CN110123658B - 一种具有自组装聚集体结构的超分子多肽及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种具有自组装聚集体结构的超分子多肽,是由有机羧酸盐‑多肽双组分复合物自组装形成的,有机羧酸盐和多肽之间通过疏水作用及静电引力作用聚集成纳米和微米级自组装体。本发明提供了一种具有自组装聚集体结构的超分子多肽,超分子多肽中的分子间作用力为非共价键作用力,能够缓慢释放出多肽,使用本发明所述超分子多肽后,皮肤表面的多肽浓度至少能在12h内维持在较高水平,缓释效果优良;所述方法的工艺条件十分温和,不会破坏多肽本身的结构,因而能够保证多肽的生物活性;所述方法的工艺简单,易于实现工业化生产。

Description

一种具有自组装聚集体结构的超分子多肽及其制备方法
技术领域
本发明涉及化妆品领域,具体为一种具有自组装聚集体结构的超分子多肽及其制备方法。
背景技术
皮肤是人体内部器官和组织的保护者,同时也是内部器官、精神与周围环境的效应器官,对人体的健康和美丽起着尤为重要的作用。皮肤组织细胞的增殖、细胞趋化与迁移、修复与再生、血管形成与重建、色素形成与清除、蛋白合成与分泌等皮肤自然老化的防御和护理过程中,活性生物多肽起着重要的生理作用。
多肽是由两个或两个以上氨基酸通过肽键共价连接形成的天然活性物质,其与机体物质同源、分子量小、生化生理机制明确,是目前公认比较安全的美容护肤原料。目前,市场上的多肽类产品多种多样,但作用比较单一,一般都是将多肽溶液直接加入到配方中,其有效利用率普遍偏低,而且安全性方面问题也有待考究。鉴于上述情况,研制具有自组装聚集体结构的超分子多肽是目前国内外大型化妆品公司共同关注的课题。
发明内容
本发明所解决的技术问题在于提供一种具有自组装聚集体结构的超分子多肽及其制备方法,以解决上述背景技术中的问题。
本发明所解决的技术问题采用以下技术方案来实现:一种具有自组装聚集体结构的超分子多肽,是由有机羧酸盐-多肽双组分复合物自组装形成的,有机羧酸盐和多肽之间通过疏水作用及静电引力作用聚集成纳米和微米级自组装体。
进一步的,所述多肽为棕榈酰四肽-7、乙酰基六肽-8、棕榈酰三肽-1、乙酰基四肽-5、棕榈酰五肽-4、类蛇毒肽、九肽-1、肌肽中的至少一种。
进一步的,所述有机羧酸盐为月桂酸钠、棕榈酸钠、硬脂酸钠、油酸钠、花生酸钠、山嵛酸钠、透明质酸钠、海藻酸钠中的至少一种。
一种具有自组装聚集体结构的超分子多肽的制备方法,其工艺包括如下步骤:
步骤1、将多肽溶解于pH值为5-8的溶剂中,所述多肽的浓度为0.01-100mg/mL;
步骤2、将有机羧酸盐加入到步骤1形成的溶液中,在20℃-90℃下搅拌1-10h,冷却到5℃-15℃后即形成超分子多肽。
进一步的,所述有机羧酸盐在混合液中的浓度为0.1mg/mL-1000mg/mL.
