RS57777B1 - Dpa-obogaćene kompozicije omega-3 polinezasićenih masnih kiselina u obliku slobodne kiseline - Google Patents

Dpa-obogaćene kompozicije omega-3 polinezasićenih masnih kiselina u obliku slobodne kiseline

Info

Publication number
RS57777B1
RS57777B1 RS20181033A RSP20181033A RS57777B1 RS 57777 B1 RS57777 B1 RS 57777B1 RS 20181033 A RS20181033 A RS 20181033A RS P20181033 A RSP20181033 A RS P20181033A RS 57777 B1 RS57777 B1 RS 57777B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
amount
acid
epa
dpa
dha
Prior art date
Application number
RS20181033A
Other languages
English (en)
Inventor
Timothy J Maines
Bernardus N M Machielse
Bharat M Mehta
Gerald Wisler
Michael Davidson
Peter Ralph Wood
Original Assignee
Omthera Pharmaceuticals Inc
Chrysalis Pharma Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=48744082&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS57777(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Omthera Pharmaceuticals Inc, Chrysalis Pharma Ag filed Critical Omthera Pharmaceuticals Inc
Publication of RS57777B1 publication Critical patent/RS57777B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/20—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids
    • A61K31/202—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids having three or more double bonds, e.g. linolenic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/20—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids
    • A61K31/201—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids having one or two double bonds, e.g. oleic, linoleic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
    • A61K31/22—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/27—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carbamic or thiocarbamic acids, meprobamate, carbachol, neostigmine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/365—Lactones
    • A61K31/366—Lactones having six-membered rings, e.g. delta-lactones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/32—Macromolecular compounds obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. carbomers, poly(meth)acrylates, or polyvinyl pyrrolidone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/4816—Wall or shell material
    • A61K9/4825—Proteins, e.g. gelatin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/4891—Coated capsules; Multilayered drug free capsule shells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Developing Agents For Electrophotography (AREA)
  • Materials For Photolithography (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

