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PATENTANSPRÜCHE
1. (Co) oligomere Hydroxycarbonsäure, deren Carboxylgruppe mindestens teilweise mit einem Fettalkohol oder einem Sterol verestert oder mit einer Aminosäure oder mit einem Peptid amidiert ist, deren (Co) Oligomeranteil ein Molgewicht von 500 bis 10 000 hat und Milchsäure- und/oder Glykolsäureeinheiten enthält.
2. (Co) oligomere Hydroxycarbonsäure gemäss Anspruch 1 mit einem (Co) Oligomeranteil, das für mindestens 70 Gewichts-% aus Milchsäureeinheiten aufgebaut ist.
3. (Co) oligomere Hydroxycarbonsäure gemäss Anspruch 1, mit einem (Co) Oligomeranteil, das aus bis 60 Gewichts-% Glykolsäureeinheiten aufgebaut ist.
4. (Co) oligomere Hydroxycarbonsäure gemäss Anspruch 1, mit einer Säurezahl zwischen 10 und 20.
5. (Co) oligomere Hydroxycarbonsäure gemäss Anspruch 1, mit einer Säurezahl bis maximal 1,5.
6. (Co) oligomere Hydroxycarbonsäure gemäss Ansprüchen 1-5, aus einer (Co oligomeren Hydroxycarbonsäure, mit einer aromatischen Aminosäure amidiert.
7. Verfahren zur Herstellung eines Produktes gemäss Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass man die freie (Co) oligomere Hydroxycarbonsäure unter thermischen und/oder wasserentziehenden Bedingungen mit einer mindestens äquimolären Menge einer Aminosäure oder Peptid amidiert.
8. Verfahren gemäss Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, dass bei der Umsetzung mit der Aminosäure, die Carboxylgruppe der freien (Co) oligomeren Hydroxycarbonsäure auf die Amidierung durch Aktivierung vorbereitet wird.
9. Verfahren zur Herstellung eines Produktes gemäss Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass man die freie (Co) oligomere Hydroxycarbonsäure unter thermischen und/oder wasserentziehenden Bedingungen mit einer mindestens äquimolären Menge eines Fettalkohols oder eines Sterols verestert.
10. Pharmazeutische Zusammensetzung, aus einer wirkstoffenthaltenden Matrix, die aus einem Produkt gemäss Anspruch 1 besteht, in Form von Mikrokapseln, bzw. Implantate.
Die Erfindung betrifft (Co) oligomere Hydroxycarbonsäurederivate und deren Herstellung und Verwendung in pharmazeutischen Zusammensetzungen. (Co) oligomere Hydroxycarbonsäuren sind kettenförmige Polyester mit einem Molgewicht zwischen etwa 500 und 10 000, können aus gleichen oder verschiedenen Hydroxycarbonsäureeinheiten aufgebaut sein und besitzen eine Hydroxylgruppe und eine Carboxylgruppe als endständige Gruppen. Durch Derivierung der Carboxylgruppe entstehen Produkte mit hervorragenden Eigenschaften und entsprechender Einsetzbarkeit.
Gegenstand der Erfindung sind (Co) Oligohydroxycarbonsäuren, deren Carboxylgruppe mindestens teilweise mit einem Fettalkohol oder einem Sterol verestert oder mit einer Aminosäure oder mit einem Peptid amidiert sind, deren (Co) Oligomeranteil ein Molgewicht von 500 bis 10 000 haben und aus Milchsäure- und/oder Glykolsäureeinheiten aufgebaut sind, hiernach als erfindungsgemässe Produkte angedeutet. Die Bestimmung der Molgewichte kann mittels verschiedener Methoden vorgenommen werden, z.B. durch Dampfdruckerniedrigung und Gelpermeationschromatographie. Diese Methoden liefern jedoch keine gleichen Resultate und sind jeweils besser für verschiedene Molgewichtsbereiche geeignet.
Es werden für die Molgewichtsbereiche von 500 bis 5000 die aus der Dampfdruckerniedrigung berechneten Werte und für die Bereiche über 5000 die aus der Gelpermeationschromatographie bestimmten Werte genommen. Die obenbeschriebenen (Co) oligomere Hydroxycarbonsäuren sind aus Milchsäureeinheiten, aus Glykolsäureeinheiten oder aus Kombinationen beider Säureeinheiten aufgebaut, können jedoch auch noch andere Hydroxycarbonsäureeinheiten enthalten.
Aus dem obenbeschriebenen Produktebereich werden vorzugsweise solche Produkte genommen mit einem (Co) Oligomeranteil, das für mindestens 70 Gew.-% aus Milchsäureeinheiten aufgebaut ist, und zwar besonders solche, deren (Co) Oligomeranteil ein Molgewicht von 500 bis 5000, speziell 500 bis 3000, besonders 500 bis 2000, hat. Ebenfalls werden aus dem Produktebereich vorzugsweise solche Produkte genommen mit einem (Co) Oligomeranteil, das aus bis 60 Gew.-% aus Glykolsäureeinheiten aufgebaut ist, besonders solche mit 10 bis 50 Gew.-% Glykolsäureeinheiten. Die Produkte mit bis 60 Gew.-% Glykolsäureeinheiten besitzen vorzugsweise einen (Co) Oligomeranteil mit einem Molgewicht von 1000 bis 5000, besonders 1000 bis 3000, speziell 1000 bis 2500.
Andere mögliche Produkte aus dem Produktebereich sind solche mit einem (Co) Oligomeranteil, das für mindestens 70 Gew.-% aus Glykolsäureeinheiten aufgebaut ist. Vorzugsweise werden solche Produkte genommen, dessen (Co) Oligomeranteil ein Molgewicht von 500 bis 1500 hat.
Wie bereits oben erwähnt, können die Produkte in ihrem (Co) Oligomeranteil noch andere Hydroxycarbonsäureeinheiten enthalten als Milchsäure oder Glykolsäure. Auch andere a- bis s-Hydroxycarbonsäureeinheiten, z.B. ±-Hydroxy- capronsäureeinheiten, sind möglich, wobei vorzugsweise bis maximal 30 Gew.-% von diesen anderen Hydroxycarbonsäureeinheiten im (Co) oligomeranteil vorhanden ist.
Die Milchsäureeinheiten können als Racemat, als optisch aktives Gemisch oder als Antipode vorliegen.
Die erfindungsgemässen Produkte können hergestellt werden, indem man die freien (Co) oligomeren Hydroxycarbonsäuren unter thermischen und wasserentziehenden Bedingungen mit einer mindestens äquimolären Menge des Fettalkohols oder Sterols verestert oder der Aminosäure oder des Peptids amidiert. Vorzugsweise werden dabei keine Katalysatoren verwendet, welche die (Co) oligomeren Hydroxycarbonsäuren polymerisieren und dadurch ihre Molgewichte vergrössern. Am besten wird ohne Katalysator gearbeitet. Bei der Amidierung wird vorzugsweise die Carboxylgruppe der freien (Co) oligomeren Hydroxycarbonsäure in bekannter Weise, z.B. durch Imidbildung aktiviert, wonach die Amidierung durch Abspaltung der Imidgruppe stattfinden kann.
