CN113543801A - 含有非洲猪瘟病毒肽及蛋白的免疫原性组合物及疫苗以及其用途 - Google Patents

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Abstract

本发明是关于非洲猪瘟病毒(ASFV)肽和/或多肽以及其免疫原性片段、对应的编码AFSV寡核苷酸和/或多核苷酸以及其免疫原性片段、免疫原性组合物、疫苗以及其用途。

Description

含有非洲猪瘟病毒肽及蛋白的免疫原性组合物及疫苗以及其 用途
序列表
本申请案包含符合37C.F.R.1.821-1.825的序列表。本申请案随附序列表以全文引用的方式并入本文中。
技术领域
本发明是关于兽医疫苗领域,且具体言的关于非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白以及其免疫原性片段、对应的编码非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸以及其免疫原性片段、免疫原性组合物、疫苗以及其用途。
背景技术
非洲猪瘟(ASF)在2007年引入乔治亚且随后自2018年在亚洲扩散之后连续蔓延遍及欧洲大陆,此种情况证明此种疾病为全世界养猪业的主要威胁。ASF为具有世界动物卫生组织(OIE)的强制性宣告的猪出血性疾病且对受影响国家造成巨大经济损失。病原体非洲猪瘟病毒(ASFV)为具有长度为约180kbp的dsDNA基因组的大包膜二十面体病毒。当前不存在商业抗ASFV疫苗。后续以经感染动物及接触动物的屠宰的早期且有效诊断为现今OIE所推荐的唯一控制方法、处境较差地区不幸地难以承受的措施。
ASF疫苗研发很大程度上因缺乏关于ASFV感染及保护性免疫的重要方面的知识而受阻。在此方面,已广泛地显示CD8+T淋巴球在抗ASFV的保护性反应中发挥重要作用。然而,能够诱导保护性CD8+T细胞反应的ASFV抗原的身分标识很大程度上仍然未知。该等保护性抗原的识别可产生ASFV免疫基础机制的基本疫苗设计原理以及优选理解。
已确认在使用减毒活病毒的情况下提供抗Georgia2007/1分离株保护的可行性(Monteagudo等人,2017;O'Donnell等人,2015),此举证明保护性Georgia2007/1抗原的存在。尽管如此,虽然已证实DNA疫苗接种成功地确定具有抗E75 ASFV保护性潜能的抗原或表位(Argilaguet等人,2012;Lacasta等人,2014),但此等结果在针对高度毒性Georgian分离株而言时不可再现。其他基于DNA的疫苗调配物已呈现ASFV特异性反应,但再次未能赋予抗Georgia2007/1分离株/病毒株保护(Jancovich等人,2018;Lopera-Madrid等人,2017)。
另一先前技术如下:
Farlow J等人(Virology Journal 2018,15(1):190)描述来自乔治亚国的高度病原性非洲猪瘟病毒(ASFV)的内部流行性基因组变化。
Uniprot数据库揭示登陆编号为A0A2X0RVA9的ASFV Georgia 2007/1全CDS蛋白A118R。
De Villiers EP等人(Virology 2010,400:128-136)描述11种完全非洲猪瘟病毒基因组序列的谱系学分析。
Netherton CL等人(Front Immunol 2019,10:1318)描述非洲猪瘟病毒抗原的识别及免疫原性。
Sánchez EG等人(Virus Research 2019,265:150-155)描述抗非洲猪瘟病毒疫苗的研发。
WO 2017/096341揭示以腺病毒为载体的多价疫苗。
仍然存在对特别地赋予抗Georgia2007/1ASFV分离株/病毒株保护的安全ASF疫苗的未满足需求。
发明内容
为克服先前技术中的不足,本发明提供含有以下的免疫原性组合物:
(a)一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段;和/或
(b)编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段;和/或
(c)病毒或细菌载体,优选是重组和/或非天然存在的病毒或细菌载体,其含有编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段;以及
(d)视情况选用之一或多种医药学上或兽医学上可接受的载剂或赋形剂,该一或多种载剂或赋形剂优选是适用于经口、皮内、肌内或鼻内施用。
本发明进一步关于含有以下的疫苗或医药组合物:
(a)一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段;和/或
(b)编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段;和/或
(c)病毒或细菌载体,优选是重组和/或非天然存在的病毒或细菌载体,其含有编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段;以及
(d)一或多种医药学上或兽医学上可接受的载剂或赋形剂,该一或多种载剂或赋形剂优选是适用于经口、皮内、肌内或鼻内施用;
该疫苗或医药组合物视情况进一步含有佐剂。
本发明进一步关于用于减少或预防猪科动物,优选是猪的由至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒感染造成的临床症状或疾病的方法中、或用于治疗和/或预防猪科动物,优选是猪的至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒感染的方法中的如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中该等由至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒感染造成的临床症状或疾病或该至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒感染优选是选自由以下组成的组:非洲猪瘟、急性非洲猪瘟、慢性非洲猪瘟、病死、死亡、猝死、发热、高热、厌食、嗜睡、虚弱、食欲缺乏、伏卧、红斑、发绀性皮肤斑痣病、痢疾、便秘、腹痛、呼吸道症状、咳嗽、呕吐、呼吸困难、鼻涕及结合膜分泌物、出血、流鼻血、流产、白血球减少症、血小板减少症。本发明亦意欲含有减少或预防猪科动物,优选是猪的由至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒感染造成的临床症状或疾病的对应方法、或治疗和/或预防猪科动物,优选是猪的至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒感染的对应方法(其含有向该猪科动物,优选是猪施用如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物)、以及如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物用于制备用以减少或预防猪科动物,优选是猪的由至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒感染造成的临床症状或疾病或用以治疗和/或预防猪科动物,优选是猪的至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒感染的药剂的对应用途。
本发明进一步关于用于使猪科动物,优选是猪免疫,以对抗至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒在猪科动物,优选是猪中造成的临床疾病的方法中的如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,该方法含有以下步骤:向猪科动物,优选是猪施用如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中该免疫原性组合物或疫苗或医药组合物不会造成临床感染症状,但能诱导使猪科动物,优选是猪对该至少一种非洲猪瘟病毒,优选是该至少一种非洲猪瘟病毒的病原性形式免疫的免疫反应,其中该临床疾病或该等临床感染症状优选是选自由以下组成的组:非洲猪瘟、急性非洲猪瘟、慢性非洲猪瘟、病死、死亡、猝死、发热、高热、厌食、嗜睡、虚弱、食欲缺乏、伏卧、红斑、发绀性皮肤斑痣病、痢疾、便秘、腹痛、呼吸道症状、咳嗽、呕吐、呼吸困难、鼻涕及结合膜分泌物、出血、流鼻血、流产、白血球减少症、血小板减少症。本发明亦意欲含有使猪科动物,优选是猪免疫,以对抗至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒在猪科动物,优选是猪中造成的临床疾病的对应方法,该方法含有以下步骤:向猪科动物,优选是猪施用如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中该免疫原性组合物或疫苗或医药组合物不会造成临床感染症状,但能诱导使猪科动物,优选是猪对该至少一种非洲猪瘟病毒,优选是该至少一种非洲猪瘟病毒的病原性形式免疫的免疫反应;以及如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物用于制备用以使猪科动物,优选是猪免疫,以对抗至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒在猪科动物,优选是猪中造成的临床疾病的药剂的对应用途,其中该免疫原性组合物或疫苗或医药组合物不会造成临床感染症状,但能诱导使猪科动物,优选是猪对该至少一种非洲猪瘟病毒,优选是该至少一种非洲猪瘟病毒的病原性形式免疫的免疫反应。
本发明进一步关于用于对猪科动物,优选是猪进行初免-加强型免疫,以对抗至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒在猪科动物,优选是猪中造成的临床疾病的方法中的如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,该方法含有以下步骤:向猪科动物,优选是猪施用一次或两次含有以下的如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物:(i)作为唯一免疫原组分的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段;或(ii)病毒或细菌载体,优选是重组和/或非天然存在的病毒或细菌载体,其含有作为唯一免疫原组分的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段(初免步骤);且随后-在初免一次或两次之后-向猪科动物,优选是猪施用减毒活非洲猪瘟病毒,优选是BA71ΔCD2(加强步骤);其中该免疫原性组合物或疫苗或医药组合物以及减毒活非洲猪瘟病毒彼此独立地不会造成临床感染症状,但能诱导使猪科动物,优选是猪对该至少一种非洲猪瘟病毒,优选是该至少一种非洲猪瘟病毒的病原性形式免疫的免疫反应,其中该临床疾病或该等临床感染症状优选是选自由以下组成的组:非洲猪瘟、急性非洲猪瘟、慢性非洲猪瘟、病死、死亡、猝死、发热、高热、厌食、嗜睡、虚弱、食欲缺乏、伏卧、红斑、发绀性皮肤斑痣病、痢疾、便秘、腹痛、呼吸道症状、咳嗽、呕吐、呼吸困难、鼻涕及结合膜分泌物、出血、流鼻血、流产、白血球减少症、血小板减少症。本发明亦意欲包括对猪科动物,优选是猪进行初免-加强型免疫,以对抗至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒在猪科动物,优选是猪中造成的临床疾病的对应方法,该方法含有以下步骤:向猪科动物,优选是猪施用一次或两次含有以下的如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物:(i)作为唯一免疫原组分的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段;或(ii)病毒或细菌载体,优选是重组和/或非天然存在的病毒或细菌载体,其含有作为唯一免疫原组分的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段(初免步骤);且随后-在初免一次或两次之后-向猪科动物,优选是猪施用减毒活非洲猪瘟病毒,优选是BA71ΔCD2(加强步骤);其中该免疫原性组合物或疫苗或医药组合物以及减毒活非洲猪瘟病毒彼此独立地不会造成临床感染症状,但能诱导使猪科动物,优选是猪对该至少一种非洲猪瘟病毒,优选是该至少一种非洲猪瘟病毒的病原性形式免疫的免疫反应;以及如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物用于制备用以对猪科动物,优选是猪进行初免-加强型免疫,以对抗至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒在猪科动物,优选是猪中造成的临床疾病的药剂的对应用途。
本发明进一步关于用于试剂盒,其用于猪科动物,优选是猪进行疫苗接种,以针对猪科动物,优选是猪中与至少一种非洲猪瘟病毒(优选是病原性非洲猪瘟病毒)相关联的疾病和/或降低与至少一种非洲猪瘟病毒(优选是病原性非洲猪瘟病毒)相关联或由至少一种非洲猪瘟病毒(优选是病原性非洲猪瘟病毒)造成的一或多种临床症状的发生率或严重程度,该试剂盒含有:
(a)能够将疫苗施用至该猪科动物的分配器;及
(b)如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物;以及
(c)视情况选用的说明书小册;
其中该疾病或该等临床症状优选是选自由以下组成的组:非洲猪瘟、急性非洲猪瘟、慢性非洲猪瘟、病死、死亡、猝死、发热、高热、厌食、嗜睡、虚弱、食欲缺乏、伏卧、红斑、发绀性皮肤斑痣病、痢疾、便秘、腹痛、呼吸道症状、咳嗽、呕吐、呼吸困难、鼻涕及结合膜分泌物、出血、流鼻血、流产、白血球减少症、血小板减少症。
本发明进一步关于非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、19、21、23、25、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、1、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150、151、152、153、154、155、156、157、158、159、160、161、162、163、164、165、166、167、168、169、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、180、181、182、183、184、185、186、187、188、189、190、191、192、193、194、195、196、197、198、199、200、201、202、203、204、205、206、207、208、209、210、211、212、213、214、215、216、217、218、219、220、221、222、223、224、225、226、227、228、229、230、231、232、233、234、235、236、237、238、239、240、241、242、243、244、245、246、247、248、249、250、251、252、253、254、255、256、257、258、259、260、261、262、263、264、265、266、267、268、269、272、274、275、276、277、278、279、280、281、282、283、284、285、287、289、290、291、292、293、294、295、297、299、300、301、302、303、304、305、306、307、308、309、310、311、312、313、314、315、316、317、318、319、320、321、322、323、324、325、326、327、328、329、330、331、332、333、334、335、336、337、338、339、340、341、342、343、344、345、346、347、348、349、350、351、352、353、354、355、356、357、358、359、360、361、362、363、364、365、366、367、368、369、370、371、372、373、374、375、376、377、378、379、380、381、382、383、384、385、386、387、388、389、390、391、392、393、394、395、396、397、398、399、400、401、402、403、404、405、406、407、408、409、410、411、412、413、414、415、416、417、418、420、422、423、424、425、426、427、428、429、430、432、434、435、436、437、438、439、440、441、442、443、444、445、446、447、448、449、450、451、452、453、454、455、456、458、460、461、462、463、464、465、466、468、470、471、472、473、474、475、476、477、478、479、481、483、484、485、486、487、489、491、492、493、494、495、496、497、498、499、500、501、502、503、504、505、506、507、508、509、510、511、512、513、514、515、516、518、520、521、522、523、524、526、528、529、530、531、532、533、534、535、536、537、538、539、540、541、542、543、544、545、546、547、548、549、550、551、552、553、554、555、556、557、558、559、560、561、562、563、564、565、566、568、570、572、574、575、576、577、578、579、580、581、582、583、584、585、586、587、588、589、590、591、592、593、594、595、596、597、598、599、600、601、602、603、604、605、606、607、608、609、610、611、612、613、614、615、616、617、618、619、620、621、622、623、624、625、626、627、628、629、630、631、632、633、634、635、636、637、638、639、640、641、642、643、644、645、646、647、648、649、650、651、652、653、654、655、656、657、658、659、660、661、662、663、664、665、666、667、668、669、670、671、672、673、674、675、676、677、678、679、680、681、682、683、684、685、686、687、688、689、690、691、692、693、694、695、696、697、698、699、700、701、702、703、704、705、706、707、708、709、710、711、712、713、714、715、716、717、719、721、722、724、726、727、728、729、730、731、732、733、734、735、736、737、738、739、740、741、742、743、744、745、746、747、748、749、750、751、752、753、754、755、756、757、758、759、760、761、762、763、764、765、766、767、768、769、770、771、772、774、776、777、778、779、780、781、782、783、784、785、786、787、788、789、790、791、792、793、794、795、796、797、798、799、800、801、802、803、804、805、806、807、808、809、810、811、812、813、814、815、816、817、818、819、820、821、822、823、824、825、826、827、828、829、830、831、832、833、834、835、836、837、838、839、840、841、842、843、844、845、846、847、848、849、850、851、852、853、854。
本发明进一步关于非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自以下所组成组中的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)、A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQID NO:572、570)、K145R(SEQ ID NO:526、524、523、522、521、520、518、516、515、514)、B475L(SEQ ID NO:66、65、64、63、62、61、60、59、58、57、56、55、54、53、52、51、50、49、48)、H339R(SEQ ID NO:468、466、465、464、463、462、461、460、458、456、455、454)、I226R(SEQ ID NO:489、487、486、485、484、483、481、479、478)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:266、265、264、263、262、261)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:260、259、258)、G1211R(SEQ ID NO:432、430、429、428、427、426、425、424、423、422、420、418、417、416)、M1249L(SEQ ID NO:562、561、560、559、558、557、556、555、554、553、552、551、550、549、548、547、546、545、544、543、542、541、540、539)、MGF505-9R(SEQ ID NO:733、732、731、730、729、728、727、726)、P1192R(SEQ IDNO:817、816、815、814、813、812、811、810、809、808、807、806、805、804、803、802、801)、MGF505-1R(SEQ ID NO:692、691、690、689、688、687、686、685、684)、MGF505-3R(SEQ ID NO:703、702、701、700、699)、EP424R(SEQ ID NO:389、388、387、386、385、384、383、382、381、380、379)、C475L(SEQ ID NO:201、200、199、198、197、196、195、194、193、192、191、190、189、188)、B602L(SEQ ID NO:75、74、73、72、71、70、69、68、67)、CP530R(SEQ ID NO:278、277、276、275)、D339L(SEQ ID NO:322、321、320)、D117L(SEQ ID NO:862、864)、I243L(SEQ IDNO:494、493、492、491)、I73R(SEQ ID NO:504、503、502)、DP238L(SEQ ID NO:327、326、325)、I9R(SEQ ID NO:513、512、511、510);优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)、A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570);且最优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQID NO:854、853、25)。
本发明进一步关于非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其中非洲猪瘟病毒多肽,优选是全长蛋白含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A238L(SEQ ID NO:21)、A238L(SEQ ID NO:23)、A240L(SEQ ID NO:853)、A240L(SEQ ID NO:854)、B475L(SEQ IDNO:65)、B475L(SEQ ID NO:66)、CP2475(SEQ ID NO:256)、CP2475(SEQ ID NO:257)、CP312R(SEQ ID NO:272)、CP312R(SEQ ID NO:274)、D1133L(SEQ ID NO:295)、D1133L(SEQ ID NO:297)、EP402R(SEQ ID NO:378)、EP424R(SEQ ID NO:388)、EP424R(SEQ ID NO:389)、G1211R(SEQ ID NO:430)、G1211R(SEQ ID NO:432)、H339R(SEQ ID NO:466)、H339R(SEQ ID NO:468)、I226R(SEQ ID NO:487)、I226R(SEQ ID NO:489)、K145R(SEQ ID NO:524)、K145R(SEQID NO:526)、M448R(SEQ ID NO:566)、M448R(SEQ ID NO:568)、M1249L(SEQ ID NO:561)、M1249L(SEQ ID NO:562)、MGF_100-1L/MGF100-1L(SEQ ID NO:572)、MGF505-1R/MGF_505-1R(SEQ ID NO:691)、MGF505-1R/MGF_505-1R(SEQ ID NO:692)、MGF505-8R/MGF_505-8R(SEQ ID NO:722)、MGF505-7R/MGF_505-7R(SEQ ID NO:724)、MGF505-8R/MGF_505-8R(SEQID NO:772)、MGF505-7R/MGF_505-7R(SEQ ID NO:774)、MGF505-9R/MGF_505-9R(SEQ IDNO:732)、MGF505-9R/MGF_505-9R(SEQ ID NO:733)、P1192R(SEQ ID NO:816)、P1192R(SEQID NO:817);且/或其中非洲猪瘟病毒肽和/或其免疫原性片段和/或非洲猪瘟病毒多肽/全长蛋白免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A238L(SEQ ID NO:17)、A238L(SEQ ID NO:19)、A240L(SEQ ID NO:25)、B475L(SEQ ID NO:48)、B475L(SEQ ID NO:49)、B475L(SEQ ID NO:50)、B475L(SEQ ID NO:51)、B475L(SEQ ID NO:52)、B475L(SEQ ID NO:53)、B475L(SEQ IDNO:54)、B475L(SEQ ID NO:55)、B475L(SEQ ID NO:56)、B475L(SEQ ID NO:57)、B475L(SEQID NO:58)、B475L(SEQ ID NO:59)、B475L(SEQ ID NO:60)、B475L(SEQ ID NO:61)、B475L(SEQ ID NO:62)、B475L(SEQ ID NO:63)、B475L(SEQ ID NO:64)、CP2475(SEQ ID NO:235)、CP2475(SEQ ID NO:236)、CP2475(SEQ ID NO:237)、CP2475(SEQ ID NO:238)、CP2475(SEQID NO:239)、CP2475(SEQID NO:240)、CP2475(SEQ ID NO:241)、CP2475(SEQ ID NO:242)、CP2475(SEQ ID NO:243)、CP2475(SEQ ID NO:244)、CP2475(SEQ ID NO:245)、CP2475(SEQID NO:246)、CP2475(SEQ IDNO:247)、CP2475(SEQ ID NO:248)、CP2475(SEQ ID NO:249)、CP2475(SEQ ID NO:250)、CP2475(SEQ ID NO:251)、CP2475(SEQ ID NO:252)、CP2475(SEQID NO:253)、CP2475(SEQ ID NO:254)、CP2475(SEQ ID NO:255)、CP2475L(p37)(SEQ IDNO:261)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:262)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:263)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:264)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:265)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:266)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:258)、CP2475L(p150)(SEQ IDNO:259)、CP2475L(p150)(SEQ IDNO:260)、CP312R(SEQ ID NO:267)、CP312R(SEQ ID NO:268)、CP312R(SEQ ID NO:269)、D1133L(SEQ ID NO:281)、D1133L(SEQ ID NO:282)、D1133L(SEQ IDNO:283)、D1133L(SEQID NO:284)、D1133L(SEQ ID NO:285)、D1133L(SEQ ID NO:287)、D1133L(SEQ ID NO:289)、D1133L(SEQ ID NO:290)、D1133L(SEQ ID NO:291)、D1133L(SEQ ID NO:292)、D1133L(SEQID NO:293)、D1133L(SEQ ID NO:294)、EP402R(SEQ ID NO:372)、EP402R(SEQ IDNO:373)、EP402R(SEQ ID NO:374)、EP402R(SEQ ID NO:375)、EP402R(SEQ ID NO:376)、EP402R(SEQID NO:377)、EP424R(SEQ ID NO:379)、EP424R(SEQ ID NO:380)、EP424R(SEQ ID NO:381)、EP424R(SEQ ID NO:382)、EP424R(SEQ ID NO:383)、EP424R(SEQ ID NO:384)、EP424R(SEQID NO:385)、EP424R(SEQ ID NO:386)、EP424R(SEQ ID NO:387)、G1211R(SEQ ID NO:416)、G1211R(SEQ ID NO:417)、G1211R(SEQ ID NO:418)、G1211R(SEQ ID NO:420)、G1211R(SEQID NO:422)、G1211R(SEQ ID NO:423)、G1211R(SEQ ID NO:424)、G1211R(SEQ ID NO:425)、G1211R(SEQ ID NO:426)、G1211R(SEQ ID NO:427)、G1211R(SEQ ID NO:428)、G1211R(SEQID NO:429)、H339R(SEQ ID NO:454)、H339R(SEQ ID NO:455)、H339R(SEQ ID NO:456)、H339R(SEQ ID NO:458)、H339R(SEQ ID NO:460)、H339R(SEQ ID NO:461)、H339R(SEQ IDNO:462)、H339R(SEQ ID NO:463)、H339R(SEQ ID NO:464)、H339R(SEQ ID NO:465)、I226R(SEQ IDNO:478)、I226R(SEQ ID NO:479)、I226R(SEQ ID NO:481)、I226R(SEQ ID NO:483)、I226R(SEQID NO:484)、I226R(SEQ ID NO:485)、I226R(SEQ ID NO:486)、K145R(SEQID NO:514)、K145R(SEQ ID NO:515)、K145R(SEQ ID NO:516)、K145R(SEQ ID NO:518)、K145R(SEQ ID NO:520)、K145R(SEQ ID NO:521)、K145R(SEQ ID NO:522)、K145R(SEQ IDNO:523)、M448R(SEQ ID NO:563)、M448R(SEQ ID NO:564)、M448R(SEQ ID NO:565)、M1249L(SEQ ID NO:539)、M1249L(SEQID NO:540)、M1249L(SEQ ID NO:541)、M1249L(SEQ ID NO:542)、M1249L(SEQ ID NO:543)、M1249L(SEQ ID NO:544)、M1249L(SEQ ID NO:545)、M1249L(SEQ ID NO:546)、M1249L(SEQ IDNO:547)、M1249L(SEQ ID NO:548)、M1249L(SEQ ID NO:549)、M1249L(SEQ ID NO:550)、M1249L(SEQ ID NO:551)、M1249L(SEQ ID NO:552)、M1249L(SEQ ID NO:553)、M1249L(SEQ IDNO:554)、M1249L(SEQ ID NO:555)、M1249L(SEQ ID NO:556)、M1249L(SEQ ID NO:557)、M1249L(SEQ ID NO:558)、M1249L(SEQ ID NO:559)、M1249L(SEQ ID NO:560)、MGF_100-1L/MGF100-1L(SEQ ID NO:570)、MGF505-1R/MGF_505-1R(SEQID NO:684)、MGF505-1R/MGF_505-1R(SEQ ID NO:685)、MGF505-1R/MGF_505-1R(SEQ IDNO:686)、MGF505-1R/MGF_505-1R(SEQ ID NO:687)、MGF505-1R/MGF_505-1R(SEQ ID NO:688)、MGF505-1R/MGF_505-1R(SEQ ID NO:689)、MGF505-1R/MGF_505-1R(SEQ ID NO:690)、MGF505-8R/MGF_505-8R(SEQ ID NO:717)、MGF505-7R/MGF_505-7R(SEQ ID NO:719)、MGF505-7R/MGF_505-7R(SEQ ID NO:721)、MGF505-9R/MGF_505-9R(SEQ ID NO:726)、MGF505-9R/MGF_505-9R(SEQ ID NO:727)、MGF505-9R/MGF_505-9R(SEQ ID NO:728)、MGF505-9R/MGF_505-9R(SEQ ID NO:729)、MGF505-9R/MGF_505-9R(SEQ ID NO:730)、MGF505-9R/MGF_505-9R(SEQ ID NO:731)、P1192R(SEQ ID NO:801)、P1192R(SEQ ID NO:802)、P1192R(SEQ ID NO:803)、P1192R(SEQ ID NO:804)、P1192R(SEQ ID NO:805)、P1192R(SEQ ID NO:806)、P1192R(SEQ ID NO:807)、P1192R(SEQ ID NO:808)、P1192R(SEQ ID NO:809)、P1192R(SEQ ID NO:810)、P1192R(SEQ ID NO:811)、P1192R(SEQ ID NO:812)、P1192R(SEQ ID NO:813)、P1192R(SEQ ID NO:814)、P1192R(SEQ ID NO:815)。
本发明进一步关于非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其中非洲猪瘟病毒多肽,优选是全长蛋白含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722)、M448R(SEQ ID NO:568、566)、D1133L(SEQ ID NO:297、295)、CP312R(SEQ ID NO:274、272)、A240L(SEQ ID NO:854、853)、A238L(SEQ ID NO:23、21)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572)、K145R(SEQ ID NO:526、524)、B475L(SEQ ID NO:66、65)、H339R(SEQ ID NO:468、466)、I226R(SEQ ID NO:489、487)、CP2475(SEQ ID NO:257)、CP2475(SEQ ID NO:256)、G1211R(SEQ ID NO:432、430)、M1249L(SEQ ID NO:562、561)、MGF505-9R(SEQ ID NO:733、732)、P1192R(SEQ ID NO:817、816)、MGF505-1R(SEQ ID NO:692、691)、MGF505-3R(SEQ ID NO:703、702)、EP424R(SEQ ID NO:389、388)、C475L(SEQ IDNO:201、200)、B602L(SEQ ID NO:75、74)、CP530R(SEQ ID NO:278、277)、D339L(SEQ ID NO:322、321)、D117L(SEQ ID NO:862、864)、I243L(SEQ ID NO:494、493)、I73R(SEQ ID NO:504、503)、DP238L(SEQ ID NO:327、326)、I9R(SEQ ID NO:513、512);且/或其中非洲猪瘟病毒肽和/或其免疫原性片段和/或非洲猪瘟病毒多肽/全长蛋白免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQID NO:269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:25)、A238L(SEQ ID NO:19、17)、MGF100-1L(SEQID NO:570)、K145R(SEQ ID NO:523、522、521、520、518、516、515、514)、B475L(SEQ ID NO:64、63、62、61、60、59、58、57、56、55、54、53、52、51、50、49、48)、H339R(SEQ ID NO:465、464、463、462、461、460、458、456、455、454)、I226R(SEQ ID NO:486、485、484、483、481、479、478)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:266、265、264、263、262、261)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:260、259、258)、G1211R(SEQ ID NO:429、428、427、426、425、424、423、422、420、418、417、416)、M1249L(SEQ ID NO:560、559、558、557、556、555、554、553、552、551、550、549、548、547、546、545、544、543、542、541、540、539)、MGF505-9R(SEQ ID NO:731、730、729、728、727、726)、P1192R(SEQ ID NO:815、814、813、812、811、810、809、808、807、806、805、804、803、802、801)、MGF505-1R(SEQ ID NO:690、689、688、687、686、685、684)、MGF505-3R(SEQ IDNO:701、700、699)、EP424R(SEQ ID NO:387、386、385、384、383、382、381、380、379)、C475L(SEQ ID NO:199、198、197、196、195、194、193、192、191、190、189、188)、B602L(SEQ ID NO:73、72、71、70、69、68、67)、CP530R(SEQ ID NO:277、276、275)、D339L(SEQ ID NO:320)、I243L(SEQ ID NO:492、491)、I73R(SEQ ID NO:502)、DP238L(SEQ ID NO:325)、I9R(SEQ IDNO:511、510)。
本发明进一步关于编码如本文所描述且/或主张的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段。
本发明进一步关于编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:SEQ ID NO:18、20、22、24、26、27、270、271、273、286、288、296、298、419、421、431、433、457、459、467、469、480、482、488、490、517、519、525、527、567、569、571、573、718、720、723、725、773、775。
本发明进一步关于编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)、A238L(SEQ ID NO:24、22、20、18)、MGF100-1L(SEQ ID NO:573、571)、K145R(SEQ ID NO:527、525、519、517)、B475L(SEQID NO:866、867)、H339R(SEQ ID NO:469、467、459、457)、I226R(SEQ ID NO:490、488、482、480)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:868、869)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:870、871)、G1211R(SEQ ID NO:433、431、421、419)、M1249L(SEQ ID NO:872、873)、MGF505-9R(SEQ ID NO:874、875)、P1192R(SEQ ID NO:876、877)、MGF505-1R(SEQ ID NO:878、879)、MGF505-3R(SEQID NO:880、881)、EP424R(SEQ ID NO:882、883)、C475L(SEQ ID NO:884、885)、B602L(SEQID NO:886、887)、CP530R(SEQ ID NO:888、889)、D339L(SEQ ID NO:890、891)、D117L(SEQID NO:863、865)、I243L(SEQ ID NO:892、893)、I73R(SEQ ID NO:894、895)、DP238L(SEQ IDNO:896、897)、I9R(SEQ ID NO:898、899);优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)、A238L(SEQ ID NO:24、22、20、18)、MGF100-1L(SEQ ID NO:573、571);且最优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)。
本发明进一步关于含有一种、两种、三种或更多种如本文所描述且/或主张的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段的载体。该载体优选是含有三种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,该三种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段优选是选自EP402R、CP312R及A240L(多重表位-I,ME-I),更优选是含有以下、最优选是由以下组成:选自由SEQ ID NO:855组成的组的核酸序列;或含有十三种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,该十三种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段优选是选自D1133L、G1211R、M1249L、MGF505-9R、P1192R、CP2475L(p150)、B475L、EP424R、H339R、I226R、K145R、MGF505-1R及CP2475L(p37)(多重表位-II,ME-II),更优选是含有以下、最优选是由以下组成:选自由SEQ ID NO:856组成的组的核酸序列。
本发明进一步关于含有如本文所描述且/或主张的载体的宿主细胞,优选是哺乳动物宿主细胞。
因此,上述技术问题的解决方案是通过本说明书及在申请专利范围中表征的实施例来达成,且本发明在其不同方面中是根据申请专利范围来实施。
附图说明
以下图式形成本说明书的部分且包括在内以进一步展现本发明的某些方面。结合本文所呈现的特定实施例的详细描述,参照此等图式中之一或多个可更好地理解本发明。
图1描绘以下内容:黑色为通过ELISpot分析使用经pCMV-Ub-MGF505-7R质粒转染的纤维母细胞作为APC且使用来自ASF恢复期动物的PBMC作为效应细胞来评估的IFNγ反应。斑点在经受经pCMV-Ub空质粒转染的纤维母细胞刺激时的从不超过10的数目是由经表示的值减除。灰色显示为ASFV特异性IFNγ-SC的含量。
图2描绘通过ELISpot分析使用分别经pCMV-Ub-A238L质粒及pCMV-Ub-MGF100-1L质粒转染的纤维母细胞作为APC且使用来自ASF恢复期动物的PBMC作为效应细胞来评估的针对A238L及MGF100-1L全长Georgia2007/1蛋白的IFNγ反应。
图3描绘Georgia2007/1致死性攻击之后的经所选15种重组质粒(15种克隆)或空pCMV-Ub质粒(对照)初免的猪的存活百分比。两组均经低剂量的减毒活病毒(LAV)BA71ΔCD2免疫接种。
图4描绘Georgia2007/1致死性攻击感染之后的经M448R+MGF505-7R初免组(实线)及对照组(虚线)内的存活猪百分比。
图5描绘Georgia2007/1致死性攻击之后的经多重表位初免组(实线)及对照组(虚线)内的存活猪百分比。
具体实施方式
本发明解决先前技术中固有的问题且提供目前先进技术中的独特进展。
一般而言,本发明是关于含有以下的免疫原性组合物:
(a)一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段;和/或
(b)编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段;和/或
(c)病毒或细菌载体,优选是重组和/或非天然存在的病毒或细菌载体,其含有编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段;以及
(d)视情况选用之一或多种医药学上或兽医学上可接受的载剂或赋形剂,该一或多种载剂或赋形剂优选是适用于经口、皮内、肌内或鼻内施用;
或含有以下的疫苗或医药组合物:
(a)一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段;和/或
(b)编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段;和/或
(c)病毒或细菌载体,优选是重组和/或非天然存在的病毒或细菌载体,其含有编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段;以及
(d)一或多种医药学上或兽医学上可接受的载剂或赋形剂,该一或多种载剂或赋形剂优选是适用于经口、皮内、肌内或鼻内施用;
(e)该疫苗或医药组合物视情况进一步含有佐剂。
在一特定方面中,提供如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中非洲猪瘟病毒选自由以下组成的组:BA71、BA71ΔCD2和/或Georgia2007/1病毒株。
在另一特定方面中,提供如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、19、21、23、25、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、1、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150、151、152、153、154、155、156、157、158、159、160、161、162、163、164、165、166、167、168、169、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、180、181、182、183、184、185、186、187、188、189、190、191、192、193、194、195、196、197、198、199、200、201、202、203、204、205、206、207、208、209、210、211、212、213、214、215、216、217、218、219、220、221、222、223、224、225、226、227、228、229、230、231、232、233、234、235、236、237、238、239、240、241、242、243、244、245、246、247、248、249、250、251、252、253、254、255、256、257、258、259、260、261、262、263、264、265、266、267、268、269、272、274、275、276、277、278、279、280、281、282、283、284、285、287、289、290、291、292、293、294、295、297、299、300、301、302、303、304、305、306、307、308、309、310、311、312、313、314、315、316、317、318、319、320、321、322、323、324、325、326、327、328、329、330、331、332、333、334、335、336、337、338、339、340、341、342、343、344、345、346、347、348、349、350、351、352、353、354、355、356、357、358、359、360、361、362、363、364、365、366、367、368、369、370、371、372、373、374、375、376、377、378、379、380、381、382、383、384、385、386、387、388、389、390、391、392、393、394、395、396、397、398、399、400、401、402、403、404、405、406、407、408、409、410、411、412、413、414、415、416、417、418、420、422、423、424、425、426、427、428、429、430、432、434、435、436、437、438、439、440、441、442、443、444、445、446、447、448、449、450、451、452、453、454、455、456、458、460、461、462、463、464、465、466、468、470、471、472、473、474、475、476、477、478、479、481、483、484、485、486、487、489、491、492、493、494、495、496、497、498、499、500、501、502、503、504、505、506、507、508、509、510、511、512、513、514、515、516、518、520、521、522、523、524、526、528、529、530、531、532、533、534、535、536、537、538、539、540、541、542、543、544、545、546、547、548、549、550、551、552、553、554、555、556、557、558、559、560、561、562、563、564、565、566、568、570、572、574、575、576、577、578、579、580、581、582、583、584、585、586、587、588、589、590、591、592、593、594、595、596、597、598、599、600、601、602、603、604、605、606、607、608、609、610、611、612、613、614、615、616、617、618、619、620、621、622、623、624、625、626、627、628、629、630、631、632、633、634、635、636、637、638、639、640、641、642、643、644、645、646、647、648、649、650、651、652、653、654、655、656、657、658、659、660、661、662、663、664、665、666、667、668、669、670、671、672、673、674、675、676、677、678、679、680、681、682、683、684、685、686、687、688、689、690、691、692、693、694、695、696、697、698、699、700、701、702、703、704、705、706、707、708、709、710、711、712、713、714、715、716、717、719、721、722、724、726、727、728、729、730、731、732、733、734、735、736、737、738、739、740、741、742、743、744、745、746、747、748、749、750、751、752、753、754、755、756、757、758、759、760、761、762、763、764、765、766、767、768、769、770、771、772、774、776、777、778、779、780、781、782、783、784、785、786、787、788、789、790、791、792、793、794、795、796、797、798、799、800、801、802、803、804、805、806、807、808、809、810、811、812、813、814、815、816、817、818、819、820、821、822、823、824、825、826、827、828、829、830、831、832、833、834、835、836、837、838、839、840、841、842、843、844、845、846、847、848、849、850、851、852、853、854。
