MX2007001663A

MX2007001663A - Formulacion de interferon pegilado estable.

Info

Publication number: MX2007001663A
Application number: MX2007001663A
Authority: MX
Inventors: Mohammed Shameem; Anita Dabbara
Original assignee: Schering Corp
Priority date: 2004-08-12
Filing date: 2005-08-11
Publication date: 2007-04-10
Also published as: CA2576549A1; ATE476967T1; NO20071341L; AU2005272862B2; US20060051320A1; ZA200701154B; AU2005272862A1; WO2006020720A2; CA2576549C; WO2006020720A3; ES2349472T3; CN101039660B; EP1796647A2; KR20070045244A; HK1103977A1; DE602005022895D1; BRPI0513332A; US7632491B2; JP2008509919A; CN101039660A

Abstract

La presente invencion se relaciona con formulaciones liofilizadas de interferon pegilado que se preparan utilizando trehalosa como crioprotector; las formulaciones tiene un bajo contenido de humedad que ayuda a estabilizar el interferon pegilado mediante el almacenamiento de las formulaciones a temperatura ambiente; adicionalmente se proporcionan metodos para preparar estas formulaciones.

Description

FORMULACIÓN DE INTERFERON PEGILADO ESTABLE SOLICITUDES RELACIONADAS Esta solicitud reclama el beneficio de la solicitud provisional de E.U.A. no. de serie 60/600,846 presentada el 12 de agosto del 2004.

CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a formulaciones estables de conjugados de ¡nterferón pegilado, que son útiles para tratar una variedad de condiciones para las cuales es benéfica la terapia con interferón. En particular, se proporcionan formulaciones que incluyen el interferón pegilado con ingrediente farmacéutico activo y trehalosa, que son estables a temperatura ambiente cuando se liofilizan.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Los ¡nterferones son una familia de proteínas altamente homologas que inhiben la replicación viral, inhiben la proliferación celular y modulan la respuesta inmune. Los ¡nterferones humano se agrupan en tres clases basadas en su origen celular y antigenicidad: a-interferón (leucocitos), ß-interferón (fibroblastos) y ?-interferón (células B). Las formas recombinantes de cada grupo se han desarrollado y se encuentran comercialmente disponibles. Debido a sus variables actividades biológicas, ha sido propuesto el uso de ¡nterferones para tratar un número de condiciones, incluyendo infecciones virales y varios cánceres. Sin embargo, como con otras proteínas, el uso de interferones como agentes farmacéuticos se ha limitado generalmente por varios inconvenientes, incluyendo antigenicidad, que conduce a la formación de anticuerpos neutralizantes y pérdida de respuesta clínica, y una vida media corta, que significa que dosis frecuentes se requieren para mantener las concentraciones terapéuticamente efectivas de la proteína. Estos problemas pueden superarse al conjugar el interferón a polímeros tal como polietilenglicol. Sin embargo, aunque los conjugados de ¡nterferón-polímero son clínicamente benéficos, el uso amplio de dichos conjugados en práctica clínica requiere formulaciones que puedan ser almacenadas durante un período prolongado durante la fabricación y distribución a los médicos. Algunos conjugados de interferón-polímero, sin embargo, se deterioran fácilmente, incluso en soluciones congeladas. La liofilización (también conocida como secado por congelamiento) es un procedimiento que puede producir un conjugado de interferón-polímero en una forma que puede superar esta deficiencia. La liofilización es un procedimiento con el cual el agua se sublima a partir de una composición después de que se congela. En este procedimiento, los productos farmacéuticos y biológicos que son relativamente inestables en una solución acuosa durante un período pueden colocarse en contenedores de dosis en un estado líquido fácilmente procesado, secarse sin el uso de calor dañino y almacenarse en un estado seco durante periodos prolongados. Una formulación designada para liofilización con frecuencia contiene ingredientes formadores de cuerpo que incrementan la cantidad de material sólido, como también críoprotectores, lioprotectores y otros estabilizadores para proteger el ingrediente activo del daño durante y después de la liofilización. La patente de E.U.A. 6,180,096 describe que la liofilización de conjugados de ¡nterferón alfa pegilado puede dar como resultado cambios en la naturaleza y grado de conjugación de PEG a interferón a. Dichos cambios incluyen degradación del conjugado en PEG libre e ¡nterferón a, fijación subsecuente de PEG libre en otras moléculas de interferón pegilado, o desplazamientos intramoleculares de las moléculas de PEG de un sitio de conjugación a otro dentro de la misma molécula. Esta patente describe la estabilidad de los conjugados de interferón alfa pegilado durante y después de que se logra la liofilización al liofilizar dichos conjugados en un regulador de pH, un estabilizador, un crioprotector y un solvente. Aunque la patente '096 menciona varios crioprotectores pueden utilizarse, incluyendo disacáridos, la sacarosa es el único crioprotector utilizado en la única formulación que se ejemplifica específicamente en esta patente. Las formulaciones liofilizadas que contienen Peginterferón alfa-2b, fosfato dibásico de sodio anhidro, fosfato de sodio monobásico dihidratado, sacarosa y polisorbato 80 se comercializan por Schering Corporation, Kenilworth, NJ como recipientes PEG-Intron® y PEG-Intron® Redipen (véase PEG-Intron® Product Information, Rev. 2/05.). El Redipen® es un cartucho de vidrio de doble cámara que contiene PEG-Intron líofilizado en una cámara y agua estéril para inyección en la otra cámara. El fabricante recomienda almacenamiento a temperatura ambiente para los recipientes de PEG-Intron (es decir, 25°C), y almacenamiento refrigerado para los cartuchos de PEG-intron Redipen (es decir, 2o a 8°C). Existe la necesidad en la actualidad de formulaciones adicionales que no sólo protejan los conjugados de interferón pegílado del daño durante y después de la liofilización, sino que también permita almacenamiento a largo plazo a temperatura ambiente cuando se liofilizan en cartuchos de vidrio. De forma ideal, dichas formulaciones deben ser manejables para un procedimiento de fabricación que sea más efectivo en cuanto a costo que el procedimiento utilizado para formulaciones a base de sacarosa.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención se basa en el descubrimiento sorprendente de que el uso de trehalosa, como el único crioprotector o en combinación con otros crioprotectores, durante la liofilización del interferón alpha 2b pegilado permite utilizar ciclos de liofilización significativamente más cortos mientras producen un polvo liofilizado que es inferior en contenido de humedad y de esta manera más estable a temperatura ambiente que cuando se utiliza sacarosa como el único crioprotector. Se ha encontrado que reducir el contenido de la humedad incrementa significativamente la estabilidad a temperatura ambiente de ciertos interferones pegilados en una formulación liofilizada. Estos efectos benéficos de trehalosa fueron inesperados ya que la temperatura de colapso (Te) y la temperatura de transición de vidrio (Tg) de una solución de ¡nterferón pegilado congelado con trehalosa como el único crioprotector (-29.5°C y -27°C, respectivamente) no son mucho mayores que la Te y Tg' de la misma solución cuando se utiliza sacarosa en lugar de trehalosa como el único crioprotector (-32.7°C y 32°C, respectivamente). En teoría, el paso de secado principal en la liofilización de una formulación de ¡nterferón pegilado debe realizarse por debajo de la Te y Tg'; de otra manera la torta puede colapsarse debido al calentamiento de producto, lo cual puede provocar que la torta contenga contenido de humedad superior, que puede conducir a la estabilidad reducida del interferón pegilado. De este modo, el experto en la técnica que busca reducir el contenido de humedad de las formulaciones de interferón pegilado a base de sacarosa en cartuchos de vidrio puede no considerar utilizar un crioprotector con una Te o Tg' superior al de la sacarosa. Sin embargo, como se describe con mayor detalle a continuación, los inventores en la presente han descubierto sorprendentemente que el uso de trehalosa como crioprotector permite que ser realice el paso de secado principal a temperaturas superiores a la Te y Tg' de la solución congelada, mientras logra un producto liofilizado con bajo contenido de humedad y mínimos defectos de torta. De este modo, las formulaciones