FI67705B - Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara (6,7r)-7-((z)-2-(2-aminotiazol-4-yl)-2-(substituerad oxiimi noacetamido)-(eventuellt substituerat pyridiniummetyl)cef-3 -e-4-karboxylatfoereningar - Google Patents

Description

rBl m KUULUTUSJULKAISU , rj ry n ς »tSFit " ” UTLÄGGNINGSSKRIFT Ö//UO

1¾¾ C (45) Γ-ΐ- " · ;··.:· i: T> 1·';25 (51) Kv.lk.4/lnt.CI.* C 07 D 501/56 (21) Patenttihakemus — Patentansökning 80 1609 (22) Hakemispäivä — Ansökningsdag 1 9 · 0 5 · 8θ ^ (23) Alkupäivä — Giltighetsdag 25.05.79 (41) Tullut julkiseksi — Blivit offentlig 19*05.80

Patentti· ja rekisterihallitus ,. ...... .. „ , , . .....

• (4/4) Nahtaväksipanon ja kuut.julkaisun pvm.—

Patent- och registerstyrelsen ' ' Ansökan utlagd och utl.skriften publicerad 31 .01 .85 (32)(33)(31) Pyydetty etuoikeus — Begärd prioritet 26.05.78 26.05.70 Englanti-England(GB) 22911/78, 22913/78 (71) Glaxo Group Limited, Clarges House, 6-12 Clarges Street, London W1Y 8DH, Englanti-England(GB) (72) Cynthia Hilda 01Ca11aghan, . Gerrards Cross, Buckinghamshire,

David George Hubert Livermore, London, Christopher Earle Newall,

London, Engl anti-England(GB) (7*0 Oy Kolster Ab (5*0 Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten (6R,78)“7“/(Z)-2-(2-amino-t iatsol -*»-yy 1 i) -2- (subst i tuoi tu oksi - i mi no) asetami do/-/mahdol 1 i sest i sub st i tuo itu py r i d i n i ummetyy 1 i/ke f -3-em-*i-karboksy 1 aat t i yhd i s te i den valmistamiseksi - Förfarande för framstälIning av terapeutiskt använd-bara (6R,7R)-7-/(Z)-2-(2-ami not iazol-4-y1)-2-(subst ituerad ox i imi no)-acetamido/-/eventuel 11 substituerat pyridiniummetyl /cef-3_em-*4-karb-oxylatföreningar (62) Jakamalla erotettu hakemuksesta 791678 (kuulutusjulkaisu 67555) -Avdelad fran ansökan 791678 (utläggningsskrift 67555)

Keksintö koskee menetelmää terapeuttisesti käyttökelpoisten kaavan (I) mukaisten (6R,7R)-7-/1Z)-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(substituoitu oksi-imino)asetamido7~/mahdollisesti substituoitu pyridiniummetyyli7kef-3-em-4-karboksylaattiyhdisteiden ja niiden myrkyttömien suolojen valmistamiseksi, 2 NH, 67705 I 2

OH H

ii f I ®/“\ \ R" °"" ......Ny^H2\bj^ \°.C.C°0H <|οθθ Nr4

Rb ä b jossa R ja R voivat olla samoja tai erilaisia ja merkitsevät C.,- ci Id ** alkyyliä tai R ja R muodostavat yhdessä hiiliatomin kanssa, johon 4 ne ovat liittyneet, C^_^-sykloalkylideeniryhmän, ja R on vety tai 3- tai 4-karbamoyyli, sillä edellytyksellä, että Ra ja Rb eivät 4 samanaikaisesti tarkoita metyyliä, kun R on vety.

Kaavan (I) mukaisista kefalosporiini-yhdisteistä käytetään julkaisussa J. Amer. Chem. Soc., 1962, 84, 3400 esitettyjä termiin "kefam" perustuvia nimiä, jolloin "kefem" tarkoittaa kefam-rakennet-ta, jossa on yksi kaksoissidos.

Kefalosporiini-antibiootteja käytetään laajalti patogeenisten bakteerien ihmisillä ja eläimillä aiheuttamien tautien hoidossa, ja ne ovat erityisen hyödyllisiä sellaisten bakteerien aiheuttamien tautien hoidossa, joihin muut antibiootit, kuten penisilliinit, eivät tehoa, ja penisilliinille herkkien potilaiden hoidossa. Useissa tapauksissa on edullista käyttää kefalosporiiniantibioottia, jolla on aktiviteettia sekä gram-positiivisia että gram-negatiivisia mikro-organismeja vastaan.

GB-patenttijulkaisussa no. 1 399 086 on kuvattu uusi kefalo-sporiiniantibioottien luokka, jonka yhdisteillä on synkonfiguraati-ossa oleva 7.^-( -eetteröity-oksi-imino)-asyyliamidoryhmä. Näille antibiooteille on ominaista korkea antibioottinen aktiviteetti monia gram-positiivisia ja gram negatiivisia organismeja vastaan samalla kun ne ovat erityisen kestäviä useiden gram-negatiivisten organismien tuottamien -laktamaasien suhteen.

Tämän yhdisteluokan keksiminen on innostanut lisätutkimuksiin samalla alueella, jotta löydettäisiin yhdisteitä, joilla on parantuneet ominaisuudet esim. tiettyjä, varsinkin gram-negatiivisia organismeja vastaan.

GB-patenttijulkaisussa no. 1 496 757 on kuvattu kefalosporii- ni-antibiootteja, joissa on kaavan R.C.CO.NH- 3 67705 N f (A) ''N). (CH.) C (CH0) COOH 2 m. λ n

iB

A

mukainen 7 /0 -asyyliamidoryhmä (jossa R on tienyyli tai furyyli, R

g ja R voivat merkitä monia erilaisia ryhmiä, esimerkiksi C^_^-alkyy-liä tai yhdessä hiiliatomin kanssa, johon ne ovat liittyneet, C^_--sykloalkylideeniä, ja m ja n ovat kumpikin 0 tai 1, jolloin m+n on 0 tai 1). Nämä yhdisteet ovat syn-isomeerejä tai syn- ja anti-isomee-rien seoksia, jotka sisältävät vähintään 90% syn-isomeeria. Kefalo-sporiini-molekyylin 3-asema voi olla substituoimaton, tai siinä voi olla erilaisia substituentteja. Näiden yhdisteiden on havaittu olevan erityisen aktiivisia gram-negatiivisia organismeja vastaan.

GB-patenttijulkaisussa no. 1 522 140 on kuvattu kaavan (B) R1 . C . CO. NH--_ R3 s. | LciTY <b> coo 1 2 mukaisia kefalosporiineja (R on furyyli tai tienyyli, R on C^-C^-

alkyyli, CQ-C7-sykloalkyyli, furyylimetyyli tai tienyylimetyyli, ja 3 J

R on vety tai karbamoyyli-, karboksi-, karboksimetyyli-, sulfo- tai metyyliryhmä), jotka ovat syn-isomeereja tai syn- ja anti-isomeerien seoksia, joissa on vähintään 90% syn-isomeeria. Näillä yhdisteillä on korkea antibakteerinen aktiviteetti useita erilaisia gram-positii-visia ja gram-negatiivisia organismeja vastaan. Ne ovat myös erittäin pysyviä gram-negatiivisten organismien tuottamien /3 -laktamaa-sien suhteen, ja niillä on myös hyvä in vivo pysyvyys.

Näistä yhdisteistä on kehitetty muita samankaltaisen rakenteen omaavia yhdisteitä, kun on pyritty löytämään antibiootteja, joiden antibioottinen aktiviteettispektri olisi laajempi ja/tai aktiviteetti gram-negatiivisia organismeja vastaan suurempi. Tässä kehitystyössä on paitsi muunnettu edellä esitetyssä kaavassa 7 /3 -asyyliamidoryhmää myös liitetty kefalosporiinimolekyylin 3-asemaan 67705 erityisiä ryhmiä. Esimerkiksi BE-patenttijulkaisussa 852 427 on kuvattu kefalosporiineja, jotka kuuluvat GB-patenttijulkaisun 1 399 086 suojapiiriin, joissa edellä olevan kaavan (A) mukaisissa yhdisteissä R voidaan korvata monin erilaisin orgaanisin ryhmin, mm. 2-aminotiatsol-4-yyliryhmällä, ja oksi-iminoryhmän happiatomi on liittynyt alifaattiseen hiilivetyryhmään, joka voi olla substituoitu esimerkiksi karboksilla. Näissä yhdisteissä on 3-asemassa substitu-enttina asyylioksimetyyli-, hydroksimetyyli, formyyli- tai mahdollisesti substituoitu heterosykli-tiometyyliryhmä.

BE-patenttijulkaisussa no. 836 813 on kuvattu kefalosporiineja, joissa edellä olevassa kaavassa (A) ryhmän R tilalla voi olla esimerkiksi 2-aminotiatsol-4-yyli, ja oksi-iminoryhmä on hydroksi-imino tai suojattu hydroksi-imino-, esim. metoksi-iminoryhmä. Näissä yhdisteissä kefalosporiinimolekyylin 3-asemassa on substituenttina metyyli, joka voi mahdollisesti olla substituoitu monilla erilaisilla nukleofiilisten yhdisteiden tähteillä, esim. pyridiniumryhmällä, joka voi olla substituoitu esim. karbamoyyliryhmällä. Tässä BE-patentti-julkaisussa ei mainita näillä yhdisteillä olevan antibioottista aktiviteettia, vaan yhdisteiden mainitaan olevan välituotteita valmistettaessa tässä BE-patenttijulkaisussa esitettyjä antibiootteja.

BE-patenttijulkaisussa no. 853 545 on kuvattu kefalosporiineja, joiden 7 /3-asyyliamido-sivuketju on ensisijaisesti 2-(2-amino-tiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-imiasetamidoryhmä, ja 3-asemassa oleva substituentti määritelty pääasiassa samalla tavalla kuin BE-patentti julkaisussa no. 836 813. Esimerkkejä on erityisesti yhdisteitä, joiden 3-asemassa on pyridiniummetyyli- tai 4-karbamoyyli-pyridiniummetyyliryhmä.

5 67705

Fl-patenttihakemuksesta 771 951 tunnetaan kefalosporiini-yhdisteitä, jotka eroavat nyt kuvatuista mm. siinä, että niissä ei olesyn-oksiimi-substituenttiin liittynyttä, karboksilla substitu-oitua alkoksiryhmää, joka yhdessä 3-metyyliin liittyneen pyridinium-ryhmän kanssa tekee kaavan (I) mukaiset yhdisteet erityisen edullisiksi. Mainitun FI-hakemuksen esimerkistä 17 tunnetaan 7-/2-(2-imino-4-tiatsol-4-yyli)-2-hydroksi-iminoasetamido/-3-(4-karbamoyylipyridiniummetyyli)-kef-3-em-4-karboksylaatti (syn-iso-meeri). Kyseessä oleva yhdiste ei kuitenkaan ole kaupallisesti saatavissa. Vastaava 3-pyridiniummetyyli-analogi on sitävastoin saatavissa ja jäljempänä esitetyissä yhdisteiden aktiivisuutta kuvaavissa taulukoissa sitä on käytetty vertailuyhdisteenä. Kyseessä oleva yhdiste soveltuu erittäin hyvin vertailuyhdisteeksi, koska on tunnettua, että 3-pyridiniummetyyliyhdisteet ovat vähintään yhtä aktiivisia kuin vastaavat karbamoyylisillä substituoidut yhdisteet. Taulukoissa esitetyt arvot osoittavat, että kaavan (I) mukaiset yhdisteet ovat huomattavasti aktiivisempia kuin vertailu-yhdiste .

