KR20040073310A - 혈관 확장성 약제학적 제조물 및 건강식품 조성물 - Google Patents
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Abstract
혈관을 확장하는 작용을 지니며, 이로써 인체의 각종 질병, 장해를 억제 또는 경감시키는 신규 소재를 제공한다.
김, 미역, 톳, 다시마, 클로렐라, 스피룰리나에서 선택된 해조에서 유래하는 단백질, 대두, 참깨에서 선택된 식물에서 유래하는 단백질, 가다랭이, 고등어, 꽁치, 전갱이에서 선택된 어류에서 유래하는 단백질, 탈지분유, 유장에서 선택된 각종 우유단백에서 유래하는 단백질, 소, 돼지에서 선택된 동물에서 유래하는 단백질, 소의 각 부위 콜라겐, 돼지껍질 콜라겐, 어린(魚鱗)에서 유래하는 콜라겐형 단백질 등의 단백질을 가수분해하여 얻어지는 펩티드를 유효 성분으로 하는 조성물을 의약 조성물 및 건강식품 조성물로서 이용함으로써, 혈관 확장 효과를 거두며 이로써 혈류성 저하에 따른 어깨결림, 두통, 냉증 등의 각종 증상을 억제, 개선한다.
Description
본 발명은 혈관 확장 작용을 지니며 그로 인해 어깨 결림, 두통, 냉증 및 이와 관련된 기능 저하증상을 억제, 개선할 수 있는 의약 및 건강식품 조성물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 각종 단백질을 가수분해하여 얻어진 펩티드를 유효 성분으로 하는 상기 의약 및 건강식품 조성물에 관한 것이다.
혈액 순환을 개선하는 것은 어깨 결림, 냉증, 두통, 손발 저림과 같은 증상의 개선, 피로 회복, 말단 조직 및 모발의 신진대사의 촉진과 직결된다. 혈액 순환을 개선함으로써 전체적으로는 말단 조직에 산소, 영양이 충분히 전달되어 탄산 가스, 유산 등 노폐물이 회수되므로 입욕 후와 같은 기분 좋은 상태가 되어 몸이 따뜻해지고 피로, 신경통, 갱년기 장해가 해소되는 등의 증상 개선의 효과가 있다.
혈류를 촉진하는 메카니즘에는 몇 가지가 있다. 첫째는 적혈구의 변형능 향상에 의한 혈액 유동성의 증가이며, 또 하나는 혈관을 확장함에 따른 혈류량의 증가이다. 전자에 관한 종래기술로는, 가령 대추 및 그 추출물에 의해 적혈구의 변형능 저하를 방지하는 것이 있으며(특허문헌 1 및 특허문헌 2 참조), 또한 적혈구, 백혈구, 혈소판 등 혈액성분의 점성을 낮추어 혈액 유동성을 개선하는 콜라겐 펩티드에 관한 보고도 있다(특허문헌 3 참조).
또한, 다음과 같은 각종 천연물 또는 그 추출물에 의한 혈류 개선 효과에 관한 보고가 있으나, 그 혈류 개선의 메카니즘에 관해서는 반드시 명확한 것은 아니다. 예컨대, 사프란 또는 사프란의 추출물(특허문헌 4 참조), 민들레와 쑥의 농축액(특허문헌 5 참조), 소의 내장과 뼈를 죽처럼 끓여 졸인 것(특허문헌 6 참조), 연근의 줄기와 뿌리털을 태운 것(특허문헌 7 참조), 빨간 고구마의 수용성 추출물(특허문헌 8 참조), 데아닌 함유물(특허문헌 9 참조), 지황(특허문헌 10 참조), 석잠풀(Stachys riederi var. japonica)의 사포닌(특허문헌 11 참조)의 예가 알려져 있다.
또한, 혈관 확장이 인정된 예로는 토끼의 귀 혈관을 정어리 근육에서 유래하는 펩티드가 확장시킨 보고가 있다(특허문헌 12 참조). 그러나, 현상의 측면만 보고된 것으로서 인체에 대한 유효한 예의 보고나 용도에 대해서는 기재되어 있지 않다.
최근, 각종 혈류 개선 메카니즘에 의한 혈류 개선 물질의 개발이 더욱 요구되고 있다.
[특허문헌 1]
일본 특허공개공보 평5(1993)-210639호
[특허문헌 2]
일본 특허공개공보 평7(1995)-61933호
[특허문헌 3]
일본 특허 제3197547호 명세서
[특허문헌 4]
일본 특허공개공보 평10(1998)-287576호
[특허문헌 5]
일본 특허공개공보 소60(1985)-160856호
[특허문헌 6]
일본 특허공개공보 소54(1979)-41354호
[특허문헌 7]
일본 특허공개공보 소53(1978)-133646호
[특허문헌 8]
일본 특허공개공보 2001-145471호
[특허문헌 9]
일본 특허공개공보 2000-247878호
[특허문헌 10]
일본 특허공개공보 2000-169385호
[특허문헌 11]
일본 특허공개공보 평7(1995)-233191호
[특허문헌 12]
일본 특허 2732056호 명세서
본 발명은 혈관을 확장시키는 작용을 가지며, 이로 인해 혈액 순환을 개선하여 어깨 결림, 냉증, 두통, 피로, 갱년기 장해를 억제 또는 경감시키고 신진대사를 촉진하는 신규 소재를 제공하는 것을 목적으로 하며, 나아가 이러한 작용을 지니는 건강식품, 의약품을 제공하는 것을 목적으로 한다.
