RO112730B1 - Conjugat polimer cu actiune imunomodulatoare, procedeu si intermediar pentru obtinerea acestuia - Google Patents

Conjugat polimer cu actiune imunomodulatoare, procedeu si intermediar pentru obtinerea acestuia Download PDF

Info

Publication number
RO112730B1
RO112730B1 RO93-01141A RO9301141A RO112730B1 RO 112730 B1 RO112730 B1 RO 112730B1 RO 9301141 A RO9301141 A RO 9301141A RO 112730 B1 RO112730 B1 RO 112730B1
Authority
RO
Romania
Prior art keywords
conjugate
lower alkyl
interferon
integer
peg
Prior art date
Application number
RO93-01141A
Other languages
English (en)
Inventor
Robert Karasiewicz
Carle Nalin
Perry Rosen
Original Assignee
Hoffmann La Roche
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hoffmann La Roche filed Critical Hoffmann La Roche
Publication of RO112730B1 publication Critical patent/RO112730B1/ro

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • C07K14/555—Interferons [IFN]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/62—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D213/63—One oxygen atom
    • C07D213/64—One oxygen atom attached in position 2 or 6
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C69/00—Esters of carboxylic acids; Esters of carbonic or haloformic acids
    • C07C69/96—Esters of carbonic or haloformic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • C07K14/555—Interferons [IFN]
    • C07K14/56—IFN-alpha
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K19/00—Hybrid peptides, i.e. peptides covalently bound to nucleic acids, or non-covalently bound protein-protein complexes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