Kaavan (I) mukaiset yhdisteet ovat syn-isomeereja. Syn-isomeerimuoto määritellään ryhmän

Ra

-O.C.COOH

konfiguraatiolla karboksamidoryhmän suhteen. Tässä hakemuksessa syn-konfiguraatiota esitetään rakenteella 6 n„2 67?05

X

\--/ C.CO.NH- V f

ND.C.COOH

'b

R

Koska kaavan (I) mukaiset yhdisteet ovat geometrisia isomeerejä, on käsitettävä, että ne voivat olla jonkin verran anti-isomeeria sisältäviä seoksia.

Kaavan (I) mukaiset yhdisteet voivat esiintyä eri tautomeerei-na (esimerkiksi 2-imidatsolyyliryhmä) ja on käsitettävä, että yhdisteryhmä käsittää myös tällaiset tautomeeriset muodot, esim. 2-imino-tiatsolinyylimuodon. Lisäksi edellä olevalla kaavalla (I) esitetyt yhdisteet voivat olla myös vaihtoehtoisissa kahtaisionimuodoissa, esim. sellaisissa, joissa 4-karboksyyliryhmässä on protoni ja 7-sivu- ketjun karboksyyliryhmä on esim. deprotonoitu.

3 b

Kun r” ja Rd edellä esitetyssä kaavassa ovat erilaisia C^_^-alkyyliryhmiä, on hiiliatomi, johon ne ovat liittyneet asymmetrinen. Tällaiset yhdisteet ovat diastereoisomeerisia, ja yhdisteryhmä käsittää kaikki erilaiset diastereoisomeerit sekä niiden seokset.

Kaavan (I) mukaisilla yhdisteillä on laaja antibioottinen spektri. Niiden aktiivisuus gram-negatiivisia organismeja vastaan on erittäin korkea ja koskee myös monia-laktamaasia tuottavia gram-negatiivisia kantoja. Yhdisteet ovat erittäin pysyviä /3 -lakta-maasia tuottavien gram-negatiivisten organismien suhteen.

Kaavan (I) mukaisilla yhdisteillä on havaittu olevan epätavallisen korkea aktiviteetti Pseudomonas-kantoja, esim. Pseudomonas aeruginosakantoja vastaan, sekä erilaisia Enterobacteriaceaeheimon jäseniä vastaan (esimerkkeinä mainittakoon kannat Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Salmonella typhimurium, Shigella sonnei, Enterobacter cloacae, Serratia marceascens, Providense-lajit, Proteus mirabilis ja erityisesti indolipositiiviset Proteus-organismit, kuten Proteus vulgaris ja Proteus morgaani) ja Haemophilus influezae-kan-toja vastaan.

7 67705

Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden ominaisuudet ovat hyvin verrattavissa aminoglykosidien, kuten amikasiinin tai gentamisiinin ominaisuuksiin. Tämä koskee varsinkin niiden aktiviteettia Pseudo-monas-organismeja vastaan, joihin useimmat kaupallisesti saatavina olevat antibiootit eivät tehoa. Toisin kuin aminoglykosidit, kefalo-sporiinit ovat normaalisti erittäin vähän myrkyllisiä ihmisille. Aminoglykosidien käyttöä ihmislääketieteessä rajoittaa tai vaikuttaa usein niiden suuri myrkyllisyys. Esillä olevan keksinnön mukaisilla kefalosporiineilla on siten suuria etuja aminoglykosideihin verrattuna.

Yleisen kaavan (I) mukaiset yhdisteet voivat muodostaa suoloja jommankumman karboksyyliryhmän tai molempien karboksyyliryhmien reaktiossa. Tällaisia suoloja ovat epäorgaanisten emästen suolat, kuten alkalimetallisuolat (esim. Na- tai K-suolat), maa-alkalimetallisuolat (esim. Ca-suolat), aminohapposuolat (esim. lysiini- ja arginiinisuo-lat), orgaanisten emästen suolat (esim. prokaiini-, fenyylietyyli-bentsyyliamiini-, dibentsyylietyleenidiamiini, etanoliamiini-, die-tanoliamiini- ja N-metyyliglukosamiinisuolat). Muita myrkyttömiä suoloja ovat esimerkiksi happoadditiosuolat, kuten suolat kloorivety-hapon, bromivetyhapon, rikkihapon, typpihapon, fosforihapon, muurahaishapon ja trifluorietikkahapon kanssa. Suolat voivat olla myös resinaatteina, jotka on muodostettu esim. polystyreenihartsin tai verkkoutetun polystyreenidivinyylibentseenikopolymeerihartsin kanssa, joka sisältää amino- tai kvaternäärisiä aminoryhmiä tai solfonihappo-ryhmiä, tai karboksyyliryhmiä sisältävän hartsin kanssa, esim. poly-akryylihappohartsin kanssa. Kaavan (I) mukaisia yhdisteitä voidaan käyttää terapeuttisiin tarkoituksiin liukoisina emässuoloina (esim. alkalimetalli-, kuten Na-suoloina), koska tällaiset suolat lääkeannon jälkeen nopeasti imeytyvät kehoon. Jos kuitenkin johonkin erityistarkoitukseen tarvitaan kaavan (I) mukaisten yhdisteiden liukenemattomia suoloja, esim. pitkävaikutteisiin lääkevalmisteisiin, niin tällaisia suoloja voidaan valmistaa tavallisella tavalla, esim. sopivien orgaanisten amiinien kanssa.

Näitä ja muita suolajohdannaisia, kuten tolueeni-p-sulfoniha-pon ja metaanisulfonihapon suoloja voidaan käyttää välituotteina valmistettaessa ja/tai puhdistettaessa kaavan (I) mukaisia yhdisteitä.

8 67705

Korkean antibioottisen aktiviteettinsa vuoksi edullisen yhdisteryhmän muodostavat sellaiset kaavan (I) mukaiset yhdisteet, 4 joissa R on vety, so. yhdisteet, joilla on yleinen kaava f2 H H (la) \ / ' c C.CO.NH-------η---- N Ra ' ®'· \ O.C.COOH O- j Z \ / COO® Q. Id jossa R ja R merkitsevät samaa kuin edellä, ja niiden myrkyttömät suolat.

Edullinen kaavan (Ia) mukainen yhdiste on (6R,7R)-7-/(Z)-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(1-karboksisyklobut-1-oksi-imino)asetamido/- 3-(1-pyridiniummetyyli)-kef-3-em-4-karboksylaatti ja sen myrkyttömät suolat.

Muita edullisia kaavan (I) mukaisia yhdisteitä ovat seuraavat yhdisteet ja niiden myrkyttömät suolat: (6R, 7R) -7-/f(Z) -2- (2-aminotiatsol-4-yyli) -2- (2-karboksiprop-2-oksi-imino) asetamidoj7-3- (4-karbamoyyli-1 -pyridiniummetyyli) -kef-3-em-4-karboksylaatti, (6R, 7R) -7-/f(Z) -2- ( 2-aminotiatsol-4-yyli) -2- (1 -karboksisyklo-prop-1-oksi-imino)asetamido7-3-(1-pyridiniummetyyli)-kef-3-em-4-karboksylaatti, (6R,7R)-7-/j(Z)-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(1-karboksisyklo-pent-1-yylioksi-imino)asetamidoy-3-(1-pyridiniummetyyli)-kef-3-em-4-karboksylaatti ja (6R,7R)-7-/1Z)-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(1-karboksisyklobut- 1 -oksi- imino) asetamid<£7-3- ( 4-karbamoyy li-1 -pyridiniummetyyli) -kef-3-em-4-karboksylaatti.

Muita kaavan (I) mukaisia yhdisteitä ovat esimerkiksi sellaiset, joissa ryhmillä Ra, Rb ja R on seuraavat merkitykset: 67705

Ra Rb R4 a) AIkyy1iryhmät

-CH3 "C2H5 H

-C2H5 -C2H5 -CH3 -CH3 3-CONH2 -c2h5 -c2h5 -CH3 " 4-CONH2 -C H " " ^2n5 10 67705

Ra--- C - Rb R4 _1__ b) Sykloalkylideeniryhmät

Syklobutylideeni 3-CONH2

Syklopentylideeni 3-CONH2 " 4-CONH2

Sykloheksylideeni H

" 3-CONH2 " 4-CONH2

Syklopropylideeni 3-CONH2 " 4-CONH2 11 67705

Kaavan (I) mukaisia yhdisteitä voidaan käyttää monien erilaisten patogeenisten bakteerien ihmisillä ja eläimillä aiheuttamien tautien hoitoon, kuten hengitysaineiden infektioiden ja virtsatieinfektioiden käsittelyyn.

Kaavan (I) mukaisia yhdisteitä ja niiden myrkyttömiä suoloja voidaan valmistaa siten, että (A) yhdiste, jonka kaava on ψ ¥ i > H,N__(II> J-CH„N \) -Ν-γ—- 2 coo θ 4 jossa B on >S tai >S->0, R on vety tai 3- tai 4-karbamoyyliryhmä, ja 2-, 3- ja 4-asemien välissä oleva katkoviiva osoittaa, että yhdiste on kef-2-em- tai kef-3-em-yhdiste, tai sen suola tai N- silyylijohdannainen tai vastaava yhdiste, jonka 4-asemassa on 5 5 kaavan -C00R mukainen ryhmä, jossa R on vety tai karboksyylisuo- 0 jaryhmä, jolloin yhdisteeseen liittyy anioni A , asyloidaan hapolla, jonka kaava on R7

X

S N

\—C.COOH (III) V K3 x. i /:

O.C.COOR

kb 3 b 6 jossa R ja R merkitsevät samaa kuin edellä, R on karboksyylisuo- 7 jaryhmä ja R on amino- tai suojattu aminoryhmä, tai sitä vastaavalla asylointiaineella, tai (B) yhdiste, jonka kaava on R7

As, H H

\ / ! ! b (IV) \—^J C.CO.NH---·/ \ pa ' Il

8a o" V" XCH.X

O.C.COOR ° I 2 ! k COOR8

R

_____ I: __ 12 67705 jossa Ra, R^3, R^, B ja katkoviiva merkitsevät samaa kuin edellä, 8 R ja R merkitsevät toisistaan riippumatta vetyjä tai karbok-syylisuojaryhmää ja X on nukleofiilin korvattavissa oleva tähde, tai sen suola saatetaan reagoimaan pyridiiniyhdisteen kanssa, jonka kaava on O* 4 jossa R merkitsee samaa kuin edellä, minkä jälkeen tarvittaessa ja/ tai haluttaessa suoritetaan seuraavat reaktiot missä tahansa sopivassa järjestyksessä: K Δ2 -isomeeri muutetaan halutuksi Δ3 l-isomeeriksi, ii) yhdiste, jossa B on >S->0, pelkistetään yhdisteeksi, jossa B on >S, iii) karboksyyliryhmä muutetaan myrkyttömäksi suolaksi, ja iv) mahdolliset karboksyyli- ja/tai N-suojaryhmät poistetaan.

