SI7911231A8

SI7911231A8 - Process for obtaining cephalosporin antibiotics

Info

Publication number: SI7911231A8
Application number: SI7911231A
Authority: SI
Inventors: Cynthia Hilda O'callaghan; David George Hubert Livermore; Christopher Earle Newall
Original assignee: Glaxo Group Ltd
Priority date: 1978-05-26
Filing date: 1979-05-25
Publication date: 1997-06-30
Also published as: FI801609A; IE802453L; ATA239281A; DE2921316A1; PT69669A; IE791025L; DK216779A; FI67555C; IE49172B1; IL59793A; FI67555B; IL57400A; PH16961A; CH649556A5; FR2445835A1; FR2445835B1; SE7904576L; AT370420B; YU223482A; DK157685C

Description

OBLAST_TEHNIKE

Pronalazak spada u oblast proizvodnje novih sintetičkih antibiotika, a posebno se odnosi na postupak za dobivanje novih cefalosporina.

Cefalosporinska jedinjenja u ovoj prijavi se imenuju pomocu reference cefam prema J.Amer.Soc.,1962, £4, 3400, dok se termin cefem- odnosi na osnovnu cefam strukturu sa jednom dvogubom vezom.

Prema Medjunarodnoj klasifikaciji patenata, pronalazak je svrstan u klase C 07D 501/00; A 61K 31/545.

TEHNIČKI-PROBLEM

Pronalaskom se rešava.problem dobivanja novih cefalosporinskih antibiotika sa proširenim spektrom delovanja i umanjenim neželjenim efektima.

STANJE_TEHNIKE

Cefalosporinski antibiotici se široko koriste u lečenju bolesti izazvanih patogenim bakterijama na ljudskim bičima i životinjama, i riaročito su korisni za tretiranje bolesti izazvanih bakterijama koje su rezistentne na d^uge antibiotike kao što su penicilinska jedinjenja, kao i za lečenje pacijenata koji su osetljivi na penicilin. U mnogim slučajevima, poželjno jp da se koristi cefalosporinski antibiotik koji ispoljava aktivnost i protiv gram-pozitivnih i protiv gram-negativnih mikroorganizama, pa je značajna količina istraživanja bila usemerena na razvoj raznih tipova cefalosporinskih antibiotika širokog spektra.

Tako, na primer, u našoj Britanskoj Patentnoj Prijavi No. 1,399,086, mi opisujemo novu klasu cefalosporinskih antibiotika koji sadrže 7β-(α-eterifikovanu)-aci1amido grupu, pri čemu oksimino grupa ima sin konfiguraciju. Ova klasa antibiotskih jedinjenja karakteriše se visokom antibakterijskom aktivnošču protiv intervala gram-pozitivnih i gram-negativnih organizama zajedno sa naročito visokom stabilnošču prema [i-1 aktamazama koje proizvode razni gram-negati vni organizmi.

Otkriče ove klase jedinjenja stimulisalo je dalja istraživanja u istoj oblasti u pokušajima da se pronadju jedinjenja koja itnaju poboljšane osobine, na primer, protiv odredjenih klasa organizama, naročito, gram-negativnih organizama.

U našoj Britanskoj Patentnoj Prijavi No. 1,496,757, mi opisujemo cefalosporinske antibiotike koji sadrže 7A-aci1amido grupu formule

R.C.CO

II

N

NH (A)

<^CH2>m? (CH₂)_nCOOH R^B'

A B (u kojoj je R tienil iii furil grupa; R i R mogu široko i 1 i varirati i mogu biti, na primer, alkil grupe zajedno sa ugljenikovim atomom za koji su vezani obrazuju cikioalki 1iden grupu, i m i n su svaki 0 iii 1 tako da je zbir minO iii 1), pri čemu su jedinjenja sin izomeri iii smeše sin i anti izomera koje sadrže najmanje 90% sin izomera. 3-Položaj cefalosporinskog molekula može biti nesupstituisan ili može sadržati jedan od raznih mogučih supstituenata. Ova jedinjenja imaju naročito dobru aktivnost protiv gram-negativnih organizama.

Dalje, u našoj Britanskoj Patentnoj Prijavi No. 1,522,140 mi opisujemo cefalosporinske antibiotike formule

alkil grupu, C^-C^ cikloalkil grupu, furilmetil ili 3 tienilmetil grupu; i R pretstavlja vodonikov atom ili karbamoil, karboksi, karboksimeti1 , sulfo ili metil grupu), pri čemu su jedi njenja s i n izomeri ili postoje kao smeše sin i anti izomera koje sadrže najmanje 90% sin izomera.

Ova jedinjenja ispoljavaju visoku antibakterijsku aktivnost protiv širokog intervala gram-pozitivnih i gram-negativnih organizama. Jedinjenja takodje poseduju visoku stabilnost prema -laktamazama koje proizvode razni gram-negativni organizmi, kao i dobru stabilnost ih vivo.

Iz ovij jedinjenja razredčena su druga jedinjenja slične strukture u daljim pokušajima da se pronadju antibiotici koji imajo poboljšanu antibiotsku aktivnost i/ili visoku aktivnost protiv gram-negativnih organizama. Takvi razvoji uključivali su varijacije ne samo 7g»acilamido grupe u gornjim formulama več takodje i uključivanje odredjenih grupa u 3-položaju cefalosporinskog molekula. Tako, na primer, u Belgijskoj Patentnoj

Prijavi No. 852,427, opisana su cefalospirinska antibiotska jedinjenja koja spadaju unutar opšteg obima Britanske Patentne Prijave No. 1,399,086, i gde grupa R u formuli (A) gore može biti zamenjena sa raznim organskim grupama, uključujuči

2-aminotiazol-4-i1, a kiseonikov atom u oksiimino grupa spojen je za alifatičnu ugljovodoničnu grupu koja i sama može biti supstituisana , na primer, sa karboksi. U takvim jedi njenjima, supstituent u 3-položaju je aciloksimeti1, hidroksimeti 1, formi! iii opciono supstituisana heterocikiična-ti ometi 1 grupa.

Dalje, Belgijska Patentna Prijava No. 836,813 opisuje cefalosporinska jedinjenja u kojima grupa R u formuli (A) gore može biti zamenjena sa, na primer, 2-aminotiazol-4-i1 grupom, a oksiimino grupa je hidroksiimino iii blokirana hidroksiimino grupa. U takvim jedinjenjima, 3-položaj cefalosporinskog molekula supstituisan je sa metil grupom koja i sama može biti opciono supstituisana sa jednim od velikog broja ostataka nukleofilnih jedinjenja koja su tamo opisana, n.pr., piridinijum grapa koja može biti opciono supstituisana sa, na primer, karbamoil grupom. U gore spomenutoh specifikaciji ne pripisuje se antibiotska aktivnost takvim jedinjenjima koja se samo spominju kao intermedijeri za pravljenje antibiotika opisanih u toj prijavi.

Belgijska Patentna Prijava No. 853,545 opisuje cefalosporinske antibiotike u kojima je 76-acilamido bočni niz primarno 2-(2-ami noti azol-4-i1)-2-( si n)-metoksiimino-ačetamido grupa a supstituent u 3-položaju široko je definisan na sličan način sa onim iz gore spomenute Belgijske Patentne Prijave No. 836,813. Jedinjenja koja se specifično navode kao primeri ^{u to}J prijavi uključuju jedinjenja u kojima je 3-položaj supstitulsan sa p1rid1n1Jummet11 111 4-karbamo1lp1r1d1n1 jummetll grtipom.

OPIS REŠENJA TEHNIČKOG PROBLEMA SA PRIMERIMA IZVODJENJA

Sada smo otfcrlll da se odgovarajučlm Izborom malog broja odredjenlh grupa u 7b-položaju u kombinaciji sa bilo plrldlnljuinr.ietll 111 3- 111 4-karbamo1 Ip1 ri d1 n1 jummetll gruponi u 3-položaju, mogu dobiti cefalosporlnska jedlnjenja koja ii.iaju naročlto podesnu aktivnost (opisana detaljnlje niže) protlv širokog Intervala patogenih organizama koJ1 se oblino c redu.

5ada2nj1 pronalazak ojezbcdjuje cofalosporlnske antibiotiku opSte formulo:

(u kojoj R^a 1 R^b, koji mogu biti 1st1 111 razllčitl, svaki pretstavlJaJu C|_-(* alkil grupu (poželjno alkil grupu pravog niza, n.pr., metil, et11, n-propll 111 n-but1l grupu 1 odredjeno metil 111 et11 grupu) 111 R^a 1 R^b zojedno sa ugljenlkovlm .atomom za koji su spojeni obrazuju c11;loa1k111den grupu, poželjno C, _r dkloalkl ttden grupirj 1 pretstavlja w

vodonlk 111 3- 111 4-korbur.iol 1 grupu)-1 njihove netokslčne soli j netokslčne metabol1čki labilne estre.

Jedlnjenja prema pronalasku su s 1 n 1zomer1. S1n Izomernl oblik deflnlsan je konf 1gurac1 Joni grupe

-O.C.COCII

-· 1- .6. --.u odnosu na karboksamido grupu. U ovoj Prijavi sin konfigu racija označava se strukturno kao

C.COOH

Biče jasno da pošto su jedinjenja prema pronalasku geometrijski izomeri, može nastati izvesno mešanje sa odgovarajučim anti izomerom.

