ES2453164T3 - Cristales que incluyen una sal de ácido málico de N-[2-(dietilamino)etil]-5-[(5-fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida, procedimientos para su preparación y sus composiciones - Google Patents

Abstract

Un cristal que comprende la sal de ácido L-málico de N-[2-(dietilamino)etil]-5-[(5-fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3- iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida, en el que el cristal tiene picos de difracción característicos en 13,2 y 24,2 grados dos theta en un patrón de difracción de rayos X de polvo.

Description

Cristales que incluyen una sal de ácido málico de N-[2-(dietilamino)etil]-5-[(5-fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida, procedimientos para su preparación y sus composiciones

Campo de la invención

La presente invención se refiere a un cristal, y sus composiciones, en el que el cristal incluye una sal de ácido L-málico de N-[2-(dietilamino)etil]-5-[(5-fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida, en los que el cristal tiene picos de difracción característicos en 13,2 y 24,2 grados dos-theta en un patrón de difracción de rayos X de polvo. La presente invención se refiere también a procedimientos de preparación de dichos cristales.

Antecedentes

Las PK son enzimas que catalizan la fosforilación de grupos hidroxi en residuos de proteínas tirosina, serina y treonina. Las consecuencias de esta actividad aparentemente simple son alarmantes: crecimiento, diferenciación y proliferación celular, es decir, prácticamente todos los aspectos de la vida celular de una manera u otra, dependen de la actividad PK. Además, la actividad PK anormal se ha relacionado con una serie de trastornos, que van desde enfermedades relativamente no amenazantes para la vida, tales como la psoriasis, a enfermedades extremadamente virulentas, tales como glioblastoma (cáncer cerebral). Las PK pueden ser divididas convenientemente en dos clases, las proteínas tirosina quinasas (PTK) y las serina-treonina quinasas (STK).

Uno de los aspectos principales de la actividad PTK es su implicación con los receptores de los factores de crecimiento. Los receptores de factores de crecimiento son proteínas de la superficie celular. Cuando se unen mediante un ligando del factor de crecimiento, los receptores de factores de crecimiento se convierten en una forma activa, que interactúa con las proteínas en la superficie interna de una membrana celular. Esto conduce a la fosforilación en residuos de tirosina del receptor y otras proteínas y a la formación dentro de la célula de complejos con una diversidad de moléculas de señalización citoplasmáticas que, a su vez, producen numerosas respuestas celulares, tales como división celular (proliferación), diferenciación celular, crecimiento celular, expresión de efectos metabólicos al microentorno extracelular, etc.

Las moléculas pequeñas que actúan como inhibidores de PK han sido identificadas e incluyen, por ejemplo, compuestos 2-indolinona sustituidos con 3-pirrol, tal como se describe en la publicación internacional PCT Nº WO 01/60814 (Tang et al.). Los compuestos 2-indolinona sustituidos con 3-pirrol incluyen, por ejemplo, N-[2(dietilamino)etil] -5-[(5-fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida tal como se describe en el documento PCT de publicación internacional Nº WO 01/60814 (Tang et al.). Sin embargo, la divulgación no hace ninguna mención acerca de la preparación y la naturaleza de las formas cristalinas específicas de las sales de N-[2(dietilamino)etil]-5-[(5-fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida. Existe una necesidad de formas cristalinas de dichos materiales que tengan propiedades químicas y/o físicas superiores, que sean útiles en aplicaciones de administración de fármacos.

Sumario de la invención

En un aspecto, la presente invención proporciona un cristal que incluye una sal de ácido L-málico de un compuesto que tiene la estructura:

en la que el cristal tiene picos de difracción característicos en 13,2 y 24,2 grados dos-theta en un patrón de difracción de rayos X de polvo.

El compuesto con la estructura anterior es conocido también como N-[2-(dietilamino)etil]-5-[(5-fluoro-1,2-dihidro-2-oxo

3H-indol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida. Preferentemente, el cristal es anhidro. El cristal tiene picos de difracción característicos a aproximadamente 13,2 y 24,2 grados dos theta y, más preferentemente, a aproximadamente 13,2, 19,4, 24,2 y 25,5 grados dos theta y, más preferentemente tal como se indica en la Tabla 1 para la Forma Cristalina I, en un patrón de difracción de rayos X de polvo. Preferentemente, el cristal incluye como máximo aproximadamente el 2% en peso de agua, más preferentemente, como máximo aproximadamente el 0,5% en peso de agua y, más preferentemente, como máximo aproximadamente el 0,2% en peso de agua. Preferentemente, el cristal tiene un punto de fusión al menos aproximadamente 190ºC y, más preferentemente, de al menos aproximadamente 195ºC. También se proporcionan composiciones que incluyen los cristales descritos en la presente memoria. Preferentemente, las composiciones incluyen una cantidad terapéuticamente eficaz de los cristales. Opcionalmente, las composiciones incluyen un excipiente, preferentemente un excipiente farmacéuticamente aceptable.

En otro aspecto, la presente invención proporciona procedimientos de preparación de un cristal anhidro que incluye una sal de ácido L-málico de N-[2-(dietilamino)etil]-5-[(5-fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol3-carboxamida (Forma Cristalina I). En una realización, el procedimiento incluye: combinar ácido L-málico, N-[2(dietilamino)etil]-5-[(5-fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida y un disolvente; e inducir la cristalización de la sal bajo condiciones de cristalización (condiciones de cristalización de la Forma Cristalina I) que incluyen uno o más factores incluyendo: una diferencia entre las temperaturas inicial y final de la solución de cristalización no superior a aproximadamente 100ºC; una velocidad de enfriamiento no superior a aproximadamente 50ºC por hora; sin siembra; una relación de sobresaturación no superior a aproximadamente 10; sin agentes de precipitación y/o sus combinaciones. Preferentemente, el disolvente incluye uno o más disolventes, incluyendo, por ejemplo, acetonitrilo, metanol, etanol, isopropanol, tolueno, n-butanol, tetrahidrofurano, N,Ndimetilformamida, acetona, agua y sus combinaciones.

En otra realización, el procedimiento de preparación de un cristal anhidro que incluye una sal de ácido L-málico de N[2-(dietilamino)etil]-5-[(5-fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida (Forma Cristalina I) incluye: poner en contacto un cristal que incluye una sal de ácido málico de N-[2-(dietilamino)etil]-5 -[(5fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida con un disolvente en el que el cristal de contacto tiene una solubilidad sustancial, en el que el cristal de contacto (Forma Cristalina II) tiene picos de difracción característicos a aproximadamente 3,0 y 27,7 grados dos-theta en un patrón de difracción de rayos X de polvo. Preferentemente, el disolvente incluye uno o más disolventes, incluyendo, por ejemplo, acetonitrilo, etanol, metanol y sus combinaciones. Preferentemente, el contacto del cristal con el disolvente forma una suspensión, y preferentemente la suspensión es agitada y/o calentada. Opcionalmente, el cristal anhidro puede ser retirado de la suspensión.

