EP3856353A1 - Utilisation d'un extrait d'agave pour renforcer la fonction barrière de la peau, du cuir chevelu et/ou des muqueuses et moduler le microbiote cutané - Google Patents
Utilisation d'un extrait d'agave pour renforcer la fonction barrière de la peau, du cuir chevelu et/ou des muqueuses et moduler le microbiote cutanéInfo
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- EP3856353A1 EP3856353A1 EP19797774.7A EP19797774A EP3856353A1 EP 3856353 A1 EP3856353 A1 EP 3856353A1 EP 19797774 A EP19797774 A EP 19797774A EP 3856353 A1 EP3856353 A1 EP 3856353A1
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Definitions
- the present invention relates to a non-therapeutic cosmetic use of an Agave extract, to a non-therapeutic cosmetic process comprising application to the skin, scalp and / or mucous membranes of an Agave extract and to a Agave extract for preventive and / or curative use.
- the skin is a vital organ in its own right which is made up of three distinct tissues, each assuming different roles thanks to different cell types and different structures.
- This multi-layered (Malpighian) and keratinized epithelium is composed of different cells associated with numerous barrier and protective functions. The majority cells are the keratinocytes which divide in the basal layer and begin their differentiation up to the stratum corneum
- the major role of the epidermis is to provide the skin, and therefore the human body, with a first line of protection against external aggressions, such as physical, chemical, water and bacteriological aggressions.
- This protection is provided in particular by the most differentiated layers and the stratum corneum known for its hydrophobic properties and its compact and waterproof appearance.
- Good differentiation and therefore good flaking are essential for a smooth, homogeneous and regular surface. All of these mechanisms depend directly on the proliferative capacities of keratinocytes. However, external stresses and age slow down this process which can then become longer and more irregular. The scaling becoming irregular and / or anarchic, smoothing defects and homogeneity of the skin surface settle.
- the dermis is a connective tissue invested mainly with fibroblasts and matrix proteins giving the skin its known qualities of compressibility and elasticity. Changes in its texture and composition are largely responsible for the changes in the skin that occur during aging. The relief and the quality of the stratum corneum are, moreover, directly conditioned by the quality and density of the dermis which underlies it.
- other cells and structures are also intercalated, such as an important circulatory and nutritive network, consisting of blood vessels and lymphatic capillaries, as well as the epidermal appendages: hair, hairs, nails, pilosebaceous glands and sweat glands, which arise in the deep dermis.
- hypodermis located deep and consisting mainly of fatty lobules (adipocytes), provides a primary support function, mechanical and thermal protection and also plays a role in storing energy reserves that can be quickly mobilized for all biological needs, such as for example cell renewal, body defense or muscle contraction.
- adipocytes fatty lobules
- the skin is the largest organ in the human body and represents 1.6 to 1.8 m 2 in an adult. It acts as a barrier against pathogens and environmental aggressors. It's about in fact of a complex ecosystem which shelters a large variety of microorganisms located on the surface of the skin (called cutaneous microbiota), in the sweat and sebaceous glands but also in the deep dermis and the hypodermis. There is thus the formation of complex interactions with the host and the different communities, influencing the health of the host's skin.
- the skin microbiota is made up of approximately 1 million germs per cm 2 and is thus made up of several hundred distinct species among which bacteria, fungi, parasites and viruses (Chen YE, Tsao H., The skin microbiome : current perspectives and future challenges, J Am Acad Dermatol, 69 (1): 143-55, 2013 ([1]); Kong HH, Segre JA., Skin microbiome: looking back to move forward, J Invest Dermatol, 132: 933-9, 2012 ([2]); Bouslimani A, Porto C, Rath CM et al., Molecular cartography of the human skin surface in 3D, Proc Natl Acad Sci USA; 112: E2120-9, 2015 ([3] )).
- the diversity of the microbiota is important between the different regions of the skin of the human body, and the scalp is no exception.
- the scalp ecosystem is home to a well-characterized microbiota. It is mainly composed of Staphylococcus spp, Cutibacterium spp and Malassezia spp (McGinley KJ, Leyden JJ, Marples RR, Kligman AM. Quantitative microbiology of the scalp in non-dandruff, dandruff, and seborrheic dermatitis. J Invest Dermatol. 1975 Jun ; 64 (6): 401-5 ([4]); Sally Grimshaw, Adrian Smith, David Taylor, Philip Helme. The human scalp microbiome: Application of next generation sequencing of microbial communities. JAAD. April 2012, Volume 66, Issue 4, Supplement 1, Page AB62 ([5])).
- Dandruff is a major problem for a very large part of the population, yet there has been a long-recognized link between dandruff and the yeast Malassezia. Indeed, in the same way as stress, the winter period, an excess of sebum or a lack of hydration, the proliferation of the latter on the skin or hair follicles is involved in the appearance of dander or dandruff.
- the yeasts of the Malassezia spp type represent approximately 46% of the microbiota of a healthy scalp, this proportion increases to 74% in the case of the presence of dandruff.
- the role of the yeasts Malassezia spp, in particular M. globosa and M. restricta, in this phenomenon has been described for many years (Dawson TL Jr. Malassezia globosa and restricta: breakthrough understanding of the etiology and treatment of dandruff and seborrheic dermatitis through whole -genome analysis. J Investig Dermatol Symp Proc. 2007 Dec; 12 (2): 15-9. Review ([6])). Mr. restricta would be represented at approximately 73% while Mr. globosa would be represented at 17%.
- Malassezia which is the most abundant yeast on the skin (50-80%), especially on oily areas of the skin, is lipophilic.
- the lipase it has allows it to produce fatty acids like oleic acid which could alter the permeability of the skin barrier, leading to inflammation and irritation (Dawson Jr TL, ([6])) .
- dandruff states are associated with skin inflammation and an alteration of the barrier function of the epidermis, responsible for the itching sensations inducing scratching and therefore strengthening the dandruff condition.
- There would be induction of an innate immune response probably mediated by an overexpression of Toll-like receptors of the TLR2 type (Ashbee HR. Update on the genus Malassezia.
- the inventors are the very first to use Agave extracts which precisely enable the above-mentioned needs to be met effectively.
- an extract of Agave tequilana has an action of strengthening the barrier function of the skin, scalp and / or mucous membranes.
- the Applicant has indeed demonstrated, after extensive research, that the use of the extract makes it possible to modify the distribution of the microbiota on the skin, the scalp and / or the mucous membranes, while retaining their concentration, making them the compounds of choice for nourishing and / or hydrating the skin, scalp and / or mucous membranes, while respecting the skin microbiota.
- a first object of the invention relates to the non-therapeutic cosmetic use of an Agave extract to strengthen the barrier function of the skin, scalp and / or mucous membranes.
- “Reinforcement of the skin barrier function” is understood, within the meaning of the present invention, to restore or maintain a normal level of in / out exchanges (water loss) and out / in (penetration of agents or hydrophilic microorganisms) of the skin, scalp and / or mucous membranes.
- strengthening the barrier function of the skin, scalp and / or mucous membranes makes it possible to prevent their degradation and / or improve their appearance.