Pronalazak takodje uključuje unutar svog obima solvate (naročito hidrate) jedinjenja formule (I), On takodje uključuje u svoj obim soli i estre jedinjenja formule (I).

Jedinjenja prema sadašnjem pronalasku mogu postojati u tautomernim oblicima (na primer, u odnosu na 2-aminotiazoli1 grupu) i biče jasno da su takvi tautomerni oblici, n.pr.,

2-iminotiazolini1 oblik, biti uključeni u obim pronalaska. štaviše, jedinjenja formule (I) opisana gore mogu takodje postojati u alternativnim cviterjon oblicima, na primer, gde je 4-karboksi1 na grupa protonovana a karboksilna grupa u 7-bočnom nizu je deprotonovana, pa su i ovi alternativni oblici uključeni u obim sadašnjeg pronalaska.

Biče jasno da kada R^a i R*³ u gornjoj formuli pretsta/ vljaju razne alkil grupe, ugljenikov atom za koji su vezane može imati centar asimetrije. Takva jedinjenja su diastereoizomerna i sadašnji pronalazak obuhvata pojedinačne diastereoizomere ovih jedinjenja kao i smeše ovih.

i

Jedinjenja prema pronalasku ispoljavaju široki spektar antibiotske aktivnosti. Protiv gram-negativnih organizama aktivnost je neuobičajeno visoka. Ova visoka aktivnost proteze se na mnoge gram-negativne sojeve koji proizvodeB-laktamaze. Jedinjenja takodje poseduju visoku stabilnost protiv β-laktamaza koje proizvode razni gram-negativni organizmi.

Nadjerio je da jedinjenja prema pronalasku ispoljavaju neuobičajeno visoku aktivnost protiv sojeva Pseudomonas organizama, n.pr., sojeva Pseudomonas aeruginoša kao i visoku aktivnost protiv raznih članova Enterobacteriaceae (n.pr., sojevi Es cheri chiac coli, KTebsi el la prieumoni ae , Salmoneli a typhimurium, Shigella sonnei, Enterobacter cTacae, Serratia marcescens, Providence s pe c i e s, Proteus mirabi 1is, i n a r o č i t o protiv indol-pozitivnih Proteus organizama kao što su proteus vulg ari s i Proteus morgani i) kao i protiv H a emophi1u s inf T u eri Z a e.

Antibiotske osobine jedinjenja prema pronalasku uporedjuju se vrlo povoljno sa osobinama aminogiikozi da kao što su amikacin iii gentamicin. Odredjeno, ovo se odnosi na njihovu aktivnost protiv raznih sojeva Pseudomonas organi zama koji nisu podložni dejstvu največeg broja postoječih komercijalno pristupačnih antibiotskih jedinjenja. Za razliku od aminoglikozi da , cefalosporinski antibiotici normalno ispoljavaju nisku tokisčnost kod ljudi. Koriščenje aminoglikozida u humanoj terapiji teži da ograniči iii da se komplikuje visokom toksičnošču ovih antibiotika. Cefalos porinski antibiotiki iz s adašnjeg pronalaska tako poseduju potencijalno velike prednosti nad aminoglikozi dima .

Netoksični derivati soli koji se mogu obrezovati sa bilo kojom od karboksilnih grupa koje su prisutne u jedinjenjma l

opšte formule (I) uključuju soli sa neorganskim bazama kao što su al kalnometalne soli (n.pr., natrijumove i kalijumove soli) zemnoalakalnometal ne soli (n.pr., kalcijumove soli); soli sa amino-kiselinama (n.pr., lizinom i argininom); soli sa organskim bazama (n.pr., sa prokainom, feni 1eti1benzi1 aminom, dibenzi1eti1endiaminom, etanol aminom, dietanolaminom i N-metiIglukozaminom). Drugi netoksični derivati soli uključuju adicione soli sa kiselinama, n.pr., obrazovane sa hiorovodoničnom, bromovodoničnom, sumpornom, azotnom, fosfornom, mravljom i trifluorosirčetnom kiselinom. Soli takodje mogu biti u obliku rezinata obrazovanih sa, na primer, polistirolnom smolom iii sa umreženim pol isti rol-divi ni 1benzolnim kopolimerom koji sadrži amino iii kvaternerne amino grupe iii sulfonske kiselinekse grupe, iii sa smolom koja sadrži karboksilne grupe, n.pr., sa smolom od poliakrilne kiseline. Rastvorne soli sa bazama (n.pr., alkalnometalne soli kao što je natrijumova so) jedinjenja formule (I) mogu se koristiti u terapeutskim primenama zbog brzog rasporedjivanja takvih soli u organizmu posle davanja. Medjutim, kada su za koriščenje u odredjenoj primeni poželjne nerastvorne soli jedinjenja (I), n.pr., za koriščenje u depo preparatima, takve soli se mogu obrazovati na konvencionalni način, na primer, sa odgovarajučim organskim aminima.

Ovi i drugi derivati sol ΰ· kao što su soli sa £-toluolsulfonskom kiselinom i metansulfonskom kiselinom, mogu se koristiti kao intermedijeri za pravljenje i/ili prečiščavanje /

sadašnjih jedinjenja formule (I), na primer, u postupcima koji su opisani niže.

Netoksični metabolički labilni estarski derivati koji se mogu obrazovati esterifikacijom samo jedne iii i

obe karboksilne grupe u sadašnjem jedinjenju formule (I) uključuju aci1oksialki 1 estre» n.pr., niže 1kanoi1oksi-miti 1 iii -etil estre kao što su acetoksi-meti1 iii -etil iii pivaloiloksimeti1 estri. Pored gornjih estarskih derivata, sadašnji pronalazak uključuje u svoj obim jedinjenja formule (I) u obliku drugih fiziološki prihvatljivi h jedinjenja, n.pr., fiziološki prihvatijivih jedinjenja, koja se slično metabolički labilnim estrima, prevode in vivo u osnovno antibiotsko jedinjenje formule (I).

Poželjna grupa jedinjenja prema pronalasku na osnovu njihove visoke antibiotske aktivnosti jesu jedinjenja formule (I) gore gde R pretstavlja vodonik, t.j., jedinjenja opšte formule:-

(la)

njihove u kojoj R^a i imaju gore definisana značenja, i netoksične soli i netoksične metabolički labilne estre.

Izvanredno jedinjenje formule (la) je (6R,7R)-7-/(Z)-2(2-aminoti azol-4-i1)-2-(2-karboks iprop-2-oks i i m ino)ačetamido/3-(1-piridinijummeti1)-cef-3-em-4-karboksilat koji ima formulu: 1<Τ!

Η

N CH,

\. I 2

II

Ό. Č.COOH

(Ib)

Η

Η t

Ο

COO zajedno sa njegovim netoksičnim solima (n.pr., natrijumova so) i netoksičnim metabolički labilnim estrima. Jedinjenje formule (Ib) poseduje u izbanrednom obimu opšte antibiotske osobine prikazane gore za jedinjenja opšte formule (I).

Medjutim, mora da se istakne njegova sjajna aktivnost protiv sojeva Pseudomonas organizama. Jedinjenje ima sjajne antibakterijske osobine koje nisu oštečene ljudskim serumom, i štaviše, efekat povečanih inokulata protiv jedinjenja je nizak.

Jedinjenje ima brzo baktericidno dejstvo u koncentracijama koje su bliske minimalnoj inhibirajučoj koncentarciji.

Dobro se rasporedjuje u organizmima malih glodara dajuči korisne terapeutske nivoe posle potkožne inekcije sa ekspomencijalnim padom koncentracije sa vremenom. U primatima jedinjenje· daje visoke i dugotrajne nivoe u serumu posle intramuskularne inekcije. Poluživot seruma u primatima ističe verovatnoču srazmerno dugog poluživota kod ljudi, što omogučuje da se daju manje česte doze za manje ozbiljne infekcije. Eksperimentalne infekcije na miševima sa gram-negativnim bakterijama su uspešno tretirane koriščenjem jedinjenja i, odredjeno, dobivpna je sjajna zaštita protiv sojeva Pseudomonas aeruginosa, organizma koji je normalno rezistentan na tretiranje sa cefalosporinskim antibioticima. Ova zaštita je uporediva sa tretiranjem sa nekim atakvim aminoglikozi dom kao što je amikacin. Testovi akutne toksičnosti na ^iševima dali su LD₅q vrednosti iznad 1.0 g/kg. Nije zapažena nefrotoksičnost na pacovima pri dozama 2.0 g/kg.

Drugo jedinjenje koje poseduje slične osobine sa jedinjenjem formule (Ib) jeste (6R,7R)-7-/(Z)-2-(2-aminotiazol4-i1)-2-(1-karboksici kiobut-1-oksiimino)acetamido/-3-(1 piridinijummeti1)-cef-3-em-4-karboksilat, zajedno sa njegovim netoksičnim solima i netoksičnim metabolički aktivnim labilnim estrima.