在又另一特定方面中,提供如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自以下所组成组中的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)、A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570)、K145R(SEQ ID NO:526、524、523、522、521、520、518、516、515、514)、B475L(SEQ ID NO:66、65、64、63、62、61、60、59、58、57、56、55、54、53、52、51、50、49、48)、H339R(SEQ ID NO:468、466、465、464、463、462、461、460、458、456、455、454)、I226R(SEQ ID NO:489、487、486、485、484、483、481、479、478)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:266、265、264、263、262、261)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:260、259、258)、G1211R(SEQ ID NO:432、430、429、428、427、426、425、424、423、422、420、418、417、416)、M1249L(SEQ ID NO:562、561、560、559、558、557、556、555、554、553、552、551、550、549、548、547、546、545、544、543、542、541、540、539)、MGF505-9R(SEQ ID NO:733、732、731、730、729、728、727、726)、P1192R(SEQ ID NO:817、816、815、814、813、812、811、810、809、808、807、806、805、804、803、802、801)、MGF505-1R(SEQ ID NO:692、691、690、689、688、687、686、685、684)、MGF505-3R(SEQ ID NO:703、702、701、700、699)、EP424R(SEQ ID NO:389、388、387、386、385、384、383、382、381、380、379)、C475L(SEQ ID NO:201、200、199、198、197、196、195、194、193、192、191、190、189、188)、B602L(SEQ ID NO:75、74、73、72、71、70、69、68、67)、CP530R(SEQ ID NO:278、277、276、275)、D339L(SEQ ID NO:322、321、320)、D117L(SEQ ID NO:862、864)、I243L(SEQ ID NO:494、493、492、491)、I73R(SEQ ID NO:504、503、502)、DP238L(SEQ ID NO:327、326、325)、I9R(SEQ ID NO:513、512、511、510);优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)、A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570);且最优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQID NO:854、853、25)。
在又另一特定方面中,提供如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码如本文所揭示且/或主张的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段。
在又另一特定方面中,提供如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自以下所组成组中的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)、A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570)、K145R(SEQ ID NO:526、524、523、522、521、520、518、516、515、514)、B475L(SEQ ID NO:66、65、64、63、62、61、60、59、58、57、56、55、54、53、52、51、50、49、48)、H339R(SEQ ID NO:468、466、465、464、463、462、461、460、458、456、455、454)、I226R(SEQ ID NO:489、487、486、485、484、483、481、479、478)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:266、265、264、263、262、261)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:260、259、258)、G1211R(SEQ ID NO:432、430、429、428、427、426、425、424、423、422、420、418、417、416)、M1249L(SEQ ID NO:562、561、560、559、558、557、556、555、554、553、552、551、550、549、548、547、546、545、544、543、542、541、540、539)、MGF505-9R(SEQ ID NO:733、732、731、730、729、728、727、726)、P1192R(SEQ ID NO:817、816、815、814、813、812、811、810、809、808、807、806、805、804、803、802、801)、MGF505-1R(SEQ ID NO:692、691、690、689、688、687、686、685、684)、MGF505-3R(SEQ ID NO:703、702、701、700、699)、EP424R(SEQ ID NO:389、388、387、386、385、384、383、382、381、380、379)、C475L(SEQ ID NO:201、200、199、198、197、196、195、194、193、192、191、190、189、188)、B602L(SEQ ID NO:75、74、73、72、71、70、69、68、67)、CP530R(SEQ ID NO:278、277、276、275)、D339L(SEQ ID NO:322、321、320)、D117L(SEQ ID NO:862、864)、I243L(SEQ ID NO:494、493、492、491)、I73R(SEQ ID NO:504、503、502)、DP238L(SEQ ID NO:327、326、325)、I9R(SEQ ID NO:513、512、511、510);优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)、A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570);且最优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQID NO:854、853、25)。
在又另一特定方面中,提供如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:SEQ ID NO:18、20、22、24、26、27、270、271、273、286、288、296、298、419、421、431、433、457、459、467、469、480、482、488、490、517、519、525、527、567、569、571、573、718、720、723、725、773、775。
在又另一特定方面中,提供如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)、A238L(SEQ ID NO:24、22、20、18)、MGF100-1L(SEQ ID NO:573、571)、K145R(SEQ ID NO:527、525、519、517)、B475L(SEQ ID NO:866、867)、H339R(SEQ ID NO:469、467、459、457)、I226R(SEQ ID NO:490、488、482、480)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:868、869)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:870、871)、G1211R(SEQ ID NO:433、431、421、419)、M1249L(SEQ ID NO:872、873)、MGF505-9R(SEQ IDNO:874、875)、P1192R(SEQ ID NO:876、877)、MGF505-1R(SEQ ID NO:878、879)、MGF505-3R(SEQ ID NO:880、881)、EP424R(SEQ ID NO:882、883)、C475L(SEQ ID NO:884、885)、B602L(SEQ ID NO:886、887)、CP530R(SEQ ID NO:888、889)、D339L(SEQ ID NO:890、891)、D117L(SEQ ID NO:863、865)、I243L(SEQ ID NO:892、893)、I73R(SEQ ID NO:894、895)、DP238L(SEQ ID NO:896、897)、I9R(SEQ ID NO:898、899);优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)、A238L(SEQ ID NO:24、22、20、18)、MGF100-1L(SEQ ID NO:573、571);且最优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ IDNO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ IDNO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQID NO:860、27、26)。
在又另一特定方面中,提供如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),病毒或细菌载体选自由以下组成的组:非洲猪瘟病毒载体、鸟类痘病毒载体、犬麻疹病毒载体、疱疹病毒载体、水痘病毒载体、劳森氏菌属(Lawsoniaspp.)、沙门氏菌属(Salmonella spp.)。
在又另一特定方面中,提供如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),病毒或细菌载体含有编码如本文所揭示且/或主张的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段。
在又另一特定方面中,提供如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自以下所组成组中的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)、A238L(SEQID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570)、K145R(SEQ ID NO:526、524、523、522、521、520、518、516、515、514)、B475L(SEQ ID NO:66、65、64、63、62、61、60、59、58、57、56、55、54、53、52、51、50、49、48)、H339R(SEQ ID NO:468、466、465、464、463、462、461、460、458、456、455、454)、I226R(SEQ ID NO:489、487、486、485、484、483、481、479、478)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:266、265、264、263、262、261)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:260、259、258)、G1211R(SEQ ID NO:432、430、429、428、427、426、425、424、423、422、420、418、417、416)、M1249L(SEQ ID NO:562、561、560、559、558、557、556、555、554、553、552、551、550、549、548、547、546、545、544、543、542、541、540、539)、MGF505-9R(SEQ ID NO:733、732、731、730、729、728、727、726)、P1192R(SEQ ID NO:817、816、815、814、813、812、811、810、809、808、807、806、805、804、803、802、801)、MGF505-1R(SEQ ID NO:692、691、690、689、688、687、686、685、684)、MGF505-3R(SEQ ID NO:703、702、701、700、699)、EP424R(SEQ ID NO:389、388、387、386、385、384、383、382、381、380、379)、C475L(SEQ ID NO:201、200、199、198、197、196、195、194、193、192、191、190、189、188)、B602L(SEQ ID NO:75、74、73、72、71、70、69、68、67)、CP530R(SEQ ID NO:278、277、276、275)、D339L(SEQ ID NO:322、321、320)、D117L(SEQID NO:862、864)、I243L(SEQ ID NO:494、493、492、491)、I73R(SEQ ID NO:504、503、502)、DP238L(SEQ ID NO:327、326、325)、I9R(SEQ ID NO:513、512、511、510);优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ IDNO:854、853、25)、A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570);且最优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)。
在又另一特定方面中,提供如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:SEQ ID NO:18、20、22、24、26、27、270、271、273、286、288、296、298、419、421、431、433、457、459、467、469、480、482、488、490、517、519、525、527、567、569、571、573、718、720、723、725、773、775。
在又另一特定方面中,提供如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ IDNO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQID NO:860、27、26)、A238L(SEQ ID NO:24、22、20、18)、MGF100-1L(SEQ ID NO:573、571)、K145R(SEQ ID NO:527、525、519、517)、B475L(SEQ ID NO:866、867)、H339R(SEQ ID NO:469、467、459、457)、I226R(SEQ ID NO:490、488、482、480)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:868、869)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:870、871)、G1211R(SEQ ID NO:433、431、421、419)、M1249L(SEQ ID NO:872、873)、MGF505-9R(SEQ ID NO:874、875)、P1192R(SEQ ID NO:876、877)、MGF505-1R(SEQ ID NO:878、879)、MGF505-3R(SEQ ID NO:880、881)、EP424R(SEQ IDNO:882、883)、C475L(SEQ ID NO:884、885)、B602L(SEQ ID NO:886、887)、CP530R(SEQ IDNO:888、889)、D339L(SEQ ID NO:890、891)、D117L(SEQ ID NO:863、865)、I243L(SEQ IDNO:892、893)、I73R(SEQ ID NO:894、895)、DP238L(SEQ ID NO:896、897)、I9R(SEQ ID NO:898、899);优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、271、(MGF505-7R))、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)、A238L(SEQ ID NO:24、22、20、18)、MGF100-1L(SEQ ID NO:573、571);且最优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)。
在又另一特定方面中,提供如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中非洲猪瘟病毒多肽,优选是全长蛋白含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A238L(SEQ ID NO:21)、A238L(SEQ ID NO:23)、A240L(SEQ ID NO:853)、A240L(SEQ ID NO:854)、B475L(SEQID NO:65)、B475L(SEQ ID NO:66)、CP2475(SEQ ID NO:256)、CP2475(SEQ ID NO:257)、CP312R(SEQ ID NO:272)、CP312R(SEQ ID NO:274)、D1133L(SEQ ID NO:295)、D1133L(SEQID NO:297)、EP402R(SEQ ID NO:378)、EP424R(SEQ ID NO:388)、EP424R(SEQ ID NO:389)、G1211R(SEQ ID NO:430)、G1211R(SEQ ID NO:432)、H339R(SEQ ID NO:466)、H339R(SEQ IDNO:468)、I226R(SEQ ID NO:487)、I226R(SEQ ID NO:489)、K145R(SEQ ID NO:524)、K145R(SEQ ID NO:526)、M448R(SEQ ID NO:566)、M448R(SEQ ID NO:568)、M1249L(SEQ ID NO:561)、M1249L(SEQ ID NO:562)、MGF_100-1L/MGF100-1L(SEQ ID NO:572)、MGF505-1R/MGF_505-1R(SEQ ID NO:691)、MGF505-1R/MGF_505-1R(SEQ ID NO:692)、MGF505-8R/MGF_505-8R(SEQ ID NO:722)、MGF505-7R/MGF_505-7R(SEQ ID NO:724)、MGF505-8R/MGF_505-8R(SEQ ID NO:772)、MGF505-7R/MGF_505-7R(SEQ ID NO:774)、MGF505-9R/MGF_505-9R(SEQID NO:732)、MGF505-9R/MGF_505-9R(SEQ ID NO:733)、P1192R(SEQ ID NO:816)、P1192R(SEQ ID NO:817);且/或其中非洲猪瘟病毒肽和/或其免疫原性片段和/或非洲猪瘟病毒多肽/全长蛋白免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A238L(SEQ ID NO:17)、A238L(SEQ ID NO:19)、A240L(SEQ ID NO:25)、B475L(SEQ ID NO:48)、B475L(SEQ ID NO:49)、B475L(SEQ ID NO:50)、B475L(SEQ ID NO:51)、B475L(SEQ ID NO:52)、B475L(SEQ ID NO:53)、B475L(SEQ IDNO:54)、B475L(SEQ ID NO:55)、B475L(SEQ ID NO:56)、B475L(SEQ ID NO:57)、B475L(SEQID NO:58)、B475L(SEQ ID NO:59)、B475L(SEQ ID NO:60)、B475L(SEQ ID NO:61)、B475L(SEQ ID NO:62)、B475L(SEQ ID NO:63)、B475L(SEQ ID NO:64)、CP2475(SEQ ID NO:235)、CP2475(SEQ ID NO:236)、CP2475(SEQ ID NO:237)、CP2475(SEQ ID NO:238)、CP2475(SEQID NO:239)、CP2475(SEQ ID NO:240)、CP2475(SEQ ID NO:241)、CP2475(SEQ ID NO:242)、CP2475(SEQ ID NO:243)、CP2475(SEQ ID NO:244)、CP2475(SEQ ID NO:245)、CP2475(SEQID NO:246)、CP2475(SEQ ID NO:247)、CP2475(SEQ ID NO:248)、CP2475(SEQ ID NO:249)、CP2475(SEQ ID NO:250)、CP2475(SEQ ID NO:251)、CP2475(SEQ ID NO:252)、CP2475(SEQID NO:253)、CP2475(SEQ ID NO:254)、CP2475(SEQ ID NO:255)、CP2475L(p37)(SEQ IDNO:261)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:262)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:263)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:264)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:265)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:266)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:258)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:259)、CP2475L(p150)(SEQID NO:260)、CP312R(SEQ ID NO:267)、CP312R(SEQ ID NO:268)、CP312R(SEQ ID NO:269)、D1133L(SEQ ID NO:281)、D1133L(SEQ ID NO:282)、D1133L(SEQ ID NO:283)、D1133L(SEQID NO:284)、D1133L(SEQ ID NO:285)、D1133L(SEQ ID NO:287)、D1133L(SEQ ID NO:289)、D1133L(SEQ ID NO:290)、D1133L(SEQ ID NO:291)、D1133L(SEQ ID NO:292)、D1133L(SEQID NO:293)、D1133L(SEQ ID NO:294)、EP402R(SEQ ID NO:372)、EP402R(SEQ ID NO:373)、EP402R(SEQ ID NO:374)、EP402R(SEQ ID NO:375)、EP402R(SEQ ID NO:376)、EP402R(SEQID NO:377)、EP424R(SEQ ID NO:379)、EP424R(SEQ ID NO:380)、EP424R(SEQ ID NO:381)、EP424R(SEQ ID NO:382)、EP424R(SEQ ID NO:383)、EP424R(SEQ ID NO:384)、EP424R(SEQID NO:385)、EP424R(SEQ ID NO:386)、EP424R(SEQ ID NO:387)、G1211R(SEQ ID NO:416)、G1211R(SEQ ID NO:417)、G1211R(SEQ ID NO:418)、G1211R(SEQ ID NO:420)、G1211R(SEQID NO:422)、G1211R(SEQ ID NO:423)、G1211R(SEQ ID NO:424)、G1211R(SEQ ID NO:425)、G1211R(SEQ ID NO:426)、G1211R(SEQ ID NO:427)、G1211R(SEQ ID NO:428)、G1211R(SEQID NO:429)、H339R(SEQ ID NO:454)、H339R(SEQ ID NO:455)、H339R(SEQ ID NO:456)、H339R(SEQ ID NO:458)、H339R(SEQ ID NO:460)、H339R(SEQ ID NO:461)、H339R(SEQ IDNO:462)、H339R(SEQ ID NO:463)、H339R(SEQ ID NO:464)、H339R(SEQ ID NO:465)、I226R(SEQ ID NO:478)、I226R(SEQ ID NO:479)、I226R(SEQ ID NO:481)、I226R(SEQ ID NO:483)、I226R(SEQ ID NO:484)、I226R(SEQ ID NO:485)、I226R(SEQ ID NO:486)、K145R(SEQID NO:514)、K145R(SEQ ID NO:515)、K145R(SEQ ID NO:516)、K145R(SEQ ID NO:518)、K145R(SEQ ID NO:520)、K145R(SEQ ID NO:521)、K145R(SEQ ID NO:522)、K145R(SEQ IDNO:523)、M448R(SEQ ID NO:563)、M448R(SEQ ID NO:564)、M448R(SEQ ID NO:565)、M1249L(SEQ ID NO:539)、M1249L(SEQ ID NO:540)、M1249L(SEQ ID NO:541)、M1249L(SEQ ID NO:542)、M1249L(SEQ ID NO:543)、M1249L(SEQ ID NO:544)、M1249L(SEQ ID NO:545)、M1249L(SEQ ID NO:546)、M1249L(SEQ ID NO:547)、M1249L(SEQ ID NO:548)、M1249L(SEQ ID NO:549)、M1249L(SEQ ID NO:550)、M1249L(SEQ ID NO:551)、M1249L(SEQ ID NO:552)、M1249L(SEQ ID NO:553)、M1249L(SEQ ID NO:554)、M1249L(SEQ ID NO:555)、M1249L(SEQ ID NO:556)、M1249L(SEQ ID NO:557)、M1249L(SEQ ID NO:558)、M1249L(SEQ ID NO:559)、M1249L(SEQ ID NO:560)、MGF_100-1L/MGF100-1L(SEQ ID NO:570)、MGF505-1R/MGF_505-1R(SEQID NO:684)、MGF505-1R/MGF_505-1R(SEQ ID NO:685)、MGF505-1R/MGF_505-1R(SEQ IDNO:686)、MGF505-1R/MGF_505-1R(SEQ ID NO:687)、MGF505-1R/MGF_505-1R(SEQ ID NO:688)、MGF505-1R/MGF_505-1R(SEQ ID NO:689)、MGF505-1R/MGF_505-1R(SEQ ID NO:690)、MGF505-8R/MGF_505-8R(SEQ ID NO:717)、MGF505-7R/MGF_505-7R(SEQ ID NO:719)、MGF505-7R/MGF_505-7R(SEQ ID NO:721)、MGF505-9R/MGF_505-9R(SEQ ID NO:726)、MGF505-9R/MGF_505-9R(SEQ ID NO:727)、MGF505-9R/MGF_505-9R(SEQ ID NO:728)、MGF505-9R/MGF_505-9R(SEQ ID NO:729)、MGF505-9R/MGF_505-9R(SEQ ID NO:730)、MGF505-9R/MGF_505-9R(SEQ ID NO:731)、P1192R(SEQ ID NO:801)、P1192R(SEQ ID NO:802)、P1192R(SEQ ID NO:803)、P1192R(SEQ ID NO:804)、P1192R(SEQ ID NO:805)、P1192R(SEQ ID NO:806)、P1192R(SEQ ID NO:807)、P1192R(SEQ ID NO:808)、P1192R(SEQ ID NO:809)、P1192R(SEQ ID NO:810)、P1192R(SEQ ID NO:811)、P1192R(SEQ ID NO:812)、P1192R(SEQ ID NO:813)、P1192R(SEQ ID NO:814)、P1192R(SEQ ID NO:815)。
在又另一特定方面中,提供如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中非洲猪瘟病毒多肽,优选是全长蛋白含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722)、M448R(SEQ ID NO:568、566)、D1133L(SEQ ID NO:297、295)、CP312R(SEQ ID NO:274、272)、A240L(SEQ ID NO:854、853)、A238L(SEQ ID NO:23、21)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572)、K145R(SEQ ID NO:526、524)、B475L(SEQ ID NO:66、65)、H339R(SEQ ID NO:468、466)、I226R(SEQ ID NO:489、487)、CP2475(SEQ ID NO:257)、CP2475(SEQ ID NO:256)、G1211R(SEQ ID NO:432、430)、M1249L(SEQ ID NO:562、561)、MGF505-9R(SEQ ID NO:733、732)、P1192R(SEQ ID NO:817、816)、MGF505-1R(SEQ ID NO:692、691)、MGF505-3R(SEQ ID NO:703、702)、EP424R(SEQ ID NO:389、388)、C475L(SEQ IDNO:201、200)、B602L(SEQ ID NO:75、74)、CP530R(SEQ ID NO:278、277)、D339L(SEQ ID NO:322、321)、D117L(SEQ ID NO:862、864)、I243L(SEQ ID NO:494、493)、I73R(SEQ ID NO:504、503)、DP238L(SEQ ID NO:327、326)、I9R(SEQ ID NO:513、512);且/或其中非洲猪瘟病毒肽和/或其免疫原性片段和/或非洲猪瘟病毒多肽/全长蛋白免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQID NO:269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:25)、A238L(SEQ ID NO:19、17)、MGF100-1L(SEQID NO:570)、K145R(SEQ ID NO:523、522、521、520、518、516、515、514)、B475L(SEQ ID NO:64、63、62、61、60、59、58、57、56、55、54、53、52、51、50、49、48)、H339R(SEQ ID NO:465、464、463、462、461、460、458、456、455、454)、I226R(SEQ ID NO:486、485、484、483、481、479、478)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:266、265、264、263、262、261)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:260、259、258)、G1211R(SEQ ID NO:429、428、427、426、425、424、423、422、420、418、417、416)、M1249L(SEQ ID NO:560、559、558、557、556、555、554、553、552、551、550、549、548、547、546、545、544、543、542、541、540、539)、MGF505-9R(SEQ ID NO:731、730、729、728、727、726)、P1192R(SEQ ID NO:815、814、813、812、811、810、809、808、807、806、805、804、803、802、801)、MGF505-1R(SEQ ID NO:690、689、688、687、686、685、684)、MGF505-3R(SEQ IDNO:701、700、699)、EP424R(SEQ ID NO:387、386、385、384、383、382、381、380、379)、C475L(SEQ ID NO:199、198、197、196、195、194、193、192、191、190、189、188)、B602L(SEQ ID NO:73、72、71、70、69、68、67)、CP530R(SEQ ID NO:277、276、275)、D339L(SEQ ID NO:320)、I243L(SEQ ID NO:492、491)、I73R(SEQ ID NO:502)、DP238L(SEQ ID NO:325)、I9R(SEQ IDNO:511、510)。
在又另一特定方面中,提供如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中ASFV多肽为ASFV全长蛋白,该ASFV全长蛋白优选是由含有以下,更优选是由以下组成的多核苷酸序列编码:任何可能的开放读码框(ORF);甚至更优选是由含有以下、最优选是由以下组成的多核苷酸序列编码:具有5'端起始密码子及3'端终止密码子的开放读码框(ORF)。
在又另一特定方面中,提供如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中免疫原性组合物或疫苗或医药组合物或任何所含有的免疫原性片段的免疫原性(和/或免疫反应)由经诱导的IFN-γ反应指示/表征,优选是在猪科动物IFN-γELISpot分析中,更优选是在如实施例1中所描述的猪科动物IFN-γELISpot分析中由经诱导的IFN-γ反应指示/表征。
在又另一特定方面中,提供用于减少或预防猪科动物,优选是猪的由至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒感染造成的临床症状或疾病的方法中、或用于治疗和/或预防至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒感染的方法中的如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中该等由至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒感染造成的临床症状或疾病或该至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒感染优选是选自由以下组成的组:非洲猪瘟、急性非洲猪瘟、慢性非洲猪瘟、病死、死亡、猝死、发热、高热、厌食、嗜睡、虚弱、食欲缺乏、伏卧、红斑、发绀性皮肤斑痣病、痢疾、便秘、腹痛、呼吸道症状、咳嗽、呕吐、呼吸困难、鼻涕及结合膜分泌物、出血、流鼻血、流产、白血球减少症、血小板减少症。本发明亦意欲含有减少或预防猪科动物,优选是猪的由至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒感染造成的临床症状或疾病的对应方法、或治疗和/或预防猪科动物,优选是猪的至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒感染的对应方法(其含有向该猪科动物,优选是猪施用如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物)、以及如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物用于制备用以减少或预防猪科动物,优选是猪的由至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒感染造成的临床症状或疾病或用以治疗和/或预防猪科动物,优选是猪的至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒感染的药剂的对应用途。
在又另一特定方面中,提供用于使猪科动物,优选是猪免疫,以对抗至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒在猪科动物,优选是猪中造成的临床疾病的方法中的如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,该方法含有以下步骤:向猪科动物,优选是猪施用如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中该免疫原性组合物或疫苗或医药组合物不会造成临床感染症状,但能诱导使猪科动物,优选是猪对该至少一种非洲猪瘟病毒,优选是该至少一种非洲猪瘟病毒的病原性形式免疫的免疫反应,其中该临床疾病或该等临床感染症状优选是选自由以下组成的组:非洲猪瘟、急性非洲猪瘟、慢性非洲猪瘟、病死、死亡、猝死、发热、高热、厌食、嗜睡、虚弱、食欲缺乏、伏卧、红斑、发绀性皮肤斑痣病、痢疾、便秘、腹痛、呼吸道症状、咳嗽、呕吐、呼吸困难、鼻涕及结合膜分泌物、出血、流鼻血、流产、白血球减少症、血小板减少症。本发明亦意欲含有使猪科动物,优选是猪免疫,以对抗至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒在猪科动物,优选是猪中造成的临床疾病的对应方法,该方法含有以下步骤:向猪科动物,优选是猪施用如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中该免疫原性组合物或疫苗或医药组合物不会造成临床感染症状,但能诱导使猪科动物,优选是猪对该至少一种非洲猪瘟病毒,优选是该至少一种非洲猪瘟病毒的病原性形式免疫的免疫反应;以及如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物用于制备用以使猪科动物,优选是猪免疫,以对抗至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒在猪科动物,优选是猪中造成的临床疾病的药剂的对应用途,其中该免疫原性组合物或疫苗或医药组合物不会造成临床感染症状,但能诱导使猪科动物,优选是猪对该至少一种非洲猪瘟病毒,优选是该至少一种非洲猪瘟病毒的病原性形式免疫的免疫反应。
在又另一特定方面中,提供用于对猪科动物,优选是猪进行初免-加强型免疫,以对抗至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒在猪科动物,优选是猪中造成的临床疾病的方法中的如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,该方法含有以下步骤:向猪科动物,优选是猪施用一次或两次含有以下的如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物:(i)作为唯一免疫原组分的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段;或(ii)病毒或细菌载体,优选是重组和/或非天然存在的病毒或细菌载体,其含有作为唯一免疫原组分的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段(初免步骤);且随后-在初免一次或两次之后-向猪科动物,优选是猪施用减毒活非洲猪瘟病毒,优选是BA71ΔCD2(加强步骤);其中该免疫原性组合物或疫苗或医药组合物以及减毒活非洲猪瘟病毒彼此独立地不会造成临床感染症状,但能诱导使猪科动物,优选是猪对该至少一种非洲猪瘟病毒,优选是该至少一种非洲猪瘟病毒的病原性形式免疫的免疫反应,其中该临床疾病或该等临床感染症状优选是选自由以下组成的组:非洲猪瘟、急性非洲猪瘟、慢性非洲猪瘟、病死、死亡、猝死、发热、高热、厌食、嗜睡、虚弱、食欲缺乏、伏卧、红斑、发绀性皮肤斑痣病、痢疾、便秘、腹痛、呼吸道症状、咳嗽、呕吐、呼吸困难、鼻涕及结合膜分泌物、出血、流鼻血、流产、白血球减少症、血小板减少症。本发明亦意欲包括对猪科动物,优选是猪进行初免-加强型免疫,以对抗至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒在猪科动物,优选是猪中造成的临床疾病的对应方法,该方法含有以下步骤:向猪科动物,优选是猪施用一次或两次含有以下的如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物:(i)作为唯一免疫原组分的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段;或(ii)病毒或细菌载体,优选是重组和/或非天然存在的病毒或细菌载体,其含有作为唯一免疫原组分的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段(初免步骤);且随后-在初免一次或两次之后-向猪科动物,优选是猪施用减毒活非洲猪瘟病毒,优选是BA71ΔCD2(加强步骤);其中该免疫原性组合物或疫苗或医药组合物以及减毒活非洲猪瘟病毒彼此独立地不会造成临床感染症状,但能诱导使猪科动物,优选是猪对该至少一种非洲猪瘟病毒,优选是该至少一种非洲猪瘟病毒的病原性形式免疫的免疫反应;以及如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物用于制备用以对猪科动物,优选是猪进行初免-加强型免疫,以对抗至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒在猪科动物,优选是猪中造成的临床疾病的药剂的对应用途。
在又另一特定方面中,提供试剂盒,其用于猪科动物,优选是猪进行疫苗接种,以针对猪科动物,优选是猪中与至少一种非洲猪瘟病毒(优选是病原性非洲猪瘟病毒)相关联的疾病和/或降低与至少一种非洲猪瘟病毒(优选是病原性非洲猪瘟病毒)相关联或由至少一种非洲猪瘟病毒(优选是病原性非洲猪瘟病毒)造成的一或多种临床症状的发生率或严重程度,该试剂盒含有:
(a)能够将疫苗施用至该猪科动物的分配器;及
(b)如本文所描述且/或主张的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物;以及
(c)视情况选用的说明书小册;
其中该疾病或该等临床症状优选是选自由以下组成的组:非洲猪瘟、急性非洲猪瘟、慢性非洲猪瘟、病死、死亡、猝死、发热、高热、厌食、嗜睡、虚弱、食欲缺乏、伏卧、红斑、发绀性皮肤斑痣病、痢疾、便秘、腹痛、呼吸道症状、咳嗽、呕吐、呼吸困难、鼻涕及结合膜分泌物、出血、流鼻血、流产、白血球减少症、血小板减少症。
在又另一特定方面中,提供非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、19、21、23、25、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、1、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150、151、152、153、154、155、156、157、158、159、160、161、162、163、164、165、166、167、168、169、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、180、181、182、183、184、185、186、187、188、189、190、191、192、193、194、195、196、197、198、199、200、201、202、203、204、205、206、207、208、209、210、211、212、213、214、215、216、217、218、219、220、221、222、223、224、225、226、227、228、229、230、231、232、233、234、235、236、237、238、239、240、241、242、243、244、245、246、247、248、249、250、251、252、253、254、255、256、257、258、259、260、261、262、263、264、265、266、267、268、269、272、274、275、276、277、278、279、280、281、282、283、284、285、287、289、290、291、292、293、294、295、297、299、300、301、302、303、304、305、306、307、308、309、310、311、312、313、314、315、316、317、318、319、320、321、322、323、324、325、326、327、328、329、330、331、332、333、334、335、336、337、338、339、340、341、342、343、344、345、346、347、348、349、350、351、352、353、354、355、356、357、358、359、360、361、362、363、364、365、366、367、368、369、370、371、372、373、374、375、376、377、378、379、380、381、382、383、384、385、386、387、388、389、390、391、392、393、394、395、396、397、398、399、400、401、402、403、404、405、406、407、408、409、410、411、412、413、414、415、416、417、418、420、422、423、424、425、426、427、428、429、430、432、434、435、436、437、438、439、440、441、442、443、444、445、446、447、448、449、450、451、452、453、454、455、456、458、460、461、462、463、464、465、466、468、470、471、472、473、474、475、476、477、478、479、481、483、484、485、486、487、489、491、492、493、494、495、496、497、498、499、500、501、502、503、504、505、506、507、508、509、510、511、512、513、514、515、516、518、520、521、522、523、524、526、528、529、530、531、532、533、534、535、536、537、538、539、540、541、542、543、544、545、546、547、548、549、550、551、552、553、554、555、556、557、558、559、560、561、562、563、564、565、566、568、570、572、574、575、576、577、578、579、580、581、582、583、584、585、586、587、588、589、590、591、592、593、594、595、596、597、598、599、600、601、602、603、604、605、606、607、608、609、610、611、612、613、614、615、616、617、618、619、620、621、622、623、624、625、626、627、628、629、630、631、632、633、634、635、636、637、638、639、640、641、642、643、644、645、646、647、648、649、650、651、652、653、654、655、656、657、658、659、660、661、662、663、664、665、666、667、668、669、670、671、672、673、674、675、676、677、678、679、680、681、682、683、684、685、686、687、688、689、690、691、692、693、694、695、696、697、698、699、700、701、702、703、704、705、706、707、708、709、710、711、712、713、714、715、716、717、719、721、722、724、726、727、728、729、730、731、732、733、734、735、736、737、738、739、740、741、742、743、744、745、746、747、748、749、750、751、752、753、754、755、756、757、758、759、760、761、762、763、764、765、766、767、768、769、770、771、772、774、776、777、778、779、780、781、782、783、784、785、786、787、788、789、790、791、792、793、794、795、796、797、798、799、800、801、802、803、804、805、806、807、808、809、810、811、812、813、814、815、816、817、818、819、820、821、822、823、824、825、826、827、828、829、830、831、832、833、834、835、836、837、838、839、840、841、842、843、844、845、846、847、848、849、850、851、852、853、854。
在又另一特定方面中,提供非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自以下所组成组中的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)、A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570)、K145R(SEQ ID NO:526、524、523、522、521、520、518、516、515、514)、B475L(SEQ ID NO:66、65、64、63、62、61、60、59、58、57、56、55、54、53、52、51、50、49、48)、H339R(SEQ ID NO:468、466、465、464、463、462、461、460、458、456、455、454)、I226R(SEQ ID NO:489、487、486、485、484、483、481、479、478)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:266、265、264、263、262、261)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:260、259、258)、G1211R(SEQ ID NO:432、430、429、428、427、426、425、424、423、422、420、418、417、416)、M1249L(SEQ ID NO:562、561、560、559、558、557、556、555、554、553、552、551、550、549、548、547、546、545、544、543、542、541、540、539)、MGF505-9R(SEQ ID NO:733、732、731、730、729、728、727、726)、P1192R(SEQ ID NO:817、816、815、814、813、812、811、810、809、808、807、806、805、804、803、802、801)、MGF505-1R(SEQ ID NO:692、691、690、689、688、687、686、685、684)、MGF505-3R(SEQ ID NO:703、702、701、700、699)、EP424R(SEQ ID NO:389、388、387、386、385、384、383、382、381、380、379)、C475L(SEQ ID NO:201、200、199、198、197、196、195、194、193、192、191、190、189、188)、B602L(SEQ ID NO:75、74、73、72、71、70、69、68、67)、CP530R(SEQ ID NO:278、277、276、275)、D339L(SEQ ID NO:322、321、320)、D117L(SEQ ID NO:862、864)、I243L(SEQ ID NO:494、493、492、491)、I73R(SEQ ID NO:504、503、502)、DP238L(SEQ ID NO:327、326、325)、I9R(SEQ ID NO:513、512、511、510);优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)、A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570);且最优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQID NO:854、853、25)。
