FI109765B - Menetelmä interferonikonjugaatin valmistamiseksi ja menetelmässä käyttökelpoisia yhdisteitä - Google Patents

Menetelmä interferonikonjugaatin valmistamiseksi ja menetelmässä käyttökelpoisia yhdisteitä Download PDF

Info

Publication number
FI109765B
FI109765B FI933740A FI933740A FI109765B FI 109765 B FI109765 B FI 109765B FI 933740 A FI933740 A FI 933740A FI 933740 A FI933740 A FI 933740A FI 109765 B FI109765 B FI 109765B
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
interferon
conjugate
peg
compound
lower alkyl
Prior art date
Application number
FI933740A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI933740A (fi
FI933740A0 (fi
Inventor
Robert Karasiewicz
Carlo Nalin
Perry Rosen
Original Assignee
Hoffmann La Roche
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hoffmann La Roche filed Critical Hoffmann La Roche
Publication of FI933740A0 publication Critical patent/FI933740A0/fi
Publication of FI933740A publication Critical patent/FI933740A/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI109765B publication Critical patent/FI109765B/fi

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • C07K14/555—Interferons [IFN]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/62—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D213/63—One oxygen atom
    • C07D213/64—One oxygen atom attached in position 2 or 6
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C69/00—Esters of carboxylic acids; Esters of carbonic or haloformic acids
    • C07C69/96—Esters of carbonic or haloformic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • C07K14/555—Interferons [IFN]
    • C07K14/56—IFN-alpha
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K19/00—Hybrid peptides, i.e. peptides covalently bound to nucleic acids, or non-covalently bound protein-protein complexes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