Drugi primeri poželjnih jedinjenja prema sadašnjem pronalasku uključuju sledeča jedinjenja formule (I) i njihove netok sčne soli i netoksične metabolički labilne estre, naime:(6R,7R)-7-/(Z)-2-(2-aminotiazol-4-il)-2-(2-karboks iprop-2 oks i i m ino)a četami do/-3-(4-karbamoi1-1-pi ri di nijummeti 1)-ce f3-em-4-karboks ilat;

(6R,7R)-7-/(Z)-2-(2-aminotiazol-4-i1)-2-(1-karboksici kToprop-1-oksi i mi no)ačetami do/-3-(1-pi ri dinijummeti1)-cef-3em-4-karboksi1 at;

(6R,7R)-7-/(Z)-2-(2-aminoti azol-4-i1)-2-(1-karboksi ci klopent-1 -i1oksi imino)acetamido/-3-(1-pi ridi ni jummeti1)-cef-3em-4-karboksi1 at; i (6R,7R)-7-/(Z)-2-(2-aminoti azol-4-i1)-2-(1-karboksic i ki obut-1-oksi imino)acetamido/-3-(4-karbamoi1-1-piridinijummeti 1 )-cef-3-em-4-karboks ilat.

Druga jedinjenja prema sadašnjem pronalasku uključuju, na primer, ona u kojima su grupe R^a, R^b i R⁴ u formuli (I) sledeče:i

1-2'

R³		„4
• ' ' ..... ....... . . . ,
a) Alkil grupe
-CH₃	^C2^H5	H
“^C2^H5	^C2^H5	11
-ch₃	-CH_q	3-C0NH₂
11	-^C2^H5	II
^C2^H5	n	II
-ch₃	11	-CONH₂
~^C2^H5	II	II
• ' . ... ,

b) CikloaTkiliden grupe Ciklobuti 1iden ciklopentiliden

Ci kioheksiliden

Ci kiopropi1i den

3-C0NH₂

3- C0NH₂

4- C0NH₂H

3- C0NH₂

4- C0NH₂

3- C0NH₂

4- CONH₂

X i

Jedinjenja formule (I) mogu se koristiti za tretiranje raznih bolesti izazvanih patogenim bakterijama na ljudskim bicima i životinjama, kao što su infekcije respiratornog trakta i infekcije urinarnog trakta.

Prema pronalasku je obezbedjen postupak za dobivanje cefalosporinskog antibiotika opšte formule (I) kao što je ovde ranije definisana iii njegove netoksične soli iii nje· govog netoksičnog metabblički labilnog estra koji obuhvata acilovanje jedinjenja formule

(TI) /u kojoj je ϊΛ kao što je definisano gore; B je^S iii (eZ - iii (5 ); i tačkasta linija kcja premošcuje 2-, '3- i 4- položaje pokazuje da je jedinjenje cef-2-em iii cef-3em jedinjenje/ iii njegove soli, n.pr., adicione soli sa kiselinama (obrazovane sa, na primer, nekom takvom mineraInom kiselinom kao što je hlorovodnična, bromovodonična, snmporna, azotna iii fosforna kiselina iii sa takvom organskom kiselinom kao što je metansulfonska iii p-toluolsuIfonska kiselina) iii njegovog N-silil derivata, iii nekog jr odgovarajuceg jedinjenja koje ima grupu formule -COOIr u 4-položaju /gde je R^vodonikov atom iii karboksilna· blokirajuca ferupa, n.pr., ostatak nekog alifatičnog iii aralifatičnog alkohola koji obrazuje estar iii fenola koji obra zuje estra, silanola iii stananola (pomenuti alkohol,fenol i

- 14 silanol iii stananol poželjno sadrže 1-20 ugljenikovih atoma) / i koje ima pridruženi anjon Λ kao što je neki halogenid, n.pr., hlorid iii bromid, iii trifluoroacetatni anjon, sa kiselinom formule

R

(m)

C.COOH

II

COOR⁶ (u ko jo j su R^a i R^b kao što je ovde rani j e definisano; R^ predstavlja karboksilnu blokirajuču grupu, n.pr., kao što je opisano za R^; i R? je amino iii zaštičena amino grupa) iii sa sredstvom za acilovanje koje odgovara ovoj kiselini; posle čega se, prema potrebi i/ili kako se želi u svakom slučaju, vrši ma koja od sledečih reakcija, u bilo kojoj odgovarajučoj sekvenci:p X

i) konverzija &Γ - izomera u željeni Δ - izomer, ii) redukcija jedinjenja gde je B ^S-»0 tako da se obrezuje jedinjenje gde je B ^S.

iii) konverzija karboksilne grupe u netoksičnu so iii netoksičnu metabolički labilnu estarsku funkciju, i iv) uklanjanje ma koje karboksilne blokirajuce i/ili N-zaštitne grupe.

U gore opisanom postupku polaziti materijal formule (II) je poželjno jedinjenje gde je B a tačkasta linija predstavlja cef-3-em jedinjenje. Jedan takav polazni materijal koji je naročito podesan za koriščenje u postupku je I7-(7-nminocef-3-em-3--ilmstil)priridini jum-4-karboksilat

- 15 dihlorhidrat, zbog visoke čistoče sa kojoin se može napraviti.

<z

Sredstva za acilovanje koja se mogu koristiti u pravljenju jedinjenja formule (I) uključuju kiselinslce halogenide, naročito hloride iii bromide. Takva sredstva za acilovanje mogu se napraviti reakcijom kiseline (III) iii njene soli sa sredstvom za halogenovanje, n.pr., fosfor-pentahloridom, tionilhloridom iii oksalilhloridom.

Acilovanja se koriščenjem kiselinskih halogenida mogu se vršiti u vodenim i nevodenim reakcionim sredsinama, podesno na temperaturama od -50 do +50°C, poželjno -20 do +50°C ako se želi u prisustvu sredstva za vezivanje kiseline. Podesne reakcione sredine uključuju takve vodene ketone kao što je vodeni aceton, estre kao što je etilacetat, halogenovana ugljovodonike kao što je metilenhlorid, amide kao što je dimetilacetamid, nitrile kao što je acetonitril, iii smeše dva iii više takvih rastvarača. Podesna sredstva za vezivanje kiseline uključuju tercijarne amine (n.pr., trietilamin iii dimetilanilin), neorganske baze (n.pr., kalcijum-karbonat iii natrijum-bikarbonat) i oksirane kao što su niši 1,2-alkilert-oksidi (n.pr., etilenoksid iii propilenoksid) koji vezuju halogenovodnoik koji se oslobadja u reakciji acilovanja.

Kiseline formule (III) mogu se same po sebi koristiti kao sredstva za acilovanje u pravljenju jedinjenja formule (I). Acilovanja sa kosriščenjem kiselina poželjno se vrše u prisustvu nekog kondenzacionog sredstva, na primer, nekog takvog karbodiimida kao što je N, N’-dicikloheksilkarbodiimid iii R-etil-N’-y-dimetilaminopropilkarbodiimid;

i

- 16 nekog karbonilnog jedinjenja kao što jekarbonildiimidazol; iii neke izoksazolijum soli kao što je N-etil-5-fenilizoksazolijura perhlorat.

Acilovanje se takodje može vršiti sa drugim derivatima kiselina koji obrazuju amide formule (III), kao što je, na primer, neki aktivirani estar, simetrični anhidrid iii mešoviti anhidrid (n.pr., obrazovan sa pivalinskom kiselinom iii sa nekim haloformijatom, kao što je neki niži alkilhaloformijat). Mešoviti anhidridi mogu se takodje obrazovati sa fosforovim kiselinama (na primer, fosforna iii fosforasta kiselina), sumpornom kiselinom iii alifatičnim iii aromatičnim sulfonskim kiselinama (na primer, p-toluolsulfonska kiselina). Aktivirani estar može se podesno obrazovati in situ koriščenjem, na primer, 1-hidroksibenzotriazola u prisustvu nekog kondenzacionog sredstva kao što je opisano gore. Alternativno se aktivirani estar može preformirati.

Reakcije acilovanja koje uključuju slobodne kišeline iii njihove gore sporaenute derivate koji obrazuju amide se poželjno vrše u .nekoj anhidrovanoj reakcionoj sredini, n.pr., metilenhloridu, tetrahidrofuranu, diroetilformamidu iii acetonitrilu.

Prema potrebi, gornje reakcije acilovanja mogu se vršiti u prisustvu takvog katalizatbra kao sto je 4-dimetilaminopiridin.

Kišeline formule (III) i sredstva za acilovanja koj a im odgovaraju mogu se, prema potrebi, napraviti i koristiti u obliku njihovih adicionih soli sa kiselinama. Tako,na primer, kiselinski hloridi se mogu podesno koristiti kao njihove hlofhidratne soli, a kiselinski bromidi kao njihove bromhi- 17 drantne soli.

Reakcioni proizvod se može odvojiti iz reakcione smeše, koja može sadržati, na primer, nepromenjeni polazni cefalosporinskj. polazni materija! i druge supstance, raznim postu-

hromatografijom na jonoizmenjivačkim smolama) iii makroretikularnih smola.

rt &“-Cefalosporinski estarski derivati dobiveni prema postupku iz pronalaska mogu se prevesti u odgovarajuči derivat, na primer, tretiranjem Δ. -estra sa takvom bazom kao što je piridin iii trietilamin.

