CN1390219A - 作为治疗剂的吡唑并嘧啶类 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了式(I)的化合物,包括其药用盐和/或前药,其中G、Ra、R2、R3如该说明书中所定义。

Description

作为治疗剂的吡唑并嘧啶类
相关申请
本申请要求1999年9月17日申请的美国临时申请No.60/154,620的利益，其中全部教导引入本文作为参考。发明背景
至少有400种酶被鉴定为蛋白激酶。这些酶催化靶蛋白底物的磷酸化作用。该磷酸化作用一般是将一个磷酸根基团从ATP转移到蛋白底物中的反应。此磷酸根转移的靶底物中的特异性结构是酪氨酸、丝氨酸或苏氨酸残基。由于这些氨基酸残基是磷酰基转移的靶结构，故这些蛋白激酶一般称为酪氨酸激酶或丝氨酸/苏氨酸激酶。
在酪氨酸、丝氨酸和苏氨酸残基上进行的此磷酸化反应及中和磷酸酶反应参与了无数的细胞过程，这些过程构成了对不同细胞内信号(一般通过细胞受体介导)的反应、细胞功能的调节及细胞过程的激活或灭活的基础。蛋白激酶的级联常常参与细胞内信号的传递，且是实现这些细胞过程所必需的。由于这些过程中它们的普遍存在，蛋白激酶作为浆膜的整个部分、或作为细胞质酶被发现，或者常常作为酶复合物的组分位于细胞核内。在很多情况下，这些蛋白激酶是酶和结构蛋白复合物的必需元素，其决定了细胞内细胞过程何时何地发生。
蛋白酪氨酸激酶：蛋白酪氨酸激酶(PTKs)是催化细胞内蛋白中的特异性酪氨酸残基的磷酸化作用的酶。这些底物蛋白的翻译后修饰，常常是酶本身，作为调节细胞增殖、活化和分化的分子开关(其综述，见Schlessinger and Ulrich，1992，Neuron 9：383-391)。在很多病症中已发现了异常的或过度的PTK活性，这些病症包括良性和恶性增殖疾病及免疫系统不适当的激活导致的疾病(如，自身免疫性疾病)，同种移植物排斥和移植物抗宿主病。此外，内皮细胞受体PTKs如KDR和Tie-2介导血管生成过程，并因此参与支持癌症或涉及不适当的血管形成的其它疾病(例如，糖尿病性视网膜病，与年龄有关的视网膜黄斑变性引起的脉络膜血管化，牛皮癣，关节炎，早产儿视网膜病，婴儿血管瘤)。
酪氨酸激酶可以是受体型的(具有细胞外、跨膜和细胞内功能域)或非受体型的(全部在细胞内)。
受体酪氨酸激酶(RTKs)：RTKs包括具有不同生物活性的一大类跨膜受体。目前，已鉴定了至少19种不同的RTK亚类。此受体酪氨酸激酶(RTK)族包括对多种类型细胞的生长和分化起决定作用的受体(Yarden and Ullrich，Ann.Rev.Biochem.57：433-478，1988；Ullrich and Schlessinger，Cell 61：243-254，1990)。RTKs的内在功能是在配体结合时激活，其导致受体和多种细胞底物的磷酸化，并随后带来多种细胞反应(Ullrich & Schlessinger，1990，Cell 61：203-212)。因此，受体酪氨酸激酶介导的信号传导是由与特异性生长因子(配体)的细胞外作用引发的，一般随之而来的是受体二聚作用、内在蛋白酪氨酸激酶活性的刺激和受体磷酸根转移作用。于是创造了细胞内信号传导分子的结合位点，并导致形成与一系列促进适当细胞反应的细胞质信号分子的复合物(例如，细胞分裂、分化、代谢作用、细胞内微环境的变化)，见Schlessinger and Ullrich，1992，Neuron9：1-20。
带有SH2的蛋白(src同源性-2)或磷酰基酪氨酸结合(PTB)功能域结合活化的酪氨酸激酶受体及其具有传播信号进入细胞的高亲合力的底物。这两种功能域都识别磷酰基酪氨酸(Fantl等，1992，Cell 69：413-423；Songyang等，1994，Mol.Cell.Biol.14：2777-2785；Songyang等，1993，Cell 72：767-778；和Koch等，1991，Science252：668-678；Shoelson，Curr.Opin.Chem.Biol.(1997)，1(2)，227-234；Cowburn，Curr.Opin.Struct.Biol.(1997)，7(6)，835-838)。已鉴定了若干种与受体酪氨酸激酶(RTKs)有关的细胞内底物蛋白。它们被主要分为两类：(1)具有催化功能域的底物；和(2)缺少这样的功能域但作为接合器并与催化活性分子有联系的底物(Songyang等，1993，Cell 72：767-778)。受体或蛋白与其底物的SH2或PTB功能域之间的相互作用的特异性由直接围绕所述磷酰化酪氨酸残基的氨基酸残基决定。例如，SH2功能域和围绕特定受体上的磷酰基酪氨酸残基的氨基酸序列之间的结合亲合力的差别与在其底物磷酰基化特性中观察到的差别相关(Songyang等，1993，Cell 72：767-778)。所观察到的现象暗示各受体酪氨酸激酶的功能不仅由其表达的形式和配体有效性决定，还由特定受体激活的下游信号传导路径的排列以及那些刺激物的作用时间点和持续时期决定。因此，磷酸化作用提供了重要的调节步骤，该步骤决定了特定生长因子受体以及分化因子受体反射增进的信号路径的选择性。
虽然其中某些会间接促进血管生成，但是已表明若干受体酪氨酸激酶如FGFR-1、PDGFR、TIE-2和c-Met，及与其结合的生长因子，在血管生成中起一定作用(Mustonen and Alitalo，J.Cell Biol.129：895-898，1995)。此类受体酪氨酸激酶中的一种，称为“胎肝激酶1”(FLK-1)，是RTKs的III型亚类中的一员。人FLK-1的另一种命名是“含激酶插入功能域的受体”(KDR)(Terman等，Oncogene 6：1677-83，1991)。FLK-1/KDR的另一种命名是“血管内皮细胞生长因子受体”(VEGFR-2)，这是由于其以高亲合力结合VEGF。鼠型FLK1/VEGFR-2还被称为NYK(Oelrichs等，Oncogene 8(1)：11-15，1993)。已分离出DNAs编码小鼠、大鼠和人FLK-1，并报告了核苷酸和编码的氨基酸序列(Matthews等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，88：9026-30，1991；Terman等，1991，出处同上；Terman等，Biochem.Biophys.Res.Comm.187：1579-86，1992；Sarzani等，出处同上；及Millauer等，Cell 72：835-846，1993)。一些研究，如在Millauer等在出处同上的文献中所报告的，暗示VEGF和FLK-1/KDR/VEGFR-2在血管内皮细胞的增殖、血管的形成和抽芽(分别命名为血管生成和血管发生)中扮演重要角色的配体-受体对。
命名为“fms样酪氨酸激酶1”(Flt-1)的另一种RTK的III型亚类与FLK-1/KDR有关(DeVries等，Science 255；989-991，1992；Shibuya等，Oneogene 5：519-524，1990)。Flt-1的另一种命名是“血管内皮细胞生长因子受体1”(VEGFR-1)。目前，已发现FLK-1/KDR/VEGFR-2和Flt-1/VEGFR-1亚类中的很多成员主要表达在内皮细胞上。这些亚类成员接受血管内皮生长因子(VEGF)类配体的特异性刺激(Klagsburn and D′Amore，Cytokine & Growth Factor Reviews7：259-270，1996)。血管内皮细胞生长因子(VEGF)结合Flt-1的亲合力较结合FLK-1/KDR的亲合力高，并对血管内皮细胞具有致有丝分裂作用(Terman等，1992，出处同上；Mustonen等出处同上；DeVries等，出处同上)。据信Flt-1是血管发育期间内皮组织所必需的。Flt-1表达与小鼠胚胎的早期血管发育相联系，并与伤口愈合期间的新血管形成有关(Mustonen and Alitalo，出处同上)。Flt-1在单核细胞、破骨细胞和成骨细胞以及在成人组织如肾小球中的表达暗示了此受体的与细胞生长无关的其它功能(Mustonen and Alitalo，出处同上)。
如上所述，最近的证据表明VEGF在正常的血管发生和病理性血管发生的刺激中起了一定作用(Jakeman等，Endocrinology 133：848-859，1993；Kolch等，Breast Cancer Research and Treatment36：139-155，1995；Ferrara等，Endocrine Reviews 18(1)；4-25，1997；Ferrara等，Regulation of Angiogenesis(L.D.Goldberg and E.M.Rosen编辑)，209-232，1997)。此外，VEGF已涉足血管渗透性的控制和提高(Connolly等，J.Biol.Chem.26420017-20024，1989；Brown等，Regulation of Angiogenesis(L.D.Goldberg and E.M.Rosen编)，233-269，1997)。已报告了由mRNA的另一种剪接产生的不同形式的VEGF，按Ferrara等所述包括4种类型(J.Cell.Biochem.47：211-218，1991)。VEGF的分泌型和主要与细胞有关的类型已由Ferrara等鉴定(出处同上)，且已知该蛋白以二硫键连接的二聚体的形式存在。
最近还确定了VEGF的若干相关同系物。但是，它们在正常生理和疾病过程中的作用还未得到说明。此外，VEGF类的很多成员在一些组织中常常与VEGF共同表达，且一般能与VEGF形成杂二聚体。此性质可能改变受体的特异性和此类杂二聚体的生物作用，并进一步使它们的特异性功能的说明复杂化，如下所述(Korpelainen and Alitalo，Curr.Opin.Cell Biol.，159-164，1998及其其中引用的文献)。
胎盘生长因子(PlGF)的氨基酸序列与VEGF序列表现出显著的同种性(Park等，J.Biol.Chem.269：25646-54，1994；Maglione等，Oncogene 8：925-31，1993)。正如VEGF，不同类型的PlGF由mRNA的另一种剪切产生，且蛋白己二聚形式存在(Park等，出处同上)。PlGF-1和PlGF-2已高亲合力结合Flt-1，而PlGF-2还迫切地与神经纤维素(neuropilin)-1结合(Migdal等，J.Biol.Chem.273(35)：22272-22278)，但是它们都不结合FLK-1/KDR(Park等，出处同上)。已报告当VEGF以低浓度存在时PlGF加强血管渗透性和内皮细胞上的VEGF的致有丝分裂作用(这意味着归因于杂二聚体的形成)(Park等，出处同上)。
VEGF-B以两种异构形式产生(167和185残基)，其似乎也结合Flt-1/VEGFR-1。它通过调节脲激酶型纤溶酶原激活物和纤溶酶原激活物抑制剂1的表达和活性，可以在细胞外基质降解、细胞粘附性和迁移的调节中起一定作用(Pepper等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.(1998)，95(20)：11709-11714)。
VEGF-C原本以VEGFR-3/Flt-4的配体形式克隆，其主要由淋巴内皮细胞表达。在其完全处理后的形式中，VEGF-C也可以结合KDR/VEGFR-2并刺激体内的内皮细胞增殖和迁移及体外模型中的血管发生(Lymboussaki等，Am.J.Pathol.(1998)，153(2)：395-403；Witzenbichler等，Am.J.Pathol.(1998)，153(2)，381-394)。VEGF-C的转基因过度表达只引起淋巴管的增殖和肥大，而对血管没有影响。与VEGF不同，VEGF-C不会由低氧症引起(Ristimaki等，J.Biol.Chem.(1998)，273(14)，8413-8418)。
多数最近发现的VEGF-D与VEGF-C结构非常相似。据报告VEGF-D结合并激活至少两种VEGFRs，即VEGFR-3/Flt-4和KDR/VEGFR-2。他原本以成骨细胞的c-fos可诱导的促细胞分裂剂形式克隆，并最主要表达在肺和皮肤的间质细胞中(Achen等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.(1998)，95(2)，548-553及其中所引用的文献)。
正如VEGF，已有人声称当注射到皮肤组织内时，VEGF-C和VEGF-D引起Miles检测中的体内血管渗透性的升高(PCT/US97/14696；WO98/07832，Witzenbichler等，出处同上)。这些配体在调节血管渗透性过高和有其表达的组织中内皮反应中的生理作用和有效性尚不清楚。
最近已报告了病毒编码的、新型血管内皮生长因子，VEGF-E(NZ-7VEGF)，其优先利用KDR/Flk-1受体并具有强有丝分裂活性而没有肝素-结合功能域(Meyer等，EMBO J.(1999)，18(2)，363-374；Ogawa等，J.Biol.Chem.(1998)，273(47)，31273-31282)。VEGF-E序列与哺乳动物VEGF具有25％的同源性，并由副痘病毒Orf病毒(OV)编码。此副痘病毒使绵羊和山羊并偶尔使人产生具有血管发生的伤害。VEGF-E是约20kDa的二聚体，其没有基础功能域，对肝素也不具亲合力，但是具有存在于所有哺乳动物VEGF中的特征性半胱氨酸结节方式(knot motif)，并令人惊奇地发现其具有类似于肝素结合VEGF-A的VEGF165异构形式的效力和生物活性，即两种因子都刺激组织因子(TF)的释放、体外培养的血管内皮细胞的增殖、趋化和发芽以及体内血管发生。正如VEGF165，发现VEGF-E以高亲合力与VEGF受体-2(KDR)结合，导致受体自身磷酸化和在游离的细胞内Ca2+浓度中产生二相性，但与VEGF165相反，VEGF-E不结合的VEGF受体-1(Flt-1)。
基于VEGF和VEGFRs的其它同系物的发现及配体和受体杂二聚作用的先例，这些VEGF同系物的作用可以涉及VEGF配体杂二聚体的形成、和/或受体的杂二聚作用、或者结合尚未发现的VEGFR(Witzenbichler等，出处同上)。另外，最近的报告表明神经纤维素-1(Migdal等，出处同上)或VEGFR-3/Flt-4(Witzenbichler等，出处同上)，或KDR/VEGFR-2以外的受体可以涉及血管渗透性的诱发(Stacker，S.A.，Vitali，A.，Domagala，T.，Nice，E.和Wilks，A.F.，“Angiogenesis and Cancer”Conference，Amer.Assoc.Cancer Res.，1998年1月，Orlando，FL；Williams，Diabetelogia40：S 118-120(1997))。
Tie-2(TEK)是最近发现的内皮细胞特异性受体酪氨酸激酶的一员，其涉及重要的血管发生过程，如血管分枝、发芽、改型、成熟和稳定。Tie-2是第一种哺乳动物受体酪氨酸激酶，其激动剂配体(一种或多种)(例如，for which both agonist ligand(s)(例如，血管生成素(Angiopoietin)1(“Ang1”)，其刺激受体自身磷酸化和信号传导)，及拮抗剂配体(一种或多种)(例如，血管生成素2(“Ang2”))，二者都已得到鉴定。Tie-2及其配体表达的剔除和转基因操作表明了对Tie-2信号的严格的空间和时间控制是新脉管系统的适当发育所必需的。通用的模型表明Ang1配体对Tie-2激酶的刺激直接涉及心血管的分枝、发芽和长出，而周皮内皮支撑细胞的募集和相互作用在维持血管完整性和诱导静止中是重要的。对Tie-2缺乏Ang1刺激或用Ang2抑制Tie-2自身磷酸化，其在血管退化位点以高水平产生，可以引起血管结构和基质联系的丧失，这导致内皮细胞死亡，特别是在生长/存活刺激物不存在时。但是，由于最近报告的至少两种其它Tie-2配体(Ang3和Ang4)，且已表明多种激动性或拮抗性血管生成素的杂低聚化的能力会因此修饰它们的活性，这样情况变得更加复杂。靶向Tie-2配体-受体相互作用作为抗血管生成治疗手段便倍受冷落，而激酶抑制策略成为优选。
Tie-2的可溶性细胞外功能域(“ExTek”)可以破坏乳腺癌异种移植和肺转移模型中肿瘤脉管系统的建立以及肿瘤细胞介导的眼新血管生成。由于腺病毒感染，啮齿类中可以在7-10天内造成体内mg/ml水平的ExTek的产生，而没有副作用。这些结果暗示在正常健康的动物中破坏Tie-2信号路径可以很好地被耐受。对ExTek的这些Tie-2抑制性反应可以是配体(一种或多种)的随之而来的螯合作用和/或全长Tie-2非生产性杂二聚体的产生。
最近，在人关节炎关节的血管滑膜关节翳内已发现了Tie-2表达的显著上调，这与其在不适当的新血管形成中的角色一致。此发现暗示在类风湿性关节炎的进展中Tie-2起了一定作用。已确定产生Tie-2基本活化形式的点突变与人静脉畸形病有关。因此，Tie-2抑制剂被用于治疗这些疾病，并用于不适当新血管生成的其它情形中。
非受体酪氨酸激酶：非受体酪氨酸激酶代表了缺乏细胞外和跨膜序列的细胞酶的集合。目前，已确定了24种以上的具体非受体酪氨酸激酶，其中包括11种亚类(Src，Frk，Btk，Csk，Abl，Zap70，Fes/Fps，Fak，Jak，Ack和LIMK)。目前，非受体酪氨酸激酶的Src亚类由最多的PTK成员组成，并包括包括Src、Yes、Fyn、Lyn、Lck、Blk、Hck、Fgr和Yrk。该Src亚类已与瘤形成和免疫反应建立了联系。对非受体酪氨酸激酶的更详细的讨论由Bohlen，1993，Oncogene 8：2025-2031提供，将其引入作为参考。
已发现很多酪氨酸激酶，不论是RTK还是非受体酪氨酸激酶，参与了涉及多种致病性症状的细胞信号路径，包括癌症、牛皮癣及其它过度增殖性紊乱或过度免疫反应。
调节PTKs的化合物的开发：考虑到PTKs对细胞增殖、与异常细胞增殖有关的疾病和紊乱的控制、调节和调制的臆测重要性，人们为了确定受体和非受体酪氨酸激酶“抑制剂”进行了很多尝试，其中使用了多种手段，包括使用突变配体(美国专利No.4,966,849)、可溶性受体和抗体(WO 94/10202；Kendall & Thomas，1994，Proc.Natl.Acad.Sci 90：10705-09；Kim等，1993，Nature 362：841-844)、RNA配体(Jellinek等，Biochemistry 33：10450-56；Takano等，1993，Mol.Bio.Cell4：358A；Kinsella等1992，Exp.Cell Res.199：56-62；Wright等，1992，J.Cellular Phys.152：448-57)和酪氨酸激酶抑制剂(WO 94/03427；WO 92/21660；WO 91/15495；WO94/14808；美国专利No.5,330,992；Mariani等，1994，Proc.Am.Assoc.Cancer Res.35：2268)。
最近，人们试图识别作为酪氨酸激酶抑制剂的小分子。例如，双单环、双环或杂环芳基化合物(PCT WO 92/20642)和亚乙烯基-吖吲哚衍生物(PCT WO 94/14808)普遍被描述为酪氨酸激酶抑制剂。苯乙烯基化合物(美国专利No.5,217,999)、苯乙烯基-取代的吡啶基化合物(美国专利No.5,302,606)、某些喹唑啉衍生物(EP申请No.0 566 266A1；Expert Opin.Ther.Pat.(1998)，8(4)：475-478)、硒代吲哚和硒化物(PCT WO 94/03427)、三环多羟基化合物(PCT WO 92/21660)和苄基膦酸化合物(PCT WO 91/15495)已被描述为用作酪氨酸激酶抑制剂用于治疗癌症的化合物。苯氨基噌啉(PCT WO 97/34876)和喹唑啉衍生物化合物(PCT WO97/22596；PCT WO97/42187)已被描述为血管发生和血管渗透性的抑制剂。
此外，人们尝试确定作为丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂的小分子。例如，已描述了双(吲哚基马来酰亚胺)化合物抑制特定PKC丝氨酸/苏氨酸激酶异构形式，这些异构形式的信号传递功能与VEGF相关的疾病中的血管渗透性有关(PCT WO97/40830；PCT WO 97/40831)。Plk-1激酶抑制剂
Plk-1是丝氨酸/苏氨酸激酶，其是细胞循环过程的重要调节剂。其在有丝分裂纺锤体的装配和动力功能中扮演关键角色。业已表明Plk-1和相关激酶紧密涉及其它细胞循环调节剂如细胞周期蛋白依赖性激酶的活化和灭活。Plk-1的高水平表达与细胞增殖活性有关。其常常发现于不同起因的恶性肿瘤中。预计Plk-1的抑制剂通过中断涉及有丝分裂纺锤体和不适当活化的细胞周期蛋白依赖性激酶的过程来阻断癌细胞增殖。Cdc2/细胞周期蛋白B激酶抑制剂(Cdc2也称为cdkl)
Cdc2/细胞周期蛋白B是属于细胞周期蛋白依赖性激酶(cdks)类的其它丝氨酸/苏氨酸激酶。这些酶涉及细胞周期过程的不同相之间的临界过渡。据信作为癌症的证明的失控的细胞增殖，依赖于这些细胞中的升高的cdk活性。cdc2/细胞周期蛋白B激酶抑制剂对癌细胞中升高的cdk活性的抑制，可以抑制增殖，并可以恢复对细胞周期过程的正常控制。
CDK活化的调节很复杂，但是需要将CDK与细胞周期蛋白类的调节性亚单元的一员相联系(Draetta，Trends in Cell Biology，3：287-289(1993))；Murray和Kirschner，Nature，339：275-280(1989)；Solomon等，Molecular Biology of the Cell，3：13-27(1992))。水平更进一步的调节通过激活或灭活CDK亚单元的磷酸化作用而得以发生(Draetta，Trends in Cell Biology，3：287-289(1993))；Murray和Kirschner，Nature，339：275-280(1989)；Solomon等，Molecular Biology of the Cell，3：13-27(1992)；Ducommun等，EMBO Journal，10：3311-3319(1991)；Gautier等，Nature 339：626-629(1989)；Gould和Nurse，Nature，342：39-45(1989)；Krek和Nigg，EMBO Journal，10：3331-3341(1991)；Solomon等，Cell，63：1013-1024(1990))。不同细胞周期蛋白/CDK复合物的协调激活和灭活是细胞周期的正常过程所需要的(Pines，Trendsin Biochemical Sciences，18：195-197(1993)；Sherr，Cell，73：1059-1065(1993))。临界G1-S和G2-M转变都由不同细胞周期蛋白/CDK活性的激活来控制。在G1中，细胞周期蛋白D/CDK4和细胞周期蛋白E/CDK2都被认为能介导S期的开始(Matsushima等，Molecular & Cellular Biology，14：2066-2076(1994)；Ohtsubo和Roberts，Science，259：1908-1912(1993)；Quelle等，Genes & Development，7：1559-1571(1993)；Resnitzky等，Molecular & Cellular Biology，14：1669-1679(1994))。通过S期的过程需要细胞周期蛋白A/CDK2的活性(Girard等，Cell，67：1169-1179(1991)；Pagano等，EMBO Journal，11：961-971(1992)；Rosenblatt等，Proceedings of the National Academy of ScienceUSA，89：2824-2828(1992)；Walker和Maller，Nature，354：314-317(1991)；Zindy等，Biochemical & Biophysical ResearchCommunications，182：1144-1154(1992))，其中细胞周期蛋白A/cdc2(CDK1)和细胞周期蛋白B/cdc2的激活是中期的开始所需要的(Draetta，Trends in Cell Biology，3：287-289(1993))；Murray和Kirschner，Nature，339：275-280(1989)；Solomon等，Molecular Biology of the Cell，3：13-27(1992)；Girard等，Cell，67：1169-1179(1991)；Pagano等，EMBO Journal，11：961-971(1992)；Rosenblatt等，Proceedings of the National Academyof Science USA，89：2824-2828(1992)；Walker和Maller，Nature，354：314-317(1991)；Zindy等，Biochemical & BiophysicalResearch Communications，182：1144-1154(1992))。因此，人们并不奇怪，CDK调节的失控是过度增殖性疾病和癌症中时常发生的事件(Pines，Current Opinion in Cell Biology，4：144-148(1992)；Lees，Current Opinion in Cell Biology，7：773-780(1995)；Hunter和Pines，Cell，79：573-582(1994))。
参与了介导和维持疾病状态的激酶的抑制剂代表了对这些疾病的新的治疗方法。这些激酶的实例包括但不限于：(1)抑制癌症中的c-Src(Brickell，Critical Reviews in Oneogenesis，3：401-406(1992)；Courtneidge，Seminars in Cancer Biology，5：236-246(1994)、抑制raf(Powis，Pharmacology & Therapeutics，62：57-95(1994))和抑制细胞周期蛋白依赖性激酶(CDKs)1、2和4(Pines，Current Opinion in Cell Biology，4：144148(1992)；Lees，Current Opinion in Cell Biology，7：773-780(1995)；Hunter和Pines，Cell，79：573-582(1994))，(2)抑制再狭窄中的CDK2或PDGF-R激酶(Buchdunger等，Proceedings of the National Academyof Science USA，92：2258-2262(1995))，(3)抑制早老性痴呆中的CDK5和GSK3激酶(Hosoi等，Journal of Biochemistry(Tokyo)，117：741-749(1995)；Aplin等，Journal of Neurochemistry，67：699-707(1996)，(4)抑制骨质疏松中的c-Src激酶(Tanaka等，Nature，383：528-531(1996)，(5)抑制II型糖尿病中的GSK-3激酶(Borthwick等，Biochemical & Biophysical ResearchCommunications，210：738-745(1995)，(6)抑制炎症中的p38激酶(Badger等，The Journal of Pharmacology and ExperimentalTherapeutics，279：1453-1461(1996))，(7)抑制涉及血管发生的疾病中的VEGF-R 1-3和TIE-1及-2激酶(Shawver等，DrugDiscovery Today，2：50-63(1997))，(8)抑制病毒感染中的UL97激酶(He等，Journal of Virology，71：405-411(1997))，(9)抑制骨和造血疾病中的CSF-1R激酶(Myers等，Bioorganic & MedicinalChemistry Letters，7：421-424(1997)，以及(10)抑制自身免疫性疾病和移植排斥中的Lck激酶(Myers等，Bioorganic & MedicinalChemistry Letters，7：417-420(1997))。
在所述激酶并未失调但是其是维持该疾病要素时，某些激酶的抑制剂还可能用于治疗这些疾病。在此情况下，对激酶活性的抑制将是为了治疗或减轻这些疾病。例如，很多病毒，如人乳头状瘤病毒，中断细胞周期并使细胞进入细胞循环的S期(Vousden，FASEB Journal，7：8720879(1993))。通过抑制必要的S期起始活性如CDK2来阻止在病毒感染后细胞进入DNA合成阶段，可以通过阻止病毒复制来中断病毒生命周期。这一相同的原理可以用来保护机体的正常细胞免受周期特异性化疗剂的毒性(Stone等，Cancer Research，56：3199-3202(1996)；Kohn等，Journal of Cellular Biochemistry，54：44-452(1994))。抑制CDKs 2或4将阻止进入正常细胞的周期并限制在S期、G2或有丝分裂期起作用的细胞毒素的毒性。此外，还表明CDK2/细胞周期蛋白E活性调节NF-kB。抑制CDK2活性刺激NF-kB依赖性基因表达，这是通过与p300辅激活蛋白作用阶段的事件(Perkins等，Science，275：523-527(1997))。NF-kB调节牵涉炎性反应的基因(如造血生长因子、趋化因子和白细胞粘附分子)(Baeuerle和Henkel，Annual Review of Immunology，12：141-179(1994))并可能涉及细胞内编程性细胞死亡信号的抑制(Beg and Baltimore，Science，274：782-784(1996)；Wang等，Science，274：784-787(1996)；Van Antwerp等，Science，274：787-789(1996))。因此，抑制CDK2可以抑制细胞毒药物通过涉及NF-kB的机理引起的编程性细胞死亡。因此，这表明抑制CDK2活性还在其中NF-kB的调节在疾病的病因中起一定作用的其它情况中具有应用价值。可以从真菌感染中列举其它实例：曲霉病是免疫遭到危害的患者中的常见感染(Armstrong，Clinical Infectious Diseases，16：1-7(1993))。对曲霉属激酶Cdc2/CDC28或Nim A的抑制(Osmani等，EMBO Journal，10：2669-2679(1991)；Osmani等，Cell，67：283-291(1991))可以引起该真菌的抑制或死亡，以便改进这些感染患者的治疗结果。
因此需要对有效的小化合物进行鉴定，这些化合物通过调节受体和非受体酪氨酸及丝氨酸/苏氨酸激酶的活性，来调节和调制反常或异常的细胞增殖、分化或代谢，特异性地抑制信号传导和细胞增殖。具体地讲，对特异性抑制酪氨酸激酶功能的方法和化合物的鉴定将是有利的，该酪氨酸激酶是血管生成(antiogenic)过程或血管渗透性过高的形成所必需的，血管渗透性过高导致水肿、腹水、渗漏、流出和大分子溢出及基质沉积以及相关的紊乱。发明概述
本发明提供了式I的化合物，其外消旋-非对映异构混合物、旋光异构体、药用盐、前药或生物活性代谢物，其中：
G是
Figure A0081575900442
其中Z100是
Figure A0081575900443
或被R1任选地取代的基团，其选自如下：环烷基、萘基、四氢萘基、苯并噻吩基、呋喃基、噻吩基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、噻唑基、苯并呋喃基、2，3-二氢苯并呋喃基、吲哚基、异噁唑基、四氢吡喃基、四氢呋喃基、哌啶基、吡唑基、吡咯基、噁唑基、异噻唑基、噁二唑基、噻二唑基、二氢吲哚基、吲唑基、苯并异噻唑基、吡啶并-噁唑基、吡啶并-噻唑基、嘧啶并噁唑基、嘧啶并噻唑基和苯并咪唑基；
Z110是共价键，或是任选地被取代的(C1-C6)，其任选地被一个或多个选自如下的取代基取代：烷基、CN、OH、卤素、NO2、COOH、被取代或未被取代的氨基和被取代或未被取代的苯基；
Z111是共价键，任选地被取代的(C1-C6)或任选地被取代的-(CH2)n-环烷基-(CH2)n-；其中此任选地被取代的基团任选地被一个或多个选自如下的取代基取代：烷基、CN、OH、卤素，NO2、COOH、被取代或未被取代的氨基和被取代或未被取代的苯基；
Ra和R1各表示一个或多个取代基，其每次出现时独立地选自如下：氢原子，卤素，-CN，-NO2，-C(O)OH，-C(O)H，-OH，-C(O)O-烷基，被取代或未被取代的甲酰氨基，四唑基，三氟甲基羰基氨基，三氟甲基磺酰氨基，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的烷氧基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的链烯基，被取代或未被取代的芳基氧基，被取代或未被取代的杂芳基氧基，被取代或未被取代的芳基烷基，被取代或未被取代的链炔基，被取代或未被取代的氨基，被取代或未被取代的氨基烷基，被取代或未被取代的酰氨基，被取代或未被取代的杂芳硫基，被取代或未被取代的芳硫基，-Z105-C(O)N(R)2，-Z105-N(R)-C(O)-Z200，-Z105-N(R)-S(O)2-Z200，-Z105-N(R)-C(O)-N(R)-Z200，Rc和CH2ORc；其中Rc每次出现时独立地是氢原子，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基，-CH2-NRdRe，-W-(CH2)t-NRdRe，-W-(CH2)t-O-烷基，-W-(CH2)t-S-烷基或-W-(CH2)t-OH；
Z105每次出现时独立地是共价键或(C4-C6)；
Z200每次出现时独立地是被取代或未被取代的(C1-C6)，被取代或未被取代的苯基或者被取代的或未被取代的-(C1-C6)-苯基；
Rd和Re每次出现时独立地是H，烷基，烷酰基或SO2-烷基；或Rd、Re和它们所连接的氮原子一起形成5或6员杂环；t每次出现时独立地是2至6的整数；W每次出现时独立地是化学键或O、S、S(O)、S(O)2或NRf，其中Rf每次出现时独立地是H或烷基；
或者R1是被取代或未被取代的与环2稠合的碳环或杂环；
R3是氢原子，羟基，被取代或未被取代的烷基或者被取代的或未被取代的烷氧基；
A是-O-；-S-；-S(O)p-；-N(R)-；-N(C(O)OR)-；-N(C(O)R)-；-N(SO2R)-；-CH2O-；-CH2S-；-CH2N(R)-；-CH(NR)-；-CH2N(C(O)R))-；-CH2N(C(O)OR)-；-CH2N(SO2R)-；-CH(NHR)-；-CH(NHC(O)R)-；-CH(NHSO2R)-；-CH(NHC(O)OR)-；-CH(OC(O)R)-；-CH(OC(O)NHR)-；-CH＝CH-；-C(＝NOR)-；-C(O)-；-CH(OR)-；-C(O)N(R)-；-N(R)C(O)-；-N(R)S(O)p；-OC(O)N(R)-；-N(R)-C(O)-(CH2)n-N(R)-，-N(R)C(O)O-；-N(R)-(CH2)n+1-C(O)-，-S(O)pN(R)-；-O-(CR2)n+1-C(O)-，-O-(CR2)n+1-O-，-N(C(O)R)S(O)p-；-N(R)S(O)pN(R)-；-N(R)-C(O)-(CH2)n-O-，-C(O)N(R)C(O)-；-S(O)pN(R)C(O)-；-OS(O)pN(R)-；-N(R)S(O)pO-；-N(R)S(O)pC(O)-；-SOpN(C(O)R)-；-N(R)SOpN(R)-；-C(O)O-；-N(R)P(ORb)O-；-N(R)P(ORb)-；-N(R)P(O)(ORb)O-；-N(R)P(O)(ORb)-；-N(C(O)R)P(ORb)O-；-N(C(O)R)P(ORb)-；-N(C(O)R)P(O)(ORb)O-或-N(C(O)R)P(ORb)-；其中R每次出现时独立地是H、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基烷基或者被取代的或未被取代的芳基；
Rb每次出现时独立地是H、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基烷基、被取代或未被取代的环烷基或者被取代的或未被取代的芳基；
p是1或2；
或在含磷的基团中，氮原子、磷原子、R和Rb一起形成5或6员杂环；或
A是NRSO2，而R、Ra和氮原子一起形成被取代或未被取代的与环1稠合的5或6员杂环；
R2是-Z101-Z102；
Z101是共价键，-(C1-C6)-，-(C1-C6)-O-，-(C1-C6)-C(O)-，-(C1-C6)-C(O)O-，-(C1-C6)-C(O)-NH-，-(C1-C6)-C(O)-N((C1-C6))-或被取代或未被取代的苯基；
Z102是氢原子，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的环烷基，被取代或未被取代的饱和或不饱和的杂环基团，或被取代或未被取代的饱和或不饱和的杂双环基团；
所述被取代的杂环或者被取代的杂双环基团带有一个或多个取代基，其各自独立地选自羟基，氰基，被取代或未被取代的烷氧基，被取代或未被取代的磺酰氨基，被取代或未被取代的脲基，被取代或未被取代的甲酰氨基；被取代或未被取代的氨基，氧代基团，饱和的、不饱和的或芳族的被取代或未被取代的杂环基团，该杂环中含有一个或多个氮原子、一个或多个氧原子或二者兼而有之；
其中所述氮原子独立地任选地被如下基团取代：被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基或者被取代的或未被取代的芳基烷基；或
R2是式B-E，其中B是被取代或未被取代的环烷基，被取代或未被取代的氮杂环烷基，被取代或未被取代的氨基，被取代或未被取代的氨基烷基磺酰基，被取代或未被取代的烷氧基烷基，被取代或未被取代的烷氧基，被取代或未被取代的氨基烷基羰基，羟基，被取代或未被取代的亚烷基，被取代或未被取代的氨基烷基，被取代或未被取代的亚烷基羰基或者被取代的或未被取代的氨基烷基羰基；且E是被取代或未被取代的氮杂环烷基，被取代或未被取代的氮杂环烷基羰基，被取代或未被取代的氮杂环烷基磺酰基，被取代或未被取代的氮杂环烷基烷基，被取代或未被取代的杂芳基，被取代或未被取代的杂芳基羰基，被取代或未被取代的杂芳基磺酰基，被取代或未被取代的杂芳基烷基，被取代或未被取代的氮杂环烷基羰基氨基，被取代或未被取代的杂芳基羰基氨基或者被取代的或未被取代的芳基；
a是1，而D1、G1、J1、L1和M1各自独立地选自CRa和N，其条件是D1、G1、J1、L1和M1中至少两个是CRa；或
a是0，而D1、G1、L1和M1之一是NRa，D1、G1、L1和M1之一是CRa，且其余独立地选自CRa和N，其中Ra定义如上；
b是1，而D2、G2、J2、L2和M2各自独立地选自CRa和N，其条件是D2、G2、J2、L2和M2中至少两个是CRa；或
b是0，而D2、G2、L2和M2之一是NRa，D2、G2、L2和M2之一是CRa，且其余独立地选自CRa和N，其中Ra定义如上；且
n每次出现时独立地是0至6的整数。
优选的式(I)化合物是，其中R3是H；R1每次出现时独立地选自如下：F，Cl，Br，I，CH3，NO2，OCF3，OCH3，CN，CO2CH3，CF3，-CH2NRdRc，叔丁基，吡啶基，被取代或未被取代的噁唑基，被取代或未被取代的苄基，被取代或未被取代的苯磺酰基，被取代或未被取代的苯氧基，被取代或未被取代的苯基，被取代或未被取代的氨基，羧基，被取代或未被取代的四唑基及被取代或未被取代的苯乙烯基。
另一种优选的式(I)化合物是，其中R3是H；Ra每次出现时独立地选自如下：F，Cl，Br，I，CH3，NO2，OCF3，OCH3，CN，CO2CH3，CF3，叔丁基，吡啶基，被取代或未被取代的噁唑基，被取代或未被取代的苄基，被取代或未被取代的苯磺酰基，被取代或未被取代的苯氧基，被取代或未被取代的苯基，被取代或未被取代的氨基，羧基，被取代或未被取代的四唑基及被取代或未被取代的苯乙烯基。
另一种优选的式(I)化合物是，其中R3是H；R2是下式其中n是1、2或3。
另一种优选的式(I)化合物是，其中R3是H；R2是下式
Figure A0081575900482
其中m是0、1、2或3，且
Rg是H或-(CH2)pN(R4)R5，其中p是2至6的整数，而R4和R5各自独立地是H、氮杂双环烷基或Y-Z，其中Y选自-C(O)-、-(CH2)q、-S(O)2-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、-(CH2)qO-、-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中q是0至6的整数；且r是0、1或2；且Z是被取代或未被取代的部分，其选自烷基、烷氧基、氨基、芳基、杂芳基和杂环烷基，或R4、R5和它们所连接的氮原子一起形成3、4、5、6或7-员被取代或未被取代的杂环或杂双环基团。
另一种优选的式(I)化合物是，其中R3是H；R2是下式其中m是0、1、2或3，
a和b各自独立地是0至6的整数；
Q是-OR6或-NR4R5；各R4和R5独立地是H、氮杂双环烷基或Y-Z，其中Y选自-C(O)-、-(CH2)q，-S(O)2-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、(CH2)qO-、-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中q是0至6的整数；且r是0、1或2；且Z是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的烷氧基、氨基、芳基、杂芳基或杂环烷基，或R4、R5和它们所连接的氮原子一起形成3、4、5、6或7员被取代或未被取代的杂环或杂双环基团；且
R6是氢原子或被取代或未被取代的烷基。
另一种优选的式(I)化合物是，其中R3是H；R2是下式其中n是1、2或3；且
R4是H、氮杂双环烷基或Y-Z，其中Y选自-C(O)-、-(CH2)q、-S(O)2-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、(CH2)qO-)-、-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中q是0至6的整数；且r是0、1或2；且Z是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的氨基、芳基、被取代或未被取代的杂芳基或者被取代的或未被取代的杂环烷基。
另一种优选的式(I)化合物是，其中R3是H；R2是下式其中m是0、1、2或3；
R5是H、氮杂双环烷基或Y-Z，其中Y选自如下：共价键、-C(O)-、-(CH2)q-、-S(O)2-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、-(CH2)qO-、-(CH2)qNH-、-(CH2)qC(O)-、-C(O)(CH2)q-和-(CH2)qS(O)r-，其中(CH2)q-、-(CH2)qO-、-(CH2)qNH-、-(CH2)qC(O)-、-C(O)(CH2)q-和-(CH2)qS(O)r的烷基部分任选地被下列基团取代：卤素、羟基或烷基；其中q是0至6的整数；且r是0、1或2；且Z是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的氨基、被取代或未被取代的烷氧基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的杂芳基或者被取代的或未被取代的杂环烷基；
或Y和Z一起是天然或非天然氨基酸，其胺的氮原子上可以单或二烷基化；且
R6表示一个或多个取代基，其各自独立地选自氢原子、羟基、氧代基团、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的杂环基、被取代或未被取代的烷氧基羰基、被取代或未被取代的烷氧基烷基、被取代或未被取代的氨基羰基、被取代或未被取代的烷基羰基、被取代或未被取代的芳基羰基、被取代或未被取代的杂环基羰基、被取代或未被取代的氨基烷基和被取代或未被取代的芳基烷基；其条件是与氮原子相邻的碳原子不被羟基取代。
另一种优选的式(I)化合物是，其中R3是H；R2是下式其中R4是H、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的氮杂双环烷基或Y-Z，其中Y选自-C(O)-、(CH2)q、-S(O)2-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、-(CH2)qO-、-(CH2)qNH-和-(CH2)(O)r-；其中q是0至6的整数，而r是0、1或2；且Z是氢原子、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的氨基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的杂芳基或者被取代的或未被取代的杂环烷基。
另一种优选的式(I)化合物是，其中R3是H；R2是下式
Figure A0081575900512
其中m是1至6的整数；且
R4和R5各自独立地是H、被取代或未被取代的氮杂双环烷基或Y-Z，其中Y选自-C(O)-、-(CH2)q、-S(O)2-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、-(CH2)qO-、-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)，-；其中q是0至6的整数；且r是0、1或2；且Z是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的氨基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的杂芳基或者被取代的或未被取代的杂环烷基；或
R4、R5和它们所连接的氮原子一起形成3、4、5、6或7员被取代或未被取代的杂环或者被取代的或未被取代的杂双环基团。
另一种优选的式(I)化合物是，其中R3是H；R2是下式其中
n是0至4的整数；
r是0而m是1至6的整数；或
r是1而m是0至6的整数；
Q是-OR6或-NR4R5；
各R4和R5独立地是H、被取代或未被取代的氮杂双环烷基或Y-Z，其中Y选自-C(O)-、-(CH2)q-、-S(O)2-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、-(CH2)qO-、-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中q是0至6的整数；且r是0、1或2；且Z是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的烷氧基、被取代或未被取代的氨基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的杂芳基或者被取代的或未被取代的杂环烷基；或R4、R5和它们所连接的氮原子一起形成3、4、5或6员被取代或未被取代的杂环基团；且
R6是氢原子或被取代或未被取代的烷基。
另一种优选的式(I)化合物是，其中R3是H；R2是下式
n是0至4的整数；
m是0至6的整数；
R4是H、被取代或未被取代的氮杂双环烷基或Y-Z，其中Y选自-C(O)-、-(CH2)q-、-S(O)2-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、-(CH2)qO-、-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中q是0至6的整数；且r是0，1或2；且Z是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的氨基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的杂芳基或者被取代的或未被取代的杂环烷基；且
R6是氢原子或被取代或未被取代的烷基。
更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中R4、R5和氮原子一起形成下式的杂环基团
Figure A0081575900531
其中R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13和R14各自独立地是低级烷基或氢原子；或R7和R8；R9和R10；R11和R12；或R13和R14中的至少一对取代基一起是一个氧原子；或R7和R9中至少一个是氰基、CONHR15、COOR15、CH2OR15或CH2NR15(R16)，其中R15和R16各自独立地是H、氮杂双环烷基或V-L，其中V选自-C(O)-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、(CH2)qO-、(CH2)p-、-S(O)2-、-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整数，q是0至6的整数，而r是0、1或2；且L是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的氨基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的杂芳基或者被取代的或未被取代的杂环烷基；或R15、R16与氮原子一起形成3、4、5、6或7-员被取代或未被取代的杂环或被取代或未被取代的杂双环基团；
X是O、S、SO、SO2、CH2、CHOR17或NR17，其中R17是氢原子、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的芳基烷基、-C(NH)NH2、-C(O)R17或-C(O)OR18，其中R18是氢原子、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基或者被取代的或未被取代的芳基烷基；且
t是0或1。
更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中R4、R5和氮原子一起形成下式的杂环其中
R19和R20各自独立地是氢原子或低级烷基；或R19和R20一起是一个氧原子；
R21和R22各自独立地是H、被取代或未被取代的氮杂双环烷基或V-L，其中V选自如下：-C(O)-、-(CH2)p-、-S(O)2-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、(CH2)qO-、-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整数，q是0至6的整数，而r是0，1或2；且L是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的氨基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的杂芳基或者被取代的或未被取代的杂环烷基；或R21、R22和氮原子一起形成3、4、5或6-员被取代或未被取代的杂环基团；
m是1至6的整数；且
n是0至6的整数。
更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中R4、R5和氮原子一起形成下式的杂环基团
Figure A0081575900542
其中
m是1至6的整数；且
R23是CH2OH、NRR′、C(O)NRR′或COOR，其中R和R′各自独立地是氢原子或者被取代的或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基或者被取代的或未被取代的芳基烷基。
更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中R4、R5和氮原子一起形成下式的杂环基团其中R24是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基或者被取代或未被取代的芳烷基、羧基、氰基、C(O)OR25、CH2OR25、CH2NR26R27或C(O)NHR26，其中R25是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的芳烷基、被取代或未被取代的杂环基或者被取代或未被取代的杂环芳基；且R26和R27各自独立地是H、被取代或未被取代的氮杂双环烷基或V-L，其中V选自-C(O)-、-(CH2)p-、-S(O)2-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、(CH2)qO-、-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整数，q是0至6的整数，而r是0、1或2；且L是被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的氨基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的杂芳基或者被取代的或未被取代的杂环烷基；或R26、R27和氮原子一起形成3、4、5或6-员被取代或未被取代的杂环基团。
更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中R4和R5的至少一个是式Y-Z，其中
Z是下式其中
T是C(O)、S、SO、SO2、CHOR或NR，其中R是氢原子或被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基或者被取代的或未被取代的芳基烷基；且
n是0、1或2。
更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中R4和R5的至少一个是式Y-Z，其中Z是式-N(R28)R29，其中R28和R29各自独立地是被取代或未被取代的羧基烷基、被取代或未被取代的烷氧基羰基烷基、被取代或未被取代的羟基烷基、被取代或未被取代的烷基磺酰基、被取代或未被取代的烷基羰基或者被取代的或未被取代的氰基烷基；或R28和R29与氮原子一起形成5或6员被取代或未被取代的杂环基团。
更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中R4、R5和氮原子一起形成下式的杂环基团其中
R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13和R14各自独立地是低级烷基或氢原子；或R7和R8；R9和R10；R11和R12；或R13和R14中至少一对取代基一起是一个氧原子；或R7和R9的至少一个是氰基、CONHR15、COOR15、CH2OR15或CH2NR15(R16)，其中R15和R16各自独立地是H、被取代或未被取代的氮杂双环烷基或V-L，其中V选自如下：-C(O)-，-(CH2)p-，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，-CONH-，(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整数，q是0至6的整数，而r是0、1或2；且L是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的氨基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的杂芳基或者被取代的或未被取代的杂环烷基；或R15、R16和氮原子一起形成3、4、5、6或7-员被取代或未被取代的杂环或杂双环基团；
X是O、S、SO、SO2、CH2、CHOR17或NR17，其中R17是氢原子、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的芳基烷基、-C(NH)NH2、-C(O)R11或-C(O)OR18，其中R18是氢原子、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基或者被取代的或未被取代的芳基烷基；且
t是0或1。
更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中R4、R5和氮原子一起形成下式的杂环基团
Figure A0081575900571
其中R19和R20各自独立地是氢原子或低级烷基；或R19和R20一起是一个氧原子；
R21和R22各自独立地是H、被取代或未被取代的氮杂双环烷基或V-L，其中V选自-C(O)-、-(CH2)p-、-S(O)2-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、(CH2)qO-、-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整数，q是0至6的整数，而r是0、1或2；且L是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的氨基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的杂芳基或者被取代的或未被取代的杂环烷基；或R21、R22和氮原子一起形成3、4、5或6-员被取代或未被取代的杂环基团；
m是1至6的整数；且
n是0至6的整数。
更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中R4、R5和氮原子一起形成下式的杂环基团
Figure A0081575900572
其中m是1至6的整数；且
R23是CH2OH、NRR′、C(O)NRR′或COOR，其中R是氢原子或被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基或者被取代的或未被取代的芳基烷基。
更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中R4、R5和氮原子一起形成下式的杂环基团其中R24是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基或者被取代的或未被取代的芳基烷基、羧基、氰基、C(O)OR25、CH2OR25、CH2NR26R27或C(O)NHR26，其中R25是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的芳基烷基、被取代或未被取代的杂环基或者被取代的或未被取代的杂环芳基；且R26和R27各自独立地是H、被取代或未被取代的氮杂双环烷基或V-L，其中V选自-C(O)-、-(CH2)p-、-S(O)2-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、(CH2)qO-、-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整数，q是0至6的整数，而r是0、1或2；且L是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的氨基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的杂芳基或者被取代的或未被取代的杂环烷基；或R26、R27和氮原子一起形成3、4、5或6员被取代或未被取代的杂环基团。
更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中R4和R5的至少一个是式Y-Z，其中
Z是下式
Figure A0081575900582
其中g是0或1；
T是C(O)、O、S、SO、SO2、CH2、CHOR17或NR17，其中R17是氢原子、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的芳基烷基、-C(NH)NH2、-C(O)R18或-C(O)OR18，其中R18是氢原子、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基或者被取代的或未被取代的芳基烷基；且
R32是氢原子、氰基、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的烷氧基羰基、被取代或未被取代的烷氧基烷基、被取代或未被取代的羟基烷基、被取代或未被取代的氨基羰基、被取代或未被取代的烷基羰基或者被取代的或未被取代的芳基烷基。
更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中R4和R5的至少一个是式Y-Z，其中Z是式-N(R28)R29，其中R28和R29各自独立地是被取代或未被取代的羧基烷基、被取代或未被取代的烷氧基羰基烷基、被取代或未被取代的羟基烷基、被取代或未被取代的烷基磺酰基、被取代或未被取代的烷基羰基或者被取代的或未被取代的氰基烷基；或R28和R29与氮原子一起形成5或6员被取代或未被取代的杂环基团。
更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中R5是Y-Z，其中Z是式N(R30)R31，其中R30和R31各自独立地是氢原子、烷基、烷氧基羰基、烷氧基烷基、羟基烷基、氨基羰基、氰基、烷基羰基或芳基烷基。
更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中R5是Y-Z，其中Z是下式
Figure A0081575900591
其中各X独立地是CH或N；且
R32是氢原子、氰基、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的烷氧基羰基、被取代或未被取代的烷氧基烷基、被取代或未被取代的羟基烷基、被取代或未被取代的氨基羰基、被取代或未被取代的烷基羰基或者被取代的或未被取代的芳基烷基。
更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中R5是Y-Z，其中Z是下式其中g是0或1；
T是O、S、SO、SO2、CH2、CHOR17或NR17，其中R17是氢原子、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的芳基烷基、C(O)NH2、-C(NH)NH2、-C(O)R17或-C(O)OR18，其中R18是氢原子、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基或者被取代的或未被取代的芳基烷基；且
R32是氢原子、氰基、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的烷氧基羰基、被取代或未被取代的烷氧基烷基、被取代或未被取代的羟基烷基、被取代或未被取代的氨基羰基、被取代或未被取代的烷基羰基或者被取代的或未被取代的芳基烷基。
更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中R5是Y-Z，其中Z是下式
Figure A0081575900602
其中g是0、1或2；且
R32是氢原子、氰基、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的烷氧基羰基、被取代或未被取代的烷氧基烷基、被取代或未被取代的羟基烷基、被取代或未被取代的氨基羰基、被取代或未被取代的烷基羰基或者被取代的或未被取代的芳基烷基。
更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中R5是Y-Z，其中Z是下式
Figure A0081575900611
其中
T是C(O)、O、S、SO、SO2、CH2、CHOR17或NR17，其中R17是氢原子、被取代或未被取代的烷基、芳基、芳基烷基、-C(NH)NH2、-C(O)R18或-C(O)OR18，其中R18是氢原子、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基或者被取代的或未被取代的芳基烷基；
g是0或1；且
R32是氢原子、氰基、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的烷氧基羰基、被取代或未被取代的烷氧基烷基、被取代或未被取代的羟基烷基、被取代或未被取代的氨基羰基、被取代或未被取代的烷基羰基或者被取代的或未被取代的芳基烷基。
更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中R5是Y-Z，其中Z是下式其中R32是氢原子、氰基、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的烷氧基羰基、被取代或未被取代的烷氧基烷基、被取代或未被取代的羟基烷基、被取代或未被取代的氨基羰基，烷基羰基、被取代或未被取代的硫代烷氧基或者被取代的或未被取代的芳基烷基；且
R33是氢原子、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的烷氧基羰基、被取代或未被取代的烷氧基烷基、被取代或未被取代的氨基羰基、全卤代烷基、被取代或未被取代的链烯基、被取代或未被取代的烷基羰基或者被取代的或未被取代的芳基烷基。
优选的式(I)化合物是，其中R3是H；R2是下式其中
m是0或1；
R34、R35、R36、R37、R38、R39、R40和R41各自独立地是甲基或氢原子；或R34和R35；R36；和R37；R38和R39；或R40和R41中的至少一对取代基一起是一个氧原子；且
R42是H、被取代或未被取代的氮杂双环烷基或Y-Z，其中Y选自-C(O)-、-(CH2)p-、-S(O)2-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、(CH2)qO-、-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整数，q是0至6的整数，而r是0、1或2；且Z是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的氨基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的杂芳基或者被取代的或未被取代的杂环烷基；或R42是下式其中
u是0或1；
R43、R44、R45、R46、R47、R48、R49和R50各自独立地是甲基或氢原子；或R43和R44；R45和R46；R47和R48；或R49和R50中的至少一对取代基一起是一个氧原子；且
R51是H、被取代或未被取代的氮杂双环烷基或V-L，其中V选自-C(O)-、-(CH2)p-、-S(O)2-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、(CH2)qO-、-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)-；其中p是0至6的整数，q是0至6的整数，而r是0、1或2；且L是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的氨基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的杂芳基或者被取代的或未被取代的杂环烷基。
优选的式(I)化合物是，其中R3是H；R2是下式其中h、i、j、k和l独立地是0或1；
R52、R53、R54、R55、R56、R57、R58、R59、Rg和Rh各自独立地是甲基或氢原子；或R52和R53；R54和R55；R56和R57；或R58和R59中的至少一对取代基一起是一个氧原子；且
R60是H、被取代或未被取代的氮杂双环烷基或Y-Z，其中Y选自-C(O)-、-(CH2)p-、-S(O)2-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、(CH2)qO-、-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整数，q是0至6的整数，而r是0、1或2；且Z是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的氨基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的杂芳基或者被取代的或未被取代的杂环烷基；或R60是下式其中v是0或1；
R61、R62、R63、R64、R65、R66、R67和R68各自独立地是低级烷基或氢原子；或R61和R62；R63和R64；R65和R66；且R67和R68中的至少一对取代基一起是一个氧原子；且
R69是H、被取代或未被取代的氮杂双环烷基或V-1，其中V选自-C(O)-、-(CH2)p-、-S(O)2-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、(CH2)qO-、-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整数，q是0至6的整数，而r是0、1或2；且L是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的氨基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的杂芳基或者被取代的或未被取代的杂环烷基。
另一种更优选的式(I)化合物是，其中R3是H；R2是Z101-Z102，其中Z101是共价键、-(C1-C6)-、-(C1-C6)-O-、-(C1-C6)-C(O)-、-(C1-C6)-C(O)O-、-(C1-C6)-C(O)-NH-、-(C1-C6)-C(O)-N((C1-C6))-或被取代的苯基；且
Z102是氢原子、被取代或未被取代的烷基或被取代或未被取代的饱和或不饱和的杂环基团。
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中Z101选自-CH2-C(O)O-、-CH2-C(O)-、-CH2-C(O)-NH-、-CH2-C(O)-N(Me)-、-CH(Me)-C(O)O-、(CH2)3-C(O)O-、-CH(Me)-C(O)-NH-和-(CH2)3-C(O)-NH-；且
Z102选自如下：氢原子、甲基、乙基、N，N-二甲基氨基乙基、N，N-二乙基氨基乙基、2-苯基-2-羟基乙基、4-吗啉基、哌嗪基、N-甲基哌嗪基和2-羟基甲基吡咯烷基。
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中G是或 其中Z100是被取代或未被取代的苯并噁唑基或被取代或未被取代的苯并噻唑基。
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中G是
Figure A0081575900651
Figure A0081575900652
或
Figure A0081575900653
其中只有一个Ra且其是H或F。
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中Z101是共价键；且Z102是任选地被取代的吡啶基。
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中G是
Figure A0081575900654
另一种优选的式(I)化合物是，其中R3是H；R2是环戊基；且G是
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中Z110是氢原子；A是O；且Z100是任选地被取代的苯基、呋喃基或噻吩基，其中Z100任选地被一个或多个取代基取代，所述取代基各自独立地选自如下：F、COOH、NO2、-OMe、COOMe、OCF3和CF3。
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中Z110是氢原子；A是-O-、-O-(CR2)n-C(O)-或-O-(CR2)n-O-；n每次出现时是0至3；
Z100是任选地被取代的基团，其选自：环己基、苯基、四氢吡喃基、四氢呋喃基、异噁唑基和哌啶基；其中Z100任选地被一个或多个选自如下的取代基取代：烷基、烷氧基、卤素、羟基和烷氧基羰基。
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中R2是任选地被取代的基团，其选自环丁基和环己基。
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中R2任选地被一个或多个选自如下的取代基取代：羟基，烷基、羟基烷基、羧基烷基和苯基烷氧基烷基。
另一种优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中G是4-苯氧基苯基。
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中m是2；a是0；R6是H；b是1或2；且R4和R5各是氢原子。
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中m是0、1或2；R6是氢原子；R5是H或Y-Z；
其中Y是共价键，-C(O)-、-(CH2)qO-、-(CH2)q、-(CH2)qC(O)-或-C(O)(CH2)q，其中-(CH2)qO-、-(CH2)p-、-(CH2)qC(O)-和-C(O)(CH2)q的烷基部分任选地被下列基团取代：卤素、羟基或烷基；且
Z是氢原子、烷基、任选地被取代的烷基、烷氧基烷基、任选地被取代的杂环烷基、任选地被取代的杂芳基、或任选地被取代的氨基。
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中Z是氢原子、甲基、乙基、羟基甲基、甲氧基乙基、N-甲基-哌啶基、(叔丁氧基羰基)(羟基)哌啶基、羟基哌啶基、(羟基甲基)哌啶基、(羟基)(甲基)哌啶基、4-吗啉基、(甲氧基乙基)哌嗪基、甲基哌嗪基、4-哌啶基哌啶基、咪唑基、甲基咪唑基、N-甲基氨基、N，N-二甲基氨基、N-异丙基氨基、N，N-二乙基氨基、2，3-二羟基丙基氨基、2-羟基乙基氨基、3-羟基丙基氨基、甲氧基乙基氨基、乙氧基羰基甲基氨基、苯基甲基氨基、N-甲基-N-甲氧基氨基、呋喃基甲基氨基、哌啶基乙基氨基、N-(2-N，N-二甲基氨基乙基)-N-甲基氨基、2-N，N-二甲基氨基乙基氨基、N-甲基-N-(N-甲基哌啶-4-基)氨基、2-(4-吗啉基)-乙基氨基、3-(4-吗啉基)-丙基氨基、3-咪唑基丙基氨基或3-(2-氧代吡咯烷基)丙基氨基。
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中m是2；R5是Y-Z；Y是-C(O)-；且Z是其中n是0、1、2或3。
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中
R4是氢原子或甲基；
G是
Figure A0081575900672
A选自O、-N(R)-和-N(R)C(O)-；
Z111是-(CH2)n-环烷基-(CH2)n-；
R是氢原子或烷基；n是0至5；
Ra是一个或多个各自独立地选自H、OH、F、Cl、甲基和甲氧基的取代基；
R1是一个或多个取代基，其各自独立地选自H、CN、F、CF3、OCF3、甲基、甲氧基和任选地被取代的氨基；且其中所述氨基任选地被一个或两个基团取代，其各自独立地选自烷基、烷氧基烷基、苯基、被取代的苯基及任选地被取代的杂芳基。
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中R1是4-甲基苯硫基或2-吡啶硫基。
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中G是其中Z100选自苯并[b]噻吩基、呋喃基和噻吩基。
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中Ra是烷氧基；A是-NH-C(O)-；且在A和Z100之间存在一个共价键。
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中G是
Figure A0081575900682
其中A选自-N(R)-C(O)-N(R)-、-(CH2)n-N(R)C(O)N(R)-、-N(R)-和-N(R)-SO2-；R是氢原子或烷基；
Z100是吡啶基，噻唑基，呋喃基，苯并呋喃基或噁唑基；
X是S、O或NR′，其中R′每次出现时独立地是H或Me；
Ra是一个或多个取代基，其各自独立地选自H和F；且R1是一个或多个取代基，各自独立地选自H、F、Cl、Br、NO2、CF3、烷基、烷氧基和烷氧基羰基。
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中R4是甲基；m是1、2或3；R5是Y-Z，其中Y是-C(O)O-、-C(O)-或-C(O)-(CH2)p-；且Z是氨基烷基、N-烷基氨基、N，N-二烷基氨基或羟基烷基氨基烷基。
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中R4是甲基；G是其中n是0至3；Z100是任选地被取代的基团，其选自：吲哚基、茚基、甲基茚基、甲基吲哚基、二甲基氨基苯基、苯基、环己基和苯并呋喃基。
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中
G是
Figure A0081575900692
Z100是任选地被取代的基团，其选自苯基、咪唑基、吲哚基、呋喃基、苯并呋喃基和2，3-二氢苯并呋喃基；
其中Z100任选地被一个或多个取代基取代，所述取代基自独立地选自如下：F、Cl、CN、任选地被取代的烷基、-O-(任选地被取代的烷基)、-COOH、-Z105-C(O)N(R)2、-Z105-N(R)-C(O)-Z200、-Z105-N(R)-S(O)2-Z200和-Z105-N(R)-C(O)-N(R)-Z200；
Z105是共价键或(C1-C6)；
Z200是任选地被取代的基团，其选自(C1-C6)、苯基和-(C1-C6)-苯基；
Z110和Z111各自独立的是共价键或(C1-C3)基团，其任选地被如下基团取代：烷基、羟基、COOH、CN或苯基；且
A是O、-N(R)-C(O)-N(R)-、-N(R)-C(O)-O-、-N(R)-或-N(R)-C(O)-，其中R是H或烷基。
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中R4是甲基。
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中
G是
Figure A0081575900701
其中Z100是任选地被取代的基团，其选自苯并噁唑基、苯并噻唑基和苯并咪唑基。
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中R4是甲基；A是-NH-；只有一个Ra且其是H或F；且Z100任选地被一个或多个取代基取代，所述取代基各自独立地选自烷基、卤素、CF3和烷氧基。
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中
G是
Z100是任选地被取代的基团，其选自：苯基，吡咯基，吡啶基，苯并咪唑基，萘基和
Figure A0081575900703
其中Z100任选地被一个或多个取代基取代，所述取代基各自独立地选自如下：F、Cl、Br、NO2、氨基、N-烷基氨基、N，N-二烷基氨基、CN、任选地被取代的烷基、-O-(任选地被取代的烷基)和苯基；
Z110和Z111每次出现时独立地是(C0-C3)，其任选地被任选地被取代的苯基取代；且
A是-N(R)-C(O)-N(R)-、-N(R)-S(O)2-、-N(R)-C(O)-、-N(R)-或-N(R)-C(O)-O-。
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中R4是甲基和只有一个Ra且其是F。
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中G是
Z100是任选地被取代的基团，其选自：苯基、异噁唑基、四氢萘基、呋喃基、苯并呋喃基、吡啶基和吲哚基；其中Z100任选地被一个或多个取代基取代，所述取代基各自独立地选自F、CN、NO2、-C(O)H、-CONH2、-NHSO2CF3、任选地被取代的烷基、任选地被取代的杂芳基和-O-(任选地被取代的烷基)；
Z110和Z111各自独立地是任选地被取代的(C0-C3)；且
A是O、-N(R)-C(O)-(CH2)n-N(R)、-C(O)-N(R)-、-N(R)-C(O)-O-、-N(R)-C(O)-或-N(R)-。
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中R4是甲基；Ra是H或甲氧基；且Z110和Z111各自是未被取代的。
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中G是其中R是H或低级烷基而n每次出现时独立地是1 to 6。
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中G是
Figure A0081575900722
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中Z100是被取代或未被取代的苯基。
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中G是
Figure A0081575900723
其中Z100是任选地被取代的基团，其选自苯并噁唑基、苯并噻唑基和苯并咪唑基。
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中n是2；R6是H；m是1；r是1；且R4和R5各自是氢原子。
另一种更优选的式(I)化合物是，其中在任何适宜的上述优选化合物中G是4-苯氧基苯基。
在本发明的另一方面中，其涉及抑制患者的一种或多种蛋白激酶活性的方法，其中包括给所述患者使用治疗有效量的式(I)的化合物或其生理可接受盐、前药或生物活性代谢物。优选的方法是其中所述蛋白激酶选自如下：KDR、FGFR-1、PDGFRβ、PDGFRα、IGF-1R、c-Met、Flt-1、Flt-4、TIE-2、TIE-1、Lck、Src、fyn、Lyn、Blk、hck、fgr和yes。另一个优选的方法是其中所述蛋白激酶是蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶或蛋白酪氨酸激酶。更优选的方法是其中所述蛋白激酶是TIE-2，而另一种更优选的方法是其中所述蛋白激酶活性涉及T细胞活化、B细胞活化、肥大细胞脱粒、单核细胞活化、炎性反应的加强或其联合。
本发明的另一个方面中，涉及影响患者的过度增殖性紊乱的方法，其中包括给所述患者使用治疗有效量的式(I)的化合物或其生理可接受盐、前药或生物活性代谢物。
在本发明的另一个方面中，涉及影响患者的血管生成的方法，其中包括给所述患者使用治疗有效量的式(I)的化合物或其生理可接受盐、前药或生物活性代谢物。优选的方法是其中所述化合物或其生理可接受盐、前药或生物活性代谢物是以促进血管发生或血管生成的有效量给药的。更优选的方法是其中所述患者患有贫血，局部出血，梗塞，移植排斥，创伤，坏疽或坏死。
在本发明的另一方面中，涉及治疗患者的一种或多种溃疡的方法，包括给所述患者使用治疗有效量的式(I)的化合物或其生理可接受盐、前药或生物活性代谢物。优选的方法是其中所述一种或多种溃疡是由细菌或真菌感染引起的；或所述一种或多种溃疡是莫伦氏溃疡；或所述一种或多种溃疡是溃疡性结肠炎的症状。
在本发明的另一方面中，涉及治疗患者的病症的方法，包括给所述患者使用治疗有效量的式(I)的化合物或其生理可接受盐、前药或生物活性代谢物，其中所述病症是眼部病症，心血管病，癌症，Crow-Fukase(POEMS)综合征，糖尿病，镰刀细胞贫血病，慢性炎症，系统性狼疮，肾小球性肾炎，滑膜炎，炎性肠疾病，克罗恩氏病，肾小球性肾炎，类风湿性关节炎，骨关节炎，多发性硬化，移植物排斥，莱姆病，败血症，von Hippel Lindau病，类天疱疮，牛皮癣，佩吉特氏病，多囊性肾病，纤维变性疾病，肉样瘤病，肝硬化，甲状腺炎，粘滞性过高综合征，Osler-Weber-Rendu疾病，慢性梗塞性肺病，哮喘或烧伤、外伤、辐射、中风、低氧症、局部出血后水肿，卵巢高刺激性综合征，子痫前期，月经过多，子宫内膜异位，或单纯性疱疹、带状疱疹、人类免疫缺陷病毒、副痘病毒、原生动物或弓形体病引起的感染。
优选的方法是其中所述眼部病症是：
眼或视网膜黄斑水肿，眼新血管病，巩膜炎，光角膜切开术，眼色素层炎，玻璃体炎，近视，眼凹，慢性视网膜脱离，激光治疗后并发症，结膜炎，遗传性黄斑变性，Eales病，视网膜病或视网膜黄斑变性；
所述心血管病是：
动脉粥样硬化，再狭窄，局部出血/再灌注损伤，血管闭塞或颈动脉梗塞性疾病；
所述癌症是：
实体瘤，肉瘤，纤维肉瘤，骨瘤，黑素瘤，成视网膜细胞瘤，成横纹肌细胞肉瘤，成胶质细胞瘤，成神经细胞瘤，畸胎样瘤，造血系统恶性肿瘤，Kaposi′s肉瘤，何杰金氏病，淋巴瘤，骨髓瘤，白血病或恶性腹水；且
所述糖尿病病症是：
胰岛素依赖性糖尿病青光眼，糖尿病性视网膜病或微血管病。
在本发明的另一方面中，涉及降低患者生育力的方法，所述方法包括给所述患者使用有效量的式(I)的化合物或其生理可接受盐、前药或生物活性代谢物的步骤。
在本发明的另一方面中，涉及一种方法，其中所述式I的化合物或其生理可接受盐、前药或生物活性代谢物与原血管生成生长因子联合给药。优选的方法是其中所述原血管生成生长因子选自VEGF、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E、HGF、FGF-1、FGF-2、其衍生物及其抗独特型抗体。发明详述
在一个实施方案中，本发明提供了如上所述的式I化合物。在式I化合物的优选基团中取代基的含义给出如下。
优选R1选自如下：F，Cl，Br，I，CH3，NO2，OCF3，OCH3，CN，CO2CH3，CF3，叔丁基，吡啶基，被取代或未被取代的噁唑基，被取代或未被取代的苄基，被取代或未被取代的苯磺酰基，被取代或未被取代的苯氧基，被取代或未被取代的苯基，被取代或未被取代的氨基，羧基，被取代的和未被取代的四唑基，被取代的和未被取代的苯乙烯基，被取代的和未被取代的芳硫基，被取代或未被取代的硫代烷氧基，被取代的和未被取代的杂芳硫基；CH2ORc，其中Rc是氢原子或者被取代的或未被取代的烷基或芳基；及W-(CH2)t-NRdRe，其中t是约1至约6的整数；W是化学键、O、S、S(O)、S(O)2或NRf，其中Rf是H或烷基，而Rd和Re独立地是H、烷基、烷酰基或SO2-烷基；或Rd、Re和它们所连接的氮原子一起形成5或6员杂环。
优选Ra选自如下：F，Cl，Br，I，CH3，NO2，OCF3，OCH3，CN，CO2CH3，CF3，叔丁基，吡啶基，被取代或未被取代的噁唑基，被取代或未被取代的苄基，被取代或未被取代的苯磺酰基，被取代或未被取代的苯氧基，被取代或未被取代的苯基，被取代或未被取代的氨基，被取代或未被取代的硫代烷氧基，羧基，被取代的和未被取代的四唑基，被取代的和未取代的苯乙烯基，被取代的和未被取代的芳硫基，被取代的和未被取代的杂芳硫基；CH2ORc，其中Rc是氢原子或者被取代的或未被取代的烷基或芳基；且-W-(CH2)t-NRdRe，其中t是约1至约6的整数；W是化学键、O、S、S(O)、S(O)2或NRf，其中Rf是H或烷基，而Rd和Re独立地是H、烷基、烷酰基或SO2-烷基；或Rd、Re和它们所连接的氮原子一起形成5或6员杂环。
式(I)的化合物可以以与药用酸形成的盐的形式存在。本发明包括这些盐。此类盐的实例包括盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、甲磺酸盐、硝酸盐、马来酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐、酒石酸盐[例如(+)-酒石酸盐、(-)-酒石酸盐或其混合物，包括外消旋混合物]、琥珀酸盐、苯甲酸盐，以及与氨基酸如谷氨酸形成的盐。这些盐可以通过本领域技术人员已知的方法制备。
具有酸性取代基的某些式(I)的化合物可以以与药用碱形成的盐的形式存在。本发明包括这样的盐。此类盐的实例包括钠盐、钾盐、赖氨酸盐和精氨酸盐。这些盐可以通过本领域技术人员已知的方法制备。
某些式(I)的化合物及其盐可以存在一种以上的结晶形式，本发明包括了各结晶形式及其混合物。
某些式(I)的化合物及其盐还可以以溶剂化物的形式存在，例如水合物，本发明包括了各种溶剂化物及其混合物。
某些式(I)的化合物可以含有一个或多个手性中心，并可以存在不同的旋光活性形式。当式I的化合物含有一个手性中心时，这些化合物已两种对映异构体的形式存在，本发明包括了这两种对映异构体以及对映异构体的混合物，如外消旋混合物。这些对映体可以通过本领域技术人员已知的方法拆分，例如，通过结晶；形成非对映异构体衍生物或复合物，它们可以分离，例如，通过结晶、气-液相或液相色谱；用对映体特异性试剂对一种对映体进行选择性反应，例如酶酯化；或在手性环境中进行气-液相或液相色谱，例如，在手性载体如结合了手性配体的硅胶，或者在手性溶剂的存在下。应领会当通过上述分离方法之一将需要的对映异构体转变为另一种化学物质时，进一步需要释放所需的对映异构形式的步骤。或者，特定的对映异构体可以通过不对称合成用旋光性试剂、底物、催化剂或溶剂来合成，或通过不对称转化反应将一种对映异构体转变为另一种。
当式(I)的化合物含有一个以上的手性中心时，其可以已非对映异构体的形式存在。可以通过本领域技术人员已知的方法分离这些非对映异构体对，例如，通过色谱或结晶，而每对中的单一对映体可以如上所述进行分离。本发明包括了式I化合物的各非对映异构体及其混合物。
某些式(I)的化合物可以存在不同的互变异构形式或几何异构体，本发明包括了式I化合物的各互变异构体和/或几何异构体及其混合物。
某些式(I)的化合物存在不同的稳定构象形式，它们是可以分离的。由于围绕不对称单键的受限制的旋转(例如，由于空间位阻或环张力)带来的扭转不对称性，为不同构象异构体的分离提供了可能。本发明包括了式(I)化合物的各构象异构体及其混合物。
某些式(I)的化合物可以存在两性离子形式，本发明包括了式(I)化合物的各种两性离子形式及其混合物。
杂芳基，在本文中，包括杂芳基环系(例如，其目的是举例，不视为对本发明范围的限制：噻吩基，吡啶基，吡唑基，异噁唑基，噻二唑基，噁二唑基，吲唑基，呋喃基，吡咯基，咪唑基，吡唑基，三唑基，嘧啶基，吡嗪基，噻唑基，异噻唑基，噁唑基或四唑基)及其中碳环芳环、碳环非芳环或杂芳基环与一个或多个其它杂芳基环稠合的杂芳基环系(例如，目的是举例，其不视为对本发明范围的限制：苯并(b)噻吩基，苯并咪唑基，苯并噁唑基，苯并噻唑基，苯并噻二唑基，苯并噁二唑基，吲哚基，四氢吲哚基，氮杂吲哚基，吲唑基，喹啉基，咪唑并吡啶，喹唑啉嘌呤，吡咯并[2，3-d]嘧啶，吡唑并[3，4-d]嘧啶)及其N-氧化物。被取代的杂芳基优选被一个或多个各自独立地选自如下的取代基取代：卤素、羟基、烷基、烷氧基、烷基-O-C(O)-、烷氧基烷基、杂环烷基、任选地被取代的苯基、硝基、氨基、单-取代的氨基或二-取代的氨基。
杂环(杂环基)基团，在本文中，指杂芳基和杂环烷基。
杂双环基团，在本文中，指含有一个或多个杂原子的双环基团，其是饱和的、部分不饱和的或不饱和的。
芳基烷基，在本文中，是通过具有1至约6个碳原子的脂族基团与某化合物连接的芳族取代基。优选的芳基烷基是苄基。
杂芳烷基，在本文中，是通过具有1至约6个碳原子的脂族基团与某化合物连接的杂芳族的取代基。
杂环烷基，在本文中，是具有3至8个原子并包括至少一个杂原子如氮原子、氧原子或硫原子的非芳族环系。
在本文中，脂族基团或符号如“(C0-C6)”包括直链的、支链的或环状的烃，它们完全饱和或者含有一个或多个不饱和单元。当该基团是C0时，这意味着该部分不存在，或换言之该部分是一个化学键。
在本文中，芳族基团(或芳基)包括芳族的碳环环系(例如，苯基)和稠合的多环芳族环系(例如，萘基和1，2，3，4-四氢萘基)。
在本文中，术语“天然氨基酸”指本领域已知的23种天然氨基酸，它们是(以其前3个字母表示)：Ala，Arg，Asn，Asp，Cys，Cys-Cys，Glu，Gln，Gly，His，Hyl，Hyp，Ile，Leu，Lys，Met，Phe，Pro，Ser，Thr，Trp，Tyr和Val。术语非天然氨基酸指式NH2-(C(X)2)n-COOH的化合物，它们是α-(当n是1时)或β-(当n是2时)氨基酸，其中X每次出现时独立地是本领域技术人员认可的任何侧链部分；非天然氨基酸的实例，包括但不限于：羟基脯氨酸、高脯氨酸、4-氨基-苯基丙氨酸、β-(2-萘基)丙氨酸、正亮氨酸、环己基丙氨酸、β-(3-吡啶基)丙氨酸、β-(4-吡啶基)丙氨酸、α-氨基异丁酸、尿刊酸、N，N-四甲基脒基-组氨酸、N-甲基丙氨酸、N-甲基-甘氨酸、N-甲基-谷氨酸、叔丁基甘氨酸、α-氨基丁酸、叔丁基丙氨酸、鸟氨酸、α-氨基异丁酸、β-丙氨酸、γ-氨基丁酸、5-氨基戊酸、12-氨基十二烷酸、2-氨基二氢化茚-2-甲酸等，及其衍生物，特别是其中所述胺的氮原子已被单-或二-烷基化的。
在本文中，很多部分或取代基被命名为“被取代或未被取代的”或“任选地被取代的”。当某部分被这些术语之一修饰时，其表示该部分中任何本领域技术人员已知的可被取代的部分可以被取代，其包括一个或多个取代基，其中如果存在一个以上的取代基，则各取代基是独立地进行选择的。这意味着取代是本领域熟知的和/或是本公开文本中所教导的。出于举例目的，其不视为对本发明范围的限制，作为取代基的基团的一些实例为：烷基(其本身也可被取代，如CF3)，烷氧基(其本身也可被取代，如OCF3)，卤素或卤素基团(F，Cl，Br，I)，羟基，硝基，氧代基团，CN，COH，COOH，氨基，N-烷基氨基或N，N-二烷基氨基(其中烷基也可被取代)，酯(-C(O)-OR，其中R是如烷基、芳基等，其可以被取代)，芳基(首选苯基，其可以被取代)和芳基烷基(其可以被取代)。
式I化合物的适当的合成路线在方案I-XII中给出。方案I说明了3-卤代-4-氯吡唑并嘧啶向N1-取代的3-芳基-4-氨基吡唑并嘧啶的转变。方案II说明了在3-卤代-4-氨基吡唑并嘧啶的N-1位进行的取代，接着用芳基置换卤素。方案III阐明了在3-芳基-4-氨基吡唑并嘧啶的N-1位进行的取代。方案IV说明了4-羟基吡唑并嘧啶向1-取代的3-溴-4-氯吡唑并嘧啶的转变。方案V阐明了吡唑并嘧啶核的形成。方案VI说明了3-芳基-4-氨基吡唑并嘧啶的形成。方案VII说明了对N-1取代基的进一步处理。P表示一种适宜的氨基保护基。方案VIII阐明了用于方案I中的芳基硼酸酯的制备。方案IX和X显示了对N-1取代基的修饰。方案XI阐明3-芳基的官能基化。在方案I-XI中，正如本领域已知的，某些反应可能需要对不参与反应的官能团进行适当的保护/脱保护。
本发明的化合物具有抗血管生成性质。这些抗血管生成性质至少部分是由于对血管生成过程中必需的蛋白酪氨酸激酶的抑制。为此，这些化合物可以用作抗如下疾病的活性剂，例如，关节炎，动脉粥样硬化，再狭窄，牛皮癣，血管瘤，心肌血管生成，冠状和脑血管侧支，局部缺血性四肢血管生成，局部出血/再灌注损伤，伤口愈合，消化溃疡性螺杆菌属相关的疾病，病毒引起的血管生成紊乱，骨折，Crow-Fukase综合征(POEMS)，子痫前期，月经过多，猫抓热，潮红，新血管性青光眼和视网膜病如与糖尿病性视网膜病有关的，早产儿视网膜病或与年龄有关的视网膜黄斑变性。此外，一些此类化合物可以用作抗如下疾病的活性剂：实体瘤，恶性腹水，yon Hippel Lindau病，造血系统癌症和过度增殖性紊乱如甲状腺增生(特别是Graves病)，及囊肿(如多囊卵巢综合征(Stein-Leventhal综合征)的卵巢基质血管过多和多囊性肾病。
此外，一些此类化合物可以用作治疗如下疾病的活性剂：烧伤，慢性肺病，中风，息肉，过敏症，慢性和急性炎性反应，延迟型过敏症，卵巢高刺激性综合征，与脑瘤有关的脑水肿，高空、外伤或低氧症诱发的脑或肺水肿，眼和视网膜黄斑水肿，腹水，肾小球性肾炎和其它其中血管渗透性、流出、渗出、蛋白溢出或水肿是疾病病症的疾病。这些化合物还可用于治疗其中蛋白溢出导致纤维和细胞外基质沉积，促进基质增殖的疾病(例如瘢痕疙瘩，纤维变性疾病，肝硬化和腕管综合征)。VEGF产生的增加强化了炎症过程如单核细胞募集和活化。本发明的化合物还可用于治疗炎性疾病如炎性肠疾病(IBD)和克罗恩氏病。方案I
Figure A0081575900801
方案II
Figure A0081575900802
方案III
Figure A0081575900803
方案IV
Figure A0081575900811
方案V
Figure A0081575900812
方案VI方案VII方案VIII方案IX
Figure A0081575900831
方案X
Figure A0081575900832
方案XI
Figure A0081575900833
VEGF是已知的造成血管渗透性过高和水肿形成的仅有的血管生成生长因子，就此而言它们是独一无二的。实际上，与很多其它生长因子的表达和使用有关的血管渗透性过高和水肿似乎是通过VEGF的产生来介导的。炎性细胞因子刺激VEGF的产生。低氧症导致很多组织中VEGF的明显上调，于是，涉及梗塞、闭塞、局部出血、贫血或循环损伤的情况一般引起VEGF/VPF介导的反应。血管渗透性过高、相关性水肿、透皮交换的变化和大分子外渗(其常常伴发白血球渗出)，可以导致过量的基质沉积、异常的基质增殖、纤维变性疾病等。因此，VEGF介导的渗透性过高可显著地造成具有这些病因学特征的紊乱。
由于胚泡植入、胎盘发育和胚胎发生是血管生成依赖性的，本发明的某些化合物用作避孕药和抗生育药。
考虑到上述紊乱非常大的程度上是由涉及KDR/VEGFR-2和/或Flt-1/VEGFR-2和/或TIE-2酪氨酸激酶的蛋白酪氨酸激酶活性介导的。通过抑制这些酪氨酸激酶的活性，上述紊乱的发展受到抑制，这是因为此疾病状态的血管生成或血管渗透性过高因素被严重地缩减。相对于使用低选择性的酪氨酸激酶抑制剂带来的副作用而言，本发明某些化合物通过它们对特异性酪氨酸激酶的选择性，其的作用使副作用降低至最小。本发明的某些化合物还是FGFR、PDGFR、c-Met和IGF-1-R的有效抑制剂。这些受体激酶可以直接或间接加强多种疾病中的血管生成和过度增殖反应，因此，它们的抑制可以阻止疾病的恶化。
本发明的化合物对蛋白激酶具有抑制活性，即这些化合物通过蛋白激酶调节信号传导。本发明的化合物抑制丝氨酸/苏氨酸和酪氨酸激酶类的蛋白激酶。具体地讲，这些化合物选择性地抑制KDR/FLK-1/VEGFR-2酪氨酸激酶的活性。本发明的某些化合物还抑制其它酪氨酸激酶如Flt-1/VEGFR-1，Flt-4，Tie-1，Tie-2，FGFR，PDGFR，IGF-1R，c-Met，Src-亚类激酶如Lck、Src、hck、fgr、fyn、yes等的活性。此外，本发明的一些化合物显著抑制丝氨酸/苏氨酸激酶如如PKC、MAP激酶、erk、CDKs、Plk-1或Raf-1，它们在细胞增殖和细胞循环过程中扮演了重要的角色。本发明通式化合物对特定蛋白激酶的效力和特异性常常是可以改变的，并通过取代基(即R1、R2、R3、A和环1)的性质、数目和排列的改变以及构象限制得以实现最佳化。此外，某些化合物的代谢物也可以具有显著的蛋白激酶抑制活性。
当给需要这些化合物的个体使用时，本发明的化合物抑制这些个体中血管渗透性过高和水肿的形成。据信，这些化合物通过抑制参与血管渗透性过高和水肿形成过程的KDR酪氨酸激酶的活性而发挥作用。KDR酪氨酸激酶也可称作FLK-1酪氨酸激酶、NYK酪氨酸激酶或VEGFR-2酪氨酸激酶。当血管内皮细胞生长因子(VEGF)或其它活化配体(如VEGF-C，VEGF-D，VEGF-E或HIV Tat蛋白)结合细胞内皮细胞表面上的KDR酪氨酸激酶受体时，KDR酪氨酸激酶被激活。这些KDR酪氨酸激酶活化后，产生血管渗透性过高，并有流体从血流中通过血管壁进入到组织间隙中，于是形成水肿区域。血细胞渗出还常常伴发此反应。类似地，过度的血管高渗透性可以阻断跨关键组织和器官(如肺和肾)中内皮的正常分子交换，于是引起大分子外渗和沉积。对KDR刺激的此急性反应(据信其加速随后的血管生成过程)后，延长的KDR酪氨酸激酶刺激导致血管内皮细胞的增殖和趋化性以及新血管的形成。通过抑制KDR酪氨酸激酶活性，或者通过阻断激活配体的产生，或者通过阻断激活配体与KDR酪氨酸激酶受体结合，或通过阻止受体二聚化和磷酸根转移作用，或通过抑制KDR酪氨酸激酶活性(抑制此酶的磷酸化功能)或者通过一些干扰下游信号的其它机理(D.Mukhopedhyay等，Cancer Res.58：1278-1284(1998)和其中引用的文献)，渗透性过高及相关的外渗、随后的水肿形成和基质沉积以及血管生成反应，可以受到抑制或最小化。
本发明一组优选的化合物具有抑制KDR酪氨酸激酶活性而不显著抑制Flt-1酪氨酸激酶活性(Flt-1酪氨酸激酶也称为VEGFR-1酪氨酸激酶)的性质。KDR酪氨酸激酶和Flt-1酪氨酸激酶通过VEGF分别结合KDR酪氨酸激酶受体和Flt-1酪氨酸激酶受体而被激活。本发明某些优选的化合物是独一无二的，因为它们抑制通过激活配体激活的一种VEGF受体酪氨酸激酶(KDR)的活性而不抑制其它受体酪氨酸激酶。因此，本发明的某些优选化合物以此方式在它们的酪氨酸激酶抑制性中是有选择性的。
在一个实施方案中，本发明提供了治疗患者的蛋白激酶介导的病症的方法，包括给所述患者使用治疗或预防有效量的一种或多种式I的化合物。
“蛋白激酶介导的病症”或“蛋白激酶活性介导的病症”是一种病症，如一种疾病或其它不需要的身体症状，其发生或发展至少部分依赖于至少一种蛋白激酶的活性。此蛋白激酶可以是，例如，蛋白酪氨酸激酶或蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶。
接受治疗的患者可以是任何动物，并优选哺乳动物，如驯养的动物或家畜。更优选，该患者是人。
“治疗有效量”是完全或部分抑制病症的发展或者至少部分减轻该病症的一种或多种症状的式I化合物或者两种或多种此类化合物的联合形式的量。治疗有效量也可以是预防有效的量。治疗有效量依赖于患者的体形大小性别、被治疗的病症、该病症的严重性及要获得的结果。对于指定的患者，治疗有效量可以通过本领域技术人员已知的方法确定。
本发明的方法用于治疗蛋白激酶介导的病症，如上述病症中的任何一种。在一个实施方案中，蛋白激酶介导的病症的特征是不需要的血管生成、水肿或基质沉积。例如，此病症可以是一种或多种溃疡，如细菌或真菌引起的溃疡、莫伦氏溃疡和溃疡性结肠炎。病症也可以由微生物感染引起，如莱姆病、败血症、脓毒性休克或单纯性疱疹、带状疱疹、人类免疫缺陷病毒、原生动物、弓形体病或副痘病毒的感染；血管生成紊乱，如von Hippel Lindau病、多囊性肾病、类天疱疮、佩吉特氏病和牛皮癣；生殖系统病症，如子宫内膜异位、卵巢高刺激性综合征、子痫前期或月经过多；纤维变性和水肿病症，如肉样瘤病、纤维变性疾病、肝硬化、甲状腺炎、系统性粘滞性过高综合征、Osler-Weber-Rendu病、慢性梗塞性肺病、哮喘和烧伤、外伤、辐射、中风、低氧症或局部出血后水肿；或炎性/免疫性病症，如系统性狼疮、慢性炎症、肾小球性肾炎、滑膜炎、炎性肠疾病、克罗恩氏病、类风湿性关节炎、骨关节炎、多发性硬化和移植物排斥。适宜的蛋白激酶介导的病症还包括镰刀细胞贫血病、骨质疏松、骨硬化病，肿瘤诱发的血钙过多和骨转移瘤。除了视网膜病而视网膜黄斑变性外，可以通过本发明方法治疗的其它蛋白激酶介导的病症包括眼部病症，如眼和视网膜黄斑水肿、眼新血管病、巩膜炎、光角膜切开术、眼色素层炎、玻璃体炎、近视、眼凹、慢性视网膜脱离、激光治疗后并发症、结膜炎、遗传性黄斑变性和Eales病。
本发明的化合物也可以用于治疗心血管病症，如动脉粥样硬化、再狭窄、血管闭塞和颈动脉梗塞性疾病。
本发明的化合物还可以用于治疗与癌症相关的适应征，如实体瘤，肉瘤(特别是Ewing氏肉瘤和骨肉瘤)，成视网膜细胞瘤，成横纹肌细胞肉瘤，成神经细胞瘤，造血系统恶性肿瘤，包括白血病和淋巴瘤，肿瘤诱发的胸膜或心包渗漏和恶性腹水。
本发明的化合物还可以用于治疗Crow-Fukase(POEMS)综合征和糖尿病，如青光眼、糖尿病性视网膜病而微血管病。
Src、Tec、Jak、Map、Csk、NFκB和Syk类的激酶在调节免疫功能中起关键作用。Src类通常包括Fyn、Lck、Fgr、Fes、Lyn、Src、Yrk、Fyk、Yes、Hck和Blk。Syk类通常理解为只包括Zap和Syk。TEC类包括Tec、Btk、Rlk和Itk。Janus类激酶涉及生长因子和原炎性细胞因子信号通过一些受体的传导。虽然Tec类激酶的成员BTK和ITK，在免疫生物学中起的作用还不明确，抑制剂对它们的调节可以改善治疗效果。Csk类通常被认为包括Csk和Chk。激酶RIP、IRAK-1、IRAK-2、NIK、p38 MAP激酶、Jnk、IKK-1和IKK-2涉及关键原炎性细胞因子如TNF和IL-1的信号传导路径。借助它们抑制一种或多种这些激酶的能力，式I的化合物可以作为免疫调节剂，用于维持同种移植物、治疗自身免疫性疾病和治疗败血症和脓毒性休克。通过它们调节T细胞、B细胞、肝细胞、单核细胞和嗜中性白细胞的迁移或灭活，这些化合物可以用来治疗自身免疫性疾病和败血症。预防移植排斥，或者是固体器官的宿主抗移植物病，或者是骨髓的移植物抗宿主病，受到目前使用的免疫抑制剂的限制，应得益于具有改进的治疗指数的有效药物。基因靶向实验已表明了Src在破骨细胞(负责骨吸收的细胞)的生物学中的重要作用。式I的化合物，通过它们调节Src的能力，还可以用于治疗骨质疏松、骨硬化病、佩吉特氏病、肿瘤引起的血钙过多并用于治疗骨转移瘤。
已表明一些蛋白激酶是原致癌基因。染色体破坏(在染色体5上的ltk激酶断裂位点)、象对Abl基因的情况那样用BCR易位(肺城染色体)、在如c-Kit或EGFR情况下的截短，或突变(例如，Met)，导致调节障碍的蛋白产生，将其从原致癌基因转变为致癌基因产物。在其它肿瘤中，瘤形成是由自分泌或旁分泌配体/生长因子受体相互作用驱动的。src类激酶的一些成员一般参与下游信号传导，于是加强了癌形成，且通过过度表达或突变它们本身可以变成致癌性。通过抑制这些蛋白的蛋白激酶活性，可以破坏这些疾病过程。血管再狭窄可以包括FGF和/或PDGF-促进的平滑肌和内皮细胞增殖。对FGFR、PDGFR、IGF1-R和c-Met在体内的配体刺激是原血管生成性的，并强化血管生成依赖性的疾病。抑制FGFr、PDGFr、c-Met或IGF1-R激酶活性，不论针对个别的或是联合的，都可以是抑制这些现象的有效策略。因此，抑制正常或异常的c-kit、c-met、c-fms、src-类成员、EGFr、erbB2、erbB4、BCR-Abl、PDGFr、FGFr、IGF1-R和其它受体或胞质酪氨酸激酶的激酶活性的式I化合物，可能对治疗良性和肿瘤性增殖疾病是有价值的。
在很多病理症状中(例如，原发实体瘤和转移瘤、Kaposi氏肉瘤、类风湿性关节炎、由于不适当的眼新血管形成导致的失明、牛皮癣和动脉粥样硬化)，疾病进展伴随持久的血管生成。多肽生长因子常常由疾病组织或相关炎性细胞产生的，而其相应的内皮细胞特异性受体酪氨酸激酶(例如，KDR/VEGFR-2、Fltl/VEGFR-1、Flt-4、Tie-2/Tek和Tie)是刺激内皮细胞生长、迁移、组构、分化及必不可少的新功能性血管的建立所必需的。在介导血管高渗透性中VEGF的血管渗透性因子活性的结果，人们还确信VEGFR激酶的VEGF刺激在以下问题的形成中起重要作用：肿瘤腹水，脑和肺水肿，胸膜和心包渗漏，延迟型过敏反应，外伤、烧伤、局部出血、糖尿病性并发症、子宫内膜异位、成人呼吸窘迫综合征(ARDS)、心肺搭桥术后相关低血压和高渗透性后组织水肿和器官功能不全，以及由于不适当的新血管形成导致青光眼或失明的眼水肿。除VEGF外，最近鉴定的VEGF-C和VEGF-D，及病毒编码的VEGF-E或HIV-Tat蛋白也可以通过刺激VEGFR激酶引起血管渗透性过高反应。KDR/VEGFR-2和/或Tie-2也在造血干细胞的选择群落中表达。此群落的某些成员本质上是多能的，并可以被生长因子刺激分化为内皮细胞，并参与血管发生性血管生成过程。为此，这些物质已被人们称为内皮祖细胞(EPCs)(J.Clin.Investi.103：1231-1236(1999))。在一些内皮祖细胞中，Tie-2可以在它们的募集、粘附、调节和分化中起一定作用(Blood，4317-326(1997))。因此，能阻断内皮细胞特异性激酶的激酶活性的式I的某些试剂可以抑制涉及这些情形的疾病的发展。
据信Tie-2(Ang2)的拮抗剂配体的血管去稳定作用在内皮中引起不稳定的“塑料”态。在高VEGF水平的存在下，可以导致强有力的血管发生反应；但是，在VEGF或VEGF-血管刺激物不存在时，可以发生直接的血管退化和内皮编程性细胞死亡(Genes和Devel.13：1055-1066(1999))。在类似的方式中，在VEGF相关刺激物的存在或不存在下，Tie-2激酶抑制剂分别可以是原血管形成性的或抗血管生成性的。因此，Tie-2抑制剂可以与适当的原血管生成性刺激子如VEGF一起使用，以促进某些情形如伤口愈合、梗塞和局部出血中的治疗性血管生成。
式I的化合物或其盐或含其治疗有效量的药物组合物，可以用于治疗蛋白激酶介导的病症，如上述良性或肿瘤性增殖疾病或免疫系统的紊乱。例如，这些疾病包括自身免疫性疾病如类风湿性关节炎，甲状腺炎，I型糖尿病，多发性硬化，肉样瘤病，炎性肠疾病，克罗恩氏病，重症肌无力和系统性红斑狼疮；牛皮癣，器官移植排斥(如肾排斥、移植物抗宿主病)，良性和肿瘤性增殖疾病，人癌症如肺、乳腺、胃、膀胱、结肠、胰腺、卵巢、前列腺和直肠癌症以及造血系统恶性肿瘤(白血病和淋巴瘤)，以及涉及不适当的血管化的疾病例如糖尿病性视网膜病，早产儿视网膜病，人类的由于与年龄有关的视网膜黄斑变性引起的脉络膜新血管形成和婴儿血管瘤。此外，这些抑制剂可以用于治疗涉及VEGF介导的水肿、腹水、渗漏和渗出的疾病，包括，例如，视网膜黄斑水肿，脑水肿，急性肺损伤和成人呼吸窘迫综合征(ARDS)。
本发明的化合物还可以用于预防上述疾病。
考虑到上述紊乱很大程度上由涉及VEGF受体(例如，KDR、Flt-1和/或Tie-2)的蛋白酪氨酸激酶活性所介导。通过抑制这些受体酪氨酸激酶的活性，上述紊乱的进展受到抑制，这是由于此疾病态的血管生成因素被严重缩减。本发明化合物的作用，通过它们对特异性酪氨酸激酶的选择性，使如果使用选择性小的酪氨酸激酶抑制剂造成的副作用最小化。
在本发明的另一方面中，提供了如上所定义的式I化合物用作药物，特别是用作蛋白激酶活性如酪氨酸激酶活性、丝氨酸激酶活性和苏氨酸激酶活性的抑制剂。在本发明的另一方面中，提供了如上所定义的式I化合物在制备用于抑制蛋白激酶活性的药物中的用途。
在本发明中，使用了下列定义：
“生理可接受盐”指保留游离碱的生物有效性和性质的那些盐，其可以通过与无机酸或有机酸反应制备，无机酸例如氢氯酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸，有机酸如磺酸、羧酸、有机膦酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸、乳酸、酒石酸等。药物制剂
本发明的化合物可以以其本身或在药物组合物给病人使用，在药物组合物中它们以治疗或改善血管渗透性过高、水肿和相关疾病的剂量与适宜的载体或赋形剂(一种或多种)混合。这些化合物的混合物也可以已简单的混合物形式或以适宜的配制药物组合物给该患者使用。治疗有效量还指足以给不适当的新血管形成、过度增殖性疾病、水肿、VEGF相关性渗透性过高和/或VEGF相关性低血压带来预防或减轻作用的化合物(一种或多种)的量。有关本申请化合物的配制和使用技术，请见“Remington′s Pharmaceutical Sciences”Mack Publishing Co.，Easton，PA，最新版本。给药途径
给药的适宜途径，例如，可以包括口服、滴眼、直肠、透粘膜、局部或肠道给药。非肠道给药，包括肌肉内、皮下、髓内注射，以及鞘内、直接心室内、静脉内、腹膜内、鼻内或眼内注射。
或，可局部使用此化合物，而不是采用系统方式，例如，通过直接给水肿部位注射此化合物，该注射常常采用贮库或缓释制剂的形式。
此外，可以在靶向药物转运系统中使用此药物，例如，在用内皮细胞特异性抗体包被的质脂体中。组合物/制剂
本发明的药物组合物可以以已知的方式制备，例如，通过常规混合、溶解、制粒、制糖衣丸、磨细、乳化、包囊、包载或冻干方法。
因此，本发明使用的药物组合物可以已常规方式配制，使用一种或多种生理可接受的包括赋形剂和辅剂的载体，它们有利于将活性化合物加工为可药用的制剂。适宜的制剂依赖于所选择的给药途径。
对于注射，本发明的试剂可以在水溶液中配制，优选生理相容的缓冲剂，如Hanks溶液、Ringer氏溶液或生理盐水缓冲剂。对于透粘膜给药，在该制剂中使用适于所透过屏障的渗透剂。这样的渗透剂一般是本领域已知的。
对于口服给药，该化合物可以容易地通过将活性化合物与本领域已知的药用载体混合进行配制。这些载体能使本发明的组合物配制为片剂、丸剂、糖衣丸、胶囊、溶液剂、凝胶、糖浆、浆液、混悬剂等，以使接受治疗的患者口服摄入。口服用药物制剂可以按照如下方法制备：将活性化合物与固体赋形剂混合，任选地研磨所得混合物，如果需要则加入适宜的辅剂，之后加工颗粒的混合物，以获得片剂或糖衣丸核芯。具体地讲，适宜的赋形剂为填充剂如糖，包括乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨醇；纤维素制剂如玉米淀粉、小麦淀粉、稻米淀粉、马铃薯淀粉、明胶、黄芪胶、甲基纤维素、羟丙甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。如果需要，可以加入崩解剂，如交联聚乙烯吡咯烷酮、琼脂、藻酸或其盐如藻酸钠。
对糖衣丸核芯进行适当包衣。为此，可以使用浓的糖溶液，琼脂可以任选地含有阿拉伯胶、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、卡波姆胶、聚乙二醇和/或二氧化钛、漆溶液以及适宜的有机溶剂或溶剂混合物。可以向片剂或糖衣丸包衣中加入染料或色素以识别或区别活性化合物剂量的不同联合形式。
可以口服使用的药物制剂包括明胶制成的推入配合胶囊，以及明胶和增塑剂如甘油和山梨醇制成的软的密封胶囊。推入配合胶囊可以含有活性组分，其与填充剂如乳糖、粘合剂如淀粉和/或润滑剂如滑石或硬脂酸镁以及任选地存在的稳定剂混合。在软胶囊中，活性化合物可以溶解于或悬浮于适当的液体如脂肪油、液体石蜡或液体聚乙二醇中。此外，可以加入稳定剂。口服给药的所有制剂的剂量应适于此给药方式。
对于颊部给药，组合物可以是以常规方式配制的片剂或锭剂形式。
对于吸入给药，用于本发明的化合物已从加压包装或喷雾器中提供的喷雾形式方便地给药，其中使用适宜的抛射剂，例如，二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其它适宜的气体。在加压气雾剂中，剂量单位可以通过提供转运计量量的阀来确定。例如，用于吸入器或吹入器的胶囊和药筒可以配制为含有该化合物和适宜的粉末基质如乳糖或淀粉的粉末混合物的形式。
可以配制这些化合物以通过注射进行非肠道给药，例如，快速浓注或连续输液。注射剂可以以单位剂型的形式存在，例如，在安瓿或多剂量容器中，其中加入了防腐剂。这些组合物可以采用，例如，在含油或含水载体的混悬剂、溶液剂或乳液的形式，并可以含有配制试剂如助悬剂、稳定剂和/或分散剂。
非肠道给药的药物组合物包括水溶形式的活性化合物的水溶液。此外，活性化合物的混悬剂可以制备为适当的含油注射混悬剂。适宜的亲脂溶剂或载体包括脂肪油如芝麻油，或者合成的脂肪酸酯，如油酸乙酯或甘油三酯，或者质脂体。含水注射混悬剂可以含有增加该混悬剂粘度的物质，如羧甲基纤维素钠、山梨醇或右旋糖酐。该混悬剂可以任选地含有适宜的稳定剂或增加这些化合物溶解度的试剂，以制备高浓度的溶液。
或者，活性组分可以是在使用前，用适宜载体，例如，灭菌无热原的水重新配制的粉末形式。
这些化合物还可以配制为直肠用组合物，如栓剂或保留灌肠剂，例如，其中含有常规栓剂基质如可可脂或其它甘油酯。
除上述制剂外，这些化合物还可以配制为贮库制剂。此类长效制剂可以通过埋入法给药(例如，透皮或肌内埋入，或通过肌内注射)。因此，例如，这些化合物可以与适宜的聚合物或疏水性物质(例如，在可接受的油中的乳液)或离子交换树脂一起配制，或将其制成溶解度小的衍生物，例如，溶解度小的盐。
用于疏水性的本发明化合物的药物载体的实例是助溶剂系统，包括苄醇、非极性表面活性剂、与水混溶的有机聚合物以及水相。该助溶剂系统可以是VPD助溶剂系统。VPD是3％w/v苄醇、8％w/v的非极性表面活性剂吐温80和65％w/v聚乙二醇300的溶液，在纯乙醇中达到规定的体积。该VPD助溶剂系统(VPD：5W)由在5％葡萄糖水溶液中进行1∶1稀释的VPD组成。此助溶剂系统很好地溶解疏水性化合物，而其本身在系统给药时只产生很低的毒性。当然，在不破坏其溶解性和毒性的前提下，助溶剂系统的比例可以作很大变化。此外，助溶剂组分的特性可以变化：例如，可以使用其它低毒非极性表面活性剂代替吐温80；聚乙二醇的馏份大小可以变化；可以用其它生物相容性聚合物如聚乙烯吡咯烷酮代替聚乙二醇；且其它糖或多糖可以代替葡萄糖。
或者，可以使用疏水性药物化合物的其它转运系统。质脂体和乳液是疏水性药物的转运载体的熟知实例。虽然通常要付出较大毒性的代价，但是也可以使用某些有机溶剂如二甲基亚砜。此外，这些化合物可以用缓释系统转运，例如含治疗剂的固体疏水性聚合物的半渗透性基质。多种缓释物质已得以确认，且它们是本领域技术人员熟知的。根据其化学性质，缓释胶囊可以在几周至100天以上释放这些化合物。根据治疗剂的化学性质和生物稳定性，可以使用蛋白稳定化的其它策略。
这些药物组合物还可以含有固体或凝胶相载体或赋形剂。此类载体或赋形剂的实例包括但不限于碳酸钙、磷酸钙、多种糖、淀粉、纤维素衍生物、明胶和聚合物如聚乙二醇。
本发明的很多化合物可以以与药学相容性相反离子形成的盐的形式提供。药学相容性盐可以与很多酸形成，包括但不限于氢氯酸、硫酸、乙酸、乳酸、酒石酸、苹果酸、琥珀酸等。盐在水或其它质子溶剂中比相应的游离碱形式更易溶解。有效剂量
适用于本发明的药物组合物包括含有达到预定目的有效量的活性组分的组合物。更具体地讲，治疗有效量指有效防止接受治疗对象的现存症状的发展或减轻该症状的量。有效量的确定在本领域技术人员的能力范围内。
对于用于本发明方法中的任何化合物，可以先由细胞试验评估此治疗有效量。例如，可以在细胞或动物模型中使用某剂量以达到包括在细胞试验中测定的IC50(即对指定的蛋白激酶活性达到半数最大抑制的被测化合物浓度)的循环浓度范围。在一些情况下，适于在3至5％血清白蛋白的存在下测定IC50，这是由于这样的检测接近血浆蛋白对此化合物的结合作用。如此获得的信息可以用来更准确地确定在人体内的有用的剂量。进一步讲，首选的系统给药的本发明的化合物，以在血浆中可以安全达到的浓度，有效地抑制完整细胞中的蛋白激酶信号。
治疗有效量指减轻患者症状的化合物的量。这些化合物的毒性和疗效可以提供标准药学方法在细胞培养物或试验动物中测定，例如，测定最大耐受剂量(MTD)和ED50(产生50％最大反应的有效量)。毒性和疗效之间的剂量比是治疗指数，且可以可以以MTD和ED50之比表示。优选表现出高治疗指数的化合物。由这些细胞培养试验和动物研究中获得的数据可以用于形成用于人的剂量范围。这些化合物的剂量优选在包括ED50的循环浓度又几乎没有或没有毒性的范围内。根据所用剂型和所用给药途径，此剂量可以在此范围内变化。确切的制剂、给药途径和剂量可以由具体医生基于患者的情况作出选择(见，例如，Fingl等，1975，“治疗药学基础(The Pharmacological Basis ofTherapeutics)”，第一章，第1页)。在危象的治疗中，可能需要达到MTD的紧急快速浓注或输液以获得快速反应。
可以具体调整给药剂量和间隔以提供足以为此激酶调节作用的活性组分的血浆浓度，即最低有效浓度(MEC)。MEC应随各化合物有所变化，但是可以由体外数据估计；例如，用本文中描述的试验检测的达到对蛋白激酶50-90％抑制所需要的浓度。获得MEC所需要的剂量应根据个体的特性和给药的途径变化。但是，可以用HPLC检测或生物检测来测定血浆浓度。
也可以用MEC值确定给药间隔。化合物应使用的给药方案中，应为维持此时的血浆水平高于MEC 10-90％，优选30-90％并首选50-90％，直到症状获得了所要求程度的减轻。在局部给药或选择性吸收的情况中，药物的有效局部浓度可能与血浆浓度不相关。
当然，组合物的给药量应依赖于接受治疗的对象、对象的体重、疾病的严重性、给药方式和主治医的诊断。包装
如果需要，这些组合物可以存在于包装或分配器中，其中可以装有含有活性组分的一个或多个单位剂型。例如，此包装可以包括金属或塑料箔片，如凸泡包装。此包装或分配器可以附加给药的说明。含有在相容药用载体中配制的本发明化合物的组合物，也可以制备并置于适当的容器，并标示治疗的适应征。
在一些制剂中，以非常小的颗粒形式使用本发明的化合物可能是有利的，例如，该颗粒可以用流能磨获得。
通过下面的描述举例说明本发明化合物在制备药物组合物中的用途。在本说明书中，术语“活性化合物”指本发明的任何化合物，但是特别是指作为上述实施例之一的终产物的化合物。a)胶囊
在胶囊的制备中，可以将10重量份的活性化合物和240重量份的乳糖去凝聚化并混合。将此混合物填充入硬明胶胶囊中，每个胶囊含有单位剂量或部分单位剂量的活性化合物。b)片剂
可以由下列组分制备片剂。
                                            重量份
活性化合物                                    10
乳糖                                          190
玉米淀粉                                      22
聚乙烯吡咯烷酮                                10
硬脂酸镁                                      3
可以将活性化合物、乳糖和一些淀粉去凝聚化、混合并将所得混合物用聚乙烯吡咯烷酮的乙醇溶液制粒。干燥的颗粒可以与硬脂酸镁和其余的淀粉混合。然后在制片机中压缩此混合物以获得片剂，每片含有单位剂量或部分单位剂量的活性化合物。c)肠溶包衣片剂
可以通过上述(b)描述的方法制备片剂。这些片剂可以按照常规方式用20％邻苯二甲酸乙酸纤维素和3％邻苯二甲酸二乙酯在乙醇∶二氯甲烷(1∶1)中的溶液进行肠溶包衣。d)栓剂
在栓剂的制备中，100重量份的活性化合物可以掺混在1300重量份的甘油三酯栓剂基质中，并将此混合物制成栓剂，每个栓剂含有治疗有效量的活性组分。
在本发明的组合物中，如果需要，这些活性化合物可以与其它相容的药学活性组分结合。例如，本发明的化合物可以与一种或多种其它药物试剂联合使用，这些其它的药物能抑制或防止VEGF或血管生成素产生、减弱对VEGF或血管生成素的细胞内反应、阻断细胞内信号传导，抑制血管渗透性过高、降低炎症，或者抑制或防止水肿形成或新血管形成。本发明的化合物可以在其它药剂给药前、后或同时给药，其中任何一种给药方式都是适当的。其它药剂包括但不限于抗水肿甾类、NSAIDS、ras抑制剂、抗TNF剂、抗-IL-1剂、抗组胺药、PAF拮抗剂、COX-1抑制剂、COX-2抑制剂、NO合酶抑制剂、Akt/PTB抑制剂、IGF-1R抑制剂、PKC抑制剂和PI3激酶抑制剂。本发明的化合物和其它药剂的作用或者是加和的或者是协同的。因此，抑制血管生成、血管渗透性过高和/或抑制水肿形成的物质的此联合给药，与其中任何一种物质单独给药相比，能更大地减轻过度增殖性疾病、血管生成、血管渗透性过高或水肿的有害作用。在恶性疾病的治疗中，可先进行与抗增殖或细胞毒化疗或放疗的联合治疗。
本发明还包括式I化合物作为药物的用途。
本发明的另一方面，提供了式I化合物或其盐在制备治疗哺乳动物特别是人的血管渗透性过高、血管生成依赖性疾病、增殖性疾病和/或免疫系统紊乱的药物方面的用途。
本发明还提供了治疗血管渗透性过高、不适当的新血管生成、增殖性疾病和/或免疫系统紊乱的方法，该方法包括给需要的哺乳动物特别是人使用治疗有效量的式I化合物。
在抑制这些蛋白激酶方面化合物的体外效果，可以通过详述如下的方法测定。
化合物的效力可以通过比较被测化合物和对照组抑制外源性底物(如合成肽)磷酸化的量来测定(Z.Songyang等，Nature.373：536-539)。用杆状病毒系统产生KDR酪氨酸激酶：
通过PCR用从HUVEC细胞中分离的cDNA生成人KDR细胞内功能域(aa789-1354)的编码序列。将聚-His6序列引入此蛋白的N末端。将此片断克隆到转染载体pVL1393的Xbal和Not1位点。用BaculoGold转染试剂(PharMingen)通过共转染产生重组杆状病毒(BV)。通过Western分析将重组BV进行噬斑纯化和检验。为了产生蛋白，SF-9细胞以2×106/ml生长于SF-900-II培养基中，并以0.5噬斑形成单位每细胞(MOI)感染。感染后在第48小时收集细胞。KDR的纯化
通过向得自1L细胞培养物的细胞颗粒中加入50ml的TritonX-100裂解缓冲液(20mM Tris，pH8.0，137mM NaCl，10％甘油，1％Triton X-100，1mM PMSF，10μg/ml抑蛋白酶肽，1μg/ml亮抑蛋白酶肽)将表达了(His)6 KDR(aa 789-1354)的SF-9细胞裂解。在4℃，在Sorval SS-34转子中以19000rpm将此裂解物离心30分钟。将此细胞裂解物加到5ml NiCl2螯合琼脂糖凝胶柱上，用50mM HEPES，pH7.5，0.3 M NaCl进行平衡。用含0.25M咪唑的相同缓冲液洗脱KDR。用SDS-PAGE和检测激酶活性的ELISA试验(如下)分析柱馏份。纯化的KDR交换到25mM HEPES，pH7.5，25mM NaCl，5 mM DTT缓冲液中，并在-80℃下保存。人Tie-2激酶的产生和纯化
通过PCR用从人胎盘模板中分离的cDNA生成人Tie-2细胞内功能域(aa 775-1124)的编码序列。将聚-His 6序列引入此蛋白的N末端并将此构成物克隆到转染载体pVL1939的Xba1和Not1位点。用BaculoGold转染试剂(PharMingen)通过共转染产生重组杆状病毒(BV)。通过Western分析将重组BV进行噬斑纯化和检验。为了产生蛋白，SF-9细胞以2×106/ml生长于SF-900-II培养基中，并以0.5的MOI感染。用于筛选的His标记的激酶类似于KDR所述进行纯化。人Flt-1酪氨酸激酶的产生和纯化
用杆状病毒表达载体pVL1393(Phar Mingen，Los Angeles，CA)。将编码聚-His6的核苷酸序列的5′端置于编码人Flt-1的整个细胞内激酶功能域(氨基酸786-1338)的核苷酸区域。编码此激酶功能域的核苷酸序列通过PCR用分离自HUVEC细胞的cDNA文库产生。此组氨酸残基使蛋白的亲和纯化成为可行，如类似用于KDR和ZAP70的方式。以0.5的多重性感染SF-9昆虫细胞，并在感染后48小时收集。EGFR酪氨酸激酶来源
EGFR购自Sigma(Cat # E-3641；500单位/50μl)，而EGF配体得自Oncogene Research Products/Calbiochem(Cat # PF011-100)。ZAP70的表达
用杆状病毒表达载体pVL1393(Phar Mingen，Los Angeles，CA)。将编码氨基酸M(H)6 LVPR9S的核苷酸序列的5′端置于编码ZAP70整体(氨基酸786-1338)的区域。编码ZAP70编码区域的核苷酸序列通过PCR用分离自Jurkat无限增殖化T细胞的cDNA文库产生。此组氨酸残基使蛋白的亲和纯化成为可行(参见红外)。此LVPR9S桥构成了通过凝血酶进行蛋白水解的识别序列，能从该酶中除去亲和端。以0.5的感染多重性感染SF-9昆虫细胞，并在感染后48小时收集。ZAP70的提取和纯化
将SE-9细胞在20 mM Tris，pH 8.0，137 mM NaCl，10％甘油，1％ Triton X-100，1 mM PMSF，1μg/ml亮抑蛋白酶肽，10μg/ml抑蛋白酶肽和1mM原钒酸钠组成的缓冲液中裂解。将可溶性裂解物加到螯合琼脂糖凝胶HiTrap柱(Pharmacia)上，该柱在50 mM HEPES，pH7.5，0.3 M NaCl中平衡。用250mM咪唑洗脱融合蛋白。将该酶保存在含50 mM HEPES，pH 7.5，50mM NaCl和5 mM DTT的缓冲液中。蛋白激酶来源
Lck、Fyn、Src、Blk、Csk和Lyn，及其截短形式可以商购(例如，购自Upstate Biotechnology Inc.(Saranac Lake，N.Y)和SantaCruz Biotechnology Inc.(Santa Cruz，Ca.))或由已知的天然或重组原料用常规方法纯化。PTKs的酶联免疫吸附测定(ELISA)
酶联免疫吸附测定(ELISA)用于发现和检测酪氨酸激酶活性的存在。ELISA按照已知方案进行，这些方案描述于，例如，Voller等，1980，“酶联免疫吸附测定”，Manual of Clinical Immunology，第2版，Rose和Friedman编，pp 359-371 Am.Soc.of Microbiology，Washington，D.C。
所公开的方案适于检测特异性的PTK活性。例如，进行ELISA试验的优选方案如下。用这些方案来检测化合物对PTK类其它成员以及非受体酪氨酸激酶的活性，是本领域技术人员力所能及的。为了测定抑制剂选择性，在此检测中使用通用的PTK底物(例如，聚(Glu4 Tyr)的无规共聚物，20,000-50,000MW)，以约两倍于外观Km的浓度与其一起使用ATP(一般5μM)。
下面的方法用来检测本发明化合物对KDR、Flt-1、Flt-4/VEGFR-3、Tie-1、Tie-2、EGFR、FGFR、PDGFR、IGF-1-R、c-Met、Lck、Blk、Csk、Src、Lyn、Fyn和ZAP70酪氨酸激酶活性的抑制作用：缓冲液和溶液：
PGT聚(Glu，Tyr)4∶1
将粉末保存在-20℃。在磷酸盐缓冲的盐水(PBS)中溶解粉末，形成50mg/ml的溶液。在-20℃下保存多个1ml等份。当制板时，在GibcoPBS中稀释至250μg/ml。
反应缓冲液：100mM Hepes，20mM MgCl2，4mM MnCl2，5mM DTT，0.02％ BSA，200μM NaVO4，pH 7.10。
ATP：在-20℃下的保存等份。在水中稀释至20μM。
洗涤缓冲液：含0.1％Tween 20的PBS。
抗体稀释缓冲液：在PBS中的0.1％牛血清白蛋白(BSA)。
TMB底物：临用前混合的TMB底物和过氧化物溶液9∶1或使用Neogen的K-蓝底物。
终止溶液：1M磷酸。方法
1.制板
在PBS中将PGT贮存液(50mg/ml，冷冻)稀释至250μg/ml。在Corning改良平底高亲和性ELISA培养板(Corning # 25805-96)的每个孔中加入125μl。向空白孔中加入125μl PBS。用密封带覆盖并在37℃下孵育过夜。用250μl洗涤缓冲液洗涤1次，并在37℃干燥恒温箱中干燥约2小时。在4℃下在密封袋中保存包被板直到使用。
2.酪氨酸激酶反应：
—以4倍的浓度在20％DMSO水溶液中制备抑制剂溶液。
—制备反应缓冲液。
—制备酶溶液，以便所需的单位是50μl，例如，在这些反应中每孔50ng总量的KDR的浓度为1ng/μl。保存在冰上。
—由100mM贮存液在水中制备4份20μM的ATP溶液。保存在冰上。
—每孔加入50μl的酶溶液(一般5-50ng酶/孔，视该激酶的具体活性而定)。
—加入25μl的4×抑制剂。
—加入25μl的4×ATP，以进行抑制剂检测。
—室温下孵育10分钟。
—通过每孔加入50μl 0.05N HCl停止反应。
—洗板。
**反应的最终浓度：5μM ATP，5％DMSO。
3.抗体结合
—通过2步稀释法(100×，然后200×)，在含0.1％ BSA的PBS中将1mg/ml等份的PY20-HRP(Pierce)抗体(一种磷酸酪氨酸抗体)稀释至50ng/ml。
—每孔加入100μl Ab。室温下孵育1小时。在4℃下孵育1小时。
—洗涤4×培养板。
4.呈色反应
—制备TMB底物并每孔加入100μl。
—在650nm监控OD值直到达到0.6。
—用1M磷酸停止反应。在培养板读数器上摇动。
—在450nm立即读取OD值。
最佳的孵育时间和酶反应条件随酶制剂有轻微的变化，并对每批通过经验确定。对于Lck，所用反应缓冲液为100 mM MOPSO，pH 6.5，4 mM MnCl2，20mM MgCl2，5 mM DTT，0.2％ BSA，200mM NaVO4，检测条件类似。
式I的化合物在治疗涉及包括本文中没有提及的已确定的蛋白酪氨酸激酶和式I化合物能抑制的尚未确定的蛋白酪氨酸激酶的疾病中具有治疗用途。本文中所列举的所有化合物在浓度等于或低于50μM时显著地抑制FGFR、PDGFR、KDR、Tie-2、Lck、Fyn、Blk、Lyn或Src。本发明的一些化合物在浓度等于或低于50μM时还显著抑制其它酪氨酸或丝氨酸/苏氨酸激酶如cdc2(cdk1)。Cdc2来源
人重组酶和检测缓冲液可以商购(New England Biolabs，Beverly，MA.USA)或由已知的天然或重组原料用常规方法纯化。Cdc2检测
用所购买试剂提供的方法，只稍加修改。简言之，该反应在如下组成的缓冲液中进行：50mM Tris pH7.5，100mM NaCl，1mM EGTA，2mM DTT，0.01％ Brij，5％ DMSO和10mM MgCl2(商购缓冲液)，其中添加了新鲜的最终浓度为300μM ATP(31μCi/ml)和30μg/ml IIIss型组织蛋白。含酶单位的80μl反应体积在25℃下在存在或不存在抑制剂的条件下反应20分钟。通过加入120μL的10％乙酸停止此反应。通过点混合物在磷酸纤维素纸上，接着用75mM磷酸洗涤5分钟，洗涤3次，将此底物与未标记的物质分离。在液体闪烁体的存在下用倍他计数器检测计数。本发明一些化合物在浓度低于50μM时显著抑制cdc2。PKC激酶来源
PKC的催化亚单位可以商购(Calbiochem)。PKC激酶检测
按照以下公开的方法进行A放射性激酶检测(Yasuda，I.，Kirshimoto，A.，Tanaka，S.，Tominaga，M.，Sakurai，A.，Nishizuka，Y.，Biochemical and Biophysical ResearchCommunication 3：166，1220-1227(1990))。简言之，所有的反应在组成如下的激酶缓冲剂中进行：50mM Tris-HCl pH7.5，10mM MgCl2，2mM DTT，1mM EGTA，100μM ATP，8μM肽，5％ DMSO和33P ATP(8Ci/mM)。在该反应容器中混合化合物和酶，通过加入ATP和底物混合物引发此反应。加入10μL停止缓冲液(5 mM ATP在75mM磷酸中)停止该反应后，将部分混合物点在磷酸纤维素滤纸上。在室温下以75mM磷酸将所点样品洗涤3次，每次5至15分钟。通过液体闪烁计数测量放射标记物的掺入。Erk2酶来源
重组鼠酶和检测缓冲液可以商购(New England Biolabs，BeverlyMA.USA)或由已知天然或重组原料用常规方法纯化。Erk2酶检测
简言之，该反应在组成如下的缓冲液中在供应商推荐的条件下进行：50mM Tris pH7.5，1mM EGTA，2mM DTT，0.01％ Brij，5％ DMSO和10mM MgCl2(商购缓冲液)，其中添加了新鲜的100μM ATP(31μCi/ml)和30μM髓鞘碱性蛋白。反应体积和检测掺入放射活性的方法如PKC检测所述(参见上文)。T细胞活化的体外模型
一旦促细胞分裂剂或抗原活化时，诱发T细胞分泌IL-2，一种支持其随后增殖期的生长因子。因此，可以检测初级T细胞或适当的T细胞系中IL-2的产生或其中的细胞增殖，作为T细胞活化的替代指标。这两种检测方法在文献中进行了充分的描述，其参数得到适当记载(见Current Protocols in immunology，Vol 2，7.10.1-7.11.2)。
简言之，通过与同种异体的刺激细胞共同培养可以激活T细胞，此方法称为单向混合淋巴细胞反应。按照制造商的说明通过Ficoll-Hypaque梯度(Pharmacia)纯化反应和刺激外周血单核细胞。通过用丝裂霉素C(Sigma)或γ辐射处理来通过抑制有丝分裂来灭活刺激子细胞。反应和刺激细胞以2∶1的比例在被测化合物存在或不存在下共同培养。一般105的反应细胞与5×104刺激细胞混合并置于(200μl体积)U型底微量滴定板(Costar Scientific)中。将这些细胞在RPMI1640中培养，其中添加了热灭活的胎牛血清(Hyclone Laboratories)或得自男性供者的人混合AB血清，5×10-5M 2-巯基乙醇和0.5％DMSO，在收集细胞前一天(一般是第3天)将此培养物用0.5μCi的3H胸苷(Amersham)调制。收集培养物(Betaplate harvester，Wallac)并通过液体闪烁技术(Betaplate，Wallac)评价同位素的吸收。
通过检测IL-2的产生，可以用相同的培养系统评价T细胞活化。培养开始后18至24小时，移出上清液并按照制造商的说明通过ELISA(R和D系统)检测IL-2浓度。T细胞活化的体内模型
化合物的体内效果可以在已知直接检测T细胞活化的或其中已证明T细胞是效应物的动物模型中检测。在体内，通过带有单克隆抗-CD3抗体(Ab)的T细胞受体的固定部分的连接，可以激活T细胞。在此模型中，在放血前2小时，给BALB/c小鼠腹膜内注射10μg的抗-CD3Ab。在抗-CD3 Ab使用前，用单剂量的化合物预处理接受被测药物的动物。通过ELISA检测T细胞活化的指示剂：原炎性细胞因子干扰素-γ(NFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)。使用类似的模型用特异性抗原如匙孔嘁血蓝蛋白(K1H)体内引发T细胞，接着用相同的抗原二次刺激引流出的淋巴节细胞。如上所述，用对细胞因子产生的检测评价培养细胞的活化状态。简言之，用在完全福氏佐剂(CFA)中乳化的100μg KLH在第0天皮下免疫C57BL/6小鼠。在免疫前1天用此化合物预处理动物，并在免疫后第1、2、3天用此化合物处理动物。在第4天收集引流出的淋巴节，并在组织培养基(添加了热灭活的胎牛血清(HycloneLaboratories)、5×10-5M 2-巯基乙醇和0.5％ DMSO的RPMI 1640)中以6×106个细胞每毫升将其中的细胞培养24和48小时。然后，用ELISA评价培养物上清液的自分泌T细胞生长因子白细胞介素-2(IL-2)和/或IFN-γ水平。
重要的化合物也可在人疾病的动物模型中进行检测。这些通过实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)和胶原引起的关节炎(CIA)例证。在大鼠和小鼠中已描述了模拟人多发性硬化多个方面的EAE模型(综述见FASEB J. 5：2560-2566，1991；鼠模型：Lab.Invest.4(3)：278，1981；啮齿动物模型：J.Immuno l146(4)：1163-8，1991)。简言之，用髓鞘碱性蛋白(MBP)或其神经原性肽衍生物和CFA免疫小鼠或大鼠。加入细菌毒素如百日咳杆菌抗原引起急性疾病。从MBP/肽免疫的动物中过继转移T细胞来诱发复发的/恢复原状的疾病。
通过用II型胶原免疫可以在DBA/1小鼠中诱发CIA(J.Immunol：142(7)：2237-2243)。早在抗原刺激后10天小鼠就对产生关节炎征兆，且在免疫后长达90天内可以进行评分。在EAF和CIA模型中，化合物可以预防性给药或者疾病开始时给药。有效的药物应降低严重性和/或发病率。
抑制一种或多种血管生成受体PTK和/或参与介导炎性反应的蛋白激酶如lck的本发明的某些化合物，可以降低这些模型中关节炎的严重性和发病率。
在小鼠同种异体移植模型中也可检测化合物，或者是皮肤(在Ann.Rev.Immunol.，10：333-58，1992；Transplantation：57(12)：1701-1706，1994中综述)或是心脏(Am.J.Anat.：113：273，1963)。简言之，完整厚度的皮肤移植物由C57BL/6小鼠移植给BALB/c小鼠。在第6天开始每天检查移植物以寻找排斥反应的证据。在小鼠新生心脏移植模型中，新生心脏由C57BL/6小鼠异位移植到成年CBA/J小鼠的耳廓。移植后心脏开始跳动4至7天，用解剖显微镜观察跳动的停止以目测评价排斥反应。细胞受体PTK检测
下列细胞检测用来测定本发明不同化合物对KDR/VEGFR2的活性和作用水平。按照与其它酪氨酸激酶的相同路线，用本领域熟知的技术可以设计使用特异性配体刺激的类似的受体PTK检测。
在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中VEGF诱导的KDR磷酸化作用以Western印迹法检测：
1.由Clonetics(San Diego，CA)购买HUVEC细胞(来自联营供者)，并按照制造商的说明培养。只有前面几代(3-8)用于此检测。在100mm培养皿中培养细胞(组织培养用Falcon；Becton Dickinson；Plymouth，England)，使用完全EBM培养基(Clonetics)。
2.为了评价化合物的抑制活性，将细胞胰蛋白酶化并以0.5-1.0×105个细胞/孔接种6孔簇合培养板(Costar；Cambridge，MA)的每个孔中。
3.接种3-4天后，培养板90-100％融合。从所有孔中除去培养基，用5-10ml的PBS清洗细胞，并用不含补充成分(即没有血清)的5ml的EBM碱性培养基培养18-24小时。
4.将在1ml的EBM培养基中系列稀释的抑制剂加入到(25μM，5μM或1μM最终浓度)细胞中，并在37℃下孵育1小时。然后向所有孔中加入存在于2ml的EBM培养基中的人重组VEGF165(R & D Systems)，最终浓度为50ng/ml，并在37℃下孵育10分钟。用未处理的或只用VEGF处理的对照细胞评价背景磷酸化作用和由VEGF诱发的磷酸化作用。
再用含1mM原钒酸钠(Sigma)的5-10ml冷PBS清洗所有细胞，并在200μl的RIPA缓冲液(50mM Tris-Cl)pH7，150mM NaCl，1％NP-40，0.25％脱氧胆酸钠，1mM EDTA)裂解并击打细胞，该缓冲液中含有蛋白酶抑制剂(PMSF 1mM，抑蛋白酶肽1μg/ml，胃蛋白酶抑制剂1μg/ml，亮抑蛋白酶肽1μg/ml，钒酸钠1mM，氟化钠1mM)和1μg/ml的脱氧核糖核酸酶(所有化学品得自Sigma Chemical Company，St Louis，MO)。将此裂解物以14000rpm离心30分钟以除去核。
然后，通过加入冷(-20℃)乙醇(2倍体积)，最少放置1小时，或最多放置过夜，沉淀等量的蛋白。在含5％巯基乙醇(BioRad；Hercules，CA)的Laemli样品缓冲液中重新构建颗粒并煮沸5分钟。通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(6％，1.5mm Novex，San Deigo，CA)解离蛋白质，并用Novex系统转移到硝酸纤维素膜上。用牛血清白蛋白(3％)阻断后，用抗-KDR多克隆抗体(C20，Santa Cruz Biotechnology；Santa Cruz，CA)或用抗磷酸酪氨酸单克隆抗体(4G10，Upstate Biotechnology，Lake Placid，NY)在4℃下过夜探测这些蛋白质。洗涤并用绵羊抗兔或绵羊抗小鼠IgG的HRP-轭合F(ab)2孵育1小时后，用发射化学发光(ECL)系统(Amersham Life Sciences，Arlington Height，IL)可以看到谱带。在浓度低于50μM时，本发明的某些实施例显著抑制细胞VRGF诱导的KDR酪氨酸激酶磷酸化作用。体内子宫水肿模型
此试验检测化合物抑制小鼠子宫重量快速增加的能力，此现象发生在雌激素刺激后的头若干小时内。已知此子宫重量增加的早期发作是由于子宫脉管系统渗透性增加引起的水肿导致的。Cullinan-Bove和Koss(Endocrinology(1993)，133：829-837)证明了雌激素刺激的子宫水肿与该子宫中VEGF mRNA表达增加之间的紧密的暂时联系。这些结果已通过使用VEGF的中和性单克隆抗体得到了证实，此抗体显著降低了雌激素刺激后子宫重量的急性增加(WO 97/42187)。因此，此系统可以作为体内抑制VEGF信号和相关渗透性过高和水肿的模型。
材料：所有激素以冻干粉末的形式购自Sigma(St.Louis，MO)或Cal Biochem(La Jolla，CA)，并按照供应商的指示制备。
载体组分(DMSO，Cremaphor EL)购自Sigma(St.Louis，MO)。
小鼠(Balb/c，8-12周龄)购自Taconic(Germantown，NY)，并按照动物保护和使用委员会准则饲养在无热原动物房中。方法：
第1天：给Balb/c小鼠腹膜内(i.p.)注射12.5单位的妊娠母驴的血清促性腺素(PMSG)。
第3天：小鼠i.p.接受15单位的人绒毛膜促性腺素(hCG)。
第4天：将小鼠随机分组，每组5-10只。根据溶解度和载体，以1-100mg/kg的剂量，通过i.p.、i.v.或p.o.途径使用被测化合物。载体对照组只接受载体，并保留两组不进行处理。
30分钟后，试验组、载体组和一个未处理组接受腹膜内注射的17-雌二醇(500g/kg)。2-3小时后，通过吸入二氧化碳处死动物。剪开中线后，分离出各个子宫，并通过恰在子宫颈下和在子宫和输卵管的接合处切割摘除。在称重(湿重)前小心地除去脂肪和结缔组织，避免破坏子宫的完整性。将子宫置于在两页过滤纸之间压出流体以吸干此子宫，用装有水的1升玻璃瓶盛接。吸干后称重子宫(吸干后重量)。将湿重和吸干后重量的差作为子宫流体的含量。将治疗组的平均流体含量和未治疗或载体处理组的作比较。通过t检验确定显著性。用未刺激对照组监控雌二醇反应。
结果表明当通过多种途径进行系统给药时本发明的某些化合物抑制水肿的形成。
抑制血管生成受体酪氨酸激酶的本发明的某些化合物，对新血管生成的Matrigel移植模型也能显示出活性。Matrigel新血管生成模型包括在皮下移植的细胞外基质的清晰大理石花纹内新血管的形成，其是由生成肿瘤细胞的原血管生成因子的存在下引起的(例如，见：Passaniti，A.，等，Lab.Investig.(1992)，67(4)，519528；Anat.Rec.(1997)，249(1)，63-73；Int.J.Cancer(1995)，63(5)，694-701；Vasc.Biol.(1995)，15(11)，1857-6)。此模型优选进行3-4天，终点包括从未用抑制剂治疗动物中排除移植物对对照组后新血管生成的肉眼目视/图象评分、显微镜下微血管密度检测和血红蛋白定量测定(Drabkin方法)。或者该模型使用bFGF或HGF作为刺激物。
抑制一种或多种致癌的、原致癌的或增殖依赖性或者血管生成受体PTK的蛋白激酶的本发明的某些化合物，也抑制初生鼠、大鼠或人异种移植肿瘤在小鼠中的生长，或者抑制鼠模型中的肿瘤转移。实施例
实施例1
1-(1-苄基-4-哌啶基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(化合物1)
3-溴-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-醇(中间体A)
将1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-醇(10g，73.5mmol)悬浮于700ml水中。加入溴(10ml，194mmol)并将所得反应混合物加热至91℃，保持过夜。在冰水上冷却后，过滤收集固体得到1.508 g的3-溴-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-醇，为淡黄色固体。1H NMR(DMSO)8.06(s 1H)，12.25(bs，1H)，14.06(bs，1H)。
3-溴-4-氯-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(中间体B)
将3-溴-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-醇(中间体A)(15.08g，70.5mmol)悬浮于189ml的磷酰氯中。加入二乙胺(19ml，119.4mmol)并将所得反应混合物加热至106℃，保持2小时。冷却至室温后，除去溶剂并将所得琥珀色浆倒入到300ml冰水中。20分钟后，用乙醚(500ml×4)萃取水层。将合并的有机层洗涤，干燥并蒸发得到6.87g的3-溴-4-氯-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶，为淡黄色固体。1H NMR(DMSO)8.857(s 1H)，14.84(bs，1H)；LC/MS(MH+＝233)。
1-(1-苄基-4-哌啶基)-3-溴-4-氯-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(中间体C)
将3-溴-4-氯-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(中间体B)(5.0g，21.42mmol)、1-苄基-4-哌啶醇(8.2g，42.83mmol)和三苯基膦(11.23g，42.83mmol)悬浮于250ml四氢呋喃中。该反应混合物在冰水浴中冷却并滴加偶氮二甲酸二乙酯(6.8ml，42.83mmol)。10分钟后，该反应混合物升温至室温。搅拌2小时后，除去溶剂并将此残余物在乙酸乙酯中回收。将有机层洗涤、干燥并蒸发。粗品通过Biotage快速柱，用二氯甲烷/乙酸乙酯(90∶10)作为流动相，得到10.56g的1-(1-苄基-4-哌啶基)-3-溴-4-氯-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶。产物纯度61％，HPLC保留时间为12.46分钟(HPLC条件：5至95％ CH3CN在0.1N醋酸铵水溶液中在20分钟内，柱规格为3.9×150mm，300A)。
1-(1-苄基-4-哌啶基)-3-溴-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体D)
将1-(1-苄基-4-哌啶基)-3-溴-4-氯-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(中间体C)(9g，纯度61％)与二噁烷(100ml)和氢氧化铵(100ml)在压力容器中混合。此混合物加热至120℃过夜。除去溶剂并将此残余物通过急骤柱色谱纯化，用乙酸乙酯作为流动相，得到1-(1-苄基-4-哌啶基)-3-溴-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺。1H NMR(CDCl3)1.94(d，J＝11.23Hz，2H)，2.21(m，2H)，2.35(m，2H)，3.04(d，J＝11.48Hz)，3.57(s，2H)，4.71(m，1H)，5.98(s，2H)，7.34(m，5H)，8.33(s，1H)；LC/MS(MH+＝389)。
1-(1-苄基-4-哌啶基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4胺