109765
Menetelmä interferonikonjugaatin valmistamiseksi ja menetelmässä käyttökelpoisia yhdisteitä Tämä keksintö kohdistuu menetelmään interferoni-5 konjugaatin valmistamiseksi, jolla on kaava Γ oi
II
RO-(CH2CHO) -(CH2CHOL-(CH2CHOL-CH2CH-w/\ NH- - interferoni k k * fc- k (I> 10 * m jossa R on alempi alkyyli; R1, R2, R3 ja R4 ovat H tai alempi alkyyli; m valitaan kokonaisluvusta, joka on > 1 aina 15 siihen lukuun asti kuin interferonissa on alttiita aminoryhmiä; W on 0 tai NH; x on kokonaisluku, joka on välillä 1 ja 1 000 ja y ja z ovat kumpikin kokonaislukuja 0 - 1 000, ja x:n, y:n 20 ja z:n summa on 3 - 1 000; sillä ehdolla, että ainakin yksi R1:stä, R2:sta, * 3 4 ·· ' R :sta ja R : stä on alempi alkyyli; • · · sekä menetelmässä käyttökelpoisiin yhdisteisiin.
• · • *.· Useita luonnollisesti esiintyviä ja rekombinantti- 25 proteiineja voidaan käyttää lääketieteellisesti ja farma- • · · f’·*. seuttisesti. Kun ne on puhdistettu ja formuloitu, niitä • t voidaan antaa parenteraalisesti useisiin terapeuttisiin • · · indikaatioihin. Parenteraalisesti annetut proteiinit voi- . . vat kuitenkin olla immunogeenisiä, ne voivat olla suhteel- • · » *,,* 30 lisen huonosti veteen liukenevia ja niillä voi olla lyhyt • t ·;·’ farmakologinen elinikä. Niin muodoin voi olla vaikeaa saa- j da aikaan proteiinien terapeuttisesti käyttökelpoiset ta- sot potilaiden veressä.
• · · .’. Nämä ongelmat voidaan ratkaista konjugoimalla pro- ’ \ 35 teiinit polymeereihin, kuten polyetyleeniglykoliin. Davis 2 109765 et ai., US-patentti 4 179 337, kuvaavat polyetyleeniglyko-lin (PEG) konjugoimisen proteiineihin, kuten entsyymeihin ja insuliiniin, sellaisten konjugaattien saamiseksi, joissa proteiini olisi vähemmän immunogeeninen, mutta jossa se 5 säilyttäisi oleellisen osan fysiologisesta aktiivisuudestaan. Nakagawa et ai. kuvaavat PEG:n konjugoimisen saareketta aktivoivaan proteiiniin sen sivuvaikutuksien ja im-munogeenisyyden alentamiseksi. Veronese et ai., Applied Biochem. and Biotech., _11: 141 - 152 (1985), kuvaavat po- 10 lyetyleeniglykolien aktivoimisen fenyyliklooriformaateilla ribonukleaasin ja superoksididismutaasin modifioimiseksi. Katre et ai., US-patentit 4 766 106 ja 4 917 888, kuvaavat myös proteiinien liuottamisen polymeerikonjugaatiolla. PEG ja muut polymeerit konjugoidaan rekombinanttiproteiinien 15 kanssa niiden immunogeenisyyden alentamiseksi ja niiden eliniän pidentämiseksi. Katso Nitecki et ai., US-patentti 4 902 502, Enzon, Inc. kansainvälinen patenttihakemus PCT/US90/03133, Nishimura et ai., EP-patenttihakemus 154 316 ja Tomasi, kansainvälinen patenttihakemus 20 PCT/US85/02572.
Aiemmat menetelmät PEG/proteiinikonjugaattien muo- .. 1 dostamiseksi ja mainituista menetelmistä tuloksena synty- • · · neet konjugaatit muodostavat useita ongelmia. Yksi näistä • · • 1·. ongelmista on se, että tietyt menetelmät näiden proteiini- 25 PEG-konjugaattien muodostamiseksi voivat inaktivoida pro- :1·1. teiinin niin, että tuloksena syntyneillä konj ugaateilla * | voi olla huono biologinen aktiivisuus. Lisäksi tietyt liitososat, joita käytetään näiden proteiini-PEG-konjugaat- . . tien muodostamiseksi, voivat olla herkkiä hydrolyyttiselle * « · *,.1 30 katkeamiselle in vivo. Kun sellainen katkeaminen tapahtuu • · ·;·’ annon jälkeen, nämä konjugaatit menettävät PEG-molekyylis- j tä aiheutuvat edulliset ominaisuudet.
Tässä kuvataan uusia interferoni-PEG-konjugaat- i · · teja, joilla on ainutlaatuiset liitososat, jotka liittävät • · · 35 interferonin (IFN) aminoryhmän PEG-molekyylin kanssa.
3 109765
Esillä oleva keksintö koskee erityisesti menetelmää interferonikonjugaatin valmistamiseksi, jolla on kaava Γ oi Ϊ 5 RO-(CH2CHO)x-(CH2CHOL-(CH2CHO)z-CH2CH-W<' ^ NH— interferoni (^) k ' if r3 if L J m j ossa R on alempi alkyyli; R1, R2, R3 ja R4 ovat H tai 10 alempi alkyyli; m valitaan kokonaisluvusta, joka on > 1 aina siihen lukuun asti kuin interferonissa on alttiita aminoryhmiä; W on O tai NH; 15 x on kokonaisluku, joka on välillä 1 ja 1 000 ja y ja z ovat kumpikin kokonaislukuja 0 - 1 000, ja x:n, y:n ja z:n summa on 3 - 1 000; sillä ehdolla, että ainakin yksi R1:stä, R2:sta, R3:sta ja R4:stä on alempi alkyyli.
20 Keksinnön mukaiselle menetelmälle on tunnusomais ta, että se sisältää vaiheet, joissa yhdiste, jolla on
t « I
.. · yleinen kaava i.v25 xX"ji (ii>
RC-(CH2CHO)x-(CH2CHO)y-(CH2CHO)z-CH2CH-W' XCr N
R’ k k k tai jos W on O interferonikonjugaatissa, yhdiste, jolla on • · · '· 30 yleinen kaava • »
* * P
* · · ! · · ·. RO-(CH2CHO)x-(CH2CHO)y-{CH2CHO)z-CH2CHO -p- C=0 (III) [ A’ i2 r3 k* 35 2 4 109765 joissa kaavoissa R, R1, R2, R3, R4, W, x, y ja z ovat kuten yllä on määritelty ja R5 on H tai alempi alkyyli, sillä ehdolla, että ainakin yksi R1:stä, R2:sta, R3:sta ja R4:stä on alempi alkyyli; saatetaan reagoimaan interferonin tai 5 sen suolan kanssa ja interferonikonjugaatit eristetään reaktioseoksesta.
Lisäksi keksintö koskee yhdisteitä, joille on tunnusomaista se, mitä patenttivaatimuksissa 11 ja 15 esitetään.
10 On itsestään selvää, että -NH-ryhmä kaavassa I on peräisin interferonimolekyylin alttiista aminoryhmästä.
Spesifisemmin kahdella eri interferonikonjugaa-tilla on kaavat:
15 I O
Λ
RO-(CH2CHO)x — (CH2CHO)y— (CH2CHO)z-CH2CH-NH NH -;inter- |A
I III feroni R1 R2 R3 R4 20 — —m • · · o ί Λ
...... 25 RO-(CH2CHO)x -(CH2CHO)y- (CH2CH0)z-CH2CH-0 NH _ .. r. R
, . Ill I xm:er. 10 R1 R2 R3 R4 feronl — -Im • · 30 joissa R on alempi alkyyli; R1, R2, R3, ja R4 ovat H tai ·.··’ alempi alkyyli; m on luku, joka on korkeintaan interfero- : ·.. nissa olevien alttiiden aminoryhmien määrä, ja x, y ja z valitaan mistä tahansa lukujen yhdistelmästä niin, että * * · konjugaatilla on ainakin osa sen proteiinin biologisesta 35 * * » · · 5 109765 aktiivisuudesta, joka muodostaa konjugaatin; sillä ehdolla, että ainakin yksi R1:stä, R2:sta, R3:sta ja R4:stä on alempi alkyyli.
Kuvio 1: PEG-modifikaation aikakäyrä esimerkin 7 5 yhdisteen kanssa. Interferonia (5 mg/ml) inkuboitiin rea-genssin 10-, 20- tai 40-kertaisessa ylimäärässä proteiinin verrattuna osoitetut ajat 25 mM Tricine (pH 10,0), 0,5 M
KSCN, 100 mM NaCl -liuoksessa. Eri aikoina poistettiin osa liuoksesta, reaktio lopetettiin glysiinillä ja analysoi-10 tiin 15 % SDS-PAGE-geelissä. Merkki "I" tarkoittaa interferonia .
Kuvio 2: PEG-modifikaation aikakäyrä esimerkin 5 yhdisteen kanssa. Interferonia inkuboitiin reagenssin 3-tai 10-kertaisessa ylimäärässä osoitetut ajat, kuten ku-15 viossa 1. Osoitettuina aikoina poistettiin osa liuoksesta, reaktio lopetettiin glysiinillä ja analysoitiin 15 % SDS-PAGE-geelissä. "S" tarkoittaa molekyylipainostandardeja, "I" tarkoittaa interferonia.
Kuvio 3: Esimerkin 1 yhdisteen (vasen puoli) ja 20 esimerkin 3 yhdisteen (oikea puoli) PEG-modifikaation vertailu. Interferonia inkuboitiin kunkin reagenssin 3-ker-.. · täisessä ylimäärässä 0,25, 1,5 tai 24 tuntia. Liuoksesta poistettiin osa, reaktio lopetettiin glysiinillä ja ana-. lysoitiin 15 % SDS-PAGE-geelissä. Merkki "S" tarkoittaa 25 proteiinimolekyylipainostandarde j a, merkki "I" tarkoittaa interferonia.
• · • t
Tämän keksinnön mukaisesti kaavojen IA ja IB
• ♦ · mukaiset IFN-konjugaatit voidaan tuottaa kondensoimalla . , aktivoitu PEG, jossa terminaalinen hydroksi- tai '· *· 30 aminoryhmä on korvattu aktivoidulla liitosryhmällä. Sitten * · ···* nämä reagenssit voivat reagoida IFN-proteiinin yhden tai |\t useamman aminoryhmän kanssa. Kondensaatio ainoastaan yhden aminoryhmän kanssa niin, että muodostetaan monopegyloitu i » · konjugaatti, on esillä olevan keksinnön suositeltava > · · '·'·* 35 suoritustapa. Sen vuoksi keksintö koskee myös uusia akti- * 6 109765 voituja yhdisteitä (reagensseja) , joita voidaan käyttää esillä olevan keksinnön mukaisten interferonikonjugaattien tuottamiseen. Näillä yhdistellä on seuraavat yleiset kaavat: 5 R5 A 'Cjl 11 RO-iCHgCHO^-ICHjCHOWCHgCHO^-CHjCH-W ^ 10 A' h k k jossa R on alempi alkyyli; R1, R2, R3, R4 ja R5 ovat H tai alempi alkyyli; W on NH tai O; 15 x on kokonaisluku, joka on välillä 1 - 1 000, ja y ja z ovat kumpikin kokonaislukuja välillä 0-1 000, ja x:n, y:n ja z:n summa on 3 - 1 000; sillä ehdolla, että jos W on NH tai jos W on O ja R5 on H, ainakin yksi R1;stä, R2:sta, R3:sta ja R4:sta on alempi al-20 kyyli, ja * t « » » ·
• · · ·: ‘ RO-(CH2CHO)x-(CH2CHOlr-(CH2CHO)z-CH2CHO 4— C-0 III
:'·· k h k L‘ !.V 25 2 * * · * » · • · * · * « .
* * · * · · jossa R on alempi alkyyli; R1, R2, R3 ja R4 ovat H tai me- . , tyyli, x on kokonaisluku välillä 1-1 000, ja y ja z ovat * · · ’;t[· 30 kumpikin kokonaislukuja välillä 0 - 1 000, ja x:n, y:n ja * i ··' z:n summa on 3 - 1 000.
i t t * » * » · * » ♦ * *
> I
* » « * » 7 109765
Spesifisemmin kaava II sisältää yhdisteet, jotka ovat seuraavien kahden tyypin mukaisia: 5 aAj
Ra(CH2CHO)xlCH2CHO)y-(CH2CHO)z^H2CH-NH ° R1 R2 R3 R4
10 R5NsAA
AAj ΠΒ R0-(CH2CH0)x-(CH2(|H0)y-(CH2CH0)z-CH2CH-0 0
Rt R2 ia l* 15
Kaavoissa IIA, IIB ja III R, R1, R2, R3, R4, R5 ovat kuten yllä; ja x, y ja z valitaan mistä tahansa lukujen yhdistelmästä niin, että polymeeri proteiiniin konjugoitu- na sallii proteiinin säilyttävän ainakin osan siitä biolo- 20 gisen aktiivisuuden aktiivisuustasosta, joka sillä on kon- ... jugoimattomassa muodossa; niiden ehtojen mukaisesti, jotka ·· * on mainittu kaavan II alla.
• · · Tämän keksinnön mukaisesti muodostetaan, kaavojen IIA, IIB tai III mukaisia aktivoituja PEG-reagensseja kon- * · · ·// 25 jugaattien tuottamiseen käyttäen, liitossidos proteiinin, ! ·*; kuten interferonin (IFN), vapaiden aminoryhmien ja PEG- '· · molekyylin välille niin, että tuloksena syntyvällä konju- gaatilla on ainakin osa proteiinin biologisesta aktiivi- .·. : suudesta ja alentunut immunogeenisyys. Lisäksi tämän kek- • · · 30 sinnön mukaiseen kon j ugaattiin muodostetut liitosryhmät, jotka on muodostettu mitä tahansa kaavojen IIA, IIB tai • · ’·. III mukaista aktivoitua polyetyleeniglykolia käyttäen, : : tuottavat proteiinikonjugaatin, joka ei ole kovin herkkä (-'<f hydrolyyttiselle katkeamiselle in vivo ja jolla ei ole 35 alan aiempien PEG-proteiinikonjugaattien haittapuolia.
8 109765 Tämän keksinnön mukaisesti R, R1, R2, R3, R4 ja R5 voivat olla mikä tahansa alempi alkyyli, suositeltavasti metyyli. Termi alempi alkyyli viittaa alempiin alkyyliryh-miin, jotka sisältävät 1-6 hiiliatomia, kuten metyyliin, 5 etyyliin, n-propyyliin, isopropyyliin, jne. Yleisesti suositeltava alkyyliryhmä on alempi alkyyliryhmä, joka sisältää 1-4 hiiliatomia metyylin ollessa suositeltavin. Ri, R2/ R3, R4 ja R5 voivat myös olla vetyjä, mutta R1, R2, R3 ja R4 eivät ole samanaikaisesti vetyjä.
10 Tämän keksinnön mukaisesti x, y ja z voidaan valita mistä tahansa lukujen yhdistelmästä niin, että tuloksena syntyvä konjugaatti sisältää ainakin osan sen IFN-proteiinin biologisesta aktiivisuudesta, joka muodostaa konjugaatin. On ilmeistä, että x:n, y:n ja z:n 15 summa ja m ovat kääntäen verrannollisia siihen IFN-proteiinin biologisen aktiivisuuden määrään, joka säilyy konjugaatissa. x:n, y:n ja z:n numeerinen arvo edustaa glykoliyksiköiden määrää siinä polyglykolissa, joka muodostaa konjugaatin. Termi m edustaa IFN-proteiinin 20 niiden vapaiden alttiiden aminoryhmien määrää, jotka ... voivat reagoida aktivoidun PEG-seoksen kanssa. Mitä kor- keampi on m: n ja x:n, y:n ja z:n arvo, sitä korkeampi on ····' konjugaatin molekyylipaino. Tämän keksinnön mukaisesti x, • · ' *· y ja z ovat mikä tahansa luku niin, että konjugaatin 1 · · 25 molekyylipaino, proteiinin painoa mukaan laskematta, on * t : · : noin 300 - noin 30 000 daltonia. IFN-proteiinia varten m on suositeltavasti luku 1 - 3. Erittäin suositeltava suoritustapa on valmistaa sellainen monopegyloitu konju- .·. : gaatti, jossa m on 1, joka tuotetaan sellaisissa olosuh- • * · 30 teissä, että saadaan sellaisen IFN-konj ugaatin korkea ’!* saanto, joka konjugaatti koostuu IFN-proteiinista, jossa
* ainoastaan yksi vapaa aminoryhmä on reagoinut kaavan II-A
: tai II-B tai III mukaisen PEG-reagenssin kanssa. Suosi- • ht teltavan suoritustavan mukaisesti, jossa m on 1, x, y, ja • · · '. 35 z ovat mikä tahansa luku niin, että glykolin, joka • * 1 · · i 9 109765 muodostaa konjugaatin, keskimääräinen molekyylipaino on noin 300 - noin 30 000 daltonia, suositeltavasti noin 1 000 - noin 10 000 daltonia, erikoisesti noin 1 000 - 5 000 daltonia. Erikoisen suositeltavassa suoritustavassa 5 molekyylipaino on noin 2 000 daltonia.
Mitä tulee yksiköiden x:n, y:n ja z:n määriin, x on kokonaisluku 1 - 1 000 ja y ja z ovat kumpikin kokonaislukuja 0-1 000 ja x:n, y:n ja z:n summa on 3 - 1 000.
10 Yhdessä suositeltavassa suoritustavassa saatavien kaavojen IA ja IB mukaisten konjugaattien x ja y ovat 5 -500 ja z on 0 - 4. Erikoisen suositeltavassa suoritustavassa käytetty glykoli on glykolien seos, jossa x on 10 -100, y on 1 - 10 ja z on 0. Suositeltavinta on valmistaa 15 kaavan IA mukainen interferonikonjugaatti, jossa m on 1, R, R2 ja R4 ovat CH3; R1 on H; x on noin 19, y on noin 2 ja z on 0. Tämä vastaa PEG-yksikön keskimääräistä molekyy-lipainoa, joka on noin 1 000 daltonia.
Kaikkien epäilyjen, jotka koskevat PEG- 20 molekyylissä olevien yksiköiden lukumäärää, välttämiseksi ... polyetyleeniglykolipolymeerin karakterisointi molekyyli- * painon suhteen on suositeltavaa osoittamalla PEG- ···· molekyylissä olevien itseään toistavien yksiköiden (SRU) « · • ” määrä x:llä, y:llä 3 a z:lla. Nämä arvot voivat olla 25 vaikeita vahvistaa johtuen PEG-lähtöyhdisteiden mahdolli-: ’ : sesta epähomogeenisyydestä, jotka yhdisteet yleensä määritellään niiden keskimääräisen molekyylipainon suhteen eikä niiden sisältämien itseään toistavien yksiköiden .·. : lukumäärän suhteen. Eri molekyylipainon sisältävät PEG- • · · 30 lähtöyhdisteet voidaan valmistaa alalla tunnetuilla ”* menetelmillä tai ne voidaan hankkia kaupallisilta * ’· toimittajilta.
* · · ί : Siinä tapauksessa, että molekyylipainomäärityksel- lä saadut x:n, y:n ja z:n arvot tai toimittajan osoittamat • · · 35 arvot eivät ole kokonaislukuja (kuten yleensä on asia), • · 10 109765 ] niiden arvot täytyy pyöristää ylös- tai alaspäin tavallisella tavalla niin, että voidaan määrätä kokonaisluvut sille polymeerimolekyylille, joka todennäköisesti muodostaa suurimman osan polymeeriseoksesta.
5 Kun minkä tahansa kaavan IIA, II-B tai III
mukaisen reagenssin annetaan reagoida IFN-proteiinin kanssa, joka sisältää useamman kuin yhden vapaan aminoryhmän, voidaan tuottaa konjugaatti seoksena, jossa on IFN-proteiinin ja PEG-reagenssiseosten eri reaktiotuotteita. 10 Nämä reaktiotuotteet muodostuvat johtuen PEG-reagenssin reaktiosta yhden tai usemamman vapaan aminoryhmän kanssa. Tätä merkitään m:llä kaavoissa IA ja IB. Esimerkiksi, kun IFN sisältää kolme vapaata aminoryhmää, aktivoitu PEG-reagenssi voi reagoida yhden vapaan aminoryhmän kanssa, 15 kahden vapaan aminoryhmän kanssa tai kaikkien kolmen kanssa. Tässä tapauksessa seos sisältää konjugoidut reaktio-tuotteet, jotka ovat muodostuneet kaikilla kolmella tavalla. Koska eri konjugoiduilla reaktiotuotteilla tässä seoksessa on valtavan erilaiset molekyylipainot riippuen 20 mistä, se on 1, 2 tai 3, nämä reaktiotuotteet voidaan ... erottaa tavanomaisilla menetelmillä, kuten kromatografi- alla. Sen määrittämiseksi, onko m ja x, y ja z valittu ··“ sopivasti, erotetut konjugaattireaktiotuotteet voidaan • * • ·* seuloa biologisen aktiivisuuden suhteen samoilla tavoilla, 25 joita käytetään IFN-emoproteiinin seulomiseksi, sen j määrittämiseksi, sisältääkö konjugoitu reaktiotuote vielä osan sen IFN-proteiinin biologisesta aktiivisuudesta, jota käytettiin konjugaatin muodostamiseen. Tällä tavalla voi-.·. : daan min ja xin, yin ja zin lukumäärät säätää millä • Il ··. 30 tahansa halutulla tavalla halutun aktiivisuuden saamisek- • ·
IM
. SI .
• ’·· Suositeltavan suoritustavan mukaisesti m on 1. Kun ί,.,ί m on 1, tämä konjugaatti voidaan saada aikaan jopa sil- loin, kun on olemassa kaksi vapaata aminoryhmää tai enem- • i i ‘ 35 män. Aktivoitu PEG-reagenssi voi ensin reagoida IFN-pro- • · 11 109765 teiinin yhden vapaan aminoryhmän kanssa. Säätelemällä rea-genssien, kuten IFN-proteiinin, konsentraatiota ja reaktio-olosuhteita standardien amiinikondensaatiomenetelmien mukaisesti, voidaan säädellä proteiinissa olevien vapaiden 5 aminoryhmien pegylaatioastetta. Proteiineissa, jotka sisältävät yhden tai usemamman vapaan aminoryhmän, joissa yksi vapaista aminoryhmistä on reaktiivisempi kuin muut aminoryhmät, voidaan olosuhteet valita niin, että proteiini reagoi aktivoidun PEG-yhdisteen kanssa muodostaen kaa-10 van IA tai IB mukaisen yhdisteen, jossa m on 1. Proteiinin muodostavissa aminohapoissa olevien muiden vapaiden aminoryhmien voidaan antaa sen jälkeen reagoida PEG-molekyylin kanssa antamalla kondensaatioreaktion jatkua pidempään tai käyttäen muita vahvempia olosuhteita.
15 Esillä olevassa patenttihakemuksessa ja patentti vaatimuksissa käytettynä termit interferoni ja IFN sisältävät kaikki interferonityypit (nimittäin molekyylit, joilla on interferoniaktiivisuus), esimerkiksi α-, β-, γ- ja ω-interferonit ja kaikki näiden tyyppien alatyypit, 20 kuten ai-, a2-, a2A-, a2B- tai a2C-alatyypit, ja eri tyyp-... pien ja/tai alatyyppien hybridit tai kimeerit. Interferoni voi olla peräisin mistä tahansa lähteestä ja se voidaan t 11 saada luonnollisista lähteistä, kudosvil jelmistä tai yh-' " distelmä-DNA-menetelmillä. Menetelmät luonnollisten tai i · · 25 rekombinantti-interferonien tuottamiseksi ja eristämiseksi « · · j ‘'1 ovat alalla hyvin tunnetut ja ne on kuvattu esim. patent- tihakemuksissa, joiden julkaisunumerot ovat EP 43 980, EP 211 148, EP 140 127, DE 3 028 919, USP 4 503 035 ja .*. : USP 4 414 150.
* « · ,···^ 30 Kaavojen IIA, IIB ja III mukaisten reagenssien, joissa ainakin yksi R1:stä, R2:sta, R3:sta, R4:stä on • ’·· alempi alkyyli, erikoisesti metyyli (alkyylillä substitu- • · · :(>>ί oidut reagenssit) , käyttöetu johtuu odottamattomasta > konjugaatin, se on pegyloidun proteiinin, saannon tehos- • * · ’ \ 35 tumisesta käytettäessä alkyylillä substituoituja reagens- i 12 109765 seja verrattuna vastaaviin substituoimattomiin reagenssei-hin. Alkyylillä substituoidut reagenssit antavat ainakin kaksinkertaisen konjugaattimäärän samassa reaktioajassa verrattuna vastaaviin substituoimattomiin reagensseihin 5 sellaisia konjugaatteja tuotettaessa.
Jos annetaan potilaille terapeuttisia tarkoituksia varten, kaavojen IA ja IB mukaisilla konjugaateilla, jotka on tuotettu yllä kuvatuista substituoiduista reagensseis-ta, olisi odottamattomasti tehostunut elinikä in vivo po-10 tilaan verenkierrossa verrattuna konjugaattiin, joka on muodostettu vastaavista substituoimattomista reagensseis-ta. Vaikka elinikä in vivo on suoraan verrannollinen kon-jugaatin molekyylipainoon, substituoidusta reagenssista tuotetulla konjugaatilla on yllättävästi yhtä pitkä elin-15 ikä kuin korkeamman molekyylipainon sisältävällä konjugaatilla, joka on tuotettu substituoimattomasta reagenssista. Pidempi terapeuttisen aineen elinikä potilaan verenkierrossa antaa parantuneen tehon annettaessa ainetta potilaalle. Esimerkiksi, alkyylillä substituoiduista reagens-20 seistä valmistettuja konjugaatteja voidaan antaa harvemmin ... ja/tai pienempinä määrinä kuin konjugaatteja, jotka on ··‘ valmistettu vastaavasta substituoimattomasta reagenssista.
* · ·
Biologisesti aktiivisten polyetyleeniglykolin kanssa kon- * ’·* jugoitujen proteiinien antotehokkuuden parantamiseksi on > · 25 näiden proteiinikon j ugaattien muodostamisessa käytetty korkeampia molekyylipainoja sisältävää polyetyleeniglyko- • · lia. Aktiivisen konjugoidun IFN-proteiinin biologinen tehokkuus pienenee kuitenkin molekyylipainon kohotessa. Tä-.·. : män keksinnön mukaisesti valmistettavilla substituoiduilla • 4 · 30 reagensseilla tuotettujen konjugaattien käytöllä on antotehokkuus kuitenkin parantunut yli sen, joka saadaan • ’·· käytettäessä vastaavaa substituoimatonta konjugaattia, : jolla on pienempi molekyylipaino.
* i 13 109765
Toisessa suoritustavassa esillä oleva keksintö koskee myös menetelmiä uusien konjugaattien valmistamiseksi .
Kaavan I-A mukainen konjugaatti voidaan valmistaa 5 seuraavasti: aR5 R5 ____ 10 PEG-? amiini ^ ' r 15 RO-(CH2CHO)X —(CH2CHO)j- (CH2CHO)2-CH2CHNH v R1 R2 R3 R« % ° 20
IIA
M» * t t · ·*··' NH2- proteiini 25 M * • · · • f-- tmmm
!·.·. RO-(CH2CHO)x —(CHgCHO)^· (CH^HOJz-CHaCHNH [J
',* · I | | | \ y” ' proteiini
R1 R2 R3 R4 V
I - so |_ ° _ • · «
I-A
: **: jossa R, R1, R2, R3, R4 ja R5, m ja x, y ja z ovat, kuten yllä; sillä ehdolla, että mikä tahansa yksi tai useampi ' 35 R1:stä, R2:sta, R3:sta, R4:stä voi olla alempi alkyyli.
