 100 ml metanol omrördes 1 timme vid rums- temperatur under kväveatmosfär. Efter avdrivning av de organiska lösningsmedlen triturerades den oljiga åter- stoden med isopropyleter för erhållande av 50,5 g av en blandning av det “kvaterniserade saltet och isonikotin- amid. En lösning av blandningen (50,3 g) och 16 g natrium- bisulfit i 160 ml 85 %-ig HCOOH omrördes 40 minuter vid rumstemperatur och därefter 1 timme vid 40°C under kväve.

Blandningen indunstades i vakuum. Den rešterande oljan blandades med 50 ml toluen, indunstades azeotropiskt och triturerades med 400 ml aceton för erhållande av 27,8 g av den i rubriken angivna föreningen som en råprodukt.

Detta material behandlades tvâ gånger med 2 N HCl (1 l och 0,5 1). Syraextrakten kombinerades och applicerades på en kolonn av HP-20-harts (1,5 1). Kolonnen eluerades med 9 l vatten och 10 1 30 %-ig metanol. De fraktioner som innehöll den önskade föreningen kombinerades och koncentrenadesrfiönfierhäïfiändëäamwenwgußicüjäïäsbmwtfätdßä rerades med 300 ml aceton för erhållande av 9,35 g av zwitterjonformen av den i rubriken angivna föreningen..

Till en suspension av produkten (9,3 9) i 180 ml metanol sattes 1 N HCl i metanol (55 ml) för erhållande av en klar lösning. Lösningen koncentrerades i cirka 100 ml och späddes med isopropanol för utfällning av 9,50 g (ren- het 75%) av den i rubriken angivna föreningen I-1H (E- isomer) som sin hydroklorid. Blekgult amorft pulver med en smp. överstigande 195°C (sönderdelning)..

Egamgiai i is 7-/2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidÜfB-ßf HflFaIbaIIDYlPYIiCfiPiW *1'P1f°Pef>“1ufY.1J'3f , _ cefem-4*karboxylat (I-TH) (E-isomer) 0 _ Detta exempel visar framställningen av föreningen I-1H 2U~ II 466 205 via sista steget (7-N-acylering) i reaktionsschema 1c.

Till en iskyld suspension av 5,0 g (12,6 mmol) av 7-amino- cefemhydrokloriden XXII-H (E-isomer) i 100 ml av en 50 %-ig vattenlösning av aceton sattes natriumbikarbonat i små por- tioner. Blandningen pH-värde övervakades medelst en pH- mätare under reaktionen. Till den kalla neutraliserade lösningen (pH cirka 7) sattes 4,0 g (15,6 mmol) 2-(5- amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetyklorid-hydro- klorid i små portioner under en tidsrymd av 1 timme och 7,5 genom tillsats alltefter behov av natriumbikarbonat. all förening XXII-H hade förbrukats surgjordes bland- _ ningen till pH 3 genom tillsats av 2 N klorvätesyra. Bland- ningen filtrerades och filtratet koncentrerades under redu- cerat tryck. Aterstoden späddes med 400 ml aceton för separation av fällningen, som tillvaratogs genom filtre- ring, varvid man.erhöll 9,59 g av den i rubriken angivna och filtratet adsorberades på en kolonn av 500 ml HP-20- harts. Efter tvättning med 1,5 1 vatten eluerades kolonnen med en 25 %-ig vattenlösning av isopropylalkohol och elua- tet tillvaratogs i 100 ml fraktioner. De önskade frak- tionerna poolades, surgjordes med 10 ml 2 N klorvätesyra och koncentrerades. Den resterande oljan triturerades med' 200 ml isopropylalkohol och fällningen tillvaratogs genom filtrering. Efter torkning över fosforpentoxid erhölls ,18 g av hydrokloriden av den i rubriken angivna före- ningen X-1H (E-isomer) som ett gult amorft pulver. Smp. överstigande 190°C (sönderdelning). Uppskattad renhet 75%. ' 202 72 466 205 gšgmpel 19 Rening och kristallisation av förening I-1H (E-isomer) Förening I-1h-hydroklorid, som erhölls i exempel 16, var ett blekgult amorft pulver med en renhet av 85%.

Förfarande 1.: 6 g av hydrokloriden med en renhet av 85% upplöstes i 20 ml vattenrpch filtnæædbs genom en celite-dyna. Det bärnssteng- färgade filtratet (pH 2) fick passera en reversfaskolonn (fyllning från en prepPAK-500/C18-patron, Waters; 120 ml), som eluerades med vatten. Eluatet tillvaratogs i 120 ml fraktioner under övervakning medelst HPLC. Fraktionerna 3-S kombinerades och koncentrerades i cirka 10 ml och ut- fälldes medelst 100 ml aceton för erhållande av 3,3 g av zwitterjonformen av I-1H (blekgult amorft pulver; uppskattad renhet 95%).

Till en suspension av pulvret med en renhet aw 95% (3,2 g) i 32 ml metanol sattes 1 N HC1 i 18 ml metanol och bland- ningen omrördes vid rumstemperatur till dess en klar lös- ning erhölls. Lösningen filtrerades och filtratet koncentre- rades till cirka 10 ml. Till koncentratet sattes 100 ml isopropanol för separation av en blekgul fällning, som tillvaratogs genom fitrering, tvättades med 5 ml isopropa- nol och torkades för erhållande av 2,6 g av HC1-saltet (amorft pulver; uppskattad renhet 95%).

En lösning av hydrokloriden med en renhet av 95% (1 g) i 4 ml vatten inställdes på pH 6,5 med 200 mg natriumväte- karbonat och omrördes 30 minuter. De kristaller som sepa- rerade under omröring tillvaratogs genom filtrering, tvättades med 2 x 5 ml vatten och torkades i vakuum för erhållande av 710 mg av I-1H (zwitterjonform) som blek- 1 ZGÜ' Funnet: /3 466 205 gula prismor. Smp. överstigande 185°C (sönderdelning).

Mikroanalys visade att föreningen förelog som trihydratet.

In = väg; cm", 1780, 1695, 166ø, 1630, 1610. uv = zšgífatbuffert (PH 7)nm 1:) 227 (zzooo), 290 (zaooo).

NMR : snusa-d6+n2o ppm 3,45 (2H, br, S, 2-H), 3,9 (BH, s, ocH3), 4,99 (1H, d, J=4,5 Hz, 6-H), 5,16 (2H, d, J=7 Hz, cg2N*), 5,61 (1a, a, J=4,s Hz, 7-H), 5,8 (1H, d-t,, J=16 & 7 Hz, 3-CHIC§), 6,93 (1H, d, J=16 Hz, 3-Cgå, 8,18 & 8,89 (vardera 2H, d, J=7_Hz,-Py- H).

Analys beräknat för C21H2oN8O6S2-3H2O: C, 42,14; H, 4,38 _ N, 18,72; S, 10,71.

C, 42,41; H, 4435:. n' .,1>“si,vs6f,-j^-s ,- 31:11 , 00:» _* Kolonn, Lichrosorb_RP-18, 4 x 300 mm: Mobil fas, 0,01 M fosfatbuffert (pH 7,2)/CH3OH = 85/15: Detektering, UV (254 nm).

Förfarande 2 Då kristallin I-1H hade erhållits genom förfarande 1 var det möjligt att erhålla den kristallinazwitterjonformen av I-1H direkt från den råa I-1H-hydrokloriden genom till- sats av några få kristaller av ren I=1H som groddkristaller.

En lösning av hydrokloriden med en renhet av 85% (250 mg) i 1 ml vatten behandlades med träkol. Lösningen inställdes på pH 6,5 med 60 mg natriumvätekarbonat och avfärgades med träkol. Filtratet försattes med groddkristaller, som hade erhållits från förfarande 1, och omrördes över natten vid rumstemperatur. De separerade kristallerna tillvara- togs genom filtrering, tvättades med 2 x 2 ml vatten och :of 74 4,66 205 torkades under reducerat tryck för erhållande av 170 mg (80% utvinning) av blekgula prismor av I-1H (zwitterjon- form) med en smp. överstigande 185°C (sönderdelning), som var identisk med den som erhölls medelst förfarande 1 (vilket kunde visas genom IR, UV och NMR). §§em2el 20 S NI--ïTïï\ CONH'---T 3203 i .Är-'N 1' _' RZN/L s /N ocg: 0/ cn-cn-cnz I-IK *E 7-[ä-(5-amino+T,2}4+tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidq]-3-[É-(3-hydroximetylpyridinio)-1-propenyl]-3fcefem- 4-karboxylat (I-1K) (E-isomer)^ ' ' ' A. Difeny1metyl-7-j?-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2- metoxiiminoacetamidq]-3-[3-(3-hydroximetylpyridinio)-1- propenyl]-3-cefem-4-karboxylat-jodid (E-isomer) ' (XII-HK) ' a - I Till en lösning av 1,79 g (2,5 mmol) IX-1 (E-isomer) i 2,5 ml metanol och 7,5 ml CH3CN sattes 545 mg (5 mmol) 3-hydroximetylpyridin och blandningen omrördes 3 timmar vid rumstemperatur. Reaktionsblandningen hälldes i 100 ml etylacetat under kraftig omröring. Den erhållna fällningen tillvaratogs genom filtrering, tvättades med en liten volym etylacetat och torkades för erhållande av 2,06 g (100%) av den i rubriken angivna förening XII-1K som ett brun- färgat pulver. Smp. 170-180°C (sönderdelning).

- ... Mm.. '15 Zflxfrf 75 466 205 (kar) 1 cm'1 1780, 1725, 1e75,'1e15, 1530, 1355, 1225, 1o4o, 750, 7oo.

I IR : Vmax 1% UV . Ämax (C2H5OH) i nm (É cm) 290 (196).

NMR = s (nnso + D20) i ppm 3,7 (zu, br.s, 2-H), 3,91 (su, s, OCH3), 4,70 (2H, s, Py-C§2- on), 5,25 (za, m, cnz-N*), 5,23 (1H, d, J=5Hz, s-H), d, J=5Hz, m, « ~'3-cn=cg),=s,ae (1n, d, J=16 Håï S, m, Ph-H), 7,9_8,9 m, u B. 7-¿2-(5-amino-1,2,4-tiadiazøl-3-y1)-2-metox1imino- acetamidQ]-3-[3-(3-hydroximetylpyridinio)f1fpropenyl]- 3-cefem-4-karboxylaå (I-1x) (E-isomerr' ' * Efi*hIandning»ava2$Gfig»(2ïl“moff"XTI4TK”{E=fšomërfïocñ?,f” 1 g natriumbisulfit i 10 ml 85 %-ig HCOOH omrördes 2 timmar vid rumstemperatur. Reaktionsblandningen koncentre- rades till cirka 5 ml under reducerat tryck. Den oljiga återstoden hälldes i 100 ml aceton under kraftig omröring.

Fällningen tillvaratogs genom filtrering, tvättades med en liten mängd aceton och torkades för erhållande av 1,1 g av ett brunfärgat pulver, som renades genom kolonnkromato- grafi (under användning av fyllningen från en PrepPAK- 500/C18-patron (Waters)) för erhållande av 283 mg (22%) av I-1K som ett amorft pulver. Pulvret kristalliserades ur 4N svavelsyra och aceton för erhållande av 144 mg av den i rubriken angivna föreningen I-1K som färglösa nålar. smp. 185-1ss°c (sönaerdeining).

In = vmax (xsr) 1 cm'1 1775, 1saosn, 1550, 1630, 1225, 1045, sso. _ l~| 99 76 466 205 UV : Ä 1% max (fosfatbuffert, pH 7) i nm (E1 cm) 236,5 (283) 275 sh, (280), 292,5 (330).

NMR : §(D2O) i ppm 3,75 (2H, s, 2-H), 4,18 (3H, s, OCH3), 4,97 (zu, s, Py-cgzoa), 5,35 (1P, d, J=4nz, 6-H), 5,43 (zu, a, J=s,suz, cnz-N*), 5,92 (1n, a, J=4Hz, 7-H), 6,18 (1H, a-c, J=16nz, J=6,snz, 3-cH=cg-), 6,97 (1n, d, J=1sHz, 3-ca), 8,13 (1n, ~' d-a, J=sHz, J=6Hz, Py-ññ, 8,60 (1H, d, J=8,Hz, Py=H), 8,84 (1H, d, J=6Hz, Py- H), 8,90 (1H, S, Py-H). 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-(Z)-metoxiimino- acetamidq]-3-[3-¶4-N-metylkarbamoylpyridiniol-1-propenyl]- 3-cefem-4-karboxylat (I-1M) (E-isomer)' " ' En blandning av 450 mg (0,62 mmol) difenyl-7-[?-(5-amino- 1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetamido]-3-(3-jod-1- propenyl)-3-cefem-4-karboxylat (IX-1) (E-isomer) och 215 mg (1,58 mmol) 4-N-metylkarbamoylpyridin [ïramställd medelst förfarandet enligt M. Samejima, Yakugaku Zasshi, QQ, 1706 (1960)] i 2 ml acetonitril omrördes 5 timmar vid rumstempe- ratur under kväveatmosfär. Blandningen indunstades under reducerat tryck och återstoden triturerades med eter för erhållande av 530 mg av det "kvaternära saltet. En bland- ning av det fasta materialet och 150 mg natriumbisulfit 2_Q. _ 466 205 i 2 ml 85 %-ig myrsyra omrördes 4 timmar och upphettades därefter 30 minuter vid 40°C. Blandningen indunstades under reducerat tryck. Aterstoden triturerades med aceton och råprodukten tillvaratogs genom filtrering. Råprodukten kromatograferades på en kolonn av HP-20 (1,5 x 18 cm) och kolonnen eluerades med vatten och en 30 %fig vattenlös- ning av metanol. Det metanoliska eluatet indunstades under reducerat tryck och återstoden frystorkades för erhållande av 140 mg av ett amorft pulver, som ytterligare renades medelst HPLC (kolonn: Lichrosorb RP-18, löšningsmedel: %Tmetanol) och eluatet från HPLC frystorkades för erhållande av 60 mg (18%) av den i rubriken angivna pro- dukten I-1M. Smp. 180-183°C (sönderdelning). Uppskattad renhet: 80%.

IR = »max (mer) i cm* 1760, 1660, 1eoo.å UV : Å max (fosfatbuffert, pH 7) i_nm (C) 230 (22100), 286 (22100). mm = 34020) ~i'ppm~3,oks^ fan; s, tconncgy, 3,72 (zn, s, z-H), 4,16 (3Hfs, ocH3), 5,35 (1H, d, J=4,5Hz), 6-H), 5,95 (1H, d, J=4,5Hz, 7-H), 7,00 (1H, d, J=16Hz, 3-CH), 8,35 (ZH, d, J-6Hz, pyridin-H), 9,05 (2H, d, J=16Hz, pyridin-H).

Exempel 22 --- coun- n N s 112,1* s/N \oc 3 j- jcogåcn=caænšñ®æoon I-IN *E/Z I 7/1 1 1 zÛiißçr' 78 466 205 7-Z?-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidq]-3-[3-(4-karboxipyridinio)-1-propeny1]-3-cefem-4- karboxylat (I-1N) Till en omrörd suspension av 340 mg (2,8 mmol) isonikotin- syra i 3,5 ml torr DMF sattes 0,7 ml (2,8 mmol) N,O-bis- (trimetylsilyl)acetamid under kväveatmosfär. Till den er- hållna klara lösningen sattes 720 mg (1 mmol) difenylmetyl- 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetamidq]- 3-(3-jod-1-propenyl)-3-cefem-4-karboxylat (IX-1) (E-isomer) i en portion och den röda lösningen omrördes 1,5 timmar __ - vid rumstemperatur. Reaktionsblandningen sattes droppvis till en omrörd mättad natriumkloridlösning (50 ml), som innehöll 150 mg natriumtiosulfat. Den gula fällningen till- varatogs genom filtrering, tvättades med vatten och torka- des för erhållande 722 mg av ett blekgult pulver. Pulvret (700 mg) och natriumbisulfit (70 mg) upplöstes i 5 ml 85 %-ig myrsyra och'1ösningen fick stå 1,5 timmar vid rumstemperatur. Dlandningen suspenderades i 50 ml toluen ocuakoncentreradesneAtersmodemætritnnemmmaáëmedäaflàmåâace-ne»33 ton och fällningen isolerades genom filtrering för er- hållande av 421 mg_av ett gult pulver. Detta råa pulver (400 mg) suspenderades i 2 ml vatten och till suspensionen sattes natriumbikarbonat. Den erhållna mörka lösningen adsorberades på en kolonn innehållande 50 ml fyllning från en PrepPAK/C18-patron (waterïs System 500) och köionnen eluerades med 200 ml vatten. Eluatet fraktionerades i tio'fraktioner (20 ml vardera) och de önskade fraktionerna (fraktionerna nr. 4-7) kombinerades, surgjordes till pH 3 med 2N klorvätesyra och koncentrerades. Återstoden tri- turerades med 30 ml aceton och fällningen tillvaratogs genom filtrering för erhållande av 201 mg (37%) av den i rubriken angivna föreningen I-1N som ett gult pulver.

E/z = 7/1; søæ renhet. smp. överstigande 1s9°c (sönder- delning). -10 ” 466 205 1 In = vmax* (xsr) 1 cm' 1770, 1665, 1600.

