FR3071410A1

FR3071410A1 - Utilisation cosmetique de cellules meristematiques de syringa vulgaris l. pour une uniformisation du teint

Info

Publication number: FR3071410A1
Application number: FR1758963A
Authority: FR
Inventors: Celine LaPerdrix; Catherine Goncalves-Ariera; Jocelyn Giboulot
Original assignee: Laboratoires de Biologie Vegetale Yves Rocher SA
Current assignee: Laboratoires de Biologie Vegetale Yves Rocher SA
Priority date: 2017-09-27
Filing date: 2017-09-27
Publication date: 2019-03-29
Anticipated expiration: 2037-09-27
Also published as: WO2019063928A1; FR3071410B1

Abstract

La présente invention se rapporte à une utilisation cosmétique d'un extrait de cellules méristématiques de Syringa vulgaris L. pour améliorer l'homogénéité de la couleur/du teint et/ou diminuer les tâches pigmentées de la peau et/ou améliorer l'éclat de la peau et/ou lisser la peau et/ou adoucir la peau. La présente invention se rapporte également à une utilisation d'une composition cosmétique ou dermatologique anti-âge comprenant un extrait de cellules méristématiques de Syringa vulgaris L. et un véhicule cosmétiquement et/ou dermatologiquement acceptable, ladite composition comprenant 0,00001 à 5 % en poids dudit extrait de cellules méristématiques de Syringa vulgaris L. par rapport au poids total de la composition pour améliorer l'homogénéité de la couleur/du teint et/ou diminuer les tâches pigmentées de la peau et/ou améliorer l'éclat de la peau et/ou lisser la peau et/ou adoucir la peau. La présente invention se rapporte en outre à un procédé cosmétique pour améliorer l'aspect de la peau, comprenant une application sur la peau d'une composition cosmétique telle que définie précédemment, ainsi qu'à un procédé de préparation de la composition cosmétique ou dermatologique, comprenant le mélange d'un extrait de cellules méristématiques de Syringa vulgaris L. et d'un véhicule cosmétiquement et/ou dermatologiquement acceptable.

Description

UTILISATION COSMETIQUE DE CELLULES MERISTEMATIQUES DE SYRINGA VULGARIS L. POUR UNE UNIFORMISATION DU TEINT

DESCRIPTION

Domaine technique

La présente invention se rapporte à l’utilisation cosmétique d’un extrait de cellules méristématiques de Syringa vulgaris L., ainsi qu’à une composition cosmétique ou dermatologique comprenant un extrait de cellules méristématiques de Syringa vulgaris L., et à un procédé et un dispositif impliquant cette composition.

La présente invention trouve ses applications dans le domaine de la cosmétique et de la dermatologie, plus particulièrement de la cosmétique cutanée.

Dans la description ci-dessous, les références entre crochets ([]) renvoient à la liste des références présentée à la fin du texte.

Etat de la technique

La peau est un organe vital à part entière qui se compose de trois tissus distincts, assumant chacun différents rôles grâce à différents types cellulaires et différentes structures.

Le tissu le plus en surface et donc le plus exposé est l'épiderme. Cet épithélium pluristratifié (Malpighien) et kératinisé, se compose de différentes cellules associées à de nombreuses fonctions de barrière et de protection. Les cellules majoritaires sont les kératinocytes qui se divisent dans la couche basale et entament leur différenciation jusqu’à la couche cornée (couche la plus externe) puis sont éliminés par desquamation, en 21 à 28 jours, en moyenne. L’épiderme comprend également des mélanocytes, cellules responsables de la pigmentation de la peau. Ces derniers présentent des dendrites, ramifications permettant le transport de la mélanine vers les kératinocytes environnants. Un mélanocyte est en contact avec une quarantaine de kératinocytes en moyenne, ce qui forme une unité pigmentaire. Le rôle majeur de l'épiderme est d'apporter à la peau, et donc au corps humain, une première ligne de protection contre les agressions extérieures, comme les agressions physiques, chimiques, hydriques et bactériologiques. Cette protection est notamment assurée par les couches les plus différenciées et la couche cornée connue pour ses propriétés hydrophobes, son aspect compacte et étanche. Une bonne différenciation des kératinocytes et donc une bonne desquamation sont essentielles pour une surface lisse, homogène et régulière. L’ensemble de ces mécanismes dépend directement des capacités prolifératives des kératinocytes. Or, les stress extérieurs et l’âge ralentissent ce processus qui peut alors devenir plus long et plus irrégulier. La desquamation devenant irrégulière et/ou anarchique, des défauts de lissage et d’homogénéité de surface de la peau s’installent. De plus, lors du vieillissement, des tâches pigmentaires peuvent apparaître en raison de la désorganisation de la mélanine, ce qui implique des irrégularités de couleur et de teint du visage.

