NL8001348A - Cefalosporineverbindingen. - Google Patents

Description

,Λ ƒ ƒ ’ % u ....

GLAXO GROUP LIMITED, te Londen, Groot-Brittannie.

Cefalosporineverbindingen.

De uitvinding heeft betrekking op cefalosporineverbindingen die waardevolle antibiotische eigenschappen bezitten.

De cefalosporineverbindingen in deze beschrijving werden vernoemd aan de hand van "cefam" volgens J.A.G.S., 1962, 84, 3400, 5 en de uitdrukking "cefem" heeft betrekking op de basiscefamstruktuur met een dubbele binding.

Cefalosporine antibiotica worden op grote schaal gebruikt bij de behandeling van ziekten die veroorzaakt worden door pathogene bacteriën bij de mens en bij dieren, en zijn in het bijzonder bruik-10 baar voor de behandeling van ziekten die veroorzaakt worden door bacteriën die bestand zijn tegen andere antibiotica zoals penicil-lineverbindingen, en voor de behandeling van voor penicillinegevoelige patiënten. In vele gevallen is het gewenst om een cefalosporine antibioticum te gebruiken dat aktiviteit vertoont tegen zowel gramposi-15 tieve als gramnegatieve microorganismen, en een aanzienlijke hoeveel heid onderzoek is gewijd aan de ontwikkeling van verschillende typen breed spectrum cefalosporine antibiotica.

Zo wordt b.v. in ons Britse octrooischrift 1.399.086 een nieuwe klasse cefalosporine antibiotica beschreven met een 7g-(a-ver-20 etherde oximino)-acylamidogroep, waarin de oximinogroep de syn confi guratie bezit. Deze klasse van antibiotische verbindingen wordt gekenmerkt door hoge antibacteriële werkzaamheid tegen een reeks gram-positieve en gramnegatieve organismen, die gepaard gaat met bijzonder hoge stabiliteit ten opzichte van β-lactamasen die/ïe verschillende 25 gramnegatieve organismen worden, gevormd.

Het ontdekken van deze klasse verbindingen heeft verder onderzoek in hetzelfde gebied gestimuleerd bij pogingen om verbindingen te vinden met verbeterde eigenschappen, b.v, tegen bepaalde klassen 8001348 2 organismen, in het bijzonder gramnegatieve organismen.

In ons Britse octrooischrift 1.1*96.757 worden cefalo- sporine antibiotica beschreven met een 78-acylamidogroep met formule 1,

. A B

waarin R een thienyl of furylgroep is, R en R onafhankelijk zeer 5 verschillend kunnen zijn en b.v. een alkylgroep met 1-1* koolstofatomen kunnen zijn of samen met het koolstofatoom waaraan ze gebonden zijn een cycloalkylideengroep vormen met 3-7 koolstofatomen, en m en n ieder 0 of 1 zijn, zodanig dat de som van m en n gelijk is aan 0 of 1, en deze verbindingen zijn syn isomeren of mengsels van syn en anti 10 isomeren met tenminste 90 % van het syn isomeer. De 3-plaats van het cefalosporinemolekuul kan ongesübstitueerd zijn of êén van een grote verscheidenheid van mogelijke substituenten bevatten. Deze verbindingen zijn gebleken bijzonder goede werking te bezitten tegen gramnegatieve organismen.

15 Bovendien worden in ons Britse octrooischrift 1,522.11*0 cefalosporine antibiotica beschreven met formule 2, waarin een furyl of thienyl-groep is, Rg een alkylgroep met 1-1* koolstofatomen, — een cycloalkylgroep met 3-7 koolstofatomen, een furylmethyl of thienylmethylgroepis, en R^ waterstof of een carbamoyl, carboxy, 20 carboxymethyl, sulfo of methylgroep is, waarbij de verbindingen syn isomeren zijn of voorkomen als een mengsel van syn en antiisomeren met tenminste 90 % van het syn isomeer. Deze verbindingen vertonen hoge antibacteriele werking tegen een ruime groep grampositieve en gramnegatieve organismen. De verbindingen bezitten ook een hoge 25 stabiliteit tegen 5-lactamasen, die gevormd worden door verschillende gramnegatieve organismen, alsmede een goede in vivo stabiliteit.

Andere verbindingen van een dergelijke struktuur zijn uit deze verbindingen ontwikkeld bij verderejpogingen om antibiotica te vinden met een verbeterde breed spectrum antibiotische werking 30 en/of hoge werking tegen gramnegatieve organismen. Dergelijke ontwikkelingen berusten op variaties van niet alleen de 78-acylamidogroepen in bovengenoemde formules, maar ook de invoering van bijzondere groepen op de 3-plaats van het cefalosporinemolekuul. Zo worden b.v. in Belgisch octrooischrift 852.1*27 cefalosporine antibiotische verbindingen 35 beschreven die binnen het kader van ons Britse octrooischrift 1.399*086 8001348 s 3 rallen, en waarin de groep R in formule 1 kan worden verrangen door een grote verscheidenheid verschillende organische groepen, met inbegrip van de 2-aminothiazool-^-yl groep, en het zuurstofatoom in de oximino-groep gebonden is aan een alifatische koolwaterstofgroep, die zelf 5 gesubstitueerd kan zijn, b.v. door een caxboxygroep, In dergelijke verbindingen is de substituent op de 3-plaats een acyloxymethyl, hydroxymethyl, formyl of desgewenst gesubstitueerde heterocyclische thiomethylgroep.

Bovendien beschrijft Belgisch octrooischrift 836.813 10 cefalosporineverbindingen waarin de groep R in formule 1 vervangen kan worden door b.v. een 2-aminothiazol-^-ylgroep en de oximinogroep een hydroximinogroep of een geblokkeerde hydroximinogroep is, b.v. een methoxyiminogroep. In dergelijke verbindingen is de 3-plaats van het cefalosporinemolekuul gesubstitueerd door een methylgroep, 15 die zelf desgewenst gesubstitueerd kan zijn door allerlei verschillende resten van^nucleofiele verbindingen als daarin beschreven, b.v. een pyridiniumgroep, die b.v. gesubstitueerd kan zijn door een carbamoylgroep.

In laatstgenoemd octrooischrift wordt geen antibiotische werking toegeschreven aan dergelijke verbindingen, en deze worden alleen maar 20 vermeld als tussenprodukten voor de bereiding van antibiotica die in genoemd octrooischrift worden beschreven.

Belgisch octrooischrift 853.5^5 beschrijft cefalosporine-antibiotica waarin de 7P-acylamido zijketen in de eerste plaats een 2-(2-aminothiazol-k-yl)-2-(syn)-methox iminoaceetamidogroep is en de 25 substituent op de 3-plaats in grote lijnen op overeenkomstige wijze wordt gedefinieerd als in bovengenoemd Belgisch octrooischrift 836.813. Verbindingen die specifiek als voorbeelden worden genoemd in dit octrooischrift zijn verbindingen waarin de 3-plaats gesubstitueerd is door een pyridiniummethyl of H-carbamoylpyridiniummethylgroep.

30 Er is nu gevonden, dat door een geschikte keuze uit een klein aantal bepaalde groepen op de 7B-plaats in combinatie met ofwel een pyridiniummethyl of een 3- of k-carbamoylpyridiniummethyl-groep op de 3-plaats, cefalosporineverbindingen verkregen kunnen worden met een bijzonder gunstige werking (zoals hieronder nader 35 beschreven) tegen een breed trajekt gewoonlijk voorkomende pathogene 8001348 4 -t organisme.

De uitvinding verschaft cefalosporine antibiotica met formule 3, waarin en R^ onafhankelijk ieder een alkylgroep met 1-4 koolstofatomen (bij voorkeur een rechte keten alkylgroep, dat wil 5 zeggen een methyl, ethyl, n-propyl of n-butylgroep en in het bijzonder een methyl of ethylgroep) zijn of R^ en R^ samen met het koolstofatoom waaraan ze gebonden zijn een cycloalkylideengroep met 3-7 koolstofatomen vormen, met dien verstande, dat R& en R^ niet elk een methyl-groep voorstellen als R^ waterstof voorstelt, bij voorkeur een cyclo-10 alkylideengroep met 3-5 koolstofatomen, en R^ waterstof of een 3- of 4-carbamoylgroep is, alsmede niet giftige zouten en niet giftige metabolisch labiele esters daarvan.

De verbindingen volgens de uitvinding zijn syn isomeren.

De syn isomere vorm wordt gedefinieerd door de configuratie van de groep 15 met de formule 4, waarin R& en R^ de bovenstaande betekenis hebben, ten opzichte van de carbonamidogroep. In deze beschrijving wordt de syn configuratie struktureel aangegeven overeenkomstig formule 5.

Het zal duidelijk zijn, dat omdat de verbindingen volgens de uitvinding geometrische isomeren zijn, enige vermenging met overeen-20 komstig anti-isomeer kan optreden.

De uitvinding heeft ook betrekking op de sulfaten (in het bijzonder de hydraten) van de verbindingen met formule 3. Ook heeft de uitvinding betrekking op zouten of esters van verbindingen met formule 3.

De verbindingen volgens de uitvinding kunnen voorkomen in 25 tautomere vormen (b.v. ten opzichte van de 2-aminothiazolylgroep) en het zal duidelijk zijn, dat dergelijke tautomere vormen, b.v. de 2-iminothia-zolinylvorm, eveneens binnen het kader van de uitvinding vallen. Bovendien kunnen de verbindingen met formule 3 eveneens voorkomen in alternatieve zwitterionvorm, b.v. waarin de 4-carboxygroep geprotoneerd is 30 en de carboxygroep in de 7-zijketen gedeprotoneerd is, en deze alterna tieve vormen vallen eveneens binnen het kader van de uitvinding.

Het zal ook duidelijk zijn, dat wanneer R^· en R^ in de genoemde formule verschillende alkylgroepen met 1-4 koolstofatomen zijn, het koolstof waaraan ze gebonden zijn een asymmetriecentrum vormt.

35 Dërgelijke verbindingen zijn diastereoisomeer en de uitvinding omvat 8001348 * 5 afzonderlijke diastereoisomeren van deze verbindingen alsmede mengsels daarvan.

De verbindingen volgens de uitvinding vertonen breed spectrum antibiotische werking. De werking tegen gramnegatieve organismen 5 is ook enorm groot. Deze grote werking zet zich uit over vele jS-lactamasevormende gramnegatieve stammen. De verbindingen bezitten ook hoge stabiliteit tegen S-lactamasen die gevormd worden door een reeks gramnegatieve organismen.

Gevonden is dat verbindingen volgens de uitvinding 10 ongewoon hoge werking vertonen tegen stammen van Pseudomonas organismen, b.v. stammen van Pseudomonas aeruginosa alsmede een hoge werking tegen verschillende leden van de Enterobacteriaceae (b.v. stammen van Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Salmonella typhimurium,

Shigella sonnei, Enterobacter cloacae, Serratia marcescens.Providence 15 soorten, Proteus mirabilis en in het bijzonder indooïpositieve

Proteus organismen, zoals Proteus vul-garis en Proteus morganii) en stammen van Haemophilus influenzae.

De antibiotische eigenschappen van de verbindingen volgens de uitvinding onderscheiden zich in zeer gunstige zin van die 20 van de aminoglucosiden zoals amikacine of gentamiciné. In het bijzonder geldt dit voor hun werkzaamheid tegen stammen van verschillende Pseudomonas organismen, die niet gevoelig zijn voor het grootste deel van de bestaande in de handel verkrijgbare antibiotische verbindingen.

Anders dan de aminoglycosiden vertonen cefalosporineantibiotica 25 in het algemeen geringe giftigheid bij de mens. Het gebruik van aminoglycosiden voor therapie bij de mens'wordt- veelal beperkt of gecompliceerd door de grote giftigheid van deze antibiotica. De cefalosporineantibiotica volgens de uitvinding vertonen derhalve potentieel grote voordelen ten opzichte van de aminoglycosiden.

30 Niet giftige zouten die gevormd kunnen worden bij reaktie van een of beide carboxygroepen die in de verbindingen volgens formule 3 aanwezig zijn, zijn zouten van anorganische basen, zoals alkalimetaalzouten (b.v. natrium of kaliumzouten) en aardalkalimetaal-zouten (b.v. calciumzouten); aminozure zouten (b.v. lysine en arginine- , 35 zouten ); zouten van organische basen (b.v. procaine, fenylethylbenzyl- 8001348 6 amine,dibenzylethyleendiamine, ethanolamine, diethanolamine en N-methyl-glucosaminezouten). Andere niet giftigezoutderivaten zijn zuuradditie-zouten, b.v. gevormd met zoutzuur, broomwaterstofzuur, zwavelzuur, salpeterzuur, fosforzuur, mierezuur of trifluorazijnzuur, De zouten 5 kunnen ook in de vorm zijn van resinaten, die b.v, gevormd zijn met een - polystyreenhars of verknoopt polystyreendivinylbenzeencopolymeerhars die amino of kwaternaire aminogroepen of sulfonzuurgroepen bevat, of met een hars die carboxygroepen bevat, b.v, met polyacrylzuurhars.

Oplosbare· zouten van basen (b.v. alkalimetaalzouten zoals natriumzout) 10 van verbindingen met formule 3 kunnen worden gebruikt voor therapeutische toepassingen wegens de snelle verdding van dergelijke zouten in het lichaam bij toediening. Wanneer echter onoplosbare zouten van de verbindingen met formule 3 gewenst zijn voor een bepaalde toepassing, b.v. voor gebruik in depotpreparaten, kunnen deze zouten op gebruikelijke wijze 15 worden gevormd, b.v. met geschikte organische aminen. .

t, Deze en andere zoutderivaten zeals de zouten met tolueen-p-sulfonzuur en methaansulfonzuur, kunnen worden gebruikt als tussen-— produkten bij de bereiding en/of zuivering vands verbindingen met formule 3, b.v. bij de hieronder beschreven werkwijzen.