t 14 109765 Tässä reaktiossa PEG-amiini sekoitetaan kaavan IV mukaisen yhdisteen kanssa hiilivetyliuottimessa tai klooratussa hiilivetyliuottimessa kaavan IIA mukaisen yhdisteen tuottamiseksi. Kaavan IIA mukainen yhdiste voidaan 5 kondensoida vesipohjaisessa liuoksessa proteiinin yhden tai useamman vapaan aminoryhmän kanssa kaavan IA mukaisen konjugaatin tuottamiseksi. Tämä reaktio voidaan suorittaa tavanomaisissa olosuhteissa, joilla amiineja kondensoidaan vesipohjaisessa liuoksessa. Tämä reaktio suoritetaan ylei-10 sesti standardissa vesipohjaisessa puskuriliuoksessa, jonka pH on 7 - 10, kaavan IA mukaisen konjugaatin tuottamiseksi. Tämä reaktio voi tuottaa eri molekyylipainoisten PEG-proteiinikonjugaattien seoksen riippuen proteiinissa olevien vapaiden aminoryhmien määrästä ja reaktioajasta. 15 Sitten PEG-proteiinikonjugaatit voidaan erottaa yksittäisiksi komponenteikseen tavanomaisin menetelmin, kuten korkean erotuskyvyn nestekromatografiällä (HPLC) tai geeli-elektroforeesilla. Mitä tahansa tavanomaisia olosuhteita voidaan käyttää yhdisteiden erottamiseksi molekyylipainon 20 suhteen HPLC:11a tai geelielektroforeesilla. Tämän seoksen ... erottaminen voidaan suorittaa niiden tuotteiden molekyyli- “ ’ painojen mukaisesti, joiden tuotteiden muodostus on kuvat- « « · • ••Σ tu tässä.
• ’· Kaavan IB mukainen IFN-konjugaatti voidaan valmis- • * · • 25 taa seuraavan reaktiokaavion mukaisesti: * * * • · • * • · * * · » » · » * * i • * * • a * « * • « tll I « t I · I t t • a * ·
• » I
• · · > » a · · « a • a R5 15 109765
Il * I
„ CI-C-CI
N OH
5 ' ' a"V*\
0 II
o\\J
PEG-alkoholi
IV
15 i ' 20 χθ RO-(CH2CHO)x ”(CH2CHO)jr (CHjiCHO^-CHzCHO 0 R1 r2 r3 r< 25 « I · · > » ·.· · NH2-::’-nterferon;‘· :.v: 30 .0 N|--interferoni RO-iCHaCHO), — (CH^HO)^-(CHaCHOJz-CHaCH ^ V 35 L I I I n i-b
,...: r1 R2 r3 r4 O
109765 ! 16 jossa R, R1, R2, R3, R4, R5, m, x, y, z ja ehdot ovat, kuten yllä.
Kaavan IV mukainen yhdiste tuotetaan kondensoimal-la fosgeeni 2-hydroksipyridiinin (substituoitu, jos R5 = 5 alempi alkyyli) kanssa käyttäen mitä tahansa tavanomaista menetelmää, jota käytetään happohalidin kondensoimisessa alkoholin kanssa.
PEG-alkoholin kondensoiminen kaavan IV mukaisen yhdisteen kanssa suoritetaan käyttäen tavanomaisia olosuh-10 teitä, joita käytetään alkoholin kondensoimisessa karbonaatin kanssa, kaavan II-B mukaisen yhdisteen tuottamiseksi. Kaavan II-B mukainen yhdiste kondensoidaan proteiinin kanssa proteiinin yhden tai useamman vapaan aminoryhmän välityksellä kaavan I-B mukaisen yhdisteen tuottamiseksi. 15 Tämä reaktio suoritetaan samalla tavalla kuin on kuvattu kaavan IIA mukaisen yhdisteen kondensoimiseksi kaavan I-A mukaisen konjugaatin tuottamiseksi. Riippuen vapaiden ami-noryhmien määrästä siinä proteiinissa, joka reagoi kaavan II-B mukaisen yhdisteen kanssa, kaavan I-B mukainen kon-20 jugaatti voidaan muodostaa konjugaattiseoksena, joka sisältää eri molekyylipainoja. Tämä konjugaattiseos voidaan erottaa samalla tavalla kuin on kuvattu tässä aiemmin.
’··· Kaavan IB mukainen yhdiste voidaan tuottaa myös t · · ^ käyttäen seuraavaa reaktiokaaviota: 25 I ·
RO-(CH2CHO)x-(CH2CHO)y-(CH2CHO)z-CH2CHOH + T O
O.; 30 R* • I ·
IV
• · V
» ·
* I
t * I
V.: 35 i f 17 109765 RO-(CH2CHO^-(CH2CHO)y-(CH2CHO)z-CH2CHO - — C=0 A1 A2 A3 A4 2
5 III
NHy interferoni < r 10 » o — Ϊ RO-(CH2CHO)x-(CH2CHO)y-(CH2CHO)z-CH2 CH- Q NNH--interferoni I I I I ι-b 15 R1 R2 R3 R4 jossa R, R1, R2, R3, R4, R5, m, x, ja y ovat, kuten yllä.
Tässä reaktiokaaviossa PEG-alkoholi kondensoidaan 20 kaavan IV mukaisen yhdisteen kanssa kaavan III mukaisen yhdisteen tuottamiseksi. Tässä reaktiossa muodostuu kaavan * · · ,, : IIB mukainen yhdiste välivaiheena, joka sitten reagoi toi- 'j· sen PEG-alkoholimoolin kanssa tuottaen kaavan III mukaisen yhdisteen. Tätä reaktiota suoritettaessa PEG-alkoholi on 25 läsnä määränä, joka on ainakin 2 moolia per mooli kaavan IV mukaista yhdistettä. Tässä menetelmässä voidaan käyttää » i mitä tahansa tavanomaista menetelmää, jota käytetään alko- * · ♦ * holin kondensoimisessa karbonaatin kanssa. Kaavan III mu kaisen yhdisteen annetaan reagoida interferonin kanssa • * · ’· V 30 kaavan I-B mukaisen konjugaatin muodostamiseksi samalla tavalla kuin on kuvattu muutettaessa kaavan IIA mukainen *.·. yhdiste kaavan IA mukaiseksi yhdisteeksi. Riippuen pro- ,···, teiinissa olevien vapaiden aminoryhmien määrästä kaavan III mukaisen yhdisteen kondensoiminen proteiinin kanssa V.: 35 tuottaa konjugaattiseoksen, joka voidaan erottaa yksittäi- 18 109765 siksi komponeneteikseen samalla tavalla kuin tässä on aiemmin kuvattu kaavan IA mukaisen konjugaatin erottamiseksi .
Tämän keksinnön mukaisesti on havaittu, että tämän 5 keksinnön mukaisesti valmistetuilla interferonikonjugaa-teilla on sama käyttökelpoisuus kuin proteiinilla, jota käytetään konjugaatin muodostukseen. Sen vuoksi nämä konjugaatit ovat terapeuttisesti aktiivisia samalla tavalla kuin proteiini, josta ne on muodostettu ja niitä 10 voidaan käyttää samalla tavalla kuin proteiinia itseään ilman, että tuotetaan ei-toivottuja immuunivasteita, jotka voivat tapahtua annettaessa kohteille proteiineja itseään. Sen vuoksi tässä kuvataan myös farmaseuttisia koostumuksia perustuen kaavan I mukaisiin yhdisteisiin tai niiden suo-15 loihin ja menetelmiä niiden tuottamiseksi.
Tässä kuvattavat farmaseuttiset koostumukset, joita käytetään sairauksien säätelemiseksi tai ehkäisemiseksi, sisältävät yleisen kaavan I mukaisen interferoni-konjugaatin ja terapeuttisesti inertin myrkyttömän ja 20 terapeuttisesti hyväksyttävän kantajamateriaalin. Käytettävät farmaseuttiset koostumukset voidaan formuloida ja : annostella tavalla, joka on yhdenmukainen hyvän lääke- '··· tieteellisen tavan kanssa ottaen huomioon hoidettavan tau- din, yksittäisen potilaan tilan, proteiinikonjugaatin an-25 tokohdan, antotavan ja muut lääkäreiden tuntemat tekijät.
• · !! ! Seuraavat esimerkit edustavat esillä olevan • * · *.,) keksinnön kuvaavia suoritustapoja niin, että se ei ole » · · ’·’ niiden rajoittama.
Näissä esimerkeissä käytettynä Jeffamine M-2070 on 30 keskimääräisen molekyylipainon 2070 sisältävä monometok- sipolyoksialkyleenipropyyliamiinipolymeeri, joka on peräi- sin propyleeni- ja etyleenioksidista, joka koostuu poly- ”... etyleeniglykolirungosta ja sisältää keskimäärin 30 % umpi- » · "* mähkäisesti inkorporoituneita propyleenioksidiryhmiä.
35 i 19 109765
Jeffamine M-IOOO on keskimääräisen molekyylipainon 1000 sisältävä monometoksipolyalkyleenipropyyliamiinipo-i lymeeri, joka on peräisin propyleeni- ja etyleenioksidis- ta, joka koostuu polyetyleeniglykolirungosta sisältäen 5 14 % spesifisesti inkorporoituneita propyleenioksidiryh- miä, jossa x on keskimäärin 18,6, y on keskimäärin 1,6 ja z on 0 (x:ää, y:tä ja z: aa käytetään tässä samassa merkityksessä kuin yllä on kuvattu).
Kaikkia näissä esimerkeissä kuvattuja reagensseja 10 voidaan säilyttää kuivattuna ruskeassa lasiastiassa 4 °C:ssa, kunnes niitä tarvitaan. Kutakin modifikaatiota varten käytetään tuoreita eriä.
Esimerkki 1
Alfa-alfa-oksometyleenibis[omega-metoksipoly(oksi-15 1,2-etaanidiyyli)]SRU 111 -yhdisteen valmistus
Suspensiosta, jossa oli 1,5 g MPEG-yhdistettä (me-toksipolyetyleeniglykolia) (mp. 5000) 80 ml:ssa vedetöntä tolueenia, tislattiin 50 ml liuotinta. Sitten liuos jäähdytettiin ja lisättiin 30,5 mg di-2-pyridyylikarbonaattia. 20 Sitten tuloksena syntynyttä seosta takaisinvirtautettiin 24 tuntia. Sitten liuos jäähdytettiin ja tuloksena synty- • · · : nyt saostuma suodatettiin ja pestiin pienellä määrällä ··· tolueenia ja sen jälkeen dietyylieetterillä. Sitten kiin- teä aines kuivattiin korkeassa tyhjiössä saaden 0,6 g al-25 fa, alfa ' -oksometyleenibis (omega-metoksipoly (oksi-1,2- t · etaanidiyyli) SRU 111 -yhdistettä valkoisena jauheena. PEG-modifioitu interferoni valmistettiin alla kuvatulla mene-telmällä 1.
PEG-modifioidun interferoni-alfan valmistus \ 30 Menetelmä 1: Konsentraationa 5 mg proteiinia per ',,,· ml olevaa rekombinantti-interferoni-alfaa dialysoitiin 5 ;·. mM natriumasetaatti, pH 5,0, 120 mM NaCl -puskuria vas- r i i taan. Lisättiin kaliumtiosyanaattia niin, että lopullisek- > · ‘1’ si konsentraatioksi saatiin 0,5 M, ja pH säädettiin lisää- ν',: 35 mällä yksi kymmenesosa tilavuudesta 1 M Tricine- * · 20 109765 natriumhydroksia, pH 11,9 niin, että liuoksen lopulliseksi pH:ksi tuli 10,0. PEG-reagenssi lisättiin proteiiniin 3:1 I moolisuhteessa kiinteänä aineena tai liuotettuna DMSOrhon j (DMSO:n tilavuus oli vähemmän kuin 10 % kokonaistila- | 5 vuudesta). Modifikaation annettiin jatkua huoneenlämpö- tilassa 30 minuutin - 4 tunnin ajan, jonka jälkeen lisättiin 1 M L-glysiiniä (pH 6,3) lisämodifikaation
lopettamiseksi niin, että lopulliseksi konsentraatioksi tuli 20 mM. PEG-modifioitu proteiini saostettiin lisäämäl-10 lä 3,5 M ammoniumsulfaatti, 50 mM natriumfosfaatti -liuosta, pH 7,0 niin, että ammoniumsulfaatin lopulliseksi konsentraatioksi tuli 1,1 M (1,0 M ammoniumsulfaatti PEG-1000-molekyylille) , saostuma kerättiin sentrifugoimalla, pestiin ja liuotettiin uudelleen 25 mM ammoniumasetaat-15 tiin, pH 5,0. PEG-modifioidut proteiinit puhdistettiin kromatografoimalla hydrofobisessa vaihtopylväässä (esimerkiksi 75 x 7,5 mm), kuten BioRad TSK Phenyl-5-PW tai Toyopearl Phenyl-650M, käyttäen gradienttia, jossa oli aleneva ammoniumsulfaattimäärä 50 mM natriumfosfaatissa, 20 pH 7,0. Vaihtoehtoisesti, PEG-IFN puhdistettiin geelisuo-datuksella Sephacryl S-200-pylväässä (esimerkiksi 90 cm x : 3,2 cm:n pylväs)(Pharmacia), joka oli tasapainotettu 25 mM
’ ··· natriumasetaatti (pH 5,0), 200 mM NaCl -liuoksessa. PEG- modifioitu proteiini tunnistettiin SDS-PAGE: 11a. Pylväästä 25 eluoitunut proteiini, joka vastasi interferonia, jossa oli • · yksi (PEGi-IFN) tai kaksi (PEG2-IFN) PEG-molekyyliä • · *,,! sitoutuneena yhdistettiin, konsentroitiin ja proteiini » · ·
I * I
’ määritettiin absorbanssilla 280 nm:ssa tai kolorimetri- sellä testillä (Pierce). PEG-IFN säilytettiin 4 °C:ssa 50 * · > · * V 30 mM natriumfosfaatti, pH 7,0, 0,3 M ammoniumsulfaatti - ‘ · puskurissa.
Menetelmä 2: Proteiinikonsentraatiossa, joka oli * · ·
.... noin 6 mg per ml, oleva a-2a-interferoni dialysoitiin 5 mM
* · “!* natriumasetaatti, pH 5,0, 0,12 M natriumkloridi -liuok- V." 35 seen. Proteiinikonsentraatio määritettiin mittaamalla ab- 21 109765 j sorbanssi 280 nm:ssa käyttäen ekstinktiokerrointa 1,0 mg1 ml. Proteiiniliuos sekoitettiin modifioivan rea-genssin kanssa proteiinin 1:3 moolisuhteessa reagenssiin. Modifikaatioreaktio aloitettiin säätämällä pH 10,0 reen 5 käyttäen yksi kymmenesosatilavuutta 0,1 M Na2B407-Na0H-liuosta, pH 10,7. Kun oli inkuboitu huoneenlämpötilassa yksi tunti, reaktio pysäytettiin lisäämällä yksi kahdeskymmenesosa tilavuutta 1 M glysiiniä, pH 7,5. 3 - 5 minuutin kuluttua pH alennettiin 5,0 - 6,Oraan lisäämällä yksi 10 kahdeskymmesosa tilavuutta 1 M natriumasetaattia, pH 4,0.
Liuos, joka sisälsi PEG-interferonia, lopetusrea-genssia ja modifioimatonta interferonia, laimennettiin nelinkertaisesti 40 mM ammoniumasetaatilla, pH 4,5, ja ladattiin CM-selluloosapylvääseen (Whatman CM-52, noin 15 0,5 ml resiiniä per mg proteiinia). Kun pylväs oli pesty 5 tilavuudella 40 mM ammoniumasetaattia, pH 4,5, PEG-inter-feroni ja modifioimaton interferoni eluoitiin käyttäen 40 mM ammoniumasetaatissa, pH 4,5, olevaa lineaarista nat-riumkloridigradienttia (0 - 0,5 M). Fraktiot, jotka sisäl-20 sivät proteiinin, tunnistettiin absorbanssilla 280 nmrssa ja PEG-interferonia sisältävät fraktiot tunnistettiin SDS-PAGE: 11a.
··· PEG-interferoni lisäpuhdistettiin kokoerotukseen perustuvalla geelisuodatuskromatografiällä pylväässä, joka 25 sisälsi Sephacryl S-200-resiiniä (Pharmacia LKB) . Pyi- I i väästä eluoituneet fraktiot analysoitiin SDS-PAGErlla ja PEG-interferonia sisältävän huipun materiaalit yhdistet- * » · ‘ tiin.
Esimerkki 2 • · ‘30 Alfa, alfa-oksometyleenibis [omega-metoksipoly (oksi- 1,2-etaanidiyyli) ] SRU 28,3 -yhdisteen valmistus F. Esimerkissä 1 kuvatulla menetelmällä MPEG (mp.
,···. 1300) muutettiin yhdisteeksi alfa, alfa-oksometyleenibis- * φ < i · » 22 109765 [omega-metoksipoly(oksi-1,2-etaanidiyyli)]SRU 28,3 ja PEG-modifioitu interferoni valmistettiin tätä reagenssia käyttäen esimerkissä 1 kuvatulla menetelmällä 1.
Esimerkki 3 5 Yhdisteen alfa-metyyli-omega-[2[[(2-pyridinyyli-
oksi)karbonyyli]oksi]etoksi]poly(oksi-1,2-etaanidiyyli)SRU
111,7 valmistus
Liuoksesta, jossa oli 1 g molekyylipainon 5000 sisältävää MPEG-yhdistettä liuotettuna 30 ml:aan vedetöntä 10 CH2Cl2:ta, tislattiin 10 ml liuotinta. Liuos jäähdytettiin huoneenlämpötilaan ja lisättiin 132 mg (0,6 mM) di-2-py-ridyylikarbonaattia ja 4 mg DMAP-yhdistettä. Sitten tuloksena syntynyttä liuosta sekoitettiin 14 tuntia ja liuotin poistettiin tyhjiössä. Jäännös trituroitiin dietyylieet-15 terillä ja tuloksena syntynyt saostuma suodatettiin. Sitten tuote liuotettiin 7 ml:aan vedetöntä glyymiä, lämmitettiin sen liuottamiseksi ja tuloksena syntyneen liuoksen annettiin jäähtyä huoneenlämpötilaan ja seistä siinä useita tunteja. Sitten tuloksena syntynyt saostuma suodatet-20 tiin ja pestiin 2x5 ml:11a vedetöntä glyymiä. Kiinteä aines kuivattiin sitten tyhjiöuunissa ja typpikaasuvirran : alla saaden 0,7 g yhdistettä alfa-[(2-pyridinyylioksi)kar- ··· bonyyli] omega-metoksipoly (oksi-1,2-etaanidiyyli) SRU 111,7.
i i M
y>4t Analyyttisesti laskettu yhdisteelle C9H11NO4 (CH2- 25 CH2O) 111,-7: C, 54,57; H, 9,02; N, 0,28. Löydetty: C, 54,51; • * H, 9,19; N, 0,28.
PEG-modifioitu interferoni valmistettiin tätä rea- * t · I < · genssia käyttäen esimerkin 1 menetelmän 1 mukaisesti. Esimerkki 4 1 · I * * '· '· 30 Yhdisteen alfa- (2-pyridinyylioksi) karbonyyli] ome- ga-metoksipoly (oksi-1,2-etaanidiyyli) SRU 225 valmistus ;*. Esimerkissä 3 kuvatun menetelmän mukaisesti mole- t · · ,···, kyylipainon 10 000 sisältävä MPEG muutettiin yhdisteeksi > * alfa-[(2-pyridinyylioksi)karbonyyli]omega-metoksipoly(ok-LV 35 si-1,2-etaanidiyyli) SRU 225.
23 109765 !
Analyyttisesti laskettu yhdisteelle C9H11NO4 (CH2-CH20) 225: C, 54,54; H, 9,08; N, 0,14. Löydetty: C, 54,54; H, 9,12; N, 0,11.
PEG-modifioitu interferoni valmistettiin tätä rea-5 genssia käyttäen esimerkissä 1 kuvatun menetelmän 1 mukaisesti .
Esimerkki 5
Yhdisteen alfa-metyyli-omega[2-[2-[[2-pyridinyy- lioksi)karbonyyli]oksi]propoksi]propoksi]poly(oksi-1,2-10 etaanidiyyli)SRU 64,7 valmistus
Liuoksesta, jossa oli 0,5 g yhdistettä alfa-2-[2-(hydroksipropoksi)propyyli]omega-metoksipoly(oksi-1,2-etaanidiyyli)SRU 64,7 40 mlrssa vedetöntä CH2Cl2:ta, tislattiin 15 ml liuotinta. Liuokseen lisättiin sitten 108 mg 15 di-2-pyridyylikarbonaattia, 4 mg DMAP-yhdistettä ja useita 4A molekyyliseulahelmiä. Sitten seosta sekoitettiin yli yön, suodatettiin ja sitten liuotin poistettiin alennetussa paineessa. Jäännös puhdistettiin kokoerotukseen perustuvalla kromatografiällä.
20 Tämä reagenssi vastaa kaavan
O
Il
; ; CH3-0-(CH2CH20)nCH2CH0CH2CH — 0-UNJI
• ·*: 25 CH3 CH3 • » * » · » « · • ·
I I I
* · t * » · mukaista yhdistettä, jossa n on noin 64. Tämä vastaa polymeerin molekyylipainoa, joka on noin 3 000 daltonia.
• * * ’> 30 PEG-modifioitu interferoni valmistettiin tätä rea- » » ...* genssia käyttäen esimerkissä 1 kuvatun menetelmän 1 mukai- G. sesti.
» · · 1 1 1 * » » · i » · i * * » S » » * 24 109765
Esimerkki 6 ί Yhdisteen alfa-metyyli-omega-[2-[2-[[(2-pyridinyy- lioksi)karbonyyli]oksi]propoksilpropoksi]poly(oksi-1,2-etaanidiyyli)SRU 110 valmistus 5 Esimerkissä 5 kuvatun menetelmän mukaisesti yhdiste alfa-2-[2-(hydroksipropoksi)propyyli]-omega-metok-sipoly(oksi-1,2-etaanidiyyli)SRU 110 muutettiin yhdisteeksi alfa-metyyli-omega-[2-[2-[[(2-pyridinyylioksi)karbonyyli] oksi]propoksi]propoksi]poly(oksi-1,2-etaanidiyyli)SRU 10 110.
Tämä reagenssi (IIB—2) vastaa sitä, joka on kuvattu esimerkissä 5 (11B—1) paitsi, että n on noin 110, joka vastaa noin 5 000 daltonia.
PEG-modifioitu interferoni valmistettiin tätä rea-15 genssia käyttäen esimerkissä 1 kuvatun menetelmän 1 mukaisesti .
Esimerkki 7
Oksiraanin kanssa polymeerinä olevan metoksioksi-raanin, [2-[[(2-pyridinyylioksi)karbonyyli]amino]propyyli-20 metyylieetterin (MO/O = 10/32), valmistus
Liuoksesta, jossa oli 1 g Jeffamine M-2070-poly- • · · .. ; meeriä (Texaco Chemical Co.) 40 ml:ssa vedetöntä jj· CH2Cl2:ta, tislattiin 15 ml liuotinta. Liuos jäähdytettiin !*·.. 0 °C:seen ja lisättiin 215 mg di-2-pyridyylikarbonaattia.
• V. 25 Tuloksena syntynyttä liuosta sekoitettiin lisää 4 tuntia 0 °C:ssa, jonka jälkeen liuotin poistettiin alennetussa • paineessa. Sitten jäännös puhdistettiin kahden kokoerotuk- • · · seen perustuvan phenomenex-pylvään avulla, jotka oli liitetty peräkkäin (500 Ä ja 1 000 Ä). Tuotteessa on kaksi • · « *· *· 30 rintamaa UV:ssa 232 nm:ssa ja 310 nm:ssa.
Tämä reagenssi vastaa kaavan CH30CH2CH20(CH2CH0)-CH2CH—NH—C -Ο-L J IIA*1
*···* 35 L I il N
R2 ch3 o 25 109765 i mukaista yhdistettä, jossa R5 on H, R2 on H tai metyyli ja n:n keskimääräinen jakautuma on 32, jos R2 on H, ja n:n keskimääräinen jakautuma on 10, jos R2 on metyyli.
PEG-modifioitu interferoni valmistettiin tätä rea-5 genssia käyttäen esimerkissä 1 kuvatun menetelmän 2 mukaisesti .
Esimerkki 8
Oksiraanin kanssa polymeerinä olevan metyyliok-siraanin, [2-[[(3-metyyli-2-pyridinyylioksi)karbonyyli]- 10 amino]propyylimetyylieetterin (MO/O = 10/32), valmistus
Esimerkissä 7 kuvatun menetelmän mukaisesti annettiin 1 g:n Jeffamine M-2070-polymeeriä reagoida bis(3-me-tyyli-2-pyridyyli)karbonaatin kanssa saaden oksiraanin kanssa polymeerinä oleva metyylioksiraani, [2-[[(3-metyy-15 li-2-pyridinyylioksi)karbonyyli]amino]propyylimetyylieet-teri (MO/O = 10/32).
Tämä reagenssi (IIA-2) vastaa esimerkissä 7 kuvattua (IIA-1) paitsi, että R5 on CH3.
PEG-modifioitu interferoni valmistettiin tätä rea-20 genssia käyttäen esimerkissä 1 kuvatun menetelmän 1 mukaisesti .
• · · .. ' Esimerkki 9 • · · G’ Oksiraanin kanssa polymeerinä olevan metyylioksi- raanin, [2-[[ (2-pyridinyylioksi)karbonyyli]amino]propyyli-·’·*. 25 metyylieetteriryhmän (MO/O = 1,6/18,6), valmistus
Esimerkissä 7 kuvatun menetelmän mukaisesti 0,6 » · g:n Jeffamine M-1000-polymeeriä (Texaco Chemical Co.) • · · annettiin reagoida 155,6 mg:n kanssa di-2-pyridyylikarbo-naattia saaden oksiraanin kanssa polymeerinä oleva metyy- • · · *· 30 lioksiraani, [2-[[(2-pyridinyylioksi)karbonyyli]amino]pro- ...* pyylimetyylieetteriryhmä (MO/O = 1,6/18,6).
• · · • * • · * t · • · 1C9765 26 j Tämä tuottaa kaavan
O
CH30(CH2CH20^6(CH2CH0)16CH2CH-N' '0-Lj IIA'3
I I H N
5 ch3 ch3 mukaisen yhdisteen, jolla on osoitettu yksiköiden keskimääräinen jakautuma polymeerituotteessa.
PEG-modifioitu interferoni valmistettiin tätä rea-j 10 genssia käyttäen esimerkissä 1 kuvatun menetelmän 1 mukai sesti.
Interferonin viruksen vastainen aktiivisuus
Interferonin ja PEG-modifioidun interferonin viruksen vastainen aktiivisuus määritettiin (Rubenstein et 15 ai., (1981) J. Virol. 37: 755 - 758; Familletti et ai., (1981) Methods Enzymol. 78: 387 - 394). Kaikki testit standardoitiin suhteessa kontrolliin. Testissä käytetyn interferonistandardin spesifinen aktiivisuus oli 2 x 108 yksikköä per mg proteiinia.
20 Olosuhteet interferonin modifioimiseksi perustui vat optimoituihin menetelmiin, kuten on kuvattu. PEG- .. · modifikaatio analysoitiin SDS-PAGE:lla tarkkaillen inter- « * · feronin muuttumista monoPEG-interferoniksi useissa inku- • · · « baatioaikapisteissä (kemiallinen reaktiivisuus) ja jakau-25 tumista eri PEG-interferonikonjugaattilajeiksi (kohtase-lektiivisyys) . SDS-PAGE:ssa PEG-modifioidut lajit havait-tiin hitaammin kulkevina rintamina geelissä. Sekä monoPEG-että diPEG-interferoneita tuotettiin riittävinä saantoina niin, että nämä lajit voitiin puhdistaa reaktioseoksista » · · ’* " 30 hydrofobiseen interaktioon perustuvalla kromatografiällä.
• · ...· Puhdistetut PEG-interferonit testattiin viruksen vastaisen ·*·,, aktiivisuuden suhteen ja verrattiin modifioimattomiin in- terferoni-a2a standardeihin. Käytettyjen polymeerien mole- * t · kyylipainot kuin myös joidenkin pegyloitujen johdannaisten *·’·* 35 viruksen vastainen aktiivisuus on kuvattu taulukossa 1.
27 109765
Taulukko 1 PEG-reagenssien fysiologiset ominaisuudet ja niiden proteiinikonjugaattien biologiset aktiivisuudet 5
Viruksen vastainen aktiivisuus
Esimerkin Polymeerin (% kontrollista)
yhdiste molek.paino monoPEG diPEG
10 4 10000 25 2 3 5000 40 4
1 5000 40 ND
6 5000 40 ND
5 3000 Θ0 ND
15 7 2070 45 ND
2 1300 70 ND
9 1000 100 40 ND as ei määritetty • · · * * « · i · f · · I · I · · » · · • · • I · · I * · * » ·

