CN101711152A - MC-1R、MC-2R、和/或μ阿片样物质受体刺激作用 - Google Patents

MC-1R、MC-2R、和/或μ阿片样物质受体刺激作用 Download PDF

Info

Publication number
CN101711152A
CN101711152A CN200880019188A CN200880019188A CN101711152A CN 101711152 A CN101711152 A CN 101711152A CN 200880019188 A CN200880019188 A CN 200880019188A CN 200880019188 A CN200880019188 A CN 200880019188A CN 101711152 A CN101711152 A CN 101711152A
Authority
CN
China
Prior art keywords
skin
extract
opposing
improve
active substance
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN200880019188A
Other languages
English (en)
Other versions
CN101711152B (zh
Inventor
S·潘
C·德聚特
V·安德烈
C·雷梅尔米耶
I·奥利
E·佩里尔
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
BASF Beauty Care Solutions France SAS
Original Assignee
BASF Beauty Care Solutions France SAS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by BASF Beauty Care Solutions France SAS filed Critical BASF Beauty Care Solutions France SAS
Publication of CN101711152A publication Critical patent/CN101711152A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN101711152B publication Critical patent/CN101711152B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
    • A61K31/216—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acids having aromatic rings, e.g. benactizyne, clofibrate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/34—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having five-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom, e.g. isosorbide
    • A61K31/343—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having five-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom, e.g. isosorbide condensed with a carbocyclic ring, e.g. coumaran, bufuralol, befunolol, clobenfurol, amiodarone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/13—Coniferophyta (gymnosperms)
    • A61K36/14—Cupressaceae (Cypress family), e.g. juniper or cypress
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/24—Apocynaceae (Dogbane family), e.g. plumeria or periwinkle
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/28—Asteraceae or Compositae (Aster or Sunflower family), e.g. chamomile, feverfew, yarrow or echinacea
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/48—Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/53—Lamiaceae or Labiatae (Mint family), e.g. thyme, rosemary or lavender
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/73—Rosaceae (Rose family), e.g. strawberry, chokeberry, blackberry, pear or firethorn
    • A61K36/736—Prunus, e.g. plum, cherry, peach, apricot or almond
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/75—Rutaceae (Rue family)
    • A61K36/752—Citrus, e.g. lime, orange or lemon
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/88—Liliopsida (monocotyledons)
    • A61K36/888—Araceae (Arum family), e.g. caladium, calla lily or skunk cabbage
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/88—Liliopsida (monocotyledons)
    • A61K36/90—Smilacaceae (Catbrier family), e.g. greenbrier or sarsaparilla
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9755—Gymnosperms [Coniferophyta]
    • A61K8/9761—Cupressaceae [Cypress family], e.g. juniper or cypress
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A61K8/9789—Magnoliopsida [dicotyledons]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A61K8/9794—Liliopsida [monocotyledons]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/16—Emollients or protectives, e.g. against radiation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
    • A61K2236/333—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using mixed solvents, e.g. 70% EtOH

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明涉及在皮肤细胞中调节POMC基因产物的受体(MC-1R、MC-2R和μ阿片样物质受体)的表达、并可能地调节POMC的表达的活性物质，特别地涉及调节表皮细胞的增殖和分化，以再形成上皮、维持神经支配、滋养皮肤或抵抗衰老、或者独立地调节色素形成或皮肤不老化。本发明也涉及筛选此类活性物质的方法。