在又另一特定方面中,提供非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其中非洲猪瘟病毒多肽,优选是全长蛋白含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A238L(SEQ ID NO:21)、A238L(SEQ ID NO:23)、A240L(SEQ ID NO:853)、A240L(SEQ ID NO:854)、B475L(SEQID NO:65)、B475L(SEQ ID NO:66)、CP2475(SEQ ID NO:256)、CP2475(SEQ ID NO:257)、CP312R(SEQ ID NO:272)、CP312R(SEQ ID NO:274)、D1133L(SEQ ID NO:295)、D1133L(SEQID NO:297)、EP402R(SEQ ID NO:378)、EP424R(SEQ ID NO:388)、EP424R(SEQ ID NO:389)、G1211R(SEQ ID NO:430)、G1211R(SEQ ID NO:432)、H339R(SEQ ID NO:466)、H339R(SEQ IDNO:468)、I226R(SEQ ID NO:487)、I226R(SEQ ID NO:489)、K145R(SEQ ID NO:524)、K145R(SEQ ID NO:526)、M448R(SEQ ID NO:566)、M448R(SEQ ID NO:568)、M1249L(SEQ ID NO:561)、M1249L(SEQ ID NO:562)、MGF_100-1L/MGF100-1L(SEQ ID NO:572)、MGF505-1R/MGF_505-1R(SEQ ID NO:691)、MGF505-1R/MGF_505-1R(SEQ ID NO:692)、MGF505-8R/MGF_505-8R(SEQ ID NO:722)、MGF505-7R/MGF_505-7R(SEQ ID NO:724)、MGF505-8R/MGF_505-8R(SEQ ID NO:772)、MGF505-7R/MGF_505-7R(SEQ ID NO:774)、MGF505-9R/MGF_505-9R(SEQID NO:732)、MGF505-9R/MGF_505-9R(SEQ ID NO:733)、P1192R(SEQ ID NO:816)、P1192R(SEQ ID NO:817);且/或其中非洲猪瘟病毒肽和/或其免疫原性片段和/或非洲猪瘟病毒多肽/全长蛋白免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A238L(SEQ ID NO:17)、A238L(SEQ ID NO:19)、A240L(SEQ ID NO:25)、B475L(SEQ ID NO:48)、B475L(SEQ ID NO:49)、B475L(SEQ ID NO:50)、B475L(SEQ ID NO:51)、B475L(SEQ ID NO:52)、B475L(SEQ ID NO:53)、B475L(SEQ IDNO:54)、B475L(SEQ ID NO:55)、B475L(SEQ ID NO:56)、B475L(SEQ ID NO:57)、B475L(SEQID NO:58)、B475L(SEQ ID NO:59)、B475L(SEQ ID NO:60)、B475L(SEQ ID NO:61)、B475L(SEQ ID NO:62)、B475L(SEQ ID NO:63)、B475L(SEQ ID NO:64)、CP2475(SEQ ID NO:235)、CP2475(SEQ ID NO:236)、CP2475(SEQ ID NO:237)、CP2475(SEQ ID NO:238)、CP2475(SEQID NO:239)、CP2475(SEQ ID NO:240)、CP2475(SEQ ID NO:241)、CP2475(SEQ ID NO:242)、CP2475(SEQ ID NO:243)、CP2475(SEQ ID NO:244)、CP2475(SEQ ID NO:245)、CP2475(SEQID NO:246)、CP2475(SEQ ID NO:247)、CP2475(SEQ ID NO:248)、CP2475(SEQ ID NO:249)、CP2475(SEQ ID NO:250)、CP2475(SEQ ID NO:251)、CP2475(SEQ ID NO:252)、CP2475(SEQID NO:253)、CP2475(SEQ ID NO:254)、CP2475(SEQ ID NO:255)、CP2475L(p37)(SEQ IDNO:261)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:262)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:263)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:264)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:265)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:266)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:258)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:259)、CP2475L(p150)(SEQID NO:260)、CP312R(SEQ ID NO:267)、CP312R(SEQ ID NO:268)、CP312R(SEQ ID NO:269)、D1133L(SEQ ID NO:281)、D1133L(SEQ ID NO:282)、D1133L(SEQ ID NO:283)、D1133L(SEQID NO:284)、D1133L(SEQ ID NO:285)、D1133L(SEQ ID NO:287)、D1133L(SEQ ID NO:289)、D1133L(SEQ ID NO:290)、D1133L(SEQ ID NO:291)、D1133L(SEQ ID NO:292)、D1133L(SEQID NO:293)、D1133L(SEQ ID NO:294)、EP402R(SEQ ID NO:372)、EP402R(SEQ ID NO:373)、EP402R(SEQ ID NO:374)、EP402R(SEQ ID NO:375)、EP402R(SEQ ID NO:376)、EP402R(SEQID NO:377)、EP424R(SEQ ID NO:379)、EP424R(SEQ ID NO:380)、EP424R(SEQ ID NO:381)、EP424R(SEQ ID NO:382)、EP424R(SEQ ID NO:383)、EP424R(SEQ ID NO:384)、EP424R(SEQID NO:385)、EP424R(SEQ ID NO:386)、EP424R(SEQ ID NO:387)、G1211R(SEQ ID NO:416)、G1211R(SEQ ID NO:417)、G1211R(SEQ ID NO:418)、G1211R(SEQ ID NO:420)、G1211R(SEQID NO:422)、G1211R(SEQ ID NO:423)、G1211R(SEQ ID NO:424)、G1211R(SEQ ID NO:425)、G1211R(SEQ ID NO:426)、G1211R(SEQ ID NO:427)、G1211R(SEQ ID NO:428)、G1211R(SEQID NO:429)、H339R(SEQ ID NO:454)、H339R(SEQ ID NO:455)、H339R(SEQ ID NO:456)、H339R(SEQ ID NO:458)、H339R(SEQ ID NO:460)、H339R(SEQ ID NO:461)、H339R(SEQ IDNO:462)、H339R(SEQ ID NO:463)、H339R(SEQ ID NO:464)、H339R(SEQ ID NO:465)、I226R(SEQ ID NO:478)、I226R(SEQ ID NO:479)、I226R(SEQ ID NO:481)、I226R(SEQ ID NO:483)、I226R(SEQ ID NO:484)、I226R(SEQ ID NO:485)、I226R(SEQ ID NO:486)、K145R(SEQID NO:514)、K145R(SEQ ID NO:515)、K145R(SEQ ID NO:516)、K145R(SEQ ID NO:518)、K145R(SEQ ID NO:520)、K145R(SEQ ID NO:521)、K145R(SEQ ID NO:522)、K145R(SEQ IDNO:523)、M448R(SEQ ID NO:563)、M448R(SEQ ID NO:564)、M448R(SEQ ID NO:565)、M1249L(SEQ ID NO:539)、M1249L(SEQ ID NO:540)、M1249L(SEQ ID NO:541)、M1249L(SEQ ID NO:542)、M1249L(SEQ ID NO:543)、M1249L(SEQ ID NO:544)、M1249L(SEQ ID NO:545)、M1249L(SEQ ID NO:546)、M1249L(SEQ ID NO:547)、M1249L(SEQ ID NO:548)、M1249L(SEQ ID NO:549)、M1249L(SEQ ID NO:550)、M1249L(SEQ ID NO:551)、M1249L(SEQ ID NO:552)、M1249L(SEQ ID NO:553)、M1249L(SEQ ID NO:554)、M1249L(SEQ ID NO:555)、M1249L(SEQ ID NO:556)、M1249L(SEQ ID NO:557)、M1249L(SEQ ID NO:558)、M1249L(SEQ ID NO:559)、M1249L(SEQ ID NO:560)、MGF_100-1L/MGF100-1L(SEQ ID NO:570)、MGF505-1R/MGF_505-1R(SEQID NO:684)、MGF505-1R/MGF_505-1R(SEQ ID NO:685)、MGF505-1R/MGF_505-1R(SEQ IDNO:686)、MGF505-1R/MGF_505-1R(SEQ ID NO:687)、MGF505-1R/MGF_505-1R(SEQ ID NO:688)、MGF505-1R/MGF_505-1R(SEQ ID NO:689)、MGF505-1R/MGF_505-1R(SEQ ID NO:690)、MGF505-8R/MGF_505-8R(SEQ ID NO:717)、MGF505-7R/MGF_505-7R(SEQ ID NO:719)、MGF505-7R/MGF_505-7R(SEQ ID NO:721)、MGF505-9R/MGF_505-9R(SEQ ID NO:726)、MGF505-9R/MGF_505-9R(SEQ ID NO:727)、MGF505-9R/MGF_505-9R(SEQ ID NO:728)、MGF505-9R/MGF_505-9R(SEQ ID NO:729)、MGF505-9R/MGF_505-9R(SEQ ID NO:730)、MGF505-9R/MGF_505-9R(SEQ ID NO:731)、P1192R(SEQ ID NO:801)、P1192R(SEQ ID NO:802)、P1192R(SEQ ID NO:803)、P1192R(SEQ ID NO:804)、P1192R(SEQ ID NO:805)、P1192R(SEQ ID NO:806)、P1192R(SEQ ID NO:807)、P1192R(SEQ ID NO:808)、P1192R(SEQ ID NO:809)、P1192R(SEQ ID NO:810)、P1192R(SEQ ID NO:811)、P1192R(SEQ ID NO:812)、P1192R(SEQ ID NO:813)、P1192R(SEQ ID NO:814)、P1192R(SEQ ID NO:815)。
在又另一特定方面中,提供非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其中非洲猪瘟病毒多肽,优选是全长蛋白含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722)、M448R(SEQ ID NO:568、566)、D1133L(SEQ ID NO:297、295)、CP312R(SEQ ID NO:274、272)、A240L(SEQ ID NO:854、853)、A238L(SEQ ID NO:23、21)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572)、K145R(SEQ ID NO:526、524)、B475L(SEQ ID NO:66、65)、H339R(SEQ ID NO:468、466)、I226R(SEQ ID NO:489、487)、CP2475(SEQ ID NO:257)、CP2475(SEQ ID NO:256)、G1211R(SEQ ID NO:432、430)、M1249L(SEQ ID NO:562、561)、MGF505-9R(SEQ ID NO:733、732)、P1192R(SEQ ID NO:817、816)、MGF505-1R(SEQ ID NO:692、691)、MGF505-3R(SEQ ID NO:703、702)、EP424R(SEQ ID NO:389、388)、C475L(SEQ IDNO:201、200)、B602L(SEQ ID NO:75、74)、CP530R(SEQ ID NO:278、277)、D339L(SEQ ID NO:322、321)、D117L(SEQ ID NO:862、864)、I243L(SEQ ID NO:494、493)、I73R(SEQ ID NO:504、503)、DP238L(SEQ ID NO:327、326)、I9R(SEQ ID NO:513、512);且/或其中非洲猪瘟病毒肽和/或其免疫原性片段和/或非洲猪瘟病毒多肽/全长蛋白免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQID NO:269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:25)、A238L(SEQ ID NO:19、17)、MGF100-1L(SEQID NO:570)、K145R(SEQ ID NO:523、522、521、520、518、516、515、514)、B475L(SEQ ID NO:64、63、62、61、60、59、58、57、56、55、54、53、52、51、50、49、48)、H339R(SEQ ID NO:465、464、463、462、461、460、458、456、455、454)、I226R(SEQ ID NO:486、485、484、483、481、479、478)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:266、265、264、263、262、261)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:260、259、258)、G1211R(SEQ ID NO:429、428、427、426、425、424、423、422、420、418、417、416)、M1249L(SEQ ID NO:560、559、558、557、556、555、554、553、552、551、550、549、548、547、546、545、544、543、542、541、540、539)、MGF505-9R(SEQ ID NO:731、730、729、728、727、726)、P1192R(SEQ ID NO:815、814、813、812、811、810、809、808、807、806、805、804、803、802、801)、MGF505-1R(SEQ ID NO:690、689、688、687、686、685、684)、MGF505-3R(SEQ IDNO:701、700、699)、EP424R(SEQ ID NO:387、386、385、384、383、382、381、380、379)、C475L(SEQ ID NO:199、198、197、196、195、194、193、192、191、190、189、188)、B602L(SEQ ID NO:73、72、71、70、69、68、67)、CP530R(SEQ ID NO:277、276、275)、D339L(SEQ ID NO:320)、I243L(SEQ ID NO:492、491)、I73R(SEQ ID NO:502)、DP238L(SEQ ID NO:325)、I9R(SEQ IDNO:511、510)。
在又另一特定方面中,提供编码如本文所描述且/或主张的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段。
在又另一特定方面中,提供编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:SEQ ID NO:18、20、22、24、26、27、270、271、273、286、288、296、298、419、421、431、433、457、459、467、469、480、482、488、490、517、519、525、527、567、569、571、573、718、720、723、725、773、775。
在又另一特定方面中,提供编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ IDNO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)、A238L(SEQ ID NO:24、22、20、18)、MGF100-1L(SEQ ID NO:573、571)、K145R(SEQ ID NO:527、525、519、517)、B475L(SEQ ID NO:866、867)、H339R(SEQ ID NO:469、467、459、457)、I226R(SEQ ID NO:490、488、482、480)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:868、869)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:870、871)、G1211R(SEQ ID NO:433、431、421、419)、M1249L(SEQ ID NO:872、873)、MGF505-9R(SEQ IDNO:874、875)、P1192R(SEQ ID NO:876、877)、MGF505-1R(SEQ ID NO:878、879)、MGF505-3R(SEQ ID NO:880、881)、EP424R(SEQ ID NO:882、883)、C475L(SEQ ID NO:884、885)、B602L(SEQ ID NO:886、887)、CP530R(SEQ ID NO:888、889)、D339L(SEQ ID NO:890、891)、D117L(SEQ ID NO:863、865)、I243L(SEQ ID NO:892、893)、I73R(SEQ ID NO:894、895)、DP238L(SEQ ID NO:896、897)、I9R(SEQ ID NO:898、899);优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)、A238L(SEQ ID NO:24、22、20、18)、MGF100-1L(SEQ ID NO:573、571);且最优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ IDNO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ IDNO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQID NO:860、27、26)。
在又另一特定方面中,提供如本文所描述且/或主张的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段、或编码如本文所描述且/或主张的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中ASFV多肽为ASFV全长蛋白,该ASFV全长蛋白优选是由含有以下,更优选是由以下组成的多核苷酸序列编码:任何可能的开放读码框(ORF);甚至更优选是由含有以下、最优选是由以下组成的多核苷酸序列编码:具有5'端起始密码子及3'端终止密码子的开放读码框(ORF)。
在又另一特定方面中,提供如本文所描述且/或主张的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段、或编码如本文所描述且/或主张的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中免疫原性组合物或疫苗或医药组合物或任何所含有的免疫原性片段的免疫原性(和/或免疫反应)由经诱导的IFN-γ反应指示/表征,优选是由在猪科动物IFN-γELISpot分析中,更优选是在如实施例1中所描述的猪科动物IFN-γELISpot分析中的经诱导的IFN-γ反应指示/表征。
在又另一特定方面中,提供含有一种、两种、三种或更多种如本文所描述且/或主张的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段的载体。该载体优选是含有三种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,该三种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段优选是选自EP402R、CP312R及A240L(多重表位-I,ME-I),更优选是含有以下、最优选是由以下组成:选自由SEQ ID NO:855组成的组的核酸序列;或含有十三种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,该十三种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段优选是选自D1133L、G1211R、M1249L、MGF505-9R、P1192R、CP2475L(p150)、B475L、EP424R、H339R、I226R、K145R、MGF505-1R及CP2475L(p37)(多重表位-II,ME-II),更优选是含有以下、最优选是由以下组成:选自由SEQ ID NO:856组成的组的核酸序列。
在又另一特定方面中,提供含有如本文所描述且/或主张的载体的宿主细胞,优选是哺乳动物宿主细胞。
定义
除非另外定义,否则在申请时本文所用的所有技术及科学术语均具有与熟习本发明所属的技术者通常所理解的含义相同的含义。术语的含义及范畴应为清楚的;然而,在任何潜在不明确性的情况下,本文所提供的定义优先于任何字典或外部定义。此外,除非上下文另外需要,否则单数术语应包括复数且复数术语应包括单数。除非另外说明,否则本文中“或”的使用意谓“和/或”。此外,术语“包括(including)”以及诸如“包括(includes/included)”的其他形式的使用不具限制性。本文所提及的所有专利及公开案均以引用的方式并入本文中。
除非另外指示,否则本发明的实践将采用介于此项技术内的病毒学、分子生物学、微生物学、重组DNA技术、蛋白质化学及免疫学的习知技术。该等技术在文献中已得到充分解释。参见例如Sambrook,Fritsch及Maniatis,Molecular Cloning:A LaboratoryManual,第I、II及III卷,第二版(1989);DNA Cloning,第I及II卷(D.N.Glover编1985);Oligonucleotide Synthesis(M.J.Gait编1984);Nucleic Acid Hybridization(B.D.Hames及S.J.Higgins编1984);Animal Cell Culture(R.K.Freshney编1986);Immobilized Cells and Enzymes(IRL press,1986);Perbal,B.,A Practical Guide toMolecular Cloning(1984);Methods In Enzymology系列(S.Colowick及N.Kaplan编,Academic Press,Inc.);Protein purification methods-a practical approach(E.L.V.Harris及S.Angal,编,Oxford University Press的IRL Press);及Handbook ofExperimental Immunology,第I-IV卷(D.M.Weir及C.C.Blackwell编,1986,BlackwellScientific Publications)。
在详细描述本发明之前,应理解本发明不限于特定DNA,因此多肽序列或程序参数当然可变化。亦应理解,本文所用的术语仅用于描述本发明的特定实施例的目的,且不意欲为限制性的。必须注意,除非上下文另外明确指示,否则如本说明书及所附申请专利范围中所用的单数形式“一(a/an)”及“该/该等”包括复数个提及物。因此,举例而言,对“抗原”的提及包括两种或更多种抗原的混合物,对“赋形剂”的提及包括两种或更多种赋形剂的混合物,及其类似者。
术语“病毒或细菌载体”描述经基因修饰的病毒或细菌,该经基因修饰的病毒或细菌是通过重组DNA技术以使得其向宿主细胞中的进入引起载体进行特定生物活动,例如诸如ASFV基因的转基因的表达的方式经受操纵。在一特定方面中,转基因为ASFV抗原。病毒或细菌载体在目标细胞、组织或生物体中可复制的或不可复制的。在此上下文中,术语“病毒载体”及“病毒”可互换使用-如同术语“细菌载体”及“细菌”一样。
病毒或细菌载体的生成可使用此项技术中众所周知的任何合适的基因工程改造技术来实现,该等基因工程改造技术包括(但不限于):限制性核酸内切酶消化、连接、转化、质粒纯化、DNA定序、于细胞培养物中转染的标准技术,例如如Sambrook等人(MolecularCloning:A Laboratory Manual.Cold Spring Harbor Laboratory Press,N.Y.(1989))或K.Maramorosch及H.Koprowski(Methods in Virology Volume VIII,Academic PressInc.London,UK(2014))中所描述。
病毒或细菌载体可包括两种或更多种所关注蛋白质的编码区。举例而言,病毒或细菌载体可包括第一所关注蛋白质的编码区及第二所关注蛋白质的编码区。第一所关注蛋白质及第二所关注蛋白质可相同或不同。在一些实施例中,病毒或细菌载体可包括第三或第四所关注蛋白质的编码区。第三及第四所关注蛋白质可相同或不同。由一种病毒或细菌载体编码的两种或更多种所关注蛋白质的总长度可变化。举例而言,两种或更多种蛋白质的总长度可为至少约200个氨基酸。至少约250个氨基酸、至少约300个氨基酸、至少约350个氨基酸、至少约400个氨基酸、至少约450个氨基酸、至少约500个氨基酸、至少约550个氨基酸、至少约600个氨基酸、至少约650个氨基酸、至少约700个氨基酸、至少约750个氨基酸、至少约800个氨基酸或更长。
根据本发明的特定方面,术语“病毒或细菌载体”或可替代地“病毒或细菌构建体”是指来源于病毒或细菌的重组病毒或细菌构建体,其选自由以下组成的组:非洲猪瘟病毒载体、鸟类痘病毒载体、犬麻疹病毒载体、疱疹病毒载体、水痘病毒载体、劳森氏菌属、沙门氏菌属。
术语“病毒或细菌载体”及“病毒或细菌构建体”可互换使用。
如本文所用的术语“构建体”是指诸如质粒、BAC或人工生成的重组病毒或细菌的重组核酸。
术语“质粒”是指独立于细菌宿主细胞内的细菌染色体复制的细胞质DNA。在本发明之一特定方面中,术语“质粒”和/或“转移质粒”是指可用于构筑例如表达卡匣以插入病毒载体中的重组DNA技术的组件。在另一特定方面中,术语“质粒”可用于指定可用于DNA疫苗接种目的的质粒。
如本文所用的术语“核酸”及“多核苷酸”可互换且是指任何核酸。
如本文所用的术语“核酸”、“核酸序列”、“核苷酸序列”、“RNA序列”、“cDNA序列”或“DNA序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸以及其片段及部分,且是指可为单链或双链的且表示正义链或反义链的基因体源或合成源的DNA或RNA。序列可为非编码序列、编码序列或两者的混合物。本发明的核酸序列可使用熟习此项技术者熟知的标准技术来制备。
术语“核酸”、“核酸序列”及“核苷酸序列”亦特定地包括由除五种生物学上存在的碱基(腺嘌呤、鸟嘌呤、胸腺嘧啶、胞嘧啶及尿嘧啶)以外的碱基构成的核酸。
术语“互补核苷酸序列”描述诸如DNA或RNA的多核苷酸的两个成对链中之一链。互补链的核苷酸序列反映其成对链的核苷酸序列以使得对于各腺苷酸,其包含胸腺嘧啶(或对于RNA,其包含尿嘧啶),对于各鸟嘌呤,其包含胞嘧啶,且反的亦然。例如5'-GCATAC-3'的互补核苷酸序列为3'-CGTATG-5',或对于RNA,互补核苷酸序列为3'-CGUAUG-5'。
如本文所用的术语“表达”是指宿主细胞内核酸序列的转录和/或翻译。根据本发明的特定方面,术语“表达”是指宿主细胞内异源和/或外源核酸序列的转录和/或翻译。宿主细胞中所需产物的表达量可基于细胞中存在的对应RNA或mRNA的量或由所选序列编码的所需多肽的量来确定。举例而言,自所选序列转录的mRNA可通过北方印迹杂交、核糖核酸酶RNA保护、与细胞RNA原位杂交或通过RTqPCR(逆转录后接定量PCR)来定量。自所选序列表达的蛋白质可通过各种方法,例如通过ELISA、通过免疫印迹法、通过放射免疫分析、通过免疫沉淀、通过蛋白质生物活性分析或通过蛋白质免疫染色后接FACS分析来定量。
术语“病毒负荷”为熟习该项技术者所熟知。在本文中,术语病毒负荷可与术语“病毒效价”互换使用。病毒负荷或病毒效价为活动性病毒感染的严重程度的量度,且可通过熟习此项技术者已知的方法来测定。测定可基于诸如通过抗体结合至病毒蛋白进行的病毒蛋白检测及进一步检测来进行,或可替代地,通过利用诸如RT-PCR的扩增方法进行的病毒核酸检测来进行。通过核酸扩增方法监测血浆中的病毒粒子相关病毒RNA为广泛地用于评估逆转录病毒疾病的状态及发展以及用于评估预防性干预及治疗性干预的有效性的参数。举例而言,病毒负荷或病毒效价可通过估计所涉及体液中活病毒的量,诸如每毫升血浆中RNA复本的数目来计算。优选是,术语“病毒负荷”或“病毒效价”为每体积病毒制剂中感染单元的量度。病毒效价为生物程序的端点且定义为并行进行的特定比例的测试显示效应时的稀释度。具体言的,组织培养物感染剂量五十/毫升(TCID50/ml)给出并行接种的多个细胞培养物的50%受感染时的病毒制剂的稀释度,该并行接种是在彼稀释度的情况下进行。
根据定义,当插入宿主细胞中且因此编码各别蛋白质或RNA的每一核苷酸序列或每一基因来自不同(病毒或细菌)物种时,其相对于宿主细胞而言称为“外源”、“外源序列”、“外源基因”、“外源编码序列”、“外源抗原编码序列”。
根据定义,插入宿主细胞中且因此编码各别蛋白质或RNA的每一核苷酸序列或每一基因相对于宿主细胞而言称为“异源”、“异源序列”、“异源基因”、“异源编码序列”、“转基因”或“异源蛋白质”。即使待引入的序列或待引入的基因与宿主细胞的内源序列或内源基因一致,上述说法仍适用。举例而言,根据定义,在不同位点处或相较于野生型病毒或细菌而言以经修饰形式引入病毒或细菌载体中的特定启动子序列为异源序列。如本文所用,关于诸如抗原的所关注序列或基因,术语“异源”意谓该所关注序列或基因、具体言的该抗原是在其天然亚种情形以外表达。
术语“非天然存在的”意谓在此上下文中非天然存在的诸如抗原的任何所关注序列或基因(诸如杂交序列)、或来自不同物种的诸如抗原的所关注序列或基因、或由于人工突变、插入、删除或其类似者而不为天然产物的诸如抗原的所关注序列或基因。
在整个本发明的说明书中,术语“重组”可与术语“非天然存在的”、“异源”及“外源”互换使用。因此,“重组”蛋白为由异源或外源核苷酸序列表达的蛋白质。如关于病毒或细菌使用的术语重组意谓通过人工操纵病毒或细菌基因组产生的病毒或细菌。含有诸如外源抗原编码序列的异源或外源序列的病毒或细菌为重组病毒或细菌。术语重组病毒或细菌及术语非天然存在的病毒或细菌可互换使用。
因此,术语“异源载体”意谓含有异源或外源核苷酸序列的载体。术语“重组载体”意谓含有异源或重组核苷酸序列的载体。
如本文所用的“序列同源性”是指测定两个序列的相关性的方法。为测定序列同源性,将两个或更多个序列进行最优选比对,且必要时引入间隙。然而,当测定序列同源性时,与“序列一致性”形成对比,保守氨基酸取代视为匹配。换言之,为获得与参考序列具有95%序列同源性的多肽或多核苷酸,参考序列中85%、优选是90%、91%、92%、93%、94%、甚至更优选是95%、96%、97%、98%、99%、99.9%氨基酸残基或核苷酸必须匹配或含有另一氨基酸或核苷酸的保守取代,或参考序列中总氨基酸残基或核苷酸(不包括保守取代)的至多15%、优选是至多10%、9%、8%、7%、6%、甚至更优选是至多5%、4%、3%、2%、1%、0.1%之一定数目的氨基酸或核苷酸可插入参考序列中。优选是,同源序列含有至少50个、甚至更优选是100个、甚至更优选是250个、甚至更优选是500个核苷酸的延伸段。
如此项技术中已知,“序列一致性”是指两个或更多个多肽序列或两个或更多个多核苷酸序列,亦即参考序列及待与参考序列比较的既定序列之间的关系。序列一致性是通过在对序列进行最优选比对以产生最高程度的序列类似性之后比较既定序列与参考序列来测定,如通过该等序列串之间的匹配所测定。在该比对后,基于逐位置方式测定序列一致性,例如若核苷酸或氨基酸残基在特定位置处一致,则序列在彼位置处“一致”。随后,将该等位置一致性的总数目除以参考序列中核苷酸或残基的总数目,得到序列一致性%。序列一致性可易于通过已知方法来计算,该等已知方法包括(但不限于):ComputationalMolecular Biology,Lesk,A.N.,编,Oxford University Press,New York(1988),Biocomputing:Informatics and Genome Projects,Smith,D.W.,编,Academic Press,NewYork(1993);Computer Analysis of Sequence Data,第I部分,Griffin,A.M.,及Griffin,H.G.,编,Humana Press,New Jersey(1994);Sequence Analysis in Molecular Biology,von Heinge,G.,Academic Press(1987);Sequence Analysis Primer,Gribskov,M.及Devereux,J.,编,M.Stockton Press,New York(1991);以及Carillo,H.及Lipman,D.,SIAMJ.Applied Math.,48:1073(1988)中所描述的方法,该等参考文献的教示内容以引用的方式并入本文中。测定序列一致性的优选方法经设计以给出所测试序列之间的最大匹配。测定序列一致性的方法编码于测定既定序列之间的序列一致性的可公开获得的计算机程序中。该等程序的实施例包括(但不限于):GCG程序包(Devereux,J.,等人,Nucleic AcidsResearch,12(1):387(1984))、BLASTP、BLASTN及FASTA(Altschul,S.F.等人,J.Molec.Biol.,215:403-410(1990))。BLASTX程序可自NCBI及其他来源公开获得(BLASTManual,Altschul,S.等人,NCVI NLM NIH Bethesda,MD 20894,Altschul,S.F.等人,J.Molec.Biol.,215:403-410(1990),该等参考文献的教示内容以引用的方式并入本文中)。此等程序使用默认间隙权数(default gap weight)最优选比对序列,以便产生既定序列与参考序列之间的最高序列一致性位准。作为说明,通过具有与参考核苷酸序列具有至少例如85%、优选是90%、91%、92%、93%、94%、甚至更优选是95%、96%、97%、98%、99%、99.9%“序列一致性”的核苷酸序列的多核苷酸,希望除既定多核苷酸序列可包括参考核苷酸序列的每100个核苷酸至多15个、优选是至多10个、甚至更优选是至多5个点突变之外,既定多核苷酸的核苷酸序列与参考序列一致。换言之,在具有相对于参考核苷酸序列具有至少85%、优选是90%、91%、92%、93%、94%、甚至更优选是95%、96%、97%、98%、99%、99.9%一致性的核苷酸序列的多核苷酸中,参考序列中至多15%、优选是10%、9%、8%、7%、6%、甚至更优选是5%、4%、3%、2%、1%、0.1%核苷酸可删除或经另一核苷酸取代,或参考序列中总核苷酸的至多15%、优选是10%、9%、8%、7%、6%、甚至更优选是5%、4%、3%、2%、1%、0.1%之一定数目的核苷酸可插入参考序列中。参考序列的此等突变可发生于参考核苷酸序列的5'端或3'端位置或彼等端位置之间的任何位置处,单独地散置于参考序列中的核苷酸中或参考序列内之一或多个邻接基团中。类似地,通过具有与参考氨基酸序列具有至少例如85%、优选是90%、91%、92%、93%、94%、甚至更优选是95%、96%、97%、98%、99%序列一致性的既定氨基酸序列的多肽,希望除既定多肽序列可包括参考氨基酸序列的每100个氨基酸至多15个、优选是至多10、9、8、7、6个、甚至更优选是至多5、4、3、2、1个氨基酸更改的外,多肽的既定氨基酸序列与参考序列一致。换言之,为获得与参考氨基酸序列具有至少85%、优选是90%、91%、92%、93%、94%、甚至更优选是95%、96%、97%、98%、99%序列一致性的既定多肽序列,参考序列中至多15%、优选是至多10%、9%、8%、7%、甚至更优选是至多5%、4%、3%、2%、1%氨基酸残基可删除或经另一氨基酸取代,或参考序列中总氨基酸残基数目的至多15%、优选是至多10%、9%、8%、7%、甚至更优选是至多5%、4%、3%、2%、1%之一定数目的氨基酸可插入参考序列中。参考序列的此等更改可发生于参考氨基酸序列的氨基端或羧基端位置或彼等端位置之间的任何位置处,单独地散置于参考序列中的残基中或参考序列内之一或多个邻接基团中。优选是,不一致残基位置的不同之处在于保守氨基酸取代。然而,当测定序列一致性时,保守取代不作为匹配包括在内。
术语“序列一致性”或“一致性百分比”在本文中可互换使用。出于本发明的目的,此处定义,为测定两个氨基酸序列或两个核酸序列之一致性百分比,出于最优选比较目的来比对序列(例如可将间隙引入第一氨基酸或核酸序列中以与第二氨基酸或核酸序列进行最优选比对)。随后,比较对应氨基酸或核苷酸位置处的氨基酸或核苷酸残基。当第一序列中的位置由与第二序列中的对应位置处相同的氨基酸或核苷酸残基占据时,则彼位置处的分子具有一致性。两个序列之间之一致性百分比为该等序列共享之一致位置数目的函数(亦即,一致性%=一致位置数目/总位置数目(亦即重叠位置)×100)。优选是,两个序列长度相同。
可在所比较的两个序列的全长上或在两个序列的片段上进行序列比较。在本发明的范畴内,通常且优选是,在所比较的两个序列的全长上进行比较。然而,可在例如二十个、五十个、一百个或更多个邻接氨基酸残基的区域上进行序列一致性。
如本文所用,尤其应理解,术语“与根据SEQ ID NO:Y的核酸/氨基酸序列具有至少X%序列一致性”(或可替代地,术语“与SEQ ID NO:Y的/中所阐述的核酸/氨基酸序列具有至少X%序列一致性”分别等效于术语“在SEQ ID NO:Y的长度上与根据SEQ ID NO:Y的核酸/氨基酸序列具有至少X%序列一致性”或等效于术语“在SEQ ID NO:Y的全长上与根据SEQ ID NO:Y的核酸/氨基酸序列具有至少X%序列一致性”。
熟习此项技术者应了解数个不同计算机程序可用于测定两个序列之间的同源性的事实。举例而言,序列比较及两个序列之间的一致性百分比测定可使用数学算法来实现。在一特定方面中,使用已并入Accelrys GCG软件包(可在http://www.accelrys.com/products/gcg/处获得)中GAP程序中的Needleman及Wunsch(J.Mol.Biol.(48):444-453(1970))算法,使用Blosum 62矩阵或PAM250矩阵以及16、14、12、10、8、6或4之间隙权数及1、2、3、4、5或6的长度权数来测定两个氨基酸或核酸序列之间的一致性百分比。熟习此项技术者应了解,所有此等不同参数将产生略微不同的结果,但在使用不同算法时两个序列的总体一致性百分比不显著更改。
本发明的蛋白质序列或核酸序列可进一步用作“查询序列”以针对公共数据库执行搜寻,例如识别其他家族成员或相关序列。该等搜寻可使用Altschul等人(1990)J.Mol.Biol.215:403-10的BLASTN及BLASTP程序(2.0版)来执行。BLAST蛋白质搜寻可用BLASTP程序、得分=50、字长=3来执行以获得与本发明的蛋白质分子同源的氨基酸序列。为出于比较目的获得间隙比对,可如Altschul等人(1997)Nucleic Acids Res.25(17):3389-3402中所描述利用间隙式BLAST。当利用BLAST及间隙式BLAST程序时,可使用各别程序(例如BLASTP及BLASTN)的预设参数。参见美国国家生物技术信息中心(the NationalCenter for Biotechnology Information)在http://www.ncbi.nlm.nih.gov/的主页。
在本发明的范畴内,术语“猪科动物”是指猪及猪属(Sus)中的动物中的任一者。术语“猪”包括家养猪(家猪(Sus scrofa domesticus))及野生猪(野猪(Sus scrofascrofa))以及疣猪(红河猪(Potamochoerus porcus))、丛林猪(假面野猪(Potamochoeruslarvatus))、巨型森林猪(大林猪(Hylochoerus meinertzhageni))以及野化猪。必须理解,猪含有雌性及雄性动物。精液可包含ASFV,且出于彼原因,措辞“猪科动物”涵盖雌性及雄性育种动物。因此,措辞“猪科动物”及“猪”含有诸如公猪的雄性动物以及诸如女猪及母猪的雌性动物。如本文所用的术语“女猪”是指首次妊娠/怀孕之前及期间的猪科动物,优选是猪。相比之下,如本文所用的术语“母猪”是指首次分娩之后的猪科动物,优选是猪,分娩为其首次妊娠/怀孕的积极结果。优选是,“猪科动物”为猪,详言的家养猪。
“免疫原性组合物或免疫组合物”一般指具有含有至少一种抗原或其免疫原部分的物质的组合物,该物质在宿主体内引发针对组合物的细胞免疫反应或抗体介导的免疫反应的免疫反应。优选是,免疫原性组合物诱导免疫反应,且更优选是,赋予针对ASFV感染的临床症状中之一或多种的保护性免疫。在宿主展现保护性免疫反应使得抗新型感染性增强且/或疾病的临床严重程度降低的情况下,免疫原性组合物描述为“疫苗”。
本文所用的术语“抗原”在此项技术中得到充分理解且包括免疫原物质(亦即免疫原)以及诱发免疫无反应性或惰能(亦即缺乏身体防御机制防御外来物质的反应)的物质。如本文所用的术语“抗原”意欲意谓包含或含有表位的全长蛋白以及其肽片段。此外,术语“抗原编码序列”是关于编码抗原的序列。优选是,抗原编码序列为诸如cDNA序列的核酸序列。
如本文特定地描述且主张的“免疫原性组合物”含有引发如本文所描述的免疫反应和/或免疫原性的以下物质:一种、两种或更多种ASFV肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,诸如ASFV表面蛋白和/或其免疫原性片段;或编码ASFV肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种ASFV寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段;或病毒或细菌载体,优选是重组和/或非天然存在的病毒或细菌载体,其含有编码ASFV肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种ASFV寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段。
在本发明过程中,术语“免疫原性片段”或“免疫原部分”或“其免疫原性片段”是指ASFV肽、多肽或全长蛋白的片段或经截短和/或经取代形式以及对应的编码ASFV寡核苷酸或多核苷酸的片段或经截短和/或经取代形式,以上所有者均包括一或多个表位且因此引发如本文所描述的免疫反应和/或免疫原性。在本发明过程中,例如ASFV全长蛋白的免疫原性片段可为ASFV多肽或ASFV肽。视此类ASFV肽的长度和/或性质而定,该ASFV肽亦可含有超过一个表位-因此在本发明过程中,甚至有可能地,既定ASFV肽之一或多个免疫原性片段存在-此视所含有的表位的数目而定。此外,在本发明过程中,例如对应的编码ASFV多核苷酸的免疫原性片段可为对应的编码ASFV寡核苷酸。视此类ASFV寡核苷酸的长度和/或性质而定,该ASFV寡核苷酸亦可含有超过一个表位-因此在本发明过程中,亦有可能地,既定ASFV寡核苷酸之一或多个免疫原性片段存在-此视所含有的表位的数目而定。此外,在本发明过程中,该等ASFV寡核苷酸和/或多核苷酸自身具免疫原性,亦即既定核酸因此具免疫原性且含有至少一个表位且因此引发如本文所描述的免疫反应和/或免疫原性。可替代地,在本发明过程中,该等ASFV寡核苷酸和/或多核苷酸自身不具免疫原性,但编码具免疫原性且含有至少一个表位且因此引发如本文所描述的免疫反应和/或免疫原性的ASFV肽、多肽或全长蛋白。优选是,该ASFV肽、多肽或全长蛋白的片段或经截短和/或经取代形式以及对应的编码ASFV寡核苷酸或多核苷酸的片段或经截短和/或经取代形式含有2至1000、3至500、4至300、5至200、6至180或7至150个邻接氨基酸残基的相对于ASFV肽、多肽或全长蛋白的长度;更优选是至少4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、120、140、160、180、200或更多个邻接氨基酸残基的相对于ASFV肽、多肽或全长蛋白的长度;或含有6至3000、9至1500、12至900、15至600、18至540或21至450个邻接核苷酸的对应的编码ASFV寡核苷酸或多核苷酸的长度;更优选是至少12、15、18、20、21、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、150、200、250、300、350、400、450、500、550、600、650、700、750、800、850、900、950、1000或更多个邻接核苷酸的对应的编码ASFV寡核苷酸或多核苷酸的长度。
该等片段可使用任何数目的此项技术中众所周知的表位定位技术来识别。参见例如Epitope Mapping Protocols in Methods in Molecular Biology,第66卷(GlennE.Morris,编,1996)Humana Press,Totowa,New Jersey。举例而言,线性表位可通过以下测定:在固体载体上同时合成大量肽,该等肽对应于蛋白质分子的部分,且在肽仍连接至载体时,使肽与抗体反应。该等技术在此项技术中已知且得以描述,参见例如美国专利第4,708,871号;Geysen等人(1984)Proc.Natl.Acad.Sci.USA81:3998-4002;及Geysen等人(1986)Molec.Immunol.23:709-715。类似地,易通过诸如利用例如x射线结晶学及二维核磁共振确定氨基酸的空间构形来识别构形表位。参见Epitope Mapping Protocols,同上。例如多重表位、侧接表位及其他重组抗原或合成衍生抗原的合成抗原亦包括在该定义内。参见例如Bergmann等人(1993)Eur.J.Immunol.23:2777-2781;Bergmann等人(1996),J.Immunol.157:3242-3249;Suhrbier,A.(1997),Immunol.and Cell Biol.75:402-408;及Gardner等人,(1998)12th World AIDS Conference,Geneva,Switzerland,1998年6月28日-7月3日。该等参考文献的教示内容及内容全部以引用的方式并入本文中。
在本发明过程中,术语“ASFV肽”是指由两个或更多个、但不超过50个氨基酸残基,更优选是4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个氨基酸残基组成、含有至少一个表位且因此引发如本文所描述的免疫反应和/或免疫原性的氨基酸序列。
在本发明过程中,术语“ASFV多肽”是指由超过50个氨基酸残基组成、含有至少一个表位且因此引发如本文所描述的免疫反应和/或免疫原性的氨基酸序列。
术语“ASFV全长蛋白”是指ASFV多肽,该ASFV多肽由含有以下,更优选是由以下组成的多核苷酸序列编码:任何可能的开放读码框(ORF);优选是由含有以下,更优选是由以下组成的多核苷酸序列编码:具有5'端起始密码子及3'端终止密码子的开放读码框(ORF)。
在本发明过程中,术语“ASFV寡核苷酸”是指具有至少两个、但不超过12个核苷酸、可含有至少一个表位且因此引发如本文所描述的免疫反应和/或免疫原性的核苷酸序列。
在本发明过程中,术语“ASFV多核苷酸”是指具有13个或更多个核苷酸、可含有至少一个表位且因此引发如本文所描述的免疫反应和/或免疫原性的核苷酸序列。
术语“使…免疫(immunizing)”是关于通过向待免疫接种的猪科动物施用免疫原性组合物,由此引起针对该免疫原性组合物中所包括的抗原的免疫反应的有效免疫接种。
如本文所用的术语“有需要的(in need/of need)”意谓施用/治疗与接受本发明的免疫原性组合物的动物的健康状况或临床症状的提升或改善或对该等动物的健康状况的任何其他积极医疗效果相关联。
如本文所用的术语“疫苗”是指含有在动物体内诱导免疫反应的至少一种免疫活性组分及可能地但非必要地增强活性组分的免疫活性之一或多种额外组分的医药组合物。疫苗可另外含有对医药组合物典型的另外组分。作为区别,疫苗的免疫活性组份可含有完整病毒粒子,该等完整病毒粒子是呈其原始形式、或在所谓改良式活毒疫苗(modifiedlive vaccine,MLV)中呈减毒粒子形式、或在所谓死毒疫苗(KV)中呈通过适当方法失活的粒子形式。呈另一形式的疫苗的免疫活性组分可含有生物体(亚单位疫苗)的诸如肽和/或多肽,优选是全长蛋白以及寡核苷酸和/或多核苷酸的适当组件,从而此等组件如下生成:通过破坏完整粒子或包含该等粒子的生长培养物且随后视情况进行纯化步骤,得到所需结构,或通过包括通过使用基于例如细菌、昆虫、哺乳动物或其他物种的合适系统进行的适当操纵的合成过程加视情况选用之后续分离及纯化程序,或通过在需要疫苗的动物体内通过使用合适医药组合物直接并有基因或物质来诱导合成过程(多核苷酸疫苗接种)。疫苗可含有一种上文所描述的组件或可同时含有上文所描述的组件中的超过一种。如在本发明的特定方面内所用的“疫苗”是指活毒疫苗或活病毒,亦称为重组疫苗。在本发明的另一特定方面中,“疫苗”是指失活病毒或死毒病毒,包括病毒样粒子(VLP)。因此,疫苗可为亚单位疫苗或死毒疫苗(KV)或失活疫苗。
术语“DNA疫苗接种”或“多核苷酸疫苗接种”意谓使用合适医药组合物直接接种遗传物质。
此项技术中已知各种物理及化学失活方法。术语“失活”是指先前毒性或非毒性病毒已经照射(紫外线(UV)、X射线、电子束或γ辐射)、加热或化学处理以使该病毒失活或杀灭该病毒,同时保留其免疫原性。合适失活剂包括β-丙内酯、二元次乙亚胺或β-次乙亚胺或乙酰基-次乙亚胺、戊二醛、臭氧及福尔马林(formalin)(甲醛)。
对于通过福尔马林或甲醛进行的失活,通常使甲醛与水及甲醇混合,产生福尔马林。甲醇添加防止活化过程期间的降解或交叉反应。一个实施例使用约0.1%至1%的37%甲醛溶液以使病毒失活。关键是调节福尔马林的量以确保物质失活,但不会达到由高剂量引起副作用的程度。
更特定言之,在病毒的情形下,术语“失活”意谓病毒不能进行活体内或活体外复制。举例而言,术语“失活”可指病毒已活体外繁殖且随后已使用化学或物理手段失活,从而使其不再能够复制。
如本文所用的术语“失活”、“死毒”或“KV”可互换使用。
术语“活毒疫苗”是指含有活生物体或可复制型病毒或病毒载体的疫苗。
“医药组合物”基本上由能够改良其所施用的生物体或存活于该生物体中或该生物体上的生物体的生理功能(例如免疫功能)的一或多种成分组成。该术语包括(但不限于):抗生素或抗寄生虫剂以及常用于达成某些其他目标的其他组分,该等目标诸如但不限于加工特质、无菌性、稳定性、经由经肠途径或诸如经口、鼻内、静脉内、肌内、皮下、皮内或其他合适途径的非经肠途径施用组合物的可行性、施用后耐受性或受控释放特性。仅出于示范目的而给出的此类医药组合物的一个非限制性实施例可如下制备:将具有经感染细胞培养物的细胞培养物上清液与稳定剂(例如亚精胺和/或牛血清白蛋白(BSA))混合且随后通过其他方法将混合物冻干或脱水。在疫苗接种之前,接着在水溶液(例如盐水、磷酸盐缓冲盐水(PBS))或非水溶液(例如油乳液、基于铝的佐剂)中复水混合物。