Claims (18)

  1. 28 109765
  2. 1. Menetelmä interferonikonjugaatin valmistamiseksi, jolla on kaava 5 Γ ° 1 ϊ RO-(CH2CHO)x-(CH2CHOy(CH2CHO)z^H2CH-W//'s· NH-- interferoni (I) ! 1 12 i.3 I i R1 R R R4 L J m 10 jossa R on alempi alkyyli; R1, R2, R3 ja R4 ovat H tai alempi alkyyli; m valitaan kokonaisluvusta, joka on > 1 aina siihen lukuun asti kuin interferonissa on alttiita amino-15 ryhmiä; W on O tai NH; x on kokonaisluku, joka on välillä 1 ja 1 000 ja y ja z ovat kumpikin kokonaislukuja 0 - 1 000, ja x:n, y:n ja z:n summa on 3 - 1 000; 1 2 20 sillä ehdolla, että ainakin yksi R :stä, R :sta, R3:sta ja R4:stä on alempi alkyyli; • · · .. · tunnettu siitä, että menetelmä sisältää • · · vaiheet, joissa yhdiste, jolla on yleinen kaava ’’*·· R5 i:v 25 o V^i lv X [ J (II) :.: : RO-iCHsCHOh-IC^CHObtCHtCHO^-C^CH-W O ^ k ~ k k k * * · 30 tai jos W on O interferonikonjugaatissa, yhdiste, jolla on yleinen kaava > i » » · : **: dll) ’:' RO-(CH2CHO)x-(CH2CHOL-(CH2CHO)z-CH2CHO — c=o 35 1' h k
  3. 1 J2 29 109765 ί joissa kaavoissa R, R1, R2, R3, R4, W, x, y ja z ovat kuten yllä on määritelty ja R5 on H tai alempi alkyyli, sillä ehdolla, että ainakin yksi R1:stä, R2:sta, R3:sta ja R4:stä 5 on alempi alkyyli; saatetaan reagoimaan interferonin tai sen suolan kanssa ja interferonikonjugaatit eristetään reaktioseoksesta.
  4. 2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että x, y ja z valitaan niin, että 10 konjugaatin polymeeriyksikön molekyylipaino on välillä noin 300 - 30 000 daltonia.
  5. 3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että m on 1.
  6. 4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, 15 tunnettu siitä, että R on metyyli.
  7. 5. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että x, y ja z valitaan niin, että konjugaatin polymeeriyksikön molekyylipaino on välillä noin 1 000 - 5 000 daltonia.
  8. 6. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että x, y ja z valitaan niin, että • · · .. ·’ konjugaatin polymeeriyksikön molekyylipaino on välillä noin 1 000 - 2 200 daltonia. < · 4 *
  9. 7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, 25 tunnettu siitä, että x ja y ovat 5,0 - 500,0 ja z i · on 0,0 - 4,0. *..! 8. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, ' tunnettu siitä, että x on 10,0 - 100,0, y on 1,0 - 10,0 ja z on 0. > · · '· ‘5 30 9. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, i » · '...· tun nettu siitä, että interferoni on interferoni a2A. i · · .·*·. 10. Patenttivaatimuksen 9 mukainen menetelmä, » * ’·* tunnettu siitä, että W on NH; m on 1; R, R2 ja
  10. 35 R4 ovat CH3; R1 on H; x on 18,6, y on 1,6 ja z on 0. 30 1 0 9 7 6 5
  11. 11. Yhdiste, jolla on kaava R5 o s ilj (II) RO-(CH2CHO)x-{CH2CHO)y-(CH2CHO)z-CH2CH-W' Xr N 1' k2 R3 1 jossa R on alempi alkyyli, R1, R2, R3, R4 ja R5 ovat H tai 10 alempi alkyyli; W on NH tai O; x on kokonaisluku, joka on välillä 1 ja 1 000, ja y ja z kumpikin ovat kokonaislukuja 0-1 000, ja x:n, y:n ja z:n summa on 3 - 1 000, 15 sillä ehdolla, että jos W on NH tai jos W on O ja R5 on H, ainakin yksi R1:stä, R2:sta, R3:sta ja R4:stä on alempi alkyyli.
  12. 12. Patenttivaatimuksen 11 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että x, y ja z valitaan niin, että 20 mainitun yhdisteen molekyylipaino on välillä noin 300 -30 000 daltonia. · 13. Patenttivaatimuksen 11 mukainen yhdiste, t * t t<|j· tunnettu siitä, että R on metyyli.
  13. 14. Patenttivaatimuksen 13 mukainen yhdiste, 25 tunnettu siitä, että x on 10,0 - 100,0, y on 1,0 - 10,0 ja z on 0,0 - 4,0. • · ··· 15. Yhdiste, jolla on kaava « * · ROKCH2CHO^-(CH2CHO)-{CH2CHO)-CH2CHO f- C=0 ,TTT. ... h l2 7 I3 L 11 ’ R R2 R R4 • · 2 • * · jossa Ml R on alempi alkyyli;
  14. 35 R1, R2, R3 ja R4 ovat H tai metyyli, 31 109765 x on kokonaisluku välillä 1-1 000 ja y ja z kum-t pikin ovat kokonaislukuja välillä 0 - 1 000, ja x:n, y:n ja z:n sumina on 3 - 1 000.
  15. 16. Patenttivaatimuksen 15 mukainen yhdiste, 5 tunnettu siitä, että x, y ja z valitaan niin, että mainitun yhdisteen molekyylipaino on välillä noin 300 - 30 000 daltonia.
  16. 17. Patenttivaatimuksen 15 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että ainakin yksi R^ustä, R2:sta,
  17. 10 R3:sta ja R4:stä on alempi alkyyli.
  18. 18. Patenttivaatimuksen 15 mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että R on metyyli. • « * * t * · · · I · • i> » I * * » * * » 3 I * · I » • I t • · · » · * · · I * * • * · • » I | · » t » I » · ' I · I I I · I f · * t t I « li· » » » III·· • » 32 109765
FI933740A 1992-08-26 1993-08-25 Menetelmä interferonikonjugaatin valmistamiseksi ja menetelmässä käyttökelpoisia yhdisteitä FI109765B (fi)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US07/935,770 US5382657A (en) 1992-08-26 1992-08-26 Peg-interferon conjugates
US93577092 1992-08-26