Cef-2-em reakcioni proizvod može se takodje oksidovati tako da daje odgovarajuči cef-3-em 1-oksid, na primer, reakcijoin sa nekom perkiselinom, n.pr., persircetnom kiselinom iii m-hloroperbenzoevom kiselinom; dobiveni sulfoksid može se, ako se to želi, kasnije redukovati kao što je ovde kasnije opisano tako da daje odgovarajuči cef-3-em sulfid.

Kada se dobiva jedinjenje u kojem je B / S-^0 ovo se može prevesti u odgovarajuči sulfid, na primer, redukcijom odgovarajuče aciloksisulfonijum iii alkoksisulfonijum soli napravljene in situ reakcijom sa, n.pr., acetilhloridom u slučaju acetoksisulfonijum soli, pri čemu se redukcija vrši sa, na jr primer, natrijum-ditionitom iii sa jodidnim jonom, kao u rastvoru kalijum-jodida u nekom rastvaraču koji se meša sa vodom, n.jir., sirčetnoj kiselini, acetonu, tetrahidrofuranu, dioksanu, dimetilformamidu iii dimetilacetamidu. Reakcija se može vršiti na temperaturi od -20° do +50°C.

- 18 Metabolički labilni estarski derivati jedinjenja formule (I) mogu se napraviti reakcijom jedinjenja formule (I) iii njegove soli iii zašticenog derivata sa odgovarajučim sredstvom sa esterifikaciju kao što je neki aciloksialkil halogenid (n.pr., jodid), podesno u nekom inertnom organskom rastvaraču kiio što je dimetilformamid iii aceton, i zatim, prema potrebi, uklanjanjem bilo kojih zaštitnih grupa.

Bazne soli jedinjenja formule (I) mogu se obrezovati reakcijom kiseline formule (I) sa nekom odgovarajučom basom. Tako, na primer, natrijumove iii kalijumove soli se mogu napraviti koriščenjem odgovarajuče 2-etilheksanoatne iii bikarbonatne soli. Adicione soli sa kiselinama mogu se napraviti reakcijom jedinjenja formule (I) iii njegovog metabolički labilnog estarskog derivata sa odgovarajucom kiselinom.

Kada se jedinjenje formule (I) dobiva kao smeša izomera, sin izomer se može dobiti, na primer, konvencionalnim postupcima kao što je kristalizacija iii hromatografija.

Za koriščenje jedinjenja opšte formule (I) kao polaznih materijala prema ovom pronalasku, jedinjenja opšte formule (III) i kiselinski halogenidi i anhidridi koji im odgovaraju poželjno se koriste u njihovom sin izomernom obiiku iii u obiiku smeša sin izomera i odgovarajučih anti izomera koje sadrže najmanje 90$ sin izomerarKiseline formule (III) (pod uslovom da R^a i R^b zajedno sa ugljenikovim atomom za koji su vezani ne obrazuju ciklopropiliden grupu) mogu se napraviti eterifikacijom jedinjenja R⁷ formule ;

C.COOR⁹ (VI)

II

- 19»7 (gde je R kao što je gore definisano a R⁹ je karboksilne bloki rajuča grupa), reakcijom jedinjenja opšte formule «7

T.C.COOR (VII)

T je halogen kao što je hloro, bromo iii jodo; sulfat; iii takav sulfonat kao što je tozilat), i zatim uklanjanjem karboksilne blokirajuce grupe R . Odvajanje izomera može ee izvršiti pre iii posle takve eterifikacije, Reakcija eterifikacije se poželjno vrši u prisustvu neke baze, n.pr., kali jum-karbonata iii natrijum-hidrida, i poželjno se vrši u nekom organskom rastvaraču, na primr^ dimetilsulfoksidu, nekom takvom cikličnom etru kao što je tetrahidrofuran iii dioksan, iii nekom R,R-disupstituisanom amidu kao što je dimetilformamid, Pod ovim uslovima konfiguracija oksiimino grupa je suštinski nepromenjena reakcijom eteridikacija. Reakcija treba da se vrši u prisustvu baze ako se koristi adiciona so jedinjenja formule (VI) sa kiselinama. Baza treba da se koristi u dovoljnoj količini da se brzo neutrališe kiselina u pitanju.

Kiseline opšte formule (III) mogu se takodje napraviti reakcijom jedinjenja formule:

gde su'R? i R^ kao što je ovde ranije definisano) sa jedinjenjem formule

R^a

H-N.C.COOR⁶ (ix)

- 20 - T. z· u ko joj su R , R° i R° kao što je definisano gore), i zatim uklanjanjem karboksilne blokirajuce grupe R^, i kada je to potrebno odvajanjem sin i anti izomera.

Poslednja spomenuta reakcija je naročito priinenljiva na pravljenje kiselina formule (III) u kojima R^a i R^ zajedno sa ugljenikovim atomom za koji su vezani obrazuju ciklopropiliden grupu. U ovom slučaju, relevantna jedinjenja formule (IX) mogu se napraviti na konvencionalan način, n.pr., sintezorn kao što je opisano u Belgijskoj Patentnoj Prijavi Ro. 866.422 za pravijenjet-butil 1-aminooksi-ciklopropan karboksilata.

Kiseline formule (III) mogu se prevesti u odgovarajuče kiselinske halogenide i anhidride i adicione soli sa kiselinama konvencionalnim postupcima, na primer, kao što je opisano gore.

Polazni materijali formule (II) mogu se takodje napraviti na konvencionalan način, na primer, nukleofilnom reakcijom zamene odgovarajučeg jj-acetoksimetil jedinjenja sa odgovarajucim nukleofilom, n.pr., kao što je opisano u Britanskoj Patentnoj Prijavi No. 1.028.563·

Dalji postupak za pravljenje polaznih materijala formule (II) obuhvata uklanjanje zaštite odgovarajučeg zaštičenog 7B-amino jedinjenja na konvencionalan način, n.pr,, koriščenjem PCl^.

Treba da je jasno da u nekim od gornjih transformacija može b$ti potrebno da se zaštite ma kakve osetljive grupe u molekulu jedinjenja da se izbegnu nepoželjne bočne reakcije.

Na primer, za vreme reakcionih sekvenci navedenih gore

- 21 može biti potrebno da se zaštiti NEL·, grupa aminotiazol vrste, na primer, tritilovanjem, acilovanjem (n.pr., hloroacetilovanjern), protonacijom iii drugim konvencionalnim postupkoin. Zaštitna grupa se može posle toga ukloniti na ma koji konvencionalni način koji ne izaziva raskidanje šeljenog jedinjenja, n.pr., u slučaju tritil grupe koriščenjem opciono halogenovane karboksilne kiseline, n.pr., sirčetne kiseline, mravlje kiseline, hlorsirčetne kiseline iii trifluorosirčetne kiseline iii koriščenjem neke mineralne kiseline, n.pr., hlorovodonične kiseline iii smeše takvih kiselina, poželjno ti prisustvu nekog protičnog rastvarača kao što je voda iii, u slučaju hloroacetil grupe, tretiranjem sa tiokarbamidom.

Karboksilne blokirajuče grupe koje se koriste za pravljenje jedinjenja formule (I) iii za pravljenje neophodnih položnih materijala su poželjne grupe koje se mogu lako raskinuti u podesnoj fazi reakcione sekvence, podesno u poslednjo j fazi. Medjutim, može biti podesno u nekim slučajevima da se koriste netoksične metabolički labilne karboksilne blokirajuce grupe kao što su aciloksi-metil iii -etil grupe (n.pr., acetoksi-metil iii -etil iii pivaloiloksimetil) i da se ove zadrže u finalnom proizvodu tako da se dobije odgo varajuči estarski derivat jedinjenja formule (I).

Podane karboksilne blokirajuče grupe su dobro poznate u nauči, i lista reprezentativnih blokirajučih karboksilnih grupa ukljušena je u Britanskom Patentu No. 1.399*086. Poželjne blokirajuče karboksilne grupe uključuju aril niže alkoksikarbonil grupe kao što su n-metoksibenziloksikarbonil p-nitrobenziloksikarbonil i difenilmetoksikarbonil; niže alkoksi karbonil grupe kao što je t-butoksikarbonil; i niže

- 22 haloalkoksilcarbonil grupe kao što Je 2,2,2-trihloroetolcsikarbonil. Karboksilne blokirajuče grupe mogu se kasnije odvojiti ma kojiro od odgovarajucih postupaka koji su opisani u literaturi; tako, na primer, kisela iii bazno katalizovana hidrolizo. može se primeniti u mnogim slučajevima, kao i onz.imski-katalizovane hidrolize.

Antibiotska jedinjenja iz pronalaska mogu se formulisati za davanje na ma koji podesan način, analogijom sa drugim nntibioticima i pronalazak zato uključuje u svoj obim farmaceutske preparate koji obuhvataju antibiotsko jedinjenje prema pronalasku koje je adaptirano za koriščenje u humanoj i veterinarskoj medicini. Takvi preparati mogu se formulisati za koriščenje na konvencionalni način pomoču ma kojih neophodnih farmaceutskih nosača iii sastojaka.