도 1은 토끼의 귀에 대해 실시한 해조에서 유래하는 펩티드의 혈관 확장 작용의 실험 데이터를 나타낸 그래프이다.
도 2는 토끼의 귀에 대해 실시한 해조에서 유래하는 펩티드의 혈관 확장 작용의 실험 데이터를 나타낸 그래프이다.
도 3은 토끼의 귀에 대해 실시한 식물에서 유래하는 펩티드의 혈관 확장 작용의 실험 데이터를 나타낸 그래프이다.
도 4는 토끼의 귀에 대해 실시한 어류에서 유래하는 펩티드의 혈관 확장 작용의 실험 데이터를 나타낸 그래프이다.
도 5는 토끼의 귀에 대해 실시한 유류(乳類)에서 유래하는 펩티드의 혈관 확장 작용의 실험 데이터를 나타낸 그래프이다.
도 6은 토끼의 귀에 대해 실시한 동물류에서 유래하는 펩티드의 혈관 확장 작용의 실험 데이터를 나타낸 그래프이다.
도 7은 토끼의 귀에 대해 실시한 콜라겐에서 유래하는 펩티드의 혈관 확장 작용의 실험 데이터를 나타낸 그래프이다.
본 발명자는 각종 단백질을 가수분해하여 얻은 펩티드류를 주체로 하는 성분을 토끼의 귀 혈관을 이용해 스크리닝한 결과, 이들 펩티드류에 혈관을 확장시키는 효과가 존재함을 발견하였다. 즉, 각종 단백질의 산 또는 알칼리에 의한 가수분해, 및/또는 효소 프로테아제에 의한 가수분해를 통해 얻어지는 펩티드류를 포함한 성분을 그대로 또는 정제하여 토끼에게 경구 투여하고 혈관의 확장을 확인한 것이다.
이와 같이 토끼의 귀에서 확인된 혈관 확장은 혈류의 증가로 이어지며 그 결과, 혈압 저하 효과, 어깨 결림과 냉증 및 두통의 개선 효과, 피로 회복 효과, 갱년기 장해의 억제 및 경감 효과, 신진대사의 촉진에 따른 육모(育毛)효과, 피부 상태 개선 효과 등 폭넓은 효과가 확인되었다.
이러한 효과가 인정된 단백질의 가수분해물로는, 대두, 참깨 등 식물성 단백질의 가수분해물, 소, 돼지 등 동물 단백질의 가수분해물, 가다랭이, 고등어, 꽁치, 전갱이 등 어류 단백질의 가수분해물, 김, 미역, 톳, 다시마 등의 해조류, 클로렐라, 스피룰리나 등 미세조류의 단백질 가수분해물, 탈지분유, 유장 단백질의 유 단백에서 유래하는 성분의 가수분해물, 소고기, 돼지고기 등 축산물에서 유래하는 단백질의 가수분해물, 소의 콜라겐, 돼지껍질 등 돼지 콜라겐, 어린 등 어류에서 유래하는 콜라겐 단백질 가수분해물을 들 수 있으며, 이러한 가수분해물에 포함되는 펩티드에 혈관의 확장 작용이 존재하는 것으로 확인되었다.
따라서, 본 발명은 상기 각종 단백질의 가수분해에 의해 얻어진 펩티드를 유효 성분으로 하는 혈관 확장성 의약 및 건강식품 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 있어서 단백질의 가수분해는, 산 또는 알칼리에 의한 분해, 프로테아제를 이용하는 효소 분해가 일반적으로 사용된다. 산 또는 알칼리는 유/무기의 산이나 알칼리를 이용할 수 있으며, 산 가수분해일 경우 pH 1∼4의 범위, 알칼리 가수분해일 경우에는 pH 8∼13의 범위가 바람직하다. 분해 시의 온도, 시간 등의 반응 조건은 적절히 설정한다.
프로테아제로는 펩신, 판크레아틴, 파파인, 프로레더(Proleather, 아마노세이야쿠 제품), 서모아제(다이와카세이 제품), 스미팀 AP, 스미팀MP, 스미팀FP(모두 신닛폰카가쿠 제품), 그 밖에 일반적으로 이용되는 프로테아제 활성을 지닌 효소를 이용할 수 있다. 반응 시에 효소의 사용 농도, 반응의 pH나 반응 온도, 기타 조건 등은 각 효소제마다 최적의 조건을 선택하면 된다.
