RS57397B1 - Cmv glikoproteini i rekombinantni vektori - Google Patents

Cmv glikoproteini i rekombinantni vektori

Info

Publication number
RS57397B1
RS57397B1 RS20180490A RSP20180490A RS57397B1 RS 57397 B1 RS57397 B1 RS 57397B1 RS 20180490 A RS20180490 A RS 20180490A RS P20180490 A RSP20180490 A RS P20180490A RS 57397 B1 RS57397 B1 RS 57397B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
antigen
cmv
virus
vector
promoter
Prior art date
Application number
RS20180490A
Other languages
English (en)
Inventor
Louis Picker
Klaus Fruh
Scott Hansen
Original Assignee
Univ Oregon Health & Science
Louis Picker
Klaus Fruh
Scott Hansen
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Univ Oregon Health & Science, Louis Picker, Klaus Fruh, Scott Hansen filed Critical Univ Oregon Health & Science
Publication of RS57397B1 publication Critical patent/RS57397B1/sr
Publication of RS57397B8 publication Critical patent/RS57397B8/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C12N15/86—Viral vectors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/525—Virus
    • A61K2039/5256—Virus expressing foreign proteins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/16011—Herpesviridae
    • C12N2710/16111—Cytomegalovirus, e.g. human herpesvirus 5
    • C12N2710/16121—Viruses as such, e.g. new isolates, mutants or their genomic sequences
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/16011—Herpesviridae
    • C12N2710/16111—Cytomegalovirus, e.g. human herpesvirus 5
    • C12N2710/16141—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
    • C12N2710/16143—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
    • C12N2740/00011—Details
    • C12N2740/10011—Retroviridae
    • C12N2740/15011—Lentivirus, not HIV, e.g. FIV, SIV
    • C12N2740/15034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
    • C12N2740/00011—Details
    • C12N2740/10011—Retroviridae
    • C12N2740/15011—Lentivirus, not HIV, e.g. FIV, SIV
    • C12N2740/15071—Demonstrated in vivo effect
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2800/00—Nucleic acids vectors
    • C12N2800/20—Pseudochromosomes, minichrosomosomes
    • C12N2800/204—Pseudochromosomes, minichrosomosomes of bacterial origin, e.g. BAC
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

