PT1298132E

PT1298132E - Sais de adição de ácido derivados de hidropiridina

Info

Publication number: PT1298132E
Application number: PT01945799T
Authority: PT
Inventors: Fumitoshi Asai; Taketoshi Ogawa; Hideo Naganuma; Naotoshi Yamamura; Teruhiko Inoue; Kazuyoshi Nakamura
Original assignee: Sankyo Co; Ube Industries
Priority date: 2000-07-06
Filing date: 2001-07-03
Publication date: 2007-01-31
Also published as: DK1728794T3; EP1298132A4; DK1298132T3; KR20030014294A; IL153546A; HUP0301645A2; HUP1100350A2; NO328651B1; US20030134872A1; DE60134508D1; CY1107554T1; AU6791601A; KR20080021152A; CY1110395T1; KR20120062906A; EP1728794A1; CN1452624A; CA2415558A1; TWI290927B; AU2001267916B2

Description

ΡΕ1298132 1 DESCRIÇÃO "SAIS DE ADIÇÃO DE ÁCIDO DERIVADOS DE HIDROPIRIDINA" [Campo Técnico da Invenção] A presente invenção diz respeito ao sal de adição de hidrocloreto de 2-acetoxi-5- (oí-ciclopropilcarbonil-2--fluorobenzil)-4,5,6,7-tetra-hidrotieno[3,2-c]piridina o qual exibe excelente absorção oral, metabolização no composto activo e actividade na inibição da agregação de plaquetas, e é útil como agente terapêutico ou profiláctico para doenças induzidas pela formação de trombo ou induzidas por embolização.

[Antecedentes da Invenção]

Na EP-542411 (Publicação do Pedido de Patente Japonesa N° Hei 6-411239) está descrito que 2-acetoxi-5--(a-ciclopropilcarbonil-2-fluorobenzil)-4,5,6,7-tetra-hidrotieno [3, 2-c] piridina e seus derivados, os quais são antagonistas de receptores de adenosina-difosfato (daqui em diante referida como ADP), exibem excelente actividade na inibição da agregação de plaquetas e são úteis como agentes antitrombóticos ou antiembólicos.

[Revelação da Invenção]

Durante muitos anos os inventores têm estudaram 2 ΡΕ1298132 seriamente a actividade farmacológica de vários derivados de hidropiridina de modo a descobrir compostos tendo excelente actividade na inibição da agregação de plaquetas. Os inventores encontraram que o sal de adição de hidro-cloreto de 2-acetoxi-5-(a-ciclopropilcarbonil-2-fluo-robenzil)-4,5,6,7-tetra-hidrotieno[3,2-c]piridina exibe excelente absorção oral, metabolização no composto activo, actividade na inibição da agregação de plaquetas, baixa toxicidade e excelentes estabilidades no armazenamento e manuseamento, e é útil como medicamento (preferivelmente útil como agente terapêutico ou profiláctico (preferivelmente agente terapêutico)) para doenças induzidas pela formação de trombo ou induzidas por embolização (preferivelmente trombose ou embolismo). A presente invenção proporciona o sal de adição de hidrocloreto de 2-acetoxi-5-(a-ciclopropilcarbonil-2--fluorobenzil)-4,5,6,7-tetra-hidrotieno[3,2-c]piridina, o qual exibe excelente actividade na inibição da agregação de plaquetas; processos para a sua preparação; e medicamentos que o contêm os quais são agentes terapêuticos ou profilácticos úteis (preferivelmente terapêuticos) para doenças induzidas pela formação de trombo ou induzidas por embolização, e são preferivelmente agentes terapêuticos ou profilácticos úteis (preferivelmente terapêuticos) para trombose ou embolismo.

[Descrição da Invenção] A presente invenção diz respeito ao sal de adição 3 ΡΕ1298132 hidrocloreto de 2-acetoxi-5-(a-ciclopropilcarbonil-2-fluo-robenzil)-4,5,6,7-tetra-hidrotieno[3,2-c]piridina e diz respeito a medicamentos que contêm o sal de adição de hidrocloreto de 2-acetoxi-5-(a-ciclopropilcarbonil-2-fluoro-benzil)-4,5,6,7-tetra-hidrotieno[3,2-c]piridina como ingrediente activo. 0 hidrocloreto de 2-acetoxi-5-(a-ciclopropil-carbonil-2-fluorobenzil)-4,5,6,7-tetra-hidrotieno[3,2-c]-piridina da presente invenção tem a seguinte fórmula:

0 sal de adição de hidrocloreto de 2-acetoxi-5- - (a-ciclopropilcarbonil-2-fluorobenzil)-4,5,6,7-tetra-hi-drotieno[3,2-c]piridina tem um carbono assimétrico na molécula e podem existir dois isómeros tendo configurações R e S. A presente invenção abrange os isómeros individuais e misturas destes isómeros em proporções opcionais. Um isómero opticamente activo de hidrocloreto de 2-acetoxi-5- - (a-ciclopropilcarbonil-2-fluorobenzil)-4,5, 6, 7-tetra-hidrotieno [3, 2-c] piridina da presente invenção pode ser preparado usando um material de partida opticamente activo ou é isolado a partir de uma mistura racémica de hidrocloreto de 2-acetoxi-5-(a-ciclopropilcarbonil-2-fluorobenzil) -4,5,6,7-tetra-hidrotieno[3,2-c]piridina preparada sinteticamente por uma resolução óptica convencional. 4 ΡΕ1298132

