CN113318005A

CN113318005A - 一种具有抗衰抗皱组合物及其应用

Info

Publication number: CN113318005A
Application number: CN202110534138.XA
Authority: CN
Inventors: 周秋娜; 金荣熙; 周春亚; 金炫延; 尹锺赫; 金延埈
Original assignee: Cosmax China Cosmetics Co Ltd
Current assignee: Dailaixi Biotechnology (Shanghai) Co.,Ltd.; Cosmax China Cosmetics Co Ltd
Priority date: 2021-05-17
Filing date: 2021-05-17
Publication date: 2021-08-31

Abstract

本发明提供一种具有抗衰抗皱组合物及其应用。所述组合物按重量计，由以下组分组成：低聚糖1‑5％，大分子蛋白质0.1‑0.8％，小分子寡肽0.01‑0.1％，余量为水。本发明提供了一种从整体到局部的护肤策略，即以表皮‑真皮‑肌肉为主线，全方位预防和减缓衰老现象发生，以抑制肌肉收缩的起始‑传递‑效应阶段为支线，松弛肌肉，减少表情纹产生。通过主线、支线的相辅相成，协同增效，兼具抗衰和抗皱效果。

Description

一种具有抗衰抗皱组合物及其应用

技术领域

本发明属于化妆品领域，具体涉及一种具有抗衰抗皱组合物及其应用。

背景技术

衰老，是一切生物体必然会发生的过程，是不可逆的，即使生活在最适宜的环境中也会逐渐衰老，皮肤衰老现象不尽相同，如皮肤颜色、色泽、形态、质感等外观状况的改变，其中皱纹是衰老现象最明显的标志之一。

从衰老现象维度来说，皱纹主要分为干纹、静态纹和动态纹。首先，干纹主要是皮肤屏障受损，皮肤水分、脂质、营养物质等流失导致的，和皮肤的表皮层有关。表皮细胞通过基底层干细胞的增殖分化，经由基底层、棘层、颗粒层，最终成为表皮最外层的角质层，形成独特的多层结构，是皮肤物理屏障重要的组成部分，也是关乎表皮层保湿的重要细胞。维生素D是影响表皮分化至关重要的因素之一，作用于控制表皮细胞最终分化的基因网络中心的。维生素D是一种脂溶性维生素，人体内大部分都是经由皮肤合成的，而皮肤内合成维生素D的特殊之处在于，太阳紫外线的照射必不可少。然而人体产生维生素D的能力随年龄增长而减弱，加之防晒产品的推广使用，“维生素D缺乏症”日渐流行，已经成为一个重大的全球健康问题。

静态纹是在静态下就能看到的皱纹，多是因为胶原蛋白和水分流失等导致肌肤失去弹性跟张力而形成的皱纹，随着时间的累积，静态纹会越来越深，比如说法令纹、嘴边纹就是静态纹，主要和皮肤的真皮层有关。真皮层位于皮肤表皮层下方，主要由胶原纤维及弹性纤维(主要含有弹性蛋白)所构成，是与肌肤老化有直接关系的重要部位。胶原纤维主要含有胶原蛋白，占真皮总蛋白的70％左右，具有维持皮肤张力的作用，韧性大，抗拉力强，但缺乏弹力；弹性纤维主要含有弹性蛋白，只占真皮总蛋白的2％，但却是皮肤老化产生松弛、下垂和细纹的主要原因。胶原蛋白和弹性蛋白协同工作构成皮肤的基础物质，缺一不可。但随着年龄的增长，成纤维细胞合成胶原蛋白和弹性蛋白慢慢减少，同时长时间的光照也会降解胶原蛋白和弹性蛋白，导致皮肤开始松弛、变薄、产生细纹和皱纹。

