COMPOSITION COSMETIQUE - DERMATOLOGIQUE COMPRENANT AU MOINS UNE HUILE ESSENTIELLE ET LEUR UTILISATION
DESCRIPTION Domaine technique La présente invention se rapporte à l'utilisation cosmétique d'huiles essentielles en particulier, pour la stimulation de l'expression de la 1 o claudine-1. La présente invention trouve une application notamment dans le domaine cosmétique ou dermatologique. Dans la description ci-dessous, les références entre crochets ([]) renvoient à la liste des références présentée à la fin du texte. 15 Etat de la technique La peau est un organe vital à part entière qui se compose de trois tissus distincts, assumant chacun différents rôles grâce à différents types cellulaires et structures. 20 L'hypoderme, situé en profondeur et constitué en majeure partie de lobules graisseux (adipocytes), assure une fonction de support primaire, de protection mécanique et thermique et joue aussi un rôle de stockage des réserves énergétiques. En position intermédiaire, le derme est aussi un tissu conjonctif investi majoritairement de fibroblastes et de protéines 25 matricielles donnant à la peau ses qualités de compressibilité et d'élasticité connues. Au sein de la trame conjonctive, s'intercalent aussi d'autres cellules et structures, tel un important réseau circulatoire et nutritif, constitué des vaisseaux sanguins et des capillaires lymphatiques et les annexes épidermiques (poils, ongles, glandes pilosébacées et glandes 30 sudoripares) qui prennent naissance dans le derme profond. Le tissu le plus en surface et donc le plus exposé est l'épiderme. Cet épithélium pluristratifié (Malpighien) et kératinisant, dont la partie la plus
externe est la couche cornée, se compose de différentes cellules associées à de nombreuses fonctions de barrière de protection. Les cellules majoritaires sont les kératinocytes qui, par leurs processus de prolifération/différenciation, aboutissent à la formation de la couche cornée connue pour son aspect et ses propriétés hydrophobes, compactes et étanches. Le rôle majeur de l'épiderme est donc d'apporter à la peau, via la différenciation et le stratum corneum une première ligne de protection contre les agressions physiques chimiques, thermiques, hydriques, bactériologiques... 1 o La différenciation kératinocytaire est une maturation orientée des kératinocytes épidermiques en cornéocytes (kératinocytes de la couche cornée) durant laquelle les cellules changent de taille, de morphologie, de composition biochimique, de nature membranaire, d'activité biologique. Les cornéocytes sont des kératinocytes morts, anucléés qui s'empilent à la 15 surface de la peau, avant de desquamer. Ils forment ainsi une couche compacte et très hydrophobe à travers de laquelle la pénétration d'agents exogènes ou les déperditions hydriques ne sont normalement pas possibles. Ce processus de différenciation s'accompagne aussi de modifications des composantes et de structures cellulaires comme les 20 jonctions interkératinocytaires qui sont de plus en plus représentées en fonction de la différenciation. Les jonctions intercellulaires sont des zones caractéristiques des membranes des cellules épithéliales qui permettent une adhérence forte des cellules entre elles. Elles représentent des zones d'interaction de la 25 membrane plasmique avec le cytosquelette et de fait, des zones de communication intercellulaire. On peut les subdiviser en trois catégories : jonctions d'ancrage, jonctions communicantes et jonctions imperméables. Les jonctions d'ancrage sont des structures qui joignent mécaniquement les cellules entre elles avec des arrangements 30 intracytoplasmiques plus ou moins complexes. Ce sont les jonctions intermédiaires / jonctions adhérentes (zonula adherens) directement