Nalguns casos, quando o sal de adição de hidro-cloreto de 2-acetoxi-5-(a-ciclopropilcarbonil-2-fluoroben-zil)-4,5,6,7-tetra-hidrotieno[3,2-c]piridina é deixado em repouso em contacto com a atmosfera ou é recristalizado, ele pode absorver água ou pode captar água para formar um hidrato. A presente invenção abrange estes hidratos. 0 sal de adição de hidrocloreto de 2-acetoxi-5- - (oí-ciclopropilcarbonil-2-fluorobenzil) -4,5, 6, 7-tetra-hidrotieno [3, 2-c] piridina é preparado na presença ou ausência de um solvente inerte (preferivelmente num solvente inerte) por adição de 2-acetoxi-5-(a-ciclopropilcarbonil-2-fluorobenzil )-4,5,6,7-tetra-hidrotieno[3,2-c]piridina, a qual é sintetizada pelo método descrito na EP-542411, ao ácido (preferivelmente ácido clorídrico ou cloreto de hidrogénio (gás); mais preferivelmente ácido clorídrico concentrado); ou na presença ou ausência de um solvente inerte (preferivelmente num solvente inerte) por adição gota a gota ou adição do ácido (preferivelmente ácido clorídrico ou cloreto de hidrogénio (gás); mais preferivelmente ácido clorídrico concentrado) numa ou mais vezes a 2-acetoxi-5- - (a-ciclopropilcarbonil-2-fluorobenzil)-4,5, 6, 7-tetra-hi-drotieno[3,2-c]piridina. Neste procedimento, se necessário, cristais sementes do referido sal podem ser adicionados. 0 solvente usado na reacção acima não está particularmente restringido com a condição de não ter efeito adverso na reacção e de que possa dissolver o material de 5 ΡΕ1298132 partida em alguma extensão. Exemplos de tais solventes incluem hidrocarbonetos alifáticos tais como hexano, ciclo-hexano, heptano, ligroina ou éter de petróleo; hidrocarbonetos aromáticos tais como benzeno, tolueno ou xileno; hidrocarbonetos halogenados tais como diclorometano, clorofórmio, tetracloreto de carbono, 1,2-dicloroetano, cloro-benzeno ou diclorobenzeno; derivados de éter tais como éter dietilico, éter diisopropílico, tetra-hidrofurano, dioxano, dimetoxietano ou éter di(etilenoglicol)dimetílico; derivados de cetona tais como acetona, cetona etílica e metílica ou cetona dietílica; derivados de éster tais como acetato de etilo, acetato de propilo ou acetato de butilo; derivados de ácido carboxílico tais como ácido acético ou ácido propiónico; ou derivados de nitrilo tais como acetonitrilo ou propionitrilo. Os solventes preferidos são derivados de éter, derivados de cetona, derivados de éster, derivados de ácido carboxílico ou derivados de nitrilo; os solventes mais preferidos são tetra-hidrofurano, dioxano, acetona, cetona etílica e metílica, acetato de etilo, ácido acético ou acetonitrilo; solventes ainda mais preferidos são tetra-hidrofurano, dioxano, ácido acético ou acetona. A acetona é a mais preferida. A temperatura de reacção variará dependendo do reagente, solvente e semelhantes, e usualmente é desde -20 °C até 100 °C, preferivelmente desde 0 °C a 70 °C, mais preferivelmente desde 30 °C a 60 °C e sendo o mais preferível desde 40 °C a 55 °C. 6 ΡΕ1298132 0 tempo de reacção variará dependendo do reagente, solvente, temperatura de reacção e semelhantes, e usualmente é desde 5 minutos até 10 horas, preferivelmente de 10 minutos a 5 horas. A reacção é preferivelmente realizada por adição ou adição gota a gota da quantidade requerida de ácido cloridrico concentrado (usualmente equimolar em relação ao derivado de tienopiridina) a uma solução de 2-acetoxi-5-(a--ciclopropilcarbonil-2-fluorobenzil)-4,5,6,7-tetra-hidro-tieno[3,2-c]piridina em acetona entre 0 °C e 70 °C (preferivelmente entre 35 °C e 60 °C) seguido permanência em repouso à referida temperatura durante 30 minutos a 3 horas.

Mais preferivelmente a reacção é realizada por adição gota a gota de metade da quantidade requerida de ácido cloridrico concentrado (usualmente equimolar em relação ao derivado de tienopiridina) a uma solução do derivado de tienopiridina em acetona entre 35 °C e 60 °C (preferivelmente entre 40 °C e 55 °C) ao longo de desde 2 minutos a 10 minutos, com adição de cristais sementes do sal referido se necessário, seguido por permanência em repouso à referida temperatura durante 30 minutos a 2 horas; e em seguida por outra adição gota a gota da restante quantidade requerida de ácido cloridrico concentrado à mistura reaccional ao longo de desde 30 minutos a 2 horas seguido por permanência em repouso à referida temperatura durante 1 hora a 3 horas. 7 ΡΕ1298132

