PT690864E

PT690864E - Acido livre de ceftiofur cristalino

Info

Publication number: PT690864E
Application number: PT94910721T
Authority: PT
Inventors: Michael J Dunn; Michael S Bergren; Gregory E Hardee; Kenneth Paul Shephard; Robert S Chao; Jeffrey L Havens
Original assignee: Upjohn Co
Priority date: 1993-03-12
Filing date: 1994-03-07
Publication date: 2001-11-30
Also published as: PL184611B1; HUT73781A; AU694419B2; SK111495A3; FR05C0045I1; CZ289332B6; BR1101034A; DE122005000055I1; AU6351094A; IL108910A0; NO2005025I2; CA2155322C; FR05C0045I2; NL300208I1; SK283674B6; NO953564D0; HU9501960D0; CN1055090C; TW267170B; FI954250A

Description

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ΕΡ Ο 690 864 / ΡΤ

Introdução

Este invento refere-se a uma nova forma cristalina do ácido livre de ceftiofur, a um processo para a preparação desta forma cristalina e a uma composição farmacêutica de libertação sustentada contendo esta forma cristalina.

Antecedentes do invento São conhecidos muitos compostos de cefalosporinas, derivados destes e processos para a sua preparação. Por exemplo, são conhecidos os seguintes: axetilcefuroxima amorfa, o seu sal de sódio cristalino, o seu derivado de naftiridina e o seu sesqui-hidrato (patentes U.S. 4,820,833; 4,298,732; 4,442,101); cefemcarboxilato de sódio cristalino (patente U.S. 4,692,519); hepta-hidrato de cefem cristalino (patente U.S. 4,555,404); di- ou tri-hidrato de cefalosporina cristalino (patentes U.S. 4,812,561; 5,017.380; 4,933,443); mono-hidrato de cefadroxilo (patente U.S. 4,898,938); ceftazidima cristalina anidra e o seu penta-hidrato (patentes U.S. 4,624,948; 4,616,080; EP 0 278 656); solvato de pirrolidona de amoxicilina de sódio (patente U.S. 4,318,852); mono-hidrato de cefazolina de sódio (patente U.S. 4,104,470); o-formilcefamandolo cristalino (patente U.S. 4,006,138); sais de derivados do ácido 3-acetoximetil-7-(iminoacetamido)-cefalosporânico, que podem ser quer cristalinos quer amorfos (patente U.S. 5,103,012); mono-hidrato cristalino do ácido 7-[D-a-amino-a-(p-hidroxifenil)acetamido]-3-metil-3-cefem-4-carboxílico (patente U.S. 4,504,657); sal cloridrato cristalino do ácido sin-7-[[(2-amino-4-tiazolil)(metoxiimino)acetil]amino]-3-metil-3-cefem-4-carboxílico (patente U.S. 4,400,503); sais de adição ácida de cefem cristalinos (pedido de patente canadiana 2,018,794); 7-P-[2-(2-amino-4-tiazolil)acetamido]-3-[[[l-[2-(dimetilamino)etil]-lH-tetrazol-5-il]tio]metil]-3-cefem-4-carboxilato de (pivaloíloxi)metilo cristalino (Chemical Abstmcts 97:3876lq (1982)); cefalexina cristalina {Chemical Abstracts 84:184895j (1976); mono-hidrato de cefalexina cristalina (patente U.S. 3.531,481); tetra-hidrato cristalino do ácido 7-(D-2-naftilglicilamido)-3-metil-3-cefem-4-carboxílico (patente U.S. 4,747,780); a preparação de um composto de cefalosporina específico cristalino por agitação e adição de metanol e acetato de butilo (Chemical Abstracts 110:212490z (1989)); um método para produção de produtos antibióticos cristalinos puros, tais como a penicilina e a cefalosporina. por tratamento com etano em um ou dois passos (patente U.S. 4,912.211).

86 797 ΕΡ Ο 690 864 / ΡΤ 2 A partir de um grande número de patentes e de referências bibliográficas que estão disponíveis relativamente a compostos de cefalosporina, parece que a ocorrência de um composto de cefalosporina anidro ou não solvatado, que não seja em forma de sal cristalina é raro. A maioria das formas cristalinas tendem a ser sais, hidratos, solvatos ou derivados destes. O antibiótico de cafalosporina ácido 7-[2-(2-amino-l,3-tiazol-4-il)-2-metoxiimino)-acetamido]-3-[(fur-2-ilcarbonil)tiometil]-3-cefem-4-carboxílico (designado também por ácido 7-[2-(2-amino-4-tiazolil)-2-metoxiimino)acetamido]-3-[(2-furanilcarboniltiometil)-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo[4.2.0]oct-2-eno-l-carboxílico de fórmula I no Esquema de Fórmulas abaixo, os seus sais de metal alcalino, metal alcalino-terroso e de amina do grupo de ácido carboxílico, e os grupos de éster destes facilmente hidrolisáveis, são descritos e reivindicados na Patente U.S. N° 4,464,367 (Labeeuw et cil.). Este composto de ácido livre de cefalosporina é agora conhecido pelo nome genérico de “ceftiofúr”. Ver também o Merck Index, Décima Primeira Edição, 1948 (1989). O ceftiofúr de sódio é correntemente comercializado por Upjohn Company como NAXCEL® ou como solução estéril EXCENEL® para tratar a doença respiratória dos bovinos (BRD). Este produto é administrado intra-muscularmente (IM) durante um período de três a cinco dias usando doses diárias. O ácido livre e as formas de sal de metal catiónico e de amina e de éster deste antibiótico de cefalosporina são de algum modo quimicamente instáveis e são obtidos como compostos amorfos que são difíceis de purificar, e são menos desejáveis para se trabalhar no fabrico de formulações farmacêuticas que o contenham. Este ácido livre e os sais amorfos são sólidos difíceis de isolar e de manusear nas fábricas de produtos farmacêuticos, que os peritos na arte farmacêutica prefeririam evitar.

Contudo, não se pode prever como fazer uma forma cristalina específica de um compostos de droga activo particular. Mais especificamente, não se pode prever como fazer uma forma cristalina anidra ou não solvatada, não salina de uma cefalosporina.

Divulgação de informação A patente U.S. 4,467,367 (Labeeuw et ai), tal como discutido atrás, descreve a preparação de uma forma amorfa do ácido livre de ceftiofúr no Exemplo l(b).

86 797 ΕΡ Ο 690 864 / ΡΤ A patente U.S. 4,937,330 (Sacks et ai), descreve a preparação do sal de sódio de ceftiofur por neutralização do sal cloridrato com uma resina básica. O ácido livre amorfo é descrito como um intermediário neste processo. A patente U.S. 4,902,683 (Amin et ai), descreve e reivindica os sais bromidrato e cloridrato de ceftiofur, a forma cristalina do sal cloridrato. processos para a sua preparação, e composições farmacêuticas contendo-os para uso veterinário. A patente U.S. 5,079,007 (Putnam), descreve implantes antibióticos de libertação controlada contendo cloridrato de ceftiofur cristalino e sal de sódio de ceftiofur amorfo. A patente U.S. 4,877,782 (Cazers et ai), descreve complexos de zinco-ceftiofúr que são úteis como antibióticos, especialmente em medicina veterinária. A patente U.S. 5,143,137 (Cazers et ai), descreve derivados de dissulfureto de ceftiofur, que são úteis como agentes antibacterianos especialmente em medicina veterinária.

