JP4704560B2 - ｐ３８の複素環式インヒビター - Google Patents

Description

【０００１】
（発明の技術分野）
本発明は、細胞増殖、細胞死、および細胞外刺激に対する応答に関与する哺乳動物のタンパク質キナーゼであるｐ３８の、インヒビターに関する。本発明はまた、これらのインヒビターの生成方法に関する。本発明はまた、本発明のインヒビターを含有する薬学的組成物、ならびに様々な障害の処置および予防において、これらの組成物を利用する方法を提供する。
【０００２】
（発明の背景）
タンパク質キナーゼは、細胞外信号に対する様々な細胞応答に関わる。最近、マイトジェン−活性化タンパク質キナーゼ（ＭＡＰＫ）のファミリーが発見された。このファミリーのメンバーは、基質がリン酸化によって活性化されるＳｅｒ／Ｔｈｒキナーゼである［Ｂ．Ｓｔｅｉｎら，Ａｎｎ．Ｒｅｐ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，３１，ｐｐ．２８９−９８（１９９６）］。ＭＡＰＫはそれ自体が成長因子、サイトカイン、ＵＶ照射、およびストレス誘導剤を含む様々な信号で活性化される。
【０００３】
１つの特に注目すべきＭＡＰＫはｐ３８である。ｐ３８は、サイトカイン抑制性の抗炎症薬結合タンパク質（ＣＳＢＰ）およびＲＫとしてもまた公知であり、リポ多糖類（ＬＰＳ）レセプターＣＤ１４を用いて形質移入され、そしてＬＰＳを用いて誘導されたマウスのｐｒｅ−Ｂ細胞から単離された。ｐ３８は単離され、そしてヒトおよびマウスにおいてそれをコードするｃＤＮＡを有するとして配列決定された。ｐ３８の活性化はリポ多糖類（ＬＰＳ）、ＵＶ、アニソマイシン、または浸透圧のショックの処置のようなストレスによって、ならびにＩＬ−１およびＴＮＦのようなサイトカインによって刺激された細胞中で観察された。
【０００４】
ｐ３８キナーゼの阻害は、ＩＬ−１およびＴＮＦの両方の産生の遮断へと導く。ＩＬ−１およびＴＮＦは、ＩＬ−６およびＩＬ−８のような他の炎症誘発性のサイトカインの産生を刺激し、急性および慢性炎症性疾病ならびに閉経後の骨粗鬆症に関わっていた［Ｒ．Ｂ．Ｋｉｍｂｌｅら，Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．，１３６，ｐｐ．３０５４−６１（１９９５）］。
【０００５】
この発見に基づき、ｐ３８は、他のＭＡＰＫと共に、白血球蓄積、マクロファージ／単球活性化、組織再吸収、発熱、急性期応答および好中球増多のような炎症性の刺激に対する細胞応答を媒介する役割を有すると思われる。さらに、ｐ３８のようなＭＡＰＫは癌、トロンビン誘導血小板凝集、免疫不全障害、自己免疫性疾患、細胞死、アレルギー、骨粗鬆症および神経変性障害に関係してきた。ｐ３８のインヒビターもまたプロスタグランジンエンドペルオキシドシンターゼ−２誘導の阻害を通して疼痛管理の領域に関係してきた。Ｉｌ−１、ＩＬ−６、ＩＬ−８またはＴＮＦ過剰産生に関係した他の疾病は、ＷＯ ９６／２１６５４に示されている。
ＰＣＴ公開ＷＯ９７／３３８８３は、サイトカイン媒介疾患の処置に使用するためのアミノ置換ピリミジン化合物を記載する。欧州特許出願ＥＰ０ ３３７ ９４３およびＥＰ０ ３３７ ９４４は、除草性および植物成長調節活性を有するＮ−フェニル−Ｎ−ピリミジン−２−イルウレアを記載する。
【０００６】
他者はすでに特異的にＭＡＰＫを阻害する薬品の開発を試み始めている。例えば、ＰＣＴ公開ＷＯ ９５／３１４５１ではＭＡＰＫ、特にｐ３８を阻害するピラゾール化合物を記述している。しかしながら、これらのインヒビターのインビボでの有効性はまだ研究され続けている。ＰＣＴ公開ＷＯ９８／２７０９８もまた、ｐ３８インヒビターを記載し、これは置換ピリジン化合物を含む。
【０００７】
従って、他の強力な、ｐ３８の活性化と関係した様々な状態の処置に有用なｐ３８（ｐ３８−特異的インヒビターを含む）の開発が、いまだ非常に必要とされている。
【０００８】
（発明の要旨）
本発明は、ｐ３８の強力な阻害を示す化合物を提供することによって、この問題を解決する。
【０００９】
これらの化合物は、以下の一般式を有する：
【００１０】
【化２３】
ここで、各Ｑ₁およびＱ₂は、独立して、フェニルまたは５〜６員芳香族複素環式環系、あるいは芳香族炭化水素環式環、芳香族複素環式環、または芳香族炭素環式環と芳香族複複素式環の組み合わせを含む８〜１０員二環式環系から選択される。
【００１１】
複素環式環系または複素環式環は、１〜４個のヘテロ原子を含み、これらのヘテロ原子は独立して、Ｎ、Ｏ、Ｓ、ＳＯおよびＳＯ₂から選択される。
【００１２】
Ｑ₁を形成する環は１〜４個の置換基で置換され、この置換基の各々は以下から独立して選択される：ハロ；ＮＲ’₂、ＯＲ’、ＣＯ₂Ｒ’もしくはＣＯＮＲ’₂で必要に応じて置換されたＣ₁〜Ｃ₃アルキル；ＮＲ’₂、ＯＲ’、ＣＯ₂Ｒ’もしくはＣＯＮＲ’₂で必要に応じて置換されたＯ−（Ｃ₁〜Ｃ₃）−アルキル；ＮＲ’₂；ＯＣＦ₃；ＣＦ₃；ＮＯ₂；ＣＯ₂Ｒ’；ＣＯＮＲ’；ＳＲ’；Ｓ（Ｏ₂）Ｎ（Ｒ’）₂；ＳＣＦ₃；ＣＮ；Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）Ｒ⁴；Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）ＯＲ⁴；Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｒ⁴；Ｎ（Ｒ’）Ｓ（Ｏ₂）Ｒ⁴；Ｎ（Ｒ’）Ｒ⁴；Ｎ（Ｒ⁴）₂；ＯＲ⁴；ＯＣ（Ｏ）Ｒ⁴；ＯＰ（Ｏ）₃Ｈ₂；またはＮ＝Ｃ−Ｎ（Ｒ’）₂。
【００１３】
Ｑ₂を形成する環は４個までの置換基で必要に応じて置換され、この置換基の各々は以下から独立して選択される：ハロ；ＮＲ’₂、ＯＲ’、ＣＯ₂Ｒ’、Ｓ（Ｏ₂）Ｎ（Ｒ’）₂、Ｎ＝Ｃ−Ｎ（Ｒ’）₂、Ｒ³、もしくはＣＯＮＲ’₂で必要に応じて置換されたＣ₁〜Ｃ₃直鎖または分枝アルキル；Ｏ−（Ｃ₁〜Ｃ₃）−アルキル；ＮＲ’₂、ＯＲ’、ＣＯ₂Ｒ’、Ｓ（Ｏ₂）Ｎ（Ｒ’）₂、Ｎ＝Ｃ−Ｎ（Ｒ’）₂、Ｒ³、もしくはＣＯＮＲ’₂で必要に応じて置換されたＯ−（Ｃ₁〜Ｃ₃）−アルキル；ＮＲ’₂；ＯＣＦ₃；ＣＦ₃；ＮＯ₂；ＣＯ₂Ｒ’；ＣＯＮＲ’；Ｒ³；ＯＲ³；ＮＲ³；ＳＲ³；Ｃ（Ｏ）Ｒ³；Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）Ｒ³；Ｃ（Ｏ）ＯＲ³；ＳＲ’；Ｓ（Ｏ₂）Ｎ（Ｒ’）₂；ＳＣＦ₃；Ｎ＝Ｃ−Ｎ（Ｒ’）₂；またはＣＮ。
【００１４】
Ｑ₂’は、必要に応じて１〜３個の置換基で置換された、フェニルまたは５〜６員芳香族複素環式環から選択され、この置換基の各々は、独立して、ハロゲン；ＮＲ’₂、ＯＲ’、ＣＯ₂Ｒ’、ＣＯＮＲ’₂、またはＯ−Ｐ（Ｏ₃）Ｈ₂で必要に応じて置換されたＣ₁〜Ｃ₃アルキル；必要に応じてＮＲ’₂、ＯＲ’、ＣＯ₂Ｒ’、ＣＯＮＲ’₂、またはＯＰ（Ｏ₃）Ｈ₂で置換されたＯ−（Ｃ₂〜Ｃ₃）−アルキル；ＯＣＦ₃；ＣＦ₃；ＯＲ⁴；Ｏ−ＣＯ₂Ｒ⁴；Ｏ−Ｐ（Ｏ₃）Ｈ₂；ＣＯ₂Ｒ’；ＣＯＮＲ’；ＳＲ’；Ｓ（Ｏ₂）Ｎ（Ｒ’）₂；ＳＣＦ₃；ＣＮ；Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）Ｒ⁴；Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）ＯＲ⁴；Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｒ⁴；Ｎ（Ｒ’）Ｓ（Ｏ₂）Ｒ⁴；Ｎ（Ｒ’）Ｒ⁴；Ｎ（Ｒ⁴）₂；ＯＲ⁴；ＯＣ（Ｏ）Ｒ⁴；ＯＰ（Ｏ）₃Ｈ₂；またはＮ＝Ｃ−Ｎ（Ｒ’）₂から選択され、ただしＱ₂’は、ハロ、メトキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシ、メチルまたはエチルから独立して選択される１〜３個の置換基で必要に応じて置換されたフェニルではない。
【００１５】
Ｒ’は、水素；（Ｃ₁〜Ｃ₃）−アルキル；（Ｃ₂〜Ｃ₃）−アルケニルまたはアルキニル；フェニル、またはハロ、メトキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシ、メチルもしくはエチルから独立して選択される１〜３個の置換基で置換されたフェニル；あるいはハロ、メトキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシ、メチルまたはエチルから独立して選択される１〜３個の置換基で必要に応じて置換された５〜６員複素環式環系から選択される。
【００１６】