Publications (3)

Publication Number Publication Date
FI933740A0 FI933740A0 (fi) 1993-08-25
FI933740A FI933740A (fi) 1994-02-27
FI109765B true FI109765B (fi) 2002-10-15

Family

ID=25467637

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI933740A FI109765B (fi) 1992-08-26 1993-08-25 Menetelmä interferonikonjugaatin valmistamiseksi ja menetelmässä käyttökelpoisia yhdisteitä

Country Status (37)

Country Link
US (1) US5382657A (fi)
EP (1) EP0593868B1 (fi)
JP (1) JP2859105B2 (fi)
KR (1) KR100295520B1 (fi)
CN (3) CN1183112C (fi)
AT (1) ATE165102T1 (fi)
AU (1) AU668742B2 (fi)
BG (1) BG98067A (fi)
BR (1) BR9303469A (fi)
CA (1) CA2103829C (fi)
CZ (1) CZ169393A3 (fi)
DE (1) DE69317979T2 (fi)
DK (1) DK0593868T3 (fi)
EE (1) EE9400151A (fi)
ES (1) ES2116376T3 (fi)
FI (1) FI109765B (fi)
HR (1) HRP931094A2 (fi)
HU (1) HUT67013A (fi)
IL (1) IL106750A0 (fi)
IS (1) IS4067A (fi)
LT (1) LT3174B (fi)
LV (1) LV10907B (fi)
MW (1) MW7693A1 (fi)
MX (1) MX9305146A (fi)
MY (1) MY131445A (fi)
NO (1) NO933028D0 (fi)
NZ (2) NZ264872A (fi)
OA (1) OA09850A (fi)
PH (1) PH30460A (fi)
PL (1) PL300194A1 (fi)
RO (1) RO112730B1 (fi)
SI (1) SI9300423A (fi)
SK (1) SK89893A3 (fi)
UY (1) UY23635A1 (fi)
YU (1) YU56693A (fi)
ZA (1) ZA936098B (fi)
ZW (1) ZW11193A1 (fi)