Menetelmäehdossa (A) kaavan (II) mukainen lähtöaine on edullisesti sellainen, jossa B on >S ja katkoviiva vastaa kef-3-em-yhdis-tettä. Erityisen sopivaksi lähtöaineeksi menetelmässä A käytettäväksi on osoittautunut N-(7-aminokef-3-em-3-yylimetyyli)pyridinium-41-karboksylaattidihydrokloridi, koska sitä voidaan valmistaa erittäin puhtaana.

Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden valmistuksessa käytettäviä sopivia asylointiaineita ovat esimerkiksi happohalogenidit,varsinkin happokloridit tai bromidit. Tällaisia asylointiaineita voidaan valmistaa saattamalla kaavan (III) mukainen yhdiste tai sen suola reagoimaan halogenointiaineen kanssa, esim. fosforipentakloridin, tionyylikloridin tai oksalyylikloridin kanssa.

Asylointi happohalogenidilla voidaan suorittaa vesipitoisessa tai vedettömässä reaktioväliaineessa sopivasti -50 - +50°C:ssa, edullisesti -20 - +30°C:ssa, ja haluttaessa happoa sitovan aineen läsnäollessa. Sopivia reaktioväliaineita ovat vesipitoiset ketonit, kuten vesipitoinen asetoni, esteri, kuten etyyliasetaatti, haloge-noidut hiilivedyt, kuten metyleenikloridi, amidit, kuten dimetyyli-asetamidi, nitriilit, kuten asetonitriili, ja kahden tai useamman 13 67705 tällaisen liuottimen seokset. Sopivia happoa sitovia aineita ovat tertiääriset amiinit (esim. trietyyliamiini tai dimetyylianiliini), epäorgaaniset emäkset (esim. kalsiumkarbonaatti tai natriumbikarbonaatti) ja oksiraanit, kuten alemmat 1,2-alkyleenioksidit (esim. etyleenioksidi tai propyleenioksidi), jotka sitovat asylointireak-tiossa vapautuneen halogeenivedyn.

Kaavan (III) mukaisia happoja voidaan itse käyttää asylointi-aineina valmistettaessa kaavan (I) mukaisia yhdisteitä. Asylointi käyttäen kaavan (III) mukaisia happoja suoritetaan edullisesti kon-densointiaineen, esim. karbodi-imidin, kuten N,N'-disykloheksyyli-karbodi-imidin tai N-atyyli-N'- ^ -dimetyyliaminopropyylikarbodi-imidin läsnäollessa, karbonyyliyhdisteen, kuten karbonyylidi-imidat-solin, tai isoksatsoliumsuolan, kuten N-etyyli-5-fenyyli-isoksatso-liumperkloraatin läsnäollessa.

Asylointi voidaan suorittaa käyttämällä muita kaavan (III) mukaisen hapon amidia muodostavia johdannaisia, kuten esim. aktivoitua esteriä, symmetristä anhydridiä tai seka-anhydridiä (esim. pivaliinihapon tai halogeeniformiaatin, kuten alkyylihalogeeniformi-aatin kanssa muodostettua). Seka-anhydridejä voidaan muodostaa myös fosforihappojen (fosforihappo tai fosforihapoke), rikkihapon tai alifaattisten tai aromaattisten sulfonihappojen (esim. tolueeni-p-sulfonihappo) kanssa. Aktivoitu esteri voidaan sopivasti muodostaa in situ käyttäen esim. 1-hydroksibentsotriatsolia edellä esitetyn kondensointiaineen läsnäollessa. Toisaalta aktivoitu esteri voidaan muodostaa etukäteen.

Asylointireaktio vapaan hapon tai sen edellä mainitun amidia muodostavan johdannaisen kanssa suoritetaan edullisesti vedettömässä reaktioväliaineessa, esim. metyleenikloridissa, tetrahydrofuraanissa, dimetyyliformamidissa tai asetonitriilissä.

Haluttaessa edellä kuvattu asylointireaktio voidaan suorittaa katalysaattorin, kuten 4-dimetyyliaminopyridiinin läsnäollessa.

Kaavan (III) mukaisia happoja ja niitä vastaavia asylointi-aineita voidaan haluttaessa valmistaa ja käyttää happoadditiosuolo-jensa muodossa. Esimerkiksi happoklorideja voidaan sopivasti käyttää hydrokloridisuoloina ja happobromideja hydrobromidisuoloina.

Menetelmävaihtoehdossa (B) kaavan (V) mukainen pyridiiniyhdis-te toimii nukleofiilina, joka saattaa korvata kaavan (IV) mukaisessa 14 67705 kefalosporiinissa erilaisia substituentteja X. Jossain määrin korvausreaktion helppous riippuu hapon HX, josta substituentti on johdettu, vakiosta pK . Siten vahvoista hapoista johdetut atomit tai ryhmät X on yleensä helpompi korvata muin heikoista hapoista johdetut. Korvausreaktion helppous on myös jossain määrin riippu- 4 vainen kaavan (V) mukaisen yhdisteen substituentin R luonteesta.

X:n korvaaminen kaavan (V) mukaisella pyridiiniyhdisteellä voidaan suorittaa reaktanttien ollessa liuoksessa tai suspensiossa. Reaktio suoritetaan edullisesti käyttäen 1-10 moolia pyridiiniyh-distettä.

Nukleofiiliset korvausreaktiot sellaisilla kaavan (IV) mukaisilla yhdisteillä, joissa X on halogeeni tai asyylioksi, voidaan suorittaa esimerkiksi seuraavassa kuvatulla tavalla.

Asylioksiryhmät

Nukleofiilisessä korvausreaktiossa kaavan (V) mukaisen pyri-diiniyhdisteen kanssa käytetään lähtöaineina sopivasti sellaisia kaavan (IV) mukaisia yhdisteitä, joissa X on asetoksi. Vaihtoehtoisia tähän yhdisteluokkaan kuuluvia yhdisteitä ovat sellaiset kaavan (IV) mukaiset yhdisteet, joissa X on substituoidun etikkahapon tähde, esim. kloorietikkahapon, dikloorietikkahapon tai trifluorietikkaha-pon tähde.

Sellaisten kaavan (IV) mukaisten yhdisteiden korvausreaktio, joissa on tähän luokkaan kuuluva substituentti X, varsinkin jos X on asetoksi, voi tapahtua helpommin, kun reaktioväliaineessa on läsnä jodidi- tai tiosyanaatti-ioneja. Tämän tyyppisiä reaktioita on kuvattu yksityiskohtaisesti GB-patenttijulkaisuissa no. 1 132 621 ja 1 171 603.

Substituentti X voi olla myös johdettu halogeenimuurahaisha-posta, kuten kloorimuurahaishaposta, tai karbamiinihaposta.

Kun käytetään sellaista kaavan (IV) mukaista yhdistettä, jossa X on asetoksi tai substituoitu asetoksi, on yleensä edullista, g että ryhmä R kaavassa (IV) on vety ja B on >S. Tässä tapauksessa reaktio suoritetaan edullisesti vesipitoisessa väliaineessa, edullisesti pH-arvossa 5-8, varsinkin 5,5-7.

Edellä kuvattu menetelmä käyttäen kaavan (IV) mukaisia yhdisteitä, joissa X on substituoidun etikkahapon tähde, voidaan suorittaa siten kuin on kuvattu GB-patenttijulkaisussa no.1 241 657.

15 67705

Kun käytetään kaavan (IV mukaisia yhdisteitä, joissa X on asetoksiryhmä, niin reaktio voidaan sopivasti suorittaa 30-110°c:ssa, edullisesti 50-80°C:ssa.

Halogeenit ähtöaineena nukleofiilisessä korvausreaktiossa kaavan (V) mukaisen yhdisteen kanssa voidaan myös sopivasti käyttää kaavan (IV) mukaisia yhdisteitä, joissa X on kloori, bromi tai jodi. Kun käytetään tällaisia kaavan (IV) mukaisia yhdisteitä, B voi olla g >S-> O ja R voi olla karboksyylisuojaryhmä. Reaktio suoritetaan sopivasti vedettömässä väliaineessa, joka edullisesti sisältää yhtä tai useampaa orgaanista liuotinta, sopivimmin polaarista liuotinta, kuten eetteriä, esim. dioksaania tai tetrahydrofuraania, esteriä kuten etyyliasetaattia, amidia, esim. formamidia ja N,N-dimetyyli-formamidia, tai ketonia, esim. asetonia. Joissakin tapauksissa voidaan itse pyridiiniä käyttää liuottimena. Muita sopivia liuottimia on kuvattu yksityiskohtaisesti GB-patenttijulkaisussa no.1326531. Reaktioväliaine ei saisi olla vahvan hapan eikä vahvan emäksinen.

Jos reaktio suoritetaan käyttäen sellaista kaavan (IV) mukaista yh- 8 s a, distettä, jossa R ja R ovat karboksyylisuojaryhmiä, niin 3-pyri-diniummetyyli-yhdiste saadaan vastaavana halogenidisuolana, jolle voidaan suorittaa haluttaessa yksi tai useampi ioninvaihtoreaktio halutun anionin saamiseksi.

Kun käytetään sellaista kaavan (IV) mukaista yhdistettä, jossa X on halogeeniatomi, kuten edellä kuvattiin, niin reaktio suoritetaan sopivasti -10 - +50°C:ssa, edullisesti +10 - +30°C:ssa.

Reaktiotuote voidaan eristää reaktioseoksesta, joka saattaa sisältää esim. muuttumatonta kefalosporiinilähtöainetta ja muita aineita, erilaisin menetelmin, kuten uudelleenkiteyttämällä, pylväs-kromatografiällä ja käyttämällä ioninvaihtajia (esim. kromatografoi-malla ioninvaihtohartsilla) tai makroretikulaarihartseja.

Keksinnön mukaisesti saadut Z\^-kefalosporiiniesterijohdannaiset voidaan muuttaa vastaaviksi Δ3 -johdannaisiksi esim. käsittelemällä Δ2 -esteriä emäksellä, kuten pyridiinillä tai trietyyli-amiinilla.