Opis
1. OSNOVA
[0001] Farmaceutske kompozicije bogate u omega-3 ("ω-3" ili "n-3") polinezasićenim masnim kiselinama ("PUFA") su razvijene za tretman različitih kliničkih indikacija.
[0002] Ovi proizvodi, koji su izvedeni iz prirodnih izvora, tipično riblja ulja, su heterogene kompozicije, i sadrže različite vrste omega-3 PUFA, omega-6 PUFA i drugih manjih komponenti, uključujući mononezasićene i zasićene masne kiseline. Zabeleženi klinički efekti se tipično pripisuju kompoziciji kao celini, iako se veruje da najčešće PUFA vrste prisutne u smeši, obično EPA i DHA, doprinose značajnom delu zabeleženog kliničkog efekta. Kako su kompozicije heterogene, proizvodi su definisani tako da obuhvataju određene obavezne polinezasićene vrste masnih kiselina, svaka unutar definisanog procenta opsega tolerancije. Kompozicije su dalje definisane tako da ograniče određene neželjene komponente, kako one koje potiču iz prirodnog izvora, kao što su određeni sredinski kontaminanti, tako i one potencijalno stvorene u postupku prečišćavanja.
[0003] Optimalna kompozicija verovatno se razlikuje prema namenjenim kliničkim indikacijama. Čak za prvu odobrenu kliničku indikaciju, međutim, tretman teške hipertrigliceridemije (TGs > 500 mg/dl), optimalna kompozicija još uvek nije definisana.
[0004] Na taj način, prva odobrena farmaceutska kompozicija za tretman teške hipertrigliceridemije sadrži omega-3 PUFA vrste eikozapentaenoinsku kiselinu ("EPA") i dokozaheksaenoinsku kiselinu ("DHA") u obliku etil estara u težinskim procentima od približno 46:38 (EPA:DHA), sa EPA i DHA koji zajedno čine približno 84% svih PUFA vrsta u kompoziciji. Nasuprot tome, skorije odobreni proizvod, Vascepa® (prethodno poznat kao AMR101), koji je odobren za istu kliničku indikaciju, je >96% čist EPA u oblik etil estra, značajno bez DHA. Nutraceutski proizvod, OMAX3, koji se prodaje kao dijetetski suplement i koji je stimulisao delimično niže nivoe triglicerida, sadrži EPA i DHA u težinskom odnosu od oko 4.1:1, gde su EPA i DHA slično u obliku etil estra, pri čemu je formulacija više od 84% EPA i DHA prema težini i više od 90% omega-3 masnih kiselina prema težini.
[0005] Ove široke varijacije u kompoziciji reflektuju kontinuiranu nesigurnost u vezi sa optimalnom kompozicijom za ovu kliničku indikaciju.
[0006] Nesigurnost je posledica, delimično, kompetitivnih kliničkih ciljeva. Na primer, omega-3 PUFA vrsta, DHA, je poznata kao potentnija u snižavanju triglicerida u serumu nego EPA, ali je poznato da ima veću tendenciju da poveća nivoe LDL, Mori et al., Am. J. Clin. Nutr. 71:1085-94 (2000), Grimsgaard et al., Am. J. Clin. Nutr. 66:649 -59 (1997); veruje se da je povećanje LDL klinički nepovoljno kod subjekata sa povećanim kardiovaskularnim rizikom. Iako je smanjenje u agregaciji trombocita i trombogenezi pomoću omega-3 PUFA često klinički poželjno, potencijalno povećanje u vremenu krvarenja je navelo neke da predlože dodavanje određene količine omega-6 PUFA vrste, arašidonske kiseline ("AA"), u farmaceutske kompozicije koje su bogate u omega-3 PUFA. Videti SAD publikaciju pre priznanja br.2010/0160435.
[0007] Teškoća u definisanju optimalne kompozicije je takođe posledica delimično enzimatske interkonverzije među određenim omega-3 PUFA vrstama, i kompeticije između omega-3 i omega-6 polinezasićenih masnih kiselina za zajedničke enzime u njihovim odgovarajućim biosintetičkim putevima od PUFA srednje dužine iz hrane (videti SL. 1).
[0008] Dodatni izazov u dizajniranju optimalne kompozicije je varijacija biodostupnosti oralno primenjenih PUFA kompozicija. Poznato je da apsorpcija PUFA u obliku etil estara, na primer, zavisi od prisustva pankreasne lipaze, koja se oslobađa kao odgovor na ingestirane masti. Apsorpcija PUFA etil estara je prema tome neefikasna, i značajno varira, kako među subjektima tako i kod bilo kog pojedinačnog subjekta, u zavisnosti od unosa masti ishranom. Videti Lawson et al., "Human absorption of fish oil masnih kiselina as triacylglycerols, free acids, ili etil estars," Biochem Biophys Res Commun. 152:328-35 (1988); Lawson et al., Biochem Biophys Res Commun. 156:960-3 (1988). Apsorpcija je naročito redukovana kod subjekata na ishrani sa niskim sadržajem masti, ishrana koja se preporučuje za subjekte sa povišenim nivoima triglicerida u serumu ili kardiovaskularnom bolešću.
[0009] Za bilo koju specifično poželjnu PUFA farmaceutsku kompoziciju, postupak prečišćavanja je dizajniran tako da proizvodi krajnji proizvod koji ima obavezne komponente masne kiseline unutar unapred definisanih procenata opsega tolerancije i da ograniči određene neželjene komponente do nivoa ispod određenih unapred definisanih granica tolerancije, sa dovoljnim prinosom da bi se postupak učinio komercijalno izvodljivim i ekološki održivim. Razlike u željenoj krajnjoj kompoziciji diktiraju razlike u postupku prečišćavanja.
[0010] Različiti poznati koraci postupka predstavljaju kompromise koji otežavaju afaptaciju specifičnu za kompoziciju i optimizaciju postupka prečišćavanja. Na primer, urea inkluziona kompleksacija (klatracija) u prisustvu etanola je često korišćena za uklanjanje zasićenih i mono-nezasićenih dugolančanih masnih kiselina, povećavajući relativnu proporciju željenih dugolančanih omega-3 polinezasićenih masnih kiselina u rezultujućoj kompoziciji. Premalo uree redukuje obogaćenje dugolančanom omega-3 PUFA. Višak uree, međutim, može da dovede do koncentrovanja neželjenih komponenti i ima potencijal da dovede, na bilo kojoj datoj temperaturi i reakcionom vremenu, do povećane proizvodnje etil karbamata, karcinogena koji je nedozvoljen iznad određenih definisanih niskih graica. Postojeće alternative kompleksaciji uree, međutim, predstavljaju druge teškoće.
[0011] US5502077 otkriva kompozicije masne kiseline koje sadrže najmanje 80 težinskih % omega-3 masnih kiselina.
[0012] Tu, prema tome, postoji potreba za poboljšanim farmaceutskim kompozicijama bogatim u omega-3 polinezasićenim masnim kiselinama, naročito za tretman hipertrigliceridemije i mešanih dislipidemija, i za poboljšanim postupcima za prečišćavanje takvih kompozicija od ribljeg ulja.
2. REZIME
[0013] U prvom aspektu, predmetno otkriće daje DPA-obogaćene farmaceutske kompozicije omega-3 polinezasićenih masnih kiselina u obliku slobodne kiseline. Obogaćenje u sadržaju DPA nije bilo nameravano i nije bilo očekivana posledica postupka proizvodnje u komercijalnim razmerama. Pokazano je da ove DPA-obogaćene farmaceutske kompozicije imaju izuzetnu farmakološku i kliničku efikasnost u in vitro eksperimentima i u kliničkim ispitivanjima na ljudima.
[0014] Prema tome, u sledećem aspektu, farmaceutske kompozicije su obezbeđene za upotrebu u postupcima za lečenje. U jednoj seriji primera izvođenja tretmana, farmaceutske kompozicije su obezbeđene za upotrebu u tretmanu teške hipertrigliceridemije (TGs > 500 mg/dL). U sledećoj seriji primera izvođenja tretmana, farmaceutske kompozicije su obezbeđene za upotrebu u tretmanu hipertrigliceridemije (200 mg/dL - 500 mg/dL) dopunskom primenom statina i farmaceutskih kompozicija koje su ovde opisane. Ovde su takođe otkriveni postupci za pripremu farmaceutskih kompozicija u komercijalnim razmerama, uključujući postupke koji obuhvataju korak kompleksacije uree u kome su kompozicijski-ograničene šarže proizvodnog stoka transestarifikovanog intermedijera podvrgute koraku kompleksacije uree upotrebom količina uree unutar opsega određenih pomoću novog procesnog algoritma.
3. KRATAK OPIS SLIKA
[0015]
SL. 1 prikazuje poznate humane puteve za biosintezu omega-3 i omega-6 dugolančanih polinezasićenih masnih kiselina od esencijalnih masnih kielina srednje dužine lanca.
SL. 2 je dijagram primera postupka za pripremu proizvodnog stoka intermedijera PUFA etil estara.
SL. 3A prikazuje grafikon prosečnog relativnog prečišćavanja klasa masnih kiselina pomoću koraka kompleksacije uree u kome su algoritamski-određene količine uree dodate u kompoziciono-definisani proizvodni stoka intermedijera PUFA etil estara.
SL. 3B ilustruje prosečno diferencijalno prečišćavanje pojedinačnih vrsta omega-3 i omega-6 PUFA etil estara kada su algoritamski-određene količine uree dodate u kompozicionodefinisani proizvodni stok intermedijera PUFA etil estara.
SL. 4 je dijagram tretmana koji ilustruje dizajn ECLIPSE kliničke studije dalje opisane u Primeru 7.
SL. 5 upoređuje biodostupnost ukupnih EPA DHA (promena podešena prema početnoj vrednosti) posle jedne doze (4 g) Lovaza® u toku perioda ishrane hranom sa visokim sadržajem masti i hranom sa niskim sadržajem masti.
SL. 6 upoređuje biodostupnost ukupnih EPA+DHA (promena podešena prema polaznoj vrednosti) posle jedne doze (4 g) Lovaza® ("EE-FA") ili Epanova®, DPA-obogaćenom kompozicijom omega-3 PUFA u obliku slobodne kiseline ("FFA"), u toku perioda ishrane hranom sa visokim sadržajem masti.
SL. 7 upoređuje ukupne koncentracije EPA+DHA u plazmi (promena podešena prema polaznoj vrednosti) posle jedne doze (4g) Lovaza® ili Epanova® u toku perioda ishrane hranom sa niskim sadržajem masti.
SL. 8 upoređuje ukupne koncentracije EPA u plazmi (promena podešena prema početnoj vrednosti) posle jedne doze (4 g) Lovaza® ili Epanova® u toku perioda ishrane hranom sa niskim sadržajem masti.
SL. 9 upoređuje ukupne koncentracije DHA u plazmi (promena podešena prema početnoj vrednosti) posle jedne doze (4g) Lovaza® ili Epanova® u toku perioda ishrane hranom sa niskim sadržajem masti.
SL. 10A i 10B predstavljaju AUCo-todgovore pojedinačnog subjekta u toku ishrane hranom sa niskim sadržajem masti i hranom sa visokim sadržajem masti kao odnos (%) AUC0-tkod unosa niskog sadržaja masti prema AUC0-tkod visokog unosa viskog sadržaja masti. Negativni odnosi nisu prikazani na grafikonu.
SL. 11 je dijagram tretmana koji ilustruje dizajn 14-dnevnog komparativnog ispitivanja biodostupnosti koje je dodatno opisano u Primeru 8 (vremenska linije nije u srazmeri).
SL. 12A prikazuje grafikon srednjih nepodešenih ukupnih koncentracija EPA+DHA naspram vremena (linearna skala) za tretman sa Lovaza® naspram tretmana sa Epanova® u 14-dnevnom komparativnom ispitivanju biodostupnosti koje je dodatno opisano u Primeru 8. SL. 12B je histogram koji prikazuje razliku u nepodešenim EPA+DHA (nmol/mL) za tačke prikazane u zagradama na SL. 12A.
SL. 13 prikazuje grafikon EPA+DHA srednje vrednosti podešene u odnosu na početnu vrednost ukupne EPA+DHA koncentracije u plazmi naspram vremena (linearna skala) za tretman sa Lovaza® naspram tretmana sa Epanova® u 14-dnevnom komaprativnom ispitivanju biodostupnosti.
SL. 14A je histogram koji prikazuje povećanja od početne vrednosti do stabilnog stanja u nepodešenim nivoima u krvi za EPA+DHA u Lovaza® i Epanova® grani 14-dnevnog komparativnog ispitivanja biodostupnosti.
SL. 14B je histogram koji prikazuje povećanja od početne vrednosti do stabilnog stanja u nepodešenim Cavgza EPA+DHA u Lovaza® i Epanova® grani 14-dnevnog komparativnog ispitivanja biodostupnosti.
SL. 15A je histogram koji prikazuje povećanja od početne vrednosti do stabilnog stanja za ukupne nivoe DHA u krvi u Lovaza® i Epanova® granama 14-dnevnog komparativnog ispitivanja biodostupnosti.
SL. 15B je histogram koji prikazuje povećanja od početne vrednosti do stabilnog stanja za Cavgnivoe DHA u Epanova® kohorti u poređenju sa Lovaza® kohortom u 14-dnevnom komparativnom ispitivanju biodostupnosti.
SL. 16A je histogram koji prikazuje povećanja od početne vrednosti do stabilnog stanja za ukupne nivoe EPA u krvi u Lovaza® i Epanova® granama 14-dnevnog komparativnog ispitivanja biodostupnosti.
SL. 16B je histogram koji prikazuje povećanja od početne vrednosti do stabilnog stanja za Cavgnivoe EPA u Epanova® i Lovaza® kohortama u 14-dnevnom komparativnom ispitivanju biodostupnosti.
SL. 17 obezbeđuje dijagram tretmana koji ilustruje dizajn EVOLVE studije, koja je dalje opisana u Primeru 10.
SL. 18 detaljnije rezimira dizajn EVOLVE ispitivanja, koji dalje identifikuje vreme poseta tokom studije.
SL. 19 prikazuje raspored subjekata u EVOLVE ispitivanju.
SL. 20A - 20D prikazuje prosečne početne i na kraju tretmana ("EOT") nivoe u plazmi (u mg/mL) za EPA (SL. 20A), DHA (SL. 20B), DPA (SL. 20C) i AA (SL. 20D), za svaku od grana tretmana u EVOLVE ispitivanju.
SL. 20E upoređuje prosečne početne i EOT EPA nivoe za ECLIPSE ispitivanje opisano u Primeru 7, 14-dnevno ispitivanje biodostupnosti opisano u Primeru 8, studiju inetrakcije statina lek-lek ("STATIN DDI") opisu u Primeru 11, pri čemu je grana tretmana kao i kontrolna grana EVOLVE ispitivanja opisana u Primeru 10, i vrednosti ranije objavljene u literaturi za nepovezano JELIS ispitivanje ("JELIS"), koje je koristilo različitu kompoziciju omega-3.
SL. 21A - 21D prikazuje grafikon srednjh početnih i na kraju tretmana ("EOT") nivoa u plazmi (u mg/mL) za EPA (SL. 21A), DHA (SL. 21B), DPA (SL. 21C) i AA (SL. 21D) u EVOLVE ispitivanju.
SL. 22A i 22B prikazuje grafikon promene od početne vrednosti do EOT u apsolutnim nivoima u plazmi (u mg/mL) AA, DHA, EPA i DPA, za svaku od grana tretmana EVOLVE ispitivanja. SL. 22A prikazuje grafikon prosečnih promena; SL. 22B prikazuje grafikon srednjih promena.
SL. 23A prikazuje grafikon prosečne promene od početne vrednosti do EOT, kao procenat početne vrednosti, za AA, DHA, EPA i DPA u svakoj od grana tretmana EVOLVE ispitivanja. SL.23B prikazuje grafikon srednjeg procenta promene od početne do EOT.
SL. 24A - 24I prikazuje grafikon prosečne početne vrednosti i EOT nivoe u plazmi (u mg/dL, sa izuzetkom LpPLA2, prikazane u ng/mL) u EVOLVE ispitivanju za trigliceride (SL. 24A), Ne-HDL-C (SL. 24B), HDL-C (SL. 24C), V-LDL-C (SL. 24D), LDL-C (SL. 24E), ApoB (SL. 24F), ApoCIII (SL.24G), RLP (SL. 24H), LpPLA2 (SL.24I).
SL. 25A - 25I prikazuje grafikon srednje početne vrednosti i EOT nivoa u plazmi (u mg/dL, sa izuzetkom LpPLA2, prikazane u ng/mL) u EVOLVE ispitivanju za trigliceride (SL. 25A), Ne-HDL-C (SL. 25B), HDL-C (SL. 25C), V-LDL-C (SL. 25D), LDL-C (SL. 25E), ApoB (SL. 25F), ApoCIII (SL.25G), RLP (SL. 25H), LpPLA2 (SL.25I).
SL. 26A i 26B prikazuje grafikon promene od početne vrednosti do EOT u apsolutnim nivoima u plazmi (u mg/dL) u EVOLVE ispitivanju triglicerida ("TG"), Non-HDL-C ("NHDL-C"), HDL-C, VLDL-C i LDL-C za svaku od grana tretmana EVOLVE ispitivanja, sa SL. 26A koja prikazuje grafikon prosečne promene i SL.26B prikazuje srednju promenu. SL. 27 prikazuje grafikon procenata subjekata u EVOLVE ispitivanju, dat na Y-osi, kod kojih su nivoi triglicerida smanjeni naznačenim procentom datim na X-osi, za 2g dozu i 4g dozu Epanova®.
SL. 28A prikazuje grafikon prsečne promene od početne vrednosti do EOT, kao procenat početne vrednosti, za TG, ne-HDL-c ("NHDLC"), HDL-C, VLDL-C, LDL-C, ApoB, ApoCIII, LpLPA2 i RLP u svakoj od grana tretmana EVOLVE ispitivanja, pri čemu SL. 28B prikazuje grafikon srednjeg procenta promene od početne vrednosti do EOT.
SL. 29 prikazuje grafikon stope promene (apsolutna vrednost) srednjeg procenta promene od početne vrednosti u nivoima u plazmi EPA, DHA, DPA, AA, TG, NHDL-C i HDL-C između 2g i 4g doze Epanova® u EVOLVE ispitivanju.
SL. 30 ilustruje komparativne podatke za Epanova®, kao što su mereni u EVOLVE ispitivanju, i podatke objavljene od strane drugih za AMR-101 (Vascepa), na naznačenim dozama, u odnosu na TG nivoe.
SL. 31 ilustruje komparativne podatke za Epanova®, kao što su mereni u EVOLVE ispitivanju, i AMR-101 (Vascepa), u odnosu na različite parametre lipida u krvi. Podaci za AMR-101 su objavljeni od strane drugih. (*) označava p vrednost manju od 0.05, (**) označava p vrednost manju od 0.01, i (***) označava p vrednost manju od 0.001.
SL. 32 ilustruje komparativne podatke za Epanova® 2g i 4g doze, kao što su određeni u EVOLVE ispitivanju, i Lovaza® 4 g dozu, u odnosu na različite parametre lipida u krvi. Podaci za Lovaza® su objavljeni od strane drugih. (*) označava p vrednost manju od 0.05, (**) označava p vrednost manju od 0.01 i (***)označava p vrednost manju od 0.001.
SL. 33 ilustruje komparativne podatke za Epanova® 2g i 4g doze, kao što su određeni u EVOLVE ispitivanju, i Lovaza® 4 g dozu, kao što su drugi objavili, u odnosu na nivoe TG. Superskriptovi označavaju podatke iz (1) EVOLVE ispitivanja, (2) meta-analize iz Lovaza® nove primene leka ("NDA") (3) etikete Lovaza® FDA-odobrenog proizvoda i (4) Takeda studije. (*) označava p vrednost manju od 0.05, (**) označava p vrednost manju od 0.01 i (***) označava p vrednost manju od 0.001.
SL. 34 prikazuje grafikon korelacije između procenta promene u LDL i procenta promene u ApoCIII, kao što je meren u EVOLVE ispitivanju.
SL. 35 prikazuje grafikon najmanjih kvadrata (LS) srednjeg procenta promene od početne vrednosti za podgrupu subjekata EVOLVE ispitivanja koji imaju TG početne nivoe veće od ili jednake 750 mg/dL, za naznačene grane tretmana EVOLVE studije, kao što je dalje opisano u Primeru 10. (*) označava p vrednost manju od 0.05, (**) označava p vrednost manju od 0.01 i (***) označava p vrednost manju od 0.001.
SL. 36 prikazuje grafikon najmanjih kvadrata (LS) srednjeg procenta promene od početne vrednosti za podgrupu subjekata koji imaju dijabetes tipa II, za naznačene grane tretmana EVOLVE studije, kao što je opisano u Primeru 10. (*) označava p vrednost manju od 0.05, (**) označava p vrednost manju od 0.01 i (***) označava p vrednost manju od 0.001.
SL. 37 prikazuje grafikon najmanjih kvadrata (LS) srednjeg procenta promene od početne vrednosti za podgrupu subjekata koji se podvrgavaju istovremenoj terapiji statinom, za naznačene grane tretmana EVOLVE studije, kao što je opisano u Primeru 10. (*) označava p vrednost manju od 0.05, (**) označava p vrednost manju od 0.01 i (***) označava p vrednost manju od 0.001.
SL. 38 prikazuje grafikon najmanjih kvadrata (LS) srednjeg procenta razlike u odnosu na kontrolu za trigliceride ("TG"), ne-HDL-holestarol ("NHDL-C"), HDL-C, LDL-C, TC, VLDL-C i TC/HDL-C, upoređujući subjekte iz EVOLVE studije opisane u Primeru 10 koji su ili primili (STATIN) ili nisu primili (NE-STATIN) terapiju statinom istovremeno sa tretmanom sa 2g dozom Epanova®. (*) označava p vrednost manju od 0.05, (**) označava p vrednost manju od 0.01, i (***) označava p vrednost manju od 0.001.
SL. 39 prikazuje grafikon srednjeg procenta promene od početne vrednosti za TG, NHDL-C, HDL-C, LDL-C, TC, VLDL-C i TC/HDLC za podgrupu subjekata koji se podvrgavaju istovremenoj terapiji statinom, u naznačenim granama tretmana EVOLVE studije, dalje opisane u Primeru 10. (*) označava p vrednost manju od 0.05, (**) označava p vrednost manju od 0.01, i (***)označava p vrednost manju od 0.001.
SL. 40 daje dijagram tretmana koji ilustruje dizajn ESPRIT studije, dalje opisane u Primeru 12.
SL. 41 prikazuje raspored subjekata u ESPRIT ispitivanju.
SL. 42A i 42B prikazuju grafikon srednjeg LS procenta promene od početne vrednosti za EPA (SL. 42A) i DHA (SL. 42B) iz ESPRIT studije, dalje opisane u Primeru 12. (*) označava p vrednost manju od 0.05, (**) označava p vrednost manju od 0.01 i (***) označava p vrednost manju od 0.001.
SL. 43 prikazuje grafikon srednjeg LS procenta promene od početne vrednosti za TG, ne-HDL-C i HDL-C. Prikazani podaci su iz ESPRIT studije, dalje opisane u Primeru 12. (*) označava p vrednost manju od 0.05, (**) označava p vrednost manju od 0.01 i (***) označava p vrednost manju od 0.001.
SL. 44 prikazuje grafikon srednjeg LS procenta promene od početne vrednosti za ApoB, LDL-C, VLDL-C i TC/HDL-C. Prikazani podaci su iz ESPRIT studije, dalje opisane u Primeru 12. (*) označava p vrednost manju od 0.05, (**) označava p vrednost manju od 0.01 i (***) označava p vrednost manju od 0.001.
SL. 45 prikazuje grafikon srednjeg procenta promene od početne vrednosti za TG, sa subjektima grupisanim u tercile prema početnim TG nivoima, za subjekte u ESPRIT ispitivanju.
SL. 46 prikazuje grafikon srednjeg procenta promene od početne vrednosti za ne-HDL-C, sa subjektima grupisanim u tercile prema početnim ne-HDL-C nivoima, za subjekte u ESPRIT ispitivanju.
SL. 47 prikazuje grafikon srednjeg procenta promene od početne vrednosti za LDL-C, sa subjektima grupisanim u tercile prema početnim LDL-C nivoima, za subjekte u ESPRIT ispitivanju.
SL. 48 prikazuje grafikon srednjeg procenta promene od početne vrednosti za TG za svaku od grana tretmana ESPRIT ispitivanja, sa subjektima grupisanim prema identitetu statina uzimanog u istovremenoj terapiji.
SL. 49 prikazuje grafikon srednjeg procenta promene od početne vrednosti za TG za svaku od grana tretmana ESPRIT ispitivanja, sa subjektima grupisanim prema niskoj ili visokoj potenciji istovremene terapije statinom.
SL. 50 prikazuje grafikon srednjeg procenta promene od početne vrednosti za ne-HDL-C za svaku od grana tretmana ESPRIT ispitivanja, sa subjektima grupisanim prema niskoj ili visokoj potenciji istovremene terapije statinom.
SL. 51 prikazuje grafikon srednjeg procenta promene od početne vrednosti za LDL-C za svaku od grana tretmana ESPRIT ispitivanja, sa subjektima grupisanim prema niskoj ili visokoj potenciji istovremene terapije statinom.
SL. 52 prikazuje grafikon srednjeg procenta promene od početne vrednosti za TG, sa subjektima u svakoj grani tretmana ESPRIT ispitivanja grupisanim u tri grupe prema visokoj početnoj TG, visokoj početnoj EPA ili istovremenoj terapijom rosuvastatinom.
SL. 53 prikazuje grafikon srednjeg LS procenta promene u raspodeli veličine čestica od početne vrednosti za V-LDL čestice grupisane prema veličini, kao što je određeno u ESPRIT ispitivanju. (*) označava p vrednost manju od 0.05, (**)označava p vrednost manju od 0.01 i (***) označava p vrednost manju od 0.001.
SL. 54 prikazuje grafikon srednjeg LS procenta promene u raspodeli veličine čestica od početne vrednosti za LDL čestice grupisane prema veličini za svaku od grana tretmana ESPRIT ispitivanja. (*) označava p vrednost manju od 0.05, (**) označava p vrednost manju od 0.01, i (***) označava p vrednost manju od 0.001.
SL. 55 prikazuje grafikon LS srednjeg procenta promene u veličini čestica LDL, sa subjektima grupisanim u tri grupe prema ESPRIT EOT nivoima triglicerida.
SL. 56A prikazuje početne nivoe arašidonske kiseline (AA) u plazmi (u mg/mL) za subjekte u kliničkom ispitivanju dodatno opisanom u Primeru 11, grupisanim prema genotipu na rs174546 SNP. SL. 56B prikazuje procenat promene od početne vrednosti u nivoima AA u plazmi na dan 15 od tretmana sa Epanova®, grupisanim prema genotipu na rs174546 SNP. Za svaki genotip, interkvartilni opseg je označen pavougaonikom, medijana je označena horizonalnom linijom u unutrašnjosti interkvartilnog pravougaonika, i srednja vrednost je predstavljena dijamantom. Ekstremne vrednosti su prikazane praznim krugovima. Viskeri se protežu do minimalne i maksimalne vrednosti van ekstremnih vrednosti. Skor 1 identifikuje subjekte koji su homozigoti za glavni alel; Skor 3 identifikuje subjekte homozigotne za minorni alel; i Skor 2 predstavlja heterozigote.
4. DETALJAN OPIS
4.1 Prikaz: Farmaceutske kompozicije omega-3 polinezasićenih masnih kiselina u obliku slobodne kiseline koje su neočekivano obogaćene u DPA imaju izuzetnu kliničku efikasnost
[0016] Urea inkluziona kompleksacija (klatracija) je standardni korak često korišćen u rafinisanju ribljih ulja da bi se uklonile zasićene i mono-nezasićene masne kiseline dugog lanca, na taj način obogaćujući rezultujuću kompoziciju omega-3 polinezasićenim masnim kiselinama dugog lanca. Uprkos dugotrajnog korišćenja, međutim, i studija dizajniranih da karakterizuju efekte različitih fizičko-hemijskih parametara procesa, stepen do kog kompleksacija uree obogaćuje pojedinačne vrste polinezasićenih masnih kiselina dugačkog lanca ostaje nepredvidiv. Ova rezidualna nepredvidivost u proceduri kompleksacije uree, zajedno sa potencijalom za stvaranje nedopustivo visokih nivoa etil karbamata, koji obavezno uključuje dodatnu obradu, inicijalno je išao u prilog izostavljanju kompleksacije uree iz procesa rafinisanja komercijalne razmere koji bi se koristio za proizvodnju kompozicija omega-3 PUFAs u obliku slobodne kiseline farmaceutskog kvaliteta koje ispunjavaju određene željene specifikacije kompozicije.
[0017] Međutim, kao što je dodatno opisano u Primeru 1, rani napori da se razvije proces komercijalne razmere bez uree jasno su ukazali da takvi procesi ne mogu pouzdano proizvesti šarže sa kompozicijom koja ispunjava zahtevane specifikacije. Shodno tome, tražen je proces koji koristi kompleksaciju uree, i otkriveno je da striktna kompoziciona kontrola PUFA vrsta prisutnih u intermedijernom etil estar stoku, zajedno sa algoritamski određenom količinom uree, može pouzdano proizvesti šarže koje ispunjavaju zahtevane specifikacije, i bez prelaska prihvatljivih granica etil karbamata.
[0018] Kao što je opisano u Primeru 2, proizvedena su četiri primera proizvodnih šarži polinezasićenih masnih kiselina u obliku slobodne kiseline korišćenjem koraka kompleksacije uree. Striktne kompozicione kontrole su primenjene na stok etil estar intermedjera, korišćenjem samo šarži u kojima su specifikovane vrste polinezasićenih masnih kiselina potpadale u dobro definisane granice opsega, i korišćene su količine uree koje su potpadale unutar opsega koji je zahtevan od strane algoritma urea kalkulatora. Određeno je da sve četiri proizvodne šarže farmaceutske kompozicije ispunjavaju željene kompozicione specifikacije.
[0019] Kao što je očekivano, korak kompleksacije uree značajno je smanjio procenat zasićenih masnih kiselina i mono-nezasićenih masnih kiselina u rezultujućoj kompoziciji, čime je značajno obogaćena u odnosu na polinezasićene masne kiseline. Videti SL. 3A. Neočekivano, međutim, izvođenje kompleksacije uree korišćenjem količine uree koja potpada unutar algoritamski određenog opsega imalo je različite efekte na obogaćivanje određenim vrstama omega-3 polinezasićenih masnih kiselina i omega-6 polinezasićenih masnih kiselina.
[0020] Kao što je opisano u nastavku u Primeru 3, pronađeno je da su omega-3 dokozapentaenoinska kiselina vrste, DPA (C22:5 n-3), obogaćene, dok su odgovarajuće omega-6 vrste, sa identičnom dužinom lanca i stepenom nezasićenosti, dokozapentaenoinska kiselina (C22:5 n-6), smanjene u prevalenci. Divergentni efekat kompleksacije uree na obogaćivanje sa ova dva izomera – zajedno sa razlikama u njihovim relativnim koncentracijama u odnosu na stok etil estar intermedijera – rezultovao je u razlici log redosleda u njihovim konentracijama u finalnoj, slobodnoj kiselini, farmaceutske kompozicije ("API").
[0021] Dodatne proizvodne šarže su pripremljene, i kao što je opisano u Primeru 4, kompoziciona analiza 10 šarži API pokazala je reproducibilne povišene nivoe DPA u finalnoj kompoziciji. Kao što je opisano u Primeru 5, kompoziciona analiza 21 šarže pripremljene korišćenjem kompleksacije uree pokazala je reproducibilnu 10-struku razliku u koncentraciji omega-3 vrsta, DPA, u poređenju sa njegovim omega-6 izomerom, dokozapentaenoinskom kiselinom (C22:5 n-6).
[0022] U prosečnoj koncentraciji od 4.44% (a/a) u 21 proizvodnoj šarži, DPA je treća najzastupljenija vrsta polinezasićene masne kiseline u API, od koje ima više samo EPA i DHA. Na ovom nivou, DPA koncentracija je takođe približno 10-puta veća od one registrovane za raniju farmaceutsku kompoziciju omega-3 polinezasićenih masnih kiselina u obliku slobodne kiseline, nazvane Purepa, za koju je objavljeno da je DPA prisutna u nivou od 0.5%. Videti Belluzzi et al., Dig. Dis. Sci.39(12): 2589-2594 (1994).
[0023] Iako je DPA inetrmedijer u biosintetskom putu od EPA do DHA (videti SL. 1), iznenađujuće malo se zna o specifičnim biološkim efektima DPA. Da bi se razjasnio potencijalni doprinos DPA kliničkoj efikasnosti farmaceutske kompozicije, izvedeni su eksperimenti profilisanja genske ekspresije korišćenjem HepG2 ćelija hepatokarcinoma.
[0024] Kao što je dodatno opisano u Primeru 6, efekti DPA na gensku ekspresiju ćelije jetre predviđaju veću kliničku efikasnost DPA-obogaćenih kompozicija.
[0025] Eksperimenti sa profilisanjem genske ekspresije pokazali su da DPA ima značajnu biološku aktivnost na relevantne in vitro koncentracije. Ovi efekti su jasno različiti od onih uočenih sa EPA i sa DHA.
[0026] Na relevantnoj koncentraciji, uočeno je da DPA utiče na ekspresiju gena u višestrukim metaboličkim putevima, uključujući gene u kategorijama poznatim kao relevantnim za kliničke efekte omega-3 polinezasićenih masnih kiselina: geni uključeni u metabolizam lipida, geni uključeni u kardiovaskularnu fiziologiju, i geni uključeni u inflamaciju. Značajni efekti drugog reda su takođe predviđeni, uzimajući u obzir promene uočene u ekspresiji gena koji kodiraju proteini koji sami po sebi utiču na ekspresiju gena, i u genima koji kodiraju proteine koji utiču na post-transkripcionu modifikaciju.
[0027] Specifični efekti na ekspresiju nekoliko gena uključenih u metabolizam lipida sugerišu da DPA, na analognoj in vivo koncentraciji, treba da doprinese poboljšanju različitih klinički relevantnih lipidnih parametara. Naročito, uočena ushodna regulacija ACADSB, acil-CoA dehidrogenaze kratkog/granatog lanca, vođena sa DPA, predviđa niže nivoe serumskih triglicerida; DPA vođena nishodna regulacija HMGCR, analogna inhibiciji kodiranog enzima HMG-CoAreduktaze sa statinima, predviđala bi poželjna smanjenja u odnosu ukupnog holestarola:HDL; i DPA nishodna regulacija SQLE, koraka koji ograničava stopu sinteze sterola, analogno predviđa redukcije u nivoima ukupnog holestarola.
[0028] Eksperimenti sa profilisanjem ekspresije takođe su pokazali prag doze za efekte DPA. Niža testirana koncentracija, izabrana da imitira 10-struko nižu koncentraciju DPA u ranijoj formulaciji slobodne kiseline omega-3, Purepa, uticala je na ekspresiju 10-struko manje gena od više DPA koncentracije, izabrane da imitira izlaganje očekivano od ovde opisanih farmaceutskih kompozicija, pokazujući da niža koncentracija DPA obezbeđuje izlaganje ispod praga, i očekivalo bi se da obezbeđuje subterapeutsku dozu in vivo.
[0029] Kliničke studije na ljudima su potvrdile izuzetnu kliničku efikasnost DPA-obogaćene farmaceutske kompozicije omega-3 polinezasićenih masnih kiselina u obliku slobodne kiseline.
[0030] Primer 7 predstavlja rezultate ECLIPSE kliničke studije, otvorene, pojedinačne doze, randomizovane 4-struko ukrštene studije koja je upoređivala biodostupnost 4g doze Lovaza® i bioraspoloživosti 4g doze DPA-obogaćene farmaceutske kompozicije omega-3 PUFA u obliku slobodne kiseline opisane ovde (nadalje, "Epanova®"), pod uslovima ishrane i bogate mastima i siromašne mastima. Prema FDA-odobrenom obeležavanju proizvoda, svaka 1-gramaka kapsula Lovaza® sadrži najmanje 900 mg etil estara omega-3 masnih kiselina poreklom iz ribljih ulja, pretežno kombinacije etil estara eikozapentaenoinske kiseline (EPA – približno 465 mg) i dokozaheksaenoinske kiseline (DHA – približno 375 mg). Šarža Epanova® korišćena u studiji sadržala je 57.3% (a/a) EPA, 19.6% (a/a) DHA, i 6.2% (a/a) DPA, svaka značajno u obliku slobodne kiseline.
[0031] Promena podešena prema referentnoj vrednosti u ukupnoj EPA+DHA i pojedinačni profili apsorpcije EPA i DHA (AUC) sa Epanova® (omega-3 PUFAs u obliku slobodne kiseline) bili su značajno veći nego sa Lovaza® (omega-3-PUFA etil estri) tokom perioda ishrane bogate mastima i dramatično bolji tokom perioda ishrane siromašne mastima. Dodatno, postojao je dubok uticaj sadržaja masti obroka na biodostupnost Lovaza®, dok je biodostupnost Epanova® bila predvidljivija, usled samo umerenog efekta ishrane.
[0032] Superiorna od masti nezavisna biodostupnost Epanova® u odnosu na Lovaza® je klinički važna, u odnosu na NCEP ATP III preporuku da se subjekti sa hipertrigliceridemijom i dislipidemijama pridržavaju ishrane siromašne mastima tokom dodatne terapije.
[0033] Primer 8 predstavlja rezultate 14-dnevne studije biodostupnosti, koja je pokazala da povećanje biodostupnosti uočeno kod jedne doze ECLIPSE studije je održavana, čak poboljšana, tokom dve nedelje doziranja. Dodatno, neagregirajući podaci specifični za subjekte pokazali su da je subjekt sa najmanjim odgovorom na Epanova® još uvek imao veću dan-14 EPA+DHA Cmaxnego subjekt sa najboljim odgovorom na Lovaza®.
[0034] Primer 10 predstavlja rezultate EVOLVE studije, 12-nedeljne, dvostruko slepe, studije sa maslinovim uljem kao kontrolom pacijenata izabranih na osnovu visokih nivoa triglicerida, u opsegu od 500-2,000 mg/dL (teška trigliceridemija). Primarna krajnja tačka studije bio je procenat promene u nivou triglicerida u plazmi od refrentne početne vrednosti do kraja tretmana ("EOT"). Druga krajnja tačka bio je procenat promene u ne-HDL holesterolu u plazmi ("ne-HDL-C") od početne vrednosti do EOT.
[0035] Kao što se može videti iz SL. 20 - 23, 12 nedeljni tretman sa Epanova® izazavao je dramatično povećanje nivoa EPA, DHA, i DPA u plazmi.
[0036] Povećanja u nivoima EPA, DHA, i DPA u plazmi bila su praćena sa značajnim smanjenjima u nivoima AA u plazmi, sa 4g doznim režimom koji je uticao na prosečno smanjenje od 18%, srednje smanjenje od 25.9%, i smanjenje najmanjih kvadrata ("LS") srednje vrednosti od 23.2%. Ova smanjenja u nivoima arašidonske kiseline u plazmi uočena su uprkos primene egzogene arašidonske kiseline, koja je bila prisutna sa 2.446% (a/a) u Epanova® šarži korišćenoj u ovoj studiji.
[0037] Povećanje u nivoima EPA u plazmi sa istovremenim smanjenjem nivoa AA u plazmi izazvala je značajno povećanje u EPA/AA odnosu, od približno 0.10 na početnoj vrednosti do približno 0.67 (prosečno) i 0.62 (medijana) na kraju tretmana ("EOT") sa 4g dozom. Objavljeno je da EPA/AA odnos čini nezavisni faktor rizika za koronarnu aterosklerozu, Nakamua & Maegawa, Endocrine Abstracts (2012) 29 OC19.1, sa niskim odnosima povezanim sa napredovanjem koronarne ateroskleroze kod pacijenata tretiranih sa statinom sa bolešću koronarnih arterija, Nozue et al., Am J Cardiol. 2013 Jan 1;111(1):6-1 (ePub pre štampane verzije).
[0038] Dodatno, tretman sa Epanova® rezultovao je u značajnim smanjenjima nivoa triglicerida (vodeti FIGS. 26A i 26B), smanjenjima u ne-HDL-C i VLDL-C, i povećanju u HDL-C. LDL-C nivoima je bilo povišeno, podatak koji bi se mogao pripisati povećanju veličine čestice LDL nakon tretmana (razmatrano dodatno u Primeru 12).
[0039] EVOLVE studija je takođe pokalazala da je Apolipoprotein CIII (ApoCIII) bio značajno smanjen sa Epanova® tretmanom. Pronađeno je da su povećani nivoi ApoCIII nezavisni prediktor rizika kardiovaskularne srčane bolesti (CHD), dok su genetički smanjeni nivoi ApoCIII povezani sa zaštitom od CHD, i takođe su u korelaciji sa povećanjem dužine života.
[0040] Ekstremno visoka biodostupnost omega-3 PUFAs u Epanova® otkrila je prethodno nepoznate, i neočekivane, razlike u farmakokinetičkom odgovoru između različitih PUFA vrsta.
[0041] SL. 29 je grafik stope promene u procentu medijane od početne vrednosti u nivoima EPA, DHA, DPA, AA, TG, ne-HDL-C, i HDL-C u plazmi (apsolutna vrednost) između doze od 2g i 4g Epanova®. Sa malo ili bez povećanja u nivoima DHA i DPA u plazmi nakon dupliranja Epanova® doze od 2g do 4g na dan, stopa promene (nagib) u promeni medijane procenta od početne vrednosti je blizu nule, predviđajući da bi malo dalje povećanje u nivoima DHA i DPA u plazmi bilo postignuto ukoliko bi se doza dodatno povećala. Sličan plato odgovora viđen je u nivoima triglicerida, HDL-C, i ne-HDL-C (podaci nisu prikazani).
[0042] Nasuprot tome, stopa promene EPA ostaje visoka, sa nagibom od 0.59; dodatno povećanje u nivoima EPA u plazmi je očekivano da se dobije povećanjem Epanova® doze iznad 4g na dan. Značajno, stopa promene (smanjenje) AA nivoa po dupliranju Epanova® doze od 2g do 4g na dan je čak veće nego ono za EPA; dodatno smanjenje u nivoima AA u plazmi je očekivano sa povećanjem doze Epanova® iznad 4g/dan. Epanova® stoga pokazuje neprevaziđenu potenciju u sposobnosti da poveća EPA nivoe, smanji AA nivoe, i poboljša EPA:AA odnos.
[0043] Kao što je prikazano na SL. 38, subset subjekata u 2g grupi tretmana u EVOLVE studiji koji su primali istovremenu terapiju statinima prikazivao je veće veličine procentualne promene (srednja vrednost LS razlike), u odnosu na kontrolu, za TG, ne-HDL-C, HDL-C, LDL-C, TC, VLDL-C, i TC/HDL-C, u poređenju sa onim subjektima u 2g grupi tretmana koji nisu primili istovremenu terapiju statinima. Subjekti koji su primali istovremenu terapiju statinima pokazali su dozno zavisni odgovor na Epanova®, kao što je prikazano u komparativnim podacima za Epanova® 2g i Epanova® 4g prkazanim na SL.39.
[0044] Primer 12 opisuje ESPRIT kliničku studiju, koja je izvedena da bi se proučavali pacijenti na referentnoj terapiji statinima sa nivoima triglicerida između 200-500 mg/dL, nižim od pacijenata sa teškom hipertrigliceridemijom uključenim u EVOLVE studiju opisanu u Primeru 10.
[0045] Dozno zavisna smanjenja u trigliceridima, smanjenja ne-HDL-C, i povećanja u HDL-C, su uočena, u poređenju sa placebom maslinovim uljem (videti SL. 43). Dodatno, uočena su dozno zavisna smanjenja u VLDL-C i TC/HDL-C (videti SL. 44). Uzeti zajedno, rezultati (rezimirani u SL. 42 - 44) pokazuju efikasnost Epanova® kao dodatak terapiji statinima kod pacijenata sa nivoima triglicerida između 200 -500 mg/dL.
[0046] SL. 45 - 52 ilustruju da je Epanova® efikasna kao dodatak i statinima sa niskom potencijom i statinima sa visokom potencijom, u opsegu referentnih vrednosti stanja pacijenata. Kao što se vidi na SL. 48, smanjenja u TG nivoima su uočena za pacijente koji su primili istovremeno rosuvastatin, atorvastatin, i simvastatin terapiju. Statistički značajni efekti na trigliceride, ne-HDL-C, i LDL-C nivoe su uočeni nezavisno da li koprimenjeni statini sa niskom ili visokom potencijom, kao što je prikazano na SL.49 - 51.
4.2 DPA-obogaćene Omega-3 kompozicije u obliku slobodne kiseline
[0047] Shodno tome, u prvom aspektu, poboljšane kompozicije polinezasićenih masnih kiselina ("PUFAs") u obliku slobodne kiseline su obezbeđene. U različitim primerima izvođenja, kompozicija je farmaceutska kompozicija pogodna za oralnu primenu.
4.2.1 Tipični primeri izvođenja
[0048] Kompozicija sadrži više vrsta omega-3 PUFA, svaka prisutna značajno u obliku slobodne kiseline.
[0049] Kompozicija sadrži eikozapentaenoinsku kiselinu (C20:5 n-3) ("EPA," takođe poznata kao timnodonska kiselina), dokozaheksaenoinsku kiselinu (C22:6 n-3) ("DHA," takođe poznata kao cervonska kiselina), i dokozapentaenoinsku kiselinu (C22:5 n-3) ("DPA", takođe takođe poznatu kao klupanodonska kiselina), svaka suštinski u obliku slobodne kiseline.
