RO112730B1 - Conjugat polimer cu actiune imunomodulatoare, procedeu si intermediar pentru obtinerea acestuia - Google Patents

Conjugat polimer cu actiune imunomodulatoare, procedeu si intermediar pentru obtinerea acestuia Download PDF

Info

Publication number
RO112730B1
RO112730B1 RO93-01141A RO9301141A RO112730B1 RO 112730 B1 RO112730 B1 RO 112730B1 RO 9301141 A RO9301141 A RO 9301141A RO 112730 B1 RO112730 B1 RO 112730B1
Authority
RO
Romania
Prior art keywords
conjugate
lower alkyl
interferon
integer
peg
Prior art date
Application number
RO93-01141A
Other languages
English (en)
Inventor
Robert Karasiewicz
Carle Nalin
Perry Rosen
Original Assignee
Hoffmann La Roche
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hoffmann La Roche filed Critical Hoffmann La Roche
Publication of RO112730B1 publication Critical patent/RO112730B1/ro

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • C07K14/555—Interferons [IFN]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/62—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D213/63—One oxygen atom
    • C07D213/64—One oxygen atom attached in position 2 or 6
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C69/00—Esters of carboxylic acids; Esters of carbonic or haloformic acids
    • C07C69/96—Esters of carbonic or haloformic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • C07K14/555—Interferons [IFN]
    • C07K14/56—IFN-alpha
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K19/00—Hybrid peptides, i.e. peptides covalently bound to nucleic acids, or non-covalently bound protein-protein complexes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

