NL8601026A - Nieuwe 7alfa-methoxycefalosporinen en werkwijze ter bereiding daarvan. - Google Patents

Description

t s'

Nieuwe 7<x-methoxycef alosporinen en werkwijze ter bereiding daarvan.

De uitvinding heeft betrekking op nieuwe 7a-methoxy-cefalosporinen en op werkwijzen voor de bereiding van deze verbindingen.

De verbindingen volgens de uitvinding wor-5 den gekarakteriseerd door een breed antibacterieel spec trum tegen gram-positieve en -negatieve bacteriën en door hun bestendigheid tegen door bacteriën gevormd 0-lactamase. Zij zijn daarom zeer bruikbaar voor de behandeling van variërende infectie-ziekten.

10 De Nederlandse octrooiaanvrage 75.05375 beschrijft cefalosporinen met een gesubstitueerde methyl-groep op de 3-plaats en een (4-alkyl-2.3-dioxopiperazine-1-ylcarbonylamino)-groep op de 70-plaats. Het Franse octrooi-schrift 2.338.944 beschrijft 70-/ 2-(4-alkyl-2.3-dioxo-15 piperazine-l-ylcarbonylamino)-2-fenyl-acetylamino_/-7a- methoxy-3-(gesubstitueerd methyl)-3-cefem-4-carbonzuur.

J. Antibiotics _29, 554-558 en 973-975 (1976) beschrijven de invoering van een 7a-methoxygroep in zekere cefalospo-rinen.

20 Gevonden werd nu dat nieuwe verbindingen met de hieronder nader omschreven algemene formule 1, waarin de cefem-ring een gesubstitueerde methylgroep op de 3-plaats en een methoxygroep op de 7a-plaats draagt en waarin de aminogroep op de 70-plaats is gebonden aan de 25 groep met de formule 11, waarin A en B de hieronder aange geven betekenissen bezitten, en de zouten van deze verbindingen een verrassend goede antibacteriële werking vertonen .

Een doel van deze uitvinding is te voor-30 zien in nieuwe 7a-methoxycefalosporinen met in hun mole cuul een 2.3-dioxo-l-piperazinecarbonylamido-groep en een ^ .

·* * 7 - 2 - groep B.

Een ander doel van deze -uitvinding is te voorzien in nieuwe 7a-methoxyce£alosporinen met een breed antibacterieel spectrum, met een hoge b e stendigheid tegen 5 door bacteriën gevormd β-lactamase en met een doeltreffen de antibacteriële activiteit tegen klinische isolaten van bacteriën.

Een verder doel van de uitvinding is te voorzien in een werkwijze ter bereiding van de nieuwe 7 a-10 methoxycefalosporinen.

Nog een verder doel van de uitvinding is te voorzien in een farmaceutisch preparaat, dat het nieuwe 7a-methoxycefalosporine of een farmaceutisch aanvaardbaar zout daarvan als actief bestanddeel bevat.

15 Andere doeleinden en voordelen van deze uit vinding zullen duidelijk worden uit de volgende beschrijving .

De verbinding volgens de onderhavige uitvinding omvat een 7a-methoxycefalosporine met de algemene for-20 mule 1, waarin voorstelt een waterstofatoom of een carboxyl-beschermende groep, voorstelt een acetoxy- groep of een eventueel gesubstitueerde 1.2.3.4-tetrazol- 5-yl-thio- of 1.3.4-thiadiazol-2-ylthio-groep, A voorstelt een alkylgroep met 1-5 koolstofatomen en B voorstelt een 25 thienyl·-, furyl-, aminothiazolyl- of cyclohexadieny1- groep, of een farmaceutisch aanvaardbaar zout daarvan.

De bovengenoemde groepen R^ kunnen gesubstitueerd zijn door een halogeenatoom of lager alkyl, fenyl, C^alkenyl, hydroxyl, lager alkoxy, lager alkyl-30 thio, nitro, cyano, lager alkylamino, di-lager-alkylamino, acylamino, acyl, acyloxy, acyl-lager alkyl, carboxyl, carbamoyl, amino.lager alkyl, N-lager-alkylamino-lager~ alkyl, N.N-di-lager alkylamino-lager alkyl, hydroxy-lager-alkyl, hydroxyimino-lager alkyl, lager-alkoxy-lager-alkyl, 35 carboxy-lager alkyl, sulfo-lager alkyl, sulfo, sulfamoyl- lager alkyl, sulfamoyl, carbamoyl-lager alkyl, carbamoyl- *\ -¾ ' i i * Λ - 3 - alkenyl, N-hydroxycarbamoyl-lager alkyl of dergelijke.

Wanneer een tautomerie bekend is op te treden in één van de groepen, voorgesteld door B, vallen de tautomeren binnen het raam van deze uitvinding. Bijvoor-5 beeld bestaat een aminothiazolyl-groep in tautomere vormen, die in evenwicht zijn, zoals weergegeven door reactie-schema A«

Het farmaceutisch aanvaardbare zout van het 7a-methoxycefalosporine volgens deze uitvinding, voorge-10 steld door de algemene formule 1, omvat die welke worden gevormd aan de zure groep en die welke worden gevormd aan de basische groep, welke zouten algemeen bekend zijn in de penicilline- en cefalosporine-chemie.

Alle optische isomeren en racemische verbin-15 dingen en alle kristalvormen en hydraten van het 7a-methoxy- cefalosporine, voorgesteld door de algemene formule 1, of een farmaceutisch aanvaardbaar zout daarvan vallen binnen het raam van deze uitvinding.

De verbindingen met de algemene formulé 1 20 of zouten daarvan worden bereid volgens bekende methodes, zoals bijvoorbeeld die welke hieronder zijn beschreven.

Bereidingsmethode (1): Een methode, waarbij een verbinding met de algemene formule 2, waarin Rg voorstelt een waterstofatoom, een organische silylgroep of 25 een organische fosfor-bevattende groep, R^a voorstelt een waterstofatoom of een gebruikelijke carboxy-beschermende groep en R£ en B de boven aangegeven betekenissen bezitten, in reactie wordt gebracht met een reactief derivaat in de carboxylgroep van een verbinding met de algemene formule 3, 30 waarin A de boven aangegeven betekenissen bezit.

Bereidingsmethode (2): Een methode, waarbij een verbinding met de algemene formule 4, waarin R , let R2 en Rg de boven aangegeven betekenissen bezitten, in reactie wordt gebracht met een verbinding met de algemene 35 formule 5, waarin A en B de boven aangegeven betekenissen bezitten, of een reactief derivaat in de carboxylgroep van *

* I

- 4 - deze verbinding 5.

Bereidingsmethode (3): Een methode, waarbij een cefalosporine met de algemene formule 6, waarin , R^, A en B de boven aangegeven betekenissen bezitten, in tegen-5 woordigheid van’methanol in reactie wordt gebracht met een alkalimetaalmethylaat met de algemene formule 7, waarin een alkalimetaal voorstelt, en vervolgens in reactie wordt gebracht met een halogeneermiddel.

Bereidingsmethode (4): Een methode, waarbij 10 een 7a-methoxycefalosporine met de algemene formule 8, waar in R? een gemakkelijk door een nucleofiel reagens vervangbare groep voorstelt en Rj, A en B de boven aangegeven betekenissen bezitten, in reactie wordt gebracht met een verbinding met de algemene formule 9, waarin M2 een waterstof-15 atoom, een alkalimetaal of een aardalkalimetaal voorstelt en R^ de boven aangegeven betekenissen bezit.

De organische silylgroepen en de organische fosfor-bevattende groepen, voorgesteld door Rg in de bovengenoemde algemene formules, omvatten de groepen, die ge-20 woonlijk amino of carboxyl-beschermende groep bij de peni- cilline-en cefalosporine-synthese worden gébruikt, zoals (CH3)3Si-v (CH3)2Si< , pP-, ^>P-, (C2H50)2P- 25 en (C„H_)-P- die gemakkelijk worden verwijderd door een l 5 2 behandeling met bijvoorbeeld water of een alkohol.

De door R^ voorgestelde groepen, die gemakkelijk kunnen worden vervangen door een nucleofiel reagens, omvatten halogeenatomen, zoals chloor, broom en dergelijke, 30 lagere alkanoyloxy-groepen, zoals formyloxy, acetoxy, propionyloxy, butyryloxy, pivaloyloxy en dergelijke, aryl-carbonyloxygroepen, zoals benzoyloxy, naftoyloxy en dergelijke, arylthiocarbonyloxygroepen, zoals thiobenzoyloxy, thionaftoyloxy en dergelijke, arylcarbonylthiogroepen, 35 zoals benzoylthio, naftoylthio en dergelijke, arylthio- carbonylthiogroepen, zoals thiobenzoylthio, thionaftoylthio * * . ’ > 3

». « ; .„i '-J

* * m - 5 - en dergelijke, een carbamoyloxygroep, thiocarbamoyloxygroep, pyridine-N-oxyde-2-y1-groep en pyridazine-N-oxyde-6-yl-groep. Deze groepen, voorgesteld door kunnen verder sub-stituenten bevatten, zoals bijvoorbeeld een halogeenatoom, 5 nitrogroep, lagere alkylgroep, lagere alkoxygroep, lagere alkylthiogroep, acylgroep en dergelijke.

De verbinding met de algemene formule 5 wordt gemakkelijk verkregen door reactie tussen een alkalimetaal-zout, een aardalkalimetaalzout of een organische base-zout 10 van een verbinding met de algemene formule 10, waarin B

de boven aangegeven betekenissen bezit, en een reactief derivaat in de carboxylgroep van een verbinding met de algemene formule 3 in tegenwoordigheid van een zuurbindend middel en een inert oplosmiddel.

15 De verbindingen met de algemene formules 2 en 4 kunnen op een op zichzelf bekende wijze worden gesynthetiseerd, bijvoorbeeld als beschreven in Journal of Synthetic Organic Chemistry, Japan, Vol. 35, 568-574 (1977).

De praktische uitvoeringsvormen van de 20 bereidingsmethodes (1), (2), (3) en (4) zijn hieronder be schreven .

De methodes (1) en (2) kunnen onder nagenoeg dezelfde omstandigheden worden uitgevoerd. De verbinding 2 of 4 wordt opgelost of gesuspendeerd in een inert oplos-25 middel, zoals bijvoorbeeld water, aceton, tetrahydrofuran, dioxan, acetonitril, dimethylformamide, dimethylaceetamide, methanol, ethanol, methoxyethanol, diethylether, diisopropyl-ether, benzeen, tolueen, methyleenchloride, chloroform, ethylacetaat of methylisobutylketon, elk afzonderlijk of een 30 mengsel van twee of meer daarvan. Aan de resulterende oplos sing of suspensie wordt een reactief derivaat in de carboxylgroep van de verbinding 3 of de verbinding 5 of een reactief derivaat in de carboxylgroep van de verbinding 5 toegevoegd.

Men laat het mengsel reageren in aanwezigheid of afwezigheid 35 van een base bij -60°C tot 80°C, bij voorkeur -40°C tot 30°C. Een reactieduur van 5 minuten tot 5 uren is in het al- ► 8.

- 6 -Λ gemeen voldoende.

De bij de bovengenoemde reactie gebruikte basen omvatten anorganische basen, zoals alkalimetaalhydroxy-den, alkalimetaalhydrogeencarbonaten, alkalimetaalcarbona-5 ten en alkalimetaalacetaten, tertiaire aminen, zoals tri- methylamine, triethylamine, tributylamine, pyridine, N-me-thylpiperidine, N-methylmorfoline, lutidine, collidine en dergelijke, en secundaire aminen, zoals dicyclohexylamine, diethylamine, en dergelijke.

10 Wanneer de verbinding 5 of een zout daarvan bij methode (2) als uitgangsmateriaal wordt gebruikt kan de reactie worden uitgevoerd in tegenwoordigheid van een dehydratatie-condensatie-middel, zoals bijvoorbeeld N .N' -dicyclohexylcarbodiimide, N-cyclohexyl-N1-morfolino-15 ethylcarbodiimide, N.N'-diethylcarbodiimide, N.N'-carbonyl- bis(2-methylimidazool), trialkylfosfieten, ethylpolyfosfaat, fosforoxychloride, fosfortrichloride, 2-chloor-l.3.2-dioxa-fosfolan, oxazolylchloride, dimethylchloorforminiumchlo-ride en dimethylethoxyforminiumchloride.

20 De methode (3) wordt op de volgende wijze uitgevoerd: Een cefalosporine met de formule 6, op bekende wijze verkregen / Japanse octrooiaanvrage Kokai (gepubliceerd) 70,788/76 en 113.890/76 7, wordt opgelost of gesuspendeerd in een inert oplosmiddel, zoals bijvoorbeeld tetra-25 hydrofuran, dioxan, ethyleenglycoldimethylether, methyleen- chyoride, chloroform, dimethylformamide, dimethylaceetamide, acetonitril, methanol of dergelijke of een mengsel van twee of meer van deze oplosmiddelen. Aan de resulterende oplossing of suspensie wordt een alkalimetaalmethylaat 30 (7) samen met methanol toegevoegd, Het resulterende mengsel wordt in reactie gebracht en het reactiemengsel wordt vervolgens in reactie gebracht met een halogeneermiddel. Bij deze reactie wordt methanol in overmaat gebruikt en de gebruikte hoeveelheid van het alkalimetaalmethylaat (7) is 35 bij voorkeur 2-6 equivalenten per equivalent van het gebruik te cefalosporine (6). De uitdrukking " in overmaat" betekent * * - 7 - een hoeveelheid van meer dan één equivalent per equivalent van het cefalosporine (6). Alle bovengenoemde reacties worden uitgevoerd bij -120°C tot -10°C, bij voorkeur -100°C tot -50°C. Een reactieduur van 5-30 minuten is voldoende en 5 de reactie wordt beëindigd door aanzuring van het reactie- systeem.