进一步的,所述pH值为5-8的溶剂为pH值为5-6的醋酸钠缓冲溶液,pH值为5-8的磷酸盐缓冲溶液,pH值为5-6的柠檬酸缓冲溶液中的一种。
与已公开技术相比,本发明存在以下优点:本发明提供了一种具有自组装聚集体结构的超分子多肽,超分子多肽中的分子间作用力为非共价键作用力,能够缓慢释放出多肽,使用本发明所述超分子多肽后,皮肤表面的多肽浓度至少能在12h内维持在较高水平,缓释效果优良;所述超分子多肽是由有机羧酸盐-多肽双组分复合物通过疏水作用及静电引力作用自组装形成的,所述方法的工艺条件十分温和,不会破坏多肽本身的结构,因而能够保证多肽的生物活性;所述方法的工艺简单,易于实现工业化生产。
附图说明
图1为实施例2制备的超分子多肽的释放曲线;
图2为实施例2制备的超分子多肽的偏光显微镜照片;
图3为实施例3制备的超分子多肽的偏光显微镜照片;
图4为实施例4制备的超分子多肽的偏光显微镜照片;
图5为实施例5制备的超分子多肽的偏光显微镜照片;
图6为实施例2制备的超分子多肽的扫描电子显微镜照片;
图7为实施例3制备的超分子多肽的扫描电子显微镜照片;
图8为实施例4制备的超分子多肽的扫描电子显微镜照片;
图9为实施例5制备的超分子多肽的扫描电子显微镜照片。
具体实施方式
为了使本发明的技术手段、创作特征、工作流程、使用方法达成目的与功效易于明白了解,下面将结合本发明实施例,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
实施例1
一种具有自组装聚集体结构的超分子多肽,是由有机羧酸盐-多肽双组分复合物自组装形成的,有机羧酸盐和多肽之间通过疏水作用及静电引力作用聚集成纳米和微米级自组装体。
进一步的,所述多肽为棕榈酰四肽-7、乙酰基六肽-8、棕榈酰三肽-1、乙酰基四肽-5、棕榈酰五肽-4、类蛇毒肽、九肽-1、肌肽中的至少一种。
进一步的,所述有机羧酸盐为月桂酸钠、棕榈酸钠、硬脂酸钠、油酸钠、花生酸钠、山嵛酸钠、透明质酸钠、海藻酸钠中的至少一种。
一种具有自组装聚集体结构的超分子多肽的制备方法,其工艺包括如下步骤:
步骤1、将多肽溶解于pH值为5-8的溶剂中,所述多肽的浓度为0.01-100mg/mL;
步骤2、将有机羧酸盐加入到步骤1形成的溶液中,在20℃-90℃下搅拌1-10h,冷却到5℃-15℃后即形成超分子多肽。
进一步的,所述有机羧酸盐在混合液中的浓度为0.1mg/mL-1000mg/mL.
进一步的,所述pH值为5-8的溶剂为pH值为5-6的醋酸钠缓冲溶液,pH值为5-8的磷酸盐缓冲溶液,pH值为5-6的柠檬酸缓冲溶液中的一种。
实施例2
一种具有自组装聚集体结构的超分子多肽的制备方法,其工艺包括如下步骤:
步骤1、将棕榈酰四肽-7加入已装有磁力搅拌子的100mL圆底烧瓶中,然后向其中加入pH值为5.0的醋酸钠缓冲液形成混合液,所述棕榈酰四肽-7在混合液中的浓度为10mg/mL;
步骤2、将所述装有混合液的圆底烧瓶放入恒温水浴磁力搅拌器上,水浴温度为70℃,然后向其中加入月桂酸钠,以300r/min的转速搅拌4h,冷却至10℃后,得到超分子多肽。将反应完毕后的混合液在3000r/min的转速下离心5min,弃掉上清液,将所得沉淀用蒸馏水洗涤3次,然后冷冻干燥成粉末,并将所得粉末于-20℃密封保存。所述月桂酸钠在混合液中的浓度为20mg/mL。
实施例3
一种具有自组装聚集体结构的超分子多肽的制备方法,其工艺包括如下步骤:
步骤1、将乙酰基六肽-8加入已装有磁力搅拌子的100mL圆底烧瓶中,然后向其中加入pH值为5.0的醋酸钠缓冲液形成混合液,所述乙酰基六肽-8在混合液中的浓度为30mg/mL;