20 Niet giftige metabolisch labiele esterderivaten, die gevorndkunnen worden door verestering van een van beide of beide carboxygroepen in de moederverbinding met formule 3, behoren acyloxyalkyl-esters, b.v. korte keten alkanoyloxymethyl of -ethylesters, zoals acetoxy-methyl of -ethyl of pivaloyloxymethylesters. Naast de boven-25 genoemde esterderivaten heeft de uitvinding ook betrekking op verbindingen met formule 3 in de vorm van andere fysiologisch aanvaardbare equivalenten, d.w.z. fysiologisch aanvaardbare verbindingen die, net als de metabolisch labiele esters, in vivo worden omgezet in de antibiotische moederverbinding met formule 3.' . 30 Een voorkeursgroep verbindingen volgens de uitvinding wegens een hoge antibiotische aktiviteit zijn de verbindingen met formule 3, waarin R^ waterstof is, d.w.z, verbindingen met formule 3a, waarin Ra en R^ de bovenstaande betekenis hebben, alsmede de niet giftige zouten en niet giftige metabolisch labiele esters daarvan.

35 Een bijzondere verbinding met formule 3a is (6r,7R)- 8 Ö 0 13 4 8 * 7 7-/”(2)-2-( 2-aminothiazol-i+-yl)-2-(2-carboxyprop-2-ox>'imino)aceetamido7-3-(1 -pyridiniummethyl) -cef-3-em-^-carboxylaat met formule 313, alsmede de niet giftige zouten (b.v. het natriuazout) en niet giftige metabolisch labiele esters daarran. De verbindingen met formule 3b bezitten ,-in uitstekende mate de algemene antibiotische eigenschappen als hierboven uiteengezet voor de verbindingen met formule 3. Zijn uitstekende werking tegen stammen van Pseudomonas organismen kan echter worden onderstreept.

De verbinding heeft uitstekende antibacteriële eigenschappen, die niet belemmerd worden door menselijk serum en bovendien is de uitwerking van verhoogde inocula tegen de verbinding gering. De verbinding is zo bactericide in concentraties die dicht leven bij de minimum afremmende concentratie. Hij wordt goed verdeeld in de lichamen van de kleine knaagdieren en verschaft bruikbare therapeutische gehalten na subcutane injektie. Bij primaten levert de verbinding een hoog en lang aanhoudend serumgehalte na intramusculaire injektie. De serum halfwaarde hij primaten duidt op dp waarschijnlijkheid van betrekkelijk lange halfwaarde bij de mens, met de mogelijkheid dat minder veelvuldige doseringen nodig zijn -voor minder ernstige infek-ties. Experimentele infektiesbij muizen met gramnegatieve bacteriën werden met goed gevolg behandeld met gebruikmaking van de verbinding en in het bijzonder werd uitstekende bescherming verkregen tegen stammen van Pseudomonas aeruginosa, een organisme dat gewoonlijk niet gevoelig is voor behandeling met cefalosporine antibiotica. Deze bescherming was vergelijkbaar met de behandeling met een aminoglycoside zoals amikacine. Acute giftigheids-proeven met de verbinding hij muizen leverde LD<-q waarden van meer dan 1,0 g/kg. Er werd geen nefrotoxiciteit hij ratten waargenomen in doses van 2,0 g/kg.

, Een andere verbinding met niet sterk afwijkende eigen schappen als de verbinding met formule 3b is (6r,7R)-7-/”(Z)-2-(2-amino-2Q thiazol-U-yl)-2-(1-carboxycyclobut~1-oximino)aceetamido7-3-(1-pyridinium-methyl)-cef-3-em-^-carboxylaat, tezamen met de niet giftige zouten en niet giftige metabolisch labiele esters daarvan. Andere voorbeelden van voorkeursverbindingen volgens de uitvinding zijn de onderstaande verbindingen met formule 3 en de niet giftige zouten en niet giftige y. metabolisch labiele esters daarvan, n.l.

8001348 8 (6R,7R)-7-/ (Z)-2-(2-aminothiazol-U-yl)-2-(2-carboxyprop-2-oximino)aceetamido7-3-(^-carbamoyl-1-pyridiniummethyl)-cef-3-em-4-carboxylaat; (6R,7R)-7-/*"(Z)-2-(2-aminothiazol-^-yl)-2-(1-carboxy-cycloprop-1-oximino)aceetamido7-3-(1-pyridiniummethyl)-c ef-3-era-^-carboxy-laat; (ÖR,7R)-7-/”(Z)-2-(2-aminothiazol-^-yl)-2-(1-carboxy- am cyclopent-1-yloximino)aceetamido7-3-( 1 -pyridiniummethyl )-cef-3-em-k-carboxy-laat; en ( 6r , 7R) -7-/” (Z) -2- (2-aminothiazol-it-yl) -2- (1 -carboxy-cyclobut-1-oximino)aceetamido7-3-(^-carbamoyl-1-pyridiniummethyl)-cef-3-ea-^-carboxylaat.

Andere verbindingen volgens de uitvinding zijn b.v. de verbindingen waarin de groepen R&, R^ en R^ in formule 3 de volgende betekenis hebben: . ” \\ \ a) Alkylgroepen

-ch3 -c2h5 H

-c2n5 -c2h5 -CH3 -CH3 3-C0NH2 -c2h5 -c2h5 -CH3 ” U-CONH^

p TT H W

C2H5 R--C -R. Rk a 4 b _h_ b) cycloalkylideengroepen cyclobutylideen 3-CONH,, cyclopentylideen 3-CONIt, " U-CONHg

cyclohexylideen H

" 3-C0NH2 " U-conh2 cyclopropylideen 3-C0NHp

_ " 4-CONH

8001348 2 9

De verbindingen met formule 3 kunnen vorden gebruikt voor de behandeling van een grote verscheidenheid van ziekten die veroorzaakt worden door pathogene bacteriën bij mensen en dieren, zoals ademhalingskanaalinfekties en urinewegeninfekties.

5 De uitvinding heeft tevens betrekking op een werkwijze voor de bereiding van een antibiotische verbinding met formule 3 zoals hierboven beschreven of een niet giftig zout of niet giftig metabolisch labiele ester daarvan, doordat men (a) een verbinding met formule 6, waarin R^ de bovenstaande betekenis heeft; B een groep >S of >S —* 0 (a- of (5-) 10 is, en de stippellijn die de 2-, 3- en k-plaats verbindt aangeeft dat de verbinding een cef-2-em of cef-3-em verbinding is, of een zout, b.v. een zuuradditiezout (gevormd met b.v. eea mineraal zuur, zoals zoutzuur, broomwaterstofzuur, zwavelzuur, salpeterzuur of fosforzuur of een organisch zuur, zoals methaansulfonzuur of tolueen-p-sulfonzuur) -of een N-silyl-15 derivaat daarvan, of een overeenkomstige verbinding met een groep met de formules ~p00R^ op de i+-plaats, waarin waterstof of een carboxy-blokkerende groep is, b.v, een rest van een estervormende alifatische of aralifatische alkohol of een estervormend fenol, silanol of stannanol, waarbij de alkohol, het fenol, silanol of stannanol bij voorkeur 1-20 20 koolstofatomen bevatten) en met een bijbehorend anion A omvat, zoals een halogenide, b.v. chloride of bromide, of trifluoracetaation, laat reageren met een zuur met formule 7» waarin R& en de bovenstaande betekenis hebben, Rg een carboxyblokkerende groep is, b.v. zoals beschreven voor R^ en R^ een amino of beschermde aminogroep is, of met een 25 daarmee overeenkomend acyleringsmiddel; of (b) een verbinding met formule 8, waarin R&} R^, R^, B en de stippellijn de bovenstaande betekenis hebben, Rg en R8a onafhankelijk waterstof of een carboxy beschermende groep zijn, en X een aanvaardbare rest is van een nucleofiel, b.v. een acetoxy of dichlooracetoxygroep of een halogeenatoom, 30 zoals chloor, broom of jood, of een zout daarvan, laat reageren met een verbinding met de formule 9, waarin R^ de bovenstaande betekenis heeft, waarna zonodig en/of desgewenst in elk van de gevallen een willekeurige van de volgende reakties, in iedere geschikte volgorde, worden uitgevoerd: * 2 3 35 i) omzetting van een Δ -isomeer in het gewenste Δ -iso- 8001348 10 meer, ii) reductie van een verbinding waarin B een groep S -> 0 is, tot een verbinding waarin B een groep > S is, iii) omzetting van een carboxygroep in een niet giftig 5 zout of niet giftige metabolisch labiele estergroep, en iv) verwijdering van eventue-le carboxyblokkerende en/of N-beschermende groepen.

In de hierboven beschreven werkwijze (a) is het uitgangs-materiaal met formule 6 bij voorkeur een verbinding waarin B / groep >S 10 is en de stippellijn een cef-3-em verbinding weergeeft.Een dergelijk uitgangsmateriaal dat bijzonder geschikt is gebleken om te worden gebruikt bij werkwijze (a) is 5-(7-811110006^3-6111-3-7111^1171^3^^1^1111-^-carboxylaat dihydrochloride wegens de hoge zuiverheid waarin deze verbinding kan worden bereid.

15 Acyleringsmiddelen die gebruikt kunnen worden bij de bereiding yan verbindingen met formule 3 zijn zuurhalogeniden, in het bijzonder zuurchloriden of zuurbromiden. Dergelijke acyleringsmiddelen ” kunnen worden bereid door een zuur met formule 7 of een zout daarvan te laten reageren met een halogeneringsmiddel, b.v. fosforpentachloride, 20 thionylchloride of oxalylchloride.

Acyleringen waarbij zuurhalogeniden worden gebruikt kunnen worden uitgevoerd in waterige of niet waterige reaktiemedium, gesc Ükt bij een temperatuur in het trajekt van -50°C tot +50°C, bij voorkeur -20°C tot +30°C, desgewenst in aanwezigheid van een zuur-25 bindend middel. Geschikte reaktiemedia zijn waterige ketonen, zoals waterige aceton, esters, zoals ethylacetaat, gehalogeneerde koolwaterstoffen, zoals methyleenchloride, amiden, zoals dimethylaceetamide, nitrilen, zoals acetonitrile, of mengsels van twee of meer dergelijke oplosmiddelen. Geschikte zuurbindende middelen zijn tertiaire aminen 30 (b.v. triethylamine of dimethylaniline), anorganische basen (b.v. calcium- carbonaat of natriumbicarbonaat) en oxiranen, zoals korte keten 1,2-alkyleenoxyden (b.v. ethyleenoxyde of propyleenoxyde) diebalogeen-waterstof, dat bij de acyleringsreaktie vrij komt, binden.

Zuren met formule 7 kunnen als zodanig worden gebruikt 35 als acyleringsmiddelen bij de bereiding van verbindingen met formule 3.

8001348 ^ι£Ζ£Σ*&ΐ£*****τ· ' * *>m* m, - ·»» ¢+ ·& > * ·* — * 11 \

Het is wenselijk om acyleringen waarbij zuren met formule 7 worden gebruikt, uit te voeren in aanwezigheid van een condensatiemiddel, b.v. een carbodiimide, zoals N, N *-dicyclohexylcarbodiimide of N-ethyl-N'-' ‘ γ-dimethylaminopropylcarbodiimide, een carbonylverbinding, zoals carbo- 5 diimidazool, of een isoxazoliumzout, zoals N-ethyl-5-fenylisoxazoliua perchloraat.

Acyleringen kunnen ook worden uitgevoerd met andere amidevormende derivaten van zuren met formule 7, zoals b.v. een geaktiveerde ester, een symmetrisch zuuranhydride of een gemengd zuur-10 anhydride (b.v. gevormd met pivalinezuur of met een halogeenformiaat, zoals een korte keten alkylhalogeenformiaat). Gemengde zuuranhydriden kunnen ook worden gevormd met een fosforzuur (b.v. fosforzuur als zodanigof een fosforig zuur), zwavelzuur of een alifatisch of aromatische sulfonzuur (b.v. tolueen-p-sulfonzuur). Een geaktiveerde ester kan 15 geschikt in situ worden gevormd met behulp van b.v. 1-hydroxybenzotri-azool in a,anwezigheid van een condensatiemiddel zoals hierboven vermeld. In plaats daarvan kan de geaktiveerde ester voorgevormd zijn.

Het is gewenst dat acyleringsreakties waarbij de vrije zuren of hun bovengenoemde amidevormende derivaten worden uitgevoerd 20 in een vatervrij reaktiemedium, b.v. methyleenchloride, tetrahydrofuran, dimethylformamide of acetonitrile.

Desgewenst kunnen de bovengenoemde acyleringsreakties worden uitgevoerd in aanwezigheid van een katalysator, zoals H-dimethyl-aminopyridine.

25 De zuren met formule 7 en acyleringsmiddelen die daarmee overeenkomen kunnen desgewenst worden bereid en gebruikt in de vorm van hun zuuradditiezouten. Zo kunnen b.v. zuurchloriden geschikt worden gebruikt als hun hydrochloridezouten en zuurbromiden als hun hydro-bromidezouten.