Het bij deze methode gébruikte halogeneer-middel is in het algemeen bekend een bron voor het.ver- *|* 4* schaffen van een positief halogeenatoom, zoals Cl , Br 10 of J+, te zijn. Voorbeelden van dergelijke halogeneermid- delen zijn onder andere halogenen, zoals chloor, broom en dergelijke, N-halogeenimiden, zoals N-chloorsuccinimide, N-broomsuccinimide en dergelijke, N-halogeenamiden, zoals N-chlooraceetaraide, N-broomaceetamide en dergelijke, N-15 halogeensulfonamiden, zoals N-chloorbenzeensulfonamide, N-chloor-p-tolueensulfonamide en dergelijke, 1-halogeen-benzotriazolen, 1-halogeentriazinen, organisch hypohalo-geniet, zoals tert.-butylhypochloriet, tert.-butylhypo-jodide en dergelijke, halogeenhydantoinen, zoals N.N-di-20 broomhydantoine, en dergelijke. Van deze halogeneermidde- len geniet tert.-butylhypochloriet de voorkeur. Het haloge-neermiddel wordt gebruikt in een hoeveelheid, die voldoende is voor het verschaffen van een positief halogeen in een hoeveelheid, equivalent aan die van het cefalosporine met 25 de algemene formule 6.

Geschikte zuren voor de beëindiging van de reactie zijn die welke, wanneer zij worden toegevoegd aan een koud reactiemengsel, geen stolling van het reactiemengsel of bevriezing van het reactiemengsel tot een zwaar vis-30 keus mengsel zullen veroorzaken. Voorbeelden van geschikte zuren zijn 98 %'s mierezuur, ijsazijn, trichloorazijnzuur en methaansulfonzuur.

Na de beëindiging van de reactie kan de overmaat halogeneermiddel worden verwijderd door behande-35 ling met een reductiemiddel, zoals trialkylfosfiet, natrium- thiosulfaat of dergelijke.

* • i - 8 -

Bij de uitvoering van bereidingsmethode (4) wordt, wanneer gebruik wordt gemaakt van een andere verbinding met de formule 8 dan de verbinding , waarin de groep R^ een heterocyclische aromatische amine-N-oxyde-thio-groep 5 met een thio-groep aan het koolstofatoom, aangrenzend aan de N-oxyde-groep, is, deze verbinding in reactie gebracht met een verbinding met de formule 10 in een inert oplosmiddel, zoals bijvoorbeeld water, methanol, ethanol, propanol, isoprqpanol, butanol, aceton, methylethylketon, methyΙ-ΙΟ isobutylketon, tetrahydrofuran, dioxan, acetonitril, ethyl- acetaat, 2-methoxyethanol, dimethoxyethaan,dimethylform-amide, dimethylsulfoxyde, dimethylaceetamide, dichloorethaan, chloroform, dichloormethaan en dergelijke, alleen of in een mengsel van twee of meer daarvan.

^ De bovengenoemde reactie wordt bij voorkeur uitgevoerd in een sterk polair oplosmiddel, zoals water. Het is voordelig de pH van het reactie-oplosmiddel op 2-10 en bij voorkeur 4-8 te handhaven. De reactie wordt bewerkstelligd na de toevoeging van een buffer, zoals natrium- 20 fosfaat, teneinde de pH op een gewenste waarde in te stellen. Hoewel de reactie-omstandigheden niet van kritisch belang zijn wordt de reactie in het algemeen uitgevoerd bij 0-100°C gedurende verscheidene uren tot verscheidene tienden van uren.

25

Wanneer een verbinding met de algemene formule 8, waarin de groep een heterocyclische aromatische amine-N-oxyde-thio-groep met een thiogroep aan het koolstof atoom, aan-grenzend aan de N-oxyde-groep, is, wordt gebruikt worden de verbinding met de algemene formule 8 en 30 een verbinding met de algemene formule 9 met elkaar in reactie gebracht in één of meer van de bovengenoemde inerte oplosmiddelen in tegenwoordigheid van een tweewaardige koperverbinding. Deze procedure is in het bijzonder bruikbaar wanneer de verbinding met de algemene formule 9 een alkohol, 35 zoals methylalkohol, ethylalkohol, propylalkohol, isopropyl- alkohol, n-butylalkohol, benzylalkohol, ethyleenglycol of ·· - '1 it - 9 - dergelijke is. In dit geval verloopt de reactie gemakkelijk bij toepassing van een overmaat van de alkohol, die als oplosmiddel dient. De bij deze procedure gebruikte tweewaardige koperverbindingen zijn anorganische of organische 5 tweewaardige koperverbindingen, zoals bijvoorbeeld cupri- chloride, cupribromide, cuprifluoride, cuprinitraat, cupri-sulfaat, cupriboraat, cuprifosfaat, cupricyanide, cupri-formiaat, cupriacetaat, cupripropionaat, cupricitraat, cupritartraat, cupribenzoaat en cuprisalicylaat. De gebruik-10 te hoeveelheid van de tweewaardige koperverbinding is bij voorkeur 0,5 mol of meer per mol van de verbinding mét de algemene formule 8. Hoewel afhankelijk van de types van de gebruikte verbinding met de algemene formule 8, de gebruikte tweewaardige koperverbinding en de gebruikte verbinding 15 met de algemene formule 9 is de reactietemperatuur in het algemeen 0-100°C en de reactieduur verscheidene minuten tot verscheidene dagen.

De omzetting van een verbinding met de algemene formule 1, waarin een carboxyl-beschermende groep is, 20 in een verbinding met de algemene formule 1, waarin R^ een waterstofatoom is, of een zout van deze laatste verbinding, de omzetting van een verbinding met de algemene formule 1, waarin een waterstofatoom is, in een zout of in een verbinding met de algemene formule 1, waarin R^ een carboxyl-25 beschermende groep is, of de omzetting van een zout van een verbinding met de algemene formule 1 in het vrije zuur daarvan kan op een gebruikelijke wijze worden uitgevoerd.

Bij de reactie van een verbinding, waarin de groep A, B of reactief is, kan de reactieve groep worden 30 beschermd met een beschermende groep, die gewoonlijk wordt gébruikt bij de bescherming van een carboxyl-, amino- of hydroxy1-groep. Na de reactie kan een dergelijke beschermende groep op een gebruikelijke wijze worden verwijderd teneinde de groep A, B of R2 terug te verkrijgen.

35 De omstandigheden voor de bereiding zijn niet beperkt tot die welke hierboven zijn beschreven, maar j* ♦ ï 4 - 10 - kunnen op geschikte wijze worden gemodificeerd in afhankelijkheid van het gebruikte speciale type reagens.

De isolatie van een 7a-methoxycefalo-sporine (1) of een zout daarvan uit het reactiemengsel kan 5 op een gebruikelijke wijze worden uitgevoerd.

De methodes voor de bereiding van een 7a-methoxycefalosporine met de algemene formule 1 en een zout daarvan zijn niet beperkt tot de hierboven beschreven methodes. Deze verbindingen kunnen eveneens via andere methodes 10 worden bereid.

De aldus verkregen 7a-methoxycefalosporinen met de algemene formule 1 en de zouten daarvan zijn zeer bruikbaar voor de therapie van menselijke en dierlijke ziekten vanwege hun brede antibacteriële spectrum tegen 15 gram-positieve bacteriën en gram-negatieve bacteriën, hun uitstekende antibacteriële activiteit tegen Pseudomonas aeruginosa, Klebsiella pneumoniae en Proteus species, en hun bestendigheid tegen β-lactamase.

De antibacteriële activiteiten van de 20 representatieve verbindingen lb van de 7a-methoxycefalo- sporinen volgens de uitvinding zijn aangegeven in tabellen A, B en C.

De waarden, aangegeven in tabellen A, B en C, zijn de minimale remconcentratie (MIC in mcg/ml) van elke 25 verbinding, die bepaald werd volgens de methode, beschreven

in Chemotherapy (Society of Chemotherapy, Japan), Vol. 16, 98-99 (1968): Een cultuur, verkregen door kweken van de proef-bacterie in een hart-infusie-medium (Eiken Kagaku Co.), werd geinoculeerd in een hart-infusie-agarmedium (Eiken 30 Kagaku Co.). Na een incubatie gedurende 20 uur bij 37°C

werd de groei van de bacterie onderzocht teneinde de minimale remconcentratie (MIC in mcg/ml) te bepalen. De inocula- 4 6 tie-hoeveelheid van de bacterie was 10 cellen/plaat (10 cellen/ml).

35 (1) Minimale remconcentratie (MIC in mcg/ml).

; - ^ ... -5 _ - 11 —

Tabel A

eenheid:irtcg/ml

x. Verbinding B

(lb) CS-I170 S

(controle) ?~ï

. \ r2 «sA^ir -SAyJT

N. CH- CBLQQQE

Bacteriën \ 2 *- ___\^_ 1__2_ S·. aureus F-19 (penicillinase- 1/56 3/13 6/25 vormende bacterie) E. coli HIHJ 0/39 40,1 40,1 JC. pneumoniae Y-50 0^39 0,39 6,25

Prot. vulgaris GF-76 3,13 0,2 0,78

Ps. aeruginosa I>200 ^5 25 rp 0-5445 _- [ ’ ___

Ser. marcescens ¥-8 =2200 25 50

Acinetobacter τη r nc iriüüHê^TA-6 50 12’5 25 C. freundii GrïT-346 (Cefalosporinase- ^200 25 50 vormende bacterie)

Ent, cloacae IID977 >200 25 25

Citrobacter ¥-7 25 0,78 1,56

Ser. marcescens , ,¾ n n no· ÏTO62S-1- 3’13 0)78 °>78

Klebsiella sot. T-72 12,5 6,25 25

Ser. τη-arceengns ¥—35 100 6,25 100'

Ps. aeruginosa S-68 2i20Q 12,5 50 OCH-: 3 q opm.·: CS-1170 betekent KCCHgSCHgCOMn f | « J— ΪΓ CH9S iT3" c-jo . : ·; ,, 0 C00H (k.

* > - 12 -

Tabel A (vervolg)

-CP

H—-ίί ΪΓ— ΪΓ ¥ = ÏT

-0C0CH3 -S -sA^ir-CH2CH2IT(CH5)2 CH2C0M2 CH2CH20ïï 6.25 3,13 3,13 - 6,25 ' <0,1 £ 0,1 - £ 0,1 io,i 1.56 0,39 0,39 0,78 1.56 0,78 0,39 3,13 50 . 12,5 12,5 50 100 25 50 50 25· . 6,25 6,25 25 100 12,5 25 50. ' 12,5 25 25 3,13 3,13 ’ 1,56 3,13 •3,13 0,2 0,2 0,2 6.25 1,56 1,56 50 12,5 12,5 _ 50 12,5 12,5 _

Tabel A (vervolg) - 13 - : Ïü ÏÏT—1Γ ,r ,τ Έ — Έ Έ — Ή Λ u 11 — ja .I i tl «

t b I I

CE2C32ïï(öE3)2 GH=CH2 CS2CE2m2 6,25 6,25 5,15 6,25 ^0,1 £0,1 <0,1 £0,1 0,78 0,59 0,59 0,78 1,56 0,78 0,78 0,78 50 25 25 12,5 50 25 25 50 | 12,5 12,5 12,5 12,5 25 100 12,5 25 25 100 25 50 6,25 12,5 5,15 5,15 0,59 0,78 0,2 0,2 12,5 1,56 ' 6,25 5,15 50 12,5 12,5 6,25 25 25 12,5 12,5

' -j 'l ·_ 1. V

Tabel A (vervolg) - 14 -

Jj [ ó ~

- ?””? F—F F—F ~ F—F

“S-^rF -sX^F -sXrF -sX^Jf

CH0C=FOH I | I

CH^ CÏÏ2COCÏÏ5 CHgCOFHOH CE^ 3,13 6,25 _ 25 3,13 1θ,1 <1 0,1 £0,1 £0,1 0,78 0,59 1,56 0,78 0,78 0,78 0,78 3,13 25 ' 25 12,5 12,5 50 50 100- 100 12.,5 25 1,56 6,25 . · 50 25 2200 25 ':25 · 50 200 25 6.25 6,25 50 6,25 0,2 0,2 0,78 0,78 ' 6.25 6,25 100 12,5 25 25 200 50 12,5 25 25 25 ^ ' *v * λ ,Λ

'?·* -.· d \β SJrn .'jJ

Tabel A (vervolg) - 15 -

-Q

Έ—Ή Έ—E Ή Έ Έ ΪΓ -sX^Jr -s-ï^ir -sX^ir CH^ CH2C0M2 GÏÏ2CH20H ch=ch2 6,25 6,25 6,25 '3,13 £0,1 <0,1 <0,1 <0,1 0,2 0,2 0,2 0,2 0,78 1,56 1,56 3,13 12.5 12,5 12,5 25 100 12.5 25 25 25 25 25 <0,1 <0,1 <0,1 <0,1 6,25 _

12.5 ____j_L

25 ·· * ' - ..j ^

Tabel A (vervolg) - 16 - Ή-r ___________ Ή—Ή Ή—Κ F — Ή -S-^KJr -S Λ ή,Ή -0000-SA g Λ CH5 cïï^ cH2com2 3,13 3,13 6,25 6,25 ^0,1 10,1 £0,1 <0,1 0,2 0,78 ' 1,56 5,13 3,13 12,5 12,5 25 25 .· 100 25 12,5 25 25 50 25 1,56 10,1 10,1 0,39 0,.39 1,56 6,25 25 '« - U -J, ο - 17 -

Overzicht onderzochte verbindingen.