Prezenta invenție se referă la un conjugat polimer cu acțiune imunomodulatoare, procedeu și intermediar pentru obținerea acestuia, acest conjugat fiind utilizat în tratamentul și profilaxia bolilor 5 imunomodulatorii, cum ar fi boli neoplazice și boli infecțioase.
Se cunoaște că diverse proteine naturale și recombinate prezintă utilitate medicală și farmaceutică. După ce au fost 10 purificate și formulate, acestea pot fi administrate pe cale parenterală, în diverse indicații terapeutice. Totuși, proteinele administrate pe cale parenterală pot fi imunogenice, pot fi relativ insolubile în apă, 15 și pot avea un timp de înjumătățire farmacologică scurt. în consecință, poate fi dificilă realizarea de niveluri, utile din punct de vedere terapeutic, a proteinei în sângele pacientului. 20
Aceste probleme pot fi rezolvate prin conjugarea proteinelor cu polimeri, cum ar fi polietilenglicol. Davis at al., în brevetul US 4179337, descriu conjugarea polietilenglicolului (PEG) cu proteine, cum 25 ar fi enzime sau insulină, pentru a se obține conjugate în care proteina va fi mai puțin imunogenică reținând în schimb o proporție substanțială a activității sale fiziologice. Nakagawa et al. descriu conjugarea PEG 30 la proteină activată insulară pentru a reduce efectele sale secundare și imunogenicitatea. Veronese et al., Applied Biochem. and Biotech., 11; 141152(1985), descriu activarea polietilen- 35 glicolilor cu cloroformiați de fenil pentru a modifica o ribonuclează și o dismutază superoxid. Katre et al., în brevetul US
4766106 și 4917888, descriu, de asemenea, solubilizarea proteinelor prin conjugare cu polimer PEG și alți polimeri, care sunt conjugați cu proteine recombinante pentru a le reduce imunogenicitatea și a le crește timpul de înjumătățire. Acestea se regăsesc în Nitocki et al., brevetul US 4902502, Enzon, Inc., cererea de brevet internațională PCT/US 90/03133, Nishimura etal., cererea de brevet european 154316 și Tomasi, cerere de brevet internațională PCT/US 85/02572.
Metodele precedente de formare a conjugatelor PEG/proteină și conjugatele care rezultă din metodele respective prezintă mai multe probleme. Printre aceste probleme este și aceea că anumite metode de formare a acestor conjugate proteină-PEG, pot inactiva proteina astfel, încât conjugatele care rezultă au slabă activitate biologică. în plus, anumiți lincheri utilizați în formarea acestor conjugate PEGproteină pot fi susceptibili la scindarea hidrolitică in vivo. Când are loc o astfel de scindare după administrare, conjugatele respective își pierd proprietățile benefice conferite de PEG.
Prezenta invenție înlătură dezavantajele menționate prin noul conjugat interferon-PEG care are un unic agent de legare ce conectează o grupare amino a interferonului la PEG. Invenția de față prezintă în particular un conjugat polimer cu acțiune imunomodulatoare cu formula generală I
O
Ϊ
RO-iCHjCHOl^CHîCHOHCHjCHOk-CHjCH-W'^
R2 R3 R4
NH— interferon (I) în care R este alchil inferior;
Rv P2> R3 Și R4 sunt H sau alchil inferior; m este selectat dintre numere întregi > 1 până la numărul de grupări amino accesibile în interferon;
W este □ sau NH;
x este un număr îngtreg între 1 și 1000 și fiecare y și z este un număr întreg de la D la 1000, și suma lui x, y și z este de la 3 la 1000, cu condiția că cel puțin unul dintre R^ R2, R3 și R4 este alchil inferior; x, y și z sunt astfel selectați încât greutatea
RO 112730 Bl
T moleculară a unității polimere din conjugat este în intervalul de la circa 300 daltoni până la circa 30000 daltoni.
Este de la sine înțeles că gruparea -NH din formula I derivă de la o grupare 5 amino accesibilă a moleculei de interferon.
Mai precis cele două conjugate diferite ale interferonului au următoarele formule:
RCHCHzCHO), — (04/3140)—
R1 R2
O
Λ (CHzCHOJrCHjCH-NH NH
(IA)
RC4CH2CHO)x —(CH2CHO)y— (CHîCHOJrCHiCHO NH Xinterteron R1 R2 R3 R4 în care R este alchil inferior; Rp R2, R3 și 15 R4 sunt hidrogen sau alchil inferior; m este un număr până la numărul de grupări amino accesibile în interferon; și x, y și z sunt selectați din orice combinație de numere astfel încât conjugatul are cel puțin 2 o parțial activitatea biologică a proteinei care formează conjugatul; cu condiția că cel puțin unul din Rv R2, R3 și R4 este alchil inferior.
Conform acestei invenții, conjugatele 2 5 IFN cu formulele IA și IB pot fi produse prin condensarea PEG activat la care o grupare hidroxi sau amino terminală a fost înlocuită cu un agent de legare activat. Acești reactivi pot reacționa apoi cu una sau mai multe grupări amino de la IFN. Condensarea cu numai o grupare amino pentru a forma un monopolietilenglicolat reprezintă o întruchipare preferată a acestei invenții. Prin urmare, invenția se referă de asemenea la noi intermediari care pot fi utilizați pentru a produce conjugatul polimer cu acțiune imunomodulatoare. Acești intermediari au formule generale II și III:
RO-iCHjCHO^-fCHjCHOHCHjCHO^-CHgCH-W
Â’ Ă* Â3
(II) în care R este alchil inferior, Rn R2, R3 și 35 R4 și R5 sunt hidrogen sau alchil inferior;
W este NH sau □;
x este un număr întreg între 1 și 1000 și fiecare y și z este un număr întreg până la 1000, și suma lui x, y și z este de la 3 4 o la 1000, cu condiția că dacă W este NH sau dacă W ste O și R5 este H atunci cel puțin unul dintre Rn R2, R3 și R4 este un alchil inferior, iar x, y și z sunt astfel selectați încât greutatea moleculară a compusului respectic este în intervalul de la circa 300 daltoni până la circa 30000 daltoni.
Și
RO 112730 Bl
RO-(CH2CHO^-(CH2CHO)y-(CH2CHO)z-CH2CHO — C-0 I < 12 13 14
R R R R în care R este un alchil inferior; Rn R2, R3 și R4 sunt hidrogen sau metil, x este un număr de la 1 la 1OOO și fiecare y și z este un număr întreg de la o la 1000, și suma lui x, y și z este de la 3 la 1000, iar x, y și z sunt astfel selectați încât greutatea moleculară a compusului este în intervalul de la circa 300 daltoni la circa 30000 daltoni.
Formula II include mai ales compuși de următoarele două tipuri:
io
RO-(CHjCHO)x-(CH2CHO)y-(CH2CHO)2-CH2CH-NH
R’ Rz R3 R4 (HA)
(UB) în IIA, IIB și III, R, Rv R2, R3, R4 sunt ca 20 mai sus; și x, y și z sunt selectați dintr-o combinație de numere astfel încât atunci când polimerul se conjugă cu o proteină, îi permite proteinei să rețină cel puțin o porțiune a nivelului de activitate avut înainte 25 de conjugare; cu condiția menționată pentru formula II.
Conform invenției de față, utilizând reactivi PEG activați cu formula IIA, IIB sau III pentru a produce conjugatul se formează 30 o legătură între grupările amino libere dintr-o proteină cum este interferon (IFN) și PEG, astfel încât conjugatul rezultat reține cel puțin o porțiune a activității biologice a proteinei cu imunogenicitate 35 redusă. în plus, grupările de legare formate în conjugatele din această invenție prin intermediul utilizării oricăruia dintre polietilenglicolii activați cu formulele IIA, IIB sau III duce la obținerea unui conjugat proteinic care nu este susceptibil de scindare hidrolitică in vivo și nu face obiectul dezavantajelor prezentate la conjugatele PEG cunoscute în stadiul anterior al tehnicii.
în formulele de mai sus R, Rv R2, R3, R4 și R5 pot fi orice alchil inferior, preferabil metil. Termenul de alchil inferior desemnează grupări alchil inferior conținând de la 1 la 6 atomi de carbon, cum ar fi metil, etil, n-propil, izopropil etc. în
RO 112730 Bl general grupările alchil preferate sunt grupări alchil conținând de la 1 la 4 atomi de carbon, metilul fiind cel mai preferat. Rb R2, R3, R4 și R5 pot fi de asemenea hidrogen, dar R,, R2, R3 și R4 nu sunt hidrogen în mod simultan.
în aceleași formule, x, y, z pot fi selectați din orice combinație de numere astfel încât conjugatul rezultat conține cel puțin o porțiune a activității biologice a IFN care formează conjugatul. Este evident că suma lui x, y și z, și m este invers proporțională cu cantitatea de activitate biologică a IFN care este reținută de către conjugat. Valoarea numerică a x, y și z reprezintă numărul unităților de glicol din polietilenglicolul care formează conjugatul. Termenul m reprezintă numărul grupărilor aminice libere sau accesibile conținute de IFN, care pot reacționa cu amestecul PEG activat. Cu cât este mai mare m și x, y și z, cu atât este mai mare greutatea moleculară a conjugatului. în conformitate cu această invenție, x, y și z sunt orice număr astfel încât greutatea moleculară a conjugatului, excluzând greutatea proteinei, este între circa 3OG și circa 3OOOO daltoni. Preferabil pentru IFN, m este un număr de la 1 la 3. Un aspect foarte preferat este un conjugat monopolietilen-glicolat în care m este 1 obținut în astfel de condiții încât se obține un conjugat IFN compus din IFN în care numai o grupare amino liberă a reacționat cu reactivul PEG de formula HA, IIB sau III. Conform unei întruchipări preferate când m este 1, x, y și z sunt orice număr astfel încât glicolul care formează conjugatul are o greutate moleculară medie de la circa 300 la circa 30000 daltoni, preferabil de la circa 1000 la circa 30000 daltoni, în special de la circa 1000 la circa 5000 daltoni. într-o întruchipare deosebit de preferată, greutatea molculară este de circa 2000 daltoni.
în ceea ce privește numerele x, y și z ale unităților, x este un număr întreg de 1 la 1000 și fiecare dintre y și z este un număr întreg de la O la 1000 și suma lui x, y și z este între 3 și 1000.
într-o întruchipare preferată a conjugatelor de formulele IA și IB, x și y sunt de la 5 la 500 și z este de la O la 4. Deosebit de preferat este ca glicolul utilizat să fie un amestec de glicoli în care x este între 10 și 100, y este între 1 și 10 și z este O. Cel mai preferat este un interferon conjugat de formula IA în care m este 1, R, R1 și R4 sunt CH3, R1 este H, x este circa 19, y este circa 2 și z este O. Aceasta corespunde unei greutăți moleculare medii în unitatea PEG-ului de circa 1000 daltoni.
Pentru a evita orice dubii privind numărul de unități în molecula de PEG, se preferă caracterizarea polimerului polietilenglicolic prin greutate moleculară în loc de indicarea numărului de unități de autorepetare (SRUj în polimerul PEG prin x, y și z. Aceste valori pot fi dificil de evaluat datorită imunogenicității potențiale a compușilor PEG de pornire care sunt definiți în mod obișnuit prin greutatea moleculară medie și nu prin numărul de unități de autorepetare pe care aceștia le conțin. Compușii PEG de pornire cu diverse greutăți moleculare pot fi preparați prin metode cunoscute în tehnica de specialitate sau pot fi obținuți de la furnizori comerciali.
în cazul în care valorile lui x, y și z obținute prin determinarea greutăților moleculare sau după cum a fost indicat de furnizor nu sunt întregi (așa cum va fi cazul în general), valorile lor vor trebui rotunjite în plus sau în minus în modul obișnuit pentru a permite o determinare a întregilor la molecula polimerică care formează probabil partea majoră a amestecului polimeric.
Atunci când reactivul având oricare dintre formulele HA, IIB sau III este reacționat cu un IFN, care conține mai mult de o grupare amino liberă, conjugatul cu acțiune imunomodulatoare se poate obține sub forma unui amestec de diverse produse de reacție ale IFN cu amestecurile de reactiv PEG. Aceste produse de reacție se formează ca rezultat al reacției reactivului PEG cu una sau mai multe dintre grupările amino libere. Acest lucru esre însemnat prin m în formula IA și IB. De exemplu, atunci când IFN-ul conține trei grupări amino libere, reactivul PEG activat
RO 112730 Bl poate reacționa cu una dintre grupările amino, cu două dintre grupările amino libere, sau cu toate trei. în această situație amestecul conține produse de reacție conjugate formate în toate cele trei cazuri. 5 Deoarece diversele produse de reacție conjugate din acest amestec au greutăți moleculare foarte diferite, funcție de valorile lui m, adică 1, 2 sau 3, aceste produse de reacție pot fi separate prin 10 metode convenționale cum ar fi prin cromatografie. Pentru a determina dacă m, și x, y și z au fost selectați în mod adecvat, produșii de reacție separați pot fi testați pentru activitatea biologică prin 15 aceleași metode cu cele utilizate pentru a testa IFN-ul inițial pentru a determina dacă produsul de reacție conjugat mai reține încă o porțiune a activității biologice a IFN-ului utilizat pentru a forma conjugatul. 2 o în această manieră, numerele m, și x, y și z pot fi ajustate în orice mod dorit pentru a stabili activitatea dorită.
într-o prezentare preferată, m este 1. Atunci când m este 1, acest conjugat 25 poate fi obținut chiar și atunci când există două sau mai multe grupări libere. Reactivul PEG activat va reacționa mai întâi cu una dintre grupările amino libere conținute în IFN. Prin reglarea concentrației 30 reactivilor cum ar fi IFN-ul, și a condițiilor de reacție, conform metodelor standard de condensare a aminelor, se poate regie gradul de polietilenglicolare al grupărilor amino libere conținute în proteină. în 35 proteinele care conțin una sau mai multe grupări amino libere, în care una dintre grupările amino este mai reactivă decât celelalte grupări amino, pot fi selectate condițiile astfel încât proteina este reacționată cu compusul PEG activat pentru a forma compusul cu formula IA sau IB în care m este 1. Alte grupări amino libere conținute în amino acizii care formează proteina pot fi reacționate ulterior cu PEGul fie lăsând reacția de condensare să se desfășoare un timp mai îndelungat, fie utilizând alte condiții de reacție mai viguroare.
Așa cum este utilizat în descrierea de față și în revendicări termenii interferon și IFN includ toate tipurile de interferon (evident molecule cu activitate de interferon), de exemplu a, β, γ și ω interferon, și toate subtipurile acestor tipuri, cum ar fi α2, α2Α, a2B sau a2C sau hidrizi sau himere a diferitelor tipuri și/sau subtipuri. Interferonul poate fi de oricare origine și poate fi obținut din surse naturale, culturi de țesut sau prin tehnici ADN recombinat. Metodele pentru producerea și izolarea interferonului natural sau recombinat sunt bine cunoscute în specialitate și sunt descrise, de exemplu în cererile de brevet publicate EP 43980, EP 211148, EP 140127, DE 3028919, brevet US 4503035 și brevet U9 4414150.
Un alt obiect al prezentei invenții se referă la un procedeu pentru prepararea unui conjugat polimer cu acțiune imunomodulatoare care cuprinde reacționarea unui intermediar cu formula II sau cu formula III cu interferon sau o sare a acestuia urmată de izolarea produsului obținut din amestecul de reacție.
(ie)
RO 112730 Bl în care
R este alchil inferior;
Rv R2, R3> R 4 și R5sunt H sau alchil inferior;
W este NH sau O;
x este un număr întreg între 1 și 1OOO și fiecare dintre y și z este un număr întreg până la 1000 și suma lui x, y și z este de la 3 la 1 □□□; ' cu condiția ca dacă W este NH sau dacă W este □ și R5 este H cel puțin unul dintre Rv R2, R3 și R4 este alchil inferior;
(III) în care
R este alchil inferior;
Rv R2, R3 și R4 sunt H sau metil;
x este un număr de la 1 la 1000 și fiecare y și z este un număr întreg de la O la 1000, și suma lui x, y și z este de la 3 la 1000.
Conjugatul cu formula IA poate fi obținut după cum urmează:
PEG-amină (IV)
(IIA)
H
---- proteină m
(l-A)
RO 112730 Bl in care
R, Rv R2, R3, R4 si R5, m și x, y și z sunt ca mai sus;
cu condiția că oricare sau mai mulți dintre Rv R2, R3 și R4 pot fi alchil inferior. 5 în această reacție o amină-PEG este amestecată cu compusul de formulă IV într-o hidrocarbură sau o hidrocarbură clorurată cu solvent pentru a se obține compusul de formula HA. Compusul de 10 formula IIA poate fi condensat într-un mediu apos cu una sau mai multe grupări amino libere ale proteinei pentru a se obține conjugatul de formula IA. Această reacție poate fi realizată în condiții convenționale 15 pentru condensarea aminelor într-un mediu apos. în general această reacție este realizată într-o soluție tampon apoasă standard având un pH între 7 și 1 □ pentru a produce conjugatele de formula IA. Se 20 poate obține un amestec de conjugate PEGproteină de diverse greutăți moleculare funcție de numărul grupărilor amino libere din molecula de proteină și de timpul de reacție. Conjugatele PEG proteină pot fi separate apoi în componentele lor individuale prin metoda convențională cum ar fi cromatografie lichidă de înaltă performanță (HPLC) sau electroforeză pe gel. Pot fi utilizate oricare dintre condițiile convenționale pentru separarea compușilor funcție de greutatea moleculară cu HPIC sau electroforeză pe gel. Separarea acestui amestec poate fi realizată conform greutăților moleculare ale produșilor formați așa cum s-a descris aici.
Un conjugat de formula IB poate fi preparat conform următoarei scheme de reacție:
RCHCHjCHO), — (CHjCHOyj- (CHjCHO^OyXOH
R® R3 R4
PEG-alcool (IV)
RO-țCHzCHO), I R'
RO-(CH2CHO)x I R1 —(CH2CHO)j~ (CHîCHOJjOIjCHO —(CHjCHOJt- (CHjCHOfeOlaCH
i.
(U-β)
NHy-interferon
NI- — interteron
-< V
I 11
R4 ° (1-B)
RO 112730 Bl în care R, R7, R2> R3, R4, m, x, y, z și condiția sunt ca mai sus.
Compusul de formula IV este obținut prin condensarea fosgenului cu 2-hidroxipiridină (substituită dacă R5 este alchil inferior) 5 utilizând o metodă convențională pentru condensarea unei halogenuri acide cu un alcool.
Condensarea unui alcool-PEG cu compusul de formula IV este efectuată io utilizând condițiile convenționale pentru condensarea unui alcool cu un carbonat pentru a se produce compusul de formula ll-B. Compusul de formula IIB este condensat cu proteina prin intermediul uneia îs sau mai multor grupări amino libere de la proteină pentru a se obține compusul de formula IB. Această reacție este realizată în maniera descrisă pentru condensarea compusului IIA pentru a produce conjugatul de formula IA. Funcție de numărul de grupări amino libere conținute în proteina care reacționează cu compusul de formula IIB, conjugatul de formula IB poate fi format ca un amestec de conjugate având greutăți moleculare diferite. Acest amestec de conjugat poate fi separat în maniera descrisă mai înainte.
Compusul de formula IB poate fi produs de asemenea utilizând următoarea schemă de reacție:
R^CHjCHO^^CHjCW^CH/ÎHOij-aizCHOH
R1 R2 R3 L
Ă1 A2 ' R3 R4
RCHCHaCHO^CHjCHO^CHaCHO^-CHjCHO - — C-O Ă’ A2 R3 R4 z
(HI)
NHj-rrferferon
NH--interferon (l-B) în care 40
R, Rv R2, R3, R4, R5, m, x, și y sunt ca mai sus.