UV : Ämax (fosfatbuffert, pH 7= i nm (5) 227 (22500), 290 (22100).

NMR : 5(D20 + NaHCO3) i ppm 3,7 (2H, br.s), 4,15 (3H, s), ,32 (1H, d, J=4Hz), 5,39 (2H, d, J=6HZ), 6,14 (1H, d-t, J=15,5 Och 6Hz), 7,03 (1H, d, J=15,5Hz), 8,31 (2H, d, J=7Hz), 8,94 (zu, d,_J=7Hz).

Exemgel 23 N--ír-g conn- S | /N .Km kr; / aan s 113 0/ C :stats *a 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-(Z)-metoxiimino- acetamidq]-3-[3-(2,3-cyklopentenopyridinio)-1fpropenyl]-_ 3-cefem-4-karboxylat (I-10) (E-isomer) ' En blandning av 450 mg (0,62 mmol) difenylmety1-7-[2- (5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetamidq]- 3-(3¥jod-1-propenyl)-3-cefem-4-karboxylat (IX-1) (E- isomer) och 217 mg (1,83 mmol) 2,3-cyklopentenopyridin i 2 ml acetonitril omrördes under kväveatmosfär 4 timmar vid rumstemperatur. Efter indunstning under reducerat tryck triturerades blandningen med eter för erhållande av 560 mg av det .kvaternära saltet. En blandning av det fasta materialet och 2 ml 85 %-ig myrsyra omrördes 3 timmar under kväve vid rumstemperatur och upphettades därefter 30 minuter vid 40°C. Blandningen indunstades under reducerat tryck och triturering av återstoden gav 391 mg râprodukt, som renades genom kromatografi på en 2&:_ 80 466 205 kolonn av HP-20 (1,5 x 18 cm). Kolonnen eluerades med vatten och en 30 %-ig vattenlösning av metanol. Avdriv- ning av det metanoliska eluatet under reducerat tryck, följt av frystorkning gav 160 mg av ett amorft pulver, som renades ytterligare medelst HPLC (kolonn: Lichrosorb, Eluatet från HPLC frystorka- des för erhållande av 50 mg (15%) av den i rubriken an- givna produkten I-10. Smp. lösningsmedel:10% metanol). överstigande 190°C (sönder- delning). Uppskattad renhet: 75%. -f IR = xxmax (kbr) i cmqnvss, 1s7o, 1600. .__ UV : )max (fosfatbuffert, pH 7) i nm (¿) 235 (20000), 283 (25000).

NMR : 6(D2O + NaHCO3) i ppm 2,2-2,6 (2H, m, -CH2-), 3,1- 3|6 m1 -cH2-)/ s] 5133 d' J=4/5Hzy 6_H)I i 6,75 (TH, d, J=16Hz, 3-CH), 7,65-8,2 (3H, m, pyridin-H).

Exempel 24 'L / j-'N / H2" s ° ca-cn-cn ? C285 C00 I~2N iš 466 205 7-12-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-(Z)-etoxiimino- acetamidq]-3-[3-(4-karboxipyridinio)-1-propenyl]-3- cefem-4-karboxylat (I-2N, E-isomer) och 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-(Z)-etoxiimino- acetamidQ]-3-[3-(4-karboxipyridinio)-1-propenyl]-3- cefem-4-karboxylat (I-2N, Z-isomer) \ Till en kyld blandning av 1,0 ml (4,12 mmol) BSA och 506 mg (4,12 mmol) isonikotinsyra sattes 1,0 g (1,37 mmol) IX-2 (frân förberedningsexempel 21) och blandningen omrördes 2 timmar vid rumstemperatur under kväve. Bland- ningen hälldes i 20 ml 10 %-ig Na2S2O3 för utfällning av 1,3 g av det Ikvaternära saltet, som tillvaratogs genom filtrering, tvättades med vatten och torkades. En bland- ning av det fasta materialet och 0,3 g natriumbisulfit i ml 98 %-ig myrsyra upphettades 1 timme vid 40°C och in- dunstadesrf,undemzreducerraßtßzfiüngclcatš'- Åitensftodenäë, i “ med aceton och filtrërades för erhållande av 900 mg rå- produkt (E-propenylisomer:Z-propenylisomer = 2:1). Sepa- ration av isomererna utfördes medelst HPLC (kolonn: Lichrosorb, lösningsmedel, 15% metanol). De snabbrörliga fraktionerna från HPLC tillvaratogs, indunstades under reducerat tryck och frystorkades för erhållande av 44 mg (utbyte 6%) av E-propenylisomeren av I-2N. De långsammare fraktionerna gav 32 mg íutbyte 4%) av Z-propenylisomeren av I-2N vid ett liknande förfarande.

I-2N, E-isomer smp. >2oo°c jsönd.) -1 IR = u (KBr§ 1 cm 17ss,.1ß6o, 1620, 1380. max UV : )max (vatten i nm (8) 228 (22200), 291 (23600). 2 offšf _466 205 NMR I-2N, Z-isomer >2oo°c (söna.) (Kßr) 1 @m;1,;1sø;'1s5o(sk1, 1620, 1370. 82 = 8(v20) 1 ppm 1,45 (sn, t, J=snz, cx¿c§3), 3,72 (zu, s, 2-H), 4,45 (zu, q, cg2cH3). ,40 (1H, d, J=4nz, 6-H), 5,90 (1n, d, J=4Hz, 7-H), 7,05 (1H, d, J=15Hz, 3-CH), 8,30 (zn, d, J=6Hz, Py-H), 8,95 (2H, d, J=6Hz, Py-H). Åmax (fosfatbuffert, pH 7) i nm (5) 225 (22400), 275 (sh, 16000). 8(n2o) 1 ppm 1,45 (sn, t, J=1nz, cnzcgs), 3,50 (1H, d, J=17Hz, 2-H), 3,75 (1H, d, J=17Hz,- 2-H), 5,38 (1n, d, J=4Hz, 6-H), 5,95 (1H, d, J=4Hz, 7-H), 6,62 (1H, d, J=11Hz, 'Sli-.fïåïzz 'TÉ (ZH, d, J=6Hz, Py=H). " Smp: IR : Q max UV : NMR : Exemgel 25 N ||F'f HZN S//N r,s /- * 5 0/ n :llecu-cn-cnz-Q. ggn: I-38 *E 466 205 7-[2-(amino-1,2,5-tiadiazo1-3-yl)-2-(propen-3-yloxiimino)- acetamidq]-3-[3-(4-karbamoylpyridinio)-1-propenyl]-3-cefem- 4-karboxylat (I-3H) (E-isomer) Till en lösning av 35 mg (0,08 mol) 7-amino-3-[3-(4-karba- moylpyridinio)-1-(E)-propenyl]-3-cefem-4-karboxylat-hydro- klorid i 2 ml av en 50 %-ig vattenlösning av aceton sattes 52 mg 2-[S-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)]-2-(propen-3-yloxi- imino)acetylklorid-hydroklorid (från förberedningsexempel ) och-hlandningen inställdes på pH 6,5-7,0 med 2N natrium- karbonat. Blandningen omrördes 1 timme vid rumstemperatur, surgjordes till pH 2 med 1N klorvätesyra och koncentrerades under reducerat tryck. Aterstoden kromatograferades på en kolonn av HP-20-harts, som eluerades med 300 ml vatten och % CH3OH-H20. De fraktioner som innehöll produkten kombi- nerades ochfindunstades under reducerat tryck. Aterstoden, 73 mg, renades på en kolonn av reversfasbärare, som uttogs ur en PrepPAK-500/C18-kolonn (Waters, 30 ml). Kolonnen elueradesfiiitur+och“ordning*meä*vattenfïâïfimëtanflliålüäfi"I metanol och 20% metanol. De fraktioner som innehöll produk- ten kombinerades och lyofiliserades Éöf erhållande av 26 mg (62%) av den i rubriken angivna produkten I-3H. Smp. 160°C (sönderdelning). 1 IR : v (KBr) i cm- max 3400, 1765, 1680, 1605, 1400.

UV : Amax (fosfatbuffert, pH 7) i nm (6) 226 (24600), 288 (22800).

NMR = s (D20) 1 ppm 3,75 (zu, S, 2-H), 5,41 (1H, a, J=5Hz, 6-H), 5,50 (4H, m, cazn* & cH=cg2), _ ,98 (1H, a, J=5nz, 7-H), 6,20 (1H, m, 3-cn=cg), 7,09 (1H, d, J=17nz, 3-ca). 8,50 (2H, d, J=7nz, Py-H), 9,16 (zu, d, J=7Hz, Py-H).

; Hj? ~coNa- 1-'43 Oil s _ fp” / a* ç/ \- åwøw *s 7-(2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-propargyloxiimino- acetamidQ]-3-[3-(4-karbamoylpyridinio)-1-propenyL]f3-p cefem-4-karboxylat (I-4H) (E-isomer) Till en lösning av 86 mg (0,19 mmol) 7-amino*3-Z3-(4- karbamoylpyridinio)-1-(E)-propenyl]-3-cefem-4-karboxylat- hydroklorid (XXII-H) i 2 ml av en 50 %-ig vattenlösning av aceton sattes 63 mg 2-propargyloxiimino-2-(5-amino- 1,2,4-tiadiazol-3-yl)-acetylklorid-hydroklorid (frân förberedningsexempeL¿26ienSuspensionennhölls;widigHi&¿5= 3, 7,0 med 2N:natríumkarbonaf och omrördes T timme vid rums- temperatur. Reaktionsbíandningen surgjordes till pH 2 med 1N klorvätesyra och koncentrerades i vakuum. Åter- stoden späddes med 30 ml vatten, neutraliserades med natriumvätekarbonat och filtrerades. Filtratet överfördes till toppen av en kolonn, som var packad med reversfas- bärare (30 ml), som hade uttagits ur en PrepPAK-500/18- patron (Waters). Kolonnen eluerades i tur och ordning med vatten, 5% metanol, 10% metanol och 20% metanol. De fraktioner som innehöll produkten kombinerades och lyo- filiserades för erhållande av 13 mg (12%) av den i rub- riken angivna produkten I-4H. Uppskattad renhet 70%.

Smp. 160°C.

IR 0 ma. x (Klar) i cm 1 3400, 2120, 1765, 1680, 1610. zo<' '35 466 205 UV : Ä max (fosfatbuffert, pH 7) i nm (8) 229 (24000) 288 (21200).

NMR : &(D2O) i ppm 3,78 (2H, s, 2-H), 5,15 (2H, d, J=1Hz, -C§2-CEEECH), 5,40 (1H, d, J=5Hz, 6-H)} s,so (zu, m, eg-u*), s,sa <1a, a, J=saz, 7-H), 6,20 (1n, m, 3-cn=cg>, 7,05 (1a, d, J=17H2, 3-Cë), 8,50 (ZH, d, J=7Hz, Py-H), 9,16 (2H, d, J=7Hz, Py-H).

Exemgel 27 _. _ H H coun _ í”s I Û æ \ f" / /\ 3 Nfl\\s cB=cH-cnz-N co 2 í- “_ _ I-sn fr 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-cyk1opentyloxiimino- acetamidq]-3-[3-(4-karbamoylpyridinio)-1-propenyl]-3jcefem- 4-karboxylat (I-SH) (E-isomer) T111 en omröra lösning av 139 mg (o,31 mmol 7-aminø-3-[3- (4-karbamoylpyridinio)-1-propenyi]-3-cefem-4-karboxylat- hydroklorid i 3,5 ml av en 50 %-ig vattenlösning i ett is- kylbad sattes portionsvis 120 mg (0,44 mmol) 2-(5-amino- 1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-cyklopentyloxiiminoacetylklorid- hydroklorid (från förberedningsexempel 27). Blandningen inställdes på pH 6,5-7,0 med 2N natriumkarbonat (0,9 ml) och omrördes 1 timme vid 10°C. Reaktionsblandningen sur- gjordes till pH 2 med 1N HCl och indunstades under reducerat tryck. Återstoden kromatograferades på en kolonn av HP-20- harts (20 mi) och eluerades i tur och ordning med 300 ml vatten och 30% CH3OH-H20. De fraktioner som innehöll pro- dukten kombinerades och koncentrerades i vakuum. Ater- stoden behandlades med 60 ml aceton för erhållande av 111 mg (83%) av den i rubriken angivna föreningen I-SH. 86 466 205 Smp. 160°C (sönderdelning). Uppskattad renhet 70%.

In = vmax_(xßr) cm" 3400, 1770, 1sso, 1605, 1sso.

UV : Ä max (fosfatbuffert, pH 7) i nm (6) 224 (23300), 236 (24aoo>. nun = 8 H brus: fi)rsros d: J=5HZ, O 6-H), 5,30 (zu, m, cn2N*), 5,67 (1n, d-d, J=5Hz & 7Hz, 7-H), 6,20 (1H, m, 3-cH=cg), 7,oa (1H, a, J=17nz, 3-ca), 8,34 (2H, d, J=7Hz, Py-H), 9,11 (2H, d, J=7Hz, Py-H), 9,3s"(1n, d, J=7Hz, ~_ 7-NH), Exempel 28 N CONB ÄIFÉ HZN S/'N \\0CH3 Öâ I-IP *E 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetamidq]- 3-[3-(3-karboximetylpyridipiç)-1fp;qpany;]-§fca§e@f4-karb- ggylat (I-1P) (E-isomer) A. Difenylmetyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-y;)-2- metoxiiminoacetamidq]-3-[3-(3-karbpxtmetylpyridiçio)f1f propenyl]-3-cefem-4-karboxylat (XII-TP, jodId,>E-isomer) Till en suspension av 0,89 g (5 mmol) 3-karboximetylpyridin- hydfoklorid i 10 ml CH2Cl2 sattes 4,97 ml (18 mmol) 1š _ 466 205 N,O-bis(trimetylsilyl)acetamid och blandningen omrördes vid rumstemperatur till dess en klar lösning erhölls. Till lösningen sattes 1,79 g (2,5 mol) IX-1 och blandningen fick stå vid rumstemperatur. Efter 3 timmar tillsattes 3 ml metanol till den kylda blandningen och lösningen indunstades i vakuum för erhållande av en olja, som tri- turerades med etylacetat för erhållande av 2,28 g av den i rubriken angivna föreningen XII-1P som ett brunfärgat pulver. Smp. 161°C (sönderdelning). 1 IR : V --4KBr) i cm- max 1780, 1720, 1675q-á630, 1530, 1385, 1225, 1045, 755, 700. 1% UV : Ä 1 cm max > 295 (188). (c2H5oH) 1 nm (E NMR = 8(DMso + D20) 1 ppm 3,70 (2H, br.s, 2-H), 3,90 (SH, S] OCH3 & Py-cH2c0)¶ 5'25 (3H| m, -en N* a 6-H), 5,92 (1a, a, 2 3#CB=C§šfi,.G;¶GÉÉ1H,UdQWJå16H2šÉ ~ m; Ph-H)f sys-gyo m' Py-H)c B. 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimino- acetamidq]-3-[3-(3-karboximetylpyridiniolf1fpropenyl]f 3-cefem-Åekarboxylàt (I-1Pï E-isomer'“' " ~ En blandning av 2,28 g XII-1P (jodid) och 1,1 g natrium- bisulfit i 10 ml 85 %-ig HCOOH omrördes 2 timmar vid rums- temperatur. Reaktionsblandningen koncentrerades till cirka ml under reducerat tryck. Den oljiga återstoden triture- rades med 100 ml aceton för erhållande av 1,22 g râprodukt, som renades medelst kolonnkromatografi (HP-20, 420 ml) för erhållande av 533 mg av den i rubriken angivna föreningen I-1P (38% utgående från IX-1) som ett blekgult amorft pulver. Smp. 165°C (sönderdelning).

ZQ OO 466 205 In = vmax (Kur) 1 cm" 1770, 1e7o, 1eoo, 1s3o, 1385, 1140, 1o4o. . 1% vv = àmax (fosfatbuffert, pa 6,21 1 nm (E, cm) 234 (374), 277 sk (3901, 290 (402).