Vorzugsweise wird das Komponentgemisch auf 1500 bis 200 aufgeheizt und das freiwerdende Wasser abdestilliert.
Die erfindungsgemässen Produkte für die Umhüllung sind im weitesten Sinne Gemische aus den veresterten oder amidierten (Co) oligomeren Hydroxycarbonsäuren, den freien (Co) oligomeren Hydroxycarbonsäuren und den Fettalkoholen, Sterolen, Aminosäuren oder Peptiden. Jedoch kann die Umsetzung weitgehend so gesteuert werden, dass praktisch nur noch veresterte oder amidierte (Co) oligomere Hydroxycarbonsäuren entstehen.
Die Menge der noch vorhandenen freien (Co) oligomeren Hydroxycarbonsäuren wird durch die Säurezahl ausgedruckt und wird durch Titration der Masse mit einer KOH-Lösung bestimmt. Vorzugsweise haben die erfindungsgemässen Produkte eine Säurezahl bis 20, wie zwischen 10 und 20.
Zusätzlich kann noch eine Reinigung vorgenommen werden, wobei die Menge der freien (Co) oligomeren Hydroxycarbonsäuren herabgesetzt wird, z.B. durch Säulenchromatographie.
Dadurch können erfindungsgemässe Produkte erhalten
werden, für welche eine Säurezahl unter 2, vorzugsweise unter 1,5 bestimmt wird.
Die anderen Reaktionskomponenten, der Fettalkohol, der Sterol, die Aminosäure oder das Peptid, können in anderer Weise quantitativ bestimmt werden, z.B. durch Dünnschichtchromatographie oder, z.B. im Fall von Cholesterol als Sterol, durch Bestimmung der Jodzahl. Bereits ohne Reinigung ist von diesen anderen Reaktionskomponenten nur noch weniger als 2 Gewichts.-%, besonders weniger als 1,5 Gew.-% vorhanden.
Die erfindungsgemässen Produkte enthalten oder sind vorzugsweise Ester aus Sterolen wie Cholesteryl- oder Dihydrocholesterylester oder Ester aus (C1222)Fettalkoholen, wie Cetyl, Stearyl oder Behenylester oder Amide aus neutralen, sauren oder basischen Aminosäuren oder deren Peptide.
Als neutrale Aminosäuren sind Glycin, Alanin, Valin, Leucin, Phenylalanin, Prolin oder Tryptophan geeignet, als saure Aminosäuren Glutamin- oder Asparaginsäure und als basische Aminosäuren Arginin, Lysin, Histidin oder Ornithin.
Bevorzugt werden Amide aus aromatischen Aminosäuren wie Phenylalanin und Tyrosin oder deren Peptide.
Die erfindungsgemässen Produkte haben alle vorzugsweise eine Grenzviskosität unter 0,1 = (100 ml/g) in Benzol oder Chloroform 25,0 "C.
Sie werden vorzugsweise verwendet zur Herstellung von Mikrokapseln oder Implantaten, besonders zur Herstellung von pharmazeutischen Zusammensetzungen mit wirkstoffenthaltenden Mikrokapseln für orale oder intramuskuläre Verabreichungen oder Implantaten für subkutane Verabreichung, da die Mikrokapseln oder Implantate aus körpereigenen Komponenten aufgebaut sind.
Die Mikrokapseln oder Implantate aus den erfindungsgemässen Produkten werden im Körper rascher abgebaut als solche aus Polymilchsäure oder aus Poly-Lactid-Glykolid und weisen im Körper eine regelmässige und, abhängig vom Wirkstoff, langsamere Abgabe dieses Wirkstoffes auf.
Ausserdem wird bei der Herstellung der erfindungsgemässen Mikrokapseln der Wirkstoff, abhängig von seiner Art, besser eingebaut.
Die Herstellung der erfindungsgemässen Zusammensetzungen kann in an sich bekannter Weise stattfinden. Zur Herstellung der Mikrokapseln wird z.B. der Wirkstoff in einem flüchtigen Lösungsmittel, wie CHC13, gelöst, wonach eine Lösung des Umhüllungsmaterials zugegeben und die entstandene homogene Phase versprüht und während des Sprühens getrocknet wird.
Eine Alternative ist, dass der Wirkstoff zusammen mit dem Umhüllungsmaterial in ein mit Wasser nicht mischbares flüchtiges Lösungsmittel gebracht und der Wirkstoff darin gelöst oder suspendiert und das Umhüllungsmaterial darin gelöst wird, wonach die organische Phase unter Rühren in eine wässrige Lösung, welche Gelatin oder Polyvinylpyrrolidon als Emulgator enthält, getropft, aus der entstandenen Emulsion das organische Lösungsmittel entfernt und die entstandenen Mikrokapseln abfiltriert oder abzentrifugiert, in einer Pufferlösung gewaschen und schliesslich getrocknet werden.
Zur Herstellung der Implantate wird z.B. der Wirkstoff mit dem Umhüllungsmaterial vermischt und in einem flüchtigen Lösungsmittel gelöst. Das Lösungsmittel wird abgedampft und der Rückstand zu einem Pulver verrieben, woraus ein Extrudat gebildet wird. Dieses Extrudat wird verschnitten und liefert damit das Implantat.
Die Mikrokapseln können, abhängig vom Wirkstoff, durchschnittlich bis etwa 60 Gew.-% 0/0 Wirkstoff aufnehmen.
Die Implantate werden vorzugsweise in solcher Weise hergestellt, dass sie bis 60 Gew.-% Wirkstoff enthalten.
Die Mikrokapseln können in ihrem Durchmesser von einigen Submikrons bis Millimeter variieren. Für pharmazeutische Zusammensetzungen ist der Durchmesser höchstens etwa 250 Il, damit der Durchgang durch die Injektionsnadel nicht erschwert wird.
Die Mikrokapseln sind brauchbar zur Verabreichung von weit auseinander liegenden Typen von Verbindungen, z.B. biologisch aktiven wie Antikonzeptiva, Beruhigungsmittel, Steroide, Sulphonamide, Vakzine, Vitamine, Antimigränemittel, Enzyme, Bronchodilatatoren, kardiovaskuläre Wirkstoffe, Analgetika, Antibiotika, Antigene, Antikonvulsiva, Entzündungshemmer, Anti-Parkinson Wirkstoffe und Anti-Malariamittel.
Die pharmazeutischen Zusammensetzungen können für die bekannten Indikationen der betreffenden Wirkstoffe angewendet werden.
Die Mengen der Wirkstoffe und der zu verabreichenden Zusammensetzungen werden von verschiedenen Faktoren abhängen, z.B. von dem zu behandelnden Zustand, von der gewünschten Zeitdauer und von der biologischen Abbaubarkeit der (Co) oligomeren Matrix.
Die pharmazeutischen Zusammensetzungen können, wenn in Form von Mikrokapseln, als Suspension in einem geeigneten flüssigen Träger, intramuskulär, und wenn als Implantat, subkutan verabreicht werden.
Die Zusammensetzung kann erneut verabreicht werden, wenn das Matrixmaterial genügend abgebaut worden ist, z.B. nach 1 bis 2 Monaten.