- the improvement of the barrier function may imply, or be due, directly or indirectly, to the increase in the synthesis of the proteins involved in differentiation. epidermal, for example keratin 10, involucrine or loricrin.
- the extract of Agave reinforces the barrier function while being able to modify the distribution of microorganisms on the surface of the skin, scalp and / or mucous membranes, by playing in particular on the density of certain microorganisms, without however have a harmful effect on the microbiota as independently confirmed via counts of microorganisms.
- the microorganisms whose density and / or distribution is modified by application of the extract is at least one microorganism chosen from the group comprising Cutibacterium acnes, Malassezia restricta, Staphylococcus epidermidis and Malassezia sp.
- the invention means the cosmetic use of the extract to nourish and / or moisturize the skin, scalp and / or mucous membranes.
- the invention also includes the cosmetic use of the extract to modify the distribution of the microbiota on the skin, scalp and / or mucous membranes.
- the microbiota concerned comprises at least one microorganism chosen from Cutibacterium acnes, Malassezia restricta, Staphylococcus epidermidis and Malassezia sp.
- the modification of the distribution of the microbiota can, for example, be a reduction in the quantity and / or the density and / or the surface of aggregates of at least one microorganism on the zone concerned.
- the biofilm is not reduced in the area concerned, despite the modification of the distribution of the microbiota.
- Agave extract is understood to mean, within the meaning of the present invention, any Agave extract making it possible to obtain at least one of the effects mentioned above. It can be an extract of Agave tequilana, Agave americana or Agave attenuata. Preferably, it may be an extract of Agave tequilana.
- the agave is a monocotyledonous plant, currently classified in the family of Agavaceae. The most common species are Agave tequilana, Agave americana and Agave attenuata. The agave is endemic on the American continent and is present from the south of Canada to the North of South America and the Caribbean islands, in particular in Mexico and in all of Central America (Maria de la Soledad ALONSO GUTIÉRREZ, thesis, "Valorization of the bagasse of Agave tequilana W. cv azul: characterization, study of the digestibility and fermentation of sugars ”, 2005 ([9])).
- Agaves have an underground part in the shape of a rhizome, and an aerial part with long stems and large fibrous leaves, arranged in the shape of a rosette and which end in a thorn.
- the flowers are found at the end of the stem and are yellow-green in color (ALONSO GUTIÉRREZ ([10])).
- Agaves are known to be sources of complex sugars such as inulins.
- Inulin is a reserve polysaccharide found in plants of the Arteraceae family, in particular in the bulbs and roots of dahlias, Jerusalem artichokes, artichokes, dandelions and chicory, the latter being the most widely used source industrially. .
- Agave inulins are carbohydrate stores of the fructan type (also called fructans). Polyfructosans were extracted from Agave tequilana Weber var.
- the Agave extract can comprise fructo-oligosaccharides having a degree of polymerization less than or equal to 10 and / or inulins having a degree of polymerization greater than 10.
- the fructo-oligosaccharides can, for example, have a degree of polymerization of from 3 to 10.
- the inulins can have a degree of polymerization strictly greater than 10, for example ranging from 10 to 60, or for example from 10 to 29.
- the Agave extract can comprise or consist only of fructo-oligosaccharides having a degree of polymerization less than or equal to 10.
- the Agave extract can comprise or consist only of inulins having a higher degree of polymerization to 10.
- the fructo-oligosaccharide to inulin ratio can be understood from 100/0 to 0/100, the limits 0/100 and 100/0 being possibly not included. The ratio can for example be 75/25, or 25/75, or 50/50.
- Agave extract can be obtained by extracting carbohydrates from bagasse, clarifying the raw liquor obtained after extraction and then separating to obtain a fraction of fructo-oligosaccharides having a lower degree of polymerization or equal to 10, and / or a fraction of inulin having a degree of polymerization greater than 10. It is understood that the fructo-oligosaccharides and the inulin are therefore natural, that is to say unmodified chemically.
- An extract of Agave tequilana can be a commercial extract, for example the product Metlos ® (NEKUTLI), characterized by fructo-oligosaccharides having a degree of polymerization less than or equal to 10, and / or the product Metlin ® (NEKUTLI) characterized by real inulins having a degree of polymerization greater than 10. It can be a mixture of Metlos ® and Metlin ®, whose ratio may be equal for example to 75/25, or 25/75, or at 50/50. In the context of the invention, any mixture of fructo-oligosaccharides and inulins as defined above is considered to be an extract of Agave within the meaning of the present invention.
- the Agave extract can be applied to the skin, scalp or mucous membranes in the form of a cosmetic or dermatological composition, comprising the Agave extract as described above.
- cosmetic composition is understood to mean, in the present invention, any composition for cosmetic, ie aesthetic purposes, a composition which can be brought into contact with the surface parts of the human body, for example the epidermis, the hair systems and capillaries.
- a cosmetic composition makes it possible, exclusively or mainly, to protect them, perfume, maintain them in good condition, modify their appearance or correct surface cosmetic defects.
- “dermatological composition” means any composition for dermatological purposes, that is to say a composition which can be brought into contact with the superficial parts of the human body, for a treatment of the skin, in particular of the scalp, and integuments, such as hair or body hair.
- composition may comprise any cosmetically or dermatologically acceptable vehicle, suitable for use in contact with human and animal skin cells, in particular epidermal cells, without toxicity, irritation, undue and similar allergic response, and proportionate to a ratio reasonable benefit / risk.
- the cosmetically acceptable vehicle can for example be chosen from water, glycerin, aloe vera gel, an aqueous plant extract, surfactants of natural origin, this list not being limiting.
- the cosmetic or dermatological composition as defined above can be obtained by any suitable process known to those skilled in the art for the manufacture of a cosmetic composition. It may for example be a mixture of an agave extract as defined above, and a cosmetically and / or dermatologically acceptable vehicle. It may alternatively be, for example, a method comprising a step of incorporating an internal phase into an external phase by means of an emulsifier, for example a rotor-type turbine. stator. It may also be, for example, a process using the phase inversion temperature (TIP), this process being conventionally used by those skilled in the art to obtain oil-in-water emulsions in which the dispersed droplets are particularly fines, for example with a diameter of 0.1 to 1 ⁇ m.
- TIP phase inversion temperature
- the cosmetic or dermatological composition may comprise from 0.05 to 5% by weight of Agave extracts relative to the total weight of the composition, for example from 0.1 to 5%, from 0.1 to 1%, from 0.25 to 1% or 0.25 to 0.5%.
- the cosmetic or dermatological composition can be in any form suitable for cosmetic or dermatological application.
- the composition is a composition for topical use, rinsed or leave-in.
- the cosmetic or dermatological composition can for example be in a form chosen from the group comprising an aqueous or hydroalcoholic gel, an aqueous or hydroalcoholic cream and an aqueous or hydroalcoholic lotion.
- these formulations which can be used for the implementation of the present invention are known in the prior art by formulators. In these composition examples, it suffices to add extracts of Agave of the present invention to obtain a composition in accordance with the present invention.
- the composition can be in a form chosen from a shampoo, an ointment, a cream, an oil, a milk, an ointment, a powder, a solution, a gel, a serum, a balm, a butter, a lotion, a suspension, a soap or an emulsion, this form being able to be rinsed or not rinsed.