Un procedimiento de preparación de un cristal que incluye una sal de ácido L-málico de N-[2-(dietilamino)etil]-5-[(5fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3carboxamida (por ejemplo, la Forma Cristalina II) incluye: combinar ácido málico, N-[2-(dietilamino)etil]-5-[(5-fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil1H-pirrol-3-carboxamida y un disolvente; e inducir la cristalización de la sal bajo condiciones de cristalización (condiciones de cristalización de la Forma Cristalina II), que incluyen uno o más factores incluyendo: una diferencia entre las temperaturas inicial y final de la solución de cristalización de al menos aproximadamente 25ºC; una velocidad de enfriamiento de al menos aproximadamente 25ºC por hora; siembra; una relación de sobresaturación de al menos aproximadamente 2; presencia de un agente de precipitación y/o sus combinaciones. Preferentemente, el disolvente incluye uno o más disolventes, incluyendo, por ejemplo, metanol, agua, mezclas de tetrahidrofurano/agua y sus combinaciones. El cristal tiene picos de difracción característicos a aproximadamente 3,0 y 27,7 grados dos-theta en un patrón de difracción de rayos X de polvo.

La Forma Cristalina I anhidra es ventajosa con respecto a la Forma Cristalina II para muchas aplicaciones debido a que las propiedades que la Forma Cristalina I ofrece incluyen preferentemente, por ejemplo, mayor estabilidad termodinámica, una mayor cristalinidad y menor higroscopicidad que las respectivas propiedades de la Forma Cristalina II.

Numerosos factores afectan a las condiciones de cristalización, y son bien conocidos por una persona con conocimientos en la materia. Dichos factores incluyen, por ejemplo: la concentración de la sal en la solución de cristalización; la diferencia, si la hay, entre las temperaturas inicial y final de la solución de cristalización; la velocidad de enfriamiento, en su caso; la tasa de vaporización de disolvente, si la hay; la siembra; relación de sobresaturación y presencia de un agente de precipitación. Con la guía de la divulgación proporcionada en la presente memoria, una persona con conocimientos en la materia, sin experimentación indebida, puede seleccionar y/o ajustar uno o más factores apropiados para llegar a las condiciones de cristalización para proporcionar la Forma Cristalina I y/o la Forma Cristalina II.

Definiciones

Tal como se usa en la presente memoria, "relación de sobresaturación" se refiere a la relación de la concentración del 3

material en solución a la concentración del material en una solución saturada a la temperatura de cristalización.

Tal como se usa en la presente memoria, "siembra" se refiere a la técnica de añadir un cristal "semilla" a la solución de cristalización para promover la formación de cristales. Preferentemente, la composición del cristal semilla es la misma que la composición de los cristales que está siendo formado.

Tal como se usa en la presente memoria, "agente de precipitación" significa una sustancia que tiende a inducir cristalización cuando es añadida a una solución de cristalización. Los agentes de precipitación útiles incluyen, por ejemplo, no disolventes para la sal y soluciones, incluyendo el exceso de iones de carga opuesta. Tal como se usa en la presente memoria, un no disolvente es un disolvente en el que la sal tiene preferentemente una solubilidad no superior a aproximadamente el 1% en peso, más preferentemente, no superior a aproximadamente el 0,1% en peso y, más preferentemente, no superior a aproximadamente el 0,01% en peso.

Tal como se usa en la presente memoria, "cristal anhidro" significa un cristal en el que el agua no está unida específicamente. Preferentemente, los cristales anhidros no incluyen cantidades sustanciales de agua. El contenido de agua puede ser determinado mediante procedimientos conocidos en la técnica, incluyendo, por ejemplo, valoraciones de Karl Fischer. Preferentemente, un cristal anhidro incluye como máximo aproximadamente el 2% en peso de agua, más preferentemente, como máximo aproximadamente el 0,5% en peso de agua y, más preferentemente, como máximo aproximadamente el 0,2% en peso de agua.

Tal como se usa en la presente memoria, "cristalino" significa un material que tiene una estructura molecular ordenada, de largo alcance. El grado de cristalinidad de una forma cristalina puede determinarse mediante muchas técnicas que incluyen, por ejemplo, difracción de rayos X de polvo, absorción de humedad, calorimetría diferencial de barrido, calorimetría de solución y propiedades de disolución.

Tal como se usa en la presente memoria, "más cristalino" significa que un material tiene un mayor grado de cristalinidad que el material con el que se está comparando. Los materiales con grados de cristalinidad más altos generalmente tienen una estructura molecular altamente ordenada, de largo alcance, con menos defectos en la estructura cristalina que los materiales con grados de cristalinidad más bajos. El mayor grado de cristalinidad puede evaluarse con relación a la otra forma mediante técnicas que incluyen, por ejemplo, reflexiones más nítidas en el patrón de difracción de rayos X de polvo, menor absorción de humedad para partículas de tamaño similar a una humedad relativa especificada, menor calor de la solución, mayor calor de fusión, menor velocidad de disolución y sus combinaciones.

Tal como se usa en la presente memoria, "menos cristalino" significa que un material tiene un menor grado de cristalinidad que el material con el que se está comparando. Los materiales con grados de cristalinidad más bajos generalmente tienen menos orden de largo alcance y más defectos en la estructura cristalina que los materiales con grados de cristalinidad más altos. El grado de cristalinidad más bajo puede ser evaluado con relación a la otra forma mediante técnicas que incluyen, por ejemplo, reflexiones más amplias y/o en menor cantidad en el patrón de difracción de rayos X de polvo, mayor absorción de humedad para partículas de tamaño similar a una humedad relativa especificada, mayor calor de la solución, menor calor de fusión, velocidad de disolución más rápida y sus combinaciones.

Tal como se hace referencia en la presente solicitud, "estable" en los ensayos de estabilidad de fármaco a granel significa que al menos aproximadamente el 97% en peso, preferentemente al menos aproximadamente el 98% en peso y, más preferentemente, al menos aproximadamente el 99% en peso del fármaco permanece inalterado después de su almacenamiento bajo las condiciones indicadas durante el tiempo indicado.

Breve descripción de las figuras

La Figura 1 es una ilustración de los datos de difracción de rayos X de polvo (PXRD) para la Forma Cristalina I de la sal de ácido L-málico de N-[2-(dietilamino)etil]-5-[(5-fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3carboxamida. El patrón es distinto de otras formas cristalinas de la sal y la base libre, y es más cristalina que la Forma Cristalina II (por ejemplo, la Figura 2).

La Figura 2 es una ilustración de los datos de difracción de rayos X de polvo (PXRD) para la Forma Cristalina II de la sal de ácido L-málico de N-[2-(dietilamino)etil]-5-[(5fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol3-carboxamida. El patrón es distinto de otras formas cristalinas de la sal y la base libre, y es menos cristalino que la Forma Cristalina I tal como se evidencia por las reflexiones más amplias en el patrón de difracción de rayos X de polvo (por ejemplo, la Figura 1).

La Figura 3 es una ilustración de la isoterma de absorción mediante gravimetría de absorción de humedad dinámica (DMSG) para los perfiles de adsorción de humedad para la Forma Cristalina I y la Forma Cristalina II de la sal de ácido L-málico de N-[2-(dietilamino)etil]-5-[(5-fluor-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3carboxamida. La Forma Cristalina I, más polimorfa y cristalina, es de menor higroscopicidad, absorbe menos del 0,5% 4 10

de agua en todo el intervalo de humedad relativa 0-90%. La Forma Cristalina II, menos polimorfa y cristalina, es muy higroscópica, absorbe más del 15% de agua en todo el intervalo de humedad relativa 0-90%.