将1-(1-苄基-4-哌啶基)-3-溴-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体D)(4.3g，11.10mmol)、4-苯氧基苯基羟基代硼酸(中间体V)(2.61g，12.21mmol)、四(三苯基膦)钯(0.77g，0.67mmol)和碳酸钠(2.82g，26.65mmol)与乙二醇二甲醚(100ml)和水(50ml)混合。将该反应混合物加热回流过夜。除去有机溶剂并将水层用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层洗涤、干燥并蒸发。残余物通过急骤柱色谱纯化，用乙酸乙酯/甲醇(98/2)作为流动相，得到2.65g的1-(1-苄基-4-哌啶基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺。1HNMR(CDCl3)1.99(d，J＝11.02Hz，2H)，2.25(m，2H)，2.47(m，2H)，3.07(d，J＝11.12Hz)，3.59(s，2H)，4.80(m，1H)，5.52(s，2H)，7.07(d，J＝0.67，1H)，7.15(m，3H)，7.37(m，6H)，7.66(d，J＝8.51，2H)，8.37(s，1H)；LC/MS(MH+＝477)。
实施例2
3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌啶基)-1 H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将1-(1-苄基-4-哌啶基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(化合物1)(1.224g，2.57mmol)、10％钯碳(1.22g)和甲酸铵(0.81g，12.84mmol)与21ml甲醇混合。室温下搅拌6小时后，该反应混合物过滤并用热甲醇洗涤。除去溶剂并将此残余物在二氯甲烷中回收，并将有机层洗涤、干燥并蒸发得到0.77g的3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺。1H NMR(CDCl3)2.05(d，J＝12.17Hz，2H)，2.26(m，2H)，2.87(m，2H)，3.29(d，J＝12.76Hz)，4.89(m，1H)，5.54(s，2H)，7.09(m，2H)，7.15(m，3H)，7.39(m，2H)，7.67(d，J＝9.39Hz，2H)，8.37(s，1H)；LC/MS(MH+＝387)。
实施例3
1-[1-(1-甲基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，三马来酸盐(化合物3)
1-[1-(1-甲基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体E)
将3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(化合物2)(199mg，0.515mmol)、1-甲基-4-哌啶酮(70μl，0.566mmol)、三乙酰氧基硼氢化钠(163mg，0.772mmol)和冰醋酸(34mg，0.566mmol)与3ml的1，2-二氯乙烷混合。室温下搅拌过夜后，加入2ml水，接着加入固体碳酸氢钠直到pH达到约8。分层并将水层用二氯甲烷萃取。将合并的有机层洗涤、干燥并蒸发。残余物通过急骤柱色谱纯化得到92mg的1-[1-(1-甲基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺。1H NMR(DMSO)1.47(m，2H)，1.72(d，J＝11.75Hz，2H)，1.88(m，4H)，2.14(s，3H)，2.35(m，5H)，2.81(d，J＝11.32Hz，2H)，3.01(d，J＝11.26Hz，2H)，4.62(m，1H)，7.16(m，5H)，7.44(m，2H)，7.67(d，J＝8.69Hz，2H)，8.23(s，1H)；LC/MS(MH+＝484)。
1-[1-(1-甲基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，三马来酸盐
将1-[1-(1-甲基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(92mg，0.190mmol)溶解于25ml的热乙酸乙酯中，并加入存在于5ml热乙酸乙酯中的马来酸(66mg，0.571mmol)。室温下放置2小时后，滤出此固体再干燥得到135mg的1-[1-(1-甲基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，三马来酸盐。1H NMR(DMSO)1.87(m，2H)，2.22(m，4)，2.45(m，2H)，2.77(s，3H)，2.18(bm，9H)，5.06(m，1H)，6.11(s，6H)，7.15(m，5H)，7.45(m，2H)，7.67(d，J＝8.51Hz，2H)，8.27(s，1H)；LC/MS(MH+＝484)。
实施例4
1-[1-(1-异丙基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，三马来酸盐(化合物4)
1-[1-(1-异丙基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体F)
将3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4胺(化合物2)(221mg，0.572mmol)、1-异丙基-4-哌啶酮(89mg，0.63mmol)、三乙酰氧基硼氢化钠(182mg，0.86mmol)和冰醋酸(40μl，0.63mmol)与3ml的1，2-二氯乙烷混合。室温下搅拌过夜后，加入2ml水，接着加入固体碳酸氢钠直到pH达到约8。分层并将水层用二氯甲烷萃取。将合并的有机层洗涤、干燥并蒸发。残余物通过急骤柱色谱纯化得到132mg的1-[1-(1-异丙基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺。1H NMR(DMSO)0.99(d，J＝6.54Hz，6H)，1.42(m，2H)，1.72(d，J＝11.41Hz，2H)，1.88(d，J＝9.61Hz，2H)，2.14(s，3H)，2.16(m，6H)，2.66(m，2H)，2.83(d，J＝10.98Hz，2H)，2.98(d，J＝8.25Hz，2H)，4.62(m，1H)，7.16(m，5H)，7.44(m，2H)，7.67(d，J＝8.69Hz，2H)，8.23(s，1H)；LC/MS(MH+＝512)
1-[1-(1-异丙基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，三马来酸盐
将1-[1-(1-异丙基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体F)(132mg，0.258mmol)溶解于30ml的热乙酸乙酯中并加入存在于5ml热乙酸乙酯中的马来酸(90mg，0.774mmol)。室温下放置2小时后，滤出此固体再干燥得到205mg的1-[1-(1-异丙基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，三马来酸盐。1H NMR(DMSO)1.26(d，J＝6.34Hz，6H)，1.90(m，2H)，2.23(m，4H)，2.50(m，2H)，3.53(bm，9H)，5.08(m，1H)，7.16(m，5H)，7.44(m，2H)，7.67(d，J＝8.30Hz，2H)，8.28(s，1H)；LC/MS(MH+＝512)。
实施例5
1-[1-(1-叔丁氧基羰基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，三马来酸盐(化合物5)
1-[1-(1-叔丁氧基羰基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体G)
将3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(化合物2)(350mg，0.906mmol)、1-叔丁氧基羰基-4-哌啶酮(198mg，0.996mmol)、三乙酰氧基硼氢化钠(288mg，1.358mmol)和冰醋酸(60μl，0.996mmol)与5ml的1，2-二氯乙烷混合。室温下搅拌过夜后，加入2ml水，接着加入固体碳酸氢钠直到pH达到约8。分层并将水层用二氯甲烷萃取。将合并的有机层洗涤、干燥并蒸发。残余物通过急骤柱色谱纯化得到254mg的1-[1-(1-叔丁氧基羰基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺。1H NMR(DMSO)1.39(m，13H)，1.75(m，2H)，1.91(m，2H)，2.17(m，2H)，2.35(m，2H)，2.72(m，2H)，3.0(m，2H)，3.63(m，1H)，3.98(m，2H)，4.63(m，1H)，7.16(m，5H)，7.44(m，2H)，7.67(d，J＝8.60Hz，2H)，8.23(s，1H)；LC/MS(MH+＝484)。
1-[1-(1-叔丁氧基羰基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，三马来酸盐
将1-[1-(1-叔丁氧基羰基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(254 mg，0.446mmol)在存在于二氯甲烷中的25ml的10％三氟乙酸中搅拌过夜。蒸发溶剂并将此残余物溶解于二氯甲烷。加入饱和碳酸氢钠并将所得混合物搅拌30分钟。分层并将水层用二氯甲烷萃取。将合并的有机层洗涤、干燥并蒸发得到108mg的1-[1-(4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体GG)，其不经进一步纯化直接使用。
将1-[1-(4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(108mg，0.230mmol)溶解于25ml的乙醇中并加入存在于5ml热乙醇中的马来酸(80mg，0.690mmol)。室温下放置2小时后，滤出此固体并干燥得到155mg的1-[1-(4哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，三马来酸盐。1H NMR(DMSO)1.80(m，2H)，2.42(m，4)，2.51(m，2H)，2.95(m，3H)，3.44(bm，7H)，5.06(m，1H)，6.10(s，6H)，7.15(m，5H)，7.45(m，2H)，7.67(d，J＝8.51Hz，2H)，8.27(s，1H)；LC/MS(MH+＝484)。
实施例6
1-(反-4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，二马来酸盐(化合物6)
1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶4-胺(化合物9)(中间体I)
将3-(4-苯氧基苯基)-1 H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(化合物15)(3.36g，11.1mmol)、1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-醇(中间体M)(5.26g，33.3mmol)、三苯基膦(5.81g，22.2mmol)悬浮于130ml四氢呋喃中。该反应混合物在冰水浴中冷却并滴加偶氮二甲酸二乙酯(3.9ml，22.2mmol)。10分钟后，该反应混合物升温至室温。搅拌2小时后，除去溶剂并将此残余物在乙酸乙酯中回收。将有机层洗涤、干燥并蒸发。粗品通过Biotage急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/乙酸乙酯(由50∶50至10∶90)作为流动相，得到3.829g的1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺。1H NMR(CDCl3)1.83(m，2H)，1.945(m，2H)，2.05(m，2H)，2.45(m，2H)，3.99(s，4H)，4.86(m，1H)，5.74(bs，2H)，7.09(m，2H)，7.15(m，3H)，7.39(m，2H)，7.66(d，J＝8.70Hz，2H)，8.37(s，1H)；LC/MS(MH+＝444)。
4-(4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-环己酮(化合物10)(中间体J)
将1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(化合物9)(3.80g，8.57mmol)悬浮于190ml的丙酮中并冷却至0℃。通过加液漏斗缓慢加入48ml的5.0N盐酸。除去冰水浴并将反应混合物室温下搅拌过夜。除去丙酮并用1.0N氢氧化钠将水层中和至pH约为10。滤出固体并干燥得到2.926g的4-(4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-环己酮。1H NMR(CDCl3)2.39(m，2H)，2.62(m，6H)，5.30(m，1H)，6.08(b s，2H)，7.09(m，2H)，7.15(m，3H)，7.42(m，2H)，7.64(d，J＝8.70Hz，2H)，8.39(s，1H)；LC/MS(MH+＝400)。
1-(反-4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体K)和1-(顺-4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体L)
将4-(4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-环己酮(化合物10)(2.916g，7.30mmol)、4-甲基哌嗪(2.4ml，21.90mmol)、三乙酰氧基硼氢化钠(2.01mg，9.49mmol)和冰醋酸(1.31g，21.90mmol)与147ml的1，2-二氯乙烷混合。室温下搅拌6小时后，加入57ml的水，接着加入3.8g的固体碳酸氢钠。分层并将水层用二氯甲烷萃取。将合并的有机层洗涤、干燥并蒸发。残余物通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇/氨水(90/10/0.2至80/20/0.5)作为流动相，得到
(A)，0.47g的反-1-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基)-3-(4苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺。1H NMR(DMSO)1.49(m，2H)，2.00(m，6H)，2.23(s，3H)，2.59(m，9H)，4.66(m，1H)，7.17(m，5H)，7.44(m，2H)，7.64(d，J＝8.69Hz，2H)，8.23(s，1H)；LC/MS(MH+＝484)。
(B)，2.582g的1-(顺-4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺。1H NMR(DMSO)1.58(m，2H)，1.68(m，2H)，2.08(m，2H)，2.15(s，3H)，2.28(m，11H)，4.79(m，1H)，7.17(m，5H)，7.44(m，2H)，7.64(d，J＝8.69Hz，2H)，8.23(s，1H)；LC/MS(MH+＝484)。
1-(反-4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，二马来酸盐
将反-1-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.47g，0.972mmol)溶解于140ml的热乙醇中并加入存在于10ml热乙醇中的马来酸(0.40g，2.47mmol)。室温下放置2小时后，滤出此固体再干燥得到0.62g of 1-(反-4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，二马来酸盐。1H NMR(DMSO)1.58(m，2H)，2.04(m，6)，2.67(m，3H)，2.79(vbm，9H)，4.70(m，1H)，7.41(s，4H)，7.17(m，5H)，7.44(m，2H)，7.66(d，J＝8.63Hz，2H)，8.24(s，1H)；LC/MS(MH+＝484)。
实施例7
1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基胺三马来酸盐(化合物7)
将4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环己酮(化合物10)(中间体J)(4.45g)在300mL二氯甲烷中在氮气氛下搅拌，同时加入3.72 mLN-甲基哌嗪和1.92 mL乙酸。30分钟后加入三乙酰氧基硼氢化钠(3.40g)并将此混合物搅拌过夜。第二天加入2 mLN-甲基哌嗪、1.2 mL乙酸和1.85g三乙酰氧基硼氢化钠并搅拌过夜。再加入2 mLN-甲基哌嗪、1.2mL乙酸和1.85g三乙酰氧基硼氢化钠并搅拌过夜。将混合物真空蒸发，将此残余物与250 mL水和100 mL 6M盐酸一起搅拌并放置过夜。此混合物用乙酸乙酯洗涤两次。将水层碱化(过量的氨水)，用乙酸乙酯萃取并将此萃取物干燥并蒸发得到3.5g淡棕色胶状物，其通过急骤色谱纯化，用8∶1∶1乙酸乙酯∶乙醇∶三乙胺洗脱，得到1.2g纯品，为无色胶状物。用存在于乙酸乙酯中的0.9g马来酸处理此胶状物的乙酸乙酯溶液得到马来酸盐，为无定形固体，其经收集并用乙酸乙酯洗涤。在空气中干燥，然后在80℃/20 mbar下干燥，得到1.9g 1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基胺三马来酸盐，为0.8乙酸乙酯溶剂化物，熔点169-170℃。理论值C43.2H51.4N7O14.6C57.5，H5.7，N10.9，实测值C57.7，H5.7，N10.9。
实施例8
N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-4-氟-1-苯磺酰胺二马来酸盐(化合物8)
1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基胺(中间体KA)
将3-氨基-4-吡唑基甲腈(26.85g，0.248mol)在甲酰胺(140mL)中的悬浮液在180℃下氮气氛下加热4小时。冷却时产生沉淀，其经过滤收集并用水洗涤。将此固体冻干得到1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基胺，为黄褐色粉末(87％，29.25g，0.217mol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)13.34(br s，1H)，8.13(s，1H)，8.07(s，1H)，7.56(br s，2H)；TLC(二氯甲烷/甲醇＝9∶1)Rf 0.16。
3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基胺(中间体LA)
将4-氨基吡唑并[3，4-d]嘧啶(中间体KA)(11.75g，0.087mol)和N-碘代琥珀酰亚胺(25.45g，0.113mol)在二甲基甲酰胺(300mL)中的混合物在50℃下加热24小时。再加入N-碘代琥珀酰亚胺(3.92g，0.017mol)，并在50℃下再继续加热24小时。将此混合物冷却至室温并通过减压浓缩将体积降低1/3。将水(500mL)加入到所得浆状物中得到暗棕色沉淀，其经过滤收集，用水和乙醇洗涤并真空干燥得到3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基胺，为淡黄色粉末(97％，22g，0.084mol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)13.81(s，1H)，8.17(s，1H)，2.73(s，1H)，2.57(s，1H)；TLC(二氯甲烷/甲醇＝9∶1)Rf 0.4。
1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-醇(中间体M)
将1，4-环己烷二酮单亚乙基缩酮(125g，0.8mol)的甲醇(21)溶液冷却至0℃，然后在30分钟内分批加入硼氢化钠(30.3g，0.8mol)。将该反应混合物在0℃下搅拌3小时并减压除去溶剂。黄色浆状物再溶解于二氯甲烷/异丙醇(3∶1，1.51)并用2N氢氧化钠洗涤(1L)。水层再用二氯甲烷/异丙醇(3∶1)萃取并将合并的有机层用水洗涤，用硫酸钠干燥并减压浓缩。收集的1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-醇，为无色油状物(65％，82.4g，0.65mol)：1H NMR(CDCl3 400MHz)3.95(m，4H)，3.79(m，1H)，1.84(m，4H)，1.60(m，4H)。TLC(乙酸乙酯/庚烷＝1∶1)Rf 0.16。
1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基胺(中间体N)
在室温、氮气氛下将3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基胺(中间体LA)(11g，0.042mol)悬浮于四氢呋喃(500mL)中。将1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-醇(中间体M)(19.98g，0.126mol)的四氢呋喃(50mL)溶液，并随后将三苯基膦(22.1g，0.084mol)加入到此悬浮液中。将此悬浮液冷却至0℃，然后缓慢加入偶氮二甲酸二乙酯(14.67g，0.084mol)。在0℃搅拌此反应混合物15分钟后，其升温至室温，保持1小时。将该反应混合物减压浓缩。残余物溶解于乙酸乙酯(300-400mL)并放置过夜。形成沉淀，其经过滤收集，用乙酸乙酯洗涤，并冻干得到1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基胺，为淡黄色固体(54％，9.12g，0.023mol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.19(s，1H)，4.70(m，1H)，3.90(m，4H)，2.13(m，2H)，1.74(m，6H)。TLC(二氯甲烷/甲醇＝9∶1)Rf 0.61。
N-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(中间体P)
在氮气氛下，15分钟内将双(三甲基甲硅烷基)氨化钠(1.0M四氢呋喃溶液，270mL，0.27mol)溶液滴加到4-溴-2-氟苯胺(24.78g，0.130 mol)的四氢呋喃(250 mL)溶液中。再过15分钟后，分批加入二碳酸二叔丁基酯(34.12g，0.156mol)(注意：观察到轻微的放热)并继续搅拌4小时。该反应混合物经减压浓缩并将此残余物在乙酸乙酯(300mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(150mL)之间分配。水层进一步用乙酸乙酯(2×200mL)萃取并将合并的有机层用硫酸钠干燥并减压浓缩。通过柱色谱在硅胶上用10％至15％乙酸乙酯/庚烷梯度纯化得到淡黄色蜡状固体(中间体O)(79％，30.0g)，1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.51(9H，s)，7.22(1H，m)，及7.24(2H，m)。
被保护的溴苯胺(中间体O)(54.0g，0.186mol)、双-频哪醇合二硼烷(pinacolatodiborane)(56.8g，0.223mol)、醋酸钾(54.7g，0.558mol)和[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(4.65g，5.58mmol)在二甲基甲酰胺(1L)中的溶液在80℃下在氮气氛下加热16小时。将二甲基甲酰胺减压除去并将所得深色固体残余物溶解于二氯甲烷(500mL)。通过硅胶垫过滤除去无机残余物并将此滤液通过柱色谱在硅胶上纯化，用10％至15％乙酸乙酯/庚烷梯度洗脱得到产物，为黄色粘稠油状物，其放置时产生结晶(92％，56.5g)，1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.33(12H，s)，1.53(9H，s)，6.82(1H，br s)，7.46(1H，d)，7.55(1H，br d)，及8.12(1H，br t)。
N-{4-[4-氨基-1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}氨基甲酸叔丁基酯(中间体Q)
将1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基胺(中间体N)(6.5g，0.016mol)、N-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(中间体P)(24.3g，0.024mol)，四(三苯基膦)钯(0)(749mg，0.648mmol)和碳酸钠(4.29g，0.04mol)在脱气水(50mL)和二甲氧基乙烷(300mL)中的悬浮液，在80℃下加热18小时。将该反应混合物减压浓缩，然后用乙酸乙酯(500mL)和盐水(500mL)稀释。形成固体，其经过滤收集，用乙酸乙酯洗涤并真空干燥得到N-{4-[4-氨基-1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}氨基甲酸叔丁基酯，为黄褐色固体(81％，6.38g，0.013mol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)9.19(s，1H)，8.23(s，1H)，7.83(t，1H)，7.43(m，2H)，4.78(m，1H)，3.91(m，4H)，2.24(m，2H)，1.79(m，6H)，1.49(s，9H)。TLC(二氯甲烷/甲醇＝95∶5)Rf 0.42。
4-[4-氨基-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环己酮(中间体R)
将叔丁基N-{4-[4-氨基-1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}氨基甲酸酯(中间体Q)(6.38g，0.013mol)悬浮于丙酮(400mL)中并冷却至室温。向此悬浮液缓慢加入5M盐酸(96mL)。该反应混合物再在60℃下加热3小时并减压浓缩。用碳酸氢钠水溶液将剩余的酸性层调节至pH8。形成沉淀，其经过滤收集，用水洗涤，并冻干得到4-[4-氨基-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环己酮，为黄褐色固体(91％，4.1g，0.012mol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.24(s，1H)，7.20(m，2H)，6.89(m，1H)，5.48(s，1H)，5.21(m，1H)，2.69(m，2H)，2.37(m，4H)，2.20(m，2H)；TLC(乙酸乙酯/庚烷)＝4∶1；MH+341。
顺-和反-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体S和T)
将N-甲基哌嗪(3.6g，0.036mol)和乙酸(2.17g，0.036mol)加入到4-[4-氨基-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环己酮(中间体R)(4.1g，0.012mol)在二氯乙烷(200mL)中的悬浮液中。然后向该反应混悬液中分批加入三乙酰氧基硼氢化钠(3.32g，0.016mol)。该反应混合物室温下搅拌18小时。在5天内分两批再加入三乙酰氧基硼氢化钠(1.79g，0.084mol和1.28g，0.06mol)。将该反应混合物过滤，用二氯乙烷(100mL)洗涤并将此滤液减压浓缩得到3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，为黄色固体(14.5g，0.034mol)。将黄色固体纯化并将顺/反异构体通过急骤柱色谱在硅胶上分离，用二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵(93∶5∶2)作为洗脱剂，得到反式3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(流出较慢组分)，为白色固体(115mg，0.27mmol)。1HNMR(DMSO-d6，400MHz)8.19(s，1H)，7.18(m，2H)，6.88(m，1H)，5.46(s，2H)，4.60(m，1H)，2.35(br m，4H)，2.14(s，3H)，1.95(brm，6H)，1.44(m，2H)，1.26(m，4H)，0.86(m，2H)。TLC(二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵＝95∶5)Rf 0.31。
还收集到顺-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，为白色固体(1.1g，2.59mmol)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.19(s，1H)，7.20(m，2H)，6.90(m，1H)，5.47(s，2H)，4.75(m，1H)，3.40(m，4H)，2.23(m，6H)，2.17(m，2H)，1.98(s，3H)，1.61(m，4H)；TLC(二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵＝95∶5)Rf 0.37。
N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-4-氟-1-苯磺酰胺二马来酸盐
将3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体T)(107mg，0.252mmol)和4-氟苯磺酰基氯(49mg，0.252mmol)在吡啶(2.5mL)中的混合物在40℃下加热20小时。在24小时内再加入4-氟苯磺酰基氯(15mg，0.063mmol和10mg，0.051mmol)。将该反应混合物减压浓缩得到桔黄色油状物(220mg，0.378mmol)。将粗品油状物通过制备RP-HPLC(Gilson C18)纯化，用醋酸铵梯度/乙腈梯度洗脱得到N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-4-氟-1-苯磺酰胺(中间体U)，为白色固体(220mg)。将马来酸(55mg，0.474mmol)和游离碱N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-4-氟-1-苯磺酰胺(92mg，0.158mmol)溶解于热乙醇(3mL)。冷却时产生沉淀，其经过滤收集，并冻干得到N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-4-氟-1-苯磺酰胺二马来酸盐，为白色固体(100mg，0.172mmol)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)10.42(s，1H)，8.23(s，1H)，7.86(m，2H)，7.41(m，5H)，6.16(s，4H)，4.67(br m，1H)，2.62(br m，6H)，2.01(br m，6H)，1.56(b rm，2H)；MH+ 583.6。
实施例9(中间体I)
1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基胺(化合物9，中间体I)
4-苯氧基苯基羟基代硼酸(中间体V)
向4-苯氧基溴苯(98.2g，0.39mol)的干燥THF(800mL)溶液中，在氮气氛下在-78℃下滴加n-BuLi(2.5M己烷溶液)(172mL，0.43mol)。观察到温度升高至-65℃。加毕，此混合物在-78℃下搅拌15分钟。在30分钟内，滴加硼酸三异丙基酯(109.2mL，0.473mol)。加毕，观察到形成悬浮液。在1小时内将此混合物升温至0℃，在0℃下搅拌4小时。通过加入水(300mL)使内部温度＜20℃(需要冰浴)停止该反应。此混合物升温至室温过夜，然后蒸发至干。将残余物悬浮于水(600mL)并通过小心地加入浓盐酸进行酸化。通过过滤收集所得沉淀并在45℃下真空干燥。将此固体磨为细粉并用石油醚研磨(40-60℃)。将此淡色固体过滤并干燥得到4-苯氧基苯基羟基代硼酸(68.8g，83％)。1H NMR(250MHz，d6-DMSO)：7.99(1H，m)，7.91(1H，t)，7.83(1H，d)，7.4(2H，m)，7.14(1H，m)，6.92-7.07(5H，m)。微量分析：理论值C(71.4％)，H(5.45％)，实测值C(70.25％)，H(4.7％)
1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-醇(中间体M)
将1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-酮(150g，0.96mol)与MeOH(1200mL)在氮气氛下搅拌直到发生溶解。干冰(drykold)/丙酮浴中冷却至-5℃并在2小时内分批用NaBH4(72.6g，1.82mol)处理(T＜10℃)。加毕，此混合物冷却至-10℃并再使其升温至室温。室温下搅拌过夜。将所得混合物蒸发并用冰冷的5N NaOH(400mL)处理，用CH2Cl2(2×500mL)萃取，接着用4∶1二氯甲烷∶异丙醇(2×250mL)萃取。合并的萃取物用盐水(2×200mL)洗涤，干燥过夜(硫酸钠)并蒸发得到无色油状物。将其进一步真空干燥得到1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-醇(141.8g，93％收率)1H NMR：CDCl3(250MHz)3.91(4H，m)，3.81(1H，m)，1.21-1.88(8H，m，脂族H的)。
3-溴-4-氯-1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(中间体W)
在0℃下在氮气氛下向3-溴-4-氯吡唑并[3，4-d]嘧啶(中间体B)(7.5g，32mmol)、1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-醇(中间体M)(15.17g，96mmol)、三苯基膦(16.86g，64mmol)的THF(275mL)溶液中加入存在于THF(50mL)中的偶氮二甲酸二乙酯(11.14g，64mmol)。该反应混合物在0℃下搅拌1小时，升温至室温并再在室温下搅拌3小时。将该反应混合物真空浓缩并溶解于热庚烷/EtOAc/DCM(5∶1∶5)。进行急骤硅胶柱色谱，用庚烷、庚烷/EtOAc(5/1)然后用庚烷/EtOAc(4/1)洗脱得到固体，其用庚烷研磨，并将此固体过滤移出得到8.2g的3-溴-4-氯-1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶，为白色固体(69％)[在1∶1庚烷：EtOAc中Rf＝0.5]1HNMR(400MHz，d6-DMSO)：8.89(1H，s)，4.92(1H，m)，3.90(4 H，m)，2.16(2H，m)，1.96(2H，m)，1.81(6H，m)HPLC：Tr＝17.11分钟，96.6％。
3-溴-1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基胺(中间体X)
将3-溴-4-氯-1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(中间体W)(8.2g，21mmol)、浓氨水(100mL)和二噁烷(100mL)在Parr压力容器中在120℃下加热20小时。蒸发溶剂并将此残余物在乙酸乙酯和水之间分配。乙酸乙酯层用硫酸钠干燥，过滤并蒸发得到3-溴-1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基胺固体(4.7g，61％)，其不经进一步纯化直接使用。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)：8.21(1H，s)，4.71(1H，m)，3.90(4H，m)，2.11(2H，m)，1.72-1.88(6H，m)HPLC：Tr＝11.84分钟，92.1％。
1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基胺
将3-溴-1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基胺(中间体X)(4.0g，11.3mmol)、4-苯氧基苯基羟基代硼酸(中间体V)(2.66g，12mmol)、碳酸钠(2.87g，27mmol)、四(三苯基膦)钯(0.78g，0.6mmol)在二甲氧基乙烷(120mL)/水(60mL)的混合物中在85℃氮气氛下加热4小时。冷却至室温并放置72小时。过滤沉淀的固体并用水和乙醚(各100ml)洗涤。真空干燥3小时得到4.2g的1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基胺，为米色固体(87％)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)8.24(1H，s)，7.67(2H，m)，7.45(2H，m)，7.19(5H，m)，4.78(1H，m)，3.90(4H，m)，2.25(2H，m)，1.71-1.84(6H，m)，质谱：MH+＝444.2
1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基胺。
第二路线
将在200mL干燥的二甲基乙酰胺中的4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(化合物15)(4.9g)在氮气氛下用60％氢化钠(2.0g)处理并搅拌30分钟。加入1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基4-甲基-1-苯磺酸酯(中间体Y)(15g)并将此混合物在105℃下加热42小时。真空蒸发并用水处理得到固体，其经收集并用水充分洗涤然后在空气中干燥。将此固体用乙醚(6×120mL)煮沸并将此经过滤的溶液蒸发。用丙酮处理得到1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基胺，为米白色固体，其经收集并用丙酮洗涤，然后在空气中干燥，熔点200-202.5℃。理论值C25H25N5O3 C67.7，H5.6，N15.8；实测值C67.6，H5.8，N15.4。
实施例10
4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环己酮(化合物10，中间体J)
向在丙酮(200mL)中的1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(4-苯氧基苯基)-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基胺(化合物9)(4.2g，95mmol)中滴加HCl(5N，50mL)。室温下搅拌24小时。蒸发丙酮并用氢氧化钠(5N，60mL)碱化。用EtOAc(3×200mL)萃取。干燥、过滤并蒸发得到固体，其用EtOAc：Et2O(1∶20)研磨并过滤得到4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环己酮，为霜状固体(3.4g，90％)，熔点203-205℃。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)8.28(1H，s)，7.66(2H，m)，7.44(2H，m)，7.08-7.20(5H，m)，6.1-7.3(2H，bs)，5.26(1H，m)，2.71(2H，m)，2.41(4H，m)，2.24(2H，m)HPLC：Tr＝15.43分钟，95％。
实施例11
4-4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]环己基-1-哌嗪甲酸叔丁基酯(化合物11和12)
向4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环己酮(化合物10)(2.0g，5mmol)和叔丁氧基羰基哌嗪(2.8g，15 mmol)的二氯乙烷(200 mL)溶液中，加入冰醋酸(0.9g，15 mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(1.59g，7.5 mmol)。室温氮气氛下搅拌20小时。用NaOH溶液(2.5N，200mL)停止反应。分离有机层并用二氯甲烷(2×100mL)萃取水层。用水洗涤合并的有机层，干燥(硫酸钠)并过滤。将此溶液蒸发得到红色油状物，其进行急骤硅胶柱色谱，用乙酸乙酯至10％ MeOH/乙酸乙酯(2.5％甲醇的增量)。合并相应于快速流出物质的馏份(在9∶1 EtOAc∶MeOH中Rf＝0.27)并蒸发得到4-4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]环己基-1-哌嗪甲酸叔丁基酯，为白色固体(1.48g，53％)，熔点170-172℃，鉴定为顺式非对映异构体(化合物11)1H NMR(400MHz，d6-DMSO)8.23(1H，s)，7.65(2H，d，J＝8.8Hz)，7.43(2H，m)，7.12-7.20(5H，m)，4.82(1H，m)，3.34(4H，m)，2.40(4H，m)，2.30(3H，m)，2.04(2H，m)，1.60-1.72(4H，m)，1.39(9H，s)。HPLC：Tr＝15.74分钟，98.16％，质谱：MH+＝570.1。
合并相应于流出较慢的物质的馏份(在9∶1 EtOAc∶MeOH中Rf＝0.18)并蒸发得到4-4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]环己基-1哌嗪甲酸叔丁基酯，为霜状固体(0.5g，18％)，熔点178-179℃，鉴定为反式非对映异构体(化合物12)1H NMR(400MHz，d6-DMSO)8.23(1H，s)，7.65(2H，d，J＝8.4Hz)，7.42(2H，m)，7.11-7.20(5H，m)，4.63(1H，m)，3.34(4H，m)，2.47(5H，m)，1.89-2.06(6H，m)，1.34-1.55(11H，m)HPLC：Tr＝15.29分钟，98.15％，质谱：MH+＝570.1。
实施例12
顺-3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌嗪基环己基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基胺三马来酸盐(化合物13)
在0℃下在氮气氛下，向二氯甲烷(35mL)中的顺-叔丁基4-4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶1-基]环己基-1-哌嗪甲酸酯(化合物11)(1.4g，2.46mmol)中滴加TFA(6mL)。将该反应混合物室温下搅拌48小时，用NaOH(5N水溶液，50mL)停止反应并用二氯甲烷(3×50mL)萃取。用水洗涤，干燥(硫酸钠)，过滤并蒸发得到无色油状物(1.23g)，其溶解于EtOAc(40mL)。向此溶液中加入马来酸(913mg)的EtOAc(10mL)溶液。在氮气流下过滤所得固体并在真空下再干燥2小时。这样得到1.8g(90％)的顺-3-(4苯氧基苯基)-1-(4-哌嗪基环己基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基胺三马来酸盐，为白色固体熔点173-175℃。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)8.26(1H，s)，7.67(2H，d，J＝8.8Hz)，7.42(2H，m)，7.12-7.21(5H，m)，6.19(6H，s)，4.86(1H，m)，3.18(4H，m)，2.89(4H，m)，2.67(1H，m)，2.28(2H，m)，2.05(2 H，m)，1.7 4-1.80(4H，m)HPLC：Tr＝12.52分钟，100％，质谱：MH+＝470.3，微量分析：C39H43N7O13理论值：C：57.3％，H：5.3％，N：12.0％；实测值C：57.0％，H：5.3％，N：11.97％。
实施例13
反式-3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌嗪基环己基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基胺三马来酸盐(化合物14)
在0℃下在氮气氛下，向在二氯甲烷(15mL)中的反-叔丁基4-4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]环己基-1-哌嗪甲酸酯(化合物12)(0.5g，0.88mmol)中滴加TFA(4 mL)。室温下搅拌48小时。用氢氧化钠溶液(5N，25 mL)停止反应并用二氯甲烷(3×25mL)萃取。用水洗涤，干燥(硫酸钠)，过滤并蒸发得到米色固体(0.39g)，其溶解于EtOAc(20mL)。向此溶液中加入马来酸(290mg)的EtOAc(5mL)溶液。在氮气流下过滤所得固体并在真空下再干燥2小时。这样得到0.6g(83％)的反-3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌嗪基环己基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基胺三马来酸盐，为白色固体熔点153-155℃。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)8.25(1H，s)，7.65(2H，m)，7.43(2H，m)，7.11-7.21(5H，m)，6.17(6H，s)，4.69(1H，m)，3.20(4H，m)，2.97(4H，m)，2.84(1H，m)，2.04-2.09(6H，m)，1.59(2H，m)。HPLC：Tr＝12.65分钟，100％，质谱：MH+＝470.1微量分析：理论值C39H43N7O13 C：57.3％ H：5.3％ N：12.0％，实测值C：57.1％  H：5.4％  N：12.10％。
实施例14
4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(化合物15)
1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-醇(中间体M)
在氮气氛下将1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-酮(150g，0.96mol)与MeOH(1200 mL)一起搅拌直到发生溶解。将该反应混合物在干冰(drykold)/丙酮浴中冷却至-5℃并在2小时内分批用NaBH4处理(72.6g，1.82mol)(T＜10℃)。加毕，将此混合物冷却至-10℃，然后使其升温至室温并室温下搅拌过夜。将所得混合物蒸发并用冰冷的5N NaOH(400mL)处理，并用二氯甲烷(2×500mL)萃取，接着用4∶1二氯甲烷∶异丙醇(2×250mL)萃取。合并的萃取物用盐水洗涤(2×200mL)，干燥过夜(硫酸钠)并蒸发得到无色油状物。将其进一步真空干燥(除去残余的异丙醇)得到1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-醇(141.8g，93％收率)1H NMR：CDCl3(250MHz)：3.91(4H，m)，3.81(1H，m)，1.21-1.88(8H，m，脂族H的)。
1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基4-甲基-1-苯磺酸酯(中间体Y)
向搅拌的1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-醇(中间体M)(99.8g，0.63mol)的吡啶(450mL)溶液中，在0℃在氮气氛下分批加入甲苯磺酰氯(132.4g，0.69mol)使T＜2℃。加毕，此混合物缓慢升温至室温并室温下搅拌过夜。用水(750mL)处理并用乙酸乙酯(500mL，然后2×250mL)萃取。合并的萃取物用3N HCl(3×300mL)、盐水(300mL)洗涤并用硫酸钠干燥。过滤并蒸发得到淡黄色油状物(200g粗品)。将此油状物用石油醚(40-60℃)(200mL)处理并刮划以诱发固体形成。过滤1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基4-甲基1-苯磺酸酯，用石油醚(40-60℃)(200mL)洗涤并真空干燥。收率＝181.0g，92％。
1，1-二氰基-2-羟基-2-(4-苯氧基苯基)乙烯(中间体Z)
将4-苯氧基苯甲酸(48g)加入到100mL亚硫酰氯中并在温和回流下加热1小时。蒸馏除去亚硫酰氯，残余的油状物溶解于甲苯，并在80℃/20毫巴下除去挥发性物质。所得酰氯溶解于200mL甲苯和35mL四氢呋喃中。加入14.8g丙二腈，并将此溶液在-10℃搅拌，同时在0℃以下加入存在于150mL甲苯中的57.9g二异丙基乙基乙胺。再在0℃下1小时后，将此混合物在20℃搅拌过夜。将胺盐酸盐过滤移出并将此滤液真空蒸发，在乙酸乙酯中回收此残余物并用1.25M硫酸洗涤，然后用盐水洗涤并用硫酸钠干燥。蒸发得到半固体残余物，将其用少量乙酸乙酯处理得到4.1g纯品，为白色固体熔点160-162℃。将此滤液蒸发得到56.5g(96％)的1，1-二氰基-2-羟基-2-(4-苯氧基苯基)乙烯，为灰棕色固体，其纯度足以符合进一步使用的要求。1H NMR(DMSO-d6 400MHz)8.18(宽s，1H)，7.62(d，2H)，7.42(m，2H)，7.19(m，1H)，7.07(d，2H)，6.94(d，2H)。
1，1-二氰基-2-甲氧基-2-(4-苯氧基苯基)乙烯(中间体AA)
将1，1-二氰基-2-羟基-2-(4-苯氧基苯基)乙烯(中间体Z)(56.5g)在780mL乙腈和85mL甲醇中，在氮气氛下，在0℃下搅拌，同时加入52.5mL二异丙基乙胺，然后加入150mL 2M三甲基甲硅烷基二偶氮甲烷的THF溶液。在20℃下搅拌2天后，加入2g硅胶进行色谱：没有注意到再放出氮气。将此棕红色溶液真空蒸发，残余物溶解于乙酸乙酯，并用水充分洗涤，然后用盐水洗涤，干燥并蒸发。残余物用乙醚(3×250mL)萃取，从不溶性油状物中倾析。蒸发醚萃取物得到22.5g的1，1-二氰基-2-甲氧基-2-(4-苯氧基苯基)乙烯，为淡桔黄色固体，通过TLC(3∶2乙酸乙酯∶环己烷)检测其几乎是纯的。不溶性油状物通过急骤色谱纯化得到15.0g橘红色油状物。合并的收率(63％)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)7.71(d，2H)，7.48(m，2H)，7.29(m，1H)，7.16(m，4H)，3.93(s，3H)。
3-氨基-4-氰基-5-(4-苯氧基苯基)吡唑(中间体AB)
将1，1-二氰基-2-甲氧基-2-(4-苯氧基苯基)乙烯(中间体AA)(22.5g)和1，1-二氰基-2-甲氧基-2-(4-苯氧基苯基)乙烯油状物(15g)用18mL肼水合物的25mL乙醇溶液处理，并在蒸汽浴上加热1小时，加入15mL乙醇，接着加入10mL水。收集沉淀的固体并用4∶1乙醇∶水洗涤，然后在空气中干燥得到3-氨基-4-氰基-5-(4-苯氧基苯基)吡唑，为淡桔黄色固体30.0g(80％)熔点187-188.5℃。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)12.11(宽s，1H)，7.80(d，2H)，7.42(m，2H)，7.18(m，1H)，7.09(m，4H)，6.47(宽s，2H)。理论值C16H12N4O，C 69.6，H4.3，N20.3；实测值C69.5，H4.4，N 20.2。
4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶
将3-氨基-4-氰基-5-(4-苯氧基苯基)吡唑(中间体AB)(29.5g)悬浮于300mL甲酰胺中并在在氮气氛下在180℃加热4小时，冷却至30℃，加入300mL水并收集固体，用水然后用甲醇充分洗涤并在空气中干燥得到24.6g纯品(80％)的4-氨基3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶熔点267-269℃，为淡棕色-灰色固体。理论值C17H13N5OC67.3，H4.3，N23.1；实测值C67.0，H4.4，N23.1。
实施例15
4-氨基-1-环戊基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(化合物16)
将4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(化合物15)(0.91g)在50mL干燥二甲基乙酰胺中在25℃氮气氛下搅拌，同时加入60％氢化钠(0.20g)。搅拌30分钟后，加入溴代环戊烷(0.8mL)并将此混合物搅拌过夜。真空蒸发后，残余物用水处理并用乙酸乙酯萃取。进行急骤色谱(3∶2环己烷∶乙酸乙酯)纯化得到0.36g的1-环戊基-4-(环戊基氨基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶，为无色油状物。1H n.m.r.(DMSO)8.319(s，1H)，7.65-7.69(m，2H)，7.40-7.48(m，2H)，7.09-7.23(m，5H)，5.926/5.955(d，1H)，5.17-5.29(五重峰，1H)，4.44-4.52(m，1H)，1.86-2.12(m，8H)，1.39-1.72(m，8H)。
用乙酸乙酯进一步洗脱得到4-氨基-1-环戊基-3-(4-苯氧基苯基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶。用甲基叔丁基醚重结晶得到无色针状物熔点134.7-135.6℃(0.2g，18％)。理论值C22H21N5O C71.2，H5.7，N18.9；实测值C71.05，H5.7，N18.8。1H n.m.r.(DMSO)8.237(s，1H)，7.64-7.68(m，2H)，7.40-7.47(m，2H)，7.10-7.22(m，5H)，6.85(特宽s，2H)，5.17-5.30(五重峰，1H)，1.67-2.09(m，8H)。
实施例16
3-(4-苯氧基苯基)-1-(四氢吡喃-4-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基胺(化合物17)
将3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基胺(化合物15)(0.97g)在33mL干燥二甲基乙酰胺中在氮气氛下搅拌，同时加入60％氢化钠(0.22g)。30分钟后加入四氢吡喃-4-基甲苯磺酸酯(1.0g)并将此混合物在105℃下加热4小时，然后在135℃下加热3.5小时。真空蒸发并用水处理得到淡棕色固体，其经收集并用水充分洗涤然后在空气中干燥。在19∶1乙酸乙酯∶三乙胺中进行急骤色谱得到0.22g(18％)的3-(4-苯氧基苯基)-1-(四氢吡喃-4-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基胺熔点187-187.5℃。理论值C22H21N5O2 C68.2，H5.4，N 18.1；实测值C 68.1，H 5.5，N18.0。
实施例17
顺-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲酮二马来酸盐(化合物18)和反-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)苯基)(苯基)甲酮二马来酸盐(化合物19)
苯基-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]甲酮(中间体AL)
将4-溴二苯酮(2.97g，0.011mol)、乙硼烷频哪醇酯(diboronpinacol ester)(3.47g，0.014mol)、[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷(1∶1)的复合物(0.28g，0.00034mol)和醋酸钾(3.34g，0.034mol)在N，N-二甲基甲酰胺(65mL)中的混合物，在80℃下氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。将二氯甲烷(50mL)加入到此残余物中并将所得固体通过硅藻土板滤出。浓缩此滤液得到黄色油状物，其通过急骤色谱纯化，在硅胶上用乙酸乙酯/正庚烷(5∶95)作为流动相，得到苯基[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]甲酮(2.01g，0.0065mol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)7.85(d，2H)，7.71(m，5H)，7.56(d，2H)，1.32(s，12H)；TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶9)Rf0.36
4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-环己酮(中间体AK)
将1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基胺(中间体N)(13.12g，32.7mmol)悬浮于丙酮(240mL)并将此混合物冷却至0℃。滴加5N盐酸(200mL)，在加入期间保持温度低于4℃。加毕，混合物升温至室温并搅拌18小时。滤出剩余的固体，并用饱和碳酸氢钠水溶液中和此滤液。沉淀通过过滤收集并用水洗涤并真空干燥得到4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-环己酮(8.20g，32.8mmol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.23(s，1H)，5.18(m，1H)，2.64-2.73(m，2H)，2.26-2.37(m，4H)，2.17-2.30(m，2H)。
顺-和反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体AC和AD)
将4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-环己酮(中间体AK)(1.32g，0.0037mol)、N-甲基哌嗪(1.11g，0.011mol)和乙酸(0.66g，0.011mol)在1，2-二氯乙烷(50mL)中的混合物在40℃下搅拌10分钟，并立即加入三乙酰氧基硼氢化钠(1.09g，0.0052mol)。将此混合物在室温氮气氛下搅拌24小时，并加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.25g，0.0012mol)。此混合物搅拌再搅拌48小时，减压除去溶剂并将此残余物在饱和碳酸氢钠水溶液(80mL)和氯仿(50mL)之间分配。分离有机层并将水层进一步用氯仿(3×50mL)萃取。合并的有机萃取物用硫酸镁干燥并减压除去溶剂得到黄色油状物。此化合物在硅胶上通过急骤色谱进一步纯化，用二氯甲烷/三乙胺/甲醇(88∶11∶1)作为流动相洗脱得到顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，为白色固体(0.93g，0.0021mol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.18(s，1H)，4.71(m，1H)，2.38-1.9(m，13H)，2.17(s，3H)，1.63-1.5(m，4H)；TLC(二氯甲烷/三乙胺＝9∶1)Rf 0.24和反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，为白色固体(0.38g，0.00086mol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.18(s，1H)，4.55(m，1H)，2.38-1.9(m，15H)，2.15(s，3H)，1.42(m，2H)；TLC(二氯甲烷/三乙胺＝9∶1)Rf 0.11。
顺-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲酮二马来酸盐
将苯基[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]甲酮(中间体AL)(0.241g，0.00078mol)、顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体AC)(0.30g，0.00068mol)、四(三苯基膦)钯(0.047g，0.000041mol)和碳酸钠(0.18g，0.0017mol)的混合物，在乙二醇二甲基醚(10mL)和水(5mL)的混合物中，在80℃下氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。残余物在饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)和乙酸乙酯之间分配，分离有机层并将水层用乙酸乙酯再萃取两次。合并的有机萃取物用硫酸镁干燥。减压蒸发溶剂得到黄褐色固体，其通过急骤柱色谱在硅胶上进行纯化，用二氯甲烷/三乙胺/甲醇(95∶4∶1)作为流动相洗脱得到顺-{4-[4-氨基-1-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基)]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基-]-苯基}(苯基)甲酮，为白色固体(0.195g，0.0004mol)。其溶解于回流的乙醇(17mL)中并加入预热的马来酸(0.137g，0.0018mol)溶液。此混合物回流10分钟，冷却至室温并过滤收集沉淀，用乙酸乙酯洗涤并干燥得到顺-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲酮二马来酸盐，为白色固体(0.221g，0.0003mol)：1HNMR(DMSO-d6，400MHz)8.28(s，1H)，7.90(d，2H)，7.83(m，4H)，7.73(t，1H)，7.61(m，2H)，6.15(s，4H)，4.88(m，1H)，3.1(br，9H)，2.71(s，3H)，2.28(m，2H)，2.07(m，2H)，1.74(m，4H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 12.63min。MS：MH+496。
反-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲酮二马来酸盐
类似的方法用于反式异构体得到反-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲酮二马来酸盐，为白色固体(0.155g，0.0002mol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.27(s，1H)，7.90(d，2H)，7.83(m，4H)，7.73(t，1H)，7.61(m，2H)，6.17(s，4H)，4.77(m，1H)，3.1(br，9H)，2.68(s，3H)，2.05(br，6H)，1.61(br，2H)RP-HPLC(Hypersil C18，5m，100A，25cm；5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，在20分钟内，1mL/min)Rt 12.59min。MS：MH+ 496。
实施例18
顺-3-(4-苯氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺三马来酸盐(化合物20)
N-苯基-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]胺(中间体AE)
将N，N-(4-溴苯基)-苯基胺(0.60g，0.0024mol)、乙硼烷频哪醇酯(0.74g，0.0029mol)、[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷(1∶1)的复合物(0.059g，0.000073mol)和醋酸钾(0.71g，0.0073mol)在N，N-二甲基甲酰胺(25mL)中的混合物，在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。将二氯甲烷(50mL)加入到此残余物中并将所得固体通过硅藻土板滤出。浓缩此滤液得到黄色油状物，其在硅胶上通过急骤色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(2∶98)作为流动相，得到N-苯基-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]胺(0.33g，0.0011mol)：1H NMR(DMSO-d6 400MHz)8.42(s，1H)，7.51(d，2H)，7.27(m，2H)，7.12(d，2H)，7.01(d，2H)，6.83(t，1H)，1.27(s，12H)；TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶9)Rf 0.54
顺-3-(4-苯氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺三马来酸盐
将N-苯基-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]胺(中间体AE)(0.33g，0.0011mol)、顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体AC)(0.43g，0.00097mol)、四(三苯基膦)钯(0.0067g，0.000058mol)和碳酸钠(0.26g，0.0024mol)在乙二醇二甲基醚(16mL)和水(8mL)的混合物中在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。残余物在饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)和乙酸乙酯(50mL)之间分配，分离有机层并将水层用乙酸乙酯再萃取两次。合并的有机萃取物用硫酸镁干燥并减压蒸发得到黄褐色固体，其通过急骤柱色谱在硅胶上进行纯化，用二氯甲烷/三乙胺/甲醇(92∶7∶1)作为流动相洗脱得到3-(4-苯氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，为白色固体(0.400g，0.00074mol)。其溶解于回流的乙醇(17mL)中并加入预热的马来酸(0.342g，0.003mol)的乙醇(8mL)溶液。将此混合物回流10分钟，冷却至室温并过滤收集沉淀，用乙酸乙酯洗涤并干燥得到顺-3(4-苯氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺三马来酸盐(0.44g，0.00053mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.45(s，1H)，8.23(s，1H)7.52(d，2H)，7.28(m，2H)，7.20(m，4H)，6.89(t，1H)，6.19(s，6H)，4.83(m，1H)，3.1(br，9H)，2.72(s，3H)，2.28(m，2H)，2.07(m，2H)，1.74(m，4H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 13.12min。MH+ 483。
实施例19
顺-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-(6-苯氧基-3-吡啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二马来酸盐(化合物21)和反-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-(6-苯氧基-3-吡啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺马来酸盐(化合物2 2)
5-溴-2-苯氧基吡啶(中间体AF)
将苯酚(1.99g，0.021mol)的N，N-二甲基甲酰胺(60mL)溶液冷却至0℃并立即加入在石蜡中的氢化钠(0.89g，0.022mol)的60％混悬液。此混合物在此温度下搅拌10分钟并立即加入2，4-二溴吡啶。此混合物升温至室温同时在氮气氛下搅拌72小时并在70℃下加热24小时。减压除去溶剂；此残余物溶解于乙酸乙酯(150mL)中并饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)、盐水(80mL)洗涤，用硫酸镁干燥并蒸发。残余物通过制备RP-LC/MS纯化(Gilson-Micromass C18，5m，130A，21cm，0％-100％乙腈-0.1M醋酸铵在9分钟内，25mL/min)得到2-溴-5-苯氧基吡啶，为黄色油状物(1.40g，0.0056mol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.28(s，1H)，8.07(d，1H)，7.45(t，2H)，7.25(t，1H)，7.16(d，2H)，7.04(d，1H)；MS：MH+ 250
2-苯氧基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(中间体AG)
将5-溴-2-苯氧基吡啶(1.40g，0.0056mol)、乙硼烷频哪醇酯(中间体AF)(1.71g，0.0067mol)、[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷(1∶1)的复合物(0.137g，0.00017mol)和醋酸钾(1.65g，0.0168mol)在N，N-二甲基甲酰胺(50mL)中的混合物在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。将二氯甲烷(40mL)加入到此残余物中并将所得固体通过硅藻土板滤出。浓缩此滤液得到黄色油状物，其在硅胶上通过急骤色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶9)作为流动相，得到2-苯氧基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-吡啶，为白色固体(纯度93％(HPLC)，1.20g，0.004mol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.36(s，1H)，8.03(d，1H)，7.45(t，2H)，7.25(t，1H)，7.16(d，2H)，7.01(d，1H)，1.30(s，12H)；MS：MH+298
1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(6-苯氧基-3-吡啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体AH)
将2-苯氧基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(中间体AG)(1.1g，0.0037mol)、1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-吲哚-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体N)(1.29g，0.0032mol)、四(三苯基膦)钯(0.22g，0.00019mol)和碳酸钠(0.85g，0.008mol)的混合物在乙二醇二甲基醚(40mL)和水(20mL)的混合物中在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并将乙二醇二甲基醚减压除去。通过过滤收集沉淀，用水洗涤1次，用乙腈洗涤2次，用乙醚洗涤2次，得到1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(6-苯氧基-3-吡啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，为米白色固体(1.03g，0.0023mmol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.36(s，1H)，8.24(s，1H)，8.03(d，1H)，7.45(t，2H)，7.22(m，3H)，7.16(d，1H)，4.81(m，1H)，3.93(s，4H)，2.24(m，2H)，1.88(m，6H)；MS：MH+ 445
4-[4-氨基-3-(6-苯氧基-3-吡啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环己酮(中间体AI)
将1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(6-苯氧基-3-吡啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体AH)(1.00g，0.0022 mol)在丙酮(20mL)中研磨，并滴加5N盐酸溶液。此混合物室温下搅拌20小时并用饱和碳酸氢钠溶液中和。通过过滤收集沉淀，用水洗涤两次并干燥得到4-[4-氨基-3-(6-苯氧基-3-吡啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环己酮，为米白色固体(纯度94％(HPLC)，0.90g，0.0022mol))：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.36(s，1H)，8.24(s，1H)，8.07(d，1H)，7.45(t，2H)，7.22(m，3H)，7.16(d，1H)，5.27(m，1H)，2.74(m，2H)，2.35(m，6H)；
RP-HPLC(C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.29 min。
顺-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-(6-苯氧基-3-吡啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二马来酸盐和反-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-(6-苯氧基-3-吡啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺马来酸盐
将4-[4-氨基-3-(6-苯氧基-3-吡啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环己酮(中间体AI)(0.90g，0.0022mol)、N-甲基哌嗪(0.676g，0.0067mol)和乙酸(0.405g，0.0067mol)在1，2-二氯乙烷(40mL)中的混合物搅拌10分钟，并立即加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.62g，0.0029mol)。将此混合物室温下氮气氛下搅拌24小时，并加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.30g，0.0014mol)。将此混合物再搅拌48小时，减压除去溶剂并将此残余物在饱和碳酸氢钠水溶液(80ml)和二氯甲烷(50mL)之间分配。分离有机层，并将水层用二氯甲烷再萃取两次(50mL)。合并的有机萃取物用硫酸镁干燥并减压除去溶剂得到黄色油状物。此化合物在硅胶上通过急骤色谱进一步纯化，用二氯甲烷/三乙胺/甲醇(89∶10∶1)作为流动相洗脱得到顺-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-(6-苯氧基-3-吡啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体AJ)：TLC(二氯甲烷/三乙胺＝9∶1)Rf 0.29和反-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-(6-苯氧基-3-吡啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺：TLC(二氯甲烷/三乙胺＝9∶1)Rf 0.14。
将顺-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-(6-苯氧基-3-吡啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体AJ)(0.53g，0.0011mol)在乙酸乙酯(25mL)和乙醇(4mL)混合物中的溶液加热回流并加入预热的马来酸(0.51g，0.0044mol)的乙酸乙酯(15mL)溶液。将此混合物再回流10分钟，冷却至室温并过滤收集沉淀，用乙酸乙酯洗涤并干燥得到顺-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-(6-苯氧基-3-吡啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二马来酸盐，为白色固体(0.61g，0.00084 mol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.38(s，1H)，8.25(s，1H)，8.06(d，1H)，7.46(t，2H)，7.22(m，4H)，6.15(s，4H)，4.85(m，1H)，3.1(br，9H)，2.70(s，3H)，2.25(m，2H)，2.04(m，2H)，1.74(m，4H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 11.93 min。MS：MH+ 485。
类似的方法用于反式异构体得到反-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-(6-苯氧基-3-吡啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺马来酸盐，为白色固体(0.049g，0.00008mol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.35(s，1H)，8.25(s，1H)，8.06(d，1H)，7.46(t，2H)，7.22(m，4H)，6.21(s，4H)，4.70(m，1H)，3.1(br，9H)，2.69(s，3H)，2.05(br，6H)，1.61(br，2H)：RP-HPLC(Hypersil C18，5m，100A，25cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 12.40min。MS：MH+ 485。
实施例20
反-苄基-N-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基}氨基甲酸酯二马来酸盐(化合物23)
苄基N-(4-溴-2-甲氧基苯基)氨基甲酸酯(中间体AM)
将碳酸氢钠(3.12g，0.0371mol)的水(35mL)溶液加入到4-溴-2-甲氧基苯胺(3.00g，0.0148mol)的二噁烷(50mL)溶液中。将所得混合物搅拌5分钟并在3分钟内滴加氯甲酸苄基酯(3.8g，0.022mol)。该反应混合物反应2小时，然后将二噁烷减压除去并用乙酸乙酯两次萃取水相(每次100mL)。合并的有机萃取物用硫酸镁干燥并在过滤后减压浓缩。所得残余物在硅胶上通过急骤色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(5∶95)作为流动相，得到N-(4-溴-2-甲氧基苯基)氨基甲酸苄基酯(3.75g，0.011mol)，为白色固体：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.72(s，1H)，7.61(d，1H)，7.38(m，5H)，7.20(s，1H)，7.10(d，1H)，5.14(s，2H)，3.81(s，3H)；
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶9)Rf 0.21
N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸苄基酯(中间体AN)
将N-(4-溴-2-甲氧基苯基)氨基甲酸苄基酯(中间体AM)(3.0g，0.0089mol)、乙硼烷频哪醇酯(2.72g，0.0107mol)、[1，1′双(二苯基膦基)二茂铁]-二氯钯(II)与二氯甲烷(1∶1)的复合物(0.219g，0.00027mol)和醋酸钾(2.65g，0.027mol)在N，N-二甲基甲酰胺(70mL)中的混合物，在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。将二氯甲烷(70mL)加入到此残余物中并将所得固体通过硅藻土板滤出。浓缩此滤液得到黄色油状物，其在硅胶上通过急骤色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶9)作为流动相，得到N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸苄基酯(1.6g，0.0042mol)，为白色固体：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.66(s，1H)，7.80(d，1H)，7.38(m，5H)，7.25(d，1H)，7.17(s，1H)，5.15(s，2H)，3.81(s，3H)，1.29(s，12H)；
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶9)Rf 0.13
反-苄基N-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并-[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基}氨基甲酸酯二马来酸盐
将N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-苯基]氨基甲酸苄基酯(中间体AD)(1.26g，0.0033mol)、顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4胺(1.21g，0.0027mol)、四-(三苯基膦)钯(0.19g，0.00016mol)和碳酸钠(0.726g，0.00685mol)的混合物在乙二醇二甲基醚(40mL)和水(20mL)的混合物中，在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。残余物在饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)和乙酸乙酯(100mL)之间分配，分离有机层并将水层用乙酸乙酯再萃取两次(每次600mL)。合并的有机萃取物用硫酸镁干燥。减压蒸发溶剂得到黄褐色固体，其通过急骤柱色谱在硅胶上进行纯化，用二氯甲烷/三乙胺/甲醇(94∶5∶1)作为流动相洗脱得到反-N-({4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基}氨基甲酸苄基酯(中间体AO)，为白色固体(1.29g，0.0023mol)。将反-N-({4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基}氨基甲酸苄基酯(中间体AO)(0.222g，0.00039mol)溶解于回流的乙醇(17mL)中，并加入预热的马来酸(0.135g，0.00117mol)的乙醇(8mL)溶液。将此混合物回流10分钟，冷却至室温并过滤收集沉淀，用乙酸乙酯洗涤并干燥得到反-N-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基}-氨基甲酸苄基酯二马来酸盐，为白色固体(0.250g，0.00031mol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.76(s，1H)，8.23(s，1H)，7.89(d，1H)，7.40(m，5H)，7.20(m，2H)，6.15(s，4H)，5.18(s，2H)，4.69(m，1H)，3.87(s，3H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)，2.05(m，6H)，1.57(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 13.86 min。
MS：MH+ 570。
实施例21
反-N-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基}苯甲酰胺二马来酸盐(化合物24)
3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体AP)
向搅拌的反-N-(4-4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基-2-甲氧基苯基)-氨基甲酸苄基酯(中间体AO)(0.95g，0.00167mol)的乙醇(35mL)溶液中，加入10％钯碳(0.33g)并将所得混合物在一个大气压的氢气中氢化18小时。通过硅藻土板过滤除去催化剂并将此滤液减压浓缩得到3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，为白色固体(0.71g，0.00164mol)RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 8.81 min。
MS：MH+ 437。
反-N-(4-4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基-2-甲氧基苯基)苯甲酰胺二马来酸盐
向搅拌的3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体AP)(0.31g，0.00071mol)和苯甲酰基氯(0.105g，0.00075mol)的无水二氯甲烷(10mL)溶液中，在5分钟内滴加N-乙基-N，N-二异丙基胺(0.11g，0.00085mol)。在氮气氛下再继续搅拌4小时，减压除去溶剂并将此残余物在乙酸乙酯(30mL)和水(25mL)之间分配。将有机相用硫酸镁干燥并减压浓缩得到黄色油状物，其通过急骤柱色谱在硅胶上进行纯化，用二氯甲烷/三乙胺/甲醇(94∶5∶1)作为流动相洗脱得到反-N-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基}苯甲酰胺，为白色固体(0.250g，0.00045mol)。其溶解于回流的乙醇(17mL)并加入预热的马来酸(0.155g，0.00133mol)的乙醇(8mL)溶液。此混合物回流10分钟，冷却至室温并过滤收集沉淀，用乙酸乙酯洗涤并干燥得到反-N-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基}苯甲酰胺二马来酸盐，为白色固体(0.196g，0.000254mol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)9.49(s，1H)，8.25(s，1H)，8.08(d，1H)，7.98(d，2H)，7.62(m，3H)，7.29(m，2H)，6.16(s，4H)，4.71(m，1H)，3.94(s，3H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)，2.05(m，6H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 12.20min。
MS：MH+ 571。
实施例22
N-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基}-N′-苯基磺酰胺二马来酸盐(化合物25)
在0℃，将3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体AP)(0.37g，0.00085mol)和三乙胺(0.086g，0.00085mol)悬浮于无水乙腈(15mL)中，并在5分钟内滴加N-苯基氨磺酰基氯(0.88g，0.0046mol)的无水乙腈(15mL)溶液。此混合物在氮气氛下升温至室温并搅拌2.5小时。减压除去溶剂并将此残余物通过制备RP-HPLC纯化(Rainin，Hypersil C18，8m，100A，25cm；5％-85％乙腈-0.1％醋酸铵，在20分钟内，21ml/min)得到N-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基}-N′-苯基磺酰胺(0.1g，0.00017mol)。其溶解于回流的乙酸乙酯(17mL)并加入预热的马来酸(0.039g，0.00034mol)的乙酸乙酯(8mL)溶液。将此混合物回流10分钟，冷却至室温并过滤收集沉淀，用乙酸乙酯洗涤并干燥得到N-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基}-N′-苯基磺酰胺二马来酸盐，为白色固体(0.089g，0.00011mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)10.12(s，1H)，9.31(s，1H)，8.23(s，1H)，7.50(d，1H)，7.19(m，6H)，6.99(m，1H)，6.15(s，4H)，4.67(m，1H)，3.83(s，3H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)，2.05(m，6H)，1.57(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt11.83 min。
MS：MH+ 592。
实施例23
顺-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-苯基}(苯基)甲酮O-甲基肟二马来酸盐(化合物27)
反式{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-苯基}(苯基)甲酮O-
甲基肟二马来酸盐(化合物26)
(4-溴苯基)(苯基)甲酮O-甲基肟(中间体AQ)
将4-溴二苯酮(3.02g，0.0116mol)和甲氧基胺盐酸盐(4.83g，0.0578mol)的混合物在乙醇(90mL)和吡啶(18mL)的混合物中在氮气氛下加热回流2小时。减压除去溶剂并将此残余物在水(150mL)和二氯甲烷(100mL)之间分配。水相进一步用二氯甲烷萃取两次(各80mL)并将合并的有机萃取物用硫酸镁干燥。减压除去溶剂并将此残余物在硅胶上通过急骤色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(2∶98)作为流动相洗脱得到(4-溴苯基)(苯基)甲酮O-甲基肟，为无色油状物(3.13g，0.0108mol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)7.67(d，1H)，7.59(d，1H)，7.48(m，4H)，7.32(m，1H)，7.26(m，2H)，3.93(s，3H)；
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶9)Rf 0.44
苯基-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]甲酮O-甲基肟(中间体AR)
将(4-溴苯基)(苯基)甲酮O-甲基肟(中间体AQ)(2.41g，0.0083mol)、乙硼烷频哪醇酯(2.53g，0.010mol)、[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]-二氯钯(II)与二氯甲烷(1∶1)的复合物(0.203g，0.00025mol)和醋酸钾(2.44g，0.025mol)的混合物在N，N-二甲基甲酰胺(65mL)中在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。将二氯甲烷(50mL)加入到此残余物中并将所得固体通过硅藻土板滤出。浓缩此滤液得到黄色油状物，其在硅胶上通过急骤色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(2∶98)作为流动相，得到苯基-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]甲酮O-甲基肟(1.9g，0.0056mol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)7.76(d，1H)，7.67(d，1H)，7.41(m，5H)，7.26(d，2H)，3.88(s，3H)1.30(s，12H)；
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶9)Rf 0.27
顺-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-苯基}(苯基)甲酮O-甲基肟二马来酸盐
将苯基-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-甲酮O-甲基肟(中间体AQ)(0.701g，0.0021mol)、顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4胺(中间体AC)(0.80g，0.0018mol)、四(三苯基膦)钯(0.125g，0.00011mol)和碳酸钠(0.48g，0.0045mol)的混合物在乙二醇二甲基醚(40mL)和水(20mL)的混合物中，在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。残余物在饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)和乙酸乙酯(100mL)之间分配，分离有机层并将水层用乙酸乙酯再萃取两次(各自70mL)。合并的有机萃取物用硫酸镁干燥。减压蒸发溶剂得到黄褐色固体，其通过急骤柱色谱在硅胶上进行纯化，用二氯甲烷/三乙胺/甲醇(96∶3∶1)作为流动相洗脱得到顺-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-苯基}(苯基)甲酮O-甲基肟，为白色固体(0.700g，0.00133mol)。
将顺-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-苯基}(苯基)甲酮O-甲基肟(0.201g，0.00039mol)溶解于回流的乙醇(17mL)并加入预热的马来酸(0.178g，0.0015mol)的乙醇(8mL)溶液。将此混合物回流10分钟，冷却至室温并过滤收集沉淀，用乙酸乙酯洗涤并干燥得到顺-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基}(苯基)甲酮O-甲基肟二马来酸盐，为白色固体(0.212g，0.00028mol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)  8.26(s，1H)，7.74(d，1H)，7.66(d，1H)，7.51(m，6H)，7.33(d，1H)，6.14(s，4H)，4.85(m，1H)，3.91(s，3H)3.1(br，9H)，2.71(s，3H)，2.33(m，2H)，2.07(m，2H)，1.74(m，4H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.25min。
MS：MH+ 525。
反-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-苯基}(苯基)甲酮O-甲基肟二马来酸盐
类似方法(c)用于反式异构体，以反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体AD)(0.317g，0.00072mol)开始得到反-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基}(苯基)甲酮O-甲基肟二马来酸盐，为白色固体(0.255g，0.000337mol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.25(s，1H)，7.75(d，1H)，7.66(d，1H)，7.51(m，6H)，7.33(d，1H)，6.17(s，4H)，4.71(m，1H)，3.91(s，3H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)，2.05(br，6H)，1.59(br，2H)RP-HPLC(HypersilC18，5m，100A，25cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.10min。
MS：MH+ 525。
实施例24
反-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲酮肟二马来酸盐(化合物28)
(4-溴苯基)(苯基)甲酮肟(中间体AS)
将4-溴二苯酮(10.0g，0.0383mol)和羟基胺盐酸盐(13.3g，0.192mol)的混合物在乙醇(250mL)和吡啶(50mL)的混合物中在氮气氛下加热回流2小时。减压除去溶剂并将此残余物在水(300mL)和二氯甲烷(300mL)之间分配。水相再用二氯甲烷萃取两次(每次180mL)并将合并的有机萃取物用硫酸镁干燥。减压除去溶剂并将此残余物在硅胶上通过急骤色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶9)作为流动相洗脱得到(4-溴苯基)(苯基)甲酮肟，为白色固体(9.93g，0.036mol)：1HNMR(DMSO-d6，400MHz)7.66(d，1H)，7.57(d，1H)，7.33(m，7H)；
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶5)Rf 0.38；
苯基[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]甲酮肟(中间体AT)
将(4-溴苯基)(苯基)甲酮肟(1.02g，0.0037mol)、乙硼烷频哪醇酯(1.13g，0.0044mol)、[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]-二氯钯(II)与二氯甲烷(1∶1)的复合物(0.09g，0.00011mol)和醋酸钾(1.09g，0.011mol)的混合物在N，N-二甲基甲酰胺(30mL)中在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。将二氯甲烷(50mL)加入到此残余物中并将所得固体通过硅藻土板滤出。浓缩此滤液得到黄色油状物，其在硅胶上通过急骤色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶7)作为流动相，得到苯基[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]甲酮肟(0.82g，0.00254mol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)11.40(s，1H)，7.76(d，1H)，7.66(d，1H)，7.41(m，5H)，7.26(d，2H)，1.32(s，12H)；
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶5)Rf 0.22
反-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基}(苯基)甲酮肟二马来酸盐
将苯基[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]甲酮肟(0.357g，0.0011mol)、反式-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体AD)(0.80g，0.00096mol)、四-(三苯基膦)钯(0.067g，0.00006mol)和碳酸钠(0.26g，0.0024mol)在乙二醇二甲基醚(22mL)和水(11mL)的混合物中在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。残余物在饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)和乙酸乙酯(50mL)之间分配，分离有机层并将水层用乙酸乙酯再萃取两次(各40mL)。将合并的有机萃取物用硫酸镁干燥。减压蒸发溶剂得到黄褐色固体，其通过急骤柱色谱在硅胶上进行纯化，用二氯甲烷/三乙胺/甲醇(93∶6∶1)作为流动相，得到反式-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基}(苯基)甲酮肟，为白色固体(0.211g，0.00041mol)。将其悬浮于回流的氯仿(17mL)中，并加入甲醇(4mL)，此时此混合物变得透明。加入预热的马来酸(0.096g，0.00082mol)的甲醇(8mL)溶液，并将此混合物回流10分钟，冷却至室温并减压除去溶剂。将残余物悬浮于乙酸乙酯并通过过滤收集沉淀，用乙酸乙酯洗涤并干燥得到反-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基}(苯基)甲酮肟二马来酸盐，为白色固体(0.295g，0.0004mol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.26(s，1H)，7.75(d，1H)，7.65(d，1H)，7.51(m，6H)，7.33(d，1H)，6.14(s，4H)，4.72(m，1H)，3.1(b1，9H)，2.68(s，3H)，2.05(m，6H)，1.60(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min) Rt11.82 min。
MS：MH+ 511。
实施例25
反-1-{4-[4-氨基-3-(4-(1-苯基铵基)苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-环己基}-4-甲基六氢吡嗪二鎓三[(Z)-3-羧基-2-丙烯酸盐](化合物29)
与用于化合物20的方法类似，以反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体AD)(0.33g，0.00075mol)开始，得到反-1-{4-[4-氨基-3-(4-(1-苯基铵基)苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-环己基}-4-甲基六氢吡嗪二鎓三[(Z)-3-羧基-2-丙烯酸盐](0.245g，0.00034mol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.43(s，1H)，8.22(s，1H)7.51(d，2H)，7.28(m，2H)，7.20(m，4H)，6.89(t，1H)，6.17(s，6H)，4.67(m，1H)，3.1(br，9H)，2.73(s，3H)，2.08(m，6H)，1.56(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 12.63 min。MH+ 483。
实施例26
顺-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-(2-苯氧基-5-嘧啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(化合物30)
5-溴-2-苯氧基嘧啶(中间体AU)
将5-溴-2-氯嘧啶(5.00g，0.0259mol)、苯酚(3.16g，0.0336mol)、二苯并-18-冠-6(0.47g，0.0013mol)和研磨过的氢氧化钾(3.51g，0.0626mol)在甲苯(75ml)中的混合物加热回流5小时，共沸下除去水。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。残余物在水和氯仿之间分配。分层并将水相用氯仿萃取三次。合并的有机层用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。残余物在硅胶上通过急骤柱色谱纯化，用正庚烷/乙酸乙酯(98∶2)作为洗脱剂，得到5-溴-2-苯氧基-嘧啶，为白色固体(3.55g，0.0141mol)：1H MNR(DMSO-d6，400MHz)8.80(s，2H)，7.45(t，2H)，7.27(t，1H)，7.22(d，2H)；TLC(正己烷/乙酸乙酯＝95∶5) Rf 0.20；
2-苯氧基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)嘧啶(中间体AV)
将5-溴-2-苯氧基-嘧啶(中间体AU)(3.00g，0.0119mol)、乙硼烷频哪醇酯(3.64g，0.0143mol)、[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]-二氯钯(II)与二氯甲烷(1∶1)的复合物(0.29g，0.00036mol)和醋酸钾(3.52g，0.0358mol)的混合物在N，N-二甲基甲酰胺(70mL)中在80℃下在氮气氛下加热过夜。将此混合物冷却至室温并减压除去大部分溶剂。将二氯甲烷(70ml)加入到此残余物中并将所得固体通过硅藻土板滤出。浓缩此滤液得到深色油状物。残余物溶解于二氯甲烷(5mL)并加入到庚烷(75mL)中。将此混合物过滤，并将此沉淀在庚烷(75mL)成浆17小时。过滤并干燥后，并真空干燥，得到2-苯氧基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-嘧啶，为灰色固体(2.95g，0.00989mol)：1H NMR(DMSO-d6 400MHz)8.75(s，2H)，7.45(t，2H)，7.27(t，1H)，7.20(d，2H)，1.31(s，12H)；
顺-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-(2-苯氧基-5-嘧啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体AW)
将顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体AC)(0.297g，0.000674mol)、2-苯氧基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)嘧啶(中间体AV)(0.221g，0.000741mol)、碳酸钠(0.179g，0.001684mol)在1，2-二甲氧基乙烷(10mL)和水(20mL)中的混合物，快速搅拌并加入四(三苯基膦)钯(0)(0.047g，0.000040mol)。将该反应混合物在80℃下搅拌18小时。真空下除去溶剂并将此残余物在乙酸乙酯(50mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)之间分配。进行相分离并将水相用乙酸乙酯(3×25mL)萃取。合并的有机相用硫酸镁干燥，并真空下除去溶剂。产物在硅胶上通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵(95∶5∶0.5)。真空下除去溶剂得到顺-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-(2-苯氧基-5-嘧啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，为白色固体(0.185g，0.000381mol)：1H NMR(DMSO-d6 400MHz)8.79(s，2H)，8.24(s，1H)，7.48(t，2H)，7.28(t，1H)，7.27(d，2H)，4.81(m，1H)，1.55-2.56(m，20H)；TLC(二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵＝90∶10∶0.5)Rf 0.23。
顺-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-(2-苯氧基-5-嘧啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二马来酸盐
将顺-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-(2-苯氧基-5-嘧啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体AW)(0.193g，0.00040mol)在无水乙醇(15mL)中的溶液加热回流。加入加热至78℃的马来酸(0.184g，0.00159mol)的无水乙醇(10mL)溶液并将此混合物加热回流10分钟。让此混合物冷却至室温，并将所形成的白色沉淀通过过滤收集并用无水乙醇(2×10mL)洗涤。将此残余物真空下除去溶剂得到1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-(2-苯氧基-5-嘧啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二马来酸盐，为白色固体(0.254g，0.00035mol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.81(s，2H)，8.26(s，1H)，7.49(t，2H)，7.28(t，1H)，7，26(d，2H)，6.14(s，4H)，4.87(m，1H)，1.60-2.85(m，20H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 11.12 min。MS：MH+ 486
实施例27
反-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-(2-苯氧基-5-嘧啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二马来酸盐(化合物31)
反-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-(2-苯氧基-5-嘧啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体AX)
将反式3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体AD)(0.300g，0.00068mol)、2-苯氧基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)嘧啶(中间体AV)(0.304g，0.00102mol)、碳酸钠(0.180g，0.00170mol)在1，2-二甲氧基乙烷(10mL)和水(20mL)中的混合物，快速搅拌并加入四(三苯基膦)钯(0)(0.047g，0.000040mol)。将该反应混合物在80℃下搅拌18小时。真空下除去溶剂并将此残余物在乙酸乙酯(50mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)之间分配。进行相分离并将水相用乙酸乙酯萃取(3×25mL)。合并的有机相用硫酸镁干燥，并真空下除去溶剂。产物在硅胶上通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵(95∶5∶0.5)。真空下除去溶剂得到反-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-(2-苯氧基-5-嘧啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，为白色固体(0.155g，0.00032mol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.78(s，2H)，8.25(s，1H)，7.48(t，2H)，7.28(t，1H)，7.27(d，2H)，4.65(m，1H)，1.44-2.36(m，20H)；TLC(二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵＝90∶10∶0.5)Rf 0.33。
反-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-(2-苯氧基-5-嘧啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二马来酸盐(化合物31)
将反-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-(2-苯氧基-5-嘧啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体AX)(0.155g，0.00032mol)的无水乙醇(15mL)溶液加热回流。加入加热至78℃的马来酸(0.148g，0.000128mol)的无水乙醇(10mL)溶液，并将此混合物加热回流10分钟。让此混合物冷却至室温，并将所形成的白色沉淀通过过滤收集并用无水乙醇(2×10mL)洗涤。将此残余物真空下除去溶剂得到反-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-(2-苯氧基-5-嘧啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二马来酸盐，为白色固体(0.082g，0.00011mol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.78(s，2H)，8.26(s，1H)，7.48(t，2H)，7.28(t，1H)，7.26(d，2H)，4.70(m，1H)，1.50-3.00(m，20H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 10.83 min。MS：MH+486
实施例28
顺-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-[4-(2-嘧啶基氧基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(化合物32)
2-苯氧基嘧啶(中间体AY)
将5-氯嘧啶(5.00g，0.0437mol)、苯酚(5.38g，57.2mmol)、二苯并-18-冠-6(0.84g，0.0023mol)和研磨过的氢氧化钾(5.92g，0.1055mol)在甲苯(75ml)的混合物加热回流3小时，共沸下除去水。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。残余物在水和氯仿之间分配。分层并将水相用氯仿萃取三次。合并的有机层用硫酸镁干燥，过滤并蒸发得到2-苯氧基嘧啶，为白色粉末(95％纯，4.56g，0.0265mol)：1H NMR(CDCl3 400MHz)8.57(d，2H)，7.43(t，2H)，7.26(t，1H)，7.20(d 2H)；TLC(正庚烷/乙酸乙酯＝1∶1)Rf 0.42
2-(4-碘苯氧基)嘧啶(中间体AZ)
将2-苯氧基嘧啶(中间体AY)(4.03g，0.0234mol)和N-碘代琥珀酰亚胺(10.52g，0.0468mol)在三氟乙酸(40mL)和三氟乙酸酐(8mL)中的混合物加热回流4小时。将此混合物冷却至室温并加入水(75mL)。此混合物用50mL萃取三次。合并的有机层用饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)洗涤两次，用10％硫代硫酸钠水溶液(50mL)和盐水(50mL)洗涤两次。将此有机层用硫酸镁干燥，过滤并真空下除去溶剂。粗品固体在硅胶上通过急骤柱色谱纯化，用正庚烷/乙酸乙酯(3∶1)作为洗脱剂，得到2-(4-碘苯氧基)嘧啶，为淡黄色固体(3.49g，0.0117mol)：1H NMR(CDCl3 400MHz)8.57(d，2H)，7.73(d，2H)，7.07(t，1H)，6.98(d 2H)；TLC(正庚烷/乙酸乙酯＝1∶1)Rf 0.45
2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯氧基]嘧啶(中间体BA)
将2-(4-碘苯氧基)嘧啶(中间体AZ)(3.50g，0.0118mol)、乙硼烷频哪醇酯(3.58g，0.0141mol)、[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷(1∶1)的复合物(0.29g，0.00035mol)和醋酸钾(3.46g，0.00346mol)在N，N-二甲基甲酰胺(70ml)中的混合物，在80℃下在氮气氛下加热过夜。将此混合物冷却至室温并减压除去大部分溶剂。二氯甲烷(70ml)加入到此残余物中并将所得固体通过硅藻土板滤出。浓缩此滤液得到深色油状物，其通过急骤柱色谱在硅胶上进行纯化，用正庚烷/乙酸乙酯(2∶1)作为洗脱剂，得到2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯氧基]嘧啶，为白色固体(2.95g，0.00989mol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.65(d，2H)，7.74(d，2H)，7.29(t，1H)，7.20(d，2H)，1.31(s，12H)；
1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-[4-(2-嘧啶基氧基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体BB)
将1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体N)(1.50g，0.00374mol)、2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯氧基]-嘧啶(中间体BA)(1.23g，0.00412mol)、四(三苯基膦)钯(0)(0.26g，0.00022mol)和碳酸钠(0.993g，0.00937mol)在40mL 1，2-二甲氧基乙烷和20mL水中的混合物，在80℃下加热18小时，之后再加入1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.15g，0.00037mol)。将此混合物再搅拌1小时，然后冷却至室温。过滤此沉淀并用1，2-二甲氧基乙烷洗涤，并真空干燥，得到1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-[4-(2-嘧啶基氧基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，为白色固体(1.26g，0.00283mol)：1H NMR(DMSO-d6400MHz)8.68(d，2H)，8.254(s，1H)，7.73(d，2H)，7.37(d，2H)，7.31(t，1H)，6.30-7.20(bs，2H)，4.78-4.84(m，1H)，3.91(s，4H)，2.22-2.30(m，2H)，1.73-1.92(m，6H)；
4-{4-氨基-3-[4-(2-嘧啶基氧基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基}环己酮(中间体BC)
将1-(1，4-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基)-3-[4-(2-嘧啶基氧基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体BB)(1.22g，0.00274mol)在丙酮中的浆状物冷却至0℃，并滴加5N盐酸(15mL)，保持温度低于5℃。加毕，将此混合物室温下搅拌3小时。将此溶液通过硅藻土过滤并用饱和碳酸氢钠水溶液中和。过滤所形成的沉淀，用水洗涤并真空干燥过夜，得到4-{-4-氨基-3-[4-(2-嘧啶基氧基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基}-环己酮，为白色固体(0.937g，0.00243mol)：1H NMR(DMSO-d6 400MHz)8.68(d，2H)，8.29(s，1H)，7.56(d，2H)，7.37(d，2H)，7.31(t，1H)，6.30-7.20(bs，2H)，5.25-5.30(m，1H)，2.67-2.75(m，2H)，2.24-2.43(m，6H)；
顺-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-[4-(2-嘧啶基氧基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体BD)
将4-{4-氨基-3-[4-(2-嘧啶基氧基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]-嘧啶-1-基}-1-环己酮(中间体BC)(0.925g，0.0024mol)、N-甲基哌嗪(0.721g，0.0072mol)和乙酸(0.432g，0.0072mol)在二氯甲烷(40mL)中的混合物，快速搅拌并以30分钟的间隔分2批加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.661g，0.00312mol)。将该反应混合物室温下搅拌18小时。再加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.300g，0.00142mol)并将此混合物再搅拌4小时。真空下除去溶剂并将此残余物在二氯甲烷(25mL)和饱和碳酸氢钠水溶液之间分配。进行相分离并用二氯甲烷将水相萃取3次(25mL)。合并的有机相用硫酸镁干燥，并真空下除去溶剂。将顺-和反式异构体在硅胶上通过急骤色谱进行分离，用二氯甲烷/三乙胺/甲醇(87∶10∶3)洗脱。从反式1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-[4-(2-嘧啶基氧基)苯基1-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺馏份中真空下除去溶剂(TLC(二氯甲烷/三乙胺/甲醇＝90∶8∶2)Rf0.45)，并将此残余物溶解于二氯甲烷并用1.0M碳酸钠水溶液萃取两次。将有机相用硫酸镁干燥，过滤并真空下除去溶剂得到反-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-[4-(2-嘧啶基氧基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，为白色固体(0.272g，0.00056mol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.68(d，2H)，8.25(s，1H)，7.73(d，2H)，7.39(d，2H)，7.31(t，1H)，6.30-6.20(bs，2H)，4.79-4.84(m，1H)，2.06-2.75(m，12H)，2.24-2.43(m，4H)；
顺-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-[4-(2-嘧啶基氧基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺三马来酸盐
将顺-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-[4-(2-嘧啶基氧基)-苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体BD)(0.193g，0.0004mol)的无水乙醇(15mL)溶液加热回流。加入加热至78℃的马来酸(0.184g，0.00159mol)的无水乙醇(10mL)溶液并将此混合物加热回流10分钟。让此混合物冷却至室温，并将所形成的白色沉淀通过过滤收集并用无水乙醇(2×10mL)洗涤。将此残余物真空下除去溶剂得到顺-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-[4-(2-嘧啶基氧基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺三马来酸盐，为白色固体(0.222g，0.00027mol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.68(d，2H)，8.26(s，1H)，7.72(d，2H)，7.39(d，2H)，7.32(t，1H)，6.17(s，6H)，4.85-4.87(m，1H)，3.85-2.85(br，9H)，2.71(s，3H)，2.23-2.43(bs，2H)，2.03-2.18(bs，2H)，1.71-2.89(bs，4H)RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.56 min。
MS：MH+ 486
反-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-[4-(2-嘧啶基氧基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(中间体BE)
用类似的方法，以反-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-[4-(2-嘧啶基氧基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.06g，0.000124mol)开始，得到反-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-[4-(2-嘧啶基氧基)-苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二马来酸盐(化合物33)，为白色固体(0.06g，0.000084mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.68(d，2H)，8.25(s，1H)，7.71(d，2H)，7.37(d，2H)，7.31(t，1H)，6.18(s，4H)，4.71(m，1H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)2.06(m，6H)1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.45min。
MS：MH+ 486
实施例29
向一系列5ml盖着隔膜的小瓶中，加入3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌啶基甲基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基胺(300mg，0.776mmol)、三乙酰氧基硼氢化钠(247mg，1.16mmol)和适当的醛或酮(0.85mmol)。依次加入二氯乙烷(5mL)和冰醋酸(50μl，0.87mmol)。将小瓶盖上并在轨道式震动器上摇动过夜。该反应混合物的HPLC表明对于一些反应，仍存在一些起始的胺。对这些反应，再加入醛或酮(0.85mmol)、三乙酰氧基硼氢化钠(247mg，1.16mmol)和冰醋酸(50μL)并将所得混合物再次摇动过夜。加入水(2mL)，接着加入过量的固体碳酸氢钠，直到没有气体放出。通过将此混合物通过3MEmpore萃取圆盘柱(Octadecyl C18 SD)，移出水层。粗品用Supelco′s超净(supelclean)硅胶固相柱(10g大小)纯化，用二氯甲烷/甲醇(95∶5)作为洗脱剂，得到适当的产物。
分析LC/MS条件：
柱：Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：在4.5分钟内0％B/A至100％B/A(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，PH 4.5)，3.5mL/min。LCMS数据详述如下：
实施例30
顺-3-{4-[氨基(苯基)甲基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
a)(4-溴苯基)(苯基)甲胺
将甲酸铵(20.1g，0.318mol)置于装备有温度控制器、磁力搅拌器和冷凝器的三颈烧瓶中，并在150℃下加热。立即加入4-溴二苯酮(7.2g，0.0276mol)，将温度升高到165℃并将此混合物搅拌加热回流24小时。将该反应混合物冷却至室温，在乙酸乙酯(350mL)中研磨，用炭处理并通过硅藻土板过滤。浓缩此滤液，悬浮于浓盐酸(120mL)并加热回流8小时。该反应混合物冷却至室温并通过过滤收集沉淀。将其在水(120mL)中研磨，用饱和碳酸氢钠水溶液碱化并用乙酸乙酯(2×250mL)萃取。合并的有机萃取物用硫酸镁干燥并减压浓缩得到(4-溴苯基)(苯基)甲胺(5.25g，0.02mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.46(d，2H)，7.36(m，4H)，7.27(t，2H)，7.18(t，1H)，5.07(s，1H)。RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt15.54min。
b)N-[(4-溴苯基)(苯基)甲基]氨基甲酸叔丁基酯
将二-叔丁基-二碳酸酯(5.63g，0.0258mol)溶解于无水二氯甲烷(150mL)中，冷却至0℃并滴加(4-溴苯基)(苯基)甲胺(5.2g，0.0198mol)的无水二氯甲烷(30mL)溶液。将此混合物升温至室温并在氮气氛下搅拌16小时。有机相用碳酸氢钠水溶液(120mL)洗涤，用硫酸镁干燥并减压浓缩得到黄色油状物，其在硅胶上通过急骤色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(7∶93)作为流动相，得到N-[(4-溴苯基)(苯基)甲基]氨基甲酸叔丁基酯(5.9g，0.0163mol)，为无色油状物。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.01(d，1H)，7.51(d，2H)，7.36(m，7H)，5.81(d，1H)，1.39(s，9H)。TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶9)Rf 0.24
c)N-{苯基-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]甲基}氨基甲酸叔丁基酯
将N-[(4-溴苯基)(苯基)甲基]氨基甲酸叔丁基酯(4.5g，0.0123mol)、乙硼烷频哪醇酯(3.79g，0.0149mol)、[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]-二氯钯(II)的复合物与二氯甲烷(1∶1)(0.305g，0.000373mol)和醋酸钾(3.66g，0.0373mol)在N，N-二甲基甲酰胺(80mL)中的混合物，在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。将二氯甲烷(80mL)加入到此残余物中并将所得固体通过硅藻土板滤出。浓缩此滤液得到黄色油状物，其在硅胶上通过急骤色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶9)作为流动相。将所得馏份浓缩，残余物在正庚烷中研磨并过滤收集沉淀得到N-{苯基-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]甲基}氨基甲酸叔丁基酯(3.0g，0.00733mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.01(d，1H)，7.61(d，2H)，7.33(d，2H)，7.28(m，5H)，5.81(d，1H)，1.39(s，9H)，1.27(s，12H)。TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶5)Rf 0.34；
d)顺-N-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲基]氨基甲酸叔丁基酯
将N-{苯基[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]甲基}氨基甲酸叔丁基酯(3.0g，0.00733mol)、顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.4g，0.0054mol)、四-(三苯基膦)钯(0.381g，0.00033mol)和碳酸钠一水合物(1.69g，0.0136mol)的混合物在乙二醇二甲基醚(80mL)和水(40mL)的混合物中在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。残余物在饱和碳酸氢钠水溶液(200mL)和乙酸乙酯(200mL)之间分配，分离有机层并将水层用乙酸乙酯再萃取两次(各100mL)。合并的有机萃取物用硫酸镁干燥。减压蒸发溶剂得到黄褐色固体，其通过急骤柱色谱在硅胶上进行纯化，用二氯甲烷/三乙胺/甲醇(96∶3∶1)作为流动相洗脱，得到顺-N-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)-甲基]氨基甲酸叔丁基酯(2.24g，0.00375mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，8.01(d，1H)，7.60(d，2H)，7.49(d，2H)，7.35(m，4H)，7.23(t，1H)，5.91(d，4H)，4.78(m，1H)，2.5-2.1(br，9H)，2.17(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，1.42(m，4H)，1.40(s，9H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.45 min。
e)顺-3-{4-[氨基(苯基)甲基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将顺-N-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲基]氨基甲酸叔丁基酯(2.05g，0.00344mol)在无水二氯甲烷(50mL)中研磨，并将该反应混合物冷却至0℃。滴加三氟乙酸(10mL)并将所得溶液升温至室温并在氮气氛下搅拌一个半小时。减压除去溶剂，残余物悬浮于水(50mL)并用饱和碳酸氢钠水溶液碱化。将其用二氯甲烷萃取(3×150mL)，合并的有机萃取物用硫酸镁干燥并减压除去溶剂得到顺-3-{4-[氨基(苯基)甲基]苯基}-1-[4-{4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(1.60g，0.00322mol)，为米白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.57(m，4H)，7.45(d，2H)，7.31(dd，2H)，7.20(t，1H)，5.17(s，1H)，4.78(m，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.68(m，2H)，1.56(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.36 min。
f)顺-N1-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲基]乙酰胺二乙酸盐
将顺-3-{4-[氨基(苯基)甲基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.0001mol)溶解于无水吡啶(1mL)中，加入乙酸酐(0.010g，0.0001mol)，并将所得溶液室温下搅拌20小时。减压除去溶剂并将所得残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分钟内10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)得到顺-N1-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲基]乙酰胺二乙酸盐(0.015g，0.000021mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.84(d，1H)，8.23(s，1H)，7.62(d，2H)，7.46(d，2H)，7.35(m，4H)，7.28(m，1H)，6.21(d，1H)，4.78(m，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.95(s，3H)，1.90(s，6H)，1.68(m，2H)，1.56(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 11.15 min。
MS：MH+ 539。
实施例31
顺-N1-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲基]苯甲酰胺二乙酸盐
将顺-3-{4-[氨基(苯基)甲基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.0001mol)溶解于无水吡啶(1mL)，加入苯甲酰基氯(0.014g，0.0001mol)并将所得溶液室温下搅拌20小时。减压除去溶剂并将所得残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分钟内10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)得到顺-N1-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲基]苯甲酰胺二乙酸盐(0.017g，0.000024mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.32(d，1H)，8.23(s，1H)，7.96(d，2H)，7.62(d，2H)，7.58-7.29(b，10H)，6.51(d，1H)，4.78(m，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.90(s，6H)，1.68(m，2H)，1.56(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 13.53 min。
MS：MH+ 601。
实施例32
顺-N-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲基]甲烷磺酰胺
将顺-3-{4-[氨基(苯基)甲基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.0001mol)溶解于无水吡啶(1mL)，加入甲烷磺酰基氯(0.011g，0.0001mol)并将所得溶液室温下搅拌20小时。减压除去溶剂并将所得残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分钟内10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)得到顺-N-[(4{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲基]甲烷磺酰胺二乙酸盐(0.021g，0.00003mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.39(d，1H)，8.23(s，1H)，7.65(d，2H)，7.57(d，2H)，7.47(d，2H)，7.37(t，2H)，7.27(t，1H)，5.72(d，1H)，4.78(m，1H)，2.70(s，3H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.90(s，6H)，1.68(m，2H)，1.56(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 11.81 min。
MS：MH+ 575。
实施例33
顺-N1-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲基]-1-苯磺酰胺乙酸盐
将顺-3-{4-[氨基(苯基)甲基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.0001mol)溶解于无水吡啶(1mL)，加入苯磺酰基氯(0.018g，0.0001mol)并将所得溶液室温下搅拌20小时。减压除去溶剂并将所得残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分钟内10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)得到顺-N1-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲基]-1-苯磺酰胺乙酸盐(0.045g，0.000065mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.89(d，1H)，8.23(s，1H)，7.65(d，2H)，7.57-7.27(br，12H)，5.66(d，1H)，4.78(m，1H)，2.70(s，3H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.90(s，3H)，1.68(m，2H)，1.56(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 13.78min。
MS：MH+ 637。
实施例34
顺-N1-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲基]-3-羟基丁酰胺乙酸盐
将顺-3-{4-[氨基(苯基)甲基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.0001mol)和β-丁内酯(0.009g，0.0001mol)在二噁烷中加热回流3小时。减压除去溶剂并将所得残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；10-60％乙腈-0.1M醋酸铵在25分钟内，21mL/min)得到顺-N1-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲基]-3-羟基丁酰胺乙酸盐(0.027g，0.000042mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.78(d，1H)，8.23(s，1H)，7.62(d，2H)，7.45(d，2H)，7.35(m，4H)，7.27(t，1H)，6.21(d，1H)，4.78(m，1H)，4.67(d，1H)，4.02(m，1H)，2.5-2.1(br，15H)，2.17(s，3H)，1.90(s，3H)，1.68(m，2H)，1.56(m，2H)，1.07(d，3H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 10.97和11.13 min。
MS：MH+ 583。
实施例35
顺-4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苯甲酰胺
a)4-(4-溴苯氧基)苄腈
将4-溴苯酚(4.56g，0.0264mol)、4-氟苄腈(0.0264mol)、18-冠-6(0.7g，0.00264mol)和40％在氧化铝上的氟化钾(10.8g)在无水乙腈(100mL)的混合物，在氮气氛下加热回流12小时。将其冷却至室温，通过硅藻土板过滤并减压浓缩。残余物在乙醚(120mL)和水(100mL)之间分配，有机相进一步用氯化钾饱和水溶液洗涤，用硫酸镁干燥并浓缩。残余物在硅胶上通过急骤色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(3∶97)作为流动相，得到4-(4-溴苯氧基)苄腈(3.7g，0.0135mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.85(d，2H)，7.64(d，2H)，7.13(dd，4H)，
TLC(乙酸乙酯/庚烷3∶97)Rf 0.21
b)4-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯氧基]苄腈
将4-(4-溴苯氧基)苄腈(4.55g，0.0166mol)、乙硼烷频哪醇酯(5.06g，0.020mol)、[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷(1∶1)的复合物(0.407g，0.000498mol)和醋酸钾(4.88g，0.0498mol)在N，N-二.甲基甲酰胺(90mL)中的混合物，在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。将二氯甲烷(120mL)加入到此残余物中并将所得固体通过硅藻土板滤出。浓缩此滤液得到黄色油状物，其在硅胶上通过急骤色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(5∶95)作为流动相。将合并的馏份减压浓缩，残余物在正庚烷中研磨并过滤收集沉淀得到4-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯氧基]苄腈(2.75g，0.0086mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.85(d，2H)，7.64(d，2H)，7.13(dd，4H)，1.28(s，12H)，
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶5)Rf 0.63
c)顺-4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄腈
将4-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯氧基]苄腈(2.63g，0.00819mol)、顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(3.01g，0.00683mol)、四-(三苯基膦)钯(0.473g，0.00041mol)和碳酸钠一水合物(2.12g，0.0171mol)的混合物在乙二醇二甲基醚(80mL)和水(40mL)的混合物中，在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。残余物在饱和碳酸氢钠水溶液(200mL)和乙酸乙酯(200mL)之间分配，分离有机层并将水层用乙酸乙酯再萃取两次(各100mL)。合并的有机萃取物用硫酸镁干燥。减压蒸发溶剂得到黄褐色固体，其通过急骤柱色谱在硅胶上进行纯化，用二氯甲烷/三乙胺/甲醇(96∶3∶1)作为流动相洗脱得到顺-4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄腈(2.45g，0.00483mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.87(d，2H)，7.71(d，2H)，7.30(d，2H)，7.25(d，2H)，4.78(m，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 13.04 min。
d)顺-4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苯甲酰胺
将顺-4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄腈(0.200g，0.000394mol)溶解于二噁烷(3mL)，加入氢氧化钠(0.15g，0.00197mol)的水(2mL)溶液，接着加入30％过氧化氢水溶液(5滴)。该反应混合物在氮气氛下加热回流1.5小时，冷却至室温并用5％枸橼酸水溶液中和。减压除去溶剂并将此残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分钟内10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)得到顺-4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苯甲酰胺(0.120g，0.000223mol)，为米白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.93(m，3H)，7.68(d，2H)，7.30(s，1H)，7.24(d，2H)，7.15(d，2H)，4.78(m，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，
RP-HPLC(Delta PakC18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 10.87 min。
MS：MH+  527。
实施例36
顺-4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苯甲酸
将顺-4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄腈(0.200g，0.000394mol)溶解于乙酸(15mL)和6N盐酸(15mL)的混合物中，并将此溶液加热回流12小时。将其冷却至室温并减压浓缩并将此残余物用N，N-二甲基甲酰胺重结晶得到顺-4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苯甲酸(0.100g，0.00019mol)，为米白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.97(d，2H)，7.70(d，2H)，7.24(d，2H)，7.15(d，2H)，4.78(m，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 10.95 min。
MS：MH+ 528。
实施例37
顺-N1-[4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]乙酰胺乙酸盐
a)顺-3-{4-[4-(氨基甲基)苯氧基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将顺-4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄腈(0.600g，0.00118mol)溶解于甲醇(50mL)和浓氢氧化铵水溶液(3mL)中，加入50％的阮内镍在水(2mL)中的浆状物，并将所得混合物在一个大气压下氢化18小时。该反应混合物通过硅藻土板过滤，减压浓缩并将此残余物用二氯甲烷(50mL)浸提。将有机相用硫酸镁干燥，减压浓缩并将此残余物悬浮于乙醚(25mL)中。过滤收集此沉淀并干燥得到顺-3-{4-[4-(氨基甲基)苯氧基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.45g，0.0088mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.63(d，2H)，7.39(d，2H)，7.12(d，2H)，7.08(d，2H)，4.78(m，1H)，3.73(s，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.72 min.
b)顺-N1-[4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]乙酰胺乙酸盐
将顺-3-{4-[4-(氨基甲基)苯氧基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.051g，0.0001mol)溶解于无水吡啶(1mL)，加入乙酸酐(0.010g，0.0001mol)并将所得溶液室温下搅拌20小时。减压除去溶剂并将所得残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分钟内10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)得到顺-N1-[4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]乙酰胺乙酸盐(0.046g，0.0000749mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.38(t，1H)，8.23(s，1H)，7.63(d，2H)，7.31(d，2H)，7.12(d，2H)，7.08(d，2H)，4.78(m，1H)，4.25(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.87(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 11.33 min。
MS：MH+  555。
实施例38
顺-N-[4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]甲烷磺酰胺乙酸盐
将顺-3-{4-[4-(氨基甲基)苯氧基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.051g，0.0001 mol)溶解于无水吡啶(1mL)，加入甲烷磺酰基氯(0.011g，0.0001mol)并将所得溶液室温下搅拌20小时。减压除去溶剂并将所得残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分钟内10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)得到顺-N-[4(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]甲烷磺酰胺乙酸盐(0.011g，0.000017mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.64(d，2H)，7.57(t，1H)，7.40(d，2H)，7.13(m，4H)，4.78(m，1H)，4.17(d，2H)，2.89(s，3H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 11.97 min。
MS：MH+  591。
制备顺-3-{4-[3-(氨基甲基)苯氧基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺及其衍生物的方法与制备顺-3-{4-[4-(氨基甲基)苯氧基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺及其衍生物的方法相同，其中使用适当的起始物。
实施例39
顺-3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苯甲酰胺二乙酸盐
a)3-(4-溴苯氧基)苄腈
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.59(m，5H)，7.38(m，1H)，7.06(d，2H)，
TLC(乙酸乙酯/庚烷3∶97)Rf 0.19
b)3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯氧基]苄腈
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.65(m，5H)，7.41(m，1H)，7.06(d，2H)，1.27(s，12H)
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶5)Rf 0.56
c)顺-3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄腈
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.68(d，2H)，7.61(m，3H)，7.47(m，1H)，7.25(d，2H)，4.78(m，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 12.96 min。
d)顺-3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苯甲酰胺二乙酸盐
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，8.02(s，1H)，7.68(m，3H)，7.60(s，1H)，7.50(t，1H)，7.44(s，1H)，7.27(m，1H)，7.15(d，2H)，4.78(m，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s.6H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 10.99min。
MS：MH+ 527。
实施例40
顺-3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苯甲酸
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.75(d，1H)，7.68(d，2H)，7..56(m，2H)，7.39(m，1H)，7.20(d，2H)，4.78(m，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 11.01 min。
MS：MH+  528。
实施例41
顺-N1-[3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]乙酰胺乙酸盐
a)顺-3-{4-[3-(氨基甲基)苯氧基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.63(d，2H)，7.38(m，1H)，7.15(m，4H)，6.96(d，1H)，4.78(m，1H)，3.73(s，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.32 min。
b)顺-N1-[3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]乙酰胺乙酸盐
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.38(t，1H)，8.23(s，1H)，7.65(d，2H)，7.36(t，1H)，7.15(d，2H)，7.07(d，1H)，7.00(m，2H)，4.78(m，1H)，4.25(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.87(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 11.44 min。
MS：MH+  555。
实施例42
顺-N1-[3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]苯甲酰胺
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.07(t，1H)，8.23(s，1H)，7.86(d，2H)，7.63(d，2H)，7.48(m，4H)，7.10(m，5H)，4.78(m，1H)，4.49(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 13.58 min。
MS：MH+ 617。
实施例43
顺-N-[3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]甲烷磺酰胺乙酸盐
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.64(d，2H)，7.58(t，1H)，7.42(t，1H)，7.16(m，3H)，7.12(s，1H)，7.03(d，1H)，4.78(m，1H)，4.17(d，2H)，2.89(s，3H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 12.12 min。
MS：MH+ 591
实施例44
顺-N-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并-[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基}氨基甲酸苄基酯二马来酸盐
将N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-苯基]氨基甲酸苄基酯(2.00g，0.0052mol)、顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(1.92g，0.0044mol)、四(三苯基膦)钯(0.300g，0.00026mol)和碳酸钠(1.35g，0.0109mol)的混合物在乙二醇二甲基醚(70mL)和水(35mL)的混合物中，在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。残余物在饱和碳酸氢钠水溶液(150mL)和乙酸乙酯(180mL)之间分配，分离有机层并将水层用乙酸乙酯再萃取两次(各250mL)。合并的有机萃取物用硫酸镁干燥。减压蒸发溶剂得到黄褐色固体，其通过急骤柱色谱在硅胶上进行纯化，用二氯甲烷/三乙胺/甲醇(96∶3∶1)作为流动相洗脱得到顺-N-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基}氨基甲酸苄基酯，为白色固体(1.88g，0.0023mol)。将顺-N-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸苄基酯(0.206g，0.00036mol)溶解于回流的乙醇(17mL)中并加入预热的马来酸(0.126g，0.00108mol)的乙醇(8mL)溶液。将此混合物回流10分钟，冷却至室温并过滤收集沉淀，用乙酸乙酯洗涤并干燥得到顺-苄基N-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基}-氨基甲酸酯二马来酸盐，为白色固体(0.224g，0.00028mol)：
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.76(s，1H)，8.23(s，1H)，7.89(d，1H)，7.40(m，5H)，7.20(m，2H)，6.15(s，4H)，5.18(s，2H)，4.85(m，1H)，3.87(s，3H)，3.1(br，11H)，2.67(s，3H)，2.05(m，2H)，1.57(m，4H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 13.83 min。
MS：MH+  571。
实施例45
顺-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-N′-苄基脲乙酸盐
将顺-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.082g，0.000188mol)溶解于无水吡啶(1mL)，加入异氰酸苄基酯(0.025g，0.000188mol)并将所得溶液室温下搅拌20小时。减压除去溶剂并将所得残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分钟内10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)得到顺-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-N’-苄基脲乙酸盐(0.009g，0.0000142mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.29(d，1H)，8.18(m，2H)，7.33(m，5H)，7.26(t，1H)，7.19(s，1H)，7.13(d，1H)，4.78(m，1H)，4.33(d，2H)，3.91(s，3H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.90(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 12.35 min。
MS：MH+ 570。
将顺-或反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺还原烷基化的总方法
步骤A：
将顺-或反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(或者只是顺或反式)(1当量)、醛(1当量)、三乙酰氧基硼氢化钠(3.4当量)和乙酸(3.4当量)的混合物在无水1，2-二氯乙烷中搅拌16小时。将此反应混合物减压浓缩，用饱和碳酸氢钠水溶液停止反应，并再次浓缩。将此残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分钟内10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)得到所需的产物。
步骤B：
合成和纯化(方法A)后，将此残余物用二氯甲烷(1mL)浸提，加样到Trikonex柱(7cm)上并用二氯甲烷(5mL)洗脱。切下需要的带(UV-检测)并将此化合物用二氯甲烷∶甲醇∶三乙胺＝90∶5∶5的混合物(10mL)萃取，过滤并将此滤液减压浓缩。残余物悬浮于乙醚(4mL)并过滤收集此沉淀并干燥。
实施例46
顺-3-[4-(苄基氨基)-3-甲氧基苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸盐
步骤A
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.34(m，4H)，7.22(t，1H)，7.06(s，1H)，6.99(d，1H)，6.55(d，1H)，5.90(t，1H)，4.78(m，1H)，4.40(d，2H)，3.88(s，3H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 13.81 min。
MS：MH+ 527。
实施例47
顺-3-(3-甲氧基-4-[4-(三氟甲基)苄基]氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
步骤A
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.69(d，2H)，7.59(d，2H)，7.06(s，1H)，6.99(d，1H)，6.49(d，1H)，6.14(t，1H)，4.78(m，1H)，4.50(d，2H)，3.88(s，3H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 15.50 min。
MS：MH+  595。
实施例48
顺-3-{4-[(1H-4-咪唑基甲基)氨基]-3-甲氧基苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸盐
步骤A
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ11.85(br，1H)，8.19(s，1H)，7.59(s，1H)，7.06(br，3H)，6.77(d，1H)，5.30(br，1H)，4.78(m，1H)，4.24(d，2H)，3.88(s，3H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 8.70 min。
MS：MH+  517。
实施例49
反-3-[4-(苄基氨基)-3-甲氧基苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二马来酸盐
反-3-[4-(苄基氨基)-3-甲氧基苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺按照步骤A进行制备。将反-3-[4-(苄基氨基)-3-甲氧基苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.190g，0.00036mol)溶解于乙醇(20mL)中并将此溶液加热回流。立即加入马来酸(0.126g，0.00108mol)溶液并再继续回流10分钟。将该反应混合物冷却至室温，此沉淀通过过滤收集并干燥。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.34(m，4H)，7.22(t，1H)，7.06(s，1H)，6.99(d，1H)，6.55(d，1H)，6.16(d，4H)，4.68(m，1H)，4.40(d，2H)，3.88(s，3H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)，2.05(m，6H)，1.57(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 13.89min。
MS：MH+ 527。
实施例50
反-3-{4-[(2，6-二甲氧基苄基)氨基]-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
步骤A
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.25(t，1H)，7.09(d，1H)，7.02(s，1H)，6.92(d，1H)，6.69(d，2H)，4.68(m，1H)，4.60(t，1H)，4.31(d，2H)，3.83(m，9H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.87min。
MS：MH+  587。
实施例51
反-3-{4-[(2-氯-6-氟苄基)氨基]-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
步骤A
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.39(m，2H)，7.26(t，1H)，7.10(d，1H)，7.02(s，1H)，6.86(d，1H)，5.21(t，1H)，4.68(m，1H)，4.31(d，2H)，3.83(s，3H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 15.23min。
MS：MH+ 579。
还原烷基化中间体：
顺-和反-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
a)N-(4-溴苯基)氨基甲酸叔丁基酯
将二-叔丁基-二碳酸酯(16.5g，0.0756mol)溶解于无水二氯甲烷(150mL)，冷却至0℃并滴加4-溴苯胺(9.75g，0.0567mol)的无水二氯甲烷(50mL)溶液。将此混合物升温至室温并在氮气氛下搅拌16小时。有机相用碳酸氢钠饱和水溶液洗涤(120mL)，用硫酸镁干燥并减压浓缩得到黄色油状物，其在硅胶上通过急骤色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(3∶97)作为流动相，得到N-[(4-溴苯基)氨基甲酸叔丁基酯(7.1g，0.0257mol)，为无色油状物。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.49(s，1H)，7.42(s，4H)1.47(s，9H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶5)Rf 0.74
b)N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯
将N-[(4-溴苯基)氨基甲酸叔丁基酯(5.95g，0.0219mol)、乙硼烷频哪醇酯(6.67g，0.0263mol)、[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷(1∶1)的复合物(0.536g，0.00066mol)和醋酸钾(6.47g，0.066mol)在N，N-二甲基甲酰胺(120mL)中的混合物，在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。将二氯甲烷(100mL)加入到此残余物中并将所得固体通过硅藻土板滤出。浓缩此滤液得到黄色油状物，其在硅胶上通过急骤色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(7∶93)作为流动相。将所得馏份浓缩，残余物在正庚烷中研磨并过滤收集沉淀得到N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(6.0g，0.0188mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.50(s，1H)，7.55(d，2H)，7.46(d，2H)，1.47(s，9H)，1.27(s，12H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶5)Rf 0.56
c)顺-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)氨基甲酸叔丁基酯
将N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(3.71g，0.0116mol)、顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(4.46g，0.0101mol)、四(三苯基膦)钯(0.700g，0.00061 mol)和碳酸钠一水合物(3.13g，0.0253mol)的混合物在乙二醇二甲基醚(140mL)和水(70mL)的混合物中，在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。残余物在饱和碳酸氢钠水溶液(300mL)和乙酸乙酯(300mL)之间分配，分离有机层并将水层用乙酸乙酯再萃取两次(各150mL)。合并的有机萃取物用硫酸镁干燥。减压蒸发溶剂得到黄褐色固体，其通过急骤柱色谱在硅胶上进行纯化，用二氯甲烷/三乙胺/甲醇(95∶4∶1)作为流动相洗脱得到顺-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)氨基甲酸叔丁基酯(4.1g，0.0081mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.57(s，1H)，8.21(s，1H)，7.63(d，2H)，7.52(d，2H)，4.78(m，1H)，2.5-2.1(br，9H)，2.17(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，1.50(s，9H)，1.42(m，4H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 12.41 min。
顺-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将顺-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)氨基甲酸叔丁基酯(4.0g，0.0079mol)在无水二氯甲烷(75mL)中研磨并将该反应混合物冷却至0℃。滴加三氟乙酸(10mL)并将所得溶液升温至室温，并在氮气氛下搅拌1.5小时。减压除去溶剂，残余物悬浮于水(70mL)并用饱和碳酸氢钠水溶液碱化。将其用二氯甲烷(3×150mL)萃取，合并的有机萃取物用硫酸镁干燥并减压除去溶剂得到顺-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(3.0g，0.00739mol)，为米白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.18(s，1H)，7.30(d，2H)，6.71(d，2H)，5.41(s，2H)，4.78(m，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 8.64 min。
通过类似于顺-3-(4-氨基苯基)-1-[4(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺的路线，制备反-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺。
反-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.30(d，2H)，6.69(d，2H)，5.40(s，2H)，4.60(m，1H)，4.40(d，2H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)，2.05(m，6H)，1.50(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 8.32min。
将顺-或反-3-(4-氨基-苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺还原烷基化的一般方法
步骤C：
将顺-或反-3-(4-氨基-苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(或者是中间体...或者...)(1当量)、醛(1当量)、三乙酰氧基硼氢化钠(3.4当量)和乙酸(3.4当量)的混合物，在无水1，2-二氯乙烷中搅拌16小时。将该反应混合物减压浓缩，用饱和碳酸氢钠水溶液停止反应并再次浓缩。残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分钟内10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)得到所需产物。
步骤D：
合成和纯化(步骤C)后，将残余物用二氯甲烷浸提(1mL)，加样到Trikonex柱(7cm)上并用二氯甲烷(5mL)洗脱。切下所需谱带(UV-检测)并将此化合物用二氯甲烷∶甲醇∶三乙胺＝90∶5∶5(10mL)的混合物萃取，过滤并将此滤液减压浓缩。残余物悬浮于乙醚(4mL)并过滤收集此沉淀并干燥。
实施例52
顺-3-[4-(苄基氨基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
步骤C
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.34(m，6H)，7.26(t，1H)，6.74(d，1H)，6.62(t，1H)，4.78(m，1H)，4.35(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 13.10 min。
MS：MH+ 497。
实施例53
顺-3-{4-[(2-甲基苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环-己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
步骤C
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.37(m，3H)，7.18(m，3H)，6.75(d，2H)，6.43(t，1H)，4.76(m，1H)，4.28(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.35(s，3H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.25 min。
MS：MH+ 511。
实施例54
顺-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-(4-[2-(三氟甲基)苄基]氨基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
步骤C
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.76(d，1H)，7.64(d，2H)，7.48(t，1H)，7.36(d，2H)，6.75(t，1H)，6.69(d，2H)，4.76(m，1H)，4.52(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.95 min。
MS：MH+  565。
实施例55
顺-3-{4-[(2-氯苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
步骤D
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.38(m，6H)，6.74(d，2H)，6.55(t，1H)，4.76(m，1H)，4.39(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.43 min。
MS：MH+ 531。
实施例56
顺-3-{4-[(2-溴苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
步骤D
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.68(d，1H)，7.38(m，4H)，7.20(t，1H)，6.70(m，3H)，4.76(m，1H)，4.39(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.76 min。
MS：MH+ 576。
实施例57
顺-3-{4-[(2-乙氧基苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
步骤D
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.34(d，2H)，7.29(s，1H)，7.20(t，1H)，6.99(d，1H)，6.88(t，1H)，6.72(d，2H)，6.42(t，1H)，4.76(m，1H)，4.30(d，2H)，4.12(q，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)，1.38(t，3H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.71 min。
MS：MH+  541。
实施例58
顺-3-(4-[2-(二氟甲氧基)苄基]氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
步骤D
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.33(m，7H)，6.83(d，2H)，6.62(t，1H)4.76(m，1H)，4.38(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.25min。
MS：MH+ 563。
实施例59
顺-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-(4-[2-(三氟甲氧基)苄基]氨基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
步骤C
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.62(d，1H)，7.38(m，4H)，6.73(d，2H)，6.64(t，1H)，4.76(m，1H)，4.40(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 15.33min。
MS：MH+ 581。
实施例60
顺-2-[2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)甲基]苯氧基-1-乙醇二乙酸盐
步骤C
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.32(m，3H)，7.21(t，1H)，7.00(d，1H)，6.90(t，1H)，6.74(d，2H)，6.42(t，1H)，4.76(m，1H)，4.33(d，2H)，4.07(t，2H)，3.78(t，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 12.08min。
MS：MH+ 557。
实施例61
顺-2-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)甲基]苄腈二乙酸盐
步骤C
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.86(d，1H)，7.69(t，1H)，7.59(d，1H)，7.47(t，1H)，7.37(d，2H)，6.73(m，3H)，4.76(m，1H)，4.53(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt12.72min。
MS：MH+ 522。
实施例62
顺-3-{4-[(2，6-二氟苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
步骤C
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.40(m，3H)，7.17(dd，2H)，6.82(d，2H)，6.38(t，1H)，4.78(m，1H)，4.33(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 13.59 min。
MS：MH+ 533。
实施例63
顺-3-4-[(2-氯-6-氟苄基)氨基]苯基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸盐
步骤C
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.41(m，4H)，7.30(t，1H)，6.84(d，2H)，6.29(t，1H)，4.76(m，1H)，4.38(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.36min。
MS：MH+ 549。
实施例64
顺-3-(4-[2-氟-6-(三氟甲基)苄基]氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
步骤D
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.67(m，3H)，7.39(m，2H)，6.84(d，2H)，6.18(t，1H)，4.76(m，1H)，4.38(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 15.02min。
MS：MH+ 583。
实施例65
顺-3-{4-[(2-氟-6-甲氧基苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
a)2-氟-6-甲氧基苯甲醛
将3-氟茴香醚(3.36g，0.0266mol)的无水四氢呋喃溶液冷却至-78℃，并滴加1.4M正丁基锂的己烷溶液(19mL，0.0266mol)，保持该反应混合物温度低于-75℃。加毕，滴加N，N，N′，N′，N″-五甲基二亚乙基三胺，并在-78℃下在氮气氛下继续搅拌2小时。滴加N，N-二甲基甲酰胺(3.89g，0.0532mol)并将该反应混合物缓慢升温同时搅拌半小时。通过滴加1N盐水停止反应并分层。水相进一步用乙酸乙酯(2×150mL)萃取并将合并的有机萃取物用硫酸镁干燥。有机相减压浓缩并将此残余物在正庚烷中研磨。过滤收集此沉淀并干燥得到2-氟-6甲氧基苯甲醛(2.95g，0.0191mol)，为米白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.31(s，1H)，7.66(dd，1H)，7.06(d，1H)，6.89(dd，1H)，3.92(s，3H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷5∶95)Rf 0.24
b)顺-3-{4-[(2-氟-6-甲氧基苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
步骤C
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.35(m，3H)，6.90(m，4H)，6.08(t，1H)，4.76(m，1H)，4.25(d，2H)，3.87(s，3H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.84min。
MS：MH+ 550。
实施例66
顺-3-4-[(2，6-二氯苄基)氨基]苯基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
步骤D
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.54(d，2H)，7.39(m，3H)，6.84(d，2H)，6.18(t，1H)，4.76(m，1H)，4.44(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 15.20min。
MS：MH+ 566。
实施例67
顺-3-{4-[(2，6-二甲氧基苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
步骤C
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.34(d，2H)，7.26(t，1H)，6.82(d，2H)，6.69(d，2H)，5.75(t，1H)，4.78(m，1H)，4.22(d，2H)，3.82(s，6H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.01min。
MS：MH+ 557。
实施例68
顺-3-{4-[(2-氟-4-甲基苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
a)2-氟-4-甲基苯甲醛
将3-氟甲苯(2.91g，0.0266mol)的无水四氢呋喃溶液冷却至-78℃并加入1.4M正丁基锂的己烷溶液(19mL，0.0266mol)，保持该反应混合物温度低于-75℃。加毕，滴加N，N，N′，N′，N″-五甲基二亚乙基三胺并在-78℃下在氮气氛下继续搅拌2小时。滴加N，N-二甲基甲酰胺(3.89g，0.0532mol)并将该反应混合物缓慢升温，同时搅拌0.5小时。通过滴加1N盐酸停止反应并分层。水相进一步用乙酸乙酯(2×150mL)萃取并将合并的有机萃取物用硫酸镁干燥。有机相减压浓缩并将此残余物在硅胶上通过急骤色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(5∶95)作为流动相，得到2-氟-4-甲基苯甲醛(0.83g，0.006mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.17(s，1H)，7.74(d，1H)，7.23(m，2H)，2.41(s，3H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷5∶95)Rf 0.18
b)顺-3-{4-[(2-氟-4-甲基苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
步骤C
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.33(m，3H)，7.00(m，2H)，6.74(d，2H)，6.52(t，1H)，4.76(m，1H)，4.32(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.34(s，3H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.58min。
MS：MH+ 529。
实施例69
顺-3-{4-[(1H-2-吲哚基甲基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
步骤C
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ11.04(s，1H)，8.18(s，1H)，7.44(d，1H)，7.35(m，3H)，7.01(t，1H)，6.95(t，1H)，6.83(d，2H)，6.48(t，1H)，6.36(s，1H)，4.76(m，1H)，4.46(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 13.75 min。MS：MH+ 536。
实施例70
顺-3-(4-[(1-甲基-1H-2-吲哚基)甲基]氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
步骤C
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.49(d，1H)，7.41(d，1H)，7.33(d，2H)，7.11(t，1H)，7.00(t，1H)，6.87(d，2H)，6.50(t，1H)，6.43(s，1H)，4.76(m，1H)，4.56(d，2H)，3.77(s，3H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.84 min。MS：MH+550。
实施例71
反-3-[4-(苄基氨基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺三马来酸盐
反-3-[4-(苄基氨基)-3-甲氧基苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺按照步骤C制备。将反-3-[4-(苄基氨基)-3-甲氧基苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.215g，0.00043mol)溶解于乙醇(20mL)并将此溶液加热回流。立即加入马来酸(0.151g，0.00129mol)溶液并再继续回流10分钟。该反应混合物冷却至室温，过滤收集此沉淀并干燥。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ 8.18(s，1H)，7.34(m，7H)，6.74(d，2H)，6.16(s， 6H)，4.65(m，1H)，4.33(s，2H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)，2.05(m，6H)，1.57(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 13.09 min。
MS：MH+ 497。
实施例72
反-3-{4-[(2-甲基苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
步骤C
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ 8.18(s，1H)，7.35(d，2H)，7.30(t，1H)，7.17(m，3H)，6.74(d，2H)，6.42(t，1H)，4.60(m，1H)，4.28(d，2H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)，2.14(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.44(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.24 min。
MS：MH+ 511。
实施例73
反-3-{4-[(2，6-二甲氧基苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
步骤C
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.35(d，2H)，7.24(t，1H)，6.81(d，2H)，6.69(d，2H)，5.75(t，1H)，4.60(m，1H)，4.20(d，2H)，3.82(s，6H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.15 min。
MS：MH+ 557。
实施例74
反-3-{4-[(2-氯苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
步骤C
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ 8.18(s，1H)，7.40(m，6H)，6.65(m，3H)，4.60(m，1H)，4.40(d，2H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.53 min。
MS：MH+ 531。
实施例75
反-3-{4-[(2-溴苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸盐
步骤D
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ 8.18(s，1H)，7.64(d，1H)，7.39(m，4H)，7.22(t，1H)，6.65(m，3H)，4.60(m，1H)，4.36(d，2H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，3H)，1.46(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，在20分钟内，1mL/min)Rt 14.79 min。
MS：MH+  576。
3-(4-氨基-苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺还原烷基化的总方法：
步骤E：
将3-(4-氨基-苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(1当量)、醛(1当量)、三乙酰氧基硼氢化钠(3.4当量)和乙酸(3.4当量)的混合物在无水1，2-二氯乙烷中搅拌16小时。该反应混合物减压浓缩，用饱和碳酸氢钠水溶液停止反应并再次浓缩。残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分钟内10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)得到所需产物。
步骤F：
合成和纯化(步骤E)后，将残余物用二氯甲烷浸提(1mL)，加样到Trikonex柱(7cm)上并用二氯甲烷(5mL)洗脱。切下所需谱带(UV-检测)并将此化合物用二氯甲烷∶甲醇∶三乙胺＝90∶5∶5(10mL)的混合物萃取，过滤并将此滤液减压浓缩。残余物悬浮于乙醚(4mL)并过滤收集此沉淀并干燥。
实施例76
3-[4-(苄基氨基)苯基]-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸盐
步骤E
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.33(m，4H)，7.22(t，1H)，7.07(s，1H)，6.98(d，1H)，6.54(d，1H)，5.89(t，1H)，4.60(m，1H)，4.39(d，2H)，3.89(s，3H)，2.98(d，2H)，2.79(d，2H)，2.25(br，5H)，2.15(s，3H)，1.91(m，7H)，1.69(d，2H)，1.46(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 12.88min。
MS：MH+ 527。
实施例77
3-{4-[(2，6-二甲氧基苄基)氨基]苯基}-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸盐
步骤E
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ 8.18(s，1H)，7.24(t，1H)，7.12(d，1H)，7.04(s，1H)，6.93(d，1H)，6.68(d，2H)，4.81(t，1H)，4.60(m，1H)，4.31(d，2H)，3.82(s，9H)，2.98(d，2H)，2.79(d，2H)，2.25(br，5H)，2.15(s，3H)，1.91(m，7H)，1.69(d，2H)，1.46(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 13.71 min。
MS：MH+  587。
实施例78
3-{4-[(2-氯-6-氟苄基)氨基]苯基}-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
步骤F
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.37(m，2H)，7.25(t，1H)，7.11(d，1H)，7.07(s，1H)，6.86(d，1H)，5.21(t，1H)，4.60(m，1H)，4.49(d，2H)，3.83(s，3H)，2.98(d，2H)，2.79(d，2H)，2.25(br，5H)，2.15(s，3H)，1.89(m，4H)，1.69(d，2H)，1.46(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 13.94 min。
MS：MH+  579。
实施例79
顺-3-4-[苄基(甲基)氨基]苯基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
a)N-苄基-N-甲基-N-苯基胺
在0℃下，将60％氢化钠在矿物油中的分散液(2.37g，0.0592mol)加入到N-苯基-N-苄基胺(10.33g，0.0564mol)的无水N，N-二甲基甲酰胺(200mL)溶液中。该反应混合物升温至室温并搅拌45分钟。滴加碘代甲烷(7.99g，0.0564mol)并在室温下在氮气氛下继续搅拌20小时。减压除去溶剂并将此残余物在乙酸乙酯(250mL)和水(200mL)之间分配。将有机相用硫酸镁干燥并减压浓缩。残余物在硅胶上通过急骤色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(2∶98)作为流动相，得到N-苄基-N-甲基-N-苯基胺(4.4g，0.0223mol)，为黄色油状物。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ 7.30(m，2H)，7.20(m，5H)，6.70(d，2H)，6.60(t，1H)，4.55(s，2H)，2.99(s，3H)；
TLC(乙酸乙酯/庚烷5∶95)Rf 0.53
b)N-苄基-N-(4-溴苯基)-N-甲基胺
将N-苄基-N-苯基-N-甲基胺(4.41g，0.0224mol)溶解于无水二氯甲烷(150mL)中，并在30分钟内以10个相等的批量加入2，4，4，6-四溴环己二烯-1-酮(9.16g，0.0224mol)。室温下继续搅拌20小时。有机相依次用0.5N氢氧化钠水溶液(100mL)、1N氢氧化钠水溶液(100mL)、水(120mL)和盐水(120mL)洗涤。将有机相用硫酸镁干燥并减压浓缩。残余物在硅胶上通过急骤色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶99)作为流动相，得到N-苄基-N-(4-溴苯基)-N-甲基胺(3.52g，0.0127mol)，为无色油状物。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.27(m，7H)，6.65(d，2H)，4.55(s，2H)，2.99(s，3H)；
TLC(乙酸乙酯/庚烷5∶95)Rf 0.67
c)N-苄基-N-甲基-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]胺
将N-苄基-N-(4-溴苯基)-N-甲基胺(3.52g，0.0128mol)、乙硼烷频哪醇酯(3.89g，0.0153mol)、[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]-二氯钯(II)与二氯甲烷(1∶1)的复合物(0.312g，0.00038mol)和醋酸钾(3.72g，0.038mol)在N，N-二甲基甲酰胺(75mL)中的混合物，在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。将二氯甲烷(120mL)加入到此残余物中并将所得固体通过硅藻土板滤出。浓缩此滤液得到黄色油状物，其在硅胶上通过急骤色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(2∶98)作为流动相。将所得馏份浓缩，残余物在正庚烷中研磨并过滤收集沉淀得到N-苄基-N-甲基-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]胺(0.75g，0.00232mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ 7.45(d，2H)，7.30(m，5H)，6.68(d，2H)，4.62(s，2H)，3.03(s，3H)，1.27(s，12H)；
TLC(乙酸乙酯/庚烷5∶95)Rf 0.62
d)顺-3-{4-[苄基(甲基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
将N-苄基-N-甲基-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]胺(0.076g，0.000235mol)、顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.080g，0.000181mol)、四-(三苯基膦)钯(0.012g，0.000011mol)和碳酸钠一水合物(0.056g，0.00045mol)的混合物在乙二醇二甲基醚(5mL)和水(3mL)的混合物中，在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；10-60％乙腈0.1M醋酸铵在25分钟内，21mL/min)得到顺-3-{4-[苄基(甲基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐(0.069g，0.00011mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.19(s，1H)，(d，2H)，7.34(m，2H)，7.26(m，3H)，6.89(d，2H)，4.78(m，1H)，4.66(s，2H)，3.09(s，3H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.60 min。
MS：MH+  511。
实施例80
顺-3-{4-[苄基(乙基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
a)N-苄基-N-(4-溴苯基)-N-乙胺
将N-苄基-N-苯基-N-乙胺(2.25g，0.0107mol)溶解于无水二氯甲烷(80mL)中，并在20分钟内以6个相等的批量加入2，4，4，6-四溴环己二烯-1-酮(4.36g，0.0107mol)。室温下继续搅拌20小时；有机相依次用0.5N氢氧化钠水溶液(50mL)、1N氢氧化钠水溶液(50mL)、水(70mL)和盐水(75mL)洗涤。将有机相用硫酸镁干燥并减压浓缩。残余物在硅胶上通过急骤色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶99)作为流动相，得到N-苄基-N-(4-溴苯基)-N-乙胺(2.38g，0.0082mol)，为无色油状物。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ 7.27(m，7H)，6.59(d，2H)，4.51(s，2H)，3.46(q，2H)，1.11(t，3H)；
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶99)Rf 0.23
b)N-苄基-N-乙基-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]胺
将N-苄基-N-(4-溴苯基)-N-乙胺(2.22g，0.00765mol)、乙硼烷频哪醇酯(2.33g，0.00919mol)、[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]-二氯钯(II)与二氯甲烷(1∶1)的复合物(0.188g，0.00023mol)和醋酸钾(2.25g，0.023mol)在N，N-二甲基甲酰胺(50mL)中的混合物，在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。将二氯甲烷(100mL)加入到此残余物中并将所得固体通过硅藻土板滤出。浓缩此滤液得到黄色油状物，其在硅胶上通过急骤色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(3∶97)作为流动相。将所得馏份浓缩，残余物在正庚烷中研磨并过滤收集沉淀得到N-苄基-N-乙基-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]胺(0.24g，0.000712mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.42(d，2H)，7.30(m，2H)，7.20(m，3H)，6.63(d，2H)，4.57(s，2H)，3.48(q，2H)，1.27(s，12H)，1.09(t，3H)；
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶99)Rf 0.14
c)顺-3-{4-[苄基(乙基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
将N-苄基-N-乙基-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]胺(0.065g，0.000193mol)、顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.071g，0.000161mol)、四-(三苯基膦)钯(0.011g，0.00001mol)和碳酸钠一水合物(0.056g，0.00045mol)的混合物在乙二醇二甲基醚(5mL)和水(3mL)的混合物中，在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，5μm，25cm；在25分钟内10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)得到顺-3-{4-[苄基(乙基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐(0.049g，0.000076mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.19(s，1H)，7.42(d，2H)，7.34(m，2H)，7.26(m，3H)，6.83(d，2H)，4.78(m，1H)，4.61(s，2H)，3.55(q，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，1.19(t，3H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 15.47 min。
MS：MH+  525。
实施例81
顺-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-2-苯基乙酰胺二乙酸盐
将顺-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.255g，0.00063mol)和苯基乙酰基氯(0.102g，0.00066mol)溶解于无水二氯甲烷(20mL)并将所得混合物室温氮气氛下搅拌5分钟。滴加N，N-二异丙基乙胺(0.097g，0.00076mol)并继续搅拌16小时。有机相用碳酸氢钠水溶液(25mL)洗涤，减压浓缩并将此残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分钟内10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)得到顺-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-2-苯基乙酰胺二乙酸盐(0.250g，0.000388mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.37(s，1H)，8.20(s，1H)，7.77(d，2H)，7.57(d，2H)，7.33(m，4H)，7.23(t，1H)，4.78(m，1H)，3.68(s，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt  11.86 min。
MS：MH+  525。
实施例82
顺-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-[4-(苯乙基氨基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
将顺-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-2-苯基乙酰胺二乙酸盐(0.200g，0.00031mol)悬浮于无水四氢呋喃(15mL)中，将此悬浮液冷却至0℃并立即加入氢化锂铝(0.177g，0.00416mol)。将所得混合物升温至室温并在氮气氛下搅拌18小时。通过滴加水停止反应，减压除去溶剂并将此残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分钟内10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)得到顺-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-[4-(苯乙基氨基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐(0.039g，0.0000619mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ 8.20(s，1H)，7.37(d，2H)，7.31(m，4H)，7.22(m，1H)，6.75(d，2H)，6.07(t，1H)，4.78(m，1H)，3.32(m，2H)，2.86(t，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.03 min。
MS：MH+  511。
实施例83
顺-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-3-苯基丙酰胺二乙酸盐
将顺-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.250g，0.000616 mol)和3-苯基丙酰氯(0.109g，0.000646mol)溶解于无水二氯甲烷(20mL)中，并将所得混合物室温氮气氛下搅拌5分钟。滴加N，N-二异丙基乙胺(0.095g，0.00074mol)并继续搅拌16小时。有机相用碳酸氢钠水溶液洗涤(25mL)，减压浓缩并将此残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25m；在25分钟内10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)得到顺-N(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基苯基)-3-苯基}丙酰胺二乙酸盐(0.225g，0.00034mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.12(s，1H)，8.20(s，1H)，7.77(d，2H)，7.57(d，2H)，7.29(m，4H)，7.19(t，1H)，4.78(m，1H)，2.94(m，2H)，2.67(m 2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 12.57 min。
MS：MH+  539。
实施例84
顺-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-{4-[(3-苯基丙基)氨基]苯基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
将顺-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-3-苯基丙酰胺二乙酸盐(0.090g，0.000167mol)悬浮于无水四氢呋喃(5mL)，将此悬浮液冷却至0℃并立即加入氢化锂铝(0.01g，0.00025mol)。将所得混合物升温至室温并在氮气氛下搅拌18小时。通过滴加水停止反应，减压除去溶剂并将此残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分钟内10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21 mL/min)得到顺-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-{4-[(3-苯基丙基)氨基]苯基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐(0.037g，0.000057mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.20(s，1H)，7.29(m，7H)，6.70(d，2H)，6.02(t，1H)，4.78(m，1H)，3.08(m，2H)，2.71(m，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(m，8H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.84 min。
MS：MH+  525。
中间体A：3-(苄基氧基)苯基羟基代硼酸
向3-苄基氧代溴苯(0.590g，2.24mmol，1当量)在THF(10mL)中的-78℃混合物中，加入正丁基锂(1.6M在己烷中，2.9mL，4.7mmol，2.1当量)。将该反应混合物搅拌45分钟，然后加入硼酸三异丙基酯(0.77mL，3.4mmol，1.5当量)。将该反应混合物在-78℃下搅拌30分钟，并在2小时内升温至室温。加入盐酸(2.5M，10mL)并将此混合物剧烈搅拌16小时。分离有机层并用两部分乙醚萃取水层(各50mL)。合并的有机萃取物用硫酸镁干燥，过滤，并浓缩得到棕色油状物。残余物用庚烷(100mL)研磨并通过过滤收集沉淀得到3-(苄基氧基)苯基羟基代硼酸，为淡紫色固体(0.111g，0.486mmol)：1H NMR(d6 DMSO，400MHz)：δH 8.00(2H，bs)，7.02-7.46(9H，m)，及5.09(2H，s)。
中间体B：4-(4-氨基-1-环戊基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)苯酚
将3-[4-(苄基氧基)苯基]-1-环戊基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.47g，6.41mmol，1当量)、Pb黑(0.341g，3.20mmol，0.5当量)及甲酸铵(2.02g，32mmol，5当量)在乙醇(50mL)中的混合物在80℃下加热4小时。该反应混合物冷却至室温并将所得固体通过硅藻土板借助于乙醇(300mL)过滤移出。浓缩此滤液得到淡黄色固体，其通过用二氯甲烷洗涤(200mL)纯化，得到4-(4-氨基-1-环戊基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)苯酚，为白色固体(1.89g，6.4mmol)：1HNMR(d6 DMSO，400MHz)：δH8.22(1H，s)，7.45(2H，d，J＝8.5Hz)，6.92(2H，d，J＝8.5Hz)，5.17-5.24(1H，m)，2.01-2.10(4H，m)，1.87-1.90(2H，m)，1.67-1.70(2H，m)。RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，在20分钟内，1mL/min)Rt 13.13 min。MS：MH+  296。
中间体C：N-(3-溴苯基)氨基甲酸叔丁基酯
向二-叔丁基二碳酸酯(9mL，39mmol，1.3当量)在二氯甲烷(75mL)中的0℃混合物中，加入3-溴苯胺(3.3mL，30mmol，1当量)的二氯甲烷(75mL)溶液。该反应混合物缓慢升温至室温并搅拌16小时。粗品反应混合物在饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)和EtOAc(50mL)之间分配。分离有机层，并将水层用乙酸乙酯(100mL)萃取。合并的有机萃取物用硫酸镁干燥，过滤，并浓缩得到红色油状物。通过柱色谱在硅胶上纯化(以1L的3％ EtOAc/庚烷和1L 5％ EtOAc/庚烷洗脱)得到N-(3-溴苯基)氨基甲酸叔丁基酯，为粘稠的黄色固体(9.0g，33mmol)：1H NMR(d6 DMSO，400MHz)：δH 9.54(1H，s)，7.75(1H，s)，7.37-7.39(1H，m)，7.12-7.22(2H，m)，及1.47(9H，s)。
中间体D：N-[3-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯
将N-(3-溴苯基)氨基甲酸叔丁基酯(8.19g，30.1mmol，1当量)、PdCl2(dppf)2(0.675g，0.90mmol，0.03当量)、乙硼烷频哪醇酯(9.17g，36.1mmol，1.2当量)及醋酸钾(8.86g，90.3mmol，3.0当量)在DMF(150mL)中的混合物，在80℃下加热12小时。该反应混合物冷却至室温并减压除去溶剂。残余物溶解于二氯甲烷(100mL)并将固体通过硅藻土板借助于二氯甲烷(100mL)和Et2O(100mL)过滤移出。减压除去溶剂并将此残余物通过硅胶柱色谱纯化(以1L的5％EtOAc/庚烷洗脱)得到N-[3-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯，为白色固体(6.77g，21.2mmol)：
1H NMR(d6 DMSO，400MHz)：δH 9.30(1H，s)，7.85(1H，s)，7.45-7.50(1H，m)，7.25-7.30(2H，m)，1.47(9H，s)，及1.29(12H，s)。
中间体E：顺-N-(3-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)氨基甲酸叔丁基酯
将顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(1.89g，4.28mmol，1当量)、叔丁基N-[3-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸酯(1.64g，5.14mmol，1.2当量)、四(三苯基膦)钯(0.271g，0.257mmol，0.06当量)及碳酸钠一水合物(1.28g，10.3mmol，2.4当量)在水(13mL)和DME(18mL)中的混合物在85℃下加热14小时。让此混合物冷却至室温。加入饱和碳酸氢钠水溶液(15mL)并将此水相用乙酸乙酯(30mL)萃取。有机萃取物用硫酸镁干燥，过滤，并浓缩得到淡黄色固体。通过柱色谱在硅胶上纯化(以2L的95∶4∶1二氯甲烷∶Et 3N∶MeOH洗脱)得到顺-(3-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)氨基甲酸叔丁基酯，为白色固体(1.76g，3.47mmol)：1H NMR(d6 DMS0，400 MHz)：δH 9.55(1H，s)，8.23(1H，s)，7.81(1H，s)，7.40-7.52(2H，m)，7.24(1H，d，J＝7.5Hz)，4.79-4.81(1H，m)，2.05-2.44(11H，m)，2.14(3H，s)，1.54-1.70(6H，m)，1.49(9H，s)；RP HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 12.61min。
中间体F：顺-3-(3-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将顺-N-(3-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)氨基甲酸叔丁基酯(1.7g，3.3mmol，1当量)和二氯甲烷(40mL)的混合物在0℃下冷却，然后加入三氟乙酸(10.5mL，137mmol，41当量)。在3小时内将该反应混合物升温至室温，减压除去溶剂，并将此残余物在二氯甲烷(50mL)和水(50mL)之间分配。分离有机层并用饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)处理。有机萃取物用硫酸镁干燥，过滤，并浓缩得到顺-3-(3-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，为白色固体(1.34g，3.30mmol)：1H NMR(d6 DMSO，400MHz)：δH 8.21(1H，s)，7.17-7.21(1H，m)，6.85(1H，s)，6.72-6.74(1H，m)，6.65-6.68(1H，m)，5.36(2H，bs)，4.75-4.80(1H，m)，2.22-2.51(11H，m)，2.20(3H，s)，2.06-2.08(2H，m)，1.58-1.68(4H，m)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.06 min。MS：MH+ 407。
中间体G：2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯氧基]苄腈
将[2-(4-溴苯氧基)苯基](次甲基)铵(4.00g，14.6mmol，1当量)、PdCl2(dppf)2(0.320g，0.44mmol，0.03当量)、乙硼烷频哪醇酯(4.45g，17.5mmol，1.2当量)及醋酸钾(4.30g，43.8mmol，3.0当量)在DMF(70mL)中的混合物，在80℃下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂得到黑色泥状沉淀。所得固体通过硅藻土板借助于二氯甲烷(200mL)和EtOAc(200mL)过滤移出。浓缩此滤液得到暗棕色油状物，其通过柱色谱在硅胶上纯化(用500ml的5％MeOH/二氯甲烷洗脱)得到2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯氧基]苄腈，为淡黄色油状物(2.04g，6.35mmol)：1HNMR(d6 DMSO，400MHz)：H7.92-7.94(1H，m)，7.69-7.92(3H，m)，7.33-7.37(1H，m)，7.08-7.12(3H，m)，及1.30(12H，s)。
实施例85
1-环戊基-3-[4-(3-甲氧基苯氧基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将4-(4-氨基-1-环戊基-1 H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)苯酚(0.195g，0.660mmol，1当量)、3-甲氧基羟基代硼酸(0.240g，1.58mmol，2.4当量)、醋酸酮(II)(0.180g，0.990mmol，1.5当量)和4分子筛在吡啶(0.27mL)中的混合物加热回流5小时。将此混合物冷却至室温并将所得固体通过硅藻土板借助于二氯甲烷(20mL)和MeOH(20mL)滤出。浓缩此滤液得到油状绿色固体，其通过柱色谱在硅胶上纯化(用1L的二氯甲烷、600ml的20％MeOH/二氯甲烷和600ml的40％ MeOH/二氯甲烷洗脱)得到1-环戊基-3-[4-(3-甲氧基苯氧基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，为黄棕色固体(0.072g，0.179mmol)：1H NMR(d6 DMSO，400MHz)：δH 8.23(1H，s)，7.67(2H，d，J＝8.6Hz)，7.34(1H，t，J＝8.2Hz)，7.16(2H，d，J＝8.6Hz)，6.78(1H，d，J＝8.3Hz)，6.65-6.70(2H，m)，5.21-5.25(1H，m)，3.76(3H，s)，2.02-2.11(4H，m)，1.87-1.91(2H，m)，1.67-1.71(2H，m)；RP-HPLC(Hypercil C18，5μm，100，15cm；在15分钟内5％-100％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)。Rt 13.35 min。MS：MH+ 402。
实施例86
3-[4-(苄基氧基)苯基]-1-环戊基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
向1-环戊基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(5.41g，17.1mmol，1当量)和4-(苄基氧基)苯基羟基代硼酸(4.87g，21.4mmol，1.2当量)的DME(100mL)混合物中，加入四(三苯基膦)钯(1.19g，1.03mmol，0.06当量)和碳酸钠一水合物(5.09g，41mmol，2.4当量)的水(54mL)溶液。将此混合物在85℃下加热2小时。再加入四(三苯基膦)钯(1.19g，1.03mmol，0.06当量)并将该反应混合物在85℃下加热3小时。将此混合物冷却至室温并过滤收集白色结晶固体(3.868g)。为了回收更多的产物，将此滤液真空浓缩并将此残余物在水(50mL)和EtOAc(50mL)之间分配。水层用3部分乙酸乙酯萃取(各150mL)并将合并的有机萃取物用3部分水(各100mL)和盐水(100mL)洗涤，用硫酸镁干燥，过滤，并浓缩得到黄色固体(0.916g)。合并这两批固体并用热EtOAc重结晶，得到3-[4-(苄基氧基)苯基]-1-环戊基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，为白色固体(3.41g，8.8mmol)：1HNMR(d6 DMSO，400MHz)：δH 8.22(1H，s)，7.19-7.62(7H，m)，7.18(2H，d，J＝6.9Hz)，5.18-5.23(1H，m)，5.22(2H，s)，2.00-2.10(4H，m)，1.87-1.89(2H，m)，1.66-1.70(2H，m)。RP-HPLC(Hypercil C18，5μm，100，15cm；在15分钟内5％-100％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)。Rt 13.05 min。
实施例87
1-环戊基-3-[4-(4-氟苯氧基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将4-(4-氨基-1-环戊基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)苯酚(0.151g，0.511mmol，1当量)、4-(氟苯基)羟基代硼酸(0.357g，2.55mmol，5.0当量)、醋酸酮(II)(0.139g，0.766mmol，1.5当量)，及4分子筛在吡啶(0.21mL)和二氯乙烷(5mL)中的混合物，加热回流48小时。将此混合物冷却至室温并将所得固体通过硅藻土板借助于MeOH(20mL)过滤移出。浓缩此滤液得到棕色油状物，其通过柱色谱在硅胶上纯化(用300ml的二氯甲烷、400ml的10％ MeOH/二氯甲烷和400ml的20％ MeOH/CH2Cl2洗脱)得到红色油状物，其进一步通过制备RP-HPLC纯化(Rainin C18，8μm，300，25cm；50％-100％乙腈-0.1M醋酸铵，在20分钟内，21mL/min)。真空下除去溶剂得到1-环戊基-3-[4-(4-氟苯氧基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，为白色固体(0.010g，0.025mmol)：1H NMR(d6CDCl3，400MHz)δH8.37(1H，s)，7.65(2H，d，J＝8.6Hz)，7.03-7.26(6H，m)，5.59(2H，bs)，5.27-5.35(1H，m)，2.09-2.21(4H，m)，1.95-2.02(2H，m)，1.68-1.79(2H，m)；RP-HPLC(Hypercil C18，5μm，100，15cm；在15分钟内5％-100％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.63 min。MS：MH+  390。
实施例88
1-环戊基-3-4-[3-(三氟甲基)苯氧基]苯基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将4-(4-氨基-1-环戊基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)苯酚(0.170g，0.576mmol，1当量)、3-(三氟甲基苯基)羟基代硼酸(0.328g，1.73mmol，3.0当量)、醋酸酮(II)(0.108g，0.594mmol，1.0当量)及4分子筛在吡啶(0.23mL)和二氯乙烷(5.8mL)中的混合物，加热回流6小时。加入醋酸酮(II)(0.050g，0.5当量)并将该反应混合物加热回流16小时。再加入分子筛和3-(三氟甲基苯基)羟基代硼酸(0.250g，2.3当量)并将该反应混合物加热回流54小时。该反应混合物冷却至室温并将所得固体通过硅藻土板借助于MeOH(20mL)滤出。浓缩此滤液得到棕色固体，其通过硅胶柱色谱纯化(用400ml的庚烷、400ml的10％ EtOAc/庚烷、400ml的20％ EtOAc/庚烷和400ml的50％ EtOAc/庚烷洗脱)得到黄色固体。通过制备RP-LC/MS进一步纯化(Gilson-Micromass C18，5μm，130，21cm，在9分钟内0％-100％乙腈-0.1M醋酸铵，25mL/min)，真空下除去乙腈，并将此含水混合物冻干得到1-环戊基-3-4-[3-(三氟甲基)苯氧基]苯基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，为淡棕色固体(0.017g，0.039mmol)：1HNMR(d6 DMSO，400MHz)：δH 8.29(1H，s)，7.68-7.74(3H，m)，7.6(1H，d，J＝8.1Hz)，7.52-7.54(2H，m)，7.24(2H，d，J＝8.7Hz)，7.7(2H，bs)，5.20-5.28(1H，m)，2.03-2.11(4H，m)，1.90-1.91(2H，m)，1.68-1.70(2H，m)；RP-HPLC(Hypercil C18，5μm，100，15cm；在15分钟内5％-100％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt15.72min。MS：MH+  440。
实施例89
1-环戊基-3-[4-(3-硝基苯氧基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将4-(4-氨基-1-环戊基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)苯酚(0.202g，0.684mmol，1当量)、3-硝基苯基羟基代硼酸(0.571g，3.42mmol，5.0当量)、醋酸酮(II)(0.186g，1.02mmol，1.5当量)及4分子筛在吡啶(0.28mL)和二氯乙烷(6.8mL)中的混合物，加热回流24小时。该反应混合物冷却至室温。将二氯甲烷(25mL)加入到此残余物中并将所得固体通过硅藻土板借助于MeOH(20mL)滤出。浓缩此滤液得到棕色液体，其通过柱色谱在硅胶上纯化(用400ml的庚烷、400ml的10％ EtOAc/庚烷、400ml的20％ EtOAc/庚烷和800ml的MeOH洗脱)得到红色油状物，其进一步通过制备RP-LC/MS纯化(Gilson-Micromass C18，5μm，130，21cm，在9分钟内0％-100％乙腈-0.1M醋酸铵，25mL/min)。真空下除去乙腈并将此含水混合物冻干得到1-环戊基-3-[4-(3-硝基苯氧基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，为淡黄色固体(0.034g，0.081mmol)：1H NMR(d6 DMSO，400MHz)：δH8.22(1H，s)，7.28-7.74(6H，m)，7.18(2H，d，J＝8.6Hz)，7.7(2H，bs)，5.13-5.26(1H，m)，2.02-2.10(4H，m)，1.89-1.91(2H，m)，1.68-1.70(2H，m)；RP-HPLC(Hypercil C18，5μm，100，15cm；在15分钟内5％-100％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt19.98 min。MS：MH+ 417。
实施例90
1-环戊基-3-4-[4-(三氟甲氧基)苯氧基]苯基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将4-(4-氨基-1-环戊基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)苯酚(0.100g，0.339mmol，1当量)、4-三氟甲氧基苯基羟基代硼酸(0.349g，1.69mmol，5.0当量)、醋酸酮(II)(0.092g，0.51mmol，1.5当量)及4A分子筛在吡啶(0.12mL)和二氯乙烷(3.4mL)中的混合物，加热回流72小时。将该反应混合物冷却至室温。加入二氯甲烷(25mL)并将所得固体通过硅藻土板滤出。减压除去溶剂得到棕色油状物其通过制备RP-HPLC纯化(Rainin C18，8μm，300，25cm；在20分钟内10％-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)。真空下除去乙腈并将此含水混合物冻干得到1-环戊基-3-4-[4-(三氟甲氧基)苯氧基]苯基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，为白色固体(0.020g，0.044mmol)：1HNMR(d6 CDCl3，400MHz)：δH 8.53(1H，s)，7.69(2H，d，J＝8.6Hz)，7.07-7.26(6H，m)，5.55(2H，bs)，5.28-5.36(1H，m)，2.16-2.21(4H，m)，1.94-2.04(2H，m)，1.72-1.79(2H，m)；RP-HPLC(Hypercil C18，5μm，100，15cm；在15分钟内5％-100％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 16.33 min。MS：MH+ 456。
实施例91
1-环戊基-3-4-[4-(三氟甲基)苯氧基]苯基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
用合成1-环戊基-3-4-[4-(三氟甲氧基)苯氧基]苯基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺时所详述的方法，制备了1-环戊基-3-4-[4-(三氟甲基)苯氧基]苯基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，为白色固体(0.008g，0.018mmol)：1H NMR(d6 CDCl3，400MHz)：δH8.34(1H，s)，7.60-7.73(4H，m)，7.05-7.32(4H，m)，5.89(2H，bs)，5.27-5.34(1H，m)，2.17-2.21(4H，m)，2.00-2.03(2H，m)，1.72-1.79(2H，m)；RP-HPLC(Hypercil C18，5μm，100，15cm；在15分钟内5％-100％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 15.77min。MS：MH+ 440。
实施例92
3-[3-(苄基氧基)苯基]-1-环戊基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
向1-环戊基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.200g，0.631mmol，1当量)和3-(苄基氧基)苯基羟基代硼酸(0.110g，0.487mmol，1.0当量)在DME(6mL)中的混合物中，加入四(三苯基膦)钯(0.044g，0.038mmol，0.07当量)和碳酸钠一水合物(0.187g，1.51mmol，2.4当量)的水(2mL)溶液。将此混合物在85℃下加热16小时，然后冷却至室温。减压除去溶剂并将此残余物在EtOAc(50mL)和水(50mL)之间分配。将此有机层用硫酸镁干燥，过滤，并浓缩得到油状橘红色固体。用热乙酸乙酯重结晶得到橘红色固体，其通过制备RP-HPLC纯化(Rainin C18，8μm，300，25cm；在20分钟内10％-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)。真空下除去乙腈并将此含水混合物冻干得到3-[3-(苄基氧基)苯基]-1-环戊基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，为白色固体(0.023g，0.060mmol)：1H NMR(d6 CDCl3，400MHz)：δH8.34(1H，s)，7.27-7.46(8H，m)，7.07-7.10(1H，m)，5.63(2H，bs)，5.31(1H，五重峰，J＝7.6Hz)，5.16(2H，s)，2.15-2.20(4H，m)，1.96-2.01(2H，m)，1.72-1.75(2H，m)；RP-HPLC(Hypercil C18，5μm，100，15cm；在15分钟内5％-100％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt14.00min。MS：MH+386。
实施例93-99
合成[被取代的(甲基氨基)]苯基吡唑并嘧啶的总方法如下：
向顺-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺的二氯乙烷的0.10M溶液中，加入1.5当量的被取代的苯甲醛、3.8当量的冰醋酸和3.5当量的三乙酰氧基硼氢化钠。此混合物室温下搅拌16小时。再加入3.3当量的三乙酰氧基硼氢化钠(如果需要)。将该反应混合物搅拌1.5小时，然后用二氯乙烷(5mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(5mL)稀释。分离有机层并将此水层用二氯甲烷(10mL)萃取。合并的有机萃取物用硫酸镁干燥，过滤，并浓缩。残余物通过制备RP-HPLC纯化(Rainin C18，8μm，300，25cm；在20分钟内10％-60％乙腈0.1M醋酸铵，21mL/min)。真空下除去乙腈并将此含水混合物冻干得到所需产物。
通过上述方式合成的化合物包括：
         名称                      HPLC rt   M+
                                  (分钟)实施例93 顺-3-{4-[(3-氟苄基)氨基]苯   13.25    515.3基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺三乙酸盐实施例94 顺-3-{4-[(2-氟苄基)氨基]苯   13.24    515.3基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺三乙酸盐实施例95 顺-3-{4-[(4-甲氧基苄基)氨    13.08    527.3基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐实施例96 顺-3-{4-[(3-甲氧基苄基)氨    13.12    527.3基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺三乙酸盐实施例97 顺-3-{4-[(4-氟苄基)氨基]苯   13.35    515.3基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺三乙酸盐实施例98 顺-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环  10.19    498.5己基]3-4-[(3-吡啶基甲基)氨基]苯基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺实施例99 顺-3-{4-[(2-甲氧基苄基)氨    13.57    527.4基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
RP-HPLC(Delta Pak C18，5mm，300，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)
实施例100
顺-3-[3-(苄基氨基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺三乙酸盐
向顺-3-(3-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.104g，0.256mmol，1当量)的二氯乙烷(2mL)溶液中，加入苯甲醛(0.03mL，0.282mmol，1.1当量)、冰醋酸(0.06mL，1.0mmol，3.9当量)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.212g，1.0mmol，3.9当量)。此混合物室温下搅拌16小时。加入饱和碳酸氢钠水溶液(5mL)，分离有机层，并将此水层用两部分二氯甲烷萃取(各15mL)。合并的有机萃取物用硫酸镁干燥，过滤，并浓缩得到黄色油状物，其通过制备RP-HPLC纯化(两次)(Rainin C18，8μm，300，25cm；在20分钟内10％-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)。真空下除去乙腈并将此含水混合物冻干得到顺-3-[3(苄基氨基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺三乙酸盐，为白色固体(0.023g，0.046mmol)：1H NMR(d6 DMSO，400MHz)：δH 8.21(1H，s)，7.40(4H，m)，7.20-7.25(2H，m)，6.88(1H，s)，6.78(1H，d，J＝7.7Hz)，6.67-6.69(1H，m)，6.56-6.58(1H，m)，4.75-4.79(1H，m)，4.32(2H，d，J＝5.8Hz)，2.21-2.49(11H，m)，2.14(3H，s)，2.05-2.14(2H，m)，1.89(9H，s)，1.54-1.68(4H，m)；RP-HPLC(Hypercil C18，5μm，100，15cm；在15分钟内5％-100％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 13.04min。
MS：MH+ 497。
实施例101
顺-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄腈
将顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.29g，5.19mmol，1当量)、2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯氧基]苄腈(2.0g，6.2mmol，1.2当量)、四(三苯基膦)钯(0.329g，0.311mmol，0.06当量)、DME(21mL)及碳酸钠一水合物(1.54g，12.5mmol，2.4当量)在水(16mL)中的混合物，在85℃下加热60小时。再加入四(三苯基膦)钯(0.100g，0.02当量)并将该反应混合物在85℃下加热6.5小时。该反应混合物冷却至室温并在饱和碳酸氢钠水溶液(25mL)和EtOAc(25mL)之间分配。有机萃取物用硫酸镁干燥，过滤，并浓缩。残余物用乙醚研磨，并通过柱色谱在硅胶上纯化(用1L的5％甲醇/二氯甲烷、1L的10％甲醇/二氯甲烷、1L的20％甲醇/二氯甲烷和1L的25％甲醇/二氯甲烷洗脱)得到顺-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄腈，为淡黄色固体(1.79g，3.52mmol)：1H NMR(d6 DMSO，400MHz)：δH 8.24(1H，s)，7.94(1H，d，J＝7.7Hz)，7.68-7.73(3H，m)，7.31-7.34(3H，m)，7.18(1H，d，J＝8.5Hz)，4.78-4.83(1H，m)，2.21-2.51(11H，m)，2.19(3H，s)，2.05-2.08(2H，m)，1.56-1.71(4H，m)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt13.16min。MS：MH+ 509。
实施例102
顺-2-(3-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苯甲酰胺三乙酸盐
将顺-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄腈(0.111g，0.218mmol，1当量)、25％氢氧化钠水溶液(1mL)及30％H2O2(1mL)在二噁烷(1mL)中的混合物，在100℃下加热16小时。再加入部分30％H2O2(1mL)并将该反应混合物在100℃下加热2小时。该反应混合物冷却至室温并用二氯甲烷(15mL)稀释。分离有机层并减压除去溶剂得到淡黄色固体，其通过制备RP-HPLC纯化(Rainin C18，8μm，300，25cm；在20分钟内10％-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)。真空下除去乙腈并将此含水混合物冻干得到顺-2-(3-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苯甲酰胺三乙酸盐，为米白色固体(0.020g，0.038mmol)：1H NMR(d6 DMSO，400MHz)：δH8.23(1H，s)，7.75(1H，d，J＝7.7Hz)，7.64(3H，d，J＝6.7Hz)，7.56(1H，s)，7.48(1H，t，J＝7.5Hz)，7.27(1H，t，J＝7.4Hz)，7.19(2H，d，J＝8.6Hz)，7.06(1H，d，J＝7.7Hz)，4.76-4.82(1H，m)，2.20-2.50(11H，m)，2.14(3H，s)，2.04-2.08(2H，m)，1.89(9H，s)，1.58-1.70(4H，m)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 10.79min。MS：MH+ 527。
实施例103
顺-3-4-[2-(氨基甲基)苯氧基]苯基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将顺-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄腈(0.097g，0.19mmol，1当量)和氢化锂铝(0.036g，0.95mmol，5当量)在THF(2mL)中的混合物在66℃下加热2小时。将该反应混合物冷却至室温并在冰水(30mL)和二氯甲烷(50mL)之间分配。有机萃取物用硫酸镁干燥，过滤，并浓缩得到黄色固体，其通过制备RP-HPLC纯化(Rainin C18，8μm，300，25cm；在20分钟内10％-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)。真空下除去乙腈并将此含水混合物冻干得到顺-3-4-[2-(氨基甲基)苯氧基]苯基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，为白色固体(0.078g，0.152mmol)：1H NMR(d6 DMSO，400MHz)：δH8.22(1H，s)，7.57-7.64(3H，m)，7.21-7.29(2H，m)，7.04(2H，d，J＝8.7Hz)，7.01(1H，d，J＝7.9Hz)，4.76-4.81(1H，m)，3.74(2H，s)，2.20-2.51(11H，m)，2.14(3H，s)，2.05-2.08(2H，m)，1.57-1.70(4H，m)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.85min。
MS：MH+ 513。
实施例104
顺-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-4-[2-(2H-1，2，3，4-四唑-5-基)苯氧基]苯基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
将顺-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄腈(0.070g，0.14mmol，1当量)和叠氮基三丁基锡(0.8mL，2.4mmol，17当量)的混合物，在85℃下加热80小时。将该反应混合物冷却至室温并用EtOAc(15mL)稀释。过滤收集所得沉淀得到米色固体，其通过制备RP-HPLC纯化(RaininC18，8μm，300，25cm；在20分钟内10％-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)。真空下除去乙腈并将此水层用饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)处理以除去残余的乙酸。此含水混合物用二氯甲烷(25mL)萃取，并将有机萃取物用硫酸镁干燥，过滤，并浓缩得到顺-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-4-[2-(2H-1，2，3，4-四唑-5-基)苯氧基]苯基1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐，为白色固体(0.009g，0.016mmol)：1H NMR(d6 DMSO，400MHz)：δH 8.20(1H，s)，7.94(1H，d，J＝7.7Hz)，7.54(2H，d，J＝8.7Hz)，7.32-7.37(1H，m)，7.24-7.28(1H，m)，7.11(1H，d，J＝9.1Hz)，6.99(2H，d，J＝8.7Hz)，4.73-4.80(1H，m)，2.23-2.34(11H，m)，2.14(3H，s)，2.05-2.07(2H，m)，1.68(6H，s)，1.56-1.65(4H，m)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 10.86min。MS：MH+ 552。
实施例105
顺-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-[4-(2-硝基苯氧基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
将4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯酚(0.200g，0.491mmol，1当量)和60％氢化钠(0.020g，0.49mmol，1当量)在二噁烷(4.9mL)中的混合物，室温下搅拌20分钟。加入2-氟硝基苯(0.06mL，0.6mmol，1.1当量)并将该反应混合物在100℃下加热3小时。再加入氢化钠(0.010g，0.24mmol，0.5当量)和2-氟硝基苯(0.02mL，0.2mmol，0.4当量)并将该反应混合物在100℃下加热3小时。该反应混合物冷却至室温并将所得固体过滤移出，其中借助二氯甲烷(10mL)和EtOAc(10mL)。浓缩此滤液得到黄色半固体，其通过制备RP-HPLC纯化(Rainin C18，8μm，300，25cm；在20分钟内10％-60％乙腈0.1M醋酸铵，21mL/min)。真空下除去乙腈并将此含水混合物冻干得到顺-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-[4-(2-硝基苯氧基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐，为白色固体(0.023g，0.043mmol)：1H NMR(d6 DMSO，400MHz)：δH 8.23(1H，s)，8.10(1H，d，J＝8.2Hz)，7.68-7.73(3H，m)，(1H，m)，7.33-7.40(1H，m)，7.31(1H，d，J＝7.3Hz)，7.24(2H，d，J＝8.7Hz)，4.76-4.82(1H，m)，2.26-2.51(11H，m)，2.24(3H，s)，2.17-2.21(2H，m)，2.05(6H，s)，1.56-1.71(4H，m)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 13.09min。
实施例106
顺-3-[4-(2-氨基苯氧基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将顺-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-[4-(2-硝基苯氧基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.059g，0.091mmol，1当量)、冰醋酸(0.03mL，0.5mmol，5当量)及10％ Pd-C(0.024g，0.4wt/wt当量)在乙醇(1mL)中的混合物，室温下在氢气的正压下搅拌16小时。将固体过滤移出，其中借助二氯甲烷(10mL)，并将此滤液浓缩得到黄色油状物。残余物通过制备RP-HPLC纯化(Rainin C18，8μm，300，25cm；在20分钟内10％-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)。真空下除去乙腈并将此含水混合物冻干得到顺-3-[4-(2-氨基苯氧基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，为米白色固体(0.018g，0.036mmol)：1H NMR(d6 DMSO，400MHz)：δH 8.22(1H，s)，7.59(2H，d，J＝8.6Hz)，7.05(2H，d，J＝8.7Hz)，6.85-6.98(3H，m)，6.58-6.61(1H，m)，4.93(2H，bs)，4.78-4.80(1H，m)，2.20-2.50(11H，m)，2.14(3H，s)，2.05-2.09(2H，m)，1.55-1.70(4H，m)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 12.00min。MS：MH+ 499。
实施例107
[2-(4-氨基-1-环戊基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)-5-苯氧基苯基]甲醇
a)(2-溴-5-苯氧基苯基)甲醇
向3-苯氧基苯基甲醇(4.0g，0.020mol)的无水乙腈溶液中，室温下加入1-溴-2，5-吡咯烷二酮(3.73g，0.021mol)。将此混合物室温下搅拌1.5小时在氮气氛下。减压除去溶剂。将四氯甲烷(100mL)加入到此残余物中，并将此混合物过滤。将此滤液浓缩为残余物，并将此残余物在硅胶上通过急骤色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶5)作为流动相洗脱得到(2-溴-5-苯氧基苯基)甲醇(4.7g，0.017mol)：RP-HPLC(Hypersil C18，5μm，250×4.6mm；在10分钟内含0.1M乙酸胺的25％-100％，1mL/min)Rt 11.7min。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶5)Rf 0.18
b)5-苯氧基-1，3-二氢-2，1-苯并氧杂硼杂环戊二烯-1-醇
在-78℃下在氮气氛下，将正丁基锂的正己烷溶液(2.24M，8.6mL，0.019mol)缓慢加入到(2-溴-5-苯氧基苯基)甲醇(2.21g，0.0079mol)的无水四氢呋喃(50mL)溶液中。在-78℃下将该反应搅拌30分钟，然后在-25℃下搅拌20分钟。将该反应冷却至-50℃并缓慢加入硼酸三异丙基酯(4.075g，0.0216mol)。该反应升温至室温并搅拌1小时。加入1N盐酸(20mL)使pH达到5，然后将该反应室温下搅拌1小时。该反应混合物用乙醚(3×40mL)萃取。合并的有机萃取物用水(60mL)和盐水(60mL)洗涤，并用硫酸钠干燥。减压蒸发溶剂得到残余物，并将此残余物在硅胶上通过急骤柱色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶5)，接着用乙酸乙酯/正庚烷(1∶4)作为流动相，得到5-苯氧基-1，3-二氢-2，1-苯并氧杂硼杂环戊二烯-1-醇(1.3g，0.0058mol)。
RP-HPLC(Hypersil C18，5μm，250×4.6mm；在10分钟内含0.1M乙酸胺的25％-100％，1mL/min)Rt 10.8min。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶2)Rf 0.24
c)[2-(4-氨基-1-环戊基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)-5苯氧基苯基]甲醇
将1-环戊基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.36g，0.0011mol)，5-苯氧基-1，3-二氢-2，1-苯并氧杂硼杂环戊二烯-1-醇(0.30g，0.0013mol)、四(三苯基膦)钯(0.077g，0.000067mol)和碳酸钠一水合物(0.34g，0.0028mol)在乙二醇二甲基醚(7mL)和水(5mL)中的混合物，在80℃下在氮气氛下加热17小时。让此混合物冷却至室温，并减压除去溶剂。残余物在乙酸乙酯(20mL)和饱和碳酸钠水溶液(20mL)之间分配。水层进一步用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。减压下除去有机溶剂。将乙酸乙酯(15mL)加入到残余物中并形成白色沉淀。将此固体过滤并用丙酮(2×15mL)和二氯甲烷(1×15mL)洗涤得到[2-(4-氨基-1-环戊基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)-5-苯氧基苯基]甲醇(0.267g，0.00067mol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.46(m，2H)，7.38(m，1H)，7.28(m，1H)，7.13(m，3H)，7.00(m，1H)；5.28(m，1H)，5.17(m，1H)，4.48(d，2H)，2.08(br，2H)，1.98(br，2H)，1.86(br，2H)，1.68(br，2H)。
RP-HPLC(Hypersil C18，5μm，250×4.6mm；在10分钟内含0.1M乙酸胺的25％-100％，1mL/min)Rt 10.5min。
MS：MH+ 402
实施例108
顺-1-(氨基甲基)-4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环己醇马来酸盐
a)顺-1-(1-氧杂螺[2.5]辛烷-6-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将氧化锍三甲基碘(0.33g，0.0015mol)和氢化钠(60％在油中，0.055g，0.00138mol)在甲基亚砜(4mL)中的混合物，室温氮气氛下搅拌30分钟。将该反应混合物冷却至10℃并加入存在于甲基亚砜(2mL)中的4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环己酮(0.5g，0.00125mol)。该反应混合物室温氮气氛下搅拌2小时。此混合物在饱和氯化铵水溶液(20mL)和二氯甲烷之间分配，并将水层用二氯甲烷(3×20mL)萃取。合并的有机萃取物用水和盐水洗涤并用硫酸钠干燥。减压除去溶剂得到顺-1-(1-氧杂螺[2.5]辛烷-6-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.527g，0.00125mmol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.25(s，1H)，7.68(d，2H)，7.42(m，2H)，7.19(m，5H)，4.90(br，1H)，2.70(s，2H)，2.17(br，4H)，1.97(br，2H)，1.32(br，2H)。
RP-HPLC(Hypersil C18，5μm，250×4.6mm；在23分钟内含0.1M乙酸胺的25％-100％，1mL/min)Rt 11.7min。
MS：MH+ 413
b)顺-1-(氨基甲基)-4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环己醇马来酸盐
将在氨(2M在甲醇中，15mL)的顺-1-(1-氧杂螺[2.5]辛烷-6-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.62g，0.0015mol)和20％N，N-二甲基甲酰胺的异丙醇(15mL)溶液在65℃下在压力容器中加热18小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。残余物在硅胶上通过急骤色谱纯化，用氢氧化铵/甲醇/二氯甲烷(2∶5∶93)，接着用氢氧化铵/甲醇/二氯甲烷(2∶8∶90)作为流动相，得到顺-1-(氨基甲基)-4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环己醇(0.11g，0.00026mol)。在40℃下将此化合物溶解于乙酸乙酯(10mL)并加入预热的马来酸(0.060g，0.000512mol)的乙酸乙酯(2mL)溶液。将此混合物在40℃下加热10分钟，冷却至室温并过滤收集沉淀，用乙酸乙酯洗涤并干燥得到顺-1-(氨基甲基)-4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环己醇马来酸盐(0.140g，0.00026mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.24(s，1H)，7.73(br，3H)，7.64(d，2H)，7.42(m，2H)，7.13(m，5H)，6.01(s，2H)，4.94(s，1H)，4.70(br，1H)，2.79(s，2H)，2.36(br，2H)，1.76(br，4H)，1.58(br，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 8.9min。
MS：MH+ 431
实施例109
顺-1-(2-氨基乙基)-4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环己醇马来酸盐
a)顺-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羟基环己基}甲腈
向顺-1-(1-氧杂螺[2.5]辛烷-6-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(4.4g，0.011mol)和高氯酸锂(1.7g，0.016mol)的混合物中，加入在乙腈(600ml)中的氰化钾(1.04g，0.016mol)。将该反应混合物回流6小时。减压除去溶剂。将此混合物用水(200mL)稀释并用乙醚(2×300mL)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤并用硫酸镁干燥。减压除去溶剂得到顺-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羟基环己基}甲腈(4.30g，0.0098mol)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 10.4min。
MS：MH+ 441
b)顺-1-(2-氨基乙基)-4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环己醇马来酸盐
向在甲醇(100ml)和氢氧化铵(5mL)的顺-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羟基环己基}甲腈(3.4g，0.0077mol)中，加入阮内镍(50％在水中的浆状物，3mL)。将此混合物在氢气氛下(1atm)搅拌18小时。将该反应混合物通过硅藻土过滤并真空下除去溶剂得到粗品顺-1-(2-氨基乙基)-4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环己醇(1.82g，0.0041mol)。将0.8g的粗品顺-1-(2-氨基乙基)-4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环己醇在硅胶上通过急骤色谱纯化，用氢氧化铵/甲醇/二氯甲烷(2∶3∶95)，接着用氢氧化铵/甲醇/二氯甲烷(2∶12∶86)作为流动相，得到顺-1-(2-氨基乙基)-4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环己醇(0.423g，0.00095mol)。在40℃下将此化合物溶解于乙酸乙酯(40mL)中，并加入预热的马来酸(0.13g，0.0014mol)的乙酸乙酯(5mL)溶液。此混合物在40℃下加热10分钟，冷却至室温并过滤收集沉淀，用乙酸乙酯洗涤并干燥得到顺-1-(2-氨基乙基)-4-[4-氨基-3-(4苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环己醇马来酸盐(0.186g，0.00033mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.67(m，2H)，7.60(br，3H)，7.42(m，2H)，7.16(m，5H)，6.01(s，2H)，4.73(br，1H)，4.53(s，1H)，2.92(br，2H)，2.38(br，2H)，1.72(br，6H)，1.54(br，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.1min。
MS：MH+ 455
c)顺-2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1羟基环己基}乙酰胺
向顺-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羟基环己基)甲腈(0.972g，0.0022mol)和碳酸钾(1.28g，0.00093)的甲基亚砜(20mL)混合物中，在20℃下缓慢加入30％过氧化氢水溶液(3mL)。将该反应混合物室温下搅拌18小时。该反应烧瓶置于冰浴中，并将冰水(20mL)缓慢倒入到此反应中。将此混合物用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。合并的有机层用水和盐水洗涤并用硫酸镁干燥。真空下除去溶剂。残余物用二氯甲烷(8mL)研磨，并将此固体过滤得到顺式-2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羟基环己基}乙酰胺(0.542g，0.0012mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.24(s，1H)，7.67(m，2H)，7.42(m，3H)，7.16(m，5H)，7.06(s，1H)，4.95(br，1H)，4.65(m，1H)，2.39(m，2H)，2.24(s，2H)，1.70(br，6H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.6min。
MS：MH+ 459
实施例110
1-(3-氮杂环丁烷基(azetanyl))-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
a)3-羟基-1-氮杂环丁烷(azetane)甲酸叔丁基酯
向1-二苯甲基-3-氮杂环丁醇(azetanol)(7.5g，0.031mol)和二碳酸二叔丁基酯(10.3g，0.047mol)的混合物中，加入在乙酸乙酯(200mL)中的20％氢氧化钯-碳(1.0g)。此混合物在Parr-氢化仪中室温下在氢气氛下摇动20小时。此混合物通过硅藻土过滤，并将此滤液减压浓缩。残余物在硅胶上通过急骤色谱纯化，用二氯甲烷、接着用甲醇/二氯甲烷(5∶95)作为流动相，得到3-羟基-1-氮杂环丁烷甲酸叔丁基酯(5.015g，0.029mol)。
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ4.59(m，1H)，4.14(m，2H)，3.80(m，2H)，2.55(br，1H)，1.50(s，9H)
TLC(甲醇/二氯甲烷＝2∶98)Rf 0.13
b)3-[(甲基磺酰基)氧基]-1-氮杂环丁烷甲酸叔丁基酯
向3-羟基-1-氮杂环丁烷甲酸叔丁基酯(4.0g，0.023mol)的无水吡啶(50mL)溶液中，在-20℃氮气氛下，加入甲烷磺酰基氯(5.3g，0.046mol)。在-20℃至-30℃下，将此黄色不均匀的混合物搅拌1小时，然后在0℃至-5℃下搅拌2小时。将此混合物倒入到冰水(50mL)中。水相用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合并的有机萃取物用水(1×50mL)、5％枸橼酸水溶液(4×50mL)、水(1×50mL)、饱和碳酸氢钠(1×50mL)和盐水(1×50mL)洗涤，并用硫酸钠干燥。减压除去溶剂得到3-[(甲基磺酰基)氧基]-1-氮杂环丁烷甲酸叔丁基酯，为褐色油状物(4.85g，0.019mol)。
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ5.19(m，1H)，4.25(m，2H)，4.07(m，2H)，3.04(s，3H)，1.42(s，9H)
TLC(甲醇/二氯甲烷＝2∶98)Rf 0.28
c)3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷甲酸叔丁基酯
向3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(1.0g，0.0033mol)和碳酸铯(2.14g，0.0066mol)在无水N，N-一甲基甲酰胺(30mL)中的混合物中，室温氮气氛下加入存在于无水N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的3-[(甲基磺酰基)氧基]-1-氮杂环丁烷甲酸叔丁基酯(1.66g，0.0066mol)。此混合物在75℃下搅拌22小时。将此混合物倒入到冰水(50mL)中。水相用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。合并的有机萃取物用水(1×70mL)和盐水(1×70mL)洗涤，并用硫酸钠干燥。减压除去溶剂。残余物在硅胶上通过急骤色谱纯化，用二氯甲烷接着用甲醇/二氯甲烷(5∶95)作为流动相，得到3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷甲酸叔丁基酯(0.81g，0.0018mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.25(s，1H)，7.69(d，2H)，7.44(m，2H)，7.19(m，5H)，5.70(br，1H)，4.35(br，4H)，1.39(s，9H)
RP-HPLC(Hypersil C18，5μm，250×4.6mm；在10分钟内含0.1M乙酸胺的25％-100％，1mL/min)Rt 12min。
MS：MH+ 459
1-(3-氮杂环丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
向3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷甲酸叔丁基酯(0.81g，0.0018mol)的二氯甲烷(5mL)溶液中，在0℃氮气氛下缓慢加入20％三氟乙酸的二氯甲烷(10mL)溶液。将此混合物升温至室温并搅拌18小时。减压除去溶剂。在0℃下将5N氢氧化钠水溶液加入到残余物中，使pH为11。水相用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。合并的有机萃取物用水(1×60mL)和盐水(1×60mL)洗涤，并用硫酸钠干燥。减压除去溶剂得到1-(3-氮杂环丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.44g，0.0012mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.28(s，1H)，7.70(d，2H)，7.45(m，2H)，7.18(m，5H)，5.70(m，1H)，4.20(m，2H)，4.05(m，2H)
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 8.8min。
MS：MH+ 359
总方法：
将1-(3-氮杂环丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4胺烷基化
向1-(3-氮杂环丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.00014mol，1当量)和碳酸钾(0.058g，0.00042mol，3当量)在无水乙腈的混合物中，室温下加入相应的烷基溴(0.00014mol，1当量)。将此混合物搅拌18小时。减压除去溶剂。残余物溶解于二氯甲烷(3mL)并用水(2mL)洗涤。减压除去溶剂。残余物通过RP-HPLC纯化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分钟内含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到相应的烷基氮杂环丁烷。
实施例111
a)烷基溴：2-溴-1-乙醇
2-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-1-乙醇
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.24(s，1H)，7.69(d，2H)，7.44(m，2H)，7.14(m，5H)，5.41(m，1H)，4.69(br，1H)，3.83(m，2H)，3.63(m，2H)，3.42(m，2H)，2.62(m，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.0min。
MS：MH+ 403
实施例112
b)烷基溴：2-溴乙基甲基醚
1-[1-(2-甲氧基乙基)-3-氮杂环丁烷基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸盐
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.09(br，1H)，8.27(s，1H)，7.67(d，2H)，7.42(m，2H)，7.15(m，5H)，5.69(m，1H)，4.13(m，2H)，3.94(m，2H)，3.51(m，2H)，3.36(s，3H)，2.95(m，2H)，2.08(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.6min。
MS：MH+ 417
实施例113
c)烷基溴：1-溴-2-(2-甲氧基乙氧基)乙烷
1-{1-[2-(2-甲氧基乙氧基)乙基]-3-氮杂环丁烷基}-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.24(s，1H)，7.69(d，2H)，7.44(m，2H)，7.14(m，5H)，5.41(m，1H)，3.79(m，2H)，3.62(m，2H)，3.44(br，6H)，3.23(s，3H)，2.69(br，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.6min。
MS：MH+ 461
实施例114
1-[1-(1-甲基-4-哌啶基)-3-氮杂环丁烷基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将1-(3-氮杂环丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.06g，0.00017mol)、1-甲基-4-哌啶酮(0.057g，0.0005mol)，及乙酸(0.03g，0.0005mol)在二氯乙烷(2.5mL)中的混合物，室温氮气氛下搅拌一个半小时。将三乙酰氧基硼氢化钠(0.072g，0.00034mol)加入到此混合物中，并在室温氮气氛下搅拌2小时。减压除去溶剂，并将此残余物在硅胶上通过急骤色谱纯化，用氢氧化铵/甲醇/二氯甲烷(2∶15∶83)作为流动相，得到1-[1-(1-甲基-4-哌啶基)-3-氮杂环丁烷基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.029g，0.000064mol)。
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.38(s，1H)，7.68(d，2H)，7.42(m，2H)，7.18(m，3H)，7.08(d，2H)，5.64(m，1H)，5.57(br，2H)，3.93(m，2H)，3.73(m，2H)，2.83(br，2H)，2.40(br，3H)，2.00(br，1H)，1.78(br，4H)，1.46(br，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵在10分钟内，1mL/min)Rt 8.9min。
MS：MH+ 456
实施例115
1-{1-[(1-甲基-1H-2-咪唑基)甲基]-3-氮杂环丁烷基}-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将1-(3-氮杂环丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.06g，0.00017mol)、1-甲基-1H-2-咪唑甲酸(0.056g，0.0005mol)及乙酸(0.03g，0.0005mol)在二氯乙烷(2.5mL)中的混合物，室温氮气氛下搅拌一个半小时。将三乙酰氧基硼氢化钠(0.072g，0.00034mol)加入到此混合物中，并在室温氮气氛下搅拌2小时。减压除去溶剂，并将此残余物通过RP-HPLC纯化(Hypersilprep HSC18，8μm，250×21.1mm；在25分钟内含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到1-{1-[(1-甲基-1H-2-咪唑基)甲基]-3-氮杂环丁烷基}-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.020g，0.000044mol)。
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.35(s，1H)，7.67(d，2H)，7.42(m，2H)，7.20(d，3H)，7.18(d，2H)，6.93(s，1H)，6.85(s，1H)，5.59(m，3H)，3.93(m，6H)，3.85(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.5min。
MS：MH+ 453
实施例116
1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-1-乙酮
向1-(3-氮杂环丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.020g，0.000056mol)和碳酸钾(0.016g，0.00012mol)在无水N，N，-二甲基甲酰胺(1mL)中的混合物中，室温下加入乙酸酐(0.009g，0.000084mol)。将该反应混合物搅拌1小时。减压除去溶剂。残余物通过RP-HPLC纯化(Hypersilprep HS C18，5μm，100×20mm；在7.5分钟内含0.05M乙酸铵的20％-85％，251mL/min)得到1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-1-乙酮(0.014g，0.000035mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.27(s，1H)，7.71(d，2H)，7.44(m，2H)，7.17(m，5H)，5.72(m，1H)，4.66(m，1H)，4.58(m，1H)，4.35(m，1H)，4.29(m，1H)，1.84(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.9min。
MS：MH+ 401
实施例117 顺-3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环丁醇
a)3-亚丙基环丁基甲烷磺酸酯
将3-亚丙基-1-环丁醇(0.344g，0.00307mol)的吡啶(5mL)溶液冷却至0℃。滴加甲烷磺酰基氯(0.422g，0.00369mol)，保持温度低于2℃。将此混合物搅拌2小时，然后倒入到冰水(15mL)中，并用乙醚(2×10mL)萃取。合并的有机层用水洗涤(3×10mL)。将此有机层用硫酸镁干燥并真空下除去溶剂得到3-亚丙基环丁基甲烷磺酸酯(0.492g，0.00221mol)，为黄色油状物。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ5.25-5.29(m，1H)，4.98-5.04(m，1H)，3.17(s，3H)，2.98-3.16(m，2H)，2.78-2.96(m，2H)，1.86-1.91(m，2H)，0.91(t，3H)。
b)3-(4-苯氧基苯基)-1-(3-亚丙基环丁基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.743g，0.00245mol)的N，N-二甲基甲酰胺(20mL)溶液与3-亚丙基环丁基甲烷磺酸酯(0.699g，0.00367mol)和碳酸铯(0.866g，0.00367mol)在70℃下反应3天。将该反应混合物倒入水(30mL)中并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。合并的有机层用水(2×20mL)和盐水(20mL)洗涤。有机层用硫酸镁干燥并真空下除去溶剂。残余物在硅胶上通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(98∶2)。真空下除去溶剂得到3-(4-苯氧基苯基)-1-(3-亚丙基环丁基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.655g，0.00165mol)，为黄褐色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.25(s，1H)，7.69(d，2H)，7.44(t，2H)，7.10-7.19(m，5H)，5.35-5.40(m，1H)，5.38-5.33(m，1H)，3.09-3.38(m，4H)1.90-1.97(m，2H)，0.96(t，3H)；
MS：MH+ 398；
TLC(二氯甲烷/甲醇95∶5)Rf 0.52。
c)3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环丁酮
将3-(4-苯氧基苯基)-1-(3-亚丙基环丁基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.156g，0.00039mol)的二氯甲烷(25mL)溶液冷却至-78℃并通入臭氧直到该溶液变蓝。将该反应混合物搅拌5分钟并通氮气直到蓝色消失。加入二甲硫(0.12mL，0.097g，0.00157mol)并将此混合物温度回到室温下。真空下除去溶剂得到3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环丁酮(0.144g，0.00038mol)，为黄褐色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.29(s，1H)，7.69(d，2H)，7.44(t，2H)，7.11-7.22(m，5H)，5.61-5.66(m，1H)，3.65-3.74(m，4H)；
MS：MH+ 372；
TLC(二氯甲烷/甲醇＝90∶10)Rf 0.62。
顺-3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环丁醇
将3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环丁酮(0.208g，0.00056mol)在四氢呋喃(10mL)和无水乙醇(5mL)中的溶液与硼氢化钠(0.021g，0.00056mol)室温下反应4小时。加入水(5mL)并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。合并的有机相用硫酸镁干燥，并真空下除去溶剂。残余物在硅胶上通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(98∶2)。真空下除去溶剂得到顺-3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环丁醇(0.090g，0.00024mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.68(d，2H)，7.44(t，2H)，7.11-7.22(m，5H)，5.31(d，1H)，4.82-4.89(m，1H)，4.04-4.10(m，1H)，2.70-2.73(m，2H)，2.50-2.60(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.50min.；
MS：MH+ 374
实施例118
反式3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环丁醇
a)反式3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]环丁基4-硝基苯甲酸酯
将顺-3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环丁醇(0.113g，0.000302mol)、4-硝基苯甲酸(0.101g，0.000605mol)和三苯基膦(0.159g，0.000605mol)的四氢呋喃(5mL)溶液冷却至0℃。滴加偶氮二甲酸二乙酯(0.096mL，0.159g，0.000605mol)，保持温度低于10℃。在18小时内让此混合物温度回到室温下。真空下除去溶剂并将此残余物在硅胶上通过急骤柱色谱纯化，用庚烷/乙酸乙酯(3∶1)。真空下除去溶剂得到反式3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]环丁基4-硝基苯甲酸酯(0.081g，0.000164mmol)，为黄褐色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.39(d，2H)，8.29(d，2H)，8.26(s，1H)，7.72(d，2H)，7.44(t，2H)7.12-7.22(m，5H)，5.60-5.69(m，1H)，3.03-3.12(m，2H)，2.85-2.94(m，2H)。
反式3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环丁醇
将反式3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]环丁基4-硝基苯甲酸酯(0.081g，0.000164mol)的甲醇(5mL)溶液与氢氧化钾(0.091g，0.00164mol)加热回流1小时。真空下除去溶剂并将此残余物在水(10mL)和乙酸乙酯(5mL)之间分配。分层并将水层用乙酸乙酯(2×5mL)萃取。合并的有机相用1N氢氧化钠水溶液(5mL)和盐水(5mL)洗涤。将此有机层用硫酸镁干燥，并真空下除去溶剂。残余物悬浮于水并冻干得到反式3-[4氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环丁醇(0.055g，0.000147mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.68(d，2H)，7.44(t，2H)，7.11-7.22(m，5H)，5.43-5.52(m，1H)，4.53-4.65(m，1H)，2.75-2.80(m，2H)，2.39-2.44(m，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt14.77min。