NMR = ¿(n2o + NaHco3) 1 ppm 3,78 (za, s, 2-H), 3,92 (23, , Py-cnzcø), 4,22 (an, S, OCH3), 5,40 (1H, Ö, J=4HZ, 6-H), ,44 (zu, a, J=s,snz, -cuz-N*), ,97 (1H, Ö, J=4HZ, 7'H), 6,20 (1H, d-t, J=16 a 6,sHz, 3-cH=cg), 7,08 (1HÅ-Ö, J=16HZ, 3-CH), 8,11 (1H, d-d, J=s 4 7Hz, Py-H5), 8,53 (1H, d, J=8Hz, Py-H4), 8,82 (1H, d, J=7Hz, Py-H6), 8,86 (1H, S, Py-H2). 1 1 1Exenxa1 29w$¿:8,,¿; S _ _ ., N c conz JL Uk fl/ ' 9 ngn sf' ocna ca=ca-cn2-nšï:ï>>-s.CH2c°°H coöa " I-IQ *E z- 7-[?-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidq]-3-[§-(4-karboximeçy1ti9py;¿dipiQ}-¶fp;Qpepy;]-3f cefem-4-karboxylat (I¿1g¿'tEfisømerï'7 1 ' 7 ~ A. Difenylmetyl-7-[ï-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)- 2-metoxiim;noacetamidq]-3-13-(4-karboximetyltio- pyridinio)-l-propenyL]-3fcefçmf§-k§rbçxy}a;_(X;If1Q, jodid, E-isomer zw, 07 466 205 Till en suspension av 0,88 g (S mmol) 4-karboximetyltio- pyridin i 10 ml CH2Cl2 sattes 5 ml (18 mmol) N,O-bis(tri- metylsilyl)-acetamid och blandningen omrördes vid rums- temperatur till dess en klar lösning erhölls. Till lös- ningen sattes 1,79 g (2,5 mmol) IX-1 (E-isomer) och bland- ningen fick stå vid rumstemperatur. Efter 3 timmar sattes 3 ml metanol till den kalla blandningen och lösningen in- dunstades i vakuum för erhållande av en oljig återstod, som triturerades med etylacetat för erhållande av 2,43 g av den i rubriken angivna föreningen XII-1Q (jodid) som ett bruafërgat pulver. Smp. 155°C (sönderdelning). 1 IR : W (KBr) i cm- max 1780, 1720, 1670, 1625, 1525, 1385, 1225, 1115, 1040, 755, 700. 1% uv = ;max (cznson) i nm (E1 Cm ) 312 (299).

NMR = 5(nmso-as + D20) 1 ppm 3,70 (2H,_br.s, 2-H), 3,93 (an, S, ocn31, 5,07 (za, m, M cngfuímt s,z36e1nywaæ6æ:snz,%~ 6-H), 5,90 (1H, 6, J_sHz, 7-H), 6,29 (1H, à, 3-cH=cg), 6,87 (1H, d, J=16Hz, 3-ca), 6,91 (1n, s, cnphz), 1,35 (1oH, m, Ph-H), 7,88 & 8,58 (vardera 2H, d, J=6Hz, Py-H).

B. 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimino- acetamidq7-3-[3-(4-karboximetyltiopyridinio1-1- propenylj-3-cefem-4-karboxylat (I-1QL_(E-isomer) En blandning av 2,43 g av XII-1Q (jodid) och 1,1 g natrium- bisulfit i 10 ml 85 %-ig HCOOH omrördes 2 timmar vid rums- temperatur. Reaktionsblandningen koncentrerades till cirka 5 m1 underrreducerat tryck. Den oljiga återstoden triturerades med 100 ml aceton, filtrerades och torkades för erhållande av 1,39 g râprodukt, som renades medelst kolonnkromatografi 90 466 205 (HP-20, 20 ml) för erhållande av 577 mg av den i rubriken angivna föreningen I-1Q (39% utgående från IX-1) som ett blekgult amorft pulver. Smp. 188°C (sönderdelning).

In = vmax (nar) 1 cm" 1785, 1570, 1825, 1530, 1380, 1110, 1035. uv = Amax (fosfatbuffert, pa 6,2) 1 nm (n]%cm1 234 (4591, 310 (878). _- NMR : 8 (D20 + NaHCO3) i ppm 3,79 (2H, br.s, 2-H), 4,10 (za, S, s-cnz), 4,23 (3n, S, ocH3), 5,25 (zu, a, J=s,5Hz, cnz-N*1, 5,39 (18, 5, J=4,oHz, 8-H1, 5,97 (1H, a, J=4nz, 7-H1, ' 6,18 (18, a-t, J=1s,5nz 8 s,5Hz, 3-cH=cg), 7,05 (15, a, J=15,5 Hz, 3-cm), 7,84 8 8,55 (vardera 2H, d, J=7Hz, Py-H1. 1 EG; Exempel'30 S Ní-fl-fi-ïconu--I/ _ lL\ N 3 . a3c GB N / ngn s/N oca3 OJ'- / cn-ca-cnšu c0ó3 - I-IA' *E/z - 7/1 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amiW-ß-ß- WfPflYlPYrf°li<1ifli9> f?-1.=f.°f>5fl¥1Jf3-°5f5m-4f karboxylat-sulfat (I-TA, sulfat)' ' A. Difenylmety1-7-[?-(5-amino-1;2,4-tiadiazol-3-yl)-2- metoxiiminoacetamidq]-3-13-(1-metylpyrro1idini9)f1- gropenylZ-3-cefem-4-karboxylåt (XII-1A, jodid)' 466 205 Till en kall lösning av 21,5 g (30 mmol) difenylmetyl-7- [2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetamidq7- 3-(3-jod-propenyl)-3-cefem-4-karboxylat (IX-1) (från för- beredningsexempel 14) i 300 ml etylacetat sattes droppvis en lösning av 2,55 g (30 mmol) 1-metylpyrrolidin i 30 ml etylacetat under 1 timme vid -5 till 0°C under omröring.

Efter omröring ytterligare 10 minuter tillvaratogs den erhållna fållningen genom filtrering och tvättades med 200 ml kloroform för erhållande av 23,0 g (95,8%) av den i rubriken angivna föreningen (IX-1A, jodid) med en smp. överstigande 175°C (sönderdelning). - - IR = vmax (xßr) 1 cm'1 3300, 1780, 1730, 1885, 1815.

Uv 1 )ma¿ (cznson) 1 nm (E:%C¿) 218 (435), 295 (188).

B. Difenylmetyl-7-j2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2- f metoxiiminoacetamidq]-3-[3-(1fmetylpyrrolidinio)-lf gropenylZ-3-cefem-4-karboxylat (XII-1A, klorid) 23 g (28,7 mmol) av föreningen XII-1A (jodid) upplöstes i 230 ml av en 1:1-blandning av aceton och metanol och applicerades på en kolonn av Anberlítle: IRA-410 (k1orid- form, 230 ml), som förbehandlades med samma blandlösnings- medel. Kolonnen framkallades med lösningsmedlet och de fraktioner som innehöll den önskade föreningen kombine- rades och koncentrerades till en oljig återstod, som triturerades med 300 ml etylacetat för erhållande av 17,9 g (87,7%) av den i rubriken~angivna föreningen (xx:-1A, kløria) med en smp. av 190°c (sönaerae1n1ng). 1 :R = 0 (ner) 1 cm' 3380, 1780, 1880, 1820.

ITlaX uv = lmax (cznson) 1 nm (E}%cm) 220 (389), 290 (232). 92 466 205 C 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimino- acetam1dq]-3-[3-(1-metylpyrrolidinio)-1-propenyl]-3- cefem-4-karboxylatsulfat (I-1A, sulfat En blandning av 17,8 g (25 mmol) av föreningen XII-1A (klorid) i 178 ml 85 %-ig myrsyra omrördes 2 timmar vid rumstemperatur under kväveatmosfär. Blandningen indunsta- des i vakuum och den ojiga återstoden triturerades med aceton för erhållande av 9,80 g rå I-1A. Koncentrering av filtratet ochacetontvättvätskornagav ytterligare 2,95 g rå I-1A. Två satser av râmaterialet kombinerades _. _ och extraherades med 1 1 respektive 0,5 l 2N klorväte- syra. De kombinerade extrakten adsorberades på en 1,5 l kolonn av Diaion HP-20-harts, som eluerades med vatten och en 30 %-ig vattenlösning av metanol. De önskade frak- tionerna tillvaratogs och indunstades i vakuum till en oljig återstod, som triturerades med 200 ml isopropanol och 200 ml aceton i tur och ordning för erhållande av 7,09 g av ett ljusgult pulver. Detta material (6,80 g) ngEösfiesifivzflhmmävaflmenwæmflw:'7M ï“ kromatografi över fyllningen från en PrepPAK-500/C18-kolonn (90 ml) under användning av vatten och en 10 %-ig vatten- lösning av metanol som elueringsmedel. Eluatet tillvara- togs i 20 ml fraktioner under övervakning medelst HPLC. fimlonn, Nucleocil ssc-ons-zsz, s x 1oo m; 0,01M fosfatbuffert (pH 7,2)/CH3OH = 90:10; detektering, UV (254 nm)]. Fraktionerna 4-10 kombinerades, indunstades under reducerat tryck och lyofiliserades för erhållande 7/1, 70% renhet) Fraktionerna 11-85 upparbetades på samma sätt mobil fas, av 2,28 g av ett gult pulver (E/Z = (sats 1). som beskrivits ovan för erhållande av 3,27 g av ett gult pulver (E/Z = 5/1, 70% renhet) (sats 2). En portion av sats 1 (1,0 g) renades genom återkromatografering på fyll- ningen från en PrepPAK-500/C18-patron (90 ml). Kolonnen eluerades i tur och ordning med vatten och en 5 %-ig vattenlösning av metanol. Det eluat som innehöll den önskade föreningen koncentrerades och lyofiliserades för “afiàääsfiäämæfifiämfikd%dnnä~»1sf 466 205 erhållande 638 mg (E/z = 7/1, 80% renhet) av ett gult pulver. Ytterligare en portion av sats 1 (1,14 g) uppar- betades på samma sätt för erhållande av 880 mg (E/Z = 7/1, 80% renhet) av ett gult pulver. De två renade pro- verna kombinerades och en portion (1,45 g) upplöstes 1 ml 1N svavelsyra. Lösningen späddes med 315 mg aceton under omröring. Den krämiga fällningen tillvaratogs genom filtrering, varvid man erhöll 1,48 g av den i rubriken angivna föreningen (I-1A, sulfat) (E/Z = 7/1, 80% renhet) med en smp. överstigande 185°C (sönderdelning). __ _. __~_ IR = 9 (kar) 1 6m'1 3390, 3ooo, 1165, 1675, 1630, 1535, maX 1390, 1115. ' ' uv = lmax (fosfatbuffert, ps 7 1 1 nm (6) 236 1199009, 291,s“(225oo).

H NMR : $(D2O + NaHCO3) i ppm 2,36 (4H, br.,'N I ), 3,15 2011.., i ~ . 1-¿3nf;,:í'11e,:.163615611; brl, 2-H och ”nl 0 ), 3,63 116, br., 2-H), 4,13 (zu, 6, J=sHz, cnzuï), 4,22 (36, S, ocn3), ,39 (16, 6, J=4,5nz, 6-H), 5,96 (16, 6, J=4,5nz, 1-H), 6,oo 116, m, 3-cn=c§), 6,67 (1/sn, 6, J; 1OHz, 3-CH, cis), 7,04 (7/8H, d, J=16Hz, 3-CH, trans). fQ-.ïi-r , 94 466 205 Exemgel 31 17%., s couu---1/1 »ín / i 57 en-ca-ca:-N(cu3)3 c 3 I-1D *E/2 I 10/1 ._ - 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazolf3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidq]-2-[3-trimetylammonio-1-propenyl]-3-cefem-4- karboxylat (1-1D) i "~ A. Difenylmetyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)- 2-metoxiiminoacetamidQ]-3-(3-trimetylamnoniof1-V grppenyl)-3-cefem-4-karboxylat (XII-TD, jodid) Till en lösning av 13,0 g (19 mmol) difenylmetyl-7-[?- ¿a-aminofwg2amsfimaaïazëxaaæyææfææmeanz2“"' - æamuxkg&#¿~ 3-(3-jodpropenyl)-3-cefem-4-karboxyíat (IX-1, från för- beredningsexempel 10) i 38 ml torrt etylacetat sattes 1,75 ml (19,1 mmol) 1,1N trimetylamin i etylacetat vid -5°C och blandningen omrördes 1 timme vid -5°C. Den er- hållna fällningen avfiltrerades, tvättades väl med CHC1 och torkades för erhållande av 12,5 g (88%) av den i 3 rubriken angivna föreningen (XII-1D) som jodiden. 1 IR : V (KBr) i cm- max 3300, 1765, 1720, 1665. uv zhax (cznson) 1 nm (2) zoo (1s4oo).

B. Difeny1metyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2- met°Xiim¿“9a°etam?d9Z'3T(3Tt??m??Y??mW9“ï9'TfP¥9P?PY1)' 3-cefem44+karbo;y1at'(xIr-fn,'k1ør1d1' <\“ ' 12,5 g av jodiden XII-1D upplöstes i 60 ml metanol-aceton 466 205 (1:1) och fick passera en kolonn av jonbytarharts (IRA-410 (Cl_), 125 ml). Kolonnen eluerades med 300 ml metanol- aceton (1:1) och eluatet indunstades i vakuum och triture- rades med 300 ml isopropyleter för erhållande av 10,4 g (91%) av det "kvaternära saltet (XII-1D, klorid). 1 IR = v (Kax) i cm' 3300, 1765, 1710, 1665. max UV Ämax(C2H5GH) i nm (8) 298 (15100).

C. 7-[2:(5:amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimino- acetamidqj-3-[3-trimetylammonio-1-propenyl]-3-cefem- 4-karboxylat (I-1D, sulfat, E-isomer) En lösning av 10,4 g (16,0 mmol) XII-1D (klorid) i 20,8 ml 85 %-ig myrsyra-fick stå 3 timmar vid rumstemperatur och koncentrerades i vakuum. Aterstoden behandlades med 210 ml isopropanol och fällningen avfiltrerades. Det fasta materia- let (10,1 9) triturerades med 210 ml vatten och neutrali- seradesfmedmnatrinmbikarbonatm Suspensionenaamfiiltnfiäadesm och filtratet kromatograferadës pâ'en*koTdnn'av“HP=20”“ß (300 ml), som eluerades i tur och~ordning med 1000 ml vatten, 200 ml 10 %-ig metanol och 150 ml 30 %-ig metanol.

De fraktioner som innehöll den önskade produkten kombine- rades och koncentrerades under reducerat tryck. Aterstoden renades medelst reversfaskromatografi- Kolonnen packades med fyllningen från en PrepPAK-500/C18-kolonn, (Waters, 200 ml). Eluering i tur och ordning med 600 ml vatten och 200 ml 30 %-ig metanol, följt av koncentrering av de frak- tioner som innehöll den önskade produkten, gav 2,52 g (18%) av den i rubriken angivna föreningen. En lösning av zwitterjonprodukten (1,5 g) i 5 ml 1N svavelsyra sattes portionsvis till 300 ml aceton och den erhållna fällningen _ filtrerades och torkades. Utbytet av I-1D-sulfat var 1,42 g (80%). Förhållande E/Z var approximativt 10/1 räknat på HPLC. 96 466 205 Ia = vmax (nar) 1 cm'1 saso, 1765, 1665. uv = ämax (fosfatbuffert, pa 1), 1 um (¿)¿237 (19soo), 293 (224oo).

MR = 8(D2o) 1 ppm 3,25 (sn, S, N*-CH3), 3,94 (zu, S, 2-H), 4,14 (za, d, J=7az, cn2N*), 4,23 (sn, s, o-CH3), 5,42 (1n, d, J=4,sHz, 6-H), e,oø (1u, a, J=4,sHz, 7-H), 6,23 (1H, d-t-r J=7 s. 16Hz, 3-CH=C§), 7,23 T- ,. (1n, a, J=1sHz, 3-cn).

Exempel 32 _ ' ' _ S lï;?-TT-E CONH- | N * G9 /"“'" 1' H- H - I/ \ ngn s,,N \\°cH3 _ 0/ en-c c 2 N __ connz C _, '-7 .

I. 7-[Q-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidq]-3-[3-(4-karbamoylpyridinio)f1fpropenyL7f3-oefemf§- karboxylat (I-1H, E-isomer) " * * 'f Till en blandning av 397 mg (1 mmol) 7-amino-3-[3-(4- karbamoy1pyridinio)-1-(E)fpropenyl/-3-cefem-4-karboxylsyra- hydroklorid (XXII-H) och 168 mq (2 mmol) natriumbikarbonat i vattenhaltig DMF (3,5 ml vatten och 7,5 ml DMF) sattes 479 mg (1,5 mmol) bensotriazo1-1-yl-2-(5-amino-1,2,4- tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetat (frân förberednings- exempel 28). Blandningen omrördes 3,5 timmar vid rumstempera- tur. Reaktionsblandningen inställdes på pH 3-4 med 3N HCl och späddes med 200 ml aceton för erhållande av en fällning, som tillvaratogs genom filtrering. Râprodukten upplöstes i en liten volym vattenhaltig THF ochflösningen inställdes på pH 6,8 med natriumvätekarbonat, behandlades 466 205 med avfärgande kol, koncentrerades till cirka 1 ml och försattes med groddkristaller av kristallin I-1H. Efter omröring över natten tillvaratogs den kristallin fäll- ningen genom filtrering för erhållande av den i rubriken angivna föreningen I-1H (zwitterjonform). Utbyte 83 mg ' (16%). smp. överstigande 1ss°c (sönasraslning). Fysikalisk/ kemiska data för denna produkt var identiska med de för föreningen enligt exempel 10.

Förberedningsexempel 1 Defenylmetyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxi- iminoacetamidqZ:3-klormetyl-3-cefem-4-karoboxylat (IV-1) Till en omrörd suspension av 2;1 g (10 mmol) 2-(5-amino- 1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoättiksyra (III-1) i so m1 torr cH2c12 sattes 2,09 g (10 mmol) Pc15 vid -3o°c och blandningen omrördes 20 minuter vid från -15 till -20°C.