La Figura 4 es una ilustración de los datos de calorimetría diferencial de barrido (DSC) que muestran los perfiles de DSC para la Forma Cristalina I y la Forma Cristalina II de la sal del ácido L-málico de N-[2-(dietilamino)etil]-5-[(5-fluoro1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil] -2,4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida. Las transiciones exotérmicas se indican en la dirección hacia arriba. La Forma Cristalina I se funde a una temperatura más alta (aproximadamente 196ºC) con una entalpía de fusión más alta (aproximadamente 141 J/g) que la Forma Cristalina II, que se funde a aproximadamente 181ºC con una entalpía de fusión de aproximadamente 105 J/g. Esto sugiere que las dos formas cristalinas son monotrópicas, aunque la degradación se produce después de que los cristales se funden. El monotropismo es confirmado por la conversión de la Forma Cristalina II a la Forma Cristalina I en una suspensión a temperatura ambiente, tal como se describe en la presente memoria.

Descripción detallada de las realizaciones preferentes

La N-[2-(dietilamino)etil]-5-[fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida es un compuesto 2-indolinona sustituido con 3-pirrol que tiene la estructura siguiente:

La N-[2-(dietilamino)etil]-5-[(5-fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida pueden se preparada como la base libre mediante procedimientos sintéticos estándar que incluyen, por ejemplo, los divulgados en la publicación internacional PCT Nº WO 01/60814 (Tang et al.). Aunque la base libre puede ser cristalizada en forma de partículas pequeñas, es deseable en operaciones a gran escala, por ejemplo, tener cristales de tamaño de partícula mayor para facilitar la filtración. Para este fin, se prepararon sales de N-[2-(dietilamino)etil]-5[(5fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida para evaluar las propiedades resultantes relacionadas con el procesamiento de la sal y la preparación de composiciones farmacéuticas orales de las mismas.

Las formas cristalinas de N-[2-(dietilamino)etil]-5-[(5-fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol -3-carboxamida que incluyen la base y sales libres de la misma (por ejemplo, sales de ácido ciclámico, ácido maleico, ácido bromhídrico, ácido mandélico, ácido tartárico, ácido fumárico, ácido ascórbico, ácido fosfórico, ácido clorhídrico, ácido p-toluenosulfónico, ácido cítrico y ácido málico) fueron seleccionadas por sus propiedades relacionadas con el procesamiento de la sal y la preparación de composiciones farmacéuticas orales de las mismas, incluyendo, por ejemplo, cristalinidad (por ejemplo, cristalino o amorfo, grado de cristalinidad, cristales anhidros o hidratados), toxicidad, higroscopicidad, estabilidad y morfología. En base al cribado anterior, se determinó una sal de ácido málico de N-[2(dietilamino)etil]-5-[(5-fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida para proporcionar el mejor equilibrio entre las propiedades deseadas. Tras un estudio adicional, se encontró que una sal de ácido málico de N-[2-(dietilamino)etil]-5-[5-fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3carboxamida cristalizó en múltiples formas cristalinas.

En la presente memoria se describen procedimientos de preparación de formas cristalinas que incluyen una sal de ácido L-málico de N-[2-(dietilamino)etil]-5-[5-fluoro-1, 2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3carboxamida y la identificación de esas formas cristalinas. La preparación de cristales anhidros que incluyen una sal de ácido L-málico se describe en la presente memoria. La Forma Cristalina I anhidra tiene propiedades superiores para muchas aplicaciones.

Forma cristalina I

En una realización, se prepara una sal de ácido L-málico de N-[2-(dietilamino)etil]-5-[(5 fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3Hindol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida como cristales anhidros (Forma Cristalina I). La Forma Cristalina I anhidra es termodinámicamente más estable que otras formas cristalinas (Forma Cristalina II). En un

procedimiento, la Forma Cristalina I puede ser preparada, por ejemplo, mediante la inducción de la cristalización de una sal de ácido L-málico bajo las condiciones de cristalización de la Forma Cristalina I a partir de una solución sobresaturada.

Tal como se usa en la presente memoria, "condiciones de cristalización de la Forma Cristalina I" se refiere a condiciones de cristalización que proporcionan la forma cristalina termodinámica (Forma Cristalina I). Dichas condiciones se denominan comúnmente condiciones de cristalización "lenta". Una persona con conocimientos en la materia puede seleccionar uno o más factores que incluyen, por ejemplo: una diferencia entre las temperaturas inicial y final de la solución de cristalización de preferentemente como máximo aproximadamente 100ºC, más preferentemente, como máximo aproximadamente 50ºC, incluso más preferentemente, como máximo aproximadamente 25ºC y, más preferentemente, de aproximadamente 0ºC, una velocidad de enfriamiento de preferentemente como máximo aproximadamente 50ºC por hora, más preferentemente, como máximo aproximadamente 20ºC por hora, todavía más preferentemente, como máximo aproximadamente 2ºC por hora y, más preferentemente, de aproximadamente 0ºC por hora; sin siembra; una relación de sobresaturación de preferentemente como máximo aproximadamente 10, más preferentemente, como máximo aproximadamente 5 y, más preferentemente, como máximo aproximadamente 1,5; sin agentes de precipitación y/o sus combinaciones para proporcionar condiciones de cristalización para la Forma Cristalina I.

Los disolventes útiles para preparar la solución de cristalización incluyen, por ejemplo, acetonitrilo, metanol, etanol, isopropanol, tolueno, n-butanol, tetrahidrofurano, N,N-dimetilformamida, acetona, agua y sus combinaciones.

En otro procedimiento, la Forma Cristalina I puede ser preparada, por ejemplo, proporcionando una suspensión de la Forma Cristalina II en disolventes en los que la Forma Cristalina II tiene una solubilidad considerable. Tal como se usa en la presente memoria, una “solubilidad considerable" significa que un cristal es preferentemente soluble en el disolvente en concentraciones de al menos aproximadamente el 0,1% en peso, más preferentemente, al menos aproximadamente el 1% en peso y, más preferentemente, al menos aproximadamente el 10% en peso, a aproximadamente temperatura ambiente (por ejemplo, de aproximadamente 15ºC a aproximadamente 30ºC). Opcionalmente, el cristal puede ser disuelto en el disolvente a la concentración indicada a temperatura ambiente.

Dichos disolventes incluyen, por ejemplo, acetonitrilo, etanol, metanol y sus combinaciones.

Forma cristalina II

Se prepara una sal de ácido L-málico de N-[2-(dietilamino)etil]-5[(5-fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil]-2,4dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida en otra forma cristalina (Forma Cristalina II). La Forma Cristalina II es útil, por ejemplo, como un intermedio en la preparación de la Forma Cristalina I anhidra.

La Forma Cristalina II puede ser preparada, por ejemplo, induciendo la cristalización de una sal de ácido málico bajo condiciones de cristalización de la Forma Cristalina II a partir de una solución sobresaturada.

Tal como se usa en la presente memoria, "condiciones de cristalización de la Forma Cristalina II" se refiere a condiciones de cristalización que proporcionan una forma cristalina que no sea la forma termodinámica. Dichas condiciones se denominan comúnmente condiciones de cristalización "rápida". Una persona con conocimientos en la materia puede seleccionar uno o más factores que incluyen, por ejemplo: una diferencia entre las temperaturas inicial y final de la solución de cristalización de preferentemente al menos aproximadamente 25ºC, más preferentemente, al menos aproximadamente 50ºC y, más preferentemente, al menos aproximadamente 100ºC; una velocidad de enfriamiento preferentemente de al menos aproximadamente 25ºC por hora, más preferentemente, al menos aproximadamente 100ºC por hora y, más preferentemente, al menos aproximadamente 300ºC por hora; siembra; una relación de sobresaturación de preferentemente al menos aproximadamente 2, más preferentemente, al menos aproximadamente 5 y, más preferentemente, al menos aproximadamente 10; presencia de un agente de precipitación y/o sus combinaciones para proporcionar condiciones de cristalización para la Forma Cristalina II.