Kef-2-em-reaktiotuote voidaan myös hapettaa vastaavaksi kef- 3-em~1-oksidiksi esim. perhapolla, kuten peretikkahapolla tai m-klooriperbentsoehapolla; saatu sulfoksidi voidaan haluttaessa 16 67705 sitten pelkistää vastaaviksi kef-3-em-sulfidiksi seuraavassa kuvatulla tavalla.

Kun saatu yhdiste, jossa B on >S->0, halutaan muuttaa vas taavaksi sulfidiksi, se voidaan suorittaa pelkistämällä vastaava asyylioksisulfonium- tai alkoksisulfoniumsuola, joka on valmistettu in situ reaktiossa 3 sim. asetyylikloridin kanssa, kun kyseessä on asetoksisulfoniumsuola, jolloin pelkistys suoritetaan esim. natri-umditioniitilla tai jodidi-ionilla, kuten kaliumjodidin liuoksessa veden kanssa sekoittuvassa liuottimessa, esim. etikkahapossa, asetonissa, tetrahydrofuraanissa, dioksaanissa, dimetyyliformamidissa tai dimetyyliasetamidissa. Reaktio voidaan suorittaa -20 - +50°C:ssa.

Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden emäsuoloja voidaan muodostaa saattamalla kaavan (I) mukainen happo reagoimaan sopivan emäksen kanssa. Esimerkiksi natrium- tai kaliumsuoloja voidaan siten valmistaa käyttämällä vastaavaa 2-etyyliheksanoaatti- tai vetykarbonaatti-suolaa. Happoadditiosuoloja voidaan valmistaa saattamalla kaavan (I) mukainen yhdiste reagoimaan sopivan hapon kanssa.

Kun kaavan (I) mukaista yhdistettä saadaan isomeeriseoksena, niin syn-isomeeri voidaan saada esim. tavanomaisin menetelmin, kuten kiteyttämällä tai kromatografiällä.

Yleisen kaavan (I) mukaisten yhdisteiden valmistuksessa keksinnön mukaisesti käytetään lähtöaineina yleisen kaavan (III) mukaisia yhdisteitä ja vastaavia happohalogenideja ja anhydridejä edullisesti syn-isomeereina tai syn- ja anti-isomeerien seoksina, jotka sisältävät vähintään 90% syn-isomeeriä.

3. K

Kaavan (III) mukaisia happoja (joissa R ja RD eivät muodosta hiiliatomin kanssa, johon ne ovat liittyneet, syklopropylideeniryh-mää) voidaan valmistaa eetteröimällä yhdiste, jolla on kaava R7 \ / 9 (vl)

N=^-C.COOR

I! N.

^OH

7 9 jossa R merkitsee samaa kuin edellä, ja R on karboksyylisuoja- ryhmä, reaktiossa yhdisteen kanssa, jolla on yleinen kaava, 67705

Ra T.C.COOR6 (VII) ’b

R

jossa Ra, Rb ja R^ merkitsevät samaa kuin edellä, ja T on halogeeni, kuten kloori, bromi tai jodi, sulfaatti tai sulfonaatti, kuten tosy- 9 laatti, ja poistamalla sitten karboksyylisuojaryhmä R . Isomeerien erottaminen voidaan suorittaa joko ennen eetteröintiä tai sen jälkeen. Eetteröintireaktio suoritetaan tavallisesti emäksen, esim. kaliumkarbonaatin tai natriumhydridin läsnäollessa, edullisesti orgaanisessa liuottimessa, kuten dimetyylisulfoksidissa, syklisessä eetterissä, kuten tetrahydrofuraanissa tai dioksaanissa, tai N,N-disubstituoidussa amidissa, kuten dimetyyliformamidissa. Näissä olosuhteissa oksi-iminoryhmän konfiguraatio ei olennaisesti muutu eetteröintireaktiossa. Reaktio tulisi suorittaa emäksen läsnäollessa, jos käytetään kaavan (VI) mukaisen yhdisteen happoadditiosuolaa.

Emästä tulisi käyttää riittävästi neutraloimaan nopeasti mainittu happo.

Yleisen kaavan (III) mukaisia happoja voidaan valmistaa myös saattamalla yhdiste, jolla on kaava R7 (Vili) /-CO. COOR9 7 9 jossa R ja R merkitsevät samaa kuin edellä, reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla on kaava

Ra H2N.O.C.COOR6 (IX) ib jossa Ra, Rb ja R^ merkitsevät samaa kuin edellä, ja poistamalla 9 sitten karboksyylisuojaryhmä R , ja tarvittaessa erottamalla syn-ja anti-isomeerit.

Viimeksimainittua reaktiota voidaan käyttää erityisesti sellaisten kaavan (III) mukaisten happojen valmistamiseen, joissa s b R ja R muodostavat yhdessä hiiliatomin kanssa, johon ne ovat ie 6770 5 liittyneet, syklopropyylideeniryhmän. Tässä tapauksessa tarvittavat kaavan (IX) mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa tavanomaisella tavalla, esim. BE-patenttijulkaisussa no. 866 422 kuvatulla tert-butyyli-1-amino-oksisyklopropaanikarboksylaatin valmistusmenetelmällä.

Kaavan (III) mukaiset hapot voidaan muuttaa vastaaviksi happo-halogenideiksi tai -anhydrideiksi tavanomaisin menetelmin, esim. edellä kuvatulla tavalla.

Kun kaavan(IV) mukaisessa yhdisteessä X on halogeeni, so. kloori, bromi tai jodi, niin kef-3-em-lähtöaineita voidaan valmistaa tavanomaisella tavalla, esim. halogenoimalla 7/3 -suojattu-amino-3-metyylikef-3-em-4-karboksyylihappoesteri-1 /3 -oksidi, poistamalla 7 /3 -suojaryhmä, asyloimalla saatu 7 /?* -aminoyhdiste vastaavan asyyliamidoryhmän muodostamiseksi, esim. analogisesti edellä kuvatun menetelmän (A) kanssa, pelkistämällä sitten 1 /3 -oksidiryhmä myöhemmässä vaiheessa. Tämä synteesi on kuvattu GB-patenttijulkaisussa no.

1 326 531. Vastaavia kef-2-em-yhdisteitä voidaan valmistaa NL-patenttijulkaisun 6 902 013 kuvaamalla tavalla saattamalla 3-metyyli-kef-2-em-yhdiste reagoimaan N-bromisukkinimidin kanssa, jolloin saadaan vastaava 3-bromimetyylikef-2-em-yhdiste.

Kun kaavan (IV) mukaisessa yhdisteessä X on asetoksiryhmä, niin tällaisia lähtöaineita voidaan valmistaa esim. asyloimalla 7-aminokefalosporaanihappo, esim. siten kuin edellä menetelmässä (A). Sellaisia kaavan (IV) mukaisia yhdisteitä, joissa X on asyylioksi-ryhmä, voidaan valmistaa asyloimalla vastaavia 3-hydroksimetyyli-yhdisteitä, joita voidaan valmistaa esim. hydrolysoimalla sopivien 3-asetoksimetyyliyhdisteitä, esim. siten kuin on kuvattu GB-patentti-julkaisuissa no. 1 474 519 ja 1 531 212.

Kaavan (II) mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa tavanomaisella tavalla esim. vastaavan 3-asetoksimetyyliyhdisteen nukleofii-lisella korvausreaktiolla sopivan nukleofiilin avulla, esim. GB-patentti julkaisussa no. 1 028 563 kuvatulla tavalla.

Toisessa menetelmässä kaavan (II) mukaisten lähtöaineiden valmistamiseksi vastaavasta suojatusta 7 /3-aminoyhdisteestä poistetaan suojaryhmä tavallisella tavalla esim. käyttäen PCl^:ä.

On huomattava, että joissakin edellä kuvatuissa reaktioissa saattaa olla tarpeen suojata kyseessä olevan yhdisteen herkästi reagoivat ryhmät epätoivottujen sivureaktioiden välttämiseksi.

Il 19 67705

Edellä esitetyissä reaktiosarjoissa saattaa olla esim. välttämätöntä suojata aminotiatsolyylin Nl^-ryhmä, esim. trityloimalla, asyloimalla (esim. klooriasetylointi), protonoimalla tai muilla sopivilla menetelmillä. Suojaryhmä voidaan sitten poistaa millä tahansa sopivalla menetelmällä, joka ei aiheuta halutun yhdisteen hajoamista, esim. trityyliryhmä voidaan poistaa käyttäen mahdollisesti halogenoitua karboksyylihappoa, esim. etikkahappoa, muurahaishappoa, kloorietikkahappoa tai trifluorietikkahappoa, tai mine-raalihappoa, kuten kloorivetyhappoa, tai tällaisten happojen seosta, edullisesti proottisen liuottimen, kuten veden läsnäollessa, tai poistettaessa klooriasetyyliryhmä käsittelemällä tiourealla.

Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden valmistuksessa tai tarvittavien lähtöaineiden valmistuksessa käytettävät suojaryhmät ovat mielellään ryhmiä, jotka voidaan helposti lohkaista pois missä tahansa reaktiosarjän sopivassa vaiheessa, edullisesti viimeisessä vaiheessa.

Sopivat karboksyylisuojaryhmät ovat alalla tunnettuja, ja niitä on esitetty esimerkiksi GB-patenttijulkaisussa no. 1 399 086. Sopivia suojattuja karboksyyliryhmiä ovat esim. aryyli-alempialkok-sikarbonyyliryhmät, kuten p-metoksibentsyylioksikarbonyyli, p-nitro-bentsyylioksikarbonyyli ja difenyylimetoksikarbonyyli, alempialkoksi-karbonyyliryhmät, kuten, tert-butoksikarbonyyli, ja alempihalogeeni-alkoksikarbonyyliryhmät, kuten 2,2,2-trikloorietoksikarbonyyli. Karboksyylisuojaryhmät (t) voidaan poistaa millä tahansa kirjallisuudesta tunnetulla sopivalla menetelmällä, kuten esim. monissa tapauksissa sopivalla happo- tai emäshydrolyysillä tai entsyymaatti-sella hydrolyysillä.

Keksinnön mukaisesti valmistetut antibiootit voidaan muodostaa sopiviksi farmaseuttisiksi koostumuksiksi ihmis- ja eläinlääketieteen käyttöön millä tahansa sopivalla tavalla, jota käytetään antibiottien valmistamiseen lääkekoostumuksiksi. Tällaiset lääke-koostumukset voivat olla tavanomaisina lääkemuotoina, jotka sisältävät tarvittavia farmaseuttisia kantaja- tai täyteaineita.