(1) Verbindingen volgens de Nederlandse octrooiaanvrage 75.05375 T-I55I (Gefoperazone) o o y_^ *(d) __ C2RyN n—CONH-CH CONH —η—γ8 > Η Η ‘

cooh ch3 OH

T-1554 0 0 W *(D) - CZHSH N-CONH-CHCQNH —τ- ^^ X— CH^OCO CH3

[O) o' T

V1 CO OH

T-I555

Oo ^ #(0) _ '

m ° COOH

(2) Verbindingen volgens de uitvinding: s * r * - 18 - fi.

:Γ 't r T—1414 * id)

CjHyN N-CONH-CHCONH-!-/SN ff w l ^V-c„,sJir: \=j CO OH CH3 1-1461 *\)—. % (D) ?CHi C^HSN N— CONH— CH CONH—I jj J=j qJ CHgOCOCHj || ^=1 COOH i ;i T-1688 !| Ο Ο ΛΛϋ i1 ^ *(o) °cCHa _ ! QH5-N N- CONH— CH CONH—jty-Pf

<J=j q^~~~ N^"CHaS I

COOH CH?-C=NOH

TM689 . £Hs I

^ β . y (d) ' OCH3 C2H5fi N —CONH —CH CONH-j-^Sn ^ ^ ^=V 0^~— \=J COOH CH*COCH3 Τ-Ί70Ι °H° * (D) ?CH* ' .

C,HrN N-CONH-CHCONH—iπ W

w h I

^ COOH CHaCH^NH^ T-1658 Λ .

°H *(D) Γ% n-n

GHcN N-CONH-CHCONH —f—[1 |j N—f }=r\ J—-Nv^L-CHjS “*sn^N

- J ^ \j I t) S\=J COOH CH2C0NH0H

; ; - 19 - - T-1659 o O , . OCH*

M ',(D1 I S N-W

CiM N— CONH—CHCONH —f-S S [| |1 N ' J=j /-Nv^~CH?S ^n<n

\=] ° CO OH CHROOM

T-166I

°M° * (D) °ch3

CjHrflN—CONH—CHCONH —ί ^n, —N

^ CO OH C^CHgNfCHa^ T-I487 V<° *1« ?CH> N_m C^Hdi N-CONH —CHCONH 7 -f^N Ij ||

'—/ ^=j QJ-Nv^J—CHjS—Vjj|^N

w CO OH CH=CHe T-1488 °j /? *(0) ?CHi . _

CsHs-NN-CONH- CHCONH -f—^'S 0 — |ί W f]

\=J COOH CH*CH*OH

T-1482 °M° *(p) °CH>

CjHs-N N-CONH-CHCONH-f-r'^'S

^ , sH <y—V"C*S-VN

C00H CHiCONHj T-1462 ^ β #(θ) ?CH3

CzH-jNN-CONH-CHCONH -f-1 fj1

O;; j v=J u COOH

-20 - T—1711 ο Ο ' , OCHj -Κ(Ο) = _ C^Hj-N Ν — CONH— CHCONH —τ-r'®'') » ff ^ Λ „J-V-cb'sJ!·»'" KéJ cooh · ^ Τ-1719 °^>_β «(Dt) °chi

CjHjN N-CONH—CHCONH—P-f'5''. j f|

^ L óJ-A^cV-yN

°\J COOH CHj T-ï 753 $ (DL) ?CHl C2HrN n— CONH—CH CONH u f}1

W /J * H^-VN

s Q . T I

COOH CH3 nh2 - 21 - :

rt\ vO vO vO 00 O CO O* vO

£ - £ in tn r- o p- λ tn *n vO -> ·< - ·> - — ~ " " _Γ

5 O ~ — o O o - <N

H Vil co VO VD vO 03 O 03 03 'fj ίη — u~> m m p* o p' ^

^ V* « -Γ O* " o‘ O - M

I ” E-> V» _ co en oo co ui O — 04 ” — cm O — r- — o cT o" <n o“ «n o* *o « H Vlf r*o\er\vo co co *0 ^ CO CO CO IA CM O — ^ ^ ^ vO Λ Λ * * ~ . * — o O O o COO^Ö E-* 'ill co 03 00 PO _ Μ <2 Jf) 1*

CO — CO Γ"* — CM O -- p~ P'· “V

S·*** « « * «o * “ * _ o O O CO O COO^OP^ H Vil „ cooveocnO-OoC'O^ o _ “ co — — o *n r- uo cm <f Λ Λ Λ * · Λ *" * * * — Ο Ο Ο οο d — Ο —

^ VII

3 ' I 5-2 S £ “ ÏÏ S'cm £ -ο

Η 5 ο <ο" ο - ο - Ο - CJ

Vrf irt 00 Ο 03 Ο “0 Ο £ — Ο CM Ο Γ» Ο - “3 CM “Ο m *> ui «uo «cm ~ « — o o o ^ .co l·* Vl!

5 s s “ s ui o S- s I'S

*7 O ~ O* OM CM —

Η — /V

— a\ CO O MD UI O O

UI—.UÓ CO «Λ Γ-- O UO CM O UO

I/O λ CM * «*>CM « —' — O O CM O — H Vfl ~ . 01 ui

CC I

o <U <U <11 ω i-jcoca rj o ü οι oi o -r· I -H — f—/ 03 01 -M 01 -fM 2 _

ij kV Ö C <U CJ f“I "r-1 i—l O 'O

5 f-ί O o CJ O O **M c O I

g g s-ι cm ^ * ja — ta:c o *-j < •rl ·Η 3 0 ~Ά ca Ό «3 * <0 — MM3 «J C .

,-j t—i ojuo ai<r g C ε CO Ju — <-< r·. cd—· o cn O O Cl Cl * M *| ---11 3 2: CM I -3 o cj o. o. >- J-/M U3= E H > o «ca -na

«.. . ai ai · · i—i ο-H

cuwiil MüocnfriCi-Mï'Mi^ , - -4 - J '* ^ - 22 - m σν o oo co en m u-ι — — cs. en — O r-- r-~ — cs fS Μ Λ Λ Λ Λ Λ Λ Λ — ο Ο Ο Ο Ο Ο Ο en

ε!η Mil Vil VII

σν οο ο S3 οο οι . ~ CS |-* — Ο ιΠ Ρ- — ιπ ^ Μ Μ η Α Α Λ Λ Λ Λ — οο.ο ο ο — ο co cs Η vil VU Vil' ” _ comco oincntnin — — cs ρ» cs p- ο cs — cs cs fS A A A Λ ‘ « ^ Λ Λ Α Λ „OO'OvOO S3 en S3 S3 cL, ν/ι <u 051 Η *Η w 0 Vi

•Η ·Η <U

0 Μ -U

ο cs unovencommcocn 0 ο tg \ο ' — es en — ρ* es cs ρ* — in jjcö

ft ft. ft Λ Λ Λ ft » « Ο JO

— ο 'Λ Ο en O vö oencs 0 .

ι — ja ω τ< 6-| \ί il rS Π3 ·'

1 4 ΐ S

? 00 C £ VB 2 £ τ—* Ρ Ρ ο οο en σ> οο m οο οο sain ·· u ρ > sr — — en . ρ- cs es ρ. m es Ό Ο ! J_l —, ί\ Α ο η ft ft. ft ft. ft «Η ^ 0 0 1 O en O O O O O — sa 2 I 2 > h ., „ 'S ω 2

Vil Ö oi c 00--(

0 C U

•H o

f—^ r—1 CU

co en σΊ ca o οο σι vo »n £ R w oo — — en p. es m p. en m es ^ r o ^ η n A a a Λ A A A M Ü ^ — oen o o o -o o — sa 0'H« ι , ι-t C os eL \ II . i—10 0

^ 0 &4 O

O

M ··

vO

f^, CO ’OSCO lACHCOCO O ri ‘5 co«— —> en — 04 cN — r·* m — £

MM «% #» «l MMMM

— o en O en O en o en es ^ -vin — co en en . o en o vo— — r» — en in — m un m vo * Α μ a μ . ft ft ft es — σ o o en o en — es ' H νή Mn ” en en cc ι S! . 0 0 0 0 0 *n en’ ed ei o o w eno 53 ι *h *i-t en oi R oi R w M3eJC C 0 0 R R η 0Ό 2 h o o ooa r >s>e « 01 £ E u es υ X ja — 0* a --1-05 •H -H 3 0 3X 0 vQ 0 X 0 — . 00 vO 0 0 r r 0m 0sr £o E co υ — r p. 0·— uoi O O Cl c’l · R · I R I 32 RI *3 o υ o.>H &.>i hr us θ Η ρ ο · ca -hu ·. . . 0 0 . · R 0*1-1

fJ Cdfcrf Pi ca ca cu P* < < R

.Λ \ ..5 ij -, j >,< v '-j - 23 —

Tabel C

Vergelijkend onderzoek tussen enerzijds de verbindingen volgens de Nederlandse octrooiaanvrage 75.05375 en het Franse octrooischrift 2.338.944 en de verbindingen volgens de uitvinding.

_T-1551 T-1559 T-1711 T-1719 T-1753 E.coli TK-3* 25 1,56 0,2 5 0,1 50,1 K. pneumoniae Y-50 0,39 0,78 0,78 0,2 .0,2 K.pneumoniae Y-4* 12,5 3,13 6,25 0,78 0,39

Ser.marcescens IID620 0,78 0,78 0,78 5 0,1 <0,1

Al.faecalis I B-l 100 3,13 6,25 3,13 3,13 g 10 cellen/ml eenheid: jxg/mL * : Penicillinase-vormende bacterie

Opmerkingen bij tabel:

Representatieve verbinding van de Nederlandse octrooiaanvrage 75.05375 T'1551 0_0 *(0)

Ww(j-C0NH-CHC0MHn-N — N

W lAi J-JL /N

O CT I

T COOH L

OH CHJ

Λ ^ Λ / ’> ;> - 24 -

Representatieve verbinding van Frans octrooischrift 2.338.944 T-1559 0 0. , , OCHi W * (D) _

_N-CONH—CHCONH -f-r^SN N

· W (h 0^Nr\CH,S^N^

^ COOH I

CHj

Verbindingen volgens de uitvinding Τ-Ί711 η n OCHi °y_^° *(d) / _ C2HrN N-CONH-CHCONH -f—π ,1 w ó COCH iHi T-1719 °yj.° *(0L) PCH5

CjHfW N-CONH-CHCONH-^-r^S N π

^ C00H I

CH3 ^ Λ Λ ) __ΐ

*·ϊ· ✓ i \J

« V - 25 - T-1753 0 0 *(DL) Ρ*

r~i 1 / N-N

C,HjN N-CONH-CHCONH-f—S > || - j=j /“N C0C1H CH, MHi * > % \ - 26 - (2) Bestendigheid ten opzichte van β-lac-tamase.

De bestendigheid ten opzichte van β-lactama-se werd onderzocht door jodometrie bij 30°C volgens de 5 methode van Perret /"c.J. Ferret, "lodometric assay of penicillinase", Nature 174, 1012-1013 (1954)uitgezonderd dat een 0,1 M. fosfaatbuffer-oplossing (pH = 7,0) werd gebruikt in plaats van de 0,2 M. fosfaatbuffer-oplossing (pH = 6,5). De bestendigheid (stabiliteit) van elke 10 verbinding is in tabel D aangegeven in termen van de rela tieve hydrolyse-graad, waarbij verondersteld wordt dat de stabiliteit van Gephaloridin (CER) ten opzichte van cefalosporinase 100 is en de stabiliteit van penicilline G (PC-G) ten opzichte van penicillinase 100 is.

15 - 27 - Η <μ ο cn o- Η Ο Ο Ο Ο —J >· A ·Χ Λ ^ Ι Ο ο ο ο ο

& V ν V

--.-1---*=% ^ S— Ο 03 Ο 'Φ Η ^ <Μ ,-,__/ Η η σ> w ° Η 02

CM

------ W

Ο

fc{ Ο Ο ΙΑ Η CO I S

§ ° Η Η * „Hf \-------η γ*

ε I

« ώ κ S ρ cm CM Ο ο ο Ο \0 Μ- Ρη Η Η Η § ^ 2 £ S-Π +» to ι \ / ° 13 ι 03 ΤίΞ . § 02 ω "ω ® <Μ 3: HO Ο

If g S ο Φ d 2'

*3 5 ΙΟ S3 0Λ d CQ

C Η I Φ I Ή Ο ]

0) Ρ S ο W S3 Ö JJ

Μ Ή Ο !Π · Β Ο 2 μ Ο S μ£ ^ ® 3 3 £ η I 2 - g° ^ 0 Ο d Ο Ö Φ ·Η ffi Λ Ο εΐ Ο- Pi Cd Η

U, · · · · «Ν W

Ο pqj cal PQ1 WI Λ( d ο τΗ Μ 1 . ® β

0 - Ο (U

01 «5 "r m

Sum S $ •H 2 d Φ Λ

U o S3 -P

o § -η ω 2 2 ft λ ’% 5. ^ 5* ill ,, P S Ν ή h g . g rj u è*

S I Η H

(¾ SJ d ·η

O g Λ O

o > ft . -H

ω S3 , o CD a II p* si

* o · - A o V

„ " . - · J *- ·.. „ - ν Λ -> * * y - 28 - (3) Remdosis ten opzichte van β-lactamase.