En position intermédiaire, le derme est un tissu conjonctif investi majoritairement de fibroblastes et de protéines matricielles donnant à la peau ses qualités de compressibilité et d'élasticité connues. Les modifications de sa texture et de sa composition sont largement responsables des altérations de la peau qui surviennent au cours du vieillissement. Le relief de la couche cornée est, par ailleurs, directement conditionné par la qualité et la densité du derme qui la sous-tend.

Au sein de la trame conjonctive, s'intercalent aussi d’autres cellules et structures, tel un important réseau circulatoire et nutritif, constitué des vaisseaux sanguins et des capillaires lymphatiques, ainsi que les annexes épidermiques : cheveux, poils, ongles, glandes pilosébacées et glandes sudoripares, qui prennent naissance dans le derme profond.

L'hypoderme, situé en profondeur et constitué en majeure partie de lobules graisseux (adipocytes), assure une fonction de support primaire, de protection mécanique et thermique et joue aussi un rôle de stockage des réserves énergétiques rapidement mobilisables pour tous les besoins biologiques, comme par exemple le renouvellement cellulaire, la défense de l’organisme ou la contraction musculaire.

Les attentes des consommateurs en termes de soins cosmétiques s’orientent de plus en plus vers des produits naturels, efficaces et écoconçus. Les actifs agissant sur la couleur de la peau sont le plus souvent des actifs inhibant la synthèse de mélanine mais qui vont agir de façon globale sur la peau et ont un effet anti-tâche limité. Or les consommateurs recherchent un effet anti-tâche et une uniformisation du teint, c’est-à-dire une meilleure répartition de la mélanine dans la peau, plutôt qu’un changement global de leur couleur de leur peau.

Il reste donc un réel besoin de trouver de nouvelles compositions et/ou composés permettant d'assurer de façon effective et complète un effet d’uniformisation de la couleur de la peau. En particulier, il existe un réel besoin de trouver des composés naturels qui permettent une homogénéisation de la répartition de la mélanine au sein de la peau pour un meilleur effet anti-tâche que les produits existants.

Description de l’invention

La présente invention a précisément pour but de répondre à ces besoins et inconvénients de l’art antérieur.

Les inventeurs sont les tout premiers à utiliser un extrait de cellules méristématiques de Syringa vulgaris L. permettant précisément de répondre efficacement aux besoins précités.

Les inventeurs sont les tous premiers à avoir découvert que cet extrait de cellules méristématiques de Syringa vulgaris L. possède de manière inattendue un effet d’uniformisation de la couleur de la peau / du teint et d’amélioration de l’aspect de la peau.

En effet, les inventeurs ont notamment mis en évidence un effet de cet extrait sur l’amélioration du transfert de la mélanine des mélanocytes au kératinocytes environnants, sur l’inhibition de synthèse de la mélanine, et également un effet sur le renouvellement des kératinocytes épidermiques.

Ainsi, les inventeurs sont les premiers à proposer cet extrait en tant qu’agent cosmétique permettant d’uniformiser le teint et de limiter les tâches pigmentées de la peau, notamment par l’inhibition de la synthèse de mélanine et l’homogénéisation du transfert de la mélanine dans les kératinocytes, ceci afin d’obtenir une meilleure répartition de la coloration. Avantageusement, cet extrait permet également d’améliorer l’aspect de la peau, notamment il apporte un effet de régénération de la peau, de lissage, et/ou de douceur, et/ou d’amélioration de l’éclat.

Ainsi, un premier objet de l’invention se rapporte à l’utilisation cosmétique d’un extrait de cellules méristématique de Syringa vulgaris L. pour améliorer l’homogénéité de la couleur/du teint et/ou diminuer les tâches pigmentées de la peau et/ou améliorer l’éclat de la peau et/ou lisser la peau et/ou adoucir la peau. Il s’agit de préférence d’améliorer l’homogénéité de la couleur de la peau et de limiter les tâches pigmentées de la peau.

Un deuxième objet de l’invention se rapporte à une utilisation d’une composition cosmétique ou dermatologique anti-âge comprenant un extrait de cellules méristématiques de Syringa vulgaris L. et un véhicule cosmétiquement et/ou dermatologiquement acceptable, ladite composition comprenant 0,00001 à 5 % en poids dudit extrait de cellules méristématiques de Syringa vulgaris L. par rapport au poids total de la composition pour améliorer l’homogénéité de la couleur/du teint et/ou diminuer les tâches pigmentées de la peau et/ou améliorer l’éclat de la peau et/ou lisser la peau et/ou adoucir la peau.