산, 알칼리에 의한 가수분해에서는 반응의 진행을 일정하게 조절하는 것이 반드시 쉽지만은 않다. 따라서 엄밀한 반응 처리가 필요하다. 더욱이 산 또는 알칼리에 의한 가수분해 처리와 효소에 의한 가수분해를 병용할 수가 있다. 산 또는 알칼리에 의한 처리 후, 이어서 단백 분해 효소처리를 실시함으로써 펩티드의 저분자화가 진행되어 저분자 펩티드류의 비율이 높아진다. 저분자 펩티드는 소화관에서 흡수되기 쉽고 혈관 확장 효과가 높기 때문에, 이러한 방법으로 저분자 펩티드의 비율을 높이는 것이 바람직하다. 단, 인체의 소화관내에서는 고분자 펩티드도 소화관의 펩신, 트립신 및 펩티다아제에 의해 저분자 펩티드를 생성하기 때문에, 저분자 이외의 펩티드여도 효과가 인정된다. 그러나, 저분자 펩티드쪽이 단기간에확실히 효과를 발현한다고 생각된다. 따라서, 펩티드의 분자량에 대해서는 저분자 펩티드의 비율이 높은 것이 바람직하지만, 식품으로서 이용할 경우에는 중, 고분자 펩티드를 포함하고 있어도 마찬가지로 혈관 확장의 효과가 확인된다.
각 단백질의 가수분해를 통해 얻어진 펩티드 성분은 반응물을 그대로 이용하여도 되지만, 펩티드 성분을 농축 정제하여 이용할 수도 있다. 농축 정제 처리는 전기 투석막에 의한 탈염 처리, 이온 교환 수지에 의한 탈염·농축 처리, 활성탄에 의한 탈색, 탈취 및 농축 처리, 유기 용매에 의한 침전 처리에 의해 실시될 수 있다. 각각의 성분은 액체인 채로 이용할 수도 있지만, 분무 건조, 냉결 건조를 실시함으로써 분말화할 수도 있다. 또한, 크로마토그래피를 이용하여 더욱 정제한 것을 이용할 수도 있다.
가수 분해 처리되는 각종 단백질 원료는 정제된 단백질인 것이 바람직하다. 해조류, 식물 재료, 어육, 밀크 단백질, 동물의 고기, 동물 콜라겐 등 각종 원료를 그대로 이용할 수도 있지만, 원료에 지방성분이 많을 경우에는 분해물 속에 지방분이 남아 산화되므로 다른 냄새나 맛이 생기거나 하는 경우가 많다. 따라서, 미리 유분을 제거한 원재료를 이용하는 것이 바람직하다. 예컨대, 대두, 참깨의 경우에는 착유 후의 유분이 적은 대두 찌꺼기나 참깨 찌꺼기를 이용하는 것이 바람직하다. 또, 가수분해 후 유분을 제거하는 방법도 가능하기는 하다. 어육, 축산물의 고기일 경우에도 마찬가지로 기름 제거 조작을 추가하는 것이 중요하다. 이에 대하여 해조류를 이용할 경우에는 지질 성분이 적기 때문에, 탈지 조작을 하지 않고 조류를 그대로 가수 분해에 제공하며 가수분해 후에도 탈지 조작은 굳이 필요하지않다.
혈관의 확장효과는 토끼의 귀를 이용하여 확인하였다. 즉, 토끼에게 시료를 경구투여하고 귀 혈관의 변화를 시각적으로 확인하여 그 사진에서 면적계산 소프트를 사용하여 혈관 확장의 정도를 수치화하였다. 이하에 나타내는 실시예에서는 모두 상기한 방법에 의해 혈관 확장 효과를 확인하였다.
본 발명에서는 단백질의 가수분해물에 의한 혈관의 확장 결과, 혈류가 증가하였으며 이에 따라 영양분의 말단조직으로의 이행이 개선되는 동시에 노폐물의 이행도 개선되는 것으로 추정된다. 그 결과, 사람에 대해서는 어깨 결림, 두통, 냉증의 억제, 경감의 목적으로 사용될 수 있다. 또한, 혈액 순환의 개선을 통해 순환기계뿐만 아니라 신경계, 내분비계, 면역계가 관여하는 생리기능의 개선도 도모할 수 있어 수면장해, 갱년기 장해의 억제 및 개선의 목적으로 사용될 수 있다. 그리고 말초 조직으로부터 탄산 가스, 유산 기타 노폐물을 적절히 회수하며 말초 조직으로 산소, 영양성분을 충분히 공급하기 때문에, 피로 회복, 나아가 피부상태의 개선, 미용효과, 육모 효과도 얻을 수 있다. 이러한 효과에 관해서는 인체에 대한 시험 결과를 실시예로서 나타내었다.
본 발명의 각종 단백질 가수분해물의 사용 양태로는, 식품 첨가제로서 일반 식품에 첨가하거나 건강 식품 조성물 또는 의약 조성물로서 이용할 수 있다. 각종 단백질의 가수분해물의 형태는 수용액, 현탁물, 분말, 고체 성형물 등 어느 형태여도 무방하며 특별히 한정하는 것은 없다. 따라서, 일반 식품에 폭넓게 첨가하여 사용할 수 있으며, 건강식품, 의약품으로는 캡슐제, 정제, 분말제, 과립제, 드링크제 등으로서 제공된다. 이 경우에 단미(單味) 성분으로서 사용할 뿐만 아니라, 기타 정미(呈味)성분, 증량제, 안정제 및 생약, 허브 등의 기능성 소재나 그 기능성 성분과 혼합, 병용하여 이용할 수가 있으며, 비타민, 미네랄 등 영양성분이나 식품으로서 허용되는 소재 등과 혼합, 병용하여 사용할 수도 있다.