- the extract of the present invention can be used in a cosmetic or dermatological composition alone or in combination with other He
- cosmetically or dermatologically active or inactive substances or ingredients are those that do not act cosmetically or dermatologically.
- Inactive substances or ingredients are those that do not act cosmetically or dermatologically. These are the elements of the composition which make it possible in particular to accompany the extract, to constitute a particular formulation, to keep the extract active over time, this list not being limiting. In other words, it can be any basic product which can be found in conventional cosmetic or dermatological compositions.
- the active substances or ingredients are those which in the intended cosmetic or dermatological application have an aesthetic and / or medical action.
- the Agave extract of the present invention can be the only active substance or ingredient in a composition, or it can be combined with other active substances or ingredients in a cosmetic or dermatological composition.
- Another subject of the invention relates to a non-therapeutic, cosmetic or dermatological treatment process for strengthening the barrier function of the skin, scalp and / or mucous membranes, comprising an application to the skin, the scalp and / or the mucous membranes of an Agave extract as defined above.
- the use means a non-therapeutic use, for example for the treatment of healthy skin, scalp and mucous membranes, that is to say in particular not presenting a pathological state and / or for a strictly aesthetic use, to the exclusion of any therapeutic use.
- the cosmetic and aesthetic use of the invention is not associated with an inevitable therapeutic effect.
- any cosmetic use and any cosmetic method according to the invention are non-therapeutic cosmetic uses and non-therapeutic cosmetic methods, respectively, which are not intended to treat a pathology.
- Another subject of the invention relates to an Agave extract for its use in the treatment and / or prevention of a more or less recurrent inflammation of the skin, scalp and / or mucous membranes, linked to the more or less excessive presence of at least one microorganism chosen from Cutibacterium acnes, Malassezia restricta, Staphylococcus epidermidis and Malassezia sp. Inflammation may include a skin manifestation chosen from itching, irritation and redness.
- the Applicant has in fact surprisingly found that the expression of TNF-alpha, increased in the event of contact, is very significantly inhibited after the application, on the skin concerned, of the Agave extract.
- this may indicate a reduction in the inflammation induced by the microorganisms, if any.
- FIG. 1 represents the histo-morphology (sectional view) at 72 hours of the reconstructed human epidermis (EHR) colonized with Cutibacterium acnes and Malassezia restricta and treated or not with Agave extracts, as described in Example 2.
- EHR human epidermis
- FIG. 2 represents the 72 h ultrastructural analysis of EHRs colonized with Cutibacterium acnes and Malassezia restricta and treated or not with Agave extracts are shown in FIG. 2.
- A Untreated EHR.
- B EHR treated with the formula with Agave extracts.
- C EHR treated with the formula without Agave extracts.
- the raw material used for the production of fructooligosaccharides with a degree of polymerization less than or equal to 10 (commercial product Metlos ® ) and inulins with a degree of polymerization greater than 10 (commercial product Metlin ® ) is the organic blue agave harvested in the high plateaus of the state of Jalisco. After 5 to 7 years of carefully controlled growth, the Agave has the maximum amount of fructans, and is therefore ready for processing.
- the agave is received fresh and washed on arrival to remove as much foreign matter as possible.
- the agave is then ground in three stages to go from 40 to 100 kg of agave kernel to a pulpy bagasse, ready to be transformed into extracting the carbohydrates.
- Example 2 Effect of the Agave Extracts Obtained in Example 1 on the Skin / Microbiota Communication
- EHR human epidermis
- Episkin® reconstructed human epidermis
- This model reproduces the morphology of the epidermis.
- the EHRs are transferred to 6-well plates previously filled with culture medium (1 ml / well) and then they are incubated at 37 ° C. with 5% CO 2, saturated in humidity, for 3 h before starting. the study itself.
- the microorganisms of Cutibacterium acnes and Malassezia restricta are inoculated on the surface of the epidermis at the rate of approximately 10 7 CFU / cm 2 and 10 5 CFU / cm 2 .
- Oil Food grade olive is added to crops especially for Malassezia restricta.
- a serum-type formula containing or not containing 0.5% Agave extracts is applied to the surface of the epidermis / microorganism model, then this operation is repeated every 24 hours for 72 hours. From the inoculation of the epidermis, the model is maintained at 32 ° C, with 5% CO2, saturated with humidity.
- a rating is made from 0 to 4 (1: 0 or very weak marking, 2: diffuse marking, 3: localized marking, 4: strong marking).
- the 3 differentiation markers show that Agave extracts increase the intensity of expression of the latter, which induces an improvement in the barrier function and better protection.
- the results of the 72 h ultrastructural analysis of EHRs colonized with Cutibacterium acnes and Malassezia restricta and treated or not with Agave extracts are shown in FIG. 2.
- Untreated EHR very clearly shows significant aggregates of microorganisms and in particular Malassezia restricta which is more visible because it is larger than Cutibacterium acnes (approximately 4-8 pm vs 2pm). Malassezia restricta is located on the surface while some Cutibacterium acnes cells are visible on the surface but most of it covers the epidermis in the form of biofilm.
- Treatment with the formula containing Agave extracts shows a strong reduction in surface aggregates without reducing the biofilm.
- Treatment with the formula without Agave extracts again shows the presence of aggregates even if their density remains less consistent than with untreated EHR.
- the Agave extract reinforces the barrier function and is capable of modifying the distribution of microorganisms on the surface of EHRs by playing in particular on the density of Malassezia restricta, without having any harmful effect on the microbiota as confirmed independently via counts of microorganisms.
- Example 3 Effect of a Serum Containing Agave Extracts Obtained in Example 1 on Skin Inflammation
- EHR episkin® human epidermis
- This model reproduces the morphology of the epidermis.
- the EHRs are transferred to 6-well plates previously filled with culture medium (1 ml / well) and then they are incubated at 37 ° C with 5% CO2, saturated with humidity, for 3 h before starting the study itself. After this period and according to the conditions, the microorganisms of
- Cutibacterium acnes and Malassezia restricta are inoculated on the surface epidermis at a rate of approximately 10 7 CFU / cm 2 and 10 5 CFU / cm 2 .
- Food grade olive oil is added to the crops especially for Malassezia restricta.
- a serum type formula containing or not containing 0.5% Agave extracts is applied to the surface of the epidermis / microorganism model, then this operation is repeated every 24 hours for 72 hours. From the inoculation of the epidermis, the model is maintained at 32 ° C, with 5% CO2, saturated with humidity. After 72 hours of coculture and application of Agave extracts in formula, the gene expression by qRT-PCR of the TNF-a markers was measured.
- Table II shows the quantifications of the expression of TNF-alpha at 72 h of the EHRs colonized with Cutibacterium acnes and Malassezia restricta and not treated or treated with the formula with the extracts of Agave.
- TNF-alpha The synthesis of TNF-alpha is increased in case of infection, this is what we measure in the model not treated with a formula.
- the formula When the formula is applied with Agave extracts, there is a very substantial inhibition of its expression, indicating a reduction in inflammation induced by microorganisms.
