FR3086542A1

FR3086542A1 - Utilisation d'un extrait d'agave pour renforcer la fonction barriere de la peau, du cuir chevelu et/ou des muqueuses et moduler le microbiote cutane

Info

Publication number: FR3086542A1
Application number: FR1858968A
Authority: FR
Inventors: Celine LaPerdrix; Stephane Desaint; Nathalie Collard
Original assignee: Laboratoires de Biologie Vegetale Yves Rocher SA
Current assignee: Laboratoires de Biologie Vegetale Yves Rocher SA
Priority date: 2018-09-28
Filing date: 2018-09-28
Publication date: 2020-04-03
Anticipated expiration: 2038-09-28
Also published as: MX2021002619A; WO2020065213A1; FR3086542B1; EP3856353A1

Abstract

La présente invention se rapporte à l'utilisation cosmétique non thérapeutique d'un extrait d'Agave pour renforcer la fonction barrière de la peau, du cuir chevelu et/ou des muqueuses. La présente invention se rapporte également à un procédé cosmétique non thérapeutique pour renforcer la fonction barrière de la peau, du cuir chevelu et/ou des muqueuses, comprenant une application sur la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses d'un extrait d'Agave. La présente invention se rapporte en outre à un extrait d'Agave pour son utilisation dans le traitement et/ou la prévention d'une inflammation de la peau, du cuir chevelu et/ou des muqueuses, liée à la présence d'au moins un micro-organisme choisi parmi Cutibacterium acnes, Malassezia restricta, Staphylococcus epidermidis et Malassezia sp.

Description

UTILISATION D’UN EXTRAIT D’AGAVE POUR RENFORCER LA FONCTION BARRIERE DE LA PEAU, DU CUIR CHEVELU ET/OU DES MUQUEUSES ET MODULER LE MICROBIOTE CUTANE

DESCRIPTION

Domaine technique

La présente invention se rapporte à une utilisation cosmétique non thérapeutique d’un extrait d’Agave, à un procédé cosmétique non thérapeutique comprenant une application sur la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses d’un extrait d’Agave et à un extrait d’Agave pour une utilisation préventive et/ou curative.

Dans la description ci-dessous, les références entre crochets ([]) renvoient à la liste des références présentée à la fin du texte.

Etat de la technique

La peau est un organe vital à part entière qui se compose de trois tissus distincts, assumant chacun différents rôles grâce à différents types cellulaires et différentes structures.

Le tissu le plus en surface, et donc le plus exposé, est l'épiderme. Cet épithélium pluristratifié (Malpighien) et kératinisé, se compose de différentes cellules associées à de nombreuses fonctions de barrière et de protection. Les cellules majoritaires sont les kératinocytes qui se divisent dans la couche basale et entament leur différenciation jusqu’à la couche cornée (couche la plus externe), puis sont éliminés par desquamation en 21 à 28 jours en moyenne. Le rôle majeur de l'épiderme est d'apporter à la peau, et donc au corps humain, une première ligne de protection contre les agressions extérieures, comme les agressions physiques, chimiques, hydriques et bactériologiques. Cette protection est notamment assurée par les couches les plus différenciées et la couche cornée connue pour ses propriétés hydrophobes et son aspect compacte et étanche. Une bonne différenciation et donc une bonne desquamation sont essentielles pour une surface lisse, homogène et régulière. L’ensemble de ces mécanismes dépend directement des capacités prolifératives des kératinocytes. Or, les stress extérieurs et l’âge ralentissent ce processus qui peut alors devenir plus long et plus irrégulier. La desquamation devenant irrégulière et/ou anarchique, des défauts de lissage et d’homogénéité de surface de la peau s’installent.

En position intermédiaire, le derme est un tissu conjonctif investi majoritairement de fibroblastes et de protéines matricielles donnant à la peau ses qualités de compressibilité et d'élasticité connues. Les modifications de sa texture et de sa composition sont largement responsables des altérations de la peau qui surviennent au cours du vieillissement. Le relief et la qualité de la couche cornée sont, par ailleurs, directement conditionnés par la qualité et la densité du derme qui la soustend. Au sein de la trame conjonctive, s'intercalent aussi d’autres cellules et structures, tel un important réseau circulatoire et nutritif, constitué des vaisseaux sanguins et des capillaires lymphatiques, ainsi que les annexes épidermiques : cheveux, poils, ongles, glandes pilosébacées et glandes sudohpares, qui prennent naissance dans le derme profond.

L'hypoderme, situé en profondeur et constitué en majeure partie de lobules graisseux (adipocytes), assure une fonction de support primaire, de protection mécanique et thermique et joue aussi un rôle de stockage des réserves énergétiques rapidement mobilisables pour tous les besoins biologiques, comme par exemple le renouvellement cellulaire, la défense de l’organisme ou la contraction musculaire.