动态纹和静态纹则相反，动态纹是指面部活动时出现的皱纹，也就是有表情的时候出现的皱纹，所以也称为表情纹。丰富的面部表情变化也是皱纹产生的一个因素，展现喜怒哀乐等各种表情的肌肉称为表情肌，肌肉收缩的基本过程是起始阶段：脑啡肽受体产生神经电信号→传递阶段：电化学信号到生物电信号转换，生物电信号与受体结合，产生动作电位→效应阶段：肌肉收缩，重复的肌肉收缩运动导致表情纹加深，形成永久性皱纹。目前市面上的产品最有效的方法是注射肉毒素，阻断信号传递是改善皱纹产生，但这种方法可能会引发面瘫、肌肉僵硬、疼痛等副作用。

发明内容

基于此，本发明提供了一种从整体到局部的护肤策略，即以表皮-真皮-肌肉为主线，全方位预防和减缓衰老现象发生，以抑制肌肉收缩的起始-传递-效应阶段为支线，松弛肌肉，减少表情纹产生。通过主线、支线的相辅相成，协同增效，兼具抗衰和抗皱效果。

针对现有市场的需要，本发明的目的在于提供一种具有抗衰抗皱组合物及其应用。

本发明的目的通过以下技术方案实现：

本发明提供了一种抗衰抗皱组合物，所述组合物由以下质量百分数的组分组成：

所述低聚糖为2-10个同种或不同种单糖分子构成的聚合物；所述大分子蛋白质为胶原蛋白和弹性蛋白中的至少一种；所述小分子寡肽为氨基酸个数为2-6个的肽，包括但不限于二肽、三肽、四肽、五肽和六肽的一种或几种。

作为优选，所述组合物由以下质量百分数的组分组成：

作为优选，所述组合物由以下质量百分数的组分组成：

作为优选，所述低聚糖为非还原性低聚糖，包括但不限于低聚果糖、棉子糖、海藻糖等。

作为优选，所述大分子蛋白质，优选地是胶原蛋白：弹性蛋白的质量比为5:1。

作为优选，所述小分子寡肽为乙酰基六肽-8：芋螺肽：类蛇毒肽的质量比为2:1:1。

低聚糖是由2-10个同种或不同种单糖分子构成的聚合物，具有特殊的理化性质，如保湿、抗氧化等；另外，低聚糖也能够对皮肤起到“益生元”作用，通过刺激皮肤产生抗菌肽，增强皮肤的免疫力，对抗微生物感染，保护皮肤屏障。低聚糖分为还原性低聚糖和非还原性低聚糖，但还原糖的醛基在非酶促条件下，与蛋白质、氨基酸、脂类或核酸等大分子物质的游离氨基发生缩合、重排、裂解、氧化修饰，产生稳定的糖基化终产物(advancedglycation end products，AGE)，AGE一旦在皮肤上沉积，就不能被除去。AGE在表皮层积累，会导致新陈代谢和皮肤滋润度的降低，造成皮肤暗淡无光；在真皮层积累，胶原蛋白和弹力纤维硬化，进而断裂、受损，导致皮肤失去弹性，紧致度下降，皱纹也会慢慢显现，加上AGEs本身带有褐色，真皮层就会变黄变暗。

乙酰基六肽-8是一种仿生肽，为模仿SNAP-25蛋白的N端并由六个氨基酸组成的寡肽，通过竞争SNAP-25在融泡复合体的位点，抑制神经递质乙酰胆碱的释放，从而使肌肉收缩减弱，防止皱纹的形成。

芋螺肽是一种通过生物模拟芋螺毒素，经过排序、合成的活性肽，主要作用于肌肉细胞膜上的钠离子通道，抑制肌肉收缩的信号传递，放松肌肉，达到舒缓细纹、淡化表情纹的除皱效果。