în această schemă de reacție, PEGalcool este condensat cu compusul de formula IV pentru a se obține compusul 45 de formula III. în această reacție, compusul de formula IIB se formează ca intermediar care apoi reacționează cu un al doilea mol de alcool-PEG pentru a produce compusul de formula III. în realizarea acestei reacții, PEG-alcoolul este prezent într-o cantitate de cel puțin 2 moli pe mol de compus de formula IV. în acest procedeu poate fi
RO 112730 Bl utilizată orice metodă convențională de condensare a unui alcool cu un carbonat. Compusul de formula III este reacționat cu interferon pentru a forma conjugatul de formula IB în modul descris pentru transformarea compusului de formula HA la compusul de formula IA. Funcție de cantitatea de grupări amino libere conținute de către proteină, condensarea compusului de formula III cu proteina duce la obținerea unui amestec de conjugate care pot fi separate în componentele lor individuale în maniera descrisă mai înainte pentru separarea conjugatului de formula IA.
Conjugatul polimer din prezenta invenție se utilizează în compoziții farmaceutice drept compus activ alături de un purtător inert din punct de vedere terapeutic la tratamentul și profilaxia afecțiunilor imunomodulatorii.
Compozițiile farmaceutice din prezenta invenție, utilizate în controlul sau prevenirea bolilor, cuprind un conjugat cu acțiune imunomodulatoare de formula generală I, și un material purtător inert din punct de vedere terapeutic, netoxic și acceptabil din punct de vedere terapeutic. Compozițiile farmaceutice care urmează să fie utilizate, pot fi formulate și dozate într-un mod care concordă cu o practică medicală bună, având în vedere afecțiunea de tratat, starea pacientului, locul de eliberare a conjugatului proteic, metoda de administrare și alți factori, cunoscuți practicienilor.
Conjugatul cu acțiune imunomodulatoare din prezenta invenție prezintă o serie de avantaje:
- are aceeași utilitate ca și proteina utilizată pentru formarea conjugatului. Prin urmare, acest conjugat este activ din punct de vedere terapeutic în același mod ca și proteina de la care se formează și poate fi utilizat în același mod ca și proteina însăși fără producerea de răspuns imun nedorit care poate fi asociat cu administrarea proteinei simple la subiecți;
- utilizarea reactivilor de formulele IIA, IIB și III în care cel puțin unul dintre R^ R2, R3, R4 este alchil inferior, în special metil (reactivi substituiți cu alchil) deter mină o îmbunătățire neașteptată a randamentului în conjugat, adică proteină polietilenglicolată, atunci când sunt utilizați reactivi substituiți cu alchil în comparație cu reactivii corespunzători nesubstituiți. Reactivii substituiți cu alchil duc la obținerea a cel puțin de două ori cantitatea de conjugate în același timp de reacție comparativ cu reactivii corespunzători nesubstituiți atunci când se produc astfel de conjugate.
Dacă sunt administrate pacienților pentru scopuri terapeutice, conjugatele de formulele IA și IB obținute din reactivii substituiți descriși mai sus au un timp de înjumătățire in vivo, crescut în mod neașteptat, în curentul sanguin al pacientului prin comparație cu conjugatele formate din reactivii corespunzători nesubstituiți. Deși timpul de înjumătățire in vivo este direct porțional cu greutatea moleculară a conjugatului, un conjugat produs dintr-un reactiv substituit va avea în mod surprinzător un timp de înjumătățire tot atât de îndelungat ca și un conjugat de greutate moleculară mai mare obținute din reactiv nesubstituit. Un timp de înjumătățire mai îndelungat în curentul sanguin al pacientului pentru un agent terapeutic conferă eficiență mărită la administrarea agentului la pacient. De exemplu, conjugatele obținute din reactivi substituiți cu alchil pot fi administrate mai puțin frecvent și/sau în cantități mai mici decât conjugatele obținute din reactivii corespunzători nesubstituiți. Pentru a mări eficiența administrării conjugatelor de proteină cu polietilenglicol, active din punct de vedere biologic, au fost utilizate greutăți moleculare crescute ale polietilenglicolilor atunci când au fost formate aceste conjugate cu proteină. Totuși, eficacitatea biologică a conjugatului IFN descrește odată cu creșterea greutății moleculare, totuși, prin utilizarea conjugatelor din această invenție obținute cu reactivi substituiți, eficiența administrării este mărită de cazul utilizării conjugatelor corespunzătoare nesubstituite cu creșterea mai mică a greutății moleculare.
în cele ce urmează se dau exemple de realizare a invenției în legătură și cu fig. 1...3, care reprezintă:
RO 112730 Bl
-fig. 1, comportamentul în timp a modificării PEG cu compusul din exemplul 7;
-fig.2,comportamentul în timp a modificării PEG cu compusul din exemplul 5;
-fig.3,comparație între modificarea PEG cu compusul din exemplul 1 (în partea stângă] și din exemplul 3 (în partea dreaptă].
Așa cum se utilizează în exemple, Jeffamine M-2O7O este un polimer monometoxipolioxialchilen propilaminic de greutate moleculară medie de 2070, derivat de propilenă și etilenoxid care este compus dintr-un polietilenglicol de bază și conține în medie 30% grupări de propilenoxid incorporate în mod întâmplător.
Jeffamida-M-1000 este un polimer monometoxipolialchilen propilamină de greutate moleculară medie de 1000, derivat de propilenă și etilenoxid care este compus dintr-un polietilenglicol de bază conținând în medie 14% grupări de propilenoxid încorporate în mod specific în care x este o medie de 18,6, y este o medie de 1,6 și z este □ (x, yși z sunt utilizați aici cu aceleași semnificații cu cele descrise mai sus).
Toți reactivii descriși în aceste exemple pot fi stocați deshidratați în sticlă de culoare închisă la 4°C până se transformă în ace. Pentru fiecare modificare sunt utilizate alicotele proaspete.
Exemplul 1. Prepararea de a, aoxometilen bis[m-metoxipoli(oxi-1,2-etandiil)] SRU 111
Dintr-o suspensie de 1,5 g MPEG (metoxipolietilenglicol) (greutate moleculară 5DDD) în 80 ml de toluen anhidru sunt distilați 50 ml de solvent. Soluția este apoi răcită și se adaugă 30,5 mg de di-2piridilcarbonat. Amestecul este apoi refluxat timp de 24 de ore. Soluția este apoi răcită și precipitatul rezultat este filtrat și spălat cu un volum mic de toluen urmat de dietileter. Solidul a fost apoi uscat sub vid înaintat, pentru a da 0,6 g de a,aoxometilen bis[G>-metoxipoli(oxi-1,2-etandiil)] SRU 111 sub forma unei pulberi albe. Interferonul modificat cu PEG a fost preparat prin metoda 1 descrisă mai jos.
Prepararea de interferon-α modificat cu PEG
Metoda 1: lnterferonul-α recombinat în cantitate de 5 mg de proteină pe ml distilat cu o soluție tampon conținând 5 mM acetat de sodiu, pH 5,0, 120 mM NaCI. Se adaugă tiocianat de potasiu pentru a obține o concentrație finală de 0,5 M, și pH-ul se ajustează prin adăugarea unei zecimi de volum de 1 M Tricinăhidroxid de sodiu, pH 11,9, pentru a obține o soluție cu pH final de 10.
Reactivul PEG se adaugă la proteină într-un raport molar de 3:1, sub formă solidă sau dizolvat în DMSO (volumul de DMSO este mai puțin de 10% din total). Modificarea a fost lăsată să se desfășoare la temperatura camerei pentru un timp de la 30 mi la 4 h, urmată de adăugarea a 1 M L-glicină (pH 6,3) până la o concentrație finală de 20 mM pentru a opri modificări suplimentare. Proteina modificată cu PEG este precipitată prin adăugarea de 3,5 M sulfat de amoniu, 50 mM fosfat de amoniu, pH 7,0, până la o concentrație finală de 1,1 M sulfat de amoniu (1,0 M sulfat de amoniu pentru un PEG -1000), precipitatul este colectat prin centrifugare, este spălat și redizolvat în 25 mM acetat de amoniu, pH 5,0. Proteinele modificate cu PEG sunt purificate prin cromatografie pe o coloană de schimb hidrofobic (de exemplu 75 x 7,5 mm) cum ar fi BioRad TSK fenil-5.PW sau Tayapearl-650 M, utilizând un gradient de descreștere sulfat de amoniu în 50 mM fosfat de sodiu, pH 7,0. în mod alternativ, PEG-IFN-ul se poate purifica prin filtrare pe gel pe o coloană Sephacryl S-200 (de exemplu 90 x 3,2 cm) (Pharmacia) care se echilibrează în 25 mM acetat de sodiu (pH 5,0), 200 mM NaCI. Proteina modificată cu PEG este identificată prin SDSPAGE. Proteina eluată de pe coloană corespunzând la interferon având una (PEGJFN) sau două (PEG^-IFN) legături PEG sunt reunite, concentrate și proteina este determinată prin absorbanță la 280 nm sau prin determinare colorimetrică (Pierce). PEG-IFN-ul este păstrat la 4°C în tampon conținând 50 mM fosfat de sodiu, pH 7,0, 0,3 M sulfat de amoniu.
RO 112730 Bl
Metoda 2: Interferonul α-A cu o concentrație de proteină de aproximativ 6 mg pe ml, este dializatîn 5 mM acetat de sodiu, pH 5,0, 0,12 M clorură de sodiu. Concentrația proteinei se determină prin măsurarea absorbției la 280 pm utilizând 1,0 mg'1ml, drept coeficient de extincție. Soluția de proteină se amestecă cu reactivul modificat într-un raport molar de 3:1 proteină la reactiv.
Reacția de modificare este inițiată prin ajustarea pH-ului la 10,0 utilizând o zecime de volum de □, 1 M Na^Cț-NaOH, pH 10,7. După incubare la temperatura camerei timp de o oră, reacția este stopată prin adăugarea a 1 /20 volum de 1 M glicină, pH 7,5. După 3-5- min, pH-ul este descrescut la 5,0-6,0 prin adăugarea a 1 /20 volum de 1 M acetat de sodiu, pH 4,0.
Soluția conținând PEG-interferon, reactiv stopat și interferon nemodificat este diluată de patru ori cu 40 mM acetat de amoniu, pH 4,5 și este încărcat într-o coloană CM-celuloză (Whatman CM-52, aproximativ 0,5 ml rășină pe mg proteină). După spălarea coloanei cu 5 volume de 40 mM acetat de amoniu, pH 4,5, PEGinterferonul și interferonul nemodificat sunt eluați utilizând un gradient liniar de clorură de sodiu (0-0,5 M) în 40 mM acetat de amoniu, pH 4,5. Fracțiunile conținând proteină sunt identificate prin absorbanță la 280 nm, și fracțiunea conținând PEGinterferon se identifică prin SDS-PAGE.
PEG-interferonul este purificat suplimentar prin cromatografie filtrantă pe gel cu excludere funcție de dimensiune pe o coloană conținând rășină Sephacryl-S200 (Pharmacia IKB). Fracțiunile eluate de pe coloană sunt analizate prin SDSPAGE și se reunesc materialele de vârf conținând PEG-interferon.
Interferonul este incubat cu de 3 ori execes din fiecare reactiv timp de 0,25, 1,5 sau 24 ore. Alicotele sunt îndepărtate, reacția este oprită cu glicerină și se face analiza pe un gel 15% SDS-PAGE. S este marcajul pentru standardele greutăților moleculare ale proteinelor, Ί este marcajul pentru interferon.
Exemplul 2. Prepararea de α,αoxometilen bis[ω-metaxipolifoxi-1,2-etandiil]] SRU 28,3
Prin procedeul descris în exemplul 1, MPEG-ul este transformat în α,αoxometilenbis[G>-metoxipoli(oxi-1,2-etan-diil)] SRU 28,3 și interferonul modificat cu PEG este preparat utilizând acest reactiv prin metoda 1 descrisă în exemplul 1.
Exemplul 3. Prepararea a-metil-w[2[[[2-piridiniloxi]carbonil]oxi]-etoxi]-poli-(oxi1,2-etandiil] SRU 111,7
Dintr-o soluție din 1 g MPEG de greutate moleculară 5000 dizolvat într-un volum de 30 ml CH2CI2 anhidru se distilă 10 ml de solvent. Soluția se răcește la temperatura camerei și se adaugă 132 mg (0,6 mM) carbonat de di-2-piridiil și mg de DMAP.
Soluția rezultată este agitată apoi timp de 14 h și solventul este îndepărtat sub vid. Reziduul se triturează cu dietilester și precipitatul rezultat este filtrat. Produsul este apoi dizolvat îm 7 ml glimă anhidră, este încălzit pentru a produce dizolvarea și soluția rezultată este lăsată să se răcească și să stea la temperatura camerei timp de mai multe ore. Precipitatul rezultat este apoi filtrat și spălat cu 2 x ml glimă anhidră. Solidul este uscat apoi într-o etuvă sub vid în curent de azot pentru a da 0,7 g de a-[[(2-piridiniloxi)carbonil]-<Ometoxipoli-(oxi-1,2-etandiil] SRU 111,7.
Analiză. Calculat pentru CgH11N04 (CH^Oh, 7 : C 54,57; H 9,02; N 0,28. GăsitC 54,51; H 9,19; N 0,28.
Interferonul modificat cu PEG se prepară utilizând acest reactiv prin metoda 1 descrisă în exemplul 1.
Exemplul 4. Prepararea a-[(2piridiniloxi]carbonil]M-metoxipoli-[oxi-1,2etandiil] SRU 225
Prin procedeul descris în exemplul 3 se transformă MPEG de greutate moleculară 10000 în cc-[(2-piridiniloxi]carbonil)<o-metoxipoli-(oxi-1,2-etandiil) SRU 225.
Analiză. Calculat pentru CgHq^QJCH, CH, 0^25 : C 54,54; H 9,08; N0,14. Găsit: C 54,54; H 9,12; N 0,11.
Interferonul modificat cu PEG se prepară utilizând acest reactiv prin metoda
RO 112730 Bl descrisă în exemplul 1.
Exemplul 5. Prepararea de a-metilω[2-[2-[(2-piridiniloxi]carbonil] oxi]propoxi]poli(oxi-1, 2-etandiil) SRU 64,7 □intr-o soluție din 0,5 mg a-2-[2- 5 (hidroxipropoxi)propil]-<d-metoxipoli[oxi-1,2etandiil) SRU 64,7 în 40 ml de CH2CI2 anhidru se distilă 15 ml de solvent. La soluție se adaugă apoi 108 mg de di-2 piridil carbonat, 4 mg de DMAP și mai multe bile de sită moleculară 4A. Amestecul este agitat peste noapte, este filtrat și solventul este apoi îndepărtat sub presiune redusă. Reziduul se purifică cu ajutorul cromatografiei cu excludere dimensională.
Acest reactiv corespunde unui compus cu formula:
o
CH3-O-(CH2CH2O)nCH2CHOCH2CH -
CH3 ch3 (ΠΒ-1) în care n este circa 64. 15
Aceasta corespunde unei greutăți moleculare a polimerului de circa 3000 daltoni.
Interferonul modificat cu PEG este preparat prin metoda 1 descrisă în exem- 20 piui 1.
Interferonul este incubat cu de 3 ori sau de 10 ori exces de reactiv pe perioadele de timp indicate ca în Figura
1. La momentele indicate sunt îndepărtate 25 alicotele, reacția este oprită cu glicerină, și se face analiza pe un gel 15% SDS_PAGE. S este marcajual pentru standardele de greutate moleculară a proteinei, I este marcajul pentru 30 interferon.
Exemplul G. Prepararea a-metilω[2-[2-[[(2-piridiniloxiJcarbonil] oxi]propoxi]propoxi]poli[oxi-1,2-etandiil) SRU 110 35
Prin procedeul descris în exemplul 5, se transformă a-2-[2-(hidroxipropoxi]propil]-o-metoxipoli(oxi-1,2-etandiil)SRU 110în a-metil-G)[2-[2-[(2-piridiniloxi]carboniljoxij-propoxi] propoxi]poli(oxi-1,2-etandiil) 4 o SRU 110.
Acest reactiv (IIB-2) corespunde celui descris în exemplul 5 (IIB-I) cu excepția faptului că n este circa 110 ceea ce corespunde la circa 5000 daltoni.
Interfefonul modificat cu PEG este preparat utilizând acest reactiv prin metoda 1 din exemplul 1.
Exemplul 7. Prepararea de metiloxiran, polimer cu oxiran, [2-[[(2-piridiniloxijcarboniljamino ]propil]metil eter (M0/0=10/32)
Dintr-o soluție din 1 g Jeffamine M-2D7D (Texaco Chemical Co.) în 40 ml CHgCIg anhidru se distilă 15 ml de solvent. Soluția se răcește la D°C și se adaugă 215 mg de carbonat de c/A2-piridil. Soluția rezultată este agitată încă 4 h la 0°C după care solventul se îndepărtează la presiune redusă. Reziduul este purificat apoi cu ajutorul a două coloane cu excludere dimensională atașate în succesiune (500 Â și 1DD0 Â). Produsul prezintă două benzi în UV la 232 nm și la 310 nm.
Acest reactiv corespunde unui compus cu formula
CH3OCH2CH2O(CH2CHO)n-CH2CH—NH
M CH3
(ΠΑ-1)
RO 112730 Bl în care R5 este H, R2 este H sau metil, și ca o distribuție medie, n este 32 dacă R2 este H și n este 10 dacă (¾ este metil.
Interferonul modificat cu PEG este preparat prin metoda 2 descrisă în 5 exemplul 1.
Interferonul (5 mg/ml) este incubat cu de 10 ori, 20 ori, sau 40 ori exces de reactiv, față de proteină, pe perioadele de timp indicate în 25 mM Tricine (pH) io 10,0), 0,5 M KSCN, 100 mN NaCI. LA diverși timpi sunt îndepărtate alicotele, reacția este oprită cu glicerină și se face analiza pe un gel 15% SDF-PAGE. în tabel, I este pentru interferon. 15
Exemplul 8. Prepararea de metiloxiran, polimer cu oxiran, [2-[[[3-metil-2piridiniloxiJcarboniljamino]propil]metileter (MO/O = 10/32]
Prin procedeul descris în exemplul 20 7, 1 g de Jeffamino M-207D este reacționat cu carbonat de b/s(3-metil-2 piridil) pentru a da metiloxiran, polimer cu oxiran, [2-[[(3-metil-2-piridiniloxi)carbonil]amino]propil]metil eter [MO/O = 10/32).
Acest reactiv (IIA-2) corespunde celui descris în exemplul 7 (IIA-1) cu excepția că R5 este CH3.
Interferonul modificat cu PEG este preparat utilizând acest reactiv prin metoda 1 descrisă în exemplul 1.
Exemplul 9. Prepararea de metiloxiran, polimer cu oxiran, [2-[[(2-piridiniloxi]carbonil]amino]propil]metileter, bloc (MO/O = 1,6/18,6]
Prin procedeul descris în exemplul 7, 0,6 g de Jeffamină M-1000 (Texaco Chemical Co.) sunt reacționate cu 155,6 mg de carbonat de di-2-piridil pentru a da metioxiran, polimer cu oxiran,[2-[[(2-oxi] carbonil)amino]propil]metil eter, bloc (MO/O = 1,6/18,6).
Această reacție conduce la un compus cu formula:
o c n
CHaOiCHîCHzO^^CHjCHO)! 6CH2CH- N z '0-UN ') CH3 ch3 (IIA-3 ) având media indicată a distribuției unităților 25 în produsul polimeric.
Interferonul modificat cu PEG este preparat utilizând acest reactiv prin metoda 1 descrisă în exemplul 1.
Activitatea antivirală a interferonului. 30
A fost determinată activitatea antivitală a interferonului și a interferonului modificat cu PEG (Rubenstein, et. al., (1981) J. Virol. 37: 755-758; Familletti, et. al., (1981) Methods Enzymol. 78:387- 35 394). Toate testele au fost standardizate față de control. Interferonul standard utilizat în test avea o activitate specifică de 2 x 108 unități pe mg de proteină.
Condițiile utilizate pentru modificarea 4 o interferonului s-au bazat pe protocoalele optimizate descrise. Modificarea cu PEG a fost analizată prin SDS-PAGE pentru determinarea transformării interferonului în mono-PEG-interferon de-a lungul a diverse timpuri de incubare (reactivitate chimică], și a distribuției în diferite specii de conjugate PEG-interferon (selectivitate de situs). în testul SDS-PAGE, speciile modificate cu PEG au fost observate ca migrând mai încet, sub formă de bandă, pe gel. Atât monoPEG- cât și diPEGinterferonii au fost obținuți în cantitate suficientă astfel încât aceste specii să poată fi purificate din amestecurile de reacție prin cromatografie de interacție hidrodobică. Interferonii modificați cu PEG purificați au fost testați pentru activitatea antivirală comparativ cu standarde interferon-a2A nemodificate. Greutățile moleculare ale polimerilor utilizați și activitatea antivirală a unor derivați PEG sunt descrise în tabelul următor.
RO 112730 Bl
Proprietățile fizice ale reactivilor PEG și activitățile biologice ale conjugatelor proteinice
Compus din exemplul: Polimer Greutate Moleculară Activitate Antivirală (% control)
monoPEG diPEG
4 10000 25 2
3 5000 40 4
1 5000 40 ND
6 5000 40 ND
5 3000 60 ND
7 2070 60 ND
2 1300 70 ND
9 1000 100 40
MD = nedeterminat.
Revendicări aceea că este reprezentat prin formula generală I