Ｒ³は、Ｒ’、Ｒ⁴、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）Ｒ⁴、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ⁴もしくは−Ｊでそれぞれ必要に応じて置換された５〜８員芳香族または非芳香族炭素環式または複素環式環系；各々がＲ’、Ｒ⁴、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）Ｒ⁴、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ⁴または−Ｊで必要に応じて置換された、芳香族炭素環式環、芳香族複素環式環、あるいは芳香族炭素環式環と芳香族複素環式環との組み合わせを含む８〜１０員二環式環系から選択される。
【００１７】
Ｒ⁴は、Ｎ（Ｒ’）₂、ＯＲ’、ＣＯ₂Ｒ’、ＣＯＮ（Ｒ’）₂またはＳＯ₂Ｎ（Ｒ²）₂で必要に応じて置換された（Ｃ₁〜Ｃ₄）−直鎖または分枝アルキル；あるいはＮ（Ｒ’）₂、ＯＲ’、ＣＯ₂Ｒ’、ＣＯＮ（Ｒ’）₂またはＳＯ₂Ｎ（Ｒ²）₂で必要に応じて置換された５〜６員炭素環式または複素環式環系である。
【００１８】
Ｒ⁵は、水素；Ｒ³で必要に応じて置換された（Ｃ₁〜Ｃ₃）−アルキル；それぞれＲ³で必要に応じて置換された（Ｃ₂〜Ｃ₃）−アルケニルまたはアルキニル；フェニル、またはハロ、メトキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシ、メチルもしくはエチルから独立して選択される１〜３個の置換基で置換されたフェニル；あるいはハロ、メトキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシ、メチルまたはエチルから独立して選択される１〜３個の置換基で必要に応じて置換された５〜６員複素環式環系から選択される。
【００１９】
Ｗは、Ｈ；Ｎ（Ｒ²）ＳＯ₂−Ｎ（Ｒ²）₂；Ｎ（Ｒ²）ＳＯ₂−Ｎ（Ｒ²）（Ｒ³）；Ｎ（Ｒ²）Ｃ（Ｏ）−ＯＲ²；Ｎ（Ｒ²）Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ²）₂；Ｎ（Ｒ²）Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ²）（Ｒ³）；Ｎ（Ｒ²）Ｃ（Ｏ）−Ｒ²；Ｎ（Ｒ²）₂；Ｃ（Ｏ）−Ｒ²；ＣＨ（ＯＨ）−Ｒ²；Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ²）₂；Ｃ（Ｏ）−ＯＲ²；Ｊ；またはＮ（Ｒ’）₂、ＯＲ’、ＣＯ₂Ｒ’、ＣＯＮ（Ｒ’）₂、Ｒ³、ＳＯ₂Ｎ（Ｒ²）₂、ＯＣ（Ｏ）Ｒ²、ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ²）₂、−Ｎ（Ｒ⁴）（Ｒ⁵）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ⁵）（Ｒ²）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ⁵、−Ｎ（Ｒ²）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ²）（Ｒ⁵）、−ＮＣ（Ｏ）ＯＲ⁵、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ²）（Ｒ⁵）もしくは−Ｊで必要に応じて置換された（Ｃ₁〜Ｃ₄）直鎖または分枝アルキル；Ｎ（Ｒ’）₂、ＯＲ’、ＣＯ₂Ｒ’、ＣＯＮ（Ｒ’）₂もしくはＳＯ₂Ｎ（Ｒ²）₂で必要に応じて置換された５〜６員炭素環式またヘテロ環式環系；あるいはＮ（Ｒ’）₂、ＯＲ’、ＣＯ₂Ｒ’、ＣＯＮ（Ｒ’）₂もしくはＳＯ₂Ｎ（Ｒ²）₂で必要に応じて置換された８〜１０員炭素環式またはヘテロ環式環系から選択され、ただし、Ｗは、Ｒ³置換Ｃ₁アルキルではない。
【００２０】
Ｗ’は、Ｎ（Ｒ²）−ＳＯ₂−Ｑ₂；Ｎ（Ｒ²）−ＣＯ₂−Ｑ₂；Ｎ（Ｒ²）−Ｃ（Ｏ）−Ｑ₂；Ｎ（Ｒ²）（Ｑ₂）；Ｃ（Ｏ）−Ｑ₂；ＣＯ₂−Ｑ₂；Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ²）（Ｑ₂）；Ｃ（Ｒ²）₂Ｑ₂から選択される。
【００２１】
各Ｒは、独立して、水素、−Ｒ²、−Ｎ（Ｒ²）₂、−ＯＲ²、ＳＲ²、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ²）₂、−Ｓ（Ｏ₂）−Ｎ（Ｒ²）₂、−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ²または−Ｃ（Ｏ）Ｒ²から選択され、ここで２つの隣接するＲは、必要に応じて互いに結合し、そしてそれらがそれぞれ結合している各Ｙと一緒になって、４〜８員炭素環式または複素環式環を形成する。
【００２２】
Ｒ²は、水素、（Ｃ₁〜Ｃ₃）−アルキルまたは（Ｃ₁〜Ｃ₃）−アルケニルから選択され、これらの各々は、−Ｎ（Ｒ’）₂、−ＯＲ’、ＳＲ’、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ’）₂、−Ｓ（Ｏ₂）−Ｎ（Ｒ’）₂、−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ’、−ＮＳＯ₂Ｒ⁴、ＮＳＯ₂Ｒ³、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）（Ｒ³）、−ＮＣ（Ｏ）Ｒ⁴、−Ｎ（Ｒ’）（Ｒ³）、−Ｎ（Ｒ’）（Ｒ⁴）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ³、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）（Ｒ⁴）、−Ｎ（Ｒ⁴）₂、−Ｃ（Ｏ）Ｎ＝Ｃ（ＮＨ）₂またはＲ³で必要に応じて置換される。
【００２３】
Ｙは、ＮまたはＣであり；ここで、ＹがＮの場合、Ｙに結合しているＲまたはＵは、孤立電子対である。
【００２４】
Ｚは、ＣＨ、Ｎ、Ｃ（ＯＣＨ₃）、Ｃ（ＣＨ₃）、Ｃ（ＮＨ₂）、Ｃ（ＯＨ）またはＣ（Ｆ）である。
【００２５】
Ｕは、ＲまたはＷから選択される。
【００２６】
Ｖは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ₂、−Ｐ（Ｏ）（ＮＨ₂）₂、または−ＳＯ₂ＮＨ₂から選択される。
【００２７】
Ａ、ＢおよびＣは独立して、−Ｏ−、−ＣＨＲ’−、−ＣＨＲ⁴−、−ＮＲ’−、−ＮＲ⁴−または−Ｓ−から選択される。
【００２８】
Ｊは、Ｄ、−Ｔ−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、または−ＯＰＯ₃Ｈ₂から選択される１〜３個の置換基で置換された（Ｃ₁〜Ｃ₄）直鎖または分枝アルキル誘導体である。
【００２９】
Ｄは、以下の基：
【００３０】
【化２４】
から選択される。
【００３１】
Ｔは、ＯまたはＮＨのいずれかである。
【００３２】
Ｇは、ＮＨ₂またはＯＨのいずれかである。
【００３３】
別の実施態様において、本発明は、本発明のｐ３８インヒビターを含有する薬学的組成物を提供する。これらの組成物は、種々の障害（例えば、癌、炎症性疾患、自己免疫疾患、破壊性骨障害、増殖性障害、感染症、ウイルス性疾患および神経変性疾患）の処置または予防方法に利用され得る。これらの組成物はまた、細胞死および過形成を予防するための方法において有用であり、従って発作における再灌流／虚血、心臓発作、および器官低酸素症を処置または予防するために使用され得る。これらの組成物はまた、トロンビン誘発血小板凝集を予防するための方法において有用である。これらの上記の方法の各々はまた、本発明の一部である。
【００３４】
（発明の詳細な説明）
これらの化合物は、以下の一般式を有する：
【００３５】
【化２５】
ここで、Ｑ₁およびＱ₂のそれぞれが独立して、フェニルまたは５〜６員芳香族複素環式環系、あるいは芳香族炭素環式環、芳香族複素環式環または芳香族炭素環式環および芳香族複素環式環の組合せを含む８〜１０員二環式環系から選択される。
【００３６】
Ｑ₁を形成する環は１〜４個の置換基で置換され、この置換基のそれぞれは以下から独立して選択される：ハロ；ＮＲ’₂、ＯＲ’、ＣＯ₂Ｒ’もしくはＣＯＮＲ’₂で任意に置換されたＣ₁〜Ｃ₃アルキル；ＮＲ’₂、ＯＲ’、ＣＯ₂Ｒ’もしくはＣＯＮＲ’₂で任意に置換されたＯ−（Ｃ₁〜Ｃ₃）−アルキル；ＮＲ’₂；ＯＣＦ₃；ＣＦ₃；ＮＯ₂；ＣＯ₂Ｒ’；ＣＯＮＲ’；ＳＲ’；Ｓ（Ｏ₂）Ｎ（Ｒ’）₂；ＳＣＦ₃；ＣＮ；Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）Ｒ⁴；Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）ＯＲ⁴；Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｒ⁴；Ｎ（Ｒ’）Ｓ（Ｏ₂）Ｒ⁴；Ｎ（Ｒ’）Ｒ⁴；Ｎ（Ｒ⁴）₂；ＯＲ⁴；ＯＣ（Ｏ）Ｒ⁴；ＯＰ（Ｏ）₃Ｈ₂；またはＮ＝Ｃ−Ｎ（Ｒ’）₂。