이러한 효과를 발휘시키기 위한 인체 투여량은 단백질 가수분해물로서 0.5∼2000mg/kg·일(日)이 바람직하며, 10∼400mg/kg·일이 더욱 바람직하다. 단, 증상의 종류, 정도에는 개인 차가 있으므로 이러한 범위로 한정되는 것은 아니다.
이하에는 본 발명의 실시 양태를 제조예, 실시예를 통해 설명하도록 한다.
(제조예 1)
다음의 방법에 의해 김속 해조인 김의 단백질로부터 김 펩티드를 조제하였다.
마른 김 50kg을 95℃로 뜨겁게 데운 열탕 950리터에 현탁하고, 1시간동안 끓인 후 끓인 국물을 제거하였다. 그 후, 50℃의 물 950리터를 넣고 황산에 의해 pH를 2.0으로 조정하고 펩신(아마노세이야쿠 제품) 2kg을 넣어 교반하면서 50℃에서 24시간동안 반응시켰다. 얻은 분리액을 1N 수산화 나트륨 용액에 의해 pH 5.0으로 조정하고, 50℃로 10분간 유지하여 펩신을 탈활성화시켰다. 다음으로 원심 분리(14000r.p.m. 20분간)에 의해 추출 찌꺼기를 제거하고 상청액(上淸液)을 농축한 후에 분무 건조하여 김 펩신 분해물을 얻었다(시료 1).
상기 김 펩신 분해물 1kg을 증류수에 용해하고, 염산으로 치환한 바이오 푸드사의 Dowex-50(H+) 칼럼(φ50cm×200cm)에 부하하여 120리터의 증류수로 세정한 후, 2N 암모니아수로 흡착되어 있는 펩티드를 용출하였다. 다음으로, 증발기에 의해 암모니아수를 제거한 후, 냉결 건조하여 함량 90%의 김 펩티드 385g를 얻었다(시료 2).
(제조예 2)
김 분말(10∼50메시) 2kg에 물 10리터를 첨가하여 교반한 후, 자동 분쇄기를 이용하여 실온에서 1시간동안 마쇄하고 원심 분리하여 김 추출물 잔여물과 상청액을 분리한다.
얻은 상청액에 에탄올을 첨가하고 -20℃에서 12시간 방치하여 단백질 성분을 침전시키고, 원심 분리하여 침전물로서 수 가용성 김 단백질 400g을 얻었다.
상기 김 단백질에 대하여 이하와 같이 산 가수분해와 효소분해를 병용하여 실시하여 저분자 펩티드를 조제하였다. 즉, 김 단백질 200g을 1N 염산용액 1리터에 용해하고, 100℃로 2시간동안 데워 산 분해하였다. 다음으로 수산화 나트륨에 의해 pH 6.0으로 조정한 후, 스미팀FP(닛폰카가쿠고교 제품)을 5g 첨가하고 40℃에서 8시간동안 분해하였다. 분해액을 100℃에서 20분간 유지하여 효소를 탈활성화시키고 감압 농축한 후, 제조예 1의 시료 2와 마찬가지로 처리하여 김 펩티드 160g을 얻었다(시료 3).
(제조예 3)
이하와 같은 방법으로 미역 단백에서 미역 펩티드를 조제하였다. 마른 미역1kg을 분쇄해 35메시로 미분화하고 증류수 20리터에 현탁하여 습식 마쇄기로 마쇄하였다. 이것을 원심 분리하여 5리터의 미역 단백질 함유용액을 얻었다. 이어서 1리터로 감압 농축한 후, 8리터의 에탄올을 첨가하고 -20℃에서 12시간동안 방치하여 단백질을 침전시켰다. 이것을 원심 분리하여 얻은 침전물을 실온에서 바람으로 건조한 후, 수용성 미역 단백질 100g을 얻었다.
상기 미역 단백질 50g을 인산 완충액(pH 7.7) 500ml에 용해하고 서모라이신 2.5g을 첨가하여 40℃에서 12시간 반응시켜 단백질을 가수분해하였다. 반응 후 100℃로 20분간 유지하여 효소를 탈활성화시킨 후, 반응액을 냉결 건조하여 미역 펩티드 35g를 얻었다(시료 4).
상기와 동일하게 처리하여 다시마 펩티드(시료 5), 톳 펩티드를 얻었다(시료 6).
(제조예 4)
클로렐라 펩티드, 스피룰리나 펩티드를 이하와 같은 방법으로 조제하였다. 클로렐라 분말, 스피룰리나 분말 각각 50g을 0.5N 수산화 나트륨 1리터에 용해하고, 80℃로 5시간동안 데워 알칼리 분해하였다. 이어서, 염산으로 중화한 후, 염산으로 치환된 Dowex-50(H+)칼럼(φ10cm×65cm)에 부하하여 5리터의 증류수로 세정한 후, 2N 암모니아수로 흡착되어 있는 펩티드를 용출하였다. 더욱이, 증발기로 암모니아를 제거한 후, 냉결 건조하여 클로렐라 펩티드 21g(시료 7), 스피룰리나 펩티드 18g(시료 8)를 얻었다.