De remdosis (ID<.q) van T-1414 ten opzichte van β-lactamase is die welke is aangegeven in tabel E, zo-5 als bepaald volgens de jodometrische methode van Perret onder gebruikmaking van Cefazolin.als substraat.

Tabel E

Remdosis t.o.v. β-lactamase 10 Cefalosporinase- ID50 ^ Wï/ih1) vormende bacteriën_ E.coli GN-5482 0,82 S. marcescens W-8 0,54 C. freundii GN-346 1,7 15 (4) Tegen infectie beschermende activiteit. Groepen van vier weken oude mannetjes muizen van de ICR-stam, waarbij elke groep bestond uit vijf muizen, werden intraperitoneaal ingespoten met een van te voren 20 bepaalde hoeveelheid van een pathogene bacterie, gesuspen deerd in 5 %Vs gomoplossing. Na 1 uur vanaf de inspuiting werd aan de muizen subcutaan het te onderzoeken preparaat toegediend teneinde de tegen infectie beschermende activiteit te bepalen. De verkregen resultaten zijn aangegeven 25 in tabel F. De waarden in tabel F geven de beschermende

activiteit in termen van de ED

- 29 -

O

a r—i *> 1 Ώ n O GO H u S Λ O - Ö S9---- ® +1 m S3 . w OSH -tf* o | oi 5 ω < ' ^Βί .. H o" s « * Λ Ο

. -' ' —. ~~ ’" 1,1 1 rH

φ Η Ο Λ Φ C— (3 λ Η Ο Ο -Ο <0 +» Η Ο Ο -(-1^ •Η I <Μ Η ,η ® εα λ -η £ ο " Λ > . H Ό Χ> S ^ Ρ-} Φ Φ ο \ Η in cvi -η φ ίΰ Μ ^ *» ^ ö ·η

5-1 i 2 ^ ΰ -S

Ή J5, Λ Φ «Η ö — ^ «α φ

ο __ φ tS

go 01 Φ *· ® S Ό -- 0J °* OW β S ö a *3 S ϋ ' \ο - Ά α

2 φ 8&Ö5 ωο ο § I

•Η > Φ +J ·~ί Η Η TS Φ θ' Ο Φ ® ^ Ο Ο G Φ Ο $ g φ .η-μ % $ 5 ‘51 · « « ο ·η « a ? · ΐΛ . ο ΙΗ Η1 3 Η '33

'&ι \ * W V

• Φ > ^ Ο Β Φ Φ

+J ι—I

•Η Η OJ

D Φ ö

^ I

--—-·- Ο m ö 0) ο

CQ

ω i ο - * 1 § 0 I J3 S m

01 V

! col sï - 30 -

De 7a-methoxycefalosporinen volgens de uitvinding bezitten een lage toxiciteit. Zo vertoonde bijvoorbeeld T-1414 een LD^ van 5 g/kg of hoger (muizen van de ICR-stam; intraveneus).

De 7a-methoxycefalosporinen volgens de uitvinding met de alge-5 mene formule 1 en de farmaceutisch aanvaardbare zouten daarvan kunnen aan mensen en dieren worden toegediend in de vorm van het vrije zuur of in de vorm van een farmaceutisch aanvaardbaar zout of een farmaceutisch aanvaardbare ester. De verbindingen kunnen worden gerecepteerd tot de verschillende doserings-vormen, die gebruikelijk zijn voor penicilline- of cefalosporine-preparaten, 10 bijvoorbeeld capsules, stropen en injectie-vloeistoffen, en kunnen oraal of parenteraal worden toegediend.

De uitvinding wordt verder toegelicht maar niet beperkt door de volgende voorbeelden, waarin de percentages, tenzij anders is aangegeven, gewichtspercentages zijn.

15

Voorbeeld I

(1) In een mengsel van 20 ml watervrij chloroform en 5 ml watervrij tetrahydrofuran werden opgelost 0,80 g difenylmethyl-76-/ D(-)-a-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecarboxamide)-a-(2-thienyl)-20 aceetamidoy^V 5-(1-raethyl-l.2.3.4-tetrazolyl)thiomethyl_/-&3-cefem- 4-carboxylaat. De oplossing werd afgekoeld tot -70° C en onder handhaving van de temperatuur op -70° C werden aan de oplossing 3,5 ml van een methanol-oplossing van lithiummethoxyde (1,425 mmol/ml) toegevoegd. Na 3 min. roe-ren werden aan het resulterende mengsel 0,18 ml tert.-butylhypochloriet toege-25 voegd en werd gedurende 15 min. bij dezelfde temperatuur geroerd, waarna 0,29 ml azijnzuur en 0,1 ml triethylfosfiet in deze volgorde werden toegevoegd. De temperatuur van het reactiemengsel werd vervolgens verhoogd tot kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd gebracht in 25 ml van een citraat-bufferoplossing (pH 7,0). De organische laag werd afgescheiden, gewassen 30 met water, gedroogd boven magnesiumsulfaat en van oplosmiddel bevrijd door destillatie onder verminderde druk. Het residu werd gezuiverd door kolom-chromatografie (stationaire fase: silicagel; elueermiddel: een 1:1 mengsel Vein benzeen en ethylacetaat), waarbij men verkreeg 0,50 g difenylmethyl-76-/ D(-)-a-(4-ethyl-2,3-dioxo-l-piperazinecarboxamido)-a-(2-thienyl)-35 aceetamido_/-7a-methoxy-3-/> 5- (1 -methyl-1.2,3.4-tetrazolyl) thiomethy 1__/- , &3-cefem-4-carboxylaat; opbrengst 60,2 %.

Λ _ Λ ( '?V O Vl· i - 31 - IR (KBr) cm Sv C = O 1775, 1705, 1675.

NMR (CDCl^) δ waarden: 1,09 (3H, t, -CH ), 3,20-3,65 (611, m, >CH2 x 3) , 3,46 (3H, s, —CH,) , 3,65-4,65 <2H, m, >CH ) , 3,75 (3H, s, -CH ) , 4,31 {2H, Abq >CH ) , 5 4,97 (1H, s, ^CH) , 5,88 (lil, d, -^CH), 6,80-7,47 (14H, -CgHg x 2, sj , ^CH) , 8,12 C1H, s, 9,72 (1H, d, >NH).

(2) In 2,0 ral anisool werden opgelost 0,3 g 10 difenyl-75-/^ D(-) -a-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecarboxainido) -a- (2- thienyl)aceetaraido_/-7a-methoxy-3-/i 5-(1-methyl-l.2.3.4-tefcrazolyl)thio-methyl_/-A^-cefem-4-carboxylaat. Λan de oplossing werden onder afkoeling met ijs toegevoegd 2,0 ml trifluorazijnzuur en het mengsel werd gedurende 30 min. bij dezelfde temperatuur geroerd. Na de voltooiing van de reactie 15 werd het oplosmiddel door destillatie onder verminderde druk verwijderd.

Aan het residu werden toegevoegd 5 ral ethylacetaat en 5 ml water en de pH van de oplossing werd ingesteld op 7,0 met een waterige natriumhydro-geencarbonaatoplossing. De waterige laag werd afgescheiden en gemengd met 10 ml vers raethylacetaat, waarna de pH daarvan werd ingesteld op 2,0 met 20 2N chloorwaterstofzuur. De organische laag werd afgescheiden, gewassen met water, gedroogd boven magnesiumsulfaat en van oplosmiddel bevrijd door destillatie onder verminderde druk. Het residu werd gewassen met diethylether, waarbij men verkreeg 0,20 g wit 7B-(_ D(-)-a-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecarboxamido)-o-(2-thienyl)-aceetamido_/-7o-raethoxy-3-25 5-(l-methyl-1.2.3.4-tetrazolyl)thiomethyl_y-A3-cefem-4-carbonzuur; opbrengst 83,3 %.

IR (KBr) cm”1: v C * O 1770, 1705, 1695, 1675.

NMR (DMSO-d.) 6 waarden: 6 1,12 (3H, t, -CH3), 3,20-3,70 (6H, ia, >CH2 x 3), 3,46 (3H, 30 s, -CH3), 3,70-4,35 (4H, m, >CH2 x 2) , 3,95 (3H, s, -CH3), 503 (1H, s, ^CH), 5,80 (1H, d, ^-CH), 6,95-7,30 (2H, m, ν,Η

S I }, 7,40-7,55 ' II

(lH,m, SJ), 9,70-9,90 (2H, m)NHx 2).

35 h ; · % *** '· -5 * - ** - 32 —

Op analoge wijze werden de volgende verbindingen verkregen.

70-L D(“)-a-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecarbox-amido)-a-(2-thienyl)-aceetamido_/-7a-methoxy-3-/ 5-{1-carboxymethyl-5 1.2.3.4-tetrazolyl)thiomethyl_/-A3-cefem-4-carbonzuur; smpt. = 60° C

(ontl.).

IR (KBr) cm"1: \> C =· O 1770, 1705, 1670 NMR (DMSO - de): δ waarden;

O

1,09 (3H, t, -CH3) , 3,11-3,72 (6H, m, x 3), 3,41 10 (3H, s, -CH3), 3,76-4,60 (411, m, >-Clï2 x 2), 5,04 (1H, s, ^CH), 5,26 (2H, s, >>CH2), 5,90 (1H, d, ^CH) , 6,92-7,26 (2H, m,

Η H

ö >· 7,39-7,50 (1H, m, II), 9,68-9,79 (2H, ra, ^>NH x 2).

15 70-,/ D(-)-a-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazine- carboxamido)-a-(2-thienyl)aceetamido_/-7a-methoxy-3-acetoxymethyl-A - cefem-4-carbonzuur; smpt. 150° - 165° C (ontl.).

IR (KBr) cm"1: v C = O 1775, '1720, 1705, 1675.

NMR (DMSO- d.): δ waarden: 6 20 1,07 (3H, t, -CH3), 200 (3H, s, -CH3), 3,19-3,72 (6H, m,' >CH2 x 3), 3,42 (311, s, -CI^) , 3,74-4,12 (2H, m, >CII2), 475 (2H, ABq, >CII2), 5,10 (1H, s, ^CH), 5,89 (1H, d, ^CII), 6,89-7,22 (2H, m,

Η H

), 7,40-7,51 (1H, m, JP'l^ H) , 9,65 (lH, d, >NH) , 9,81 (1H, s,

25 S S

> NH).

Voorbeeld II

In 15 ml water werden gesuspendeerd 1 g van het 70-/ D (-) -a- (4-ethyl-2, 3-dioxo-l-piperazinecarboxamido) -a- (2-thienyl) -30 aceetamido /-7a-methoxy-3-acetoxymethyl-A^-cefem-4-carbonzuur, verkregen in voorbeeld I, en 0,34 g 5-mercapto-i-carbamoylmethyl-l.2.3.4-tetrazool. Aan de suspensie werden 0,28 g natriumhvdrogeencarbonaat onder roeren toegevoegd. Men liet de resulterende oplossing reageren bij 55-60° C gedurende 20 uren onder instelling van de pH van het reactiemengsel op 35 6,0-6,3. Na de voltooiing van de reactie werden 20 ml methylacetaat aan (y ·' 'i ···» -λ .λ '·

üov : viU

- 33 - het reactiemengsel toegevoegd en de pH van de oplossing werd ingesteld op 2 door druppelsgewijze toevoeging van 2N cnioorwaterstofzuur. De methyl-acetaatlaag werd afgescheiden en de waterige laag werd drie maal geëxtraheerd met 15 ml porties methylacetaat. De organische lagen werden gecom-5 bineerd, gedroogd boven watervrij magnesiumsulfaat en drooggedampte Het residu werd opgelost in 20 ml aceton. Difenyldiazomethaan werd druppelsgewijze onder roeren toegevoegd aan de resulterende oplossing totdat de kleur aanwezig bleef. De oplossing werd van oplosmiddel bevrijd door destillatie onder verminderde druk en het residu werd gezuiverd door 10 kolomchromatografie (stationaire faser silicagel; elueermiddel: 1:3 mengsel van benzeen en ethylacetaat), waarbij men difenylmethyl-7B-/ D(-)-a-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecarboxamido)-a-(2-thienyl)-aceetamido_/-7a-methoxy-3-/> 5-(1-carbamoylmethyl-l.2.3.4-tetrazolyl)thiomethyl_/-A^-cefem-4-carboxylaat verkreeg in de vorm van een enigszins geel poeder.