- Example 5 Formulation of Agave Extracts in a Day Care
- Example 6 Formulation of agave extracts in a night treatment.
- Example 7 Formulation of an Agave Extract in a Hair Care Serum
- Example 8 Formulation of an Agave Extract in a Shampoo
Landscapes
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Abstract
La présente invention se rapporte à l'utilisation cosmétique non thérapeutique d'un extrait d'Agave pour renforcer la fonction barrière de la peau, du cuir chevelu et/ou des muqueuses. La présente invention se rapporte également à un procédé cosmétique non thérapeutique pour renforcer la fonction barrière de la peau, du cuir chevelu et/ou des muqueuses, comprenant une application sur la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses d'un extrait d'Agave. La présente invention se rapporte en outre à un extrait d'Agave pour son utilisation dans le traitement et/ou la prévention d'une inflammation de la peau, du cuir chevelu et/ou des muqueuses, liée à la présence d'au moins un micro-organisme choisi parmi Cutibacterium acnes, Malassezia restricta, Staphylococcus epidermidis et Malassezia sp.
Description
UTILISATION D’UN EXTRAIT D’AGAVE POUR RENFORCER LA FONCTION BARRIERE DE LA PEAU, DU CUIR CHEVELU ET/OU DES MUQUEUSES ET MODULER LE MICROBIOTE CUTANE DESCRIPTION
Domaine technique
La présente invention se rapporte à une utilisation cosmétique non thérapeutique d’un extrait d’Agave, à un procédé cosmétique non thérapeutique comprenant une application sur la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses d’un extrait d’Agave et à un extrait d’Agave pour une utilisation préventive et/ou curative.
Dans la description ci-dessous, les références entre crochets ([ ]) renvoient à la liste des références présentée à la fin du texte.
Etat de la technique
La peau est un organe vital à part entière qui se compose de trois tissus distincts, assumant chacun différents rôles grâce à différents types cellulaires et différentes structures.
Le tissu le plus en surface, et donc le plus exposé, est l'épiderme. Cet épithélium pluristratifié (Malpighien) et kératinisé, se compose de différentes cellules associées à de nombreuses fonctions de barrière et de protection. Les cellules majoritaires sont les kératinocytes qui se divisent dans la couche basale et entament leur différenciation jusqu’à la couche cornée
(couche la plus externe), puis sont éliminés par desquamation en 21 à 28 jours en moyenne. Le rôle majeur de l'épiderme est d'apporter à la peau, et donc au corps humain, une première ligne de protection contre les agressions extérieures, comme les agressions physiques, chimiques, hydriques et bactériologiques. Cette protection est notamment assurée par les couches les plus différenciées et la couche cornée connue pour ses
propriétés hydrophobes et son aspect compacte et étanche. Une bonne différenciation et donc une bonne desquamation sont essentielles pour une surface lisse, homogène et régulière. L’ensemble de ces mécanismes dépend directement des capacités prolifératives des kératinocytes. Or, les stress extérieurs et l’âge ralentissent ce processus qui peut alors devenir plus long et plus irrégulier. La desquamation devenant irrégulière et/ou anarchique, des défauts de lissage et d’homogénéité de surface de la peau s’installent.
En position intermédiaire, le derme est un tissu conjonctif investi majoritairement de fibroblastes et de protéines matricielles donnant à la peau ses qualités de compressibilité et d'élasticité connues. Les modifications de sa texture et de sa composition sont largement responsables des altérations de la peau qui surviennent au cours du vieillissement. Le relief et la qualité de la couche cornée sont, par ailleurs, directement conditionnés par la qualité et la densité du derme qui la sous- tend. Au sein de la trame conjonctive, s'intercalent aussi d’autres cellules et structures, tel un important réseau circulatoire et nutritif, constitué des vaisseaux sanguins et des capillaires lymphatiques, ainsi que les annexes épidermiques : cheveux, poils, ongles, glandes pilosébacées et glandes sudoripares, qui prennent naissance dans le derme profond.
L'hypoderme, situé en profondeur et constitué en majeure partie de lobules graisseux (adipocytes), assure une fonction de support primaire, de protection mécanique et thermique et joue aussi un rôle de stockage des réserves énergétiques rapidement mobilisables pour tous les besoins biologiques, comme par exemple le renouvellement cellulaire, la défense de l’organisme ou la contraction musculaire.
Les scientifiques ont longtemps considéré que le tégument fonctionnait indépendamment et qu’il était la première ligne de défense car directement en contact avec l’extérieur. La peau est l’organe le plus vaste du corps humain et représente 1 ,6 à 1 ,8 m 2 chez un adulte. Elle agit comme une barrière contre les pathogènes et les agresseurs environnementaux. Il s’agit
en fait d’un écosystème complexe qui abrite une grande variété de microorganismes localisés à la surface de la peau (appelé microbiote cutané), dans les glandes sudorales et sébacées mais également dans le derme profond et l’hypoderme. Il y a ainsi formation d’interactions complexes avec l’hôte et les différentes communautés, influençant la santé de la peau de l’hôte. Le microbiote cutané est composé d’environ 1 million de germes par cm2 et serait ainsi constitué de plusieurs centaines d’espèces distinctes parmi lesquelles des bactéries, des champignons, des parasites et des virus (Chen YE, Tsao H., The skin microbiome: current perspectives and future challenges, J Am Acad Dermatol, 69(1 ): 143-55, 2013 ([1]) ; Kong HH, Segre JA., Skin microbiome: looking back to move forward, J Invest Dermatol, 132: 933-9, 2012 ([2]) ; Bouslimani A, Porto C, Rath CM et al., Molecular cartography of the human skin surface in 3D, Proc Natl Acad Sci USA; 112: E2120-9, 2015 ([3])). La diversité du microbiote est importante entre les différentes régions de la peau du corps humain, et le cuir chevelu n’y fait pas exception.
En effet, l’écosystème du cuir chevelu abrite un microbiote bien caractérisé. Il est composé majoritairement de Staphylococcus spp, de Cutibacterium spp et de Malassezia spp (McGinley KJ, Leyden JJ, Marples RR, Kligman AM. Quantitative microbiology of the scalp in non-dandruff, dandruff, and seborrheic dermatitis. J Invest Dermatol. 1975 Jun;64(6):401- 5 ([4]) ; Sally Grimshaw, Adrian Smith, David Taylor, Philip Helme. The human scalp microbiome: Application of next génération sequencing of microbial communities. JAAD. April 2012, Volume 66, Issue 4, Supplément 1 , Page AB62 ([5])). Les pellicules représentent un problème majeur pour une très grande partie de la population, or il existe un lien reconnu depuis très longtemps entre l’état pelliculaire et la levure Malassezia. En effet, au même titre que le stress, la période hivernale, un excès de sébum ou un défaut d'hydratation, la prolifération de cette dernière sur la peau ou les follicules pileux est impliquée dans l’apparition de squames ou de pellicules.