Após a reacção, o sal de adição de hidrocloreto de 2-acetoxi-5-(a-ciclopropilcarbonil-2-fluorobenzil)-4,5,-6,7-tetra-hidrotieno[3,2-c]piridina pode ser isolado da mistura reaccional por métodos convencionais. Por exemplo, após a reacção, os cristais resultantes são isolados por filtração para produzirem o produto desejado ou o solvente da mistura reaccional é evaporado para produzir o produto desejado. 0 produto, se necessário, pode ser purificado por recristalização, reprecipitação ou cromatografia. 0 sal de adição de hidrocloreto de 2-acetoxi-5--(a-ciclopropilcarbonil-2-fluorobenzil)-4,5,6,7-tetra-hidrotieno [3, 2-c] piridina da presente invenção exibe excelente absorção oral, metabolização no composto activo e actividade na inibição da agregação de plaquetas, e além disso excelentes estabilidades no armazenamento e manuseamento, e é útil como agente profiláctico ou terapêutico (preferivelmente agente terapêutico) para doenças induzidas pela formação de trombo ou induzidas por embolização; mais preferivelmente um agente profiláctico ou terapêutico (preferivelmente agente terapêutico) para trombose ou embolis-mo. Os medicamentos acima descritos são preferivelmente para um animal de sangue quente, mais preferivelmente um humano.

[Aplicabilidade Industrial]

Quando o sal de adição de hidrocloreto de 2-ace- ΡΕ1298132 toxi-5-(a-ciclopropilcarbonil-2-fluorobenzil)-4,5, 6, 7--tetra-hidrotieno[3,2-c]piridina da presente invenção é usado como agente terapêutico ou profiláctico para as doenças conforme acima descrito, ele pode ser administrado isolado ou na forma de uma mistura com excipientes, diluentes e semelhantes farmaceuticamente aceitáveis, em várias formas de dosagem tais como comprimidos, cápsulas, grânulos, pós, xaropes e semelhantes para administração oral; e injecções, supositórios ou semelhante para administração parentérica.

Cada uma das formulações acima pode ser preparada por métodos bem conhecidos usando aditivos para a formulação tais como excipientes, lubrificantes, ligantes, desintegrantes, emulsionantes, estabilizantes, correctores e diluentes.

Exemplos de excipientes incluem excipientes orgânicos, por exemplo derivados de açúcar tais como lactose, sacarose, glucose manitol ou sorbitol; derivados de amido tais como amido de milho, amido de batata, cx-amido ou dextrina; derivados de celulose tais como celulose cristalina; acácia; dextrano; pululano; e excipientes inorgânicos, por exemplo derivados de silicato tais como anidrido de ácido silicico leve, silicato de alumínio sintético, silicato de cálcio ou aluminato metassilicato de magnésio; derivados de fosfato tais como hidrogenofosfato de cálcio; derivados de carbonato tais como carbonato de cálcio; derivados de sulfato tais como sulfato de cálcio; ou semelhantes. 9 ΡΕ1298132

Exemplos de lubrificantes incluem ácido esteárico; derivados estearato de metal tais como estearato de cálcio ou estearato de magnésio; talco; ceras tais como cera de abelhas ou espermacete; ácido bórico; ácido adipico; derivados de sulfato tais como sulfato de sódio; glicol; ácido fumárico; benzoato de sódio; DL-leucina; derivados de sulfato de laurilo tais como sulfato de laurilo e sódio ou sulfato de laurilo e magnésio; derivados de ácido silicico tais como anidrido silicico ou hidrato de ácido silicico; e derivados de amido conforme descritos nos excipientes acima.

Exemplos de ligantes incluem hidroxipropilcelulo-se, hidroxipropilmetilcelulose, polivinilpirrolidona, macrogol (nome registado) ou excipientes conforme descrito nos excipientes acima.

Exemplos de desintegrantes incluem derivados de celulose tais como hidroxipropilcelulose substituída inferior, carboximetilcelulose, carboximetilcelulose cálcica ou carboximetilcelulose sódica de ligação cruzada internamente; amido quimicamente modificado ou derivados de celulose tais como carboximetilamido ou carboximetilamido sódico; polivinilpirrolidina de ligação cruzada; e derivados de amido conforme acima descrito.

Exemplos de emulsionantes incluem argila coloidal tal como bentonite ou «veegum»; hidróxidos de metal tais como hidróxido de magnésio ou hidróxido de alumínio; 10 ΡΕ1298132 tensioactivos aniónicos tais como sulfato de laurilo e sódio ou estearato de cálcio; tensioactivos catiónicos tais como cloreto de benzalcónio; tensioactivos não iónicos tais como polioxietileno-éter alquilico, polioxietileno-ésteres de sorbitano de ácidos gordos ou ésteres de sacarose de ácidos gordos.

Exemplos de estabilizantes incluem derivados de éster de ácido para-hidroxibenzóico tais como metilparabeno ou propilparabeno; derivados de álcool tais como cloro-butanol, álcool benzilico ou álcool fenetilico; cloreto de benzalcónio; derivados de fenol tais como fenol ou cresol; timerosal; ácido desidroacético ou ácido sórbico.

Exemplos de correctores incluem adoçantes, agentes de paladar acre, aromatizantes ou semelhantes gue são convenientemente usados. A dose especifica de um composto da presente invenção será variada de acordo com a severidade dos sintomas, idade e semelhantes do paciente. Para administração oral a quantidade de ingrediente activo numa dosagem unitária pode estar no intervalo de 0,1 mg (preferivelmente 1 mg) a 1000 mg (preferivelmente 500 mg). Uma dose unitária para administração intravenosa pode estar no intervalo de 0,01 mg (preferivelmente 0,1 mg) a 500 mg (preferivelmente 250 mg) de um composto da presente invenção. 11 ΡΕ1298132 A dose unitária pode ser administrada a um adulto humano de 1 a 7 vezes por dia durante um periodo de desde 1 a 7 dias dependendo da severidade dos sintomas do paciente.