Till ovan angivna syrakloridlösning sattes en lösning av #s&sq¶@ïGnmhfi*dfflanyímafiyiëütaminohíäkïormtglfißéodfiehëånav 4-karboxylatfhydroklorid (II) i 50 ml CH2Cl2, som innehöll g (É0_mmol) N,O-bis-(trimetylsilyl)acetamid, vid -30°C.

Efter omröring 1 timme vid -10°C, koncentrerades blandningen för avlägsnande av CH2Cl2 och späddes med 200 ml etylacetat.

Blandningen tvättades i tur och ordning med 2 x 40 ml av en 10 %-ig vattenlösning av natriumvätekarbonat, 2 x 20 ml vatten och 10 ml saltlösning och torkades över magnesium- sulfat. Lösningsmedlet avdrevs i vakuum och den erhållna oljiga återstoden (10 g) upplöstes i 20 ml CHCI3 och kromatograferades på en silikagelkolonn (Wako-gel C-200, 100 g innehållande 10 ml 1/1,5 M fosfatbuffert pH 7) under användning av 1 - 3 % metanol-CHCl3. De fraktioner som innehöll den i rubriken angivna föreningen indunstades för erhållande av 5,7 g (95%) av IV-1 som ett gult amorft pulver. Smp. överstigande 140°C (sönderdelning).

Züäg JO 466 205 In = våg: cm°1 33oo, 1780, 1720, 1630, 1620. uv zššïflnm 1:) 245 (1800), zso (9900). nun = 8:gâ°'ds 3,53 (za, Asq, 2-uy, 3,94 (3H, S, ocg3), 4,42 (2H, S, 3-CH2), 5,22 (1H, d, J=4,5, 6-H)y d-d; J=4ps & 6; 7-H)' (1HI s! m| Ph_H)| 8'1 (2H, br-s, NH2), 9,58g(1H, d, J=6, 7-NH).

Förberedningsexempel 2 Difenylmetyl-7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadia;olf3fyl)f2f_ __ __ metoxiiminoacetamidgZ-3-jodmetyl-3-cefem-4flkarboxylat (V-1) En blandning av 5,7 g (9,5 mmol) av IV-1 från förberednings- exempel 1 och 4,3 g (29 mmol) Nal i 50 ml torr aceton om- rördes 5 minuter vid rumstemperatur. Blandningen koncent- rerades under reducerat tryck och den erhållna oljan skakades med en blandning av 100 ml etylacetat och 10 ml vatten-l, , '_ -, nanm-tatt;-.,:segareradaatvochsflftuättadeasnzrz-"f i tur och ordning med 1W“%=ígE (vikt/voIymT”natrïumtío* sulfat och saltlösning. Efter torkning avlägsnades etyl- acetatet i vakuum, varvid man erhöll 6,1 g (93%) av den i rubriken angivna föreningen (V-1) som ett gult amorft pulver med en smältpunkt överstigande 120°C (sönderdelç ning).

IR : Väg: cm_1 Et0H UV . Ämax nm 3300, 1780, 1725, 1680, 1620. (8) 245 (17000), 282 (12000). nun = 6§:â°'de 3,72 (zu, Aßq, 2-H1, 3,94 (an, S, ocn3), 4,23 (za, S, 3-cn21, 5,21 (1n, a, J=4,s, 6-H), s,s9 (1H, a-a, J=4,s a 6, 7-H), 6,94 (1H, s, cgpnz), 7,35 (1oH, m, Ph-H), 8,12 (zHy br-sy d; J=6f 7-NH)n zw 466 205 Förberedningsexempel 3 Difeny1metyl-7-[2-(5-amino-1,2,4#tiadiazol-3-yl)-2- metoxiiminoacetamidq]-3-trifenylfosfoniometyl-3-cefem- 4-karboxylatjodid (VI-1) ' _ En blandning av 690 mg (1 mmol) av V-1 från förberednings- exempel 2 och 786 mg (3 mmol) trifenylfosfin i 20 ml etyl- acetat omrördes vid rumstempratur över natten. Det fasta material som utföll tillvaratogs, tvättades med 2 x 10 ml etylacetat och-torkades, varvid man erhöll 959 mg (100%) av fosfoniomjodiden VI-1. Smp. 186°C (sönderdelning).

IR = 0:2: cm'1 3300, 1700, 1710, 1580, 1510.

Uv = Ešïfinm (g) 268 (150oo), 275 (13000), 300 (7300).

NMR = Sëšâ°'ds 3,52 (zn, br-s, zu), 3,94 (sn, s, ocg3), ,34 (1H, a, J=4,5f"s-H), 5,9 (1n, m, 7-H), 61,1 337%? -Mïufvm-*í-Sfršfí “iJLf-ïfiï »(* 1- GEif«:f"IIfï-JI:MÉihífwïkâíg; (".T=5íïI-I”,*ï:~.e=ï*j:*~°“ m, Ph-H).

Förberedningsexempel 4 Difenylmetyl-7-j?-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxi- imilwawetamiêfl-3-flfilfifsvylfßfirêflyliëefl? Ivetlrl-Zfßfeefism- 4-karboxylat (VII-1) ' *i ~ “ ' ' “ En blandning av 952 mg (1 mmol) av VI-1 från förberednings- exempel 3, 500 mg Nnæuiiür IRA-410 (0H_-form) och 4 ml 1N natriumhydroxid i 10 ml CH2Cl2 omrördes 1 timme vid rums- temperatur. Blandningen filtrerades och det separerade _ organiska skiktet torkades över magnesiumsulfat och koncente rerades under reducerat tryck. Den erhållna oljan triturera- des med etylacetat och den erhållna gula fällningen till- varatogs genom filtrering för erhållande av 740 mg {90%) av den i rubriken angivna föreningen VII-1. Smp. överstigande 180°C (sönderdelning). 100 466 2Û5 In = våg: cm'1 3400, 1750, 1630. ston uv kmax pm (6) 268 112000), 276 110000), 384 123000).

Förberedningsexempel 5 Difenylmetylf7-[ï-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxi- iminoacetamidq]-3-(3-klor-1-propen-1-yl)-3-cefem-4-karboxyf_ lat (VIII-1) 8 -Till en lösning av 6,9 g (8,4 mol) VII-1 från förberednings- exempel 4 sattes 3 g magnesiumsulfat och 810 mg (8,4 mmol) 40 %-ig kloracetaldehyd. Blandningen omrördes 1,5 timmar vid rumstemperatur och filtrerades därefter. Filtratet eluerades på silikagel (Wakogel C-200, 100 g innehållande ml 1/1,5 M fosfatbuffert) under;användning av CHC13 och CHCl3 innehållande metanol. De fraktioner som innehöll den önskade produkten (0,5-1% metanol-CHCI3) indunstades i vakuum för erhållande av 1,6 g (30%) av den i rubriken an- “ï,«;mwmæ@fiöénángænäflïfiïfiwïsameefifimgufiäamdæfi&ä@m@we:ä%som%W< var en blandning av Z- och E-isomererna med avseende på klorpropenylgruppen (Z/E=2/1 enligt NMR). Smp. överstigande 130°C (sönderdelning).

IR = väg: cm'1 3300, 1780, 1725, 1680, 1620.

Uv = lšågfi max (8) 240 120000), 286 112000). nun = ¿§gâ°'d6*°2° 3,56 6 3,8 (m, 2-3), 3,94 (3H, S, 0cH3), 4,16 (a, J=7,s,6cg2c1),'s,26 (13, a, J=4,s, 6-H), 5,87 (1n, 0, J=4,s, 1-3), 6,28 (2/3n, a, J=11, 3-og cis-H), 6,72 (1/3H, d, J=16, 3-Cg trans-H), §,81 (2/3H, S, cgphz), 6,92 (1/3n, S, cgpnz), 7,4 (10H, m, Ph-H). ": 466 205 Eärberedningsexempel 6 Difenylmetyl-7-bensy1idenamino-3-Åltrifenylfosforanyli- den)mety;-3-cefem-4-karboxylat (XVI) Till en lösning av 60 g (70 mmol) difenylmetyl-7-bensyli- denamino-3-[Ttrifenylfosfonio)metyl]-3-cefem-4-karboxylat- jaa-la (xv) [framställa naaalsf förfarandet enligt aan publicerade japanska patentansökningen (Kokai) 56-86187 (7/31/81L7 i 350 ml CHZCI2 sattes 140 ml 1N natriumhydr- axla och asfg :mbafllfa :RA-mo (onïfnrm) via s°c. slana- ningen omrördes 1 timme vid 5°C och filtrerades. Det or- ganiska skiktet separerades, torkades över magnesiumsulfat, koncentrerades till en volym av cirka 100 ml och utfälldes med 500 ml etylacetat. Det erhållna gula fasta materialet tillvaratogs genom filtrering och torkades i vakuum för erhållande 48 g (94%) av denïi rubriken angivna föreningen XVI med en smp. av 195-198°C (sönderdelning). \._~.= f, V z -y-TÉ ~ 1 flxïfln, , i:"__-=::"1ï-;: l:1æ_~...:~ _ 171e~:;..-.1s2:e. _ Förberedningsexempel 7 DifeflylmefivlfV-bensylidsflamiflëfßf i 3f1$1?=.=-TfP1F°PsI=-? fYU - . 3~cefem-4-karboxylat'(XVII)' " * 0* "'^w"' '“' Till en omrörd lösning av 2,9 g (4 mmol) XVI från för- beredningsexempel 6 i en blandning av 40 ml_CH2Cl2 och ml vatten sattes 800 mg vattenfri kloracetaldehyd vid rumstemperatur. Till blandningen sattes ytterligare 800 mg kloracetaldehyd i tre portioner under en tidsrymd av 1 timme medan blandningens pH-värde hölls mellan 6 och 9 genom tillsats av 1N natriumhydroxid. Efter 15 minuter avlägsnades vattenskiktet och det organiska skiktet torka- des över magnesiumsulfat. Avdrivning av lösningsmedlet gav en röd olja, som upplöstes i 80 ml av en 1:2-blandning av etylacetat och isopropyleter. Lösningen tvättades i IDG 466 205 tur och ordning med 10 ml av en mättad vattenlösning av natriumvätekarbonat och 10 ml vatten. Efter torkning över magnesiumsulfat gav avlägsnande av lösningsmedlet 3,3 g av en gul olja. En lösning av oljan 1 50 ml CHZCI2 filtre- rades med hjälp av silikagel (12 g, Wakogel C-200) inne- hållande 1/1,5 M fosfatbuffert (1,2 ml, pH 6,4) och silika- gelen tvättades med 50 ml CH2Cl2. Filtratet och tvätt- vätskorna kombinerades och indunstades till torrhet. Åter- stoden triturerades med n-hexan för erhållande av 1,7 g (80%) av den i rubriken angivna föreningen (XVII) som ett gult pulver. NMR-spektrum visade att klorpropenylgruppen hade Z-konfiguration. Smp. överstigande 50°C (sönderdelning).

IR = u:§:cm'1 34oø, 1775, 1720, 1630. ston Uv = kmax nm (s) 253 (11ooo), 258 (11ooo), 265 (1ooo0), 273 (8300), 281 (vooo), 290 (6300). una = 6:§â°'ds 3,63 (za) br-s, 2-H)) 4,0 (za, m, cgz-cl), S-rßláfizvårif Infyjg. fdvj- _,_ - J=4;5, 7-Ha;-S727*fwn7*a$fJaTm;*3=cHm;= 6,85 (1H7 s, C§Ph2),°7,33 (10H, m, Ph-H).

Framställning av vattenfriklgracetaldehvd Vattenfri kalciumklorid sattes till en kyld lösning av 50 ml av en 50 %-ig vattenlösning av kloracetaldehyd under omröring i syfte att separera den i tvâ skikt.

Kloracetaldehydhydratskiktet(1)(det övre skiktet) separe- rades och späddes med 100 ml CHC13, blandades med 20 g magnesiumsulfat, upphettades till âterflöde under 5 minu- ter och filtrerades. Lösningsmedlet och vattnet avlägs- nades azeotropiskt (kokpunkt 56-64°C) (2) destillerades för erhållande av vattenfri kloracetaldehyd (3), kokpunkt 70-s2°c/vso mm. och återstoden Zür '.'trimeæylammoniumkïonidhydïazf- IVJ 466 205 ufilmc -1 max m 1720.

IR : (1) R.P. Kurkjy, E. V. Brown, J. Amer.-Chem. Soc., lå, 5778 (1952). (2) S. Trippett, D. M. Walker, J. Chem. Søc., 1961 1266. (3) H. O. House, V. K. Jones, G. A. Frank, J. Org, Chem., 22, 3327 (1964).

Förberedningsexempel 8 Difenylmetyl-7-amino-3-(3-klor-1jpropen-1-yl)f3-cefem-4- karboxylat (RVIII) En lösning av 180 mg (0,34 mmol) XVII från förberednings- exempel_7 i 10 ml etylacetat sattes till en lösning av 251 mg (1,5 mmol) Girard reagens T Zïkarboximetyll- 0,25 m1 ättiksyra vid s°c. efter omröring 30 minuter vid °C koncentrerades blandningen för avlägsnande av metano- len och 20 ml etylacetat tillsattes därefter. Etylacetat- lösningen tvättades i tur och ordning med 2 x 5 ml vatten, ml av en mättad vattenlösning av natriumvätekarbonat och ml saltlösning och torkades över magnesiumsulfat. Av- drivning av lösningsmedlet gav 145 mg (97%) av den i rhb- riken angivna föreningen XVIII (Z-isomer) som ett gult pulver. Smp. överstigande 100°C- (sönderdelning).

KB: -1 In = vmax cm 3400, 1170, 1720. uv = lâšgfl nm (E) 252 (3700), zss (3800), 260 (4000), 274 (4000)1 285 (4000). Ädnqnæmnncsšoninneænræfiaëßri 104 466 205 Förberedningsexempel 9 Difenylmetyl-7-[ï-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxi- iminoacetamidq]-3-(3-klor-1-propen-1-yl)-3-cefem-4- karboxylat (VIII-1) En blandning av 10,1 g (50 mmol) 2-(5-amino-1,2,4-tiadia- zol-3-yl)-2-metoxiiminoättiksyra (III-1) och 10,! g (50 mmoi) Pc15 i 1oo m1 torr cn2c12 omröraes vid -7 till -1s°c under 2 timmar. Den klara lösningen hälldes i 500 ml n-hexan för erhållande av en fällning. Det organiska_skiktet kasse- rades genom dekantering och det kvarvarande fasta materialet triturerades med 100 ml n-hexan. Den gula fällningen till- varatogs genom filtrering och torkades i vakuum för er- hållande av 12,5'g (99%) av syrakloriden med en smp. av so°c zsönderaelning).

IR_ : vå:í°1 çm_1 1770. f (zü-.êfiz-f-f-xnnolm-.xffif axnflff; .safihas-fizänilkflšëèfiàemallsäsniuqåß i av 44 mg (0,1 mmol) av XVIII (Z-isomer) från förberednings- exempel 8 i 5 ml torr CH2Cl2 vid rumstemperatur under om- röring. Efter 30 minuter koncentrerades blandningen under reducerat tryck och späddes med 20 ml etylacetat och 5 ml av en mättad vattenlösning av natriumvätekarbonat. Det organiska skiktet tvättades med 5 ml av en mättad vatten- lösning av natriumvätekarbonat, 5 ml saltlösning, 5 ml %-ig saltsyra och 5 ml saltlösning. Lösningsmedlet torkades över magnesiumsulfat och lösningen indunstades till torrhet för erhållande av produkten som ett gult skum. Skummet renades medelst silikagelkolonnkromatografi (Wakogel C-200, 1 g innehållande 0,1 ml 1/1,5 M fosfat- buffert pH 6,4) genom eluering med en 100:1-blandning av CH2Cl2 och metanol för erhållande av 31 mg (50%) av den i rubriken angivna föreningen VIII-1 (Z-ísomer) som ett gult pulver. Smp. överstigande 150°C (sönderdelning). 2Qh”” IUU 466 205 IR = VKBI cm'1 max 3400, 1775, 1720, 1675, 1630. uv = )fi:§H mm (e) 240 (17ooo), zso (1oooo).

NMR : SDMSO-d 6 3,6 (2H, m, 2-H), 3,92 (3H, s, O-CH3), ppm 4,0 (2H, m, C§2Cl), 5,27 (ZH, m, 6-H g 3-CH=C§), 5,83 (1H, d-d, J=4,5 & 10, 7-H), 6,25 (1H, d, J=11, 3-Cfi), 6,83 (1H, s, C§Ph2), 7,33 (10H, m, Ph-B), 8,0 (2H, br-s, NH2), 9,57 (1H, d, J=10, 7-NH). 1 Förberedningsexempel 10 Difenylmetyl-7-[?-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxi- iminoacetamidq]-3-(3-jod-1-propen-1-yl)-3-cefemfd-karöoxylat (Ix-1) - ' ' ' ' ~ ~ Ö» En lösning av 480 mg (0,77 mmol) VIII-1 från förberednings- exempel 5 (Z/E = 2/1) i 10 ml torr aceton innehållande 346 mg342ä3ïmmolk?HáIaamföräesg3G$máflm$en%wh&flmm§Å fl ,f V* temperatur. Reaktionsblandningen indunstades under redu- cerat tryck. Den erhållna oljan fördelades mellan 50 ml etylacetat och 10 ml vatten. Det övre skiktet tvättades i tur och ordning med 10 ml av en 10 %-ig (vikt/volym) vattenlösning av natriumtiosulfat och 10 ml saltlösning och torkades över magnesiumsulfat. Avdrivning av lösnings- medlet gav 540 mg (98%) av den i rubriken angivna föreningen IX-1 (Z/E = 1/1) som ett rödaktigt amorft fast material med en smpl överstigande 120°C (sönderdelning).