15 Aan deze verbinding werden onder afkoeling met ijs toegevoegd 3 ml anisool en 3 ml trifluorazijnzuur. Men liet het mengsel gedurende 60 min. onder afkoeling met ijs reageren. Na de voltooiing van de reactie werd het reactiemengsel van oplosmiddel bevrijd door destillatie onder verminderde druk. Aan het residu werden toegevoegd 10 ml ethylacetaat en de gepreci-20 piteerde kristallen werden verzameld door filtratie, waarbij men verkreeg 0,32 g 78-/ D(-)-a-(4-ethyl-2„3-dioxo-l-piperazinecarbanido)-a-(2-thienyl)-aceetamido_/-7a-methoxy-3-/_5-(1-carbamoylmethyl-l.2.3.4-tetrazolyl)thio-methyl /-Λ^-cefem-4-carbonzuur; smpt. 145° - 150° C (ontl.); opbrengst 27,6 %.

25 IR (KBr) cm"1: v C = O 1775, 1670-1720 NMR (DMSO - dg): 5 waarden: 1,10 (3H, t -CH3>, 3,20-4,10 (8H, m, ">CH2 x 4), 3,44 (3H, s, CH30 -), 4,34 (2H, ABq, >CH2) , 5,10 (2H, s, >CH2), 5,19 (1H, s, ^CH), 5,95 (1H, d, ^CH), 6,91-7,88 (5H, m, 30 H N_ hJi l , -CONH2), 9,70 (1H, d, ]>NH), 9,05 (1H, d,^>NH),

S

Op analoge wijze werden de volgende verbindingen verkregen.

35 - 34 - 7β—/_ D (-) -α-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecarbox-amido)-a-(2-thienyl)aceetamido_/-7a-methoxy-3-{5-/_ 1-(2-hydroxyethyl)- 1.2.3.4-tetrazolyl_/thioraethyl}-i!^-ce£em-4-earbonzuur; smpt. 125° - 130° C (ontl,).

5 IR (KBr) cia'1: v C = O 1770, 1720-1670 NMR (DMSO - d,_) : δ waarden: 6

1,12 (3H, t, -CH ), 3,20-4,50 (1411, m, >CH2 x 7), 3,40 (3H, s, CiI3'o'-), 5,00 (1H, s,-^CH), 6,05 (1H, d,-^CH), 6,05-7,60 (3H, m, Η H

ID H W ), 9,70 (1H, d, y NH) , 9,86 (1H, s,>NH).

76~L D (-) -cl- (4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinocarbox-amido)-a-(2-thienyl)-acetamido_/-7a-nethoxy-3-/_ 3-(6-hydroxypyridazinyl)-thiomethyl_/-A^-cefera-4-carbonzuur; smpt. 155° - 160° C (ontl.).

15 IR (KBr) enf1: υ C = O 1765, 1700, 1665 NMR (DMSO - d_): 6 waarden:

O

1,10 (3H, t -CH ) , 3,20-4,30 (10H, m, >CH, x 5), 3,41 J <· (3H, s, CH3 O -) , 5,02 (1H, s,^CH), 5,05 (1H, d, ^CH) , 6,70-7,50 (5H, m,

Η Η Ηκ— ύ H

\_/ (f 20 H_[! li NrN ), 9,70 (1H, d, J>NH) , 9,85 (1H, s,J>NH).

S

7β-/ d(-)-a-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecarbox-amido)-a-(2-thienyl)aceetamido__/-7a-methoxy-3-/> 5-(2-methyl-1,2.3.4-tetrazolyl) thiomethyl_/-A^r-cefem-4-carbonzuur, smpt. 165° - 174° C (ontl.). 25 IR (KBr) cm"1: v C ~ O 1770, 1710, 1670.

NMR (DMSO - d,): ówaarden/:

O

1,07 (3H* t, -CH3), 3,20-3,76 (6H, m, >CH2 x 3), 3,41 (3H, s, CH30-), 3,76-4,2Ö (4H, m, >Cli2 x 2), 4,39 (3H, s, >N-CH3), 5,04 (1H, s, >CH) , 5,90 (1H, d, ^CH) , 6,89-7,25 (2H, ra,

30 H_ H

JT T ), 7,35-7,48 (HI, m X JL H) , 9,60-9,77 (2H, m, > NH x 2).

S 5 7β-/ D(-)-o-(4~ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecarbox-amido)-n-(2-t,hienyl)aceetamido_/-7a-methoxy-3-/> 5-(1.3.4-thiadiazolyl)-33 thiomethyl_/-A^-cefem-4-carbonzuur, smpt. 160° - 175° c (ontl.).

c 'j , -j 2, 5 - 35 — ? ' t IR (KBr) cm"1: υ C = O 1780, 1710, 1675 NMR (DMSO - d_): δ waarden: Θ 1,09 (3H, t, -CH3), 3,21-3,75 (6H, m, >CH2 x 3), 3,43 (3H, s, CH30-}, 3,75-4,10 (211, m, >CH2), 4,40 (2H, ABq, >CH2) , 5,14 5 (1H, s, ^rCH) , 5,94 (1H, d, ^CH) , 6,91-7,39 (211, m,

H_j H _ N N

Jr Jj ), 7,40-7,53 (1H, m, JQ- H), 9.,53 (1H, s, jf jP H ), 9,65- 9,84 (2H, ΐί,/ΝΗχ 2).

10 78-/ D(-)-a-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecarbox- amido}-a-(2-thienyl)aceetamido_/-7a-methoxy-3-/ 5-(l-vinyl-1.2.3.4-tetra- zolyl)thiomethyl_/-i -cefem-4-carbonzuur, smpt. 150° - 153° C (ontl.).

IR (KBr) cm-1: υ C · O 1770, 1710, 1700, 1665.

NMR (DMSO - d,.) : δ waarden: o 15 1,10 (3H, t, -CH3), 3,20-3,70 (6H, m, >CH2 x 3), 3,43 (3H, s, -CH,), 3,80-4,55 (4H, ra, >CII, x 2), 5,10 (lH, s, ^CH), 5,46 J L·.

(1H, d, = CH), 5,03 (1H, d, = CH) , 5,94 (lil, d, ^CH) , 6,90-7,52 (4H, m,

II H

j[ , = CH-), 9,70 (1H, d, >NII), 9,86 (lH, s, ^NH).

20 ^ 7S-/_D(-)-a-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecarbox- amldo) -a-(2-thienyl)aceetamido__/-7a-methoxy-3-/_ S-/_ 1- (2-hydroxyiminopro-pyl)-1.2.3.4-tetrazolyl__/thiaraethyl_/-A^-cefera-4-carbonzuur, smpt. 165° -172° C (ontl.).

IR (KBr) cm"1: υ C - O 1775, 1705, 1675.

25 NMR (DMSO - d-):δwaarden: o 1,09 (3H, t, -CH3), 1,58 (1,7h, s, -CH.^ , 176 (1,3H, s, -CH3), 3,18-3,69 (6H, m, >CH2 x 3), 3,49 (3H, s, -CH3) , 3,77-4,20 (4H, m, >CH2 x 2), 5,05 (3H, m, ^CH, , 857 (1H, d,-^CH), 6,85-7,25

(2H, m, Η H

30 \ jf ), 7,40-7,44 (lH, m, JQL H) , 9,60 (1H, d, >NH) , 9,65 (1H, s >NH).

78-/ 0(-)-a-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecarbox-araido)-a-(2-thienyl)aceetamido_/-7a-methoxy-3V 5-(l-acetylmethyl-l.2.3.4-35 tetrazolyl)thiomethyl_/-A^-cefem-4-carbonzuur, smpt. 164° - 175° C (ontl.).

A

- 36 - IR (KBr) ctn'1: v C = 0 1775, 1720, 1705, 1675.

NMR (DMSO - d,.): 6 waarden: 6 1,10 <3H, t, -CH ), 2,27 (3H, s, -CH ) , 3,10-3,70 (6H, m, >CH2 x 3), 3,43 (3H, s, -CH ) , 3,75-4,20 (4H, m, ^ CH, x 2), 4,40 5 (2H, a,^CH ), 5,00 (1H, s,^ai), 5,45 (1H, d,^CH) , 6,95-7,32 (2H, m,

H_ H

]i jJ ), 7,40-7,47 (1H, m, o H) , 9,45-9,67 (2H, m,^NHx2).

^ 7β-/_D(-)-a-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecarbox- araido)-a-(2-thienyl)aceetamido_/-7a-methoxy-3-{-5-,/ 1-(hydroxyaminocarbo-10 nylraethyl)-1.2.3.4-tetrazolyl_/thiomethyl}-A^-cefem-4-carbonzuur; srapt.

160° - 170° C (ontl.).

IR (KBr) cm-1: v C = O 1770, 1710, 1700, 1665.

NMR (DMSO - d.): 6 waarden: 6 v.

1,11 (3H, t, -CH ), 3,20-3,70 (6H, m, >CII2 x 3), 3,40 15. (3H, s, -CH3), 3,80-4,65 (411, m, >CH, x 2), 5,07 (III, s, ~CII), 5,28 (2H, s,_>CH2), 590 (111, d,^CIl), 6,90-7,50 (3H, m,

Η H

HÏ ί ), 9,67 (1H, d, >NH) , 9,01 (lil, s, >NH).

S

20 Voorbeeld III

In 10 ml van een waterige oplossing, bevattende 0,27 g natriumhydrogeencarbonaat, werden opgelost 1 g TQ-/_ D(-)-a-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecarboxamido)-a- (2-thienyl)-aceetamido_/-7a-methoxy-3-acetoxymethyl-A^-cefem-4-carbonzuur en 0,17 g 5-mercapto-l,2.3.4-25 tetrazool. Nadat de pH van de oplossing was ingesteld op 6,4 liet men de oplossing gedurende 20 uren bij 60° C reageren. Aan het reactiemengsel werden toegevoegd 10 ml raethylacetaat en 5 ml ethylacetaat. Nadat de pH daarvan was ingesteld op 2,2 met 2N chloorwaterstofzuur werd de organische laag twee maal gewassen met 10 ml porties water, gedroogd boven magnesium-30 sulfaat en van oplosmiddel bevrijd door destillatie onder verminderde druk. Het residu werd gezuiverd door kolomchromatografie (stationaire fase: silicagel; elueermiddel: een 1:2 mengsel van benzeen enethylacetaat) waarbij men verkreeg 0,39 g TQ-/_ D(-)-a-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazine-carboxamido)-a-(2-thienyl)aceetamido_/-7a-methoxy-3-/ 5-(1.2.3.4-tetrazo-35 lyl)thiomethyl_/-A^-cefem-4-carbonzuur; smpt. 178° - 183° C (ontl.); ^ * - i ij Z, -j 1 - 37 - IR (KBr} en”1: V C = O 1770, 1690, 1670. Opbrengst 36,48 %.

NMR (DMSO - d-): δ waarden:

O

1,08 (3H, t, -CH3), 3,18-3,70 f6H, m, ,>CH2 x 3), 3,40 {3H, s, CII^O-}, 3,70-4,10 (4K, m, >»CH2 x 2), 5,07 (lil, s, ^-CH) , 5,89 5Γ (1H, d, ^CII), 5,87-7,20 (2H, m,

Η H

X? ) , 7,39-7,50 (1H, m, H ), 9,65 (1H, d, >NH), 9,81 (1H, s, ^>NH) .

jq Op analoge wijze werd de volgende verbinding verkregen.

70-/ D(-)-a-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecar-boxamido)-a-(2-thienyl)aceetamido__/-7a-methoxy~3-/_ 5-(1.2.3.4-triazolyl)-thionethyl_/-A^-cefem-4-carbonzuur, smpt. 178° - 190° C (ontl.).

15; IR (KBr) ca v C = O 1770, 1695, 1680.

NMR (DMSO - dg) 0 waarden:.

1,10 (3H, t-CH-j), 3,20-3,70 (6H, ra, >CH2 x 3), 3,40 (3H, s, CIljO-), 3,80-4,20 (4H, ra, >CH2 x 2), 5,10 (IK, s,-^>CH), 5,91 (1H, d, ^CH), 6,88-7,20 (2H, ra, 2ü: HwH |— ? JTjJ ), 7,37-7,50 (1H, ra, JT H ), 7,90 (1H, s, ^ y M ), 9,58-9,74 (2H, ra, >NH x 2).

Voorbeeld IV

25 In 10 ml van een waterige oplossing, bevattende 0,27 g natriumhydrogeencarbonaat, werden opgelost 1 g 70-/_D(-)-a-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecarboxamido)-a-(2-thienyl)aceetamido_/-7a-methoxy-3-acetoxymethyl-A3-cefera-4-carbonzuur en 0,32 g van het natrium-zout van 1-(2-dimethy1aminoe thy1)-5-raercapto-l.2.3.4-tetrazool. Onder 30 handhaving van de pH op 6,2-6,5 liet raen de oplossing gedurende 16 uren bij 60° C reageren. Het reactiemengsel werd gezuiverd door kolorachroma-tografie (stationaire fase: 22Ö g Amberliat XAD; elutie met 100 ml water en vervolgens net 100 ml 50 %'.s waterige oplossing van methanol). Het eluaat werd drooggedampt, waarbij men verkreeg 0,32 g natrium-70V D(—> — 35 ot-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecarboxaraido)-o-(2-thienyl)aceetamido_/- w i,.. s* « / ‘.i* ** -38- 7ci-methoxy-3-{ 5-/_ l-(2-dimethylaminoethyl)-1.2.3.4-tetrazolyl__/thiomethyl} -A^-cefem-4-carboxylaat in de vorm van een wit poeder, smpt. 166° - 175° C (ontl.); opbrengst 26,17 %.