Prezenta invenție se referă la un conjugat polimer cu acțiune imunomodulatoare, procedeu și intermediar pentru obținerea acestuia, acest conjugat fiind utilizat în tratamentul și profilaxia bolilor 5 imunomodulatorii, cum ar fi boli neoplazice și boli infecțioase.
Se cunoaște că diverse proteine naturale și recombinate prezintă utilitate medicală și farmaceutică. După ce au fost 10 purificate și formulate, acestea pot fi administrate pe cale parenterală, în diverse indicații terapeutice. Totuși, proteinele administrate pe cale parenterală pot fi imunogenice, pot fi relativ insolubile în apă, 15 și pot avea un timp de înjumătățire farmacologică scurt. în consecință, poate fi dificilă realizarea de niveluri, utile din punct de vedere terapeutic, a proteinei în sângele pacientului. 20
Aceste probleme pot fi rezolvate prin conjugarea proteinelor cu polimeri, cum ar fi polietilenglicol. Davis at al., în brevetul US 4179337, descriu conjugarea polietilenglicolului (PEG) cu proteine, cum 25 ar fi enzime sau insulină, pentru a se obține conjugate în care proteina va fi mai puțin imunogenică reținând în schimb o proporție substanțială a activității sale fiziologice. Nakagawa et al. descriu conjugarea PEG 30 la proteină activată insulară pentru a reduce efectele sale secundare și imunogenicitatea. Veronese et al., Applied Biochem. and Biotech., 11; 141152(1985), descriu activarea polietilen- 35 glicolilor cu cloroformiați de fenil pentru a modifica o ribonuclează și o dismutază superoxid. Katre et al., în brevetul US
4766106 și 4917888, descriu, de asemenea, solubilizarea proteinelor prin conjugare cu polimer PEG și alți polimeri, care sunt conjugați cu proteine recombinante pentru a le reduce imunogenicitatea și a le crește timpul de înjumătățire. Acestea se regăsesc în Nitocki et al., brevetul US 4902502, Enzon, Inc., cererea de brevet internațională PCT/US 90/03133, Nishimura etal., cererea de brevet european 154316 și Tomasi, cerere de brevet internațională PCT/US 85/02572.
Metodele precedente de formare a conjugatelor PEG/proteină și conjugatele care rezultă din metodele respective prezintă mai multe probleme. Printre aceste probleme este și aceea că anumite metode de formare a acestor conjugate proteină-PEG, pot inactiva proteina astfel, încât conjugatele care rezultă au slabă activitate biologică. în plus, anumiți lincheri utilizați în formarea acestor conjugate PEGproteină pot fi susceptibili la scindarea hidrolitică in vivo. Când are loc o astfel de scindare după administrare, conjugatele respective își pierd proprietățile benefice conferite de PEG.
Prezenta invenție înlătură dezavantajele menționate prin noul conjugat interferon-PEG care are un unic agent de legare ce conectează o grupare amino a interferonului la PEG. Invenția de față prezintă în particular un conjugat polimer cu acțiune imunomodulatoare cu formula generală I
O
Ϊ
RO-iCHjCHOl^CHîCHOHCHjCHOk-CHjCH-W'^
R2 R3 R4
NH— interferon (I) în care R este alchil inferior;
Rv P2> R3 Și R4 sunt H sau alchil inferior; m este selectat dintre numere întregi > 1 până la numărul de grupări amino accesibile în interferon;
W este □ sau NH;
x este un număr îngtreg între 1 și 1000 și fiecare y și z este un număr întreg de la D la 1000, și suma lui x, y și z este de la 3 la 1000, cu condiția că cel puțin unul dintre R^ R2, R3 și R4 este alchil inferior; x, y și z sunt astfel selectați încât greutatea
RO 112730 Bl
T moleculară a unității polimere din conjugat este în intervalul de la circa 300 daltoni până la circa 30000 daltoni.
Este de la sine înțeles că gruparea -NH din formula I derivă de la o grupare 5 amino accesibilă a moleculei de interferon.
Mai precis cele două conjugate diferite ale interferonului au următoarele formule:
RCHCHzCHO), — (04/3140)—
R1 R2
O
Λ (CHzCHOJrCHjCH-NH NH
(IA)
RC4CH2CHO)x —(CH2CHO)y— (CHîCHOJrCHiCHO NH Xinterteron R1 R2 R3 R4 în care R este alchil inferior; Rp R2, R3 și 15 R4 sunt hidrogen sau alchil inferior; m este un număr până la numărul de grupări amino accesibile în interferon; și x, y și z sunt selectați din orice combinație de numere astfel încât conjugatul are cel puțin 2 o parțial activitatea biologică a proteinei care formează conjugatul; cu condiția că cel puțin unul din Rv R2, R3 și R4 este alchil inferior.
Conform acestei invenții, conjugatele 2 5 IFN cu formulele IA și IB pot fi produse prin condensarea PEG activat la care o grupare hidroxi sau amino terminală a fost înlocuită cu un agent de legare activat. Acești reactivi pot reacționa apoi cu una sau mai multe grupări amino de la IFN. Condensarea cu numai o grupare amino pentru a forma un monopolietilenglicolat reprezintă o întruchipare preferată a acestei invenții. Prin urmare, invenția se referă de asemenea la noi intermediari care pot fi utilizați pentru a produce conjugatul polimer cu acțiune imunomodulatoare. Acești intermediari au formule generale II și III:
RO-iCHjCHO^-fCHjCHOHCHjCHO^-CHgCH-W
Â’ Ă* Â3
(II) în care R este alchil inferior, Rn R2, R3 și 35 R4 și R5 sunt hidrogen sau alchil inferior;
W este NH sau □;
x este un număr întreg între 1 și 1000 și fiecare y și z este un număr întreg până la 1000, și suma lui x, y și z este de la 3 4 o la 1000, cu condiția că dacă W este NH sau dacă W ste O și R5 este H atunci cel puțin unul dintre Rn R2, R3 și R4 este un alchil inferior, iar x, y și z sunt astfel selectați încât greutatea moleculară a compusului respectic este în intervalul de la circa 300 daltoni până la circa 30000 daltoni.
Și
RO 112730 Bl
RO-(CH2CHO^-(CH2CHO)y-(CH2CHO)z-CH2CHO — C-0 I < 12 13 14
R R R R în care R este un alchil inferior; Rn R2, R3 și R4 sunt hidrogen sau metil, x este un număr de la 1 la 1OOO și fiecare y și z este un număr întreg de la o la 1000, și suma lui x, y și z este de la 3 la 1000, iar x, y și z sunt astfel selectați încât greutatea moleculară a compusului este în intervalul de la circa 300 daltoni la circa 30000 daltoni.
Formula II include mai ales compuși de următoarele două tipuri:
io
RO-(CHjCHO)x-(CH2CHO)y-(CH2CHO)2-CH2CH-NH
R’ Rz R3 R4 (HA)
(UB) în IIA, IIB și III, R, Rv R2, R3, R4 sunt ca 20 mai sus; și x, y și z sunt selectați dintr-o combinație de numere astfel încât atunci când polimerul se conjugă cu o proteină, îi permite proteinei să rețină cel puțin o porțiune a nivelului de activitate avut înainte 25 de conjugare; cu condiția menționată pentru formula II.
Conform invenției de față, utilizând reactivi PEG activați cu formula IIA, IIB sau III pentru a produce conjugatul se formează 30 o legătură între grupările amino libere dintr-o proteină cum este interferon (IFN) și PEG, astfel încât conjugatul rezultat reține cel puțin o porțiune a activității biologice a proteinei cu imunogenicitate 35 redusă. în plus, grupările de legare formate în conjugatele din această invenție prin intermediul utilizării oricăruia dintre polietilenglicolii activați cu formulele IIA, IIB sau III duce la obținerea unui conjugat proteinic care nu este susceptibil de scindare hidrolitică in vivo și nu face obiectul dezavantajelor prezentate la conjugatele PEG cunoscute în stadiul anterior al tehnicii.
în formulele de mai sus R, Rv R2, R3, R4 și R5 pot fi orice alchil inferior, preferabil metil. Termenul de alchil inferior desemnează grupări alchil inferior conținând de la 1 la 6 atomi de carbon, cum ar fi metil, etil, n-propil, izopropil etc. în
RO 112730 Bl general grupările alchil preferate sunt grupări alchil conținând de la 1 la 4 atomi de carbon, metilul fiind cel mai preferat. Rb R2, R3, R4 și R5 pot fi de asemenea hidrogen, dar R,, R2, R3 și R4 nu sunt hidrogen în mod simultan.
în aceleași formule, x, y, z pot fi selectați din orice combinație de numere astfel încât conjugatul rezultat conține cel puțin o porțiune a activității biologice a IFN care formează conjugatul. Este evident că suma lui x, y și z, și m este invers proporțională cu cantitatea de activitate biologică a IFN care este reținută de către conjugat. Valoarea numerică a x, y și z reprezintă numărul unităților de glicol din polietilenglicolul care formează conjugatul. Termenul m reprezintă numărul grupărilor aminice libere sau accesibile conținute de IFN, care pot reacționa cu amestecul PEG activat. Cu cât este mai mare m și x, y și z, cu atât este mai mare greutatea moleculară a conjugatului. în conformitate cu această invenție, x, y și z sunt orice număr astfel încât greutatea moleculară a conjugatului, excluzând greutatea proteinei, este între circa 3OG și circa 3OOOO daltoni. Preferabil pentru IFN, m este un număr de la 1 la 3. Un aspect foarte preferat este un conjugat monopolietilen-glicolat în care m este 1 obținut în astfel de condiții încât se obține un conjugat IFN compus din IFN în care numai o grupare amino liberă a reacționat cu reactivul PEG de formula HA, IIB sau III. Conform unei întruchipări preferate când m este 1, x, y și z sunt orice număr astfel încât glicolul care formează conjugatul are o greutate moleculară medie de la circa 300 la circa 30000 daltoni, preferabil de la circa 1000 la circa 30000 daltoni, în special de la circa 1000 la circa 5000 daltoni. într-o întruchipare deosebit de preferată, greutatea molculară este de circa 2000 daltoni.
în ceea ce privește numerele x, y și z ale unităților, x este un număr întreg de 1 la 1000 și fiecare dintre y și z este un număr întreg de la O la 1000 și suma lui x, y și z este între 3 și 1000.
într-o întruchipare preferată a conjugatelor de formulele IA și IB, x și y sunt de la 5 la 500 și z este de la O la 4. Deosebit de preferat este ca glicolul utilizat să fie un amestec de glicoli în care x este între 10 și 100, y este între 1 și 10 și z este O. Cel mai preferat este un interferon conjugat de formula IA în care m este 1, R, R1 și R4 sunt CH3, R1 este H, x este circa 19, y este circa 2 și z este O. Aceasta corespunde unei greutăți moleculare medii în unitatea PEG-ului de circa 1000 daltoni.
Pentru a evita orice dubii privind numărul de unități în molecula de PEG, se preferă caracterizarea polimerului polietilenglicolic prin greutate moleculară în loc de indicarea numărului de unități de autorepetare (SRUj în polimerul PEG prin x, y și z. Aceste valori pot fi dificil de evaluat datorită imunogenicității potențiale a compușilor PEG de pornire care sunt definiți în mod obișnuit prin greutatea moleculară medie și nu prin numărul de unități de autorepetare pe care aceștia le conțin. Compușii PEG de pornire cu diverse greutăți moleculare pot fi preparați prin metode cunoscute în tehnica de specialitate sau pot fi obținuți de la furnizori comerciali.
în cazul în care valorile lui x, y și z obținute prin determinarea greutăților moleculare sau după cum a fost indicat de furnizor nu sunt întregi (așa cum va fi cazul în general), valorile lor vor trebui rotunjite în plus sau în minus în modul obișnuit pentru a permite o determinare a întregilor la molecula polimerică care formează probabil partea majoră a amestecului polimeric.
Atunci când reactivul având oricare dintre formulele HA, IIB sau III este reacționat cu un IFN, care conține mai mult de o grupare amino liberă, conjugatul cu acțiune imunomodulatoare se poate obține sub forma unui amestec de diverse produse de reacție ale IFN cu amestecurile de reactiv PEG. Aceste produse de reacție se formează ca rezultat al reacției reactivului PEG cu una sau mai multe dintre grupările amino libere. Acest lucru esre însemnat prin m în formula IA și IB. De exemplu, atunci când IFN-ul conține trei grupări amino libere, reactivul PEG activat
RO 112730 Bl poate reacționa cu una dintre grupările amino, cu două dintre grupările amino libere, sau cu toate trei. în această situație amestecul conține produse de reacție conjugate formate în toate cele trei cazuri. 5 Deoarece diversele produse de reacție conjugate din acest amestec au greutăți moleculare foarte diferite, funcție de valorile lui m, adică 1, 2 sau 3, aceste produse de reacție pot fi separate prin 10 metode convenționale cum ar fi prin cromatografie. Pentru a determina dacă m, și x, y și z au fost selectați în mod adecvat, produșii de reacție separați pot fi testați pentru activitatea biologică prin 15 aceleași metode cu cele utilizate pentru a testa IFN-ul inițial pentru a determina dacă produsul de reacție conjugat mai reține încă o porțiune a activității biologice a IFN-ului utilizat pentru a forma conjugatul. 2 o în această manieră, numerele m, și x, y și z pot fi ajustate în orice mod dorit pentru a stabili activitatea dorită.
într-o prezentare preferată, m este 1. Atunci când m este 1, acest conjugat 25 poate fi obținut chiar și atunci când există două sau mai multe grupări libere. Reactivul PEG activat va reacționa mai întâi cu una dintre grupările amino libere conținute în IFN. Prin reglarea concentrației 30 reactivilor cum ar fi IFN-ul, și a condițiilor de reacție, conform metodelor standard de condensare a aminelor, se poate regie gradul de polietilenglicolare al grupărilor amino libere conținute în proteină. în 35 proteinele care conțin una sau mai multe grupări amino libere, în care una dintre grupările amino este mai reactivă decât celelalte grupări amino, pot fi selectate condițiile astfel încât proteina este reacționată cu compusul PEG activat pentru a forma compusul cu formula IA sau IB în care m este 1. Alte grupări amino libere conținute în amino acizii care formează proteina pot fi reacționate ulterior cu PEGul fie lăsând reacția de condensare să se desfășoare un timp mai îndelungat, fie utilizând alte condiții de reacție mai viguroare.
Așa cum este utilizat în descrierea de față și în revendicări termenii interferon și IFN includ toate tipurile de interferon (evident molecule cu activitate de interferon), de exemplu a, β, γ și ω interferon, și toate subtipurile acestor tipuri, cum ar fi α2, α2Α, a2B sau a2C sau hidrizi sau himere a diferitelor tipuri și/sau subtipuri. Interferonul poate fi de oricare origine și poate fi obținut din surse naturale, culturi de țesut sau prin tehnici ADN recombinat. Metodele pentru producerea și izolarea interferonului natural sau recombinat sunt bine cunoscute în specialitate și sunt descrise, de exemplu în cererile de brevet publicate EP 43980, EP 211148, EP 140127, DE 3028919, brevet US 4503035 și brevet U9 4414150.
Un alt obiect al prezentei invenții se referă la un procedeu pentru prepararea unui conjugat polimer cu acțiune imunomodulatoare care cuprinde reacționarea unui intermediar cu formula II sau cu formula III cu interferon sau o sare a acestuia urmată de izolarea produsului obținut din amestecul de reacție.
(ie)
RO 112730 Bl în care
R este alchil inferior;
Rv R2, R3> R 4 și R5sunt H sau alchil inferior;
W este NH sau O;
x este un număr întreg între 1 și 1OOO și fiecare dintre y și z este un număr întreg până la 1000 și suma lui x, y și z este de la 3 la 1 □□□; ' cu condiția ca dacă W este NH sau dacă W este □ și R5 este H cel puțin unul dintre Rv R2, R3 și R4 este alchil inferior;
(III) în care
R este alchil inferior;
Rv R2, R3 și R4 sunt H sau metil;
x este un număr de la 1 la 1000 și fiecare y și z este un număr întreg de la O la 1000, și suma lui x, y și z este de la 3 la 1000.
Conjugatul cu formula IA poate fi obținut după cum urmează:
PEG-amină (IV)
(IIA)
H
---- proteină m
(l-A)
RO 112730 Bl in care
R, Rv R2, R3, R4 si R5, m și x, y și z sunt ca mai sus;
cu condiția că oricare sau mai mulți dintre Rv R2, R3 și R4 pot fi alchil inferior. 5 în această reacție o amină-PEG este amestecată cu compusul de formulă IV într-o hidrocarbură sau o hidrocarbură clorurată cu solvent pentru a se obține compusul de formula HA. Compusul de 10 formula IIA poate fi condensat într-un mediu apos cu una sau mai multe grupări amino libere ale proteinei pentru a se obține conjugatul de formula IA. Această reacție poate fi realizată în condiții convenționale 15 pentru condensarea aminelor într-un mediu apos. în general această reacție este realizată într-o soluție tampon apoasă standard având un pH între 7 și 1 □ pentru a produce conjugatele de formula IA. Se 20 poate obține un amestec de conjugate PEGproteină de diverse greutăți moleculare funcție de numărul grupărilor amino libere din molecula de proteină și de timpul de reacție. Conjugatele PEG proteină pot fi separate apoi în componentele lor individuale prin metoda convențională cum ar fi cromatografie lichidă de înaltă performanță (HPLC) sau electroforeză pe gel. Pot fi utilizate oricare dintre condițiile convenționale pentru separarea compușilor funcție de greutatea moleculară cu HPIC sau electroforeză pe gel. Separarea acestui amestec poate fi realizată conform greutăților moleculare ale produșilor formați așa cum s-a descris aici.
Un conjugat de formula IB poate fi preparat conform următoarei scheme de reacție:
RCHCHjCHO), — (CHjCHOyj- (CHjCHO^OyXOH
R® R3 R4
PEG-alcool (IV)
RO-țCHzCHO), I R'
RO-(CH2CHO)x I R1 —(CH2CHO)j~ (CHîCHOJjOIjCHO —(CHjCHOJt- (CHjCHOfeOlaCH
i.
(U-β)
NHy-interferon
NI- — interteron
-< V
I 11
R4 ° (1-B)
RO 112730 Bl în care R, R7, R2> R3, R4, m, x, y, z și condiția sunt ca mai sus.
Compusul de formula IV este obținut prin condensarea fosgenului cu 2-hidroxipiridină (substituită dacă R5 este alchil inferior) 5 utilizând o metodă convențională pentru condensarea unei halogenuri acide cu un alcool.
Condensarea unui alcool-PEG cu compusul de formula IV este efectuată io utilizând condițiile convenționale pentru condensarea unui alcool cu un carbonat pentru a se produce compusul de formula ll-B. Compusul de formula IIB este condensat cu proteina prin intermediul uneia îs sau mai multor grupări amino libere de la proteină pentru a se obține compusul de formula IB. Această reacție este realizată în maniera descrisă pentru condensarea compusului IIA pentru a produce conjugatul de formula IA. Funcție de numărul de grupări amino libere conținute în proteina care reacționează cu compusul de formula IIB, conjugatul de formula IB poate fi format ca un amestec de conjugate având greutăți moleculare diferite. Acest amestec de conjugat poate fi separat în maniera descrisă mai înainte.
Compusul de formula IB poate fi produs de asemenea utilizând următoarea schemă de reacție:
R^CHjCHO^^CHjCW^CH/ÎHOij-aizCHOH
R1 R2 R3 L
Ă1 A2 ' R3 R4
RCHCHaCHO^CHjCHO^CHaCHO^-CHjCHO - — C-O Ă’ A2 R3 R4 z
(HI)
NHj-rrferferon
NH--interferon (l-B) în care 40
R, Rv R2, R3, R4, R5, m, x, și y sunt ca mai sus.
în această schemă de reacție, PEGalcool este condensat cu compusul de formula IV pentru a se obține compusul 45 de formula III. în această reacție, compusul de formula IIB se formează ca intermediar care apoi reacționează cu un al doilea mol de alcool-PEG pentru a produce compusul de formula III. în realizarea acestei reacții, PEG-alcoolul este prezent într-o cantitate de cel puțin 2 moli pe mol de compus de formula IV. în acest procedeu poate fi
RO 112730 Bl utilizată orice metodă convențională de condensare a unui alcool cu un carbonat. Compusul de formula III este reacționat cu interferon pentru a forma conjugatul de formula IB în modul descris pentru transformarea compusului de formula HA la compusul de formula IA. Funcție de cantitatea de grupări amino libere conținute de către proteină, condensarea compusului de formula III cu proteina duce la obținerea unui amestec de conjugate care pot fi separate în componentele lor individuale în maniera descrisă mai înainte pentru separarea conjugatului de formula IA.
Conjugatul polimer din prezenta invenție se utilizează în compoziții farmaceutice drept compus activ alături de un purtător inert din punct de vedere terapeutic la tratamentul și profilaxia afecțiunilor imunomodulatorii.
Compozițiile farmaceutice din prezenta invenție, utilizate în controlul sau prevenirea bolilor, cuprind un conjugat cu acțiune imunomodulatoare de formula generală I, și un material purtător inert din punct de vedere terapeutic, netoxic și acceptabil din punct de vedere terapeutic. Compozițiile farmaceutice care urmează să fie utilizate, pot fi formulate și dozate într-un mod care concordă cu o practică medicală bună, având în vedere afecțiunea de tratat, starea pacientului, locul de eliberare a conjugatului proteic, metoda de administrare și alți factori, cunoscuți practicienilor.
Conjugatul cu acțiune imunomodulatoare din prezenta invenție prezintă o serie de avantaje:
- are aceeași utilitate ca și proteina utilizată pentru formarea conjugatului. Prin urmare, acest conjugat este activ din punct de vedere terapeutic în același mod ca și proteina de la care se formează și poate fi utilizat în același mod ca și proteina însăși fără producerea de răspuns imun nedorit care poate fi asociat cu administrarea proteinei simple la subiecți;
- utilizarea reactivilor de formulele IIA, IIB și III în care cel puțin unul dintre R^ R2, R3, R4 este alchil inferior, în special metil (reactivi substituiți cu alchil) deter mină o îmbunătățire neașteptată a randamentului în conjugat, adică proteină polietilenglicolată, atunci când sunt utilizați reactivi substituiți cu alchil în comparație cu reactivii corespunzători nesubstituiți. Reactivii substituiți cu alchil duc la obținerea a cel puțin de două ori cantitatea de conjugate în același timp de reacție comparativ cu reactivii corespunzători nesubstituiți atunci când se produc astfel de conjugate.
Dacă sunt administrate pacienților pentru scopuri terapeutice, conjugatele de formulele IA și IB obținute din reactivii substituiți descriși mai sus au un timp de înjumătățire in vivo, crescut în mod neașteptat, în curentul sanguin al pacientului prin comparație cu conjugatele formate din reactivii corespunzători nesubstituiți. Deși timpul de înjumătățire in vivo este direct porțional cu greutatea moleculară a conjugatului, un conjugat produs dintr-un reactiv substituit va avea în mod surprinzător un timp de înjumătățire tot atât de îndelungat ca și un conjugat de greutate moleculară mai mare obținute din reactiv nesubstituit. Un timp de înjumătățire mai îndelungat în curentul sanguin al pacientului pentru un agent terapeutic conferă eficiență mărită la administrarea agentului la pacient. De exemplu, conjugatele obținute din reactivi substituiți cu alchil pot fi administrate mai puțin frecvent și/sau în cantități mai mici decât conjugatele obținute din reactivii corespunzători nesubstituiți. Pentru a mări eficiența administrării conjugatelor de proteină cu polietilenglicol, active din punct de vedere biologic, au fost utilizate greutăți moleculare crescute ale polietilenglicolilor atunci când au fost formate aceste conjugate cu proteină. Totuși, eficacitatea biologică a conjugatului IFN descrește odată cu creșterea greutății moleculare, totuși, prin utilizarea conjugatelor din această invenție obținute cu reactivi substituiți, eficiența administrării este mărită de cazul utilizării conjugatelor corespunzătoare nesubstituite cu creșterea mai mică a greutății moleculare.
în cele ce urmează se dau exemple de realizare a invenției în legătură și cu fig. 1...3, care reprezintă:
RO 112730 Bl
-fig. 1, comportamentul în timp a modificării PEG cu compusul din exemplul 7;
-fig.2,comportamentul în timp a modificării PEG cu compusul din exemplul 5;
-fig.3,comparație între modificarea PEG cu compusul din exemplul 1 (în partea stângă] și din exemplul 3 (în partea dreaptă].
Așa cum se utilizează în exemple, Jeffamine M-2O7O este un polimer monometoxipolioxialchilen propilaminic de greutate moleculară medie de 2070, derivat de propilenă și etilenoxid care este compus dintr-un polietilenglicol de bază și conține în medie 30% grupări de propilenoxid incorporate în mod întâmplător.
Jeffamida-M-1000 este un polimer monometoxipolialchilen propilamină de greutate moleculară medie de 1000, derivat de propilenă și etilenoxid care este compus dintr-un polietilenglicol de bază conținând în medie 14% grupări de propilenoxid încorporate în mod specific în care x este o medie de 18,6, y este o medie de 1,6 și z este □ (x, yși z sunt utilizați aici cu aceleași semnificații cu cele descrise mai sus).
Toți reactivii descriși în aceste exemple pot fi stocați deshidratați în sticlă de culoare închisă la 4°C până se transformă în ace. Pentru fiecare modificare sunt utilizate alicotele proaspete.
Exemplul 1. Prepararea de a, aoxometilen bis[m-metoxipoli(oxi-1,2-etandiil)] SRU 111
Dintr-o suspensie de 1,5 g MPEG (metoxipolietilenglicol) (greutate moleculară 5DDD) în 80 ml de toluen anhidru sunt distilați 50 ml de solvent. Soluția este apoi răcită și se adaugă 30,5 mg de di-2piridilcarbonat. Amestecul este apoi refluxat timp de 24 de ore. Soluția este apoi răcită și precipitatul rezultat este filtrat și spălat cu un volum mic de toluen urmat de dietileter. Solidul a fost apoi uscat sub vid înaintat, pentru a da 0,6 g de a,aoxometilen bis[G>-metoxipoli(oxi-1,2-etandiil)] SRU 111 sub forma unei pulberi albe. Interferonul modificat cu PEG a fost preparat prin metoda 1 descrisă mai jos.
Prepararea de interferon-α modificat cu PEG
Metoda 1: lnterferonul-α recombinat în cantitate de 5 mg de proteină pe ml distilat cu o soluție tampon conținând 5 mM acetat de sodiu, pH 5,0, 120 mM NaCI. Se adaugă tiocianat de potasiu pentru a obține o concentrație finală de 0,5 M, și pH-ul se ajustează prin adăugarea unei zecimi de volum de 1 M Tricinăhidroxid de sodiu, pH 11,9, pentru a obține o soluție cu pH final de 10.
Reactivul PEG se adaugă la proteină într-un raport molar de 3:1, sub formă solidă sau dizolvat în DMSO (volumul de DMSO este mai puțin de 10% din total). Modificarea a fost lăsată să se desfășoare la temperatura camerei pentru un timp de la 30 mi la 4 h, urmată de adăugarea a 1 M L-glicină (pH 6,3) până la o concentrație finală de 20 mM pentru a opri modificări suplimentare. Proteina modificată cu PEG este precipitată prin adăugarea de 3,5 M sulfat de amoniu, 50 mM fosfat de amoniu, pH 7,0, până la o concentrație finală de 1,1 M sulfat de amoniu (1,0 M sulfat de amoniu pentru un PEG -1000), precipitatul este colectat prin centrifugare, este spălat și redizolvat în 25 mM acetat de amoniu, pH 5,0. Proteinele modificate cu PEG sunt purificate prin cromatografie pe o coloană de schimb hidrofobic (de exemplu 75 x 7,5 mm) cum ar fi BioRad TSK fenil-5.PW sau Tayapearl-650 M, utilizând un gradient de descreștere sulfat de amoniu în 50 mM fosfat de sodiu, pH 7,0. în mod alternativ, PEG-IFN-ul se poate purifica prin filtrare pe gel pe o coloană Sephacryl S-200 (de exemplu 90 x 3,2 cm) (Pharmacia) care se echilibrează în 25 mM acetat de sodiu (pH 5,0), 200 mM NaCI. Proteina modificată cu PEG este identificată prin SDSPAGE. Proteina eluată de pe coloană corespunzând la interferon având una (PEGJFN) sau două (PEG^-IFN) legături PEG sunt reunite, concentrate și proteina este determinată prin absorbanță la 280 nm sau prin determinare colorimetrică (Pierce). PEG-IFN-ul este păstrat la 4°C în tampon conținând 50 mM fosfat de sodiu, pH 7,0, 0,3 M sulfat de amoniu.
RO 112730 Bl
Metoda 2: Interferonul α-A cu o concentrație de proteină de aproximativ 6 mg pe ml, este dializatîn 5 mM acetat de sodiu, pH 5,0, 0,12 M clorură de sodiu. Concentrația proteinei se determină prin măsurarea absorbției la 280 pm utilizând 1,0 mg'1ml, drept coeficient de extincție. Soluția de proteină se amestecă cu reactivul modificat într-un raport molar de 3:1 proteină la reactiv.
Reacția de modificare este inițiată prin ajustarea pH-ului la 10,0 utilizând o zecime de volum de □, 1 M Na^Cț-NaOH, pH 10,7. După incubare la temperatura camerei timp de o oră, reacția este stopată prin adăugarea a 1 /20 volum de 1 M glicină, pH 7,5. După 3-5- min, pH-ul este descrescut la 5,0-6,0 prin adăugarea a 1 /20 volum de 1 M acetat de sodiu, pH 4,0.
Soluția conținând PEG-interferon, reactiv stopat și interferon nemodificat este diluată de patru ori cu 40 mM acetat de amoniu, pH 4,5 și este încărcat într-o coloană CM-celuloză (Whatman CM-52, aproximativ 0,5 ml rășină pe mg proteină). După spălarea coloanei cu 5 volume de 40 mM acetat de amoniu, pH 4,5, PEGinterferonul și interferonul nemodificat sunt eluați utilizând un gradient liniar de clorură de sodiu (0-0,5 M) în 40 mM acetat de amoniu, pH 4,5. Fracțiunile conținând proteină sunt identificate prin absorbanță la 280 nm, și fracțiunea conținând PEGinterferon se identifică prin SDS-PAGE.
PEG-interferonul este purificat suplimentar prin cromatografie filtrantă pe gel cu excludere funcție de dimensiune pe o coloană conținând rășină Sephacryl-S200 (Pharmacia IKB). Fracțiunile eluate de pe coloană sunt analizate prin SDSPAGE și se reunesc materialele de vârf conținând PEG-interferon.
Interferonul este incubat cu de 3 ori execes din fiecare reactiv timp de 0,25, 1,5 sau 24 ore. Alicotele sunt îndepărtate, reacția este oprită cu glicerină și se face analiza pe un gel 15% SDS-PAGE. S este marcajul pentru standardele greutăților moleculare ale proteinelor, Ί este marcajul pentru interferon.
Exemplul 2. Prepararea de α,αoxometilen bis[ω-metaxipolifoxi-1,2-etandiil]] SRU 28,3
Prin procedeul descris în exemplul 1, MPEG-ul este transformat în α,αoxometilenbis[G>-metoxipoli(oxi-1,2-etan-diil)] SRU 28,3 și interferonul modificat cu PEG este preparat utilizând acest reactiv prin metoda 1 descrisă în exemplul 1.
Exemplul 3. Prepararea a-metil-w[2[[[2-piridiniloxi]carbonil]oxi]-etoxi]-poli-(oxi1,2-etandiil] SRU 111,7
Dintr-o soluție din 1 g MPEG de greutate moleculară 5000 dizolvat într-un volum de 30 ml CH2CI2 anhidru se distilă 10 ml de solvent. Soluția se răcește la temperatura camerei și se adaugă 132 mg (0,6 mM) carbonat de di-2-piridiil și mg de DMAP.
Soluția rezultată este agitată apoi timp de 14 h și solventul este îndepărtat sub vid. Reziduul se triturează cu dietilester și precipitatul rezultat este filtrat. Produsul este apoi dizolvat îm 7 ml glimă anhidră, este încălzit pentru a produce dizolvarea și soluția rezultată este lăsată să se răcească și să stea la temperatura camerei timp de mai multe ore. Precipitatul rezultat este apoi filtrat și spălat cu 2 x ml glimă anhidră. Solidul este uscat apoi într-o etuvă sub vid în curent de azot pentru a da 0,7 g de a-[[(2-piridiniloxi)carbonil]-<Ometoxipoli-(oxi-1,2-etandiil] SRU 111,7.
Analiză. Calculat pentru CgH11N04 (CH^Oh, 7 : C 54,57; H 9,02; N 0,28. GăsitC 54,51; H 9,19; N 0,28.
Interferonul modificat cu PEG se prepară utilizând acest reactiv prin metoda 1 descrisă în exemplul 1.
Exemplul 4. Prepararea a-[(2piridiniloxi]carbonil]M-metoxipoli-[oxi-1,2etandiil] SRU 225
Prin procedeul descris în exemplul 3 se transformă MPEG de greutate moleculară 10000 în cc-[(2-piridiniloxi]carbonil)<o-metoxipoli-(oxi-1,2-etandiil) SRU 225.
Analiză. Calculat pentru CgHq^QJCH, CH, 0^25 : C 54,54; H 9,08; N0,14. Găsit: C 54,54; H 9,12; N 0,11.
Interferonul modificat cu PEG se prepară utilizând acest reactiv prin metoda
RO 112730 Bl descrisă în exemplul 1.
Exemplul 5. Prepararea de a-metilω[2-[2-[(2-piridiniloxi]carbonil] oxi]propoxi]poli(oxi-1, 2-etandiil) SRU 64,7 □intr-o soluție din 0,5 mg a-2-[2- 5 (hidroxipropoxi)propil]-<d-metoxipoli[oxi-1,2etandiil) SRU 64,7 în 40 ml de CH2CI2 anhidru se distilă 15 ml de solvent. La soluție se adaugă apoi 108 mg de di-2 piridil carbonat, 4 mg de DMAP și mai multe bile de sită moleculară 4A. Amestecul este agitat peste noapte, este filtrat și solventul este apoi îndepărtat sub presiune redusă. Reziduul se purifică cu ajutorul cromatografiei cu excludere dimensională.
Acest reactiv corespunde unui compus cu formula:
o
CH3-O-(CH2CH2O)nCH2CHOCH2CH -
CH3 ch3 (ΠΒ-1) în care n este circa 64. 15
Aceasta corespunde unei greutăți moleculare a polimerului de circa 3000 daltoni.
Interferonul modificat cu PEG este preparat prin metoda 1 descrisă în exem- 20 piui 1.
Interferonul este incubat cu de 3 ori sau de 10 ori exces de reactiv pe perioadele de timp indicate ca în Figura
1. La momentele indicate sunt îndepărtate 25 alicotele, reacția este oprită cu glicerină, și se face analiza pe un gel 15% SDS_PAGE. S este marcajual pentru standardele de greutate moleculară a proteinei, I este marcajul pentru 30 interferon.
Exemplul G. Prepararea a-metilω[2-[2-[[(2-piridiniloxiJcarbonil] oxi]propoxi]propoxi]poli[oxi-1,2-etandiil) SRU 110 35
Prin procedeul descris în exemplul 5, se transformă a-2-[2-(hidroxipropoxi]propil]-o-metoxipoli(oxi-1,2-etandiil)SRU 110în a-metil-G)[2-[2-[(2-piridiniloxi]carboniljoxij-propoxi] propoxi]poli(oxi-1,2-etandiil) 4 o SRU 110.
Acest reactiv (IIB-2) corespunde celui descris în exemplul 5 (IIB-I) cu excepția faptului că n este circa 110 ceea ce corespunde la circa 5000 daltoni.
Interfefonul modificat cu PEG este preparat utilizând acest reactiv prin metoda 1 din exemplul 1.
Exemplul 7. Prepararea de metiloxiran, polimer cu oxiran, [2-[[(2-piridiniloxijcarboniljamino ]propil]metil eter (M0/0=10/32)
Dintr-o soluție din 1 g Jeffamine M-2D7D (Texaco Chemical Co.) în 40 ml CHgCIg anhidru se distilă 15 ml de solvent. Soluția se răcește la D°C și se adaugă 215 mg de carbonat de c/A2-piridil. Soluția rezultată este agitată încă 4 h la 0°C după care solventul se îndepărtează la presiune redusă. Reziduul este purificat apoi cu ajutorul a două coloane cu excludere dimensională atașate în succesiune (500 Â și 1DD0 Â). Produsul prezintă două benzi în UV la 232 nm și la 310 nm.
Acest reactiv corespunde unui compus cu formula
CH3OCH2CH2O(CH2CHO)n-CH2CH—NH
M CH3
(ΠΑ-1)
RO 112730 Bl în care R5 este H, R2 este H sau metil, și ca o distribuție medie, n este 32 dacă R2 este H și n este 10 dacă (¾ este metil.
Interferonul modificat cu PEG este preparat prin metoda 2 descrisă în 5 exemplul 1.
Interferonul (5 mg/ml) este incubat cu de 10 ori, 20 ori, sau 40 ori exces de reactiv, față de proteină, pe perioadele de timp indicate în 25 mM Tricine (pH) io 10,0), 0,5 M KSCN, 100 mN NaCI. LA diverși timpi sunt îndepărtate alicotele, reacția este oprită cu glicerină și se face analiza pe un gel 15% SDF-PAGE. în tabel, I este pentru interferon. 15
Exemplul 8. Prepararea de metiloxiran, polimer cu oxiran, [2-[[[3-metil-2piridiniloxiJcarboniljamino]propil]metileter (MO/O = 10/32]
Prin procedeul descris în exemplul 20 7, 1 g de Jeffamino M-207D este reacționat cu carbonat de b/s(3-metil-2 piridil) pentru a da metiloxiran, polimer cu oxiran, [2-[[(3-metil-2-piridiniloxi)carbonil]amino]propil]metil eter [MO/O = 10/32).
Acest reactiv (IIA-2) corespunde celui descris în exemplul 7 (IIA-1) cu excepția că R5 este CH3.
Interferonul modificat cu PEG este preparat utilizând acest reactiv prin metoda 1 descrisă în exemplul 1.
Exemplul 9. Prepararea de metiloxiran, polimer cu oxiran, [2-[[(2-piridiniloxi]carbonil]amino]propil]metileter, bloc (MO/O = 1,6/18,6]
Prin procedeul descris în exemplul 7, 0,6 g de Jeffamină M-1000 (Texaco Chemical Co.) sunt reacționate cu 155,6 mg de carbonat de di-2-piridil pentru a da metioxiran, polimer cu oxiran,[2-[[(2-oxi] carbonil)amino]propil]metil eter, bloc (MO/O = 1,6/18,6).
Această reacție conduce la un compus cu formula:
o c n
CHaOiCHîCHzO^^CHjCHO)! 6CH2CH- N z '0-UN ') CH3 ch3 (IIA-3 ) având media indicată a distribuției unităților 25 în produsul polimeric.
Interferonul modificat cu PEG este preparat utilizând acest reactiv prin metoda 1 descrisă în exemplul 1.
Activitatea antivirală a interferonului. 30
A fost determinată activitatea antivitală a interferonului și a interferonului modificat cu PEG (Rubenstein, et. al., (1981) J. Virol. 37: 755-758; Familletti, et. al., (1981) Methods Enzymol. 78:387- 35 394). Toate testele au fost standardizate față de control. Interferonul standard utilizat în test avea o activitate specifică de 2 x 108 unități pe mg de proteină.
Condițiile utilizate pentru modificarea 4 o interferonului s-au bazat pe protocoalele optimizate descrise. Modificarea cu PEG a fost analizată prin SDS-PAGE pentru determinarea transformării interferonului în mono-PEG-interferon de-a lungul a diverse timpuri de incubare (reactivitate chimică], și a distribuției în diferite specii de conjugate PEG-interferon (selectivitate de situs). în testul SDS-PAGE, speciile modificate cu PEG au fost observate ca migrând mai încet, sub formă de bandă, pe gel. Atât monoPEG- cât și diPEGinterferonii au fost obținuți în cantitate suficientă astfel încât aceste specii să poată fi purificate din amestecurile de reacție prin cromatografie de interacție hidrodobică. Interferonii modificați cu PEG purificați au fost testați pentru activitatea antivirală comparativ cu standarde interferon-a2A nemodificate. Greutățile moleculare ale polimerilor utilizați și activitatea antivirală a unor derivați PEG sunt descrise în tabelul următor.
RO 112730 Bl
Proprietățile fizice ale reactivilor PEG și activitățile biologice ale conjugatelor proteinice
Compus din exemplul: Polimer Greutate Moleculară Activitate Antivirală (% control)
monoPEG diPEG
4 10000 25 2
3 5000 40 4
1 5000 40 ND
6 5000 40 ND
5 3000 60 ND
7 2070 60 ND
2 1300 70 ND
9 1000 100 40
MD = nedeterminat.
Revendicări aceea că este reprezentat prin formula generală I

Claims (15)

1. Conjugat polimer cu acțiune imunomodulatoare, caracterizat prin
O
RO-tCHjCHOJ/CHîCHOHCHaCHO^-CHîCH-W/ M i· k l? 4*
NH— interferon (I) în care R este alchil inferior; 20
Rt Ρξ· Ra sunt H sau alchil inferior; m este selectat dintre numere întregi > 1 până la numărul de grupări amino accesibile în interferon;
W este O sau NH; 25 x este un număr întreg între 1 și 10OO și fiecare yșiz este un număr întreg de la O la 1000, și suma lui x și y și z este de la 3 la 1000, cu condiția ca cel puțin unul dintre Rn R2, R3 și R4, este alchil 30 inferior;
x, y și z sunt astfel selectați încât greutatea moleculară a unității polimere din conjugat este în intervalul de la circa 300 daltoni până la circa 30000 daltoni. 35
2. Conjugat conform revendicării
1, caracterizat prin aceea că m este 1.
3. Conjugat conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că R este metil.
4. Conjugat conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că x, y și z sunt astfel selectați, încât greutate moleculară a unității polimere din conjugat este în intervalul de la circa 1000 până la circa 5000 daltoni, preferabil în intervalul de la circa 1000 până la circa 2200.
5. Conjugat conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că x și y sunt de la 5 la 500 și z este până la 4, prefe
RO 112730 Bl rabil xeste de la 10 la 100, yeste de la 1 la 10 și z este □.
6. Conjugat conform revendicării
1, caracterizat prin aceea că interferonul este interferon a2A. 5
7. Conjugat conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că W este NH; m este 1; R, R2 și R4 sunt Chk, R] este H, x este 18, 6 y este 1,6 și z este O.
8. Procedeu pentru prepararea unui conjugat polimer cu acțiune imunomodulatoare, caracterizat prin aceea că, cuprinde reacționarea unui intermediar cu formula II sau cu formula III cu interferon sau o sare a acestuia urmat de izolarea produsului obținut din amestecul de reacție.
în care
R este alchil inferior,
Rv R2, R3, R4 și R5 sunt H sau alchil inferior,
W este NH sau O;
x este un număr întreg între 1 și 1000 și fiecare dintre y și zeste un număr întreg până la 1000 și suma lui x, y și z este de la 3 la 1000, iar suma lui x, y și z este de la 3 la 1000, cu condiția că dacă W este NH sau dacă W este □ și R5 este H cel puțin unul dintre Rv R2, R3 și R4 este alchil inferior;
RO-fCHzCHO^CHjCHOHCHzCHO^-CHaCHO · — C-0
11 12 J, 3 li
R R R R (III) în care
R este alchil inferior,
Rv R2, R3 și R4 sunt H sau metil, x este un număr întreg de la 1 la 1000 și fiecare dintre y și z este un număr întreg de la O la 1003 și suma lui x, yși z este de la 3 la 1000.
9. Intermediar pentru obținerea unui conjugat polimer cu formula I, caracterizat prin aceea că are formula generală II (II)
RO 112730 Bl în care
R este alchil inferior,
Rv R3, R3, R4 și R5 sunt H sau alchil inferior;
W este NH sau □; 5 x este un număr întreg 1 și 1OOO și fiecare dintre y și z este un număr întreg până la 1000 și suma lui x, yși zeste de la 3 la 1 000, cu condiția că dacă W este NH sau dacă W este O și R5 este H și cel 10 puțin unul dintre Rp Rg, Rj și R este alchil inferior, iar x și y și z sunt astfel selectați încât greutatea moleculară a compusului respectiv este în intervalul de la circa 300 daltoni până la circa 30000 daltoni.
10. Intermediar conform revendicării 9, caracterizat prin aceea că R este metil.
11. Intermediar conform revendicării 9, caracterizat prin aceea că, x este de la 10 la 100, y este de la 1 la 10 și z este de la O la 4.
12. Intermediar pentru obținerea unui conjugat polimer cu formula I, caracterizat prin aceea că are formula generală III
RO^CHzCHO^CHjCHO^-iCHzCHOk-CHzCHO
R1 R2 R3 R4 în care 20
R este alchil inferior
Rv R2, R3 și R4 sunt H sau metil, zeste un număr întreg de la 1 la 1000 și fiecare dintre yși zeste un număr întreg de la O la 1000 și suma lui x, y și z este 25 de la 3 la 1000,' x, yși z fiind astfel selectați încât greutatea moleculară a compusului este în intervalul de la circa 300 daltoni la circa 30000 daltoni. 30
13. Intermediar conform revendi- cării 12, caracterizat prin aceea că cel (III) puțin unul dintre R.,, (¾, (¾ și R, sunt alchil inferior.
14. Intermediar conform revendicării 12, caracterizat prin aceea că R este metil.
15. Conjugat conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că se utilizează drept compus activ în compoziții farmaceutice, alături de un purtător inert din punct de vedere terapeutic, la tratamentul și profilaxia afecțiunilor imunomodulatorii cum ar fi boli neoplazice sau boli infecțioase.
RO93-01141A 1992-08-26 1993-08-23 Conjugat polimer cu actiune imunomodulatoare, procedeu si intermediar pentru obtinerea acestuia RO112730B1 (ro)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US07/935,770 US5382657A (en) 1992-08-26 1992-08-26 Peg-interferon conjugates

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RO112730B1 true RO112730B1 (ro) 1997-12-30

Family

ID=25467637

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RO93-01141A RO112730B1 (ro) 1992-08-26 1993-08-23 Conjugat polimer cu actiune imunomodulatoare, procedeu si intermediar pentru obtinerea acestuia

Country Status (37)

Country Link
US (1) US5382657A (ro)
EP (1) EP0593868B1 (ro)
JP (1) JP2859105B2 (ro)
KR (1) KR100295520B1 (ro)
CN (3) CN1183112C (ro)
AT (1) ATE165102T1 (ro)
AU (1) AU668742B2 (ro)
BG (1) BG98067A (ro)
BR (1) BR9303469A (ro)
CA (1) CA2103829C (ro)
CZ (1) CZ169393A3 (ro)
DE (1) DE69317979T2 (ro)
DK (1) DK0593868T3 (ro)
EE (1) EE9400151A (ro)
ES (1) ES2116376T3 (ro)
FI (1) FI109765B (ro)
HR (1) HRP931094A2 (ro)
HU (1) HUT67013A (ro)
IL (1) IL106750A0 (ro)
IS (1) IS4067A (ro)
LT (1) LT3174B (ro)
LV (1) LV10907B (ro)
MW (1) MW7693A1 (ro)
MX (1) MX9305146A (ro)
MY (1) MY131445A (ro)
NO (1) NO933028D0 (ro)
NZ (2) NZ264872A (ro)
OA (1) OA09850A (ro)
PH (1) PH30460A (ro)
PL (1) PL300194A1 (ro)
RO (1) RO112730B1 (ro)
SI (1) SI9300423A (ro)
SK (1) SK89893A3 (ro)
UY (1) UY23635A1 (ro)
YU (1) YU56693A (ro)
ZA (1) ZA936098B (ro)
ZW (1) ZW11193A1 (ro)

Families Citing this family (291)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2989002B2 (ja) * 1988-12-22 1999-12-13 キリン―アムジエン・インコーポレーテツド 化学修飾顆粒球コロニー刺激因子
DE59010941D1 (de) 1989-04-21 2005-03-24 Amgen Inc TNF-Rezeptor, TNF bindende Proteine und dafür kodierende DNAs
US7264944B1 (en) 1989-04-21 2007-09-04 Amgen Inc. TNF receptors, TNF binding proteins and DNAs coding for them
US6143866A (en) * 1989-07-18 2000-11-07 Amgen, Inc. Tumor necrosis factor (TNF) inhibitor and method for obtaining the same
IL95031A (en) 1989-07-18 2007-03-08 Amgen Inc Method for the production of a human recombinant tumor necrosis factor inhibitor
US6552170B1 (en) * 1990-04-06 2003-04-22 Amgen Inc. PEGylation reagents and compounds formed therewith
US5595732A (en) * 1991-03-25 1997-01-21 Hoffmann-La Roche Inc. Polyethylene-protein conjugates
US5880131A (en) * 1993-10-20 1999-03-09 Enzon, Inc. High molecular weight polymer-based prodrugs
US5919455A (en) * 1993-10-27 1999-07-06 Enzon, Inc. Non-antigenic branched polymer conjugates
US5951974A (en) * 1993-11-10 1999-09-14 Enzon, Inc. Interferon polymer conjugates
PT730470E (pt) * 1993-11-10 2002-08-30 Enzon Inc Conjugados melhorados de interferao-polimero
IL112583A0 (en) * 1994-02-08 1995-05-26 Amgen Inc Oral delivery of chemically modified proteins
US5730990A (en) * 1994-06-24 1998-03-24 Enzon, Inc. Non-antigenic amine derived polymers and polymer conjugates
US20030053982A1 (en) * 1994-09-26 2003-03-20 Kinstler Olaf B. N-terminally chemically modified protein compositions and methods
DE4435087A1 (de) * 1994-09-30 1996-04-04 Deutsches Krebsforsch Konjugat zur Behandlung von Infektions-, Autoimmun- und Hauterkrankungen
US5824784A (en) * 1994-10-12 1998-10-20 Amgen Inc. N-terminally chemically modified protein compositions and methods
US5738846A (en) * 1994-11-10 1998-04-14 Enzon, Inc. Interferon polymer conjugates and process for preparing the same
TW426523B (en) * 1995-04-06 2001-03-21 Hoffmann La Roche Interferon solution
DE19514087A1 (de) * 1995-04-13 1996-10-17 Deutsches Krebsforsch Konjugat aus einem Wirkstoff, einem Polyether und ggfs. einem nicht als körperfremd angesehenen, nativen Protein
CA2236591C (en) 1995-11-02 2012-01-03 Schering Corporation Continuous low-dose cytokine infusion therapy
US5908621A (en) 1995-11-02 1999-06-01 Schering Corporation Polyethylene glycol modified interferon therapy
TW517067B (en) 1996-05-31 2003-01-11 Hoffmann La Roche Interferon conjugates
TW555765B (en) * 1996-07-09 2003-10-01 Amgen Inc Low molecular weight soluble tumor necrosis factor type-I and type-II proteins
IL133974A0 (en) * 1997-07-14 2001-04-30 Bolder Biotechnology Inc Derivatives of growth hormone and related proteins
US20080076706A1 (en) 1997-07-14 2008-03-27 Bolder Biotechnology, Inc. Derivatives of Growth Hormone and Related Proteins, and Methods of Use Thereof
US7270809B2 (en) * 1997-07-14 2007-09-18 Bolder Biotechnology, Inc. Cysteine variants of alpha interferon-2
US7495087B2 (en) 1997-07-14 2009-02-24 Bolder Biotechnology, Inc. Cysteine muteins in the C-D loop of human interleukin-11
US6753165B1 (en) * 1999-01-14 2004-06-22 Bolder Biotechnology, Inc. Methods for making proteins containing free cysteine residues
BR9812466A (pt) * 1997-09-18 2000-09-19 Hoffmann La Roche Uso de ifn-alfa e amantadina para o tratamento da hepatite c crÈnica
EP1037649B1 (en) 1997-12-17 2009-09-30 Enzon, Inc. Polymeric prodrugs of amino- and hydroxyl-containing bioactive agents
US6180095B1 (en) * 1997-12-17 2001-01-30 Enzon, Inc. Polymeric prodrugs of amino- and hydroxyl-containing bioactive agents
US5985263A (en) * 1997-12-19 1999-11-16 Enzon, Inc. Substantially pure histidine-linked protein polymer conjugates
US5981709A (en) * 1997-12-19 1999-11-09 Enzon, Inc. α-interferon-polymer-conjugates having enhanced biological activity and methods of preparing the same
FR2774687B1 (fr) * 1998-02-06 2002-03-22 Inst Nat Sante Rech Med Lipopeptides contenant un fragment de l'interferon gamma, et leur utilisation dans des compositions pharmaceutiques
US6180096B1 (en) 1998-03-26 2001-01-30 Schering Corporation Formulations for protection of peg-interferon alpha conjugates
AU754002B2 (en) * 1998-03-26 2002-10-31 Merck Sharp & Dohme Corp. Formulations for protection of peg-interferon alpha conjugates
CN100335503C (zh) * 1998-04-28 2007-09-05 应用研究系统Ars股份公司 多元醇干扰素β偶联物
CN1230198C (zh) 1998-05-15 2005-12-07 先灵公司 给首次接受抗病毒疗法的G慢性丙型肝炎感染患者施用包括利巴韦林和α干扰素的联合疗法
EP1079859B1 (en) 1998-05-22 2010-07-14 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Bifunctional molecules and therapies based thereon
ITMI981148A1 (it) * 1998-05-22 1999-11-22 Therapicon Srl Utilizzo di lisozima c modificato per preparare composizioni medicinali per il trattamento di alcune gravi malattie
CN1170543C (zh) * 1998-06-08 2004-10-13 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 PEG-IFN-α和三唑核苷在治疗慢性丙型肝炎中的用途
US20030143662A1 (en) 1998-06-16 2003-07-31 Cummings Richard D. Glycosulfopeptide inhibitors of leukocyte rolling and methods of use thereof
US7223845B2 (en) 1998-06-16 2007-05-29 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Synthetic glycosulfopeptides and methods of synthesis thereof
AU773542B2 (en) * 1998-06-16 2004-05-27 Board Of Regents Of The University Of Oklahoma, The Glycosulfopeptides and methods of synthesis and use thereof
EA004789B9 (ru) * 1998-10-16 2017-05-31 Байоджен, Инк. Полимерные конъюгаты бета-1а-интерферона и их использование
WO2000023472A2 (en) * 1998-10-16 2000-04-27 Biogen, Inc. Interferon-beta fusion proteins and uses
US6660843B1 (en) * 1998-10-23 2003-12-09 Amgen Inc. Modified peptides as therapeutic agents
NZ513077A (en) 1999-01-14 2004-03-26 Bolder Biotechnology Inc Methods for making proteins containing free cysteine residues
US8288126B2 (en) 1999-01-14 2012-10-16 Bolder Biotechnology, Inc. Methods for making proteins containing free cysteine residues
CZ300546B6 (cs) * 1999-01-29 2009-06-10 Amgen, Inc. Fyziologicky aktivní konjugát, prostredek a zpusob prípravy
AR023398A1 (es) 1999-04-08 2002-09-04 Schering Corp Terapia para melanomas
US6605273B2 (en) 1999-04-08 2003-08-12 Schering Corporation Renal cell carcinoma treatment
US6362162B1 (en) 1999-04-08 2002-03-26 Schering Corporation CML Therapy
US6923966B2 (en) 1999-04-08 2005-08-02 Schering Corporation Melanoma therapy
JO2291B1 (en) 1999-07-02 2005-09-12 اف . هوفمان لاروش ايه جي Erythropoietin derivatives
JP4737903B2 (ja) 1999-07-07 2011-08-03 ザイモジェネティクス， インコーポレイテッド ヒトサイトカイン受容体
AU4934299A (en) * 1999-07-15 2001-02-05 Kuhnil Pharm. Co., Ltd. Novel water soluble-cyclosporine conjugated compounds
US6531122B1 (en) * 1999-08-27 2003-03-11 Maxygen Aps Interferon-β variants and conjugates
US7144574B2 (en) * 1999-08-27 2006-12-05 Maxygen Aps Interferon β variants and conjugates
US7431921B2 (en) * 1999-08-27 2008-10-07 Maxygen Aps Interferon beta-like molecules
WO2001026677A1 (fr) 1999-10-12 2001-04-19 Santen Pharmaceutical Co., Ltd. Complexe a base d'interferon et son utilisation en medecine
YU32402A (sh) 1999-11-12 2005-03-15 Maxygen Holdings Ltd. Konjugati gama interferona
HUP0203409A3 (en) 1999-11-12 2005-06-28 Maxygen Holdings Ltd Redwood C Interferon gamma conjugates
US6887842B1 (en) * 1999-11-19 2005-05-03 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Modulating a pharmacokinetic property of a drug by administering a bifunctional molecule containing the drug
US7220552B1 (en) 1999-11-19 2007-05-22 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Bifunctional molecules and their use in the disruption of protein-protein interactions
EP1229924A4 (en) 1999-11-19 2004-12-15 Univ Leland Stanford Junior TARGETED BIFUNCTIONAL MOLECULES AND THERAPIES BASED THEREON
AU2253301A (en) 1999-12-03 2001-06-12 Zymogenetics Inc. Human cytokine receptor
EP2133098A1 (en) 2000-01-10 2009-12-16 Maxygen Holdings Ltd G-CSF conjugates
US20020009428A1 (en) * 2000-01-24 2002-01-24 Zaknoen Sara L. Combination therapy for cancer
EP1908477A3 (en) * 2000-01-24 2008-06-11 Schering Corporation Combination of temozolomide and pegylated interferon-alpha for treating cancer
PL206148B1 (pl) 2000-02-11 2010-07-30 Bayer HealthCare LLCBayer HealthCare LLC Koniugat polipeptydowy, polipeptyd, sekwencja nukleotydowa, wektor ekspresyjny, komórka gospodarz, sposób wytwarzania koniugatu polipeptydowego, środek farmaceutyczny i zastosowanie koniugatu polipeptydowego
KR100353392B1 (ko) * 2000-03-13 2002-09-18 선바이오(주) 높은 생체 활성도를 갖는 생체 활성 단백질과 ｐｅｇ의결합체 제조방법
US6756037B2 (en) 2000-03-31 2004-06-29 Enzon, Inc. Polymer conjugates of biologically active agents and extension moieties for facilitating conjugation of biologically active agents to polymeric terminal groups
US6777387B2 (en) 2000-03-31 2004-08-17 Enzon Pharmaceuticals, Inc. Terminally-branched polymeric linkers containing extension moieties and polymeric conjugates containing the same
JP5170931B2 (ja) * 2000-10-16 2013-03-27 中外製薬株式会社 Ｐｅｇ修飾エリスロポエチン
US20020169290A1 (en) * 2000-11-02 2002-11-14 Claus Bornaes New multimeric interferon beta polypeptides
AU2002230659A1 (en) 2000-11-07 2002-05-21 Zymogenetics Inc. Human tumor necrosis factor receptor
DK1362053T3 (da) * 2001-02-20 2008-03-10 Enzon Inc Terminalt forgrenede polymere linkere og polymere konjugater indeholdende disse
US20030012783A1 (en) 2001-02-20 2003-01-16 Wayne Kindsvogel Antibodies that bind both BCMA and TACI
WO2002074806A2 (en) 2001-02-27 2002-09-26 Maxygen Aps New interferon beta-like molecules
AU2002305944A1 (en) 2001-03-02 2002-09-19 Zymogenetics, Inc. Mouse cytokine receptor
US7038015B2 (en) * 2001-04-06 2006-05-02 Maxygen Holdings, Ltd. Interferon gamma polypeptide variants
US6958388B2 (en) 2001-04-06 2005-10-25 Maxygen, Aps Interferon gamma polypeptide variants
WO2002083166A1 (en) * 2001-04-10 2002-10-24 Santen Pharmaceutical Co., Ltd. Interferon-polymer complexes and medicinal use thereof
ATE446771T1 (de) 2001-05-24 2009-11-15 Zymogenetics Inc Taci-immunoglobulin-fusionsproteine
WO2003000278A1 (en) * 2001-06-22 2003-01-03 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Ointments
MD2053C2 (ro) * 2001-07-10 2003-07-31 Национальный Научно-Практический Центр Превентивной Медицины Министерства Здравоохранения Республики Молдова Remediu cu acţiune interferonogenă
WO2003018665A1 (en) 2001-08-22 2003-03-06 Bioartificial Gel Technologies Inc. Process for the preparation of activated polyethylene glycols
US20050095224A1 (en) * 2001-12-07 2005-05-05 Ramachandran Radhakrishnan Compositions and method for treating hepatitis virus infection
KR100888371B1 (ko) 2002-01-17 2009-03-13 동아제약주식회사 가지 달린 고분자 유도체와 인터페론 결합체를 포함하는 항바이러스제
CA2473526C (en) 2002-01-18 2013-10-22 Biogen Idec Ma Inc. Polyalkylene polymer compounds and uses thereof
WO2003076490A1 (en) * 2002-03-13 2003-09-18 Beijing Jiankai Technology Co., Ltd. Hydrophilic polymer derivate with y type branch and preparation method of it medical composite comprising above compound
WO2003087308A2 (en) * 2002-04-11 2003-10-23 Zymogenetics, Inc. Use of interleukin-24 to treat ovarian cancer
EP1497415B1 (en) 2002-04-19 2010-12-29 ZymoGenetics, L.L.C. Methods for detection or modulation of the interaction of a cytokine receptor with its ligand
ATE503498T1 (de) 2002-06-21 2011-04-15 Novo Nordisk Healthcare Ag Pegylierte glykoformen von faktor vii
CA2491178A1 (en) * 2002-07-03 2004-01-15 Maxygen Holdings Ltd. Full-length interferon gamma polypeptide variants
WO2004012773A1 (en) * 2002-07-24 2004-02-12 F. Hoffmann-La Roche Ag Polyalkylene glycol acid additives
EP1545573A4 (en) * 2002-09-05 2008-02-13 Gen Hospital Corp ASIALO-INTERFERONS AND TREATMENT OF LIVER CANCER
HK1079995A1 (zh) * 2002-09-05 2006-04-21 The General Hospital Corporation 修饰的脱唾液酸-干扰素系及其应用
WO2004028568A1 (en) * 2002-09-27 2004-04-08 F. Hoffmann-La Roche Ag Conjugates of insulin-like growth factor binding protein-4 and poly (ethylene glycol)
US20040175359A1 (en) * 2002-11-12 2004-09-09 Desjarlais John Rudolph Novel proteins with antiviral, antineoplastic, and/or immunomodulatory activity
US7314613B2 (en) * 2002-11-18 2008-01-01 Maxygen, Inc. Interferon-alpha polypeptides and conjugates
US20040136952A1 (en) * 2002-12-26 2004-07-15 Mountain View Pharmaceuticals, Inc. Polymer conjugates of cytokines, chemokines, growth factors, polypeptide hormones and antagonists thereof with preserved receptor-binding activity
EP1667708B9 (en) * 2002-12-26 2012-10-31 Mountain View Pharmaceuticals, Inc. POLYETHYLENE GLYCOL CONJUGATES OF INTERFERON-BETA-1b WITH ENHANCED IN VITRO BIOLOGICAL POTENCY
AU2003303519C1 (en) * 2002-12-31 2010-08-12 Nektar Therapeutics Polymeric reagents comprising a ketone or a related functional group
EP1597299A2 (en) * 2003-02-19 2005-11-23 Pharmacia Corporation Carbonate esters of polyethylene glycol activated by means of oxalate esters
JP2006519235A (ja) * 2003-02-26 2006-08-24 インターミューン インコーポレイティッド ポリエチレングリコール修飾インターフェロン組成物およびその使用方法
WO2004078127A2 (en) * 2003-02-28 2004-09-16 Intermune, Inc. Continuous delivery methods for treating hepatitis virus infection
CA2458085A1 (en) 2003-03-21 2004-09-21 F. Hoffmann-La Roche Ag Transcriptional activity assay
EP2390262A1 (en) 2003-05-16 2011-11-30 Intermune, Inc. Synthetic chemokine receptor ligands and methods of use thereof
WO2005023862A2 (en) 2003-08-07 2005-03-17 Zymogenetics, Inc. Homogeneous preparations of il-28 and il-29
GB0320638D0 (en) 2003-09-03 2003-10-01 Novartis Ag Organic compounds
EP2263684A1 (en) 2003-10-10 2010-12-22 Novo Nordisk A/S IL-21 derivatives
EP1680137B1 (en) 2003-10-14 2012-11-21 F. Hoffmann-La Roche Ltd. Macrocyclic carboxylic acid and acylsulfonamide compound as inhibitor of HCV replication
EP2633866A3 (en) 2003-10-17 2013-12-18 Novo Nordisk A/S Combination therapy
WO2005042563A2 (en) * 2003-10-22 2005-05-12 Akzo Nobel N.V. Process for incrasing protein pegylation reaction yields by diafiltration ultrafiltration
WO2005040758A2 (en) * 2003-10-24 2005-05-06 Intermune, Inc. Use of pirfenidone in therapeutic regimens
WO2005062949A2 (en) * 2003-12-23 2005-07-14 Intermune, Inc. Method for treating hepatitis virus infection
GB0500020D0 (en) 2005-01-04 2005-02-09 Novartis Ag Organic compounds
BRPI0507169A (pt) * 2004-02-02 2007-06-26 Ambrx Inc polipeptìdeos do hormÈnio de crescimento humano modificados e seu usos
US7351787B2 (en) * 2004-03-05 2008-04-01 Bioartificial Gel Technologies, Inc. Process for the preparation of activated polyethylene glycols
RU2311930C2 (ru) * 2004-04-30 2007-12-10 Закрытое акционерное общество "ВЕРОФАРМ" Пэгилированный интерферон для борьбы с вирусной инфекцией
US7318918B2 (en) 2004-05-19 2008-01-15 Maxygen, Inc. Interferon-alpha polypeptides and conjugates
US20060018875A1 (en) * 2004-06-14 2006-01-26 Blatt Lawrence M Interferon compositions and methods of use thereof
MXPA06014684A (es) * 2004-06-18 2007-02-12 Ambrx Inc Novedosos polipeptidos de enlace antigeno y sus usos.
WO2006091231A2 (en) * 2004-07-21 2006-08-31 Ambrx, Inc. Biosynthetic polypeptides utilizing non-naturally encoded amino acids
WO2006012644A2 (en) 2004-07-29 2006-02-02 Zymogenetics, Inc. Use of il-28 and il-29 to treat cancer
US7632491B2 (en) 2004-08-12 2009-12-15 Schering Corporation Stable pegylated interferon formulation
EP2301963A1 (en) 2004-09-23 2011-03-30 Vasgene Therapeutics, Inc. Polypeptide compounds for inhibiting angiogenesis and tumor growth
MX2007007591A (es) 2004-12-22 2007-07-25 Ambrx Inc Metodos para expresion y purificacion de hormona de crecimiento humano recombinante.
ATE542920T1 (de) 2004-12-22 2012-02-15 Ambrx Inc Modifiziertes menschliches wachstumshormon
US7736872B2 (en) * 2004-12-22 2010-06-15 Ambrx, Inc. Compositions of aminoacyl-TRNA synthetase and uses thereof
CN103520735B (zh) * 2004-12-22 2015-11-25 Ambrx公司 包含非天然编码的氨基酸的人生长激素配方
WO2006086396A2 (en) 2005-02-08 2006-08-17 Zymogenetics, Inc. Anti-il-20, anti-il-22 and anti-il-22ra antibodies and binding partners and methods of using in inflammation
WO2006124667A2 (en) 2005-05-12 2006-11-23 Zymogenetics, Inc. Compositions and methods for modulating immune responses
EP1888633A4 (en) * 2005-05-18 2010-01-27 Maxygen Inc UNFOLDED INTERFERON ALPHA POLYPEPTIDE
AU2006255122B2 (en) * 2005-06-03 2010-10-21 Ambrx, Inc. Improved human interferon molecules and their uses
CA2611836A1 (en) * 2005-06-13 2006-12-21 Nastech Pharmaceutical Company Inc. Transmucosal delivery of peptide derivatives
EP2360170A3 (en) 2005-06-17 2012-03-28 Novo Nordisk Health Care AG Selective reduction and derivatization of engineered proteins comprinsing at least one non-native cysteine
AR054778A1 (es) 2005-06-17 2007-07-18 Novartis Ag Uso de sangliferina en hcv
US7695710B2 (en) 2005-06-20 2010-04-13 Pepgen Corporation Antitumor and antiviral combination therapies using low-toxicity, long-circulating human interferon-alpha analogs
CA2612901A1 (en) * 2005-06-20 2007-01-04 Pepgen Corporation Low-toxicity, long-circulating chimeras of human interferon- alpha analogs and interferon tau
ES2436761T3 (es) * 2005-06-29 2014-01-07 Yeda Research And Development Co., Ltd. Mutantes de interferón alfa 2 (IFN alfa 2) recombinante
CN101263156A (zh) 2005-07-25 2008-09-10 因特蒙公司 C型肝炎病毒复制的新颖大环抑制剂
NZ565294A (en) * 2005-08-18 2010-06-25 Ambrx Inc Compositions of tRNA and uses thereof
DK1931697T3 (da) 2005-09-28 2010-11-08 Zymogenetics Inc IL-17A og IL-17F-antagonister og fremgangsmåder til anvendelse af disse
CN101415705B (zh) 2005-10-11 2011-10-26 因特蒙公司 抑制丙型肝炎病毒复制的化合物和方法
US20080171696A1 (en) * 2005-10-21 2008-07-17 Avigenics, Inc. Pharmacodynamically enhanced therapeutic proteins
EP1937294A4 (en) * 2005-10-21 2009-11-04 Synageva Biopharma Corp GLYCOLIC AND GLYCOSYLATED THERAPEUTIC PROTEINS DERIVED FROM POULTRY
JP5508716B2 (ja) * 2005-11-08 2014-06-04 アンブルックス，インコーポレイテッド 非天然アミノ酸、および非天然アミノ酸ポリペプチドを修飾するための促進剤
EP2339014B1 (en) * 2005-11-16 2015-05-27 Ambrx, Inc. Methods and compositions comprising non-natural amino acids
CN105384807A (zh) * 2005-12-14 2016-03-09 Ambrx公司 含有非天然氨基酸和多肽的组合物、涉及非天然氨基酸和多肽的方法以及非天然氨基酸和多肽的用途
AU2007205545B9 (en) 2006-01-12 2012-10-18 Hokusan Co. Ltd. Oral composition containing interferon-alpha
CN100475270C (zh) 2006-01-20 2009-04-08 清华大学 一种治疗肿瘤的药物及其应用
CN101002945B (zh) 2006-01-20 2012-09-05 清华大学 一种用于肿瘤治疗的新型复合物
WO2007133865A2 (en) 2006-04-11 2007-11-22 Novartis Ag Hcv/hiv inhibitors an their uses
US20080096819A1 (en) * 2006-05-02 2008-04-24 Allozyne, Inc. Amino acid substituted molecules
AU2007248680C1 (en) * 2006-05-02 2014-01-23 Allozyne, Inc. Non-natural amino acid substituted polypeptides
RU2008145084A (ru) 2006-05-24 2010-06-27 Ново Нордиск Хелс Кеа Аг (Ch) Аналоги фактора ix, имеющие пролонгированное время полужизни in vivo
CN101336110B (zh) 2006-06-01 2011-06-01 程云 预防或治疗肝损伤的肽及其衍生物及其应用
CN1911447B (zh) * 2006-06-30 2010-05-12 复旦大学 转铁蛋白-聚乙二醇-药物分子复合物及其制备药物的用途
EP1886685A1 (en) 2006-08-11 2008-02-13 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods, uses and compositions for modulating replication of hcv through the farnesoid x receptor (fxr) activation or inhibition
CA2666814A1 (en) * 2006-08-21 2008-05-29 United Therapeutics Corporation Combination therapy for treatment of viral infections
CN106190983B (zh) * 2006-09-08 2019-05-28 Ambrx公司 用于脊椎动物细胞的杂合抑制tRNA
CA2663083A1 (en) * 2006-09-08 2008-03-13 Ambrx, Inc. Modified human plasma polypeptide or fc scaffolds and their uses
CN101511856B (zh) * 2006-09-08 2016-01-20 Ambrx公司 脊椎动物细胞中抑制因子trna的转录
JP5537946B2 (ja) 2006-11-22 2014-07-02 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー Ｉｇｆ−ｉｒを含むチロシンキナーゼ受容体に対する改変タンパク質に基づく標的治療薬
CN101219219B (zh) 2007-01-10 2013-02-13 北京普罗吉生物科技发展有限公司 包含血管抑素或其片段的复合物、其制备方法及应用
ATE516814T1 (de) 2007-02-02 2011-08-15 Bristol Myers Squibb Co 10fn3 domain zur behandlung von krankheiten begleitet von unerwünschter angiogenese
ES2385114T3 (es) 2007-03-30 2012-07-18 Ambrx, Inc. Polipéptidos de FGF-21 modificados y sus usos
US8114630B2 (en) * 2007-05-02 2012-02-14 Ambrx, Inc. Modified interferon beta polypeptides and their uses
CA2707840A1 (en) 2007-08-20 2009-02-26 Allozyne, Inc. Amino acid substituted molecules
KR101502645B1 (ko) * 2007-09-04 2015-03-13 바이오스티드 진 익스프레션 테크. 컴파니 리미티드 폴리에틸렌 글리콜에 의해 변형된 인터페론 알파 2ｂ, 이의 제조 방법 및 용도
PT2196475E (pt) 2007-09-04 2012-09-07 Biosteed Gene Expression Tech Co Ltd Interferão alfa-2a modificado por polietilenoglicol, seu processo de síntese e aplicação
EP3241846B1 (en) 2007-10-04 2022-02-23 ZymoGenetics, Inc. B7 family member zb7h6 and related compositions and methods
WO2009055343A2 (en) 2007-10-22 2009-04-30 Schering Corporation Fully human anti-vegf antibodies and methods of using
KR101656107B1 (ko) * 2007-11-20 2016-09-08 암브룩스, 인코포레이티드 변형된 인슐린 폴리펩티드 및 이의 용도
ES2660036T3 (es) 2007-12-07 2018-03-20 Zymogenetics, Inc. Moléculas de anticuerpo humanizadas específicas para IL-31
MX2010008632A (es) 2008-02-08 2010-08-30 Ambrx Inc Leptina-polipeptidos modificados y sus usos.
PT2272875E (pt) 2008-04-03 2014-04-28 Biosteed Gene Expression Tech Co Ltd Hormona de crescimento modificada com polietilenoglicol de cadeia dupla, método de preparação e aplicação deste
PE20091931A1 (es) 2008-05-22 2009-12-31 Bristol Myers Squibb Co Proteinas de dominio de armazon basadas en fibronectina multivalentes
EP2313105B1 (en) 2008-06-27 2013-07-24 ZymoGenetics, Inc. SOLUBLE HYBRID Fc gamma RECEPTORS AND RELATED METHODS
EP2318029B1 (en) * 2008-07-23 2017-11-01 Ambrx, Inc. Modified bovine g-csf polypeptides and their uses
EP2342223B1 (en) 2008-09-26 2017-04-26 Ambrx, Inc. Modified animal erythropoietin polypeptides and their uses
NZ592249A (en) 2008-09-26 2013-03-28 Ambrx Inc Non-natural amino acid replication-dependent microorganisms and vaccines
EP3025727A1 (en) 2008-10-02 2016-06-01 The J. David Gladstone Institutes Methods of treating liver disease
WO2010107739A2 (en) 2009-03-18 2010-09-23 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods and compositions of treating a flaviviridae family viral infection
US8512690B2 (en) 2009-04-10 2013-08-20 Novartis Ag Derivatised proline containing peptide compounds as protease inhibitors
US20110182850A1 (en) 2009-04-10 2011-07-28 Trixi Brandl Organic compounds and their uses
BRPI1013016A2 (pt) 2009-06-04 2016-03-29 Massachusetts Inst Technology "métodos para identificação de locais para conjugação de igg"
US20110027229A1 (en) 2009-07-31 2011-02-03 Medtronic, Inc. Continuous subcutaneous administration of interferon-alpha to hepatitis c infected patients
BR112012010110A2 (pt) 2009-10-30 2019-09-24 Boehringer Ingelheim Int regimes de dosagem para terapia combinada para hcv compreendendo bi201335, interferon alfa e ribavirina
CN107674121A (zh) 2009-12-21 2018-02-09 Ambrx 公司 经过修饰的牛促生长素多肽和其用途
SG181769A1 (en) 2009-12-21 2012-07-30 Ambrx Inc Modified porcine somatotropin polypeptides and their uses
WO2011143274A1 (en) 2010-05-10 2011-11-17 Perseid Therapeutics Polypeptide inhibitors of vla4
US8765737B1 (en) 2010-05-11 2014-07-01 Demerx, Inc. Methods and compositions for preparing and purifying noribogaine
US8362007B1 (en) 2010-05-11 2013-01-29 Demerx, Inc. Substituted noribogaine
US9394294B2 (en) 2010-05-11 2016-07-19 Demerx, Inc. Methods and compositions for preparing and purifying noribogaine
ES2573108T3 (es) 2010-05-26 2016-06-06 Bristol-Myers Squibb Company Proteínas de armazón a base de fibronectina que tienen estabilidad mejorada
WO2011159930A2 (en) 2010-06-16 2011-12-22 Medtronic, Inc. Damping systems for stabilizing medications in drug delivery devices
US8637648B1 (en) 2010-06-22 2014-01-28 Demerx, Inc. Compositions comprising noribogaine and an excipient to facilitate transport across the blood brain barrier
US9586954B2 (en) 2010-06-22 2017-03-07 Demerx, Inc. N-substituted noribogaine prodrugs
US8741891B1 (en) 2010-06-22 2014-06-03 Demerx, Inc. N-substituted noribogaine prodrugs
US8802832B2 (en) 2010-06-22 2014-08-12 Demerx, Inc. Compositions comprising noribogaine and an excipient to facilitate transport across the blood brain barrier
IN2012MN02896A (ro) 2010-06-24 2015-06-12 Panmed Ltd
CN103079571A (zh) 2010-07-23 2013-05-01 德莫科斯公司 降伊波加因碱组合物
EP3572091B1 (en) 2010-08-17 2023-12-13 Ambrx, Inc. Modified relaxin polypeptides and their uses
US9567386B2 (en) 2010-08-17 2017-02-14 Ambrx, Inc. Therapeutic uses of modified relaxin polypeptides
AR083006A1 (es) 2010-09-23 2013-01-23 Lilly Co Eli Formulaciones para el factor estimulante de colonias de granulocitos (g-csf) bovino y variantes de las mismas
CN103179974A (zh) 2010-10-05 2013-06-26 诺华有限公司 丙型肝炎病毒感染的新疗法
JP5909495B2 (ja) 2010-10-08 2016-04-26 ノバルティス アーゲー スルファミドｎｓ３阻害剤のビタミンｅ製剤
EP2646038A1 (en) 2010-11-30 2013-10-09 Novartis AG New treatments of hepatitis c virus infection
EP2481740B1 (en) 2011-01-26 2015-11-04 DemeRx, Inc. Methods and compositions for preparing noribogaine from voacangine
WO2012107589A1 (en) 2011-02-11 2012-08-16 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical compositions for the treatment and prevention of hcv infections
CA2831428A1 (en) 2011-03-31 2012-10-04 Novartis Ag Alisporivir to treat hepatitis c virus infection
BR112013024809A2 (pt) 2011-04-01 2016-09-06 Novartis Ag tratamento para infecção com vírus de hepatite b sozinho ou em combinação com vírus de hepatite delta e doenças do fígado associadas
SG10201602184TA (en) 2011-04-13 2016-04-28 Novartis Ag Treatment of hepatitis c virus infection with alisporivir
US20140187488A1 (en) 2011-05-17 2014-07-03 Bristol-Myers Squibb Company Methods for maintaining pegylation of polypeptides
EP2709648A4 (en) 2011-05-19 2015-04-08 Geysen Hendrik M COMPOUNDS FOR BINDING TO THE ERYTHROPOIETIN RECEPTOR
CN103930440A (zh) 2011-07-01 2014-07-16 拜耳知识产权有限责任公司 松弛素融合多肽及其用途
US20140314713A1 (en) 2011-07-20 2014-10-23 Universite Paris Diderot - Paris Vii Methods for determining treatment response in patients infected with hcv genotype 4
WO2013028233A1 (en) * 2011-08-25 2013-02-28 Nanogen Pharmaceutical Biotechnology Peg-interferon lambda 1 conjugates
US9617274B1 (en) 2011-08-26 2017-04-11 Demerx, Inc. Synthetic noribogaine
CN103826654A (zh) 2011-09-27 2014-05-28 诺华股份有限公司 用于治疗丙型肝炎病毒感染的阿拉泊韦
US9522951B2 (en) 2011-10-31 2016-12-20 Bristol-Myers Squibb Company Fibronectin binding domains with reduced immunogenicity
AU2012347785B2 (en) 2011-12-06 2017-03-16 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods and compositions for treating viral diseases
WO2013085922A1 (en) 2011-12-09 2013-06-13 Demerx, Inc. Phosphate esters of noribogaine
US9150584B2 (en) 2012-01-25 2015-10-06 Demerx, Inc. Indole and benzofuran fused isoquinuclidene derivatives and processes for preparing them
CA2858820C (en) 2012-01-25 2021-08-17 Demerx, Inc. Synthetic voacangine
US8454947B1 (en) 2012-03-01 2013-06-04 Nanogen Pharmaceutical Biotechnology PEG-interferon lambda 1 conjugates
WO2013137869A1 (en) 2012-03-14 2013-09-19 Boehringer Ingelheim International Gmbh Combination therapy for treating hcv infection in an hcv-hiv coinfected patient population
JP2015512900A (ja) 2012-03-28 2015-04-30 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 特別な患者の遺伝子亜型分集団のｈｃｖ感染症を治療するための併用療法
EP2830663B1 (en) 2012-03-30 2019-02-06 Sorrento Therapeutics Inc. Fully human antibodies that bind to vegfr2
WO2013177187A2 (en) 2012-05-22 2013-11-28 Massachusetts Institute Of Technology Synergistic tumor treatment with extended-pk il-2 and therapeutic agents
WO2013174988A1 (en) 2012-05-24 2013-11-28 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for predicting and monitoring treatment response in hcv- and hcv/hiv-infected subjects
KR102410078B1 (ko) 2012-05-31 2022-06-22 소렌토 쎄라퓨틱스, 인코포레이티드 Pd-l1에 결합하는 항원 결합 단백질
CA2875989A1 (en) 2012-06-08 2013-12-12 Sutro Biopharma, Inc. Antibodies comprising site-specific non-natural amino acid residues, methods of their preparation and methods of their use
EP2863946A4 (en) 2012-06-21 2016-04-13 Sorrento Therapeutics Inc ANTIGEN-BINDING PROTEINS THAT BIND TO C-MET
HK1208236A1 (en) 2012-06-22 2016-02-26 Sorrento Therapeutics, Inc. Antigen binding proteins that bind ccr2
US9732161B2 (en) 2012-06-26 2017-08-15 Sutro Biopharma, Inc. Modified Fc proteins comprising site-specific non-natural amino acid residues, conjugates of the same, methods of their preparation and methods of their use
US9682934B2 (en) 2012-08-31 2017-06-20 Sutro Biopharma, Inc. Modified amino acids
US20140205566A1 (en) 2012-11-30 2014-07-24 Novartis Ag Cyclic nucleuoside derivatives and uses thereof
US9045481B2 (en) 2012-12-20 2015-06-02 Demerx, Inc. Substituted noribogaine
US8940728B2 (en) 2012-12-20 2015-01-27 Demerx, Inc. Substituted noribogaine
EP2934541A4 (en) 2012-12-20 2016-08-03 Demerx Inc NORIBOGAINE SUBSTITUTE
US20150361159A1 (en) 2013-02-01 2015-12-17 Bristol-Myers Squibb Company Fibronectin based scaffold proteins
HK1221964A1 (zh) 2013-05-31 2017-06-16 Sorrento Therapeutics, Inc. 与pd-1结合的抗原结合蛋白
EP3019522B1 (en) 2013-07-10 2017-12-13 Sutro Biopharma, Inc. Antibodies comprising multiple site-specific non-natural amino acid residues, methods of their preparation and methods of their use
EP3055298B1 (en) 2013-10-11 2020-04-29 Sutro Biopharma, Inc. Modified amino acids comprising tetrazine functional groups, methods of preparation, and methods of their use
US11311519B2 (en) 2014-05-01 2022-04-26 Eiger Biopharmaceuticals, Inc. Treatment of hepatitis delta virus infection
KR20240112990A (ko) 2014-05-01 2024-07-19 아이거 바이오파마슈티컬스 인코포레이티드 델타 간염 바이러스 감염의 치료
US9388239B2 (en) 2014-05-01 2016-07-12 Consejo Nacional De Investigation Cientifica Anti-human VEGF antibodies with unusually strong binding affinity to human VEGF-A and cross reactivity to human VEGF-B
US10076512B2 (en) 2014-05-01 2018-09-18 Eiger Biopharmaceuticals, Inc. Treatment of hepatitis delta virus infection
US9550789B2 (en) 2014-06-18 2017-01-24 Demerx, Inc. Halogenated indole and benzofuran derivatives of isoquinuclidene and processes for preparing them
EP3180018B1 (en) 2014-08-12 2019-07-24 Massachusetts Institute Of Technology Synergistic tumor treatment with il-2 and integrin-binding-fc-fusion protein
US20170224777A1 (en) 2014-08-12 2017-08-10 Massachusetts Institute Of Technology Synergistic tumor treatment with il-2, a therapeutic antibody, and a cancer vaccine
MA40526A (fr) 2014-08-22 2017-06-28 Sorrento Therapeutics Inc Protéines de fixation antigénique fixant le cxcr3
US9987241B2 (en) 2014-09-25 2018-06-05 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Enzyme conjugate and prodrug cancer therapy
SG11201702824UA (en) 2014-10-24 2017-05-30 Bristol Myers Squibb Co Modified fgf-21 polypeptides and uses thereof
JP6820841B2 (ja) * 2014-11-06 2021-01-27 ファーマエッセンティア コーポレイション ペグ化インターフェロンのための投薬計画
WO2016148179A1 (ja) * 2015-03-17 2016-09-22 国立大学法人信州大学 Ｉｆｎを用いた非接着培養による樹状細胞の調製方法
DK3285768T3 (da) 2015-04-21 2021-01-25 Eiger Biopharmaceuticals Inc Farmaceutiske sammensætninger omfattende lonafarnib og ritonavir
MX377531B (es) 2015-11-03 2025-03-10 Hoffmann La Roche Terapia de combinación de un inhibidor del ensamble de la cápside del hbv y un interferón.
DK3370723T3 (da) 2015-11-04 2021-01-25 Eiger Biopharmaceuticals Inc Behandling af hepatitis delta-virusinfektion
MX2018009228A (es) 2016-01-29 2019-07-08 Sorrento Therapeutics Inc Proteínas de unión a antigeno que se unen a pd-l1.
WO2018087345A1 (en) 2016-11-14 2018-05-17 F. Hoffmann-La Roche Ag COMBINATION THERAPY OF AN HBsAg INHIBITOR, A NUCLEOS(T)IDE ANALOGUE AND AN INTERFERON
US10350266B2 (en) 2017-01-10 2019-07-16 Nodus Therapeutics, Inc. Method of treating cancer with a multiple integrin binding Fc fusion protein
WO2018132516A1 (en) 2017-01-10 2018-07-19 Nodus Therapeutics Combination tumor treatment with an integrin-binding-fc fusion protein and immune modulator
US20190374611A1 (en) 2017-01-18 2019-12-12 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical compositions for the treatment patients suffering from myeloproliferative disorders
WO2018148419A1 (en) 2017-02-08 2018-08-16 Bristol-Myers Squibb Company Modified relaxin polypeptides comprising a pharmacokinetic enhancer and uses thereof
WO2019020593A1 (en) 2017-07-25 2019-01-31 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) METHODS AND PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS FOR MODULATION OF MONOCYTOPOISIS
WO2020032951A1 (en) 2018-08-09 2020-02-13 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Antimalarial enzyme conjugates, kits containing same, and methods of producing and using same
US11485781B2 (en) 2017-08-17 2022-11-01 Massachusetts Institute Of Technology Multiple specificity binders of CXC chemokines
LT3849614T (lt) 2018-09-11 2024-03-25 Ambrx, Inc. Interleukino-2 polipeptido konjugatai ir jų panaudojimas
EP3856763A1 (en) 2018-09-28 2021-08-04 Massachusetts Institute of Technology Collagen-localized immunomodulatory molecules and methods thereof
AU2019361206A1 (en) 2018-10-19 2021-06-03 Ambrx, Inc. Interleukin-10 polypeptide conjugates, dimers thereof, and their uses
US11235032B2 (en) 2019-01-23 2022-02-01 Massachusetts Institute Of Technology Combination immunotherapy dosing regimen for immune checkpoint blockade
CA3128081A1 (en) 2019-02-12 2020-08-20 Ambrx, Inc. Compositions containing, methods and uses of antibody-tlr agonist conjugates
KR20220035365A (ko) 2019-07-18 2022-03-22 엔요 파마 인터페론의 부작용을 감소시키는 방법
US20210285000A1 (en) 2020-03-05 2021-09-16 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy for treating hepatitis b virus infection
KR20220151202A (ko) 2020-03-11 2022-11-14 암브룩스, 인코포레이티드 인터류킨-2 폴리펩타이드 접합체 및 그의 사용 방법
WO2021228983A1 (en) 2020-05-13 2021-11-18 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) A pharmaceutical composition comprising an arsenic compound, an inductor of type-1 ifn and a protein kinase inhibitor for treating cancer
EP3912627B1 (en) 2020-05-20 2022-09-07 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for the treatment of coronavirus infections
US20210403908A1 (en) 2020-06-22 2021-12-30 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for treatment of hepatitis d virus infection
KR20230073200A (ko) 2020-08-20 2023-05-25 암브룩스, 인코포레이티드 항체-tlr 작용제 접합체, 그 방법 및 용도
WO2022043496A2 (en) 2020-08-28 2022-03-03 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Use of mait cells as biomarkers and biotargets in covid-19
WO2022079205A1 (en) 2020-10-15 2022-04-21 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Use of ifn-alpha polypeptides for the treatment of coronavirus infections
WO2022159414A1 (en) 2021-01-22 2022-07-28 University Of Rochester Erythropoietin for gastroinfestinal dysfunction
AU2022249223A1 (en) 2021-04-03 2023-10-12 Ambrx, Inc. Anti-her2 antibody-drug conjugates and uses thereof
WO2024164213A1 (zh) 2023-02-09 2024-08-15 谢彦晖 聚乙二醇修饰的白介素2、糖皮质激素和透明质酸用于治疗特应性皮炎
WO2025006676A2 (en) 2023-06-27 2025-01-02 Firecyte Therapeutics, Inc. Insulin-like growth factor binding protein like 1 (igfbpl1) compositions and methods of use thereof

Family Cites Families (53)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2651657A (en) * 1949-05-21 1953-09-08 Standard Oil Dev Co Synthetic lubricating oil
SE337223B (ro) * 1967-05-23 1971-08-02 Pharmacia Ab
US3619371A (en) * 1967-07-03 1971-11-09 Nat Res Dev Production of a polymeric matrix having a biologically active substance bound thereto
SE343210B (ro) * 1967-12-20 1972-03-06 Pharmacia Ab
DK132327A (ro) * 1968-07-16
US3632828A (en) * 1968-12-16 1972-01-04 Dow Chemical Co Polyethylene glycol monomethyl ether carbonates
BE758425A (fr) * 1969-12-02 1971-04-16 Baxter Laboratories Inc Streptokinase liee chimiquement a une matrice en carbohydrate (
DE2247163A1 (de) * 1972-09-26 1974-03-28 Merck Patent Gmbh Traegermatrix zur fixierung biologisch wirksamer stoffe und verfahren zu ihrer herstellung
US4179337A (en) * 1973-07-20 1979-12-18 Davis Frank F Non-immunogenic polypeptides
US4002531A (en) * 1976-01-22 1977-01-11 Pierce Chemical Company Modifying enzymes with polyethylene glycol and product produced thereby
US4100271A (en) * 1976-02-26 1978-07-11 Cooper Laboratories, Inc. Clear, water-miscible, liquid pharmaceutical vehicles and compositions which gel at body temperature for drug delivery to mucous membranes
GB1578348A (en) * 1976-08-17 1980-11-05 Pharmacia Ab Products and a method for the therapeutic suppression of reaginic antibodies responsible for common allergic
US4094744A (en) * 1976-11-18 1978-06-13 W. R. Grace & Co. Water-dispersible protein/polyurethane reaction product
IT1107772B (it) * 1977-08-22 1985-11-25 Cancer Res Inst Royal Procedimento per la produzione di complessi macromolecolari prodotto ottenuto e composizioni farmaceutiche che lo contengono come ingrediente attivo
JPS55110105A (en) * 1979-02-19 1980-08-25 Japan Atom Energy Res Inst Preparation of polymer composition containing physiologically active material
JPS6023084B2 (ja) * 1979-07-11 1985-06-05 味の素株式会社 代用血液
US4640835A (en) * 1981-10-30 1987-02-03 Nippon Chemiphar Company, Ltd. Plasminogen activator derivatives
US4609546A (en) * 1982-06-24 1986-09-02 Japan Chemical Research Co., Ltd. Long-acting composition
WO1985003934A1 (fr) * 1984-03-06 1985-09-12 Takeda Chemical Industries, Ltd. Proteine modifiee chimiquement et son procede de preparation
US4486344A (en) * 1983-03-28 1984-12-04 Miles Laboratories, Inc. Urea-linked immunogens, antibodies, and preparative method
JPS6098988A (ja) * 1983-11-01 1985-06-01 Chemo Sero Therapeut Res Inst Ｌｐｆ−ｈａの精製法
JPS60127952A (ja) 1983-12-14 1985-07-08 Fanuc Ltd 領域加工方法
US4496689A (en) * 1983-12-27 1985-01-29 Miles Laboratories, Inc. Covalently attached complex of alpha-1-proteinase inhibitor with a water soluble polymer
DE3572982D1 (en) * 1984-03-06 1989-10-19 Takeda Chemical Industries Ltd Chemically modified lymphokine and production thereof
GB8430252D0 (en) * 1984-11-30 1985-01-09 Beecham Group Plc Compounds
US4732863A (en) * 1984-12-31 1988-03-22 University Of New Mexico PEG-modified antibody with reduced affinity for cell surface Fc receptors
US4766106A (en) * 1985-06-26 1988-08-23 Cetus Corporation Solubilization of proteins for pharmaceutical compositions using polymer conjugation
US4917888A (en) * 1985-06-26 1990-04-17 Cetus Corporation Solubilization of immunotoxins for pharmaceutical compositions using polymer conjugation
WO1987000056A1 (en) * 1985-06-26 1987-01-15 Cetus Corporation Solubilization of proteins for pharmaceutical compositions using polymer conjugation
US4847079A (en) * 1985-07-29 1989-07-11 Schering Corporation Biologically stable interferon compositions comprising thimerosal
US5102872A (en) * 1985-09-20 1992-04-07 Cetus Corporation Controlled-release formulations of interleukin-2
US4818769A (en) * 1985-09-20 1989-04-04 Cetus Corporation Method of controlling stress-related disease in livestock by administration of human IL-2
US5100664A (en) * 1985-09-20 1992-03-31 Cetus Corporation Human IL-2 as a vaccine adjuvant
US4791192A (en) * 1986-06-26 1988-12-13 Takeda Chemical Industries, Ltd. Chemically modified protein with polyethyleneglycol
US4810638A (en) * 1986-07-24 1989-03-07 Miles Inc. Enzyme-labeled antibody reagent with polyalkyleneglycol linking group
US4894226A (en) * 1986-11-14 1990-01-16 Cetus Corporation Solubilization of proteins for pharmaceutical compositions using polyproline conjugation
US4851220A (en) * 1986-11-26 1989-07-25 Schering Corporation Stable oleaginous gel
US4871538A (en) * 1987-07-13 1989-10-03 Schering Corporation Insoluble copper-alpha interferon complex
CA1308377C (en) * 1987-08-21 1992-10-06 Henry Berger, Jr. Complex of polyethyleneglycol and tissue plasminogen activator
US4847325A (en) * 1988-01-20 1989-07-11 Cetus Corporation Conjugation of polymer to colony stimulating factor-1
US5199360A (en) 1988-09-27 1993-04-06 Sirkka Koistinen Table constructions
GB8824591D0 (en) * 1988-10-20 1988-11-23 Royal Free Hosp School Med Fractionation process
WO1990005534A1 (en) * 1988-11-23 1990-05-31 Genentech, Inc. Polypeptide derivatives
US4902502A (en) * 1989-01-23 1990-02-20 Cetus Corporation Preparation of a polymer/interleukin-2 conjugate
US5122614A (en) * 1989-04-19 1992-06-16 Enzon, Inc. Active carbonates of polyalkylene oxides for modification of polypeptides
ATE181732T1 (de) * 1989-04-19 1999-07-15 Novo Nordisk As Aktive karbonate von polyalkylenoxyden zur modifizierung von polypeptiden
ES2085297T3 (es) * 1989-05-27 1996-06-01 Sumitomo Pharma Procedimiento para preparar derivados de poli(etilenglicol) y proteina modificada.
JP2978187B2 (ja) * 1989-11-02 1999-11-15 日本ケミカルリサーチ株式会社 修飾スーパーオキサイドディスムターゼの製造法
US5234903A (en) * 1989-11-22 1993-08-10 Enzon, Inc. Chemically modified hemoglobin as an effective, stable non-immunogenic red blood cell substitute
WO1991008229A1 (de) * 1989-12-01 1991-06-13 Basf Aktiengesellschaft Hirudinpolyalkylenglykolkonjugate
JPH04202293A (ja) * 1990-11-29 1992-07-23 Tonen Corp 作動油
US5595732A (en) * 1991-03-25 1997-01-21 Hoffmann-La Roche Inc. Polyethylene-protein conjugates
US5281698A (en) * 1991-07-23 1994-01-25 Cetus Oncology Corporation Preparation of an activated polymer ester for protein conjugation

Also Published As

Publication number Publication date
LT3174B (en) 1995-02-27
AU668742B2 (en) 1996-05-16
FI933740L (fi) 1994-02-27
CN1088936A (zh) 1994-07-06
EP0593868A1 (en) 1994-04-27
IL106750A0 (en) 1993-12-08
KR940003969A (ko) 1994-03-14
CA2103829A1 (en) 1994-02-27
EE9400151A (et) 1996-02-15
ATE165102T1 (de) 1998-05-15
MY131445A (en) 2007-08-30
MX9305146A (es) 1994-03-31
CN1211578A (zh) 1999-03-24
UY23635A1 (es) 1994-03-01
CN1173500A (zh) 1998-02-18
HUT67013A (en) 1995-01-30
CN1039015C (zh) 1998-07-08
CZ169393A3 (en) 1994-04-13
HU9302366D0 (en) 1993-11-29
NZ264872A (en) 1996-01-26
CN1183112C (zh) 2005-01-05
NO933028D0 (no) 1993-08-25
LV10907A (lv) 1995-12-20
YU56693A (sh) 1997-01-08
NZ248452A (en) 1995-12-21
SI9300423A (en) 1994-03-31
PH30460A (en) 1997-05-28
BG98067A (en) 1994-12-02
US5382657A (en) 1995-01-17
SK89893A3 (en) 1994-04-06
DE69317979D1 (de) 1998-05-20
ZA936098B (en) 1994-03-01
CA2103829C (en) 2003-04-08
FI933740A0 (fi) 1993-08-25
FI109765B (fi) 2002-10-15
BR9303469A (pt) 1994-03-22
HRP931094A2 (en) 1997-06-30
KR100295520B1 (ko) 2001-09-17
DE69317979T2 (de) 1998-08-20
OA09850A (fr) 1994-08-15
IS4067A (is) 1994-02-27
ES2116376T3 (es) 1998-07-16
LV10907B (en) 1996-04-20
DK0593868T3 (da) 1999-02-08
CN1155618C (zh) 2004-06-30
JP2859105B2 (ja) 1999-02-17
JPH06192300A (ja) 1994-07-12
PL300194A1 (en) 1994-04-05
ZW11193A1 (en) 1994-03-23
AU4478093A (en) 1994-03-03
MW7693A1 (en) 1994-06-08
LTIP888A (lt) 1994-08-25
EP0593868B1 (en) 1998-04-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RO112730B1 (ro) Conjugat polimer cu actiune imunomodulatoare, procedeu si intermediar pentru obtinerea acestuia
JP2637010B2 (ja) ポリエチレンタンパク質接合体
AU725195B2 (en) Interferon conjugates
AU2003258518B2 (en) Polyalkylene glycol acid additives
AU660843B2 (en) Lyophilized polyethylene oxide modified protein and polypeptide complexes with cyclodextrin
KR20030045416A (ko) 에리트로포이에틴과 폴리에틸렌글리콜 유도체의 배합체
HK1005225B (en) Interferon conjugates