Les scientifiques ont longtemps considéré que le tégument fonctionnait indépendamment et qu’il était la première ligne de défense car directement en contact avec l’extérieur. La peau est l’organe le plus vaste du corps humain et représente 1,6 à 1,8 m² chez un adulte. Elle agit comme une barrière contre les pathogènes et les agresseurs environnementaux. Il s’agit en fait d’un écosystème complexe qui abrite une grande variété de microorganismes localisés à la surface de la peau (appelé microbiote cutané), dans les glandes sudorales et sébacées mais également dans le derme profond et l’hypoderme. Il y a ainsi formation d’interactions complexes avec l’hôte et les différentes communautés, influençant la santé de la peau de l’hôte. Le microbiote cutané est composé d’environ 1 million de germes par cm² et serait ainsi constitué de plusieurs centaines d’espèces distinctes parmi lesquelles des bactéries, des champignons, des parasites et des virus (Chen YE, Tsao H., The skin microbiome: current perspectives and future challenges, J Am Acad Dermatol, 69(1): 143-55, 2013((1]) ; Kong HH, Segre JA., Skin microbiome: looking back to move forward, J Invest Dermatol, 132: 933-9, 2012 ([2]) ; Bouslimani A, Porto C, Rath CM et al., Molecular cartography of the human skin surface in 3D, Proc Natl Acad Sci USA; 112: E2120-9, 2015 ([3])). La diversité du microbiote est importante entre les différentes régions de la peau du corps humain, et le cuir chevelu n’y fait pas exception.

En effet, l’écosystème du cuir chevelu abrite un microbiote bien caractérisé. Il est composé majoritairement de Staphylococcus spp, de Cutibacterium spp et de Malassezia spp (McGinley KJ, Leyden JJ, Marples RR, Kligman AM. Quantitative microbiology of the scalp in non-dandruff, dandruff, and seborrheic dermatitis. J Invest Dermatol. 1975 Jun;64(6):4015 ([4]) ; Sally Grimshaw, Adrian Smith, David Taylor, Philip Helme. The human scalp microbiome: Application of next generation sequencing of microbial communities. JAAD. April 2012, Volume 66, Issue 4, Supplement 1, Page AB62 ([5])). Les pellicules représentent un problème majeur pour une très grande partie de la population, or il existe un lien reconnu depuis très longtemps entre l’état pelliculaire et la levure Malassezia. En effet, au même titre que le stress, la période hivernale, un excès de sébum ou un défaut d'hydratation, la prolifération de cette dernière sur la peau ou les follicules pileux est impliquée dans l’apparition de squames ou de pellicules. A titre d’exemple, les levures de type Malassezia spp représentent environ

46% du microbiote d’un cuir chevelu sain, cette proportion augmente à 74% dans le cas de la présence de pellicules. Le rôle des levures Malassezia spp, en particulier M. globosa et M. restricta, dans ce phénomène est décrit depuis de nombreuses années (Dawson TL Jr. Malassezia globosa and restricta: breakthrough understanding of the etiology and treatment of dandruff and seborrheic dermatitis through whole-genome analysis. J Investig Dermatol Symp Proc. 2007 Dec; 12(2): 15-9. Review ([6])). M. restricta serait représenté à hauteur d’environ 73% alors que M. globosa le serait à hauteur de 17%.

Malassezia, qui est la levure la plus abondante sur la peau (50-80%), en particulier sur les zones grasses de la peau, est lipophile. La lipase qu’elle possède lui permet de produire des acides gras comme l’acide oléique qui pourrait altérer la perméabilité de la barrière cutanée, conduisant à de l’inflammation et de l’irritation (Dawson Jr TL, ([6])). En effet, les états pelliculaires sont associés à une inflammation cutanée et à une altération de la fonction barrière de l’épiderme, responsable des sensations de démangeaison induisant des grattages et donc renforçant l’état pelliculaire. Il y aurait induction d’une réponse immunitaire innée, médiée probablement par une surexpression des récepteurs Toll-like de type TLR2 (Ashbee HR. Update on the genus Malassezia. Med Mycol. 2007 Jun;45(4):287-303 ([7])) Une étude récente suggère que le déséquilibre du microbiote et en particulier du ratio bactérie/levure pourrait être corrélé à un état pelliculaire (Clavaud C. et al. Dandruff is associated with disequilibrium in the proportion of the major bacterial and fungal populations colonizing the scalp. PLoS One. 2013;8(3) ([8])).

Il existe un réel besoin de nouveaux composés d’origine végétale et/ou naturels pour le soin de la peau, du cuir chevelu et des muqueuses, qui considèrent et/ou qui respectent le microbiote cutané.

Description de l’invention

La présente invention a précisément pour but de répondre à ce besoin de l’art antérieur.

Les inventeurs sont les tout premiers à utiliser des extraits d’Agave permettant précisément de répondre efficacement aux besoins précités.

La Demanderesse a identifié, de manière surprenante, qu’un extrait d’Agave tequilana, possède une action de renforcement de la fonction barrière de la peau, du cuir chevelu et/ou des muqueuses.

La Demanderesse a en effet mis en évidence, au terme d’importantes recherches, que l’utilisation de l’extrait permet de modifier la répartition du microbiote sur la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses, tout en conservant leur concentration, ce qui en fait des composés de choix pour nourrir et/ou pour hydrater la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses, tout en respectant le microbiote cutané.

Ainsi, un premier objet de l’invention se rapporte à l’utilisation cosmétique non thérapeutique d’un extrait d’Agave pour renforcer la fonction barrière de la peau, du cuir chevelu et/ou des muqueuses.