[0050] Kompozicija sadrži EPA u količini, izračunatoj kao procenat površine GC hromatograma svih masnih kiselina u kompoziciji, od najmanje 45% ("45% (a/a)"). U različitim primerima izvođenja, kompozicija sadrži EPA u količini od najmanje 46% (a/a) 47% (a/a), 48% (a/a), 49% (a/a), ili najmanje 50% (a/a). U određenim primerima izvođenja, kompozicija sadrži EPA u količini od najmanje 51% (a/a), najmanje 52% (a/a), najmanje 53% (a/a), najmanje 54% (a/a), najmanje 55% (a/a), najmanje 56% (a/a), najmanje 57% (a/a), najmanje 58% (a/a), čak najmanje 59% (a/a), najmanje 60% (a/a), najmanje 61% (a/a), 62% (a/a), 63% (a/a), 64% (a/a), ili 65% (a/a).
[0051] U određenim primerima izvođenja, kompozicija sadrži EPA u količini od 45 do 65% (a/a). U naročitim primerima izvođenja, EPA je prisutna u količini od 50 do 60% (a/a). U različitim primerima izvođenja, EPA je prisutna u količini od 52 do 58.0 % (a/a). U nekim primerima izvođenja, EPA je prisutna u količini od 55% (a/a) do 56% (a/a). U nekim primerima izvođenja, EPA je prisutna u količini od 55% (a/a).
[0052] U različitim primerima izvođenja, kompozicija sadrži EPA u količini, izračunatoj kao procenat po masi svih masnih kiselina u kompoziciji ("% (m/m)"), od 50% (m/m) do 60 % (m/m). U određenim primerima izvođenja, EPA je prisutna u količini od 55% (m/m).
[0053] Kompozicija sadrži DHA u količini od najmanje 17% (a/a). U različitim primerima izvođenja, kompozicija sadrži DHA u količini od najmanje 18% (a/a), najmanje 19% (a/a), ili najmanje 20% (a/a). U izabranim primerima izvođenja, kompozicija sadrži DHA u količini od najmanje 21% (a/a), najmanje 22% (a/a), najmanje 23% (a/a).
[0054] U nekoliko primera izvođenja, DHA je prisutna u količini od 17% (a/a) do 23 % (a/a). U određenim primerima izvođenja, DHA je prisutna u količini od 19% (a/a) do 20% (a/a).
[0055] U različitim primerima izvođenja, kompozicije sadrže DHA u količini od 17% (m/m) do 23% (m/m). U određenim primerima izvođenja, DHA je prisutna u količini od 20% (m/m).
[0056] Kompozicija sadrži DPA u količini od najmanje 1% (a/a). U različitim primerima izvođenja, kompozicij asadrži DPA u količini od najmanje 1.5% (a/a), 2% (a/a), 2.5% (a/a), 3% (a/a), 3.5% (a/a), 4% (a/a), 4.5% (a/a), čak najmanje 5% (a/a). U izabranim primerima izvođenja, kompozicija sadrži DPA u količini od najmanje 6% (a/a), najmanje 7% (a/a), najmanje 8% (a/a), ili najmanje 9% (a/a).
[0057] U različitim primerima izvođenja, kompozicija sadrži DPA u količini od 1% (a/a) do 8% (a/a). U određenim primerima izvođenja, kompozicija sadrži DPA u količini od 2% (a/a) do 7% (a/a). U izabranim primerima izvođenja, kompozicija sadrži DPA u količini od 3% (a/a) do 6% (a/a). U naročitim primerima izvođenja, kompozicija sadrži DPA u količini od 4% (a/a) do 5% (a/a).
[0058] U različitim primerima izvođenja, kompozicija sadrži DPA, izračunatu kao procenat po masi svih masnih kiselina u kompoziciji, u količini koja nije manja od 1% (m/m). U različitim primerima izvođenja, kompozicija sadrži DPA u količini od 1% (m/m) do 8% (m/m). U naročitim primerima izvođenja, kompozicija sadrži DPA u količini ne manjoj od 10% (m/m).
[0059] Kompozicija sadrži EPA i DHA u ukupnoj količini od najmanje 60% (a/a). U različitim primerima izvođenja, kompozicija sadrži EPA i DHA u ukupnoj količini od najmanje 61% (a/a), 62% (a/a), 63% (a/a), 64% (a/a), 65% (a/a), 66% (a/a), 67% (a/a), 68% (a/a), 69% (a/a), ili najmanje 70% (a/a). U naročitim primerima izvođenja, kompozicija sadrži EPA i DHA u ukupnoj količini od najmanje 71% (a/a), 72% (a/a), 73% (a/a), 74% (a/a), 75% (a/a), 76% (a/a), 77% (a/a), 78% (a/a), 79% (a/a), čak najmanje 80% (a/a). U određenim primerima izvođenja, kompozicija sadrži EPA i DHA u ukupnoj količini od najmanje 81% (a/a), 82% (a/a), najmanje 83% (a/a), 84% (a/a), čak najmanje 85% (a/a).
[0060] U različitim primerima izvođenja, kompozicija sadrži EPA i DHA u količini od 70.0 % (m/m) do 80.0% (m/m). U određenim primerima izvođenja, kompozicija sadrži 75% (m/m) EPA plus DHA.
[0061] Kompozicija sadrži EPA, DHA, i DPA u ukupnoj količini od najmanje 61% (a/a). U tipičnim primerima izvođenja, kompozicija sadrži EPA, DHA, i DPA u ukupnoj količini od najmanje 62% (a/a), 63% (a/a), 64% (a/a), 65% (a/a), 66% (a/a), najmanje 67% (a/a), najmanje 68% (a/a), najmanje 69% (a/a), ili najmanje 70% (a/a). U određenim primerima izvođenja, kompozicija sadrži EPA, DHA, i DPA u ukupnoj količini od najmanje 71% (a/a), 72% (a/a), 73% (a/a), 74% (a/a), 75% (a/a), 76% (a/a), 77% (a/a), 78% (a/a), 79% (a/a), 80% (a/a), čak najmanje 81% (a/a), 82% (a/a), 83% (a/a), 84% (a/a), 85% (a/a), 86% (a/a), 87% (a/a), čak najmanje 88% (a/a).
[0062] U različitim primerima izvođenja, kompozicija sadrži EPA, DHA, i DPA u ukupnoj količini od između 70% (a/a) do 90% (a/a).
[0063] U naročitoj seriji primera izvođenja, EPA je prisutna u količini od 55% (a/a) do 56% (a/a); DHA je prisutna u količini od 19% (a/a) do 20% (a/a); i DPA je prisutna u količini od 4% (a/a) do 5 % (a/a).
[0064] U određenim primerima izvođenja, kompozicija dodatno sadrži jednu ili više vrsta omega-3 polinezasićenih kiselina izabranih iz grupe koja se sastoji od: α-linoleinske kiseline (C18:3 n-3), moroktinske kiseline (C18:4 n-3, takođe poznate kao stearidonska kiselina), eikozatrienoinske kiseline (C20:3 n-3), eikozatetraenoinska kiselina (C20:4 n-3), i heneikozapentenoinske kiseline (C21:5 n-3).
[0065] U naročitim primerima izvođenja, kompozicija sadrži EPA, DHA, DPA, i moroktinsku kiselinu, svaku suštinski u obliku slobodne kiseline. U različitim primerima izvođenja, kompozicija sadrži EPA, DHA, DPA, moroktinsku kiselinu, i heneikozapentenoinsku kiselinu, svaku suštinski u obliku slobodne kiseline. U specifičnim primerima izvođenja, kompozicija sadrži EPA, DHA, DPA, moroktinsku kiselinu, heneikozapentenoinsku kiselinu, i eikozatetraenoinsku kiselinu, svaku suštinski u obliku slobodne kiseline. U izabranim primerima izvođenja, kompozicija sadrži EPA, DHA, DPA, α-linoleinsku kiselinu (C18:3 n-3), moroktinsku kiselinu (C18:4 n-3), eikozatrienoinsku kiselinu (C20:3 n-3), eikozatetraenoinsku kiselinu (C20:4 n-3), i heneikozapentenoinsku kiselinu (C21:5 n-3).
[0066] U različitim primerima izvođenja, ukupne omega-3 masne kiseline – definisane kao zbir alfa-linoleinske kiseline (C18:3 n-3), moroktinske kiseline (C18:4 n-3), eikozatrienoinske kiseline (C20:3 n-3), eikozatetraenoinske kiseline (C20:4 n-3), eikozapentenoinske kiseline (EPA) (C20:5 n-3), heneikozapentenoinske kiseline (C21:5 n-3), dokozapentenoinske kiseline (C22:5 n-3) i dokozaheksaenoinske kiseline (DHA) (C22:6 n-3) – sačinjavaju od 80% (a/a) do 95% (a/a) svih masnih kiselina u kompoziciji. U različitim primerima izvođenja, ukupne omega-3 masne kiseline čine od 80 do 95% (m/m) svih masnih kiselina u kompozicija.
[0067] U različitim primerima izvođenja, kompozicija dodatno sadrži jednu ili više vrsta omega-6 PUFA, svaku prisutnu suštinski u obliku slobodne kiseline.
[0068] U određenim primerima izvođenja, kompozicija sadrži jednu ili više vrsta omega-6 PUFA izabranu iz grupe koja se sastoji od linolne kiseline (C18:2 n-6), gama-linoleinske kiseline (C18:3 n-6), eikozadienoinske kiseline (C20:2 n-6), dihomogama-linoleinske kiseline (C20:3 n-6) ("DGLA"), arašidonske kiseline (C20:4 n-6) ("AA"), i dokozapentaenoinske kiseline (C22:5 n-6, takođe poznate kao osbond kiselina).
[0069] U naročitim primerima izvođenja, kompozicija sadrži linolnu kiselinu (C18:2 n-6), gama-linoleinsku kiselinu (C18:3 n-6), eikozadienoinsku kiselinu (C20:2 n-6), dihomogamalinoleinsku kiselinu (C20:3 n-6) ("DGLA"), arašidonsku kiselinu (C20:4 n-6) ("AA"), i dokozapentaenoinsku kiselinu (C22:5 n-6), svaku prisutnu suštinski u obliku slobodne kiseline.
[0070] U različitim primerima izvođenja, AA je prisutna u količini ne većoj od 5% (a/a) masnih kiselina u kompoziciji. U određenim primerima izvođenja, AA čini ne više od 4.5% (a/a) masnih kiselina u kompoziciji. U naročitim primerima izvođenja, AA je prisutna u količini ne većoj od 4% (a/a) masnih kiselina u kompoziciji.
[0071] U određenim primerima izvođenja, AA je prisutna u količini ne većoj od 5% (m/m) masnih kiselina u kompoziciji. U određenim primerima izvođenja, AA čini ne više od 4.5% (m/m) masnih kiselina u kompoziciji. U naročitim primerima izvođenja, AA je prisutna u količini ne većoj od 4% (m/m) masnih kiselina u kompoziciji.
[0072] U određenim primerima izvođenja, ukupne omega-6 polinezasićene masne kiseline – definisane kao zbir linolne kiseline (C18:2 n-6), gama-linoleinske kiseline (C18:3 n-6), eikozadienoinske kiseline (C20:2 n-6), dihomogama-linoleinske kiseline (C20:3 n-6) ("DGLA"), arašidonske kiseline (C20:4 n-6) ("AA"), i dokozapentaenoinske kiseline (C22:5 n-6) – čine ne više od 10% (a/a) masnih kiselina u kompoziciji. U određenim primerima izvođenja, ukupne omega-6 polinezasićene masne kiseline – definisane kao zbir linolne kiseline (C18:2 n-6), gama-linoleinske kiseline (C18:3 n-6), eikozadienoinske kiseline (C20:2 n-6), dihomogama-linoleinske kiseline (C20:3 n-6) ("DGLA"), arašidonske kiseline (C20:4 n-6) ("AA"), i dokozapentaenoinske kiseline (C22:5 n-6) – čine ne više od (m/m) masnih kiselina u kompoziciji.
[0073] U specifičnim primerima izvođenja, kompozicija je data u Tabeli 11, sa svakom vrstom PUFA koja je tamo identifikovana koja potpada unutar opsega od -3 SD do 3 SD respektivno navedenog proseka. U određenim primerima izvođenja, svaka vrsta PUFA tamo identifikovana potpada unutar opsega od -2SD do 2 SD respektivno navedenog proseka. U određenim primerima izvođenja, svaka vrsta potpada unutar opsega od -1SD do 1SD respektivno navedenog proseka.
[0074] U izabranim primerima izvođenja, kompozicija je data u Tabeli 13, sa svakom vrstom PUFA koja je tamo identifikovana koja potpada unutar opsega od -3SD do 3 SD respektivno navedenog proseka. U određenim primerima izvođenja, svaka vrsta potpada unutar opsega od -2SD do 2 SD respektivno navedenog proseka. U određenim primerima izvođenja, svaka vrsta PUFA potpada unutar opsega od -1SD do 1SD respektivno navedenog proseka.
[0075] U određenim primerima izvođenja, polinezasićene masne kiseline različite od omega-3 i omega-6 polinezasićenih masnih kiselina su prisutne u količini ne više od 5% (a/a). U različitim primerima izvođenja, polinezasićene masne kiseline različite od omega-3 i omega-6 polinezasićene masne kiseline su prisutne u količini ne većoj od 5% (m/m).
[0076] U različitim primerima izvođenja, najmanje 90% svakih više vrsta omega-3 PUFA u kompoziciji je u obliku slobodne kiseline. U određenim primerima izvođenja, najmanje 91%, najmanje 92%, najmanje 93%, najmanje 94%, najmanje 95%, najmanje 96%, najmanje 97%, najmanje 98%, čak najmanje 99% svake vrste omega-3 PUFA u kompoziciji je prisutna u obliku slobodne kiseline. U primerima izvođenja, najmanje 90% od ukupnog sadržaja omega-3 polinezasićenih masnih kiselina u kompoziciji composition je prisutna u obliku slobodne kiseline. U određenim primerima izvođenja, najmanje 91%, najmanje 92%, najmanje 93%, najmanje 94%, najmanje 95%, najmanje 96%, najmanje 97%, najmanje 98%, čak najmanje 99% od ukupnog sadržaja omega-3 polinezasićenih masnih kiselina u kompoziciji je prisutna u obliku slobodne kiseline.
[0077] U različitim primerima izvođenja, najmanje 90% od svakih više vrsta omega-6 PUFA u kompoziciji je u obliku slobodne kiseline. U određenim primerima izvođenja, najmanje 91%, najmanje 92%, najmanje 93%, najmanje 94%, najmanje 95%, najmanje 96%, najmanje 97%, najmanje 98%, čak najmanje 99% od svake vrste omega-6 PUFA u kompoziciji je prisutna u obliku slobodne kiseline. U primerima izvođenja, najmanje 90% od ukupnog sadržaja omega-6 polinezasićenih masnih kiselina u kompoziciji je prisutno u obliku slobodne kiseline.
[0078] U različitim primerima izvođenja, najmanje 90% od ukupnih polinezasićenih masnih kiselina u kompoziciji je prisutno u obliku slobodne kiseline. U određenim primerima izvođenja, najmanje 91%, najmanje 92%, najmanje 93%, najmanje 94%, najmanje 95%, najmanje 96%, najmanje 97%, najmanje 98%, čak najmanje 99% od ukupnih polinezasićenih masnih kiselina u kompoziciji je prisutno u obliku slobodne kiseline.
[0079] Kompozicija sadrži, u tipičnim primerima izvođenja, ne više od 3.0% (a/a) zasićenih masnih kiselina i ne više od 5.0% (a/a) mono-nezasićenih masnih kiselina. U različitim primerima izvođenja, kompozicija sadrži ne više od 3.0% (m/m) zasićenih masnih kiselina i ne više od 5.0% (m/m) mono-nezasićenih masnih kiselina.
[0080] U tipičnim primerima izvođenja, kompozicija korisno dodatno sadrži antioksidans. U određenim primerima izvođenja, antioksidant je butilovani hidroksianizol (BHA). U nekim primerima izvođenja, antioksidans je alfa-tokoferol. U nekim primerima izvođenja, alfatokoferol je prisutan u količini od 0.20 -0.40% (m/m). U različitim primerima izvođenja, alfatokoferol je prisutan u količini od 0.25 -0.35% (m/m). U naročitim primerima izvođenja, alfatokoferol je prisutan u količini od 0.27 -0.33% (m/m).
[0081] U nekim primerima izvođenja, kompozicija sadrži ne više od 0.1 ppm etil karbamata. U različitim primerima izvođenja, kompozicija sadrži manje od 0.1 ppm etil karbamata.
4.2.1 Dodatni primeri izvođenja
[0082] U određenim dodatnim primerima izvođenja, kompozicija sadrži EPA u količini, izračunatoj kao procenat po površini na GC hromatogramu svih masnih kiselina u kompoziciji, od 50.0 -60.0 % (a/a). U različitim primerima izvođenja, EPA je prisutna u količini od 52.0 -58.0 % (a/a). U nekim primerima izvođenja, EPA je prisutna u količini od 55.0% (a/a).
[0083] U određenim primerima izvođenja, EPA je prisutna u količini od 55.0 -58.4 % (a/a). U različitim primerima izvođenja, EPA je prisutna u količini od 55.6 -57.9 % (a/a). U nekim primerima izvođenja, EPA je prisutna u količini od 56.7% (a/a).
[0084] U različitim primerima izvođenja, kompozicija sadrži EPA u količini, izračunatoj kao procenat po masi svih masnih kiselina u kompoziciji, od 50.0 - 60.0% (m/m). U određenim primerima izvođenja, EPA je prisutna u količini od 55% (m/m).
[0085] U određenim dodatnim primerima izvođenja, kompozicija sadrži DHA u količini, izračunatoj kao procenat po površini na GC hromatogramu svih masnih kiselina u kompoziciji, od 13.0 -25.0 % (a/a). U određenim primerima izvođenja, DHA je prisutna u količini od 15.0 -23.0% (a/a). U različitim primerima izvođenja, DHA je prisutna u količini od 17.0 -21.0% (a/a). U određenim primerima izvođenja, DHA je prisutna u količini od 19.0 -20.0% (a/a).
[0086] U određenim primerima izvođenja, DHA je prisutna u količini od 17.7 -22.2% (a/a). U različitim primerima izvođenja, DHA je prisutna u količini od 18.4 -21.4% (a/a). U određenim primerima izvođenja, DHA je prisutna u količini od 19.9% (a/a).
[0087] U različitim primerima izvođenja, kompozicija sadrži DHA, izračunat kao procenat po masi svih masnih kiselina u kompoziciji, u količini od 15.0 - 25.0% (m/m). U određenim primerima izvođenja, DHA je prisutna u količini od 20.0% (m/m).
[0088] U različitim dodatnim primerima izvođenja, kompozicija sadrži EPA i DHA u ukupnoj količini, izračunatoj kao procenat po površini na GC hromatogramu svih masnih kiselina u kompoziciji, od 67.0 - 81.0 % (a/a). U određenim primerima izvođenja, kompozicija sadrži ukupnu količinu EPA i DHA od 69.0 -79.0% (a/a). U različitim primerima izvođenja, kompozicija sadrži ukupnu količinu EPA plus DHA od 71.0 -77.0% (a/a). U određenim primerima izvođenja, kompozicija sadrži ukupnu količinu EPA+DHA od 74.0 -75.0% (a/a).
[0089] U različitim primerima izvođenja, kompozicija sadrži EPA+DHA u ukupnoj kolličini, izračunat kao procenat po masi svih masnih kiselina u kompoziciji, od 70.0-80.0% (m/m). U određenim primerima izvođenja, kompozicija sadrži 75.0% (m/m) EPA plus DHA.
[0090] U onim dodatnim primerima izvođenja koji dodatno sadrže α-linoleinsku kiselinu (C18:3 n-3), α-linoleinska kiselina je prisutna u količini od 0.07 -1.10% (a/a). U određenim primerima izvođenja, α-linoleinska kiselina je prisutna u količini od 0.24 -0.91% (a/a). U različitim primerima izvođenja, α-linoleinska kiselina je prisutna u količini od 0.40 -0.80 % (a/a). U određenim primerima izvođenja, α-linoleinska kiselina je prisutna u količini od 0.50 do 0.600% (a/a).
[0091] U onim dodatnim primerima izvođenja koji dodatno sadrže moroktinsku kiselinu (C18:4 n-3), moroktinska kiselina je prisutna u količini od 0.01 -7.90% (a/a). U određenim primerima izvođenja, moroktinska kiselina je prisutna u količini od 0.25 -6.40% (a/a). U određenim primerima izvođenja, moroktinska kiselina je prisutna u količini od 1.70% - 4.90% (a/a). U naročitim primerima izvođenja, moroktinska kiselina je prisutna u količini od 3.25% (a/a).
[0092] U onim dodatnim primerima izvođenja koji dodatno sadrže eikozatrienoinsku kiselinu (C20:3 n-3), eikozatrienoinska kiselina je prisutna u količini od 0.75 -3.50% (a/a). U određenim primerima izvođenja, eikozatrienoinska kiselina je prisutna u količini od 1.20 -3.00% (a/a). U različitim primerima izvođenja, eikozatrienoinska kiselina je prisutna u količini od 1.60 -2.60% (a/a). U određenim primerima izvođenja, eikozatrienoinska kiselina je prisutna u količini od 2.10% (a/a).
[0093] U onim dodatnim primerima izvođenja koji dodatno sadrže eikozatetraenoinsku kiselinu (C20:4 n-3), eikozatetraenoinskа kiselina je prisutna u količini od 0.01 -0.40% (a/a). U određenim primerima izvođenja, eikozatetraenoinskа kiselina je prisutna u količini od 0.01 -0.30% (a/a). U nekim primerima izvođenja, eikozatetraenoinskа kiselina je prisutna u količini od 0.03 -0.22% (a/a). U nekim primerima izvođenja, eikozatetraenoinskа kiselina je prisutna u količini od 0.12% (a/a).
[0094] U onim dodatnim primerima izvođenja koji dodatno sadrže heneikozapentaenoinsku kiselinu (C21:5 n-3), heneikozapentaenoinska kiselina je prisutna u količini od 0.01 - 4.10% (a/a). U određenim primerima izvođenja, heneikozapentaenoinska kiselina je prisutna u količini od 0.01 -3.20% (a/a). U naročitim primerima izvođenja, heneikozapentaenoinska kiselina je prisutna u količini od 0.60 -2.35% (a/a). U različitim primerima izvođenja, heneikozapentaenoinska kiselina je prisutna u količini od 1.50% (a/a).
[0095] U različitim dodatnim primerima izvođenja, DPA je prisutna u količini od 0.90 -7.60% (a/a). U različitim primerima izvođenja, DPA je prisutna u količini od 2.00 -6.50% (a/a). U određenim primerima izvođenja, DPA je prisutna u količini od 3.10 -5.40% (a/a). U različitim primerima izvođenja, DPA je prisutna u količini od 4.25% (a/a).
[0096] U različitim dodatnim primerima izvođenja, DPA je prisutna u količini od 2.13 -8.48% (a/a). U određenim primerima izvođenja, DPA je prisutna u količini od 3.19 -7.42% (a/a). U nekim primerima izvođenja, DPA je prisutna u količini od 4.25 -6.37% (a/a). U različitim primerima izvođenja, DPA je prisutna u količini od 5.31% (a/a).
[0097] U različitim primerima izvođenja, ukupne omega-3 masne kiseline čine od 80.0-95% (m/m) svih masnih kiselina u farmaceutskoj kompoziciji.
[0098] U dodatnim primerima izvođenja koji sadrže DGLA, DGLA je prisutna u količini, izračunatoj kao procenat po površini na GC hromatogramu svih masnih kiselina u kompoziciji, od 0.01 -4.40% (a/a). U nekim primerima izvođenja, DGLA je prisutna u količini od 0.01 -3.30% (a/a). U određenim primerima izvođenja, DGLA je prisutna u količini od 0.01 -2.20% (a/a). U nekim primerima izvođenja, DGLA je prisutna u količini od 1.10% (a/a).
[0099] U nekim primerima izvođenja, DGLA je prisutna u količini od 0.28 -0.61% (a/a). U određenim primerima izvođenja, DGLA je prisutna u količini od 0.33 -0.56% (a/a). U nekim primerima izvođenja, DGLA je prisutna u količini od 0.44% (a/a).
[0100] U dodatnim primerima izvođenja koji sadrže AA, AA je prisutna u količini, izračunatoj kao procenat po površini na GC hromatogramu svih masnih kiselina u kompoziciji, od 0.01 - 6.90% (a/a). U različitim primerima izvođenja, AA je prisutna u količini od 0.01 -5.40% (a/a). U određenim primerima izvođenja, AA je prisutna u količini od 0.70 -3.80% (a/a). U određenom broju primera izvođenja, AA je prisutna u količini od 2.25% (a/a).
[0101] U različitim primerima izvođenja, AA je prisutna u količini od 1.41 -4.87% (a/a). U određenim primerima izvođenja, AA je prisutna u količini od 1.99 -4.30% (a/a). U određenom broju primera izvođenja, AA je prisutna u količini od 2.57 -3.72% (a/a).
[0102] U različitim primerima izvođenja, kompozicija sadrži AA u količini od ne više od 4.5% (a/a). U nekim primerima izvođenja, kompozicija sadrži AA u količini od ne više od 3.14% (a/a).
[0103] U onima od dodatnih primera izvođenja koji dodatno sadrže linolnu kiselinu (C18:2 n-6), linolna kiselina je prisutna u količini od 0.25% - 1.30 % (a/a). U određenim primerima izvođenja, linolna kiselina je prisutna u količini od 0.40% -1.20% (a/a). U različitim primerima izvođenja, linolna kiselina je prisutna u količini od 0.60% - 0.95% (a/a). U naročitim primerima izvođenja, linolna kiselina je prisutna u količini od 0.80% (a/a).
[0104] U onima od dodatnih primera izvođenja koji dodatno sadrže gama-linoleinsku kiselinu (C18:3 n-6), gama-linoleinska kiselina je prisutna u količini od 0.01 -0.65% (a/a). U različitim primerima izvođenja, gama-linoleinska kiselina je prisutna u količini od 0.03 -0.51% (a/a). U određenim primerima izvođenja, gama-linoleinska kiselina je prisutna u količini od 0.15 -0.40% (a/a). U nekoliko primera izvođenja, gama-linoleinska kiselina je prisutna u količini od 0.27% (a/a).
[0105] U onim dodatnim primerima izvođenja koji dodatno sadrže eikozadienoinsku kiselinu (C20:2 n-6), eikozadienoinska kiselina je prisutna u količini od 0.01-0.30 (a/a). U različitim primerima izvođenja, eikozadienoinska kiselina je prisutna u količini od 0.04 -0.24% (a/a). U određenim primerima izvođenja, eikozadienoinska kiselina je prisutna u količini od 0.09 -0.20% (a/a). U nekim primerima izvođenja, eikozadienoinska kiselina je prisutna u količini od 0.14% (a/a).
[0106] U onim dodatnim primerima izvođenja koji dodatno sadrže dokozapentaenoinsku kiselinu (C22:5 n-6), dokozapentaenoinska kiselina je prisutna u količini od 0.01 - 0.95% (a/a). U različitim primerima izvođenja, dokozapentaenoinska kiselina (C22:5 n-6) je prisutna u količini od 0.01 -1.05% (a/a). U nekim primerima izvođenja, dokozapentaenoinska kiselina (C22:5 n-6) je prisutna u količini od 0.05 -0.71% (a/a). U određenim primerima izvođenja, dokozapentaenoinska kiselina (C22:5 n-6) je prisutna u količini od 0.01 -0.48% (a/a). U naročitim primerima izvođenja, dokozapentaenoinska kiselina (C22:5 n-6) je prisutna u količini od 0.24% (a/a).
[0107] U nekim primerima izvođenja, dokozapentaenoinska kiselina (C22:5 n-6) je prisutna u količini od 0.01 -1.19% (a/a). U određenim primerima izvođenja, dokozapentaenoinska kiselina (C22:5 n-6) je prisutna u količini od 0.16 -0.98% (a/a). U naročitim primerima izvođenja, dokozapentaenoinska kiselina (C22:5 n-6) je prisutna u količini od 0.57% (a/a).
[0108] U određenim primerima izvođenja, kompozicija sadrži ne više od 10.0% (a/a) ukupnih omega-6 masnih kiselina.
[0109] Kompozicija sadrži, u tipičnim primerima izvođenja između ovih dodatnih primera izvođenja, ne više od 3.0% (a/a) zasićenih masnih kiselina, ne više od 5.0% (a/a) mononezasićenih masnih kiselina, i ne više od 0.1 ppm etil karbamata. U nekim primerima izvođenja, kompozicija sadrži ne više od 0.1 ppm etil karbamat. U različitim primerima izvođenja, kompozicija sadrži manje od 0.1 ppm etil karbamata.
4.3 Jedinični dozni oblici
[0110] U sledećem aspektu, farmaceutska kompozicija DPA-obogaćenih omega-3 PUFAs u obliku slobodne kiseline opisana prethodno u Odeljku 4.2 je pogodno pakovana u jediničnim doznim oblicima za oralnu primenu.
[0111] U naročitim primerima izvođenja, dozni oblik je kapsula. U određenim primerima izvođenja, dozni oblik je kapsula od želatina. U naročitim primerima izvođenja, želatinska kapsula je kapsula od tvrdog želatina. U drugim primerima izvođenja, dozni oblik je mekana želatinska kapsula.
[0112] U različitim primerima izvođenja, kapsula sadrži želatin Tipa A. U nekim primerima izvođenja, kapsula sadrži i Tip A i Tip B želatin. Izvori kolagena za proizvodnju ili tipa A ili tipa B želatina, uključuju, ali nisu ograničeni na, krave, svinje i ribe.
[0113] U različitim primerima izvođenja, kapsula je meka želatinska kapsula koja sadrži dovoljno svinjskog želatina tipa A tako da se kapsula raspada unutar vremenskog perioda od ne više od 30 minuta u prečišćenoj vodi na 37°C nakon skladištenja od najmanje 3 meseca na 40°C. U određenim primerima izvođenja, kapsula je meka želatinska kapsula koja sadrži dovoljno svinjskog želatina tipa A tako da se kapsula raspada unutar vremenskog perioda od ne više od 30 minuta u prečišćenoj vodi na 37°C nakon skladištenja od 6 meseci na 40°C. U određenim primerima izvođenja, kapsula je meka želatinska kapsula koja sadrži dovoljno svinjskog želatina tipa Tipa A tako da se kapsula raaspada unutar vremenskog perioda od ne više od 30 minuta u prečišćenoj vodi na 37°C nakon skladištenja od 12 meseci na 40°C.
[0114] U različitim primerima izvođenja, kapsula je meka želatinska kapsula koja sadrži dovoljno svinjskog želatina Tipa A tako da se kapsula raspada unutar vremenskog perioda od ne više od 30 minuta u prečišćenoj vodi na 37°C nakon skladištenja od najmanje 3 meseca na 30°C. U određenim primerima izvođenja, kapsula je meka želatinska kapsula koja sadrži dovoljno svinjskog želatina tipa A tako da se kapsula raspada unutar vremenskog perioda od ne više od 30 minuta u prečišćenoj vodi na 37°C nakon skladištenja od najmanje 6 meseci na 30°C. U nekim primerima izvođenja, kapsula je meka želatinska kapsula koja sadrži dovoljno svinjskog želatina tipa A tako da se kapsula raspada unutar vremenskog perioda od ne više od 30 minuta u prečišćenoj vodi na 37°C nakon skladištenja od najmanje 12 meseci na 30°C.
[0115] U određenim primerima izvođenja, kapsula je meka želatinska kapsula koja sadrži smešu svinjskog želatina tipa A i želatina tipa B. U različitim takvim primerima izvođenja, najmanje 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 40% čak najmanje 50% (tež/tež) želatina je svinjski želatin tipa A. U izabranim primerima izvođenja, najmanje 55%, 60%, 65%, 70%, 75% (tež/tež) želatina je svinjski želatin tipa A. U naročitim primerima izvođenja, najmanje 80%, 85%, 90%, even 95% (tež/tež) želatina je svinjski želatin tipa A.
[0116] U različitim primerima izvođenja, kapsula je meka želatinska kapsula u kojoj se želatin suštinski sastoji od svinjskog želatina tipa A.
[0117] U nekim primerima izvođenja, kapsula je redukovana unakrsno vezana želatinska kapsula, kao što su one opisane u U.S. Pat. No.7,485,323.
[0118] U određenim primerima izvođenja, kapsula sadrži sukcinilovani želatin.
[0119] U različitim primerima izvođenja, kapsule su napravljene od supstanci koje nisu životinjski nusproizvodi, kao što su agar-agar, karaginan, pektin, konjak, guar guma, skrob iz hrane, modifikovani kukuruzni skrob, skrob krompira, i tapioka. Neživotinjski izvori materijala koji se mogu koristiti za pripremu kapsula korisni u oralnim jediničnim doznim oblicima opisanim ovde opisani su u U.S. Patent Publication No. 2011/0117180. U nekim primerima izvođenja, korišćene su Vegicaps® Capsules (Catalent).
[0120] U određenim kapsularnim oralnim jediničnim doznim oblicima, kapsula je neobložena.
[0121] U određenim kapsularnim oralnim jediničnim doznim oblicima, kapsula je obložena.
[0122] U određenim primerima izvođenja sa obloženom kapsulom, kompozicija masnih kiselina je oslobođena na vremenski zavisan način. U različitim primerima izvođenja, suštinski ne postoji oslobađanje PUFA kompozicije najmanje 30 minuta nakon ingestije. U određenim primerima izvođenja, suštinski ne postoji oslobađanje PUFA kompozicije najmanje 30 minuta kada je oslobađanje testirano in vitro. U određenim primerima izvođenja, ne više od 20% PUFA kompozicije je oslobođeno unutar prvih 30 minuta kada se testira in vitro. U izabranim primerima izvođenja, ne više od oko 25%, 30%, čak ne više od 35% PUFA kompozicije je oslobođeno unutar prvih 30 minuta, kada se testira in vitro. U naročitim primerima izvođenja, osobine in vitro oslobađanja su procenjene u skladu sa procedurama opisanim u privremenoj patentnoj prijavi br. 61/749,124, podnetoj 4. januara 2013, pod naslovom "Postupak za testiranje oslobađanja omega-3 polinezasićenih masnih kiselina," od strane Bharat Mehta.
[0123] U naročitim primerima izvođenja, značajne količine PUFA kompozicije su oslobođene u 60 minuta nakon ingestije. U određenim primerima izvođenja, značajne količine PUFA kompozicije su oslobođene u 60 minuta pri testiranju in vitro. U izabranim primerima izvođenja, najmanje 40% PUFA kompozicije je oslobođeno u 60 minuta, pri testiranju in vitro. U različitim primerima izvođenja, najmanje 45%, 50%, 55%, 60%, čak najmanje 65% PUFA kompozicije je oslobođeno u oko 60 minuta, pri testiranju in vitro. U naročitim primerima izvođenja, in vitro osobine oslobađanja su procenjene u skladu sa procedurama opisanim u privremenoj patentnoj prijavi br. 61/749,124, podnetoj 4 januara 2013, pod naslovom "Postupak za testiranje oslobađanja omega-3 polinezasićenih masnih kiselina," od strane Mehta.
[0124] U određenim primerima izvođenja, kapsule su obložene kao što je opisano u U.S. Pat. Nos. 5,792,795 i 5,948,818. U različitim primerima izvođenja sa oblogom, obloga je poli(etilakrilat-metilakrilat) kopolimer. U nekim primerima izvođenja, obloga je Eudragit NE 30-D (Evonik Industries AG), koja ima prosečnu molekulsku težinu od oko 800,000.
[0125] U drugim primerima izvođenja obložene kapsule, kapsula je obložena sa enteričkim omotačem koji štiti kapsulu od rastvaranja ili raspadanja u želudcu, ali se rastvara na pH vrednostima koje se sreću u tankom crevu.
[0126] U različitim primerima izvođenja, oralni jedinični dozni oblik sadrži od 100 mg do 2000 mg PUFA kompozicije. U nekim primerima izvođenja, oralni dozni oblik sadrži 250 mg PUFA kompozicije. U nekim primerima izvođenja, oralni dozni oblik sadrži 500 mg PUFA kompozicije. U određenim primerima izvođenja, oralni dozni oblik sadrži 750 mg PUFA kompozicije. U nekim primerima izvođenja, oralni dozni oblik sadrži 1000 mg PUFA kompozicije. U drugim primerima izvođenja, oralni dozni oblik sadrži 1500 mg PUFA kompozicije. U određenim primerima izvođenja, jedinični dozni oblik sadrži neintegralne težinske količine PUFA kompozicije između 100 mg i 2000 mg.
4.4 Dozni kompleti
[0127] U sledećem aspektu, više jediničnih doznih oblika kao što je prethodno opisano može biti pogodno zajedno spakovano u dozni komplet da bi se olakšala upotreba i komplijansa pacijenta.
[0128] U određenim primerima izvođenja, dozni komplet je boca. U drugim primerima izvođenja, više doznih oblika je spakovano u blister pakovanjima, pri čemu više blister pakovanja može biti izborno spakovano zajedno u kutiju ili drugi oblik. Tipično, bilo da je u boci ili jednom ili više blister pakovanja, više jediničnih doznih oblika je dovoljno za 30 dana, 60 dana, ili 90 dana doziranja. Stoga, u izabranim primerima izvođenja, jedinični dozni oblik je kapsula koja sadrži približno jedan gram prethodno opisane farmaceutske kompozicije, i dozni komplet sadrži 30, 60, 90, 120, 150, 180, 240, 270, ili 300 takvih kapsula.
[0129] U različitim primerima izvođenja, više jediničnih doznih oblika je spakovano pod inertnim gasom, kao što je azot ili plemeniti gas, ili je pakovano pod vakuumom.
4.5 Medicinska upotreba
[0130] U sledećem aspektu, farmaceutska kompozicija je obezbeđena za upotrebu u medicinskim tretmanima.
4.5.1 Tretman teške hipertrigliceridemije (> 500 mg/dL)
[0131] U prvoj seriji primera izvođenja tretmana, obezbeđene su farmaceutske kompozicije za upotrebu u tretiranju teške hipertrigliceridemije.
[0132] Tretmani sadrže oralnu primenu farmaceutske kompozcije opisane u Odeljku 4.2 prethodno na pacijenta koji ima serum ili plazma nivoe triglicerida ≥500 mg/dL pre tretmana, u količini i trajanju dovoljnom da se smanje nivoi serum ili plazma triglicerida ispod nivoa pre tretmana. U tipičnim primerima izvođenja, svaka doza farmaceutske kompozicije je primenjena kao jedna ili kao više jediničnih doznih oblika opisanih u Odeljku 4.3, prethodno.
[0133] U određenim primerima izvođenja, efikasna količina je najmanje 2g na dan. U različitim primerima izvođenja, efikasna količina je najmanje 3g na dan. U naročitim primerima izvođenja, efikasna količina je najmanje 4g na dan. U tipičnim primerima izvođenja, efikasna količina je 2g na dan. U određenim primerima izvođenja, efikasna količina je 4g na dan.
[0134] U tipičnim primerima izvođenja, farmaceutska kompozicija je primenjena najmanje 30 dana. U određenim primerima izvođenja, farmaceutska kompozicija je primenjena najmanje 60 dana. U naročitim primerima izvođenja, farmaceutska kompozicija je primenjena najmanje 90 dana, 120 dana, 180 dana, 240 dana, ili najmanje 360 dana. U određenim primerima izvođenja, farmaceutska kompozicja je primenjena neograničeno.
[0135] U nekim primerima izvođenja, farmaceutska kompozicja je primenjena dnevno. U drugim primerima izvođenja, farmaceutska kompozicja je primenjena svaki drugi dan.
[0136] U naročitim primerima izvođenja, dnevna doza farmaceutske kompozicije je primenjena u jednoj dnevnoj dozi. U drugim primerima izvođenja, farmaceutska kompozicija je primenjena u podeljenim dozama, sa dnevnom dozom podeljenom na dve primene, tri primene, ili čak četiri primene, tokom dana.
[0137] U određenim primerima izvođenja, farmaceutska kompozicija je primenjena sa hranom. U određenim primerima izvođenja, farmaceutska kompozicija je primenjena sa obrokom siromašnim mastima. U drugim primerima izvođenja, farmaceutska kompozicija je primenjena bez hrane. U određenim primerima izvođenja, farmaceutska kompozicija je primenjena u stanju gladovanja.
[0138] Postupci, u određenim primerima izvođenja, dodatno sadrže primenu statina. U naročitim primerima izvođenja, statin je izabran iz grupe koja se sastoji od: pravastatin, lovastatin, simvastatin, atorvastatin, fluvastatin, rosuvastatin, tenivastatin, i pitavastatin.
4.5.2 Tretman hipertrigliceridemije (200 - 500 mg/dL)
[0139] U sledećoj seriji primera izvođenja tretmana, farmaceutske kompozicije su obezbeđene za upotrebu u tretiranju pacijenata koji imaju serum ili plazma nivoe triglicerida od 200 mg/dL do 500 mg/dL pre tretmana. U određenim primerima izvođenja, pacijenti su već na terapiji statinima; kod ovih pacijenata, serum ili plazma nivoi triglicerida su ini mereni tokom tretmana statinom, pre primene farmaceutskih kompozicija opisanih u Odeljku 4.2 prethodno.
[0140] Tretman sadrži oralnu primenu efikasne količine statina, i dodatno primenu farmaceutske kompozicije opisane u Odeljku 4.2 ovde, oralno, u količini i trajanju dovoljnom da snizi serum ili plasma nivoe triglicerida ispod nivoa merenih pre tretmana sa farmaceutskom kompozicijom opisanom ovde. Farmaceutska kompozicija opisana u Odeljku 4.2 i statin ne moraju biti primenjeni istovremeno, sa istim rasporedom doza, ili čak istog dana. Dovoljno je da oba budu primenjena dovoljno vremenski blizu tako da pacijent ima terapeutsku korist istovremeno od oba.
[0141] U različitim primerima izvođenja, farmaceutska kompozicija opisana ovde u Odeljku 4.2 je primenjena u jediničnim doznim oblicima kao što je opisano prethodno u Odeljku 4.3.
[0142] U različitim primerima izvođenja, farmaceutska kompozicija je primenjena u količini od najmanje 1g na dan. U nekim primerima izvođenja, farmaceutska kompozicija je primenjena u količini od najmanje 2g/dan. U određenim primerima izvođenja, farmaceutska kompozicija je primenjena u količini od najmanje 3g/dan. U naročitim primerima izvođenja, farmaceutska kompozicija je primenjena u količini od najmanje 4g/dan. U tipičnim primerima izvođenja, farmaceutska kompozicija je primenjena u količini od 2g/dan. U određenim primerima izvođenja, farmaceutska kompozicija je primenjena u količini od 3g/dan ili 4g na dan.
4.6 Postupak
[0143] U sledećem aspektu, poboljšani postupak je predstavljen za rafinisanje ribljeg ulja u farmaceutske kompozicije koje sadrže PUFAs u obliku slobodne kiseline, i naročito za rafinisanje ribljeg ulja u farmaceutske kompozicije opisane u Odeljku 4.2 ovde.
4.6.1 Priprema proizvodnog stoka intermedijera
[0144] Proizvodni stok intermedijera je pripremljen transestarifikacijom telesnog ulja dobijenog od ribe, na primer riba iz porodica Engraulidae, Clupeidae i Scombridae, standardnim tehnikama dobro poznatim u tehnici, sa parametrima postupka podešenim tako da se postigne kompozicija koja je u okviru tolerancije opisane u Odeljku 4.6.2 neposredno u nastavku.
[0145] Pogodni koraci standardnog postupka su opisani, npr., u U.S. Pat. Nos. 5,656,667; 5,719,302; 5,945,318; 6,204,401; 6,518,049; 6,528,669; 7,491,522; 7,550,613; 7,678,930; 7,718,698; 7,732,488 i u U.S. Pat. Nos. 5,472,705; 5,750,572; 5,776,978; 5,869,714; 7,541,480; 7,553,870; i 7,619,002.
[0146] U primeru procesa, sirovo triglicerid ulje je ekstrahovano iz riba, kao što su inćun, sardine, skuša i velika haringa. Sirovo triglicerid ulje je zatim alkalno rafinisano, npr. korišćenjem natrijum hidroksida, i deodorisano, ispolirano, i osušeno. PUFAs su zatim pretvorene u estre, kao što su metil estri ili etil estri, preko transestarifikacije. Transestarifikacija se može izvesti, na primer, etanolizom u prisustvu etanola i natrijum etoksida da bi se proizveli etil estri. Nakon transestarifikacije sledi najmanje jedna runda, tipično više rundi, destilacije.
[0147] U drugom primeru postupka, triglicerid ulje je alkalno rafinisano i deodorisano, transesterifikovano sa etanolom, kao što je sa etanolizom u prisustvu etanola i natrijum etoksida, i zatim podvrgnuto jednoj ili više rundi frakcione destilacije.
[0148] SL. 2 predstavlja grafik primera postupka za proizvodnju proizvodnog stoka intermedijera. U ovom postupku, ribe su kuvane u vodi i rezultujuća smeša tečnosti i čvrstih supstanci je filtrirana i tečni deo je centrifugiran da bi se uklonila vodena faza. Uljna frakcija preostala iz prethodnog koraka tretirana je sa bazom da bi se nautralisale bilo koje prisutne slobodne masne kiseline, nakon čega sledi ispiranje vodom. Nakon toga, alkalno rafinisano riblje ulje u obliku triglicerida je deodorisano i smanjeni su sredinski zagađivači, npr. destilacijom. Osušeno deodorisano riblje ulje je pretvoreno u oblik etil estra korišćenjem reakcije sa etanolom, katalizovanom upotrebom natrijum etoksida. Nakon završetka reakcije, višak etanola je uklonjen destilacijom i etil estri su isprani sa rastvorom limunske kiseline i zatim sa vodom. U ovom primeru postupka, etil estri su destilovani da bi se postigla zahtevana koncentracija EPA etil estra (EPA-EE) i DHA etil estra (DHA-EE) za upotrebu kao proizvodnog stoka intermedijera. U nekim primerima izvođenja, izvedeno je više rundi destilacije. Egzaktni korišćeni uslovi su podešeni u zavisnosti od sastava ulazne kompozicije etil estra da bi se postigla zahtevana koncentracija EPA-EE i DHA-EE za proizvodni stok intermedijera, kao što je dato u Odeljku 4.6.2 neposredno u nastavku.