Opis
OBLAST TEHNIKE
[0001] Ovaj pronalazak odnosi se na rekombinantne citomegalovirusne vektore, postupke njihove proizvodnje, upotrebe za njih, proizvode ekspresije za njih, njihove upotrebe. Ovaj pronalazak takođe se odnosi na citomegalovirusne glikoproteine US2 do US 11, određenije rekombinantne citomegalovirusne vektore kojima nedostaje jedan ili više glikoproteina US2 do US11, posebno US8 do US11, a posebnije, US 11.
LEGENDA FEDERALNIH SREDSTAVA
[0002] Ovaj pronalazak je delimično podržan od strane Nacionalnih Instituta Zdravlja, broj priznanja RO1 AI059457. Federalna vlada može da ima određena prava na ovaj pronalazak.
POZADINA PRONALASKA
[0003] HCMV je sveprisutan virus koji je prisutan u preko 60% populacije u zavisnosti od socioekonomskog statusa. Nakon primarne infekcije, HCMV traje tokom života domaćina. Iako je HCMV uopšteno benigan kod zdravih pojedinaca, virus može da uzrokuje razarajuću bolest u imunokompromitovanim populacijama što rezultuje visokom morbidnošću i mortalitetom (za pregled, videti (Pass, R. F.2001. Cytomegalovirus, p.2675-2705. In P. M. H. David M. Knipe, Diane E. Griffin, Robert A. Lamb, Malcolm A. Martin, Bernard Roizman and Stephen E. Straus (ed.), Fields Virology, 4th ed. Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia).
[0004] CMV je jedan od najimunogenijih poznatih virusa. Visoki titri antitela usmereni su protiv brojnih virusnih proteina tokom primarne infekcije zdravih pojedinaca (Alberola, J et al., J Clin Virol 16, 113-122 (2000); Rasmussen L et al., J Infect Dis 164, 835-842 (1991); i (Farrell HE and Shellam GR, J Gen Virol 70 2573-2586 (1989). Dodatno, veliki deo repertoara T ćelija domaćina takođe je usmeren protiv CMV antigena, sa 5-10 puta većim srednjim frekvencijama CD4+ T ćelijskog odgovora na HCMV nego na akutne viruse (male boginje, zauške, grip, adenovirus) ili čak drugi izdržljivi virusi kao što su herpes simpleks i varičela-zoster virusi (Sylwester AW et al., J Exp Med 202, 673-685 (2005). Visoka frekvencija CD8+ odgovora na definisane HCMV epitope ili proteine takođe se obično opaža (Gillespie GM et al., J Virol 74, 8140-8150 (2000), Kern F et al., J Infect Dis 185, 1709-1716 (2002), Kern F et al., Eur J Immunol 29, 2908-2915 (1999), Kern F et al., J Virol 73, 8179-8184 (1999) i Sylwester AW et al., J Exp Med 202, 673-685 (2005). U humanoj studiji velikih razmera koja kvantifikuje CD4+ i CD8+ T ćelijske odgovore na ceo HCMV genom, srednje frekvencije CMV-specifičnih CD4+ i CD8+ T ćelija prešle su 10% memorijske populacije za oba podskupa i u nekim pojedincima, CMV-specifične T ćelije da objasni za >25% repertoara memorijskih T ćelija.
[0005] Paradoksalno, snažan imuni odgovor na CMV ne može da iskoreni virus iz zdravih inficiranih osoba ili pruži zaštitu od ponovne infekcije. Ova mogućnost CMV da izbegne istrebljenje imunim sistemom, i da ponovo inficira sero-pozitivnog domaćina dugo se verovalo da je povezana sa višestrukim virusnim imunomodulatorima kodiranih virusom (za pregled, videti Mocarski ES et al., Trends Microbiol 10, 332-339 (2002) inkorporiran ovde referencom.) HCMV US6 familija proteina (ekvivalentna RhCMV homolozima: Rh182-Rh189) je najobuhvatnije ispitivana ovih imunomodulatora (Loenen WA et al., Semin Immunol 13, 41-9 (2001). Najmanje četiri različita gena, US2, US3, US6 i US11 - i odgovarajući RhCMV homolozi (Rh182, Rh184, Rh185, i Rh189) – poznati su da su umešani u sklop i transport MHC I molekula (Ahn K et al., Proc Natl Acad Sci U S A 93, 10990-10995 (1996), Ahn K et al., Imunitet 6, 613-621 (1997.) Jones TR et al., J Virol 69, 4830-4841 (1995); Pande NT et al., J Virol 79, 5786-5798, (2005). Wiertz EJ et al., Cell 84, 769-779 (1996); i Wiertz EJ et al., Nature 384, 432-438 (1996).)
[0006] Svaki od ova četiri molekula uključen je u različitim ključnim tačkama sazrevanja MHC I proteina. US2 vezuje se za novo sintetizovani MHC I tečki lanac (HC) i obrnuto premešta protein kroz kanal translokacije SEC61 nazad u citosol gde se HC razgrađuje proteazom. Slično, US 11 izbacuje MHC I nazad u citoplazmu. US3 i US6 deluju kasnije u procesu sklapanja MHC-I sa US3 zadržavajući u potpunosti formirane heterotrimere u ER čime se sprečava njihov transport na površinu ćelije i US6 sprečavajući peptidni transport od strane TAP, a tako se formira trimerni kompleks HC, β2m i peptida.
[0007] CMV-bazirani vektori koji eksprimiraju heterologne antigene ne indukuju citotoksične T ćelije usmerene protiv imunodominantnih epitopa tih heterolognih antigena. Ovo ograničava efikasnost T ćelija povišenih CMV-baziranom vakcinom da zaštiti protiv infekcije patogenom ili izgradi ćelijski imuni odgovor protiv tumora.
[0008] Međutim, CMV-bazirani vektori koji nemaju virusne inhibitore antigenske prezentacije od strane MHC klase I molekula - CMV bazirani vektori koji imaju štetne mutacije u (uključujući delecija od) svim US2, US3, US6, US8, US10, i US11 (ΔUS2-11 vektori) zaista indukuju T ćelije da reaguju na imunodominantne antigene. (Hansen SG et al., Science 328, 102-106 (2010). Međutim, divlji tip US2, US3, US6, US8, US10, i US11 dodeljuju superinfektivnost u vektorima divljeg tipa CMV. Prema tome, vektori koji imaju štetne mutacije u svim US2, US3, US6, US8, US 10, i US 11 eliminisani su citotoksičnim CD8+ T ćelijama kod osoba prethodno inokulisanih CMV-vektorima ili prirodno inficiranih sa CMV. Zbog velike većine ljudi koji su izloženi na CMV u nekom trenutku njihovih života, CMV bazirani vektori koji imaju štetne mutacije u svim US2, US3, US6, US8, US10, i US11 biće ograničene upotrebe.
[0009] Sposobnost CMV divljeg tipa da superinficira CMV-imune osobe i njegova nesposobnost da indukuje citotoksične CD8+ T ćelije do imunodominantnih epitopa heterolognih antigena smatralo se da je neraskidivo povezano. Imunogenost CMV vektora bila je samo poboljšana po cenu gubitka sposobnosti da superinficiraju.
[0010] Postoji potreba za CMV vektorima koji mogu da superinficiraju CMV-imune osobe i indukuju neki imuni odgovor, na primer, citotoksične CD8+ T ćelije.
SAŽETAK PRONALASKA
[0011] Ovaj pronalazak odnosi se na virusne vektore koji prevazilaze ključne nedostatke u razvoju vakcina na bazi citomegalovirusa (CMV).
[0012] Ovaj pronalazak odnosi se na vektore koji mogu da imaju mutacije (do i uključujući sve delecije) US8, US 10, i US 11 gena, ali koji održavaju funkcionalne homologe US2, US3, i US6. Ovi vektori mogu da budu korisni kod pacijenata sa ranijim CMV imunitetom, i da generišu citotoksični T-ćelijski odgovor na imunodominantne epitope heterolognih antigena.
[0013] Ovaj pronalazak je definisan patentnim zahtevima.
KRATAK OPIS SLIKA
[0014] Detaljan opis koji sledi, dat putem primera, ali bez namere da se ograniči ovaj pronalazak samo na specifične opisane primere izvođenja, može najbolje da se razume u vezi sa pratećim slikama.
FIG.1 pokazuje skup dva linijska dijagrama koji upoređuju ciljanje epitopa CD8+ T ćelije SIVgagspecifičnih odgovora koji nastaju nakon vakcinacije Mamu A*01+, CMV-naivog RM sa wt vs. US2-11 nokaut (KO) RhCMV/gag vektorima. US2-11 KO vektor izaziva odgovore na sve prethodno karakterisane Mamu A*01-ograničene gag epitope, pri čemu wt CMV vektori izazivaju gag-specifične CD8+ T ćelijske odgovore koji ne ciljaju ove epitope (gag = ukupne gag 15merne mešavine).
FIG.2 prikazuje grafikon koji prikazuje prepoznavanje pojedinačnih, uzastopnih gag 15mernih peptida sa 3 svaka Mamu A*01+, CMV-naivnih RM vakcinisanih sa wt vs. US2-11 nokaut (KO) RhCMV/gag vektori. Napomena je da dok i wt i KO vektori izazivaju jasno prepoznavanje CD8+ T ćelijskih gag epitopa, samo KO vektor-izazvani odgovori uključuju prepoznavanje peptida koji sadrže konvencionalne imunodominantne epitope (žuti pravougaonici; epitop označeni na vrhu).
FIG.3 prikazuje RhCMV US2-11 region. MHC-I inhibitori su Rh182, Rh184, Rh185 i Rh189.
Humani CMV homolozi prikazani su dole.
FIGS.4A-4B prikazuje dijagram virusa korišćenih u Primeru 2. Regioni genoma koji su izmenjeni radi stvaranja mutantnog virusa prikazani su ovde detaljno. Svi RhCMV ORF prikazani su kao strelice koje odgovaraju smeru ORF unutar genoma. Plave strelice predstavljaju gene koji regulišu nadole MHC klasu I. Naznačena RhCMV nomenklatura koristi se za sve ORF. Za ORF sa homologijom za HCMV gene, naziv odgovarajućeg HCMV homologa prikazan je u zagradama. Takođe su prikazani SIV imunološki markeri SIVgag i RTN, i mesta rekombinacije LoxP, FRT, i F5 FRT.
FIG.5A prikazuje karakterizaciju rekombinantnih RhCMV pomoću RT-PCR. Fibroblasti su inficirani sa MOI=1 naznačenim virusom i ukupna RNK prikupljena je 24hpi (Δ6-9gag = ΔUS8-11gag). cDNK je sintetirana slučajnim heksamernim prajmiranjem, a transkripti su amplifikovani sa prajmerima specifičnim za ORF naznačene levo. Geni koji flankiraju izbrisane regione uključeni su da bi detektovali moguće promene u transkripciji zbog delecija. WT= divlji tip RhCMV izveden iz bakterijskog veštaškog hromozoma (BAC). RT=reverzna transkriptaza.
FIG.5B prikazuje ekspresiju SIVgag i SIV RTN rekombinantnim virusima. Analiza imunoblota FLAG-obeleženog SIVgag i V5-obeleženog SIV RTN izvedena je u naznačenim vremenima nakon što su fibroblasti inficirani sa MOI=1 i ukupni lizat je prikupljen.
FIG.6A prikazuje pojačan RhCMV-specifični CD4+ T ćelijski odgovor u PBMC i BAL. Pojačanje prethodno postojećih anti-CMV T ćelijskih odgovora su znak superinfekcije dolazećim vektorom. FIG.6B prikazuje razvoj ukupnog SIVgag-specifičnog CD4+ i CD8+ T ćelijskog odgovora u PBMC i BAL. Razvoj novog SIVgag odgovora je dokaz za superinfekciju.
FIG.6C prikazuje razvoj CD8+ T ćelijskog odgovora u PBMC na specifične SIVgag-izvedene peptide koji su poznati Mamu A*01-ograničeni epitopi. Razvoj T ćelijskih odgovora protiv imunodominantnih epitopa je u suprotnosti sa nedostatkom ovih odgovora usled superinfekcije sa RhCMV divljeg tipa koji eksprimira gag (FIG.1).
FIG.7A je linijski dijagram koji prikazuje procenat ćelija u krvi (levo) i BAL (desno) koje reaguju na SIVrtn i SIVgag u RM inokulisanim sa ΔUS8-11RhCMV/rtn i ΔUS8-11RhCMV/gag vektorima tokom vremena nakon inokulacije.
FIG.7B je linijski dijagram koji prikazuje procenat ćelija u krvi (levo) i BAL (desno) koje reaguju na imunodominantne Mamu A*01-ograničene epitope SIVtat(SL8) i SIVgag(CM9) određene protočnom citometrijskom analizom u RM inokulisanom sa ΔUS8-11RhCMV/rtn i ΔUS8-11RhCMV/gag vektorima tokom vremena nakon inokulacije.
FIG.8A je linijski dijagram koji prikazuje procenat ćelija u krvi (levo) i BAL (desno) koje reaguju na SIVrtn i SIVgag u RM inokulisanom sa ΔUS2-6RhCMV/rtn i ΔUS2-6RhCMV/gag vektorima tokom vremena nakon inokulacije.
FIG.8B je linijski dijagram koji prikazuje procenat ćelija u krvi (levo) i BAL (desno) koje reaguju na imunodominantne Mamu A*01-ograničene epitope SIVtat(SL8) i SIVgag(CM9) određene protočnom citometrijskom analizom u RM inokulisanom sa ΔUS2-6RhCMV/rtn i ΔUS2-6RhCMV/gag vektorima tokom vremena nakon inokulacije. Nisu detektovane ćelije koje reaguju.
FIG.9A je šematski prikaz konstrukta RTNΔ189gag.
FIG.9B je fotografija gela koja prikazuje rezultate PCR amplifikacije konstrukata sa FIG.9A što potvrđuje Rh189-deleciju i SIVgag umetanje.
FIG.9C je forografija ispitivanja imunoblota za SIVretanef u naznačenim konstruktima.
FIG.10 je dijagram toka ćelija koje reaguju na RTN i njegov imunodominantni peptid SL8-tat u rezus makakiju inokulisanom sa RhCMV/RTNΔ189gag, što pokazuje da štetna mutacija u US 11 sama je dovoljna da dodeli superinfektivnost i prezentaciju imunodominantnih epitopa.
DETALJAN OPIS PRONALASKA
[0015] Ovaj pronalazak odnosi se na CMV vektor koji može da više puta inficira organizam koji može da obuhvata štetnu mutaciju u glikoproteinu US 11 takvog karaktera da nutacija učini određeni glikoprotein ne-funkcionalnim ili izazove smanjenje u funkciji. Mutacija može da bude bilo koja mutacija, uključujući tačkastu mutaciju, mutaciju pomeranja okvira čitanja, i deleciju manje od celog glikoproteina, deleciju celog glikoproteina, ili deleciju sekvence nukleinske kiseline koja obuhvata sav US8, US10, i US11 i sve interventne sekvence. U daljim primerima, CMV vektor može da obuhvata štetnu mutaciju u US 11, sve do i uključujući deleciju celog US 11 ORF.
[0016] Na primer, FIG.6A, 6B i 6C prikazuju da virusni vektor sa delecijom US8-11 i dalje može da superinficira CMV-pozitivne životinje i da CMV koji nema US8-11 indukuje T ćelijski odgovor na imunodominantne SIV epitope. Dva CMV-pozitivna rezus makakija (RM) (#26597 i #27198) inokulisana su subkutano sa 10<7>PFU rekombinantnog ΔUS8-11gag. Odgovori frekvencije određeni su analizom protočne citometrije bojenja intracelularnog citokina za CD69, TNF-α i interferon-γ upotrebu RhCMV ili preklapanje 15mernih peptida koji odgovaraju SIVgag. Procenat reagujućih, SIVgag specifičnih T ćelija unutar ukupnog memorijskog podskupa prikazan je za svaku vremensku tačku. RhCMV-specifični odgovori izmereni su dodavanjem prečišćenog virusa.
[0017] Mutacije mogu biti nasumične ili usmerene na mesto. Za nasumične mutacije, mogu da se koriste mutageni agensi, određenije alkilirajući mutageni agensi, su dietil sulfat (des), etilenimin (ei), propan sulton, N-metil-N-nitrozouretan (mnu), N-nitrozo-N-metilurea (NMU), N-etil-N-nitrozourea (enu), natrijum azid. Alternativno, mutacije mogu da se indukuju pomoću zračenjem, koje je na primer odabrano od zračenja x-zraka, brzih neutrona, UV.
[0018] Mutacije mogu da se uvedu upotrebom sintetičkih oligonukleotida. Ovi oligonukleotidi sadrže nukleotidne sekvence koje flankiraju željena mesta mutacije. Pogodan postupak opisan je u Morinaga et al. (Biotechnology (1984)2, p 646-649). Drugi postupak uvođenja mutacija u nukleotidne sekvence koje kodiraju enzim opisan je u Nelson i Long (Analytical Biochemistry (1989), 180, p 147-151). Umesto usmerene mutageneze na mesto, kako je gore opisano, jedna može da uvede mutacije nasumično na primer upotrebom komercijalnog kita kao što je GeneMorph PCR kit mutageneze za Stratagene, ili Diversify PCR kit za nasumičnu mutagenezu od Clontech. EP 0583265 odnosi se na postupke optimizovanja PCR bazirane mutageneze, koja takođe može da se kombinuje sa upotrebom mutagenih DNK analoga kao što su oni opisani u EP 0866796. PCR tehnologije koje su sklone greškama pogodne su za proizvodnju varijanata lipid acil transferaza sa željenim karakteristikama.
[0019] Besmislene tehnike kao i usmerene genske manipulacije poznate su za upotrebu u modulaciji genske ekspresije. Ovaj pronalazak tako uključuje upotrebu besmislenih nukleinskih kiselina, koje mogu da inkorporiraju prirodne ili modifikovane nukleotide, ili oba, ribozime, uključujući ribozime u obliku glave čekića, genski nokaut kao što je homolognom rekombinacijom, i ostale tehnike za smanjenje nivoa genske ekspresije.
[0020] RNK interferencija (RNKi) je postupak post-transkripcionog utišavanja gena (PTGS) indukovanog direktnim uvođenjem dvolančane RNK (dsRNK) i nastao je kao korisno sredstvo za nokaut ekspresije specifičnih gena u raznim organizmima. RNKi je opisana od strane Fire et al., Nature 391:806-811 (1998). Ostali postupci PTGS poznati su i uključuju, na primer, uvođenje transgena ili virusa. Uopšteno, u PTGS, transkript utišanog gena sintetiše se, ali se neakumulira jer se brzo dezintegrira. Postupci za PTGS, uključujući RNKi opisani su, na primer, na Ambion.com world wide vebsajtu, u direktorijumu "/hottopics/", u "rnai" fajlu. Pogodni postupci za RNKi in vitro poznati su prosečnom stručnjaku u ovoj oblasti. Jedan takav postupak uključuje uvođenje siRNK (mala interferirajuća RNK). Dosadašnji modeli ukazuju da ove 21-23 nukleotidne dsRNK mogu da indukuju PTGS. Postupci za konstruisanje efikasnih siRNK opisani su, na primer, na Ambion vebsajtu opisanom gore.
[0021] CMV vektori, kada se koriste kao ekspresioni vektori u prirodi su ne-patogeni u odabranim subjektima ko što su ljudi ili su modifikovani kako bi bili ne-patogeni u odabranim subjektima. Na primer, replikacija-defektivni adenovirusi i alfavirusi dobro su poznati i mogu da se koriste kao vektori isporuke gena. Bez US2-11 svi ovi vektori (osim za CMV koji sadrži US2-11 prirodno) izazivaju vektorspecifični imunitet koji zabranjuje njihovo ponovno korišćenje.
[0022] Ovaj pronalazak takođe se odnosi na postupak indukovanja CD8+ T ćelijskog odgovora u subjektu, koji može da obuhvata (a) davanje CMV vektora sa najmanje jednim obrisanim glikoproteinom citomegalovirusa (CMV) iz CMV vektora, pri čemu je glikoprotein US 11, a gde CMV vektor sadrži i eksprimira najmanje jedan heterologni (ne-CMV) antigen i (b) davanje vektora životinji ili ljudskom subjektu.
[0023] Heterologni antigen može da bude izveden iz patogena. Patogen može da bude virusni patogen, a antigen može da bude protein izveden iz virusnog patogena. Virusi uključuju, ali nisu ograničeni na, adenovirus, koksakivirus, hepatitis A virus, poliovirus, rinovirus, Herpes simpleks, tip 1, Herpes simpleks, tip 2, varičela-zoster virus, Epštajn-Barov virus, herpesvirus povezan sa Kapošijevim sarkomom, humani citomegalovirus, humani herpesvirus, tip 8, hepatitis B virus, hepatitis C virus, virus žute groznice, virus denge, virus Zapadnog Nila, humani virus imunodeficijencije (HIV), virus gripa, virus malih boginja, virus zauški, paravirus gripa, respiratorni sincicijalni virus, humani metapneumovirus, humani papilomavirus, virus besnila, virus rubeole, humani bokavirus i Parvovirus B19.
[0024] Patogen može da bude bakterijski patogen, a antigen može da bude protein izveden iz bakterijskog patogena. Patogene bakterije uključuju, ali nisu ograničene na, Bordetella pertussis, Borrelia burgdorferi, Brucella abortus, Brucella canis, Brucella melitensis, Brucella suis, Campylobacter jejuni, Chlamydia pneumoniae, Chlamydia trachomatis, Chlamydophila psittaci, Clostridium botulinum, Clostridium difficile, Clostridium perfringens, Clostridium tetani, Corynebacterium diphtheriae, Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium, Escherichia coli, Francisella tularensis, Haemophilus influenzae, Helicobacter pylori, Legionella pneumophila, Leptospira interrogans, Listeria monocytogenes, Mycobacterium leprae, Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium ulcerans, Mycoplasma pneumoniae, Neisseria gonorrhoeae, Neisseria meningitidis, Pseudomonas aeruginosa, Rickettsia rickettsii, Salmonella typhi, Salmonella typhimurium, Shigella sonnei, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus saprophyticus, Streptococcus agalactiae, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Treponema pallidum, Vibrio cholera i Yersinia pestis.
[0025] Patogen može da bude parazit, a antigen može da bude protein izveden iz patogena parazita. Parazit može da bude protozojski organizam ili bolest izazvana protozojskim organizmom kao što su, ali nisu ograničeni na, Acanthamoeba, Babesiosis, Balantidiasis, Blastocystosis, Coccidia, Dientamoebiasis, Amoebiasis, Giardia, Isosporiasis, Leishmaniasis, primarni ameboidni meningoencefalitis (PAM), malarija, Rhinosporidiosis, Toxoplasmosis - parazitska pneumonija, Trichomoniasis, bolest spavanja i Šagasova bolest. Parazit može da bude helmintni organizam ili crv ili bolest izazvana helmintnim organizmom kao što je, ali bez ograničenja, Ancylostomiasis/kukasti crv, Anisakiasis, valjkasti crv -parazitska pneumonija, valjkasti crv - Baylisascariasis, pantljičara – infekcija pantljičarom, Clonorchiasis, Dioctophyme renalis infekcija, Diphyllobothriasis - pantljičara, gvinejski crv - Dracunculiasis, Echinococcosis - pantljičara, mala dečja glista - Enterobiasis, veliki metilj - Fasciolosis, Fasciolopsiasis -crevni metilj, Gnathostomiasis, Hymenolepiasis, Loa loa filariasis, Calabar oticanje, Mansonelliasis, Filariasis, Metagonimiasis - crevni metilj, rečno slepilo, kineski veliki metilj, Paragonimiasis, Lung metilj, Šistozomijaza - bilharzija, bilharziosis ili pužna groznica (svi tipovi), crevna šistozomijaza, urinarna šistozomijaza, šistozomijaza od strane Schistosoma japonicum, azijska crevna šistozomijaza, Sparganosis, Strongyloidiasis - Parazitska pneumonija, goveđa pantljičara, svinjska pantljičara, Toxocariasis, Trichinosis, Swimmer-ov svrab, crv vlašnjak i Elephantiasis Lymphatic filariasis. Parazit može da bude organizam ili bolest izazvana organizmom kao što je, ali bez ograničenja na, parazitski crv, Halzoun sindrom, Myiasis, Chigoe flea, ljudska muva i Kandiru. Parazit može da bude ektoparazit ili bolest izazvana nekim ektoparazitom kao što je, ali bez ograničenja na, kućne stenice, siva vaš -Pediculosis, telesna vaš - Pediculosis, stidna vaš - Pediculosis, demodeks - Demodicosis, šuga, Screwworm i Cochliomyia.
[0026] Antigen može da bude protein izveden iz kancera. Ovi kanceri, uključuju, ali nisu ograničeni na, akutnu limfoblastnu leukemiju; akutnu mijeloidnu leukemiju; adrenokortikalni karcinom; SIDA-povezane kancere; SIDA-povezan limfom; analni kancer; Appendix kancer; Astrocitom, cerebelarni ili cerebralni u dečijem uzrastu; karcinom bazalnih ćelija; kancer žučnog kanala, ekstrahepatični; kancer bešike; kancer kostiju, Osteosarkom/Maligni fibrozni histiocitom; gliom moždanog stabla; tumor mozga; tumor mozga, cerebelarni astrocitom; tumor mozga, cerebralni astrocitom/maligni gliom; tumor mozga, ependimom; tumor mozga, meduloblastom; tumor mozga, supratentorijalne primitivne neuroektodermalne tumore; tumor mozga, gliom vizuelnih puteva i hipotalamusa; kancer dojke; bronhialne adenome/karcinoide; Burkittov limfom; karcinoidni tumor, u dečijem uzrastu; karcinoidni tumor, gastrointestinalnini; karcinom nepoznatog primarnog; Limfom centralnog nervnog sistema, primarni; cerebelarni astrocitom, u dečijem uzrastu; cerebralni astrocitom/maligni gliom, u dečijem uzrastu; cervikalni kancer; kancere u dečijem uzrastu; hroničnu limfocitnu leukemiju; hroničnu mijeloidnu leukemiju; hronične mijeloproliferativne poremećaje; kancer kolona; limfom kutanih T-ćelija; dezmoplastični tumor malih okruglih ćelija; endometrijalni kancer; ependimom; kancer ezofagusa; Juingov sarkom u Juingovoj porodici tumora; ekstrakranijalni tumor germinativnih ćelija, u dečijem uzrastu; ekstragonadalni tumor germinativnih ćelija; ekstrahepatični kancer žučnih kanala; kancer oka, intraokularni melanom; kancer oka, retinoblastom; kancer žučne kese; gastrični kancer (želudca); gastrointestinalni karcinoidni tumor; gastrointestinalni stromalni tumor (GIST); tumor germinativnih ćelija: ekstrakranijalni, ekstragonadalni, ili ovarijuma; gestacijski trofoblastni tumor; gliom moždanog stabla; gliom, cerebralni astrocitom u dečijem uzrastu; gliom vizuelnih puteva i hipotalamusa u dečijem uzrastu; gastrični karcinoidni; leukemiju vlasastih ćelija; kancer glave i vrata; kancer srca; hepatocelularni (jetre) kancer; Hodžkinov limfom; hipofaringealni kancer; hipotalamski gliom i gliom vizuelnih puteva, u dečijem uzrastu; intraokularni melanom; karcinom ćelija u obliku ostrvaca (endokrini pankreas); Kapošijev sarkom; kancer bubrega (kancer renalnih ćelija); laringealni kancer; leukemije; leukemiju, akutnu limfoblastnu (takođe se naziva akutna limfocitna leukemija); leukemiju, akutnu mijeloidnu (takođe se naziva akutna mijeloidna leukemija); leukemiju, hroničnu limfocitnu (takođe se naziva hronična limfocitna leukemija); leukemiju, hroničnu mijeloidnu (takođe se naziva hronična mijeloidna leukemija); leukemiju, vlasastih ćelija; kancer usne i oralne šuoljine; kancer jetre (primarni); kancer pluća, ne-malih ćelija; Lung kancer, malih ćelija; limfome; limfom, SIDA-povezani; limfom, Burkittov; limfom, kutanih T-ćelija; limfom, Hodžkinov; limfome, ne-Hodžkinov (stara klasifikacija svih limfoma osim Hodžkinovog); limfom, primarnog centralnog nervnog sistema; Marcus Whittle, smrtonosna bolest; makroglobulinemija, Waldenström-ova; maligni fibrozni histiocitom kostiju/osteosarkom; meduloblastom, u dečijem uzrastu; melanom; melanom, intraokularni (očni); karcinom merkelovih ćelija; mezoteliom, maligni kod odraslih; mezoteliom, u dečijem uzrastu; metastatski kancer skvamoznog vrata sa okultno primarnim; kancer usta; multipla endokrina neoplazija sindrom, u dečijem uzrastu; multipli mijelom/neoplazma plazmatičnih ćelija; Mycosis Fungoides; mijelodisplastične sindrome;
mijelodisplastične/mijeloproliferativne bolesti; mijeloidnu leukemiju, hroničnu; mijeloidnu leukemiju, akutnu kod odraslih; mijeloidnu leukemiju, u dečijem uzrastu akutnu; mijelom, multipli (kancer kostijusrži); mijeloproliferativne poremećaje, hronične; kancer nosne šupljine i paranazalnih sinusa; nazofaringealni karcinom; neuroblastom; ne-Hodžkinov limfom; kancer ne-malih ćelija pluća; oralni kancer; orofaringealni kancer; osteosarkom/maligni fibrozni histiocitom kostiju; kancer jajnika; kancer epitela jajnika (površinski epitelijalni-stromalni tumor); tumor germinativnih ćelija jajnika; nisko-maligni potencijalni tumor jajnika; kancer pankreasa; kancer pankreasa, ćelija u obliku ostrvaca; kancer paranazalnog sinusa i nosne šupljine; paratiroidni kancer; kancer penisa; faringealni kancer; feohromocitom; pinealni astrocitom; pinealni germinom; pineoblastom i supratentorijalne primitivne neuroektodermalne tumore, u dečijem uzrastu; adenom hipofize; neoplazija plazmatičnih ćelija/multipli mijelom; pleuropulmonarni blastom; primarni limfom centralnog nervnog sistema; kancer prostate; rektalni kancer; karcinom renalnih ćelija (kancer bubrega); bubrežne karlice i mokraćovoda, kancer prelaznih ćelija; retinoblastom; Rabdomiosarkom, u dečijem uzrastu; kancer pljuvačnih žlezda; sarkom, Juingova porodica tumora; sarkom, Kapošijev; sarkom, mekog tkiva; sarkom, materični; Sézary sindrom; kancer kože (nemelanom); kancer kože (melanom); karcinom kože, merkelovih ćelija; kancer malih ćelija pluća; kancer tankog creva; sarkom mekog tkiva; karcinom skvamoznih ćelija - videti kancer kože (nemelanom); kancer skvamoznog vrata sa okultno primarnim, metastatski; kancer želudca; supratentorijalni primitivni neuroektodermalni tumor, u dečijem uzrastu; limfom T-ćelija, kutani (Mycosis Fungoides i Sézary sindrom); kancer testisa; kancer grla; timom, u dečijem uzrastu; timom i karcinom timusa; tiroidni kancer; tiroidni kancer, u dečijem uzrastu; kancer prelaznih ćelija bubrežne karlice i mokraćovoda; trofoblastni tumor, gestacijski; nepoznatog primarnog mesta, karcinom od, kod odraslih; nepoznatog primarnog mesta, kancer od, u dečijem uzrastu; mokraćovoda i bubrežne karlice, kancer prelaznih ćelija; kancer mokraćovoda; materični kancer, endometrijalni; materični sarkom; vaginalni kancer; gliom vizuelnih puteva i hipotalamusa, u dečijem uzrastu; kancer vulve; Waldenströmovu makroglobulinemiju i Wilmsov tumor (kancer bubrega).
[0027] Prema tome, ovaj pronalazak obezbeđuje CMV sintetički modifikovan da bi u sebi sadržao egzogenu DNK. Kod CMV je obrisan US 11.
[0028] Ovaj pronalazak dalje obezbeđuje vektor za kloniranje ili ekspresiju heterologne DNK koja može da obuhvata rekombinantni CMV.
[0029] Heterologni DNK može da kodira neki proizvod ekspresije koji može da obuhvata: neki epitop od interesa, modulator biološkog odgovora, faktor rasta, sekvencu prepoznavanja, terapeutski gen, ili fuzioni protein.
[0030] Epitop od interesa je njegov antigen ili imunološki aktivan fragment iz patogena ili toksina od interesa za životinje ili ljude.
[0031] Epitop od interesa može da bude antigen patogena ili toksin, ili iz antigena patogena ili toksina, ili drugi antigen ili toksin koji izaziva odgovor u odnosu na patogen, ili iz drugog antigena ili toksina koji izaziva odgovor u odnosu na patogen.
[0032] Epitop od interesa može da bude antigen humanog patogena ili toksin, ili iz antigena humanog patogena ili toksina, ili drugi antigen ili toksin koji izaziva odgovor u odnosu na patogen, ili iz drugog antigena ili toksina koji izaziva odgovor u odnosu na patogen, kao što su, na primer: antigen virusa morbila, npr., antigen virusa malih boginja kao što je HA ili F; glikoprotein besnila, npr., glikoprotein G virusa besnila; antigen gripa, npr., virus gripa HA ili N; antigen herpesvirusa, npr., glikoprotein herpes simpleksa virusa (HSV), humani citomegalovirus (HCMV), Epštajn-Barov; antigen flavivirusa, JEV, antigen virusa žute groznice ili virusa denge; antigen hepatitis virusa, npr., HBsAg; antigen virusa imunodeficijencije, npr., HIV antigen kao što su gp120, gp160; antigen Hantaan virusa; C. tetani antigen; antigen zauški; pneumokokni antigen, npr., PspA; Borrelia antigen, npr., OspA, OspB, OspC od Borrelia povezanih sa lajmskom bolešću kao što su Borrelia burgdorferi, Borrelia atzelli i Borrelia garinii; antigen ovčijih boginja (varičela zoster); ili antigen plazmodijuma.
[0033] Epitop od interesa može da se izvede iz antigena nekog virusa imunodeficijencije kao što su HIV ili SIV. Međutim, epitop od interesa može da bude antigen bilo kog veterinarskog ili humanog patogena ili iz bilo kog antigena bilo kog veterinarskog ili humanog patogena.
[0034] Budući da heterologni DNK može da kodira faktor rasta ili terapeutski gen, rekombinantni CMV može da se koristi u genskoj terapiji. Genska terapija uključuje prenošenje genetičke informacije; a, u odnosu na gensku terapiju i imunoterapiju, upućuje se na U.S. Pat. No.5,252,479, zajedno sa dokumentima koji su u njemu navedeni i na njegovoj prednjoj strani, i na WO 94/16716 i U.S. prijavu Ser. br.08/184,009, podnetu 19. Januara 1994., zajedno sa dokumentima koji su u njoj navedeni. Faktor rasta ili terapeutski gen, na primer, može da kodira protein koji se bori protiv bolesti, molekul za lečenje kancera, supresor tumora, citokin, antigen povezan sa tumorom, ili interferon; a, faktor rasta ili terapeutski gen mogu, na primer, da se odaberu iz grupe koju čine gen-kodirajući alfa-globin, betaglobin, gama-globin, faktor stimulacije granulocitnih makrofagnih kolonija, faktor nekroze tumora, interleukin, faktor stimulacije makrofagnih kolonija, faktor stimulacije granulocitnih kolonija, eritropoietin, faktor rasta mastocita, supresor tumora p53, retinoblastom, interferon, antigen povezan sa melanomom ili B7.
[0035] Ovaj pronalazak dalje obezbeđuje imunogenu kompoziciju, imunološku kompoziciju ili kompoziciju vakcine koja sadrži rekombinantni CMV virus ili vektor, i farmaceutski prihvatljiv nosač ili razblaživač. Neka imunološka kompozicija koja sadrži rekombinantni CMV virus ili vektor (ili njegov proizvod ekspresije) izaziva imunološki odgovor--lokalno ili sistemski. Odgovor može, ali ne mora, da bude zaštitan. Imunogena kompozicija koja sadrži rekombinantni CMV virus ili vektor (ili njegov proizvod ekspresije) isto tako izaziva lokalni ili sistemski imunološki odgovor koji može, ali ne mora, da bude zaštitan. Kompozicija vakcine izaziva lokalni ili sistemski zaštitni odgovor. Prema tome, izrazi "imunološka kompozicija" i "imunogena kompozicija" uključuju "kompoziciju vakcine" (jer dva prethodna izraza mogu da budu zaštitne kompozicije).
[0036] Ovaj pronalazak, prema tome, takođe obezbeđuje postupak indukovanja imunološkog odgovora u domaćinu kičmenjaku koji može da obuhvata davanje domaćinu neke imunogene kompozicije, imunološke kompozicije ili kompozicije vakcine koja može da obuhvata rekombinantni CMV virus ili vektor i farmaceutski prihvatljiv nosač ili razblaživač. Za svrhe ove specifikacije, pojam "subjekat" uključuje sve životinje i ljude, dok "životinja" uključuje sve vrste kičmenjaka, osim ljudi; "kičmenjaci" uključuje sve kičmenjake, uključujući životinje (kao što se "životinja" koristi ovde) i ljude. I, naravno, podskup "životinja" je "sisar", koji za svrhe ove specifikacije uključuje sve sisare, osim ljudi.
[0037] Ovaj pronalazak čak dalje obezbeđuje terapeutske kompozicije koja sadrži rekombinantni CMV virus ili vektor i farmaceutski prihvatljiv nosač ili razblaživač. Terapeutska kompozicija je korisna u primerima izvođenja genske terapije i imunoterapije prema ovom pronalasku, npr., u postupku za prenošenje genetičke informacije na životinju ili čoveka kom je to potrebno, koji može da obuhvata davanje kompozicije domaćinu; a, ovaj pronalazak, prema tome, uključuje postupke za prenošenje genetičke informacije.
[0038] U još nekom drugom primeru izvođenja, ovaj pronalazak obezbeđuje postupak ekspresije proteinskog ili genskog proizvoda ili nekog proizvoda ekspresije, koji može da obuhvata inficiranje ili transfekciju ćelije in vitro sa rekombinantnim CMV virusom ili vektorom prema ovom pronalasku i, opciono, ekstrakciju, prečišćavanje ili izolovanje proteina, genskog proizvoda ili proizvoda ekspresije ili DNK iz ćlije. I, ovaj pronalazak obezbeđuje postupak za kloniranje ili replikaciju heterologne DNK sekvence koja može da obuhvata inficiranje ili transfekciju ćelije in vitro ili in vivo sa rekombinantnim CMV virusom ili vektorom prema ovom pronalasku i opciono ekstrakciju, prečišćavanje ili izolovanje DNK iz ćelijskog ili progenog virusa.
[0039] Ovaj pronalazak u drugom aspektu obezbeđuje postupak za pripremu rekombinantnog CMV virusa ili vektora prema ovom pronalasku koji može da obuhvata umetanje egzogene DNK u neesencijalni region CMV genoma.
[0040] Postupak može dalje da obuhvata brisanje ne-esencijalnog regiona iz CMV genoma, poželjno pre umetanja egzogene DNK.
[0041] Postupak može da obuhvata in vivo rekombinaciju. Tako, postupak može da obuhvata transfekciju ćelije sa CMV DNK u ćelijski kompatibilnom medijumu u prisustvu donorske DNK koja može da obuhvata egzogenu DNK flankiranu od strane DNK sekvenci homolognih sa delovima CMV genoma, pri čemu se egzogena DNK uvodi u genom CMV, i opciono zatim oporavak CMV modifikovanog sa in vivo rekombinacijom.
[0042] Postupak može takođe da obuhvata cepanje CMV DNK da bi se dobila cepana CMV DNK, vezivanje egzogene DNK za cepanu CMV DNK da bi se dobila hibridna CMV-egzogena DNK, transfekciju ćelije sa hibridnom CMV-egzogenom DNK, a opciono zatim oporavak CMV modifikovanog prisustvom egzogene DNK.
[0043] Budući da je in vivo rekombinacija shvaćena, ovaj pronalazak, prema tome, takođe obezbeđuje plazmid koji može da obuhvata donorsku DNK koja se prirodno ne javlja u CMV koji kodira polipeptid stran za CMV, donorska DNK je unutar segmenta CMV DNK koja bi drugačije bila kolinearna sa neesencijalnim regionom CMV genoma tako da je DNK iz ne-esencijalnog regiona CMV flankirala donorsku DNK.
[0044] Egzogena DNK može da se umetne u CMV da bi se generisao rekombinantni CMV u bilo kojoj orjentaciji koja daje stabilnu integraciju te DNK, i njenu ekspresiju, kada je poželjno.
[0045] Egzogena DNK u rekombinantnom CMV virusu ili vektori prema ovom pronalasku može da uključuje promotor. Promotor može da bude iz herpes virusa. Na primer, promotor može da bude promotor citomegalovirusa (CMV), kao što je humani CMV (HCMV) ili mišji CMV promotor. Promotor može takođe da bude ne-virusni promotor kao što je EF1α promotor.
[0046] Promotor može da bude skraćeni transkripcioni aktivni promotor koji može da obuhvata region transaktiviran sa transaktivirajućim proteinom obezbeđenim virusom i najmanjim regionom promotora celom dužinom promotora iz kog je skraćeni transkripcioni aktivni promotor izveden. Za svrhe ove specifikacije, "promotor" se sastoji od asocijacije DNK sekvenci koje odgovaraju najmanjem promotoru i uzvodno regulatornim sekvencama; "najmanji promotor" sastoji se od CAP mesta plus TATA kutije (najmanje sekvence za osnovni nivo transkripcije; neregulisani nivo transkripcije); i, "uzvodno regulatorne sekvence" sastoje se od uzvodnog elementa(ata) i poboljšivač sekvence(i). Dalje, pojam "skraćen" označava da celom dužinom promotor nije kompletno prisutan, tj., da je neki deo uklonjen celom dužinom promotora. I, skraćen promotor može da se izvede iz herpesvirusa kao što je MCMV ili HCMV, npr., HCMV-IE ili MCMV-IE.
[0047] Kao prethodno navedeni promotor, inventivni promotor može da bude herpesvirus, npr., MCMV ili HCMV kao što je MCMV-IE ili HCMV-IE promotor; a, može biti do 40% i čak do 90% smanjenja u veličini, iz cele dužine promotora, na osnovu parova baza. Promotor može takođe da bude modifikovan ne-virusni promotor.
[0048] Tako, ovaj pronalazak takođe obezbeđuje ekspresionu kaseta za umetanje u rekombinantni virus ili plazmid koji može da obuhvata skraćeni transkripcioni aktivni promotor. Ekspresiona kaseta može dalje da uključuje funkcionalni skraćeni signal poliadenilacije; na primer, SV40 signal poliadenilacije koji je skraćen, ali funkcionalan. Uzimajući u obzir da priroda obezbeđuje veći signal, zaista je iznenađujuće da je skraćeni signal poliadenilacije funkcionalan; a, skraćen signal poliadenilacije rešava probleme ograničenja veličine umetaka rekombinantnih virusa kao što je CMV. Ekspresiona kaseta može takođe da uključuje egzogenu ili heterolognu DNK u odnosu na virus ili sistem u koji se umeće; a ta DNK može da bude egzogena ili heterologna DNK kao što je opisano ovde.
[0049] U specifičnijem aspektu, ovaj pronalazak obuhvata CMV, rekombinante koji mogu da obuhvataju virusne ili ne-virusne promotore, poželjno skraćeni promotor iz njega. Ovaj pronalazak dalje razmatra antitela izazvanih inventivnim kompozicijama i/ili rekombinantima i upotrebe takvih antitela. Antitela, ili proizvod (epitopi od interesa) koji ih izaziva, ili monoklonalna antitela iz antitela, mogu da se koriste u testovima vezivanja, testovima ili kitovima za određivanje prisustva ili odsustva nekog antigena ili antitela.
[0050] Flankirajuća DNK korišćena u ovom pronalasku može da bude iz mesta umetanja ili dela genoma koji mu je susedan (gde "susedan" uključuje granične sekvence, npr., kodon ili kodone, kao i do tolike sekvence, npr., kodon ili kodone, ispred interventnog mesta umetanja).
[0051] Egzogena ili heterologna DNK (ili DNK strana CMV, ili DNK koja se prirodno ne javlja u CMV) može da bude DNK koja kodira bilo koji od gore navedenih epitopa od interesa, kao što je gore navedeno. Egzogena DNK može da uključuje marker, npr., boju ili svetlosni marker. Egzogena DNK može takođe kodira za proizvod koji bi bio štetan za domaćin insekata tako da proizvod ekspresije može da bude pesticid ili insekticid. Egzogena DNK takođe može da kodira za anti-fungalni polipeptid; i, za informaciju o takvom polipeptidu i DNK za njega, upućuje se na U.S. Pat. No.5,421,839 i dokumenta koja su u njemu navedena.
[0052] Heterologna ili egzogena DNK u rekombinantima prema ovom pronalasku poželjno kodira proizvod ekspresije koji može da obuhvata: neki epitop od interesa, modulator biološkog odgovora, faktor rasta, sekvencu prepoznavanja, terapeutski gen, ili fuzioni protein. U odnosu na ove izraze, upućuje se na sledeće opise, a uopšteno na Kendrew, THE ENCYCLOPEDIA OF MOLECULAR BIOLOGY (Blackwell Science Ltd 1995) i Sambrook, Fritsch, Maniatis, Molecular Cloning, A LABORATORY MANUAL (2d Edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989).
[0053] Što se tiče antigena za upotrebu u vakcini ili imunološkim kompozicijama, videti takođe Stedman's Medical Dictionary (24th edition, 1982), npr., definiciju vakcinu (za listu antigena korišćenih u formulacijama vakcine; takvi antigeni ili epitopi od interesa iz tih antigena mogu da se koriste u ovom pronalasku, kao ili proizvod ekspresije inventivnog rekombinantnog virusa, ili u multivalentnoj kompoziciji koja sadrži inventivni rekombinantni virus ili neki njegov proizvod ekspresije).
[0054] Što se tiče epitopa od interesa, prosečan stručnjak u ovoj oblasti može da odredi epitop ili imunodominantni region peptida ili polipeptida i ergo kodiranje DNK za njega na osnovu aminokiseline i odgovarajućih DNK sekvenci peptida ili polipeptida, kao i iz prirode posebnih aminokiselina (npr., veličina, naelektrisanje, itd.) i rečnika kodona, bez nepotrebnog eksperimentisanja.
[0055] Opšti postupak za određivanje koji delovi proteina da se koriste u imunološkoj kompoziciji fokusiran je na veličini i sekvenci antigena od interesa. "Uopšteno, veliki proteini, zato što imaju više potencijalnih determinanata, bolji su antigeni nego oni mali. Što je više stran antigen, to jest manje sličan samostalnim konfiguracijama koje izazivaju toleranciju, on je efikasniji u izazivanju imunog odgovora." Ivan Roitt, Essential Immunology, 1988.
[0056] Što se tiče veličine: stručan praktikant može da maksimizira veličinu proteina kodiranog DNK sekvencom koja se umeće u virusni vektor (imajući na umu ograničenja pakovanja vektora). Radi minimiziranja DNK ubačene dok se maksimizira veličina proteina eksprimiranog, DNK sekvenca može da isključi introne (regione gena koji su transkribovani ali koji su naknadno izrezani iz primarnog RNK transkripta).
[0057] Minimalno, DNK sekvenca može da kodira za peptid dug najmanje 8 ili 9 aminokiselina. Ovo je minimalna dužina koje peptid treba da bude da bi se stimulisao CD8+ T ćelijski odgovor (koji prepoznaje virusom inficirane ćelije ili kancerogene ćelije). Minimalna dužina peptida od 13 do 25 aminokiselina korisna je za stimulaciju CD4+ T ćelijskog odgovora (koji prepoznaje specijalne antigen predstavljajuće ćelije koje su zahvatile patogen). Videti Kendrew, supra. Međutim, kako su ovo minimalne dužine, ovi peptidi verovatno će da generišu neki imunološki odgovor, tj., neko antitelo ili T ćelijski odgovor; ali, za zaštitni odgovor (kao iz kompozicije vakcine), poželjan je duži peptid.
[0058] U odnosu na sekvencu, DNK sekvenca poželjno kodira najmanje regione peptida koji generišu neki odgovor antitela ili T ćelijski odgovor. Jedan postupak za određivanje T i B ćelijskih epitopa uključuje mapiranje epitopa. Protein od interesa "je fragmentiran u preklapajuće peptide proteolitičkim enzimima ili preklapajući peptidi se generišu sintezom oligopeptida. Pojedinačni peptidi zatim se testiraju na njihovu sposobnost da se vežu za neko antitelo izazvano prirodnim proteinom ili da indukuju aktivaciju T ćelija ili B ćelija. Ovaj pristup naročito je koristan u mapiranju T-ćelijskih epitopa, budući da T ćelija prepoznaje kratke linearne peptide u kompleksu sa MHC molekulima (videti FIG.2). Postupak je manje efikasan za određivanje B-ćelijskih epitopa" budući da B ćelijski epitopi često nisu linearne aminokiselinske sekvence već su pre rezultat tercijarne strukture savijenog trodimenzionalnog proteina. Janis Kuby, Immunology, (1992) pp.79-80.
[0059] Drugi postupak za određivanje epitopa od interesa je da se odaberu regioni proteina koji su hidrofilni. Hidrofilni ostaci često su na površini proteina a, prema tome, često su regioni proteina koji su dostupni antitelu. Janis Kuby, Immunology, (1992) p.81.
[0060] Čak neki drugi postupak za određivanje epitopa od interesa jeste izvođenje kristalografske analize X-zracima kompleksa antigen (cele dužine)-antitelo. Janis Kuby, Immunology, (1992) p.80.
[0061] Još neki drugi postupak za odabir epitopa od interesa koji može da generiše T ćelijski odgovor je da se identifikuje iz potencijalnih HLA motiva vezivanja sidrenjem proteinske sekvence koji su peptidne sekvence za koje je poznato da se vezuju za MHC molekul.
[0062] Peptid koji je putativni epitop od interesa, za generisanje T ćelijskog odgovora, treba da bude prisutan u MHC kompleksu. Peptid poželjno sadrži odgovarajuće motive sidrenja za vezivanje za MHC molekule, a treba da se veže sa dovoljno visokim afinitetom da bi se generisao imuni odgovor. Faktori koji se mogu uzeti u obzir su: HLA tip pacijenta (kičmenjak, životinja ili ćovek) za kog se očekuje da će se imunizovati, sekvenca proteina, prisustvo odgovarajućih motiva sidrenja i pojava peptidne sekvence u ostalim životnim želijama.
[0063] Imuni odgovor se generiše, uopšteno, kako sledi: T ćelije prepoznaju proteine samo kad je protein iscepan u manje peptide i prisutan u kompleksu koji se naziva "glavni kompleks histokompatabilnosti (MHC)" smešten na drugoj ćelijskoj površini. Postoje dve klase MHC kompleksa--klasa I i klasa II, a svaku klasu čine mnoge različite alele. Različite vrste, i pojedinačni subjekti imaju različite tipove alela MHC kompleksa; kaže se da imaju različiti HLA tip.
[0064] MHC kompleksi klase I nalaze se na prakično svakoj ćeliji i predstavljaju peptide iz proteina proizvedenih unutar ćelije. Tako, MHC kompleksi klase I korisni su za ubijanje ćelija koje kada s inficirane virusima ili koje će postati kancerne i kao rezultat ekspresije onkogena. T ćelije koje imaju protein koji se naziva CD8 na njihovoj površini, vezuju se za ćelije MHC klase I i izlučuju limfokine. Limfokini stimulišu odgovor; ćelije stižu i ubijaju virusom inficiranu ćeliju.
[0065] MHC kompleksi klase II nalaze se samo na ćelijama koje ispoljavaju antigen i koriste se da ispolje peptide iz cirkulacionih patogena koji su endocitozirani ćelijama koje ispoljavaju antigen. T ćelije koje imaju protein koji se naziva CD4 vezuju se za MHC ćelije klase II i ubijaju ćeliju egzocitozom litičkih granula.
[0066] Neke smernice u određivanju da li je protein epitop od interesa koji će stimulisati T ćelijski odgovor, uključuju: dužinu peptida--peptid treba da bude najmanje 8 ili 9 aminokiselina dug da se smesti u MHC kompleks klase I i najmanje 13-25 aminokiselina dug da se smesti u MCH kompleks klase II. Ova dužina je minimalna za peptid da se veže za MHC kompleks. Poželjno je za peptide da budu duži od ovih dužina jer ćelije mogu da seku eksprimirane peptide. Peptid treba da sadrži odgovarajući motiv sidrenja koji će omogućiti da se veže za različite molekule klase I ili klase II sa dovoljno visokom specifičnošću da bi se generisao imuni odgovor (videti Bocchia, M. et al., Specific Binding of Leukemia Oncogene Fusion Protein Peptides to HLA Class I Molecules, Blood 85:2680-2684; Englehard, V H, Structure of peptides associated with class I and class II MHC molecules, Ann. Rev. Immunol.12:181 (1994)). Ovo se može izvesti, bez nepotrebnog eksperimentisanja, upoređivanjem sekvence proteina od interesa sa objavljenim strukturama peptida povezanih sa MHC molekulima. Proteinski epitopi prepoznati od strane T ćelijskih receptora su peptidi generisani enzimskom razgradnjom proteinskog molekula i ispoljeni su na ćelijskoj površini zajedno sa MHC molekulima klase I ili klase II.
[0067] Dalje, stručan praktikant može da utvrdi neki epitop od interesa upoređivanjem proteinske sekvence sa sekvencama datim u bazi podataka proteina. Regioni proteina koji dele malo ili nimalo homologije bolji su izbori za epitop tog proteina a, prema tome, korisni su u vakcini ili imunološkoj kompoziciji. Regioni koji dele veliku homologiju sa široko ustanovljenim sekvencama prisutnim u životnim ćelijama treba da se izbegnu.
[0068] Čak dalje, neki drugi postupak je jednostavan za generisanje ili ekspresiju delova proteina od interesa, generisanje monoklonalnih antitela za te delove proteina od interesa, a zatim utvrđivanje da li ta antitela inhibiraju rast in vitro patogena iz kog je dobijen protein. Stručan praktikant može da koristi ostale smernice prethodno navedene u ovom opisu i u ovoj oblasti za generisanje ili eksprimiranje delova proteina od interesa za analizu da li će antitela za to da inhibiraju rast in vitro. Na primer, stručan praktikant može da generiše delove proteina od interesa pomoću: odabira delova proteina dužine 8 do 9 ili 13 do 25 aminokiselina, odabira hidrofilnih regiona, odabira delova koji su pokazali da se vezuju iz podataka iz X-zračenja kompleksa antigen (cele dužine)-antitelo, odabira regiona koji se razlikuju u sekvenci od ostalih proteina, odabira potencijalnih HLA motiva vezivanja sidrenjem, ili bilo koje kombinacije ovih postupaka ili drugih postupaka poznatih u ovoj oblasti.
[0069] Epitopi prepoznati pomoću antitela eksprimiraju se na površini proteina. Da bi se odredili regioni proteina koji će verovatno stimulisati odgovor antitela, prosečan stručnjak u ovoj oblasti može poželjno da izvede mapiranje epitopa, korišćenjem opštih postupaka opisanih gore, ili drugih postupaka mapiranja poznatih u ovoj oblasti.
[0070] Kao što se može videti iz prethodno navedenog, bez nepotrebnog eksperimentisanja, iz ovog opisa i znanja u ovoj oblasti, stručan praktikant može da utvrdi aminokiselinu i odgovarajuću DNK sekvencu epitopa od interesa za dobijanje odgovora T ćelije, B ćelije i/ili antitela. Dodatno, upućuje se na Gefter et al., U.S. Pat. No.5,019,384, objavljen 28. Maja, 1991, i dokumenta koja navodi, (Napominje se posebno "Relevantna literatura" odeljak ovog patenta, i stubac 13 ovog patent koja opisuje da: "Veliki broj epitopa definisan je za širok spektar organizama od interesa. Od posebnog interesa su oni epitopi na koja su usmerena neutrališuća antitela.")
[0071] Kada je u pitanju ekspresija modulatora biološkog odgovora, upućuje se na Wohlstadter, "Selection Methods," WO 93/19170, objavljena 30. Sep.1993., i dokumenta koja su u njoj navedena.
[0072] Na primer, modulator biološkog odgovora moduliše biološku aktivnost; na primer, modulator biološkog odgovora je modulatorna komponenta kao što je protein visoke molekulske mase povezan sa ne-NMDA ekscitatornim aminokiselinskim receptorima i koji alosterno reguliše afinitet AMPA vezivanja (videti Kendrew, supra). Rekombinanti ovog pronalaska mogu da eksprimiraju takav protein visoke molekulske mase.
[0073] Uopštenije, priroda je obezbedila brojne precedente modulatora biološkog odgovora.
Modulacija aktivnosti može se izvesti mehanizmima tako komplikovano i složeno kao alosterno indukovana kvaternarna promena na jednostavne sisteme pristunosti/odsutnosti, npr., ekspresije/razgradnje. Zaista, represija/aktivacija ekspresija mnogih bioloških molekula je sama po sebi posredovana molekulima čije aktivnosti mogu da se moduliraju raznim mehanizmima.
[0074] Tabela 2 iz Neidhardt et al., Physiology of the Bacterial Cell (Sinauer Associates Inc., Publishers, 1990), na stranici 73, daje listu hemijskih modifikacija za bakterijske proteine. Kao što je dato u tabeli, neke modifikacije uključene su u odgovarajući sklop a druge modifikacije nisu, ali u svakom slučaju takve modifikacije mogu da izazovu modulaciju funkcije. Iz tabele, analogne hemijske modulacije za proteine drugih ćelija mogu da se odrede, bez nepotrebnog eksperimentisanja.
[0075] U nekim slučajevima, modulacija bioloških funkcija može da bude posredovana jednostavno odgovarajućom/neodgovarajućom lokalizacijom molekula. Molekuli mogu da funkcionišu da obezbede prednost ili nedostatak rasta samo ako su ciljani na posebne lokacije. Na primer, molekul može obično da ne bude uzet ili korišćen od strane ćelije, kao funkcija toga da se molekul prvo dezintegrira ćelijom sekrecijom nekog enzima za degradaciju. Tako, proizvodnja enzima od strane rekombinanata može da reguliše upotrebu ili unos molekula od strane. Slično, rekombinanti mogu da eksprimiraju molekul koji se vezuje za enzim potreban za unos ili upotrebu molekula, čime se slično reguliše njegov unos ili upotreba.
[0076] Ciljanje lokalizacije proteina izvodi se cepanjem signalnih peptida koji je drugi tip modulacije ili regulacije. U ovom slučaju, specifična katalitička aktivnost endoproteaze može da se eksprimira rekombinantima.
[0077] Ostali primeri mehanizama kroz koje se može pojaviti modulacija funkcije su poli-proteini RNK virusa, alosterni efekti, i opšta kovalentna i nekovalentna sterička prepreka. HIV je dobro proučavan primer nekog RNK virusa koji eksprimira ne-funkcionalne poli-proteinske konstrukte. U HIV "gag, pol, i env poli-proteini obrađuju se da daju, respektivno, virusne strukturne proteine p17, p24, i p15--reverzna transkriptaza i integrazu i dva omotna proteina gp41 i gp120" (Kohl et al., PNAS USA 85:4686-90 (1988)). Pravilno cepanje poli-proteina je ključno za replikaciju virusa, a virioni koji nose neaktivnu mutantnu HIV proteazu su ne-infektivni. Ovo je drugi primer fuzije proteina koji modulira nadole njihovu aktivnost. Tako, moguće je da se izgrade rekombinantni virusi koji eksprimiraju molekule koji posreduju sa endoproteazama, ili koji obezbeđuju endoproteaze, za inhibiranje ili poboljšanje prirodne ekspresije određenih proteina (posredovanjem ili poboljšanjem cepanja).
[0078] Funkcionalna korisnost enzima može takođe da se modulira izmenom njihove sposobnosti da katalizuju reakciju. Ilustrativni primeri moduliranih molekula su zimogeni, formiranje/disocijacija višepodjediničnih funkcionalnih kompleksa, RNK virusni poli-proteinski lanci, alosterne interakcije, opšta sterička prepreka (kovalentna i nekovalentna) i razne hemijske modifikacije kao što su fosforilacija, metilacija, acetilacija, adenilacija, i uridenilacija (videti Tabelu 1 iz Neidhardt, supra, na stranici 315 i Tabelu 2 na stranici 73).
[0079] Zimogeni su primeri proteinskih fuzija koje se javljaju u prirodi koje uzrokuju modulaciju enzimske aktivnosti. Zimogeni su jedna klasa proteina koja se konvertuje u njihovo aktivno stanje ograničenom proteolizom. Videti Tabelu 3 iz Reich, Proteases and Biological Control, Vol.2, (1975) na stranici 54). Priroda je razvila mehanizam modulacije nadole aktivnosti određenih enzima, kao što je tripsin, ekspresijom ovih enzima sa dodatnim "vodećim" peptidnim sekvencama na njihovim amino terminima. Sa ekstra peptidnom sekvencom, enzim je u stanju neaktivnog zimogena. Usled cepanja ove sekvence, zimogen se konvertuje u svoje enzimski aktivno stanje. Ukupne brzine reakcije zimogena su "oko 10.sup.5 - 10.sup.6 puta manje od onih odgovarajućeg enzima" (videti Tabelu 3 iz Reich, supra na stranici 54).
[0080] Prema tome, moguće je da se modulira nadole funkcija određenih enzima jednostavno dodavanjem peptidne sekvence jednom od njegovih termina. Na primer, sa znanjem o ovoj osobini, rekombinanti mogu da eksprimiraju peptidne sekvence koje sadrže dodatne aminokiseline na jednom ili oba termina.
[0081] Formiranje ili disocijacija više-podjediničnih enzima je drugi način putem kog se modulacija može javiti. Različiti mehanizmi mogu da budu odgovorni za modulaciju aktivnosti usled formiranja ili disocijacije više-podjediničnih enzima.
[0082] Prema tome, steričko ometanje pravilnih specifičnih interakcija podjedinica moduliraće nadole katalitičku aktivnost. I, prema tome, rekombinanti prema ovom pronalasku mogu da eksprimiraju molekul koji sterično ometa enzim ili enzimski kompleks koji se prirodno javlja, tako da modulira biološke funkcije.
[0083] Određeni inhibitori enzima pružaju dobre primere modulacije nadole kovalentnom steričkom preprekom ili modifikacijom. Suicidni supstrati koji se nepovratno vezuju za aktivno mesto nekog enzima na katalitički važnoj aminokiselini u aktivnom mestu su primeri kovalentnih modifikacija koje sterično blokiraju mesta enzimske aktivnosti. Primer suicidnog supstrata je TPCK za himotripsin (Fritsch, Enzyme Structure and Mechanism, 2d ed; Freeman & Co. Publishers, 1984). Ovaj tip modulacije je moguć rekombinantnim eksprimiranjem pogodnog suicidnog supstrata, kako bi se time modulirali biološki odgovori (npr., ograničenjem enzimske aktivnosti).
[0084] Takođe, postoje primeri nekovalentne steričke prepreke koji uključuju mnoge represorne molekule. Rekombinanti mogu da eksprimiraju represorne molekule koji mogu da sterički ometaju i tako moduliraju nadole funkciju DNK sekvence sprečavanjem određenih DNK-RNK polimerazne interakcije.
[0085] Alosterni efekti su drugi način na koji se izvodi modulacija u nekim biološkim sistemima.
Aspartat transkarbamoilaza je dobro karakterizovan alosterni enzim. U interakciji sa katalitičkim subjedinicama su regulatorni domeni. Usled vezivanja za CTP ili UTP, regulatorne subjedinice mogu da indukuju promenu kvaternarne strukture u holoenzimu izazivajući modulaciju nadole katalitičke aktivnosti. Nasuprot tome, vezivanje ATP za regulatorne podjedinice može da izazove modulaciju nagore katalitičke aktivnosti (Fritsch, supra). Upotrebom postupaka prema ovom pronalasku, molekuli mogu da se eksprimiraju a koji imaju sposobnost vezivanja i izazivanja modulatornih kvaternarnih ili tercijarnih promena.
[0086] Dodatno, razne hemijske modifikacije, npr., fosforilacija, metilacija, acetilacija, adenilacija i uridenilacija mogu da se izvode tako da moduliraju funkciju. Poznato je da modifikacije kao što su ove imaju važne uloge u regulaciji mnogih važnih ćelijskih komponenata. Tabela 2 iz Neidhardt, supra, na stranici 73, daje listu različitih bakterijskih enzima koji podležu takvim modifikacijama. Iz te liste, prosečan stručnjak u ovoj oblasti može da utvrdi ostale enzime drugih sistema koji podležu istim ili sličnim modifikacijama, bez nepotrebnog eksperimentisanja. Dodatno, mnogi proteini koji su umešani u humanu bolest takođe podležu takvim hemijskim modifikacijama. Na primer, otkriveno je da se mnogi onkogeni modifikuju fosforilacijom ili da se modifikuju drugi proteini fosforilacijom ili defosforilacijom. Prema tome, sposobnost koju pruža ovaj pronalazak da se eksprimiraju modulatori koji mogu da modifikuju ili izmene funkciju, npr., fosforilacija, je od značaja.
[0087] Iz prethodno navedenog, stručan praktikant može da koristi ovaj pronalazak da eksprimira modulator biološkog odgovora, bez bilo kakvog nepotrebnog eksperimentisanja.
[0088] U odnosu na ekspresiju fuzionih proteina inventivnim rekombinantima, upućuje se na Sambrook, Fritsch, Maniatis, Molecular Cloning, A LABORATORY MANUAL (2d Edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989) (naročito tom 3), i Kendrew, supra. Učenja iz Sambrook et al., mogu da se pogodno prilagode, bez nepotrebnog eksperimentisanja, iz ovog opisa, za stručnog praktikanta da generiše rekombinante koji eksprimiraju fuzione proteine.
[0089] Što se tiče genske terapiji i imunoterapije, upućuje se na U.S. Pat. Nos.4,690,915 i 5,252,479 zajedno sa dokumentima koji su u njima navedeni i na prvoj strani, i na WO 94/16716 i U.S. prijavu Ser. No.08/184,009, podnetu 19. Jan.1994., zajedno sa dokumentima koji su u njoj navedeni.
[0090] Faktor rasta može da se definiše kao multifunkcionalni, lokalno delujući međućelijski signalizirajući peptidi koji kontrolišu i ontogenetsko razviće i održavanje tkiva i funkcije (videti Kendrew, naročito na stranici 455 et seq.).
[0091] Faktor rasta ili terapeutski gen, na primer, može da kodira protein koji se bori protiv bolesti, molekul za lečenje kancera, supresor tumora, citokin, antigen povezan sa tumorom, ili interferon; a, faktora rasta ili terapeutski gen može, na primer, da se odabere iz grupe koju čine gen-kodirajući alfaglobin, beta-globin, gama-globin, faktor stimulacije granulocitnih makrofagnih kolonija, faktor nekroze tumora, interleukin (npr., interleukin odabran od interleukina 1 do 14, ili 1 do 11, ili bilo koje njihove kombinacije), faktor stimulacije makrofagnih kolonija, faktor stimulacije granulocitnih kolonija, eritropoietin, faktor rasta mastocita, supresor tumora p53, retinoblastom, interferon, antigen povezan sa melanomom ili B7. U.S. Pat. No.5,252,479 obezbeđuje listu proteina koja mogu da se eksprimiraju u adenovirusnom sistemu za gensku terapiju, a stručan praktikant se upućuje na taj opis. WO 94/16716 i U.S. prijava Ser. No.08/184,009, podneta 19. Jan.1994., obezbeđuje gene za citokine i antigene povezane sa tumorom i postupke imunoterapije, uključujući ex vivo postupke, a stručan praktikant upućuje se na ove opise.
[0092] Tako, prosečan stručnjak u ovoj oblasti može da kreira rekombinante koji eksprimiraju faktor rasta ili terapeutski gen i koriste rekombinante, iz ovog opisa i znanja u ovoj oblasti, bez nepotrebnog eksperimentisanja.
[0093] Štaviše, iz prethodno navedenog i znanja u ovoj oblasti, nije potrebno nepotrebno eksperimentisanje za stručnog praktikanta da konstruiše inventivne rekombinante koji eksprimiraju neki epitop od interesa, modulator biološkog odgovora, faktor rasta, sekvencu prepoznavanja, terapeutski gen, ili fuzioni protein; ili za stručnog praktikanta da koristi takve rekombinante.
[0094] Podrazumeva se da egzogena ili heterologna DNK može sama po sebi da uključuje promotor za vođenje ekspresije u rekombinantnom CMV, ili egzogena DNK može jednostavno da bude kodirajuća DNk i da se na odgovarajući način smesti nizvodno od CMV-endogenog promotora da vodi ekspresiju. Dalje, višestruke kopije kodirajuće DNK ili upotreba snažnog ili ranog promotora ili ranog i kasnog promotora, ili bilo koje njihove kombinacije, može se izvesti tako da se pojača ili poveća ekspresija. Tako, egzogena ili heterologna DNK može da bude pogodno postavljena u odnosu na CMV-endogeni promotor, ili ovi promotori mogu da se pomere sa mesta da bi se umetnuli na druge lokacije, sa egzogenom ili heterolognom DNK. Kodirajuća DNK može da bude DNK koja kodira za više od jednog proteina tako da ima ekspresiju više od jednog proizvoda iz rekombinantnog CMV.
[0095] Proizvodi ekspresije mogu da budu antigeni, imunogeni ili epitopi od interesa; a, prema tome, ovaj pronalazak dalje se odnosi na imunološke kompozicije, antigene kompozicije ili kompozicije vakcine koje sadrže proizvode ekspresije. Dalje, budući da CMV vektor može, u određenim slučajevima, da se daje direktno pogodnom domaćinu, ovaj pronalazak odnosi se na kompozicije koje sadrže CMV vektor. Dodatno, budući da proizvod ekspresije može da se izoluje iz CMV vektora in vitro ili iz ćelija inficiranih ili transfektovanih CMV vektorom in vitro, ovaj pronalazak odnosi se na postupke za ekspresiju proizvoda, npr., koji mogu da obuhvataju ubacivanje egzogene DNK u CMV kao vektor, npr., ograničenjem/ligacijom ili rekombinacijom praćenom infekcijom ili transfekcijom odgovarajućih ćelija in vitro sa rekombinantnim CMV, a opciono ekstrakciju, prečišćavanje ili izolovanje proizvoda ekspresije iz ćelija. Mogu da se koriste bilo koje pogodne tehnike ekstrakcije, prečišćavanje ili izolovanja.
[0096] Posebno, nakon inficiranja ćelija sa rekombinantnim CMV, protein(i) iz ekspresije egzogene DNK prikupljaju se poznatim tehnikama kao što je hromatografija (videti Robbins, EPA 0162738A1; Panicali, EPA 0261940A2); Richardson, supra; Smith et al., supra; Pennock et al., supra; EP Patent Publication No.
0265785). Prikupljeni protein(i) potom mogu da se koriste u kompoziciji vakcine, antigenoj ili imunološkoj kompoziciji koja takođe sadrži pogodan nosač.
[0097] Tako, rekombinantni CMV može da se koristi da se pripreme proteini kao što su antigeni, imunogeni, epitopi od interesa, itd. koji mogu dalje da se koriste u imunološkim kompozicijama, antigenim kompozicijama ili kompozicijama vakcine. Naznačeno je da rekombinantni CMV koji eksprimira proizvod štetan za rast ili razvoj insekata može da se koristi za pripremu insekticida, a rekombinantni CMV koji eksprimira neki proizvod štetan za rast biljaka može da se koristi za pripremu herbicida (izolovanjem proizvoda ekspresije i njegovim umešavanjem sa nekim insekticidalnim ili herbicidalnim prihvatljivim nosačem ili razblaživačem) i rekombinantni CMV koji eksprimira neki antifungalni polipeptid može da se koristi za pripremu anti-fungalnog preparata (izolovanjem proizvoda ekspresije i njegovim umešavanjem sa pogodnim nosačem ili razblaživačem).
[0098] Budući da proizvodi ekspresije mogu da obezbede antigeni, imunološki ili zaštitni (vakcina) odgovor, ovaj pronalazak dalje se odnosi na proizvode od njih; naime, antitela i njihove upotrebe. Određenije, proizvodi ekspresije mogu da izazovu antitela. Antitela mogu da se formiraju u monoklonalna antitela; i, antitela ili proizvodi ekspresije mogu da se koriste u kitovima, testovima, ispitivanjima, i slično koji uključuju vezivanje, tako da se ovaj pronalazak odnosi na ove upotrebe, takođe. Dodatno, budući da rekombinanti prema ovom pronalasku mogu da se koriste za replikaciju DNK, ovaj pronalazak odnosi se na rekombinantni CMV kao vektor i postupke za replikaciju DNK inficiranjem ili transfekcijom ćelija sa rekombinantom i prikupljanja DNK odatle. Dobijena DNK može da se koristi kao probe ili prajmeri ili za amplifikaciju.
[0099] Procedura davanja za rekombinantni CMV ili njegov proizvod ekspresije, kompozicija prema ovom pronalasku kao što su imunološke kompozicije, antigene kompozicije ili kompozicije vakcine ili terapeutske kompozicije može da bude parenteralnim putem (intradermalno, intramuskularno ili subkutano). Takvo neko davanje omogućava sistemski imuni odgovor. Davanje može da bude mukoznim putem, npr., oralno, nazalno, genitalno, itd. Takvo neko davanje omogućava lokalni imuni odgovor.
[0100] Uopštenije, inventivne antigene kompozicije, imunološke kompozicije ili kompozicije vakcine ili terapeutske kompozicije (kompozicije koje sadrže CMV rekombinante prema ovom pronalasku ili proizvode ekspresije) mogu da se pripreme u skladu sa standardnim tehnikama dobro poznatim prosečnim stručnjacima u farmaceutskim oblastima. Takve kompozicije mogu da se daju u dozama i tehnikama dobro poznatim prosečnim stručnjacima u medicinskim oblastima uzimanjem u obzir takvih faktora kao što su sojevi ili vrste, starost, pol, masa, i stanje određenog pacijenta, i put davanja.
Kompozicije mogu da se daju same, ili mogu da se ko-daju ili sekvencijalno daju sa drugim kompozicijama prema ovom pronalasku ili sa drugim imunološkim kompozicijama, antigenim kompozicijama ili kompozicijama vakcine ili terapeutskim kompozicijama. Takve druge kompozicije mogu da uključuju prečišćene prirodne antigene ili epitope ili antigene ili epitope iz ekspresije rekombinantnim CMV ili nekim drugim vektorskim sistemom; i daju se uzimajući u obzir prethodno pomenute faktore.
[0101] Primeri kompozicija prema ovom pronalasku uključuju tečne preparate za otvore, npr., oralno, nazalno, analno, genitalno, npr., vaginalno, itd., davanje kao što su suspenzije, sirupi ili eliksiri; i, preparati za parenteralno, subkutano, intradermalno, intramuskularno ili intravenozno davanje (npr., injekciono davanje) kao što su sterilne suspenzije ili emulzije. U takvim kompozicijama, rekombinanti mogu da budu u mešavini sa pogodnim nosačem, razblaživačemili ekscipijensom kao što je sterilna voda, fiziološki slani rastvor, glukoza ili slično.