Antibiotske jedinjenja prema pronalasku, mogu se formulisati za inekcije i mogu se formulisati u jedinični dozni oblik u ampulama, iii u multi-doznim kontejnerima, prema potrebi sa dodanim prezervansom. Preparati mogu takodje uzimati takve oblike kao što su suspenzije, rastvori iii emulzije u uljanim iii vodenim nosečima, i mogu sadržati takva sredstva za formulisanje kao što su sredstva za suspendovanje, stabilizaciju i/ili dispergovanje. Alternativno aktivni sastojak može biti u obliku praha za rekonstituisanje sa nekim podesniro nosačem, n.pr., sterilnom vodom bez pirogena, pre koriščenja.

Prema potrebi, takve formulacije u prahu mogu sadržati odgovarajucu netoksičnu bazu u cilju poboljšavanja rastvorljivosti u vodi aktivnog sastojka i/ili za obezbedjivanje da je, kada se prah rekonstituiše sa vodom, pil dobivene vodene formulacije fiziološki nrihvatljiv. Alternativno baza može biti prisutna u vodi sa kojom je prah rekonstituisan. Baza «i· može biti, na primer, neorganska baza kao što je natrijum-korbonat, inatrijum-bikarbonat iii natrijum-acetat, iii takvo organska baza kao što je lizin iii lizin-acetat.

Antibiotska jedinjenja mogu se takodje formulisati kao «iipozitorije, n.pr., koje sadrže konvencionalne osnove sa supozitorije kao što su kakao buter iii drugi gliceridi.

Preparati za veterinarsku medicinu mogu se, na primer, formulisati kao intrasisni preparati bilo u bazama za dugo dejstvo iii za brzo oslobadjanje.

Preparati mogu sadržati od 0.1% pa na gore, n.pr.,

0.1-99% aktivnog materijala, zavisno od postupka davanja.

Kada preparati obuhvataju dozne jedinice, svaka jedinica če poželjno sadržati 50-1500 mg aktivnog sastojka. Doza koja se koristi za tretiranje odraslih ljudi če poželjno varirati od 500 do 6000 mg na dan, zavisno od načina i učestanosti davanja. Na primer, za tretiranje odraslih ljudi 1000 do 3000 mg na dan koji se daju intravenozno iii intramuskularno biče normalno dovoljni. U tretiranju Pšeudomonas infekcija mogu biti potrebne više·.dnevne doze.

Antibiotska jedinjenja prema pronalasku mogu se davati u kombinaciji sa drugim terapeutskim sredstvima kao što su antibiotici, na primer, penicilini iii drugi cefalosporini.

Sledeči primeri ilustruju pronalazak. Sve temperature su u °C. Petrol označava petroletar (t.klj. 40-60°).

Spektri protonske magnetne rezonacije (p.m.r.) odredjeni su na 100 MHz. Integrali se slažu sa rasporedima, konstante kuplovanja, J, su u Hz, a znaci nisu odredjeni; s = singlet, d= dublet, dd = dvostruki dublet, m = multiplet, q = kvartet

- 24 i ΛΒ^ = ΛΒ kvartet.

Preparat 1

Etil (Z)-2-(2-aminotiazol-4-il)-2-(hidroksiimino)acetat

Pečanom i ledom hladjenora rastvoru etilacetoacetata (292 g) u glacijalnoj sircetnoj kiselini (296 ml) doda se rastvor natrijum-nitrita (180 g) u vodi (400 ml) takvom brzinom da se reakciona temperatura održava ispod 10°C. Mešanje i hladjenje se nastave oko 30 min., kada se doda rastvor kalijum-blorida (160 g) u vodi (800 ml). Lobivena smeša se meša jedan čas. Donja uljasta faza se odvoji i vodena faza se ekstrahuje sa dietiletrom. Ekstrakt se kombinuje sa uljem.

Ispere se sukcesivno sa zasičenim slanim rastvorom, suši se i ispari se. Zaostalo ulje, koje očvrščava pri stajanju, se ispere sa petrolom i suši se u vakuumu preko kalijum-hidroksida, dajuci etil (Z)-2-(hidroksiimino)-3-oksobutirat (300 g).

Mešani i ledom hladjeni rastvor etil (Z)-2-(hidroksiimino) -3-oksobutinata (150 g) u dihlorometanu (400 ml) tretira se ukapavanjem sa sulfurilhloridom (140 g). Dobiveni rastvor se t, drži na sobnoj temperaturi 3 dana, tada se ispari. Ostatak se rastvori u dietiletru, ispere se sa vodom dok filtrati od ispiranja ne budu gotovo neutralni, suši se i ispari se. Zaostalo ulje (177 g) se rastvori u etanolu (500 ml) i dimetilamflinu (77 ml) i doda se tiokarbamid (42 g) sa mešanjem. Posle dva časa, proizvod se sakupi filtracijorn, ispere se sa etanolom i suši tako da se dobiva naslovno jedinjenje (73 g)

t.t. 188°.

- 25 Preparat 2

Etil (Z)-2-hidroksiimino-2-(2-trltilaminotiazbl-4-il)-acetat, ln lorhldrat

Tritilhlorid (16.75 β) se dodaje u partijama u toku 2 eana mešanom i hladjenom (-30°) rastvoru proizvoda iz Preparata. 1 (12.91 g) u dimetilformamidu (28 ml) koji sadrži trietilamin (8.4 ml). Smeša se pusti da se zagreje na 15° u toku jednog časa, meša se još 2 časa i tada se raspodeli izmeči ju vode (500 ml) i etilacetata (500 ml). Organska faza se odvoji, ispere se sa vodom (2 x 500 ml) i tada se mucka sa II’ ECI (500 ml). Talog se sakupi, ispere se sukcesivno sa vodom (100 ml), etilacetatom (200 ml) i etrom (200 ml) i suši se u vakumu tako da se obezbedjuje naslovno jedinjenje kao bela supstanca (16.4 g); t.t. 184 do 186° (rasp.).

Preparat 5

Etil (Z)-2-(2-t-butoksikarbonilurop-2-oksiirnino) -2-( 2-tritilaminotiazol-4-ll)acetat

Kalijum-karbonat (34.6 g) i t-butil 2-bromo-2-metilpropianat (24.5 g) u dimetilsulfoksidu (25 ml) dodaju se mešanom rastvoru pod azotom proizvoda iz Preparata 2 (49.4 g) u dimetilsulfoksidu (200 ml) i smeša se meša na sobnoj temperaturi 6 časova. Smeša se izlije u vodu (2 1), meša se 10 min. i filtruje. Suspstanca se ispere sa vodom i rastvori se u etilacetatu (600 ml)- Rastvor se ispere sukcesivno sa vodom, 2E hlorovoctoničnora kiselinom, vodom i zasičenim slanim rastvorom, suši se i ispari. Ostatak se rekristališe iz petroletra (t.klj 60-80°) tako da daje naslovno jedinjenje (34 g), t.t. 123.5 do 125°.

Preparat 4 ( Z) -2- (2-t-Butoksikarbonilprop-2-oksiimino) -2- ( 2-tritilamino tiazol-4-il)sircetna kiselina

Proizvod iz Preparate. 5 (2 g) se rastvori u metanolu (20 ml) i doda se 2N natrijum-hidroksid (3*3 ml). Smeša se refleksuje 1.5 čas i tada se koncentruje. Ostatak se sakupi u smeši vode (50 ml). 2N hlorovodnične kiseline (7 ml) i etilecetata (50 ml). Organska faza se odvoji i vodena faza se ekstrahuje sa etilacetatom. Organski rastvori se spoje, isperu se sukcesivno sa vodom i zasičenim slanim rastvorom, suše se i ispare. Ostatak se rekristališe iz ugljentetrahlorida i petrola tako da daje naslovno jedinjenje (1 g), t.t. 152 do 156° (rasp.).

Preparat 5

Etil (Z)-2-(2-tritilaminotiazol-4-il)-2-(l-butoksikarbonilciklobut-l-oksiimino) acetat

Proizvod iz Preparata 2 (55·θ g) se meša pod azotom u dimetilsulfoksidu (400 ml) sa kalijum-karbonatorn (fino samleven, 31*2 g) na sobnoj temperaturi. Posle 30 minuta, doda se t-butil 1-bromociklobutan (29.2 g). Posle još 8 časova doda se kalijum-karbonat (31*2 g). Doda se još kalijum-karbonata (6 x 16 g partije) za vreme sledeča tri dana i doda se još t-butil 1-bromociklobutan -karboksilata (3.45 g) posle 3 dana. Posle ukupno 4 dana, srneša se izlije u ledenu vodu (ca. 3 litra) i supstanca se sakupi filtracijom i ispere se dobro sa vodom i Petrolom. Supstanca se rastvori u etilacetatu i rastvor se ispere sa slonim·rastvorom (dva puta), suši se sa magnezijum-sulfatom i ispari se do pene.