As patentes U.S. 4,912,212 (Ochiai et ai) e 4,973,684 (Ochiai et ai), descreve compostos de cefem possuindo um resíduo de um composto nucleófilo na posição 3. A patente U.S. 5,013,713 (Mitchell), descreve métodos para a libertação prolongada de somatotropinas biologicamente activas. A patente U.S. 4,521,431 (Crookes), descreve uma nova forma cristalina de ranitidina, designada por Forma 2, que possui características favoráveis de filtração e de secagem sobre o cristal de Forma 1.

Hoover, “Dispensing of Medication”, 8a Ed. Mack Pub. Co. (1976); e J.R. Robinson Ed., “Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems”, Mareei Dekker, (1978), descreve a técnica para prolongar a libertação de uma droga no corpo por diminuição da solubilidade (através de uma ou mais técnicas) da droga, que diminui a velocidade de dissolução se a droga for proporcionada numa suspensão. V. H. Guerrini et ai, “Pharmaceutical evaluation of a slow-release cefotaxime suspension in the dog and sheep”, Am. J. Vet. Res., vol. 47. N°9, (1986) descreve o conceito das formulações de libertação sustentada. Guerrini et ai, descreve que a administração subcutânea (sc) da cefotaxima numa suspensão em óleo em cães e ovelhas proporciona concentrações no plasma (Cp) satisfatórias e mais prolongadas do que a preparação aquosa dada intramuscularmente (im) (apenas nas ovelhas) ou dada sc (ovelhas e cães). ϋίτ 86 797 ΕΡ Ο 690 864 / ΡΤ 4 A patente WO-A-8706231 descreve amoxicilina anidra cristalina. A patente EP-A-0122585 descreve a ceftazidina anidra cristalina. A patente DE-A-1207933 descreve a D-a-aminobenzilpenicilina cristalina anidra

Sumário do invento O presente invento proporciona em particular: um composto cristalino de fórmula I que é o ácido 7-[2-(2-amino-l,3-tiazol-4-il)-2-metoxiimino)acetamido]-3-[(fur-2-ilcarbonil)tiometil]-3-cefem-4-carboxílico, ou seja o ácido livre de ceftiofur cristalino; o ácido livre de ceftiofur em que pelo menos quarenta por cento (40%) do composto é cristalino; uma composição farmacêutica que compreende um composto cristalino de fórmula I; e um processo para preparar o ácido livre cristalino de fórmula I, que compreende a combinação de uma solução do ácido livre ou cloridrato de ceftiofur em acetona ou tetra-hidrofurano (THF) com água, a uma temperatura entre 40 e 60°C.

Ao longo deste documento, os seguintes termos possuem os significados indicados:

Por “libertação sustentada” pretende-se significar uma formulação em que a droga se toma biologicamente disponível para o paciente, com uma velocidade mensurável durante um período prolongado.

Por “portador ou excipiente farmaceuticamente aceitável”, pretende-se significar qualquer portador ou excipiente que é usualmente usado em composições farmacêuticas e que são bem conhecidos e prontamente preparados por um perito na arte. Tal portador ou excipiente pode ser um sólido ou um líquido e conter um ou mais agentes de suspensão, dispersão, estabilização, emulsionante, tampão, espessante, adoçante, aromatizante, corante ou conservante. A “solubilidade” é uma consequência directa de uma estrutura sólida e de forças intermoleculares que mantêm o sólido junto e é definida como a quantidade de droga que 5 86 797 ΕΡ Ο 690 864 / ΡΤ existe em solução quando o equilíbrio é alcançado entre a solução e o material de estado sólido. A “velocidade de dissolução” é a tradução cinética da solubilidade para um sistema bem agitado sob condições de imersão. A “libertação in vivo" é a consequência biológica da velocidade de dissolução de um composto, que é caracterizada pelo tempo para a máxima concentração e a máxima concentração do fluido biológico de interesse. A “higroscopicidade” é a capacidade de um composto de absorver humidade ou perder humidade para a atmosfera com variações da humidade relativa.

Este invento proporciona uma forma cristalina do ácido 7-[2-(2-amino-l,3-tiazol-4-il)-2-metoxiimino)acetamido]-3-[(fur-2-ilcarbonil)tiometil]-3-cefem-4-carboxílico (também denominado ácido 7-[2-(2-amino-4-tiazolil)-2-metoxiimino)acetamido]-3-[(2- furanilcarbonil-tiometil)-8-oxo-5-tia-l-azabiciclo[4.2.0]oct-2-eno-l-carboxílico), também conhecido como ceftiofur, de fórmula I no Esquema de Fórmulas. A forma cristalina do presente invento é mais precisamente descrita como uma forma cristalina, não salina de ceftiofur que é anidra ou não solvatada.

Tal como indicado atrás, o antibiótico de cefalosporina pode ser designado através de dois sistemas diferentes de nomenclatura. Alguns preferem o sistema mais formal do CHEMICAL ABSTRACTS, em que o composto é designado como derivado de um sistema em anel “biciclo”. Alguns preferem o sistema mais simples de nomenclatura de anel de “cefem”.

Os compostos orgânicos cristalinos consistem num grande número de átomos que são dispostos numa ordem periódica no espaço tridimensional. A periodicidade estrutural manifesta normalmente propriedades físicas distintas, tais como características espectrais precisas e explícitas na maior parte das análises espectroscópicas (e.g., diffacção de raios X, infravermelhos e RMN de estado sólido). A difracção de raios X (XRD) é conhecida como sendo um dos métodos mais sensíveis para determinar a cristalinidade dos sólidos. Os cristais dão origem a máximos de difracção explícitos que se observam com ângulos específicos consistentes com os espaçamentos interplanares dos arranjos regulares, tal como previsto pela lei de Bragg. 86 797 ΕΡ Ο 690 864 / ΡΤ ί/-

Pelo contrário, os materiais amorfos não possuem uma ordem a longa distância. Estes retêm frequentemente um volume adicional entre as moléculas, tal como no estado líquido. Os sólidos amorfos normalmente revelam um padrão de XRD característico, com halos largos e difusos por causa da ausência da ordem a longa distância dos arranjos regulares dos cristais repetitivos.

Os materiais cristalinos são preferidos na maioria das aplicações farmacêuticas. As formas cristalinas são termodinamicamente mais estáveis do que as formas amorfas da mesma substância. Esta estabilidade termodinâmica é reflectida na baixa solubilidade e na melhorada estabilidade física da forma cristalina. O empilhamento regular das moléculas no sólido cristalino nega a incorporação de impurezas químicas. Deste modo os materiais cristalinos possuem geralmente uma maior pureza química do que os seus correspondentes amorfos. O arranjo no sólido cristalino restringe as moléculas a posições de arranjos regulares bem definidos e reduz a mobilidade molecular que é o pré-requisito para reacções químicas. Deste modo, os sólidos cristalinos, com muito poucas excepções notáveis, são quimicamente mais estáveis do que os sólidos amorfos da mesma composição molecular. O ácido livre de ceftiofur cristalino do presente invento possui um espectro de infravermelhos com transformada de Fourier (FTIR) distinto e um perfil de diffacção de raios X em pó (XRD) distinto. Através de qualquer dos meios, o material é prontamente diferenciado de outros sólidos contendo ceftiofur, incluindo o sal cloridrato de ceftiofur cristalino, o sal de sódio de ceftiofur amorfo, o ácido livre de ceftiofur amorfo, e o sal de zinco de ceftiofur amorfo. A identidade do material como ceftiofur é confirmada pela presença de um padrão de XRD. As observações de XRD são corroboradas pela observação da birreffingência com microscopia de luz polarizada. A birrefringência é um meio aceite pela Farmacopeia Americana para determinar a cristalinidade. (U.S. Pharmacopeia and National Formulary, Vol. 22, página 1577, (1989)). O material existe sob a forma de ácido livre não associado de ceftiofur, verificado pela ausência de cloreto (presente no material de partida de cloridrato de ceftiofur).