如本文所用的“医药学上或兽医学上可接受的载剂”包括任何及所有溶剂、分散介质、包衣、佐剂、稳定剂、稀释剂、防腐剂、抗细菌剂及抗真菌剂、等张剂、吸附延迟剂及其类似物。在一些特定方面且特别包括冻干免疫原性组合物的方面中,用于本发明的稳定剂包括用于冻干或冷冻干燥的稳定剂。
在一些实施例中,本发明的免疫原性组合物包含佐剂。如本文所用的“佐剂”可包括氢氧化铝及磷酸铝、皂素(例如Quil A、QS-21(Cambridge Biotech Inc.,CambridgeMA)、GPI-0100(Galenica Pharmaceuticals,Inc.,Birmingham,AL))、油包水乳液、水包油乳液、水包油包水乳液。乳液可特别地基于轻质液体石蜡油(欧洲药典(EuropeanPharmacopea)类型);诸如鲨烷或鲨烯的类异戊二烯油;由烯烃、具体异丁烯或癸烯寡聚产生的油;包含直链烷基的酸或醇的酯,更特定言之植物油、油酸乙酯、丙二醇二-(辛酸酯/癸酸酯)、甘油基三-(辛酸酯/癸酸酯)或丙二醇二油酸酯;分支链脂肪酸或醇的酯,详言之异硬脂酸酯。油与乳化剂组合使用以形成乳液。乳化剂优选为非离子界面活性剂,详言之视情况经乙氧基化的脱水山梨糖醇的酯、二缩甘露糖醇的酯(例如无水甘露糖醇油酸酯)、乙二醇的酯、聚丙三醇的酯、丙二醇的酯及油酸的酯、异硬脂酸的酯、蓖麻油酸的酯或羟基硬脂酸的酯;以及聚氧丙烯-聚氧乙烯共聚物嵌段,详言之Pluronic产品,特别言之L121。参见Hunter等人,The Theory and Practical Application of Adjuvants(Ed.Stewart-Tull,D.E.S.),JohnWiley and Sons,NY,第51-94页(1995),及Todd等人,Vaccine 15:564-570(1997)。例示性佐剂为描述于“Vaccine Design,The Subunit and Adjuvant Approach”,M.Powell及M.Newman编,Plenum Press,1995的第147页上的SPT乳液及描述于此同一本书的第183页上的乳液MF59。
佐剂的另一实施例为选自丙烯酸或甲基丙烯酸的聚合物及顺丁烯二酸酐与烯基衍生物的共聚物的化合物。有利佐剂化合物为尤其与糖或多元醇的聚烯基醚交联的丙烯酸或甲基丙烯酸的聚合物。此等化合物通过术语卡波姆(carbomer)已知(Phameuropa第8卷,第2期,1996年6月)。熟习此项技术者亦可参考美国专利第2,909,462号,该专利描述与具有至少3个羟基、优选是不超过8个羟基的多羟基化化合物交联的该等丙烯酸聚合物,其中至少三个羟基的氢原子经具有至少2个碳原子的不饱和脂族基团置换。优选基团为例如乙烯基、烯丙基及其他烯是不饱和基团的包含2至4个碳原子的不饱和脂族基团。不饱和基团自身可包含诸如甲基的其他取代基。以商品名
Figure BDA0003235935660000351
(BF Goodrich,Ohio,USA)出售的产品尤其适合。其与烯丙基蔗糖或烯丙基新戊四醇交联。尤其可提及Carbopol 974P、934P及971P。最优选为使用
Figure BDA0003235935660000352
971P。在顺丁烯二酸酐与烯基衍生物的共聚物中为共聚物EMA(Monsanto),其为顺丁烯二酸酐与乙烯的共聚物。此等聚合物溶解于水中产生酸溶液,优选是将该酸溶液中和至生理pH,以便得到并有免疫原、免疫或疫苗组合物本身的佐剂溶液。
另外的合适佐剂尤其包括(但不限于):RIBI佐剂系统(Ribi Inc.)、Block共聚物(CytRx,Atlanta GA)、SAF-M(Chiron,Emeryville CA)、单磷酰基脂质A、Avridine脂质-胺佐剂、来自大肠杆菌(E.coli)(重组或以其他方式)的不耐热肠毒素、霍乱毒素IMS 1314或胞壁酰二肽或天然存在的或重组细胞介素或其类似物或内源性细胞介素释放刺激剂。
预期佐剂可以每剂约100μg至约10mg的量、优选是以每剂约100μg至约10mg的量,更优选是以每剂约500μg至约5mg的量、甚至更优选是以每剂约750μg至约2.5mg的量且最优选是以每剂约1mg的量添加。可替代地,佐剂可以最终产物的体积计呈约0.01%至50%的浓度、优选是呈约2%至30%的浓度,更优选是呈约5%至25%的浓度、再更优选是呈约7%至22%的浓度且最优选是呈10%至20%的浓度。
“稀释剂”可包括水、盐水、右旋糖、乙醇、甘油及其类似物。等张剂可尤其包括氯化钠、右旋糖、甘露糖醇、山梨糖醇及乳糖。稳定剂尤其包括白蛋白及乙二胺四乙酸的碱金属盐。
“经分离”意谓“人工”自其天然状态更改,亦即若其存在于自然界中,则其自其原始环境改变或移除或两者。举例而言,当该术语用于本文中时,天然存在于活生物体中的多核苷酸或多肽未“经分离”,但与其天然状态的共存物质分离的相同多核苷酸或多肽“经分离”。
“减毒”意谓降低病原体毒性。在本发明中,“减毒”与“无毒”同义。在本发明中,减毒病毒为毒性已降低以使其不造成临床感染症状,但能在目标动物体内诱导免疫反应的病毒,但亦可意谓与感染非减毒病毒或病原体且未接受减毒病毒的动物的“对照组”相比,感染减毒病毒的动物中的临床症状发生率或严重程度降低。在此情形下,术语“降低(reduce/reduced)”意谓与如上文所定义的对照组相比,降低至少10%、优选是25%、甚至更优选是50%、再更优选是60%、甚至更优选是70%、再更优选是80%、甚至更优选是90%且最优选是100%。因此,诸如如所主张的减毒病毒或细菌载体的减毒、无毒病原体适用于生成改良式活毒疫苗(MLV)或改良式活免疫原性组合物。
术语“治疗和/或防治”及“减少或预防临床症状或疾病”是指降低特定ASFV感染的发生率或降低由特定ASFV感染造成或与特定ASFV感染相关联的临床症状的严重程度。因此,术语“治疗和/或防治”及“减少或预防临床症状或疾病”亦指与动物未接受如本文所提供的免疫原性组合物的动物组相比,在动物已接受有效量的该免疫原性组合物的动物组中,减少感染特定ASFV的动物的数目(=降低ASFV感染的发生率)或降低通常与ASFV感染相关联或由ASFV感染造成的临床症状的严重程度。术语“治疗和/或防治”及“减少或预防临床症状或疾病”一般涉及向需要或可受益于此类治疗/防治/减少/预防的一或多只动物施用有效量的本发明的免疫原性组合物。术语“治疗”是指一旦动物或至少一些动物已感染该ASFV且其中该等动物已显示由该ASFV感染造成或与该ASFV感染相关联的一些临床症状,则施用有效量的免疫原性组合物。术语“防治”及“预防”是指在该动物感染任何ASFV之前或至少在该动物不显示或一组动物中无一动物显示由该ASFV感染造成或与该ASFV感染相关联的任何临床症状的情况下向动物施用。术语“防治”及“预防”在本申请案中可互换使用。
如本文所用的术语“临床症状”是指动物感染ASFV的症状。临床感染症状视所选ASFV病毒株而定。该等临床症状的实施例包括(但不限于):个体口渴增多、排尿增多、体重减轻、食欲下降、嗜睡、呕吐、病毒血症、发热及环境中排毒。然而,临床症状亦包括(但不限于):可直接自活动物观测到的临床症状。
优选是,与未经治疗或经在本发明之前可获得的免疫原性组合物治疗、但随后感染特定ASFV的动物相比,经治疗动物中发生率或严重程度降低的临床症状是指非洲猪瘟、急性非洲猪瘟、慢性非洲猪瘟、病死、死亡、猝死、发热、高热、厌食、嗜睡、虚弱、食欲缺乏、伏卧、红斑、发绀性皮肤斑痣病、痢疾、便秘、腹痛、呼吸道症状、咳嗽、呕吐、呼吸困难、鼻涕及结合膜分泌物、出血、流鼻血、流产、白血球减少症、血小板减少症。
本文中,“有效剂量”意谓但不限于抗原在施用有抗原的动物体内引发或能够引发产生临床症状减少的免疫反应的量。
在组合物的情形下,如本文所用的术语“有效量”意谓免疫原性组合物在动物体内能够诱导降低感染或疾病事故的发生率或降低其严重程度的免疫反应的量。该有效量能够降低猪科动物中特定ASFV感染的发生率或降低特定ASFV感染的临床症状的严重程度。特定言的,有效量是指每剂的菌落形成单位(CFU)。可替代地,在疗法的情形下,术语“有效量”是指疗法足以降低或改善疾病或病症或其一或多种症状的严重程度或持续时间、防止疾病或病症发展、引起疾病或病症消退、防止与疾病或病症相关联的一或多种症状复发、显现、发作或发展、或增强或改进另一疗法或治疗剂的预防或治疗的量。
“免疫反应(immune response/immunological response)”或“免疫原性”意谓但不限于显现针对所关注(免疫原)组合物或疫苗的细胞免疫反应和/或抗体介导的免疫反应。通常,免疫反应或免疫原性包括(但不限于):以下作用中的一或多者:产生或活化特定地针对所关注组合物或疫苗中所包括的一或多种抗原的抗体、B细胞、辅助T细胞、抑制T细胞和/或细胞毒性T细胞。优选是,宿主将展现治疗性或保护性免疫(记忆)反应,以使得抗新型感染性增强且/或疾病的临床严重程度降低。该保护将通过以下展现:症状数目减少、症状严重程度降低、或与病原体感染相关联的症状中的一或多者缺乏、病毒血症发作延迟、病毒续存减少、总体病毒负荷降低和/或病毒分泌减少。
在本发明过程中,“免疫反应”或“免疫原性”更优选是在猪科动物IFN-γELISpot分析中,更优选是在如实施例1中所描述的猪科动物IFN-γELISpot分析中优选由经诱导的IFN-γ反应指示/表征。可根据本发明应用的一种例示性猪科动物IFN-γELISpot分析如下:遵循先前报导的方法,通过ELISpot分析使用经纯化小鼠抗猪IFNγ克隆P2G10作为捕捉抗体且使用经生物素标记小鼠抗猪科动物IFNγ抗体P2C11作为检测抗体评估IFNγ反应(Lacasta等人,2014)。简言之,在4℃下用含5μg/ml捕捉抗体的碳酸盐-碳酸氢盐缓冲液pH9.6涂布96孔盘隔夜。将盘用PBS洗涤3次,且在37℃下用具有10%FBS的完全RPMI封闭1小时。在具有对应刺激物的情况下使用5×105个PBMC/孔,最终体积为200μl。添加肽和/或多肽,优选是全长蛋白作为刺激物,最终浓度为4μg/ml。分别使用RPMI及10μg/ml植物血凝素-M作为阴性对照及阳性对照。当使用减毒活病毒BA71ΔCD2作为刺激物时,每孔添加105个PFU。在37℃、5%CO2下培育隔夜之后,用PBS 0.05%Tween20洗掉细胞,且在37℃下使用0.5μg/ml经生物素标记抗猪科动物IFNγ抗体检测IFNγ1小时。在洗涤之后,通过添加50μl不可溶3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)底物发展ELISpot且通过用水洗涤停止ELISpot。
“疾病预防”、“保护性免疫”、“功能性免疫”、“临床症状/症状减少”、“中和抗体诱导/产生和/或血清转化”及类似片语意谓通过施用一或多种本发明的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物或其组合生成针对疾病或病况的部分或完全反应,所产生的有害作用少于已暴露于疾病或感染的未经免疫接种的动物的预期有害作用。亦即,经疫苗接种的动物中的有害感染作用的严重程度降低。经疫苗接种的动物的感染可减轻、减缓或有可能完全预防。本文中,在意谓感染的完全预防的情况下,对完全预防加以特定地陈述。若未陈述完全预防,则该术语包括部分预防。“保护性免疫反应”或“保护性免疫”将通过以下展现:经感染宿主通常所呈现的临床症状/症状减少或缺乏、恢复时间加快和/或感染持续时间缩短、或经感染宿主的组织或体液或排泄物中的病原体效价降低。
本文中,“降低临床症状的发生率和/或严重程度”或“减少临床症状”或“减少或预防临床症状或疾病”意谓但不限于与野生型感染相比,减少一组中经感染动物的数目、减少或消除展现临床感染症状的动物的数目、或降低一或多只动物中存在的任何临床症状的严重程度。举例而言,其应指病原体负荷、病原体排出的任何减少、病原体传播减少或有ASFV感染症状的任何临床症状减少。优选是,与未接受本发明的治疗性组合物且经感染的动物相比,接受该组合物之一或多只动物的此等临床症状/症状减少至少10%。更优选是,接受本发明的组合物的动物的临床症状/症状减少至少20%、优选是至少30%,更优选是至少40%且甚至更优选是至少50%。
本文中的术语“保护增加”意谓但不限于与未经疫苗接种的动物对照组相比,经疫苗接种的动物组中与感染物所致的感染相关联的一或多种临床症状或症状在统计学上显著减少。术语“临床症状统计学上显著减少”意谓但不限于在感染物攻击之后,经疫苗接种的动物组中至少一种临床症状的发生频率比未经疫苗接种的对照组低至少10%、优选是20%,更优选是30%、甚至更优选是50%、且甚至更优选是70%。
术语“病原体”为熟习该项技术者所熟知。术语“病原体”包括细菌及病毒。在本发明过程中,术语“感染猪科动物的病原体”优选是为ASFV。
“长效保护”应指持续至少3周、但更优选是至少3个月、再更优选是至少6个月的“改良功效”。
术语“排毒”是指诸如鼻涕的分泌物,且进一步指咳嗽或打喷嚏产生的气溶胶。因此,排毒可通过检验鼻拭子中的病毒效价或肺中的病毒效价来测定。术语“排毒”进一步涵盖病毒转移向易感动物(即易感者(sentinel))。量测排毒的方式是在熟习此项技术者的常识内。
“安全性”是指在疫苗接种后经疫苗接种的动物中没有以下不良后果,包括(但不限于):基于病原体的疫苗可能恢复的毒力、临床上显著的副作用(诸如持续全身疾病或疫苗施用部位处的不可接受的发炎)。
如本文所用的术语“疫苗接种(vaccination/vaccinating)”或其变化形式意谓(但不限于)包括施用本发明的免疫原性组合物的过程,当施用动物时,会直接或间接引发或能够引发该动物体内的免疫反应。
在本发明的上下文中,“病死”是指由感染造成的死亡,且包括感染严重,以致需对动物进行安乐死以防痛苦,且提供人道终止其生命的情况。
本发明的调配物含有有效免疫量的一或多种免疫原性组合物及生理学上可接受的媒剂。疫苗含有有效免疫量的一或多种免疫原性组合物及生理学上可接受的媒剂。调配物应适合施用模式。
视需要,免疫原性组合物亦可包含少量润湿剂或乳化剂或pH缓冲剂。免疫原性组合物可为液体溶液、悬浮液、乳液、锭剂、丸剂、胶囊、持续释放调配物或散剂。口服调配物可包括诸如医药级甘露糖醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、纤维素、碳酸镁等的标准载剂。
优选施用途径包括(但不限于):鼻内、经口、皮内、皮下及肌内。希望在饮用水中投药,最优选是施用单次剂量。熟习此项技术者咸了解,本发明的组合物亦可以施用一次、两次或更多次剂量,及通过其他施用途径施用。举例而言,该等其他途径包括皮下、皮内、腹膜内,且视所需治疗持续时间及有效性而定,根据本发明组合物可施用一次或数次,亦可间歇性投药,例如以每日为基础持续数天、数周或数月,且施用不同剂量,诸如:约1×103至1×109。在本发明的特定方面中,剂量为约1×104至1×108个TCID50
术语“样本”是指体液样本、经分离细胞样本或组织或器官样本。体液样本可通过众所周知技术获得,且优选是包括血液、血浆、血清或尿液样本,更优选是血液、血浆或血清样本。组织或器官样本可通过例如生检而获自任何组织或器官。经分离细胞可通过诸如离心或细胞分选的分离技术而获自体液或组织或器官。
术语“获得”可含有熟习此项技术者已知的优选是使用沉淀、管柱等进行的分离和/或纯化步骤。
术语“免疫测试”及“基因体分析测试”为用于区分经本发明的免疫原性组合物疫苗接种的动物及感染天然存在的(疾病相关联的)ASFV的动物的基础。免疫测试的实施例包括诸如以下的任何酶免疫或免疫化学检测方法:ELISA(酶联免疫吸附分析)、EIA(酶免疫分析)、RIA(放射免疫分析)、夹心酶免疫测试、荧光抗体测试(FAT)、电化学发光夹心免疫分析(ECLIA)、解离增强型镧系氟免疫分析(DELFIA)或固相免疫测试、免疫荧光测试(IFT)、免疫组织学染色、免疫印迹分析或熟习此项技术的技术人员可获得的任何其他合适方法。视所用分析而定,可通过酶、荧光团或放射性同位素标记抗原或抗体。参见例如Coligan等人Current Protocols in Immunology,John Wiley&Sons Inc.,New York,N.Y.(1994);及Frye等人,Oncogen 4:1153-1157,1987。
术语“基因体分析测试”是指基于以下的基因体分析方法:聚合酶链反应(PCR)、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、实时PCR(r-PCR)或实时逆转录PCR(rRT-PCR)、Templex-PCR、基于核酸序列的扩增(NASBA)及使用聚合酶及特定寡核苷酸作为引物的等温扩增方法。前述扩增方法在此项技术中众所周知。
杂交反应可在不同“严格度”条件下执行。增加杂交反应严格度的条件是众所周知。参见例如“Molecular Cloning:A Laboratory Manual”,第二版(Sambrook等人1989)。相关条件(为提高严格度)的实施例包括:25℃、37℃、50℃及68℃的培育温度;10×SSC、6×SSC、1×SSC、0.1×SSC(其中SSC为0.15M NaCl及15mM柠檬酸盐缓冲液)的缓冲液浓度以及使用其他缓冲液系统的其等效浓度;0%、25%、50%及75%的甲酰胺浓度;5分钟至24小时的培育时间;1个、2个或更多个洗涤步骤;1、2或15分钟的洗涤培育时间;以及6×SSC、1×SSC、0.1×SSC的洗涤溶液或去离子水。
术语“表位”是指为特定B细胞和/或T细胞的反应对象的诸如本发明的ASFV肽、多肽或全长蛋白以及ASFV寡核苷酸或多核苷酸的抗原上的位点。该术语亦可与“抗原决定子”或“抗原决定位点”互换使用。辨识相同表位的抗体可在显示一种抗体阻断另一抗体与目标抗原的结合的能力的简单免疫分析中得到识别。
序列表
本申请案包含序列表。序列表含有为氨基酸序列(N端至C端方向)或DNA序列(5'端至3'端方向)的以下序列:
SEQ ID NO:1 A118R肽Georgia 2007/1,23-43,21
SEQ ID NO:2 A118R肽Georgia 2007/1,33-43,11
SEQ ID NO:3 A118R肽Georgia 2007/1,41-50,10
SEQ ID NO:4 A118R蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:5 A137R肽BA71
SEQ ID NO:6 A137R蛋白BA71
SEQ ID NO:7 A137R蛋白Georgia2007/1
SEQ ID NO:8 A151R肽BA71
SEQ ID NO:9 A151R肽Georgia 2007/1,40-55,16
SEQ ID NO:10 A151R肽Georgia 2007/1,43-52,10
SEQ ID NO:11 A151R肽Georgia 2007/1,48-55,8
SEQ ID NO:12 A151R蛋白BA71
SEQ ID NO:13 A151R蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:14 A179L肽BA71
SEQ ID NO:15 A179L蛋白BA71
SEQ ID NO:16 A179L蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:17 A238L肽BA71
SEQ ID NO:18 A238L肽BA71
SEQ ID NO:19 A238L肽Georgia 2007/1
SEQ ID NO:20 A238L肽Georgia 2007/1
SEQ ID NO:21 A238L蛋白BA71
SEQ ID NO:22 A238L蛋白BA71
SEQ ID NO:23 A238L蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:24 A238L蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:25 A240L肽Georgia 2007/1
SEQ ID NO:26 A240L肽Georgia 2007/1
SEQ ID NO:27 A240L蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:28 A859L肽Georgia 2007/1,572-580,9
SEQ ID NO:29 A859L肽Georgia 2007/1,626-636,11
SEQ ID NO:30 A859L蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:31 B117L肽BA71
SEQ ID NO:32 B117L蛋白BA71
SEQ ID NO:33 B117L蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:34 B119L肽Georgia 2007/1,68-75,8
SEQ ID NO:35 B119L蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:36 B125R肽BA71
SEQ ID NO:37 B125R肽BA71
SEQ ID NO:38 B125R蛋白BA71
SEQ ID NO:39 B125R蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:40 B169L肽Georgia 2007/1,26-34,9
SEQ ID NO:41 B169L蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:42 B175L肽Georgia 2007/1,69-78,10
SEQ ID NO:43 B175L蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:44 B318L肽Georgia 2007/1,155-162,8
SEQ ID NO:45 B318L蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:46 B385R肽Georgia 2007/1,180-188,9
SEQ ID NO:47 B385R蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:48 B475L肽BA71
SEQ ID NO:49 B475L肽BA71
SEQ ID NO:50 B475L肽BA71
SEQ ID NO:51 B475L肽BA71
SEQ ID NO:52 B475L肽BA71
SEQ ID NO:53 B475L肽BA71
SEQ ID NO:54 B475L肽Georgia 2007/1
SEQ ID NO:55 B475L肽Georgia 2007/1
SEQ ID NO:56 B475L肽Georgia 2007/1
SEQ ID NO:57 B475L肽Georgia 2007/1
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SEQ ID NO:59 B475L肽Georgia 2007/1
SEQ ID NO:60 B475L肽Georgia 2007/1,10-18,9
SEQ ID NO:61 B475L肽Georgia 2007/1,14-24,11
SEQ ID NO:62 B475L肽Georgia 2007/1,14-28,15
SEQ ID NO:63 B475L肽Georgia 2007/1,18-28,11
SEQ ID NO:64 B475L肽Georgia 2007/1,62-70,9
SEQ ID NO:65 B475L蛋白BA71
SEQ ID NO:66 B475L蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:67 B602L肽BA71
SEQ ID NO:68 B602L肽BA71
SEQ ID NO:69 B602L肽BA71
SEQ ID NO:70 B602L肽Georgia 2007/1,54-77,24
SEQ ID NO:71 B602L肽Georgia 2007/1,61-69,9
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SEQ ID NO:73 B602L肽Georgia 2007/1,73-81,9
SEQ ID NO:74 B602L蛋白BA71
SEQ ID NO:75 B602L蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:76 B646L肽BA71
SEQ ID NO:77 B646L肽BA71
SEQ ID NO:78 B646L肽BA71
SEQ ID NO:79 B646L肽BA71
SEQ ID NO:80 B646L肽Georgia 2007/1,455-465,11
SEQ ID NO:81 B646L肽Georgia 2007/1,457-465,9
SEQ ID NO:82 B646L蛋白BA71
SEQ ID NO:83 B646L蛋白Georgia2007/1
SEQ ID NO:84 B962L肽Georgia 2007/1,599-606,8
SEQ ID NO:85 B962L蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:86 BA71V-A104R蛋白BA71
SEQ ID NO:87 BA71V-A104R蛋白Georgia2007/1
SEQ ID NO:88 BA71V-A118R蛋白BA71
SEQ ID NO:89 BA71V-A118R蛋白Georgia2007/1
SEQ ID NO:90 BA71V-A137R(p11.5)蛋白BA71
SEQ ID NO:91 BA71V-A137R(p11.5)蛋白Georgia2007/1
SEQ ID NO:92 BA71V-A179L(5HL)Bcl2蛋白BA71
SEQ ID NO:93 BA71V-A179L(5HL)Bcl2蛋白Georgia2007/1
SEQ ID NO:94 BA71V-A224L(4CL)蛋白BA71
SEQ ID NO:95 BA71V-A224L(4CL)蛋白Georgia2007/1
SEQ ID NO:96 BA71V-A238L(5EL)蛋白BA71
SEQ ID NO:97 BA71V-A238L(5EL)蛋白Georgia2007/1
SEQ ID NO:98 BA71V-A859L蛋白BA71
SEQ ID NO:99 BA71V-A859L蛋白Georgia2007/1
SEQ ID NO:100 BA71V-B175L蛋白BA71
SEQ ID NO:101 BA71V-B175L蛋白Georgia2007/1
SEQ ID NO:102 BA71V-B263R蛋白BA71
SEQ ID NO:103 BA71V-B263R蛋白Georgia2007/1
SEQ ID NO:104 BA71V-B407L蛋白BA71
SEQ ID NO:105 BA71V-B407L蛋白Georgia2007/1
SEQ ID NO:106 BA71V-B438L(p49)蛋白BA71
SEQ ID NO:107 BA71V-B438L(p49)蛋白Georgia2007/1
SEQ ID NO:108 BA71V-C62L蛋白BA71
SEQ ID NO:109 BA71V-C62L蛋白Georgia2007/1
SEQ ID NO:110 BA71V-D129L蛋白BA71
SEQ ID NO:111 BA71V-D129L蛋白Georgia2007/1
SEQ ID NO:112 BA71V-D250R(g5R)蛋白BA71
SEQ ID NO:113 BA71V-D250R(g5R)蛋白Georgia2007/1
SEQ ID NO:114 BA71V-D345L(i3L,i4L)蛋白BA71
SEQ ID NO:115 BA71V-D345L(i3L,i4L)蛋白Georgia2007/1
SEQ ID NO:116 BA71V-D79L(g7L)蛋白BA71
SEQ ID NO:117 BA71V-D79L(g7L)蛋白Georgia2007/1
SEQ ID NO:118 BA71V-DP96R蛋白BA71
SEQ ID NO:119 BA71V-DP96R蛋白Georgia2007/1
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SEQ ID NO:121 BA71V-E111R(k6R)蛋白Georgia2007/1
SEQ ID NO:122 BA71V-E120R(p14.5)蛋白BA71
SEQ ID NO:123 BA71V-E120R(p14.5)蛋白Georgia2007/1
SEQ ID NO:124 BA71V-E165R(k1R)蛋白BA71
SEQ ID NO:125 BA71V-E165R(k1R)蛋白Georgia2007/1
SEQ ID NO:126 BA71V-E183L(p54,j13L)蛋白BA71
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SEQ ID NO:129 BA71V-E184L(j12L)蛋白Georgia2007/1
SEQ ID NO:130 BA71V-E199L(j18L)蛋白BA71
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SEQ ID NO:133 BA71V-E248R(k2R)蛋白Georgia2007/1
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SEQ ID NO:135 BA71V-E296R(k4R)蛋白Georgia2007/1
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SEQ ID NO:137 BA71V-E301R(j15R)蛋白Georgia2007/1
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SEQ ID NO:139 BA71V-EP152R蛋白Georgia2007/1
SEQ ID NO:140 BA71V-EP364R蛋白BA71
SEQ ID NO:141 BA71V-EP364R蛋白Georgia2007/1
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SEQ ID NO:144 BA71V-F317L蛋白BA71
SEQ ID NO:145 BA71V-F317L蛋白Georgia2007/1
SEQ ID NO:146 BA71V-H124R蛋白BA71
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SEQ ID NO:149 BA71V-H171R(j2R)蛋白Georgia2007/1
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SEQ ID NO:151 BA71V-H359L(j1L)蛋白Georgia2007/1
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SEQ ID NO:157 BA71V-I215L(k13L)蛋白Georgia2007/1
SEQ ID NO:158 BA71V-I267L(k7L)蛋白BA71
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SEQ ID NO:160 BA71V-K205R蛋白BA71
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SEQ ID NO:162 BA71V-K78R(p10)蛋白BA71
SEQ ID NO:163 BA71V-K78R(p10)蛋白Georgia2007/1
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SEQ ID NO:167 BA71V-O174L蛋白Georgia2007/1
SEQ ID NO:168 BA71V-S183(i5L)蛋白BA71
SEQ ID NO:169 BA71V-S183(i5L)蛋白Georgia2007/1
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SEQ ID NO:171 BA71V-S273R(i6R)蛋白Georgia2007/1
SEQ ID NO:172 BA71V-X69R蛋白BA71
SEQ ID NO:173 BA71V-X69R蛋白Georgia2007/1
SEQ ID NO:174 C129R肽BA71
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SEQ ID NO:176 C129R蛋白BA71
SEQ ID NO:177 C129R蛋白Georgia2007/1
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SEQ ID NO:179 C147L蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:180 C257L肽BA71
SEQ ID NO:181 C257L蛋白BA71
SEQ ID NO:182 C257L蛋白Georgia2007/1
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SEQ ID NO:184 C315R肽Georgia 2007/1,257-267,11
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SEQ ID NO:187 C315R蛋白Georgia 2007/1
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SEQ ID NO:190 C475L肽BA71
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SEQ ID NO:197 C475L肽Georgia 2007/1,210-217,8
SEQ ID NO:198 C475L肽Georgia 2007/1,213-221,9
SEQ ID NO:199 C475L肽Georgia 2007/1,438-445,8
SEQ ID NO:200 C475L蛋白BA71
SEQ ID NO:201 C475L蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:202 C62L肽Georgia 2007/1,33-51,19
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SEQ ID NO:204 C62L蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:205 C62L蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:206 C717R肽Georgia 2007/1,104-116,13
SEQ ID NO:207 C717R肽Georgia 2007/1,356-363,8
SEQ ID NO:208 C717R肽Georgia 2007/1,356-366,11
SEQ ID NO:209 C717R肽Georgia 2007/1,388-407,20
SEQ ID NO:210 C717R肽Georgia 2007/1,394-404,11
SEQ ID NO:211 C717R肽Georgia 2007/1,425-435,11
SEQ ID NO:212 C717R肽Georgia 2007/1,47-62,16
SEQ ID NO:213 C717R肽Georgia 2007/1,495-505,11
SEQ ID NO:214 C717R肽Georgia 2007/1,543-553,11
SEQ ID NO:215 C717R肽Georgia 2007/1,543-563,21
SEQ ID NO:216 C717R肽Georgia 2007/1,546-553,8
SEQ ID NO:217 C717R蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:218 C84L肽Georgia 2007/1,42-49,8
SEQ ID NO:219 C84L蛋白Georgia 2007/1
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SEQ ID NO:221 C962R肽Georgia 2007/1,398-407,10
SEQ ID NO:222 C962R肽Georgia 2007/1,398-417,20
SEQ ID NO:223 C962R肽Georgia 2007/1,400-409,10
SEQ ID NO:224 C962R肽Georgia 2007/1,407-416,10
SEQ ID NO:225 C962R肽Georgia 2007/1,536-544,9
SEQ ID NO:226 C962R肽Georgia 2007/1,726-742,17
SEQ ID NO:227 C962R肽Georgia 2007/1,730-738,9
SEQ ID NO:228 C962R蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:229 CP123L肽BA71
SEQ ID NO:230 CP123L肽BA71
SEQ ID NO:231 CP123L蛋白BA71
SEQ ID NO:232 CP123L蛋白Georgia2007/1
SEQ ID NO:233 CP204L肽Georgia 2007/1,23-33,11
SEQ ID NO:234 CP204L蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:235 CP2475L肽BA71
SEQ ID NO:236 CP2475L肽BA71
SEQ ID NO:237 CP2475L肽BA71
SEQ ID NO:238 CP2475L肽BA71
SEQ ID NO:239 CP2475L肽BA71
SEQ ID NO:240 CP2475L肽BA71
SEQ ID NO:241 CP2475L肽BA71
SEQ ID NO:242 CP2475L肽BA71
SEQ ID NO:243 CP2475L肽BA71
SEQ ID NO:244 CP2475L肽Georgia 2007/1,1540-1562,23
SEQ ID NO:245 CP2475L肽Georgia 2007/1,1547-1557,11
SEQ ID NO:246 CP2475L肽Georgia 2007/1,1795-1807,13
SEQ ID NO:247 CP2475L肽Georgia 2007/1,1889-1898,10
SEQ ID NO:248 CP2475L肽Georgia 2007/1,2019-2029,11
SEQ ID NO:249 CP2475L肽Georgia 2007/1,214-221,8
SEQ ID NO:250 CP2475L肽Georgia 2007/1,2226-2234,9
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SEQ ID NO:252 CP2475L肽Georgia 2007/1,543-551,9
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SEQ ID NO:786 NP1450L蛋白Georgia 2007/1
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SEQ ID NO:791 NP419L蛋白Georgia 2007/1
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SEQ ID NO:803 P1192R肽BA71
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SEQ ID NO:811 P1192R肽Georgia 2007/1,189-197,9
SEQ ID NO:812 P1192R肽Georgia 2007/1,372-382,11
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SEQ ID NO:814 P1192R肽Georgia 2007/1,605-614,10
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SEQ ID NO:816 P1192R蛋白BA71
SEQ ID NO:817 P1192R蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:818 Q706L肽BA71
SEQ ID NO:819 Q706L肽Georgia 2007/1,137-144,8
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SEQ ID NO:823 Q706L蛋白Georgia 2007/1
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SEQ ID NO:827 QP383R蛋白BA71
SEQ ID NO:828 QP383R蛋白Georgia2007/1
SEQ ID NO:829 QP509L肽Georgia 2007/1,384-402,19
SEQ ID NO:830 QP509L肽Georgia 2007/1,392-400,9
SEQ ID NO:831 QP509L肽Georgia 2007/1,51-63,13
SEQ ID NO:832 QP509L肽Georgia 2007/1,76-85,10
SEQ ID NO:833 QP509L蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:834 R298L 1蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:835 R298L肽Georgia 2007/1,189-199,11
SEQ ID NO:836 R298L肽Georgia 2007/1,189-214,26
SEQ ID NO:837 R298L肽Georgia 2007/1,193-201,9
SEQ ID NO:838 R298L肽Georgia 2007/1,193-203,11
SEQ ID NO:839 R298L肽Georgia 2007/1,198-207,10
SEQ ID NO:840 R298L肽Georgia 2007/1,205-214,10
SEQ ID NO:841 R298L肽Georgia 2007/1,220-230,11
SEQ ID NO:842 R298L肽Georgia 2007/1,99-108,10
SEQ ID NO:843 R298L蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:844 S183L肽Georgia 2007/1,10-18,9
SEQ ID NO:845 S183L肽Georgia 2007/1,128-136,9
SEQ ID NO:846 S183L蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:847 S273R肽Georgia 2007/1,113-122,10
SEQ ID NO:848 S273R肽Georgia 2007/1,96-104,9
SEQ ID NO:849 S273R蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:850 X69R肽Georgia 2007/1,19-29,11
SEQ ID NO:851 X69R肽Georgia 2007/1,47-54,8
SEQ ID NO:852 X69R蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:853 A240L蛋白BA71
SEQ ID NO:854 A240L蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:855 多重表位-I(ME-I)构建体
SEQ ID NO:856 多重表位-II(ME-II)构建体
SEQ ID NO:857 MGF505-7R蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:858 M448R蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:859 D1133L蛋白Georgia 2007/1
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SEQ ID NO:863 D117L蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:864 D117L蛋白BA71
SEQ ID NO:865 D117L蛋白BA71
SEQ ID NO:866 B475L蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:867 B475L蛋白BA71
SEQ ID NO:868 CP2475L(p37)蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:869 CP2475L(p37)蛋白BA71
SEQ ID NO:870 CP2475L(p150)蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:871 CP2475L(p150)蛋白BA71
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SEQ ID NO:873 M1249L蛋白BA71
SEQ ID NO:874 MGF-505-9R蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:875 MGF-505-9R蛋白BA71
SEQ ID NO:876 P1192R蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:877 P1192R蛋白BA71
SEQ ID NO:878 MGF-505-1R蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:879 MGF-505-1R蛋白BA71
SEQ ID NO:880 MGF-505-3R蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:881 MGF-505-3R蛋白BA71
SEQ ID NO:882 EP424R蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:883 EP424R蛋白BA71
SEQ ID NO:884 C475L蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:885 C475L蛋白BA71
SEQ ID NO:886 B602L蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:887 B602L蛋白BA71
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SEQ ID NO:889 CP530R蛋白BA71
SEQ ID NO:890 D339L蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:891 D339L蛋白BA71
SEQ ID NO:892 I234L蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:893 I234L蛋白BA71
SEQ ID NO:894 I73R蛋白Georgia 2007/1
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SEQ ID NO:896 DP238L蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:897 DP238L蛋白BA71
SEQ ID NO:898 I9R蛋白Georgia 2007/1
SEQ ID NO:899 I9R蛋白BA71
SEQ ID NO:900 CP312R肽Georgia 2007/1
SEQ ID NO:901 CP312R肽Georgia 2007/1
实施例
实施例1-材料及方法
细胞及病毒
猪科动物肺泡巨噬细胞:通过用补充有1μg/ml庆大霉素(gentamicin)(Sigma-Aldrich)的PBS 1×进行肺脏灌洗来获得来自健康常见猪(蓝瑞斯猪(Landrace)×大白猪(Large White))的猪科动物肺泡巨噬细胞(PAM)。使用无菌漏斗施用PBS溶液通过气管,将肺叶轻轻地按摩5分钟,且将体积收集至无菌容器中。在用250ml PBS溶液洗涤三次之后,将所回收的流体在400×g下离心10分钟。将细胞集结粒用PBS 1×洗涤一次,且悬浮于补充有2mM L-谷氨酰胺(Invitrogen)、100IU/mL青霉素(Invitrogen)、100μg/ml链霉素(Invitrogen)及10%热失活猪科动物血清(Gibco)的RPMI 1640介质(Gibco)中。将PAM维持在37℃、5%CO2下细胞培养物中,或在FBS 10%DMSO(Sigma-Aldrich)中冷冻且在-150℃下储存。
原代猪纤维母细胞:遵循先前所描述的方案由2cm2耳组织样本块建立原代纤维母细胞培养。简言之,将组织切割成小切片且在37℃下与含0.5%胰蛋白酶溶液的PBS一起培育隔夜。经由40μm细胞过滤器(Corning)过滤细胞以舍弃剩余组织块,且在150×g下离心10分钟。丢弃上清液,且将细胞再悬浮于补充有10%FBS(HyClone,GE HealthCare)、100IU/ml青霉素(Invitrogen)、100μg/ml链霉素(Invitrogen)、2mM L-谷氨酰胺(Invitrogen)及50IU/ml制霉素(Sigma-Aldrich)的完全DMEM中。将原代纤维母细胞接种在T形烧瓶中,且在多个连续传代之后维持其活力。遵循标准方案通过胰蛋白酶消化执行细胞传代。
外周血液单核细胞(PBMC):使用Histopaque-1077(Sigma-Aldrich)密度梯度溶液自全血分离猪科动物PBMC。在PBS中1:1稀释自猪颈静脉抽取至10ml EDTA真空管(BectonDickinson)中的血液样本。使经稀释血液在50ml锥形管中在10ml Histopaque-1077顶部上轻轻地成层且在20℃下在400×g下离心30分钟,既不加速亦不中断。抽吸在包含单核细胞的中间相中形成的发白肤色血球层且转移至填充有PBS的洁净15ml锥形管中,且在20℃下在400×g下离心10分钟。丢弃上清液,且通过使用9ml无菌蒸馏水进行低渗压冲击30秒,接着添加3.5mL 3.5%NaCl溶液来溶解红血球。之后,将细胞在20℃下400×g离心10分钟,用PBS洗涤,且悬浮于补充有2mM L-谷氨酰胺(Invitrogen)、100IU/mL青霉素(Invitrogen)、100μg/ml链霉素(Invitrogen)及10%热失活FBS(HyClone,GE HealthCare)的RPMI 1640介质(Gibco)中。为将其用于ELISpot分析中,将50μMβ-巯基乙醇(Sigma-Aldrich)添加至介质中以帮助维持还原环境。
兔肾RK13细胞:在37℃、5%CO2下在补充有10%FBS(HyClone,GE HealthCare)、100IU/ml青霉素(Invitrogen)、100μg/ml链霉素(Invitrogen)及2mM L-谷氨酰胺(Invitrogen)的DMEM中培养兔肾上皮RK13细胞株(ATCC CCL-37)。
非洲猪瘟病毒:使用两种不同ASFV毒性野外分离株:BA71(Rodriguez JM等人,PLoS One 2015;10(11):e0142889;获自1971年西班牙巴达和斯(Badajoz,Spain)的经感染动物的脾脏;GenBank登陆编号KP055815)及Georgia2007/1(Chapman DA等人,EmergInfect Dis.2011,17(4):599-605;获自2007年6月4日提交至英国珀布赖特的动物卫生协会(Institute for Animal Health,Pirbright,UK)的世界动物卫生组织参考实验室(theWorld Organisation for Animal Health Reference Laboratory)的猪组织样本;GenBank登陆编号FR682468)。先前获得减毒活BA71ΔCD2病毒,亦即缺乏CD2v基因的BA71的删除突变体(EP402R)(WO 2015/091322)。
CD8+T细胞表位的多参数计算机仿真预测:自Uniprot检索Georgia2007/1蛋白质组(UP000141072)以进行计算机仿真CD8+T细胞表位预测。使用NetMHCpan 3.0软件作出预测。考虑42种SLA I类猪白血球抗原(SLA)等位基因,且选择介于8至11个氨基酸残基范围内且IC50(抑制标准肽结合50%的肽浓度)低于500nM的肽。获得8,648个不同序列。为进一步选择最有前景的理论CTL候选物,评估包括以下各肽的额外特点:
i).蛋白酶体裂解,通过使用来自IEDB(http://tools.iedb.org/processing)的MHC-I加工工具进行分析。此程序允许评估肽或其N端延长前驱体可有效地通过免疫蛋白酶体自其源蛋白释放的方式。
ii).多样(promiscuity):预测以500nM或更低的亲和力结合肽的SLA I等位基因的数目。
iii).重叠:在至少一个氨基酸中与既定多肽重叠的SLA结合亲和力为500nM或更低的所预测肽的数目。