Un troisième objet de la présente invention se rapporte à un dispositif se présentant sous une forme choisie parmi un pot, un flacon-pompe, une lingette, un masque, un dispositif transdermique, un patch, un spray, ledit dispositif comprenant une composition telle que définie précédemment.

Un autre objet de l’invention se rapporte à un procédé cosmétique pour améliorer l’aspect de la peau, comprenant une application sur la peau d’une composition cosmétique telle que définie précédemment.

Un autre objet de l’invention se rapporte à une utilisation d’une composition cosmétique ou dermatologique telle que définie précédemment, pour son utilisation dans un produit cosmétique ou dermatologique destiné à l’amélioration de l’aspect la peau d’un sujet.

Un autre objet de l’invention se rapporte à un procédé de préparation d’une composition cosmétique ou dermatologique telle que définie précédemment, comprenant le mélange d’un extrait de cellules méristématiques de Syringa vulgaris L. et d’un véhicule cosmétiquement et/ou dermatologiquement acceptable.

Syringa vulgaris L. (Oleaceae) également appelé Lilas commun en Français est un arbuste originaire d’Europe centrale et d’Orient et largement cultivé et introduit en Europe et en Amérique du Nord. Réputé pour son utilisation en ornementation, il est également utilisé en médecine traditionnelle pour sa faculté à traiter les rhumatismes (arthroses) ou encore le diabète (Su et al., Phytochemical and pharmacological progresson the genus Syringa. Chemistry Central Journal, 2015, 9, 2 ([1])).

Les cellules méristématiques de Syringa vulgaris L·., peuvent être obtenues à partir de culture in vitro de cellules de Syringa vulgaris L. Les technologies de culture cellulaires végétales in vitro ont débuté en 1939 avec la démonstration de l’obtention de cals qui sont des amas de cellules indifférenciées appelés également cellules méristématiques. Leur production à l’échelle industrielle remonte aux années 1990 (Trevor A.Thorpe. History of plant tissue culture. Molecular biotechnology, 2007, 37, 2, 169-180 ([3])). Le principe consiste, à partir d’un échantillon végétal, à dédifférencier les cellules constitutives de l’échantillon, puis induire ensuite la multiplication cellulaire de ces cellules méristématiques. Le but est d’accroître la biomasse afin que les cellules soient récupérées entières, ou fragmentées avec une concentration importante en métabolites d’intérêt.

Les « métabolites », au sens de la présente invention, des composés ou molécules produits par des cellules d’une plante). Il peut s’agit de métabolites primaires, par exemples des sucres, protéines/acides aminés et/ou des lipides. Alternativement ou complémentairement, il peut s’agir de métabolites secondaires comme par exemple des polyphénols, des terpènes et/ou d’alcaloïdes (Bruneton J, Pharmacognosie-plantes médicinales, 5eme édition, Lavoisier, 2016 ([4])). Il est ensuite possible de récupérer les cellules (ou fragments de cellules) pour les incorporer en tant qu’actifs cosmétiques ou alors une étape supplémentaire peut être réalisée dans le but d’extraire et de récupérer les métabolites des cellules sous une forme plus ou moins purifiée. De nombreux avantages existent en ce qui concerne l’utilisation de la culture cellulaire in-vitro pour produire des actifs cosmétiques : la possibilité de fragmenter les cellules permet d’avoir avantageusement accès aux macromolécules de la paroi cellulaire et il est également possible de rajouter dans le milieu de culture des précurseurs métaboliques pour induire la production de métabolites et ainsi les concentrer dans le milieu intra-cellulaire (Franck DiCosmo and Masanaru Misawa, Plant cell and tissue culture : alternatives for métabolite production, Biotechnology Advances 1995, 13, 425-453 ([5])).

Par exemple, les cellules méristématiques de Syringa vulgaris L. peuvent être obtenues, mises en culture et conservées selon les méthodes décrites dans les brevets EP1736167 ([6]) et EP2319914 ([7]).

Les cellules méristématiques de Syringa vulgaris L peuvent appartenir à la lignée cellulaire Syringa vulgaris IRB-SV25/B DSMZ, déposée le 15/09/2004 à la DMSZ (Deutsche Sammlung Von Mikroorganismen and Zellkulturen, Inhoffenstr. 7B, D-38124 Braunscheid, Allemagne) sous le numéro DSM 16857 par la société IRB (Instituto di Richerche Biotechnologiche S.p.A, 7 Via Lago di Tovel, 36077 Altavilla Vicentina (VI), Italie). Cette lignée cellulaire est décrite dans le document EP1736167 ([6]).