Los disolventes útiles para la solución de cristalización incluyen, por ejemplo, metanol, agua, mezclas de tetrahidrofurano/agua y sus combinaciones.

Difracción de rayos X de polvo (PXRD)

Los compuestos orgánicos cristalinos consisten en un gran número de átomos que están dispuestos en una matriz periódica en el espacio tridimensional. La periodicidad estructural se manifiesta normalmente en distintas propiedades físicas, tales como características espectrales nítidas y explícitas con la mayoría de las sondas espectroscópicas (por ejemplo, difracción de rayos X, infrarrojos y RMN en estado sólido). La difracción de rayos X (XRD) es reconocida como uno de los procedimientos más sensibles para determinar la cristalinidad de los sólidos. Los cristales producen máximos de difracción explícitos que surgen a ángulos específicos consistentes con las separaciones entre planos de una red, tal como predice la ley de Bragg. Por el contrario, los materiales amorfos no poseen orden de largo alcance. Frecuentemente, retienen volumen adicional entre las moléculas, como en el estado líquido. Normalmente, los sólidos 6 10

amorfos revelan un patrón de difracción de rayos X sin rasgos, halos difusos, amplios debido a la ausencia del orden de largo alcance de una red cristalina repetitiva.

Se ha informado acerca del uso de la difracción de rayos X de polvo para caracterizar diferentes formas cristalinas de compuestos orgánicos (por ejemplo, compuestos útiles en composiciones farmacéuticas). Véase, por ejemplo, las patentes US Nos. 5.504.216 (Holohan et al), 5.721.359 (Dunn et al.), 5.910.588 (Wangnick et al.), 6.066.647 (Douglas et al.), 6.225.474 (Matsumoto et al.), 6.239.141 (Allen et al.), 6.251.355 (Murata et al.), 6.288.057 (Harkness), 6.316.672 (Stowell et al.), 6.329.364 (Groleau) y las publicaciones de solicitud de patente US Nos. 2001/0003752 (Talley et al.), 2002/0038021 (Barton et al.) y 2002/0045746 (Barton et al.).

Los materiales cristalinos son preferentes en muchas aplicaciones farmacéuticas. Generalmente, las formas cristalinas son termodinámicamente más estables que las formas amorfas de la misma sustancia. Esta estabilidad termodinámica se refleja preferentemente en una menor solubilidad y una mejor estabilidad física de la forma cristalina. Preferentemente, el empaquetamiento regular de las moléculas en el sólido cristalino deniega la incorporación de impurezas químicas. Por lo tanto, los materiales cristalinos poseen generalmente una mayor pureza química que sus homólogos amorfos. Generalmente, el empaquetamiento en el sólido cristalino limita las moléculas a posiciones bien definidas en la red y reduce la movilidad molecular, que es el requisito previo para las reacciones químicas. Por lo tanto, los sólidos cristalinos, con muy pocas excepciones, son químicamente más estables que los sólidos amorfos de la misma composición molecular. Preferentemente, las formas cristalinas de las sales de ácido L-málico de N-[2(dietilamino)etil]-5-[(5-fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida divulgadas en la presente solicitud poseen una o más de las propiedades químicas y/o físicas ventajosas divulgadas en la presente memoria.

Las formas cristalinas de sales de ácido L-málico de N-[2-(dietilamino)etil]-5[(5-fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida divulgadas en la presente solicitud tienen preferentemente perfiles de difracción de rayos X de polvo distintos. Por ejemplo, los cristales anhidros que incluyen una sal de ácido L-málico de N-[2-(dietilamino)etil]-5-[(5-fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida pueden distinguirse preferentemente de la otra forma cristalina que incluye una sal de ácido L-málico divulgada en la presente memoria por la presencia de picos de difracción característicos. Tal como se usa en la presente memoria, los picos de difracción característicos son picos seleccionados de entre los picos más intensos del patrón de difracción observado. Preferentemente, los picos característicos se seleccionan de entre aproximadamente 20 de los picos más intensos, más preferentemente, de entre aproximadamente 10 de los picos más intensos y, más preferentemente, de entre aproximadamente 5 de los picos más intensos en el patrón de difracción.

Las Figuras 1 y 2 muestran los patrones de difracción de rayos X de polvo para las Formas Cristalinas I y II, respectivamente, de la sal de ácido L-málico de N-[2-(dietilamino)etil]-5-[(5-fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida. La Tabla 1 contiene la lista de los picos más intensos de cada patrón PXRD entre 2 y 35 grados dos theta. La base libre, la Forma Cristalina I y la Forma Cristalina II se distinguen fácilmente por sus patrones PXRD únicos.

Un cristal anhidro que incluye una sal de ácido L-málico de N-[2-(dietilamino)etil]-5-[(5-fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida (Forma Cristalina I) tiene picos de difracción característicos a aproximadamente 13,2 y 24,2 grados dos theta, más preferentemente, a aproximadamente 13,2, 19,4, 24,2 y 25,5 grados dos theta y, más preferentemente, tiene los picos de difracción característicos enumerados en la Tabla 1 para la Forma Cristalina I.

La Forma cristalina II de una sal de ácido L-málico de N-[2-(dietilamino)etil]-5-[(5-fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3iliden)metil-2, 4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida tiene picos de difracción característicos a aproximadamente 3,0 y 27,7 grados dos theta, más preferentemente, a aproximadamente 3,0, 12,1, 14,5 y 27,7 grados dos theta y, más preferentemente, tiene los picos de difracción característicos enumerados en la Tabla 1 para la Forma Cristalina II.

Tabla1: Tabla de picos de difracción de rayos X de polvo para las Formas Cristalinas I y II

Forma Cristalina I

Forma Cristalina II

Dos Theta (grados)

Intensidad relativa Dos Theta (grados) Intensidad relativa

11,39

7 3,02 100

11,90

7 5,93 12

13,16

82 7,61 18

15,92

27 9,26 7

16,79

25 12,08 32

17,18

24 14,54 42

19,40

76 17,54 19

20,30

20 19,46 28

21,26

31 23,36 54

21,68

28 24,77 28

22,13

48 27,71 80

22,91

21

24,17

100

25,46

79

26,06

23

26,96

26

27,56

28

32,27

13

32,93

17

34,43

23

Pureza y estabilidad en estado sólido

La pureza de la Forma Cristalina I de una sal de ácido L-málico de N-[2-(dietilamino)etil]-5-[(5-fluoro-1,2-dihidro-2-oxo3H-indol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida se evaluó mediante cromatografía líquida de alta presión 5 (HPLC). Los resultados mostraron un área de pureza superior a aproximadamente el 98% con menos de aproximadamente el 2% área de impurezas detectadas (Tabla 2).

Se realizó también un estudio de estabilidad en estado sólido de la Forma Cristalina I de la sal de ácido L-málico de N[2-(dietilamino)etil]-5-[(5-fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida (Tabla 2). Los datos de cuatro semanas después de un envejecimiento a 60ºC/humedad relativa ambiente, 60ºC/75% de 10 humedad relativa y 80ºC/ humedad relativa ambiente no mostraron ninguna degradación significativa. La difracción de rayos X de polvo correspondiente a las muestras de dos semanas tampoco indicó ningún cambio en la forma cristalina.