IR (KBr) cm"1: \> C = 0 1760, 1705, 1670, 1610 5 NMR (DMSO - dJ: 5 waarden: 6 1.10 (3H, t, -CH3), 2,20 (611, m, -CH3 x 2), 2,68 (2H, t, ^>CH2), 3,20-3,70 (6H, m, > CH2 x 3), 3,40 (3H, s, CH30-), 3,72-4,30 (6H, m, >CH2 x 3 ), 5,05 (1H, s,^CH), 5,91 (1H, d, ^CH) , 6,90-7,30 (2H, m * 10 'Ks 7'40-7'51 (iH'o H ), 9,6-9,75 (2H, m, >MH x 2).

3 3

Op analoge wijze werden de volgende verbindingen verkregen.

Natrium-7S-/ D(-)-a-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-pipera-zinecarboxamido) -a- (2-thienyl) aceetamido_/-7a-methoxy-3-{ 5-/_ 2- (2-dimethyl-15 aminoethyl)-1.2.3.4-tetrazolyl__/thiomethyl}-A^-cefem-4-carboxylaat; smpt.

175° - 183° C (ontl.).

IR (KBr) cm"1: υ C = 0 1760, 1705, 1670, 1615.

NMR (DMSO - dj: 6 waarden: 6 1.11 (311, t, -CH ) , 2,24 (6H, m, -CH3 X 2), 2,83 (2H, t, 20 J>CH2), 3,20-3,70 (6H, m, >CII., x 3), 3,42 (3H, s, CH3-0-) , 3,70-4,20 - (4H, ra, >CH_ x 2), 4,60 (2H, t, >CH,) , 5,0 (1H, s, ^CII) , 5,92 (1H, d, ^Cll) , 6,90-7,30 (2H, ra, Η H f—1 -i ), 7,37-7,48 (1H, ra, JJ. s jJ— H) , 9,6-9,75 (2H, ra, ^NH* 2).

25 3

Natrium-78-/ D(—)-a-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-pipera-zinecarboxamido)-a-(2-thienyl)aceetamido_/-7a-methoxy-3-{5-/ 1-(2-amino-ethyl)-1,2.3.4-tetrazolyl_/thiomethylJ-A^-cefem-4-carboxylaat; smpt.

180° - 187° C (ontl.).

30 IR KBr) cm"1: v C = O 1765, 1705, 1670, 1600.

NMR (DMSO - d-): 6 waarden: 6 1,10 (3H, t, -CH3), 3,23-3,74 (6H, m,>CH x 3), 3,45 (3H, s, -CH-j), 3,77-4,87 (6H, ra, > CH2 x 3), 4,81 (2H, t, >0^), 5,07 (1H, s, ^-CH), 5,45 (III, d, >CH) , 6,95 - 7,25 (2H, m, 35 Γ ,: ι\ ‘· λ o *5 ^ v ; ij £ 0 - 39 - Η Η

Xf ), 7,40-7,52 (1Κ, π, JT”1^ Η }, 9,51-9,80 (2Η, ra, >NHx 2). Voorbeeld V

5 (1) Aan een met ijs gekoelde suspensie van 2,55 g DL-a-amino-2-furylazijnzuur in 35 ml methyleenchloride werden 4,81 ml trimethylchloorsilan toegevoegd. Aan het resulterende mengsel werden druppelsgewijze 5,04 ml triethylamine over een periode van 10 min. bij

5-10° C toegevoegd. Men liet de reactie gedurende 1 uur bij 15-20° C

10 verlopen. Aan het reactiemengsel werden over een periode van 15 min. bij 5-10° C 7,01 g van een mengsel van 4.-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecarbonyl- chloride en triethylaraine-hydrochloride, welk mengsel 58,02 % van de eerstgenoemde verbinding bevatte, toegevoegd„ Men liet de reactie verlopen bij 10-15° C gedurende 1 uur. Na toevoeging van 20 ml water werd het reac- 15 tiemengsel gedurende 1 uur bij kamertemperatuur geroerd en vervolgens gedurende 30 min. bij 5-7° C. De geprecipiteerde kristallen werden door filtratie verzameld, gewassen met 5 ml methyleenchloride en 5 ml water in deze volgorde en vervolgens gedroogd, waarbij men verkreeg 4,75 g DL-a-(4- ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecarboxamido)-2-furylazijnzuur; smpt. 179° - 20 181° C (ontl.); opbrengst 85,6 l, IR (KBr) cm v C = O 1735, 1709, 1650.

NMR (DMSO - d,) : <5 waarden: o 1,09 (3H, t, -CH3), 3,18-3,71 (4H, ra, >CK2 x 2), 3,78- 4,09 (2H, m, >CH2), 5,53 (1H, d, ^CH) , 6,44 (2H, m,

25 Η H

ji" jj ), 7,61 <1H, s, JV jL-H ), 9,69 (1H, d, ^NH).

(2) In 15 ml watervrij methyleenchloride werden gesuspendeerd 0,94 g DL-a-£4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecarboxamido)-2-30 furylazijnzuur. Aan de suspensie werden toegevoegd 0,35 ral N-methylmorfo- line, waarbij een homogene oplossing werd gevormd. Aan de oplossing, afgekoeld tot -20° C, werd druppelsgewijze over een periode van 5 min. een oplossing van 0,32 ml ethylchloorcarbonaat in 2 ral watervrij methyleenchloride toegevoegd. Het mengsel werd gedurende 60 min. bij -15° C 35 geroerd. Aan het mengsel, weer af gekoeld tot -20° C, werd druppelsgewijze ·* y - 40 - over een periode van 10 min. een oplossing van 1,50 g difenylmethyl-7-amino-3-/~5-(1-methyl-1.2.3.4-tetrazolyl)thioraethyl_/-A3-cefem-4-carboxy-laat in 15 ml watervrij methyleenchloride toegevoegd. Het mengsel werd 5 verder nog gedurende 90 min. bij -10° C geroerd. Nadat de temperatuur van het reactiemengsel was verhoogd tot kamertemperatuur werd het reactie-mengsel uitgegoten in 10 ml water en de organische laag werd afgescheiden en 10 ml vers water werden daaraan toegevoegd, waarna de pH daarvan werd ingesteld op 6,5 met een waterige oplossing van natriumhydrogeencarbonaat. 10 De organische laag werd afgescheiden, gewassen met 10 ml water en 10 ml verzadigde natriumchloride-oplossing in deze volgorde en gedroogd boven magnesiumsulfaat. Na de verwijdering Van het oplosmiddel door destillatie onder verminderde druk werd het residu behandeld met diethylether, waarbij men 2,0 g van een wit poeder verkreeg. Door dunne laag chromatografie 15 /^ontwikkelaar: een benzeen-ethylacetaat-mengsel (1:3}_/ werd gevonden dat dit poeder bestond uit twee componenten (Rf: 0,20 en 0,24). Het witte poeder werd onderworpen aan een elutie door kolomchromatografie (stationaire fase: silicagel? elueermiddel: een benzeen-ethylacetaat-mengsel (2:1)) teneinde de component, overeenkomende met de component in de 20 bovenzóne bij de dunne laag chromatografie, en de component, overeenkomende met de component in de benedenzone bij de dunne laag chromatografie, te isoleren, waarbij de hoeveelheid van de twee geïsoleerde componenten in totaal 1,1 g bedroeg.

De component in de bovenzone (waarschijnlijk 25 difenylmethyl-7V D-α-(4-ethy:l-2.3-dioxo-l-piperazinecarboxamido) -a-(2- furyl)aceetamido_/-3-/_ 5-(1-methyl-1.2.3.4-tetrazolyl) thiomethyl__/-43-cefem-4-carboxylaat); smpt. 428° - 138° C (ontl.), iR(KBr) cm”1: V c = O 1800, 1705, 1680.

NMR (CDCl^): <5 waarden: 30 1,11 (3H, t, -CH3), 3,30-4,30 (1011, m, J>CH2 x 5), 3,76

OH, s, -CH3), 4,91 (1H, d, >CH), 5,72-5,93 (2H, ra, ^CH x 2), 6,25 (2H, m, Η H

), 6,82 (1H, s, >CH), 7,20-7,53 (12H, ra, -CgH5 x 2, X>«' 35 NH), 9,80 (1H, d, ^lIH),

• "V

...» .'· i.V

f * - 41 -

De component in de benedenzone (waarschijnlijk difenylmethvl-7-/ L-cc- (4-ethyl-2.3-dioxo-1 -piperazinecarboxamido) -a-(2-furyl)aceetamido_/-3-/ 5-(1-methyl-i.2.3.4-tetrazolyl)thiomethyl_/-A^-cefem-4-carboxylaat); smpt. 128° - 136° C (ontl.).

5 IR (KBr) Cia-1: \i C = 0 1800, 1705, 1680.

NMR (CDCl^): 5 waarden: 1,08 (3H, t, -CH3), 3,20-4,30 (10H, m, >CH2 x 5), 3,86 C3H, s, -CH3), 5,00 (1H, d, ^CH), 5,61-5,98 (2H, m,-^CHx2) , 6,31 (211, m, Η H _ 10 \j ), 6,83 (1H, ξ,^ΟΙΙ), 7,29 (11H, m, -CgIl5 x 2 J7 TL- H )/ 7/94 (III, d, >NH), 9,88 (1H, d, > NH).

(3) In een mengsel van 14 ml watervrij chloroform en 3,5 ml watervrij tetrahydrofuran werden opgelost 0,86 g van de 15 component in de bovenzone, verkregen onder (2). Aan'de oplossing, afge koeld tot -75° C, werden toegevoegd 1,97 ml van een oplossing van lithium-methoxyde (1,948 mmol/ml) in methanol en het resulterende mengsel werd gedurende 3 min. bij -75° C geroerd, Na toevoeging van 0,20 ml tert.-butyl-hypochloriet werd het mengsel gedurende 15 min. bij -70 tot -65° C geroerd.

20 Ma toevoeging van 0,20 ml azijnzuur werd de temperatuur van het reactie- systeem verhoogd tot kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd van oplosmiddel bevrijd door destillatie onder verminderde druk en het residu werd opgelost in een mengsel van 10 ml ethylacetaat en 10 ml water. De organische laag werd afgescheiden en 10 ml water werden daaraan toegevoegd, 25 waarna de pH daarvan werd ingesteld op 2,5 met 2N chloorwaters tof zuur. De organische laag werd afgescheiden, twee maal gewassen met 10 ml porties verzadigde natriumchloride-oplossing, gedroogd boven magnesiumsulfaat en bevrijd van oplosmiddel door destillatie onder verminderde druk. Het residu werd gezuiverd door kolomchromatografie (stationaire fase: 15 g 30 silicagel; elueermiddel: een benzeen-ethylacetaat-mengsel (2:1)), waarbij 0,30 g van een wit poeder werden verkregen.

Het aldus verkregen witte poeder werd opgelost in 3,0 ml anisool en 3,0 g trifluorazijnzuur werd onder ijskoeling aan de oplossing toegevoegd. Het resulterende mengsel werd gedurende 30 min. bij 35 dezelfde temperatuur geroerd. Na de verwijdering van het oplosmiddel door v > ' i - 1 « - 42 - destillatie onder verminderde druk werden 5 ml ethylacetaat en 5 ml water aan het residu toegevoegd en een verzadigde natriumhydrogeencarbonaatop-lossing werd vervolgens daaraan toegevoegd onder roeren teneinde de pH in te stellen op 6,5, waarna het residu werd opgelost de waterige laag 5 werd afgescheiden en 10 ml methylacetaat werden daaraan toegevoegd, waarna de pH werd ingesteld op 2,0 met 2N chloorwaterstofzuur en de organische laag werd afgescheiden. De waterige laag werd verder geëxtraheerd met 10 ml methylacetaat en het extract werd gecombineerd met de hierboven verkregen organische laag. De gecombineerde organische laag 10 werd twee maal gewassen met 10 ml porties van verzadigde natriumchloride- oplossing, gedroogd boven magnesiumsulfaat en van oplosmiddel bevrijd door destillatie onder verminderde druk. Het residu werd behandeld met diethylether, waarbij men verkreeg 0,17 g 7B-V D-a-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazincarboxamido)-a-{2-furyl)aceetamido__/-7a-methoxy-3-/i 5- (1-raethyl-15 1.2.3.4-tetrazolyl)thiomethyl_/-A^-cefem-4-carbonzuur in witte poedervorm smpt. 130° - 138° C (ontl.); opbrengst 70,8 %.

IR (KBr) cm"1: υ C = O 1770, 1700, 1670.

NMR (DMSO - d.): <$ waarden: 6 1,07 (3H, t, -CH3) 3,28-4,01 (8H, m, >CH2 x 4) , 3,38 20 (3H, s, -CH3), 3,88 (3H, s, -CH3) , 4,10-4,45 (2H, m, ^CI^) , 5,03 (1H, ’ s, ^CH) , 5,73 (1H, d, ^CH) , 6,39 (2H, m,

Η H

X? ), 7,54 (1H, bs, ), 9,51-9,70 (2H, m, > NH x 2).