Chemische Herstellung von Ausgangsprodukten D,L-Oligomilchsäure
A. 1 In einem 2 1 Sulfierkolben mit Thermometer, Gaseinleitkapillare, Liebigkühler und Vakuumanschluss werden 1600 g optisch inaktive Milchsäure vorgelegt und unter einem schwachen Argon-Strom auf eine Badtemperatur von 160 "C aufgeheizt. Nach 8 Stunden ist ein klares farbloses Destillat angefallen. Dann wird 4 Stunden lang bei 100 Torr weiterdestilliert, dann weitere 4 Stunden bei 20 Torr. Dann wird noch 3 Stunden bei 10 Torr destilliert. Die Säurezahl des Sumpfes ist 30, entsprechend einem durchschnittlichen Molekulargewicht von 1870. Das Produkt wird heiss auf eine Porzellanschale geleert, erkalten gelassen und dann kalt vermahlen.
Schmelzbereich des Produktes 40600, Säurezahl 30.
Molgewicht bestimmt durch Dampfdruckerniedrigung ist 2000. Das Produkt ist völlig amorph und löst sich gut in Aceton und Methylenchlorid bei Raumtemperatur.
In analoger Weise werden Produkte hergestellt mit den folgenden Kenndaten:
Molgewicht
Grenzvis- Säure- aus Säure- aus Dampf kosität zahl zahl druckernie drigung A.2 D,L-Oligomilchsäure 0,04 25,0 2240 2400 A.3 D,L-Oligomilchsäure 0,03 25,0 2240 2100 A.4 L-Oligomilchsäure 104 538 A.5 L-Oligomilchsäure 63,5 882
Molgewicht
Grenzvis- Säure- aus Säure- aus Dampf kosität zahl zahl druckernie drigung A.6 L-Oligomilchsäure 48,5 1154 A.7 D,L-Oligomilchsäure 0,01 27,0 2070 A.8 D,L-Oligomilchsäure 0,01 18,8 2980 A.9 D,L-Oligomilchsäure 0,03 23 2400 A. 10 D,L-Oligomilchsäure 12 4590 Co-oligo-DL-Lactid-Glykolid
A. 11 In einem 2 1 Sulfierkolben mit Thermometer, Gaseinleitung, Rückflusskühler und Vakuumanschluss werden 1350,0 g optisch inaktive Milchsäure (72 Gew.-%ige wässri- ge Lösung) und 150,6 g Glykolsäure vorgelegt.
Unter Durchleiten eines schwachen Argon-Stromes wird auf eine Sumpftemp. von 160 hochgeheizt. Der Rückflusskühler wird durch einen absteigenden Kühler ersetzt. Nach 8 Stunden sind 295 ml Destillat abgetrennt und Wasser abdestilliert. Dann wird der Druck auf 100 Torr gesenkt und 2 Stunden dabei gehalten. Der Druck wird weiter auf 20 Torr gesenkt und 8 Stunden dabei gehalten. Die Sumpftemperatur wird dabei auf 1 80C erhöht. Die Säurezahl des Sumpfes ist zu diesem Zeitpunkt 48 entsprechend einem durchschnittlichen Molekulargewicht von 1170. Dann wird noch weitere 8 Stunden bei 10 Torr gehalten. Die Säurezahl ist dann 31,7 (Molgewicht 1770). Es sind insgesamt 555 ml Destillat angefallen. Das Produkt wird heiss auf eine Porzellanschale entleert, erkalten gelassen und dann kalt vermahlen.
Es entsteht ein hellgelbes Pulver, Schmelzbereich 40-60 , Säurezahl 31,7.
Das durch Dampfdruckerniedrigung ermittelte Molgewicht ist 1900. Mikroanalyse C 48,20%, H 5,61%, 046,30%, 84 Gew.-% Milchsäureeinheiten gemäss NMR.
In analoger Weise werden Produkte hergestellt mit den folgenden Kenndaten:
Molgewicht
Säure- aus Säure- aus Dampf- Gew.-% Mikroanalyse Gew.-% zahl zahl druckernie- Milchsäure drigung nach NMR
C H O A.12 23 2430 1820 89 A.13 23 2430 1870 81 A.14 29 1930 1770 84 48,2 5,6 46,3 A.15 31 1800 1800 75 48,0 5,5 46,7 A.16 28 2000 1910 71 A.17 25 2240 1820 50 Oligoglykolsäure A. 18 In einem 750 ml Sulfierkolben mit Thermometer, Liebigkühler und Gaseinleitkapillare werden 500 g feste Glykolsäure vorgelegt und auf eine Sumpftemperatur von 160 "C erhitzt. Es wurde zunächst 2 Stunden bei Normaldruck, dann 2 Stunden bei 100 Torr und zuletzt zwei weitere Stunden bei 10 Torr destilliert. Der noch heisse Sumpf wird auf eine Porzellanschale geleert und erstarrt sofort zu einer weissen wachsartigen Masse.
Der Rückstand hat eine Säurezahl 79, ein Molgewicht 700 und einen Schmelzbereich von 140-190 .
Chemische Herstellung der erssndungsgemässen Produkte: (Co) oligo-DL-Lactid-Glykolid-cholesterylester
E.1 In einem 2 1 Sulfierkolben mit Thermometer, Liebigkühler, Gaseinleitung und Rührer werden unter Argon-Spülung und guter Rührung 927 g des Cooligo-DL-Lactid-Glykolids A. 15 und 298,2 g Cholesterin (0,77 Mol; Molverhältnis Cooligomer zu Cholesterin = 1:1,5) aufgeschmolzen.
Sumpftemperatur 1700. Es wird 6 Stunden bei 10 Torr gerührt. Dann wird die heisse gelbbraune Masse auf eine Porzellanschale geleert und erkalten gelassen. Das Produkt hat die Säurezahl 14,6, Verseifungszahl 588, Jodzahl 14,0; das Molgewicht durch Dampfdruckerniedrigung ist 1140. Der Gehalt an freiem Cholesterin ist 1,0-2,0 Gew.-% nach Dünnschichtchromatographie an freies Lactid* 1,0 Gew.-%, der Wassergehalt ist 0,25 Gew.-% und der Schmelzbereich 70-90 -. Mikroanalyse C 56,60%, H 6,90%, 0 36,30%.
In analoger Weise werden Produkte hergestellt mit den folgenden Kenndaten: Produkt E.2 E.3 E.4 Molverhältnis 1:1 1:2 1:1,5 Oligomer: Cholesterin Säurezahl 17,6 13,2 15,7 Verseifungszahl 643 582 575 Molgewicht aus 1370 1150 1140 Dampfdruckerniedr.