Tabla 2: Estabilidad de la Forma Cristalina I en base a un análisis HPLC

Condición

Pureza (% área) Impurezas totales (% área)

Inicial

99,7 1,5

2 semanas a 60ºC/HR ambiente*

98,2 1,1

2 semanas a 60ºC/75% de HR

99,6 1,2

2 semanas a 80ºC/HR ambiente

99,5 1,2

4 semanas a 60ºC/HR ambiente

100,4 1,2

4 semanas a 60ºC/75% de HR

100,1 2,2

4 semanas a 80ºC/HR ambiente

98,0 3,1

*Humedad relativa (HR)

Datos de absorción de humedad

Los datos de absorción de humedad a 25ºC para las Formas cristalinas I y II de la sal de ácido L-málico de N-[2(dietilamino)etil]-5-[(5-fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida se muestran en la Figura 3. La Forma Cristalina I, más polimorfa y cristalina, es de baja higroscopicidad y absorbe menos del 0,5% de agua en todo el intervalo de humedad relativa 0-90%. La Forma Cristalina II, menos polimorfa y cristalina, es muy higroscópica y absorbe más del 15% de agua en todo el intervalo de humedad relativa 0-90%.

Datos térmicos

Los datos de calorimetría diferencial de barrido se muestran en la Figura 4. La Forma Cristalina I anhidra de sal de ácido L-málico de N-[2-(dietilamino)etil]5-[(5-fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil ]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3carboxamida se funde a aproximadamente 196ºC, mientras que la Forma Cristalina II se funde a aproximadamente 181ºC. Los eventos observados después de la fusión inicial sugieren que es probable que haya cierta descomposición asociada con la fusión. Por lo tanto, no pudo medirse, de manera fácil y precisa, un calor de fusión.

Los datos TGA para la Forma Cristalina I (no mostrada) no mostraron una pérdida de peso considerable hasta el punto de fusión, lo que indica falta de disolvente residual y/o agua retenida en los cristales.

Administración y composiciones farmacéuticas

Los cristales de la presente invención pueden ser administrados, como tales, a un paciente humano o pueden ser administrados en composiciones farmacéuticas en las que el cristal anterior es mezclado con vehículos o excipientes adecuados. Las técnicas de formulación y administración de fármacos pueden encontrarse en "Remington’s Pharmacological Sciences", Mack Publishing Co., Easton, PA., Última edición.

Tal como se usan en la presente memoria, "administrar" o "administración" se refieren al suministro de un cristal de la presente invención o una composición farmacéutica del mismo a un organismo con el propósito de prevenir o tratar un trastorno relacionado con PK.

Las vías de administración adecuadas pueden incluir, sin limitación, la administración oral, rectal, transmucosal o intestinal o intramuscular, subcutánea, intramedular, intratecal, intraventricular directa, intravenosa, intravítrea, intraperitoneal, intranasal o intraocular. Las vías de administración preferentes son la oral y la parenteral.

De manera alternativa, el cristal de la presente invención o una composición farmacéutica del mismo pueden ser administrados en una manera local en lugar de sistémica, por ejemplo, mediante inyección del cristal de la presente invención o una composición farmacéutica del mismo directamente a un tumor sólido, frecuentemente en una formulación de depósito o de liberación sostenida.

Además, el fármaco puede ser administrado en un sistema de administración dirigida de fármacos, por ejemplo, en un liposoma recubierto con un anticuerpo específico de tumor. Los liposomas se dirigirán al tumor y serán absorbidos selectivamente por el mismo.

Las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden ser fabricadas mediante procedimientos bien conocidos en la técnica, por ejemplo, por medio de procedimientos convencionales de mezclado, disolución, granulación, elaboración de grageas, levigación, emulsión, encapsulación, atrapamiento o liofilización.

Las composiciones farmacéuticas para su uso según la presente invención pueden ser formuladas de manera convencional usando uno o más vehículos fisiológicamente aceptables que incluyen excipientes y adyuvantes que facilitan el procesamiento de los cristales de la presente invención en preparaciones que pueden ser usadas farmacéuticamente. La formulación apropiada depende de la vía de administración elegida.

Para la inyección, un cristal de la presente invención o una composición farmacéutica del mismo pueden ser formulados en soluciones acuosas, preferentemente en tampones fisiológicamente compatibles, tales como solución de Hanks, solución de Ringer o tampón de solución salina fisiológica. Para la administración transmucosal, se usan agentes de penetración apropiados para la barrera a ser permeada en la formulación. Dichos agentes de penetración son generalmente conocidos en la técnica.

Para la administración oral, un cristal de la presente invención o una composición farmacéutica del mismo pueden ser formulados combinando un cristal de la presente invención con vehículos farmacéuticamente aceptables bien conocidos en la técnica. Dichos vehículos permiten que los cristales de la presente invención sean formulados como comprimidos, píldoras, pastillas, grageas, cápsulas, líquidos, geles, jarabes, pastas, suspensiones y similares, para la ingestión oral por un paciente. Las preparaciones farmacéuticas para uso oral pueden fabricarse usando un excipiente sólido, opcionalmente moliendo la mezcla resultante y procesando la mezcla de gránulos, después de añadir otros adyuvantes adecuados si se desea, para obtener comprimidos o núcleos de grageas. Los excipientes útiles son, en

particular, cargas tales como azúcares, incluyendo lactosa, sacarosa, manitol o sorbitol, preparaciones de celulosa tales como, por ejemplo, almidón de maíz, almidón de trigo, almidón de arroz y almidón de patata y otros materiales tales como gelatina, goma de tragacanto, metil celulosa, hidroxipropilmetil celulosa, carboximetilcelulosa de sodio y/o polivinil-pirrolidona (PVP). Si se desea, pueden añadirse agentes disgregantes, tales como polivinil pirrolidona reticulada, agar o ácido algínico. También puede usarse una sal, tal como alginato de sodio.

A los núcleos de las grágeas se les aplican recubrimientos adecuados. Para este propósito, pueden usarse soluciones de azúcar concentradas, que pueden contener opcionalmente goma arábiga, talco, polivinilpirrolidona, gel de carbopol, polietilenglicol y/o dióxido de titanio, soluciones de laca y disolventes orgánicos adecuados o mezclas de disolventes. Pueden añadirse colorantes o pigmentos a los recubrimientos de comprimidos o grageas para identificar o caracterizar diferentes combinaciones de dosis activas.

Las composiciones farmacéuticas que pueden ser usadas por vía oral incluyen cápsulas de ajuste por presión realizadas en gelatina, así como cápsulas selladas blandas realizadas en gelatina y un plastificante, tal como glicerol o sorbitol. Las cápsulas de ajuste por presión pueden contener los ingredientes activos mezclados con una carga tal como lactosa, un aglutinante tal como almidón y/o un lubricante tal como talco o estearato de magnesio y, opcionalmente, estabilizadores. En las cápsulas blandas, los cristales de la presente invención pueden estar disueltos

o suspendidos en líquidos adecuados, tales como aceites grasos, parafina líquida o polietilenglicoles líquidos. También pueden añadirse estabilizantes en estas formulaciones.

Las cápsulas pueden ser empaquetadas en botellas de vidrio o de plástico marrones para proteger de la luz los cristales de la presente invención o las composiciones farmacéuticas de los mismos. Los recipientes que contienen la formulación activa de la cápsula deben ser almacenados a temperatura ambiente controlada (por ejemplo, de aproximadamente 15ºC a aproximadamente 30ºC).