步骤2、将所述装有混合液的圆底烧瓶放入恒温水浴磁力搅拌器上,水浴温度为70℃,然后向其中加入棕榈酸钠,以500r/min的转速搅拌6h,冷却至10℃后,得到超分子多肽。将反应完毕后的混合液在5000r/min的转速下离心10min,弃掉上清液,将所得沉淀用蒸馏水洗涤3次,然后冷冻干燥成粉末,并将所得粉末于-20℃密封保存。所述棕榈酸钠在混合液中的浓度为20mg/mL。
实施例4
一种具有自组装聚集体结构的超分子多肽的制备方法,其工艺包括如下步骤:
步骤1、将棕榈酰三肽-1加入已装有磁力搅拌子的100mL圆底烧瓶中,然后向其中加入pH值为6.0的磷酸盐缓冲液形成混合液,所述棕榈酰三肽-1在混合液中的浓度为50mg/mL;
步骤2、将所述装有混合液的圆底烧瓶放入恒温水浴磁力搅拌器上,水浴温度为80℃,然后向其中加入硬脂酸钠,以500r/min的转速搅拌4h,冷却至10℃后,得到超分子多肽。将反应完毕后的混合液在5000r/min的转速下离心15min,弃掉上清液,将所得沉淀用蒸馏水洗涤3次,然后冷冻干燥成粉末,并将所得粉末于-20℃密封保存。所述硬脂酸钠在混合液中的浓度为20mg/mL。
用偏光显微镜观察反应完毕后混合液中超分子多肽的微观形态,结果如图1所示;用场发射扫描电子显微镜观察所述超分子多肽干燥后的聚集体形态,结果如图2所示。
实施例5
一种具有自组装聚集体结构的超分子多肽的制备方法,其工艺包括如下步骤:
步骤1、将乙酰基四肽-5加入已装有磁力搅拌子的100mL圆底烧瓶中,然后向其中加入pH值为6.0的磷酸盐缓冲液形成混合液,所述乙酰基四肽-5在混合液中的浓度为40mg/mL;
步骤2、将所述装有混合液的圆底烧瓶放入恒温水浴磁力搅拌器上,水浴温度为75℃,然后向其中加入油酸钠,以600r/min的转速搅拌4h,冷却至10℃后,得到超分子多肽。将反应完毕后的混合液在6000r/min的转速下离心10min,弃掉上清液,将所得沉淀用蒸馏水洗涤3次,然后冷冻干燥成粉末,并将所得粉末于-20℃密封保存。所述油酸钠在混合液中的浓度为20mg/mL。
实施例6
一种具有自组装聚集体结构的超分子多肽的制备方法,其工艺包括如下步骤:步骤1、将棕榈酰五肽-4加入已装有磁力搅拌子的100mL圆底烧瓶中,然后向其中加入pH值为5.0的柠檬酸钠缓冲液形成混合液,所述棕榈酰五肽-4在混合液中的浓度为20mg/mL;
步骤2、将所述装有混合液的圆底烧瓶放入恒温水浴磁力搅拌器上,水浴温度为60℃,然后向其中加入花生酸钠,以400r/min的转速搅拌4h,冷却至5℃后,得到超分子多肽。将反应完毕后的混合液在3000r/min的转速下离心15min,弃掉上清液,将所得沉淀用蒸馏水洗涤3次,然后冷冻干燥成粉末,并将所得粉末于-20℃密封保存。所述花生酸钠在混合液中的浓度为20mg/mL。
实施例7
一种具有自组装聚集体结构的超分子多肽的制备方法,其工艺包括如下步骤:
步骤1、将类蛇毒肽加入已装有磁力搅拌子的100mL圆底烧瓶中,然后向其中加入pH值为5.0的柠檬酸钠缓冲液形成混合液,所述类蛇毒肽在混合液中的浓度为50mg/mL;
步骤2、将所述装有混合液的圆底烧瓶放入恒温水浴磁力搅拌器上,水浴温度为70℃,然后向其中加入山嵛酸钠,以600r/min的转速搅拌4h,冷却至5℃后,得到超分子多肽。将反应完毕后的混合液在3000r/min的转速下离心15min,弃掉上清液,将所得沉淀用蒸馏水洗涤3次,然后冷冻干燥成粉末,并将所得粉末于-20℃密封保存。所述山嵛酸钠在混合液中的浓度为60mg/mL。
实施例8
一种具有自组装聚集体结构的超分子多肽的制备方法,其工艺包括如下步骤:步骤1、将九肽-1加入已装有磁力搅拌子的100mL圆底烧瓶中,然后向其中加入pH值为5.0的柠檬酸钠缓冲液形成混合液,所述九肽-1在混合液中的浓度为50mg/mL;