- 27 Ova pena se rastvori u etilacetat-petrolu (1:2) i filtruje se kroz silika-gel (500 g). Isparavanje daje naslovno jedinjenje (60 g) kao penu, S) _max (CHBrj) 3400 (NH) i 1730 (estar)

Preparat 6 (Z)-2-(l-t-Butoksikarbonilciklobut-l-oksiimino)-2-(2-triti1 aminotiazol-4-il) slrčetna kiselina

Smeša proizvoda iz Preparata 5 (3*2 g) i kalijum-karbonata (1.65 g) se refluksuje u metanolu (180 ml) i vodi (20 ml) u toku 9 časova i smeša se ohladi na sobnu ternperaturu. Smeša se koncentruje i ostatak se raspodeli izmedju etilacetata i vode, i ovome se doda 2N HCI (12.2 ml). Organska faza se odvoji i vodena faza se ekstrahuje sa etilacetatom. Spojeni organski ekstrakti se isperu sa zasičenim slanim rastvorom, suše se i ispare tako da se dobiva naslovno jedinjen,ie (2.5 S)i (etanol) 265 nm (E^_om 245).

Preparat 7

Etil (Z)-2-(l-t-butoksikarbonilciklopent-l-iloksiimino)-2-(2-tritilaminotiazol-4—il)acetat

Proizvod iz Preparata 2 (10-g) se meša sa t-butil 2bromo-ciklopentankarboksilatom (7 g) u dimetilsulfoksidu (40 ml) koji sadrži kalijum-karbonat (10 g) pod azotom na /

21° u toku 21 časa. Smeša se izlije u led-vodu (500 ml) i suva supstanca se sakupi filtracijom, ispere sa vodom i suši na vazduhu.

- 28 Rekristalizacija ove supstance iz metanola (500 ml) daje naslovno jedinjenje (11.7 g), t.t. 179-180°, *^_max (CHBr^)

5410 (RH), 1755 (estar), 1275 (estar) i 755 cm'^{* 1} (fenil).

Pr o n ar a t 8 (Z)-2-(l-t-Butoksikarbonilciklopent-l-iloksiimino)-2-(2-tritil umlnotiazol-4-il) sirčetna kiselina

Proizvod iz Preparata 8 (625 mg) se refluksuje sa 2N rastvoroin natrijum-hidroksida (0.5 ml) i vodom (1 ml) u metanolu (12 ml) u toku 7 časova. Brneča se ostavi da se ohladi preko noči. Posle razblaživanja sa vodom, doda se ortofosforna kiselina da se podesi rastvor na pH 2. Talog se ekstrahuje sa etrom i spojeni ekstrakti se isperu sa slanim rastvorom. Posle sušenja sa magnezijum-sulfatom, rastvarač se ispari tako da se dobiva gumasti ostatak .(495 mg)· Rekristalizacija iz diizopropiletra daje naslovno jedinjenje (556 mg), t.t. 171-174°, V_max (CHBr₅ 2500-5500 (OH i NH), 1755 (estar),

1692 (kiselina) i 755 i 770 cm'¹ (fenil).

Preparat 9 (6R,7R)-7-amino-3-(l-piridinijummetil)cef-5-em-4-karbokBilna kiselina dihlorid

a) Mešanja suspenzija (6R,7R)-7-(2-tienilacetamido)-3-(lpiridinijummetil)cef-5-ein-4-karboksilata (4.15 g) u dihlorometanu (50 ml) tretira se sa Ν,Ν-dimetilanilinom (5·Ο9 ml) i hlorotrimetilsilanom (2.52 ml). Ova smeŠa se meša na 30-55° jedan čas i tada se ohladi na -28 i tretira se sa fosforpentahloridom (4.16 g), meša se na -25° do 50° još 1 čas i tada se izlije u mešani ohladjeni (-20°) rastvor butan-1,

3-diola (8.1 ml) i dihlorometana (20 ml). Rastvor se pusti ir da dostigne temperaturu 0° za 50 minuta, i staložena supstanca (A) se filtruje, ispere se sa dihlorometanom i suši u vnkumu. Ponovo se rastvori u metanolu (17· 5 ml), meša se i razblnži sa dihlorometanom (87*5 ml) i staložena supstanca se filtruje, ispere se sa dihlorometanom i suši u vakumu tako da se dobiva naslovno jedinjenje kao bela supstanca (3.2 r), λ _max (pH 6 pufer) 253 nm (E^_cm 518); Γ(ϋ₂0) vrednosti uključuju 0.95 1-32 i 1.84 (piridinijum protoni).

4.10 do 4.46 (ΛΒ , J 16Kz, 3-CH?-), 4.56 (d, J 5Hz, ?-H), 4,70 (d, J 5Hz, 6-H), 6.14 do 6.50 (ΛΒ , J 17Hz, C_?-H). b) Supstanca (A) napravljena u fazi (a) gore (8 g) se rastgori u IN hlorovodoničnoj kiselini (25 ml). Bodavanje izopropanola (95 ml) taloži kristalno naslovno jedinjenje kao dihidrat (4.95 g)» vrednosti uključuju 1.02, 1.36 i

1.87 (piridinijum protoni); 4.2 + 4.55 (AB , J = 14Hz, 3“ CII₂-); 4.62 (d, J = 5Kz, C_?-H); 47.4 (d, J = 5Hz, Οθ-Η)}

6.19 + 6.38 (ΛΒ , J = 18Hz, C_?-H). Sadržaj vode po metodu Karla Fišera: 9.4%.

Primer 1 (6R,7R)-7“/(Z)~2-Aminotiazol-4-il)-2-(l-karboksiciklopentl-iI-oksiimino)-acetaroido/-5-(l-piridinijummetil)gef-3-em4-karboksilat, dihlorhidratna so

Fosfor-pentahlorid (0.46 g) se rastvori u metilenhloridu (20 ml) na običnoj temperaturi i rastvor se ohladi na 10°; doda se proizvod iz Preparata 8 (1.095 β) u jednoj partiji. Smeša se zagreje na -5° i meša se 30 minuta.

- 30 Rastvor se ohladi na -10° i doda se trietilamin (0.61 ml)

O i zatim voda (6.7 ml) sa snažnim mešanjem tako da se voda ne zamrzne iako temperatura ne prelazi 0°. Dvofazna smeša se meša 3 minuta i prenese se u ravan levak. Donja faza se doda u snažno mešanu suspenziju proizvoda iz Preparata 10 a) (0.76 g) u R,K-dimetilacetamidu (10 ml) i aceton!trilu (10 ml) koji sadrži trietilamin (1.4- ml), koji su bili prethodno ohladjeni na -20° i dodavanje se vrši tako da temperatura ne premaži -10°. Smeša se meša 4-5 minuta na -5 do - 10° i tada se pusti da se zagreje na 21° u toku 1 časa. Doda se metanol (0.3 ml) i metilenhlorid se ispari pod smanjenim pritiskom sa temperaturom kupatila 30°. Ostatak se pažljivo raspodeli izmodju etilacetata (30 ml) i vode (30 ml) i doda se malo natri jum-hlorida.

Organski sloj se ispere sa još vode (2 x 30 ml). Spojeni filtrati od ispiranja i još dodani natrijum-hlorid se ekstrahuju sa etilacetatom (20 ml) i spojeni organski slojevi se suše sa magnezijum-sulfatom. Isparavanje daje penu (1.79 g) i ova se tretira sa diizopropiletrom tako da se dobiva čvrsta supstanca (1.35 g)·

Najveci deo čvrste supstance (1.2 g) rastvori se u raravljoj kiselini (5 ml) i doda se koncentrobana hlorovodonična kiselina (0.36 ml) sa snažnim m&šanjem. Posle 1 časa na 21°, suspenzija se filtruje i ostatak se izluži sa malo mravlje kiseline. Spojeni filtrati se koncentruju isparavanjem i / ostatak se tretira sa acetonom tako da se dobiva naslovno jedinjenje (374 mg) /cZ/_p + 8.6° (c 1.02, H₂0) /\_max (pH 6 pufer) ^{255 nm 239)}’ ^λ infl. ^{295 2}?J>· >i„n. ^2S9<^E^cm ^8)

- 31 Primer 2 (6R,7R)-7~/(Z)-2-(2-Aminotiazol-4-il)-2-(2-karboksiprop-2oksiimino)acetamido/-5-(I~piridinijummetil)-cef-5-em-4-karboksilat natri,gumova so (6R,7R)-7-/(Z)-2-(2-Aminotiazol-4-il)-2-(2-karboksiprop-2oksiimino)acetamido/-3~(1-piridinijummetll)-cef-3-ern-4-karboksilat (2.5 g) se rastvori u vodi i rastvor se tretira sa natrijum 2-etilheksanoatom (1.52 g) u metanolu (8 ml).

Smeša se doda u mešani aceton u toku 15 minuta i dobivenn suspenzija se filtruje, ispere se i suši tako da se dobiva naslovno jedinjenje (2.5 g); /°i/ p⁵ 0° (c 1.0, HgO), A_ji)ax(ph 6 fosfat), 255 (Ξ ~'ζ_ιη 327, £18630) sa Λ _infna 240

1% (4^%Cm £ 17,370) i 280 (E^_CR] 172, 9,800), max (Njudžol) 1780 cm“^ ( (b -laktam); natrijum, nadjeno: 4.5%; izrač, za 022^^0^^82 Na: 4.04%.