Os padrões de FTIR e XRD representativos do ácido livre de ceftiofur cristalino do presente invento são mostrados nas Figuras 2, 4 e 5 abaixo e do ácido livre de ceftiofur amorfo, preparado tal como descrito no Exemplo l(b) da patente U.S. 4,464.367, que são mostrados nas Figuras 1 e 3 abaixo. Como se tomará aparente para um perito na arte, o composto da Figura 3 está na forma amorfa devido aos picos largos e não distintivos do seu espectro de XRD. A Figura 1 que é o espectro de FTIR deste composto, é consistente com esta interpretação da Figura 3. O composto das Figuras 4 e 5 está na forma cristalina por 7 86 797 ΕΡ Ο 690 864 / ΡΤ causa da forma afiada de picos distintos no seu espectro de XRD. A Figura 2, ÍJtie é o espectro de FTIR deste composto, é consistente com esta interpretação das Figuras 4 e 5. A Tabela 1 lista os picos de difracçào característicos do ácido livre de ceftiofur cristalino do presente invento.

Para além disso, o ácido livre de ceftiofur cristalino do presente invento, que contém um grupo amino e um grupo de ácido carboxílico, pode também ser escrito como um Zwitterião (ou ião dipolar) tal como mostrado na fórmula [A do Esquema de Fórmulas abaixo. Muitas das suas propriedades físicas e químicas são consistentes com a estrutura de Zwitterião. E um sólido não volátil cristalino que funde com decomposição a temperaturas elevadas; e é solúvel em solventes não polares, mas é fracamente solúvel em água. Um dos mais sensíveis e convenientes métodos analíticos usado para identificar a estrutura de Zwitterião de um ácido livre é a espectroscopia no infravermelho (IV). Por exemplo, os modos de vibração assimétricos e simétricos do ião NH/ são assinalados a cerca de 3250 e 2600-2400 cm'1, respectivamente. enquanto que a vibração do ião carboxilato COO' se localiza a cerca de 1565 cm'1. E de notar que o modo de vibração de C=0 de um ácido carboxílico normal (não um aminoácido) aparece a cerca de 1750-1700 cm'1 da gama espectral. O espectro IV do ácido livre de ceftiofur cristalino do presente invento na fase sólida (ver Figura 2 abaixo) é totalmente consistente com a estrutura de Zwitterião de fórmula IA. O ácido livre de ceftiofur cristalino do presente invento tem vantajosas propriedades físico-químicas. Possui menos solubilidade em solventes aquosos do que o material de partida de sal cloridrato cristalino. Acredita-se que a solubilidade inferior contribui para a sua baixa velocidade de dissolução e as suas propriedades de libertação sustentada in vivo, tal como discutido nos Exemplos a seguir. Também, a sua higroscopicidade e estabilidade (em bruto e em formulações) são superiores a outros sais de ceftiofur tais como o sal cloridrato cristalino e o ácido livre amorfo. Adicionalmente, o ácido livre cristalino é consideravelmente mais estável, tem melhores características de processamento, e pode ser seco mais facilmente devido à sua maior estabilidade a temperaturas elevadas. Todas estas propriedades são muito úteis quando se formula um produto farmacêutico a partir do ácido livre cristalino.

Uma comparação destas propriedades físico-químicas do ácido livre de ceftiofur cristalino do presente invento, do ácido livre de ceftiofur amorfo, preparado tal como descrito no Exemplo 1 (b) da patente U.S. 4,464.367, e do sal cloridrato de ceftiofur cristalino é resumida na Tabela II abaixo. Desta Tabela, toma-se evidente que as propriedades

86 797 ΕΡ Ο 690 864 / ΡΤ 8 mensuráveis do ácido livre cristalino do presente invento são distintamente diferentes de e superiores às do ácido livre amorfo e do sal cloridrato cristalino. Também, a partir desta tabela, se toma evidente que enquanto se espera que as propriedades físico-químicas de um composto melhorem como consequência de passar de uma forma amorfa para uma fnrma cristalina, as características favoráveis do ácido livre de ceftiofur cristalino em relação às do sal cloridrato de ceftiofur cristalino se tomam imprevisíveis e não se podem antecipar. Surpreendente e inesperadamente, o ácido livre cristalino do presente invento é anidro, enquanto que o sal cloridrato cristalino existe quer como hemi-hidrato ou como mono-hidrato, ou como uma mistura dos dois, com a humidade relativa ambiente normal. A natureza anidra do ácido livre conduz por si só a melhores características de formulação. Também, tal como demonstrado nos Exemplos abaixo, o ácido livre cristalino possui propriedades de libertação sustentada in vivo enquanto que o sal cloridrato não possui estas úteis propriedades de libertação sustentada.

Outra propriedade destes compostos de ceftiofur. que é comparada na Tabela II, é quer a sua estabilidade térmica (temperatura de decomposição por calorimetria de exploração diferencial (DSC)). (As temperaturas de decomposição dadas abaixo e na Tabela II são aproximadas e são o resultado de uma única leitura a partir de lotes típicos destes compostos). O Ceftiofur é termicamente instável no estado sólido a temperaturas elevadas. A liquefacção é acompanhada por decomposição. Nestas circunstâncias, é mais útil comparar as temperaturas de decomposição do que as temperaturas de fusão, porque a amostra se decompõe antes do processo de fusão estar completo. A DSC é uma técnica adequada para monitorizar o calor desenvolvido durante a decomposição da amostra. Os picos de temperaturas de decomposição e o início da decomposição podem ser retiradas a partir do perfil do fluxo de calor em função da temperatura. A decomposição do ácido livre de ceftiofur e do sal cloridrato de ceftiofur é exotérmica e ocorre em duas etapas. A primeira etapa de decomposição ocorre a temperaturas mais baixas e está bastante completa antes da segunda etapa começar. A primeira etapa de decomposição produz um pico exotérmico na DSC a uma temperatura que depende da fase sólida. O início deste pico é tipicamente medida como a intersecção da linha de base com o declive do pico. Uma vez que o início proporciona uma boa estimativa da temperatura quando a decomposição se inicia, este reflecte-se na estabilidade térmica da fase sólida.

Sob as condições de varrimento de DSC típicas de 5°C/minuto, a temperatura de início para uma amostra típica de ácido livre de ceftiofur amorfo foi de cerca de 144°C. A 86 797 ΕΡ Ο 690 864 / ΡΤ 9 exotérmica larga de decomposição possuía uma temperatura de pico de cerca de 177°C. Sobre as mesmas condições, a temperatura de início para uma amostra típica de ácido livre de ceftiofur cristalino foi de cerca de 212°C, e a temperatura do pico foi de cerca de 222°C. A temperatura de início aumentada para o ácido livre de ceftiofur cristalino reflecte uma srande melhoria na estabilidade térmica da fase cristalina como consequência de um empilhamento regular das moléculas do arranjo regular cristalino.