MS：MH+374
实施例119
1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]环丁基}-4-甲基六氢吡嗪二鎓二马来酸盐
将3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环丁酮(0.300g，0.00081mol)、N-甲基哌嗪(0.243g，0.00242mol)和乙酸(0.146g，0.00242mol)在1，2-二氯乙烷(20ml)中的混合物，在40℃下搅拌20分钟，并在1小时内分三批加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.223g，0.00105mol)。将此混合物在40℃下搅拌18小时。减压除去溶剂并将此残余物在饱和碳酸氢钠水溶液(30ml)和氯仿(15ml)之间分配。分离有机层并将水层再用萃取氯仿3次(每次15ml)。合并的有机萃取物用硫酸镁干燥并减压除去溶剂得到黄色油状物，其在硅胶上通过急骤色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(97∶3)作为流动相。真空下除去溶剂并将此残余物(0.120g，0.000263mol)溶解于无水乙醇(10mL)。加入马来酸(0.122g，0.001053mol)的无水乙醇(5mL)溶液并将此混合物回流搅拌15分钟。将此溶液冷却至室温并过滤此沉淀，用无水乙醇(3×5mL)洗涤。真空下除去溶剂得到1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]环丁基}-4-甲基六氢吡嗪二鎓二马来酸盐(0.181g，0.000397mmol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6 400MHz)δ8.25(s，1H)，7.67(d，2H)，7.44(t，2H)，7.10-7.20(m，5H)，6.14(s，4H)，5.05-5.16(m，1H)，2.77(s，1H)，2.48-3.00(m，5H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 13.35min。
MS：MH+ 456。
实施例120
反式1-{3-[(苄基氧基)甲基]环丁基}-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
a)顺-3-[(苄基氧基)甲基]环丁基甲烷磺酸酯
将顺-3-((苄基氧基)甲基)-1-环丁醇(2.50g，0.0130mol)的吡啶(50mL)溶液冷却至0℃。滴加甲烷磺酰基氯(1.21mL，1.79g，0.0126mol)，保持温度低于2℃。将此混合物搅拌4小时，然后倒入到冰水(100mL)并用乙醚(2×50mL)萃取。合并的有机层用水(3×50mL)和盐水(50mL)洗涤。将此有机层用硫酸镁干燥并真空下除去溶剂得到顺3-[(苄基氧基)甲基]环丁基甲烷磺酸酯(2.73g，0.0101mol)，为黄色油状物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.29-7.38(m，5H)，4.88-4.94(m，1H)，4.52(s，2H)，3.45(d，2H)，2.99(s，3H)，2.50-2.56(m，2H)，2.12-2.19(m，3H)。
b)反式1-{3-[(苄基氧基)甲基]环丁基}-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.452g，0.00149mol)的N，N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液与顺3-[(苄基氧基)甲基]环丁基甲烷磺酸酯(0.483g，0.00179mol)和碳酸铯(0.582g，0.00179mol)在70℃下反应2天。将该反应混合物倒入水中(30mL)并用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。合并的有机层用水(2×20mL)和盐水(20mL)洗涤。有机层用硫酸镁干燥并真空下除去溶剂。残余物在硅胶上通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(98∶2)洗脱。真空下除去溶剂得到反式1-{3-[(苄基氧基)甲基]环丁基}-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.325g，0.000681mol)，为黄褐色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.69(d，2H)，7.44(t，2H)，7.37-7.39(m，4H)，7.29-7.31(m，1H)，7.11-7.21(m，5H)，5.42-5.47(m，1H)，4.57(s，1H)，3.63(d，2H)，2.76-2.81(m，2H)，2.60-2.70(m，1H)，2.28-2.34(m，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 21.92min。
MS：MH+ 478。
反式3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]环丁基甲醇
将反式1-{3-[(苄基氧基)甲基]环丁基}-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.244g，0.00051mol)的二氯甲烷(10mL)溶液冷却至-78℃，并滴加1.0M三氯化硼的二氯甲烷溶液(1.53mL，0.00153mol)，保持温度低于-70℃。在-78℃下将该反应混合物搅拌7小时，之后加入8M氨的甲醇溶液(1.5mL)。真空下除去溶剂。残余物在硅胶上通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(93∶7)洗脱。真空下除去溶剂得到反式3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]环丁基甲醇(0.192g，0.00049mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6 400MHz)δ8.23(s，1H)，7.69(d，2H)，7.44(t，2H)，7.11-7.22(m，5H)，5.36-5.46(m，1H)，4.70-4.80(br，1H)，3.58(d，2H)2.70-2.75(m，2H)，2.43-2.50(m，1H)，2.26-2.32(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 15.31min。
MS：MH+ 388。
实施例121-137
合成芳基烷基顺-3(4-氨基-3-氟苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺类的总方法
将顺-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(50mg，0.118mmol)悬浮于1，2-二氯乙烷(4mL)中。将适当的醛(0.177mmol)、乙酸(35mg，0.59mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(50mg，0.236mmol)加入到此悬浮液中。再将该反应混合物在100℃加热1.5小时。所有反应完成的确定基于TLC和/或HPLC分析。在共3-5天内分两批再将三乙酰氧基硼氢化钠(100mg，0.472mmol)加入到各反应中，并在室温下继续摇动。各反应用二氯甲烷(4mL)稀释，然后用饱和碳酸氢钠(4mL)停止反应。形成乳液时，加入盐水(1mL)。分离有机层再减压浓缩。粗品通过RP-HPLC纯化，或者用质谱检测(Micromass/Gilson，Hypersil BDS C18，5μm，100×21.2mm柱；在12.5分钟内0-100％乙腈和0.05M醋酸铵，缓冲至pH 4.5，25mL/min)或紫外检测(Waters PrepLC 4000，流速：10mL/min。λ＝254nm，梯度：在40分钟内10％至30％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度；Deltapak C18，300A，15μm，40×100mm柱)。以80％-100％的纯度获得了所需最终化合物，纯度通过分析RP-HPLC(流速：1mL/min，λ＝254nm梯度：在20分钟内5％至85％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)获得。
生成马来酸盐的总方法
实施例137
顺-3-{4-[(4-溴苄基)氨基]-3-氟苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺三马来酸盐
将游离碱形式的顺-3-{4-[(4-溴苄基)氨基]-3-氟苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(36mg，0.061mmol)溶解于乙醇(2mL)中，然后加入马来酸(14mg，0.121mmol)。将此混合物加热得到几乎清澈的溶液。此溶液冷却时形成沉淀。过滤收集固体，用最小量的乙醇洗涤，然后减压干燥。收集到16mg的顺-3-{4-[(4-溴苄基)氨基]-3-氟苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺三马来酸盐。
Figure A0081575902271
实施例138-153
合成顺和反-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺的磺酰胺衍生物的总方法
将顺-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(100mg，0.236mmol)溶解于吡啶(3mL)。然后，或者以在吡啶(0.25mL)中的溶液形式或者以固体形式加入适当的磺酰基氯(0.472mmol)。该反应混合物在40℃在氮气氛下加热约1-7天。如果需要，则再加入磺酰基氯(0.5当量)。将各反应浓缩至其原体积的-半，然后用N，N-二甲基甲酰胺(1.5mL)稀释。这些样品通过RP-HPLC纯化，或者用质谱检测(Micromass/Gilson，Hypersil BDS C18，5μm，100×21.2mm柱；在12.5分钟内0-100％乙腈和0.05M醋酸铵，缓冲至pH4.5，25mL/min)或紫外检测(WatersPrepLC 4000，流速：10mL/min，λ＝254nm，梯度：在40分钟内10％至30％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度；Deltapak C18，300A，15μm，40×100mm柱)。以90％-100％的纯度获得所需最终化合物，纯度通过分析RP-HPLC获得：(流速：1mL/minλ＝254nm梯度：在20分钟内5％至85％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)。在某些情况下制备马来酸盐。
Figure A0081575902301
Figure A0081575902311
实施例154
顺-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-N′-(2，4-二氟苯基)脲
将顺-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(100mg，0.236mmol)溶解于乙酸(6mL)中，然后室温下缓慢加入2，4-二氟苯基异氰酸酯(44mg，0.283mmol)。2天后，将该反应混合物减压浓缩得到粗品，为淡黄色油状物(185mg)。粗品物质通过RP-HPLC纯化(Waters PrepLC 4000，流速：10mL/min，λ＝254nm梯度：在40分钟内10％至30％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度；Deltapak C18，300A，15μm，40×100mm柱)。收集所需产物，为白色固体(52mg，0.090mmol)。
HPLC-RT：13.19分钟(流速：1mL/min，λ＝254nm梯度：在20分钟内5％至85％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝580.3。
实施例155
反-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-N’-(3-甲氧基苯基)脲单乙酸盐。
将反-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(77mg，0.182mmol)悬浮于吡啶(1mL)。将3-甲氧基苯基异氰酸酯(30mg，0.200mmol)的吡啶(1mL)加入到该反应混合物中并继续搅拌19小时。将该反应混合物减压浓缩得到粗品，为淡黄色油状物(149mg)。粗品物质通过RP-HPLC纯化(Waters PrepLC 4000，流速：10mL/min，λ＝254nm梯度：在40分钟内10％至30％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度；Deltapak，C18，300A，15μm，40×100mm柱)得到反-N’-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-N-(3-甲氧基苯基)脲，为白色固体(76mg，0.133mmol)。HPLC-RT：12.33min，(流速：1mL/minλ＝254nm梯度：在20分钟内5％至85％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝574.2。
实施例156
反-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-N’-(3-甲基苯基)脲单乙酸盐，以如上所详述的方式制备。
HPLC-RT：13.02min，(流速：1mL/minλ＝254nm梯度：在20分钟内5％至85％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝558.3。
实施例157
顺-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-N′-(3-甲基苯基)脲，用与反式异构体所述的相同方法制备。
HPLC-RT：13.03min，(流速：1mL/minλ＝254nm梯度：在20分钟内5％至85％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝558.5。
实施例158
顺-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-N-乙基-N′-(3-甲基苯基)脲
a.顺-3-[4-(乙基氨基)-3-氟苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将顺-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(75mg，0.177mmol)悬浮于1，2-二氯乙烷(6mL)。加入乙醛(12mg，0.266mmol)的1，2-二氯乙烷(0.300mL)溶液和乙酸(42mg，0.708mmol)并将此混合物搅拌1小时。加入三乙酰氧基硼氢化钠(75mg，0.354mmol)。16小时后，再加入三乙酰氧基硼氢化钠(37mg，0.175mmol)并将该反应再继续3小时。该反应混合物再进行减压浓缩。残余物溶解于二氯甲烷(75mL)中，然后用饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)和盐水(100mL)洗涤。将此有机层用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。收集粗品(80mg)，为无色油状物。m/z(MH+)＝453.3。
b.顺-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-N-乙基-N′-(3-甲基苯基)脲
将顺-3-[4-(乙基氨基)-3-氟苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(80mg，0.177mmol)溶解于吡啶(3mL)，然后冷却至0℃。将间甲苯基异氰酸酯(26mg，0.194mmol)加入到该反应中并在0℃下继续搅拌2.5小时。将该反应混合物升温至室温并搅拌过夜。再将间甲苯基异氰酸酯(13mg，0.101mmol)加入到该反应混合物中并继续搅拌1周。将该反应混合物减压浓缩得到粗品，为淡黄色油状物(110mg)。通过RP-HPLC纯化(Waters PrepLC4000，流速：10mL/min，λ＝254nm梯度：在40分钟内10％至30％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度；Deltapak C18，300A，15μm，40×100mm柱)。收集顺-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-N-乙基-N′-(3-甲基苯基)脲，为白色固体(10mg)。HPLC-RT：13.18min，(流速：1mL/min，λ＝254nm梯度：在20分钟内5％至85％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝586.5。
实施例159
顺-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-N-苄基-N′-(2，4-二氟苯基)脲
将顺-3-[4-(苄基氨基)-3-氟苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(28mg，0.054mmol)溶解于乙酸(3mL)，然后在4天内加入2，4-二氟苯基异氰酸酯(28mg，0.183mmol)。将该反应混合物减压浓缩得到淡黄色油状物(65mg)。通过RP-HPLC纯化(Waters PrepLC 4000，流速：10mL/min，λ＝254nm梯度：在40分钟内10％至30％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度；DeltapakC18，300A，15μm，40×100mm柱)得到顺-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-N-苄基-N′-(2，4-二氟苯基)脲，为白色固体(13mg，0.019mmol)。HPLC-RT：14.66min，(流速：1mL/min，λ＝254nm梯度：在20分钟内5％至85％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝670.1。
实施例160
顺-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-N′-(3-甲基苯基)脲
将顺-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(50mg，0.123mmol)溶解于吡啶(3.5mL)，然后冷却至0℃。加入间甲苯基异氰酸酯(18mg，0.135mmol)并在16小时内将该反应升温至室温。该反应混合物减压浓缩得到淡黄色油状物(200mg)。通过RP-HPLC纯化(Waters PrepLC 4000，流速：10mL/min，λ＝254nm梯度：在40分钟内10％至30％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度；Deltapak C18，300A，15μm，40×100mm柱)。收集所需产物，为白色固体(52mg)。HPLC-RT：12.58min，(流速：1mL/minλ＝254nm梯度：在20分钟内5％至85％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝540.1。
实施例161-164
N-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}-N′-(3-甲基苯基)脲的酰胺类物质
a.4-[4-氨基-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-哌啶甲酸叔丁基酯
将3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.12g，6.48mmol)溶解于1∶1二噁烷/水(20mL)中。将碳酸钠(1.03g，9.72mmol)和二碳酸二叔丁基酯(1.55g，7.12mmol)加入到该反应混合物。3小时后，将该反应减压浓缩。剩余的残余物在二氯甲烷(100mL)和水(100mL)之间分配，然后用二氯甲烷(200mL)萃取。合并有机层并用盐水(100mL)洗涤。有机层再用硫酸钠干燥并减压浓缩得到黄棕色泡沫(2.85g，6.67mmol)。HPLC-RT：14.41min，(流速：1mL/min，λ＝254nm梯度：在20分钟内5％至85％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝428.1。
a.4-(4-氨基-3-{3-氟-4-[(3-甲苯氨基羰基)氨基]苯基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯
将4-[4-氨基-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-哌啶甲酸叔丁基酯(600mg，1.41mmol)溶解于吡啶(25mL)，并冷却至0℃。加入间甲苯基异氰酸酯(206mg，1.54mmol)并将该反应在0℃下搅拌2.5小时。将该反应混合物减压浓缩得到粗品，为棕黄色泡沫(841mg)。通过柱色谱在硅胶上纯化，用25％至50％乙酸乙酯/庚烷梯度、接着用5％甲醇/二氯甲烷作为洗脱剂，得到4-(4-氨基-3-{3-氟-4-[(3-甲苯氨基羰基)氨基]苯基}1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯，为淡黄色固体(243mg，0.434mmol)。HPLC-RT：17.82min，(流速：1mL/min，λ＝254nm梯度：在20分钟内5％至85％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝561.4。
a.N-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}-N′-(3-甲基苯基)脲二盐酸盐
将4-(4-氨基-3-{3-氟-4-[(3-甲苯氨基羰基)氨基]苯基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯(117mg，0.209mmol)悬浮于丙酮(7mL)，并冷却至0℃。将盐酸(6N，1.6mL)缓慢加入到该反应混合物中。将该反应混合物升温至室温，然后在50℃下加热4小时。减压下浓缩该反应混合物，接着用二氯甲烷(25mL)研磨，得到N-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}-N′-(3-甲基苯基)脲二盐酸盐，为米白色固体(111mg，0.241mmol)。HPLC-RT：11.98min，(流速：1mL/minλ＝254nm梯度：在20分钟内5％至85％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝461.3。
a.合成N-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}-N′-(3-甲基苯基)脲的酰胺类物质的总方法
i).总方法(A)：未保护的氨基酸
实施例161
N-[4-(4-氨基-1-{1-[2-(二甲基氨基)乙酰基]-4-哌啶基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯基]-N′-(3-甲基苯基)脲
将N-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}-N′-(3-甲基苯基)脲二盐酸盐(50mg，0.109mmol)溶解于二氯甲烷(6mL)和N-乙基-N-异丙基胺(0.095mL)中。将N，N-二甲基甘氨酸(14mg，0.136mmol)、1-羟基-7-氮杂苯并三唑(15mg，0.109mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(26mg，0.136mmol)加入到该反应混合物中。16小时后，将该反应混合物用二氯甲烷(100mL)稀释，然后用水(50mL)和盐水(50mL)洗涤。将此有机层用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。剩余的残余物用乙醚(25mL)研磨得到淡黄色固体(52mg，0.097mmol)。通过RP-HPLC纯化(WatersPrepLC 4000，流速：10mL/min，λ＝254nm梯度：在40分钟内10％至30％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度；Deltapak C18，300A，15μm，40×100mm柱)得到N-[4-(4氨基-1-{1-[2-(二甲基氨基)乙酰基]-4-哌啶基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯基]-N′-(3-甲基苯基)脲，为白色固体(27mg，0.050mmol)。HPLC-RT：12.48min，(流速：1mL/minλ＝254nm梯度：在20分钟内5％至85％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝546.0。
实施例162
N-[4-(4-氨基-1-{1-[3-(二乙基氨基)丙酰基]-4-哌啶基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯基]-N′-(3-甲基苯基)脲单乙酸盐如总方法A所述制备。
HPLC-RT：13.16min，(流速：1mL/minλ＝254nm梯度：在20分钟内5％至85％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝588.2。
d.ii).总方法(B)：叔丁氧基羰基保护的氨基酸
实施例163
N-[4-(4-氨基-1-{1-[2-(甲基氨基)乙酰基]-4-哌啶基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯基]-N′-(3-甲基苯基)脲
将N-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}-N′-(3-甲基苯基)脲二盐酸盐(63mg，0.118mmol)溶解于二氯甲烷(7mL)和N-乙基-N-异丙基胺(0.113mL)中，将2-[(叔丁氧基羰基)(甲基)氨基]乙酸(28mg，0.147mmol)、1-羟基-7-氮杂苯并三唑(16mg，0.118mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(28mg，0.147mmol)加入到该反应混合物中。16小时后，该反应混合物用二氯甲烷(75mL)稀释，然后用水(75mL)洗涤。将此有机层用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。分离粗品，为淡黄色固体(75mg，0.119mmol)。
将粗品N-{2-[4-(4-氨基-3-{3-氟-4-[(3-甲苯氨基羰基)氨基]苯基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)哌啶子基]-2-氧代乙基}-N-甲基氨基甲酸叔丁基酯(75mg，0.119mmol)溶解于丙酮(5mL)，然后缓慢加入盐酸(6N，1mL)。该反应混合物在45℃下加热2.5小时再减压浓缩。剩余的残余物用二氯甲烷(25mL)研磨得到淡黄色固体。通过RP-HPLC纯化(Waters PrepLC 4000，流速：10mL/min，λ＝254nm梯度：在40分钟内10％至30％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度；DeltapakC18，300A，15μm，40×100mm柱)得到N-[4-(4-氨基-1-{1-[2-(甲基氨基)乙酰基]-4-哌啶基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯基]-N′-(3-甲基苯基)脲，为白色固体(40mg，0.075mmol)。HPLC-RT：12.22min，(流速：1mL/minλ＝254nm梯度：在20分钟内5％至85％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝532.1。
实施例164
N-{4-[4-氨基-1-(1-{3-[(2-羟基乙基)氨基]丙酰基}-4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}-N′-(3-甲基苯基)脲单乙酸盐
a).3-[(叔丁氧基羰基)(2-羟基乙基)氨基]丙酸
将商购的3-[(2-羟基乙基)氨基]丙酸(76mg，0.571mmol)溶解于二噁烷/水(1.5mL/1.5mL)中，然后加入碳酸钠(91mg，0.886mmol)和二碳酸二叔丁基酯(137mg，0.628mmol)。将该反应混合物室温下搅拌2天，过滤并减压浓缩得到3-[(叔丁氧基羰基)(2羟基乙基)氨基]丙酸，为无色油状物(135mg，0.579mmol)。1H NMR(d6-DMSO)：δ1.40(s，9H)；2.36(br s，2H)；3.27(br s，3H)；3.46(br s，2H)；3.64(br s，2H)；5.71(br s，1H)。
b).N-{4-[4-氨基-1-(1-{3-[(2-羟基乙基)氨基]丙酰基}-4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}-N′-(3-甲基苯基)脲单乙酸盐通过d.ii).总方法B中描述的方法制备。
HPLC-RT：12.19min，(流速：1mL/min λ＝254nm梯度：在20分钟内5％至85％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝576.3。
实施例165
顺-3-{4-[(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
a)N2-(4-溴苯基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-胺
将2-氯-1-甲基-苯并咪唑(0.639g，3.84mmol)和4-溴苯胺(0.710g，4.12mmol)在170℃加热21小时。将所得棕色固体冷却至室温，用3份5mL的庚烷洗涤，然后用甲苯研磨得到N2-(4-溴苯基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-胺(1.120g，90％)，为棕色粉末。RP-HPLC(在10分钟内在0.1N醋酸铵水溶液中的25至100％ CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝10.85分钟，96％；m/z 302(MH+)。
b)N2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-胺
向N2-(4-溴苯基)-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-胺(1.12g，3.71mmol)的二甲基甲酰胺(15mL)溶液中，在氮气氛下加入双(频哪醇合)乙硼烷(1.129g，4.448mmol)，醋酸钾(1.204g，12.27mmol)，和[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)二氯甲烷(1∶1)的复合物(0.334g，0.409mmol)。将此紫色溶液在80℃下搅拌18小时，然后冷却至室温。将所得暗棕色混合物真空浓缩得到暗棕色固体。此物质用二氯甲烷研磨，过滤，并浓缩此滤液得到暗棕色油状物。通过急骤色谱在硅胶上纯化(用30％乙酸乙酯/庚烷洗脱)得到N2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2胺(0.515g，40％)，为白色粉末：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.10(s，1H)，7.88(d，2H)，7.63(d，2H)，7.40(m，1H)，7.30(m，1H)，7.08(m，2H)，3.72(s，3H)，1.29(s，12H)；RP-HPLC(在10分钟内在0.1N醋酸铵水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝11.70分钟，90％；m/z 350(MH+)。
c)顺-3-{4-[(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
向顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.100g，0.227mmol)的乙二醇二甲基醚(3mL)和水(1.5mL)溶液中，在氮气氛下加入N2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-胺(0.099g，0.28mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(0.013mg，0.011mmol)及碳酸钠(0.060mg，0.568mmol)。将此溶液在83℃下搅拌15小时。将所得黄色混合物真空浓缩得到黄色油状物。通过制备HPLC纯化(在20分钟内在0.1N醋酸铵水溶液中25至100％CH3CN，21mL/min，用8μHypersil HS C18，250×21mm柱，tr＝7.3-11.2min)得到顺-3-{4-[(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，为米白色固体(0.061g，50％)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.17(s，1H)，8.23(s，1H)，8.08(d，2H)，7.62(d，2H)，7.42(m，1H)，7.33(m，1H)，7.08(m，1H)，4.80(m，1H)，3.76(s，3H)，2.50-2.07(m，12H)，1.80-1.60(m，8H)；RP-HPLC(在10分钟内在0.1N醋酸铵水溶液中25至100％ CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝5.92min.，99％；m/z 537(MH+)。
实施例166-170
得自顺-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-7H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺的酰胺
典型方法：
向存在于二氯甲烷(1.5ml)中适当的甲酸(0.46mmol)加入草酰氯(400μl，0.2mmol)和DMF(1滴)。给小瓶盖上隔膜，并在每个盖上插入小孔针以释放压力。将小瓶在J-Kem震动器上摇动过夜。分离50％的溶液，并将过量的草酰氯和二氯甲烷在12-孔Supelco支管上真空下随氮气流除去。将粗品酰氯(0.23mmol)加入到存在于干燥吡啶(800μl)的顺-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(40mg，0.09mmol)中并室温下搅拌。将所得溶液直接通过制备HPLC纯化(Hypersil BSD C18，5μm，100×21mm，在10分钟内0％-100％乙腈/0.05M醋酸铵，25.0mL/min)。所得产物通过在二氯甲烷(4ml)和1.0N氢氧化钠(2ml)之间分配，并通过Empor高效萃取圆盘柱(C18-SD十八烷基)进行纯化，得到相应的产物。此化合物相应的LCMS(Micromass-柱：Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：在4.5分钟内0％B/A至100％B/A，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，PH 4.5)，3.5mL/min)数据在下页详述。
实施例171
顺-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-苯基丙酰胺
向顺-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(75mg，0.17mmol)和三乙胺(34mg，0.34mmol)的二氯甲烷(2.5ml)溶液中，滴加存在于二氯甲烷(0.5ml)中的氢化肉桂酰氯(34mg，0.20mmol)。将此溶液在室温下搅拌48小时，并再加入一个等份的氢化肉桂酰氯。将此反应混合物再搅拌24小时。将所得混合物在二氯甲烷(4ml)和2N NaOH(1.5ml)之间分配，并通过Empore萃取筒。蒸发溶剂得到油状固体，其通过硅胶色谱纯化，用10-20％ MeOH/二氯甲烷洗脱得到顺-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-苯基丙酰胺(12mg，13％)。1H NMR(CDCl3)：δH 8.55(1H，d)，8.36(1H，s)，7.75(1H，s)，7.25(7H，m)，5.51(2H，bs)，4.91(1H，m)，3.92(3H，s)，3.09(2H，m)，2.76(2H，m)，2.34-2.59(9H，m)，2.29(3H，s)，2.16(2H，m)，1.85(4H，m)，1.66(2H，m)。
LCMS(Micromass-柱：Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：在4.5分钟内0％B/A至100％B/A，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，PH 4.5)，3.5mL/min.)Rt＝1.92分钟，MH+＝569.6。
实施例172
反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(二甲基氨基)苯甲酰胺三马来酸盐
向反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(500mg，1.15mmol)的吡啶(5ml)溶液中，滴加4-(二甲基氨基)苯甲酰基氯(420mg，2.28mol)。将此溶液搅拌过夜，蒸发溶剂并将此残余物在二氯甲烷和2N NaOH溶液之间分配。水层用二氯甲烷(X3)萃取。将有机相干燥，过滤并蒸发得到固体，其用EtOAc/Et2O(1∶4)研磨得到固体，其溶解于EtOAc并用马来酸(3当量)处理得到反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(二甲基氨基)苯甲酰胺(320mg，30％)。1H NMR(d6-DMSO)：δH 9.05(1H，s)，8.25(1H，s)，8.18(1H，d，J＝8Hz)，7.84(2H，d，J＝9.2Hz)，7.29(1H，s)，7.25(1H，d，J＝8Hz)，6.78(2H，d，J＝8.8Hz)，6.17(6H，s)，4.71(1H，m)，3.95(3H，s)，3.01(6H，s)，2.83-3.18(9H，m)，2.68(3H，s)，2.08(6H，m)，1.56(2H，m)。HPLC(5.23分钟，100％)
实施例173
N-4-[4-氨基-1-(3-氰基-2-吡啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基-N′-(3-甲基苯基)脲
a).2-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-3-吡啶甲腈
将氢化钠(60％在矿物油中的分散液，3.825mmol，153mg)加入到4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(1.0g，3.825mmol)的DMF(5mL)悬浮液中。10分钟后，加入2-氯-3-氰基吡啶(531mg)并将该反应在60℃下加热16小时。所得深色混合物倒入到冰水(50mL)中并过滤收集固体得到2-(4-氨基-3碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-3-吡啶甲腈，为棕色固体(1.1g，79％)；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.82(1H，m)，8.29(1H，s)，8.64(1H，m)和8.93(1H，m)；RP-HPLC(Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm柱，在50mM乙酸胺中0％至100％乙腈，缓冲至pH 4.5，3.5mL/min)Rt 2.16min.
b)2-[4-氨基-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-3-吡啶甲腈
将2-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-3-吡啶甲腈(1.35g)、N-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(1.5g)、四-三苯基膦钯(253mg)和碳酸钠(1.153g)悬浮于脱气的水(10mL)和DME(20mL)中并在85℃下加热16小时。真空下除去溶剂并将此残余物在乙酸乙酯(200mL)和水(200mL)之间分配。移出固体沉淀并分离有机层，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。残余物用最少量的乙酸乙酯结晶得到N-4-[4-氨基-1-(3-氰基-2-吡啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基氨基甲酸叔丁基酯，为米白色固体(400mg)。将TFA(4 mL)缓慢加入到N-4-[4-氨基-1-(3-氰基-2-吡啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基氨基甲酸叔丁基酯(400mg)的二氯甲烷(4mL)悬浮液中。1小时后，将所得红色溶液减压浓缩并用饱和碳酸钠水溶液中和油状残余物得到2-[4-氨基-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-3-吡啶甲腈，为黄色沉淀(300mg)；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ5.61(2H，br s)，6.92(1H，t)，7.36(2H，m)，7.76(1H，m)，8.32(1H，s)，8.62(1H，m)和8.93(1H，m)；RP-HPLC(Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm柱，在50mM乙酸胺中0％至100％乙腈，缓冲至pH 4.5，3.5mL/min)Rt 2.25min。
c).N-4-[4-氨基-1-(3-氰基-2-吡啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基-N′-(3-甲基苯基)脲
将间甲苯基异氰酸酯(0.1mmol)加入到(2-[4-氨基-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-3-吡啶甲腈(35mg，0.1mmol)的吡啶溶液中，并将该反应室温下搅拌2天。该反应真空浓缩。用质量驱动的制备RP-HPLC纯化(Micromass/Gilson，Hypersil BDSC18，5μm，100×21.2mm柱；在12.5分钟内0-100％乙腈和0.05M醋酸铵，缓冲至pH 4.5，25mL/min)得到N-4-[4-氨基-1-(3-氰基-2-吡啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基-N′-(3-甲基苯基)脲(4mg)；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ2.30(3H，s)，6.84(1H，d)，7.19(1H，t)，7.25(1H，m)，7.33(1H，br s)，7.58(2H，m)，7.80(1H，m)，8.35(1H，s)，8.43(1H，t)，8.65(1H，m)，8.80(1H，br s)，8.95(1H，m)和9.10(1H，br s)，及RP-HPLC(Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm柱；在50mM乙酸胺中0％至100％乙腈，缓冲至pH 4.5，3.5mL/min)Rt 3.09min。
实施例174-185
制备N1-4-(4-氨基-1-{4-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶基]}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)-2氟苯基-1-芳基磺酰胺的总路线
a)4-(4-氨基-3-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-氟苯基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯
将4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯(8.756g，20.26mmol)、N-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(10.25g，30.38mmol)、四-三苯基膦钯(940mg，0.81mmol)和碳酸钠(4.20g，50.64mmol)的混合物悬浮于脱气的水(57mL)和DME(323mL)中，并在80℃下加热18小时。真空下除去溶剂并将此残余物在乙酸乙酯(200mL)和10％碳酸钠水溶液(200mL)之间分配。有机层进一步用10％碳酸钠水溶液(2×200mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥并减压浓缩。在硅胶上通过柱色谱纯化，用1∶1乙酸乙酯：庚烷接着用纯乙酸乙酯作为洗脱剂，得到不纯的馏份。此馏份进一步通过用乙酸乙酯重结晶来纯化得到4-(4-氨基-3-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-氟苯基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯(7.256g，68％)；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ1.43(9H，s)，1.49(9H，s)，1.93(2H，m)，2.01(2H，m)，3.00(2H，br m)，4.04(2H，br d)，4.90(1H，m)，7.42(2H，m)，7.83(1H，t)，8.24(1H，s)和9.17(1H，br s)。
b)3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将4-(4-氨基-3-{4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3氟苯基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯(6.26g，11.9mmol)、5M HCl(95mL)和丙酮(390mL)的混合物，室温下搅拌16小时。将该反应用碳酸钠碱化并减压浓缩。残余物在二氯甲烷(200mL)和水(200mL)之间分配，并将此水相再用二氯甲烷(2×200mL)萃取。合并的有机层用无水硫酸钠干燥并蒸发至干得到3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(3.427g，88％)；1H NMR(DMSOd6，400MHz)δ1.85(2H，br t)，2.06(2H，m)，2.65(2H，m)，3.10(2H，m)，4.72(1H，m)，5.45(2H，br s)，6.89(1H，m)，7.22(2H，m)和8.19(1H，s)。
c)N1-4-(4-氨基-1-{4-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶基]}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯基苯胺
向3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.0g，6.11mmol)、N-甲基哌啶-4-酮(0.69g，6.11mmol，0.8mL)和冰醋酸(1.25mL)的N-甲基吡咯烷酮(100mL)溶液中，在氮气氛下加入三乙酰氧基硼氢化钠(1.5当量，1.94g，9.16mmol)。将此溶液搅拌18小时，再加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.6当量，0.78g)和N-甲基哌啶-4-酮(0.4当量，0.32mL)并将该反应再继续18小时。该反应真空浓缩，在二氯甲烷(100mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)之间分配。水层再用二氯甲烷(4×100mL)萃取并将合并的有机层用无水硫酸镁干燥，并蒸发至干得到黄色泡沫(0.95g)。在硅胶上通过柱色谱纯化，用二氯甲烷∶甲醇(4∶1)作为洗脱剂得到N1-4-(4-氨基-1-{4-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶基]}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯基苯胺(1.67g，72％)；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ1.44(2H，m)，1.69(3H，m)，1.83(4H，m)，2.13(3H，s)，2.28(4H，m)，2.78(2H，br d)，2.98(2H，br d)，4.58(1H，m)，5.25(2H，br s)，6.89(1H，t)，7.18(1H，d)，7.24(1H，d)和8.19(1H，s)。
d)将N1-4-(4-氨基-1-{4-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶基]}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯基苯胺磺酰基化的总方法
将N1-4-(4-氨基-1-{4-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶基]}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯基苯胺(100mg，0.236mmol)和芳基磺酰基氯(2当量，0.471mmol)在吡啶(2mL)中的混合物，在40℃下加热3天。真空下除去溶剂。用质量驱动的制备RP-HPLC纯化(Micromass/Gilson，Hypersil BDS C18，5μm，100×21.2mm柱；在12.5分钟内在0.05M醋酸铵中0-100％乙腈，缓冲至pH 4.5，25mL/min)得到下列化合物：
Figure A0081575902471
Figure A0081575902481
分析RP-HPLC条件：10至90％CH3CN在0.1N醋酸铵水溶液中，缓冲至pH 4.5，在12分钟内，2mL/min，用Waters Symmetry C18，5μm，250×4.6mm柱。
实施例186-189
顺-3-{4-[氨基(苯基)甲基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺类似物
a.合成磺酰胺和甲酰胺衍生物的总方法
将顺-3-{4-[氨基(苯基)甲基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(50mg，0.10mmol)、相应的亲电子试剂(磺酰基氯或酰氯)(1当量)和吡啶(1mL)的混合物，在40℃下加热24-72小时。(在一些情况下，需要再加入亲电子试剂(一般1当量)以便使完成反应)。真空下除去溶剂。用质量驱动的制备RP-HPLC纯化(Micromass/Gilson，Hypersil BDS C18，5μm，100×21.2mm柱；0-100％乙腈和0.05M醋酸铵，缓冲至pH 4.5，在12.5分钟内，25mL/min)得到下列化合物：
分析RP-HPLC条件：在0.1N醋酸铵水溶液中10至90％CH3CN，缓冲至pH 4.5，在12分钟内，2mL/min，用Waters Symmetry C18，5μm，250×4.6mm柱。
实施例195
1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-{4-[(苯乙基氨基)(苯基)甲基]苯基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
向顺-3-{4-[氨基(苯基)甲基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(50mg，0.10mmol)、苯乙醛(13mg)和冰醋酸(0.013mL)的1，2-二氯乙烷(1mL)溶液中，在氮气氛下加入三乙酰氧基硼氢化钠(2当量，43mg)。将此溶液搅拌18小时，然后真空浓缩，在二氯甲烷(10mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)之间分配，并分离有机层。水层再用二氯甲烷(4×10mL)萃取，并将合并的有机层用无水硫酸镁干燥并蒸发至干。用质量驱动的制备RP-HPLC纯化(Micromass/Gilson，Hypersil BDS C18，5μm，100×21.2mm柱；0-100％乙腈和0.05M醋酸铵，缓冲至pH 4.5，在12.5分钟内，25mL/min)得到1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-{4-[(苯乙基氨基)(苯基)甲基]苯基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(28mg)；RP-HPLC(在0.1N醋酸铵水溶液中10至90％ CH3CN，缓冲至pH 4.5，在12分钟内，2mL/min，用Waters Symmetry C18，250×4.6mm柱)Rt＝12.269分钟，95.2％；m/z(MH+)601.3。
实施例196
N-{4-[4-氨基-1-(4-氧代环己基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}-N′-(3-甲基苯基)脲
将间甲苯基异氰酸酯(1.2当量，37.7mg，0.283mmol)加入到4-[4-氨基-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环己酮(80.3mg，0.236mmol)的吡啶溶液中。在40℃下16小时后，用水(2mL)停止该反应并蒸发至干。通过制备RP-HPLC纯化(10％至40％CH3CN在0.1N醋酸铵水溶液中，缓冲至pH 4.5，在60分钟内，10mL/min，用水Deltapak C18，15μm，100×40mm柱，λ＝254nm)得到N-{4-[4-氨基-1-(4-氧代环己基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}-N′-(3-甲基苯基)脲(91mg，84％)；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ2.26(2H，br t)，2.30(3H，s)，2.43(4H，m)，2.69(2H，m)，5.26(1H，m)，6.82(1H，d)，7.18(1H，t)，7.25(1H，br d)，7.32(1H，br s)，7.45(2H，m)，8.26(1H，s)，8.36(1H，t)，8.72(1H，d)和9.05(1H，s)和RP-HPLC(10至90％CH3CN在0.1N醋酸铵水溶液中，缓冲至pH 4.5，在12分钟内，2mL/min，用Waters SymmetryC18，5μm，250×4.6mm柱)Rt＝15.433分钟，97.9％。
实施例197
2-[4-氨基-3-(4-[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸乙酯
a)2-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)乙酸乙酯
将氢化钠(60％，0.138g，3.45mmol)加入到3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.750g，2.87mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(9mL)悬浮液中，并将此混合物室温下搅拌1小时，直到获得均匀溶液。加入溴乙酸乙酯(0.447mL，4.03mmol)，并将此混合物在室温氮气氛下搅拌14小时。减压除去溶剂并将所得固体依次用水(25mL)和乙醚/石油醚(4∶1，50mL)研磨，得到2-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)乙酸乙酯(0.791g，2.28mmol)，为棕色固体：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.21(s，1H)，5.17(s，2H)，4.15(qt，2H)，1.20(t，3H)；
RP-HPLC(25至100％ CH3CN，在0.1M醋酸铵水溶液中，在10分钟内，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt 6.87min。
b)2-(4-氨基-3-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-氟苯基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)乙酸乙酯
将2-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)乙酸乙酯(0.790g，2.28mmol)、N-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(1.08g，3.19mmol)、四(三苯基膦)钯(0.105g，0.091mmol)及碳酸氢钠(0.478g，5.69mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(12mL)和水(2mL)中的悬浮液，在90℃下在氮气氛下加热14小时。减压除去溶剂，并将此残余物在饱和氯化钠水溶液(50mL)和乙酸乙酯(30mL)之间分配。分离水层并进一步用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。合并的有机萃取物用硫酸镁干燥，过滤，并减压浓缩。通过急骤色谱在硅胶上纯化，用乙酸乙酯/庚烷(9∶1)作为流动相洗脱，得到2-(4-氨基-3-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-氟苯基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)乙酸乙酯(0.193g，0.449mmol)，为黄色油状物：1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.41(s，1H)，8.30(m，1H)，7.47(m，2H)，6.81(s，1H)，5.47(br，2H)，5.20(s，2H)，4.25(qt，2H)，1.55(s，9H)，1.27(t，3H)；RP-HP(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在10分钟内，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt 9.47min.
c)2-[4-氨基-3-(4-[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸乙酯
向其中装有氯化氢的二噁烷溶液(4M，6mL)和乙醇(6mL)的50mL烧瓶中，加入2-(4-氨基-3-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-氟苯基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)乙酸乙酯(0.452g，1.05mmol)。在此烧瓶上安装空气冷凝器，并将此混合物在50℃在氮气氛下搅拌。16小时后，该反应混合物冷却至室温，并减压除去溶剂。残余物在盐酸(0.5M，30mL)和乙醚(20mL)之间分配。分离有机层并倾析掉。将水层用饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)碱化，并将所得混合物用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。合并的乙酸乙酯萃取物用硫酸镁干燥，过滤，并浓缩得到黄色固体(0.295g)。
将黄色固体加入到2，3-二氯苯磺酰基氯(0.263g，1.07mmol)和4-二甲基氨基吡啶(0.005g，0.041mmol)的吡啶(5mL)溶液中，并将所得溶液并在氮气氛下搅拌3天。加入甲醇/二氯甲烷(1∶19，100mL)并将所得混合物用碳酸氢钠水溶液(3×10mL)萃取。将此有机层用硫酸镁干燥，过滤，并浓缩。将此物质的一部分通过制备HPLC纯化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μHypersil HS C18，250×21mm柱，Rt 12.4-13.9min)得到2-[4-氨基-3-(4-[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸乙酯，为白色固体(0.011g，0.020mmol)：RP-HP(25至100％ CH3CN，在0.1M醋酸铵水溶液中，在10分钟内，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt 9.78min。1HNMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.84(s，1H)，8.25(s，1H)，7.97(s，1H)，7.95(s，1H)，7.54(t，1H)，7.43(m，3H)，5.21(s，2H)，4.15(qt，2H)，1.20(t，3H)；MS：MH+ 539。
实施例198
N1-4-[4-氨基-1-(2-羟基乙基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基-2，3-二.氯-1-苯磺酰胺
将2-[4-氨基-3-(4-[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸乙酯(0.120g，0.222mmol)悬浮于乙二醇二甲基醚(2mL)中，并将此悬浮液冷却至0C。加入氢化锂铝(0.025g，0.660mmol)。并将该反应混合物升温至室温。24小时后，通过加入盐酸(0.5M，10mL)来停止过量的氢化物的反应。水层用乙酸乙酯(2×7mL)萃取，并将有机萃取物倾析掉。将水层用饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)碱化，用氯化钠饱和，并用甲醇/二氯甲烷(1∶9，4×20mL)萃取。合并有机层，用硫酸镁干燥，过滤，并减压浓缩。通过制备HPLC纯化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μHypersil HS C18，250×21mm柱，Rt 8.93-9.90min)得到N1-4-[4-氨基-1-(2-羟基乙基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基-2，3-二氯-1-苯磺酰胺，为米白色固体(0.004g，0.008mmol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.82(s，1H)，8.23(s，1H)，7.97(s，1H)，7.95(s，1H)，7.54(t，1H)，7.39(m，3H)，6.90(br，2H)，4.86(t，1H)，4.35(t，2H)，4.04(t，2H)；MS：(M-H)-495。
实施例199
N1-(4-{4-氨基-1-[2-氰基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基｝-2-氟苯基)-2，3-二氯-1-苯磺酰胺
将3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.172g，0.66mmol)、氢化钠(60％，0.030g，0.75mmol)、2，5-二氟苄腈(0.105g，0.75mmol)和N，N-二甲基甲酰胺(2.5mL)的悬浮液在100℃下加热24小时。将此反应混合物冷却至室温，并减压浓缩。将此萃取物在二氯甲烷(50mL)和水(10mL)之间分配。分离有机层，用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。
将此物质(0.045g)和碳酸铯(0.115g，0.353mmol)悬浮液1-甲基哌嗪(1mL)中，并将此混合物在110℃下在密封试管中加热20小时。将此反应混合物冷却至室温并减压浓缩。残余物用盐酸(1M，10mL)酸化，并将水相用乙醚(10mL)萃取。倾析有机相，并将此水相用碳酸钠水溶液(3M，10mL)碱化。将水相用二氯甲烷(3×15mL)萃取，并将合并的有机馏份用硫酸镁干燥，过滤，并减压浓缩。此物质用(b)中的方法加工，并用(c)中的方法脱保护并磺酰基化。通过制备HPLC纯化产物(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μHypersil HS C18，250×21mm柱，Rt 8.4-9.4min)得到N1-(4-{4-氨基-1-[2-氰基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-2，3-二氯-1-苯磺酰胺，为黄色固体(0.007g，0.011mmol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.27(s，1H)，7.98(d，1H)，7.86(d，1H)，7.69(d，1H)，7.53(m，6H)，3.30(m，4H)，2.70(m，4H)，2.40(s，3H)；MS(M-H)-650。
实施例200
顺-N1-苯基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲酰胺
a)4-溴-2-甲氧基苄腈
在-50℃下，将甲醇钾(4.24g，60.0mmol)的四氢呋喃(40mL)悬浮液分批加入到4-溴-2-氟苄腈(8.0g，40.0mmol)的四氢呋喃(50mL)溶液中。1小时后，除去干冰浴并将该反应混合物升温至室温，并室温下搅拌6小时。该反应混合物倒入到水(250mL)中，并过滤收集此固体得到4-溴-2-甲氧基苄腈(7.85g，92％)。1H NMR(DMSO-d6)δ3.94(s，3H)，7.32(d，J＝8.23Hz，1H)，7.15(s，1H)，7.69(d，J＝8.23Hz，1H)。
b)4-溴-2-甲氧基苯甲酸
将4-溴-2-甲氧基苄腈(7.35g，35mmol)溶解于二噁烷(400mL)。加入氢氧化钠(2.0N，200mL)并将此悬浮液在100℃下加热16小时。减压除去有机溶剂并将此含水混合物过滤并用水洗涤。此滤液用盐酸(5.0N)中和至pH 1。过滤收集固体得到4-溴-2-甲氧基苯甲酸(3g，37％)。1H NMR(DMSO-d6)δ3.84(s，3H)，7.21(d，J＝8.25Hz，1H)，7.33(s，1H)，7.58(d，J＝8.23Hz，1H)。
c)4-溴-2-甲氧基-1-苯羰基氯
将4-溴-2-甲氧基苯甲酸(2.934g，12.70mmol)与碳酸钠(2.2g，26.51mmol)混合。加入亚硫酰氯(20mL)并将该反应混合物在80℃下加热16小时。蒸馏掉过量的亚硫酰氯后，加入庚烷并过滤收集固体，得到4-溴-2-甲氧基-1-苯羰基氯(3.16g，100％)。1H NMR(CDCl3)δ3.94(s，3H)，7.16(s，1H)，7.20(d，J＝8.51Hz，1H)，7.95(d，J＝8.51Hz，1H)。
d)N1-苯基-4-溴-2-甲氧基苯甲酰胺
将苯胺(1.24mL，13.62mmol)缓慢加入到4-溴-2-甲氧基-1-苯羰基氯(3.24g，12.98mmol)和三乙胺(2.7mL，19.48mmol)在二氯甲烷(130mL)中的混合物中。3小时后，减压除去溶剂。加入乙酸乙酯并将此混合物过滤。此滤液减压浓缩并将此残余物用乙酸乙酯/庚烷重结晶得到N1-苯基-4-溴-2-甲氧基苯甲酰胺(2.92g，74％)。1H NMR(DMSO-d6)δ3.92(s，3H)，7.09(s，1H)，7.27(m，1H)，7.33(m，2H)，7.39(s，1H)，7.55(d，J＝8.15Hz，1H)，7.71(m，2H)，10.10(s，1H)。
e)4-(苯氨基羰基)-3-甲氧基苯基羟基代硼酸
在-78℃下将正丁基锂(1.6M在己烷溶液中，5.1ml，8.16mmol)缓慢加入到N1-苯基-4-溴-2-甲氧基苯甲酰胺(1.0g，3.26mmol)的四氢呋喃(25mL)溶液中。30分钟后，快速加入硼酸三异丙基酯(1.13mL，4.90mmol)。15分钟后将该反应混合物升温至室温并在室温下搅拌16小时。加入盐酸(2.5N，18mL)并将此混合物搅拌5小时。分层并将水层用乙酸乙酯萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并浓缩。残余物用乙酸乙酯/庚烷重结晶，得到4-(苯氨基羰基)-3-甲氧基苯基羟基代硼酸(0.549g，62％)。1H NMR(DMSO-d6)δ3.91(s，3H)，7.08(m，1H)，7.33(m，2H)，7.47(d，J＝7.57Hz，1H)，7.59(m，2H)，7.73(d，J＝7.36Hz，2H)，8.24(s，2H)，10.10(s，1H)。
f)顺-N1-苯基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲酰胺
将顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-基胺(148mg，0.335mmol)、4-(苯氨基羰基)-3-甲氧基苯基羟基代硼酸(100mg，0.369mmol)、四(三苯基膦)钯(23mg，0.020mmol)和碳酸钠(85mg，0.845mmol)与乙二醇二甲醚(4mL)和水(2mL)混合。将该反应混合物加热回流过夜。减压除去有机溶剂并将水层用二氯甲烷萃取。合并的有机层用水洗涤，然后用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。残余物通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(95∶5)作为流动相，得到顺-N1-苯基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲酰胺(125mg，69％)。1H NMR(CDCl3)δ1.69(m，2H)，1.86(m，2H)，2.17(m，2H)，2.31(s，3H)，2.44(m，11H)，4.15(s，3H)，4.96(m，1H)，5.69(bs，2H)，7.14(m，1H)，7.37(m，2H)，7.45(m，2H)，7.68(m，2H)，8.41(m，2H)，9.77(s，1H)。LC/MS(Micromass-柱：Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：0％B/A至100％B/A在4.5分钟内，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，pH 4.5)，3.5mL/min.)：MH+＝541.2，Rt＝2.58min。
实施例201
反-N1-苯基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲酰胺
将反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(266mg，0.604mmol)、4-(苯氨基羰基)-3-甲氧基苯基羟基代硼酸(180mg，0.664mmol)、四(三苯基膦)钯(42mg，0.036mmol)和碳酸钠(154mg，1.449mmol)与乙二醇二甲醚(8mL)和水(4mL)混合。将该反应混合物加热回流过夜。减压除去有机溶剂并将水层用二氯甲烷萃取。合并的有机层用水洗涤，然后用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。残余物通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(95∶5)作为流动相，得到反-N1-苯基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲酰胺(226mg，69％)。1H NMR(CDCl3)δ1.58(m，4H)，2.17(m，7H)，2.32(s，3H)，2.52(m，2H)，2.69(2.69，3H)，4.16(s，3H)，4.78(m，1H)，5.49(bs，2H)，7.14(m，1H)，7.43(m，4H)，7.69(m，2H)，8.44(m，2H)，9.77(s，1H)。LC/MS(Micromass-柱：Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：在4.5分钟内0％B/A至100％B/A，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，pH 4.5)，3.5mL/min.)：MH+ 541.2，Rt＝2.61min。
实施例202
顺-N1-苄基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲酰胺
a)N1-苄基-4-溴-2-甲氧基苯甲酰胺
将苄基胺(0.69mL，6.31mmol)缓慢加入到4-溴-2-甲氧基-1-苯羰基氯(1.5g，6.01mmol)和三乙胺(1.3mL，9.02mmol)在二氯甲烷(60mL)中的混合物中。3小时后，减压除去溶剂。加入乙酸乙酯并将此混合物过滤。此滤液减压浓缩并将此残余物用乙酸乙酯/庚烷重结晶得到N1-苄基-4-溴-2-甲氧基苯甲酰胺(1.654g，86％)。1H NMR(DMSO-d6)δ3.92(s，3H)，4.67(d，J＝5.67Hz，32H)，7.31(m，7H)，8.03(bs，1H)，8.13(d，J＝8.41，1H)。
b)4-[(苄基氨基)羰基]-3-甲氧基苯基羟基代硼酸
在-78℃下将正丁基锂(1.6M在己烷溶液中，8.0ml，12.88mmol)缓慢加入到N1-苄基-4-溴-2-甲氧基苯甲酰胺(1.65g，5.15mmol)的四氢呋喃(40mL)溶液中。30分钟后，快速加入硼酸三异丙基酯(1.8mL，7.73mmol)。13分钟后将该反应混合物升温至室温并搅拌16小时。加入盐酸(2.5N，36mL)并将此混合物搅拌过夜。除去有机溶剂并将水层用乙酸乙酯萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并浓缩。残余物通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(95∶5)作为流动相，得到4-[(苄基氨基)羰基]-3-甲氧基苯基羟基代硼酸(0.675g，46％)。1H NMR(DMSO-d6)δ3.90(s，3H)，4.51(d，J＝6.18Hz，2H)，7.24(m，1H)，7.34(m，4H)，7.43(d，J＝7.55Hz，1H)，7.59(s，1H)，7.69(d，J＝7.55Hz，1H)，8.23(s，2H)，8.69(m，1H)。
c)顺-N1-苄基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲酰胺
将顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(141mg，0.319mmol)、4-[(苄基氨基)羰基]-3-甲氧基苯基羟基代硼酸(100mg，0.351mmol)、四(三苯基膦)钯(22mg，0.019mmol)和碳酸钠(81mg，0.765mmol)与乙二醇二甲醚(4mL)和水(2mL)混合。将该反应混合物加热回流过夜。减压除去有机溶剂并将水层用二氯甲烷萃取。合并的有机层用水洗涤，然后用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。残余物通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(95∶5)作为流动相，得到顺-N1-苄基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲酰胺(126mg，71％)。1H NMR(CDCl3)δ1.83(m，6H)，2.34(s，3H)，2.45(m，11H)，4.02(s，3H)，4.43(d，J＝5.66Hz，2H)，4.95(m，1H)，5.52(bs，2H)，7.37(m，7H)，8.18(m，1H)，8.41(m，1H)；LC/MS(Micromass-柱：Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：在4.5分钟内0％ B/A至100％B/A，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，pH 4.5)，3.5mL/min.)：MH+ 555.5，Rt＝2.65min。
实施例203
顺-N1-苯乙基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲酰胺
a)N1-苯乙基-4-溴-2-甲氧基苯甲酰胺
将苯乙胺(0.79mL，6.31mmol)缓慢加入到4-溴-2-甲氧基-1-苯羰基氯(1.5g，6.01mmol)和三乙胺(1.3mL，9.02mmol)在二氯甲烷(60mL)中的混合物中。2小时后，减压除去溶剂。加入乙酸乙酯并将此混合物过滤。此滤液减压浓缩并将此残余物通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/乙酸乙酯(97∶3)作为流动相，得到N1-苯乙基-4-溴-2-甲氧基苯甲酰胺(1.81g，90％)。1H NMR(DMSO-d6)δ2.83(m，2H)，3.50(m，2H)，3.84(s，3H)，7.31(m，7H)，7.65(d，J＝8.28Hz，1H)，8.15(m，1H)。
b)4-[(苯乙基氨基)羰基]-3-甲氧基苯基羟基代硼酸
在-78℃下将正丁基锂(1.6M在己烷溶液中，8.5ml，13.54mmol)缓慢加入到N1-苯乙基-4-溴-2-甲氧基苯甲酰胺(1.81g，5.41mmol)的四氢呋喃(40mL)溶液中。30分钟后，快速加入硼酸三异丙基酯(1.87mL，8.12mmol)。13分钟后将该反应混合物升温至室温并搅拌3小时。加入盐酸(2.5N，40mL)并将此混合物搅拌过夜。分层并将水层用乙酸乙酯萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并浓缩。残余物通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(95∶5)作为流动相，得到4-[(苄基氨基)羰基]-3-甲氧基苯基羟基代硼酸(0.916g，56％)。1H NMR(DMSO-d6)δ2.85(m，2H)，3.53(m，2H)3.88(s，3H)，7.31(m，7H)，7.70(d，J＝7.61Hz，1H)，8.19(m，2H)，9.10(m，1H)。
c)顺-N1-苯乙基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲酰胺
将顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(154mg，0.349mmol)、4-[(苯乙基氨基)羰基]-3-甲氧基苯基羟基代硼酸(115mg，0.384mmol)、四(三苯基膦)钯(24mg，0.021mmol)和碳酸钠(89mg，0.839mmol)与乙二醇二甲醚(4mL)和水(2mL)混合。将该反应混合物加热回流过夜。减压除去有机溶剂并将水层用二氯甲烷萃取。合并的有机层用水洗涤，然后用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。残余物通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(95∶5)作为流动相，得到顺-N1-苯乙基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲酰胺(64mg，32％)。1H NMR(CDCl3-d)δ1.62(m，4H)，2.16(m，16H)，2.87(m，2H)，3.57(m，2H)，3.90(s，3H)，4.83(m，1H)，7.31(m，7H)，7.95(m，1H)，8.22(m，2H)；LC/MS(Micromass-柱：Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：在4.5分钟内0％B/A至100％B/A，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，pH 4.5)，3.5mL/min.)：MH+＝569.3，Rt＝2.50min。
实施例204
顺-N1-苯基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯甲酰胺
a)N1-苯基-4-溴苯甲酰胺
将苯胺(0.87mL，9.57mmol)缓慢加入到4-溴-1-苯羰基氯(2.0g，9.11mmol)和三乙胺(1.9mL，13.67mmol)在二氯甲烷(95mL)的混合物中。3小时后，减压除去溶剂。加入乙酸乙酯并将此混合物过滤。将此滤液减压浓缩并将此残余物用乙酸乙酯/庚烷重结晶得到N1-苯基-4-溴苯甲酰胺(1.00g，40％)。1H NMR(DMSO-d6)δ7.11(m，1H)，7.38(m，2H)，7.76(m，4H)，7.92(m，2H)，10.30(s，1H)。
b)4-(苯氨基羰基)苯基羟基代硼酸
在-78℃下将正丁基锂(1.6M在己烷溶液中，5.7ml，9.05mmol)缓慢加入到N1-苯基-4-溴-2-甲氧基苯甲酰胺(1.0g，3.62mmol)的四氢呋喃(27mL)溶液中。30分钟后，快速加入硼酸三异丙基酯(1.25mL，5.43mmol)。13分钟后将该反应混合物升温至室温并搅拌6小时。加入盐酸(2.5N，27mL)并将此混合物搅拌过夜。分层并将水层用乙酸乙酯萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并浓缩。残余物用乙酸乙酯/庚烷重结晶得到4-(苯氨基羰基)苯基羟基代硼酸(0.354g，40％)。1H NMR(DMSO-d6)δ7.10(m，1H)，7.35(m，2H)，7.80(m，4H)，7.92(m，2H)，8.23(s，2H)，10.23(s，1H)。
c)顺-N1-苯基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯甲酰胺
将顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(100mg，0.226mmol)、4-(苯氨基羰基)苯基羟基代硼酸(60mg，0.249mmol)、四(三苯基膦)钯(16mg，0.014mmol)和碳酸钠(58mg，0.544mmol)与乙二醇二甲醚(3mL)和水(1.5mL)混合。将该反应混合物加热回流过夜。减压除去有机溶剂并将水层用二氯甲烷萃取。合并的有机层用水洗涤，然后用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。残余物通过制备薄层柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵(95∶5∶05)作为流动相，得到顺-N1-苯基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯甲酰胺(32mg，27％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.60(m，4H)，1.73(m，2H)，2.08(m，2H)，2.19(s，3H)，2.28(m，11H)，4.84(m，1H)，7.12(m，1H)，7.38(m，2H)，7.81(m，4H)，8.16(d，J＝8.30Hz，2H)，8.27(s，1H)，10.34(s，1H)。LC/MS(Micromass-柱：Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：0％B/A至100％B/A在4.5分钟内，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，pH 4.5)，3.5mL/min.)：MH+＝511.2，Rt＝2.41min。
实施例205
顺-N1-苯乙基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯甲酰胺
a)N1-苯乙基-4-溴苯甲酰胺
将苯乙胺(1.2mL，9.57mmol)缓慢加入到4-溴-1-苯羰基氯(2.0g，9.11mmol)和三乙胺(1.9mL，13.67mmol)在二氯甲烷(95mL)中的混合物中。3小时后，减压除去溶剂。加入乙酸乙酯并将此混合物过滤。将此滤液减压浓缩并将此残余物用乙酸乙酯/庚烷重结晶得到N1-苯基-4-溴苯甲酰胺(1.925g，69％)。1H NMR(DMSO-d6)δ2.84(m，2H)，3.47(m，2H)，7.28(m，5H)，7.67(d，J＝8.59Hz，2H)，7.76(d，J＝8.59Hz，4H)，8.64(m，1H)。
b)4-[(苯乙基氨基)羰基]苯基羟基代硼酸
在-78℃下将正丁基锂(1.6M在己烷溶液中，10ml，15.78mmol)缓慢加入到N1-苯基-4-溴-2-甲氧基苯甲酰胺(1.92g，6.31mmol)的四氢呋喃(47mL)溶液中。30分钟后，快速加入硼酸三异丙基酯(2.2mL，9.47mmol)。13分钟后将该反应混合物升温至室温并搅拌16小时。加入盐酸(2.5N，47mL)并将此混合物搅拌5小时。分层并将水层用乙酸乙酯萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并浓缩。残余物用乙酸乙酯/庚烷重结晶得到4-[(苯乙基氨基)羰基]苯基羟基代硼酸(0.486g，28％)。1H NMR(DMSO-d6)δ2.85(m，2H)，3.49(m，2H)，7.22(m，5H)，7.73(m，4H)，8.17(s，2H)，8.54(m，1H)。
c)顺-N1-苯乙基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯甲酰胺
将顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(100mg，0.226mmol)、4[(苯乙基氨基)羰基]苯基羟基代硼酸(60mg，0.249mmol)、四(三苯基膦)钯(16mg，0.014mmol)和碳酸钠(58mg，0.544mmol)与乙二醇二甲醚(3mL)和水(1.5mL)混合。将该反混合物加热回流过夜。减压除去有机溶剂并将水层用二氯甲烷萃取。合并的有机层用水洗涤，然后用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。残余物通过制备薄层柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(80∶20)作为流动相，得到顺-N1-苯乙基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯甲酰胺(28mg，23％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.62(m，4H)，2.24(m，16H)，2.88(m，2H)，3.54(m，2H)，4.82(m，1H)，7.29(m，7H)，8.73(d，J＝8.10Hz，2H)，7.99(d，8.17Hz，1H)，8.67(m，1H)。LC/MS(Micromass-柱：Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：在4.5分钟内0％B/A至100％B/A，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，pH 4.5)，3.5mL/min.)：MH+＝539.3，Rt＝2.50min。
实施例206
反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-1H-2-吲哚基甲酰胺，三马来酸盐
a)反-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯
将反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(4.0g，9.06mmol)、N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(3.48g，9.97mmol)、四(三苯基膦)钯(0.63g，0.64mmol)和碳酸钠(2.30g，21.75mmol)与乙二醇二甲醚(100ml)和水(50ml)混合。将该反应混合物加热回流过夜。减压除去有机溶剂并将水层用二氯甲烷萃取。合并的有机层用水洗涤，然后用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。残余物通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(80∶20)作为流动相，得到反-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(4.75g，98％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.48(m，11H)，2.02(m，6H)，2.15(s，3H)，2.35(m，5H)，2.53(m，4H)，3.87(s，3H)，4.64(m，1H)，7.20(m，2H)，7.90(d，J＝8.15，1H)，8.03(s，1H)，8.22(s，1H)。
b)反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
在0℃下，将三氟乙酸/二氯甲烷(20∶80，150mL)的混合物加入到N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(4.75g，8.85mmol)的二氯甲烷(100mL)溶液中。2小时后，除去冰浴并蒸发溶剂，并将此残余物溶解于二氯甲烷。加入氢氧化钠(1.0N)以调节pH约为10。过滤收集除去有机溶剂时形成的固体，得到反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(3.85g，100％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.44(m，2H)，1.96(m，6H)，2.21(s，3H)，2.33(m，5H)，2.53(m，4H)，3.83(s，3H)，4.60(m，1H)，5.03(bs，2H)，6.76(d，J＝7.91Hz，1H)，6.98(d，J＝7.89Hz，1H)，7.03(m，2H)，8.19(s，1H)。
c)反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-1H-2-吲哚基甲酰胺
向存在于二氯甲烷(14mL)的1H-2-吲哚基甲酸(0.738g，4.58mmol)中加入草酰氯(4mL，45.8mmol)和DMF(1滴)。将该反应混合物搅拌过夜。蒸发溶剂并将此残余物溶解于二氯甲烷(5mL)。在0℃，将此二氯甲烷溶液的一半(2.5mL)加入到存在于吡啶(6mL)的反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.50g，1.145mmol)中。30分钟后，过滤收集此固体。然后将水加入到此固体中并用氢氧化钠(1.0N)将此溶液的pH调节至10，水相用二氯甲烷萃取。合并的有机层用水洗涤，然后用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。残余物通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(80∶20)作为流动相，得到反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-1H-2-吲哚基甲酰胺(0.312g，47％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.49(m，2H)，2.05(m，6H)，2.15(s，3H)，2.32(m，5H)，2.51(m，4H)，3.97(s，3H)，4.66(m，1H)，7.10(m，1H)，7.22(m，1H)，7.30(d，J＝7.98Hz，1H)，8.11(d，J＝8.14Hz，1H)，8.24(s，1H)，9.44(s，1H)。
d)反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-1H-2-吲哚基甲酰胺，三马来酸盐
将反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-1H-2-吲哚基甲酰胺(312mg，0.539mmol)溶解于热乙酸乙酯(35mL)中并加入存在于热乙酸乙酯(5mL)的马来酸(187mg，1.614mmol)。将该反应混合物室温下搅拌5小时。过滤收集固体得到反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-1H-2-吲哚基甲酰胺，二马来酸盐(473mg，95％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.60(m，2H)，2.09(m，6H)，2.68(s，3H)，2.84-3.19(bm，9H)，3.97(s，3H)，4.73(m，1H)，6.17(s，6H)，7.11(m，1H)，7.25(m，1H)，7.30(m，1H)，7.34(s，1H)，7.41(s，1H)，7.49(d，J＝8.21，1H)，7.68(d，J＝8.02Hz，1H)，8.13(d，J＝8.15Hz，1H)，8.26(s，1H)，9.44(s，1H)，11.38(s，1H)。LCMS(Finigan-柱：Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：0％B/A至100％B/A，在4分钟内，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，pH 4.5)，3.0mL/min.)：MH+＝580.4，Rt＝2.01min。
实施例207
反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-1-甲基-1H-2-吲哚基甲酰胺，三马来酸盐
a)反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-1-甲基-1H-2-吲哚基甲酰胺
向存在于二氯甲烷(14mL)的1-甲基-1H-2-吲哚基甲酸(0.802g，4.58mmol)中加入草酰氯(4mL，45.8mmol)和DMF(1滴)。将该反应混合物搅拌过夜。蒸发溶剂并将此残余物溶解于二氯甲烷(5mL)。在0℃，将此二氯甲烷溶液的一半(2.5mL)加入到存在于吡啶(6mL)的反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.50g，1.145mmol)中。30分钟后，过滤收集固体。然后将水加入到此固体中并用氢氧化钠(1.0N)将此溶液的pH调节至10。水相用二氯甲烷萃取。合并的有机层用水洗涤，然后用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。残余物通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(80∶20)作为流动相，得到反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-1-甲基-1H-2-吲哚基甲酰胺(0.545g，80％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.49(m，2H)，2.02(m，6H)，2.17(s，3H)，2.36(m，5H)，2.55(m，4H)，3.96(s，3H)，4.04(s，3H)，4.66(m，1H)，7.15(m，1H)，7.28-7.35(m，4H)，7.58(d，J＝8.42Hz，1H)，7.70(d，J＝7.96Hz，1H)，8.11(d，J＝8.14，1H)，8.24(s，1H)，9.43(s，1H)。
b)反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-1-甲基-1H-2-吲哚基甲酰胺，三马来酸盐
将反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-甲氧基苯基)-1-甲基-1H-2-吲哚基甲酰胺(545mg，0.917mmol)溶解于热乙酸乙酯(60mL)并加入存在于热乙酸乙酯(5mL)的马来酸(320mg，2.75mmol)。将该反应混合物室温下搅拌5小时。过滤收集固体得到反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-1-甲基-1H-2-吲哚基甲酰胺，二马来酸盐(473mg)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.60(m，2H)，2.06(m，6H)，2.68(s，3H)，2.83-3.57(bm，9H)，3.96(s，3H)，4.04(s，3H)，4.72(m，1H)，6.18(s，6H)，7.16(m，1H)，7.28-7.36(m，4H)，7.59(d，J＝8.44Hz，1H)，7.72(d，J＝7.94Hz，1H)，8.13(d，J＝8.15，1H)，8.28(s，1H)，9.44(s，1H)。LC/MS(Finigan-柱：Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm洗脱剂：0％B/A至100％B/A，在4分钟内，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，pH 4.5)，3.0mL/min.)：MH+＝594.4，Rt＝2.24。
实施例208
反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲基)苯甲酰胺，三马来酸盐
a)反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲基)苯甲酰胺
在0℃下，将存在于二氯甲烷(1mL)的4-(三氟甲基)-1-苯羰基氯(262mg，1.256mmol)加入到反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(500mg，1.145mmol)的吡啶(8mL)溶液中。30分钟后，除去冰浴并将该反应混合物室温下搅拌1.5小时。蒸发溶剂并将此残余物通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(80∶20)作为流动相，得到反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲基)苯甲酰胺(516mg，74％)。1H NMR(CDCl3-d)δ1.55(m，2H)，1.74(m，2H)，2.10-2.27(m，6H)，2.30(s，3H)，2.51(m，4H)，2.66(m，3H)，3.96(s，3H)，4.04(s，3H)，4.78(m，1H)，5.57(bs，2H)，7.30(m，2H)，7.79(d，J＝8.25Hz，2H)，8.04(d，J＝8.05Hz，2H)，8.38(s，1H)，8.64(s，1H)，8.68(d，J＝8.20Hz，1H)。
b)反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲基)苯甲酰胺三马来酸盐
将反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲基)苯甲酰胺(510mg，0.838mmol)溶解于热乙酸乙酯(55mL)，并加入存在于热乙酸乙酯(5mL)的马来酸(292mg，2.513mmol)。将该反应混合物室温下搅拌5小时。过滤收集固体得到反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲基)苯甲酰胺，二马来酸盐(802mg，100％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.60(m，2H)，2.06(m，6H)，2.68(s，3H)，2.83-3.17(bm，9H)，3.93(s，3H)，4.72(m，1H)，6.17(s，6H)，7.29(d，J＝8.12Hz，1H)，7.33(s，1H)，7.92(d，J＝8.34Hz，2H)，8.02(d，J＝8.12Hz，1H)，8.17(d，J＝8.12Hz，2H)，8.26(s，1H)，9.83(s，1H)。LCMS(Finigan-柱：Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：0％B/A至100％B/A，在4分钟内，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，pH 4.5)，3.0mL/min.)：MH+＝609.4，Rt＝2.16min。
实施例209
反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲氧基)苯甲酰胺，三马来酸盐
a)反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲氧基)苯甲酰胺
在0℃下，将存在于二氯甲烷(1mL)的4-(三氟甲氧基)-1-苯羰基氯(283mg，1.256mmol)加入到反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(500mg，1.145mmol)的吡啶(8mL)溶液中。30分钟后，除去冰浴，将该反应混合物室温下搅拌1.5小时。蒸发溶剂并将此残余物通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(80∶20)作为流动相，得到反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲氧基)苯甲酰胺(526mg，74％)。1H NMR(CDCl3)δ1.57(m，2H)，1.74(m，2H)，2.10-2.27(m，6H)，2.30(s，3H)，2.51(m，4H)，2.66(m，3H)，4.03(s，3H)，4.77(m，3H)，5.56(bs，2H)，7.26-7.37(m，4H)，7.99(m，2H)，8.38(s，1H)，8.59(s，1H)，8.67(d，J＝8.21Hz，1H)。
b)反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲氧基)苯甲酰胺，三马来酸盐
将反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲氧基)苯甲酰胺(520mg，0.832mmol)溶解于热乙酸乙酯(55mL)并加入存在于热乙酸乙酯(5mL)的马来酸(290mg，2.497mmol)。将该反应混合物室温下搅拌5小时。过滤收集固体得到反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲氧基)苯甲酰胺，二马来酸盐(780mg，96％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.60(m，2H)，2.06(m，6H)，2.68(s，3H)，2.83-3.17(bm，9H)，3.93(s，3H)，4.72(m，1H)，6.18(s，6H)，7.28(d，J＝8.14Hz，1H)，7.33(s，1H)，7.54(d，J＝8.47Hz，2H)，8.01(d，J＝8.12Hz，1H)，8.10(d，J＝8.69Hz，2H)，8.26(s，1H)，9.69(s，1H)。LCMS(Finigan-柱：Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：0％B/A至100％B/A，在4分钟内，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，pH 4.5)，3.0mL/min.)：MH+＝625.4，Rt＝2.21min。
实施例210
N1-{4-[4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-3-苯基丙酰胺
a)4-羟基-1-哌啶甲酸叔丁基酯
在0℃下，将硼氢化钠(3.8g，100.4mmol)分批加入到4-氧代-1-哌啶甲酸叔丁基酯(20g，100.4mmol)的甲醇(600mL)溶液中。15分钟后，除去冰水浴并将该反应混合物室温下搅拌3小时。加入氢氧化钠(1.0N，100mL)并蒸发有机溶剂。水层用乙醚萃取4次。合并的有机层用水洗涤，然后用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发得到叔丁基4-羟基-1-哌啶甲酸酯(20.48g，100％)。1H NMR(CDCl3-d)δ1.48(s，9H)，1.63(m，2H)，1.87(m，2H)，3.03(m，2H)，3.83(m，3H)。
b)4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯
将3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(10g，38.3mmol)、4-羟基-1-哌啶甲酸叔丁基酯(16.96g，84.2mmol)和三苯基膦(20.09g，76.0mmol)悬浮于四氢呋喃(425mL)。将该反应混合物在冰水浴中冷却并滴加偶氮二甲酸二乙酯(12.09mL，76.0mmol)。10分钟后，该反应混合物升温至室温。5小时后，减压除去溶剂并在加热下加入二氯甲烷(65mL)。将此固体过滤并用二氯甲烷(20ml)洗涤。此固体进-步用乙酸乙酯(5×20mL)洗涤得到二乙基1，2-肼二甲酸酯和叔丁基4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸酯(1∶1，14.98g，63％)，其不经进一步纯化直接使用。1H NMR(CDCl3)δ1.48(s，9H)，1.95(m，2H)，2.20(m，2H)，2.92(m，2H)，4.23(m，2H)，4.84(m，1H)，8.31(s，1H)。
c)3-碘-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
在0℃下，将三氟乙酸/二氯甲烷(20∶80，250mL)的混合物加入到存在于二氯甲烷(100mL)的4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯(10.72g，24.1mmol)中。15分钟后，除去冰浴并将该反应混合物室温下搅拌5小时。蒸发溶剂并将此残余物溶解于二氯甲烷。加入盐酸(5.0N)并将水层用二氯甲烷洗涤3次。加入氢氧化钠(50％)以调节pH为约10。将此悬浮液冻干，将体积降低到原体积的三分之一。过滤收集此固体得到3-碘-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(8.109g，97％)。1H NMR(CDCl3)δ1.81(m，2H)，1.99(m，2H)，2.65(m，2H)，3.07(m，2H)，4.68(m，1H)，8.19(s，1H)。
d)3-碘-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)]-哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将3-碘-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.00g，5.81mmol)、1-甲基-4-哌啶酮(2.14mL，17.42mmol)、三乙酰氧基硼氢化钠(2.45g，11.62mmol)和冰醋酸(1.05g，17.42mmol)与1，2-二氯乙烷(75mL)混合。将该反应混合物室温下搅拌6小时并加入饱和碳酸氢钠溶液以调节PH为约8。过滤收集固体得到3-碘-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)]-哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.39g，93％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.52(m，2H)，1.75(m，2H)，1.87(m，2H)，2.05(m，4H)，2.24(s，3H)，2.28(m，3H)，2.91(m，2H)，3.00(m，2H)，4.55(m，1H)，8.18(s，1H)。
e)N-{4-[4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)-哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}氨基甲酸叔丁基酯
将3-碘-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)]-哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.39g，5.41mmol)、N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(2.08g，5.96mmol)、四(三苯基膦)钯(0.375g，0.32mmol)和碳酸钠(1.38g，13.00mmol)与乙二醇二甲醚(80mL)和水(40mL)混合。将该反应混合物加热回流过夜。减压除去有机溶剂并将水层用二氯甲烷萃取。合并的有机层用水洗涤，然后用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。残余物通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵(95∶5∶0.5)作为流动相，得到N-{4-[4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)-哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}氨基甲酸叔丁基酯(1.67g，57％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.48(m，11H)，1.71(m，2H)1.86(m，4H)，2.14(s，3H)，2.18(m，3H)，2.32(m，2H)，2.80(m，2H)，3.89(s，3H)，4.64(m，1H)，7.22(m，2H)，7.91(d，J＝8.12，1H)，8.03(s，1H)，8.21(s，1H)。
f)N1-{4-[4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-3-苯基丙酰胺
将3-苯基丙酰氯(77mg，0.458mmol)加入到3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)-哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(100mg，0.229mmol)的吡啶(1.2mL)溶液中。5小时后，蒸发溶剂并将此残余物通过急骤柱色谱纯化得到N1-{4-[4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-3-苯基丙酰胺(24mg，18％)。1H NMR(CDCl3-d)δ1.70(m，2H)，1.85(m，2H)，2.04(m，4H)，2.30(s，3H)，2.41(m，5H)，2.75(m，2H)，2.97(m，2H)，3.08(m，4H)，3.90(s，3H)，4.75(m，1H)，5.71(bs，2H)，7.24(m，8H)，7.76(s，1H)，8.34(s，1H)，8.52(d，J＝8.12，1H)。LCMS(Finigan-柱：Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：0％B/A至100％B/A，在4分钟内，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，PH 4.5)，3.0mL/min.)：MH+＝569.5，Rt＝1.65min。
实施例211
N1-{4-[4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-4-(三氟甲氧基)苯甲酰胺
将4-(三氟甲氧基)-1-苯羰基氯(103mg，0.458mmol)加入到3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)-哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(100mg，0.229mmol)的吡啶(1.0mL)溶液中。5小时后，蒸发溶剂并将此残余物通过急骤柱色谱纯化得到N1-{4-[4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-4-(三氟甲氧基)苯甲酰胺(40mg，28％)。1H NMR(CDCl3-d)δ1.67(m，2H)，1.84(m，2H)，1.97(m，2H)，2.06(m，2H)，2.28(s，3H)，2.45(m，5H)，2.94(m，2H)，3.10(m，2H)，4.03(s，3H)，4.77(m，1H)，5.53(bs，2H)，7.34(m，4H)，7.98(d，J＝8.73Hz，2H)，8.38(s，1H)，8.59(s，1H)，8.66(d，J＝8.73Hz，1H)。
LCMS(Finigan-柱：Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：0％B/A至100％B/A，在4分钟内，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，PH 4.5)，3.0mL/min.)：MH+＝625.5，Rt＝2.00min。
实施例212
N1-{4-[4-氨基-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-4-(三氟甲基)苯甲酰胺，三马来酸盐
a)N1-{4-[4-氨基-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-4-(三氟甲基)苯甲酰胺
将4-(三氟甲基)-1-苯羰基氯(48mg，0.231mmol)加入到3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)-哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(101mg，0.231mmol)的吡啶(1.0mL)溶液中。5小时后，蒸发溶剂并将此残余物通过急骤柱色谱纯化得到N1-{4-[4-氨基-1-(1-甲基-4哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-4-(三氟甲基)苯甲酰胺(83mg，59％)。1H NMR(CDCl3-d)δ1.68(m，2H)，1.82(m，4H)，2.01(m，4H)，2.29(s，3H)，2.44(m，3H)，2.93(m，2H)，3.30(m，2H)，4.03(s，3H)，4.77(m，1H)，5.60s，2H)，7.33(m，2H)，1.79d，J＝8.19Hz，2H)，8.04(d，J＝8.04Hz，2H)，8.37(s，1H)，8.66(m，2H)。LCMS(Micromass-柱：Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：在4.5分钟内0％B/A至100％B/A，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，PH 4.5)，3.5mL/min.)：MH+＝609.4，Rt＝2.50min。
b)N1-{4-[4-氨基-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-4-(三氟甲基)苯甲酰胺，三马来酸盐
将N1-{4-[4-氨基-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-4-(三氟甲基)苯甲酰胺(78mg，0.128mmol)溶解于热乙酸乙酯(10mL)中，并加入在热乙酸乙酯(1mL)中的马来酸(45mg，0.387mmol)。将该反应混合物室温下搅拌5小时。除去溶剂并加入乙酸乙酯，过滤收集固体得到N1-{4-[4-氨基-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-4-(三氟甲基)苯甲酰胺，三马来酸盐(115mg，94％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.87(m，2H)，2.24(m，4H)，2.79(s，3H)，3.01-3.57(bm，11H)，3.93(s，3H)，5.09(m，1H)，6.12(s，6H)，7.32(m，2H)，7.93(d，J＝8.37Hz，2H)，8.04(d，J＝8.11Hz，1H)，8.16(d，J＝8.18Hz，2H)，8.29(s，1H)，9.84(s，1H)。LCMS(Micromass-柱：Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：在4.5分钟内0％B/A至100％B/A，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，PH 4.5)，3.5mL/min.)：MH+＝609.4，Rt＝2.50min。
实施例213
1-[1-(1H-2-咪唑基甲基)四氢-1H-3-吡咯基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
a)3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-吡咯烷甲酸叔丁基酯
将3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.5g，1.648mmol)，3-｛[(4-甲基苯基)磺酰基]氧基}-1-吡咯烷甲酸叔丁基酯(1.12g，3.30mmol)和碳酸铯(1.07g，3.30mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(12mL)中在75℃下加热过夜。将该反应混合物倒入到冰水(100mL)中。水层用乙酸乙酯萃取。合并的有机层用水洗涤，然后用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。残余物通过急骤柱色谱纯化，用乙酸乙酯作为流动相，得到3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-吡咯烷甲酸叔丁基酯(0.20g，28％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.38(m，9H)，2.37(m 2H)，3.32(s，3H)，3.44(m，1H)，3.59(m，1H)，3.65(m，1H)，3.75(m，1H)，5.44(m，1H)，7.16(m，5H)，7.43(m，2H)，7.65(m，2H)，8.26(s，1H)。
b)3-(4-苯氧基苯基)-1-四氢-1H-3-吡咯基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
在0℃下，将三氟乙酸/二氯甲烷(20∶80，8mL)的混合物加入到3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-吡咯烷甲酸叔丁基酯(240mg，0.508mmol)的二氯甲烷(1mL)溶液中。15分钟后，除去冰浴并将该反应混合物室温下搅拌5小时。然后蒸发溶剂并将此残余物溶解于乙酸乙酯。加入饱和碳酸氢钠以调节pH为约8。分层并将水层用乙酸乙酯萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发得到3-(4-苯氧基苯基)-1-四氢-1H-3-吡咯基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.157mg，91％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.99-2.21(m，2H)，2.94(m，1H)，3.04-3.23(m，3H)，5.31(m，1H)，7.14(m，5H)，7.44(m，2H)，7.67(m，2H)，8.24(s，1H)。
c)1-[1-(1H-2-咪唑基甲基)四氢-1H-3-吡咯基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将3-(4-苯氧基苯基)-1-四氢-1H-3-吡咯基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(100mg，5.81mmol)、1H-2-咪唑甲醛(77mg，0.806mmol)、三乙酰氧基硼氢化钠(113mg，0.537mmol)和冰醋酸(48mg，0.806mmol)与1，2-二氯乙烷(4mL)混合。将该反应混合物室温下搅拌6小时，并加入饱和碳酸氢钠溶液以调节pH为约9。水层用二氯甲烷萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。残余物通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(90∶10)作为流动相，得到1-[1-(1H-2-咪唑基甲基)四氢-1H-3-吡咯基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(100mg，83％)。1H NMR(DMSO-d6)δ2.33(m，2H)，2.81(m，4H)，3.15(m，1H)，3.69(s，2H)，5.38(m，1H)，6.90(s，2H)，7.15(m，5H)，7.44(m，2H)，7.66(m，2H)，8.24(s，1H)。LCMS(Micromass-柱：Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：在4.5分钟内0％B/A至100％B/A，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，PH 4.5)，3.5mL/min.)：MH+453.4，Rt＝2.17min。
实施例214
1-[1-(1-甲基-4-哌啶基)四氢-1H-3-吡咯基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，三马来酸盐
a)1-[1-(1-甲基-4-哌啶基)四氢-1H-3-吡咯基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将3-(4-苯氧基苯基)-1-四氢-1H-3-吡咯基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(150mg，0.403mmol)、1-甲基-4-哌啶酮(0.099mL，0.806mmol)，三乙酰氧基硼氢化钠(113mg，0.537mmol)和冰乙酸(48mg，0.806mmol)与1，2-二氯乙烷(4mL)混合。将反应混合物室温下搅拌6小时，并加入饱和碳酸氢钠溶液以调节pH为约9。水层用二氯甲烷萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。残余物通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(85∶15)作为流动相，得到1-[1-(1-甲基-4-哌啶基)四氢-1H-3-吡咯基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(148mg，78％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.42(m，2H)，1.81(m，2H)，1.92(m，2H)，2.15(m，1H)，2.26(m，2，3H)，2.28(m，2H)，2.75(m，4H)，2.86(m，1H)，3.22(m，1H)，5.36(m，1H)，7.16(m，5H)，7.44(m，2H)，7.67(m，2H)，8.24(s，1H)。LCMS(Micromass-柱：Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：在4.5分钟内0％B/A至100％B/A，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，PH 4.5)，3.5mL/min.)：MH+＝470.4，Rt＝2.01。
b)1-[1-(1-甲基-4-哌啶基)四氢-1H-3-吡咯基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，三马来酸盐
将1-[1-(1-甲基-4-哌啶基)四氢-1H-3-吡咯基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(148mg，0.315mmol)溶解于热乙酸乙酯(20mL)，并加入存在于热乙酸乙酯(1mL)的马来酸(110mg，0.946mmol)。将该反应混合物室温下搅拌5小时。过滤收集固体得到1-[1-(1-甲基-4-哌啶基)四氢-1H-3-吡咯基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，三马来酸盐(230mg，90％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.81(m，2H)，2.27(m，2H)，2.78(s，3H)，2.97-3.84(bm，11H)，5.63(m，1H)，6.12(s，6H)，7.17(m，5H)，7.45(m，2H)，7.68(m，2H)，8.29(s，1H)。LCMS(Micromass-柱：Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：在4.5分钟内0％B/A至100％B/A，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，PH 4.5)，3.5mL/min.)：MH+＝470.4，Rt＝2.01。
实施例215
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1H-2-咪唑基甲基)-4-哌啶基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-苯基丙酰胺
a)1-[1-(1H-2-咪唑基甲基)-4-哌啶基]-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将3-碘-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.5g，1.45mmol)、1H-2-咪唑甲醛(0.42g，4.34mmol)、三乙酰氧基硼氢化钠(0.61g，2.90mmol)和冰醋酸(0.26g，4.36mmol)与1，2-二氯乙烷(20mL)混合。将该反应混合物室温下搅拌6小时，并加入饱和碳酸氢钠溶液以调节pH为约9。水层用二氯甲烷萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发得到1-[1-(1H-2-咪唑基甲基)-4-哌啶基]-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.57g，92％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.85(m，2H)，2.17(m，4H)，2.92(m，2H)，3.55(s，2H)，4.57(m，1H)，6.92(s，2H)，8.14(s，1H)。
b)N-(4-{4-氨基-1-[1-(1H-2-咪唑基甲基)-4-哌啶基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯
将1-[1-(1H-2-咪唑基甲基)-4-哌啶基]-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(127mg，0.299mmol)、N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(115mg，0.329mmol)、四(三苯基膦)钯(21mg，0.018mmol)和碳酸钠(76mg，0.718mmol)与乙二醇二甲醚(3mL)和水(1.5mL)混合。将该反应混合物加热回流过夜。减压除去有机溶剂并将水层用二氯甲烷萃取。合并的有机层用水洗涤，然后用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。残余物通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(95∶5)作为流动相，得到N-(4-{4-氨基-1-[1-(1H-2-咪唑基甲基)-4-哌啶基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(64mg，41％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.48(m，9H)，1.87(m，2H)，2.23(m，4H)，2.94(m，2H)，3.56(s，2H)，3.88(s，3H)，4.66(m，1H)，6.92(s，2H)，7.21(m，2H)，7.90(d，J＝8.14，1H)，8.04(s，1H)，8.22(s，1H)。
c)3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1H-2-咪唑基甲基)-4-哌啶基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
在0℃下，将三氟乙酸/二氯甲烷(20∶80，2mL)的混合物加入到N-(4-{4-氨基-1-[1-(1H 2-咪唑基甲基)-4-哌啶基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(55mg，0.106mmol)的二氯甲烷(0.5mL)溶液中。15分钟后，除去冰浴并将该反应混合物室温下搅拌5小时。然后蒸发溶剂并将此残余物溶解于二氯甲烷。加入饱和碳酸氢钠以调节PH为约8。分层并将水层用二氯甲烷萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发得到3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1H 2-咪唑基甲基)-4-哌啶基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(30mg，68％)。1H NMR(CDCl3-d)δ2.20(m，2H)，2.44(m，2H)，3.04(m，2H)，3.75(s，2H)，3.93(s，3H)，4.01(s，2H)，4.80(m，1H)，5.58(bs，2H)，6.82(m，1H)，7.01(m，4H)，8.34(s，1H)。
e)N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1H-2-咪唑基甲基)-4-哌啶基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-苯基丙酰胺
在0℃下将3-苯基丙酰氯(0.011mL，0.0715mmol)加入到3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1H-2-咪唑基甲基)-4-哌啶基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(30mg，0.0715mmol)的吡啶(1.2mL)溶液中。2小时后，蒸发溶剂并将此残余物通过急骤柱色谱纯化，得到N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1H-2-咪唑基甲基)-4-哌啶基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-苯基丙酰胺(20mg，51％)。1H NMR(CDCl3)δ2.27(m，2H)，2.61(m，2H)，2.76(m，4H)，3.09(m，2H)，3.93(s，3H)，4.07(s，2H)，4.96(m，1H)，5.61(bs，2H)，7.06-7.33(m，10H)，7.78(s，1H)，8.35(s，1H)，8.55(d，J＝8.15Hz，1H)。LCMS(Finigan-柱：Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：0％B/A至100％B/A，在4分钟内，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，pH4.5)，3.0mL/min.)：MH+＝552.5，Rt＝1.83min。
实施例216-221
得自顺-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-7H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺的酰胺
典型方法：
向存在于二氯甲烷(1.4mL)的适当羧酸(0.46mmol)中加入草酰氯(0.4mL，4.6mmol)和DMF(1滴)。将小瓶用隔膜盖上并在各盖上插入小号针头以释放压力。这些小瓶在J-Kem震摇器上摇动过夜。分离50％的溶液，然后将过量的草酰氯和二氯甲烷在12孔Supelco支管上真空下随氮气流除去。将粗品酰氯(0.23mmol)加入到存在于干燥吡啶(0.6mL)中的顺-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(50mg，0.11mmol)中，并室温下搅拌过夜。所得溶液直接通过制备HPLC进行纯化(HypersilBSD C18，5μm，100×21mm，在10分钟内0％-100％乙腈/0.05M醋酸铵，25.0mL/min)。所得产物通过在二氯甲烷(4ml)和1.0N氢氧化钠(2ml)之间分配并通过Empore高效萃取圆盘柱(C18-SD十八烷基)来进一步纯化，得到相应的产物。对这些化合物的详细描述见下页，其中给出了相应的LCMS(Micromass-柱：Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：在4.5分钟内0％B/A至100％B/A，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，PH 4.5)，3.5L/min.)数据。
实施例221
顺-3-[4-(苄基氧基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(3.41g，7.74mmol)在乙二醇二甲基醚(50mL)中的混合物用4-(苄基氧基)苯基羟基代硼酸(1.94g，8.51mmol)、四(三苯基膦)钯(0.537g，0.464mmol)和碳酸钠(1.97g，18.58mmol)的水(25mL)溶液处理。将该反应混合物在85℃氮气氛下搅拌过夜。减压下除去有机溶剂。将乙酸乙酯(300mL)加入到水层中。分层，并将水层用乙酸乙酯(200mL)萃取。合并的有机层用水和盐水洗涤(各1L)，用硫酸镁干燥，过滤并减压蒸发。将乙酸乙酯加到此固体中。大部分此固体不溶于乙酸乙酯，接着过滤得到2.95g(77％)的顺-3-[4-(苄基氧基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.217(s，1H)，7.592-7.570(m，2H)，7.504-7.483(m，2H)，7.440-7.369(m，3H)，7.206-7.184(m，2H)，5.186(s，2H)，4.802-4.755(m，1H)，2.497-2.354(m，7H)，2.256-2.228(m，4H)，2.151(s，3H)，2.076-1.989(m，2H)，1.694-1.673(m，2H)，1.607-1.545(m，2H)；
HPLC Waters 2690 Alliance HPLC(Symmetry Shield RP18 3.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵，在15分钟内，0.5mL/min)Rt 5.128min(100％)。
实施例222
顺-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-[(3-甲氧基丙基)氨基]苄腈
顺-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶3-基}苯酚
将顺-3-[4-(苄基氧基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.500g，1.005mmol)的无水乙醇(25mL)溶液用10wt.％钯-活性炭(0.100g，0.201mmol)和甲酸铵(0.317g，5.03mmol)处理。将该反应混合物在80℃下搅拌2小时；通过薄层色谱观察不到起始物。将该反应混合物通过硅藻土垫过滤，用乙醇(500mL)洗涤。减压下除去有机层。所得固体真空下干燥过夜，得到0.406g(99％)的顺-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯酚。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.204-8.194(m，2H)，7.472-7.437(m，2H)，6.947-6.912(m，2H)，4.791-4.744(m，1H)，2.418(m，9H)，2.249-2.243(m，2H)，2.193(s，3H)，2.077-2.050(m，2H)，1.688-1.666(m，2H)，1.656-1.578(m，2H)；HPLC Waters 2690 Alliance HPLC(Symmetry Shield RP18 3.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵，在15分钟内，0.5mL/min)Rt 3.47min(99％)。
2-氟-6-[(2-甲氧基乙基)氨基]苄腈
将2，6-二氟苄腈(3.5g，25.16mmol)的二甲基甲酰胺(50mL)溶液用3-甲氧基丙基胺(2.24g，25.16mmol)和碳酸钾(6.94g，50.32mmol)处理。将该反应混合物在氮气氛下搅拌过夜。将水(100mL)加入到该反应溶液中。分层，并将水层用乙酸乙酯(1.2L)萃取。将合并的有机层用水洗涤(1.5L)，用硫酸镁干燥，过滤，并减压蒸发。粗品在硅胶上通过急骤色谱纯化，用7∶1庚烷∶乙酸乙酯作为洗脱剂。过柱后得到3.5g(68％)的2-氟-6-[(2-甲氧基乙基)氨基]苄腈。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.48-7.39(m，1H)，6.64-6.48(m，2H)，3.45-3.31(m，2H)，3.30-3.20(m，5H)，1.85-1.75(m，2H)；HPLC Waters 2690 Alliance HPLC(Symmetry Shield RP18 3.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵，在15分钟内，0.5mL/min)Rt6.57min(97％)。
顺-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-[(3-甲氧基丙基)氨基]苄腈
将顺-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯酚(0.200g，0.491mmol)的二甲基甲酰胺(25mL)溶液，用2-氟-6-[(2-甲氧基乙基)氨基]苄腈(0.124g，0.589mmol)和碳酸钾(0.136，0.982mmol)处理。将该反应混合物在120℃下在氮气氛下搅拌过夜。该反应18小时后还没有完成，因此再将2-氟-6-[(2-甲氧基乙基)氨基]苄腈(0.12g，0.574mmol)加入到该反应混合物中并搅拌过夜。将乙酸乙酯加入到该反应混合物中，并用1N氢氧化钠溶液(300mL)洗涤。将此有机层用水和盐水洗涤(各300mL)，用硫酸镁干燥，过滤并减压蒸发。产物通过急骤色谱在硅胶Supelco柱上纯化，用存在于二氯甲烷中的20％甲醇作为洗脱剂。过柱后得到0.050g的产物，其中含有一些起始物。粗品通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，100×21mm柱，5μm，15-100％乙腈梯度在8分钟内，总过柱时间-10min，缓冲液-50mM醋酸铵，25ml/min)。将得自HPLC柱的产物溶解于二氯甲烷，用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤以除去残余的醋酸铵。分层，用Empore萃取圆盘柱纯化得到0.010g(3％)顺-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-[(3-甲氧基丙基)氨基]苄腈。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.328(s，1H)，7.706-7.678(m，2H)，7.305-7.211(m，4H)，6.433-6.411(d，1H，J＝8.8Hz)，4.925-4.904(m，1H)，3.574-3.547(m，2H)，3.400(s，3H)，3.389-3.343(m，2H)，2.441-2.418(m，3H)，2.382(s，3H)，2.25-2.10(m，2H)，2.031(s，3H)，1.973-1.944(m，2H)，1.851-1.829(m，2H)，1.700-1.679(m，3H)，1.355-1.200(m，5H)；HPLC Waters 2690Alliance HPLC(Symmetry Shield RP18 3.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵，在15分钟内，0.5mL/min)Rt 5.185min(100％)。
实施例223
顺-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-[(4-甲基苯基)硫基]苄腈三马来酸盐
2-氟-6-[(4-甲基苯基)硫基]苄腈
将2，6-二氟苄腈(5.18g，37.26mmol)的二甲基甲酰胺(100mL)溶液用对甲苯硫酚(4.628g，37.26mmol)和碳酸钾(10.28g，74.52mmol)处理。将该反应混合物在氮气氛下搅拌24小时。将水(150mL)和乙酸乙酯(250mL)加入到该反应混合物中。分层，并将水层用乙酸乙酯(500mL)萃取。合并的有机层用水洗涤(1L)，用硫酸镁干燥，过滤并减压蒸发。粗品在硅胶上通过急骤色谱纯化，用7∶1庚烷∶乙酸乙酯洗脱。过柱后得到3.341g(37％)的2-氟-6-[(4甲基苯基)硫基]苄腈。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.66-7.61(m，1H)，7.47-7.45(m，2H)，7.36-7.32(m，3H)，6.83-6.79(m，1H)，2.36(s，3H)；HPLCWaters 2690 Alliance HPLC(Symmetry Shield RP18 3.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵，在15分钟内，0.5mL/min)Rt 8.04min(93％)。
顺-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-[(4-甲基苯基)硫基]苄腈三马来酸盐
将顺-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯酚(0.300g，0.736mmol)的二甲基甲酰胺(20mL)溶液，用2-氟-6-[(4-甲基苯基)硫基]苄腈(0.447g，1.84mmol)和碳酸钾(0.203，1.47mmol)处理。将该反应混合物在120℃下在氮气氛下搅拌过夜。将乙酸乙酯(150mL)和1N氢氧化钠溶液加入到该反应溶液中。分层，并将有机层用1N氢氧化钠溶液(300mL)洗涤。将此有机层用水和盐水洗涤(各400mL)，用硫酸镁干燥，过滤，并减压蒸发。粗品通过急骤硅胶柱色谱纯化，用存在于二氯甲烷中的10％甲醇作为流动相。淡棕色固体用乙酸乙酯研磨并过滤得到0.050g(11％)顺-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-[(4-甲基苯基)硫基]苄腈。将顺-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-[(4-甲基苯基)硫基]苄腈(0.050g，0.079mmol)在乙酸乙酯/甲醇中的温溶液用马来酸(0.028g，0.240mmol)的乙酸乙酯温溶液处理。立即形成沉淀并在氮气氛下过滤，得到0.028g的顺-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-[(4-甲基苯基)硫基]苄腈三马来酸盐。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.251(s，1H)，7.72-7.70(d，2H，J＝8Hz)，7.55-7.48(m，3H)，7.37-7.33(m，4H)，6.96-6.93(d，1H，J＝12Hz)，6.74-6.72(d，1H，J＝8Hz)，6.18(s，6H)，4.85(m，1H)，3.15-2.90(m，4H)，2.85-2.75(m，3H)，2.38(s，3H)，2.05-1.99(m，2H)，1.90-1.60(m，5H)；HPLC Waters 2690 AllianceHPLC(Symmetry Shield RP18 3.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵，在15分钟内，0.5mL/min)Rt 6.359min(100％)。