On entend par « renforcement de la fonction barrière de la peau », au sens de la présente invention, la restauration ou le maintien d’un niveau normal des échanges in/out (perte en eau) et out/in (pénétration d’agents ou de microorganismes hydrophiles) de la peau, du cuir chevelu et/ou des muqueuses. Avantageusement, le renforcement de la fonction barrière de la peau, du cuir chevelu et/ou des muqueuses permet de prévenir leur dégradation et/ou d’améliorer leur aspect. Sans vouloir être liée par un mécanisme d’action particulier, on peut émettre l’hypothèse que l’amélioration de la fonction barrière peut impliquer, ou être due, directement ou indirectement, à l’augmentation de la synthèse des protéines impliquées dans la différenciation épidermique, par exemple la kératine 10, l’involucrine ou la loricnne. Il semblerait que l’extrait d’Agave renforce la fonction barrière tout en étant capable de modifier la répartition des microorganismes en surface de la peau, du cuir chevelu et/ou des muqueuses, en jouant notamment sur la densité de certains de microorganismes, sans pour autant avoir d’effet néfaste sur le microbiote comme confirmé indépendamment via des numérations de microorganismes. Avantageusement, les microorganimes dont la densité et/ou la répartition est modifiée par application de l’extrait est au moins un microorganisme choisi dans le groupe comprenant Cutibacterium acnés, Malassezia restricta, Staphylococcus epidermidis et Malassezia sp.

Ainsi, l’invention s’entend de l’utilisation cosmétique de l’extrait pour nourrir et/ou pour hydrater la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses.

L’invention s’entend également de l’utilisation cosmétique de l’extrait pour modifier la répartition du microbiote sur la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses. Avantageusement, le microbiote concerné comprend au moins un micro-organisme choisi parmi Cutibacterium acnés, Malassezia restricta, Staphylococcus epidermidis et Malassezia sp. La modification de la répartition du microbiote peut, par exemple, être une diminution de la quantité et/ou de la densité et/ou de la surface d’agrégats d’au moins un micro-organisme sur la zone concernée. Avantageusement, le biofilm n’est pas réduit sur la zone concernée, malgré la modification de la répartition du microbiote.

On entend par « extrait d’Agave » au sens de la présente invention, tout extrait d’Agave permettant d’obtenir au moins l’un des effets cités précédemment. Il peut s’agir d’un extrait d’Agave tequilana, d’Agave americana ou d’Agave attenuata. Préférentiellement, il peut s’agir d’un extrait d’Agave tequilana.

L’agave est une plante monocotylédone, actuellement classée dans la famille des Agavaceae. Les espèces les plus courantes sont Agave tequilana, Agave americana et Agave attenuata. L’agave est endémique sur le continent américain et est présente du sud du Canada jusqu’au Nord de l’Amérique du Sud et les îles Caraïbes, en particulier au Mexique et dans toute l’Amérique centrale (Maria de la Soledad ALONSO GUTIERREZ, thèse, « Valorisation de la bagasse de l’Agave tequilana 1/1/. cv azul :

caractérisation, étude de la digestibilité et de la fermentation des sucres », 2005 ([9])).

Les agaves présentent une partie souterraine ayant la forme d’un rhizome, et une partie aérienne présentant de longues tiges et de grandes feuilles fibreuses, disposées en forme de rosette et qui finissent en épine. Les fleurs se trouvent à la fin de la tige et sont de couleur jaune-vert (ALONSO GUTIERREZ ([10])).

Les Agaves sont connues pour être des sources de sucres complexes comme par exemple les inulines. L’inuline est un polysaccharide de réserve trouvé dans les plantes de la famille des Artéracées, notamment dans les bulbes et racines de dahlias, de topinambour, d’artichauts, de pissenlits et dans la chicorée, cette dernière étant la source la plus utilisée industriellement. Constituée de 30 à 40 unités de fructose liées par des liaisons glycosidiques en β (1-2), et d’une à deux molécules de glucose placées en bout de chaîne, l’inuline est en réalité un glucofructosane. Les inulines d’agaves sont des réserves glucidiques de type fructanes (également appelées fructosanes). Des polyfructosanes ont été extraits de l’Agave tequilana Weber var. azul, âgée de 8 ans. La caractérisation de ces fructosanes indique un degré de polymérisation compris entre 3 et 29, et une composition complexe de fructo-oligosacharides avec des liaisons de β (1-2) et β (2- 6) différentes des inulines rencontrées dans les autres plantes (Lopez, M.G. ; Mancilla, N.A. ; Mendoza-Diaz, G. (2003). : Molecular structures of fructans from Agave tequilana Weber var. azul. J. Agric. Chem. 51,7835-7840 ([9]) ; ALONSO GUTIERREZ ([8])). Les inulines de chicorée ont une structure différente de celle des inulines d’agave. Elles présentent en effet des chaînes linéaires de fructose liées par des liaisons beta 2-1 alors que les inulines d’agave, même si elles sont composées également principalement de fructose, ont des structres latérales branchées à la structure principale par des liaisons béta 2-6 (Lépez, M.G. et al. ([9])).

L’extrait d’Agave peut comprendre des fructo-oligosaccharides ayant un degré de polymérisation inférieur ou égal à 10 et/ou des inulines ayant un degré de polymérisation supérieur à 10.

Les fructo-oligosaccharides peuvent avoir par exemple un degré de polymérisation compris de 3 à 10.

Les inulines peuvent avoir un degré de polymérisation supérieur strictement à 10, par exemple compris de 10 à 60, ou par exemple de 10 à 29.