Avantageusement, l’extrait peut être constitué de cellules méristématiques de Syringa vulgaris L. constitué des parois cellulaires desdites cellules et/ou du contenu cellulaire desdites cellules.

Dans la présente invention, le ou les constituants de l’extrait peu(ven)t être issu(s) de la lyse d’une culture cellulaire de cellules méristématiques entières de Syringa vulgaris L..

Par exemple, les cellules méristématiques de Syringa vulgaris L. peuvent être mises en culture selon la méthode décrite dans le brevet EP 1736167 ([5]) puis lysées de façon à obtenir deux fractions distinctes : une fraction A constituée de fragments de parois cellulaires et une fraction B constituée du contenu cellulaire. Les fractions A et/ou B peuvent éventuellement être mises en suspension dans la glycérine pour obtenir une préparation glycérinée de cellules méristématiques de Syringa vulgaris L. Par exemple, la fraction A et la fraction B peuvent être présents dans l’extrait dans un ratio allant de 1 :99 à 99 :1, par exemple être un ratio d’environ 50 :50. Avantageusement, le contenu cellulaire contient tout ou partie des métabolites tels que décrits ciavant.

Un extrait selon l’invention est susceptible d’être préparé selon le procédé comprenant les étapes de :

a) culture cellulaire in-vitro, obtention de cellules méristématiques entières,

b) lyse desdites cellules de l’étape a) par procédé haute pression,

c) filtration desdites cellules lysées à l’étape c),

d) association du retentât qui contient les parois cellulaires des cellules lysées et du filtrat qui contient le contenu cellulaire des cellules lysées, et

e) mise en suspension dudit rétentât et dudit filtrat dans la glycérine avec ajout de gomme xanthane et d’acide citrique.

On entend par « améliorer l’homogénéité de la couleur de la peau », au sens de la présente invention, l’obtention d’une couleur, c’est-à-dire d’un teint, plus homogène après utilisation de l’extrait sur la peau, notamment via une meilleure répartition de la mélanine synthétisée par les mélanocytes vers les kératinocytes environnants

On entend par « limiter les tâche pigmentées de la peau », au sens de la présente invention, la diminution de la pigmentation des tâches de la peau après l’utilisation de l’extrait sur la peau, notamment via une diminution de la synthèse de mélanine et un meilleur transfert de celle-ci vers les kératinocytes.

On entend par « améliorer l’aspect de la peau », au sens de la présente invention, tout effet permettant d’obtenir un avantage esthétique sur l’aspect de la peau par rapport à l’aspect de la peau avant utilisation de l’extrait selon l’invention.

On entend par « régénération de la peau », au sens de la présente invention, la stimulation métabolique des cellules cutanées épidermiques dont le renouvellement conditionne directement ou indirectement l’aspect de surface de la peau.

L’utilisation cosmétique de l’invention peut avantageusement permettre en outre d’améliorer l’éclat de la peau.

On entend par « améliorer l’éclat de la peau », au sens de la présente invention, l’obtention d’une peau plus lumineuse. Cet effet peut être observé qualitativement, par exemple visuellement, ou quantitativement, par exemple par des études de chromamétrie où les composantes L*a*b* sont mesurées.

Alternativement ou en complément, l’action de l’extrait peut être une action de restauration, de maintien ou de renforcement de l’hydratation de la peau, de ses annexes ou des muqueuses, cet effet étant distinct et complémentaire des effets précédemment cités.

On entend par « composition cosmétique », dans la présente invention, toute composition à visée cosmétique, c’est à dire esthétique, une composition pouvant être mise en contact avec les parties superficielles du corps humain, par exemple l'épiderme, les systèmes pileux et capillaires. Avantageusement, une composition cosmétique permet, exclusivement ou principalement de les protéger, parfumer, maintenir en bon état, modifier leur aspect ou en corriger les défauts superficiels.

Dans la présente, on entend par « composition dermatologique » toute composition à visée dermatologique, c’est à dire une composition pouvant être mise en contact avec les parties superficielles du corps humain, pour un traitement de la peau, des muqueuses, et des phanères, comme les ongles, les cheveux, ou les poils. Une telle composition peut comprendre des actifs additionnels autres que l’extrait de cellules méristématiques de Syringa vulgaris L., susceptibles d’être qualifiés de dermatologiques ou thérapeutiques, ce qui explique la qualité de « dermatologique » de la composition.