de la invención comprenden un interferón pegílado como el ingrediente farmacéutico activo y trehalosa como un crioprotector. Las formulaciones de la invención pueden contener uno o más agentes diferentes que realizan una función crioprotectora, siempre que la trehalosa comprenda al menos 60%, en peso, de dichos agentes que están presentes. Se ha encontrado que la presencia de trehalosa durante la liofilización de interferones pegilados en cartuchos de vidrio de doble cámara permite el uso de un ciclo de liofilización relativamente corto (por ejemplo, <3 días contra >5 días para la misma formulación que contiene sacarosa como el único crioprotector) para producir un polvo liofilizado de bajo contenido de humedad inicial y baja higroscopicidad, con rechazos mínimos debido al colapso de la torta, contracción, formación de tapa o refusión. En una modalidad, la presente invención proporciona una solución para preparar una formulación en polvo liofilizada. La solución comprende un interferón pegilado, un crioprotector, un regulador de pH, un estabilizado, y agua estéril para inyección, en donde la trehalosa comprende al menos 60%, en peso, del crioprotector. Otra modalidad específica de la invención es un polvo liofilizado que comprende un interferón pegilado, un crioprotector, un regulador de pH, y un estabilizador, en donde la trehalosa comprende al menos 60%, en peso, del crioprotector y el polvo liofilizado tiene un contenido de humedad menor a 3%. Incluso otra modalidad de la invención es un producto de fármaco de interferón pegilado que comprende un contenedor de vidrio, que comprende un polvo liofilizado que comprende un ¡nterferón pegilado, un crioprotector, un regulador de pH, y un estabilizador en donde la trehalosa comprende al menos 60%, en peso, del crioprotector y el polvo tiene un contenido de humedad menor al 3%. En una modalidad preferida, el contendor de vidrio es un cartucho que tiene primeras y segundas cámaras, en donde la primera cámara contiene el polvo liofilizado y la segunda cámara contiene agua estéril para inyección, que se utiliza para reconstituir el polvo en una solución para inyección. Además, la presente invención proporciona métodos para preparar las formulaciones de ¡nterferón pegilado liofilizado. Dichos métodos comprenden liofilizar un interferón pegilado en presencia de un crioprotector, un regulador de pH, un estabilizador, y agua estéril para inyección, en donde la trehalosa comprende al menos 60%, en peso, del crioprotector. La liofilizacíón se realiza bajo condiciones que producen un contenido de humedad menor al 3%.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención proporciona novedosas formulaciones liofilizadas de interferones pegilados que son estables durante almacenamiento a largo plazo a temperatura ambiente, como también procedimientos para preparar estas formulaciones. Esta sección presenta una descripción detallada de estas formulaciones, su preparación y sus aplicaciones. Esta descripción es por medio de varias ilustraciones ejemplares, a detalle y especificidad incrementados de varias modalidades de esta invención. Estos ejemplos son no limitativos, y variaciones relacionadas que serán evidentes para un experto en la técnica pretenden abarcarse por las reivindicaciones anexas. De manera que la invención pueda entenderse más fácilmente, ciertos términos técnicos y científicos se definen específicamente en esta sección. Todos los términos técnicos y científicos utilizados en la presente tienen el significado comúnmente comprendido por un experto en la técnica al cual pertenece la invención. Como se utiliza en la presente el término "interferón pegilado" significa conjugados covalentes de una o más moléculas de polietilenglicol (PEG) y una o más moléculas de interferón. Los conjugados preferidos para utilizarse en las formulaciones de la invención tienen una a cuatro moléculas de PEG por molécula de interferón, y más preferiblemente, los conjugados están entre una sola molécula de PEG y una sola molécula de interferón. El interferón pegilado puede comprender un solo isómero posicíonal o una mezcla de isómeros posicionales conjugados, por ejemplo, las moléculas de PEG se fijan covalentemente a diferentes residuos aminoácidos en las moléculas de interferón individuales. Por ejemplo, la patente de E.U.A. 5,951 ,974 describe la preparación de mezclas de isómeros posicionales del conjugado PEG-interferón alfa en donde algunos de los isómeros son conjugados entre PEG y un residuo de histidina de la molécula de interferón, otros isómeros en la mezcla son conjugados entre PEG y un residuo de lisina de interferón e incluso otros isómeros son conjugados entre PEG y la terminal amino de la molécula de interferón. Preferiblemente, el componente de interferón pegilado de las formulaciones de la invención comprende una mezcla de isómeros posicionales en donde al menos 15%, y más preferiblemente al menos 30%, de los conjugados en la mezcla se encuentran entre una sola molécula de PEG y una sola molécula de interferón en el residuo de histidina. Las moléculas de PEG en los conjugados pueden tener diferentes pesos moleculares. Preferiblemente, las moléculas de PEG tienen un peso molecular promedio que oscila entre 1 ,000 y 15,000. En una modalidad particularmente preferida, los conjugados se preparan utilizando PEG120oo. es decir, lo que significa que las moléculas de PEG en los conjugados tendrán un peso molecular promedio de alrededor de 12,000. La porción de interferón de los conjugados de interferón pegilados utilizados en la presente invención puede ser cualquier interferón natural o recombinante conocido por los expertos en la técnica. Los a-interferones naturales y recombinantes que pueden utilizarse en las formulaciones de la invención incluyen interferón a-n3, (por ejemplo, Sumiferon®, Sumitomo), interferón a-n3, interferón -2a (Roferon® A, Hoffmann-La Roche, Inc.), ¡nterferón a-2b (INTRON® A, Shering-Plough Corp.), interferón a-2c (Berofor®, Boehringer Ingelheim, Inc.), e interferón de consenso (Infergen® InterMune, INC.). Los ß-interferones y ?-¡nterferones que son adecuados para practicar la invención incluyen interferón ß-1 a (AVONEX®, Biogen Idee), interferón ß-1 b (Betaseron ® Berlex laboratories, Ríchmond, CA) e ¡nterferón ?-1 b (ACTIMMUNE®, InterMune, Inc.). Los interferones preferidos son ¡nterferón a-2a e ¡nterferón a-2b. Más preferiblemente, el ¡nterferón a-2b se utiliza para preparar el ingrediente activo de las formulaciones de la presente invención. La conjugación del PEG y las moléculas de interferón pueden realizarse medíante cualquier reacción de conjugación conocida por los expertos en la técnica, por ejemplo, como se describe en la patente de E.U.A. Nos. 5,612,460, 5,711 ,944 y 5,951 ,974. Preferiblemente, la molécula de PEG se fija covalentemente a la molécula de interferón con un enlace de uretano. Más preferiblemente, el interferón pegilado se genera al hacer reaccionar el interferón con carbonato de metoxipoli(etilen glicol)- succinimidilo (SC-PEG) a un pH de 6.5, como se describe en la patente de E.U.A. No 5,951 ,974. El interferón pegilado más preferido para utilizarse en las formulaciones de la invención es PEG120oo- interferón a-2b.