25 Op analoge wijze werden de volgende verbindingen verkregen.

78-/ D-a-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecarbox-amido) -a-(2furvl) -aceetamido_/-7a-methoxy-3-[_ 5- (1-carbamoylmethyl-l,2.3.4-tetrazoly1)thiomethyl__/-A^-c efem-4-carbonzuur.

30 7β-/_ D/-a-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecarbox- amido) -a- (2-furyl) -aceetamido_/^-7a-methoxy-3-{ 5-/_ l-{2-hydroxyethyl) - 1.2.3.4-tetrazolyl_/thiomethyl}-A^-cefera-4-carbonzuur.

7β-/ D-a-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecarbox-amido)-a-{2-f„uryl)aceetamido^-7a-methoxy-3V 5- (1-vinyl-l .2.3.4-tetrazo-35 lyl)thiomethyl_/-A^-cefem-4-carbonzuur.

V Ij * - 43 -

Voorbeeld VI

(1) Aan een suspensie van 2,5 g D(-)-a-amino-1.4-cyclohexadi enylaz ijnzuur in 20 ml water werden druppelsgewijze onder afkoeling met ijs 2,3 ml triethylamine toegevoegd onder vorming van een 5 oplossing. Aan de oplossing bij 5-10° C werden druppelsgewijze 6,3 g 4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecarbonylchloride (zuiverheid 58,02 %) over een periode van 30 min. toegevoegd, waarbij de pH op 6,5-8,0 werd ingesteld met 2,5 ml triethylamine. Het mengsel werd gedurende nog 30 min. bij 10-15° C geroerd. Het reactiemengsel werd gewassen met 20 ml ethyΙ-ΙΟ acetaat en 30 mi vers ethylacetaat werden daaraan toegevoegd, waarna de pH daarvan werd ingesteld op 2,2 met 6N chloorwaterstofzuur. De organische laag werd afgescheiden en de waterige laag werd verder geëxtraheerd met 15 ml ethylacetaat. Het extract werd gecombineerd met de bovengenoemde organische laag, 2 maal gewassen met 20 ml porties water en vervolgens 15 met 20 ml van een verzadigde waterige natriumchloride-oplossing. De gewassen organische laag werd gedroogd boven magnesiumsulfaat en van oplosmiddel bevrijd door destillatie onder verminderde druk, waarbij men verkreeg 4,2 g D{-)-a-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecarboxamido)-1.4-cyclohexadienylasijnzuur in witte poedervorm, smpt. 104° - 108° C; op-20 brengst 80,0 %.

IR (KBr) cm-1: v C = 0 1705, 1670.

MMR (DMSO-d.} 5 waarden: 6 1,10 (3H, t, -CH3), 2,61 (4H, m, >CH2 x 2), 3,18-3,69 (4H, m, ^>CH2 x 2), 3,70-4,13 (3H, m, J>CH2,^CH), 4,56 (1H, d, ^CH) , 25 5,60 (2H, m, ^>CH x 2), 5,70 (1H, s, ^CH), 9,49 (1H, d, >NH), (2) Aan eery oplossing van 2,3 g D(-)-a-(4-ethyl- 2.3-dioxo-l-piperazinecarboxamido)>-1.4-cyclohexadienylazijnzuur in 20 ml watervrije methyleenchloride werden bij -20° C 0,79 ml N-methylmorofo-line toegevoegd. Aan het mengsel werden druppelsgewijze 0,75 ml ethyl-30 chloorcarbonaat toegevoegd over een periode van 5 min. bij -20 tot -15° C.

Aan het mengsel, dat gedurende nog 60 min. bij -20 tot -15° C was geroerd, werd druppelsgewijze over een periode van 15 min. bij -20° C een oplossing van 3,0 g difenylmethyl-7-amino-3-/^ 5-(1-methyl-1,2,3.4-tetrazolyl)thio- _ 3 methyl_/-A -cefem-4-carboxylaat in 30 ml watervrije methyleenchloride toe-35 gevoegd. Het mengsel werd gedurende nog 120 min. bij -10° C geroerd. Het Λ 6.

- 44 - reactiemengsel werd uitgegoten in 50 ml water en de organische laag werd afgescheiden. Aan de organische laag werden toegevoegd 30 ml water en de pH daarvan werd ingesteld op 7,0 met verzadigde waterige natriumhydrogeen- carbonaatoplossing. Daarna werd de organische laag afgescheiden, gewassen 5 met 30 ml water en 30 ml verzadigde wateriqe natriumchloride-oplossing in deze volgorde, gedroogd boven magnesiumsulfaat en van oplosmiddel bevrijd door destillatie onder verminderde druk. Aan het residu werden toegevoegd 30 ml benzeen en de geprecipiteerde kristallen werden door filtratie verzameld, waarbij men verkreeg 3,9 g difenylmethyl 7 3-/ D(-)-a-(4-ethyl- 10 2,3-dioxo- 1-niperazinecarboxamido) -et- (1.4-cyclohexadienyl) aceetamido /-3- - - .3 /_ 5-(l-methyl-1.2.3.4-tetrazolyl)thioraethyl_/-Zl -cefem-4-carboxylaat, smpt. 151° - 155° C; opbrengst 80,7 %, IR (KBr) cm v C = 0 1770, 1700, 1665.

NMR (CDC13) δ waarden: 15 1,15 (3H, t, -CH3), 2,62 (4H, m, >-CH2 x 2), 3,23-3,70 (6H, m, >CH2 x 3), 3,71 (3H, s, -C!^) , 3,70-4,35 (4H, ra, >CH2 x 2), 4,92-5,28 (2H, n, x 2), 5,57 (211, m,^KZH x 2), 5,75-5,97 (211, ra, ^CHx 2), 6,78 (lil, s,^-CH), 7,75 (ΠΗ, m, -CgH5 x 2,>·ΝΗ), 9,57 (1H, d, >NH) .

20 (3) In een mengsel van 15 ml watervrij chloroform en 4 ml watervrij tetrahydrofuran werden opgelost 0,80 g difenylmethyl-73-/ D(-)-a-(4-ethvl-2.3-dioxo-l-piperazinecarboxamido)-a-(l.4-cyclohexadienyl) aceetamido_/-3-/ 5- (1-methyl-1. 2.3.4-tetrazolyl) thiomethyl_/-A^-cefem-4-carboxylaat. Na toevoeging van 1,0 g "moleculaire zeef 3A" werd 25 de oplossing afgekoeld tot -70° C. Aan de oplossing werden toegevoegd 1,8 ml van een oplossing van lithiummethoxyde (1,948 nmol/ml) in methanol. Het mengsel werd gedurende 3 min. bij -70° C geroerd. Daarna werden 0,18 ml tert.-butylhypochloriet in één keer toegevoegd en het mengsel werd gedurende 15 min. bij -70 tot -65° C geroerd en 0,2 ml azijnzuur 30 werden daaraan toegevoegd, waarna de temperatuur van het mengsel werd verhoogd tot kamertemperatuur. Na de verwijdering van de moleculaire zeef door filtratie werd het reactiemengsel van oplosmiddel bevrijd door destillatie onder verminderde druk. Het residu werd opgelost door toevoeging van 20 ml ethylacetaat en 10 ml water en de pH van de oplossing 35 werd ingesteld op 6,5 met verzadigde waterige natriumhydrogeencarbonaat- ·. 'o . _ ? * - 45 - oplossing. De organische laag werd afgescheiden en 10 ml water werden daaraan toegevoegd, waarna de pH daarvan werd ingesteld op 2,5 met 6N chloorwaterstofzuur. De organische laag werd weer afgescheiden, gewassen met 10 ml water en 10 al verzadigde waterige natriumchloride-oplossing in 5 deze volgorde en bevrijd van oplosmiddel door destillatie onder verminder de druk. Het residu werd gezuiverd door kolomchromatografie (stationaire fase: silicagel; elueermiddel: benzeen-ethylacetaat-mengsel (2:1)}. Na de verwijdering van het oplosmiddel uit het eluaat door destillatie onder verminderde druk werd het residu behandeld met diethylether, waarbij men 10 verkreeg 0,5 g difenylmethyl-7B-/ D(-)-a-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazine- carboxamido)-a-(1.4-cyclohexadienyl)aceetamido_/-7a-raethoxy-3-/ 5-{1-me-thyl-1.2.3.4-tetrazolyl)thiomethyl_y-A^-cefem-4-carboxylaat in witte poedervorm; opbrengst 60,3 i.

IR (KBr) cm-1: v C = O 1775, 1710, 1675.

15 NMR (CDCl^) <5 waarden: 1,17 (3H, t, -GH3)7 2,75 (4H, m,)>CH2 x2), 3,29-3,63 (6H, m, >CH2 x 3), 3,47 (3H, s, -CH^) , 3,77 (3H, s, -CH3), 3,80-4,09 (4H, m, >CII2 X 2), 4,99 (1H, s.^CIl), 5,61 (2H, m, ^-CH x 2), 5,95 (1H, s,^CI0, 6,87 (1H, s, >CH) , 7,23-7,45 (11H, m, -CgH5 x 2, 20 ^NH), 9,55 (lil, d,-^NH).

(4) In 5 ml anisool werden opgelost 0,4 g dife-nylmethyl-73-/ D(-)-ei-(4-ethyl-2.3-dioxo-1-piperazinexarboxamido)-a-(1.4-cyclohexadienyi)aceetamido_/-7a-methoxy-3-/ 5-(1-methyl-l.2.3.4-tetrazo-lyl)thiomethyl_/-A^-cefem-4-carboxylaafc. Aan de oplossing werden 5 ml 25 trifluorazijnzuur onder ijskoeling toegevoegd en het mengsel werd geduren de 30 min. bij dezelfde temperatuur geroerd. Na de verwijdering van het oplosmiddel uit het react!emengsel werden 10 ml methylacetaat en 10 ml water aan het residu toegevoegd en de pH daarvan werd ingesteld op 6,5 door toevoeging onder roeren van een verzadigde waterige natriumhydrogeen-30 carbonaatoplossing. De waterige laag werd afgescheiden en 5 ml methyl acetaat werden daaraan toegevoegd, waarna de pH daarvan werd ingesteld op 2,2 met 6N chloorwaterstofzuur en vervolgens liet men het mengsel gedurende de nacht in een ijskast staan. De geprecipiteerde kristallen werden door filtratie verzameld, tweemaal gewassen met 5 ml porties water 35 en vervolgens met 3 ml methylacetaat en gedroogd, waarbij men verkreeg v - 46 - 0,2 g 73-/ D(-)-a-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecarboxamido)-a-(l,4-cyclohexadienyl)aceetamido_/-7a-methoxy-3~./ 5- (1-methyi-l. 2.3.4-tetrazo-lyl) thiomethyl__/-A^-cefem-4-carbonzuur, smpt. 177° - 178° C (ontl.); opbrengst 62,7 %.

5 IR (KBr) cm"1: v C = 0 1770, 1710, 1685.

NMR (DMSO - d/) 6 waarden: 5 1,10 (3H, t, -CH3) , 2,18 (4H, m, > ZIi2 x 2), 3,34-3,73 (6H, ra, >-CH2 x 3), 3,41 <3H, s, -CH^, 3,79-4,37 (4H, m, > CU2 x 2), 3,93 (3H, s, -CII3), 4,97 (1H, d,^‘cil), 5,06 (10. s,^CH), 5,61 (2H, m, 10 ^CH x 2), 5,87 (lil, s, JcH), 9,30 (1H, d,>NH), 9,53 (1H, s,>rNH).

Op analoge wijze werden de volgende verbindingen verkregen„ 7β-/ D(-)-a-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecarbox-amido)-a-(1.4-cyclohexadienyl)aceetamido_/-7a-methoxy-3-acetoxymethyl-A -15 cefem-4-carbonzuur.

7β-/ D(—)—a—(4-ethvl-2.3-dioxo-l-piperazinecarbox-amido) -α- (1.4-cyclohexadienyl) aceetaraido__/-7n-methoxy-3-/i 2- (5-methyl- 1.3.4-thiadiazolyl) thiomethyl_/-A^-ce£ em-4-carbonzuur.

Voorbeeld VII

20 (1) In 15 ral watervrij methyleenchloride werden opgelost 2,0 g a-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecarboxamido)-o-(2-tri-chloorethoxycarbonylamino-4-thiazolyl)-azijnzuur. Aan de oplossing werden bij -20° C toegevoegd 0,43 ml N-raethylmorforline. Aan het resulterende mengsel werd druppelsgewijze over een periode van 5 min. een oplossing 25 van 0,41 ml ethylchloorcarbonaat in 2 ml methyleenchloride toegevoegd onder handhaving van de temperatuur op -20 tot -25° C. Men liet de reactie gedurende 1,5 uren bij dezelfde temperatuur verlopen. Aan het reactiemengsel werd druppelsgewijze bij -15 tot -20° C over een periode van 15 min. een oplossing van 2,0 g difenylmethyl-7-amino-3-/ 5-(1-methyl-30 1.2.3.4-tetrazolyl)thiomethyl_/-A^-cefem-4-carboxylaat in 30 ml water vrij methyleenchloride toegevoegd, De reactie werd bewerkstelligd gedurende 2 uren bij -10 tot -15° C. Nadat de temperatuur van het reactiemengsel was verhoogd tot kamertemperatuur werd het reactiemengsel uitgegoten in 30 ml water en de pH daarvan werd ingesteld op 6,5 met een ver-35 zadigde waterige oplossing van natriumhydrogeencarbonaat. De organische V V 1 - 47 - % t laag werd afgescheiden en 30 ral water werd weer daaraan toegevoegd, waarna de pH daarvan werd ingesteld op 2,0 met 6N chloorwaterstofzuur. De organische laag werd afgescheiden, gewassen met 30 ml water en 30 ml verzadigde waterige natriumchloride-oplcssing in deze volgorde, gedroogd boven magne-5 siumsulfaat en van oplosmiddel bevrijd, door destillatie onder verminderde druk, waarbij 3,3 g van een wit schuimachtig residu werden verkregen. Door dunne laag chromatografie (ontwikkelaar; een 1:3 mengsel van benzeen en ethylacetaat) werd gevonden dat dit residu bestond uit twee componenten.