Description

MC-1R、MC-2R、和/或μ阿片样物质受体刺激作用
本发明涉及调节由POMC(阿黑皮素原)基因编码的神经介导受体的表达，并可能地调节相应神经介质的表达的活性组分。本发明还涉及组合物的用途，该组合物包含至少一种对POMC基因编码的神经介导受体在皮肤水平的表达有活性的物质，以及一种筛选此类活性组分的方法。
当前对本发明主题的认识：
皮肤具有感觉功能，因此是个体的信息最初来源。外周神经负责皮肤的神经支配，它们具有轴突，其细胞体沿着脊髓分布。皮肤神经支配包括，特别是包括，感觉神经和自主交感神经纤维。表皮游离神经末梢是唯一深入表皮内部的感觉纤维。皮肤细胞和皮肤神经间存在一种重要的交换。皮肤细胞合成大量作用于皮肤神经元的神经介质(旁分泌途径)。皮肤细胞还拥有与神经细胞和皮肤细胞自身释放的某些神经介质相对应的受体；因此皮肤细胞可以接受这些神经介质并对它们作出反应。
皮肤老化与皮肤细胞代谢失调有关，其特征为角质形成细胞增殖减少、角质形成细胞分化失调、死细胞堆积和皮肤神经支配减少。
α-MSH或α-促黑激素(α-MSH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、β促脂解素(β-LPH)和β内啡肽是阿黑皮素原(POMC)单基因产生的神经激素。它们主要在脑垂体中合成，但在许多外周组织如皮肤中也有发现(WintzenM，Yaar M，Burbach JP，Gilchrest BA.J Invest Dermatol(皮肤学研究杂志).1996年4月；106(4)：673-8)。POMC基因和蛋白质α-MSH、ACTH、β-LPH及β内啡肽由真皮细胞、成纤维细胞、朗格汉斯细胞、和表皮细胞、黑色素细胞和角质形成细胞表达。
与这些蛋白质对应的受体也由皮肤细胞表达。黑皮质素受体1(MC-1R或MCR-1)是α-MSH和ACTH的受体，黑皮质素受体2(MC-2R或MCR-2)是ACTH的受体，μ阿片样物质受体(μ阿片样物质R)是β内啡肽的受体。
在皮肤中，α-MSH、ACTH和β内啡肽抑制炎性细胞因子IL-1、TNFα和IL-10的合成，因此它们具有消炎特性。而且，这些细胞因子刺激神经激素的合成(Moustafa M，Szabo M，Ghanem GE，Morandini R，KempEH，MacNeil S，Haycock JW，《皮肤学研究杂志》(.J Invest Dermatol).2002年12月；119(6)：1244-53)。因此，皮肤内存在皮肤神经炎症的负反向控制。
已知α-MSH和ACTH可通过作用于其在黑色素细胞中的相应受体调节黑色素生成。α-MSH和ACTH是黑色素细胞增殖的诱导物。此外，已知β内啡肽具有促进黑色素细胞有丝分裂的作用，并能增加黑色素细胞的树突形成(Kauser S，Schallreuter KU，Thody AJ，Gummer C，TobinDJ，《皮肤学研究杂志》(J Invest Dermatol).2003年6月；120(6)：1073-80)。
已知α-MSH和ACTH也由角质形成细胞合成。这两种蛋白质诱导皮肤角质形成细胞的增殖和分化(Chakraborty AK，Funasaka Y，SlominskiA，Ermak G，Hwang J，Pawelek JM，Ichihashi M.，《生物化学与生物物理学学报》(Biochim Biophys Acta).1996年8月28日；1313(2)：130-8)。
皮肤的不同细胞(角质形成细胞、黑色素细胞和成纤维细胞)能够合成其他神经介质，例如神经生长因子(NGF)等神经营养因子。角质形成细胞和成纤维细胞产生NGF、TrkA和p75NTR的受体。通过与TrkA结合，NGF诱导这些细胞的增殖，以防角质形成细胞凋亡。众所周知，NGF可诱导神经元分化并使其存活；因此NGF在保持神经元密度方面起重要作用。此外，在小鼠中，背根神经节神经元内显示出POMCmRNA的存在，这表明黑皮质素系统，特别是α-MSH参与了外周神经修复。因此，α-MSH在神经营养机能中起一定作用(Gispen WH，Adan RA.，《纽约科学院院报》(Ann N Y Acad Sci.)1999年10月20日；885：342-9，van der KraanM，Tatro JB，Entwistle ML，Brakkee JH，Burbach JP，Adan PA，GispenWH.《大脑研究与分子脑研究》(Brain Res Mol Brain Res.)1999年1月8日；63(2)：276-86)。此外，已知β内啡肽和其衍生物通过与神经细胞的μ阿片样物质受体结合，可使人产生康乐感。
迄今为止，专业人员曾试图调节α-MSH或β内啡肽等神经介质的释放或模拟它们的功能，以影响皮肤的内环境稳定和/或改善皮肤的神经支配。
此外，专业人员一直试图通过不完全相当的不同代谢途径解决皮肤老化问题。但现在仍存在一些新途径亟待探索。
先前的一项专利申请WO2007/039058公开了将阿片样物质受体拮抗剂用于下调黑色素细胞中阿片样物质受体表达的总体用途。先前的另一项专利申请US2004/0214851公开了一种提高阿片样物质受体表达以用于诊断和/或治疗(仅用于受损组织)的方法。这些公开的内容未提供解决上下文中所述的皮肤老化的方法。
发明目的：
本发明人已经找到创造性方法，用于恢复皮肤神经支配或维持或促进皮肤细胞的内环境稳定，特别是一般的老化和色斑问题。
本发明还意图提供用于一种评估标准，用于评估皮肤美容学中的活性组分对皮肤的神经支配、皮肤内环境稳定和黑色素生成的影响。
本发明的主要目的是提供至少一种活性物质，特别是在皮肤水平，以：
-促进细胞内环境稳定，特别是促进角质形成细胞增殖，以允许上皮再形成，
-直接或间接恢复或维持皮肤的神经支配，以允许维持表皮的神经网络并获得康乐感，
-直接或间接恢复或维持血管生成，以维持令人满意的血液滋养，
-调节黑色素生成。
所有这些目的都是为了预防或抵抗皮肤老化和/或抵抗皮肤老化过程中观察到的应激诱导的变化的影响，例如光诱导的老化或时间生物学老化。
因此，本发明的一个目的是预防和/或抵抗皮肤属性的丧失，特别是表皮，以及预防和/或抵抗自然肤色的改变，特别是形成色斑，例如白斑或褐色斑。
本发明还意图提供一种物质，该物质允许对其他介质(参与皮肤的神经支配、血管形成和上皮形成)的合成的级联诱导。
本发明还意图提供一种物质，该物质可预防和/或抵抗皮肤水平的营养机能丧失。
本发明还意图提供上文所述的化妆品学和/或药学，特别是皮肤学领域中的一些活性物质。
本发明的一个特别目的是提供可局部地和/或营养保健地(neutraceutically)应用的活性物质，特别是至少一种植物提取物，其可能通过生物技术转化而来，或者至少一种已表征的分子。
对于生物技术，本发明指此过程包含至少一个在微生物的存在下进行的步骤。
发明概述：
在本发明人研究的用于缓和上述技术问题并实现本发明目的创新途径中，本发明人发现，非常有意思的是，可调节、且更优选地提高POMC基因编码的至少一种介质的至少一种受体在皮肤水平的表达。
鉴定活性组分的方法以诱导激素αMSH或β内啡肽的表达为基础，或以添加可模拟这些神经激素的作用的物质为基础，但这些物质不会以任何方式导致这些激素的受体的表达。
本发明人发现，在时间生物学的老化过程中，受体MC-1R、MC-2R和μ阿片样物质R的基因水平的表达减少了约4倍，角质形成细胞中POMC基因的表达增加了约5倍。此外，由于MC-1R和μ阿片样物质受体是由黑色素细胞表达的，因此可使用本发明的活性物质预防和/或抵抗皮肤老化和/或修饰皮肤的色素沉着。
本发明涉及调节MC-1R、MC-2R和μ阿片样物质R这三种受体中至少一种的表达的物质，特别是在皮肤水平的表达，以改善神经介质的影响，从而允许对参与皮肤神经支配、血管形成和上皮形成的其他介质的合成的级联诱导。
本发明涉及至少一种调节MC-1R、MC-2R和μ阿片样物质R这三种受体的基因中至少一种基因的表达的物质，特别是在皮肤水平的表达，以维持或促进皮肤水平的细胞内环境稳定，恢复皮肤的神经支配或血液滋养，并调节黑色素生成。
对于调节MC-1R、MC-2R或μ阿片样物质受体中的至少一种受体的表达，本发明人指调节(刺激或抑制，可能是部分刺激或抑制)分别编码蛋白质MC-1R、MC-2R或μ阿片样物质R的基因中的至少一种，并调节(刺激或抑制，可能是部分刺激或抑制)相应信使RNA对蛋白质MC-1R、MC-2R或μ阿片样物质受体中至少一种的合成，以及调节(刺激或抑制，可能是部分刺激或抑制)蛋白质MC-1R、MC-2R或μ阿片样物质R的活性。
对于刺激MC-1R、MC-2R或μ阿片样物质受体中的至少一种受体的表达，本发明人指刺激，可能是部分刺激，分别编码蛋白质MC-1R、MC-2R或μ阿片样物质R的基因中的至少一种，并刺激，可能是部分刺激，相应自信使RNA对蛋白质MC-1R、MC-2R或μ阿片样物质受体中至少一种的合成，以及刺激，可能是部分刺激，蛋白质MC-1R、MC-2R或μ阿片样物质R的活性。
对于抗衰老，优选刺激受体基因的表达约4倍。
对于抗衰老，优选刺激使蛋白质MC-1R、MC-2R或μ阿片样物质R的表达约5倍。
对于“恢复”一词，本发明人是针对某参数而言，是指此参数从低于或高于良好生理功能所需的水平恢复到更适合相关受试者的生理水平。
对于“产生康乐感”一词，本发明人指通过释放容易与μ-阿片样物质受体结合的β内啡肽产生的康乐感。
本发明特别涉及调节、且更优选地是刺激MC-1R基因和/或MC-2R基因和/或μ阿片样物质R基因的表达，和/或分别由这些基因编码的蛋白质的表达，特别是在人类中。
本发明还特别涉及调节POMC基因产物，以及MC-1R和/或MC-2R受体，和/或μ阿片样物质R，以提高受体-配体复合物的效用；因此也调节POMC基因表达的活性组分也是优选的。对于抵抗老化，可能使对POMC基因表达的抑制为约5倍来实现，但是根据本发明，优选维持或提高POMC基因表达，以增强神经介质的作用。对于黑色素生成，优选刺激或维持POMC基因的表达。
调节作用优选地足以实现对表达这些受体中的至少一种受体的目标皮肤细胞增殖和/或分化的刺激，和/或恢复，至少部分恢复皮肤的神经支配。
与对照模型(不接触活性组分)中MC-1R、MC-2R和/或μ阿片样物质受体的表达水平相比，能够使模型中这些受体基因的表达提高至少约1.2倍，优选至少约2倍，这种模型包含至少一种细胞类型，这种细胞类型与活性组分接触时会表达这些受体，这样的活性组分被认为能有效刺激或激活上述受体基因。
与对照模型(不接触活性组分)中MC-1R、MC-2R和/或μ阿片样物质受体的表达水平相比，能够使模型中这些蛋白质的表达提高至少约1.1倍，优选至少约1.2倍，这种模型包含至少一种细胞类型，这种细胞类型与活性组分接触时会表达这些受体，这样的活性组分被认为能有效刺激或激活上述受体的表达。
与对照模型(不接触活性组分)中MC-1R、MC-2R和/或μ阿片样物质R的表达水平相比，模型中这些基因的表达水平约低于或等于其0.95倍，优选0.8倍，这种模型包含至少一种细胞类型，这种细胞类型与活性组分接触时会表达这些受体，这样的活性组分被认为能有效抑制或降低上述受体的表达。
与对照模型(不接触活性组分)中MC-1R、MC-2R和/或μ阿片样物质R的表达水平相比，模型中这些基因的表达水平约低于或等于其0.95倍，优选0.8倍，这种模型包含至少一种细胞类型，这种细胞类型与活性组分接触时会表达这些受体，这样的活性组分被认为能有效抑制或降低上述受体的表达。
根据一种具体实施方法，优选激活或刺激MC-1R、MC-2R，和/或μ阿片样物质受体基因，和/或MC-1R、MC-2R和/或μ阿片样物质受体蛋白质的表达，并可能维持或刺激POMC基因和/或角质形成细胞中由POMC基因编码的神经介质。
根据另一种实施方法，这些被表达的受体中的至少一种在角质形成细胞中的表达增加，以减少炎症反应，特别是与这些皮肤细胞的过度增殖有关的一部分病理。
根据另一种具体实施方法，额外地对黑色素细胞中MC-1R和/或μ阿片样物质受体基因的表达，和/或MC-1R和/或μ阿片样物质受体蛋白质的表达，以及可能的POMC基因的表达和/或POMC基因编码的神经介质的表达进行了调节。
本发明的一方面涉及鉴定活性物质的方法，该物质能够调节至少一种活细胞的增殖和分化，这种细胞能够表达MC-1R、MC-2R和/或已表征的μ阿片样物质受体，其特征在于其包括：
-使至少一种能够表达MC-1R、MC-2R和/或μ阿片样物质受体，和可能表达POMC基因的活细胞接触这种活性物质；
-分析MC-1R、MC-2R和/或μ阿片样物质受体的表达，其特别目的是鉴定可调节、优选是刺激MC-1R、MC-2R和/或μ阿片样物质受体表达的活性物质。
优选通过对编码MC-1R、MC-2R和/或μ阿片样物质受体的核苷酸序列的表达进行定性和/或定量分析，来分析受体MC-1R、MC-2R和/或μ阿片样物质受体的基因表达。
RT-PCR优选包括用与SEQ ID No.1、2、3、4的序列互补的DNA核苷酸序列中的至少一部分杂交的引物扩增编码MC-1R、MC-2R和/或μ阿片样物质受体和可能编码POMC基因的核苷酸序列的至少一部分。
SEQ ID No1：MC-1R NM_002386
SEQ ID No2：MC-2RNM_000529
SEQ ID No3：μ阿片样物质受体NM_000914
SEQ ID No4：POMCNM_000939
所用的活细胞优选包括角质形成细胞和/或黑色素细胞，特别是提取自成年人类受试者特定部位(腹部、胸部等)的皮肤。优选使用所谓的“正常”细胞，即，例如非转化细胞(非转化的肿瘤细胞或非转化的转基因细胞)，具有显著代表性，可用于被研究对象组的细胞类型试验。
优选根据年龄进行分类，以建立年龄/基因关系和年龄/蛋白质合成关系。年轻受试者的年龄介于17至40岁之间；中年受试者的年龄介于40至50岁之间，超过50岁的为老年受试者。
鉴定方法优选包括一个分析蛋白质MC-1R(34.7kDa)、MC-2R(33.9kDa)和/或μ阿片样物质受体(44.8kDa)表达的步骤，该步骤通过这种方法进行，即，将凝胶中的蛋白质转移到硝酸纤维素膜上(蛋白质印迹法)，此方法特别用于检测当活性物质与上述活细胞接触时，对相应蛋白质表达的调节。