类蛇毒肽是一种模拟蛇毒血清的活性肽，有效阻断肌肉收缩的信号传递，快速平复各类表情纹、静态纹及细纹。

通过添加这种活性肽，可以实现在分子水平上迅速改善淡化动态纹，带来即时的紧致感官体验，并达到安全、自然不僵硬的除皱效果。

本发明还提供了一种所述的组合物的制备方法，包括以下步骤：

(1)称取低聚糖加入去离子水中，50-70℃搅拌至均匀，得到第一溶剂；

(2)按比例称取大分子蛋白质，加入去离子水，低温搅拌至完全溶解，得到第二溶剂；

(3)将第一溶剂缓慢加入到第二溶剂中，搅拌混合均匀得到第三溶剂；

(4)按比例称取小分子寡肽加入到第三溶剂中，搅拌混合均匀后，补足余量水，即得所述组合物。

本发明还提供了一种所述组合物的应用，将所述组合物应用于包括水剂、乳剂、喷雾、膏霜、面膜、粉底液的化妆品中。与现有技术相比，本发明具有以下优点和有益效果：

(1)本发明提供了一种从整体到局部的护肤策略，从表皮到真皮再到肌肉，既相互区别又密不可分，全方位预防和减缓衰老现象发生。

(2)本发明提供的组合物，从局部出发，抑制表情纹的起始、传递阶段，涵盖了肌肉收缩产生皱纹的多个路径，达到快速、有效的祛皱效果。

(3)本发明提供了一种低聚糖和大分子蛋白和小分子寡肽的组合物，其中低聚糖为非还原性低聚糖，保证抗衰、抗皱功效的前提下，又能有效避免蛋白质的糖化反应。

附图说明

图1是效果例1中维生素D的作用率图(％)；

图2是效果例2中基因表达量图；

图3是效果例3中胶原蛋白表达量图；

图4为效果例4中角质层含水量增长率(％)；

图5为效果例4中皮肤光泽度改善率(％)；

图6为效果例4中眼角皱纹总体尺寸减小率(％)。

具体实施方式

以下将通过实施例来详细说明本申请的实施方式，借此对本申请如何应用技术手段来解决技术问题并达成技术功效的实现过程能充分理解并据以实施。

本申请中所用原料、设备，若无特别说明，均为本领域的常用原料、设备，均来自市售产品。本申请中所用方法，若无特别说明，均为本领域的常规方法。

本申请还存在其它多种可实施的技术方案，在此不做一一列举，本申请权利要求中要求保护的技术方案都是可以实施的。

在本发明下述的实施例及对比例中，具有抗衰抗皱组合物采用以下工艺制备：

(1)取适量低聚糖加入去离子水中，55℃搅拌至均匀，备用；

(2)按比例称取大分子蛋白质，加入去离子水，低温搅拌至完全溶解，备用；

(3)将步骤(2)所得溶液缓慢加入到步骤(1)所得溶液中，搅拌混合均匀；

(4)按比例称取小分子寡肽加入到步骤(3)所得溶液中，搅拌混合均匀后，补足余量水，即得一种具有抗衰抗皱组合物。

实施例1-9及对比例1-3，按照表1中的比例采用上述方法制备获得，并进行功效测试。

表1各实施例及对比例配方组成

	原料组成(低聚糖:大分子蛋白:小分子寡肽)
		实施例1	1:0.1:0.01
实施例2	3:0.1:0.01
		实施例3	5:0.1:0.01
实施例4	3:0.4:0.01
		实施例5	3:0.6:0.01
实施例6	3:0.8:0.01
		实施例7	3:0.6:0.04
实施例8	3:0.6:0.08
		实施例9	3:0.6:0.10
对比例1	1:0:0
		对比例2	0:1:0
对比例3	0:0:1

效果例1：维生素D受体的转录活性试验：

维生素D会激活角质形成细胞，产生“维生素D受体”(VDR)，随着VDR数量增加，处于VDR激活步骤下游的有益生物过程会更有效地激活，导致表皮分化改善，从而改善皮肤上层(角质层)的水合状态。