[0149] Alternative ovim koracima postupka su dobro poznate, i mogu se koristiti kao odgovarajuće sve dok rezultujuća kompozicija proizvodnog stoka intermedijera potpada unutar tolerancija definisanih u Odeljku 4.6.2 neposredno u nastavku teksta.
4.6.2 Kompozicija proizvodnog stoka intermedijera
4.6.2.1 Tipični primeri izvođenja
[0150] Proizvodni stok intermedijera kompozicije sadrži više vrsta omega-3 PUFAs, svaku prisutnu značajno u obliku etil estra.
[0151] Proizvodni stok intermedijera kompozicije sadrži EPA, DHA, i DPA, svaku značajno u obliku etil estra.
[0152] U različitim primerima izvođenja, proizvodni stok intermedijera kompozicije sadrži EPA etil estar (EPA-EE), DHAEE, i DPA-EE, u količini, izračunatoj kao procenat po površini GC hromatograma svih etil estara masnih kiselina u kompoziciji, koji potpadaju unutar opsega od -3SD do 3 SD proseka respektivno navedenih u Tabeli 9. U određenim primerima izvođenja, svaki od EPA-EE, DHA-EE, i DPA-EE potpada unutar -2SD do 2 SD respektivno navedenog proseka. U određenim primerima izvođenja, svaki od EPA-EE, DHA-EE, i DPA-EE potpada unutar -1SD do 1SD respektivno navedenog proseka. U određenim primerima izvođenja, proizvodni stok intermedijera kompozicije sadrži EPA-EE, DHA-EE, i DPA-EE unutar opsega postavljenog njihovim respektivnim minimalnim i maksimalnim površinskim procentima između šarži opisanih u Tabeli 8.
[0153] U određenim primerima izvođenja, kompozicija dodatno sadrži jednu ili više omega-3 polinezasićenih masnih kiselina, svaku značajno u obliku etil estra, izabranog iz grupe koja se sastoji od: α-linoleinske kiseline (C18:3 n-3), moroktinske kiseline (C18:4 n-3), eikozatrienoinske kiseline (C20:3 n-3), eikozatetraenoinske kiseline (C20:4 n-3), i heneikozapentaenoinske kiseline (C21:5 n-3). U različitim primerima izvođenja, jedna ili više dodatnih vrsta omega-3-EE, ukoliko je prisutna, prisutna je u količini, izračunatoj kao procenat po površini na GC hromatogramu svih etil estara masnih kiselina u kompoziciji, koji potpadaju unutar opsega od -3SD do 3 SD proseka respektivno navedenih u Tabeli 9. U određenim primerima izvođenja, svaka vrsta je unutar -2SD do 2 SD respektivno navedenog proseka. U određenim primerima izvođenja, svaka vrsta je unutar -1SD do 1SD respektivno navedenog proseka. U određenim primerima izvođenja, jedna ili više dodatnih vrsta omega-3-EE, ukoliko je prisutna, prisutna je u količini, izračunatoj kao procenat po površini na GC hromatogramu svih etil estara masnih kiselina u kompoziciji, koji potpadaju unutar opsega postavljenog njihovim respektivnim minimalnim i maksimalnim procentima površine između šarži opisanih u Tabeli 8.
[0154] U određenim primerima izvođenja, proizvodni stok intermedijera kompozicije takođe sadrži najmanje jednu vrstu omega-6 PUFA. U različitim primerima izvođenja, kompozicija sadrži etil estre jedne ili više omega-6 polinezasićenih masnih kiselina izabranih iz grupe koja se sastoji od: linolne kiseline (C18:2 n-6), gama-linoleinske kiseline (C18:3 n-6), eikozadienoinske kiseline (C20:3 n-6), dihomo-gama-linoleinske kiseline ("DGLA") (C20:3 n-6), arašidonske kiseline (C20:4 n-6) ("AA"), i dokozapentaenoinske kiseline (C22:5 n-6). Svaka vrsta omega-6 PUFA je prisutna značajno u obliku etil estra.
[0155] U različitim primerima izvođenja, jedna ili više vrsta omega-6-EE, ukoliko je prisutna, prisutna je u količini, izračunatoj kao procenat po površini na GC hromatogramu svih etil estara masnih kiselina u kompoziciji, koji potpadaju unutar opsega, od -3SD do 3 SD proseka respektivno navedenih u Tabeli 9. U određenim primerima izvođenja, svaka vrsta je unutar -2SD do 2 SD respektivno navedenog proseka. U određenim primerima izvođenja, svaka vrsta je unutar -1SD do 1SD respektivno navedenog proseka. U određenim primerima izvođenja, jedna ili više dodatnih vrsta omega-3-EE, ukoliko je prisutna, prisutna je u količini, izračunatoj kao procenat po površini na GC hromatogramu svih etil estara masnih kiselina u kompoziciji, koji potpadaju unutar opsega koji je postavljen njihovim respektivnim minimalnim i maksimalnim procentima površine između šarži opisanih u Tabeli 8.
4.6.2.2 Dodatni primeri izvođenja
[0156] U različitim dodatnim primerima izvođenja, proizvodni stok intermedijera kompozicije sadrži EPA etil estar (EPAEE) u količini, izračunatoj kao procenat po površini na GC hromatogramu svih etil estara masnih kiselina u kompoziciji, od 45.0 -53.0% (a/a). U određenim primerima izvođenja, EPA-EE je prisutna u količini od 48.40 -50.04% (a/a). U različitim primerima izvođenja, EPA-EE je prisutna u količini od 48.67 -49.77% (a/a). U nekim primerima izvođenja, proizvodni stok intermedijera kompozicije sadrži EPA-EE u količini od 48.95 -49.49% (a/a). U određenim primerima izvođenja, proizvodni stok intermedijera kompozicije sadrži EPA-EE u količini od 49.22% (a/a).
[0157] U različitim primerima izvođenja, EPA-EE je prisutna u količini od 44.20% (a/a) -46.92% (a/a). U nekim primerima izvođenja, EPA-EE je prisutna u količini od 45.56% (a/a).
[0158] U različitim primerima izvođenja, EPA-EE je prisutna u količini od 425 - 460 mg/g.
[0159] U različitim dodatnim primerima izvođenja, proizvodni stok intermedijera kompozicije sadrži DHA etil estar (DHAEE) u količini, izračunatoj kao procenat po površini na GC hromatogramu svih etil estara masnih kiselina u kompoziciji, od 13.0 -20.0% (a/a). U različitim primerima izvođenja, DHA-EE je prisutna u količini od 16.43 - 18.28% (a/a). U različitim primerima izvođenja, proizvodni stok sadrži DHA-EE u količini od 16.74 -17.98% (a/a). U nekim primerima izvođenja, proizvodni stok intermedijera kompozicije sadrži DHA-EE u količini od 17.05 % - 17.67% (a/a). U određenim primerima izvođenja, proizvodni stok intermedijera kompozicije sadrži DHA-EE in 17.4% (a/a).
[0160] U nekim primerima izvođenja, proizvodni stok intermedijera kompozicije sadrži DHA u količini od 14.77% (a/a) -17.87% (a/a). U nekim primerima izvođenja, proizvodni stok intermedijera kompozicije sadrži DHA u količini od 16.32% (a/a).
[0161] U nekim primerima izvođenja, proizvodni stok intermedijera kompozicije sadrži DHA u količini od 150 - 170 mg/g.
[0162] U različitim dodatnim primerima izvođenja, DPA-EE je prisutna u količini od 4.10 do 6.74 % (a/a). U nekim primerima izvođenja, DPA-EE je prisutna u količini od 4.54 do 6.30% (a/a). U različitim primerima izvođenja, DPA-EE je prisutna u količini od 4.98 do 5.86% (a/a). U određenim primerima izvođenja, DPA-EE je prisutna u količini od 5.42% (a/a).
[0163] U različitim primerima izvođenja, DPA-EE je prisutna u količini od 0.41 do 0.70% (a/a). U određenim primerima izvođenja, DPAEE je prisutna u količini od 0.56% (a/a).
[0164] U različitim primerima izvođenja, proizvodni stok intermedijera kompozicije dodatno sadrži etil estar arašidonske kiseline (C20:4 n-6). U različitim primerima izvođenja, AA-EE je prisutna u količini od 1.72 do 2.81% (a/a). U nekim primerima izvođenja, arašidonska kiselina-EE je prisutna u količini od 1.9 do 2.63% (a/a). U različitim primerima izvođenja, arašidonska kiselina-EE je prisutna u količini od 2.09 do 2.45% (a/a). U nekim primerima izvođenja, arašidonska kiselina-EE je prisutna u količini od 2.27% (a/a).
[0165] U određenim primerima izvođenja, arašidonska kiselina-EE je prisutna u količini od ne više od 3.0% (a/a). U nekim primerima izvođenja, arašidonska kiselina-EE je prisutna u količini od ne više od 4.0% (a/a).
[0166] U onim primerima izvođenja proizvodnog stoka intermedijera koji dodatno sadrži αetil estar linoleinske kiseline, α-linoleinska kiselina-EE je, u određenim primerima izvođenja, prisutan u količini od 0.3 - 0.45% (a/a). U nekim primerima izvođenja, α-linoleinska kiselina-EE je prisutan u količini od 0.4% (a/a).
[0167] U nekim primerima izvođenja, α-linoleinska kiselina-EE je prisutan u količini od 0.24% (a/a) - 0.62% (a/a).
[0168] U nekim primerima izvođenja, α-linoleinska kiselina-EE je prisutan u količini od 0.43% (a/a).
[0169] U određenim od ovih primera izvođenja proizvodnog stoka intermedijera koji dodatno sadrži etil estar moroktinske kiseline (C18:4 n-3), moroktinska kiselina-EE je prisutan u količini, izračunatoj kao procenat po površini na GC hromatogramu svih etil estara masnih kiselina u kompoziciji, od 0.60 -2.03% (a/a). U nekim primerima izvođenja, moroktinska kiselina-EE je prisutan u količini od 0.84 do 1.80% (a/a). U različitim primerima izvođenja, moroktinska kiselina-EE je prisutan u količini od 1.10 do 1.60% (a/a). U naročitim primerima izvođenja, moroktinska kiselina-EE je prisutan u količini od 1.32 % (a/a).
[0170] U različitim primerima izvođenja, moroktinska kiselina-EE je prisutan u količini od 0.64% do 1.93% (a/a). U naročitim primerima izvođenja, moroktinska kiselina-EE je prisutan u količini od 1.28 % (a/a).
[0171] U različitim od onih primera izvođenja proizvodnog stoka intermedijera koji dodatno sadrži etil estar eikozatrienoinske kiseline (C20:3 n-3), eikozatrienoinska kiselina-EE je prisutan u količini manjoj od 0.1% (a/a). U nekim primerima izvođenja, eikozatrienoinska kiselina-EE je prisutan u količini manjoj od 0.4% (a/a).
[0172] U primerima izvođenja proizvodnog stoka intermedijera koji dodatno sadrži etil estar eikozatetraenoinske kiseline (C20:4 n-3), eikozatetraenoinska kiselina-EE je, u određenim primerima izvođenja, prisutan u količini od 1.57 do 2.10% (a/a). U nekim primerima izvođenja, eikozatetraenoinska kiselina-EE je prisutan u količini od 1.66 do 2.02% (a/a). U određenim primerima izvođenja, eikozatetraenoinska kiselina-EE je prisutan u količini od 1.75 do 1.93% (a/a). U specifičnim primerima izvođenja, eikozatetraenoinska kiselina-EE je prisutan u količini od 1.84% (a/a).
[0173] U određenim primerima izvođenja, eikozatetraenoinska kiselina-EE je prisutan u količini od 1.42 do 2.49% (a/a). U nekim primerima izvođenja, eikozatetraenoinska kiselina-EE je prisutna u količini od 1.95% (a/a).
[0174] U različitim primerima izvođenja proizvodnog stoka intermedijera koji dodatno sadrži etil estar heneikozapentaenoinske kiseline (C21:5 n-3), heneikozapentaenoinska kiselina-EE je prisutan u količini od 2.25 do 2.36% (a/a). U različitim primerima izvođenja, heneikozapentaenoinska kiselina-EE je prisutan u količini od 2.27 -2.34% (a/a). U nekim primerima izvođenja, heneikozapentaenoinska kiselina-EE je prisutan u količini od 2.29 do 2.32 % (a/a). U naročitim primerima izvođenja, heneikozapentaenoinska kiselina-EE je prisutan u količini od 2.31% (a/a).
[0175] U nekim primerima izvođenja, heneikozapentaenoinska kiselina-EE je prisutan u količini od 1.42 do 2.76 % (a/a). U određenim primerima izvođenja, heneikozapentaenoinska kiselina-EE je prisutan u količini od 2.09% (a/a).
[0176] U seriji primera izvođenja proizvodni stok intermedijera dodatno sadrži etil estar omega-6 PUFA, linolne kiseline (C18:2 n-6), linolna kiselina-EE je prisutan u količini od 0.53 do 0.56% (a/a). U nekim primerima izvođenja, linolna kiselina-EE je prisutan u količini od 0.53 do 0.55% (a/a). U nekim primerima izvođenja, linolna kiselina-EE je prisutan u količini od 0.54 do 0.55% (a/a). U određenim primerima izvođenja, linolna kiselina-EE je prisutan u količini od 0.54% (a/a).
[0177] U nekim primerima izvođenja, linolna kiselina-EE je prisutan u količini od 0.38 do 0.83% (a/a). U određenim primerima izvođenja, linolna kiselina-EE je prisutan u količini od 0.60% (a/a).
[0178] U primerima izvođenja proizvodni stok intermedijera koji dodatno sadrži etil estar gama-linoleinske kiseline (C18:3 n-6), gama-linoleinska kiselina-EE je prisutan, u primerima izvođenja, u količini manjoj od 0.1% (a/a). U primerima izvođenja proizvodnog stoka intermedijera koji dodatno sadrži etil estar gama-linoleinske kiseline (C18:3 n-6), gamalinoleinska kiselina-EE je prisutan u količini manjoj od 0.4% (a/a).
[0179] U primerima izvođenja proizvodni stok intermedijera koji dodatno sadrži etil estar eikozadienoinske kiseline (C20:2 n-6), eikozadienoinska kiselina -EE je prisutan u količini od 0.00 do 0.63% (a/a) u razčličitim primerima izvođenja. U nekim primerima izvođenja, eikozadienoinska kiselina-EE je prisutan u količini od 0.00 do 0.45% (a/a). U određenim primerima izvođenja, eikozadienoinska kiselina-EE je prisutan u količini od 0.00 do 0.27% (a/a). U naročitim primerima izvođenja, eikozadienoinska kiselina-EE je prisutan u količini od 0.09% (a/a).
[0180] U određenim primerima izvođenja, eikozadienoinska kiselina-EE je prisutna u količini od 0.00 do 0.54% (a/a). U naročitim primerima izvođenja, eikozadienoinska kiselina-EE je prisutan u količini od 0.25% (a/a).
[0181] U više primera izvođenja proizvodnog stoka intermedijera koji dodatno sadrži etil estar dihomogama-linoleinske kiseline (C20:3 n-6), DGLA-EE je prisutan u količini od 0.35 do 0.68% (a/a). U nekim primerima izvođenja, dihomo-gama-linoleinska kiselina-EE je prisutan u količini od 0.41 do 0.63% (a/a). U nekim primerima izvođenja, dihomo-gama linoleinska kiselina-EE je prisutan u količini od 0.46 do 0.57% (a/a).
[0182] U nekim primerima izvođenja, dihomo-gama-linoleinska kiselina-EE je prisutan u količini od 0.26 do 0.55% (a/a). U nekim primerima izvođenja, dihomo-gama-linoleinska kiselina-EE je prisutna u količini od 0.40% (a/a).
[0183] Određeni dodatni primeri izvođenja proizvodnog stoka intermedijera dodatno sadrže dokozapentaenoinsku kiselinu (C22:5 n-6), u obliku etil estra. U različitim ovim primerima izvođenja, dokozapentaenoinska kiselina-EE je prisutan u količini of 0.54 do 0.80% (a/a). U nekim primerima izvođenja, dokozapentaenoinska kiselina-EE je prisutan u količini od 0.59% do 0.76% (a/a). U različitim primerima izvođenja, dokozapentaenoinska kiselina-EE je prisutan u količini od 0.63% do 0.72% (a/a). U naročitim primerima izvođenja, dokozapentaenoinska kiselina-EE je prisutan u količini od 0.67% (a/a).
[0184] U nekim primerima izvođenja, dokozapentaenoinska kiselina (C22:5 n-6)-EE je prisutan u količini od 1.45% do 7.21% (a/a). U nekim primerima izvođenja, dokozapentaenoinska kiselina (C22:5 n-6)-EE je prisutan u količini od 4.33% (a/a).
4.6.3 Kompleksacija uree
[0185] Transesterifikovani proizvodni stok intermedijera sa kompozicijom koja je prethodno definisana podvrgnut je urea inkluzionoj kompleksaciji. U tipičnim primerima izvođenja, količina uree korišćena za kompleksaciju spada unutar algoritamski određenog opsega.
[0186] Stoga, u sledećem aspektu, predstavljen je poboljšani postupak za rafinisanje ribljeg ulja u farmaceutske kompozicije koje sadrže PUFAs u obliku slobodne kiseline, naročito za rafinisanje ribljeg ulja u farmaceutske kompozicije kao što su ovde opisane. Poboljšanje sadrži podvrgavanje proizvodnog stoka intermedijera transesterifikovanog ribljeg ulja koje sadrži etil estre različitih omega-3 i omega-6 PUFA vrsta u definisanom opsegu procenata koraku urea inkluzione kompleksacije, gde je količina uree korišćene za kompleksaciju unutar opsega izračunatog prema (i) formuli I(a), ili (ii) prema formuli I(b), ili (iii) prema obe formule I (a) i formule I(b) sa količinom uree podešenom na vrednost unutar opsega podešenog sa, i uključujući, rezulatte formula I(a) i I(b), kao što j njihov prosek, gde su formule kao što sledi:
[Urea] = Fobogaćivanje-DHA*((DHAciljno– DHA-EEinput)/DHA-EEinput)) (Ia)
[Urea] = Fobogaćivanje-EPA*((EPAciljno– EPA-EEinput)/EPA-EEinput)) (Ib).
[0187] DHA i EPA ciljne vrednosti su izabrane na osnovu željene finalne kompozicije. Faktori obogaćivanja, Fobogaćivanje-DHAi Fobogaćivanje-EPA, mogu biti isti ili različiti. U tipičnom primeru izvođenja, Fobogaćivanje-DHAi Fobogaćivanje-EPAsu isti, sa vrednošću od oko 100/0.34, ili oko 300.
[0188] Korišćenjem algoritamski određene količine uree, kompleksacija je izvedena prema standardnim tehnikama. Videti, npr., U.S. Pat. Nos. 4,377,526; 5,106,542; 5,243,046; 5,679,809; 5,945,318; 6,528,669; 6,664,405; 7,541,480; 7,709,668; i 8,003,813.
[0189] U primeru izvođenja, proizvodni stok intermedijera je pomešan sa rastvorom uree u etanolu. Kompleksacija je izvedena na 60°C - 80°C, smeša je zatim ohlađena, i smeša je zatim filtrirana ili centrfifugirana da bi se uklonili kompleksi uree. Etanol je uklonjen destilacijom i ulje je isprano nekoliko puta sa vodom.
4.6.4 Post-kompleksacioni završetak
[0190] Nakon uklanjanja urea kompleksa, nekompleksovani PUFA estri su hidrolizovani do slobodnih masnih kiselina standardnim tehnikama. Kompozicija je dodatno prečišćena destilacijom, ili pre ili posle hidrolize, i dodatno završena korišćenjem jedne ili više sledećih standardnih tehnika: tretman sa aktivnim ugljem, hromatografsko prečišćavanje, uklanjanje rastvarača, izbeljivanje, npr. sa glinom za izbeljivanje, i superkritična ekstrakcija. Dodati su antioksidansi, kao što su BHA ili α-tokoferol.
5. PRIMERI
5.1 Primer 1: Kompleksacija uree je neophodna za pouzdanu proizvodnju omega-3 PUFA kompozicija u obliku slobodne kiseline koje ispunjavaju zahteve specifikacije
[0191] Urea inkluziona kompleksacija (klatracija) je standardni korak često korišćen u rafinisanju ribljih ulja da bi se uklonile zasićene i mono-nezasićene masne kiseline dugačkog lanca, čime se vrši obogaćivanje željenim omega-3 polinezasićenim masnim kiselinama dugačkog lanca u rezultujućoj kompoziciji. Uprkos dugog korišćenja, međutim (videti, npr., U.S. Pat. No. 4,377,526), i studija dizajniranih da karakterizuju efekte različitih fizičkohemijskih parametara postupka (videti, npr., Hayes et al., "Triangular Phase Diagrama to Predict The Fractionation Of Free Fatty Acid Mixtures Via Urea Complex Formation," Separation Sci. Technol. 36(1):45-58 (2001) i Hayes, "Purification of Free Masnih kiselina via Urea Inclusion Compounds," in Handbook of Functional Lipids (Taylor & Francis Group) (2005)), stepen do koga kompleksacija uree obogaćuje pojedinačne vrste polinezasićenih masnih kiselina dugačkog lanca, uključujući vrste i omega-3 PUFAs, i omega-6 PUFAs, ostaju nepredvidivi. Ova rezidualna nepredvidljivost u proceduri urea kompleksacije, i potencijal za urea kompleksaciju da bi se generisali nedopustivi nivoi etil karbamata, koji bi zahtevao dodatnu obradu, inicijalno su govorili u prilog izostavljanja urea kompleksacije iz procesa rafinisanja komercijalne razmere za proizvodnju kompozicija farmaceutskog stepena omega-3 PUFAs u obliku slobodne kiseline koje ispunjavaju specifikacije date u Tabeli 1, u nastavku.
[0192] Rani napori da se razvije postupak bez uree, međutim, pokazali su da takav postupak nije mogao da pouzdano proizvede farmaceutske kompozicije u komercijalnoj razmeri koje su ispunjavale zahtevanu ciljnu specifikaciju za kompoziciju. Tabela 2, u nastavku, predstavlja podatke o dva takva lota. Vrednosti koji su izvan željenog opsega specifikacije su podvučene.
p p ( )
[0193] Shodno tome, tražen je postupak koji koristi kompleksaciju uree, i otkriveno je da je striktna kompoziciona kontrola na PUFA vrstama prisutna u etil estar proizvodnom stoku intermedijera, zajedno sa upotrebom količina uree unutar algoritamski postavljenih opsega, mogla pouzdano da proizvede farmaceutske kompozicije koje ispunjavaju specifikacije postavljene u Tabeli 1 bez prelaženja prihvatljivih granica etil karbamata.
[0194] Kompozicioni zahtevi za proizvodni stok inetermedijernog etil estra su predstavljeni u Odeljku 4.6.2 i Primerima 2 i 4. Videti Tabele 3 - 6, 8 - 9.
[0195] Nađeno je da optimalna količina uree neophodna da se koristi može biti određena (i) formulom I(a), ili (ii) prema formuli I(b), ili (iii) prema obe formule I(a) i formule I(b), sa količinom uree postavljene na vrednost unutar opsega postavljenog, i uključujući, rezultate formule I(a) i I(b), kao što je prosek dva rezultata, gde su formule kao što sledi:
[Urea] = Fobogaćivanje-DHA*((DHAciljno– DHA-EEinput)/DHA-EEinput)) (Ia)
[Urea] = Fobogaćivanje-EPA*((EPAciljno– EPA-EEinput)/EPA-EEinput)) (Ib).
Faktori obogaćivanja, Fobogaćivanje-DHAi Fobogaćivanje-EPA, mogu biti isti ili različiti. Pronađeno je da je tipična vrednost, korišćenjem šarži proizvodnog stoka intermedijera opisana u Primerima 2 i 4, oko 100/0.34 (tj., oko 300) za obe.
5.2 Primer 2: Kompoziciona analiza četiri primera proizvodnih šarži proizvedenih pod kontrolisanom kompleksacijom uree potvrđuju da su ispunjeni zahtevi specifikacije
[0196] Pripremljena su četiri primera proizvodnih šarži polinezasićenih masnih kiselina u obliku slobodne kiseline. Striktne kompozicione kontrole su primenjene na etil estar proizvodni stok intermedijera, korišćenjem samo šarži u kojima su specifikovane vrste polinezasićenih masnih kiselina unutar definisanih granica opsega. Količina uree koja treba da se koristi za kompleksaciju na proizvodnoj razmeri prvo je određena empirijski u laboratorijskoj razmeri, korišćenjem malih test šarži etil estar proizvodnog stoka intermedijera i menjanjem koncentracije uree, čime je menjan odnos ulje:urea:etanol. Optimalna koncentracija sugerisana određivanjem test razmere potvrđena je da je unutar opsega neophodnog za algoritam opisan u Primeru 1, i korišćena za izradu u proizvodnoj razmeri.
[0197] Kompozicija intermedijernog transesterifikovanog proizvodnog stoka i finalne farmaceutske kompozicije ("aktivni farmaceutski sastojak", ili "API"), određena je gasnom hromatografijom. Rezultati su sakupljeni u Tabelama 3 - 6, u nastavku.
( )
[0198] Sve četiri proizvodne šarže API ispunile su kompozicione specifikacije date u Tabeli 1, prethodno.
Primer 3: Kontrolisana kompleksacija uree diferencijalno obogaćuje izabrane omega-3 i omega-6 vrste
[0199] Kao što je očekivano, korak kompleksacije uree značajno je smanjio procenat zasićenih masnih kiselina i mono-nezasićenih masnih kiselina u rezultujućoj kompoziciji, čime se značajno obogaćuje sa polinezasićenim masnim kiselinama. Videti Tabele 3 - 6, i SL.
3A. Neočekivano, međutim, izvođenje kompleksacije uree korišćenjem količina uree koje su unutar algoritamski određenog opsega imalo je diferencijalni efekat na obogaćivanje pojedinačnih vrsta omega-3 polinezasićenih masnih kiselina i omega-6 polinezasićenih masnih kiselina.
[0200] Tabela 7 obezbeđuje kvalitativnu procenu obogaćivanja različitim vrstama polinezasićenih masnih kiselina, poredeći prevalencu u proizvodnom stoku etil estar intermedijera sa onim u API u obliku slobodne kiseline, sa prosečnim vrednostima za četiri proizvodne šarže opisane u Tabelama 3 - 6. Videti takođe SL.3B.
[0201] Iako su omega-3 polinezasićene masne kiseline, kao klasa, značajno obogaćene, ofekat kompleksacije uree na omega-6 PUFAs, kao klasu, nije predvidiv. U proseku, omega-6 vrste DGLA i dokozapentaenoinske kiseline su smanjene; gama-linoleinska kiselina i arašidonska kiselina su povećane; i postoji mali ili nema nikakvog efekta na linoleinsku kiselinu i eikozadienoinsku kiselinu.
[0202] Zapazili smo, naročito, da je vrsta omega-3 dokozapentaenoinska kiselina, DPA (C22:5 n-3), obogaćena, dok odgovarajuća omega-6 vrsta, sa identičnom dužinom lanca i stepenom nezasićenosti, dokozapentaenoinska kiselina (C22:5 n-6), je smanjena. Divergentni efekat ompleksacije uree na obogaćivanje ova dva izomera – zajedno sa razlikama u njihovim relativnim koncentracijama u proizvodnom stoku etil estar intermedijera – rezultuju u razlici log reda u njihovim koncentracijama u finalnom, API u obliku slobodne kiseline. U proseku za četiri šarže API predstvaljnih u Tabelama 3 - 6, omega-3 dokozapentaenoinska kiselina vrsta, DPA, je prisutna u finalnom API sa 5.85% (a/a), dok je omega-6 dokozapentaenoinska kiselina vrsta prisutna sa prosečnom koncentracijom od 0.46% (a/a).
[0203] Sa prosečnom koncentracijom od 5.85% (a/a), DPA je treća najzastupljenija vrsta polinezasićenih masnih kiselina u API, koju prevazilaze samo EPA i DHA. Na ovom nivou, DPA koncentracija je takođe 10-puta veća nego ona zabeležena za raniju farmaceutsku kompoziciju omega-3 polinezasićenih masnih kiselina u obliku slobodne kiseline, označene Purepa, u kojima je zabeleženo da je DPA prisutna na nivou od 0.5%. Videti Belluzzi et al., Dig. Dis. Sci.39(12): 2589-2594 (1994).
5.4 Primer 4: Kompoziciona analiza deset (10) primera proizvodnih šarži API pokazuje reproducibilno povećane nivoe DPA
[0204] Dodatne proizvodne šarže su pripremljene prema postupcima opisanim u Primeru 2.
[0205] Podaci iz deset (10) šarži API, uključujući četiri šarže opisane u Tabelama 3-6 u Primeru 2, proizvedeni iz osam (8) različitih šarži proizvodnog stoka transesterifikovanog intermedijera (etil estar), su predstavljeni u tabelama u nastavku. Kompozicija svake od šarži proizvodnih stokova intermedijera prikazna je na Tabeli 8. Tabela 9 predstavlja srednju vrednost ("AVG"), standardnu devijaciju ("STDEV", "SD"), i Delta ("Δ", apsolutnu razliku između 1 SD i -1 SD, 2 SD i -2 SD, itd.) u 8 šarži proizvodnog stoka intermedijera za svaku od navedenih (etil estar) vrsta. Kompozicija svake od deset šarži finalnog API prikazana je u Tabeli 10, u nastavku; Tabela 11 predstavlja prosek, standardnu devijaciju, i Delta vrednosti za svaku od navedenih (slobodna kiselina) vrsta u 10 šarži API.
[0206] Kao što je očigledno iz Tabele 11, razlika log reda u realtivnoj koncentraciji omega-3 dokozapenatenoinske kiseline vrste, DPA (C22:5 n-3) u API, i izomera omega-6 dokozapentaenoinske kiseline (C22:5 n-6), je održana na 5.31% (a/a) za DPA (C22:5 n-3) vs.
0.57% (a/a) za dokozapentaenoinsku kiselinu (C22:5 n-6) – kao što je i 10-struko povećanje u koncentraciji DPA u poređenju sa ranijom formulacijom Purepa slobodne kiseline omega-3 objavljene u Belluzzi et al. (5.31 vs.0.5%).
5.5 Primer 5: Kompoziciona analiza 21 primera proizvodnih šarži pokazuje reproducibilno povećane nivoe DPA
[0207] Visoka apsolutna i relativna koncentracija vrste omega-3 dokozapentaenoinske kiseline, DPA, sada je uočena u 21 šarži API proizvedenog korišćenjem kompleksaciju uree, kao što je rezimirano u Tabelama 12 i 13, u nastavku.
2
5.6 Primer 6: Efekti DPA na gensku ekspresiju ćelije jetre predviđaju veću kliničku efikasnost DPA-obogaćenih kompozicija
[0208] DPA je treća najzastupljenija vrsta polinezasićenih masnih kiselina u farmaceutskim kompozicijama analiziranim u prethodnim primerima, i prisutna je u koncentraciji 10-struko većoj od one u Purepa, ranije farmaceutske kompozicije omega-3 polinezasićenih masnih kiselina u obliku slobodne kiseline. Iako je DPA intermedijer u biosintetskom putu od EPA do DHA (videti SL. 1), iznenađujuće malo se zna o DPA specifičnim biološkim efektima. Videti Kaur et al., "Dokosapentaenoic acid (22:5n-3): a review of its biological effects," Prog. Lipid Res. 50:28-34 (2011). Da bi se razjasnio potencijalni doprinos DPA kliničkoj efikasnosti farmaceutske kompozicije, izvedeni su eksperimenti profilisanja geneske ekspresije.
5.6.1 Postupci
[0209] Kultura ćelija i tretman - Hep G2 ćelije hepatokarcinoma kultivisane su u Dulbecco modifikovanom Eagle medijumu (DMEM) bez seruma (Sigma-Aldrich) sa 4.5 g/l glukoze, 1-glutamina, NaHCO3i piridoksin HCl sa dodatkom 1% (zapr/zapr) neesencijalnih aminokiselina, 1% Na-piruvata, 1% penicilin/streptomicin, i 10% (zapr/zapr) albumina goveđeg seruma (BSA) bez masnih kiselina, svi kupljeni od Gibco BRL.
[0210] Ćelijske kulture su prenošene nedeljno tripsinizacijom i inkubirane na 37°C u ovlaženom inkubatoru koji sadrži 5% CO2. Nakon 5 nedelja kulture ćelija, EPA (eikozapentaenoinska kiselina, lot #0439708-2, Cayman Chemicals), DPA (dokozapentaenoinska kiselina, lot 163481-26, Cayman Chemicals), i DHA (dokozaheksaenoinska kiselina, lot 0437083-5, Cayman Chemicals), razblažene neposredno pre upotrebe u DMEM bez seruma, dodate su bunarčićima u triplikatu (250,000 ćelija/bunarčiću) u finalnim efikasnim koncentracijama datim u Tabeli 14, u nastavku.
[0211] Odnosi EPA (na 100 mM), DHA (na 40 mM), i DPA (na 11 mM) izabrane su da aproksimiraju odnose EPA, DHA, i DPA u farmaceutskoj kompoziciji (API) opisanoj u Odeljku 4.2 i Primeru 5 (videti Tabele 12 i 13). Apsolutne koncentracije su izabrane da najbolje aproksimiraju – unutar ograničenja nametnutih željenim odnosima u kompoziciji i ograničenja nametnutih od strane uslova kulture – opsezi u plazmi uočeni u 2g i 4g granama tretmana EVOLVE studije (videti Primer 10). Niža DPA koncentracija (1 mM) je izabrana da aproksimira sistemsko izlaganje koje bi se očekivalo od upotrebe ranije farmaceutske kompozicije omega-3 polinezasićenih masnih kiselina u obliku slobodne kiseline, nazvane Purepa, za koju je objavljeno da je DPA prisutna na 1/10 nivoa koji je uočen u predmetnoj farmaceutskoj kompoziciji.
[0212] HepG2 ćelije su inkubirane sa identifikovanom masnom kiselinom (EPA, DHA, DPA, ili specifikovane smeše) ukupno 48 časova pre sakupljanja ćelija i RNK ekstrakcije.
( )
[0213] Sakupljanje ćelija i izolacija RNK - Ukupna RNK je izolovana upotrebom TRIzol, prema uputstvima proizvođača (Invitrogen). Kvalitet RNK je procenjen sa Nanodrop 8000 Spectrophotometer (Thermo Scientific). Kao što je dato u Tabeli 14, prethodno, svaka od ekstrakcija RNK za svaki tretman imala je odnos 260/280 između 2.0 i 2.2. RNK je zatim dodatno prečišćena sa Qiagen RNeasy kolonama. Od 300 ng ukupne RNK po preparaciji, Illumina TotalPrep RNK Amplification kit (Ambion) je korišćen da bi se dobila umnožena biotinilovana cRNK nakon reverzne transkripcije sa Eberwine procedurom. Alikvote tretiranih i kontrolnih uzoraka RNK poslati su u laboratoriju za gensku ekspresiju na analizu. Ostatak uzorka ukupne RNK uskladišten je na -70°C.
[0214] Test ekspresije i analiza podataka – Specifični transkripti unutar biotinilovane cRNK mereni su fluorescentnom vizuelizacijom nakon direktne hibridizacije sa Illumina HT-12 bead arrays, v.4.0. Podaci genske ekspresije analizirani su korišćenjem Ingenuity® iReport™ softvera (Ingenuity Systems, Redwood City, CA).
5.6.2 Rezultati
5.6.2.1 Profilisanje ekspresije pokazuje da DPA ima biološke efekte različite od EPA i DHA
[0215] Iako je DPA intermedijer u biosintetskom putu od EPA do DHA, i iako je poznato da se DPA retrokonvertuje do EPA in vivo, Kaur et al., Prog. Lipid Res. 50:28-34 (2011), uočili smo jasno različite efekte na ekspresiju gena ćelije jetre nakon inkubacije sa DPA, u poređenju sa efektima uočenim sa EPA i sa DHA.
[0216] Za procenu sličnosti i razlika visokog nivoa u efektima na ekspresiju gena, koristili smo Ingenuity® iReport™ softver za upite u odnosu na podatke genske ekspresije za prvih 5 odgovora rangiranih sa Ingenuity® iReport™ algoritmom, viđenih nakon izlaganja svake od EPA (100 mM), DHA (40 mM), i DPA (11 mM), unutar razlilčitih izabranih kategorija gena. Rezultati su prikazani u Tabeli 15, u nastavku. Analogna procena, korišćenjem različite kategorizacije, predstavljena je u Tabeli 16, u nastavku. Korišćeni simboli su: "|" – osobina je jedinstvena navedenoj vrsti masne kiseline; "¶" – osobina je zajednička sa drugom vrstom masne kiseline; i "♦" – osobina je uobičajena u sve 3 vrste masnih kiselina.
[0217] Podaci naglašavaju jasne razlike u efektima DPA, EPA, i DHA, u višestrukim kategorijama.
[0218] Razlike u efektima na ekspresiju gena takođe uočene korišćenjem različite analize, u kojima su specifični geni najznačajnije ushodno i nishodno regulisani sa svakom od EPA (100 mM), DHA (40 mM) i DPA (11 mM) su identifikovane. Podaci su respektivno kompilirani u Tabelama 17 (ushodno regulisani geni) i 18 (nishodno regulisani geni) u nastavku. Korišćeni simboli su: "→" –ekspresija pogođena na obe DPA koncentracije; "¶" ekspresija regulisana zajedno sa drugom vrstom masne kiseline, identifikovanom u zagradi; "♦" gen regulisan sa sve tri vrste masne kiseline.
[0219] Razlike u efektima DPA, EPA, i DHA se takođe lako uočavaju pri poređenju gena čija je ekspresija jedinstveno pogođena sa svakom od vrsta omega-3 PUFA.
[0220] Razlike u efektima DPA, EPA, i DHA na gensku ekspresiju takođe se mogu uočiti poređenjem gena čija je ekspresija najznačajnije pogođena sa najmanje dve od vrsta polinezasićenih masnih kiselina.
[0221] Ove analize zajedno pokazuju da postoje jasne razlike u efektima EPA, DHA, i DPA u mnogim fiziološkim, farmakološkim, i biohemijskim kategorijama. EPA, DHA, i DPA nemaju identične efekte; određene vrste koje su prisutne u omega-3 PUFA kompoziciji jasno su značajne za fiziološke efekte koje će kompozicija imati nakon primene.
5.6.2.2 DPA ima značajnu aktivnost na višoj, ali ne nižoj, koncentraciji
[0222] Procenjene su dve koncentracije DPA. Kao što je napomenuto prethodno, visoka DPA koncentracija (na 11 µM), bila je izabrana tako da odnosi EPA (na 100 µM), DHA (na 40 µM), i DPA (at 11 µM) aproksimiraju odnose EPA, DHA, i DPA u farmaceutskim kompozicijama (API) opisanim u Odeljku 4.2 i Primeru 5, sa izabranim apsolutnim koncentracijama izabranim da najbolje aproksimiraju – unutar ograničenja nametnutih željenim kompozicionimm odnosom i ograničenja nametnutih uslovima kulture – opsege u plazmi uočene u granama tretmana EVOLVE studije (videti Primer 10). Niža DPA koncentracija (1 mM) je izabrana da aproksimira sistemsku izloženost koja bi se očekivala od upotrebe ranije farmaceutske kompozicije omega-3 polinezasićenih masnih kiselina u obliku slobodne kiseline, nazvana Purepa, u kojoj je objavljeno da je DPA prisutna na 1/10 nivoa koji je uočen u predmetnoj farmaceutskoj kompoziciji.
[0223] Ukupno, 310 gena je bilo jedinstveno responsivno na viši, ali ne na niži, DPA nivo. Veliki broj gena koji pokazuju statistički značajne promene u genskoj ekspresiji predviđaju da će DPA imati smislene biološke efekte kada se visoka koncentracija dostigne in vivo. Nasuprot tome, niža DPA koncentracija je jasno doza ispod praga, najmanje u odnosu na regulaciju ovih 310 gena, i očekivao bi se daleko manji odgovor sa ovom nižom plazma koncentracijom in vivo.
[0224] Kada su efekti procenjeni na genima koji su široko kategorizovani sa iReport™ softverom da utiču na molekularnu i ćelijsku funkciju, dve podkategorije se jedinstveno pojavljuju u prvih pet 5, rangiranih Ingenuity® iReport™ algoritmom, na višoj, ali ne nižoj DPA, koncentraciji – oni uključeni u gensku ekspresiju, i oni koji utiču na RNK posttranskripcionu modifikaciju. Uzimajući u obzir potencijal za plejotropske efekte drugog reda izazvane promenama u ekspresiji gena koji kodiraju proteine koij sami utiču na ekspresiju gena, i gena koji kodiraju proteine koji utiču na post-transkripcionu modifikaciju, ovi rezultati sugerišu da je DPA sposobna da modulira veliki broj metaboličkih puteva na višoj, ali ne nižoj, koncentraciji.
[0225] Efekat pražne doze se takođe može uočiti fokusiranjem na tri kategorije gena za koje je poznato da su relevantni za kliničke efekte omega-3 polinezasićenih masnih kiselina: geni uključeni u metabolizam lipida, geni uključeni u kardiovaskularnu fiziologiju, i geni uključeni u inflamaciju (raspoređivanje gena u identifikovane kategorije izvedeno automatski pomoću iReport™ softvera). Rezultati su dati u Tabeli 24, u nastavku.
[0226] Kao što je prikazano u Tabeli 24, samo 2 gena uključena u metabolizam lipida imali su odgovor na 1 µM koncentraciju DPA, dok je 22 gena lipidnog metabolizma jedinstveno odgovorilo sa statistički značajnom promenom u ekspresiji nakon inkubacije u prisustvu 11 µM DPA. Fokusirajući se na metabolizam lipida, 1 µM DPA je jasno doza ispod praga, dok 11 µM ima značajne efekte.
[0227] Veći broj gena pokazao se kao responsivan na 1 µM DPA dozu u kategoriji kardiovaskularne fiziologije, i uočili smo petostruko (pre nego 10-struko) povećanje u broju gena na koje je izvršen uticaj na 11 µM DPA. Čak veći broj gena uključenih u inflamatorne puteve bilo je responsivno na 1 µM DPA, sa samo manjim povećanjem u broju gena na 11 µM.
[0228] Koncentracija 11 µM in vitro je niža od ∼ 90 µM koncentracije u plazmi uočene kod 4g/dan EVOLVE pacijenata. Videti Primer 10. Rezultati stoga predviđaju da će klinički relevantna doza DPA-obogaćenih kompozicija opisanih u Odeljku 4.2 i Primeru 5 (videti Tabele 12 i 13) imati značajne metaboličke efekte, uključujući efekte na metabolizam lipida, kardiovaskularnu fiziologiju, i inflamaciju. Nekoliko, možda i nijedan, od ovih DPA-specifičnih efekata bio bi očekivan na 10-struko nižim DPA nivoima uočenim u ranijem Purepa preparatu.
5.6.2.3 DPA, na višoj koncentraciji, utiče na ekspresiju više gena metabolizma lipida
[0229] 22 gena lipidnog metabolizma koji pokazuju statistički značajne promene u ekspresiji na 11 µM DPA koncentraciji, ali ne na 1 µM koncentraciji, identifikovani su u Tabeli 25, u nastavku.
[0230] DPA efekti na ekspresiju nekoliko od ovih gena sugerišu da DPA, na analognoj in vivo koncentraciji, treba da dovede do poboljšanja u različitim klinički relevantnim lipidnim parametrima.
[0231] Na primer, DPA na 11 µM ushodno reguliše ACADSB, acil-CoA dehidrogenazu kratkog/granatog lanca. ACADSB genski proizvod je uključen u razlaganje triglicerida; očekivalo bi se da ushodna regulacija rezultuje u nižim nivoima triglicerida u serumu.
HMGCR, koji je nishodno regulisan, kodira HMG-CoA reduktazu, enzim koji ograničava stopu za sintezu holesterola i koji je ciljna struktura za inhibiciju statina. Stoga, analogno aktivnosti statina, nishodna regulacija ekspresije HMGCR gena sa DPA treba da dovede do povoljnog smanjenja u odnosu na ukupni holesterol:HDL. SQLE, koji je takođe nishodno regulisan, kodira skvalen epoksidazu, koja katalizuje prvi oksigenacioni korak u biosintezi sterola i smatra se da je jedan od enzima koji ograničava stopu u ovom putu. Nishodna regulacija SQLE trebalo bi da takođe vodi smanjenju nivoa ukupnog holesterola.
5.6.2.4 Rezime rezultata profilisanja ekspresije
[0232] Naši eksperimenti profilisanja ekspresije korišćenjem ćelijske linije jetre pokazali su da DPA ima značajnu biološku aktivnost na koncentraciji koja aproksimira plazma nivoe uočene kod humanih pacijenata na koje je primenjena 4g dnevna doza primera šarže DPA-obogaćene farmaceutske kompozicije.
[0233] Na ovoj koncentraciji, DPA utiče na ekspresiju gena u više metaboličkih puteva, uključujući gene u kategorijama za koje se zna da su relevantni za kliničke efekte omega-3 polinezasićenih masnih kiselina: geni uključeni u metabolizam lipida, geni uključeni u kardiovaskularnu fiziologiju, i geni uključeni u inflamaciju. Očekivani su značajni efekti drugog reda, uzimajući u obzir promene koje smo uočili u ekspresiji gena koji kodiraju proteine koji sami utiču na ekspresiju gena, i u genima koji kodiraju proteine koji utiču na post-transkripcionu modifikaciju.