KBr -1 IR : V cm max 3300, 1780, 1720, 1680, 1620.

Uv = Ašâïfi cm'1 1:) 240 (21ooo), 290 (12ooo).

;D“s°'D2° 3,67 (za, m, 2-H), 5,29 (1H, a, J=4,s, ppm 6-H), 5,95 (1H, a, J=4,5, 7-n), 6,27 (1/zu, a, J=11, 3-cn cis), 6,72 (1/zu, d, J=16, 3fCH trans), 6,87 a 6,96 (vardera 1/zn, s, cgphz), 7,4 (1oH, m, Ph-H).

NMR : ' ZOTÄ 106 466 205 Förberedningsexempel 11 01feny1mety1-7-¿2-(5-amino-1,2,4-tiaalazoi-3-y1)-2-met0x1- iminoacetamidq]-3-(3-jod-1-propen-1-yl)-3-cefem-4-karboxylat (Ix-1) En blandning av 5,6 g (9 mmol) VIII-1 (Z-isomer) från för- beredningsexempel 9 och 4 g (27 mmol) NaI i 100 ml torr aceton omrördes 1,5 timmar vid rumstemperatur. Blandningen indunstades och den resterande oljan späddes med 90 ml etylacetat.~Etylacetatskiktet tvättades med-10 ml av en %-ig (vikt/volym) vattenlösning av natriumtiosulfat och 10 ml vatten. Avlägsnande av det över magnesiumsulfat torkade lösningsmedlet.gav en gül olja, som solidifierade' genom triturering med isopropyleter. Filtrering av fäll- ningen gav 4,3 g (67%) av den i rubriken angivna före- ningen IX-1 som E-isomer. Smp. överstigande 165°C (sönder- delning). -zxf«=» všššïcmšßraámæigmvaangfizzsæ¿1e00000æmæfi0.50 uv = fišgfl nn (2) 240 110000), 297 411000). nun = æ°“S°'ds*°2° 3,90 (an, s, ocH3), 5,25 (1n, m, 6-H), ppm 5,95 (1n, m, 7-H), 5,7; (0, J=1s, 3-en trans)) s; m] Förberedningsexempel 12 Beflshydrvl-*amiflv-ßffßfklw-1fvvéPev-PYU-êflešelflflf karboxylat (Z-isomerï'(XVIIIï *""""^ 0 ' Förening XVIII är den gemensamma mellanprodukt som utnyttjas i reaktionsschema 1b och 1c.

ZUÛ" 466 205 A. Benshydrv1-7-bensylidenamino-3-trifenylfosfoniomety1-3- cefem-4-karboxylatklorid (XV) Till en suspension av 200 g (0,44 mol) benshydryl-7-amino- 3-klormetyl-3-cefem-4-karboxylathydroklorid (II-hydroklorid) i 940 ml CH2Cl2 sattes 440 ml 1N natriumhydroxid vid rums- temperatur. Blandningen skakades 10 minuter och det orga- niska skiktet separerades. Till det organiska skiktet sattes 75 g magnesiumsulfat och 51 g (0,48 mol) bensalde- hyd och blandningen fick stå 3 timmar. Reaktionsblandningen filtrerades och det olösliga materialet tvättades med 200 ml CH2C12. Kombinationen av filtrat och tvättvätskor för- sattes med 126 g (0,48 mol) trifenylfosfin. Blandningen koncentrerades till en volym av cirka 400 ml och fick stå 4 dagar. Den erhållna viskösa oljan späddes med 1 l etyl- acetat och triturerades för separation av den i rubriken angivna föreningen XV som ett blekgult kristallint pulver, som tillvaratogs genom filtrering och torkades i vakuum._ utbyte 322 g (96%). smp, 185-19o°c (sönaeraelning).

IR = väg: ¿m*T"17so, 1720, 1630. uv = låššclz nn (2) zso (241oo).

B. Benshydryl-7-bensylidenamino-3-[Xtrifenylfosforanyliden)- meçyij-3-cefem-4-karboxylat' En blandning av 322 g (0,42 mol) XV och 252 ml SN natrium-, karbonat i 1,63, CH2Cl2 omrördes kraftigt under 15 minuter vid rumstemperatur. Det organiska skiktet separerades, torkades över magnesiumsulfat och koncentrerades till en volym av cirka 500 ml. Koncentratet sattes till 1 l aceton under omröring för erhållande av ett ljusgult kristallint pulver, som tillvaratogs genom.filtrering, vad vid man er- höll 237 g (18%) av xv1 maa en amp. av 195-19s°c (sönder- delning). 108 466 205 In = ešfiš cm'1 1770, 1620. uv šššclz nm (s) 254 (zsooo), 389 (zzooo). nun = ;°°°13 2,56 a 3,16 (za, Ang), s,oo (1n, a, J=4 Hz), PPIH 5,23 (111, d. J=4 H2), 5,47 HH, ä, J=22 H2). 6995 5)! 7I2-7I8 m)f 5): C. Benshydryl-7-amino-3-Åklor-1-propen-1-yl]-3-cefem-4- karboxylat-hydroklorid (Z-isomer)~(XVIII-hydrokloridï Till enåtíoppskdcande lösning av 214 g (0,294 mol) XVI och 40 ml (0,15 mol) N,O-bis-(trimetylsily1)acetamid i 2,9 1 torr CH2Cl2 sattes droppvis under omröring 93 g (0,59 mol) av en 50 %-ig lösning av kloracetaldehyd i CHCI3 under en tidsrymd av 15 minuter. Efter det att blandningen hade fått stå 30 minuter koncentrerades den till torrhet.

Till den resterande oljan sattes 1,5 l CH2Cl2, 99 g (0,59 mol) Girard reagens.T.och 300 ml av en 10 %-ig vatten- f I a» .. Lösning-_,avfasaßïftsfifizfaäidctízi* 'iíë-í rumstemperatur. Det organiska skiktet tvättades med 200 ml vatten och med 200 ml av en mättad natriumkloridlösning, torkades över magnesiumsulfat, behandlades med 5 g träkol och filtrerades. Filtratet kyldes till -10°C och behandla- des med 300 ml 1N klorvätesyra i metanol. Blandningen om- rördes 30 minuter vid rumstemperatur och koncentrerades till en volym av cirka 300 ml. Koncentratet späddes med 400 ml etylacetat och försattes med groddkristaller av XVIII-hydroklorid. Efter 2 timmar tillvaratogs de av- skilda kristallerna genom filtrering, tvättades med 200 ml etylacetat och torkades i vakhum'för erhållande av 74 g (53%) av den i rubriken angivna föreningen XVIII som dess hydroklorid med en smp..överstigande 185°C (sönderdelning).

-Blekgula nålar.

IR :_ VKBI cm_1 max 2830, 1780, 1720. 2 466 205 UV : aâšï" nm (a) :es (aaoo). nun = 6DMÉ°'de 3,73 (an, br, s, z-m, 3,97 (za, m, cgzcn, ppm 5,22 (1H, d, J=4,5 Hz, 6-H), 5,37 (1H, d, J=4,s Hz, v-H), 5,77 (m, m, 3-cn=cg>, 6,45 (m, a, J=11Hz, s-cg), 6,88 (m, s, cgphz), 7133 br] s] Ph-g)n Analys beräknat för C23H21N2O3SC1'HCl: C, 57,87; H, 4,65; N, 5,87; S, 6,72; Cl, 14,85. - C, 57,62; H, 4,53; N, 5,70; S, 6,64; Cl, 14,80.

Funnet: Förberedningsexempel 13 Benshydryl17-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxi- iminoacetamidqjf3-[3:klor-1-propen-1-yl]-3fcefemf4-karboxy- c-zf-fisomenrvfaa(vrm-rnr» Till en omrörd lösningiav 20 g (42 mmol) XVIII (Z-isomer) i 420 ml CH2Cl2 innehållande 34 ml (125 mmol) N,0-bis- trimetylsilyl)acetamid sattes 15,2 g (59 mmol) 2-(5-amino- 1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetylklorid-hydroklorid i 3 portioner under en tidsrymd av 30 minuter vid från -10 till OOC. Blandningen omrördes 30 minuter vid 0-5°C och koncentrerades under reducerat tryck. Den resterande bruna oljan upplöstes i 420 ml etylacetat och lösningen tvättades i tur och ordning med 3 x 15 ml av en mättad vattenlösning av natriumvätekarbonat, 15 ml av en mättad vattenlösning av natriumklorid, 15 ml 10 %-ig saltsyra och 15 ml av en mättad vattenlösning av natriumklorid och koncentrerades till en volym av cirka 50 ml. Till koncentra- tet sattes 200 ml n-heptan för erhållande av 28,5 g (90%“ renhet) av den i rubriken angivna föreningen VIII-1 (Z- isomer) som ett färglöst pulver. Smp. överstigande 150°C (sönderdelning). 110 466 205 In = HKB* cm'1 3400, 1760, 1720, 1660, 1620. max av AEt°H um (6) 240 (200o0),2s3 (1zo00). lfl-BX A nun = ¿a°°t°“'d6 3,6 (za, m, 2-H), 3,96 (sn, S, ocg3), ppm 4,0 (2H, m, C§2C1), 5,32 (1H, d, J=4,5 Hz, 6-H), 5,62 (1H, m, 3eCH~C§), 6,03 (1H, d, J=4,5 Hz, 7-H), 6,32 (1H, d, J=11 Hz, 3-CH), 6,87 (1H, s, cgphz), 7,33 (10H, br, s, Ph-H).

Förberedningsexempel 14 Benshydryl-7-[2-(5-amino-1,2,4ftiadiazol-3-yl)-2-metoxi- iminoacetamidQ]-3-[ä-jod-1-propen-1-yl]-3-cefemf§-karboxy- lat (E-isomer) (IX-1) " ' En blandning av 28,5 g (90% renhet) av VIII-1 (Z-isomer) och 19 g natriumjodid i 420 ml torr aceton omrördes 10 minuterævidänumstempegaturmqchfifïgkfistääëäflåmmamflvidëäߧC;@;fl~ Blandningen koncentrerades under reducerat tryck. Till åter- stodenâsattes 420 ml etylacetat och 30 ml av en 10%-ig (vikt/volym) vattenlösning av natriumtiosulfat och bland- ningen skakades. Det organiska skiktet tvättades med 30 ml vatten, torkades över magnesiumsulfat och indunstades till en volym av cirka 50 ml. Koncentratet späddes med 200 ml n-heptan för erhållande av 30,6 g(95% renhet) av den i rubriken angivna föreningen IX-1 (E-isomer) som ett gult pulver med en smp. överstigande 120°C (sönderdelning).

In = väg: cm'1 3400, 1760, 1725, 1660, 1620.

Uv = Aššgfl nm (6) 306 (1so00). una = 3a°et°“”d6 3,71 (zu, m, 2-H), 3,97 (sn, S, ocg3), ppm 4,0 (za, 6, J=s Hz, cgzx), 5,26 (10, a, J=4|5 6-H)' d-d' J=4|5 a Zflsß 466 205 8 Hz, ändradestill dublett J=4,5 Hz med D20, 7-H), 6,32 (1H; d-tp i 8 Hz; 3_CH=C_E)| d) Hz; s' m] br, s, försvann med D20, Ngz), 8,52 (1H, d, J=8 Hz, för- svann med DZO, 7-Ng).

Förberedningsexempel 15 Benshydryl-7-[É-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimino- acetamidQ]-3-[3-(4-karbamoyl-1-pyridinio)-1-propen-1-yl]-3- cefem-4-karboxylat-jodid (E-isomer) (XII-1H) Ü' Till en suspension av 30,5 g IX-1 (E-isomer) och 26 g (212 mmol) isonikotinamid och 120 ml CHBCN sattes 100 ml CH30H till dess blandningen blev klar. Lösningen omrördes 2 timmar under kväveatmosfär vid rumstemperatur och kon- centrerades till cirka 100 ml under reducerat tryck. Det resterande halvfasta materialet triturerades med 200 ml isopropyleter. Lösningsmedlet avlägsnades genom dekate- ringgochndetrresteandewgulalpulvretntvättadesnmedmilflpml av en*3 :f1~blandning av isopropylétër”och metanol: Pulvret“ tillvaratogs genom filtrering och torkades i vakuum för erhållande av 36 g (75% renhet uppskattat genom HPLC) av den i rubriken angivna föreningen XII-1H (E-isomer) som ett ljusgult pulver med en smp. överstigande 150°C (sönderdelning)..

IR UV NMR ' VKBI max cm Et0H ax PPm '1 3300, 1780, 1720, 1680, 1620. 1% nm (E1 cm) 282 (170). 6 3,72 (zn, m, z-H), 3,90 (an, s, ocg3), ,25 (an, m, 6-H a cg2n*), 5,9 (1n, d-a, J=4,5 & 8 Hz, ändrades till en dubléttt J=4,5 Hz vid D20 tillsats, 7-H), 6,35 (1H, m, 3-CH=C§), 6,89 (m, s, cgPhz), 6,9 (m, s, J=16 Hz, s-cg), 7,35 (1011, m, Ph-H), fr. . 466 205 8,06 (2H, br, s, försvann vid D20, Ngz), 8,21 (2H, br, s, försvann vid D20 - tillsats, NH2), 8,36 & 9,07 (vardera 2H, d, J=6 Hz, Py-H), 9,57 (1H, d, J=8 Hz, försvann vid D20 - tillsats, 7-NH).

Förberedningsexempel 16 Benshydryl-7-bensylidenamino-3-(3-klor-1-propen-1-yl]-3- cefem-4-karboxylat (XVII) (Z-isomer) Till en iskyld blandning av 13,4 g (28 mmolL_av den kristal- lina 7-amino-cefem-mellanprodukten XVIII (Z-isomer) och 3,3 g (31 mmol) bensàldehyd i 150 ml etylacetat sattes droppvis 56 ml (28 mmol) 0,5N natriumhydroxid under en tidsrymd av 20 minuter för att hålla reaktionsblandningens temperatur under 10°C. Blandningen omrördes under kylning ytterligare 15 minuter och det organiska skiktet separera- des, tvättades med 2 x 100 ml av en mättad vattenlösning av natriumbikarbonat och torkades över magnesiumsulfat.

Till den torkade lösningen sattesnennliten,mång§p;;äkql@1 och blandningen filtreradesl FiTtraEet"koncefltreradës i* till torrhet. Den resteradeaoljan upplöstes i 50 ml kol- tetraklorid och koncentrerades ånyo. Detta förfarande upp- repades tre gånger och blandningen övervakades medelst reversfas-TLC för att bekräfta att all utgångs-7-amino- cefalosporin hade omvandlats till den Schiffska basen.

Avlägsnande av lösningsmedlet i vakuum gav 16,45 g av den i rubriken angivna föreningen XVII (Z-isomer) som ett blekgult pulver (uppskattad renhet 85%) med en smp. av 74°C (sönderdelning). Produkten användes i efterföl- jande steg utan rening. uKBr -1 m = max om mo, 1725, 1635.

Uv . Ašgšclz mn (nfcln) 257 (aooi. man = Cncls 6,18 un, a, J=11 nz).

PPm 20_~ 466 205 Eörberedningsexempel 17 Benshydryl-7-bensylidenamino-3-j§-(4-karbamoyl-1-pyridinio)- 1-propen-1-ylzf3-cefem-4-karbogylat-jodid (XXI-H) (E-isomer) Till en kyld blandning av 16,4 g av 3-klorpropenylcefem- föreningen XVII (Z-isomer) i 5 ml aceton sattes droppvis en lösning av 6,3 g (42 mmol) natriumjodid i 30 ml aceton under 10 minutervunder kväveatmosfär och blandningen om- rördes vid rumstemperatur. Reaktionen övervakades genom matning ev uv-ebeerptiensföraailendet [slim (zss nma/ Efcm (szo nmu. när detta fdrhanende nådde ett värde under 1,30 (efter 45 minuter) späddes blandningen med 400 ml koltetraklorid och fick stå vid rumstemperatur.

När förhållandet nådde ett värde under 1,10 (efter 3 timmar) koncentrerades blandningen till halva sin volym. Koncentra- tet behandlades med en liten mängd träkol och diatomacëjord och filtrerades. Filterkakan tvättadesmed100 ml av en 1:1-blandning av metylenklorid och koltetraklorid. Till den kombinerade lösningennav,filtnateoch tvåttvätskorn sattes en lösning av 325 g (28/T mmolï”isoníkontinamid i 20 ml dimetylformamid och blandningen koncentrenades ' under reduceuat tryck. Koncentratet fick stå 1,5 timmar vid rumstemperatur och tvättades med 3 x 100 ml isopropyl- eter. Den resterande bruna halvfasta substansen upplöstes i 50 ml metylenklorid och lösningen sattes droppvis under omröring till 1,5 l etylacetat. Den erhållna fällningen tillvaratogs genom filtrering och tvättades med 200 ml etylacetat. Efter torkning över fosforpentoxid i vakuum erhölls 17 g av den i rubriken angivna förening XXI-H (E-isomer). Gült amorft pulver. Smpf"1S0-155°C (sönder- delning). Uppskattad renhet 80% enligt NMR.