30 De pyridineverbinding met formule 9 kan als een nucleo- fiel werken teneinde een grote verscheidenheid van substituenten X te vervangen in het cefalosporine met formule 8. Enige mate houdt het gemak van de vervanging verband met de pK van het zuur HX, waaruit de substituent wordt verkregen. Zo kunnen atomen of groepen X die verkregen 35 zijn uit sterke zuren in het algemeen gemakkelijker worden vervangen 8001348 12 dan atomen of groepen die zijn afgeleid van zwakkere zuren. Het gemak van de vervanging houdt ook enige mate verband met de juiste aard van de substituent R^ -in de verbinding met formule 9·

De vervanging van X door de pyridineverbinding met 5 formule 9 kan geschikt worden bewerkstelligd door de reaktiedeelnemers in oplossing of suspensie te houden. De reaktie wordt geschikt uitgevoerd met gebruikmaking van 1-10 mol van de pyridineverbinding.

Nucleofiele vervangingsreakties kunnen geschikt worden uitgevoerd met die verbindingen met formule 8, waarin de substituent X 10 een halogeenatoom of een acyloxygroep is, b.v. zoals hieronder besproken.

Acyloxygroepen

Verbindingen met formule 8, waarin X een acetoxygroep is, zijn geschikte uitgangsmaterialen ten gebruike bij de nucleofiele vervangingsreaktie met de pyridineverbinding met formule 9. Andere 15 uitgangsmaterialen in deze klasse zijn verbindingen met formule 8, waarin X de rest is van een gesubstitueerd azijnzuur, b.v. chloor-azijnzuur,i’ di chloor azijnzuur of tri fluor azijnzuur.

Vervangingsreakties in de verbindingen met formule 8 die X substituenten van deze klasse bevatten, in het bijzonder in het 20 geval dat X een acetoxygroep is, kunnen worden vergemakkelijkt door de aanwezigheid in het reaktiemedium van jodide of thioxyanaationen.

Reakties van dit type werden nader beschreven in de Britse octrooi-schriften 1.132.621 en 1.171.603.

De substituent X kan ook zijn afgeleid van mierezuur, 25 een halogeenmierezuur, zoals chloormierezuur, of een carbaminezuur.

Bij gebruik van een verbinding met formule 8, waarin X een acetoxy of gesubstitueerde acetoxygroep is, is het in het algemeen gewenst, dat de groep Rg in de verbinding met formule 8 een waterstofatoom is en dat B een groep> S is. In dat geval wordt de reaktie met 30 goed gevolg uitgevoerd in een waterig medium, bij voorkeur bij een pH van 5 - 8, in het bijzonder 5,5-7.

De hierboven beschreven werkwijze waarbij verbindingen met formule 8 worden gebruikt, waarin X de rest is van een gesubstitueerd azijnzuur, kunnen worden uitgevoerd op de wijze als beschreven 35 in Brits octrooischrift 1.2kl.657.

β 0 Ö 13 4 8 13

Bij gebruik van verbindingen met formule 8, waarin X een acetoxygroep is, wordt de reaktie geschikt uitgevoerd bij een temperatuur van 30 - 110°C, bij voorkeur 50 - 80°C.

Halogenen 5 Verbindingen met formule 8, waarin X een chloor, broom of joodatoom is, kunnen ook geschikt worden gebruikt alsiitgangs-materialen bij de nucleofiele verdringingsreaktie met de pyridine-verbinding met formule 9. Bij gebruik van verbindingen met formule 8 in deze klasse kan B een groep >S —> 0 zijn en Rg kan een carboxy-10 blokkeringsgroep zijn. De reaktie wordt geschikt uitgevoerd in een niet waterig medium, dat bij voorkeur bestaat uit één of meer organische oplosmiddelen, bij voorkeur van polaire aard, zoals ethers, b.v. dioxan of tetrahydrofuran, esters, b.v. ethylacetaat, amiden, b.v. formamide of Ν,Ν-dimethylformamide of ketonen, b.v, aceton. In bepaalde gevallen -15 kan de pyridineverbinding zelf het oplosmiddel zijn. Andere geschikte , organisch^, oplosmiddelen worden nader beschreven in Brits octrooischrift 1.326,531. Het reaktiemedium dient noch bijzonder zuur noch bijzonder basisch te zijn. In het geval dat de reakties worden uitgevoerd met verbindingen met formule 8, waarin Rg en Rga carboxyblokkeringsgroepen 20 zijn, wordt het 3-pyridiniummethylprodukt gevormd als het overeenkomstige halogenidezout, dat desgewenst kan worden onderworpen aan één of meer ionenuitwisselingsreakties teneinde een zout te verkrijgen met het gewenste anion.

Bij gebruik van verbindingen met formule 8, waarin X 25 een halogëenatoom is zoals hierboven beschreven, werd de reaktie geschikt uitgevoerd bij een temperatuur van -10°C tot +50°C, bij voorkeur 10-30°C.

Het reaktieprodukt kan uit het reaktiemengsel, dat b.v. onveranderd cefalosporine uitgangsmateriaal en andere verbindingen 30 bevat, worden afgescheiden volgens verschillende methoden met inbegrip van omkristalliseren, ionoforese, kol'omchromatografie en het gebruik van ionenuitwisselaars (b.v, door chromatografie op ionenuitwisselings- harsen) of grootcellige harsen.

2 ’ Δ -cefalosporine esterderivaten die verkregen zijn 35 overeenkomstig de werkwijze volgens de uitvinding kunnen worden omgezet 8001348 i } j i 1¾ • 3 I in het overeenkomstige Δ -derivaat b.v. door behandeling van de 2 . .

Δ -ester met een base zoals pyridine of trie thy lamme.

Een cef-2-em reaktieprodukt kan ook worden geoxydeerd, waardoor het overeenkomstige cef-3-em 1-oxyde wordt verkregen, b.v.

5 door reaktie met een perzuur, zoals b.v. perazijnzuur of m-chloorper-benzoëzuur; het verkregen sulfoxyde kan desgewenst daarna worden gereduceerd op de hieronder beschreven wijze waardoor het overeenkomstige cef-3-em sulfide wordt verkregen.

Wanneer een verbinding wordt verkregen waarin B een groep 10 > S —i 0 is, kan deze worden omgezet in het overeenkomstige sulfide, b.v. door reductie van het overeenkomstige acyloxysulfonium of alkoxy-sulfoniumzout, in situ bereid, door reaktie met b.v. acetylchloride in het geval van een acetoxysulfoniumzout, waarbij de reductie wordt uitgevoerd met b.v. natriumdithioniet of met jodide-ion zoals in een 15 oplossing van kaliumjodide in een water mengbaar oplosmiddel, b.v. azijnzuur, aceton, tetrahydrofuran, dioxan, dimethylformamide of dimethylaceetamide. De reaktie kan worden uitgevoerd bij een temperatuur ___ in het trajekt van -20°C tot +50°C.

Metabolisch labiele esterderivaten van de verbindingen 20 met formule 3 kunnen worden bereid door een verbinding met formule 3 of een zoutof beschermd derivaat daarvan te laten reageren met een geschikt veresteringsmiddel, zoals een acyloxyalkylhalogenide (b.v. jodide), geschikt in een inert organisch oplosmiddel, zoals dimethylformamide of aceton, indien nodig gevolgd door verwijdering van eventuele beschermings-25 groepen.

Zouten van basen van de verbindingen met formule 3 kunnen worden gevormd door een zuur met formule 3 te laten reageren met een geschikte base. Zo kunnen b.v. natrium of kaliumzouten worden bereid met behulp van het respectieve 2-ethylhexanoaat of vaterstofcarbonaatzout.

30 Zuuradditiezouten kunnen worden bereid door een verbinding met formule 3 of een metabolisch labiele esterderivaat daarvan te laten reageren met het geschikte zuur.

Wanneer een verbinding met formule 3 wordt verkregen als een mengsel van isomeren, kan het syn isomeer worden verkregen, 35 b.v. met gebruikelijke methoden, zoals kristalliseren of chromatografie.

8001348 15

Voor het gebruik als uitgangsmaterialen voor de bereiding van verbindingen met formule 3 volgens de uitvinding vorden bij voorkeur verbindingen met formule 7 en overeenkomstige zuurhalogeniden en zuuranhydriden in hun syn isomere vorm of in de vorm van mengsels 5 van de syn isomeren en de overeenkomstige anti isomeren, waarin tenminste 90 % van het syn isomeer, gebruikt.

Zuren met formule 7 (vooropgesteld dat R& en R^ tezamen met het koolstofatoom waaraan ze gebonden zijn geen cyclopropylideen-groep vormen) kunnen vorden bereid door veretheringian een verbinding 10 roet formule 10, waarin de bovenstaande betekenis heeft en R^ een carboxy blokkeringsgroep vormt, door reaktie met een verbinding met formule 11, waarin Ra en R^ en Rg de bovenstaande betekenis hebben, T halogeen, zoals chloor, broom of jood, sulfaat, of sulfonaat zoals tosylaat, is, gevolgd door vervgdering van de carboxy blokkeringsgroep 15 R^. Scheiding van isomeren kan geschieden hetzij voor of na een dergelijke veretherin^. De veretheringsreaktie wordt in het algemeen uitgevoerd in aanwezigheid van een base, b.v. kaliumcarbonaat of natriumhydride, en wordt bij voorkeur uitgevoerd in een organisch oplosmiddel, b.v. dimethylsulfoxyde, een cyclische ether, zoals tetrahydrofuran of dioxan, 20 of een. N,R-digesubstitueerd amide, zoals dimethylformamide. Onder deze omstandigheden wordt de configuratie van de oximinogroep vrijwel onveranderd gelaten door de veretheringsreaktie. De reaktie dient te worden uitgevoerd in aanwezigheid van een base, wanneer een zuuradditiezout van een verbinding met formule 10 wordt gebruikt. De base dient 25 te worden gebruikt in een voldoende hoeveelheid om het betreffende zuur snel te neutraliseren.

Zuren met formule 7 kunnen ook worden bereid door een verbinding met formule 12, waarin R^ en de bovenstaande betekenis hebben, te laten reageren met een verbinding met formule 13, waarin R , 30 Rjj en Rg de bovenstaande betekenis hebben, gevolgd door verwijdering van de carboxyblokkeringsgroep R^, en indien nodig door scheiding van de syn en anti isomeren.

De laatstgenoemde reaktie is in het bijzonder van toepassing voor de bereiding van zuren met formule 7, waarin R en R

SI D

35 samen met het koolstofatoom waaraan ze gebonden zijn een cyclopropylideen 8001348 16 groep vormen. In dit geval kunnen de betreffende verbindingen met formule 13 op gebruikelijke wijze worden bereid, b.v. door middel van de synthese als beschreven in Belgisch octrooischrift 866Λ22 voor de bereiding van de tert.butylester van 1-aminooxycyclopropaancarbonzuur.

5 De zuren met formule 7 kunnen warden omgezet in de overeenkomstige zuurhalogeniden en zuuranhydriden en zuuradditie-zouten volgens gebruikelijke methoden, b.v. zoals hierboven beschreven.

Wanneer X een halogeen is, d.w.z. chloor, broom of jood, een verbinding met formule 8, kunnen cef-3-em uitgangsverbindingen op 10 gebruikelijke wijze worden bereid, b.v. door halogeneren van een 78-beschermd amino-3-methylcef-3-em-4-carbonzu-re ester 16-oxyde, verwijdering van de 78-beschermingsgroep, acyleren van de verkregen 78-aminoverbinding om de gewenste 78-acylamidogroep te vormen, b.v. op een overeenkomstige wijze als in werkwijze (a) als boven beschreven, 15 gevolgd door reductie van de 1S-oxydegroep tijdens de verdere behandeling. Dit wordt beschreven in Brits octrooischrift 1.326.531· De overeenkomstige I' cef-2-em verbindingen kunnen worden bereid volgens de methode volgens Nederlandse octrooiaanvrage 6.902.013 door reaktie van een 3-methylcef-2-em verbinding met If-broomsuccinimide, waardoor de overeenkomstige 20 3-broommethylcef-2-em verbinding wordt verkregen.

Wanneer X in een verbinding met formule 8 een acetoxy-groep is, kunnen dergelijke utgangsmaterialen worden bereid door b.v.

7-aminocefalosporaanzuur te acyleren, b.v. op overeenkomstige wijze als volgens werkwijze (a) als hierboven beschreven. Verbindingen met 25 formule 8, waarin X een andere acyloxygroep is, kunnen worden bereid door acyleren van de overeenkomstige 3-acetoxymethylverbindingen, die bereid kunnen worden door b.v. de geschikte 3-acetoxymethylverbindingen te hydrolyseren, b.v. zoals beschreven in de Britse octrooischriften 1.U7U.519 en 1.531.212.

30 De uitgangsmaterialen met formule 6 kunnen ook worden bereid op gebruikelijke wijze, b.v. door nucleofiele vervanging van de overeenkomstige 3-acetoxymethylverbinding door de geschikte nucleo-fiel, b.v. zoals beschreven in Brits octrooischrift 1.028.563.

Een verdere methode voor de bereiding van de uitgangs-35 materialen met formule 6 bestaat uit het verwijderen van de beschermings- 8001348 17 groep uit een overeenkomstige beschermde 7fl-aminoverbinding op gebruikelijke wijze, b.v. met gebruikmaking van PCl^.

Het zal duidelijk zijn, dat bij enkele van de hierboven vermelde omzettingen het noodzakelijk kan zijn om een of meer gevoelige 5 groepen in het molekuul van de betreffende verbinding te beschermen om ongewenste nevenreakties te vermijden. Tijdens een van de hierboven genoemde reaktiereeksen kan het b.v. noodzakelijk zijn om de HH^-groep van de aminothiazolylgroep te beschermen, b.v. door trityleren, acyleren (b.v. chlooracetylering), protoneren of een andere gebruikelijke 10 methode. De beschermingsgroep kan daarna worden verwijderd op iedere gebruikelijke wijze, die niet leidt tot afbraak van de gewenste verbinding, b.v, in het geval van een tritylgroep, door gebruik te maken van een desgewenst gehalogeneerd carbonzuur, b.v. azijnzuur, mierezuur, chloorazijnzuur 'of trifluorazijnzuur of door een mineraal zuur te 15 gebruiken, b.v. zoutzuur, of mengsels van dergelijke zuren, bg voorkeur in aanwezigheid van een protisch oplosmiddel, zoals water,, of, in het geval van de chlooracetylgroep, door behandeling met thioureum.