【００３７】
Ｑ₂を形成する環は４個までの置換基で任意に置換され、この置換基のそれぞれは以下から独立して選択される：ハロ；ＮＲ’₂、ＯＲ’、ＣＯ₂Ｒ’、Ｓ（Ｏ₂）Ｎ（Ｒ’）₂、Ｎ＝Ｃ−Ｎ（Ｒ’）₂、Ｒ³、もしくはＣＯＮＲ’₂で任意に置換されたＣ₁〜Ｃ₃直鎖もしくは分枝アルキル；Ｏ−（Ｃ₁〜Ｃ₃）−アルキル；ＮＲ’₂、ＯＲ’、ＣＯ₂Ｒ’、Ｓ（Ｏ₂）Ｎ（Ｒ’）₂、Ｎ＝Ｃ−Ｎ（Ｒ’）₂、Ｒ³、もしくはＣＯＮＲ’₂で任意に置換されたＯ−（Ｃ₁〜Ｃ₃）−アルキル；ＮＲ’₂；ＯＣＦ₃；ＣＦ₃；ＮＯ₂；ＣＯ₂Ｒ’；ＣＯＮＲ’；Ｒ³；ＯＲ³；ＮＲ³；ＳＲ³；Ｃ（Ｏ）Ｒ³；Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）Ｒ³；Ｃ（Ｏ）ＯＲ³；ＳＲ’；Ｓ（Ｏ₂）Ｎ（Ｒ’）₂；ＳＣＦ₃；Ｎ＝Ｃ−Ｎ（Ｒ’）₂；またはＣＮ。
【００３８】
Ｑ₂’は、フェニル、あるいは１〜３個の置換基で任意に置換された５〜６員の芳香族複素環式環から選択され、そのそれぞれの置換基は、以下から独立して選択される：ハロゲン；Ｃ_1-3アルキル（任意にＮＲ’₂、ＯＲ’、ＣＯ₂Ｒ’、ＣＯＮＲ’₂またはＯ−Ｐ（Ｏ₃）Ｈ₂で置換される）；Ｏ−（Ｃ₂〜Ｃ₃）−アルキル（任意にＮＲ’₂、ＯＲ’、ＣＯ₂Ｒ’、ＣＯＮＲ’₂またはＯ−Ｐ（Ｏ₃）Ｈ₂で置換される）；ＯＣＦ₃；ＣＦ₃；ＯＲ⁴；Ｏ−ＣＯ₂Ｒ⁴；Ｏ−Ｐ（Ｏ₃）Ｈ₂；ＣＯ₂Ｒ’；ＣＯＮＲ’；ＳＲ’；Ｓ（Ｏ₂）Ｎ（Ｒ’）₂；ＳＣＦ₃；ＣＮ；Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）Ｒ⁴；Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）ＯＲ⁴；Ｎ（Ｒ’）Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）Ｒ⁴；Ｎ（Ｒ’）Ｓ（Ｏ₂）Ｒ⁴；Ｎ（Ｒ’）Ｒ⁴；Ｎ（Ｒ⁴）₂；ＯＲ⁴；ＯＣ（Ｏ）Ｒ⁴；ＯＰ（Ｏ）₃Ｈ₂；またはＮ＝Ｃ−Ｎ（Ｒ’）₂；ただし、Ｑ₂’は、ハロ、メトキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシ、メチルまたはエチルから独立して選択される１〜３個の置換基で任意に置換されたフェニルではない。
【００３９】
Ｒ’は、以下から選択される：水素；（Ｃ₁〜Ｃ₃）−アルキル；（Ｃ₂〜Ｃ₃）−アルケニルまたはアルキニル；フェニル、またはハロ、メトキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシ、メチルもしくはエチルから独立して選択される、１〜３個の置換基で置換されたフェニル；あるいはハロ、メトキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシ、メチルまたはエチルから独立して選択される１〜３個の置換基で任意に置換された５〜６員の複素環式環系。
【００４０】
Ｒ³は、それぞれがＲ’、Ｒ⁴、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）Ｒ⁴、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ⁴または−Ｊで任意に置換された５〜８員の芳香族または非芳香族炭素環式あるいは複素環式環系；あるいは、それぞれがＲ’、Ｒ⁴、−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、−Ｃ（Ｏ）Ｒ⁴、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ⁴または−Ｊで任意に置換された、芳香族炭素環式環、芳香族複素環式環あるいは芳香族炭素環式環と芳香族複素環式環の組み合わせを含む、８〜１０員の二環式環系から選択される。
【００４１】
Ｒ⁴は、Ｎ（Ｒ’）₂、ＯＲ’、ＣＯ₂Ｒ’、ＣＯＮ（Ｒ’）₂、またはＳＯ₂Ｎ（Ｒ²）₂で任意に置換された（Ｃ₁〜Ｃ₄）−直鎖もしくは分枝アルキル；あるいはＮ（Ｒ’）₂、ＯＲ’、ＣＯ₂Ｒ’、ＣＯＮ（Ｒ’）₂、またはＳＯ₂Ｎ（Ｒ²）₂で任意に置換された５〜６員の炭素環式または複素環式環系である。
【００４２】
Ｒ⁵は、以下から選択される：水素；Ｒ³で任意に置換された（Ｃ₁〜Ｃ₃）−アルキル；それぞれがＲ³で任意に置換された（Ｃ₂〜Ｃ₃）−アルケニルまたはアルキニル；フェニル、またはハロ、メトキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシ、メチルもしくはエチルから独立して選択される、１〜３個の置換基で置換されたフェニル；あるいはハロ、メトキシ、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシ、メチルまたはエチルから独立して選択される、１〜３個の置換基で任意に置換された５〜６員の複素環式環系。
【００４３】
Ｗは、以下から選択される：Ｈ；Ｎ（Ｒ²）ＳＯ₂−Ｎ（Ｒ²）₂；Ｎ（Ｒ²）ＳＯ₂−Ｎ（Ｒ²）（Ｒ³）；Ｎ（Ｒ²）Ｃ（Ｏ）−ＯＲ²；Ｎ（Ｒ²）Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ²）₂；Ｎ（Ｒ²）Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ²）（Ｒ³）；Ｎ（Ｒ²）Ｃ（Ｏ）−Ｒ²；Ｎ（Ｒ²）₂；Ｃ（Ｏ）−Ｒ²；ＣＨ（ＯＨ）−Ｒ²；Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ²）₂；Ｃ（Ｏ）−ＯＲ²；Ｊ；あるいは、Ｎ（Ｒ’）₂、ＯＲ’、ＣＯ₂Ｒ’、ＣＯＮ（Ｒ’）₂、Ｒ³、ＳＯ₂Ｎ（Ｒ²）₂、ＯＣ（Ｏ）Ｒ²、ＯＣ（Ｏ）Ｒ’、ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ²）₂、−Ｎ（Ｒ⁴）（Ｒ⁵）、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ⁵）（Ｒ²）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ⁵、−Ｎ（Ｒ²）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ²）（Ｒ⁵）、−ＮＣ（Ｏ）ＯＲ⁵、−ＯＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ²）（Ｒ⁵）、または−Ｊで任意に置換された（Ｃ₁〜Ｃ₄）直鎖または分枝アルキル；Ｎ（Ｒ’）₂、ＯＲ’、ＣＯ₂Ｒ’、ＣＯＮ（Ｒ’）₂またはＳＯ₂Ｎ（Ｒ²）₂で任意に置換された５〜６員の炭素環式または複素環式環系；あるいは、Ｎ（Ｒ’）₂、ＯＲ’、ＣＯ₂Ｒ’、ＣＯＮ（Ｒ’）₂またはＳＯ₂Ｎ（Ｒ²）₂で任意に置換された８〜１０員の炭素環式または複素環式環系；ただし、Ｗは、Ｒ³置換Ｃ₁アルキルではない。
【００４４】
Ｗ’は、Ｎ（Ｒ²）−ＳＯ₂−Ｑ₂；Ｎ（Ｒ²）−ＣＯ₂−Ｑ₂；Ｎ（Ｒ²）−Ｃ（Ｏ）−Ｑ₂；Ｎ（Ｒ²）（Ｑ₂）；Ｃ（Ｏ）−Ｑ₂；ＣＯ₂−Ｑ₂；Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ²）（Ｑ₂）；Ｃ（Ｒ²）₂Ｑ₂から選択される。
【００４５】
各Ｒは、独立して、水素、−Ｒ²、−Ｎ（Ｒ²）₂、−ＯＲ²、ＳＲ²、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ²）₂、−Ｓ（Ｏ₂）−Ｎ（Ｒ²）₂、−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ²、または−Ｃ（Ｏ）Ｒ²から選択され、ここで２個の隣接するＲは、互いに任意に結合し、そしてこれらがそれぞれ結合した各Ｙと一緒になって、４〜８員炭素環式または複素環式環を形成する。
【００４６】
２つのＲ成分が、それらがそれぞれ結合しているＹ成分と一緒に環を形成する場合、各非縮合Ｒ成分からの末端水素が失われることは当業者に明らかである。例えば、環構造が２つのＲ成分（一方は
【００４７】
【化２６】
であり、他方は
【００４８】
【化２７】
である）を一緒に結合することによって形成される場合、各Ｒ成分の一方の末端水素（太字で示される）は失われる。それ故、得られる環構造の部分は、式
【００４９】
【化２８】
を有する。
【００５０】