[0234] Specifični efekti na ekspresiju nekoliko gena uključenih u metabolizam lipida sugerišu da DPA, na koncentraciji analognoj in vivo koncentraciji, treba da vodi poboljšanju u različitim klinički relevantnim parametrima. Naročito, uočili smo DPA-vođenu ushodnu regulaciju ACADSB, acil-CoA dehidrogenaze kratkog/granatog lanca, za koju se očekuje da rezultuje u nižim nivoima triglicerida u serumu; nishodna regulacija HMGCR, koja, slično tretmanu sa statinima, treba da dovede do povoljnog smanjenja u ukupnom odnosu holesterol:HDL; i nishodna regulacija SQLE, koja treba da analogno dovede do smanjenja nivoa ukupnog holesterola.
[0235] Ovi efekti se razlikuju od onih uočenih sa EPA i DHA.
[0236] Naši eksperimenti su pokazali statistički značajne dozno-zavisne efekte za DPA, sa nižom koncentracijom, izabranom da imitira 10-struko nižu koncentraciji DPA u ranijoj omega-3 formulaciji slobodne kiseline, koja utiče na 10-struko manje gena od više DPA koncentracije, koja je izabrana da imitira izloženost plazme uočenu u kliničkoj studiji DPA-obogaćenih farmaceutskih kompozicija opisanih ovde. Najmanje u odnosu na 300 gena jedinstveno regulisanih sa višom koncentracijom DPA – naročito uključujući gene koji povoljno utiču na metabolizam lipida – niža koncentracija DPA obezbeđuje izlaganje ispod praga, i očekuje se da obezbedi subterapeutsku dozu in vivo.
5.7 Primer 7: ECLIPSE klinička studija
5.7.1 LEKOVI
[0237] Lovaza® - Prescription Lovaza® kapsule su dobijene preko komercijalnih US izvora. Prema FDA-dozvoljenoj oznaci proizvoda, svaka 1-gramaka kapsula Lovaza® sadrži najmanje 900 mg etil estara omega-3 masnih kiselina iz ribljih ulja, pretežno kombinaciju etil estara eikozapentaenoinske kiseline (EPA – približno 465 mg) i dokozaheksaenoinske kiseline (DHA - približno 375 mg). Nezavisna kompoziciona analiza nije izvedena.
[0238] LEK IZ STUDIJE (Epanova®) –pripremljene su kapsule mekog svinjskog želatina tipa A obložene sa Eudragit NE 30-D (Evonik Industries AG), svaka sadrži jedan gram PUFA kompozicije u kojoj su polinezasićene masne kiseline prisutne u obliku slobodnih masnih kiselina ("API"). Inkapsulirani API imao je kompoziciju datu u Tabeli 26.
5.7.2 DIZAJN STUDIJE
[0239] Otvorena, sa jednom dozom, randomizovana, 4-struka ukrštena studija biodostupnosti izvedena je sa dva različita tretmana: 4 grama Epanova® ili 4 g Lovaza®, svaki primenjena sa obrokom siromašnim mastima i obrokom bogatim mastima na 54 zdrave odrasle osobe. SL. 4 obezbeđuje dijagram tretmana koji ilustruje dizajn studije: ukratko, nakon perioda ispiranja, subjekti su randomizovani u jednu od dve sekvence tretmana:
(i) Epanova® (niske masti) → Lovaza® (niske masti) → Epanova® (visoke masti) → Lovaza® (niske masti), ili
(ii) Lovaza® (niske masti) → Epanova® (niske masti) → Lovaza® (visoke masti) → Epanova® (visoke masti).
[0240] Obroci u periodu siromašnom mastima (periodi 1 i 2): bez doručka (gladovanje); ručak bez masti (0 g masti; 600 kcal) nakon 4-časa uzorkovanje krvi; večera siromašna mastima (9 g masti; 900 kcal) nakon 12-časova uzorkovanje krvi. Hrana siromašna mastima bila je: nemasni jogurt, voćni kup, nemasni Fig Newtons, Lean Cuisine obrok. Periodi sa obrocima bogatim mastima (periodi 3 i 4): doručak bogat mastima (20 g masti; 600 kcal) odmah nakon 0.5 časa uzorkovanje krvi; ručak bogat mastima (30 g masti; 900 kcal) nakon 4-časa uzorkovanje krvi; i večera bogata mastima (30 g masti; 900 kcal) nakon 12-časova uzorkovanje krvi. Hrana bogata mastima bila je: sendvič za doručak & mini krofne sa šećerom; pica sa sirom; čips od krompira; i panini sa šunkom i sirom.
[0241] Zahtevi za ispiranje za skrining pre studije su bili: 60 dana riblje ulje, EPA ili DHA suplementi ili fortifikacija hrane; 7 dana riba, lan, perila seme, konoplja, spirulina, ili ulje crne ribizle, statini, sekvestranti žučne kiseline, inhibitori apsorpcije holesterola ili fibrati. Period unakrsnog ispiranja bio je najmanje 7 dana.
[0242] Veče pre posete klinici, subjekti su uzeli večeru siromašnu mastima 12 časova pre vremena 0 svakog perioda tretmana (9 g masti; 900 kcal). Istraživani proizvod (Epanova® ili LOVAZA®) je primenjen ujutru nakon uzimanja uzorka krvi (vreme 0). Farmakokinetičko uzorkovanje krvi svaka 2-dana perioda tretmana na -1.0, -0.5 i 0 časova (pre-doze) i post-doze na 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 10 i 12 časova (+/- 5 minuta) za prvi dan i na 24 časa (+/- 15 min) za drugi dan.
5.7.3 FARMAKOKINETIČKE I STATISTIČKE ANALIZE
[0243] Sledeći farmakokinetički parameteri za EPA i DHA plazma koncentracije su izračunati za promene podešene prema početnoj vrednosti u ukupnim i pojedinačnim EPA i DHA koncentracijama preko standardnih nekompartmentalnih postupaka: AUC0-t, AUC0-inf, Cmax, i Tmax.
[0244] Primarne determinante biodostupnosti: ln-transformisana površina krive pod plazma koncentracijom nasuprot vremena (AUCt) i maksimalno izmerena koncentracija u plazmi (Cmax) tokom 24-časovnog intervala za promenu u odnosu na početnu vrednost u ukupnim i pojedinačnim EPA i DHA koncentracijama.
[0245] Koncentracije u plazmi su podešene u odnosu na početnu vrednost pre izračunavanja farmakokinetičkih parametara. Slike su plotovane u odnosu na podešenu promenu u odnosu na početnu vrednost u geometrijskoj sredini (ln-transformisani).
[0246] Korišćena je analiza varijanse (ANOVA) da se procene ln-transformisani farmakokinetički parametri za razlike usled tretmana, perioda, sekvence doziranja i subjekta unutar sekvence.
[0247] Odnosi srednjih vrednosti su izračunati korišćenjem metode najmanjih kvadrata srednjih vrednosti za ln-transformisane AUC-t, AUC-inf, i Cmax.
[0248] Odnosi srednjih vrednosti i njihovih 90% intervala poverenja treba da leže iznad gornje granice od 125.00% za AUC0-t, AUC0-inf, i Cmaxda bi se pokazalo da Epanova® ima superiornu realtivnu biodostupnost u poređenju sa Lovaza® u odnosu na ishranu.
5.7.4 REZULTATI
[0249] Populacija studije – U studiji je učestvovalo 54 zdrave odrasle osobe, 41 muškarac (75.9%) i 13 žena (24.1%), od 21 do 77 godina starosti. Svi periodi tretmana su završeni od strane 51 subjekta (94.4%), sa 53 subjekta (98.1%) koja su završila deo studije siromašan mastima. Populacija je bila pretežno crna ili Afro-američka (66.7%) sa 31.5% belaca i 1.8% azijata.
[0250] Biodostupnost - SL. 5 poredi biodostupnost ukupnih EPA+DHA (promena podešena u odnosu na početnu) nakon jedne doze (4g) Lovaza® tokom perioda bogatih i siromašnih mastima (dozni uslovi sa gladovanjem), potvrđujući da je biodostupnost Lovaza® značajno smanjena sa ishranom siromašnom mastima. Promena podešena u odnosu na početnu vrednost u ukupnim nivoima EPA+DHA u plazmi pokazuje da AUCtza Lovaza® u periodu sa obrocima siromašnim mastima je smanjena za 83.3% u poređenju sa Lovaza® u periodu sa obrocima bogatim mastima: 661.6 vs 3959.5 nmol-h/mL, respektivno (p<0.0001) (podaci za LS vrednosti u Tabeli 27, u nastavku). CMAXLovaza® u periodu siromašnom mastima smanjila se za 80.6% u poređenju sa periodom bogatim mastima (p<0.0001) i TMAXse povećala 62% u periodu siromašnom mastima u odnosu na period bogat mastima (10.2 vs.6.3 č, respektivno; p=0.0001).
[0251] SL. 6 poredi biodostupnost ukupnih EPA+DHA (promena podešena prema početnoj vrednosti) tokom perioda bogatog mastima nakon jedne doze (4g) Lovaza® nasuprot jedne doze (4g) Epanova®, pokazujući da u periodima sa obrocima bogatim mastima, u kojima je potvrđeno da je biodostupnost Lovaza® najveća, biodostupnost EPA DHA je ipak značajno veća kada je primenjena u obliku slobodne kiseline (Epanova®) nego kao odgovarajuća etil estar omega-3 kompozicija (Lovaza®) (p<0.0007).
[0252] SL. 7 poredi biodostupnost ukupnih EPA+DHA (promena podešena prema početnoj vrednosti) nakon jedne doze Epanova® vs. Lovaza® tokom perioda ishrane siromašne mastima, pokazujući da promena podešena prema početnoj vrednosti u ukupnim EPA+DHA nivoima u plazmi pokazuje 4.6-puta veću AUCtza Epanova® nego Lovaza® tokom perioda sa obrocima siromašnim mastima: 3077.8 vs. 668.9 nmol-h/mL, respektivno (p<0.0001) (podaci za LS srednje vrednosti u Tabeli 28, u nastavku). CmaxEpanova® je 3.2-puta veća od Lovaza® (p < 0.0001) i Tmaxje 20% kraće od LOVAZA® (8 vs 10 č, respektivno; p=0.0138).
)
[0253] SL. 8 poredi biodostupnost EPA (promena podešena prema početnoj vrednosti) nakon jedne doze Epanova® vs. Lovaza® tokom perioda sa ishranom siromašnom mastima, pokazujući 13.5-puta veću AUCtza Epanova® nego Lovaza® tokom perioda sa obrocima siromašnim mastima: 578.2 vs. 42.7 µg č/mL, respektivno (p<0.0001) (podaci za LS srednje vrednosti su prikazani u Tabeli 29, u nastavku). CMAXEpanova® je 5.6-puta veća od Lovaza® (p<0.0001) i TMAXje 12% kraće od Lovaza® (8 vs. 9 časova, respektivno; p=0.2605).
[0254] SL. 9 poredi biodostupnost DHA (promena podešena prema početnoj vrednosti) nakon jedne doze Epanova® vs. Lovaza® tokom perioda ishrane siromašne mastima, pokazujući 2.2-puta veću AUCtza Epanova® od Lovaza® tokom perioda ishrane siromašne mastima: 383.1 vs 173.4 µg·č/mL, respektivno (p<0.0001) (podaci za LS srednje vrednosti predstavljeni su u Tabeli 30, u nastavku). CmaxEpanova® je 1.9-puta veća od Lovaza® (p<0.0001) i TMAXje 21% kraća od Lovaza® (8 vs. 11 časova, respektivno; p=0.0148). 2.2-puta veća DHA biodostupnost Epanova® vs Lovaza® dogodila se uprkos što je bilo 42% manje DHA u Epanova® formulaciji.
j
[0255] SL. 10A i 10B predstavljaju AUCo-todgovore pojedinačnih subjekata tokom perioda ishrane siromašne i bogate mastima izražene kao (%) od siromašne mastima AUC0-tdo bogate mastima AUC0-t. Negativni odnosi nisu ucrtani. Podaci pokazuju da tokom perioda siromašnog mastima, 30 od 54 (56%) supjekata na Epanova® (slobodnim masnim kiselinama) nasuprot 3 od 52 (6%) na Lovaza® (etil estri) održalo je AUCtkoja je bila ≥50% respektivne AUCtiz perioda ishrane bogate mastima.
[0256] Registrovan jeukupno 51 štetni događaj od strane 29 subjekata. Najčešći štetni događaj bile su glavobolje (10 subjekata) i retka stolica ili dijareja (9 subjekata). Svi štetni događaji bili su umerene težine, i nijedan nije bio ozbiljan. Nije bilo nikakvih klinički značajnih promena u laboratorijskim, vitalnim znacima ili fizikalnim procenama.
5.7.5 ZAKLJUČCI
[0257] Promena podešena prema početnoj vrednostiin ukupnih EPA+DHA i pojedinačno EPA i DHA apsorpcionih profila (AUC) sa Epanova® (omega-3 PUFAs u obliku slobodne kiseline) bila je značajno veća nego sa Lovaza® (omega-3-PUFA etil estri) tokom ishrane bogate mastima i dramatično bolja tokom perioda ishrane siromašne mastima. Dodatno, postojao je veoma dubok efekat sadržaja masti u obrocima na biodostupnost Lovaza®, dok je biodostupnost Epanova® bila mnogo predvidljivija usled samo skromnog efekta hrane. Superiorna od masti nezavisna biodostupnost Epanova® u odnosu na Lovaza® je klinički važna jer subjekti sa izuzetno povećanim trigliceridima zahtevaju ishranu veoma siromašnu mastima. Ovi nalazi pokazuju značajnu terapeutsku prednost Omega-3 kompozicije sa slobodnim masnim kiselinama za tretman teških hipertrigliceridemija u odnosu na NCEP ATP III preporuke da se ovi subjekti pridržavaju ishrane siromašne mastima tokom dodatne terapije.
5.8 Primer 8: 14 dnevna komparativna studija biodostupnosti
[0258] Da bi se odredilo da li su efekti uočeni nakon jedne doze održani nakon ponovljenog doziranja, izvedena je duža studija. SL. 11 je dijagram tretmana koji ilustruje dizajn 14 dnevne komparativne studije biodostupnosti, u kojoj studiji je lek (Lovaza® ili Epanova®) konzumiran sa doručkom siromašnim mastima. Nasuprot tome, doze su date pri gladovanju u grani siromašnoj mastima originalne ECLIPSE studije opisane u Primeru 7.
[0259] Promene u odnosu na početnu vrednost do stabilnog stanja u EPA i DHA nivoima u Lovaza® grani 14 dnevne komparativne studije biodostupnosti bili su konzistentni sa prethodnim studijama, kao što je prikazano na Tabeli 31, koja predstavlja srednju vrednost procenta promene u EPA i DHA u identifikovanim prethodnim studijama.
p g ( ) ( )
[0260] SL. 12A je grafik srednje vrednosti nepodešenih ukupnih EPA+DHA koncentracija nasuprot vremenu (linearna skala), i za tretman sa Lovaza® i tretman Epanova®. SL. 12B je histogram koji prikazuje razliku u nepodešenim EPA+DHA (nmol/mL) za vremenske tačke u zagradama na SL. 12A. SL. 12A i 12B pokazuju da je nakon 14-dana doziranja, akumulacija EPA+DHA iz Epanova® bila 2.6 puta veća od Lovaza® kod subjekata koji su održavani na ishrani siromašnoj mastima.
[0261] SL. 13 je grafik srednje vrednosti podešenih u odnosu na početnu vrednost ukupnih EPA+DHA koncentracija u plazmi nasuprot vremenu (linearna skala) za tretman sa Lovaza® vs. tretman sa Epanova® u 14 dnevnoj komparativnoj studiji biodostupnosti, pokazujući da su nakon 14-dana doziranja sa obrokom siromašnim mastima, EPA+DHA nivoi (AUC0-24) Epanova® bili 5.8 puta veći od Lovaza® kod subjekata koji su održavani na ishrani siromašnoj mastima.
[0262] SL. 14A je histogram koji prikazuje povećanja od početne vrednosti do stabilnog stanja kod nepodešenih EPA+DHA nivoa u krvi za Lovaza® i Epanova® grane 14 dnevne komparativne studije biodostupnosti, pokazujući da su se nivoi EPA+DHA povećali 316% od početne vrednosti do stabilnog stanja u Epanova® kohorti u poređenju sa 66% u Lovaza® kohorti. SL. 14B je histogram koji prikazuje povećanja od početne vrednosti do stabilnog stanja kod nepodešenih Cavgza EPA+DHA u Lovaza® i Epanova® granama 14 dnevne komparativne studije biodostupnosti, pokazujući da su se prosečni nivoi koncentracije (Cavg) EPA+DHA povećali 448% od početne vrednosti u Epanova®kohorti u poređenju sa 90% u Lovaza® kohorti.
[0263] SL. 15A je histogram koji prikazuje povećanja od početne vrednosti do stabilnog stanja za ukupne DHA nivoe u krvi u Lovaza® i Epanova® grani 14 dnevne komparativne studije biodostupnosti, pokazujući da su DHA nivoi povećani 109% od početne vrednosti do stabilnog stanja u Epanova® kohorti u poređenju 34% u Lovaza® kohorti. SL. 15B prikazuje povećanja od početne vrednosti do stabilnog stanja za DHA Cavgnivoe u Epanova® kohorti u poređenju sa Lovaza® kohortom u 14 dnevnoj komparativnoj studiji biodostupnosti, i pokazuje da su se nivoi prosečne koncentracije (Cavg) DHA povećali 157% od početne vrednosti u Epanova® kohorti u poređenju sa 47% u Lovaza® kohorti.
[0264] SL. 16A je histogram koji prikazuje povećanja od početne vrednosti do stabilnog stanja za ukupne EPA nivoe u plazmi u Lovaza® i Epanova® granama 14 dnevne komparativne studije biodostupnosti, i pokazujući da su nivoi EPA povećani 1021% od početne vrednosti do stabilnog stanja u Epanova® kohorti u poređenju sa 210% u Lovaza® kohorti. SL. 16B prikazuje povećanje prosečne koncentracije od početne vrednosti do stabilnog stanja, i pokazuje da su nivoi CavgEPA povećani 1,465% od početne vrednosti u Epanova® kohorti u poređenju sa 297% u Lovaza® kohorti.
[0265] Podaci pokazuju da je povećanje biodostupnosti uočeno nakon jednog doziranja u ECLIPSE studiji održano, čak poboljšano, tokom dužeg perioda (2 nedelje). Dodatno, neagregirani podaci specifični za subjekta (nije prikazano) pokazuju da je subjekt sa najmanjim odgovorom na Epanova® i dalje imao veću Dan 14 EPA+DHA Cmaxod subjekta sa najboljim odgovorom na Lovaza®.
[0266] Povećana Cavgi ukupni nivoi u krvi klinički relevantnih omega-3 PUFA vrsta postignuti sa Epanova® u poređenju sa Lovaza® predviđaju značajno poboljšanu efikasnost u snižavanju nivoa triglicerida u serumu i u smanjenju kardiovakularnog rizika.
5.9 Primer 9: Studija na pacovima u trajanju od 13 nedelja
[0267] Ova studija je poredila omega-3 izloženost i njene efekte na nivoe lipida u seumu kod pacova tretiranih sa jednakim dozama Epanova® ili LOVAZA® 13 nedelja.
[0268] Sprague Dawley pacov je izabran za ovu studiju jer je bio soj pacova korišćen u toksikološkom programu izvedenom sa Lovaza®, i stoga je omogućio direktno poređenje podataka iz predmetne studije sa Epanova® i javno dostupnih toksikoloških podataka na pacovu u Lovaza® Summary Basis of Approval. Dizajn studije je obezbedio robusnu toksikološku procenu Epanova® sa izabranim dozama na osnovu javno dostupnih toksikoloških podataka za pacove za Lovaza® (maksimalna tolerisana doza = 2000 mg/kg). Sprague Dawley pacovi obezbeđuju model koji je prepoznat da predviđa efekte omega-3 PUFAs na promene lipida za trigliceride i ukupni holesterol u humanim subjektima. Rezultati na 13 nedelja prikazani su u Tabeli 32, u nastavku.
[0269] Kao što je prikazano u Tabeli 32, Epanova® nije obezbedila samo jasno veće maksimalne koncentracije u plazmi (Cmax) DHA i EPA od Lovaza®, već je takođe obezbedila i jasno više AUC(0-t)za dve vrste omega-3; AUC(0-t)je mera sistemske izloženosti. Veća biodostupnost i dugoročno sistemsko izlaganje ove dve vrste omega-3 PUFA sa Epanova® terapijom rezultovali su u dugoročnim razlikama u efikasnosti smanjenja lipida, sa Epanova® koja je izvela značajno veća smanjenja triglicerida u plazmi i u ukupnom holesterolu nego što je uočeno sa LOVAZA®. Ovde opisane kompozicije stoga obezbeđuju veću efikasnost u odnosu na dva klinički važna kardiovaskularna parametra.
5.10 Primer 10: EVOLVE studija
5.10.1 LEKOVI
[0270] LEK STUDIJE (Epanova®) – Pripremljene su meke želatinske kapsule svinjskog porekla tipa A, svaka je sadržala jedan gram (1g) PUFA kompozicije koja sadrži omega-3 PUFAs u obliku slobodne kiseline ("API"). Kapsule su obložene sa Eudragit NE 30-D (Evonik Industries AG). API je imao kompoziciju datu u šarži 2 u Tabeli 10 (videti Primer 4, prethodno).
[0271] PLACEBO – Pripremljene su kapsule koje sadrže maslinovo ulje kao kontrolu.
5.10.2 DIZJAN STUDIJE
[0272] 12-nedeljna dvostruko slepa, sa maslinovim uljem kao kontrolom, studija je izvedena u Sjedinjenim državama, Danskoj, Mađarskoj, Indiji, Holandiji, Rusiji, i Ukraini. Subjekti su izabrani na osnovu visokih nivoa triglicerida, u opsegu od 500-2,000 mg/dL. Subjekti su nasumično izabrani da prime 2, 3, ili 4 grama Epanova®, ili 4 grama maslinovog ulja kao placebo. Opšti dizajn studije je ilustrovan na SL. 17, uz to da SL. 18 obezbeđuje detaljniji dijagram tretmana koji dodatno identifikuje vreme vizita u studiji. Primarna krajnja tačka studije bio je procenat promene u nivoima triglicerida u plazmi od početne vrednosti do kraja tretmana ("EOT"). Druga krajnja tačka bio je procenat promene plazma ne-HDL-holesterola ("ne-HDL-C") od početne vrednosti do EOT.
5.10.3 REZULTATI
[0273] SL. 19 prikazuje dispoziciju svih subjekata, sa "AE" skraćenicom za "štetni događaj" i "SAE" skraćenicom za "ozbiljan štetni događaj."
[0274] Ukupno 1,356 je podvrgnuto inicijalnom skriningu, i od njih, 399 je izabrano da učestvuju u studiji. Od 399 subjekata, 99 je primilo maslinovo ulje kao placebo, 100 je primilo Epanova® 2 g/dan; 101 je primilo Epanova® 3 g/dan; i 99 je primilo Epanova® 4 g/dan. Tabela 33 prikazuje prosečne vrednosti triglicerida (TG) i holesterola za subjekte pri randomizaciji (pre tretmana), u poređenju sa poželjnim nivoima kao što je opisano u Third Report of the Expert Panel on Detection, Evaluation, i Treatment of High Blood Cholestarol in Adults (Adult Treatment Panel III), od strane National Heart Lung i Blood Institute.
[0275] Od pacijenata koji su primali maslinovo ulje, ukupno pet je povučeno iz studije usled sledećih razloga: sporazumno povlačenje (1), nepohađanja naknadne procene (1), i drugi razlozi (3). Od pacijenata koji su primali Epanova® 2 g/dan, ukupno sedam je povučeno iz studije usled sledećih razloga: štetni efekti (5), sporazumno povlačenje (1), i drugi razlozi (1).
Od pacijenata koji su primali Epanova® 3 g/dan, ukupno 14 je povučeno usled: štetnih efekata (7), nekomplijanse (2), sporazumnog povlačenja (1), nepohađanja naknadne procene (3), i drugih razloga (1). Od pacijenata koji su primali Epanova® 4 g/dan, 9 je povučeno, usled: štetnih efekata (5), nekomplijanse (1), sporazumnog povlačenja (2), i drugih razloga (1).
[0276] Epanova® je postigla primarnu krajnju tačku smanjenja triglicerida i sekundarnu krajnju tačku smanjenja ne-HDL holesterola (ukupni nivo holesterola minus nivo HDL-holesterola) ("ne-HDL-C") na svim dozama, i proizveo je statistički značajna smanjenja u više ustanovljenih markera aterogeničnosti: Apo B, Apo CIII, RLP, i LpPLA2. Kod pacijenata sa istovremenom terapijom sa statinima, Epanova® je obezbedila aditivnu efikasnost za ključne lipidne parametre: TG; ne -HDLC; HLD-c; ukupni holesterol (TC); i TC/HDL-C.
[0277] Plazma nivoi EPA, DHA, i DPA – tri vrste omega-3 lc-PUFA najviše zastupljeni u Epanova® - izmereni su na početnoj vrednosti i na kraju tretmana (EOT), kao i plazma nivoi omega-6 lc-PUFA, arašidonske kiseline (AA). Tabela 34, u nastavku, zasebno prikazuje prosečnu početnu vrednost, medijanu početne vrednosti, prosečni kraj tretmana (EOT), i medijanu EOT plazma nivoa EPA, DHA, DPA, i AA, kao i TG, NHDL-C, HDL-C, VLDL-C, i LDL-C.
[0278] Početne vrednosti plazma nivoa EPA, DHA, DPA, i AA ukazuju na efikasnu randomizaciju subjekata u grane tretmana. EPA:AA odnosi na početnoj vrednosti bili su oko 0.10 (videti Tabelu 37, u nastavku).
[0279] SL. 20A - 20E prikazuju prosečnu početnu vrednost i kraj tretmana ("EOT") plazma nivoa (u mg/mL) za EPA (SL. 20A), DHA (SL. 20B), DPA (SL. 20C) i AA (SL. 20D), za svaku od grana tretmana u EVOLVE studiji. SL. 20E poredi prosečnu početnu vrednost i EOT EPA nivoe za svaku granu tretmana i kontrolu (maslinovo ulje) sa vrednostima ranije registrovanim u ECLIPSE (videti Primer 7), 14-dnevnu studiju biodostupnosti (videti Primer 8), studiju statin lek-lek interakcije (Statin DDI), i nepovezane JELIS studije izvedene od strane drugih sa različitom omega-3 PUFA formulacijom ("JELIS"). Napominje se da su japanski subjekti u JELIS studiji imali više početne vrednosti EPA nivoa. SL. 21A - 21D prikazuju medijanu početne vrednosti i kraj tretmana (EOT) plazma nivoe (u mg/mL) za EPA (SL. 21A), DHA (SL.21B), DPA (SL. 21C), i AA (SL. 21D).
[0280] Tabela 35, u nastavku, prikazuje prosečnu promenu i medijanu promene u apsolutnim plazma nivoima od početne vrednosti do EOT za EPA, DHA, DPA, i AA, kao i TG, NHDL-C, HDL-C, VLDL-C, i LDL-C.
[0281] SL. 22A, 22B, 26A, i 26B prikazuju podatke iz prethodne tabele, prikazujući promenu od početne vrednosti do EOT u apsolutnim nivoima u plazmi (u mg/mL) AA, DHA, EPA, i DPA za svaku od grana tretmana EVOLVE studije, sa SL. 22A koja prikazuje prosečnu promenu i SL.22B prikazuje medijanu promenu u odnosu napočetnu vrednost.
[0282] Tabela 36A, u nastavku, zasebno prikazuje prosek, medijanu, i procenat najmanjih kvadrata srednjih vrednosti od početne vrednosti do EOT u plazma nivoima EPA, DHA, DPA, i AA, kao i TG, NHDL-C, HDL-C, VLDL-C, i LDL-C, za svaku od grana tretmana EVOLVE studije.
[0283] Tabela 36B, u nastavku, zasebno prikazuje prosek, medijanu, i procenat najmanjih kvadrata srednjih vrednosti od početne vrednosti do EOT u plazma nivoima ApoB, ApoCIII, LpPLA2, i RLP, za svaku od grana tretmana EVOLVE studije.
[0284] SL. 23A prikazuje prosečnu promenu od početne vrednosti do EOT, kao procenat početne vrednosti, za AA, DHA, EPA, i DPA u svakoj od grana tretmana EVOLVE studije, i SL. 23B prikazuje medijanu procenta promene od početne vrednsoti do EOT.
[0285] Tabela 37 u nastavku predstavlja EPA/AA odnose na početku i kraju tretmana za svaku od grana tretmana EVOLVE studije.
g
[0286] Kao što se može videti iz Tabela 35 i 36A i SL. 20 - 23, 12 nedeljni tretman sa Epanova® izazvao je dramtično povećanje plazma nivoa EPA, DHA, i DPA. Na primer, na 2g dozi, prosečni procenat promene od početne vrednosti do EOT u EPA plazma nivoima bio je 411%; na 4g dozi, 778%. Medijana procenta promene EPA plazma nivoa bio je respektivno 254% i 405%. Na 2g dozi, prosečna promena od početne vrednosti do EOT u DHA plazma nivoima bila je 69%; na 4g dozi, prosečan procenat promene bio je 106%. Medijana procenta promene u DHA plazma nivoima bila je manje dramatična, sa 61.2% promene na 2g Epanova®, i 65.5% promene na 4g.
[0287] Povećanje plazma nivoa EPA, DHA, i DPA bilo je praćeno značajnim smanjenjem u AA plazma nivoima, sa 4g doznim režimom koji je postigao prosečno smanjenje od 95.8 mg/mL i medijanu smanjenja od 89.2 mg/mL, što odgovara prosečnom procentu smanjenja od 18%, medijanu procenta promene od 25.9%, i promeni LS srednjih vrednosti od 23.2%. Treba napomenuti da smanjenje u plazma nivoima arašidonske kiseline je uočeno uprkos egzogenoj primeni arašinonske kiseline, koja je bila prisutna sa 2.446% (a/a) u Epanova® šarži korišćenoj u ovoj studiji.
[0288] Povećanje u EPA plazma nivoima i istovremeno smanjenje u AA plazma nivoima dovodi do značajnog poboljšanja u EPA/AA odnosu, kao što je prikazano u Tabeli 37, od približno 0.10 na početnoj vrednosti do približno 0.67 (prosek) i 0.62 (medijana) na EOT na 4g dozi.
[0289] Dodatno, tretman sa Epanova® rezultovano je u značajnim smanjenjima TG nivoa, kao što je prikazano na SL. 26A i SL. 26B koje prikazuju prosek i medijanu, respektivno, za apsolutnu promenu od početne vrednosti. SL. 27 ilustruje procenat subjekata koji su pokazali 0-10% smanjenje TG, 10-20% smanjenje TG, 20-30% smanjenje TG, 30-40% smanjenje TG, 40-50% smanjenje TG, i više od 50% smanjenje TG, za Epanova® 2g i 4g doze.
[0290] SL. 26A i SL. 26B takođe prikazuju da su ne-HDL-C i VLDL-C bili smanjeni, dok je HDL-C povećan. LDL-C nivoi su takođe bili povećani, vrednost koja je verovatno usled povećanja u veličini čestica LDL nakon tretmana (razmatrano dodatno u Primeru 12). Prosek i medijana procenta promene su prikazani na SL.28A i SL.28B, respektivno.
[0291] Apsolutni prosečni nivoi početne vrednosti i EOT su prikazani na SL. 24A - 24I za TG (SL. 24A), Ne-HDL-C (SL. 24B), HDL-C (SL. 24C), V-LDL-C (SL. 24D), LDL-C (SL.
24E), ApoB (SL. 24F), ApoCIII (SL. 24G), RLP (SL. 24H), i LpPLA2 (SL. 24I). Apsolutne medijane nivoa početne vrednosti i EOT su prikazani na SL. 25A - 25I za TG (SL. 25A), NeHDL-C (SL. 25B), HDL-C (SL. 25C), V-LDL-C (SL. 25D), LDL-C (SL. 25E), ApoB (SL.
25F), ApoCIII (SL.25G), RLP (SL.25H), i LpPLA2 (SL.25I).
[0292] Ekstremno visoka biodostupnost omega-3 PUFAs u Epanova® otkrila je razlike u farmakokinetičkom odgovoru između različitih vrsta u plazmi. SL. 29 prikazuje stopu promene u medijani promene procenta od početne vrednosti u plazma nivoima EPA, DHA, DPA, AA, TG, ne-HDL-C, i HDL-C (apsolutna vrednost) između 2g i 4g doza Epanova®. Tabela 38, u nastavku, prikazuje rezultate:
[0293] Uzimajući u obzir malo ili nikakvo povećanje u plazma nivoima DHA i DPA nakon dupliranja Epanova® doze od 2g do 4g na dan, stopa promene (nagib) u medijani promene procenta od početne vrednosti je blizu nula, predviđajući da će malo dodatno povećanje u DHA i DPA plazma nivoima biti uočeno nakon dodatnog povećanja doze. Slično dostizanje platoa odgovora je uočeno u nivoima triglicerida, HDL-C nivoima, i ne-HDL-C nivoima (podaci nisu prikazani).
[0294] Nasuprot tome, stopa promene EPA ostaje visoka, sa nagibom od 0.59; dodatno povećanje u EPA plazma nivoima je očekivano sa povećanjem Epanova® doze iznad 4g/dan. Značajno, stopa promene u AA nivoima nakon dupliranja Epanova® doze od 2g do 4g na dan je čak veća nego ona za EPA; dodatno smanjenje AA plazma nivoa se očekuje sa povećanjem Epanova® doze iznad 4g/dan. Epanova® stoga pokazuje neprevaziđenu potenciju u sposobnosti da smanji AA nivoe.
[0295] Rezime rezultata EVOLVE studije je prikazan u Tabeli 39, u nastavku.
[0296] EVOLVE studija je takođe pokazala da je Apolipoprotein CIII (ApoCIII) bio značajno smanjen sa Epanova® tretmanom. ApoCIII inhibira aktivnost lipoprotein lipaze i preuzimanje lipoproteina bogatih sa trigliceridima u jetri. Nađeno je da su povišeni nivoi ApoCIII nezavisni prediktor rizika za kardiovaskularnu bolest srca (CHD) dok je genetički smanjen ApoCIII povezan sa zaštitom od CHD.
[0297] Pokazano je da formulacije omega-3 masnih kiselina koje sadrže DHA povećavaju LDL-C kod pacijenata sa teškom hipertrigliceridemijom (Kelley et al., 2009, J. Nutrition, 139(3):495-501). Pokazano je da je ovaj efekt na LDL-C rezultat povećane veličine čestica lipoproteina (Davidson et al., 2009, J. Clin. Lipidology, 3(5):332-340). Klinički podaci sugerišu da eikozapentaenoinska kiselina (EPA) zasebno, u dozi koja smanjuje trigliceride do sličnog stepena kao EPA DHA, ne podiže LDL-C, ali takođe ne uspeva da smanji ApoCIII (Homma et al., 1991, Atherosclerosis, 91(1):145-153).
[0298] SL. 34 prikazuje korelaciju između procenta promene u LDL i procenta promene u ApoCIII za podatke iz EVOLVE studije. Pearson-ov koeficijent korelacije od -0.28 je dobijen kada su ovi podaci fitovani korišćenjem linearne regresije, pokazujući da su povećanja u LDL u korelaciji sa smanjenjima u ApoCIII nakon tretmana sa Epanova®. Ovi rezultati su konzistentni sa prethodnim objavama o povećanju LDL nakon primene DHA, opservacija koja se može pripisati povećanoj veličini čestice lipoproteina. Efekti Epanova® na veličinu čestice lipoproteina su razmatrani dalje u Primeru 12, u nastavku.
[0299] Subset subjekata, prikazan u Tabeli 40, pokazao je više od 800% povećanja u EPA sa manje od 5% smanjenjem u nivou triglicerida. Ovaj neuspeh u odgovoru se verovatno može pripisati deficijenciji ili funkcionalnom defektu u enzimu lipoprotein lipazi (LPL) tipa 1. LPL hidrolizuje trigliceride prisutne u hilomikronima do slobodnih masnih kiselina, i poznato je da je onesposobljavanje LPL povezano sa teškom hipertrigliceridemijom (Fojo i Brewer, 1992, J. of Int. Med. 231:669-677). Subjekti koji su pokazali značajno povećanje u EPA fnakon tretmana sa Epanova®, praćeno sa malom promenom u kliničkim parametrima kao što su nivoi triglicerida, nivoi AA, itd., mogu se klasifikovati kao subjekti koji ne odgovaraju na tretman. Takvi subjekti se mogu ukloniti iz tretmana sa Epanova®.
5.11 Primer 11: Ispitivanje interakcije lek-lek statina
5.11.1 LEKOVITA SREDSTVA
[0300] ISPITIVANI LEK (Epanova®) – Pripremljene su svinjske mekane želatinske kapsule tipa A, od kojih svaka sadrži jedan gram (1g) PUFA kompozicije koja sadrži omega-3 PUFA u obliku slobodne kiseline ("API"). Kapsule su obložene sa Eudragit NE 30-D (Evonik Industries AG). API imale su sastav dat u seriji 3 Tabele 9 (videti primer 4, u prethodnom tekstu).
[0301] ISPITIVANI LEK (Zocor®) - 40 mg tablete simvastatina proizvedene od strane Merck Sharp & Dohme Ltd. Dobijene su iz komercijalnog izvora.
[0302] ISPITIVANI LEK (Aspirin®) - 81 mg gastrorezistentno obložene tabelete proizvedene od strane Bayer HealthCare Pharmaceuticals dobijene su iz komercijalnog izvora.
5.11.2 DIZAJN STUDIJE
[0303] Otvorena, randomizovana, 2-struka unakrsna studija je dizajnirana za procenu efekta višestrukih doza Epanova® na farmakokinetiku višestruke doze simvastatina kod zdravih normalnih subjekata. Niska doza aspirina (81 mg) je takođe primenjivana dnevno u obe grane studije.
[0304] Uslovi primene "A" sastojali su se od koprimene oralne doze od 40 mg simvastatina (1 tableta), 81 mg aspirina (1 tableta) i 4 g (4 kapsule) Epanova®, jednom dnevno (svaka 24 časa) sa 240 mL vode ujutru na dane 1 do 14, tokom ukupno 14 doza, uz uslove gladovanja. Uslovi primene "B" sastojali su se od primene oralne doze od 40 mg simvastatina (1 tableta) i 81 mg aspirina (1 tableta) jednom dnevno (svaka 24 časa) sa 240 mL vode ujutru na dane 1 do 14, tokom ukupno 14 doza, pod uslovima gladovanja. Između tretmana je postojalo ispiranje od 14 dana.
[0305] Ukupno 52 subjekata je uključeno i randomizovano u odnosu na redosled tretmana. Od njih, 46 učesnika su bili španskog porekla.
[0306] Krv je vađena za nivoe masne kiseline u plazmi (EPA, DHA, AA) prilikom prijave (dan -1) i prilikom odjave (dan 15) posle tretmana grane sa Epanova® (tretman "A"). Genotipizacija je izvedena na različitim prethodno identifikovanim SNPs, uključujući SNPs u FADS1 genu (npr. rs174546), uključujući SNP povezan sa konverzijom DGLA u AA (SNP rs174537), FADS2 genu i Scd-1 genu.
5.11.3 REZULTATI
[0307] Prosečni početni i na kraju tretmana ("EOT") nivoi u plazmi (u µg/mL) za EPA nivoe prikazani su na SL. 20E.
[0308] SL. 56 prikazuje nivoe arašidonske kiseline (AA) u plazmi za subjekte grupisane prema genotipu na rs174546 SNP, na (A) početku (u µg/mL), i (B) dan 15 tretmana sa Epanova® (u procentima promene od početne vrednosti). Za svaki genotip, interkvartilni opseg je naznačen pravougaonikom, medijana je naznačena horizontalnom linijom u unutrašnjosti interkvartilnog pravougaonika, i srednja vrednost je predstavljena rombom. Ekstremne vrednosti su predstavljene praznim krugovima. Viskeri se pružaju do minimalne i maksimalne vrednosti izvan ekstremnih vrednosti. Skor 1 identifikuje subjekte koji su homozigotni na glavnom alelu; skor 3 identifikuje subjekte homozigotne na manjem alelu; i skor 2 predstavlja heterozigote.
[0309] Pre tretmana, populacija španskog porekla je imala veću prevalencu TT homozigota (41%) u poređenju sa CC homozigotima (24%) za SNP rs174546. Ovo je odgovaralo značajno različitim početnim nivoima EPA (CC=18 µg/mL; CT=11 µg/mL; TT=7 µg/mL, p<0.0001) i arašidonske kiseline (AA) (CC=266 µg/mL; CT=202 µg/mL; TT=167 µg/mL, p <0.0001) kod genotipova.
[0310] Kao odgovor na tretman sa Epanova®, zabeleženo je značajno povećanje u EPA, sa najvećim procentom povećanja kod TT genotipa (TT: 1054%, CT:573%, CC:253%).
5.12 Primer 12: ESPRIT ispitivanje
5.12.1 LEKOVITA SREDSTVA
[0311] ISPITIVANI LEK (Epanova®) – Pripremljene su svinjske mekane želatinske kapsule tipa A, od kojih svaka sadrži jedan gram (1g) PUFA kompozicije koja sadrži omega-3 PUFA u obliku slobodne kiseline ("API"). Kapsule su obložene sa Eudragit NE 30-D (Evonik Industries AG). API imale su sastav dat u seriji 3 Tabele 9 (videti primer 4, u prethodnom tekstu).
[0312] PLACEBO – Pripremljene su kapsule koje sadrže maslinovo ulje za upotrebu kao kontrola.
5.12.2 DIZAJN STUDIJE
[0313] Kao što je prikazano na SL. 38, podgrupa subjekata u 2g grani tretmana EVOLVE ispitivanja koji su primali istovremenu terapiju statinom ispoljili su veće opsege procenta promene (srednja vrednost razlike LS), u odnosu na kontrolu, za TG, ne-HDL-C, HDL-C, LDL-C, TC, VLDL-C, i TC/HDL-C, u poređenju sa onim subjektima u 2g grani tretmana koji nisu primili istovremenu terapiju statinom. Subjekti koji su primali istovremenu terapiju statinom su pokazali odgovor zavistan od doze na Epanova®, kao što je prikazano u komparativnim podacima za Epanova® 2g i Epanova® 4g prikazanim na SL.39.
[0314] Kao posledica povećane efikasnosti zabeležene za Epanova® zajedno sa terapijom statinom, ESPRIT kliničko ispitivanje je izvedeno za ispitivanje pacijenata na početnoj terapiji statinom. Kao što je prikazano na SL. 40, pacijenti su izabrani za ESPRIT studiju na osnovu nivoa TG između 200-500 mg/dL i početne terapije statinom. Od 660 pacijenata koji su izabrani za ispitivanje, 220 su tretirani sa maslinovim uljem placebo, 220 su tretirani sa Epanova® 2g dozom, i 220 su tretirani sa Epanova® 4g dozom. Svi placebo i Epanova® tretmani su primenjeni pored početne terapije statinom.
[0315] Tabela 41, u daljem tekstu, prikazuje početne nivoe za TG, HDL-C, LDL-C, ne-HDL-C, i VLDL-C za subjekte u ESPRIT ispitivanju, u poređenju sa poželjnim nivoima kao što je opisano od strane Third Report of the Expert Panel on Detection, Evaluation, and Treatment of High Blood Cholesterol in Adults (Adult Treatment Panel III), izdatim od strane National Heart Lung and Blood Institute.
5.12.3 REZULTATI
[0316] SL. 41 ilustruje raspored pacijenata za ESPRIT ispitivanje, pokazujući da su 6 pacijenata povučeni iz placebo grane, 6 pacijenata su povučeni iz grane za tretman sa 2g i 12 pacijenata su povučeni iz grane za tretman sa 4g. Broj pacijenata koji su imali štetne efekte (AE) bio je nizak ukupno, sa 2 u placebo grani, 3 u grani za tretman sa 2g i 7 u grani za tretman sa 4g.
[0317] Pacijenti u ESPRIT ispitivanju ispoljili su značajan procenat promena u nivoima EPA i DHA u plazmi, kao što je prikazano na SL. 42A i SL. 42B, respektivno. Ovi pacijenti su takođe pokazali smanjenja TG, smanjenja u ne-HDL-C i povećanja u HDL-C zavisna od doze, u poređenju sa onima koji su primali placebo, maslinovo ulje (videti SL. 43). Pored toga, zabeležena su smanjenja u VLDL-C i TC/HDL-C zavisna od doze (videti SL. 44). Uzeti zajedno, rezultati sa SL.42-44 pokazuju efikasnost Epanova® na dodatnu terapiju statinom.
[0318] Dodatni detalji rezultata ESPRIT ispitivanja su predstavljeni na SL. 45 - 52, koje pokazuju da je Epanova® efikasan kao dodatak kako za statine niske potencije tako i za one visoke potencije, u opsegu početnih uslova pacijenta. SL. 45 prikazuje rezultate za medijanu procenta promene TG od početne vrednosti za tri tercila pacijenata, podeljene početnim nivoima TG. SL. 46 prikazuje rezultate za medijanu procenta promene ne-HDL-C od početne vrednosti za tri tercila pacijenata, podeljenu početnim nivoima ne-HDL-C. SL. 47 prikazuje rezultate za medijanu procenta promene LDL-C od početne vrednosti za tri tercila pacijenata, podeljenu početnim nivoima LDL-C.
[0319] Kao što se vidi sa SL. 48, smanjenja u nivoima TG su zabeležena za pacijente koji su primali istovremeno terapiju rosuvastatinom, atorvastatinom i simvastatinom. Statistički značajni efketi na nivoe triglicerida, ne-HDL-C, i LDL-C zabeleženi su bez obzira na to da li su statini niske potencije ili visoke potencije koprimenjivani, kao što je prikazano na SL. 49-51.
[0320] SL. 52 upoređuje medijanu procenta promene od početne vrednosti za trigliceride za (A) pacijente koji imaju više početne nivoe TG (≥ 294 mg/dL), (B) pacijente koji imaju visoke početne nivoe EPA (≥ 26.58 µg/mL), i (C) pacijente koji primaju istovremenu terapiju rosuvastatinom. Rezultati pokazuju da Epanova® 2g doza funkcioniše slično dozi 4g kod onih populacija pacijenata prikazanih na SL.52.
[0321] Povećani nivoi LDL-C zabeleženi posle tretmana sa Epanova® bili su u skladu sa zabeleženom povećanom veličinom čestica lipoproteina. Veliki VLDL, srednji VLDL, mali VLDL, ukupni VLDL i veličina VLDL mereni su za placebo i svaku od grana tretmana ESPRIT ispitivanja. Rezultati su prikazani na SL. 53 i pokazuju da je tretman sa Epanova® rezultovao u smanjenim količinama velikih VLDL čestica i odgovarajuće povećanim količinama malih VLDL čestica. Zabeleežna je smanjena veličina VLDL čestica, kao što je prikazano na Sl. 53 zajedno sa povećanjima u veličini LDL čestica, kao što je prikazano na SL. 54. Kao što je prikazano na SL. 55, kako se nivoi TG na kraju tretmana smanjuju, procenti povećanja u veličini LDL-P su bili veći. Uzete zajedno, SL. 53 - 55 pokazuju da je tretman sa Epanova® rezultirao u povećanoj veličini čestica lipoproteina, zapažanje koje se može smatrati odgovornim za zabeleženi povećani LDL-C.
[0322] Tabela 42, u daljem tekstu, rezimira rezultate ESPRIT ispitivanja.