(제조예 5)
식물에서 유래하는 단백질 가수분해물의 예로서 지질 대두 찌꺼기 및 지질 참깨 찌꺼기에서 대두 펩티드, 참깨 펩티드를 얻었다. 즉, 지질 대두 찌꺼기, 지질 참깨 찌꺼기 각각 1kg을 분쇄하고 각각 5리터의 물에 현탁한 후, 황산에 의해 pH를 2.0으로 조정하여 돼지간에서 유래하는 펩신(아마노세이야쿠 제품) 40g을 첨가해 교반하면서 50℃에서 24시간동안 반응시켰다. 반응 후, 고형물을 여과 분리하여 얻은 상청을 제조예 1와 마찬가지로 Dowex-50(H+)에 흡착시키고 물 세정, 암모니아 용출, 암모니아 제거, 농축, 냉결건조의 조작을 실행하여 대두 펩티드 200g(시료 9), 참깨 펩티드 98g(시료 10)를 얻었다.
(제조예 6)
어육에서 유래하는 단백질 가수분해물의 예로서 가다랭이, 고등어, 꽁치, 전갱이의 어육에서 각각의 펩티드를 얻었다. 신선한 가다랭이, 고등어, 꽁치, 전갱이의 각 어육부분 500g을 각각 채취하고 으깬 어육으로 만들어 1리터의 물을 첨가하고 100℃에서 10분간 유지하여 열 변성시켰다. 황산에 의해 pH를 2.0으로 조정하고 펩신(아마노세이야쿠 제품)을 각각 20g 첨가하여 50℃로 16시간동안 유지하였다. 반응 종료 후 수산화 나트륨수로 pH를 5.0으로 조정하고 50℃로 10분간 가열하여 효소를 탈활성화시켰다. 반응액을 원심 분리하여 얻은 상청을 각각 Dowex 50(H+)에 흡착시켜 충분히 물 세정한 후, 2N 암모니아 수로 용출하여 펩티드 구분을 얻었다. 펩티드 용액은 감압 농축하여 암모니아를 제거한 후에 냉결 건조하였다.이상의 조작에 의해 가다랭이에서 유래하는 펩티드 30g(시료 11), 고등어에서 유래하는 펩티드 32g(시료 12), 꽁치에서 유래하는 펩티드 45g(시료 13), 전갱이에서 유래하는 펩티드 33g(시료 14)를 각각 얻었다.
(제조예 7)
이하와 같은 방법으로 가축의 젖에서 유래하는 단백질 가수분해물의 예로서 탈지분유, 유장으로부터 각각의 펩티드를 얻었다. 시판되는 탈지분유 및 시판되는 분리 유장 단백 1kg을 각각 온수 2리터에 현탁시키고 pH 7.5로 조정한 후, 각각에 대하여 서모아제(다이와카세이 제품) 40g을 첨가하여 50℃에서 16시간 반응시켰다. 반응 후 100℃에서 10분간 가열하여 효소를 탈활성화시킨 후, Dowex 50(H+)에 흡착시켜 물 세정, 암모니아수 용출을 통해 펩티드 구분을 얻었다. 감압 농축하여 암모니아를 제거한 후, 냉결 건조하여 탈지분유 펩티드 270g(시료 15), 분리 유장 단백 펩티드 333g(시료 16)을 얻었다.
(제조예 8)
이하와 같은 방법으로 가축의 고기에서 유래하는 단백질의 가수분해물의 예로서 소고기, 돼지고기로부터 각각의 펩티드를 얻었다.
기름이 적은 소고기 1kg을 저민 것을 1N 염산 2리터에 넣고 100℃에서 2시간동안 가열한다. 냉각 후에 수산화 나트륨에 의해 pH를 2.0으로 조정한 후에 돼지의 간에서 유래하는 펩신(아마노세이야쿠 제품) 40g을 첨가하고 50℃에서 16시간동안 교반하여 반응시켰다. 반응이 종료된 후, 수산화 나트륨에 의해 pH를 5.0으로중화하고 50℃로 10분간 유지하여 효소를 탈활성화시켰다. 반응액은 원심 분리(3000r.p.m. 10분간)하여 상청액을 분리하였다. 상청중의 오일층은 가능한한 제거하고 Dowex 50(H+)에 부하하여 충분히 물로 세정한 다음에 2N 암모니아수로 용출하여 펩티드 분획(fraction)을 얻었다. 감압 농축하여 암모니아를 제거한 후, 냉결 건조하여 소고기에서 유래하는 펩티드 343g(시료 17)를 얻었다. 돼지고기에서 유래하는 펩티드 318g도 상기와 완전히 동일한 방법을 통해 얻었다(시료 18).
(제조예 9)
이하와 같은 방법으로 콜라겐의 가수분해물의 예로서 돼지껍질에서 유래하는 아교 및 어린(魚鱗)에서 각각의 펩티드를 얻었다.