Ｒ²は、水素、（Ｃ₁〜Ｃ₃）−アルキル、または（Ｃ₁〜Ｃ₃）−アルケニルから選択され；それぞれが−Ｎ（Ｒ’）₂、−ＯＲ’、ＳＲ’、−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ’）₂、−Ｓ（Ｏ₂）−Ｎ（Ｒ’）₂、−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ’、−ＮＳＯ₂Ｒ⁴、−ＮＳＯ₂Ｒ³、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）（Ｒ³）、−ＮＣ（Ｏ）Ｒ⁴、−Ｎ（Ｒ’）（Ｒ³）、−Ｎ（Ｒ’）（Ｒ⁴）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ³、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ’）（Ｒ⁴）、−Ｎ（Ｒ⁴）₂、−Ｃ（Ｏ）Ｎ＝Ｃ（ＮＨ）₂またはＲ³で任意に置換される。
【００５１】
ＹはＮまたはＣである；ここで、ＹがＮである場合、それに結合するＲまたはＵは、孤立電子対である。
【００５２】
Ｚは、ＣＨ、Ｎ、Ｃ（ＯＣＨ₃）、Ｃ（ＣＨ₃）、Ｃ（ＮＨ₂）、Ｃ（ＯＨ）またはＣ（Ｆ）である。
【００５３】
Ｕは、ＲまたはＷから選択される。
【００５４】
Ｖは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ₂、−Ｐ（Ｏ）（ＮＨ₂）₂、または−ＳＯ₂ＮＨ₂から選択される。
【００５５】
Ａ、ＢおよびＣは、独立して−Ｏ−、−ＣＨＲ’−、ＣＨＲ⁴−、−ＮＲ’−、−ＮＲ⁴−または−Ｓ−から選択される。
【００５６】
Ｊは、Ｄ、−Ｔ−Ｃ（Ｏ）Ｒ’、または−ＯＰＯ₃Ｈ₂から選択される１〜３個の置換基で置換された（Ｃ₁〜Ｃ₄）直鎖または分枝アルキル誘導体である。
【００５７】
Ｄは、以下の基から選択される：
【００５８】
【化２９】
Ｔは、ＯまたはＮＨのいずれかである。
【００５９】
Ｇは、ＮＨ₂またはＯＨである。
【００６０】
好ましい実施態様により、Ｑ₁は１〜３個の置換基を含むフェニルまたはピリジルから選択され、ここで少なくとも１個の上記置換基がオルト位に存在し、かつ上記置換基は独立して以下から選択される：クロロ、フルオロ、ブロモ、−ＣＨ₃、−ＯＣＨ₃、−ＯＨ、−ＣＦ₃、−ＯＣＦ₃、−Ｏ（ＣＨ₂）₂ＣＨ₃、ＮＨ₂、３，４−メチレンジオキシ、−Ｎ（ＣＨ₃）₂、−ＮＨ−Ｓ（Ｏ）₂−フェニル、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−ＣＨ₂−４−ピリジン、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）ＣＨ₂−モルホリン、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）ＣＨ₂−Ｎ（ＣＨ₃）₂、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）ＣＨ₂−ピペラジン、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）ＣＨ₂−ピロリジン、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）−モルホリン、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）−ピペラジン、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）Ｃ（Ｏ）−ピロリジン、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）ＣＨ₂−Ｎ（ＣＨ₃）₂、または−Ｏ−（ＣＨ₂）₂−Ｎ（ＣＨ₃）₂。
【００６１】
両方がオルト位にある、少なくとも２個の上記置換基を含むフェニルまたはピリジルが、なおより好ましい。
【００６２】
好ましいＱ₁のいくつかの特定の例は以下である：
【００６３】
【化３０】
最も好ましくは、Ｑ₁は以下から選択される：２−フルオロ−６−トリフルオロメチルフェニル、２，６−ジフルオロフェニル、２，６−ジクロロフェニル、２−クロロ−４−ヒドロキシフェニル、２−クロロ−４−アミノフェニル、２，６−ジクロロ−４−アミノフェニル、２，６−ジクロロ−３−アミノフェニル、２，６−ジメチル−４−ヒドロキシフェニル、２−メトキシ−３，５−ジクロロ−４−ピリジル、２−クロロ−４，５メチレンジオキシフェニル、または２−クロロ−４−（Ｎ−２−モルホリノ−アセトアミド）フェニル。
【００６４】
好ましい実施態様により、Ｑ₂は０〜３個の置換基を含むフェニルまたはピリジルまたはナフチルであり、ここで各置換基は独立して以下から選択される：クロロ、フルオロ、ブロモ、メチル、エチル、イソプロピル、−ＯＣＨ₃、−ＯＨ、−ＮＨ₂、−ＣＦ₃、−ＯＣＦ₃、−ＳＣＨ₃、−ＯＣＨ₃、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ₃、−ＣＨ₂ＮＨ₂、−Ｎ（ＣＨ₃）₂、−ＣＨ₂−ピロリジンおよび−ＣＨ₂ＯＨ。
【００６５】
好ましいＱ₂のいくつかの特定の例は以下である：
【００６６】
【化３１】
非置換２−ピリジルまたは非置換フェニル。
【００６７】
Ｑ₂が以下から選択される化合物が最も好ましい：フェニル、２−イソプロピルフェニル、３，４−ジメチルフェニル、２−エチルフェニル、３−フルオロフェニル、２−メチルフェニル、３−クロロ−４−フルオロフェニル、３−クロロフェニル、２−カルボメトキシルフェニル、２−カルボキシフェニル、２−メチル−４−クロロフェニル、２−ブロモフェニル、２−ピリジル、２−メチレンヒドロキシフェニル、４−フルオロフェニル、２−メチル−４−フルオロフェニル、２−クロロ−４−フルオロフェニル（２−ｃｈｌｏｒｏ−４−ｆｌｕｏｒｐｈｅｎｙｌ）、２，４−ジフルオロフェニル、２−ヒドロキシ−４−フルオロフェニル（２−ｈｙｄｒｏｘｙ−４−ｆｌｕｏｒｐｈｅｎｙｌ）、２−メチレンヒドロキシ−４−フルオロフェニル、１−ナフチル、３−クロロ−２−メチレンヒドロキシ、３−クロロ−２−メチル、または４−フルオロ−２−メチル。
【００６８】
別の好ましい実施態様により、各ＹはＣである。
【００６９】
さらにより好ましい実施態様により、各ＹはＣであり、かつその各Ｙ成分に結合したＲおよびＵは水素またはメチルから選択される。
【００７０】
別の好ましい実施態様により、Ｗは、アルコール、アミン、カルボン酸、エステル、アミド、または複素環で終端する０〜４個の炭素鎖である。
【００７１】
好ましいＷの幾つかの特定の例は以下である：
【００７２】
【化３２】
最も好ましくは、Ｗは以下から選択される：
【００７３】
【化３３】
Ｕは、Ｗと同様の好ましい実施態様および最も好ましい実施態様を有する。
【００７４】
さらにより好ましい実施態様により、各ＹはＣであり、そしてＷおよび／またはＵは水素ではない。
【００７５】
いくつかの好ましい実施態様を以下の表１〜６に示す。
【００７６】
【表１】
【００７７】
【表２】
【００７８】
【表３】
【００７９】
【表４】
【００８０】
【表５】
【００８１】
【表６】
特に好ましい実施態様には以下が挙げられる：
【００８２】
【化３４】
特に好ましい実施態様にはまた、以下が挙げられる：
【００８３】
【化３５】
他の特に好ましい実施態様には以下が挙げられる：
【００８４】
【化３６】
他の特に好ましい実施態様には以下が挙げられる：
【００８５】
【化３７】
他の特に好ましい実施態様には以下が挙げられる：
【００８６】
【化３８】
最も好ましい実施態様には以下が挙げられる：
【００８７】
【化３９】
別の実施態様により、本発明は、式（Ｉａ）、（Ｉｂ）、（Ｉｃ）、（Ｉｄ）および（Ｉｅ）を有する、上記で同定したｐ３８のインヒビターを生成する方法を提供する。式（Ｉａ）の代表的な合成スキームを以下に示す。
【００８８】
スキーム１〜３は、Ｗがアミノ、カルボキシルまたはアルデヒド基のいずれかである化合物の調製を示す。各例において、特定の部分は、文献において周知の化学によって修飾され得る。例えば、最終アミノ化合物ＤおよびＮ（それぞれスキーム１および４）は、アシル化、スルホニル化またはアルキル化されて、Ｗの範囲内の化合物を調製し得る。全てのスキームにおいて、開始物質のＬ１およびＬ２基は、複素環式環における窒素原子に対してオルト位の脱離基を表すことが意味される。例えば、化合物Ａは、２，６−ジクロロ−３ニトロピリジンであり得る。
【００８９】
【化４０】
スキーム１において、Ｗは、Ｎ（Ｒ²）ＳＯ₂−Ｎ（Ｒ²）₂；Ｎ（Ｒ²）ＳＯ₂−Ｎ（Ｒ²）（Ｒ³）；Ｎ（Ｒ²）Ｃ（Ｏ）−ＯＲ²；Ｎ（Ｒ²）Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ²）₂；Ｎ（Ｒ²）Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ²）（Ｒ³）；Ｎ（Ｒ²）Ｃ（Ｏ）−Ｒ²；またはＮ（Ｒ²）₂のようなアミノ誘導体化された化合物から選択される。
【００９０】