L’extrait d’Agave peut comprendre ou être constitué uniquement de fructo-oligosaccharides ayant un degré de polymérisation inférieur ou égal à 10. Alternativement, l’extrait d’Agave peut comprendre ou être constitué uniquement d’inulines ayant un degré de polymérisation supérieur à 10. Par exemple, le ratio fructo-oligosaccharides sur inulines peut être compris de 100/0 à 0/100, les bornes 0/100 et 100/0 n’étant éventuellement pas incluses. Le ratio peut être par exemple de 75/25, ou de 25/75, ou de 50/50.

L’extrait d’Agave peut être obtenu par extraction des carbohydrates à partir de la bagasse, clarification de la liqueur brute obtenue à l’issue de l’extraction puis séparation pour obtenir une fraction de fructooligosaccharides ayant un degré de polymérisation inférieur ou égal à 10, et/ou une fraction d’inulines ayant un degré de polymérisation supérieur à 10. Il est entendu que les fructo-oligosaccharides et les inulines sont donc naturels, c’est-à-dire non modifiés chimiquement.

Un extrait d’Agave tequilana peut être un extrait commercial, par exemple le produit Metlos® (NEKUTLI), caractérisé par des fructooligosaccharides ayant un degré de polymérisation inférieur ou égal à 10, et/ou le produit Metlin® (NEKUTLI) caractérisé par des inulines vraies ayant un degré de polymérisation supérieur à 10. Il peut s’agir d’un mélange des produits Metlos® et Metlin®, dont le ratio peut être égal par exemple à 75/25, ou à 25/75, ou à 50/50. Dans le cadre de l’invention, tout mélange de fructooligosaccharides et d’inulines tels que défini ci-avant est considéré comme étant un extrait d’Agave au sens de la présente invention.

L’extrait d’Agave peut être appliqué sur la peau, le cuir chevelu ou les muqueuses sous la forme d’une composition cosmétique ou dermatologique, comprenant l’extrait d’Agave tel que décrit précédemment.

On entend par « composition cosmétique », dans la présente invention, toute composition à visée cosmétique, c’est à dire esthétique, une composition pouvant être mise en contact avec les parties superficielles du corps humain, par exemple l'épiderme, les systèmes pileux et capillaires. Avantageusement, une composition cosmétique permet, exclusivement ou principalement de les protéger, parfumer, maintenir en bon état, modifier leur aspect ou en corriger les défauts esthétiques superficiels.

Dans la présente, on entend par « composition dermatologique » toute composition à visée dermatologique, c’est à dire une composition pouvant être mise en contact avec les parties superficielles du corps humain, pour un traitement de la peau, notamment du cuir chevelu, et des phanères, comme les cheveux ou les poils.

La composition peut comprendre tout véhicule cosmétiquement ou dermatologiquement acceptable, adapté pour une utilisation en contact avec des cellules humaines et animales cutanées, en particulier les cellules de l’épiderme, sans toxicité, irritation, réponse allergique indue et similaire, et proportionné à un rapport avantage/risque raisonnable.

Le véhicule cosmétiquement acceptable peut par exemple être choisi parmi l’eau, la glycérine, un gel d’aloe vera, un extrait de plante aqueux, les tensio-actifs d’origine naturelle, cette liste n’étant pas limitative.

La composition cosmétique ou dermatologique telle que définie précédemment peut être obtenue par tout procédé approprié connu de l’homme du métier pour la fabrication d’une composition cosmétique. Il peut s’agir par exemple d’un mélange d’un extrait d’agave tel que défini précédemment, et d’un véhicule cosmétiquement et/ou dermatologiquement acceptable. Il peut s’agir alternativement, par exemple, d’un procédé comprenant une étape d’incorporation d’une phase interne dans une phase externe au moyen d'un émulseur, par exemple d'une turbine de type rotor stator. Il peut s’agir également par exemple d’un procédé utilisant la Température d'inversion de Phase (TIP), ce procédé étant classiquement utilisé par l'homme de l'art pour obtenir des émulsions huile dans eau dont les gouttelettes dispersées sont particulièrement fines, par exemple avec un diamètre de 0,1 à 1 pm.

La composition cosmétique ou dermatologique peut comprendre de 0,05 à 5 % en poids d’extraits d’Agave par rapport au poids total de la composition, par exemple de 0,1 à 5%, de 0,1 à 1%, de 0,25 à 1% ou de 0,25 à 0,5%.

La composition cosmétique ou dermatologique peut se trouver sous toute forme appropriée pour une application cosmétique ou dermatologique. Avantageusement, la composition est une composition à usage topique, rincée ou non rincée.

Il peut s’agir par exemple d’une composition sous une forme choisie dans le groupe comprenant une émulsion huile dans eau ou eau dans huile ou un mélange de ces émulsions.

Selon l’invention, la composition cosmétique ou dermatologique peut par exemple se trouver sous une forme choisie dans le groupe comprenant un gel aqueux ou hydroalcoolique, une crème aqueuse ou hydroalcoolique et une lotion aqueuse ou hydroalcoolique. Ces formulations utilisables pour la mise en œuvre de la présente invention sont connues dans l’état de la technique par les formulateurs. Dans ces exemples de composition, il suffit d’ajouter des extraits d’Agave de la présente invention pour obtenir une composition conforme à la présente invention.