Par « véhicule cosmétiquement ou dermatologiquement acceptable », on entend un véhicule adapté pour une utilisation en contact avec des cellules humaines et animales cutanées, en particulier les cellules de l’épiderme, sans toxicité, irritation, réponse allergique indue et similaire, et proportionné à un rapport avantage/risque raisonnable.

Le véhicule cosmétiquement acceptable peut être choisi parmi l’eau, l’allantoïne, la glycérine, le méthylpropanediol ; cette liste n’étant pas limitative.

La composition de l’invention peut être obtenue par tout procédé approprié connu de l’homme du métier pour la fabrication d’une composition cosmétique. Il peut s’agir, par exemple d’un simple mélange. Il peut s’agir alternativement, par exemple, d’un procédé comprenant une étape d’incorporation d’une phase interne dans une phase externe au moyen d'un émulseur, par exemple d'une turbine de type rotor-stator. Il peut s’agir également par exemple d’un procédé utilisant la Température d'inversion de Phase (TIP), ce procédé étant classiquement utilisé par l'homme de l'art pour obtenir des émulsions huile dans eau dont les gouttelettes dispersées sont particulièrement fines, par exemple avec un diamètre de 0,1 à 1 pm.

Selon l’invention, la composition cosmétique ou dermatologique peut comprendre 0,00001 à 5 % en poids dudit extrait ou dudit mélange par association d’extraits de cellules méristématiques de Syringa vulgaris L. par rapport au poids total de la composition, par exemple de 0,0001 à 5,0 % en poids, ou de 0,001 à 5,0 % en poids, ou de 0,01 à 5,0 % en poids ou de 0,1 à 5,0 % en poids, ou de 1,0 à 5,0 % en poids, ou de 2,0 à 4,0 %, par exemple 0,5% en poids dudit extrait cellules méristématiques de Syringa vulgaris L par rapport au poids total de la composition.

La composition cosmétique ou dermatologique de la présente invention peut se trouver sous toute forme appropriée pour une application cosmétique ou dermatologique. Avantageusement, la composition peut être une composition à usage topique.

Il peut s’agir par exemple d’une composition sous une forme choisie dans le groupe comprenant une émulsion huile dans eau ou eau dans huile ou un mélange de ces émulsions.

Selon l’invention, la composition cosmétique ou dermatologique peut par exemple se trouver sous une forme choisie dans le groupe comprenant un gel aqueux ou hydroalcoolique, une crème aqueuse ou hydroalcoolique et une lotion aqueuse ou hydroalcoolique. Ces formulations utilisables pour la mise en œuvre de la présente invention sont connues dans l’état de la technique par les formulateurs. Dans ces exemples de composition, il suffit d’ajouter l’extrait de cellules méristématiques de Syringa vulgaris L. de la présente invention pour obtenir une composition conforme à la présente invention.

Selon l’invention, la composition peut être sous une forme choisie parmi un onguent, une crème, une huile, un lait, une pommade, une poudre, un tampon imbibé, une solution, un gel, un sérum, un baume, un beurre, une lotion, une suspension, un savon ou une émulsion.

L’extrait de la présente invention peut être utilisé dans une composition cosmétique ou dermatologique seul ou en combinaison avec d’autres substances ou ingrédients actifs ou inactifs cosmétiquement ou dermatologiquement. Les substances ou ingrédients inactifs sont ceux qui n’agissent pas cosmétiquement ou dermatologiquement. Il s’agit des éléments de la composition permettant notamment d’accompagner l’extrait, de constituer une formulation particulière, de conserver l’extrait actif dans le temps, cette liste n’étant pas limitative. Il peut s’agir en d’autres termes de tout produit de base pouvant se trouver dans les compositions cosmétiques ou dermatologiques classiques. Par opposition, les substances ou ingrédients actifs sont ceux qui dans l’application cosmétique ou dermatologique visée ont une action esthétique et/ou médicale.

Ainsi, l’extrait de cellules méristématiques de Syringa vulgaris L. de la présente invention, peut être la seule substance ou ingrédient actif d’une composition, ou il peut être associé à d’autres substances ou ingrédients actifs d’une composition cosmétique ou dermatologique.

Le procédé de soin cosmétique ou dermatologique de l’invention permettant d’apporter notamment un effet d’amélioration des qualités de surface de la peau, par exemple d’au moins un effet choisi parmi l’homogénéisation de la couleur, l’amélioration du teint, la diminution des tâches pigmentées de la peau de la régénération de la peau, l’amélioration de l’éclat, du lissage, de la douceur de la peau, de l’aspect général de la peau.

Dans le cadre des procédés cosmétiques selon l’invention, ou de l’utilisation selon l’invention, l’utilisation s’entend d’une utilisation nonthérapeutique, par exemple pour le traitement des peaux normales, c’est-à11 dire des peaux ne présentant pas un état pathologique, à l’exclusion de toute utilisation thérapeutique.

Ainsi, toute utilisation cosmétique et tout procédé cosmétique selon l’invention sont respectivement des utilisations cosmétiques nonthérapeutiques et procédés cosmétiques non-thérapeutiques.

D’autres avantages pourront encore apparaître à l’homme du métier à la lecture des exemples ci-dessous, donnés à titre illustratif.

EXEMPLES

Exemple 1 : Préparation d’extrait de cellules méristématiques de Syrinqa vulqaris L.

Dans les exemples suivants, une suspension glycérinée de cellules méristématiques de Syringa vulgaris L a été préparée comme suit, et conformément au protocole décrit dans le document EP1736167 ([6]).

1- 1. Culture cellulaire in-vitro des cellules de la lignée DSM 16857 pour l’obtention de cellules méristématiques entières. Les cellules cultivées sur un milieu solide (GAMBORG B5 dans une agarose à 1% supplémentée avec 20 g /1 de saccharose, 2 g /1 de peptone végétale, 1 mg /1 de kinétine, 1 mg / 1 d'acide naphtalène acétique, 0,2 mg /1 d'acide indolacétique à pH 6,5) sont inoculées dans des flacons de 20 x 300 ml, chacun contenant 50 ml de milieu liquide (GAMBORG B5 supplémenté avec 20 g /1 de saccharose, 2 g /1 de plante peptone, 1 mg /1 de kinéine, 1 mg /1 d'acide naphtalénacétique, 0,2 mg /1 d'acide indolacétique à pH 6,5). Après la fermentation pendant 7 jours, les cultures sont utilisées pour inoculer également des flacons de 1000 ml contenant chacun 250 ml de milieu liquide qui sont ensuite déchargés après une période de 14 jours. La biomasse est combinée. Lyse des cellules par procédé haute pression à l'aide d'un ultraturrax.

2- Filtration des cellules lysées à travers une maille de nylon avec une porosité d’au moins 100 pm.

3- Le retentât et le filtrat sont associés et mis en suspension dans la glycérine (>80% en poids) avec ajout de gomme xanthane (stabilisant) et d’acide citrique (conservateur).

Pour les exemples suivants, les retentât et le filtrat sont associés et mis en suspension dans la glycérine à hauteur de 10%.

Exemple 2 : Effet d’extrait de cellules méristématiques de Syringa vulqaris L. obtenu dans l’Exemple 1 sur le transfert de mélanine au kératinocytes.

Les études ont été réalisées sur des kératinocytes normaux humains et sur des mélanocytes humains normaux, obtenus à partir de plasties abdominales, ensemencés en monocouche dans les conditions de culture adéquates, à savoir dans mélange de milieu kératinocyte-SFM et de milieu 254 complémenté (ratio 4:1), à une température de 37°C, sous atmosphère à 5% de CO2 et saturée en humidité. Les cellules ont été traitées deux fois avec l’extrait de cellules meristématique de Syringa vulgaris L. pendant 48h puis 72h à 5.10-3%. Les cellules sont ensuite récupérées, et le transfert de mélanine est évalué par co-marquage des kératinocytes avec l’anticorps CD49f et des mélanosomes avec un anticorps spécifique d’une protéine des mélanosomes (Pmel17). Ce co-marquage associé à l’analyse en cytométrie en flux permet de quantifier spécifiquement les mélanosomes ayant effectivement été transférés dans les kératinocytes.

Durée	Milieu	Extrait de cellules méristématiques de Syringa vulgaris L.
Traitement (jours)	base	5.10^-3%
5	100	115

Le traitement avec l’extrait de cellules méristématiques de Syringa vulgaris L. permet de stimuler le transfert de mélanine de 15% à 5.10^_3%. Ces résultats montrent que l’extrait de cellules méristématiques de Syringa vulgaris L. améliore la répartition de la mélanine au sein des kératinocytes et favorise ainsi l’homogénéité du teint.

Exemple 3 : Effet d’extrait de cellules méristématiques de Syringa vulgaris L. obtenu dans l’Exemple 1 sur la synthèse de mélanine.