スキーム１において、Ｑ２環は、ビアリール化合物の生成を生じる当該分野に公知の多くの反応のうち１つを利用して導入される。一例は、アリールリチウム化合物とピリジン中間体Ａとの反応であり得る。あるいは、アリール金属化合物（例えば、アリールスズまたはアリールボロン酸）をＰｄ⁰触媒の存在下で、アリールハライド部分（中間体Ａ）と反応させることによって生成物Ｂが生成され得る。次の工程において、Ｑ１置換誘導体（例えば、フェニルアセトニトリル誘導体）を塩基（例えば、水素化ナトリウム、ナトリウムアミド、ＬＤＡ、リチウムヘキサメチルジシラジドまたは多数の他の非求核性塩基）で処理することによってシアノ基に対してα位が脱プロトン化され得る。これは、マスクされたアミド部分を示す。このアニオンを次いで、中間体Ｂと接触させると、Ｃが形成される。中間体Ｃのニトリルまたは等価の基は、次いで、加水分解されてアミドを形成し、そしてニトロ基は、還元条件に曝されて、アミン中間体Ｄを形成する。次いでこの中間体Ｄが使用され、Ｗによって規定される種々の官能基を、文献において周知のアシル化、スルホニル化またはアルキル化反応のような化学によって導入する。この手順の最初の２工程の位置化学に依存して、最初の２工程は逆転される必要があり得る。
【００９１】
【化４１】
スキーム２において、Ｗはカルボキシル誘導体化された化合物（例えば、Ｃ（Ｏ）−Ｒ²；ＣＨ（ＯＨ）−Ｒ²；Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ²）₂；またはＣ（Ｏ）−ＯＲ’）から選択される。
【００９２】
スキーム２は一般に、Ｅのようなカルボキシル中間体が出発物質であることを除いてスキーム１に記載の手順に従う。最初の２工程はスキーム１を模倣し、スキーム１で述べたように、これらの工程は特定の実施例の位置化学に依存して逆転され得る。中間体Ｇは、これらの最初の２工程から形成され、そしてこの物質は、述べたように加水分解され得、カルボキシル中間体Ｈを得る。カルボキシル基は次いで、規定されたＷ置換基を有するアナログを調製するために、文献からの周知の手順（例えば、アシル化、アミド化およびエステル化）に従って修飾され得る。
【００９３】
【化４２】
スキーム３において、Ｗは以下から選択される：Ｎ（Ｒ’）₂、ＯＲ’、ＣＯ₂Ｒ’、ＣＯＮ（Ｒ’）₂、またはＳＯ₂Ｎ（Ｒ²）₂で任意に置換された（Ｃ₁〜Ｃ₄）直鎖または分枝アルキル；あるいはＮ（Ｒ’）₂、ＯＲ’、ＣＯ₂Ｒ’、ＣＯＮ（Ｒ’）₂、またはＳＯ₂Ｎ（Ｒ²）₂で任意に置換された５〜６員の炭素環式または複素環式環系；ただし、Ｗは、Ｒ³置換Ｃ₁アルキルではない。
【００９４】
スキーム３において、ピリジン誘導体は、金属化され（ｍｅｔａｌａｔｅｄ）、そしてアルデヒドを発生し得る多くの公知の求電子剤のうち一つを使用してクエンチされ、中間体Ｉを形成する。次いでこのアルデヒドをマスクして、ジメチルアセタールＪを形成し得る。この中間体は次いで、Ｑ１およびＱ２置換基を導入するためにスキーム１および２に記載されるように実施され、中間体Ｌを生成する。上記のように、これら２工程は、特定の位置化学に依存して交換され得る。マスクされたアルデヒドＬは、次いで、脱保護され得、そしてアルキル化および還元アミノ化のような周知の化学を使用して、規定されたＷ置換を用いて化合物を形成するために利用され得る。
【００９５】
スキーム４〜６は、標的化合物がＺ＝窒素である化合物であることを除いて、スキーム１〜３と同様である。これらスキームの工程は、フェニルアセトニトリルを用いるアルキル化が、Ｑ₁アミン誘導体（例えば、置換アニリン誘導体）との反応に置き換えられることを除いて、１〜３と同様である。次いで、この分子のアミド部分が、例えば、クロロスルホニルイソシアネートとのアシル化反応の際に導入される。
【００９６】
【化４３】
スキーム４において、Ｗは、以下から選択されるアミノ誘導基である：Ｎ（Ｒ²）ＳＯ₂−Ｎ（Ｒ²）₂；Ｎ（Ｒ²）ＳＯ₂−Ｎ（Ｒ²）（Ｒ³）；Ｎ（Ｒ²）Ｃ（Ｏ）−ＯＲ²；Ｎ（Ｒ²）Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ²）₂；Ｎ（Ｒ²）Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ²）（Ｒ³）；Ｎ（Ｒ²）Ｃ（Ｏ）−Ｒ²；またはＮ（Ｒ²）₂。
【００９７】
スキーム４において、中間体Ｂ（スキーム１より）を、例えば、塩基（例えば炭酸カリウム）の存在下でアニリン誘導体で処理する。さらに、パラジウム触媒を使用して、必要ならば、この一般的なタイプの反応の反応性を高め得る。次いで、得られたアミン誘導体をアシル化して中間体Ｍを形成する。次いで、Ｍのニトロ基を還元してＮを形成し、次いで、このアミノ基を、スキーム１について記載したように、誘導し得る。スキーム１〜３について記載のように、Ｑ１およびＱ２置換基の導入に包含される工程は、特定の化合物の特定のレジオ化学に依存して、交換され得る。
【００９８】
【化４４】
スキーム５において、Ｗは、Ｃ（Ｏ）−Ｒ²；ＣＨ（ＯＨ）−Ｒ²；Ｃ（Ｏ）−（ＮＲ²）₂；またはＣ（Ｏ）−ＯＲ²などのカルボキシル誘導基から選択される。
【００９９】
【化４５】
スキーム６において、Ｗは、以下から選択される：Ｎ（Ｒ’）₂、ＯＲ’、ＣＯ₂Ｒ’、ＣＯＮ（Ｒ’）、Ｒ³、またはＳＯ₂Ｎ（Ｒ²）₂で必要に応じて置換される、（Ｃ₁−Ｃ₄）直鎖または分枝アルキル；あるいは、Ｎ（Ｒ’）₂、ＯＲ’、ＣＯ₂Ｒ’、ＣＯＮ（Ｒ’）₂、またはＳＯ₂Ｎ（Ｒ²）₂で必要に応じて置換される、５〜６員の炭素環または複素環の環系；但しＷはＲ³置換Ｃ₁アルキルでない。
【０１００】
スキーム５および６は、一般的に、上述の手順に続く。
【０１０１】
当業者は、スキーム１〜６が、一般式（Ｉｂ）、（Ｉｃ）、（Ｉｄ）および（Ｉｅ）を有する化合物を合成するために使用され得ることを認識する。
【０１０２】
本発明の別の実施態様によると、本発明のｐ３８インヒビターの活性は、インビトロ、インビボまたは細胞株によりアッセイされ得る。インビトロアッセイは、活性化ｐ３８のキナーゼ活性またはＡＴＰアーゼ活性のいずれかの阻害を決定するアッセイを含む。代替のインビトロアッセイは、ｐ３８に結合するインヒビターの能力を定量し、そして結合前にインヒビターを放射標識し、インヒビター／ｐ３８複合体を単離し、そして結合した放射標識の量を決定するか、もしくは新しいインヒビターを公知の放射リガンドに結合したｐ３８とインキュベートする競合実験を実行することで、測定され得る。
【０１０３】
本発明の化合物の阻害効果の細胞培養アッセイは、ネガティブコントロールで処置した細胞と比較した場合、インヒビターで処理した細胞における全血もしくはその細胞フラクションで産生されるＴＮＦ、ＩＬ−１、ＩＬ−６もしくはＩＬ−８の量を決定し得る。これらのサイトカインのレベルは、市販のＥＬＩＳＡの使用により決定し得る。
【０１０４】
本発明のｐ３８インヒビターの阻害活性の決定に有用なインビボアッセイは、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｕｔｙｒｉｃｕｍ誘発アジュバント関節炎を有するラットにおける、後肢浮腫の抑制である。これは、Ｊ． Ｃ． Ｂｏｅｈｍら、Ｊ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．、３９、３９２９−３７頁（１９９６）に述べられ、この開示は本明細書中で参考として援用される。本発明のｐ３８インヒビターは、関節炎、骨吸収、内毒素ショックおよび免疫機能の動物モデルにおいて、またアッセイされ得る。これはＡ． Ｍ． Ｂａｄｇｅｒら、Ｊ． Ｐｈａｒｍａｃｏｌ． Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、２７９、１４５３−６１頁（１９９６）に述べらており、この開示は本明細書中で参考として援用される。
【０１０５】
ｐ３８インヒビターもしくはその薬学的な塩は、動物もしくはヒトへ投与するための薬学的組成物に処方され得る。これらの薬学的組成物（ｐ３８−媒介状態を処置しもしくは防止するために有効なｐ３８インヒビターおよび薬学的に受容可能なキャリアの量を含む）は、本発明の他の実施態様である。
【０１０６】
本明細書中で使用される用語「ｐ３８−媒介状態」は、ｐ３８が行う役割として公知の、任意の疾患もしくは他の有害な状態を意味する。これは、ＩＬ−１、ＴＮＦ、ＩＬ−６もしくはＩＬ−８の過剰産生により引き起こされる公知の状態を含む。このような状態には、炎症性疾患、自己免疫性疾患、破壊性骨障害、増殖性疾患、感染性疾患、神経変性疾患、アレルギー、発作における再灌流／虚血、心臓発作、血管新生障害、器官低酸素症、血管過形成、心臓肥大、トロンビン誘発血小板凝集およびプロスタグランジンエンドペルオキシダーゼシンターゼ−２に関連した状態が含まれるが、これらに限定するものではない。
【０１０７】
本発明の化合物により処置もしくは防止され得る炎症性疾患には、急性膵炎、慢性膵炎、喘息、アレルギーおよび成人過呼吸症候群が含まれるが、これらに限定するものではない。