Carboxyblokkeringsgroepen die gebruikt worden bij de bereiding van verbindingen met formule 3 of door de bereiding van 20 benodigde uitgangsmaterialen zijn gewenste groepen, die gemakkelijk kunnen worden afgesplitst in een geschikt stadium van de reaktiereeks, geschikt in de laatste trap. Het kan echter in sommige gevallen geschikt zijn om niet giftige metabolisch labiele carboxyblokkeringsgroepen te gebruiken, zoals acyloxy-methyl of -ethylgroepen (b.v. acetoxymethyl 25 bf -ethyl of pivaloyloxymethyl) en deze in het eindprodukt te behouden om een geschikt esterderivaat te verkrijgen van een verbinding met formule 3.

Geschikte carboxyblokkeringsgroepen zijn uit de stand van de techniek bekend en een opsomming van representatieve geblokkeerde 30 carboxygroepen wordt gegeven in Brits octrooischrift 1.399*086. Bij voorkemp gebruikte geblokkeerde carboxygroepen zijn aryl - korte keten alkoxyearbonylgroepen, zoals p-methoxybenzyloxycarbonyl, p-nitrobenzyl-oxycarbonyl en difenylmethoxycarbonyl, korte keten alkoxycarbonyl-» groepen, zoals tert.butoxycarbonyl, en korte keten halogeenalkoxycarbonyl- 35 groepen, zoals 2,2,2-trichloorethoxycarbonyl. Carboxy blokkeringsgroepen 8001348 I.' - j kunnen vervolgens worden verwijderd volgens iedere geschikte methode die in de literatuur beschreven is; zo kan in vele gevallen b.v. door zuur of base gekatalyseerde hydrolyse worden toegepast, evenals door ! enzymen gekatalyseerde.hydrolyse.

5 De antibiotische verbinding volgens de uitvinding kunnen op iedere geschikte manier worden geformuleerd voor toediening, overeenkomstig aan andere antibiotica en de uitvinding heeft derhalve ook betrekking op farmaceutische preparaten die een antibiotische verbinding volgens de uitvinding bevatten en geschikt is om te worden 10 gebruikt in humane of veterinaire medicijnen. Dergelijke preparaten kunnen voor het gebruik worden verschaft op de gebruikelijke wijze met behulp van alle noodzakelijke farmaceutische dragers of excipienten.

De antibiotische verbindingen volgens de uitvinding kunnen worden geformuleerd per injektie en kunnen worden verschaft in eenheids-15 doseringsvorm in ampullen of in houders voor meervoudige dosering, zonodig met een toegevoegd conserveringsmiddel. De preparaten kunnen ook . »· in de vorm zijn van suspensies, oplossingen of emulsies in olie of — waterige drager, en kunnen formuleringsmiddelen bevatten zoals suspendeer, stabiliseer en/of dispergeermiddelen. In plaats daarvan kan het aktieve 20 bestanddeel in poedervorm zijn om te werden gereconstitueerd met een geschikte drager, b.v. steriel, pyrogeen-vrij water, voor het gebruik.

Desgewenst kunnen dergelijke poederformuleringen een geschikte niet giftige base bevatten teneinde de water oplosbaarheid van het aktieve bestanddeel te verbeteren en/of er voor te zorgen, dat 25 wanneer het poeder gereconstitueerd wordt met water, de pH van de verkregen waterige formulering fysiologisch aanvaardbaar is. In plaats daarvan kan de base aanwezig zijn in het water waarmee het poeder wordt gereconstitueerd. De base kan b.v. een anorganische base zijn zoals natriumcarbonaat, natriumbicarbonaat of natriumacetaat, of een organische 30 base, zoals lysine ei lysineacetaat.

De antibiotische verbindingen kunnen ook worden geformuleerd als zetpillen, b.v. met gebruikelijke zetmeelbasis, zoals cacaoboter of andere glyceriden.

, , . en

Preparaten voor veterinaire medicijn kunnen b.v.

35 geformuleerd vorden als intramammair^preparaten in ofwel langdurig 8001348 19 werkende of snel afgevende vorm.

De preparaten kunnen vanaf 0,1 %, b.v. 0,1-99 ί, aktief materiaal bevatten, afhankelijk van de wijze van toediening.

Wanneer de preparaten bestaan uit doseringseenheden, bevat iedere eenheid 5 . bij voorkeur 50-1500 mg aktief bestanddeel. De dosering zoals die gebruikt wordt voor de behandeling van een volwassen mens ïgt bij voorkeur in het trajekt van 500 - 6000 mg/dag, afhankelijk van de wijze van toediening èn de veelvuldigheid van de toediening. Voor de behandeling van de volwassen mens zijn b.v. gewoonlijk 1000 - 3000 mg/dag bij 10 intraveneuze of intramusculaire toediening voldoende. Voor de behandeling van pseudomonas infekties kunnen hogere dagelijkse doses noodzakelijk zijn,

De antibiotische verbindingen volgens de uitvinding kunnen in combinatie met andere therapeutische middelen worden toegediend, 15 zoals antibiotica, b.v. penicillinen of andere cefalosporinen.

,, De onderstaande voorbeelden dienen ter nadere toelichting van de uitvinding. Daarin zijn alle temperaturen in °C. De uitdrukking "Petrol" heeft betrekking op petroleumether (kpt. Uo - 6o°).

K.a.r. spectra werden bepaald bij 100 MHz. De gehele 20 getallen zijn in overeenstemming met de toekenningen, koppelings- constanten, J, zijn in Hz, de tekens zijn niet vastgesteld; s 3 singulet, d 3 doublet, dd * dubbel doublet, m 3 multiplet en ABq 3 AB kwartet.

Bereidingswijze 1 ethylester van (Z)-2-(2-aminothiazol-^-yl)-2-(hydroxy-25 imino)azijnzuur _

Aan een geroerde en ijsgekoelde oplossing van ethyl-acetoacetaat (292 g) in ijsazijn (296 ml) werd een oplossing toegevoegd voor natriumnitriet (180 g) in water (h-00 ml) met een zodanige snelheid, dat de reaktietemperatuur beneden 10°C werd gehouden. Roeren en koelen 30 werden voortgezet gedurende 30 min., waarna een oplossing van kalium-chloride (l6o g) in water (800 ml) werd toegevoegd. Het verkregen mengsel werd gedurende 1 uur geroerd. De onderste olieachtige fase werd afgescheiden en de waterige fase werd geextraheerd met diethylether.

Het extract werd gecombineerd met de olie, achtereenvolgens gewassen met 3'5 water en verzadigde zoutoplossing, gedroogd en ingedampt. De achter- 8001348 20 blijvende olie, die bij staan vast werd, werd gewassen met Petrol en in vacuum gedroogd boven kaliumhydroxyde waardoor ethyl (Z)-2-(hydroxy- imino)-3-oxobutyraat (309 g) werd verkregen.

Een geroerde en ijsgekoelde oplossing van ethyl (Z)-2-5 (hydroxyimino)-3-oxobutyraat (150 g) in dichloormethaan (1+00 ml) werd druppelsgewijze behandeld met sulfurylchloride (11+0 g). De verkregen oplossing werd 3 dagen op kamertemperatuur gehouden, daarna ingedampt.

Het residu wordt opgelost in diethylether, gewassen met water tot de wassingen vrijwel neutraal waren, gedroogd en ingedampt. De achterblijvende 10 olie (177 g) werd opgelost in ethanol (500 ml) en dimethylaniline (77 ml) en thioureum (1+2 g) werden onder roeren toegevoegd. Ha 2 uur werd het produkt verzameld door filtreren, gewassen met ethanol en gedroogd, waardoor de in de aanhef genoemde verbinding (73 g) met smpt. 188° (ontl.) werd verkregen.

15 Bereidingswijze 2 , (> Ethyl (Z) -2-hydroximino-2-( 2-tritylaminothiazol-l+-yl) - acetaat, hydrochloride

Tritylchloride (16,75 g) werd in gedeelten in een tijdsbestek van 2 uur toegevoegd aan een geroerde en gekoelde (-30°) oplossing 20 van het produkt van bereidingswijze 1 (12,91 g) in dimethylformamide (28 ml) dat triethylamine (8,1+ ml) bevatte. Het mengsel liet men in 1 uur tijd opwarmen tot 15°, roerde nog 2 uur en verdeelde haar daarna tussen water (500 ml) en ethylacetaat (500 ml). De organische fase werd afgescheiden, gewassen met water (2 x 500 ml) en daarna geschud 25 met 1 n HC1 (500 ml). Het neerslag werd verzameld, achtereenvolgens gewassen met water (100 ml), ethylacetaat (200 ml) en ether (200 ml) en in vacuum gedroogd om de in de aanhef genoemde verbinding te verschaffen zoals een witte vaste stof (16,1+ g), smpt. 181+—186° (ontl.). Bereidingswijze 3 30 Ethyl (Z)-2-(2-tert-butoxycarbonylprop-2-oximino)-2-(2- tr ityl-aminothiazol-l+-yl) acetaat_

Kaliumcarbonaat (31+,6 g) en tert.butyl 2-broom-2-methyl-propionaat (2l»,5 g) in dimethylsulfoxyde (25 ml) werden toegevoegd aan een geroerde oplossing om het produkt van bereidingswijze 2 (1+9,1+ g) 35 in dimethylsulfoxyde (200 ml) onder een stikstofdeken en het mengsel 8001348 21 werd 6 uur bij kamertemperatuur geroerd. Het mengsel werd uitgegoten in water (2 1), 10 min. geroerd en afgefiltreerd. De vaste stof werd gewassen met water en opgelost in ethylacetaat (600 ml). De oplossing werd achtereenvolgens gewassen met water, 2n zoutzuur, water en ver-5 zadigde zoutoplossing, gedroogd en ingedaapt, Het residu werd omgekristalliseerd uit petroleumether (kpt.60-80°) waardoor de in de aanhef genoemde verbinding (31* g) met sa^t. 123,5 - 125° werd verkregen.

Bereidingswijze ^ (2)-2-(2-tert.butoxycarbonylprop-2-oximino)-2-(2-trityΙ-ΙΟ aminothiazol-^-yl)azijnzuur

Het produkt van bereidingswijze 3 (2 g) werd opgelost in methanol (20 ml) en 2 n natriumhydroxyde (3,3 ml) werd toegevoegd.

Het mengsel werd 15 uur onder terugvloeien verwarmd en daarna geconcentreerd. Het residu werd opgenomen in een mengsel van water (50 ml), 15 2n zoutzuur (7 ml) en ethylacetaat (50 ml). De organische fa3e werd . afgescheiden en de waterige fase werd geextraheerd met ethylacetaat.

De organische oplossingen werden gecombineerd en achtereenvolgens gewassen met water en verzadigde zoutoplossing, gedroogd en ingedampt.

Het residu werd omgekristalliseerd uit een mengsel van tetrachloor-20 koolstof en petrol waardoor de in de aanhef genoemde verbinding (1 g) met smpt. 152 - 156° (ontl.) werd verkregen.

Bereidingswijze 5

Ethyl (2)-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)-2-(1-tert.- butoxycarbonylcyclobut-1-oximino) acetaat_ 25 Het produkt van bereidingswijze 2 (55,8 g) werd onder een stikstofdeken geroerd in dimethylsulfoxyde (kOO ml) met kalium-carbonaat (fijngemalen, 31,2 g) bij kamertemperatuur. Na 30 min. werd tert.butyl 1-broomcyclobutaan carboxylaat (29,2 g) toegevoegd. Na 8 uur werden nog 31,2 g kaliumcarbonaat toegevoegd. Nog meer kaliumcarbonaat 30 (6x hoeveelheden van 16 g) werden toegevoegd gedurende de volgende 3 dagen en nog meer tert.butyl 1-broomcyclobutaancarboxylaat (3,^5 g) werd na 3 dagen toegevoegd. Na in totaal h dagen werd het mengsel uitgegoten in ijswater (omstreeks 31) en de vaste stof werd verzameld » door filtreren en goed gewassen met water en petrol. De vaste stof 35 werd opgelost in ethylacetaat en de oplossing werd met zoutoplossing 4 .

8001348 22 gewassen (2x), gedroogd met magnesiumsulfaat en ingedampt tot een schuim.

Dit schuim werd opgelost in ethylacetaat-petrol (1:2) en gefiltreerd door.siliciumdioxydegel (500 g). Indampen leverde de in de aanhef genoemde verbinding (60 g) als een schuim, υ (CHBr«) 3U00 (NH) en . max 3 5 1730 cm” (ester).