시판되는 돼지껍질에서 유래하는 아교 2kg을 분쇄하여 염산 산성 pH 3.0의 물 4리터에 현탁하고 실온에서 3일간 교반한다. 그 후, 염산으로 pH2로 조정하여 돼지의 간에서 유래하는 펩신(아마노세이야쿠 제품) 40g을 첨가하고 50℃에서 16시간동안 유지하였다. 반응 후 수산화나트륨에 의해 pH 5.0으로 조정하고 50℃에서 10분간 유지하여 효소를 탈활성화시켰다. 그 후, 원심 분리한 상청액을 Dowex 50(H+)칼럼에 흡착시켜 물 세정한 후 2N 암모니아수로 용출하여 펩티드 분획을 얻었다. 펩티드 용출액은 감압 농축한 후 냉결 건조하여 아교에서 유래하는 콜라겐 펩티드 720g(시료 19)을 얻었다.
또한, 시판되는 어린에서 유래하는 50% 콜라겐 용액 1리터(타임리 제품)를 이용하여 상기한 방법과 동일하게 펩신에 의한 분해, 양이온 교환 수지에 의한 정제, 냉결건조에 의한 분말화를 수행하여 어린에서 유래하는 콜라겐 펩티드 265g(시료 20)를 얻었다.
다음으로, 상기 제조예에서 얻은 각 시료의 혈관 확장 효과를 확인한 실시예 및 사용예를 나타낸다.
(실시예 1)
체중 1.5∼1.8kg의 9주된 숫토끼(Slc:JW·CSK)을 1주간 예비 사융한 후 실험에 사용하였다. 사육실은 온도 22℃±1℃, 습도 50%, 12시간 사이클의 명암 주기를 제공하고, 먹이는 Lab Diet 5L95(닛폰 SLC 제품)을 자유롭게 섭취시키며 물도 자유롭게 먹도록 하였다. 또한, 시료를 제공하기 전에는 2시간동안 금식시켰다. 체중 1kg당 시료 1000mg를 3∼10ml의 생리 식염수에 타서 경구 존데(sonde)로 강제로 섭취시켰다.
토끼의 귀 혈관상태는 다음과 같이 측정하였다. 토끼를 채혈함에 고정한 후, 토끼가 안정을 취하여 귀 혈관의 변화가 보이지 않게 되었을 때 디지털 카메라로 촬영하였으며 그 시점을 0분으로 하였다. 시료를 섭취한지 10분 후부터 사진 촬영을 시작하여 혈관의 확장이 가라앉을 때까지 10분 간격으로 촬영을 계속했다. 이들 사진을 면적 계산 소프트 LIA 32에 의해 면적을 계산하여 수치화하였다.
이상의 측정을 제조예 1 내지 제조예 9를 통해 얻은 시료 1∼20에 대해 실시하고 그 결과를 그래프화하여 도 1∼7에 나타내었다. 도면에서 세로축은 측정 혈관 단면적을 0분인 경우에 1로 하여 수치화한 것으로서, 그 시간 경과 후의 변화를 도시한 것이다. 그 결과, 어떠한 시료를 사용하더라도 토끼의 귀 혈관 확장작용이있는 것으로 확인되었다.
(실시예 2)
시료 1을 75중량% 함유하며, 환원 맥아당 물엿 15%, 덱스트린 5.8%, 구연산 0.9%, 향료 2.3%, 감미료(스테비아) 1.0%를 포함하는 과립제로 만들어 1.2g씩 나누어 포장하여 제품화하였다. 또한, 시료 1 88중량%, 환원 맥아당 9%, 자당 지방산 에스테르 3%를 함유하는 300mg중량의 정제를 제조하였다.
(실시예 3)
시료 2∼20을 각각 80%, 환원 맥아당 물엿 10%, 덱스트린 7%, 자당 지방산 에스테르 3%(모두 중량%)를 함유하는 300mg중량의 정제를 각각 제조하였다.
(실시예 4)
실시예 2의 과립제를 이용하여 어깨 결림을 호소하는 20명의 지원자에게 매일 아침 저녁으로 1포씩 1일 2포를 30일간 복용하도록 하였다. 30일이 종료된 후에 각 지원자에 대해 앙케이트를 실시하였다. 그 결과를 표 1에 나타낸다. 그 결과, 지원자 중 70%가 어깨 결림이 해소 또는 경감되는 효과가 확인되었다.
| 증상 | 사람의 수 |
| 어깨결림이 해소되었다 | 5 |
| 어깨결림이 경감되었다 | 9 |
| 변함이 없다 | 6 |
| 어깨결림이 심해졌다 | 0 |
(실시예 5)
실시예 3의 시료 2를 포함하는 정제를 이용하여 어깨결림을 호소하는 10명의 지원자에게 매일 6정제를 30일간 복용시켰다. 30일이 종료된 후에 각 지원자에게앙케이트를 실시하였다. 그 결과를 표 2에 나타내었다. 그 결과, 60%의 지원자에게서 어깨결림의 해소 또는 경감이 확인되었다.
| 증상 | 사람의 수 |
| 어깨결림이 해소되었다 | 2 |
| 어깨결림이 경감되었다 | 4 |
| 변함이 없다 | 4 |
| 어깨결림이 심해졌다 | 0 |
(실시예 6)
실시예 3의 시료 3을 포함하는 정제를 이용하여 어깨결림을 호소하는 10명의 지원자에게 매일 6정제를 30일간 복용하도록 하였다. 30일이 종료된 후에 각 지원자에게 앙케이트를 실시하였더니, 어깨결림이 해소된 사람이 3명, 경감된 사람이 3명이었고 기타 4명은 변화가 없었다.