【０１０８】
本発明の化合物により処置もしくは防止され得る自己免疫性疾患には、糸球体腎炎、リウマチ性関節炎、全身性エリテマトーデス、強皮症、慢性甲状腺炎、グレーブス病、自己免疫性胃炎、糖尿病、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性好中球減少症、血小板減少症、アトピー性皮膚炎、慢性活性肝炎、重症筋無力症、多発性硬化症、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、クローン病、乾癬もしくは対宿主性移植片病が含まれるが、これらに限定するものではない。
【０１０９】
本発明の化合物により処置もしくは防止され得る破壊性骨障害には、骨粗鬆症、骨関節炎および多発性骨髄腫関連骨障害が含まれるが、これらに限定するものではない。
【０１１０】
本発明の化合物により処置もしくは防止され得る増殖性疾患には、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、転移性メラノーマ、カポジ肉腫および多発性骨髄腫が含まれるが、これらに限定するものではない。
【０１１１】
本発明の化合物により処置もしくは防止され得る血管新生障害には、固形腫瘍、眼性新生血管形成、小児血管腫（ｈａｅｍａｎｇｉｏｍａｓ）が含まれる。
【０１１２】
本発明の化合物により処置もしくは防止され得る感染性疾患には、敗血症、敗血症ショックおよび細菌性赤痢が含まれるが、これらに限定するものではない。
【０１１３】
本発明の化合物により処置もしくは防止され得るウイルス性疾患には、急性肝炎感染（Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎およびＣ型肝炎を含む）、ＨＩＶ感染、およびＣＭＶ網膜炎が含まれるが、これらに限定するものではない。
【０１１４】
本発明の化合物により処置もしくは防止され得る神経変性疾患には、アルツハイマー病、パーキンソン病、大脳虚血もしくは外傷性損傷により引き起こされる神経変性疾患が含まれるが、限定するものではない。
【０１１５】
「ｐ３８−媒介状態」はまた、発作における虚血／再灌流、心臓発作、心筋虚血、器官低酸素症、血管過形成、心臓肥大およびトロンビン誘発血小板凝集を含む。
【０１１６】
さらに、本発明のｐ３８インヒビターはまた、プロスタグランジンエンドペルオキシドシンターゼ−２（ＰＧＨＳ−２）のような、炎症誘発性タンパク質（またシクロオキシゲナーゼ−２（ＣＯＸ−２）と呼ばれる）の誘導性発現を阻害し得る。従って、本発明の化合物により処置され得る他の「ｐ３８−媒介状態」は、浮腫、痛覚消失、発熱および痛み（例えば、神経筋痛、頭痛、ガン痛、歯痛および関節炎痛）を含む。
【０１１７】
本発明のｐ３８インヒビターにより処置もしくは防止され得る疾患はまた、疾患の原因であると考えられる、サイトカイン（ＩＬ−１、ＴＮＦ、ＩＬ−６、ＩＬ−８）により慣習的に分類され得る。
【０１１８】
従って、ＩＬ−１−媒介疾患もしくは状態には、リウマチ性関節炎、骨関節炎、発作、内毒血症および／もしくは毒性ショック症候群、内毒素により誘発される炎症性反応、炎症性腸疾患、結核、アテローム硬化症、筋肉変性、悪液質、乾癬性関節炎、ライター症候群、痛風、外傷性関節炎、風疹関節炎、急性滑膜炎、糖尿病、膵臓β−細胞疾患およびアルツハイマー病を含む。
【０１１９】
ＴＮＦ−媒介疾患もしくは状態には、リウマチ性関節炎、リウマチ性脊椎炎、骨関節炎、痛風性関節炎および他の関節炎状態、敗血症、敗血症ショック、内毒素ショック、グラム陰性敗血症、毒素ショック症候群、成人過呼吸症候群、大脳マラリア、慢性肺炎症疾患、硅肺症、肺サルコイドシス（ｓａｒｃｏｉｓｏｓｉｓ）、骨吸収疾患、再灌流障害、移植片対宿主反応、同種移植拒絶、感染による発熱および筋肉痛、悪液質二次感染、ＡＩＤＳ、ＡＲＣもしくは悪性疾患、ケロイド形成、瘢痕組織形成、クローン病、潰瘍性大腸炎もしくは不全麻痺を含む。ＴＮＦ−媒介疾患は、ＨＩＶ、ＣＭＶ、インフルエンザおよびヘルペスのようなウイルス性感染をまた含む；および、レンチウイルス感染のような獣医学のウイルス性感染は、ウマ伝染性貧血ウイルス、ヤギ関節炎ウイルス、ビスナウイルスまたはヒツジの慢性進行性肺炎（ｍａｅｄｉ）ウイルス；もしくは、ネコの免疫不全ウイルス、ウシの免疫不全ウイルスもしくはイヌの免疫不全ウイルスを含む、レトロウイルス感染を含むが、これらに限定するものではない。
【０１２０】
ＩＬ−８媒介疾患もしくは状態は、大量の（ｍａｓｓｉｖｅ）好中球浸潤により特徴付けられる、乾癬、炎症性腸疾患、喘息、心臓および腎臓の再灌流傷害、成人過呼吸症候群、血栓症および糸球体腎炎のような疾患を含む。
【０１２１】
さらに、本発明の化合物は、ＩＬ−１もしくはＴＮＦにより引き起こされる、もしくは悪化した状態を処置するまたは防止するために局所的に使用され得る。この状態には、炎症状態の関節、湿疹、乾癬、日焼けのような炎症性皮膚状態、結膜炎のような炎症性眼状態、不全麻痺、炎症と関連のある痛みおよび他の状態を含む。
【０１２２】
本発明の化合物に加えて、薬学的に受容可能な本発明の化合物の塩もまた、上記の障害を処置もしくは防止するための組成物において、使用され得る。
【０１２３】
本発明の化合物の、薬学的に受容可能な塩は、薬学的に受容可能な無機のおよび有機の、酸ならびに塩基から誘導されたものを含む。適切な酸の塩の例は、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、クエン酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルコヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、グリコール酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、パモ（ｐａｌｍｏａｔｅ）酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバレート、プロピオン酸塩、サリチル酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トシル酸塩およびウンデカン酸塩を含む。シュウ酸のような他の酸は、それ自体薬学的に受容可能ではないものの、本発明の化合物およびそれらの薬学的に受容可能な酸の付加塩を得る際に、中間体として、有用な塩の調製に使用され得る。適切な塩基から誘導した塩は、アルカリ金属（例えば、ナトリウムおよびカリウム）、アルカリ土類金属（例えば、マグネシウム）、アンモニウムおよびＮ−（Ｃ１−４ アルキル）４＋の塩を含む。本発明はまた、本明細書中に開示された化合物のいずれかの塩基性窒素含有基の四級化を想定している。水溶性または油溶性、あるいは水または油に分散性の生成物は、このような四級化により得られ得る。
【０１２４】
これらの薬学的組成物において使用され得る、薬学的に受容可能なキャリアには、イオン交換剤、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、血清タンパク質（例えば、ヒト血清アルブミン）、緩衝液基質（例えば、リン酸）、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、飽和植物性脂肪酸の部分的グリセリドの混合物、水、塩もしくは電解質（例えば、硫酸プロタミン）、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイド状シリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロースベース（ｂａｓｅｄ）物質、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、ポリエチレングリコールおよび羊毛脂が含まれるが、これらに限定するものではない。
【０１２５】
本発明の組成物は、経口的に、非経口的に、噴霧吸入により、局所的に、直腸から、鼻から、口腔から、膣からもしくは移植リザーバーを介して投与し得る。本明細書中で使用する用語「非経口的」は、皮下の、静脈内の、筋肉内の、関節内の、関節滑液嚢内の、胸骨内の、クモ膜下の、肝臓内の、病変内のおよび頭蓋内の、注射もしくは注入技術を含む。好ましくは、組成物は経口的に、腹腔内にもしくは静脈内に投与される。
【０１２６】