根据第一个优选的实施方法，可表达MC-1R、MC-2R和/或μ阿片样物质受体的活细胞类型为角质形成细胞。在这种情况中，所述活性细胞被发现可刺激或提高MC-1R、MC-2R和/或μ阿片样物质受体的表达，和可能降低POMC基因的表达。
根据第二个的实施方法，可表达MC-1R和/或μ阿片样物质受体的活细胞类型为黑色素细胞。在这种情况中，所述活性细胞被发现可调节MC-1R和/或μ阿片样物质受体的表达，和可能调节POMC基因的表达。
作用于角质形成细胞时，所述活性物质优选包括对NGF和VEGF合成的一种级联增加，并因此分别刺激神经支配(神经元密度和树突形成)和新血管生成。
本发明的第二个方面涉及上述活性物质的用途；即，该物质可根据上述筛选方法被确认为具有活性，可作为活性物质用于化妆用组合物或营养保健用组合物，或用于生产药物组合物，优选地是皮肤药组合物，特别用来调节，优选是刺激蛋白质MC-1R、MC-2R和/或μ阿片样物质受体的合成，特别地以用来诱导角质形成细胞增殖和/或分化和/或成熟。
本发明的第三方面涉及上述活性物质的用途，作为活性物质用于化妆用组合物或营养保健用组合物，或用于生产药物组合物，优选地是皮肤药组合物，特别用来预防和/或抵抗时间生物性皮肤老化或由日光导致的老化和/或抵抗在皮肤老化过程中观察到的应激作用诱导的变化，或预防和/或抵抗表皮内环境稳定减弱，或促进上皮形成，或改善细胞增殖和分化，特别是在表皮水平，或预防或抵抗皮肤血管形成的减少，或改善皮肤血管形成，或改善血管通透性过高，或改善皮肤结疤期间的血管生成，或预防和/或抵抗皮肤神经支配减弱，或改善皮肤神经支配，或产生一种康乐感，或改善肤色和/或色泽和/或调节皮肤色素形成，特别是当所述色素形成表现为局部瑕疵例如色素斑时。
本发明的第四方面涉及化妆用组合物或营养保健用组合物，用来预防和/或抵抗皮肤老化和/或抵抗在皮肤老化过程中观察到的应激作用诱导的变化，或预防和/或抵抗表皮内环境稳定减弱，或促进上皮形成，或改善细胞增殖和分化，特别是在表皮水平，或预防或抵抗皮肤血管形成的减少，或改善皮肤血管形成，或改善血管通透性过高，或改善皮肤结疤期间的血管生成，或预防和/或抵抗皮肤神经支配减弱，或改善皮肤神经支配，或产生一种康乐感，或改善肤色和/或色泽和/或调节皮肤色素形成，特别是当所述色素形成表现为局部瑕疵例如色素斑时；上述组合物包含作为活性成分的活性物质，如之前描述的，可能与之前描述的物质组合使用。
本发明的第五方面涉及药物组合物，特别用来预防和/或抵抗皮肤老化或抵抗在皮肤老化过程中观察到的应激作用诱导的变化，或预防和/或抵抗表皮内环境稳定减弱，或促进上皮形成，或改善细胞增殖和分化，特别是在表皮水平，或预防和/或抵抗皮肤血管形成的减少，或改善血管通透性过高，或改善皮肤结疤期间的血管生成，或预防或抵抗皮肤神经支配减弱，或改善皮肤神经支配，或产生一种康乐感，或改善肤色和/或色泽和/或调节皮肤色素形成，特别是当所述色素形成表现为局部瑕疵例如色素斑时；上述组合物包含作为活性成分的活性物质，如之前描述的，可能与之前描述的物质组合使用。
本发明的第六方面涉及一种化妆性护理方法，其特征在于，将上述化妆用组合物或上述活性物质用于皮肤以获得改善的美化效果。
由专业人员通过简单的常规做法确定所述活性物质的有效量。
本发明还涉及预防性处理或治疗性处理的方法，作为上述全部目的和应用的一部分。
发明详细说明：
本发明人已首次表明了在时间生物性皮肤老化过程中受体MC-1R、MC-2R和μ阿片样物质R的表达会降低，特别是当这些受体由人类皮肤的角质形成细胞表达时。
本发明人还首次确定了在时间生物性皮肤老化过程中POMC基因表达的提高，特别是在人类皮肤角质形成细胞中。
因此本发明人制定了角质形成细胞中的筛选方法，用以寻找活性物质，特别是植物提取物或已表征的化学分子或通过生物技术转化而来的分子中的活性物质，这些活性物质可刺激，特别是编码受体MC-1R、MC-2R和μ阿片样物质R的mRNA的表达，和可能维持、刺激或抑制编码神经介质(由POMC基因编码)的mRNA的表达。然后试验所选活性物质对mRNA的相应蛋白质表达的作用。
本发明还表征了角质形成细胞中MC-1R、MC-2R和μ阿片样物质受体表达的特性。之前，仅确认过角质形成细胞中MC-2R的mRNA(Moustafa M，Szabo M，Ghanem GE，Morandini R，Kemp EH，MacNellS，Haycock JW.，Invest Dermatol.2002年12月；119(6)：1244-53)，因此本发明人最先确认了角质形成细胞中的蛋白质MC-2R，并指出ACTH不仅通过与角质形成细胞中的MC-1R结合发挥活性，还与MC-2R结合以发挥活性。
因此，本发明描述了物质的用途，所述物质刺激编码神经介质(由POMC基因编码)受体的基因中的至少一种基因的表达，该受体优选选自至少一种皮肤细胞类型中的MC-1R、MC-2R和μ阿片样物质R，这种皮肤细胞可表达这些受体中的至少一种。本发明描述了物质作为活性物质的用途，用于组合物的制备，以刺激选自α-MSH、ACTH和β-内啡肽中的一种神经介质与其相应受体间的至少一种相互作用。
已经将所选活性物质用于化妆用组合物、营养保健用组合物和药物组合物中，优选是皮肤药组合物，特别用于预防和/或抵抗表皮变薄，特别是时间生物性或光诱导的皮肤老化过程中的表皮变薄。
上述物质优选能够提高或刺激编码神经介质(由POMC基因编码)的受体的基因的表达，以抵抗或预防角质形成细胞中配体和受体间平衡的失调。
上述物质优选能够降低POMC基因的表达，以抵抗或预防在角质形成细胞中分别观察到的配体和受体平衡表达的失调，特别是在老化过程中。
上述物质优选能组合使用，以抑制POMC基因的表达和刺激受体基因的表达。
上述物质优选能提高或维持POMC基因的表达以提高α-MSH、ACTH和β-内啡肽的上述作用。
幸运的是，上述物质提高了角质形成细胞中由POMC基因编码的神经介质的至少一种受体的表达，可以预防和/或抵抗皮肤老化或应激作用引起的各种变化，如皮肤老化过程中所观察到的变化。
因此，本发明涉及调节这些受体，优选是刺激这些受体，特别是以减轻失调，尤其是减少α-MSH、和/或ACTH、和/或β-内啡肽与其相应受体的相互作用，其中所述相互作用与细胞老化有关，并影响角质形成细胞。
上述物质优选能增加NGF的合成，从而可能增加外周神经在皮肤水平的生长。因此本发明涉及下述物质的用途，该物质允许皮肤神经支配的增加，其中所述的皮肤神经支配被观察到在老化过程中或应激作用引起的变化中减少，正如在皮肤老化过程中所观察到的。
上述物质优选能增加VEGF的合成，从而可能增加皮肤水平的血管形成。因此本发明涉及下述物质的用途，该物质可使皮肤得到更好的滋养，其中所述的皮肤滋养被观察到在老化过程中或应激作用引起的变化中减少，正如在皮肤老化过程中所观察到的。
能刺激角质形成细胞中MC-1R和/或MC-2R和/或μ阿片样物质受体表达的物质优选选自：
4种已表征的分子：
-苯乙酸3，6，9-三甲基-2，7-二氧-2，3，3a，4，5，7，9a，9b-八氢-薁并[4，5-b]呋喃-4-基，
-Z-十氢-6，8a-二羟基-1-异丙基-3a，6-二甲基薁-5-基-2-甲基丁-2-烯酸酯
-2，6二甲基-4(2-甲基丁烯酸酯)5-6(1-异丙基-1-羟基环戊烷))1，2环氧环庚烷(CAS号352220-52-1)及其酯，
-特别是7-乙酸酯-2，6二甲基-4(2-甲基丁烯酸酯)5-6(1-异丙基-1-羟基环戊烷))1，2环氧环庚烷，已知其CAS号为86992-41-8，其通用名为lapiferrin；
以及含有此类已表征的分子的植物提取物。
6种植物提取物：淡黄鼬瓣花(Galeopsis ochroleuca)(野生大麻)、普通欧蓍草(Achillea millefolium)、野生芋头(Colocasia esculenta)、欧洲酸樱桃(Prunus cerasus)、黑刺李(Prunus spinosa)、长春布宁提取物(夹竹桃科(Apocynacea)Amsonia Abrenaemontan)；
4种生物技术水解产物，通过用现有微生物发酵植物提取物获得：用乳酸细菌特别是乳杆菌，例如胚芽乳杆菌(lactobacillus plantarum)，转化芒果、海枣或番木瓜的提取物，或用乳酸细菌特别是乳杆菌，例如副干酪乳杆菌(lactobacillus paracasei)，转化的香蕉提取物；和它们的混合物。
在这些已表征的分子中，lapiferin，特别是多石阿魏(Ferula lapidosa)提取物中的，或来自多石阿魏提取物的，以及苯乙酸3，6，9-三甲基-2，7-二氧-2，3，3a，4，5，7，9a，9b-八氢-薁并[4，5-b]呋喃-4-基是本发明的优选物质。
在植物提取物中，普通欧蓍草(Achillea millefolium)和黑刺李(Prunusspinosa)是本发明的优选物质。
根据一个优选实施方式，所述植物提取物优选通过将植物(优选是根、根状茎、茎、皮、花、果实、种子、胚芽或叶)浸泡于1-10％(p/p)(通常为1-5％)的一种溶剂中或溶剂混合物中获得，通常为水和醇、二醇或多元醇(例如乙醇、甘油、丁二醇和其他二醇、木糖醇等)的混合物，其比例为100/0至0/100，优选浸泡于水中。最后将获得的提取物过滤或蒸馏，以回收可溶部分，将此部分过滤，优选用0.45μm的滤膜。用于发酵植物提取物以获得生物技术水解产物的微生物通常来自乳酸细菌属，特别是胚芽乳杆菌或副干酪乳杆菌，和双歧杆菌属(bifidobacterium)，特别是长双歧杆菌(bifidobacterium longum)，或酵母属(Saccharomyces)。优选对这些水解产物进行进一步过滤，优选用0.45μm的滤膜，以获得活性组分。
通过溶解于溶剂中制备所述已表征的分子(包括lapiferin和苯乙酸3，6，9-三甲基-2，7-二氧-2，3，3a，4，5，7，9a，9b-八氢-薁并[4，5-b]呋喃-4-基)，这种溶剂通常为DMSO、乙醇、二醇，特别是溶解于浓度为0.1％的DMSO中。
上述活性物质用于化妆用组合物时，对于植物提取物和生物技术水解产物，其含量优选介于0.01％至5％(v/v)，对于已表征的分子，其含量介于1.10-7％至1％(v/v)，优选介于1.10-5％至1.10-1％。
本发明特别涉及一种用于化妆护理或预防性处理或治疗性处理的组合物，用于改善皮肤结疤期间的通透性过高，改善细胞增殖和分化，特别是在表皮水平，从而改善皮肤上皮形成，促进维持皮肤神经支配。
上述物质还表现出对神经细胞中的MC-1R和/或MC-2R和/或μ阿片样物质受体表达的刺激作用，特别是在皮肤神经网络中。
上述活性物质有利地与下列其他活性物质组合使用：
-刺激皮肤神经营养机能和/或活化敏感皮肤神经的活性组分，例如专利申请FR 2825273所引用的组分，红椒(Capsicum annuum)的提取物、红色素(红辣椒)、或胡椒(Piper nigrum)、或谷氨酰胺基乙基吲哚(Exsymol)；
-具有模拟β内啡肽效果的活性组分，以改善皮肤的屏障功能，例如专利申请US 2006069032所引用的组分，可可豆壳提取物；
-刺激β内啡肽合成的活性组分，可使人获得康乐感，例如Tephroline，来自植物灰毛豆(tephrosia purpurea)(Soliance)；
-刺激细胞增殖和/或细胞分化的活性组分，具有抗老化活性，例如下列分子：NGF、α-MSH、β内啡肽、或衍生物，例如专利申请FR 2857874中所述的物质，P3-内啡肽。
-保护成纤维细胞生长因子(特别是FGF2)不被降解的活性组分，例如申请人提交并公布的GB 244036专利申请中所述的植物提取物，特别是黄葵(Hibiscus Abelmoscus)提取物；
-刺激成纤维细胞活动和/或增殖的活性组分，例如发酵大豆多肽，这是申请人以PhytokineTM这一商品名销售的产品，可与黄葵提取物组合使用；
-刺激透明质酸酶合酶(Hyaluronase synthase)，特别是透明质酸酶合酶2的活性组分，如专利FR2893252所述；
-刺激赖氨酰氧化酶(例如LOXL)活性和/或合成的活性组分，例如专利FR2855968所述的组分，特别是用于刺激弹性纤维生成的莳萝提取物。
-具有消炎特性(例如抑制PLA2)的活性组分，特别是专利FR2847267中所述的组分，特别是野葛根提取物
Figure G2008800191887D00141
-可改变肤色的活性物质，例如用于亮化和/或美白皮肤的活性组分；
-具有消除浮肿特性的活性物质，例如橙皮素月桂酸酯或五羟黄酮辛酸酯
Figure G2008800191887D00143
此外，上述活性物质刺激MC-1R和/或MC-2R和/或μ阿片样物质受体的表达，优选地在角质形成细胞中，可与另一种活性物质组合使用，该物质调节，优选地提高或降低下列至少一种受体的表达，即黑色素细胞表达的MC-1R和μ阿片样物质受体，和/或调节由黑色素细胞表达的POMC基因的表达。此实施方式的目标在于改善肤色和/或色泽和/或调节皮肤色素形成，特别是当所述色素形成表现为局部瑕疵例如色素斑时，以预防和/或抵抗与老化有关或无关的特定色素点的色素沉着或色素脱失，如下文所述。
本发明人还研究出了一种用于黑色素细胞的筛选方法，用以寻找活性物质，特别是植物提取物或已表征的化学分子或通过生物技术转化而来的分子等活性物质，特别用来调节编码MC-1R和μ阿片样物质R的mRNA的表达，和可能调节编码神经介质(由POMC基因编码)的mRNA的表达。然后试验依此选出的活性物质对mRNA的相应蛋白质表达的作用。
已经将所选活性物质用于化妆用组合物、营养保健用组合物和药物组合物中，优选是皮肤药制剂，特别用于预防和/或抵抗色素沉着或色素脱失。
上述物质优选可调节黑色素细胞中由POMC基因编码的一种神经介质的至少一种受体的表达，以预防或抵抗色素沉着或色素脱失。
上述物质优选可调节POMC基因的表达，以预防或抵抗色素沉着或色素脱失；特别是，保留可同时刺激黑色素细胞中的POMC和受体的物质以增加色素沉着并保留可同时减少或抑制黑色素细胞中的POMC和受体的物质以减少色素沉着。这些物质可组合使用以刺激POMC表达和/或受体表达并增加色素沉着或抑制POMC和受体并减少色素沉着。
根据一个实施方式，可刺激黑色素细胞中MC-1R和/或μ阿片样物质受体中至少一种的表达和/或刺激POMC表达的物质可为下列物质：
-一种已表征的分子：1-甲基-β-咔啉-3-羧酸；