Claims (15)

1. Conjugat polimer cu acțiune imunomodulatoare, caracterizat prin
O
RO-tCHjCHOJ/CHîCHOHCHaCHO^-CHîCH-W/ M i· k l? 4*
NH— interferon (I) în care R este alchil inferior; 20
Rt Ρξ· Ra sunt H sau alchil inferior; m este selectat dintre numere întregi > 1 până la numărul de grupări amino accesibile în interferon;
W este O sau NH; 25 x este un număr întreg între 1 și 10OO și fiecare yșiz este un număr întreg de la O la 1000, și suma lui x și y și z este de la 3 la 1000, cu condiția ca cel puțin unul dintre Rn R2, R3 și R4, este alchil 30 inferior;
x, y și z sunt astfel selectați încât greutatea moleculară a unității polimere din conjugat este în intervalul de la circa 300 daltoni până la circa 30000 daltoni. 35
2. Conjugat conform revendicării
1, caracterizat prin aceea că m este 1.
3. Conjugat conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că R este metil.
4. Conjugat conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că x, y și z sunt astfel selectați, încât greutate moleculară a unității polimere din conjugat este în intervalul de la circa 1000 până la circa 5000 daltoni, preferabil în intervalul de la circa 1000 până la circa 2200.
5. Conjugat conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că x și y sunt de la 5 la 500 și z este până la 4, prefe
RO 112730 Bl rabil xeste de la 10 la 100, yeste de la 1 la 10 și z este □.
6. Conjugat conform revendicării
1, caracterizat prin aceea că interferonul este interferon a2A. 5
7. Conjugat conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că W este NH; m este 1; R, R2 și R4 sunt Chk, R] este H, x este 18, 6 y este 1,6 și z este O.
8. Procedeu pentru prepararea unui conjugat polimer cu acțiune imunomodulatoare, caracterizat prin aceea că, cuprinde reacționarea unui intermediar cu formula II sau cu formula III cu interferon sau o sare a acestuia urmat de izolarea produsului obținut din amestecul de reacție.
în care
R este alchil inferior,
Rv R2, R3, R4 și R5 sunt H sau alchil inferior,
W este NH sau O;
x este un număr întreg între 1 și 1000 și fiecare dintre y și zeste un număr întreg până la 1000 și suma lui x, y și z este de la 3 la 1000, iar suma lui x, y și z este de la 3 la 1000, cu condiția că dacă W este NH sau dacă W este □ și R5 este H cel puțin unul dintre Rv R2, R3 și R4 este alchil inferior;
RO-fCHzCHO^CHjCHOHCHzCHO^-CHaCHO · — C-0
11 12 J, 3 li
R R R R (III) în care
R este alchil inferior,
Rv R2, R3 și R4 sunt H sau metil, x este un număr întreg de la 1 la 1000 și fiecare dintre y și z este un număr întreg de la O la 1003 și suma lui x, yși z este de la 3 la 1000.
9. Intermediar pentru obținerea unui conjugat polimer cu formula I, caracterizat prin aceea că are formula generală II (II)
RO 112730 Bl în care
R este alchil inferior,
Rv R3, R3, R4 și R5 sunt H sau alchil inferior;
W este NH sau □; 5 x este un număr întreg 1 și 1OOO și fiecare dintre y și z este un număr întreg până la 1000 și suma lui x, yși zeste de la 3 la 1 000, cu condiția că dacă W este NH sau dacă W este O și R5 este H și cel 10 puțin unul dintre Rp Rg, Rj și R este alchil inferior, iar x și y și z sunt astfel selectați încât greutatea moleculară a compusului respectiv este în intervalul de la circa 300 daltoni până la circa 30000 daltoni.
10. Intermediar conform revendicării 9, caracterizat prin aceea că R este metil.
11. Intermediar conform revendicării 9, caracterizat prin aceea că, x este de la 10 la 100, y este de la 1 la 10 și z este de la O la 4.
12. Intermediar pentru obținerea unui conjugat polimer cu formula I, caracterizat prin aceea că are formula generală III
RO^CHzCHO^CHjCHO^-iCHzCHOk-CHzCHO
R1 R2 R3 R4 în care 20
R este alchil inferior
Rv R2, R3 și R4 sunt H sau metil, zeste un număr întreg de la 1 la 1000 și fiecare dintre yși zeste un număr întreg de la O la 1000 și suma lui x, y și z este 25 de la 3 la 1000,' x, yși z fiind astfel selectați încât greutatea moleculară a compusului este în intervalul de la circa 300 daltoni la circa 30000 daltoni. 30
13. Intermediar conform revendi- cării 12, caracterizat prin aceea că cel (III) puțin unul dintre R.,, (¾, (¾ și R, sunt alchil inferior.
14. Intermediar conform revendicării 12, caracterizat prin aceea că R este metil.
15. Conjugat conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că se utilizează drept compus activ în compoziții farmaceutice, alături de un purtător inert din punct de vedere terapeutic, la tratamentul și profilaxia afecțiunilor imunomodulatorii cum ar fi boli neoplazice sau boli infecțioase.
RO93-01141A 1992-08-26 1993-08-23 Conjugat polimer cu actiune imunomodulatoare, procedeu si intermediar pentru obtinerea acestuia RO112730B1 (ro)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US07/935,770 US5382657A (en) 1992-08-26 1992-08-26 Peg-interferon conjugates

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RO112730B1 true RO112730B1 (ro) 1997-12-30

Family

ID=25467637

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RO93-01141A RO112730B1 (ro) 1992-08-26 1993-08-23 Conjugat polimer cu actiune imunomodulatoare, procedeu si intermediar pentru obtinerea acestuia

Country Status (37)

Country Link
US (1) US5382657A (ro)
EP (1) EP0593868B1 (ro)
JP (1) JP2859105B2 (ro)
KR (1) KR100295520B1 (ro)
CN (3) CN1039015C (ro)
AT (1) ATE165102T1 (ro)
AU (1) AU668742B2 (ro)
BG (1) BG98067A (ro)
BR (1) BR9303469A (ro)
CA (1) CA2103829C (ro)
CZ (1) CZ169393A3 (ro)
DE (1) DE69317979T2 (ro)
DK (1) DK0593868T3 (ro)
EE (1) EE9400151A (ro)
ES (1) ES2116376T3 (ro)
FI (1) FI109765B (ro)
HR (1) HRP931094A2 (ro)
HU (1) HUT67013A (ro)
IL (1) IL106750A0 (ro)
IS (1) IS4067A (ro)
LT (1) LT3174B (ro)
LV (1) LV10907B (ro)
MW (1) MW7693A1 (ro)
MX (1) MX9305146A (ro)
MY (1) MY131445A (ro)
NO (1) NO933028D0 (ro)
NZ (2) NZ248452A (ro)
OA (1) OA09850A (ro)
PH (1) PH30460A (ro)
PL (1) PL300194A1 (ro)
RO (1) RO112730B1 (ro)
SI (1) SI9300423A (ro)
SK (1) SK89893A3 (ro)
UY (1) UY23635A1 (ro)
YU (1) YU56693A (ro)
ZA (1) ZA936098B (ro)
ZW (1) ZW11193A1 (ro)