Tal como notado atrás, o sal cloridrato de ceftiofur é outro sólido cristalino contendo a molécula de ceftiofur. No varrimento de DSC a 5°C/minuto, a temperatura de início para a decomposição térmica numa amostra típica de sal cloridrato de ceftiofur foi de 187°C, e a temperatura no pico foi de 192°C. Surpreendente e inesperadamente, o ácido livre de ceftiofur cristalino possui melhor estabilidade térmica, tal como medido por DSC, do que o sal cloridrato cristalino.

Deste modo, tal como discutido acima, não é previsível que propriedades um composto cristalino vai ter. Para além disso, e tal como exemplificado abaixo, não se pode prever como preparar a forma cristalina de um qualquer dado composto.

Tipicamente, para se conseguir a forma cristalina de um composto orgânico, o composto é colocado num solvente orgânico em que seja minimamente solúvel à temperatura ambiente e então é aquecido para se obter uma solução do composto. A solução é arrefecida e durante este período de arrefecimento, o composto cristalizará. A preparação de cloridrato de ceftiofur cristalino é considerada como envolvendo uma cristalização típica. Vários métodos de preparação do cloridrato de ceftiofur são descritos na patente U.S. 4,902,683. Num método prontamente usado, uma vez que tenha sido obtido o sal cloridrato por adição de ácido clorídrico à solução água/acetona de ceftiofur, a solução resultante é arrefecida lentamente para se obter cloridrato de ceftiofur cristalino.

Contudo, a preparação de ácido livre de ceftiofur cristalino do presente invento proporciona uma surpreendente e única aproximação à preparação de um composto cristalino. No processo do presente invento, é necessário calor para induzir a cristalização do ácido livre de ceftiofur. Por exemplo, num método prontamente usado do presente invento, uma solução em tetra-hidrofurano do ácido livre de ceftiofur é adicionado a água quente com agitação. Inicialmente, o ácido livre de ceftiofur precipita como um sólido amorfo; contudo, 10 86 797 ΕΡ Ο 690 864 / ΡΤ livre de a agitação continuada e aquecimento da solução resulta na formação do ácido ceftiofur cristalino, que é um polimorfo único.

Um tal método para induzir a cristalização de um composto não é típico. De facto, quando um químico coloca um composto orgânico num solvente orgânico miscível em água e dilui esta solução com água para causar precipitação (usualmente designado por “golpe de água”), poderia esperar usualmente obter um composto amorfo, não um cristalino.

Mais especificamente, a forma cristalina do ácido livre de ceftiofur do presente invento é preparada por combinação do cloridrato de ceftiofur cristalino de fórmula II, preparado tal como descrito na patente U.S. 4,902,683, que deste modo é aqui incorporada como referência, com qualquer uma ou várias soluções orgânicas/aquosas, incluindo soluções 1:1 de água com o solvente miscível em água, tal como a acetona, o acetonitrilo, o metanol, o tetra-hidrofúrano (THF) ou o isopropanol, ou uma solução 3:7 de água com qualquer solvente miscível com água, tal como o etanol. O uso da resina de polivinilpiridina para neutralizar o sal cloridrato de ceftiofur é ainda descrito na patente U.S. 4,937,330 (Sacks et al.), que é aqui incorporada como referência. O procedimento preferido para a preparação do ácido livre de ceftiofur cristalino começa com o cloridrato de ceftiofur cristalino, que é tratado com resina de polivinilpiridina numa mistura água-tetra-hidrofurano para remover o cloridrato de ceftiofur. Após filtração desta mistura para se remover a resina de polivinilpiridina, o filtrado é adicionado lentamente a água, o que é preferido, ou é adicionada água ao filtrado. A água deve estar a uma temperatura entre 40°C e 60°C. Mais preferencialmente, a água está aproximadamente a 50°C. A razão de água para o filtrado está na gama de 10:1 para 2:1. Preferencialmente, a razão de água em relação ao filtrado é de aproximadamente 3:1. Esta mistura é então agitada durante um período de tempo entre trinta (30) minutos e vinte e quatro (24) horas. Mais preferencialmente, é agitada durante trinta (30) minutos a uma (1) hora. Finalmente, a mistura é filtrada, de preferência imediatamente, e seca através de procedimentos bem conhecidos pelos conhecedores da matéria para se obter o ácido livre cristalino do presente invento. O Exemplo 3 abaixo é o processo mais preferido para a preparação do ácido livre cristalino do presente invento.

Por modificação do procedimento descrito acima (e.g., duração do aquecimento e agitação) podem ser obtidas composições de ácido livre de ceftiofur, contendo várias percentagens de ácido livre cristalino. Por exemplo, períodos maiores de aquecimento e de agitação resultam tipicamente em composições contendo mais ácido livre cristalino. As 86 797 ΕΡ Ο 690 864 / ΡΤ 11 composições contendo pelo menos quarenta por cento (40%) ou cinquenta por cento (50%) do ácido livre cristalino são preferidas, sendo as composições contendo pelo menos setenta por cento (70%) as mais preferidas. O ácido livre de ceftiofur cristalino do presente invento é útil como composto de droga antibiótico activo em formas de doseamento farmacêutico para tratamento de mamíferos animais e humanos e para tratar infecçòes bacterianas nesses animais ou humanos. Presentemente é contemplado que este composto será especialmente útil como droga antibiótica veterinária para tratar animais tais como gado bovino, porcos, cavalos, ovelhas, cabras, cães e gatos para lutar contra os efeitos de infecçòes bacterianas provocadas por organismos susceptíveis, tais como os Pasturella hemolitica. Pasturella multiocida, Salmonella typhimurinm, Salmonella cholenieasuis. Actinbacillus plearopneumoniae. Streptococcus suis, Haemophilus somnus, E. coli, Staphylococcus aureus e outros do género, alguns dos quais estão usualmente associados a doenças de animais tais como a doença respiratória bovina e a doença respiratória suína. O termo “forma de unidade de dosagem’* tal como usado neste fascículo refere-se a unidades fisicamente discretas adequadas para doses unitárias para sujeitos mamíferos, contendo cada unidade, como ingrediente activo essencial, uma quantidade pré-determinada de ácido livre de ceftiofur cristalino deste invento, com os meios farmacêuticos necessários que adaptam o referido ingrediente para administração sistémica. As especificações para as novas formas de dosagem deste invento são ditadas por e directamente dependentes das características físicas do ingrediente activo essencial e do efeito particular a ser alcançado tendo em vista as limitações inerentes da arte das composições de um tal material activo essencial para efeitos benéficos nos humanos e animais, tal como descrito em detalhe neste fascículo. Exemplos de formas de unidade de dosagem adequadas de acordo com este invento são as preparações líquidas em veículos líquidos adequados para administração intramuscular, intramamária e intravenosa, supositórios e preparações secas estéreis para preparação extemporânea (mistura imediatamente antes da aplicação) de preparações injectáveis estéreis num veículo líquido adequado ou para administração como implante sólido. Os diluentes ou portadores sólidos adequados para as formas de unidade de dosagem farmacêuticas sólidas são seleccionados do grupo constituído por lípidos. hidratos de carbono, proteínas e sólidos minerais, por exemplo, amido, sacarose, lactose, caulino, fosfato dicálcico, gelatina, goma arábica, xarope de milho, amido de milho, talco e outros do género. As preparações líquidas são preparadas em água ou veículos aquosos que com vantagem contêm agentes de suspensão, por exemplo, metilcelulose, alginatos, tragacanta, pectina, quelgina, carragenina. goma arábica, polivinilpirrolidona, álcool polivinílico e outros do 12 86 797 ΕΡ Ο 690 864 / ΡΤ género, para aumentar a viscosidade da composição. Adicionalmente, para formas injectáveis a formulação deve ser estéril e deve ser fluida numa extensão que facilite a utilização em seringa, ou pode ser sólida para implantes. Tais preparações devem ser estáveis sob as condições de fabrico e armazenamento, e conter ordinariamente para além do solvente principal ou líquido de suspensão, conservantes com natureza de agentes bacteriostáticos e fungistáticos, por exemplo, parabenos, clorobutanol, álcool benzílico, ácido benzóico, fenol, timerosal, e outros do género para conservar a composição contra microorganismos. Em muitos casos, é preferível incluir agentes osmoticamente activos, por exemplo, açúcares ou cloreto de sódio em concentrações isotónicas. Portadores e veículos incluem óleos vegetais, dimetilacetamida, dimetilformamida, lactato de etilo, carbonato de etilo, miristato de isopropilo, etanol, polióis, por exemplo, glicerol, propilenoglicol, polietilenoglicol líquido e outros do género. Quaisquer preparações sólidas para preparações extemporâneas subsequentes de preparações injectáveis estéreis são esterilizadas, por exposição ao calor, irradiação com cobalto 60, ou por exposição a gás esterilizante, por exemplo, óxido de etileno. Os atrás mencionados portadores, veículos, diluentes, tensioactivos, excipientes, conservantes, agentes isotónicos e outros do género constituem os meios farmacêuticos que adaptam as preparações para administração sistémica.