-下列植物提取物：大豆粉、(红色)菝葜(salsaparilla)(丽花菝葜(Smilax ornata))、普通欧蓍草(Achillea millefolium)、Cecropia obtusa、月见草(Oenothera biennis)、胡萝卜提取物、绵马、欧洲酸樱桃、或它们的任何混合物，以及；
-通过用现有微生物发酵植物提取物获得的生物技术水解产物，选自：发酵的酵母或羽扇豆，特别是用乳酸细菌发酵的，例如胚芽乳杆菌；用乳酸细菌转化的番木瓜、海枣或大豆的提取物，特别是用乳杆菌转化的，例如胚芽乳杆菌；用双歧杆菌例如长双歧杆菌发酵的柠檬提取物；和它们的任何混合物。
根据本发明，上述可刺激MC-1R和/或MC-2R和/或μ阿片样物质受体表达的活性物质与上述可刺激黑色素细胞表达的MC-1R和/或μ阿片样物质受体和/或POMC物质的组合使用可增加皮肤色素沉着，具有增黑作用，以预防和/或抵抗与老化有关或无关的色素脱失斑点。
根据第二实施方式，降低黑色素细胞中POMC基因表达的物质可为淡黄鼬瓣花(Galeopsis ochroleuca)(野生大麻)以及欧刺柏(Juniperuscommunis)(杜松子)的水提取物或水醇提取物，并且/或者可降低黑色素细胞中MC-1R和/或μ阿片样物质受体中至少一种的表达的物质为欧刺柏(杜松子)的水提取物或水醇提取物。根据本发明，上述可刺激MC-1R和/或MC-2R和/或μ阿片样物质受体的活性物质与上述可减少黑色素细胞表达的MC-1R和/或μ阿片样物质受体和/或减少黑色素细胞中的POMC基因的物质的组合使用可减少皮肤色素沉着，具有亮白作用，以提高肤色亮度，预防和/或抵抗与老化有关或无关的色素沉着点。
本发明特别涉及一种用于化妆品或皮肤化妆护理或预防性处理或治疗性处理的组合物，用来改变皮肤亮度以及色素沉着，特别是与老化有关或无关的色素点。
本发明的化合物被制成局部用组合物的形式，特别是化妆用组合物或药物组合物，优选是可用于皮肤的皮肤用组合物。因此，对于这些组合物，赋形剂包括例如下列至少一种，包括防腐剂、软化剂、乳化剂、表面活性剂、保湿剂、增稠剂、调节剂、消光处理剂、稳定剂、抗氧化剂、调质剂、闪光剂、成膜剂、增溶剂、色素、染料、香料和遮光剂。这些赋形剂优选氨基酸和其衍生物、聚甘油类、酯类、聚合物和纤维素衍生物、羊毛脂衍生物、磷脂类、乳铁蛋白、乳过氧化物酶、基于蔗糖的稳定剂、维生素E和其衍生物、天然和合成蜡、植物油、甘油三酯、不可皂化物、植物固醇类、植物酯类、硅氧烷和其衍生物、蛋白水解产物、荷荷芭油和其衍生物、脂溶性/水溶性酯、甜菜碱类、胺化物、蔗糖酯植物提取物、二氧化钛、甘氨酸、对羟苯甲酸酯，更优选丁二醇、硬脂醇聚醚-2、硬脂醇聚醚-21、乙二醇-15硬脂基醚、十六/十八醇、苯氧乙醇、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、丁二醇、天然生育酚、甘油、二羟基十六烷基磷酸钠、羟基十六烷基异丙醚、硬脂酸乙二醇酯、三异壬酸甘油酯、椰油酸辛酯、聚丙烯酰胺、异链烷烃、月桂基聚氧乙烯(7)醚、卡波姆、丙二醇、甘油、没药醇、聚二甲基硅氧烷、氢氧化钠、PEG 30-二聚羟基硬脂酸、癸酸/辛酸甘油三酯、十六/十八醇辛酸酯、己二酸二丁酯、葡萄籽油、荷荷芭油、硫酸镁、EDTA、环状聚二甲基硅氧烷、黄原酸胶、柠檬酸、十二烷基硫酸钠、矿物蜡和矿物油、异硬脂醇异硬脂酸酯、丙二醇二壬酸、丙二醇异硬脂酸酯、PEG 8、蜂蜡、氢化棕榈仁油甘油酯、羊毛脂油、芝麻油、鲸蜡醇乳酸酯、羊毛脂醇、二氧化钛、乳糖、蔗糖、低密度聚乙烯和等渗盐水。
上述化合物理想地制成下列剂型，包括水溶液或基于油的溶液、基于水的乳膏或凝胶或油性凝胶，特别是瓶装或管装，特别是沐浴液、香波、乳液、乳剂、微乳剂或纳米乳剂，特别是水包油或油包水或各种基于硅氧烷的；润肤液，特别是玻璃瓶装或塑料瓶装或喷雾装、吸塑装、液体皂、皮肤用皂、香膏剂、泡沫剂、一种无水产品，优选液体、乳膏剂或固体，例如棒状的，特别是唇膏。
本文使用的“局部应用”一词指将本发明的组合物用于或喷在皮肤表面。
本文使用的“可用于皮肤”一词表示所用化合物适合与人的皮肤接触，不会产生不必要的毒性、不相容性、不稳定性、过敏反应或其等同状况。
专业人员将许多活性化妆品成分用于改善皮肤健康和/或外观。这些专业人员知道怎样配制这些化妆品或皮肤组合物以获得最佳效果。此外，本发明所述的化合物与其他物质组合使用时具有协同作用。这些组合使用也在本发明范围内。《CFTA化妆品成分手册第二版》(CFTA CosmeticIngredient Handbook Second Edition)(1992)描述了化妆品和药品行业目前常用的特别适合局部应用的各种化妆品和药品成分。这类成分的一些实例包括但不限于下列化合物：研磨剂、吸收剂化合物、具有美化目的化合物例如香水、色素、染料、精油、收敛剂等(例如，丁香油、薄荷脑、樟脑、桉树油、丁香酚、乳酸甲酯、金缕梅精馏液)，祛痘剂、抗絮凝剂、消沫剂、抗菌剂(例如：碘代丙烷基丁基氨基甲酸酯)、抗氧化剂、粘合剂、生物添加剂、吸湿剂、膨胀剂、螯合剂、添加剂、杀菌剂、变性剂、外部止痛剂、成膜材料、聚合物、乳浊剂、pH调节剂、还原剂、褪色或澄清剂(例如，对苯二酚、曲酸、抗坏血酸、磷酸抗坏血酸酯镁盐、抗坏血酸葡萄糖胺)、调节剂(例如：保湿剂)、皮肤舒缓及和/或抗疤痕剂(例如：泛醇和其衍生物，例如：乙基泛醇)、芦荟、泛酸和其衍生物、尿囊素、没药醇和甘草酸二钾盐、增稠剂、维生素和其衍生物或等同物。
附图简述：
在图中：
图1显示了老化过程中人体活组织切片中角质形成细胞中的受体MC-1R、MC-2R和/或μ阿片样物质受体基因表达的显著降低。
图2显示了通过对人体正常皮肤的活组织切片部分进行免疫荧光检查观察到的微管蛋白βIII和200神经丝蛋白表达的显著降低。
图3和4分别显示了年龄介于15至75岁的受试者的微管蛋白βIII和200神经丝蛋白相对表达率。
图5和6分别显示了与图3和4中的研究相对应的统计分析。
当阅读解释性描述时，这些描述涉及仅用于说明目的且不以任何方式限制本发明领域的实施例，本发明的其他目的、特性和益处对本领域技术人员而言是显而易见的。
这些实施例是本发明不可或缺的一部分，对于本文所述的与任何先前技术相比的任何新特性，其整体包括实施例，均为构成本发明功能及一般方面完整性的一部分。
因此，每个实施例都具有一般范围。
实施例
实施例1：通过免疫组织学阐示人体活组织切片上的蛋白质MC-1R、MC-2R和μ阿片样物质受体的表达水平在老化过程中的降低
发明人已经证明了取自年轻女性(年龄低于40岁)和老年女性(年龄超过50岁)的活组织切片中MC-1R、MC-2R和μ阿片样物质受体的蛋白质水平的表达在时间生物性老化过程中的变化。(见图1：取自30或60岁人类患者的人体活组织切片中的受体表达-免疫组织化学结果)
此研究用免疫组织学方法进行。由于使用了以下抗体：抗-MC-1R(1/500)、抗-MC-2R(1/200)和抗-μ阿片样物质受体(1/1000)，从而得以明确证明。
将重建的皮肤模型(
Figure G2008800191887D00191
Coletica，里昂，法国)和活组织切片制成冷冻横切片，或者然后用石蜡密封，用于免疫标记。
所用抗体为：抗-MC-1R、抗-MC-2R和抗-μ阿片样物质受体(ChemiconInternational公司)。用合适的经缀合的二次抗体进行检测。
结果见图1，结果证明了老化过程中角质形成细胞中的受体MC-1R、MC-2R和μ阿片样物质R的基因水平的表达降低。
实施例2：通过实时RT-PCR方法阐示在老化过程中成年人角质形成细胞中MC-1R、MC-2R和μ阿片样物质受体基因表达水平的降低和POMC基因表达水平的提高
本发明还涉及人类活组织切片中的角质形成细胞的受体MC-1R、MC-2R和μ阿片样物质R基因表达和POMC基因表达水平在时间生物性老化过程中的变化。用实时RT-PCR(逆转录酶聚合酶定量链式反应)分析这四种目标基因及肌动蛋白基因的表达。此技术通过将一种基因与肌动蛋白基因的表达(视为常数)进行对比，对这种基因表达进行精确定量。从而对此基因表达水平的调节进行定量。
将总RNA用“SV 96总RNA分离系统”试剂盒(Promega，Charbonnieres，法国)提纯总RNA。将纯化的RNA在100μl无RNA酶的水(Promega，Charbonnieres，法国)中制成悬液，测定后分到两个板中(96孔微量滴定板，10μl总RNA(5ng/μl每PCR))。此项目中选用的引物如表1所示：
表1：
  肌动蛋白有义(SEQ ID No5)肌动蛋白反义(SEQ ID No6)   GTGGGGCGCCCCAGGCACCACTCCTTAATGTCACGCACGATTTC
  MC-1R有义(SEQ ID No7)MC-1R反义(SEQ ID No8)   GGGCTCTGAGAACGACTTTTCCGGGCTCCTGTCTGGTTGG
  MC-2R有义(SEQ ID No9)MC-2R反义(SEQ ID No10)   TCACGTCGCTGTTCCCGCTGATAAGAGAGACATGTAGCAGGCGCAGTA
  μ阿片样物质受体有义(SEQ ID No11)μ阿片样物质受体反义(SEQ ID No12)   CTCAGCCAGGACTGGTTTCTGTAAGATCGGACAGGTTGCCATCTAAGTG
  POMC有义(SEQ ID No13)POMC反义(SEQ ID No14)   CGCCCAGTGAAGGTGTACCCGGCGTCTGGCTCTTCTCGGAGGTC
在OPTICON温度循环器中用“Quanti Tect SYBR Green RT-PCR”试剂盒(Qiagen，法国)对含mRNA的板实施实时RT-PCR技术，进行扩增循环。在50℃逆转录(RT)30分钟，然后在95℃保持15分钟，以抑制逆转录酶，激活聚合酶，变性获得的互补DNA(cDNA)。进行50个循环的序列聚合反应(PCR)(95℃15秒，60℃30秒，72℃30秒)。每个循环结束时，读取荧光值，该值与片段数成比例。用每个基因的表达水平与肌动蛋白表达水平之比定义表达水平。
发明人表明年龄超过52岁的女性中MC-1R基因的表达比年轻女性的低4倍，该值具有统计显著性。
发明人表明年龄超过5岁的女性中MC-2R基因的表达比年轻女性的低8倍，该值具有统计显著性。
发明人表明年龄超过55岁的女性中μ阿片样物质受体基因的表达比年轻女性的低6.5倍，该值具有统计显著性。
发明人表明年龄超过50岁的女性中POMC基因的表达比年轻女性的高5倍，该值具有统计显著性。
总之，本发明允许人体角质形成细胞中的受体及其配体表达间的平衡出现扰动，以支持配体增多和所有受体减少。
实施例3：分析受体MC-1R、MC-2R和μ阿片样物质R的信使RNA和POMC的mRNAs的表达，例如在使角质形成细胞与活性组分接触或不与其接触的条件下通过定量RT-PCR进行分析
本发明特别涉及一种筛选新分子的方法，此分子可诱导3种受体MC-1R、MC-2R和/或μ阿片样物质受体的合成，以恢复重建皮肤，恢复人体皮肤活组织切片中的老化角质形成细胞中相关受体的生理表达，这种生理表达可在年轻皮肤中的角质形成细胞中观察到。
所述活性组分具有不同来源(例如植物或合成分子)。
特别是，所述植物提取物通过将植物(优选根、根状茎、茎、皮、花、果实、种子、胚芽或叶)浸泡于1-10％(p/p)(通常为1-5％)的一种溶剂中或溶剂混合物中获得，通常为水和醇、二醇或多元醇(例如乙醇、甘油、丁二醇和其他二醇、木糖醇等)的混合物，其比例为100/0至0/100，优选浸泡于水中。然后将获得的提取物过滤或蒸馏，以回收可溶部分，将此部分过滤，优选0.45μm的滤膜。在微生物存在下通过发酵植物提取物获得生物技术水解产物，其中所述微生物通常来自乳酸细菌属，特别是胚芽乳杆菌或副干酪乳杆菌，和双歧杆菌属，特别是长双歧杆菌；或酵母菌。然后对这些水解产物进行进一步过滤，优选0.45μm的滤膜，以获得活性组分。
通过溶解于溶剂中制备所述已表征的分子，所述溶剂通常为DMSO、乙醇、二醇，特别是溶解于浓度为0.1％的DMSO中。
将活性组分溶于培养环境中，然后对角质形成细胞进行试验：对于植物提取物和生物技术水解产物，其含量通常介于0.1％至2％(v/v)，特别是介于0.5％至1％，对于已表征的分子，通常介于0.001％至0.01％(v/v)。在本实施例的培养环境中，对于植物提取物和生物技术水解产物，采用的是1％的含量，对于已表征的分子，采用的是0.01％的含量。
通过酶消化从正常成年人的整形手术中获取角质形成细胞，在用于角质形成细胞的特定环境中使该角质形成细胞增殖，然后接种(例如每平方厘米50000个)到24孔板中，然后在严格无血清环境中在单层板中进行培养。汇合后，将细胞与用培养基稀释的活性物质接触，通常接触24小时。
用未处理的对照样品(仅培养基)和3个阳性对照样品(1ng/mlTGF-β，50pg/ml IL-1α和100ng/ml TNF-α)进行平行试验，例如在同一个培养板上。先前已试验1ng/ml TGF-β，100ng/ml TNF-α和50pg/mlIL-1α这三个样，通过分析mRNA(例如通过定量RT-PCR，对于这3种诱导剂用x2或x.08)，已经验证这三种浓度的细胞因子对3种受体的mRNA合成的刺激作用.
将细胞与活性物质接触后，例如接触24小时后，移去培养环境，保存细胞，例如先用pH 7.4的磷酸盐溶液漂洗，然后在-80℃冷冻干燥。提取总RNA，例如用二氧化硅柱96-孔提取试剂盒，然后分到96-孔分光光度计上，在260nm处进行测定(纯度指标：280nm处蛋白质的量)。将RNA稀释，例如稀释到5ng/μl。进行第1步中的定量RT-PCR，例如在96-孔板上对50ng初始RNA进行，对肌动蛋白、MC-1R、MC-2R、μ阿片样物质R和POMC基因进行。使用每种基因的特定引物，例如0.5μM，见上表1中的明确说明。
扩增的各项参数如下：在OPTICON温度循环器中用“Quanti TectSYBR Green RT-PCR”试剂盒(Qiagen，法国)对含mRNA的板实施实时RT-PCR技术，进行扩增循环。在50℃逆转录(RT)30分钟，然后在95℃保持15分钟，以抑制逆转录酶，激活聚合酶，变性获得的互补DNA(cDNA)。顺序进行50个循环的聚合(PCR)(95℃15秒，60℃30秒，72℃30秒)。每个循环结束时，读取荧光值，该值与扩增的片段数成比例。用每个基因的表达水平与肌动蛋白基因表达水平之比定义表达水平。