responsables du maintien de la forme cellulaire et directement impliquée dans la communication puisque à l'origine de nombreux signaux cellulaires; et les desmosomes et hemidesmosomes qui assurent une adhérence solide et durable en agissant comme un "bouton-pression" (jonctions prédominantes dans la peau et les plus solides). Les jonctions communicantes sont les jonctions à écart, appelées souvent jonction gap (de l'anglais "gap junctions"). Ces sont des jonctions qui ouvrent un passage direct entre les cytosols de deux cellules adjacentes et qui sont très importantes du fait de leur rôle particulier de 1 o communication. Elles n'apportent cependant pas de lien solide entre les cellules. Aussi appelées jonctions serrées (zonula occludens), les jonctions imperméables (de l'anglais "tight junctions") assurent une cohésion par fusion des feuillets externes des membranes de deux cellules adjacentes. 15 Les protéines transmembranaires occludine et claudine relient les micro-filaments d'actine par l'intermédiaire des protéines ZO1 à ZO3 au niveau de ces jonctions tel que représenté sur la figure 1. Elles sont localisées sur toutes les cellules polarisées des épithéliums unistratifiés et pluristratifiés et ont un lien direct avec la différenciation: avec un gradient d'expression 20 en fonction de la différenciation, majorité dans le stratum granulosum. Les kératinocytes de l'épiderme sont depuis peu décrits comme pouvant établir des jonctions serrées (J Invest Dermatol, (2001) 117, 1050-1058 [3]; Arch Dermatol Res, (2002) 294, 14-18 [4]; Skin Pharmacol.Physiol., (2006) 19, 71-77 [5]). 25 Des études ont démontré un lien explicite entre le niveau d'hydratation de l'épiderme et la présence de ces jonctions: les souris dont les gènes codant pour les protéines composant les tight junctions sont invalidés (K.O. : Knock Out) ont une perte insensible en eau (PIE) excessive et meurent de déshydratation (Int J Cosmet Science, 29:413- 30 422, 2007 [6]; Blackwell Publishing, (2007) 6, 75-82 [7]; IFSCC magazine, (2009) 2, 87-91 [8]; SOFW-journal, (2009) 4, 50-60 [9]).
Les jonctions serrées sont donc impliquées dans la régulation de l'hydratation de la peau, dans la protection de celle-ci et dans les procédés de cicatrisation. Cependant peu de compositions de l'art antérieur permettent d'agir au niveau des jonctions précitées dans le but d'améliorer la cohésion des cellules de la peau et ainsi, par exemple de protéger la peau et/ou de réguler l'hydratation de la peau. En outre, peu de compositions ou crèmes de l'art permettent de modifier la structure de ces jonctions par une action sur les protéines 1 o structurelles de celle-ci. Il existe donc un réel besoin de trouver de nouvelles compositions et/ou composés permettant de stimuler les protéines des jonctions serrées. En particulier, il existe un réel besoin de trouver ces composés afin notamment, de renforcer la cohésion des cellules de la peau et/ou de 15 réguler l'hydratation de la peau.
Description de l'invention La présente invention a précisément pour but de répondre à ces besoins et inconvénients de l'art antérieur en fournissant des composés 20 permettant de consolider les jonctions serrées, en particulier par stimulation de l'expression des protéines des jonctions serrées En particulier, la présente invention a pour objet l'utilisation d'huiles essentielles pour cette consolidation/stimulation. Les inventeurs sont les premiers à avoir découvert, notamment, que 25 des huiles essentielles permettent de stimuler l'expression de protéines jonctionnelles des jonctions serrées au niveau des kératinocytes. Ils ont mis en évidence ces propriétés par exemple avec au moins une huile essentielle choisie parmi l'huile essentielle de Géranium, de Cèdre ou de Petit Grain Citronnier ou un mélange de celles-ci.