Además de un interferón pegilado, las formulaciones de la presente invención comprenden un crioprotector, que protege el interferón pegilado de daño, adsorción y pérdida de vacío utilizado en la liofilización. El crioprotector también sirve para estabilizar el interferón pegilado durante el procedimiento de secado por congelamiento y en el polvo liofilizado resultante, y como agente formador de cuerpo para formar una torta fácilmente reconstituible. La cantidad de crioprotector utilizada típicamente se basa en el peso total de la formulación. En una modalidad, el crioprotector está presente en una cantidad de 0.05% a 90% del peso total. En modalidades preferidas, la formulación comprende una cantidad de crioprotector que se encuentra entre 0.05% y 50%, y más preferiblemente entre 0.15% y 10%, del peso total de la formulación. La trehalosa comprende al menos 60% del peso total del crioprotector en la formulación. El crioprotector puede comprender trehalosa en cualquier porcentaje entre 60% y 100% en peso, por ejemplo, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% o 100%. Preferiblemente, la trehalosa comprende por lo menos 75% del peso total del crioprotector. Más preferiblemente, al menos 80% del crioprotector, en peso, es trehalosa y más preferiblemente, la trehalosa constituye 100% del crioprotector. La trehalosa es un dísacárido que contiene dos moléculas de glucosa unidas en un enlace a.a-1 ,1. Cualquier forma de trehalosa es adecuada para utilizarse en la preparación de formulaciones de la presente invención. Una forma preferida de trehalosa es trehalosa dihidratada.