基因MC-1R、MC-2R、μ阿片样物质受体和POMC的表达水平用与阴性对照(未处理)进行比较得出的变化百分数表示。作为受试物的这些活性物质如下表II所示：
表II
名称(拉丁名) 植物部位 MC-1R对照×： MC-2R对照×：   μ阿片样物质R对照×： POMC对照×：
  普通欧蓍草(Achilleamillefolium) 植物 2.73 3.0 23.0 3.38
  淡黄鼬瓣花(Galeopsisochroleuca) 植物 2.9 1.0 1.0 1
  野生芋头(Colocasiaesculenta) 块茎 2.0 1.0 24.0 1
名称(拉丁名) 植物部位 MC-1R对照×： MC-2R对照×：   μ阿片样物质R对照×： POMC对照×：
  欧洲酸樱桃(Prunuscerasus) 茎 1.0 1.0 5.3 2.6
  月见草(Oenotherabiennis) 种子 0.67 1.0 1.0 0.36
  黑刺李(Prunus spinosa)   果实   1.0   2.3   6.0   1
  (Z)-十氢-6，8a-二羟基-1-异丙基-3a，6-二甲基薁-5-基-2-甲基丁-2-烯酸酯 分子 1.0 18.5 1.0 1
  苯基乙酸-3，6，9-三甲基-2，7-二氧-2，3，3a，4，5，7，9a，9b-八氢-薁并[4，5-b]呋喃-4-基 分子 20.0 20.0 1.0 1
  芒果胚芽乳杆菌   果实   1.0   10   3   0.4
  海枣胚芽乳杆菌   果实   1.0   1   60   1
  番木瓜乳酸细菌   果实   1.1   4   5   0.6
  香蕉乳酸细菌   果实   1.2   10   42   0.4
  Lapiferin   分子   1.0   2.8   4.0   1.0
“对照×”指“对照乘以”
结论：960种中的13种活性物质在所考虑的条件下可显著提高角质形成细胞中编码MC-1R、MC-2R或μ阿片样物质R的基因的mRNA的表达率。此外，4种活性物质特别抑制了POMC基因的表达。
实施例4：分析受体MC-1R和μ阿片样物质R的信使RNA的表达，例如在使黑色素细胞与活性组分接触或不与其接触的条件下通过定量RT-PCR进行
除了细胞培养以外，此实验的其他实验条件与上一个实施例相同。
通过酶消化从正常成人的整形手术中获取黑色素细胞，在黑色素细胞特定的环境中使黑色素细胞增殖，然后接种(例如每平方厘米50000个)到24孔板中，然后在黑色素细胞特定的环境中培养。汇合后，将细胞与用培养基稀释的活性物质接触，通常接触24小时。
表III
名称(拉丁名) 植物部位 MC-1R对照×： μ阿片样物质R对照×： POMC对照×；
 普通欧蓍草(Achilleamillefolium) 植物 1.0 1.0 4.3
 淡黄鼬瓣花(Galeopsisoch roleuca) 植物 1.0 1.0 0.47
 月见草(Oenothera biennis)   种子   4.0   1.0   1.96
 1-甲基-β咔啉-3-羧酸   1.0   1.0   3.3
 酵母乳酸细菌 1.0 1 2.18
 柠檬长双歧杆菌   1.0   1.0   2.18
 菝葜(丽花菝葜(Smilax   根   3.9   1.0   2.74
  ornata))
名称(拉丁名) 植物部位 MC-1R对照×： μ阿片样物质R对照×： POMC对照×；
  欧刺柏(Juniperuscommunis) 果实 0.4 1.0 0.25
  Cecropia obtusia   芽   3.2   1.0   2.18
  番木瓜乳酸细菌   2.58   1.0   1.0
  胡萝卜   果实   1.97   1.0   1.0
  酸樱桃   果实   2.0   1.0   1.0
  羽扇豆胚芽乳杆菌   1.0   1.0   2.15
  大豆粉   //   1.0   1.0   2.42
  海枣胚芽乳杆菌   果实   3.23   1.0   1.0
  大豆胚芽乳杆菌   2.0   1.0   1.0
“对照×”指“对照乘以”
结论：10种活性物质提高了黑色素细胞中MC-1R基因的表达；9种活性物质提高了POMC基因的表达，并且2种活性物质降低了黑色素细胞中POMC基因的表达。
实施例5：检测活性组分作用后角质形成细胞中的MC-1R、MC-2R和μ阿片样物质受体蛋白
分别用下列商业化的多克隆抗体通过电泳确定蛋白质MC-1R、MC-2R和μ阿片样物质受体的特性：OPA1-15013(Affinity生物试剂)、AB5128(Chemicon International)和AB5511(Chemicon International)。
在K-SFM环境中在含5％CO2的大气中在37℃培养细胞，K-SFM(Invitrogen)中含BPE(25mg)、EGF(2.5μg)和normocin。
用PBS溶液洗细胞，在4℃在蛋白酶抑制剂的存在下用裂解液(Tris50mM，NaCl 250mM，pH 7.5，1％triton)提取30分钟，提取出蛋白质。将裂解产物离心分离(15分钟，13,000g)。在β-巯基乙醇存在下用Laemmli溶液稀释漂浮物，然后电泳。
将蛋白质在4-12％SDS-聚丙烯酰胺凝胶中电泳分离，用于免疫检测。将所得蛋白质转移到硝酸纤维素膜(Biorad)上。然后在室温下将膜浸于含3％BSA的TBS溶液中，浸一小时。在4℃将一抗培养过夜，然后在室温下用偶联了Alexa 488(invitrogen)的二抗对上述蛋白质进行免疫检测，时间为1小时。
上述抗体以如下稀释度使用：5μg/mL抗-MC-1R、5μg/mL抗-MC-2R和1/1000抗-μ阿片样物质R。
通过图像分析进行半定量化。作为受试物的这些活性物质如下表IV所示：
表IV
名称 植物部位： MC-2R对照×： μ阿片样物质R对照×：
普通欧蓍草   植物   18.2   2.81
淡黄鼬瓣花   植物   1.0   2.54
野生芋头   块茎   1.0   1.52
欧洲酸樱桃   茎   1.0   1.44
月见草   种子   1.0   1.46
黑刺李   果实   8.26   2.02
(Z)-十氢-6，8a-二羟基-1-异丙基-3a，6-二甲基薁-5-基-2-甲基丁-2-烯酸酯 1.99 1.37
苯乙酸3，6，9-三甲基-2，7-二氧-2，3，3a，4，5，7，9a，9b-八氢薁并[4，5-b]呋喃-4-基 1.96 1.66
“对照×”指“对照乘以”
结论：通过蛋白质水平的提高证实了在基因水平所观察到的由活性物质诱导的提高。淡黄鼬瓣花、月见草和两种已表征的分子虽然未提高μ阿片样物质R基因的表达，但是诱导了其蛋白质表达的提高。
实施例6：人体活组织切片中βIII微管蛋白和神经丝蛋白200的免疫检测
发明人已通过免疫荧光法表明在时间生物性老化过程中，微管蛋白βIII和神经丝蛋白200在神经生物性老化过程中会减少(图2)。发明人选择了这两种标记物用于检测皮肤中轴突延长的存在。标记物微管蛋白βIII可用于对细胞核数量和神经网络密度进行定量化，标记物神经丝蛋白200更适于指示成熟的神经网络。通过对80位年龄介于17岁至75岁的女性的乳房造影法活组织切片进行的免疫荧光学检查，发明人已证实超过38岁的女性的微管蛋白βIII的表达要低3.7倍，神经丝蛋白200的表达则低3.5倍。上述抗体使用下列稀释度：1∶500(抗-微管蛋白βIII)和1∶500(抗-神经丝蛋白200)。用结合了ALEXA 594的抗小鼠IgG(山羊)，稀释到1∶100来检测免疫复合物。
图2显示了通过免疫荧光法对人体正常皮肤中的微管蛋白βIII和神经丝蛋白200进行的检测。
所谓的年轻受试者(26岁)中微管蛋白βIII的免疫检测见图A，所谓老年受试者(56岁)中微管蛋白βIII的免疫检测见图B。所谓的年轻受试者(26岁)中神经丝蛋白200的免疫检测见图C，所谓的老年受试者(56岁)中神经丝蛋白200的免疫检测见图D。用白线表示真皮-表皮的交界处。每个图左上方的方块表示使用对照同型抗体的阴性对照。
图3和4分别显示了年龄介于15至75岁的受试者的微管蛋白βIII和神经丝蛋白200的相对表达率。红色箭头表示曲线转折点。
图5和6分别显示了与图3和4中的研究相对应的统计分析。结果显示，年轻受试者中βIII微管蛋白和神经丝蛋白200的表达比38岁受试者中的分别高3.7和3.5倍。所得结果代表了平均±SD，t检验的p值＝0.05。
实施例7：角质形成细胞培养中的漂浮物分泌的NGF和VEGF的量
将老年受试者的角质形成细胞进行培养，将细胞与活性物质接触一段时间，例如24小时，然后恢复环境，用ELISA技术检测角质形成细胞分泌的NGF或VEGF。所用方法与研发系统提供者(DY256)用于NGF的方法和Clinisciences(KHG0112)用于VEGF的方案一致。在受试活性物质中，下列受试活性物质表现出了最强的调节作用，特别是对NGF的调节作用，如表V所示。
表V
植物 植物部分   NGF对照乘以
  普通欧蓍草   植物   11.28
  欧洲酸樱桃   茎   17.8
  淡黄鼬瓣花   植物   11.24
实施例8：在存活的人体活组织切片中βIII微管蛋白和神经丝蛋白200的免疫检测
在DMEM培养基中，在存在或不存在NGF或活性组分的条件下，从成人整形手术中获得的活组织切片，维持存活4天。然后将活组织切片冷冻，进行免疫荧光学研究，以鉴定神经元标记物，特别是实施例6中所述的物质。
实施例9：重建的皮肤模型中的分化和增殖标记物的免疫检测
此模型结合了重建真皮的培养和在此基础上进行的重建表皮的补充培养。
采用下列方案创建重建的真皮模型：
-将0.5至1.106人体正常皮肤成纤维细胞接种到胶原蛋白基基底基质上，通常为糖胺聚糖壳聚糖，然后在营养性培养基中培养，例如DMEM-Glutamax，其中补充了10％小牛血清、抗坏血酸最终浓度优选1mM、EGF(表皮生长因子)最终浓度优选10ng/mL、和Normocin最终浓度优选100μg/mL，培养21天。
采用下列方案创建重建的皮肤模型：
-将0.5至1.106人体正常角质形成细胞接种到真皮替代物上，然后在营养性培养基中培养，例如DMEM-Glutamax/Ham F-12(比例3/1v/v)，其中补充了小牛血清、抗坏血酸最终浓度优选1mM、EGF(表皮生长因子)最终浓度优选10ng/mL、氢化可的松最终浓度优选0.4μg/mL、umuline最终浓度优选0.12UI/mL、异丙肾上腺素最终浓度优选0.4μg/mL、三碘甲状腺原氨酸最终浓度优选2.10-9M、腺嘌呤最终浓度优选24.3μg/mL、和Normocin最终浓度优选100μg/mL。在浸泡条件下培养7天。将培养物置于气-液界面处再培养14天，所用培养基与浸泡培养时的培养环境相同，除了小牛血清、氢化可的松、异丙肾上腺素、三碘甲状腺原氨酸和umuline之外。
然后在Boulin固定液(LOX、LOXL、弹力蛋白)或10％甲醛溶液(用于弹力蛋白)中制备重建皮肤(
Figure G2008800191887D00291
Coletica，里昂，法国)，然后用石蜡密封，用于免疫组织化学研究，或直接用液氮冷冻，用于免疫荧光分析。从石蜡中取出6μm厚的切片，在甘氨酸-HCl(100mmol/l)中漂白。在第45天对重建皮肤进行Ki67(增殖标记物)、角蛋白14(所有细胞层的标记物)、角蛋白10(上基部的角质形成细胞层标记物)、内披蛋白、转谷氨酰胺酶、巢蛋白免疫检测。
实施例10：组合使用本发明产品和现有的专利分子
可以将本发明产品与特别是可刺激对敏感皮肤神经起作用的皮肤神经营养机能的提取物组合使用，例如红椒提取物(甜椒)和/或红色素(红辣椒)和/或胡椒(L′OREAL FR2825273)，和/或谷氨酰胺基乙基吲哚(Exsymol)。
可将本发明产品与模拟β内啡肽作用以改善皮肤屏障功能的提取物组合使用，例如可可豆壳提取物(L′OREAL US2006069032)。
还可将本发明产品与活化β内啡肽以产生康乐感的提取物组合使用，例如Tephrosia purpurea(灰毛豆)提取物。
还可将本发明产品与其他分子或其衍生物组合使用，对于其他分子，例如α-MSH、β内啡肽，对于其衍生物，例如P3内啡肽和精油，以刺激角质形成细胞分化，以获得NGF的抗老化作用(CODIF FR2857874)，从而影响神经营养机能。
实施例11：将本发明产品用于水包油乳剂型化妆品或药物制剂的配方
配方11a：
Figure G2008800191887D00301
配方11b：
Figure G2008800191887D00302
配方11c：
Figure G2008800191887D00321
实施例12：将本发明产品用于油包水型配方
Figure G2008800191887D00322
实施例13：将本发明产品用于香波或沐浴凝胶型配方
Figure G2008800191887D00331
实施例14：将本发明产品用于唇膏型或其他无水产品的配方
Figure G2008800191887D00332
Figure G2008800191887D00341
实施例15：将本发明产品用于水凝胶(眼霜、减肥霜等)的配方
Figure G2008800191887D00342
实施例16：将本发明产品用于三重乳液型配方
初级乳W1/O
Figure G2008800191887D00343
Figure G2008800191887D00351
二级乳W1/O/W2
实施例17：含有本发明产品的药物剂型的制备
配方17a：丸剂的制备
＊例如，按照实施例3中描述的提取过程，然后干燥，即可获得本发明产品。
配方17b：香膏剂的制备
Figure G2008800191887D00362
＊例如，按照实施例3中描述的提取过程，然后干燥，即可获得本发明产品。
配方17c：可注射制剂的制备
Figure G2008800191887D00363
＊例如，按照实施例3中描述的提取过程，然后干燥，即可获得本发明产品。