L’étude a été réalisée sur une lignée de mélanocytes S91, cultivés dans un milieu KBM-Gold supplémenté avec le FGF bullet kit (Lonza), du calcium, du PMA (phorbol myristate acétate), de l’alpha-MSH (Mélanocyte Stimulating hormone) et du SVF (sérum de veau fœtal). Les cellules sont traitées pendant 72h avec 1mM de L-tyrosine pour activer la synthèse de mélanine et avec l’extrait de Syringa vulgaris L. à 0,1 ou 0,01%. En parralèle des cellules sont traitées avec de l’acide lipoïque à 5 pg/ml comme contrôle d’inhibition de la synthèse de mélanine. La mélanine est dosée par solubilisation dans de la soude 1N durant 30 min à 60°C, puis mesurée par lecture de la Do à 405 nm.

Traitement	% de synthèse de mélanine par rapport au contrôle non stimulé	% d’inhibition de la mélanine par rapport au contrôle stimulé par LTyrosine 1 mM
NT	100%	0%
Acide lipoïque 5pg/ml	/	60%
Extrait de Syringa vulgaris L. 0,1%	76%	56%
Extrait de Syringa vulgaris L. 0,01%	100%	10%

Le traitement avec l’extrait de cellules méristématiques de Syringa vulgaris L. permet d’inhiber la synthèse de mélanine jusqu’à 56% à 0,1%. Ces résultats montrent que l’extrait de cellules méristématiques de Syringa vulgaris L. présente un effet anti-tâche.

Exemple 4 : Effet d’extrait de cellules méristématiques de Syringa vulgaris L. obtenu dans l’Exemple 1 sur l’expression d’ARN messagers codant pour des protéines du cycle cellulaire.

Les études ont été réalisées sur des kératinocytes épidermiques humains normaux, obtenus à partir de plasties abdominales, ensemencés en monocouche dans les conditions de culture adéquates, à savoir dans un milieu kératinocyte-SFM, à une température de 37°C, sous atmosphère à 5% de CCteet saturée en humidité. Les cellules ont été traitées avec l’extrait de cellules meristématique de Syringa vulgaris L. pendant 48h à 10^-3 % ou 5.10’ ³%. Puis les expressions de E2F1 et PCNA ont été évaluées par RT-qPCR sur les ARN totaux extraits des tapis impliquée dans la progression cellulaires de chaque condition expérimentale. Le gène E2F1 code pour une protéine de la phase G1 (facteur stimulant la transcription de PCNA et CyclinE). Le gène PCNA code pour un cofacteur de l’ADN polymérase et favorise donc la réplication (phase S).

Tableau I : Niveau d’expression de E2F1 et PCNA par les kératinocytes

Kératinocytes	Milieu base	Extrait de cellules méristématiques de Syringa vulgaris L.
10’³%	5.10’³%
E2F1	100%	193%	163%
PCNA	100%	131%	166%

Le traitement avec l’extrait de cellules méristématiques de Syringa vulgaris L. permet de stimuler l’expression de E2F1 jusqu’à 93% à 10^_3% chez les kératinocytes. Il stimule également l’expression de PCNA jusqu’à 66% à 5.10’³% chez les kératinocytes. Ces résultats montrent que l’extrait de cellules méristématiques de Syringa vulgaris L. stimule les facteurs du cycle cellulaire chez les kératinocytes favorisant ainsi leur renouvellement.

Exemple 5 : Formulation de l'extrait de cellules méristématiques de

Syrinqa vulqaris L. dans un soin de type sérum

Composants	Pourcentage (% en poids)
Eau	qsp 100
Glycérine	5,000
Jus d’Aloe barbadensis	5,000
Sorbitol	4,000
Huile de noix de coco	5,000
Alcool	2,800
Stéarate de sorbitane	1,700
Extrait d’Acer saccharum	1,400
Beurre de Butyrospermum parkii	1,100
Extrait d’Agave tequilana	1,000
Alcool stéarylique (Octadécanol)	0,700
cellules méristématiques de Syringa vulgaris	1,000
Parfum	0,400
Acide salicylique	0,300
Gomme xanthane	0,300
Acide sorbique	0,150
Soude	0,120
Acétate de tocophérol	0,100
Mangiférine	1

Exemple 6 : Formulation de l'extrait de cellules méristématiques de

Syrinqa vulqaris L. dans un soin de jour

Composants	Pourcentage (% en poids)
Eau	qsp 100

Glycérine	5,000
Huile de Coco	5,000
Huile de Helianthus an nu us	3,000
Myristate de myristyle	2,000
Huile de sésame	2,000
Acide stéarique	1,500
Eau d’Hamamelis virginiana	1,100
Stéarate de glycérol AE	1,000
cellules méristématiques de Syringa vulgaris	0,500
Parfum	0,500
Eau de Calendula officinalis	2
Gomme xanthane	0,150
Acide sorbique	0,100
Allantoïne	0,100
Acétate de tocophérol	0,100
Soude	0,030
Mangiférine	1,000

Exemple 7 : Formulation de l'extrait de cellules méristématiques de Syringa vulgaris L. dans un soin de nuit.