Otros agentes que pueden utilizarse con trehalosa en el crioprotector son carbohidratos tal como sacáridos, sacarosa, alcoholes de azúcar, tal como manitol, agentes activos de superficie tal como Tweens, como también glicerol y dimetílsulfóxido. Un crioprotector preferido es un carbohidrato. Un carbohidrato preferido es un disacárido. Un disacárido preferido es sacarosa. En una modalidad preferida, las formulaciones se prepararan al liofilizar una solución que contiene 60 mg/ml de trehalosa dihidratada y 40 mg/ml de sacarosa como el crioprotector. En una modalidad más preferida, la solución comprende 80 mg/ml de trehalosa dihidratada y 20 mg/ml de sacarosa como el crioprotector. En incluso una modalidad más preferida, el crioprotector consiste en trehalosa deshidratada, que está presente en la solución a 90 mg/ml de trehalosa. Las formulaciones de la invención también contienen un regulador de pH para mantener el pH de la formulación en una escala de 4.5 a 7.1. Preferiblemente, el regulador de pH mantiene el pH entre 6.5 y 7.1 , y más preferiblemente mantiene el pH a 6.8. Un regulador de pH preferido comprende cantidades de masa iguales de fosfato de sodio dibásico anhidro y fosfato de sodio monobásico monohidratado, con la concentración total de estos compuestos en la formulación entre 0.005 y 0.01 molar. Otros sistemas reguladores de pH adecuados para mantener la escala de pH deseada incluyen citrato de sodio/ácido cítrico y acetato de sodio/ácido acético.

Las formulaciones de la presente invención también contienen un estabilizador para evitar la adsorción del interferón pegilado a las superficies de vidrio y acero inoxidable del equipo y contenedores utilizados para liofilizar y almacenar las formulaciones. Además, los estabilizadores pueden estabilizar el interferón pegilado al reducir al mínimo su exposición a interfaces aire-agua y hielo-agua durante la liofílizacíón y almacenamiento. Como un ejemplo, los polisorbatos son útiles como agentes estabilizadores. El polisorbato 80 es un agente de estabilización preferido. Cuando se utiliza polisorbato 80, la concentración preferida es 0.01 a 1 mg/ml. Otros estabilizadores adecuados son agentes activos de superficie tales como alcohol polivinílico (PVA) y PEG 300, que pueden utilizarse a <2% del volumen de la solución utilizada para la formulación liofilizada. Para preparar las formulaciones de la presente invención, el interferón pegilado, crioprotector, regulador de pH y estabilizador se disuelven en agua para inyección en una cantidad seleccionada para lograr concentraciones de los ingredientes sólidos que son adecuadas para liofilización. Como se utiliza en la presente, el término "agua para inyección" significa agua estéril y purificada que cumple los estándares reglamentarios para partículas, sólidos disueltos, contaminantes orgánicos, inorgánicos, microbianos y endotoxinas. Una vez que todos los ingredientes de la formulación están en solución, la solución se repartió en alícuotas en contenedores de vidrio adecuados para usarse en un liofilizador y para almacenamiento del polvo liofilizado resultante. Los contenedores preferidos son recipientes y cartuchos. Como se utiliza en la presente, el término "recipiente" se refiere a un pequeño contenedor de vidrio con una parte inferior ligeramente cóncava o plana, un cuello corto y una pestaña plana diseñada para obstrucción. Los recipientes generalmente se colocan directamente en las charolas o anaqueles de la cámara liofilizadora para transferencia directa de calor. Como se utiliza en la presente, los términos "cartuchos" y "cartucho de cámara doble" como se utiliza intercambiablemente para mencionar el contenedor de vidrio similar a un tubo con dos cámaras que están separadas por un tope medio. Una cámara (cámara activa) tiene un cuello angosto y se cierra mediante un cierre a presión. La otra cámara (cámara de dilución) es más ancha y cerrada por un tope de extremo. Los cartuchos son contenedores i, que mantienen los cartuchos verticales, y posteriormente los contenedores se colocan directamente en las charolas/anaqueles del liofilizador. Los cartuchos pueden estar o no estar en contacto directo con la charola/anaquel del liofilizador para la transferencia de calor. Los contenedores de vidrio que contienen una formulación de ¡nterferón pegilado de la invención se someten a liofilización bajo condiciones apropiadas para producir un polvo liofilizado que tiene un contenido de humedad de menos de 3%. Preferiblemente, el polvo liofilizado tiene un contenido de humedad de entre 0.5% y 2.5%, y más preferiblemente entre 1 % y 2%.