[Melhor Modo de Realizar a Invenção]

Os exemplos seguintes, exemplos de referência, exemplos de teste e exemplos de formulação têm a intenção de ilustrar a presente invenção e não têm a intenção de limitar o âmbito e alcance desta invenção.

Exemplo 1

Hidrocloreto de 2-acetoxi-5- (a-ciclopropilcarbonil-2-fluoro-benzil)-4,5,6,7-tetra-hidrotieno[3,2-c]piridina (cristal A) A uma solução de 2-acetoxi-5-(a-ciclopropilcarbo-nil-2-fluorobenzil)-4,5,6,7-tetra-hidrotieno[3,2-c]piridina (10 g) obtida no Exemplo de Referência 1 em acetona (150 mL) foi adicionado gota a gota ácido clorídrico concentrado (36%; 2,71 g) com agitação à temperatura ambiente (25 °C) . Uma pequena quantidade de cristais sementes do produto desejado (cristal A preparado por outro procedimento) foi adicionada à solução e em seguida a mistura foi agitada durante 90 minutos à mesma temperatura. Os cristais resultantes foram separados por filtração e os cristais foram lavados com uma pequena quantidade de acetona e em seguida secos a 50 °C sob pressão reduzida durante 4 horas para dar o composto mencionado em título na forma de cristais brancos (8,1 g, rendimento de 74%) (cristal A). p.f.: 133 °C - 136 °C; 12 ΡΕ1298132 1H—NMR (CDC13) ê i ppm: O 1 CM CD O 99 (1H, m) , 1,05-1,16 (2H, m) , 1,23- -1,34 (1H, m) , 1,84- -1, 95 (1H, m) , 2,26 (3H, s) , 3, 07 -3,23 (2H, m) , 3,57-4,39 (4H, m) , 6, 04 (1H, s), 6,45 (1H , brs) , 7,37 -7,57 (3H, m), 7, 66 -7,75 (1H, m) ; Massa (Cl , m/z) : 374 (M++l) ; IR (KBr) Vmáx cm Γ1: 1762, 1720.

Exemplo 3

Hidrocloreto de 2-acetoxi-5-(a-ciclopropilcarbonil-2-fluoroben-zil)-4,5,6,7-tetra-hidrotieno[3,2-c]piridina (cristal Bl) A uma solução de 2-acetoxi-5-(a-ciclopropilcarbo-nil-2-fluorobenzil)-4,5,6,7-tetra-hidrotieno[3,2-c]piridina (10 g) obtida no Exemplo de Referência 1 em acetona (100 mL) foi adicionado gota a gota ácido clorídrico concentrado (36%; 2,71 g) ao longo de 1 minuto com agitação a 40 °C. A mistura reaccional foi agitada à mesma temperatura durante 60 minutos (os cristais começaram a precipitar após 10 minutos a partir da adição de ácido clorídrico concentrado). Os cristais resultantes foram separados por filtração e os cristais foram lavados com acetona (20 mL) e em seguida secos a 60 °C sob pressão reduzida durante 2 horas para dar o composto mencionado em título na forma de cristais brancos (9,72 g, rendimento de 89%) (cristal Bi) o qual exibe mais excelente estabilidade no armazenamento do que o cristal A. p.f.: 166 °C - 174 °C;

Massa (Cl, m/z): 374 (M++l); IR (KBr) vmáx cm"1: 1758, 1690. 13 ΡΕ1298132

Exemplo 4

Hidrocloreto de 2-acetoxi-5-(a-ciclopropilcarbonil-2-fluoroben-zil)-4,5,6,7-tetra-hidrotieno[3,2-c]piridina (cristal B2) A uma solução de 2-acetoxi-5-(a-ciclopropilcarbo-nil-2-fluorobenzil)-4,5,6,7-tetra-hidrotieno[3,2-c]piridina (50 g) obtida no Exemplo de Referência 1 em acetona (750 mL) foi adicionado gota a gota ácido clorídrico concentrado (36%; 6,78 g) ao longo de 5 minutos com agitação a 40 °C. Cristais de BI (0,1 g) obtidos no Exemplo 3 foram adicionados à mistura reaccional como cristais sementes e a mistura resultante foi agitada à mesma temperatura durante 60 minutos. À mistura resultante foi ainda adicionado gota a gota ácido clorídrico concentrado (36%; 6,10 g) ao longo de 60 minutos e a mistura foi agitada à mesma temperatura durante 120 minutos. Os cristais resultantes foram separados por filtração e os cristais foram lavados com acetona (100 mL) e em seguida secos a 70 °C sob pressão reduzida durante 3 horas para dar o composto mencionado em titulo na forma de cristais brancos (47,8 g, rendimento de 92%) (cristal B2) o qual exibe mais excelente estabilidade no armazenamento do que o cristal BI obtido no Exemplo 3. p.f.: 165 °C - 178 °C;