Bereidingswijze 6 (Z) -2-( 1 -tert. butoxycarbonylcyclobut-1 -oximino) -2- (2- trityl-aminothiazol-l*-yl) azijnzuur

Een mengsel van het produkt van bereidingswijze 5 10 (3,2 g) en kaliumcarbonaat (1,65 g) werd onder terugvloeien verwarmd in methanol (180 ml) en water (20 ml) gedurende 9 uur en het mengsel werd afgekoeld tot kamertemperatuur. Het mengsel werd geconcentreerd » en het residu werd verdeeld tussen ethylacetaat en water, waaraan 2n HC1 (12,2 ml) werd toegevoegd. De organische fase werd afgescheiden en 15 de waterige fase geëxtraheerd met ethylacetaat. De gecombineerde organische extracten werden gewassen met verzadigde zoutoplossing, gedroogd en ingedampt waardoor de in de aanhef genoemde verbinding 1¾ (2,3 g), λ _ (ethanol) 165 nm (E. 2^3) werd verkregen, max 1 cm

Bereidingswi.ize 7 29 (Z)-2-(1-tert.butoxycarbonylcycloprop-1-oximino)-2- (2-trityl-aminothiazol-l*-yl )azi.jnzuur Een oplossing van hydrazinehydraat (0,20 g) in methanol (0,¾ ml) werd toegevoegd aan een oplossing van 1-tert.butoxycarbonylcy cloprop- 1-oxyfthalimide (0,61 g, bereid zoals beschreven in Belgisch 25 octrooischrift 866.1*22) in dichloormethaan (7 ml), Het mengsel werd 1 uur bij kamertemperatuur geroerd en behandeld met 5n waterige ammoniakoplossing (7 ml). De organische fase werd afgescheiden en de waterige fase werd geextraheerd met dichloormethaan. De gecombineerde organische oplossingen werden gewassen met water, gedroogd en ingedampt. 30 Het olieachtige residu (0,30 g) werd opgelost in een mengsel van ether (5 ml) en ethylacetaat (5 ml). 2-tritylaminothiazol-l*-ylglyoxylzuur (0,73 g, bereid zoals beschreven in Belgisch octrooischrift 86¾.828) werd toegevoegd. Het mengsel werd een nacht lang bij kamertemperatuur geroerd en daarna afgefiltreerd. De vaste stof werd gewassen met een 35 weinig ether en in vacuum gedroogd waardoor de in de aanhef genoemde 8001348 23 verbinding (0,5 g), smpt. 156,8 - 157,2°; v (CHBrJ 2300-3500 max ^ «j (0-H, N-H); 1750 (tert.butyl ester); 1690 cm " (zuur) werd verkregen. Bereidingswijze 8

Ethyl (Z)-2-(1-tert.butoxycarbonylcyclopent-1-yloximino)- 5 2-(2-tritylaminothi azol-4-yl)acetaat

Het produkt van bereidingswijze 2 (10 g) werd geroerd met tert.butyl 2-broom-cyclopentaancarboxylaat ( J g) in dimethylsulfoxyde uur t 0 (40 ml) dat kaliumcarbonaat (10 g) bevatte gedurende 21 bij 21 onder een stikstofdeken. Het mengsel werd uitgegoten in ijswater 10 (500 ml) en de grijze vaste stof werd verzameld door filtrering, gewassen met water en lucht droog gemaakt. Omkristalliseren van deze vaste stof uit methanol (500 ml) leverde de in de aanhef genoemde verbinding (11,7 g), smpt. 179-100°, \j (CHBr^) 3410 (NH), 1735 (ester), ^ max j 1275 (ester) en 755 cm" (fenyl).

15 Bereidingswijze 9 (Z )-2-(1-tert.butoxycarbonylcyclopent-1-yloximino)-2- (2-tr itylaminothi azol-4-yl) azijnzuur_

Het produkt van bereidingswijze 8 (625 mg) werd onder terugvloeien verwarmd met 2n natriumhydroxydeoplossing (0,5 ml) en 20 water (1 ml) in methanol (12 ml) gedurende zeven uur. Het mengsel liet men gedurende de nacht afkoelen. Ha verdunnen met water werd ortho- fosforzuur toegevoegd om de oplossing in te stellen op pH =* 2.

Het neerslag werd geextraheerd met ether en de gecombineerde extracten werden gewassen met zoutoplossing. Ha drogen met magnesiumsulfaat werd 25 het oplosmiddel verdampt waardoor een gom werd verkregen (1*93 rag).

Omkristalliseren uit diisopropylether leverde het in de aanhef genoemde verbinding (356 mg), smpt. 171-173°, v (CHBr,) 2500-3500 (OH en HH), max * j 1755 (ester), 1692 (zuur) en 755 en 770 cm"1 (fenyl).

Bereidingswijze 10 30 (6R,7R)-7-amino-3-(1-pyridiniuramethyl)cef-3-em-4-carbon- zuur dihydrochloride (a) Een geroerde suspensie van (6R,7R)-7-(2-thienylaceet-amido)-3-(1-pyridiniummethyl)cef-3-em-4-carboxylaat (4,15 g) in di-chloormethaan (30 ml) werd behandeld met N,H-dimethylaniline (5,09 ml) 35 en chloortrimethylsilaan (2,52 ml). Dit mengsel werd 1 uur bij 30-35° 8001348 24 geroerd en daarna afgekoeld tot -28° en behandeld met fosforpenta-chloride (U,ΐ6 g), nog een uur geroerd bij -25° tot -30° en daarna uitgegoten in een geroerde, gekoelde (-20°) oplossing van butaan-1,3-diol (8,1 ml) en dichloormethaan (20ml). De oplossing liet 5 men in 30 min. op een temperatuur van 0° komen en de neergeslagen vaste stof (A) werd afgefiltreerd, gewassen met dichloormethaan en in vacuum gedroogd. Deze werd opnieuw opgelost in methanol (17,5 ml), geroerd en verdund met dichloormethaan (87,5 ml) en de neergeslagen vaste stof werd afgefiltreerd, gewassen met dichloormethaan en in 10 vacuum gedroogd, waardoor de in de aanhef genoemde verbinding werd verkregen als een witte vaste stof (3,2 g), λ max (pH 6 buffer) 258 nm (e] ^ 318); τ (D-0) waarden zijn o.m. 0,95; 1,32 en 1,84 1 cm c (pyridinium protonen), 4,10 tot 4,46 (ABq, J 16 Hz, S-CHg-), 4,56 (d, J 5 Hz 7-H); 4,70 (d, J 5 Hz, 6-H); 6,14 tot 6,50 (ABq, J 17 Hz, 15 c2-h).

t, (b) Vaste stof (A) zoals bereid in trap (a) hierboven (8 g) werd opgelost in 1 n zoutzuur (25 ral). Toevoegen van isopropanol (95 ml) deed de in de aanhef genoemde verbinding kristallijn neerslaan als een dihydraat (4,95 g). T(Dg0) waarden zijn o.m. 1,02; 1,36 en 20 1,87 (pyridinium protonen); 4,2 + 4,55 (ABq, J * 14Hz, S-CHg-)» 4,62 (d, J * 5Hz, CT-H); 47,4 (d, J - 5Hz, Cg-H); 6,19 + 6,38 (ABq, J - 18Hz, Cg-H), Watergehalte volgens Karl Fischer methode: 9,4 %.

Voorbeeld I

a) tert.butyl ( 6r ,7R)-3-acetoxymethyl-7-Γ(2)-2-(2-tert.

25 butoxy carbonylprop-2-oximino)-2-(2-tritylaminothiazol-4- yl)aceetamido7 cef-3-em-4-carboxylaat___

Een geroerde oplossing van het produkt van bereidingswijze 4 (572 rag) en tert.butyl (6R,7R)-3-acetoxymethyl-7-aminocef-3-em-4-carboxylaat (328 mg) in dimethylformamide (10 ml) werd gekoeld tot 0° 30 en 1-hydroxybenzotriazol (150 rag) werd toegevoegd, gevolgd door dicyclo-hexylcarbodiimide (225 mg). Het mengsel werd op kamertemperatuur verwarmd, 5 uur geroerd en men liet het daarna een nacht lang staan. Het mengsel werd afgefiltreerd en de witte vaste stof werd gewassen met een weinig ether. Het filtraat en de wassingen werden verdund met water (50 ml) 35 en geextraheerd met ethylacetaat. De organische extracten worden 8001348 25 gecombineerd, achtereenvolgens gewassen met water, 2n zoutzuur, water, natriumbicarbonaat oplossing en verza-digde zoutoplossing, gedroogd en ingedampt. Het residu werd geelueerd dooreen silicium-dioxydekolom met ether.. Het produkt bevatte de eluaat werd verzameld 5 en geconcentreerd, waardoor de in de aanhef genoemde verbinding (533 mg) werd verkregen. Een gedeelte werd omgekristalliseerd uit diisopropyl-ether, sapt. 103 - 113° (ontl.); /"a7^° + 8,5° (c, 1,0, DMSO).

b) (6r,7R)-3-acetoxymethyl-7-/'"(Z)-2-(2-aminothiazol-^-yl)-2-(2-carboxyprop-2-oximino)aceetamido7cef-3-em-4- 10 carbonzuur

Trifluorazijnzuur (18 ml) werd toegevoegd aan een oplossing van het produkt van trap a) (2,U g) en anisol (18 ml) bij 0°.

Het mengsel werd bij kamertemperatuur 2 uur geroerd en geconcentreerd.

Het residu werd opgelost in ethylacetaat en geextraheerd met verzadigde 15 natriumbicarbonaatoplossing. De pH van . .. de,‘ waterige extracten werd ingesteld op 6 en de oplossing werd gewassen met ethylacetaat.

* V

De waterige fase werd aangezuurd tot pH * 1,5 onder ethylacetaat, verzadigd met natriumchloride en geextraheerd met ethylacetaat. De gecombineerde organische extracten werden gewassen met verzadigde 20 zoutoplossing, gedroogd en ingedampt. Het residu werd opgelost in warm 50 % waterig mierezuur (20 ml) waarna men het 2 uur liet staan.

Het mengsel werd verdund met water (50 ml) en gefiltreerd. Het filtraat werd gecnncentreerd. Het residu werd opgenomen in water (50 ml), opnieuw gefiltreerd en gelyofiliseerd waardoor de in de aanhef ge-25 noemde verbinding werd verkregen (920 mg), A (pH 6 buffer) 236 nm (E!L 25(rt· Xinf 255 - 235>· 256 - <S g. ,03)· /Vd° +20,0° (c 1,0, DMSO).

c) (6r, 7R)-7-/~(Z)-2-(2-aminothiazol-^-yl)-2-(2-carboxy-prop-2-oximino) aceet amido7-3- (1 -pyridLiniummethyl) -cef-3-em- 30 h-carboxylaat, mono-natrium zout

Pyridine (2 ml) en het produkt uit trap b) (1,8 g) verden toegevoegd aan een geroerde oplossing van natriumjodide (7,12 g) in water (2,2 ml) bij 80°. De oplossing werd bij 80° gedurende 1 uur geroerd, afgekoeld en tot 100 ml verdund met water. De pH van de oplossing 35 werd ingesteld op 6,0 met 2n natriumhydroxydeoplossing en deze oplossing 8001348 26 werd geconcentreerd teneinde pyridine te verwijderen. Het waterige residu werd verdund tot 100 ml met water, methylïsobutylketon (2 druppels) werd toegevoegd en de oplossing werd aangezuurd tot pH » 1 met 2n zoutzuur. Het mengsel werd afgefiltreerd en de vaste stof werd gewassen 5 met een weinig water. Het filtraat en de wassingen werden verzameld en gewassen met ethylacetaat en de pH werd ingesteld op 6,0 met 2n natriumhydroxydeoplossing. De oplossing werd geconcentreerd tot 50 ml en op een kolom van 500 g Amberlite XAD-2 (handelsmerk) hars gebracht waarbij eerst water en daarna 20 ί-ig waterig ethanol werden 10 gebruikt als elutieoplosmiddel. De produktbevattende frakties werden geconcentreerd en gelyofiliseerd waardoor de in de aanhef genoemde ΐί verbinding werd verkregen, (0,56 g), λ (pH 6 buffer) 253,5 nm (E.

1 ¥ max.^ on λ cm 307), Ainf 282 11111 (E1cm 159)’ 260 11111 ( E icm 295)i +2U>5 (q 1,0; DMSO).

15 Voorbeeld II

,, (6R,TR)-T-/”(2)-2-(2-aminothiazol-1i-yl)-2-(2-carboxyprop-2-oximino) aceetamido7-3-(l»-carbamoyl-1-pyridinium-methyl)-cef-3-em-^-carboxylaat. mono-natriumzout. Isonicotinamide (0,56 g) werd toegevoegd aan een geroerde 20 oplossing van het produkt uit voorbeeld Ib) (0,59 g) in water (0,7 ml) die voldoende natriumbicarbonaat bevatte om een uiteindelijke pH te verschaffen van 6,5. Natriumjodide (2,1 g) werd toegevoegd aan het mengsel werd 1 uur bij 80°C geroerd; Natriumbicarbonaat werd met tussenpozen toegevoegd om een pH in het trajekt van 5,5 - 6,5 te 25 handhaven. Het produkt werd in wezen geïsoleerd zoals beschreven in voorbeeld I c) waardoor de in de aanhef genoemde verbinding werd ver- 1 <t kregen, (0,09 g), XmQX (pH 6 buffer) 257,5 ma (E1cm 276), λ.^ 291,5 nm (e!^ 125)»τ (D_0) waarden zijn o.m. 0,92; 1,70 (^H; pyridinium protonen); icm c- 3,10 (1H, aminothiazol-5-H); ^,3U; ^.6h (2H; ABq; 3-CHg-); 8,5h 30 (6H;-CMe2-).