本発明の組成物の無菌注射可能な形態は、水性もしくは油性の懸濁液であり得る。これらの懸濁液は、適切な分散剤もしくは湿潤剤および懸濁剤を使用して、公知の技術に従って処方され得る。無菌の注射可能な調製物はまた、非毒性の非経口的に受容可能な希釈剤もしくは溶媒（例えば、１，３−ブタンジオールの溶液として）中の、無菌の注射可能な溶液または懸濁液であり得る。使用され得る受容可能なビヒクルおよび溶媒は水、リンガー溶液および等張性塩化ナトリウム溶液である。さらに、無菌の不揮発性油は、溶媒もしくは懸濁媒体として従来通り使用されている。この目的で、任意の無刺激の不揮発性油を使用し得、これは合成のモノもしくはジグリセリドを含む。オレイン酸およびそのグリセリド誘導体のような脂肪酸は、天然の薬学的受容可能な油（例えばオリーブ油もしくはヒマシ油、特にそれらのポリオキシエチル化型）として、注射可能物の調製に有用である。これら油の溶液もしくは懸濁液はまた、乳液および懸濁液を含む薬学的に受容可能な投薬形態の処方物に通常使用される、カルボキシメチルセルロースまたは同様の分散剤のような、長鎖のアルコール希釈液もしくは分散液を含有し得る。薬学的に受容可能な固体、液体もしくは他の投薬形態の製造において通常使用される、Ｔｗｅｅｎ、Ｓｐａｎおよび他の乳化剤もしくはバイオアベイラビリティーエンハンサーのような、他の通常使用される界面活性剤もまた、処方の目的のために使用され得る。
【０１２７】
本発明の薬学的組成物は、任意の経口的に受容可能な投薬形態（これには、カプセル、錠剤、水性の懸濁液もしくは溶液が含まれるが、これらに限定されない）で、経口的に投与され得る。経口用途のための錠剤の場合、通常使用されるキャリアには、ラクトースおよびコーンスターチが挙げられる。潤滑剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム）もまた、代表的に、添加される。カプセル形態の経口投与に有用な希釈剤には、ラクトースおよび乾燥コーンスターチが挙げられる。水性懸濁液が経口用途のために必要とされる場合、その活性成分は、乳化剤および懸濁剤と組み合わされる。所望ならば、特定の甘味料、香料または着色剤もまた添加され得る。
【０１２８】
あるいは、本発明の薬学的組成物は直腸投与のための座剤の形態で投与され得る。これらは、薬剤と、適切な非刺激性の賦形剤（これは、室温で固体であるが、直腸温度では液体であり、従って、直腸で溶けて薬物を放出する）とを混合することにより、調製され得る。このような物質には、ココアバター、蜜ろうおよびポリエチレングリコールが挙げられる。
【０１２９】
特に処置の標的が、眼、皮膚もしくは下部腸管の疾患を含む、局所的な適用により容易にアクセス可能な領域または器官を含む場合、本発明の薬学的組成物はまた局所的に投与され得る。適切な局所内処方物は、これらの領域または器官の各々のために容易に調製される。
【０１３０】
下部腸管への局所的適用は、直腸座剤処方物（上記を参照のこと）、もしくは適切な浣腸処方物においてなされ得る。局所的な経皮パッチもまた使用され得る。
【０１３１】
局所的適用について、薬学的組成物は、１つ以上のキャリアに懸濁するかまたは溶解した活性成分を含む適切な軟膏で、処方され得る。本発明の化合物の局所投与用のキャリアには、鉱油、液化石油、白色（ｗｈｉｔｅ）石油、プロピレングリコール、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン化合物、乳化ワックスおよび水を含むが、これらに限定されない。あるいは、この薬学的組成物は、１つ以上の薬学的に受容可能なキャリアに懸濁するかまたは溶解した活性成分を含む適切なローションかクリームで処方され得る。適切なキャリアには、鉱油、ソルビタンモノステアレート、ポリソルベート ６０、セチルエステルワックス、セテアリールアルコール、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコールおよび水を含むが、これらに限定されない。
【０１３２】
眼への使用に関して、薬学的組成物は等張性ｐＨ調整無菌生理食塩水中の微細化物の懸濁液としてまたは好ましくは保存剤（例えば、塩化ベンジルアルコニウム）を使用または不使用のいずれかの、等張性ｐＨ調製無菌生理食塩水中の溶液として、処方され得る。あるいは、眼への使用に関して、薬学的組成物は、ワセリンのような軟膏に処方され得る。
【０１３３】
本発明の薬学的組成物はまた、鼻用のエアロゾルもしくは吸入により、投与し得る。このような組成物は、薬学的処方における当該分野に周知の技術に従って調製され得、そしてベンジルアルコールもしくは他の適切な保存剤、バイオアベイラビリティーを強化するための吸収促進剤、フルオロカーボンおよび／または他の従来の可溶化剤または分散剤を使用した、生理食塩水中の溶液として調製され得る。
【０１３４】
単一の投薬形態を作製するために、キャリア物質と組み合わされ得るｐ３８インヒビターの量は、処置される宿主、特定の投与の様式に依存して変化する。好ましくは、インヒビターの０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重／日の投与量がこれらの組成物を受け取る患者に対して投与され得るように、組成物は処方されるべきである。
【０１３５】
任意の特定の患者のための特定の投薬量および処置レジメは、種々の因子（使用される特定の化合物の活性、年齢、体重、一般的な健康状態、性別、食事、投与時間、排泄率、薬物の組合せ、処置する医師の判断および処置される特定の疾患の重篤度を含む）に依存することを、また理解するべきである。インヒビターの量はまた、組成物中の特定の化合物に依存する。
【０１３６】
他の実施態様に従って、本発明は、上記の薬学的組成物の１つを、患者へ投与する工程を含む、ｐ３８−媒介状態を処置もしくは防止するための方法を提供する。本明細書中で使用される用語「患者」は、動物、好ましくはヒトを意味する。
【０１３７】
好ましくは、その方法は、炎症性疾患、自己免疫性疾患、破壊性骨障害、増殖性障害、感染性疾患、変性疾患、アレルギー、発作における再灌流／虚血、心臓発作、血管新生障害、器官低酸素症、血管過形成、心臓肥大およびトロンビン誘発血小板凝集から選択される状態の、処置もしくは防止のために使用される。
【０１３８】
他の実施態様に従って、本発明のインヒビターは、ＩＬ−１、ＩＬ−６、ＩＬ−８もしくはＴＮＦ−媒介疾患もしくは状態の、処置もしくは防止のために使用される。そのような状態は上記に記載される。
【０１３９】
処置もしくは防止される特定のｐ３８−媒介状態に依存して、その状態を処置もしくは防止するために通常投与される追加の薬物が、本発明のインヒビターと共に投与され得る。例えば、増殖性疾患を処置するために、化学療法剤もしくは他の抗増殖剤が、本発明のｐ３８インヒビターと組み合わせられ得る。
【０１４０】
これらの追加の薬剤は、複数の投薬レジメの１部として、ｐ３８インヒビター含有組成物とは別々に投与され得る。あるいは、これらの薬剤は単一投薬形態の１部であり得、単一組成物中のｐ３８インヒビターと共に混合され得る。
【０１４１】
本明細書中に記載された発明がより十分に理解される得るように、以下の実施例が記載される。これらの実施例は、例示の目的だけのものであり、いずれの様式においても、本発明を限定するものとして解釈されるべきではないと理解されるべきである。
【０１４２】
（実施例１）
（ｐ３８インヒビター化合物（６）の合成）
【０１４３】
【化４６】
−７８℃のＬＤＡ溶液（６０ｍｍｏｌ、４０ｍＬ）へ、ＴＨＦ（３０ｍＬ、乾燥）中の２，６−ジブロモピリジン（４０ｍｍｏｌ、９．４８ｇ）の溶液を滴下した。この混合物を−７８℃で２０分間攪拌した。ギ酸エチル（４００ｍｍｏｌ、３２．３ｍＬ）を添加し、そして攪拌を−７８℃で２時間続けた。飽和塩化アンモニウム（２００ｍＬ）を添加し、そしてこの混合物を室温まで加温した。この反応混合物を酢酸エチルで希釈して、そしてこの有機層を水性の酸および塩基で洗浄した。この有機層を乾燥して、そして真空下でエバポレートした。得られた物質を、シリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、続いてｎ−ヘキサン中１０％酢酸エチルで溶出して、（１）（３２ｍｍｏｌ、８．４１ｇ）を白色固体として得た。
【０１４４】
【化４７】
メタノール（５０ｍＬ）中の（１）（１３．０８ｍｍｏｌ、３．１ｇ）および濃硫酸（１ｍＬ）の溶液を一晩還流した。この反応混合物を冷却し、水性の塩基で中和し、そして酢酸エチルに抽出した。この有機層の乾燥およびエバポレーションにより、（２）（１１．７７ｍｍｏｌ、３．６３ｇ）をオイルとして得た。
【０１４５】
【化４８】
ｔ−ブトキシド（２．２ｍｍｏｌ、２ｍＬ）の溶液へ、ＴＨＦ（２ｍＬ、乾燥）中の２，６−ジクロロアニリン（１．０ｍｍｏｌ、１６２ｍｇ）の溶液を滴下した。この混合物を室温で２０分間攪拌した。ＴＨＦ（５ｍＬ）中の（２）（１．０ｍｍｏｌ、３０９ｍｇ）の溶液を添加し、そして攪拌を３時間続けた。この反応混合物を酢酸エチルで希釈し、そしてこの有機層を水性の酸および塩基で洗浄した。この有機層を乾燥しそして真空下でエバポレートした。得られた物質をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、続いてｎ−ヘキサン中５％アセトンで溶出して、（３）（０．３３ｍｍｏｌ、１２８ｍｇ）を橙色固体として得た。