Massa (Cl, m/z): 374 (M++l); IR (KBr) vmáx cm"1: 1758, 1690. 14 ΡΕ1298132

Exemplo 6

Hidrocloreto de 2-acetoxi-5-(a-ciclopropilcarbonil-2-fluoroben-zil)-4,5,6,7-tetra-hidrotieno[3,2-c]piridina (cristal B2) A uma solução de 2-acetoxi-5-(a-ciclopropilcarbo-nil-2-fluorobenzil)-4,5,6,7-tetra-hidrotieno[3,2-c]piridina (50 g) obtida no Exemplo de Referência 1 em acetona (750 mL) foi adicionado gota a gota ácido clorídrico concentrado (36%; 6,78 g) ao longo de 5 minutos com agitação a 55 °C. Cristais de BI (0,1 g) obtidos no Exemplo 3 foram adicionados à mistura reaccional como cristais sementes e a mistura resultante foi agitada à mesma temperatura durante 60 minutos. À mistura resultante foi ainda adicionado gota a gota ácido clorídrico concentrado (36%; 6,08 g) ao longo de 60 minutos e a mistura foi agitada à mesma temperatura durante 120 minutos. Os cristais resultantes foram separados por filtração e os cristais foram lavados com acetona (100 mL) e em seguida secos a 70 °C sob pressão reduzida durante 3 horas para dar o composto mencionado em título na forma de cristais brancos (46,2 g, rendimento de 89%) (cristal B2). p.f.: 164 °C - 178 °C;

Massa (Cl, m/z): 374 (M++l); IR (KBr) vmáx cm-1: 1758, 1690.

Exemplo de Referência 1 2-Acetoxi-5-(α-ciclopropi1carbonil-2-fluoro-benzil)-4,5,6,7-tetra-hidrotieno[3,2-c]piridina (a) Cetona ciclopropílica e 2-fluorobenzílica A uma suspensão de pó de magnésio (7,2 g) em éter 15 ΡΕ1298132 dietílico anidro (60 mL) foi adicionada uma solução de brometo de 2-fluorobenzilo (30 mL) em éter dietilico (30 mL), em seguida a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura reaccional foi adicionada gota a gota a uma solução de cianeto de ciclopropilo (18,2 mL) em éter dietilico (120 mL) ao longo de 100 minutos. Após agitação durante 30 minutos à temperatura ambiente, a mistura agitada foi aquecida em refluxo durante 1 hora. Após a reacção, a mistura reaccional foi repartida entre acetato de etilo e solução aquosa saturada de cloreto de amónio. A camada de acetato de etilo foi sucessivamente lavada com água, solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, em seguida seca sobre sulfato de sódio anidro e em seguida evaporada sob pressão reduzida. O residuo foi purificado por cromatografia sobre uma coluna de gel de silica usando tolueno como eluente para produzir o produto desejado (23 g contendo solvente) na forma de um liquido amarelo. 1H-NMR (CDC13) δ ppm: 0,82-0, 98 (2H, m) , 1,03-1,17 (2H, m) , 1, 92-2,06 (1H, m) , 3,86 (2H, s) , 7,10-7,30 (4H, m) ;

Massa (Cl, m/z): 179 (M++l). (b) 5-(a-Ciclopropilcarbonil-2-fluorobenzil)-2-oxo- -2,4,5,6,7,7a-hexa-hidrotieno[3,2-c]piridina A uma solução de cetona ciclopropílica e 2-fluo-robenzílica (8,7 g) obtida no Exemplo de Referência 1(a) em tetracloreto de carbono (80 mL) foi adicionada N-bromossuc- 16 ΡΕ1298132 cinimida (9,6 g) e peróxido de benzoílo (0,5 g), em seguida a mistura foi aquecida sob refluxo durante 6 horas. Após reacção, foi adicionado tolueno à mistura reaccional e o sólido resultante foi separado por filtração. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O residuo foi purificado por cromatografia sobre uma coluna de gel de silica usando tolueno como eluente para produzir brometo de a-ci-clopropilcarbonil-2-fluorobenzilo (8,5 g) na forma de um óleo amarelo. A uma solução de brometo de cx-ciclopropilcarbo-nil-2-fluorobenzilo (6,0 g) obtida acima em dimetilformami-da (20 mL) foi adicionado hidrocloreto de 2-oxo-2,4,5, 6,7,7a-hexa-hidrotieno[3,2-c]piridina (4,8 g) , o qual foi preparado de acordo com o método descrito na EP 192535 (Publicação do Pedido de Patente Japonesa N° Sho 61-246186) e carbonato de potássio (7,0 g) . Após agitação da mistura reaccional à temperatura ambiente durante 2 horas, a mistura reaccional foi repartida entre acetato de etilo e água. A camada de acetato de etilo foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, em seguida seca sobre sulfato de magnésio anidro e evaporada sob pressão reduzida. Após purificação do residuo por cromatografia sobre uma coluna de gel de silica usando tolueno/acetato de etilo = 3/1 como eluente, o produto foi cristalizado em éter diisopropilico para produzir o produto desejado (2,6 g, rendimento de 35%) na forma de cristais castanhos pálidos. p.f.: 123 °C - 125 °C; 17 ΡΕ1298132 ΧΗ—NMR (CDC13) δ ppm: 0,75-0, 96 (2Η, m) , 0,99-1,14 (2H, m) , 1,83-2,01 (1H, m) , 2,02-2,17 (1H, m), 2,25-2,45 e 2,47-2, 62 (total 2H, cada um m) , 2,85 e 3,10 (total 2H, cada um d, J=12,0 Hz), 3,88-4,01 e 4,03-4,16 (total 2H, cada um m), 4,85 e 4,89 (total 1H, cada um s) , 6,03 e 6,06 (total 1H, cada um s), 7,10-7,45 (4H, m);