[0102] Antigene kompozicije, imunološke kompozicije ili kompozicije vakcine obično mogu da sadrže neki adjuvans i neku količinu rekombinantnog CMV ili proizvoda ekspresije da izazovu željeni odgovor. Kod humanih primena, alum (aluminijum fosfat ili aluminijum hidroksid) je obično adjuvans. Saponin i njegova prečišćena komponenta Quil A, Frojndov kompletni adjuvans i drugi adjuvansi korišćeni u istraživanju i veterinarskim primenama imaju toksičnosti koje ograničavaju njihovu potencijalnu upotrebu u humanim vakcinama. Hemijski definisani preparati kao što su muramil dipeptid, monofosforil lipid A, konjugati fosfolipida kao što su oni opisani od strane Goodman-Snitkoff et al., J. Immunol.147:410-415 (1991), inkapsulacija proteina unutar proteolipozoma kao što je opisano od strane Miller et al., J. Exp. Med.176:1739-1744 (1992) i inkapsulacija proteina u lipidnim vezikulama kao što su Novasome lipidne vezikule (Micro Vescular Systems, Inc., Nashua, N.H.) takođe mogu da se koriste.
[0103] Kompozicija može da se pakuje u jedan dozni oblik za imunizaciju parenteralnim (tj., intramuskularnim, intradermalnim ili subkutanim) davanjem ili davanjem kroz otvor, npr., perlingvalnim (tj., oralnim), intragastričnim, mukoznim uključujući intraoralno, intraanalno, intravaginalno, i slično davanje. I opet, efikasna doza i put davanja određuju se na osnovu prirode kompozicije, na osnovu prirode proizvoda ekspresije, na osnovu ekspresionog nivoa ako se rekombinantni CMV direktno koristi, i na osnovu poznatih faktora, kao što su sojevi ili vrste, starost, pol, masa, stanje i priroda domaćina, kao i LD50i druge skrining procedure koje su poznate i ne zahtevaju nepotrebno eksperimentisanje. Doze eksprimiranog proizvoda mogu da budu u opsegu od nekoliko do nekoliko stotina mikroorganizama, npr., 5 do 500 µg. Inventivni rekombinanti mogu da se daju u bilo kojoj odgovarajućoj količini da bi se postigla ekspresija na ovim doznim nivoima. CMV vakcine daje se u nekoj količini od najmanje 10<2>pfu; tako, inventivni rekombinanti mogu da se daju u najmanje ovoj količini; ili u opsegu od oko 10<2>pfu do oko 10<7>pfu. Ostali pogodni nosači ili razblaživači mogu da budu voda ili puferski slani rastvor, sa ili bez konzervansa. Proizvod ekspresije ili rekombinantni CMV može da bude liofizovan za resuspenziju u vreme davanja ili može da bude u rastvoru.
[0104] Nosač takođe može da bude polimerni sistem sa odloženim oslobađanjem. Sintetički polimeri naročito su korisni u formulaciji kompozicije koja ima kontrolisano oslobađanje. Raniji primer ovoga bio je polimerizacija metil metakrilata u sfere sa prečnicima manjim od jednog mikrometra da se formiraju takozvane nano čestice, izložene od strane Kreuter, J., Microcapsules and Nanoparticles in Medicine and Pharmacology, M. Donbrow (Ed). CRC Press, pp.125-148.
[0105] Mikroinkapsulacija primenjuje se u injekciju mikroinkapsuliranih farmaceutika da bi se dobilo kontrolisano oslobađanje. Brojni faktori doprinose odabiru posebnog polimera za mikroinkapsulaciju. Ponovljivost sinteze polimera i postupka mikroinkapsulacije, cena materijala i postupka za mikroinkapsulaciju, toksikološki profil, zahtevi za kinetike varijabilnog oslobađanja i fizikoohemijska kompatibilnost polimera i antigena su sve faktori koji se moraju uzeti u obzir. Primeri korisnih polimera su polikarbonati, poliestri, poliuretani, poliortoestri i poliamidi, naročito oni koji su biorazgradivi.
[0106] Čest izbor nosača za farmaceutike, a nedavno za antigene, je poli (d,1-laktid-ko-glikolid) (PLGA). Ovo je biorazgradivi poliestar koji ima dugu istoriju medicinske upotrebe u erozivnim suturama, koštanim pločicama i ostalim privremenim protezama gde on ne pokazuje bilo kakvu toksičnost. Širok spektar farmaceutika koji uključuju peptide i antigene formulisan je u PLGA mikrokapsulama. Telo podataka akumulira se na adaptaciji PLGA za kontrolisano oslobađanje antigena, na primer, kao što je razmatrano od strane Eldridge, J. H., et al., Current Topics in Microbiology and Immunology.1989, 146:59-66. Klopka antigena u PLGA mikrosferama od 1 do 10 mikrometara u prečniku pokazalo se da ima izuzetan adjuvansni efekat kada se daje oralno. Postupak PLGA mikroinkapsulacije koristi faznu separaciju emulzije vode u ulju. Jedinjenje od interesa priprema se kao vodeni rastvor i PLGA se rastvara u pogodnim oraganskim rastvaračima kao što su metilen hlorid i etil acetat. Ova dva nemešljiva rastvora se ko-emulguju mešanjem velikom brzinom. Nerastvarač za polimer se potom dodaje, izazivajući taloženje polimera oko vodenih kapi da se formiraju embrionske mikrokapsule. Miksrokapsule se prikupljaju, i stabilizuju sa jednim od asortimana agenasa (polivinil alkohol (PVA), želatin, alginati, polivinilpirolidon (PVP), metil celuloza) i rastvarač se uklanja ili sušenjem u vakuumu ili ekstrakcijom rastvarača.
[0107] Tako, predviđene su čvrste, uključujući tečnost koja sadrži čvrstu supstancu, tečne, i gel (uključujući "gel kasule") kompozicije.
[0108] Dodatno, inventivni vektori, npr., rekombinantni CMV, i njegovi proizvodi ekspresije od njega mogu da stimulišu neki imuni odgovor ili odgovor antitela u životinjama. Iz ovih antitela, tehnikama dobro poznatim u ovoj oblasti, mogu da se pripreme monoklonalna antitela i, ta monoklonalna antitela mogu da se koriste u dobro poznatim testovima vezivanja antitela, dijagnostički kitovi ili testovi za određivanje prisustva ili odsustva antigena(a) a, iz toga, prisustvo ili odsustvo prirodnog uzročnika tog antigena ili, za određivanje da li je neki imuni odgovor na taj agens ili na taj antigen(e) jednostavno stimulisan.
[0109] Monoklonalna antitela su imunoglobulin proizveden od strane hibridoma ćelija. Monoklonalno antitelo reaguje sa jednim antigenim determinantom i obezbeđuje veću specifičnost nego konvencionalno, antitelo dobijeno iz seruma. Dalje, skrining velikog broja monoklonalnih antitela omogućava da se odabere neko pojedinačno antitelo sa željenom specifičnošću, avidnošću i izotipom. Hibridoma ćelijske linije obezbeđuju stalan, jeftin izvor hemijski identičnih antitela, a preparati tih antitela mogu se lako standardizovati. Postupci za proizvodnju monoklonalnih antitela dobro su poznati prosečnim stručnjacima u ovoj oblasti, npr., Koprowski, H. et al., U.S. Pat. No.4,196,265, objavljen 1. Apr.1989.
[0110] Upotrebe monoklonalnih antitela su poznate. Jedna takva upotreba je u dijagnostičkim postupcima, npr., David, G. i Greene, H., U.S. Pat. No.4,376,110, objavljen 8. Mar.1983.
[0111] Monoklonalna antitela takođe se koriste za oporavak materijala imunoadsorpcionom hromatografijom, npr. Milstein, C., 1980, Scientific American 243:66, 70.
[0112] Dalje, inventivni rekombinantni CMV ili njegovi proizvodi ekspresije mogu da se koriste za stimulisanje odgovora u ćelijama in vitro ili ex vivo za naknadnu reinfuziju u pacijenta. Ako je pacijent seronegativan, reinfuzija je da bi se stimulisao neki imuni odgovor, npr., neki imunološki ili antigeni odgovor kao što je aktivna imunizacija. Kod seropozitivnog pojedinca, reinfuzija je da bi se stimulisao ili pojačao imuni sistem protiv patogena.
[0113] Rekombinantni CMV prema ovom pronalasku takođe je koristan za generisanje DNK za probe ili za PCR prajmere koji mogu da se koriste za detektovanje prisustva ili odsustva DNK koja može da se hibridizuje ili da se amplifikuje DNK, npr., da se detektuje patogen u uzorku ili za amplifikovanje DNK.
[0114] Dalje, kako je opisano gore, ovaj pronalazak obuhvata promotore i ekspresione kasete koji su korisni u adenovirusnim sistemima, kao i u bilo kojem virusnom ili ćelijskom sistemu koji obezbeđuje neki transaktivirajući protein.
[0115] Ekspresiona kaseta prema ovom pronalasku može dalje da uključuje funkcionalni skraćeni signal poliadenilacije; na primer SV40 signal poliadenilacije koji je skraćen, a ipak funkcionalan. Ekspresiona kaseta može da sadrži egzogenu ili heterolognu DNK (u odnosu na virus ili sistem u koji se promotor ili ekspresiona kaseta umeće); na primer egzogena ili heterologna kodirajuća DNK kao što je ovde prethodno opisana, i u Primerima. Ova DNK može pogodno da bude pozicionirana i radno povezana sa promotorom za ekspresiju. Ekspresiona kaseta može da se ubaci u bilo kojoj orijentaciji; poželjno, orijentacija koja daje maksimalnu ekspresiju od sistema ili virusa u koji je ubačena ekspresiona kaseta.
[0116] Dok su promotor i ekspresiona kaseta posebno dati za primer u odnosu na adenoviruse, stručan praktikant može da prilagodi ove primere izvođenja prema ovom pronalasku drugim virusima i plazmidima za ćelije kao što su eukariotske ćelije, bez nepotrebnog eksperimentisanja, jednostavnim utvrđivanjem da li virus, plazmid, ćelija ili sistem obezbeđuje transaktivirajući protein.
[0117] Što se tiče HCMV promotora, upućuje se na U.S. Pat. Nos.5,168,062 i 5,385,839. Što se tiče ćelija transfekcije sa plazmidnu DNK za ekspresiju od njih, upućuje se na Felgner et al. (1994), J. Biol. Chem.269, 2550-2561. I, što se tiče direktnog ubrizgavanja plazmidne DNK kao jednostavnog i efikasnog postupka vakcinacije protiv raznih infektivnih bolesti (upućuje se na Science, 259:1745-49, 1993. Prema tome, unutar obima ovog pronalaska je da se inventivni promotor i ekspresiona kaseta koriste u sistemima koji nidu adenovirus; na primer, u plazmidima za direktno ubrizgavanje plazmida DNK.
[0118] Proteinski fragmenti prema ovom pronalasku formiraju dalji aspekt prema ovom pronalasku; a, takva jedinjenja mogu da se koriste u postupcima medicinskih tretmana, kao što su za dijagnozu, prevenciju ili lečenje HIV ili za izazivanje antitela za dijagnozu HIV, uključujući upotrebu u vakcinama. Dalje, ta jedinjenja mogu da se koriste u pripremi medikamenata za te tretmane ili prevenciju, ili kompozicija za dijagnostičke svrhe. Jedinjenja mogu da se koriste sama ili u kombinaciji sa drugim tretmanima, vakcinama ili preventivnim sredstvima; i, jedinjenja mogu da se koriste u pripremi kombinovanih medikamenata za te tretmane ili prevenciju, ili u kitovima koji sadrže jedinjenje i neki drugi tretman ili preventivno sredstvo.
[0119] U čak nekom drugom primeru izvođenja, ovaj pronalazak takođe obuhvata upotrebu proteinskih fragmenata prema ovom pronalasku opisanih ovde kao imunogena, povoljno kao komponenata HIV-1 vakcine.
[0120] Pojmovi "protein", "peptid", "polipeptid", i "aminokiselinska sekvenca" koriste se ovde naizmenično da označe polimere aminokiselinskih ostataka bilo koje dužine. Polimer može da bude ravan ili razgranat, može da obuhvata modifikovane aminokiseline ili aminokiselinske analoge, i može da bude isprekidan hemijskim ostacima koji nisu aminokiseline. Pojmovi takođe obuhvataju aminokiselinski polimer koji je modifikovan prirodno ili intervencijom; na primer formiranje disulfidne veze, glikozilacija, lipidacija, acetilacija, fosforilacija, ili bilo koja druga manipulacija ili modifikacija, kao što je konjugacija sa obeležavajućom ili bioaktivnom komponentom.
[0121] Kako se ovde koristi, pojmovi "antigen" ili "imunogen" koriste se naizmenično a označavaju supstancu, obično protein, koja može da indukuje neki imuni odgovor kod subjekta. Pojam takođe označava proteine koji su imunološki aktivni u smislu da kada se jednom daju subjektu (ili direktno ili davanjem subjektu neke nukleotidne sekvence ili vektora koji kodira protein) mogu da izazovu neki imuni odgovor humoralnog i/ili ćelijskog tima usmeren protiv tog proteina.
[0122] Pojam "antitelo" uključuje netaknute molekule kao i njihove fragmente, kao što su Fab, F(ab')2, Fv i scFv koji mogu da se vežu za determinant epitopa. Ovi fragmenti antitela zadržavaju nešto sposobnosti da se selektivno vežu sa svojim antigenom ili receptorom i uključuju, na primer:
a. Fab, fragment koji sadrži monovalentni antigen-vezujući fragment nekog molekula antitela, može da se proizvede digestijom celog antitela enzimom papain da bi se dobio netaknut laki lanac i deo jednog teškog lanca;
b. Fab', fragment molekula antitela, može da se dobije tretiranjem celog antitela pepsinom, praćeno redukcijom, da bi se dobio netaknut laki lanac i deo teškog lanca; dva Fab' fragmenta dobijaju se po molekulu antitela;
c. F(ab')2, fragment antitela koji se može dobiti tretiranjem celog antitela sa enzimom pepsin bez naknadne redukcije; F(ab')2 je dimer dva Fab' fragmenta koji se drže zajedno preko dva disulfidna mosta;
d. scFv, koji uključuje genetski modifikovan fragment koji sadrži varijabilni region nekog teškog i nekog lakog lanca kao fuziran jednolančani molekul.
[0123] Opšti postupci za proizvodnju ovih fragmenata poznati su u ovoj oblasti. (Videti na
primer, Harlow and Lane, Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, New York (1988).
[0124] "Neutralizujuće antitelo" može da inhibira ulazak HIV-1 virusa na primer SF162 i/ili JRCSF sa indeksom neutralizacije >1,5 ili >2,0. Opšta i snažna neutralizujuća antitela mogu da neutrališu više od oko 50% HIV-1 virusa (iz različitih kladusa i različitih sojeva unutar kladusa) u testu neutralizacije.
Inhibitorna koncentracija monoklonalnih antitelo može da bude manja od oko 25 mg/ml da bi se neutralisalo oko 50% ulaska virusa u testu neutralizacije.
[0125] Podrazumeva se da se proteini i nukleinske kiseline koje ih kodiraju mogu razlikovati od tačnih sekvenci ilustrovanih i opisanih ovde. Tako, ovaj pronalazak razmatra delecije, adicije, skraćivanja i supstitucije za sekvence prikazane, sve dok sekvence funkcionišu u skladu sa postupcima prema ovom pronalasku. U vezi s tim, supstitucije će uopšteno biti konzervativne prirode, tj., te supstitucije koje se odigravaju unutar familije aminokiselina. Na primer, aminokiseline su uopšteno podeljene u četiri familije: (1) kiseli--aspartat i glutamat; (2) bazni--lizin, arginin, histidin; (3) ne-polarni alanin, valin, leucin, izoleucin, prolin, fenilalanin, metionin, triptofan; i (4) nenaelektrisani polarni--glicin, asparagin, glutamin, cistein, serin treonin, tirozin. Fenilalanin, triptofan, i tirozin nekad su klasifikovani kao aromatične aminokiseline. Razumno je predviđeno da neka izolovana zamena leucina sa izoleucinom ili valinom, ili vice versa; aspartata sa glutamatom ili vice versa; treonina sa serinom ili vice versa; ili slična konzervativna zamena neke aminokiseline sa strukturno povezanom aminokiselinom, neće imati značajan efekat na biološku aktivnost. Proteini koji imaju suštinski istu aminokiselinsku sekvencu kao sekvence ilustrovane i opisane ali koji poseduju possessing manje aminokiselinske supstitucije koje suštinski ne utiču na imunogenost proteina su, prema tome, unutar obima ovog pronalaska.
[0126] Kao što se ovde koriste izrazi "nukleotidne sekvence" i "sekvence nukleinske kiseline" označavaju sekvence dezoksiribonukleinske kiseline (DNK) ili ribonukleinske kiseline (RNK), uključujući, bez ograničenja, informacionu RNK (mRNK), DNK/RNK hibride, ili sintetičke nukleinske kiseline.
Nukleinska kiselina može da bude jednolančana, ili delimično ili potpuno dvolančana (dupleks). Dupleks nukleinske kiseline mogu da budu homodupleks ili heterodupleks.
[0127] Kao što se ovde koristi pojam "transgen" može da se koristi da označi "rekombinantne" nukleotidne sekvence koje se mogu izvesti iz bilo kojih nukleotidnih sekvenci koje kodiraju proteine prema ovom pronalasku. Pojam "rekombinant" znači nukleotidnu sekvencu koji je manipulisan "od strane čoveka" i koja se ne javlja u prirodi, ili je povezana sa drugom nukleotidnom sekvencom ili se nalazi u različitom uređenju u prirodi. Podrazumeva se da manipulisan "od strane čoveka" znači manipulisan nekim veštačkim sredstvima, uključujući upotrebu uređaja, kodonska optimizaciju, restrikcione enzime, itd.
[0128] Na primer, u jednom primeru izvođenja nukleotidne sekvence mogu da budu mutirane tako da je aktivnost kodiranih proteina in vivo ukinuta. U drugom primeru izvođenja nukleotidne sekvence mogu da budu kodonski optimizovane, na primer kodoni mogu da budu optimizovani za humanu upotrebu. U poželjnim primerima izvođenja nukleotidne sekvence prema ovom pronalasku su i mutirane da bi se ukinula normalna in vivo funkcija kodiranih proteina, i kodon optimizovane za humanu upotrebu. Na primer, svaki od Gag, Pol, Env, Nef, RT, i Int sekvenca prema ovom pronalasku može da bude izmenjen na ove načine.
[0129] Što se tiče kodonske optimizacije, molekuli nukleinskih kiselina prema ovom pronalasku imaju nukleotidnu sekvencu koja kodira antigene prema ovom pronalasku i može da se izvede da koriste kodoni koji se koriste u genima subjekta u kojima će se antigen proizvesti. Mnogi virusi, uključujući HIV i druge lentiviruse, koriste veliki broj retkih kodona a, izmenom ovih kodona da odgovaraju kodonima koji se obično koriste kod željenog subjekta, može da se postigne poboljšana ekspresija antigena. U nekom poželjnom primeru izvođenja, korišćeni kodoni su "humanizovani" kodoni, tj., kodoni su oni koji se često javljaju u visoko eksprimiranim humanim genima (Andre et al., J. Virol.72:1497-1503, 1998) umesto onih kodona koji se često koriste od strane HIV. Takva upotreba kodona obezbeđuje efikasnu ekspresiju transgenih HIV proteina u humanim ćelijama. Bilo koji pogodan postupak kodonske optimizacije može da se koristi. Takvi postupci, i izbor tih postupaka, dobro su poznati prosečnim stručnjacima u ovoj oblasti. Dodatno, postoji nekoliko kompanija koje će optimizovati kodone sekvenci, kao što je Geneart (geneart.com). Tako, nukleotidne sekvence prema ovom pronalasku mogu lako da se kodonski optimizuju.
[0130] Ovaj pronalazak dalje obuhvata nukleotidne sekvence koje kodiraju funkcionalne i/ili antigenske ekvivalentne varijante i derivate CMV vektora i glikoproteine uključene u njemu. Ove funkcionalne ekvivalentne varijante, derivati, i fragmenti pokazuju sposobnost da zadrže antigenu aktivnost. Na primer, promene u DNK sekvenci koje ne menjaju kodiranu aminokiselinsku sekvencu, kao i one koje rezultuju konzervativnim supstitucijama aminokiselinskih ostataka, jednom ili više delecija ili dodavanja aminokiselina, i supstitucijom aminokiselinskih ostataka aminokiselinskim analozima su one koje neće značajno uticati na svojstva kodiranog polipeptida. Konzervativne supstitucije aminokiselina su glicin/alanin; valin/izoleucin/leucin; asparagin/glutamin; asparaginska kiselina/glutaminska kiselina; serin/treonin/metionin; lizin/arginin; i fenilalanin/tirozin/triptofan. U jednom primeru izvođenja, varijante imaju najmanje 50%, najmanje 55%, najmanje 60%, najmanje 65%, najmanje 70%, najmanje 75%, najmanje 80%, najmanje 85%, najmanje 86%, najmanje 87%, najmanje 88%, najmanje 89%, najmanje 90%, najmanje 91%, najmanje 92%, najmanje 93%, najmanje 94%, najmanje 95%, najmanje 96%, najmanje 97%, najmanje 98% ili najmanje 99% homologiju ili identitet sa antigenom, epitopom, imunogenom, peptidom ili polipeptidom od interesa.
[0131] Za svrhe ovog pronalaska, identitet ili homologija sekvence određuje se upoređivanjem sekvenci kada su poravnate tako da se maksimizira preklapanje i identit dok se minimiziraju praznine između sekvenci. Posebno, identit sekvence može da se odredi bilo kojeg od brojnih matematičkih algoritama. Neograničavajući primer matematičkog algoritma korišćen za poređenje dve sekvence je algoritam Karlin & Altschul, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1990; 87: 2264-2268, modifikovan kao u Karlin & Altschul, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1993;90: 5873-5877.
[0132] Drugi primer matematičkog algoritma korišćenog za upoređivanje sekvenci je algoritam Myers & Miller, CABIOS 1988;4: 11-17. Takav algoritam inkorporiran je u ALIGN program (verzija 2.0) koji je deo softverskog paketa GCG sequence alignment. Kada se koristi ALIGN program za poređenje aminokiselinskih sekvenci, mogu da se koriste tablica mase ostataka PAM120, penal za dužinu praznine od 12, i penal za prazninu od 4. Još jedan koristan algoritam za identifikovanje regiona sličnosti i poravnanja lokalnih sekvenci je FASTA algoritam kao što je opisano u Pearson & Lipman, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1988; 85: 2444-2448.
[0133] Prednost za upotrebu prema ovom pronalasku ima WU-BLAST (Washington University BLAST) verzija 2.0 softver. WU-BLAST verzija 2.0 izvršni programi za nekoliko UNIX platformi mogu se skinuti sa ftp://blast.wustl.edu/blast/executables. Ovaj program je na bazi WU-BLAST verzije 1.4, koja je zauzvrat na bazi javnog domena NCBI-BLAST verzije 1.4 (Altschul & Gish, 1996, Local alignment statistics, Doolittle ed., Methods in Enzymology 266: 460-480; Altschul et al., Journal of Molecular Biology 1990; 215: 403-410; Gish & States, 1993;Nature Genetics 3: 266-272; Karlin & Altschul, 1993;Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 5873-5877).
[0134] Razne rekombinantne nukleotidne sekvence i antitela i/ili antigeni prema ovom pronalasku proizvode se upotrebom standardne rekombinantne DNK i tehnika kloniranja. Te tehnike dobro su poznate prosečnim stručnjacima u ovoj oblasti. Videti na primer, "Molecular Cloning: A Laboratory Manual", drugo izdanje (Sambrook et al.1989).
[0135] Nukleotidne sekvence prema ovom pronalasku mogu da se umetnu u "vektore." Pojam "vektor" veoma se koristi i razume se od strane prosečnih stručnjaka u ovoj oblasti, a kao što se ovde koristi pojam "vektor" koristi se dosledno u skladu sa svojim značenjem prosečnim stručnjacima u ovoj oblasti. Na primer, pojam "vektor" obično se koristi od strane prosečnih stručnjaka u ovoj oblasti i označava nosač koji omogućava ili olakšava prenos molekula nukleinskih kiselina iz jedne sredine u drugu ili koji omogućava ili olakšava manipulaciju molekula nukleinske kiseline.
[0136] Bilo koji vektor koji omogućava ekspresiju virusa prema ovom pronalasku može da se koristi u skladu sa ovim pronalaskom. U određenim primerima izvođenja, virusi prema ovom pronalasku mogu da se koriste in vitro (kao što je upotreba ekspresionih sistema bez ćelija) i/ili u kultivisanim ćelijama koje su rasle in vitro radi proizvodnje kodiranih HIV- antigena i/ili antitela koji se potom mogu koristiti za razne primene kao što je u proizvodnji proteinskih vakcina. Za takve primene, može da se koristi bilo koji vektor koji omogućava ekspresiju virusa in vitro i/ili u kultivisanim ćelijama.
[0137] Za egzogene antigene prema ovom pronalasku koji će se eksprimirati, potein kodirajuća sekvenca egzogenog antigena treba da bude "radno povezana" sa regulatornim sekvencama ili kontrolnim sekvencama nukleinske kiseline koje regulišu transkripciju i translaciju proteina. Kako se ovde koristi, kodirajuća sekvenca i kontrolna sekvenca nukleinske kiseline ili promotor kaže se da su "radno povezane" kasu one kovalentno povezane na takav način kako bi stavile ekspresiju ili transkripciju i/ili translaciju kodirajuće sekvence pod uticaj ili kontrolu kontrolne sekvence nukleinske kiseline. "Kontrolna sekvenca nukleinske kiseline" može da bude bilo koji element nukleinske kiseline, kao što su, ali ne ograničavajući se na promotore, poboljšivače, IRES, introne, i druge elemente opisane ovde koji regulišu ekspresiju neke sekvence nukleinske kiseline ili kodirajuće sekvence koja je radno povezana za njega. Pojam "promotor" koristiće se ovde da označava grupu transkripcijskih kontrolnih modula koji su grupisani oko inicijalnog mesta za RNK polimerazu II i koji kada su radno povezani sa protein-kodirajućim sekvencema prema ovom pronalasku dovode do ekspresije kodiranog proteina. Ekspresija transgena prema ovom pronalasku može da bude pod kontrolom konstitutivnog promotora ili nekog inducibilnog promotora, koji inicira transkripciju samo kada je izložen nekim određenim spoljašnjim stimulansima, kao što su, bez ograničenja, antibiotici kao što je tetraciklin, hormoni kao što je ekdizon, ili teški metali. Promotor može takođe da bude specifičan za određen tip ćelije, tkivo ili organ. Mnogi pogodni promotori i poboljšivači poznati su u ovoj oblasti, a bilo koji takav promotor ili poboljšivač može da se koristi za ekspresiju transgena prema ovom pronalasku. Na primer, pogodni promotori i/ili poboljšivači mogu da se odaberu iz Baze eukariotskih promotera (EPDB).
[0138] Ovaj pronalazak odnosi se na rekombinantni virusni vektor koji eksprimira strani epitop.
Povoljno, epitop je neki HIV epitop. U nekom povoljnom primeru izvođenja, HIV epitop je proteinski fragment prema ovom pronalasku, međutim, ovaj pronalazak može da obuhvata dodatne HIV antigene, epitope ili imunogene. Povoljno, HIV epitop je neki HIV antigen koji uključuje, ali bez ograničenja, HIV antigene iz U.S. Patent No.7,341,731; 7,335,364; 7,329,807; 7,323,553; 7,320,859; 7,311,920;
7,306,798; 7,285,646; 7,285,289; 7,285,271; 7,282,364; 7,273,695; 7,270,997; 7,262,270; 7,244,819; 7,244,575; 7,232,567; 7,232,566; 7,223,844; 7,223,739; 7,223,534; 7,223,368; 7,220,554; 7,214,530; 7,2 11,659; 7,211,432; 7,205,159; 7,198,934; 7,195,768; 7,192,555; 7,189,826; 7,189,522; 7,186,507; 7,179, 645; 7,175,843; 7,172,761; 7,169,550; 7,157,083; 7,153,509; 7,147,862; 7,141,550; 7,129,219; 7,122,188 ; 7,118,859; 7,118,855; 7,118,751; 7,118,742; 7,105,655; 7,101,552; 7,097,971; 7,097,842; 7,094,405; 7, 091,049; 7,090,648; 7,087,377; 7,083,787; 7,070,787; 7,070,781; 7,060,273; 7,056,521; 7,056,519; 7,049 ,136; 7,048,929; 7,033,593; 7,030,094; 7,022,326; 7,009,037; 7,008,622; 7,001,759; 6,997,863; 6,995,00 8; 6,979,535; 6,974,574; 6,972,126; 6,969,609; 6,964,769; 6,964,762; 6,958,158; 6,956,059; 6,953,689; 6 ,951,648; 6,946,075; 6,927,031; 6,919,319; 6,919,318; 6,919,077; 6,913,752; 6,911,315; 6,908,617; 6,90 8,612; 6,902,743; 6,900,010; 6,893,869; 6,884,785; 6,884,435; 6,875,435; 6,867,005; 6,861,234; 6,855,5 39; 6,841,381; 6,841,345; 6,838,477; 6,821,955; 6,818,392;6,818,222; 6,815,217; 6,815,201; 6,812,026; 6,812,025; 6,812,024; 6,808,923; 6,806,055; 6,803,231; 6,800,613; 6,800,288; 6,797,811; 6,780,967; 6,7 80,598; 6,773,920; 6,764,682; 6,761,893; 6,753,015; 6,750,005; 6,737,239; 6,737,067; 6,730,304; 6,720, 310; 6,716,823; 6,713,301; 6,713,070; 6,706,859; 6,699,722; 6,699,656; 6,696,291; 6,692,745; 6,670,181 ; 6,670,115; 6,664,406; 6,657,055; 6,657,050; 6,656,471; 6,653,066; 6,649,409; 6,649,372; 6,645,732; 6, 641,816; 6,635,469; 6,613,530; 6,605,427; 6,602,709; 6,602,705; 6,600,023; 6,596,477; 6,596,172; 6,593 ,103; 6,593,079; 6,579,673; 6,576,758;6,573,245; 6,573,040; 6,569,418; 6,569,340; 6,562,800; 6,558,961 ;6,551,828; 6,551,824; 6,548,275; 6,544,780; 6,544,752; 6,544,728; 6,534,482; 6,534,312; 6,534,064; 6,5 31,572; 6,531,313; 6,525,179; 6,525,028; 6,524,582; 6,521,449; 6,518,030; 6,518,015; 6,514,691; 6,514, 503; 6,511,845; 6,511,812; 6,511,801; 6,509,313; 6,506,384; 6,503,882; 6,495,676; 6,495,526; 6,495,347 ; 6,492,123; 6,489,131; 6,489,129; 6,482,614; 6,479,286; 6,479,284; 6,465,634; 6,461,615; 6,458,560; 6, 458,527; 6,458,370; 6,451,601; 6,451,592; 6,451,323; 6,436,407; 6,432,633; 6,428,970; 6,428,952; 6,428 ,790; 6,420,139; 6,416,997; 6,410,318; 6,410,028; 6,410,014; 6,407,221; 6,406,710; 6,403,092; 6,399,29 5; 6,392,013; 6,391,657; 6,384,198; 6,380,170; 6,376,170; 6,372,426; 6,365,187; 6,358,739; 6,355,248; 6 ,355,247; 6,348,450; 6,342,372; 6,342,228; 6,338,952; 6,337,179; 6,335,183; 6,335,017; 6,331,404; 6,32 9,202; 6,329,173; 6,328,976; 6,322,964;6,319,666; 6,319,665; 6,319,500; 6,319,494; 6,316,205; 6,316,00 3; 6,309,633; 6,306,625; 6,296,807; 6,294,322; 6,291,239; 6,291,157; 6,287,568; 6,284,456; 6,284,194; 6 ,274,337; 6,270,956; 6,270,769;6,268,484; 6,265,562; 6,265,149; 6,262,029; 6,261,762; 6,261,571; 6,261 ,569; 6,258,599; 6,258,358; 6,248,332; 6,245,331; 6,242,461; 6,241,986; 6,235,526; 6,235,466; 6,232,12 0; 6,228,361; 6,221,579;6,214,862; 6,214,804; 6,210,963; 6,210,873; 6,207,185; 6,203,974; 6,197,755; 6, 197,531; 6,197,496; 6,194,142; 6,190,871; 6,190,666; 6,168,923; 6,156,302; 6,153,408; 6,153,393; 6,153 ,392; 6,153,378; 6,153,377; 6,146,635; 6,146,614; 6,143,876; 6,140,059; 6,140,043; 6,139,746; 6,132,99 2; 6,124,306; 6,124,132; 6,121,006; 6,120,990; 6,114,507; 6,114,143; 6,110,466; 6,107,020; 6,103,521; 6 ,100,234; 6,099,848; 6,099,847; 6,096,291; 6,093,405; 6,090,392; 6,087,476; 6,083,903; 6,080,846; 6,08 0,725; 6,074,650; 6,074,646; 6,070,126; 6,063,905; 6,063,564; 6,060,256; 6,060,064; 6,048,530; 6,045,7 88;6,043,347; 6,043,248; 6,042,831; 6,037,165; 6,033,672; 6,030,772; 6,030,770; 6,030,618; 6,025,141; 6,025,125; 6,020,468; 6,019,979; 6,017,543; 6,017,537; 6,015,694; 6,015,661; 6,013,484; 6,013,432; 6,0 07,838; 6,004,811; 6,004,807; 6,004,763; 5,998,132; 5,993,819; 5,989,806; 5,985,926; 5,985,641; 5,985, 545; 5,981,537; 5,981,505; 5,981,170; 5,976,551; 5,972,339; 5,965,371; 5,962,428; 5,962,318;5,961,979 ; 5,961,970; 5,958,765; 5,958,422; 5,955,647; 5,955,342; 5,951,986; 5,951,975; 5,942,237; 5,939,277; 5, 939,074; 5,935,580;5,928,930; 5,928,913; 5,928,644; 5,928,642; 5,925,513; 5,922,550; 5,922,325; 5,919, 458; 5,916,806; 5,916,563; 5,914,395; 5,914,109; 5,912,338; 5,912,176; 5,912,170; 5,906,936; 5,895,650 ; 5,891,623; 5,888,726; 5,885,580; 5,885,578; 5,879,685; 5,876,731; 5,876,716; 5,874,226; 5,872,012; 5, 871,747; 5,869,058; 5,866,694; 5,866,341;5,866,320; 5,866,319; 5,866,137; 5,861,290; 5,858,740; 5,858, 647; 5,858,646; 5,858,369; 5,858,368; 5,858,366; 5,856,185; 5,854,400; 5,853,736; 5,853,725; 5,853,724 ; 5,852,186; 5,851,829; 5,851,529;5,849,475; 5,849,288; 5,843,728; 5,843,723; 5,843,640; 5,843,635;5,8 40,480; 5,837,510; 5,837,250; 5,837,242; 5,834,599; 5,834,441; 5,834,429; 5,834,256; 5,830,876; 5,830, 641; 5,830,475; 5,830,458; 5,830,457; 5,827,749; 5,827,723; 5,824,497; 5,824,304; 5,821,047; 5,817,767 ; 5,817,754; 5,817,637; 5,817,470; 5,817,318; 5,814,482; 5,807,707; 5,804,604; 5,804,371; 5,800,822; 5, 795,955; 5,795,743; 5,795,572; 5,789,388; 5,780,279; 5,780,038; 5,776,703; 5,773,260; 5,770,572; 5,766 ,844; 5,766,842; 5,766,625; 5,763,574; 5,763,190; 5,762,965; 5,759,769; 5,756,666; 5,753,258; 5,750,37 3; 5,747,641; 5,747,526; 5,747,028; 5,736,320; 5,736,146; 5,733,760; 5,731,189; 5,728,385; 5,721,095; 5 ,716,826; 5,716,637; 5,716,613; 5,714,374; 5,709,879; 5,709,860; 5,709,843; 5,705,331; 5,703,057; 5,70 2,707; 5,698,178; 5,688,914; 5,686,078; 5,681,831; 5,679,784; 5,674,984; 5,672,472; 5,667,964; 5,667,7 83; 5,665,536; 5,665,355; 5,660,990; 5,658,745; 5,658,569; 5,643,756; 5,641,624; 5,639,854; 5,639,598; 5,637,677; 5,637,455; 5,633,234; 5,629,153; 5,627,025; 5,622,705; 5,614,413; 5,610,035; 5,607,831; 5,6 06,026; 5,601,819; 5,597,688; 5,593,972; 5,591,829; 5,591,823; 5,589,466; 5,587,285; 5,585,254; 5,585, 250; 5,580,773; 5,580,739; 5,580,563; 5,573,916; 5,571,667; 5,569,468; 5,558,865; 5,556,745; 5,550,052 ; 5,543,328; 5,541,100; 5,541,057; 5,534,406; 5,529,765; 5,523,232; 5,516,895; 5,514,541; 5,510,264; 5, 500,161; 5,480,967; 5,480,966; 5,470,701; 5,468,606; 5,462,852; 5,459,127; 5,449,601; 5,447,838; 5,447 ,837; 5,439,809; 5,439,792; 5,418,136; 5,399,501; 5,397,695; 5,391,479; 5,384,240; 5,374,519; 5,374,51 8; 5,374,516; 5,364,933; 5,359,046; 5,356,772; 5,354,654; 5,344,755; 5,335,673; 5,332,567; 5,320,940; 5 ,317,009; 5,312,902; 5,304,466; 5,296,347; 5,286,852; 5,268,265; 5,264,356; 5,264,342; 5,260,308; 5,25 6,767; 5,256,561; 5,252,556; 5,230,998; 5,230,887; 5,227,159; 5,225,347; 5,221,610; 5,217,861; 5,208,3 21; 5,206,136; 5,198,346; 5,185,147; 5,178,865; 5,173,400; 5,173,399; 5,166,050; 5,156,951; 5,135,864; 5,122,446; 5,120,662; 5,103,836; 5,100,777; 5,100,662; 5,093,230; 5,077,284; 5,070,010; 5,068,174; 5,0 66,782; 5,055,391; 5,043,262; 5,039,604; 5,039,522; 5,030,718; 5,030,555; 5,030,449; 5,019,387; 5,013, 556; 5,008,183; 5,004,697; 4,997,772; 4,983,529; 4,983,387; 4,965,069; 4,945,082; 4,921,787; 4,918,166 ; 4,900,548; 4,888,290; 4,886,742; 4,885,235; 4,870,003; 4,869,903; 4,861,707; 4,853,326; 4,839,288; 4, 833,072 i 4,795,739.
[0139] U nekom drugom primeru izvođenja, HIV, ili njegovi imunogeni fragmenti, mogu da se koriste kao HIV epitop. Na primer, HIV nukleotidi iz U.S. Patent Br.7,393,949, 7,374,877, 7,306,901, 7,303,754, 7,173,014, 7,122,180, 7,078,516, 7,022,814, 6,974,866, 6,958,211, 6,949,337, 6,946,254, 6,896,900, 6,8 87,977, 6,870,045, 6,803,187, 6,794,129, 6,773,915, 6,768,004, 6,706,268, 6,696,291, 6,692,955, 6,656, 706, 6,649,409, 6,627,442, 6,610,476, 6,602,705, 6,582,920, 6,557,296, 6,531,587, 6,531,137, 6,500,623 , 6,448,078, 6,429,306, 6,420,545, 6,410,013, 6,407,077, 6,395,891, 6,355,789, 6,335,158, 6,323,185, 6, 316,183, 6,303,293, 6,300,056, 6,277,561, 6,270,975, 6,261,564, 6,225,045, 6,222,024, 6,194,391, 6,194 ,142, 6,162,631, 6,114,167, 6,114,109, 6,090,392, 6,060,587, 6,057,102, 6,054,565, 6,043,081, 6,037,16 5, 6,034,233, 6,033,902, 6,030,769, 6,020,123, 6,015,661, 6,010,895, 6,001,555, 5,985,661, 5,980,900, 5 ,972,596, 5,939,538, 5,912,338, 5,869,339, 5,866,701, 5,866,694, 5,866,320, 5,866,137, 5,864,027, 5,86 1,242, 5,858,785, 5,858,651, 5,849,475, 5,843,638, 5,840,480, 5,821,046, 5,801,056, 5,786,177, 5,786,1 45, 5,773,247, 5,770,703, 5,756,674, 5,741,706, 5,705,612, 5,693,752, 5,688,637, 5,688,511, 5,684,147, 5,665,577, 5,585,263, 5,578,715, 5,571,712, 5,567,603, 5,554,528, 5,545,726, 5,527,895, 5,527,894, 5,2 23,423, 5,204,259, 5,144,019, 5,051,496 i 4,942,122 korisni su za ovaj pronalazak.
[0140] Bilo koji epitop prepoznat od strane nekog HIV antitela može da se koristi u ovom pronalasku. Na primer, anti-HIV antitela iz U.S. Patent Br.6,949,337, 6,900,010, 6,821,744, 6,768,004, 6,613,743, 6,534,312, 6,511,830, 6,489,131, 6,242,197, 6,114,143, 6,074,646, 6,063,564, 6,060,254, 5,919,457, 5,9 16,806, 5,871,732, 5,824,304, 5,773,247, 5,736,320, 5,637,455, 5,587,285, 5,514,541, 5,317,009, 4,983, 529, 4,886,742, 4,870,003 i 4,795,739 korisni su za ovaj pronalazak. Dalje, monoklonalna anti-HIV antitela iz U.S. Patent Br.7,074,556, 7,074,554, 7,070,787, 7,060,273, 7,045,130, 7,033,593, RE39,057, 7,008,622, 6,984,721, 6,972,126, 6,949,337, 6,946,465, 6,919,077, 6,916,475, 6,911,315, 6,905,680, 6,9 00,010, 6,825,217, 6,824,975, 6,818,392, 6,815,201, 6,812,026, 6,812,024, 6,797,811, 6,768,004, 6,703, 019, 6,689,118, 6,657,050, 6,608,179, 6,600,023, 6,596,497, 6,589,748, 6,569,143, 6,548,275, 6,525,179 , 6,524,582, 6,506,384, 6,498,006, 6,489,131, 6,465,173, 6,461,612, 6,458,933, 6,432,633, 6,410,318, 6, 406,701, 6,395,275, 6,391,657, 6,391,635, 6,384,198, 6,376,170, 6,372,217, 6,344,545, 6,337,181, 6,329 ,202, 6,319,665, 6,319,500, 6,316,003, 6,312,931, 6,309,880, 6,296,807, 6,291,239, 6,261,558, 6,248,51 4, 6,245,331, 6,242,197, 6,241,986,6,228,361, 6,221,580, 6,190,871, 6,177,253, 6,146,635, 6,146,627, 6, 146,614, 6,143,876, 6,132,992, 6,124,132, RE36,866, 6,114,143, 6,103,238, 6,060,254, 6,039,684, 6,030, 772, 6,020,468, 6,013,484, 6,008,044, 5,998,132, 5,994,515, 5,993,812, 5,985,545, 5,981,278, 5,958,765 , 5,939,277, 5,928,930, 5,922,325, 5,919,457, 5,916,806, 5,914,109, 5,911,989, 5,906,936, 5,889,158, 5, 876,716, 5,874,226, 5,872,012, 5,871,732, 5,866,694, 5,854,400, 5,849,583, 5,849,288, 5,840,480, 5,840 ,305, 5,834,599, 5,831,034, 5,827,723, 5,821,047, 5,817,767, 5,817,458, 5,804,440, 5,795,572, 5,783,67 0, 5,776,703, 5,773,225, 5,766,944, 5,753,503, 5,750,373, 5,747,641, 5,736,341,5,731,189, 5,707,814, 5, 702,707, 5,698,178, 5,695,927, 5,665,536, 5,658,745, 5,652,138, 5,645,836, 5,635,345, 5,618,922, 5,610 ,035, 5,607,847, 5,604,092, 5,601,819, 5,597,896, 5,597,688, 5,591,829, 5,558,865, 5,514,541, 5,510,26 4, 5,478,753, 5,374,518, 5,374,516, 5,344,755, 5,332,567, 5,300,433, 5,296,347, 5,286,852, 5,264,221, 5 ,260,308, 5,256,561, 5,254,457, 5,230,998, 5,227,159, 5,223,408, 5,217,895, 5,180,660, 5,173,399, 5,16 9,752, 5,166,050, 5,156,951, 5,140,105, 5,135,864, 5,120,640, 5,108,904, 5,104,790, 5,049,389, 5,030,7 18, 5,030,555, 5,004,697, 4,983,529, 4,888,290, 4,886,742 i 4,853,326, korisni su za ovaj pronalazak.
[0141] U jednom primeru, epitop je neki SIV epitop. Podrazumeva se od strane stručnjaka u ovoj oblasti da bilo šta što se odnosi na HIV u ovoj specifikaciji takođe se primenjuje i na SIV. U povoljnom primeru izvođenja, SIV epitop je proteinski fragment prema ovom pronalasku, međutim, ovaj pronalazak može da obuhvata dodatne SIV antigene, epitope ili imunogene. Povoljno, SIV epitop je neki SIV antigen, koji uključuje, ali bez ograničenja na, SIV antigene iz U.S. Patent Br.7,892,729; 7,886,962;
7,879,914; 7,829,287; 7,794,998; 7,767,455; 7,759,477; 7,758,869; 7,754,420; 7,749,973; 7,748,618; 7,732,124; 7,709,606; 7,700,342; 7,700,273; 7,625,917; 7,622,124; 7,611,721; 7,608,422; 7,601,518; 7,585,675; 7,534,603; 7,511,117; 7,508,781; 7,507,417; 7,479,497; 7,464,352; 7,457,973; 7,442,551; 7,439,052; 7,419,829; 7,407,663; 7,378,515; 7,364,760; 7,312,065; 7,261,876; 7,220,554; 7,211,240; 7,198,935; 7,169,394; 7,098,201; 7,078,516; 7,070,993; 7,048,929; 7,034,010; RE39,057; 7,022,814; 7,018,638; 6,955,919; 6,933,377; 6,908,617; 6,902,929; 6,846,477; 6,818,442; 6,803,231; 6,800,281; 6,797,811; 6,790,657; 6,712,612; 6,706,729; 6,703,394; 6,682,907; 6,656,706; 6,645,956; 6,635,472; 6,596,539; 6,589,763; 6,562,571; 6,555,523; 6,555,342; 6,541,009; 6,531,574; 6,531,123; 6,503,713; 6,479,281; 6,475,718; 6,469,083; 6,468,539; 6,455,265; 6,448,390; 6,440,730; 6,423,544; 6,365,150; 6,362,000; 6,326,007; 6,322,969; 6,291,664; 6,277,601; 6,261,571; 6,255,312; 6,207,455; 6,194,142; 6,117,656; 6,111,087; 6,107,020; 6,080,846; 6,060,064; 6,046,228; 6,043,081; 6,027,731; 6,020,123; 6,017,536; 6,004,781; 5,994,515; 5,981,259; 5,961,976; 5,950,176; 5,929,222; 5,928,913; 5,912,176; 5,888,726; 5,861,243; 5,861,161; 5,858,366; 5,830,475; 5,817,316; 5,804,196; 5,786,177; 5,759,768; 5,7 47,324; 5,705,522; 5,705,331; 5,698,446; 5,688,914; 5,688,637; 5,654,195; 5,650,269; 5,631,154; 5,582, 967; 5,552,269; 5,512,281; 5,508,166; 5,470,572; 5,312,902; 5,310,651; 5,268,265; 5,254,457; 5,212,084 ; 5,087,631 i 4,978,687.
[0142] Vektori korišćeni u skladu sa ovim pronalaskom trebalo bi obično da se odaberu tako da oni sadrže pogodan genski regulatorni region, kao što je promotor ili poboljšivač, tako da antigeni prema ovom pronalasku mogu da se eksprimiraju.
[0143] Kada je cilj da se eksprimiraju antigeni prema ovom pronalasku in vivo u subjektu, na primer da bi se generisao neki imuni odgovor protiv HIV-1 antigena i/ili zaštitni imunitet protiv HIV-1, ekspresioni vektori koji su pogodni za ekspresiju na tom subjektu, i koji su bezbedni za upotrebu in vivo, treba da se odaberu. Na primer, u nekim primerima izvođenja može biti poželjno da se eksprimiraju antitela i/ili antigeni prema ovom pronalasku u laboratorijskoj životinji, kao što je za pred-kliničko testiranje HIV-1 imunogenih kompozicija i vakcina prema ovom pronalasku. U ostalim primerima izvođenja, biće poželjno da se eksprimiraju antigeni prema ovom pronalasku u humanim subjektima, kao što je u kliničkim probama i za stvarnu kliničku upotrebu imunogenih kompozicija i vakcine prema ovom pronalasku. Bilo koji vektori koji su pogodni za takve upotrebe mogu da se koriste, i to je dobro unutar sposobnosti stručnog praktikanta da odabere pogodan vektor. U nekim primerima izvođenja može da bude poželjno da vektori korišćeni za ove in vivo primene su oslabljeni do vektora od pojačavanja u subjektu. Na primer, ako se koriste plazmidni vektori, poželjno njima će da nedostaje neko poreklo replikacije koje funkcioniše u subjektu tako da se poboljša bezbednost za in vivo upotrebu u subjektu. Ako se koriste virusni vektori, poželjno oni su oslabljeni ili su replikacija-defektivni u subjektu, ponovo, tako da se poboljša bezbednost za in vivo upotrebu u subjektu.
[0144] U poželjnim primerima izvođenja prema ovom pronalasku koriste se virusni vektori. povoljno, vektor je CMV vektor, poželjno koji nema najmanje glikoprotein US 11.
[0145] U poželjnim primerima izvođenja, virusni vektori prema ovom pronalasku daju se in vivo, na primer gde je cilj da se proizvede neki imunogeni odgovor u subjektu. Na primer, u nekim primerima izvođenja može da bude poželjno da se eksprimiraju transgeni prema ovom pronalasku u laboratorijskoj životinji, kao što je za pred-kliničko testiranje HIV-1 imunogenih kompozicija i vakcina prema ovom pronalasku. U ostalim primerima izvođenja, poželjno je da se eksprimiraju antitela i/ili antigeni prema ovom pronalasku u humanim subjektima, kao što je u kliničkim probama i za stvarnu kliničku upotrebu imunogenih kompozicija i vakcine prema ovom pronalasku. U poželjnim primerima izvođenja subjekat je čovek, na primer čovek koji je inficiran sa, ili postoji rizik da se inficira sa, HIV-1.
[0146] Za takve in vivo primene nukleotidnih sekvenci, antitela i/ili antigena prema ovom pronalasku poželjno se daju kao komponenta neke imunogene kompozicije koja može da obuhvata nukleotidne sekvence i/ili antigene prema ovom pronalasku u mešavini sa farmaceutski prihvatljivim nosačem. Imunogene kompozicije prema ovom pronalasku korisne su da bi se stimulisao neki imuni odgovor protiv HIV-1 i mogu da se koriste kao jedna ili više komponenata profilaktičke ili terapeutske vakcine protiv HIV-1 za prevenciju, ublažavanje ili lečenje SIDA. Nukleinske kiseline i vektori prema ovom pronalasku naročito su korisni za obezbeđivanje genetičkih vakcina, tj. vakcina za dostavu nukleinskih kiselina koje kodiraju antigene prema ovom pronalasku subjektu, kao što je čovek, tako da se antigeni zatim eksprimiraju u subjektu da bi se izazvao neki imuni odgovor.
[0147] Kompozicije prema ovom pronalasku mogu da budu injektibilne suspenzije, rastvori, sprejevi, liofilizovani praškovi, sirupi, eliksiri i slično. Bilo koji pogodan oblik kompozicije može da se koristi. Da bi se pripremila takva kompozicija, neka nukleinska kiselina ili vektor prema ovom pronalasku, koja ima željeni stepen čistoće, se umešava sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača i/ili ekscipijenasa. Nosači i ekscipijensi moraju da budu "prihvatljivi" u smislu da su kompatabilni sa ostalim sastojcima kompozicije. Prihvatljivi nosači, ekscipijensi, ili stabilizatori su netoksični za recipijente u korišćenim dozama i koncentracijama, i uključuju, ali nisu ograničeni na, vodu, slani rastvor, fosfatni puferski slani rastvor, dekstrozu, glicerol, etanol, ili njihove kombinacije, pufere kao što su fosfat, citrat, i druge organske kiseline; antioksidansi uključujući askorbinsku kiselinu i metionin; konzervansi (kao što su oktadecildimetilbenzil amonijum hlorid; heksametonijum hlorid; benzalkonijum hlorid, benzetonijum hlorid; fenol, butil ili benzil alkohol; alkil parabene kao što su metil ili propil paraben; katehol; rezorcinol; cikloheksanol; 3-pentanol; i m-kresol); polipeptid male molekulske mase (manje od oko 10 ostataka); proteine, kao što su serum albumin, želatin, ili imunoglobulini; hidrofilne polimere kao što je polivinilpirolidon; aminokiseline kao što su glicin, glutamin, asparagin, histidin, arginin, ili lizin; monosaharide, disaharide, i druge ugljenehidrate uključujući glukozu, manozu, ili dekstrine; helatne agense kao što je EDTA; šećere kao što su saharoza, manitol, trehaloza ili sorbitol; kontra jone koji formiraju soli kao što je natrijum; metalne komplekse (npr., Zn-protein kompleksi); i/ili ne-jonske surfaktante kao što su TWEEN® PLURONICS® ili polietilen glikol (PEG).
[0148] Imunogena ili imunološka kompozicija takođe može da se formuliše u obliku emulzije ulje u vodi. Emulzija ulje u vodi može da bude na bazi, na primer, lakog tečnog parafinskog ulja (European Pharmacopea type); izoprenoidno ulje kao što su skvalan, skvalen, EICOSANE TM ili tetratetrakontan; ulje koje se dobija iz oligomerizacije alkena(a), npr., izobuten ili dekan; estri kiselina ili alkohola koji sadrže linearnu alkil grupu, kao što su biljna ulja, etil oleat, propilen glikol di(kaprilat/kaprat), gliceril tri(kaprilat/kaprat) ili propilen glikol dioleat; estri razgranatih masnih kiselina ili alkohola, npr., izostearinski kiseli estri. Povoljno, ulja se koriste u kombinaciji sa emulgatorima radi formiranja emulzije. Emulgatori mogu da budu nejonski surfaktantni, kao što su estri sorbitan, manid (npr., anhidromanitol oleat), glicerol, poliglicerol, propilen glikol, i oleinska, izostearinska, ricinoleinska, ili hidroksistearinska kiselina, koji su opciono etoksilirani, i polioksipropilen-polioksietilen kopolimerni blokovi, kao što su Pluronic® products, npr., L121. Adjuvans može da bude mešavina emulgatora(a), agensa formiranja micela, i ulje kao što je ono koje je komercijalno dostupno pod imenom Provax® (IDEC Pharmaceuticals, San Diego, CA).
[0149] Imunogene kompozicije prema ovom pronalasku mogu da sadrže dodatne supstance, kao što su agensi za vlaženje i emulgovanje, puferišuće agense, ili adjuvanse da bi se poboljšala efikasnost vakcina (Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th edition, Mack Publishing Company, (ed.) 1980).
[0150] Adjuvansi mogu takođe da budu uključeni. Adjuvansi uključuju, ali nisu ograničeni na, mineralne soli (npr., AlK(SO4)2AlNa(SO4)2, AlNH(SO4)2, silicijum dioksid, alum, Al(OH)3, Ca3(PO4)2, kaolin, ili ugljenik), polinukleotide sa ili bez imuno stimulišućih kompleksa (ISCOM) (npr., CpG oligonukleotidi, kao što su oni opisani u Chuang, T.H. et al., (2002) J. Leuk. Biol.71(3): 538-44; Ahmad-Nejad, P. et al. (2002) Eur. J.
Immunol.32(7): 1958-68; poli IC ili poli AU kiseline, poliarginin sa ili bez CpG (takođe poznat u ovoj oblasti kao IC31; videti Schellack, C. et al. (2003) Proceedings of the 34th Annual Meeting of the German Society of Immunology; Lingnau, K. et al. (2002) Vaccine 20(29-30): 3498-508), JuvaVax (U.S. Patent No.
6,693,086), određene prirodne supstance (npr., vosak D iz Mycobacterium tuberculosis, supstance koje se nalaze u Cornyebacterium parvum, Bordetella pertussis, ili članovima roda Brucella), flagelin (Tollsličan receptorski 5 ligand; videti McSorley, S.J. et al. (2002) J. Immunol.169(7): 3914-9), saponine kao što su QS21, QS17, i QS7 (U.S. Patent Nos.5,057,540; 5,650,398; 6,524,584; 6,645,495), monofosforil lipid A, posebno, 3-de-O-acilovani monofosforil lipid A (3D-MPL), imikvimod (takođe u ovoj oblasti poznat kao IQM i komercijalno dostupan kao Aldara®); U.S. Patent Nos.4,689,338; 5,238,944; Zuber, A.K. et al. (2004) 22(13-14): 1791-8), i CCR5 inhibitor CMPD167 (videti Veazey, R.S. et al. (2003) J. Exp. Med.198: 1551-1562). Aluminijum hidroksid ili fosfat(alum) obično se koristi pri 0,05 do 0,1% rastvora u fosfatnom puferskom slanom rastvoru. Drugi adjuvansi koji mogu da se koriste, naročito sa DNK vakcinama, su toksin kolere, naročito CTA1-DD/ISCOM (videti Mowat, A.M. et al. (2001) J. Immunol. 167(6): 3398-405), polifosfazeni (Allcock, H.R. (1998) App. Organometallic Chem.12(10-11): 659-666; Payne, L.G. et al. (1995) Pharm. Biotechnol.6: 473-93), citokini kao što su, ali bez ograničenja, IL-2, IL-4, GM-CSF, IL-12, IL-15 IGF-1, IFN-α, IFN-β, i IFN-γ (Boyer et al., (2002) J. Liposome Res.121:137-142; WO01/095919 imunoregulatorni proteini kao što su CD40L (ADX40; videti, na primer, WO03/063899), i CD1a ligand prirodnih ćelija ubica (takođe poznate CRONY ili α-galaktozil keramid; videti Green, T.D. et al., (2003) J. Virol.77(3): 2046-2055), imunostimulatorni fuzioni proteini kao što je IL-2 fuziran sa Fc fragmentom imunoglobulina (Barouch et al., Science 290:486-492, 2000) i kostimulatorni molekuli B7.1 i B7.2 (Boyer), od kojih se svi mogu dati ili kao proteini ili u obliku DNK, u istim virusnim vektorima kao što su oni koji kodiraju antigene prema ovom pronalasku ili na zasebnim ekspresionim vektorima. Alternativno, vakcine prema ovom pronalasku mogu da budu obezbeđene i date bez ikakvog adjuvansa.
[0151] Imunogene kompozicije mogu da budu konstruisane da uvedu virusne vektore na željeno mesto delovanja i oslobode se odgovarajućom i kontrolisanom brzinom. Postupci pripreme formulacija sa kontrolisanim oslobađanjem poznati su u ovo oblasti. Na primer, preparati sa kontrolisanim oslobađanjem mogu da se proizvedu upotrebom polimera na komplekse ili apsorbuju imunogen i/ili imunogenu kompoziciju. Formulacije sa kontrolisanim oslobađanjem mogu da se pripreme upotrebom odgovarajućih makromolekula (na primer, poliestri, poliaminokiseline, polivinil, pirolidon, etilenvinilacetat, metilceluloza, karboksimetilceluloza, ili protamin sulfat) za koje je poznato da obezbeđuju željene karakteristike kontrolisanog osloađanja ili profil oslobađanja. Drugi mogući postupak za kontrolisanje trajanja dejstva preparatom za kontrolisano oslobađanje je da se inkorporiraju aktivni sastojci u čestice polimernog materijala kao što je, na primer, poliestri, poliaminokiseline, hidrogelovi, polimlečna kiselina, poliglkolna kiselina, kopolimeri ovih kiselina, ili etilen vinilacetat kopolimeri. Alternativno, umesto da se inkorporiraju ovi aktivni sastojci u polimerne čestice, moguće je zaroviti ove materijale u mikrokapsule pripremljene, na primer, tehnikama koacervacije ili međuprostornom polimerizacijom, na primer, hidroksimetilceluloza ili želatin-mikrokapsula i poli-(metilmetakrilat) mikrokapsula, respektivno, u koloidnim sistemima za dostavu leka (na primer, lipozomo, albumin mikrosfere, mikroemulzije, nano-čestice i nanokapsule) ili u makroemulzijama. Te tehnike opisane su u New Trends and Developments in Vaccines, Voller et al. (eds.), University Park Press, Baltimore, Md., 1978 i Remington's Pharmaceutical Sciences, 16th edition.
[0152] Odgovarajuće doze virusnih vektora prema ovom pronalasku (kolektivno, imunogeni) u imunogenoj kompoziciji prema ovom pronalasku može lako da se odredi od strane prosečnog stručnjaka u ovoj oblasti. Na primer, doza imunogena može da varira u zavisnosti od puta davanja i veličine subjekta. Pogodne doze mogu se odrediti od strane prosečnih stručnjaka u ovoj oblasti, na primer merenjem imunog odgovora subjekta, kao što je laboratorijska životinja, upotrebom konvencionalnih imunoloških tehnika, i podešavanjem doza po potrebi. Te tehnike za merenje imunog odgovora subjekta uključuju, ali nisu ograničene na, testove oslobađanja hroma, testovi vezivanja tetramera, IFN-γ ELISPOT testovi, IL-2 ELISPOT testovi, testovi intracelularnog citokina, i drugi imunološki detekcioni testovi, npr., kao pto je detaljno opisano u "Antibodies: A Laboratory Manual" od Ed Harlow i David Lane.
[0153] Imunogene kompozicije mogu da se daju upotrebom bilo kog pogodnog postupka dostave koji uključuje, ali bez ograničenja, intramuskularnu, intravenoznu, intradermalnu, mukoznu i topikalnu dostavu. Te tehnike dobro su poznate prosečnim stručnjacima u ovoj oblasti. Specifičniji primeri postupaka dostave su intramuskularna injekcija, intradermalna injekcija, i subkutana injekcija. Međutim, dostava se ne treba ograničiti na injekcione postupke.
[0154] Raspored imunizacije (ili režimi) dobro su poznati za životinje (uključujući ljude) i može se lako odrediti za određenog subjekta i imunogenu kompoziciju. Stoga, imunogeni mogu da se daju jednom ili više puta subjektu. Poželjno, postoji određeni vremenski interval između odvojenih davanja imunogene kompozicije. Dok ovaj interval varira za svaki subjekat, obično je u opsegu od 10 dana do nekoliko nedelja, a često je 2, 4, 6 ili 8 nedelja. Za ljude, interval je obično od 2 do 6 nedelja. U posebno povoljnom primeru izvođenja prema ovom pronalasku, interval je duži, povoljno oko 10 nedelja, 12 nedelja, 14 nedelja, 16 nedelja, 18 nedelja, 20 nedelja, 22 nedelja, 24 nedelja, 26 nedelja, 28 nedelja, 30 nedelja, 32 nedelja, 34 nedelja, 36 nedelja, 38 nedelja, 40 nedelja, 42 nedelja, 44 nedelja, 46 nedelja, 48 nedelja, 50 nedelja, 52 nedelja, 54 nedelja, 56 nedelja, 58 nedelja, 60 nedelja, 62 nedelja, 64 nedelja, 66 nedelja, 68 nedelja ili 70 nedelja.
[0155] Režimi imunizacije obično imaju od 1 do 6 davanja imunogene kompozicije, ali mogu da imaju tako malo kao što je jedno ili dva ili četiri. Postupci indukovanja nekog imunog odgovora mogu takođe da uključuju neki adjuvans sa imunogenima. U nekim slučajevima, godišnji, dvogodišnji ili interval neke druge dužine (5-10 godina) pojačane imunizacije mogu da dopune inicijalni protokol imunizacije.
[0156] Ovaj pronalazak takođe uključuje razne osnovne-buster režime, na primer DNK osnovne-Adenovirus buster režime. U ovim postupcima, jedna ili više osnovnih imunizacija praćene su jednom ili više buster imunizacija. Stvarna imunogena kompozicija može da bude ista ili različita za svaku imunizaciju, a tip imunogene kompozicije (npr., koja sadrži protein ili ekspresioni vektor), put i formulacija imunogena takođe mogu da se variraju. Na primer, ako se neki ekspresioni vektor koristi za za osnovne i buster faze, on može da bude ili istog ili različitog tipa (npr., DNK ili bakterijski ili virusni ekspresioni vektor). Jedan koristan osnovni-buster režim obezbeđuje za dve osnovne imunizacije, sa četiri nedelje razmaka, praćeno sa dve buster imunizacije u 4 i 8 nedelji nakon poslednje osnovne imunizacije. Takođe bi trebalo biti jasno vidljivo prosečnom stručnjaku u ovoj oblasti da postoji nekoliko permutacija i kombinacija koje su obuhvaćene upotrebom DNK, bakterijskih i virusnih ekspresionih vektora prema ovom pronalasku da bi se obezbedili osnovni i buster režimi. U slučaju da virusni vektori eksprimiraju US2-11 ili malo gena kodiranih u US2-11 regionu, oni mogu da se koriste više puta dok eksprimiraju različite antigene izvedene iz različitih patogena.
[0157] Specifični primer izvođenja prema ovom pronalasku obezbeđuje postupke indukovanja nekog imunog odgovora protiv patogena u subjektu davanjem neke imunogene kompozicije prema ovom pronalasku, poželjno CMV vektor sa štetnom mutacijom u najmanje US 11 koji kodira jedan ili više od epitopa prema ovom pronalasku, jednom ili više puta subjektu pri čemu se epitopi eksprimiraju na nivou dovoljnom da se indukuje specifični imuni odgovor u subjektu. Takve imunizacije mogu da se ponavljaju više puta u vremenskim intervalima od najmanje 2, 4 ili 6 nedelja (ili više) u skladu sa željenim režimom imunizacije.
[0158] Imunogene kompozicije prema ovom pronalasku mogu da se daju same, ili mogu da se ko-daju, ili sekvencijalno daju, sa nekim drugim antigenima, npr., sa "nekim drugim" imunološkim kompozicijama, antigenim kompozicijama ili kompozicijama vakcine ili terapeutskim kompozicijama, pri čemu se obezbeđuje multivalentne ili "koktel" ili kombinovane kompozicije prema ovom pronalasku i postupci njihovog korišćenja. Ponovo, sastojci i način (sekvencijalni ili ko-davanje) davanja, kao i doze mogu da se odrede uzimajući u obzir takve faktore kao što su starost, pol, masa, vrste i stanje određenog subjekta, i put davanja.
[0159] Kada se koriste u kombinaciji, ostali antigeni mogu da se daju u isto vreme ili u različita vremena kao deo sveukupnog režima imunizacije, npr., kao deo osnovnog-buster ržima ili nekog drugog protokola imunizacije. U jednom povoljnom primeru izvođenja, drugi HIV imunogen je env, poželjno HIV env trimer.
PRIMERI
Primer 1: Rekombinantni citomegalovirusni vektori sa poboljšanom imunogenošću
[0160] Tokom evolucije CMV/SIV vektora imunogenost Rezus makakija (Rh), SIV epitopi za koje je prethodno prikazano da predstavljaju dominantne ciljeve CD8+ T ćelija u SIV-inficiranim ili DNK/Adenovirus/boginje vektorom vakcinisanim Rezus makakijima uopšte nisu bili ciljani RhCMV/SIV vektor-izazvanim CD8+ T ćelijskim odgovorima (pomoću ICS ili bojenja tetramera). Ovo je uključivalo 9 Mamu A*01-ograničene epitope u 12 životinja; 3 Mamu A*02 epitope u 4 životinje, 1 B*08-epitop u 1 životinji, i 3 Mamu B*17-epitope u 7 životinja (FIG.1; levo). HCMV i RhCMV eksprimiraju 4 povezana glikoproteina -- US2/Rh182, US3/Rh184, US6/Rh185 i US11/Rh189 – koji deluju zajedno sa veoma visokom efikasnošću da inhibiraju ispoljavanje MHC klase I-ograničene epitope inficiranim
ćelijama Powers C et al., Curr Top Microbiol Immunol 325, 333-359 (2008); Liu Z et al., Int J Biochem Cell Biol 41, 503-506 (2009); van der Wal, FJ et al., Curr Top Microbiol Immunol 269, 37-55 (2002); Hewitt EW et al., EMBO J 20, 387-396 (2001).
[0161] US2-11 region CMV prikazan je na FIG.3. Prijavioci su generisali jedan vektor koji može da obuhvata deleciju koja obuhvata US2, US3 i US6 (ΔUS2-6) gene, a drugi koji može da obuhvata deleciju US8, US10 i US11 (ΔUS8-11). Svaki vektor može da se generiše BAC-mutagenezom, kao što je opisano u Hansen SG et al., 2010 supra. Ostali konstrukti mogu da obuhvataju SIVgag, SIVenv, SIVretanef(rtn), SIVpol, ili druge egzogene virusne, bakterijske, parazitske ili kancer-izvedene antigene umesto US2-US6 ili US8-11. Dodatni konstrukti uključuju pojedinačne mutacije i/ili delecije US2, US3, US6, US8, US10 ili US11 sa ostatkom US2-11 netaknutim. Takvi konstrukti mogu takođe da uključuju egzogene antigene.
Primer 2 - Izgradnja i karakterizacija RhCMVΔUS2-6 i RhCMVΔUS8-11
[0162] Vektori Rh186-189 (ΔUS8-11), i Rh182-185 (ΔUS2-6) generisani su BAC rekombinacijom. BAC rekombinacija počinje sa rekombinacijom u E. coli između RhCMV soja 68-1 BAC i nekog PCR proizvoda koji sadrži SIV gag ili SIVrtn marker i kanamicin rezistentnu (KanR) kasetu. KanR kaseta flankira se FRT mestima, a krajevi PCR proizvoda uključuju između 40-60 baznih parova homologije za ORF koji će se obrisati. Rekombinanti su odabrani sa kanamicinom, a onda se podvrgavaju arabinoza-indukovanoj rekombinaciji FRT mesta da bi se obrisala KanR kaseta. Prema tome, samo gag/rtn marker i jedan FRT ožiljak ostaju umesto obrisane ORF. Ovaj krajnji BAC proizvod je elektroporisan u rezus fibroblaste, iz kojih se rekombinantni virus prikuplja. Virusi proizvedeni ovim postupkom i uključeni u ovu studiju dati su u dijagramu na FIG.4A i 4B.
[0163] Svi virusi bili su temeljno okarakterisani in vitro. Svi rekombinantni BAC su prikazani pomoću restriktivnog pregleda kako bi se prikazao netaknut virusni genom. BAC su takođe pregledani pomoću PCR da bi se osiguralo da su obrisani pravi ORF. Jednom kada su se virusi rekonstituisali iz ćelijske kulture, profili njihove genske ekspresije, ekspresija SIV proteinskog markera, i kinetike rasta su analizirane. Semi-kvantitativna RT-PCR potvrdila je da se nokaut strategija obrisala odgovarajuće ORF bez dejstva na okolne transkripte ili ćelijske kontrole GAPDH ili β-aktin (FIG.5A). Dodatno, Western blot inficiranog ćelijskog lizata potvrdio je ekspresiju ili SIVgag ili SIVrtn (označeno sa Flag ili V5, respektivno). Svu inficirani ćelijski lizati eksprimirali su virusni protein IE-1 ili IE-2 (FIG.5B).
[0164] RhCMV koji nema homologe od HCMV US8-11 izaziva superinfekciju i izaziva gag-specifične imunodominantne odgovore. Prijavioci su inficirali dva Mamu A*01 RhCMV-seropozitivna rezus makakija (RM) virusom koji sadrži ciljnu deleciju unutar Rh182-189 regiona kom su nedostajali ORF Rh186-Rh189 (što odgovara HCMV US8-11) ali je sadržao egzogeni antigen SIVgag vođen EF1α promotorom (ΔUS8-11gag) (FIG.4A i 4B). Ovaj virus i dalje sadrži većinu MHC-I inhibitora, uključujući homologe HCMV US2, US3, i US6. ΔUS8-11gag mogao je da prevaziđe već postojeći imunitet prema RhCMV i superinficira oba Mamu A*01 RM, kao što je određeno protočnom citometrijom sa više parametara PBMC i BAL prikupljenih iz dve životinje (FIG.6A). Dodatno, obe životinje razvile su SIVgagspecifični PBMC i BAL odgovore CD4+ i CD8+ T ćelija unutar 2 nedelje od ΔUS8-11gag inokulacije (FIG.
6B). Ukupni SIVgag-specifični T ćelijski odgovori izmereni su upotrebom bazena preklapajućih peptida. Znatno, oba RM razvila su iste Mamu A*01-ograničene SIVgag imunodominantne odgovore viđene sa ΔUS2-11gag (FIG.1 i 6C). Ovi podaci pokazuju da US8-11-obrisani vektori mogu da superinficiraju ali da takođe indukuju T ćelije prema imunodominantnim epitopima.
Primer 3 - CMV vektori koji nemaju US8-11 mogu da superinficiraju CMV-pozitivne rezus makakije (RM) i CMV/SIV vektori koji nemaju US8-11 indukuju dugotrajan CD8+ T ćelijski odgovor na tipične imunodominantne SIV epitope
[0165] Četiri CMV-pozitivna RM inokulisana su subkutano sa 10<7>plak-formirajućih jedinica (PFU) rekombinantnog ΔUS8-11RhCMV/rtn i ΔUS8-11RhCMV/gag vektora. Krv ili BAL je prikupljena u naznačenim danima i T ćelijski odgovori su analizirni istog tog dana. Na FIG.7A, frekvencije CD8+ T ćelijskih odgovora prema SIV antigenima SIVgag i SIVrtn (fuzija rev-tat-nef) određeni su analizom protočne citometrije bojenja intracelularnog citokina za CD8+ T ćelije, a aktivacija markera CD69, TNF-α i IFN-γ nakon stimulacije PBMC sa preklapajućim peptidima koji su pokrili SIV antigene. Procenat odgovora, SIVrtn ili SIVgag-specifičnih T ćelija unutar ukupnog memorijskog podskupa i u krvnim (levo) i u BAL (desno) frakcijama prikazani su za svaku vremensku tačku kao srednja vrednost za sva četiri RM (+/- SEM). Razvoj i prisustvo T ćelijskih odgovora protiv SIVrtn i SIVgag ukazuje na sposobnost US8-11-obrisanih vektora da superinficiraju CMV+ RM. Na FIG.7B, frekvencije CD8+ T ćelijskih odgovora na imunodominantne Mamu A*01-ograničene epitope SIVtat(SL8) i SIVgag(CM9) odrećene su analizom protočne citometrije bojenja intracelularnog citokina za CD8+ T ćelije, a aktivacija markera CD69, TNF-α i IFN-γ nakon stimulisanja PBMC sa SL8 i CM99-mernim peptidima. Procenat odgovora, SIVtat(SL8) ili SIVgag(CM9) specifičnih T ćlija unutar ukupnog memorijskog podskupa i u krvnim (levo) i u BAL (desno) frakcijama prikazani su za svaku vremensku tačku kao srednja vrednost za sva četiri RM (+/- SEM).
Razvoj T ćelijskih odgovora protiv imunodominantnih epitopa tatSL8 i gagCM9 ukazuje na sposobnost US8-11-obrisanih vektora da izazovu CD8+ T ćelijske odgovore na imunodominantne epitope koji nisu ciljani za CD8+ T ćelijske odgovore RhCMVrtn- ili RhCMgag-eksprimirajućim vektorima divljeg tipa.
Primer 4 - CMV vektori koji nemaju US2-6 mogu da superinficiraju CMV-pozitivne rezus makakije (RM) ali ne da indukuju CD8+ T ćelijski odgovor na tipične imunodominantne SIV epitope.
[0166] Četiri CMV-pozitivna RM inokulisana su subkutano sa 10<7>plak-formirajuće jedinice (PFU) rekombinantnog ΔUS2-6RhCMV/rtn i ΔUS2-6RhCMV/gag vektora. Krv ili BAL su prikupljeni u naznačenim danima i T ćelijski odgovori su analizirani istog tog dana. Na FIG.8A, frekvencije CD8+ T ćelijskih odgovora na SIV antigene SIVgag i SIVrtn (fuzija rev-tat-nef) određene su analizom protočne citometrije bojenja intracelularnog citokina za CD8+ T ćelije, a aktivacija markera CD69, TNF-α i IFN-γ nakon stimulacije PBMC sa preklapajućim peptidima koji su prekrili SIV antigene. Procenat odgovora, SIVrtn ili SIVgag-specifičnih T ćelija unutar ukupnog memorijskog podskupa i u krvnim (levo) i u BAL (desno) frakcijama prikazani su za svaku vremensku tačku kao srednja vrednost za sva četiri RM (+/-SEM). Razvoj i otpornost T ćelijskih odgovora protiv SIVrtn i SIVgag ukazuje na sposobnost US2-6obrisanih vektora da superinficiraju CMV+ RM. Na FIG.7B, frekvencije CD8+ T ćelijskih odgovora na imunodominantne Mamu A*01-ograničene epitope SIVtat(SL8) i SIVgag(CM9) određene su analizom protočne citometrije bojenja intracelularnog citokina za CD8+ T ćelije, a aktivacija markera CD69, TNF-α i IFN-γ nakon stimulacije PBMC sa SL8 i CM99-mernim peptidima. Procenat odgovora, SIVtat(SL8) ili SIVgag(CM9) specifičnih T ćelija unutar ukupnog memorijskog podskupa i u krvnim (levo) i BAL (desno) frakcijama prikazani su za svaku vremensku tačku kao srednja vrednost za sva četiri RM (+/- SEM).
Nedostatak T ćelijskih odgovora protiv imunodominantnih epitopa tatSL8 i gagCM9 ukazuje da US2-6-obrisani vektori ne mogu da indukuju CD8+ T ćelijske odgovore na imunodominantne epitope slično RhCMVrtn- ili RhCMgag-eksprimirajućim vektorima divljeg tipa.
Primer 5 - Delecija Rh189(US11) pomoću gag-umetanja u RhCMV-retanef
[0167] FIG.9A pokazuje šematski prikaz konstrukta RTNΔ189gag. Inhibitor ispoljavanja antigena Rh189 (US11) obrisan je umetanjem SIVgag bez promotora. SIVretanef umetnut je između Rh213 i 214 i vođen je EF1α promotorom kak oje opisano (Hansen et al. Nat. Med.2009).
[0168] FIG.9B prikazuje potvrdu Rh189-delecije i SIVgag umetanja polimeraznom lančanom reakcijom. Lizati rezus fibroblasta neinficirani ili inficirani naznačenim virusima podvrgnuti su PCR upotrebom prajmera specifičnih za naznačene umetke. Napominje se da konstrukt RTNΔRh189gag ne daje Rh189-specifični DNK fragment, samo se ne-specifične grupe takođe nlaze u neinficiranim ćelijama. Nasuprot tome, ispitivanje za SIVgag ili za susedni otvoreni okvir čitanja Rh190 rezultuje specifičnim PCR proizvodom.
[0169] FIG.9C prikazuje imunoblot za SIVretanef. Lizati fibroblasta inficiranih naznačenim virusima razdvojeni su pomoću SDS-PAGE i nakon prenosa na membrane imunoblota ispitivani sa nekim antitelom protiv V5-epitopa koji je fuziran sa rev-tat-nef (rtn) fuzionim proteinom SIV. Napominje se da je samo u virusima koji eksprimiraju SIVrtn respektivni protein detektibilan.
Primer 6 - FIG.10: RhCMV koji nema Rh189(US11) može da superinficira CMV+ životinje i indukuje neki imuni odgovor protiv imunodominantnih SIV epitopa.
[0170] CMV-pozitivni RM inokulisan je subkutano sa 10<7>plak-formirajućim jedinicama (PFU) rekombinantnog RhCMV/RTNΔ189gag. Slika prikazuje frekvencije CD8+ T ćelijskih odgovora na preklapajuće peptide SIVrtn fuzija rev/tat i nef ili protiv imunodominantnog Mamu A*01-ograničenog epitopa SL8 od SIVtat kao što je određeno analizom protočne citometrije bojenja intracelularnog citokina za CD8+ T ćelije, a aktivacija markera TNF-α i IFN-γ nakon stimulacije ćelija periferne krvi (gornji paneli) i BAL T ćelija (donji paneli) sa peptidima. Prikazane su T ćelije iz reprezentativnih RM koji reaguju na SIVrtn (levi paneli) ili SIVtat(SL8) (desni paneli). Gornji i donji desni kvadranti profila protočne citometrije ukazuju da neto procenat ukupne CD8+ T ćelijske populacije koja reaguje na željeni antigen sa proizvodnjom oba TNF i IFN-γ ili TNF samog, respektivno.
LISTA SEKVENCI
[0171]