Families Citing this family (291)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2006596C (en) * 1988-12-22 2000-09-05 Rika Ishikawa Chemically-modified g-csf
ATE289350T1 (de) 1989-04-21 2005-03-15 Amgen Inc Tnf-rezeptor, tnf bindende proteine und dafür kodierende dnas
US7264944B1 (en) 1989-04-21 2007-09-04 Amgen Inc. TNF receptors, TNF binding proteins and DNAs coding for them
IL95031A (en) 1989-07-18 2007-03-08 Amgen Inc Method for the production of a human recombinant tumor necrosis factor inhibitor
US6143866A (en) * 1989-07-18 2000-11-07 Amgen, Inc. Tumor necrosis factor (TNF) inhibitor and method for obtaining the same
US6552170B1 (en) 1990-04-06 2003-04-22 Amgen Inc. PEGylation reagents and compounds formed therewith
US5595732A (en) * 1991-03-25 1997-01-21 Hoffmann-La Roche Inc. Polyethylene-protein conjugates
US5880131A (en) * 1993-10-20 1999-03-09 Enzon, Inc. High molecular weight polymer-based prodrugs
US5919455A (en) 1993-10-27 1999-07-06 Enzon, Inc. Non-antigenic branched polymer conjugates
CA2176229C (en) * 1993-11-10 2003-05-27 Carl W. Gilbert Improved interferon polymer conjugates
US5951974A (en) * 1993-11-10 1999-09-14 Enzon, Inc. Interferon polymer conjugates
IL112583A0 (en) * 1994-02-08 1995-05-26 Amgen Inc Oral delivery of chemically modified proteins
US5730990A (en) * 1994-06-24 1998-03-24 Enzon, Inc. Non-antigenic amine derived polymers and polymer conjugates
US20030053982A1 (en) * 1994-09-26 2003-03-20 Kinstler Olaf B. N-terminally chemically modified protein compositions and methods
DE4435087A1 (de) * 1994-09-30 1996-04-04 Deutsches Krebsforsch Konjugat zur Behandlung von Infektions-, Autoimmun- und Hauterkrankungen
US5824784A (en) * 1994-10-12 1998-10-20 Amgen Inc. N-terminally chemically modified protein compositions and methods
US5738846A (en) * 1994-11-10 1998-04-14 Enzon, Inc. Interferon polymer conjugates and process for preparing the same
JP2758154B2 (ja) * 1995-04-06 1998-05-28 エフ・ホフマン−ラ ロシユ アーゲー インターフェロンを含む液体製剤
DE19514087A1 (de) * 1995-04-13 1996-10-17 Deutsches Krebsforsch Konjugat aus einem Wirkstoff, einem Polyether und ggfs. einem nicht als körperfremd angesehenen, nativen Protein
JP2000507917A (ja) 1995-11-02 2000-06-27 シェーリング コーポレイション 持続的低用量サイトカイン注入治療
US5908621A (en) 1995-11-02 1999-06-01 Schering Corporation Polyethylene glycol modified interferon therapy
TW517067B (en) 1996-05-31 2003-01-11 Hoffmann La Roche Interferon conjugates
TW555765B (en) * 1996-07-09 2003-10-01 Amgen Inc Low molecular weight soluble tumor necrosis factor type-I and type-II proteins
DE69838552T2 (de) 1997-07-14 2008-05-21 Bolder Biotechnology, Inc., Louisville Derivate des wachstumshormons und verwandte proteine
US7495087B2 (en) * 1997-07-14 2009-02-24 Bolder Biotechnology, Inc. Cysteine muteins in the C-D loop of human interleukin-11
US20080076706A1 (en) 1997-07-14 2008-03-27 Bolder Biotechnology, Inc. Derivatives of Growth Hormone and Related Proteins, and Methods of Use Thereof
US6753165B1 (en) * 1999-01-14 2004-06-22 Bolder Biotechnology, Inc. Methods for making proteins containing free cysteine residues
US7270809B2 (en) * 1997-07-14 2007-09-18 Bolder Biotechnology, Inc. Cysteine variants of alpha interferon-2
KR100364938B1 (ko) * 1997-09-18 2002-12-18 에프. 호프만-라 로슈 아게 만성 씨형 간염의 치료를 위한 인테페론-알파와 아만타딘을 함유한 약제
US6180095B1 (en) * 1997-12-17 2001-01-30 Enzon, Inc. Polymeric prodrugs of amino- and hydroxyl-containing bioactive agents
AU1825299A (en) 1997-12-17 1999-07-05 Enzon, Inc. Polymeric prodrugs of amino- and hydroxyl-containing bioactive agents
US5981709A (en) * 1997-12-19 1999-11-09 Enzon, Inc. α-interferon-polymer-conjugates having enhanced biological activity and methods of preparing the same
US5985263A (en) * 1997-12-19 1999-11-16 Enzon, Inc. Substantially pure histidine-linked protein polymer conjugates
FR2774687B1 (fr) * 1998-02-06 2002-03-22 Inst Nat Sante Rech Med Lipopeptides contenant un fragment de l'interferon gamma, et leur utilisation dans des compositions pharmaceutiques
US6180096B1 (en) 1998-03-26 2001-01-30 Schering Corporation Formulations for protection of peg-interferon alpha conjugates
CZ302005B6 (cs) * 1998-03-26 2010-09-01 Schering Corporation Vodný prostredek PEG-interferon alfa konjugátu, jeho lyofilizát a výrobek jej obsahující
WO1999055377A2 (en) 1998-04-28 1999-11-04 Applied Research Systems Ars Holding N.V. Polyol-ifn-beta conjugates
ES2172288T3 (es) 1998-05-15 2002-09-16 Schering Corp Terapia de combinacion que comprende ribavirina e interferon alfa en pacientes que no han sido sometidos a tratamiento antiviral y que tienen infeccion cronica de hepatitis c.
WO1999061055A1 (en) * 1998-05-22 1999-12-02 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Bifunctional molecules and therapies based thereon
ITMI981148A1 (it) * 1998-05-22 1999-11-22 Therapicon Srl Utilizzo di lisozima c modificato per preparare composizioni medicinali per il trattamento di alcune gravi malattie
ID29285A (id) * 1998-06-08 2001-08-16 Hoffmann La Roche PENGGUNAAN PEG-IFN-α DAN RIBAVIRIN UNTUK PENGOBATAN HEPATITIS C KRONIS
US20030143662A1 (en) * 1998-06-16 2003-07-31 Cummings Richard D. Glycosulfopeptide inhibitors of leukocyte rolling and methods of use thereof
JP2002518354A (ja) * 1998-06-16 2002-06-25 ザ ボード オブ リージェンツ オブ ザ ユニヴァーシティー オブ オクラホマ 糖硫酸ペプチド、その合成方法および使用方法
US7223845B2 (en) 1998-06-16 2007-05-29 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Synthetic glycosulfopeptides and methods of synthesis thereof
SG2008070138A (en) 1998-10-16 2017-08-30 Biogen Ma Inc Polymer conjugates of interferon beta- 1a and their uses
EA005005B1 (ru) * 1998-10-16 2004-10-28 Байоджен, Инк. ГИБРИДНЫЙ ПОЛИПЕПТИД β1α-ИНТЕРФЕРОНА ЧЕЛОВЕКА, ЕГО МУТАНТНЫЕ ФОРМЫ И ПРОИЗВОДНЫЕ И СОДЕРЖАЩАЯ ИХ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ
US6660843B1 (en) * 1998-10-23 2003-12-09 Amgen Inc. Modified peptides as therapeutic agents
US8288126B2 (en) 1999-01-14 2012-10-16 Bolder Biotechnology, Inc. Methods for making proteins containing free cysteine residues
EP1144613B2 (en) 1999-01-14 2020-05-06 Bolder Biotechnology, Inc. Methods for making proteins containing free cysteine residues
KR100689212B1 (ko) * 1999-01-29 2007-03-09 암겐 인코포레이티드 Ｇｃｓｆ 결합체
PT1043026E (pt) 1999-04-08 2005-09-30 Schering Corp Terapeutica do melanoma
US6605273B2 (en) 1999-04-08 2003-08-12 Schering Corporation Renal cell carcinoma treatment
US6362162B1 (en) 1999-04-08 2002-03-26 Schering Corporation CML Therapy
US6923966B2 (en) 1999-04-08 2005-08-02 Schering Corporation Melanoma therapy
JO2291B1 (en) 1999-07-02 2005-09-12 اف . هوفمان لاروش ايه جي Erythropoietin derivatives
EP2241623A3 (en) 1999-07-07 2010-12-01 ZymoGenetics, Inc. Monoclonal antibody against a human cytokine receptor
AU4934299A (en) * 1999-07-15 2001-02-05 Kuhnil Pharm. Co., Ltd. Novel water soluble-cyclosporine conjugated compounds
US7431921B2 (en) * 1999-08-27 2008-10-07 Maxygen Aps Interferon beta-like molecules
US6531122B1 (en) * 1999-08-27 2003-03-11 Maxygen Aps Interferon-β variants and conjugates
US7144574B2 (en) * 1999-08-27 2006-12-05 Maxygen Aps Interferon β variants and conjugates
US6969524B1 (en) 1999-10-12 2005-11-29 Santen Pharamceutical Co., Ltd. Interferon complex and medicinal use thereof
BR0015506A (pt) 1999-11-12 2002-07-23 Maxygen Holdings Ltd Conjugados de interferon gama, métodos para sua preparação, composições farmacêuticas que compreendem ás moléculas e seu uso no tratamento de doenças
YU32402A (sh) 1999-11-12 2005-03-15 Maxygen Holdings Ltd. Konjugati gama interferona
AU2044001A (en) 1999-11-19 2001-05-30 Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Targeted bifunctional molecules and therapies based thereon
US6887842B1 (en) 1999-11-19 2005-05-03 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Modulating a pharmacokinetic property of a drug by administering a bifunctional molecule containing the drug
US7220552B1 (en) 1999-11-19 2007-05-22 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Bifunctional molecules and their use in the disruption of protein-protein interactions
AU2253301A (en) 1999-12-03 2001-06-12 Zymogenetics Inc. Human cytokine receptor
CZ20022727A3 (cs) 2000-01-10 2002-11-13 Maxygen Holdings Ltd Polypeptidový konjugát, způsob jeho výroby a farmaceutický prostředek
EP1908477A3 (en) * 2000-01-24 2008-06-11 Schering Corporation Combination of temozolomide and pegylated interferon-alpha for treating cancer
WO2001052882A1 (en) * 2000-01-24 2001-07-26 Schering Corporation Combination of temozolomide and pegylated interferon-alpha for treating cancer
EP1982732A3 (en) 2000-02-11 2011-06-08 Bayer HealthCare LLC Factor VII or VIIA-like conjugates
KR100353392B1 (ko) * 2000-03-13 2002-09-18 선바이오(주) 높은 생체 활성도를 갖는 생체 활성 단백질과 ｐｅｇ의결합체 제조방법
US6756037B2 (en) 2000-03-31 2004-06-29 Enzon, Inc. Polymer conjugates of biologically active agents and extension moieties for facilitating conjugation of biologically active agents to polymeric terminal groups
US6777387B2 (en) 2000-03-31 2004-08-17 Enzon Pharmaceuticals, Inc. Terminally-branched polymeric linkers containing extension moieties and polymeric conjugates containing the same
ES2320101T3 (es) * 2000-10-16 2009-05-19 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Eritropoyetina conjugada con mono-peg.
US20020169290A1 (en) * 2000-11-02 2002-11-14 Claus Bornaes New multimeric interferon beta polypeptides
ATE432986T1 (de) 2000-11-07 2009-06-15 Zymogenetics Inc Menschlicher rezeptor für tumor necrosis factor
JP2004532289A (ja) * 2001-02-20 2004-10-21 エンゾン ファーマシューティカルズ，インコーポレーテッド 末端分枝高分子リンカーおよびそれを含む高分子複合体
WO2002066516A2 (en) 2001-02-20 2002-08-29 Zymogenetics, Inc. Antibodies that bind both bcma and taci
PL367154A1 (en) 2001-02-27 2005-02-21 Maxygen Aps New interferon beta-like molecules
JP2004532624A (ja) 2001-03-02 2004-10-28 ザイモジェネティクス，インコーポレイティド マウスサイトカイン受容体
US6958388B2 (en) 2001-04-06 2005-10-25 Maxygen, Aps Interferon gamma polypeptide variants
US7038015B2 (en) * 2001-04-06 2006-05-02 Maxygen Holdings, Ltd. Interferon gamma polypeptide variants
WO2002083166A1 (en) * 2001-04-10 2002-10-24 Santen Pharmaceutical Co., Ltd. Interferon-polymer complexes and medicinal use thereof
ATE446771T1 (de) 2001-05-24 2009-11-15 Zymogenetics Inc Taci-immunoglobulin-fusionsproteine
WO2003000278A1 (en) * 2001-06-22 2003-01-03 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Ointments
MD2053C2 (ro) * 2001-07-10 2003-07-31 Национальный Научно-Практический Центр Превентивной Медицины Министерства Здравоохранения Республики Молдова Remediu cu acţiune interferonogenă
ATE376020T1 (de) 2001-08-22 2007-11-15 Bioartificial Gel Technologies Inc Verfahren zu herstellung von aktivierten polyethylenglykolen
JP2005517648A (ja) * 2001-12-07 2005-06-16 インターミューン インコーポレイテッド 肝炎ウイルス感染症を治療するための組成物および方法
KR100888371B1 (ko) 2002-01-17 2009-03-13 동아제약주식회사 가지 달린 고분자 유도체와 인터페론 결합체를 포함하는 항바이러스제
PT3025726T (pt) * 2002-01-18 2020-01-09 Biogen Ma Inc Compostos do polímero polialquileno e utilizações dos mesmos
US8003089B2 (en) * 2002-03-13 2011-08-23 Beijing Jiankai Technology Co., Ltd. Y shape branched hydrophilic polymer derivatives, their preparation methods, conjugates of the derivatives and drug molecules, and pharmaceutical compositions comprising the conjugates
IL164214A0 (en) * 2002-04-11 2005-12-18 Zymogenetics Inc Use of interleukin-24 to treat ovarian cancer
JP4409962B2 (ja) 2002-04-19 2010-02-03 ザイモジェネティクス，インコーポレイティド サイトカイン受容体
BR0311978A (pt) 2002-06-21 2005-03-22 Novo Nordisk Healthcare Ag Preparação, método para preparar a mesma, formulação farmacêutica, métodos para tratar de uma sìndrome responsiva ao fator vii, para prevenir hemorragias indesejáveis, para prevenir coagulação sanguìnea indesejável e para prevenir as reações mediadas pelo fator tecidual, e, uso de uma preparação
US7524931B2 (en) * 2002-07-03 2009-04-28 Maxygen Holdings Ltd. Full-length interferon gamma polypeptide variants
MXPA05000796A (es) * 2002-07-24 2005-04-19 Hoffmann La Roche Aditivos de acidos polialquilenglicolicos.
JP2006510589A (ja) * 2002-09-05 2006-03-30 ザ ジェネラル ホスピタル コーポレーション アシアロインターフェロンおよび肝臓癌の治療
JP2006508918A (ja) * 2002-09-05 2006-03-16 ザ ジェネラル ホスピタル コーポレーション 修飾されたアシアロインターフェロンおよびその使用
AU2003285286A1 (en) * 2002-09-27 2004-04-19 F. Hoffmann-La Roche Ag Conjugates of insulin-like growth factor binding protein-4 and poly (ethylene glycol)
US20040175359A1 (en) * 2002-11-12 2004-09-09 Desjarlais John Rudolph Novel proteins with antiviral, antineoplastic, and/or immunomodulatory activity
US7314613B2 (en) * 2002-11-18 2008-01-01 Maxygen, Inc. Interferon-alpha polypeptides and conjugates
KR101162908B1 (ko) * 2002-12-26 2012-07-06 마운틴 뷰 파마슈티컬즈, 인크. 수용체-결합 활성이 보존된, 사이토카인, 케모카인,성장인자, 폴리펩티드 호르몬 및 이들의 길항제의 중합체접합체
US9125880B2 (en) * 2002-12-26 2015-09-08 Mountain View Pharmaceuticals, Inc. Polymer conjugates of interferon-beta with enhanced biological potency
CA2509248A1 (en) * 2002-12-31 2004-07-22 Nektar Therapeutics Al, Corporation Polymeric reagents comprising a ketone or a related functional group
WO2004074345A2 (en) * 2003-02-19 2004-09-02 Pharmacia Corporation Carbonate esters of polyethylene glycol activated by means of oxalate esters
WO2004076474A2 (en) * 2003-02-26 2004-09-10 Intermune, Inc. Polyethylene glycol modified interferon compositions and methods of use thereof
WO2004078127A2 (en) * 2003-02-28 2004-09-16 Intermune, Inc. Continuous delivery methods for treating hepatitis virus infection
CA2458085A1 (en) 2003-03-21 2004-09-21 F. Hoffmann-La Roche Ag Transcriptional activity assay
CN101039957A (zh) 2003-05-16 2007-09-19 因特缪恩公司 合成的趋化因子受体配体及其使用方法
CN1910200A (zh) 2003-08-07 2007-02-07 津莫吉尼蒂克斯公司 Il－28和il－29的均一化制剂
GB0320638D0 (en) 2003-09-03 2003-10-01 Novartis Ag Organic compounds
EP1673387B1 (en) 2003-10-10 2010-09-15 Novo Nordisk A/S Il-21 derivatives
RS54573B1 (sr) 2003-10-14 2016-06-30 F. Hoffmann-La Roche Ltd Makrociklične karboksilne kiseline i acilsulfonamidi kao inhibitori replikacije hcv
ES2428358T3 (es) 2003-10-17 2013-11-07 Novo Nordisk A/S Terapia de combinación
US20050089952A1 (en) * 2003-10-22 2005-04-28 Akzo Nobel N.V. Apparatuses and processes for increasing protein PEGylation reaction yields
WO2005040758A2 (en) * 2003-10-24 2005-05-06 Intermune, Inc. Use of pirfenidone in therapeutic regimens
WO2005062949A2 (en) * 2003-12-23 2005-07-14 Intermune, Inc. Method for treating hepatitis virus infection
GB0500020D0 (en) 2005-01-04 2005-02-09 Novartis Ag Organic compounds
SG135176A1 (en) * 2004-02-02 2007-09-28 Ambrx Inc Modified human four helical bundle polypeptides and their uses
US7351787B2 (en) * 2004-03-05 2008-04-01 Bioartificial Gel Technologies, Inc. Process for the preparation of activated polyethylene glycols
RU2311930C2 (ru) * 2004-04-30 2007-12-10 Закрытое акционерное общество "ВЕРОФАРМ" Пэгилированный интерферон для борьбы с вирусной инфекцией
JP2008507298A (ja) 2004-05-19 2008-03-13 マキシジェン， インコーポレイテッド インターフェロンαポリペプチドおよび結合体
US20060018875A1 (en) * 2004-06-14 2006-01-26 Blatt Lawrence M Interferon compositions and methods of use thereof
CN102603895B (zh) * 2004-06-18 2016-09-28 Ambrx公司 新颖抗原结合多肽和其用途
WO2006091231A2 (en) * 2004-07-21 2006-08-31 Ambrx, Inc. Biosynthetic polypeptides utilizing non-naturally encoded amino acids
BRPI0513865A (pt) 2004-07-29 2008-05-20 Zymogenetics Inc métodos para tratar cáncer, para inibir a progressão de cáncer, para retardar o começo de cáncer, para reduzir a severidade de cáncer, e para inibir pelo menos uma das condições ou sintomas de cáncer, do linfoma não-hodgkin, do mieloma múltiplo, e de tumores da cabeça e o pescoço
MX2007001663A (es) 2004-08-12 2007-04-10 Schering Corp Formulacion de interferon pegilado estable.
EP1799713B1 (en) 2004-09-23 2014-11-05 VasGene Therapeutics, Inc. Polypeptide compounds for inhibiting angiogenesis and tumor growth
MX2007007581A (es) * 2004-12-22 2007-07-24 Ambrx Inc Composiciones de amino acil-arnt sintetasa y sus usos.
US7816320B2 (en) 2004-12-22 2010-10-19 Ambrx, Inc. Formulations of human growth hormone comprising a non-naturally encoded amino acid at position 35
WO2006073846A2 (en) * 2004-12-22 2006-07-13 Ambrx, Inc. Methods for expression and purification of recombinant human growth hormone
CN103690936A (zh) 2004-12-22 2014-04-02 Ambrx公司 经修饰的人类生长激素
JP2008532931A (ja) 2005-02-08 2008-08-21 ザイモジェネティクス， インコーポレイテッド 抗ｉｌ−２０、抗ｉｌ−２２および抗ｉｌ−２２ｒａ抗体ならびに結合パートナー、ならびに炎症における使用法
JP2008544746A (ja) 2005-05-12 2008-12-11 ザイモジェネティクス， インコーポレイテッド 免疫応答を調節するための組成物および方法
WO2007044083A2 (en) * 2005-05-18 2007-04-19 Maxygen, Inc. Evolved interferon-alpha polypeptides
CN101247821B (zh) * 2005-06-03 2013-01-23 Ambrx公司 经改良人类干扰素分子和其用途
MX2007015819A (es) * 2005-06-13 2008-02-22 Nastech Pharm Co Suministro de derivados peptidicos a traves de la mucosa.
EP1893632B1 (en) 2005-06-17 2015-08-12 Novo Nordisk Health Care AG Selective reduction and derivatization of engineered factor vii proteins comprising at least one non-native cysteine
AR054778A1 (es) 2005-06-17 2007-07-18 Novartis Ag Uso de sangliferina en hcv
CN101257925A (zh) * 2005-06-20 2008-09-03 派普根公司 人干扰素α类似物和干扰素τ的低毒长循环的嵌合体
US7695710B2 (en) 2005-06-20 2010-04-13 Pepgen Corporation Antitumor and antiviral combination therapies using low-toxicity, long-circulating human interferon-alpha analogs
WO2007000769A2 (en) * 2005-06-29 2007-01-04 Yeda Research And Development Co. Ltd. At The Weizmann Institute Of Science RECOMBINANT INTERFERON α2 (IFNα2) MUTANTS
GEP20105124B (en) 2005-07-25 2010-11-25 Array Biopharma Inc Novel macrocyclic inhibitors of hepatitis c virus replication
JP4829969B2 (ja) * 2005-08-18 2011-12-07 アンブルックス，インコーポレイテッド ｔＲＮＡ組成物、およびその使用
PT1931697E (pt) 2005-09-28 2010-12-06 Zymogenetics Inc Antagonistas de il-17a e il-17f e processos para a sua utilização
CN101415705B (zh) 2005-10-11 2011-10-26 因特蒙公司 抑制丙型肝炎病毒复制的化合物和方法