A titre d’exemple, les levures de type Malassezia spp représentent environ
46% du microbiote d’un cuir chevelu sain, cette proportion augmente à 74% dans le cas de la présence de pellicules. Le rôle des levures Malassezia spp, en particulier M. globosa et M. restricta, dans ce phénomène est décrit depuis de nombreuses années (Dawson TL Jr. Malassezia globosa and restricta: breakthrough understanding of the etiology and treatment of dandruff and seborrheic dermatitis through whole-genome analysis. J Investig Dermatol Symp Proc. 2007 Dec;12(2):15-9. Review ([6])). M. restricta serait représenté à hauteur d’environ 73% alors que M. globosa le serait à hauteur de 17%.
Malassezia, qui est la levure la plus abondante sur la peau (50-80%), en particulier sur les zones grasses de la peau, est lipophile. La lipase qu’elle possède lui permet de produire des acides gras comme l’acide oléique qui pourrait altérer la perméabilité de la barrière cutanée, conduisant à de l’inflammation et de l’irritation (Dawson Jr TL, ([6])). En effet, les états pelliculaires sont associés à une inflammation cutanée et à une altération de la fonction barrière de l’épiderme, responsable des sensations de démangeaison induisant des grattages et donc renforçant l’état pelliculaire. Il y aurait induction d’une réponse immunitaire innée, médiée probablement par une surexpression des récepteurs Toll-like de type TLR2 (Ashbee HR. Update on the genus Malassezia. Med Mycol. 2007 Jun;45(4):287-303 ([7]))· Une étude récente suggère que le déséquilibre du microbiote et en particulier du ratio bactérie/levure pourrait être corrélé à un état pelliculaire (Clavaud C. et al. Dandruff is associated with disequilibrium in the proportion of the major bacterial and fungal populations colonizing the scalp. PLoS One. 2013;8(3J ([8])).
Il existe un réel besoin de nouveaux composés d’origine végétale et/ou naturels pour le soin de la peau, du cuir chevelu et des muqueuses, qui considèrent et/ou qui respectent le microbiote cutané. Description de l’invention
La présente invention a précisément pour but de répondre à ce besoin de l’art antérieur.
Les inventeurs sont les tout premiers à utiliser des extraits d’Agave permettant précisément de répondre efficacement aux besoins précités.
La Demanderesse a identifié, de manière surprenante, qu’un extrait d’Agave tequilana, possède une action de renforcement de la fonction barrière de la peau, du cuir chevelu et/ou des muqueuses.
La Demanderesse a en effet mis en évidence, au terme d’importantes recherches, que l’utilisation de l’extrait permet de modifier la répartition du microbiote sur la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses, tout en conservant leur concentration, ce qui en fait des composés de choix pour nourrir et/ou pour hydrater la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses, tout en respectant le microbiote cutané.
Ainsi, un premier objet de l’invention se rapporte à l’utilisation cosmétique non thérapeutique d’un extrait d’Agave pour renforcer la fonction barrière de la peau, du cuir chevelu et/ou des muqueuses.
On entend par « renforcement de la fonction barrière de la peau », au sens de la présente invention, la restauration ou le maintien d’un niveau normal des échanges in/out (perte en eau) et out/in (pénétration d’agents ou de microorganismes hydrophiles) de la peau, du cuir chevelu et/ou des muqueuses. Avantageusement, le renforcement de la fonction barrière de la peau, du cuir chevelu et/ou des muqueuses permet de prévenir leur dégradation et/ou d’améliorer leur aspect. Sans vouloir être liée par un mécanisme d’action particulier, on peut émettre l’hypothèse que l’amélioration de la fonction barrière peut impliquer, ou être due, directement ou indirectement, à l’augmentation de la synthèse des protéines impliquées dans la différenciation épidermique, par exemple la kératine 10, l’involucrine ou la loricrine. Il semblerait que l’extrait d’Agave renforce la fonction barrière tout en étant capable de modifier la répartition des microorganismes en surface de la peau, du cuir chevelu et/ou des muqueuses, en jouant notamment sur la densité de certains de microorganismes, sans pour autant
avoir d’effet néfaste sur le microbiote comme confirmé indépendamment via des numérations de microorganismes. Avantageusement, les microorganimes dont la densité et/ou la répartition est modifiée par application de l’extrait est au moins un microorganisme choisi dans le groupe comprenant Cutibacterium acnés, Malassezia restricta, Staphylococcus epidermidis et Malassezia sp.
Ainsi, l’invention s’entend de l’utilisation cosmétique de l’extrait pour nourrir et/ou pour hydrater la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses.
L’invention s’entend également de l’utilisation cosmétique de l’extrait pour modifier la répartition du microbiote sur la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses. Avantageusement, le microbiote concerné comprend au moins un micro-organisme choisi parmi Cutibacterium acnés, Malassezia restricta, Staphylococcus epidermidis et Malassezia sp. La modification de la répartition du microbiote peut, par exemple, être une diminution de la quantité et/ou de la densité et/ou de la surface d’agrégats d’au moins un micro-organisme sur la zone concernée. Avantageusement, le biofilm n’est pas réduit sur la zone concernée, malgré la modification de la répartition du microbiote.
On entend par « extrait d’Agave » au sens de la présente invention, tout extrait d’Agave permettant d’obtenir au moins l’un des effets cités précédemment. Il peut s’agir d’un extrait d’Agave tequilana, d 'Agave americana ou d’Agave attenuata. Préférentiellement, il peut s’agir d’un extrait d’Agave tequilana.
L’agave est une plante monocotylédone, actuellement classée dans la famille des Agavaceae. Les espèces les plus courantes sont Agave tequilana, Agave americana et Agave attenuata. L’agave est endémique sur le continent américain et est présente du sud du Canada jusqu’au Nord de l’Amérique du Sud et les îles Caraïbes, en particulier au Mexique et dans toute l’Amérique centrale (Maria de la Soledad ALONSO GUTIÉRREZ, thèse, « Valorisation de la bagasse de l’Agave tequilana W. cv azul :
caractérisation, étude de la digestibilité et de la fermentation des sucres », 2005 ([9])).
Les agaves présentent une partie souterraine ayant la forme d’un rhizome, et une partie aérienne présentant de longues tiges et de grandes feuilles fibreuses, disposées en forme de rosette et qui finissent en épine. Les fleurs se trouvent à la fin de la tige et sont de couleur jaune-vert (ALONSO GUTIÉRREZ ([10])).
Les Agaves sont connues pour être des sources de sucres complexes comme par exemple les inulines. L’inuline est un polysaccharide de réserve trouvé dans les plantes de la famille des Artéracées, notamment dans les bulbes et racines de dahlias, de topinambour, d’artichauts, de pissenlits et dans la chicorée, cette dernière étant la source la plus utilisée industriellement. Constituée de 30 à 40 unités de fructose liées par des liaisons glycosidiques en b (1 -2), et d’une à deux molécules de glucose placées en bout de chaîne, l’inuline est en réalité un glucofructosane. Les inulines d’agaves sont des réserves glucidiques de type fructanes (également appelées fructosanes). Des polyfructosanes ont été extraits de l 'Agave tequilana Weber var. azul, âgée de 8 ans. La caractérisation de ces fructosanes indique un degré de polymérisation compris entre 3 et 29, et une composition complexe de fructo-oligosacharides avec des liaisons de b (1 -2) et b (2- 6) différentes des inulines rencontrées dans les autres plantes (Lépez, M.G. ; Mancilla, N.A. ; Mendoza-Diaz, G. (2003). : Molecular structures of fructans from Agave tequilana Weber var. azul. J. Agric. Chem. 51 , 7835-7840 ([9]) ; ALONSO GUTIÉRREZ ([8])). Les inulines de chicorée ont une structure différente de celle des inulines d’agave. Elles présentent en effet des chaînes linéaires de fructose liées par des liaisons beta 2-1 alors que les inulines d’agave, même si elles sont composées également principalement de fructose, ont des structres latérales branchées à la structure principale par des liaisons béta 2-6 (Lépez, M.G. et al. ([9])).