iv).肽免疫原性:考虑其氨基酸特性及其在序列内的位置的肽免疫原性的预测(Calis J等人,2013)。
以10个区间分配各特点的值以使得最优选值得到10评分且最差值评分为1。最终评分表达为所有值总和且最后用于选择最优选候选物。
为比较所选肽的组库,制作并有先前用于识别来自E75 ASFV病毒株的CD2v CTL肽的作为新型参数的TAPREG评分的额外清单(Argilaguet等人,2012)。TAPREG服务器使用支持向量机回归(Support Vector Machine Regression)计算肽与TAP的结合亲和力。TAPREG评分新增提供替代列表,且组合两个肽列表获得最终肽选择。当在两个清单中找到重叠肽时,选择最优选评分及较大肽两者。另外,根据既定热斑点中超过10个重叠肽的存在来选择较大肽(15-27个氨基酸)。
基于质谱法的免疫多肽组学
PAM活体外感染ASFV:在6孔盘中接种5×106个PAM/孔以使用指定感染倍率(MOI)进行ASFV感染。将各别病毒接种物(0.5ml)稀释于不具有血清的完全RPMI中且施用至PAM单层。在37℃、5%CO2下培育2小时之后,丢弃接种物,且用补充有10%猪科动物血清(Gibco)的完全RPMI补给细胞。使用经受相同条件的平行盘以监测ASFV感染。在此情况下,收获细胞上清液,且如先前所描述,通过qPCR分析病毒动力学(Lacasta等人,2014)。在37℃及5%CO2下培育细胞,且当细胞病变效应显而易见(视所用MOI而定)时通过刮擦收获。将PAM在4℃下在350×g下离心5分钟且用PBS洗涤。丢弃上清液且在-80℃下冷冻集结粒直至使用为止。
SLA I分子亲和纯化:使用4B7/8α-SLA I抗体结合型CNBr琼脂糖珠粒(GEHealthcare)免疫沉淀SLA I-肽复合物。使用具有mAbα-SLA I的杂交瘤培养物上清液。遵循制造商说明书执行抗体与经CNBr活化的琼脂糖的偶合。在4℃下使用分子量截止值为12-14kDa的最大D形管透析器(Novagen)以用包含0.1M碳酸钠缓冲液pH 8.3的0.5M NaCl(偶合缓冲液)透析含抗体上清液。将冻干琼脂糖悬浮于1mM HCl pH 3中且在RT下在底盖翻转旋转中培育20分钟以洗掉冻干添加剂,在RT下在500×g下离心2分钟,且用偶合缓冲液洗涤一次。将含抗体的偶合溶液以0.8-1.2mg/ml的最优选偶合浓度添加至经洗涤琼脂糖中,且在4℃下底盖翻转旋转隔夜。在偶合前后量测在280nm处的抗体溶液的OD以测定偶合效率且必要时培育更长时间。将琼脂糖在RT下在500×g下短暂离心2分钟,且丢弃偶合缓冲液。在4℃下在底盖翻转旋转中用0.1M Tris-HCl pH 8封闭任何剩余活动性组2小时。在使用包含0.1M乙酸pH 4的0.5M NaCl(酸性洗涤缓冲液)及包含0.1M Tris-HCl pH8的0.5M NaCl(碱性洗涤缓冲液)进行三次交替pH循环的情况下洗涤偶合有抗体的琼脂糖。最后,将经偶合琼脂糖再悬浮于包含50mM Tris-HCl pH 8的150mM NaCl(免疫沉淀缓冲液)中以进行免疫沉淀。使用PBS 0.1%(w/v)迭氮化钠以在4℃下长期储存经偶合琼脂糖。
在冰上解冻细胞集结粒且与含500μl 1%正十二烷基β-D-麦芽糖苷(ThermoFisher Scientific)的免疫沉淀缓冲液及1×完全蛋白酶抑制剂混合液(Thermo FisherScientific)一起溶解,且在4℃下在底盖翻转旋转的情况下培育8小时。通过在4℃下在20000×g下离心20分钟来澄清细胞溶解物,且在4℃底盖翻转下培育2小时,其中琼脂糖未连接抗体以移除与琼脂糖非特异性相互作用的任何蛋白质。随后,将500μl经澄清溶解物添加至等体积的含4B7/8α-SLA I抗体结合型CNBr琼脂糖的免疫沉淀缓冲液(含约250μl琼脂糖的250μl缓冲液)中,且在底盖翻转旋转的情况下在4℃下培育隔夜。通过用15-20琼脂糖体积的150mM NaCl、50mM碳酸氢铵洗涤来移除非特异性结合分子。在4-5琼脂糖体积的50%乙腈、5%甲酸中洗脱SLA I-肽复合物,且在-80℃下储存直至分析为止。
用以检测经免疫沉淀的SLA I-肽复合物的免疫印迹:使用Concentrator 5301(Eppendorf)将各样本体积的5%蒸发至干燥,悬浮于具有10%β-巯基乙醇的25μl 1×NuPAGE LDS样本缓冲液(Invitrogen)中,且在100℃下加热5分钟。在1.5小时期间在包含NuPAGE抗氧化剂(Thermofisher)的1×NuPAGE MES SDS运行缓冲液(Invitrogen)中在4%-12%梯度NuPAGE Bis-Tris丙烯酰胺SDS-PAGE(Invitrogen)中在200V下运行一半样本体积(总洗脱体积的2.5%)。使用加His标签的蛋白质梯(Thermofisher)作为分子量标记。在4小时期间在50V下在由包含12mM Tris-HCl(pH 8)的96mM甘胺酸及20%(v/v)甲醇制成的转移缓冲液中使用具有印迹模块的XCell SureLockTM微型细胞(Thermofisher)将凝胶转移至硝化纤维素膜(Amersham,Protran Premium)。在转移之后,用ATX丽春红S红色染色溶液(Biochemika Fluka)对硝化纤维素膜进行染色且在蒸馏水中脱色以确认蛋白质转移。其后,在RT下在回转式震荡器上轻轻搅动的情况下在溶解于洗涤缓冲液(TBS 0.1%Tween-20)中的3%(w/v)脱脂奶中封闭硝化纤维素膜1小时。将浓度为4μg/ml的含4B7/8α-SLA I抗体的封闭缓冲液添加至膜中,且在用洗涤缓冲液洗涤3次达20分钟之后,在RT下在轻轻搅动的情况下培育1小时。随后,在RT下在搅动的情况下将膜与于封闭缓冲液中1:10000稀释的结合型抗小鼠IgG HRP(Sigma-Aldrich)一起培育1小时。对于His标签标记,使用结合型小鼠抗His标签HRP(Novex)1:100000。在如上文所描述进行彻底洗涤之后,通过在RT下在暗处使用Western Lightning Ultra化学发光底物(PerkinElmer)使膜上的特定信号显影5分钟。使用Fluorchem HD2(Alpha Innotech)以进行成像。
尖端去盐及LC-MS/MS分析:遵循标准程序用TopTips C18(PolyLC Inc)对样本进行去盐。将获自去盐过程的洗脱液蒸发至干燥且在20ml 5%MeOH、1%HCOOH中复原以用于通过液相层析法偶联质谱法(LC-MS/MS)进行的分析。所用MS系统为配备有nanoESI离子源的LTQ XL Orbitrap(ThermoFisher)。将总量(20μl)各样本装载至含于连接至长度为15cm、内径为100μm的C18管柱(Nikkyo Technos Co Ltd)的C18预浓缩筒(AgilentTechnologies)中的层析系统中。在3%至40%的120分钟乙腈梯度(溶剂A:0.1%甲酸,溶剂B:乙腈0.1%甲酸)中以0.4μL/min进行分离。HPLC系统由Agilent 1200毛细管纳米泵、二元泵、恒温微注射器及微转换阀构成。在正离子模式下以1.8kV喷雾电压操作LTQXLOrbitrap。在数据依赖型模式下执行光谱分析,获取全扫描,接着为在总体列表的MS扫描中检测到的10个最强信号的10个MS/MS扫描。在Orbitrap中获取全MS(范围400-1800),其中分辨率为60.000。在线性离子捕获中进行MS/MS光谱。
数据库搜寻及肽识别:使用SEQUEST(Proteome Discoverer 1.4版,ThermoFisher),使用包括野猪、BA71及Georgia2007/1ASFV的合并数据库搜寻所有LC-MS/MS光谱且进行各病毒基因组的6框翻译(以便识别已知ORF之中及之外的肽)。以下参数为固定的:肽信赖度=高,肽等级=1,Xcorr>2。另外,使用经识别的猪特异性9聚体,使用WebLogo以产生各PAM批料的序列标志。各标志由符号堆栈组成,一个堆栈用于序列中的各位置。堆栈总高度指示彼位置处的序列保守,而堆栈内的符号高度指示彼位置处的各氨基酸的相对频率。使用由序列标志给出的结合位点描述以选择或废除不确定序列。
ASFV基因表达质粒
编码全长ASFV蛋白的质粒:基于E75 ASFV分离株(GenBank编号FN557520.1)建构所用ASFV基因表达库。将E75 ORF与泛蛋白一起框内克隆至pCMV-Ub质粒中(Rodriguez F等人,2001)。遵循相同策略进行基于Georgia2007/1序列的质粒(GenBank登陆编号FR682468)的额外构筑。在Georgia2007/1基因的终止密码子前添加FLAG标签序列以便通过免疫荧光法确认蛋白质表达。
用以检查蛋白质表达的抗FLAG标签免疫荧光法:在经转染RK13细胞中通过抗FLAG标签免疫荧光法检查Georgia2007/1质粒的蛋白质表达。根据制造商说明书使用Lipofectamine 3000转染试剂盒(Invitrogen)进行RK13细胞转染。经模拟物转染的细胞充当阴性对照。在37℃及5%CO2下培育2天之后,将细胞在4℃下用3%PFA固定1小时,接着在37℃下用含0.2%Tween20的PBS渗透30分钟。在RT下对AlexaFluor 488结合型抗FLAG标签单克隆抗体(MA1-142-A488,Invitrogen)进行1:100稀释且添加至细胞中1小时。使用Hoechst 33342(Life Technologies)以进行细胞核染色。最后,通过荧光显微法检验细胞。
编码ASFV多重表位的质粒:使用NetMHCpan 3.0软件执行经选择包括于多重表位构建体中的ASFV Georgia2007/1蛋白的CTL表位预测。自Georgia2007/1蛋白质组(Uniprot编号UP000141072)检索蛋白质序列。考虑在NetMHCpan 3.0中可获得的42个SLA I等位基因,且选择介于8至11个氨基酸残基范围内且IC50低于500nM的肽以进行进一步分析。选择包含高密度所预测表位的蛋白质区。在多重表位-II(ME-II)中,各结构域亦包括通过前述基于MS的免疫多肽组学分析识别的肽。单DNA构建体设计成具有通过最优选蛋白酶体裂解位点(AAY)连接(Velders等人,2001)且利用泛蛋白作为前导序列以增强其SLAI加工及呈现(Rodriguez及Whitton,2000;Argilaguet等人,2012;Lacasta等人,2014)的结构域。通过GenScript(New Jersey,USA;SEQ ID NO:855及856)合成编码多重表位的质粒。
活体内实验
动物及动物安全:在所描述的所有活体内实验中使用雄性蓝瑞斯猪×大白猪仔猪。任意饲喂猪且通过经编号耳标签加以识别,且在操纵动物之前建立七天驯化期。根据优良实验规范(Good Experimental Practices)准则且在西班牙巴塞罗那自治大学的伦理及动物福祉委员会(the Ethical and Animal Welfare Committee of the UniversitatAutònoma de Barcelona,Spain)的监督下进行动物照护及程序。
肽免疫接种:使用三至四周龄仔猪以在IRTA Monells猪实验农场(Girona,Spain)处进行肽免疫接种实验。猪接受间隔3周的两次后四分体肌内施用。肽混合液(1ml)包括20nM各肽与在第一次免疫接种中完全弗氏佐剂(complete Freund's adjuvant)(ThermoFisher Scientific)及在第二次免疫接种中不完全弗氏佐剂(Thermo FisherScientific)。在第二次肽施用之后2周自颈静脉抽取EDTA-血液样本以进行PBMC分离。
待旨在定量ASFV特异性T细胞反应而在不同分析中用作效应细胞的PBMC的来源:以实验方式感染Georgia2007/1的猪在其能够诱导ASFV特异性T细胞之前产生100%病死率。因此,遵循替代途径以获得ASFV特异性T细胞。为自ASF恢复期动物分离PBMC,在西班牙巴塞罗那的动物卫生研究中心(Centre de Recerca en Sanitat Animal,IRTA-CReSA,Barcelona,Spain)的3级生物安全设施处执行BA71ΔCD2免疫接种-Georgia2007/1攻击活体内实验。使用六至八周龄仔猪,且如先前所描述向动物肌内施用含106个空斑形成单位(PFU)或3.3×104个PFU的BA71ΔCD2的1ml PBS(Monteagudo等人,2017)。三周之后,用致死性剂量的Georgia2007/1ASFV分离株的103个基因体当量复本(GEC)肌内攻击猪。在BA71ΔCD2免疫接种之后(在Georgia2007/1攻击之前)三周及在攻击之后两至三周,抽取EDTA-血液样本且在不同分析中使用经分离PBMC以定量ASFV特异性T细胞反应。
异源DNA初免-BA71ΔCD2加强及Georgia2007/1攻击:Georgia2007/1的高毒性妨碍发现允许猪存活超过一周的致死性攻击剂量,因此阻碍免疫反应监测。为增加暴露特异性ASFV抗原的保护潜能的机会,建立初免-加强方案,用DNA疫苗(编码特异性ASFV抗原)初免动物且用低剂量的BA71ΔCD2加强动物。将三至四周龄雄性蓝瑞斯猪×大白猪仔猪一起圈养于西班牙巴塞罗那的IRTA-CReSA的3级生物安全设施的实验箱(12m2)中。间隔两周用两次剂量的含0.6mg对应的无内毒素DNA质粒或质粒混合液(Qiagen)的1.5ml盐水对猪进行免疫接种。根据先前所描述的优化方案,将各疫苗剂量的三分之一肌内注射至股四头肌中,三分之一肌内注射至颈部斜方肌中,且最后三分之一皮下注射至耳中(Argilaguet等人,2011)。遵循相同施用方案,对照猪接受pCMV-Ub空质粒。在第二次DNA剂量之后两周,将次最优选(具部分保护性)剂量的103个PFU的BA71ΔCD2减毒活ASFV施用至猪作为加强。三周之后,用致死性剂量的Georgia2007/1ASFV分离株的103个GEC肌内攻击猪。自猪颈静脉抽取血液样本,且在以下时间点中的各者前后采集鼻拭子:DNA初免(0、4及7dpp)、BA71ΔCD2加强(0、4、7及14dpb)及Georgia2007/1攻击(0、4、7、14及21dpc)。进行解剖检验以确认或废除ASFV可兼容病理性病变的存在。
ASF可相容临床症状监测:根据福利排程每日观测动物以监测其健康状况且记录感染ASFV之后的临床症状。临床评估包括直肠温度、行为、身体状况(脊椎及肋骨隆起)、发绀、消化道症状及呼吸道症状。如Galindo-Cardiel及合作者所描述,根据严重程度,各参数评分为0至3(0:正常,1:轻微,2:中等,3:严重)。当疾病发展导致不可接受的全体福利损失时,达到人道终点(Galindo-Cardiel等人,2013)。
通过qPCR定量血清及鼻拭子中的病毒效价:使用先前所描述的SYBR Green实时PCR(qPCR)方法定量来自血清及鼻拭子-PBS悬浮液的病毒DNA(Lacasta等人,2014)。简言之,使用NucleoSpin血液试剂盒(Macherey-Nagel)自200μl血清或拭子-PBS悬浮液获得病毒基因体DNA,且随后用作用以使用PowerUp SYBR Green主混合物(Thermo FisherScientific)自ASFV丝氨酸蛋白激酶基因(R298L)扩增85bp长的片段的模板。结果表示为log10 GEC数目/ml血清或鼻拭子,且在103个GEC/ml处建立分析的检测极限。
免疫读数
猪科动物IFNγELISpot:遵循先前所报导的方法,通过ELISpot分析使用经纯化小鼠抗猪IFNγ克隆P2G10(BD Pharmingen)作为捕捉抗体且使用经生物素标记小鼠抗猪科简言之动物IFNγ抗体P2C11(BD Pharmingen)作为检测抗体来评估IFNγ反应(Lacasta等人,2014)。,在4℃下用含5μg/ml捕捉抗体的碳酸盐-碳酸氢盐缓冲液pH 9.6涂布96孔盘(Costar 3590,Corning)隔夜。将盘用PBS洗涤3次,且在37℃下用具有10%FBS的完全RPMI封闭1小时。在具有对应刺激物的情况下使用5×105个PBMC/孔,最终体积为200μl。添加肽作为刺激物,最终浓度为4μg/ml,且分别使用RPMI及10μg/ml植物血凝素-M(PHA-M,Sigma-Aldrich)作为阴性对照及阳性对照。当使用LAV BA71ΔCD2作为刺激物时,每孔添加105个PFU。在37℃、5%CO2下培育隔夜之后,用PBS 0.05%Tween20洗掉细胞,且在37℃下使用0.5μg/ml经生物素标记抗猪科动物IFNγ抗体检测IFNγ1小时。在洗涤之后,通过添加50μl不可溶3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)底物(Calbiochem)显示ELISpot且通过用水洗涤停止ELISpot。在图中表示的特异性IFNγ分泌细胞(IFNγ-SC)的频率为减除阴性对照孔中的计数的两种复制物的平均值。300个斑点/孔视为分析分辨率的限值(具有超过300个斑点的孔得到300评分)。
对于纤维母细胞在ELISpot分析中作为APC的使用,所用比率为1个APC:5个自体PBMC。通过电穿孔使用Neon转染系统10μl试剂盒(Invitrogen)进行纤维母细胞的质粒转染。通过胰蛋白酶消化收集纤维母细胞,在RT下在250×g下离心5分钟且用PBS洗涤。将适当数目的细胞(100000个纤维母细胞/种条件)置放于洁净Eppendorf管中,且悬浮于10μlNeon再悬浮缓冲液R中,且与500ng对应质粒或质粒混合液混合。在以下脉冲条件情况下进行电穿孔:脉冲电压=1700V,脉冲宽度=20ms,脉冲数目=1。使用经空pCMV-Ub质粒电穿孔的纤维母细胞作为阴性对照。最后,将经电穿孔细胞与自体PBMC一起置放于96孔盘的对应孔中且如上文所描述继续进行。当处理经转染纤维母细胞时,不制作复制物。使用经空pCMV-Ub质粒转染的纤维母细胞的对照孔中从不超过10的斑点数目是由在图中表示的特异性IFNγ-SC减除。
通过ELISA检测ASFV特异性抗体:通过经OIE批准之间接ELISA分析基于使用来自感染ASFV的细胞的可溶性提取物来检测猪血清中的ASFV特异性抗体(Gallardo等人,2013)。使用呈1/20000稀释度的过氧化酶结合型抗猪IgG(Sigma-Aldrich)作为二级抗体且使用可溶性TMB作为特异性过氧化酶底物(Sigma-Aldrich)来检测阳性血清的存在。用1NH2SO4(Sigma-Aldrich)停止反应。在450nm波长下读取盘且结果表示为光学密度(OD)值。
实施例2-计算机仿真预测、免疫多肽组学及基因库:识别ASFV CD8+T细胞表位
此研究旨在探索用于识别具有抗Georgia2007/1ASFV分离株的保护潜能的ASFVCD8+T细胞表位的三种不同策略的有效性,该病毒当前在欧洲大陆及中国流行。
此处所探索的第一种方法为使用Georgia2007/1蛋白质组作为用于预测更有可能通过SLA I路径杂乱呈现的肽序列的模板进行的多参数生物信息学分析。
此处所采用的第二种策略在于表征在活体外感染病毒的PAM中找到的ASFV SLA I结合型肽的组库。通过IFNγELISPOT,使用来自接种有LAV BA71ΔCD2的动物的PBMC作为效应细胞评估来自计算机仿真预测及免疫多肽组学分析两者的各单独肽刺激ASFV特异性T细胞的潜能。由于BA71ΔCD2能够赋予抗异源Georgia2007/1病毒株保护,故可假定两种分离株之间共享保护抗原。在此活体外刺激分析中,肽直接结合至暴露于细胞表面上的SLA I分子且能够刺激特异性CD8+T细胞,尽管其受限于其特异性SLA I分子匹配。
此处所测试的第三种策略试图通过使用可能包含具有多SLA I特异性的表位的全长蛋白作为活体外刺激剂来克服基于肽的分析的单倍型特异性。为增强SLA I加工及抗原呈现,使用各自编码融合至泛蛋白的单独全长ASFV ORF的基因表达质粒(Rodriguez及Whitton,2000;Rodriguez等人,2001)作为用于分析的ASFV抗原的来源。将单独质粒转染至猪皮肤纤维母细胞中,因此在使用ASF恢复期猪的自体PBMC作为效应细胞的IFNγELISPOT分析中充当APC。
结果
评估Georgia2007/1CD8+T细胞表位预测:合成在使用Georgia2007/1蛋白质组作为模板的多参数生物信息学分析中评分最优选理论等级的序列。最终选定集合包括来自110个ASFV蛋白的330个肽。266个肽为预测软件的直接输出物,因此长度介于8至11个氨基酸范围内,且由于存在多个具有10个或更多个重叠预测的肽,故选择64个较长序列(长度为12-27个氨基酸)。
在330个所预测肽当中,仅一个所预测肽在来自先前经BA71ΔCD2免疫接种的Georgia2007/1存活者的PBMC中诱导IFNγ反应,由此计算机仿真预测产生0.3%经辨识肽。免疫原肽对应于MGF100-1L(SEQ ID NO:570及571)的残基68-86,且20只所测试动物中有11只(55%)显示特异性IFNγ分泌。必须考虑肽为19聚体,且因此不为所用软件的直接结果,但因为彼序列内的肽具有超过9个所预测CD8+T细胞重叠表位,故选择该肽。
评估通过基于质谱法的免疫多肽组学识别的SLA I限定肽:使用感染Georgia2007/1、BA71或LAV BA71ΔCD2的PAM以进行基于MS的免疫多肽组学分析。通过qPCR评估上清液中病毒效价的增加证实细胞中的病毒复制。在抗SLA I免疫沉淀及洗脱之后,通过免疫印迹确认SLA I-肽复合物的存在。位于40kDa与50kDa之间的谱带与I类SLA重链的约45kDa的预期分子量一致。略微较重的谱带及25kDa谱带最可能对应于已与琼脂糖珠粒分离的用于免疫沉淀的抗SLA I抗体的重链及轻链。亦通过免疫印迹分析来自未经感染PAM的样本以废除抗SLA I抗体的非特异性相互作用的可能性。
令人遗憾地,未自经Georgia2007/1感染的巨噬细胞中找到肽,此与所用PAM或感染倍率及时间无关。相反地,感染BA71或BA71ΔCD2的巨噬细胞赋予SLA I特异性肽。此等比较分析允许确认Georgia2007/1SLA I限定肽缺乏为病毒株特异性的。
使用来自三种动物的PAM识别来自56个不同ASFV蛋白的135个SLA I结合型肽(106个不同序列)。对于BA71及Georgia2007/1分离株两者,84.3%经识别序列具有一致性,13%肽的不同之处仅在于1个氨基酸,该氨基酸在SLA I结合中理论上不发挥关键作用,且仅1.7%肽在两种病毒之间显示其序列中的相当大分异度,因此确认此方法用以识别ASFV病毒株之间的高度保守肽的有用性。
足够引起关注地,当经BA71感染的PAM引起44个ASFV序列测定时,88个肽自经BA71ΔCD2感染的样本成型。如针对SLAI配位体所预期,肽长度范围为8至13个氨基酸,其中50%肽为9聚体。自功能视角看,最大百分比是用于具有未知功能的蛋白质,占总肽35.6%,但亦识别出参与转录及复制、形态发生、宿主细胞相互作用且来自多基因家族蛋白质的肽。关于感染性循环期间的蛋白质的瞬时表达,识别出早期、中期及晚期蛋白质,后者蛋白质占最高百分比(35.6%),但45.9%肽来自具有未知瞬时表达的蛋白质。
在总计9个肽的情况下,自其中识别出大量肽的ASFV蛋白为非典型蛋白B475L,接着为由CP2475L基因编码的结构聚合蛋白pp220及由D1133L ORF编码的解螺旋酶,自其中分别测定到8及7个肽。此外,五个SLAI肽定位于任何已知ORF的外的区域中,确认先前所描述的结果(Jenson等人,2000),且该等SLA I肽中之一些甚至不具有常规起始密码子。惊人地,五个框外肽全部自经BA71ΔCD2感染的样本中识别出。坚持认为此等框外肽亦可得到表达且在触发抗Georgia2007/1ASFV的保护性反应中发挥作用,在Georgia2007/1分离株基因组中找到同源序列。
在通过免疫多肽组学方法识别的111个不同肽当中,5个肽在来自Georgia2007/1攻击存活动物的PBMC中诱导IFNγ反应(表1),因此占肽总数目的4.5%。引起关注地,在经BA71ΔCD2感染的PAM中识别出通过超过一只所测试动物辨识的三个肽,而排他性地自经BA71感染的样本成型的抗原肽仅在10%动物中诱导IFNγ反应。绝非定论:此表明BA71ΔCD2及BA71的肽组库略微不同。
表1.来自免疫多肽组学研究的ASFV表位在来自接种有LAV BA71ΔCD2的ASF恢复期动物的PBMC中活体外诱导IFNγ反应。若计数出20个或更多个斑点,则将动物分类为有反应者。
Figure BDA0003235935660000691
如所预期,肽未由所有猪均一地辨识,最可能反映其对于特异性SLA等位基因的明显限制。支持此想法,用具有通过基于MS的免疫多肽组学识别的约25个肽的有弗氏佐剂混合液进行的猪接种显示肽中之一些具免疫原性,但再次未由所有猪一致地辨识(表2)。此处所采用的肽是在所执行的第一次免疫多肽组学分析中得以识别。视各肽与在NetMHCpan3.0处可获得的SLA I等位基因的理论结合亲和力而定,界定两个免疫接种组。对所分析的大部分等位基因具有高结合亲和力(IC50<1000nM)的彼等肽分类为强结合子,而具有较低理论结合亲和力(IC50>1000nM)的肽分组为弱结合子。来自蛋白D1133L及I226R的两个经辨识肽分类为强结合子,而来自蛋白G1211R的第三个经辨识肽为理论弱结合子。值得注意地,与根据理论预测的预期内容相对立,理论弱结合子由66.7%所测试动物辨识,而两个强结合子仅在六只猪中之一只中诱导IFNγ反应(表2)。
表2-ASFV特异性表位在接种有有弗氏佐剂的肽混合液的动物的PBMC中诱导通过ELISpot评估的IFNγ反应。
Figure BDA0003235935660000701
使用基因表达质粒以识别免疫显性ASFV CD8+T细胞抗原:如上文所反映,基于肽的方法展现大缺陷:限定SLA单倍型的受限呈现。
以避免此限制为目标且试图延伸上文所描述的研究,旨在自ASFV识别杂乱CD8+T细胞决定子,聚焦于其全长抗原。将编码全长ASFV ORF的pCMV-Ub质粒转染至原代纤维母细胞中,且彼等经转染纤维母细胞在使用来自相同动物的PBMC(自体)作为效应细胞的ELISpot分析中用作APC。
用于使用Neon转染系统进行的纤维母细胞电穿孔的最优选条件为使用不同电穿孔配置将pCMV-GFP质粒转染至原代猪纤维母细胞中的先前设置。考虑相对于活细胞的经转染细胞(GFP+)的百分比,选择最优选条件。所用条件给出36.14%GFP+细胞及4.60%病死率。尽管可能不会确保此等值在以下分析中恒定,但充当用于证实以下的概念验证:原代纤维母细胞可借助pCMV启动子表达蛋白质。
使用属于如上文所描述可获得的ASFV基因表达库的73个重组质粒的集合。尽管基因表达库包含近乎100个重组质粒,但此处不包括15个所测试重组质粒及编码已知免疫原蛋白的其他重组质粒。在第一筛选步骤中,将10或11个质粒的混合物电穿孔至纤维母细胞中以随后测试能够特异性地诱导IFNγ反应的来自混合物的单独质粒。通过在ASFV基因的C端处添加FLAG标签序列且如此实施例及以下实施例中所描述通过免疫荧光法对其加以检测来确认类似ASFV基因表达质粒的表达。
自ASFV基因表达库识别出能够在所有所测试动物(除一只外)中特异性地刺激IFNγ表达之一个单克隆:pCMV-Ub-MGF505-7R(图1)。无反应者猪(猪13)显示ASFV特异性IFNγ-SC,因此废除PBMC的可能性免疫抑制状态。然而,可能不排除一些特定电穿孔事件(一次转染/个质粒)失败。值得注意地,在免疫多肽组学分析中使用感染BA71ΔCD2的PAM识别来自MGF505-8R的单独肽(MGF505-7R334-341:NSTLVIRI;SEQ ID NO:717)。此肽是由小比例的ASF恢复期猪辨识的事实确认其SLA I限定性质且积极地说明在未来发展中有利于使用包含多个CD8+T细胞决定子的全长MGF505-7R蛋白的优势。
引起关注地,使用此方法识别两种额外抗原蛋白:A238L及MGF100-1L。尽管彼两种蛋白显示低于MGF505-7R的杂乱性,但其仍大致地由ASFV特异性T细胞辨识。因此,经编码全长A238L及MGF100-1L的重组质粒转染的纤维母细胞分别在ASFV活体外刺激之后在60%及50%动物中诱导IFNγ反应(图2)。引起关注地,先前通过免疫多肽组学分析自此等蛋白识别的肽:A238L81-91及MGF100-1L68-86分别在30%及50%猪中特异性地刺激IFNγ反应。
结论:上文所展现的结果强烈地表明,相比于用于识别ASFV特异性CD8+T细胞表位的计算机仿真预测,活体外感染ASFV的PAM的免疫多肽组学分析为更可靠的策略。然而,肽未由所有猪均一地辨识,可能反映其对于特异性SLA等位基因的明显限制。此可通过使用全长蛋白来克服,该等全长蛋白在此处用于识别作为新颖免疫显性且杂乱的ASFV抗原的MGF505-7R及两个额外抗原(亦即由至少50%所测试动物辨识的A238L及MGF100-1L)。因此,聚焦于全长蛋白而非表位可能为更适用于识别具有杂乱地诱导特异性T细胞反应的潜能的ASFV抗原的方法。
实施例3-M448R及MGF505-7R:两个具有保护潜能的免疫显性ASFV抗原
由于肽对特异性SLA等位基因的明显限制为基于肽的疫苗接种方法的大缺陷中的一种,故在本发明研究中聚焦于全长蛋白。根据通过基于MS的免疫多肽组学进行的SLA I限定肽识别,15个经ASFV编码的蛋白选为CD8+T细胞反应的潜在诱导子。
为评估其免疫原性及保护潜能,使猪接种有15个所选重组质粒,各重组质粒编码在N端处具有泛蛋白序列的ASFV抗原,此举旨在使SLA I呈现优化且增强CD8+T细胞反应的诱导。如实施例1中所解释,应用包括用15个所选抗原进行的DNA初免型免疫接种后接用低剂量的减毒活BA71ΔCD2 ASFV进行的接种的异源方案。赋予不仅抗亲本BA71且亦抗包括Georgia2007/1分离株的异源病毒的保护的BA71ΔCD2的交叉保护性能力允许增强通过重组质粒诱导的任何交叉保护性反应,因此增加识别相关抗原特异性T细胞的机会。另外,相较于经不编码任何ASFV特异性蛋白的质粒初免的对照组,此免疫接种方案允许评估经所选15个抗原初免的猪达成抗Georgia2007/1致死性攻击的保护的能力。
在此处所描述的第一实验中,在接受作为DNA初免型疫苗接种的15个所选抗原的猪中观测到抗Georgia2007/1攻击的部分保护。在质粒混合液中所包括的抗原当中,一种蛋白M448R显示最高免疫显性性质。此外,M448R在不接受DNA初免型疫苗接种的ASFV恢复期猪中展现杂乱细胞反应。如实施例1中所描述,使用暂时表达ASFV抗原的纤维母细胞作为用于来自ASF恢复期猪的自体PBMC的APC允许识别另一ASFV蛋白:具有与M448R的杂乱性质类似的杂乱性质的MGF505-7R。因此,M448R及MGF505-7R两者均为待进一步探索其在ASFV保护性免疫中的重要性的有前景候选物。
因此,本发明研究描述设计成使用如上文所解释的初免-加强型免疫接种方案评估合并M448R及MGF505-7R的免疫原性及保护潜能的第二活体内实验。
结果
用编码15个ASFV预选择蛋白的质粒混合液进行的DNA免疫接种赋予抗Georgia2007/1攻击感染的部分保护:基于经ASFV感染的PAM的SLAI免疫多肽组学研究的前述结果,15个ASFV抗原选为用以诱导CD8+T细胞反应的潜在候选物,且评估其免疫原性及抗Georgia2007/1致死性攻击的保护潜能。
所选集合包括有可能参与核酸代谢的三个ASFV潜在酶:D339L(RNA聚合酶次单元7)、EP424R(推定甲基转移酶)及M448R(RNA连接酶);以及假设转录因子I243L。此外,包括参与病毒粒子形态发生的两种蛋白质:为聚合蛋白pp220的加工产物的结构蛋白p37及伴随蛋白B602L。亦选择多基因家族505成员MGF505-1R及MGF505-3R以及具有未知功能的七种蛋白质:B475L、DP238L、H339R、I226R、I73R、I9R及K145R。所有上文所提及的蛋白质均代表ASFV复制周期期间的早期、晚期及中期蛋白质。如实施例1中所描述,在经转染RK13细胞中通过抗FLAG标签免疫荧光法确认此处所测试的ASFV蛋白的表达。
遵循实施例1中所描述的免疫接种方案,经15个重组质粒初免的五只猪中的三只(60%)在Georgia2007/01致死性攻击中存活。相反地且与使用低剂量的BA71ΔCD2的实验室的前述结果一致地,经低剂量的BA71ΔCD2免疫接种一次的五只对照猪中仅一只(20%)存活(图3)。
在实验期间,每日监测动物包括以下的ASF典型临床症状:发热、嗜睡、一般身体状况、消化道症状、呼吸道症状及发绀。即使四只存活猪罹患暂时ASF可相容症状,但与来自对照组的存活猪相比,经15个重组质粒初免的三只存活猪显示较轻度临床症状。此等结果与以下相关:i)经15个重组质粒初免的群组中的存活动物的血清病毒血症时间推迟且缩短,ii)其攻击病毒的最大效价的1至2log10减小,及iii)攻击后任何时间的不可检测病毒。另外,与对照组中的非存活动物及存活动物两者相比,观测到鼻排毒中之一至二log10减小。
来自对照组的存活者(猪185)显示伴有神气呆滞行为的在4dpc时开始的高且长时间的发热峰(>41℃达5天),而经15个重组质粒初免的群组中的三只存活动物具有轻度发热,持续至多三天。在整个研究中,猪181经历与轻度发热峰一致的偶发性症状,且猪184不具有明显症状。但存活猪180亦显示神气呆滞行为及显而易见的呼吸困难。与存活对照及非存活者两者相比,临床症状发作推迟。“15个克隆”组的猪182及183分别在9dpc及8dpc时屈服,且其血清及鼻拭子中的温度及病毒负荷与对照组的血清及鼻拭子中的温度及病毒负荷类似。
用15个重组质粒进行的免疫接种诱导ASFV特异性T细胞,但未检测到抗体反应:15个重组质粒的施用并不诱导任何特异性抗体反应,但其在14dpp时诱导可检测ASFV特异性IFNγ反应,因此指示15个所包括抗原中的至少一者的免疫原性。
在BA71ΔCD2疫苗接种之后,所有动物均经血清转化且出现ASFV特异性T反应。考虑到在免疫接种之后诱导的抗体或T细胞的含量,未观测到清晰保护相关性,此是由于经BA71ΔCD2疫苗接种仅一次的对照动物亦显示明显的ASFV特异性免疫反应。尽管如此,未在Georgia2007/1攻击中存活的来自“15个克隆”组的两只动物在攻击感染时显示最低抗体含量及ASFV特异性T反应。在DNA免疫接种之后直接诱导的T细胞反应极有可能有助于经“15个克隆”初免的群组中的ASFV感染更优选控制及病毒清除。
M448R显示先前经15个重组质粒初免的ASFV恢复期动物中的免疫显性性质:一旦确认经施用质粒混合液的免疫原性,则旨在测定所用15个ASFV抗原中的各者的免疫原性概况。为此目的,用含于免疫接种混合物中的各单独重组质粒对猪纤维母细胞进行电穿孔,且在利用在14dpc时获得的作为效应细胞的自体PBMC的ELISpot分析中用作APC。
引起关注地,当将PBMC与经pCMV-Ub-M448R转染的纤维母细胞一起培育时,在所有动物中排他性地检测到高含量IFNγ-SC(>50个斑点)。M448R特异性IFNγ-SC的数目与在转染具有15个重组质粒的混合物时获得的IFNγ-SC的数目相当。此结果表明针对M448R的T细胞免疫性很大程度上负责在经15个重组质粒免疫接种之后观测到的免疫原性。此外,经初免的M448R特异性T细胞可能有助于“15个克隆”群组中的Georgia2007/1感染的较轻度病程及存活增加。
当在加强之后使用ASFV作为刺激物时的斑点的数目比当使用经pCMV-Ub-M448R质粒转染的猪纤维母细胞时高得多,此种情况最可能由不同原因解释。首先,ASFV感染APC比质粒转染APC好得多,因此更有效地加以加工。其次,相比于质粒混合物中所含的抗原,来自ASFV恢复期猪的PBMC亦更可能辨识ASFV中所存在的其他抗原。
在无先前DNA初免的ASFV感染期间M448R诱导特异性T细胞反应:在下一步骤中,试图确定M448R是否不仅在猪经pCMV-Ub-M448R初免时且亦在ASFV感染之后诱导ASFV特异性CD8+T细胞。对于此,在利用经pCMV-Ub-M448R质粒转染的自体猪纤维母细胞的ELISpot分析中测试来自经BA71ΔCD2免疫接种的动物且经致死性剂量的Georgia2007/1攻击的PBMC(先前未经pCMV-Ub-M448R质粒初免)。惊人地,在9只动物中的7只中诱导当于pCMV-Ub质粒中表达时针对M448R的IFNγ反应,因此确认M448R的杂乱性质及其内的免疫显性T细胞表位的存在。
用pCMV-Ub-M448R及pCMV-Ub-MGF505-7R进行的免疫接种赋予抗Georgia2007/1致死性攻击的部分保护:在M448R的免疫显性特点及其保护潜能的情况下,决定在未来实验疫苗调配物中将其连同为由ASF恢复期猪杂乱地辨识的第二抗原的MGF505-7R一起包括在内(实施例1)。因此,通过用编码在N端处具有泛蛋白序列的M448R及MGF505-7R蛋白的两个DNA质粒对一组猪进行初免且用低剂量的BA71ΔCD2进行加强来评估此两个抗原的免疫原性及保护潜能。
与使用低剂量的BA71ΔCD2之前述结果一致地,对照组中的五只动物中仅一只(20%)在Georgia2007/1攻击感染中存活。相比之下,在经pCMV-Ub-M448R+pCMV-Ub-MGF505-7R免疫接种的群组中,五只猪中有三只在致死性攻击感染中存活(图4)。
来自经DNA初免的群组的存活动物显示比对照猪低且短的发热峰。因此,89号猪在Georgia2007/1攻击之后的任何时间不显示发热且不显示其他临床症状,且90号猪在20-21dpc时显示短暂发热峰。此组中的第三只存活者(猪88)显示轻度神气呆滞且身体状况略微地受影响(临床评分从不超过2),但在攻击后第14天完全恢复。来自经DNA初免的群组的86及87号猪在感染中屈服,显示与对照猪(仅经BA71ΔCD2疫苗接种)中发现的ASF临床症状不可区分的ASF临床症状。此等ASF临床症状包括诸如以下的严重ASF症状:嗜睡、抑郁、可见脊椎和/或肋骨、呼吸困难及发绀(在临床症状量表中评分为至少4)。
对照组中的ASF临床症状更加显而易见,其中有两个为例外。97号猪在死亡之前罹患轻度ASF症状及高热(>41℃)至少2个连续日之后发现出乎意料地晚死亡(在19dpc时),且99号猪尽管在Georgia2007/1攻击中存活,但罹患在9dpc时开始且持续直至试验结束为止的长时间嗜睡,且亦罹患耳及尾发绀。
尽管经M448R+MGF505-7R初免的群组中的存活百分比与当经15个克隆初免(60%)时相同,但动物似乎对Georgia2007/1感染应对地更好,至少根据所观测到的临床症状如此。
用pCMV-Ub-M448R及pCMV-Ub-MGF505-7R进行的初免有助于在Georgia2007/1攻击感染之后减小血清中的病毒效价且减少鼻排毒:在指定取样日收集血清及鼻拭子且随后通过qPCR测试ASFV DNA的存在。在BA71ΔCD2疫苗接种之后,在来自经DNA初免的动物的血清或鼻拭子中未发现病毒DNA。相反地且证明LAV复制,在BA71ΔCD2施用之后在一只对照动物中检测到血清中的病毒DNA峰。
在Georgia2007/1接种之后,与必须处死的猪(所有猪在感染之后某一时间点均达到至少107个GEC/ml)对比,始终存活的动物的血清中的病毒DNA含量保持低于106个GEC/ml。聚焦于存活动物,除在动物90中在21dpc时发现病毒峰外,在来自动物89及90的血清中未检测到ASFV DNA,且在鼻拭子中发现低含量ASFV DNA。此等结果与在此等动物中不存在所报导的临床症状一致。来自7dpc时的动物88的血清及鼻拭子两者中的ASFV DNA检测与在此存活动物中观测到的轻度ASF症状一致。尽管报导长时间嗜睡及发绀,但对照组中的存活动物(猪99)能够控制病毒复制,显示低血清中病毒DNA含量及减少的鼻排毒。在来自经DNA初免的群组的必须处死的动物中观测到的严重ASF临床症状与血清及鼻拭子两者中的高病毒效价一致,且在经免疫接种组与对照组中的屈服动物之间未发现差异。
用pCMV-Ub-M448R及pCMV-Ub-MGF505-7R进行的DNA免疫接种诱导能够活体外辨识M488R及MGF505-7R抗原两者的ASFV特异性T细胞反应:如所预期,pCMV-Ub-M448R及pCMV-Ub-MGF505-7R质粒的施用并不诱导任何可检测ASFV特异性抗体反应。未在Georgia2007/1接种之前的存活及屈服动物当中观测到关于抗体反应的差异,所有动物均在攻击当天显示含量升高(亦显示弱T细胞反应的100号猪除外)。
亦如所预期,在经DNA初免的动物中而非在对照组中进行第二次DNA免疫接种之后7天检测到针对经pCMV-Ub-M448R及pCMV-Ub-MGF505-7R转染的猪纤维母细胞的IFNγ反应。尽管检测到低含量IFNγ-SC(有可能是由于大型动物中的DNA疫苗的低免疫原性),但此确认当于基于DNA的调配物中施用时所测试抗原的免疫原性。值得注意地,在此早时间点,不显示M448R及MGF505-7R特异性T细胞反应的两只动物(猪86及87)为之后屈服Georgia2007/1攻击的动物。
与显示ASFV感染期间M448R及MGF505-7R两者的杂乱且免疫显性性质之前述结果一致地,在BA71ΔCD2疫苗接种之后,除一只对照(猪100)的外的所有动物均能够辨识其经包含pCMV-Ub-M448R及pCMV-Ub-MGF505-7R的重组质粒混合液转染的自体猪纤维母细胞。在整个实验中,无反应对照显示低细胞及体液反应,此可能反映免疫抑制状态。
为表征通过此处所测试的抗原中的每一者诱导的反应,用经pCMV-Ub-M448R或pCMV-Ub-MGF505-7R转染的猪纤维母细胞执行ELISpot分析。在所有动物(不辨识MGF505-7R的猪86除外)中检测到针对M448R及MGF505-7R的同时IFNγ反应,因此废除当于基于DNA的调配物中施用时M448R与MGF505-7R之间的可能性免疫显性作用。在群组位准下,三只存活动物(猪88、89及90)的针对M448R及MGF505-7R两者的IFNγ反应高于在所有所分析时间点死亡的两只动物(猪86及87)。再次确认M448R及MGF505-7R特异性T细胞在不具有先前DNA初免型免疫接种的Georgia2007/1恢复期动物中的存在,存活对照动物(猪99)在试验结束时显示明显的针对两个抗原的IFNγ反应。
为确定DNA初免型免疫接种是否对ASFV特异性T细胞反应的程度具有作用,在加强之后早期及晚期(分别在7天及21dpb时)评估在经BA71ΔCD2疫苗接种之后对BA71ΔCD2有反应的IFNγ分泌细胞的数目。在21dpb时,所有猪均显示不可区分的ASFV特异性T细胞反应,低反应者猪100除外。亦在7dpb时在所有动物中检测到IFNγ反应,但在经DNA初免的动物与对照组之间未发现显著差异。值得提及对照组内的最优选IFNγ反应者猪99为唯一存活者。
结论:在本发明研究中,通过施用编码具有泛蛋白的框内全长ASFV蛋白的15个质粒混合液来确认在猪中诱导ASFV特异性细胞反应的可行性。此处证实包括用15个重组质粒进行的DNA初免、接着为低剂量的LAV BA71ΔCD2的异源免疫接种方案赋予抗Georgia2007/1攻击的部分保护。蛋白M448R主要负责质粒混合液的免疫原性,因此表明其保护潜能。此外,不接受先前DNA初免的ASF恢复期动物杂乱地辨识M448R。
遵循相同实验设计,亦显示具有免疫显性且杂乱性质的用M448R以及MGF505-7R进行的DNA初免(实施例1)亦产生60%存活百分比。
实施例4-设计基于多重表位的DNA构建体且评估其免疫原性及抗ASFV保护潜能
在首次试图增强基于Georgia2007/1序列的DNA构建体的免疫原性中,针对包含多个理论CTL表位的区域的存在,对其中CD8+T细胞决定子的存在为先前所描述的EP402R、CP312R及A240L的ASFV蛋白加以分析。此等蛋白区或“SLAI-热斑点”经选择包括于疫苗调配物中,此举旨在诱导宽SLA I限定免疫反应组库。添加间隔不同蛋白域的最优选蛋白酶体裂解位点,且使用泛蛋白基因作为前导序列。在此设计的情况下,旨在增强SLA I加工及如先前所报导的表位呈现,因此诱导特异性CD8+T细胞反应,当时消除体液反应。活体内确认此编码多重表位的质粒(在本文中称为多重表位-I(ME-I;SEQ ID NO:855))的免疫原性。确认策略功效,经ME-I免疫接种的猪诱导特异性地辨识来自EP402R、CP312R及A240L的肽的ASFV特异性T细胞反应。
延伸此结果以识别新颖Georgia2007/1抗原,根据实施例2,选择具有诱导CD8+T细胞反应的潜能的蛋白质。因此,基于活体外感染ASFV的巨噬细胞的免疫多肽组概况分析、接着为该等巨噬细胞中的每一者的计算机仿真CTL表位预测进行选择。包含高密度所预测表位及在免疫多肽组学分析中识别的至少一种SLA I限定肽的蛋白区选为“SLA I热斑点”以设计第二多重表位DNA构建体(ME-II;SEQ ID NO:856)。
试图增加实验疫苗原型的成功机会,使用实施例1中所描述的异源初免-加强型免疫接种方案。因此,使动物经编码多重表位构建体的DNA质粒初免,接着经低剂量的减毒活BA71ΔCD2病毒肌内接种。此模型不仅可用于确认所选抗原诱导ASFV特异性CD8+T细胞的能力,且亦可用于评估其抗Georgia2007/1致死性攻击的保护潜能。
结果
选择具有触发免疫显性CD8+T细胞反应的潜能的ASFV蛋白且设计多重表位DNA构建体:使用SLAI限定免疫多肽组学分析的结果以选择具有诱导CD8+T细胞反应的潜能的ASFV蛋白。根据三项主要准则选择最优选蛋白质候选物:(i)在SLA I限定免疫多肽组学分析中自其识别5个或更多个肽的蛋白质,(ii)使用来自不同动物的PAM自其识别肽的蛋白质,及(iii)已通过获自接种有减毒活病毒(LAV)BA71ΔCD2或包括彼特异性肽(亦即抗原肽)的肽混合液的猪的特异性T细胞自其辨识肽的蛋白质。
牢记此数据,最后选择13种蛋白质以进行进一步分析。引起关注地,此等蛋白质中的4种蛋白质对应于以下参与核酸代谢的ASFV酶:G1211R(DNA聚合酶β)、D1133L(解螺旋酶)、P1192R(DNA拓朴异构酶II)及EP424R(推定甲基转移酶);而另外两种蛋白质对应于由CP2475L ORF编码作为pp220聚合蛋白前驱体的p150及p37结构蛋白。另外,选择所得两个多基因家族505成员:可能涉及IFN I抑制且在非病原性OURT88/3及BA71V ASFV中不存在的MGF505-1R;及MGF505-9R。最后,选择先前使用来自恢复期猪的血清识别为免疫显性抗原的K145R ORF以及四种额外具有未知功能的ORF:B475L、M1249L、H339R及I226R。
为编码于唯一ORF中的13种所选蛋白质,对每一所选蛋白质加以计算机仿真分析以使用如实施例1中所描述的NetMHCpan 3.0软件识别具有高密度表位的区域。最后,单DNA构建体设计成具有通过最优选蛋白酶体裂解位点(AAY)连接(Velders等人,2001)且利用泛蛋白作为前导序列旨在增强其SLA I加工及呈现的所选蛋白区。包括泛蛋白基因的最终质粒编码长度为1,884个氨基酸的蛋白质,该最终质粒在下文称为多重表位-II(ME-II;SEQID NO:856)。
用基于ASFV多重表位的质粒进行的DNA免疫接种部分抵抗Georgia2007/1致死性攻击:为测试所选ASFV候选物的保护功效,评估先前所描述的初免-加强型异源疫苗接种方案。将ME-I及ME-II两者施用至猪。如图5中所表示,经多重表位初免的五只猪中有三只(60%)在Georgia2007/01攻击中存活,而五只对照中仅有一只(20%)与所用低剂量的BA71ΔCD2的预期结果一致。
在经多重表位免疫接种的群组中,三只存活动物中有两只(猪175及176)甚至连续两日不发热,且此等动物的血清及鼻拭子的ASFV阳性样本显示低病毒效价,此确认用质粒进行的DNA初免成功。此外,在整个实验中,猪175保持无ASF可相容临床症状。动物176显示在14dpc时开始直至试验结束为止、但不与发热相关,亦不与ASFV阳性血清样本或鼻排毒相关的轻微神气呆滞及显而易见的呼吸困难。第三只存活者(猪178)显示在5dpc时开始、与长时间血清及鼻拭子两者中的ASFV检测相关的持续但轻微的ASF症状及暂时发热事件。然而,在实验结束时,此动物几乎恢复,不显示发热且仅显示轻微呼吸困难及血清及鼻拭子中不可检测含量的ASFV。来自经ME-I+ME-II初免的群组的必须处死的猪(177及179)的直肠温度及病毒效价并非与在大部分对照组动物中发现的直肠温度及病毒效价不同。
对照组中的感染病程与使用低剂量的BA71ΔCD2之前述结果一致(Monteagudo等人,2017)。在此组中,ASF可相容临床症状自Georgia2007/1攻击之后第3天明显,此与长时间发热发作一致(所有动物均发热至少五个连续日)且与血清及鼻拭子中的病毒效价符合。与亦显示ASF症状出现延迟的经ME-I+ME-II初免的群组中的存活者相比,存活对照动物(猪185)具有长时间发热。
编码来自ASFV的多个表位的基于多重表位的DNA构建体活体内诱导ASFV特异性T细胞:如所预期,多重表位接种不诱导任何ASFV特异性抗体反应,但其诱导可检测ASFV特异性IFNγ反应,此确认用所选抗原进行的DNA初免成功。在BA71ΔCD2加强之后,所有猪均经血清转化且ASFV特异性T细胞的数目显著地增多。如前所描述,攻击时间点的抗体或特异性T细胞的含量与所获保护之间似乎不存在相关性,至少当通过此处所采用的技术进行量测时如此。
确认多重表位DNA构建体的抗原性,当将其转染至纤维母细胞中且此等经转染纤维母细胞用作用于在21dpb时获得的自体PBMC的APC时,通过ELISpot来检测IFNγ反应。
识别ASFV抗原:经DNA初免的动物对未经初免的动物:以测定且分级在基于多重表位的DNA构建体中经编码的单独ASFV抗原的免疫原性为目标,将编码ME-I及ME-II两者中所包括的全长蛋白中的各者的pCMV-Ub质粒转染至纤维母细胞中,且此等经转染纤维母细胞在ELISpot分析中用作APC。如实施例1中所描述,通过免疫荧光法确认此处所采用的全长ASFV抗原的表达。为确定DNA初免可对T细胞反应的诱导及调节所具有的作用,在ELISpot分析中使用来自经多重表位初免且先前不经DNA初免的接种有BA71ΔCD2的动物的PBMC作为效应细胞。当几乎所有克隆均刺激特异性IFN-γ反应时,在两种情况下蛋白CP312R及D1133L均显示最杂乱性质。惊人地,当5只先前未经初免的经ASFV感染的动物中有3只对CP312R及D1133L有反应时,在所有经DNA初免的动物中观测到IFN-γ产生,此表明DNA初免对针对此两种抗原的特异性T细胞反应的诱导的作用。亦在经DNA初免的动物中见到对A240L有反应的动物的数目增多。此等结果证实使用所设计多重表位以表征两个先前未描述的具有诱导保护性T细胞反应的潜能的免疫显性ASFV抗原CP312R及D1133L的DNA初免成功。
结论:本发明研究已证明多重表位DNA构建体在包括于使用LAV BA71ΔCD2作为加强的异源初免-加强型免疫接种方案中时活体内诱导ASFV特异性T细胞反应且增加Georgia2007/1致死性攻击之后的存活的可行性。因此,在DNA质粒中经编码的表位的保护潜能已得到确认,确证基于经ASFV感染的巨噬细胞的免疫多肽组学研究的抗原选择。在ELISpot分析中使用同种异体纤维母细胞作为APC允许缩小潜在候选物范围且允许识别作为高度杂乱抗原的CP312R及D1133L。
本文所揭示且主张的所有组合物及方法可在不依据本发明进行不当实验的情况下制作及执行。尽管本发明的组合物及方法已就特定方面而言加以描述,但熟习此项技术者将显而易见的为可在不脱离本发明的概念、精神及范畴的情况下对本文所描述的组合物及方法以及步骤或方法步骤序列施加变化。更特定地,显而易见化学上及生理学上均相关的某些药剂可取代本文所描述的药剂,同时达成相同或类似结果。对熟习此项技术者显而易见的所有该等类似取代及修改均视为在如由以下申请专利范围所定义的本发明的精神、范畴及概念内。
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Uniprot数据库登陆编号A0A2X0RVA9
WO 2015/091322
WO 2017/096341
本发明的范畴及精神亦含有以下技术方案:
1.一种免疫原性组合物,其含有
(a)一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段;和/或
(b)编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段;和/或
(c)病毒或细菌载体,优选是重组和/或非天然存在的病毒或细菌载体,其含有编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段;及
(d)可选存在地,一或多种医药学上或兽医学上可接受的载剂或赋形剂,该一或多种载剂或赋形剂优选是适用于经口、皮内、肌内或鼻内施用。
2.一种疫苗或医药组合物,其含有
(a)一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段;和/或
(b)编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段;和/或
(c)病毒或细菌载体,优选是重组和/或非天然存在的病毒或细菌载体,其含有编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段;及
(d)一或多种医药学上或兽医学上可接受的载剂或赋形剂,该一或多种载剂或赋形剂优选是适用于经口、皮内、肌内或鼻内施用;
(e)可选存在地,该疫苗或医药组合物进一步含有佐剂。
3.如技术方案1的免疫原性组合物或如技术方案2的疫苗或医药组合物,其中该非洲猪瘟病毒选自由以下组成的组:BA71、BA71ΔCD2和/或Georgia2007/1病毒株。