EP1937294A4 (en) * 2005-10-21 2009-11-04 Synageva Biopharma Corp GLYCOLIC AND GLYCOSYLATED THERAPEUTIC PROTEINS DERIVED FROM POULTRY
US20080171696A1 (en) * 2005-10-21 2008-07-17 Avigenics, Inc. Pharmacodynamically enhanced therapeutic proteins
HRP20110404T1 (hr) * 2005-11-08 2011-08-31 Ambrx Ubrzivači za modifikaciju ne-prirodnih aminokiselina i polipeptida ne-prirodnih aminokiselina
KR20080079643A (ko) * 2005-11-16 2008-09-01 암브룩스, 인코포레이티드 비-천연 아미노산을 포함하는 방법 및 조성물
AU2006326404B2 (en) * 2005-12-14 2011-11-03 Ambrx, Inc. Compositions containing, methods involving, and uses of non-natural amino acids and polypeptides
CA2636914C (en) 2006-01-12 2016-08-09 Kuniaki Yoshioka Oral composition containing interferon-.alpha.
CN100475270C (zh) 2006-01-20 2009-04-08 清华大学 一种治疗肿瘤的药物及其应用
CN101002945B (zh) 2006-01-20 2012-09-05 清华大学 一种用于肿瘤治疗的新型复合物
BRPI0710878A2 (pt) 2006-04-11 2015-03-31 Novartis Ag Compostos orgânicos e seus usos
AU2007248680C1 (en) * 2006-05-02 2014-01-23 Allozyne, Inc. Non-natural amino acid substituted polypeptides
US20080096819A1 (en) * 2006-05-02 2008-04-24 Allozyne, Inc. Amino acid substituted molecules
RU2008145084A (ru) 2006-05-24 2010-06-27 Ново Нордиск Хелс Кеа Аг (Ch) Аналоги фактора ix, имеющие пролонгированное время полужизни in vivo
EP2030628B1 (en) 2006-06-01 2012-08-15 Yun Cheng A peptide for preventing or treating liver damage and its derivant and the use
CN1911447B (zh) * 2006-06-30 2010-05-12 复旦大学 转铁蛋白-聚乙二醇-药物分子复合物及其制备药物的用途
EP1886685A1 (en) 2006-08-11 2008-02-13 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods, uses and compositions for modulating replication of hcv through the farnesoid x receptor (fxr) activation or inhibition
US20080131398A1 (en) * 2006-08-21 2008-06-05 United Therapeutics Corporation Combination therapy for treatment of viral infections
EP2064333B1 (en) * 2006-09-08 2014-02-26 Ambrx, Inc. Suppressor trna transcription in vertebrate cells
CA2663083A1 (en) * 2006-09-08 2008-03-13 Ambrx, Inc. Modified human plasma polypeptide or fc scaffolds and their uses
CN101541955B (zh) * 2006-09-08 2016-09-28 Ambrx公司 用于脊椎动物细胞的杂合抑制tRNA
AU2007325838B2 (en) 2006-11-22 2013-09-19 Bristol-Myers Squibb Company Targeted therapeutics based on engineered proteins for tyrosine kinases receptors, including IGF-IR
CN101219219B (zh) * 2007-01-10 2013-02-13 北京普罗吉生物科技发展有限公司 包含血管抑素或其片段的复合物、其制备方法及应用
ATE516814T1 (de) 2007-02-02 2011-08-15 Bristol Myers Squibb Co 10fn3 domain zur behandlung von krankheiten begleitet von unerwünschter angiogenese
BRPI0809583B1 (pt) 2007-03-30 2022-02-22 Ambrx, Inc Polipeptídeo fgf-21 modificado, composição compreendendo o mesmo, método para produzir o referido polipetídeo fgf-21 e célula compreendendo um polinucleotídeo
MX2009011870A (es) * 2007-05-02 2009-11-12 Ambrx Inc Polipeptidos de interferon beta modificados y usos de los mismos.
CA2707840A1 (en) 2007-08-20 2009-02-26 Allozyne, Inc. Amino acid substituted molecules
WO2009030066A1 (en) * 2007-09-04 2009-03-12 Biosteed Gene Expression Tech. Co., Ltd. Polyethylene glycol modified interferon alpha 2b and preparation method and applicatioins thereof
PL2196475T3 (pl) 2007-09-04 2012-10-31 Biosteed Gene Expression Tech Co Ltd Interferon alfa 2a zmodyfikowany rozgałęzioną cząsteczką glikolu polietylenowego, sposób jego syntezy i zastosowanie
ES2908934T3 (es) 2007-10-04 2022-05-04 Zymogenetics Inc ZB7H6 miembro de la familia B7 y composiciones y métodos relacionados
US8216571B2 (en) 2007-10-22 2012-07-10 Schering Corporation Fully human anti-VEGF antibodies and methods of using
ES2632504T3 (es) 2007-11-20 2017-09-13 Ambrx, Inc. Polipéptidos de insulina modificados y sus usos
PL2796466T3 (pl) 2007-12-07 2018-04-30 Zymogenetics, Inc. Humanizowane cząsteczki przeciwciała swoiste dla il-31
NZ620606A (en) 2008-02-08 2015-08-28 Ambrx Inc Modified leptin polypeptides and their uses
BRPI0822530B1 (pt) 2008-04-03 2022-03-22 Biosteed Gene Expression Tech. Co., Ltd Método de preparação de um hormônio de crescimento humano glicolado por polietileno (modificado por peg), hormônio do crescimento humano modificado por peg de menor peso molecular aparente e seu uso, preparação de hormônio do crescimento humano modificado por peg de menor peso molecular aparente e seu método de preparação e composição
AR071874A1 (es) 2008-05-22 2010-07-21 Bristol Myers Squibb Co Proteinas de dominio de armazon basadas en fibronectina multivalentes
US8658766B2 (en) 2008-06-27 2014-02-25 Zymogenetics, Inc. Soluble hybrid Fcγ receptors and related methods
PE20110426A1 (es) 2008-07-23 2011-07-01 Ambrx Inc Polipeptidos g-csf bovinos modificados
PT2337846T (pt) 2008-09-26 2018-04-05 Ambrx Inc Vacinas e microrganismos dependentes da replicação de aminoácidos não naturais
CN102232085A (zh) 2008-09-26 2011-11-02 Ambrx公司 修饰的动物促红细胞生成素多肽和其用途
EP2341924A4 (en) 2008-10-02 2013-01-23 David Gladstone Inst METHOD FOR THE TREATMENT OF HEPATITIS C VIRUS INFECTIONS
EP2408449A4 (en) 2009-03-18 2012-08-08 Univ Leland Stanford Junior METHOD AND COMPOSITIONS FOR TREATING FLAVIVIRIDAE VIRUS INFECTIONS
US8512690B2 (en) 2009-04-10 2013-08-20 Novartis Ag Derivatised proline containing peptide compounds as protease inhibitors
US20110182850A1 (en) 2009-04-10 2011-07-28 Trixi Brandl Organic compounds and their uses
EP2896404B1 (en) 2009-06-04 2017-08-02 Novartis AG Methods for identification of sites for IgG conjugation
US20110027229A1 (en) 2009-07-31 2011-02-03 Medtronic, Inc. Continuous subcutaneous administration of interferon-alpha to hepatitis c infected patients
EA201200650A1 (ru) 2009-10-30 2012-12-28 Бёрингер Ингельхайм Интернациональ Гмбх Курсы комбинированного лечения вируса гепатита с, включающие bi201335, интерферон-альфа и рибавирин
JP2013515080A (ja) 2009-12-21 2013-05-02 アンブルックス，インコーポレイテッド 修飾されているウシのソマトトロピンポリペプチドおよびそれらの使用
WO2011087810A1 (en) 2009-12-21 2011-07-21 Ambrx, Inc. Modified porcine somatotropin polypeptides and their uses
EP2569331A1 (en) 2010-05-10 2013-03-20 Perseid Therapeutics LLC Polypeptide inhibitors of vla4
US8765737B1 (en) 2010-05-11 2014-07-01 Demerx, Inc. Methods and compositions for preparing and purifying noribogaine
US8362007B1 (en) 2010-05-11 2013-01-29 Demerx, Inc. Substituted noribogaine
US9394294B2 (en) 2010-05-11 2016-07-19 Demerx, Inc. Methods and compositions for preparing and purifying noribogaine
EP3091028A1 (en) 2010-05-26 2016-11-09 Bristol-Myers Squibb Company Fibronectin based scaffold proteins having improved stability
CN102711871A (zh) 2010-06-16 2012-10-03 麦德托尼克公司 用于稳定药物递送装置中的药物的阻尼系统
US9586954B2 (en) 2010-06-22 2017-03-07 Demerx, Inc. N-substituted noribogaine prodrugs
US8741891B1 (en) 2010-06-22 2014-06-03 Demerx, Inc. N-substituted noribogaine prodrugs
US8802832B2 (en) 2010-06-22 2014-08-12 Demerx, Inc. Compositions comprising noribogaine and an excipient to facilitate transport across the blood brain barrier
US8637648B1 (en) 2010-06-22 2014-01-28 Demerx, Inc. Compositions comprising noribogaine and an excipient to facilitate transport across the blood brain barrier
EP2585065A1 (en) 2010-06-24 2013-05-01 Panmed Ltd. Treatment of hepatitis c virus related diseases using hydroxychloroquine or a combination of hydroxychloroquine and an anti-viral agent
US9358237B2 (en) 2010-07-23 2016-06-07 Demerx, Inc. Noribogaine compositions
US9567386B2 (en) 2010-08-17 2017-02-14 Ambrx, Inc. Therapeutic uses of modified relaxin polypeptides
AU2011291943B2 (en) 2010-08-17 2015-01-22 Ambrx, Inc. Modified relaxin polypeptides and their uses
TWI480288B (zh) 2010-09-23 2015-04-11 Lilly Co Eli 牛顆粒細胞群落刺激因子及其變體之調配物
WO2012045704A1 (en) 2010-10-05 2012-04-12 Novartis Ag New treatments of hepatitis c virus infection
AU2011311880B2 (en) 2010-10-08 2014-07-24 Novartis Ag Vitamin E formulations of sulfamide NS3 inhibitors
CN105381450A (zh) 2010-11-30 2016-03-09 诺华有限公司 丙型肝炎病毒感染的新疗法
EP2481740B1 (en) 2011-01-26 2015-11-04 DemeRx, Inc. Methods and compositions for preparing noribogaine from voacangine
WO2012107589A1 (en) 2011-02-11 2012-08-16 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical compositions for the treatment and prevention of hcv infections
WO2012130996A1 (en) 2011-03-31 2012-10-04 Novartis Ag Alisporivir to treat hepatitis c virus infection
JP2014509630A (ja) 2011-04-01 2014-04-21 ノバルティス アーゲー Ｂ型肝炎ウイルス単独の感染症またはデルタ肝炎ウイルスとの複合感染症および付随する肝疾患の治療
WO2012140082A1 (en) 2011-04-13 2012-10-18 Novartis Ag Treatment of hepatitis c virus infection with alisporivir
US20140187488A1 (en) 2011-05-17 2014-07-03 Bristol-Myers Squibb Company Methods for maintaining pegylation of polypeptides
EP2709648A4 (en) 2011-05-19 2015-04-08 Geysen Hendrik M COMPOUNDS FOR BINDING TO THE ERYTHROPOIETIN RECEPTOR
MX2014000031A (es) 2011-07-01 2014-07-09 Bayer Ip Gmbh Polipeptidos de fusion de relaxina y usos de los mismos.
US20140314713A1 (en) 2011-07-20 2014-10-23 Universite Paris Diderot - Paris Vii Methods for determining treatment response in patients infected with hcv genotype 4
JP2014525939A (ja) * 2011-08-25 2014-10-02 ナノジェン・ファーマシューティカル・バイオテクノロジー ペグインターフェロンλ１複合体
US9617274B1 (en) 2011-08-26 2017-04-11 Demerx, Inc. Synthetic noribogaine
BR112014007247A2 (pt) 2011-09-27 2017-03-28 Novartis Ag alisporivir para o tratamento de infecção por vírus da hepatite c
CN104053670A (zh) 2011-10-31 2014-09-17 百时美施贵宝公司 具有降低的免疫原性的纤连蛋白结合域
MY171759A (en) 2011-12-06 2019-10-28 Univ Leland Stanford Junior Methods and compositions for treating viral diseases
EP2788003A4 (en) 2011-12-09 2015-05-27 Demerx Inc PHOSPHATESTER OF NORIBOGAIN
US9150584B2 (en) 2012-01-25 2015-10-06 Demerx, Inc. Indole and benzofuran fused isoquinuclidene derivatives and processes for preparing them
WO2013112673A1 (en) 2012-01-25 2013-08-01 Demerx, Inc. Synthetic voacangine
US8454947B1 (en) 2012-03-01 2013-06-04 Nanogen Pharmaceutical Biotechnology PEG-interferon lambda 1 conjugates
JP2015509980A (ja) 2012-03-14 2015-04-02 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング Ｈｃｖ−ｈｉｖ同時感染患者集団のｈｃｖ感染症を治療するための併用療法
JP2015512900A (ja) 2012-03-28 2015-04-30 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 特別な患者の遺伝子亜型分集団のｈｃｖ感染症を治療するための併用療法
HK1206610A1 (en) 2012-03-30 2016-01-15 Sorrento Therapeutics, Inc. Fully human antibodies that bind to vegfr2
WO2013177187A2 (en) 2012-05-22 2013-11-28 Massachusetts Institute Of Technology Synergistic tumor treatment with extended-pk il-2 and therapeutic agents
WO2013174988A1 (en) 2012-05-24 2013-11-28 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for predicting and monitoring treatment response in hcv- and hcv/hiv-infected subjects
JP2015519375A (ja) 2012-05-31 2015-07-09 ソレント・セラピューティクス・インコーポレイテッドＳｏｒｒｅｎｔｏ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ， Ｉｎｃ． Ｐｄ−ｌ１に結合する抗原結合蛋白質
US9738724B2 (en) 2012-06-08 2017-08-22 Sutro Biopharma, Inc. Antibodies comprising site-specific non-natural amino acid residues, methods of their preparation and methods of their use
CN105050618B (zh) 2012-06-21 2018-11-16 索伦托治疗有限公司 与c-Met结合的抗原结合蛋白
CA2877814A1 (en) 2012-06-22 2013-12-27 Dingqiu HUANG Antigen binding proteins that bind ccr2
DK2863955T3 (en) 2012-06-26 2017-01-23 Sutro Biopharma Inc MODIFIED FC PROTEINS, INCLUDING LOCATION-SPECIFIC NON-NATURAL AMINO ACID RESIDUES, CONJUGATES THEREOF, METHODS OF PRODUCING ITS AND PROCEDURES FOR USE THEREOF
BR112015004022B1 (pt) 2012-08-31 2023-04-25 Sutro Biopharma, Inc Aminoácidos modificados compreendendo um grupo azido
US20140205566A1 (en) 2012-11-30 2014-07-24 Novartis Ag Cyclic nucleuoside derivatives and uses thereof
US8940728B2 (en) 2012-12-20 2015-01-27 Demerx, Inc. Substituted noribogaine
WO2014098877A1 (en) 2012-12-20 2014-06-26 Demerx, Inc. Substituted noribogaine
US9045481B2 (en) 2012-12-20 2015-06-02 Demerx, Inc. Substituted noribogaine
US20150361159A1 (en) 2013-02-01 2015-12-17 Bristol-Myers Squibb Company Fibronectin based scaffold proteins
CA2913977C (en) 2013-05-31 2022-11-29 Sorrento Therapeutics, Inc. Antigen binding proteins that bind pd-1
ES2658039T3 (es) 2013-07-10 2018-03-08 Sutro Biopharma, Inc. Anticuerpos que comprenden múltiples residuos de aminoácidos no naturales sitio-específicos, métodos para su preparación y métodos de uso
US9840493B2 (en) 2013-10-11 2017-12-12 Sutro Biopharma, Inc. Modified amino acids comprising tetrazine functional groups, methods of preparation, and methods of their use
SI3137078T1 (sl) 2014-05-01 2019-08-30 Eiger Biopharmaceuticals, Inc. Zdravljenje okužbe s hepatitis delta virusom
US10076512B2 (en) 2014-05-01 2018-09-18 Eiger Biopharmaceuticals, Inc. Treatment of hepatitis delta virus infection
US11311519B2 (en) 2014-05-01 2022-04-26 Eiger Biopharmaceuticals, Inc. Treatment of hepatitis delta virus infection
US9388239B2 (en) 2014-05-01 2016-07-12 Consejo Nacional De Investigation Cientifica Anti-human VEGF antibodies with unusually strong binding affinity to human VEGF-A and cross reactivity to human VEGF-B
WO2015195673A2 (en) 2014-06-18 2015-12-23 Demerx, Inc. Halogenated indole and benzofuran derivatives of isoquinuclidene and processes for preparing them
EP3180018B1 (en) 2014-08-12 2019-07-24 Massachusetts Institute Of Technology Synergistic tumor treatment with il-2 and integrin-binding-fc-fusion protein
US20170224777A1 (en) 2014-08-12 2017-08-10 Massachusetts Institute Of Technology Synergistic tumor treatment with il-2, a therapeutic antibody, and a cancer vaccine
CA2958673A1 (en) 2014-08-22 2016-02-25 Sorrento Therapeutics, Inc. Antigen binding proteins that bind cxcr3
US9987241B2 (en) 2014-09-25 2018-06-05 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Enzyme conjugate and prodrug cancer therapy
SG11201702824UA (en) 2014-10-24 2017-05-30 Bristol Myers Squibb Co Modified fgf-21 polypeptides and uses thereof
SI3215193T1 (sl) * 2014-11-06 2024-02-29 Pharmaessentia Corporation Dozirna shema za pegiliran interferon
WO2016148179A1 (ja) * 2015-03-17 2016-09-22 国立大学法人信州大学 Ｉｆｎを用いた非接着培養による樹状細胞の調製方法
KR102514971B1 (ko) 2015-04-21 2023-03-27 아이거 바이오파마슈티컬스 인코포레이티드 로나파르닙 및 리토나버를 포함하는 약제 조성물
CN108135979A (zh) 2015-11-03 2018-06-08 豪夫迈·罗氏有限公司 Hbv衣壳组装抑制剂和干扰素的组合疗法
CN108367001A (zh) 2015-11-04 2018-08-03 艾格尔峰生物制药有限公司 治疗丁型肝炎病毒感染
CN109715821B (zh) 2016-01-29 2022-09-06 索伦托药业有限公司 与pd-l1结合的抗原结合蛋白
WO2018087345A1 (en) 2016-11-14 2018-05-17 F. Hoffmann-La Roche Ag COMBINATION THERAPY OF AN HBsAg INHIBITOR, A NUCLEOS(T)IDE ANALOGUE AND AN INTERFERON
US10350266B2 (en) 2017-01-10 2019-07-16 Nodus Therapeutics, Inc. Method of treating cancer with a multiple integrin binding Fc fusion protein
EP3568150A4 (en) 2017-01-10 2020-12-02 Xcella Biosciences, Inc. POLYTHERAPY FOR TUMOR TREATMENT WITH INTEGRIN-BOUND FC FUSION PROTEIN AND IMMUNE MODULATOR
ES3009748T3 (en) 2017-01-18 2025-03-31 Inst Nat Sante Rech Med Pharmaceutical compositions for the treatment patients suffering from myeloproliferative disorders
KR102670432B1 (ko) 2017-02-08 2024-05-28 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 약동학적 인핸서를 포함하는 변형된 렐락신 폴리펩티드 및 그의 용도
US11926664B2 (en) 2017-07-25 2024-03-12 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical compositions for modulating monocytopoiesis
US11446365B2 (en) 2017-08-09 2022-09-20 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Antimalarial enzyme conjugates, kits containing same, and methods of producing and using same
WO2019036605A2 (en) 2017-08-17 2019-02-21 Massachusetts Institute Of Technology MULTIPLE SPECIFICITY BINDING AGENTS OF CXC CHEMOKINES AND USES THEREOF
SG11202102427XA (en) 2018-09-11 2021-04-29 Ambrx Inc Interleukin-2 polypeptide conjugates and their uses
US20200102370A1 (en) 2018-09-28 2020-04-02 Massachusetts Institute Of Technology Collagen-localized immunomodulatory molecules and methods thereof
AU2019361206A1 (en) 2018-10-19 2021-06-03 Ambrx, Inc. Interleukin-10 polypeptide conjugates, dimers thereof, and their uses
WO2020154032A1 (en) 2019-01-23 2020-07-30 Massachusetts Institute Of Technology Combination immunotherapy dosing regimen for immune checkpoint blockade
CN119455004A (zh) 2019-02-12 2025-02-18 Ambrx公司 包含抗体-tlr激动剂缀合物的组合物、方法和用途
US20220241376A1 (en) 2019-07-18 2022-08-04 Enyo Pharma Method for decreasing adverse-effects of interferon
WO2021178612A1 (en) 2020-03-05 2021-09-10 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy for treating hepatitis b virus infection
CA3174114A1 (en) 2020-03-11 2021-09-16 Ambrx, Inc. Interleukin-2 polypeptide conjugates and methods of use thereof
WO2021228983A1 (en) 2020-05-13 2021-11-18 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) A pharmaceutical composition comprising an arsenic compound, an inductor of type-1 ifn and a protein kinase inhibitor for treating cancer
ES2929379T3 (es) 2020-05-20 2022-11-28 Inst Nat Sante Rech Med Métodos para el tratamiento de infecciones por coronavirus
US20210403908A1 (en) 2020-06-22 2021-12-30 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for treatment of hepatitis d virus infection
WO2022040596A1 (en) 2020-08-20 2022-02-24 Ambrx, Inc. Antibody-tlr agonist conjugates, methods and uses thereof
WO2022043496A2 (en) 2020-08-28 2022-03-03 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Use of mait cells as biomarkers and biotargets in covid-19
WO2022079205A1 (en) 2020-10-15 2022-04-21 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Use of ifn-alpha polypeptides for the treatment of coronavirus infections
WO2022159414A1 (en) 2021-01-22 2022-07-28 University Of Rochester Erythropoietin for gastroinfestinal dysfunction
KR20240004342A (ko) 2021-04-03 2024-01-11 암브룩스, 인코포레이티드 항-her2 항체-약물 접합체 및 이의 용도
CN120676956A (zh) 2023-02-09 2025-09-19 谢彦晖 聚乙二醇修饰的白介素2、糖皮质激素和透明质酸用于治疗特应性皮炎
WO2025006676A2 (en) 2023-06-27 2025-01-02 Firecyte Therapeutics, Inc. Insulin-like growth factor binding protein like 1 (igfbpl1) compositions and methods of use thereof