Families Citing this family (288)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2006596C (en) * 1988-12-22 2000-09-05 Rika Ishikawa Chemically-modified g-csf
US7264944B1 (en) 1989-04-21 2007-09-04 Amgen Inc. TNF receptors, TNF binding proteins and DNAs coding for them
DK0393438T3 (da) 1989-04-21 2005-05-30 Amgen Inc TNF-receptor, TNF-bindende proteiner og DNAér, der koder herfor
US6143866A (en) * 1989-07-18 2000-11-07 Amgen, Inc. Tumor necrosis factor (TNF) inhibitor and method for obtaining the same
IL95031A (en) 1989-07-18 2007-03-08 Amgen Inc A method of producing a recombinant human necrotic factor absorber
US6552170B1 (en) * 1990-04-06 2003-04-22 Amgen Inc. PEGylation reagents and compounds formed therewith
US5595732A (en) * 1991-03-25 1997-01-21 Hoffmann-La Roche Inc. Polyethylene-protein conjugates
US5880131A (en) * 1993-10-20 1999-03-09 Enzon, Inc. High molecular weight polymer-based prodrugs
US5919455A (en) 1993-10-27 1999-07-06 Enzon, Inc. Non-antigenic branched polymer conjugates
EP0730470B1 (en) * 1993-11-10 2002-03-27 Enzon, Inc. Improved interferon polymer conjugates
US5951974A (en) * 1993-11-10 1999-09-14 Enzon, Inc. Interferon polymer conjugates
AU1916295A (en) * 1994-02-08 1995-08-29 Amgen, Inc. Oral delivery of chemically modified proteins
US5730990A (en) * 1994-06-24 1998-03-24 Enzon, Inc. Non-antigenic amine derived polymers and polymer conjugates
US20030053982A1 (en) * 1994-09-26 2003-03-20 Kinstler Olaf B. N-terminally chemically modified protein compositions and methods
DE4435087A1 (de) * 1994-09-30 1996-04-04 Deutsches Krebsforsch Konjugat zur Behandlung von Infektions-, Autoimmun- und Hauterkrankungen
US5824784A (en) * 1994-10-12 1998-10-20 Amgen Inc. N-terminally chemically modified protein compositions and methods
US5738846A (en) * 1994-11-10 1998-04-14 Enzon, Inc. Interferon polymer conjugates and process for preparing the same
JP2758154B2 (ja) * 1995-04-06 1998-05-28 エフ・ホフマン−ラ ロシユ アーゲー インターフェロンを含む液体製剤
DE19514087A1 (de) * 1995-04-13 1996-10-17 Deutsches Krebsforsch Konjugat aus einem Wirkstoff, einem Polyether und ggfs. einem nicht als körperfremd angesehenen, nativen Protein
US5908621A (en) * 1995-11-02 1999-06-01 Schering Corporation Polyethylene glycol modified interferon therapy
AU7473096A (en) 1995-11-02 1997-05-22 Schering Corporation Continuous low-dose cytokine infusion therapy
TW517067B (en) * 1996-05-31 2003-01-11 Hoffmann La Roche Interferon conjugates
TW555765B (en) * 1996-07-09 2003-10-01 Amgen Inc Low molecular weight soluble tumor necrosis factor type-I and type-II proteins
US6753165B1 (en) * 1999-01-14 2004-06-22 Bolder Biotechnology, Inc. Methods for making proteins containing free cysteine residues
CN1269805A (zh) * 1997-07-14 2000-10-11 博尔德生物技术公司 生长激素和相关蛋白的衍生物
US7495087B2 (en) 1997-07-14 2009-02-24 Bolder Biotechnology, Inc. Cysteine muteins in the C-D loop of human interleukin-11
US7270809B2 (en) * 1997-07-14 2007-09-18 Bolder Biotechnology, Inc. Cysteine variants of alpha interferon-2
US20080076706A1 (en) 1997-07-14 2008-03-27 Bolder Biotechnology, Inc. Derivatives of Growth Hormone and Related Proteins, and Methods of Use Thereof
EP1011714A2 (en) * 1997-09-18 2000-06-28 F. Hoffmann-La Roche Ag Use of ifn-alpha and amantadine for the treatment of chronic hepatitis c
AU1825299A (en) 1997-12-17 1999-07-05 Enzon, Inc. Polymeric prodrugs of amino- and hydroxyl-containing bioactive agents
US6180095B1 (en) * 1997-12-17 2001-01-30 Enzon, Inc. Polymeric prodrugs of amino- and hydroxyl-containing bioactive agents
US5981709A (en) * 1997-12-19 1999-11-09 Enzon, Inc. α-interferon-polymer-conjugates having enhanced biological activity and methods of preparing the same
US5985263A (en) * 1997-12-19 1999-11-16 Enzon, Inc. Substantially pure histidine-linked protein polymer conjugates
FR2774687B1 (fr) * 1998-02-06 2002-03-22 Inst Nat Sante Rech Med Lipopeptides contenant un fragment de l'interferon gamma, et leur utilisation dans des compositions pharmaceutiques
US6180096B1 (en) 1998-03-26 2001-01-30 Schering Corporation Formulations for protection of peg-interferon alpha conjugates
ID28470A (id) * 1998-03-26 2001-05-24 Schering Corp Formulasi-formulasi untuk perlindungan terhadap konjugasi polietilen glikol-interferon alfa
EA003789B1 (ru) * 1998-04-28 2003-10-30 Апплайд Резеч Системз Арс Холдинг Н.В. КОНЪЮГАТЫ ПОЛИОЛ-β-ИНТЕРФЕРОН
JP5281726B2 (ja) 1998-05-15 2013-09-04 メルク・シャープ・アンド・ドーム・コーポレーション 慢性Ｃ型肝炎感染を有する、抗ウイルス処置を受けていない患者における、リバビリンおよびインターフェロンαを含む併用療法
ITMI981148A1 (it) * 1998-05-22 1999-11-22 Therapicon Srl Utilizzo di lisozima c modificato per preparare composizioni medicinali per il trattamento di alcune gravi malattie
ATE473759T1 (de) 1998-05-22 2010-07-15 Univ Leland Stanford Junior Bifunktionelle moleküle sowie darauf basierende therapien.
ATE307597T1 (de) * 1998-06-08 2005-11-15 Hoffmann La Roche Verwendung von peg-ifn-alpha und ribavirin zur behandlung chronischer hepatitis c
EP1087996B1 (en) * 1998-06-16 2007-01-17 The Board of Regents of The University of Oklahoma Glycosulfopeptides and methods of synthesis and use thereof
US7223845B2 (en) 1998-06-16 2007-05-29 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Synthetic glycosulfopeptides and methods of synthesis thereof
US20030143662A1 (en) * 1998-06-16 2003-07-31 Cummings Richard D. Glycosulfopeptide inhibitors of leukocyte rolling and methods of use thereof
DK1121156T3 (da) 1998-10-16 2006-06-06 Biogen Idec Inc Polymerkonjugater af interferon-beta-1a samt deres anvendelse
BR9915548A (pt) * 1998-10-16 2001-08-14 Biogen Inc Proteìnas de fusão de interferon-beta e usos
US6660843B1 (en) * 1998-10-23 2003-12-09 Amgen Inc. Modified peptides as therapeutic agents
BR0008759B1 (pt) 1999-01-14 2014-03-11 Bolder Biotechnology Inc Métodos para a produção de proteinas contendo resíduos de cisteina livre
US8288126B2 (en) 1999-01-14 2012-10-16 Bolder Biotechnology, Inc. Methods for making proteins containing free cysteine residues
CZ300546B6 (cs) * 1999-01-29 2009-06-10 Amgen, Inc. Fyziologicky aktivní konjugát, prostredek a zpusob prípravy
US6605273B2 (en) 1999-04-08 2003-08-12 Schering Corporation Renal cell carcinoma treatment
US6923966B2 (en) 1999-04-08 2005-08-02 Schering Corporation Melanoma therapy
US6362162B1 (en) 1999-04-08 2002-03-26 Schering Corporation CML Therapy
ATE419001T1 (de) 1999-04-08 2009-01-15 Schering Corp Melanoma therapie
JO2291B1 (en) 1999-07-02 2005-09-12 اف . هوفمان لاروش ايه جي Erythropoietin derivatives
EP2241623A3 (en) 1999-07-07 2010-12-01 ZymoGenetics, Inc. Monoclonal antibody against a human cytokine receptor
AU4934299A (en) * 1999-07-15 2001-02-05 Kuhnil Pharm. Co., Ltd. Novel water soluble-cyclosporine conjugated compounds
US7144574B2 (en) * 1999-08-27 2006-12-05 Maxygen Aps Interferon β variants and conjugates
US6531122B1 (en) 1999-08-27 2003-03-11 Maxygen Aps Interferon-β variants and conjugates
US7431921B2 (en) * 2000-04-14 2008-10-07 Maxygen Aps Interferon beta-like molecules
CA2387205A1 (en) 1999-10-12 2001-04-19 Santen Pharmaceutical Co., Ltd. Interferon complex and pharmaceutical use thereof
CN1309423C (zh) 1999-11-12 2007-04-11 马克西根控股公司 干扰素γ偶联物
JP2003513681A (ja) * 1999-11-12 2003-04-15 マキシゲン・ホールディングス・リミテッド インターフェロンガンマ・コンジュゲート
US6887842B1 (en) * 1999-11-19 2005-05-03 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Modulating a pharmacokinetic property of a drug by administering a bifunctional molecule containing the drug
US7220552B1 (en) 1999-11-19 2007-05-22 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Bifunctional molecules and their use in the disruption of protein-protein interactions
EP1229924A4 (en) 1999-11-19 2004-12-15 Univ Leland Stanford Junior TARGETED BIFUNCTIONAL MOLECULES AND THERAPIES THEREFORE
JP2003534773A (ja) 1999-12-03 2003-11-25 ザイモジェネティクス，インコーポレイティド ヒトサイトカイン受容体
CA2395713C (en) 2000-01-10 2012-04-10 Torben Lauesgaard Nissen G-csf conjugates
WO2001052882A1 (en) * 2000-01-24 2001-07-26 Schering Corporation Combination of temozolomide and pegylated interferon-alpha for treating cancer
EP1908477A3 (en) * 2000-01-24 2008-06-11 Schering Corporation Combination of temozolomide and pegylated interferon-alpha for treating cancer
WO2001058935A2 (en) 2000-02-11 2001-08-16 Maxygen Aps FACTOR VII OR VIIa-LIKE MOLECULES
KR100353392B1 (ko) * 2000-03-13 2002-09-18 선바이오(주) 높은 생체 활성도를 갖는 생체 활성 단백질과 ｐｅｇ의결합체 제조방법
US6777387B2 (en) 2000-03-31 2004-08-17 Enzon Pharmaceuticals, Inc. Terminally-branched polymeric linkers containing extension moieties and polymeric conjugates containing the same
US6756037B2 (en) 2000-03-31 2004-06-29 Enzon, Inc. Polymer conjugates of biologically active agents and extension moieties for facilitating conjugation of biologically active agents to polymeric terminal groups
EP1333036B1 (en) * 2000-10-16 2009-01-21 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Peg-modified erythropoietin
US20020169290A1 (en) * 2000-11-02 2002-11-14 Claus Bornaes New multimeric interferon beta polypeptides
DE60138927D1 (de) 2000-11-07 2009-07-16 Zymogenetics Inc Menschlicher rezeptor für tumor necrosis factor
AU2002238052A1 (en) 2001-02-20 2002-09-04 Zymogenetics, Inc. Antibodies that bind both bcma and taci
MXPA03007392A (es) * 2001-02-20 2003-12-04 Enzon Inc Enlazantes polimericos ramificados terminalmente y conjugados polimericos que contienen los mismos.
IL156059A0 (en) 2001-02-27 2003-12-23 Maxygen Aps NEW INTERFERON beta-LIKE MOLECULES
CA2439636A1 (en) 2001-03-02 2002-09-12 Zymogenetics, Inc. Mouse cytokine receptor
US7038015B2 (en) * 2001-04-06 2006-05-02 Maxygen Holdings, Ltd. Interferon gamma polypeptide variants
US6958388B2 (en) 2001-04-06 2005-10-25 Maxygen, Aps Interferon gamma polypeptide variants
WO2002083166A1 (fr) * 2001-04-10 2002-10-24 Santen Pharmaceutical Co., Ltd. Complexes de polymeres d'interferons et leur utilisation medicinale
ATE542545T1 (de) 2001-05-24 2012-02-15 Zymogenetics Inc Taci-immunoglobulin-fusionsproteine
WO2003000278A1 (fr) * 2001-06-22 2003-01-03 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Onguents
MD2053C2 (ro) * 2001-07-10 2003-07-31 Национальный Научно-Практический Центр Превентивной Медицины Министерства Здравоохранения Республики Молдова Remediu cu acţiune interferonogenă
ATE376020T1 (de) 2001-08-22 2007-11-15 Bioartificial Gel Technologies Inc Verfahren zu herstellung von aktivierten polyethylenglykolen
JP2005517648A (ja) * 2001-12-07 2005-06-16 インターミューン インコーポレイテッド 肝炎ウイルス感染症を治療するための組成物および方法
KR100888371B1 (ko) 2002-01-17 2009-03-13 동아제약주식회사 가지 달린 고분자 유도체와 인터페론 결합체를 포함하는 항바이러스제
EP3669887A1 (en) * 2002-01-18 2020-06-24 Biogen MA Inc. Polyalkylene polymer compounds and uses thereof
DE60315145T2 (de) * 2002-03-13 2008-04-30 Beijing Jiankai Technology Co., Ltd. Hydrophiles polymerderivat mit y-verzweigung und herstellungsverfahren dafür; obige verbindung enthaltender medizinischer verbundwerkstoff
IL164214A0 (en) * 2002-04-11 2005-12-18 Zymogenetics Inc Use of interleukin-24 to treat ovarian cancer
JP4409962B2 (ja) 2002-04-19 2010-02-03 ザイモジェネティクス，インコーポレイティド サイトカイン受容体
JP4634145B2 (ja) 2002-06-21 2011-02-16 ノボ ノルディスク ヘルス ケア アクチェンゲゼルシャフト ペジル化されたｖｉｉ因子糖形体
US7524931B2 (en) * 2002-07-03 2009-04-28 Maxygen Holdings Ltd. Full-length interferon gamma polypeptide variants
EP1526872A1 (en) * 2002-07-24 2005-05-04 F. Hoffmann-La Roche Ag Polyalkylene glycol acid additives
AU2003268463A1 (en) * 2002-09-05 2004-03-29 The General Hospital Corporation Asialo-interferons and the treatment of liver cancer
MXPA05002476A (es) * 2002-09-05 2005-10-19 Gi Company Inc Asialo-interferones modificados y sus usos.
DE60313786T2 (de) * 2002-09-27 2008-01-24 F. Hoffmann-La Roche Ag Poly(ethylen glykol)-konjugate von insulinähnlichem wachstumfaktor bindenden protein-4
US20040175359A1 (en) * 2002-11-12 2004-09-09 Desjarlais John Rudolph Novel proteins with antiviral, antineoplastic, and/or immunomodulatory activity
US7314613B2 (en) * 2002-11-18 2008-01-01 Maxygen, Inc. Interferon-alpha polypeptides and conjugates
AU2003303635B2 (en) * 2002-12-26 2009-07-23 Mountain View Pharmaceuticals, Inc. Polymer conjugates of interferon-beta with enhanced biological potency
TWI364295B (en) * 2002-12-26 2012-05-21 Mountain View Pharmaceuticals Polymer conjugates of cytokines, chemokines, growth factors, polypeptide hormones and antagonists thereof with preserved receptor-binding activity
EP1581260B1 (en) * 2002-12-31 2014-09-17 Nektar Therapeutics Polymeric reagents comprising a ketone or a related functional group
WO2004074345A2 (en) * 2003-02-19 2004-09-02 Pharmacia Corporation Carbonate esters of polyethylene glycol activated by means of oxalate esters
WO2004076474A2 (en) * 2003-02-26 2004-09-10 Intermune, Inc. Polyethylene glycol modified interferon compositions and methods of use thereof
US20070077225A1 (en) * 2003-02-28 2007-04-05 Blatt Lawrence M Continuous delivery methods for treating hepatitis virus infection
CA2458085A1 (en) 2003-03-21 2004-09-21 F. Hoffmann-La Roche Ag Transcriptional activity assay
US20070172446A1 (en) 2003-05-16 2007-07-26 Intermune, Inc. Synthetic chemokine receptor ligands and methods of use thereof
DK1668031T3 (da) 2003-08-07 2008-06-30 Zymogenetics Inc Homogene præparater af IL-29
GB0320638D0 (en) 2003-09-03 2003-10-01 Novartis Ag Organic compounds
EP2263684A1 (en) 2003-10-10 2010-12-22 Novo Nordisk A/S IL-21 derivatives
RS20110578A3 (en) 2003-10-14 2016-02-29 F. Hoffmann-La Roche Ltd MACROCYCLIC CARBOXYLIC ACIDS AND ACYLSULPHONAMIDES AS HCV REPLICATION INHIBITORS
ES2428358T3 (es) 2003-10-17 2013-11-07 Novo Nordisk A/S Terapia de combinación
WO2005042563A2 (en) * 2003-10-22 2005-05-12 Akzo Nobel N.V. Process for incrasing protein pegylation reaction yields by diafiltration ultrafiltration
US7407973B2 (en) * 2003-10-24 2008-08-05 Intermune, Inc. Use of pirfenidone in therapeutic regimens
WO2005062949A2 (en) * 2003-12-23 2005-07-14 Intermune, Inc. Method for treating hepatitis virus infection
GB0500020D0 (en) 2005-01-04 2005-02-09 Novartis Ag Organic compounds
JP4896745B2 (ja) 2004-02-02 2012-03-14 アンブレツクス・インコーポレイテツド 修飾されたヒトインターフェロンポリペプチドおよびこれらの使用
US7351787B2 (en) * 2004-03-05 2008-04-01 Bioartificial Gel Technologies, Inc. Process for the preparation of activated polyethylene glycols
WO2005113592A2 (en) * 2004-05-19 2005-12-01 Maxygen, Inc. Interferon-alpha polypeptides and conjugates
WO2005123113A2 (en) * 2004-06-14 2005-12-29 Intermune, Inc. Interferon compositions and methods of use thereof
EP1771205B1 (en) * 2004-06-18 2016-10-26 Ambrx, Inc. Novel antigen-binding polypeptides and their uses
CA2569381A1 (en) * 2004-07-21 2006-08-31 Ambrx, Inc. Biosynthetic polypeptides utilizing non-naturally encoded amino acids
US7351689B2 (en) 2004-07-29 2008-04-01 Zymogenetics, Inc. Use of IL-28 and IL-29 to treat cancer and autoimmune disorders
US7632491B2 (en) 2004-08-12 2009-12-15 Schering Corporation Stable pegylated interferon formulation
WO2006034455A2 (en) 2004-09-23 2006-03-30 Vasgene Therapeutics, Inc. Polipeptide compounds for inhibiting angiogenesis and tumor growth
CA2590429C (en) * 2004-12-22 2014-10-07 Ambrx, Inc. Compositions of aminoacyl-trna synthetase and uses thereof
US8080391B2 (en) 2004-12-22 2011-12-20 Ambrx, Inc. Process of producing non-naturally encoded amino acid containing high conjugated to a water soluble polymer
WO2006071840A2 (en) * 2004-12-22 2006-07-06 Ambrx, Inc. Formulations of human growth hormone comprising a non-naturally encoded amino acid
MX2007007580A (es) * 2004-12-22 2007-12-11 Ambrx Inc Hormona del crecimiento humana modificada.
CA2596390A1 (en) 2005-02-08 2006-08-17 Zymogenetics, Inc. Anti-il-20, anti-il-22 and anti-il-22ra antibodies and binding partners and methods of using in inflammation
EP1891107B1 (en) 2005-05-12 2011-07-06 ZymoGenetics, Inc. Compositions and methods for modulating immune responses
WO2007044083A2 (en) * 2005-05-18 2007-04-19 Maxygen, Inc. Evolved interferon-alpha polypeptides
CA2609205A1 (en) * 2005-06-03 2006-12-14 Ambrx, Inc. Improved human interferon molecules and their uses
EP1893240A2 (en) * 2005-06-13 2008-03-05 Nastech Pharmaceutical Company Inc. Transmucosal delivery of peptide derivatives
JP5335422B2 (ja) 2005-06-17 2013-11-06 ノボ ノルディスク ヘルス ケア アクチェンゲゼルシャフト 少なくとも１つの非天然のシステインを含んでいる操作されたタンパク質の選択的な還元および誘導体化
RU2427372C2 (ru) 2005-06-17 2011-08-27 Новартис Аг Применение санглиферина для лечения вируса гепатита с
JP2008543943A (ja) * 2005-06-20 2008-12-04 ペプゲン コーポレイション ヒトインターフェロンアルファ類似体とインターフェロンタウの低毒性長期循環性キメラ
US7695710B2 (en) 2005-06-20 2010-04-13 Pepgen Corporation Antitumor and antiviral combination therapies using low-toxicity, long-circulating human interferon-alpha analogs
EP1909822B1 (en) * 2005-06-29 2013-09-25 Yeda Research And Development Co., Ltd. Recombinant interferon alpha 2 (ifn alpha 2) mutants
CN102816170A (zh) 2005-07-25 2012-12-12 因特蒙公司 C型肝炎病毒复制的新颖大环抑制剂
EP1937824B1 (en) * 2005-08-18 2013-03-13 Ambrx, Inc. COMPOSITIONS OF tRNA AND USES THEREOF
CA2621623A1 (en) 2005-09-28 2007-04-05 Zymogenetics, Inc. Il-17a and il-17f antagonists and methods of using the same
AU2006301966A1 (en) 2005-10-11 2007-04-19 Array Biopharma, Inc. Compounds and methods for inhibiting hepatitis C viral replication
JP2009514814A (ja) * 2005-10-21 2009-04-09 シナジェバ・バイオファーマ・コーポレイション グリコール化およびグリコシル化された家禽類由来の治療用たんぱく質
US20080171696A1 (en) * 2005-10-21 2008-07-17 Avigenics, Inc. Pharmacodynamically enhanced therapeutic proteins
CN104710503B (zh) * 2005-11-08 2023-04-25 Ambrx 公司 用于修饰非天然氨基酸和非天然氨基酸多肽的促进剂
US20090018029A1 (en) * 2005-11-16 2009-01-15 Ambrx, Inc. Methods and Compositions Comprising Non-Natural Amino Acids
SG170116A1 (en) * 2005-12-14 2011-04-29 Ambrx Inc Compositions containing, methods involving, and uses of non-natural amino acids and polypeptides
US8992905B2 (en) 2006-01-12 2015-03-31 Hokusan Co. Ltd. Oral composition containing interferon-α
CN101002945B (zh) 2006-01-20 2012-09-05 清华大学 一种用于肿瘤治疗的新型复合物
CN100475270C (zh) 2006-01-20 2009-04-08 清华大学 一种治疗肿瘤的药物及其应用
MX2008013119A (es) 2006-04-11 2008-10-21 Novartis Ag Inhibidores de hcv/vih y sus usos.
US20080096819A1 (en) * 2006-05-02 2008-04-24 Allozyne, Inc. Amino acid substituted molecules
AU2007248680C1 (en) * 2006-05-02 2014-01-23 Allozyne, Inc. Non-natural amino acid substituted polypeptides
KR20090013816A (ko) 2006-05-24 2009-02-05 노보 노르디스크 헬스 케어 악티엔게젤샤프트 연장된 생체내 반감기를 갖는 인자 ⅸ 유사체
CN101336110B (zh) 2006-06-01 2011-06-01 程云 预防或治疗肝损伤的肽及其衍生物及其应用
CN1911447B (zh) * 2006-06-30 2010-05-12 复旦大学 转铁蛋白-聚乙二醇-药物分子复合物及其制备药物的用途
EP1886685A1 (en) 2006-08-11 2008-02-13 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods, uses and compositions for modulating replication of hcv through the farnesoid x receptor (fxr) activation or inhibition
KR20090057035A (ko) * 2006-08-21 2009-06-03 유나이티드 세러퓨틱스 코오포레이션 바이러스 감염의 치료를 위한 병용 요법
AU2007292893B2 (en) * 2006-09-08 2012-03-01 Ambrx, Inc. Suppressor tRNA transcription in vertebrate cells
AU2007292903B2 (en) * 2006-09-08 2012-03-29 Ambrx, Inc. Modified human plasma polypeptide or Fc scaffolds and their uses
KR20090051227A (ko) * 2006-09-08 2009-05-21 암브룩스, 인코포레이티드 척추동물 세포를 위한 하이브리드 서프레서 ｔＲＮＡ
EP2121743B1 (en) 2006-11-22 2015-06-03 Bristol-Myers Squibb Company Targeted therapeutics based on engineered proteins for tyrosine kinases receptors, including igf-ir
CN101219219B (zh) * 2007-01-10 2013-02-13 北京普罗吉生物科技发展有限公司 包含血管抑素或其片段的复合物、其制备方法及应用
ATE516814T1 (de) 2007-02-02 2011-08-15 Bristol Myers Squibb Co 10fn3 domain zur behandlung von krankheiten begleitet von unerwünschter angiogenese
JP2010523084A (ja) * 2007-03-30 2010-07-15 アンブルックス，インコーポレイテッド 修飾ｆｇｆ−２１ポリペプチド
WO2008137471A2 (en) * 2007-05-02 2008-11-13 Ambrx, Inc. Modified interferon beta polypeptides and their uses
CA2707840A1 (en) 2007-08-20 2009-02-26 Allozyne, Inc. Amino acid substituted molecules
CN101636411B (zh) 2007-09-04 2013-01-09 厦门伯赛基因转录技术有限公司 聚乙二醇修饰的干扰素α2a及其制备方法和应用
ES2382124T3 (es) 2007-09-04 2012-06-05 Biosteed Gene Expression Tech. Co., Ltd. Interferón alfa 2b modificado con polietilenglicol y método de preparación y aplicaciones de este
CA2971794C (en) 2007-10-04 2020-03-24 Zymogenetics, Inc. B7 family member zb7h6 and related compositions and methods
US8216571B2 (en) 2007-10-22 2012-07-10 Schering Corporation Fully human anti-VEGF antibodies and methods of using
US8946148B2 (en) 2007-11-20 2015-02-03 Ambrx, Inc. Modified insulin polypeptides and their uses
EP2796466B1 (en) 2007-12-07 2017-11-22 ZymoGenetics, Inc. Humanized antibody molecules specific for IL-31
CA2712606A1 (en) 2008-02-08 2009-08-13 Ambrx, Inc. Modified leptin polypeptides and their uses
PL2272875T3 (pl) 2008-04-03 2014-06-30 Biosteed Gene Expression Tech Co Ltd Hormon wzrostu modyfikowany dwuniciowym glikolem polietylenowym, sposoby otrzymywania i stosowania
EP2291399B1 (en) 2008-05-22 2014-06-25 Bristol-Myers Squibb Company Multivalent fibronectin based scaffold domain proteins
CN102131517B (zh) 2008-06-27 2014-12-17 津莫吉尼蒂克斯公司 可溶性杂合Fc γ受体和相关的方法
NZ600382A (en) 2008-07-23 2013-11-29 Ambrx Inc Modified bovine G-CSF polypeptides and their uses
CN102232085A (zh) 2008-09-26 2011-11-02 Ambrx公司 修饰的动物促红细胞生成素多肽和其用途
KR101732054B1 (ko) * 2008-09-26 2017-05-02 암브룩스, 인코포레이티드 비천연 아미노산 복제 의존성 미생물 및 백신
EP3025727A1 (en) 2008-10-02 2016-06-01 The J. David Gladstone Institutes Methods of treating liver disease
JP2012520884A (ja) 2009-03-18 2012-09-10 ザ ボード オブ トラスティーズ オブ ザ リランド スタンフォード ジュニア ユニバーシティー フラビウイルス科ウイルス感染症を治療する方法および組成物
US20110182850A1 (en) 2009-04-10 2011-07-28 Trixi Brandl Organic compounds and their uses
US8512690B2 (en) 2009-04-10 2013-08-20 Novartis Ag Derivatised proline containing peptide compounds as protease inhibitors
KR20180056805A (ko) 2009-06-04 2018-05-29 노파르티스 아게 ＩｇＧ 콘쥬게이션을 위한 자리의 확인 방법
EP2459211A1 (en) 2009-07-31 2012-06-06 Medtronic, Inc. Continuous subcutaneous administration of interferon- to hepatitis c infected patients
AU2010313497B2 (en) 2009-10-30 2013-08-01 Boehringer Ingelheim International Gmbh Dosage regimens for HCV combination therapy comprising BI201335, interferon alpha and ribavirin
AU2010341518B2 (en) 2009-12-21 2014-01-09 Ambrx, Inc. Modified porcine somatotropin polypeptides and their uses
JP2013515080A (ja) 2009-12-21 2013-05-02 アンブルックス，インコーポレイテッド 修飾されているウシのソマトトロピンポリペプチドおよびそれらの使用
EP2569331A1 (en) 2010-05-10 2013-03-20 Perseid Therapeutics LLC Polypeptide inhibitors of vla4
US8362007B1 (en) 2010-05-11 2013-01-29 Demerx, Inc. Substituted noribogaine
US9394294B2 (en) 2010-05-11 2016-07-19 Demerx, Inc. Methods and compositions for preparing and purifying noribogaine
US8765737B1 (en) 2010-05-11 2014-07-01 Demerx, Inc. Methods and compositions for preparing and purifying noribogaine
JP6023703B2 (ja) 2010-05-26 2016-11-09 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ 改善された安定性を有するフィブロネクチンをベースとする足場タンパク質
WO2011159930A2 (en) 2010-06-16 2011-12-22 Medtronic, Inc. Damping systems for stabilizing medications in drug delivery devices
US8637648B1 (en) 2010-06-22 2014-01-28 Demerx, Inc. Compositions comprising noribogaine and an excipient to facilitate transport across the blood brain barrier
US9586954B2 (en) 2010-06-22 2017-03-07 Demerx, Inc. N-substituted noribogaine prodrugs
US8802832B2 (en) 2010-06-22 2014-08-12 Demerx, Inc. Compositions comprising noribogaine and an excipient to facilitate transport across the blood brain barrier
US8741891B1 (en) 2010-06-22 2014-06-03 Demerx, Inc. N-substituted noribogaine prodrugs
EP2585065A1 (en) 2010-06-24 2013-05-01 Panmed Ltd. Treatment of hepatitis c virus related diseases using hydroxychloroquine or a combination of hydroxychloroquine and an anti-viral agent
MX2013000733A (es) 2010-07-23 2013-05-30 Demerx Inc Composiciones de noribogaina.
US9567386B2 (en) 2010-08-17 2017-02-14 Ambrx, Inc. Therapeutic uses of modified relaxin polypeptides
SG10201506443TA (en) 2010-08-17 2015-10-29 Ambrx Inc Modified relaxin polypeptides and their uses
TWI480288B (zh) 2010-09-23 2015-04-11 Lilly Co Eli 牛顆粒細胞群落刺激因子及其變體之調配物
AR083337A1 (es) 2010-10-05 2013-02-21 Novartis Ag Tratamientos de infeccion por el virus de hepatitis c
BR112013008510A2 (pt) 2010-10-08 2016-07-05 Novartis Ag vitamina e formulações de inibidores de sulfamida ns3
WO2012072655A1 (en) 2010-11-30 2012-06-07 Novartis Ag New treatments of hepatitis c virus infection
EP2481740B1 (en) 2011-01-26 2015-11-04 DemeRx, Inc. Methods and compositions for preparing noribogaine from voacangine
WO2012107589A1 (en) 2011-02-11 2012-08-16 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical compositions for the treatment and prevention of hcv infections
WO2012130996A1 (en) 2011-03-31 2012-10-04 Novartis Ag Alisporivir to treat hepatitis c virus infection
CA2831675A1 (en) 2011-04-01 2012-10-04 Novartis Ag Treatment for infection with hepatitis b virus alone or in combination with hepatitis delta virus and associated liver diseases
EP2696883A1 (en) 2011-04-13 2014-02-19 Novartis AG Treatment of hepatitis c virus infection with alisporivir
WO2012158678A1 (en) 2011-05-17 2012-11-22 Bristol-Myers Squibb Company Methods for maintaining pegylation of polypeptides
EP2709648A4 (en) 2011-05-19 2015-04-08 Geysen Hendrik M COMPOUNDS FOR BINDING TO THE ERYTHROPOIETIN RECEPTOR
MX2014000031A (es) 2011-07-01 2014-07-09 Bayer Ip Gmbh Polipeptidos de fusion de relaxina y usos de los mismos.
US20140314713A1 (en) 2011-07-20 2014-10-23 Universite Paris Diderot - Paris Vii Methods for determining treatment response in patients infected with hcv genotype 4
AU2012299423A1 (en) * 2011-08-25 2014-03-06 Nanogen Pharmaceutical Biotechnology Peg-interferon lambda 1 conjugates
US9617274B1 (en) 2011-08-26 2017-04-11 Demerx, Inc. Synthetic noribogaine
RU2014116988A (ru) 2011-09-27 2015-11-10 Новартис Аг Алиспоривир для лечения инфекции, вызванной вирусом гепатита с
WO2013067029A2 (en) 2011-10-31 2013-05-10 Bristol-Myers Squibb Company Fibronectin binding domains with reduced immunogenicity
AU2012347785B2 (en) 2011-12-06 2017-03-16 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods and compositions for treating viral diseases
WO2013085922A1 (en) 2011-12-09 2013-06-13 Demerx, Inc. Phosphate esters of noribogaine
WO2013112673A1 (en) 2012-01-25 2013-08-01 Demerx, Inc. Synthetic voacangine
US9150584B2 (en) 2012-01-25 2015-10-06 Demerx, Inc. Indole and benzofuran fused isoquinuclidene derivatives and processes for preparing them
US8454947B1 (en) 2012-03-01 2013-06-04 Nanogen Pharmaceutical Biotechnology PEG-interferon lambda 1 conjugates
WO2013137869A1 (en) 2012-03-14 2013-09-19 Boehringer Ingelheim International Gmbh Combination therapy for treating hcv infection in an hcv-hiv coinfected patient population
JP2015512900A (ja) 2012-03-28 2015-04-30 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 特別な患者の遺伝子亜型分集団のｈｃｖ感染症を治療するための併用療法
WO2013149219A2 (en) 2012-03-30 2013-10-03 Sorrento Therapeutics Inc. Fully human antibodies that bind to vegfr2
WO2013177187A2 (en) 2012-05-22 2013-11-28 Massachusetts Institute Of Technology Synergistic tumor treatment with extended-pk il-2 and therapeutic agents
WO2013174988A1 (en) 2012-05-24 2013-11-28 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for predicting and monitoring treatment response in hcv- and hcv/hiv-infected subjects
BR112014029883B1 (pt) 2012-05-31 2023-10-24 Sorrento Therapeutics Inc. Anticorpo recombinante anti-pd-l1 e uso de um anticorpo recombinante anti-pd-l1
AU2013270684B2 (en) 2012-06-08 2018-04-19 Sutro Biopharma, Inc. Antibodies comprising site-specific non-natural amino acid residues, methods of their preparation and methods of their use
JP6429771B2 (ja) 2012-06-21 2018-11-28 ソレント・セラピューティクス・インコーポレイテッドＳｏｒｒｅｎｔｏ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ， Ｉｎｃ． ｃ−Ｍｅｔに結合する抗原結合タンパク質
CA2877814A1 (en) 2012-06-22 2013-12-27 Dingqiu HUANG Antigen binding proteins that bind ccr2
EP2863955B1 (en) 2012-06-26 2016-11-23 Sutro Biopharma, Inc. Modified fc proteins comprising site-specific non-natural amino acid residues, conjugates of the same, methods of their preparation and methods of their use
JP6826367B2 (ja) 2012-08-31 2021-02-03 ストロ バイオファーマ インコーポレーテッド アジド基を含む修飾アミノ酸
US20140205566A1 (en) 2012-11-30 2014-07-24 Novartis Ag Cyclic nucleuoside derivatives and uses thereof
US8940728B2 (en) 2012-12-20 2015-01-27 Demerx, Inc. Substituted noribogaine
US9783535B2 (en) 2012-12-20 2017-10-10 Demerx, Inc. Substituted noribogaine
US9045481B2 (en) 2012-12-20 2015-06-02 Demerx, Inc. Substituted noribogaine
US20150361159A1 (en) 2013-02-01 2015-12-17 Bristol-Myers Squibb Company Fibronectin based scaffold proteins
CA3175360C (en) 2013-05-31 2024-05-28 Sorrento Therapeutics, Inc. Antigen binding proteins that bind pd-1
EP3019522B1 (en) 2013-07-10 2017-12-13 Sutro Biopharma, Inc. Antibodies comprising multiple site-specific non-natural amino acid residues, methods of their preparation and methods of their use
US9840493B2 (en) 2013-10-11 2017-12-12 Sutro Biopharma, Inc. Modified amino acids comprising tetrazine functional groups, methods of preparation, and methods of their use
US10076512B2 (en) 2014-05-01 2018-09-18 Eiger Biopharmaceuticals, Inc. Treatment of hepatitis delta virus infection
EP3620163A1 (en) 2014-05-01 2020-03-11 Eiger Biopharmaceuticals, Inc. Treatment of hepatitis delta virus infection
US9388239B2 (en) 2014-05-01 2016-07-12 Consejo Nacional De Investigation Cientifica Anti-human VEGF antibodies with unusually strong binding affinity to human VEGF-A and cross reactivity to human VEGF-B
US11311519B2 (en) 2014-05-01 2022-04-26 Eiger Biopharmaceuticals, Inc. Treatment of hepatitis delta virus infection
WO2015195673A2 (en) 2014-06-18 2015-12-23 Demerx, Inc. Halogenated indole and benzofuran derivatives of isoquinuclidene and processes for preparing them
JP6800141B2 (ja) 2014-08-12 2020-12-16 マサチューセッツ インスティテュート オブ テクノロジー Ｉｌ−２およびインテグリン結合性ｆｃ融合タンパク質による相乗的な腫瘍処置
WO2016025645A1 (en) 2014-08-12 2016-02-18 Massachusetts Institute Of Technology Synergistic tumor treatment with il-2, a therapeutic antibody, and an immune checkpoint blocker
EP3485910A2 (en) 2014-08-22 2019-05-22 Sorrento Therapeutics, Inc. Antigen binding proteins that bind cxcr3
US9987241B2 (en) 2014-09-25 2018-06-05 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Enzyme conjugate and prodrug cancer therapy
TWI705071B (zh) 2014-10-24 2020-09-21 美商必治妥美雅史谷比公司 經修飾之fgf-21多肽及其用途
CA2964390A1 (en) * 2014-11-06 2016-05-12 Pharmaessentia Corporation Dosage regimen for pegylated interferon
WO2016148179A1 (ja) * 2015-03-17 2016-09-22 国立大学法人信州大学 Ｉｆｎを用いた非接着培養による樹状細胞の調製方法
CN107530338B (zh) 2015-04-21 2020-12-01 艾格尔峰生物制药有限公司 包含洛那法尼和利托那韦的药物组合物
EP3370759A1 (en) 2015-11-03 2018-09-12 H. Hoffnabb-La Roche Ag Combination therapy of an hbv capsid assembly inhibitor and an interferon
JP7187315B2 (ja) 2015-11-04 2022-12-12 アイガー・バイオファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド デルタ型肝炎ウイルス感染の処置
KR20190026642A (ko) 2016-01-29 2019-03-13 소렌토 쎄라퓨틱스, 인코포레이티드 Pd-l1에 결합하는 항원 결합 단백질
WO2018087345A1 (en) 2016-11-14 2018-05-17 F. Hoffmann-La Roche Ag COMBINATION THERAPY OF AN HBsAg INHIBITOR, A NUCLEOS(T)IDE ANALOGUE AND AN INTERFERON
US10350266B2 (en) 2017-01-10 2019-07-16 Nodus Therapeutics, Inc. Method of treating cancer with a multiple integrin binding Fc fusion protein
WO2018132516A1 (en) 2017-01-10 2018-07-19 Nodus Therapeutics Combination tumor treatment with an integrin-binding-fc fusion protein and immune modulator
US20190374611A1 (en) 2017-01-18 2019-12-12 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical compositions for the treatment patients suffering from myeloproliferative disorders
MX2019008449A (es) 2017-02-08 2019-09-09 Bristol Myers Squibb Co Polipetidos de relaxina modificada que comprenden un mejorador farmacocinetico y sus usos.
EP3658173A1 (en) 2017-07-25 2020-06-03 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical compositions for modulating monocytopoiesis
WO2020032951A1 (en) 2018-08-09 2020-02-13 The Board Of Regents Of The University Of Oklahoma Antimalarial enzyme conjugates, kits containing same, and methods of producing and using same
EP3684811A2 (en) 2017-08-17 2020-07-29 Massachusetts Institute of Technology Multiple specificity binders of cxc chemokines and uses thereof
DK3849614T3 (da) 2018-09-11 2024-02-26 Ambrx Inc Interleukin-2-polypeptidkonjugater og anvendelser deraf
JP7557882B2 (ja) 2018-09-28 2024-09-30 マサチューセッツ インスティテュート オブ テクノロジー コラーゲンに局在化される免疫調節分子およびその方法
JP2022512746A (ja) 2018-10-19 2022-02-07 アンブルックス，インコーポレイテッド インターロイキン－１０ポリペプチド複合体、その二量体、およびそれらの使用
WO2020154032A1 (en) 2019-01-23 2020-07-30 Massachusetts Institute Of Technology Combination immunotherapy dosing regimen for immune checkpoint blockade
KR20210136014A (ko) 2019-02-12 2021-11-16 암브룩스, 인코포레이티드 항체-tlr 작용제 콘쥬게이트를 함유하는 조성물, 방법 및 이의 용도
KR20220035365A (ko) 2019-07-18 2022-03-22 엔요 파마 인터페론의 부작용을 감소시키는 방법
US20210285000A1 (en) 2020-03-05 2021-09-16 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy for treating hepatitis b virus infection
KR20220151202A (ko) 2020-03-11 2022-11-14 암브룩스, 인코포레이티드 인터류킨-2 폴리펩타이드 접합체 및 그의 사용 방법
WO2021228983A1 (en) 2020-05-13 2021-11-18 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) A pharmaceutical composition comprising an arsenic compound, an inductor of type-1 ifn and a protein kinase inhibitor for treating cancer
EP3912627B1 (en) 2020-05-20 2022-09-07 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for the treatment of coronavirus infections
CN116096383A (zh) 2020-06-22 2023-05-09 杨森制药公司 用于治疗丁型肝炎病毒感染的组合物和方法
AU2021327396A1 (en) 2020-08-20 2023-03-23 Ambrx, Inc. Antibody-TLR agonist conjugates, methods and uses thereof
WO2022043496A2 (en) 2020-08-28 2022-03-03 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Use of mait cells as biomarkers and biotargets in covid-19
WO2022079205A1 (en) 2020-10-15 2022-04-21 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Use of ifn-alpha polypeptides for the treatment of coronavirus infections
WO2022159414A1 (en) 2021-01-22 2022-07-28 University Of Rochester Erythropoietin for gastroinfestinal dysfunction
AU2022249223A1 (en) 2021-04-03 2023-10-12 Ambrx, Inc. Anti-her2 antibody-drug conjugates and uses thereof