Egalement, les inventeurs sont les premiers à avoir découvert, notamment, que les huiles essentielles stimulent l'expression de la claudine-1. Ils ont mis en évidence ces propriétés par exemple avec au moins une huile essentielle choisie parmi l'huile essentielle de Géranium, de Cèdre ou de Petit Grain Citronnier Selon l'invention, par « huile essentielle » on entend une huile obtenue par exemple à partir d'une plante et/ou d'une partie d'une plante. Il peut s'agir par exemple d'une huile obtenue à partir de fleurs ou sommités 1 o fleuries, feuilles, brindilles, graines, racines, bois, péricarpes et/ou fruits. Selon l'invention, l'huile essentielle de Géranium est l'huile essentielle Pelargonium graveolens. De préférence, selon l'invention, l'huile essentielle de Géranium est une huile essentielle provenant des sommités fleuries de Pelargonium graveolens. Il peut s'agir, par exemple d'huile 15 essentielle de Géranium disponible dans le commerce, par exemple provenant de la société Robertet (Paris, France). Selon l'invention, l'huile essentielle de Géranium peut comprendre un ou plusieurs ou l'ensemble des composés suivants : du citronellol, du géraniol, du linalool, du citral, du limonène, du menthol, de l'eugénol, de 20 l'eucalyptol, du benzyl benzoate. Selon l'invention, l'huile essentielle de Cèdre est l'huile essentielle de Juniperus Virginiana. De préférence, l'huile essentielle de Cèdre est une huile essentielle du bois de Juniperus Virginiana. Il peut s'agir par exemple d'une huile essentielle de bois de Cèdre disponible dans le commerce, par 25 exemple provenant de la société Mane (Grasse, France). Selon l'invention, l'huile essentielle de Cèdre peut comprendre, par exemple un, plusieurs ou l'ensemble des composés suivants : du thujopsène, du cédrol, de l'alphacédrène, du bétâ-cédrène, de l'alpha-copaène et du widdrol. Selon l'invention l'huile essentielle de Petit Grain Citronnier est l'huile 3o essentielle de Citrus limon. Il peut s'agir par exemple d'une huile essentielle de Petit Grain Citronnier disponible dans le commerce, par exemple provenant de la société Robertet. Selon l'invention, l'huile
essentielle de Petit Gain Citronnier peut comprendre les composés suivants : du limonène, du citral, du géraniol, de l'eucalyptol, du linalool, du citronellol, de l'estragol, du phénylacétaldéhyde et du farnesol. Selon l'invention, les huiles essentielles peuvent être obtenues par tout procédé d'extraction d'huiles essentielles connue de l'homme du métier. Il peut s'agir par exemple d'un procédé choisi dans le groupe comprenant les procédés de pression à froid, les procédés de distillation, voire les procédés d'extractions par CO2 supercritique. Lorsque le procédé d'extraction utilisé est un procédé de pression à 1 o froid, il peut s'agir, par exemple d'un procédé de pression à froid comprenant le pressage mécanique d'une plante et/ou partie de plante. Le pressage peut être effectué par exemple à température ambiante, par exemple entre de 15 et 30°C. Lorsque le procédé d'extraction utilisé est un procédé de distillation, il 15 peut s'agir, par exemple d'un procédé de distillation à la vapeur comprenant le passage de vapeur d'eau au travers d'une plante et/ou partie d'une plante afin d'en extraire les composés volatiles. Lesdits composés volatiles sont ainsi entraînés, condensés et recueillis dans un essencier. 20 Lorsque le procédé d'extraction utilisé est un procédé d'extraction par CO2 à l'état supercritique, il peut s'agir classiquement d'utiliser les propriétés du gaz carbonique d'être, à l'état supercritique, un bon solvant pour extraire les composés organiques. Cette technique communément utilisée, car modulable en fonction de la pression et la température de mise 25 en oeuvre, permet d'obtenir des extraits se rapprochant de ce que l'on obtient classiquement par le procédé de distillation. Il peut s'agir, par exemple du procédé décrit dans le document Perrut, M et al.. (1999). « Le fractionnement des corps gras par fluide supercritique. » OCL, 6 (3), 208-211 [1] ou dans le document King et al. (2001) « Supercritical fluid 30 extraction of Vernonia galamensis seeds » industrial crops and product 14 (2001) 241-249 [2].