Family Cites Families (53)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2651657A (en) * 1949-05-21 1953-09-08 Standard Oil Dev Co Synthetic lubricating oil
SE337223B (ro) * 1967-05-23 1971-08-02 Pharmacia Ab
US3619371A (en) * 1967-07-03 1971-11-09 Nat Res Dev Production of a polymeric matrix having a biologically active substance bound thereto
SE343210B (ro) * 1967-12-20 1972-03-06 Pharmacia Ab
DK132327A (ro) * 1968-07-16
US3632828A (en) * 1968-12-16 1972-01-04 Dow Chemical Co Polyethylene glycol monomethyl ether carbonates
BE758425A (fr) * 1969-12-02 1971-04-16 Baxter Laboratories Inc Streptokinase liee chimiquement a une matrice en carbohydrate (
DE2247163A1 (de) * 1972-09-26 1974-03-28 Merck Patent Gmbh Traegermatrix zur fixierung biologisch wirksamer stoffe und verfahren zu ihrer herstellung
US4179337A (en) * 1973-07-20 1979-12-18 Davis Frank F Non-immunogenic polypeptides
US4002531A (en) * 1976-01-22 1977-01-11 Pierce Chemical Company Modifying enzymes with polyethylene glycol and product produced thereby
US4100271A (en) * 1976-02-26 1978-07-11 Cooper Laboratories, Inc. Clear, water-miscible, liquid pharmaceutical vehicles and compositions which gel at body temperature for drug delivery to mucous membranes
GB1578348A (en) * 1976-08-17 1980-11-05 Pharmacia Ab Products and a method for the therapeutic suppression of reaginic antibodies responsible for common allergic
US4094744A (en) * 1976-11-18 1978-06-13 W. R. Grace & Co. Water-dispersible protein/polyurethane reaction product
DE2862449D1 (en) * 1977-08-22 1984-11-22 Nat Res Dev Macromolecular covalent conjugates, methods for preparing and pharmaceutical compositions containing them
JPS55110105A (en) * 1979-02-19 1980-08-25 Japan Atom Energy Res Inst Preparation of polymer composition containing physiologically active material
JPS6023084B2 (ja) * 1979-07-11 1985-06-05 味の素株式会社 代用血液
US4640835A (en) * 1981-10-30 1987-02-03 Nippon Chemiphar Company, Ltd. Plasminogen activator derivatives
US4609546A (en) * 1982-06-24 1986-09-02 Japan Chemical Research Co., Ltd. Long-acting composition
WO1985003934A1 (fr) * 1984-03-06 1985-09-12 Takeda Chemical Industries, Ltd. Proteine modifiee chimiquement et son procede de preparation
US4486344A (en) * 1983-03-28 1984-12-04 Miles Laboratories, Inc. Urea-linked immunogens, antibodies, and preparative method
JPS6098988A (ja) * 1983-11-01 1985-06-01 Chemo Sero Therapeut Res Inst Ｌｐｆ−ｈａの精製法
JPS60127952A (ja) 1983-12-14 1985-07-08 Fanuc Ltd 領域加工方法
US4496689A (en) * 1983-12-27 1985-01-29 Miles Laboratories, Inc. Covalently attached complex of alpha-1-proteinase inhibitor with a water soluble polymer
DE3572982D1 (en) * 1984-03-06 1989-10-19 Takeda Chemical Industries Ltd Chemically modified lymphokine and production thereof
GB8430252D0 (en) * 1984-11-30 1985-01-09 Beecham Group Plc Compounds
US4732863A (en) * 1984-12-31 1988-03-22 University Of New Mexico PEG-modified antibody with reduced affinity for cell surface Fc receptors
DE3676670D1 (de) * 1985-06-26 1991-02-07 Cetus Corp Solubilisierung von proteinen fuer pharmazeutische zusammensetzungen mittels polymerkonjugierung.
US4917888A (en) * 1985-06-26 1990-04-17 Cetus Corporation Solubilization of immunotoxins for pharmaceutical compositions using polymer conjugation
US4766106A (en) * 1985-06-26 1988-08-23 Cetus Corporation Solubilization of proteins for pharmaceutical compositions using polymer conjugation
US4847079A (en) * 1985-07-29 1989-07-11 Schering Corporation Biologically stable interferon compositions comprising thimerosal
US5100664A (en) * 1985-09-20 1992-03-31 Cetus Corporation Human IL-2 as a vaccine adjuvant
US4818769A (en) * 1985-09-20 1989-04-04 Cetus Corporation Method of controlling stress-related disease in livestock by administration of human IL-2
US5102872A (en) * 1985-09-20 1992-04-07 Cetus Corporation Controlled-release formulations of interleukin-2
US4791192A (en) * 1986-06-26 1988-12-13 Takeda Chemical Industries, Ltd. Chemically modified protein with polyethyleneglycol
US4810638A (en) * 1986-07-24 1989-03-07 Miles Inc. Enzyme-labeled antibody reagent with polyalkyleneglycol linking group
US4894226A (en) * 1986-11-14 1990-01-16 Cetus Corporation Solubilization of proteins for pharmaceutical compositions using polyproline conjugation
US4851220A (en) * 1986-11-26 1989-07-25 Schering Corporation Stable oleaginous gel
US4871538A (en) * 1987-07-13 1989-10-03 Schering Corporation Insoluble copper-alpha interferon complex
AU611932B2 (en) * 1987-08-21 1991-06-27 Wellcome Foundation Limited, The Novel complex
US4847325A (en) * 1988-01-20 1989-07-11 Cetus Corporation Conjugation of polymer to colony stimulating factor-1
US5199360A (en) 1988-09-27 1993-04-06 Sirkka Koistinen Table constructions
GB8824591D0 (en) * 1988-10-20 1988-11-23 Royal Free Hosp School Med Fractionation process
AU4660789A (en) * 1988-11-23 1990-06-12 Genentech Inc. Polypeptide derivatives
US4902502A (en) * 1989-01-23 1990-02-20 Cetus Corporation Preparation of a polymer/interleukin-2 conjugate
US5122614A (en) * 1989-04-19 1992-06-16 Enzon, Inc. Active carbonates of polyalkylene oxides for modification of polypeptides
WO1990013540A1 (en) * 1989-04-19 1990-11-15 Enzon, Inc. Active carbonates of polyalkylene oxides for modification of polypeptides
EP0400472B1 (en) * 1989-05-27 1996-04-03 Sumitomo Pharmaceuticals Company, Limited Process for preparing polyethylene glycol derivatives and modified protein.
JP2978187B2 (ja) * 1989-11-02 1999-11-15 日本ケミカルリサーチ株式会社 修飾スーパーオキサイドディスムターゼの製造法
US5234903A (en) * 1989-11-22 1993-08-10 Enzon, Inc. Chemically modified hemoglobin as an effective, stable non-immunogenic red blood cell substitute
JP3187044B2 (ja) * 1989-12-01 2001-07-11 ビーエーエスエフ アクチェンゲゼルシャフト ヒルジン突然変異蛋白質及びヒルジンポリアルキレングリコール複合体
JPH04202293A (ja) * 1990-11-29 1992-07-23 Tonen Corp 作動油
US5595732A (en) * 1991-03-25 1997-01-21 Hoffmann-La Roche Inc. Polyethylene-protein conjugates
US5281698A (en) * 1991-07-23 1994-01-25 Cetus Oncology Corporation Preparation of an activated polymer ester for protein conjugation