Para la administración por inhalación, un cristal de la presente invención o una composición farmacéutica del mismo es administrada convenientemente en la forma de una pulverización de aerosol usando un envase presurizado o un nebulizador y un propulsor adecuado, por ejemplo, sin limitación, diclorodifluorometano, triclorofluorometano, diclorotetrafluoroetano o dióxido de carbono. En el caso de un aerosol presurizado, la unidad de dosificación puede ser controlada proporcionando una válvula para suministrar una cantidad medida. Pueden formularse cápsulas y cartuchos de, por ejemplo, gelatina para su uso en un inhalador o insuflador que contienen una mezcla en polvo de un cristal de la presente invención o una composición farmacéutica del mismo, y una base en polvo adecuada, tal como lactosa o almidón.

Un cristal de la presente invención o una composición farmacéutica del mismo pueden ser formulados también para la administración parenteral, por ejemplo, mediante inyección de bolo o infusión continua. Las formulaciones para inyección pueden ser presentadas en una forma de dosificación unitaria, por ejemplo, en ampollas o en recipientes de múltiples dosis, con un conservante añadido. Las composiciones pueden tomar formas tales como suspensiones, soluciones o emulsiones en vehículos oleosos o acuosos, y pueden contener materiales de formulación tales como agentes de suspensión, estabilizantes y/o dispersantes.

Las composiciones farmacéuticas para administración parenteral incluyen soluciones acuosas de una forma soluble en agua de un cristal de la presente invención o una composición farmacéutica del mismo. Además, pueden prepararse suspensiones de cristales de la presente invención o composiciones farmacéuticas de los mismos en un vehículo lipófilo. Los vehículos lipófilos adecuados incluyen aceites grasos tales como aceite de sésamo, ésteres de ácidos grasos sintéticos tales como oleato de etilo y triglicéridos, o materiales tales como liposomas. Las suspensiones acuosas para inyección pueden contener sustancias que aumentan la viscosidad de la suspensión, tales como carboximetil celulosa de sodio, sorbitol o dextrano. Opcionalmente, la suspensión puede contener también estabilizantes y/o agentes que aumentan la solubilidad de los cristales de la presente invención o una composición farmacéutica del mismo para permitir la preparación de soluciones altamente concentradas.

De manera alternativa, el ingrediente activo puede estar en forma de polvo para su constitución con un vehículo adecuado, por ejemplo, agua estéril libre de pirógenos, antes de su uso.

Un cristal de la presente invención o una composición farmacéutica del mismo pueden ser formulados también en composiciones rectales, tales como supositorios o enemas de retención, usando, por ejemplo, bases de supositorio convencionales, tales como manteca de cacao u otros glicéridos.

Además de las formulaciones descritas anteriormente, un cristal de la presente invención o una composición farmacéutica del mismo pueden ser formulados también como preparaciones de depósito. Dichas formulaciones de acción prolongada pueden ser administradas mediante implantación (por ejemplo, por vía subcutánea o intramuscular)

o por inyección intramuscular. Un cristal de la presente invención o una composición farmacéutica del mismo pueden ser formulados para esta vía de administración con materiales poliméricos o hidrófobos adecuados (por ejemplo, en una emulsión con un aceite farmacológicamente aceptable), con resinas de intercambio iónico, o como un derivado

poco soluble.

Además, un cristal de la presente invención o una composición farmacéutica del mismo pueden ser administrados usando un sistema de liberación sostenida, tal como matrices semipermeables de polímeros sólidos hidrófobos que contienen el agente terapéutico. Se han establecido diversos materiales de liberación sostenida y son bien conocidos por las personas con conocimientos en la materia. Las cápsulas de liberación sostenida pueden liberar, dependiendo de su naturaleza química, una sal o una composición farmacéutica de la misma durante unas pocas semanas hasta más de 100 días. Dependiendo de la naturaleza química y la estabilidad biológica del reactivo terapéutico, pueden emplearse estrategias adicionales para la estabilización de proteínas.

Las composiciones farmacéuticas de la presente memoria pueden incluir también vehículos o excipientes adecuados en fase sólida o gel. Los ejemplos de dichos vehículos o excipientes incluyen, pero no se limitan a, carbonato de calcio, fosfato de calcio, diversos azúcares, almidones, derivados de celulosa, gelatina y polímeros tales como polietilenglicoles.

Las composiciones farmacéuticas adecuadas para su uso en la presente invención incluyen composiciones en las que los ingredientes activos están contenidos en una cantidad suficiente para conseguir el objetivo buscado, por ejemplo, la modulación de la actividad PK o el tratamiento o prevención de un trastorno relacionado con PK.

Más específicamente, una cantidad terapéuticamente eficaz significa una cantidad de cristales de la presente invención o composiciones farmacéuticas de los mismos eficaz para prevenir, aliviar o mejorar los síntomas de la enfermedad o prolongar la supervivencia del sujeto bajo tratamiento.

La determinación de una cantidad terapéuticamente eficaz está dentro de la capacidad de las personas con conocimientos en la materia, especialmente a la luz de la divulgación detallada proporcionada en la presente memoria.

Para cualquiera de los cristales de la presente invención o composiciones farmacéuticas de los mismos usados en los procedimientos de la invención, la cantidad o dosis terapéuticamente eficaz puede ser estimada inicialmente a partir de ensayos de cultivo celular. A continuación, la dosificación puede ser formulada para su uso en modelos animales para conseguir un intervalo de concentración circulante que incluye el valor IC50 según se determina en el cultivo celular (es decir, la concentración de los cristales de la presente invención o composiciones farmacéuticas de los mismos que consigue una inhibición del 50% con respecto a la máxima actividad PK). A continuación, dicha información puede ser usada para determinar más exactamente las dosis útiles en seres humanos.

La toxicidad y la eficacia terapéutica de un cristal de la presente invención o una composición farmacéutica del mismo pueden ser determinadas mediante procedimientos farmacéuticos estándar en cultivos celulares o animales experimentales, por ejemplo, mediante la determinación de los valores IC50 y DL50 (ambos de los cuales se describen en otro lugar en la presente memoria) para un cristal objeto de la presente invención o una composición farmacéutica del mismo. Los datos obtenidos de estos ensayos de cultivo celular y estudios en animales pueden ser usados para formular un intervalo de dosificación para su uso en seres humanos. La dosificación puede variar dependiendo de la forma de dosificación empleada y la vía de administración utilizada. La formulación, la vía de administración y la dosificación exactas pueden ser seleccionadas por el médico individual en vista del estado del paciente. (Véase, por ejemplo, Fingl, et al., 1975, en " The Pharmacological Basis of Therapeutics", Cap. 1 p. 1).

La cantidad y el intervalo de dosificación pueden ser ajustados individualmente para proporcionar niveles plasmáticos de las especies activas que son suficientes para mantener los efectos moduladores de quinasa. Estos niveles plasmáticos se denominan concentraciones eficaces mínimas (MEC). La MEC variará para cada cristal de la presente invención o composición farmacéutica del mismo, pero puede ser estimada a partir de datos in vitro, por ejemplo, la concentración necesaria para alcanzar una inhibición del 50-90% de una quinasa puede determinarse usando los ensayos descritos en la presente memoria. Las dosificaciones necesarias para conseguir la MEC dependerán de las características del individuo y la vía de administración. Pueden usarse ensayos HPLC o bioensayos para determinar las concentraciones plasmáticas.

Los intervalos de dosificación pueden ser determinados también usando el valor MEC. Un cristal de la presente invención o una composición farmacéutica del mismo deben administrarse usando un régimen que mantenga los niveles plasmáticos por encima de la MEC durante el 10-90% del tiempo, preferentemente entre el 30-90% y, más preferentemente, entre el 50-90%.

En los casos de administración local o absorción selectiva, la concentración local eficaz del fármaco puede no estar relacionada con la concentración plasmática y pueden emplearse otros procedimientos conocidos en la técnica para determinar la cantidad y el intervalo de dosis correctos.