Claims (17)

1.刺激由POMC基因编码的神经介质的受体在至少一种类型的皮肤细胞中表达的至少一种物质的用途，用作化妆用组合物中的活性成分，或者作为活性成分用于制备营养保健用组合物，其中所述受体选自MC-1R、MC-2R和μ阿片样物质R，所述至少一种类型的皮肤细胞表达至少一种这些受体和POMC基因产物。
2.根据权利要求1所述的至少一种物质的用途，其中所述物质也调节、优选地提高或维持POMC表达。
3.根据权利要求1或2所述的用途，用来刺激所述受体的表达以增加α-MSH和/或ACTH和/或β内啡肽的美容效果。
4.刺激选自MC-1R和MC-2R的受体在角质形成细胞中表达的至少一种物质的用途，用于制备药物组合物，特别是皮肤药组合物。
5.在角质形成细胞中刺激选自MC-1R、MC-2R和μ阿片样物质R的受体的表达和调节、优选地提高或维持POMC表达的至少一种物质的用途，用于制备药物组合物，特别是皮肤药组合物。
6.根据前述权利要求中任一项所述的用途，用于抵抗或预防α-MSH和/或ACTH和/或β内啡肽效果的失调。
7.根据前述权利要求中任一项所述的用途，其中皮肤细胞为角质形成细胞。
8.根据前述权利要求中任一项所述的用途，用于预防或抵抗皮肤老化和/或抵抗在皮肤老化过程中观察到的应激作用诱导的变化，和/或预防和/或抵抗表皮内环境稳定减弱，和/或促进上皮形成，和/或改善细胞增殖和分化，特别是在表皮水平，和/或预防或抵抗皮肤血管形成的减少，和/或改善皮肤血管形成，和/或改善血管的通透性过高，和/或改善皮肤结疤期间的血管生成，和/或预防和/或抵抗皮肤神经支配减弱，或改善皮肤神经支配，或产生康乐感，和/或改善肤色和/或调节皮肤色素形成，特别是当所述色素形成表现为局部瑕疵例如色素斑时。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的用途，其特征在于，所述物质选自：
-普通欧蓍草植物(Achillea millefolium)的提取物；
-黑刺李(Prunus spinosa)的提取物；
-欧洲酸樱桃(Prunus cerasus)的提取物；
-野生芋头(Colocasia esculenta)的提取物；
-野生大麻(淡黄鼬瓣花(Galeopsis ochroleuca))的提取物；
-长春布宁提取物(夹竹桃科(Apocynacea)AmsoniaAbrenaemontan)；
-(Z)-十氢-6，8a-二羟基-1-异丙基-3a，6-二甲基薁-5-基-2-甲基丁2-烯酸酯；
-苯乙酸-3，6，9-三甲基-2，7-二氧-2，3，3a，4，5，7，9a，9b-八氢薁并[4，5-b]呋喃-4-基；
-CAS号352220-52-1下的2，6-二甲基-4(2-甲基丁烯酸酯)-5-6-(1-异丙基-1-羟基环戊烷))-1，2-环氧环庚烷和/或其酯
-已知在CAS号86992-41-8下的7-乙酸酯-2，6-二甲基-4(2-甲基丁烯酸酯)-5-6-(1-异丙基-1-羟基环戊烷))-1，2-环氧环庚烷
-用乳杆菌(lactobacillus)转化的芒果提取物
-用乳杆菌转化的海枣提取物
-用乳酸细菌转化的番木瓜提取物
-用乳酸细菌转化的香蕉提取物
-和它们的任何混合物。
10.选自以下的物质的用途：
-普通欧蓍草植物(Achillea millefolium)的提取物；
-黑刺李(Prunus spinosa)的提取物；
-欧洲酸樱桃(Prunus cerasus)的提取物；
-野生芋头(Colocasia esculenta)的提取物；
-野生大麻(淡黄鼬瓣花(Galeopsis ochroleuca))的提取物；
-长春布宁提取物(夹竹桃科(Apocynacea)AmsoniaAbrenaemontan)；
-(Z)-十氢-6，8a-二羟基-1-异丙基-3a，6-二甲基薁-5-基-2-甲基丁-2-烯酸酯；
-苯乙酸-3，6，9-三甲基-2，7-二氧-2，3，3a，4，5，7，9a，9b-八氢薁并[4，5-b]呋喃-4-基；
-CAS号352220-52-1下的2，6-二甲基-4(2-甲基丁烯酸酯)-5-6-(1-异丙基-1-羟基环戊烷))-1，2-环氧环庚烷和/或其酯
-已知在CAS号86992-41-8下的7-乙酸酯-2，6-二甲基-4(2-甲基丁烯酸酯)-5-6-(1-异丙基-1-羟基环戊烷))-1，2-环氧环庚烷
-用乳杆菌转化的芒果提取物
-用乳杆菌转化的海枣提取物
-用乳酸细菌转化的番木瓜提取物
-用乳酸细菌转化的香蕉提取物
-和它们的任何混合物，
用于预防或抵抗皮肤老化和/或抵抗在皮肤老化过程中观察到的应激作用诱导的变化，和/或预防和/或抵抗表皮内环境稳定减弱，和/或促进上皮形成，和/或改善细胞增殖和分化，特别是在表皮水平，和/或预防或抵抗皮肤血管形成的减少，和/或改善皮肤血管形成，和/或改善血管的通透性过高，和/或改善皮肤结疤期间的血管生成，和/或预防和/或抵抗皮肤神经支配减弱，或改善皮肤神经支配，或产生康乐感，和/或改善肤色和/或调节皮肤色素形成，特别是当所述色素形成表现为局部瑕疵例如色素斑时。
11.根据权利要求1至10中任一项所述的用途，用于与另外的物质一起使用，其中所述另外的物质提高或降低由黑色素细胞表达的、选自MC-1R和μ阿片样物质受体的至少一种受体的表达，并可能调节POMC基因的表达，以改善肤色和/或调节皮肤色素形成，特别是当所述色素形成表现为局部瑕疵例如色素斑时。
12.根据权利要求11的用途，其中所述另外的物质选自：
-1-甲基-β-咔啉-3-羧酸；
-乳酸细菌发酵的酵母，
-双歧杆菌(bifidobacterium)发酵的柠檬提取物，
-乳酸细菌发酵的番木瓜提取物，
-乳酸细菌发酵的羽扇豆提取物，
-乳酸细菌发酵的大豆提取物，
-乳酸细菌发酵的海枣提取物，
-大豆粉提取物，
-菝葜(丽花菝葜(Smilax ornata))的提取物，
-Cecropia obtusa提取物，
-普通欧蓍草(Achillea millefolium)的提取物，
-月见草(Oenothera biennis)的提取物，
-胡萝卜提取物，
-绵马提取物，
-欧洲酸樱桃(Prunus cerasus)的提取物，
-欧刺柏(Juniperus communis)(杜松子)的水提取物或水醇提取物，
-淡黄鼬瓣花(Galeopsis ochroleuca)的提取物
-月见草(Oenothera biennis)的提取物
-和它们的任何混合物。
13.根据前述权利要求中任一项所述的用途，其特征在于，所述物质用于与选自以下的另外的活性组分组合使用：
-刺激角质形成细胞增殖和/或分化的活性物质，旨在具有抗老化作用；
-模拟β内啡肽的作用以改善皮肤屏障功能的活性物质；
-刺激皮肤神经营养机能的活性物质；
-诱导康乐感的活性物质；
-允许改变肤色的活性物质，
-刺激成纤维细胞活性和/或增殖的活性物质
-具有消炎特性的活性物质，特别是抑制磷脂酶A2的酶活性，
-保护成纤维细胞生长因子特别是FGF2不被降解的活性物质，
-刺激透明质酸酶合酶，特别是透明质酸酶合酶2的活性物质，
-刺激赖氨酰氧化酶例如LOXL的活性和/或合成的活性物质，
-具有消除浮肿特性的活性物质，
-和它们的任何组合。
14.化妆用组合物或皮肤化妆用组合物或营养保健用组合物，用来预防和/或抵抗皮肤老化和/或抵抗在皮肤老化过程中观察到的应激作用诱导的变化，或预防和/或抵抗表皮内环境稳定减弱，或促进上皮形成，或改善细胞增殖和分化，特别是在表皮水平，或预防或抵抗皮肤血管形成的减少，或改善皮肤血管形成，或改善血管通透性过高，或改善皮肤结疤期间的血管生成，或预防和/或抵抗皮肤神经支配减弱，或改善皮肤神经支配，或产生康乐感，或改善肤色和/或调节皮肤色素形成，特别是当所述色素形成表现为局部瑕疵例如色素斑时；所述组合物包含作为活性成分的活性物质，如权利要求9或10中定义的活性物质，可能地与如权利要求11至13中任一项所述的物质组合。
15.药物组合物，优选地用于预防和/或抵抗皮肤老化和/或抵抗在皮肤老化过程中观察到的应激作用诱导的变化，或预防和/或抵抗表皮内环境稳定减弱，或促进上皮形成，或改善细胞增殖和分化，特别是在表皮水平，或预防或抵抗皮肤血管形成的减少，或改善皮肤血管形成，或改善血管通透性过高，或改善皮肤结疤期间的血管生成，或预防和/或抵抗皮肤神经支配减弱，或改善皮肤神经支配，或产生康乐感，或改善肤色和/或调节皮肤色素形成，特别是当所述色素形成表现为局部瑕疵例如色素斑时；所述组合物包含作为活性成分的活性物质，如权利要求9或10中定义的活性物质，可能地与如权利要求11至13中任一项所述的物质组合。
16.美容护理方法，包括将权利要求9或10中定义的物质应用于皮肤上，用于改善的美容效果，可能地与权利要求11至13中任一项所述的物质组合。
17.核苷酸序列，其具有下列序列中的一种序列：
GGGCTCTGAGAACGACTTTT(MC-1R有义-SEQ ID No7)；
CCGGGCTCCTGTCTGGTTGG(MC-1R反义-SEQ ID No8)；
TCACGTCGCTGTTCCCGCTGAT(MC-2R有义-SEQ ID No9)；
AAGAGAGACATGTAGCAGGCGCAGTA(MC-2R反义-SEQ IDNo10)；
CTCAGCCAGGACTGGTTTCTGTAAGA(μ阿片样物质受体有义-SEQ ID No11)；
TCGGACAGGTTGCCATCTAAGTG(μ阿片样物质受体反义-SEQID No12)；
CGCCCAGTGAAGGTGTACCC(POMC有义-SEQ ID No13)；和
GGCGTCTGGCTCTTCTCGGAGGTC(POMC反义-SEQ ID No14)。
CN2008800191887A 2007-06-06 2008-06-06 MC-1R、MC-2R、和/或μ阿片样物质受体刺激作用 Active CN101711152B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR0755529 2007-06-06
FR0755529A FR2916977A1 (fr) 2007-06-06 2007-06-06 STIMULATION DE LA SYNTHESE DES RECPTEURS MCR1, MCR2 ET µ OPIOIDE.
PCT/EP2008/057129 WO2008148891A2 (en) 2007-06-06 2008-06-06 MC-1R, MC-2R, AND/OR µ OPIOID RECEPTORS STIMULATION