La présente invention se rapporte également à une composition, par exemple cosmétique ou dermatologique, comprenant au moins une huile essentielle. Dans la présente par « composition cosmétique » on entend toute composition à visée cosmétique c'est à dire une composition pouvant être mise en contact avec les parties superficielles du corps humain, par exemple l'épiderme, les systèmes pileux et capillaires, les organes externes, les dents et les muqueuses. Dans la présente par « composition dermatologique » on entend 1 o toute composition à visée dermatologique c'est à dire une composition pouvant être mise en contact avec les parties superficielles du corps humain, par exemple l'épiderme, les systèmes pileux et capillaires, les organes externes, les dents et les muqueuses. Selon l'invention, la composition peut comprendre indépendamment 15 au moins une, au moins deux ou trois huiles essentielles choisies dans le groupe comprenant l'huile essentielle de Petit Grain Citronnier, l'huile essentielle de Cèdre et l'huile essentielle de Géranium. Selon l'invention, l'huile essentielle ou un mélange d'huiles essentielles peut, par exemple, être présent dans une composition à une 20 teneur comprise entre 0,0001% et 5% en poids de la composition, de préférence entre 0,001 et 2% en poids de la composition, de manière encore plus préférée entre 0,05 et 2 %. La composition cosmétique ou dermatologique selon l'invention peut comprendre un ou plusieurs adjuvants connus de l'homme du métier. Il 25 peut s'agir par exemple d'un ou plusieurs adjuvant(s) choisi(s) parmi des agents de type esters, des agents hydratants, des agents émollients, des agents épaississants minéraux, des agents épaississants organiques, associatifs ou non, des filtres solaires organiques hydrosolubles et liposolubles, des filtres solaires minéraux, des composés siliconés, des 30 parfums, des conservateurs, des céramides, et pseudo-céramides, des vitamines et les provitamines, des protéines, des agents séquestrants, des agents alcanisants, des agents acidifiants, des agents réducteurs, des
agents oxydants, des charges minérales, des colorants ou tout autre adjuvant pouvant être cité dans le dictionnaire INCI (International Nomenclature Cosmetic Ingredients) publié par le CTFA (Cosmetic, Toiletry and Fragrance Association).
Selon l'invention, la composition cosmétique ou dermatologique peut, par exemple, se présenter sous toute forme connue de l'homme du métier. Il peut s'agir, par exemple d'une émulsion huile-dans-l'eau, eau-dansl'huile, eau dans silicone, d'une émulsion multiple, d'une miniémulsion, d'une microémulsion, d'une nanoémulsion, d'une émulsion solide, d'un gel aqueux ou hydroalcoolique, d'une crème, d'une huile, ou bien d'une lotion aqueuse ou hydroalcoolique. De préférence la composition peut être sous toute forme galénique connue de l'homme du métier pour une application par voie topique, par exemple sous la forme d'un onguent, d'une crème, d'une huile, d'un lait, d'une pommade, d'une poudre, d'un stick, d'un tampon imbibé, d'un patch transdermique, d'une solution, d'un gel, d'un spray, d'une lotion ou d'une suspension. La composition de l'invention peut être obtenue par tout procédé approprié connu de l'homme du métier pour la fabrication d'une composition cosmétique ou dermatologique. Il peut s'agir, par exemple d'un simple mélange. Il peut s'agir également, par exemple, d'un procédé comprenant une étape d'incorporation d'une phase interne dans une phase externe au moyen d'un émulseur, par exemple d'une turbine de type rotor-stator. Il peut s'agir également par exemple d'un procédé utilisant la Température d'Inversion de Phase (TIP), procédé classiquement utilisé par l'homme de l'art pour obtenir des émulsions huile dans eau dont les gouttelettes dispersées sont particulièrement fines, par exemple avec un diamètre de 0,1 à 1 pm. La présente invention a donc également pour objet l'utilisation d'au moins une huile essentielle selon l'invention pour la fabrication d'une composition cosmétique telle que décrite précédemment.