Gehalt freies* Lactid 1,3 99 1,0 (Gew.-%) Gehalt freies 0,7-1,0 1,0-1,5 ca. 1,0 Cholesterin (Gew.-%) Wassergehalt 0,20 (Gew.-%) Schmelzbereich (DSC) 40-50 40-50' 60-80" C (Gew.-%) 54,0 57,6 56,9 H (Gew.-%) 6,4 6,8 6,8 O (Gew.-%) 39,2 35,8 36,3 Gew.-% Cholesterin 13,1 23,2 24,1 in Einsatzmischung Herstestellt aus (Co)- A.9 A.9 A. 11 oligomerer Hydroxycarbonsäure * cyclische Komponente 1:
4 r Reinigung der Co(JIigo !- actitl-Glykolid-cholesteryl- X xl( r 1 .4 und E.2 I(N)() g des Cooligo-D L- Lactid-Glykolid-cholesterylesters 1i.4 werden in 2,5 Liter Isopropylacetat bei Raumtemperatur gelöst. Die Lösung wird auf eine Chromatographiesäule, die mit Kieselgel Qualität Merck 60 Korngrösse 0,063-0,200 mm (Nr. 7734) gefüllt ist, aufgebracht und mit weiterem Isopropylacetat eluiert. Die einzelnen Fraktionen werden am rotierenden Verdampfer bei Badtemperaturen von 140 zur Trockenen eingedampft und dann noch 6 Stunden im Trokkenschrank bei 1300 und 1 Torr getrocknet.
Die nachfolgende Tabelle gibt die einzelnen Fraktionen wieder: Fraktion Gewicht in g Säurezahl Nr. trocknen 1,8 0,2
2 22,9 0,4
3 98,0 0,2
4 192,0 0,6
5 196,0 3,8
6 136,9 8,0
7 81,8 12,8
8 65,8 15,5
9 51,3 20,3 10 22,2 24,9
868,9
Die ersten 4 Fraktionen werden vereinigt, in trockenem Zustand gut gemischt und bei 1300 noch 2 Stunden nachbehandelt und dann nach dem Erkalten wieder gemahlen.
Es resultiert ein Produkt mit den Spezifikationen: Freies Cholesterin 0,5 Gew.-%, Säurezahl 0,5, Jodzahl 13,7, Verseifungszahl 600, Gehalt Schwermetalle unter 20 ppm, Molgewicht nach Dampfdruckerniedrigung 1320, Schmelzbereich 40-60 , Gehalt freies Lactid* unter 0,2 Gew.-%, Gehalt freies Glykolid* unter 0,5 Gew.-%, Gehalt Isopropylacetat 0,02 Gew.-%, Gehalt Glührückstand unter 0,03 Gew.-%. Mikroanalyse C 59,70, H 7,62, 0 32,90. Molmassen nach GPC,** Mw 2980 MN 2000.
E. 1 .r In analoger Weise wird der Cooligo-DL-Lactid Glykolid-cholesterylester E.1 gereinigt. Diejenige Fraktionen die eine Säurezahl kleiner als 1,5 aufweisen, werden vereinigt und weiter verarbeitet. Es resultiert ein Produkt mit den folgenden Spezifikationen: Gehalt freies Cholesterin 1,5 Gew.-%, Säurezahl 1,2, Jodzahl 13,7, Verseifungszahl 590, Gehalt Schwermetalle unter 20 ppm., Molgewicht nach Dampfdruckerniedrigung 1160, Schmelzbereich 4060 "C, Gehalt freies Lactid* 0,2 Gew.-%, Gehalt freies Glykolid* unter 0,5 Gew.-%, Gehalt Isopropylacetat 0,02 Gew.-%, Gehalt Glührückstand 0,03 Gew.-%, Mikroanalyse C 59,50, H 7,60, 0 33,20, Molmassen nach GPC** Mw = 2850, MN = 2021.
* cyclische Komponente ** GPC = Gelpermeationschromatographie E.5 DL-Oligolactoyl-N- (L) -Phenylalanin a) Ester aus DL-Oligomilchsäure- und Hydroxysuccinimid
30 g (0,015 mol) D,L-Oligomilchsäure A.7 und 1,7 g (0,015 mol) N-Hydroxysuccinimid werden in 100 ml Äthylacetat suspendiert. Zu dieser Suspension wird, innerhalb 1 Minute, 3,1 g (0,015 mol) Dicyclohexylcarbodiimid portionenweise zugegeben. Die Zugabe ist leicht exotherm und die Mischung wird mit Wasserbad gekühlt. Die braunbeige Suspension ändert sich mit der Zeit zu einer sehr dicken, weissen Suspension. Nach 23 Stunden wird die Suspension abfiltriert, der Filterkuchen mit 2 x 10 ml Äthylacetat gewaschen. Die klare Mutterlauge wird am Rotavapor, bei 50 "C Bad Temperatur eingedampft. Die sehr visköse Masse wird im Vakuumtrockenschrank, bei 50 über 24 Stunden getrocknet.
Man erhält ein leicht gelbes harziges Produkt mit folgenden NMR: lH-NMR 360 MHz, Lösungsmittel CDC13: ppm 5,50 (m, 1H, CH-OH Ketteende); 5,18 (m, 27H, C11-C- in der Kette); 4,39 (m, 1H, CH-C-O Ketteende); 2,86 (S, 4H, CH2 in Succinimidyl); 1,72 (m, 3H, CH3-C-OH Ketteende); 1,57 (m, 81H, C113- in der Kette); 1,48 (d, 3H, CH3-C-Ketteende).
b) DL-Ollgolactoyl-N- (L)-Phenylolanin
2,4 g (0,0145 mol) L-Phenylalanin werden in einer Lösung aus 1,2 g (0,0145 mol) Natriumbicarbonat und 104 ml Wasser suspendiert. Nach 10 Minuten rühren wird eine Lösung von 30,0 g (0,0145 mol) (i)Oligolactoylhydroxysuccin- imid in 104 ml Tetrahydrofuran, innert 25 Minuten, tropfenweise zugegeben. Die Zugabe ist leicht exotherm. Die Reaktionsmischung wird 72 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, das pH ist am Ende 6,6 und wird mittels 1N Chlorwasserstoffsäure auf 4,0 gestellt. Die Phasen werden getrennt und die wässrige Phase zweimal mit je 200 ml Methylenchlorid ausgeschüttelt. Die vereinigten organischen Phasen werden zweimal mit je 100 ml Wasser gewaschen. Die entstandene Lösung wird über Magnesiumsulfat getrocknet, dann am Rotavapor eingedampft.
Der Rückstand wird im Vakuumtrockenschrank 48 Stunden bei Raumtemperatur getrocknet.
Man erhält eine leicht gelbe Substanz. Nach NMR Messungen ist die Umsetzung 60%.
NMR-360 MHz in CDC13: ppm 7,25 (m. 3.8H, AR NH); 5,38 8m, 1H, -CH-C-Ketteende); 5,21 (m, 27H, CH- C- in der Kette); 5,06 (m, 0,6H, CH-OH Ketteende); 4,38 (m, 0.6H, -CH-N); 3,07-3,32 (m, 1,2H, CH2-Ar); 1,57 (m.
81n, CH3 in der Kette); 1,46 (m, 6H, CH3-Ketteende). GPC: M3 4860; Nn 3200; MW/Mn = 1,52; Säurezahl: 17,3.