4.如技术方案1至3中任一项的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、19、21、23、25、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、1、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150、151、152、153、154、155、156、157、158、159、160、161、162、163、164、165、166、167、168、169、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、180、181、182、183、184、185、186、187、188、189、190、191、192、193、194、195、196、197、198、199、200、201、202、203、204、205、206、207、208、209、210、211、212、213、214、215、216、217、218、219、220、221、222、223、224、225、226、227、228、229、230、231、232、233、234、235、236、237、238、239、240、241、242、243、244、245、246、247、248、249、250、251、252、253、254、255、256、257、258、259、260、261、262、263、264、265、266、267、268、269、272、274、275、276、277、278、279、280、281、282、283、284、285、287、289、290、291、292、293、294、295、297、299、300、301、302、303、304、305、306、307、308、309、310、311、312、313、314、315、316、317、318、319、320、321、322、323、324、325、326、327、328、329、330、331、332、333、334、335、336、337、338、339、340、341、342、343、344、345、346、347、348、349、350、351、352、353、354、355、356、357、358、359、360、361、362、363、364、365、366、367、368、369、370、371、372、373、374、375、376、377、378、379、380、381、382、383、384、385、386、387、388、389、390、391、392、393、394、395、396、397、398、399、400、401、402、403、404、405、406、407、408、409、410、411、412、413、414、415、416、417、418、420、422、423、424、425、426、427、428、429、430、432、434、435、436、437、438、439、440、441、442、443、444、445、446、447、448、449、450、451、452、453、454、455、456、458、460、461、462、463、464、465、466、468、470、471、472、473、474、475、476、477、478、479、481、483、484、485、486、487、489、491、492、493、494、495、496、497、498、499、500、501、502、503、504、505、506、507、508、509、510、511、512、513、514、515、516、518、520、521、522、523、524、526、528、529、530、531、532、533、534、535、536、537、538、539、540、541、542、543、544、545、546、547、548、549、550、551、552、553、554、555、556、557、558、559、560、561、562、563、564、565、566、568、570、572、574、575、576、577、578、579、580、581、582、583、584、585、586、587、588、589、590、591、592、593、594、595、596、597、598、599、600、601、602、603、604、605、606、607、608、609、610、611、612、613、614、615、616、617、618、619、620、621、622、623、624、625、626、627、628、629、630、631、632、633、634、635、636、637、638、639、640、641、642、643、644、645、646、647、648、649、650、651、652、653、654、655、656、657、658、659、660、661、662、663、664、665、666、667、668、669、670、671、672、673、674、675、676、677、678、679、680、681、682、683、684、685、686、687、688、689、690、691、692、693、694、695、696、697、698、699、700、701、702、703、704、705、706、707、708、709、710、711、712、713、714、715、716、717、719、721、722、724、726、727、728、729、730、731、732、733、734、735、736、737、738、739、740、741、742、743、744、745、746、747、748、749、750、751、752、753、754、755、756、757、758、759、760、761、762、763、764、765、766、767、768、769、770、771、772、774、776、777、778、779、780、781、782、783、784、785、786、787、788、789、790、791、792、793、794、795、796、797、798、799、800、801、802、803、804、805、806、807、808、809、810、811、812、813、814、815、816、817、818、819、820、821、822、823、824、825、826、827、828、829、830、831、832、833、834、835、836、837、838、839、840、841、842、843、844、845、846、847、848、849、850、851、852、853、854。
5.如技术方案1至3中任一项的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:SEQ IDNO:18、20、22、24、26、27、270、271、273、286、288、296、298、419、421、431、433、457、459、467、469、480、482、488、490、517、519、525、527、567、569、571、573、718、720、723、725、773、775。
6.如技术方案1至5中任一项的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体选自由以下组成的组:非洲猪瘟病毒载体、鸟类痘病毒载体、犬麻疹病毒载体、疱疹病毒载体、水痘病毒载体、劳森氏菌属、沙门氏菌属。
7.如技术方案6的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中该病毒或细菌载体含有编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:SEQ IDNO:18、20、22、24、26、27、270、271、273、286、288、296、298、419、421、431、433、457、459、467、469、480、482、488、490、517、519、525、527、567、569、571、573、718、720、723、725、773、775。
8.如技术方案1至7中任一项的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中该等非洲猪瘟病毒多肽,优选是全长蛋白含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:853、SEQ ID NO:854、SEQ ID NO:65、SEQ ID NO:66、SEQ ID NO:256、SEQ ID NO:257、SEQ IDNO:272、SEQ ID NO:274、SEQ ID NO:295、SEQ ID NO:297、SEQ ID NO:378、SEQ ID NO:388、SEQ ID NO:389、SEQ ID NO:430、SEQ ID NO:432、SEQ ID NO:466、SEQ ID NO:468、SEQ IDNO:487、SEQ ID NO:489、SEQ ID NO:524、SEQ ID NO:526、SEQ ID NO:566、SEQ ID NO:568、SEQ ID NO:561、SEQ ID NO:562、SEQ ID NO:572、SEQ ID NO:691、SEQ ID NO:692、SEQ IDNO:722、SEQ ID NO:724、SEQ ID NO:772、SEQ ID NO:774、SEQ ID NO:732、SEQ ID NO:733、SEQ ID NO:816、SEQ ID NO:817;且/或
其中该等非洲猪瘟病毒肽和/或其免疫原性片段和/或非洲猪瘟病毒多肽/全长蛋白免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:19、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:48、SEQ IDNO:49、SEQ ID NO:50、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:53、SEQ ID NO:54、SEQ IDNO:55、SEQ ID NO:56、SEQ ID NO:57、SEQ ID NO:58、SEQ ID NO:59、SEQ ID NO:60、SEQ IDNO:61、SEQ ID NO:62、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:64、SEQ ID NO:235、SEQ ID NO:236、SEQID NO:237、SEQ ID NO:238、SEQ ID NO:239、SEQ ID NO:240、SEQ ID NO:241、SEQ ID NO:242、SEQ ID NO:243、SEQ ID NO:244、SEQ ID NO:245、SEQ ID NO:246、SEQ ID NO:247、SEQID NO:248、SEQ ID NO:249、SEQ ID NO:250、SEQ ID NO:251、SEQ ID NO:252、SEQ ID NO:253、SEQ ID NO:254、SEQ ID NO:255、SEQ ID NO:261、SEQ ID NO:262、SEQ ID NO:263、SEQID NO:264、SEQ ID NO:265、SEQ ID NO:266、SEQ ID NO:258、SEQ ID NO:259、SEQ ID NO:260、SEQ ID NO:267、SEQ ID NO:268、SEQ ID NO:269、SEQ ID NO:281、SEQ ID NO:282、SEQID NO:283、SEQ ID NO:284、SEQ ID NO:285、SEQ ID NO:287、SEQ ID NO:289、SEQ ID NO:290、SEQ ID NO:291、SEQ ID NO:292、SEQ ID NO:293、SEQ ID NO:294、SEQ ID NO:372、SEQID NO:373、SEQ ID NO:374、SEQ ID NO:375、SEQ ID NO:376、SEQ ID NO:377、SEQ ID NO:379、SEQ ID NO:380、SEQ ID NO:381、SEQ ID NO:382、SEQ ID NO:383、SEQ ID NO:384、SEQID NO:385、SEQ ID NO:386、SEQ ID NO:387、SEQ ID NO:416、SEQ ID NO:417、SEQ ID NO:418、SEQ ID NO:420、SEQ ID NO:422、SEQ ID NO:423、SEQ ID NO:424、SEQ ID NO:425、SEQID NO:426、SEQ ID NO:427、SEQ ID NO:428、SEQ ID NO:429、SEQ ID NO:454、SEQ ID NO:455、SEQ ID NO:456、SEQ ID NO:458、SEQ ID NO:460、SEQ ID NO:461、SEQ ID NO:462、SEQID NO:463、SEQ ID NO:464、SEQ ID NO:465、SEQ ID NO:478、SEQ ID NO:479、SEQ ID NO:481、SEQ ID NO:483、SEQ ID NO:484、SEQ ID NO:485、SEQ ID NO:486、SEQ ID NO:514、SEQID NO:515、SEQ ID NO:516、SEQ ID NO:518、SEQ ID NO:520、SEQ ID NO:521、SEQ ID NO:522、SEQ ID NO:523、SEQ ID NO:563、SEQ ID NO:564、SEQ ID NO:565、SEQ ID NO:539、SEQID NO:540、SEQ ID NO:541、SEQ ID NO:542、SEQ ID NO:543、SEQ ID NO:544、SEQ ID NO:545、SEQ ID NO:546、SEQ ID NO:547、SEQ ID NO:548、SEQ ID NO:549、SEQ ID NO:550、SEQID NO:551、SEQ ID NO:552、SEQ ID NO:553、SEQ ID NO:554、SEQ ID NO:555、SEQ ID NO:556、SEQ ID NO:557、SEQ ID NO:558、SEQ ID NO:559、SEQ ID NO:560、SEQ ID NO:570、SEQID NO:684、SEQ ID NO:685、SEQ ID NO:686、SEQ ID NO:687、SEQ ID NO:688、SEQ ID NO:689、SEQ ID NO:690、SEQ ID NO:717、SEQ ID NO:719、SEQ ID NO:721、SEQ ID NO:726、SEQID NO:727、SEQ ID NO:728、SEQ ID NO:729、SEQ ID NO:730、SEQ ID NO:731、SEQ ID NO:801、SEQ ID NO:802、SEQ ID NO:803、SEQ ID NO:804、SEQ ID NO:805、SEQ ID NO:806、SEQID NO:807、SEQ ID NO:808、SEQ ID NO:809、SEQ ID NO:810、SEQ ID NO:811、SEQ ID NO:812、SEQ ID NO:813、SEQ ID NO:814、SEQ ID NO:815。
9.如技术方案1至8中任一项的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中该ASFV多肽为ASFV全长蛋白,该ASFV全长蛋白优选是由含有以下,更优选是由以下组成的多核苷酸序列编码:任何可能的开放读码框(ORF);甚至更优选是由含有以下、最优选是由以下组成的多核苷酸序列编码:具有5'端起始密码子及3'端终止密码子的开放读码框(ORF)。
10.如技术方案1至9中任一项的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中该免疫原性组合物或该疫苗或医药组合物或任何所含有的免疫原性片段的免疫原性(和/或免疫反应)由经诱导的IFN-γ反应指示/表征,优选是在猪科动物IFN-γELISpot分析中由经诱导的IFN-γ反应指示/表征。
11.如技术方案1至10中任一项的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其用于减少或预防猪科动物,优选是猪的由至少一种病原性非洲猪瘟病毒感染造成的临床症状或疾病的方法中、或用于治疗和/或预防至少一种病原性非洲猪瘟病毒感染的方法中,其中该等由至少一种病原性非洲猪瘟病毒感染造成的临床症状或疾病或该至少一种病原性非洲猪瘟病毒感染优选是选自由以下组成的组:非洲猪瘟、病死、死亡、猝死、发热、高热、厌食、嗜睡、虚弱、食欲缺乏、伏卧、红斑、发绀性皮肤斑痣病、痢疾、便秘、腹痛、呼吸道症状、咳嗽、呕吐、呼吸困难、鼻涕及结合膜分泌物、出血、流鼻血、流产、白血球减少症、血小板减少症。
12.如技术方案1至10中任一项的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其用于使猪科动物,优选是猪,以对由该猪科动物,优选是猪中的至少一种病原性非洲猪瘟病毒造成的临床疾病免疫的方法中,该方法含有以下步骤:向该猪科动物,优选是猪施用如技术方案1至10中任一项的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中该免疫原性组合物或疫苗或医药组合物不会造成临床感染症状,但能诱导使该猪科动物,优选是猪对该至少一种非洲猪瘟病毒的病原性形式免疫的免疫反应,其中该临床疾病或该等临床感染症状优选是选自由以下组成的组:非洲猪瘟、病死、死亡、猝死、发热、高热、厌食、嗜睡、虚弱、食欲缺乏、伏卧、红斑、发绀性皮肤斑痣病、痢疾、便秘、腹痛、呼吸道症状、咳嗽、呕吐、呼吸困难、鼻涕及结合膜分泌物、出血、流鼻血、流产、白血球减少症、血小板减少症。
13.如技术方案1至10中任一项的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其用于对猪科动物,优选是猪进行初免-加强型免疫,以针对由所述猪科动物,优选是猪中的至少一种非洲猪瘟病毒,优选至少一种病原性非洲猪瘟病毒造成的临床疾病的方法中,该方法含有以下步骤:向该猪科动物,优选是猪施用一次或两次含有以下的如技术方案1至10中任一项的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物:(i)作为唯一免疫原组分的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段;或(ii)病毒载体,优选是重组和/或非天然存在的病毒载体,其含有作为唯一免疫原组分的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段(初免步骤);且随后-在初免一次或两次之后-向该猪科动物,优选是猪施用减毒活非洲猪瘟病毒,优选是BA71ΔCD2(加强步骤);其中该免疫原性组合物或疫苗或医药组合物以及该减毒活非洲猪瘟病毒彼此独立地不会造成临床感染症状,但能诱导使该猪科动物,优选是猪对该至少一种非洲猪瘟病毒的病原性形式免疫的免疫反应,其中该临床疾病或该等临床感染症状优选是选自由以下组成的组:非洲猪瘟、病死、死亡、猝死、发热、高热、厌食、嗜睡、虚弱、食欲缺乏、伏卧、红斑、发绀性皮肤斑痣病、痢疾、便秘、腹痛、呼吸道症状、咳嗽、呕吐、呼吸困难、鼻涕及结合膜分泌物、出血、流鼻血、流产、白血球减少症、血小板减少症。
14.一种试剂盒,其用于猪科动物,优选是猪进行疫苗接种,以针对猪科动物,优选是猪中与至少一种病原性非洲猪瘟病毒相关联的疾病和/或降低与至少一种病原性非洲猪瘟病毒相关联或由至少一种病原性非洲猪瘟病毒造成的一或多种临床症状的发生率或严重程度,该试剂盒含有:
(a)能够将疫苗施用至该猪科动物的分配器;及
(b)如技术方案1至10中任一项的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物;以及
(c)可选存在地,的说明书小册;
其中该疾病或该等临床症状优选是选自由以下组成的组:非洲猪瘟、病死、死亡、猝死、发热、高热、厌食、嗜睡、虚弱、食欲缺乏、伏卧、红斑、发绀性皮肤斑痣病、痢疾、便秘、腹痛、呼吸道症状、咳嗽、呕吐、呼吸困难、鼻涕及结合膜分泌物、出血、流鼻血、流产、白血球减少症、血小板减少症。
15.一种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、19、21、23、25、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、1、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150、151、152、153、154、155、156、157、158、159、160、161、162、163、164、165、166、167、168、169、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、180、181、182、183、184、185、186、187、188、189、190、191、192、193、194、195、196、197、198、199、200、201、202、203、204、205、206、207、208、209、210、211、212、213、214、215、216、217、218、219、220、221、222、223、224、225、226、227、228、229、230、231、232、233、234、235、236、237、238、239、240、241、242、243、244、245、246、247、248、249、250、251、252、253、254、255、256、257、258、259、260、261、262、263、264、265、266、267、268、269、272、274、275、276、277、278、279、280、281、282、283、284、285、287、289、290、291、292、293、294、295、297、299、300、301、302、303、304、305、306、307、308、309、310、311、312、313、314、315、316、317、318、319、320、321、322、323、324、325、326、327、328、329、330、331、332、333、334、335、336、337、338、339、340、341、342、343、344、345、346、347、348、349、350、351、352、353、354、355、356、357、358、359、360、361、362、363、364、365、366、367、368、369、370、371、372、373、374、375、376、377、378、379、380、381、382、383、384、385、386、387、388、389、390、391、392、393、394、395、396、397、398、399、400、401、402、403、404、405、406、407、408、409、410、411、412、413、414、415、416、417、418、420、422、423、424、425、426、427、428、429、430、432、434、435、436、437、438、439、440、441、442、443、444、445、446、447、448、449、450、451、452、453、454、455、456、458、460、461、462、463、464、465、466、468、470、471、472、473、474、475、476、477、478、479、481、483、484、485、486、487、489、491、492、493、494、495、496、497、498、499、500、501、502、503、504、505、506、507、508、509、510、511、512、513、514、515、516、518、520、521、522、523、524、526、528、529、530、531、532、533、534、535、536、537、538、539、540、541、542、543、544、545、546、547、548、549、550、551、552、553、554、555、556、557、558、559、560、561、562、563、564、565、566、568、570、572、574、575、576、577、578、579、580、581、582、583、584、585、586、587、588、589、590、591、592、593、594、595、596、597、598、599、600、601、602、603、604、605、606、607、608、609、610、611、612、613、614、615、616、617、618、619、620、621、622、623、624、625、626、627、628、629、630、631、632、633、634、635、636、637、638、639、640、641、642、643、644、645、646、647、648、649、650、651、652、653、654、655、656、657、658、659、660、661、662、663、664、665、666、667、668、669、670、671、672、673、674、675、676、677、678、679、680、681、682、683、684、685、686、687、688、689、690、691、692、693、694、695、696、697、698、699、700、701、702、703、704、705、706、707、708、709、710、711、712、713、714、715、716、717、719、721、722、724、726、727、728、729、730、731、732、733、734、735、736、737、738、739、740、741、742、743、744、745、746、747、748、749、750、751、752、753、754、755、756、757、758、759、760、761、762、763、764、765、766、767、768、769、770、771、772、774、776、777、778、779、780、781、782、783、784、785、786、787、788、789、790、791、792、793、794、795、796、797、798、799、800、801、802、803、804、805、806、807、808、809、810、811、812、813、814、815、816、817、818、819、820、821、822、823、824、825、826、827、828、829、830、831、832、833、834、835、836、837、838、839、840、841、842、843、844、845、846、847、848、849、850、851、852、853、854。
16.如技术方案15的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其中该等非洲猪瘟病毒多肽,优选是全长蛋白含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:SEQ ID NO:21、SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:853、SEQ ID NO:854、SEQ ID NO:65、SEQ ID NO:66、SEQ ID NO:256、SEQ IDNO:257、SEQ ID NO:272、SEQ ID NO:274、SEQ ID NO:295、SEQ ID NO:297、SEQ ID NO:378、SEQ ID NO:388、SEQ ID NO:389、SEQ ID NO:430、SEQ ID NO:432、SEQ ID NO:466、SEQ IDNO:468、SEQ ID NO:487、SEQ ID NO:489、SEQ ID NO:524、SEQ ID NO:526、SEQ ID NO:566、SEQ ID NO:568、SEQ ID NO:561、SEQ ID NO:562、SEQ ID NO:572、SEQ ID NO:691、SEQ IDNO:692、SEQ ID NO:722、SEQ ID NO:724、SEQ ID NO:772、SEQ ID NO:774、SEQ ID NO:732、SEQ ID NO:733、SEQ ID NO:816、SEQ ID NO:817;且/或
其中该等非洲猪瘟病毒肽和/或其免疫原性片段和/或非洲猪瘟病毒多肽/全长蛋白免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:SEQ ID NO:17、SEQ ID NO:19、SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:48、SEQ IDNO:49、SEQ ID NO:50、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:53、SEQ ID NO:54、SEQ IDNO:55、SEQ ID NO:56、SEQ ID NO:57、SEQ ID NO:58、SEQ ID NO:59、SEQ ID NO:60、SEQ IDNO:61、SEQ ID NO:62、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:64、SEQ ID NO:235、SEQ ID NO:236、SEQID NO:237、SEQ ID NO:238、SEQ ID NO:239、SEQ ID NO:240、SEQ ID NO:241、SEQ ID NO:242、SEQ ID NO:243、SEQ ID NO:244、SEQ ID NO:245、SEQ ID NO:246、SEQ ID NO:247、SEQID NO:248、SEQ ID NO:249、SEQ ID NO:250、SEQ ID NO:251、SEQ ID NO:252、SEQ ID NO:253、SEQ ID NO:254、SEQ ID NO:255、SEQ ID NO:261、SEQ ID NO:262、SEQ ID NO:263、SEQID NO:264、SEQ ID NO:265、SEQ ID NO:266、SEQ ID NO:258、SEQ ID NO:259、SEQ ID NO:260、SEQ ID NO:267、SEQ ID NO:268、SEQ ID NO:269、SEQ ID NO:281、SEQ ID NO:282、SEQID NO:283、SEQ ID NO:284、SEQ ID NO:285、SEQ ID NO:287、SEQ ID NO:289、SEQ ID NO:290、SEQ ID NO:291、SEQ ID NO:292、SEQ ID NO:293、SEQ ID NO:294、SEQ ID NO:372、SEQID NO:373、SEQ ID NO:374、SEQ ID NO:375、SEQ ID NO:376、SEQ ID NO:377、SEQ ID NO:379、SEQ ID NO:380、SEQ ID NO:381、SEQ ID NO:382、SEQ ID NO:383、SEQ ID NO:384、SEQID NO:385、SEQ ID NO:386、SEQ ID NO:387、SEQ ID NO:416、SEQ ID NO:417、SEQ ID NO:418、SEQ ID NO:420、SEQ ID NO:422、SEQ ID NO:423、SEQ ID NO:424、SEQ ID NO:425、SEQID NO:426、SEQ ID NO:427、SEQ ID NO:428、SEQ ID NO:429、SEQ ID NO:454、SEQ ID NO:455、SEQ ID NO:456、SEQ ID NO:458、SEQ ID NO:460、SEQ ID NO:461、SEQ ID NO:462、SEQID NO:463、SEQ ID NO:464、SEQ ID NO:465、SEQ ID NO:478、SEQ ID NO:479、SEQ ID NO:481、SEQ ID NO:483、SEQ ID NO:484、SEQ ID NO:485、SEQ ID NO:486、SEQ ID NO:514、SEQID NO:515、SEQ ID NO:516、SEQ ID NO:518、SEQ ID NO:520、SEQ ID NO:521、SEQ ID NO:522、SEQ ID NO:523、SEQ ID NO:563、SEQ ID NO:564、SEQ ID NO:565、SEQ ID NO:539、SEQID NO:540、SEQ ID NO:541、SEQ ID NO:542、SEQ ID NO:543、SEQ ID NO:544、SEQ ID NO:545、SEQ ID NO:546、SEQ ID NO:547、SEQ ID NO:548、SEQ ID NO:549、SEQ ID NO:550、SEQID NO:551、SEQ ID NO:552、SEQ ID NO:553、SEQ ID NO:554、SEQ ID NO:555、SEQ ID NO:556、SEQ ID NO:557、SEQ ID NO:558、SEQ ID NO:559、SEQ ID NO:560、SEQ ID NO:570、SEQID NO:684、SEQ ID NO:685、SEQ ID NO:686、SEQ ID NO:687、SEQ ID NO:688、SEQ ID NO:689、SEQ ID NO:690、SEQ ID NO:717、SEQ ID NO:719、SEQ ID NO:721、SEQ ID NO:726、SEQID NO:727、SEQ ID NO:728、SEQ ID NO:729、SEQ ID NO:730、SEQ ID NO:731、SEQ ID NO:801、SEQ ID NO:802、SEQ ID NO:803、SEQ ID NO:804、SEQ ID NO:805、SEQ ID NO:806、SEQID NO:807、SEQ ID NO:808、SEQ ID NO:809、SEQ ID NO:810、SEQ ID NO:811、SEQ ID NO:812、SEQ ID NO:813、SEQ ID NO:814、SEQ ID NO:815。
17.一种编码如技术方案16的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段。
18.一种编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:SEQ ID NO:18、20、22、24、26、27、270、271、273、286、288、296、298、419、421、431、433、457、459、467、469、480、482、488、490、517、519、525、527、567、569、571、573、718、720、723、725、773、775。
19.如技术方案15至16中任一项的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,或如技术方案17至18中任一项的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该免疫原性组合物或该疫苗或医药组合物或任何所含有的免疫原性片段的免疫原性(和/或免疫反应)由经诱导的IFN-γ反应指示/表征,优选是在猪科动物IFN-γELISpot分析中由经诱导的IFN-γ反应指示/表征。
20.如技术方案15至16中任一项的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,或如技术方案17至18中任一项的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该ASFV多肽为ASFV全长蛋白,该ASFV全长蛋白优选是由含有以下,更优选是由以下组成的多核苷酸序列编码:任何可能的开放读码框(ORF);甚至更优选是由含有以下、最优选是由以下组成的多核苷酸序列编码:具有5'端起始密码子及3'端终止密码子的开放读码框(ORF)。
21.一种载体,优选是表达载体,其含有一种、两种、三种或更多种如技术方案17至18中任一项的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段。
22.如技术方案21的载体,其含有三种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,该三种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,优选是选自EP402R、CP312R及A240L(多重表位-I,ME-I),更优选是含有以下、最优选是由以下组成:选自由SEQ ID NO:855组成的组的核酸序列;或
含有十三种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,该十三种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段优选是选自D1133L、G1211R、M1249L、MGF505-9R、P1192R、CP2475L(p150)、B475L、EP424R、H339R、I226R、K145R、MGF505-1R及CP2475L(p37)(多重表位-II,ME-II),更优选是含有以下、最优选是由以下组成:选自由SEQ ID NO:856组成的组的核酸序列。
23.一种宿主细胞,优选是哺乳动物宿主细胞,其含有如技术方案21至22中任一项的载体。
本发明的范畴及精神亦含有以下额外技术方案:
24.一种免疫原性组合物,其含有
(a)一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段;和/或
(b)编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段;和/或
(c)病毒或细菌载体,优选是重组和/或非天然存在的病毒或细菌载体,其含有编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段;及
(d)可选存在地,一或多种医药学上或兽医学上可接受的载剂或赋形剂,该一或多种载剂或赋形剂优选是适用于经口、皮内、肌内或鼻内施用。
25.一种疫苗或医药组合物,其含有
(a)一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段;和/或
(b)编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段;和/或
(c)病毒或细菌载体,优选是重组和/或非天然存在的病毒或细菌载体,其含有编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段;及
(d)一或多种医药学上或兽医学上可接受的载剂或赋形剂,该一或多种载剂或赋形剂优选是适用于经口、皮内、肌内或鼻内施用;
(e)可选存在地,该疫苗或医药组合物进一步含有佐剂。
26.如技术方案24的免疫原性组合物或如技术方案25的疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自以下所组成组中的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)、A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570)、K145R(SEQ ID NO:526、524、523、522、521、520、518、516、515、514)、B475L(SEQ ID NO:66、65、64、63、62、61、60、59、58、57、56、55、54、53、52、51、50、49、48)、H339R(SEQ ID NO:468、466、465、464、463、462、461、460、458、456、455、454)、I226R(SEQ IDNO:489、487、486、485、484、483、481、479、478)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:266、265、264、263、262、261)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:260、259、258)、G1211R(SEQ ID NO:432、430、429、428、427、426、425、424、423、422、420、418、417、416)、M1249L(SEQ ID NO:562、561、560、559、558、557、556、555、554、553、552、551、550、549、548、547、546、545、544、543、542、541、540、539)、MGF505-9R(SEQ ID NO:733、732、731、730、729、728、727、726)、P1192R(SEQID NO:817、816、815、814、813、812、811、810、809、808、807、806、805、804、803、802、801)、MGF505-1R(SEQ ID NO:692、691、690、689、688、687、686、685、684)、MGF505-3R(SEQ ID NO:703、702、701、700、699)、EP424R(SEQ ID NO:389、388、387、386、385、384、383、382、381、380、379)、C475L(SEQ ID NO:201、200、199、198、197、196、195、194、193、192、191、190、189、188)、B602L(SEQ ID NO:75、74、73、72、71、70、69、68、67)、CP530R(SEQ ID NO:278、277、276、275)、D339L(SEQ ID NO:322、321、320)、D117L(SEQ ID NO:862、864)、I243L(SEQ IDNO:494、493、492、491)、I73R(SEQ ID NO:504、503、502)、DP238L(SEQ ID NO:327、326、325)、I9R(SEQ ID NO:513、512、511、510);
优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)、A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570);且
最优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)。
27.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)。
28.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R(SEQ ID NO:774)。
29.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-8R(SEQ ID NO:772)。
30.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R(SEQ ID NO:724)。
31.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-8R(SEQ ID NO:722)。
32.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R(SEQ ID NO:721)。
33.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R(SEQ ID NO:719)。
34.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-8R(SEQ ID NO:717)。
35.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)。
36.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:M448R(SEQ ID NO:568)。
37.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:M448R(SEQ ID NO:566)。
38.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:M448R(SEQ ID NO:565)。
39.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:M448R(SEQ ID NO:564)。
40.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:M448R(SEQ ID NO:563)。
41.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)。
42.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:297)。
43.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:295)。
44.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:294)。
45.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:293)。
46.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:292)。
47.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:291)。
48.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:290)。
49.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:289)。
50.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:287)。
51.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:285)。
52.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:284)。
53.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:283)。
54.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:282)。
55.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:281)。
56.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)。
57.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:CP312R(SEQ ID NO:274)。
58.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:CP312R(SEQ ID NO:272)。
59.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:CP312R(SEQ ID NO:269)。
60.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:CP312R(SEQ ID NO:268)。
61.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:CP312R(SEQ ID NO:267)。
62.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A240L(SEQ ID NO:854、853、25)。
63.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A240L(SEQ ID NO:854)。
64.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A240L(SEQ ID NO:853)。
65.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A240L(SEQ ID NO:25)。
66.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)。
67.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A238L(SEQ ID NO:23)。
68.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A238L(SEQ ID NO:21)。
69.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A238L(SEQ ID NO:19)。
70.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A238L(SEQ ID NO:17)。
71.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570)。
72.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF100-1L(SEQ ID NO:572)。
73.如技术方案26的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(a),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF100-1L(SEQ ID NO:570)。
74.如技术方案24至73中任一项的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自以下所组成组中的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)、A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570)、K145R(SEQ ID NO:526、524、523、522、521、520、518、516、515、514)、B475L(SEQID NO:66、65、64、63、62、61、60、59、58、57、56、55、54、53、52、51、50、49、48)、H339R(SEQ IDNO:468、466、465、464、463、462、461、460、458、456、455、454)、I226R(SEQ ID NO:489、487、486、485、484、483、481、479、478)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:266、265、264、263、262、261)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:260、259、258)、G1211R(SEQ ID NO:432、430、429、428、427、426、425、424、423、422、420、418、417、416)、M1249L(SEQ ID NO:562、561、560、559、558、557、556、555、554、553、552、551、550、549、548、547、546、545、544、543、542、541、540、539)、MGF505-9R(SEQ ID NO:733、732、731、730、729、728、727、726)、P1192R(SEQ ID NO:817、816、815、814、813、812、811、810、809、808、807、806、805、804、803、802、801)、MGF505-1R(SEQ ID NO:692、691、690、689、688、687、686、685、684)、MGF505-3R(SEQ ID NO:703、702、701、700、699)、EP424R(SEQ ID NO:389、388、387、386、385、384、383、382、381、380、379)、C475L(SEQ ID NO:201、200、199、198、197、196、195、194、193、192、191、190、189、188)、B602L(SEQ ID NO:75、74、73、72、71、70、69、68、67)、CP530R(SEQ ID NO:278、277、276、275)、D339L(SEQ ID NO:322、321、320)、D117L(SEQ ID NO:862、864)、I243L(SEQ ID NO:494、493、492、491)、I73R(SEQ ID NO:504、503、502)、DP238L(SEQ ID NO:327、326、325)、I9R(SEQ ID NO:513、512、511、510);
优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)、A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570);且
最优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)。
75.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)。
76.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R(SEQ ID NO:774)。
77.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-8R(SEQ ID NO:772)。
78.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R(SEQ ID NO:724)。
79.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-8R(SEQ ID NO:722)。
80.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R(SEQ ID NO:721)。
81.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R(SEQ ID NO:719)。
82.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-8R(SEQ ID NO:717)。
83.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)。
84.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:M448R(SEQ ID NO:568)。
85.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:M448R(SEQ ID NO:566)。
86.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:M448R(SEQ ID NO:565)。
87.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:M448R(SEQ ID NO:564)。