Claims (11)

Patentni zahtevi
1. Citomegalovirusni (CMV) vektor za upotrebu u postupku izazivanja CD8+ T ćelijskog odgovora na heterologni antigen u CMV-seropozitivnom subjektu,
pri čemu je CMV vektor:
(a) humani CMV (HCMV) vektor koji kodira heterologni antigen i funkcionalne US2-US6 proteine i ne eksprimira aktivni US11 protein, ili
(b) rezus CMV (RhCMV) vektor koji kodira heterologni antigen i funkcionalne Rh182-Rh185 proteine i ne eksprimira aktivni Rh189 protein; i
gde heterologni antigen predstavlja antigen infektivne bolesti ili tumorski antigen.
2. CMV vektor za upotrebu prema zahtevu 1, pri čemu je heterologni antigen odabran iz grupe koju čine: antigen virusa morbila; HA antigen virusa malih boginja; F antigen virusa malih boginja; glikoprotein besnila; G antigen glikoproteina virusa besnila; antigen gripa; HA antigen virusa gripa; N antigen virusa gripa; antigen herpesvirusa; antigen glikoproteina herpes simpleksa virusa (HSV); antigen Epštajn-Barovog virusa; antigen flavivirusa; JEV antigen; antigen virusa žute groznice; antigen virusa denge; antigen hepatitis virusa; HBsAg; antigen virusa imunodeficijencije; antigen Hantaan virusa; C. tetani antigen; antigen zauški; pneumokokni antigen; PspA; Borrelia antigen; OspA, OspB i OspC od Borrelia povezanih sa lajmskom bolešću kao što su Borrelia burgdorferi, Borrelia atzelli i Borrelia garinii; antigen ovčijih boginja (varičela zoster); i antigen plazmodijuma.
3. CMV vektor za upotrebu prema zahtevu 1, pri čemu je heterologni antigen odabran iz grupe koju čine: HIV gag antigen, HIV env antigen, HIV rev antigen, HIV tat antigen, HIV nef antigen, HIV pol antigen i HIV int antigen.
4. CMV vektor za upotrebu prema zahtevu 1, pri čemu je heterologni antigen odabran iz grupe koju čine: SIV gag antigen, SIV env antigen, SIV rev antigen, SIV tat antigen, SIV nef antigen, SIV pol antigen i SIV int antigen.
5. CMV vektor za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1-4, pri čemu je CMV-seropozitivni subjekat čovek ili rezus makakiji.
6. CMV vektor za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1-5, pri čemu CMV vektor obuhvata jednu ili više od tačkaste mutacije u sekvenci nukleinske kiseline koja kodira US 11, mutacije pomeranja okvira čitanja u sekvenci nukleinske kiseline koja kodira US 11, delecije cele ili dela sekvence nukleinske kiseline koja kodira US11, ili besmisleni ili RNKi konstrukt koji inhibira ekspresiju US 11 kako je prikazano u SEQ ID NO: 4.
7. CMV vektor za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1-6, pri čemu se CMV vektor daje intravenoznim, intramuskularnim, intraperitonealnim ili oralnim davanjem.
8. CMV vektor za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1-7, pri čemu se ekspresija heterolognog antigena pokreće sekvencom koja kodira heterologni antigen a koja je radno povezana sa promotorom.
9. CMV vektor za upotrebu prema zahtevu 8, pri čemu je promotor odabran iz grupe koju čine konstitutivni promotor, inducibilni promotor, ne-virusni promotor i virusni promotor.
10. CMV vektor za upotrebu prema zahtevu 8, pri čemu promotor predstavlja EF1-alfa, MCMV-IE, ili HCMV-IE promotor.
11. CMV vektor za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1-10, pri čemu taj CMV vektor kodira US2 kako je prikazano u SEQ ID NO:1, US3 kako je prikazano u SEQ ID NO:2, i US6 kako je prikazano u SEQ ID NO:3.
RS20180490A 2011-06-10 2012-06-08 Cmv glikoproteini i rekombinantni vektori RS57397B8 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161495552P 2011-06-10 2011-06-10
EP12797634.8A EP2691530B1 (en) 2011-06-10 2012-06-08 Cmv glycoproteins and recombinant vectors
PCT/US2012/041475 WO2012170765A2 (en) 2011-06-10 2012-06-08 Cmv glycoproteins and recombinant vectors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RS57397B1 true RS57397B1 (sr) 2018-09-28
RS57397B8 RS57397B8 (sr) 2020-01-31