K. 1 Man löst 2,5 g Bromokryptin mesylat in 20 ml Methanol p.a. und 7,5 g D,L-Oligolactoyl-N-(L)-phenylalanin (E.5) in 180 ml Methylenchlorid p.a. mischt die beiden Lösungen und sprühtrocknet unter den folgenden Bedingungen:
Transportleistung der Pumpe: 600 mlgh.
Eingangstemperatur: 59.
Ausgangstemperatur: 39.
Ventilation auf Position 11.
Luftstrom auf 310 Nl/h.
Die so erhaltenen Mikrokapseln sind kleiner als 0,125 mm und lassen sich sehr gut dispergieren und mit einer Injektionsnadel applizieren ohne Aggregate zu bilden. Die Mikrokapseln weisen eine Einbauquote von 20 Gew.- /e auf, bezogen auf das Gesamtgewicht. Die in vitro Freisetzung wird bei pH 4,0 und 37 (Zitrat/Phosphatpuffer) nach der rotating paddle-Methode (US-PXX) bei 120 > /mm gemessen.
Ergebnisse % Freisetzung an Bromo kryptine-mesylat Zeit (Min.) Kapselmatrix aus E.5
60 2,4
120 2,4
180 2,5
300 2,6
420 2,6 1440 3,1
K.2 10 g DL-Oligo-Lactid-Glycolid-Cholesterylester (E.l.r) werden unter Rühren in 250 g Methylenchlorid gelöst. 10 g Dihydroergotamin werden zugegeben und intensiv suspendiert. Die Suspension wird in einem Sprühtrockner bei 55 "C innerhalb von 10 Minuten zu Mikrokapseln versprüht. Das Produkt fällt als freifliessendes Pulver an.
Die Teilchengrösse der Mikrokapseln ist kleiner als 0,125 mm. In einem Vergleichsversuch werden in zwei gleichen Volumen Pufferlösung (pH = 4) von 37 "C jeweils eine Menge des reinen Wirkstoffes und eine gleiche Menge des Wirkstoffes, in Mikrokapseln eingebaut, gelöst. In der Zeitspanne in der sich der reine Wirkstoff fast 100%ig gelöst hat, wurde von den Kapseln unter gleichen Lösebedingungen nur 7% des Wirkstoffes freigesetzt, was bedeutet, dass mindestens 93% des Wirkstoffes in den Kapseln aufgenommen wurde und zurückgeblieben ist.
Implantatenherstellung
1.1 25 mg Ketotifen und 475 mg DL-Cooligo-Lactid Glykolid-cholesterylester (E.4) werden vermischt und in einem Mörser verrieben. Das entstandene Pulver wird in 25 ml Methylenchlorid gelöst. Das Lösungsmittel wird in einem rotierenden Verdampfer in 20 Minuten bei Raumtemperatur und unter vermindertem Druck entfernt und der Rückstand
10 Minuten in einem Wasserbad auf 50 erwärmt. Der erhaltene Film wird in einem Mörser verrieben. Aus dem gebildeten Pulver wird bei einer Temperatur von 66680 ein Extrudat mit einem Durchmesser von 1 mm gebildet, das, in Längen von 20 mm geschnitten, als Implantat verwendet wird.
Dieses Implantat wird subkutan injiziert.
In analoger Weise werden Implantate aus folgenden Komponenten hergestellt: 1.225 mg Bromokryptin-mesylat und 475 mg DL-Oligo
Lactid-cholesterylester (E.2)
1.3 25 mg Dihydroergotamin und 475 mg DL-Cooiigo Lactid-Glykolid-cholesterylester (E.4.r) Abbaugeschwindigkeit in wässrigem Medium
In einem in vitro Versuch wurde von den erfindungsgemässen Verbindungen im Vergleich zu den freien polymeren Hydroxycarbonsäuren und (co) polymeren Hydroxycarbonsäuren ein beschleunigter Abbau in Wasser und gegenüber den nicht derivatisierten co-oligomeren Hydroxycarbonsäuren ein verbesserter verlangsamter Abbau festgestellt:
Filme aus den folgenden Produkten wurden in Wasser von 37 aufbewahrt und deren Gewichtsverlust nach einer Zeitspanne bestimmt:
Gewichtsverlust nach Tagen:
:
13 40 54 90 Cooligo-DL-Lactid Glykolid(A.15) 37% 100% Copoly-DL-Lactid Glykolid 0,1% 75 Gew.-% Lactid; Mw = 28 000 Cooligo-DL-Lactid Glykolid-cholesteryl- 2% 45% ester (E.l.r) L-Polymilchsäure Mw = 40 000 2% Grenzviskosität = 0,68
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PATENT CLAIMS
1. (Co) oligomeric hydroxycarboxylic acid, the carboxyl group of which is at least partially esterified with a fatty alcohol or a sterol or amidated with an amino acid or with a peptide, the (co) oligomer component of which has a molecular weight of 500 to 10,000 and lactic acid and / or glycolic acid units contains.
2. (Co) oligomeric hydroxycarboxylic acid according to claim 1 with a (co) oligomer component which is made up of at least 70% by weight of lactic acid units.
3. (Co) oligomeric hydroxycarboxylic acid according to claim 1, with a (co) oligomer component which is composed of up to 60% by weight of glycolic acid units.
4. (Co) oligomeric hydroxycarboxylic acid according to claim 1, with an acid number between 10 and 20.
5. (Co) oligomeric hydroxycarboxylic acid according to claim 1, with an acid number of up to 1.5.
6. (Co) oligomeric hydroxycarboxylic acid according to claims 1-5, from a (co oligomeric hydroxycarboxylic acid, amidated with an aromatic amino acid.
7. A process for producing a product according to claim 1, characterized in that the free (co) oligomeric hydroxycarboxylic acid is amidated with an at least equimolar amount of an amino acid or peptide under thermal and / or dehydrating conditions.
8. The method according to claim 7, characterized in that in the reaction with the amino acid, the carboxyl group of the free (co) oligomeric hydroxycarboxylic acid is prepared for the amidation by activation.
9. A process for producing a product according to claim 1, characterized in that the free (co) oligomeric hydroxycarboxylic acid is esterified under thermal and / or dehydrating conditions with an at least equimolar amount of a fatty alcohol or a sterol.
10. Pharmaceutical composition, from an active ingredient-containing matrix, which consists of a product according to claim 1, in the form of microcapsules or implants.
The invention relates to (co) oligomeric hydroxycarboxylic acid derivatives and their production and use in pharmaceutical compositions. (Co) oligomeric hydroxycarboxylic acids are chain polyesters with a molecular weight between about 500 and 10,000, can be constructed from the same or different hydroxycarboxylic acid units and have a hydroxyl group and a carboxyl group as terminal groups. The derivation of the carboxyl group results in products with excellent properties and corresponding applicability.
The invention relates to (co) oligohydroxycarboxylic acids whose carboxyl group is at least partially esterified with a fatty alcohol or a sterol or amidated with an amino acid or with a peptide, the (co) oligomer content of which has a molecular weight of 500 to 10,000 and which consists of lactic acid and / or glycolic acid units are constructed, hereafter indicated as products according to the invention. The molecular weights can be determined using various methods, e.g. by lowering the vapor pressure and gel permeation chromatography. However, these methods do not provide the same results and are better suited for different molecular weight ranges.