步骤2、将所述装有混合液的圆底烧瓶放入恒温水浴磁力搅拌器上,水浴温度为70℃,然后向其中加入透明质酸钠,以400r/min的转速搅拌4h,冷却至10℃后,得到超分子多肽。将反应完毕后的混合液在3000r/min的转速下离心15min,弃掉上清液,将所得沉淀用蒸馏水洗涤3次,然后冷冻干燥成粉末,并将所得粉末于-20℃密封保存。所述透明质酸钠在混合液中的浓度为50mg/mL。
实施例9
一种具有自组装聚集体结构的超分子多肽的制备方法,其工艺包括如下步骤:步骤1、将肌肽加入已装有磁力搅拌子的100mL圆底烧瓶中,然后向其中加入pH值为5.0的柠檬酸钠缓冲液形成混合液,所述肌肽在混合液中的浓度为30mg/mL;
步骤2、将所述装有混合液的圆底烧瓶放入恒温水浴磁力搅拌器上,水浴温度为70℃,然后向其中加入海藻酸钠,以300r/min的转速搅拌4h,冷却至10℃后,得到超分子多肽。将反应完毕后的混合液在6000r/min的转速下离心15min,弃掉上清液,将所得沉淀用蒸馏水洗涤3次,然后冷冻干燥成粉末,并将所得粉末于-20℃密封保存。所述海藻酸钠在混合液中的浓度为40mg/mL。
实施例10
本实施例对本发明所述具有自组装聚集体结构的超分子多肽进行模拟释放实验。
取实施例1制备的超分子多肽粉末加入缓冲液中混合均匀,然后装入截留分子量为5000道尔顿的透析袋中,将透析袋放入装有缓冲液的50mL烧杯中,在30℃、振荡下进行模拟释放实验,分别于第1h、2h、3h、4h、5h、6h、7h、8h、9h、10h、11h及第12h从烧杯中取出5mL溶液,然后再向烧杯中滴加5mL新鲜的缓冲液,所述缓冲液为pH=8的磷酸钠缓冲液。通过高效液相色谱定量测试取出的样品中棕榈酰四肽-7的浓度。
实施例2制备的超分子多肽的模拟释放曲线如图1所示,从图1可知,实施例1制备的超分子棕榈酰四肽-7在测试的12h内缓慢释放,说明实施例2制备的超分子多肽具有良好的缓释性能,能提高多肽的有效利用率。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征及本发明的优点。本行业的技术人员应该了解,本发明不受上述实施例的限制,上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理,在不脱离本发明精神和范围的前提下,本发明还会有各种变化和改进,这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明的要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。

Claims (4)

1.一种具有自组装聚集体结构的超分子多肽,其特征在于:是由有机羧酸盐-多肽双组分复合物自组装形成的,有机羧酸盐和多肽之间通过疏水作用及静电引力作用聚集成纳米和微米级自组装体,所述多肽为棕榈酰四肽-7、乙酰基六肽-8、棕榈酰三肽-1、乙酰基四肽-5中的至少一种,所述有机羧酸盐为月桂酸钠、棕榈酸钠、硬脂酸钠、油酸钠中的至少一种。
2.一种具有自组装聚集体结构的超分子多肽的制备方法,其特征在于:其工艺包括如下步骤:
步骤1、将多肽溶解于pH值为5-8的溶剂中,所述多肽的浓度为0.01-100mg/mL;
步骤2、将有机羧酸盐加入到步骤1形成的溶液中,在20℃-90℃下搅拌1-10h,冷却到5℃-15℃后即形成超分子多肽。
3.根据权利要求2所述的一种具有自组装聚集体结构的超分子多肽的制备方法,其特征在于:所述有机羧酸盐在混合液中的浓度为0.1mg/mL-1000mg/mL。
4.根据权利要求2所述的一种具有自组装聚集体结构的超分子多肽的制备方法,其特征在于:所述pH值为5-8的溶剂为pH值为5-6的醋酸钠缓冲溶液,pH值为5-8的磷酸盐缓冲溶液,pH值为5-6的柠檬酸缓冲溶液中的一种。
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