(실시예 7)
실시예 2의 정제를 이용하여 냉증을 호소하는 20세 내지 40세의 여성 지원자 20명에게 매일 6정제를 2주간 복용하도록 하였고, 2주간 후에 앙케이트를 실시하였다. 그 결과를 표 3에 나타내었다. 13명에게서 냉증이 해소 또는 개선된 것으로 확인되었다.
| 증상 | 사람의 수 |
| 냉증이 해소되었다 | 3 |
| 냉증이 경감되었다 | 10 |
| 변함이 없다 | 7 |
| 냉증이 심해졌다 | 0 |
(실시예 8)
실시예 3에 기재된 시료 10을 포함하는 정제를 이용하여 냉증을 호소하는 20세 내지 40세의 여성 지원자 10명에게 매일 6정제를 2주간 복용하도록 하였고, 2주간 후에 앙케이트를 실시하였다. 그 결과를 표 4에 나타내었다. 그 결과, 6명에게서 냉증이 해소, 개선된 것으로 확인되었다.
| 증상 | 사람의 수 |
| 냉증이 해소되었다 | 2 |
| 냉증이 개선되었다 | 4 |
| 변함이 없다 | 4 |
| 냉증이 심해졌다 | 0 |
(실시예 9)
실시예 2, 3에 기재된 시료 1∼20를 포함하는 정제를 복용한 후의 손가락 끝의 온도를 측정하였다. 시험은 실시예 7의 지원자 중에서 냉증이 해소 또는 경감되는 효과를 본 사람 중 10명의 지원자를 선택하여 여러 날에 걸쳐 시험하였다. 시험은 아침 식사를 거르고 20℃, 습도 50%로 조정된 방에 들어가 1시간이 경과한 후에 이루어졌으며, 시료 1∼20를 포함하는 각각의 정제 6정을 물 50ml와 함께 복용하도록 하여 손가락 끝의 온도 변화를 복용 30분 경과 후 서미스터 온도계로 측정하여 0시간 부터의 상승온도로 표기하였다. 한편, 1시료에 대하여 2명의 지원자를 시험하고 그 평균치를 기록하였다.
| 시료 | 상승온도(℃) | 시료 | 상승온도(℃) |
| 1 | 0.3 | 11 | 0.5 |
| 2 | 0.5 | 12 | 0.2 |
| 3 | 0.4 | 13 | 0.1 |
| 4 | 0.3 | 14 | 0.3 |
| 5 | 0.2 | 15 | 0.3 |
| 6 | 0.1 | 16 | 0.4 |
| 7 | 0.5 | 17 | 0.5 |
| 8 | 0.4 | 18 | 0.4 |
| 9 | 0.4 | 19 | 0.2 |
| 10 | 0.5 | 20 | 0.2 |
(실시예 10)
실시예 2의 과립제를 이용하여 편두통이 있는 15명의 지원자에게 매일 2포를 30일간 복용시키고 30일 후에 앙케이트를 회수하였다. 그 결과는 표 6과 같이 8명의 사람에게서 두통의 해소 또는 경감이 확인되었다.
| 증상 | 사람의 수 |
| 두통이 해소되었다 | 2 |
| 두통이 경감되었다 | 6 |
| 변함이 없다 | 7 |
| 두통이 심해졌다 | 0 |
(실시예 11)
갱년기성 고혈압증을 앓는 55세에서 63세까지의 5명의 여성에게 실시예 2의 과립제를 매일 2포, 30일간 복용시켰다. 또한, 모두 본 과립제와 함께 난포 호르몬을 병용하였다. 그 결과, 혈압이 모두 정상 범위로 떨어졌고, 더욱이 난포 호르몬만 사용한 경우에 비해 몸이 따뜻해지는 느낌을 받았다. 또, 갱년기 장해의 경감도 확인되었다.
(실시예 12)
운동 선수 5명에게 1500m를 전력 질주시키고 달리기 전과 달리고 난 5분 후의 혈액을 채취하여 혈중 유산치를 측정하였다. 다음날, 실시예 2의 과립제 2포를 복용한 후 1500m를 전력으로 질주하고 전날과 마찬가지로 혈중의 유산치를 계측하였다. 그 결과를 표 7에 나타내었다. 과립제를 복용하지 않은 경우에 비해 과립제를 복용했을 경우, 선수들은 모두 달리고 난 다음의 혈중 유산치가 감소한 것으로 확인되었다.
| 혈중 유산치(mmol/l) | ||||
| 과립제 복용 안함 | 과립제 복용함 | |||
| 달리기 전 | 달리고 난 후 | 달리기 전 | 달리고 난 후 | |
| A | 1.0 | 10.5 | 1.1 | 9.0 |
| B | 1.1 | 10.8 | 1.0 | 8.3 |
| C | 0.9 | 11.1 | 1.0 | 7.8 |
| D | 1.1 | 12.1 | 0.9 | 7.6 |
| E | 1.2 | 12.3 | 1.2 | 8.1 |
(실시예 13)
30세에서 35세까지의 여성 20명에게 실시예 2의 정제 6정을 복용시키고 1개월 후의 피부증상의 변화를 자기 평가(복수 항의 회답을 허용함)하도록 하였다. 그 결과, 다음의 피부 개선 효과가 확인되었다.