IR e max cm 1775, 1725, 1690, 1635.

Uv = xâïšclz mn (sfcm) :se (sas) 298 (255). 2u>;. 114 466 205 una = ¿°"§°'d6 3,4-3,8 (za, br.), 5,25 (za, br.), 5,41 ppm (1H, d, J=4 Hz), 5,73 (1H, d, J=4 Hz), 6,93 (1n, s), 5,91 (1u, a, J=1e Hz), 7,3- 7,5 (15a, br. s), 5,40 (zu, d, J=e,5 Hz), 9,15 (2H, d, J=6,5 Hz).

Förberedningsexempel 18 7-amino-3-[3-(4-karbamoyl-1-pyridinio)-1-propen-1-yl]-3- cefem-4-karboxylat (XXII-H) (E-isomer) - ___ Till en suspension av 17 g av den ikyaterniserade cefem- föreningen XXI-H i 25 ml 85 %-ig myrsyra sattes droppvis ml koncentrerad klorvätesyra och blandningen omrördes _ 1,5 timmar vid rumstemperatur och behandlades med en liten mängd träkol.-Blandningen filtnerades och tvättades med ml 85 %-ig myrsyra. Filtratet kombinerades med tvätt- vätskan och hälldes i 1 l aceton under omröring. Den er- hållna fällningen_tillvaratogs.genom.fiiltrering för er- ««ñâ¥Iandeáæva9;52fgåavvenmgnifiäräaflfiråpmdddhflaäïïfiflhenmsns-5:5 pension av råmaterialet (9,5 g)_i 50 ml vatten sattes en liten mängd träkol och blandningen filtrerades. Filtratet sattes droppvis under omröring till 700 ml isopropylalko- hol. Den erhållna fällningen tillvaratogs genom filtrering, tvättades med en liten mängd metanol (30 ml) och torkades för erhållande av 7,58 g av den i rubriken angivna före- ningen XXII-H (E-isomer) som hydrokloriden. Ljusgult pul- ver. Uppskattad renhet 85% enligt.UV. Smp. 173-188°C I (sönderdelning).

IR = våg: cm'1 1795, 1680, 1520, 1575, 1540. _ fosfatbuffert (pH 7) 1% uv . Ähax nm (E1 cm) 294 (457). 466 205 nun = :°2°*°°1 3,32 (zu, S), s,17 (1u, a, J=s Hz), ppm 5,33 (2H, d, J=7 Hz), 5,43 (1H, d, J=5 Hz), 6,37 (1H, d+t, J=16 0 7 Hz), 7,23 (1H, d, J=16 Hz), 8,34 (za, d, J=7 Hz), 9,00 (zn, d, J=7 Hz).

Förberedningsexempel 19 2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetylklorid- hydroklorid (III-1_§pm sin syraklorid-hydroklorid A. 2-cyano-2-metoxiiminoacetamid Till en omrörd blandning av 252 g (3 mol) «-cyanoacet- amid och 414 g (6 mol) natriumnitrit i 600 ml vatten sattes 371 m1 (10 m°1) ättiksyra vid s-1o°c under 1,s timmar. Bland- ningen omrördes ytterligare 1,5 timmar och inställdes=pâ pH 8,5 med 6N natriumhydroxid. Till blandningen sattes 568 ml (6 mol) dimetylsulfat vid 15-20°C och blandningen 0mröraes,1,s timmar vid 4s°c..neaxtiansblandningan inställer aesepå pa 0,5 maa sn natræumhyarøxia och fick sta vïa-s°c“ över natten för separation av fällningen, som tillvaratogs genom filtrering, tvättades med kallt vatten och lufttorka- des för erhållande av 292 g 177%) av den i rubriken angivna föreningen som bruna nålar med en smp. av 170-172°C.

IR = 0:2: cm'1 3400, 3100, 17z0 1570. uv A? 2 nm 1:1 230,5 (8290), zes (sk, 3870). _ snusa-d NMR : 6 4,20 (3H, S, OCH3), 7,85 (2H, br. NH2).

PPm Analys beräknat för C4H5N3O2: C, 37,80; H, 3,97; N, 33,06 Funnet: C, 37,43; H, 3,75; N, 32,51. 2G..Å 466 205 B. 2-metoxiiminopropandinitril En omrörd blandning av 88,9 g (0,7 mol) 2-cyano-2-metoxi- iminoacetamid, 70 g natriumklorid och 97 ml (1,05 mol) fosforoxiklorid i 350 ml torr 1,2-dikloretan åtloppskoka- des 16 timmar. Det olösliga materialet avfiltrerades genom en dicalite-dyna och tvättades med dikloretan. Filtratetl och tvättvätskan kombinerades och hälldes under omröring i 1,5 l isvatten för sönderdelning av överskottet av fos- foroxiklorid. Den organiska fasen tvättades med 500 ml %-ig natriumbikarbonat, 3 x 500 ml vatten och_500 ml av en mättad natriumkloridlösning och torkades över magne- siumsulfat. Filtratet destillerades under reducerat tryck för erhållande av 61,5 g (81%) av den i rubriken angivna föreningen,ssom kokade vid 62°C/24.mm Hg. (Litteraturvärde kokpunkt 41-4s°c/12 mm ng). in = všïískefilm cm'1 3020, 2960, 2245, 2020, 1530, 1455, 1000. nun = acncïs 3 4,35 Ian; sy 0cH5f.“' i > - - n , C. 2-cyano-2-metoxiiminoacetamidiniumacetat Till en lösning av 28,4 g (0,53 mol) ammoniumklorid i 355 ml av en 28 %-ig vattenlösning av ammoniak och 180 ml etanol sattes droppvis en lösning av 58,0 g (0,53 mol) I 2-metoxiiminopropandinitril i 120 ml metanol vid -15 till -10°C under en tidsrymd av 30 minuter under omröring. Bland- ningen omrördes vid -10°C över natten ochfldärefter vid om- givningens temperatur (20-25°C) under en dag. Reaktions- blandningen fördelades mellan 350 ml vatten och 350 ml CH2Cl2 och vattenfasen mättades med natriumklorid och extraherades ånyo med 300 ml CH2Cl2. De organiska extrakten_ kombinerades, torkades över magnesiumsulfat och indunstades i vakuum. En lösning av återstoden i 1,6 1 etylacetat in- ställdes på pH 3-4 med ättiksyrafför utfällning av den i rubriken angivna föreningen som kristaller, vilka till- -, 466 205 varatogs genom filtrering och tvättades med etylacetat. utbyte 61,6 g (69%). snp. 1s2-4°c (sönaeraelnnng).¿ï1ttere- tnrvarde= enp. 150-1ss°c (eönaeraelningyj.

In = 0:2; em'1 3160, 2900, 2360, 2235, 2000, 1665, 1sss, 1495, 1415.

Uv = Ešífi nm (2) 243 (8500). 265 (ek, 5380), 305 (ek, 1400).

Nmn = 6D"S°"ds 1,88-(an, e, cg3cooH), 4,15 (sn, e,pocn3), ppm 7,60 (4H, br.).

Analys beräknat för C4H6N4O'CH3C00H: C, 38,71; H, 5,41; N, 30,09 Funnet: C, 38,71; H, 5,59; * N, 29,51.

De 2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimino- acetonitril< ät i . _ I *%%_ Till en suspension av 125 g 10,672 mol) 2-cyano-2-metoxi- iminoacetamidiniumacetat i 1,25 l metanol sattes dropp- vis 234 ml (1,68 mol) trietylamin vid -10°C ochådärefter 41,6 ml (0,806 mol) brom under 20 minuter vid -15 till -10°C och blandningen omrördes 20 minuter. Till bland- ningen sattes droppvis en lösning av 78,3 g (0,806 mol) xscn 1 sso m1 metenei under 1 timme vid -1s till -10°c.

Efter emröring vid 0-s°c under 1 timme näilaee blandningen i 12 1 isvatten för bildning av en kristallin fällning, som tillvaratogs genom filtrering, tvättades med vatten och lufttorkades för erhållande av 120 g (98%) av den i rub- riken angivna föreningen. Smp. 263-5°C (sönderdelning).

Smp. för den framställda föreningen är cirka 60°C högre än den smp. som anges i litteraturen (Japanska publice- rade patentansökan Kokai 57-158769; 210-ISOC (sönderdelning)). men våra spektral- och mikroanalysdata är i överensstämmelse med strukturen. 118 466 205 IR : vKBI bm'1 max 3435, 3260, 3120, 2960, 2245, 9020, 1630, 1545, 1455, 1415. vv = 3:22” nm (6) 246 (13300>, 310 (3410).

SDMSO-Ö NMR : i 6 4,21 (3H, s, OCH3), 8,30 (2H, br. NH2).

PPm Analys beräknat för CSHSNSOS: C, 32,78; H, 2,75; N, 38,23; S, 17,50.

Funnët: C,,32,76; H, 2,51; N, 30,02; 'i A, 17,50. '* E. 2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoättik- syra (III-1) I “ 55 -' l En blandning av 18,3 g (0,1 mol) 2-(5-amino-1,2,4-tiadia- zol-3-yl-2-metoxiiminoacetonitril)-i 250 ml 4N natrium- hydroxid upphettades 3 timmar vid 50-559C under omröring.- Reaktvionsblaxfdnfcn ï~meßi_«;f=šaffiæ:ficfrsyrfaaï.ï>¿,a“ och tvättades med 100 ml etylacetaa, mättades med natrium- klorid och extraherades tre gånger med en blandning av etylacetat och tetrahydrofuran (3:1, 2 x 300 ml och 1 x 200 ml). Extrakten kombinerades, torkades över magnesium- sulfat och koncentrerades under reducetatrtryck. Åter- stoden triturerades med isopropyleter för erhållande av blekgula kristaller av den i rubriken angivna syran. Ut- byte 16,0 g (83%). smp. 164-1s5°c (sönderaelning). (Litte-5 raturvärde:(japanska publicerade patentansökningen Kokai 57-156769; smp. (so-1s2°c (s6naerae1ning)).

In = vïfiš cm'1 3460, 3260, 3140, 1125, 1620, 16051 1545. uv 3 Äfiší nm (6) 234 (13200), 288 (sk, 3620). 119 466 205 F. 2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacetyl- klorid-hydroklorid Till en suspension av 40,4 9 (0,2 mol) 2-(5-amino-1,2,4- tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoättiksyra (III+4) i 400 ml torr CH2Cl2 sattes 41,6 g (0,2 mol) PCl5 i en portion vid -so°c. nlananingen omröraes 4 timmar vid -2o-t111 -s°c och hälldes i 2 l av en 2:1-blandning av n-heptan och iso- propyleter; Den gula fällningen tillvaratogs genom filtre- ring, tvättades med samma lösningsmedelsblandning och tor- kades med kaliumhydroxid unde:-reducerat tryck för err hållande av 46,0 g (90%) av den i rubriken angivna syra- kloriden.

In = vffåifl om* 1775.

Förberedniggsexempel 20 i ca-cs-caz-ci 2:5 coocn (ma) 2 VIII-2 92 ' nifenyimetyl-v-[z- (s-'aminø-1 , 2 , 4-tiadiaz°1-3-y1)-2-(z)- swxiimiflfflfwetamifiel-B-ßfklêff?-P#°P<ï===>f1-7f?- karboxylat (VIII-2, Z-isomer) " ' Till en blandning av 2,3 ml (9 mmol) N,0-bis(trimetyl- silyl)acetamid och 1,338 g (2,8 mmol) 7-amino-3-[É-klor- 1-(Z)-propen-1-yl]-3-cefem-4-karboxylat-hydroklorid (XVIII; från förberedningsexempel 12) i 10 ml metylenklorid sattes 800 mg (2,95 mmol) 2-(5-amino-1,2,4-tiadiazo1-3-y1)-2- (Z)-etoxiiminoacetylklorid-hydroklorid portionsvis under ømrasrmg vid -1o°c och biananingen fick sta 2 tim: via 0°C. Blandningen späddes med 200 ml etylacetat, tvättades 120 466 205 med vatten och indunstades under reducerat tryck. Tritu- rering av återstoden med isopropyleter gav den 1 rubriken angivna produkten VIII-2 som ett amorft pulver. Utbyte 1,70 g (95%). Smp. överstigande 150°C (sönderdelning). 1 In = v xlxßr) 1 om' 3330, 1780, 1720, 1690, 1380, 1220. ma. uv = Ämax (cznsou) 1 mn (a) zss (moon).

NMR : 8(DMSO-dö) i ppm 1,26 (3H, t, J=7HZ¿_CH2C§3), 4,25 e- c (ZH, q, J=7Hz, CEZCH3), 5,90 (1Hh d-d, J=4 & 8Hz, 7-H), 6,26 (1H, d, J=11Hz, 3-CH), 6,85 (1H, s, CHPh2); 9,53 (1H, d, J=8Hz, 7-NH).

Förberedningsexempel 21 Difeny1mety1-7-Å2-(5-aminow1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-(Z)- etoxiiminoacetamidQ]-3-[3-jod-1-propenyl]-3-cefemf4-karb- Qgylat (IX-2) ' 0 ' En blandning av 1,90 g (3 mmol) VIII-2 (från förberednings- exempel 20) och 1,4 g (9 mmol) natriumjodid i 20 ml.aeeton omrördes 10 minuter vid rumstemperatur och fick därefter stå 3 timmar vid 5°C. Blandningen indunstades under redu- cerat tryck, späddes med 100 ml etylacetat, tvättades med %-ig natriumtiosulfat och vatten och indunstades under reducerat tryck. Triturering av återstoden med isopropyl- 0” 121 466 205 eter gav 1,82 g (84%) av den i rubriken angivna produkten IX-2 sonmett ljusbrunt amorft pulver.

(KBr) i cm_1 In = v¿ax 3290, 1770, 1720, 1670, 1530, 1370, 1220. uv .= >max'(c2H5on) 1 nm (z}%cm) 304 (199).

Förberedningsexempel 22 0? I s QCH-h _ f» I »- N / ca-cn-ca2?r®-C0NH2 coocs(rh)¿ Difenylmetyl-7-bensyIidënamino-3-lïfif-3-(4-karbamoyfi¿* pyridinio)-1-propenyl]-3-cefem-4-karboxylat (XXI-fi'jodid) (E-isomer) " Till en kyld lösning av 42,8 g (90 mmol) av 3-klorpropenyl- cefemföreningen (XVII, Z-isomer) (från förberedningsexem- pel 16) i 80 ml torr DMF sattes 20 g (120 mmol) KI i en portion och blandningen omrördes vid rumstemperatur. Reakn tionen övervakades medelst UV-absorptionsförhâllandet ¿ä}%cm (255 nm)/ E:%cm (320L]. när förhållandet understeg 1,10 (efter 45 minuter) späddes blandningen med 800 ml metylenklorid, behandlades med 4 g aktivt kol och filtre- rades. Filterkakan tvättades med 100 ml CH2Cl2. Till kombi- nationen av filtrat och tvättvätskor sattes 14,64 g iso- nikotinamid och blandningen koncentrerades under reducerat tryck. Koncentratet hölls 1,5 timmar vid rumstemperatur och tvättades med 600 ml av en 1:1-blandning av toluen och n-heptan. Det resterande bruna halvfasta materialet upplöstes i 100 ml CH2C12 och lösningen sattes droppvis 200 122 466 205 till 3 1 etylacetat under kraftig omröring. Efter tork- ning över P205 i vakuum erhölls 57,37 9 (88%) av den kvaternisergaé' i rubriken angivna produkten XXI-H som jodiden. Gult amorft pulver. Smp. 150-155°C (sönderdel- ning). Denna produkt var identisk med den som erhölls genom jodering med NaI (förfieredningsexempel 17).

Förberedningsexempel 23 :m1- uzu--l/ *f * .- N * 04 / cn-cn-cnz-ci coocn (m) 2 _ XVIII_ *Z Difeny1metyl-7-amino-3-(3-klor-1-propenyl)-3-cefem-4- karboxylat-hydroklorid (Z-isomer) (XVIII, hydroklorid) En 25 %-ig lösning av 69 g (0,22 mmol) kloracetaldehyd i CHC13.sattes till en lösning av 80 g (0,11 mol) XVI i 1,1 1 CH2Cl2 innehållande 16,2 ml (0,06 mol) N,O-bis- (trimetylsilyl)acetamid vid -10°C i en portion och bland- ningen fick stå över natten vid 5°C. Blandningen koncent- rerades till cirka 0,3 1, späddes med ett blandlösningsç medel av etylacetat och isopropyleter (1/2, 0,6 1), be- handlades med silikagel (wakogel C-100, 60 g) och filtre- rades genom en dicalite-dyna. Filterkakan tvättades med ~ samma lösningsmedelssystem ( 0,2 1) Kombinatet av filtrat och tvättvätska koncentrerades till cirka 0,2 1, behand- lades med Girard reagens T (60 g, 0,26 mol) och 220 ml 4N HC1 och försattes med några groddkristaller av XVIII- hydroklorid. Efter omröring 3 timmar tillvaratogs de er- hållna kristallerna genom filtrering, tvättades med 0,5 l vatten och 0,5 1 etiíacetat och torkades i vakuum för erhållande av 37 g (70%) av den i rubriken angivna XVIII- '10 123 466 205 hydrokloriden med en smp. vid >185°C (sönderdelning). Blek- gula nälar41Denna produkt var identisk med den som erhölls i förberedningsexempel 12.