La présente invention a également pour objet l'utilisation d'au moins une huile essentielle selon l'invention pour la fabrication d'une composition dermatologique telle que décrite précédemment. La présente invention a également pour objet un procédé de traitement cosmétique comprenant l'application sur la peau d'au moins une huile essentielle selon l'invention ou d'une composition cosmétique ou dermatologique comprenant au moins une huile essentielle selon l'invention. La ou les huile(s) essentielle(s) sont telles que définies ci-dessus.
Pour cette application, on peut, par exemple, utiliser les formes galéniques décrites ci-dessus. L'application sur la peau peut donc être réalisée en fonction de la forme galénique utilisée. Cette application peut avantageusement être accompagnée d'un massage. L'application peut être, par exemple une application journalière quotidienne, hebdomadaire. Il peut s'agir par exemple d'une application une fois par jour, deux fois par jour ou plusieurs fois par jour. Avantageusement, la présente invention permet la stimulation des protéines des jonctions serrées, en particulier la claudine-1. La stimulation des jonctions serrées selon la présente invention permet avantageusement d'améliorer la protection, la restauration et la régénération de la fonction barrière épidermique et le maintien de l'hydratation épidermique. En particulier, la stimulation de la claudine-1 permet avantageusement de consolider et fonctionnaliser les jonctions serrées au niveau des kératinocytes.
Avantageusement, la présente invention peut être utilisée, par exemple, pour prévenir et/ou traiter un tissu épidermique d'agressions extérieures, par exemple d'agressions physiques, chimiques, thermiques, hydriques, solaires et/ou des effets de vieillissements, protéger et/ou améliorer l'éclat de la peau et/ou du teint, par exemple la couleur, l'uniformité, la radiance.
Avantageusement, la présente invention peut également être utilisée par exemple pour prévenir et/ou traiter des agressions bactériologiques. La présente invention a également pour objet une composition utilisable pour un traitement topique pour la prévention ou le traitement d'agressions bactériologiques, ladite composition comprenant au moins une huile essentielle selon l'invention. Les huiles essentielles et teneurs sont telles que définies précédemment.
D'autres avantages pourront encore apparaître à l'homme du métier à la lecture des exemples ci-dessous, illustrés par les figures annexées, donnés à titre illustratif.
Brève description des figures - La figure 1 représente un schéma de l'organisation protéique des jonctions serrées - La figure 2 représente des photographies de coupes d'expiants de peau après immunomarquage. Les expiants ont été incubés dans un milieu provoquant un état inflammatoire stressé ou non stressé en présence ou en absence de l'huile essentielle de Géranium à 0,05% et à 0,005%. - La figure 3 représente des photographies de coupes d'expiants de peau après immunomarquage. Les expiants ont été incubés dans un milieu provoquant un état inflammatoire stressé ou non stressé en présence ou en absence de l'huile essentielle de Cèdre à 0,05% et à 0,005%. - La figure 4 représente des photographies de coupes d'expiants de peau après immunomarquage. Les expiants ayant été incubés dans un milieu provoquant un état inflammatoire stressé ou non stressé en présence ou en absence de l'huile essentielle de Petit Grain Citronnier à 0,05% et à 0,005%.