The values calculated from the lowering of the vapor pressure are taken for the molecular weight ranges from 500 to 5000 and the values determined from the gel permeation chromatography for the ranges above 5000. The (co) oligomeric hydroxycarboxylic acids described above are built up from lactic acid units, from glycolic acid units or from combinations of both acid units, but can also contain other hydroxycarboxylic acid units.
From the product range described above, such products are preferably taken with a (co) oligomer fraction which is made up of at least 70% by weight of lactic acid units, especially those whose (co) oligomer fraction has a molecular weight of 500 to 5000, especially 500 to 3000 , especially 500 to 2000, has. Products with a (co) oligomer content which is composed of up to 60% by weight of glycolic acid units, particularly those with 10 to 50% by weight of glycolic acid units, are preferably also taken from the product area. The products with up to 60% by weight glycolic acid units preferably have a (co) oligomer fraction with a molecular weight of 1000 to 5000, particularly 1000 to 3000, especially 1000 to 2500.
Other possible products from the product range are those with a (co) oligomer fraction which is made up of at least 70% by weight of glycolic acid units. Products are preferably used whose (co) oligomer content has a molecular weight of 500 to 1500.
As already mentioned above, the products in their (co) oligomer content may contain other hydroxycarboxylic acid units than lactic acid or glycolic acid. Other a to s-hydroxycarboxylic acid units, e.g. ± -Hydroxycaproic acid units are possible, preferably up to a maximum of 30% by weight of these other hydroxycarboxylic acid units being present in the (co) oligomer portion.
The lactic acid units can be present as a racemate, as an optically active mixture or as an antipode.
The products according to the invention can be prepared by esterifying the free (co) oligomeric hydroxycarboxylic acids under thermal and dehydrating conditions with an at least equimolar amount of the fatty alcohol or sterol or amidating the amino acid or the peptide. It is preferred not to use catalysts which polymerize the (co) oligomeric hydroxycarboxylic acids and thereby increase their molecular weights. It is best to work without a catalyst. In the amidation, the carboxyl group of the free (co) oligomeric hydroxycarboxylic acid is preferably used in a known manner, e.g. activated by imide formation, after which the amidation can take place by cleavage of the imide group.
The component mixture is preferably heated to 1500 to 200 and the water released is distilled off.
The products according to the invention for the coating are in the broadest sense mixtures of the esterified or amidated (co) oligomeric hydroxycarboxylic acids, the free (co) oligomeric hydroxycarboxylic acids and the fatty alcohols, sterols, amino acids or peptides. However, the reaction can largely be controlled so that practically only esterified or amidated (co) oligomeric hydroxycarboxylic acids are formed.
The amount of free (co) oligomeric hydroxycarboxylic acids still present is printed out by the acid number and is determined by titrating the mass with a KOH solution. The products according to the invention preferably have an acid number of up to 20, such as between 10 and 20.
In addition, cleaning can be carried out, the amount of free (co) oligomeric hydroxycarboxylic acids being reduced, e.g. by column chromatography.
Products according to the invention can thereby be obtained
are, for which an acid number below 2, preferably below 1.5 is determined.
The other reactants, the fatty alcohol, the sterol, the amino acid or the peptide, can be quantified in other ways, e.g. by thin layer chromatography or, e.g. in the case of cholesterol as sterol, by determining the iodine number. Even without cleaning, there is only less than 2% by weight, particularly less than 1.5% by weight, of these other reaction components.
The products according to the invention preferably contain or are esters from sterols such as cholesteryl or dihydrocholesteryl esters or esters from (C1222) fatty alcohols such as cetyl, stearyl or behenyl esters or amides from neutral, acidic or basic amino acids or their peptides.
Glycine, alanine, valine, leucine, phenylalanine, proline or tryptophan are suitable as neutral amino acids, glutamic or aspartic acid as acidic amino acids and arginine, lysine, histidine or ornithine as basic amino acids.
Amides of aromatic amino acids such as phenylalanine and tyrosine or their peptides are preferred.
The products according to the invention preferably all have an intrinsic viscosity below 0.1 = (100 ml / g) in benzene or chloroform 25.0 "C.
They are preferably used for the production of microcapsules or implants, in particular for the production of pharmaceutical compositions with active substance-containing microcapsules for oral or intramuscular administrations or implants for subcutaneous administration, since the microcapsules or implants are built up from the body's own components.
The microcapsules or implants from the products according to the invention are broken down more rapidly in the body than those made from polylactic acid or from poly-lactide glycolide and have a regular and, depending on the active ingredient, slower release of this active ingredient in the body.
In addition, depending on its type, the active ingredient is better incorporated in the production of the microcapsules according to the invention.
The compositions according to the invention can be prepared in a manner known per se. For the production of the microcapsules e.g. the active ingredient is dissolved in a volatile solvent, such as CHC13, after which a solution of the coating material is added and the resulting homogeneous phase is sprayed and dried while spraying.
An alternative is that the active ingredient is placed together with the coating material in a water-immiscible volatile solvent and the active ingredient is dissolved or suspended in it and the coating material is dissolved therein, after which the organic phase is stirred with an aqueous solution, which gelatin or polyvinylpyrrolidone as Emulsifier contains, added dropwise, the organic solvent removed from the resulting emulsion and the resulting microcapsules filtered off or centrifuged, washed in a buffer solution and finally dried.
For the manufacture of the implants e.g. the active ingredient is mixed with the wrapping material and dissolved in a volatile solvent. The solvent is evaporated and the residue is triturated to a powder, from which an extrudate is formed. This extrudate is cut and thus delivers the implant.
Depending on the active ingredient, the microcapsules can absorb an average of up to about 60% by weight of 0/0 active ingredient.
The implants are preferably manufactured in such a way that they contain up to 60% by weight of active ingredient.
The diameter of the microcapsules can vary from a few submicrons to millimeters. For pharmaceutical compositions, the diameter is at most about 250 Il, so that the passage through the injection needle is not made more difficult.
The microcapsules are useful for the administration of widely spaced types of compounds, e.g. biologically active such as anticonceptives, sedatives, steroids, sulphonamides, vaccines, vitamins, antimigraine drugs, enzymes, bronchodilators, cardiovascular agents, analgesics, antibiotics, antigens, anticonvulsants, anti-inflammatories, anti-Parkinson agents and anti-malaria drugs.
The pharmaceutical compositions can be used for the known indications of the active compounds in question.
The amounts of the active ingredients and the compositions to be administered will depend on various factors, e.g. on the condition to be treated, on the desired length of time and on the biodegradability of the (co) oligomeric matrix.
The pharmaceutical compositions, when in the form of microcapsules, as a suspension in a suitable liquid carrier, intramuscularly, and when as an implant, can be administered subcutaneously.
The composition can be re-administered when the matrix material has degraded sufficiently, e.g. after 1 to 2 months.