As várias formas de dosagem farmacêuticas exemplificadas na patente U.S. 4.902,683 (Amin et al.), especialmente colunas 9-16, e os implantes antibióticos descritos na patente U.S. 5,079,007 (Putnam), são também aqui incorporados como referência.

Devido à inferior solubilidade do ácido livre de ceftiofur cristalino, a sua velocidade de dissolução é mais lenta. Como resultado, a velocidade de absorção é menor, e deste modo podem ser preparadas também várias formulações de libertação controlada ou de libertação sustentada usando-o. Uma formulação de libertação controlada ou de libertação sustentada pode ser mais convenientemente, dada uma vez por tratamento em oposição a ser dada diariamente para outras formulações. Por exemplo, o Ceftiofur de Sódio, que é correntemente comercializado como NAXEL® ou EXCENEL® Solução Estéril, é administrado IM em doses diárias durante um período de três a cinco dias.

Usando os critérios para a libertação sustentada como o tempo em que as concentrações de plasma permanecem acima de uma certa concentração mínima (t^,), pode ser feita uma comparação de vários derivados de ceftiofur. Em formulações aquosas, verifica-se uma correlação de ordem inversa (tal como esperado a partir dos dados de solubilidade) entre a solubilidade aquosa a pH neutro e o tempo acima da concentração mínima seleccionada para os sais de ceftiofur (sódio < cloridrato cristalino < ácido livre 13 86 797 ΕΡ Ο 690 864 / ΡΤ cristalino < zinco). Em formulações em óleo, verifica-se uma ordem inesperada de duração (sódio < cloridrato cristalino < zinco < ácido livre cristalino), com o ácido livre cristalino a ser o mais prolongado. Esta diferença tem significado prático e estatístico. Uma vez que o cloridrato cristalino possui lima solubilidade muito superior à do ácido livre cristalino dados mostram a propriedade de libertação sustentada do ácido livre cristalino, especialmente em formulações em óleo, que é ainda exemplificada nos Exemplos 5 e 6 abaixo. A preparação de tais formulações em óleo é bem conhecida dos peritos na arte da formulação. As formulações em óleo convencionais e os métodos para a sua preparação são apresentados na patente U.S. 5,013,713 (Mitchell), que é aqui incorporada como referência, especificamente, coluna 6, linhas 17-59; coluna 7, linhas 22-37; coluna 7, linha 48; até à coluna 8 linha 4; e coluna 9, linha 59 até à coluna 10, linha 23. Os óleos preferidos incluem óleo de milho, óleo de amendoim, óleo de sésamo, azeite, óleo de palma, óleo de cártamo, óleo de soja, óleo de semente de algodão, óleo de colza. óleo de girassol, e misturas destes. O mais preferido é o óleo de semente de algodão.

Tal como mencionado atrás, as composições do presente invento são úteis para administração parentérica, e.g.. por injecção intraperitoneal ou, mais preferencialmente, subcutânea ou intramuscularmente. Também tal como mencionado atrás, a duração da libertação sustentada é o período de tempo durante o qual a droga activa é entregue com a velocidade requerida para o desejado efeito biológico, tipicamente indicado pela concentração da droga na corrente sanguínea do mamífero.

As formas de unidade de dosagem farmacêuticas do ácido livre de ceftiofur cristalino (ingrediente activo) do presente invento são preparadas de acordo com a descrição geral precedente para proporcionar o tratamento em aplicação de cerca de 1,1 a 6 mg/kg de ingrediente activo por forma de unidade de dosagem. A dosagem preferida é de cerca de 2 a 6 mg/kg de ingrediente activo, com cerca de 4,4 mg/kg sendo a dosagem mais preferida, especialmente para a doença respiratória dos bovinos ou dos suínos. As variações nas dosagens anteriores do ácido livre de ceftiofur cristalino para o mamífero e/ou doença específicos a serem tratados será rapidamente determinada e evidente para os peritos na arte da medicina veterinária.

Para além disso, a quantidade de ingrediente activo proporcionada nas formas de unidade de dosagem farmacêuticas é uma quantidade que seja suficiente para se obterem os efeitos antibióticos dentro das atrás mencionadas gamas de dosagem eficazes não tóxicas. 86 797 ΕΡ Ο 690 864 / ΡΤ 14

Por exemplo, as formulações injectáveis do ácido livre de ceftiofur cristalino do presente invento, tal como descritas atrás, possuem preferencialmente uma concentração de ingrediente activo de cerca de vinte (20) a cerca de duzentos (200) mg/ml de modo a proporcionar ao mamífero a ser tratado a dosagem apropriada de ingrediente activo. tal como descrito atrás.

Descricão detalhada do invento O invento é ainda ilustrado através dos seguintes exemplos detalhados.

Condições experimentais de FTIR: A. O espectro no infravermelho da amostra do Exemplo 1 foi registado usando um espectrómetro Matsan Galaxv 5020 FTIR. A amostra foi preparada como 1% numa pastilha de brometo de potássio (KBr) para aquisição de dados. Os parâmetros instrumentais importantes são listados abaixo.

Resolução:

Sensibilidade:

Gama de infravermelhos: 4000-600 cm O espectro no infravermelho da Figura 1 abaixo foi registado usando este procedimento. O espectro de FTIR resultante desta amostra é consistente com a determinação de ser amorfo. B. O espectro no infravermelho da amostra do Exemplo 2 foi registado usando um espectrómetro Digilab FTS-40 FTIR. A amostra foi preparada como uma dispersão em óleo mineral para aquisição de dados. Os parâmetros instrumentais importantes são listados abaixo.

Função Boxcar MCT-B

Resolução:

Varrimento:

Apodização:

Detector:

Sensibilidade:

Gama de infravermelhos: 4000-600 cm 15 86 797 ΕΡ Ο 690 864 / ΡΤ registado usando este é consistente com a Ο espectro no infravermelho da Figura 2 abaixo foi procedimento. O espectro de FTIR resultante desta amostra determinação de ser cristalino.