Las condiciones de liofilización también se eligen para lograr niveles aceptables de defectos en la torta mientras mantiene el contenido de humedad bajo deseado. Como se utiliza en la presente, la frase "defecto de torta" se refiere a una torta que tiene uno o más defectos físicos, tal como colapso, contracción, formación de tapa o refusión. Las tortas colapsadas, que generalmente se debe a calentamiento excesivo de la formulación durante el secado por congelamiento, se relacionan con la pérdida de elegancia del producto y una pobre estabilidad. La contracción, que es provocada por un ciclo de secado por congelamiento ineficaz, puede ser un signo de colapso parcial o micro colapso y puede dar como resultado una estabilidad pobre del interferón pegilado tras almacenamiento. Formación de tapa se refiere a un defecto físico en donde la parte superior de la torta forma una película delgada o corteza, separada de la mayor parte de la torta. Refusíón se refiere a una forma común del colapso de la torta que principalmente se debe a sublimación incompleta (cambio de estado sólido a vapor) de la formulación. La refusión se relaciona con cambio en la forma física del ¡nterferón pegilado o bolsa(s) de humedad, que puede dar como resultado inestabilidad y despegilacíón del interferón pegilado. Preferiblemente, el porcentaje de este tipo de defecto de torta en el polvo liofilizado es menor a 50%, más preferiblemente menor a 10%, incluso más preferiblemente menor a 2% y más preferiblemente menor a 1 %. El uso de trehalosa en las formulaciones de la presente invención permite las condiciones de liofilización agresivas para lograr polvos liofilizados con un bajo contenido de humedad deseado y defectos de torta mínimos. La carga de los contenedores de vidrio en el liofilizador puede realizarse a presión ambiente entre -55° y 5°C. Los contenedores cargados pueden someterse a congelación a temperatura ambiente durante 1 a 4 horas a una temperatura entre -55C y° -40°C, seguido por recocido a presión ambiente de 4 a 8 horas a una temperatura de entre -25°C y -15°C. La solución congelada se seca en dos pasos bajo vacío a una presión de entre 8 y 100 miliTorr (mTorr), preferiblemente entre 15 y 30mTorr. El paso de secado primario puede realizarse de 15 a 35 horas a una temperatura entre -30°C y -15°C mientras que el paso de secado secundario puede realizarse de 5 a 10 horas a una temperatura que empieza tan baja como 0 a 5°C y elevarse hasta 40°C durante el periodo de secado. La descarga de los contenedores de vidrio que contienen el polvo liofilizado puede realizarse a temperatura ambiente y a una temperatura en el cuarto o por debajo. La invención contempla que variaciones de estas condiciones de liofilizado producirán polvos liofilizados que tienen las caracterizadas deseada. El experto en la técnica puede diseñar y probar fácilmente procedimientos de liofilizado alternativos con base en consideraciones conocidas en la técnica. Ver por ejemplo Tang y Pikal, Pharmaceutical Research, 21(2):191-200 (2004)). Un ciclo de liofilizado preferido para preparar una formulación de interferón pegilada liofilizada de la presente invención se resume en el cuadro 1 a continuación.