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN101711152A true CN101711152A (zh) 2010-05-19
CN101711152B CN101711152B (zh) 2013-09-11

Family

ID=38961885

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2008800191887A Active CN101711152B (zh) 2007-06-06 2008-06-06 MC-1R、MC-2R、和/或μ阿片样物质受体刺激作用
CN200880101954A Pending CN101772349A (zh) 2007-06-06 2008-06-06 MC-1R、MC-2R和μ阿片样物质受体的调节

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN200880101954A Pending CN101772349A (zh) 2007-06-06 2008-06-06 MC-1R、MC-2R和μ阿片样物质受体的调节

Country Status (9)

Country Link
US (2) US20100272699A1 (zh)
EP (3) EP2574332A1 (zh)
JP (4) JP5686597B2 (zh)
KR (3) KR20100040836A (zh)
CN (2) CN101711152B (zh)
BR (2) BRPI0813897A2 (zh)
ES (1) ES2730836T3 (zh)
FR (1) FR2916977A1 (zh)
WO (2) WO2008148892A2 (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106146445A (zh) * 2015-04-27 2016-11-23 中国人民解放军第二军医大学 蒿属植物奇蒿中单体去氢母菊内酯酮的提取方法及其应用

Families Citing this family (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2916977A1 (fr) * 2007-06-06 2008-12-12 Engelhard Lyon Sa STIMULATION DE LA SYNTHESE DES RECPTEURS MCR1, MCR2 ET µ OPIOIDE.
CN101999999B (zh) * 2009-09-01 2012-02-01 珈侬生化科技(中国)有限公司 西伯利亚刺柏活性提取物的制法及美白抗衰老活性化妆品
CN101691596B (zh) * 2009-10-15 2012-02-29 哈尔滨商业大学 水解大豆蛋白产生外啡肽的方法
FR2999930A1 (fr) * 2012-12-21 2014-06-27 Oreal Utilisation de microorganismes probiotiques comme agent favorisant la synthese de melanine
FR2999931A1 (fr) * 2012-12-21 2014-06-27 Oreal Utilisation de microorganismes probiotiques comme agent favorisant la synthese de melanine
FR2999933B1 (fr) * 2012-12-21 2020-01-31 Société des Produits Nestlé S.A. Utilisation de microorganismes probiotiques comme agent favorisant la synthese de melanine
FR2999932B1 (fr) * 2012-12-21 2020-01-31 Société des Produits Nestlé S.A. Utilisation de microorganismes probiotiques comme agent favorisant la synthese de melanine
FR3000488B1 (fr) 2012-12-27 2015-10-02 Basf Beauty Care Solutions F Nouveaux derives de l'acide sinapique et leurs utilisations cosmetiques ou pharmaceutiques
FR3004348A1 (fr) * 2013-04-11 2014-10-17 Limousine D Applic Biolog Soc Ind Utilisation d'activateurs de l'autophagie des cellules cutanees pour favoriser la longevite cellulaire et tissulaire de la peau
JP2014062136A (ja) * 2014-01-17 2014-04-10 Oriza Yuka Kk メラニン生成抑制剤
AU2015217846B2 (en) * 2014-01-30 2019-10-10 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Opioid receptor binding agents and uses thereof
JP5629841B1 (ja) * 2014-08-06 2014-11-26 大高酵素株式会社 発酵化粧料の製造方法及び乳酸菌菌株
US10093960B2 (en) 2015-07-24 2018-10-09 Molecular Devices, Llc Luminescence measurement of biological samples utilizing dual reagents
AU2017240068B2 (en) 2016-03-31 2022-12-15 Gojo Industries, Inc. Antimicrobial peptide stimulating cleansing composition
JP2019510036A (ja) 2016-03-31 2019-04-11 ゴジョ・インダストリーズ・インコーポレイテッド プロバイオティクス／プレバイオティクス有効成分を含む清浄剤組成物
CA3043748A1 (en) 2016-11-23 2018-05-31 Gojo Industries, Inc. Sanitizer composition with probiotic/prebiotic active ingredient
EA201992529A1 (ru) 2017-07-12 2020-06-02 Юнилевер Н.В. Подвергнутая сублимационной сушке композиция активного вещества и система для ее применения
IT201700089680A1 (it) * 2017-08-03 2019-02-03 Giuliani Spa Composizione sinergica come promoter di autofagia/a synergistic composition as a promoter of autophagy
FR3075646B1 (fr) * 2017-12-21 2019-12-20 Robertet S.A. Utilisation d'absolue en cosmetique pour depigmenter la peau
CN113402506B (zh) * 2021-06-17 2023-06-16 四川大学 中间体和制备方法及其在合成长春布宁上的应用
CN113867252A (zh) * 2021-10-13 2021-12-31 南京凌华微电子科技有限公司 一种吸尘器测试用plc数据采集处理方法及装置