Composants	Pourcentage (% en poids)
Eau	qsp 100
Glycérine	6,000
Huile de soja	4,000
Huile de noix de coco	3,000
Stéarate de sorbitane	1,000
Beurre de Butyrospermum parkii	1,000
cellules méristématiques de Syringa vulgaris	1,000
Parfum	0,400

Linoléate d'éthyle	0,300
Gomme xanthane	0,150
Acide sorbique	0,150
Allantoïne	0,100
Acétate de tocophérol	0,100
Palmitate de rétinol	0,100
Extrait d’Hippophae rhamnoides	1,000
Soude	0,060
Mangiférine	1,000

RÉFÉRENCES BIBLIOGRAPHIQUES

1. Su et al., Phytochemical and pharmacological progress on the genus Syringa. Chemistry Central Journal, 2015, 9, 2.

2. Trevor A.Thorpe. History of plant tissue culture. Molecular biotechnology, 2007, 37, 2, 169-180.

3. Bruneton J, Pharmacognosie-plantes médicinales, 5eme édition, Lavoisier, 2016.

4. Franck DiCosmo and Masanaru Misawa, Plant cell and tissue culture: alternatives for métabolite production, Biotechnology Advances 1995, 13, 425-453.

5. EP1736167.

6. EP2319914.

7. FR3017292.

Claims

REVENDICATIONS

1. Utilisation cosmétique d’un extrait de cellules méristématiques de Syringa vulgaris L. pour améliorer l’homogénéité de la couleur/du teint et/ou diminuer les tâches pigmentées de la peau et/ou améliorer l’éclat de la peau.
2. Utilisation cosmétique selon la revendication 1, dans laquelle l’action d’amélioration de l’homogénéité du teint et de diminution des tâches pigmentées est une action de stimulation du transfert de mélanine des mélanocytes aux kératinocytes et d’inhibition de la synthèse de mélanine.
3. Utilisation cosmétique selon l’une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle l’action d’amélioration de l’éclat ou de l’homogénéité du teint est une action de renouvellement cellulaire par la stimulation des facteurs du cycle cellulaire des kératinocytes.
4. Utilisation selon l’une quelconque des revendications 1 à 3, dans laquelle ledit extrait est constitué des parois cellulaires desdites cellules et/ou du contenu cellulaire desdites cellules.
5. Utilisation selon la revendication 4, dans laquelle ledit ou lesdits constituant(s) de l’extrait est/sont issu(s) de la lyse d’une culture cellulaire de cellules méristématiques entières de Syringa vulgaris L..
6. Utilisation d’une composition cosmétique ou dermatologique antiâge comprenant un extrait de cellules méristématiques de Syringa vulgaris L. et un véhicule cosmétiquement et/ou dermatologiquement acceptable, ladite composition comprenant 0,00001 à 5 % en poids dudit extrait de cellules méristématiques de Syringa vulgaris L. par rapport au poids total de la composition pour améliorer l’homogénéité de la couleur/du teint et/ou diminuer les tâches pigmentées de la peau et/ou améliorer l’éclat de la peau et/ou lisser la peau et/ou adoucir la peau.
7. Utilisation selon la revendication 6, dans laquelle ladite composition étant sous une forme choisie parmi un onguent, une crème, une huile, un lait, une pommade, une poudre, un tampon imbibé, une solution, un gel, un sérum, un baume, un beurre, une lotion, une suspension, un savon ou une émulsion.
8. Dispositif se présentant sous une forme choisie parmi un pot, un flacon-pompe, une lingette, un masque, un dispositif transdermique, un patch, un spray, ledit dispositif comprenant une composition telle que définie dans l’une quelconque des revendications 6 ou 7.
9. Procédé cosmétique pour améliorer l’aspect de la peau, comprenant une application sur la peau d’une composition cosmétique telle que définie dans l’une quelconque des revendications 6 ou 7.
10. Utilisation d’une composition cosmétique ou dermatologique telle que définie dans l’une quelconque des revendications 6 ou 7, pour son utilisation dans un produit dermatologique destiné à l’amélioration de l’aspect la peau d’un sujet.
11. Procédé de préparation d’une composition cosmétique ou dermatologique telle que définie dans la revendication 6 ou 7, comprenant le mélange d’un extrait de cellules méristématiques de Syringa vulgaris L. et d’un véhicule cosmétiquement et/ou dermatologiquement acceptable.