Selon l’invention, la composition peut être sous une forme choisie parmi un shampooing, un onguent, une crème, une huile, un lait, une pommade, une poudre, une solution, un gel, un sérum, un baume, un beurre, une lotion, une suspension, un savon ou une émulsion, cette forme pouvant être rincée ou non rincée.

L’extrait de la présente invention peut être utilisé dans une composition cosmétique ou dermatologique seul ou en combinaison avec d’autres substances ou ingrédients actifs ou inactifs cosmétiquement ou dermatologiquement. Les substances ou ingrédients inactifs sont ceux qui n’agissent pas cosmétiquement ou dermatologiquement. Il s’agit des éléments de la composition permettant notamment d’accompagner l’extrait, de constituer une formulation particulière, de conserver l’extrait actif dans le temps, cette liste n’étant pas limitative. Il peut s’agir en d’autres termes de tout produit de base pouvant se trouver dans les compositions cosmétiques ou dermatologiques classiques. Par opposition, les substances ou ingrédients actifs sont ceux qui dans l’application cosmétique ou dermatologique visée ont une action esthétique et/ou médicale.

Ainsi, l’extrait d’Agave de la présente invention peut être la seule substance ou ingrédient actif d’une composition, ou il peut être associé à d’autres substances ou ingrédients actifs d’une composition cosmétique ou dermatologique.

Un autre objet de l’invention se rapporte à un procédé de soin non thérapeutique, cosmétique ou dermatologique, pour renforcer la fonction barrière de la peau, du cuir chevelu et/ou des muqueuses, comprenant une application sur la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses d’un extrait d’Agave tel que défini précédemment.

Dans le cadre des procédés cosmétiques selon l’invention, ou de l’utilisation cosmétique selon l’invention, l’utilisation s’entend d’une utilisation non-thérapeutique, par exemple pour le traitement des peaux, cuirs chevelus et muqueuses saines, c’est-à-dire notamment ne présentant pas un état pathologique et/ou pour une utilisation strictement esthétique, à l’exclusion de toute utilisation thérapeutique. En effet, l’utilisation cosmétique et esthétique de l’invention n’est pas associée à un effet thérapeutique inévitable.

Ainsi, toute utilisation cosmétique et tout procédé cosmétique selon l’invention sont respectivement des utilisations cosmétiques nonthérapeutiques et des procédés cosmétiques non-thérapeutiques, ne visant pas à traiter une pathologie.

Un autre objet de l’invention se rapporte à un extrait d’Agave pour son utilisation dans le traitement et/ou la prévention d’une inflammation plus ou moins récurrente de la peau, du cuir chevelu et/ou des muqueuses, liée à la présence plus ou moins excessive d’au moins un micro-organisme choisi parmi Cutibacterium acnés, Malassezia restricta, Staphylococcus epidermidis et Malassezia sp. L’inflammation peut comprendre une manifestation cutanée choisie parmi une démangeaison, une irritation et une rougeur. La Demanderesse a en effet constaté de manière surprenante que l’expression de la TNF-alpha, augmentée en cas de contact, est inhibée de manière très conséquente après l’application, sur la peau concernée, de l’extrait d’Agave. Avantageusement, ceci peut indiquer une réduction de l’inflammation induite par les microorganismes, le cas échéant.

D’autres avantages pourront encore apparaître à l’homme du métier à la lecture des exemples ci-dessous, illustrés par les figures annexées, donnés à titre illustratif.

Brève description des figures

La figure 1 représente l’histo-morphologie (vue en coupe) à 72h des épidermes humains reconstruits (EHR) colonisés ave Cutibacterium acnés et Malassezia restricta et traités ou non avec les extraits d’Agave, tel que décrit dans l’Exemple 2. A: Traitement sans extraits d’Agave. B: Traitement avec extraits d’Agave.

La figure 2 représente l’analyse ultrastructurale à 72h des EHR colonisés avec Cutibacterium acnés et Malassezia restricta et traités ou non avec les extraits d’Agave sont montrés sur la figure 2. A : EHR non traité. B : EHR traité avec la formule avec extraits d’Agave. C : EHR traité avec la formule sans extraits d’Agave.

EXEMPLES

Exemple 1 : Préparation des extraits d’Agave

La matière première utilisée pour la production des fructooligosaccharides de degré de polymérisation inférieur ou égal à 10 (produit commercial Metlos®) et des inulines de degré de polymérisation supérieur à 10 (produit commercial Metlin®) est l'Agave bleu biologique récoltée dans les hauts plateaux de l'État de Jalisco. Après 5 à 7 ans de croissance soigneusement contrôlée, l'Agave a la quantité maximale de fructanes, et est donc prête à être transformée.

L'agave est reçue fraîche et lavée à l'arrivée pour éliminer autant de matières étrangères que possible. L'agave est ensuite broyée en trois étapes pour passer de 40 à 100 kg de noyau d'agave à une bagasse pulpeuse, prête à être transformée en extraire les glucides.

La liqueur brute obtenue à partir de l'extraction est ensuite clarifiée pour éliminer toute couleur et impuretés restantes. Ensuite, le jus clarifié est purifié en deux fractions: Metlos® et Metlin®. Chaque produit est ensuite amené à une dernière étape de purification afin d'éliminer tous les minéraux pour obtenir une pureté élevée (> 99% de glucides).