Claims (16)

Patentni zahtevi
1. Farmaceutska kompozicija, koja sadrži:
eikozapentaenoinsku kiselinu (omega-3) (EPA), u obliku slobodne kiseline, u količini od 50% (m/m) do 60% (m/m);
dokozaheksaenoinsku kiselinu (omega-3) (DHA), u obliku slobodne kiseline, u količini od 17% (m/m) do 23% (m/m); i
dokozapentaenoinsk kiselinu (omega-3) (DPA), u obliku slobodne kiseline, u količini od ne manje od 1% (m/m);
gde m/m označava procenat po težini svih masnih kiselina u kompoziciji.
2. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 1, naznačena time što je najmanje 95 težinskih % polinezasićene masne kiseline u kompoziciji prisutno u obliku slobodne kiseline.
3. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 1, naznačena time što DPA je prisutna u količini od ne više od 10% (m/m).
4. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 1, naznačena time što DPA je prisutna u količini od 1% (m/m) do 8% (m/m).
5. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 1, naznačena time što EPA je prisutna u količini od 55% (m/m).
6. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 1, naznačena time što DHA je prisutna u količini od 20% (m/m).
7. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 1, naznačena time što je najmanje 90 težinskih % ukupne polinezasićene kiseline u kompoziciji prisutno u obliku slobodne kiseline.
8. Oblik jedinične doze pogodan za oralnu primenu, koji sadrži kapsulu, naznačen time što kapsula inkapsulira najmanje 500 mg farmaceutske kompozicije prema patentnom zahtevu 1.
9. Oblik jedinične doze prema patentnom zahtevu 8, naznačen time što kapsula inkapsulira 1000 mg farmaceutske kompozicije prema patentnom zahtevu 1.
10. Oblik jedinične doze prema patentnom zahtevu 9, naznačen time što kapsula je mekana želatinska kapsula.
11. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 1 za upotrebu u tretmanu teške hipertrigliceridemije kod pacijenta koji ima nivoe triglicerida u serumu pre tretmana ≥500 mg/dL, pri čemu navedeni tretman sadrži oralnu primenu farmaceutske kompozicije prema patentnom zahtevu 1 u količini od najmanje 2 g na dan i u trajanju od najmanje 30 dana.
12. Farmaceutska kompozicija za upotrebu prema patentnom zahtevu 11, naznačena time što navedeni tretman dalje sadrži oralnu primenu efikasne količine statina.
13. Farmaceutska kompozicija za upotrebu prema patentnom zahtevu 12, naznačena time što statin je izabran iz grupe koja se sastoji od pravastatina, lovastatina, simvastatina, atorvastatina, fluvastatina, rosuvastatina i pitavastatina.
14. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 1 za upotrebu u tretmanu hipertrigliceridemije kod pacijenata koji imaju nivoe triglicerida u serumu ili plazmi od 200 mg/dL do 500 mg/dL na terapiji statinom, pri čemu navedeni tretman sadrži oralnu primenu efikasne količine statina i najmanje 2 g na dan farmaceutske kompozicije prema patentnom zahtevu 1.
15. Farmaceutska kompozicija za upotrebu prema patentnom zahtevu 11 ili patentnom zahtevu 14, naznačena time što količina farmaceutske kompozicije prema patentnom zahtevu 1 je najmanje 3 g na dan.
16. Farmaceutska kompozicija za upotrebu prema patentnom zahtevu 11 ili patentnom zahtevu 14, naznačena time što količina farmaceutske kompozicije prema patentnom zahtevu 1 je najmanje 4g na dan.
RS20181033A 2012-01-06 2013-01-04 Dpa-obogaćene kompozicije omega-3 polinezasićenih masnih kiselina u obliku slobodne kiseline RS57777B1 (sr)