Chemical production of starting products D, L-oligo-lactic acid
A. 1 1600 g of optically inactive lactic acid are placed in a 2 1 sulfonation flask with thermometer, gas inlet capillary, Liebig cooler and vacuum connection and heated to a bath temperature of 160 "C under a weak stream of argon. After 8 hours, a clear colorless distillate is obtained. Then The distillation is continued for 4 hours at 100 torr, then for a further 4 hours at 20 torr. Then the distillation is continued for 3 hours at 10 torr. The acid number of the bottoms is 30, corresponding to an average molecular weight of 1870. The product is poured hot onto a porcelain dish, let cool and then grind cold.
Melting range of the product 40600, acid number 30.
Molecular weight determined by lowering the vapor pressure is 2000. The product is completely amorphous and dissolves well in acetone and methylene chloride at room temperature.
Products are manufactured in an analogous manner with the following characteristics:
Molecular weight
Boundary vis- acid- from acid- from vapor viscosity number number pressure reduction A.2 D, L-oligo-lactic acid 0.04 25.0 2240 2400 A.3 D, L-oligo-lactic acid 0.03 25.0 2240 2100 A.4 L -Oligo-lactic acid 104 538 A.5 L-oligo-lactic acid 63.5 882
Molecular weight
Boundary vis- acid- from acid- from vapor viscosity number number pressure reduction A.6 L-oligo-lactic acid 48.5 1154 A.7 D, L-oligo-lactic acid 0.01 27.0 2070 A.8 D, L-oligo-lactic acid 0.01 18.8 2980 A.9 D, L-oligo-lactic acid 0.03 23 2400 A. 10 D, L-oligo-lactic acid 12 4590 co-oligo-DL-lactide-glycolide
A. 11 1350.0 g of optically inactive lactic acid (72% by weight aqueous solution) and 150.6 g of glycolic acid are placed in a 2 1 sulfonation flask with thermometer, gas inlet, reflux condenser and vacuum connection.
Passing a weak argon current to a sump temp. heated by 160. The reflux condenser is replaced by a descending condenser. After 8 hours, 295 ml of distillate are separated off and water is distilled off. Then the pressure is reduced to 100 torr and held for 2 hours. The pressure is further reduced to 20 torr and held there for 8 hours. The bottom temperature is increased to 1 80C. At this point in time, the acid number of the sump is 48, corresponding to an average molecular weight of 1170. The mixture is then kept at 10 Torr for a further 8 hours. The acid number is then 31.7 (molecular weight 1770). A total of 555 ml of distillate was obtained. The hot product is emptied onto a porcelain bowl, left to cool and then ground cold.
A light yellow powder is formed, melting range 40-60, acid number 31.7.
The molecular weight determined by lowering the vapor pressure is 1900. Microanalysis C 48.20%, H 5.61%, 046.30%, 84% by weight of lactic acid units according to NMR.
Products are manufactured in an analogous manner with the following characteristics:
Molecular weight
Acid from acid from steam% by weight Microanalysis% by weight number of printers Lactic acid purification according to NMR
CHO A.12 23 2430 1820 89 A.13 23 2430 1870 81 A.14 29 1930 1770 84 48.2 5.6 46.3 A.15 31 1800 1800 75 48.0 5.5 46.7 A.16 28 2000 1910 71 A.17 25 2240 1820 50 oligoglycolic acid A. 18 500 g of solid glycolic acid are placed in a 750 ml sulfonation flask with a thermometer, Liebig cooler and gas inlet capillary and heated to a bottom temperature of 160 ° C. It was initially run for 2 hours at normal pressure, then distilled for 2 hours at 100 torr and finally two more hours at 10 torr. The still hot sump is emptied onto a porcelain bowl and immediately solidifies to a white waxy mass.
The residue has an acid number 79, a molecular weight 700 and a melting range of 140-190.
Chemical production of the products according to the invention: (Co) oligo-DL-lactide-glycolide-cholesteryl ester
E.1 927 g of Cooligo-DL-lactide glycolide A. 15 and 298.2 g of cholesterol (0.77 mol; molar ratio.) Are placed in a 2 1 sulfonation flask with thermometer, Liebig cooler, gas inlet and stirrer under argon purging and stirring well Cooligomer melted to cholesterol = 1: 1.5).
Bottom temperature 1700. The mixture is stirred at 10 torr for 6 hours. Then the hot yellow-brown mass is emptied onto a porcelain bowl and allowed to cool. The product has an acid number of 14.6, saponification number 588, iodine number 14.0; the molecular weight by lowering the vapor pressure is 1140. The content of free cholesterol is 1.0-2.0% by weight after thin layer chromatography of free lactide * 1.0% by weight, the water content is 0.25% by weight and Melting range 70-90 -. Microanalysis C 56.60%, H 6.90%, 0 36.30%.
Products are manufactured in an analogous manner with the following characteristics: Product E.2 E.3 E.4 Molar ratio 1: 1 1: 2 1: 1.5 Oligomer: cholesterol Acid number 17.6 13.2 15.7 Saponification number 643 582 575 Molecular weight from 1370 1150 1140 low steam pressure.
Content free * lactide 1.3 99 1.0 (% by weight) Content free 0.7-1.0 1.0-1.5 approx.1.0 cholesterol (% by weight) Water content 0.20 ( Wt%) Melting Range (DSC) 40-50 40-50 '60-80 "C (wt%) 54.0 57.6 56.9 H (wt%) 6.4 6.8 6 , 8 O (% by weight) 39.2 35.8 36.3% by weight cholesterol 13.1 23.2 24.1 in feed mixture Manufactured from (Co) - A.9 A.9 A. 11 oligomeric Hydroxycarboxylic acid * cyclic component 1:
4 r Purification of the Co (JIigo! - actitl-glycolide-cholesteryl-X xl (r 1 .4 and E.2 I (N) () g of the Cooligo-D L-lactide-glycolide-cholesteryl ester 1i.4 are carried out in 2 , 5 liters of isopropyl acetate at room temperature The solution is applied to a chromatography column which is filled with silica gel quality Merck 60 grain size 0.063-0.200 mm (No. 7734) and eluted with further isopropyl acetate The individual fractions are on a rotating evaporator at bath temperatures evaporated to dryness from 140 and then dried for 6 hours in a drying cabinet at 1300 and 1 torr.
The following table shows the individual fractions: Fraction Weight in g Acid number no. Dry 1.8 0.2
2 22.9 0.4
3 98.0 0.2
4 192.0 0.6
5 196.0 3.8
6 136.9 8.0
7 81.8 12.8
8 65.8 15.5
9 51.3 20.3 10 22.2 24.9
868.9
The first 4 fractions are combined, mixed well in the dry state and aftertreated at 1300 for 2 hours and then ground again after cooling.
The result is a product with the specifications: free cholesterol 0.5% by weight, acid number 0.5, iodine number 13.7, saponification number 600, content of heavy metals below 20 ppm, molecular weight after vapor pressure reduction 1320, melting range 40-60, content of free lactide * below 0.2% by weight, free glycolide content * below 0.5% by weight, isopropyl acetate content 0.02% by weight, glow residue content below 0.03% by weight. Microanalysis C 59.70, H 7.62, 0 32.90. Molar masses according to GPC, ** Mw 2980 MN 2000.