88.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:M448R(SEQ ID NO:563)。
89.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)。
90.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:297)。
91.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:295)。
92.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:294)。
93.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:293)。
94.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:292)。
95.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:291)。
96.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:290)。
97.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:289)。
98.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:287)。
99.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:285)。
100.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:284)。
101.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:283)。
102.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:282)。
103.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:281)。
104.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)。
105.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:CP312R(SEQ ID NO:274)。
106.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:CP312R(SEQ ID NO:272)。
107.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:CP312R(SEQ ID NO:269)。
108.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:CP312R(SEQ ID NO:268)。
109.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:CP312R(SEQ ID NO:267)。
110.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A240L(SEQ ID NO:854、853、25)。
111.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A240L(SEQ ID NO:854)。
112.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A240L(SEQ ID NO:853)。
113.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A240L(SEQ ID NO:25)。
114.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)。
115.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A238L(SEQ ID NO:23)。
116.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A238L(SEQ ID NO:21)。
117.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A238L(SEQ ID NO:19)。
118.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A238L(SEQ ID NO:17)。
119.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570)。
120.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF100-1L(SEQ ID NO:572)。
121.如技术方案74的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF100-1L(SEQ ID NO:570)。
122.如技术方案24至121中任一项的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)、A238L(SEQ ID NO:24、22、20、18)、MGF100-1L(SEQ ID NO:573、571)、K145R(SEQ ID NO:527、525、519、517)、B475L(SEQID NO:866、867)、H339R(SEQ ID NO:469、467、459、457)、I226R(SEQ ID NO:490、488、482、480)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:868、869)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:870、871)、G1211R(SEQ ID NO:433、431、421、419)、M1249L(SEQ ID NO:872、873)、MGF505-9R(SEQ ID NO:874、875)、P1192R(SEQ ID NO:876、877)、MGF505-1R(SEQ ID NO:878、879)、MGF505-3R(SEQID NO:880、881)、EP424R(SEQ ID NO:882、883)、C475L(SEQ ID NO:884、885)、B602L(SEQID NO:886、887)、CP530R(SEQ ID NO:888、889)、D339L(SEQ ID NO:890、891)、D117L(SEQID NO:863、865)、I243L(SEQ ID NO:892、893)、I73R(SEQ ID NO:894、895)、DP238L(SEQ IDNO:896、897)、I9R(SEQ ID NO:898、899);
优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)、A238L(SEQ ID NO:24、22、20、18)、MGF100-1L(SEQ ID NO:573、571);且
最优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)。
123.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)。
124.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-7R(SEQ ID NO:857)。
125.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-7R(SEQ ID NO:775)。
126.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-8R(SEQ ID NO:773)。
127.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-7R(SEQ ID NO:725)。
128.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-8R(SEQ ID NO:723)。
129.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-7R(SEQ ID NO:720)。
130.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-8R(SEQ ID NO:718)。
131.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:M448R(SEQID NO:858、569、567)。
132.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:M448R(SEQID NO:858)。
133.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:M448R(SEQID NO:569)。
134.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:M448R(SEQID NO:567)。
135.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)。
136.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:D1133L(SEQ ID NO:859)。
137.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:D1133L(SEQ ID NO:298)。
138.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:D1133L(SEQ ID NO:296)。
139.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:D1133L(SEQ ID NO:288)。
140.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:D1133L(SEQ ID NO:286)。
141.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)。
142.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:CP312R(SEQ ID NO:861)。
143.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:CP312R(SEQ ID NO:273)。
144.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:CP312R(SEQ ID NO:901、271)。
145.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:CP312R(SEQ ID NO:900、270)。
146.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:A240L(SEQID NO:860、27、26)。
147.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:A240L(SEQID NO:860)。
148.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:A240L(SEQID NO:27)。
149.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:A240L(SEQID NO:26)。
150.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:A238L(SEQID NO:24、22、20、18)。
151.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:A238L(SEQID NO:24)。
152.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:A238L(SEQID NO:22)。
153.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:A238L(SEQID NO:20)。
154.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:A238L(SEQID NO:18)。
155.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF100-1L(SEQ ID NO:573、571)。
156.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF100-1L(SEQ ID NO:573)。
157.如技术方案122的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),该编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF100-1L(SEQ ID NO:571)。
158.如技术方案24至157中任一项的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体选自由以下组成的组:非洲猪瘟病毒载体、鸟类痘病毒载体、犬麻疹病毒载体、疱疹病毒载体、水痘病毒载体、劳森氏菌属、沙门氏菌属。
159.如技术方案24至158中任一项的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自以下所组成组中的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ IDNO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)、A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570)、K145R(SEQ ID NO:526、524、523、522、521、520、518、516、515、514)、B475L(SEQ ID NO:66、65、64、63、62、61、60、59、58、57、56、55、54、53、52、51、50、49、48)、H339R(SEQ ID NO:468、466、465、464、463、462、461、460、458、456、455、454)、I226R(SEQ ID NO:489、487、486、485、484、483、481、479、478)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:266、265、264、263、262、261)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:260、259、258)、G1211R(SEQ IDNO:432、430、429、428、427、426、425、424、423、422、420、418、417、416)、M1249L(SEQ ID NO:562、561、560、559、558、557、556、555、554、553、552、551、550、549、548、547、546、545、544、543、542、541、540、539)、MGF505-9R(SEQ ID NO:733、732、731、730、729、728、727、726)、P1192R(SEQ ID NO:817、816、815、814、813、812、811、810、809、808、807、806、805、804、803、802、801)、MGF505-1R(SEQ ID NO:692、691、690、689、688、687、686、685、684)、MGF505-3R(SEQ ID NO:703、702、701、700、699)、EP424R(SEQ ID NO:389、388、387、386、385、384、383、382、381、380、379)、C475L(SEQ ID NO:201、200、199、198、197、196、195、194、193、192、191、190、189、188)、B602L(SEQ ID NO:75、74、73、72、71、70、69、68、67)、CP530R(SEQ ID NO:278、277、276、275)、D339L(SEQ ID NO:322、321、320)、D117L(SEQ ID NO:862、864)、I243L(SEQ ID NO:494、493、492、491)、I73R(SEQ ID NO:504、503、502)、DP238L(SEQ ID NO:327、326、325)、I9R(SEQ ID NO:513、512、511、510);
优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)、A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570);且
最优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)。
160.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)。
161.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R(SEQ ID NO:774)。
162.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-8R(SEQ ID NO:772)。
163.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R(SEQ ID NO:724)。
164.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-8R(SEQ ID NO:722)。
165.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R(SEQ ID NO:721)。
166.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R(SEQ ID NO:719)。
167.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-8R(SEQ ID NO:717)。
168.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)。
169.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:M448R(SEQ ID NO:568)。
170.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:M448R(SEQ ID NO:566)。
171.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:M448R(SEQ ID NO:565)。
172.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:M448R(SEQ ID NO:564)。
173.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:M448R(SEQ ID NO:563)。
174.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)。
175.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:297)。
176.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:295)。
177.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:294)。
178.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:293)。
179.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:292)。
180.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:291)。
181.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:290)。
182.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:289)。
183.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:287)。
184.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:285)。
185.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:284)。
186.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:283)。
187.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:282)。
188.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:281)。
189.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)。
190.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:CP312R(SEQ ID NO:274)。
191.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:CP312R(SEQ ID NO:272)。
192.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:CP312R(SEQ ID NO:269)。
193.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:CP312R(SEQ ID NO:268)。
194.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:CP312R(SEQ ID NO:267)。
195.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A240L(SEQ ID NO:854、853、25)。
196.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A240L(SEQ ID NO:854)。
197.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A240L(SEQ ID NO:853)。
198.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A240L(SEQ ID NO:25)。
199.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)。
200.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A238L(SEQ ID NO:23)。
201.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A238L(SEQ ID NO:21)。
202.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A238L(SEQ ID NO:19)。
203.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A238L(SEQ ID NO:17)。
204.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570)。
205.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF100-1L(SEQ ID NO:572)。
206.如技术方案159的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF100-1L(SEQ ID NO:570)。
207.如技术方案24至206中任一项的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)、A238L(SEQ ID NO:24、22、20、18)、MGF100-1L(SEQ ID NO:573、571)、K145R(SEQ IDNO:527、525、519、517)、B475L(SEQ ID NO:866、867)、H339R(SEQ ID NO:469、467、459、457)、I226R(SEQ ID NO:490、488、482、480)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:868、869)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:870、871)、G1211R(SEQ ID NO:433、431、421、419)、M1249L(SEQ ID NO:872、873)、MGF505-9R(SEQ ID NO:874、875)、P1192R(SEQ ID NO:876、877)、MGF505-1R(SEQID NO:878、879)、MGF505-3R(SEQ ID NO:880、881)、EP424R(SEQ ID NO:882、883)、C475L(SEQ ID NO:884、885)、B602L(SEQ ID NO:886、887)、CP530R(SEQ ID NO:888、889)、D339L(SEQ ID NO:890、891)、D117L(SEQ ID NO:863、865)、I243L(SEQ ID NO:892、893)、I73R(SEQ ID NO:894、895)、DP238L(SEQ ID NO:896、897)、I9R(SEQ ID NO:898、899);
优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)、A238L(SEQ ID NO:24、22、20、18)、MGF100-1L(SEQ ID NO:573、571);且
最优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)。
208.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)。
209.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-7R(SEQ ID NO:857)。
210.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-7R(SEQ ID NO:775)。
211.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-8R(SEQ ID NO:773)。
212.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-7R(SEQ ID NO:725)。
213.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-8R(SEQ ID NO:723)。
214.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-7R(SEQ ID NO:720)。
215.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-8R(SEQ ID NO:718)。
216.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:M448R(SEQ ID NO:858、569、567)。
217.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:M448R(SEQ ID NO:858)。
218.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:M448R(SEQ ID NO:569)。
219.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:M448R(SEQ ID NO:567)。
220.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)。
221.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:D1133L(SEQ ID NO:859)。
222.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:D1133L(SEQ ID NO:298)。
223.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:D1133L(SEQ ID NO:296)。
224.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:D1133L(SEQ ID NO:288)。
225.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:D1133L(SEQ ID NO:286)。
226.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)。
227.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:CP312R(SEQ ID NO:861)。
228.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:CP312R(SEQ ID NO:273)。
229.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:CP312R(SEQ ID NO:901、271)。
230.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:CP312R(SEQ ID NO:900、270)。
231.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:A240L(SEQ ID NO:860、27、26)。
232.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:A240L(SEQ ID NO:860)。
233.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:A240L(SEQ ID NO:27)。
234.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:A240L(SEQ ID NO:26)。
235.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:A238L(SEQ ID NO:24、22、20、18)。
236.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:A238L(SEQ ID NO:24)。
237.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:A238L(SEQ ID NO:22)。
238.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:A238L(SEQ ID NO:20)。
239.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:A238L(SEQ ID NO:18)。
240.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF100-1L(SEQ ID NO:573、571)。
241.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF100-1L(SEQ ID NO:573)。
242.如技术方案207的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),该病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF100-1L(SEQ ID NO:571)。
243.如技术方案24至242中任一项的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中该ASFV多肽为ASFV全长蛋白,该ASFV全长蛋白优选是由含有以下,更优选是由以下组成的多核苷酸序列编码:任何可能的开放读码框(ORF);甚至更优选是由含有以下、最优选是由以下组成的多核苷酸序列编码:具有5'端起始密码子及3'端终止密码子的开放读码框(ORF)。
244.如技术方案24至243中任一项的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中该非洲猪瘟病毒选自由以下组成的组:BA71、BA71ΔCD2和/或Georgia2007/1病毒株。
245.如技术方案24至244中任一项的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中该免疫原性组合物或该疫苗或医药组合物或任何所含有的免疫原性片段的免疫原性(和/或免疫反应)由经诱导的IFN-γ反应指示/表征,优选是在猪科动物IFN-γELISpot分析中,更优选是在如实施例1中所描述的猪科动物IFN-γELISpot分析中由经诱导的IFN-γ反应指示/表征。
246.如技术方案24至245中任一项的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其用于减少或预防猪科动物,优选是猪的由至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒感染造成的临床症状或疾病的方法中、或用于治疗和/或预防至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒感染的方法中,其中该等由至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒感染造成的临床症状或疾病或该至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒感染优选是选自由以下组成的组:非洲猪瘟、急性非洲猪瘟、慢性非洲猪瘟、病死、死亡、猝死、发热、高热、厌食、嗜睡、虚弱、食欲缺乏、伏卧、红斑、发绀性皮肤斑痣病、痢疾、便秘、腹痛、呼吸道症状、咳嗽、呕吐、呼吸困难、鼻涕及结合膜分泌物、出血、流鼻血、流产、白血球减少症、血小板减少症。
247.如技术方案24至245中任一项的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其用于使猪科动物,优选是猪免疫,以对抗至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒在猪科动物,优选是猪中造成的临床疾病的方法中,该方法含有以下步骤:向该猪科动物,优选是猪施用如技术方案24至245中任一项的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中该免疫原性组合物或疫苗或医药组合物不会造成临床感染症状,但能诱导使该猪科动物,优选是猪对该至少一种非洲猪瘟病毒,优选是该至少一种非洲猪瘟病毒的病原性形式免疫的免疫反应,其中该临床疾病或该等临床感染症状优选是选自由以下组成的组:非洲猪瘟、急性非洲猪瘟、慢性非洲猪瘟、病死、死亡、猝死、发热、高热、厌食、嗜睡、虚弱、食欲缺乏、伏卧、红斑、发绀性皮肤斑痣病、痢疾、便秘、腹痛、呼吸道症状、咳嗽、呕吐、呼吸困难、鼻涕及结合膜分泌物、出血、流鼻血、流产、白血球减少症、血小板减少症。
248.如技术方案24至245中任一项的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其用于对猪科动物,优选是猪进行初免-加强型免疫,以对抗至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒在猪科动物,优选是猪中造成的临床疾病的方法中,该方法含有以下步骤:向该猪科动物,优选是猪施用一次或两次含有以下的如技术方案24至245中任一项的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物:(i)作为唯一免疫原组分的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段;或(ii)病毒载体,优选是重组和/或非天然存在的病毒载体,其含有作为唯一免疫原组分的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段(初免步骤);且随后-在初免一次或两次之后-向该猪科动物,优选是猪施用减毒活非洲猪瘟病毒,优选是BA71ΔCD2(加强步骤);其中该免疫原性组合物或疫苗或医药组合物以及该减毒活非洲猪瘟病毒彼此独立地不会造成临床感染症状,但能诱导使该猪科动物,优选是猪对该至少一种非洲猪瘟病毒,优选是该至少一种非洲猪瘟病毒的病原性形式免疫的免疫反应,其中该临床疾病或该等临床感染症状优选是选自由以下组成的组:非洲猪瘟、急性非洲猪瘟、慢性非洲猪瘟、病死、死亡、猝死、发热、高热、厌食、嗜睡、虚弱、食欲缺乏、伏卧、红斑、发绀性皮肤斑痣病、痢疾、便秘、腹痛、呼吸道症状、咳嗽、呕吐、呼吸困难、鼻涕及结合膜分泌物、出血、流鼻血、流产、白血球减少症、血小板减少症。
249.一种试剂盒,其用于猪科动物,优选是猪进行疫苗接种,以针对猪科动物,优选是猪中与至少一种非洲猪瘟病毒(优选是病原性非洲猪瘟病毒)相关联的疾病和/或降低与至少一种非洲猪瘟病毒(优选是病原性非洲猪瘟病毒)相关联或由至少一种非洲猪瘟病毒(优选是病原性非洲猪瘟病毒)造成的一或多种临床症状的发生率或严重程度,该试剂盒含有:
(a)能够将疫苗施用至该猪科动物的分配器;及
(b)如技术方案24至245中任一项的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物;以及
(c)可选存在地,说明书小册;
其中该疾病或该等临床症状优选是选自由以下组成的组:非洲猪瘟、急性非洲猪瘟、慢性非洲猪瘟、病死、死亡、猝死、发热、高热、厌食、嗜睡、虚弱、食欲缺乏、伏卧、红斑、发绀性皮肤斑痣病、痢疾、便秘、腹痛、呼吸道症状、咳嗽、呕吐、呼吸困难、鼻涕及结合膜分泌物、出血、流鼻血、流产、白血球减少症、血小板减少症。
250.一种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自以下所组成组中的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQID NO:854、853、25)、A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570)、K145R(SEQ ID NO:526、524、523、522、521、520、518、516、515、514)、B475L(SEQ ID NO:66、65、64、63、62、61、60、59、58、57、56、55、54、53、52、51、50、49、48)、H339R(SEQ ID NO:468、466、465、464、463、462、461、460、458、456、455、454)、I226R(SEQ ID NO:489、487、486、485、484、483、481、479、478)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:266、265、264、263、262、261)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:260、259、258)、G1211R(SEQ ID NO:432、430、429、428、427、426、425、424、423、422、420、418、417、416)、M1249L(SEQ ID NO:562、561、560、559、558、557、556、555、554、553、552、551、550、549、548、547、546、545、544、543、542、541、540、539)、MGF505-9R(SEQ ID NO:733、732、731、730、729、728、727、726)、P1192R(SEQ ID NO:817、816、815、814、813、812、811、810、809、808、807、806、805、804、803、802、801)、MGF505-1R(SEQ ID NO:692、691、690、689、688、687、686、685、684)、MGF505-3R(SEQ ID NO:703、702、701、700、699)、EP424R(SEQ ID NO:389、388、387、386、385、384、383、382、381、380、379)、C475L(SEQID NO:201、200、199、198、197、196、195、194、193、192、191、190、189、188)、B602L(SEQ IDNO:75、74、73、72、71、70、69、68、67)、CP530R(SEQ ID NO:278、277、276、275)、D339L(SEQ IDNO:322、321、320)、D117L(SEQ ID NO:862、864)、I243L(SEQ ID NO:494、493、492、491)、I73R(SEQ ID NO:504、503、502)、DP238L(SEQ ID NO:327、326、325)、I9R(SEQ ID NO:513、512、511、510);
优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)、A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570);且
最优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)。
251.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)。
252.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R(SEQ ID NO:774)。
253.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-8R(SEQ ID NO:772)。
254.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R(SEQ ID NO:724)。
255.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-8R(SEQ ID NO:722)。
256.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R(SEQ ID NO:721)。
257.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R(SEQ ID NO:719)。
258.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-8R(SEQ ID NO:717)。
259.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)。
260.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:M448R(SEQ ID NO:568)。
261.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:M448R(SEQ ID NO:566)。
262.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:M448R(SEQ ID NO:565)。
263.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:M448R(SEQ ID NO:564)。
264.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:M448R(SEQ ID NO:563)。
265.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)。
266.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:297)。
267.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:295)。
268.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:294)。
269.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:293)。
270.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:292)。
271.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:291)。
272.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:290)。
273.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:289)。
274.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:287)。
275.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:285)。
276.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:284)。
277.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:283)。
278.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:282)。
279.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:D1133L(SEQ ID NO:281)。
280.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)。
281.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:CP312R(SEQ ID NO:274)。
282.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:CP312R(SEQ ID NO:272)。
283.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:CP312R(SEQ ID NO:269)。
284.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:CP312R(SEQ ID NO:268)。
285.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:CP312R(SEQ ID NO:267)。
286.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A240L(SEQ ID NO:854、853、25)。
287.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A240L(SEQ ID NO:854)。
288.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A240L(SEQ ID NO:853)。
289.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A240L(SEQ ID NO:25)。
290.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)。
291.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A238L(SEQ ID NO:23)。
292.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A238L(SEQ ID NO:21)。
293.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A238L(SEQ ID NO:19)。
294.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:A238L(SEQ ID NO:17)。
295.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570)。
296.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF100-1L(SEQ ID NO:572)。
297.如技术方案250的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF100-1L(SEQ ID NO:570)。
298.如技术方案250至297中任一项的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其中该等非洲猪瘟病毒多肽,优选是全长蛋白含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722)、M448R(SEQ ID NO:568、566)、D1133L(SEQ ID NO:297、295)、CP312R(SEQ ID NO:274、272)、A240L(SEQ ID NO:854、853)、A238L(SEQ ID NO:23、21)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572)、K145R(SEQ ID NO:526、524)、B475L(SEQ ID NO:66、65)、H339R(SEQ ID NO:468、466)、I226R(SEQ ID NO:489、487)、CP2475(SEQ ID NO:257)、CP2475(SEQ ID NO:256)、G1211R(SEQ ID NO:432、430)、M1249L(SEQ ID NO:562、561)、MGF505-9R(SEQ ID NO:733、732)、P1192R(SEQ ID NO:817、816)、MGF505-1R(SEQ ID NO:692、691)、MGF505-3R(SEQ ID NO:703、702)、EP424R(SEQ ID NO:389、388)、C475L(SEQ ID NO:201、200)、B602L(SEQ ID NO:75、74)、CP530R(SEQ ID NO:278、277)、D339L(SEQ ID NO:322、321)、D117L(SEQ ID NO:862、864)、I243L(SEQ ID NO:494、493)、I73R(SEQ ID NO:504、503)、DP238L(SEQ ID NO:327、326)、I9R(SEQ ID NO:513、512);且/或