Voorbeeld III

a) tert.butyl (6R,7R)-3-acetoxymethyl-7-/ (Z)-2-(1-tert. butoxycarbonylcyclobut-1-oximino)-2-(2-tritylaminothi a- zol-^-yl)aceetamido7cef-3-em-^-carboxylaat_ 35 Een geroerde oplossing van het produkt uit bereidings- 8001348 27 wijze 6 (2U,2 g) en tert.butyl (6R,7R)-3-acetoxymethyl-7-aminocef-3-em-U-carboxylaat (13,6 g) in dimethylformamide (300 ml) werd tot 0° gekoeld, behandeld met 1-hydroxybenztriazool monohydraat (^,5 g) gevolgd door dicyclohexylcarbodiimide (6,H g) en het produkt werd in wezen geiso-5 leerd op de wijze als beschreven in voorbeeld I a) waardoor de in de aanhef genoemde verbinding werd verkregen (12,8 g), smpt. 113,5 tot 116,5° (ontl.); /"a7p° + 15,0° (c 1,0 DMS0).

b) (6R,7R)-3-acetoxymethyl-7-/*"(Z)-2-(2-aminothiazol-^-yl)-2-(1-carboxycyclobut-1-oximino)aceetamido7cef-3-em- 10 U-carbonzuur

Trifluorazijnzuur (100 ml) werd toegevoegd aan een mengsel van het produkt van trap a) (12,5 g) en anisool (5 ml) bij 0°. Het mengsel werd in wezen behandeld zoals beschreven in voorbeeld I b) waardoor de in de aanhef genoemde verbinding werd verkregen, 15 (¾ g), *max (pH 6 buffer) 2l»6 nm (E^m 26h), Ainf 295 nm (E^m 118); /“α7ρ° -+ 2,7,3° (c 1,0, DMS0).

c) (6R,7R)-7-/**(Z)-2-feroinothiazol-^-y1)-2-(1-carboxycyclobut- 1-oximino)aceetamido7-3-(1-pyridiniummethyl)-cef-3-em-h-carboxylaat, mono-natrium zout 20 Pyridine (U,1 ml) en het produkt van trap b) (3,75 g) werden toegevoegd aan een geroerde oplossing van natriumjodide (U,6 g) in water (^,5 ral) bij 80° en het produkt verd in wezen geïsoleerd op de wijze als beschreven in voorbeeld I c) waardoor de in de aanhef genoemde verbinding werd verkregen, (1,3 g) λ (pH 6 25 buffer) 252,5 nm (eJ^ 310), X-nf 291 nm (E^m 139); /Vjf + 5° (c, 1,0, DMS0).

Voorbeeld IV

(6r,7R)-7-/”(Z)-2-(2-aminothiazol-^-yl)-2-(1-carboxycyclobut- 1 -oximino ) aceetamido7-3- (k-carbamoyl-1 -30 pyridiniuramethyl)-cef-3-em-I+-carboxylaat, mono-natrium zout_ '_;_

Isonicotinaraide (1,22 g) werd toegevoegd aan een geroerde oplossing van het produkt van voorbeeld III b) (1,08 g) in water (1,3 ml) dat voldoende natriumbicarbonaat bevatte om een 35 uiteindelijke pH te verkrijgen van 6,5. ïfatriumjodide (U g) werd ÖO 0 13 4 8 i 28 toegevoegd en het mengsel werd 1 uur bij 80° geroerd; natriumbicarbonaat werd met tussenpozen toegevoegd om de pH in een traject van 6,0 - 6,5 te houden. Hst produkt werd in wezen geïsoleerd op de wijze als beschreven in voorbeeld I c) waardoor de in de aanhef genoemde 5 verbinding werd verkregen, (0,16 g), / a7^ -18° (c_ 1,08, ); X (pH 6 buffer) 256 nm (e!^ 298), λ. - 29¾ nm (e!^ 135)· max icm inr »cm

Voorbeeld V

a) tert.butyl (6R,7R) 3-acetoxymethyl-7-/ (E)-2- (2-tritylaainothi azol-^-yl)-2-(1-tert.butoxycarbonyl-10 cycloprbp-1-oximiho)aceetamido7cef-3-em-^-carboxylaat T-hydroxybenztriazool monohydraat (0,12 g) en dicyclo-hexylcarbodiiaide (0,16 g) werden toegevoegd aan een geroerde oplossing van het produkt van bereidingswijze 7 ( 0,3¾ g) en tert.butyl (6R,7R)-3-acetoxymethyl-7-aminocef-3-ea-1*-carboxylaat (0,25 g) in tetrabydro-15 furan (6 ml). Het mengsel werd een nacht lang bij kamertemperatuur geroerd en daarna gefiltreerd. Hst filtraat werd ingedampt. Het residu werd opgelost in een weinig ethylacetaat-petroleumether (kpt. 60-80°) (1:1) en geelueerd door*Solom van neutraal aluminiumoxyde (10 g) met. hetzelfde oplosmiddel. Het eluaat werd geconcentreerd tot een schuim 20 (0,¾¾ g), dat werd omgekristalliseerd uit diisopropylether (15 ml) waardoor de in de aanhef genoemde verbinding werd verkregen, (0,29 g), smpt. 115° - 119°; /”a7p° (c 1,0, DMS0) + 13°.

b) (6R,7R)-3-acetoxymethyl-7-/"’(Z)-2-(2-aminothiazol^-yl)-2- (1 -carboxycycloprop-1 -oximino) aceetamido7 cef-3-em^- mm 25 carbonzuur, hydrochloridezout

Geconcentreerd zoutzuur (0,6 ml) werd toegevoegd aan een geroerde oplossing van het produkt uit trap a) (1,92 g) in mierezuur) (7,5 ml) bij 10°. Het mengsel werd bij kamertemperatuur 1,25 uur geroerd en daarna gefiltreerd. Het filtraat werd toegevoegd aan diisopropyl- 30 ether (300 ml) en het mengsel werd 1 i uur geroerd. De vaste stof werd afgefiltreerd, gewassen met diisopropylether en diethylether en in vacuum gedroogd, waardoor de in de aanhef genoemde verbinding werd verkregen, (1,16 g), /“a7n° (c 1,0, DMSO) + 35°; X (pH 6 buffer) . if — — u max 239 nm, (E ' 300).

1 cm \ 3001348 • 35 29 c) (6r,7R)-7-/~(Z)-2-(2-aminothiazol-l+-yl)-2-(1-carboxy-cycloprop-1-oximino)aceetamido7-3-(1-pyridiniummethyl)-cef-3-gm-^-caTboxyIaat, natriurazout Een mengsel van het produkt uit trap b) (0,56 g, 5 natriumbicarbonaat (0,17 g) en water (0,5 ml) werd opgewarmd tot 50°. Meer natriumbicarbonaat (0,09 g) werd toegevoegd, gevolgd door pyridine (0,2 ml). De oplossing werd opgewarmd tot 80° en natriumjodide (2g) werd toegevoegd. De oplossing werd 1+0 min. bij 80° geroerd, afgekoeld en verdund met aceton (50 ml). Eet mengsel werd afgefiltreerd en de 10 vaste stof werd gewassen met aceton en ether waardoor een vaste stof werd verkregen. Deze vaste stof werd opgelost in water (20 ml) en druppelsgewijze met 2n zoutzuur aangezuurd tot zich een neerslag vormde, dat bij staan niet meer in oplossing ging. Het mengsel werd geroerd met neutraal aluminiumoxyde (5 g)en gefiltreerd door een kussen van 15 neutraal aluminium _ (10 g). Het kussen werd grondig geelueerd met water. )(Het waterige eluaat werd geconcentreerd en het residu werd getritureerd met aceton, De vaste stof werd afgefiltreerd en gedroogd tot een vaste stof (0,35 g). Deze vaste stof (0,30 g) werd opgelost in een weinig water en geelueerd door een kolom van 50 g 20 Amberlite XAD-2 (handelsmerk) hars, waarbij eerst water werd gebruikt en daarna 20 j£-ige ethanol in water als elutie oplosmiddel. De produkt bevattende frakties werden geconcentreerd en het residu werd getritureerd met aceton waardoor de in de aanhef genoemde verbinding werd verkregen, (0,06 g); /"α7ίΡ 0° + 1,5° (c 0,1, water); λ (pH 6 buffer) " ~ - max 25 25¾ nm, (Eicm 3^0), 296 m. (ϊ,ς 125).

Voorbeeld VI

(6R,7R)-7-/""(Z)-2-aminothiazol-U-yl)-2-(l-carboxy-cyclopent-1-yl-oximino)-aceetamido7-3-(1-pyridiniummethyl )cef-3-em-l+-carboxylaat. dihydrochloride Zout.

30 Fosforpentachloride (0,1+6 g) werd opgelost in methyleen- chloride (20 ml) bij kamertemperatuur en de oplossing werd afgekoeld tot -10°; het produkt van bereidingswijze 9 (1,095 g) werd in 1x toegevoegd. Het mengsel werd opgewarmd tot -5° en werd 30 min. geroerd.

De oplossing werd afgekoeld tot -10° en triethylamine 35 (a,6l ml) gevolgd door water (6,7 ml) werd toegevoegd onder krachtig 8001348 3° roeren, zodat het water niet bevroor en de temperatuur toch niet boven 0° kwam. Het tweefasenmengsel werd 3 min. geroerd en overgebracht in een trechter met kraan. De onderste fase werd toegevoegd aan een krachtig geroerde suspensie van het produkt van bereidingswijze 10 a) 5 (0,76 g) in Η,ΙΪ-dimethylaceetamide (lOmL) en acetonitrile (10 ml) waarin triethylamine (1,U ml), die voorgekoeld was tot -20° en de toevoeging werd zodang uitgevoerd, dat de temperatuur niet uitkwam boven -10°, Het mengsel werd ^5 min. bij -5° tot -10° geroerd waarna men het in 1 uur liet opwarmen tot 21°. Methanol (0,3 ml) werd 10 toegevoegd en het methyleenchloride werd bij verlaagde druk verdampt waarbij, een badtemperatuur van 30°. Het residu werd zorgvuldig verdeeld tussen ethylacetaat (30 ml) en water (30 ml) en een weinig natrium- chloride werd toegevoegd. De organische laag werd verder gewassen met water (2 x 30 ml). De gecombineerde wassingen en verder toegevoegd 15 natriumchloride werden geextraheerd met ethylacetaat (20 ml) en de gecombineerde organische lagen werden gedroogd met magnesiumsulfaat.

Indampen leverde een schuim (1,79 g) en dit werd getritureerd met diisopropylether waardoor een vaste stof (1,35 g) werd verkregen.

Hst grootste deel van deze vaste stof (1,2 g) werd 20 opgelost in mierezuur (5 ml) en geconcentreerd zoutzuur (0,38 ml) werd onder krachtig roeren toegevoegd, Ifa 1 uur bij 21° werd de suspensie afgefiltreerd en het residu werd uitgeloogd met een weinig mierezuur. De gecombineerde filtraten werden geconcentreerd door indampen en het residu werd getritureerd met aceton waardoor de in de 25 aanhef genoemde verbinding werd verkregen, (371* mg), /""*7D + 8,6° (c 1,02, H„0) (p F6 buffer) 255 nm (e!* 289), λ. .. 295 —2 max .¾ tem mu (E, 273), λ. „ 280 (E, 158).

1cm inf1 1cm

VoorbeeldTII

(6r,7R)-7-/”(Z)-2-(2-aminothiazol-U-yl)-2-(2-carboxy-30 prop-2-oximino)aceetamido7-3-(l-pyridiniummethyl)-cef-3- em-k-carboxylaat natriumzout,_ (6R ,7R)-7-/‘(Z)-2-(2-aminothiazol-U-yl)-2-(2-carboxy-prop-2-oximino) aceet amido7-3- (1 -pyr idiniummethyl) -cef-3-em-4-carboxylaat (2,5 g) werd opgelost in water en de oplossing werd behandeld met 35 natrium 2-ethylhexanoaat (1,52 g) in methanol (8 ml).

8001348 31

Het mengsel werd. in 15 min. toegevoegd aan een geroerde aceton en de aldus verkregen suspensie werd af gefiltreerd, gewassen en gedroogd waardoor de in de aanhef genoemde verbinding werd verkregen, (2,5 g); C*!f 0° (c 1,0, H20), (pH 6 fosfaat), 255 (e]^ 327, 5 e 13630) met λ-ηΛ bij 240 (ï]^ 305, e 17.370) en 280 172, ε 9.800), (ïïujol), 1780 cm“ (ff-lactam); natrium, gevonden:

2&3JC

4,5 £; berekend voor ^2^21^7^6¾

Voorbeeld VIII

a) difenylmethyl (IS, 6R, 7R)-7-/”(Z)-2-(2-tert.butoxy-10 carbonylprop-2-oximino)-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)- acectamido7-3-broommethylcef-3-em-1-oxyde-4-carboxylaat Fosforpentachloride (0,75 g) werd onder roeren gesuspendeerd in methyleendichloride (20 ml). lèt mengsel werd afgekoeld tot *10° en het produkt van bereidingswijze 4 (2,0 g) werd toegevoegd.

15 Set roeren werd 10 min. bij -5° tot -10° voortgezet. Triethylamine (0,88 ml) in methyleendichloride (5 ml) van -10° werd toegevoegd, na 5 min. gevolgd door een suspensie van difenylmethyl (1S,6r,7R}-7-amino-3-broommethylcef-3-em-1-oxyde-^-carboxylaat hydrobromide (1,67 g) in methyleendichloride (30 ml) waarin triethylamine (0,42 ml), 20 die werden gespoeld met methyleendichloride (5 ml) Het mengsel werd 20 min. bij -5° tot -10° geroerd en daarna uitgegoten in half-verzadigde waterige natriumbicarbonaatoplossing (50 ml). De organische laag werd afgescheiden, gewassen met verdund zoutzuur (1η, 3 x 30 ml) en de zoutoplossing (2 x 30 ml) en in vacuum tot een schuim ingedampt. 25 ïfet schuim werd opgenomen in ettylacetaat (ongeveer 10 ml) en behandeld met diisopropylether (‘00 ml). De neergeslagen vaste stof werd door filtreren verzameld, gewassen met diisopropylether en een nacht lang onder vacuum bij 40° gedroogd waardoor de in de aanhef genoemde verbinding werd verkregen (2,1 g) τ (CDClg) waarden zijn o.m.