Exemple 2 : Effet des extraits d’Agave obtenus dans l’Exemple 1 sur la communication peau/microbiote

Les études ont été réalisées sur des épidermes humains reconstruits (EHR, Episkin®) de 0,5cm², cultivés pendant 10 jours à partir de kératinocytes humains sur des inserts de polycarbonates de 0.4pm. Ce modèle reproduit la morphologie de l’épiderme. A réception au laboratoire, les EHR sont transférés dans des plaques 6 puits préalablement remplies de milieu de culture (1ml/puits) puis ils sont incubés à 37°C avec 5% de CO2, saturé en humidité, pendant 3 h avant de commencer l’étude proprement dite. Après ce délai et selon les conditions, les microorganismes de Cuti bacterium acnés et de Malassezia restricta sont inoculés à la surface des épidermes à raison d’environ 10⁷ UFC/cm² et 10⁵ UFC/cm² De l’huile d’olive de qualité alimentaire est ajoutée aux cultures en particulier pour Malassezia restricta. Après 2h de colonisation, une formule de type sérum contenant ou pas les extraits d’Agave à 0,5% est appliquée à la surface du modèle épiderme/microorganisme puis cette opération est reproduite toutes les 24h pendant 72h. A partir de l’inoculation de l’épiderme, le modèle est maintenu à 32°C, avec 5% de CO2, saturé en humidité. Après 72h de coculture et d’application de formule, différentes mesures sont effectuées, une analyse histo-morphologique par coloration avec l’hématoxyline et l’éosine, la quantification des protéines de différenciation (Involuchne, lorichne, kératine 10 - KRT10) par immunofluorescence et l’analyse ultrastucturale par microscopie électronique à balayage.

Les résultats de l’histo-morphologie à 72h des épidermes humains reconstruits (EHR) colonisés ave Cutibacterium acnés et Malassezia restricta, traités ou non avec les extraits d’Agave, sont montrés dans la Figure 1.

Comme montré sur la figure, les extraits d’Agave ne modifient pas significativement la morphologie de l’EHR.

L’évaluation de l’intensité du signal d’immunofluorescence des biomarqueurs sélectionnés Kératine 10 (KRT10), involucrine (IVL) et lorichne (LOR) est montrée dans la Tableau I.

Tableau I :

	Traitement sans extraits d’Agave	Traitement avec extraits d’Agave
KRT10	1	3
IVL	1	3
LOR	1	2

Une cotation est faite de 0 à 4 (1 : 0 ou marquage très faible, 2 : marquage diffus, 3 : marquage localisé, 4 : marquage fort).

Les 3 marqueurs de différenciation montrent que les extraits d’Agave augmentent l’intensité d’expression de ces derniers, ce qui induit une amélioration de la fonction barrière et une meilleure protection.

Les résultats de l’analyse ultrastructurale à 72h des EHR colonisés avec Cutibacterium acnés et Malassezia restricta et traités ou non avec les extraits d’Agave sont montrés sur la figure 2.

L’EHR non traité montre très clairement des agrégats conséquents de microorganismes et en particulier de Malassezia restricta qui est plus visible car plus grande que Cutibacterium acnés (environ 4-8 pm vs 2pm). Malassezia restricta est localisé en surface alors que quelques cellules de Cutibacterium acnés sont visibles en surface mais la plus grande partie recouvre l’épiderme sous forme de biofilm. Le traitement avec la formule contenant les extraits d’Agave montre une forte réduction des agrégats en surface sans pour autant réduire le biofilm. Enfin, le traitement avec la formule sans les extraits d’Agave, montrent à nouveau la présence d’agrégats même si leur densité reste moins conséquente qu’avec les EHR non traités.

Ces résultats montrent que l’extrait d’Agave renforce la fonction barrière et est capable de modifier la répartition des microorganismes en surface des EHR en jouant notamment sur la densité de Malassezia restricta, sans pour autant avoir d’effet néfaste sur le microbiote comme confirmé indépendamment via des numérations de microorganismes.

Exemple 3 : Effet d’un sérum contenant des extraits d’Agave obtenus dans l’Exemple 1 sur l’inflammation cutanée

Les études ont été réalisées sur des épidermes humain reconstruits (EHR episkin®) de 0,5cm², cultivés pendant 10 jours à partir de kératinocytes humains sur des inserts de polycarbonates de 0,4pm. Ce modèle reproduit la morphologie de l’épiderme. A réception au laboratoire, les EHR sont transférés dans des plaques 6 puits préalablement remplies de milieu de culture (1 ml/puits) puis ils sont incubés à 37°C avec 5% de CO2, saturé en humidité, pendant 3 h avant de commencer l’étude proprement dite. Après ce délai et selon les conditions, les microorganismes de Cutibacterium acnés et de Malassezia restricta sont inoculés à la surface des épidermes à raison d’environ 10⁷ UFC/cm² et 10⁵ UFC/cm² De l’huile d’olive de qualité alimentaire est ajoutée aux cultures en particulier pour Malassezia restricta. Après 2h de colonisation, une formule de type sérum contenant ou pas les extraits d’Agave à 0,5% est appliquée à la surface du modèle épiderme/microorganisme, puis cette opération est reproduite toutes les 24h pendant 72h. A partir de l’inoculation de l’épiderme, le modèle est maintenu à 32°C, avec 5% de CO2, saturé en humidité. Après 72h de coculture et d’application d’extraits d’Agave en formule, l’expression génique par qRT-PCR des marqueurs TNF-α a été mesurée.