利用荧光素报告基因检测法检测维生素D受体(VDR)的转录活性。

阴性对照(不含组合物NT)；阳性对照(100nmol/l骨化三醇)；实施例1-9和对比例1-3的培养基中，质量浓度为0.5％。

培养正常人体表皮细胞(NHEK)播种于96孔培养板，培养24h。使用VDR荧光素酶报告基因、转染试剂对细胞进行转染，培养24h后，添加各组样品及作为基质的荧光素之后，培养24h，培养结束后溶解细胞，用光度计测定由荧光素酶活性引起的化学发光强度，并以此作为VDR的转录活性量。

类维生素D作用率＝(测试荧光强度/对照组荧光强度)*100％

结果如图1所示：

1)实施例1-9组合物的维生素D受体(VDR)的转录活性均高于对比例1-3，说明3种单一原料通过组合方式可获得更好的VDR转录活性，具有类维生素D作用；

2)实施例1-3组合物的VDR转录活性随低聚糖的增加而升高，具有一定量效关系，达到一定量后增加幅度减小，且随着低聚糖用量的增加，组合物粘度上升，影响肤感；

3)实施例2、4、5、6组合物的VDR转录活性随大分子蛋白的增加，先上升后下降，推测是因为大分子蛋白成膜，影响低聚糖的渗透吸收导致；

4)实施例5、7、8、9组合物的VDR转录活性随小分子寡肽的增加而升高，达到一定量后趋于平稳，且小分子寡肽的经济成本较高；

综上所述，3种原料不同比例组合对VDR转录活性的能力不同，优选实施例7(低聚糖：大分子蛋白：小分子寡肽＝3:0.6:0.04)。

效果例2：角质细胞基因表达试验：

Caspase14(CASP14，天冬胺酶蛋白水解酶)是参与表皮细胞的终末分化及皮肤屏障的形成，可作为评价皮肤屏障功能状态的指标。

采用实时荧光定量PCR法检测组合物对靶标基因表达量的调节。

阴性对照(不含组合物NT)；阳性对照(含0.01％质量浓度的透明质HA)；实施例1-9和对比例1-3的培养基中，质量浓度为0.1％。

HaCaT细胞以3*10⁵/孔接种至6孔板上，培养24h，细胞贴壁生长。将样品配制成1X、共2个浓度的梯度稀释剂量点，每孔2ml加入细胞板，于37℃5％CO₂恒温培养箱继续孵育24h之后，收集细胞，应用PureLink mini RNA抽提试剂盒对细胞总RNA进行提取，核酸浓度定量，每管200-800ng RNA作为模板，Taqman一步法反应(逆转录+Real Time-PCR)进行实时定量荧光PCR检测各个基因的相对表达量(20μl体系)。

计算公式：

Fold change＝2^-ΔΔCT；

-ΔΔCT＝[(CT靶标基因–CT内参基因)待测组-(CT靶标基因–CT内参基因)对照组]。

此试验中，靶标基因为CASP14，内参基因1个，为GAPDH。

结果如图2所示：

1)实施例1-9组合物的CASP14基因表达活性均高于对比例1-3，说明3种单一原料通过组合方式可获得更好促进CASP14基因表达；

2)实施例1-3组合物的CASP14基因表达活性随低聚糖的增加而升高，具有一定量效关系，但随着低聚糖用量的增加，组合物粘度上升，影响肤感；

3)实施例2、4、5、6组合物的CASP14基因表达随大分子蛋白的增加，先上升后下降，推测是因为大分子蛋白成膜，影响低聚糖的渗透吸收导致；

4)实施例5、7、8、9组合物的CASP14基因表达随小分子寡肽的增加而升高，但增加幅度不明显，且小分子寡肽的经济成本较高；

综上所述，3种原料不同比例组合对CASP14基因表达活性的能力不同，结合稳定性、肤感、经济成本等因素，优选实施例7(低聚糖：大分子蛋白：小分子寡肽＝3:0.6:0.04)。

