SE503406C2 - Farmaceutisk komposition avsedd för fördröjd och styrd frisättning av vattenolösliga polypeptider samt förfarande för dess framställning - Google Patents

Description

503 406 10 15 20 25 30 35 2 vilka uppvisar en omätbart låg löslighet i en vatten- lösning vid rums- eller kroppstemperatur, och varvid trots detta en effektiv och styrd frigöring av sådana peptider erhålles, då deras kompositioner administreras parenteralt i en fysiologisk, huvudsakligen vattenhaltig omgivning.

En ny och överraskande konsekvens av föreliggande uppfinning är att polypeptiderna, vilka normalt är vatten- lösliga i naturen och då de beredes syntetiskt, med fördel kan göras vattenolösliga genom bildandet av olös- liga additionssalter, såsom med pamoinsyra, tanninsyra, stearinsyra och andra icke-toxiska, vattenolösliga syror, innan de mikroinkapslas eller dispergeras i en bioned- brytbar polymermatris.

Användningen av svagt lösliga eller vattenolösliga derivat är naturligtvis väl känd, även inom peptidområdet (jämför Schally et al, US patent 4 010 125, mars 1977, spalt 7, rad 25), då depådoseringsformer med långsam frigöring erfordras.

Då emellertid bionedbrytbara polymerer, såsom poly- mjölksyra, polyglykolsyra, polyhydroxismörsyra, polyorto- estrar, polyacetaler och liknande användes som läke- medelsavgivande system, har frigöringen av peptiderna på ett kontinuerligt sätt genomgående krävt en avse- värd vattenlöslighet. Rapporterade experiment har visat att bionedbrytbarheten för polymerer (såsom polylaktid och polylaktid-sam-glykolid) leder till vattenupptag- ning och alstrar vattenkanaler eller porer, från vilka peptider läcker ut eftersom de är vattenlösliga.

Vår upptäckt att peptider kan frigöras från matriser och mikrokapslar med ett mycket önskat frigöringsmönster då deras vattenlöslighet minskas till praktiskt taget noll-nivåer, är helt överraskande och motsäger vad som utläres av tidigare känd teknik. Speciellt har vi funnit att frigöringen av vissa peptider, såsom D-Trp6-LHRH, från polymermatriser, är bättre med avseende på enhet- lighet och varaktighet ju mera vattenolösligt additions- saltet för peptiden är. 10 15 20 25 30 35 isøz 406 3 "Vattenolöslighet“ definieras härvid såsom mängden peptid, vilken kan mätas i lösning då saltet disperge- rats och omrörts under 4 h i destillerat vatten vid en temperatur av 40°C eller därunder, varvid mängderna är 25 mg/liter eller mindre (0-25 ppm).

Det är starkt önskvärt att administrera biologiskt aktiva polypeptider kontinuerligt och under en fördröjd tidsperiod, från l vecka till flera månader. Det är också starkt önskvärt att frigöringsmönstret kan kont- rolleras för att undvika ojämn frigöring av peptiden vid början, i mitten eller vid slutet av den terapeu- tiska cykeln. Man har ofta funnit att peptiderna fri- göres från bionedbrytbara matriser i skurar (även kallat skureffekter), slutet då den polymera matrisen har eroderats genom antingen vid början av cykeln eller vid hydrolys.

Ett viktigt drag av föreliggande uppfinning är en styrning av frigöringsmönstret och i allmänhet en minskning av den initiella skureffekten. Den vatten- olösliga peptiden frigöres i mindre grad än dess vatten- lösliga derivat, vilket således ger en mera utsträckt frigöringstid och varvid man undviker att överdosera patienten. Genom att omvandla en normalt vattenlöslig peptid till en olöslig sådan kan vi begränsa den ini- tiella skureffekten (dvs mängden peptid som frigöres under de första 24 h) till mindre än 30% av den totala dosen.