其中该等非洲猪瘟病毒肽和/或其免疫原性片段和/或非洲猪瘟病毒多肽/全长蛋白免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:25)、A238L(SEQ ID NO:19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:570)、K145R(SEQ ID NO:523、522、521、520、518、516、515、514)、B475L(SEQ ID NO:64、63、62、61、60、59、58、57、56、55、54、53、52、51、50、49、48)、H339R(SEQ ID NO:465、464、463、462、461、460、458、456、455、454)、I226R(SEQID NO:486、485、484、483、481、479、478)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:266、265、264、263、262、261)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:260、259、258)、G1211R(SEQ ID NO:429、428、427、426、425、424、423、422、420、418、417、416)、M1249L(SEQ ID NO:560、559、558、557、556、555、554、553、552、551、550、549、548、547、546、545、544、543、542、541、540、539)、MGF505-9R(SEQ ID NO:731、730、729、728、727、726)、P1192R(SEQ ID NO:815、814、813、812、811、810、809、808、807、806、805、804、803、802、801)、MGF505-1R(SEQ ID NO:690、689、688、687、686、685、684)、MGF505-3R(SEQ ID NO:701、700、699)、EP424R(SEQ ID NO:387、386、385、384、383、382、381、380、379)、C475L(SEQ ID NO:199、198、197、196、195、194、193、192、191、190、189、188)、B602L(SEQ ID NO:73、72、71、70、69、68、67)、CP530R(SEQ ID NO:277、276、275)、D339L(SEQ ID NO:320)、I243L(SEQ ID NO:492、491)、I73R(SEQ ID NO:502)、DP238L(SEQ ID NO:325)、I9R(SEQ ID NO:511、510)。
299.一种编码如技术方案250至298中任一项的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段。
300.一种编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)、A238L(SEQ ID NO:24、22、20、18)、MGF100-1L(SEQ ID NO:573、571)、K145R(SEQ ID NO:527、525、519、517)、B475L(SEQ IDNO:866、867)、H339R(SEQ ID NO:469、467、459、457)、I226R(SEQ ID NO:490、488、482、480)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:868、869)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:870、871)、G1211R(SEQ ID NO:433、431、421、419)、M1249L(SEQ ID NO:872、873)、MGF505-9R(SEQ ID NO:874、875)、P1192R(SEQ ID NO:876、877)、MGF505-1R(SEQ ID NO:878、879)、MGF505-3R(SEQID NO:880、881)、EP424R(SEQ ID NO:882、883)、C475L(SEQ ID NO:884、885)、B602L(SEQID NO:886、887)、CP530R(SEQ ID NO:888、889)、D339L(SEQ ID NO:890、891)、D117L(SEQID NO:863、865)、I243L(SEQ ID NO:892、893)、I73R(SEQ ID NO:894、895)、DP238L(SEQ IDNO:896、897)、I9R(SEQ ID NO:898、899);
优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)、A238L(SEQ ID NO:24、22、20、18)、MGF100-1L(SEQ ID NO:573、571);且
最优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)。
301.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)。
302.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-7R(SEQ ID NO:857)。
303.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-7R(SEQ ID NO:775)。
304.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-8R(SEQ ID NO:773)。
305.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-7R(SEQ ID NO:725)。
306.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-8(SEQ ID NO:)。
307.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-7R(SEQ ID NO:720)。
308.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-8R(SEQ ID NO:718)。
309.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:M448R(SEQ ID NO:858、569、567)。
310.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:M448R(SEQ ID NO:858)。
311.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:M448R(SEQ ID NO:569)。
312.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:M448R(SEQ ID NO:567)。
313.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)。
314.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:D1133L(SEQ ID NO:859)。
315.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:D1133L(SEQ ID NO:298)。
316.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:D1133L(SEQ ID NO:296)。
317.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:D1133L(SEQ ID NO:288)。
318.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:D1133L(SEQ ID NO:286)。
319.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)。
320.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:CP312R(SEQ ID NO:861)。
321.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:CP312R(SEQ ID NO:273)。
322.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:CP312R(SEQ ID NO:901、271)。
323.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:CP312R(SEQ ID NO:900、270)。
324.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:A240L(SEQ ID NO:860、27、26)。
325.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:A240L(SEQ ID NO:860)。
326.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:A240L(SEQ ID NO:27)。
327.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:A240L(SEQ ID NO:26)。
328.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:A238L(SEQ ID NO:24、22、20、18)。
329.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:A238L(SEQ ID NO:24)。
330.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:A238L(SEQ ID NO:22)。
331.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:A238L(SEQ ID NO:20)。
332.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:A238L(SEQ ID NO:18)。
333.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF100-1L(SEQ ID NO:573、571)。
334.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF100-1L(SEQ ID NO:573)。
335.如技术方案300的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF100-1L(SEQ ID NO:571)。
336.如技术方案250至298中任一项的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,或如技术方案299至335中任一项的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该免疫原性组合物或该疫苗或医药组合物或任何所含有的免疫原性片段的免疫原性(和/或免疫反应)经诱导的IFN-γ反应指示/表征,优选是在猪科动物IFN-γELISpot分析中,更优选是在如实施例1中所描述的猪科动物IFN-γELISpot分析中由经诱导的IFN-γ反应指示/表征。
337.如技术方案250至298及336中任一项的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段或如技术方案299至336中任一项的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中该ASFV多肽为ASFV全长蛋白,该ASFV全长蛋白优选是由含有以下,更优选是由以下组成的多核苷酸序列编码:任何可能的开放读码框(ORF);甚至更优选是由含有以下、最优选是由以下组成的多核苷酸序列编码:具有5'端起始密码子及3'端终止密码子的开放读码框(ORF)。
338.一种病毒或细菌载体,其优选是选自由以下组成的组:非洲猪瘟病毒载体、鸟类痘病毒载体、犬麻疹病毒载体、疱疹病毒载体、水痘病毒载体、劳森氏菌属、沙门氏菌属,该病毒或细菌载体含有一种、两种、三种或更多种如技术方案299至335中任一项的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段。
339.一种载体,优选是表达载体,其含有一种、两种、三种或更多种如技术方案299至335中任一项的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段。
340.如技术方案338的病毒或细菌载体或如技术方案339的载体,其含有三种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,该三种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段优选是选自EP402R、CP312R及A240L(多重表位-I,ME-I),更优选是含有以下、最优选是由以下组成:选自由SEQ ID NO:855组成的组的核酸序列;或含有十三种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,该十三种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段优选是选自D1133L、G1211R、M1249L、MGF505-9R、P1192R、CP2475L(p150)、B475L、EP424R、H339R、I226R、K145R、MGF505-1R及CP2475L(p37)(多重表位-II,ME-II),更优选是含有以下、最优选是由以下组成:选自由SEQ ID NO:856组成的组的核酸序列。
341.一种宿主细胞,优选是哺乳动物宿主细胞,其含有如技术方案338至340中任一项的病毒或细菌载体或载体。
342.如技术方案24至341中任一项的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中该病毒或细菌载体为经基因修饰的病毒或细菌,该经基因修饰的病毒或细菌是通过重组DNA技术进行操作以使得其向宿主细胞中的进入引起特定生物活动,例如载体携带的转基因如如ASFV基因的表达,其中该转基因优选是为ASFV抗原,且其中该病毒或细菌载体在目标细胞或宿主细胞中优选是可复制的或不可复制的。

Claims (25)

1.一种免疫原性组合物,其含有:
(a)一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段;和/或
(b)编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段;和/或
(c)病毒或细菌载体,优选是重组和/或非天然存在的病毒或细菌载体,其含有编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段;以及
(d)可选存在地,一或多种医药学上或兽医学上可接受的载剂或赋形剂,所述一或多种载剂或赋形剂优选是适用于经口、皮内、肌内或鼻内施用。
2.一种疫苗或医药组合物,其含有:
(a)一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段;和/或
(b)编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段;和/或
(c)病毒或细菌载体,优选是重组和/或非天然存在的病毒或细菌载体,其含有编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段;以及
(d)一或多种医药学上或兽医学上可接受的载剂或赋形剂,所述一或多种载剂或赋形剂优选是适用于经口、皮内、肌内或鼻内施用;
(e)可选存在地,该疫苗或医药组合物进一步含有佐剂。
3.如权利要求1的免疫原性组合物或如权利要求2的疫苗或医药组合物,其中根据(a),所述一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自以下所组成组中的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)、A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570)、K145R(SEQ ID NO:526、524、523、522、521、520、518、516、515、514)、B475L(SEQID NO:66、65、64、63、62、61、60、59、58、57、56、55、54、53、52、51、50、49、48)、H339R(SEQ IDNO:468、466、465、464、463、462、461、460、458、456、455、454)、I226R(SEQ ID NO:489、487、486、485、484、483、481、479、478)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:266、265、264、263、262、261)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:260、259、258)、G1211R(SEQ ID NO:432、430、429、428、427、426、425、424、423、422、420、418、417、416)、M1249L(SEQ ID NO:562、561、560、559、558、557、556、555、554、553、552、551、550、549、548、547、546、545、544、543、542、541、540、539)、MGF505-9R(SEQ ID NO:733、732、731、730、729、728、727、726)、P1192R(SEQ ID NO:817、816、815、814、813、812、811、810、809、808、807、806、805、804、803、802、801)、MGF505-1R(SEQ ID NO:692、691、690、689、688、687、686、685、684)、MGF505-3R(SEQ ID NO:703、702、701、700、699)、EP424R(SEQ ID NO:389、388、387、386、385、384、383、382、381、380、379)、C475L(SEQ ID NO:201、200、199、198、197、196、195、194、193、192、191、190、189、188)、B602L(SEQ ID NO:75、74、73、72、71、70、69、68、67)、CP530R(SEQ ID NO:278、277、276、275)、D339L(SEQ ID NO:322、321、320)、D117L(SEQ ID NO:862、864)、I243L(SEQ ID NO:494、493、492、491)、I73R(SEQ ID NO:504、503、502)、DP238L(SEQ ID NO:327、326、325)、I9R(SEQ ID NO:513、512、511、510);
优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)、A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570);且
最优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)。
4.如权利要求1-3中任一项所述的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),所述一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段:与选自以下所组成组中的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)、A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570)、K145R(SEQ ID NO:526、524、523、522、521、520、518、516、515、514)、B475L(SEQID NO:66、65、64、63、62、61、60、59、58、57、56、55、54、53、52、51、50、49、48)、H339R(SEQ IDNO:468、466、465、464、463、462、461、460、458、456、455、454)、I226R(SEQ ID NO:489、487、486、485、484、483、481、479、478)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:266、265、264、263、262、261)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:260、259、258)、G1211R(SEQ ID NO:432、430、429、428、427、426、425、424、423、422、420、418、417、416)、M1249L(SEQ ID NO:562、561、560、559、558、557、556、555、554、553、552、551、550、549、548、547、546、545、544、543、542、541、540、539)、MGF505-9R(SEQ ID NO:733、732、731、730、729、728、727、726)、P1192R(SEQ ID NO:817、816、815、814、813、812、811、810、809、808、807、806、805、804、803、802、801)、MGF505-1R(SEQ ID NO:692、691、690、689、688、687、686、685、684)、MGF505-3R(SEQ ID NO:703、702、701、700、699)、EP424R(SEQ ID NO:389、388、387、386、385、384、383、382、381、380、379)、C475L(SEQ ID NO:201、200、199、198、197、196、195、194、193、192、191、190、189、188)、B602L(SEQ ID NO:75、74、73、72、71、70、69、68、67)、CP530R(SEQ ID NO:278、277、276、275)、D339L(SEQ ID NO:322、321、320)、D117L(SEQ ID NO:862、864)、I243L(SEQ ID NO:494、493、492、491)、I73R(SEQ ID NO:504、503、502)、DP238L(SEQ ID NO:327、326、325)、I9R(SEQ ID NO:513、512、511、510);
优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)、A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570);且
最优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)。
5.如权利要求1-4中任一项所述的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(b),所述编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)、A238L(SEQ ID NO:24、22、20、18)、MGF100-1L(SEQ ID NO:573、571)、K145R(SEQ ID NO:527、525、519、517)、B475L(SEQID NO:866、867)、H339R(SEQ ID NO:469、467、459、457)、I226R(SEQ ID NO:490、488、482、480)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:868、869)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:870、871)、G1211R(SEQ ID NO:433、431、421、419)、M1249L(SEQ ID NO:872、873)、MGF505-9R(SEQ ID NO:874、875)、P1192R(SEQ ID NO:876、877)、MGF505-1R(SEQ ID NO:878、879)、MGF505-3R(SEQID NO:880、881)、EP424R(SEQ ID NO:882、883)、C475L(SEQ ID NO:884、885)、B602L(SEQID NO:886、887)、CP530R(SEQ ID NO:888、889)、D339L(SEQ ID NO:890、891)、D117L(SEQID NO:863、865)、I243L(SEQ ID NO:892、893)、I73R(SEQ ID NO:894、895)、DP238L(SEQ IDNO:896、897)、I9R(SEQ ID NO:898、899);
优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)、A238L(SEQ ID NO:24、22、20、18)、MGF100-1L(SEQ ID NO:573、571);且
最优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)。
6.如权利要求1-5中任一项所述的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),所述病毒或细菌载体选自由以下组成的组:非洲猪瘟病毒载体、鸟类痘病毒载体、犬麻疹病毒载体、疱疹病毒载体、水痘病毒载体、劳森氏菌属(Lawsonia spp.)、沙门氏菌属(Salmonella spp.)。
7.如权利要求1-6中任一项所述的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),所述病毒或细菌载体含有编码含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段:与选自以下所组成组中的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ IDNO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)、A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570)、K145R(SEQ ID NO:526、524、523、522、521、520、518、516、515、514)、B475L(SEQ ID NO:66、65、64、63、62、61、60、59、58、57、56、55、54、53、52、51、50、49、48)、H339R(SEQ ID NO:468、466、465、464、463、462、461、460、458、456、455、454)、I226R(SEQ ID NO:489、487、486、485、484、483、481、479、478)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:266、265、264、263、262、261)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:260、259、258)、G1211R(SEQ IDNO:432、430、429、428、427、426、425、424、423、422、420、418、417、416)、M1249L(SEQ ID NO:562、561、560、559、558、557、556、555、554、553、552、551、550、549、548、547、546、545、544、543、542、541、540、539)、MGF505-9R(SEQ ID NO:733、732、731、730、729、728、727、726)、P1192R(SEQ ID NO:817、816、815、814、813、812、811、810、809、808、807、806、805、804、803、802、801)、MGF505-1R(SEQ ID NO:692、691、690、689、688、687、686、685、684)、MGF505-3R(SEQ ID NO:703、702、701、700、699)、EP424R(SEQ ID NO:389、388、387、386、385、384、383、382、381、380、379)、C475L(SEQ ID NO:201、200、199、198、197、196、195、194、193、192、191、190、189、188)、B602L(SEQ ID NO:75、74、73、72、71、70、69、68、67)、CP530R(SEQ ID NO:278、277、276、275)、D339L(SEQ ID NO:322、321、320)、D117L(SEQ ID NO:862、864)、I243L(SEQ ID NO:494、493、492、491)、I73R(SEQ ID NO:504、503、502)、DP238L(SEQ ID NO:327、326、325)、I9R(SEQ ID NO:513、512、511、510);
优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)、A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570);且
最优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)。
8.如权利要求1-7中任一项所述的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中根据(c),所述病毒或细菌载体含有编码一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中所述一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)、A238L(SEQ ID NO:24、22、20、18)、MGF100-1L(SEQ ID NO:573、571)、K145R(SEQ IDNO:527、525、519、517)、B475L(SEQ ID NO:866、867)、H339R(SEQ ID NO:469、467、459、457)、I226R(SEQ ID NO:490、488、482、480)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:868、869)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:870、871)、G1211R(SEQ ID NO:433、431、421、419)、M1249L(SEQ ID NO:872、873)、MGF505-9R(SEQ ID NO:874、875)、P1192R(SEQ ID NO:876、877)、MGF505-1R(SEQID NO:878、879)、MGF505-3R(SEQ ID NO:880、881)、EP424R(SEQ ID NO:882、883)、C475L(SEQ ID NO:884、885)、B602L(SEQ ID NO:886、887)、CP530R(SEQ ID NO:888、889)、D339L(SEQ ID NO:890、891)、D117L(SEQ ID NO:863、865)、I243L(SEQ ID NO:892、893)、I73R(SEQ ID NO:894、895)、DP238L(SEQ ID NO:896、897)、I9R(SEQ ID NO:898、899);
优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)、A238L(SEQ ID NO:24、22、20、18)、MGF100-1L(SEQ ID NO:573、571);且
最优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)。
9.如权利要求1-8中任一项所述的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中所述ASFV多肽为ASFV全长蛋白,所述ASFV全长蛋白优选是由含有以下,更优选是由以下组成的多核苷酸序列编码:任何可能的开放读码框(ORF);甚至更优选是由含有以下,最优选是由以下组成的多核苷酸序列编码:具有5'端起始密码子及3'端终止密码子的开放读码框(ORF)。
10.如权利要求1-9中任一项所述的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中所述非洲猪瘟病毒选自由以下组成的组:BA71、BA71ΔCD2和/或Georgia2007/1病毒株。
11.如权利要求1-10中任一项所述的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中所述免疫原性组合物或所述疫苗或所述医药组合物或所述任何所含有的免疫原性片段的免疫原性(和/或免疫反应)由经诱导的IFN-γ反应指示/表征,优选是由在猪科动物IFN-γELISpot分析中的经诱导的IFN-γ反应指示/表征,更优选是由在如实施例1中所描述的猪科动物IFN-γELISpot分析中的经诱导的IFN-γ反应指示/表征。
12.如权利要求1-11中任一项所述的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其用于减少或预防猪科动物,优选是猪的由至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒感染造成的临床症状或疾病的方法中、或用于治疗和/或预防至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒感染的方法中,其中优选地,所述由至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒感染造成的临床症状或疾病或所述至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒感染选自由以下组成的组:非洲猪瘟、急性非洲猪瘟、慢性非洲猪瘟、病死、死亡、猝死、发热、高热、厌食、嗜睡、虚弱、食欲缺乏、伏卧、红斑、发绀性皮肤斑痣病、痢疾、便秘、腹痛、呼吸道症状、咳嗽、呕吐、呼吸困难、鼻涕及结合膜分泌物、出血、流鼻血、流产、白血球减少症、血小板减少症。
13.如权利要求1-11中任一项所述的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其用于使猪科动物,优选是猪免疫,以对抗至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒在猪科动物,优选是猪中造成的临床疾病的方法中,所述方法含有以下步骤:向所述猪科动物,优选是猪施用如权利要求1-11中任一项所述的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其中所述免疫原性组合物或所述疫苗或所述医药组合物不会造成临床感染症状,但能诱导使所述猪科动物,优选是猪对所述至少一种非洲猪瘟病毒,优选是所述至少一种非洲猪瘟病毒的病原性形式免疫的免疫反应,其中所述临床疾病或该等临床感染症状优选是选自由以下组成的组:非洲猪瘟、急性非洲猪瘟、慢性非洲猪瘟、病死、死亡、猝死、发热、高热、厌食、嗜睡、虚弱、食欲缺乏、伏卧、红斑、发绀性皮肤斑痣病、痢疾、便秘、腹痛、呼吸道症状、咳嗽、呕吐、呼吸困难、鼻涕及结合膜分泌物、出血、流鼻血、流产、白血球减少症、血小板减少症。
14.如权利要求1-11中任一项所述的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其用于对猪科动物,优选是猪进行初免-加强型免疫,以针对由所述猪科动物,优选是猪中的至少一种非洲猪瘟病毒,优选至少一种病原性非洲猪瘟病毒造成的临床疾病的方法中,所述方法含有以下步骤:向所述猪科动物,优选是猪施用一次或两次含有如权利要求1-11中任一项所述的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物,其包含:(i)作为唯一免疫原组分的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段;或(ii)病毒载体,优选是重组和/或非天然存在的病毒载体,其含有作为唯一免疫原组分的一种、两种或更多种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段(初免步骤);且随后-在初免一次或两次之后,向所述猪科动物,优选是猪施用减毒活非洲猪瘟病毒,优选是BA71ΔCD2(加强步骤);其中所述免疫原性组合物及所述减毒活非洲猪瘟病毒彼此独立地不会造成临床感染症状,但能诱导使所述猪科动物,优选是猪对所述至少一种非洲猪瘟病毒,优选是所述至少一种非洲猪瘟病毒的病原性形式免疫的免疫反应,其中优选地,所述临床疾病或临床感染症状选自由以下组成的组:非洲猪瘟、急性非洲猪瘟、慢性非洲猪瘟、病死、死亡、猝死、发热、高热、厌食、嗜睡、虚弱、食欲缺乏、伏卧、红斑、发绀性皮肤斑痣病、痢疾、便秘、腹痛、呼吸道症状、咳嗽、呕吐、呼吸困难、鼻涕及结合膜分泌物、出血、流鼻血、流产、白血球减少症、血小板减少症。
15.一种试剂盒,其用于猪科动物,优选是猪进行疫苗接种,以针对猪科动物,优选是猪中与至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒相关联的疾病和/或降低与至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒相关联或由至少一种非洲猪瘟病毒,优选是病原性非洲猪瘟病毒造成的一或多种临床症状的发生率或严重程度,所述试剂盒含有:
(a)能够将疫苗施用至所述猪科动物的分配器;及
(b)如权利要求1-11中任一项所述的免疫原性组合物或疫苗或医药组合物;以及
(c)可选存在地,说明书小册;
其中所述疾病或临床症状优选是选自由以下组成的组:非洲猪瘟、急性非洲猪瘟、慢性非洲猪瘟、病死、死亡、猝死、发热、高热、厌食、嗜睡、虚弱、食欲缺乏、伏卧、红斑、发绀性皮肤斑痣病、痢疾、便秘、腹痛、呼吸道症状、咳嗽、呕吐、呼吸困难、鼻涕及结合膜分泌物、出血、流鼻血、流产、白血球减少症、血小板减少症。
16.一种非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自以下所组成组中的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ IDNO:854、853、25)、A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570)、K145R(SEQ ID NO:526、524、523、522、521、520、518、516、515、514)、B475L(SEQ ID NO:66、65、64、63、62、61、60、59、58、57、56、55、54、53、52、51、50、49、48)、H339R(SEQ ID NO:468、466、465、464、463、462、461、460、458、456、455、454)、I226R(SEQ ID NO:489、487、486、485、484、483、481、479、478)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:266、265、264、263、262、261)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:260、259、258)、G1211R(SEQ ID NO:432、430、429、428、427、426、425、424、423、422、420、418、417、416)、M1249L(SEQ ID NO:562、561、560、559、558、557、556、555、554、553、552、551、550、549、548、547、546、545、544、543、542、541、540、539)、MGF505-9R(SEQ ID NO:733、732、731、730、729、728、727、726)、P1192R(SEQ ID NO:817、816、815、814、813、812、811、810、809、808、807、806、805、804、803、802、801)、MGF505-1R(SEQ ID NO:692、691、690、689、688、687、686、685、684)、MGF505-3R(SEQ ID NO:703、702、701、700、699)、EP424R(SEQ ID NO:389、388、387、386、385、384、383、382、381、380、379)、C475L(SEQID NO:201、200、199、198、197、196、195、194、193、192、191、190、189、188)、B602L(SEQ IDNO:75、74、73、72、71、70、69、68、67)、CP530R(SEQ ID NO:278、277、276、275)、D339L(SEQ IDNO:322、321、320)、D117L(SEQ ID NO:862、864)、I243L(SEQ ID NO:494、493、492、491)、I73R(SEQ ID NO:504、503、502)、DP238L(SEQ ID NO:327、326、325)、I9R(SEQ ID NO:513、512、511、510);
优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)、A238L(SEQ ID NO:23、21、19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572、570);且
最优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722、721、719、717)、M448R(SEQ ID NO:568、566、565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:297、295、294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:274、272、269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:854、853、25)。
17.如权利要求16的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,其中所述非洲猪瘟病毒多肽,优选是全长蛋白含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:774、772、724、722)、M448R(SEQ ID NO:568、566)、D1133L(SEQ ID NO:297、295)、CP312R(SEQ ID NO:274、272)、A240L(SEQ ID NO:854、853)、A238L(SEQ ID NO:23、21)、MGF100-1L(SEQ ID NO:572)、K145R(SEQ ID NO:526、524)、B475L(SEQ ID NO:66、65)、H339R(SEQ ID NO:468、466)、I226R(SEQ ID NO:489、487)、CP2475(SEQ ID NO:257)、CP2475(SEQ ID NO:256)、G1211R(SEQ ID NO:432、430)、M1249L(SEQ ID NO:562、561)、MGF505-9R(SEQ ID NO:733、732)、P1192R(SEQ ID NO:817、816)、MGF505-1R(SEQ ID NO:692、691)、MGF505-3R(SEQ ID NO:703、702)、EP424R(SEQ ID NO:389、388)、C475L(SEQ IDNO:201、200)、B602L(SEQ ID NO:75、74)、CP530R(SEQ ID NO:278、277)、D339L(SEQ ID NO:322、321)、D117L(SEQ ID NO:862、864)、I243L(SEQ ID NO:494、493)、I73R(SEQ ID NO:504、503)、DP238L(SEQ ID NO:327、326)、I9R(SEQ ID NO:513、512);且/或
其中所述非洲猪瘟病毒肽和/或其免疫原性片段和/或非洲猪瘟病毒多肽/全长蛋白免疫原性片段含有以下氨基酸序列,优选是由以下氨基酸序列组成:与选自由以下组成的组的氨基酸序列具有至少80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的氨基酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:721、719、717)、M448R(SEQID NO:565、564、563)、D1133L(SEQ ID NO:294、293、292、291、290、289、287、285、284、283、282、281)、CP312R(SEQ ID NO:269、268、267)、A240L(SEQ ID NO:25)、A238L(SEQ ID NO:19、17)、MGF100-1L(SEQ ID NO:570)、K145R(SEQ ID NO:523、522、521、520、518、516、515、514)、B475L(SEQ ID NO:64、63、62、61、60、59、58、57、56、55、54、53、52、51、50、49、48)、H339R(SEQ ID NO:465、464、463、462、461、460、458、456、455、454)、I226R(SEQ ID NO:486、485、484、483、481、479、478)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:266、265、264、263、262、261)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:260、259、258)、G1211R(SEQ ID NO:429、428、427、426、425、424、423、422、420、418、417、416)、M1249L(SEQ ID NO:560、559、558、557、556、555、554、553、552、551、550、549、548、547、546、545、544、543、542、541、540、539)、MGF505-9R(SEQ IDNO:731、730、729、728、727、726)、P1192R(SEQ ID NO:815、814、813、812、811、810、809、808、807、806、805、804、803、802、801)、MGF505-1R(SEQ ID NO:690、689、688、687、686、685、684)、MGF505-3R(SEQ ID NO:701、700、699)、EP424R(SEQ ID NO:387、386、385、384、383、382、381、380、379)、C475L(SEQ ID NO:199、198、197、196、195、194、193、192、191、190、189、188)、B602L(SEQ ID NO:73、72、71、70、69、68、67)、CP530R(SEQ ID NO:277、276、275)、D339L(SEQ ID NO:320)、I243L(SEQ ID NO:492、491)、I73R(SEQ ID NO:502)、DP238L(SEQID NO:325)、I9R(SEQ ID NO:511、510)。
18.一种编码如权利要求16至17中任一项的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段。
19.一种编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其含有以下核酸序列,优选是由以下核酸序列组成:与选自以下所组成组中的核酸序列具有至少70%、75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、97%、98%、99%或100%一致性的核酸序列:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)、A238L(SEQ ID NO:24、22、20、18)、MGF100-1L(SEQ ID NO:573、571)、K145R(SEQ ID NO:527、525、519、517)、B475L(SEQ ID NO:866、867)、H339R(SEQ ID NO:469、467、459、457)、I226R(SEQ ID NO:490、488、482、480)、CP2475L(p37)(SEQ ID NO:868、869)、CP2475L(p150)(SEQ ID NO:870、871)、G1211R(SEQID NO:433、431、421、419)、M1249L(SEQ ID NO:872、873)、MGF505-9R(SEQ ID NO:874、875)、P1192R(SEQ ID NO:876、877)、MGF505-1R(SEQ ID NO:878、879)、MGF505-3R(SEQ IDNO:880、881)、EP424R(SEQ ID NO:882、883)、C475L(SEQ ID NO:884、885)、B602L(SEQ IDNO:886、887)、CP530R(SEQ ID NO:888、889)、D339L(SEQ ID NO:890、891)、D117L(SEQ IDNO:863、865)、I243L(SEQ ID NO:892、893)、I73R(SEQ ID NO:894、895)、DP238L(SEQ IDNO:896、897)、I9R(SEQ ID NO:898、899);
优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)、A238L(SEQ ID NO:24、22、20、18)、MGF100-1L(SEQ ID NO:573、571);且
最优选是选自由以下组成的组:MGF505-7R/MGF505-8R(SEQ ID NO:857、775、773、725、723、720、718)、M448R(SEQ ID NO:858、569、567)、D1133L(SEQ ID NO:859、298、296、288、286)、CP312R(SEQ ID NO:861、273、901、900、271、270)、A240L(SEQ ID NO:860、27、26)。
20.如权利要求16至17中任一项的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,或如权利要求18至19中任一项的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中所述免疫原性组合物或所述疫苗或所述医药组合物或所述任何所含有的免疫原性片段的免疫原性(和/或免疫反应)由经诱导的IFN-γ反应指示/表征,优选是由在猪科动物IFN-γELISpot分析中的经诱导的IFN-γ反应指示/表征,更优选是由在如实施例1中所描述的猪科动物IFN-γELISpot分析中的经诱导的IFN-γ反应指示/表征。
21.如权利要求16至17中任一项的非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段,或如权利要求18至19中任一项的编码非洲猪瘟病毒肽和/或多肽,优选是全长蛋白和/或其免疫原性片段的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,其中所述ASFV多肽为ASFV全长蛋白,优选是由含有以下,更优选是由以下组成的多核苷酸序列编码:任何可能的开放读码框(ORF);甚至更优选是由含有以下、最优选是由以下组成的多核苷酸序列编码:具有5'端起始密码子及3'端终止密码子的开放读码框(ORF)。
22.一种病毒或细菌载体,其优选是选自由以下组成的组:非洲猪瘟病毒载体、鸟类痘病毒载体、犬麻疹病毒载体、疱疹病毒载体、水痘病毒载体、劳森氏菌属、沙门氏菌属,所述病毒或细菌载体含有一种、两种、三种或更多种如权利要求18至19中任一项的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段。
23.一种载体,优选是表达载体,其含有一种、两种、三种或更多种如权利要求18至19中任一项的非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段。
24.如权利要求22的病毒或细菌载体或如权利要求23的载体,其含有三种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,优选是选自EP402R、CP312R及A240L(多重表位-I,ME-I),更优选是含有以下、最优选是由以下组成:选自由SEQ ID NO:855组成的组的核酸序列;或含有十三种非洲猪瘟病毒寡核苷酸和/或多核苷酸和/或其免疫原性片段,优选是选自D1133L、G1211R、M1249L、MGF505-9R、P1192R、CP2475L(p150)、B475L、EP424R、H339R、I226R、K145R、MGF505-1R及CP2475L(p37)(多重表位-II,ME-II),更优选是含有以下、最优选是由以下组成:选自由SEQ ID NO:856组成的组的核酸序列。
25.一种宿主细胞,优选是哺乳动物宿主细胞,其含有如权利要求22或24的病毒或细菌载体或如权利要求23-24中任一项的载体。
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