效果例3：成纤维细胞蛋白表达试验：

人皮肤成纤维细胞(HDF)来自于皮肤真皮层，具明显的合成胶原蛋白及弹性蛋白功能。HDF细胞所合成的胶原蛋白主要为Ⅰ型胶原蛋白，并作为胶原纤维的主要成分。

HDF细胞用FM培养基补充10％新生胎牛血清、青霉素(100IU/ml)和链霉素(100μg/ml)，37℃，5％CO2条件下培养。然后取对数期的HDF细胞进行悬浮培养，调节细胞密度(细胞活力检测时，细胞密度为111111个/ml，每孔90μl加入96孔板中；Ⅰ型胶原合成检测时，细胞密度为30000个/ml，每孔2ml加入12孔板中)，37℃，5％CO2条件下培养。24h后，细胞贴壁，加入待测样品(实施例7)及阳性对照(EGF，10ng/ml)。收取上清液用ELISA试剂盒检测Ⅰ型胶原含量，所测结果以细胞数目以及未经处理的细胞所产生的胶原数量作为参比(＝100％)。结果如图3所示。

效果例4:

筛选健康志愿者30名，年龄在30-45岁。使用含1％实施例7乳液和空白乳液，每天早晚各1次，连续使用4周，利用Corneometer测试含水量，利用SkinGlossmeter测量皮肤光泽度，利用Antera 3D测量皮肤皱纹，结果如图4、图5和图6所示。

图4为角质层含水量增长率(％)。

图5为皮肤光泽度改善率(％)。

图6为眼角皱纹总体尺寸减小率(％)。

本申请说明书中未作详细描述的内容属于本领域技术人员的公知常识。

如在通篇说明书及权利要求当中所提及的“包含”为一开放式用语，故应解释成“包含但不限定于”。“大致”是指在可接收的误差范围内，本领域技术人员能够在一定误差范围内解决所述技术问题，基本达到所述技术效果。

还需要说明的是，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的商品或者系统不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种商品或者系统所固有的要素。在没有更多限制的情况下，由语句“包括一个……”限定的要素，并不排除在包括所述要素的商品或者系统中还存在另外的相同要素。

上述说明示出并描述了本申请的若干优选实施例，但如前所述，应当理解本申请并非局限于本文所披露的形式，不应看作是对其他实施例的排除，而可用于各种其他组合、修改和环境，并能够在本文所述发明构想范围内，通过上述教导或相关领域的技术或知识进行改动。而本领域人员所进行的改动和变化不脱离本申请的精神和范围，则都应在本申请所附权利要求的保护范围内。

Claims

1.一种抗衰抗皱组合物，其特征在于，所述组合物由以下质量百分数的组分组成：

低聚糖1-5％；

大分子蛋白质0.1-0.8％；

小分子寡肽0.01-0.1％；

水余量；

2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物由以下质量百分数的组分组成：

低聚糖1-3％；

大分子蛋白质0.4-0.8％；

小分子寡肽0.01-0.08％；

水余量。

3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物由以下质量百分数的组分以及化妆品领域可接受的溶剂组成：

低聚糖3％；

大分子蛋白质0.6％；

小分子寡肽0.04％；

水余量。

4.根据权利要求1-3任一所述的组合物，其特征在于，所述低聚糖为非还原性低聚糖，包括但不限于低聚果糖、棉子糖、海藻糖。

5.根据权利要求1-3任一所述的组合物，其特征在于，所述大分子蛋白质，优选地是胶原蛋白：弹性蛋白的质量比为5:1。

6.根据权利要求1-3任一所述的组合物，其特征在于，所述小分子寡肽为乙酰基六肽-8：芋螺肽：类蛇毒肽的质量比为2:1:1。

7.根据权利要求1所述的组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

8.根据权利要求1-6任一所述组合物的应用，其特征在于，将所述组合物应用于包括水剂、乳剂、喷雾、膏霜、面膜、粉底液的化妆品中。