Family

ID=47296755

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20180490A RS57397B8 (sr) 2011-06-10 2012-06-08 Cmv glikoproteini i rekombinantni vektori

Country Status (16)

Country Link
US (3) US9862972B2 (sr)
EP (1) EP2691530B1 (sr)
AU (3) AU2012267786B2 (sr)
CA (1) CA2832109C (sr)
CY (1) CY1120987T1 (sr)
DK (1) DK2691530T3 (sr)
ES (1) ES2667425T3 (sr)
HR (1) HRP20180607T1 (sr)
HU (1) HUE037408T2 (sr)
LT (1) LT2691530T (sr)
PL (1) PL2691530T3 (sr)
PT (1) PT2691530T (sr)
RS (1) RS57397B8 (sr)
SI (1) SI2691530T1 (sr)
SM (1) SMT201800284T1 (sr)
WO (1) WO2012170765A2 (sr)

Families Citing this family (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2793959C (en) 2010-03-25 2019-06-04 Oregon Health & Science University Cmv glycoproteins and recombinant vectors
NO2772265T3 (sr) 2010-05-14 2018-06-16
CA2832109C (en) 2011-06-10 2021-07-06 Oregon Health & Science University Cmv glycoproteins and recombinant vectors
WO2013054199A2 (en) * 2011-10-12 2013-04-18 Novartis Ag Cmv antigens and uses thereof
HRP20181930T1 (hr) * 2013-03-05 2019-01-11 Oregon Health & Science University Citomegalovirus vektori za kontroliranje ciljanja t-stanica
CA3113595A1 (en) * 2014-07-16 2016-01-21 Oregon Health & Science University Human cytomegalovirus comprising exogenous antigens
MA40783A (fr) 2014-10-03 2017-08-08 Los Alamos Nat Security Llc Vaccins contre le vih comprenant un ou plusieurs antigènes episensus de population
CN108064304A (zh) 2015-02-10 2018-05-22 俄勒冈健康与科学大学 可用于产生非典型cd8+ t细胞应答的方法和组合物
AU2016355468B2 (en) 2015-11-20 2022-12-15 Oregon Health & Science University CMV vectors comprising microRNA recognition elements
US10611800B2 (en) 2016-03-11 2020-04-07 Pfizer Inc. Human cytomegalovirus gB polypeptide
CA3028827A1 (en) 2016-06-22 2017-12-28 Aeras Recombinant cytomegalovirus vectors as vaccines for tuberculosis
EA201990937A1 (ru) 2016-10-18 2019-09-30 Орегон Хелс Энд Сайенс Юниверсити Цитомегаловирусные векторы, выбирающие t-клетки, ограниченные по молекулам главного комплекса гистосовместимости e
EP3697806A4 (en) 2017-10-17 2021-10-27 International AIDS Vaccine Initiative, Inc. TUBERCULOSIS ANTIGEN CASSETTES
US11040551B2 (en) * 2017-12-27 2021-06-22 Seiko Epson Corporation Recording apparatus and recording system
US11629172B2 (en) 2018-12-21 2023-04-18 Pfizer Inc. Human cytomegalovirus gB polypeptide
US10632186B1 (en) 2019-03-21 2020-04-28 21C Bio Vaccine to pathogenic immune activation cells during infections
US11077185B2 (en) 2019-03-21 2021-08-03 21C Bio Vaccine to pathogenic immune activation cells during infections
WO2020188111A1 (en) 2019-03-21 2020-09-24 21C Bio Vaccine to pathogenic immune activation cells during infections
WO2021045969A1 (en) 2019-08-29 2021-03-11 Vir Biotechnology, Inc. Hepatitis b virus vaccines
TWI810589B (zh) 2020-06-21 2023-08-01 美商輝瑞股份有限公司 人巨細胞病毒糖蛋白Ｂ（ｇＢ）多肽
CA3226978A1 (en) 2021-08-31 2023-03-09 Vir Biotechnology, Inc. Tuberculosis vaccines
CA3226699A1 (en) 2021-08-31 2023-03-09 Vir Biotechnology, Inc. Recombinant hcmv vectors and uses thereof
EP4630027A1 (en) 2022-12-09 2025-10-15 DYS-Immune Therapeutics Composite aids vaccine generating anti-hiv specific neutralizing antibodies and/or anti-hiv cytotoxic t cells
US20250041399A1 (en) 2023-08-02 2025-02-06 Vir Biotechnology, Inc. Cmv-based human papillomavirus vaccines