Condições Experimentais de XRD: A. Um difractómetro Rigaku DMAX-A de raios X foi usado para a obtenção de um padrão de XRD em pó para a amostra do Exemplo 2. O instrumento usa a radiação de cobre com um filtro de níquel (CuKa, 1.5406 A). Os principais parâmetros instrumentais são apresentados como se segue: voltagem de 40 kV, amperagem de 30 mA, abertura do feixe de Io e abertura do detector (fenda do receptor) de 0,30 mm. Todos os padrões foram varridos na gama espectral de 3-40° de ângulos dois-teta com uma velocidade de varrimento de 1,5o dois-teta/min (tamanho do passo de 0,05° e tempo de contagem de 2 segundos/passo). Cada varrimento de XRD produziu um ficheiro ASCII que foi então convertido (com o programa SpectraCalc da Galactics) num formato binário para a análise de dados e resultado. A amostra foi moída até se obter um pó fino e colocada numa cadinho de alumínio. O padrão de XRD da Figura 4 e Tabela 1 abaixo foram registados usando este procedimento. O padrão de XRD resultante desta amostra indicava que era cristalina. B. Um difractómetro Siemens D-500 foi usado para a aquisição dos padrões de XRD em pó para as amostras dos Exemplos 1 e 2. O instrumento usa a radiação de cobre com um filtro de níquel (CuKa). Outros parâmetros são apresentados como se segue: voltagem de 40 kV, amperagem de 30 mA, abertura do feixe de 0,3°, abertura do detector de 0,05° e uma velocidade de varrimento contínua de 2o dois-teta/min. A velocidade do papel de registo do registador foi ajustado a 1,0° dois-teta/cm. A gama espectral está na gama de 3-40° dois-teta. A amostra foi moída até um pó fino, se necessário, e então colocada num cadinho de amostras.

Os padrões de XRD das Figuras 3 e 5 abaixo foram registados usando este procedimento. A amostra da Figura 3 era um pó escuro moído à mão. O seu padrão de XRD resultante indicava que era amorfo. A amostra da Figura 5 era um pó castanho. O seu padrão de XRD indicava que era cristalino.

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Exemplo 1 - Preparação de ácido livre de amorfo

Usando o procedimento descrito no Exemplo l(b) da Patente U.S. 4,464,367 (Labeeuw et al.) (transmitida a Sanofl, Paris, França), foi obtido o áciHn I ivrR como se segue:

Uma mistura de 50 g de ceftiofur tritilado, 83 ml de ácido fórmico, e 83 ml de água, foi aquecida a 53°C a 58°C e agitou-se a esta temperatura durante 30 minutos. Esta mistura é filtrada e os sólidos sào lavados com 83 ml de ácido fórmico/água 70/30. O filtrado foi diluído com 334 ml de etanol e concentrou-se sob vácuo até se obter um óleo. Este material é seco sob vácuo durante 60 horas. A espuma resultante é misturada com 167 ml de etanol. Esta mistura é filtrada e lavada com éter dietílico. Os sólidos são dissolvidos em 835 ml de acetona e 1567 ml de etanol. Esta solução é concentrada sob vácuo até um volume de 167 ml. Esta mistura é arrefecida a 25°C e filtrada. Os sólidos são lavados duas vezes com etanol e duas vezes com éter. Estes sólidos são secos à temperatura ambiente para dar origem a 15,1 g de ácido livre de ceftiofur amorfo.

As características físicas são as seguintes:

Espectro de FTIR: Figura 1 abaixo. XRD: Figura 3 abaixo.

Os espectros de FTIR e de XRD mostram que o produto do título é amorfo (não cristalino).

Exemplo 2 - Preparação do ácido livre de ceftiofur cristalino

Uma mistura de 75,12 g de cloridrato de ceftiofur em 375 ml de tetra-hidrofurano e 37,5 ml de água foi agitada à temperatura ambiente durante l hora. A esta lama foram adicionados 37,5 g de resina de polivinilpiridina e 225 ml de tetra-hidrofurano. A mistura resultante é agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos e então filtrada. A resina é lavada com 150 ml de tetra-hidrofurano. O filtrado é aquecido a >45°C e dilui-se com 1.075 ml de água a 50°C. A esta solução turva adiciona-se 2,25 g de ácido livre de ceftiofur cristalino e a mistura resultante é agitada durante cerca de 10 minutos. Esta mistura é então ainda diluída pela adição lenta de 905 ml de água enquanto se mantém a temperatura >45°C. A mistura resultante é agitada a 50-55°C durante (30) minutos a uma (1) hora e é gradualmente arrefecida a 19°C e filtrada. Os sólidos são lavados com água e secos com azoto para originar cerca de 65 g de ácido livre de ceftiofur cristalino (que é aproximadamente 94,5% cristalino).

As características físicas são as seguintes:

Espectro de FTIR: Figura 2 abaixo. XRD: Figura 4 e 5 abaixo.

Os espectros de FTIR e de XRD mostram que o produto do título é cristalino. A Tabela I abaixo lista os picos de difracção característicos para o ácido livre de ceftiofur cristalino do presente invento.

Exemplo 3 - Preparação do ácido livre de ceftiofur cristalino

Cloridrato de ceftiofur (17.1 g) é misturado durante pelo menos uma hora à temperatura ambiente com 70 ml de tetra-hidrofurano e 5,1 ml de água. A esta mistura são adicionados 8,6 g de resina de PVP seguindo-se 60 ml de tetra-hidrofurano. Após agitação durante 45 minutos esta mistura é filtrada. A resina de PVP é lavada com duas porções de 31 ml de tetra-hidrofurano. O filtrado é então adicionado lentamente durante um período de cerca de uma hora a 515 ml de água a 45-55°C. Esta mistura é agitada a 45-55°C durante 30 minutos e filtra-se imediatamente no final da adição. Os sólidos são lavados com 70 ml de água e secos a 50°C para originar 13,5 g de ácido livre de ceftiofur cristalino.

Exemplo 4 - Formulação de óleo de libertação sustentada

Um exemplo de uma formulação de libertação sustentada, contendo o ácido livre de ceftiofur cristalino do presente invento, que é preparado através de procedimentos facilmente conhecidos dos peritos na arte de formulação, possui os seguintes ingredientes: Ácido livre de ceftiofur (Cristalino) Lecitina (Phospholipon 90-H) Monooleato de sorbitano (Span 80) Óleo de semente de algodão 100 mg actividade por mililitro 0,5 mg por mililitro 1,5 mg por mililitro q.b.

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Exemplo 5 - Disposição no plasma de suspensões aquosas de libertação sustentada de ácido livre de ceftiofur cristalino no gado A dezasseis vitelos Holstein foi administrado ácido livre de ceftiofur cristalino em suspensão aquosa (100 mg/ml) através de via de administração intramuscular (IM) ou subcutânea (SC) numa dose única de 1,1 g de actividade ceftiofur/kg num estudo cruzado (cada vitelo teve um tratamento), com um intervalo de duas semanas entre as doses. Foram obtidas amostras de sangue em série durante 120 horas para análise do ceftiofur e metabolitos (medidos como desfuroílceftiofuracetamida. por HPLC). A variável de decisão primária foi o tempo em que as concentrações do metabolito de ceftiofur permaneciam acima de 0,2 pg/ml (t>02), sendo as variáveis de decisão secundárias “a área relativa sobre a curva concentração-tempo” (AUC) dos tratamentos e a irritação do local da injecção avaliada antemortem por inspecção visual e manual dos locais de injecção ao longo do tempo. Ambos t..,)2 e AUC foram calculados usando o método da equação farmacocinética previsível e o método gráfico directo dos trapezóides (AUC) e a interpolação log linear (t>02). O t>02 da suspensão aquosa do ácido livre de ceftiofur cristalino foi de 26,98 h após adiministração IM e de 30,43 h após administração SC (P = 0,257).