Exempel I 50 g av en sampolymer av D,L-laktid och glykolid med ett 50/50 molförhållande mellan D,L-laktid och gly- kolid och en medelmolekylvikt av 50 000 upplöstes i 950 g metylenklorid.

Lösningen lâtes passera genom ett milliporfilter för att avlägsna allt partikelformigt material och pyro- gener. Till denna lösning sättes 1 g D-Trp6-LHRH-pamoat och dispergeras med en högskjuvande blandare. 10 15 20 25 30 35 406 4 Den resulterande blandningen placeras i en rota- tionsindunstare och merparten av metylenkloriden avlägs- nas under vakuum. Den resulterande, tjocka dispersionen hälles på en glasplatta och sprides med hjälp av ett reglerbart bladset till 0,7 mm.

Efter lufttorkning vakuumtorkas den resulterande filmen under 48 h och extruderas därefter genom ett 0,8 mm munstycke vid 70°C under tryck. De resulterande stavarna males kryogent vid -40°C.

Det resulterande granulära materialet siktas genom en 180 um sikt och underkornfraktionen uppsamlas och steriliseras genom att den utsättes för gammastrâlning mellan 2,5 och 2,8 Mrad.

Exempel II Samma procedur som i exempel I följes, varvid D-Trp6- -LHRH-pamoatet ersättes med D-Trp6-LHRH-stearatsalt.

Exempel III Samma procedur som i exempel I följes med pamoat- saltet av D-Phe-Cvs-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Trp-NH2 som den vattenolösliga peptiden.

Exempel IV Förfarandet i exempel I tillämpas med ett av följande vattenolösliga pamoatsalter: D-Na1(2)6-LHRH-pamoat D-Ser(O-tBu)6-des Gly D-Ser(But)6~LHRH(l-9)-etylamidpamoat 10 10 10 -Azgly -LHRH-pamoat D-Leu6-des-Gly -LHRH-etylamidpamoat Exempel V Förfarandet från exemplen I-IV följes med D,L-1aktid- 10 15 20 25 503 406 5 -sam-glykolidpolymerer i vilka molförhållandet är 67% D,L-laktid, 33% glykolid, 75% D,L-laktid, 25% glykolid eller 100% D,L-laktid.

Exempel VI Förfarandet från exemplen I-V följes med det vatten- olösliga pamoatet, tannatet eller stearatsaltet av en ACTH, kalci- av följande peptider: oxitocin, vasopressin, tonin, epidermal tillväxtfaktor, prolaktin, inhibin, LHRH, somatostatin, insulin, glukagon, atrial GHRH, interferon, natriuretisk faktor, endorfin, en renin inhibitor, peptid-T, eller syntetiska analoger och modifieringar därav.

Frigöringsmönster hos djur (råttor) Ett typiskt frigöringsmönster för en implanterad sammansättning av D-Trp6-LHRH-pamoat i råttor är föl- jande: ng/ml av radioaktivt märkt D-Trp6-LHRH i plasma (medeltal för 6 råttor): (to) 0,04, (1 h) 7,74, (6 h) 0,80, (dag 2) 0,85, (dag 4) 0,77, (dag 7) 0,25, (dag 11) 0,12, (dag 14) 0,11, (dag 18) 0,11, (dag 21) 0,14, 25) 0,18.

De föregående exemplen är inte begränsande till (dag de beskrivna, vattenoläsliga peptiderna eller till de utnyttjade bionedbrytbara polymererna, vilket framgår för en fackman inom omrâdet.

Claims (12)

505 10 15 20 25 30 35 406 6 PATENTKRAV

1. Farmaceutisk komposition avsedd för fördröjd och styrd frisättning av ett läkemedel under en utsträckt tidsperiod, k ä n n e t e c k n a d av att den innefattar en vattenolöslig peptid dispergerad i en polylaktid, en sampolymer av mjölksyra och glykolsyra, eller en blandning av sådana polymerer, vilken, när den placeras i en vattenhaltig omgivning av fysiologisk typ, frigör peptiden kontinuerligt under en period av åtminstone l vecka och med en initiell frisättning under de första 24 h som inte överstiger 30% av den totalt frisatta mängden.