Also Published As

Publication number Publication date
ZW11193A1 (en) 1994-03-23
AU668742B2 (en) 1996-05-16
NO933028D0 (no) 1993-08-25
LT3174B (en) 1995-02-27
AU4478093A (en) 1994-03-03
DK0593868T3 (da) 1999-02-08
KR940003969A (ko) 1994-03-14
NZ248452A (en) 1995-12-21
UY23635A1 (es) 1994-03-01
DE69317979D1 (de) 1998-05-20
CN1088936A (zh) 1994-07-06
FI933740L (fi) 1994-02-27
CN1211578A (zh) 1999-03-24
CN1173500A (zh) 1998-02-18
EE9400151A (et) 1996-02-15
BG98067A (en) 1994-12-02
MX9305146A (es) 1994-03-31
ATE165102T1 (de) 1998-05-15
SI9300423A (en) 1994-03-31
CN1039015C (zh) 1998-07-08
FI109765B (fi) 2002-10-15
ES2116376T3 (es) 1998-07-16
SK89893A3 (en) 1994-04-06
NZ264872A (en) 1996-01-26
CZ169393A3 (en) 1994-04-13
KR100295520B1 (ko) 2001-09-17
HRP931094A2 (en) 1997-06-30
EP0593868B1 (en) 1998-04-15
CN1155618C (zh) 2004-06-30
IL106750A0 (en) 1993-12-08
OA09850A (fr) 1994-08-15
IS4067A (is) 1994-02-27
JP2859105B2 (ja) 1999-02-17
DE69317979T2 (de) 1998-08-20
JPH06192300A (ja) 1994-07-12
EP0593868A1 (en) 1994-04-27
YU56693A (sh) 1997-01-08
MW7693A1 (en) 1994-06-08
LV10907A (lv) 1995-12-20
CN1183112C (zh) 2005-01-05
MY131445A (en) 2007-08-30
BR9303469A (pt) 1994-03-22
HUT67013A (en) 1995-01-30
HU9302366D0 (en) 1993-11-29
ZA936098B (en) 1994-03-01
LTIP888A (lt) 1994-08-25
PL300194A1 (en) 1994-04-05
PH30460A (en) 1997-05-28
US5382657A (en) 1995-01-17
LV10907B (en) 1996-04-20
FI933740A0 (fi) 1993-08-25
CA2103829A1 (en) 1994-02-27
CA2103829C (en) 2003-04-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RO112730B1 (ro) Conjugat polimer cu actiune imunomodulatoare, procedeu si intermediar pentru obtinerea acestuia
JP2637010B2 (ja) ポリエチレンタンパク質接合体
AU2003258518B2 (en) Polyalkylene glycol acid additives
AU725195B2 (en) Interferon conjugates
AU660843B2 (en) Lyophilized polyethylene oxide modified protein and polypeptide complexes with cyclodextrin
EP1999183A1 (en) New activated poly(ethylene glycols) and related polymers and their applications
KR20030045416A (ko) 에리트로포이에틴과 폴리에틸렌글리콜 유도체의 배합체
HK1005225B (en) Interferon conjugates