Förberedningsexempel 24 ' s sci- azu--f --N ' å / cu-cn-caz-cl coocn (Ph) 2 - XVIII *Z Difenylmetyl-7-amino-3-(3-klor-1-propenyl)-3-cefem-4- karboxylat-hydroklorid (Z-isomer) (XVIII, hydroklorid Till en lösning av 628.mg (2 mmol) kloracetaldehydf125 %-ig=lösning%taCHCl3¥ßt.tfltmifiCHíCL2»sattesm&&m35mmItwï (0,5 mmol) N,0-bis(trimetylsilyl)acetamid och 728 mg (1 mmol) XVI i tur och ordning vid 5°C. Blandningen _ fick stå över natten vid 5°C. Blandningen indunstades och späddes med en blandning av etylacetat och isopropyl- eter (1/2, 10 ml). Olösligt material avlägsnades genom filtering och filtratet koncentrerades till cirka 5 ml.

Koncentratet behandlades med 2 ml 4N HC1, försattes med groddkristaller av XVIII-hydroklorid och omrördes 1 timme vid rumstemperatur. Kristallerna tíllvaratogs genom filtre- ring, tvättades med 10 ml etylacetat och 10 ml vattenfoch torkades i vakuum för erhållande av 384 mg (80%) av den i rubriken angivna XVIII-hydrökborfldazmed en smp. av >185°C (sönderdelning). Blekgula nålar. Denna produkt var iden- tisk med den som erhölls i förberedningsexempel 12. 10_ 124 ;466 205 Förberedningsexempel 25 2-(5-amino-1,2,4-tiadiazo1-3-yl)-2-(propen-3-yloxiimino)- acetylklorid-hydroklorid (III-3 som dess syrakloridhydro- klorid) " A. Metyl-2-(5-t-buto§ikarbonylamino-1,2,4-tiadiazol-3- yl)-2-(propen-3-yloxiimino)acetat En blândning av 685 mg (3,37 mmol) N-(propen-3-yloxi)- ftalimid dframstälíd medelst förfarandet enligt S1 Grochosaki & J. Jurczak, Synthesis 1976 682] och 175 mg (3,35 mmol) hydrazinhydrat i 5 ml etanol omrördes 1 timme vid rumstemperatur. Den erhållna fällningen avfiltrerades och filtratet och tvättvätskorna kombinerades. Till lös- ningen sattes 967 mg (3,37 mmol) mety1-2-(5-t-butoxí- karbonylamino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-oxoacetat och bland- ningen fick stâfï'timme~vidfrumstemperamuæfoch.koncentrera-, desimedeïflfen'rotationsïndunstareæmâäëæstodënbreaadesß* medelst silikagelkromatografi. Kolonnen eluerades med n-hexan/etylacetat (4:1) och de fraktioner som innehöll huvudprodukten kombinerades och indunstades under reduce- rat tryck. utbyte 514 mg (46%). smp. aa-s6°c. 1 IR : “max (KBr) i em 3100, 1745, 1710, 16102 UV : )hax (CZHSOH) i nm (6) 223 (9700), 242 110000).

NMR = ;(cDc13) i ppm 1,55 (sn, s, Boc-H), 4,40 (2H, d, J=sHz, 0-cH2). 5,21 (2H, m, c§2=cH), ,90 (1H, m, -cg=cH2), 9,50 (1H, br.s, NH).

B. 2-(5-t-butoxikarbonylamino-1,2,4-tiadiazo1-3-yl)-2- lpropen-3-yloxiimino)ättiksyra1) En lösning av 770 mg (2,3 mmol metyl-2-(5-t-butoxikarbonyl- 125 466 205 amino-1,2,4-tiad1azol-3-y1)~2-(propen-3-yloxiimino)acetat och 3,5 ml av en 2N natriumhydroxidlösning (7,0 mmol) 1 ml metanol åtloppskokades 30 minuter. Reaktionsbland- ningen koncentrerades i vakuum och späddeswmed 10 ml av en 1:1-blandning av etylacetat och vatten. Vattenskiktet separerades, surgjordes till pH 2 med 6N saltsyra och extraherades med 2 x 10 ml etylacetat. Etylacetatlösningen torkades över magnesiumsulfat och koncentrerades medelst en rotationsindunstare för erhållande av 596 mg (81%) av den i rubriken angivna föreningen. Smp. 134-135°C (littera- ' turvärae1)= Smp. 1ss-13s°c. -f IR : 9 1 max (Nujol) i cm 3150, 1745, 1710, 1550.

UV : Å max (CZHSOH) i nm (E) 223 111000), 242 (11300).

NMR : 8(DMSO-dö) i-ppm 1,55 (9H, S, BOC-H), 4,77 (2H, d, f" I 151' Ä éznf- 'm-'Üï- cgz =cnrf<çf= y. s";=»o«*fc=rn~f;f-f" nr;- cg=crr§æ§fr< “ 1) I. Csendes, et al., J. Antibiotics, ââ, 1020 (1983).

C. 2-(5-amino-1,2,4-tiadiazolf3-yl)-2-1progen-3-ylo3if_ imino)-ätt1ksyrar(11I-3)1* ~ - ~ ~ En lösning av 570 mg (1,74 mmbl) 2-(5-t-butoxikarbonyl- amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-(propen-3-yloxiimino)ättik- syra i 6 ml trifluorättiksyra fick stå 1 timme vid om- givningens temperatur. Indunstning följt av triturering med 30 ml isopropyleter gav 376 mg (95%) av den i rubriken angivna föreningen. Smp. 109°C (sönderdelning). 1 IR = 1 max 3180, 1710, 1545, 1460.

(Nujol) i cm- UV : Ämax (CZHSOH) i nm (E) 245 (13500).

NMR 6 2 (za, m, cg=cn), 6,0 (1H, m, cg=cn2§. .466 205 126 1) Japan Kokai 57-112396 (7/13/82, Fujisawa) Brit. ansök. 7935538 (10/12/79). ' D. 2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-vl)-2-(propen-3-yloxi- imino)~acetylklorid-hydroklorid En lösning av 350 mg (1,54 mmol) av III-3 och 410 mg (1,97 mmol) fosforpentaklorid i 5 ml diklormetan omrördes 1 timme vid 25°C. Reaktionsblandningen hälldes i 60 ml n-hexan och fällningen avfiltrerades. Utbyte-323 mg.

(Nuiol) i cm-1 IR : Q 1765. mäX 'Fërberedningsexempel 26 2-(5-amino-1,2,4-tiadiazolf3-yl)f2-propargylogiiminoacetyl klorid-hydroklorid (III-4 som sin syraklorid-hydroklorid) A. Met?lsfiaffiftfihntoxïkanhomgiaminaßimêyëftíadiazoíšiää- yl)-2-propargyloxiiminoacetat En suspension av 870 mg (4,32 mmol) N-propargyloxiftalimid1) och 200 mg (4,0 mmol) hydrazinhydrat i 5 ml etanol omrördes 1 timme vid 25°C och filtrerades. Till kombinationen av filtrat och tvättvätskor sattes 1,0 g (3,86 mmol) metyl-2- (5-t-butoxikarbonylamino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-oxoacetat Lösningen fick stå 1 timme och koncentrerades under reduce- rat tryck. Rening medelst silikagelkromatografi, följt av indunstning, gav 319 mg (27%) av den i rubriken angivna produkten med smp. 72-75°c. 2) 1 IR = “max (xßr) 1 cm' 3200, 2380, 1745, 1710, 1610.

UV = lmax (cznsofl) 1 nm ta) 235 (12200).

J=2H2, CEECH), 4,85 (ZH, Ö, J=2HZ, brus' 127 466 205 1) Kommersiellt tillgänglig, Aldrich. 2) I. Csendes et al., J. Antibiotics ââ, 1020 (1983).

B. 2-(5-t-butoxikarbonylamino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2- propargyloxiiminoättiksyra I En lösning av 490 mg (1,4 mmol) metyl+2-(5-t-butoxikarbonyl- amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-propargyloxiiminoacetat och 2,2 ml av en 2N vattenlösning av natriumhydroxid (4,4 =-mmol) i 14 ml metanol åtloppskokades 30 minuter. Reak- tionsblandningen koncentrerades under reducerat tryck och en 1:1-blandning av etylacetat och vatten sattes till lös- ningen. Det separerade vattenskiktet surgjordes till pH 2 med GN saltsyra och extraherades med 2 x 10 ml etylacetat.

Tórkning över magnesiumsulfat, följt av indunstning av det organiska skiktet, gav 149 mg (89%) av den i rubriken an- givna=produkten»med smp,-135?C.(sönderdelning).,W IR = 0 (nujol) 1 em'1 3350, 1720, 1670, 1550. max Uv = lmax (cznson) 1 nm (s) 233 111500).

J=2nz, caacn), 4,89 (zu, a, J=2nz, cgzcaecn), 9,0 (1H, S, NH).

C. 2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-propargyloxiimino- _ 3) _ ._ _, _: ¿_ ,¿¿.¿A.¿A.¿ 1. .. ' ättiksyra (I1r§4) En lösning av 410 mg (1,26 mmol) 2-(5-t-butoxikarbonyl- amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-propargyloxiiminoättiksyra i s~m1 :rifluerättiksyre fiek stå 1 timme vid 2s°c. :n- dunstning följt av triturering av återstoden med 25 ml isopropyleter gav 204 mg (72%) av den i rubriken angivna föreningen. smp. 156-1sa°c (sönaeraelning). 1 128 466 205 1 In = q¿ax'(Nujo1) 1 cm' aaoo, 2480, 1730, 1610.

UV : Ä max-(CZHSOH) i nm (5) 234 (12000).

NHR : Sümso-ds) 1 ppm 3,52 (1H, t, J=2az, cæcfl), 4,86 (zng d| J=2Hz; (2H, br.s, NH2). 3) Japan Kohai 57-112396 (7/13/82, Fujisawa) Brit. ansök. 7935538 (10J12/79). _ D. 2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-propargyloxiimino- acetylklorid-hydroklorid En blandning av 175 mg (0,07 mol) av III-4 och 182 mg- (0,88 mmol) fosforpentaklorid i 2 ml diklormetan omrördes 1 timme vid -5°C. Reaktionsblandningen hälldes i.30 ml n-hexan och fällningen avfiltrerades. Utbyte 65 mg (34%).

T IR = v “í77ó. max (Nujol) i cm' Förberedningseiempel 27 2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-cyk1openty1oxiimino- acetylklorid-hydroklorid (IIIe5 som sin syrak1orid-hydro- _ _, ._ _. . _, ., ., _. _ \. ._ ._ klorid) * * ^' ' w“» ~' ' v"< "" A. Metyl-2-(5-t-butoxikarbonylamino-1,2,§-tia§iazo1e3- 'yl)-2-cyklopentyloxiiminoacetat' """' "' ' En suspension av 860 mg (3,7 mmol) N-(cyklopentyloxi)- fta11mia1) och 185 mg (3,7 mmol) hyarazinhyarat 1 s mi etanol omrördes 1 timme vid omgivningens temperatur och filtrerades. Filtratet och tvättvätskorna kombinerades och sattes till 1,06 g (3,7 mmol) metyl-2-(5-t-butoxi- karbonylamino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-oxoacetatz). Lös- ningen fick stå 1 timme vid rumstemperatur och koncentre- rades i vakuum. Aterstoden renades medelst silikagel- kolonnkromatografi. Eluering med en 4:1-blandning av * 129 466 205 n-hexan och etylacetat, följt av indunstning, gav den 1 rubriken angivna produkten 1 ett utbyte av 906 mg (81%) den med amp. 115-11a°c. 1 In = v¿ax (xßr) 1 cm' azoo, 1745, 171o, 1sso.

Uv = lhax (czflson) 1 nm (5) 217 (1800), 252 (7600). una = ¿(cnc13) 1 ppm 1,51 (sn, S, soc-H), 1,60 (sn, br.s, HJCII 1, s,ss_13n, S, øcn3), 4,90 H. (1H, br.s, ><:] ), 8,70, 11n, br.s, o NH). 1) U.S. Patent 3 971 778 (7/27/76; Glaxo), Brit. ansök. 4925s.(1a/25/72). 2) I. Csendes et al., J. Antibiotics ââ, 1020 (1983).

B. 2-(5-t-butoxikarbonylamino-1,2,4-tiadia;olf3fyl)f2f gyklopentyloxiiminoättiksyra En lösning av 500 mg (1,34 mmol) metyl-2-(5-t-butoxi- karbonylamino-1,2;4-tiadiazol-3-yl)-2-cyklopentyloxiimino- acetat och 2 ml av en 2N natriumhydroxidlösning (4 mmol) i 15 ml metanol åtloppskokades 30 minuter. Reaktionsbland- ningen indunstades och 10 ml av en 1:1-blandning av etylacetat och vatten sattes till lösningen. Vattenskikëet separerades, surgjordes till pH 2 med 6N saltsyra och extra- herades med 2 x 10 ml etylacetat. Det organiska skíktet tvättades med saltlösning, torkades över magnesiumsulfat och koncentrerades under reducerat tryck för erhållande av 377 mg (78%) av den i rubriken angivna föreningen med smp. 185°C (sönderdelning). 130 466 205 -1 In . omax (nar) 1 cm 3160, 1710, 1sso.

Uv = Ahax (cznsoa) 1 nm (2) 238 (13:00).

H H-{:] ), 4,82 (1H, m, >x{:] )l o C. 2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-cyklopentyloxiimino- ättiksyra (III-5, Z-isomer)3) ' '_ V -I Å* .- En lösning av 348 mg (0,97 mmol 2-(5-t-butoxikarbon§lamino- 1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-cyklopentyloxiiminoättiksyra 1 2 ml trifluorättiksyra fick stå 1 timme vid rumstemperatur. Reak- tionsblandningen koncentrerades under reducerat tryck. Ater- stoden triturerades med 5 ml isopropyleter och 10 ml hexan för erhållande 215 mg (86%) av den i rubriken angivna före- ningen. Smp. 162-165°C (sönderdelningl (litteraturvärde3): Smp., wfiør-mesïèrn.1sanae1as1n1n¶11111,,. 1:1 i 1 IR = umax (uujol) 1 cm' 3290, 32oo,“171b, 1615, 1600. uv = lmax fcznsøu) 1 nm (a) 238 (133oo). una = ;(nnso-16) 1 ppm 1,11-2,10 (sn, m), 4,so-4,98 (13, m), 8,22 (2H, s). 3) Japan xokai sv-1ss1s9 (9/ao/sz, Fujisåwa) Brit. ansök. 8101134 (3/6/81).

D. 2-(5-amino-1,2,4-tiadiazölf3-yl)-2-çyklöpentyloxi- imínoacetylkloridehydrøklorid S En lösning av 190 mg (0,74 mmol) III-5 och 219 mg (1,0 mol) fosforpentaklorid i 5 ml diklormetan omrördes 1 timme vid rumstemperatur. Reaktionsblandningen hälldes i 50 ml n-hexan. Den erhållna fällningen tillvaratogs 131 466 205 genom filtrering. Utbyte 122 mg (60%). 1 IR : Q (Nujol) i cm- 1760. ma!! Förberedningsexempel 28 Bensotriazo1-1-yl-2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2- metoxiiminoacetat En blandning av 2,7 g (20 mmol) 1-hydroxibensotriazol och 4,12-g (20 mmol) dicyklohexylkarbodiimid 1 65 ml DNF om- rördes vid rumstemperatur. Efter 15 minuter sattes 4,04 g (20 mmol) av III-1 sattes till den omrörda blandningen vid 6°C och omröringen fortsattes 3 timmar. Reaktionsblandningen filtrerades för avlägsnande av den olösliga karbamiden och filterkakan tvättades med en liten volym DMF. Filtratet och tvättvätskorna kombinerades och hälldes i 800 ml is- vatten- Eällningen,tillvaratogs genom filtrering,_varvid man;.~erlïölf~l;.zïší,p2ßfai êfiåiäll: ,,a.vs'lfdenf~'=itr=' rubrikéníë«angi>vda§ï.fifi'e-É~" . ningen som ett ljusgrått pulver. Smp. 589-192°C (sönder- delning). _ 1 IR : 0 (KBr) i cm- max 1815, 1620, 1540, 1415, 1090, 1060, 1005, 945, 865, 740. uv = imax (cznson) 1 um (E}*cm) 246 (sao), zsssk (228).