2. Farmaceutisk komposition avsedd för fördröjd och styrd frisättning av ett läkemedel under en utsträckt tidsperiod, k ä n n e t e c k n a d av att den innefattar en vattenolöslig peptid mikroinkapslad i en polylaktid, en sampolymer av mjölksyra och glykolsyra, eller en blandning av sådana polymerer, vilken, när den placeras i en vattenhaltig omgivning av fysiologisk typ, frigör peptiden kontinuerligt under en period av åtminstone l vecka ochimed en initiell frisättning under de första 24 h som inte överstiger 30% av den totalt frisatta mängden.

3. Farmaceutisk komposition enligt krav l eller 2, k ä n n e t e c k n a d av att den vattenolösliga peptiden är en farmaceutiskt godtagbart salt av LHRH eller en syntetiskt beredd analog därav.

4. Farmaceutisk komposition enligt krav 1, 2 eller 3, k ä n n e t e c k n a d av att det farmaceutiskt godtagbara saltet är valt ut gruppen pamoatsalt, tannatsalt och stearatsalt.

5. Farmaceutisk komoposition enligt krav 1 eller 2, k ä n n e t e c k n a d av att den vattenolösliga peptiden är ett farmaceuptiskt godtagbart salt av kalcitonin, epidermisk oxitocin, vasopresin, ACTH, tillväxtfaktor, prolaktin, inhibin, interferon, 10 15 20 25 30 35 503 406 7 somatostatin, atrial natriuretísk faktor, ett tillväxthormon-frigörande hormon, peptid T eller insulin, glukagon, endorfin, en renin-inhibitor, syntetiska analoger och modifieringar därav.

6. Farmaceutisk komoposition enligt något av kraven 1-4, peptiden är pamoatsaltet av D-Trp6-LHRH. k ä n n e t e c k n a d av att den vattenolösliga

7. Farmaceutisk komoposition enligt något av kraven 1, 2 eller 5, vattenolösliga peptiden är pamoatsaltet av k ä n n e t e c k n a d av att den D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Trp-NH2

8. Farmaceutisk komoposition enligt något av kraven 1-7, k ä n n e t e c k n a d av att den har formen av injicerbara partiklar som har en storlek av 1-500 um.

9. Farmaceutisk komoposition enligt något av kraven 1-7, fast form steriliserad med hjälp av gammastrålning och k ä n n e t e c k n a d av att den föreligger i är lämplig för subkutan implantation.

10. Farmaceutisk komoposition enligt något av kraven 1-8, k ä n n e t e c k n a d av att den är steriliserad med gammastrålning och suspenderad i en farmaceutiskt godtagbar bärare, vilken är lämplig för parenteral administrering.

11. Förfarande för framställning av en komposition att ett vattenolösligt peptidsalt dispergeras i en lösning av en enligt krav 1-7, k ä n n e t e c k n a t av polylaktid, en polyglykolid, en sampolymer av mjölksyra och glykolsyra, eller en blandning av sådana polymerer, att lösningsmedlet torkas bort och att den resulterande blandningen formas till fasta partiklar, vilka är lämpliga för parenteral injicering eller subkutan implantation.

12. Förfarande för framställning av en komposition av att ett enligt krav 1-8, k ä n n e t e c k n a t 503 406 8 vattenolösligt peptidsalt dispergeras i en lösning av en polylaktid, en polyglykolid, en sampolymer av mjölksyra och glykolsyra, eller en blandning av sådana polymerer, att ett koacerveringsmedel tillsätts och att de 5 resulterande mikrokapslarna hälles i en farmaceuptiskt godtagbar härdande vätska och att mikrokapslarna uppsamlas från denna suspension.