Family Cites Families (53)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2651657A (en) * 1949-05-21 1953-09-08 Standard Oil Dev Co Synthetic lubricating oil
SE337223B (fi) * 1967-05-23 1971-08-02 Pharmacia Ab
US3619371A (en) * 1967-07-03 1971-11-09 Nat Res Dev Production of a polymeric matrix having a biologically active substance bound thereto
SE343210B (fi) * 1967-12-20 1972-03-06 Pharmacia Ab
DK132327A (fi) * 1968-07-16
US3632828A (en) * 1968-12-16 1972-01-04 Dow Chemical Co Polyethylene glycol monomethyl ether carbonates
BE758425A (fr) * 1969-12-02 1971-04-16 Baxter Laboratories Inc Streptokinase liee chimiquement a une matrice en carbohydrate (
DE2247163A1 (de) * 1972-09-26 1974-03-28 Merck Patent Gmbh Traegermatrix zur fixierung biologisch wirksamer stoffe und verfahren zu ihrer herstellung
US4179337A (en) * 1973-07-20 1979-12-18 Davis Frank F Non-immunogenic polypeptides
US4002531A (en) * 1976-01-22 1977-01-11 Pierce Chemical Company Modifying enzymes with polyethylene glycol and product produced thereby
US4100271A (en) * 1976-02-26 1978-07-11 Cooper Laboratories, Inc. Clear, water-miscible, liquid pharmaceutical vehicles and compositions which gel at body temperature for drug delivery to mucous membranes
GB1578348A (en) * 1976-08-17 1980-11-05 Pharmacia Ab Products and a method for the therapeutic suppression of reaginic antibodies responsible for common allergic
US4094744A (en) * 1976-11-18 1978-06-13 W. R. Grace & Co. Water-dispersible protein/polyurethane reaction product
DE2862449D1 (en) * 1977-08-22 1984-11-22 Nat Res Dev Macromolecular covalent conjugates, methods for preparing and pharmaceutical compositions containing them
JPS55110105A (en) * 1979-02-19 1980-08-25 Japan Atom Energy Res Inst Preparation of polymer composition containing physiologically active material
JPS6023084B2 (ja) * 1979-07-11 1985-06-05 味の素株式会社 代用血液
US4640835A (en) * 1981-10-30 1987-02-03 Nippon Chemiphar Company, Ltd. Plasminogen activator derivatives
DE3380726D1 (en) * 1982-06-24 1989-11-23 Japan Chem Res Long-acting composition
WO1985003934A1 (en) * 1984-03-06 1985-09-12 Takeda Chemical Industries, Ltd. Chemically modified protein and process for its preparation
US4486344A (en) * 1983-03-28 1984-12-04 Miles Laboratories, Inc. Urea-linked immunogens, antibodies, and preparative method
JPS6098988A (ja) * 1983-11-01 1985-06-01 Chemo Sero Therapeut Res Inst Ｌｐｆ−ｈａの精製法
JPS60127952A (ja) 1983-12-14 1985-07-08 Fanuc Ltd 領域加工方法
US4496689A (en) * 1983-12-27 1985-01-29 Miles Laboratories, Inc. Covalently attached complex of alpha-1-proteinase inhibitor with a water soluble polymer
DE3572982D1 (en) * 1984-03-06 1989-10-19 Takeda Chemical Industries Ltd Chemically modified lymphokine and production thereof
GB8430252D0 (en) * 1984-11-30 1985-01-09 Beecham Group Plc Compounds
US4732863A (en) * 1984-12-31 1988-03-22 University Of New Mexico PEG-modified antibody with reduced affinity for cell surface Fc receptors
US4766106A (en) * 1985-06-26 1988-08-23 Cetus Corporation Solubilization of proteins for pharmaceutical compositions using polymer conjugation
US4917888A (en) * 1985-06-26 1990-04-17 Cetus Corporation Solubilization of immunotoxins for pharmaceutical compositions using polymer conjugation
WO1987000056A1 (en) * 1985-06-26 1987-01-15 Cetus Corporation Solubilization of proteins for pharmaceutical compositions using polymer conjugation
US4847079A (en) * 1985-07-29 1989-07-11 Schering Corporation Biologically stable interferon compositions comprising thimerosal
US4818769A (en) * 1985-09-20 1989-04-04 Cetus Corporation Method of controlling stress-related disease in livestock by administration of human IL-2
US5100664A (en) * 1985-09-20 1992-03-31 Cetus Corporation Human IL-2 as a vaccine adjuvant
US5102872A (en) * 1985-09-20 1992-04-07 Cetus Corporation Controlled-release formulations of interleukin-2
US4791192A (en) * 1986-06-26 1988-12-13 Takeda Chemical Industries, Ltd. Chemically modified protein with polyethyleneglycol
US4810638A (en) * 1986-07-24 1989-03-07 Miles Inc. Enzyme-labeled antibody reagent with polyalkyleneglycol linking group
US4894226A (en) * 1986-11-14 1990-01-16 Cetus Corporation Solubilization of proteins for pharmaceutical compositions using polyproline conjugation
US4851220A (en) * 1986-11-26 1989-07-25 Schering Corporation Stable oleaginous gel
US4871538A (en) * 1987-07-13 1989-10-03 Schering Corporation Insoluble copper-alpha interferon complex
DK468388A (da) * 1987-08-21 1989-02-22 Wellcome Found Kompleks af polyethylenglycol og vaevplasminogen-aktivator, fremgangsmaade til dets fremstilling og farmaceutiske kompositioner indeholdende komplekset
US4847325A (en) * 1988-01-20 1989-07-11 Cetus Corporation Conjugation of polymer to colony stimulating factor-1
US5199360A (en) 1988-09-27 1993-04-06 Sirkka Koistinen Table constructions
GB8824591D0 (en) * 1988-10-20 1988-11-23 Royal Free Hosp School Med Fractionation process
AU4660789A (en) * 1988-11-23 1990-06-12 Genentech Inc. Polypeptide derivatives
US4902502A (en) * 1989-01-23 1990-02-20 Cetus Corporation Preparation of a polymer/interleukin-2 conjugate
US5122614A (en) * 1989-04-19 1992-06-16 Enzon, Inc. Active carbonates of polyalkylene oxides for modification of polypeptides
DE69033192T3 (de) * 1989-04-19 2004-05-19 Enzon, Inc. Aktive karbonate von polyalkylenoxyden zur modifizierung von polypeptiden
ATE136315T1 (de) * 1989-05-27 1996-04-15 Sumitomo Pharma Verfahren für die herstellung von polyethylenglykolderivate und modifizierte proteine.
JP2978187B2 (ja) * 1989-11-02 1999-11-15 日本ケミカルリサーチ株式会社 修飾スーパーオキサイドディスムターゼの製造法
US5234903A (en) * 1989-11-22 1993-08-10 Enzon, Inc. Chemically modified hemoglobin as an effective, stable non-immunogenic red blood cell substitute
US5663141A (en) * 1989-12-01 1997-09-02 Basf Aktiengesellschaft Hirudin/polyalkylene glycol conjugates and hirudin muteins
JPH04202293A (ja) * 1990-11-29 1992-07-23 Tonen Corp 作動油
US5595732A (en) * 1991-03-25 1997-01-21 Hoffmann-La Roche Inc. Polyethylene-protein conjugates
US5281698A (en) * 1991-07-23 1994-01-25 Cetus Oncology Corporation Preparation of an activated polymer ester for protein conjugation