实施例224
顺-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-(2-吡啶基硫基)苄腈二马来酸盐
顺-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-(2-吡啶基硫基)苄腈二马来酸盐
将顺-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯酚(0.300g，0.736mmol)的二甲基甲酰胺(20mL)溶液，用2-氟-6-(2-吡啶基硫基)苄腈(0.424g，1.84mmol)和碳酸钾(0.203，1.47mmol)处理。将该反应混合物在120℃氮气氛下搅拌2小时。将乙酸乙酯(125mL)和1N氢氧化钠溶液(50mL)加入到该反应混合物中。分层，并将有机层用1N氢氧化钠溶液(300mL)洗涤。将此有机层用水和盐水洗涤(各250mL)，用硫酸镁干燥，过滤并减压蒸发。此固体用乙酸乙酯研磨得到0.310g(68％)的顺-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-(2-吡啶基硫基)苄腈。将顺-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-(2-吡啶基硫基)苄腈(0.310g，0.502mmol)的温乙醇溶液用马来酸(0.175g，1.503mmol)的温乙醇溶液处理。冷却时产生沉淀并在氮气氛下过滤，得到0.356g的顺-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-(2-吡啶基硫基)苄腈二马来酸盐。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.47-8.46(d，1H，J＝4Hz)，8.26(s，1H)，7.79-7.72(m，4H)，7.53-7.51(d，1H，J＝8Hz)，7.38-7.34(m，3H)，7.28-7.24(m，2H)，6.14(s，4H)，4.85(m，1H)，3.60-3.10(m，7H)，3.1-2.85(m，2H)，2.71-2.67(m，2H)，2.32-2.27(m，3H)，2.05-1.99(m，2H)，1.78-1.71(m，4H)；HPLC Waters2690 Alliance HPLC(Symmetry Shield RP18 3.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵在15分钟内，0.5mL/min)Rt 5.196min(98％)。
实施例225
反-3-[4-(苄基氧基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(1.50g，3.4mmol)在乙二醇二甲基醚(100mL)中的混合物用4-(苄基氧基)苯基羟基代硼酸(0.853g，3.74mmol)、四(三苯基膦)钯(0.236g，0.204mmol)和碳酸钠(0.864g，8.16mmol)的水(35mL)溶液处理。该反应混合物在85℃氮气氛下搅拌过夜。减压下除去有机溶剂。将乙酸乙酯(100mL)加入到水层中。分层，并将水层用乙酸乙酯(300mL)萃取。合并的有机层用水和盐水洗涤(各500mL)，用硫酸镁干燥，过滤，并减压蒸发。粗品在硅胶上通过急骤色谱纯化，用存在于二氯甲烷中的5％甲醇、存在于二氯甲烷中的10％甲醇、存在于二氯甲烷中的20％甲醇、再用存在于二氯甲烷中的30％甲醇洗脱。过柱后得到0.817g(49％)的反-3-[4(苄基氧基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.22(s，1H)，7.59-7.57(m，2H)，7.53-7.50(m，2H)，7.48-7.21(m，3H)，7.19-7.17(d，2H，J＝8Hz)，5.18(s，2H)，4.65-4.60(m，1H)，2.5(s，3H)，2.45-2.25(m，5H)，2.15(s，3H)，2.04-1.92(m，7H)，1.50-1.44(m，2H)；HPLC Waters2690 Alliance HPLC(Symmetry Shield RP18 3.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵，在15分钟内，0.5mL/min)Rt 5.021min(95％)。
实施例226
反-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-[(3-甲氧基丙基)氨基]苄腈三马来酸盐
反-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯酚
将反-3-[4-(苄基氧基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.806g，1.62mmol)的无水乙醇(40mL)溶液用10wt.％钯-活性炭(0.161g，0.324mmol)和甲酸铵(0.511g，8.1mmol)处理。将此反应混合物在80℃下搅拌3小时。通过薄层色谱只观察到极少的产物。加入10wt.％钯-活性炭(0.161g，0.324mmol)，并再搅拌1小时，还是只检测到极少的产物。加入甲酸铵(0.204g，3.24mmol)并搅拌过夜。将此反应混合物通过硅藻土垫过滤，将其用乙醇(500mL)洗涤。减压下除去有机层。将所得固体用乙酸乙酯研磨，并在高真空下干燥过夜，得到0.491g(75％)的反-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯酚。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.74(s，1H)，8.2(s，1H)，7.46-7.44(d，2H，J＝8Hz)，6.92-6.90(d，2H，J＝8Hz)，4.64-4.58(m，1H)，2.67-2.50(m，5H)，2.39-2.34(m，4H)，2.17(s，3H)，2.06-1.92(m，6H)，1.50-1.42(m，2H)；HPLC Waters 2690 AllianceHPLC(Symmetry Shield RP18 3.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵，在15分钟内，0.5mL/min)Rt 3.337min(96％)。
反-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-[(3-甲氧基丙基)氨基]苄腈三马来酸盐
将反-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯酚(0.100g，0.245mmol)的二甲基甲酰胺(25mL)溶液，用2-氟-6-[(2-甲氧基乙基)氨基]苄腈(0.128g，0.613mmol)和碳酸钾(0.068g，0.49mmol)处理。将此反应混合物在120℃下在氮气氛下搅拌过夜。将乙酸乙酯和1N氢氧化钠溶液加入到该反应混合物中。有机层用1N氢氧化钠溶液(1L)洗涤。分层，并将此有机层用水和盐水洗涤(各500mL)，用硫酸镁干燥，过滤并减压蒸发。粗品在硅胶上通过急骤色谱纯化，用存在于二氯甲烷中的10％甲醇作为洗脱剂，得到71mg(48％)的反-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-[(3甲氧基丙基)氨基]苄腈。将反-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-[(3-甲氧基丙基)氨基]苄腈(0.071g，0.119mmol)的乙酸乙酯温溶液用马来酸(0.042g，0.358mmol)的乙酸乙酯温溶液处理。在氮气氛下过滤此沉淀并高真空下干燥，得到反-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-[(3-甲氧基丙基)氨基]苄腈三马来酸盐。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.69-7.67(d，2H，J＝8Hz)，7.37-7.33(m，1H)，7.25-7.23(d，2H，J＝8Hz)，6.53-6.51(d，1H，J＝8Hz)，6.30-6.29(m，1H)，6.19-6.17(d，1H，J＝8Hz)，6.17(s，6H)，4.65-4.64(m，1H)，3.45-3.42(m，2H)，3.27(s，3H)，2.55-2.50(m，4H)，2.50-2.30(m，5H)，2.33(br.s.，3H)，2.01-1.96(m，8Hz)，1.84-1.80(m，2H)，1.49-1.46(m，2H)；HPLC Waters 2690 Alliance HPLC(Symmetry Shield RP18 3.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵在15分钟内，0.5mL/min)Rt5.181min(95％)。
实施例227
反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-苯基丙酰胺三马来酸盐
4-溴-2-甲氧基苯胺
将邻甲氧基苯胺(5.46g，44.3mmol)的二氯甲烷(100mL)溶液用2，4，4，6-四溴-2，5-环己二烯-1-酮(18.16g，44.3mmol)在-5℃下在1小时内分批处理。加入溴化试剂后，除去干冰/丙酮浴并将该反应混合物室温下搅拌过夜。将氢氧化钠溶液(1N)加入到该反应混合物中，并分层。有机层用1N氢氧化钠溶液(1L)洗涤，用水(750mL)洗涤，用硫酸镁干燥，过滤，并减压蒸发，得到8.096g(89％)的4-溴-2-甲氧基苯胺。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ6.90(s，1H)，6.83-6.76(m，1H)，6.57-6.55(m，1H)，4.86(s，2H)，3.76(s，3H)；HPLC Waters 2690 Alliance HPLC(Symmetry Shield RP18 3.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵，在15分钟内，0.5mL/min)Rt5.635min(89％)。
N1-(4-溴-2-甲氧基苯基)-3-苯基丙酰胺
将4-溴-2-甲氧基苯胺(8.096g，40.04mmol)的二氯甲烷(100mL)溶液用三乙胺(6.06g，60.06mmol)处理，然后用氢化肉桂酰氯(7.08g，42.04mmol)处理。将该反应混合物在氮气氛下搅拌48小时。减压除去溶剂，并加入乙酸乙酯。过滤此沉淀，并将滤液减压下蒸发为固体。将此固体溶解于乙酸乙酯，并用5N盐酸溶液、5N氢氧化钠溶液、水和盐水洗涤。粗品(薄层色谱存在两个点)用甲醇研磨。过滤不溶固体，得到6g(50％)的N1-(4-溴-2-甲氧基苯基)-3-苯基丙酰胺。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.17(s，1H)，7.92-7.90(m，1H)，7.30-7.24(m，4H)，7.20-7.18(m，2H)，7.09-7.07(m，1H)，3.83(s，3H)，2.90-2.86(m，2H)，2.72-2.69(m，2H)；HPLC Waters 2690Alliance HPLC(Symmetry Shield RP18 3.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵在15分钟内，0.5mL/min)Rt 7.491min(97％)。
3-甲氧基-4-[(3-苯基丙酰基)氨基]苯基羟基代硼酸
将N1-(4-溴-2-甲氧基苯基)-3-苯基丙酰胺(1.004g，3mmol)的无水四氢呋喃(30mL)溶液，在-78℃下用1.6M正丁基锂的己烷溶液(4.7mL，7.5mmol)处理。将该反应混合物在-78℃下搅拌40分钟。将三异丙基硼酸酯(1.05mL，4.5mmol)加入到此反应混合物中，并在-78℃下搅拌20分钟。除去丙酮/干冰浴。将该反应混合物室温下搅拌4小时。将该反应混合物用2.5N盐酸溶液(30mL)停止反应。减压下除去有机层。将乙酸乙酯加入到酸性水层。分层，并将水层用乙酸乙酯(250mL)萃取。合并的有机层用水和盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并减压蒸发。粗品在硅胶上通过急骤色谱纯化，用1∶1二氯甲烷∶乙酸乙酯作为洗脱剂。梯度变为存在于二氯甲烷中的15％甲醇，以除去基线产物，得到0.209g(23％)的3-甲氧基-4-[(3-苯基丙酰基)氨基]苯基羟基代硼酸。1H NMR(DMS0-d6，400MHz)δ9.08(s，1H)，7.89-7.95(m，3H)，7.45-7.42(s，1H)，7.35-7.16(m，5H)，3.82(s，3H)，2.91-2.81(m，2H)，2.74-2.70(s，2H)；HPLC Waters 2690Alliance HPLC(Symmetry Shield RP18 3.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵，在15分钟内，0.5mL/min)Rt 5.389min(95％)。
反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-苯基丙酰胺三马来酸盐
将反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.268g，0.607mmol)的乙二醇二甲基醚(20mL)溶液用3-甲氧基-4-[(3-苯基丙酰基)氨基]苯基羟基代硼酸(0.200g，0.669mmol)、四(三苯基膦)钯(0.042g，0.036mmol)和碳酸钠(0.154，1.46mmol)的水(10mL)溶液处理。将该反应混合物在85℃在氮气氛下搅拌9小时。加入四(三苯基膦)钯(0.035g，0.03mmol)并将此混合物搅拌过夜(15小时)。减压下除去有机层，并加入乙酸乙酯。分层，并将水层用乙酸乙酯(300mL)萃取。合并的有机层用水和盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并减压蒸发。粗品在硅胶上通过急骤色谱纯化，用存在于二氯甲烷中的10％甲醇(6L)作为洗脱剂。需要在Supelco急骤色谱柱上进行二次纯化，用存在于二氯甲烷中的20％甲醇作为洗脱剂。第二次过柱得到0.132g(38％)的反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-苯基丙酰胺。产物进行制备HPLC纯化(Hypersil C18，100×21mm柱，5μm，15-100％乙腈梯度，在8分钟内，总过柱时间-10min，缓冲液-50mM醋酸铵，25ml/min)，得到0.026g的反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-苯基丙酰胺。将反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-苯基丙酰胺(0.026g，0.046mmol)的乙酸乙酯温溶液用马来酸(0.016g，0.137mmol)的乙酸乙酯温溶液处理。在氮气氛下过滤此沉淀并高真空下干燥，得到反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-苯基丙酰胺三马来酸盐。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.25(s，1H)，8.23-8.19(m，2H)，7.33-7.27(m，5H)，7.23-7.18(m，2H)，6.17(s，6H)，4.72-4.69(m，1H)，3.87(s，3H)，2.94-2.90(m，4H)，2.79-2.75(m，5H)，2.67(s，4H)，2.10-1.99(m，8H)，1.59-1.56(m，3H)；
HPLC Waters 2690 Alliance HPLC(Symmetry Shield RP18 3.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵，在15分钟内，0.5mL/min)Rt 4.844min(90％)。
实施例228
顺-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-N1-甲基-3-苯基丙酰胺
N1-(4-溴-2-甲氧基苯基)-N1-甲基-3-苯基丙酰胺
将N1-(4-溴-2-甲氧基苯基)-3-苯基丙酰胺(1.0g，3mmol)的二甲基甲酰胺(20mL)溶液，在0℃下用经过洗涤(用庚烷洗涤3次)的氢化钠(0.158g，6.6mmol)处理。将该反应混合物在0℃下搅拌1小时。滴加碘代甲烷(0.511g，3.6mmol)，并将此溶液在0℃下搅拌15分钟。除去冰浴并将该反应混合物室温下搅拌过夜。该反应过夜后仍没有反应完全；再加入碘代甲烷(0.511g，3.6mmol)并将该反应混合物搅拌过夜。该反应混合物用水(30mL)停止反应。加入乙酸乙酯，并分层。水层用乙酸乙酯萃取。合并的有机层用水和盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并减压蒸发。粗品在硅胶上通过急骤色谱纯化，用3∶1庚烷∶乙酸乙酯洗脱，得到0.729g(70％)的N1-(4-溴-2-甲氧基苯基)-N1-甲基-3-苯基丙酰胺。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.330-7.326(s，1H)，7.235-7.178(m，2H)，7.161-7.116(m，3H)，7.058-7.040(m，2H)，3.811(s，3H)，3.002(s，3H)，2.753-2.708(m，2H)，2.282-2.204(m，1H)，2.138-2.061(m，1H)；HPLC Waters 2690Alliance HPLC(Symmetry Shield RP18 3.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵，在15分钟内，0.5mL/min)Rt 7.366min(96％)。
N1-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-N1-甲基-3-苯基丙酰胺
将N1-(4-溴-2-甲氧基苯基)-N1-甲基-3-苯基丙酰胺(0.729g，2.09mmol)的二甲基甲酰胺(10mL)溶液，用乙硼烷频哪醇酯(0.637g，2.51mmol)、醋酸钾(0.615g，6.27mmol)处理，再用[1，1′-双(二苯基膦基二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷(1∶1)的复合物(0.052g，0.063mmol)处理。将该反应混合物在80℃下搅拌26小时，再加入乙硼烷频哪醇酯(0.318g，1.254mmol)、醋酸钾(0.312g，3.135mmol)和1，1′-双(二苯基膦基二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷(1∶1)的复合物(0.025g，0.031mmol)。将该反应混合物搅拌48小时。减压除去溶剂，并在高真空下干燥。将二氯甲烷加入到此黑色固体中，再通过硅藻土板和硅胶垫过滤。粗品在硅胶上通过急骤色谱纯化，用1∶1乙酸乙酯：庚烷作为洗脱剂。过柱后得到0.290g(35％)的N1-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-N1-甲基-3-苯基丙酰胺，和0.148g(18％)的匀偶联的二聚产物。N1-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-N1-甲基-3-苯基丙酰胺：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.33(s，1H)，7.29-7.27(m，2H)，7.22-7.13(m，5H)，7.06-7.03(m，1H)，3.81(s，3H)，3.03-3.00(m，3H)，2.75-2.71(m，4H)，2.30-2.15(m，2H)，2.15-2.05(m，2H)，1.30(s，12H)；HPLC Waters 2690 AllianceHPLC(Symmetry Shield RP18 3.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵，在15分钟内，0.5mL/min)Rt 5.296min(100％)。匀偶联的二聚产物：1H NMR(DMSO，400MHz)δ7.374(s，2H)，7.293-7.276(m，4H)，7.258-7.188(m，4H)，7.142-7.107(m，2H)，7.067-7.049(m，4H)，3.921(s，6H)，2.992(s，6H)，2.756-2.741(m，4H)，2.339-2.263(m，2H)，2.196-2.070(m，2H)；HPLC Waters 2690Alliance HPLC(Symmetry Shield RP18 3.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵，在15分钟内，0.5mL/min)Rt 7.910min(100％)。
顺-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-N1-甲基-3-苯基丙酰胺
将顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.293g，0.664mmol)的乙二醇二甲基醚(10mL)溶液，用3-甲氧基-4-[甲基(3苯基丙酰基)氨基]苯基羟基代硼酸(0.290g，0.730mmol)、四(三苯基膦)钯(0.046g，0.040mmol)和碳酸钠(0.169g，1.59mmol)的水(5mL)溶液处理。该反应混合物在85℃氮气氛下搅拌过夜。减压除去溶剂，并加入乙酸乙酯到水层。分层，并将水层用乙酸乙酯(150mL)萃取。合并的有机层用水和盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤，并减压蒸发。粗品在硅胶上通过急骤色谱纯化，用存在于二氯甲烷中的4％甲醇、存在于二氯甲烷中的8％甲醇、以及存在于二氯甲烷中的12％甲醇作为洗脱剂。第二次过柱采用Supelco急骤色谱硅胶柱，用存在于二氯甲烷中的30％甲醇洗脱，得到0.037g(10％)的顺-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-N1-甲基-3-苯基丙酰胺。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.374(s，1H)，7.315-7.312(m，1H)，7.285-7.213(m，3H)，7.174-7.087(m，4H)，5.795(br.s.，2H)，4.965-4.922(m，1H)，3.892(s，3H)，3.213(s，3H)，2.948-2.918(m，2H)，2.667(m，6H)，2.455-2.349(m，10H)，2.25-2.15(m，2H)，1.867-1.845(m，2H)，1.718-1.710(m，2H)；HPLC Waters 2690Alliance HPLC(Symmetry Shield RP18 3.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵，在15分钟内，0.5mL/min)Rt 4.947min(98％)。
实施例229
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲氧基)苯甲酰胺三马来酸盐
N-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯
将3-碘-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.667g，6.04mmol)的乙二醇二甲基醚(95mL)溶液，用N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(2.32g，6.64mmol)、四(三苯基膦)钯(0.419g，0.362mmol)和碳酸钠(1.54g，14.5mmol)的水(40mL)溶液处理。将该反应混合物在85℃在氮气氛下搅拌18小时。减压下除去有机层。加入乙酸乙酯(100mL)，并分层。水层用乙酸乙酯(1L)萃取。合并的有机层用水(1L)和盐水(500mL)洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并减压蒸发得到3.71g的粗品。粗品在硅胶上通过急骤色谱纯化，用存在于二氯甲烷中的20％甲醇(4L)、存在于二氯甲烷中的30％甲醇(1L)、及1∶1甲醇：二氯甲烷(1L)作为洗脱剂，得到2.305g(71％)的N-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.221(s，1H)，8.030(s，1H)，7.921-7.901(m，1H)，7.239-7.195(m，2H)，4.652-4.594(m，1H)，3.890(s，3H)，2.988-2.804(m，2H)，2.776-2.507(m，2H)，2.40-2.21(m，5H)，2.190(s，3H)，1.898-1.815(m，4H)，1.716-1.686(m，2H)，1.482-1.446(m，11H)；HPLCWaters 2690 Alliance HPLC(Symmetry Shield RP18 3.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵，在15分钟内，0.5mL/min)Rt4.541min(98％)；TLC(存在于二氯甲烷中的20％甲醇)Rt＝0.4。
3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将N-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(2.298g，4.28mmol)的二氯甲烷(26mL)溶液，在0℃下用三氟乙酸(9.2mL)的二氯甲烷(20mL)溶液处理。将该反应溶液在0℃下搅拌20分钟，之后除去冰浴，并在室温下再搅拌2小时。减压除去溶剂，并将此残余物在高真空下干燥。将乙酸乙酯(150mL)和5N盐酸溶液(100mL)加入到此油状物中。分层，并将有机层用5N盐酸溶液(400mL)萃取。在冰浴中将合并的水层冷却至0℃，并用50％氢氧化钠溶液中和至pH 10。中和后的层用二氯甲烷(700mL)萃取。将此有机层用硫酸镁干燥，过滤并减压蒸发得到1.769g(95％)的3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.189(s，1H)，7.048-7.043(s，1H)，7.004-6.980(d.d.，1H，J＝1Hz，J＝4Hz)，6.775-6.755(m，1H)，5.039(s，2H)，4.605-4.565(m，1H)，3.831(s，3H)，2.992-2.882(m，2H)，2.882-2.794(m，2H)，2.40-2.15(m，5H)，2.149(s，3H)，1.876-1.849(m，4H)，1.727-1.698(m，2H)，1.486-1.448(m，2H)；HPLCWaters 2690 Alliance HPLC(Symmetry Shield RP18 3.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵，在15分钟内，0.5mL/min)Rt 2.83min(99％)。
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲氧基)苯甲酰胺三马来酸盐
向3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.450g，1.03mmol)的吡啶(8mL)溶液中，在-5℃下滴加4-(三氟甲氧基)-1-苯羰基氯(0.231g，1.03mmol)的二氯甲烷(2.5mL)溶液进行处理。将该反应混合物在-5℃下搅拌30分钟。除去冰浴并将该反应混合物室温下搅拌3小时。加入1N氢氧化钠溶液(10mL)，并搅拌1小时。减压下除去有机溶剂。加入二氯甲烷(10mL)并用Empore萃取柱分层。减压除去有机溶剂并将粗品化合物在硅胶上通过急骤色谱纯化，用存在于二氯甲烷中的10％甲醇作为洗脱剂，得到0.430g(67％)的N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲氧基)苯甲酰胺。将N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲氧基)苯甲酰胺(0.430g，0.688mmol)的乙酸乙酯(15mL)热溶液用马来酸(0.240g，2.07mmol)的乙酸乙酯热溶液处理。形成沉淀，在氮气氛下过滤，并高真空下干燥，得到N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲氧基)苯甲酰胺三马来酸盐。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.70(s，1H)，8.28(s，1H)，8.11-8.08(m，2H)，8.05-8.03(m，1H)，7.56-7.54(m，2H)，7.34(m，1H)，7.31-7.29(m，1H)，6.11(s，6H)，5.10-5.00(m，1H)，3.93(s，3H)，3.54(m，4H)，2.99(m，2H)，2.79(s，3H)，2.22-2.19(m，4H)，1.84(m，2H)；HPLCWaters 2690 Alliance HPLC(Symmetry Shield RP18 3.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵，在15分钟内，0.5mL/min)Rt4.999min(100％)。
实施例230
4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮二马来酸盐
将3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4胺(0.300g，0.780mmol)的吡啶(5mL)溶液在0℃下用4-甲基-1-哌嗪羰基氯盐酸盐(0.127g，0.780mmol)处理。将该反应混合物在0℃下搅拌5分钟，之后除去冰浴，并将该反应室温下搅拌过夜。再加入等量的4-甲基-1-哌嗪羰基氯盐酸盐(0.127g，0.780mmol)并搅拌2小时。减压除去溶剂。将二氯甲烷(10mL)和碳酸氢钠(5mL)饱和水溶液加入到此固体中。分层，用Empore萃取柱。减压下除去有机层得到0.417g的粗品。粗品在硅胶上通过急骤色谱纯化，用存在于二氯甲烷中的8％甲醇、存在于二氯甲烷中的15％甲醇、以及存在于二氯甲烷中的20％甲醇作为洗脱剂，得到0.178g(45％)的4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮。将4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(0.178g，0.347mmol)的乙酸乙酯热溶液用马来酸(0.081g，0.693mmol)的乙酸乙酯热溶液处理。溶剂冷却时形成沉淀，在氮气氛下过滤，并高真空下干燥，得到0.124g的4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮二马来酸盐。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.257(s，1H)，7.661-7.639(d，2H，J＝8.8Hz)，7.441-7.42(m，2H)，7.210-7.112(m，5H)，6.142(s，4H)，4.963-4.908(m，1H)，3.784-3.754(d，2H，J＝12Hz)，3.7-3.2(br.s.，11H)，3.15-3.05(m，2H)，2.922(s，3H)，2.161-2.138(m，2H)，1.989-1.93(m，2H)；HPLC Waters 2690 Alliance HPLC(SymmetryShield RP18 3.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵，在15分钟内，0.5mL/min)Rt 5.159min(97％)。
实施例231
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(二甲基氨基)苯甲酰胺三马来酸盐
将3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.398g，0.912mmol)的吡啶(7mL)悬浮液，在-5℃用4-(二甲基氨基)-1-苯羰基氯(0.167g，0.912mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液处理。该反应混合物在-5℃下搅拌2.5小时，并除去冰浴。将1N氢氧化钠溶液(10mL)加入到该反应混合物中并搅拌1小时。减压下除去有机层，并加入二氯甲烷(15mL)。分层，用Empore萃取柱。减压下除去有机层。粗品固体通过急骤色谱在硅胶上纯化两次，用存在于二氯甲烷中的12％(甲醇，其中含5％氢氧化铵)作为洗脱剂，得到0.284g(53％)的N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(二甲基氨基)苯甲酰胺。将N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(二甲基氨基)苯甲酰胺的(0.284g，0.487mmol)在乙酸乙酯和几滴乙醇中的热溶液，用马来酸(0.169g，1.46mmol)的乙酸乙酯热溶液处理。在氮气氛下过滤形成的沉淀并高真空下干燥，得到0.409g的N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(二甲基氨基)苯甲酰胺三马来酸盐。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.054(s，1H)，8.278(s，1H)，8.215-8.194(m，1H)，7.851-7.828(m，2H)，7.312-7.308(m，1H)，7.288-7.263(m，1H)，6.794-6.772(m，2H)，6.096(s，6H)，5.10-5.00(m，1H)，3.951(s，3H)，3.538(s，4H)，3.061(s，8H)，2.215-2.183(m，4H)，1.90-1.81(m，2H)；HPLC Waters 2690 Alliance HPLC(SymmetryShield RP18 3.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵，在15分钟内，0.5mL/min)Rt 4.496min(97％)。
实施例232-237
顺-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2-(三氟甲基)苯甲酰胺
顺-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2-(三氟甲氧基)苯甲酰胺
顺-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-(三氟甲氧基)苯甲酰胺
顺-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2-氟-4-(三氟甲基)苯甲酰胺
顺-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-(三氟甲基)苯甲酰胺
得自顺-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-7H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺的酰胺
将存在于二氯甲烷(100μL)的商购酰氯(0.23mmol)加入到存在于吡啶(800μL)的顺-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-7H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.050g，0.115mmol)中。将该反应混合物搅拌过夜。该反应混合物用1N氢氧化钠溶液骤冷。在Supelco-支管上真空和氮气流下除去溶剂。剩余的固体进行制备HPLC(Hypersil C18，100×21mm柱，5μm，15-100％乙腈梯度，在8分钟内，总过柱时间-10min，缓冲液50mM醋酸铵，25ml/min)。将二氯甲烷和1N氢氧化钠溶液加入到此固体中。分层，用Empore萃取柱，得到相应的产物。HPLC Perkin Elmer Pecosphere C18，3μM，33×4.6，3.5ml/min 100-100％50mM醋酸铵至乙腈，在4.5分钟内，C36H44N6O3(581.2)，95％。LCMS(Perkin Elmer，Pecosphere C18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸铵水溶液至100％乙腈，在5分钟内，3.0至3.5ml/min)
Figure A0081575902981
Figure A0081575902991
实施例238
顺-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯氨基)-2-苯基-1-乙醇
将顺-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.075g，0.000172mol)和氧化苯乙烯(0.029g，0.000172mol)溶解于异丙醇(3mL)，并将所得混合物加热回流24小时。除去溶剂并将此残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分钟内10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)，得到顺-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯氨基)-2-苯基-1-乙醇(0.005g，0.0000089mol)，为米白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.36(m，5H)，7.06(s，1H)，6.91(d，1H)，6.36(d，1H)，5.55(d，1H)，5.20(s，1H)4.78(m，1H)，4.43(d，2H)，3.88(s，3H)，3.74(m，1H)，3.58(m，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 11.97min。
MS：MH+557。
中间体：顺-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将顺-或反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺还原烷基化的总方法：
步骤A：
将顺-或反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺的混合物(或者单独的顺式或反式)(1当量)、醛(1当量)、三乙酰氧基硼氢化钠(3.4当量)和乙酸(3.4当量)在无水1，2-二氯乙烷中搅拌16小时。将该反应混合物减压浓缩，用饱和碳酸氢钠水溶液停止反应并再次浓缩。残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分钟内10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)得到所需产物。
步骤B：
合成和纯化(步骤A)后，将残余物用二氯甲烷浸提(1mL)，加样到Trikonex柱(7cm)上并用二氯甲烷(5mL)洗脱。切下所需谱带(UV-检测)并将此化合物用二氯甲烷∶甲醇∶三乙胺＝90∶5∶5(10mL)的混合物萃取，过滤并将此滤液减压浓缩。残余物悬浮于乙醚(4mL)并过滤收集此沉淀并干燥。
实施例239
顺-3-{4-[(2-呋喃基甲基)氨基]-3-甲氧基苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸盐
步骤A
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.57(s，1H)，7.06(br，2H)，6.77(d，1H)，6.38(d，1H)，6.32(d，1H)，5.65(t，1H)，4.78(m，1H)，4.38(d，2H)，3.88(s，3H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 12.65min。
MS：MH+517。
实施例240
顺-5-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯氨基)甲基]-2-呋喃基甲醇乙酸盐
步骤A
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.06(br，2H)，6.77(d，1H)，6.23(d，1H)，6.19(d，1H)，5.63(t，1H)，5.18(t，1H)，4.78(m，1H)，4.35(d，4H)，3.88(s，3H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 10.91min。
MS：MH+547。
实施例241
反-3-{4-[(2-呋喃基甲基)氨基]-3-甲氧基苯基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二马来酸盐
反-3-{4-[(2-呋喃基甲基)氨基]-3-甲氧基苯基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺按照步骤A进行制备。将反-3-{4-[(2-呋喃基甲基)氨基]-3-甲氧基苯基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(1当量)溶解于乙醇(20mL)并将此溶液加热回流。立即加入马来酸溶液(3当量)并再继续回流10分钟。该反应混合物冷却至室温，过滤收集此沉淀并干燥。
反-3-{4-[(2-呋喃基甲基)氨基]-3-甲氧基苯基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二马来酸盐
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.57(s，1H)，7.06(br，2H)，6.77(d，1H)，6.38(d，1H)，6.32(d，1H)，6.16(s，4H)，5.65(t，1H)，4.67(m，1H)，4.38(d，2H)，3.88(s，3H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)，2.05(m，6H)，1.57(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 12.62min。
MS：MH+517。
实施例242
反-3-(3-甲氧基-4-[(5-甲基-2-呋喃基)甲基]氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二马来酸盐
其以与上述反-3-{4-[(2-呋喃基甲基)氨基]-3-甲氧基苯基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二马来酸盐相同的方式制备。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.08(d，2H)，6.77(d，1H)，6.16(m，5H)，5.95(d，1H)，5.65(t，1H)，4.67(m，1H)，4.32(d，2H)，3.88(s，3H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)，2.22(s，3H)，2.05(m，6H)，1.57(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 13.73min。
MS：MH+531。
将顺-或反-3-(4-氨基-苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺还原烷基化的总方法：
步骤C：
将顺-或反-3-(4-氨基-苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(或者中间体…或…)(1当量)、醛(1当量)、三乙酰氧基硼氢化钠(3.4当量)和乙酸(3.4当量)的混合物在无水1，2-二氯乙烷中搅拌16小时。将该反应混合物减压浓缩，用饱和碳酸氢钠水溶液停止反应并再次浓缩。残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分钟内10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)得到所需产物。
实施例243
顺-2-[2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)甲基]苯氧基乙酸二乙酸盐
步骤C
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.33(m，3H)，7.17(t，1H)，6.83(m，4H)，4.76(m，1H)，4.46(s，2H)，4.29(s，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 10.78min。
MS：MH+571。
实施例244
顺-3-{4-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
步骤C
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.58(s，1H)，7.36(d，2H)，6.81(d，2H)，6.46(t，1H)，6.41(d，1H)，6.34(d，1H)，4.78(m，1H)，4.31(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 11.29min。
MS：MH+487。
实施例245
顺-3-(4-[(5-甲基-2-呋喃基)甲基]氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
步骤C
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.36(d，2H)，6.79(d，2H)，6.43(t，1H)，6.21(d，1H)，5.98(d，1H)，4.78(m，1H)，4.24(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 12.86min。
MS：MH+501。
实施例246
顺-3-{4-[(3-呋喃基甲基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
步骤C
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.64(d，2H)，7.37(d，2H)，6.79(d，2H)，6.52(s，1H)，6.29(t，1H)，4.76(m，1H)，4.18(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 12.17min。
MS：MH+488。
实施例247
顺-3-{4-[(苯并[b]呋喃-2-基甲基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
步骤C
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.58(d，1H)，7.53(d，1H)，7.38(d，2H)，7.23(m，2H)，6.86(d，2H)，6.80(s，1H)，6.66(t，1H)，4.78(m，1H)，4.52(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.00min。
MS：MH+537。
实施例248
反-3-{4-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
步骤C
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.59(s，1H)，7.35(d，2H)，6.79(d，2H)，6.45(t，1H)，6.39(d，1H)，6.33(d，1H)，4.60(m，1H)，4.30(d，2H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 11.96min。
MS：MH+487。
将3-(4-氨基-苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺还原烷基化的总方法：
步骤D：
将3-(4-氨基-苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(1当量)、醛(1当量)、三乙酰氧基硼氢化钠(3.4当量)和乙酸(3.4当量)的混合物在无水1，2-二氯乙烷中搅拌16小时。将该反应混合物减压浓缩，用饱和碳酸氢钠水溶液停止反应并再次浓缩。残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分钟内10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)得到所需产物。
实施例249
3-(4-[(5-甲基-2-呋喃基)甲基]氨基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸盐
步骤D
1HNMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.07(br，2H)，6.76(d，1H)，6.17(d，1H)，5.97(d，1H)，5.57(t，1H)，4.60(m，1H)，4.30(d，2H)，3.86(s，3H)，2.98(d，2H)，2.79(d，2H)，2.27(s，3H)，2.25(br，5H)，2.15(s，3H)，1.91(m，7H)，1.69(d，2H)，1.46(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 8.97min。
MS：MH+531。
实施例250
顺-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-{4-[(1-苯基乙基)氨基]苯基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
a)N-(4-溴苯基)-N-(1-苯基乙基)胺
向冷却至-78C的N-(4-溴苯基)-N-(1-苯基亚甲基)胺(1.0g，0.00385mol)的甲苯(30mL)溶液中，滴加1.4M甲基锂的乙醚(5.5mL)溶液，保持温度低于-75℃。将此溶液升温至-40℃并在此温度下在氮气氛下搅拌3小时。通过滴加水将该反应混合物骤冷并分层。有机相用盐水(50mL)洗涤，用硫酸镁干燥并减压浓缩得到N-(4-溴苯基)-N-(1-苯基乙基)胺(1.03g，0.00373mol)，为米白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.30(m，4H)，7.18(t，1H)，7.09(d，2H)，6.43(d，2H)，6.38(d，1H)，4.43(m，1H)，1.40(d，3H)；
TLC(乙酸乙酯/庚烷5∶95)Rf 0.27
b)N-(1-苯基乙基)-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]胺
将N-(4-溴苯基)-N-(1-苯基乙基)胺(0.87g，0.00315mol)、乙硼烷频哪醇酯(0.96g，0.00378mol)、[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]-二氯钯(II)与二氯甲烷(1∶1)的复合物(0.077g，0.0000945mol)和醋酸钾(0.93g，0.00945mol)在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的混合物，在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。将二氯甲烷(60mL)加入到此残余物中并将所得固体通过硅藻土板滤出。浓缩此滤液得到黄色油状物，其在硅胶上通过急骤色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(7∶93)作为流动相。将所得馏份浓缩，残余物在正庚烷中研磨并过滤收集沉淀得到N-(1-苯基乙基)-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]胺(0.3g，0.00093mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.30(m，6H)，7.18(t，1H)，6.58(d，1H)，6.46(d，2H)，4.51(m，1H)，1.40(d，3H)，1.27(s，12H)；
TLC(乙酸乙酯/庚烷5.95)Rf 0.17
c)顺-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-{4-[(1-苯基乙基)氨基]苯基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
将N-(1-苯基乙基)-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]胺(0.070g，0.000235mol)、顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.080g，0.000181mol)、四-(三苯基膦)钯(0.012g，0.000011mol)和碳酸钠一水合物(0.056g，0.00045mol)的混合物，在乙二醇二甲基醚(5mL)和水(3mL)的混合物中，在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；10-60％乙腈0.1M醋酸铵在25分钟内，21mL/min)得到顺-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-{4-[(1-苯基乙基)氨基]苯基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐(0.062g，0.0000984mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.19(s，1H)，7.42(d，2H)，7.30(m，4H)，7.19(t，1H)，6.68(d，2H)，6.52(d，1H)，4.78(m，1H)，4.53(m，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，1.44(d，3H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 13.96min。
MS：MH+ 511。
实施例251和实施例252
顺-3-[4-(2，3-二氢苯并[b]呋喃-3-基氨基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
反-3-[4-(2，3-二氢苯并[b]呋喃-3-基氨基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
a)N-(4-溴苯基)-N-(2，3-二氢苯并[b]呋喃-3-基)胺
将60％氢化钠在矿物油中的分散液(0.145g，0.00362mol)加入到氧化锍三甲基碘(0.8g，0.00362mol)的无水二甲基亚砜(10mL)溶液中，并将所得混合物并在氮气氛下搅拌10分钟。滴加2-{[(4-溴苯基)亚氨基]甲基}苯酚(0.4g，0.00145mol)的无水二甲基亚砜(5mL)溶液并将所得混合物室温下搅拌2.5小时。将其倒入到冰冷的水(100mL)中并用乙醚(2×50mL)萃取。合并的有机萃取物用硫酸镁干燥并减压浓缩得到N-(4-溴苯基)-N-(2，3-二氢苯并[b]呋喃-3-基)胺(0.321g，0.0011mol)，为米白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.34(d，1H)，7.23(m，3H)，6.90(m，2H)，6.67(d，2H)，6.34(d，1H)，5.23(m，1H)，4.72(dd，1H)，4.19(dd，1H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶5)Rf 0.52
b)N-(2，3-二氢苯并[b]呋喃-3-基)-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]胺
将N-(4-溴苯基)-N-(2，3-二氢苯并[b]呋喃-3-基)胺(1.65g，0.00569mol)、乙硼烷频哪醇酯(1.73g，0.00683mol)、[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]-二氯钯(II)与二氯甲烷(1∶1)的复合物(0.139g，0.000171mol)和醋酸钾(0.81g，0.0171mol)在N，N-二甲基甲酰胺(35mL)的混合物，在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。将二氯甲烷(100mL)加入到此残余物中并将所得固体通过硅藻土板滤出。浓缩此滤液得到黄色油状物，其在硅胶上通过急骤色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(5∶95)作为流动相。将所得馏份浓缩，残余物在正庚烷中研磨并过滤收集沉淀得到N-(2，3-二氢苯并[b]呋喃-3-基)-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]胺(0.59g，0.00176mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.42(d，2H)，7.34(d，1H)，7.23(t，1H)，6.89(m，2H)，6.68(d，2H)，6.52(d，1H)，5.23(m，1H)，4.74(dd，1H)，4.20(dd，1H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶5)Rf 0.37
c)顺-3-[4-(2，3-二氢苯并[b]呋喃-3-基氨基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将N-(2，3-二氢苯并[b]呋喃-3-基)-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]胺(0.080g，0.000237mol)、顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.087g，0.000198mol)、四-(三苯基膦)钯(0.014g，0.000012mol)和碳酸钠一水合物(0.061g，0.000495mol)的混合物，在乙二醇二甲基醚(5mL)和水(3mL)的混合物中，在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，在25分钟内，21mL/min)。随后，将粗品溶解于二氯甲烷，加样到Trikonex柱(7cm)并用二氯甲烷洗脱(5mL)。切下所需谱带，产物用二氯甲烷/甲醇/三乙胺90∶5∶5的混合物(10mL)萃取，并减压除去溶剂。残余物用乙醚研磨，过滤收集此沉淀并干燥得到顺-3-[4-(2，3-二氢苯并[b]呋喃-3-基氨基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.021g，0.00004mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.40(m，3H)，7.25(t，1H)，6.90(m，4H)，6.50(d，1H)，5.35(m，1H)，4.80(m，2H)，4.28(dd，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 13.39min。
MS：MH+ 525。
反-3-[4-(2，3-二氢苯并[b]呋喃-3-基氨基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
将N-(2，3-二氢苯并[b]呋喃-3-基)-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]胺(0.089g，0.000265mol)、反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.090g，0.000204mol)、四(三苯基膦)钯(0.014g，0.000012mol)和碳酸钠一水合物(0.063g，0.00051mol)的混合物，在乙二醇二甲醚(5mL)和水(3mL)的混合物中，在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；10-60％乙腈-0.1M醋酸铵在25分钟内，21mL/min)得到反-3-[4-(2，3-二氢苯并[b]呋喃-3-基氨基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐(0.078g，0.000121mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.40(m，3H)，7.25(t，1H)，6.90(m，4H)，6.50(d，1H)，5.33(m，1H)，4.79(dd，1H)，4.60(m，1H)，4.28(dd，1H)，3.1(br，9H)，2.17(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.49(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，在20分钟内，1mL/min)Rt 13.05min。
MS：MH+ 525。
实施例253
顺-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)-1-苯基-1-乙酮二乙酸盐
将顺-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.6g，0.00148mol)和溴苯乙酮(0.295g，0.00148mol)溶解于无水N，N-二甲基甲酰胺(30mL)中，并将所得混合物室温氮气氛下搅拌5分钟。滴加N，N-二异丙基乙胺(0.095g，0.00074mol)并在氮气氛下继续搅拌16小时。该反应混合物经减压浓缩并将此残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，在25分钟内，21mL/min)得到顺-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)-1-苯基-1-乙酮二乙酸盐(0.410g，0.00064mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.20(s，1H)，7.99(d，2H)，7.75(t，1H)，7.61(t，2H)，7.29(d，2H)，6.69(d，2H)，5.41(br，3H)，4.78(m，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 12.16min。
MS：MH+ 525。
实施例254
顺-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)-1-苯基-1-乙醇二乙酸盐
将顺-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)-1-苯基-1-乙酮二乙酸盐(0.050g，0.000077mol)的无水甲醇(5mL)溶液冷却至0℃，并立即加入硼氢化钠(0.018g，0.0000477mol)。将此混合物升温至室温同时在氮气氛下搅拌3小时。通过滴加乙酸停止该反应，将该反应混合物减压浓缩，并将此残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，在25分钟内，21mL/min)得到顺-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)-1-苯基-1-乙醇二乙酸盐(0.035g，0.000054mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.20(s，1H)，7.31(m，7H)，6.69(d，2H)，5.41(br，2H)，5.31(d，1H)，4.78(m，1H)，2.5-2.1(br，14H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 11.34min。
MS：MH+527。
实施例255
顺-N-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲基]-N′-苄基脲乙酸盐
将顺-3-{4-[氨基(苯基)甲基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.0001mol)溶解于无水吡啶(1mL)，加入异氰酸苄基酯(0.013g，0.0001mol)并将所得溶液室温下搅拌20小时。减压除去溶剂并将所得残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分钟内10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)得到顺-N-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲基]-N′-苄基脲乙酸盐(0.015g，0.000022mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.62(d，2H)，7.45(d，2H)，7.57-7.27(br，10H)，7.04(d，1H)，6.41(t，1H)，6.03(d，1H)，4.78(m，1H)，4.25(d，2H)，2.70(s，3H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.90(s，3H)，1.68(m，2H)，1.56(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 13.39min。
MS：MH+ 630。
实施例256
顺-N1-[4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]苯甲酰胺乙酸盐
将顺-3-{4-[4-(氨基甲基)苯氧基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.051g，0.0001mol)溶解于无水吡啶(1mL)，加入苯甲酰基氯(0.014g，0.0001mol)并将所得溶液室温下搅拌20小时。减压除去溶剂并将所得残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分钟内10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)得到顺-N1-[4-(4-{4-氨基-1-[4(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]苯甲酰胺乙酸盐(0.042g，0.000062mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.07(t，1H)，8.23(s，1H)，7.91(d，2H)，7.63(d，2H)，7.49(m，3H)，7.38(t，2H)，7.12(d，2H)，7.08(d，2H)，4.78(m，1H)，4.49(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 13.62min。
MS：MH+ 617。
实施例257
顺-N1-[4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]-1-苯磺酰胺乙酸盐
将顺-3-{4-[4-(氨基甲基)苯氧基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.051g，0.0001mol)溶解于无水吡啶(1mL)，加入苯磺酰基氯(0.018g，0.0001mol)并将所得溶液室温下搅拌20小时。减压除去溶剂并将所得残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分钟内10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)得到顺-N1-[4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]-1-苯磺酰胺乙酸盐(0.042g，0.000048mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，8.18(t，1H)，7.79(d，2H)，7.63(m，3H)，7.58(t，2H)，7.26(d，2H)，7.09(d，2H)，7.01(d，2H)，4.78(m，1H)，4.01(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.31min。
MS：MH+ 653。
实施例258
顺-N-[4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]-N′-苄基脲乙酸盐
将顺-3-{4-[4-(氨基甲基)苯氧基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.051g，0.0001mol)溶解于无水吡啶(1mL)，加入异氰酸苄基酯(0.013g，0.0001mol)并将所得溶液室温下搅拌20小时。减压除去溶剂并将所得残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；10-60％乙腈0.1M醋酸铵在25分钟内，21mL/min)得到顺-N-[4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]-N′-苄基脲乙酸盐(0.019g，0.000027mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.63(d，2H)，7.27(m，7H)，7.13(d，2H)，7.09(d，2H)，6.46(m，2H)，4.78(m，1H)，4.24(d，4H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 13.49min。
MS：MH+ 646。
制备顺-3-{4-[3-(氨基甲基)苯氧基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺及其衍生物的方法与制备顺-3-{4-[4-(氨基甲基)苯氧基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺及其衍生物的方法相同。
实施例259
顺-N1-[3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]苯甲酰胺二乙酸盐
a)顺-3-{4-[3-(氨基甲基)苯氧基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.63(d，2H)，7.38(m，1H)，7.15(m，4H)，6.96(d，1H)，4.78(m，1H)，3.73(s，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.32min。
b)顺-N1-[3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]苯甲酰胺二乙酸盐
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.07(t，1H)，8.23(s，1H)，7.86(d，2H)，7.63(d，2H)，7.48(m，4H)，7.10(m，5H)，4.78(m，1H)，4.49(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 13.58min。
MS：MH+617。
实施例260
顺-N1-[3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]-1-苯磺酰胺乙酸盐
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(m，2H)，7.78(d，2H)，7.62(m，5H)，7.31(m，1H)，7.04(m，5H)，4.78(m，1H)，4.03(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.36min。
MS：MH+653。
实施例261
顺-N-[3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]-N′-苄基脲乙酸盐
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.63(d，2H)，7.35(t，1H)，7.27-7.04(m，10H)，6.46(m，2H)，4.78(m，1H)，4.25(d，2H)，4.22(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 13.44min。
MS：MH+ 646。
实施例262和实施例263
顺-3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5-苯基-1，3-噁唑烷-2-酮乙酸盐
反-3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5-苯基-1，3-噁唑烷-2-酮
a)2-(4-溴苯氨基)-1-苯基-1-乙酮
向含4-溴苯胺(7.42g，0.0431mol)和2-溴苯乙酮(8.58g，0.0431mol)的N，N-二甲基甲酰胺(200mL)溶液中，滴加N，N-二异丙基乙胺并将该反应混合物室温下搅拌5小时。减压除去溶剂并将此残余物在二氯甲烷(150mL)和水(100mL)之间分配。将有机相用硫酸镁干燥并减压浓缩。残余物悬浮于乙醚，过滤收集此沉淀并干燥得到2-(4-溴苯氨基)-1-苯基-1-乙酮(10.03g，0.0346mol)，为米白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.06(d，2H)，7.69(t，1H)，7.58(m，2H)，7.20(d，2H)，6.66(d，2H)，6.11(t，1H)，4.68(d，2H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶2)Rf 0.39
b)2-(4-溴苯氨基)-1-苯基-1-乙醇
将2-(4-溴苯氨基)-1-苯基-1-乙酮(3.50g，0.0121mol)的无水甲醇(200mL)溶液冷却至0℃，并立即加入硼氢化钠(2.28g，0.0603mol)。将此混合物升温至室温同时在氮气氛下搅拌3小时。通过滴加乙酸停止该反应，将该反应混合物减压浓缩并将此残余物在二氯甲烷(120mL)和水(85mL)之间分配。将有机相用硫酸镁干燥并减压浓缩得到2-(4-溴苯氨基)-1-苯基-1-乙醇(3.49g，0.0117mol)，为黄色油状物。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.39(d，2H)，7.33(m，2H)，7.24(t，1H)，7.17(d，2H)，5.81(t，1H)，5.47(d，1H)，4.71(m，1H)，3.18(m，1H)，3.07(m，1H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶2)Rf 0.22
c)3-(4-溴苯基)-5-苯基-1，3-噁唑烷-2-酮
将含2-(4-溴苯氨基)-1-苯基-1-乙醇(0.74g，0.00253mol)、N，N-二异丙基乙胺(1.01g，0.00786mol)和N，N-二甲基氨基吡啶(0.092g，0.00076mol)的无水二氯甲烷(32mL)溶液冷却至0℃，并滴加三光气(0.38g，0.00127mol)的无水二氯甲烷(8mL)溶液。将该反应混合物缓慢升温至室温同时在氮气氛下搅拌18小时。有机相用饱和碳酸氢钠水溶液(40mL)、盐水(30mL)洗涤并用硫酸镁干燥。减压除去溶剂并将此残余物通过急骤色谱在硅胶上纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶5)作为流动相，得到3-(4-溴苯基)-5-苯基-1，3-噁唑烷-2-酮(0.62g，0.00192mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.58(s，4H)，7.47(m，5H)，5.77(m，1H)，4.46(t，1H)，4.01(t，1H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶2)Rf 0.28
d)5-苯基-3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-1，3-噁唑烷-2-酮
将3-(4-溴苯基)-5-苯基-1，3-噁唑烷-2-酮(0.6g，0.00189mol)、乙硼烷频哪醇酯(0.58g，0.00226mol)、[1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁]-二氯钯(II)与二氯甲烷(1∶1)的复合物(0.046g，0.000057mol)和醋酸钾(0.56g，0.0057mol)在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的混合物，在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。将二氯甲烷(100mL)加入到此残余物中并将所得固体通过硅藻土板滤出。浓缩此滤液得到黄色油状物，其在硅胶上通过急骤色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶5)作为流动相。将所得馏份浓缩，残余物在正庚烷中研磨并过滤收集沉淀得到5-苯基-3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-1，3-噁唑烷-2-酮(0.19g，0.00052mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.69(d，2H)，7.62(d，2H)，7.47(m，5H)，5.77(m，1H)，4.46(t，1H)，4.01(t，1H)，1.27(s，12H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶2)Rf 0.19
e)顺-3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5-苯基-1，3-噁唑烷-2-酮乙酸盐
将5-苯基-3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-1，3-噁唑烷-2-酮(0.085g，0.000233mol)、顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.086g，0.000194mol)、四-(三苯基膦)钯(0.013g，0.000012mol)和碳酸钠一水合物(0.060g，0.000485mol)的混合物，在乙二醇二甲基醚(5mL)和水(3mL)的混合物中，在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，在25分钟内，21mL/min)得到顺-3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5-苯基-1，3-噁唑烷-2-酮乙酸盐(0.074g，0.000121mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.79(d，2H)，7.68(d，2H)，7.47(m，5H)，5.82(t，1H)，4.78(m，1H)，4.57(t，1H)，4.09(t，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，在20分钟内，1mL/min)Rt 12.84min。
MS：MH+ 553。
f)反-3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5-苯基-1，3-噁唑烷-2-酮
此化合物通过类似于制备顺-3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5-苯基-1，3-噁唑烷-2-酮乙酸盐的合成途径来制备。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.79(d，2H)，7.68(d，2H)，7.47(m，5H)，5.82(t，1H)，4.64(m，1H)，4.57(t，1H)，4.09(t，1H)，3.1(br，9H)，2.17(s，3H)，2.05(m，6H)，1.49(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 12.72min。
MS：MH+ 553。
实施例264
反-3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5-苄基-1，3-噁唑烷-2-酮二乙酸盐
a)1-(4-溴苯氨基)-3-苯基-2-丙醇
将4-溴苯胺(1.75g，0.0102mol)和2，3-环氧基丙基苯(1.77g，0.0132mol)在甲醇(40mL)中的混合物加热回流16小时。将此混合物冷却至室温并减压浓缩。残余物在硅胶上通过急骤色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶5)作为流动相，得到1-(4-溴苯氨基)-3-苯基-2-丙醇(2.2g，0.00719mol)，为无色油状物。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.33(m，7H)，6.50(d，2H)，5.76(t，1H)，4.83(d，1H)，3.82(m，1H)，2.98(m，1H)，2.90(m，1H)，2.78(dd，1H)，2.67(dd，1H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶3)Rf 0.29
b)5-苄基-3-(4-溴苯基)-1，3-噁唑烷-2-酮
将含1-(4-溴苯氨基)-3-苯基-2-丙醇(1.90g，0.00621mol)、N，N-二异丙基乙胺(2.48g，0.0193mol)和N，N-二甲基氨基吡啶(0.152g，0.00124mol)的无水二氯甲烷(64mL)溶液冷却至0℃，并滴加三光气(0.92g，0.0031mol)的无水二氯甲烷(16mL)溶液。将该反应混合物缓慢升温至室温同时在氮气氛下搅拌18小时。有机相用碳酸氢钠水溶液(70mL)、盐水(60mL)洗涤并用硫酸镁干燥。减压除去溶剂并将此残余物通过急骤色谱在硅胶上纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶5)作为流动相，得到5-苄基-3-(4-溴苯基)-1，3-噁唑烷-2-酮(1.25g，0.00377mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.54(d，2H)，7.47(d，2H)，7.27(m，5H)，4.95(m，1H)，4.12(t，1H)，3.78(t，1H)，3.07(d，2H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶3)Rf 0.37
c)5-苄基-3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-1，3-噁唑烷-2-酮
将5-苄基-3-(4-溴苯基)-1，3-噁唑烷-2-酮(1.25g，0.00377mol)、乙硼烷频哪醇酯(1.15g，0.00452mol)、[1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁]-二氯钯(II)与二氯甲烷(1∶1)的复合物(0.092g，0.000114mol)和醋酸钾(1.12g，0.0113mol)在N，N-二甲基甲酰胺(30mL)中的混合物，在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。将二氯甲烷(100mL)加入到此残余物中并将所得固体通过硅藻土板滤出。浓缩此滤液得到黄色油状物，其在硅胶上通过急骤色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶5)作为流动相。将所得馏份浓缩，残余物在正庚烷中研磨并过滤收集沉淀得到5-苄基-3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-1，3-噁唑烷-2-酮(1.03g，0.0027mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.65(d，2H)，7.54(d，2H)，7.27(m，5H)，4.95(m，1H)，4.12(t，1H)，3.78(t，1H)，3.07(d，2H)，1.28(s，12H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶3)Rf 0.25。
d)反-3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5-苄基-1，3-噁唑烷-2-酮二乙酸盐
将5-苄基-3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-1，3-噁唑烷-2-酮(0.110g，0.00029mol)、反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.080g，0.000181mol)、四-(三苯基膦)钯(0.012g，0.000011mol)和碳酸钠一水合物(0.056g，0.00045mol)的混合物，在乙二醇二甲基醚(5mL)和水(3mL)的混合物中，在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分钟内10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)得到反-3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5-苄基-1，3-噁唑烷-2-酮二乙酸盐(0.049g，0.000072mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.65(m，4H)，7.32(m，5H)，5.02(m，1H)，4.64(m，1H)，4.19(t，1H)，3.85(t，1H)，3.11(d，2H)，3.1(br，9H)，2.17(s，6H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.49(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，在20分钟内，1mL/min)Rt 13.13min。
MS：MH+ 567。
实施例265
顺-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-2-甲基-2-苯基丙酰胺二乙酸盐
将含顺-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.1g，0.000246mol)、α，α-二甲基苯基乙酸(0.045g，0.000271mol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.071g，0.000369mol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.0037g，0.000271mol)的无水N，N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液搅拌5分钟。滴加N，N-二异丙基乙胺(0.098g，0.00076mol)并在氮气氛下继续搅拌16小时。减压浓缩此反应混合物并将残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分钟内10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)得到顺-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)苯基)-2-甲基-2-苯基丙酰胺二乙酸盐(0.014g，0.000021mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.29(s，1H)，8.20(s，1H)，7.82(d，2H)，7.55(d，2H)，7.83(m，4H)，7.27(m，1H)，4.78(m，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.68(m，2H)，1.59(s，6H)，1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，在20分钟内，1mL/min)Rt 13.59min。
MS：MH+ 553。
实施例266和实施例267
顺-4(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)-4-氧代-2-苯基丁酸乙酸盐
顺-4(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)-4-氧代-3-苯基丁酸乙酸盐
a)1-(4-溴苯基)-3-苯基-2，5-吡咯烷二酮
将4-溴苯胺(5.48g，0.0318mol)和苯基琥珀酸酐(5.89g，0.0334mol)的无水苯(80mL)溶液加热回流1.5小时。将此混合物冷却至室温并减压浓缩。向此残余物中，加入乙酰基氯(60mL)并将此溶液加热回流1.5小时。将该反应混合物冷却至室温并过滤收集沉淀，用乙醚洗涤并干燥得到1-(4-溴苯基)-3-苯基-2，5-吡咯烷二酮(8.7g，0.0264mol)，为米白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.72(d，2H)，7.40(m，7H)，4.33(dd，1H)，3.33(dd，1H)，2.94(dd，1H)；
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶4)Rf 0.34
b)3-苯基-1-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-2，5-吡咯烷二酮
将1-(4-溴苯基)-3-苯基-2，5-吡咯烷二酮(2.00g，0.00602mol)、乙硼烷频哪醇酯(1.85g，0.00727mol)、[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]-二氯钯(II)与二氯甲烷(1∶1)的复合物(0.148g，0.000182mol)和醋酸钾(1.784g，0.0182mol)在N，N-二甲基甲酰胺(40mL)中的混合物，在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。将二氯甲烷(100mL)加入到此残余物中并将所得固体通过硅藻土板滤出。浓缩此滤液得到黄色油状物，其在硅胶上通过急骤色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶4)作为流动相。将所得馏份浓缩，残余物在正庚烷中研磨并过滤收集沉淀得到3-苯基-1-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-2，5吡咯烷二酮(0.78g，0.00207mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.79(d，2H)，7.40(m，7H)，4.33(dd，1H)，3.33(dd，1H)，2.97(dd，1H)，1.31(s，12H)；
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶4)Rf 0.21
c)顺-4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)-4-氧代-2-苯基丁酸乙酸盐，和
顺-4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)-4-氧代-3-苯基丁酸乙酸盐
将3-苯基-1-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-2，5-吡咯烷二酮(0.35g，0.00093mol)、顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.34g，0.000773mol)、四-(三苯基膦)钯(0.053g，0.000046mol)和碳酸钠一水合物(0.24g，0.00193mol)的混合物，在乙二醇二甲基醚(14mL)和水(7mL)的混合物中，在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，在25分钟内，21mL/min)得到顺-4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)-4-氧代-2-苯基丁酸乙酸盐(0.150g，0.000233mol)和顺-4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)-4-氧代-3-苯基丁酸乙酸盐(0.11g，0.000171mol)，都是白色固体。
顺-4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)-4-氧代-2-苯基丁酸乙酸盐
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.37(s，1H)，8.21(s，1H)，7.73(d，2H)，7.55(d，2H)，7.25(m，5H)，4.76(m，1H)，4.00(m，1H)，3.12(dd，1H)，2.71(dd，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 10.54min。
MS：MH+ 583。
顺-4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)-4-氧代-3-苯基丁酸乙酸盐
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.46(s，1H)，8.21(s，1H)，7.78(d，2H)，7.54(d，2H)，7.41(d，5H)，7.31(t，2H)，7.24(t，1H)，4.76(m，1H)，4.16(m，1H)，3.08(dd，1H)，2.51(dd，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 11.11min。
MS：MH+ 583。
实施例268
顺-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲腈
a)2-苯基-2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]乙腈
将(4-溴苯基)(苯基)甲腈(0.604g，0.00222mol)、乙硼烷频哪醇酯(0.677g，0.00266mol)、[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷(1∶1)的复合物(0.054g，0.000067mol)和醋酸钾(0.52g，0.00666mol)在N，N-二甲基甲酰胺(30mL)中的混合物，在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。将二氯甲烷(80mL)加入到此残余物中并将所得固体通过硅藻土板滤出。浓缩此滤液得到黄色油状物，其在硅胶上通过急骤色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶9)作为流动相。将所得馏份浓缩，残余物在正庚烷中研磨并过滤收集沉淀得到2-苯基-2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]乙腈(0.110g，0.000345mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.67(d，2H)，7.40(m，7H)，5.87(s，1H)，1.31(s，12H)；
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶9)Rf 0.18
b)顺-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲腈
将2-苯基-2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]乙腈(0.120g，0.000376mol)、顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.083g，0.000188mol)、四-(三苯基膦)钯(0.013g，0.000011mol)和碳酸钠一水合物(0.058g，0.00047mol)的混合物，在乙二醇二甲基醚(5mL)和水(3mL)的混合物中，在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分钟内10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)得到顺-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲腈(0.025g，0.0000494mol)，为米白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.70(d，2H)，7.58(d，2H)，7.47(m，4H)，7.38(t，1H)，5.93(s，1H)，4.76(m，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 12.95min。
MS：MH+ 507。
实施例269
顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)苯基)-1，3-苯并噁唑-2-胺二乙酸盐
a)N-(1，3-苯并噁唑-2-基)-N-(4-溴苯基)胺
将4-溴苯胺(3.9g，0.0227mol)加入到2-氯苯并噁唑(1.16g，0.00755mol)的二甲苯溶液中，并将该反应混合物在100℃下加热2小时。将其冷却至室温并减压浓缩。残余物在乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)之间分配，将有机相用硫酸镁干燥并减压浓缩。残余物在正庚烷中研磨并过滤收集沉淀，并干燥得到N-(1，3-苯并噁唑-2-基)-N-(4-溴苯基)胺(1.48g，0.00512mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.78(s，1H)，7.74(d，2H)，7.57(d，2H)，7.50(m，2H)，7.23(t，1H)，7.16(t，1H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶3)Rf 0.34
b)N-(1，3-苯并噁唑-2-基)-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]胺
将N-(1，3-苯并噁唑-2-基)-N-(4-溴苯基)胺(0.800g，0.00277mol)、乙硼烷频哪醇酯(0.84g，0.00332mol)、[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]-二氯钯(II)与二氯甲烷(1∶1)的复合物(0.068g，0.000083mol)和醋酸钾(0.81g，0.0083mol)的混合物在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中，在80℃下在氮气氛下加热16小时。让此混合物冷却至室温，并减压除去溶剂。将二氯甲烷(100mL)加入到此残余物中并将所得固体通过硅藻土板滤出。浓缩此滤液得到黄色油状物，其在硅胶上通过急骤色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶5)作为流动相。将所得馏份浓缩，残余物在正庚烷中研磨并过滤收集沉淀得到N-(1，3-苯并噁唑-2-基)-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]胺(0.59g，0.00176mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.80(s，1H)，7.78(d，2H)，7.68(d，2H)，7.50(d，2H)，7.23(t，1H)，7.16(t，1H)，1.26(s，12H)
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶3)Rf 0.29
c)顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-1，3-苯并噁唑-2-胺二乙酸盐
将N-(1，3-苯并噁唑-2-基)-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]胺(0.073g，0.000217mol)、顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.080g，0.000181mol)、四-(三苯基膦)钯(0.012g，0.000011mol)和碳酸钠一水合物(0.056g，0.000453mol)的混合物，在乙二醇二甲基醚(5mL)和水(3mL)的混合物中，在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，在25分钟内，21mL/min)得到顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基苯基)-1，3-苯并噁唑-2-胺二乙酸盐(0.082g，0.000128mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.95(d，2H)，7.66(d，2H)，7.51(m，2H)，7.25(t，1H)，7.15(t，1H)，4.78(m，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 12.80min。
MS：MH+ 524。
中间体A：2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯氧基]苯甲醛
将2-(4-碘苯氧基)苯甲醛(1.31g，4.03mmol，1当量)、PdCl2(dppf)2(0.092g，0.13mmol，0.03当量)、乙硼烷频哪醇酯(1.23g，4.84mmol，1.2当量)及醋酸钾(1.19g，12.1mmol，3.0当量)在DMF(15mL)中的混合物，在80℃下加热5.5小时。将该反应混合物冷却至室温并减压除去溶剂。残余物溶解于二氯甲烷(50mL)并将固体通过硅藻土板借助于二氯甲烷(100mL)和Et2O(100mL)滤出。浓缩此滤液得到棕色油状物，其通过柱色谱在硅胶上纯化(用500ml的5％MeOH/二氯甲烷洗脱)得到2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯氧基]苯甲醛，为红色-棕色油状物(0.875g，2.70mmol)：1H NMR(d6 DMSO，400MHz)：δH 10.30(1H，s)，7.87-7.89(1H，m)，7.69-7.75(3H，m)，7.36-7.38(1H，m)，7.05-7.22(3H，m)及1.29(12H，s)。
实施例270
2-[4-(4-氨基-1-环戊基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)苯氧基]乙酰胺
将4-(4-氨基-1-环戊基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)苯酚(0.050g，0.17mmol，1.0当量)、二噁烷(1.7mL)及氢化钠(60％，0.010g，0.17mmol，1.0当量)的混合物室温下搅拌10分钟。加入碘代乙酰胺(0.031g，0.17mmol，1.0当量)。该反应混合物室温下搅拌30分钟，然后在110℃下加热3.5小时。将此混合物冷却至室温并将所得固体过滤移出，其中借助二氯甲烷(5mL)和EtOAc(5mL)。减压除去溶剂得到黄色固体，其用乙酸乙酯研磨得到2-[(4-氨基-1-环戊基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)氧基]乙酰胺，为米色固体(0.045g，0.13mmol)：1H NMR(d6 DMSO，400MHz)：δH 8.22(1H，s)，7.60(2H，d)，7.12(2H，d)，5.20-5.25(1H，m)，4.50(2H，s)，2.02-2.10(4H，m)，1.87-1.90(2H，m)，1.68-1.71(2H，m)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 12.38min。MS：MH+353。
实施例271
5-[4-(4-氨基-1-环戊基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)苯氧基]-2-呋喃甲酸甲酯
将4-(4-氨基-1-环戊基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)苯酚(0.107g，0.362mmol，1.0当量)、DMSO(0.5mL)、氢化钠(60％，0.030g，0.72mmol，2.0当量)和甲基-5-硝基-2-呋喃甲酸酯(0.062g，0.36mmol，1.0当量)在90℃下加热3小时。将该反应混合物冷却至室温，倒入到冰水(10mL)，并用3部分二氯甲烷(各50mL)萃取。合并的有机萃取物用5％KOH溶液(50mL)洗涤，并将有机层用硫酸镁干燥，过滤，并浓缩得到红色油状物，其通过柱色谱在硅胶上纯化(用300ml的5％MeOH/二氯甲烷洗脱)得到5-[4-(4-氨基-1-环戊基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)苯氧基]-2-呋喃甲酸甲酯，为红色固体(0.070g，0.17mmol)：1H NMR(d6 DMSO，400MHz)：δH 8.24(1H，s)，7.70-7.74(2H，m)，7.35-7.39(3H，m)，6.9(2H，bs)，6.02(1H，s)，5.22-5.26(1H，m)，3.79(3H，s)，2.01-2.11(4H，m)，1.88-1.91(2H，m)，1.67-1.71(2H，m)。RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt18.17min。MS：MH+ 420。
实施例272
5-[4-(4-氨基-1-环戊基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)苯氧基]-2-呋喃甲酸
将5-[4-(4-氨基-1-环戊基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)苯氧基]-2-呋喃甲酸甲酯(0.030g，0.072mmol，1当量)和氢氧化钠(0.020g，0.50mmol，7当量)在50％ EtOH：水(1mL)中的混合物，在80℃下加热6小时。该反应混合物冷却至室温并用水(10mL)稀释。通过加入1M HCl中和此混合物并用两部分二氯甲烷(各20mL)和两部分EtOAc(各20mL)萃取。合并的有机萃取物用硫酸镁干燥，过滤，并浓缩得到黄色油状物，其通过制备RP-HPLC纯化(Rainin C18，8μm，300，25cm；50％-100％乙腈-0.1M醋酸铵，在20分钟内，21mL/min)。真空下除去乙腈并将此含水混合物冻干得到淡棕色固体(0.009g，0.022mmol)：1H NMR(d6 DMSO，400MHz)：δH 13.0(1H，bs)，8.23(1H，s)，7.74(2H，d)，7.35(2H，d)，7.29(1H，s)，6.03(1H，s)，5.21-5.28(1H，m)，2.01-2.11(4H，m)，1.89-1.90(2H，m)，1.68-1.71(2H，m)。RP-HPLC(Hypercil C18，5μm，100，15cm；在15分钟内5％-100％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 6.45min。MS：MH+ 406。
实施例273
1-环戊基-3-[4-(3-噻吩基氧基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将4-(4-氨基-1-环戊基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)苯酚(0.212g，0.718mmol，1当量)、碳酸钾(0.060g，0.43mmol，0.6当量)、铜粉末(0.015g，0.24mmol，0.33当量)及3-溴噻吩(0.09mL，0.9mmol，1.3当量)在DMF(7.2mL)的混合物在153℃下加热24小时。将该反应混合物冷却至室温，浓缩，并将此残余物通过制备RP-HPLC纯化(Rainin C18，8μm，300，25cm；在20分钟内10％-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)。真空下除去乙腈并将此含水混合物冻干得到1-环戊基-3-[4-(3-噻吩基氧基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，为淡棕色固体(0.060g，0.16mmol)：1H NMR(d6 DMSO，400MHz)：δH 9.77(1H，s)，8.46(1H，s)，8.41(1H，s)，7.73-7.74(1H，m)，7.57(2H，d，J＝4.5Hz)，7.46-7.48(1H，m)，7.15(1H，d，J＝5.2Hz)，6.96(2H，d，J＝8.6Hz)，5.24-5.30(1H，m)，2.03-2.05(4H，m)，1.89-1.93(2H，m)，1.70-1.72(2H，m)。RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 18.76min。MS：MH+378。
实施例274
顺-3-{3-[(苯并[b]呋喃-2-基甲基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺单乙酸盐
将顺-3-(3-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.107g，0.263mmol，1当量)、冰醋酸(0.06mL，1.0mmol，3.8当量)、苯并[B]呋喃-2-甲醛(0.1g，0.3mmol，1当量)、三乙酰氧基硼氢化钠(0.212g，1.0mmol，3.8当量)及二氯乙烷(2mL)的混合物，室温下搅拌4.5小时。加入碳酸氢钠水溶液，分离有机层，并将水层用两部分的二氯甲烷萃取(各10mL)。合并的有机萃取物用硫酸镁干燥，过滤，并浓缩得到黄色油状物其通过制备RP-HPLC纯化(Rainin C18，8μm，300，25cm；在20分钟内10％-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)。真空下除去乙腈并将此含水混合物冻干得到顺-3-{3-[(苯并[b]呋喃-2-基甲基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺单乙酸盐，为白色固体(0.017g，0.031mmol)：1H NMR(d6 DMSO，400MHz)：δH8.22(1H，s)，7.51-7.58(2H，m)，7.22-7.28(3H，m)，6.98(1H，s)，6.79-6.84(2H，m)，6.59-6.62(1H，m)，4.76-4.81(1H，m)，4.50(2H，d，J＝5.6Hz)，2.19-2.24(14H，m)，2.05-2.07(2H，m)，1.91(3H，s)，1.60-1.75(4H，m)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 13.99min。MS：MH+ 537。
实施例275
顺-3-{3-[二(2-呋喃基甲基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将顺-3-(3-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.120g，0.296mmol，1当量)、糠醛(0.03mL，0.3mmol，1.1当量)、冰醋酸(0.07mL，1.1mmol，3.8当量)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.314g，1.48mmol，5.0当量)在二氯乙烷(2mL)中的混合物，室温下搅拌60小时。加入饱和碳酸氢钠水溶液(5mL)，分离有机层，并将水层用两部分的二氯甲烷萃取(各10mL)。有机萃取物用硫酸镁干燥，过滤，并浓缩得到黄色油状物。通过柱色谱在硅胶上纯化(用200ml的5％ MeOH/二氯甲烷，100ml的10％ MeOH/二氯甲烷，和300ml的10∶20∶70％ MeOH/Et3N/二氯甲烷洗脱)得到顺-3-{3-[二(2-呋喃基甲基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，为白色固体(0.051g，0.10mmol)：1H NMR(d6 DMSO，400MHz)：δH 8.22(1H，s)，7.60(2H，s)，7.31-7.35(1H，m)，7.19(1H，s)，7.00(1H，d，J＝8.4Hz)，6.93(1H，d，J＝7.6Hz)，6.39(2H，s)，6.32(2H，s)，4.77-4.80(1H，m)，4.60(4H，s)，2.23-2.39(11H，m)，2.16(3H，s)，2.05-2.07(2H，m)，1.59-1.71(4H，m)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.52min。MS：MH+ 567。
实施例276
顺-N-[2-(3-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]三氟甲烷磺酰胺二乙酸盐
向顺-3-4-[2-(氨基甲基)苯氧基]苯基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.018g，0.035mmol，1当量)和吡啶(0.4mL)的混合物中，在0℃下在20秒内滴加CF3SO2Cl(0.05mL，0.04mmol，1.2当量)。将该反应混合物缓慢升温至室温并搅拌3小时。减压蒸发溶剂并将此油状黄色残余物通过制备RP-HPLC纯化(Rainin C18，8μm，300，25cm；在20分钟内10％-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)。真空下除去乙腈并将此含水混合物冻干得到顺-N-[2-(3-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]三氟甲烷磺酰胺二乙酸盐(0.004g，0.006mmol)：1H NMR(d6 DMSO，400MHz)：δH8.22(1H，s)，7.61-7.67(3H，m)，7.25-7.30(2H，m)，7.19-7.23(2H，m)，6.96-6.98(1H，m)，4.77-4.81(1H，m)，4.25(2H，s)，2.09-2.54(14H，m)，2.05-2.08(2H，m)，1.91(6H，s)，1.57-1.74(4H，m)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 15.15min。MS：MH+645。
实施例277
顺-2-(3-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苯甲醛
将顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.970g，2.20mmol，1当量)、2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯氧基]苯甲醛(0.842g，2.60mmol，1.2当量)、四(三苯基膦)钯(0.186g，0.180mmol，0.08当量)、DME(9mL)及碳酸钠一水合物(0.655g，5.30mmol，2.4当量)在水(7mL)中的混合物，在85℃下加热7小时，然后冷却至室温。加入饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)，并将此溶液用EtOAc(25mL)萃取。有机萃取物用硫酸镁干燥，过滤，并浓缩得到淡棕色固体。用乙醚(35mL)研磨得到顺-2-(3-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苯甲醛，为米白色固体(0.830g，1.62mmol)：1H NMR(d6 DMSO，400MHz)：δH 10.42(1H，s)，8.24(1H，s)，7.89(1H，d，J＝7.7Hz)，7.69-7.71(3H，m)，7.30-7.36(1H，m)，7.29(2H，d，J＝6.3Hz)，7.16(1H，d，J＝8.2Hz)，4.79-4.81(1H，m)，2.18-2.55(11H，m)，2.17(3H，s)，2.05-2.09(2H，m)，1.56-1.71(4H，m)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 12.56min。MS：MH+ 512。
实施例278
顺-3-{3-[2-(1H-2咪唑基)苯氧基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将顺-2-(3-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苯甲醛(0.102g，0.199mmol，1当量)、乙二醛(0.12mL，0.99mmol，5当量)和碳酸铵(0.078g，0.99mmol，5当量)在甲醇(1mL)中的混合物，室温下搅拌16小时。再加入乙二醛(0.20mL，1.6mmol，8.3当量)和碳酸铵(0.130g，1.66mmol，8.4当量)，并将此反应混合物在室温下搅拌24小时。粗品反应混合物通过制备RP-HPLC纯化(Rainin C18，8μm，300，25cm；在20分钟内10％-60％乙腈0.1M醋酸铵，21mL/min)。真空下除去乙腈并将此含水混合物冻干得到顺-3-{3-[2-(1H-2-咪唑基)苯氧基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，为棕色固体(0.010g，0.018mmol)：1H NMR(d6 DMSO，400MHz)：δH 8.23(1H，s)，8.11-8.13(1H，dd，J＝7.7，1.9Hz)，7.95(1H，s)，7.66(2H，d，J＝8.5Hz)，7.34-7.39(1H，m)，7.23-7.27(3H，m)，7.07-7.19(3H，m)，4.77-4.82(1H，m)，2.16-2.56(11H，m)，2.14(3H，s)，2.05-2.11(2H，m)，1.55-1.71(4H，m)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 10.43min。MS：MH+ 550。
实施例279
顺-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2-苯氨基乙酰胺
将3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.151g，0.356mmol，1当量)、碳酸钾(0.098g，0.711mmol，2当量)及氯乙酰基氯(0.04mL，0.5mmol，1.5当量)在DMF(1.5mL)中的混合物，室温下搅拌20分钟，然后加入苯胺(0.32mL，3.5mmol，10当量)。将该反应混合物室温下搅拌72小时。减压除去溶剂并将此残余物通过制备RP-HPLC纯化(Rainin C18，8μm，300，25cm；在20分钟内10％-60％乙腈0.1M醋酸铵，21mL/min)。真空下除去乙腈并将此含水混合物用饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)洗涤，然后用二氯甲烷(25mL)萃取。有机萃取物用硫酸镁干燥，过滤，并浓缩得到顺-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2-苯氨基乙酰胺，为黄色固体(0.010g，0.017mmol)：1H NMR(d6 DMS0，400MHz)：δH 9.30(1H，s)，8.35-8.38(1H，m)，8.21(1H，s)，7.21-7.23(2H，m)，7.12-7.16(2H，m)，6.64-6.66(3H，m)，6.31-6.34(1H，m)，4.77-4.81(1H，m)，3.90(2H，d，J＝6.0Hz)，3.82(3H，s)，2.21-2.51(11H，m)，2.16(3H，s)，2.06-2.08(2H，m)，1.55-1.70(4H，m)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 12.37min。MS：MH+ 570。
实施例280
(2S)-3-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}丙烷-1，2-二醇
室温下，在氮气氛下向1-(3-氮杂环丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.00014mol)的溶液中加入(R)-(+)-缩水甘油(0.05M在异丙醇中，2.8mL，0.00014mol)。此混合物在80℃下搅拌3小时。减压除去溶剂。残余物在硅胶上通过急骤色谱纯化，用氢氧化铵/甲醇/二氯甲烷(2∶7∶91)，接着用氢氧化铵/甲醇/二氯甲烷(2∶10∶88)作为流动相洗脱，得到(2S)-3-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}丙烷-1，2-二醇(0.023g，0.000053mol)。
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.31(s，1H)，7.64(d，2H)，7.38(m，2H)，7.15(m，5H)，5.90(br，2H)，5.60(m，1H)，3.97(m，3H)，3.88(m，1H)，3.75(m，2H)，3.61(m，1H)，2.80(m，2H)。
RP-HPLC(Hypersil C18，5μm，250×4.6mm；在10分钟内含0.1M乙酸胺的25％-100％，1mL/min)Rt 8.6min。
MS：MH+ 433
实施例281
(2R)-3-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}丙烷-1，2-二醇
实验方法类似于(2S)-3-3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基丙烷-1，2-二醇的合成，其中使用(S)-(-)-缩水甘油。
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.36(s，1H)，7.67(d，2H)，7.39(m，2H)，7.15(m，5H)，5.65(br，3H)，4.00(m，3H)，3.90(m，1H)，3.75(m，2H)，3.62(m，1H)，2.85(m，2H)。
RP-HPLC(Hypersil C18，5μm，250×4.6mm；在10分钟内含0.1M乙酸胺的25％-100％，1mL/min)Rt 8.76min。
MS：MH+ 433
实施例282
4-(3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基甲基)-4-羟基-1-哌啶甲酸叔丁基酯
a)1-氧杂-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁基酯
将氧化锍三甲基碘(2.62g，0.012mol)和氢化钠(0.44g，0.011mol)在无水二甲基亚砜(30mL)中的混合物，室温氮气氛下搅拌30分钟。将该反应混合物冷却至10℃，并加入存在于无水二甲基亚砜(10mL)中的4-氧代-1-哌啶甲酸(2.0g，0.010mol)。将该反应混合物升温至室温并搅拌1.5小时。此混合物倒入到饱和氯化铵水溶液(60mL)中。水相用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。合并的有机萃取物用水(1×60mL)和盐水(1×50mL)洗涤并用硫酸钠干燥。减压除去溶剂得到1-氧杂-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁基酯(2.12g，0.0099mol)。
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ3.74(br，2H)，3.44(m，2H)，2.69(s，2H)，1.80(m，2H)，1.47(s，9H)，1.46(m，2H)
TLC(乙酸乙酯/二氯甲烷＝20∶80)Rf 0.57
4-(3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基甲基)-4-羟基-1-哌啶甲酸叔丁基酯
室温下，在氮气氛下向1-(3-氮杂环丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.4g，0.0011mol)在异丙醇(40mL)中的混合物中，加入1-氧杂-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁基酯(0.27g，0.0013mol)。此混合物在80℃下搅拌3.5小时。再加入1-氧杂-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁基酯(0.13g，0.00061mol)并将此混合物在80℃下搅拌7小时。再加入1-氧杂-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁基酯(0.13g，0.00061mol)并将此混合物在60℃下搅拌18小时，然后在80℃搅拌8小时。减压除去溶剂。残余物悬浮于水(50mL)中并将水相用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合并的有机萃取物用水(1×50mL)和盐水(1×50mL)洗涤并用硫酸镁干燥。减压除去溶剂。残余物在硅胶上通过急骤色谱纯化，用甲醇/二氯甲烷(5∶95)，接着用甲醇/二氯甲烷(10∶90)作为流动相，得到4-(3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基甲基)-4-羟基-1-哌啶甲酸叔丁基酯(0.243g，0.000425mol)。
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.38(s，1H)，7.67(d，2H)，7.43(t，2H)，7.17(m，3H)，7.10(d，2H)，5.78(m，1H)，5.48(br，2H)，4.34(br，2H)，4.20(br，2H)，3.89(br，2H)，3.18(br，2H)，2.91(br，2H)，1.60(br，2H)，(s，9H)。
RP-HPLC(Hypersil C18，5μm，250×4.6mm；在10分钟内含0.1M乙酸胺的25％-100％，1mL/min)Rt 10.7min。
MS：MH+ 572
实施例283
4-(3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基甲基)-4-哌啶醇
在0℃下在氮气氛下，向4-(3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基甲基)-4-羟基-1-哌啶甲酸叔丁基酯(0.090g，0.00016mol)的二氯甲烷(2mL)溶液中，缓慢加入20％三氟乙酸的二氯甲烷溶液(10mL)。将此混合物升温至室温并搅拌4小时。减压除去溶剂。在0℃下加入5N氢氧化钠水溶液至pH为11。水相用二氯甲烷(2×30mL)萃取。合并的有机萃取物用水(1×60mL)和盐水(1×60mL)洗涤并用硫酸钠干燥。减压除去溶剂得到4-(3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基甲基)-4-哌啶醇(0.045g，0.000096mol)。
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.37(s，1H)，7.68(d，2H)，7.42(t，2H)，7.11(m，3H)，7.00(d，2H)，5.64(m，1H)，5.43(br，2H)，4.02(m，4H)，3.28(br，1H)，3.10(m，4H)，2.67(s，2H)，1.67(m，4H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 8.5min。
MS：MH+ 472
实施例284
4-(3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基甲基)-1-甲基-4-哌啶醇
将4-(3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基甲基)-4-哌啶醇(0.035g，0.000074mol)和甲醛(0.006mL，37％在水中，0.000082mol)在二氯乙烷(4mL)中的混合物，室温氮气氛下搅拌1小时。将三乙酰氧基硼氢化钠(0.022g，0.000104mol)加入到此混合物中并在室温氮气氛下搅拌18小时。加入分子筛(0.05g，3A，4-8目)和甲醛(0.006mL，37％在水中，0.000082mol)并将该反应混合物室温下搅拌18小时。减压除去溶剂，并将此残余物通过RP-HPLC纯化(Hypersil HS C18，8μm，250×21.1mm；在25分钟内含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到4-(3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基甲基)-1-甲基-4-哌啶醇(0.020g，0.000041mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.63(s，1H)，7.69(d，2H)，7.42(t，2H)，7.17(m，5H)，5.42(m，1H)，3.88(m，2H)，3.67(m，2H)，2.37(m，2H)，2.25(m，2H)，2.14(s，3H)，1.90(s，2H)，1.50(m，4H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 8.5min。
MS：MH+ 486
总方法：
将1-(3-氮杂环丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.06g，0.00017mol，1当量)、相应的氯乙酰胺(0.0005mol，3当量)及N，N-二异丙基乙胺(0.033g，0.00026mol，1.5当量)在乙腈(2.5mL)中的混合物，在75℃氮气氛下搅拌3小时。将此混合物倒入水中(10mL)，并用乙酸乙酯(2×10mL)萃取水相。合并的有机萃取物用水(1×10mL)和盐水(1×10mL)洗涤并用硫酸钠干燥。减压除去溶剂。残余物通过RP-HPLC纯化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；5％-100％在25分钟内含0.1M乙酸胺，21mL/min)得到相应的酰胺。
实施例285
N-甲基-2-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}乙酰胺
a)氯乙酰胺：N-甲基-2-氯乙酰胺
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.35(s，1H)，7.67(d，2H)，7.42(m，2H)，7.18(m，3H)，7.08(d，2H)，5.80(br，2H)，5.60(m，1H)，4.00(m，4H)，3.37(s，2H)，2.85(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.2min。
MS：MH+ 430
实施例286
N，N-二甲基-2-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}乙酰胺
b)氯乙酰胺：N，N-二甲基-2-氯乙酰胺
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.33(s，1H)，7.65(d，2H)，7.41(m，2H)，7.16(m，3H)，7.08(d，2H)，5.86(br，2H)，5.67(m，1H)，4.15(m，2H)，3.90(m，2H)，3.57(s，2H)，3.00(s，3H)，2.90(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.3min。
MS：MH+ 444
实施例287
N-异丙基-2-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}乙酰胺
c)氯乙酰胺：N-异丙基-2-氯乙酰胺
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.36(s，1H)，7.67(d，2H)，7.40(m，2H)，7.18(m，3H)，7.09(d，2H)，6.90(br，1H)，5.66(m，3H)，4.11(m，1H)，3.99(m，4H)，3.39(s，2H)，1.19(d，6H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.8min。
MS：MH+ 458
实施例288
N-(3-羟基丙基)-2-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}乙酰胺
d)氯乙酰胺：N-(3-羟基丙基)-2-氯乙酰胺
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.31(s，1H)，7.67(d，2H)，7.40(m，2H)，7.18(m，3H)，7.10(d，2H)，5.99(br，2H)，5.62(m，1H)，3.95(m，4H)，3.78(m，2H)，3.63(m，2H)，3.40(s，2H)，1.71(m，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 8.9min。
MS：MH+ 474
实施例289
2-[(2-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}乙酰基)氨基]乙酸乙酯(4037150)
e)氯乙酰胺：2-[(2-氯乙酰基)氨基]乙酸乙酯
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.37(s，1H)，7.66(d，2H)，7.65(br，1H)，7.40(m，2H)，7.18(m，3H)，7.09(d，2H)，5.67(m，1H)，5.56(br，2H)，4.23(m，2H)，4.10(m，4H)，4.00(m，2H)，3.47(s，2H)，1.29(t，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，I mL/min)Rt 9.9min。
MS：MH+ 502
实施例290
N-苄基-2-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}乙酰胺
f)氯乙酰胺：N-苄基-2-氯乙酰胺
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.25(s，1H)，7.63(d，2H)，7.40(m，2H)，7.33(m，5H)，7.16(m，5H)，5.72(m，1H)，4.49(d，2H)，3.97(m，4H)，3.44(s，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 10.7min。
MS：MH+ 506
实施例291
N，N-甲氧基甲基-2-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}乙酰胺
g)氯乙酰胺：N，N-甲氧基甲基-2-氯乙酰胺
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.37(s，1H)，7.67(d，2H)，7.42(m，2H)，7.18(m，3H)，7.08(d，2H)，5.71(m，1H)，5.48(br，2H)，4.16(m，2H)，3.92(m，2H)，3.72(s，3H)，3.69(s，2H)，3.18(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.5min。
MS：MH+ 460
实施例292
2-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-1-(4-吗啉基)-1-乙酮
h)氯乙酰胺：2-氯-1-(4-吗啉基)-1-乙酮
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.36(s，1H)，7.67(d，2H)，7.42(m，2H)，7.18(m，3H)，7.08(d，2H)，5.71(m，3H)，4.13(m，2H)，3.93(m，2H)，3.69(br，4H)，3.60(br，4H)，3.51(s，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.3min。
MS：MH+ 486
实施例293
N-(3-甲基-5-异噁唑基)-2-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}乙酰胺
i)氯乙酰胺：N-(3-甲基-5-异噁唑基)-2-氯乙酰胺
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ10.10(br，1H)，8.37(s，1H)，7.66(d，2H)，7.40(m，2H)，7.19(m，3H)，7.09(d，2H)，6.26(s，1H)，5.65(m，1H)，4.07(m，4H)，3.54(s，2H)，2.28(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，I mL/min)Rt 10.3min。
MS：MH+ 497
实施例294
1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-2-(1H-4-咪唑基)-1-乙酮
将1-(3-氮杂环丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.00014mol)、2-(1H 4-咪唑基)乙酸钠(0.0026g，0.000175mol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.0034g，0.000175mol)、N，N-二异丙基乙胺(0.033g，0.00026mol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.019g，0.00014mol)在无水N，N-二甲基甲酰胺(6mL)中的混合物，室温下搅拌18小时。减压除去溶剂。残余物溶解于二氯甲烷(3mL)并用水(2mL)洗涤。减压除去溶剂。残余物通过RP-HPLC纯化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分钟内含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-2-(1H-4-咪唑基)-1-乙酮(0.018g，0.00004mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ11.90(br，1H)，8.27(s，1H)，7.71(d，2H)，7.53(s，1H)，7.42(m，2H)，7.19(m，5H)，6.92(br，1H)，5.73(m，1H)，4.74(m，1H)，4.61(m，1H)，4.42(m，2H)，3.42(s，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.0min。
MS：MH+ 467
实施例295
1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-3-(1H-4-咪唑基)-1-丙酮
将1-(3-氮杂环丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.10g，0.00028mol)、3-(1H-4-咪唑基)丙酸(0.050g，0.00035mol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.0068g，0.00035mol)、N，N-二异丙基乙胺(0.068g，0.00053mol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.038g，0.00028mol)在无水N，N-二甲基甲酰胺(13mL)的混合物，室温下搅拌18小时。减压除去溶剂。残余物溶解于二氯甲烷(5mL)并用水(2mL)洗涤。减压除去溶剂。残余物通过RP-HPLC纯化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分钟内含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-3-(1H-4-咪唑基)-1-丙酮(0.040g，0.00008mol)。
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.96(s，1H)，7.77(br，1H)，7.64(d，2H)，7.40(m，2H)，7.17(m，3H)，7.08(m，2H)，6.90(br，1H)，5.78(m，1H)，5.56(br，2H)，4.76(m，1H)，4.57(m，3H)，2.98(m，2H)，2.55(m，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.0min。
MS：MH+ 481
总方法
向1-(3-氮杂环丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.00014mol，1当量)和碳酸钾(0.039g，0.00028mol，2当量)在无水N，N-二甲基甲酰胺中的混合物中，室温下加入氯乙酰基氯(0.031g，0.00028mol，2当量)。将此混合物搅拌10分钟，之后加入此胺(0.0014mol，10当量)。根据所用的胺，将此混合物室温下搅拌-个半小时至两天。减压除去溶剂。残余物溶解于二氯甲烷(3mL)并用水(2mL)洗涤。减压除去溶剂。残余物通过RP-HPLC纯化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分钟内含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到相应的乙酰胺。
实施例296
1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-2-[(2-羟基乙基)氨基]-1-乙酮
a)胺：2-氨基-1-乙醇
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.37(s，1H)，7.67(d，2H)，7.41(m，2H)，7.15(m，3H)，7.08(m，2H)，5.83(m，1H)，5.57(br，2H)，4.82(m，1H)，4.65(m，3H)，3.71(m，2H)，3.45(m，2H)，2.92(m，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 8.7min。
MS：MH+ 460
实施例297
1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-2-[(2-甲氧基乙基)氨基]-1-乙酮
b)胺：2-甲氧基-1-乙胺
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.38(s，1H)，7.67(d，2H)，7.41(m，2H)，7.18(m，3H)，7.10(m，2H)，5.83(m，1H)，5.54(br，2H)，4.81(m，1H)，4.64(m，2H)，4.56(m，1H)，3.55(t，2H)，3.41(s，2H)，3.37(s，3H)，2.88(t，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.0min。MS：MH+ 474
实施例298
1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-2-[(3-羟基丙基)氨基]-1-乙酮
c)胺：3-氨基-1-丙醇
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.37(s，1H)，7.67(d，2H)，7.41(m，2H)，7.18(m，3H)，7.10(m，2H)，5.86(m，1H)，5.54(br，2H)，4.81(m，1H)，4.64(m，3H)，3.87(m，2H)，3.48(m，2H)，3.01(m，2H)，1.83(m，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 8.7min。
MS：MH+ 474
实施例299
1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-2-[(2，3-二羟基丙基)氨基]-1-乙酮
d)胺：3-氨基-1，2-丙烷二醇