EXEMPLES Exemple 1: Composition cosmétique pour le soin du visaqe comprenant une huile essentielle (HE) de Cèdre La composition cosmétique ci-dessous correspond à un exemple de composition topique pour le soin du visage et/ou pour le corps. La teneur de chaque composant est exprimée en pourcentage en poids par rapport au poids total de la composition Composants
Eau Propylène glycol Glycérine Carbopol ETD 2020 Gomme xanthane Alcool stéarylique 210E Steareth-20 Steareth-2 PG Diester C8/C10 Triglycérides C8/C10 Softol ive Diméthicone HE de Cèdre HE de Myrrhe Extrait de Centella asiatica Extrait de Candida saitoana Tocophérol Composition parfumante Agent(s) de conservation Agent(s) régulateur(s) de viscosité Agent(s) régulateur(s) de pH Teneur (pourcentage en poids par rapport au poids total de la composition) Q.S.P. 100% 3% 6% 0,1 % 0,15% 2% 0,5% 1,5% 3% 3% 1,5% 1% 0,05% 0,15% 0,3% 3% 0,2% 0,3% 0,01 à 2% 0,01 à 2% 0,001 à 1% Exemples 2 à 7 : compositions cosmétiques pour le soin du visaqe comprenant une ou plusieurs huile(s) essentielle(s) choisi parmi l'huile essentielle de Géranium, l'huile essentielle de Cèdre et l'huile essentielle de Petit Grain Citronnier Dans ces exemples, les compositions correspondent à la composition de l'exemple 1 comprenant les huiles essentielles indiquées dans le tableau 1 ci-dessous. La teneur de chaque huile essentielle est exprimée en pourcentage en poids par rapport au poids total de la composition
Tableau 1 Exemple Huile essentielle Huile essentielle Huile essentielle de Géranium de Petit Grain de Cèdre Citronnier Exemple 2 0,2% - - Exemple 3 - 0,4% Exemple 4 0,25% 0,25% - Exemple 5 - 0,1 % 0,2% Exemple 6 0,3% - 0,3% Exemple 7 0,15% 0,15% 0,15% Exemple 8: Composition cosmétique protectrice pour le soin du 15 visaqe ou pour le corps comprenant une huile essentielle de Petit Grain Citronnier
La composition cosmétique ci-dessous correspond à un autre exemple de composition topique pour le soin du visage et/ou pour le corps. 20 La teneur de chaque composant est exprimée en pourcentage en poids par rapport au poids total de la composition.
Composants
Eau Butylène glycol Glycérine Gomme xanthane Monolaurate de sucrose Stéarate de sucrose 1 o Alcool stéarylique Beurre de cacao Huile minérale Palmitate éthyle hexyle Vitamine E 15 Oméga 6 céramide Silicone Chlorhydrate de carcinine HE de Petit Grain Citronnier HE de Rose 20 Extrait de soja Composition parfumante Agent(s) de conservation Agent(s) régulateur(s) de pH Teneur (pourcentage en poids par rapport au poids total de la composition) Q.S.P. 100% 3% 3% 0,15% 4,5% 3% 1,5% 3% 10% 10% 0,2% 0,2% 1,5% 2% 1,25% 0,01% 1,5% 0,6% 0,01 à 2% 0,001 à 1% 25 Exemples 9 à 14: compositions cosmétiques protectrices pour le soin du visaqe comprenant une ou plusieurs huile(s) essentielle(s) choisi parmi l'huile essentielle de Géranium, l'huile essentielle de Cèdre et l'huile essentielle de Petit Grain Citronnier
30 Dans ces exemples, les compositions correspondent à la composition de l'exemple 8 comprenant les huiles essentielles indiquées dans le tableau 2 ci-dessous. 5 15 20 La teneur de chaque huile essentielle est exprimée en pourcentage en poids par rapport au poids total de la composition Tableau 2 Exemple Huile essentielle Huile essentielle Huile essentielle de Géranium de Petit Grain de Cèdre Citronnier Exemple 9 0,5% - - Exemple 10 - - 1% Exemple 11 1,5% - 1,2% Exemple 12 - 1,2% 0,4% Exemple 13 0,15% 0,5% - Exemple 14 0,3% 1% 1% Exemple 15 : composition cosmétique solaire pour le soin du visaqe ou pour le corps comprenant une huile essentielle de Géranium