Also Published As

Publication number Publication date
EE9400151A (et) 1996-02-15
ZW11193A1 (en) 1994-03-23
LV10907B (en) 1996-04-20
AU4478093A (en) 1994-03-03
JP2859105B2 (ja) 1999-02-17
BG98067A (en) 1994-12-02
CN1211578A (zh) 1999-03-24
AU668742B2 (en) 1996-05-16
MW7693A1 (en) 1994-06-08
MY131445A (en) 2007-08-30
KR940003969A (ko) 1994-03-14
HU9302366D0 (en) 1993-11-29
YU56693A (sh) 1997-01-08
EP0593868A1 (en) 1994-04-27
CZ169393A3 (en) 1994-04-13
OA09850A (fr) 1994-08-15
NO933028D0 (no) 1993-08-25
FI933740A (fi) 1994-02-27
MX9305146A (es) 1994-03-31
JPH06192300A (ja) 1994-07-12
BR9303469A (pt) 1994-03-22
SK89893A3 (en) 1994-04-06
CN1183112C (zh) 2005-01-05
CA2103829C (en) 2003-04-08
ES2116376T3 (es) 1998-07-16
US5382657A (en) 1995-01-17
NZ264872A (en) 1996-01-26
ATE165102T1 (de) 1998-05-15
ZA936098B (en) 1994-03-01
HUT67013A (en) 1995-01-30
PL300194A1 (en) 1994-04-05
LTIP888A (lt) 1994-08-25
LV10907A (lv) 1995-12-20
DK0593868T3 (da) 1999-02-08
EP0593868B1 (en) 1998-04-15
NZ248452A (en) 1995-12-21
IL106750A0 (en) 1993-12-08
DE69317979T2 (de) 1998-08-20
CN1088936A (zh) 1994-07-06
UY23635A1 (es) 1994-03-01
PH30460A (en) 1997-05-28
IS4067A (is) 1994-02-27
KR100295520B1 (ko) 2001-09-17
LT3174B (en) 1995-02-27
CN1155618C (zh) 2004-06-30
RO112730B1 (ro) 1997-12-30
SI9300423A (en) 1994-03-31
CN1173500A (zh) 1998-02-18
HRP931094A2 (en) 1997-06-30
CN1039015C (zh) 1998-07-08
CA2103829A1 (en) 1994-02-27
DE69317979D1 (de) 1998-05-20
FI933740A0 (fi) 1993-08-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI109765B (fi) Menetelmä interferonikonjugaatin valmistamiseksi ja menetelmässä käyttökelpoisia yhdisteitä
CA2952488C (en) Polyalkylene glycol with moiety for conjugating biologically active compounds
US7547765B2 (en) Branched polyalkylene glycols
US7504477B2 (en) Polyalkylene glycol acid additives
EP1496076B1 (en) Hydrophilic polymer derivate with y type branch and preparation method of it medical composite comprising above compound
KR20020040841A (ko) 헤테로 이작용성 폴리(에틸렌 글리콜) 유도체 및 그의제조 방법
KR20030013256A (ko) 폴리옥시알킬렌 유도체 및 이의 제조방법
BG62273B1 (bg) Конюгати на интерферон
JP2005514505A (ja) マルチアーム樹枝状および機能的なｐｅｇの調製法および用途
US20030103934A1 (en) Drugs having long-term retention in target tissue
US20060014666A1 (en) Targeted hydrophilic polymer, binders with interferon and medical composite comprising above binders
KR100480423B1 (ko) 에리트로포이에틴과 폴리에틸렌글리콜 유도체의 배합체
KR20030062467A (ko) 가지 달린 고분자 유도체와 인터페론 결합체를 포함하는 항바이러스제
KR20050017774A (ko) 신규한 와이-폴리에틸렌글리콜 유도체 및 그의 제조방법

Legal Events

Date Code Title Description
GB Transfer or assigment of application

Owner name: SONERA OY

HC Name/ company changed in application

Owner name: SONERA OY

MA Patent expired