Family Cites Families (829)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5120640A (en) 1981-05-15 1992-06-09 Chaya Moroz Placental isoferritins for the prognosis and diagnosis of immunosuppression
US5135864A (en) 1983-09-15 1992-08-04 Institut Pasteur Human Immunodeficiency Virus (HIV) associated with Acquired Immunual Deficiency Syndrome (AIDS), a diagnostic method for aids and pre-aids, and a kit therefor
US5173400A (en) 1983-09-15 1992-12-22 Institut Pasteur Antibody detection of antibodies to viral proteins in serum
US6600023B1 (en) 1983-09-15 2003-07-29 Institut Pasteur Antibody directed against HIV-1 P25 antigen
US5217861A (en) 1983-09-15 1993-06-08 Institut Pasteur Antigen of a human retrovirus, namely p18 protein of human immunodeficiency virus (HIV), compositions containing the antigen, a diagnostic method for detecting acquired immune deficiency syndrome (AIDS) and pre-AIDS and a kit therefor
US6428952B1 (en) 1983-09-15 2002-08-06 Institut Pasteur Methods and kits employing LAV antigens for the detection of HIV-1-specific antibodies
IL73534A (en) 1983-11-18 1990-12-23 Riker Laboratories Inc 1h-imidazo(4,5-c)quinoline-4-amines,their preparation and pharmaceutical compositions containing certain such compounds
US5374519A (en) 1983-12-05 1994-12-20 Institut Pasteur Oligopeptides comprising p18 protein of human immunodeficiency virus (HIV), compositions comprising peptides of p18 protein of HIV, and diagnostic kits and methods for detecting acquired immune deficiency syndrome (AIDS)
US5843638A (en) 1983-12-05 1998-12-01 Institut Pasteur And Centre National De La Recherche Scientifique Nucleic acids and pepties of human immunodeficiency virus type-1 (HIV-1).
US5610035A (en) 1983-12-05 1997-03-11 Institut Pasteur Centre National De La Recherche Scientific Methods for the preparation of hybridomas producing lymphadenopathy-associated virus (LAV) GP110-specific monoclonal antibodies and methods for the purification of GP110 employing said monoclonal antibodies
US5762965A (en) 1984-03-16 1998-06-09 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army Vaccines against intracellular pathogens using antigens encapsulated within biodegradble-biocompatible microspheres
EP0162738A1 (en) 1984-04-09 1985-11-27 MOLECULAR GENETICS RESEARCH &amp; DEVELOPMENT LIMITED PARTNERSHIP Production of pseudorabies virus subunit vaccines
US7815916B1 (en) 1984-08-22 2010-10-19 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Health And Human Services Cloning and expression of HTLV-III DNA
US7045130B1 (en) 1984-10-18 2006-05-16 Institut Pasteur Antibodies against antigens of human immunodeficiency virus (HIV-1)
US5705612A (en) 1984-10-18 1998-01-06 Institut Pasteur And Centre National De La Recherche Scientifique NEF peptide encoded by human immunodefiency virus type 1 (HIV-1)
US5980900A (en) 1984-10-18 1999-11-09 Institut Pasteur And Centre National De La Recherche Scientifique Amino acid DNA sequences related to genomic RNA of human immunodeficiency virus (HIV-1)
US7285271B1 (en) 1984-10-31 2007-10-23 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Antigenic composition comprising an HIV gag or env polypeptide
CA1341423C (en) 1984-10-31 2003-03-04 Paul A. Luciw Recombinant proteins of viruses associated with lymphadenopathy syndrome and/or acquired immune deficiency syndrome
US7273695B1 (en) 1984-10-31 2007-09-25 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. HIV immunoassays using synthetic envelope polypeptides
US5168062A (en) 1985-01-30 1992-12-01 University Of Iowa Research Foundation Transfer vectors and microorganisms containing human cytomegalovirus immediate-early promoter-regulatory DNA sequence
FR2580177B2 (fr) 1985-04-15 1989-06-02 Pasteur Institut Antigenes apparentes a la glycoproteine d'enveloppe du virus du sida, notamment precurseurs de cette glycoproteine, procedes d'obtention de ces antigenes et moyens mis en oeuvre dans ces procedes, applications de ces antigenes a la preparation de compositions immunogenes ou pour le diagnostic du sida ou des affections qui lui sont apparentees
US5801056A (en) 1985-05-24 1998-09-01 Dana-Farber Cancer Institute Nucleic acid encoding HIV-1 tat protein
US6074650A (en) 1985-06-24 2000-06-13 Hoechst Aktiengesellschaft Membrane anchor/active compound conjugate, its preparation and its uses
US4945082A (en) 1985-08-26 1990-07-31 Hem Research, Inc. Controlled dsRNA therapy for human viral infections
US5068174A (en) 1985-11-07 1991-11-26 President And Fellows Of Harvard College T-cell lymphotrophic virus protein and assay
WO1987002892A1 (en) 1985-11-14 1987-05-21 President And Fellows Of Harvard College T-lymphotrophic virus
CS256960B1 (en) 1985-11-16 1988-04-15 Viktor Krchnak Peptides with properties of antigenic determinants and method of their production
FR2590674B1 (fr) 1985-11-25 1989-03-03 Inst Nat Sante Rech Med Nouveaux reactifs de diagnostic
EP0252962B1 (en) 1985-12-23 1995-08-23 Fred Hutchinson Cancer Research Center Regulating retroviral replication, infection, and pathogenesis
US5364933A (en) 1986-03-03 1994-11-15 Institut Pasteur Methods of immunopurification of antigens of human immunodeficiency virus type 2 (HIV-2)
US5310651A (en) 1986-01-22 1994-05-10 Institut Pasteur DNA probes of human immunodeficiency virus type 2 (HIV-2), and methods employing these probes for dectecting the presence of HIV-2
US6544728B1 (en) 1986-01-22 2003-04-08 Institut Pasteur Methods and kits for diagnosing human immunodeficiency virus type 2 (HIV-2), proteins of HIV-2, and vaccinating agents for HIV-2
ES2013295B3 (es) 1986-01-22 1990-05-01 Pasteur Institut Retrovirus del tipo hiv-2 susceptible de provocar el sida, sus constituyentes antigenicos y nucleicos.
US5830641A (en) 1986-01-22 1998-11-03 Institut Pasteur In vitro diagnostic assays for the detection of HIV-1 or HIV-2 employing viral-specific antigens and antibodies
US5066782A (en) 1986-01-22 1991-11-19 Institut Pasteur Retrovirus capable of causing AIDS, means and method for detecting it in vitro
US5858651A (en) 1986-01-22 1999-01-12 Institut Pasteur Nucleotide sequences of human immunodeficiency virus type 2 (HIV-2), probes of HIV-2, and methods of using these probes
US5268265A (en) 1986-01-22 1993-12-07 Institut Pasteur Immunological complex comprising an antigen of Simian Immunodeficiency Virus (SIV) and an antibody against human immunodeficiency virus type 2 (HIV 2), and method and kit for detecting antibodies to HIV-2 reactive with antigens of SIV
US4839288A (en) 1986-01-22 1989-06-13 Institut Pasteur Retrovirus capable of causing AIDS, antigens obtained from this retrovirus and corresponding antibodies and their application for diagnostic purposes
US6265149B1 (en) 1986-01-22 2001-07-24 Institut Pasteur In vitro diagnostic methods and kits for the detection of HIV-2-specific antibodies
US5580739A (en) 1986-01-22 1996-12-03 Institut Pasteur Peptides of human immunodeficiency virus type 2 (HIV-2) and in vitro diagnostic methods and kits employing the peptides for the detection of HIV-2
US6514691B1 (en) 1986-01-22 2003-02-04 Institut Pasteur Peptides of human immunodeficiency virus type 2 (HIV-2), antibodies against peptides of HIV-2, and methods and kits for detecting HIV-2
US5468606A (en) 1989-09-18 1995-11-21 Biostar, Inc. Devices for detection of an analyte based upon light interference
US6054565A (en) 1986-03-03 2000-04-25 Institut Pasteur Nucleic Acids of HIV-2, Diagnostic Test Kit and Method using Nucleic Acid Probes of HIV-2
US4983387A (en) 1986-05-19 1991-01-08 Viral Technologies Inc. HIV related peptides, immunogenic antigens, and use therefor as subunit vaccine for AIDS virus
US5276016A (en) 1986-06-03 1994-01-04 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Small peptides which inhibit binding to T-4 receptors and act as immunogens
US5034511A (en) 1987-04-13 1991-07-23 Institut Pasteur Variant of LAV viruses
US5824482A (en) 1986-06-23 1998-10-20 Institut Pasteur Purification, cloning, and characterization of a novel human immunodeficiency virus LAVMAL
US5166050A (en) 1986-08-20 1992-11-24 Bristol-Myers Squibb Company Monoclonal antibodies and peptides useful in treating and diagnosing HIV infections
EP0261940A3 (en) 1986-09-23 1989-07-05 Applied Biotechnology, Inc. Pseudorabies vaccines and dna vectors for recombination with pox viruses
IL84154A0 (en) 1986-10-16 1988-03-31 Microgenesys Inc Polypeptides derived from the envelope gene of human immunodeficiency virus in recombinant baculovirus infected insect cells and vaccines against acquired immune deficiency syndrome containing the same
US5206136A (en) 1986-11-19 1993-04-27 Genetic Systems Corporation Rapid membrane affinity concentration assays
US5030449A (en) 1988-07-21 1991-07-09 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Synthetic vaccine against AIDS virus
US6294322B1 (en) 1988-01-26 2001-09-25 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Multideterminant peptides that elicit helper T-lymphocyte cytotoxic T-lymphocyte and neutralizing antibody responses against HIV-1
US5939074A (en) 1986-12-30 1999-08-17 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Multideterminant peptide antigens
US6322964B1 (en) 1987-01-16 2001-11-27 Genetic Systems Corporation Synthetic HIV-2 gag and env oligopeptides reactive with HIV-2 specific antibodies
US4861707A (en) 1987-02-02 1989-08-29 E. I. Du Pont De Nemours And Company Human immunodeficiency virus antigen
US5140105A (en) 1987-02-19 1992-08-18 Nissin Shokuhin Kabushiki Kaisha Methods and materials for HIV detection
US5217895A (en) 1987-02-19 1993-06-08 Nissin Shokuhin Kabushiki Kaisha Monoclonal anti-idiotypic antibodies specific for anti-T4 antibodies and cross-reactive with HIV
US5169752A (en) 1987-02-19 1992-12-08 Nissin Shokuhin Kabushiki Kaisha Methods and materials for HIV detection
US5180660A (en) 1987-02-19 1993-01-19 Nissin Shokuhin Kabushiki Kaisha Methods and materials for HIV detection
US4942122A (en) 1987-02-24 1990-07-17 Research Education Institute, Inc. Aids prognosis test detecting the presence of antibodies inhibiting HIV reverse transcriptase
US4997772A (en) 1987-09-18 1991-03-05 Eastman Kodak Company Water-insoluble particle and immunoreactive reagent, analytical elements and methods of use
US5591632A (en) 1987-03-02 1997-01-07 Beth Israel Hospital Recombinant BCG
US6812024B2 (en) 1987-03-16 2004-11-02 Mcgready Roland Keith Anti-paratopic antibody as an immunogen
US4918166A (en) 1987-04-10 1990-04-17 Oxford Gene Systems Limited Particulate hybrid HIV antigens
US5122446A (en) 1987-04-17 1992-06-16 New York University Method for detecting antibodies to human immunodeficiency virus
US5100777A (en) 1987-04-27 1992-03-31 Tanox Biosystems, Inc. Antibody matrix device and method for evaluating immune status
US5104790A (en) 1987-06-29 1992-04-14 Genetic Systems Corporation Monoclonal antibodies to specific antigenic regions of the human immunodeficiency virus and methods for use
US4921787A (en) 1987-05-01 1990-05-01 Cambridge Bioscience Corporation Detection of antibodies to human immunodeficiency virus by agglutination of antigen coated latex
US5981278A (en) 1987-05-29 1999-11-09 Tanox, Inc. Chimeric monoclonal antibodies which neutralize HIV-1 infection and their applications in therapy and prevention for AIDS
US5591829A (en) 1987-05-29 1997-01-07 Matsushita; Shuzo Antibodies modified with toxic substance
US5057540A (en) 1987-05-29 1991-10-15 Cambridge Biotech Corporation Saponin adjuvant
US6657050B1 (en) 1987-05-29 2003-12-02 Tanox, Inc. Chimeric viral-neutralizing immunoglobulins
US4795739A (en) 1987-05-29 1989-01-03 Gene Labs, Inc. Method of inhibiting HIV
US4869903A (en) 1987-05-29 1989-09-26 Genelabs Incorporated Method of selectively inhibiting HIV
US5854400A (en) 1987-05-29 1998-12-29 Tanox, Inc. Monoclonal antibodies which neutralize HIV-1 infection
US5834599A (en) 1987-05-29 1998-11-10 Tanox Biosystems, Inc. Immunoconjugates which neutralize HIV-1 infection
DE3885355T2 (de) 1987-05-29 1994-06-01 Shuzo Matsushita Monoklonale Antikörper.
US5256767A (en) 1987-06-10 1993-10-26 The Immune Response Corporation Retroviral antigens
US4886742A (en) 1987-06-15 1989-12-12 Coulter Corporation Enzyme immunoassay for detecting HIV antigens in human sera
US4870003A (en) 1987-06-15 1989-09-26 Coulter Corporation Simultaneous enzyme immunoassay for detecting antigen and/or antibody in humans
US5273876A (en) 1987-06-26 1993-12-28 Syntro Corporation Recombinant human cytomegalovirus containing foreign gene
WO1988010311A1 (en) 1987-06-26 1988-12-29 Syntro Corporation Recombinant human cytomegalovirus containing foreign gene and use thereof
DK362287D0 (da) 1987-07-13 1987-07-13 Kurt Baekgaard Osther Method for rapid and sensitive detection of hiv-1 antibodies
EP0324849B1 (en) 1987-07-13 1995-10-04 Verigen, Inc. Method for rapid and sensitive detection of IgM antibodies to retroviral antigens
US5637677A (en) 1987-07-16 1997-06-10 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Biologically active compounds and methods of constructing and using the same
US5447837A (en) 1987-08-05 1995-09-05 Calypte, Inc. Multi-immunoassay diagnostic system for antigens or antibodies or both
US5004697A (en) 1987-08-17 1991-04-02 Univ. Of Ca Cationized antibodies for delivery through the blood-brain barrier
US5554528A (en) 1987-08-21 1996-09-10 Board Of Revents Of University Of Colorado Compositions and methods for inhibition of HIV production
US5039604A (en) 1987-08-21 1991-08-13 Cellular Products, Inc. Test device and method of preparing same, assay kit and method for the simultaneous detection of two HTLV or HIV antibodies
US5585254A (en) 1987-08-21 1996-12-17 University Of Colorado Foundation, Inc. Autonomous parvovirus gene delivery vehicles and expression vectors
US6210873B1 (en) 1987-08-28 2001-04-03 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods and compositions for the priming of specific cytotoxic T-lymphocyte response
IL83687A (en) 1987-08-30 1995-03-30 Yeda Res & Dev Pharmaceutical compositions comprising molecular decays and their use in the manufacture of said compositions
US5993819A (en) 1987-09-08 1999-11-30 Duke University Synthetic vaccine for protection against human immunodeficiency virus infection
US5019387A (en) 1987-09-08 1991-05-28 Duke University Production of antibodies to HIV
US5397695A (en) 1987-09-18 1995-03-14 Eastman Kodak Company Attachment of compounds to polymeric particles using carbamoylonium compounds and a kit containing same
US5571667A (en) 1987-10-01 1996-11-05 Chu; Albert E. Elongated membrane flow-through diagnostic device and method
SE8704185L (sv) 1987-10-28 1989-04-29 Ferring Ab Nya peptider, artificiella antigener och immunoanalystestsatser
US4888290A (en) 1987-11-06 1989-12-19 Coulter Corporation Monoclonal antibody specific to HIV antigens
US4900548A (en) 1987-11-13 1990-02-13 Harvard University Use of diethylcarbamazine to enhance antigen-antibody and antigen-host immune cell interactions
US5831034A (en) 1987-11-13 1998-11-03 Hermann Katinger Human monoclonal anti-HIV-I-antibodies
JPH02502251A (ja) 1987-11-13 1990-07-26 ヘルマン　カーティンガー ヒトのモノクローン性抗ｈｉｖ‐１‐抗体
US5780038A (en) 1987-11-16 1998-07-14 Roche Diagnostic Systems, Inc. HIV-2 envelope polypeptides
US5215913A (en) 1987-11-30 1993-06-01 Roger Williams General Hospital IgG-1 human monoclonal antibody reactive with an HIV-1 antigen and methods of use
GB2213057A (en) 1987-12-08 1989-08-09 I Pascuchi Josep Maria Vich Anti-viral agent
CA1312277C (en) 1987-12-18 1993-01-05 Richard C. Sutton Avidin- and biotin-immobilized reagents, analytical elements and methods of use
US7442525B1 (en) 1987-12-24 2008-10-28 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Method for expressing HIV polypeptides
US6004781A (en) 1988-01-22 1999-12-21 The General Hospital Corporation Nucleic acid encoding Ig-CD4 fusion proteins
US5039522A (en) 1988-01-29 1991-08-13 New York Blood Center, Inc. Immunogens containing peptides with an attached hydrophobic tail for adsorption to hepatitis B virus surface antigen
US6133029A (en) 1988-03-21 2000-10-17 Chiron Corporation Replication defective viral vectors for infecting human cells
US5716826A (en) 1988-03-21 1998-02-10 Chiron Viagene, Inc. Recombinant retroviruses
WO1989009393A1 (en) 1988-03-24 1989-10-05 Igen, Inc. Luminescent chimeric proteins
CA1340982C (en) 1988-03-25 2000-05-02 Toby C. Rodman Protamine-reactive igm antibodies
US5606026A (en) 1988-03-25 1997-02-25 The Institute For Human Genetics And Biochemistry Natural human IgM antibodies immunoreactive with the Tat protein of HIV-1
US5695927A (en) 1988-03-31 1997-12-09 The University Of Arizona, Department Of Internal Medicine, Section Of Hematology And Oncology Monoclonal antibodies specific for HIV and the hybridomas for production thereof
US5906936A (en) 1988-05-04 1999-05-25 Yeda Research And Development Co. Ltd. Endowing lymphocytes with antibody specificity
US5204259A (en) 1988-05-06 1993-04-20 Pharmacia Genetic Engineering, Inc. Methods and systems for producing HIV antigens
US5008183A (en) 1988-05-10 1991-04-16 Bio-Research Laboratories, Inc. Assay system for detecting antibody and a method of producing non-human immune antibody
US5264342A (en) 1988-05-10 1993-11-23 Verigen, Inc. Method for determining the sensitivity and/or specificity of an assay system for detecting antibodies
US5043262A (en) 1988-05-12 1991-08-27 Dana Farber Cancer Institute Protein, sequences containing the VPU gene therefore, vectors, methods of preparation and use
US5221610A (en) 1988-05-26 1993-06-22 Institut Pasteur Diagnostic method and composition for early detection of HIV infection
US5212084A (en) 1988-06-01 1993-05-18 Emory University Retrovirus and related method used for producing a model for evaluating the antiretroviral effects of drugs and vaccines
US6197496B1 (en) 1988-06-09 2001-03-06 Institut Pasteur Immunological reagents and diagnostic methods for the detection of human immunodeficiency virus type 2 utilizing multimeric forms of the envelope proteins gp300, p200, and p90/80
EP1369427A3 (en) 1988-06-09 2004-05-12 Innogenetics N.V. HIV-3 retrovirus strains and their use
US5312902A (en) 1988-06-09 1994-05-17 Institut Pasteur Dimer of the precursor of HIV-2 envelope glycoprotein
US5208321A (en) 1988-06-09 1993-05-04 Institut Pasteur HIV-2 transmembrane glycoprotein homodimer (GP 80)
US4983529A (en) 1988-06-10 1991-01-08 Abbott Laboratories Immunoassay for HIV-I antigens using F(AB')2 fragments as probe
US5173399A (en) 1988-06-10 1992-12-22 Abbott Laboratories Mouse monoclonal antibodies to hiv-1p24 and their use in diagnostic tests
US5747324A (en) 1988-06-10 1998-05-05 Therion Biologics Corporation Self-assembled, defective, non-self-propagating lentivirus particles
US5631154A (en) 1988-06-10 1997-05-20 Therion Biologics, Incorporated Self assembled, defective, non-self-propagating lentivirus particles
ATE141946T1 (de) 1988-06-14 1996-09-15 Qiagen Gmbh Hiv-2-virusvarianten
US5658569A (en) 1988-07-06 1997-08-19 Verigen, Inc. Anti-HIV-1 neutralizing antibodies
US5286852A (en) 1988-07-06 1994-02-15 Verigen, Inc. Antibodies specific towards HIV-1 gp 48
US5601819A (en) 1988-08-11 1997-02-11 The General Hospital Corporation Bispecific antibodies for selective immune regulation and for selective immune cell binding
US5185147A (en) 1988-08-19 1993-02-09 Cellular Products, Inc. Short polypeptide sequences useful in the production and detection of antibodies against human immunodeficiency virus
IE882585L (en) 1988-08-25 1990-02-25 Prendergast Patrick T Viral treatment system
US5030555A (en) 1988-09-12 1991-07-09 University Of Florida Membrane-strip reagent serodiagnostic apparatus and method
US5866701A (en) 1988-09-20 1999-02-02 The Board Of Regents For Northern Illinois University Of Dekalb HIV targeted hairpin ribozymes
US5183949A (en) 1988-09-22 1993-02-02 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Rabbit model for diagnosing and testing vaccines or therapeutic agents against aids
EP0361749B1 (en) 1988-09-27 1995-02-08 Dana Farber Cancer Institute A vector comprising a replication competent HIV-I provirus and a heterologous gene
US5077192A (en) 1988-10-25 1991-12-31 The General Hospital Corporation Method of detecting antigenic, nucleic acid-containing macromolecular entities
US5750373A (en) 1990-12-03 1998-05-12 Genentech, Inc. Enrichment method for variant proteins having altered binding properties, M13 phagemids, and growth hormone variants
US5916563A (en) 1988-11-14 1999-06-29 United States Of America Parvovirus protein presenting capsids
CA2003383A1 (en) 1988-11-23 1990-05-23 Sushil G. Devare Synthetic dna derived recombinant hiv antigens
US6905680B2 (en) 1988-11-23 2005-06-14 Genetics Institute, Inc. Methods of treating HIV infected subjects
US5604092A (en) 1988-12-05 1997-02-18 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Method for the detection of HIV-1 using a cyclosporine-specific monoclonal antibody that reacts with the P24 Gag protein
US4906476A (en) 1988-12-14 1990-03-06 Liposome Technology, Inc. Novel liposome composition for sustained release of steroidal drugs in lungs
US5238944A (en) 1988-12-15 1993-08-24 Riker Laboratories, Inc. Topical formulations and transdermal delivery systems containing 1-isobutyl-1H-imidazo[4,5-c]quinolin-4-amine
US6306625B1 (en) 1988-12-30 2001-10-23 Smithkline Beecham Biologicals, Sa Method for obtaining expression of mixed polypeptide particles in yeast
US5077284A (en) 1988-12-30 1991-12-31 Loria Roger M Use of dehydroepiandrosterone to improve immune response
US5198346A (en) 1989-01-06 1993-03-30 Protein Engineering Corp. Generation and selection of novel DNA-binding proteins and polypeptides
US5254457A (en) 1989-01-11 1993-10-19 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Monoclonal antibodies and method for identifying different aids-related viruses
DE69032841T2 (de) 1989-01-23 1999-05-12 Chiron Corp., Emeryville, Calif. Rekombinante zellen für therapien von infektionen und hyperprolieferative störungen und deren herstellung
US5227159A (en) 1989-01-31 1993-07-13 Miller Richard A Anti-idiotype antibodies reactive with shared idiotopes expressed by B cell lymphomas and autoantibodies
DE69013950T2 (de) 1989-02-03 1995-03-30 Abbott Lab Monoklonaler Antikörper zur Unterscheidung HIV-2-seropositiver von HIV-1-seropositiven Individuen.
US5665577A (en) 1989-02-06 1997-09-09 Dana-Farber Cancer Institute Vectors containing HIV packaging sequences, packaging defective HIV vectors, and uses thereof
WO1990010230A1 (en) 1989-02-23 1990-09-07 University Of Ottawa Polypeptide having immunological activity for use as diagnostic reagent and/or vaccine
US5731189A (en) 1989-02-28 1998-03-24 New York University Human monoclonal antibodies to human immunodeficiency virus
US6214804B1 (en) 1989-03-21 2001-04-10 Vical Incorporated Induction of a protective immune response in a mammal by injecting a DNA sequence
US5703055A (en) 1989-03-21 1997-12-30 Wisconsin Alumni Research Foundation Generation of antibodies through lipid mediated DNA delivery
US5223423A (en) 1989-03-31 1993-06-29 United States Of America Characterization of replication competent human immunodeficiency type 2 proviral clone hiv-2sbl/isy
US6309880B1 (en) 1989-04-25 2001-10-30 Tanox, Inc. Antibodies specific for CD4-binding domain of HIV-1
ES2099699T3 (es) 1989-05-02 1997-06-01 Abbott Lab Fijacion covalente de los miembros de union especificos a las fases solidas.
US5817318A (en) 1989-05-03 1998-10-06 Connaught Laboratories Limited Synthetic peptides for an HIV-1 vaccine
US5120662A (en) 1989-05-09 1992-06-09 Abbott Laboratories Multilayer solid phase immunoassay support and method of use
AU637097B2 (en) 1989-05-09 1993-05-20 Abbott Laboratories Process for preparing an improved western blot immunoassay
US5210181A (en) 1989-05-15 1993-05-11 Akzo N.V. T-lymphotropic retrovirus peptide
DE3916251C1 (sr) 1989-05-18 1991-01-03 Gesellschaft Fuer Strahlen- Und Umweltforschung Mbh (Gsf), 8000 Muenchen, De
US5320940A (en) 1989-05-19 1994-06-14 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods and compositions for identifying and characterizing individuals having autoimmune rheumatic diseases
WO1990015066A2 (fr) 1989-06-02 1990-12-13 Institut Pasteur Sequences nucleotidiques issues du genome des retrovirus du type hiv-1, hiv-2 et siv, et leurs applications notamment pour l'amplification des genomes de ces retrovirus et pour le diagnostic in vitro des infections dues a ces virus
FR2647810B1 (fr) 1989-06-02 1994-07-22 Pasteur Institut Amorces oligonucleotidiques pour l'amplification du genome des retrovirus du type hiv-2 et siv, et leurs applications au diagnostic in vitro des infections dues a ces virus
US7022814B1 (en) 1992-01-21 2006-04-04 Institut Pasteur And Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale Nucleotide sequences derived from the genome of retroviruses of the HIV-1, HIV-2 and SIV type, and their uses in particular for the amplification of the genomes of these retroviruses and for the in vitro diagnosis of the diseases due to these viruses
US5439792A (en) 1989-06-02 1995-08-08 Genetic Systems Corporation Cysteine thiol-protected peptides for use in immunoassays
ATE138575T1 (de) 1989-06-15 1996-06-15 Rorer Int Overseas Verfahren zur inaktivierung von viren in mit viren verunreinigten pharmazeutischen zusammensetzungen
US5144019A (en) 1989-06-21 1992-09-01 City Of Hope Ribozyme cleavage of HIV-I RNA
US5156951A (en) 1989-07-13 1992-10-20 Becton Dickinson And Company Detecting immunological changes in HIV infected patient samples
US5688914A (en) 1989-08-18 1997-11-18 Institut Pasteur Composition containing a B epitope of the envelope glycoprotein of a retrovirus and a T epitope of another distinct protein of this retrovirus
US6080846A (en) 1989-08-18 2000-06-27 Institut Pasteur Composition containing a B epitope of the envelope glycoprotein of a retrovirus and a T epitope of another distinct protein of this retrovirus
US5100662A (en) 1989-08-23 1992-03-31 The Liposome Company, Inc. Steroidal liposomes exhibiting enhanced stability
US6008044A (en) 1989-08-24 1999-12-28 Bioclonetics Human monoclonal antibodies directed against the transmembrane glycoprotein (gp41) of human immunodeficiency virus-1 (HIV-1) and detection of antibodies against epitope (GCSGKLIC)
US5332567A (en) 1989-08-24 1994-07-26 Immunomedics Detection and treatment of infections with immunoconjugates
US5541057A (en) 1989-09-18 1996-07-30 Biostar, Inc. Methods for detection of an analyte
US5103836A (en) 1990-02-28 1992-04-14 Epitope, Inc. Oral collection device and kit for immunoassay
US5335673A (en) 1989-09-21 1994-08-09 Epitope, Inc. Oral collection device and method for immunoassay
US5225347A (en) 1989-09-25 1993-07-06 Innovir Laboratories, Inc. Therapeutic ribozyme compositions and expression vectors
GB8923123D0 (en) 1989-10-13 1989-11-29 Connaught Lab A vaccine for human immunodeficiency virus
DE3934366A1 (de) 1989-10-14 1991-04-18 Chemotherapeutisches Forschungsinstitut Georg Speyer Haus Vakzine zum schutz vor hiv-virusinfektionen, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als diagnostikum und immuntherapeutikum
US5861282A (en) 1989-10-16 1999-01-19 Whitehead Institute For Biomedical Research Non-infectious HIV particles and uses therefor
US5013556A (en) 1989-10-20 1991-05-07 Liposome Technology, Inc. Liposomes with enhanced circulation time
US5070010A (en) 1989-10-30 1991-12-03 Hoffman-La Roche Inc. Method for determining anti-viral transactivating activity
US6316003B1 (en) 1989-12-21 2001-11-13 Whitehead Institute For Biomedical Research Tat-derived transport polypeptides
US5804604A (en) 1989-12-21 1998-09-08 Biogen, Inc. Tat-derived transport polypeptides and fusion proteins
US5747641A (en) 1989-12-21 1998-05-05 Biogen Inc Tat-derived transport polypeptide conjugates
US5480967A (en) 1990-01-05 1996-01-02 United Biomedical, Inc. HIV-1 core protein fragments
US5629153A (en) 1990-01-10 1997-05-13 Chiron Corporation Use of DNA-dependent RNA polymerase transcripts as reporter molecules for signal amplification in nucleic acid hybridization assays
US5652373A (en) 1990-01-15 1997-07-29 Yeda Research And Development Co. Ltd. Engraftment and development of xenogeneic cells in normal mammals having reconstituted hematopoetic deficient immune systems
US5849288A (en) 1990-01-15 1998-12-15 Yeda Research And Development Co. Ltd. Method for production of monoclonal antibodies in chimeric mice or rats having xenogeneic antibody-producing cells
DE69129207T2 (de) 1990-01-16 1998-10-08 Orgenics Ltd Peptide, von Virus-HIV-Hüllen-Glycoproteinen abstammend, deren Verwendung zum Nachweis einer Infektion dieser Viren und für die Impfung gegen AIDS
US5108904A (en) 1990-03-26 1992-04-28 Alan Landay CD44 as a marker for HIV infection
US5252556A (en) 1990-03-30 1993-10-12 New England Medical Center Hospitals, Inc. Fragment capable of binding anti-CD43 autoantibodies
DK0527760T3 (da) 1990-04-03 1995-11-27 Genentech Inc Fremgangsmåder og præparater til vaccination mod HIV
FR2660757B1 (fr) 1990-04-06 1994-05-27 Immunotech Sa Procede d'identification ou de dosage de proteines et applications.
US5264618A (en) 1990-04-19 1993-11-23 Vical, Inc. Cationic lipids for intracellular delivery of biologically active molecules
US5344755A (en) 1990-04-21 1994-09-06 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Method for detecting immune system dysfunction in asymptomatic, HIV-scropositive individuals
FI924964L (fi) 1990-05-04 1992-11-03 Isis Pharmaceuticals Inc Modulering av genexpression genom stoerande inverkan pao sekundaerstrukturen hos rna
JPH05507491A (ja) 1990-05-16 1993-10-28 デイナ・フアーバー・キヤンサー・インステイテユート 免疫原性ペプチド、抗体、及び、ｃｄ４レセプター結合に関するそれらの用途
AP237A (en) 1990-05-29 1993-04-29 Cedars Sinai Medical Center Immunoreagents reactive with a conserved epitope of human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) gp120 and methods of use.
US5527894A (en) 1990-06-11 1996-06-18 Nexstar Pharmacueticals, Inc. Ligands of HIV-1 tat protein
US5914109A (en) 1990-06-15 1999-06-22 New York University Heterohybridomas producing human monoclonal antibodies to HIV-1
US5178865A (en) 1990-06-19 1993-01-12 Cedars-Sinai Medical Center Chinese herbal extracts in the treatment of hiv related disease in vitro
US5709879A (en) 1990-06-29 1998-01-20 Chiron Corporation Vaccine compositions containing liposomes
US5230887A (en) 1990-07-11 1993-07-27 Immune Network Research Ltd. Immune system stabilizers for prevention and therapy of disorders associated with immune system disfunction
GB9016973D0 (en) 1990-08-02 1990-09-19 Medical Res Council Viral growth inhibition
WO1992003579A1 (en) 1990-08-16 1992-03-05 Diagnostic Biotechnology, Inc. An augmented western blot format and immunoassay for detection of viral antibodies
US5714374A (en) 1990-09-12 1998-02-03 Rutgers University Chimeric rhinoviruses
US5541100A (en) 1990-09-12 1996-07-30 Rutgers University Chimeric rhinoviruses
DE4192335C2 (de) 1990-09-18 1996-02-08 Biotech Australia Pty Ltd T-Zell-Epitope
US5786145A (en) 1990-09-20 1998-07-28 Medical Research Council Oligonucleotide competitors for binding of HIV RRE to REV protein and assays for screening inhibitors of this binding
DK0550553T3 (da) 1990-09-25 2000-10-23 Cantab Pharma Res Viral defekt vaccine fremstillet af en transkomplementerende cellelinie
ATE153138T1 (de) 1990-09-26 1997-05-15 Akers Lab Inc Verbessertes bestimmungsverfahren für liganden
US6248332B1 (en) 1990-10-05 2001-06-19 Medarex, Inc. Targeted immunostimulation with bispecific reagents
JP3011987B2 (ja) 1990-10-11 2000-02-21 旭化成工業株式会社 固相化プライマーを用いる逆転写酵素の測定法
CA2069424A1 (en) 1990-10-11 1992-04-12 Klaus Scherrer Diagnostic method
US5849475A (en) 1990-10-12 1998-12-15 Benjamin Rovinski et al Immunoassay diagnostic kit containing antigens derived from self-assembled, non-infectious, non-replicating, immunogenic retrovirus-like particles comprising modified HIV genomes and chimeric envelope glycoproteins
US5753258A (en) 1990-10-19 1998-05-19 University Of Florida Artificial viral envelopes
EP0554401A4 (en) 1990-10-26 1996-10-30 New York Health Res Inst Neutralizing human monoclonal antibodies specific for the v3 loop and cd-4 binding site of hiv-1 gp120
AU662891B2 (en) 1990-11-27 1995-09-21 Biogen Idec Ma Inc. Anti CD-4 antibodies blocking HIV-induced syncytia
US5780279A (en) 1990-12-03 1998-07-14 Genentech, Inc. Method of selection of proteolytic cleavage sites by directed evolution and phagemid display
SE9003978D0 (sv) 1990-12-13 1990-12-13 Henrik Garoff Dna expressionssystem baserade paa ett virus replikon
EP0517895B1 (en) 1990-12-14 1996-11-20 Cell Genesys, Inc. Chimeric chains for receptor-associated signal transduction pathways
US6407221B1 (en) 1990-12-14 2002-06-18 Cell Genesys, Inc. Chimeric chains for receptor-associated signal transduction pathways
US6319494B1 (en) 1990-12-14 2001-11-20 Cell Genesys, Inc. Chimeric chains for receptor-associated signal transduction pathways
US5087631A (en) 1990-12-18 1992-02-11 Glaxo Inc. Oxathi(SIV)azol-5-one compounds
US5876716A (en) 1991-01-24 1999-03-02 Bay Development Corporation Sa Method of using an antibody to the TN antigen for the inhibition of HIV infection
US5296347A (en) 1991-02-08 1994-03-22 Ciba Corning Diagnostics Corp. Bridge immunoassay
US5912170A (en) 1991-03-07 1999-06-15 The General Hospital Corporation Redirection of cellular immunity by protein-tyrosine kinase chimeras
US5843728A (en) 1991-03-07 1998-12-01 The General Hospital Corporation Redirection of cellular immunity by receptor chimeras
US7049136B2 (en) 1991-03-07 2006-05-23 The General Hospital Corporation Redirection of cellular immunity by receptor chimeras
US6004811A (en) 1991-03-07 1999-12-21 The Massachussetts General Hospital Redirection of cellular immunity by protein tyrosine kinase chimeras
DE4112440C1 (sr) 1991-04-16 1992-10-22 Diagen Institut Fuer Molekularbiologische Diagnostik Gmbh, 4000 Duesseldorf, De
GB9108386D0 (en) 1991-04-19 1991-06-05 Agricultural Genetics Co Modified plant viruses as vectors
ATE158415T1 (de) 1991-04-30 1997-10-15 Eukarion Inc Kationisierte antikörper gegen intrazelluläre eiweisse
US5879685A (en) 1991-05-08 1999-03-09 Schweiz, Serum- & Impfinstitut Bern Immunostimulating and immunopotentiating reconstituted influenza virosomes and vaccines containing them
WO1992020813A1 (en) 1991-05-17 1992-11-26 Dana Farber Cancer Institute Assays for factors affecting circularization of dna, assays for factors affecting dna integration, factors, and uses thereof
JP3220180B2 (ja) 1991-05-23 2001-10-22 三菱化学株式会社 薬剤含有タンパク質結合リポソーム
FR2677654B1 (fr) 1991-06-17 1995-11-17 Pasteur Merieux Serums Vacc Composes a effet immunogene anti-cytokine, a effet immunogene anticytostatique ou a effet vaccinal anti-infection a hiv.
US5637481A (en) 1993-02-01 1997-06-10 Bristol-Myers Squibb Company Expression vectors encoding bispecific fusion proteins and methods of producing biologically active bispecific fusion proteins in a mammalian cell
SG49046A1 (en) * 1991-07-05 1998-05-18 American Cyanamid Co Method for identifying non-essential genes of the human cytomegalovirus genome and for screening for inhibitors of human cytomegaloverirus
US5223408A (en) 1991-07-11 1993-06-29 Genentech, Inc. Method for making variant secreted proteins with altered properties
US5709860A (en) 1991-07-25 1998-01-20 Idec Pharmaceuticals Corporation Induction of cytotoxic T-lymphocyte responses
US5230998A (en) 1991-07-25 1993-07-27 Neurath Alexander R Method for the prescreening of drugs targeted to the V3 hypervariable loop of the HIV-1 envelope glycoprotein gp 120
IL102639A (en) 1991-07-25 1997-03-18 Idec Pharma Corp Compositions for inducing cytotoxic t lymphocyte responses
AU685397B2 (en) 1991-08-22 1998-01-22 Nissin Shokuhin Kabushiki Kaisha Recombinant humanized anti-human immunodeficiency virus antibody
US5558865A (en) 1991-08-22 1996-09-24 Nissin Shokuhin Kabushiki Kaisha HIV immunotherapeutics
EP0673435A1 (en) 1991-08-23 1995-09-27 Isis Pharmaceuticals, Inc. Synthetic unrandomization of oligomer fragments
US5317009A (en) 1991-08-26 1994-05-31 New York University Anti-HIV proteins GAP 31, DAP 30 and DAP 32 and therapeutic uses thereof
US5418136A (en) 1991-10-01 1995-05-23 Biostar, Inc. Devices for detection of an analyte based upon light interference
AU2784792A (en) 1991-10-15 1993-05-21 New York University Human monoclonal antibodies to the cd4-binding domain of hiv, uses thereof and synergistic neutralization of hiv
US5707814A (en) 1991-11-01 1998-01-13 The Regents Of The University Of California CD8+ cell antiviral factor
US5512281A (en) 1991-11-05 1996-04-30 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Mammalian model system and methods of testing immuno-or drug prophylaxis of fetal infection by HIV-1 or other lentiviruses
US5688511A (en) 1991-11-05 1997-11-18 Board Of Regents, The University Of Texas System Cellular protein TDP-43 and regulation of HIV-1 gene expression
US5260308A (en) 1991-11-06 1993-11-09 Mayo Foundation For Medical Education And Research Method to increase permeability of the blood-nerve/brain barriers to proteins
US6153408A (en) 1991-11-15 2000-11-28 Institut Pasteur And Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale Altered major histocompatibility complex (MHC) determinant and methods of using the determinant
US5976551A (en) 1991-11-15 1999-11-02 Institut Pasteur And Institut Nationale De La Sante Et De La Recherche Medicale Altered major histocompatibility complex (MHC) determinant and method of using the determinant
AU668374B2 (en) 1991-12-10 1996-05-02 Dana-Farber Cancer Institute Reactive neutralizing human anti-GP120 recombinant antibody, DNA coding the same and use thereof
IL103928A0 (en) 1991-12-11 1993-04-04 American Home Prod Expression of specific immunogens using viral antigens
US5256561A (en) 1991-12-20 1993-10-26 Abbott Laboratories Monoclonal antibody to HIV-2 and uses thereof
JP3907201B2 (ja) 1991-12-23 2007-04-18 カイロン コーポレイション 溶液相サンドイッチハイブリダイゼーションアッセイに用いるためのｈｉｖプローブ
IL100841A (en) 1992-01-31 1999-08-17 Bystryak Seymon Immunoassay involving photoirradiation and detection of optical density or fluorescence
US5587285A (en) 1992-01-31 1996-12-24 University Of Texas System Generation serological assay for monitoring HIV exposure
FR2687410A1 (fr) 1992-02-14 1993-08-20 Pasteur Institut Beta-lactamase recombinante, utilisable en tant que molecule porteuse pour la preparation de compositions immunogenes.
DE69333348T2 (de) 1992-03-09 2004-09-16 San Diego Regional Cancer Center, San Diego Anti-idiotypischer Antikörper und seine Verwendung zur Diagnose und Therapie bei HIV-bezogenen Krankheiten
US5643578A (en) 1992-03-23 1997-07-01 University Of Massachusetts Medical Center Immunization by inoculation of DNA transcription unit
US6103238A (en) 1992-03-13 2000-08-15 President And Fellows Of Harvard College Selectively deglycosylated human immunodeficiency virus type 1 envelope vaccines
US5422277A (en) 1992-03-27 1995-06-06 Ortho Diagnostic Systems Inc. Cell fixative composition and method of staining cells without destroying the cell surface
US6174666B1 (en) 1992-03-27 2001-01-16 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Method of eliminating inhibitory/instability regions from mRNA
US6004807A (en) 1992-03-30 1999-12-21 Schering Corporation In vitro generation of human dendritic cells
AU3968793A (en) 1992-04-02 1993-11-08 United States Of America, As Represented By The Secretary Of Health And Human Services Use of restriction endonucleases against viruses, including HIV
US5935580A (en) 1992-04-21 1999-08-10 Institut Pasteur Recombinant mutants for inducing specific immune responses
PT637335E (pt) 1992-04-21 2007-10-31 Pasteur Institut Mutantes recombinantes para induzir respostas imunitárias específicas
US6235313B1 (en) 1992-04-24 2001-05-22 Brown University Research Foundation Bioadhesive microspheres and their use as drug delivery and imaging systems
WO1993022343A1 (en) 1992-05-01 1993-11-11 The Rockfeller University Multiple antigen peptide system having adjuvant properties and vaccines prepared therefrom
IT1254360B (it) 1992-05-11 1995-09-14 San Romanello Centro Fond Epitopi immunologicamente omologhi di hla e proteine del virus hiv.
FR2691162B1 (fr) 1992-05-12 1994-07-08 Aremas Moyen pour le dosage quantitatif de retrovirus, procede pour sa preparation et kit de diagnostic comportant ledit moyen.
EP0570357B1 (en) 1992-05-14 1997-06-25 Polymun Scientific Immunbiologische Forschung GmbH Peptides that induce antibodies which neutralize genetically divergent HIV-1 isolates
JPH08500965A (ja) 1992-05-22 1996-02-06 デイナ ファーバー キャンサー インスチチュート ハイブリッドウイルス発現ベクター，その使用および新規アッセイ
US5580773A (en) 1992-06-17 1996-12-03 Korea Green Cross Corporation Chimeric immunogenic gag-V3 virus-like particles of the human immunodeficiency virus (HIV)
US5843640A (en) 1992-06-19 1998-12-01 Northwestern University Method of simultaneously detecting amplified nucleic acid sequences and cellular antigens in cells
ATE188613T1 (de) 1992-06-25 2000-01-15 Smithkline Beecham Biolog Adjuvantien enthaltende impfstoffzusammensetzung
US5650398A (en) 1992-07-02 1997-07-22 Cambridge Biotech Corporation Drug delivery enhancement via modified saponins
EP0651805B1 (en) 1992-07-17 2006-12-13 Dana Farber Cancer Institute Method of intracellular binding of target molecules
US5736146A (en) 1992-07-30 1998-04-07 Yeda Research And Development Co. Ltd. Conjugates of poorly immunogenic antigens and synthetic peptide carriers and vaccines comprising them
US5447838A (en) 1992-08-05 1995-09-05 Hybritech Incorporated Protein-dye conjugate for confirmation of correct dilution of calibrators
US6511845B1 (en) 1992-08-07 2003-01-28 Alan R. Davis Methods for producing an immune response against HIV-1
KR950702839A (ko) 1992-08-27 1995-08-23 스티븐 딕 레트로, 인버소-, 및 레트로- 인버소 합성 펩티드 유사체(retro-, inverso-, and retro-inverso synthetic peptide analogues)
US5643756A (en) 1992-08-28 1997-07-01 The Public Health Research Institute Of The City Of New York, Inc. Fusion glycoproteins
US6004763A (en) 1992-09-11 1999-12-21 Institut Pasteur Antigen-carrying microparticles and their use in the induction of humoral or cellular responses
FR2695563B1 (fr) 1992-09-11 1994-12-02 Pasteur Institut Microparticules portant des antigènes et leur utilisation pour l'induction de réponses humorales ou cellulaires.
US5686078A (en) 1992-09-14 1997-11-11 Connaught Laboratories, Inc. Primary and secondary immunization with different physio-chemical forms of antigen
CA2105629A1 (en) 1992-09-14 1994-03-15 Robert S. Becker Potentiation of immunogenic response
US5652138A (en) 1992-09-30 1997-07-29 The Scripps Research Institute Human neutralizing monoclonal antibodies to human immunodeficiency virus
FI951600L (fi) 1992-10-05 1995-05-10 Hybridon Inc Terapeuttinen HIV:n vastainen oligonukleotidi ja lääkeaine
EP0890642A3 (de) 1992-10-06 2000-09-13 Dade Behring Marburg GmbH Retrovirus aus der HIV-Gruppe und dessen Verwendung
US6153378A (en) 1992-10-16 2000-11-28 Bionova Corporation Diagnosis of, and vaccination against, a positive stranded RNA virus using an isolated, unprocessed polypeptide encoded by a substantially complete genome of such virus
US5462852A (en) 1992-10-28 1995-10-31 The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary, Dhhs HIV Nucleocapsid protein capture assay and method of use
US5391479A (en) 1992-10-29 1995-02-21 E. I. Du Pont De Nemours And Company Method for determining total analyte concentration in a sample having both free and bound analyte
US5891623A (en) 1992-11-09 1999-04-06 Consorzio Per Le Biotecnologie Diagnosis and treatment of AIDS onset
ATE150975T1 (de) 1992-11-13 1997-04-15 Univ Washington Peripheralisierung hämatopoietischer stammzellen
US5384240A (en) 1992-11-25 1995-01-24 Akzo Nobel, N.V. Base dissociation assay
GB9225453D0 (en) 1992-12-04 1993-01-27 Medical Res Council Binding proteins
JP3720353B2 (ja) 1992-12-04 2005-11-24 メディカル リサーチ カウンシル 多価および多重特異性の結合タンパク質、それらの製造および使用
GB9227068D0 (en) 1992-12-29 1993-02-24 British Bio Technology Novel proteinaceous particles
AU6080794A (en) 1992-12-31 1994-08-15 Ramot University Authority For Applied Research And Industrial Development Ltd. Antibodies directed against binding-associated epitopes
ATE276276T1 (de) 1993-01-14 2004-10-15 Chemo Sero Therapeut Res Inst Rekombinanter anti-hiv antikörper und seine herstellung
WO1994016081A1 (de) 1993-01-16 1994-07-21 Manfred Schawaller Verfahren zur gewinnung nativer domänen viraler membranproteine, deren verwendung, insbesondere als impfstoff gegen hiv
US5633234A (en) 1993-01-22 1997-05-27 The Johns Hopkins University Lysosomal targeting of immunogens
US5593972A (en) 1993-01-26 1997-01-14 The Wistar Institute Genetic immunization
US7001759B1 (en) 1993-01-26 2006-02-21 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Compositions and methods for delivery of genetic material
US5981505A (en) 1993-01-26 1999-11-09 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Compositions and methods for delivery of genetic material
FR2701319B1 (fr) 1993-02-09 1995-04-21 Elie Stefas Procédé de détection et/ou de dosage de composés viraux et support portant une glycoprotéine.
DK17093D0 (da) 1993-02-15 1993-02-15 Lyfjathroun H F Farmaceutisk praeparat til topisk administrering af antigener og/eller vacciner til pattedyr via slimhinder
ATE359370T1 (de) 1993-02-22 2007-05-15 Gen Hospital Corp Heterologe antigene in stämmen zur impfung mit lebendzellen
US5817767A (en) 1993-02-24 1998-10-06 Progenics Pharmaceuticals, Inc. Synergistic composition of CD4-based protein and anti-HIV-1 antibody, and methods of using same
US5470701A (en) 1993-02-24 1995-11-28 The Regents Of The University Of California Method for determining favorable prognosis in an HIV positive subject using HLA-DR+ /CD38- CD8bright cells
PT690132E (pt) 1993-03-11 2004-04-30 Juridical Fou The Chemo Sero T Anticorpo monoclonal anti-hiv
US5607831A (en) 1993-03-25 1997-03-04 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services In vitro methods for assessing the susceptibility of HIV-1-infected individuals to cysteine protease-mediated activation-induced programmed cell death
US6495676B1 (en) 1993-04-13 2002-12-17 Naxcor Nucleic acid sequence detection employing probes comprising non-nucleosidic coumarin derivatives as polynucleotide-crosslinking agents
US6323185B1 (en) 1993-04-23 2001-11-27 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Anti-viral guanosine-rich oligonucleotides and method of treating HIV
DE69428896T2 (de) 1993-05-07 2002-06-20 Akzo Nobel N.V., Arnheim/Arnhem Hiv immunogene komplexe
AT399054B (de) 1993-05-12 1995-03-27 Thomas Dr Schlederer Verfahren zum nachweis von substanzen
US5576016A (en) 1993-05-18 1996-11-19 Pharmos Corporation Solid fat nanoemulsions as drug delivery vehicles
US5795572A (en) 1993-05-25 1998-08-18 Bristol-Myers Squibb Company Monoclonal antibodies and FV specific for CD2 antigen
CA2164298A1 (en) 1993-06-04 1994-12-22 Richard A. Young Stress proteins and uses therefor
US6017536A (en) 1993-06-07 2000-01-25 Trimeris, Inc. Simian immunodeficiency virus peptides with antifusogenic and antiviral activities
CA2164505A1 (en) 1993-06-07 1994-12-22 Phillip W. Berman Hiv envelope polypeptides
AU693098B2 (en) 1993-06-09 1998-06-25 Connaught Laboratories Limited Tandem synthetic HIV-1 peptides
US5834256A (en) 1993-06-11 1998-11-10 Cell Genesys, Inc. Method for production of high titer virus and high efficiency retroviral mediated transduction of mammalian cells
US5861242A (en) 1993-06-25 1999-01-19 Affymetrix, Inc. Array of nucleic acid probes on biological chips for diagnosis of HIV and methods of using the same
US5478753A (en) 1993-06-29 1995-12-26 Pb Diagnostic Systems, Inc. Positive calibrator/control composition for an IgM serology assay and an IgM serology assay
US5614413A (en) 1993-07-01 1997-03-25 The Uab Research Foundation Encapsidated recombinant poliovirus nucleic acid and methods of making and using same
CA2125344A1 (en) 1993-07-01 1995-01-02 Casey D. Morrow Encapsidated recombinant poliovirus nucleic acid and methods of making and using same
US5981259A (en) 1993-07-07 1999-11-09 University Technology Corporation CD4+ T-lymphocyte protease genes and inhibitors thereof
US5470572A (en) 1993-07-16 1995-11-28 University Of Puerto Rico Non-infectious simian immunodeficiency virus particles produced by cell line CRL 11393
US5851829A (en) 1993-07-16 1998-12-22 Dana-Farber Cancer Institute Method of intracellular binding of target molecules
US5354654A (en) 1993-07-16 1994-10-11 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy Lyophilized ligand-receptor complexes for assays and sensors
US5728385A (en) 1993-08-12 1998-03-17 Classen Immunotherapies, Inc. Method and composition for an early vaccine to protect against both common infectious diseases and chronic immune mediated disorders or their sequelae
US5543328A (en) 1993-08-13 1996-08-06 Genetic Therapy, Inc. Adenoviruses having modified fiber proteins
US5585250A (en) 1993-08-20 1996-12-17 The United States Of America As Represented By The Department Of Health & Human Services Dampening of an immunodominant epitope of an antigen for use in plant, animal and human compositions and immunotherapies
FR2709309B1 (fr) 1993-08-25 1995-11-10 Centre Nat Rech Scient Compositions cellulaires, préparation et utilisations thérapeutiques.
US5762939A (en) 1993-09-13 1998-06-09 Mg-Pmc, Llc Method for producing influenza hemagglutinin multivalent vaccines using baculovirus
US5834441A (en) 1993-09-13 1998-11-10 Rhone-Poulenc Rorer Pharmaceuticals Inc. Adeno-associated viral (AAV) liposomes and methods related thereto
US6015686A (en) 1993-09-15 2000-01-18 Chiron Viagene, Inc. Eukaryotic layered vector initiation systems
US5500161A (en) 1993-09-21 1996-03-19 Massachusetts Institute Of Technology And Virus Research Institute Method for making hydrophobic polymeric microparticles
US5510264A (en) 1993-09-28 1996-04-23 Insight Biotech Inc. Antibodies which bind meningitis related homologous antigenic sequences
EP0723664A1 (en) 1993-10-15 1996-07-31 Eva M. Rakowicz-Szulczynska Detection and treatment of breast and gynecological cancer
CA2174532A1 (en) 1993-10-19 1995-04-27 Carlos F. Barbas Synthetic human neutralizing monoclonal antibodies to human immunodeficiency virus
AU685521B2 (en) 1993-10-19 1998-01-22 Ajinomoto Co., Inc. Peptide capable of inducing immune response against HIV and aids preventive or remedy containing the peptide
US6074646A (en) 1993-10-26 2000-06-13 Board Of Regents, The University Of Texas System Nondenatured HIV envelope antigens for detecting early HIV-specific antibodies
US5961970A (en) 1993-10-29 1999-10-05 Pharmos Corporation Submicron emulsions as vaccine adjuvants
US5985926A (en) 1993-11-01 1999-11-16 Cell Therapeutics, Inc. Method for inhibiting intracellular viral replication
US5981537A (en) 1993-11-12 1999-11-09 Pharmacia & Upjohn Company Pyrimidine-thioalkyl and alkylether compounds
US6025141A (en) 1993-12-10 2000-02-15 The Canadian Red Cross Society Immunofluorescence assay for the detection of antibodies using recombinant antigens in insoluble form
US5667783A (en) 1993-12-13 1997-09-16 Constantine Alen Method of treating HIV positive subjects
EP0659885A1 (en) 1993-12-21 1995-06-28 Akzo Nobel N.V. Vaccine against viruses associated with antibody-dependent-enhancement of viral infectivity
GB9326174D0 (en) 1993-12-22 1994-02-23 Biocine Sclavo Mucosal adjuvant
US5712384A (en) 1994-01-05 1998-01-27 Gene Shears Pty Ltd. Ribozymes targeting retroviral packaging sequence expression constructs and recombinant retroviruses containing such constructs
AU1838495A (en) 1994-02-03 1995-08-21 Scripps Research Institute, The Method for using tobacco mosaic virus to overproduce peptides and proteins
US5569468A (en) 1994-02-17 1996-10-29 Modi; Pankaj Vaccine delivery system for immunization, using biodegradable polymer microspheres
ATE362977T1 (de) 1994-02-14 2007-06-15 Macfarlane Burnet Ct For Medic Nicht pathogene stämme des hiv-1
US6015661A (en) 1994-02-14 2000-01-18 The Macfarlane Burnet Centre For Medical Research Limited Methods for the detection of non-pathogenic HIV-1 strains containing deletions in the Nef coding region and U3 region of the LTR
DE4405810A1 (de) 1994-02-23 1995-08-24 Behringwerke Ag Von einem Retrovirus aus der HIV-Gruppe abgeleitete Peptide und deren Verwendung
US6995008B1 (en) 1994-03-07 2006-02-07 Merck & Co., Inc. Coordinate in vivo gene expression
US5961979A (en) 1994-03-16 1999-10-05 Mount Sinai School Of Medicine Of The City University Of New York Stress protein-peptide complexes as prophylactic and therapeutic vaccines against intracellular pathogens
US5739118A (en) 1994-04-01 1998-04-14 Apollon, Inc. Compositions and methods for delivery of genetic material
US5571515A (en) 1994-04-18 1996-11-05 The Wistar Institute Of Anatomy & Biology Compositions and methods for use of IL-12 as an adjuvant
EP0758396B1 (en) 1994-04-29 2006-07-26 Pharmacia & Upjohn Company LLC Feline immunodeficiency virus vaccine
US6511812B1 (en) 1994-05-09 2003-01-28 Abbott Laboratories Method and test kit for use in improving immunoassay specificity
US5573916A (en) 1994-05-19 1996-11-12 Coretech, Inc. Immunogenic constructs comprising b-cell and t-cell epitopes on common carrier
US5639598A (en) 1994-05-19 1997-06-17 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Method and kit for identification of antiviral agents capable of abrogating HIV Vpr-Rip-1 binding interactions
US5585263A (en) 1994-05-20 1996-12-17 University Of Alabama At Birmingham Research Foundation Purified retroviral constitutive transport enhancer and its use to facilitate mRNA transport, and to produce recombinant, attenuated HIV
US5773225A (en) 1994-05-24 1998-06-30 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Screening method for the identification of compounds capable of abrogation HIV-1 gag-cyclophilin complex formation
US6222024B1 (en) 1994-05-24 2001-04-24 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Nucleic acids encoding a human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) integrase interactor protein (INI-1)
US5869058A (en) 1994-05-25 1999-02-09 Yeda Research And Development Co. Ltd. Peptides used as carriers in immunogenic constructs suitable for development of synthetic vaccines
US5641624A (en) 1994-06-02 1997-06-24 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Method for measuring anti-HIV-1 p24 antibody and use thereof
WO1995033835A1 (en) 1994-06-02 1995-12-14 Chiron Corporation Nucleic acid immunization using a virus-based infection/transfection system
US7175843B2 (en) 1994-06-03 2007-02-13 Genetics Institute, Llc Methods for selectively stimulating proliferation of T cells
US5556745A (en) 1994-06-03 1996-09-17 Sch+E,Uml U+Ee Pbach; J+E,Uml O+Ee Rg Method for the detection and quantitative determination of antigen in a test sample containing immune complexes of antigen bound to antibodies and to rheumatoid factors
US6319665B1 (en) 1994-06-07 2001-11-20 Inverness Medical Technology, Inc. Home test kit and method with telephone verification of results
US6764682B1 (en) 1994-06-16 2004-07-20 Aventis Pasteur Limited Adjuvant compositions containing more than one adjuvant
US6653066B1 (en) 1994-06-17 2003-11-25 Trinity Biotech Device and method for detecting polyvalent substances
GB9414118D0 (en) 1994-07-13 1994-08-31 Axis Genetics Ltd Modified plant viruses as vectors of heterologous peptides
ES2171190T3 (es) 1994-07-25 2002-09-01 Roche Diagnostics Gmbh Peptidos marcados con haptenos.
CN1148578C (zh) 1994-07-25 2004-05-05 罗切诊断学有限公司 免疫测定特异抗体的方法、所用试剂、抗原及其用途
US5618922A (en) 1994-07-25 1997-04-08 Nissin Shokuhin Kabushiki Kaisha NM03 antibody materials and methods
AU689626B2 (en) 1994-07-25 1998-04-02 Boehringer Mannheim Gmbh Peptides marked with metal chelates
US5846806A (en) * 1994-07-29 1998-12-08 American Cyanamid Company Identification of a human cytomegalovirus gene region involved in down-regulation of MHC class I heavy chain expression
US5885580A (en) 1994-07-29 1999-03-23 Ajinomoto Co., Inc. Anti-AIDS secretory recombinant BCG vaccine
US5733760A (en) 1994-08-05 1998-03-31 Virus Research Institute Salmonella vectors encoding truncated pag fusion protein, method of making, and uses thereof
US5686578A (en) 1994-08-05 1997-11-11 Immunomedics, Inc. Polyspecific immunoconjugates and antibody composites for targeting the multidrug resistant phenotype
US5627025A (en) 1994-08-12 1997-05-06 The Rockefeller University Method for the identification of compounds capable of abrogating human immunodeficiency virus (HIV) infection of dendritic cells and T-lymphocytes
US5955342A (en) 1994-08-15 1999-09-21 Connaught Laboratories Limited Non-infectious, replication-defective, self-assembling HIV-1 viral particles containing antigenic markers in the gag coding region
US6291157B1 (en) 1998-02-23 2001-09-18 Connaught Laboratories Limited Antigenically-marked non-infectious retrovirus-like particles
US5858838A (en) 1998-02-23 1999-01-12 Taiwan Semiconductor Manufacturing Company, Ltd. Method for increasing DRAM capacitance via use of a roughened surface bottom capacitor plate
US6436407B1 (en) 1994-08-26 2002-08-20 The Administrators Of The Tulane Educational Fund Mutant enterotoxin effective as a non-toxic adjuvant
FI98961C (fi) 1994-08-26 1997-09-10 Medix Biochemica Ab Oy Menetelmät ja määritysvälineet parodontaalisairauden aktiivisuuden ja/tai peri-implantiitin ja/tai niiden kohonneen riskin diagnosoimiseksi
AU3541495A (en) 1994-09-01 1996-03-22 Wisconsin Alumni Research Foundation Therapeutic remodeling in aids
US5861161A (en) 1994-09-07 1999-01-19 Universite De Montreal Chimeric proteins comprising a Vpr/Vpx virion incorporation domain for targeting into HIV-1 or HIV-2 virions
US5698446A (en) 1994-09-07 1997-12-16 Chiron Corporation Methods and compositions for inhibiting production of replication competent virus