Massa (Cl, m/z): 332 (M++l), 262;

Anál. calca para CisHigFNC^S: C-65,23, H-5,48, N-4,23; encontrado: C-65,09, H-5,55, N-4,20. (c) 2-Acetoxi-5-(a-ciclopropilcarbonil-2-fluoroben-zil)-4,5,6,7-tetra-hidrotieno[3,2-c]piridina A uma solução de 5- (cx-ciclopropilcarbonil-2-fluo-robenzil)-2-oxo-2,4,5,6,7,7a-hexa-hidrotieno[3,2-c]piridina (2,6 g) obtida no Exemplo de Referência 1 (b) numa mistura de dimetilformamida (10 mL) e anidrido acético (5 mL), arrefecida num banho de gelo, foi adicionado hidreto de sódio (dispersão a 60% em óleo mineral; 0,35 g), em seguida a mistura foi agitada à mesma temperatura durante 30 minutos e em seguida à temperatura ambiente durante 3 horas. Após a reacção, a mistura foi extraída com acetato de etilo e o extracto foi lavado com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, em seguida seca sobre sulfato de sódio anidro e concentrada sob pressão reduzida. Após purificação do residuo por cromatografia sobre uma coluna de gel de silica usando tolueno/acetato de etilo = 3/1 como eluente, o produto foi cristalizado em éter diisopropilico para produzir o composto mencionado em titulo (1,88 g, rendimento de 65%) na forma de cristais brancos, p.f.: 120 °C - 122 °C; 18 ΡΕ1298132 ΧΗ—NMR (CDC13) δ ppm: 0,80-0, 95 (2Η, m) , 0,99-1,16 (2H, m) , 2,27 (3H, s) , 2,21-2,34 (1H, m) , 2,70-2, 95 (4H, m) , 3, 47 (1H, d, J=15, 0 Hz), 3,57 (1H, d, CO co N O LO \—1 II •o (1H, s) , 6, 27 (1H, s), 7,10-7,55 (4H, m] > ; IR (KBr) Vmáx cm-1: : 1758, 1704; Mas: sa (Cl , m/z): 374 (M++l), 304;

Anál. calca para C2oH20FN03S: C-64,32, H-5,40, N-3,75; encontrado: C-64,46, H-5,39, N-3,73.

Exemplo de Teste 1

Concentração no plasma de um metabolito em cães

Após administração oral do composto de teste a cães bigles machos (cerca de 10 kg de massa corporal, comprados em Kasho Co., Ltd. e Nippon Nosan Kogyo K. K.), foi medida a concentração no plasma de um metabolito. Ácido (2Z) - [1- [oí-ciclopropilcarbonil-2-fluorobenzil] -4-me-tiotio-3-piperidinilideno]acético (daqui em diante referido por "forma S-metilo") foi usado como metabolito de referência. Esta forma S-metilo é um metabolito principal de 2-acetoxi-5- (cx-ciclopropilcarbonil-2-fluorobenzil) -4,5,- 6.7- tetra-hidrotieno[3,2-c]piridina no plasma humano, do cão ou ratazana. Foi já relatado que a forma S-metilo poderia ser um indice da quantidade de um metabolito activo de 2-acetoxi-5- (cx-ciclopropilcarbonil-2-fluorobenzil) -4,5,- 6.7- tetra-hidrotieno[3,2-c]piridina, porque é formado por um outro metabolismo sucessivo de um metabolito activo [Annu. Rep. Sankyo Res. Lab., 51 (1999)]. 19 ΡΕ1298132

Trinta minutos depois de se alimentar um cão com comida de cão, cada composto de teste (10 mg/kg) enchido numa cápsula de gelatina foi administrado oralmente a cada cão. Três mililitros de amostra de sangue foram drenados com uma seringa tratada com heparina a partir da veia safenosa braquial de cada cão aos 15, 30, 45, 60, 90 e 120 minutos após a administração. Imediatamente depois da recolha da amostra, o sangue completo foi centrifugado para se obter o plasma. As amostras de plasma foram guardadas a -30 °C até à análise. A 0,5 mL de plasma descongelado foram adicionados 0,25 mL de 2-hidroxiacetofenona (1 yg/mL, como substância padrão interna), 0,25 mL de tampão de fosfato de potássio 10 mM (pH 4,5) e 0,5 mL de metanol. A mistura foi agitada a 20 1 3 °C.

Após a adição de 8 mL de mistura álcool isopropi-lico/clorofórmio (1/9), a mistura foi agitada para se extrair a forma S-metilo e a substância padrão interna para a fase do solvente. O extracto foi separado numa fase aquosa e uma fase de solvente usando centrifugação de baixa velocidade (1500 x g, durante 15 minutos). Uma aliquota apropriada da fase de solvente subjacente foi seca até à secura usando gás azoto e foi em seguida redissolvida em 0,25 mL de fase móvel de HPLC. Separadamente, uma quantidade conhecida da forma S-metilo foi adicionada ao plasma de cão de controlo, seguido por extracção semelhante. A curva de calibração foi construida por representação em gráfico da razão das áreas de pico da forma S-metilo e a substância padrão interna no eixo Y contra a correspondente concentração da forma S-metilo no eixo X. A concentração da 20 ΡΕ1298132 forma S-metilo na amostra foi calculada a partir da curva de calibração.