L’extrait d’Agave peut comprendre des fructo-oligosaccharides ayant un degré de polymérisation inférieur ou égal à 10 et/ou des inulines ayant un degré de polymérisation supérieur à 10.
Les fructo-oligosaccharides peuvent avoir par exemple un degré de polymérisation compris de 3 à 10.
Les inulines peuvent avoir un degré de polymérisation supérieur strictement à 10, par exemple compris de 10 à 60, ou par exemple de 10 à 29.
L’extrait d’Agave peut comprendre ou être constitué uniquement de fructo-oligosaccharides ayant un degré de polymérisation inférieur ou égal à 10. Alternativement, l’extrait d’Agave peut comprendre ou être constitué uniquement d’inulines ayant un degré de polymérisation supérieur à 10. Par exemple, le ratio fructo-oligosaccharides sur inulines peut être compris de 100/0 à 0/100, les bornes 0/100 et 100/0 n’étant éventuellement pas incluses. Le ratio peut être par exemple de 75/25, ou de 25/75, ou de 50/50.
L’extrait d’Agave peut être obtenu par extraction des carbohydrates à partir de la bagasse, clarification de la liqueur brute obtenue à l’issue de l’extraction puis séparation pour obtenir une fraction de fructo- oligosaccharides ayant un degré de polymérisation inférieur ou égal à 10, et/ou une fraction d’inulines ayant un degré de polymérisation supérieur à 10. Il est entendu que les fructo-oligosaccharides et les inulines sont donc naturels, c’est-à-dire non modifiés chimiquement.
Un extrait d’Agave tequilana peut être un extrait commercial, par exemple le produit Metlos® (NEKUTLI), caractérisé par des fructo- oligosaccharides ayant un degré de polymérisation inférieur ou égal à 10, et/ou le produit Metlin® (NEKUTLI) caractérisé par des inulines vraies ayant un degré de polymérisation supérieur à 10. Il peut s’agir d’un mélange des produits Metlos® et Metlin®, dont le ratio peut être égal par exemple à 75/25, ou à 25/75, ou à 50/50. Dans le cadre de l’invention, tout mélange de fructo- oligosaccharides et d’inulines tels que défini ci-avant est considéré comme étant un extrait d’Agave au sens de la présente invention.
L’extrait d’Agave peut être appliqué sur la peau, le cuir chevelu ou les muqueuses sous la forme d’une composition cosmétique ou dermatologique, comprenant l’extrait d’Agave tel que décrit précédemment.
On entend par « composition cosmétique », dans la présente invention, toute composition à visée cosmétique, c’est à dire esthétique, une composition pouvant être mise en contact avec les parties superficielles du corps humain, par exemple l'épiderme, les systèmes pileux et capillaires. Avantageusement, une composition cosmétique permet, exclusivement ou principalement de les protéger, parfumer, maintenir en bon état, modifier leur aspect ou en corriger les défauts esthétiques superficiels.
Dans la présente, on entend par « composition dermatologique » toute composition à visée dermatologique, c’est à dire une composition pouvant être mise en contact avec les parties superficielles du corps humain, pour un traitement de la peau, notamment du cuir chevelu, et des phanères, comme les cheveux ou les poils.
La composition peut comprendre tout véhicule cosmétiquement ou dermatologiquement acceptable, adapté pour une utilisation en contact avec des cellules humaines et animales cutanées, en particulier les cellules de l’épiderme, sans toxicité, irritation, réponse allergique indue et similaire, et proportionné à un rapport avantage/risque raisonnable.
Le véhicule cosmétiquement acceptable peut par exemple être choisi parmi l’eau, la glycérine, un gel d’aloe vera, un extrait de plante aqueux, les tensio-actifs d’origine naturelle, cette liste n’étant pas limitative.
La composition cosmétique ou dermatologique telle que définie précédemment peut être obtenue par tout procédé approprié connu de l’homme du métier pour la fabrication d’une composition cosmétique. Il peut s’agir par exemple d’un mélange d’un extrait d’agave tel que défini précédemment, et d’un véhicule cosmétiquement et/ou dermatologiquement acceptable. Il peut s’agir alternativement, par exemple, d’un procédé comprenant une étape d’incorporation d’une phase interne dans une phase externe au moyen d'un émulseur, par exemple d'une turbine de type rotor-
stator. Il peut s’agir également par exemple d’un procédé utilisant la Température d'inversion de Phase (TIP), ce procédé étant classiquement utilisé par l'homme de l'art pour obtenir des émulsions huile dans eau dont les gouttelettes dispersées sont particulièrement fines, par exemple avec un diamètre de 0,1 à 1 pm.
La composition cosmétique ou dermatologique peut comprendre de 0,05 à 5 % en poids d’extraits d’Agave par rapport au poids total de la composition, par exemple de 0,1 à 5%, de 0,1 à 1 %, de 0,25 à 1 % ou de 0,25 à 0,5%.
La composition cosmétique ou dermatologique peut se trouver sous toute forme appropriée pour une application cosmétique ou dermatologique. Avantageusement, la composition est une composition à usage topique, rincée ou non rincée.
Il peut s’agir par exemple d’une composition sous une forme choisie dans le groupe comprenant une émulsion huile dans eau ou eau dans huile ou un mélange de ces émulsions.
Selon l’invention, la composition cosmétique ou dermatologique peut par exemple se trouver sous une forme choisie dans le groupe comprenant un gel aqueux ou hydroalcoolique, une crème aqueuse ou hydroalcoolique et une lotion aqueuse ou hydroalcoolique. Ces formulations utilisables pour la mise en œuvre de la présente invention sont connues dans l’état de la technique par les formulateurs. Dans ces exemples de composition, il suffit d’ajouter des extraits d’Agave de la présente invention pour obtenir une composition conforme à la présente invention.
Selon l’invention, la composition peut être sous une forme choisie parmi un shampooing, un onguent, une crème, une huile, un lait, une pommade, une poudre, une solution, un gel, un sérum, un baume, un beurre, une lotion, une suspension, un savon ou une émulsion, cette forme pouvant être rincée ou non rincée.