E. 1 .r The Cooligo-DL-lactide glycolide-cholesteryl ester E.1 is purified in an analogous manner. Those fractions that have an acid number less than 1.5 are combined and processed further. The result is a product with the following specifications: free cholesterol content 1.5% by weight, acid number 1.2, iodine number 13.7, saponification number 590, content heavy metals below 20 ppm., Molecular weight after lowering the vapor pressure 1160, melting range 4060 "C., Free lactide content * 0.2% by weight, free glycolide content * below 0.5% by weight, isopropyl acetate content 0.02% by weight, glowing residue content 0.03% by weight, microanalysis C 59.50 , H 7.60, 0 33.20, molecular weights according to GPC ** Mw = 2850, MN = 2021.
* cyclic component ** GPC = gel permeation chromatography E.5 DL-oligolactoyl-N- (L) -phenylalanine a) ester of DL-oligo-lactic acid and hydroxysuccinimide
30 g (0.015 mol) of D, L-oligo-lactic acid A.7 and 1.7 g (0.015 mol) of N-hydroxysuccinimide are suspended in 100 ml of ethyl acetate. 3.1 g (0.015 mol) of dicyclohexylcarbodiimide are added in portions to this suspension within 1 minute. The addition is slightly exothermic and the mixture is cooled with a water bath. The brown-beige suspension changes over time to a very thick, white suspension. After 23 hours, the suspension is filtered off and the filter cake is washed with 2 × 10 ml of ethyl acetate. The clear mother liquor is evaporated on a Rotavapor at a bath temperature of 50 ° C. The very viscous mass is dried in a vacuum drying cabinet at 50 for 24 hours.
A slightly yellow resinous product is obtained with the following NMR: 1 H-NMR 360 MHz, solvent CDC13: ppm 5.50 (m, 1H, CH-OH chain end); 5.18 (m, 27H, C11-C- in the chain); 4.39 (m, 1H, CH-C-O chain end); 2.86 (S, 4H, CH2 in succinimidyl); 1.72 (m, 3H, CH3-C-OH chain end); 1.57 (m, 81H, C113- in the chain); 1.48 (d, 3H, CH3-C chain end).
b) DL-olgolactoyl-N- (L) -phenylolanine
2.4 g (0.0145 mol) of L-phenylalanine are suspended in a solution of 1.2 g (0.0145 mol) of sodium bicarbonate and 104 ml of water. After stirring for 10 minutes, a solution of 30.0 g (0.0145 mol) of (i) oligolactoylhydroxysuccinimide in 104 ml of tetrahydrofuran is added dropwise over the course of 25 minutes. The addition is slightly exothermic. The reaction mixture is stirred for 72 hours at room temperature, the pH is 6.6 at the end and is adjusted to 4.0 using 1N hydrochloric acid. The phases are separated and the aqueous phase is extracted twice with 200 ml of methylene chloride. The combined organic phases are washed twice with 100 ml of water. The resulting solution is dried over magnesium sulfate, then evaporated on a Rotavapor.
The residue is dried in a vacuum drying cabinet at room temperature for 48 hours.
A slightly yellow substance is obtained. According to NMR measurements, the conversion is 60%.
NMR 360 MHz in CDC13: ppm 7.25 (m. 3.8H, AR NH); 5.38 8m, 1H, -CH-C chain end); 5.21 (m, 27H, CH-C- in the chain); 5.06 (m, 0.6H, CH-OH chain end); 4.38 (m, 0.6H, -CH-N); 3.07-3.32 (m, 1.2H, CH2-Ar); 1.57 (m.
81n, CH3 in the chain); 1.46 (m, 6H, CH3 chain end). GPC: M3 4860; Nn 3200; MW / Mn = 1.52; Acid number: 17.3.
K. 1 2.5 g of bromocryptin mesylate are dissolved in 20 ml of methanol p.a. and 7.5 g D, L-oligolactoyl-N- (L) -phenylalanine (E.5) in 180 ml methylene chloride p.a. mix the two solutions and spray dry under the following conditions:
Transport capacity of the pump: 600 mlgh.
Inlet temperature: 59.
Initial temperature: 39.
Ventilation in position 11.
Air flow to 310 Nl / h.
The microcapsules thus obtained are smaller than 0.125 mm and can be very easily dispersed and applied with an injection needle without forming aggregates. The microcapsules have an installation rate of 20% by weight, based on the total weight. The in vitro release is measured at pH 4.0 and 37 (citrate / phosphate buffer) according to the rotating paddle method (US-PXX) at 120> / mm.
Results% release of bromo cryptine mesylate time (min.) Capsule matrix from E.5
60 2.4
120 2.4
180 2.5
300 2.6
420 2.6 1440 3.1
K.2 10 g of DL-oligo-lactide-glycolide-cholesteryl ester (E.l.r) are dissolved in 250 g of methylene chloride with stirring. 10 g of dihydroergotamine are added and suspended intensively. The suspension is sprayed into microcapsules within 10 minutes in a spray dryer at 55 ° C. The product is obtained as a free-flowing powder.
The particle size of the microcapsules is less than 0.125 mm. In a comparative experiment, an amount of the pure active ingredient and an equal amount of the active ingredient, incorporated into microcapsules, are dissolved in two equal volumes of buffer solution (pH = 4) of 37 ° C. In the period in which the pure active ingredient is almost 100% pure only 7% of the active ingredient was released from the capsules under the same dissolving conditions, which means that at least 93% of the active ingredient was absorbed in the capsules and remained.
Implant manufacturing
1.1 25 mg ketotifen and 475 mg DL-Cooligo-lactide glycolide-cholesteryl ester (E.4) are mixed and ground in a mortar. The resulting powder is dissolved in 25 ml of methylene chloride. The solvent is removed in a rotary evaporator in 20 minutes at room temperature and under reduced pressure and the residue
Warmed to 50 in a water bath for 10 minutes. The film obtained is ground in a mortar. An extrudate with a diameter of 1 mm is formed from the powder formed at a temperature of 66680, which, cut into lengths of 20 mm, is used as an implant.
This implant is injected subcutaneously.
Analogously, implants are made from the following components: 1,225 mg bromocryptin mesylate and 475 mg DL-oligo
Lactide cholesteryl ester (E.2)
1.3 25 mg dihydroergotamine and 475 mg DL-Cooiigo lactide-glycolide-cholesteryl ester (E.4.r) degradation rate in aqueous medium
In an in vitro experiment, the compounds according to the invention compared to the free polymeric hydroxycarboxylic acids and (co) polymeric hydroxycarboxylic acids showed an accelerated degradation in water and, compared to the non-derivatized co-oligomeric hydroxycarboxylic acids, an improved slow degradation:
Films from the following products were stored in water from 37 and their weight loss determined after a period of time:
Weight loss after days:
:
13 40 54 90 Cooligo-DL-lactide glycolide (A.15) 37% 100% copoly-DL-lactide glycolide 0.1% 75% by weight lactide; Mw = 28,000 Cooligo-DL-lactide glycolide-cholesteryl-2% 45% ester (E.l.r) L-polylactic acid Mw = 40,000 2% intrinsic viscosity = 0.68