Condições de HPLC:

Coluna: YMC A302 (4,6 x 150 m)

Fase móvel: acetonitrilo/álcool isopropílico/água/ ácido trifluoroacético (10/12/78/0,01) Velocidade de fluxo: 1,0 mL/min Detecção: UV 220 nm Quantidade injectada: 30 yL

Os resultados são mostrados no Quadro 1. Neste quadro, a área sob a curva concentração de plasma - tempo, que é um indice da quantidade produzida in vivo, e a concentração máxima de plasma, que são parâmetros farmaco-cinéticos, são abreviadas para AUC e CmáX, respectivamente. Neste quadro, o termo "hidrocloreto" significa hidrocloreto de 2-acetoxi-5- (a-ciclopropilcarbonil-2-fluorobenzil) - 4,5,6,7-tetra-hidrotieno[3,2-c]piridina obtido no Exemplo 1, enquanto "forma livre" significa 2-acetoxi-5-(a-ciclo-propilcarbonil-2-fluorobenzil) -4,5, 6, 7-tetra-hidrotieno-[3,2-c]piridina.

[Quadro 1]

Parâmetros farmacocinéticos (média ± desvio padrão) da forma S-metilo no plasma após administração oral a cães Composto de teste n AUC (yg*min/mL) Cmáx (yg/mL) Hidrocloreto 4 74,1 ± 25,8 1,09 ± 0,26 Forma livre 3 36,4 ± 08,2 0, 615 ± 0,141 21 ΡΕ1298132

Os resultados indicam os valores não só da AUC mas também da Cmáx são aumentados pela conversão de 2-acetoxi-5- (a-ciclopropilcarbonil-2-fluorobenzil) -4,5, 6, 7--tetra-hidrotieno[3,2-c]piridina ao seu hidrocloreto.

Exemplo de Teste 2

Efeito inibidor sobre a agregação de plaquetas (alimentação)

Para este teste foram usados cães bigles machos (cerca de 10 kg de massa corporal, comprados em Kasho Co., Ltd. e Nippon Nosan Kogyo K. K.). Um grupo foi constituído por 5 ou 6 cães. A agregação de plaquetas foi medida usando um agregómetro de plaquetas automático ("PAM-6C", marca registada; um produto de Mebanix Corporation) de acordo com o método de Born et al. (J. Physiol., 168 (1963) 178) com uma modificação parcial. A cada 2,5 horas e 4,5 horas após a alimentação, 5,4 mL de sangue foram recolhidos da veia cefálica de cada cão usando citrato de sódio (0,6 mL, 3,8% (m/m)) como anti-coagulante. O sangue adicionado de citrato foi centrifugado (240xg, 20 minutos) para separar o plasma rico em plaquetas (daqui em diante referido por PRP) e o plasma pobre em plaquetas (daqui em diante referido por PPP). Depois do número de plaquetas no PRP estar contado por um analisador de hematologia automático ("K-1000", marca registada; um produto de Sysmex Corporation) , foi adicionado PPP para ajustar o número de plaquetas a 3 x 108/mL. PRP (240 yL) dispensado numa cuvete foi colocado no agregómetro de pia- 22 ΡΕ1298132 quetas automático. Após pré-aquecimento (a 37 °C) durante 1 minuto, 10 pL de ADP (concentração final: 20 pL) foi adicionado para provocar a agregação de plaquetas. Durante 10 minutos, a agregação de plaquetas foi determinada para dar o valor de pré-administração.

No dia seguinte, 30 minutos após a alimentação, cada composto de teste cheio numa cápsula de gelatina foi oralmente administrado aos cães. O sangue foi recolhido a cada 2 e 4 horas após a administração. A agregação de plaquetas do PRP foi medida, determinando-se assim a agregação máxima. A inibição (%) da agregação de plaquetas pelo composto de teste foi calculada por comparação com o valor de pré-administração. Os resultados são mostrados no Quadro 2.

No Quadro 2, o termo o termo "hidrocloreto" significa hidrocloreto de 2-acetoxi-5-(a-ciclopropilcarbo-nil-2-fluorobenzil) -4,5,6, 7-tetra-hidrotieno[3,2-c]piridina obtido no Exemplo 1, e "forma livre" significa 2-acetoxi-5-- (a-ciclopropilcarbonil-2-fluorobenzil) -4,5, 6, 7-tetra-hidrotieno [3,2-c]piridina.

[Quadro 2]

Inibição da agregação de plaquetas (média ± desvio padrão) após administração oral a cães

Composto de teste Dose n Inibição (%) da agregação de plaquetas (mg/kg) 2 horas 4 horas Hidrocloreto 0,34 5 49,0 ± 18,7 48,5 ± 18,3 Forma livre 0,3 5 25,8 ± 10,9 28,6 ± 14,2 23 ΡΕ1298132

Os resultados do Teste 2 indicam que o efeito inibidor do hidrocloreto de 2-acetoxi-5-(a-ciclopropilcar-bonil-2-fluorobenzil)-4,5,6,7-tetra-hidrotieno[3,2-c]piri-dina sobre a agregação de plaquetas induzida por ADP é mais forte do que o da 2-acetoxi-5- (a-ciclopropilcarbonil-2-flu-orobenzil)-4,5,6,7-tetra-hidrotieno[3,2-c]piridina, e o hidrocloreto de 2-acetoxi-5- (a-ciclopropilcarbonil-2-fluoro-benzil)-4,5,6,7-tetra-hidrotieno[3,2-c]piridina demonstra actividade farmacológica superior à da 2-acetoxi-5-(a-ci-clopropilcarbonil-2-fluorobenzil) -4,5, 6, 7-tetra-hidrotieno-[3,2-c]piridina.