CUADRO 1 Ciclo de liofilizado preferido para liofilizar formulaciones de interferón pegilada de la invención Este ciclo de liofilizado preferido requiere menos de 48 horas para completarse, incluyendo tiempo requerido para cambiar la temperatura de la cámara entre pasos como aplique. Las formulaciones de interferón pegiladas, que se preparan de conformidad con la descripción anterior, son muy estables durante almacenamiento a temperatura ambiente y superior. En una modalidad, la cantidad de interferón sin pegilar en el polvo liofilizado, después de almacenamiento a 40°C durante 30 días es menor a 10%, preferiblemente menor a 7.5% y más preferiblemente menor a 5%. Formulaciones preferidas de la invención son liofilizadas en un cartucho y consisten esencialmente en PEG?20oo-interferón alfa-2b en la cantidad de 67.5 µg, 108 µg, 162 µg ó 202.5 µg, 80 mg treahalosa dihidratada, 1.013 mg fosfato de sodio díbásico anhidro, 1.013 mg fosfato de sodio monobásico deshidratado y 0.0675 mg de polisorbato 80. Como se utiliza en la presente, el término "consistiendo esencialmente en" quiere decir que el polvo liofilizado contiene solo los materiales especificados y otros materiales que no afectan de forma importante la actividad o estabilidad biológica de la formulación y que no afectan de forma importante cualesquiera propiedades reivindicadas específicamente de la formulación, como el contenido de humedad o cantidad de defectos de formación de torta. Formulaciones particularmente preferidas consisten en los ingredientes enlistados en este párrafo. Las formulaciones de interferón pegilado de la invención son útiles para tratar enfermedades o condiciones que responden favorablemente a terapia de interferón como cáncer y otros trastornos de proliferación celular así como infecciones virales. Para administrar una formulación de la presente invención el polvo liofilizado se reconstituye en un diluyente estéril, preferiblemente agua para inyección y luego una cantidad terapéuticamente efectiva de la formulación reconstituida se inyecta en el paciente a tratarse.

EJEMPLOS Las soluciones de interferón pegiladas que contienen varias cantidades de trehalosa y sacarosa como crioprotector se prepararon y liofilizaron en cartucho de vidrio bajo condiciones diversas y los polvos liofilizados resultantes se probaron en cuanto a defectos de formación de torta, contenido de humedad y estabilidad del interferón pegilado. El cuadro 2 a continuación describe la composición de cuatro de estas soluciones que se liofilizaron utilizando las condiciones de liofilizado establecidas en el cuadro 1 anterior. CUADRO 2 Cada solución se preparó en agua para inyección Después de liofilizado (utilizando el ciclo de liofilizado que se muestra en el cuadro 1 ), el número de tortas que normalmente se rechazarían debido a tortas colapsadas, tortas con tapa, tortas severamente contraídas y refusiones se determinó y el contenido de humedad fue medido. Los resultados se muestran en el cuadro 3.

CUADRO 3 Comparación de porcentaje de tortas rechazadas para formulaciones preparadas a partir de la solución O. A, B y C Como lo muestran los datos del cuadro 3, el uso de trehalosa como crioprotector, solo o en combinación con sacarosa llevó a un menor índice de tortas rechazadas debido a menores defectos en torta (por ejemplo colapsado, contracción, formación de tapas y refusión). Adicíonalmente, el efecto de varios concentraciones de trehalosa sobre la estabilidad vista fueron pegilados se midió al medir el % de interferón libre, y corresponde al nivel de despegilación (es decir hidrólisis) que estaba presente cuando el polvo liofilizado se almacenó durante treinta días a 40°C.

Los resultados se muestran en el cuadro 4.

CUADRO 4 Comparación de % de interferón libre en polvos liofilizado preparados a partir de las soluciones O y C Nota: llenado 0.5 ml o llenado 0.7 ml se refiere a la cantidad de la solución liofilizada en un cartucho de vidrio; "nd" quiere decir no determinado Como lo muestran los datos del cuadro 4, el uso de trehalosa como el crioprotector llevó a una menor despegilación (hidrólisis) de Interferón a-2b pegilado en el polvo liofilizado. Varias publicaciones se citan en la presente, cuyas descripciones se incorporan mediante referencias en sus totalidades.