La composition cosmétique ci-dessous correspond à un autre exemple de composition topique sous la forme d'un sérum pour le soin du visage et/ou pour le corps contenant des filtres de protection solaire UVB et UVA. La teneur de chaque composant est exprimée en pourcentage en poids par rapport au poids total de la composition Teneur (pourcentage en poids par rapport au poids total de la composition) Q.S.P. 100% 2% 4% 3% 0,3% 0,5% Composants
Eau Butylène glycol Méthyl propanediol Glycérine Magnésium aluminium silicate Gomme xanthane
Emulgin VL 75 7% Cetiol CC 10% Huile minérale 3% Octyldodecanol 2,5% Octyl methoxycinnamate 6,8% (filtre UVB) Tinosorb S 3,6% (filter UVA et UVB) Silicone 5% Tinosorb M 9,5% (fltre UVB et UVA) HE de Géranium 0,35% HE d'Orange 0,4% Amidon de maïs 3% Agent(s) de conservation 0,01 à 2%
Cette composition cosmétique correspond à un autre exemple de composition qui peut être utilisée en association et/ou indépendamment d'autres compositions cosmétiques Exemples 16 à 21 : compositions cosmétiques solaires pour le soin du visaqe ou pour le corps comprenant une ou plusieurs huile(s) essentielle(s) choisi parmi l'huile essentielle de Géranium, l'huile essentielle de Cèdre et l'huile essentielle de Petit Grain Citronnier 25 Dans ces exemples, les compositions correspondent à la composition de l'exemple 15 comprenant les huiles essentielles indiquées dans le tableau 3 ci-dessous. La teneur de chaque huile essentielle est exprimée en pourcentage 30 en poids par rapport au poids total de la composition20 Tableau 3 Exemple Huile essentielle Huile essentielle Huile essentielle de Géranium de Petit Grain de Cèdre Citronnier Exemple 16 - - 0,8% Exemple 17 - 0,6% - Exemple 18 - 0,5% 0,5% Exemple 19 0,15% 0,15% - Exemple 20 0,15% - 0,15% Exemple 21 0,2% 0,2% 0,2% Exemple 22 : Effet des huiles essentielles de Petit Grain Citronnier, de Cèdre et de Géranium sur l'expression de la claudine-1 d'expiants de peau
Des expiants de peau humaine normale provenant de la société BIOPREDIC (Rennes - France) ont été mis en culture dans différentes conditions pour y provoquer un état inflammatoire (stress SDS ou acide caprique) et/ou pour y provoquer la désorganisation de la fonction barrière, en présence ou en absence de l'huile essentielle. Ce milieu a été complété avec Hibiscrub (Marque déposée) à une concentration de 4% afin de provoquer un état inflammatoire.
Les expiants de peau ont été cultivés pendant 24 heures à une température de 37°C dans une atmosphère humide contenant 5% de CO2. La protéine claudine-1 (protéine membranaire des jonctions serrées) a ensuite été visualisée par immunomarquages à l'aide d'un anticorps et d'une révélation du secondaire à la peroxydase.
L'anticorps primaire anti-claudine-1 utilisé a été obtenu commercialement chez la société Zymed Laboratories (Marque déposée) (France). Le marquage a été visualisé avec un microscope optique.
Les marquages obtenus ont ensuite été quantifiés grâce à un logiciel d'analyse d'images histolab (marque déposée). Les résultats se présentent donc sous forme d'images et de pourcentages. Le pourcentage correspond au rapport de marquage par rapport au témoin non traité.
A Effet de l'HE de Géranium La figure 2 représente le marquage de la claudine-1 sur des expiants de peau en condition de stress en fonction de l'application topique 1 o de d'huile essentielle de Géranium à une concentration de 0,005% ou de 0,05% dans du glycérol. Après analyse par le logiciel histolab (marque déposée) et comme représenté sur la figure 2, l'huile essentielle de Géranium a stimulé l'expression de la claudine-1 à hauteur de 63% pour un traitement à 15 0,005% et de 98% pour un traitement à 0,05%; par rapport témoin stressé. Cet exemple démontre donc clairement que l'application d'huile essentielle de Géranium permet d'inhiber l'effet du stress et donc de restaurer la fonction barrière.