Applications Claiming Priority (8)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261583796P 2012-01-06 2012-01-06
US201261664047P 2012-06-25 2012-06-25
US201261669940P 2012-07-10 2012-07-10
US201261680622P 2012-08-07 2012-08-07
US201261710517P 2012-10-05 2012-10-05
US201261713388P 2012-10-12 2012-10-12
EP13733671.5A EP2800563B1 (en) 2012-01-06 2013-01-04 Dpa-enriched compositions of omega-3 polyunsaturated fatty acids in free acid form
PCT/US2013/020398 WO2013103902A1 (en) 2012-01-06 2013-01-04 Dpa-enriched compositions of omega-3 polyunsaturated fatty acids in free acid form

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS57777B1 true RS57777B1 (sr) 2018-12-31

Family

ID=48744082

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20181033A RS57777B1 (sr) 2012-01-06 2013-01-04 Dpa-obogaćene kompozicije omega-3 polinezasićenih masnih kiselina u obliku slobodne kiseline

Country Status (35)

Country Link
US (5) US20150004224A1 (sr)
EP (2) EP2800563B1 (sr)
JP (3) JP6399655B2 (sr)
KR (2) KR102153245B1 (sr)
CN (3) CN104321055A (sr)
BR (1) BR112014016788A8 (sr)
CA (1) CA2860512C (sr)
CL (1) CL2014001803A1 (sr)
CO (1) CO7061070A2 (sr)
CY (1) CY1120663T1 (sr)
DK (1) DK2800563T3 (sr)
DO (1) DOP2014000159A (sr)
EC (1) ECSP14012527A (sr)
ES (1) ES2685703T3 (sr)
HK (1) HK1251457A1 (sr)
HR (1) HRP20181418T1 (sr)
HU (1) HUE039659T2 (sr)
IL (3) IL233517A (sr)
IN (1) IN2014DN06125A (sr)
LT (1) LT2800563T (sr)
MX (1) MX358319B (sr)
MY (1) MY165048A (sr)
NZ (1) NZ626699A (sr)
PE (1) PE20142459A1 (sr)
PH (2) PH12014501553A1 (sr)
PL (1) PL2800563T3 (sr)
PT (1) PT2800563T (sr)
RS (1) RS57777B1 (sr)
RU (2) RU2664429C2 (sr)
SG (2) SG10201701004RA (sr)
SI (1) SI2800563T1 (sr)
SM (1) SMT201800519T1 (sr)
UA (1) UA114615C2 (sr)
WO (1) WO2013103902A1 (sr)
ZA (1) ZA201405765B (sr)

Families Citing this family (38)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB0907413D0 (en) 2009-04-29 2009-06-10 Equateq Ltd Novel methods
SG10201701004RA (en) * 2012-01-06 2017-04-27 Omthera Pharmaceuticals Inc Dpa-enriched compositions of omega-3 polyunsaturated fatty acids in free acid form
HK1206248A1 (en) 2012-05-07 2016-01-08 Omthera Pharmaceuticals Inc. Compositions of statins and omega-3 fatty acids
EP2861227A4 (en) * 2012-06-17 2016-01-27 Matinas Biopharma Inc OMEGA-3 PENTAIC ACID COMPOSITIONS AND METHODS OF USE
GB201216385D0 (en) * 2012-09-13 2012-10-31 Chrysalis Pharma Ag A pharmaceutical composition
KR20150098611A (ko) * 2012-10-23 2015-08-28 디킨 유니버시티 트리글리세라이드를 감소시키기 위한 방법
US10123986B2 (en) 2012-12-24 2018-11-13 Qualitas Health, Ltd. Eicosapentaenoic acid (EPA) formulations
US9629820B2 (en) 2012-12-24 2017-04-25 Qualitas Health, Ltd. Eicosapentaenoic acid (EPA) formulations
GB201301626D0 (en) 2013-01-30 2013-03-13 Dignity Sciences Ltd Composition comprising 15-OHEPA and methods of using the same
US9452151B2 (en) * 2013-02-06 2016-09-27 Amarin Pharmaceuticals Ireland Limited Methods of reducing apolipoprotein C-III
WO2015011724A2 (en) 2013-07-22 2015-01-29 Kms Health Center Pvt Ltd A novel omega -3 fatty acid composition with a plant extract
WO2015024055A1 (en) * 2013-08-20 2015-02-26 Deakin University Separation of omega-3 fatty acids
ES2826201T3 (es) 2013-10-30 2021-05-17 Patheon Softgels Inc Cápsulas entéricas blandas que comprenden ácidos grasos poliinsaturados
ES2727387T3 (es) 2013-11-15 2019-10-15 Ds Biopharma Ltd Sal de lisina de ácido 15-hidroxi-8(Z),11(Z),13(E)-eicosatrienoico
US9505709B2 (en) 2014-05-05 2016-11-29 Thetis Pharmaceuticals Llc Compositions and methods relating to ionic salts of peptides
US9682055B2 (en) 2014-06-04 2017-06-20 Dignity Sciences Limted Pharmaceutical compositions comprising DGLA and use of same
US9242008B2 (en) 2014-06-18 2016-01-26 Thetis Pharmaceuticals Llc Mineral amino-acid complexes of fatty acids
EA201692548A1 (ru) 2014-06-18 2017-10-31 ТЕТИС ФАРМАСЬЮТИКАЛЗ ЭлЭлСи Минеральные аминокислотные комплексы активных веществ
US9895333B2 (en) 2014-06-26 2018-02-20 Patheon Softgels Inc. Enhanced bioavailability of polyunsaturated fatty acids
WO2016069446A1 (en) * 2014-10-28 2016-05-06 Omthera Pharmaceuticals Inc Methods for modulating plasma levels of lipoproteins
WO2016073335A1 (en) * 2014-11-05 2016-05-12 Omthera Pharmaceuticals Inc. Methods of treatment
US20160192126A1 (en) * 2014-12-31 2016-06-30 Silver Spring Networks, Inc. System and method for tracking a device
MA41611A (fr) * 2015-02-23 2018-01-02 Omthera Pharmaceuticals Inc Préparations en milli-capsules comprenant des acides gras polyinsaturés libres
WO2016178066A1 (en) * 2015-05-01 2016-11-10 Mohan M Alapati Compositions and methods for the treatment of hyperglycemia and metabolic syndrome
JP2018524274A (ja) 2015-05-13 2018-08-30 ディーエス バイオファーマ リミテッド １５−オキソ−ｅｐａまたは１５−オキソ−ｄｇｌａを含む組成物、ならびにその作製及び使用方法
ES2851525T3 (es) 2015-07-21 2021-09-07 Afimmune Ltd Composiciones que comprenden 15(S)-HEPE para su uso en la sensibilización de las células cancerosas a la radioterapia
EP4218736A3 (en) 2015-12-18 2023-10-18 Afimmune Limited Compositions comprising 15-hepe
US10263794B2 (en) * 2016-05-19 2019-04-16 Linear Technology Corporation Maintain power signature controller at power interface of PoE or PoDL system
DK3454907T3 (da) 2016-06-03 2020-10-19 Thetis Pharmaceuticals Llc Sammensætninger og fremgangsmåder relateret til salte af specialiserede pro-løsningsmediatorer af inflammation
GB201611920D0 (en) 2016-07-08 2016-08-24 Astrazeneca Ab Pharmaceutical compositions
JP7208650B2 (ja) 2017-05-16 2023-01-19 アビリティ ファーマシューティカルズ エス．エル． 癌治療のための薬剤の組み合わせ
EP3648748A1 (en) 2017-07-06 2020-05-13 Evonik Operations GmbH Enteric coated solid dosage form comprising omega-3 fatty acid amino acid salts
KR102628351B1 (ko) 2017-08-15 2024-01-25 에보니크 오퍼레이션즈 게엠베하 오메가-3 지방산 아미노산 염의 높은 활성 성분 함량을 갖는 정제
EP3586640A1 (en) 2018-06-21 2020-01-01 Nuseed Pty Ltd Dha enriched polyunsaturated fatty acid compositions
EP3586642A1 (en) 2018-06-21 2020-01-01 Nuseed Pty Ltd Ala enriched polyunsaturated fatty acid compositions
WO2021023857A1 (en) 2019-08-08 2021-02-11 Evonik Operations Gmbh Solubility enhancement of poorly soluble actives
BR112022002129A2 (pt) 2019-08-08 2022-04-19 Evonik Operations Gmbh Processo a jusante para a produção de sais de ácidos graxos poli-insaturados
US20210315851A1 (en) 2020-04-03 2021-10-14 Afimmune Limited Compositions comprising 15-hepe and methods of treating or preventing hematologic disorders, and/or related diseases