Het witte schuimachtige residu werd blootgesteld aan een elutie door kolom-10 chromatografie (stationaire fase: silicagel; elueermiddel: een 3:2 mengsel van benzeen en ethylacetaat), waarbij 1,3 g van een wit poeder met een smelttraject van 166-179° C (ontl.) werden verkregen, dat overeenkwam met de component in de bovenzone bij de dunne laag chromatografie, en 1,4 g

O

van een wit poeder met een smeltpunt van 180-190 C (ontl.), dat overeen-15 kwam met de component in de benedenzone bij de dunne laag chromatografie.

De verbinding in de bovenzone: waarschijnlijk difenylmethyl-7-/~D-α-(2-trichloorethoxycarbonylamino-4-thiazolyl)-a-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecarboxamido)aceetamido_/-3-£ 5-(1-raethyl- 1.2.3.4-tetrazolyl)thiomethyl_/-A^-cefem-4-carboxylaat.

20 IR (KBr) cm-1: v C = O 1780, 1710, 1685.

MHR (CDCl2) 5 waarden: 1,12 (3H, t, -CH3), 2,90-3,87 (8H, ra, ;>CH2 x 4) , 3,47 (3H, s,^>N-CH3), 4,12, 4,20 (2H, ABq,>CH2), 4,24, 4,90 (2H, ABq,^CH2)f 5,04 (1H, d,^CH), 5,56 (1H, d,^CH), 5,98 (1H, d, d, $SCH) , 6,76 (1H, 25 s,^CH), 6,89 (1H, s, ^=CH), 7,26 (11H, m, -Cg^ x 2,^NH), 8,62 (1H, bs, >NH), 9,70 (1H, d, >NH).

De component in de benedenzone: waarschijnlijk difenylmethyl-7-/ L-α-(2-trichloorethoxycarbonylamino-4-thiazolyl)-a-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecarboxamido)aceetamido_/-3-/ 5-(1-methyl-30 1.2.3.4-tetrazolyl)thioraethyl__/-A^-cef em-4-carboxylaat.

IR (KBr) cm v C = 0 1780, 1710, 1685.

NMR (CDCl3) 6 waarden: 1,05 (3H, t, -CH3), 3,12-4,10 (811, m, >CH2 x 4) , 3,81 (3il, s, -CH3), 4,16, 4,23 (2H, ABq, ,>0^) , 4,84 (2H, bs, >CH2) , 4,97 (1H, d, 35 ^CH) , 5,67 (1H, d, d, ^CH) , 6,12 (1H, d, >CH) , 6,75 (1H, s, ^CH) , ***-·· 4 - : * * y -a ' - 48 - t 6,84 (1H, s,^CII), 7,23 (10H, s, -Cg^ x 2), 7,90-8,30 (2H, m,^NH x 2), 9,79 (1H, d, ^NH).

(2) In een mengsel van 15 ml watervrij chloroform en 5 ml watervrij tetrahydrofuran werden opgelost 1,2 g van de component

5 van de bovenzone, verkregen onder (1), Aan de oplossing werden bij -75° C

2,17 ml van een oplossing van lithiummethoxyde (1,948 mmol/ral) in methanol toegevoegd en het resulterende mengsel werd gedurende 3 min. geroerd bij -75° C. Aan het mengsel werden bij -75° C 0,22 ml tert.-butylhypo-chloriet in één keer toegevoegd en het resulterende mengsel werd gedurende 10 15 min. bij -75° C geroerd. Na toevoeging van een oplossing van 0,2 ml azijnzuur in 2 ml chloroform werd de temperatuur van het reactiesysteem verhoogd tot kamertemperatuur. Het reactiemengsel werd van oplosmiddel bevrijd door destillatie onder verminderde druk en het residu werd opgelost door toevoeging van 20 ml ethylacetaat en 20 ml water en de pH werd 15 ingesteld op 6,5 met verzadigde waterige natriumhydrogeencarbonaatoplos- sing. De organische laag werd afgescheiden‘en 20 ml water werden daaraan toegevoegd, waarna de pH daarvan werd ingesteld on 2,0 met 2N chloorwater-stofzuur. De organische laag werd weer afgescheiden, gewassen met 10 ml water en 10 ml verzadigde natriumchloride-oplossing in deze volgorde, 20 gedroogd boven magnesiumsulfaat en van oplosmiddel bevrijd door destilla tie onder verminderde druk. Het residu werd gezuiverd door kalorachromato-grafie, (stationaire fase: silicagel; elueerniddel: een 3:2 mengsel van benzeen en ethylacetaat), waarbij men verkreeg 0,45 g difenylmethyl-7S-, [_ D-α- (2-trichloorethoxycarbonylaminoi-4-thiazolyl) -a- (4-ethyl-2.3-dioxo- 25 l-piperazinecarboxamido)aceetamido__/-T7a-methoxy-3-/> 5- (1-methyl-l .2.3.4- tetrazolyl)thiomethyl__/-A^-cefem-4-carboxylaat in witte poedervorm, smpt. 155° - 177° C (ontl.); opbrengst 36,4 %, IR (KBr) cm-1: v C - 0 1785, 1710, 1685.

NMR (CDC13) 6 waarden: 30 1,10 (3H, t, -CH3) 3,20-4,30 (10H, m, J>CH2 x 5), 3,41 (311, s, -CH3), 3,73 (3H, s, -CH3), 4ƒ73, 4,79 (2H, ABq, >CH2), 4,92 (1H, s, ^.CH), 5,74 (1H, d,!>CH), 6,,74 (1H, s, >>CH) , 7,04 (1H, s,^£cH), 7,20 (11H, m, -CgHj. X 2^>NH), 8,34 (1H, bs,]>NH), 9,78 (1H, d,]^NH).

(3) Ir> 7 ml 85 %'s mierezuur werden opgelost 0,4 35 g difenylmethyl-78-£ D-α- (2-tfichloorethoxycarbonylamino-4-thiazolyl)-a- * ' - 49 - (4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecarboxamido) aceetamido_/-7armethoxy-3-/ 5-(1-methyl-l.2.3.4-tetrazolyl)thioraethyl_/-A^-cefem-4-carboxylaat, verkregen onder (2). Aan de oplossing werd 0,4 g zinkstof onder ijskoeling toegevoegd en het mengsel werd gedurende 3 uren bij dezelfde temperatuur 5 geroerd. Het onoplosbare materiaal werd door filtratie verwijderd en het filtraat werd van oplosmiddel bevrijd door destillatie onder verminderde druk. Het residu werd opgelost door toevoeging van 7 ml raethyleenchloride, 3 ml aceton en 10 ml water en de pH van de oplossing werd ingesteld op 7,0 met een verzadigde waterige natriumhydrogeencarbonaatoplossing. De 10 organische laag werd afgescheiden, gewassen met verzadigde waterige natri- umchloride-oplossing, gedroogd boven magnesiumsulfaac en van oplosmiddel bevrijd door destillatie onder verminderde druk, waarbij 0,21 g van een wit poeder werden verkregen. Het witte poeder wera opgelost in 2 ml ani-sool en 2 ml trifluorazijnzuur werden daaraan toegevoegd onder ijskoeling, 15 waarna de oplossing gedurende 30 min. bij dezelfde temperatuur werd ge roerd. Het onoplosbare materiaal werd door filtratie verwijderd en het filtraat werd van oplosmiddel bevrijd door destillatie onder verminderde druk. Het residu werd behandeld met 5 ml ethyiacetaat, waarbij men verkreeg 0,19 g van het trifluorazijnzuurzout van 73-/ D-ct- (2-amino-4-thia-Z0 zolyl)-a-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecarooxamido)aceetamido_/-7a- methoxy-3-/_5-(1-methyl-1.2.3.4-tetrazolvlJ tbiomethyl_/-A^-cefem-4-carbon-zuur, smpt. 175° - 190° C (ontl.); opbrengst GO,9 %.

IR (KBr) cm-1: v C = O 1765, 1700, 1675.

Op analoge wijze werden de volgende verbindingen 25 verkregen.

Trifluorazijnzuurzout van 7β-/_ D-α-(2-amino-4-thiazolyl}-a-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecarboxamido)aceetamido_/-7a-methoxy-3-/_ 5-(1-carbamoylmethyl-1.2.3.4-tetrazoly1)thiomethyl_/-A^-cefem-4-carbonzuur.

30 Trifluorazijnzuurzout van 73-/ D-α-(2-amino-4- thiazolyl)-a-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecarboxamido)aceetamido_/-7a-methoxy-3-acetoxymethyl-A^-cefem-4-carbonzuur.

Trifluroazijnzuurzout van 7S-/_ D-a-(2-amino-4-thiazolyl)-a-(4-ethyl-2»3-dioxo-l-piperazinecarboxamido>aeeetamido_/-7a-35 methoxy-3-/ 2-(5-methyl-l.3.4-thiadi&zolyl)thiomethyl_/-i^-cefem-4-carbonzuur.

- . u» * . - 50 - * £ r e (4) In 3 ml watervrij aceton werden opgelost 0,16 g van het trifluorazijnzuurzout van 73-/ D-a-(2-amino-4-thiazolyl)-a-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazine-carboxamido)aceetamido 7-7a-methoxy-3-/ 5-(l-methyl- _ 3 “ 5 1.2.3.4-tetrazolyl)thiomethyl /-Δ -cefem-4-carbonzuur, verkregen onder (3), en 0,0197 g (equimolaire hoeveelheid) pyridine werden toegevoegd, waarna de oplossing van oplosmiddel werd bevrijd door destillatie onder verminderde druk. Water werd toegevoegd aan het residu en de kristallen 10 werden door filtratie verzameld, waarbij men verkreeg 73-/ D-α-(2-amino-4-thiazolyl)-a-(4-ethyl-2.3-dioxo-l-piperazinecarboxamido)aceetamido /-7a-methoxy-3-/ 5-(l- “ _ 3 “ methyl-1.2.3.4-tetrazolyl)thiomethyl_/-A -cefem-4-carbon-zuur.

15 j * *··»’

Claims (4)

1. Farmaceutisch preparaat, dat gebruikt kan worden voor de behandeling van bacteriële infecties bij 5 mensen en dieren, met het kenmerk, dat het één of meer 7α-me thoxycefalosporinen met de algemene formule 1, waarin voorstelt een waterstofatoom, voorstelt een acetoxygroep of een eventueel gesubstitueerde 1.2.3.4-tetrazol-5-ylthio-of 1.3.4-thiadiazol-2-ylthio-groep, A voorstelt een alkyl- 10 groep met 1-5 koolstofatomen en B voorstelt een thienyl-, furyl-, aminothiazolyl- of cyclohexadienylgroep, en/of één of meer farmaceutisch aanvaardbare zouten daarvan bevat.

2. Een 7a-methoxycefalosporine of farmaceutisch aanvaardbaar zout daarvan, met het kenmerk, dat dit 15 een verbinding is met de algemene formule 1, waarin R^, A en B de in conclusie 1 aangegeven betekenissen bezitten, of een farmaceutisch aanvaardbaar zout daarvan.

3. Werkwijze ter bereiding van een 7a-methoxy-cefalösporine of een farmaceutisch aanvaardbaar zout daarvan, 20 met het kenmerk, dat men een verbinding met de formule 1, waarin R^, R^, A en B de in conclusie 1 aangegeven betekenissen bezitten, op een op zichzelf bekende wijze bereidt.

4. Verbindingen en werkwijzen als beschreven in de beschrijving en/of voorbeelden. 25 * £ Cl o och3 V~f i Λ— N . N-CONH-CH—CONH—,- (r,\ B rf I 1 ^l·» u COOR,

0. OCHj CHjCH, Ν'J —CONH— CH - CONH —i- *· \ f i I ru d 1b B J-N-vj^ 9ch3 0 COOH Rt—NH —CH—CONH —|-O O B J-Nv^—CHjR2 y~-f

0. A— N N— COOH COOR1a 2 '—' 3 OCHj Ré—nh —j—°y-(0 J H'~y~ CH2R2 A — ^ ^—CONH-CH—COOH

0 COOR,a u i 5 0 0 V“f ς m och3 A—N N—CONH-CH—CONH -i-[Λ 1 + " W B J Nvj^1—1CH*Rt 7 ° COOR1a 6 Π Π R 2 Mg. y-f ^Ηι , 9 A—N N-CONH -CH-CONH —|-fy ._—CH;. R, H2N-CH-COOH

0. B (/T I yy coor1s g b 10 a-n n —conh-ch-co— B « ~A n = τι— Hï-N^S^ HN^S^ Toyama Chemical Co. , Ltd., te Tokio, Japan