Keksinnön mukaisesti valmistetut antibioottiyhdisteet voidaan valmistaa esim. injektiovalmisteiksi, jotka ovat sopivissa yhden annoksen ampulleissa tai moniannoslääkepulloissa ja jotka saattavat 20 67705 sisältää säilöntäainetta. Koostumus voi olla suspension, liuoksen, öljy- tai vesiemulsion muodossa, ja se saattaa sisältää suspendoin-ti-, stabilointi ja/tai dispergointiaineita. Vaihtoehtoisesti aktiiviaine saattaa myös olla rekonstituoitavana jauheena, johon ennen käyttöä lisätään sopivaa väliainetta, kuten steriiliä, pyro-geenivapaata vettä.

Tällaiset jauhekoostumukset voivat haluttaessa sisältää sopivaa myrkytöntä emästä aktiivisen aineen vesiliukoisuuden parantamiseksi ja/tai vedellä rekonstituoinnin jälkeen saadun vesipitoisen koostumuksen pH:n saamiseksi fysiologisesti sopivaksi. Emäs voidaan myös sisällyttää jauheeseen lisättävään veteen. Emäs voi olla esim. epäorgaaninen emäs, kuten natriumkarbonaatti natriumbikarbonaatti tai natriumasetaatti, tai orgaaninen emäs, kuten lysiini tai lysiini-asetaatti.

Antibioottiyhdiste voidaan myös muodostaa suppositoriksi, joka sisältää esim. tavanomaisia suppositoriperusaineita, kuten kaakao-voita tai muita glyseridejä.

Eläinlääkekoostumukset voidaan formuloida esim. nopeavaikut-teiksi tai hitaasti lääkeainetta vapauttaviksi utareeseen ruiskutettaviksi valmisteiksi.

Koostumukset voivat sisältää aktiiviainetta yli 0,1%, esim. 0,1-99% riippuen lääkkeenantotavasta. Kun koostumus on annosyksik-köinä, niin kukin annos sisältää edullisesti 50-1500 mg aktiiviainetta. Aikuiselle ihmiselle vuorokaudessa annettu aktiiviaineannos on edullisesti 500-6000 mg riippuen lääkkeenantotavasta ja -antovälistä. Yleensä aikuiselle ihmiselle riittää intravenöösisti tai intramusku-laaristi annettu vuorokausiannos 1000-3000 mg. Käsiteltäessä Pseu-domus-infektioita saattavat suuremmat annokset olla tarpeen.

Keksinnön mukaisesti valmistettuja antibiootteja voidaan antaa yhdessä muiden terapeuttisten aineiden, kuten antibioottien, esim. penisilliinien tai muiden kefalosporiinien kanssa.

Seuraavissa taulukoissa I ja II on esitetty tunnetun 7-/2-(2-imino-4-tiatsol-4-yyli)- 2-hydroksi-imino-aset amide/7-3-py r idin iummetyy-li)kef-3-em-4-karboksylaatin (syn-isomeeri) ja eräiden kaavan I mukaisten yhdisteiden minimiestokonsentraatiot (MEK). Kaavan I mukaisilla yhdisteillä suoritetuissa kokeissa jouduttiin käytännön syistä käyttämään toista Pseudomonas-organismien ryhmää kuin tunnetulla 67705 yhdisteellä suoritetuissa kokeissa. Kefalosporiiniantibiootit vaikuttavat kuitenkin hyvin samanlaisella tavalla kokeissa käytettyihin mikro-organismeihin. Kaavan (I) mukaisilla yhdisteillä saadut tulokset on esitetty taulukossa II. Tulokset osoittavat kaavan (I) mukaisten yhdisteiden eroavan aktiivisuudeltaan selvästi vertai-luyhdisteestä. Koska ero on näin selvä, saadut tulokset eivät voi johtua Pseudomonas-organismien herkkyyseroista, jotka ovat hyvin pieniä. Tämän osoittaa myös eri organismeilla saatujen tulosten geometrinen keskiarvo. Kuten taulukosta I ilmenee, ovat siinä mainitut Pseudomonas-organismit herkkiä gentamisiinille. Tästä voidaan olettaa, että ne ovat herkempiä koeyhdisteiden vaikutukselle kuin organismit, jotka ovat resistenttejä gentamisiinin suhteen ja joita on esitetty taulukossa II. Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden geometrinen keskiarvo on 1,3-5,58, kun taas vertailuyhdisteen geometrinen keskiarvo on 25,81. Näin ollen voidaan sanoa, että kaavan (I) mukaiset yhdisteet ovat vähintään neljä kertaa aktiivisempia kuin vertailuyhdiste.

22 67705

TAULUKKO I

/2-(2-imino-4-tiatsol-4-yyli)-2-hydroksi-imino-asetamido7-3-(1-pyridiniurametyyli)-kef-3-em-4-karboxylaatti (syn-isomeeri)

Pseudomonas-kanta Minimiestokonsentraatio ,ug/ml 5 ! (Gentamisiiniherkkä)_10 pesäkkeitä muodostavaa yksikköä 1. Pseudomonas sp. 31 2. Pseudomonas sp. 31 3. Pseudomonas sp. 4 4. Pseudomonas sp. 31 5. Pseudomonas sp. 8 6. Pseudomonas sp. 31 7. Ps. aeruginosa 16 8. Pseudomonas sp. 31 9. Ps. aeruginosa 31 10. Pseudomonas sp. 16 11. Pseudomonas sp. 31 12. Pseudomonas sp. 31 13. Pseudomonas sp. 31 14. Ps. aeruginosa 31 15. Ps. aeruginosa 31 16. Ps. aeruginosa 16 17. Ps. aeruginosa 125 18. Ps. aeruginosa 125 19. Ps. aeruginosa 62 20. Ps.'aeruginosa 31 21. Ps. aeruginosa 16 22. Ps. aeruginosa 8 23. Ps. aeruginosa 31 24. Ps. aeruginosa 16 25. Ps. aeruginosa 31

Geometrinen keskiarvo 25,81 il 23 67705

TAULUKKO II

Kanta no. Minimiestokonsentraatio ,ug/ml 5 ' _10 pesäkkeitä muodostavaa yksikköä

B C D E F

P

aeruginosa 1911E - 1 - 2 2 nucoid 4314 - 0.2 - 0.5 0.5 4699 - 1 - 2 2

P

aeruginosa 36552 8142 4

P

aeruginosa 1912E - 1 - 2 4 " 37250 2 0.5 1 1 2 37286 8284 2 37363 8282 4 37395 8142 4 38421 4121 2 38491 4121 2 38746 16 8 16 16 16 38798 8284 8 38808 4121 2 40497 16 8 8 62 31 39646 16 4 8 8 8 40328 4142 4 40464 8282 8 40473 4141 2 40906 4142 4 40662 8282 8 40676 2111 2 40740 8 1 16 4 4 24 67705

Kanta no. Minimiestokonsentraatio ,ug/ml 5 ' 10 pesäkkeitä muodostavaa yksikköä _B C D E F_

P

aeruginosa 40848 41424 40856 21112 32757 4-2-- 40952 4-2-- 36126 4-2-- 40952 4-4--

Geometrinen keskiarvo 5,58 1,31 3,78 2,17 3,68 MEKgo 82848 B (6R,7R)-7-/~(Z)-2- (2-aminotiatsol-4-yyli) -2- (2-karboksi- prop-2-oksi-imino)asetamido7-3-(4-karbamoyyli-1-pyridin-iummetyli)-kef-3-em-4-karboksylaatti)natriumsuola C (6R, 7R) -7-/1(Z) -2- (2-aminotiatsol-4-yyli) -2- (1-karboksi-syklobut-1-oksi-imino) asetamido7-3-(1-pyridinium-metyyli)-kef-3-em-4-karboksylaatti.

D (6R,7R)-7-/T(Z)-2- (2-aminotiatsol-4-yyli) -2- (1-karboksi- syklobut-1-oksi-imino)asetamido7-3-(4-karbamoyyli-1-pyridiniummetyyli)-kef-3-em-4-karboksylaatti, natrium-suola.

E (6R, 7R) -7-/~(Z) -2- (2-aminotiatsol-4-yyli) -2- (1-karboksi-sykloprop-1-oksi-imino)asetamido7-3-(1-pyridiniummetyyli) -kef-3-em-4-karboksylaatti) , natriumsuola.

F (6R, 7R) -7-/"(Z) - 2- (2-aminotiatsol-4-yyli) -2- (1-karboksi-syklopent-1-yylioksi-imino)asetamido/-3-(1-pyridiniummetyyli ) -kef-3-em-4-karboksylaatti , dihydroklorldi.

67705 25

Seuraavat esimerkit valaisevat keksintöä. Kaikki lämpötilat ovat Celsius-asteina. Petrolieetterillä tarkoitetaan 40-60°C:ssa kiehivaa petrolieetteriä.

Protonimagneettiset resonanssispektrit (p.m.r.) määritettiin 100 MHzsllä. Integraalit ovat sopimusten mukaiset, kytkentävakiot, J ovat Herzeinä, merkkejä ei ole määritetty; s = singletti, d = dubletti, dd = kaksinkertainen dubletti, m = multipletti ja ABq = AB-kvartetti.

LÄHTÖAINEIDEN VALMISTUS

Esimerkki I

Etyyli-(Z)-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(hydroksi-imino)- asetaatti

Sekoitettuun, jäillä jäähdytettyyn etyyliasetoasetaatin (292 g) liuokseen jääetikassa (296 ml) lisättiin natriumnitriitin (80 g) liuosta vedessä (400 ml) sellaisella nopeudella, että reak-tioseoksen lämpötila pysyi alle 10°C:n. Sekoitusta ja jäähdytystä jatkettiin noin 30 min. ja samalla lisättiin kaliumkloridin (160 g) liuos vedessä (800 ml). Saatua seosta sekoitettiin tunnin ajan. Alempi öljyfaasi erotettiin, ja vesifaasi uutettiin dietyylieette-rillä. Uute yhdistettiin öljyfaasiin, pestiin peräkkäin vedellä ja kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin kuiviin. Jäännöksenä saatu öljy muuttui seisotettaessa kiinteäksi, se pestiin petolieetterillä ja kuivattiin tyhjössä KOH:n yläpuolella, jolloin saatiin etyyli-(Z)-2-(hydroksi-imino)-3-oksobuty-raattia (309 g).

Sekoitettuun, jäillä jäähdytettyyn etyyli-(Z)-2-(hydroksi-imino) -3-oksobutyraatin (150 g) liuokseen dikloorimetaanissa (400 ml) lisättiin tipottain sulfuryylikloridia (140 ml). Saatu liuos sai seistä huoneen lämpötilassa 3 vrk, sitten se haihdutettiin. Jäännös liuotettiin dietyylieetteriin, liuos pestiin vedellä, kunnes pesunesteet olivat lähes neutraaleja, liuos kuivattiin ja haihdutettiin. Haihdutusjäännöksenä saatu öljy (177 g) liuotettiin etanoliin (500 ml), ja liuokseen lisättiin sekoittaen dimetyylianiliinia 67705 (77 ml) ja tioureaa (42 g). 2 tunnin kuluttua tuote suodatettiin, pestiin etanolilla ja kuivattiin, jolloin saatiin otsikon yhdistettä (73 g), sp. 188°C (hajoaa).