Family Cites Families (171)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5735512A (en) 1980-06-27 1982-02-26 Nippon Oil & Fats Co Ltd Preventive and remedy for thrombosis
US4377526A (en) 1981-05-15 1983-03-22 Nippon Suisan Kaisha, Ltd. Method of purifying eicosapentaenoic acid and its esters
BR8803255A (pt) 1981-11-10 1990-02-06 Century Lab Inc Processo de extracao e purificacao de acidos graxos poli-insaturados de fontes naturais
JPS59157018A (ja) 1983-02-27 1984-09-06 Furointo Sangyo Kk 新規なる被覆含油カプセル剤形
JPS59225115A (ja) 1983-06-06 1984-12-18 Ota Seiyaku Kk 青魚類から得た長鎖高度不飽和脂肪酸を含有する微細カプセル
JPS61126016A (ja) 1984-11-22 1986-06-13 Toagosei Chem Ind Co Ltd 不飽和脂肪酸を内相物としたマイクロカプセル
EP0347509A1 (en) 1988-06-21 1989-12-27 Century Laboratories Inc. A process of extraction and purification of polyunsaturated fatty acids from natural sources
CH669208A5 (fr) 1986-12-17 1989-02-28 Nestle Sa Procede de fractionnement en continu d'un melange d'acides gras.
US5243046A (en) 1986-12-17 1993-09-07 Nestec S.A. Process for the continuous fractionation of a mixture of fatty acids
DE3863678D1 (de) 1987-04-27 1991-08-22 Efamol Holdings Lithiumsalze enthaltende pharmazeutische zubereitungen.
IT1205043B (it) 1987-05-28 1989-03-10 Innova Di Ridolfi Flora & C S Procedimento per l'estrazione di esteri di acidi grassi poliinsaturi da olii di pesce e composizioni farmaceutiche e dietetiche contenenti detti esteri
ZA885473B (en) 1987-08-07 1989-03-29 Century Lab Inc Free fatty acids for treatment of diabetes mellitus
US4843095A (en) 1987-08-07 1989-06-27 Century Laboratories, Inc. Free fatty acids for treatment or propyhlaxis of rheumatoid arthritis arthritis
GB8819110D0 (en) * 1988-08-11 1988-09-14 Norsk Hydro As Antihypertensive drug & method for production
GB2223943A (en) 1988-10-21 1990-04-25 Tillotts Pharma Ag Oral disage forms of omega-3 polyunsaturated acids
NL9201438A (nl) 1992-08-11 1994-03-01 Prospa Bv Nieuwe farmaceutische samenstellingen die esters van omega-3 polyonverzadigde zuren omvatten en de toepassing ervan bij de plaatselijke behandeling van ziekelijke aandoeningen.
EP0679057B1 (en) 1993-01-15 1999-08-18 Abbott Laboratories Structured lipids
JPH08512336A (ja) 1993-04-29 1996-12-24 ノルスク・ヒドロ・アクシェセルスカープ 脂肪酸およびその誘導体のクロマトグラフィーによる分画方法
JPH0753356A (ja) 1993-08-16 1995-02-28 Morishita Jintan Kk 酸化され易い油性物質を内容物とするシームレスカプセルおよびその製造方法
WO1995009622A1 (en) 1993-10-06 1995-04-13 Peptide Technology Limited Polyunsaturated fatty acids and uses thereof
IT1264987B1 (it) 1993-12-14 1996-10-17 Prospa Bv Sali di un acido grasso poliinsaturo e formulazioni farmaceutiche che li contengono
US5494684A (en) 1994-02-23 1996-02-27 Bar-Ilan University Plant protection from infection by Phytophthora infestans using fish oil
GB9404483D0 (en) 1994-03-08 1994-04-20 Norsk Hydro As Refining marine oil compositions
RU2127115C1 (ru) 1994-03-28 1999-03-10 Владимир Константинович Гаврисюк Смесь омега-3 полиненасыщенных жирных кислот
ATE178582T1 (de) 1994-05-09 1999-04-15 Nestle Sa Verfahren zur herstellung eines konzentrates von estern von mehrfach ungesättigten fettsäuren
IT1274734B (it) 1994-08-25 1997-07-24 Prospa Bv Composizioni farmaceutiche contenenti acidi grassi poliinsaturi, loro esteri o sali, unitamente a vitamine o provitamine antiossidanti
JPH08100191A (ja) * 1994-09-30 1996-04-16 Nisshin Flour Milling Co Ltd 高度不飽和脂肪酸またはそのエステルの精製方法
NL9401743A (nl) 1994-10-20 1996-06-03 Prospa Bv Zouten van aminoalcoholen en farmaceutische formuleringen die deze bevatten.
GB9509764D0 (en) 1995-05-15 1995-07-05 Tillotts Pharma Ag Treatment of inflammatory bowel disease using oral dosage forms of omega-3 polyunsaturated acids
GB2300807B (en) 1995-05-15 1999-08-18 Tillotts Pharma Ag Oral dosage forms of omega-3 polynunsaturated acids for the treatment of inflammatory bowel disease
AU2738497A (en) 1996-04-24 1997-11-12 Brigham And Women's Hospital Omega-3 fatty acids and omega-3 phosphatidylcholine in the treatment of bipolar disorder
US6077828A (en) 1996-04-25 2000-06-20 Abbott Laboratories Method for the prevention and treatment of cachexia and anorexia
JPH1095744A (ja) * 1996-09-20 1998-04-14 Nof Corp 高度不飽和脂肪酸又はそのアルキルエステルの製造方法
ATE221324T1 (de) 1996-11-20 2002-08-15 Nutricia Nv Fette enthaltende ernährungszusammensetzung zur behandlung des stoffwechselssyndroms
GB9701705D0 (en) 1997-01-28 1997-03-19 Norsk Hydro As Purifying polyunsatured fatty acid glycerides
US6528699B1 (en) 1997-02-25 2003-03-04 Genzyme Transgenics Corporation Transgenically produced non-secreted proteins
US6852870B2 (en) 1999-03-22 2005-02-08 Andrew Stoll Omega-3 fatty acids in the treatment of depression
WO1999029316A1 (en) 1997-12-10 1999-06-17 Severson, Mary, L. Pharmaceutical compositions containing an omega-3 fatty acid oil
NO312973B1 (no) 1999-02-17 2002-07-22 Norsk Hydro As Lipase-katalysert forestring av marine oljer
US7112609B2 (en) 1999-06-01 2006-09-26 Drugtech Corporation Nutritional supplements
JP2001054396A (ja) 1999-06-08 2001-02-27 Nippon Suisan Kaisha Ltd リパーゼによる高度不飽和脂肪酸含有油脂の製造方法
AU5319499A (en) 1999-07-22 2001-02-13 Ivan L. Cameron Fatty acids to minimize cancer therapy side effects
NO310113B1 (no) 1999-08-11 2001-05-21 Norsk Hydro As Fremgangsmåte for utvinning av flerumettede fettsyrer fra ureakomplekser
WO2001015552A1 (en) 1999-08-30 2001-03-08 Ocean Nutrition Canada Ltd. A nutritional supplement for lowering serum triglyceride and cholesterol levels
HK1046851A1 (en) 1999-08-31 2003-01-30 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Soft capsules
EP1106072B1 (en) 1999-12-10 2005-11-30 Loders Croklaan B.V. Palmitoleic acid and its use in foods
WO2001049282A2 (en) 2000-01-06 2001-07-12 Martek Biosciences Corporation Therapeutic preparations of highly unsaturated fatty acids
ES2246769T3 (es) 2000-05-22 2006-03-01 Pro Aparts - Investimentos E Consultoria Lda Composicion de acidos grasos que contiene al menos 80% en peso de epa y dha o sus derivados y su uso farmaceutico.
GB0016045D0 (en) 2000-06-29 2000-08-23 Laxdale Limited Therapeutic combinations of fatty acids
GB0016452D0 (en) 2000-07-04 2000-08-23 Kilgowan Limited Vitamin K and essential fatty acids
EP1178103A1 (en) 2000-08-02 2002-02-06 Dsm N.V. Purifying crude pufa oils
KR20010008387A (ko) 2000-11-30 2001-02-05 이성권 결정화방법을 이용한 고순도 불포화지방산의 분리 정제 방법
CN1516592A (zh) 2001-06-18 2004-07-28 �����Ǽ���&������Դ���޹�˾ 用于预防和/或治疗心血管疾病、关节炎、皮肤癌、糖尿病、经前综合症和透皮转运的磷虾和/或海产提取物
CN1197564C (zh) * 2001-09-30 2005-04-20 中国药品生物制品检定所 海狗油在制备治疗脂代谢紊乱药物中的应用
ITMI20012384A1 (it) 2001-11-12 2003-05-12 Quatex Nv Uso di acidi grassi poliinsaturi per la prevenzione primaria di eventi cardiovascolari maggiori
GB2385852A (en) 2002-02-27 2003-09-03 Rothamsted Ex Station Delta 6-desaturases from Primulaceae
AU2003218319A1 (en) 2002-03-22 2003-10-13 Doc's Guide, Inc. Multivitamin and mineral nutritional supplement
DE10214005A1 (de) 2002-03-27 2003-10-09 Volker Bartz Blutfettsenker zur oralen Einnahme, bestehend aus einem Gemisch aus den Omega-3-Fettsäuren EPA (Eicosapentaensäure) und DHA (Docosapentaensäure) und Pektin und/oder Guar als wirksame Substanzen, sowie gegebenenfalls zusätzlichen Stoffen wie antioxidative Vitamine, Aminosäuren und Spurenelemente
ITMI20020731A1 (it) 2002-04-08 2003-10-08 Ibsa Inst Biochimique Sa Composizioni farmaceutiche per acido acetilsalicilico e oli omega-3
NZ518504A (en) 2002-04-22 2005-05-27 Ind Res Ltd Use of near-critical fluids in the separation of saturated and mono-unsaturated fatty acids from urea-containing solutions
SE0202188D0 (sv) 2002-07-11 2002-07-11 Pronova Biocare As A process for decreasing environmental pollutants in an oil or a fat, a volatile fat or oil environmental pollutants decreasing working fluid, a health supplement, and an animal feed product
EP2295529B2 (en) 2002-07-11 2022-05-18 Basf As Use of a volatile environmental pollutants-decreasing working fluid for decreasing the amount of pollutants in a fat for alimentary or cosmetic use
NO319194B1 (no) 2002-11-14 2005-06-27 Pronova Biocare As Lipase-katalysert forestringsfremgangsmate av marine oljer
US8017651B2 (en) 2002-11-22 2011-09-13 Bionexus, Ltd. Compositions and methods for the treatment of HIV-associated fat maldistribution and hyperlipidemia
WO2004056370A1 (en) 2002-12-20 2004-07-08 Pronova Biocare As Use of a fatty acid composition for treatment of male infertility
WO2004098311A1 (en) 2003-05-05 2004-11-18 Denofa As Fish oils with an altered fatty acid profile, method of producing same and their use
US6846942B2 (en) 2003-05-20 2005-01-25 David Rubin Method for preparing pure EPA and pure DHA
DE602004026729D1 (de) 2003-07-09 2010-06-02 J Oil Mills Inc Langkettige hochungesättigte fettsäure enthaltende antioxidierend wirkende fett- oder ölzusammensetzung
US7759507B2 (en) 2003-09-05 2010-07-20 Abbott Laboratories Lipid system and methods of use
ITMI20032247A1 (it) 2003-11-19 2005-05-20 Tiberio Bruzzese Interazione di derivati polari di composti insaturi con substrati inorganici
SE0303513D0 (sv) 2003-12-19 2003-12-19 Pronova Biocare As Use of a fatty acid composition comprising at least one of epa and dha or any combinations thereof
GB0403247D0 (en) 2004-02-13 2004-03-17 Tillotts Pharma Ag A pharmaceutical composition
GB0413729D0 (en) 2004-06-18 2004-07-21 Tillotts Pharma Ag A pharmaceutical composition and its use
GB0413730D0 (en) 2004-06-18 2004-07-21 Tillotts Pharma Ag A pharmaceutical composition and its use
US20070265341A1 (en) 2004-07-01 2007-11-15 The Schepens Eye Research Institute Inc. Compositions and methods for treating eye disorders and conditions
US20080193549A1 (en) 2004-07-05 2008-08-14 Otago Innovation Limited Hoki Fish Liver Oil, Fractions Thereof And Therapeutic Uses
RU2388490C2 (ru) 2004-07-19 2010-05-10 Тиа Медика Ас Композиция, содержащая растительный или рыбий жир, и соединения, содержащие неокисляющиеся структурные элементы жирных кислот
WO2006009465A2 (en) 2004-07-19 2006-01-26 Thia Medica As Composition comprising protein material and non-oxidizable fatty acid entities
WO2007130713A1 (en) 2006-02-01 2007-11-15 Transform Pharmaceuticals, Inc. Novel fenofibrate formulations and related methods of treatment
KR20070038553A (ko) 2004-08-06 2007-04-10 트렌스폼 파마수티컬스 인코퍼레이티드 신규한 스타틴 약제학적 조성물 및 관련된 치료방법
WO2007130714A1 (en) 2006-02-01 2007-11-15 Transform Pharmaceuticals, Inc. Novel statin pharmaceutical compositions and related methods of treatment
SG155189A1 (en) 2004-08-06 2009-09-30 Transform Pharmaceuticals Inc Novel fenofibrate formulations and related methods of treatment
EP1791544A4 (en) 2004-09-08 2007-09-12 Chelsea Therapeutics Inc CHINAZOLINE DERIVATIVES AS METABOLIC INERT ANTIFOLATE
US20060088596A1 (en) 2004-09-28 2006-04-27 Atrium Medical Corporation Solubilizing a drug for use in a coating
US20070191467A1 (en) * 2004-12-06 2007-08-16 Reliant Pharmaceutical, Inc. Statin and omega-3 fatty acids for lipid therapy
DE102004062141A1 (de) 2004-12-23 2006-07-06 Nutrinova Nutrition Specialties & Food Ingredients Gmbh Verfahren zur Herstellung eines Rohöls aus Gemischen von Mikroorganismen und Pflanzen, das so hergestellte Öl sowie die spezifischen Verwendungen des so hergestellten und gegebenenfalls zusätzlich raffinierten Öls
EP1845999A4 (en) 2005-01-24 2010-09-22 Pronova Biocare As USE OF A DHA-CONTAINING FATTY ACID COMPOSITION FOR THE PRODUCTION OF A PHARMACEUTICAL OR FOOD PRODUCT FOR THE TREATMENT OF AMYLOSIS RELATED DISEASES
US20080279935A1 (en) 2005-02-18 2008-11-13 Swg Invest As Composition Comprising a Powder Containing Microencapsulated Polyunsaturated Long-Chain Esterified Fatty Acids Distributed in an Effervescent Base
KR20070108945A (ko) 2005-03-08 2007-11-13 릴라이언트 파마슈티컬스 인코퍼레이티드 스타틴과 오메가-3 지방산 및 그 조합물을 이용한 치료
DE102005013779A1 (de) 2005-03-22 2006-09-28 Basf Plant Science Gmbh Verfahren zur Herstellung von mehrfach ungesättigten C20- und C22-Fettsäuren mit mindestens vier Doppelbindungen in transgenen Pflanzen
WO2006102896A2 (en) 2005-03-29 2006-10-05 Aalborg Universitet A process to concentrate ω3-pufa from fish oil by selective hydrolysis using cutinase immobilized on zeolite nay
KR100539357B1 (ko) 2005-04-11 2005-12-28 동부한농화학 주식회사 불포화 지방산의 제조방법
JP5337479B2 (ja) 2005-05-04 2013-11-06 プロノヴァ・バイオファーマ・ノルゲ・アーエス 新規化合物
US7485323B2 (en) 2005-05-31 2009-02-03 Gelita Ag Process for making a low molecular weight gelatine hydrolysate and gelatine hydrolysate compositions
CA2614095A1 (en) 2005-07-01 2007-01-11 Martek Biosciences Corporation Polyunsaturated fatty acid-containing oil product and uses and production thereof
US20070020340A1 (en) 2005-07-25 2007-01-25 David Rubin Fish oil products for reducing cholesterol, low density lipoprotein, and hypertension
JP2009515816A (ja) 2005-08-04 2009-04-16 トランスフオーム・フアーマシユーチカルズ・インコーポレーテツド フェノフィブレートおよびスタチンを含んでなる新規調合物、ならびに関連する処置方法
ITMI20051560A1 (it) 2005-08-10 2007-02-11 Tiberio Bruzzese Composizione di acidi grassi n-3 con elevata concentrazione di epa e-o dha e contenente acidi grassi n-6
US20070134493A1 (en) 2005-12-08 2007-06-14 Kanji Meghpara Compositions and capsules with stable hydrophilic layers
WO2007075841A1 (en) 2005-12-20 2007-07-05 Cenestra, Llc Omega 3 fatty acid formulations
FR2896172B1 (fr) 2006-01-17 2008-10-10 Polaris Soc Par Actions Simpli Nouveau procede de stabilisation des acides gras polyinsatures et les compositions ainsi obtenus.
DE102006008030A1 (de) 2006-02-21 2007-08-23 Basf Plant Science Gmbh Verfahren zur Herstellung von mehrfach ungesättigten Fettsäuren
AR059376A1 (es) 2006-02-21 2008-03-26 Basf Plant Science Gmbh Procedimiento para la produccion de acidos grasos poliinsaturados
WO2007128801A1 (en) 2006-05-08 2007-11-15 Novartis Ag Combination of organic compounds
US8003813B2 (en) 2006-06-27 2011-08-23 Pos Pilot Plant Corporation Process for separating saturated and unsaturated fatty acids
KR100684641B1 (ko) 2006-07-25 2007-02-22 주식회사 일신웰스 유지 조성물, 이를 함유하는 식품 및 건강보조식품
US20090304784A1 (en) 2006-07-28 2009-12-10 V. Mane Fils Seamless capsules containing high amounts of polyunsaturated fatty acids and a flavouring component
KR100758664B1 (ko) 2006-08-16 2007-09-13 (주)케비젠 불포화지방산 함유 마이크로캡슐의 제조방법, 이 방법에의해 제조된 마이크로캡슐 및 이를 포함하는 제품
CN101194913A (zh) * 2006-12-05 2008-06-11 张金生 治疗血脂偏高的天然海豹油浓缩生物制剂及其制备工艺
AU2008205325B2 (en) 2007-01-10 2013-09-12 Dsm Nutritional Products Ag Vegetarian microcapsules
JP2010515773A (ja) 2007-01-16 2010-05-13 リライアント・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド 非ステロイド系抗炎症薬およびオメガ−３脂肪酸を用いる治療ならびにその組合せ生成物
US20110190389A1 (en) 2007-02-20 2011-08-04 Linda Arterburn Oxylipins from long chain polyunsaturated fatty acids and methods of making and using the same
AU2008229604B2 (en) 2007-03-20 2013-05-30 Scf Pharma Inc. Compositions comprising polyunsaturated fatty acid monoglycerides or derivatives thereof and uses thereof
WO2008133573A1 (en) 2007-04-26 2008-11-06 Patrick Adlercreutz A polyunsaturated fatty acid (pufa) enriched marine oil comprising eicosapentaenoic acid (epa) and docosahexaenoic acid (dha), and a process of production thereof
WO2009009040A2 (en) 2007-07-06 2009-01-15 Baum Seth J Fatty acid compositions and methods of use
CL2008002020A1 (es) 2007-07-12 2008-11-14 Ocean Nutrition Canada Ltd Metodo de modificacion de un aceite, que comprende hidrolizar gliceridos con una solucion de lipasa thermomyces lanuginosus, separar la fraccion de acido graso saturado de la fraccion de glicerido hidrolizado y esterificar los gliceridos hidrolizados en la presencia de candida antarctica lipasa b; y composicion de aceite.
WO2009014452A1 (en) 2007-07-25 2009-01-29 Epax As Omega-3 fatty acid fortified composition
EP2172558B1 (en) 2007-07-30 2017-07-19 Nippon Suisan Kaisha, Ltd. Method for production of epa-enriched oil and dha-enriched oil
WO2009020406A1 (en) 2007-08-07 2009-02-12 Granate Seed Limited Methods of making lipid substances, lipid substances made thereby and uses thereof
WO2009028457A1 (ja) 2007-08-29 2009-03-05 Shinshu University 非アルコール性脂肪肝炎治療薬
DE102007055344A1 (de) 2007-11-19 2009-05-20 K. D. Pharma Bexbach Gmbh Neue Verwendung von Omega-3-Fettsäure(n)
CA2711814A1 (en) 2008-01-10 2009-07-16 Takeda Pharmaceutical Company Limited Capsule formulation
US20090182049A1 (en) 2008-01-16 2009-07-16 Joar Arild Opheim Pharmaceutical Composition and Method for Treating Hypertriglyceridemia and Hypercholesterolemia in Humans
CN102099451B (zh) 2008-05-15 2015-07-15 普罗诺瓦生物医药挪威公司 磷虾油提取方法
US20110236476A1 (en) 2008-09-02 2011-09-29 Amarin Corporation Plc. Pharmaceutical composition comprising eicosapentaenoic acid and nicotinic acid and methods of using same
US20100062057A1 (en) 2008-09-10 2010-03-11 Pronova BioPharma Norge AS. Formulation
DK3196313T3 (da) 2008-10-02 2021-04-06 Ramon Nieves Gonzalez Mikroalgeekstrakt indeholdende polyumættede omega3-fedtsyrer og fremgangsmåde til ekstrahering af olie fra mikroorganismer
US8372425B2 (en) 2008-10-31 2013-02-12 Lipid Pharmaceuticals Ehf. Fatty acids for use as a medicament
HUE048299T2 (hu) 2009-02-10 2020-07-28 Amarin Pharmaceuticals Ie Ltd Eikozapentaénsav-etil-észter hipertrigliceridémia kezelésére
CN101822651A (zh) * 2009-03-05 2010-09-08 Dpa工业公司 可咀嚼胶囊及其制备方法
WO2010119319A1 (en) 2009-03-09 2010-10-21 Pronova Biopharma Norge As Compositions comprising a fatty acid oil mixture and a free fatty acid, and methods and uses thereof
KR101759353B1 (ko) 2009-04-17 2017-07-18 나타크 파마 에스.엘 오메가-3 지방산이 풍부하고 피탄산 함량이 적은 조성물
WO2010127103A1 (en) 2009-04-29 2010-11-04 Amarin Pharma, Inc. Stable pharmaceutical composition and methods of using same
SG175390A1 (en) 2009-04-29 2011-12-29 Amarin Corp Plc Pharmaceutical compositions comprising epa and a cardiovascular agent and methods of using the same
WO2010124387A1 (en) 2009-05-01 2010-11-04 Micropharma Limited Bacterial compositions for prophylaxis and treatment of degenerative disease
SI2443246T1 (en) * 2009-06-15 2018-05-31 Amarin Pharmaceuticals Ireland Limited Compositions and methods for lowering triglycerides without raising ldl-c levels in a subject on concomitant statin therapy
IN2012DN02661A (sr) 2009-09-01 2015-09-11 Catabasis Pharmaceuticals Inc
SG10201405994UA (en) 2009-09-23 2014-10-30 Amarin Pharmaceuticals Ie Ltd Pharmaceutical Composition Comprising Omega-3 Fatty Acid And Hydroxy-derivative Of A Statin And Methods Of Using Same
WO2011048493A1 (en) 2009-10-23 2011-04-28 Pronova Biopharma Norge As Coated capsules and tablets of a fatty acid oil mixture
RU2009145010A (ru) 2009-12-04 2011-06-20 Общество с ограниченной ответственностью (ООО) "Аббифарм" (RU) Композиция омега-3 и омега-6 полиненасыщенных жирных кислот
WO2011095284A1 (de) 2010-02-02 2011-08-11 Cognis Ip Management Gmbh Anreicherung von mehrfach ungesättigten fettsäuren
GB201006204D0 (en) 2010-04-14 2010-06-02 Ayanda As Composition
EP2561050A1 (en) 2010-04-22 2013-02-27 E.I. Du Pont De Nemours And Company Method for obtaining polyunsaturated fatty acid-containing compositions from microbial biomass
US9476008B2 (en) 2010-06-25 2016-10-25 Epax As Process for separating polyunsaturated fatty acids from long chain unsaturated or less saturated fatty acids
JP2013537185A (ja) 2010-09-08 2013-09-30 プロノヴァ・バイオファーマ・ノルゲ・アーエス 遊離酸の形のｅｐａおよびｄｈａを含む脂肪酸油混合物と界面活性剤とスタチンとを含む組成物
SG188626A1 (en) 2010-09-24 2013-04-30 Pronova Biopharma Norge As Process for concentrating omega-3 fatty acids
WO2012083034A1 (en) 2010-12-15 2012-06-21 Louis Sanfilippo Modulation of neurotrophic factors by omega-3 fatty acid formulations
WO2012087153A1 (en) 2010-12-23 2012-06-28 Marine Bioproducts As Enrichment of marine oils with omega-3 polyunsaturated fatty acids by lipase-catalysed hydrolysis
EP2476425B1 (en) 2011-01-14 2014-03-19 Visiotact Pharma Composition comprising OPC and Omega-3 for preventing and/or inhibiting the development of diabetic retinopathy
EP2675442A1 (en) * 2011-02-16 2013-12-25 Pivotal Therapeutics, Inc. Cholesterol absorption inhibitor (azetidinone) and omega 3 fatty acids (epa, dha, dpa) for the reduction of cholesterol and for the reduction of cardiovascular events
EP2675445A1 (en) 2011-02-16 2013-12-25 Pivotal Therapeutics, Inc. Statin and omega 3 fatty acids (epa, dha and dpa) for use in cardiovascular diseases
CA2827561A1 (en) * 2011-02-16 2012-08-23 Pivotal Therapeutics, Inc. Omega 3 fatty acid diagniostic assay for the dietary management of patients with cardiovascular disease (cvd)
CA2827579A1 (en) * 2011-02-16 2012-08-23 Pivotal Therapeutics, Inc. Omega 3 formulations comprising epa, dha and dpa for treatment of risk factors for cardiovascular disease
WO2012112520A1 (en) 2011-02-16 2012-08-23 Pivotal Therapeutics, Inc. A formulations comprising omega 3 fatty acids and an anti obesity agent for the reduction of body weight in cardiovascular disease patients (cvd) and diabetics
WO2012112902A1 (en) 2011-02-18 2012-08-23 Martek Biosciences Corporation Methods of preparing free polyunsaturated fatty acids
WO2012156986A1 (en) 2011-04-28 2012-11-22 Duragkar Nandakishore Jeevanrao Eicosapentaenoic acid (epa) as polyunsaturated free fatty acid in its directly compressible powder form and process of isolation thereof
CN102311868B (zh) 2011-04-29 2017-05-24 塞拉斯有限责任公司 一种无溶剂提取富含磷脂和中性油脂的磷虾油的方法
US8697676B2 (en) 2011-06-15 2014-04-15 Ronald E Rosedale Omega-3 fatty acid nutriceutical composition and optimization method
EP2755646A4 (en) * 2011-09-15 2015-06-10 Omthera Pharmaceuticals Inc METHOD AND COMPOSITIONS FOR TREATING, REVERSING, INHIBITING OR PREVENTING RESISTANCE TO THROMBIA THERAPY
HK1202027A1 (en) 2011-10-21 2015-09-18 Omthera Pharmaceuticals, Inc. Methods and compositions for treating or preventing attention deficit hyperactivity disorder
WO2013063067A1 (en) * 2011-10-24 2013-05-02 Stable Solutions Llc Enriched injectable emulsion containing selected fatty acid triglycerides
SG10201701004RA (en) 2012-01-06 2017-04-27 Omthera Pharmaceuticals Inc Dpa-enriched compositions of omega-3 polyunsaturated fatty acids in free acid form
MY189576A (en) 2012-03-30 2022-02-17 Micelle Biopharma Inc Omega-3 fatty acid ester compositions
HK1206248A1 (en) 2012-05-07 2016-01-08 Omthera Pharmaceuticals Inc. Compositions of statins and omega-3 fatty acids
US20140194512A1 (en) 2012-06-17 2014-07-10 Matinas Biopharma, Inc. Compositions comprising docosapentaenoic acid and methods of use
EP2861227A4 (en) 2012-06-17 2016-01-27 Matinas Biopharma Inc OMEGA-3 PENTAIC ACID COMPOSITIONS AND METHODS OF USE
GB201216385D0 (en) 2012-09-13 2012-10-31 Chrysalis Pharma Ag A pharmaceutical composition
WO2016069446A1 (en) 2014-10-28 2016-05-06 Omthera Pharmaceuticals Inc Methods for modulating plasma levels of lipoproteins
WO2016073335A1 (en) 2014-11-05 2016-05-12 Omthera Pharmaceuticals Inc. Methods of treatment
WO2016130417A1 (en) 2015-02-11 2016-08-18 Omthera Pharmaceuticals Inc Omega-3 fatty acid prodrug compounds and uses thereof
MA41611A (fr) 2015-02-23 2018-01-02 Omthera Pharmaceuticals Inc Préparations en milli-capsules comprenant des acides gras polyinsaturés libres

Also Published As

Publication number Publication date
US10117844B2 (en) 2018-11-06
MY165048A (en) 2018-02-28
DK2800563T3 (en) 2018-10-08
ES2685703T3 (es) 2018-10-10
PH12015502307B1 (en) 2017-04-10
KR102153245B1 (ko) 2020-09-08
PH12014501553B1 (en) 2014-10-08
CL2014001803A1 (es) 2015-01-30
PH12014501553A1 (en) 2014-10-08
BR112014016788A2 (pt) 2017-06-13
US20130209556A1 (en) 2013-08-15
SG10201701004RA (en) 2017-04-27
SMT201800519T1 (it) 2018-11-09
CA2860512C (en) 2019-02-05
SI2800563T1 (sl) 2018-11-30
DOP2014000159A (es) 2014-12-15
HRP20181418T1 (hr) 2018-11-30
IL252084B (en) 2019-05-30
PL2800563T3 (pl) 2018-12-31
JP2017214392A (ja) 2017-12-07
EP3348262A1 (en) 2018-07-18
JP2020045358A (ja) 2020-03-26
US9050308B2 (en) 2015-06-09
RU2018116572A (ru) 2018-10-23
PT2800563T (pt) 2018-11-07
SG11201403805WA (en) 2014-08-28
US20150320715A1 (en) 2015-11-12
JP2015503590A (ja) 2015-02-02
MX358319B (es) 2018-08-14
US20150004224A1 (en) 2015-01-01
LT2800563T (lt) 2018-10-25
ZA201405765B (en) 2016-05-25
CY1120663T1 (el) 2019-12-11
KR102153143B1 (ko) 2020-09-08
PH12015502307A1 (en) 2017-04-10
IL233517A (en) 2017-05-29
UA114615C2 (uk) 2017-07-10
KR20140135695A (ko) 2014-11-26
US20190029985A1 (en) 2019-01-31
HUE039659T2 (hu) 2019-01-28
IL233517A0 (en) 2014-08-31
JP6626857B2 (ja) 2019-12-25
PE20142459A1 (es) 2015-01-23
IL252084A0 (en) 2017-07-31
JP6399655B2 (ja) 2018-10-03
KR20190119658A (ko) 2019-10-22
EP2800563A4 (en) 2015-06-17
EP2800563A1 (en) 2014-11-12
HK1202073A1 (en) 2015-09-18
NZ626699A (en) 2017-03-31
EP2800563B1 (en) 2018-07-11
ECSP14012527A (es) 2015-09-30
CN104321055A (zh) 2015-01-28
CN107050457A (zh) 2017-08-18
US9050309B2 (en) 2015-06-09
RU2664429C2 (ru) 2018-08-17
IL266231A (en) 2019-06-30
BR112014016788A8 (pt) 2017-07-04
CA2860512A1 (en) 2013-07-11
RU2014128500A (ru) 2016-02-27
WO2013103902A1 (en) 2013-07-11
IL266231B (en) 2020-08-31
CO7061070A2 (es) 2014-09-19
HK1251457A1 (en) 2019-02-01
IN2014DN06125A (sr) 2015-08-14
MX2014008309A (es) 2015-04-13
CN108524483A (zh) 2018-09-14
US20130177643A1 (en) 2013-07-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DK2800563T3 (en) DPA Enriched Compositions of Multi-Saturated Omega-3 Fatty Acids in Free Acid Form
US9492545B2 (en) Compositions of statins and omega-3 fatty acids
JP2015503590A5 (sr)
JP6469261B2 (ja) 多価不飽和遊離脂肪酸を含むミリカプセル製剤
Wang et al. Synthesis of eicosapentaenoic acid‐enriched medium‐and long‐chain triglyceride by lipase‐catalyzed transesterification: a novel strategy for clinical nutrition intervention
AU2013201793B2 (en) DPA-enriched compositions of omega-3 polyunsaturated fatty acids in free acid form
HK1261434A1 (en) Dpa-enriched compositions of omega-3 polyunsaturated fatty acids in free acid form
HK1239541A1 (en) Dpa-enriched compositions of omega-3 polyunsaturated fatty acids in free acid form
HK1202073B (en) Dpa-enriched compositions of omega-3 polyunsaturated fatty acids in free acid form
AU2015203404A1 (en) DPA-enriched compositions of omega-3 polyunsaturated fatty acids in free acid form
WO2016069446A1 (en) Methods for modulating plasma levels of lipoproteins
Silldorff et al. Reducing cardiovascular risk-are omega 3 fatty acids the solution?
JP2016500055A (ja) トリグリセリドを低減させる方法