US5766842A (en) 1994-09-16 1998-06-16 Sepracor, Inc. In vitro method for predicting the evolutionary response of a protein to a drug targeted thereagainst
US5763190A (en) 1994-09-21 1998-06-09 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Methods for the identification of compounds capable of inducing the nuclear translocation of a receptor complex comprising the glucocoticoid receptor type II and viral protein R interacting protein
US6001555A (en) 1994-09-23 1999-12-14 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Method for identifying and using compounds that inactivate HIV-1 and other retroviruses by attacking highly conserved zinc fingers in the viral nucleocapsid protein
US6376170B1 (en) 1994-10-03 2002-04-23 The Scripps Research Institute Ligand capture-directed selection of antibody
JP3907698B2 (ja) 1994-10-03 2007-04-18 アメリカ合衆国 抗原を発現する組み換えウイルスと免疫刺激分子を発現する組み換えウイルスとを含む組成物
GB2294047A (en) 1994-10-14 1996-04-17 Merck & Co Inc Synthetic peptides for use as epitopes specific for HIV
US6083903A (en) 1994-10-28 2000-07-04 Leukosite, Inc. Boronic ester and acid compounds, synthesis and uses
US5667964A (en) 1994-10-28 1997-09-16 Cornell Research Foundation, Inc. Rapid, direct, and qualitative method for the determination of the number of HIV-1-infected patient cells employing reactive oxygen intermediate generators
US6124132A (en) 1994-11-07 2000-09-26 Blake Laboratories, Inc. Use of anti-HIV IGA antibodies for producing immunological protection against the human immunodeficiency virus
US5695938A (en) 1994-12-09 1997-12-09 City Of Hope Anti-HIV ribozymes
US6103521A (en) 1995-02-06 2000-08-15 Cell Genesys, Inc. Multispecific chimeric receptors
DE19504211A1 (de) 1995-02-09 1996-08-14 Behringwerke Ag Entfernen von Viren durch Ultrafiltration aus Proteinlösungen
US5824497A (en) 1995-02-10 1998-10-20 Mcmaster University High efficiency translation of mRNA molecules
US6548635B1 (en) 1995-02-16 2003-04-15 Dade Behring Marburg Gmbh Retrovirus from the HIV type O and its use (MVP-2901/94)
DE19505262C2 (de) 1995-02-16 1998-06-18 Behring Diagnostics Gmbh Retrovirus aus der HIV-Gruppe und dessen Verwendung
US5658745A (en) 1995-02-17 1997-08-19 E. I. Du Pont De Nemours And Company Cell enumeration immunoassay
FR2730735B1 (fr) 1995-02-20 1997-05-09 Pasteur Institut Sequences amplificatrices, vecteurs portant ces sequences et leurs utilisations dans des compositions pour l'expression de sequences nucleotidiques dans des cellules transfectees, applications therapeutiques et vaccinales
US6287557B1 (en) 1995-02-21 2001-09-11 Cantab Pharmaceuticals Research Limited Methods of gene therapy using herpes viral vectors expressing GM-CSF
US5843635A (en) 1995-02-27 1998-12-01 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Inhibition of APC-mediated apoptosis of activated T lymphocytes
FR2731013B1 (fr) 1995-02-27 1997-05-16 Inst Nat Sante Rech Med Vih-1 de groupe o, fragments desdits virus, ainsi que leurs applications
US5736317A (en) 1995-03-07 1998-04-07 Akzo Nobel N.V. Human T-cell line infected with HIV-2 which secretes a protein corresponding to native HIV-2 gp160 in an extracellular medium
US5817470A (en) 1995-03-10 1998-10-06 Sociedad Biotecnologica Collico Limitada Immobilization of antigens to solid support by the mussel adhesive polyphenolic protein and the method for use therein
CA2215162A1 (en) 1995-03-23 1996-09-26 Cantab Pharmaceuticals Research Limited Vectors for gene delivery
US5962428A (en) 1995-03-30 1999-10-05 Apollon, Inc. Compositions and methods for delivery of genetic material
EP0820311A4 (en) 1995-04-04 2002-09-25 Cell Genesys Inc TRANSPLANTATION OF GENETICALLY MODIFIED CELLS WITH LOW CLASS I PROTEIN RATES OF THE MAJOR HISTOCOMPATIBILITY COMPLEX ON THEIR SURFACE
US5703057A (en) 1995-04-07 1997-12-30 Board Of Regents The University Of Texas System Expression library immunization
US6335358B1 (en) 1995-04-12 2002-01-01 President And Fellows Of Harvard College Lactacystin analogs
US6838477B2 (en) 1995-04-12 2005-01-04 President And Fellows Of Harvard College Lactacystin analogs
US5645836A (en) 1995-04-14 1997-07-08 Research Development Foundation Anti-AIDS immunotoxins
DE69637677D1 (de) 1995-04-14 2008-10-23 Univ Alabama Res Found Transfer system basierend auf einem fusionsprotein und seine anwendungen.
ATE219105T1 (de) 1995-04-19 2002-06-15 Polymun Scient Immunbio Forsch Monoklonale antikörper gegen hiv-1 und davon hergestellte impfstoffe
AR003941A1 (es) 1995-04-19 1998-09-30 Polymun Scient Immunbilogische Forschung Gmbh Anticuerpos monoclonales humanos neutralizadores de hiv-1
US6428790B1 (en) 1995-04-27 2002-08-06 The United States Of America As Represented By The Secretary Department Of Health And Human Services Cyanovirin conjugates and matrix-anchored cyanovirin and related compositions and methods of use
US6987096B1 (en) 1995-04-27 2006-01-17 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Antiviral proteins and peptides, DNA coding sequences therefor, and uses thereof
UA56992C2 (uk) 1995-05-08 2003-06-16 Фармація Енд Апджон Компані <font face="Symbol">a</font>-ПІРИМІДИНТІОАЛКІЛЗАМІЩЕНІ ТА <font face="Symbol">a</font>-ПІРИМІДИНОКСОАЛКІЛЗАМІЩЕНІ СПОЛУКИ
US5874226A (en) 1995-05-22 1999-02-23 H. Lee Browne In situ immunodetection of antigens
US6902743B1 (en) 1995-05-22 2005-06-07 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army Therapeutic treatment and prevention of infections with a bioactive material(s) encapuslated within a biodegradable-bio-compatable polymeric matrix
US6007838A (en) 1995-06-07 1999-12-28 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army Process for making liposome preparation
US7223739B1 (en) 1995-06-07 2007-05-29 Powderject Vaccines, Inc. Adjuvanted genetic vaccines
US5811524A (en) 1995-06-07 1998-09-22 Idec Pharmaceuticals Corporation Neutralizing high affinity human monoclonal antibodies specific to RSV F-protein and methods for their manufacture and therapeutic use thereof
AU723158B2 (en) 1995-06-07 2000-08-17 Progenics Pharmaceuticals, Inc. Fluorescence resonance energy transfer screening assay for the identification of HIV-1 envelope glycoprotein-medicated cell
US6114507A (en) 1995-06-30 2000-09-05 Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. Anti-Fas ligand antibody and assay method using the anti-Fas ligand antibody
UA68327C2 (en) 1995-07-04 2004-08-16 Gsf Forschungszentrum Fur Unwe A recombinant mva virus, an isolated eukaryotic cell, infected with recombinant mva virus, a method for production in vitro of polypeptides with use of said cell, a method for production in vitro of virus parts (variants), vaccine containing the recombinant mva virus, a method for immunization of animals
US6326007B1 (en) 1995-07-20 2001-12-04 The Regents Of The University Of California Attenuated lentivirus vectors expressing interferon
IL123109A0 (en) 1995-08-18 1998-09-24 Rentschler Biotech Gmbh Pharmaceutical compositions for competitively inhibiting the binding of a retrovirus to the ifn-receptor and means for diagnosis of an hiv infection
US5660990A (en) 1995-08-18 1997-08-26 Immunivest Corporation Surface immobilization of magnetically collected materials
JP3840521B2 (ja) 1995-08-21 2006-11-01 Ａｓｐｉｏｎ株式会社 ウイルス検出方法およびウイルス検査用キット
US5985270A (en) 1995-09-13 1999-11-16 Fordham University Adoptive immunotherapy using macrophages sensitized with heat shock protein-epitope complexes
US5935576A (en) 1995-09-13 1999-08-10 Fordham University Compositions and methods for the treatment and prevention of neoplastic diseases using heat shock proteins complexed with exogenous antigens
US5993812A (en) 1995-09-14 1999-11-30 Cangene Corporation Method of delaying the progression of an infection with the human immunodeficiency virus
US5705522A (en) 1995-09-15 1998-01-06 Compagnie De Developpement Aguettant S.A. Compounds having anti-inflammatory and anti-viral activity, compositions of these, alone and in combination with reverse transcriptase inhibitors
AU6996396A (en) 1995-09-22 1997-04-09 Medical Research Council Improvements in or relating to mutagenesis of nucleic acids
DE19541450C2 (de) 1995-11-07 1997-10-02 Gsf Forschungszentrum Umwelt Genkonstrukt und dessen Verwendung
US5888767A (en) 1996-11-27 1999-03-30 The Johns Hopkins University School Of Medicine Method of using a conditionally replicating viral vector to express a gene
CA2239027A1 (en) 1995-12-05 1997-06-12 David J. Phipps Methods for the early detection of hiv infection
US6265184B1 (en) 1995-12-20 2001-07-24 Icos Corporation Polynucleotides encoding chemokine receptor 88C
US5919457A (en) 1996-01-11 1999-07-06 Regents Of The University Of Minnesota TXU-5/B53-PAP antiviral biotherapeutic agent for the treatment of AIDS
US6406710B1 (en) 1996-01-16 2002-06-18 Nikos Panayotatos Protein occlusion for delivery of small molecules
CU22559A1 (es) 1996-01-17 1999-05-03 Ct Ingenieria Genetica Biotech Sistema de expresión de antígenos heterologos en e. coli como proteínas de fusión
US7118859B2 (en) 1996-01-17 2006-10-10 Progenics Pharmaceuticals, Inc. Methods for inhibiting HIV-1 infection
US6495526B2 (en) 1996-01-23 2002-12-17 Gpc Biotech, Inc. Inhibitors of cell-cycle progression and uses related thereto
US5747526A (en) 1996-01-25 1998-05-05 Hollinshead; Ariel C. Anti-HIV /Aids Chemo(C)-, immuno(I)-, or ci-therapy using tur (or related compounds) and/or NVA (or EPV)
US6060587A (en) 1996-01-29 2000-05-09 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Cellular receptor for HIV-1 VPR essential for G2/M phase transition of the cell cycle
US5869493A (en) 1996-02-16 1999-02-09 Medivir Ab Acyclic nucleoside derivatives
US6703394B2 (en) 1996-02-16 2004-03-09 Medivir Ab Acyclic nucleoside derivatives
US6534312B1 (en) 1996-02-22 2003-03-18 Merck & Co., Inc. Vaccines comprising synthetic genes
US6045788A (en) 1996-02-28 2000-04-04 Cornell Research Foundation, Inc. Method of stimulation of immune response with low doses of IL-2
US6509313B1 (en) 1996-02-28 2003-01-21 Cornell Research Foundation, Inc. Stimulation of immune response with low doses of cytokines
US5840305A (en) 1996-03-14 1998-11-24 The Picower Institute For Medical Research Treatment of HIV-Infection by interfering with host cell cyclophilin receptor activity
US6033672A (en) 1996-03-15 2000-03-07 University Of Southern California Method of stimulating an immune response to caprine arthritis-encephalitis virus (CAEV) in humans through the administration of CAEV immunogens
US5985545A (en) 1996-03-19 1999-11-16 Yamamoto; Nobuto Diagnostic and prognostic ELISA assays of serum α-N-acetylgalactosaminidase for AIDS
US6207185B1 (en) 1996-03-22 2001-03-27 Bio-Sphere Technology Method for inducing a systemic immune response to an HIV antigen
US5950176A (en) 1996-03-25 1999-09-07 Hsx, Inc. Computer-implemented securities trading system with a virtual specialist function
US6344545B1 (en) 1996-06-14 2002-02-05 Progenics Pharmaceuticals, Inc. Method for preventing HIV-1 infection of CD4+ cells
US5866341A (en) 1996-04-03 1999-02-02 Chugai Pharmaceutical Co., Ltd. Compositions and methods for screening drug libraries
US6451592B1 (en) 1996-04-05 2002-09-17 Chiron Corporation Recombinant alphavirus-based vectors with reduced inhibition of cellular macromolecular synthesis
US6465634B1 (en) 1996-04-05 2002-10-15 Chiron Corporation Recombinant alphavirus-based vectors with reduced inhibition of cellular macromolecular synthesis
US6225045B1 (en) 1996-05-13 2001-05-01 Ribotargets, Ltd. Assays for screening for inhibitors of HIV
DE19617851A1 (de) 1996-05-03 1997-11-13 Hoechst Ag Nukleinsäurekonstrukte mit Genen kodierend für Transportsignale
US5961976A (en) 1996-06-03 1999-10-05 United Biomedical, Inc. Antibodies against a host cell antigen complex for pre- and post-exposure protection from infection by HIV
US5741706A (en) 1996-06-13 1998-04-21 Immusol, Incorporated Anti-HIV ribozymes
US6319504B1 (en) 1996-06-24 2001-11-20 University Of Maryland Biotechnology Institute Treatment and prevention of HIV infection by administration of derivatives of human chorionic gonadotropin
US5994515A (en) 1996-06-25 1999-11-30 Trustees Of The University Of Pennsylvania Antibodies directed against cellular coreceptors for human immunodeficiency virus and methods of using the same
US5951975A (en) 1996-06-28 1999-09-14 University Of Pittsburgh Induction of CTLs specific for natural antigens by cross priming immunization
BR9710054A (pt) 1996-06-28 2000-01-11 Caliper Techn Corp Aparelhos para separar compostos de teste para um efeito sobre um sistema bioquìmico e para detectar ummefeito de um composto de teste sobre um sistema bioquìmico, processos de determinação de se uma amostra contém um composto capaz de afetar um sistema bioquìmico, de separação de uma pluralidade de compostos de teste para um efeito sobre um sistema bioquìmico e usos de um sistema microfluido e de um substrato de ensaio.
DE69707140T2 (de) 1996-07-02 2002-06-20 Bbi Bioseq, Inc. Druck-ermittelte bindung von biomolekularen komplexen
WO1998000560A2 (en) 1996-07-02 1998-01-08 Massachusetts Institute Of Technology Method for determining lymphocyte distribution and trafficking in mammals using imaging
ATE310738T1 (de) 1996-07-05 2005-12-15 Us Gov Health & Human Serv Gesättigte 1,2-dithiaheterocyclische verbindungen enthaltende antivirale pharmazeutische zubereitungen
ZA975889B (en) 1996-07-08 1998-02-23 Genentech Inc HIV envelope polypeptides and vaccine.
US6248514B1 (en) 1996-07-09 2001-06-19 Canji, Inc. Methods for measuring viral infectivity
DE19629444A1 (de) 1996-07-22 1998-01-29 Behringwerke Ag Sensitivitätssteigerung bei der immunchemischen Bestimmung eines Analyten
PT966301E (pt) 1996-07-31 2005-06-30 Ortho Mcneil Pharm Inc Identificacao de genes do citomegalovirus humano envolvidos na regulacao negativa da expressao da cadeia pesada do mhc classe i
US6057102A (en) 1996-08-08 2000-05-02 The Aaron Diamond Aids Research Center HIV coreceptor mutants
US6107020A (en) 1996-09-20 2000-08-22 Roger Williams Hospital Model for protective and pathogenic roles of HIV-1 env-directed antibody dependent cellular cytotoxicity interaction with viral load, and uses thereof
DE19639103A1 (de) 1996-09-24 1998-03-26 Hoechst Ag Nukleinsäurekonstrukte mit Hybridpromotoren für gentherapeutische Maßnahmen
NZ334941A (en) 1996-10-10 2000-11-24 Probe Internat Methods for treating infections using proteins which induce an immune response in one animal species but not in another
US5817458A (en) 1996-10-15 1998-10-06 The Avriel Group, Amcas Division Inc. Reagent system for detecting HIV-infected peripheral blood lymphocytes in whole blood
US6024965A (en) 1996-10-18 2000-02-15 Erasums University Rotterdam Induction of REV and TAT specific cytotoxic T-cells for prevention and treatment of human immunodeficiency virus (HIV) infection
US5939538A (en) 1996-10-25 1999-08-17 Immusol Incorporated Methods and compositions for inhibiting HIV infection of cells by cleaving HIV co-receptor RNA
US5962318A (en) 1996-11-15 1999-10-05 St. Jude Children's Research Hospital Cytotoxic T lymphocyte-mediated immunotherapy
DE19649390A1 (de) 1996-11-29 1998-06-04 Boehringer Mannheim Gmbh Antigenspezifischer IgG-Nachweis
DE19649389A1 (de) 1996-11-29 1998-06-04 Boehringer Mannheim Gmbh Antigenspezifischer IgM-Nachweis
US6231859B1 (en) 1996-12-02 2001-05-15 Aquila Biopharmaceuticals, Inc. Saponin adjuvant compositions
US6039684A (en) 1997-12-11 2000-03-21 Allegheny University Of The Health Sciences Non-lethal conditioning methods for the treatment of acquired immunodeficiency syndrome
US5922550A (en) 1996-12-18 1999-07-13 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Biosensing devices which produce diffraction images
EP0849596B1 (de) 1996-12-19 2006-02-15 Dade Behring Marburg GmbH Immundissoziation zur Verbesserung der immunchemischen Bestimmung eines Analyten
US6096291A (en) 1996-12-27 2000-08-01 Biovector Therapeutics, S.A. Mucosal administration of substances to mammals
US6506384B1 (en) 1997-12-31 2003-01-14 New York University Early detection of mycobacterial disease
US6245331B1 (en) 1997-01-02 2001-06-12 New York Univ. Medical Center Early detection of mycobacterial disease
US5766944A (en) 1996-12-31 1998-06-16 Ruiz; Margaret Eileen T cell differentiation of CD34+ stem cells in cultured thymic epithelial fragments
ATE516034T1 (de) 1997-01-02 2011-07-15 Univ Jefferson Verfahren zur modulation der immunreaktion in einem infektierten säugetier mittels transmukosales eingeben eines modulationsmittel
US6063905A (en) 1997-01-07 2000-05-16 Board Of Regents, The University Of Texas System Recombinant human IGA-J. chain dimer
US6197531B1 (en) 1997-01-22 2001-03-06 Center For Blood Research, Inc. Method for determining the immunocompetence of a mammal and therapies related thereto
US6884435B1 (en) 1997-01-30 2005-04-26 Chiron Corporation Microparticles with adsorbent surfaces, methods of making same, and uses thereof
US6696291B2 (en) 1997-02-07 2004-02-24 Merck & Co., Inc. Synthetic HIV gag genes
WO1998035062A1 (en) 1997-02-07 1998-08-13 Lingappa Jaisri R Multistep, atp-dependent cell-free system for the assembly of human immunodeficiency virus capsids
EP0860445A1 (en) 1997-02-18 1998-08-26 Hoechst Aktiengesellschaft New nucleotide sequences for the cell cycle regulated expression of structural genes
DK0975783T3 (da) 1997-02-27 2002-01-28 Bundesrepublik Deutschland Let Retrovirusvektorer, fremgangsmåde til fremstilling heraf samt deres anvendelse til genoverføring til CD4-positive celler
AU6727798A (en) 1997-03-10 1998-09-29 Roche Diagnostics Gmbh Method for simultaneous detection of hiv antigens and hiv antibodies
AU1629197A (en) 1997-03-14 1998-09-17 Transgene S.A. Expression of a foamy virus envelope protein
US6111087A (en) 1997-03-14 2000-08-29 Transgene S.A. Expression of a foamy virus envelope protein
US6818222B1 (en) 1997-03-21 2004-11-16 Chiron Corporation Detoxified mutants of bacterial ADP-ribosylating toxins as parenteral adjuvants
US6214540B1 (en) 1997-03-26 2001-04-10 University Of Maryland Biotechnology Institute Chemokines that inhibit immunodeficiency virus infection and methods based thereon
WO1998044945A1 (en) 1997-04-04 1998-10-15 The Immune Response Corporation Non-infectious, protease defective hiv particles and nucleic acid molecules encoding therefor
US6207455B1 (en) 1997-05-01 2001-03-27 Lung-Ji Chang Lentiviral vectors
US6531123B1 (en) 1997-05-01 2003-03-11 Lung-Ji Chang Lentiviral vectors
DE19718361A1 (de) 1997-05-02 1998-11-05 Dade Behring Marburg Gmbh Immunoassay zur Aviditätsbestimmung von Immunglobulinen
US6100234A (en) 1997-05-07 2000-08-08 Tufts University Treatment of HIV
US6099847A (en) 1997-05-15 2000-08-08 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Chimeric Gag pseudovirions
US6080725A (en) 1997-05-20 2000-06-27 Galenica Pharmaceuticals, Inc. Immunostimulating and vaccine compositions employing saponin analog adjuvants and uses thereof
AU7499498A (en) 1997-05-21 1998-12-11 Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services, The Methods and compositions for making dendritic cells from expanded populations ofmonocytes and for activating t cells
US6372217B1 (en) 1997-06-03 2002-04-16 Regents Of The University Of Minnesota Methods for the treatment of CD7+ viral infection with TXU-7-PAP
DE19723463A1 (de) 1997-06-04 1998-12-10 Dade Behring Marburg Gmbh Immunchemische Bestimmung von multivalenten Analyten
US20030138454A1 (en) 1997-06-09 2003-07-24 Oxxon Pharmaccines, Ltd. Vaccination method
US6070126A (en) 1997-06-13 2000-05-30 William J. Kokolus Immunobiologically-active linear peptides and method of identification
US6780598B1 (en) 1997-06-13 2004-08-24 William J. Kokolus Method of identifying and locating immunobiologically-active linear peptides
US20020136722A1 (en) 1997-06-18 2002-09-26 Heath Andrew William Vaccination method
US7118742B2 (en) 1997-07-07 2006-10-10 La Jolla Institute For Allergy And Immunology Ligand for herpes simplex virus entry mediator and methods of use
IS4518A (is) 1997-07-09 1999-01-10 Lyfjathroun Hf, The Icelandic Bio Pharmaceutical Group Nýtt lyfjaform fyrir bóluefni
US6855539B2 (en) 1997-07-11 2005-02-15 Pamgene International B.V. Device for performing an assay, a method for manufacturing said device, and use of a membrane in the manufacture of said device
US5891994A (en) 1997-07-11 1999-04-06 Thymon L.L.C. Methods and compositions for impairing multiplication of HIV-1
EP1003878A2 (en) 1997-07-18 2000-05-31 Innogenetics N.V. Hiv-1 group o antigens and uses thereof
DE19731465A1 (de) 1997-07-22 1999-01-28 Boehringer Mannheim Gmbh Verwendung von Kontrollflächen zur Detektion von Störproben in einem Nachweisverfahren
US6153392A (en) 1997-07-30 2000-11-28 Bionova Corporation Devices and methods comprising an HBcAg from hepatitis B virus
EP0905516A1 (en) 1997-07-31 1999-03-31 Sumitomo Pharmaceuticals Company, Limited Circulation thin layer liquid phase assay
DE19733364A1 (de) 1997-08-01 1999-02-04 Koszinowski Ulrich H Prof Verfahren zur Klonierung eines großen Virusgenoms
WO1999007869A1 (en) 1997-08-05 1999-02-18 University Of Florida Live recombinant vaccine comprising inefficiently or non-replicating virus
US6716823B1 (en) 1997-08-13 2004-04-06 The Uab Research Foundation Noninvasive genetic immunization, expression products therefrom, and uses thereof
US6348450B1 (en) 1997-08-13 2002-02-19 The Uab Research Foundation Noninvasive genetic immunization, expression products therefrom and uses thereof
US6635472B1 (en) 1997-08-15 2003-10-21 Rubicon Laboratory, Inc. Retrovirus and viral vectors
US6019979A (en) 1997-08-15 2000-02-01 The Picower Institute For Medical Research Anti-viral treatment with pertussis toxin B oligomer
WO1999009154A2 (en) 1997-08-19 1999-02-25 Hybridon, Inc. Novel hiv-specific synthetic oligonucleotides and methods of their use
AU734180B2 (en) 1997-08-29 2001-06-07 Antigenics Llc Compositions comprising the adjuvant qs-21 and polysorbate or cyclodextrin as excipient
US6815201B2 (en) 1997-09-08 2004-11-09 The Public Health Research Institute Of The City Of New York, Inc. HIV-1 gp120 V1/V2 domain epitopes capable of generating neutralizing antibodies
US6287568B1 (en) 1997-09-09 2001-09-11 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Methods relating to immunogenic dextran-protein conjugates
GB9719357D0 (en) 1997-09-11 1997-11-12 Ortho Clinical Diagnostics Immunoassay Utilizing Two Incubations With Labelled Antigen
WO1999013905A1 (en) 1997-09-18 1999-03-25 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Receptor-binding pocket mutants of influenza a virus hemagglutinin for use in targeted gene delivery
NZ503586A (en) 1997-09-25 2002-03-28 Upjohn Co Thioalkyl alpha substituted pyrimidine compounds for treating HIV.
US6368604B1 (en) 1997-09-26 2002-04-09 University Of Maryland Biotechnology Institute Non-pyrogenic derivatives of lipid A
US6511830B1 (en) 1997-09-26 2003-01-28 Kyowa, Hakko Kogyo Co., Ltd. Killer T cell receptor recognizing human immunodeficiency virus
US6716429B1 (en) 1997-10-01 2004-04-06 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Stabilization of envelope glycoprotein trimers by disulfide bonds introduced into a gp 41 glycoprotein ectodomain
US6969609B1 (en) 1998-12-09 2005-11-29 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Serivces Recombinant vector expressing multiple costimulatory molecules and uses thereof
EP1030861A4 (en) 1997-10-31 2001-09-05 Maxygen Inc MODIFICATION OF VIRUSTROPISMIUS AND THE ECONOMIC SPECTRUM BY VIRAL GENOM MIXING
US6908617B1 (en) 1997-11-10 2005-06-21 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Glycosylated modified primate lentivirus envelope polypeptides
WO1999024465A1 (en) 1997-11-10 1999-05-20 Dana-Farber Cancer Institute Stabilized primate lentivirus envelope glycoproteins
US5972339A (en) 1997-11-13 1999-10-26 The General Hospital Corporation Method of eliciting anti-HIV-1 helper T cell responses
FR2771011B1 (fr) 1997-11-17 2000-01-28 Hippocampe Obtention de vaccins destines a prevenir les effets pathogenes associes a une infection retrovirale
US6099848A (en) 1997-11-18 2000-08-08 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Immunogenic compositions comprising DAL/DAT double-mutant, auxotrophic, attenuated strains of Listeria and their methods of use
CA2310805A1 (en) 1997-11-24 1999-06-03 Johnson T. Wong Methods for treatment of hiv or other infections using a t cell or viral activator and anti-retroviral combination therapy
US6911315B2 (en) 1997-11-24 2005-06-28 David L. Rimm Method for the detection, identification, enumeration and confirmation of virally infected cells and other epitopically defined cells in whole blood
US6610833B1 (en) 1997-11-24 2003-08-26 The Institute For Human Genetics And Biochemistry Monoclonal human natural antibodies
US6391635B1 (en) 1997-11-24 2002-05-21 Institute For Human Genetics And Biochemistry Monoclonal human natural antibodies
US6270956B1 (en) 1997-12-11 2001-08-07 The Salk Institute For Biological Studies Transcriptional coactivator that interacts with Tat protein and regulates its binding to TAR RNA, methods for modulating Tat transactivation, and uses therefor
ES2185104T3 (es) 1997-12-11 2003-04-16 Roche Diagnostics Gmbh Eliminacionde las interferencias en procedimientos de diagnostico mediante peptidos de d-aminoacidos.
US6569418B1 (en) 1997-12-11 2003-05-27 University Of Maryland Biotechnology Institute Immuno-modulating effects of chemokines in DNA vaccination
US6060256A (en) 1997-12-16 2000-05-09 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Optical diffraction biosensor
DK1042001T3 (da) 1997-12-16 2002-07-08 Chiron Corp Anvendelse af mikropartikler kombineret med submikron-(olie-i-vand)-emulsioner
DE19756975A1 (de) 1997-12-20 1999-06-24 Hoechst Marion Roussel De Gmbh Bindungspartner für Inhibitoren von cyclinabhängigen Kinasen und ihre Verwendung zur Suche nach Inhibitoren, zur Diagnose oder zur Therapie einer Erkrankung
FR2773156B1 (fr) 1997-12-26 2000-03-31 Biovacs Inc Nouveaux immunogenes anti-retroviraux (toxoides), nouveaux procedes de preparation et application a la prevention et au traitement du sida
US6803231B1 (en) 1998-01-30 2004-10-12 Vanderbilt University Method of delivering antigens for vaccination with a live vector
AU2872199A (en) 1998-02-20 1999-09-06 Rockefeller University, The Apoptotic cell-mediated antigen presentation to dendritic cells
US6284194B1 (en) 1998-03-11 2001-09-04 Albert E. Chu Analytical assay device and methods using surfactant treated membranes to increase assay sensitivity
CA2323787A1 (en) 1998-03-13 1999-09-16 Wayne Marasco Humanized antibody and uses thereof
US6303081B1 (en) 1998-03-30 2001-10-16 Orasure Technologies, Inc. Device for collection and assay of oral fluids
US6403092B1 (en) 1998-04-01 2002-06-11 Duke University Immune response modulator alpha-2 macroglobulin complex
WO1999051754A1 (en) 1998-04-02 1999-10-14 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Infectious pseudotyped lentiviral vectors lacking matrix protein and uses thereof
US7157083B2 (en) 1998-04-17 2007-01-02 Surrogate Pharmaceutical Pathways, Llc Compositions and methods for treating retroviral infections
US6919318B1 (en) 1998-04-22 2005-07-19 Chiron Corporation Enhancing immune responses to genetic immunization by using a chemokine
FR2777909B1 (fr) 1998-04-24 2002-08-02 Pasteur Institut Utilisation de sequences d'adn de structure triplex pour le tranfert de sequences de nucleotides dans des cellules, vecteurs recombinants contenant ces sequences triplex
WO1999055715A2 (en) 1998-04-28 1999-11-04 Galenica Pharmaceuticals, Inc. Polysaccharide-antigen conjugates
ATE221657T1 (de) 1998-05-06 2002-08-15 Roche Diagnostics Gmbh Entstörung durch rheumafaktoren
US6500623B1 (en) 1998-05-12 2002-12-31 Genecure Llp Replication defective HIV vaccine
AU4078599A (en) 1998-05-13 1999-11-29 Epimmune, Inc. Expression vectors for stimulating an immune response and methods of using the same
EP1076715B1 (en) 1998-05-13 2007-07-18 Genetix Pharmaceuticals Inc. Lentiviral packaging cells
WO1999060110A2 (en) 1998-05-20 1999-11-25 The University Of Tennessee Research Corporation Stable envelope proteins for retroviral, viral and liposome vectors and use in gene and drug therapy
EP1079862B1 (en) 1998-05-20 2010-07-07 Immunomedics, Inc. Therapeutics using a bispecific anti-hla class ii invariant chain x anti-pathogen antibody
US6322969B1 (en) 1998-05-27 2001-11-27 The Regents Of The University Of California Method for preparing permuted, chimeric nucleic acid libraries
US6555342B1 (en) 1998-06-03 2003-04-29 Uab Research Foundation Fusion protein delivery system and uses thereof
US6706729B1 (en) 1998-06-19 2004-03-16 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Thiolesters and uses thereof
DK1086076T3 (da) 1998-06-19 2005-03-29 Vertex Pharma Sulfonamidinhibitorer af aspartylprotease
TWI229679B (en) 1998-06-20 2005-03-21 United Biomedical Inc Artificial T helper cell epitopes as immune stimulators for synthetic peptide immunogens
US6803187B1 (en) 1998-06-24 2004-10-12 Innogenetics N.V. Method for detection of drug-selected mutations in the HIV protease gene
AU4716299A (en) 1998-06-24 2000-01-10 Emory University Use of 3'-azido-2',3'-dideoxyuridine in combination with further anti-hiv drugs for the manufacture of a medicament for the treatment of hiv
US6693086B1 (en) 1998-06-25 2004-02-17 National Jewish Medical And Research Center Systemic immune activation method using nucleic acid-lipid complexes
CA2335508A1 (en) 1998-06-26 2000-01-06 Aventis Pasteur Use of poxviruses as enhancer of specific immunity
FR2781676B1 (fr) 1998-07-31 2004-04-02 Pasteur Merieux Serums Vacc Trimere du produit d'expression du gene env de hiv
WO2000009075A2 (en) 1998-08-14 2000-02-24 Galenica Pharmaceuticals, Inc. Chemically modified saponins and the use thereof as adjuvants
US6203974B1 (en) 1998-09-03 2001-03-20 Abbott Laboratories Chemiluminescent immunoassay for detection of antibodies to various viruses
EP1110091A1 (en) 1998-09-04 2001-06-27 PowderJect Research Limited Immunodiagnostics using particle delivery methods
US6475718B2 (en) 1998-09-08 2002-11-05 Schering Aktiengesellschaft Methods and compositions for modulating the interaction between the APJ receptor and the HIV virus
SE9803099D0 (sv) 1998-09-13 1998-09-13 Karolinska Innovations Ab Nucleic acid transfer
US6146642A (en) 1998-09-14 2000-11-14 Mount Sinai School Of Medicine, Of The City University Of New York Recombinant new castle disease virus RNA expression systems and vaccines
US6544785B1 (en) 1998-09-14 2003-04-08 Mount Sinai School Of Medicine Of New York University Helper-free rescue of recombinant negative strand RNA viruses
EP1001021B1 (en) 1998-09-25 2003-08-27 Wolfgang Prodinger Monoclonal antibody to human CD21, and its uses
US6596477B1 (en) 1998-09-28 2003-07-22 University Of Maryland Biotechnology Institute Treatment and prevention of immunodeficiency virus infection by administration of non-pyrogenic derivatives of lipid A
US6448078B1 (en) 1998-10-09 2002-09-10 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Cellular receptor for HIV-1 Vpr essential for G2/M phase transition of the cell cycle
US6562800B1 (en) 1998-10-30 2003-05-13 University Of Southern California Use of immunopotentiating sequences for inducing immune response
US6407077B1 (en) 1998-11-05 2002-06-18 Emory University β-L nucleosides for the treatment of HIV infection
US6656471B1 (en) 1998-11-17 2003-12-02 Board Of Regents, The University Of Texas System HIV-specific T-cell induction
US6027731A (en) 1998-11-17 2000-02-22 Wisconsin Alumni Research Foundation Pertussis toxin induced lymphocytosis
US6589763B1 (en) 1998-11-26 2003-07-08 Heinrich-Pette-Institute Retroviral hybrid vectors pseudotyped with LCMV
DE19856463B4 (de) 1998-11-26 2006-02-02 Heinrich-Pette-Institut Retrovirale, mit LCMV pseudotypisierte Hybrid-Vektoren
GB9826069D0 (en) 1998-11-28 1999-01-20 Univ Leeds HIV vaccine
US6221579B1 (en) 1998-12-11 2001-04-24 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Patterned binding of functionalized microspheres for optical diffraction-based biosensors
US6579673B2 (en) 1998-12-17 2003-06-17 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Patterned deposition of antibody binding protein for optical diffraction-based biosensors
US6017537A (en) 1998-12-18 2000-01-25 Connaught Laboratories, Inc. Formyl methionyl peptide vaccine adjuvant
US6337181B1 (en) 1998-12-21 2002-01-08 Jeffrey Joseph Stewart Method of specifying vaccine components for viral quasispecies
MXPA01006404A (es) 1998-12-21 2003-06-06 Univ Monash Deteccion y tratamiento de enfermedad renal.
US6620841B1 (en) 1998-12-25 2003-09-16 Shionogi & Co., Ltd. Aromatic heterocycle compounds having HIV integrase inhibiting activities
US6423544B1 (en) 1998-12-31 2002-07-23 Chiron Corporation Compositions and methods for producing recombinant virions
AU2221600A (en) 1998-12-31 2000-07-31 Chiron Corporation Improved expression of hiv polypeptides and production of virus-like particles
US6790657B1 (en) 1999-01-07 2004-09-14 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Lentivirus vector system
US6340744B1 (en) 1999-01-19 2002-01-22 Robert C. Leif Reagent system and method for increasing the luminescence of lanthanide(III) macrocyclic complexes
US6410013B1 (en) 1999-01-25 2002-06-25 Musc Foundation For Research Development Viral vectors for use in monitoring HIV drug resistance
US6900010B2 (en) 1999-01-25 2005-05-31 Musc Foundation For Research Development Compositions and methods for detecting human immunodeficiency virus
DE19920704C1 (de) 1999-01-26 2000-08-31 Technologie Integrale Ltd Verwendung eines gegen Harn-Trypsin-Inhibitors gerichteten Antikörpers für die Diagnose des Ausbruchs von AIDS
US6329510B1 (en) 1999-01-29 2001-12-11 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Anti-CCR1 antibodies and methods of use therefor
US6946465B2 (en) 1999-02-02 2005-09-20 4 Aza Bioscience Nv Immunosuppressive effects of pteridine derivatives
US6303293B1 (en) 1999-02-02 2001-10-16 Ortho-Clinical Diagnostics, Inc. Oligonucleotide reverse transcription primers for efficient detection of HIV-1 and HIV-2 and methods of use thereof
US6214221B1 (en) 1999-02-22 2001-04-10 Henry B. Kopf Method and apparatus for purification of biological substances
US7074556B2 (en) 1999-03-02 2006-07-11 Invitrogen Corporation cDNA synthesis improvements
NO311807B1 (no) 1999-03-04 2002-01-28 Bionor Immuno As HIV-peptider, antigener, vaksinepreparater, immunoassay- testsett og en metode for påvisning av antistoffer fremkalt av HIV
DE19910044A1 (de) 1999-03-08 2000-09-14 Bodo Plachter Virale Partikel, die nach Infektion durch humanes Cytomegalovirus freigesetzt werden und ihre Verwendung als Impfstoff
US6596497B1 (en) 1999-03-17 2003-07-22 New York Blood Center, Inc. Screening of antiviral compounds targeted to the HIV-1 gp41 core structure
AU778809B2 (en) 1999-03-29 2004-12-23 Statens Serum Institut Method for producing a nucleotide sequence construct with optimised codons for an HIV genetic vaccine based on primary, early HIV isolate and synthetic envelope BX08 constructs
CA2267481A1 (en) 1999-03-30 2000-09-30 Gabriel Pulido-Cejudo Critical interdependency: from the role of estrogen on breast cancer to the susceptibility of women towards hiv infection
US6773920B1 (en) 1999-03-31 2004-08-10 Invitrogen Corporation Delivery of functional protein sequences by translocating polypeptides
US6451601B1 (en) 1999-04-12 2002-09-17 Modex Therapeutiques, S.A. Transiently immortalized cells for use in gene therapy
US6358739B1 (en) 1999-04-12 2002-03-19 Modex Therapeutiques, S.A. Transiently immortalized cells
FR2792206B1 (fr) 1999-04-13 2006-08-04 Centre Nat Rech Scient Vaccin anti-vih-1 comprenant tout ou partie de la proteine tat de vih-1
TR200103266T2 (tr) 1999-05-13 2002-01-21 American Cyanamid Company Yardımcı kombinasyon formülasyonları
US6420545B1 (en) 1999-05-24 2002-07-16 The Trustees Of The University Of Pennsylvania CD4-independent HIV envelope proteins as vaccines and therapeutics
US6562571B1 (en) 1999-05-25 2003-05-13 University Of Rochester Human heme-regulated initiation factor 2-α kinase
WO2000072886A1 (en) 1999-05-26 2000-12-07 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Episomally replicating lentiviral vectors
US6730297B1 (en) 1999-05-28 2004-05-04 Chiron Corporation Use of recombinant gene delivery vectors for treating or preventing lysosomal storage disorders
US6884785B2 (en) 1999-06-17 2005-04-26 The Scripps Research Institute Compositions and methods for the treatment or prevention of autoimmune diabetes
US6309633B1 (en) 1999-06-19 2001-10-30 Nobex Corporation Amphiphilic drug-oligomer conjugates with hydroyzable lipophile components and methods for making and using the same
FR2798385B1 (fr) 1999-06-21 2003-09-05 Bio Merieux Procede de recherche d'une resistance aux anti-proteases chez des souches du virus vih-2
US6555523B1 (en) 1999-07-08 2003-04-29 Patrick T. Prendergast Use of cirsiliol and derivatives to treat infections
JP2003504074A (ja) 1999-07-08 2003-02-04 ストレスゲン バイオテクノロジーズ コーポレイション インビトロでのＴｈ１様応答の誘導
JP3536731B2 (ja) 1999-07-28 2004-06-14 富士レビオ株式会社 ＨＩＶ−１ｐ２４抗原の免疫測定方法及び試薬
US6420591B1 (en) 1999-10-04 2002-07-16 University Of Medicine And Dentistry Of New Jersey Carbamates and compositions thereof, and methods for their use for treating cancer, inflammation, or a viral infection
US6908612B2 (en) 1999-10-08 2005-06-21 University Of Maryland Biotechnology Institute Virus coat protein/receptor chimeras and methods of use
US7311920B1 (en) 1999-10-08 2007-12-25 University Of Maryland Biotechnology Institute Virus coat protein/receptor chimeras and methods of use
ATE454901T1 (de) 1999-10-13 2010-01-15 Novartis Vaccines & Diagnostic Verfahren zur erhaltung zellimmuneantworten gegen proteinen
US20020193740A1 (en) 1999-10-14 2002-12-19 Alchas Paul G. Method of intradermally injecting substances
WO2001026608A2 (en) 1999-10-14 2001-04-19 Ledbetter Jeffrey A Dna vaccines encoding antigen linked to a domain that binds cd40
US6569143B2 (en) 1999-10-14 2003-05-27 Becton, Dickinson And Company Method of intradermally injecting substances
AU784281B2 (en) 1999-10-26 2006-03-02 International Aids Vaccine Initiative Invasive bacterial vectors for expressing alphavirus replicons
GB9927629D0 (en) 1999-11-24 2000-01-19 Croda Int Plc Compounds
AU1241901A (en) 1999-11-24 2001-06-04 Biotronics Technologies, Inc. Devices and methods for detecting analytes using electrosensor having capture reagent
KR100354562B1 (ko) 1999-12-06 2002-09-30 주식회사 제넥신 원숭이에서 ＳＩＶｍａｃ２３９의 감염에 대한 방어를유도하는 ＡＩＤＳ ＤＮＡ 백신
US7186507B2 (en) 1999-12-09 2007-03-06 Indiana University Research And Technology Corporation Fluorescent in situ RT-PCR
US6399295B1 (en) 1999-12-17 2002-06-04 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Use of wicking agent to eliminate wash steps for optical diffraction-based biosensors
US6656706B2 (en) 1999-12-23 2003-12-02 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Molecular clones with mutated HIV gag/pol, SIV gag and SIV env genes
AU1814101A (en) 2000-01-14 2001-07-24 Massachusetts Institute Of Technology In vivo CTL elicitation by heat shock protein fusion proteins maps to a discrete ATP binding domain and is CD4+ cell-independent
EP1248654B1 (en) 2000-01-20 2005-10-05 Universität Zürich Institut für Medizinische Virologie Intra-tumoral administration of il-12 encoding naked nucleic acid molecules
US6242461B1 (en) 2000-01-25 2001-06-05 Pfizer Inc. Use of aryl substituted azabenzimidazoles in the treatment of HIV and AIDS related diseases
US6692745B2 (en) 2000-01-28 2004-02-17 Arogenics Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibition of HIV-1 infection
US6316205B1 (en) 2000-01-28 2001-11-13 Genelabs Diagnostics Pte Ltd. Assay devices and methods of analyte detection
NZ520754A (en) 2000-02-10 2004-02-27 Panacos Pharmaceuticals Inc Identifying compounds that disrupt formation of critical gp41 six-helix bundle and conformations necessary for HIV entry thereby blocking virus entry to the cell
US6312931B1 (en) 2000-02-11 2001-11-06 Purepulse Technologies, Inc. Protecting molecules in biologically derived compositions while treating with high intensity broad-spectrum pulsed light
ATE299943T1 (de) 2000-03-02 2005-08-15 Polymun Scient Immunbio Forsch Rekombinantes influenza a virus
WO2001076643A1 (en) 2000-04-07 2001-10-18 Baylor College Of Medicine Macroaggregated protein conjugates as oral genetic immunization delivery agents
US6699722B2 (en) 2000-04-14 2004-03-02 A-Fem Medical Corporation Positive detection lateral-flow apparatus and method for small and large analytes
US6399067B1 (en) 2000-04-28 2002-06-04 Thymon L.L.C. Methods and compositions for impairing multiplication of HIV-1
US6861234B1 (en) 2000-04-28 2005-03-01 Mannkind Corporation Method of epitope discovery
CA2407897A1 (en) 2000-05-05 2001-11-15 Cytos Biotechnology Ag Molecular antigen arrays and vaccines
EP1156112B1 (en) 2000-05-18 2006-03-01 Geneart GmbH Synthetic gagpol genes and their uses
HU230847B1 (en) 2000-05-19 2018-08-28 Corixa Corp Prophylactic and therapeutic treatment of infectious and other diseases with mono and disaccharide-based compounds
US6544780B1 (en) 2000-06-02 2003-04-08 Genphar, Inc. Adenovirus vector with multiple expression cassettes
AU2001265383A1 (en) 2000-06-06 2001-12-17 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Two-hybrid assay that detects hiv-1 reverse transcriptase dimerization
JP2004507231A (ja) 2000-06-15 2004-03-11 アメリカ合衆国 免疫応答を向上させるための、ｇｍ−ｃｓｆを発現する組換え非−複製性ウィルスおよびその使用
US6551828B1 (en) 2000-06-28 2003-04-22 Protemation, Inc. Compositions and methods for generating expression vectors through site-specific recombination
US7439052B2 (en) 2000-06-29 2008-10-21 Lipid Sciences Method of making modified immunodeficiency virus particles
US7407663B2 (en) 2000-06-29 2008-08-05 Lipid Sciences, Inc. Modified immunodeficiency virus particles
WO2002012258A1 (en) 2000-08-04 2002-02-14 Corixa Corporation New immunoeffector compounds
US6627442B1 (en) 2000-08-31 2003-09-30 Virxsys Corporation Methods for stable transduction of cells with hiv-derived viral vectors
US6582920B2 (en) 2000-09-01 2003-06-24 Gen-Probe Incorporated Amplification of HIV-1 RT sequences for detection of sequences associated with drug-resistance mutations
NO314588B1 (no) 2000-09-04 2003-04-14 Bionor Immuno As HIV-peptider, antigener, vaksinesammensetning, immunoassay- testsett og en fremgangsmåte for å påvise antistoffer indusert av HIV
NO314587B1 (no) 2000-09-04 2003-04-14 Bionor Immuno As HIV regulatoriske- og hjelpepeptider, antigener, vaksinepreparater, immunoassay testsett og en metode for påvisning av antistoffer fremkaltav HIV
US7033593B2 (en) 2000-09-22 2006-04-25 Duke University Immunogen comprising an HIV envelope protein, a ligand and H2 peptide
EP1331942A4 (en) 2000-09-22 2005-03-16 Univ Duke Immunogenic with ligand-bound HIV envelope protein
JP2004509914A (ja) 2000-09-28 2004-04-02 カイロン　コーポレイション 微粒子組成物およびその製造方法
AU2002212996A1 (en) 2000-09-28 2002-04-08 Non-Invasive Monitoring Systems, Inc. External addition of pulses to fluid channels of body to release or suppress endothelial mediators and to determine effectiveness of such intervention
US7419829B2 (en) 2000-10-06 2008-09-02 Oxford Biomedica (Uk) Limited Vector system
US6528325B1 (en) 2000-10-13 2003-03-04 Dexall Biomedical Labs, Inc. Method for the visual detection of specific antibodies in human serum by the use of lateral flow assays
EP1399585B1 (en) 2000-10-23 2008-02-20 Gen-Probe Incorporated Compositions and methods for detecting human immunodeficiency virus 2 (hiv-2)
US7122180B2 (en) 2000-10-23 2006-10-17 Children's Medical Center Corporation DNA vectors containing mutated HIV proviruses
DE10053781B4 (de) 2000-10-30 2008-07-03 Geneart Ag Kernexportreportersystem
US6689877B2 (en) 2000-11-06 2004-02-10 The Board Of Regents Of The University Of Nebraska Methods and compositions for the treatment of human immunodeficiency virus infection
US6800281B2 (en) 2000-11-09 2004-10-05 Oxford Biomedica (Uk) Limited Lentiviral-mediated growth factor gene therapy for neurodegenerative diseases
WO2002039951A2 (en) 2000-11-15 2002-05-23 Globe Immune, Inc. Yeast-dentritic cell vaccines and uses thereof
WO2002042480A2 (en) 2000-11-23 2002-05-30 Bavarian Nordic A/S Modified vaccinia ankara virus variant
US7097842B2 (en) 2000-11-23 2006-08-29 Bavarian Nordic A/S Modified vaccinia virus ankara for the vaccination of neonates
US6818392B2 (en) 2000-12-06 2004-11-16 Abbott Laboratories Monoclonal antibodies to human immunodeficiency virus and uses thereof
US6712612B1 (en) 2000-12-12 2004-03-30 Genecure Llc Safe and stable retroviral helper cell line and related compositions and methods
US7018638B2 (en) 2000-12-19 2006-03-28 Wyeth Mycoplasma hyopneumoniae bacterin vaccine
US6887977B1 (en) 2000-12-28 2005-05-03 Children's Hospital, Inc. Methods and materials relating to CD8-tropic HIV-1
IL156780A0 (en) 2001-01-10 2004-02-08 Amaxa Gmbh Modular transfection systems
US6768004B2 (en) 2001-01-11 2004-07-27 Mueller Sybille Nucleotide sequences encoding variable regions of heavy and light chains of monoclonal antibody 1F7, an anti-idiotypic antibody reactive with anti-HIV antibodies
AU2002242085A1 (en) 2001-02-02 2002-08-19 Chemocentryx, Inc. Methods and compositions useful for stimulating an immune response
US7301010B2 (en) 2001-02-15 2007-11-27 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Compositions and methods for treating HIV infection with cupredoxin and cytochrome c
US20040087001A1 (en) 2001-02-21 2004-05-06 Gabriele Hahn Recombinant vector containing infectious human cytomegalovirus genome with preserved wild-type characteristics of clinical isolates
NZ527937A (en) 2001-03-13 2005-03-24 Novartis Ag Stable cell lines to express high levels of lentiviral Gag/Pol proteins for generation of HIV- or BIV- based lentiviral vectors
CA2441626A1 (en) 2001-03-28 2002-10-17 Children's Medical Center Corporation Fusion protein construct and method for inducing hiv-specific serum igg and secretory iga antibodies in-vivo
US7060273B2 (en) 2001-04-06 2006-06-13 Progenics Pharmaceuticals, Inc. Methods for inhibiting HIV-1 infection
DE60229375D1 (de) 2001-05-11 2008-11-27 Ortho Mcneil Janssen Pharm Immunmodulations-vorrichtung zur verwendung in tieren
GB0112324D0 (en) 2001-05-21 2001-07-11 Croda Int Plc Compounds
FR2825372B1 (fr) 2001-06-01 2004-06-18 Centre Nat Rech Scient Pseudotypage des vecteurs vih-1 par des enveloppes de rhabdovirus
US6469083B1 (en) 2001-06-04 2002-10-22 Ferro Corporation No dry master batch for polyester resins
US7270997B2 (en) 2001-06-12 2007-09-18 Ramsingh Arlene I Coxsackievirus B4 expression vectors and uses thereof
US6962982B2 (en) 2001-06-22 2005-11-08 Roche Diagnostics Corporation Soluble complexes of target proteins and peptidyl prolyl isomerase chaperones and methods of making and using them
KR100611545B1 (ko) 2001-06-22 2006-08-10 에프. 호프만-라 로슈 아게 레트로바이러스 표면 당단백질을 함유하는 가용성 복합체
EP2842569B1 (en) 2001-07-02 2019-04-10 Zoetis Services LLC One dose vaccination with Mycoplasma hyopneumoniae
EP2412242A3 (en) 2001-07-05 2012-06-13 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. Polynucleotides encoding antigenic HIV Type C polypeptides, polypeptides and uses thereof
US6997863B2 (en) 2001-07-25 2006-02-14 Triton Biosystems, Inc. Thermotherapy via targeted delivery of nanoscale magnetic particles
CA2454920C (en) 2001-07-26 2013-06-25 Otago Innovation Limited Antigenic compositions
US6958211B2 (en) 2001-08-08 2005-10-25 Tibotech Bvba Methods of assessing HIV integrase inhibitor therapy
EP1283272B1 (en) 2001-08-08 2013-11-13 Janssen R&D Ireland Methods and means for assessing HIV envelope inhibitor therapy
US7008650B2 (en) 2001-08-09 2006-03-07 Lam Paul Y S Compositions for the treatment of acquired immunodeficiency disease
AU2002331599A1 (en) 2001-08-16 2003-03-03 The General Hospital Corporation Epitopes of human immunodeficiency virus-1
CA2457930C (en) 2001-08-20 2012-06-19 Proteome Systems Intellectual Property Pty Ltd. Diagnostic testing process and apparatus
US20030170614A1 (en) 2001-08-31 2003-09-11 Megede Jan Zur Polynucleotides encoding antigenic HIV type B polypeptides, polypeptides and uses thereof
GB0122232D0 (en) 2001-09-14 2001-11-07 Medical Res Council Gene expression
CN100392085C (zh) 2001-09-20 2008-06-04 葛兰素集团有限公司 疫苗
WO2003033666A2 (en) 2001-10-16 2003-04-24 The Government Of The United States Of America, Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Broadly cross-reactive neutralizing antibodies against human immunodeficiency virus selected by env-cd4-co-receptor complexes
ATE332688T1 (de) 2001-10-16 2006-08-15 Endo Pharmaceuticals Inc Verwendung von carbinolen zur behandlung von neuropathischer funktionsstörung
US6867005B2 (en) 2001-10-24 2005-03-15 Beckman Coulter, Inc. Method and apparatus for increasing the dynamic range and accuracy of binding assays
EP1461077A4 (en) 2001-11-07 2006-01-25 Univ Duke MULTIPURPOSE IMMUNOGEN
US7172761B2 (en) 2001-11-07 2007-02-06 Duke University Polyvalent immunogen
US7195768B2 (en) 2001-11-07 2007-03-27 Duke University Polyvalent immunogen
US20030118568A1 (en) * 2001-12-18 2003-06-26 Board Of Trustees Of The University Of Arkansas Viral stealth technology to prevent T cell-mediated rejection of xenografts
US6525028B1 (en) 2002-02-04 2003-02-25 Corixa Corporation Immunoeffector compounds
US7030094B2 (en) 2002-02-04 2006-04-18 Corixa Corporation Immunostimulant compositions comprising an aminoalkyl glucosaminide phosphate and QS-21
FR2836146B1 (fr) 2002-02-15 2005-01-07 Urrma R & D IMMUNOGLOBULINE IgG3 MARQUEUR DE PROTECTION CONTRE LES MALADIES VIRALES INFECTIEUSES ET SES UTILISATIONS
US7261876B2 (en) 2002-03-01 2007-08-28 Bracco International Bv Multivalent constructs for therapeutic and diagnostic applications
US7211240B2 (en) 2002-03-01 2007-05-01 Bracco International B.V. Multivalent constructs for therapeutic and diagnostic applications
US6927031B2 (en) 2002-04-12 2005-08-09 Rigel Pharmaceuticals, Incorporated Methods for identifying polypeptide factors interacting with RNA
US7285289B2 (en) 2002-04-12 2007-10-23 Nagy Jon O Nanoparticle vaccines
AU2002307776A1 (en) 2002-04-16 2003-10-27 Kamada Ltd. Ultrapure transferrin for pharmaceutical compositions
US20060234226A1 (en) 2002-04-26 2006-10-19 Fahner Robert L Non-affinity purification of proteins
US20060073123A1 (en) 2002-04-30 2006-04-06 Jie Mi Adenovirus vectors for immunotherapy
US7214530B2 (en) 2002-05-03 2007-05-08 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Biomolecule diagnostic devices and method for producing biomolecule diagnostic devices
US7118855B2 (en) 2002-05-03 2006-10-10 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Diffraction-based diagnostic devices
US7223368B2 (en) 2002-05-03 2007-05-29 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Diffraction-based diagnostic devices
US7223534B2 (en) 2002-05-03 2007-05-29 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Diffraction-based diagnostic devices
US7056519B2 (en) 2002-05-17 2006-06-06 Aventis Pasteur S.A. Methods for inducing HIV-neutralizing antibodies
FR2839646B1 (fr) 2002-05-17 2008-04-11 Bioalliance Pharma Utilisation de derives de quinoleine a effet anti-integrase et ses applications
US7091049B2 (en) 2002-06-26 2006-08-15 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Enhanced diffraction-based biosensor devices
DE10232322A1 (de) 2002-07-16 2004-07-29 Hahn, Gabriele, Dr. Viral kodierte CxC determinieren den Gewebetropismus von HCMV
US6933377B2 (en) 2002-07-29 2005-08-23 Qun Chen Compositions comprising multiple immunodeficiency virus subunits for inducing an immune response
US7179645B2 (en) 2002-09-24 2007-02-20 Antigen Express, Inc. Ii-Key/antigenic epitope hybrid peptide vaccines
US7169550B2 (en) 2002-09-26 2007-01-30 Kimberly-Clark Worldwide, Inc. Diffraction-based diagnostic devices
US6919077B2 (en) 2002-09-27 2005-07-19 Aids Research, Llc LFA-1 alpha subunit antibodies and methods of use
US6821744B2 (en) 2002-10-29 2004-11-23 Roche Diagnostics Operations, Inc. Method, assay, and kit for quantifying HIV protease inhibitors
PL377161A1 (pl) 2002-11-21 2006-01-23 Pevion Biotech Ltd. Wysoce efektywne pęcherzyki fuzogenne, sposób ich wytwarzania oraz kompozycje farmaceutyczne zawierające te pęcherzyki
EP1454981A1 (en) 2003-03-03 2004-09-08 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) Infectious pestivirus pseudo-particles containing functional erns, E1, E2 envelope proteins
US7508781B2 (en) 2003-03-25 2009-03-24 Texas Instruments Incorporated Power saving mechanism for wireless LANs via schedule information vector
EP2363143A3 (en) 2003-03-28 2012-02-15 The Government of the United States of America, as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services MVA expressing modified hiv envelope, gag, and pol genes
US7220554B2 (en) 2003-05-23 2007-05-22 Oregon Health And Science University Methods for identifying inhibitors
WO2004108760A2 (en) 2003-06-10 2004-12-16 Nsgene A/S Improved secretion of neublastin
US7457973B2 (en) 2003-06-20 2008-11-25 Texas Instruments Incorporated System and method for prioritizing data transmission and transmitting scheduled wake-up times to network stations based on downlink transmission duration
DE602004023094D1 (de) 2003-07-25 2009-10-22 Boehringer Ingelheim Vetmed Lawsonia intracellularis europäischen ursprungs unür
WO2005012545A2 (en) 2003-07-25 2005-02-10 The Regents Of The University Of California Cytomegalovirus gene function and methods for developing antivirals, anti-cmv vaccines, and cmv-based vectors
FR2860237B1 (fr) 2003-09-30 2006-03-10 Centre Nat Rech Scient Polypeptide d'interaction comprenant un motif heptapeptidique et un domaine de penetration cellulaire
EP1914594A3 (en) 2004-01-30 2008-07-02 FUJIFILM Corporation Silver halide color photographic light-sensitive material and color image-forming method
WO2006078268A2 (en) 2004-04-09 2006-07-27 The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services A peptide that elicits neutralizing antibodies targeting the hiv co-receptor, ccr5
AU2005285513B2 (en) 2004-05-25 2011-02-24 Oregon Health And Science University SIV and HIV vaccination using RhCMV- and HCMV-based vaccine vectors
EP1602676A1 (en) 2004-06-01 2005-12-07 SOLVAY (Société Anonyme) Catalytic compositions
WO2006004661A1 (en) 2004-06-25 2006-01-12 Medimmune Vaccines, Inc. Recombinant human cytomegalovirus and vaccines comprising heterologous antigens
CA2576511A1 (en) 2004-08-03 2006-07-20 Syracuse University Branched and multi-chain nucleic acid switches for sensing and screening
JP2006190869A (ja) 2005-01-07 2006-07-20 Nec Electronics Corp 半導体装置の設計方法および信頼性評価方法
ATE539153T1 (de) 2005-02-21 2012-01-15 Us Gov Health & Human Serv Primaten t-lymphotrophische viren
US7189522B2 (en) 2005-03-11 2007-03-13 Chembio Diagnostic Systems, Inc. Dual path immunoassay device
WO2006125983A1 (en) 2005-05-23 2006-11-30 Oxxon Therapeutics Ltd Compositions for inducing an immune response against hepatitis b
US7892729B1 (en) 2005-06-23 2011-02-22 Iowa State University Research Foundation, Inc. Universal and differential serologic assay for swine influenza virus
CA2620495A1 (en) 2005-08-31 2007-03-08 Genvec, Inc. Adenoviral vector-based malaria vaccines
US7879914B2 (en) 2005-09-23 2011-02-01 Pathlogica LLC Methods for treating viral infections using polyamine analogs
US7585675B2 (en) 2005-11-15 2009-09-08 University Of Kansas Medical Center Inhibition of HIV and SHIV replication with antisense interleukin-4
US7886962B2 (en) 2006-08-17 2011-02-15 Verizon Patent And Licensing Inc. Multi-function transaction device
US7748618B2 (en) 2006-08-21 2010-07-06 Verizon Patent And Licensing Inc. Secure near field transaction
US20100142823A1 (en) 2007-03-07 2010-06-10 Ze Wang 2d partially parallel imaging with k-space surrounding neighbors based data reconstruction
US20090148447A1 (en) 2007-07-06 2009-06-11 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Binding Peptides Having a C-terminally Disposed Specific Binding Domain
EP3441402A1 (en) 2007-10-30 2019-02-13 Genentech, Inc. Antibody purification by cation exchange chromatography
JP2012519484A (ja) 2009-03-06 2012-08-30 マウント・シナイ・スクール・オヴ・メディシン マイクロｒｎａ応答要素を含む弱毒化生インフルエンザウイルスワクチン
WO2011076883A1 (en) 2009-12-23 2011-06-30 4-Antibody Ag Binding members for human cytomegalovirus
EP2529227B1 (en) 2010-01-27 2015-10-07 Oregon Health & Science University Cytomegalovirus-based immunogenic preparations
CA2793959C (en) * 2010-03-25 2019-06-04 Oregon Health & Science University Cmv glycoproteins and recombinant vectors
JP2013527758A (ja) * 2010-05-05 2013-07-04 ティリオン，クリスティアン ベータヘルペスウイルス感染に対するワクチンおよびその使用
NO2772265T3 (sr) 2010-05-14 2018-06-16
CA2832109C (en) 2011-06-10 2021-07-06 Oregon Health & Science University Cmv glycoproteins and recombinant vectors
US20130156808A1 (en) 2011-11-22 2013-06-20 Stipan Jonjic Vaccine comprising beta-herpesvirus
HRP20181930T1 (hr) 2013-03-05 2019-01-11 Oregon Health & Science University Citomegalovirus vektori za kontroliranje ciljanja t-stanica
CA3113595A1 (en) 2014-07-16 2016-01-21 Oregon Health & Science University Human cytomegalovirus comprising exogenous antigens
EP3048114A1 (en) 2015-01-22 2016-07-27 Novartis AG Cytomegalovirus antigens and uses thereof
CN108064304A (zh) 2015-02-10 2018-05-22 俄勒冈健康与科学大学 可用于产生非典型cd8+ t细胞应答的方法和组合物
AU2016355468B2 (en) 2015-11-20 2022-12-15 Oregon Health & Science University CMV vectors comprising microRNA recognition elements
CA3028827A1 (en) 2016-06-22 2017-12-28 Aeras Recombinant cytomegalovirus vectors as vaccines for tuberculosis
CN110291402B (zh) 2016-06-27 2023-09-01 朱诺治疗学股份有限公司 鉴定肽表位的方法、结合此类表位的分子和相关用途
EA201990937A1 (ru) 2016-10-18 2019-09-30 Орегон Хелс Энд Сайенс Юниверсити Цитомегаловирусные векторы, выбирающие t-клетки, ограниченные по молекулам главного комплекса гистосовместимости e