Claims

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES 1.- Una solución para preparar una formulación de polvo liofilizado, la solución comprendiendo un interferón pegilado, un crioprotector, una solución reguladora, un estabilizador y agua para inyección, en donde la trehalosa comprende por lo menos 60% en peso y el crioprotector y la solución reguladora mantiene el pH de la formulación entre 4.5 y 7.1. 2.- La solución de conformidad con la reivindicación 1 , caracterízada además porque el crioprotector además comprende sacarosa. 3.- La solución de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada además porque la trehalosa comprende por lo menos 70% en peso del crioprotector. 4.- La solución de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada además porque la trehalosa comprende por lo menos 80% en peso del crioprotector. 5.- La solución de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada además porque el crioprotector consiste en trehalosa. 6.- La solución de conformidad con la reivindicación 5, caracterizada además porque también comprende 90 mg/ml trehalosa. 7.- La solución de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada además porque la solución reguladora mantiene el pH de la solución entre 6.5 y 7.1. 8.- La solución de conformidad con la reivindicación 7, caracterizada además porque la solución reguladora consiste en fosfato de sodio dibásíco anhidro y fosfato de sodio monobásico monohidratado. 9.- La solución de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada además porque el estabilizador es un polisorbato. 10.- La solución de conformidad con la reivindicación 9, caracterizada además porque el polisorbato es polisorbato 80. 11.- La solución de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizada además porque el interferón pegilado consiste en conjugados covalentes entre moléculas PEG y moléculas de interferón alfa. 12.- La solución de conformidad con la reivindicación 11 , caracterizada además porque las moléculas PEG se unen a las moléculas de interferón con un enlace de uretano. 13.- La solución de conformidad con la reivindicación 12, caracterizada además porque al menos 15% de las moléculas PEG unidas se adjuntan a residuos de hístídina de las moléculas de ¡nterferón alfa. 14.- La solución de conformidad con la reivindicación 13, caracterizada además porque el interferón alfa pegilado es PEG120oo-¡nterferón alfa-2b. 15.- La solución de conformidad con la reivindicación 14, caracterizada además porque también consiste de entre 100 y 300 µg/ml de PEG-?2ooo"interferón alfa-2b, 90 mg/ml trehalosa deshidratada, 1.5 mg/ml de fosfato de sodio díbásico anhidro, 1.5 mg/ml fosfato de sodio monobásico monohidratado, 0.1 mg/ml polisorbato 80 y agua para inyección. 16.- Un polvo liofilizado producido por liofilizado de una solución que comprende interferón pegilado, un crioprotector, una solución reguladora, un estabilizador y agua para inyección, en donde la trehalosa comprende por lo menos 60%, en peso del crioprotector, la solución reguladora mantiene el pH de la solución entre 4.5 y 7.1 y el polvo liofilízado tiene un contenido de humedad de menos de 3%. 17.- El polvo de conformidad con la reivindicación 16, caracterizado además porque tiene un contenido de humedad de menos de 2%. 18.- El polvo de conformidad con la reivindicación 17, caracterizado además porque tiene menos de 10% de ¡nterferón no pegilado después de almacenamiento a 40°C durante 30 días. 19.- El polvo de conformidad con la reivindicación 17, caracterizado además porque está liofilizado en un cartucho. 20.- El polvo de conformidad con la reivindicación 19, caracterizado además porque la solución consiste esencialmente de entre 100 y 300 µg/ml de PEG?2ooo-interferón alfa-2b, 90 mg/ml trehalosa deshidratada, 1.5 mg/ml fosfato de sodio dibásico anhidro, 1.5 mg/ml fosfato de sodio monobásico monohidratado, 0.1 mg/ml polisorbato 80 y agua para inyección. 21.- El polvo de conformidad con la reivindicación 20, caracterizado además porque el líofilizado se realiza utilizando un ciclo de liofilizado que comprende los siguientes pasos y valores de condición: Paso: Carga; Temperatura (°C), Presión (mTorr); valor de condición: 5; ambiente; Congelación: Temperatura (°C), Presión (mTorr), Tiempo (hrs); -50, Ambiente, 2; Recocido; Temperatura (°C), Presión (mTorr), Tiempo (hrs): -20, Ambiente, 6; Secado primario: Temperatura (°C), Presión (mTorr), Tiempo (hrs); -20, 15, 25; Secado secundario: Temperatura (°C), Presión (mTorr), Tiempo (hrs); 5 a 40, 15, 16; Descarga: Temperatura (°C), Presión (mTorr); 5, ambiente. 22.- Un procedimiento para preparar una formulación de interferón pegilada liofilizada, que comprende: proporcionar una solución que comprende un interferón pegilado, un crioprotector, una solución reguladora, un estabilizador y agua para inyección, en donde trehalosa comprende por lo menos 60% en peso del crioprotector y el regulador de pH mantiene el pH de la formulación entre 4.5 y 7.1 ; colocar la solución en un contenedor de vidrio y liofilizar la solución utilizando un ciclo de líofilizado que produce un polvo liofilízado que tiene un contenido de humedad de menos de 3%. 23.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado además porque el contenedor de vidrio es un frasco. 24.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 22, caracterizado además porque el ciclo de liofilizado comprende: cargar el contenedor de vidrio en un liofilizador a presión ambiente y a una temperatura entre -55°C y 5°C; incubar el contenedor de vidrio a presión ambiente durante 1 a 4 horas a una temperatura entre -55°C y -40°C para congelar la solución en el contenedor de vidrio; incubar el contenedor de vidrio que contiene la solución congelada a presión ambiente de 4 a 8 horas a una temperatura entre -25°C y -15°C para recocer el interferón pegílado en la solución; secar la solución congelada y recocida bajo vacío a una presión entre 8 y 100 miliTorr (mTorr) utilizando un paso de secado primario y un paso de secado secundario, en donde el paso de secado primario se realiza de 15 a 35 horas a una temperatura entre -30°C y -15°C y el paso de secado secundario se realiza de 5 a 10 horas a temperatura que empieza a 0°C a 5°C y que se eleva hasta 40°C durante el período de secado secundario; y descargar el contenedor de vidrio de liofilizador a presión ambiente y a una temperatura de 25°C o por debajo. 25.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 24, caracterizado además porque el contenedor de vidrio es un cartucho y el ciclo de liofilizado comprende los siguientes pasos y valores de condición: Paso: Carga; Temperatura (°C), Presión (mTorr); valor de condición: 5; ambiente; Congelación: Temperatura (°C), Presión (mTorr), Tiempo (hrs); -50, Ambiente, 2; Recocido; Temperatura (°C), Presión (mTorr), Tiempo (hrs): -20, Ambiente, 6; Secado primario: Temperatura (°C), Presión (mTorr), Tiempo (hrs); -20, 15, 25; Secado secundario: Temperatura (°C), Presión (mTorr), Tiempo (hrs); 5 a 40, 15, 16; Descarga: Temperatura (°C), Presión (mTorr); 5, ambiente. 26.- Un producto de fármaco de ¡nterferón pegilado que comprende un polvo liofilizado en un contenedor de vidrio, en donde el polvo liofilizado comprende un ¡nterferón pegilado, un crioprotector, una solución reguladora y un estabilizador, en donde la trehalosa comprende por lo menos 60% en peso del crioprotector y el regulador de pH mantiene el pH de la formulación entre 4.5 y 7.1. 27.- El producto de fármaco de interferón pegílado de conformidad con la reivindicación 26, caracterizado además porque la trehalosa comprende por lo menos 80% en peso del crioprotector. 28.- El producto de fármaco de ¡nterferón pegilado de conformidad con la reivindicación 27, caracterizado además porque el crioprotector consiste en trehalosa. 29.- El producto de fármaco de interferón pegilado de conformidad con la reivindicación 27, caracterizado además porque el contenedor de vidrio es un frasco. 30.- El producto de fármaco de interferón pegilado de conformidad con la reivindicación 27, caracterizado además porque la solución reguladora consiste en fosfato de sodio díbásico anhidro y fosfato de sodio monobásico monohidratado y el estabilizador es polisorbato. 31.- El producto de fármaco de ¡nterferón pegilado de conformidad con la reivindicación 30, caracterizado además porque el polisorbato es polisorbato 80. 32.- El producto de fármaco de interferón pegilado de conformidad con la reivindicación 30, caracterizado además porque el interferón pegilado consiste en conjugados covalentes entre moléculas de PEG y moléculas de interferón alfa, en donde las moléculas de PEG se unen a las moléculas de interferón alfa con un enlace de uretano. 33.- El producto de fármaco de interferón pegilado de conformidad con la reivindicación 32, caracterizado además porque por lo menos 15% de las moléculas de PEG unidas se unen a residuos de histidina de las moléculas de interferón alfa. 34.- El producto de fármaco de interferón pegílado de conformidad con la reivindicación 33, caracterizado además porque el contenedor de vidrio es un cartucho que tiene primeras y segundas cámaras en donde el polvo liofilízado está en la primera cámara y la segunda cámara comprende agua para inyección. 35.- El producto de fármaco de ¡nterferón pegilado de conformidad con la reivindicación 34, caracterizado además porque el interferón alfa pegilado es PEG?20oo-interferón alfa-2b. 36.- El producto de fármaco de ¡nterferón pegílado de conformidad con la reivindicación 35, caracterizado además porque el polvo liofilizado consiste esencialmente en 67.5 µg de PEG^ooo-interferón alfa-2b, 60.780 mg trehalosa dihídratada, 1.013 mg fosfato de sodio dibásíco anhidro, 1.013 mg fosfato de sodio monobásico deshidratado, y 0.0675 mg polisorbato 80. 37.- El producto de fármaco de ¡nterferón pegilado de conformidad con la reivindicación 35, caracterizado además porque el polvo liofilizado consiste esencialmente en 108 µm de PEG120oo-¡nterferón alfa-2b, 60.780 mg trehalosa dihidratada, 1.013 mg fosfato de sodio dibásíco anhidro, 1.013 mg fosfato de sodio monobásico deshidratado y 0.0675 polisorbato 80. 38.- El producto de fármaco de interferón pegilado de conformidad con la reivindicación 35, caracterizado además porque el polvo liofilízado consiste esencialmente en 162 µm de PEG-i2ooo-¡nterferón alfa-2b, 60.780 mg trehalosa dihidratada, 1.013 mg fosfato de sodio díbásico anhidro, 1.013 mg fosfato de sodio monobásico deshidratado y 0.0675 mg polisorbato 80. 39.- El producto de fármaco de interferón pegílado de conformidad con la reivindicación 35, caracterizado además porque el polvo liofilizado consiste esencialmente en 202.5 µm de PEG120oo-interferón alfa-2b, 60.780 mg trehalosa dihídratada, 1.013 mg fosfato de sodio dibásíco anhidro, 1.013 mg fosfato de sodio monobásico deshidratado y 0.0675 mg polisorbato 80.