Exemplo 6 - Disposição no plasma de suspensões em óleo de libertação sustentada de ácido livre de ceftiofur cristalino no gado: comparação com a solução aquosa de ceftiofur de sódio A dezasseis vitelos Holstein foi administrado ácido livre de ceftiofur cristalino em suspensão em óleo (100 mg/ml) ou ceftiofur de sódio (NAXCEL® Pó Estéril) como solução aquosa (50 mg/ml), subcutaneamente (SC), num estudo cruzado (cada vitelo teve um tratamento), com um intervalo de duas semanas entre as doses (2,2 mg actividade de ceftiofur/kg peso corporal). Foram obtidas amostras de sangue em série durante 120 horas após a administração da droga para análise do ceftiofur e de metabolitos (medidos como desfuroílceftiofuracetamida, por HPLC). A variável de decisão primária foi o tempo em que as concentrações do metabolito de ceftiofur permaneciam acima de 0,2 pg/ml (t>02), sendo as variáveis de decisão secundárias “a área relativa sobre a curva concentração-tempo” (AUC) dos tratamentos e a irritação do local da injecção avaliada antemortem por inspecção visual e manual dos locais de injecção ao longo do tempo. .Ambos t-.,,., e AUC foram calculados usando o método da equação farmacocinética previsível e o método gráfico directo dos trapezóides (AUC) e a interpolação log linear (t,02).

86 797 ΕΡ Ο 690 864 / ΡΤ A suspensão em óleo do ácido livre de ceftiofur cristalino estava igualmente biodisponível com a solução aquosa de ceftiofur de sódio quando ambas foram administradas subcutaneamente (P > 0,05). Quando comparado ao t>(J, de ceftiofur de sódio (45,50 h), o ft(), para o ácido livre de ceftiofur cristalino (121,58 h) era significativamenrp mais longo (P<0,0001). A meia vida da fase terminal (correspondente à fase de absorção neste modelo farmacocinético biestável) do ácido livre de ceftiofur cristalino em óleo era também maior.

Exemplo 7 - Dissolução in vitro das formulações de suspensão em óleo de ceftiofur

Amostras de 100 mg de ácido livre de ceftiofur cristalino, ácido livre de ceftiofur amorfo (preparado tal como descrito no Exemplo 1) e cloridrato de ceftiofur cristalino, que foram todos preparados como formulações em óleo tal como descrito no Exemplo 4 acima, foram deitadas para células de dissolução de teflon e seladas com uma membrana de diálise de área superficial constante. As células carregadas foram colocadas num dispositivo de dissolução corrente contendo 500 ml de meio de dissolução aquoso a pH 7 que foi agitado com um agitador de pás a 50 rpm.

Os resultados obtidos são mostrados abaixo na Figura 6. (Na Figura 6 todas as formulações são de 100 mg/rnl. É mostrado um desvio padrão. A amostra designada por baixa cristalinidade era aproximadamente 32,7% cristalina por XRD; a amostra designada por alta cristalinidade era aproximadamente 74,7% cristalina por XRD). As formulações contendo o cloridrato de ceftiofur cristalino e o ácido livre de ceftiofur amorfo apresentam uma libertação muito rápida da formulação para o meio de dissolução. As formulações de ácido livre de ceftiofur cristalino, especialmente a amostra altamente cristalina, mostra uma libertação significativamente reduzida para o compartimento de dissolução aquoso.

Exemplo 8 - Disposição no plasma de suspensões em óleo de ácido livre de ceftiofur administrado subcutaneamente no gado

Administrou-se ao gado uma dose subcutânea única (4,4 mgdcg de peso corporal) de ácido livre de ceftiofur cristalino e ácido livre de ceftiofur amorfo (ambos preparados e depois formulados tal como descrito nos Exemplos anteriores 1, 3 e 4). A concentração de ceftiofur no plasma e dos metabolitos mediados por desfúroílceftiofúr foi determinada ao longo do tempo durante 120 horas. O critério de decisão primário (o mais relacionado com a eficácia) foi considerado ser o tempo durante o qual as concentrações de metabolito de ceftiofur permaneciam acima de 0,2 mcg/ml (%,). Os parâmetros menos importantes

20 86 797 ΕΡ Ο 690 864 / ΡΤ calculados incluíam “a área relativa sobre a curva concentração-tempo” (AUC) tratamento e o tempo para concentrações máximas (tniax). para ada

Os resultados são mostrados graficamente na Figura 7 abaixo registando a concentração do plasma de desfuroílceftiofuracetamida (DCA) ver sus o tempo usando dados médios para 6 animais/tratamento. Ambos o t_.02 e a AUC foram calculados usando o método da equação farmacocinética previsível e o método gráfico directo dos trapezóides (AUC) e da interpolação log linear (C02). O t>02 para o ácido livre de ceftiofur cristalino foi de 101 horas após dosagem enquanto que o ácido livre de ceftiofur amorfo deu um valor de 41 horas. Adicionalmente, a comparação das AUC mostra que o ácido livre de ceftiofur cristalino possui um valor maior do que duas vezes o previamente reivindicado para o ácido livre de ceftiofur amorfo (183 mcg h/ml versus 70 mcg h/ml). Isto é especialmente importante à luz de duas formas obtendo-se estatisticamente concentrações de picos equivalentes (9,1 mcg/ml para o ácido livre de ceftiofur amorfo versus 7,3 mcg/ml para o ácido livre de ceftiofur cristalino). Através da medição secundária da libertação sustentada, tempo para a concentração do pico (tmax), a forma cristalina mostra uma libertação retardada quando comparada com a forma amorfa do ácido livre de ceftiofur (8 horas versus 2 horas).

Exemplo 9 - Disposição do plasma do ceftiofur livre em suspensões em óleo: comparação do cloridrato de ceftiofur cristalino e do ácido livre de ceftiofur cristalino

Em estudos separados mas projectados de modo similar conduzidos no mesmo laboratório, foram administradas subcutaneamente suspensões de ácido livre de ceftiofur cristalino (CFA) e cloridrato de ceftiofur cristalino (HC1) a gado, com uma dose de 2,2 mg/kg de peso corporal. Em cada experiência foram obtidas amostras de plasma durante até 120 horas após a administração da droga, para a determinação do ceftiofur e dos seus metabolitos. Os resultados são mostrados graficamente na Figura 8 abaixo, com o registo da concentração de plasma (em escala logarítmica) versus o tempo usando dados médios para 16 animais/tratamento. O critério de decisão primário (o mais relacionado com a eficácia) foi considerado ser o tempo para as concentrações de metabolitos permanecerem abaixo de 0,2 mcg/ml (t>02). As medições de parâmetros menos importantes incluíram “a área sobre a curva concentração-tempo” (AUC) para cada tratamento e o tempo para o pico e as concentrações para o pico.