L’extrait de la présente invention peut être utilisé dans une composition cosmétique ou dermatologique seul ou en combinaison avec d’autres
I l
substances ou ingrédients actifs ou inactifs cosmétiquement ou dermatologiquement. Les substances ou ingrédients inactifs sont ceux qui n’agissent pas cosmétiquement ou dermatologiquement. Il s’agit des éléments de la composition permettant notamment d’accompagner l’extrait, de constituer une formulation particulière, de conserver l’extrait actif dans le temps, cette liste n’étant pas limitative. Il peut s’agir en d’autres termes de tout produit de base pouvant se trouver dans les compositions cosmétiques ou dermatologiques classiques. Par opposition, les substances ou ingrédients actifs sont ceux qui dans l’application cosmétique ou dermatologique visée ont une action esthétique et/ou médicale.
Ainsi, l’extrait d’Agave de la présente invention peut être la seule substance ou ingrédient actif d’une composition, ou il peut être associé à d’autres substances ou ingrédients actifs d’une composition cosmétique ou dermatologique.
Un autre objet de l’invention se rapporte à un procédé de soin non thérapeutique, cosmétique ou dermatologique, pour renforcer la fonction barrière de la peau, du cuir chevelu et/ou des muqueuses, comprenant une application sur la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses d’un extrait d’Agave tel que défini précédemment.
Dans le cadre des procédés cosmétiques selon l’invention, ou de l’utilisation cosmétique selon l’invention, l’utilisation s’entend d’une utilisation non-thérapeutique, par exemple pour le traitement des peaux, cuirs chevelus et muqueuses saines, c’est-à-dire notamment ne présentant pas un état pathologique et/ou pour une utilisation strictement esthétique, à l’exclusion de toute utilisation thérapeutique. En effet, l’utilisation cosmétique et esthétique de l’invention n’est pas associée à un effet thérapeutique inévitable.
Ainsi, toute utilisation cosmétique et tout procédé cosmétique selon l’invention sont respectivement des utilisations cosmétiques non- thérapeutiques et des procédés cosmétiques non-thérapeutiques, ne visant pas à traiter une pathologie.
Un autre objet de l’invention se rapporte à un extrait d’Agave pour son utilisation dans le traitement et/ou la prévention d’une inflammation plus ou moins récurrente de la peau, du cuir chevelu et/ou des muqueuses, liée à la présence plus ou moins excessive d’au moins un micro-organisme choisi parmi Cutibacterium acnés, Malassezia restricta, Staphylococcus epidermidis et Malassezia sp. L’inflammation peut comprendre une manifestation cutanée choisie parmi une démangeaison, une irritation et une rougeur. La Demanderesse a en effet constaté de manière surprenante que l’expression de la TNF-alpha, augmentée en cas de contact, est inhibée de manière très conséquente après l’application, sur la peau concernée, de l’extrait d’Agave. Avantageusement, ceci peut indiquer une réduction de l’inflammation induite par les microorganismes, le cas échéant.
D’autres avantages pourront encore apparaître à l’homme du métier à la lecture des exemples ci-dessous, illustrés par les figures annexées, donnés à titre illustratif.
Brève description des figures
La figure 1 représente l’histo-morphologie (vue en coupe) à 72h des épidermes humains reconstruits (EHR) colonisés ave Cutibacterium acnés et Malassezia restricta et traités ou non avec les extraits d’Agave, tel que décrit dans l’Exemple 2. A : Traitement sans extraits d’Agave. B : Traitement avec extraits d’Agave.
La figure 2 représente l’analyse ultrastructurale à 72h des EHR colonisés avec Cutibacterium acnés et Malassezia restricta et traités ou non avec les extraits d’Agave sont montrés sur la figure 2. A : EHR non traité. B : EHR traité avec la formule avec extraits d’Agave. C : EHR traité avec la formule sans extraits d’Agave.
EXEMPLES
Exemple 1 : Préparation des extraits d’Agave
La matière première utilisée pour la production des fructooligosaccharides de degré de polymérisation inférieur ou égal à 10 (produit commercial Metlos®) et des inulines de degré de polymérisation supérieur à 10 (produit commercial Metlin®) est l'Agave bleu biologique récoltée dans les hauts plateaux de l'État de Jalisco. Après 5 à 7 ans de croissance soigneusement contrôlée, l'Agave a la quantité maximale de fructanes, et est donc prête à être transformée.
L'agave est reçue fraîche et lavée à l'arrivée pour éliminer autant de matières étrangères que possible. L'agave est ensuite broyée en trois étapes pour passer de 40 à 100 kg de noyau d'agave à une bagasse pulpeuse, prête à être transformée en extraire les glucides.
La liqueur brute obtenue à partir de l'extraction est ensuite clarifiée pour éliminer toute couleur et impuretés restantes. Ensuite, le jus clarifié est purifié en deux fractions: Metlos® et Metlin®. Chaque produit est ensuite amené à une dernière étape de purification afin d'éliminer tous les minéraux pour obtenir une pureté élevée (> 99% de glucides). Exemple 2 : Effet des extraits d’Agave obtenus dans l’Exemple 1 sur la communication peau/m icrobiote
Les études ont été réalisées sur des épidermes humains reconstruits (EHR, Episkin®) de 0,5cm2, cultivés pendant 10 jours à partir de kératinocytes humains sur des inserts de polycarbonates de 0.4pm. Ce modèle reproduit la morphologie de l’épiderme. A réception au laboratoire, les EHR sont transférés dans des plaques 6 puits préalablement remplies de milieu de culture (1 ml/puits) puis ils sont incubés à 37°C avec 5% de C02, saturé en humidité, pendant 3 h avant de commencer l’étude proprement dite. Après ce délai et selon les conditions, les microorganismes de Cutibacterium acnés et de Malassezia restricta sont inoculés à la surface des épidermes à raison d’environ 107 UFC/cm2 et 105 UFC/cm2. De l’huile
d’olive de qualité alimentaire est ajoutée aux cultures en particulier pour Malassezia restricta. Après 2h de colonisation, une formule de type sérum contenant ou pas les extraits d’Agave à 0,5% est appliquée à la surface du modèle épiderme/microorganisme puis cette opération est reproduite toutes les 24h pendant 72h. A partir de l’inoculation de l’épiderme, le modèle est maintenu à 32°C, avec 5% de CO2, saturé en humidité. Après 72h de coculture et d’application de formule, différentes mesures sont effectuées, une analyse histo-morphologique par coloration avec l’hématoxyline et l’éosine, la quantification des protéines de différenciation (Involucrine, loricrine, kératine 10 - KRT10) par immunofluorescence et l’analyse ultrastucturale par microscopie électronique à balayage.
Les résultats de l’histo-morphologie à 72h des épidermes humains reconstruits (EH R) colonisés ave Cutibacterium acnés et Malassezia restricta, traités ou non avec les extraits d’Agave, sont montrés dans la Figure 1.
Comme montré sur la figure, les extraits d’Agave ne modifient pas significativement la morphologie de l’EHR.
L’évaluation de l’intensité du signal d’immunofluorescence des biomarqueurs sélectionnés Kératine 10 (KRT10), involucrine (IVL) et loricrine (LOR) est montrée dans la Tableau I.
Tableau I :
Une cotation est faite de 0 à 4 (1 : 0 ou marquage très faible, 2 : marquage diffus, 3 : marquage localisé, 4 : marquage fort).