Exemplo de Formulação 1 Cápsula dura Pó de hidrocloreto de 2-acetoxi-5-(a-ciclopropil-carbonil-2-fluorobenzil) - 4,5, 6,7-tetra-hidrotieno[3,2-c]piridina (50 mg), lactose (128,7 mg), celulose (70 mg) e estearato de magnésio (1,3 mg) são misturados, passados através de um peneiro (60 mesh) e enchidos numa cápsula de gelatina dura (N° 3, 250 mg).

Exemplo de Formulação 2 Comprimido Pó de hidrocloreto de 2-acetoxi-5-(a-ciclopropil-carbonil-2-fluorobenzil) - 4,5, 6,7-tetra-hidrotieno[3,2-c]piridina (50 mg), lactose (124 mg), celulose (25 mg) e ΡΕ1298132 - 24 - estearato de magnésio (1 mg) são misturados e sujeitos a compressão por uma máquina de fazer comprimidos para se produzir um comprimido pesando 200 mg, o qual, se desejado, pode ser revestido.

Lisboa, 4 de Dezembro de 2006

Claims

ΡΕ1298132 1 REIVINDICAÇÕES 1. Hidrocloreto de 2-acetoxi-5-(a-ciclopropil-carbonil-2-fluorobenzil)-4,5,6,7-tetra-hidrotieno[3,2-c]pi-ridina.
2. Um medicamento contendo um sal de acordo com a reivindicação 1 como ingrediente activo.
3. Um medicamento de acordo com a reivindicação 2 em que o referido medicamento é para a prevenção ou tratamento de doenças induzidas pela formação de trombo ou induzidas por embolização num animal de sangue quente.
4. Um medicamento de acordo com a reivindicação 2, em que o referido medicamento é para a prevenção ou tratamento de trombose ou embolismo num humano.
5. Um medicamento de acordo com a reivindicação 2, em que o referido medicamento é para o tratamento de trombose ou embolismo num humano.
6. Uso de um sal de acordo com a reivindicação 1 na preparação de um medicamento para a prevenção ou tratamento de doenças induzidas pela formação de trombo ou induzidas por embolização num animal de sangue quente.
7. Uso de acordo com a reivindicação 6, em que ΡΕ1298132 o referido medicamento é para a prevenção ou tratamento de trombose ou embolismo num humano.
8. Uso de acordo com a reivindicação 6, em que o referido medicamento é para o tratamento de trombose ou embolismo num humano.
9. Um processo para a preparação de hidro-cloreto de 2-acetoxi-5-(a-ciclopropilcarbonil-2-fluoroben-zil)-4,5,6,7-tetra-hidrotieno[3,2-c]piridina, o qual compreende a adição qota a gota de ácido cloridrico concentrado em uma ou mais vezes a uma solução de 2-acetoxi-5- (a-ciclopropilcarbonil-2-fluorobenzil)-4,5,6,7-tetra-hidrotieno [3, 2-c] piridina em acetona, se necessário com a adição de cristais sementes, seguido por reacção da mistura.
10. Um processo para a preparação de hidro-cloreto de 2-acetoxi-5-(a-ciclopropilcarbonil-2-fluorobenzil) -4,5,6,7-tetra-hidrotieno[3,2-c]piridina, o qual compreende a adição gota a gota de metade da quantidade requerida de ácido cloridrico concentrado a uma solução de 2-acetoxi-5-(a-ciclopropilcarbonil-2-fluorobenzil)-4,5,6,7--tetra-hidrotieno[3,2-c]piridina num solvente inerte a temperatura elevada, se necessário com a adição de cristais sementes, outra adição gota a gota da quantidade requerida restante de ácido cloridrico concentrado à referida temperatura, seguido por reacção da mistura à referida temperatura. 3 ΡΕ1298132
11. Um processo para a preparação do referido hidrocloreto de acordo com a reivindicação 10, em que a referida temperatura elevada está no intervalo entre 35 °C e 60 °C.
12. Um processo para a preparação do referido hidrocloreto de acordo com a reivindicação 10, em que a referida temperatura elevada está no intervalo entre 40 °C e 55 °C.
13. Um processo para a preparação do referido hidrocloreto de acordo com qualquer uma das reivindicações 10 a 12, em que o tempo da referida adição gota a gota de metade da quantidade requerida de ácido clorídrico concentrado está no intervalo desde 2 minutos a 10 minutos.
14. Um processo para a preparação do referido hidrocloreto de acordo com a reivindicação 13, em que a seguir à referida adição gota a gota de metade da quantidade requerida de ácido clorídrico concentrado, a mistura é deixada em repouso durante um tempo no intervalo desde 30 minutos a 2 horas.
15. Um processo para a preparação do referido hidrocloreto de acordo com qualquer uma das reivindicações 10 a 14, em que o tempo da referida adição gota a gota da quantidade requerida restante de ácido clorídrico concentrado está no intervalo desde 30 minutos a 2 horas. 4 ΡΕ1298132
16. Um processo para a preparação do referido hidrocloreto de acordo com a reivindicação 15, em que a seguir à referida adição gota a gota da quantidade requerida restante de ácido cloridrico concentrado, a mistura é deixada em repouso durante um tempo no intervalo desde 1 hora a 3 horas. Lisboa, 4 de Dezembro de 2006