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.27(s，1H)，7.72(d，2H)，7.46(m，2H)，7.16(m，5H)，5.73(m，1H)，4.67(m，1H)，4.59(m，2H)，4.37(m，2H)，3.53(m，1H)，3.30(m，1H)，3.22(m，2H)，2.59(m，1H)，2.45(m，1H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，ImL/min)Rt 8.6min。
MS：MH+ 490
实施例300
1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-2-[(四氢-2-呋喃基甲基)氨基]-1-乙酮
e)胺：四氢-2-呋喃基甲胺
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.38(s，1H)，7.67(d，2H)，7.41(m，2H)，7.18(m，3H)，7.10(m，2H)，5.81(m，1H)，5.54(br，2H)，4.80(m，1H)，4.64(m，2H)，4.57(m，1H)，4.05(m，1H)，3.87(m，1H)，3.76(m，1H)，3.42(m，2H)，2.83(m，1H)，2.74(m，1H)，2.00(m，1H)，1.89(m，2H)，1.57(m，1H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，ImL/min)Rt 9.3min。
MS：MH+ 500
实施例301
f)胺：2-哌啶子基-1-乙胺
1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-2-[(2-哌啶子基乙基)氨基]-1-乙酮
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.27(s，1H)，7.70(d，2H)，7.42(m，2H)，7.18(m，5H)，5.73(m，1H)，4.60(m，2H)，4.36(m，2H)，3.24(d，2H)，2.60(m，2H)，2.36(m，6H)，1.49(m，4H)，1.36(m，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.4min。
MS：MH+ 527
实施例302
g)胺：N，N，N-三甲基-1，2-乙二胺
1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-2-[[2-(二甲基氨基)乙基](甲基)氨基]-1-乙酮
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.27(s，1H)，7.70(d，2H)，7.44(m，2H)，7.17(m，5H)，5.75(m，1H)，4.70(m，2H)，4.40(m，2H)，3.22(d，2H)，2.75(br，2H)，2.61(m，2H)，2.47(s，6H)，2.29(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.4min。
MS：MH+ 501
实施例303
h)胺：N，N-二甲基-1，2-乙二胺
1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-2-{[2-(二甲基氨基)乙基]氨基}-1-乙酮乙酸盐
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.33(s，1H)，7.67(d，2H)，7.42(m，2H)，7.15(m，3H)，7.11(m，2H)，5.81(br，3H)，4.81(m，1H)，4.59(m，3H)，3.38(s，2H)，2.89(t，2H)，2.68(t，2H)，2.43(s，6H)，2.05(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.0min。
MS：MH+ 487
实施例304
i)胺：N-甲基-N-(1-甲基-4-哌啶基)胺
1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-2-[甲基(1-甲基-4-哌啶基)氨基]-1-乙酮
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.36(s，1H)，7.67(d，2H)，7.41(m，2H)，7.18(m，3H)，7.10(m，2H)，5.76(m，1H)，5.58(br，2H)，4.87(m，1H)，4.79(m，1H)，4.62(m，1H)，4.55(m，1H)，3.27(m，2H)，2.97(br，2H)，2.51(br，1H)，2.35(s，3H)，2.31(s，3H)，2.04(br，2H)，1.79(br，2H)，1.65(br，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.1min。
MS：MH+ 527
实施例305
j)胺：2-(4-吗啉基)-1-乙胺
1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-2-[(2-(4-吗啉基)乙基)氨基]-1-乙酮
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.38(s，1H)，7.67(d，2H)，7.40(m，2H)，7.19(m，3H)，7.09(m，2H)，5.86(m，1H)，5.50(br，2H)，4.82(m，1H)，4.67(m，3H)，3.77(m，4H)，3.50(s，2H)，2.92(t，2H)，2.66(t，2H)，2.57(br，4H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.1min。
MS：MH+ 529
实施例306
k)胺：3-(4-吗啉基)-1-丙胺
1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-2-[(3-(4-吗啉基)丙基)氨基]-1-乙酮
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.38(s，1H)，7.68(d，2H)，7.41(m，2H)，7.18(m，3H)，7.10(m，2H)，5.85(m，1H)，5.54(br，2H)，4.81(m，1H)，4.64(m，3H)，3.74(m，4H)，3.40(s，2H)，2.83(br，2H)，2.52(br，6H)，1.80(br，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 8.9min。
MS：MH+ 543
实施例307
1)胺：3-(1H-1-咪唑基)-1-丙胺
1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-2-{[3-(1H-1-咪唑基)丙基]氨基}-1-乙酮
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.37(s，1H)，7.65(d，2H)，7.40(m，3H)，7.15(m，3H)，7.08(m，3H)，6.93(s，1H)，5.82(m，1H)，5.62(br，2H)，4.75(m，1H)，4.62(m，3H)，4.07(t，2H)，3.27(s，2H)，2.58(t，2H)，1.97(m，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵在10分钟内，1mL/min)Rt 8.7min。
MS：MH+ 524
实施例308
m)胺：1-(3-氨基丙基)-2-吡咯烷酮
1-{3-[(2-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-2-氧代乙基)氨基]丙基}-2-吡咯烷酮
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.38(s，1H)，7.67(d，2H)，7.41(m，2H)，7.18(m，3H)，7.10(m，2H)，5.82(m，1H)，5.54(br，2H)，4.81(m，1H)，4.64(m，3H)，3.42(m，6H)，2.79(t，2H)，2.42(t，2H)，2.07(m，2H)，1.86(br，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.0min。
MS：MH+ 541
实施例309
n)胺：4-哌啶醇
1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-2-(4-羟基哌啶子基)-1-乙酮
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.38(s，1H)，7.67(d，2H)，7.38(m，2H)，7.18(m，3H)，7.09(m，2H)，5.77(m，1H)，5.57(br，2H)，4.90(m，1H)，4.78(m，1H)，4.63(m，1H)，4.56(m，1H)，3.73(br，1H)，3.18(s，2H)，2.91(br，2H)，2.38(br，2H)，1.95(br，2H)，1.62(br，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 8.9min。
MS：MH+ 500
实施例310
o)胺：4-哌啶基甲醇
1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-2-[4-(羟基甲基)哌啶子基]-1-乙酮
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.36(s，1H)，7.67(d，2H)，7.41(m，2H)，7.18(m，3H)，7.10(m，2H)，5.78(m，1H)，5.64(br，2H)，4.89(m，1H)，4.81(m，1H)，4.62(m，1H)，4.55(m，1H)，3.49(m，2H)，3.13(s，2H)，2.97(m，2H)，2.10(m，2H)，1.74(m，2H)，1.49(br，1H)，1.30(m，2H)。
RP-HPLC(De1ta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.0min。
MS：MH+514
实施例311
p)胺：1-(2-甲氧基乙基)哌嗪
1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-2-[4-(2-甲氧基乙基)哌啶子基]-1-乙酮
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.26(s，1H)，7.71(d，2H)，7.42(m，2H)，7.18(m，5H)，5.69(m，1H)，4.73(m，2H)，4.38(m，2H)，3.39(t，2H)，3.30(s，2H)，3.21(s，3H)，3.05(m，2H)，2.43(br，8H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.0min。
MS：MH+ 543
实施例312
q)胺：吗啉
1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-2-(4-吗啉基)-1-乙酮
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.26(s，1H)，7.70(d，2H)，7.42(m，2H)，7.18(m，5H)，5.70(m，1H)，4.73(m，2H)，4.40(m，2H)，3.57(m，4H)，3.08(m，2H)，2.44(m，4H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.6min。
MS：MH+ 486
实施例313
r)胺：1-甲基哌嗪
1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-1-乙酮
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.26(s，1H)，7.70(d，2H)，7.44(m，2H)，7.16(m，5H)，5.70(m，1H)，4.70(m，2H)，4.35(m，2H)，3.29(s，2H)，3.06(m，2H)，2.45(br，6H)，2.16(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.0min。
MS：MH+ 499
实施例314
s)胺：4-哌啶子基哌啶
1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-2-[4-(哌啶-1-基)哌啶子基]-1-乙酮
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.26(s，1H)，7.70(d，2H)，7.44(m，2H)，7.18(m，5H)，5.70(m，1H)，4.73(m，2H)，4.40(m，1H)，4.30(m，1H)，2.88(m，4H)，2.38(br，4H)，2.13(m，1H)，2.00(m，2H)，1.61(br，2H)，1.43(br，6H)，1.34(br，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.2min。
MS：MH+ 567
实施例315
t)胺：1H-咪唑
1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-2-(1H-1-咪唑基)-1-乙酮
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.31(s，1H)，7.87(br，1H)，7.65(d，2H)，7.41(m，2H)，7.18(m，4H)，7.10(m，3H)，5.90(br，2H)，5.80(m，1H)，4.82(m，1H)，4.72(m，3H)，4.59(m，1H)，4.47(m，1H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.2min。
MS：MH+ 467
实施例316
1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-2-(甲基氨基)-1-乙酮乙酸盐
将1-(3-氮杂环丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.00014mol)、2-[(叔丁氧基羰基)(甲基)氨基]乙酸(0.0033g，0.000175mol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.0034g，0.000175mol)、N，N′-二异丙基乙胺(0.033g，0.00026mol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.019g，0.00014mol)在无水N，N-二甲基甲酰胺(6mL)中的混合物，室温下搅拌18小时。减压除去溶剂。残余物溶解于二氯甲烷(3mL)并用水(2mL)洗涤。减压除去溶剂。残余物通过RP-HPLC纯化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分钟内含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到N-(2-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-2-氧代乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁基酯。将此固体溶解于二氯甲烷(2mL)并在0℃下将2 5％三氟乙酸的二氯甲烷溶液(4mL)缓慢加入到该反应中。将该反应混合物室温下搅拌5小时。减压除去溶剂。在0℃下加入5N氢氧化钠水溶液至pH为11。水相用二氯甲烷(2×30mL)萃取。合并的有机萃取物用水(1×60mL)和盐水(1×60mL)洗涤并用硫酸钠干燥。减压除去溶剂得到1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-2-(二甲基氨基)-1-乙酮乙酸盐(0.022g，0.00004mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.27(s，1H)，7.69(d，2H)，7.42(m，2H)，7.15(m，5H)，5.75(m，1H)，4.70(m，1H)，4.60(m，1H)，4.40(m，1H)，4.35(m，1H)，3.18(s，2H)，2.25(s，3H)，1.90(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，I mL/min)Rt 8.9min。
MS：MH+ 430
实施例317
1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-2-(二甲基氨基)-1-乙酮乙酸盐
将1-(3-氮杂环丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.00014mol)、2-(二甲基氨基)乙酸(0.0018g，0.000175mol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.0034g，0.000175mol)、N，N′-二异丙基乙胺(0.033g，0.00026mol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.019g，0.00014mol)在无水N，N-二甲基甲酰胺(6mL)中的混合物，室温下搅拌18小时。减压除去溶剂。残余物溶解于二氯甲烷(3mL)并用水(2mL)洗涤。减压除去溶剂。残余物通过RP-HPLC纯化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分钟内含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-2-(二甲基氨基)-1-乙酮乙酸盐(0.022g，0.00004mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.27(s，1H)，7.69(d，2H)，7.42(m，2H)，7.15(m，5H)，5.69(m，1H)，4.70(m，2H)，4.40(m，2H)，2.97(m，2H)，2.20(s，6H)，1.89(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.6min。
MS：MH+ 444
实施例318
1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-3-(二乙基氨基)-1-丙酮
将1-(3-氮杂环丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.00014mol)、3-(二乙基氨基)丙酸盐酸盐(0.0032g，0.000175mol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.0034g，0.000175mol)、N，N′-二异丙基乙胺(0.068g，0.00053mol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.019g，0.00014mol)在无水N，N-二甲基甲酰胺(6mL)中的混合物，室温下搅拌18小时。减压除去溶剂。残余物溶解于二氯甲烷(3mL)并用水(2mL)洗涤。减压除去溶剂。残余物通过RP-HPLC纯化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分钟内含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-3-(二乙基氨基)-1-丙酮(0.025g，0.00005mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.26(s，1H)，7.69(d，2H)，7.44(m，2H)，7.14(m，5H)，5.70(m，1H)，4.67(m，2H)，4.37(m，2H)，2.66(m，2H)，2.45(m，4H)，2.21(m，2H)，0.95(m，6H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵在10分钟内，1mL/min)Rt 9.3min。
MS：MH+ 486
实施例319
1-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-2-(甲基氨基)-1-乙酮乙酸盐
将3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.054g，0.00014mol)、2-[(叔丁氧基羰基)(甲基)氨基]乙酸(0.0033g，0.000175mol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.0034g，0.000175mol)、N，N′-二异丙基乙胺(0.033g，0.00026mol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.019g，0.00014mol)在无水N，N-二甲基甲酰胺(6mL)中的混合物，室温下搅拌18小时。减压除去溶剂。残余物溶解于二氯甲烷(3mL)并用水(2mL)洗涤。减压除去溶剂。残余物通过RP-HPLC纯化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分钟内含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到N-(2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-2-氧代乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁基酯。将此固体溶解于二氯甲烷(2mL)并在0℃下将存在于二氯甲烷(4mL)的25％三氟乙酸缓慢加入到该反应。将该反应混合物室温下搅拌5小时。减压除去溶剂。在0℃下向此残余物中加入5N氢氧化钠水溶液至pH为11。水相用二氯甲烷(2×30mL)萃取。合并的有机萃取物用水(1×60mL)和盐水(1×60mL)洗涤并用硫酸钠干燥。减压除去溶剂得到1-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-2-(甲基氨基)-1-乙酮乙酸盐(0.010g，0.00002mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.25(s，1H)，7.67(d，2H)，7.45(m，2H)，7.13(m，5H)，4.94(br，1H)，4.53(br，1H)，3.99(br，1H)，3.36(m，2H)，3.21(br，1H)，2.85(br 1H)，2.26(s，3H)，2.10(br，1H)，1.96(br，3H)，1.85(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.1min。
MS：MH+ 458
实施例320 1-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-2-(二甲基氨基)-1-乙酮
将3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.054g，0.00014mol)、2-(二甲基氨基)乙酸(0.0018g，0.000175mol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.0034g，0.000175mol)、N，N′-二异丙基乙胺(0.033g，0.00026mol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.019g，0.00014mol)在无水N，N-二甲基甲酰胺(6mL)中的混合物，室温下搅拌18小时。减压除去溶剂。残余物溶解于二氯甲烷(3mL)并用水(2mL)洗涤。减压除去溶剂。残余物通过RP-HPLC纯化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分钟内含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到1-4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-2-(二甲基氨基)-1-乙酮(0.031g，0.00007mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.25(s，1H)，7.67(d，2H)，7.42(m，2H)，7.15(m，5H)，4.97(br，1H)，4.50(br，1H)，4.22(br，1H)，3.25(br，1H)，3.12(m，2H)，2.83(br，1H)，2.21(s，6H)，2.16(br，1H)，1.90(br，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.3min。
MS：MH+ 472
实施例321
1-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-3-(二乙基氨基)-1-丙酮乙酸盐
将3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.054g，0.00014mol)、3-(二乙基氨基)丙酸盐酸盐(0.0032g，0.000175mol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.0034g，0.000175mol)、N，N′二异丙基乙胺(0.068g，0.00053mol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.019g，0.00014mol)在无水N，N-二甲基甲酰胺(6mL)中的混合物，室温下搅拌18小时。减压除去溶剂。残余物溶解于二氯甲烷(3mL)并用水(2mL)洗涤。减压除去溶剂。残余物通过RP-HPLC纯化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分钟内含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到1-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-3-(二乙基氨基)-1-丙酮乙酸盐(0.038g，0.00006mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.25(s，1H)，7.67(d，2H)，7.42(m，2H)，7.15(m，5H)，4.97(br，1H)，4.52(br，1H)，4.03(br，1H)，3.27(br，1H)，2.80(br，1H)，2.66(m，2H)，2.49(m，8H)，2.11(br，1H)，1.95(br，3H)，1.87(s，3H)，0.93(m，6H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.7min。
MS：MH+ 514
总方法
向3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.00013mol，1当量)和碳酸钾(0.036g，0.00026mol，2当量)在无水N，N-二甲基甲酰胺(3mL)的混合物中，室温下加入氯乙酰基氯(0.028g，0.00026mol，2当量)。此混合物搅拌10分钟，之后加入胺(0.0013mol，10当量)。将此混合物搅拌室温下3小时。减压除去溶剂。残余物溶解于二氯甲烷(3mL)并用水(2mL)洗涤。减压除去溶剂。残余物通过RP-HPLC纯化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分钟内含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到相应的乙酰胺。
实施例322
a)胺：吗啉
1-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}2-(4-吗啉基)-1-乙酮乙酸盐
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.24(s，1H)，7.65(d，2H)，7.44(m，2H)，7.16(m，5H)，4.99(m，1H)，4.47(br，1H)，4.19(br，1H)，3.58(m，4H)，3.25(m，2H)，3.11(m，1H)，2.83(br，1H)，2.43(m，4H)，2.25(br，1H)，1.99(br，3H)，1.89(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.7min。
MS：MH+ 514
实施例323
b)胺：1-甲基哌嗪
1-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-1-乙酮乙酸盐
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.24(s，1H)，7.65(d，2H)，7.44(m，2H)，7.16(m，5H)，4.99(m，1H)，4.47(br，1H)，4.19(br，1H)，3.29(m，2H)，3.22(m，2H)，3.05(m，1H)，2.80(br，1H)，2.33(br，6H)，2.22(br，1H)，2.13(s，3H)，1.94(br，3H)，1.89(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.3min。
MS：MH+ 527
实施例324和实施例325
顺式和反式2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羟基环己基}乙酸
a)顺式和反式2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羟基环己基}乙酸叔丁基酯
将用酸洗涤的锌粉(0.350g，0.00535mol)和氯化亚铜(0.053g，0.000535mol)的无水四氢呋喃(10mL)悬浮液加热回流30分钟。中断加热并立即加入部分(1mL)的2-溴乙酸叔丁基酯(0.261g，0.00134mol)的四氢呋喃(10mL)溶液。将此混合物搅拌5分钟，然后滴加剩余的混合物。将此混合物加热回流30分钟。将此混合物冷却至室温，并在5分钟内滴加4-(4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-环己酮(0.200g，0.00053mol)的无水四氢呋喃(5mL)溶液。将此混合物搅拌室温下4小时。过滤除去未反应的锌，用乙醚(3×5mL)洗涤。此滤液用水(3×5mL)和盐水(10mL)洗涤。将此有机层用硫酸镁干燥，并真空下除去溶剂。粗品物质1∶1的顺式：反式比例。此异构体在硅胶上通过急骤色谱进行分离，用二氯甲烷/甲醇(98∶2)洗脱。真空下除去溶剂得到低极性的反式2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羟基环己基}乙酸叔丁基酯，为白色固体(0.092g，0.00018mol)和高极性的顺式2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羟基环己基}乙酸叔丁基酯，为白色固体(0.049g，0.000096mol)。
顺式2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羟基环己基}乙酸叔丁基酯
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.66(d，2H)，7.43(t，2H)，7.11-7.20(m，5H)，4.70-4.84(m，1H)，2.36(s，2H)，1.89-2.12(m，4H)，1.51-1.67(m，2H)，1.43(s，9H)，1.37-1.42(m，4H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，在20分钟内，1mL/min)Rt 19.31min.；
MS：MH+ 516。
反式2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羟基环己基}乙酸叔丁基酯
1H NMR(DMSO-d6 400MHz)δ8.23(s，1H)，7.66(d，2H)，7.43(t，2H)，7.11-7.20(m，5H)，4.45-4.61(m，1H)，2.36(s，2H)，1.78-1.85(m，2H)，1.64-1.71(m，2H)，1.43(s，9H)，1.36-1.45(m，4H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，I mL/min)Rt 19.64min.；
MS：MH+ 516。
顺式2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1羟基环己基}乙酸
顺式2-(4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羟基环己基}乙酸叔丁基酯(0.092g，0.000178mol)与20％三氟乙酸的二氯甲烷(10mL)溶液在室温、氮气氛下反应45分钟。真空下除去溶剂并将此残余物溶解于乙酸乙酯(25mL)并用水(3×10mL)洗涤。此溶液用硫酸镁干燥并真空下除去溶剂。残余物悬浮于水(25mL)并冻干得到顺式2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羟基环己基}乙酸，为白色粉末(0.078g，0.000170mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.32(s，1H)，7.66(d，2H)，7.44(t，2H)，7.11-7.22(m，5H)，4.62-4.67(m，1H)，2.39(s，2H)，2.27-2.43(m，2H)，1.55-1.90(m，6H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 13.65min。
MS：MH+ 460。
反式2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羟基环己基}乙酸
反式2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羟基环己基}乙酸叔丁基酯(0.049g，0.000096mol)与20％三氟乙酸二氯甲烷(10mL)溶液在室温在氮气氛下反应45分钟。真空下除去溶剂并将此残余物溶解于乙酸乙酯(25mL)，并用水(3×10mL)洗涤。此溶液用硫酸镁干燥，并真空下除去溶剂。残余物悬浮于水(25mL)并冻干，得到反式2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羟基环己基}乙酸，为白色粉末(0.038g，0.000083mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.36(s，1H)，7.67(d，2H)，7.44(t，2H)，7.11-7.22(m，5H)，4.72-4.79(m，1H)，1.99(s，2H)，1.91-2.09(m，6H)，1.61-1.65(m，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，在20分钟内，1mL/min)Rt 13.46min。
MS：MH+460。
实施例326
反式1-{3-[(苄基氧基)甲基]环丁基}-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.69(d，2H)，7.44(t，2H)，7.37-7.39(m，4H)，7.29-7.31(m，1H)，7.11-7.21(m，5H)，5.42-5.47(m，1H)，4.57(s，1H)，3.63(d，2H)，2.76-2.81(m，2H)，2.60-2.70(m，1H)，2.28-2.34(m，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，在20分钟内，1mL/min)Rt 21.92min。
MS：MH+ 478。
实施例327
[3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-(羟基甲基)环丁基]甲醇
a)3-[(甲基磺酰基)氧基]-1，1-环丁烷二甲酸二乙酯
将3-羟基-1，1-环丁烷二甲酸二乙酯(0.268g，0.00116mol)的吡啶(7mL)溶液冷却至0℃。滴加甲磺酰氯(0.11mL，0.160g，0.00140mol)，保持温度低于2℃。将此混合物搅拌4小时，然后倒入冰水(20mL)中并用乙醚(2×10mL)除去。合并的有机层用水(3×10mL)和盐水(10mL)洗涤。将此有机层用硫酸镁干燥并真空下除去溶剂得到3-[(甲基磺酰基)氧基]-1，1-环丁烷二甲酸二乙酯(0.302g，0.00102mol)，为黄色油状物：
1H NMR(CDCl3 400MHz)5.08-5.11(m，1H)，4.23(q，4H)，3.01(s，3H)，2.98-3.03(m，2H)，2.81-2.86(m，2H)，1.27(t，6H)。
b)3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1，1-环丁烷二甲酸二乙酯
3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.129g，0.00042mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液与3-[(甲基磺酰基)氧基]-1，1-环丁烷二甲酸二乙酯(0.150g，0.00051mmol)和碳酸铯(0.166g，0.00051mmol)在70℃下反应5天。将该反应混合物倒入水中(20mL)并用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。合并的有机层用水(2×10mL)和盐水(10mL)洗涤。将此有机层用硫酸镁干燥并真空下除去溶剂。残余物在硅胶上通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(98∶2)洗脱。真空下除去溶剂得到3-[4-氨基-3-(4-苯氧基-苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1，1-环丁烷二甲酸二乙酯(0.060g，0.00012mol)，为黄褐色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.24(s，1H)，7.67(d，2H)，7.44(t，2H)，7.12-7.21(m，5H)，5.38-5.42(m，1H)，4.16-4.28(m，4H)，3.14-3.17(m，2H)，2.96-3.00(m，2H)，1.17-1.28(m，6H)。
c)[3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-(羟基甲基)环丁基]甲醇
向3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1，1-环丁烷二甲酸二乙酯(0.045g，0.000089mol)的四氢呋喃(10mL)溶液中，加入氢化锂铝(0.010g，0.000270mol)。室温下将该反应混合物搅拌6小时，之后加入水(1.0mL)。将此混合物过滤通过Celite521垫过滤。真空下除去此滤液中的溶剂。残余物在水(15mL)和乙酸乙酯(15mL)之间分配。水层用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。合并的有机层用硫酸镁干燥并真空下除去溶剂。残余物通过制备RP-HPLC纯化(Rainin C18，8μm，300A，25cm；5分钟内40％恒溶剂成分，然后在30分钟内40％-100％乙腈-0.1M醋酸铵，21ml/min)。真空下除去乙腈并将此含水混合物冻干得到[3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-(羟基甲基)环丁基]甲醇，为白色固体(0.007g，0.000017mol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.22(s，1H)，7.68(d，2H)，7.44(t，2H)，7.11-7.20(m，5H)，5.28-5.34(m，1H)，4.76(t，1H)，4.58(t，1H)，3.55(d，2H)3.47(d，2H)，2.46-2.55(m，2H)，2.24-2.31(m，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 13.81min。
MS：MH+ 418。
实施例328-334
合成芳基烷基顺-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺类物质的总方法
用上述合成芳基烷基顺-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺类物质的方法进行合成这些化合物。
Figure A0081575903621
实施例335
N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-5-氯-2-噻吩磺酰胺马来酸盐
用上述顺和反-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺的方法合成此化合物，为马来酸盐HPLC-RT：12.39min，(流速：1mL/min，λ＝254nm梯度：在20分钟内5％至85％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度；Deltapak C18，300，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝606.1。
实施例336
1-(4-{4-氨基-3-[4-(1，3-苯并噁唑-2-基氨基)-3-氟苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基}哌啶子基)-2-(二甲基氨基)-1-乙酮
a).4-羟基-1-哌啶甲酸叔丁基酯
4-氧代-1-哌啶甲酸叔丁基酯(20g，100.4mmol)溶解于甲醇(250mL)，然后冷却至0℃，并在10分钟内加入硼氢化钠(3.8g，100.4mmol)。将该反应混合物由0℃升温至室温。4小时后，将该反应减压浓缩并将剩余的浆状物溶解于3∶1二氯甲烷/异丙醇(400mL)。有机层用1N氢氧化钠水溶液(200mL)洗涤。水层再用3∶1二氯甲烷/异丙醇(3×150mL)萃取。将此有机层用盐水(400mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到4-羟基-1-哌啶甲酸叔丁基酯，为淡黄色浆状物(20g，100.4mmol)。
1H NMR(d6-DMSO)：δ1.21-1.28(m，2H)，1.38(s，9H)，1.65-1.69(m，2H)，2.94-2.96(m，2H)，3.59-3.68(m，3H)，4.68(d，1H)。
b).4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯
将3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(17.3g，66.33mmol)悬浮于四氢呋喃(800mL)，并加入4-羟基-1-哌啶甲酸叔丁基酯(20g，99.5mmol)的四氢呋喃(300mL)溶液和三苯基膦(34.8g，132.66mmol)。将该反应混合物冷却至0℃并滴加偶氮二甲酸二乙酯(23.1g，132.66mmol)。室温下放置2小时后，该反应减压浓缩得到粗品4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯，为桔黄色油状物(69.44g)。HPLC-RT：14.29min.，19％，(流速：1mL/min λ＝254nm梯度：在20分钟内5％至85％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度；Deltapak C18，300，5μm，150×3.9mm柱)。
c).3-碘-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二盐酸盐
将粗品4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1哌啶甲酸叔丁基酯(69.4g，156.30mmol)溶解于丙酮(900mL)，并缓慢滴加6N盐酸(300mL)。然后在45℃下加热该反应，得到沉淀。1.5小时后，通过真空过滤收集沉淀，用最小量的丙酮洗涤并冻干，得到3-碘-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二盐酸盐，为黄色固体(16.61g，39.8mmol)。
HPLC-RT：6.16min，(流速：1mL/min λ＝254nm梯度：在20分钟内5％至85％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝345.0。
d).1-[4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)哌啶子基]-2-(二甲基氨基)-1-乙酮
将3-碘-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二盐酸盐(3g，7.19mmol)悬浮于二氯甲烷(350mL)，然后在4天内加入N，N-二甲基甘氨酸(1.02g，9.88mmol)、1-羟基-7-氮杂苯并三唑(1.08g，7.91mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(1.89g，9.89mmol)及N-乙基-N-异丙基胺(5.06g，39.2mmol)。该反应用二氯甲烷稀释(300mL)，再用水(150mL)和盐水(150mL)洗涤。将此有机层用无水硫酸钠干燥并减压浓缩得到1-[4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)哌啶子基]-2-(二甲基氨基)-1-乙酮，为黄褐色固体(2.74g，6.39mmol)。HPLC-RT：7.40min，(流速：1mL/minλ＝254nm梯度：在20分钟内5％至85％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度；Deltapak C18，300，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝430.3。
e).1-(4-{4-氨基-3-[4-(1，3-苯并噁唑-2-基氨基)-3-氟苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基}哌啶子基)-2-(二甲基氨基)-1-乙酮
将1-[4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)哌啶子基]-2-(二甲基氨基)-1-乙酮(100mg，0.233mmol)溶解于乙二醇二甲基醚(10mL)和水(1.5mL)。加入N-(1，3-苯并噁唑-2-基)-N-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]胺(103mg，0.291mmol)、四(三苯基膦)钯(13mg，0.051mmol)和碳酸钠(62mg，0.583mmol)并将该反应在80℃下加热24小时。减压浓缩该反应。剩余的残余物在二氯甲烷(100mL)和最小量的水之间分配。将有机层减压浓缩并用乙醚(25mL)研磨，得到黄色-棕色固体(172mg)。通过RP-HPLC纯化(Waters PrepLC 4000，流速：10mL/min.，λ＝254nm梯度：15％至35％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度，在40分钟内；Deltapak C18，300，15μm，40×100mm柱)得到1-(4-{4-氨基-3-[4-(1，3-苯并噁唑-2-基氨基)-3-氟苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基}哌啶子基)-2-(二甲基氨基)-1-乙酮，为米白色固体(64mg，0.121mmol)。HPLC-RT：7.27min，(流速：1mL/min λ＝254nm梯度：5％至95％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度，在20分钟内；Waters Symmetry Shield C18，3.5μm，50×2.1mm柱)；m/z(MH+)＝530.2。
实施例337
1-(4-{4-氨基-3-[4-(1，3-苯并噻唑-2-基氨基)-3-氟苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基}哌啶子基)-2-(二甲基氨基)-1-乙酮
HPLC-RT：10.09min，(流速：1mL/min λ＝254nm梯度：5％至85％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度，在20分钟内；Deltapak C18，300，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝546.2。
实施例338-364
a)烷基化的典型方法：将氢化钠(60％，0.138g，3.45mmol)加入到3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.750g，2.87mmol)的DMF(9mL)悬浮液中，并将此混合物室温下搅拌1小时，直到获得均匀的溶液。加入烷基溴(4.03mmol)，并将此混合物室温下在氮气氛下搅拌14小时。减压下除去溶剂并将所得固体依次用水(25mL)和乙醚/石油醚(4∶1，50mL)研磨得到产物。
b)Suzuki偶联的典型方法：将芳基碘(2.28mmol)、N-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(1.08g，3.19mmol)、四(三苯基膦)钯(0.105g，0.091mmol)、碳酸氢钠(0.478g，5.69mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(12mL)和水(2mL)中的悬浮液，在90℃下在氮气氛下加热14小时。减压下除去溶剂，并将此残余物在饱和氯化钠(50mL)和乙酸乙酯(30mL)之间分配。分离水层并再用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。合并的有机萃取物用硫酸镁干燥，过滤，并减压浓缩。通过急骤色谱在硅胶上纯化，用乙酸乙酯/庚烷(9∶1)作为流动相洗脱，得到该被保护的苯胺产物。
c)脱保护的典型方法：向装有氯化氢的二噁烷溶液(4M，6mL)和乙醇(6mL)的50mL烧瓶中，加入该被保护的苯胺(1.05mmol)。将空气冷凝器固定在该烧瓶上，并将此混合物在50℃氮气氛下搅拌。16小时后，该反应混合物冷却至室温，并减压除去溶剂。残余物在盐酸(0.5M，30mL)和乙醚(20mL)之间分配。分离有机层并倾析掉。将水层用饱和碳酸氢钠水溶液(30mL)碱化，并将所得混合物用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。合并的乙酸乙酯萃取物用硫酸镁干燥，过滤，并浓缩得到该苯胺产物。
d)磺酰基化的典型方法：将该苯胺(1.0mmol)加入到2，3-二氯苯磺酰基氯(0.263g，1.07mmol)和4-二甲基氨基吡啶(0.005g，0.041mmol)的吡啶(5mL)溶液中，并将所得溶液在氮气氛下搅拌3天。加入甲醇/二氯甲烷(1∶19，100mL)并将所得混合物用半饱和的碳酸氢钠水溶液(3×10mL)萃取。有机层用硫酸镁干燥，过滤，并浓缩得到该磺酰胺产物。
e)酯交换的典型方法：将此乙基酯(2.76mmol)加入到三乙胺(3.8mL，28mmol)和甲醇(30mL)的溶液中。将回流冷凝器安装到该反应器上，并将此反应混合物在75℃下在氮气氛下加热。24小时后，将反应冷却至室温，减压下除去溶剂得到该甲基酯产物。
f)酯交换的另一种方法：将乙基酯(0.279mmol)和甲醇钠(0.015g，0.279mmol)的甲醇(2mL)溶液在密封的试管中在75℃下加热2小时。将该反应冷却至室温。加入甲醇/二氯甲烷(1∶19，100mL)，并将所得混合物用半饱和碳酸氢钠水溶液(3×10mL)萃取。将此有机层用硫酸镁干燥，过滤，并浓缩得到此甲基酯产物。
g)酰胺形成的典型方法：在可再密封的Schlenk烧瓶中，将该酯(0.056mmol)悬浮于某种胺溶剂(1mL)中。用聚四氟乙烯螺旋盖密封此烧瓶，并在80℃下加热2天。将该反应冷却至室温得到酰胺产物。
h)伯酰胺形成的典型方法：在可密封的Schlenk烧瓶中装入该甲基酯(0.086mmol)。加入用氨(1mL)饱和的甲醇溶液，并密封此Schlenk烧瓶，并在90℃下加热24小时。将该反应冷却至室温，并减压除去溶剂得到此伯酰胺产物。
i)形成脲的典型方法：将苯胺(0.152mmol)溶解于吡啶(1mL)，并将此溶液冷却至-20℃。加入间甲苯基异氰酸酯(0.143mmol)，并让此溶液自然升温至室温。6小时后，减压浓缩产物得到此脲产物。
实施例338
2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸乙酯
按顺序进行烷基化(用溴乙酸乙酯作为此烷基溴)、Suzuki偶联、脱保护和磺酰基化的典型方法。通过制备HPLC纯化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μHypersilHS C18，250×21mm柱，Rt 12.4-13.9min)得到2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸乙酯，为白色固体(0.011g，0.020mmol)：RP-HP(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在10分钟内，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)R 9.78min。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.84(s，1H)，8.25(s，1H)，7.97(s，1H)，7.95(s，1H)，7.54(t，1H)，7.43(m，3H)，5.21(s，2H)，4.15(qt，2H)，1.20(t，3H)；MS：MH+ 539。
实施例339
N1-{4-[4-氨基-1-(2-(4-吗啉基)-2-氧代乙基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}-2，3-二氯-1-苯磺酰胺
用酰胺形成的典型方法用吗啉处理2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸乙酯。通过制备HPLC纯化(25至100％CH3CN，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μHypersil HS C18，250×21mm柱，Rt9.3-9.8min)得到N1-{4-[4-氨基-1-(2-(4-吗啉基)-2-氧代乙基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}-2，3-二氯-1-苯磺酰胺，为白色固体(0.005g，0.009mmol)：RP-HP(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在10分钟内，1mL/min，用HypersilHS C18，250×4.6mm柱)Rt 8.22min。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.82(s，1H)，8.21(s，1H)，7.96(d，1H)，7.94(m，1H)，7.53(t，1H)，7.39(m，3H)，6.97(br，2H)，5.32(s，2H)，3.5(m，8H)；MS：MH+ 580。
实施例340
N1-(4-{4-氨基-1-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-2，3-二氯-1-苯磺酰胺
用酰胺形成的典型方法，用1-甲基哌嗪处理2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸乙酯。通过制备HPLC纯化(25至100％ CH3CN，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μHypersil HS C18，250×21mm柱，Rt 6.4-7.0min)得到N1-(4-{4-氨基-1-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-2，3-二氯-1-苯磺酰胺，为白色固体(0.005g，0.009mmol)：RP-HP(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在10分钟内，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt 6.83min。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.20(s，1H)，7.96(d，1H)，7.88(d，1H)，7.50(t，1H)，7.36(m，3H)，5.31(s，2H)，3.45(m，4H)，2.50(m，4H)，2.30(s，3H)，MS：MH+ 593。
实施例341
N1-[(1R，2S)-2-羟基-1-甲基-2-苯基乙基]-N1-甲基-2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酰胺
将(+)-伪麻黄碱(0.037g，0.224mmol)的乙二醇二甲基醚(0.75mL)的溶液用正丁基锂的溶液(2.5M在己烷中，0.060mL，0.150mmol)处理。20分钟后，通过套管将此溶液转移至2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸乙酯(0.040g，0.074mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(0.75mL)溶液中。所得溶液在50℃下搅拌15小时。然后冷却至室温并在甲醇/二氯甲烷(1∶9，50mL)和水(15mL)之间分配。分离有机层，用硫酸镁干燥，过滤，并减压浓缩。通过制备HPLC纯化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μ Hypersil HSC18，250×21mm柱，Rt11.88-12.65min)得到N1-[(1R，2S)-2-羟基-1-甲基-2-苯基乙基]-N1-甲基-2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酰胺，为米白色固体(0.010g，0.015mmol)：RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在10分钟内，1mL/min，用HypersilHS C18，250×4.6mm柱)Rt 9.63min；MS：(MH)+ 658。
实施例342
N1-[(1S，2S)-2-羟基-1-甲基-2-苯基乙基]-N1-甲基-2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酰胺
用与上述类似的方法，将(+)-麻黄碱盐酸盐(0.061g，0.302mmol)和2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸乙酯(0.054g，0.10mmol)混合。通过制备HPLC纯化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μHypersil HS C18，250×21mm柱，Rt 11.4-11.9min)得到N1-[(1S，2S)-2-羟基-1-甲基-2-苯基乙基]-N1-甲基-2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酰胺，为米白色固体(0.010g，0.015mmol)：RP-HPLC(25至100％ CH3CN，在0.1M醋酸铵水溶液在10分钟内，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt 9.36min；MS：(M-H)-656。
实施例343
N1-[4-(4-氨基-1-{2-[(2S)-2-(羟基甲基)四氢-1H-1-吡咯基]-2-氧代乙基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯基]-2，3-二氯-1-苯磺酰胺
用与上述类似的方法，将(R)-吡咯烷甲醇(0.038mL，0.385mmol)和2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸乙酯(0.060g，0.111mmol)混合。通过制备HPLC纯化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt8.45-9.90min)得到N1-[4-(4-氨基-1-{2-[(2S)-2-(羟基甲基)四氢-1H-1-吡咯基]-2-氧代乙基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯基]-2，3-二氯-1-苯磺酰胺，为米白色固体(0.024g，0.040mmol)：RP-HPLC(25至100％ CH3CN，在0.1M醋酸铵水溶液中，在10分钟内，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt 8.05min；MS：(M-H)-592。
实施例344
N1-[4-(4-氨基-1-{2-[(2R)-2-(羟基甲基)四氢-1H-1-吡咯基]-2-氧代乙基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯基]-2，3-二氯-1-苯磺酰胺
用与上述类似的方法，将(S)-吡咯烷甲醇(0.038mL，0.385mmol)和2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸乙酯(0.060g，0.111mmol)混合。通过制备HPLC纯化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt8.15-9.70min)得到N1-[4-(4-氨基-1-{2-[(2R)-2-(羟基甲基)四氢-1H-1-吡咯基]-2-氧代乙基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯基}-2，3-二氯-1-苯磺酰胺，为米白色固体(0.022g，0.037mmol)：RP-HPLC(25至100％ CH3CN，在0.1M醋酸铵水溶液中，在10分钟内，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt 7.98min；MS：(M-H)-592。
实施例345
2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸甲酯
用酯交换的典型方法，2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸乙酯(1.49g，2.76mmol)转变为相应的甲基酯。一部分粗品物质通过制备HPLC纯化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt 11.0-12.3min)得到2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸甲酯，为白色固体(0.016g，0.030mmol)：RP-HP(25至100％ CH3CN，在0.1M醋酸铵水溶液中，在10分钟内，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt 9.22min；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ10.84(s，1H)，8.25(s，1H)，7.96(m，2H)，7.60(m，1H)，7.56(m，3H)，5.23(s，2H)，3.68(s，3H)；MS：MH+525。
实施例346
2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸
在可再密封的Schlenk烧瓶中，将2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸甲酯(0.030g，0.057mmol)溶解于甲醇/水(1∶1，1mL)。用聚四氟乙烯螺旋盖密封此烧瓶，并在90℃下加热。2天后，将此反应冷却至室温。通过制备HPLC纯化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt6.3-6.7min)得到2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸，为白色固体(0.006g，0.030mmol)：RP-HP(25至100％ CH3CN，在0.1M醋酸铵水溶液中，在10分钟内，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt 6.42min；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ8.13(s，1H)，7.97(d，1H)，7.62(d，1H)，7.36(t，1H)，7.19(m，3H)，7.15(d，1H)，4.59(s，2H)；MS：(M-H)-509。
实施例347
N1-[2-(二甲基氨基)乙基]-2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酰胺
酰胺形成的典型方法用于2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸甲酯(0.035g，0.067mmol)与N，N-二甲基亚乙基二胺(1mL)的反应。通过制备HPLC纯化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt6.85-7.45min)得到N1-[2-(二甲基氨基)乙基]-2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酰胺，为米白色固体(0.008g，0.014mmol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.20(br，1H)，8.22(m，2H)，7.96(d，1H)，7.80(d，1H)，7.45(t，1H)，7.31(m，3H)，6.90(br，2H)，4.96(s，2H)，3.40(m，2H)，2.75(m，2H)，2.07(s，6H)；MS：(M-H)-579。
实施例348
N1-[2-(二乙基氨基)乙基]-2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酰胺
酰胺形成的典型方法用于2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸甲酯(0.035g，0.067mmol)与N，N-二乙基亚乙基二胺(1mL)的反应。通过制备HPLC纯化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt7.12-7.98min)得到N1-[2-(二乙基氨基)乙基]-2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酰胺，为米白色固体(0.017g，0.028mmol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.22(s，1H)，8.12(br，1H)，7.96(d，1H)，7.78(d，1H)，7.44(t，1H)，7.31(m，3H)；6.95(br，2H)，4.96(s，2H)，3.35(m，2H)，2.82(m，2H)，2.50(m，4H)，1.05(t，6H)；MS：(M-H)-607。
实施例349
2-(二甲基氨基)乙基2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸酯
酰胺形成的典型方法用于2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸甲酯(0.035g，0.067mmol)与N，N-二甲基乙醇胺(1mL)的反应。通过制备HPLC纯化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt7.50-8.07min)得到2-(二甲基氨基)乙基2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸酯，为米白色固体(0.008g，0.014mmol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.24(s，1H)，7.96(d，1H)，7.83(d，1H)，7.48(t，1H)，7.32(m，3H)，5.23(s，2H)，4.29(t，2H)，2.86(m，2H)，2.39(s，6H)；MS：(M-H)-580。
实施例350
N1-[3-(二甲基氨基)丙基]-2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酰胺
酰胺形成的典型方法用于2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸甲酯(0.025g，0.048mmol)与3-(二甲基氨基)丙基胺(1mL)的反应。通过制备HPLC纯化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt6.7-7.3min)得到N1-[3(二甲基氨基)丙基]-2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酰胺，为米白色粉末(0.015g，0.025mmol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.20(m，1H)，7.96(m，1H)，7.76(m，1H)，7.43(t，1H)，7.30(m，2H)，4.93(s，2H)，3.12(m，2H)，2.82(m，2H)，2.50(s，6H)，1.73(m，2H)；MS(M-H)-593。
实施例351
2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酰胺
伯酰胺形成的典型方法用来将2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸甲酯(0.045g，0.086mmol)转变为相应的伯酰胺。通过制备HPLC纯化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt 6.9-8.5min)得到2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酰胺，为米白色粉末(0.015g，0.029mmol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.83(br，2H)，8.84(br，1H)，7.93(s，1H)，7.82(s，1H)，7.80(s，1H)，7.62(s，1H)，7.50(m，2H)，7.36(m，1H)；3.87(s，2H)；MS(M-H)-508。
实施例352
2-(4-氨基-3-{3-氟-4-[(3-甲苯氨基羰基)氨基]苯基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)乙酸乙酯
按顺序进行烷基化(用溴乙酸乙酯作为此烷基溴)、Suzuki偶联、脱保护和脲形成的典型方法。通过制备HPLC纯化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μ Hypersil HSC18，250×21mm柱，Rt12.1-13.5min)得到2-(4-氨基-3-{3氟-4-[(3-甲苯氨基羰基)氨基]苯基}-17吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)乙酸乙酯，为黄色粉末(0.015g，0.032mmol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.07(br，1H)，8.73(br，1H)，8.38(t，1H)，8.26(s，1H)，7.48(m，2H)，7.32(s，1H)，7.25(d，1H)，7.19(t，1H)，6.82(d，1H)，5.23(s，2H)，4.17(qt，2H)，2.30(s，3H)，1.21(t，3H)；MS：(M-H)-462。
实施例353
N-{4-[4-氨基-1-(2-(4-吗啉基)-2-氧代乙基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基)-N″-(3-甲基苯基)脲
用酯交换的典型方法，将2-(4-氨基-3-{3-氟-4-[(3-甲苯氨基羰基)氨基]苯基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)乙酸乙酯(0.025g，0.054mmol)转变为相应的甲基酯。将此产物溶解于吗啉(1mL)并将此溶液在50℃下在密封的试管中加热2天。将该反应冷却至室温，浓缩，并通过制备HPLC纯化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液，在20分钟内，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt9.3-10.2min)得到N-{4-[4-氨基-1-(2-(4-吗啉基)-2-氧代乙基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}-N″-(3-甲基苯基)脲，为黄色固体(0.009g，0.018mmol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.07(s，1H)，8.72(s，1H)，8.37(t，1H)，8.23(s，1H)，7.45(m，2H)，7.33(t，1H)，7.27(m，1H)，7.19(t，1H)，6.83(d，1H)，5.34(s，2H)，3.5(m，8H)，2.30(s，3H)；MS(M-H)-503。
实施例354
N-(4-{4-氨基-1-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-N″-(3-甲基苯基)脲
使用与上述类似的方法，不同的是用1-甲基哌嗪(1mL)代替吗啉作为溶剂，接着通过制备HPLC纯化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt 7.1-7.8min)得到N-(4-{4-氨基-1-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-N″-(3-甲基苯基)脲，为米白色固体(0.008g，0.015mmol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.07(s，1H)，8.72(s，1H)，8.37(t，1H)，8.22(s，1H)，7.45(m，2H)，7.32(s，1H)，7.25(m，1H)，7.19(t，1H)，6.90(br，2H)，6.83(d，1H)，5.33(s，2H)，3.39(m，4H)，2.40(m，4H)，2.30s，3H)；MS(M-H)-516。
实施例355
2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]丙酸乙酯
按顺序进行烷基化(用乙基2-溴丙酸酯作为此烷基溴)，Suzuki偶联，脱保护和磺酰基化的典型方法。通过制备HPLC纯化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μHypersil HS C18，250×21mm柱，Rt10.1-11.0min)得到2-[4氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]丙酸乙酯(0.016g，0.029mmol)，为灰色固体：1HNMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.84(br，1H)，8.24(s，1H)，7.97(s，1H)，7.95(s，1H)，7.54(t，1H)；7.41(m，3H)，7.0(br，1H)，5.61(qt，1H)，4.10(qt，2H)，1.73(d，3H)，1.11(t，3H)；MS(M-H)-551。
实施例356
2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]丙酸甲酯(4032811)
用酯交换的典型方法将2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]丙酸乙酯(0.400g，0.723mmol)转变为相应的甲基酯。通过制备HPLC纯化部分此物质(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt 12.4-12.9min)得到2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]丙酸甲酯(0.008g，0.015mmol)，为灰色固体：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.84(s，1H)，8.24(s，1H)，7.97(s，1H)，7.95(s，1H)，7.54(t，1H)，7.40(m，3H)，4.10(m，1H)，3.62(s，3H)，1.73(d，3H)；MS(MH)+539。
实施例357
2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]丙酰胺
用伯酰胺形成的典型方法将2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]丙酸甲酯(0.040g，0.074mmol)转变为相应的伯酰胺。通过制备HPLC纯化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt8.1-9.6min)得到2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]丙酰胺(0.015g，0.029mmol)，为白色粉末：1HNMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.82(s，1H)，8.22(s，1H)，7.98(s，1H)，7.96(s，1H)，7.56(t，1H)，7.42(m，3H)，7.31(br，1H)，7.21(br，1H)，5.34(qt，1H)，1.71(d，3H)；MS(MH)+524。
实施例358
2-(4-氨基-3-{3-氟-4-[(3-甲苯氨基羰基)氨基]苯基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)丙酸乙酯
按顺序进行烷基化(用2-溴丙酸乙基酯作为此烷基溴)，Suzuki偶联，脱保护和脲形成的典型方法。通过制备HPLC纯化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μHypersil HS C18，250×21mm柱，Rt13.3-14.3min)得到2-(4-氨基-3-{3-氟-4-[(3-甲苯氨基羰基)氨基]苯基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)丙酸乙酯，为白色固体(0.022g，0.046mmol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.06(s，1H)，8.73(s，1H)，8.37(t，1H)，8.25(s，1H)，7.46(m，2H)，7.32(s，1H)，7.25(m，1H)，7.19(t，1H)，6.83(d，1H)，5.63(qt，1H)，4.12(qt，2H)，2.30(s，3H)，1.76(d，3H)，1.15(t，3H)；MS(M-H)-476。
实施例359
2-(4-氨基-3-{3-氟-4-[(3-甲苯氨基羰基)氨基]苯基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)丙酰胺
按顺序进行烷基化(用2-溴丙酸乙基酯作为此烷基溴)、Suzuki偶联、脱保护的典型方法、酯交换的另一种方法和伯酰胺形成和脲形成的典型方法。通过制备HPLC纯化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt 9.1-10.1min)得到2-(4-氨基-3-{3-氟-4-[(3-甲苯氨基羰基)氨基]苯基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)丙酰胺，为灰色固体(0.010g，0.022mmol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.08(s，1H)，8.38(s，1H)，8.37(t，1H)，8.23(s，1H)，7.46(m，2H)，7.33(m，2H)，7.24(m，2H)，7.12(d，1H)，6.97(br，2H)，6.82(d，1H)，5.35(qt，1H)，2.30(s，3H)，1.75(d，3H)；MS(MH)+ 449。
实施例360
4-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]丁酸乙酯
按顺序进行烷基化(用4-溴丁酸乙酯作为此烷基溴)，Suzuki偶联，脱保护和磺酰基化的典型方法。通过制备HPLC纯化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μ HypersilHS C18，250×21mm柱，Rt 12.8-13.8min)得到4-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]丁酸乙酯(0.010g，0.018mmol)，为米白色固体：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.83(s，1H)，8.23(s，1H)，7.97(s，1H)，7.95(s，1H)，7.54(t，1H)，7.40(m，3H)，6.95(m，2H)，4.35(t，2H)，3.97(qt，2H)，2.30(t，2H)，2.08(m，2H)，1.12(t，3H)；MS(M-H)-565。
实施例361
4-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]丁酸甲酯
按顺序进行烷基化(用4-溴丁酸乙酯作为此烷基溴)、Suzuki偶联、脱保护的典型方法，酯交换的另一种方法和磺酰基化的典型方法。通过制备HPLC纯化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt11.7-12.2min)得到4-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]丁酸甲酯，为黄色固体(0.015g，0.027mmol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.84(br，1H)，8.23(s，1H)，7.95(m，2H)，7.52(m，1H)，7.40(m，3H)，4.35(t，2H)，3.52(s，3H)，2.32(t，2H)，2.09(m，2H)；MS(MH)+553。
实施例362
4-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]丁酰胺
用伯酰胺形成的典型方法将4-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]丁酸甲酯(0.026g，0.047mmol)转变为相应的伯酰胺。通过制备HPLC纯化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt 8.0-9.0min)得到4-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]丁酰胺，为白色固体(0.007g，0.013mmol)：1HNMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.82(s，1H)，8.24(s，1H)，7.97(s，1H)，7.95(s，1H)，7.54(t，1H)，7.45(m，3H)，7.24(br，1H)，6.93(br，2H)，6.73(br，1H)，4.31(t，2H)，2.05(m，4H)；MS(M-H)-536。
实施例363
4-(4-氨基-3-{3-氟-4-[(3-甲苯氨基羰基)氨基]苯基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)丁酸乙酯(4032812)
按顺序进行烷基化(用4-溴丁酸乙酯作为此烷基溴)，Suzuki偶联，脱保护和脲形成的典型方法。通过制备HPLC纯化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μ Hypersil HSC18，250×21mm柱，Rt 12.6-13.6min)得到4-(4-氨基-3-{3-氟-4-[(3-甲苯氨基羰基)氨基]苯基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)丁酸乙酯，为米白色粉末(0.015g，0.030mmol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.06(s，1H)，8.72(s，1H)，8.36(t，1H)，8.24(s，1H)，7.47(m，2H)，7.32(s，1H)，7.22(m，1H)，7.19(t，1H)，6.82(d，1H)，4.37(t，3H)，3.99(qt，3H)，2.34(t，2H)，2.30(s，3H)，2.11(m，2H)，1.13(t，3H)；RP-HPLC(25至100％ CH3CN，在0.1M醋酸铵水溶液中，在10分钟内，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt 10.00min。
实施例364
4-(4-氨基-3-{3-氟-4-[(3-甲苯氨基羰基)氨基]苯基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)丁酰胺
按顺序进行烷基化(用4-溴丁酸乙酯作为烷基溴)、Suzuki偶联、脱保护的典型方法，酯交换的另一种方法和伯酰胺形成和脲形成按的典型方法。通过制备HPLC纯化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt 8.4-9.1min)得到4-(4-氨基-3-{3-氟-4-[(3-甲苯氨基羰基)氨基]苯基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)丁酰胺，为白色固体(0.010g，0.022mmol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.08(s，1H)，8.73(s，1H)，8.38(t，1H)，8.25(s，1H)，7.47(m，2H)，7.32(s，1H)，7.25(m，2H)，7.19(m，1H)，6.83(d，1H)，6.75(s，1H)，4.34(t，2H)，2.30(s，3H)，2.05(m，4H)；MS(MH)+463。
实施例365
2-{4-氨基-3-[4-(1，3-苯并噁唑-2-基氨基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基}-5-(4-甲基哌嗪-1-基)苄腈
将3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.172g，0.66mmol)、氢化钠(60％，0.030g，0.75mmol)、2，5-二氟苄腈(0.105g，0.75mmol)和N，N-二甲基甲酰胺(2.5mL)的悬浮液在100℃下加热24小时。将该反应混合物冷却至室温并减压浓缩。残余物在二氯甲烷(50mL)和水(10mL)之间分配。分离有机层，用硫酸镁干燥，过滤，并减压浓缩。
将一部分此物质(0.045g，0.118mmol)和碳酸铯(0.115g，0.353mmol)悬浮于1-甲基哌嗪(1mL)，并将此化合物在110℃下在密封试管中加热20小时。将该反应混合物冷却至室温并减压浓缩。残余物用盐酸(1M，10mL)酸化，并将水相用乙醚(10mL)萃取。倾析有机相，并将此水相用碳酸钠水溶液(3M，10mL)碱化。水相用二氯甲烷(3×15mL)萃取，合并的有机馏份用硫酸镁干燥，过滤，并减压浓缩。
此物质进行Suzuki偶联，用典型方法，不同的是用N-(1，3-苯并噁唑-2-基)-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]胺代替N-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯。通过制备HPLC纯化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μHypersil HS C18，250×21mm柱，Rt 7.0-8.6min)得到2-{4-氨基-3-[4-(1，3-苯并噁唑-2-基氨基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基}-5-(4-甲基哌嗪-1-基)苄腈，为灰色固体(0.009g，0.017mmol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.93(s，1H)，8.29(s，1H)，7.98(d，2H)，7.78(d，2H)，7.73(d，1H)，7.52(m，3H)，7.44(m，1H)，7.26(t，1H)，7.17(t，1H)，3.24(m，4H)，2.45(m，4H)，2.28(s，3H)；MS(MH)+ 543。
实施例366
2-{4-氨基-3-[4-(1，3-苯并噻唑-2-基氨基)-3-氟苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基}丙酸乙酯
按顺序进行烷基化的典型方法(用2-溴丙酸乙酯作为此烷基溴)和Suzuki偶联的典型方法(不同的是用N-(1，3-苯并噻唑-2-基)-N-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]胺代替N-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯)。通过制备HPLC纯化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μ Hypersil HSC18，250×21mm柱，Rt14.4-14.9min)得到2-{4-氨基-3-[4-(1，3-苯并噻唑-2-基氨基)-3-氟苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基}丙酸乙酯，为米白色固体(0.022g，0.046mmol)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.52(s，1H)，8.82(t，1H)，8.26(s，1H)，7.85(d，1H)，7.66(d，1H)，7.55(m，2H)，7.36(t，1H)，7.22(t，1H)，5.65(qt，1H)，4.14(qt，2H)，1.77(d，3H)，1.14(t，3H)；MS(MH)+ 478。
实施例367
顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-1，3-苯并噁唑-2-胺
N2-(4-溴-2-氟苯基)-1，3-苯并噁唑-2-胺
向4-溴-2-氟苯胺(1.00g，5.26mmol)的甲苯(25mL)溶液中加入2-氯苯并噁唑(0.66mL，5.79mmol)。将此紫色溶液加热回流30分钟，然后在100℃下加热17小时。将所得白色混悬液/紫色溶液冷却至室温并过滤此沉淀。此滤饼用5个2mL每部分的庚烷洗涤得到N2-(4-溴-2-氟苯基)-1，3-苯并噁唑-2-胺(1.480g，92％)，为淡紫色粉末。RP-HPLC(在10分钟内，在0.1N醋酸铵水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝12.87分钟，97％；m/z 307(MH+)。
N2-(4-溴-2-氟苯基)-1，3-苯并噻唑-2-胺
向4-溴-2-氟苯胺(1.00g，5.26mmol)的甲苯(25mL)溶液中加入2-氯苯并噻唑(0.75mL，5.79mmol)。将此紫色溶液在110-150℃在可再密封的试管中加热66小时，然后冷却至室温。将所得棕色溶液浓缩得到紫色固体，其用庚烷研磨得到N2-(4-溴-2-氟苯基)-1，3-苯并噻唑-2-胺(1.699g，99％)，为淡紫色粉末。RP-HPLC(在10分钟内，在0.1N醋酸铵水溶液中25至100％ CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝13.82分钟，95％；m/z325(MH+)。
N2-(4-溴苯基)-1，3-苯并噻唑-2-胺
以类似N2-(4-溴-2-氟苯基)-1，3-苯并噁唑-2-胺使用的方式从4-溴苯胺(1.00g，5.81mmol)制备N2-(4-溴苯基)-1，3-苯并噻唑-2-胺。得到淡紫色粉末(0.867g，49％)。RP-HPLC(10分钟，25-100％乙腈的0.1N醋酸铵溶液，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝13.82min，100％；m/z 307(MH+)。
N2-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-1，3-苯并噁唑-2-胺
向N2-(4-溴-2-氟苯基)-1，3-苯并噁唑-2-胺(1.480g，4.819mmol)的二甲基甲酰胺(15mL)溶液中在氮气氛下加入双(频哪醇合)乙硼烷(1.468g，5.781mmol)、醋酸钾(1.419g，14.45mmol)和[1，1′-双(二苯基膦)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷(1∶1)的复合物(0.119g，0.146mmol)。将此紫色溶液在80℃下搅拌18小时，然后冷却至室温。将所得深棕色混合物真空浓缩得到暗棕色固体。此物质用二氯甲烷研磨，过滤，并浓缩此滤液得到暗棕色油状物。通过急骤色谱在硅胶上纯化(用30％乙酸乙酯/庚烷洗脱)得到2.28g的黄色固体。此物质用庚烷研磨并收集此固体得到N2-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-1，3-苯并噁唑-2-胺(0.961g，56％)，为白色粉末。RP-HPLC(在10分钟内，在0.1N醋酸铵水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝13.80分钟，88％；m/z 355(MH+)。
N2-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-1，3-苯并噻唑-2-胺
以类似于用于N2-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-1，3-苯并噁唑-2-胺的方式，由N2-(4-溴-2-氟苯基)-1，3-苯并噻唑-2-胺(1.699g，5.258mmol)制备N2-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-1，3-苯并噻唑-2-胺。形成此化合物，为米白色粉末(0.825g，42％)。RP-HPLC(在10分钟内，在0.1N醋酸铵水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝14.48分钟，90％；m/z371(MH+)。
N2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-1，3-苯并噻唑-2-胺
以类似于用于N2-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-1，3-苯并噁唑-2-胺的方式，由N2-(4-溴苯基)-1，3-苯并噻唑-2-胺(0.909g，2.98mmol)制备N2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-1，3-苯并噻唑-2-胺。形成此化合物，为米白色粉末(0.321g，31％)。RP-HPLC(在10分钟内在0.1N醋酸铵水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用HypersilHSC18，250×4.6mm柱)tr＝13.82min.，92％；m/z 351(MH+)。
实施例367
顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-1，3-苯并噁唑-2-胺
向顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.150g，0.340mmol)在乙二醇二甲基醚(3mL)和水(1.5mL)的溶液中，在氮气氛下加入N2-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-1，3-苯并噁唑-2-胺(0.151g，0.425mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(0.020mg，0.017mmol)及碳酸钠一水合物(0.105mg，0.850mmol)。此溶液在83℃下搅拌19小时。将所得黄色混合物真空浓缩得到黄色油状物。通过制备RP-HPLC纯化(在20分钟内在0.1N醋酸铵水溶液中25至100％CH3CN，21mL/min，用8m Hypersil HS C18，250×21mm柱，tr＝5.7-8.1min.)得到顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-1，3-苯并噁唑-2-胺，为米白色固体(0.046g，25％)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.65(s，1H)，8.49(m，1H)，8.25(s，1H)，7.53(d，2H)，7.48(d，2H)，7.26(t，1H)，7.20(t，1H)，4.80(m，1H)，3.51-2.50(m，11H)，2.33-2.32(m，4H)，2.09-2.06(m，2H)，1.80-1.40(m，3H)；RP-HPLC(在10分钟内在0.1N醋酸铵水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝6.95min.，99％；m/z 542(MH+)。
实施例368
顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-1，3-苯并噻唑-2-胺
以类似于用于顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-1，3-苯并噁唑-2-胺的方式，由顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.100g，0.227mmol)和N2-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷2-基)苯基)-1，3-苯并噻唑-2-胺(0.105g，0.283mmol)，制备顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-1，3-苯并噻唑-2-胺。形成此化合物，为米白色粉末(0.051g，41％)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.51(s，1H)，8.80(m，1H)，8.24(s，1H)，7.85(d，1H)，7.65(d，1H)，7.51(m，2H)，7.36(t，1H)，7.20(t，1H)，4.82(m，1H)，3.51-2.25(m，14H)，2.15-2.10(m，2H)，1.80-1.50(m，4H)；RP-HPLC(在10分钟内在0.1N醋酸铵水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝7.63min.，100％；m/z 558(MH+)。
实施例369
顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-1，3-苯并噻唑-2-胺
以类似于用于顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-1，3-苯并噁唑-2-胺的方式，由顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.100g，0.227mmol)和N2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-1，3-苯并噻唑-2-胺(0.100g，0.283mmol)，制备顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-1，3-苯并噻唑-2-胺。形成此化合物，为米白色粉末(0.035g，28％)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.71(s，1H)，8.23(s，1H)，7.98(d，2H)，7.84(d，1H)，7.65(d，3H)，7.35(t，1H)，7.19(t，1H)，4.80(m，1H)，3.50(m，1H)，2.67-2.09(m，15H)，1.71-1.57(m，4H)；RP-HPLC(在10分钟内在0.1N醋酸铵水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝7.47min.，100％；m/z 540(MH+)。
实施例370
反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-1，3-苯并噁唑-2-胺
以类似于用于顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-1，3-苯并噁唑-2-胺的方式，由反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.036g，0.082mmol)和N2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-1，3-苯并噁唑-2-胺(0.034g，0.10mmol)，制备反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-1，3-苯并噁唑-2-胺。形成此化合物，为米白色粉末(0.021g，50％)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.86(s，1H)，8.23(s，1H)，7.93(d，2H)，7.66(d，2H)，7.51(t，1H)，7.25(t，1H)，7.16(t，1H)，4.65(m，1H)，3.51(m，1H)，2.67-1.91(m，17H)，1.49-1.46(m，2H)；RP-HPLC(在10分钟内在0.1N醋酸铵水溶液中25至100％ CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝7.17min.，100％；m/z524(MH+)。
实施例371
反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-1，3-苯并噁唑-2-胺
以类似于用于此顺-异构体的方式，由反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4胺(0.100g，0.227mmol)和N2-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-1，3-苯并噁唑-2-胺(0.151g，0.425mmol)，制备反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-1，3-苯并噁唑-2-胺。形成此化合物，为白色粉末(0.053g，43％)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.63(s，1H)，8.45(m，1H)，8.24(s，1H)，7.55-7.48(m，4H)，7.25(t，1H)，7.17(t，1H)，4.65(m，1H)，3.36(m，1H)，3.31-1.93(m，16H)，1.46-1.23(m，3H)；RP-HPLC(在10分钟内在0.1N醋酸铵水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝6.73min.，99％；m/z 542(MH+)。
实施例372
反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-1，3-苯并噻唑-2-胺
以类似于用于此顺-异构体的方式，由反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4胺(0.100g，0.227mmol)和N2-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-1，3-苯并噻唑-2-胺(0.105g，0.283mmol)，制备反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-1，3-苯并噻唑-2-胺。形成此化合物，为白色粉末(0.052g，41％)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.51(s，1H)，8.79(m，1H)，8.24(s，1H)，7.85(d，1H)，7.66(d，1H)，7.51(m，2H)，7.36(t，1H)，7.20(t，1H)，4.66(m，1H)，3.69(m，1H)，2.89-1.94(m，17H)，1.50-1.4 (m，2H)；RP-HPLC(在10分钟内在0.1N醋酸铵水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用HypersilHS C18，250×4.6mm柱)tr＝6.30min.，99％；m/z 558(MH+)。
实施例373
顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-甲基-1，3-苯并噁唑-2-胺
在0℃下，将1，1′-硫羰基二-2(1H)-吡啶酮(0.086g，0.369mmol)加入到顺-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.150g，0.369mmol)的吡啶(7mL)溶液中，并将此混合物在0℃下搅拌1小时。所得桔黄色溶液在二氯甲烷(10mL)和水(10mL)之间分配。分离有机层并用0.5N HCl(10mL)洗涤，用无水硫酸镁干燥，过滤，并浓缩。将2-氨基-间甲酚(0.045g，0.369mmol)加入到所得桔黄色固体和甲苯(10mL)的悬浮液中，并将此混合物在80℃下加热1小时。加入1，3-二环己基碳二亚胺(0.114g，0.554mmol)并将该反应混合物在80℃下再加热18小时。将所得桔黄色棕色溶液冷却至室温并浓缩得到淡棕色玻璃状固体。通过制备HPLC纯化(在20分钟内在0.1N醋酸铵水溶液中25至100％CH3CN，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，tr＝8.1-10.3min.)得到顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-甲基-1，3-苯并噁唑-2-胺，为米白色固体(0.024g，12％)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.81(s，1H)，8.24(s，1H)，7.96(d，2H)，7.66(d，2H)，7.33(d，1H)，7.06(m，2H)，4.80(m，1H)，3.391(m，1H)，2.67-2.10(m，18H)，1.71-1.60(m，4H)；RP-HPLC(在10分钟内在0.1N醋酸铵水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝7.57min.，99％；m/z 538(MH+)。
实施例374
顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5-氯-1，3-苯并噁唑-2-胺
以类似于用于顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-甲基-1，3-苯并噁唑-2-胺的方式，由顺-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.100g，0.246mmol)和2-氨基-4-氯苯酚(0.035g，0.246mmol)，制备顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5-氯-1，3-苯并噁唑-2-胺。形成此化合物，为淡黄色固体(0.020g，15％)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ11.03(s，1H)，8.24(s，1H)，7.92(d，2H)，7.67(d，2H)，7.56(m，2H)，7.20(m，1H)，7.16(t，1H)，4.81(m，1H)，3.41-1.60(m，20H)；RP-HPLC(在10分钟内在0.1N醋酸铵水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝7.83min.，99％；m/z 558(MH+)
实施例375
顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5-甲基-1，3-苯并噁唑-2-胺
以类似于用于顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-甲基-1，3-苯并噁唑-2-胺的方式，由顺-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.057g，0.140mmol)和2-氨基-对甲酚(0.017g，0.140mmol)，制备顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5-甲基-1，3-苯并噁唑-2-胺。形成此化合物，为米白色固体(0.010g，13％)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.81(s，1H)，8.23(s，1H)，7.93(d，2H)，7.66(d，2H)，7.38(d，1H)，7.30(s，1H)，6.96(d，1H)，4.80(m，1H)，2.60-2.07(m，12H)，2.39(s，3H)，2.15(s，3H)，1.71-1.59(m，5H)；RP-HPLC(在10分钟内在0.1N醋酸铵水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝7.48min.，90％；m/z 538(MH+)。
实施例376
顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5，7-二甲基-1，3-苯并噁唑-2-胺
以类似于用于顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-甲基-1，3-苯并噁唑-2-胺的方式，由顺-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.100g，0.246mmol)和6-氨基-2，4-二甲苯酚(0.034g，0.246mmol)，制备顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5，7-二甲基-1，3-苯并噁唑-2-胺。形成此化合物，为米白色固体(0.031g，23％)：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.85(s，1H)，8.23(s，1H)，7.93(d，2H)，7.65(d，2H)，7.11(s，1H)，6.80(s，1H)，4.80(m，1H)，2.60-2.17(m，12H)，2.41(s，3H)，2.37(s，3H)，2.22(s，3H)，1.71-1.59(m，5H)；RP-HPLC(在10分钟内在0.1N醋酸铵水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝8.00min.，93％；m/z 552(MH+)。
实施例377
N2-[4-(4-氨基-1-{4-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶基]}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯基]-5-氯-2-噻吩磺酰胺
用上述方法，由N1-4-(4-氨基-1-{4-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶基]}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯基苯胺(100mg，0.236mmol)制备此化合物，得到N2-[4-(4-氨基-1-{4-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶基]}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯基]-5-氯-2-噻吩磺酰胺(51mg)；RP-HPLC条件：10至90％CH3CN在0.1N醋酸铵水溶液中，缓冲至pH 4.5，在20分钟内，2mL/min，用WatersSymmetry C18，300，5μm，250×4.6mm柱Rt 11.219min.，98.5％和m/z(MH+)605.2。
实施例378-383
合成顺-3-{4-[氨基(苯基)甲基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺的脲和磺酰胺类物质的总方法
这些类似物由顺-3-{4-[氨基(苯基)甲基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(50mg，0.10mmol)用上述方法制备，得到下列实施例：
Figure A0081575903921
分析RP-HPLC条件：10至90％CH3CN在0.1N醋酸铵水溶液中，缓冲至pH 4.5，在20分钟内，2mL/min，用Waters Symmetry C18，5μm，300，250×4.6mm柱。
实施例384
反-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苄基)-N′-(3-甲基苯基)脲
将含反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(850mg，1.93mmol)、N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苄基]氨基甲酸叔丁基酯(1.25当量，812mg，2.41mmol)、四-(三苯基膦)钯(135mg)和碳酸钠(2.5当量，511mg，4.83mmol)的在脱气水(10mL)和DME(30mL)中的混合物，加热并在85℃下搅拌16小时。减压除去溶剂得到棕色泡沫，其在硅胶上通过柱色谱纯化，用10％甲醇和存在于二氯甲烷中的1％氢氧化铵作为洗脱剂。形成反-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苄基)氨基甲酸叔丁基酯，为米白色泡沫(800mg，80％)。
将N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苄基)氨基甲酸叔丁基酯(800mg)的TFA(4mL)和二氯甲烷(4mL)溶液，室温下搅拌2小时。真空下除去溶剂并将此油状残余物用饱和碳酸氢钠水溶液碱化并将水层用二氯甲烷(3×20mL)洗涤。浓缩水层并加入DMF(20mL)。过滤移出盐并真空下除去DMF。残余物在硅胶上通过柱色谱纯化，用存在于二氯甲烷中的10％甲醇作为洗脱剂得到3-[4-(氨基甲基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺，为黄色固体(70mg，11％)。
将间甲苯基异氰酸酯(1.1当量，13.7mg，0.1mmol)加入到3-[4-(氨基甲基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(35mg，0.083mmol)的吡啶(0.5mL)溶液中，然后搅拌2天。将该反应混合物纯化，用质量驱动的制备RP-HPLC(Micromass/Gilson，Hypersil BDS C18，5μm，100×21.2mm柱；0-100％乙腈和0.05M醋酸铵，缓冲至pH 4.5，在12.5分钟内，25mL/min)得到反-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苄基)-N′-(3-甲基苯基)脲(17mg，37％)；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ1.46(2H，m)，2.05(4H，m)，2.18(2H，m)，2.25(3H，s)，2.33(4H，m)，2.45-2.53(8H，m)，4.38(2H，br d)，4.65(1H，m)，6.52(1H，t)，6.66(1H，d)，7.10(1H，t)，7.19(1H，br d)，7.26(1H，br s)，7.46(2H，d)，7.63(2H，d)，8.23(1H，s)和8.51(1H，s)和m/z(MH+)554.2。
实施例385
反-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苄基)-N′-(3-甲氧基苯基)脲
用实施例240所述的相同的方法和用量来制备反-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苄基)-N′-(3-甲氧基苯基)脲(17mg，36％)；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ1.46(2H，m)，2.05(4H，m)，2.18(2H，m)，2.35(4H，m)，2.45-2.53(8H，m)，3.70(3H，s)，4.38(2H，br d)，4.65(1H，m)，6.49(1H，m)，6.67(1H，m)，6.90(1H，br d)，7.12(1H，t)，7.17(1H，m)，7.46(2H，d)，7.63(2H，d)，8.23(1H，s)和8.62(1H，s)，m/z(MH+)570.2。
实施例386
顺-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2，2-二甲基-3-苯基丙酰胺
2，2-二甲基-3-苯基丙腈
将N-异丙基环己基胺(2.8g，19.72mmol)的无水四氢呋喃(25mL)溶液，在-78℃下，通过在15分钟内滴加1.6M正丁基锂己烷溶液(12.23mL，19.72mmol)进行处理。将该反应溶液在-78℃下搅拌10分钟。此溶液由无色转变为黄色。将异丁腈(1.36g，19.72mmol)加入到该反应溶液中，并将该反应混合物在-78℃下再搅拌10分钟。在-78℃下在氮气氛下将此溶液注入到苄基氯(2.62g，20.71mmol)的无水四氢呋喃溶液中。将此红色/棕色反应溶液在-78℃下搅拌1小时。然后移出此干冰/丙酮浴，并将此溶液室温下搅拌5小时。该反应溶液用饱和氯化铵水溶液(10mL)骤冷。将乙酸乙酯(25mL)加入到此骤冷后的反应溶液中。分层，并将水层用乙酸乙酯(150mL)萃取。合并的有机层用水和盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并减压蒸发得到3.18g的粗品。粗品物质在2N盐酸溶液和乙酸乙酯之间分配。将此有机层用水和盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发得到2.18g(69％)2，2-二甲基-3-苯基丙腈。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.369-7.333(m，2H)，7.309-7.270(m，3H)，2.832(s，2H)，1.294(s，6H)。将此化合物不经进一步分析用于接下来的反应中。
2，2-二甲基-3-苯基丙酸
将2，2-二甲基-3-苯基丙腈(1.0g，6.28mmol)的乙二醇(5mL)溶液用固体氢氧化钾(1.06g，18.84mmol)处理。将该反应混合物在196℃在氮气氛下搅拌48小时。真空下蒸馏除去乙二醇。将1N氢氧化钠溶液(25mL)和乙酸乙酯(15mL)加入到此棕色残余物中。分层，并将水层用乙酸乙酯(375mL)萃取。合并的有机层用水和盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤，并减压蒸发得到0.856g(76％)的2，2-二甲基-3-苯基丙酸。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ12.20(s，1H)，7.28-7.24(m，2H)，7.22-7.20(m，1H)，7.15-7.13(m，2H)，2.78(s，2H)，1.07(s，6H)。将此化合物不经进一步分析用于接下来的反应中。
2，2-二甲基-3-苯基丙酰氯
将2，2-二甲基-3-苯基丙酸(0.856g，4.8mmol)的氯仿(6mL)溶液在0℃下用草酰氯(3.05g，24mmol)和1滴二甲基甲酰胺处理。将此反应溶液在0℃下搅拌1小时。移出冰浴，并将此反应混合物在室温下搅拌过夜。减压下除去溶剂，并在高真空下干燥，得到定量的2，2-二甲基-3-苯基丙酰氯。此油状物直接用于下面的反应。
顺-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2，2-二甲基-3-苯基丙酰胺
将顺-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.100g，0.23mmol)的吡啶(2.5mL)溶液用2，2-二甲基-3-苯基丙酰氯(0.120g，0.61mmol)处理。将该反应混合物在室温、氮气氛下搅拌2小时。加入饱和碳酸氢钠溶液(10mL)，并将该反应混合物搅拌20分钟。减压除去溶剂。将二氯甲烷和饱和碳酸氢钠溶液加入到此残余物。分层，用Empore萃取柱。减压下除去有机溶剂。粗品化合物在硅胶上通过急骤色谱纯化，用存在于二氯甲烷中的10％甲醇作为洗脱剂洗脱，得到0.085g(62％)的顺-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2，2-二甲基-3-苯基丙酰胺。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.595-8.574(m，1H)，8.372(s，1H)，7.985(s，1H)，7.292-7.158(m，7H)，4.923(m，1H)，3.891(s，3H)，3.050-3.013(m，1H)，2.965(s，2H)，2.65-2.55(m，5H)，2.440-2.346(m，4H)，2.244-2.166(m，4H)，1.854-1.823(m，3H)，1.688(m，3H)，1.334(s，6H)；HPLC Waters 2690 Alliance HPLC(SymmetryShield RP18 3.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵，在15分钟内，0.5mL/min)Rt 5.517min(100％)。
实施例387
反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2，2-二甲基-3-苯基丙酰胺三马来酸盐
将反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.250g，0.573mmol)的吡啶(3mL)溶液，在0℃下用2，2-二甲基-3-苯基丙酰氯(0.304g，1.55mmol)处理。将该反应混合物在0℃下搅拌10分钟。除去冰浴并将该反应混合物室温下搅拌5小时。减压除去溶剂至干。将二氯甲烷(15mL)和饱和碳酸氢钠溶液(5mL)加入到此固体。分层，用Empore萃取柱。减压下除去有机溶剂。粗品固体通过急骤色谱纯化，用存在于二氯甲烷中的10％甲醇，然后用存在于二氯甲烷中的15％(含5％氢氧化铵的甲醇)作为洗脱剂。用乙酸乙酯和庚烷将上一纯化步骤得到粗品固体重结晶。过滤此沉淀得到0.201g(59％)的反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2，2-二甲基-3-苯基丙酰胺。将反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2，2-二甲基-3-苯基丙酰胺(0.201，0.337mmol)的乙酸乙酯热溶液用马来酸(0.117g，1.011mmol)的乙酸乙酯热溶液处理。在氮气氛下过滤此沉淀，并高真空下干燥，得到0.265g的反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2，2-二甲基-3-苯基丙酰胺三马来酸盐。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.46(s，1H)，8.241(s，1H)，8.107-8.086(d，1H，J＝8.4Hz)，7.248-7.183(m，7H)，6.170(s，6H)，4.697(m，1H)，3.883(s，3H)，2.931(s，3H)，2.9-2.75(br.s.，4H)，2.671(s，3H)，2.104-1.990(m，7H)，1.588-1.5632(m，2H)，1.226(s，7H)；HPLCWaters 2690 Alliance HPLC(Symmetry Shield RP18 3.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵，在15分钟内，0.5mL/min)Rt5.413min(95％)。
实施例388
反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(1S，2S)-2-苯基环丙烷-1-甲酰胺三马来酸盐
将反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.162g，0.371mmol)的吡啶(2mL)溶液，在0℃下在氮气氛下用反-2-苯基-1-环丙基羰基氯(0.134g，0.742mmol)处理。将该反应混合物在0℃下搅拌20分钟，除去冰浴并将此反应混合物室温下搅拌5小时。再加入反-2-苯基-1-环丙基羰基氯(0.034g，0.186mmol)，并将此反应混合物搅拌1小时。减压下除去有机层，再加入二氯甲烷(15mL)。分层，用Empore萃取柱。减压下除去有机层。粗品在硅胶上通过急骤色谱纯化，用存在于二氯甲烷中的15％甲醇，然后用存在于二氯甲烷中的20％甲醇作为洗脱剂。过柱后得到0.150g(70％)的反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(1S，2S)-2-苯基环丙烷-1-甲酰胺。将反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(1S，2S)-2-苯基环丙烷-1-甲酰胺(0.147，0.253mmol)的乙酸乙酯热溶液，用马来酸(0.088g，0.759mmol)的乙酸乙酯热溶液处理。在氮气氛下过滤所形成的沉淀，并高真空下干燥，得到0.204g的反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(1S，2S)-2-苯基环丙烷-1-甲酰胺三马来酸盐。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.64(s，1H)，8.23-8.21(m，2H)，7.33-7.29(m，2H)，7.24-7.17(m，4H)，6.16(s，6H)，4.69-4.66(m，1H)，3.90(s，3H)，2.90-2.60(m，7H)，2.37-2.35(m，2H)，2.10-1.99(m，8H)，1.70-1.50(m，3H)，1.32(m，1H)；HPLCWaters 2690 Alliance HPLC(Symmetry Shield RP18 3.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵，在15分钟内，0.5mL/min)Rt5.346min(97％)。
实施例389
顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)苯并[b]噻吩-2-甲酰胺
实施例390
顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2-噻吩甲酰胺
实施例391
顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2-呋喃甲酰胺
得自顺-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-7H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺的酰胺
将存在于二氯甲烷(100μL)中的商购的酰氯(0.23mmol)加入到存在于吡啶(800μL)的顺-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-7H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.050g，0.115mmol)中。将该反应混合物搅拌过夜。该反应混合物用1N氢氧化钠溶液骤冷。在Supelco-支管上真空和氮气流下除去溶剂。剩余的固体进行制备HPLC(Hypersil C18，100×21mm柱，5μm，15-100％乙腈梯度，在8分钟内，总过柱时间-10min，缓冲液50mM醋酸铵，25ml/min)。将二氯甲烷和1N氢氧化钠溶液加入到此固体中。分层，用Empore萃取柱，得到相应的产物。HPLC Perkin Elmer Pecosphere C18，3μM，33×4.6，3.5ml/min 100-100％50mM醋酸铵至乙腈，在4.5分钟内，C36H44N6O3(581.2)，95％。LCMS(Perkin Elmer，Pecosphere C18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸铵水溶液至100％乙腈，在5分钟内，3.0至3.5ml/min)。
实施例392
反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-甲基-3-苯基丁酰胺三马来酸盐
3-甲基-3-苯基丁酰基氯
将存在于二氯甲烷(10mL)的3-甲基-3-苯基丁酸(0.508g，2.85mmol)在-78℃下用草酰氯(3.62，28.5mmol)和1滴二甲基甲酰胺处理。将该反应混合物在-78℃下搅拌10分钟，并除去干冰/丙酮浴，室温下搅拌过夜。减压除去溶剂，并高真空下干燥。产物不经分析直接用于下一步反应。
反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-甲基-3-苯基丁酰胺三马来酸盐
将反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-7H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.200g，0.458mmol)的吡啶(4mL)溶液，在-5℃下通过滴加存在于二氯甲烷(1mL)3-甲基-3-苯基丁酰基氯(0.101g，0.514mmol)进行处理。将该反应混合物在-5℃下搅拌20分钟，然后除去干冰/丙酮浴并将该反应混合物室温下搅拌4小时。加入1N氢氧化钠溶液(5mL)并将此混合物搅拌过夜。减压除去溶剂。粗品固体在高真空下干燥。加入二氯甲烷(10mL)和1N氢氧化钠溶液(10mL)。分层，用Empore萃取柱。从顶部吹入氮气除去有机溶剂，得到0.240g(88％)的反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-甲基-3-苯基丁酰胺。将反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-甲基-3-苯基丁酰胺(0.240g，0.402mmol)在乙酸乙酯和几滴乙醇中的热溶液，用马来酸(0.140g，1.206mmol)的乙酸乙酯热溶液处理。在氮气氛下过滤所形成的沉淀，并冻干得到0.323g反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-甲基-3-苯基丁酰胺三马来酸盐。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.807(s，1H)，8.226(s，1H)，8.109-8.088(d，1H，J＝8.4Hz)，7.489-7.470(d，2H，J＝7.6Hz)，7.345-7.306(m，2H)，7.213-7.134(m，3H)，6.151(s，5H)，4.680(m，1H)，3.836(s，3H)，3.3(br.s.，7H)，2.655(s，3H)，2.541(s，4H)，2.085-1.989(m，6H)，1.574-1.551(m，2H)，1.431(s，6H)；HPLC Waters 2690 AllianceHPLC(Symmetry Shield RP18 3.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵，在15分钟内，0.5mL/min)Rt 5.407min(99％)。
实施例393-397
得自顺-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-7H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺的酰胺
典型方法：
向存在于二氯甲烷(1.4mL)的适当甲酸(0.46mmol)中，加入草酰氯(0.4mL，4.6mmol)和DMF(1滴)。将小瓶用隔膜盖上并在各盖上插入小号针头以释放压力。这些小瓶在J-Kem震摇器上摇动过夜。分离50％的溶液，然后将过量的草酰氯和二氯甲烷在12孔Supelco支管上真空下随氮气流除去。将此粗品酰氯(0.23mmol)加入到存在于干燥吡啶(0.6mL)的顺-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(50mg，0.11mmol)中并室温下搅拌过夜。所得溶液直接通过制备HPLC进行纯化(HypersilBSD C18，5μm，100×21mm，在10分钟内0％-100％乙腈/0.05M醋酸铵，25.0mL/min)。所得产物通过在二氯甲烷(4ml)和1.0N氢氧化钠(2ml)之间分配来进一步纯化并通过EmporeTM高效萃取圆盘柱(C18-SD十八烷基)得到相应的产物。这些化合物详见下页，其中给出了相应的LCMS(Micromass-柱：Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：在4.5分钟内0％B/A至100％B/A，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，pH 4.5)，3.5mL/min.)数据。
Figure A0081575904021
实施例398
顺-N4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3，5-二甲基-4-异噁唑甲酰胺
a)顺-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯
将顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(10g，22.66mmol)、N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(9.49g，27.17mmol)、四(三苯基膦)钯(1.57g，1.36mmol)和碳酸钠(5.76g，54.38mmol)与乙二醇二甲醚(180mL)和水(90mL)混合。将该反应混合物加热回流过夜。减压除去有机溶剂并将水层用二氯甲烷萃取。合并的有机层用水洗涤，然后用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。残余物通过制备薄层柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(80∶20)作为流动相，得到顺-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(10.859g，89％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.49(s，9H)，1.58(m，2H)，1.71(m，2H)，2.08(m，2H)，2.17(s，3H)，2.45(m，4H)，2.38(m，4H)，2.45(m，3H)，3.87(s，3H)，4.80(m，1H)，7.22(m，2H)，7.91(d，J＝8.14，1H)，8.04(s，1H)，8.22(s，1H)。
b)顺-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
在0℃下将三氟乙酸/二氯甲烷的混合物(20∶80，200mL)加入到存在于二氯甲烷(100mL)的N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(10.85g，20.24mmol)中。2小时后，除去冰浴并蒸发溶剂并将此残余物溶解于二氯甲烷。加入氢氧化钠(1.0N)以调节pH为约10。过滤收集除去有机溶剂时形成的固体得到顺-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(8.84g，100％)。1H NMR(CDCl3)δ1.65(m，2H)，1.83(m，2H)，2.18(m，2H)，2.31(s，3H)，2.35-2.60(m，11H)，3.90(s，3H)，4.00(bs，2H)，4.89(m，1H)，5.61(bs，2H)，6.83(d，J＝7.78Hz，1H)，7.12(m，2H)，8.35(s，1H)。
c)顺-N4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3，5-二甲基-4-异噁唑甲酰胺
将3，5-二甲基-4-异噁唑羰基氯(22mg，0.137mmol)加入到顺-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(30mg，0.067mmol)的吡啶(0.5mL)溶液中。5小时后，蒸发溶剂并将此残余物用DMSO重结晶得到顺-N4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3，5-二甲基-4-异噁唑甲酰胺(33mg，87％)。1HNMR(DMSO-d6)δ1.91(m，2H)，2.24(m，2H)，2.36(m，2H)，2.41(s，3H)，2.63(s，3H)，2.77(m，3H)，3.17(s，3H)，3.37(bm，8H)，3.95(s，3H)，4.95(m，1H)，7.37(m，2H)，8.17(d，J＝8.17，1H)，8.30(s，1H)，9.26(s，1H)。LC/MS(Micromass-柱：Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：在4.5分钟内0％B/A至100％B/A，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，pH4.5)，3.5mL/min.)，MH+＝560.2，Rt＝2.44min。
实施例399
顺-N3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-5-甲基-3-异噁唑甲酰胺
将5-甲基-3-异噁唑羰基氯(20mg，0.137mmol)加入到顺-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(30mg，0.067mmol)的吡啶(0.5mL)溶液。5小时后，蒸发溶剂并将此残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil BSD C18，5μm，100×21mm，在10分钟内0％-100％乙腈/0.05M醋酸铵，25.0mL/min)。所得产物进一步通过在二氯甲烷(4ml)和1.0N氢氧化钠(2ml)之间分配进行纯化，并通过EmporeTM高效萃取圆盘柱(C18-SD十八烷基)得到顺-N3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-5-甲基-3-异噁唑甲酰胺(14mg，38％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.81(m，2H)，2.14(m，2H)，2.35(m，2H)，2.53(s，3H)，2.76(m，3H)，3.37(bm，8H)，3.99(s，3H)，4.93(m，1H)，6.74(s，1H)，7.36(m，2H)，8.26(m，1H)，9.48(s，1H)；LCMS(Finigan-柱：Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm洗脱剂：0％B/A至100％B/A，在4分钟内，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，pH4.5)，3.0mL/min.)：MH+＝546.4，Rt＝1.82min。
实施例400
顺-N1-[(2R)-2-苯基丙基]-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲酰胺，二马来酸盐
将顺-N1-[(2R)-2-苯基丙基]-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲酰胺(100mg，0.172mmol)溶解于热乙酸乙酯(12mL)，并加入存在于热乙酸乙酯(3mL)中的马来酸(60mg，0.515mmol)。将该反应混合物室温下搅拌5小时。过滤收集固体得到顺-N1-[(2R)-2-苯基丙基]-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲酰胺，二马来酸盐(117mg，87％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.25(d，J＝6.96，3H)，1.73(m，42H)，2.09(m，2H)，2.26(m，2H)，2.71(s，3H)，2.74(m，2H)，2.85-3.70(bm，7H)，3.89(s，3H)，4.85(m，1H)，6.14(s，4H)，7.20(m，3H)，7.31(d，J＝4.33，4H)，8.12(d，J＝8.17Hz，1H)，8.24(s，1H)，9.20(s，1H)。LC/MS(Finigan-柱：Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：0％B/A至100％B/A，在4分钟内，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，pH4.5)，3.0mL/min.)：MH+＝583.4 Rt＝2.14min。
实施例401
反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)苯并[b]呋喃-2-甲酰胺，三马来酸盐
a)反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)苯并[b]呋喃-2-甲酰胺
向存在于二氯甲烷(14mL)的苯并[b]呋喃-2-甲酸(0.743g，4.58mmol)中加入草酰氯(4mL，45.8mmol)和DMF(1滴)。将该反应混合物搅拌过夜。蒸发溶剂并将此残余物溶解于二氯甲烷(5mL)。在0℃下将此二氯甲烷溶液的一半(2.5mL)加入到存在于吡啶(6mL)的反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.50g，1.145mmol)。30分钟后，过滤收集此固体。然后将水加入到此固体并用氢氧化钠(1.0N)将此溶液的pH调节至10。水相用二氯甲烷萃取。合并的有机层用水洗涤，然后用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。残余物通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(80∶20)作为流动相，得到反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)苯并[b]呋喃-2-甲酰胺(0.497g，75％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.49(m，2H)，2.01(m，6H)，2.15(s，3H)，2.40(m，3H)，2.51(m，4H)，4.00(s，3H)，4.66(m，1H)，7.31(m，1H)，7.39(m，2H)，7.54(m，1H)，7.81(m，3H)，8.24(m，1H)，9.50(s，1H)。
b)反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)苯并[b]呋喃-2-甲酰胺，三马来酸盐
将反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)苯并[b]呋喃-2-甲酰胺(497mg，0.855mmol)溶解于热乙酸乙酯(56mL)，并加入存在于热乙酸乙酯(5mL)的马来酸(298mg，2.566mmol)。将该反应混合物室温下搅拌5小时。过滤收集固体得到反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)苯并[b]呋喃-2-甲酰胺，三马来酸盐(117mg，92％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.60(m，2H)，2.09(m，6H)，2.68(s，3H)，2.82-3.17(bm，9H)，4.00(s，3H)，4.69(m，1H)，6.16(s，6H)，7.30-7.42(m，3H)，7.54(m，1H)，7.76-7.85(m，3H)，8.25(m，2H)，9.51(s，1H)；LCMS(Finigan-柱：Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：0％B/A至100％B/A，在4分钟内，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，pH4.5)，3.0mL/min.)：MH+＝581.4，Rt＝2.12min。