Por supuesto, la cantidad de una composición administrada dependerá del sujeto bajo tratamiento, la gravedad de la aflicción, la manera de administración, la opinión del médico, etc.

Si se desea, las composiciones pueden ser presentadas en un envase o dispositivo dispensador, tal como un kit aprobado por la FDA, que puede contener una o más formas de dosificación unitarias que contienen el ingrediente activo. El envase puede incluir, por ejemplo, una lámina metálica o de plástico, tal como un envase blíster. El envase o dispositivo dispensador puede ir acompañado por instrucciones para la administración. El envase o dispositivo dispensador puede ir acompañado también de una notificación relacionada con el envase en la forma prescrita por una agencia gubernamental que regula la fabricación, uso o venta de productos farmacéuticos, cuya notificación es un reflejo de la aprobación por parte de la agencia de la forma de las composiciones o de la administración humana o veterinaria. Dicha notificación, por ejemplo, puede ser un etiquetado aprobado por la U.S. Food and Drug Administration para medicamentos recetados o un prospecto de producto aprobado. Las composiciones que incluyen un cristal de la presente invención, formuladas en un vehículo farmacéutico compatible, pueden ser preparadas, colocadas también en un envase apropiado, y pueden ser etiquetadas para el tratamiento de una afección indicada. Las condiciones adecuadas indicadas en la etiqueta pueden incluir el tratamiento de un tumor, la inhibición de angiogénesis, el tratamiento de fibrosis, diabetes y similares.

También es un aspecto de la presente invención que un cristal de la presente invención o una composición farmacéutica del mismo, puedan ser combinados con otros agentes quimioterapéuticos para el tratamiento de las enfermedades y trastornos indicados anteriormente. Por ejemplo, un cristal de la presente invención o una composición farmacéutica del mismo podrían combinarse con agentes alquilantes, tales como fluorouracilo (5-FU) solo o en combinación adicional con Leukovorin; u otros agentes alquilantes, tales como, sin limitación, otros análogos de pirimidina tales como UFT, capecitabina, gemcitabina y citarabina, los sulfonatos de alquilo, por ejemplo, busulfán (usado en el tratamiento de la leucemia granulocítica crónica), improsulfan y piposulfan; aziridinas, por ejemplo, benzodepa, carboquona, meturedepa y uredepa; etileniminas y metilmelaminas, por ejemplo, altretamina, trietilenmelamina, trietilenfosforamida, trietilentiofosforamida y trimetilolmelamina; y las mostazas de nitrógeno, por ejemplo, clorambucil (usado en el tratamiento de la leucemia linfocítica crónica, macroglobulinemia primaria y linfoma no Hodgkin), ciclofosfamida (usada en el tratamiento de la enfermedad de Hodgkin, mieloma múltiple, neuroblastoma, cáncer de mama, cáncer de ovario, cáncer de pulmón, tumor de Wilm y rabdomiosarcoma), estramustina, ifosfamida, novembrichina, prednimustina y mostaza de uracilo (usada en el tratamiento de trombocitosis primaria, linfoma no Hodgkin, enfermedad de Hodgkin y cáncer de ovario); y triazinas, por ejemplo, dacarbazina (usada en el tratamiento de sarcoma de tejido blando).

Un cristal de la presente invención o una composición farmacéutica del mismo, pueden ser usados también en combinación con otros agentes quimioterapéuticos antimetabolito tales como, sin limitación, análogos de ácido fólico, por ejemplo metotrexato (usado en el tratamiento de la leucemia linfocítica aguda, coriocarcinoma, micosis fungoide, cáncer de mama, cáncer de cabeza y cuello y sarcoma osteogénico) y pteropterina; y los análogos de purina, tales como mercaptopurina y tioguanina que encuentran uso en el tratamiento de leucemias granulocítica aguda, linfocítica aguda y granulocítica crónica.

Se contempla que un cristal de la presente invención o una composición farmacéutica del mismo puedan ser usados también en combinación con agentes quimioterapéuticos basados en productos naturales tales como, sin limitación, los alcaloides de la vinca, por ejemplo, vinblastina (usada en el tratamiento de cáncer de mama y cáncer testicular ), vincristina y vindesina; las epipodofilotoxinas, por ejemplo, etopósido y tenipósido, ambos de los cuales son útiles en el tratamiento de cáncer testicular y sarcoma de Kaposi; los agentes quimioterapéuticos antibióticos, por ejemplo, daunorubicina, doxorubicina, epirubicina, mitomicina (usada para tratar cáncer de estómago, cuello uterino, de colon, de mama, de vejiga y de páncreas), dactinomicina, temozolomida, plicamicina, bleomicina (usada en el tratamiento de cáncer de piel, de esófago y de tracto genitourinario); y los agentes quimioterapéuticos enzimáticos, tales como Lasparaginasa.

Además de lo indicado anteriormente, un cristal de la presente invención o una composición farmacéutica del mismo podrían ser usados también en combinación con los complejos de coordinación de platino (cisplatino, etc.); ureas sustituidas, tales como hidroxiurea; derivados de metilhidrazina, por ejemplo, procarbazina; supresores adrenocorticales, por ejemplo, mitotano, aminoglutetimida; y hormonas y antagonistas de hormonas, tales como los adrenocorticosteroides (por ejemplo, prednisona), progestinas (por ejemplo, caproato de hidroxiprogesterona), estrógenos (por ejemplo, dietilestilbesterol); antiestrógenos tales como tamoxifeno, andrógenos, por ejemplo, propionato de testosterona; e inhibidores de aromatasa, tales como anastrozol.

Finalmente, se contempla también que la combinación de un cristal de la presente invención o una composición farmacéutica del mismo serán efectivos en combinación con mitoxantrona o paclitaxel para el tratamiento de cánceres de tumores sólidos o leucemias, tales como, sin limitación, leucemia mielógena aguda (no linfocítica).

La presente invención se ilustra mediante los ejemplos siguientes. Debe entenderse que los ejemplos, materiales, cantidades y procedimientos particulares deben interpretarse ampliamente según el ámbito y el espíritu de la invención, tal como se expone en la presente memoria.

Ejemplos

Se midieron patrones de difracción de rayos X (XRD) en un difractómetro Scintag X2 (Thermo ARL, Ecublens, Suiza) equipado con un goniómetro theta-theta. Los puntos de fusión se determinaron usando un calorímetro de barrido diferencial TA Instruments 2920 (TA Instruments, New Castle, DE) con cápsulas selladas estándar y una velocidad de calentamiento de 10ºC/minuto. La higroscopicidad fue evaluada mediante gravimetría dinámica de absorción de humedad (DMSG) usando un Controlled Atmosphere Microbalance (Pharmacia Corp., Kalamazoo, MI). Todas las sustancias químicas usadas están disponibles en Aldrich Chemical Co., Milwaukee, WI, a menos que se especifique lo contrario. N-[2-(dietilamino)etil]-5-[(5-fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida se preparó como la base libre mediante un procedimiento similar al descrito en el Ejemplo 80 de la publicación internacional PCT Nº WO 01/60814 (Tang et al.).