Esimerkki II

Etyyli-(Z)-2-hydroksi-imino-2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)- asetaattihydrokloridi

Esimerkissä I saadun tuotteen (12,91 g) sekoitettuun ja jäähdytettyyn (-30°C) liuokseen dimetyyliformamidissa (28 ml), joka sisälsi trietyyliamiinia (8,4 ml), lisättiin annoksittain 2 tunnin kuluessa trityylikloridia (16,75 g). Seos sai lämmetä 15°C:seen tunnin kuluessa, sitä sekoitettiin vielä 2 tuntia, sitten se jaettiin veden (500 ml) ja etyyliasetaatin (500 ml) kesken. Orgaaninen faasi erotettiin, pestiin vedellä (2 x 500 ml), sitten sitä ravisteltiin 1-n HCl:n kanssa (500 ml). Sakka koottiin, pestiin peräkkäin vedellä (100 ml), etyyliasetaatilla (200 ml) ja eetterillä (200 ml) ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin otsikon yhdistettä (16,4 g) valkeana kiinteänä aineena, sp. 184-186°C (hajoaa).

Esimerkki III

Etyyli-(Z)-2-(2-tert-butoksikarbonyyliprop-2-oksi-imino)- 2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)asetaatti

Esimerkissä II saadun tuotteen (49,4 g) liuokseen dimetyyli-sulfoksidissa (220 ml) lisättiin typpikehässä sekoittaem kaliumkarbonaattia (34,6 g) ja tert-butyyli-2-bromi-2-metyylipropionaattia (24,5 g) dimetyyliasulfoksidissa (25 ml), ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 6 tuntia. Seos kaadettiin veteen (2 1), sitä sekoitettiin 10 min, sitten se suodatettiin. Kiinteä aine pestiin vedellä ja liuotettiin etyyliasetaattiin (600 ml). Liuos pestiin peräkkäin vedellä, 2-n kloorivetyhapolla, vedellä ja kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin. Jäännös kiteytettiin petrolieetteristä (kp. 60-80°C), jolloin saatiin otsikon yhdistettä (34 g), sp. 123,5-125°C.

Il n 7 67705

Esimerkki IV

(Z)-2-(2-tert-butoksikarbonyyliprop-2-oksi-imino)-2-(2-tri- tyyliaminotiatsol-4-yyli)etikkahappo

Esimerkissä III saatua tuotetta (2 g) liuotettiin metanoliin (20 ml), ja liuokseen lisättiin 2-n natriumhydroksidiliuosta (3,3 ml). Seosta keitettiin palautusjäähdyttäen 1,5 tuntia, siten seos haihdutettiin. Jäännökseen lisättiin veden (50 ml), 2-n kloorivetyhapon (7 ml) ja etyyliasetaatin (50 ml) seosta. Orgaaninen faasi erotettiin, ja vesifaasi uutettiin etyyliasetaatilla. Orgaaniset liuokset yhdistettiin, pestiin peräkkäin vedellä ja kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin. Jäännös kiteytettiin hiilitetra-kloridin ja petrolieetterin seoksesta, jolloin saatiin otsikon yhdistettä (1 g), sp. 152-156°C (hajoaa).

Esimerkki V

Etyyli-(Z)-2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)-2-(1-tert-butok- sikarbonyylisyklobut-1-oksi-imino)asetaatti

Esimerkissä II saatua tuotetta (55,8 g) sekoitettiin typpi-kehässä dimetyylisulfoksidissa (400 ml) huoneen lämpötilassa hienoksi jauhetun kaliumkarbonaatin (31,2 g) kanssa. 30 minuutin kuluttua lisättiin tert-butyyli-1-bromisyklobutaanikarboksylaattia (29,2 g).

8 tunnin kuluttua lisättiin jälleen kaliumkarbonaattia (31,2 g). Seuraavien kolmen päivän aikana lisättiin edelleen kaliumkarbonaattia (6 x 16 g) ja 3 päivän kuluttua lisättiin vielä tert-butyyli-1-bromi-syklobutaanikarboksylaattia (3,45 g). Kaikkiaan 4 päivän kuluttua seos kaadettiin jääveteen (noin 3 litraa), kiinteä aine suodatettiin ja pestiin hyvin vedellä ja petrolieetterillä. Se liuotettiin sitten etyyliasetaattiin, ja liuos pestiin suolaliuoksella (2 x), kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin. Saatu vaahto liuotettiin etyyliasetaatti-petrolieetteriseokseen (1:2) ja suodatettiin silika-geelikerroksen lävitse (500 g). Haihduttamalla liuos saatiin otsikon yhdistettä (60 g) vaahtona,^ (CHBr^) 3400 (NH) ja 1730 cm ** (esteri).

28 677Q5

Esimerkki VI

(Z)-2-(1-tert-butoksikarbonyylisyklobut-1-oksi-imino)-2- (2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)etikkahappo

Esimerkissä V saadun tuotteen (3,2 g) ja kaliumkarbonaatin (1,65 g) seosta metanolin (180 ml) ja veden (20 ml seoksessa keitettiin 9 tuntia palautusjäähdyttäen, sitten seos jäähdytettiin huoneen lämpötilaan. Seos haihdutettiin ja jöönnös jaettiin etyyliasetaatin ja veden (johon oli lisätty 12,2 ml 2-n HC1) kesken. Orgaaninen faasi erotettiin, ja vesifaasi uutettiin etyyliasetaatilla. Yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin otsikon yhdistettä (2,3 g) ; /^maks (etanoli) 265 nm (E^m243) .

Esimerkki VII

(Z)-2-(1-tert-butoksikarbonyylisykloprop-1-oksi-imino)-2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)etikkahappo

Hydratsiinihydraatin (0,20 g) liuosta metanolissa (0,4 ml) lisättiin 1-tert-butoksikarbonyylisykloprop-1-oksiftaali-imidin (0,61 g, valmistettiin BE-patenttijulkaisussa no. 866 422 kuvatulla tavalla) liuokseen dikloorimetaanissa (7 ml). Seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa tunnin ajan, sitten siihen lisättiin 5-n ammoniumhydroksidin vesiliuosta (7 ml). Orgaaninen faasi erotettiin ja vesifaasi uutettiin dikloorimetaanilla. Yhdistetyt orgaaniset liuokset pestiin vedellä, kuivattiin ja haihdutettiin. öljymäinen jäännös (0,30g) liuotettiin eetterin (5 ml) ja etyyliasetaatin (5 ml) seokseen. Liuokseen lisättiin 2-trityyliaminotiatsol-4-yyliglyok-syylihappoa (0,73 g, valmistettu BE-patenttijulkaisun no. 846 828 mukaisesti). Seosta sekoitettiin yöm yli huoneen lämpötilassa, sitten se suodatettiin. Sakka pestiin pienellä määrällä eetteriä ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin otsikon yhdistettä (0,5 g), sp. 1 56,8-157,2°C; λ) ak (CHBr3) 2300-3500 (O-H, N-H) ; 1750 (tert-butyyliesteri), 1690 cm (happo).

29 6 7 7 0 5

Esimerkki VIII

Etvvli-(Z)-2-(l-tert-butoksikarbonyylisyklopent-l-yylioksi-imino)-2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)asetaatti Esimerkistä II saatua tuotetta (10 g) sekoitettiin typpi-kehässä 21°C:ssa tert-butyyli-2-bromisyklopentaanikarboksylaa-tin (7 g) kanssa dimetyylisulfoksidissa (40 ml), joka sisälsi kaliumkarbonaattia (10 g), 21 tuntia. Seos kaadettiin jääveteen (500 ml), saatu harmaa sakka suodatettiin, pestiin vedellä ja ilmakuivattiin.

Uudelleenkiteyttämällä saatu tuote metanolista (500 ml) saatiin otsikon yhdistettä (11,7 g), sp. 179-180°C, \^ma^s (CHBr^) 3410 (NH), 1735 (esteri), 1275 (esteri) ja 755 cm 1 (fenyyli). Esimerkki IX

(z)-2-(l-tert-butoksikarbonyylisyklopent-l-yylioksi-imi-no)-2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)etikkahappo Esimerkissä VIII saatua tuotetta (625 mg) keitettiin 2-n natriumhydroksidiliuoksen (0,5 ml), veden (1 ml) ja metanolin (12 ml) seoksessa 7 tuntia. Seos sai jäähtyä huoneen lämpötilaan yön aikana, se laimennettiin vedellä, ja sen pH säädettiin orto-fosforihapolla arvoon 2. Sakka uutettiin eetterillä, ja yhdistetyt uutteet pestiin suolaliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin, jolloin saatiin kumimaista jäännöstä (493 mg). Uudelleenkiteyttämällä di-isopropyylietteristä saatiin otsikon yhdistettä (356 mg), sp. 171-173°C, Ό maj,s (CHBr^) 2500-3500 (OH ja NH), 1755 (esteri), 1692 (happo) ja 755 ja 770 cm ^ (fenyyli).

Esimerkki X

(6R,7R)-7-amino-3-(l-pyridiniummetyyli)kef-3-em-4-karbok-syylihappodihydrokloridi (a) (6R,7# -7-(2-tienyyliasetamido)-3-(1-pyridiniummetyy- li)kef-3-em-4-karboksylaatin (4,15 g) suspensioon dikloorimetaa-nissa (30 ml) lisättiin sekoittaen N,N-dimetyylianiliinia (5,09 ml) ja klooritrimetyylisilaania (2,52 ml). Tätä seosta sekoitettiin 30-35°C:ssa tunnin ajan, sitten se jäähdytettiin -28°C:seen, siihen lisättiin fosforipentakloridia (4,16 g), sitä sekoitettiin 30 6 7 7 0 5

-25 - -30°C:ssa vielä tunnin ajan, ja sitten seos kaadettiin sekoittaen jäähdytettyyn (-20°C) butaani-1,3-diolin (8,1 ml) ja dikloorimetaanin (20 ml) seokseen. Liuos sai lämmetä 30 minuutin kuluessa 0°C:seen, saostunut kiinteä aine (A) suodatettiin, pestiin dikloorimetaanilla ja kuivattiin tyhjössä. Jäännös liuotettiin metanoliin (17,5 ml), liuokseen lisättiin sekoittaen dik-loorimetaania (87,5 ml), saostunut kiinteä aine suodatettiin, pestiin dikloorimetaanilla ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin otsikon yhdistettä valkeana kiinteänä aineena (3,2 g), A , (pH

^ ^ Itiä K S

6 puskuri) 258 nm (E. 318); Λ(ϋ,,Ο) arvot sisälsivät seuraavat; 1 cm 2 0,95, 1,32 ja 1,84 (pyridiniumprotonit), 4,10-4,46 (ABq, J 16 Hz, 3-CH3-), 4,56 (d, J 5 Hz 7-H), 4,70 (d, J 5 Hz, 5-H), 6,14-650 (ABq, J 17 Hz, C2~H).