Family Cites Families (68)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NL17479C (zh) 1924-12-08 1928-01-16
US3522350A (en) * 1969-11-10 1970-07-28 Arthur Goldberg Process for extracting an anti-inflammatory and anti - irritant principle from yarrow and the product produced thereby
IT1120139B (it) * 1979-12-04 1986-03-19 Kibarska Totka Agente antirughe procedimento per prepararlo e preparato cosmetico antirughe contenente detto agente
FR2557452B1 (fr) * 1983-12-28 1986-08-14 Roussel Uclaf Nouvelles compositions pour les soins de la peau renfermant de l'huile d'onagre et des traits tissulaires de rate
DE3504355A1 (de) * 1984-02-10 1985-08-14 Szilasmenti MGTSZ, Kerepestarcsa Mittel zur regenerierung der haut
FR2578422B1 (fr) * 1985-03-05 1987-06-26 Cariel Leon Composition de traitement a usage topique externe a base de luteoline et procede de preparation
LU85863A1 (fr) * 1985-04-22 1986-11-05 Oreal Composition cosmetique pour le traitement des cheveux,notamment des cheveux gras,a base d'un extrait de millefeuille(achilea millefolium l)
US5057502A (en) * 1987-06-02 1991-10-15 Walsh William E Composition and topical and systemic treatments of conditions caused by heavy, oily or greasy secretions
CN1102090A (zh) * 1993-10-23 1995-05-03 中国科学院大连化学物理研究所 以月见草油为原料制取的化妆品
US5932779A (en) * 1996-06-10 1999-08-03 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Screening methods for compounds useful in the regulation of body weight
WO1998005294A1 (en) * 1996-08-02 1998-02-12 Plum Kemi Produktion A/S An oil-in-water emulsion for use on human skin for cleansing, preserving or improving the condition of the skin
JPH11158053A (ja) * 1997-12-01 1999-06-15 Nippon Shinyaku Co Ltd 化粧料
JPH11246336A (ja) * 1998-02-27 1999-09-14 Ichimaru Pharcos Co Ltd 活性酸素消去剤及び美肌化粧料組成物
AU9369198A (en) * 1998-09-30 2000-04-17 Industrial Research Limited Antioxidant compositions and process for their preparation
JP3522609B2 (ja) * 1999-10-14 2004-04-26 株式会社ノエビア ヒアルロン酸産生促進剤、及びこれを含有して成る皮膚外用剤
JP2001233725A (ja) * 2000-02-23 2001-08-28 Shin Nippon Yakugyou Kk ツキミソウ由来ポリフェノール化合物を含有する化粧料組成物
JP2001302440A (ja) * 2000-04-17 2001-10-31 Masaaki Okubo 化粧料
JP2001335497A (ja) * 2000-05-25 2001-12-04 Kose Corp 皮膚外用剤および皮膚外用剤組成物
JP2002020225A (ja) * 2000-07-10 2002-01-23 Naris Cosmetics Co Ltd 保湿組成物
JP4402278B2 (ja) * 2000-10-27 2010-01-20 日本メナード化粧品株式会社 美白化粧料
FR2817747B1 (fr) * 2000-12-11 2004-12-03 Oreal Utilisation d'au moins une sapogenine, ou d'un extrait naturel en contenant, pour prevenir les signes du vieillissement cutane
JP2002193783A (ja) * 2000-12-27 2002-07-10 Kanebo Ltd 化粧料組成物
JP2002205950A (ja) * 2001-01-10 2002-07-23 Ichimaru Pharcos Co Ltd エラスターゼ活性阻害剤及び化粧料組成物
FR2825273B1 (fr) * 2001-05-29 2006-11-24 Oreal Composition pour le traitement des signes cutanes du vieillissement
DE20112636U1 (de) * 2001-07-31 2002-01-10 Kundic Sida Pastöse Masse zur Pflege der Haut
US20030110518A1 (en) * 2001-09-28 2003-06-12 Houseknecht Karen L. Melanocortin-5 receptor sequences and uses thereof
JP2003113066A (ja) * 2001-10-01 2003-04-18 Ai Corporation:Kk 化粧料
JP2003192568A (ja) * 2001-12-27 2003-07-09 Nonogawa Shoji Kk 芳香化粧料組成物
JP2003212770A (ja) * 2002-01-22 2003-07-30 Ichimaru Pharcos Co Ltd メイラード反応阻害剤
US20030186249A1 (en) * 2002-04-01 2003-10-02 Zairen Sun Human TARPP genes and polypeptides
JP3908126B2 (ja) * 2002-08-30 2007-04-25 株式会社ナリス化粧品 表皮角化正常化剤及びこれを含有する皮膚外用剤
JP3544541B2 (ja) * 2002-10-04 2004-07-21 株式会社アイデアる 堆肥切断攪拌装置
JP2004137233A (ja) * 2002-10-21 2004-05-13 Kose Corp 老化防止剤及びそれを用いた皮膚外用剤
FR2847267B1 (fr) 2002-11-19 2006-07-28 Coletica Procede de test de l'activite d'une substance potentiellement active pour inhiber l'activite enzymatique de la phospholipase a2
KR100513082B1 (ko) * 2002-11-27 2005-09-07 나드리화장품주식회사 세라마이드 및 식물복합추출액을 포함하는 세라리포좀함유 화장료 조성물
JP2004196669A (ja) * 2002-12-16 2004-07-15 Kose Corp メラノサイト増殖抑制剤及びそれを含有する皮膚外用剤
WO2004096144A2 (en) * 2003-04-28 2004-11-11 3M Innovative Properties Company Compositions and methods for induction of opioid receptors
TW200512007A (en) * 2003-05-30 2005-04-01 Fullerene Internat Corp Cosmetic compositions containing fullerene clusters
FR2855968B1 (fr) 2003-06-13 2012-11-30 Coletica Stimulation de la synthese et de l'activite d'une isoforme de la lysyl oxydase-like loxl pour stimuler la formation de fibres elastiques
JP2005008539A (ja) * 2003-06-17 2005-01-13 Fancl Corp マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤
US20050036974A1 (en) 2003-07-17 2005-02-17 L'oreal Beta-endorphin activity in cosmetics and dermatology
FR2857874A1 (fr) 2003-07-21 2005-01-28 Courtage Et De Diffusion Codif Utilisation dans des produits cosmetiques de principes actifs en vue de reguler la proliferation et la differenciation des keratinocytes de l'epiderme
US8278350B2 (en) * 2003-10-14 2012-10-02 Showa Denko K.K. Agent for skin external use containing salt of ascorbic acid derivative, method for stabilizing the agent for skin external use, and stabilizer
US20060233739A1 (en) * 2003-11-24 2006-10-19 Thornfeldt Carl R Treatment of mucocutaneous disorders through reversing chronic imflammation and barrier disruption
CA2548123C (en) * 2003-12-15 2012-05-22 Kuraray Co., Ltd. External preparation for skin
ES2235642B2 (es) * 2003-12-18 2006-03-01 Gat Formulation Gmbh Proceso de multi-microencapsulacion continuo para la mejora de la estabilidad y almacenamiento de ingredientes biologicamente activos.
BG65694B1 (bg) * 2003-12-31 2009-07-31 Владимир НАЙДЕНОВ Средство за лечение на дерматози
JP4569312B2 (ja) * 2004-02-25 2010-10-27 大正製薬株式会社 美白剤
FR2867476B1 (fr) * 2004-03-11 2006-05-26 Michel Prost Derives de genkwanine et sakuranetine, utilisation cosmetique et therapeutique, et procede de preparation
DE102004049062A1 (de) * 2004-03-30 2005-10-13 bitop Aktiengesellschaft für biotechnische Optimierung Topische Zubereitung zur Anwendung auf der Haut enthaltend natürliches Öl der Nachtkerze (Oenothera biennis) (=Oleum Oenothera) und Osmolyte aus extremophilen Mikroorganismen
US20050220744A1 (en) * 2004-03-31 2005-10-06 Showa Denko K.K. Polysaccharide/functional compound complex
JP2005314286A (ja) * 2004-04-28 2005-11-10 Zenzaburo Hara 美白化粧料
JP2006001837A (ja) * 2004-06-15 2006-01-05 Nonogawa Shoji Kk オピオイドレセプター傷害抑制剤
DE102004038728A1 (de) * 2004-08-10 2006-03-02 Merck Patent Gmbh Flavonoid-Komplexe
JP2006076927A (ja) * 2004-09-09 2006-03-23 Toyo Shinyaku:Kk マンゴーから得られる発酵物
JP4387903B2 (ja) * 2004-09-09 2009-12-24 株式会社東洋新薬 パパイヤから得られる発酵物
JP2006117612A (ja) * 2004-10-25 2006-05-11 Ichimaru Pharcos Co Ltd 活性酸素消去剤
EP1819356A4 (en) * 2004-11-18 2010-07-07 Biopharmacopae Design Internat PLANT EXTRACTS AND THEIR USES IN DERMATOLOGY
JP2006176414A (ja) * 2004-12-21 2006-07-06 Noevir Co Ltd 皮膚外用剤
JP2006249000A (ja) * 2005-03-11 2006-09-21 Aging Kenkyusho:Kk 美白化粧料及び美白化粧料セット
JP2006347995A (ja) * 2005-06-20 2006-12-28 Yukihiro Hirose 美容用組成物
FI118117B (fi) * 2005-08-12 2007-07-13 Lumene Oy Kosmeettinen tuote hiuspohjan käsittelyyn
US8128973B2 (en) * 2005-09-07 2012-03-06 Noreen Mulvanerty Medicated skin care preparation for promoting wound healing
EP1926490A2 (en) * 2005-09-23 2008-06-04 DSMIP Assets B.V. Use of opioid receptor antagonists
FR2893252B1 (fr) 2005-11-17 2008-02-15 Engelhard Lyon Sa Extraits vegetaux stimulant has2
IL179539A (en) * 2006-11-23 2010-11-30 Redent Nova Ltd Dental irrigator
JP4902747B2 (ja) * 2007-04-02 2012-03-21 ドンウォン カン コンタクトレンズ収納ケース
FR2916977A1 (fr) * 2007-06-06 2008-12-12 Engelhard Lyon Sa STIMULATION DE LA SYNTHESE DES RECPTEURS MCR1, MCR2 ET µ OPIOIDE.

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106146445A (zh) * 2015-04-27 2016-11-23 中国人民解放军第二军医大学 蒿属植物奇蒿中单体去氢母菊内酯酮的提取方法及其应用
CN106146445B (zh) * 2015-04-27 2018-10-19 中国人民解放军第二军医大学 蒿属植物奇蒿中单体去氢母菊内酯酮的提取方法及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
JP2014024860A (ja) 2014-02-06
JP2010529960A (ja) 2010-09-02
EP2157978A2 (en) 2010-03-03
WO2008148892A2 (en) 2008-12-11
CN101711152B (zh) 2013-09-11
FR2916977A1 (fr) 2008-12-12
EP2574332A1 (en) 2013-04-03
BRPI0812575B1 (pt) 2017-04-11
KR101661769B1 (ko) 2016-10-05
JP5686597B2 (ja) 2015-03-18
KR20100040836A (ko) 2010-04-21
JP2010529092A (ja) 2010-08-26
JP6215364B2 (ja) 2017-10-18
WO2008148892A3 (en) 2009-03-12
US20100209407A1 (en) 2010-08-19
WO2008148891A2 (en) 2008-12-11
EP2157966A2 (en) 2010-03-03
BRPI0813897A2 (pt) 2014-12-30
ES2730836T3 (es) 2019-11-12
KR20150030281A (ko) 2015-03-19
KR20100029818A (ko) 2010-03-17
JP2016128438A (ja) 2016-07-14
EP2157966B1 (en) 2019-03-13
CN101772349A (zh) 2010-07-07
BRPI0812575A2 (pt) 2014-09-30
WO2008148891A3 (en) 2009-03-19
US20100272699A1 (en) 2010-10-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101711152B (zh) MC-1R、MC-2R、和/或μ阿片样物质受体刺激作用
DE102004045187B4 (de) Wirkstoffe zur Überführung von inaktivem TGFb-latent in aktiven TGFb und deren Verwendung in kosmetischen und pharmazeutischen Zusammensetzungen
EP3060311B1 (en) Skin lightening cosmetic compositions and methods
CN107106480A (zh) 含有盐单胞菌发酵提取物的化妆品组合物及其用途
DE102004028302A1 (de) Stimulierung der Synthese und der Aktivität einer Isoform der Lysyloxidase-ähnlichen LOXL zum Stimulieren der Bildung von elastischen Fasern
CN109715183A (zh) 酵母提取物的新的美容化妆和/或营养保健或皮肤病学用途
EP3370832B1 (fr) Composition cosmétique ou dermatologique qui comprend un extrait de jania rubens et une huile essentielle d'immortelle et son utilisation
US20120225141A1 (en) Substance for restoring normal co-expression and interaction between the lox and nrage proteins
DE102004028300B4 (de) Stimulierung der Aktivität eines Isoform des Lysyloxidase zum Bekämpfen von einigen Pathologien, die durch eine unvollständige, fehlende oder desorganisierte Elastogenese verursacht sind
CN102266320B (zh) 橙皮素的新用途
CN113318005A (zh) 一种具有抗衰抗皱组合物及其应用
EP4238549A1 (en) Anti-aging composition, skin care product and cosmetic
CA2901525C (fr) Utilisation cosmetique de la queuine
US11891615B2 (en) Process to produce Klotho protein in vitro
KR101435679B1 (ko) 피부 보습 및 주름 개선용 조성물
KR102378635B1 (ko) 율피를 포함하는 혼합 생약재 추출물을 함유하는 피부 보습 및 주름 개선용 조성물
TWI331042B (en) Anti-aging cosmetics comprising chemokine
CN104224561A (zh) 橙皮素的新用途
FR3071410A1 (fr) Utilisation cosmetique de cellules meristematiques de syringa vulgaris l. pour une uniformisation du teint
Grant et al. Cosmetic or dermatological composition and use thereof

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant