RO112730B1 - Conjugat polimer cu actiune imunomodulatoare, procedeu si intermediar pentru obtinerea acestuia - Google Patents

Conjugat polimer cu actiune imunomodulatoare, procedeu si intermediar pentru obtinerea acestuia Download PDF

Info

Publication number
RO112730B1
RO112730B1 RO93-01141A RO9301141A RO112730B1 RO 112730 B1 RO112730 B1 RO 112730B1 RO 9301141 A RO9301141 A RO 9301141A RO 112730 B1 RO112730 B1 RO 112730B1
Authority
RO
Romania
Prior art keywords
conjugate
lower alkyl
interferon
integer
peg
Prior art date
Application number
RO93-01141A
Other languages
English (en)
Inventor
Robert Karasiewicz
Carle Nalin
Perry Rosen
Original Assignee
Hoffmann La Roche
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hoffmann La Roche filed Critical Hoffmann La Roche
Publication of RO112730B1 publication Critical patent/RO112730B1/ro

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • C07K14/555—Interferons [IFN]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/62—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D213/63—One oxygen atom
    • C07D213/64—One oxygen atom attached in position 2 or 6
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C69/00—Esters of carboxylic acids; Esters of carbonic or haloformic acids
    • C07C69/96—Esters of carbonic or haloformic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • C07K14/555—Interferons [IFN]
    • C07K14/56—IFN-alpha
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K19/00—Hybrid peptides, i.e. peptides covalently bound to nucleic acids, or non-covalently bound protein-protein complexes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

Prezenta invenție se referă la un conjugat polimer cu acțiune imunomodulatoare, procedeu și intermediar pentru obținerea acestuia, acest conjugat fiind utilizat în tratamentul și profilaxia bolilor 5 imunomodulatorii, cum ar fi boli neoplazice și boli infecțioase.
Se cunoaște că diverse proteine naturale și recombinate prezintă utilitate medicală și farmaceutică. După ce au fost 10 purificate și formulate, acestea pot fi administrate pe cale parenterală, în diverse indicații terapeutice. Totuși, proteinele administrate pe cale parenterală pot fi imunogenice, pot fi relativ insolubile în apă, 15 și pot avea un timp de înjumătățire farmacologică scurt. în consecință, poate fi dificilă realizarea de niveluri, utile din punct de vedere terapeutic, a proteinei în sângele pacientului. 20
Aceste probleme pot fi rezolvate prin conjugarea proteinelor cu polimeri, cum ar fi polietilenglicol. Davis at al., în brevetul US 4179337, descriu conjugarea polietilenglicolului (PEG) cu proteine, cum 25 ar fi enzime sau insulină, pentru a se obține conjugate în care proteina va fi mai puțin imunogenică reținând în schimb o proporție substanțială a activității sale fiziologice. Nakagawa et al. descriu conjugarea PEG 30 la proteină activată insulară pentru a reduce efectele sale secundare și imunogenicitatea. Veronese et al., Applied Biochem. and Biotech., 11; 141152(1985), descriu activarea polietilen- 35 glicolilor cu cloroformiați de fenil pentru a modifica o ribonuclează și o dismutază superoxid. Katre et al., în brevetul US
4766106 și 4917888, descriu, de asemenea, solubilizarea proteinelor prin conjugare cu polimer PEG și alți polimeri, care sunt conjugați cu proteine recombinante pentru a le reduce imunogenicitatea și a le crește timpul de înjumătățire. Acestea se regăsesc în Nitocki et al., brevetul US 4902502, Enzon, Inc., cererea de brevet internațională PCT/US 90/03133, Nishimura etal., cererea de brevet european 154316 și Tomasi, cerere de brevet internațională PCT/US 85/02572.
Metodele precedente de formare a conjugatelor PEG/proteină și conjugatele care rezultă din metodele respective prezintă mai multe probleme. Printre aceste probleme este și aceea că anumite metode de formare a acestor conjugate proteină-PEG, pot inactiva proteina astfel, încât conjugatele care rezultă au slabă activitate biologică. în plus, anumiți lincheri utilizați în formarea acestor conjugate PEGproteină pot fi susceptibili la scindarea hidrolitică in vivo. Când are loc o astfel de scindare după administrare, conjugatele respective își pierd proprietățile benefice conferite de PEG.
Prezenta invenție înlătură dezavantajele menționate prin noul conjugat interferon-PEG care are un unic agent de legare ce conectează o grupare amino a interferonului la PEG. Invenția de față prezintă în particular un conjugat polimer cu acțiune imunomodulatoare cu formula generală I
O
Ϊ
RO-iCHjCHOl^CHîCHOHCHjCHOk-CHjCH-W'^
R2 R3 R4
NH— interferon (I) în care R este alchil inferior;
Rv P2> R3 Și R4 sunt H sau alchil inferior; m este selectat dintre numere întregi > 1 până la numărul de grupări amino accesibile în interferon;
W este □ sau NH;
x este un număr îngtreg între 1 și 1000 și fiecare y și z este un număr întreg de la D la 1000, și suma lui x, y și z este de la 3 la 1000, cu condiția că cel puțin unul dintre R^ R2, R3 și R4 este alchil inferior; x, y și z sunt astfel selectați încât greutatea
RO 112730 Bl
T moleculară a unității polimere din conjugat este în intervalul de la circa 300 daltoni până la circa 30000 daltoni.
Este de la sine înțeles că gruparea -NH din formula I derivă de la o grupare 5 amino accesibilă a moleculei de interferon.
Mai precis cele două conjugate diferite ale interferonului au următoarele formule:
RCHCHzCHO), — (04/3140)—
R1 R2
O
Λ (CHzCHOJrCHjCH-NH NH
(IA)
RC4CH2CHO)x —(CH2CHO)y— (CHîCHOJrCHiCHO NH Xinterteron R1 R2 R3 R4 în care R este alchil inferior; Rp R2, R3 și 15 R4 sunt hidrogen sau alchil inferior; m este un număr până la numărul de grupări amino accesibile în interferon; și x, y și z sunt selectați din orice combinație de numere astfel încât conjugatul are cel puțin 2 o parțial activitatea biologică a proteinei care formează conjugatul; cu condiția că cel puțin unul din Rv R2, R3 și R4 este alchil inferior.
Conform acestei invenții, conjugatele 2 5 IFN cu formulele IA și IB pot fi produse prin condensarea PEG activat la care o grupare hidroxi sau amino terminală a fost înlocuită cu un agent de legare activat. Acești reactivi pot reacționa apoi cu una sau mai multe grupări amino de la IFN. Condensarea cu numai o grupare amino pentru a forma un monopolietilenglicolat reprezintă o întruchipare preferată a acestei invenții. Prin urmare, invenția se referă de asemenea la noi intermediari care pot fi utilizați pentru a produce conjugatul polimer cu acțiune imunomodulatoare. Acești intermediari au formule generale II și III:
RO-iCHjCHO^-fCHjCHOHCHjCHO^-CHgCH-W
Â’ Ă* Â3
(II) în care R este alchil inferior, Rn R2, R3 și 35 R4 și R5 sunt hidrogen sau alchil inferior;
W este NH sau □;
x este un număr întreg între 1 și 1000 și fiecare y și z este un număr întreg până la 1000, și suma lui x, y și z este de la 3 4 o la 1000, cu condiția că dacă W este NH sau dacă W ste O și R5 este H atunci cel puțin unul dintre Rn R2, R3 și R4 este un alchil inferior, iar x, y și z sunt astfel selectați încât greutatea moleculară a compusului respectic este în intervalul de la circa 300 daltoni până la circa 30000 daltoni.
Și
RO 112730 Bl
RO-(CH2CHO^-(CH2CHO)y-(CH2CHO)z-CH2CHO — C-0 I < 12 13 14
R R R R în care R este un alchil inferior; Rn R2, R3 și R4 sunt hidrogen sau metil, x este un număr de la 1 la 1OOO și fiecare y și z este un număr întreg de la o la 1000, și suma lui x, y și z este de la 3 la 1000, iar x, y și z sunt astfel selectați încât greutatea moleculară a compusului este în intervalul de la circa 300 daltoni la circa 30000 daltoni.
Formula II include mai ales compuși de următoarele două tipuri:
io
RO-(CHjCHO)x-(CH2CHO)y-(CH2CHO)2-CH2CH-NH
R’ Rz R3 R4 (HA)
(UB) în IIA, IIB și III, R, Rv R2, R3, R4 sunt ca 20 mai sus; și x, y și z sunt selectați dintr-o combinație de numere astfel încât atunci când polimerul se conjugă cu o proteină, îi permite proteinei să rețină cel puțin o porțiune a nivelului de activitate avut înainte 25 de conjugare; cu condiția menționată pentru formula II.
Conform invenției de față, utilizând reactivi PEG activați cu formula IIA, IIB sau III pentru a produce conjugatul se formează 30 o legătură între grupările amino libere dintr-o proteină cum este interferon (IFN) și PEG, astfel încât conjugatul rezultat reține cel puțin o porțiune a activității biologice a proteinei cu imunogenicitate 35 redusă. în plus, grupările de legare formate în conjugatele din această invenție prin intermediul utilizării oricăruia dintre polietilenglicolii activați cu formulele IIA, IIB sau III duce la obținerea unui conjugat proteinic care nu este susceptibil de scindare hidrolitică in vivo și nu face obiectul dezavantajelor prezentate la conjugatele PEG cunoscute în stadiul anterior al tehnicii.
în formulele de mai sus R, Rv R2, R3, R4 și R5 pot fi orice alchil inferior, preferabil metil. Termenul de alchil inferior desemnează grupări alchil inferior conținând de la 1 la 6 atomi de carbon, cum ar fi metil, etil, n-propil, izopropil etc. în
RO 112730 Bl general grupările alchil preferate sunt grupări alchil conținând de la 1 la 4 atomi de carbon, metilul fiind cel mai preferat. Rb R2, R3, R4 și R5 pot fi de asemenea hidrogen, dar R,, R2, R3 și R4 nu sunt hidrogen în mod simultan.
în aceleași formule, x, y, z pot fi selectați din orice combinație de numere astfel încât conjugatul rezultat conține cel puțin o porțiune a activității biologice a IFN care formează conjugatul. Este evident că suma lui x, y și z, și m este invers proporțională cu cantitatea de activitate biologică a IFN care este reținută de către conjugat. Valoarea numerică a x, y și z reprezintă numărul unităților de glicol din polietilenglicolul care formează conjugatul. Termenul m reprezintă numărul grupărilor aminice libere sau accesibile conținute de IFN, care pot reacționa cu amestecul PEG activat. Cu cât este mai mare m și x, y și z, cu atât este mai mare greutatea moleculară a conjugatului. în conformitate cu această invenție, x, y și z sunt orice număr astfel încât greutatea moleculară a conjugatului, excluzând greutatea proteinei, este între circa 3OG și circa 3OOOO daltoni. Preferabil pentru IFN, m este un număr de la 1 la 3. Un aspect foarte preferat este un conjugat monopolietilen-glicolat în care m este 1 obținut în astfel de condiții încât se obține un conjugat IFN compus din IFN în care numai o grupare amino liberă a reacționat cu reactivul PEG de formula HA, IIB sau III. Conform unei întruchipări preferate când m este 1, x, y și z sunt orice număr astfel încât glicolul care formează conjugatul are o greutate moleculară medie de la circa 300 la circa 30000 daltoni, preferabil de la circa 1000 la circa 30000 daltoni, în special de la circa 1000 la circa 5000 daltoni. într-o întruchipare deosebit de preferată, greutatea molculară este de circa 2000 daltoni.
în ceea ce privește numerele x, y și z ale unităților, x este un număr întreg de 1 la 1000 și fiecare dintre y și z este un număr întreg de la O la 1000 și suma lui x, y și z este între 3 și 1000.
într-o întruchipare preferată a conjugatelor de formulele IA și IB, x și y sunt de la 5 la 500 și z este de la O la 4. Deosebit de preferat este ca glicolul utilizat să fie un amestec de glicoli în care x este între 10 și 100, y este între 1 și 10 și z este O. Cel mai preferat este un interferon conjugat de formula IA în care m este 1, R, R1 și R4 sunt CH3, R1 este H, x este circa 19, y este circa 2 și z este O. Aceasta corespunde unei greutăți moleculare medii în unitatea PEG-ului de circa 1000 daltoni.
Pentru a evita orice dubii privind numărul de unități în molecula de PEG, se preferă caracterizarea polimerului polietilenglicolic prin greutate moleculară în loc de indicarea numărului de unități de autorepetare (SRUj în polimerul PEG prin x, y și z. Aceste valori pot fi dificil de evaluat datorită imunogenicității potențiale a compușilor PEG de pornire care sunt definiți în mod obișnuit prin greutatea moleculară medie și nu prin numărul de unități de autorepetare pe care aceștia le conțin. Compușii PEG de pornire cu diverse greutăți moleculare pot fi preparați prin metode cunoscute în tehnica de specialitate sau pot fi obținuți de la furnizori comerciali.
în cazul în care valorile lui x, y și z obținute prin determinarea greutăților moleculare sau după cum a fost indicat de furnizor nu sunt întregi (așa cum va fi cazul în general), valorile lor vor trebui rotunjite în plus sau în minus în modul obișnuit pentru a permite o determinare a întregilor la molecula polimerică care formează probabil partea majoră a amestecului polimeric.
Atunci când reactivul având oricare dintre formulele HA, IIB sau III este reacționat cu un IFN, care conține mai mult de o grupare amino liberă, conjugatul cu acțiune imunomodulatoare se poate obține sub forma unui amestec de diverse produse de reacție ale IFN cu amestecurile de reactiv PEG. Aceste produse de reacție se formează ca rezultat al reacției reactivului PEG cu una sau mai multe dintre grupările amino libere. Acest lucru esre însemnat prin m în formula IA și IB. De exemplu, atunci când IFN-ul conține trei grupări amino libere, reactivul PEG activat
RO 112730 Bl poate reacționa cu una dintre grupările amino, cu două dintre grupările amino libere, sau cu toate trei. în această situație amestecul conține produse de reacție conjugate formate în toate cele trei cazuri. 5 Deoarece diversele produse de reacție conjugate din acest amestec au greutăți moleculare foarte diferite, funcție de valorile lui m, adică 1, 2 sau 3, aceste produse de reacție pot fi separate prin 10 metode convenționale cum ar fi prin cromatografie. Pentru a determina dacă m, și x, y și z au fost selectați în mod adecvat, produșii de reacție separați pot fi testați pentru activitatea biologică prin 15 aceleași metode cu cele utilizate pentru a testa IFN-ul inițial pentru a determina dacă produsul de reacție conjugat mai reține încă o porțiune a activității biologice a IFN-ului utilizat pentru a forma conjugatul. 2 o în această manieră, numerele m, și x, y și z pot fi ajustate în orice mod dorit pentru a stabili activitatea dorită.
într-o prezentare preferată, m este 1. Atunci când m este 1, acest conjugat 25 poate fi obținut chiar și atunci când există două sau mai multe grupări libere. Reactivul PEG activat va reacționa mai întâi cu una dintre grupările amino libere conținute în IFN. Prin reglarea concentrației 30 reactivilor cum ar fi IFN-ul, și a condițiilor de reacție, conform metodelor standard de condensare a aminelor, se poate regie gradul de polietilenglicolare al grupărilor amino libere conținute în proteină. în 35 proteinele care conțin una sau mai multe grupări amino libere, în care una dintre grupările amino este mai reactivă decât celelalte grupări amino, pot fi selectate condițiile astfel încât proteina este reacționată cu compusul PEG activat pentru a forma compusul cu formula IA sau IB în care m este 1. Alte grupări amino libere conținute în amino acizii care formează proteina pot fi reacționate ulterior cu PEGul fie lăsând reacția de condensare să se desfășoare un timp mai îndelungat, fie utilizând alte condiții de reacție mai viguroare.
Așa cum este utilizat în descrierea de față și în revendicări termenii interferon și IFN includ toate tipurile de interferon (evident molecule cu activitate de interferon), de exemplu a, β, γ și ω interferon, și toate subtipurile acestor tipuri, cum ar fi α2, α2Α, a2B sau a2C sau hidrizi sau himere a diferitelor tipuri și/sau subtipuri. Interferonul poate fi de oricare origine și poate fi obținut din surse naturale, culturi de țesut sau prin tehnici ADN recombinat. Metodele pentru producerea și izolarea interferonului natural sau recombinat sunt bine cunoscute în specialitate și sunt descrise, de exemplu în cererile de brevet publicate EP 43980, EP 211148, EP 140127, DE 3028919, brevet US 4503035 și brevet U9 4414150.
Un alt obiect al prezentei invenții se referă la un procedeu pentru prepararea unui conjugat polimer cu acțiune imunomodulatoare care cuprinde reacționarea unui intermediar cu formula II sau cu formula III cu interferon sau o sare a acestuia urmată de izolarea produsului obținut din amestecul de reacție.
(ie)
RO 112730 Bl în care
R este alchil inferior;
Rv R2, R3> R 4 și R5sunt H sau alchil inferior;
W este NH sau O;
x este un număr întreg între 1 și 1OOO și fiecare dintre y și z este un număr întreg până la 1000 și suma lui x, y și z este de la 3 la 1 □□□; ' cu condiția ca dacă W este NH sau dacă W este □ și R5 este H cel puțin unul dintre Rv R2, R3 și R4 este alchil inferior;
(III) în care
R este alchil inferior;
Rv R2, R3 și R4 sunt H sau metil;
x este un număr de la 1 la 1000 și fiecare y și z este un număr întreg de la O la 1000, și suma lui x, y și z este de la 3 la 1000.
Conjugatul cu formula IA poate fi obținut după cum urmează:
PEG-amină (IV)
(IIA)
H
---- proteină m
(l-A)
RO 112730 Bl in care
R, Rv R2, R3, R4 si R5, m și x, y și z sunt ca mai sus;
cu condiția că oricare sau mai mulți dintre Rv R2, R3 și R4 pot fi alchil inferior. 5 în această reacție o amină-PEG este amestecată cu compusul de formulă IV într-o hidrocarbură sau o hidrocarbură clorurată cu solvent pentru a se obține compusul de formula HA. Compusul de 10 formula IIA poate fi condensat într-un mediu apos cu una sau mai multe grupări amino libere ale proteinei pentru a se obține conjugatul de formula IA. Această reacție poate fi realizată în condiții convenționale 15 pentru condensarea aminelor într-un mediu apos. în general această reacție este realizată într-o soluție tampon apoasă standard având un pH între 7 și 1 □ pentru a produce conjugatele de formula IA. Se 20 poate obține un amestec de conjugate PEGproteină de diverse greutăți moleculare funcție de numărul grupărilor amino libere din molecula de proteină și de timpul de reacție. Conjugatele PEG proteină pot fi separate apoi în componentele lor individuale prin metoda convențională cum ar fi cromatografie lichidă de înaltă performanță (HPLC) sau electroforeză pe gel. Pot fi utilizate oricare dintre condițiile convenționale pentru separarea compușilor funcție de greutatea moleculară cu HPIC sau electroforeză pe gel. Separarea acestui amestec poate fi realizată conform greutăților moleculare ale produșilor formați așa cum s-a descris aici.
Un conjugat de formula IB poate fi preparat conform următoarei scheme de reacție:
RCHCHjCHO), — (CHjCHOyj- (CHjCHO^OyXOH
R® R3 R4
PEG-alcool (IV)
RO-țCHzCHO), I R'
RO-(CH2CHO)x I R1 —(CH2CHO)j~ (CHîCHOJjOIjCHO —(CHjCHOJt- (CHjCHOfeOlaCH
i.
(U-β)
NHy-interferon
NI- — interteron
-< V
I 11
R4 ° (1-B)
RO 112730 Bl în care R, R7, R2> R3, R4, m, x, y, z și condiția sunt ca mai sus.
Compusul de formula IV este obținut prin condensarea fosgenului cu 2-hidroxipiridină (substituită dacă R5 este alchil inferior) 5 utilizând o metodă convențională pentru condensarea unei halogenuri acide cu un alcool.
Condensarea unui alcool-PEG cu compusul de formula IV este efectuată io utilizând condițiile convenționale pentru condensarea unui alcool cu un carbonat pentru a se produce compusul de formula ll-B. Compusul de formula IIB este condensat cu proteina prin intermediul uneia îs sau mai multor grupări amino libere de la proteină pentru a se obține compusul de formula IB. Această reacție este realizată în maniera descrisă pentru condensarea compusului IIA pentru a produce conjugatul de formula IA. Funcție de numărul de grupări amino libere conținute în proteina care reacționează cu compusul de formula IIB, conjugatul de formula IB poate fi format ca un amestec de conjugate având greutăți moleculare diferite. Acest amestec de conjugat poate fi separat în maniera descrisă mai înainte.
Compusul de formula IB poate fi produs de asemenea utilizând următoarea schemă de reacție:
R^CHjCHO^^CHjCW^CH/ÎHOij-aizCHOH
R1 R2 R3 L
Ă1 A2 ' R3 R4
RCHCHaCHO^CHjCHO^CHaCHO^-CHjCHO - — C-O Ă’ A2 R3 R4 z
(HI)
NHj-rrferferon
NH--interferon (l-B) în care 40
R, Rv R2, R3, R4, R5, m, x, și y sunt ca mai sus.
în această schemă de reacție, PEGalcool este condensat cu compusul de formula IV pentru a se obține compusul 45 de formula III. în această reacție, compusul de formula IIB se formează ca intermediar care apoi reacționează cu un al doilea mol de alcool-PEG pentru a produce compusul de formula III. în realizarea acestei reacții, PEG-alcoolul este prezent într-o cantitate de cel puțin 2 moli pe mol de compus de formula IV. în acest procedeu poate fi
RO 112730 Bl utilizată orice metodă convențională de condensare a unui alcool cu un carbonat. Compusul de formula III este reacționat cu interferon pentru a forma conjugatul de formula IB în modul descris pentru transformarea compusului de formula HA la compusul de formula IA. Funcție de cantitatea de grupări amino libere conținute de către proteină, condensarea compusului de formula III cu proteina duce la obținerea unui amestec de conjugate care pot fi separate în componentele lor individuale în maniera descrisă mai înainte pentru separarea conjugatului de formula IA.
Conjugatul polimer din prezenta invenție se utilizează în compoziții farmaceutice drept compus activ alături de un purtător inert din punct de vedere terapeutic la tratamentul și profilaxia afecțiunilor imunomodulatorii.
Compozițiile farmaceutice din prezenta invenție, utilizate în controlul sau prevenirea bolilor, cuprind un conjugat cu acțiune imunomodulatoare de formula generală I, și un material purtător inert din punct de vedere terapeutic, netoxic și acceptabil din punct de vedere terapeutic. Compozițiile farmaceutice care urmează să fie utilizate, pot fi formulate și dozate într-un mod care concordă cu o practică medicală bună, având în vedere afecțiunea de tratat, starea pacientului, locul de eliberare a conjugatului proteic, metoda de administrare și alți factori, cunoscuți practicienilor.
Conjugatul cu acțiune imunomodulatoare din prezenta invenție prezintă o serie de avantaje:
- are aceeași utilitate ca și proteina utilizată pentru formarea conjugatului. Prin urmare, acest conjugat este activ din punct de vedere terapeutic în același mod ca și proteina de la care se formează și poate fi utilizat în același mod ca și proteina însăși fără producerea de răspuns imun nedorit care poate fi asociat cu administrarea proteinei simple la subiecți;
- utilizarea reactivilor de formulele IIA, IIB și III în care cel puțin unul dintre R^ R2, R3, R4 este alchil inferior, în special metil (reactivi substituiți cu alchil) deter mină o îmbunătățire neașteptată a randamentului în conjugat, adică proteină polietilenglicolată, atunci când sunt utilizați reactivi substituiți cu alchil în comparație cu reactivii corespunzători nesubstituiți. Reactivii substituiți cu alchil duc la obținerea a cel puțin de două ori cantitatea de conjugate în același timp de reacție comparativ cu reactivii corespunzători nesubstituiți atunci când se produc astfel de conjugate.
Dacă sunt administrate pacienților pentru scopuri terapeutice, conjugatele de formulele IA și IB obținute din reactivii substituiți descriși mai sus au un timp de înjumătățire in vivo, crescut în mod neașteptat, în curentul sanguin al pacientului prin comparație cu conjugatele formate din reactivii corespunzători nesubstituiți. Deși timpul de înjumătățire in vivo este direct porțional cu greutatea moleculară a conjugatului, un conjugat produs dintr-un reactiv substituit va avea în mod surprinzător un timp de înjumătățire tot atât de îndelungat ca și un conjugat de greutate moleculară mai mare obținute din reactiv nesubstituit. Un timp de înjumătățire mai îndelungat în curentul sanguin al pacientului pentru un agent terapeutic conferă eficiență mărită la administrarea agentului la pacient. De exemplu, conjugatele obținute din reactivi substituiți cu alchil pot fi administrate mai puțin frecvent și/sau în cantități mai mici decât conjugatele obținute din reactivii corespunzători nesubstituiți. Pentru a mări eficiența administrării conjugatelor de proteină cu polietilenglicol, active din punct de vedere biologic, au fost utilizate greutăți moleculare crescute ale polietilenglicolilor atunci când au fost formate aceste conjugate cu proteină. Totuși, eficacitatea biologică a conjugatului IFN descrește odată cu creșterea greutății moleculare, totuși, prin utilizarea conjugatelor din această invenție obținute cu reactivi substituiți, eficiența administrării este mărită de cazul utilizării conjugatelor corespunzătoare nesubstituite cu creșterea mai mică a greutății moleculare.
în cele ce urmează se dau exemple de realizare a invenției în legătură și cu fig. 1...3, care reprezintă:
RO 112730 Bl
-fig. 1, comportamentul în timp a modificării PEG cu compusul din exemplul 7;
-fig.2,comportamentul în timp a modificării PEG cu compusul din exemplul 5;
-fig.3,comparație între modificarea PEG cu compusul din exemplul 1 (în partea stângă] și din exemplul 3 (în partea dreaptă].
Așa cum se utilizează în exemple, Jeffamine M-2O7O este un polimer monometoxipolioxialchilen propilaminic de greutate moleculară medie de 2070, derivat de propilenă și etilenoxid care este compus dintr-un polietilenglicol de bază și conține în medie 30% grupări de propilenoxid incorporate în mod întâmplător.
Jeffamida-M-1000 este un polimer monometoxipolialchilen propilamină de greutate moleculară medie de 1000, derivat de propilenă și etilenoxid care este compus dintr-un polietilenglicol de bază conținând în medie 14% grupări de propilenoxid încorporate în mod specific în care x este o medie de 18,6, y este o medie de 1,6 și z este □ (x, yși z sunt utilizați aici cu aceleași semnificații cu cele descrise mai sus).
Toți reactivii descriși în aceste exemple pot fi stocați deshidratați în sticlă de culoare închisă la 4°C până se transformă în ace. Pentru fiecare modificare sunt utilizate alicotele proaspete.
Exemplul 1. Prepararea de a, aoxometilen bis[m-metoxipoli(oxi-1,2-etandiil)] SRU 111
Dintr-o suspensie de 1,5 g MPEG (metoxipolietilenglicol) (greutate moleculară 5DDD) în 80 ml de toluen anhidru sunt distilați 50 ml de solvent. Soluția este apoi răcită și se adaugă 30,5 mg de di-2piridilcarbonat. Amestecul este apoi refluxat timp de 24 de ore. Soluția este apoi răcită și precipitatul rezultat este filtrat și spălat cu un volum mic de toluen urmat de dietileter. Solidul a fost apoi uscat sub vid înaintat, pentru a da 0,6 g de a,aoxometilen bis[G>-metoxipoli(oxi-1,2-etandiil)] SRU 111 sub forma unei pulberi albe. Interferonul modificat cu PEG a fost preparat prin metoda 1 descrisă mai jos.
Prepararea de interferon-α modificat cu PEG
Metoda 1: lnterferonul-α recombinat în cantitate de 5 mg de proteină pe ml distilat cu o soluție tampon conținând 5 mM acetat de sodiu, pH 5,0, 120 mM NaCI. Se adaugă tiocianat de potasiu pentru a obține o concentrație finală de 0,5 M, și pH-ul se ajustează prin adăugarea unei zecimi de volum de 1 M Tricinăhidroxid de sodiu, pH 11,9, pentru a obține o soluție cu pH final de 10.
Reactivul PEG se adaugă la proteină într-un raport molar de 3:1, sub formă solidă sau dizolvat în DMSO (volumul de DMSO este mai puțin de 10% din total). Modificarea a fost lăsată să se desfășoare la temperatura camerei pentru un timp de la 30 mi la 4 h, urmată de adăugarea a 1 M L-glicină (pH 6,3) până la o concentrație finală de 20 mM pentru a opri modificări suplimentare. Proteina modificată cu PEG este precipitată prin adăugarea de 3,5 M sulfat de amoniu, 50 mM fosfat de amoniu, pH 7,0, până la o concentrație finală de 1,1 M sulfat de amoniu (1,0 M sulfat de amoniu pentru un PEG -1000), precipitatul este colectat prin centrifugare, este spălat și redizolvat în 25 mM acetat de amoniu, pH 5,0. Proteinele modificate cu PEG sunt purificate prin cromatografie pe o coloană de schimb hidrofobic (de exemplu 75 x 7,5 mm) cum ar fi BioRad TSK fenil-5.PW sau Tayapearl-650 M, utilizând un gradient de descreștere sulfat de amoniu în 50 mM fosfat de sodiu, pH 7,0. în mod alternativ, PEG-IFN-ul se poate purifica prin filtrare pe gel pe o coloană Sephacryl S-200 (de exemplu 90 x 3,2 cm) (Pharmacia) care se echilibrează în 25 mM acetat de sodiu (pH 5,0), 200 mM NaCI. Proteina modificată cu PEG este identificată prin SDSPAGE. Proteina eluată de pe coloană corespunzând la interferon având una (PEGJFN) sau două (PEG^-IFN) legături PEG sunt reunite, concentrate și proteina este determinată prin absorbanță la 280 nm sau prin determinare colorimetrică (Pierce). PEG-IFN-ul este păstrat la 4°C în tampon conținând 50 mM fosfat de sodiu, pH 7,0, 0,3 M sulfat de amoniu.
RO 112730 Bl
Metoda 2: Interferonul α-A cu o concentrație de proteină de aproximativ 6 mg pe ml, este dializatîn 5 mM acetat de sodiu, pH 5,0, 0,12 M clorură de sodiu. Concentrația proteinei se determină prin măsurarea absorbției la 280 pm utilizând 1,0 mg'1ml, drept coeficient de extincție. Soluția de proteină se amestecă cu reactivul modificat într-un raport molar de 3:1 proteină la reactiv.
Reacția de modificare este inițiată prin ajustarea pH-ului la 10,0 utilizând o zecime de volum de □, 1 M Na^Cț-NaOH, pH 10,7. După incubare la temperatura camerei timp de o oră, reacția este stopată prin adăugarea a 1 /20 volum de 1 M glicină, pH 7,5. După 3-5- min, pH-ul este descrescut la 5,0-6,0 prin adăugarea a 1 /20 volum de 1 M acetat de sodiu, pH 4,0.
Soluția conținând PEG-interferon, reactiv stopat și interferon nemodificat este diluată de patru ori cu 40 mM acetat de amoniu, pH 4,5 și este încărcat într-o coloană CM-celuloză (Whatman CM-52, aproximativ 0,5 ml rășină pe mg proteină). După spălarea coloanei cu 5 volume de 40 mM acetat de amoniu, pH 4,5, PEGinterferonul și interferonul nemodificat sunt eluați utilizând un gradient liniar de clorură de sodiu (0-0,5 M) în 40 mM acetat de amoniu, pH 4,5. Fracțiunile conținând proteină sunt identificate prin absorbanță la 280 nm, și fracțiunea conținând PEGinterferon se identifică prin SDS-PAGE.
PEG-interferonul este purificat suplimentar prin cromatografie filtrantă pe gel cu excludere funcție de dimensiune pe o coloană conținând rășină Sephacryl-S200 (Pharmacia IKB). Fracțiunile eluate de pe coloană sunt analizate prin SDSPAGE și se reunesc materialele de vârf conținând PEG-interferon.
Interferonul este incubat cu de 3 ori execes din fiecare reactiv timp de 0,25, 1,5 sau 24 ore. Alicotele sunt îndepărtate, reacția este oprită cu glicerină și se face analiza pe un gel 15% SDS-PAGE. S este marcajul pentru standardele greutăților moleculare ale proteinelor, Ί este marcajul pentru interferon.
Exemplul 2. Prepararea de α,αoxometilen bis[ω-metaxipolifoxi-1,2-etandiil]] SRU 28,3
Prin procedeul descris în exemplul 1, MPEG-ul este transformat în α,αoxometilenbis[G>-metoxipoli(oxi-1,2-etan-diil)] SRU 28,3 și interferonul modificat cu PEG este preparat utilizând acest reactiv prin metoda 1 descrisă în exemplul 1.
Exemplul 3. Prepararea a-metil-w[2[[[2-piridiniloxi]carbonil]oxi]-etoxi]-poli-(oxi1,2-etandiil] SRU 111,7
Dintr-o soluție din 1 g MPEG de greutate moleculară 5000 dizolvat într-un volum de 30 ml CH2CI2 anhidru se distilă 10 ml de solvent. Soluția se răcește la temperatura camerei și se adaugă 132 mg (0,6 mM) carbonat de di-2-piridiil și mg de DMAP.
Soluția rezultată este agitată apoi timp de 14 h și solventul este îndepărtat sub vid. Reziduul se triturează cu dietilester și precipitatul rezultat este filtrat. Produsul este apoi dizolvat îm 7 ml glimă anhidră, este încălzit pentru a produce dizolvarea și soluția rezultată este lăsată să se răcească și să stea la temperatura camerei timp de mai multe ore. Precipitatul rezultat este apoi filtrat și spălat cu 2 x ml glimă anhidră. Solidul este uscat apoi într-o etuvă sub vid în curent de azot pentru a da 0,7 g de a-[[(2-piridiniloxi)carbonil]-<Ometoxipoli-(oxi-1,2-etandiil] SRU 111,7.
Analiză. Calculat pentru CgH11N04 (CH^Oh, 7 : C 54,57; H 9,02; N 0,28. GăsitC 54,51; H 9,19; N 0,28.
Interferonul modificat cu PEG se prepară utilizând acest reactiv prin metoda 1 descrisă în exemplul 1.
Exemplul 4. Prepararea a-[(2piridiniloxi]carbonil]M-metoxipoli-[oxi-1,2etandiil] SRU 225
Prin procedeul descris în exemplul 3 se transformă MPEG de greutate moleculară 10000 în cc-[(2-piridiniloxi]carbonil)<o-metoxipoli-(oxi-1,2-etandiil) SRU 225.
Analiză. Calculat pentru CgHq^QJCH, CH, 0^25 : C 54,54; H 9,08; N0,14. Găsit: C 54,54; H 9,12; N 0,11.
Interferonul modificat cu PEG se prepară utilizând acest reactiv prin metoda
RO 112730 Bl descrisă în exemplul 1.
Exemplul 5. Prepararea de a-metilω[2-[2-[(2-piridiniloxi]carbonil] oxi]propoxi]poli(oxi-1, 2-etandiil) SRU 64,7 □intr-o soluție din 0,5 mg a-2-[2- 5 (hidroxipropoxi)propil]-<d-metoxipoli[oxi-1,2etandiil) SRU 64,7 în 40 ml de CH2CI2 anhidru se distilă 15 ml de solvent. La soluție se adaugă apoi 108 mg de di-2 piridil carbonat, 4 mg de DMAP și mai multe bile de sită moleculară 4A. Amestecul este agitat peste noapte, este filtrat și solventul este apoi îndepărtat sub presiune redusă. Reziduul se purifică cu ajutorul cromatografiei cu excludere dimensională.
Acest reactiv corespunde unui compus cu formula:
o
CH3-O-(CH2CH2O)nCH2CHOCH2CH -
CH3 ch3 (ΠΒ-1) în care n este circa 64. 15
Aceasta corespunde unei greutăți moleculare a polimerului de circa 3000 daltoni.
Interferonul modificat cu PEG este preparat prin metoda 1 descrisă în exem- 20 piui 1.
Interferonul este incubat cu de 3 ori sau de 10 ori exces de reactiv pe perioadele de timp indicate ca în Figura
1. La momentele indicate sunt îndepărtate 25 alicotele, reacția este oprită cu glicerină, și se face analiza pe un gel 15% SDS_PAGE. S este marcajual pentru standardele de greutate moleculară a proteinei, I este marcajul pentru 30 interferon.
Exemplul G. Prepararea a-metilω[2-[2-[[(2-piridiniloxiJcarbonil] oxi]propoxi]propoxi]poli[oxi-1,2-etandiil) SRU 110 35
Prin procedeul descris în exemplul 5, se transformă a-2-[2-(hidroxipropoxi]propil]-o-metoxipoli(oxi-1,2-etandiil)SRU 110în a-metil-G)[2-[2-[(2-piridiniloxi]carboniljoxij-propoxi] propoxi]poli(oxi-1,2-etandiil) 4 o SRU 110.
Acest reactiv (IIB-2) corespunde celui descris în exemplul 5 (IIB-I) cu excepția faptului că n este circa 110 ceea ce corespunde la circa 5000 daltoni.
Interfefonul modificat cu PEG este preparat utilizând acest reactiv prin metoda 1 din exemplul 1.
Exemplul 7. Prepararea de metiloxiran, polimer cu oxiran, [2-[[(2-piridiniloxijcarboniljamino ]propil]metil eter (M0/0=10/32)
Dintr-o soluție din 1 g Jeffamine M-2D7D (Texaco Chemical Co.) în 40 ml CHgCIg anhidru se distilă 15 ml de solvent. Soluția se răcește la D°C și se adaugă 215 mg de carbonat de c/A2-piridil. Soluția rezultată este agitată încă 4 h la 0°C după care solventul se îndepărtează la presiune redusă. Reziduul este purificat apoi cu ajutorul a două coloane cu excludere dimensională atașate în succesiune (500 Â și 1DD0 Â). Produsul prezintă două benzi în UV la 232 nm și la 310 nm.
Acest reactiv corespunde unui compus cu formula
CH3OCH2CH2O(CH2CHO)n-CH2CH—NH
M CH3
(ΠΑ-1)
RO 112730 Bl în care R5 este H, R2 este H sau metil, și ca o distribuție medie, n este 32 dacă R2 este H și n este 10 dacă (¾ este metil.
Interferonul modificat cu PEG este preparat prin metoda 2 descrisă în 5 exemplul 1.
Interferonul (5 mg/ml) este incubat cu de 10 ori, 20 ori, sau 40 ori exces de reactiv, față de proteină, pe perioadele de timp indicate în 25 mM Tricine (pH) io 10,0), 0,5 M KSCN, 100 mN NaCI. LA diverși timpi sunt îndepărtate alicotele, reacția este oprită cu glicerină și se face analiza pe un gel 15% SDF-PAGE. în tabel, I este pentru interferon. 15
Exemplul 8. Prepararea de metiloxiran, polimer cu oxiran, [2-[[[3-metil-2piridiniloxiJcarboniljamino]propil]metileter (MO/O = 10/32]
Prin procedeul descris în exemplul 20 7, 1 g de Jeffamino M-207D este reacționat cu carbonat de b/s(3-metil-2 piridil) pentru a da metiloxiran, polimer cu oxiran, [2-[[(3-metil-2-piridiniloxi)carbonil]amino]propil]metil eter [MO/O = 10/32).
Acest reactiv (IIA-2) corespunde celui descris în exemplul 7 (IIA-1) cu excepția că R5 este CH3.
Interferonul modificat cu PEG este preparat utilizând acest reactiv prin metoda 1 descrisă în exemplul 1.
Exemplul 9. Prepararea de metiloxiran, polimer cu oxiran, [2-[[(2-piridiniloxi]carbonil]amino]propil]metileter, bloc (MO/O = 1,6/18,6]
Prin procedeul descris în exemplul 7, 0,6 g de Jeffamină M-1000 (Texaco Chemical Co.) sunt reacționate cu 155,6 mg de carbonat de di-2-piridil pentru a da metioxiran, polimer cu oxiran,[2-[[(2-oxi] carbonil)amino]propil]metil eter, bloc (MO/O = 1,6/18,6).
Această reacție conduce la un compus cu formula:
o c n
CHaOiCHîCHzO^^CHjCHO)! 6CH2CH- N z '0-UN ') CH3 ch3 (IIA-3 ) având media indicată a distribuției unităților 25 în produsul polimeric.
Interferonul modificat cu PEG este preparat utilizând acest reactiv prin metoda 1 descrisă în exemplul 1.
Activitatea antivirală a interferonului. 30
A fost determinată activitatea antivitală a interferonului și a interferonului modificat cu PEG (Rubenstein, et. al., (1981) J. Virol. 37: 755-758; Familletti, et. al., (1981) Methods Enzymol. 78:387- 35 394). Toate testele au fost standardizate față de control. Interferonul standard utilizat în test avea o activitate specifică de 2 x 108 unități pe mg de proteină.
Condițiile utilizate pentru modificarea 4 o interferonului s-au bazat pe protocoalele optimizate descrise. Modificarea cu PEG a fost analizată prin SDS-PAGE pentru determinarea transformării interferonului în mono-PEG-interferon de-a lungul a diverse timpuri de incubare (reactivitate chimică], și a distribuției în diferite specii de conjugate PEG-interferon (selectivitate de situs). în testul SDS-PAGE, speciile modificate cu PEG au fost observate ca migrând mai încet, sub formă de bandă, pe gel. Atât monoPEG- cât și diPEGinterferonii au fost obținuți în cantitate suficientă astfel încât aceste specii să poată fi purificate din amestecurile de reacție prin cromatografie de interacție hidrodobică. Interferonii modificați cu PEG purificați au fost testați pentru activitatea antivirală comparativ cu standarde interferon-a2A nemodificate. Greutățile moleculare ale polimerilor utilizați și activitatea antivirală a unor derivați PEG sunt descrise în tabelul următor.
RO 112730 Bl
Proprietățile fizice ale reactivilor PEG și activitățile biologice ale conjugatelor proteinice
Compus din exemplul: Polimer Greutate Moleculară Activitate Antivirală (% control)
monoPEG diPEG
4 10000 25 2
3 5000 40 4
1 5000 40 ND
6 5000 40 ND
5 3000 60 ND
7 2070 60 ND
2 1300 70 ND
9 1000 100 40
MD = nedeterminat.
Revendicări aceea că este reprezentat prin formula generală I

Claims (15)

1. Conjugat polimer cu acțiune imunomodulatoare, caracterizat prin
O
RO-tCHjCHOJ/CHîCHOHCHaCHO^-CHîCH-W/ M i· k l? 4*
NH— interferon (I) în care R este alchil inferior; 20
Rt Ρξ· Ra sunt H sau alchil inferior; m este selectat dintre numere întregi > 1 până la numărul de grupări amino accesibile în interferon;
W este O sau NH; 25 x este un număr întreg între 1 și 10OO și fiecare yșiz este un număr întreg de la O la 1000, și suma lui x și y și z este de la 3 la 1000, cu condiția ca cel puțin unul dintre Rn R2, R3 și R4, este alchil 30 inferior;
x, y și z sunt astfel selectați încât greutatea moleculară a unității polimere din conjugat este în intervalul de la circa 300 daltoni până la circa 30000 daltoni. 35
2. Conjugat conform revendicării
1, caracterizat prin aceea că m este 1.
3. Conjugat conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că R este metil.
4. Conjugat conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că x, y și z sunt astfel selectați, încât greutate moleculară a unității polimere din conjugat este în intervalul de la circa 1000 până la circa 5000 daltoni, preferabil în intervalul de la circa 1000 până la circa 2200.
5. Conjugat conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că x și y sunt de la 5 la 500 și z este până la 4, prefe
RO 112730 Bl rabil xeste de la 10 la 100, yeste de la 1 la 10 și z este □.
6. Conjugat conform revendicării
1, caracterizat prin aceea că interferonul este interferon a2A. 5
7. Conjugat conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că W este NH; m este 1; R, R2 și R4 sunt Chk, R] este H, x este 18, 6 y este 1,6 și z este O.
8. Procedeu pentru prepararea unui conjugat polimer cu acțiune imunomodulatoare, caracterizat prin aceea că, cuprinde reacționarea unui intermediar cu formula II sau cu formula III cu interferon sau o sare a acestuia urmat de izolarea produsului obținut din amestecul de reacție.
în care
R este alchil inferior,
Rv R2, R3, R4 și R5 sunt H sau alchil inferior,
W este NH sau O;
x este un număr întreg între 1 și 1000 și fiecare dintre y și zeste un număr întreg până la 1000 și suma lui x, y și z este de la 3 la 1000, iar suma lui x, y și z este de la 3 la 1000, cu condiția că dacă W este NH sau dacă W este □ și R5 este H cel puțin unul dintre Rv R2, R3 și R4 este alchil inferior;
RO-fCHzCHO^CHjCHOHCHzCHO^-CHaCHO · — C-0
11 12 J, 3 li
R R R R (III) în care
R este alchil inferior,
Rv R2, R3 și R4 sunt H sau metil, x este un număr întreg de la 1 la 1000 și fiecare dintre y și z este un număr întreg de la O la 1003 și suma lui x, yși z este de la 3 la 1000.
9. Intermediar pentru obținerea unui conjugat polimer cu formula I, caracterizat prin aceea că are formula generală II (II)
RO 112730 Bl în care
R este alchil inferior,
Rv R3, R3, R4 și R5 sunt H sau alchil inferior;
W este NH sau □; 5 x este un număr întreg 1 și 1OOO și fiecare dintre y și z este un număr întreg până la 1000 și suma lui x, yși zeste de la 3 la 1 000, cu condiția că dacă W este NH sau dacă W este O și R5 este H și cel 10 puțin unul dintre Rp Rg, Rj și R este alchil inferior, iar x și y și z sunt astfel selectați încât greutatea moleculară a compusului respectiv este în intervalul de la circa 300 daltoni până la circa 30000 daltoni.
10. Intermediar conform revendicării 9, caracterizat prin aceea că R este metil.
11. Intermediar conform revendicării 9, caracterizat prin aceea că, x este de la 10 la 100, y este de la 1 la 10 și z este de la O la 4.
12. Intermediar pentru obținerea unui conjugat polimer cu formula I, caracterizat prin aceea că are formula generală III
RO^CHzCHO^CHjCHO^-iCHzCHOk-CHzCHO
R1 R2 R3 R4 în care 20
R este alchil inferior
Rv R2, R3 și R4 sunt H sau metil, zeste un număr întreg de la 1 la 1000 și fiecare dintre yși zeste un număr întreg de la O la 1000 și suma lui x, y și z este 25 de la 3 la 1000,' x, yși z fiind astfel selectați încât greutatea moleculară a compusului este în intervalul de la circa 300 daltoni la circa 30000 daltoni. 30
13. Intermediar conform revendi- cării 12, caracterizat prin aceea că cel (III) puțin unul dintre R.,, (¾, (¾ și R, sunt alchil inferior.
14. Intermediar conform revendicării 12, caracterizat prin aceea că R este metil.
15. Conjugat conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că se utilizează drept compus activ în compoziții farmaceutice, alături de un purtător inert din punct de vedere terapeutic, la tratamentul și profilaxia afecțiunilor imunomodulatorii cum ar fi boli neoplazice sau boli infecțioase.
RO93-01141A 1992-08-26 1993-08-23 Conjugat polimer cu actiune imunomodulatoare, procedeu si intermediar pentru obtinerea acestuia RO112730B1 (ro)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US07/935,770 US5382657A (en) 1992-08-26 1992-08-26 Peg-interferon conjugates

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RO112730B1 true RO112730B1 (ro) 1997-12-30

Family

ID=25467637

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RO93-01141A RO112730B1 (ro) 1992-08-26 1993-08-23 Conjugat polimer cu actiune imunomodulatoare, procedeu si intermediar pentru obtinerea acestuia

Country Status (37)

Country Link
US (1) US5382657A (ro)
EP (1) EP0593868B1 (ro)
JP (1) JP2859105B2 (ro)
KR (1) KR100295520B1 (ro)
CN (3) CN1183112C (ro)
AT (1) ATE165102T1 (ro)
AU (1) AU668742B2 (ro)
BG (1) BG98067A (ro)
BR (1) BR9303469A (ro)
CA (1) CA2103829C (ro)
CZ (1) CZ169393A3 (ro)
DE (1) DE69317979T2 (ro)
DK (1) DK0593868T3 (ro)
EE (1) EE9400151A (ro)
ES (1) ES2116376T3 (ro)
FI (1) FI109765B (ro)
HR (1) HRP931094A2 (ro)
HU (1) HUT67013A (ro)
IL (1) IL106750A0 (ro)
IS (1) IS4067A (ro)
LT (1) LT3174B (ro)
LV (1) LV10907B (ro)
MW (1) MW7693A1 (ro)
MX (1) MX9305146A (ro)
MY (1) MY131445A (ro)
NO (1) NO933028D0 (ro)
NZ (2) NZ248452A (ro)
OA (1) OA09850A (ro)
PH (1) PH30460A (ro)
PL (1) PL300194A1 (ro)
RO (1) RO112730B1 (ro)
SI (1) SI9300423A (ro)
SK (1) SK89893A3 (ro)
UY (1) UY23635A1 (ro)
YU (1) YU56693A (ro)
ZA (1) ZA936098B (ro)
ZW (1) ZW11193A1 (ro)

Families Citing this family (292)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1990006952A1 (fr) * 1988-12-22 1990-06-28 Kirin-Amgen, Inc. Facteur de stimulation de colonies de granulocytes modifies chimiquement
US7264944B1 (en) 1989-04-21 2007-09-04 Amgen Inc. TNF receptors, TNF binding proteins and DNAs coding for them
DK0393438T3 (da) 1989-04-21 2005-05-30 Amgen Inc TNF-receptor, TNF-bindende proteiner og DNAér, der koder herfor
IL95031A (en) 1989-07-18 2007-03-08 Amgen Inc Method for the production of a human recombinant tumor necrosis factor inhibitor
US6143866A (en) * 1989-07-18 2000-11-07 Amgen, Inc. Tumor necrosis factor (TNF) inhibitor and method for obtaining the same
US6552170B1 (en) 1990-04-06 2003-04-22 Amgen Inc. PEGylation reagents and compounds formed therewith
US5595732A (en) * 1991-03-25 1997-01-21 Hoffmann-La Roche Inc. Polyethylene-protein conjugates
US5880131A (en) * 1993-10-20 1999-03-09 Enzon, Inc. High molecular weight polymer-based prodrugs
US5919455A (en) 1993-10-27 1999-07-06 Enzon, Inc. Non-antigenic branched polymer conjugates
ATE214940T1 (de) * 1993-11-10 2002-04-15 Enzon Inc Verbesserte interferon-polymerkonjugate
US5951974A (en) * 1993-11-10 1999-09-14 Enzon, Inc. Interferon polymer conjugates
DE69521880T2 (de) * 1994-02-08 2002-01-03 Amgen Inc., Thousand Oaks Orales verabreichungssystem von chemischmodifizierten proteinen g-csf
US5730990A (en) * 1994-06-24 1998-03-24 Enzon, Inc. Non-antigenic amine derived polymers and polymer conjugates
US20030053982A1 (en) * 1994-09-26 2003-03-20 Kinstler Olaf B. N-terminally chemically modified protein compositions and methods
DE4435087A1 (de) * 1994-09-30 1996-04-04 Deutsches Krebsforsch Konjugat zur Behandlung von Infektions-, Autoimmun- und Hauterkrankungen
US5824784A (en) * 1994-10-12 1998-10-20 Amgen Inc. N-terminally chemically modified protein compositions and methods
US5738846A (en) * 1994-11-10 1998-04-14 Enzon, Inc. Interferon polymer conjugates and process for preparing the same
JP2758154B2 (ja) * 1995-04-06 1998-05-28 エフ・ホフマン−ラ ロシユ アーゲー インターフェロンを含む液体製剤
DE19514087A1 (de) * 1995-04-13 1996-10-17 Deutsches Krebsforsch Konjugat aus einem Wirkstoff, einem Polyether und ggfs. einem nicht als körperfremd angesehenen, nativen Protein
DE69632062T2 (de) 1995-11-02 2004-11-18 Schering Corp. Kontinuierliche, niedrigdosierte zytokine-infusionstherapie
US5908621A (en) * 1995-11-02 1999-06-01 Schering Corporation Polyethylene glycol modified interferon therapy
TW517067B (en) 1996-05-31 2003-01-11 Hoffmann La Roche Interferon conjugates
TW555765B (en) * 1996-07-09 2003-10-01 Amgen Inc Low molecular weight soluble tumor necrosis factor type-I and type-II proteins
US7495087B2 (en) 1997-07-14 2009-02-24 Bolder Biotechnology, Inc. Cysteine muteins in the C-D loop of human interleukin-11
ES2297889T3 (es) * 1997-07-14 2008-05-01 Bolder Biotechnology, Inc. Derivados de hormona de crecimiento y proteinas relacionadas.
US6753165B1 (en) * 1999-01-14 2004-06-22 Bolder Biotechnology, Inc. Methods for making proteins containing free cysteine residues
US20080076706A1 (en) 1997-07-14 2008-03-27 Bolder Biotechnology, Inc. Derivatives of Growth Hormone and Related Proteins, and Methods of Use Thereof
US7270809B2 (en) * 1997-07-14 2007-09-18 Bolder Biotechnology, Inc. Cysteine variants of alpha interferon-2
WO1999013894A2 (en) * 1997-09-18 1999-03-25 F. Hoffmann-La Roche Ag Use of ifn-alpha and amantadine for the treatment of chronic hepatitis c
WO1999030727A1 (en) 1997-12-17 1999-06-24 Enzon, Inc. Polymeric prodrugs of amino- and hydroxyl-containing bioactive agents
US6180095B1 (en) * 1997-12-17 2001-01-30 Enzon, Inc. Polymeric prodrugs of amino- and hydroxyl-containing bioactive agents
US5985263A (en) * 1997-12-19 1999-11-16 Enzon, Inc. Substantially pure histidine-linked protein polymer conjugates
US5981709A (en) * 1997-12-19 1999-11-09 Enzon, Inc. α-interferon-polymer-conjugates having enhanced biological activity and methods of preparing the same
FR2774687B1 (fr) * 1998-02-06 2002-03-22 Inst Nat Sante Rech Med Lipopeptides contenant un fragment de l'interferon gamma, et leur utilisation dans des compositions pharmaceutiques
WO1999048535A1 (en) * 1998-03-26 1999-09-30 Schering Corporation Formulations for protection of peg-interferon alpha conjugates
US6180096B1 (en) 1998-03-26 2001-01-30 Schering Corporation Formulations for protection of peg-interferon alpha conjugates
EE05214B1 (et) * 1998-04-28 2009-10-15 Applied Research Systems ARS Holding N.V. Polool-IFN- β konjugaat, selle valmistamismeetod ja farmatseutiline kompositsioon
AU766597B2 (en) 1998-05-15 2003-10-16 Schering Corporation Combination therapy comprising ribavirin and interferon alpha in antiviral treatment naive patients having chronic hepatitis C infection
AU4093799A (en) * 1998-05-22 1999-12-13 Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Bifunctional molecules and therapies based thereon
ITMI981148A1 (it) * 1998-05-22 1999-11-22 Therapicon Srl Utilizzo di lisozima c modificato per preparare composizioni medicinali per il trattamento di alcune gravi malattie
DK1087778T3 (da) * 1998-06-08 2005-12-19 Hoffmann La Roche Anvendelse af PEG-IFN-alfa og Ribavirin til behandling af kronisk hepatitis C
US7223845B2 (en) 1998-06-16 2007-05-29 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Synthetic glycosulfopeptides and methods of synthesis thereof
US20030143662A1 (en) 1998-06-16 2003-07-31 Cummings Richard D. Glycosulfopeptide inhibitors of leukocyte rolling and methods of use thereof
JP2002518354A (ja) * 1998-06-16 2002-06-25 ザ ボード オブ リージェンツ オブ ザ ユニヴァーシティー オブ オクラホマ 糖硫酸ペプチド、その合成方法および使用方法
HU229888B1 (en) 1998-10-16 2014-11-28 Biogen Idec Ma Inc Cambridge Polymer conjugates of interferon betha-1a and uses
BR9915548A (pt) * 1998-10-16 2001-08-14 Biogen Inc Proteìnas de fusão de interferon-beta e usos
US6660843B1 (en) * 1998-10-23 2003-12-09 Amgen Inc. Modified peptides as therapeutic agents
US8288126B2 (en) 1999-01-14 2012-10-16 Bolder Biotechnology, Inc. Methods for making proteins containing free cysteine residues
CA2359345A1 (en) 1999-01-14 2000-07-20 Bolder Biotechnology, Inc. Methods for making proteins containing free cysteine residues
IL144361A0 (en) * 1999-01-29 2002-05-23 Hoffmann La Roche Gcsf conjugates
US6605273B2 (en) 1999-04-08 2003-08-12 Schering Corporation Renal cell carcinoma treatment
US6923966B2 (en) 1999-04-08 2005-08-02 Schering Corporation Melanoma therapy
US6362162B1 (en) 1999-04-08 2002-03-26 Schering Corporation CML Therapy
EP1535622B1 (en) 1999-04-08 2008-12-31 Schering Corporation Melanoma therapy
JO2291B1 (en) 1999-07-02 2005-09-12 اف . هوفمان لاروش ايه جي Erythropoietin derivatives
EP2241623A3 (en) 1999-07-07 2010-12-01 ZymoGenetics, Inc. Monoclonal antibody against a human cytokine receptor
WO2001005819A1 (en) * 1999-07-15 2001-01-25 Kuhnil Pharm. Co., Ltd. Novel water soluble-cyclosporine conjugated compounds
US6531122B1 (en) * 1999-08-27 2003-03-11 Maxygen Aps Interferon-β variants and conjugates
US7144574B2 (en) * 1999-08-27 2006-12-05 Maxygen Aps Interferon β variants and conjugates
US7431921B2 (en) * 1999-08-27 2008-10-07 Maxygen Aps Interferon beta-like molecules
EP1224939A4 (en) 1999-10-12 2005-01-12 Santen Pharmaceutical Co Ltd INTERFERON-BASED COMPLEX AND ITS USE IN MEDICINE
CN1309423C (zh) 1999-11-12 2007-04-11 马克西根控股公司 干扰素γ偶联物
CA2390292A1 (en) * 1999-11-12 2001-05-25 Maxygen Holdings Ltd. Interferon gamma conjugates
US7220552B1 (en) 1999-11-19 2007-05-22 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Bifunctional molecules and their use in the disruption of protein-protein interactions
US6887842B1 (en) * 1999-11-19 2005-05-03 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Modulating a pharmacokinetic property of a drug by administering a bifunctional molecule containing the drug
WO2001035978A1 (en) 1999-11-19 2001-05-25 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Targeted bifunctional molecules and therapies based thereon
AU2253301A (en) 1999-12-03 2001-06-12 Zymogenetics Inc. Human cytokine receptor
KR100773323B1 (ko) 2000-01-10 2007-11-05 맥시겐 홀딩스 리미티드 지-씨에스에프 접합체
EP1251866A1 (en) * 2000-01-24 2002-10-30 Schering Corporation Combination of temozolomide and pegylated interferon-alpha for treating cancer
EP1908477A3 (en) * 2000-01-24 2008-06-11 Schering Corporation Combination of temozolomide and pegylated interferon-alpha for treating cancer
CA2739933A1 (en) 2000-02-11 2001-08-16 Bayer Healthcare Llc Factor vii or viia-like molecules
KR100353392B1 (ko) * 2000-03-13 2002-09-18 선바이오(주) 높은 생체 활성도를 갖는 생체 활성 단백질과 ｐｅｇ의결합체 제조방법
US6756037B2 (en) 2000-03-31 2004-06-29 Enzon, Inc. Polymer conjugates of biologically active agents and extension moieties for facilitating conjugation of biologically active agents to polymeric terminal groups
US6777387B2 (en) 2000-03-31 2004-08-17 Enzon Pharmaceuticals, Inc. Terminally-branched polymeric linkers containing extension moieties and polymeric conjugates containing the same
WO2002032957A1 (en) * 2000-10-16 2002-04-25 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Peg-modified erythropoietin
US20020169290A1 (en) * 2000-11-02 2002-11-14 Claus Bornaes New multimeric interferon beta polypeptides
ES2329012T3 (es) 2000-11-07 2009-11-20 Zymogenetics, Inc. Receptor del factor de necrosis tumoral humano.
ATE378342T1 (de) * 2001-02-20 2007-11-15 Enzon Inc Terminal verzweigte, polymere linker und diese enthaltende polymere konjugate
WO2002066516A2 (en) 2001-02-20 2002-08-29 Zymogenetics, Inc. Antibodies that bind both bcma and taci
WO2002074806A2 (en) 2001-02-27 2002-09-26 Maxygen Aps New interferon beta-like molecules
EP1370676A4 (en) 2001-03-02 2004-09-22 Zymogenetics Inc CYTOKIN RECEPTOR FROM MOUSE
US7038015B2 (en) * 2001-04-06 2006-05-02 Maxygen Holdings, Ltd. Interferon gamma polypeptide variants
US6958388B2 (en) 2001-04-06 2005-10-25 Maxygen, Aps Interferon gamma polypeptide variants
WO2002083166A1 (en) * 2001-04-10 2002-10-24 Santen Pharmaceutical Co., Ltd. Interferon-polymer complexes and medicinal use thereof
BRPI0209933B8 (pt) 2001-05-24 2021-05-25 Zymogenetics Inc proteína de fusão, e, molécula de ácido nucleico
JP4142569B2 (ja) * 2001-06-22 2008-09-03 協和醗酵工業株式会社 軟膏剤
MD2053C2 (ro) * 2001-07-10 2003-07-31 Национальный Научно-Практический Центр Превентивной Медицины Министерства Здравоохранения Республики Молдова Remediu cu acţiune interferonogenă
CA2457876C (en) 2001-08-22 2011-10-11 Rba Pharma Inc. Process for the preparation of activated polyethylene glycols
AU2002346686A1 (en) * 2001-12-07 2003-06-23 Intermune, Inc. Compositions and method for treating hepatitis virus infection
KR100888371B1 (ko) 2002-01-17 2009-03-13 동아제약주식회사 가지 달린 고분자 유도체와 인터페론 결합체를 포함하는 항바이러스제
PT3025726T (pt) * 2002-01-18 2020-01-09 Biogen Ma Inc Compostos do polímero polialquileno e utilizações dos mesmos
JP4272537B2 (ja) * 2002-03-13 2009-06-03 北京鍵▲凱▼科技有限公司 Ｙ型分鎖親水性ポリマー誘導体、それらの調製方法、前記誘導体および薬剤分子の結合生成物、ならびに前記結合生成物を含む医薬組成物
IL164214A0 (en) * 2002-04-11 2005-12-18 Zymogenetics Inc Use of interleukin-24 to treat ovarian cancer
CN1659274A (zh) 2002-04-19 2005-08-24 津莫吉尼蒂克斯公司 细胞因子受体
UA86744C2 (en) 2002-06-21 2009-05-25 Ново Нордиск Хэлс Кеа Аг Pegylated factor vii glycoforms
CA2491178A1 (en) * 2002-07-03 2004-01-15 Maxygen Holdings Ltd. Full-length interferon gamma polypeptide variants
MXPA05000796A (es) * 2002-07-24 2005-04-19 Hoffmann La Roche Aditivos de acidos polialquilenglicolicos.
AU2003268463A1 (en) * 2002-09-05 2004-03-29 The General Hospital Corporation Asialo-interferons and the treatment of liver cancer
MXPA05002476A (es) * 2002-09-05 2005-10-19 Gi Company Inc Asialo-interferones modificados y sus usos.
CA2498062C (en) * 2002-09-27 2010-05-25 F. Hoffmann-La Roche Ag Conjugates of insulin-like growth factor binding protein-4 and poly(ethylene glycol)
US20040175359A1 (en) * 2002-11-12 2004-09-09 Desjarlais John Rudolph Novel proteins with antiviral, antineoplastic, and/or immunomodulatory activity
US7314613B2 (en) * 2002-11-18 2008-01-01 Maxygen, Inc. Interferon-alpha polypeptides and conjugates
GEP20084487B (en) * 2002-12-26 2008-09-25 Mountain View Pharmaceuticals Polymer conjugates of cytokines, chemokines, growth factors, polypeptide hormones and antagonists thereof
JP5207590B2 (ja) * 2002-12-26 2013-06-12 マウンテン ビュー ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド 増強された生物学的能力を有するインターフェロン−βのポリマー結合体
EP1581260B1 (en) * 2002-12-31 2014-09-17 Nektar Therapeutics Polymeric reagents comprising a ketone or a related functional group
CA2515612A1 (en) * 2003-02-19 2004-09-02 Pharmacia Corporation Activated polyethylene glycol esters
CA2516552A1 (en) * 2003-02-26 2004-09-10 Intermune, Inc. Polyethylene glycol modified interferon compositions and methods of use thereof
US20070077225A1 (en) * 2003-02-28 2007-04-05 Blatt Lawrence M Continuous delivery methods for treating hepatitis virus infection
CA2458085A1 (en) 2003-03-21 2004-09-21 F. Hoffmann-La Roche Ag Transcriptional activity assay
CA2525647A1 (en) 2003-05-16 2005-02-24 Intermune, Inc. Synthetic chemokine receptor ligands and methods of use thereof
EP2251352A1 (en) 2003-08-07 2010-11-17 ZymoGenetics, L.L.C. Homogeneous preparations of IL-28 and IL-29
GB0320638D0 (en) 2003-09-03 2003-10-01 Novartis Ag Organic compounds
CN1867581B (zh) 2003-10-10 2012-02-01 诺沃挪第克公司 Il-21衍生物
WO2005037214A2 (en) 2003-10-14 2005-04-28 Intermune, Inc. Macrocyclic carboxylic acids and acylsulfonamides as inhibitors of hcv replication
EP2641611A3 (en) 2003-10-17 2013-12-18 Novo Nordisk A/S Combination therapy
WO2005042563A2 (en) * 2003-10-22 2005-05-12 Akzo Nobel N.V. Process for incrasing protein pegylation reaction yields by diafiltration ultrafiltration
US7407973B2 (en) * 2003-10-24 2008-08-05 Intermune, Inc. Use of pirfenidone in therapeutic regimens
WO2005062949A2 (en) * 2003-12-23 2005-07-14 Intermune, Inc. Method for treating hepatitis virus infection
GB0500020D0 (en) 2005-01-04 2005-02-09 Novartis Ag Organic compounds
BRPI0507169A (pt) * 2004-02-02 2007-06-26 Ambrx Inc polipeptìdeos do hormÈnio de crescimento humano modificados e seu usos
US7351787B2 (en) * 2004-03-05 2008-04-01 Bioartificial Gel Technologies, Inc. Process for the preparation of activated polyethylene glycols
RU2311930C2 (ru) * 2004-04-30 2007-12-10 Закрытое акционерное общество "ВЕРОФАРМ" Пэгилированный интерферон для борьбы с вирусной инфекцией
CN101115769A (zh) * 2004-05-19 2008-01-30 马克西根公司 干扰素-α多肽和偶联物
WO2005123113A2 (en) * 2004-06-14 2005-12-29 Intermune, Inc. Interferon compositions and methods of use thereof
US7632924B2 (en) * 2004-06-18 2009-12-15 Ambrx, Inc. Antigen-binding polypeptides and their uses
WO2006091231A2 (en) * 2004-07-21 2006-08-31 Ambrx, Inc. Biosynthetic polypeptides utilizing non-naturally encoded amino acids
JP2008508310A (ja) 2004-07-29 2008-03-21 ザイモジェネティクス， インコーポレイテッド がんおよび自己免疫障害を治療するためのｉｌ−２８およびｉｌ−２９の使用法
CA2576549C (en) 2004-08-12 2011-01-18 Schering Corporation Stable pegylated interferon formulation
CA2581423A1 (en) 2004-09-23 2006-03-30 Vasgene Therapeutics, Inc. Polipeptide compounds for inhibiting angiogenesis and tumor growth
EP1836298B1 (en) * 2004-12-22 2012-01-18 Ambrx, Inc. COMPOSITIONS OF AMINOACYL-tRNA SYNTHETASE AND USES THEREOF
BRPI0519430A2 (pt) 2004-12-22 2009-02-10 Ambrx Inc hormânio do crescimento humano modificado
EP1836316A4 (en) 2004-12-22 2009-07-22 Ambrx Inc PROCESS FOR EXPRESSION AND CLEANING OF RECOMBINANT HUMAN GROWTH HORMONE
CN103520735B (zh) * 2004-12-22 2015-11-25 Ambrx公司 包含非天然编码的氨基酸的人生长激素配方
EP1856156A2 (en) 2005-02-08 2007-11-21 ZymoGenetics, Inc. Anti-il-20, anti-il-22 and anti-il-22ra antibodies and binding partners and methods of using in inflammation
EP1891107B1 (en) 2005-05-12 2011-07-06 ZymoGenetics, Inc. Compositions and methods for modulating immune responses
EP1888633A4 (en) * 2005-05-18 2010-01-27 Maxygen Inc UNFOLDED INTERFERON ALPHA POLYPEPTIDE
AU2006255122B2 (en) * 2005-06-03 2010-10-21 Ambrx, Inc. Improved human interferon molecules and their uses
WO2006135930A2 (en) * 2005-06-13 2006-12-21 Nastech Pharmaceutical Company Inc. Transmucosal delivery of peptide derivatives
AU2006259348B2 (en) 2005-06-17 2010-07-22 Novartis Ag Use of sanglifehrin in HCV
ES2553160T3 (es) 2005-06-17 2015-12-04 Novo Nordisk Health Care Ag Reducción y derivatización selectivas de proteínas Factor VII transformadas por ingeniería que comprenden al menos una cisteína no nativa
CA2612901A1 (en) * 2005-06-20 2007-01-04 Pepgen Corporation Low-toxicity, long-circulating chimeras of human interferon- alpha analogs and interferon tau
US7695710B2 (en) 2005-06-20 2010-04-13 Pepgen Corporation Antitumor and antiviral combination therapies using low-toxicity, long-circulating human interferon-alpha analogs
AU2006263331B2 (en) * 2005-06-29 2012-02-16 Yeda Research And Development Co. Ltd. At The Weizmann Institute Of Science Recombinant interferon alpha2 (IFNalpha2) mutants
MX2008001166A (es) 2005-07-25 2008-03-18 Intermune Inc Nuevos inhibidores macrociclicos de la replicacion del virus de hepatitis c.
AU2005335491B2 (en) * 2005-08-18 2010-11-25 Ambrx, Inc. Compositions of tRNA and uses thereof
JP2009510093A (ja) 2005-09-28 2009-03-12 ザイモジェネティクス， インコーポレイテッド Ｉｌ−１７ａおよびｉｌ−１７ｆアンタゴニストならびにその使用方法
AU2006301966A1 (en) 2005-10-11 2007-04-19 Array Biopharma, Inc. Compounds and methods for inhibiting hepatitis C viral replication
US20080171696A1 (en) * 2005-10-21 2008-07-17 Avigenics, Inc. Pharmacodynamically enhanced therapeutic proteins
AU2006304856A1 (en) * 2005-10-21 2007-04-26 Synageva Biopharma Corp. Glycolated and glycosylated poultry derived therapeutic proteins
CN101400646A (zh) * 2005-11-08 2009-04-01 Ambrx公司 用于修饰非天然氨基酸和非天然氨基酸多肽的促进剂
DK2339014T3 (en) * 2005-11-16 2015-07-20 Ambrx Inc Methods and compositions comprising non-natural amino acids
WO2007070659A2 (en) * 2005-12-14 2007-06-21 Ambrx, Inc. Compositions containing, methods involving, and uses of non-natural amino acids and polypeptides
AU2007205545B9 (en) 2006-01-12 2012-10-18 Hokusan Co. Ltd. Oral composition containing interferon-alpha
CN100475270C (zh) 2006-01-20 2009-04-08 清华大学 一种治疗肿瘤的药物及其应用
CN101002945B (zh) 2006-01-20 2012-09-05 清华大学 一种用于肿瘤治疗的新型复合物
EP2007789B1 (en) 2006-04-11 2015-05-20 Novartis AG Spirocyclic HCV/HIV inhibitors and their uses
US20080096819A1 (en) * 2006-05-02 2008-04-24 Allozyne, Inc. Amino acid substituted molecules
JP5313129B2 (ja) * 2006-05-02 2013-10-09 アロザイン， インコーポレイテッド 非天然アミノ酸置換ポリペプチド
KR20090013816A (ko) 2006-05-24 2009-02-05 노보 노르디스크 헬스 케어 악티엔게젤샤프트 연장된 생체내 반감기를 갖는 인자 ⅸ 유사체
JP5031827B2 (ja) 2006-06-01 2012-09-26 程云 予防或いは肝損傷を治療するペプチッド
CN1911447B (zh) * 2006-06-30 2010-05-12 复旦大学 转铁蛋白-聚乙二醇-药物分子复合物及其制备药物的用途
EP1886685A1 (en) 2006-08-11 2008-02-13 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods, uses and compositions for modulating replication of hcv through the farnesoid x receptor (fxr) activation or inhibition
KR20090057035A (ko) * 2006-08-21 2009-06-03 유나이티드 세러퓨틱스 코오포레이션 바이러스 감염의 치료를 위한 병용 요법
CN106008699A (zh) * 2006-09-08 2016-10-12 Ambrx公司 经修饰的人类血浆多肽或Fc骨架和其用途
EP2064333B1 (en) * 2006-09-08 2014-02-26 Ambrx, Inc. Suppressor trna transcription in vertebrate cells
JP5399906B2 (ja) * 2006-09-08 2014-01-29 アンブルックス，インコーポレイテッド 脊椎動物細胞用のハイブリッドサプレッサーｔｒｎａ
MX2009005466A (es) 2006-11-22 2009-08-17 Adnexus A Bristol Myers Sqibb Terapeuticos dirigidos a base de proteinas manipuladas para receptores de tirosina cinasas, incluyendo receptor de factor de crecimiento tipo insulina-i.
CN101219219B (zh) * 2007-01-10 2013-02-13 北京普罗吉生物科技发展有限公司 包含血管抑素或其片段的复合物、其制备方法及应用
EP2111228B1 (en) 2007-02-02 2011-07-20 Bristol-Myers Squibb Company 10Fn3 domain for use in treating diseases associated with inappropriate angiogenesis
CN107501407B (zh) 2007-03-30 2022-03-18 Ambrx公司 经修饰fgf-21多肽和其用途
US8114630B2 (en) * 2007-05-02 2012-02-14 Ambrx, Inc. Modified interferon beta polypeptides and their uses
CA2707840A1 (en) 2007-08-20 2009-02-26 Allozyne, Inc. Amino acid substituted molecules
KR101483814B1 (ko) 2007-09-04 2015-01-16 바이오스티드 진 익스프레션 테크. 컴파니 리미티드 폴리에틸렌 글리콜에 의해 변형된 인터페론 알파 2ａ, 이의 합성 방법 및 용도
AU2007358605B8 (en) 2007-09-04 2012-02-02 Biosteed Gene Expression Tech. Co., Ltd. Polyethylene glycol modified interferon alpha 2b and preparation method and applications thereof
CN102099055A (zh) 2007-10-04 2011-06-15 津莫吉尼蒂克斯公司 B7家族成员zB7H6及相关的组合物和方法
JP2011500086A (ja) 2007-10-22 2011-01-06 シェーリング コーポレイション 完全ヒト抗ｖｅｇｆ抗体および使用方法
MX2010005317A (es) 2007-11-20 2010-06-02 Ambrx Inc Polipeptidos de insulina modificados y sus usos.
ME03057B (me) 2007-12-07 2019-01-20 Zymogenetics Inc Molekuli humanizovanih antitela specifični za il-31
MX344166B (es) 2008-02-08 2016-12-07 Ambrx Inc Leptina-polipeptidos modificados y sus usos.
US9840546B2 (en) 2008-04-03 2017-12-12 Biosteed Gene Expression Tech. Co., Ltd. Double-stranded polyethylene glycol modified growth hormone, preparation method and application thereof
WO2009142773A2 (en) 2008-05-22 2009-11-26 Bristol-Myers Squibb Company Multivalent fibronectin based scaffold domain proteins
EP2623112B1 (en) 2008-06-27 2015-03-04 Zymogenetics, Inc. Soluble hybrid Fc gamma receptors and related methods
CN102159230A (zh) 2008-07-23 2011-08-17 Ambrx公司 经修饰的牛g-csf多肽和其用途
AU2009296267B2 (en) * 2008-09-26 2013-10-31 Ambrx, Inc. Non-natural amino acid replication-dependent microorganisms and vaccines
BR122012024318A2 (pt) 2008-09-26 2019-07-30 Ambrx, Inc. Polipeptídeos modificados de eritropoetina animal e seus usos
EP3025727A1 (en) 2008-10-02 2016-06-01 The J. David Gladstone Institutes Methods of treating liver disease
EP2408449A4 (en) 2009-03-18 2012-08-08 Univ Leland Stanford Junior METHOD AND COMPOSITIONS FOR TREATING FLAVIVIRIDAE VIRUS INFECTIONS
US20110182850A1 (en) 2009-04-10 2011-07-28 Trixi Brandl Organic compounds and their uses
US8512690B2 (en) 2009-04-10 2013-08-20 Novartis Ag Derivatised proline containing peptide compounds as protease inhibitors
MX2011012665A (es) 2009-06-04 2012-03-07 Novartis Ag Metodos para identificacion de sitios para conjugacion de igg.
EP2459211A1 (en) 2009-07-31 2012-06-06 Medtronic, Inc. Continuous subcutaneous administration of interferon- to hepatitis c infected patients
EA201200650A1 (ru) 2009-10-30 2012-12-28 Бёрингер Ингельхайм Интернациональ Гмбх Курсы комбинированного лечения вируса гепатита с, включающие bi201335, интерферон-альфа и рибавирин
BR112012015597A2 (pt) 2009-12-21 2017-01-31 Ambrx Inc peptídeos de somatotropina suínos modificados e seus usos
MX349301B (es) 2009-12-21 2017-07-21 Ambrx Inc Polipéptidos de somatotropina bovina modificados y sus usos.
WO2011143274A1 (en) 2010-05-10 2011-11-17 Perseid Therapeutics Polypeptide inhibitors of vla4
US9394294B2 (en) 2010-05-11 2016-07-19 Demerx, Inc. Methods and compositions for preparing and purifying noribogaine
US8362007B1 (en) 2010-05-11 2013-01-29 Demerx, Inc. Substituted noribogaine
US8765737B1 (en) 2010-05-11 2014-07-01 Demerx, Inc. Methods and compositions for preparing and purifying noribogaine
JP6023703B2 (ja) 2010-05-26 2016-11-09 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ 改善された安定性を有するフィブロネクチンをベースとする足場タンパク質
WO2011159930A2 (en) 2010-06-16 2011-12-22 Medtronic, Inc. Damping systems for stabilizing medications in drug delivery devices
US8802832B2 (en) 2010-06-22 2014-08-12 Demerx, Inc. Compositions comprising noribogaine and an excipient to facilitate transport across the blood brain barrier
US9586954B2 (en) 2010-06-22 2017-03-07 Demerx, Inc. N-substituted noribogaine prodrugs
US8637648B1 (en) 2010-06-22 2014-01-28 Demerx, Inc. Compositions comprising noribogaine and an excipient to facilitate transport across the blood brain barrier
US8741891B1 (en) 2010-06-22 2014-06-03 Demerx, Inc. N-substituted noribogaine prodrugs
JP2013529627A (ja) 2010-06-24 2013-07-22 パンメド リミテッド ヒドロキシクロロキンまたはヒドロキシクロロキンおよび抗ウイルス剤の組合せを使用するｃ型肝炎ウイルス関連疾患の処置
CA2806232A1 (en) 2010-07-23 2012-01-26 Demerx, Inc. Noribogaine compositions
EA030886B1 (ru) 2010-08-17 2018-10-31 Амбркс, Инк. Модифицированные полипептиды релаксина, содержащие некодируемую в природе аминокислоту, связанную с полимером, и их применение
US9567386B2 (en) 2010-08-17 2017-02-14 Ambrx, Inc. Therapeutic uses of modified relaxin polypeptides
TWI480288B (zh) 2010-09-23 2015-04-11 Lilly Co Eli 牛顆粒細胞群落刺激因子及其變體之調配物
CN103179974A (zh) 2010-10-05 2013-06-26 诺华有限公司 丙型肝炎病毒感染的新疗法
JP5909495B2 (ja) 2010-10-08 2016-04-26 ノバルティス アーゲー スルファミドｎｓ３阻害剤のビタミンｅ製剤
CA2818067A1 (en) 2010-11-30 2012-06-07 Novartis Ag New treatments of hepatitis c virus infection
EP2481740B1 (en) 2011-01-26 2015-11-04 DemeRx, Inc. Methods and compositions for preparing noribogaine from voacangine
WO2012107589A1 (en) 2011-02-11 2012-08-16 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical compositions for the treatment and prevention of hcv infections
AU2012233644A1 (en) 2011-03-31 2013-09-12 Novartis Ag Alisporivir to treat Hepatitis C virus infection
AU2012237295A1 (en) 2011-04-01 2013-09-19 Novartis Ag Treatment for infection with Hepatitis B virus alone or in combination with Hepatitis Delta virus and associated liver diseases
CN103648516A (zh) 2011-04-13 2014-03-19 诺华股份有限公司 使用阿拉泊韦治疗丙型肝炎病毒感染
EP2709669A1 (en) 2011-05-17 2014-03-26 Bristol-Myers Squibb Company Methods for maintaining pegylation of polypeptides
EP2709648A4 (en) 2011-05-19 2015-04-08 Geysen Hendrik M COMPOUNDS FOR BINDING TO THE ERYTHROPOIETIN RECEPTOR
RU2014103288A (ru) 2011-07-01 2015-08-10 Байер Интеллектчуал Проперти Гмбх Слитые полипептиды релаксина и их применение
EP2734640A1 (en) 2011-07-20 2014-05-28 INSERM - Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Methods for determining treatment response in patients infected with hcv genotype 4
CA2846092A1 (en) * 2011-08-25 2013-02-28 Nanogen Pharmaceutical Biotechnology Peg-interferon lambda 1 conjugates
US9617274B1 (en) 2011-08-26 2017-04-11 Demerx, Inc. Synthetic noribogaine
RU2014116988A (ru) 2011-09-27 2015-11-10 Новартис Аг Алиспоривир для лечения инфекции, вызванной вирусом гепатита с
JP2015504038A (ja) 2011-10-31 2015-02-05 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ 低減した免疫原性を有するフィブロネクチン結合ドメイン
BR112014013649A2 (pt) 2011-12-06 2020-10-27 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University métodos e agentes para o tratamento de doenças virais e usos dos referidos agentes
CA2855994A1 (en) 2011-12-09 2013-06-13 Demerx, Inc. Phosphate esters of noribogaine
CA2858820C (en) 2012-01-25 2021-08-17 Demerx, Inc. Synthetic voacangine
US9150584B2 (en) 2012-01-25 2015-10-06 Demerx, Inc. Indole and benzofuran fused isoquinuclidene derivatives and processes for preparing them
US8454947B1 (en) 2012-03-01 2013-06-04 Nanogen Pharmaceutical Biotechnology PEG-interferon lambda 1 conjugates
WO2013137869A1 (en) 2012-03-14 2013-09-19 Boehringer Ingelheim International Gmbh Combination therapy for treating hcv infection in an hcv-hiv coinfected patient population
JP2015512900A (ja) 2012-03-28 2015-04-30 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 特別な患者の遺伝子亜型分集団のｈｃｖ感染症を治療するための併用療法
CA2868883C (en) 2012-03-30 2022-10-04 Sorrento Therapeutics Inc. Fully human antibodies that bind to vegfr2
US9844582B2 (en) 2012-05-22 2017-12-19 Massachusetts Institute Of Technology Synergistic tumor treatment with extended-PK IL-2 and therapeutic agents
WO2013174988A1 (en) 2012-05-24 2013-11-28 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for predicting and monitoring treatment response in hcv- and hcv/hiv-infected subjects
KR20220084444A (ko) 2012-05-31 2022-06-21 소렌토 쎄라퓨틱스, 인코포레이티드 Pd-l1에 결합하는 항원 결합 단백질
EP2859017B1 (en) 2012-06-08 2019-02-20 Sutro Biopharma, Inc. Antibodies comprising site-specific non-natural amino acid residues, methods of their preparation and methods of their use
CN105050618B (zh) 2012-06-21 2018-11-16 索伦托治疗有限公司 与c-Met结合的抗原结合蛋白
WO2013192596A2 (en) 2012-06-22 2013-12-27 Sorrento Therapeutics Inc. Antigen binding proteins that bind ccr2
WO2014004639A1 (en) 2012-06-26 2014-01-03 Sutro Biopharma, Inc. Modified fc proteins comprising site-specific non-natural amino acid residues, conjugates of the same, methods of their preparation and methods of their use
EP2890402B1 (en) 2012-08-31 2019-04-17 Sutro Biopharma, Inc. Modified amino acids comprising an azido group
US20140205566A1 (en) 2012-11-30 2014-07-24 Novartis Ag Cyclic nucleuoside derivatives and uses thereof
US8940728B2 (en) 2012-12-20 2015-01-27 Demerx, Inc. Substituted noribogaine
CA2896133A1 (en) 2012-12-20 2014-06-26 Demerx, Inc. Substituted noribogaine
US9045481B2 (en) 2012-12-20 2015-06-02 Demerx, Inc. Substituted noribogaine
EP2951206A2 (en) 2013-02-01 2015-12-09 Bristol-Myers Squibb Company Fibronectin based scaffold proteins
WO2014194302A2 (en) 2013-05-31 2014-12-04 Sorrento Therapeutics, Inc. Antigen binding proteins that bind pd-1
WO2015006555A2 (en) 2013-07-10 2015-01-15 Sutro Biopharma, Inc. Antibodies comprising multiple site-specific non-natural amino acid residues, methods of their preparation and methods of their use
EP3055298B1 (en) 2013-10-11 2020-04-29 Sutro Biopharma, Inc. Modified amino acids comprising tetrazine functional groups, methods of preparation, and methods of their use
PL3137078T3 (pl) 2014-05-01 2019-08-30 Eiger Biopharmaceuticals, Inc. Leczenie zakażenia wirusem zapalenia wątroby typu delta
US11311519B2 (en) 2014-05-01 2022-04-26 Eiger Biopharmaceuticals, Inc. Treatment of hepatitis delta virus infection
US9388239B2 (en) 2014-05-01 2016-07-12 Consejo Nacional De Investigation Cientifica Anti-human VEGF antibodies with unusually strong binding affinity to human VEGF-A and cross reactivity to human VEGF-B
US10076512B2 (en) 2014-05-01 2018-09-18 Eiger Biopharmaceuticals, Inc. Treatment of hepatitis delta virus infection
WO2015195673A2 (en) 2014-06-18 2015-12-23 Demerx, Inc. Halogenated indole and benzofuran derivatives of isoquinuclidene and processes for preparing them
WO2016025647A1 (en) 2014-08-12 2016-02-18 Massachusetts Institute Of Technology Synergistic tumor treatment with il-2, a therapeutic antibody, and a cancer vaccine
CA2957717C (en) 2014-08-12 2021-10-19 Massachusetts Institute Of Technology Synergistic tumor treatment with il-2 and integrin-binding-fc-fusion protein
EA201790437A1 (ru) 2014-08-22 2017-08-31 Сорренто Терапьютикс, Инк. Антигенсвязывающие белки, связывающиеся с cxcr3
US9987241B2 (en) 2014-09-25 2018-06-05 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Enzyme conjugate and prodrug cancer therapy
CN114805532A (zh) 2014-10-24 2022-07-29 百时美施贵宝公司 修饰的fgf-21多肽及其用途
JP6820841B2 (ja) 2014-11-06 2021-01-27 ファーマエッセンティア コーポレイション ペグ化インターフェロンのための投薬計画
WO2016148179A1 (ja) * 2015-03-17 2016-09-22 国立大学法人信州大学 Ｉｆｎを用いた非接着培養による樹状細胞の調製方法
WO2016172342A1 (en) 2015-04-21 2016-10-27 Eiger Biopharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical compositions comprising lonafarnib and ritonavir
JP6668468B2 (ja) 2015-11-03 2020-03-18 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ Ｈｂｖキャプシドアセンブリ阻害剤とインターフェロンの併用療法
EP3370723B1 (en) 2015-11-04 2020-12-16 Eiger Biopharmaceuticals, Inc. Treatment of hepatitis delta virus infection
WO2017132562A1 (en) 2016-01-29 2017-08-03 Heyue Zhou Antigen binding proteins that bind pd-l1
WO2018087345A1 (en) 2016-11-14 2018-05-17 F. Hoffmann-La Roche Ag COMBINATION THERAPY OF AN HBsAg INHIBITOR, A NUCLEOS(T)IDE ANALOGUE AND AN INTERFERON
US10350266B2 (en) 2017-01-10 2019-07-16 Nodus Therapeutics, Inc. Method of treating cancer with a multiple integrin binding Fc fusion protein
AU2018207303A1 (en) 2017-01-10 2019-07-25 xCella Biosciences, Inc. Combination tumor treatment with an integrin-binding-Fc fusion protein and immune modulator
WO2018134260A1 (en) 2017-01-18 2018-07-26 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical compositions for the treatment patients suffering from myeloproliferative disorders
PE20191716A1 (es) 2017-02-08 2019-12-05 Bristol Myers Squibb Co Polipeptidos de relaxina modificada que comprenden un mejorador farmacocinetico y sus usos
WO2019020593A1 (en) 2017-07-25 2019-01-31 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) METHODS AND PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS FOR MODULATION OF MONOCYTOPOISIS
US11446365B2 (en) 2017-08-09 2022-09-20 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Antimalarial enzyme conjugates, kits containing same, and methods of producing and using same
EP3684811A2 (en) 2017-08-17 2020-07-29 Massachusetts Institute of Technology Multiple specificity binders of cxc chemokines and uses thereof
CA3111576A1 (en) 2018-09-11 2020-03-19 Ambrx, Inc. Interleukin-2 polypeptide conjugates and their uses
AU2019346335B2 (en) 2018-09-28 2024-07-25 Massachusetts Institute Of Technology Collagen-localized immunomodulatory molecules and methods thereof
JP2022512746A (ja) 2018-10-19 2022-02-07 アンブルックス，インコーポレイテッド インターロイキン－１０ポリペプチド複合体、その二量体、およびそれらの使用
EP3914289A1 (en) 2019-01-23 2021-12-01 Massachusetts Institute of Technology Combination immunotherapy dosing regimen for immune checkpoint blockade
CA3128081A1 (en) 2019-02-12 2020-08-20 Ambrx, Inc. Compositions containing, methods and uses of antibody-tlr agonist conjugates
EP3999101A1 (en) 2019-07-18 2022-05-25 ENYO Pharma Method for decreasing adverse-effects of interferon
US20210285000A1 (en) 2020-03-05 2021-09-16 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy for treating hepatitis b virus infection
EP4117732A1 (en) 2020-03-11 2023-01-18 Ambrx, Inc. Interleukin-2 polypeptide conjugates and methods of use thereof
WO2021228983A1 (en) 2020-05-13 2021-11-18 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) A pharmaceutical composition comprising an arsenic compound, an inductor of type-1 ifn and a protein kinase inhibitor for treating cancer
ES2929379T3 (es) 2020-05-20 2022-11-28 Inst Nat Sante Rech Med Métodos para el tratamiento de infecciones por coronavirus
EP4168547A1 (en) 2020-06-22 2023-04-26 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for treatment of hepatitis d virus infection
JP2023538071A (ja) 2020-08-20 2023-09-06 アンブルックス，インコーポレイテッド 抗体－ｔｌｒアゴニストコンジュゲート、その方法及び使用
WO2022043496A2 (en) 2020-08-28 2022-03-03 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Use of mait cells as biomarkers and biotargets in covid-19
WO2022079205A1 (en) 2020-10-15 2022-04-21 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Use of ifn-alpha polypeptides for the treatment of coronavirus infections
WO2022159414A1 (en) 2021-01-22 2022-07-28 University Of Rochester Erythropoietin for gastroinfestinal dysfunction
CA3213805A1 (en) 2021-04-03 2022-10-06 Feng Tian Anti-her2 antibody-drug conjugates and uses thereof
WO2024164213A1 (zh) 2023-02-09 2024-08-15 谢彦晖 聚乙二醇修饰的白介素2、糖皮质激素和透明质酸用于治疗特应性皮炎
AU2024308069A1 (en) 2023-06-27 2026-02-05 Firecyte Therapeutics, Inc. Insulin-like growth factor binding protein like 1 (igfbpl1) compositions and methods of use thereof
WO2026043823A2 (en) 2024-08-19 2026-02-26 Sutro Biopharma, Inc. Antibodies comprising site-specific non-natural amino acid residues, methods of preparation and uses thereof

Family Cites Families (53)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2651657A (en) * 1949-05-21 1953-09-08 Standard Oil Dev Co Synthetic lubricating oil
SE337223B (ro) * 1967-05-23 1971-08-02 Pharmacia Ab
US3619371A (en) * 1967-07-03 1971-11-09 Nat Res Dev Production of a polymeric matrix having a biologically active substance bound thereto
SE343210B (ro) * 1967-12-20 1972-03-06 Pharmacia Ab
DK132327A (ro) * 1968-07-16
US3632828A (en) * 1968-12-16 1972-01-04 Dow Chemical Co Polyethylene glycol monomethyl ether carbonates
BE758425A (fr) * 1969-12-02 1971-04-16 Baxter Laboratories Inc Streptokinase liee chimiquement a une matrice en carbohydrate (
DE2247163A1 (de) * 1972-09-26 1974-03-28 Merck Patent Gmbh Traegermatrix zur fixierung biologisch wirksamer stoffe und verfahren zu ihrer herstellung
US4179337A (en) * 1973-07-20 1979-12-18 Davis Frank F Non-immunogenic polypeptides
US4002531A (en) * 1976-01-22 1977-01-11 Pierce Chemical Company Modifying enzymes with polyethylene glycol and product produced thereby
US4100271A (en) * 1976-02-26 1978-07-11 Cooper Laboratories, Inc. Clear, water-miscible, liquid pharmaceutical vehicles and compositions which gel at body temperature for drug delivery to mucous membranes
GB1578348A (en) * 1976-08-17 1980-11-05 Pharmacia Ab Products and a method for the therapeutic suppression of reaginic antibodies responsible for common allergic
US4094744A (en) * 1976-11-18 1978-06-13 W. R. Grace & Co. Water-dispersible protein/polyurethane reaction product
DE2862449D1 (en) * 1977-08-22 1984-11-22 Nat Res Dev Macromolecular covalent conjugates, methods for preparing and pharmaceutical compositions containing them
JPS55110105A (en) * 1979-02-19 1980-08-25 Japan Atom Energy Res Inst Preparation of polymer composition containing physiologically active material
JPS6023084B2 (ja) * 1979-07-11 1985-06-05 味の素株式会社 代用血液
US4640835A (en) * 1981-10-30 1987-02-03 Nippon Chemiphar Company, Ltd. Plasminogen activator derivatives
DE3380726D1 (en) * 1982-06-24 1989-11-23 Japan Chem Res Long-acting composition
WO1985003934A1 (fr) * 1984-03-06 1985-09-12 Takeda Chemical Industries, Ltd. Proteine modifiee chimiquement et son procede de preparation
US4486344A (en) * 1983-03-28 1984-12-04 Miles Laboratories, Inc. Urea-linked immunogens, antibodies, and preparative method
JPS6098988A (ja) * 1983-11-01 1985-06-01 Chemo Sero Therapeut Res Inst Ｌｐｆ−ｈａの精製法
JPS60127952A (ja) 1983-12-14 1985-07-08 Fanuc Ltd 領域加工方法
US4496689A (en) * 1983-12-27 1985-01-29 Miles Laboratories, Inc. Covalently attached complex of alpha-1-proteinase inhibitor with a water soluble polymer
DE3572982D1 (en) * 1984-03-06 1989-10-19 Takeda Chemical Industries Ltd Chemically modified lymphokine and production thereof
GB8430252D0 (en) * 1984-11-30 1985-01-09 Beecham Group Plc Compounds
US4732863A (en) * 1984-12-31 1988-03-22 University Of New Mexico PEG-modified antibody with reduced affinity for cell surface Fc receptors
JP2524586B2 (ja) * 1985-06-26 1996-08-14 シタス コーポレイション ポリマ−接合を利用する医薬組成物用蛋白質の可溶化
US4917888A (en) * 1985-06-26 1990-04-17 Cetus Corporation Solubilization of immunotoxins for pharmaceutical compositions using polymer conjugation
US4766106A (en) * 1985-06-26 1988-08-23 Cetus Corporation Solubilization of proteins for pharmaceutical compositions using polymer conjugation
US4847079A (en) * 1985-07-29 1989-07-11 Schering Corporation Biologically stable interferon compositions comprising thimerosal
US5100664A (en) * 1985-09-20 1992-03-31 Cetus Corporation Human IL-2 as a vaccine adjuvant
US5102872A (en) * 1985-09-20 1992-04-07 Cetus Corporation Controlled-release formulations of interleukin-2
US4818769A (en) * 1985-09-20 1989-04-04 Cetus Corporation Method of controlling stress-related disease in livestock by administration of human IL-2
US4791192A (en) * 1986-06-26 1988-12-13 Takeda Chemical Industries, Ltd. Chemically modified protein with polyethyleneglycol
US4810638A (en) * 1986-07-24 1989-03-07 Miles Inc. Enzyme-labeled antibody reagent with polyalkyleneglycol linking group
US4894226A (en) * 1986-11-14 1990-01-16 Cetus Corporation Solubilization of proteins for pharmaceutical compositions using polyproline conjugation
US4851220A (en) * 1986-11-26 1989-07-25 Schering Corporation Stable oleaginous gel
US4871538A (en) * 1987-07-13 1989-10-03 Schering Corporation Insoluble copper-alpha interferon complex
AU611932B2 (en) * 1987-08-21 1991-06-27 Wellcome Foundation Limited, The Novel complex
US4847325A (en) * 1988-01-20 1989-07-11 Cetus Corporation Conjugation of polymer to colony stimulating factor-1
US5199360A (en) 1988-09-27 1993-04-06 Sirkka Koistinen Table constructions
GB8824591D0 (en) * 1988-10-20 1988-11-23 Royal Free Hosp School Med Fractionation process
WO1990005534A1 (en) * 1988-11-23 1990-05-31 Genentech, Inc. Polypeptide derivatives
US4902502A (en) * 1989-01-23 1990-02-20 Cetus Corporation Preparation of a polymer/interleukin-2 conjugate
ES2136595T5 (es) * 1989-04-19 2004-04-01 Enzon, Inc. Carbonatos activos de oxidos de polialquileno para la modificacion de polipeptidos.
US5122614A (en) * 1989-04-19 1992-06-16 Enzon, Inc. Active carbonates of polyalkylene oxides for modification of polypeptides
DK0400472T3 (da) * 1989-05-27 1996-05-13 Sumitomo Pharma Fremgangsmåde til fremstilling af polyethylenglycolderivater og modificeret protein
JP2978187B2 (ja) * 1989-11-02 1999-11-15 日本ケミカルリサーチ株式会社 修飾スーパーオキサイドディスムターゼの製造法
US5234903A (en) * 1989-11-22 1993-08-10 Enzon, Inc. Chemically modified hemoglobin as an effective, stable non-immunogenic red blood cell substitute
ES2084149T3 (es) * 1989-12-01 1996-05-01 Basf Ag Conjugados de hirudinpolialquilenglicol.
JPH04202293A (ja) * 1990-11-29 1992-07-23 Tonen Corp 作動油
US5595732A (en) * 1991-03-25 1997-01-21 Hoffmann-La Roche Inc. Polyethylene-protein conjugates
US5281698A (en) * 1991-07-23 1994-01-25 Cetus Oncology Corporation Preparation of an activated polymer ester for protein conjugation

Also Published As

Publication number Publication date
LV10907A (lv) 1995-12-20
NO933028D0 (no) 1993-08-25
CN1088936A (zh) 1994-07-06
PL300194A1 (en) 1994-04-05
FI933740A0 (fi) 1993-08-25
CA2103829A1 (en) 1994-02-27
SK89893A3 (en) 1994-04-06
DK0593868T3 (da) 1999-02-08
EP0593868B1 (en) 1998-04-15
ATE165102T1 (de) 1998-05-15
NZ248452A (en) 1995-12-21
NZ264872A (en) 1996-01-26
LV10907B (en) 1996-04-20
JPH06192300A (ja) 1994-07-12
KR940003969A (ko) 1994-03-14
ZA936098B (en) 1994-03-01
HU9302366D0 (en) 1993-11-29
ES2116376T3 (es) 1998-07-16
CZ169393A3 (en) 1994-04-13
HUT67013A (en) 1995-01-30
DE69317979T2 (de) 1998-08-20
SI9300423A (en) 1994-03-31
AU4478093A (en) 1994-03-03
MX9305146A (es) 1994-03-31
IS4067A (is) 1994-02-27
LT3174B (en) 1995-02-27
JP2859105B2 (ja) 1999-02-17
LTIP888A (lt) 1994-08-25
ZW11193A1 (en) 1994-03-23
CN1183112C (zh) 2005-01-05
MW7693A1 (en) 1994-06-08
DE69317979D1 (de) 1998-05-20
FI109765B (fi) 2002-10-15
AU668742B2 (en) 1996-05-16
OA09850A (fr) 1994-08-15
PH30460A (en) 1997-05-28
CN1155618C (zh) 2004-06-30
CN1039015C (zh) 1998-07-08
BG98067A (en) 1994-12-02
BR9303469A (pt) 1994-03-22
CN1211578A (zh) 1999-03-24
EP0593868A1 (en) 1994-04-27
FI933740L (fi) 1994-02-27
EE9400151A (et) 1996-02-15
CA2103829C (en) 2003-04-08
HRP931094A2 (en) 1997-06-30
UY23635A1 (es) 1994-03-01
KR100295520B1 (ko) 2001-09-17
MY131445A (en) 2007-08-30
IL106750A0 (en) 1993-12-08
YU56693A (sh) 1997-01-08
US5382657A (en) 1995-01-17
CN1173500A (zh) 1998-02-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RO112730B1 (ro) Conjugat polimer cu actiune imunomodulatoare, procedeu si intermediar pentru obtinerea acestuia
JP2637010B2 (ja) ポリエチレンタンパク質接合体
AU2003258518B2 (en) Polyalkylene glycol acid additives
AU725195B2 (en) Interferon conjugates
AU660843B2 (en) Lyophilized polyethylene oxide modified protein and polypeptide complexes with cyclodextrin
KR20030045416A (ko) 에리트로포이에틴과 폴리에틸렌글리콜 유도체의 배합체
HK1005225B (en) Interferon conjugates