Procedimientos

Difracción de rayos X de polvo (DRX). Se realizó una difracción de rayos X de polvo usando un sistema de difracción avanzado Scintag X2 operando bajo Scintag DMS/NT 1.30a y el software de Microsoft Windows NT 4.0. El sistema usa una fuente de rayos X de cobre mantenida a 45 kV y 40 MA para proporcionar una emisión de CuK(a1) de 1,5406A y un detector de estado sólido con refrigeración Peltier. La abertura del haz se controló usando divergencia del tubo y rendijas anti-dispersión de 2 y 4 mm y un detector anti-dispersión y rendijas de recepción de 0,5 y 0,2 mm de ancho. Se recogieron datos de 2 a 35º dos-theta usando un paso de barrido de 0,03º/punto con un tiempo de recuento de un segundo por paso. Se usaron copas de muestra de acero inoxidable, redondas, de carga superior, con inserciones de 12 mm de diámetro para los experimentos. El fármaco a granel se muestreo, tal como es, y se colocó en la bandeja de muestras sin ningún tipo de preparación. Algunas muestras específicas fueron trituradas a mano también en un mortero antes de su procesamiento. El análisis de datos se completó usando Origin 6.0 (Microcal Software, Northampton MA).

Gravimetría de absorción de humedad dinámica (DMSG). Se recogieron isotermas DMSG sobre la microbalanza de atmósfera controlada y temperatura variable. Se usaron aproximadamente 10 mg de muestras en la balanza. Las muestras se analizaron tal como se recibieron. La humedad se estableció secuencialmente a entre 0 y el 90% de humedad relativa (HR) en etapas de 3% de HR. La masa se midió cada dos minutos. La HR se cambió al siguiente valor cuando la masa de la muestra era estable dentro de 0,5 microgramos en 480 segundos. Se usó un programa de Visual Basic para controlar la recogida de datos y exportar la información a una hoja de cálculo Excel.

Análisis Térmico. Los datos de calorimetría diferencial de barrido (DSC) se obtuvieron sellando la muestra en polvo en cápsulas DSC de aluminio. Las muestras se analizaron tal como se recibieron, los tamaños eran de aproximadamente 1 mg. Típicamente, las temperaturas se escanearon a 320ºC a una velocidad de barrido de 10ºC por minuto. El DSC era un calorímetro TA Instruments 2920. El software de análisis de datos usado fue TA’s Universal Analysis V 1. 1 OB.

Los datos de análisis termogravimétrico (TGA) se obtuvieron en un dispositivo TA Instruments TGA 2950. Las muestras se equilibraron en el TGA a 25ºC, con un punto de rocío de 20ºC durante 30 minutos antes de iniciar el programa de temperatura. La rampa de temperatura era de 10ºC/minuto, pero se escaneó bajo condiciones de alta resolución propiedad de TA. Esta técnica disminuye la velocidad de barrido cuando se está produciendo una transición, mejorando la capacidad del instrumento para resolver los eventos de pérdida de peso independientes.

Ejemplo 1: Preparación de la Forma Cristalina I anhidra de la sal de ácido L-málico de N-[2-(dietilamino)etil]-5[(5-fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil)-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida.

Preparación A: Se añadió N-[2-(dietilamino)etil]-5-[(5-fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1Hpirrol-3-carboxamida (130 mg, 0,326 mmol) a 20 ml de metanol, y la mezcla se agitó. Se añadió ácido L-málico (47,2 mg, 0,352 mmol), dando como resultado una rápida disolución de todos los sólidos. El metanol se eliminó a presión reducida para producir un sólido de color naranja poco cristalino. Se añadió acetonitrilo (5 ml), y la suspensión se agitó y se calentó durante aproximadamente 10 minutos. Se continuó la agitación mientras que la suspensión se dejó enfriar a temperatura ambiente. Los cristales se filtraron y se secaron, dando como resultado 149 mg de sólidos (rendimiento 86%) de la Forma Cristalina I.

Preparación B: La N-[2-(dietilamino)etil]-5-[(5-fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3carboxamida puede ser purificada mediante un lavado acuoso a pH = 11 antes de la formación de la sal de ácido Lmálico. Se preparó una solución de la base libre en una mezcla de n-butanol:agua 80:20 (v:v) a 80ºC. Después de enfriar a 20ºC y agitar durante 1 hora, se observó una cristalización considerable. Se analizó una muestra mediante PXRD y se encontró que era la Forma Cristalina I. La filtración, el secado y la co-molienda de los cristales resultó en un rendimiento del 99%.

Ejemplo 2: Preparación de la Forma cristalina II de la sal de ácido L-málico de N-[2-(dietilamino)etil]-5-[(5-fluoro1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida.

Se añadieron cristales de la Forma Cristalina I de la sal de ácido L-málico de N-[2-(dietilamino)etil]-5-[(5-fluoro-1,2dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida (25 mg) a tetrahidrofurano (2 ml), seguido por la adición de agua (250 microlitros). La mezcla se calentó para disolver los cristales. El disolvente se dejó evaporar durante la noche, dando como resultado cristales de la Forma Cristalina II.

Ejemplo 3: Preparación de la Forma Cristalina I anhidro de la sal de ácido L-málico de N-[2-(dietilamino)etil]-55 [(5-fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida a partir de la Forma Cristalina II.

Se añadió acetonitrilo (aproximadamente 5 ml) a la Forma Cristalina II (150 mg). La suspensión se agitó y se calentó durante aproximadamente 10 minutos. Se continuó la agitación mientras la suspensión se dejó enfriar a temperatura ambiente. Los cristales se filtraron y se secaron, dando como resultado cristales de la Forma Cristalina I.

10 Ejemplo 4: Solubilidad de la Forma Cristalina I de la sal de ácido L-málico de N-[2(dietilamino)etil]-5-[(5-fluoro1,2-dilhidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida

Se determinó que la solubilidad de la Forma Cristalina I de la sal de ácido L-málico de N-[2-(dietilamino)etil-5-[(5-fluoro1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3-iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida era de 5 mg/ml en agua a 25ºC. Esto indica que la solubilidad no debe ser un factor limitante en la biodisponibilidad del material.

Claims (9)

1. REIVINDICACIONES

   1. Un cristal que comprende la sal de ácido L-málico de N-[2-(dietilamino)etil]-5-[(5-fluoro-1,2-dihidro-2-oxo-3H-indol-3iliden)metil]-2,4-dimetil-1H-pirrol-3-carboxamida, en el que el cristal tiene picos de difracción característicos en 13,2 y 24,2 grados dos theta en un patrón de difracción de rayos X de polvo.

   5 2. Cristal según la reivindicación 1, que tiene picos de difracción característicos en 13,2, 19,4, 24,2 y 25,5 grados dos theta en un patrón de difracción de rayos X de polvo.

2. 3.

   Cristal según la reivindicación 2, que tiene picos de difracción característicos en un patrón de difracción de rayos X de polvo según se enumeran en la Tabla 1 para la Forma Cristalina I.

3. 4.

   Cristal según la reivindicación 1, que comprende además como máximo aproximadamente el 2% en peso de agua.

   10 5. Cristal según la reivindicación 4, que comprende como máximo aproximadamente el 0,5 % en peso de agua.

4. 6.

   Cristal según la reivindicación 5 que comprende como máximo aproximadamente el 0,2 % en peso de agua.

5. 7.

   Cristal según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, que tiene un punto de fusión de 196°C, medido mediante calorimetría diferencial de barrido.

6. 8.

   Una composición farmacéutica que comprende un cristal según se ha definido en cualquiera de las reivindicaciones 15 1 a 7.

7. 9.

   Composición farmacéutica según la reivindicación 8, que comprende además un excipiente farmacéuticamente aceptable.

8. 10.

   Cristal según se ha definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, para su uso en el tratamiento de un tumor.

9. 11.

   Cristal según la reivindicación 10, para su uso en combinación con otro agente quimioterapéutico. 20