혈색이 좋아졌다(14), 피부의 윤기가 좋아졌다(12), 피부 보습이 향상되었다(9), 피부의 꺼칠함이 없어졌다(9), 화장이 잘 먹는다(8), 피부의 탄력성이 향상되었다(7).
(실시예 14)
30세에서 35세까지의 여성 10명에게 실시예 3의 시료 4를 포함하는 정제 6정을 복용시키고 1개월 후의 피부 증상의 변화를 자기 평가(복수 항 회답)하도록 하였다. 그 결과, 다음의 피부 개선 효과가 확인되었다.
혈색이 좋아졌다(7), 피부의 윤기가 좋아졌다(6), 피부의 꺼칠함이 없어졌다(4), 피부의 보습이 향상되었다(4), 화장이 잘 먹는다(3).
(실시예 15)
탈모가 심하다고 생각하는 남성 20명에게 실시예 2의 과립제를 1일 2포씩 3개월간 복용시키고 탈모의 변화에 관해 질문하였다. 그 결과, 탈모의 감소를 자각한 사람이 8명, 머리카락이 굵어졌다는 사람이 7명 있었다.
본 발명에 따르면 해조에서 유래하는 단백질, 식물에서 유래하는 단백질, 어류에서 유래하는 단백질, 밀크 단백질, 동물에서 유래하는 단백질, 콜라겐과 같은 단백질 등, 각종 단백질을 가수분해하여 얻은 펩티드를 함유하는 조성물을 의약 및 건강 식품에 이용함으로써 혈관 확장 효과를 거둘 수 있으며, 이에 따라 어깨 결림, 두통, 냉증 및 그와 관련한 기능 저하증상을 억제, 개선할 수 있다.
Claims (12)
- 김, 미역, 톳, 다시마, 클로렐라, 스피룰리나에서 선택된 해조에서 유래하는 단백질을 가수분해하여 얻어지는 펩티드를 유효 성분으로 하는 혈관 확장성 의약 조성물.
- 김, 미역, 톳, 다시마, 클로렐라, 스피룰리나에서 선택된 해조에서 유래하는 단백질을 가수분해하여 얻어지는 펩티드를 유효 성분으로 하는 혈관 확장성 건강식품 조성물.
- 대두, 참깨에서 선택된 식물에서 유래하는 단백질을 가수분해하여 얻어지는 펩티드를 유효 성분으로 하는 혈관 확장성 의약 조성물.
- 대두, 참깨에서 선택된 식물에서 유래하는 단백질을 가수분해하여 얻어지는 펩티드를 유효 성분으로 하는 혈관 확장성 건강식품 조성물.
- 가다랭이, 고등어, 꽁치, 전갱이에서 선택된 어류에서 유래하는 단백질을 가수분해하여 얻어지는 펩티드를 유효 성분으로 하는 혈관 확장성 의약 조성물.
- 가다랭이, 고등어, 꽁치, 전갱이에서 선택된 어류에서 유래하는 단백질을 가수분해하여 얻어지는 펩티드를 유효 성분으로 하는 혈관 확장성 건강식품 조성물.
- 탈지분유, 유장(乳漿)에서 선택된 각종 우유단백에서 유래하는 단백질을 가수분해하여 얻어지는 펩티드를 유효 성분으로 하는 혈관 확장성 의약 조성물.
- 탈지분유, 유장(乳漿)에서 선택된 각종 우유단백에서 유래하는 단백질을 가수분해하여 얻어지는 펩티드를 유효 성분으로 하는 혈관 확장성 건강식품 조성물.
- 소, 돼지에서 선택된 동물에서 유래하는 단백질을 가수분해하여 얻어지는 펩티드를 유효 성분으로 하는 혈관 확장성 의약 조성물.
- 소, 돼지에서 선택된 동물에서 유래하는 단백질을 가수분해하여 얻어지는 펩티드를 유효 성분으로 하는 혈관 확장성 건강식품 조성물.
- 소의 각 부위의 콜라겐, 돼지껍질 콜라겐, 어린(魚鱗)에서 유래하는 콜라겐형 단백질을 가수분해하여 얻어지는 펩티드를 유효 성분으로 하는 혈관 확장성 의약 조성물.
- 소의 각 부위의 콜라겐, 돼지껍질 콜라겐, 어린(魚鱗)에서 유래하는 콜라겐형 단백질을 가수분해하여 얻어지는 펩티드를 유효 성분으로 하는 혈관 확장성 건강식품 조성물.
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