Claims (5)

466 205 m RAQENTKLAV

1. Föreningar med formeln N --_. Åzfs lig:-;]IïL\° CONH | G9 _ 111m g 32 - á”- u BICB-Cflz-NSQ I ,f oocø 1 vari R är väte eller en konventionell aminoskyddande grupg, R ä:.väteL.en.rak.eller.gæenkedjigfalk1lgrugg, ínnehëälanderlfiiækoldnoenåïenäcgklaqïkyüëgelïe;§cEkfiwfigüQ-f alkenylring innehållande 3-6 kolatomer eller en grupp med formeln çl , çl coon -f-ca=cn-R3, -f-ceen3 , as ns eller vari R3 är väte, lägre alkyl eller kašboxyl,5X är halo- gen, hydroxi eller lägre alkoxi och R och R vardera 4 beroende av varandra är väte, metyl eller etyl eller R och R tillsammans med den kolatom till vilken de år bundna är en cykloalkylidenring innehållande 3-5 kolato- /33 466 285 mer och e -Nåo är en grupp med formeln eflå ^ '_ Q f _ n 14 ' "--' -N-n 16 9 a» ' TÅ T* - -fl/ . s i 17 I 9! -N--(cfl2 )n ellerø-fl / J _ I s /mlza å' n? _ 13 14 15 vari R , R och R är lika eller olika och är lägre alkyl, lägre alkenyl, amino(lägre alkyl) med det förbe- hållet att amino ej kan föreligga pá en ukkolatom eller hydroxi(lägre alkyl) med det förbehållet att hydroxi- gruppen ej kan föreligga på en °<-kolatom; 16 R är väte, lägre alkyl, lägre alkoxi, lägre alkyltio, amino, lägre alkylamíno, di(lägre alkyl)amino, formyl- amino, lägre alkanoylamino, karboxi, hydroxi, karboxi- (lägre alkyl), karboxi(lägre alkyl)tio, hydroxi(lägre alkyl), halo(lägre alkyl), amino(lägre alkyl), (lägre alkoxi)(lägre alkïl), karbamoyl eller N-(lägre alkyl)- karbamoyl eller R är en tvávärd alkylengrupp med 3-5 kolatomer; ' 17 R är lägre alkyl, (lägre alkoxi)(lâgre alkyl), halo- (lägre alkyl), allyl, hydroxi(lägre alkyl) med det för- 466 205 /37 behállet att hydroxigruppen ej kan föreligga på oQ-kol- atomen, amino(lägre alkyl) med det förbehållet att amino- gruppen ej kan föreligga pà¿1-kolatomen eller fenyl(lägre alkyl); RI8 är väte, lägre alkyl, lägre alkoxi, (lägre alkoxi)- (lägre alkyl), (lägre alkyl)tio, amino, (lägre alkyl)- amino, di(lägre alkyl)amino, karboxi, hydroxi, karboxi- (lägre alkyl), hydroxi(lägre alkyl), amino(lägre alkyl), formylamino, (lägre alkanoyl)amino, karbamoyl eller N- -(lägre alkyl)karbamoyl; n är ett heltal från 1 till 3, Z äï9CH2 ellïš, när n är 2, kan Z även vara S, 0 eller N-R , där R är väte eller lägre alkyl och 204' 21* i _ ., _. lo, _, __ _ _ _nnh. R-.aï-a och: n; f; lägre alkoxi, (lägre alkyl)tio, amino, lägre alkylamino, di(lägre alkyl)amino, karboxi, hydroxi, hydroxi(lägre alkyl), amino(lägre alkyl), (lägre alkoxi)(lägre alkyl), karboxi(lägre alkyl), karboxi(lägre alkyl)amino, (lägre alkanoyl)amino, karboxi(lägre alkanoyl)amino, karbamoyl eller N-(lägre alkyl)karbamoyl och ogiftiga farmaceutiskt godtagbara salter, solvat, hydrat och fysiologiskt hydrolyserbara estrar därav.

2. Föreningar enligt krav 1, k ä n n e t e c k n a d e därav, att R är lägre alkyl, cykloalkyl med 3-5 kol- atomer, 1-karboxicykloalk-1-yl med 3-5 kolatomer, allyl, propargyl eller karboxi(lägre alkyl).

3. Föreningarna 7-12-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- .fä CH CN BJ CD U"I /35' amidq7-3-[3-(tiimetylammonio)-1-propen-1-yL7-3-cefem-4- -karboxylat, 7-[I-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidqy-3-[§-(lémetylpyrrolídinio)-1-propen-1-yL7-3-cefem- -4-karboxylat, 7:12-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amid§7~3-[§-pyridinio-1-propen-l-yI7-3-cefem-4- -karboxylat, 7-[§l(5-amíno-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxíiminoacet- amid§7-3-[3-(3-aminopyridínio)-1-propen-1-yL7-3-cefem-4- -karboxylat, 7-12-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiimínoacet- amidéj-§¿[§f§3-formglaminopyridinin);1-pgopengl-y§Z¿3-,. -cæiemwévhlrboxylatwfi? " 7-12-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidgf-3-Åš-aminometylpyridinío)-1-propen-1-yL7-3-cefem-4- -karboxylat, 7-12-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidd7-3-[3-(3-karbamoylpyridinic)-1-propen-1-yl7-3- -cefem-4-karboxylat, 7-12-(5-amíno-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiíminoacet- amidqf-3-[§-(4-karbamoylpyridinio)-1-propen-1-yL]-3- -cefem-4-karboxylat, 7-[I-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxííminoacet- amidg]-3f[3-(2-metyltiazolio)-1-propen-1-yl7-3-cefem- -4-karboxylat, 7-12-(5-amíno-1,2,4-tíadiazol-3-yl)-2-metoxíiminoacet- 466 205 ”é amid§7l3fj§-(2-amino-5-tiazolo[Ã,5-§7pyridinio)-1-propen- -1-y¿7-3-cefem-4-karboxylat, 7' 7-(2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amíd§7-3-¿3-(4-hydroximetylpyridinio)-1-propen-l-yL7-3- -cefem-4-karboxylat, 7-[E-(5-amíno-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiíminoacet- amíd§7-3-[§-(3-hydroximetylpyridínío)-l-propen-1-y;7-3- -cefem-4-karboxylat, 7-12-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amid§7-3-[3-(4-(N-metylkarbamoyl)pyridinío)-l-propen-1- -y;7-3-cefem-4-karboxylat, 7-[Z-(5-amíno-1,2,4-tíadiazol-3-yl)-2-metoxiímínoacet- amid§2-3-¿3~(2,3~gnoggLengg;idiniQ)flfgpggenfihfyšzgåf1 -cefidmä64Kamhdxg¶&ü¿g$égfiA¶,; '. 7-12-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-etøxiiminoacet- amídg7-3f[3-(4-karbamoylpyridinio)-1-propen-1-y;7-3-cefem- 4-karboxylat, 7-LI-(5-amino-1,2,4-tíadiazol-3-yl)-2-cyklopentyloxi- íminoacetamid§7-3-[3-(4-karbamoylpyridínio)-1-propen-1- -y§7-3-cefem-4-karboxylat, 7-[Z-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-allyloxíimínoacet- amid§7-3-ÅÉÄ(4-karbamoylpyridinio)-1-propen-1-yL7-3- -cefem-4-karboxylat, 7-12-(5-amino-1,2,4-tíadiazol-3-yl)-2-propargyloxiimino- acetamíd§7-3-Z§-(4-karbamoylpyridinio)-l-propen-1-yi7-3- -cefem-4-karboxylat, 7-12-(5-amíno-1,2,4-tiadíazol-3-yl)-2-metoxíimínoacet- 466 205 /3? amid§7-3-¿3-(4-karboxípyridinio)-1-propen-1-y;7-3-cefem- -4-karboxylat, 7-12-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-etoxiiminoacet- amidQ7-3-[3-(4-karboxipyridinio)-2-propen-1-yl]-3-cefem- -4-karboxylat, i7-12-(5-amínoÉ1,2,4-tíadiazol-3-yl)-2-metoxíiminoacet- amid§7-3-13-karboximetylpyridinío)-1-propen-1-yl7-3- -cefem-4-karboxylat och 7-[2-(5-amino-1,2,4-tiadiazol-3-yl)-2-metoxiiminoacet- amidg-s-Lä- ( 4-karboximetyltiøpyridinio) - 1 -propen-l -ylj- -3-cefem-4-karboxylat och ogiftiga farmaceutískt godtag- bara salter, solvat, hydrat och fysiologískt hydrolyser- bara estrar därav enligt krav 1. 4.«Eöriarandenfärwframställninggæwkföaningarudedwfidnmeüfinfli n COW A1/ ' :zh/ILS J Kl' ßp' / a-ca-cnzçggq cec? vari RI år väte eller en konventionell amínoskyddande grupp, R är väte, en rak eller grenkedjig alkylgrupp innehållande 1-4 kolatomer, en cykloalkyl- eller cyklo- alkenylring innehållande 3-6 kolatomer eller en grupp med formeln 466 205 ”f” 4 4 coon -çgaCfl-RB , -ilšCíC-Ra a _ eller ns R x

4. -coon Rs vari Rs är väte, lägre alkyl eller karboxyl, X är halo- gen, hydroxi eller lägre alkoxi och R och R vardera 4 oberoende av varandra är väte, metyl eller etyl eller R och -R-- tillsammanse-med .den kolatom....ti.llïf.sæi=lk.en.~.den.än « bunana atomer och är en grupp med formeln Qgflu 'F __R1s Q / s) o n 0 h: 15 æííægz h: ellerø-N / _,.¥~=' 13 14 15 _ __ __ vari R , R och R är lika eller ohka och ar lagre alkyl, lägre alkenyl, aminoflägre alkyl) med det förbe- /29 466 205 hållet att amino ej kan föreligga på engf-kolatom eller hydroxi(lägre alkyl) med det förbehållet att hydroxí- gruppen ej kan föreligga på en dfkolatom; 16 R är väte, lägre alkyl, lägre alkoxi, lägre alkyltio, amino, lägre alkylamíno, di(lägre a1kyl)amino, formyl- amino, lägre alkanoylamino, karboxí, hydroxi, karboxí- (lägre alkyl), karboxi(lägre alkyl)tio, hydroxi(lägre alkyl), halo(lägre alkyl), amino(lägre alkyl), (lägre alkoxi)(lägre alk l), karbamoyl eller N-(lägre alkyl)- karbamoyl eller R är en tvávärd alkylengrupp med 3-5 kolatomer; 17 R är lägre alkyl, (lägre alkoxi)(lägre alkyl), halo- (lägre alkyl), allyl, hydroxi(lägre alkyl) med det för- behållet att hydroxigruppen ej kan föreligga páo(-kol- atomen, amino(lägre,alkyl) med det~förbehålletnatt,aminoa»~ gruppenwejukangföreiíggafipåæfihkdïatomemweïïérífenyfïæägnäæf alkyl); 18 R är väte, lägre alkyl, lägre alkoxí, (lägre alkoxi) (lägre alkyl), (lägre alkyl)tío, amino, (lägre alkyl)- amino, di(lägre alkyl)amino, karboxi, hydroxí, karboxi (lägre alkyl), hydroxi(lägre alkyl), amino(lägre alkyl), formylamíno, (lägre alkanoy1)amíno, karbamoyl eller N- -(lägre alkyl)karbamoyl; n är ett heltal från 1 till 3, Zlšr CH2 elàer, när n är 2, kan Z även vara S, 0 eller N- R , där R är väte eller lägre alkyl och 20 21 _ R och R är lika eller ollka och är väte, lägre alkyl, lägre alkoxi, (lägre alkyl)tio, amino, lägre alkylamino, dí(lägre alkyl)amino, karboxi, hydroxi, hydroxí(lägre alkyl), amino(lägre alkyl), (lägre alkoxi)(lägre alkyl), /90 466 205 karboxi(lägre alkyl), karboxi(lägre alkyl)amino, (lägre alkanoyl)amino, karboxi(lägre alkanoyl)amino, karbamoyl eller N-(lägre alkyl)karbamoyl eller ogiftiga, farmaceu- tiskt godtagbara salter, solvat, hydrat eller fysiolo- giskt hydrolyserbara estrar därav, k ä n n e t e c k - n a t därav, att man omsätter en förening med formeln m, a s 1"" -fm 1,!! S "y 0 ca-cacnz: m: 'i I '_ _ i r..««;=-1 - .He J1 e En ,;: 1-e .e "se varißmn»karmsammanbetgqemsemaomnfihäeüâemääæeammgrqppnnnmkän4““ formeln C008 eller - C003 UU vari X, R4 och Rs har ovan angivna betydelser, Bl är en I konventionell karboxylskyddsgrupp, B är väte eller en konventionell aminoskyddsgrupp, Z är klor, brom eller jod och m är 0 eller 1, med en tertiär amin QEEEEši(eller i tur och ordning med en sekundär amin RR'NH och en för- ening med formeln R"Z) och, om m är 1, reducerar sulf- oxiden på konventionellt sätt och därefter avlägsnar samtliga blockeringsgrupper på konventionellt sätt. /117 _ 466 205

5. Förfarande för framställning av föreningar med for- meln NÄRA' kf ”mf-if f en? vari RI är väte eller en konventionell aminoskyddande grupp, R är väte, en rak eller grenkedjig alkylgrupp innehållande 1-4 kolatomer, en cykloalkyl- eller cyklo- alkenylring innehållande 3-6 kolatomer eller en grupp med formeln ÉÄ:*"* ' - | I RS S R Å -f'CO0I RS vari R3 är väte, lägre alkyl eller karboxyl,5X är halo- gen, hydroxi eller lägre alkoxi och R och R vardera oberoende av varandra är väte, metyl eller etyl eller R och R tillsammans med den kolatom till vilken de är bundna är en cykloalkylidenring innehållande 3-5 kolatoner och -NEEEO är en grupp med formeln /Qi 466 205 1: - Qånu ' - ___. t 1: p: E -4--1215 ' QN/ ' . í ' an @-l'V---(CH2 )n elleræ-g / I 2 | I i '18 ag S B21 _ 13 14 15 _ var; R , R och R är lika eller ollka och är lägre _ alkyl, lägre alkenyl, amíno(lägre alkyl) med det förbe- hållet att amino ej kan föreligga på enCÅ-kolatom eller hydroxi(lägne,alkyL> medmdetfförhehálletrattlhgdroxi-r = - 16 - R är väte, lägre alkyl, lägre alkoxi, lägre alkyltio, amíno, lägre alkylamino, di(lägre alkyl)amíno, formyl- amino, lägre alkanoylamino, karboxi, hydroxi, karboxi- (lägre alkyl), karboxi(lägre alkyl)tío, hydroxí(lägre alkyl), halo(lägre alkyl), amíno(lägre alkyl), (lägre alkoxi)(lägre alk å), karbamoyl eller N-(lägre alkyl)- karbamoyl eller R är en tvávärd alkylengrupp med 3-5 kolatomer; R17 är lägre alkyl, (lägre alkoxí)(lägre alkyl), halo- (lägre alkyl), allyl, hydroxí(lägre alkyl) med det för- behället att hydroxigruppen ej kan föreligga pág(-kol- atomen, amino(lägre alkyl) med det förbehållet att amino- gruppen ej kan föreligga på q-kolatomen eller fenyl(lägre alkyl); 18 _ R är väte, lägre alkyl, lägre alkoxi, (lägre alkoxl) /4/3 466 205 (lägre alkyl), (lägre älkyl)tio, amino, (lägre alkyl)- amino, di(lägre alkyl)amíno, karboxi, hydroxi, karboxi (lägre alkyl), hydroxi(lägre alkyl), amino(lägre alkyl), formylamino, (lägre alkanoyhamino, karbamoyl' eller N- -(lägre alkyl)karbamoyl; n är ett heltal från 1 till 3, Z äï CH ellïš, när n är 2, kan Z även vara S, 0 eller N-R , där R är väte eller lägre alkyl och Rzo och Rzl är lika eller olika och är väte, lägre alkyl, lägre alkoxi, (lägre alkyl)tio, amino, lägre alkylamino, di(lägre alkyl)amino, karboxi, hydroxí, hydroxi(lägre alkyl), amino(lägre alkyl), (lägre alkoxi)(1ägre alkyl), karboxí(lägre alkyl), karboxi(lägre alkyl)amino, (lägre alkanoyllaminqf.karhnxiçlägre.alkann2llflminob,karbamoyl, ellerfR=(1ägre@alky1lkarhamoyläelleryogiftigqflgfarmaclægg-* tiskt godtagbara salter, solvat, hydrat eller fysiolo- giskt hydrolyserbara estrar därav, k ä n n e t e c k - n a t därav, att man omsätter en förening med formeln 1,: med en syra med formeln rä” "T 'an Ås) Én” - e /i/Å/ 466 205 I eller med ett acylerande derivat av nämnda syra, vari R har samma betydelse som R eller är en grupp med formeln COOB ene: -c coon' 4 5 1 vari X, R och R har ovan angivna betydelser, B är en konventionell karboxylskyddsgrupp och B är väte eller en konventionell aminoskyddsgrupp. 6, Farmaceutisk.kompoaitionfi,W k ä n n e tee c kan andn- därav;=attnden;ínnefiätmar$emmeifiéfiæívmantifiákteriebïmg>- mängd av minst en förening med formeln I enligt krav 1 eller ett salt, hydrat eller solvat därav jämte en farmaceutiskt godtagbar bärare.