Les 3 marqueurs de différenciation montrent que les extraits d’Agave augmentent l’intensité d’expression de ces derniers, ce qui induit une amélioration de la fonction barrière et une meilleure protection.
Les résultats de l’analyse ultrastructurale à 72h des EHR colonisés avec Cutibacterium acnés et Malassezia restricta et traités ou non avec les extraits d’Agave sont montrés sur la figure 2.
L’EHR non traité montre très clairement des agrégats conséquents de microorganismes et en particulier de Malassezia restricta qui est plus visible car plus grande que Cutibacterium acnés (environ 4-8 pm vs 2pm). Malassezia restricta est localisé en surface alors que quelques cellules de Cutibacterium acnés sont visibles en surface mais la plus grande partie recouvre l’épiderme sous forme de biofilm. Le traitement avec la formule contenant les extraits d’Agave montre une forte réduction des agrégats en surface sans pour autant réduire le biofilm. Enfin, le traitement avec la formule sans les extraits d’Agave, montrent à nouveau la présence d’agrégats même si leur densité reste moins conséquente qu’avec les EHR non traités.
Ces résultats montrent que l’extrait d’Agave renforce la fonction barrière et est capable de modifier la répartition des microorganismes en surface des EHR en jouant notamment sur la densité de Malassezia restricta, sans pour autant avoir d’effet néfaste sur le microbiote comme confirmé indépendamment via des numérations de microorganismes.
Exemple 3 : Effet d’un sérum contenant des extraits d’Agave obtenus dans l’Exemple 1 sur l’inflammation cutanée
Les études ont été réalisées sur des épidermes humain reconstruits (EHR episkin®) de 0,5cm2, cultivés pendant 10 jours à partir de kératinocytes humains sur des inserts de polycarbonates de 0,4pm. Ce modèle reproduit la morphologie de l’épiderme. A réception au laboratoire, les EHR sont transférés dans des plaques 6 puits préalablement remplies de milieu de culture (1 ml/puits) puis ils sont incubés à 37°C avec 5% de CO2, saturé en humidité, pendant 3 h avant de commencer l’étude proprement dite. Après ce délai et selon les conditions, les microorganismes de
Cutibacterium acnés et de Malassezia restricta sont inoculés à la surface
des épidermes à raison d’environ 107 UFC/cm2 et 105 UFC/cm2. De l’huile d’olive de qualité alimentaire est ajoutée aux cultures en particulier pour Malassezia restricta. Après 2h de colonisation, une formule de type sérum contenant ou pas les extraits d’Agave à 0,5% est appliquée à la surface du modèle épiderme/microorganisme, puis cette opération est reproduite toutes les 24h pendant 72h. A partir de l’inoculation de l’épiderme, le modèle est maintenu à 32°C, avec 5% de CO2, saturé en humidité. Après 72h de coculture et d’application d’extraits d’Agave en formule, l’expression génique par qRT-PCR des marqueurs TNF-a a été mesurée.
Le Tableau II montre les quantifications de l’expression de TNF-alpha à 72h des EHR colonisés avec Cutibacterium acnés et Malassezia restricta et non traités ou traités avec la formule avec les extraits d’Agave.
Tableau II :
La synthèse de TNF-alpha est augmentée en cas d’infection, c’est ce que nous mesurons dans le modèle non traité avec une formule. Lorsque la formule est appliquée avec les extraits d’Agave, il y une inhibition très conséquente de son expression, indiquant une réduction de l’inflammation induite par les microorganismes.
Ces résultats montrent que le traitement avec cette formule contenant les extraits d’Agave réduit l’inflammation induite par la présence de microorganismes. Exemple 4 : Formulation d’extraits d’Agave dans un soin de type sérum
Exemple 5 : Formulation d’extraits d’agave dans un soin de jour
Exemple 6 : Formulation d’extraits d’agave dans un soin de nuit.
Exemple 7 : Formulation d’un extrait d’Agave dans un sérum pour soin capillaire
Exemple 8 : Formulation d’un extrait d’Agave dans un shampooing
Exemple 9 : Formulation d’un extrait d’Agave dans un soin nutrition pour les cheveux sous forme d’après-shampooing
Listes des références
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Claims
1. Utilisation cosmétique non thérapeutique d’un extrait d’Agave pour renforcer la fonction barrière de la peau, du cuir chevelu et/ou des muqueuses.
2. Utilisation cosmétique selon la revendication 1 , pour nourrir et/ou pour hydrater la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses.
3. Utilisation cosmétique selon la revendication 1 ou 2, pour modifier la répartition du microbiote sur la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses.
4. Utilisation cosmétique selon la revendication 3, dans laquelle ledit microbiote comprend au moins un micro-organisme choisi parmi Cutibacterium acnés, Malassezia restricta, Staphylococcus epidermidis et Malassezia sp.
5. Utilisation cosmétique selon l’une quelconque des revendications précédentes, dans lequel ledit renforcement implique l’augmentation d’au moins un marqueur de différenciation choisi dans le groupe comprenant la kératine 10, l’involucrine et la loricrine.
6. Utilisation cosmétique selon l’une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle ledit extrait d’Agave comprend des fructo- oligosaccharides ayant un degré de polymérisation inférieur ou égal à 10 et/ou des inulines ayant un degré de polymérisation supérieur à 10.
7. Utilisation cosmétique selon la revendication 6, dans laquelle lesdits fructo-oligosaccharides ont un degré de polymérisation compris de 3 à 10.
8. Utilisation cosmétique selon la revendication 7, dans laquelle lesdites inulines ont un degré de polymérisation compris de 10 à 60.
9. Utilisation cosmétique selon la revendication 6 à 8, dans laquelle le ratio fructo-oligosaccharides sur inulines est compris de 100/0 à 0/100.
10. Utilisation cosmétique selon la revendication 9, dans laquelle le ratio fructo-oligosaccharides sur inulines est de 50/50.
11. Utilisation cosmétique selon l’une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle l’extrait d’Agave est un extrait d 'Agave tequilana.
12. Utilisation cosmétique selon l’une quelconque des revendications précédentes, ladite utilisation étant sous une forme choisie parmi un shampooing, un onguent, une crème, une huile, un lait, une pommade, une solution, une poudre, un gel, un sérum, un baume, un beurre, une lotion, une suspension, un savon ou une émulsion qui peut être rincée ou non rincée.
13. Procédé cosmétique non thérapeutique pour renforcer la fonction barrière de la peau, du cuir chevelu et/ou des muqueuses, comprenant une application sur la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses d’un extrait d’Agave tel que défini dans l’une quelconque des revendications 6 à 12.
14. Extrait d’Agave pour son utilisation dans le traitement et/ou la prévention d’une inflammation de la peau, du cuir chevelu et/ou des muqueuses, liée à la présence d’au moins un micro-organisme choisi parmi Cutibacterium acnés, Malassezia restricta, Staphylococcus epidermidis et Malassezia sp.
15. Extrait d’Agave pour son utilisation selon la revendication 14, dans laquelle la dite inflammation comprend une manifestation cutanée choisie parmi une démangeaison, une irritation et une rougeur.
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