Also Published As

Publication number Publication date
RS57397B8 (sr) 2020-01-31
EP2691530A2 (en) 2014-02-05
EP2691530B1 (en) 2018-03-07
US10760097B2 (en) 2020-09-01
DK2691530T3 (en) 2018-05-22
ES2667425T8 (es) 2019-10-08
CA2832109C (en) 2021-07-06
PT2691530T (pt) 2018-05-10
US20140141038A1 (en) 2014-05-22
HRP20180607T1 (hr) 2019-04-05
ES2667425T3 (es) 2018-05-10
EP2691530A4 (en) 2015-01-21
US9862972B2 (en) 2018-01-09
US20210395771A9 (en) 2021-12-23
US20210222195A1 (en) 2021-07-22
WO2012170765A2 (en) 2012-12-13
AU2012267786B2 (en) 2017-08-03
HUE037408T2 (hu) 2018-08-28
LT2691530T (lt) 2018-08-10
CA2832109A1 (en) 2012-12-13
AU2017254799A1 (en) 2018-01-25
PL2691530T3 (pl) 2019-02-28
WO2012170765A3 (en) 2013-03-28
SI2691530T1 (en) 2018-08-31
AU2012267786A1 (en) 2013-10-17
CY1120987T1 (el) 2019-12-11
US20190211356A1 (en) 2019-07-11
AU2019250180A1 (en) 2019-11-07
SMT201800284T1 (it) 2018-07-17
AU2019250180B2 (en) 2022-04-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2019250180B2 (en) CMV glycoproteins and recombinant vectors
US10101329B2 (en) CMV glycoproteins and recombinant vectors
US10316334B2 (en) Cytomegalovirus vectors enabling control of T cell targeting
HK1238669A1 (en) Cmv glycoproteins and recombinant vectors