30 3,11 (s, -CH Phg), 3,37 (s, thiazol-5-yl proton), 3,88 (dd, J 9Hz en 5Hz, 7-H), 5,22 + 6,02 (ABq - 3CH2), 5,49 (d, 5Hz 6-H), 8,46 (s, CMeg).

8001348 32 b) (6R,7R)-7-/”(Z)-2-(2-aminothiazol-ii-yl)-2-(2-carboxy-prop-2-oximino)aceetamido7-3-(1-pyridiniummethyl)-cef-3-cm-U-carboxylaat

Het produkt van trap a) (1 g) verd opgelost in aceton 5 (22 ml) en bij kamertea^eratuur geroerd. Pyridine ( 0,08 ml) verd toegevoegd en het mengsel verd 3 uur bij kamertemperatuur geroerd.

Meer pyridine (0,72 ml) verd toegevoegd en het mengsel liet men een nacht lang bij kamertemperatuur staan. Het mengsel verd uitgegoten in geroerde diethylether (75 al) en de neergeslagen vaste stof verd door filtreren 10 verzameld, gevassen met ether en onder vacuum bij Uo° gedroogd. Deze vaste stof (0,8 g) verd opnieuv opgelost in aceton (22 ml) bij -10°. Kaliumjodide (0,7 g) verd toegevoegd, gevolgd door acetylchloride (0,17 ml). Het mengsel verd 20 min. bij -10° geroerd en daarna verd aanvullend kaliumjodide (0,7 g) en acetylchloride (0,17 ml) toegevoegd. Na nog 15 20 min. roeren bij -10° verd het mengsel toegevoegd aan een oplossing van natriupmetabisulfiet (0,6 g) in vater (60 ml) en verzadigde zoutoplossing (30 ml). Het produkt verd geextraheerd met methyleenchloride (2x 50 ml) en de extracten verden gevassen met zoutoplossing, gedroogd boven magnesiumsulfaat en onder verlaagde druk ingedampt tot een schuim.

20 Dit verd opgelost in mierezuur (6,5 ml) vaarna men het 15 min. bij kamertemperatuur liet staan. Geconcentreerd zoutzuur (0,25 ml) verd toegevoegd en men liet het mengsel nog 1,25 uur staan. Het vaste neerslag verd afgefiltreerd en gevassen met een kleine hoeveelheid mierezuur. Het gecombineerde filtraat en de vassing verden uitgegoten 25 in ethylacetaat (5 ml) en diethylether (5 ml) met vater (10 ml) en -acetonitrile (5 ml). Aanvullend vater verd toegevoegd tot er tvee duidelijk verschillende lagen varen verkregen, De onderste laag verd afgevoerd en geextraheerd met diethylether (1H ml) die Amberlite LA2 (handelsmerk) (7 ml) en azijnzuur (0,7 ml) bevatte. De vaterige laag 30 verd opnieuv afgescheiden en gebracht op een kolom van "Zerolit" 225 SRC 15 (handelsmerk) (H+-vorm, 15 ml). De kolom verd met vater gevassen tot hij neutraal vas. Het produkt verd geelueerd met een 10 f-ige oplossing van pyridine in vater. Het eluaat verd in vacuum ingedarapt tot een geringe massa en behandeld met aceton. Het mengsel verd een 35 nacht lang op 0-^0° gekoeld en afgefiltreerd. De vaste stof verd met 1001348 33 aceton gewassen en onder vacuum bij 4o° gedroogd waardoor de in de aanhef genoemde verbinding (0,25 g) werd verkregen. Het kmr spectrum vertoonde gelijkenis met dat van de verbinding als bereid in voorbeeld VII. λ max (pH6 fosfaat) 255,5 nm (e]^ 37*0» λ inf. bij 238 cm 5 (e' 34o) en 290 nm (E, 160) icm 1cm

Voorbeeld IX

a) (6r,7R)-7-/”(Z)-2-(2-trifenylmethylaminothiazol-4-yl)-2-(2-tert.butoxycarbonylprop-2-oximino)aceetamido7-3- (1-pyridiniufflmethyl)-cef-3-em-4-carboxylaat_ 10 Het produkt van bereidingswijze 4 (3,44 g) werd toe gevoegd aan een geroerde oplossing van fosforpentachloride (1,38 g) in methyleenchloride (60 ml), gekoeld tot -10°. De verkregen oplossing werd 30 min. bij -5° geroerd en daarna afgekoeld tot -10°, Triethylamine (1,33 g) werd toegevoegd, gevolgd door water (20 ml). Het mengsel werd 15 3 min, bij 0° geroerd en daarna werd de onderste fase in 10 min.toegevoegd aan een geroerde suspensie van het produkt van bereidingswijze 10 a) (2,19 g), in een mengsel van Ν,Ν-dimethylaceetamide (30 ml)/acetonitrile (30 ml) waarin triethylamine (3,03 g), gekoeld tot -10°. Het mengsel werd 45 min. bij -10° tot -5° geroerd, en daarna 1 uur zonder koelen.

20 Methanol (1 ml) werd toegevoegd. Methyleenchloride werd door verdampen onder verlaagde druk verwijderd. De resterende oplossing werd toegevoegd aan water (200 ml) onder roeren teneinde de in de aanhef genoemde verbinding (4,89 g) neer te slaan.

τ(θϋθΐ^) waarden zijn o.m. 2,78 (s, - / CgH^ 7^); 3,37 (s - thiazol proton); 25 0,35; 1,80; 2,12 (pyridinium protonen); 4,18 (m, - 7-H); 4,95 (6-H); 8,66 (s -tert.butyl); 8,50 (s, - C(CH3)2).

b) (6R,7R)-7-/”(Z)-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(2-carboxy- ! prop-2-osimino)aceetamido7-3-(1-pyridiniummethyl)cef-3-em-4-carbonzuur dihydrochloride 30 Het produkt uit trap a) (3,38 g) werd opgelost 'in 98 ï-ig mierezuur (20 ml) onder roeren. Geconcentreerd zoutzuur (1,2 ml) werd toegevoegd en het mengsel werd 1 uur geroerd. De neergeslagen vaste stof werd,door vacuumfiltratie verwijderd. Het oplosmiddel werd verwijderd uit het filtraat door verdampen onder verlaagde druk, waardoor een olie 35 achterbleef, die getritureerd werd met aceton (30 ml) waardoor de in de 8001348 3k aanhef genoemde verbinding (2,20 g) verd verkregen.

tiDgO/NaïïCO^) vaarden zijn o.m. 3,08 (s, -thiazol proton); 1,06; 1,M; 1,93 (pyridinium protonen); ^,16 (d, H 5Hz, 7-H);^,T^ (d, J5Hz, 6-H); 8,55 (s, -CiCH^Jg)· Aceton met k.m.r., 1 mol. Watergehalte, 5 % 5 (Karl Fischer methode). Chloor, gevonden 10,1 % ^22^2^6^7¾^½ + aceton (1 mol) + vater (5 ί) vereist Cl 10,0 %).

Voorbeeld X

a) (6R,7R)-7-/~(Z)-2-(2-trifenylmethylaminothiazol-^-y1)-2-(2-tert.butoxycarbonylprop-2-oxind.no)aceetamido7-3- 10 (1-nyridiniummethyl)-cef-3-em-^-carboxylaat

Het produkt uit bereidingsvijze 10b) (2,18 g) verd tot reaktie gebracht op de wijze als beschreven in voorbeeld IX a), waardoor è de in de aanhef genoemde verbinding (H,03 g) werd verkregen, waarvan de spectroscopische eigenschappen gelijkenis vertoonden met die van het 15 produkt uit voorbeeld IX a).

b) (6r,7R)-1-Γ(Z)-2-(2-aminothiazol-k-yl)-2-(2-carboxy-prop-2-oximino)aceetamido7-3-(1-pyri diniummethyl)cef-3- em-U-carbonzuur dihydrochloride_

Het produkt uit trap a) (3,8 g) werd behandeld op de 20 wijze als beschreven in voorbeeld IX b) waardoor de in de aanhef genoemde verbinding (2,17 g) werd verkregen, waarvan de spectroscopische eigenschappen gelijkenis vertoonden met die van het produkt van voorbeeld IX b).

Voorbeeld XI

25 a) (6R ,7R)-7-/~(Z)-2-(2-trifenylmethylaminothiazol-^-yl) -2-(1-tert,butoxycarbonylcyclobut-1-oximino)aceetamido7-3- (1 -pyri diniummethyl) cef-3-em-k-carboxylaat__

Fosforpentachloride (1,38 g) werd opgelost in 60 ml dichloormethaan. De oplossing werd afgekoeld tot -10° en het produkt 30 uit bereidingswijze 6 (3,^8 g) verd in 1x toegevoegd. De oplossing werd 30 min. bij -5° geroerd. Triethylamine (1,8 ml) werd toegevoegd, gevolgd door vater (20 ml). Het mengsel werd 3 min. bij 0° geroerd. De onderste fase werd daarna toegevoegd aan een voorgekoeld mengsel van het produkt uit bereidingswijze 10 a) (2,18 g) in dimethylaceetamide (30 ml) en 35 acetonitrile (30 ml) met triethylamine (bt2 ml) daaraan toegevoegd, 8001348 35 bij -10°C,

Het reaktiemengsel werd ^5 min. bij een teaperatuur van -5° tot -10° geroerd. De koeling werd daarna verwijderd en het reaktiemengsel werd nog 1 uur geroerd, in welke periode de kamer-5 teaperatuur werd bereikt. Het oplosmiddel werd onder veriaagde druk verwijderd en het residu werd verdeeld tussen ethylacetaat en water.

De organische fase werd gewassen met zoutoplossing en de gecombineerde waterige extracten werden gsextraheerd met ethylacetaat. De gecombineerde ethylacetaatextracten werden gedroogd in aanwezigheid van houtskool 10 en het oplosmiddel werd onder verlaagde druk verwijderd. Het residu werd getritureerd met isopropylether waardoor de in de aanhef genoemde verbinding (3,80 g) werd verkregen, v max (Nujol) 1780 cm” (β-lactam) tCCDCI^) waarden zijn o.m. 2,7k (s, trifenylmethyl) 8,66 (s, t-butyl) 15 b) (6R,7R )-7-/”(Z)-2-( 2-aminothiazol-1»-yl)-2-( 1 -carboxy- i> cyclobut-1-oximino)aceetamido7-3~(l-pyridiniu«methyl)- ccf-3-em-^-carbonzuur dihydrochloride_

Het produkt uit trap a), (2,57 g), werd bij kamertemperatuur geroerd in een mengsel van 98 Jt-ige miere-zuur (15 al) 20 en geconcentreerd zoutzuur (0,9 al) gedurende 1 uur. Het mengsel werd daarna gefiltreerd en het oplosmiddel werd onder verlaagde druk . verwijderd, Het verkregen residu werd getritureerd met aceton waardoor de in de aanhef genoemde verbinding (1,79 g) werd verkregen, v max (ifujol) 17Ö5 cm” (β-lactam) τ waarden (ΰ^Ο + IfaHCO^) zijn o.m.

25 1,05; 1,1*2; 1,91 (m, pyridiniua protonen); 3,01 (s, aminothiazol proton) 1*,13 (d, J 5Hz, Cj proton); U»68 (d, J 5Hz, C-6 proton) 7,^-8,k (breed m, cyclobutyl protonen)

Dimethylaceetamide (1/3 mol) en aceton (5 mol) met k.m.r. Watergehalte 7,^ % (Karl Fischer methode) Chloor, gevonden 9,2 % (^23^2^6^7¾^½ + 30 1/3 mol dimethylaceetamide + 2 mol aceton +7tk % water vereist

Cl 9,5 %).

8001348 • · '36

Voorbeeld XII

a) (6R,TR)-3- acetoxyme thyl-7~/""(Z)-2-(2-aainothiazol-^-yl)- 2- .(2-carboxyprop-2-oximino)-aceetamido7-cef-3-em-1»~ carbonzuur hydrochloride 5 Het produkt uit voorbeeld I a) (200 g) verd opgelost in mierezuur (800 ml) voorgekoeld tot +10° en geconcentreerd zoutzuur (60 ml) werd in 5 min. aan het geroerde mengsel toegevoegd. Het roeren werd ij uur bij 20-22° voortgezet alvorens werd afgekoeld tot +10° en werd afgefiltreerd. Het bed verd gewassen met mierezuur (30 ml). Het 10 gecombineerde filtraat en de wassing werden geconcentreerd door indampen bij 20° tot een geel schuim, dat getritureerd werd met ethylacetaat (800 ml). De vaste stof die zich af zette werd verzameld door filtreren, gewassen met ethylacetaat (200 ml) en een nacht lang bij kamertemperatuur in vacuum gedroogd waardoor de in de aanhef genoemde 15 verbinding werd verkregen, (12^,6 g) λ _ (ethanol) 23^,5 nm, e!?, 311.

b) (6R,7R)-7-/~(Z)-2-(2-aminothiazol-U-yl)-2-(2-carboxy- * V * prop-2-oximino)aceetamido7-3-(pyridinium-1-ylmethyl)cef- 3- em-U-Carboxylaat hydraat

Het produkt uit trap a) (^0 g) werd toegevoegd aan een 20 geroerd mengsel van water (Uo ml) en pyridine (25,6 ml), gevolgd door natriumjodide (160 g) en het mengsel verd 35 uur op 6o° verwarmd.