Le Tableau II montre les quantifications de l’expression de TNF-alpha à 72h des EHR colonisés avec Cutibacterium acnés et Malassezia restricta et non traités ou traités avec la formule avec les extraits d’Agave.

Tableau II :

	EHR non traité	EHR avec formule avec extraits d’Agave
TNF-alpha	17.03	5.64

La synthèse de TNF-alpha est augmentée en cas d’infection, c’est ce que nous mesurons dans le modèle non traité avec une formule. Lorsque la formule est appliquée avec les extraits d’Agave, il y une inhibition très conséquente de son expression, indiquant une réduction de l’inflammation induite par les microorganismes.

Ces résultats montrent que le traitement avec cette formule contenant les extraits d’Agave réduit l’inflammation induite par la présence de microorganismes.

Exemple 4 : Formulation d’extraits d’Agave dans un soin de type sérum

Composants	Pourcentage (% en poids)
EAU PURIFIEE	qsp 100

EAU DE BLEUET BIO	1,1
MANGIFERINE	2
GLYCERINE 100% VEG	3
GOMME XANTHANE	0,1
GOMME TARA	0,2
ALCOOL C16/C18	1
ACETATE DE TOCOPHEROL	0,1
HUILE DE SESAME BIO	1,1
VITAMINE A	0,1
VITAMINE F	0,3
AMIDON DE MAIS	1
EXTRAIT D’AGAVE	1
ALCOOL AGRICOLE 96% VOL	6

Exemple 5 : Formulation d’extraits d’agave dans un soin de jour

Composants	Pourcentage (% en poids)
EAU PURIFIEE	qsp 100
MANGIFERINE	2
EAU DE BLEUET BIO SB YR	1,1
GLYCERINE 100% VEG	5
ACIDE SORBIQUE	0,1
METHYLPROPANE DIOL	4
GOMME XANTHANE standard	0,15
GOMME TARA	0,5
CIRES	2
METHYL GLUCOSE STEARATE	2
ACETATE DE TOCOPHEROL	0,1
LECITHINE DE SOJA	0,2
HUILE DE SESAME BIO DESODORISEE⁰⁰	2
HUILE DE COLZA RAFFINEE	3
HUILE DE SOJA IP°°	3
EXTRAIT D’AGAVE	1
HYDROXYDE DE SODIUM	0,05

Exemple 6 : Formulation d’extraits d’agave dans un soin de nuit.

Composants	Pourcentage (% en poids)
EAU PURIFIEE	qsp 100
GOMME XANTHANE	0,15

BUTYLENE GLYCOL	3
GOMME TARA	0,5
GLYCERINE 100% VEG	6
EAU DE BLEUET BIO	1,1
ACIDE SORBIQUE	0,1
ALCOOL C18-C22	3
BEURRE DE KARITE	2
HUILE DE COPRAH	2
ACETATE DE TOCOPHEROL	o,1
LECITHINE DE SOJA D 300	0,2
HUILE DE SOJA	4
VITAMINE A	0,1
VITAMINE F	0,3
EXTRAIT D’AGAVE	1

Exemple 7 : Formulation d’un extrait d’Agave dans un sérum pour soin capillaire

Composants (nom INCI)	Pourcentage (% en poids)
AQUA	54,575
GELLAN GUM	0,150
SODIUM CHLORIDE	0,075
SODIUM BENZOATE	0,500
POTASSIUM SORBATE	0,200
SALICYLIC ACID	0,150
BETAINE	2,000
LACTIC ACID & AQUA	0,150
PANTHENOL	0,200
ALOE BARBADENSIS LEAF JUICE	40,000
FRUCTOOLIGOSACCHARIDES	1,000
EXTRAIT D’AGAVE	1,000

Exemple 8 : Formulation d’un extrait d’Agave dans un shampooing

Composants (nom INCI)	Pourcentage (% en poids)
AQUA	76,660
GUAR HYDROXYPROPYLTRIMONIUM CHLORIDE	0,150
CITRIC ACID	0,090
SODIUM BENZOATE	0,500

ZINC GLUCONATE	0,500
SALICYLIC ACID	0,050
FRUCTOOLIGOSACCHARIDES	0,125
EXTRAIT D’AGAVE	0,125
COCO-GLUCOSIDE & GLYCERYL OLEATE & AQUA	3,000
DECYL GLUCOSIDE & AQUA	3,000
AMMONIUM LAURYL SULFATE & AQUA	10,400
COCAMIDOPROPYL BETAINE & AQUA	4,000
PARFUM	0,400
URTICA DIOICA EXTRACT & AQUA & GLYCERIN	1,000

Exemple 9 : Formulation d’un extrait d’Agave dans un soin nutrition pour les cheveux sous forme d’après-shampooing

Composants (nom INCI)	Pourcentage (% en poids)
AQUA	87,967
EXTRAIT D’AGAVE	0,250
FRUCTOOLIGOSACCHARIDES	0,250
PANTHENOL	0,100
SODIUM BENZOATE	0,350
BEHENTRIMONIUM CHLORIDE & ISOPROPYL ALCOHOL	3,000
STEARYL ALCOHOL	3,500
CETYL ALCOHOL	2,000
PERSEA GRATISSIMA OIL	1,000
COCOS NUCIFERA OIL	1,000
PARFUM	0,400
OLEA EUROPAEA FRUIT OIL & BETA-CAROTENE	0,003
CITRIC ACID	0,180

Listes des références

1. Chen YE, Tsao H., The skin microbiome: current perspectives and future challenges, J Am Acad Dermatol, 69(1): 143-55, 2013.