Os valores de AUC foram comparáveis para as duas formas de cristal (103,3 para o cloridrato cristalino e 121,3 para o ácido livre cristalino). Contudo o parâmetro t>02, usado 21 86 797 ΕΡ Ο 690 864 / ΡΤ para descrever ο efeito de libertação sustentada era significativamente superior para a forma de cristal de ácido livre (121,6 horas versus 38,5 horas). Tal como o material amorfo citado no Exemplo 8, o cloridrato cristalino mostrou uma libertação mais rápida quando comparado com o ácido livre cristalino através do critério tnm (2 horas para o cloridrato versus 8 hnrns para o cristalino).

Breve descricão dos desenhos

Figura l Espectro de FTIR do ácido livre de ceftiofur amorfo Figura 2 Espectro de FTIR do ácido livre de ceftiofur cristalino Figura 3 Padrão de difracção de XRD do ácido livre de ceftiofur amorfo Figura 4 Padrão de difracção de XRD do ácido livre de ceftiofur cristalino Figura 5 Padrão de difracção de XRD do ácido livre de ceftiofur cristalino Figura 6 Comparação da dissolução da suspensão em óleo de ceftiofur Figura 7 Perfil de disposição no plasma do ácido livre de ceftiofur: amorfo vs. cristalino Figura 8 Ceftiofur no plasma: Ceftiofur HC1 vs. Ceftiofur CFA Figura 9 Comparação da velocidade de dissolução do ceftiofur

86 797 ΕΡ Ο 690 864 / ΡΤ 23

TABELA I

PICOS DE DIFRACÇÀO DE XRD CARACTERÍSTICOS DE ÁCIDO LIVRE DE CEFTIOFUR CRISTALINO Ângulo dois-teta** (graus) Espaçamento d (Àngstrom) Intensidade Relativa3, oo (arbitrário) 38,45* 2,339 65 38,20 2,354 25 36,85 2,437 13 35,35 2,537 25 32,35 2,765 26 28,30 3,151 31 27,80 3,206 28 27,15 3,282 40 25,65 3,470 95 25,25 3,524 68 24,45 3,638 53 23,50 3,783 40 21,60 4,UI 60 21,40 4,149 48 19,85 4,469 70 18,15 4,884 56 15,30 5,786 100 14,50 6,104 37 10,55 8,379 35 8,60 10,273 29 *: pico de difracção do cadinho de amostra de alumínio. **: ±0,10° #: A intensidade relativa de cada pico é determinada pela razão da sua intensidade em relação à do maior pico com um ângulo de 15,3° sendo 100. x: Os picos que são apresentados nesta tabela são os que possuem uma intensidade relativa superior a 10. 24 86 797 ΕΡ Ο 690 864 / ΡΤ

TABELA II

COMPARAÇÃO DAS PROPRIEDADES DO ÁCIDO LIVRE DE CEFTIOFUR cristalino, ácido livre de ceftigfur crisiauino, e cloridrato de

CEFTIOFUR CRISTALINO

Propriedades Ácido livre cristalino Ácido livre amorfo Sal cloridrato cristalino Estabilidade térmica (temperatura de decomposição em DSC) Início = 212°C Pico - 222°C Início = 144HC Pico = 177"C Início = 187°C Pico = 192°C Solubilidade - pH 7 ~ 8 mg/ml ~ 100 mg/ml -100 mg/ml Velocidade de dissolução* Lenta Rápida Rápida Libertação in vivo Prolongada Rápida Rápida Pureza Elevada Baixa Elevada Estabilidade em formulações aquosas (>90% da potência inicial) Estável durante 6 meses Instável em 6 semanas Instável em 6 semanas Higroscopicidade Baixa Alta Moderada Processamento Microniza mais facilmente Difícil de micronizar Microniza mais facilmente * Mostrado graficamente na Figura 9 abaixo.

Lisboa, 10. ftGO. 2001

Por PHARMACIA & UPJOHN COMPANY - O AGENTE OFICIAL -

Claims

86 797 ΕΡ Ο 690 864 / ΡΤ 1/3 REIVINDICAÇÕES 1. Composto que é o ácido livre de ceftiofur cristalino.
2. Composto de acordo com a reivindicação 1 que apresenta essencialmente as seguintes propriedades de difracção de raios X em pó: Ângulo dois-teta ** Espaçamento d Intensidade Relativa*, oo (graus) (unidades Ângstrom) (arbitrário) 38,20 2,354 25 36,85 2,437 13 35,35 2,537 25 32,35 2,765 26 28,30 3,151 31 27,80 3,206 28 27,15 3,282 40 25,65 3,470 95 25,25 3,524 68 24,45 3,638 53 23,50 3,783 40 21,60 4,111 60 21,40 4.149 48 19,85 4,469 70 18,15 4,884 56 15,30 5,786 100 14,50 6,104 37 10,55 8,379 35 8,60 10,273 29 **: ±0,10° #: A intensidade relativa de cada pico é determinada pela razão da sua intensidade em relação à do maior pico com um ângulo de 15,3° sendo 100. *>: Os picos que são apresentados nesta tabela são os que possuem uma intensidade relativa superior a 10. 86 797 ΕΡ Ο 690 864 / ΡΤ 2/3
3. Composto que é ο ácido livre de ceftiofur cristalino, em que*40% do composto é cristalino.
4. Composto de acordo com a reivindicação 3, em que pelo menos 50% do composto é cristalino.
5. Composto de acordo com a reivindicação 3, em que pelo menos 50% do composto é cristalino.
6. Composição farmacêutica que compreende um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes e um portador ou excipiente farmaceuticamente aceitável.
7. Composição de acordo com a reivindicação 6, que é de libertação sustentada.
8. Composição da reivindicação 6 ou reivindicação 7, que compreende 20 a 100 mg/ml do composto.
9. Composição de qualquer uma das composições 6 a 8, adaptada para ser administrada por injecção subcutânea ou intramuscular.
10. Composição de acordo com qualquer uma das composições 6 a 9, que é não aquosa.
11. Composição de acordo com a reivindicação 10, em que o portador ou o excipiente é um óleo.
12. Composição de acordo com a reivindicação 11, em que o óleo é seleccionado de óleo de milho, óleo de amendoim, óleo de sésamo, azeite, óleo de palma, óleo de cártamo, óleo de soja, óleo de semente de algodão, óleo de colza, óleo de girassol, e misturas destes.
13. Processo para a preparação de um ácido livre de ceftiofur cristalino, que compreende a combinação de uma solução de ácido livre ou de cloridrato de ceftiofur em acetona ou tetra-hidrofiirano (THF). com água. a uma temperatura entre 40°C e 60°C.
14. Processo de acordo com a reivindicação 13, em que a água está aproximadamente a 50°C. 86 797 ΕΡ Ο 690 864 / ΡΤ 3/3
15. Processo de acordo com a reivindicação 13 ou reivindicação 14, em que a solução é em THF.
16. Processo de acordo com a reivindicação 15, em que a razão de água em relação à solução de THF é de 10:1 a 2:1.
17. Processo de acordo com a reivindicação 16, em que a razão de água em relação à solução de THF é de aproximadamente 3:1.
18. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 17, que compreende adicionalmente a agitação da combinação durante um período de tempo entre 30 minutos e 24 horas.
19. Processo de acordo com a reivindicação 18, em que o período de tempo é entre 30 minutos e 4 horas.
20. Processo de acordo com a reivindicação 18, em que o período de tempo é entre 30 minutos e 1 hora. Lisb°a, 10 m 2001 Por PHARMACIA & UPJOHN COMPANY - O AGENTE OFICIAL -

Eng.° ANTÓNIO JOÃO DA CUNHA FESSEIRA ΓΜ Fr Inrt