20 B Effet de l'HE de Cèdre La figure 3 représente le marquage de la claudine-1 sur des expiants de peau en condition de stress en fonction de l'application topique de d'huile essentielle de Cèdre à une concentration de 0,005% ou de 0,05%.dans du glycérol. 25 Après analyse par le logiciel histolab (marque déposée) et comme représenté sur la figure 3, l'huile essentielle de Cèdre stimule l'expression de la claudine-1 à hauteur de 59% pour un traitement à 0,005% et de 52% pour un traitement à 0,05%; par rapport témoin stressé. Cet exemple démontre donc clairement que l'application d'huile 30 essentielle de Cèdre permet d'inhiber l'effet du stress et donc de restaurer la fonction barrière.
C Effet de l'HE de Petit Grain Citronnier La figure 4 représente le marquage de la claudine-1 sur des expiants de peau en condition de stress en fonction de l'application topique de d'huile essentielle de Petit Grain Citronnier à une concentration de 0,005% ou de 0,05% dans du glycérol. Après analyse par le logiciel histolab (marque déposée) et comme représenté sur la figure 4, l'huile essentielle de Petit Grain Citronnier stimule l'expression de la claudine-1 à hauteur de 64% pour un traitement à 0,005% et de 51% pour un traitement à 0,05%; par rapport témoin stressé. Cet exemple démontre donc clairement que l'application d'huile essentielle de Cèdre permet d'inhiber l'effet du stress et donc de restaurer la fonction barrière.
Listes des références Perrut M. "Le fractionnement des corps gras par fluide supercritique" (1999), OCL, 6 (3), 208-211 King, J. W. et al. King et al. (2001) « Supercritical fluid extraction of Vernonia galamensis seeds » industrial crops and product 14 (2001) 241-249 Kati Pummi, Maria Malminen, Heikki Aho, Seija-Liisa Karvonen, Juha Peltonen, and Sirkku Peltonen; "Epidermal Tight Junctions: ZO-1 and occludin are Expressed in Mature, Developing, and Affected Skin and ln Vitro Differentiating Keratinocytes", J Invest Dermatol,(2001) 117, 1050-1058 B.Tebbe, J.Mankertz, C.Schwarz, S.Amasheh, M.Fromm, C.Assaf, U.Schultz-Ehrenburg, H.Sanchez Ruderisch, J.-D. Schulzke, C.E. Orfanos, "Tight junction proteins: a novel class of integral membrane proteins", Arch Dermatol. Res., (2002) 294, 14-18 J.M. Brandner, S. Kief, E. Wladykowski, P. Houdek, and I. Moll., "Tight Junction Proteins in the Skin"; Skin Pharmacol. Physiol., (2006) 19, 71-77 J.M.Brandner, "Pores in the epidermis: aquaporins and tight junctions" ,Int J Cosmet Science, (2007) 29 ,413-422 Sylvie Verdier-Sévrain, MD & Frédéric Bonté, PhD, "Skin hydration, a review on its molecular mechanisms", Blackwell Publishing, (2007) 6, 75-82 Shohei Kuroda, Masumi Kurasawa, Koji Mizukoshi, Tetsuo Maeda, Takuya Yamamoto, Ai Oba, and Hiroyuki Sasaki, "Epidermal Tight junction: The master skin barrier regulator", IFSCC magazine, (2009) 2, 87-91 D.Boudier, S.Mazalrey, S.Gofflo, E.Vignau, B.Closs, "Double 30 approach for improving the epidermal barrier function", SOFW-journal, (2009) 135-4, 50-60 [1] [2] [3] [4] [5] [6] [7] [8] [9]