2. Kong HH, Segre JA., Skin microbiome: looking back to move forward, J Invest Dermatol, 132: 933-9, 2012.

3. Bouslimani A, Porto C, Rath CM et al., Molecular cartography of the human skin surface in 3D, Proc Natl Acad Sci USA; 112: E2120-9, 2015.

4. McGinley KJ, Leyden J J, Marples RR, Kligman AM. Quantitative microbiology of the scalp in non-dandruff, dandruff, and seborrheic dermatitis. J Invest Dermatol. 1975 Jun;64(6):401-5.

5. Sally Grimshaw, Adrian Smith, David Taylor, Philip Helme. The human scalp microbiome: Application of next generation sequencing of microbial communities. JAAD. April 2012. Volume 66, Issue 4, Supplement 1, Page AB62.

6. Dawson TL Jr. Malassezia globosa and restricta: breakthrough understanding of the etiology and treatment of dandruff and seborrheic dermatitis through whole-genome analysis. J Investig Dermatol Symp Proc. 2007 Dec; 12(2): 15-9. Review.

7. Ashbee HR. Update on the genus Malassezia. Med Mycol. 2007 Jun;45(4):287-303.

8. Clavaud C. et al. Dandruff is associated with disequilibrium in the proportion of the major bacterial and fungal populations colonizing the scalp. PLoS One. 2013;8(3).

9. Maria de la Soledad ALONSO GUTIERREZ, thèse, « Valorisation de la bagasse de I’Agave tequilana H7 cv azul : caractérisation, étude de la digestibilité et de la fermentation des sucres », 2005.

10. Lôpez, M.G. ; Mancilla, N.A. ; Mendoza-Diaz, G. (2003). : Molecular structures of fructans from Agave tequilana Weber var. azul. J. Agric. Chem. 51, 7835-7840.

Claims

REVENDICATIONS

1. Utilisation cosmétique non thérapeutique d’un extrait d’Agave pour renforcer la fonction barrière de la peau, du cuir chevelu et/ou des muqueuses.
2. Utilisation cosmétique selon la revendication 1, pour nourrir et/ou pour hydrater la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses.
3. Utilisation cosmétique selon la revendication 1 ou 2, pour modifier la répartition du microbiote sur la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses.
4. Utilisation cosmétique selon la revendication 3, dans laquelle ledit microbiote comprend au moins un micro-organisme choisi parmi Cutibacterium acnés, Malassezia restricta, Staphylococcus epidermidis et Malassezia sp.
5. Utilisation cosmétique selon l’une quelconque des revendications précédentes, dans lequel ledit renforcement implique l’augmentation d’au moins un marqueur de différenciation choisi dans le groupe comprenant la kératine 10, l’involucrine et la lohcrine.
6. Utilisation cosmétique selon l’une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle ledit extrait d’Agave comprend des fructooligosaccharides ayant un degré de polymérisation inférieur ou égal à 10 et/ou des inulines ayant un degré de polymérisation supérieur à 10.
7. Utilisation cosmétique selon la revendication 6, dans laquelle lesdits fructo-oligosaccharides ont un degré de polymérisation compris de 3 à 10.
8. Utilisation cosmétique selon la revendication 7, dans laquelle lesdites inulines ont un degré de polymérisation compris de 10 à 60.
9. Utilisation cosmétique selon la revendication 6 à 8, dans laquelle le ratio fructo-oligosaccharides sur inulines est compris de 100/0 à 0/100.
10. Utilisation cosmétique selon la revendication 9, dans laquelle le ratio fructo-oligosaccharides sur inulines est de 50/50.
11. Utilisation cosmétique selon l’une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle l’extrait d’Agave est un extrait d’Agave tequilana.
12. Utilisation cosmétique selon l’une quelconque des revendications précédentes, ladite utilisation étant sous une forme choisie parmi un shampooing, un onguent, une crème, une huile, un lait, une pommade, une solution, une poudre, un gel, un sérum, un baume, un beurre, une lotion, une suspension, un savon ou une émulsion qui peut être rincée ou non rincée.
13. Procédé cosmétique non thérapeutique pour renforcer la fonction barrière de la peau, du cuir chevelu et/ou des muqueuses, comprenant une application sur la peau, le cuir chevelu et/ou les muqueuses d’un extrait d’Agave tel que défini dans l’une quelconque des revendications 6 à 12.
14. Extrait d’Agave pour son utilisation dans le traitement et/ou la prévention d’une inflammation de la peau, du cuir chevelu et/ou des muqueuses, liée à la présence d’au moins un micro-organisme choisi parmi Cutibacterium acnés, Malassezia restricta, Staphylococcus epidermidis et Malassezia sp.
15. Extrait d’Agave pour son utilisation selon la revendication 14, dans laquelle la dite inflammation comprend une manifestation cutanée choisie parmi une démangeaison, une irritation et une rougeur.