De warme oplossing werd uitgegoten in geroerde aceton (21) en verdund met diethylether (1,2 l). De suspensie werd gekoeld tot 2° en het ruwe produkt werd verzameld door filtreren (50,65 g). Het werd opgelost in 25 water (U80 ml) en geroerd met mierezuur (19,3 ml), "Amberlite LA2" (handelsmerk) (280 ml) in ether (560 ml). Het mengsel werd gescheiden en de organische laag werd 2x gewassen met water (2x 2l»0 ml). De waterige lagen werden gewassen met ether (280 ml) en aangebracht op een kolom van "Zerolit 225, SRC 15u (handelsmerk) (200 ml H+) gevolgd door 30 gedestilleerd water, tot het eluaat neutraal was. De kolom werd ge-elueerd met 10 $ pyridine in water en het eluaat verd door een kolom van neutraal aluminiumoxyde (bo g) gevoerd. Het eluaat werd ingedampt tot een stroop on-depverlaagde druk en de stroop werd druppelsgewijze aan geroerde aceton (500 ml) toegevoegd. De in de aanhef genoemde ver-35 binding (13,09 g) werd verkregen door filtreren en in evenwicht brengen 8001348 15» 37 aan de lucht. Ho0, 7,0 % (Karl Fischer); λ 255 nm (E * 361+) λ. „ 20 mo cm mri 2U3 en 285 nm (ï, 338 en 171)> /”®7n -3 (pH 6 fosfaat buffer), icm — — u

Voorbeeld XIII

a) (6r,7R)-7-/“(Z)-2-(2-tritylaminothiazol-l+-yl)-2- 5 (2-tert.butoxycarbonylprop-2-oximino)aceetamido7-3-(1- pyridiniummethyl)cef-3-em-l+-carboxylaat, N,H-dimethyl-formamide sólvaat

Fijngepoederd produkt uit voorbeeld IX a) werd toegevoegd aan een geroerd N,N-dimethylformamide (15 ml) bij 23°. De vaste stof 10 loste op en kort daarna trad kristallisatie op. Het geroerde mengsel werd verdund door druppelsgewijs toevoegen van diisopropylether (20 ml). De vaste stof werd verzameld door filtreren waardoor de in de aanhef genoemde verbinding (3,06 g) werd verkregen als kleurloze naalden. N,N-dimethylformamide volgens k.m.r. * 25 mol.

15 τ (DMSO-dg); 2,1+-3,0 (m, trityl); 3,32 (s, aminothiazol ring proton); 0,U7; 1,3¾ 1,82 '(pyridinium protonen); 1+,31+ (m, C-7 proton); 1+,92 (d, J-5, C-6 proton); 8,61+ (S} tert.butyl protonen); 8,62 (s, (CH^Jg-C-C ), /"«7p° a -27,5° (C * 1,1 in methanol).

b) (6R, 7R) -7-/~ (Z) -2-(2-aminothi azol-l+-yl )-2-( carboxyprop- 20 2-oximino)-aceetamido7-3-(1-pyridiniummethyl)cef-3-em- l+-carbonzuur di hydrochloride

Het produkt uit trap a) (2,1 g) werd opgelost in miere-zuur (10 ml) bij 22°. Geconcentreerd zoutzuur (0,8 ml) werd toegevoegd en na 75 min. werd de neergeslagen vaste stof afgefiltreerd. Het filtraat 25 werd ingedampt en gedenatureerde spiritis (10 ml) werd toegevoegd.

De oplossing werd opnieuw ingedampt. Het residu werd opgelost in ethanol en de oplossing werd toegevoegd aan diisopropylether waardoor de in de aanhef genoemde verbinding (1,35 g) werd verkregen. 0

λλΟ _ W

30 /“e7Jj -11+,7° (c*0,95 in pH 6 buffer) τ (DMSO-dg) 0,28 (d, J 9, -C-HH); 0,77 (d, J 6), 1,25 (t, J 6); 1,70 (t, J 6, pyridinium ring protonen); 3,0 (s, aminothiazol protonen); 3,99 (d d, J 9,5, 7-H); 1+,67 (d, J 5, 6-H); 8,1+2 (s, -(CH^g).

Voorbeeld XIV

Droog poeder voor injektie 35 Formulering per flacon 8001348 38 (6r,7R)-7-/~(Σ)-2-(2-aminothiazol-k-yl)-2-(2-carboxyprop-2-oximino)aceetamido7-3-(1- pyridiniummethyl)cef-3-em-U-carboxylaat 500 mg

Lysine acetaat 189 mg 5 Methode

Het cefalosporine antibioticum werd vermengd met lysineacetaat en afgevuld in een glazen flacon. De flacon bovenruimte werd doorgespoeld met stikstof en een combinatie-afdichting verd aangebracht door krimpen. Het produkt verd opgelost zoals voor toediening, 10 door toevoegen van 2 ml vater voor injektie.

Voorbeeld XV

Droog -poeder voor injektie

Vul steriel (6R,7R)-7-/"(Z)-2-(aminothiazol-^-yl)-2- (2-carboxyprop-2-oximino)aceetamido7-3-(1-pyridiniummethyl)cef-3-em-k- 15 carboxylaat, mononatrium zout af in glazen flacons, zodanig dat iedere flacon een hoeveelheid bevat die overeenkomt met 1,0 g van het anti- biotische zuur.Voer het afvullen aseptisch uit onder een deken van steriele stikstof. Sluit de flacons af met behulp van rubber schijfjes of pluggen, die op zijn plaats worden gehouden door aluminiumafdichtingen, 20 waardoor voorkomen wordt dat een gasuitwisseling of binnendringen van licb microorganismen optreedt. Reconstitueerde produkt door op te lossen in water voor injekties of een andere geschikte drager kort voor de toediening.

Voorbeeld XVI

25 Tweelingpak injektie a) Vul hoeveelheden van 500 mg steriel (6r,7R)-7-/~(Z)-2-(2-aminothiazol-H-yl)-2-(2-carboxyprop-2-oximino)aceetamido7-3- (1-pyridiniummethyl)cef-3-em-4-carboxylaat aseptisch af in glazen flacons onder een deken van steriele stikstof. Sluit de flacons af met behulp 30 van rubber schijven of stoppen die op zijn plaats worden gehouden door aluminiumafdichtingen, waardoor gasuitwisseling of toetreden van microorganismen wordt voorkomen.

b) Bereid een 3,8U gew.>S-ige oplossing van natrium-carbonaat, maakt deze helder door filtreren en vul 2,15 ml af in schone 35 ampullen. Leidt kooldioxyde in de inhoud van iedere ampul gedurende 1 min.

8001348 39 voor het afdichten. Steriliseer de ampullen in een autoclaaf en controleer op helderheid.

c) Reconstitueer het cefalosporine antibioticu* kort voor toediening door oplossen in 2,0 al van de natriumbicarbonaat-5 oplossing.

Voorbeeld XVII

Droog poeder voor in.jektie Formulering oer flacon (ÓR,7R)-7-/”(2)-2-(2-aminothiazol-H-yl)-2-(1-carboxy-10 cyclobut-1-oximino)aceetamido7-3-(1-pyridiniummethyl) cef-3-em-^- carboxylaat 500 mg natriua carbonaat, watervrij 1*7 mg

Methode

Het cefalosporine antibioticum wordt vermengd met 15 natriumcarbonaat en afgevuld in een glazen flacon. De flacon bovenruimte werd doorgespoeld met stikstof en een combinatieafdichting werd aangebracht door krinqsen. Het produkt werd opgelost, zoals voor toediening, door toevoeging van 2 ml water voor injektie.

Voorbeeld XVIII

20 Injektie voor veterinair gebruik

Formulering (6R ,711)-7-/^( Z )-2-( 2-aminothiazol-1+-yl )-2-( 1-carboxy-cyclobut-1-oximino)aceetamido7-3-(1-pyridinium-methyl)cef-3-em-^-carboxylaat 10 gew.JÉ 25 aluminium dist ear aat 2 gew.i) ethyloleaat tot 100 gew.ï l tot 1008ew·* e. '

Methode

Dispergeer het aluminiumdistearaat in ethyloleaat, verwarm op 150° gedurende 1 uur onder roeren en koel af tot kamer-30 temperatuur.Voeg het steriele, gemalen antibioticum aseptisch toe aam de drager en maak fijn met een hoge snelheid menger, Vul het produkt aseptisch af in injektieflacons en sluit deze af met rubber afdichtingen of stoppen die op zijn plaats worden gehouden door aluminiumafdichtingen.

8001348

Claims (6)

1. Cefalosporine antibiotica met formule 3, waarin R en cl onafhankelijk ieder een alkylgroep met 1-4 koolstofatomen zijn of R^ en R^ samen met het koolstofatoom waaraan ze gebonden zijn een cyclo-5 alkylideengroep met 3-7 koolstofatomen vormen met dien verstande, dat R& en R^ niet elk een methylgroep voorstellen als R^ waterstof voorstelt, en R^ waterstof of een 3- of 4-carbamoylgroep is, alsmede niet giftige zouten en niet giftig metabolisch labiele esters daarvan.

2. Verbinding volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat 10 daarin ten minste een van de groepen R& en R^ een methyl of ethylgroep is.

3. Verbinding volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat R^ en R^ tezamen met het koolstofatoom waaraan ze gebonden zijn een cycloalkylideengroep met 3-5 koolstofatomen vormen.

4. Verbinding volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat deze voldoet aan formule 3a, waarin Ra en R^ de bovenstaande betekenis hebben, alsmede niet giftige zouten daarvan. 5. (6R,7R)-7-/ (Z)-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(l-carboxycyclo-but-1-oximino)aceetamido/-3-(1-pyridiniummethyl)-cef-3-em-4-carboxylaat 20 en niet-giftige zouten daarvan. 6. (6R,7R)-7-/ (Z)-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(l-carboxy-cycloprop-1-oximino)aceetamido7“3-(1-pyridiniummethyl)-cef-3-em-4-carboxylaat en niet giftige zouten daarvan. 7. (6R,7R)-7-/ (Z)-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(l-carboxy- 25 cyclopent-l-yloximino)aceètamido/-3-(1-pyridiniummethyl)-cef-3-em-4- carboxylaat en niet giftige zouten daarvan. 8. (6R,7R)-7-/ (Z)-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(2-carboxyprop-2-oximino)aceetamido/-3-(4-carbamoyl-l-pyridiniummethyl)-cef-3-em-4-carboxylaat en niet giftige zouten daarvan. 30 9. (6R,7R)-7-/ (Z)-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(lcarboxy- cyclobut-l-oximino)aceetamido7“3-(4-carbamoyl-l-pyridiniummethyl)-cef- 3-em-4-carboxylaat en niet giftige zouten daarvan.

10. Werkwijze voor de bereiding van een antibiotische verbinding, met het kenmerk, dat men een verbinding met formule 3, 35 waarin Rfl en R^ onafhankelijk ieder een alkylgroep met 1-4 koolstof- '001348 atomen zijn of R& en R^ met het koolstofatoom waaraan ze gebonden zijn een cycloalkylideengroep met 3-7 koolstofatomen vormen met dien verstande, dat Ra en niet elk een methylgroep voorstellen als R^ waterstof voorstelt en R^ waterstof of een 3- of 4-carbamoylgroep is, 5 alsmede niet giftige zouten en niet giftige metabolisch labiele esters daarvan bereidt, doordat men (A) een verbinding met formule 8, waarin R& en R^ de bovenstaande betekenis hebben, Rj een amino of beschermende aminogroep is, B een groep >S of een groep >S ·*· 0 (a- of $-) is en de stippellijn, die de 2-, 3- en 4-plaats verbindt aangeeft dat de 10 verbinding een cef-2- en/of cef-3-em verbinding is, Rg en Rga onaf hankelijk waterstof of een carboxyblokkeringsgroep zijn en X een vervangbare groep is van een nucleofiel, of een zout daarvan, laat reageren met een pyridineverbinding met formule 9, waarin R^ de bovenstaande betekenis heeft, en vervolgens zonodig en/of desgewenst in 15 elk van de gevallen één of meer van de volgende reakties in wille keurige volgorde uitvoert: 2 3 . i) omzetting van een Δ -isomeer m het gewenste Δ -isomeer, ii) een verbinding, waarin B een groep >S -»· 0 is, reduceert tot een verbinding waarin B een groep >S is, 20 iii) een carboxygroep omzet in een niet giftig zout of een niet giftige metabolisch labiele estergroep en iv) eventuele carboxyblokkeringsgroepen en/of N-beschermings- groepen verwijdert, of (B) een verbinding met formule 6 waarin R^, B en de stip-25 pellijn de eerder genoemde betekenis hebben, of een zout of een N-silylderivaat daarvan of een overeenkomstige verbinding met een groep met de formule -C00R. op de 4-plaats, waarin R^ een waterstofatoom J 0 of een carboxyblokkeringsgroep is, en met een bijbehorend anion A laat reageren met een zuur met formule 7, waarin Ra, R^, R^ de boven-30 staande betekenis hebben en R,. een carboxyblokkeringsgroep is, of O met een overeenkomstig acyleringsmiddel.

11. Farmaceutisch preparaat voor humaan of veterinair gebruik, met het kenmerk, dat dit een antibiotische verbinding met formule 3, waarin R& en R^ onafhankelijk ieder een alkylgroep met 1-4 kool-35 stofatomen zijn of R^ en R^ tezamen met het koolstofatoom waaraan ze 8001348 gebonden zijn een cycloalkylideengroep met 3-7 koolstofatomen vormen met dien verstande, dat en ^ niet elk een methylgroep voorstellen als R, waterstof voorstelt, en R waterstof of een 3- of 4-carbamoyl-4 4 groep is, alsmede niet giftige zouten en niet giftige metabolisch labiele 5 asters daarvan, in voor toediening geschikte vorm bevat. 3001348