Primer 3

a) (6R,7R)-7-/(Z)-2-(2-Trifenilmetilaminotiazol-4-il)-2(2-t-butoksikarbonilprop-2-oksiimino)acetamido/-3- (1-piridini jum-metil)-cef--3-em-4-karboksilat

Proizvod iz Preparata 4 (3*44 g) doda se mešanom rastvoru fo.sfor-pentahlorida (1.38 g) u metilenhloridu (60 ml), ohladjenom na -10°. Dobiveni rastvof se meša na -5° 30 minuta, i tada se ohladi na -10°. Doda se trietilamin (1.33 g), i zatim voda (20 ml). Smeša se meša 3 minuta na 0° i tada se donja faza doda u toku 10 minuta mešanoj suspenziji proizvoda iz Preparata 9 (a) (2.19 g) u smeši N,N-dimetilformamida (30 ml)/ acetonitrila (30 ml) koja sadrži trietilamin (3.03 g)

- 32 ohladjenoj na -10°. Snieša se meša 45 minuta na -10° do -5°, i žetim 1 čas bez hladjenja. Doda se metanol (1 ml). MetiInehlorid se odvoji isparavanjem pod smanjenim pritiskom. Preostali rastvor doda se u vodu (500 ml) sa mešanjem tako da se staloži naslovno jedinjenje (4.89 g).

Τ' (CDCl₇p vrednosti uključuju 2.78 (s, -/ΟθΗ^/^; 3.37 (s tiazolov proton); 0.55, 1.80, 2.12 (piridinijum protoni);

4.18 (m, -7-H); 4.95 (6-H); 8.66 (s -t-butil); 8.50 (s, c(cu₃)₂).

b) (6R,?R) -7~/( Z) -2- (2-Aminot iaz]Jo-4-il) -2-(2-karboksiprop-2-oksiimino)acetamldo/-5-(l-niridinijummetil) cef-5-em-4-karboksllna kiselina dihlorhidrat

Proizvod iz Faze (a) (3·38 g) se rastvori u 98% mravljoj kiselini (20 ml) sa mešanjem. Doda se koncentrovana hlorovodonična kiselina (1.2 ml) i sraeša se meša 1 čas. Staložena supstanca se odvoji vakum filtracijom. Rastvarač se ukloni iz filtrata isparavanjera pod smanjenim pritiskom tako da zaostaje ulje koje se tretira sa acetonom (50 ml) tako da se dobiva naslovno jedinjenje (2.20 g).

V(D₂O/NaHCOj) vrednosti uključuju 5*08 (s, -tiazolov proton);

1.06, 1.44, 1.95 (piridinijum protoni); 4.16 (d, H 5Hz, 7-H); 4.74 (d, J5Hz, 6-H); 8.55 (s, -C(CH₅)₂).

Aceton pomoču n.m.r., 1 mol.

Sadržaj vode, 5% (postupak Karl Fišera).

Hlor, nad j eno 10.1%. (^22^24^6^7^^2 ^{+ ace-t:ori} (1 mol) + voda (5%) zahteva Cl, 10.0%).

Primer 4

a) (6R,7R)-7-/(Z)-2~(2-Trifenilmetilaminotiazol-4-il)-2-(2-t butoksikarbonilproT)-2-oksiiroino)acetaroido/' ti.l)-cef-5-em-4-karboks? 1 st

-533 Proizvod iz Preparata 10 (b) (2.18 g) reaguje kao u Primeru 3 (a) tako da daje naslovno jedinjenje (4.03 g) čije su spektroskopske osobine slične sa osobinama piOizvoda iz Primera 9a).

b) (6R,7R)~7-/(Z)-2-(2-Aminotiazol-4-il)-2-(2-karboksiprou-2

-oksiiiiitno)acetamido/~3-(l-piridini,jumroetil)cef-3-em-4-karboksi3jra_ kiselina dihlorhidrat

Proizvod iz Paze (a) (3·8 β) tretira se kao u Primeru 3 (b) tako da daje naslovno jedinjenje (2.17 g) čije su spektroskopske osobine slične sa osobinama proizvoda iz Primera 9b).

Primer 5

a) (6R,7R)-7-/(Z)-2“(2-trifenilmetilaminotiazol-4-iI)-2-(l·-t-butoksikarbonilciklobut-2-oksiimino)acetamido/-5~(l“Pi~ rldinijummetil)cef-3-em-4-karboksilat

Fosfor-pentahlorid (1.38 g) se rastvori u 60 ml sihlorometana, Rastvor se ohladi na -10°i proizvod iz Preparata 6 (3.48 g) se doda u jednoj partiji. Rastvor se meša na -5° minuta. Doda se trietilamin (1.8 ml), i zatim voda (20 ml). Smeša se meša na 0°C 3 minuta. Donja faza se tada doda prethodno ohladjenoj smeši proizvoda iz Preparata 9a) (2.18 g) u dimetilacetamidu (30 ml) i acetonitrilu (30 ml) sa trietilemainorn (4.1 ml) koji se dodaje na -10°C.

Reakciona smeša se meša 45 minuta izmedju -5°C i -10°C. Hladjenje se tada ukloni i reakcija se meša još 1 čas, pri čemu se u toku ovog perioda postigne obična temperatura. Rastvarač se ukloni pod smanjenim pritiskom i ostatak se raspodeli izmedju atilacetata i vode. Organska faza se ispere sa slanim rastvorom i spojeni vodeni ekstrakti ekstrahuju i

- 54 se sa e.tilacetatom.

Spojeni etilacetatni ekstrakti se suše u prisustvu aktivnog uglja i rastvarač se ukloni pod smanjenim pritiskom. Ostatak se tretira sa izopropiletrora tako da daje naslovno jedinjenje (5.80 g).

(^Nd^u^žol) 1780 cm^ ( p-1 akt aro) ί (CDC1₇) vrednosti uključuju 2.74 (s, trifenilraetil) 8.66 (s, t-butil).

b) (6R,7R)-7-/(Z)-2-(2-aminotiazol-4-iI)-2-(l-karboksiviklo-r but-l-oksiimino)acetamido/-3-(l-piridinijummetil)cef-3-em-4karboksilna kiselina dihlorhidrat

Proizvod iz faze a), (2.57 g) se meša na običnoj temperaturi u smeši 98% mravlje kiseline (15 ml) i koncentrovane h?_orovodonične kiseline (0.9 ml) 1 čas. Sroeša se tada filtruje i rastvarač se ukloni pod smanjenim pritiskom. Dobiveni ostatak se tretira sa acetonom tako da se proizvodi naslovno jedinjenje (1.79 g).

9max (njudžol) 1785 cm’'^- (p-laktam) £ vrednosti (D2=tNaHC0^) uključuju 1.05, 1.42, 1.91 (m, piridinijum protoni), 3-ol (s, aminotiazolov proton) 4.13 (d, J 5Hz, C? proton), 4.68 (d, J 5Hz, C-6 proton) 7.4-8.4 (širok m, ciklobutil protoni).

Dimetilacetamid (1/3 mola) i acdton (1/2 mola) na osnovu n.m.r. Hlor, nadjeno 9-2% (^2^24^07^2^2 + 1/3 mola dimetilacetarnida + 1/2 mola acetona + 7«4% vode zahteva Cl, 9-5%) /

Primer 6 (a) (6P,7R)-7-/(Z)-2-(2-Tritilaminotiazol-4-il)-2-(2-tbutoksikarbonilprop-2-oksiiinino)acetamido/-3-r(l-piridinij υ mme t i1)ce f-3-em-4-karboksi1at,Ν,Ν-dimetilformamidni solvat

- 35 Pino podeljeni proizvod iz Primera 8(a) doda se mešanom

N,N-dimetilformamidu (15 ml) na 23°· Supstanca se rastvara i ubrzo posle toga zapocinje kristalizacija, mešana smeša se razblaži ukapavanjem diizopropiletra (20 ml). Supstanca se nakupi filtracijom tako da se dobiva naslovno jedinjenje (3.06 g), u boliku bezbojnih iglica.

I!,N-dimetilformamid pomocu nmr =2.5 mola(DkSO-d^): 2.4-3-o (m, tritil); 3*32 (s, aminotiazolov nroton iz prstena); 0.47, 1.3θ, 1.82 (piridinijum protoni); 4.34 (m, C-7 proton); 4.92 (d, J-5, C-6 proton); 8.64 (s,

(C = 1.1 u metanolu).

b) (6R,)-7-/(^)-2-(2-Aminotiazol-4-il)-2-(karbokslprop-2oksiimino)-acetamido/-3-(l-Piridinijummetil)cef-3-rem-4-karboksilna kiselina dihlorhidrat

Proizvod iz Paze a) (2.1 g) se rastvori u mravljoj kiselini (10 ml) na 22°. Doda se koncentrovana hlorovodnična kiselina (0.8 ml) i posle 75 minuta, staložena supstanca se filtruje. Dalje se filtrat ispari. Ostatak se rastvori u metanolu i rastvor se doda na diizopropiletar, dajuci naslovno jedinjenje (1.35 g) /^/ρθ -14.7° (c=0.95 u pH 6 puferu) T(DMSO-dg) 0.28 (d, J 9, -C-NH )., 0.77 (d, J 6), 1.25 (t, J 6), I.70 (t, J 6, protoni^piridinijuro prstena); 3·θ (s, aminodiazol protoni); 3*99 (d d, J 9.5, 7-H); 4.67 (d J 5_} 6-H); 8.42 (s, -(CH^).