实施例402
反-N1-[(2R)-2-苯基丙基]-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲酰胺，三马来酸盐
a)反-N1-[(2R)-2-苯基丙基]-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲酰胺
向存在于二氯甲烷(7mL)的(3R)-3-苯基丁酸(376mg，2.29mmol)中，加入草酰氯(2mL，22.9mmol)和DMF(1滴)。将该反应混合物搅拌过夜。蒸发溶剂并将此残余物溶解于二氯甲烷(3mL)。在0℃下将此二氯甲烷溶液加入到反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(448mg，1.026mmol)的吡啶(6mL)溶液中。2小时后，该反应混合物倒入到乙酸乙酯(60ml)中并过滤收集此固体。然后将水加入到此固体中，并用氢氧化钠(1.0N)调节此溶液的pH至10。用二氯甲烷萃取水层。用水和盐酸洗涤合并的有机层，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。将此残余物通过急骤色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(80∶20)作为流动相，得到反-N1-[(2R)-2-苯基丙基]-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲酰胺(383mg，64％)。1HNMR(CDCl3)：δ1.40(d，J＝6.96，3H)，1.57(m，2H)，2.08-2.21(m，6H)，2.30(s，3H)，2.50(m，5H)，2.63-2.74(m，6H)，3.40(m，1H)，3.88(s，3H)，4.74(m，1H)，5.69(br，2H)，7.16-7.34(m，7H)，7.66(s，1H)，8.34(s，1H)，8.49(d，J＝8.21，1H)。
b)反-N1-[(2R)-2-苯基丙基]-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲酰胺，三马来酸盐
将反-N1-[(2R)-2-苯基丙基]-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲酰胺(383mg，0.657mmol)溶解于热乙酸乙酯(42mL)，并加入马来酸(229mg，1.971mmol)的热乙酸乙酯(5mL)溶液。将此反应混合物室温下搅拌5小时。过滤收集固体得到反-N1-[(2 R)-2-苯基丙基]-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲酰胺，三马来酸盐(571mg，93％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.25(d，J＝6.95，3H)，1.57(m，2H)，2.03(m，6H)，2.60-3.40(bm，18H)，3.89(s，3H)，4.67(m，1H)，6.16(s，6H)，7.20(m，3H)，7.31(d，J＝4.37Hz，4H)，8.14(d，J＝8.22Hz，1H)，8.23(s，1H)，9.18(s，1H)；LC/MS(Micromass-柱：Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：0％B/A至100％B/A，在4.5分钟内，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，pH4.5)，3.5mL/min.)：MH+＝583.2，Rt＝2.89min。
实施例403
N-{4-[4-氨基-1-(1-(1-甲基哌啶-4-基)-哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}氨基甲酸叔丁基酯
a)4-羟基-1-哌啶甲酸叔丁基酯
在0℃下将硼氢化钠(3.8g，100.4mmol)分批加入到4-氧代-1-哌啶甲酸叔丁基酯(20g，100.4mmol)的甲醇(600mL)溶液中。15分钟后，除去冰水浴并将该反应混合物室温下搅拌3小时。加入氢氧化钠(1.0N，100mL)并蒸发有机溶剂。水层用乙醚萃取4次。合并的有机层用水洗涤，然后用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发得到4-羟基-1-哌啶甲酸叔丁基酯(20.48g，100％)。1H NMR(CDCl3)δ1.48(s，9H)，1.63(m，2H)，1.87(m，2H)，3.03(m，2H)，3.83(m，3H)。
b)4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯
将3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(10g，38.3mmol)、4-羟基-1-哌啶甲酸叔丁基酯(16.96g，84.2mmol)和三苯基膦(20.09g，76.0mmol)悬浮于四氢呋喃(425mL)中。将该反应混合物在冰水浴中冷却并滴加偶氮二甲酸二乙酯(12.09mL，76.0mmol)。10分钟后，将该反应混合物升温至室温。5小时后，减压除去溶剂，加热下加入二氯甲烷(65mL)。将此固体过滤并用二氯甲烷(20ml)洗涤。此固体进一步用乙酸乙酯(5×20mL)洗涤得到1，2-肼二甲酸二乙酯和4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯的混合物(1∶1，14.98g，63％)，其不经进一步纯化直接使用。1H NMR(CDCl3)δ1.48(s，9H)，1.95(m，2H)，2.20(m，2H)，2.92(m，2H)，4.23(m，2H)，4.84(m，1H)，8.31(s，1H)。
c)3-碘-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
在0℃下将三氟乙酸/二氯甲烷的混合物(20∶80，250mL)加入到4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯(10.72g，24.1mmol)的二氯甲烷(100mL)溶液中。15分钟后，除去冰浴并将该反应混合物室温下搅拌5小时。蒸发溶剂并将此残余物溶解于二氯甲烷。加入盐酸(5.0N)，并将此水层用二氯甲烷洗涤3次。加入氢氧化钠(50％)调节pH为约10。将此悬浮液冻干至原体积的三分之一。过滤收集此固体得到3-碘-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(8.109g，97％)。1H NMR(CDCl3)δ1.81(m，2H)，1.99(m，2H)，2.65(m，2H)，3.07(m，2H)，4.68(m，1H)，8.19(s，1H)。
d)3-碘-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)]-哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将3-碘-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.00g，5.81mmol)、1-甲基-4-哌啶酮(2.14mL，17.42mmol)、三乙酰氧基硼氢化钠(2.45g，11.62mmol)和冰醋酸(1.05g，17.42mmol)与1，2-二氯乙烷(75mL)混合。将该反应混合物室温下搅拌6小时并加入饱和碳酸氢钠溶液以调节pH为约9。过滤收集固体得到3-碘-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)]-哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.39g，93％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.52(m，2H)，1.75(m，2H)，1.87(m，2H)，2.05(m，4H)，2.24(s，3H)，2.28(m，3H)，2.91(m，2H)，3.00(m，2H)，4.55(m，1H)，8.18(s，1H)。
e)N-{4-[4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)-哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}氨基甲酸叔丁基酯
将3-碘-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)]-哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.39g，5.41mmol)、N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(2.08g，5.96mmol)、四(三苯基膦)钯(0.375g，0.32mmol)和碳酸钠(1.38g，13.00mmol)与乙二醇二甲醚(80mL)和水(40mL)混合。该反应混合物加热回流过夜。减压除去有机溶剂并将水层用二氯甲烷萃取。合并的有机层用水洗涤，然后用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。残余物通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵(95∶5∶0.5)作为流动相，得到N-{4-[4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)-哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}氨基甲酸叔丁基酯(1.67g，57％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.48(m，11H)，1.71(m，2H)1.86(m，4H)，2.14(s，3H)，2.18(m，3H)，2.32(m，2H)，2.80(m，2H)，3.89(s，3H)，4.64(m，1H)，7.22(m，2H)，7.91(d，J＝8.12，1H)，8.03(s，1H)，8.21(s，1H)。
实施例404
3-{4-[(2-呋喃基甲基)氨基]-3-甲氧基苯基}-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
a)3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)-哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
在0℃下将三氟乙酸/二氯甲烷的混合物(20∶80，28mL)加入到N-{4-[4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)-哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}氨基甲酸叔丁基酯(0.914g，1.70mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液中。15分钟后，除去冰浴并将该反应混合物室温下搅拌5小时。然后蒸发溶剂并将此残余物溶解于二氯甲烷。加入饱和碳酸氢钠以调节pH为约8。分层并将水层用二氯甲烷萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发得到3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)-哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.726g，97％)。1H NMR(CDCl3)δ1.67(m，2H)1.83(m，4H)，2.00(m，2H)，2.27(s，3H)，2.39(m，5H)，2.91(m，2H)，3.08(m，2H)，3.92(s，3H)，3.99(m，2h)，4.73(m，1H)，5.56(bs，2H)，6.82(d，J＝7.87，1H)，7.08(d，J＝7.84，1H)，7.13(s，1H)，8.34(s，1H)。
b)3-{4-[(2-呋喃基甲基)氨基]-3-甲氧基苯基}-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)-哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(100mg，0.229mmol)、2-呋喃甲醛(0.027mL，0.321mmol)、三乙酰氧基硼氢化钠(193mg，0.916mmol)和冰醋酸(55mg，0.916mmol)与1，2-二氯乙烷(5mL)混合。将该反应混合物室温下搅拌过夜。饱和碳酸氢钠溶液以调节pH为约8。分层并将水层用二氯甲烷萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。残余物通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵(95∶5∶0.2)作为流动相，得到3-{4-[(2-呋喃基甲基)氨基]-3-甲氧基苯基}-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(57mg，48％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.45(m，2H)，1.71(m，2H)，1.87(m，4H)，2.14(s，3H)，2.28(m，5H)，2.80(m，2H)，3.01(m，2H)，3.86(s，1H)，4.37(d，J＝3.13，1H)，6.76(d，J＝8.62，1H)，7.07(m，2H)，7.57(s，1H)，8.19(s，1H)。LCMS(Finigan-柱：Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：0％B/A至100％B/A，在4分钟内，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，pH 4.5)，3.0mL/min.)：MH+517.3，Rt＝2.28min。
实施例405
N1-{4-[4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-反-2-苯基环丙烷-1-甲酰胺，二马来酸盐
a)N1-{4-[4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-反-2-苯基环丙烷-1-甲酰胺
将反-2-苯基-1-环丙烷羰基氯(42mg，0.231mmol)加入到3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)-哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(100mg，0.229mmol)的吡啶(1.0mL)溶液中。5小时后，蒸发溶剂并将此残余物通过急骤柱色谱纯化得到N1-{4-[4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-反-2-苯基环丙烷-1-甲酰胺(80mg，60％)。1H NMR(CDCl3)δ1.42(m，1H)，1.77(m，2H)，1.85(m，2H)，2.06(m，3H)，2.36-2.45(m，8H)，2.62(m，1H)，3.00(m，2H)，3.10(m，2H)，3.96(s，3H)，4.75(m，1H)，5.54(bs，2H)，7.14-7.33(m，7H)，8.10(s，1H)，8.36(s，1H)，8.54(d，J＝8.50，1H)。LCMS(Finigan-柱：Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：0％B/A至100％B/A，在4分钟内，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，pH4.5)，3.0mL/min.)：MH+＝581.4，Rt＝1.77min。
b)N1-{4-[4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-反-2-苯基环丙烷-1-甲酰胺，二马来酸盐
将N1-{4-[4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-反-2-苯基环丙烷-1-甲酰胺(75mg，0.129mmol)溶解于乙醇(2mL)并加入存在于乙醇(1mL)的马来酸(45mg，0.387mmol)。将该反应混合物室温下搅拌5小时。除去溶剂并加入乙酸乙酯，过滤收集固体得到N1-{4-[4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-反-2-苯基环丙烷-1-甲酰胺，二马来酸盐(75mg)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.17(m，1H)，1.32(m，2H)，1.48(m，2H)，1.48，(m，2H)，2.19(m，4H)，2.37(M，1H)，2.46(m，1H)，2.59(m，1H)，2.78(s，3H)，2.98-3.52(bm，9H)，3.90(s，3H)，5.02(m，1H)，6.08(s，4H)，7.17-7.33(m，7H)，8.25(m，2H)，9.65(s，1H)。LCMS(Finigan-柱：Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：0％B/A至100％B/A，在4分钟内，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，pH4.5)，3.0mL/min.)：MH+＝581.4，R＝1.77min。
实施例406和407
得自顺-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-7H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺的酰胺
典型方法：
向存在于二氯甲烷(1.5ml)的适当甲酸(0.46mmol)中，加入草酰氯(400μl，0.2mmol)和DMF(1滴)。将小瓶用隔膜盖上并在各盖上插入小号针头以释放压力。这些小瓶在J-Kem震摇器上摇动过夜。分离50％的溶液，然后将过量的草酰氯和二氯甲烷在12孔Supelco支管上真空下随氮气流除去。将粗品酰氯(0.23mmol)加入到存在于干燥吡啶(800μl)的顺-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(40mg，0.09mmol)中并室温下搅拌。所得溶液直接通过制备HPLC进行纯化(Hypersil BSD C18，5μm，100×21mm，在10分钟内0％-100％乙腈/0.05M醋酸铵，25.0mL/min)。所得产物通过在二氯甲烷(4ml)和1.0N氢氧化钠(2ml)之间分配来进一步纯化并通过EmporeTM高效萃取圆盘柱(C18-SD十八烷基)得到相应的产物。这些化合物详见下页，其中给出了相应的LCMS(Micromass-柱：Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：在4.5分钟内0％B/A至100％B/A，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，PH4.5)，3.5mL/min.)数据。
Figure A0081575904131
实施例408
N2-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]苯基}-5，7-二甲基-1，3-苯并噁唑-2-胺二盐酸盐
a)4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯
将二碳酸二叔丁基酯(0.287g，1.32mmol)加入到3-碘-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二盐酸盐(0.50g，1.20mmol)和碳酸钠(0.445g，4.20mmol)在二噁烷(10mL)和水(10mL)中的混合物中，并将该反应搅拌18小时。加入二氯甲烷(100mL)，并将有机层用水(30mL)和盐水(30mL)洗涤，干燥(硫酸钠)并真空浓缩得到4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯，为淡黄色固体(0.524g，98％)；RP-HPLC 12.227分钟，100％纯度(5％至85％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液，缓冲至pH4.5，在20分钟内，1mL/min；λ＝254nm；Deltapak C18，300，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝445.1。
b)4-(4-氨基-3-{4-[(5，7-二甲基-1，3-苯并噁唑-2-基)氨基]苯基}1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯
4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯(524mg，1.18mmol)溶解于乙二醇二甲基醚(50mL)和水(10mL)。加入N-(1，3-苯并噁唑-2-基)-N-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]胺(537mg，1.47mmol)、四(三苯基膦)钯(68mg，0.059mmol)和碳酸钠(313mg，2.95mmol)并将该反应在80℃下加热19小时。再加入羟基硼酸酯(188mg，0.515mmol)和四(三苯基膦)钯(27mg，0.024mmol)并将该反应在80℃下再加热23小时。减压浓缩该反应。剩余的残余物在二氯甲烷(100mL)和水(100mL)之间分配。将此有机层干燥(硫酸钠)再减压浓缩得到桔黄色油状物(1.4g)。在硅胶上通过色谱纯化，用2∶1至9∶1乙酸乙酯∶庚烷梯度，接着用存在于二氯甲烷中的2％至5％甲醇梯度洗脱，得到4-(4-氨基-3-{4-[(5，7-二甲基-1，3-苯并噁唑-2-基)氨基]苯基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯，为黄褐色固体(577mg，85％)；RP-HPLC 17.090分钟，98％纯度(5％至85％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液，缓冲至pH4.5，在20分钟内，1mL/min；λ＝254nm；DeltapakC18，300，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝555.2。
c).N2-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]苯基}-5，7-二甲基-1，3-苯并噁唑-2-胺二盐酸盐
将4-(4-氨基-3-{4-[(5，7-二甲基-1，3-苯并噁唑-2-基)氨基]苯基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯(142mg，0.256mmol)溶解于丙酮(7mL)和6N盐酸(1.4mL)中。然后将该反应在45℃下加热，得到沉淀。2.5小时后，通过真空过滤收集沉淀，用最小量的丙酮洗涤并冻干得到N2-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]苯基}-5，7-二甲基-1，3-苯并噁唑-2-胺二盐酸盐，为桔黄色固体(130mg，96％)；-HPLC 10.436分钟，96％纯度(5％至85％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液，缓冲至pH4.5，在20分钟内，1mL/min；λ＝254nm；Deltapak C18，300，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝455.3。
实施例409-416
合成N2-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]苯基}-5，7-二甲基-1，3-苯并噁唑-2-胺的哌啶酰胺类似物的总方法
Figure A0081575904161
在各20mL的闪烁小瓶中，加入N2-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]苯基}-5，7-二甲基-1，3-苯并噁唑-2-胺二盐酸盐(45mg，0.085mmol)、N-未保护的或N-保护的氨基酸(1.25当量)、1-羟基-7-氮杂苯并三唑(12mg，0.085mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(20mg，1.06mmol)、N-乙基-N，N-二异丙基胺(74μl，0.425mmol)和二氯甲烷(5mL)。将该反应在室温下振动2.5天。对于没有完全的反应，再加入N-乙基-N，N-二异丙基胺(15μl，0.085mmol)和)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(8mg，0.0425mmol)。此外，对于溶解度低的反应，还加入DMF(1mL)。将反应真空浓缩，溶解于二氯甲烷(2mL)，用盐水(2mL)洗涤并通过Empore柱(6mL)来分层。将有机层减压浓缩。对于纯度小于80％的产物，将样品通过RP-HPLC纯化(Waters PrepLC4000，流速：10mL/min，λ＝254nm梯度：15％至35％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度，在40分钟内；Deltapak C18，300，15μm，40×100mm柱)。将N-叔丁氧基羰基保护的产物(0.11mmol)脱保护：用6N HCl(0.7mL)和丙酮(3.5mL)，在45℃下处理4.5小时。将丙酮减压除去，并将此产物通过RP-HPLC纯化(Waters PrepLC 4000，流速：10mL/min.λ＝254nm梯度：15％至35％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度，在40分钟内；Deltapak C18，300A，15μm，40×100mm柱)。
将N-(9-芴基甲氧基羰基)保护的产物(0.126mmol)脱保护：用哌啶(0.4mL)在DMF(1.6ml)中室温下处理3.5小时脱保护。产物再通过RP-HPLC纯化(Waters PrepLC 4000，流速：10mL/min.，λ＝254nm梯度：15％至35％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液梯度，在40分钟内；Deltapak C18，300，15μm，40×100mm柱)。
产物通过RP-HPLC(5％至85％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液，缓冲至pH4.5，在20分钟内，1mL/min；λ＝254nm；Deltapak C18，300，5μm，150×3.9mm柱)和质谱进行分析，给下列化合物定性：
实施例417
顺-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基2，3-二氯-1-苯磺酸酯
将含顺-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯酚(100mg，0.245mmol)、2，3二氯苯磺酰基氯(180mg，0.735mmol)和三乙胺(0.34mL，2.45mmol)的二氯甲烷(8mL)溶液，室温下搅拌17小时。再加入二氯甲烷(20mL)，并将该反应用盐水(10mL)、饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)洗涤，干燥(硫酸钠)并减压浓缩得到顺-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基2，3-二氯-1-苯磺酸酯，为白色固体(135mg，90％)；RP-HPLC 11.787分钟，97％纯度(5％至85％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液，缓冲至pH4.5，在20分钟内，1mL/min；λ＝254nm；Deltapak C18，300，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝616.2。
实施例418
N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苄基)-5-甲基-1，3-噻唑-2-胺
(a)顺-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯甲醛
将顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(5.0g，11.33mmol)、4-甲酰基苯基羟基代硼酸(2.55g，16.98mmol)、四(三苯基膦)钯(0.47g，0.4mmol)和碳酸钠(3.002g，28.32mmol)的混合物在乙二醇二甲醚(170mL)和水(30mL)中在80℃加热18小时。再加入羟基硼酸酯(1.567当量)和催化剂(0.0135当量)并将该反应再继续40小时。将该反应冷却至室温，并真空浓缩。残余物在乙酸乙酯(300mL)和水(200mL)之间分配。通过过滤收集所得沉淀并冷冻干燥得到顺-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯甲醛，为淡棕色固体(2.1g，43％)；RP-HPLC 7.003分钟，98％纯度(5％至85％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液，缓冲至pH4.5，在20分钟内，1mL/min；λ＝254nm；Deltapak C18，300，5μm，150×3.9mm柱)；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ1.60(2H，brt)，1.72(2H，m)，2.06(2H，m)，2.17(3H，s)，2.27(3H，m)，2.35-2.50(6H，m)，3.39(2H，m)，4.84(1H，m)，7.88(2H，d)，8.07(2H，d)，8.26(1H，s)，及10.11(1H，s)。
b)N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苄基)-5-甲基-1，3-噻唑-2-胺
将含顺-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯甲醛(100mg，0.24mmol)和2-氨基-5-甲基噻唑(33mg，0.29mmol)在异丙醇钛(0.48mL)中的浆状物，室温下搅拌4小时。加入甲醇(2mL)，接着小心加入硼氢化钠(13.5mg，0.36mmol)。10分钟后，泡腾停息，并用氢氧化钠水溶液(0.1N，10mL)将该反应骤冷。所得混合物放置过夜，再通过硅藻土板过滤，再用加入甲醇(约10mL)。将滤液蒸发至干，再溶解于二氯甲烷(50mL)并用盐水(50mL)洗涤。水层进一步用二氯甲烷(3×50mL)萃取并将合并的有机层干燥(硫酸镁)并真空浓缩。通过RP-HPLC纯化(Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm柱，在50mM乙酸铵中0％至100％乙腈，缓冲至pH4.5，3.5mL/min)得到2个馏份。第一个馏份含有(4-{4-氨基-7-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-7H-环戊烷并[d]嘧啶-5-基}苯基)甲醇(5mg，5％)；RP-HPLC 6.261分钟，82％纯度(5％至85％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液，缓冲至pH4.5，在20分钟内，1mL/min；λ＝254nm；Deltapak C18，300，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝422.1。
第二个馏份中得到N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苄基)-5-甲基-1，3-噻唑-2-胺(4mg，3％)；RP-HPLC 8.344分钟，100％纯度(5％至85％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液，缓冲至pH4.5，在20分钟内，1mL/min；λ＝254nm；Deltapak C18，300，5μm，150×3.9mm柱)；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ1.59(2H，br t)，1.70(2H，m)，2.07(2H，m)，2.10-2.50(9H，m)，2.16(3H，s)，2.54(3H，s)，3.29(2H，m)，4.47(2H，d)，4.80(1H，m)，6.66(1H，s)，7.49(2H，d)，7.61(2H，d)，7.88(1H，m)，及8.23(1H，s)。
实施例419
N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苄基)-4-甲基-1，3-噻唑-2-胺
用对于5-甲基类所详述的相同的方法和用量(见上)，制备N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苄基)-4-甲基-1，3-噻唑-2-胺(11mg，8％)；RP-HPLC 8.177分钟，97％纯度(5％至85％乙腈/0.1M醋酸铵水溶液，缓冲至pH4.5，在20分钟内，1mL/min；λ＝254nm；Deltapak C18，300，5μm，150×3.9mm柱)；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ1.57(2H，br t)，1.67(2H，m)，2.07(2H，m)，2.10-2.50(9H，m)，2.19(3H，s)，2.54(3H，s)，3.29(2H，m)，4.50(2H，br s)，4.79(1H，m)，6.17(1H，s)，7.50(2H，d)，7.62(2H，d)，7.99(1H，m)，及8.23(1H，s)。
实施例420
顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5，7-二氯-1，3-苯并噁唑-2-胺
a)2-氨基-6-氯苯酚
将2-氯-6-硝基苯酚(1.210g，6.972mmol)的乙醇(50mL)溶液用铁粉(1.947g，34.86mmol)和浓HCl(3mL)处理。将黄色混合物加热回流18小时，再冷却至室温。将该反应混合物通过硅藻土垫过滤，并将此滤液用饱和碳酸氢钠水溶液中和。所得灰色混悬液通过硅藻土垫过滤，并将此滤液用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥，过滤，并浓缩得到黑色固体。用庚烷研磨得到2-氨基-6-氯苯酚(0.577g，58％)，为暗棕色固体。RP-HPLC(在10分钟内在0.1N醋酸铵水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，100，5μm，250×4.6mm柱)tr＝7.30min.，91％；m/z 143(MH+)。
b)顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5，7-二氯-1，3-苯并噁唑-2-胺
由顺-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.100g，0.245mmol)和2-氨基-4，6-二氯苯酚(0.044 g，0.245mmol)以类似于合成顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-甲基-1，3-苯并噁唑-2-胺(PH4042235)所用的方式来制备。形成此化合物，为米白色固体(0.008g，6％)：RP-HPLC(25至100％CH3CN，在0.1N醋酸铵水溶液中，在10分钟内，1mL/min，用Hypersil HS C18，100，5μm，250×4.6mm柱)tr＝8.93min.，95％；m/z 594(MH+)。
实施例421
顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-7-甲基-1，3-苯并噁唑-2-胺
a)2-氨基-4，6-二氯苯酚
2-氨基-4，6-二氯苯酚由2，4-二氯-6-硝基苯酚(0.625g，2.40mmol)类似于2-氨基-6-氯苯酚所述的方式来制备。形成此化合物，为黑色固体(0.044g，10％)。RP-HPLC(在10分钟内在0.1N醋酸铵水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，100，5μm，250×4.6mm柱)tr＝9.033min.，74％；m/z 177(MH+)。
b)顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-7-甲基-1，3-苯并噁唑-2-胺
由顺-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.100g，0.245mmol)和2-氨基-6-甲基苯酚(0.030g，0.245mmol)以类似于合成顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-甲基-1，3-苯并噁唑-2-胺(PH4052419F)所用的方式来制备。形成此化合物，为米白色固体(0.018g，14％)：RP-HPLC(在10分钟内在0.1N醋酸铵水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，100，5μm，250×4.6mm柱)tr＝7.37min.，85％；m/z 539(MH+)。
实施例422
顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-7-氯-1，3-苯并噁唑-2-胺
a)2-氨基-6-甲基苯酚
2-氨基-6-甲基苯酚由2-甲基-6-硝基苯酚(0.500g，3.26mmol)以类似于2-氨基-6-氯苯酚所述的方式来制备。形成的此化合物为黑色固体(0.030g，8％)。RP-HPLC(在10分钟内在0.1N醋酸铵水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，100，5μm，250×4.6mm柱)tr＝5.78min.，86％；m/z 123(MH+)。
b)顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-7-氯-1，3-苯并噁唑-2-胺
由顺-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.100g，0.245mmol)和2-氨基-6-氯苯酚(0.053g，0.367mmol)以类似于合成顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4甲基-1，3-苯并噁唑-2-胺(PH4052419F)所用的方式来备。形成此化合物，为米白色固体(0.018g，13％)：RP-HPLC(在10分钟内在0.1N醋酸铵水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，100，5μm，250×4.6mm柱)tr＝7.78min.，94％；m/z 558(MH+)。
实施例423
2-{4-氨基-3-[4-(1，3-苯并噁唑-2-基氨基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基}-3-吡啶甲腈
制备2-[4氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸乙酯的Suzuki偶联方法，用来将N-(1，3-苯并噁唑-2-基)-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]胺(0.052g，0.155mmol)与2-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-3-吡啶甲腈(0.045g，0.124mmol)偶联。通过制备HPLC纯化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt 10.1-11.2min)得到2-{4-氨基3-[4-(1，3-苯并噁唑-2-基氨基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基}-3吡啶甲腈，为黄色粉末(0.004g，0.009mmol)：RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在10分钟内，1mL/min，用5μ Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)  Rt8.55min；MS(MH)+446。
实施例424
N1-[2-(二甲基氨基)乙基]-2-(4-氨基-3-{4-[(5，7-二甲基-1，3-苯并噁唑-2-基)氨基]苯基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)丙酰胺
用制备4-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]丁酸甲酯所描述的酯化方法，将2-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)丙酸乙酯(2.03g，5.62mmol)，制备2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]丙酸乙酯所述的中间体，转变为相应的甲基酯(1.90g，5.47mmol)：RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在10分钟内，1mL/min，用5μHypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt 6.88min
再将一部分此甲基酯(0.110g，0.32mmol)用N，N-二甲基亚乙基二胺，用制备N1-{4-[4-氨基-1-(2-(4-吗啉基)-2-氧代乙基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}-2，3-二氯-1-苯磺酰胺所用的酰胺形成的方法转变为仲酰胺：RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在10分钟内，1mL/min，用5μ Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt 3.47min。
用制备2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺酰基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸乙酯所用的Suzuki偶联方法，将此仲酰胺(0.12g，0.30mmol)与N-(5，7-二甲基-1，3-苯并噁唑-2-基)-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]胺(0.100g，0.275mmol)偶联。通过制备HPLC纯化产物(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt 6.3-8.3min)得到N1-[2-(二甲基氨基)乙基]-2-(4-氨基-3-{4-[(5，7-二甲基-1，3-苯并噁唑-2-基)氨基]苯基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)丙酰胺，为黄色粉末(0.0015g，0.003mmol)；RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在10分钟内，1mL/min，用5μ Hypersil HSC18，250×4.6mm柱)Rt 7.60min；MS(MH)+514。
实施例425
N-(4-{4-氨基-1-[2-氰基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-N′-(3-甲基苯基)脲
使用与制备N1-(4-{4-氨基-1-[2-氰基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-2，3-二氯-1-苯磺酰胺相同的方法，不同的是最后步骤使用制备2-(4-氨基-3-{3-氟-4-[(3-甲苯氨基羰基)氨基]苯基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)乙酸乙酯所用的脲形成的方法，行2-[4-氨基-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-5-(4-甲基哌嗪-1-基)苄腈(0.018g，0.041mmol)与间甲苯基异氰酸酯(0.005mL，0.040mmol)的反应。通过制备HPLC纯化产物(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt 9.3-10.3min)得到N-(4-{4-氨基-1-[2-氰基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-N′-(3-甲基苯基)脲，为黄色粉末(0.008g，0.014mmol)；RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在10分钟内，1mL/min，用5μHypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt 8.03min；MS(MH)+577。
实施例426
顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-6-氯-1，3-苯并噻唑-2-胺
在装备有空气冷凝器的烧瓶中，将固体4-溴苯胺(1.00g，5.81mmol)和2，6-二氯苯并噻唑(1.18g，5.81mmol)在140℃加热3天(在几分钟内发生融合得到清澈液体，其在3天内固化)。将该反应混合物冷却至室温得到N-(4-溴苯基)-N-(6-氯-1，3-苯并噻唑-2-基)胺(1.97g，5.81mmol)：RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在10分钟内，1mL/min，用5μ Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt 14.65min。
羟基硼酸酯的形成方法：将粗品N-(4-溴苯基)-N-(6-氯-1，3-苯并噻唑-2-基)胺(0.178g，0.525mmol)、双(频哪醇合)乙硼烷(0.180g，0.709mmol)、醋酸钾(0.154g，1.57mmol)和[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(0.043g，0.053mmol[与二氯甲烷的1∶1复合物])在N，N-二甲基甲酰胺(3mL)中在一个可再密封的Schlenk烧瓶中在90℃下加热24小时。将此混合物冷却至室温，通过硅藻土过滤，并将粗品通过急骤柱色谱在硅胶上纯化，用乙酸乙酯/庚烷(1∶3)洗脱得到此羟基硼酸酯中间体N-(6-氯-1，3-苯并噻唑-2-基)-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]胺，为白色粉末(0.116g，0.30mmol)：RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在10分钟内，1mL/min，用5μ Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt 15.15min。
Suzuki偶联的方法：将N-(6-氯-1，3-苯并噻唑-2-基)-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]胺(0.116g，0.30mmol)、顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.106g，0.24mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(0.014g，0.012mmol)在乙二醇二甲基醚(3.0mL)中的混合物，碳酸钠(0.064g，0.60mmol)和水(1.5mL)在密封的Schlenk烧瓶中在90℃加热24小时。将此混合物冷却，用水(10mL)稀释并用甲醇/二氯甲烷(1∶19，3×20mL)萃取。将合并的有机馏份干燥(硫酸镁)，过滤，浓缩并通过制备HPLC纯化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt 7.8-10.0min)得到顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-6氯-1，3-苯并噻唑-2-胺，为黄色粉末(0.036g，0.062mmol)；RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在10分钟内，1mL/min，用5μ Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt 8.42min；MS(MH)+574。
实施例427
顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-6-甲氧基-1，3-苯并噻唑-2-胺
用类似于制备顺-N2-(4-4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基苯基)-6-氯-1，3-苯并噻唑-2-胺所用的方法，不同的是使用2-氯-6-甲氧基苯并噻唑(0.352g，2.05mmol)，通过制备HPLC纯化产物(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt 6.3-8.3min)得到顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-6-甲氧基-1，3-苯并噻唑-2-胺，为白色粉末(0.046g，0.080mmol)；RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在10分钟内，1mL/min，用5μ Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt 7.40min；MS(MH)+570。
实施例428
顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-乙基-1，3-噻唑-2-胺
将芴基甲基氧基羰基异硫氰酸酯(1.36g，4.84mmol，Kearney，P.C.；Fernandez，M.；Flygare，J.A.J.Org.Chem.1998，63，196-200)的二氯甲烷(40mL)溶液，通过移液管加入到维持在0℃的4-溴苯胺(0.86g，5.00mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中，并将所得混合物室温下搅拌14小时。将该反应用二氯甲烷(60mL)稀释并用盐酸(0.5M，2×10mL)洗涤。将此有机层干燥(硫酸镁)，过滤，并浓缩得到9H-9-芴基-甲基-N-[(4-溴苯氨基)硫羰基]氨基甲酸酯(2.25g，4.97mmol)：RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在10分钟内，1mL/min，用5μ Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt 14.25min。
噻唑合成的方法：将9H-9-芴基-甲基-N-[(4-溴苯氨基)硫羰基]氨基甲酸酯(0.25g，0.55mmol)溶解于哌啶/N，N-二甲基甲酰胺(1∶6，3.5mL)并将此混合物室温下搅拌2小时。减压除去溶剂并将此残余物溶解于乙酸(1mL)、乙醇(2mL)和二噁烷(2mL)的混合物中。加入1-溴-2-丁酮(90％，0.11mL，1.10mmol)并将此混合物室温下搅拌14小时。将该反应混合物用半饱和的碳酸钠水溶液(15mL)稀释并用甲醇/二氯甲烷(1∶19，3×20mL)萃取。将合并的有机层干燥(硫酸镁)，过滤，浓缩并通过急骤色谱在硅胶上纯化，用乙酸乙酯/庚烷(1∶4)洗脱，得到该溴噻唑N-(4-溴苯基)-N-(4-乙基-1，3-噻唑-2-基)胺(0.15g，0.53mmol)：RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在10分钟内，1mL/min，用5μ Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt 13.15min。
用制备N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-6-氯-1，3-苯并噻唑-2-胺所述的方法，将上述溴噻唑中间体转变为羟基硼酸酯，得到该羟基硼酸酯中间体N-(4-乙基-1，3-噻唑-2-基)-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]胺(0.158g，0.48mmol)：RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在10分钟内，1mL/min，用5μHypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt 13.60min。
用制备N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-6-氯-1，3-苯并噻唑-2-胺所述的Suzuki偶联方法，将该羟基硼酸酯中间体(0.15g，0.45mmol)与顺-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.182g，0.41mmol)偶联。通过制备HPLC纯化产物(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μHypersil HS C18，250×21mm柱，Rt 7.0-8.0min)得到顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-乙基-1，3-噻唑-2-胺，为米白色粉末(0.069g，0.133mmol)；RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在10分钟内，1mL/min，用5μ Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt7.05min；MS(MH)+518。
实施例429
顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4，5-二甲基-1，3-噻唑-2-胺
使用制备顺-N2(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-乙基-1，3-噻唑-2-胺所述的噻唑合成的方法，不同的是将3-溴-2-丁酮(0.183g，1.21mmol)用作烷基化试剂，而烷基化反应在40℃下进行2 4小时。通过制备HPLC纯化产物(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt 6.7-7.7min)得到顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4，5-二甲基-1，3-噻唑-2-胺，为米白色粉末(0.069g，0.133mmol)；RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在10分钟内，1mL/min，用5μ Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt 6.83min；MS(MH)+518。
实施例430
顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-苯基-1，3-噻唑-2-胺
使用制备顺-N2(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-乙基-1，3-噻唑-2-胺所描述的噻唑合成方法，不同的是将2-溴苯乙酮(0.131g，0.66mmol)用作烷基化试剂。通过制备HPLC纯化产物(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt 8.7-9.8min)得到顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-苯基-1，3-噻唑-2-胺，为黄色粉末(0.036g，0.064mmol)；RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在10分钟内，1mL/min，用5μ Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt 8.22min；MS(MH)+566。
实施例431
顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-(4-甲基苯基)-1，3-噻唑-2-胺
使用制备顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-乙基-1，3-噻唑-2-胺所述的噻唑合成方法，不同的是用2-溴-4′-甲基苯乙酮(0.118g，0.554mmol)作为烷基化试剂。通过制备HPLC纯化产物(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt 9.1-10.7min)得到顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-(4-甲基苯基)-1，3-噻唑-2-胺，为米白色粉末(0.022g，0.038mmol)；RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在10分钟内，1mL/min，用5μ Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt 8.88min；MS(MH)+580。
实施例432
顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5-甲基-4-苯基-1，3-噻唑-2-胺
使用制备顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-乙基-1，3-噻唑-2-胺所述的噻唑合成方法，不同的是用2-溴苯基丙基酮(0.081ml，0.532mmol)作为烷基化试剂。烷基化反应在50℃进行24小时。通过制备HPLC纯化产物(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在20分钟内，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt 9.1-10.3min)得到顺-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5-甲基-4-苯基-1，3-噻唑-2-胺，为米白色粉末(0.015g，0.026mmol)；RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸铵水溶液中，在10分钟内，1mL/min，用5μ Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt 8.67min；MS(MH)+580。
实施例433
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3R)-3-苯基丁酰胺三马来酸盐
(3R)-3-苯基丁酰氯
将R-3-苯基丁酸(0.755g，4.6mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液用草酰氯(0.700g，5.52mmol)和1滴二甲基甲酰胺处理。将此反应混合物在室温下氮气氛下摇动15小时。将该反应混合物摇动15小时。减压除去溶剂并高真空下干燥，得到定量的(3R)-3-苯基丁酰基氯。将此油状物直接用于以下的反应。
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3R)-3-苯基丁酰胺三马来酸盐
将3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.500g，1.15mmol)的吡啶(8mL)溶液，在-5℃下用(3R)-3-苯基丁酰基氯(0.420g，2.3mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液处理。将该反应混合物在-5℃下搅拌20分钟，然后除去干冰/丙酮浴并在室温、氮气氛下搅拌。将(3R)-3-苯基丁酰基氯(0.210g，1.15mmol)加入到该反应混合物并搅拌2小时。加入氢氧化钠(1N)溶液(10mL)并搅拌过夜。减压除去有机溶剂，并加入二氯甲烷(20mL)。分层，并将水层用二氯甲烷(125mL)萃取。将合并的有机层用水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并减压除去溶剂。将N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3R)-3-苯基丁酰胺在硅胶上通过急骤色谱纯化，用存在于二氯甲烷中的15％(含2％氢氧化铵甲醇)(10min)、存在于二氯甲烷中的20％(含2％氢氧化铵的甲醇)(15min)、存在于二氯甲烷中的50％(含2％氢氧化铵的甲醇)(7min)洗脱，得到0.378g(57％)纯N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3R)-3-苯基丁酰胺。将N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3R)-3-苯基丁酰胺(0.378g，0.649mmol)的乙酸乙酯温溶液，用马来酸(0.226g，1.95mmol)的乙酸乙酯温溶液处理。在氮气氛下过滤此沉淀并冻干得到N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3R)-3-苯基丁酰胺三马来酸盐。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.200(s，1H)，8.263(s，1H)，8.1747-8.1543(d，1H，J＝8.16Hz)，7.312-7.282(m，4H)，7.235-7.232(s，1H)，7.211-7.168(m，2H)，6.114(s，6H)，5.061(m，1H)，3.890(s，3H)，3.301(m，4H)，2.997(m，2H)，2.783-2.741(m，6H)，2.541(m，8H)，2.261-2.185(m，4H)，1.879(m，2H)；HPLC Perkin ElmerPecosphere C18，3μM，33×4.6，3.5ml/min 100-100％50mM醋酸铵至乙腈，在4.5分钟内，C36H44N6O3(581.2)，95％。LCMS(PerkinElmer，Pecosphere C18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸铵水溶液至100％乙腈，在5分钟内，3.0至3.5mil/min)Rt 2.64min(100％)。
实施例434
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-苯并[b]呋喃-2-甲酰胺三马来酸盐
苯并[b]呋喃-2-羰基氯
将2-苯并呋喃甲酸(0.746g，4.6mmol)的二氯甲烷(3mL)悬浮液用草酰氯(0.700g，5.52mmol)和1滴二甲基甲酰胺处理。将该反应混合物摇动15小时。减压除去溶剂并高真空下干燥，得到定量的苯并[b]呋喃-2-羰基氯。将此油状物直接用于以下的反应。
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-苯并[b]呋喃-2-甲酰胺三马来酸盐
将3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.500g，1.15mmol)的吡啶(8mL)溶液，在-5℃下用苯并[b]呋喃-2-羰基氯(0.415g，2.3mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液处理。将该反应混合物在-5℃下搅拌20分钟，然后除去干冰/丙酮浴并在室温下氮气氛下搅拌。将苯并[b]呋喃-2-羰基氯(0.207g，1.15mmol)加入到该反应混合物并搅拌2小时。加入氢氧化钠(1N)溶液(10mL)并搅拌过夜。减压除去有机溶剂，并加入二氯甲烷(20mL)。分层，并将水层用二氯甲烷(125mL)萃取。合并的有机层用水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并减压除去溶剂。将N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-苯并[b]呋喃-2-甲酰胺在硅胶上通过急骤色谱纯化，用存在于二氯甲烷的15％(含2％氢氧化铵的甲醇)(10min)、存在于二氯甲烷的20％(含2％氢氧化铵的甲醇)(15min)、存在于二氯甲烷的50％(含2％氢氧化铵的甲醇)(7min)洗脱，得到0.143g(21％)纯N1-(4-{4-氨基1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-苯并[b]呋喃-2-甲酰胺。将N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-苯并[b]呋喃-2-甲酰胺(0.143g，0.246mmol)的乙酸乙酯温溶液用马来酸(0.086g，0.739)的乙酸乙酯温溶液处理。在氮气氛下过滤此沉淀并冻干得到N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-甲氧基苯基)-苯并[b]呋喃-2-甲酰胺三马来酸盐。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.518(s，1H)，8.282(s，1H)，8.2652-8.2447(d，1H，J＝8.2Hz)，7.849-7.814(m，2H)，7.7813-7.7603(d，1H，J＝8.4Hz)，7.562-7.523(m，1H)，7.418-7.369(m，2H)，7.338-7.313(m，1H)，6.088(s，5H)，5.10-5.00(m，1H)，4.003(s，3H)，3.529(m，4H)，3.314(m，2H)，2.971(m，2H)，2.778(s，3H)，2.497(m，3H)，2.209(m，4H)，1.909(m，2H)；HPLC Perkin ElmerPecosphere C18，3μM，33×4.6，3.5ml/min 100-100％50mM醋酸铵至乙腈，在4.5分钟内，C36H44N6O3(581.2)，95％。LCMS(PerkinElmer，Pecosphere C18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸铵水溶液至100％乙腈，在5分钟内，3.0至3.5mil/min)Rt 2.73min(100％)。
实施例435
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3S)-3-苯基丁酰胺三马来酸盐
(3S)-3-苯基丁酰基氯
将S-3-苯基丁酸(0.755g，4.6mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液用草酰氯(0.700g，5.52mmol)和1滴二甲基甲酰胺处理。将该反应混合物在室温、氮气氛下摇动15小时。将该反应混合物摇动15小时。减压除去溶剂并高真空下干燥，得到定量的(3S)-3-苯基丁酰基氯。此油状物直接用于以下的反应。
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3S)-3-苯基丁酰胺三马来酸盐
将3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.500g，1.15mmol)的吡啶(8mL)溶液，在-5℃下用(3S)-3-苯基丁酰基氯(0.420g，2.3mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液处理。将该反应混合物在-5℃下搅拌20分钟，然后除去干冰/丙酮浴并在室温、氮气氛下搅拌。将(3S)-3-苯基丁酰基氯(0.210g，1.15mmol)加入到该反应混合物并搅拌2小时。加入氢氧化钠(1N)溶液(10mL)并搅拌过夜。减压除去有机溶剂，并加入二氯甲烷(20mL)。分层，并将水层用二氯甲烷(125mL)萃取。合并的有机层用水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并减压除去溶剂。将N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3S)-3-苯基丁酰胺在硅胶上通过急骤色谱纯化，用存在于二氯甲烷的15％(含2％氢氧化铵的甲醇)(10min)、存在于二氯甲烷的20％(含2％氢氧化铵的甲醇)(15min)、存在于二氯甲烷的50％(含2％氢氧化铵的甲醇)(7min)洗脱，得到0.455g(68％)纯N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3S)-3-苯基丁酰胺。将N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3S)-3-苯基丁酰胺(0.455g，0.782mmol)的乙酸乙酯温溶液用马来酸(0.272g，2.35)的乙酸乙酯温溶液处理。在氮气氛下过滤此沉淀并冻干得到N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3S)-3-苯基丁酰胺三马来酸盐。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.199(s，1H)，8.261(s，1H)，8.1733-8.1528(d，1H，J＝8.2Hz)，7.312-7.282(m，4H)，7.236-7.232(m，1H)，7.211-7.168(m，2H)，6.094(s，6H)，5.046(m，1H)，3.890(s，3H)，3.534(m，4H)，2.994(m，2H)，2.784-2.740(m，6H)，2.506-2.470(m，8H)，2.442-2.200(m，4H)，1.855(m，2H)；HPLC Perkin ElmerPecosphere C18，3μM，33×4.6，3.5ml/min 100-100％50mM醋酸铵至乙腈，在4.5分钟内，C36H44N6O3(581.2)，95％。LCMS(PerkinElmer，Pecosphere C18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸铵水溶液至100％乙腈，在5分钟内，3.0至3.5mil/min)Rt 2.64min(100％)。
实施例436
N-(4-{4-氨基-1-[4-硝基苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯
4-氨基-1-[4-硝基苯基]-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶
将3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.00g，7.66mmol)在二甲基甲酰胺(40mL)中的悬浮液用碳酸铯(3.74g，11.49mmol)和对氟硝基苯(1.08g，7.66mmol)处理。将该反应混合物在80℃下在氮气氛下搅拌5小时。将该反应混合物加入到冰中。过滤此沉淀并用水洗涤。将产物4-氨基-1-[4-硝基苯基]-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶冻干过夜得到2.55g(87％)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.4952-8.4720(m，2H)，8.4142-8.3654(m，3H)；LCMS(PerkinElmer，Pecosphere C18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸铵水溶液至100％乙腈，在5分钟内，3.0至3.5mil/min)tR＝3.73min(100％)M+380.6.
N-(4-{4-氨基-1-[4-硝基苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯
将4-氨基-1-[4-硝基苯基]-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(0.500g，1.31mmol)在二甲基甲酰胺(8mL)中的悬浮液，用N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(0.915g，2.62mmol)、四(三苯基膦)钯(0.091g，0.06mmol)及碳酸钠(0.333g，3.14mmol)的水(4mL)溶液进行处理。将该反应混合物在85℃下在氮气氛下搅拌26小时。将水加入到该反应混合物。过滤此沉淀并用水洗涤。将此固体用乙醚研磨，得到0.431g(63％)的N-(4-{4-氨基-1-[4-硝基苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.6862-8.6634(d，2H，J＝9.12Hz)，8.4897-8.4423(m，3H)，8.1117(s，1H)，8.0074-7.9872(d，1H，J＝8.08Hz)，7.3743-7.3293(m，2H)，3.9189(s，3H)，1.4959(s，9H)；LCMS(Perkin Elmer，Pecosphere C18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸铵水溶液至100％乙腈，在5分钟内，3.0至3.5mil/min)tR＝4.38min M+478.1。
实施例437
4-氨基-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-硝基苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶
将N-(4-{4-氨基-1-[4-硝基苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(0.386g，0.808mmol)的二氯甲烷(8mL)悬浮液，在0℃下用三氟乙酸(1.6mL)处理。将该反应混合物在0℃下搅拌20分钟，然后除去冰浴，在室温、氮气氛下搅拌。将该反应混合物搅拌18小时。减压除去溶剂。将二氯甲烷(15mL)和氢氧化钠1N溶液加入到此油状物残余物。将所形成的沉淀过滤并冻干过夜得到0.286g(94％)的4氨基-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-硝基苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.7826-8.759(m，2H)，8.4892-8.4296(m，3H)，7.1861-7.1338(m，2H)，6.8320-6.8121(d，1H，J＝7.96Hz)，5.2225(s，2H)，3.8672(s，3H)；LCMS(Perkin Elmer，Pecosphere C18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸铵水溶液至100％乙腈，在5分钟内，3.0至3.5mil/min)tR＝3.48min M+ 377.6。
实施例438
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-1-甲基-1H-2-吲哚基甲酰胺二马来酸盐
1-甲基-1H-2-吲哚基羰基氯
将1-甲基吲哚基-2-甲酸(0.805g，4.6mmol)的二氯甲烷(3mL)的悬浮液用草酰氯(0.700g，5.52mmol)和1滴二甲基甲酰胺处理。将该反应混合物摇动18小时。减压除去溶剂并高真空下干燥，得到定量的1-甲基-1H-2-吲哚基羰基氯。此油状物直接用于以下的反应。
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1-甲基-1H-2-吲哚基甲酰胺二马来酸盐
将3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.500g，1.15mmol)的吡啶(8mL)溶液在-5℃下用1-甲基-1H-2-吲哚基羰基氯(0.445g，2.3mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液处理。将该反应混合物在-5℃下搅拌20分钟，然后除去干冰/丙酮浴并在室温下氮气氛下搅拌。将1-甲基-1H-2-吲哚基羰基氯(0.221g，1.15mmol)加入到该反应混合物并搅拌2小时。加入氢氧化钠(1N)溶液(10mL)并搅拌过夜。减压除去有机溶剂，并加入二氯甲烷(20mL)。分层，并将水层用二氯甲烷(125mL)萃取。合并的有机层用水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并减压除去溶剂。将N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1-甲基-1H-2-吲哚基甲酰胺在硅胶上通过急骤色谱纯化，用存在于二氯甲烷的15％(含2％氢氧化铵的甲醇)(10min)、存在于二氯甲烷的20％(含2％氢氧化铵的甲醇)(15min)、存在于二氯甲烷的50％(含2％氢氧化铵的甲醇)(7min)洗脱，得到0.463g(68％)纯N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1-甲基-1H-2-吲哚基甲酰胺。将N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1-甲基-1H 2-吲哚基甲酰胺(0.463g，0.781mmol)的乙酸乙酯温溶液用马来酸(0.272，2.34mmol)的乙酸乙酯温溶液处理。在氮气氛下过滤此沉淀，并冻干得到N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1-甲基-1H-2-吲哚基甲酰胺二马来酸盐。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.4495(s，1H)，8.2848(s，1H)，8.1505-8.1301(d，1H，J＝8.16Hz)，7.7232-7.7034(d，1H，J＝7.92Hz)，7.6054-7.5844(d，1H，J＝8.4Hz)，7.3583-7.3012(m，4H)，7.1778-7.1406(m，1H)，6.0804(s，4H)，5.10-5.00(m，1H)，4.0403(s，3H)，3.9614(s，3H)，3.5336(m，4H)，3.1879(m，2H)，2.9937(m，2H)，2.7836(s，3H)，2.4979(m，3H)，2.2157(m，4H)，1.8513(m，2H)；HPLC Perkin Elmer，PecosphereC18，3μM，33×4.6mm，3.5ml/min 100-100％50mM醋酸铵至乙腈，在4.5分钟内，C36H44N6O3(581.2)，95％LCMS(Perkin Elmer，Pecosphere C18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸铵水溶液至100％乙腈，在5分钟内，3.0至3.5mil/min)Rt 2.76min(100％)。
实施例439
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1H-2-吲哚基甲酰胺二马来酸盐
1H-2-吲哚基羰基氯
将吲哚基-2-甲酸(0.742g，4.6mmol)在二氯甲烷(3mL)中的悬浮液用草酰氯(0.700g，5.52mmol)和1滴二甲基甲酰胺处理。将该反应混合物摇动18小时。减压除去溶剂并高真空下干燥，得到定量的1H-2-吲哚基羰基氯。此油状物直接用于以下的反应。
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1H-2-吲哚基甲酰胺二马来酸盐
将3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.500g，1.15mmol)的吡啶(8mL)溶液，在-5℃下用1H-2-吲哚基羰基氯(0.413g，2.3mmol)的二氯甲烷(1mL)溶液处理。将该反应混合物在-5℃下搅拌20分钟。除去干冰/丙酮浴并将该反应混合物在氮气氛下搅拌18小时。加入1H-2-吲哚基羰基氯(0.207g，1.15mmol)并再搅拌2小时。加入氢氧化钠(1N)溶液(10mL)并搅拌30分钟。减压除去有机溶剂，并加入二氯甲烷(25mL)。分层，并将水层用二氯甲烷萃取。合并的有机层用水和盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤，并在减压下得到粗品N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1H-2-吲哚基甲酰胺。将N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1H-2-吲哚基甲酰胺在硅胶上通过急骤色谱纯化，用存在于二氯甲烷的15％(含2％氢氧化铵的甲醇)洗脱还是得到粗品。第二次过柱用梯度10％(含2％氢氧化铵的甲醇)至50％(含2％氢氧化铵的甲醇)洗脱，得到0.139g(21％)纯N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1H-2-吲哚基甲酰胺。将N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1H-2-吲哚基甲酰胺(0.139g，0.24mmol)在温乙酸乙酯中用马来酸(0.083g，0.719mmol)的乙酸乙酯温溶液处理。在氮气氛下过滤所形成的沉淀得到0.166g的N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1H-2-吲哚基甲酰胺二马来酸盐。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ11.83(s，1H)，9.442(s，1H)，8.283(s，1H)，8.154-8.134(d，1H，J＝8.12Hz)，7.694-7.674(d，1H，J＝8.04Hz)，7.498-7.477(d，1H，J＝8.20Hz)，7.407-7.402(m，1H)，7.352-7.325(m，2H)，7.267-7.229(m，1H)，7.112-7.074(m，1H)，6.078(s，4H)，5.10-5.00(m，1H)，3.974(s，3H)，3.525(m，4H)，3.178(m，2H)，2.975(m，2H)，2.771(s，3H)，2.457(s，3H)，2.208(m，4H)，1.909(m，2H)；HPLC Perkin ElmerPecosphere C18，3μM，33×4.6，3.5ml/min 100-100％50mM醋酸铵至乙腈，在4.5分钟内，C36H44N6O3(581.2)，95％。LCMS(PerkinElmer，Pecosphere C18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸铵水溶液至100％乙腈，在5分钟内，3.0至3.5mil/min)Rt 2.67min(100％)。
实施例440
3-苯基-1-三苯甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
3-碘-1-三苯甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(3.0g，11.5mmol)在二甲基甲酰胺(50mL)中的悬浮液用碳酸铯(5.62g，17.25mmol)和三苯基甲基氯(3.85g，13.8mmol)处理。将该反应混合物在70℃下在氮气氛下搅拌22.5小时。将碳酸铯(3.75g，11.5mmol)和三苯基甲基氯(3.2g，11.5mmol)加入到该反应混合物并搅拌6.5小时。将该反应混合物加入到冰水中。过滤此沉淀并用水洗涤。将产物3-碘-1-三苯甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺冻干过夜。所得固体用乙酸乙酯研磨得到3.05g(53％)的3-碘1-三苯甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.3190-7.1106(m，16H)；TLC(Baker Pre-coated Hard Layer硅胶TLC板，Si250F254，30％乙酸乙酯在庚烷中)Rf＝0.33。
3-苯基-1-三苯甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将3-碘-1-三苯甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(1.0g，1.99mmol)的二甲基甲酰胺(20mL)溶液用苯基羟基代硼酸(0.485g，3.8mmol)、四(三苯基膦)钯(0.138g，0.119mmol)及碳酸钠(0.506g，4.78mmol)的水(10mL)溶液处理。将该反应混合物在80℃下在氮气氛下搅拌18.5小时。将该反应混合物冷却至室温并加入水(15mL)。过滤此沉淀并用水洗涤。粗品固体用乙醚研磨(30mL)。将所得固体冻干过夜，得到0.407g(45％)的3-苯基-1-三苯甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.9416(s，1H)，7.6190-7.6011(m，2H)，7.5369-7.4493(m，3H)，7.3995-7.2248(m，15H)；HPLC Waters 2690 Alliance HPLC(Symmetry Shield RP18 3.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵，在15分钟内，0.5mL/min)Rt＝11.813min(97％)。
实施例441
N1-{4-[4-氨基-1-(4-氧代环己基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-(3R)-3-苯基丁酰胺
在-10℃下将存在于二氯甲烷(10mL)中的(3R)-3-苯基丁酰基氯(2.22g，12.18mmol)加入到4-[4-氨基-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环己酮(2.86g，8.12mmol)的吡啶(50mL)溶液中。15分钟后，除去冰水浴并将此反应混合物室温下搅拌过夜。加入氢氧化钠(1.0N，15mL)并蒸发有机溶剂。将此水残余物用二氯甲烷萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。将此残余物通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(95∶5)作为流动相，得到N1-{4-[4-氨基-1-(4-氧代环己基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-(3R)-3-苯基丁酰胺(3.11g，77％)。1H NMR(CDCl3)：δ1.40(d，J＝6.97Hz，3H)，2.04(m，1H)，2.59-2.78(m，9H)，3.40(m，1H)，3.98(s，3H)，5.28(m，1H)，5.70(bs，2H)，7.15-7.35(m，7H)，7.66(s，1H)，8.38(s，1H)，8.51(d，J＝8.18，1H)。HPLC(Waters Alliance-柱：Symmetry ShieldRP18 3.5μm，2.1×50mm；洗脱剂：5％B/A至95％B/A，9.0分钟(B：乙腈，A：100mM醋酸铵缓冲液，pH4.5)，0.5mL/min)Rt＝6.273min。
实施例442
{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]苯基}甲醇
a)4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]苯甲醛
将3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.0g，6.59mmol)与4-氟苯甲醛(1.06mL，9.89mmol)、碳酸铯(4.30g，13.19mmol)在DMF(6mL)中混合。将此反应混合物在86℃下加热过夜。冷却至室温后，将此反应混合物倒入到冰水上。过滤收集此固体得到4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]苯甲醛(2.46g，92％)。1H NMR(CDCl3)δ7.19(m，5H)，7.46(m，2H)，7.78(d，J＝8.64Hz，2H)，8.10(d，J＝8.70Hz，2H)，8.44(s，1H)，8.59(d，J＝8.70Hz，2H)，10.03(s，1H)。
b){4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]苯基}甲醇
将硼氢化钠(19mg，0.491mmol)加入到4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]苯甲醛(100mg，0.245mmol)的甲醇(2mL)溶液中。16小时后，加入THF(1mL)和硼氢化钠(19mg，0.491mmol)。5小时后，除去溶剂并加入水。将水层用二氯甲烷萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。残余物通过急骤柱色谱纯化，用乙酸乙酯/二氯甲烷(80∶20至100∶0)作为流动相，得到{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]苯基}甲醇(36mg，36％)。1H NMR(DMSO-d6)δ4.56(s，2H)，5.27(bs，1H)，7.16(m，5H)，7.47(m，4H)，7.76(d，J＝8.64Hz，2H)，8.18(d，J＝8.52，2H)，8.37(s，1H)。LCMS(Thermoquest AQA singleQuad MS，Finnigan HPLC-柱：Genesis，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：30％B/A至95％B/A在4.5分钟内，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，pH4.5)，0.8mL/min.)：MH+＝410.1，Rt＝2.43min。
实施例443
1-{4-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基}-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将三乙酰氧基硼氢化钠(67mg，0.319mmol)加入到4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]苯甲醛(100mg，0.245mmol)、4-甲基哌嗪(37mg，0.369mmol)、冰醋酸(35mg，0.589mmol)在二氯乙烷(4mL)中的混合物中。室温下搅拌过夜后，再加入三乙酰氧基硼氢化钠(67mg，0.319mmol)并将该反应混合物搅拌过夜。加入水(2mL)，接着加入碳酸氢钠(250mg)。剧烈搅拌1小时后，分层并将水层用二氯甲烷萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。残余物通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(97∶3 to 80∶20)作为流动相，得到1-{4-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基}-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(25mg，21％)。1H NMR(DMSO-d6)δ2.30(s，3H)，2.48(bm，8H)，3.56(s，3H)，5.75(bs，2H)，7.11(d，J＝8.50，2H)，7.18(m，3H)，7.40(m，2H)，7.48(d，J＝8.50Hz，2H)，7.29(d，J＝8.63Hz，2H)，8.12(d，J＝8.50Hz，2H)，8.47(s，1H)。LCMS(Thermoquest AQA single Quad MS，Finnigan HPLC柱：Genesis，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：30％B/A至95％B/A，在4.5分钟内，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，pH4.5)，0.8mL/min.)：MH+＝492.2，Rt＝2.97min。
实施例444
N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-5-氟-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯
a)1-溴-2-氟-5-甲氧基-4-硝基苯
在0℃下将叔丁醇钾(1.0N在THF中，38mL，38mmol)加入到存在于THF(30mL)的甲醇(1.54mL，38.0mmol)中。30分钟后，在-78℃下将此絮状溶液通过导管加入到1-溴-2，5-二氟-4-硝基苯(9.04g，38.0mmol)的THF(27mL)溶液中。30分钟后，除去冷却浴并将该反应混合物升温至0℃。加入水(250mL)，并在10分钟后，除去有机溶剂。过滤收集固体得到1-溴-2-氟-5-甲氧基-4-硝基苯(9.28g，98％)。1H NMR(CDCl3)δ3.97(s，3H)，7.30(d，J＝5.48Hz，2H)，7.71(d，J＝7.58Hz，2H)。
b)4-溴-5-氟-2-甲氧基苯胺
在80℃下，分三批，将亚硫酸氢钠(14.7g，84.4mmol)加入到1-溴-2-氟-5-甲氧基-4-硝基苯(9.28g，37.12mmol)在乙醇(180mL)和水(130mL)中的溶液中。5小时后除去有机溶剂并通过过滤收集水层中的固体。将此固体进一步用庚烷/乙酸乙酯(3∶2，400mL)洗涤。将滤液蒸发得到4-溴-5-氟-2-甲氧基苯胺(3.29g，40％)。1H NMR(DMSO-d6)δ3.75(s，3H)，5.22(s，2H)，6.56(d，J＝10.68Hz，2H)，6.94(d，J＝6.57Hz，2H)。
c)N-(4-溴-5-氟-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯
将二-叔丁基二碳酸酯(3.42g，15.70mmol)与4-溴-5-氟-2-甲氧基苯胺(3.29g，14.95mmol)在THF(30mL)中混合。将该反应混合物在65℃下加热3天，每天加入二碳酸二叔丁基酯(3.42g，15.70mmol)。除去溶剂后，将残余物通过急骤柱色谱纯化，用庚烷/乙酸乙酯(95∶5至85∶15)作为流动相，得到所需产物N-(4-溴-5-氟-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯和二碳酸二叔丁基酯的混合物(10.4g)。在0℃下将氢氧化钠(50％溶液，2.0mL)加入到存在于甲醇(30mL)中的此混合物中，并将该反应混合物室温下搅拌过夜。除去溶剂后，加入水并将水层用庚烷萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发得到N-(4-溴-5-氟-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(4.24g，89％)。1H NMR(CDCl3)δ1.52(s，9H)，3.85(s，3H)，6.93(d，J＝6.10Hz，1H)，7.06(s，1H)，8.01(d，J＝10.4Hz，1H)。
d)N-[5-氟-2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯
将N-(4-溴-5-氟-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(4.24g，13.26mmol)、乙硼烷频哪醇酯(4.04g，15.91mmol)、醋酸钾(3.90g，39.78mmol)和[1，1′-双(二苯基膦基)-二茂铁)二氯钯(II)与二氯甲烷的复合物(0.32g，0.40mmol)在DMF(75mL)中，在85℃下加热过夜。加入乙硼烷频哪醇酯(2.02g，7.96mmol)和[1，1’-双(二苯基膦基)-二茂铁)二氯钯(II)与二氯甲烷的复合物(0.32g，0.40mmol)，并再继续加热5小时。除去溶剂后，将此黑色残余物溶解于二氯甲烷，并通过硅藻土过滤。将粗品混合物通过急骤柱色谱纯化，用庚烷/乙酸乙酯(95∶5至85∶15)作为流动相，得到N-[5-氟-2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯和乙硼烷频哪醇酯(1∶1，4.23g)的混合物，其不经进一步纯化，直接用于下一步反应。
e)反-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-5-氟-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯
将反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.60g，1.36mmol)、N-[5-氟-2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(1.0g，2.72mmol)、四(三苯基膦)钯(0.094g，0.082mmol)和碳酸钠(0.35g，3.27mmol)与乙二醇二甲醚(14mL)和水(7mL)混合。将该反应混合物加热回流过夜。减压除去有机溶剂并将水层用二氯甲烷萃取。合并的有机层用水洗涤，然后用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。残余物通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(95∶5 to 70∶30)作为流动相，得到反-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-5-氟-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(0.264g，35％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.49(s，9H)，1.97(m，6H)，2.16(s，3H)，2.33(m，5H)，2.53(m，4H)，3.84(s，3H)，4.64(m，1H)，7.60(d，J＝6.78Hz，1H)，7.83(d，J＝11.96Hz，1H)，8.20(s，1H)，8.24(s，1H)。LCMS(Thermoquest AQA single QuadMS，Finnigan HPLC-柱：Genesis，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：30％B/A至95％B/A在4.5分钟内，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，pH4.5)，0.8mL/min.)：MH+＝555.3，Rt＝2.00min。
实施例445
反-3-(4-氨基-2-氟-5-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
在0℃下将三氟乙酸/二氯甲烷的混合物(20∶80，7mL)加入到反-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-5-氟-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(250mg，0.451mmol)的二氯甲烷(4.0mL)溶液中。15分钟后，除去冰浴并将该反应混合物室温下搅拌4小时。再蒸发溶剂并将此残余物溶解于二氯甲烷。加入饱和碳酸氢钠以调节pH至8。分层并将水层用二氯甲烷萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发得到反-3-(4-氨基-2-氟-5-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(179mg，87％)。1H NMR(CDCl3)δ1.56(m，2H)，2.15(m，7H)，2.31(s，3H)，2.51(m，4H)，2.67(m，4H)，3.88(s，3H)，4.16(bs，2H)，4.74(m，1H)，5.64(bs，2H)，6.56(d，J＝10.84Hz，1H)，6.88(d，J＝6.55Hz，1H)，8.33(s，1H)。LCMS(ThermoquestAQA single Quad MS，Finnigan HPLC-柱：Genesis，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：30％B/A至95％B/A在4.5分钟内，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，pH4.5)，0.8mL/min.)：MH+＝455.2，Rt＝0.63min。
实施例446
反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-5-氟-2-甲氧基苯基)-反-2-苯基-1-环丙烷甲酰胺
在0℃下将存在于二氯甲烷(0.3mL)中的反-2-苯基-1-环丙烷羰基氯(32mg，0.176mmol)加入到反-3-(4-氨基-2-氟-5-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(80mg，0.176mmol)的吡啶(1.5mL)溶液中。5分钟后，除去冰水浴并将该反应混合物室温下搅拌3小时。再加入反-2-苯基-1-环丙烷羰基氯(32mg，0.176mmol)以保证此反应进行完全。蒸发溶剂并将此残余物通过急骤柱色谱纯化得到反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-5-氟-2-甲氧基苯基)-2-苯基-1-环丙烷甲酰胺(93mg，88％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.35(m，1H)，1.50(m，3H)，1.98(m，6H)，2.19(s，3H)，2.37-2.68(m，11H)，3.87(s，3H)，4.64(m，1H)，7.09(m，1H)，7.21(m，3H)，7.31(m，2H)，8.21(m，2H)，9.82(m，1H)。LCMS(ThermoquestAQA single Quad MS，Finnigan HPLC-柱：Genesis，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：30％B/A至95％B/A在4.5分钟内，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，pH4.5)，0.8mL/min.)：MH+＝599.3，Rt＝1.97min。
实施例447
N-{4-[4-氨基-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}氨基甲酸叔丁基酯
a)3-碘-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将3-碘-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.5g，1.45mmol)、甲醛(30％在水中，0.16mL，1.60mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.43g，2.03mmol)在二氯乙烷(5mL)中混合。4小时后，加入饱和碳酸氢钠，接着加入氢氧化钠(1.0N)以使pH为10。水层用二氯甲烷萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发得到3-碘-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.275g，53％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.85(m，2H)，2.09(m，4H)，2.22(s，3H)，2.88(m，2H)，4.75(m，1H)，8.19(s，1H)，8.32(s，1H)。
b)N-{4-[4-氨基-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶3-基]-2-甲氧基苯基}氨基甲酸叔丁基酯
将3-碘-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(270mg，0.754mmol)、N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(290mg，0.829mmol)、四(三苯基膦)钯(52mg，0.045mmol)和碳酸钠(192mg，1.81mmol)与乙二醇二甲醚(8mL)和水(4mL)混合。将该反应混合物加热回流过夜。减压除去有机溶剂并将水层用二氯甲烷萃取。合并的有机层用水洗涤，然后用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。残余物通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(90∶10 to 70∶30)作为流动相，得到N-{4-[4-氨基-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}氨基甲酸叔丁基酯(250mg，73％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.48(s，9H)，1.88(m，2H)，2.10(m，2H)，2.24(m，5H)，2.92(m，2H)，3.69(s，3H)，4.64(m，1H)，7.21(m，2H)，7.91(d，J＝8.16Hz，1H)，8.04(s，1H)，8.23(s，1H)。LCMS(Thermoquest AQAsingle Quad MS，Finnigan HPLC-柱：Genesis，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：30％B/A至95％B/A在4.5分钟内，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，pH4.5)，0.8mL/min.)：MH+＝454.2，Rt＝1.67min。
实施例448
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3R)-3-苯基丁酰胺三马来酸盐
(3R)-3-苯基丁酰基氯
将R-3-苯基丁酸(0.755g，4.6mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液用草酰氯(0.700g，5.52mmol)和1滴二甲基甲酰胺处理。将该反应混合物在室温、氮气氛下摇动15小时。该反应混合物摇动15小时。减压除去溶剂并高真空下干燥，得到定量的(3R)-3-苯基丁酰基氯。此油状物直接用于以下的反应。
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3R)-3-苯基丁酰胺三马来酸盐
将3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.500g，1.15mmol)的吡啶(8mL)溶液，在-5℃下用(3R)-3-苯基丁酰基氯(0.420g，2.3mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液处理。将该反应混合物在-5℃下搅拌20分钟，然后除去干冰/丙酮浴并在室温、氮气氛下搅拌。将(3R)-3-苯基丁酰基氯(0.210g，1.15mmol)加入到该反应混合物中并搅拌2小时。加入氢氧化钠(1N)溶液(10mL)并搅拌过夜。减压除去有机溶剂，并加入二氯甲烷(20mL)。分层，并将水层用二氯甲烷(125mL)萃取。合并的有机层用水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并减压除去溶剂。将N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3R)-3-苯基丁酰胺在硅胶上通过急骤色谱纯化，用存在于二氯甲烷的15％(含2％氢氧化铵的甲醇)(10min)、存在于二氯甲烷的20％(含2％氢氧化铵的甲醇)(15min)、存在于二氯甲烷的50％(含2％氢氧化铵的甲醇)(7min)洗脱，得到0.378g(57％)纯N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3R)-3-苯基丁酰胺。将N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3R)-3-苯基丁酰胺(0.378g，0.649mmol)的乙酸乙酯温溶液用马来酸(0.226g，1.95mmol)的乙酸乙酯温溶液处理。在氮气氛下过滤此沉淀并冻干得到N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3R)-3-苯基丁酰胺三马来酸盐。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.200(s，1H)，8.263(s，1H)，8.1747-8.1543(d，1H，J＝8.16Hz)，7.312-7.282(m，4H)，7.235-7.232(s，1H)，7.211-7.168(m，2H)，6.114(s，6H)，5.061(m，1H)，3.890(s，3H)，3.301(m，4H)，2.997(m，2H)，2.783-2.741(m，6H)，2.541(m，8H)，2.261-2.185(m，4H)，1.879(m，2H)；HPLC Perkin ElmerPecosphere C18，3μM，33×4.6，3.5ml/min 100-100％50mM醋酸铵至乙腈，在4.5分钟内，C36H44N6O3(581.2)，95％。LCMS(PerkinElmer，Pecosphere C18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸铵水溶液至100％乙腈，在5分钟内，3.0至3.5mil/min)Rt 2.64min(100％)。
实施例449
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-苯并[b]呋喃-2-甲酰胺三马来酸盐
苯并[b]呋喃-2-羰基氯
将2-苯并呋喃甲酸(0.746g，4.6mmol)在二氯甲烷(3mL)中的悬浮液用草酰氯(0.700g，5.52mmol)和1滴二甲基甲酰胺处理。将该反应混合物摇动15小时。减压除去溶剂并高真空下干燥，得到定量的苯并[b]呋喃-2-羰基氯。此油状物直接用于以下的反应。
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-苯并[b]呋喃-2-甲酰胺三马来酸盐
将3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.500g，1.15mmol)的吡啶(8mL)溶液在-5℃下用苯并[b]呋喃-2-羰基氯(0.415g，2.3mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液处理。将该反应混合物在-5℃下搅拌20分钟，然后除去干冰/丙酮浴并在室温下氮气氛下搅拌。将苯并[b]呋喃-2-羰基氯(0.207g，1.15mmol)加入到该反应混合物并搅拌2小时。加入氢氧化钠(1N)溶液(10mL)并搅拌过夜。减压除去有机溶剂，并加入二氯甲烷(20mL)。分层，并将水层用二氯甲烷(125mL)萃取。合并的有机层用水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并减压除去溶剂。将N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-苯并[b]呋喃-2-甲酰胺在硅胶上通过急骤色谱纯化，用存在于二氯甲烷的15％(含2％氢氧化铵的甲醇)(10min)、存在于二氯甲烷的20％(含2％氢氧化铵的甲醇)(15min)、存在于二氯甲烷的50％(含2％氢氧化铵的甲醇)(7min)洗脱，得到0.143g(21％)纯N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-苯并[b]呋喃-2-甲酰胺。将N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-苯并[b]呋喃-2-甲酰胺(0.143g，0.246mmol)的乙酸乙酯温溶液用马来酸(0.086g，0.739)的乙酸乙酯温溶液处理。在氮气氛下过滤此沉淀并冻干得到N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-苯并[b]呋喃-2-甲酰胺三马来酸盐。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.518(s，1H)，8.282(s，1H)，8.2652-8.2447(d，1H，J＝8.2Hz)，7.849-7.814(m，2H)，7.7813-7.7603(d，1H，J＝8.4Hz)，7.562-7.523(m，1H)，7.418-7.369(m，2H)，7.338-7.313(m，1H)，6.088(s，5H)，5.10-5.00(m，1H)，4.003(s，3H)，3.529(m，4H)，3.314(m，2H)，2.971(m，2H)，2.778(s，3H)，2.497(m，3H)，2.209(m，4H)，1.909(m，2H)；HPLC Perkin ElmerPecosphere C18，3μM，33×4.6，3.5ml/min 100-100％50mM醋酸铵至乙腈，在4.5分钟内，C36H44N6O3(581.2)，95％。LCMS(PerkinElmer，Pecosphere C18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸铵水溶液至100％乙腈，在5分钟内，3.0至3.5mil/min)Rt 2.73min(100％)。
实施例450
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3S)-3-苯基丁酰胺三马来酸盐
(3S)-3-苯基丁酰基氯
将S-3-苯基丁酸(0.755g，4.6mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液用草酰氯(0.700g，5.52mmol)和1滴二甲基甲酰胺处理。将该反应混合物在室温、氮气氛下摇动15小时。该反应混合物摇动15小时。减压除去溶剂并高真空下干燥，得到定量的(3S)-3-苯基丁酰基氯。此油状物直接用于以下的反应。
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3S)-3-苯基丁酰胺三马来酸盐
将3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.500g，1.15mmol)的吡啶(8mL)溶液，在-5℃下用(3S)-3-苯基丁酰基氯(0.420g，2.3mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液处理。将该反应混合物在-5℃下搅拌20分钟，然后除去干冰/丙酮浴并在室温、氮气氛下搅拌。将(3S)-3-苯基丁酰基氯(0.210g，1.15mmol)加入到该反应混合物并搅拌2小时。加入氢氧化钠(1N)溶液(10mL)并搅拌过夜。减压除去有机溶剂，并加入二氯甲烷(20mL)。分层，并将水层用二氯甲烷(125mL)萃取。合并的有机层用水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并减压除去溶剂。将N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3S)-3-苯基丁酰胺在硅胶上通过急骤色谱纯化，用存在于二氯甲烷的15％(含2％氢氧化铵的甲醇)(10min)、存在于二氯甲烷的20％(含2％氢氧化铵的甲醇)(15min)、存在于二氯甲烷的50％(含2％氢氧化铵的甲醇)(7min)洗脱，得到0.455g(68％)纯N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3S)-3-苯基丁酰胺。将N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3S)-3-苯基丁酰胺(0.455g，0.782mmol)的乙酸乙酯温溶液用马来酸(0.272g，2.35)的乙酸乙酯的温溶液处理。在氮气氛下过滤此沉淀并冻干得到N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3S)-3-苯基丁酰胺三马来酸盐。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.199(s，1H)，8.261(s，1H)，8.1733-8.1528(d，1H，J＝8.2Hz)，7.312-7.282(m，4H)，7.236-7.232(m，1H)，7.211-7.168(m，2H)，6.094(s，6H)，5.046(m，1H)，3.890(s，3H)，3.534(m，4H)，2.994(m，2H)，2.784-2.740(m，6H)，2.506-2.470(m，8H)，2.442-2.200(m，4H)，1.855(m，2H)；HPLC Perkin ElmerPecospher C18，3μM，33×4.6，3.5ml/min 100-100％50mM醋酸铵至乙腈，在4.5分钟内，C36H44N6O3(581.2)，95％。LCMS(PerkinElmer，Pecosphere C18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸铵水溶液至100％乙腈，在5分钟内，3.0至3.5mil/min)Rt 2.64min(100％)。
实施例451
N-(4-{4-氨基-1-[4-硝基苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯
4-氨基-1-[4-硝基苯基]-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶
将3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.00g，7.66mmol)在二甲基甲酰胺(40mL)中的悬浮液，用碳酸铯(3.74g，11.49mmol)和对氟硝基苯(1.08g，7.66mmol)处理。将该反应混合物在80℃下氮气氛下搅拌5小时。将此反应混合物加入到冰中。滤出沉淀并用水洗涤。将产物4-氨基-1-[4-硝基苯基]-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶冻干过夜，得到2.55g(87％)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)：δ8.4952-8.4720(m，2H)，8.4142-8.3654(m，3H)；LCMS(PerkinElmer，Pecosphere C18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸铵水溶液至100％乙腈，在5分钟内，3.0至3.5mil/min)tR＝3.73min(100％)M+380.6。
N-(4-{4-氨基-1-[4-硝基苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯
将4-氨基-1-[4-硝基苯基]-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(0.500g，1.31mmol)在二甲基甲酰胺(8mL)中的悬浮液，用N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(0.915g，2.62mmol)、四(三苯基膦)钯(0.091g，0.06mmol)及碳酸钠(0.333g，3.14mmol)的水(4mL)溶液处理。将该反应混合物在85℃下在氮气氛下搅拌26小时。将水加入到此反应混合物中。过滤此沉淀并用水洗涤。将此固体用乙醚研磨得到0.431g(63％)的N-(4-{4-氨基-1-[4-硝基苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.6862-8.6634(d，2H，J＝9.12Hz)，8.4897-8.4423(m，3H)，8.1117(s，1H)，8.0074-7.9872(d，1H，J＝8.08Hz)，7.3743-7.3293(m，2H)，3.9189(s，3H)，1.4959(s，9H)；LCMS(Perkin Elmer，PecosphereC18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸铵水溶液至100％乙腈，在5分钟内，3.0至3.5mil/min)tR＝4.38min M+478.1。
实施例452
4-氨基-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-硝基苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶
将N-(4-{4-氨基-1-[4-硝基苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(0.386g，0.808mmol)在二氯甲烷(8mL)中的悬浮液，在0℃下用三氟乙酸(1.6mL)处理。该反应混合物在0℃下搅拌20分钟，然后除去冰浴，在室温、氮气氛下搅拌。将该反应混合物搅拌18小时。减压除去溶剂。将二氯甲烷(15mL)和氢氧化钠1N溶液加入到此油状物残余物。将所形成的沉淀过滤并冻干过夜得到0.286g(94％)的4-氨基-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-硝基苯基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.7826-8.759(m，2H)，8.4892-8.4296(m，3H)，7.1861-7.1338(m，2H)，6.8320-6.8121(d，1H，J＝7.96Hz)，5.2225(s，2H)，3.8672(s，3H)；LCMS(Perkin Elmer，Pecosphere C18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸铵水溶液至100％乙腈，在5分钟内，3.0至3.5mil/min)tR＝3.48min M+377.6。
实施例453
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-1-甲基-1H-2-吲哚基甲酰胺二马来酸盐
1-甲基-1H-2-吲哚基羰基氯
将1-甲基吲哚基-2-甲酸(0.805g，4.6mmol)在二氯甲烷(3mL)的悬浮液，用草酰氯(0.700g，5.52mmol)和1滴二甲基甲酰胺处理。将该反应混合物摇动18小时。减压除去溶剂并高真空下干燥，得到定量的1-甲基-1H-2-吲哚基羰基氯。此油状物直接用于以下的反应。
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1-甲基-1H-2-吲哚基甲酰胺二马来酸盐
将3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.500g，1.15mmol)的吡啶(8mL)溶液，在-5℃下用1-甲基-1H-2-吲哚基羰基氯(0.445g，2.3mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液处理。将该反应混合物在-5℃下搅拌20分钟，然后除去干冰/丙酮浴并在室温下氮气氛下搅拌。将1-甲基-1H-2-吲哚基羰基氯(0.221g，1.15mmol)加入到该反应混合物并搅拌2小时。加入氢氧化钠(1N)溶液(10mL)并搅拌过夜。减压除去有机溶剂，并加入二氯甲烷(20mL)。分层，并将水层用二氯甲烷(125mL)萃取。合并的有机层用水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并减压除去溶剂。将N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1-甲基-1H-2-吲哚基甲酰胺在硅胶上通过急骤色谱纯化，用存在于二氯甲烷的15％(含2％氢氧化铵的甲醇)(10min)、存在于二氯甲烷的20％(含2％氢氧化铵的甲醇)(15min)、存在于二氯甲烷的50％(含2％氢氧化铵的甲醇)(7min)洗脱，得到0.463g(68％)纯N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1-甲基-1H-2-吲哚基甲酰胺。将N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1-甲基-1H-2-吲哚基甲酰胺(0.463g，0.781mmol)的乙酸乙酯温溶液用马来酸(0.272，2.34mmol)的乙酸乙酯温溶液处理。在氮气氛下过滤此沉淀，并冻干得到N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1-甲基-1H-2-吲哚基甲酰胺二马来酸盐。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.4495(s，1H)，8.2848(s，1H)，8.1505-8.1301(d，1H，J＝8.16Hz)，7.7232-7.7034(d，1H，J＝7.92Hz)，7.6054-7.5844(d，1H，J＝8.4Hz)，7.3583-7.3012(m，4H)，7.1778-7.1406(m，1H)，6.0804(s，4H)，5.10-5.00(m，1H)，4.0403(s，3H)，3.9614(s，3H)，3.5336(m，4H)，3.1879(m，2H)，2.9937(m，2H)，2.7836(s，3H)，2.4979(m，3H)，2.2157(m，4H)，1.8513(m，2H)；HPLC Perkin Elmer Pecosphere C18，3μM，33×4.6，3.5ml/min 100-100％50mM醋酸铵至乙腈，在4.5分钟内，C36H44N6O3(581.2)，95％。LCMS(Perkin Elmer，PecosphereC18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸铵水溶液至100％乙腈，在5分钟内，3.0至3.5mil/min)Rt 2.76min(100％)。
实施例454
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1H-2-吲哚基甲酰胺二马来酸盐
1H-2-吲哚基羰基氯
将吲哚基-2-甲酸(0.742g，4.6mmol)在二氯甲烷(3mL)的悬浮液，用草酰氯(0.700g，5.52mmol)和1滴二甲基甲酰胺处理。将该反应混合物摇动18小时。减压除去溶剂并高真空下干燥，得到定量的1H-2-吲哚基羰基氯。此油状物直接用于以下的反应。
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1H-2-吲哚基甲酰胺二马来酸盐
将3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.500g，1.15mmol)的吡啶(8mL)溶液，在-5℃下用1H-2-吲哚基羰基氯(0.413g，2.3mmol)的二氯甲烷(1mL)溶液处理。将该反应混合物在-5℃下搅拌20分钟。除去干冰/丙酮浴并将该反应混合物在氮气氛下搅拌18小时。加入1H-2-吲哚基羰基氯(0.207g，1.15mmol)并再搅拌2小时。加入氢氧化钠(1N)溶液(10mL)并搅拌30分钟。减压除去有机溶剂，并加入二氯甲烷(25mL)。分层，并将水层用二氯甲烷萃取。合并的有机层用水和盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤，并在减压下得到粗品N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1H-2-吲哚基甲酰胺。将N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1H-2-吲哚基甲酰胺在硅胶上通过急骤色谱纯化，用存在于二氯甲烷的15％(含2％氢氧化铵的甲醇)洗脱仍得到粗品。第二此过柱用梯度10％(含2％氢氧化铵的甲醇)至50％(含2％氢氧化铵的甲醇)洗脱，得到0.139g(21％)纯N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1H-2-吲哚基甲酰胺。将N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1H-2-吲哚基甲酰胺(0.139g，0.24mmol)在温乙酸乙酯中用马来酸(0.083g，0.719mmol)的乙酸乙酯温溶液处理。在氮气氛下过滤所形成的沉淀得到0.166g的N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1H-2-吲哚基甲酰胺二马来酸盐。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ11.83(s，1H)，9.442(s，1H)，8.283(s，1H)，8.154-8.134(d，1H，J＝8.12Hz)，7.694-7.674(d，1H，J＝8.04Hz)，7.498-7.477(d，1H，J＝8.20Hz)，7.407-7.402(m，1H)，7.352-7.325(m，2H)，7.267-7.229(m，1H)，7.112-7.074(m，1H)，6.078(s，4H)，5.10-5.00(m，1H)，3.974(s，3H)，3.525(m，4H)，3.178(m，2H)，2.975(m，2H)，2.771(s，3H)，2.457(s，3H)，2.208(m，4H)，1.909(m，2H)；HPLC Perkin ElmerPecosphere C18，3μM，33×4.6，3.5ml/min 100-100％50mM醋酸铵至乙腈，在4.5分钟内，C36H44N6O3(581.2)，95％。LCMS(PerkinElmer，Pecosphere C18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸铵水溶液至100％乙腈，在5分钟内，3.0至3.5mil/min)Rt 2.67min(100％)。
实施例455
3-苯基-1-三苯甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
3-碘-1-三苯甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(3.0g，11.5mmol)在二甲基甲酰胺(50mL)中的悬浮液用碳酸铯(5.62g，17.25mmol)和三苯基甲基氯(3.85g，13.8mmol)处理。将该反应混合物在70℃下在氮气氛下搅拌22.5小时。将碳酸铯(3.75g，11.5mmol)和三苯基甲基氯(3.2g，11.5mmol)加入到该反应混合物并搅拌6.5小时。该反应混合物加入到冰水。过滤此沉淀并用水洗涤。将产物3-碘-1-三苯甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺冻干过夜。所得固体用乙酸乙酯研磨得到3.05g(53％)的3-碘-1-三苯甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.3190-7.1106(m，16H)；TLC(BakerPre-coated Hard Layer硅胶TLC板，Si250F254，30％乙酸乙酯在庚烷中)Rf＝0.33。
3-苯基-1-三苯甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将3-碘-1-三苯甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(1.0g，1.99mmol)的二甲基甲酰胺(20mL)溶液，用苯基羟基代硼酸(0.485g，3.8mmol)、四(三苯基膦)钯(0.138g，0.119mmol)及碳酸钠(0.506g，4.78mmol)的水(10mL)溶液处理。将该反应混合物在80℃下在氮气氛下搅拌18.5小时。将该反应混合物冷却至室温并加入水(15mL)。过滤此沉淀并用水洗涤。粗品固体用乙醚(30mL)研磨。将所得固体冻干过夜得到0.407g(45％)的3-苯基-1-三苯甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.9416(s，1H)，7.6190-7.6011(m，2H)，7.5369-7.4493(m，3H)，7.3995-7.2248(m，15H)；HPLC Waters 2690 Alliance HPLC(Symmetry Shield RP18 3.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵，在15分钟内，0.5mL/min)Rt＝11.813min(97％)。
实施例456
N1-{4-[4-氨基-1-(4-氧代环己基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-(3R)-3-苯基丁酰胺
在-10℃下将存在于二氯甲烷(10mL)的(3R)-3-苯基丁酰基氯(2.22g，12.18mmol)，加入到4-[4-氨基-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环己酮(2.86g，8.12mmol)的吡啶(50mL)溶液中。15分钟后，除去冰水浴并将该反应混合物室温下搅拌过夜。加入氢氧化钠(1.0N，15mL)并蒸发有机溶剂。将此含水残余物用二氯甲烷萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。残余物通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(95∶5)作为流动相，得到N1-{4-[4-氨基-1-(4-氧代环己基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-(3R)-3-苯基丁酰胺(3.11g，77％)。1H NMR(CDCl3)δ1.40(d，J＝6.97Hz，3H)，2.04(m，1H)，2.59-2.78(m，9H)，3.40(m，1H)，3.98(s，3H)，5.28(m，1H)，5.70(bs，2H)，7.15-7.35(m，7H)，7.66(s，1H)，8.38(s，1H)，8.51(d，J＝8.18，1H)。HPLC(Waters Alliance-柱：WatersSymmetryShield，RP18，3.5μm，2.1×50mm。洗脱剂：5％B/A至95％B/Ain 9.0min，(B：乙腈，A：100mM醋酸铵缓冲液，pH4.5)，0.5mL/min.)：Rt＝6.273min。
实施例457
{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]苯基}甲醇
4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]苯甲醛
将3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.0g，6.59mmol)与4-氟苯甲醛(1.06mL，9.89mmol)、碳酸铯(4.30g，13.19mmol)在DMF(6mL)中混合。将该反应混合物在86℃下加热过夜。冷却至室温后，将该反应混合物倒入到冰水中。过滤收集固体得到4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]苯甲醛(2.46g，92％)。1H NMR(CDCl3)δ7.19(m，5H)，7.46(m，2H)，7.78(d，J＝8.64Hz，2H)，8.10(d，J＝8.70Hz，2H)，8.44(s，1H)，8.59(d，J＝8.70Hz，2H)，10.03(s，1H)。
b){4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]苯基}甲醇
将硼氢化钠(19mg，0.491mmol)加入到4-[4氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]苯甲醛(100mg，0.245mmol)的甲醇(2mL)溶液中。16小时后，加入THF(1mL)和硼氢化钠(19mg，0.491mmol)。5小时后，除去溶剂并加入水。水层用二氯甲烷萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。残余物通过急骤柱色谱纯化，用乙酸乙酯/二氯甲烷(80∶20至100∶0)作为流动相，得到{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]苯基}甲醇(36mg，36％)。1H NMR(DMSO-d6)δ4.56(s，2H)，5.27(bs，1H)，7.16(m，5H)，7.47(m，4H)，7.76(d，J＝8.64Hz，2H)，8.18(d，J＝8.52，2H)，8.37(s，1H)。LCMS(Thermoquest AQA singleQuad MS，Finnigan HPLC-柱：Genesis，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：30％B/A至95％B/A在4.5分钟内，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，pH4.5)，0.8mL/min.)：MH+＝410.1，Rt＝2.43min。
实施例458
1-{4-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基}-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将三乙酰氧基硼氢化钠(67mg，0.319mmol)加入到4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]苯甲醛(100mg，0.245mmol)、4-甲基哌嗪(37mg，0.369mmol)、冰醋酸(35mg，0.589mmol)在二氯乙烷(4mL)中的混合物中。室温下搅拌过夜后，再加入三乙酰氧基硼氢化钠(67mg，0.319mmol)并将该反应混合物搅拌过夜。加入水(2mL)，并接着加入碳酸氢钠(250mg)。剧烈搅拌1小时后，分层并将水层用二氯甲烷萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。残余物通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(97∶3至80∶20)作为流动相，得到1-{4-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基}-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(25mg，21％)。1H NMR(DMSO-d6)δ2.30(s，3H)，2.48(bm，8H)，3.56(s，3H)，5.75(bs，2H)，7.11(d，J＝8.50，2H)，7.18(m，3H)，7.40(m，2H)，7.48(d，J＝8.50Hz，2H)，7.29(d，J＝8.63Hz，2H)，8.12(d，J＝8.50Hz，2H)，8.47(s，1H)。LCMS(Thermoquest AQA single Quad MS，Finnigan HPLC柱：Genesis，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：30％B/A至95％B/A在4.5分钟内，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，pH4.5)，0.8mL/min.)：MH+＝492.2，Rt＝2.97min。
实施例459
N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-5-氟-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯
c)1-溴-2-氟-5-甲氧基-4-硝基苯
在0℃下将叔丁醇钾(1.0N在THF中，38mL，38mmol)加入到存在于THF(30mL)的甲醇(1.54mL，38.0mmol)。30分钟后，在-78℃下将絮状溶液通过导管加入到1-溴-2，5-二氟-4-硝基苯(9.04g，38.0mmol)的THF(27mL)溶液中。30分钟后，除去冷却浴并将该反应混合物升温至0℃。加入水(250mL)，并在10分钟后，除去有机溶剂。过滤收集固体得到1-溴-2-氟-5-甲氧基-4-硝基苯(9.28g，98％)。1H NMR(CDCl3)δ3.97(s，3H)，7.30(d，J＝5.48Hz，2H)，7.71(d，J＝7.58Hz，2H)。
d)4-溴-5-氟-2-甲氧基苯胺
在80℃下分三批将亚硫酸氢钠(14.7g，84.4mmol)加入到1-溴-2-氟-5-甲氧基-4-硝基苯(9.28g，37.12mmol)在乙醇(180mL)和水(130mL)的溶液中。5小时后，除去有机溶剂并通过过滤收集水层中的固体。将此固体进一步用庚烷/乙酸乙酯(3∶2，400mL)洗涤。将滤液蒸发得到4-溴-5-氟-2-甲氧基苯胺(3.29g，40％)。1H NMR(DMSO-d6)δ3.75(s，3H)，5.22(s，2H)，6.56(d，J＝10.68Hz，2H)，6.94(d，J＝6.57Hz，2H)。
c)N-(4-溴-5-氟-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯
将二-叔丁基二碳酸酯(3.42g，15.70mmol)与4-溴-5氟-2-甲氧基苯胺(3.29g，14.95mmol)在THF(30mL)中混合。将该反应混合物在65℃下加热3天，每天加入二碳酸二叔丁基酯(3.42g，15.70mmol)。除去溶剂后，残余物通过急骤柱色谱纯化，用庚烷/乙酸乙酯(95∶5至85∶15)作为流动相，得到所需产物N-(4-溴-5-氟-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯和二碳酸二叔丁基酯的混合物(10.4g)。在0℃下将氢氧化钠(50％溶液，2.0mL)加入到存在于甲醇(30mL)的此混合物中，并将该反应混合物室温下搅拌过夜。除去溶剂后，加入水并将水层用庚烷萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发得到N-(4-溴-5-氟-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(4.24g，89％)。1H NMR(CDCl3)δ1.52(s，9H)，3.85(s，3H)，6.93(d，J＝6.10Hz，1H)，7.06(s，1H)，8.01(d，J＝10.4Hz，1H)。
d)N-[5-氟-2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯
将N-(4-溴-5-氟-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(4.24g，13.26mmol)、乙硼烷频哪醇酯(4.04g，15.91mmol)、醋酸钾(3.90g，39.78mmol)和[1，1′-双(二苯基膦基)-二茂铁)二氯钯(II)与二氯甲烷的复合物(0.32g，0.40mmol)在DMF(75mL)中在85℃加热过夜。加入乙硼烷频哪醇酯(2.02g，7.96mmol)和[1，1’-双(二苯基膦基)-二茂铁)二氯钯(II)与二氯甲烷的复合物(0.32g，0.40mmol)，并再继续加热5小时。除去溶剂后，将此黑色残余物溶解于二氯甲烷，并通过硅藻土过滤。粗品混合物通过急骤柱色谱纯化，用庚烷/乙酸乙酯(95∶5至85∶15)作为流动相，得到N-[5-氟-2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯和乙硼烷频哪醇酯的混合物(1∶1，4.23g)，其不经纯化直接用于下一步反应。
e)反-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-5-氟-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯
将反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.60g，1.36mmol)、N-[5-氟-2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸酯(1.0g，2.72mmol)、四(三苯基膦)钯(0.094g，0.082mmol)和碳酸钠(0.35g，3.27mmol)与乙二醇二甲醚(14mL)和水(7mL)混合。将该反应混合物加热回流过夜。减压除去有机溶剂并将水层用二氯甲烷萃取。合并的有机层用水洗涤，然后用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。残余物通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(95∶5 to 70∶30)作为流动相，得到反-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-5-氟-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(0.264g，35％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.49(s，9H)，1.97(m，6H)，2.16(s，3H)，2.33(m，5H)，2.53(m，4H)，3.84(s，3H)，4.64(m，1H)，7.60(d，J＝6.78Hz，1H)，7.83(d，J＝11.96Hz，1H)，8.20(s，1H)，8.24(s，1H)。LCMS(Thermoquest AQA single Quad MS，Finnigan HPLC-柱：Genesis，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：30％B/A至95％B/A在4.5分钟内，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，pH4.5)，0.8mL/min.)：MH+＝555.3，Rt＝2.00min。
实施例460
反-3-(4-氨基-2-氟-5-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
在0℃下将三氟乙酸/二氯甲烷的混合物(20∶80，7mL)加入到反-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-5-氟-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(250mg，0.451mmol)的二氯甲烷(4.0mL)溶液中。15分钟后，除去冰浴并将该反应混合物室温下搅拌4小时。然后蒸发溶剂并将此残余物溶解于二氯甲烷。加入饱和碳酸氢钠以调节pH至8。分层并将水层用二氯甲烷萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发得到反-3-(4-氨基-2-氟-5-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(179mg，87％)。1H NMR(CDCl3)δ1.56(m，2H)，2.15(m，7H)，2.31(s，3H)，2.51(m，4H)，2.67(m，4H)，3.88(s，3H)，4.16(bs，2H)，4.74(m，1H)，5.64(bs，2H)，6.56(d，J＝10.84Hz，1H)，6.88(d，J＝6.55Hz，1H)，8.33(s，1H)。LCMS(ThermoquestAQA single Quad MS，Finnigan HPLC-柱：Genesis，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：30％B/A至95％B/A在4.5分钟内，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，pH4.5)，0.8mL/min.)：MH+＝455.2，Rt＝0.63min。
实施例461
反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-5-氟-2-甲氧基苯基)-反-2-苯基-1-环丙烷甲酰胺
在0℃下将存在于二氯甲烷(0.3mL)中的反-2-苯基-1-环丙基羰基氯(32mg，0.176mmol)加入到反-3-(4-氨基-2-氟-5-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(80mg，0.176mmol)的吡啶(1.5mL)溶液中。5分钟后，除去冰水浴，并将此反应混合物室温下搅拌3小时。再加入反-2-苯基-1-环丙基羰基氯(32mg，0.176mmol)以保证反应进行完全。蒸发溶剂，并将此残余物通过急骤柱色谱纯化，得到反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-5-氟-2-甲氧基苯基)-2-苯基-1-环丙烷甲酰胺(93mg，88％)。1H NMR(DMSO-d6)：δ1.35(m，1H)，1.50(m，3H)，1.98(m，6H)，2.19(s，3H)，2.37-2.68(m，11H)，3.87(s，3H)，4.64(m，1H)，7.09(m，1H)，7.21(m，3H)，7.31(m，2H)，8.21(m，2H)，9.82(m，1H)。LCMS(ThermoquestAQA single Quad MS，Finnigan HPLC-柱：Genesis，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：30％B/A至95％B/A，在4.5分钟内，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，pH4.5)，0.8mL/min.)：MH+＝599.3，Rt＝1.97min。
实施例462
N-{4-[4-氨基-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}氨基甲酸叔丁基酯
b)3-碘-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将3-碘-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.5g，1.45mmol)、甲醛(30％在水中，0.16mL，1.60mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.43g，2.03mmol)在二氯乙烷(5mL)中混合。4小时后，加入饱和碳酸氢钠，接着加入氢氧化钠(1.0N)，使pH至10。水层用二氯甲烷萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发得到3-碘-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.275g，53％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.85(m，2H)，2.09(m，4H)，2.22(s，3H)，2.88(m，2H)，4.75(m，1H)，8.19(s，1H)，8.32(s，1H)。
b)N-{4-[4-氨基-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶3-基]-2-甲氧基苯基}氨基甲酸叔丁基酯
将3-碘-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(270mg，0.754mmol)、N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(290mg，0.829mmol)、四(三苯基膦)钯(52mg，0.045mmol)和碳酸钠(192mg，1.81mmol)与乙二醇二甲醚(8mL)和水(4mL)混合。将该反应混合物加热回流过夜。减压除去有机溶剂并将水层用二氯甲烷萃取。合并的有机层用水洗涤，然后用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并蒸发。残余物通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(90∶10至70∶30)作为流动相，得到N-{4-[4-氨基-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}氨基甲酸叔丁基酯(250mg，73％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.48(s，9H)，1.88(m，2H)，2.10(m，2H)，2.24(m，5H)，2.92(m，2H)，3.69(s，3H)，4.64(m，1H)，7.21(m，2H)，7.91(d，J＝8.16Hz，1H)，8.04(s，1H)，8.23(s，1H)。LCMS(ThermoquestAQA single Quad MS，Finnigan HPLC-柱：Genesis，C18，3μm，33×4.6mm。洗脱剂：30％B/A至95％B/A在4.5分钟内，(B：乙腈，A：50mM醋酸铵缓冲液，pH4.5)，0.8mL/min.)：MH+＝454.2，Rt＝1.67min。
实施例463
反-3-{4-[(2-氯苄基)氨基]-3-甲氧基苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
步骤A(反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺的还原烷基化的总方法)
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.46(d，1H)，7.30(m，3H)，7.08(s，1H)，7.01(d，1H)，6.42(d，1H)，5.96(t，1H)，4.59(m，1H)，4.45(d，2H)，3.90(s，3H)，2.6-2.2(br，9H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 15.22min。
MS：MH+561。
实施例464
反-3-{3-甲氧基-4-[(1，3-噻唑-2-基甲基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
步骤A
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.76(d，1H)，7.59(d，1H)，7.08(s，1H)，7.02(d，1H)，6.59(d，1H)，6.27(t，1H)，4.68(d，2H)，4.61(m，1H)，3.89(s，3H)，2.6-2.2(br，9H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 11.09min。
MS：MH+534。
实施例465
反-3-(3-甲氧基-4-[(3-甲基-1H-4-吡唑基)甲基]氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
步骤A
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.19(s，1H)，7.47(s，1H)，7.06(m，3H)，6.74(d，1H)，5.08(t，1H)，4.61(m，1H)，4.13(d，2H)，3.84(s，3H)，2.6-2.2(br，9H)，2.25(s，3H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 10.65min。
MS：MH+531。
实施例466
反-3-{3-甲氧基-4-[(2-噻吩基甲基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸盐
步骤A
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.19(s，1H)，7.36(d，1H)，7.01(m，4H)，6.71(d，1H)，5.87(t，1H)，4.61(m，3H)，3.86(s，3H)，2.6-2.2(br，9H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，3H)，1.46(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/mi n)Rt 13.61min。
MS：MH+533。
实施例467
反-3-(3-甲氧基-4-[(5-甲基-2-噻吩基)甲基]氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸盐
步骤A
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.19(s，1H)，7.04(m，2H)，6.84(d，1H)，6.70(d，1H)，6.62(d，1H)，5.77(t，1H)，4.61(m，1H)，4.47(d，2H)，3.86(s，3H)，2.6-2.2(br，9H)，2.37(s，3H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，3H)，1.46(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.66min。
MS：MH+547。
实施例468
反-3-(4-[(5-氯-2-噻吩基)甲基]氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸盐
步骤A
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.19(s，1H)，7.04(m，2H)，6.95(s，1H)，6.69(d，1H)，5.99(t，1H)，4.61(m，1H)，4.50(d，2H)，3.86(s，3H)，2.6-2.2(br，9H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，3H)，1.46(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 15.04min。
MS：MH+567。
实施例469
反-3-(3-甲氧基-4-[(2-甲基-1，3-噻唑-4-基)甲基]氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
a)2-甲基-1，3-噻唑-4-甲醛
向4-氯甲基-2-甲基-1，3-噻唑(1.91g，0.0129mol)的甲苯(50mL)溶液中，加入N-甲基吗啉-N-氧化物(4.55g，0.0389mol)并将该反应混合物在90℃下加热4小时。加入N-甲基吗啉-N-氧化物(1.60g，0.0137mol)并继续再加热1.5小时。将此混合物冷却至室温，用水(3×50mL)洗涤并浓缩得到2-甲基-1，3-噻唑-4-甲醛(1.40g，0.011mol)，为棕色液体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.87(s，1H)，8.57(s，1H)，2.72(s，3H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶3)Rf 0.26
b)反-3-(3-甲氧基-4-[(2-甲基-1，3-噻唑-4-基)甲基]氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
步骤A
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.19(s，1H)，7.21(s，1H)，7.06(m，2H)，6.66(d，1H)，5.70(t，1H)，4.60(m，1H)，4.41(d，2H)，3.87(s，3H)，2.64(s，3H)，2.6-2.2(br，9H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt11.71min。
MS：MH+548。
实施例470
反-3-{4-[(1H-7-吲哚基甲基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
步骤C(反-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺的还原烷基化的总方法)
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ11.14(s，1H)，8.18(s，1H)，7.44(d，1H)，7.37(m，3H)，7.12(d，1H)，6.97(t，1H)，6.77(d，2H)，6.55(t，1H)，6.46(m，1H)，4.60(m，3H)，2.6-2.2(br，9H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 13.68min。
MS：MH+536。
实施例471
反-3-{4-[(2-氯-6-氟苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
步骤C
1H NMR(DMS0-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.41(m，4H)，7.29(t，1H)，6.83(d，2H)，6.26(t，1H)，4.61(m，1H)，4.37(d，2H)，2.6-2.2(br，9H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.46min。
MS：MH+549。
实施例472
反-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-3-(4-[(5-甲基-1H-4-吡唑基)甲基]氨基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
步骤C
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.19(s，1H)，7.49(s，1H)，7.35(d，2H)，6.76(d，2H)，6.07(t，1H)，4.59(m，1H)，4.06(d，2H)，2.6-2.2(br，9H)，2.21(s，3H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，在20分钟内，1mL/min)Rt 10.15min。
MS：MH+501。
实施例473
反-3-{4-[(2-氨基苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
a)N-[2-(羟基甲基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯
向二碳酸二叔丁基酯(23.04g，0.106mol)的无水二氯甲烷(150mL)溶液中，在0℃下加入2-氨基苄基醇(10.0g，0.0812mol)并将所得混合物在氮气氛下在室温下搅拌18小时。有机相用饱和碳酸氢钠水溶液(2×250mL)洗涤，用硫酸镁干燥并减压浓缩。残余物在硅胶上通过急骤色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶5)作为流动相，得到N-[2-(羟基甲基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(17.2g，0.077mol)，为无色油状物。
1H NMR(DMS0-d6，400MHz)δ8.52(s，1H)，7.57(d，1H)，7.30(d，1H)，7.22(t，1H)，7.04(t，1H)，5.42(t，1H)，4.51(d，2H)，1.46(s，9H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶3)Rf 0.28
b)N-(2-甲酰基苯基)氨基甲酸叔丁基酯
将吡啶鎓氯铬酸盐在碱性氧化铝中的20％分散液(50g)加入到N-[2-(羟基甲基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(11.0g，0.0493mol)的无水氯仿溶液中并将所得混悬液在氮气氛下室温下搅拌1小时。再加入16g的吡啶鎓氯铬酸盐的碱性氧化铝分散液，并继续搅拌45分钟。此时，再加入15g的吡啶鎓氯铬酸盐在碱性氧化铝中的20％分散液并继续搅拌25分钟。将所得混悬液通过硅胶垫过滤，将此滤液减压浓缩并将此残余物通过急骤色谱在硅胶上纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(2∶98)作为流动相，得到N-(2-甲酰基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(8.67g，0.0392mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.31(s，1H)，9.95(s，1H)，8.18(d，1H)，7.87(d，1H)，7.67(t，1H)，7.24(t，1H)，1.49(s，9H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶5)Rf 0.56
c)反-N-2-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)甲基]苯基氨基甲酸叔丁基酯乙酸盐
步骤C
1HNMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.69(s，1H)，8.18(s，1H)，7.33(m，4H)，7.18(t，1H)，7.12(t，1H)，6.68(d，2H)，6.51(t，1H)，4.58(m，1H)，4.30(d，2H)，2.6-2.2(br，9H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，3H)，1.47(s，9H)，1.46(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.73min。
d)反-3-{4-[(2-氨基苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
在0℃下将反-N-2-[(4-4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基苯氨基)甲基]苯基氨基甲酸叔丁基酯乙酸盐(0.080g，0.000118mol)溶解于二氯甲烷(4mL)，并滴加三氟乙酸(1mL)。将此混合物在室温氮气氛下搅拌1.5小时，减压浓缩并将此残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分钟内10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)得到反-3-{4-[(2-氨基苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐(0.067g，0.000106mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.35(d，2H)，7.09(d，1H)，6.95(t，1H)，6.73(d，2H)，6.66(d，1H)，6.53(d，1H)，6.36(t，1H)，4.97(br，1H)，4.58(m，1H)，4.13(d，2H)，2.6-2.2(br，9H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 11.87min。
MS：MH+512。
实施例474
反-N1-2-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)甲基]苯基乙酰胺二乙酸盐
向反-3-{4-[(2-氨基苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐(0.050g，0.000079mol)的二氯甲烷(3mL)溶液中，在0℃下依次加入N，N-二异丙基乙胺(0.041g，0.000316mol)和乙酸酐(0.011g，0.000103mol)并将所得混合物室温氮气氛下搅拌18小时。将此混合物减压浓缩并将此残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分钟内10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)得到反-N1-2-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)甲基]苯基乙酰胺二乙酸盐(0.010g，0.0000148mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.48(s，1H)，8.18(s，1H)，7.35(m，4H)，7.20(m，1H)，7.13(m，1H)，6.66(d，2H)，6.53(t，1H)，4.58(m，1H)，4.29(d，2H)，2.6-2.2(br，9H)，2.13(s，3H)，2.08(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 10.67min。
MS：MH+554。
实施例475
反-3-[3-氯-4-(2，3-二氢苯并[b]呋喃-3-基氨基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸盐
a)N-(4-溴-2-氯苯基)氨基甲酸叔丁基酯
将4-溴-2-氯苯胺(5.00g，0.0242mol)的四氢呋喃(50mL)溶液与1.0M的双(三甲基甲硅烷基)氨化钠的四氢呋喃溶液(53.2mL，0.0532mol)反应。将此混合物室温下搅拌15分钟。加入二碳酸二叔丁基酯(6.34g，0.0290mol)并将溶液搅拌2小时。真空下除去溶剂，粗品物质在硅胶上通过急骤柱色谱纯化，用庚烷/乙酸乙酯(4∶1)洗脱。真空下除去溶剂得到N-(4-溴-2-氯苯基)氨基甲酸叔丁基酯，为白色固体(4.214g，0.0137mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.75(s，1H)，7.71(d，1H)，7.54(d，1H)，7.50(dd，5H)，1.46(s，9H)；TLC(庚烷/乙酸乙酯4∶1)Rf0.54。
b)N-[2-氯-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯
将N-(4-溴-2-氯苯基)氨基甲酸叔丁基酯(2.10g，0.00685mol)、乙硼烷频哪醇酯(2.09g，0.00822mol)、[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)与二氯甲烷(1∶1)的复合物(0.17g，0.00021mol)和醋酸钾(2.02g，0.02055mol)在N，N-二甲基甲酰胺(50ml)中的混合物，在80℃下在氮气氛下加热6小时。减压除去溶剂。残余物用庚烷(70mL)研磨并将固体通过硅藻土板滤出。真空下除去庚烷得到N-[2-氯-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯，为灰色固体(1.93g，0.00546mol)。
1H NMR(DMSO-d6 400MHz)δ8.65(s，1H)，7.74(d，1H)，7.61(d，1H)，7.56(dd，1H)，1.47(s，9H)，1.29(s，12H)。
c)反式N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氯苯基)氨基甲酸叔丁基酯
将反式3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.20g，0.00498mol)、N-[2-氯-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸酯(1.93g，0.00548mol)、碳酸钠(1.32g，0.01245mol)在1，2-二甲氧基乙烷(50mL)和水(100mL)中的混合物，快速搅拌并加入四(三苯基膦)钯(0)(0.345g，0.00030mol)。将该反应混合物在80℃下搅拌6小时，之后再加入四(三苯基膦)钯(0)(0.345g，0.00030mol)。该反应混合物在80℃下再搅拌16小时。真空下除去溶剂并将此残余物在乙酸乙酯(100mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(200mL)之间分配。进行相分离并将水相用乙酸乙酯(3×75mL)萃取。将合并的有机相用硫酸镁干燥，并真空下除去溶剂。产物在硅胶上通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇/氢氧化铵(90∶10∶0.5)洗脱。真空下除去溶剂得到反式N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氯苯基)氨基甲酸叔丁基酯，为白色固体(1.993g，0.00368mol)：1H NMR(DMSO-d6 400MHz)δ8.76(s，2H)，8.23(s，1H)，7.80(d，1H)，7.68(d，1H)，7.57(dd，1H)，4.58-4.71(m，1H)，2.15(2，3H)，1.89-2.61(m，15H)，1.49(s，9H)，1.40-1.48(m，2H)；
TLC(二氯甲烷/甲醇＝90∶10)Rf 0.13，
MS：MH+541。
d)反式3-(4-氨基-3-氯苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将反式N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氯苯基)氨基甲酸叔丁基酯(1.993g，0.00368mol)加入到20％三氟乙酸的二氯甲烷溶液中。将此混合物室温下搅拌2小时。真空下除去溶剂并将此残余物溶解于二氯甲烷(50mL)，并用1.0M氢氧化钠水溶液(2×25mL)洗涤。将此有机层用硫酸镁干燥并真空下除去溶剂得到反式3-(4-氨基-3-氯苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(1.564g，0.00355mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6 400MHz)δ8.20(s，1H)，7.45(d，1H)，7.31(dd，1H)，6.92(d，1H)，4.57-4.63(m，1H)，2.23-2.55(m，9H)，2.14(s，3H)，1.89-2.08(m，6H)，1.38-1.52(m，2H)；
TLC(二氯甲烷/甲醇＝90∶10)Rf 0.08，
MS：MH+441。
e)反-3-[3-氯-4-(2，3-二氢苯并[b]呋喃-3-基氨基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸盐
将水杨醛(0.033g，0.000274mol)和反-3-(4-氨基-3-氯苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.115g，0.000261mol)在无水乙醇中混合并在室温下搅拌48小时。将该反应混合物经减压浓缩并将此残余物干燥过夜，得到反-2-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氯苯基)亚氨基]甲基苯酚，其不经进一步纯化直接使用。将氧化锍三甲基碘(0.110g，0.0005mol)溶解于无水二甲基亚砜(2mL)，并立即加入氢化钠在石蜡中的60％分散液(0.02g，0005mol)。10分钟后，加入反-2-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氯苯基)亚氨基]甲基苯酚的无水二甲基亚砜(2 mL)溶液，并将所得混合物室温氮气氛下搅拌2.5小时。将此溶液倒入到冰冷的水(50mL)中并用二氯甲烷(2×40mL)萃取。合并的有机萃取物用硫酸镁干燥并减压浓缩。残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分钟内10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)得到反-3-[3-氯-4-(2，3-二氢苯并[b]呋喃-3-基氨基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸盐(0.044g，0.000071mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.21(s，1H)，7.55(s，1H)，7.45(d，1H)，7.38(d，1H)，7.25(t，1H)，7.11(d，1H)，6.89(m，2H)，5.70(d，1H)，5.54(m，1H)，4.83(t，1H)，4.61(m，1H)，4.41(m，1H)，2.6-2.2(br，9H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，3H)，1.46(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.94min。
MS：MH+559。
实施例476
反-3-[4-(2，3-二氢苯并[b]呋喃-3-基氨基)-3-甲氧基苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
将水杨醛(0.034g，0.000282mol)和反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.117g，0.000268mol)在纯乙醇中混合，并室温下搅拌48小时。该反应混合物经减压浓缩并将此残余物干燥过夜，得到反-2-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)亚氨基]甲基苯酚，其不经进一步纯化直接使用。将氧化锍三甲基碘(0.145g，0.00068mol)溶解于无水二甲基亚砜(2mL)，并立即加入氢化钠在石蜡中的60％分散液(0.027g，00068mol)。10分钟后，加入反-2-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)亚氨基]甲基酚的无水二甲基亚砜(2mL)溶液，并将所得混合物室温氮气氛下搅拌2.5小时。将此溶液倒入到冰冷的水(50mL)中并用二氯甲烷(2×40mL)萃取。合并的有机萃取物用硫酸镁干燥并减压浓缩。残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分钟内10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)得到反-3-[4-(2，3-二氢苯并[b]呋喃-3-基氨基)-3-甲氧基苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐(0.096g，0.000142mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.21(s，1H)，7.38(d，1H)，7.25(t，1H)，7.11(m，2H)，6.89(m，3H)，5.42(m，1H)，5.18(d，1H)，4.77(t，1H)，4.61(m，1H)，4.37(m，1H)，3.83(s，3H)，2.6-2.2(br，9H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.16min。
MS：MH+555。
实施例477
反式-3-[4-(3-甲基-5-苯基-1H-1-吡唑基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
a)1-(4-溴苯基)-3-甲基-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑
向1-苯甲酰基丙酮(3.63g，0.0224mol)和N，N-二异丙基乙胺(2.88g，0.0224mol)的无水甲醇(160mL)溶液中，加入4-溴苯基肼盐酸盐并将所得混合物室温下搅拌20小时。减压除去溶剂并将所得混合物在5％枸橼酸水溶液(200mL)和乙酸乙酯(150mL)之间分配。将有机相依次用水(2×200mL)和盐水(150mL)洗涤，用硫酸镁干燥并浓缩。所得残余物在硅胶上通过急骤色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(5∶95)作为流动相，得到1-(4-溴苯基)-3-甲基-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑(4.05g，0.0129mol)，为米白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.58(d，2H)，7.36(m，3H)，7.21(d，2H)，7.17(d，2H)，6.46(s，1H)，2.72(s，3H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶5)Rf 0.41
b)3-甲基-5-苯基-1-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-4，5-二氢-1H-吡唑
将1-(4-溴苯基)-3-甲基-5-苯基-4，5-二氢-1H-吡唑(2.17g，0.00693mol)、乙硼烷频哪醇酯(2.11g，0.00832mol)、[1，1’-双(二苯基膦基)二茂铁]-二氯钯(II)与二氯甲烷(1∶1)的复合物(0.170g，0.000207mol)和醋酸钾(2.03g，0.0207mol)在N，N-二甲基甲酰胺(50mL)中的混合物，在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。将二氯甲烷(70mL)加入到此残余物中并将所得固体通过硅藻土板滤出。浓缩此滤液得到黄色油状物，其在硅胶上通过急骤色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(7∶93)作为流动相。将所得馏份浓缩，残余物在正庚烷中研磨并过滤收集沉淀得到3-甲基-5-苯基-1-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-4，5-二氢-1H-吡唑(1.00g，0.00278mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.65(d，2H)，7.36(m，3H)，7.21(m，4H)，6.46(s，1H)，2.79(s，3H)，1.29(s，12H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶5)Rf 0.27
c)反-3-[4-(3-甲基-5-苯基-1H-1-吡唑基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐
将3-甲基-5-苯基-1-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]-4，5-二氢-1H-吡唑(0.102g，0.000283mol)、反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.104g，0.000236mol)、四-(三苯基膦)钯(0.016g，0.000014mol)和碳酸钠一水合物(0.073g，0.00055mol)的混合物在乙二醇二甲基醚(5mL)和水(3mL)的混合物中，在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分钟内10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)得到反-3-[4-(3-甲基-5-苯基-1H-1-吡唑基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸盐(0.094g，0.000141mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.64(d，2H)，7.37(m，7H)，6.49(s，1H)，4.63(m，1H)，2.6-2.2(br，9H)，2.30(s，3H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 14.10min。
MS：MH+548。
实施例478
反-3-[4-(5-乙氧基-1H-1-吡唑基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸盐
a)1-(4-溴苯基)-1H-5-吡唑基乙醚
将乙酰基乙酸乙酯(3.49g，0.02684mol)和4-溴苯基肼盐酸盐(6.00g，0.02684mol)在乙酸(50mL)中回流4小时。过滤除去沉淀，将此滤液减压浓缩并将此残余物通过急骤色谱在硅胶上纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(7∶93)作为流动相，得到1-(4-溴苯基)-1H-5-吡唑基乙醚(2.63g，0.00936mol)，为米白色固体。
1H NMR(CDCl3-d6，400MHz)δ7.61(d，2H)，7.49(d，2H)，7.26(s，1H)，5.47(s，1H)，4.14(q，2H)，2.26(s，3H)，1.44(t，3H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶9)Rf 0.24
b)5-乙氧基-3-甲基-1-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧杂环戊烷-2-基)苯基]-1H-吡唑
将1-(4-溴苯基)-1H-5-吡唑基乙醚(2.22g，0.00791mol)、乙硼烷频哪醇酯(2.41g，0.00949mol)、[1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁]-二氯钯(II)与二氯甲烷(1∶1)复合物(0.194g，0.000237mol)和醋酸钾(2.32g，0.0237mol)在N，N-二甲基甲酰胺(60mL)中的混合物，在80℃下在氮气氛下加热16小时。让此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。将二氯甲烷(70mL)加入到此残余物中并将所得固体通过硅藻土垫滤出。浓缩此滤液得到黄色油状物，其在硅胶上通过急骤色谱纯化，用乙酸乙酯/正庚烷(7∶93)作为流动相。将所得馏份浓缩，残余物在正庚烷中研磨，并过滤收集沉淀得到5-乙氧基-3-甲基-1-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧杂环戊烷-2-基)苯基]-1H-吡唑(0.604g，0.00184mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.72(s，4H)，5.72(s，1H)，4.18(q，2H)，2.16(s，3H)，1.37(t，3H)，1.29(s，12H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶9)Rf 0.18
c)反-3-[4-(5-乙氧基-1H-1-吡唑基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸盐
将5-乙氧基-3-甲基-1-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧杂环戊烷-2-基)苯基]-1H-吡唑基(0.062g，0.00019mol)、反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.070g，0.000159mol)、四(三苯基膦)钯(0.011g，0.0000095mol)和碳酸钠一水合物(0.049g，0.000398mol)的混合物在乙二醇二甲基醚(5mL)和水(3mL)的混合物中，在80℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温并减压除去溶剂。残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分钟内10-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21mL/min)得到反-3-[4-(5-乙氧基-1H-1-吡唑基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸盐(0.037g，0.000064mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.85(d，2H)，7.71(d，2H)，5.75(s，1H)，4.65(m，1H)，4.21(q，2H)，2.6-2.2(br，9H)，2.18(s，3H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，3H)，1.46(m，2H)，1.40(t，3H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 12.59min。
MS：MH+516。
实施例479
反-1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-3-甲基-4，5-二氢-1H-5-吡唑酮二乙酸盐
将反-3-[4-(5-乙氧基-1H-1-吡唑基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸盐(0.100g，0.000194mol)在存在于乙酸(2.5mL)的30％氢溴酸中加热回流1.5小时。将该反应混合物经减压浓缩并将此残余物浓氢氧化铵水溶液中和。将所得混悬液减压浓缩并将此残余物通过制备HPLC纯化(Hypersil C18，8μm，25cm；5-45％乙腈-0.1M醋酸铵，在20分钟内，21mL/min)得到反-1-(4{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-3-甲基-4，5-二氢-1H-5-吡唑酮二乙酸盐(0.066g，0.00011mol)，为白色固体。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，8.02(d，2H)，7.65(d，2H)，4.64(m，1H)，2.6-2.2(br，9H)，2.53(s，2H)，2.21(s，3H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.34min。
MS：MH+ 488。
实施例480
2-(2-氨基-1H-1-咪唑基)-1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-1-乙酮乙酸盐
向1-(3-氮杂环丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.00014mol)和碳酸钾(0.039g，0.00028mol)在无水N，N-二甲基甲酰胺(3mL)中的混合物中，室温下加入氯乙酰基氯(0.0031g，0.00028mol)。将此混合物搅拌10分钟，之后加入2-氨基咪唑硫酸盐(0.18g，0.0014mol)和碳酸钾(0.19g，0.0014mol)。将此混合物室温下搅拌2天，然后升温至60℃，保持6小时。减压除去溶剂。将残余物溶解于二氯甲烷(3mL)并用水(2mL)洗涤。减压除去溶剂。残余物通过RP-HPLC纯化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分钟内含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到2-(2-氨基-1H-1-咪唑基)-1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-1-乙酮乙酸盐(0.006g，0.00001mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.27(s，1H)，7.71(d，2H)，7.44(m，2H)，7.19(m，5H)，6.55(s，1H)，6.36(s，1H)，5.76(m，1H)，5.30(s，2H)，4.59(m，2H)，4.40(m，2H)，1.90(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.1min。
MS：MH+482
实施例481
1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-3-[(2-羟基乙基)氨基]-1-丙酮
a)N-(3-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-3-氧代丙基)-N-(2-羟基乙基)氨基甲酸叔丁基酯
将1-(3-氮杂环丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4胺(0.05g，0.00014mol)、3-[(叔丁氧基羰基)(2-羟基乙基)氨基]丙酸(0.038g，0.000175mol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.034g，0.000175mol)、N，N-二异丙基乙胺(0.034g，0.00026mol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.019g，0.00014mol)在无水二氯甲烷(5mL)中的混合物，室温下搅拌18小时。减压除去溶剂。残余物通过RP-HPLC纯化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分钟内含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到N-(3-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-3-氧代丙基)-N-(2-羟基乙基)氨基甲酸叔丁基酯(0.040g，0.000070mol)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 10.3min。
MS：MH+574
b)1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-3-[(2-羟基乙基)氨基]-1-丙酮
将2ml 6N盐酸加入到N-(3-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-3-氧代丙基)-N-(2-羟基乙基)氨基甲酸叔丁基酯(0.040g，0.000070mol)在丙酮(5mL)中的混合物中。将此混合物在45℃下搅拌1.5小时。减压下除去溶剂。将水(10mL)加入到此残余物中，将此混合物冻干。残余物通过RP-HPLC纯化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分钟内含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮杂环丁烷基}-3-[(2-羟基乙基)氨基]-1-丙酮(0.003g，0.00001mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.27(s，1H)，7.69(d，2H)，7.42(m，2H)，7.19(m，5H)，5.70(m，1H)，4.67(m，1H)，4.57(m，1H)，4.40(m，1H)，4.31(m，1H)，3.40(m，2H)，2.74(m，2H)，2.51(m，2H)，2.29(m，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 8.7min。
MS：MH+474
实施例482
2-(2-氨基-1H 1-咪唑基)-1-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-1-乙酮乙酸盐
向3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.00013mol)和碳酸钾(0.036g，0.00026mol)在无水N，N-二甲基甲酰胺(3mL)中的混合物中，室温下加入氯乙酰基氯(0.028g，0.00026mol)。将此混合物搅拌10分钟，之后加入2-氨基咪唑硫酸盐(0.18g，0.0014mol)和碳酸钾(0.19g，0.0014mol)。将此混合物室温下搅拌18小时，然后升温至60℃，保持6小时。减压除去溶剂。将残余物溶解于二氯甲烷(3mL)并用水(2mL)洗涤。减压除去溶剂。残余物通过RP-HPLC纯化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分钟内含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到2-(2-氨基-1H-1-咪唑基)-1-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-1-乙酮乙酸盐(0.015g，0.00003mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.26(s，1H)，7.67(d，2H)，7.44(m，2H)，7.17(m，5H)，6.52(s，1H)，6.38(s，1H)，5.49(br，2H)，4.99(m，1H)，4.76(m，2H)，4.59(m，1H)，3.99(m，1H)，3.30(m，1H)，2.80(m，1H)，2.20(m，1H)，1.99(m，3H)，1.90(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.4min。
MS：MH+510
实施例483
1-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-2-[(2-羟基乙基)氨基]-1-乙酮
向3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.00013mol)和碳酸钾(0.036g，0.00026mol)在无水N，N-二甲基甲酰胺(3mL)中的混合物中，室温下加入氯乙酰基氯(0.028g，0.00026mol)。将此混合物搅拌10分钟，之后加入乙醇胺(0.078mL，0.0013mol)。将此混合物室温下搅拌18小时。减压除去溶剂。将残余物溶解于二氯甲烷(3mL)并用水(2mL)洗涤。减压除去溶剂。残余物通过RP-HPLC纯化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分钟内，含0.1M醋酸铵的5％-100％，21mL/min)得到1-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-2-[(2-羟基乙基)氨基]-1-乙酮(0.022g，0.00005mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.26(s，1H)，7.67(d，2H)，7.44(m，2H)，7.17(m，5H)，5.03(br，1H)，5.00(br，1H)，4.52(m，1H)，4.05(m，1H)，3.87(m，2H)，3.64(m，2H)，2.96(m，2H)，2.92(m，2H)，2.17(m，1H)，1.90(m，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵在10分钟内，1mL/min)Rt 9.0min。
MS：MH+488
实施例484
合成1-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-3-[(2-羟基乙基)氨基]-1-丙酮
N-(3-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-3-氧代丙基)-N-(2-羟基乙基)氨基甲酸叔丁基酯
将3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4胺(0.05g，0.00013mol)、3-[(叔丁氧基羰基)(2-羟基乙基)氨基]丙酸(0.038g，0.000163mol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.031g，0.000163mol)、N，N-二异丙基乙胺(0.031g，0.00024mol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.018g，0.00013mol)在无水二氯甲烷(5mL)中的混合物，室温下搅拌18小时。减压除去溶剂。残余物通过RP-HPLC纯化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分钟内含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到N-(3-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-3-氧代丙基)-N-(2-羟基乙基)氨基甲酸叔丁基酯(0.050g，0.000083mol)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 10.4min。
MS：MH+602
b)1-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-3-[(2-羟基乙基)氨基]-1-丙酮
将2ml的6 N盐酸加入到N-(3-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-3-氧代丙基)-N-(2-羟基乙基)氨基甲酸叔丁基酯(0.050g，0.000083mol)在丙酮(5mL)中的混合物中。将此混合物在45℃下搅拌1.5小时。减压除去溶剂。将水(10mL)加入到此残余物，将此混合物冻干。残余物通过RP-HPLC纯化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分钟内含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到1-{4-[4氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-3-[(2-羟基乙基)氨基]-1-丙酮(0.014g，0.00003mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.25(s，1H)，7.67(d，2H)，7.42(m，2H)，7.19(m，5H)，4.98(m，1H)，4.52(m，2H)，4.04(m，1H)，3.31(m，2H)，2.81(m，2H)，2.78(m，1H)，2.74(m，2H)，2.58(m，2H)，1.99(m，1H)，1.90(m，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，ImL/min)Rt 9.1min。
MS：MH+502
实施例485
合成2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}乙酸
a)2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}乙酸叔丁基酯
向3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.10g，0.00026mol，1当量)和碳酸钾(0.072g，0.000526mol，2当量)在无水N，N-二甲基甲酰胺(8mL)中的混合物中，室温下加入2-溴乙酸叔丁基酯(0.0768g，0.00039mol，1.5当量)。将混合物室温下搅拌18小时。减压除去溶剂。残余物溶解于二氯甲烷(5mL)并用水(3mL)洗涤。减压除去溶剂。将残余物在硅胶上通过急骤色谱纯化，用甲醇/二氯甲烷(5∶95)作为流动相，得到2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}乙酸叔丁基酯(0.10g，0.0002mol)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 11.8min。
MS：MH+501
2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}乙酸
将2ml的6N盐酸加入到2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}乙酸叔丁基酯(0.10g，0.0002mol)在丙酮(5mL)中的混合物中。此混合物在45℃搅拌2小时。减压除去溶剂。将水(10mL)加入到残余物中，并将此混合物冻干得到2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}乙酸(0.010g，0.0002mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.50(s，1H)，7.69(d，2H)，7.43(m，2H)，7.19(m，5H)，5.07(m，1H)，4.02(s，2H)，3.50(br，2H)，3.42(br，2H)，2.53(br，2H)，2.25(br，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 8.7min。
MS：MH+445
实施例486
N1-(1H-2-咪唑基)-2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}乙酰胺
将2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}乙酸(0.06g，0.00013mol)、2-氨基咪唑硫酸盐(0.022g，0.000163mol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.031g，0.000163mol)、N，N-二异丙基乙胺(0.047g，0.00036mol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.018g，0.00013mol)在无水二氯甲烷(8mL)中的混合物，室温下搅拌18小时。再加入2-氨基咪唑硫酸盐(0.022g，0.000163mol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(0.031g，0.000163mol)、N，N-二异丙基乙胺(0.047g，0.00036mol)和1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0.018g，0.00013mol)并将此混合物室温下搅拌18小时。此混合物升温至50℃，保持6小时，然后室温下搅拌2天。减压除去溶剂。残余物通过RP-HPLC纯化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分钟内含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到N1-(1H-2-咪唑基)-2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}乙酰胺(0.005g，0.00001mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.24(s，1H)，7.68(d，2H)，7.43(m，2H)，7.19(m，5H)，6.80(br，1H)，6.70(br，1H)，4.80(br，1H)，3.06(s，2H)，3.05(m，2H)，2.43(m，2H)，2.33(m，2H)，1.92(m，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 9.2min。
MS：MH+510
实施例487
反式N1-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-2-苯基-1-环丙烷甲酰胺马来酸盐
a)4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸苄基酯
向3-碘-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺二盐酸盐(13.86g，0.0333mol)和碳酸氢钠(8.4g，0.0999mol)在水(140mL)中的混合物中，室温下加入存在于二噁烷(120mL)中的氯甲酸苄基酯(6.48g，0.0383mol)。将此混合物室温氮气氛下搅拌18小时。滤出黄色固体并用乙醚洗涤得到4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸苄基酯(12g，0.025mol)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 10.5min。
MS：MH+479
b)4-(4-氨基-3-{4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-甲氧基苯基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸苄基酯
将4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸苄基酯(7.0g，0.0146mol)、N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸酯(6.15g，0.0176mol)、四(三苯基膦)钯(1.0g，0.000876mol)和碳酸钠(3.9g，0.0365mol)的混合物在乙二醇二甲基醚(170mL)和水(70mL)中，在75℃下在氮气氛下加热16小时。加入N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(6.15g，0.0176mol，1.2当量)和四(三苯基膦)钯(1.0g，0.000876mol)，再将此混合物在85℃下搅拌16小时。将此混合物冷却至室温并将乙二醇二甲基醚减压除去。水层用乙酸乙酯(3×150mL)萃取。合并的有机萃取物用水、饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，并用硫酸镁干燥。减压蒸发溶剂得到棕色固体，其通过急骤柱色谱在硅胶上进行纯化，用20％-40％乙酸乙酯/二氯甲烷，接着2％-5％甲醇/二氯甲烷作为流动相，得到4-(4-氨基-3-{4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-甲氧基苯基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸苄基酯(8.0g，0.014mol)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，在10分钟内，1mL/min)Rt 12.6min。
MS：MH+574
c)4-[4-氨基-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-哌啶甲酸苄基酯
向4-(4-氨基-3-{4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-甲氧基苯基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸苄基酯(7.68g，0.0134mol)在二氯甲烷(10mL)中的混合物中，在0℃下加入25％三氟乙酸的二氯甲烷溶液。将此混合物在氮气氛下室温下搅拌18小时。减压除去溶剂。将残余物冷却至0℃，并用5N氢氧化钠水溶液碱化。水层用二氯甲烷(3×150mL)萃取。合并的有机层用水和盐水洗涤，并用硫酸镁干燥。减压除去溶剂得到4-[4-氨基-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-哌啶甲酸苄基酯(6.02g，0.0127mol)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 10.3min。
MS：MH+474
d)反式4-[4-氨基-3-(3-甲氧基-4-{[(2-苯基环丙基)羰基]氨基}苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-哌啶甲酸苄基酯
向4-[4-氨基-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-哌啶甲酸苄基酯(3.0g，0.0063mol)在吡啶(100mL)中的混合物中，在-5℃下加入外消旋的反-2-苯基-环丙烷羰基氯(1.163g，0.007mol)。将此混合物在-5℃下搅拌10分钟，然后升温至室温并搅拌1.5小时。将此混合物用1N氢氧化钠水溶液骤冷。减压下除去有机溶剂。将残余物在水(200mL)和乙酸乙酯(200mL)之间分配。将有机层洗涤用5％枸橼酸水溶液(3×100mL)、1N盐酸(3×100mL)、水、饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，并用硫酸镁干燥。减压除去溶剂得到反式4-[4-氨基-3-(3-甲氧基-4-{[(2-苯基环丙基)羰基]氨基}苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1哌啶甲酸苄基酯(3.47g，0.006mol)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 11.5min。
MS：MH+618
e)反式N1-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-(1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基-1-环丙烷甲酰胺马来酸盐
将反式4-[4-氨基-3-(3-甲氧基-4-{[(2-苯基环丙基)羰基]氨基}苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-哌啶甲酸苄基酯(3.4g，0.0055mol)和20％氢氧化钯-碳(0.4g)在乙醇(150mL)中的混合物，在氢气氛下室温下搅拌18小时。将此混合物过滤并除去溶剂。向此残余物中，加入20％氢氧化钯-碳(0.4g)、存在于乙醇(60mL)中的乙酸(0.25mL)和乙酸乙酯(40mL)。将此混合物在氢气氛下室温下再搅拌18小时。将此混合物过滤并减压除去溶剂。残余物在硅胶上通过急骤柱色谱纯化，用25％-50％甲醇/二氯甲烷洗脱，得到反式N1-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-(1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基-1-环丙烷甲酰胺(1.36g，0.0028mol)。将反式N1-{4-[4-氨基-1-(4哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-(1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基-1-环丙烷甲酰胺(0.05g，0.000104mol)在乙酸乙酯(5mL)中加热至40℃。将先溶解于温乙酸乙酯中的马来酸(0.00133g，0.000114mol)加入到此混合物中。将此混合物在40℃下搅拌10分钟，然后冷却至室温。滤出白色沉淀，得到反式N1-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-(1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基-1-环丙烷甲酰胺马来酸盐(0.0044g，0.00001mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.65(s，1H)，8.26(m，2H)，7.25(m，7H)，6.01(d，2H)，5.09(br，1H)，3.90(s，3H)，3.48(m，2H)，3.18(m，2H)，2.61(br，1H)，2.37(m，3H)，2.13(m，2H)，1.50(br，1H)，1.34(br，1H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵在10分钟内，1mL/min)Rt 9.0min。
MS：MH+484
实施例488
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1H-2-咪唑基甲基)-4-哌啶基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基-1-环丙烷甲酰胺
将N1-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-(1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基-1-环丙烷甲酰胺(0.10g，0.00021mol)、2-咪唑甲醛(0.022g，0.00023mol)及乙酸(0.037g，0.0006mol)在二氯乙烷(8mL)中的混合物，室温氮气氛下搅拌1.5小时。将三乙酰氧基硼氢化钠(0.133g，0.00063mol)加入到此混合物并在室温氮气氛下搅拌18小时。再将乙酸(0.037g，0.0006mol)、2-咪唑甲醛(0.011g，0.00012mol)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.133g，0.00063mol)加入到此混合物中，并将此混合物搅拌18小时。该反应用5N氢氧化钠水溶液骤冷。减压除去溶剂，并将此残余物在水和二氯甲烷之间分配。将此有机层用水和盐水洗涤。减压除去溶剂。残余物通过RP-HPLC纯化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分钟内含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1H 2-咪唑基甲基)-4-哌啶基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基-1-环丙烷甲酰胺(0.019g，0.000034mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ11.8(br，1H)，9.63(s，1H)，8.22(m，2H)，7.25(m，7H)，6.99(br，1H)，6.83(br，1H)，4.68(br，1H)，3.90(s，3H)，3.56(s，2H)，2.93(m，2H)，2.58(br，1H)，2.37(br，1H)，2.22(m，3H)，1.90(m，3H)，1.50(br，1H)，1.30(br，1H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵在10分钟内，1mL/min)Rt 9.4min。
MS：MH+564
实施例489
N1-[4-(4-氨基-1-{1-[(1-甲基-1H-2-咪唑基)甲基]-4-哌啶基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-甲氧基苯基](1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基-1-环丙烷甲酰胺
将N1-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-(1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基-1-环丙烷甲酰胺(0.1g，0.00021mol)、1-甲基-2-咪唑甲醛(0.025g，0.00023mol)及乙酸(0.037g，0.0006mol)在二氯乙烷(8mL)中的混合物，室温氮气氛下搅拌1.5小时。将三乙酰氧基硼氢化钠(0.133g，0.00063mol)加入到此混合物并在室温氮气氛下搅拌18小时。该反应用5N氢氧化钠水溶液骤冷。减压除去溶剂，并将此残余物在水和二氯甲烷之间分配。将此有机层用水和盐水洗涤。减压除去溶剂。残余物在硅胶上通过急骤色谱纯化，用5％-50％甲醇/二氯甲烷作为流动相，得到N1-[4-(4-氨基-1-{1-[(1-甲基-1H 2-咪唑基)甲基]-4哌啶基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-甲氧基苯基]-(1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基-1-环丙烷甲酰胺(0.070g，0.00012mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.63(s，1H)，8.22(m，2H)，7.25(m，7H)，7.09(s，1H)，6.75(s，1H)，4.68(br，1H)，3.90(s，3H)，3.68(s，3H)，3.20(s，2H)，2.93(m，2H)，2.58(br，1H)，2.35(br，1H)，2.24(m，4H)，1.89(m，2H)，1.50(br，1H)，1.30(br，1H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵在10分钟内，1mL/min)Rt 9.6min。
MS：MH+ 578
实施例490
3-(3-甲氧基-4-{[(5-甲基-2-呋喃基)甲基]氨基}苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
a)4-[4-氨基-3-(3-甲氧基-4-{[(5-甲基-2-呋喃基)甲基]氨基}苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-哌啶甲酸苄基酯
将4-[4-氨基-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-哌啶甲酸苄基酯(3.0g，0.0063mol)、5-甲基糠醛(0.77g，0.007mol)及乙酸(1.15g，0.019mol)在二氯乙烷(100mL)中的混合物，室温氮气氛下搅拌1.5小时。将三乙酰氧基硼氢化钠(4.1g，0.0195mol)加入到此混合物并将此混合物在室温氮气氛下搅拌18小时。该反应用5N氢氧化钠水溶液骤冷。减压除去溶剂，并将此残余物在水和二氯甲烷之间分配。水层用二氯甲烷(3×200mL)萃取，并将合并的有机层用水和盐水洗涤，并用硫酸镁干燥。减压除去溶剂。残余物在硅胶上通过急骤色谱纯化，用2％-5％甲醇/二氯甲烷作为流动相，得到4-[4-氨基-3-(3-甲氧基-4-{[(5-甲基-2-呋喃基)甲基]氨基}苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-哌啶甲酸苄基酯(2.63g，0.0046mol)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵在10分钟内，1mL/min)Rt 11.59min。
MS：MH+568
b)3-(3-甲氧基-4-{[(5-甲基-2-呋喃基)甲基]氨基}苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将4-[4-氨基-3-(3-甲氧基-4-{[(5-甲基-2-呋喃基)甲基]氨基}苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-哌啶甲酸苄基酯(0.18g，0.000317mol)和20％氢氧化钯-碳(0.02g)在乙酸乙酯(10mL)中的混合物，在氢气氛下室温下搅拌18小时。将此混合物过滤并除去溶剂。残余物在硅胶上通过急骤柱色谱纯化，用5％-10％甲醇/二氯甲烷(2％NH4OH)洗脱，得到3-(3-甲氧基-4-{[(5-甲基-2呋喃基)甲基]氨基}苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.02g，0.000046mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.20(s，1H)，7.07(m，2H)，6.78(m，1H)，6.18(s，1H)，5.97(s，1H)，5.59(m，1H)，4.79(br，1H)，4.31(m，2H)，3.86(s，3H)，3.16(m，2H)，2.74(m，2H)，2.23(s，3H)，2.15(m，2H)，1.90(m，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵在10分钟内，1mL/min)Rt 8.7min。
MS：MH+434
实施例491
3-(3-甲氧基-4-{[(5-甲基-2-呋喃基)甲基]氨基}苯基)-1-{1-[(1-甲基-1H-2-咪唑基)甲基]-4-哌啶基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺
将3-(3-甲氧基-4-{[(5-甲基-2-呋喃基)甲基]氨基}苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.045g，0.0001mol)、1-甲基-2-咪唑甲醛(0.011g，0.00011mol)及乙酸(0.018g，0.0003mol)在二氯乙烷(4mL)中的混合物，室温氮气氛下搅拌1.5小时。将三乙酰氧基硼氢化钠(0.064g，0.0003mol)加入到此混合物并将此混合物在室温氮气氛下搅拌18小时。该反应用5N氢氧化钠水溶液骤冷。减压除去溶剂，并将此残余物在水和二氯甲烷之间分配。将此有机层用水和盐水洗涤。减压除去溶剂。残余物通过RP-HPLC纯化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分钟内含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到3-(3-甲氧基-4-{[(5-甲基-2-呋喃基)甲基]氨基}苯基)-1-{1-[(1-甲基-1H-2-咪唑基)甲基]-4-哌啶基}-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.03g，0.00006mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.19(s，1H)，7.16(s，1H)，7.06(m，2H)，6.86(s，1H)，6.77(d，1H)，6.18(s，1H)，5.98(s，1H)，5.59(m，1H)，4.67(br，1H)，4.31(m，2H)，3.85(s，3H)，3.71(s，3H)，3.66(s，2H)，2.96(m，2H)，2.27(m，2H)，2.23(s，3H)，2.18(m，2H)，1.91(m，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵在10分钟内，1mL/min)Rt 9.5min。
MS：MH+528
实施例492
反式N1-(4-{4-氨基-1-[(4-羟基-4-哌啶基)甲基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2-苯基-1-环丙烷甲酰胺
a)4-[(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)甲基]-4羟基-1-哌啶甲酸叔丁基酯
将3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.86g，0.0033mol)、1-氧杂-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁基酯(0.7g，0.0033mol)和碳酸铯(1.1g，0.0033mol)在无水N，N-二甲基甲酰胺(30mL)中的混合物，在60℃下搅拌18小时。减压除去溶剂。残余物在水和二氯甲烷(200mL)之间分配。将此有机层用水和盐水洗涤，并用硫酸镁干燥。减压除去溶剂。残余物用二氯甲烷研磨，并将此固体过滤得到4-[(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)甲基]-4-羟基-1-哌啶甲酸叔丁基酯(0.66g，0.0014mol)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 8.7min。
MS：MH+475
b)4-{[4-氨基-3-(4-{[(苄基氧基)羰基]氨基}-3-甲氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]甲基}-4-羟基-1-哌啶甲酸叔丁基酯
将4-[(4-氨基-3-碘-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基)甲基]-4-羟基-1-哌啶甲酸叔丁基酯(0.27g，0.00057mol)、N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸苄基酯(0.26g，0.00068mol)、四(三苯基膦)钯(0.039g，0.000034mol)和碳酸钠(0.15g，0.0014mol)的混合物在乙二醇二甲基醚(7mL)和水(3mL)中，在85℃下在氮气氛下加热16小时。将此混合物冷却至室温，并减压下除去乙二醇二甲基醚。水层用二氯甲烷(2×100mL)萃取。将合并的有机萃取物用水和盐水洗涤，并用硫酸镁干燥。有机层通过硅胶过滤两次以除去催化剂，并减压除去溶剂。残余物通过RP-HPLC纯化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分钟内含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/mi n)得到4-{[4-氨基-3-(4-{[(苄基氧基)羰基]氨基}-3-甲氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]甲基}-4-羟基-1哌啶甲酸叔丁基酯(0.1g，0.00017mol)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 10.9min。
MS：MH+ 604
c)4-{[4-氨基-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]甲基}-4-羟基-1-哌啶甲酸叔丁基酯
将4-{[4-氨基-3-(4-{[(苄基氧基)羰基]氨基}-3-甲氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]甲基}-4-羟基-1-哌啶甲酸叔丁基酯(0.1g，0.000017mol)和钯碳(0.01g)在乙醇(2.5mL)和四氢呋喃(2.5mL)中的混合物，在氢气氛下室温下搅拌18小时。将此混合物过滤并再加入钯碳(0.01g)。将此混合物在氢气氛下室温下搅拌18小时。将此混合物通过硅藻土过滤并减压除去溶剂得到4-{[4-氨基-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]甲基}-4羟基-1-哌啶甲酸叔丁基酯(0.08g，0.00017mol)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 8.8min。
MS：MH+470
d)反式4-{[4-氨基-3-(3-甲氧基-4-{[(2-苯基环丙基)羰基]氨基}苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]甲基}-4-羟基-1-哌啶甲酸叔丁基酯
向4-{[4-氨基-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]甲基}-4-羟基-1-哌啶甲酸叔丁基酯(0.08g，0.00017mol)在吡啶(4mL)中的混合物中，在-5℃下加入反-2-苯基-环丙烷羰基氯(0.035g，0.00019mol)。将此混合物在-5℃下搅拌10分钟，然后升温至室温，搅拌1小时。将此混合物用1N氢氧化钠的水溶液骤冷。减压下除去吡啶。将此残余物在水和二氯甲烷(50mL)之间分配。有机层用水洗涤。减压下除去溶剂，并将此残余物通过RP-HPLC纯化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分钟内含0.1M乙酸铵的5％-100％，21mL/min)得到反式4-{[4-氨基-3-(3-甲氧基-4-{[(2-苯基环丙基)羰基]氨基}苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]甲基}-4-羟基-1-哌啶甲酸叔丁基酯(0.08g，0.00013mol)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 10.7min。
MS：MH+614
e)反式N1-(4-{4-氨基-1-[(4-羟基-4-哌啶基)甲基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2-苯基-1-环丙烷甲酰胺盐酸盐
将反式4-{[4-氨基-3-(3-甲氧基-4-{[(2-苯基环丙基)羰基]氨基}苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]甲基}-4-羟基-1-哌啶甲酸叔丁基酯(0.08g，0.00013mol)在丙酮(12mL)和6N盐酸(3mL)中的混合物，在40℃下搅拌2小时。减压下除去丙酮，并将此残余物冻干得到反式N1-(4-{4-氨基-1-[(4-羟基-4-哌啶基)甲基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2-苯基-1-环丙烷甲酰胺盐酸盐(0.07g，0.00012mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.65(s，1H)，8.71(br，1H)，8.43(s，1H)，8.26(m，1H)，7.25(m，7H)，4.40(s，2H)，3.90(s，3H)，3.10(m，2H)，2.98(m，2H)，2.51(m，1H)，2.34(m，1H)，1.89(m，2H)，1.71(m，2H)，1.48(m，1H)，1.31(m，1H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵在10分钟内，1mL/min)Rt8.7min。
MS：MH+514
实施例493
N1-4-[4-氨基-1-(4-氧代环己基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基-(1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基环丙烷-1-甲酰胺
将4-[4-氨基-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环己酮(2.00g，0.00568mol)在吡啶(20mL)中的悬浮液冷却至-10℃。滴加外消旋的反-2-苄基环丙烷-1-羰基氯(1.53g，0.00852mol)的二氯甲烷(5mL)溶液，保持温度低于-5℃。在4小时内将该反应混合物升温至室温。加入氢氧化钠水溶液(1.0M，10mL)并将此混合物搅拌1小时。真空下除去溶剂并将此残余物在乙酸乙酯(25mL)和水(50mL)之间分配。进行相分离并将水相用乙酸乙酯(2×25mL)萃取。合并的有机相用硫酸镁干燥，并真空下除去溶剂得到N1-4-[4-氨基-1-(4-氧代环己基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基-(1S，2S)-2-苯基环丙烷-1-甲酰胺，为白色固体(1.603g，0.00323mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.64(s，1H)，8.27(s，1H)，8.23(d，1H)，7.14-7.35(m，7H)，5.24-5.27(m，1H)，3.90(s，3H)，2.65-2.78(m，2H)，2.56-2.63(m，1H)，2.34-2.37(m， 5H)，2.20-2.30(m，2H)，1.45-1.53(m，1H)，1.28-1.35(m，1H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵，在20分钟内，1mL/min)Rt 15.04min.；
MS：MH+497。
实施例494
顺式N1-(4-{4-氨基-1-[4-(铵基甲基)-4-羟基环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基-(1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基环丙烷-1-甲酰胺乙酸盐
a)顺式N1-4-[4-氨基-1-(1-氧杂螺[2.5]辛烷-6-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基-(1S，2S)-2-苯基环丙烷-1-甲酰胺
在加热干燥的烧瓶中，存在于二甲基亚砜(5ml)中的氧化锍三甲基碘(0.425g，0.00193mol)与60％氢化钠在矿物油中的分散液(0.071g，0.00193mol)反应。将此混合物室温下搅拌30分钟，然后冷却至10℃。加热N1-4-[4-氨基-1-(4-氧代环己基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基(1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基环丙烷-1-甲酰胺(0.800g，0.00161mol)的二甲基亚砜(5ml)溶液，并将此混合物室温下搅拌6小时。加入水(5mL)并将此混合物用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。有机相用水(5mL)、盐水(5mL)洗涤并用硫酸镁干燥。真空下除去溶剂得到顺-N1-4-[4-氨基-1-(1-氧杂螺[2.5]辛烷-6-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基-(1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基环丙烷-1-甲酰胺，为白色固体(0.820g，0.00160mol)：
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.64(s，1H)，8.24(s，1H)，8.22(d，1H)，7.17-7.31(m，7H)，4.84-4.90(m，1H)，3.92(s，3H)，2.70(s，2H)，2.56-2.63(m，1H)，2.34-2.42(m，1H)，2.12-2.33(m，4H)，1.90-1.99(m，2H)，1.44-1.52(m，1H)，1.27-1.37(m，3H)；
MS：MH+413。
b)顺式N1-(4-{4-氨基-1-[4-(铵基甲基)-4-羟基环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基环丙烷-1-甲酰胺乙酸盐
将顺-N1-4-[4-氨基-1-(1-氧杂螺[2.5]辛烷-6-基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基-(1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基环丙烷-1-甲酰胺(0.200g，0.000391mol)在2-丙醇(5mL)和氢氧化铵(5mL)中的混合物，在加压试管中在65℃下加热18小时。真空下除去溶剂，并将此残余物通过制备RP-HPLC纯化(Rainin C18，8μm，300A，25cm；5分钟内30％恒溶剂成分，然后在15分钟内30％-60％乙腈-0.1M醋酸铵，21ml/min)。真空下除去乙腈并将此含水混合物冻干得到顺-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(铵基甲基)-4-羟基环己基]-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基环丙烷-1-甲酰胺乙酸盐，为白色固体(0.112g，0.000212mol)：
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.64(s，1H)，8.23(d，1H)，8.22-8.24(m，1H)，7.17-7.33(m，7H)，4.59-4.80(m，1H)，3.91(s，3H)，2.28-2.65(m，4H)，1.88(s，3H)，1.68-1.72(m，4H)，1.47-1.51(m，3H)，1.30-1.33(m，1H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)Rt 13.11min.；
MS：MH+528。
实施例495
反式N1-苄基-2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羟基环己基}乙酰胺
将反式2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羟基环己基}乙酸(0.076g，0.000165mol)在二氯甲烷(2mL)中的悬浮液与三乙胺(0.050g，0.000496mol)和双(2-氧代-3-噁唑烷基)次膦酰氯(0.063g，0.000248mol)处理。将此混合物室温下搅拌2小时，在此期间发生溶解。将此溶液用水(2×2mL)洗涤。将此有机层用硫酸镁干燥，并真空下除去溶剂。粗品溶解于二氯甲烷(5mL)并与苄基胺(0.052g，0.000489mol)在室温下反应18小时。粗品物质在硅胶上通过急骤柱色谱纯化，用二氯甲烷/甲醇(95∶5)洗脱，接着用制备RP-HPLC纯化(Rainin C18，8μm，300A，25cm；5分钟内60％恒溶剂成分，然后在20分钟内60％-100％乙腈-0.1M醋酸铵，21ml/min)。真空下除去乙腈并将此含水混合物冻干得到反式N1-苄基-2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羟基环己基}乙酰胺，为白色固体(0.010g，0.000018mol)：
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.53(t，1H)，8.24(s，1H)，7.66(d，2H)，7.43(t，2H)，7.09-7.34(m，10H)，5.24(s，1H)，4.70-4.79(m，1H)，4.30(d，2H)，2.02-2.18(m，2H)，1.91(s，2H)，1.86-1.98(m，4H)，1.56-1.64(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-95％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/min)
Rt 16.16min；
MS：MH+549。
实施例496
1-(氨基甲基)-3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环丁醇
将3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环丁酮(0.150g，0.000404mol)的二氯甲烷(5mL)溶液与1，1，1-三甲基甲硅烷腈(0.060g，0.000606mol)和无水碘化锌(0.004g，0.000012mol)反应。将此混合物在回流温度下搅拌8小时。将此混合物在水(20mL)和乙醚(10mL)之间分配。分离有机层并用乙醚(10mL)萃取水层。将合并的有机层用盐水洗涤，并用硫酸镁干燥。真空下除去溶剂，并将粗品溶解于无水四氢呋喃(10mL)中，并在室温下与氢化锂铝(0.031g，0.000804mol)反应18小时。将粗品物质通过制备RP-LC/MS纯化(Gilson-Micromass C18，5μm，130A，21cm，在9分钟内0％-100％乙腈-0.1M醋酸铵，25mL/min)。真空下除去乙腈并将此含水混合物冻干得到1-(氨基甲基)-3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-环丁醇的异构体4∶1混合物，为白色固体(0.024g，0.000060mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.24(s，1H)少量，8.23(s，1H)主要，7.66-7-70(m，2H)，7.41-7.46(m，2H)，7.11-7.21(m，5H)，5.45-5.50(m，1H)少量，4.87-4.96(m，1H)主要，4.30(d，2H)，2.34-2.72(m，6H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分钟内5％-85％乙腈-0.1M醋酸铵，1mL/mi n)Rt 12.07min(少量)和12.36min(主要)；MS：MH+403。

Claims (88)

1.式(I)的化合物，其外消旋-非对映异构体混合物、旋光异构体、药用盐、前药或生物活性代谢物，其中：
G是其中Z100是
Figure A0081575900023
或者任选地被R1取代的基团，该基团选自环烷基、萘基、四氢萘基、苯并噻吩基、呋喃基、噻吩基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、噻唑基、苯并呋喃基、2，3-二氢苯并呋喃基、吲哚基、异噁唑基、四氢吡喃基、四氢呋喃基、哌啶基、吡唑基、吡咯基、噁唑基、异噻唑基、噁二唑基、噻二唑基、二氢吲哚基、吲唑基、苯并异噻唑基、吡啶并噁唑基、吡啶并-噻唑基、嘧啶并噁唑基、嘧啶并噻唑基和苯并咪唑基；
Z110是共价键，或是任选地被取代的(C1-C6)其任选地被一个或多个选自如下的取代基取代：烷基、CN、OH、卤素、NO2、COOH、被取代或未被取代的氨基及被取代或未被取代的苯基；
Z111是共价键，任选地被取代的(C1-C6)或任选地被取代的-(CH2)n-环烷基-(CH2)n-；其中任选地被取代的基团任选地被一个或多个选自如下的取代基取代：烷基、CN、OH、卤素、NO2、COOH、被取代或未被取代的氨基被取代或未被取代的苯基；
Ra和R1各表示一个或多个取代基，其每次出现时独立地选自如下：氢原子，卤素，-CN，-NO2，-C(O)OH，-C(O)H，-OH，-C(O)O-烷基，被取代或未被取代的甲酰氨基，四唑基，三氟甲基羰基氨基，三氟甲基磺酰氨基，被取代或未被取代的烷基，被取代的或未被取代的烷氧基，被取代或未被取代的芳基，被取代的或未被取代的链烯基，被取代或未被取代的芳基氧基，被取代的或未被取代的杂芳基氧基，被取代或未被取代的芳基烷基，被取代或未被取代的链炔基，被取代或未被取代的氨基，被取代或未被取代的氨基烷基，被取代或未被取代的酰氨基，被取代或未被取代的杂芳硫基，被取代的或未被取代的芳硫基，-Z105-C(O)N(R)2，-Z105-N(R)-C(O)-Z200，-Z105-N(R)-S(O)2-Z200，-Z105-N(R)-C(O)-N(R)-Z200，Rc和CH2ORc；
其中Rc每次出现时独立地是氢原子，被取代的或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基，-CH2-NRdRe，-W-(CH2)t-NRdRe，-W-(CH2)t-O-烷基，-W-(CH2)t-S-烷基或-W-(CH2)t-OH；
Z105每次出现时独立地是共价键或(C1-C6)；
Z200每次出现时独立地是被取代或未被取代的(C1-C6)，被取代或未被取代的苯基或者被取代的或未被取代的-(C1-C6)-苯基；
Rd和Re每次出现时独立地是H，烷基，烷酰基或SO2-烷基；或
Rd、Re和它们所连接的氮原子一起形成5员或6员杂环；t每次出现时独立地是2至6的整数；W每次出现时独立地是化学键或者O、S、S(O)、S(O)2或NRf，其中Rf每次出现时独立地是H或烷基；
或者R1是被取代或未被取代的与环2稠合的碳环或杂环；
R3是氢原子，羟基，被取代或未被取代的烷基或者被取代的或未被取代的烷氧基；
A是-O-；-S-；-S(O)p-；-N(R)-；-N(C(O)OR)-；-N(C(O)R)-；-N(SO2R)-；-CH2O-；-CH2S-；-CH2N(R)-；-CH(NR)-；-CH2N(C(O)R))-；-CH2N(C(O)OR)-；-CH2N(SO2R)-；-CH(NHR)-；-CH(NHC(O)R)-；-CH(NHSO2R)-；-CH(NHC(O)OR)-；-CH(OC(O)R)-；-CH(OC(O)NHR)-；-CH＝CH-；-C(＝NOR)-；-C(O)-；-CH(OR)-；-C(O)N(R)-；-N(R)C(O)-；-N(R)S(O)p-；-OC(O)N(R)-；-N(R)-C(O)-(CH2)n-N(R)-，-N(R)C(O)O-；-N(R)-(CH2)n+1-C(O)-，-S(O)pN(R)-；-O-(CR2)n+1-C(O)-，-O-(CR2)n+1-O-，-N(C(O)R)S(O)p-；-N(R)S(O)pN(R)-；-N(R)-C(O)-(CH2)n-O-，-C(O)N(R)C(O)-；-S(O)pN(R)C(O)-；-OS(O)pN(R)-；-N(R)S(O)pO-；-N(R)S(O)pC(O)-；-SOpN(C(O)R)-；-N(R)SOpN(R)-；-C(O)O-；-N(R)P(ORb)O-；-N(R)P(ORb)-；-N(R)P(O)(ORb)O-；-N(R)P(O)(ORb)-；-N(C(O)R)P(ORb)O-；-N(C(O)R)P(ORb)-；-N(C(O)R)P(O)(ORb)O-或-N(C(O)R)P(ORb)-；
其中R每次出现时独立地是H，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基烷基或者被取代的或未被取代的芳基；
Rb每次出现时独立地是H，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基烷基，被取代或未被取代的环烷基或被取代或未被取代的芳基；
p是1或2；
或在含磷的基团中，氮原子、磷原子、R和Rb一起形成5或6员杂环；或
A是NRSO2，而R、Ra和氮原子一起形成被取代或未被取代的与环1稠合的5或6员杂环；
-R2是-Z101-Z102；
Z101是共价键，-(C1-C6)-，-(C1-C6)-O-，-(C1-C6)-C(O)-，-(C1-C6)-C(O)O-，-(C1-C6)-C(O)-NH-，-(C1-C6)-C(O)-N((C1-C6))-或被取代的或未被取代的苯基；
Z102是氢原子，被取代或未被取代的烷基，被取代的或未被取代的环烷基，被取代或未被取代的，饱和或不饱和杂环基团，或被取代或未被取代的，饱和或不饱和杂双环基团；
所述被取代的杂环或者被取代的杂双环基团具有一个或多个取代基，其各自独立地选自羟基，氰基，被取代或未被取代的烷氧基，被取代的或未被取代的磺酰氨基，被取代或未被取代的脲基，被取代的或未被取代的甲酰氨基；被取代或未被取代的氨基，氧代基团，饱和的、不饱和的或芳族的被取代或未被取代的杂环基团，其中含有一个或多个氮原子、一个或多个氧原子或其联合；
其中所述氮原子独立地任选地被下列基团取代：被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基或者被取代或未被取代的芳基烷基；或
R2是式B-E，其中B是被取代或未被取代的环烷基，被取代或未被取代的氮杂环烷基，被取代或未被取代的氨基，被取代或未被取代的氨基烷基磺酰基，被取代的或未被取代的烷氧基烷基，被取代或未被取代的烷氧基，被取代的或未被取代的氨基烷基羰基，羟基，被取代或未被取代的亚烷基，被取代或未被取代的氨基烷基，被取代的或未被取代的亚烷基羰基或者被取代的或未被取代的氨基烷基羰基；且E是被取代或未被取代的氮杂环烷基，被取代或未被取代的氮杂环烷基羰基，被取代或未被取代的氮杂环烷基磺酰基，被取代的或未被取代的氮杂环烷基烷基，被取代或未被取代的杂芳基，被取代或未被取代的杂芳基羰基，被取代或未被取代的杂芳基磺酰基，被取代或未被取代的杂芳基烷基，被取代的或未被取代的氮杂环烷基羰基氨基，被取代或未被取代的杂芳基羰基氨基或者被取代的或未被取代的芳基；
a是1，而D1、G1、J1、L1和M1各自独立地选自如下：CRa和N，其条件是至少两个D1、G1、J1、L1和M1是CRa；
或者
a是0，而D1、G1、L1和M1之一是NRa，D1、G1、L1和M1之一是CRa，而其余独立地选自如下：CRa和N，其中Ra定义如上；b是1，而D2、G2、J2、L2和M2各自独立地选自如下：CRa和N，其条件是至少两个D2、G2、J2、L2和M2是CRa；
或者b是0，而D2、G2、L2和M2之一NRa，D2、G2、L2和M2之一是CRa，而其余独立地选自如下：CRa和N，其中Ra定义如上；且n每次出现时独立地是0至6的整数。
2.权利要求1所述的化合物，其中R3是H；R1每次出现时独立地选自如下：F，Cl，Br，I，CH3，NO2，OCF3，OCH3，CN，CO2CH3，CF3，-CH2NRdRe，叔丁基，吡啶基，被取代的或未被取代的噁唑基，被取代或未被取代的苄基，被取代的或未被取代的苯磺酰基，被取代或未被取代的苯氧基，被取代或未被取代的苯基，被取代或未被取代的氨基，羧基，被取代或未被取代的四唑基，及被取代的或未被取代的苯乙烯基。
3.权利要求1所述的化合物，其中R3是H；Ra每次出现时独立地选自如下：F，Cl，Br，I，CH3，NO2，OCF3，OCH3，CN，CO2CH3，CF3，叔丁基，吡啶基，被取代或未被取代的噁唑基，被取代或未被取代的苄基，被取代或未被取代的苯磺酰基，被取代或未被取代的苯氧基，被取代的或未被取代的苯基，被取代或未被取代的氨基，羧基，被取代或未被取代的四唑基，及被取代或未被取代的苯乙烯基。
4.权利要求1所述的化合物，其中R3是H；R2是下式
Figure A0081575900061
其中n是1、2或3。
5.权利要求1所述的化合物，其中R3是H；R2是下式其中m是0、1、2或3，且
Rg是H或-(CH2)pN(R4)R5，其中p是2至6的整数，而R4和R5各自独立地是H、氮杂双环烷基或Y-Z，其中Y选自-C(O)-，-(CH2)q，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，-CONH-，-(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)，-；其中q是0至6的整数；且r是0、1或2；且Z是被取代或未被取代的部分，其选自烷基、烷氧基、氨基、芳基、杂芳基和杂环烷基，或R4、R5和它们连接的氮原子一起形成3、4、5、6或7员被取代的或未被取代的杂环或杂双环基团。
6.权利要求1所述的化合物，其中R3是H；R2是下式
Figure A0081575900071
其中m是0、1、2或3，
a和b各自独立地是0至6的整数；
Q是-OR6或-NR4R5；
各R4和R5独立地是H、氮杂双环烷基或Y-Z，其中Y选自-C(O)-，-(CH2)q-，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，-CONH-，(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中q是0至6的整数；且r是0、1或2；且Z是被取代的或未被取代的烷基，被取代或未被取代的烷氧基，氨基，芳基，杂芳基或杂环烷基，或
R4、R5和它们所连接的氮原子一起形成3、4、5、6或7员的被取代或未被取代的杂环或杂双环基团；且
R6是氢原子或被取代或未被取代的烷基。
7.权利要求1所述的化合物，其中R3是H；R2是下式其中n是1、2或3；且
R4是H、氮杂双环烷基或Y-Z，其中Y选自-C(O)-，-(CH2)q-，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，CONH-，(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)-；其中q是0至6的整数；且r是0、1或2；且Z是被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的氨基，芳基，被取代或未被取代的杂芳基或者被取代的或未被取代的杂环烷基。
8.权利要求1所述的化合物，其中R3是H；R2是下式
Figure A0081575900081
其中m是0、1、2或3；
R5是H、氮杂双环烷基或Y-Z，其中Y选自共价键，-C(O)-，-(CH2)q，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，-CONH-，-(CH2)qO-，-(CH2)qNH-，-(CH2)qC(O)-，-C(O)(CH2)q-和-(CH2)qS(O)r-，其中-(CH2)q-、-(CH2)qO-、-(CH2)qNH-、-(CH2)qC(O)-、-C(O)(CH2)q-和-(CH)qS(O)r的烷基部分任选地被下列基团取代：卤素、羟基或烷基；其中q是0至6的整数；且r是0、1或2；且Z是被取代或未被取代的烷基，被取代的或未被取代的氨基，被取代或未被取代的烷氧基，被取代的或未被取代的芳基，被取代或未被取代的杂芳基或者被取代的或未被取代的杂环烷基；
或Y和Z一起是天然或非天然氨基酸，其在该胺的氮原子上可以单-或二-烷基化；且
R6表示各自独立地选自如下的一个或多个取代基：氢原子，羟基，氧代基团，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的杂环基，被取代或未被取代的烷氧基羰基，被取代或未被取代的烷氧基烷基，被取代或未被取代的氨基羰基，被取代的或未被取代的烷基羰基，被取代或未被取代的芳基羰基，被取代或未被取代的杂环基羰基，被取代的或未被取代的氨基烷基和被取代或未被取代的芳基烷基；其条件是与氮原子相邻的碳原子不被羟基取代。
9.权利要求1所述的化合物，其中R3是H；R2是下式其中R4是H、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的氮杂双环烷基或Y-Z，其中Y选自C(O)-，-(CH2)q，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，-CONH-，-(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中q是0至6的整数，而r是0、1或2；且Z是氢原子，被取代或未被取代的烷基，被取代的或未被取代的氨基，被取代或未被取代的芳基，被取代的或未被取代的杂芳基或者被取代的或未被取代的杂环烷基。
10.权利要求1所述的化合物，其中R3是H；R2是下式
Figure A0081575900091
其中m是1至6的整数；且R4和R5各自独立地是H、被取代或未被取代的氮杂双环烷基或Y-Z，其中Y选自-C(O)-，-(CHZ)q-，-S(O)，-C(O)O-，-SONH-，-CONH-，-(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中q是0至6的整数；且r是0、1或2；且Z是被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的氨基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的杂芳基或者被取代或未被取代的杂环烷基；或R4、R5和它们所连接的氮原子一起形成3、4、5、6或7-员被取代或未被取代的杂环或者被取代的或未被取代的杂双环基团。
11.权利要求1所述的化合物，其中R3是H；R2是下式其中n是0至4的整数；r是0而m是1至6的整数；或r是1而m是0至6的整数；
Q是-OR6或-NR4R5；各R4和R5独立地是H、被取代或未被取代的氮杂双环烷基或Y-Z，其中Y选自-C(O)-，-(CH2)q-，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，-CONH-，-(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；q是0至6的整数；且r是0、1或2；且Z是被取代的或未被取代的烷基，被取代或未被取代的烷氧基，被取代的或未被取代的氨基，被取代或未被取代的芳基，被取代的或未被取代的杂芳基或者被取代的或未被取代的杂环烷基；或R4、R5和它们所连接的氮原子一起形成3、4、5或6员被取代或未被取代的杂环基团；且
R6是氢原子或被取代或未被取代的烷基。
12.权利要求1所述的化合物，其中R3是H；R2是下式
Figure A0081575900101
n是0至4的整数；m是0至6的整数；
R4是H、被取代或未被取代的氮杂双环烷基或Y-Z，其中Y选自-C(O)-，-(CH2)q-，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，-CONH-，-(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中q是0至6的整数；且r是0、1或2；且Z是被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的氨基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的杂芳基或者被取代的或未被取代的杂环烷基；且
R6是氢原子或被取代或未被取代的烷基。
13.权利要求10所述的化合物，其中R4、R5和氮原子一起形成下式的杂环基团
Figure A0081575900111
其中
R7、R8、R9、R11、R12、R13、R13和R14各自独立地是低级烷基或氢原子；或者至少一对取代基R7和R8；R9和R10；R11和R12；或R13和R14一起是一个氧原子；或R7和R9中至少一个是氰基，CONHR15，COOR15，CH2OR15或CH2NR15(R16)，其中R15和R16各自独立地是H、氮杂双环烷基或V-L，其中V选自-C(O)-，-(CH2)p，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，-CONH-，(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整数，q是0至6的整数，而r是0、1或2；且L是被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的氨基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的杂芳基或者被取代的或未被取代的杂环烷基；或R15、R16和氮原子一起形成3、4、5、6或7-员被取代或未被取代的杂环或被取代的或未被取代的杂双环基团；
X是O、S、SO、SO2、CH2、CHOR17或NR17，其中R17是氢原子、被取代的或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代的或未被取代的芳基烷基、-C(NH)NH2，-C(O)R17或-C(O)OR18，其中R18是氢原子、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基或被取代或未被取代的芳基烷基；且t是0或1。
14.权利要求10所述的化合物，其中R4、R5和氮原子一起形成下式的杂环其中
R19和R20各自独立地是氢原子或低级烷基；或R10和R20一起是一个氧原子；
R21和R22各自独立地是H、被取代或未被取代的氮杂双环烷基或V-L，其中V选自如下：-C(O)-，-(CH2)p-，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，-CONH-，(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整数，q是0至6的整数，而r是0、1或2；且L是被取代或未被取代的烷基，被取代的或未被取代的氨基，被取代或未被取代的芳基，被取代的或未被取代的杂芳基或者被取代的或未被取代的杂环烷基；或
R21、R22和氮原子一起形成3、4、5或6-员被取代的或未被取代的杂环基团；m是1至6的整数；且n是0至6的整数。
15.权利要求10所述的化合物，其中R4、R5和氮原子一起形成下式的杂环基团
Figure A0081575900121
其中m是1至6的整数；且
R23是CH2OH，NRR′，C(O)NRR′或COOR，其中R和R′各自独立地是氢原子或者被取代的或未被取代的烷基，被取代的或未被取代的芳基或者被取代的或未被取代的芳基烷基。
16.权利要求10所述的化合物，其中R4、R5和氮原子一起形成下式的杂环基团其中R24是被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基或被取代或未被取代的芳基烷基，羧基，氰基，C(O)OR25，CH2OR25，CH2NR26R27或C(O)NHR26，其中R25是被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的芳基烷基，被取代或未被取代的杂环基或者被取代的或未被取代的杂环芳基；且R26和R27各自独立地是H、被取代的或未被取代的氮杂双环烷基或V-L，其中V选自-C(O)-，-(CH2)p-，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，-CONH-，(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整数，q是0至6的整数，而r是0、1或2；且L是被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的氨基，被取代的或未被取代的芳基，被取代或未被取代的杂芳基或者被取代的或未被取代的杂环烷基；或R26、R27和氮原子一起形成3、4、5或6-员被取代或未被取代的杂环基团。
17.权利要求10所述的化合物，其中R4和R5的至少一个是式Y-Z，其中Z是下式
Figure A0081575900131
其中
T是C(O)、S、SO、SO2、CHOR或NR，其中R是氢原子或被取代的或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基或者被取代的或未被取代的芳基烷基；且n是0、1或2。
18.权利要求10所述的化合物，其中R4和R5的至少一个是式Y-Z，其中Z是式-N(R28)R29，其中R28和R29各自独立地是被取代或未被取代的羧基烷基，被取代的或未被取代的烷氧基羰基烷基，被取代或未被取代的羟基烷基，被取代或未被取代的烷基磺酰基，被取代的或未被取代的烷基羰基或者被取代的或未被取代的氰基烷基；或
R28和R29与氮原子一起形成5或6员被取代或未被取代的杂环基团。
19.权利要求11所述的化合物，其中R4、R5和氮原子一起形成下式的杂环基团其中R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13和R14各自独立地是低级烷基或氢原子；或取代基R7和R8；R9和R10；R11和R12；或R13和R14中至少一对一起是一个氧原子；或R7和R9中至少一个是氰基，CONHR15，COOR15，CH2OR15或CH2NR15(R16)，其中R15和R16各自独立地是H、被取代或未被取代的氮杂双环烷基或V-L，其中V选自-C(O)-，-(CH2)p-，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，-CONH-，(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整数，q是0至6的整数，而r是0、1或2；且L是被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的氨基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的杂芳基或者被取代或未被取代的杂环烷基；或R15、R16和氮原子一起形成3、4、5、6或7-员被取代或未被取代的杂环或杂双环基团；
X是O、S、SO、SO2、CH2、CHOR17或NR17，其中R17是氢原子，被取代的或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基，被取代的或未被取代的芳基烷基，-C(NH)NH2，-C(O)R18或-C(O)OR18，其中R18是氢原子、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基或被取代或者未被取代的芳基烷基；且
t是0或1。
20.权利要求11所述的化合物，其中R4、R5和氮原子一起形成下式的杂环基团
Figure A0081575900142
其中R19和R20各自独立地是氢原子或低级烷基；或R19和R20一起是一个氧原子；
R21和R22各自独立地是H、被取代或未被取代的氮杂双环烷基或V-L，其中V选自-C(O)-，-(CH2)p-，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，-CONH-，(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整数，q是0至6的整数，而r是0、1或2；且L是被取代或未被取代的烷基，被取代的或未被取代的氨基，被取代或未被取代的芳基，被取代的或未被取代的杂芳基或者被取代的或未被取代的杂环烷基；或R21、R22和氮原子一起形成3、4、5或6-员被取代的或未被取代的杂环基团；
m是1至6的整数；且
n是0至6的整数。
21.权利要求11所述的化合物，其中R4、R5和氮原子一起形成下式的杂环基团
Figure A0081575900151
其中m是1至6的整数；且
R23是CH2OH、NRR′、C(O)NRR′或COOR，其中R是氢原子或被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基或者被取代的或未被取代的芳基烷基。
22.权利要求11所述的化合物，其中R4、R5和氮原子一起形成下式的杂环基团
Figure A0081575900152
其中R24是被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基或者被取代或未被取代的芳基烷基，羧基，氰基，C(O)OR25，CH2OR25，CH2NR26R27或C(O)NHR26，其中R25是被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的芳基烷基，被取代或未被取代的杂环基或者被取代的或未被取代的杂环芳基；且R26和R27各自独立地是H、被取代或未被取代的氮杂双环烷基或V-L，其中V选自-C(O)-，-(CH2)p-，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，-CONH-，(CH2)qO-，-(CHZ)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整数，q是0至6的整数，而r是0、1或2；且L是被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的氨基，被取代的或未被取代的芳基，被取代或未被取代的杂芳基或者被取代的或未被取代的杂环烷基；或R26、R27和氮原子一起形成3、4、5或6-员被取代或未被取代的杂环基团。
23.权利要求11所述的化合物，其中R4和R5的至少一个是式Y-Z，其中Z是下式其中
g是0或1；
T是C(O)、O、S、SO、SO2、CH2、CHOR17或NR17，其中R17是氢原子，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的芳基烷基，-C(NH)NH2，-C(O)R18或-C(O)OR18，其中R18是氢原子、被取代或未被取代的烷基、被取代的或未被取代的芳基或者被取代的或未被取代的芳基烷基；且
R32是氢原子，氰基，被取代或未被取代的烷基，被取代的或未被取代的烷氧基羰基，被取代或未被取代的烷氧基烷基，被取代或未被取代的羟基烷基，被取代或未被取代的氨基羰基，被取代或未被取代的烷基羰基或者被取代的或未被取代的芳基烷基。
24.权利要求11所述的化合物，其中R4和R5的至少一个是式Y-Z，其中Z是式-N(R28)R29，其中R28和R29各自独立地是被取代或未被取代的羧基烷基，被取代的或未被取代的烷氧基羰基烷基，被取代或未被取代的羟基烷基，被取代或未被取代的烷基磺酰基，被取代的或未被取代的烷基羰基或者被取代的或未被取代的氰基烷基；或
R28和R29与氮原子一起形成5或6员被取代或未被取代的杂环基团。
25.权利要求8所述的化合物，其中R5是Y-Z，其中Z是式N(R30)R31，其中R30和R31各自独立地是氢原子，烷基，烷氧基羰基，烷氧基烷基，羟基烷基，氨基羰基，氰基，烷基羰基或芳基烷基。
26.权利要求8所述的化合物，其中R5是Y-Z，其中Z是下式
Figure A0081575900171
其中各X独立地是CH或N；且
R32是氢原子，氰基，被取代或未被取代的烷基，被取代的或未被取代的烷氧基羰基，被取代或未被取代的烷氧基烷基，被取代或未被取代的羟基烷基，被取代或未被取代的氨基羰基，被取代或未被取代的烷基羰基或者被取代的或未被取代的芳基烷基。
27.权利要求8所述的化合物，其中R5是Y-Z，其中Z是下式其中
g是0或1；
T是O、S、SO、SO2、CH2、CHOR17或NR17，其中R17是氢原子，被取代的或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基，被取代的或未被取代的芳基烷基，C(O)NH2，-C(NH)NH2，-C(O)R17或-C(O)OR18，其中R18是氢原子，被取代或未被取代的烷基，被取代的或未被取代的芳基或者被取代的或未被取代的芳基烷基；且
R32是氢原子，氰基，被取代或未被取代的烷基，被取代的或未被取代的烷氧基羰基，被取代或未被取代的烷氧基烷基，被取代或未被取代的羟基烷基，被取代或未被取代的氨基羰基，被取代或未被取代的烷基羰基或者被取代的或未被取代的芳基烷基。
28.权利要求8所述的化合物，其中R5是Y-Z，其中Z是下式
Figure A0081575900181
其中g是0、1或2；且
R32是氢原子，氰基，被取代或未被取代的烷基，被取代的或未被取代的烷氧基羰基，被取代或未被取代的烷氧基烷基，被取代或未被取代的羟基烷基，被取代或未被取代的氨基羰基，被取代或未被取代的烷基羰基或者被取代的或未被取代的芳基烷基。
29.权利要求8所述的化合物，其中R5是Y-Z，其中Z是下式
Figure A0081575900182
其中
T是C(O)、O、S、SO、SO2、CH2、CHOR17或NR17，其中R17是氢原子，被取代或未被取代的烷基，芳基，芳基烷基，-C(NH)NH2，-C(O)R18，或C(O)OR18，其中R18是氢原子，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基或者被取代的或未被取代的芳基烷基；
g是0或1；且
R32是氢原子，氰基，被取代或未被取代的烷基，被取代的或未被取代的烷氧基羰基，被取代或未被取代的烷氧基烷基，被取代或未被取代的羟基烷基，被取代或未被取代的氨基羰基，被取代或未被取代的烷基羰基或者被取代的或未被取代的芳基烷基。
30.权利要求8所述的化合物，其中R5是Y-Z，其中Z是下式其中
R32是氢原子，氰基，被取代或未被取代的烷基，被取代的或未被取代的烷氧基羰基，被取代或未被取代的烷氧基烷基，被取代或未被取代的羟基烷基，被取代或未被取代的氨基羰基，烷基羰基，被取代或未被取代的硫代烷氧基或者被取代或未被取代的芳基烷基；且
R33是氢原子，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的烷氧基羰基，被取代或未被取代的烷氧基烷基，被取代或未被取代的氨基羰基，全卤代烷基，被取代的或未被取代的链烯基，被取代或未被取代的烷基羰基或者被取代或未被取代的芳基烷基。
31.权利要求1所述的化合物，其中R3是H；R2是下式其中m是0或1；
R34、R35、R36、R37、R38、R39、R40和R41各自独立地是甲基或氢原子；
或R34和R35；R36和R37；R38和R39；或R40和R41中的至少一对取代基一起是一个氧原子；且R42是H、被取代或未被取代的氮杂双环烷基或Y-Z，其中Y选自-C(O)-，-(CH2)p-，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，CONH-，(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整数，q是0至6的整数，而r是0、1或2；且Z是被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的氨基，被取代的或未被取代的芳基，被取代或未被取代的杂芳基或者被取代的或未被取代的杂环烷基；或
R42是下式其中u是0或1；
R43、R44、R45、R46、R47、R48、R49和R50各自独立地是甲基或氢原子；或R43和R44；R45和R46；R47和R48；或R49和R50中至少一对取代基一起是一个氧原子；且
R51是H、被取代或未被取代的氮杂双环烷基或V-L，其中V选自-C(O)-，-(CH2)p-，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，-CONH-，(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整数，q是0至6的整数，而r是0、1或2；且L是被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的氨基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的杂芳基或者被取代或未被取代的杂环烷基。
32.权利要求1所述的化合物，其中R3是H；R2是下式其中h、i、j、k和l独立地是0或1；
R52、R53、R54、R55、R56、R57、R58、R59、Rg和Rh各自独立地是甲基或氢原子；或R52和R53；R54和R55；R56和R57；或R58和R59中的至少一对取代基一起是一个氧原子；且
R60是H、被取代或未被取代的氮杂双环烷基或Y-Z，其中Y选自-C(O)-，-(CH2)p，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，-CONH-，-(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整数，q是0至6的整数，而r是0、1或2；且Z是被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的氨基，被取代的或未被取代的芳基，被取代或未被取代的杂芳基或者被取代的或者未被取代的杂环烷基；或
R60是下式其中v是0或1；
R61、R62、R63、R64、R65、R66、R67和R68各自独立地是低级烷基或氢原子；或R61和R62；R63和R64；R65和R66；及R67和R68中的至少一对取代基一起是一个氧原子；且
R69是H、被取代或未被取代的氮杂双环烷基或V-1，其中V选自-C(O)-，-(CH2)p-，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，-CONH-，(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r；其中p是0至6的整数，q是0至6的整数，而r是0、1或2；且L是被取代的或未被取代的烷基，被取代或未被取代的氨基，被取代的或未被取代的芳基，被取代或未被取代的杂芳基或者被取代的或未被取代的杂环烷基。
33.抑制患者的一种或多种蛋白激酶活性的方法，该方法包括给所述患者使用治疗有效量的权利要求1所述的化合物或其生理可接受盐、前药或生物活性代谢物。
34.权利要求33所述的方法，其中所述蛋白激酶选自KDR、FGFR-1、PDGFRβ、PDGFRα、IGF-1R、c-Met、Flt-1、Flt-4、TIE-2、TIE-1、Lck、Src、fyn、Lyn、Blk、hck、fgr和yes。
35.影响患者的过度增殖性紊乱的方法，该方法包括给所述患者使用治疗有效量的权利要求1所述的化合物或其生理可接受盐、前药或生物活性代谢物。
36.影响患者的血管生成的方法，该方法包括给所述患者使用治疗有效量的权利要求1所述的化合物或其生理可接受盐、前药或生物活性代谢物。
37.权利要求33所述的方法，其中所述蛋白激酶是蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶或蛋白酪氨酸激酶。
38.治疗患者的一种或多种溃疡的方法，该方法包括给所述患者使用治疗有效量的权利要求1所述的化合物或其生理可接受盐、前药或生物活性代谢物。
39.权利要求38的方法，其中所述一种或多种溃疡是由细菌或真菌感染引起的；或所述一种或多种溃疡是莫伦氏溃疡；或所述一种或多种溃疡是溃疡性结肠炎的症状。
40.治疗患者的病症的方法，该方法包括给所述患者使用治疗有效量的权利要求1所述的化合物或其生理可接受盐、前药或生物活性代谢物，其中所述病症是眼部病症，心血管病，癌症，Crow-Fukase(POEMS)综合征，糖尿病，镰刀细胞贫血病，慢性炎症，系统性狼疮，肾小球性肾炎，滑膜炎，炎性肠疾病，克罗恩氏病，肾小球性肾炎，类风湿性关节炎，骨关节炎，多发性硬化，移植物排斥，莱姆病，败血症，von Hippel Lindau病，类天疱疮，牛皮癣，佩吉特氏病，多囊性肾病，纤维变性疾病，肉样瘤病，肝硬化，甲状腺炎，粘滞性过高综合征，Osler-Weber Rendu病，慢性梗塞性肺病，哮喘或烧伤、外伤、辐射、中风、低氧症、局部出血后水肿，卵巢高刺激性综合征，子痫前期，月经过多，子宫内膜异位或单纯性疱疹、带状疱疹、人类免疫缺陷病毒、副痘病毒、原生动物或弓形体病引起的感染。
41.权利要求40所述的方法，其中所述眼部病症是眼或视网膜黄斑水肿，眼新血管病，巩膜炎，光角膜切开术，眼色素层炎，玻璃体炎，近视，眼凹，慢性视网膜脱离，激光治疗后并发症，结膜炎，遗传性黄斑变性，Eales病，视网膜病视网膜黄斑变性。
42.权利要求40所述的方法，其中所述心血管病是动脉粥样硬化、再狭窄、局部出血/再灌注损伤、血管闭塞或颈动脉梗塞性疾病。
43.权利要求40所述的方法，其中所述癌症是实体瘤，肉瘤，纤维肉瘤，骨瘤，黑素瘤，成视网膜细胞瘤，成横纹肌细胞肉瘤，成胶质细胞瘤，成神经细胞瘤，畸胎样瘤，造血系统恶性肿瘤，Kaposi氏肉瘤，何杰金氏病，淋巴瘤，骨髓瘤，白血病或恶性腹水。
44.权利要求40所述的方法，其中所述糖尿病是胰岛素依赖性糖尿病性青光眼，糖尿病性视网膜病或微血管病。
45.降低患者生育力的方法，该方法包括给所述患者使用有效量的权利要求1所述的化合物或其生理可接受盐、前药或生物活性代谢物的步骤。
46.权利要求36的方法，其中所述化合物或其生理可接受盐、前药或生物活性代谢物是以促进血管生成或血管发生的有效量给药的。
47.权利要求34的方法，其中所述蛋白激酶是Tie-2。
48.权利要求46的方法，其中所述式I化合物或其生理可接受盐、前药或生物活性代谢物与原血管生成生长因子联合给药。
49.权利要求48的方法，其中所述原血管生成生长因子选自VEGF、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E、HGF、FGF-1、FGF-2、其衍生物及抗独特型抗体。
50.权利要求46的方法，其中所述患者患有贫血，局部出血，梗塞，移植排斥，创伤，坏疽或坏死。
51.权利要求33所述的方法，其中所述蛋白激酶活性参与T细胞活化、B细胞活化、干细胞脱粒、单核细胞活化、炎性反应的强化或其组合。
52.权利要求1所述的化合物，其中R3是H；
R2是-Z101-Z102，其中Z101是共价键，-(C1-C6)-，-(C1-C6)-O-，-(C1-C6)-C(O)-，-(C1-C6)-C(O)O-，-(C1-C6)-C(O)-NH-，-(C1-C6)-C(O)-N((C1-C6))-或被取代的苯基；且
Z102是氢原子、被取代或未被取代的烷基、或被取代的或未被取代的饱和或不饱和的杂环基团。
53.权利要求52所述的化合物，其中Z101选自-CH2-C(O)O-，-CH2-C(O)-，-CH2-C(O)-NH-，-CH2-C(O)-N(Me)-，-CH(Me)-C(O)O-，-(CH2)3-C(O)O-，-CH(Me)-C(O)-NH-和-(CH2)3-C(O)-NH-；
Z102选自如下：氢原子，甲基、乙基、N，N-二甲基氨基乙基、N，N-二乙基氨基乙基、2-苯基-2-羟基乙基、4-吗啉基、哌嗪基、N-甲基哌嗪基和2-羟基甲基吡咯烷基。
54.权利要求53所述的化合物，其中G是 或
Figure A0081575900243
其中
Z100是被取代或未被取代的苯并噁唑基或者被取代的或未被取代的苯并噻唑基。
55.权利要求8、9、10或53所述的化合物，其中G是
Figure A0081575900244
或
Figure A0081575900246
其中只有一个Ra且其是H或F。
56.权利要求52所述的化合物，其中Z101是共价键；且Z102是任选地被取代的吡啶基。
57.权利要求56所述的化合物，其中G是
58.权利要求1所述的化合物，其中R3是H；
R2是环戊基；且G是
59.权利要求58所述的化合物，其中
Z110是氢原子；
A是O；且Z100是任选地被取代的苯基、呋喃基或噻吩基，其中Z100任选地被一个或多个取代基取代，所述取代基各自独立地选自F、COOH、NO2、OMe、-COOMe、OCF3和CF3。
60.权利要求58所述的化合物，其中
Z110是氢原子；
A是-O-、-O-(CR2)n-C(O)-或-O-(CR2)n-O-；
n每次出现时是0至3；
Z100是任选地被取代的基团，取代基选自环己基，苯基，四氢吡喃基，四氢呋喃基，异噁唑基和哌啶基；其中Z100任选地被一个或多个取代基取代，所述取代基选自烷基、烷氧基、卤素、羟基和烷氧基羰基。
61.权利要求58所述的化合物，其中R2是任选地被取代的基团，其选自环丁基和环己基。
62.权利要求61所述的化合物，其中R2任选地被选自如下的一个或多个取代基取代：羟基，烷基，羟基烷基，羧基烷基和苯基烷氧基烷基。
63.权利要求62所述的化合物，其中G是4-苯氧基苯基。
64.权利要求6所述的化合物，其中m是2；a是0；R6是H；b是1或2；而R4和R5各是氢原子。
65.权利要求8所述的化合物，其中m是0、1或2；R6是氢原子；R5是H或Y-Z；其中Y是共价键，-C(O)-，-(CH2)qO-，-(CH2)q-，-(CHZ)qC(O)-或-C(O)(CH2)q-，其中-(CH2)qO-、-(CH2)q、-(CH2)qC(O)-和-C(O)(CH2)q-的烷基部分任选地被下列基团取代：卤素、羟基或烷基；且
Z是氢原子、烷基、任选地被取代的烷基、烷氧基烷基、任选地被取代的杂环烷基、任选地被取代的杂芳基、或任选地被取代的氨基。
66.权利要求65所述的化合物，其中
Z是氢原子、甲基、乙基、羟基甲基、甲氧基乙基、N-甲基哌啶基、(叔丁氧基羰基)(羟基)-哌啶基、羟基哌啶基、(羟基甲基)哌啶基、(羟基)(甲基)-哌啶基、4-吗啉基、(甲氧基乙基)哌嗪基、甲基哌嗪基、4-哌啶基哌啶基、咪唑基、甲基咪唑基、N-甲基氨基、N，N-二甲基氨基、N-异丙基氨基、N，N-二乙基氨基、2，3-二羟基丙基氨基、2-羟基乙基氨基、3-羟基丙基氨基、甲氧基乙基氨基、乙氧基羰基甲基氨基、苯基甲基氨基、N-甲基-N-甲氧基氨基、
Figure A0081575900261
呋喃基甲基氨基、哌啶基乙基氨基、N-(2-N，N-二甲基氨基乙基)-N-甲基氨基、2-N，N-二甲基氨基乙基氨基、N-甲基-N-(N-甲基哌啶-4-基)氨基、2-(4-吗啉基)-乙基氨基、3-(4-吗啉基)-丙基氨基、3-咪唑基丙基氨基或3-(2-氧代吡咯烷基)丙基氨基。
67.权利要求8所述的化合物，其中m是2；R5是Y-Z；Y是-C(O)-；且Z是其中n是0、1、2或3。
68.权利要求9所述的化合物，其中
R4是氢原子或甲基；G是
A选自O，-N(R)-和-N(R)C(O)-；
Z111是-(CH2)n-环烷基-(CH2)n-；
R是氢原子或烷基；
n是0至5；
Ra是一个或多个取代基，各自独立地选自H、OH、F、Cl、甲基和甲氧基；且
R，is一个或多个取代基，各自独立地选自H、CN、F、CF3、OCF3、甲基、甲氧基和任选地被取代的氨基；
其中所述氨基任选地被一个或两个基团取代，取代基各自独立地选自烷基、烷氧基烷基、苯基、被取代的苯基、及任选地被取代的杂芳基。
69.权利要求68所述的化合物，其中R1是4-甲基苯硫基或2-吡啶硫基。
70.权利要求9所述的化合物，其中
G是其中Z100选自苯并[b]噻吩基、呋喃基和噻吩基。
71.权利要求9所述的化合物，其中Ra是烷氧基；A是-NH-C(O)-；且在A和Z100之间存在一个共价键。
72.权利要求1、8或9所述的化合物，其中
G是
Figure A0081575900272
其中A选自-N(R)-C(O)-N(R)-，-(CH2)n-N(R)C(O)N(R)-，-N(R)-和-N(R)-SO2-；R是氢原子或烷基；Z100是
Figure A0081575900281
吡啶基，噻唑基，呋喃基，苯并呋喃基或噁唑基；
X是S、O或NR′其中R′每次出现时独立地是H或Me；
Ra是一个或多个取代基，其各自独立地选自H和F；且
R1是一个或多个取代基，其各自独立地选自H、F、Cl、Br、NO2、CF3、烷基、烷氧基和烷氧基羰基。
73.权利要求72所述的化合物，其中R4是甲基；m是1、2或3；R5是Y-Z，其中Y是-C(O)O-、-C(O)-或-C(O)-(CH2)p-；
且Z是氨基烷基、N-烷基氨基、N，N-二烷基氨基或羟基烷基氨基烷基。
74.权利要求9所述的化合物，其中R4是甲基；G是其中n是0至3；Z100是任选地被取代的基团，选自吲哚基、茚基、甲基茚基、甲基吲哚基、二甲基氨基苯基、苯基、环己基和苯并呋喃基。
75.权利要求9的化合物，其中
G是其中Z100是任选地被取代的基团，其选自如下：苯基、咪唑基、吲哚基、呋喃基、苯并呋喃基和2，3-二氢苯并呋喃基；
其中Z100任选地被一个或多个取代基取代，所述取代基各自独立地选自如下：F、Cl、CN、任选地被取代的烷基、-O-(任选地被取代的烷基)、-COOH、-Z105-C(O)N(R)2、-Z105-N(R)-C(O)-Z200、-Z105-N(R)-S(O)2-Z200及-Z105-N(R)-C(O)-N(R)-Z200；，
Z105是共价键或(C1-C6)；
Z200是任选地被取代的基团，其选自(C1-C6)、苯基和-(C1-C6)-苯基；
Z110和Z111各自独立地是共价键或(C1-C3)基团，其任选地被烷基、羟基、COOH、CN或苯基取代；且
A是O、-N(R)-C(O)-N(R)-、-N(R)-C(O)-O-、-N(R)-或-N(R)-C(O)-，其中R是H或烷基。
76.权利要求75所述的化合物，其中R4是甲基。
77.权利要求8、9或10所述的化合物，其中
G是其中Z100是任选地被取代的基团，其选自苯并噁唑基、苯并噻唑基和苯并咪唑基。
78.权利要求77所述的化合物，其中R4是甲基；A是-NH-；只有一个Ra且其是H或F；且Z100任选地被一个或多个取代基取代，所述取代基各自独立地选自烷基、卤素、CF3和烷氧基。
79.权利要求9所述的化合物，其中
G是
Z100是任选地被取代的基团，其选自苯基、吡咯基、吡啶基、苯并咪唑基、萘基和其中Z100任选地被一个或多个取代基取代，所述取代基各自独立地选自如下：F、Cl、Br、NO2、氨基、N-烷基氨基、N，N-二烷基氨基、CN、任选地被取代的烷基、-O-(任选地被取代的烷基)和苯基；
Z110和Z111每次出现时独立地是(C1-C3)，其任选地被任选地被取代的苯基取代；且
A是-N(R)-C(O)-N(R)-，-N(R)-S(O)2-，-N(R)-C(O)-，-N(R)-或-N(R)-C(O)-O-。
80.权利要求79所述的化合物，其中R4是甲基且只存在一个Ra且其是F。
81.权利要求9或66所述的化合物，其中
G是其中Z110是任选地被取代的基团，其选自苯基、异噁唑基、四氢萘基、呋喃基、苯并呋喃基、吡啶基和吲哚基；
其中Z100任选地被一个或多个取代基取代，所述取代基各自独立地选自F、CN、NO2、-C(O)H、-CONH2、-NHSO2CF3、任选地被取代的烷基、任选地被取代的杂芳基和-O-(任选地被取代的烷基)；
Z110和Z111各自独立的是任选地被取代的(C0-C3)；且
A是O，-N(R)-C(O)-(CH2)n-N(R)-，-C(O)-N(R)-，-N(R)-C(O)-O-，-N(R)-C(O)-或-N(R)-。
82.权利要求81所述的化合物，其中R4是甲基；Ra是H或甲氧基；且Z110和Z111各自都未被取代。
83.权利要求9所述的化合物，其中G是
Figure A0081575900311
其中R是H或低级烷基，而n每次出现时独立地是1至6。
84.权利要求83所述的化合物，其中G是
Figure A0081575900312
85.权利要求84所述的化合物，其中Z100是被取代的或未被取代的苯基。
86.权利要求8、9或10所述的化合物，其中
G是其中Z100是任选地被取代的基团，其选自苯并噁唑基、苯并噻唑基和苯并咪唑基。
87.权利要求11所述的化合物，其中n是2；R6是H；m是1；r是1；而R4和R5各是氢原子。
88.权利要求64或87所述的化合物，其中G是4-苯氧基苯基。
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