(b) Edellä kohdassa (a) valmistettua kiinteää ainetta (A) (8 g) liuotettiin 1-n kloorivetyhappoon (25 ml). Lisättäessä isopropanolia (95 ml) otsikon yhdiste saostui kiteisenä dihydraatti-na (4,95 g). C (D20) arvot käsittivät seuraavat: 1,02, 1,36 ja 1,87 (pyridiniumprotonit), 4,2 + 4,55 (ABq, J = 14 Hz, 3-CH2~), 4,62 (d, J = 5 Hz, C--H), 47,4 (d, J = 5 Hz, Cc-H), 6,19 + 6,38 (ABq, J = 18 Hz, C2~H). Vesipitoisuus (Karl Fisher-menetelmä).

9,4 %.

Lopputuotteiden valmistus Esimerkki 1 (6R, 7R) -7-/ ( Z) -2- (2-aminotiatsol-4-yyli)-2- (2-karboksiprop- 2-oksi-imino)asetamido7~3-(4-karbamoyyli-l-pyridinium-metyyli)kef-3-em-4-karboksylaatti, mononatriumsuola (6R, 7R) -3-asetoksimetyyli-7-/7( Z) -2- ( 2-aminotiatsol-4-yyli) - 2-(2-karboksiprop-2-oksi-imino)asetamido7kef-3-em-4-karboksyyli-hapon (0,59 g) liuokseen vedessä (0,7 ml), joka sisälsi natriumbikarbonaattia sellaisen määrän, että liuoksen lopullinen pH oli 6,6, lisättiin sekoittaen isonikotinamidia (0,56 g). Sitten lisättiin natriumjodidia (2,1 g), ja seosta sekoitettiin tunnin ajan 80°C:ssa, jolloin pH:n pitämiseksi arvossa 5,5-6,5 lisättiin silloin tällöin natriumbikarbonaattia. Tuote eristettiin, jolloin saatiin otsikon yhdistettä (0,09 g), ?^maks (pH 6 puskuri) 257,5 nm (El cm 276) , ?^j_n£ 291,5 nm (E^ 125);"A(D20= arvot käsittivät: 0,92, 1,70 (4H, pyridiniumprotonit), 3,10 (1H, aminotiatsoli 5-H), 4,34, 4,64 (2H, ABq, 3-CH2~), 8,54 (6H, -CMe2~).

67705 31

Esimerkki 2 a) tert-butyyli-(6R,7R)-3-asetoksimetyyli-7-/(Z)-2- (1-tert-butoksikarbonyylisyklobut-l-oksi-imino)-2-(2-trityy-liaminotiatsol-4-yyli) asetamidQ7kef-3-em-4-karboksylaatti Esimerkissä VI saadun tuotteen (24,2 g) ja tert-butyyli- (6R,7R)-3-asetoksimetyyli-7-aminokef-3-em-4-karboksylaatin (13,6 g) sekoitettuun liuokseen dimetyyliformamidissa (300 ml) lisättiin 0°C:ssa 1-hydroksibentsotriatsolimonohydraaatia (4,5 g) ja sitten disykloheksyylikarbodi-imidiä (6,4 g), ja tuote eristettiin, jolloin saatiin otsikon yhdistettä (12,8 g), sp. 113,5-116,5°C (hajoaa); 15,0° (c - 1,0, DMSO).

b) (6R,7R)-3-asetoksimetyyli-7-/(Z)-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(1-karboksisyklobut-l-oksi-imino)asetamidp7-kef- 3-em-4-karboksyy1ihappo

Vaiheessa a) saadun tuotteen (12,5 g) ja anisolin (5 ml) seokseen lisättiin 0°C;ssa trifluorietikkahappoa (100 ml). Saa- >1 % , (pH 6 puskuri) 246 nm (E..

** T o. ^ ma. K s X ciTi 264), t . r 295 nm (Et * 118); ' xnf 1 cm + 27,3° (c = 1,0, DMSO) .

c) (6R, 7R) — 7 — ZL(Z) -2- (aminotiatsol-4-yyli) -2- (1-karboksi- syklobut-l-oksi-imino)asetamido7-3-(1-pyridiniummetyyli)-kef-3-em-4-karboksylaatti, mononatriumsuola Natriumjodidin (14,6 g) liuokseen vedessä (4,5 ml) lisättiin sekoittaen 80°C:ssa pyridiiniä (4,1 ml) ja vaiheessa b) saatua tuotetta (3,75 g) , ja tuote eristettiin, jolloin saatiin ot- >1 %

- , (pH 6 puskuri) 252,5 nm (E

310), Λ ψ 291 nm (E* % ); ZCXJJ*0 = +43,5° (c = 1,0, DMSO). mi i cm u

Esimerkki 3 (fi R, 7 R ΐ —7 — Z) — 2 — (2-aminotiatsol-4-vvli) -2- (1-karboksi-syklobut-l-oksi-imino)asetamido7-3-(4-karbamoyyli-l-pyri-diniummetyyli)-kef-3-em-4-karboksylaatti, mononatriumsuola Isonikotinamidia (1,22 g) lisättiin sekoittaen esimerkissä 2 b) valmistetun yhdisteen (1,08 g) liuokseen vedessä (1,3 ml), joka sisälsi natriumbikarbonaattia sellaisen määrän, että pH oli 6,5. Seokseen lisättiin natriumjodidia (4 g), ja seosta sekoitettiin tunnin ajan 80°C:ssa; tämän jälkeen lisättiin natriumbikarbonaatti aina silloin tällöin pH:n pitämiseksi arvossa 6,0-6,5.

32 67705

Tuote eristettiin, jolloin saatiin otsikon yhdistettä (0,15 g) ΖΡ<·-7ρ0= -18° (c = 1,03, H2°) * ^ntaks *pH 6 Puskuri) 256 nm cm 298), Λ , 294 nm (E* * 135).

inf 1 cm

Esimerkki 4 a) tert-butvvli- (6R, 7R) -3-asetoksimetyyli-7-zj(Z) -2-trityy-liaminotiatsol-4-vvli)-2-(1-tert-butoksikarbonyylisyklo-prop-l-oksi-imino)asetamido7kef-3-em-4-karboksylaatti

Esimerkissä VII saadun tuotteen (0,34 g) ja tert-butyyli-(6R,7R)-3-asetoksimetyyli-7-aminokef-3-em-4-karboksylaatin (0,25 g) liuokseen tetrahydrofuraanissa (6 ml) lisättiin sekoittaen 1-hyd-roksibentsotriatsolimonohydraattia (0,1.2 g) ja disykloheksyylikar-bodi-imidiä (0,16 g). Seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa yön yli, sitten se suodatettiin. Suodos haihdutettiin, jäännös liuotettiin pieneen määrään etyyliasetaattipetrolieetteriä (kp. 60-80°C) (1:1), ja liuos vietiin neutraalia aluminiumoksidia (10 g) sisältävään pylvääseen, josta se eluoitiin samalla liuottimena. Eluaatti väkevöitiin, ja saatu vaahto (0,44 g) kiteytettiin di-isopropyylieetteristä (15 ml), jolloin saatiin otsikon yhdistettä (0,29 g), sp. 115-119°C; /7^7^0 + 13° (c = 1,0, DMSO) .

b) (6R,7R) -3-asetoksimetyyli-7-/j[Z) -2- (2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(1-karboksisykloprop-l-oksi-imino)asetamido/ kef-3-em-4-karboksyylihappo, hydrokloridisuola

Vaiheessa a) saadun tuotteen (1,92 g) liuokseen muurahaishapossa (7,5 ml) lisättiin sekoittaen 10°C:ssa väkevää kloorive-tyhappoa (0,6 ml). Seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 1,25 tuntia, sitten seos suodatettiin. Suodos lisättiin di-isopropyy-lieetteriin (300 ml), ja seosta sekoitettiin 1,5 tuntia. Kiinteä aine suodatettiin, pestiin di-isopropyylieetterillä ja dietyyli-eetterillä ja kuivattiin tyhjössä, jolloin saatiin otsikon yhdistettä (1,16 g), +35° (c = 1,0, DMSO) ; T^najcs (PH 6 puskuri) 239 nm (E?" % 300).

1 cm c) (6R,7R)-7-/~[ Z)-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(1-karboksi-sykloprop-l-oksi-imino)asetamidö7-3-(1-pyridiniummetyy-li)-kef-3-em-4-karboksylaatti, natriumsuola

Vaiheessa b) saadun tuotteen (0,56 g), natriumbikarbonaatin (0,17 g) ja veden (0,5 ml) seosta kuumennettiin 50°C:ssa. Lisättiin uusi erä natriumbikarbonaattia (0,09 g) ja sitten pyridii-niä (0,2 ml). Liuos kuumennettiin 80°C:seen, ja siihen lisättiin 33 6 7 7 0 5 natriumjodidia (2 g). Liuosta sekoitettiin 80°C:ssa 40 min, se jäähdytetttiin ja laimennettiin asetonilla (50 ml). Seos suodatettiin, ja sakka pestiin asetonilla ja eetterillä. Saatu kiinteä aine liuotettiin veteen (20 ml) ja liuokseen lisättiin tipoittaan 2-n kloorivetyhappoa, kunnes muodostunut sakka ei enää liuennut seisotettaessa. Seosta sekoitettiin neutraalin aluminiumoksidin (5 g) kanssa, ja seos suodatettiin sitten neutraalin aluminiumok-sidikerroksen (10 g) lävitse. Aluminiumoksidikerros eluoitiin perusteellisesti vedellä. Vesieluaatti haihdutettiin, ja jäännöstä trituroitiin asetonissa. Kiinteä aine suodatettiin ja kuivattiin, saatiin 0,35 g. 0,30 g saatua ainetta liuotettiin pieneen vesimäärään, ja liuos eluoitiin Amberlite XAD-2 hartsilla (50 g) täytetyllä pylväällä käyttäen eluointiin ensin vettä ja sitten etanoli-vesiseosta 2:80. Tuotetta sisältävät fraktiot yhdistettiin ja haihdutettiin, jäännöstä trituroitiin asetonissa, jolloin saatiin otsikon yhdistettä (0,06 g); 0° - 1,5° (c = 0,1, vesi); Τ'" , (pH 6 puskuri) 254 nm (E?- 340) , , η a IH8.KS i λ i. cm 1ΠΓ 296 nm (E7 * 340), ?\ * 296 nm (ΕΓ * 125).