FARMACEVTSKI PRIMERI

Primer A - Suvi prah za inekcije

- 36 Formul, a po fi o li (6R,7K)-7-/(Z)-2-(2-Aminotiazol-4-il)-2-(2-karboksiprop-2oksiim:!.no)acetamido/-5-(l--piridinljummetil)cef-3-em-4 karboksilat 500 mg

Lizin-acetat 189 mg

Postunnk

Cofalosporinski antibiotik se pomeša sa lizin-acetatom i napuni se u staklenu fiolu. Čeoni prostor fiole se produva sa azotom i primeni se zatvaranje uklemljivanjem. Proizvod se rastvori, za davanje, dodavanjem 2 ml vode za inekcije.

Primer B - Suvi prah za inekcije

Napuni se sterilna mononatrijumova so (6R,7R)-7-/(Z)-2(aminotiazol-4-il)-2-(2-karboksiprop-2-oksiimino)acetamido/3-(l-piridinijummetil)cef-5-em-4-karboksilata u staklene fiole tako da svaka fiola sadrži količinu koja je ekvivalentna sa 1.0 g antibiotske kiseline. Punjenje se vrši aseptično pod plaštom sterilnog azota. Zatvore se fiole koriščenjem gumenih diskova iii čepova, držanih u položaju sa aluminijum slcim kapicama, tako da se sprečava razmena gasova iii ulaženje mikroorganizama. Proizvod se rekonstituiše rastvaranjem u vodi za inelccije iii u drugom podesnom sterilnora nosaču kratko vreme pre davanja.

Primer C - Inekcije sa dvostrukijn nakovanjem a) Napuniti aseptično količine od 500 mg sterilnog (6R,7R)-7-/(Z)-2-(2-aminotiazol-4-i1)-2-(2-karboksiprop-2-oksiimino) acetamiAo/-3-(l-piridinijummetil)cef-3-ero~4-karboksilata u staklene fiole pod plaštom sterilnog azota. Zatvoriti fiole koriščenjem gumenih diskova iii čepova, držanih u položaju

- 37 sa aluminijumski kapama, tako da se sprečava razmena gasova iii ulaženje mikroorganizama.

b) Napraviti 3.84% w/v rastvor natrijum-bikarbonata, izbistriti filtracijorn i napuniti 2.15 ml u čiste ampule. Pustiti ugljendioksid u sadržaj svake ampule jedan minut pre zatvaranja. Sterilizovati ampule autoklaviranjem i proveriti bistrimi.

c) liekonstituisati cefalosporinski antibiotik kratko vreme pre davanja rastvaranjem u 2.0 ml rastvora natrijum-bikarbonata.

Primer D - Suvi prah za inekcije

Formula po fioli (6R,7R)-7-/(Z)-2-(2-Aminotiazol-4-il(-2-(l-karboksiciklobutl-oksiimino)acetamido/-3-(l-piridinijummetil)cef-3-em-4- . · karboksilat 500 mg natrijum-karbonat, anbidrovan 47 mg

Postuoak

Cefalosporinski antibiotik se pomeša sa natrijum-karbonatom i napuni se u staklenu fiolu. Čeoni prostor fiole se produva sa azotom i izvrši se zatvaranje ukleroljivanjem. Proizvod se rastvori, za davanje, dodavanjem 2 ml vode za inekcije.

Primer E - Inekcija za veterinarko koriščenje Formula (61?, 71? )-7-/ (Z) -2- ( 2-Aminotiazol-4-il) -2-( 1-karboksi ciklobutl-oksiimino)acetamido/l-piridinijummetil)cef-3-em-4karboksilat 10$ w/v

Aluminijum-disterarat 2% w/v Etiloleat do 100% w/v do 100% w/v

- 38 Postupak

Dispergovati aluminijum-distearat u etiloleatu, zagrevati na 150° C 1 čas sa mešanjem i ohladiti na sobnu temperaturu. Dodati sterilni samleveni antibiotik aseptično u nosač i rafinisati sa mikserom velike brzine. Napuniti proizvod aseptično u fiole za inekcije i zatvoriti sa gumenim zaptivačima iii sa čepovima držanirn u položaju pomoču aluminijuraskih kapica.

Dos.73245 CE 254 14.05.1985.

P-l 231/7 9

NAVOD PRIJAVIOCA O NAJBOLJEM NJEMU POZNATOM NAČINU ZA PRIVREDNU «r

UPOTREBU PRIJAVLJENOG PRONALASKA

a) Dobivanje (6R,7R)-7-/(Z)-2-(2-trifenilmetilaminotiazol-4-il)-2(2-t-butoksikarbonilprop-2-oksiimino)acetamido/-3-(1-piridinijummetil) -cef-3-em-4-karboksilata

3.44 g (Z)-2-(2-t-butoksikarbonilprop-2-oksimino)-2-(2-tritilamino-tiazol-4-il)sircetne kiseline doda se izmešanom rastvoru fosforpentahlorida (1.38 g) u metilenhloridu (60 ml), ohladjenom na -10°C. Dobiveni rastvor se meša na -5°C tokom 30 min., i tada se ohladi na -10°C. Doda se 1.33 g trietilamina i potom 20 ml vode. Smeša se meša 3 min. na 0°C i tada se donja faza tokom 10 min. doda mešanoj suspenziji od 2.19 g (6R,7R)-7-amino-3-(1-piridinijummetil)cef-3-em-4-karboksilhe kiseline dihlorida u smeši sa N,N-dimetilformamida-acetontrila (30-30 ml), koja sadrži 3.03 g trietilamina ohladjenoj na -1O°C. Smeša se meša 45 min. na -10° do -5°C, i zatim 1 h bez hladjenja. Doda se 1 ml metanola. Metilenhlorid se odvoji isparavanjem pod sniženim pritiskom. Preostali rastvor se doda u 300 ml vode uz mešanje i tako se istaloži 4.89 g naslovnog jedinjenj

b) Dobivanje dihlorhidrata (6R,7R)-7-/(Z)-2-(2-aminotiazol-4-il)-2(2-karboksiprop-2-oksiimino)acetamido/-3-(1-piridinijummetil)cef-3-em-4-karboksilne kiseline

Gornji proizvod (3.38 g) se rastvori u 98% mravljoj kiselini (20 ml) uz mešanje. Doda se 1.2 ml konc. HCl, i smeša se meša 1 h. Staložena supstanca se odvoji vakuum destilacijom. Rastvarač se ukloni iz filtrata pparavanjem pod sniženim pritiskom tako da zaostaje ulje koje se tretira sa acetonom (30 ml) i dobiva 2.20 g naslovnog jedinjenja.

GLAXO GROUP Ltd., zas^jipaju : .

Λ —C.COOH tl \ ^Ra' ¹ 6

O.C.COOR

R^b (IH) (u kojoj su R^a i 1?^ kao što je definisano gore:, R predstavlja karboksilnu blokirajucu grupu; i R^f je amino iii zašticena amino grupa) iii sa sredstvom za acilovanje koje odgovara toj kiselini, posle čega se, prema potrebi i/ili ako se želi u svakom slučaju, vrši ma koja od sledečih reakcija ubilo kojoj odgovarajučoj sekvenci:• \ 2 - 3

i) konverzija A - izomera u zeljem Δ - izomer, ii) redukacija jedinjenja u ko jem je B S->0 tako da se obrazuje jedinjenje u kojem je 3 S.

iii) konverzija karboksilne grupe u netoksičnu so iii netoksičnu metabolički labilnu estarsku funkciju, i iv) uklanjanje ma kakvih karboksilnih blokirajučih i/ili K-zaštitnih grupa.

GLAXO GROUP Ltd., zastupaju :

. t βΕΟι'Ρ n

Dos.73245 25.130-584 04.10.1985. P-1231/79

Claims

PATENTNI 2 A H TE V :

Postupak za dobivanje cefalosporinskih antibiotika opšte'formule (I) u kojoj su R i R metil grupe iii zajedno pretstavljaju ciklobutib 4 liden iii ciklopentiliden grupu a R je vodonik, i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, naznačen time, što jedinjenje opšte formule (II)

R⁴ UD u kojoj je B sumpor, R je kao što je gore definisano, a isprekidana linija označava cef-3-em jedinjenje iii odgovarajuče jedinjenje sa grupom COOR⁵ u položaju-4, u kojoj je R⁵ vodonik iii C^alkoksi, prvenstveno t-butoksi grupa, i koja-imavezani hloridni jon, sa jedinjenjem formule (III) 7 r'

Λ

S N · C.COOH · .

II ^; N R^a - ^0.C.COOR⁶ (III)

I
-^2 i ” 7 u kojoj su R^a i R^a kao što je gore definisano, R⁷ trifenilmetilamino grupa a R^ je C₁_^alkoksi, prvenstvenot-butoksigrupa,udblikuhlorida kiseline natemperaturi u opsegu od -50 do 50°C, poželjno od' -20.....

do 30°C, u prisustvu inertnog rastvarača kao 'što je metilen hlorid, dimetilacetamid iii acetonitril, posle čega se vrši uklanjanje karboksilne blokirajuče grupe i N-zaštitne grupe hidrolizom, i po potrebi prevodjenje u farmaceutski prihvatljivu so.