1 cm xnf 1 cm

Esimerkki 5 (6R, 7R) - 7-/Π[Ζ) -2-aminotiatsol-4-yyli) -2- (1-karboksisyklo-pent -1-yylioksi-imino)asetamido7-3-(1-pyridiniummetyyli)-kef-3-em-4-karboksylaatti, dihydrokloridisuola Fosforipentakloridia (0,46 g) liuotettiin metyleeniklori-diin (20 ml) huoneen lämpötilassa, ja liuos jäähdytettiin -10°C: seen; liuokseen lisättiin yhtenä annoksena esimerkissä IX saatua tuotetta (1,095 g). Seos lämpeni -5°C:seen ja sitä sekoitettiin 30 min.

Liuos jäähdytettiin -10°C:seen, siihen lisättiin voimakkaasti sekoittaen trietyyliamiinia (0,61 ml) ja sitten vettä (6,7 ml) siten, ettei vesi jäätynyt eikä lämpötila kohonnut yli 0°C. Kaksifaasiseosta sekoitettiin 3 min, ja se siirrettiin sitten tiputussuppiloon. Alempi faasi lisättiin voimakkaasti sekoittaen valmistuksessa 10 a) saadun tuotteen (0,76 g) -20°C:seen jäähdyttyyn suspensioon N,N-dimetyyliasetamidissa (10 ml) ja asetonit-riilissä (10 ml), joka sisälsi trietyyliamiinia (1,4 ml), jolloin lisäyksen aikana lämpötila ei saanut kohota yli -10°C:n. Seosta sekoitettiin 45 min -5 - 10°C:ssa, sitten sen annettiin lämmetä yli tunnin kuluessa 21°C:seen. Seokseen lisättiin metanolia 34 67705 0,3 ml), ja metyleenikloridi haihdutettiin alennetussa paineessa (haudelämpötila 30°C). Jäännös jaettiin huolella etyyliasetaatin (30 ml) ja veden (30 ml), johon lisättiin jonkin verran natrium-kloridia, kesken. Orgaaninen kerros pestiin vedellä (2 x 30 ml). Yhdistetyt pesunesteet ja vesifaasi, johon lisättiin vielä nat-riumkloridia, uutettiin etyyliasetaatilla (20 ml), ja yhdistetyt orgaaniset uutteet kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin kuiviin. Saatua vaahtoa (1,79 g) trituroitiin di-isopropyy-lieetterissä, jolloin saatiin kiinteätä ainetta (1,35 g).

Osa tästä aineesta (1,2 g) liuotettiin muurahaishappoon (5 ml), ja liuokseen lisättiin voimakkaasti sekoittaen väkevää kloorivetyhappoa (0,38 ml). Tunnin seisottamisen jälkeen 21°C:ssa suspensio suodatettiin, ja jäännöstä käsiteltiin pienellä määrällä muurahaishappoa. Yhdistetyt suodokset haihdutettiin, ja jäännöstä trituroitiin asetonissa, jolloin saatiin otsikon yhdistettä (374 mg), Z<?\/n + 8,6° (c = 1,02, HO) , > (pH 6 puskuri) 255 nm

to, _ 1¾ ^ ^ maKS

(ΕΓ ° 289), Λ , 295 (ΕΓ" 15 273), C, , 280 (EI ° 158).

1 cm inf 1 cm inf 1 cm

Esimerkki 6 a) (6R,7R)-7-/(Z)-2-(2-trifenyylimetyyliaminotiatsol-4-yyli)-2-(1-tert-butoksikarbonyylisyklobut-l-oksi-imino)ase-tamido7-3-(1-pyridiummetyyli)kef-3-em-4-karboksylaatti Fosforipentakloridia (1,38 g) liuotettiin 60 mlraan di-kloorimetaania. Liuos jäähdytettiin -10°C:seen, ja siihen lisättiin yhtenä annoksena esimerkissä VI saatua tuotetta (3,48 g). Liuosta sekoitettiin -5°C:ssa 30 min. Siihen lisättiin trietyy-liamiinia (1,8 ml) ja sitten vettä (20 ml). Seosta sekoitettiin 0°C:ssa 3 min. Alempi faasi lisättiin sitten etukäteen jäähdytettyyn (-10°C) valmistuksessa 10 a) saadun tuotteen (2,18 g), di-metyyliasetamidin (30 ml) ja asetonitriilin (30 ml) seokseen, johon oli lisätty trietyyliamiinia (4,2 ml).

Reaktioseosta sekoitettiin 45 min -5 - 10°C:ssa. Sitten jäähdytyshaude poistettiin, ja reaktioseosta sekoitettiin vielä tunnin ajan, jolloin se lämpeni huoneen lämpötilaan. Liuotin haihdutettiin alennetussa paineessa, ja jäännös jaettiin etyyliasetaatin ja veden kesken. Orgaaninen faasi pestiin suolaliuoksella, ja yhdistetyt vesiuutteet uutettiin etyyliasetaatilla. Etyyliase-taattiuute kuivattiin hiilen läsnäollessa, ja liuotin poistettiin alennetussa paineessa. Jäännöstä trituroitiin isopropyylieetteris- 35 6 7 7 0 5 sä, jolloin saatiin otsikon yhdistettä (3,80 g).

\?maks (nujol) 1780 cm ^ -laktaami) TMCDCl^) arvot käsittivät 2,74 (s, trifenyylimetyyli), 8,66 (s, tert-butyyli) .

b) (6R,7R)-7-/_(Z)-2- (2-aminotiatsol-4-yyli) -2- (1-karbok- sisyklobut-l-oksi-imino)asetamido7~3-(1-pyridiniumme-tyyli)kef-3-em-4-karboksyylihappo-dihydrokloridi Vaiheessa a) saatua tuotetta (2,57 g) sekoitettiin huoneen lämpötilassa 98-%:sen muurahaishapon (15 ml) ja väkevän kloori-vetyhapon (0,9 ml) seoksessa tunnin ajan. Seos suodatettiin, ja liuotin haihdutettiin alennetussa paineessa. Jäännöstä trituroi-tiin asetonissa, jolloin saatiin otsikon yhdistettä (1,79 g). V^maks (nujol) 1785 cm ^ {p> -laktaami) ^-arvot (D2° + NaHC03) käsittävät: 1,05, 1,42, 1,91 (m, pyridi-niumprotonit), 3,01 (s, aminotiatsoliprotoni), 4,13 (d, J 5 Hz, C7~protoni), 4,68 (d, J, 5 Hz, C-6 protoni), 7,4-8,4 (leveä m, syklobutyyliprotonit). NMR:n mukaan dimetyyliasetamidipitoisuus oli 1/3 moolia ja asetonipitoisuus oli 1/2 moolia.

Vesipitoisuus 7,4 % (Karl Fischer-menetelmä).

Kloori, saatu 9,2 % (laskettu kaavasta ^23^24^0^82012 + 1/3 moolia dimetyyliasetamidia + 1/2 moolia asetonia + 7,4 % vettä:

Cl = 9,5 %).

Claims (5)

36 6 7 7 0 5

1. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten kaavan I mukaisten (6R, 7R) -7-/ ( Z) -2- (2-aminotiatsol-4-yyli) -2-(substitu-oitu oksi-imino)asetamidq7-/mahdollisesti substituoitu pyridi-niummetyyli7kef-3-em-4-karboksylaattiyhdisteiden ja niiden myrkyttömien suolojen valmistamiseksi, Fh2 V <!> S % P p \ f * i c \=J_C.CO.NH_____!______O"' \ jjr Ra I ' N\ ? 4_N .-CH2N \, ^0.0.C00H O' V/' ib coo© jossa Rd ja RD voivat olla samoja tai erilaisia ja merkitsevät _^-alkyyliä tai Ra ja R*3 muodostavat yhdessä hiiliatomin kanssa, johon ne ovat liittyneet, C^^-sykloalkylideeniryhmän sillä edellytyksellä, että Ra ja R*3 eivät samanaikaisesti tarkoita 4 4 metyyliä, kun R on vety, R on vety tai 3- tai 4-karbamoyyli, tunnettu siitä, että (A) yhdiste, jonka kaava on H H i i I i H N -!-B \ (II) O*'---N 4 coo® R 4 jossa B on >S tai >S-j> O, R on vety tai 3- tai 4-karbamoyyli- ryhmä, ja 2-, 3- ja 4-asemien välissä oleva katkoviiva osoittaa, että yhdiste on kef-2-em- tai kef-3-em-yhdiste, tai sen suola tai N-silyvlijohdannainen tai vastaava yhdiste, jonka 4-asemassa 5 5 on kaavan -COOR mukainen ryhmä, jossa R on vety tai karboksyy-lisuojaryhmä, jolloin yhdisteeseen liittyy anioni A®, asyloidaan hapolla, jonka kaava on . 67705 37 f -==^-C.COOH N (III) ^O.C.COOR6 ib i g jossa Ra ja RD merkitsevät samaa kuin edellä, R on karboksyyli- 7 suojaryhmä ja R on amino- tai suojattu aminoryhmä, tai sitä vastaavalla asylointlaineella, tai (B) yhdiste, jonka kaava on R7 s'\ f ? uv, V-=i_ _ C . CO. NH _i_B \ ii Ra ! n li N>.£.COOR8a 0^--^CH2X Rb COOR8 ^ Id 7 jossa Ra, R , R , B ja katkoviiva merkitsevät samaa kuin edellä, 8 8a R ja R merkitsevät toisistaan riippumatta vetyä tai karboksyy-lisuojaryhmää ja X on nukleofiilin korvattavissa oleva tähde, tai sen suola saatetaan reagoimaan pyridiiniyhdisteen kanssa, jonka kaava on .-- "A N -O 4 r (v) 4 jossa R merkitsee samaa kuin edellä, minkä jälkeen tarvittaessa ja/tai haluttaessa suoritetaan seuraavat reaktiot missä tahansa sopivassa järjestyksessä: i) Λ. -isomeeri muutetaan halutuksi -isomeeriksi, ii) yhdiste, jossa B on >S -} 0, pelkistetään yhdisteeksi, jossa B on >S, iii) karboksyyliryhmä muutetaan myrkyttömäksi suolaksi, ja iv) mahdolliset karboksyyli- ja/tai N-suojaryhmät poistetaan. 38 67705

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä/ tunnet-t u siitä, että valmistetaan (6R,7R)-7-/"(Z)-2-(2-aminotiatsol- 4-yyli)-2-(1-karboksisyklobut-1-oksi-imino)asetamido/-3-(1-pyri-diniummetyyli)kef-3-em-4-karboksylaatti tai sen myrkytön suola.

3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kaavan II mukaisena kef-3-em-yhdisteenä käytetään yhdistettä, jossa B on >S.

4. Jonkin patenttivaatimuksen 1-3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kaavan II mukainen yhdiste asyloi-daan kaavan III mukaista happoa vastaavalla happohalogenidilla.

5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnet-t u siitä, että käytetään kaavan IV mukaista yhdistettä, jossa X on asetoksiryhmä tai bromiatomi. 11 39 Patentkrav 67705