【０１４６】
【化４９】
ｏ−トリルホウ酸（０．３４ｍｍｏｌ、４６ｍｇ）、および（３）（０．２０ｍｍｏｌ、８０ｍｇ）を、トルエン／エタノール（５／１）混合液に溶解した。炭酸タリウム（０．５、２３５ｍｇ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（１０ｍｇ）をこの溶液へ添加し、そしてこのスラリーを３０分間還流した。この反応混合物を酢酸エチルで希釈し、そして有機層を水性の酸および塩基で洗浄した。この有機層を乾燥し、そして真空下でエバポレートした。得られた物質をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、続いて塩化メチレン中５％メタノールで溶出して、（４）（０．１７ｍｍｏｌ、６１ｍｇ）を白色固体として得た。
【０１４７】
【化５０】
塩化メチレン（５ｍＬ）中の（４）（０．１７ｍｍｏｌ、６１ｍｇ）およびクロロスルホニルイソシアネート（１ｍｍｏｌ、１４１．５ｍｇ）の溶液を室温で一晩攪拌した。この反応混合物を酢酸エチルで希釈し、そしてこの有機層を水性の酸および塩基で洗浄した。有機層を乾燥し、そして真空下でエバポレートした。得られた物質をシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、続いてｎ−ヘキサン中５％アセトンで溶出して、（５）（０．１２ｍｍｏｌ、４６ｍｇ）を白色固体として得た。
【０１４８】
【化５１】
水素化ホウ素ナトリウム（１．０ｍｍｏｌ、３９．８ｍｇ）をメタノール（１０ｍＬ）中の（５）（０．１２ｍｍｏｌ、４６ｍｇ）の溶液へ添加し、そしてこの溶液を１５分間攪拌した。この反応系を水でクエンチした。次いで、この反応混合物を酢酸エチルで希釈し、そしてこの有機層を水性の酸および塩基で洗浄した。この有機層を乾燥して、そして真空下でエバポレートした。得られた物質をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、（６）（０．０８ｍｍｏｌ、３６ｍｇ）を白色固体として得た。
【０１４９】
化合物６についてのスペクトルデータは以下であった：¹Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ７．９０（ｄ，１Ｈ），７．６０（ｄ，２Ｈ），７．５−７．３（ｍ，５Ｈ），６．３０（ｄ，２Ｈ），４．５（ｓ，２Ｈ），２．３（ｓ，２Ｈ）。
【０１５０】
（ｐ３８インヒビター化合物（７）の合成）
【０１５１】
【化５２】
アミノアルコール（５００ｍｇ、１．４３ｍｍｏｌ）（これを（４）と同一の様式で調製した）をジクロロメタンに溶解した。トリエチルアミン（４３３ｍｇ、４．２９ｍｍｏｌ）、続いて塩化アセチル（１６８ｍｇ、２．１５ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を室温で１時間攪拌し、水へ注ぎ、そしてジクロロメタンで抽出した。この有機抽出物を真空下でエバポレートして、そして残渣を１０．０ｍＬのトルエンに溶解した。トルエン（５．０ｍＬ）中の２０％ホスゲン溶液を添加し、そしてこの溶液を２時間還流した。この溶液を冷却し、そして５．０ｍＬの濃水酸化アンモニウムを添加し、白色固体が沈殿した。この混合物を水に注ぎ、そしてトルエンで抽出した。この有機抽出層を乾燥し（ＭｇＳＯ₄）、そして真空下でエバポレートして、２０５ｍｇの尿素−アセテート（７）を白色固体として得た。
【０１５２】
化合物（７）についてのスペクトルデータは以下であった：
¹Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ７．８０（ｄ，１Ｈ），７．６２−７．５０（ｍ，２Ｈ），７．２５−７．０（ｍ，５Ｈ），６．５９（ｄ，１Ｈ），５．１（ｓ，２Ｈ），２．１２（ｓ，３Ｈ）。ＨＲＭＳは、主なピークとしてＭＨ＋４３４．２を示した。
【０１５３】
（ｐ３８インヒビター化合物（８）の合成）
【０１５４】
【化５３】
尿素−アルコール（５４８ｍｇ、１．４ｍｍｏｌ）（これを（６）と同一の様式で調製した）を、５．０ｍＬのトルエンに溶解した。トルエン（５．０ｍＬ）中の２０％ホスゲン溶液を添加し、そしてこの溶液を２時間還流した。この溶液を冷却し、そして５．０ｍＬの濃水酸化アンモニウムを添加し、白色固体が沈殿した。この混合物を水へ注ぎ、そしてトルエンで抽出した。この有機抽出物を乾燥（ＭｇＳＯ₄）し、そして真空下でエバポレートし、２８４ｍｇのカルバメート（８）を白色固体として得た。
【０１５５】
化合物（８）のスペクトルデータは以下であった：
¹Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ７．７７（ｄ，１Ｈ），７．５５−７．４５（ｍ，２Ｈ），７．１５−６．９５（ｍ，５Ｈ），６．５０（ｄ，１Ｈ），５．４０（ｂｒ ｓ，２Ｈ），５．００（ｓ，２Ｈ）。ＨＲＭＳは、主なピークとしてＭＨ＋４３５．１を示した。
【０１５６】
（実施例２）
（ｐ３８インヒビター化合物（１６）の合成）
【０１５７】
【化５４】
１当量の２，６−ジクロロピリジン−４−カルボン酸をＴＨＦに溶解した。この溶液を０℃に冷却し、そして１当量のボラン硫化ジメチル錯体を添加した。この溶液を室温で１２時間攪拌した。この混合物を水に注ぎ、ジエチルエーテルで抽出した。このエーテル抽出物を乾燥し、そして真空下でエバポレートし、（９）を収率９３％で得た。
【０１５８】
【化５５】
１当量の（９）を塩化メチレンに溶解した。１当量のメチルクロロメチルエーテルを添加し、続いて１当量のエチルジイソプロピルアミンを添加した。この反応系を室温で数時間攪拌し、水に注ぎ、そして水に混合しない（ｗａｔｅｒ−ｉｍｍｉｓｃｉｂｌｅ）溶媒で抽出した。この抽出物を乾燥し、そして真空下でエバポレートし、（１０）を収率８６％で得た。
【０１５９】
【化５６】
１当量のカリウムｔ−ブトキシドを、室温で、ＴＨＦ中の１当量の２，６−ジクロロフェニルアセトニトリルの溶液へ添加した。この混合物を室温で３０分間攪拌し、そしてＴＨＦ中のジクロロピリジン（１０）の溶液を添加した。１．５時間攪拌した後、この混合物を塩化アンモニウム水溶液へ注ぎ、そして酢酸エチルで抽出した。この抽出物を乾燥し、そして真空下でエバポレートした。この残渣をフラッシュクロマトグラフィーで精製して、（１１）を白色粉末として収率７９％で得た。
【０１６０】
【化５７】
アセタール（１１）を濃塩酸と混合し、そして数時間攪拌した。この混合物を水に混合しない有機溶媒で抽出した。この抽出物を飽和ＮａＨＣＯ₃水溶液で洗浄し、乾燥し、そして真空下でエバポレートして（１２）を得た。
【０１６１】
【化５８】
ニトリル（１２）を濃硫酸と混合し、そして数分間１００℃まで加熱した。この混合物を冷却し、氷に注ぎ、そして濾過して（１３）を得た。
【０１６２】
【化５９】
１当量のクロロピリジン（１３）を１，２−ジメトキシエタンに溶解した。１当量の３−クロロ−２−メチルフェニルホウ酸を添加した。１当量の炭酸ナトリウムの水溶液を、触媒量のテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）と共に添加した。この混合物を数時間８０℃まで加熱した。この混合物を水に注ぎ、そして水に混合しない有機溶媒で抽出した。この抽出物を乾燥し、真空下でエバポレートし、そしてフラッシュクロマトグラフィーによって精製して（１４）を得た。
【０１６３】
【化６０】
１当量のアルコール（１４）をＴＨＦに溶解した。この溶液を０℃まで冷却し、そして１当量の塩化メタンスルホニルを添加し、続いて１当量のトリエチルアミンを添加した。この溶液を数時間攪拌し、水に注ぎ、そして水に混合しない溶媒で抽出した。この抽出物を乾燥して、そして真空下でエバポレートし、粗メシレート（１５）を得た。
【０１６４】
【化６１】
１当量のメタンスルホニルエステル（１５）をＴＨＦに溶解した。この溶液を０℃まで冷却し、そして１当量のＮ−エチルピペラジンを添加し、続いて１当量のトリエチルアミンを添加した。この溶液を数時間攪拌し、水に注ぎ、そして水に混合しない溶媒で抽出した。この抽出物を乾燥し、エバポレートし、そしてフラッシュクロマトグラフィーで精製して、純粋なアミン（１６）を得た。
【０１６５】
化合物（１６）についてのスペクトルデータは以下である：
¹Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃）δ９．８５（ｂｒ ｓ，１Ｈ），７．４７（ｄｄ，１Ｈ），７．４２（ｓ，１Ｈ），７．２７（ｍ，５Ｈ），６．７５（ｓ，１Ｈ），５．９５（ｓ，１Ｈ），５．７（ｂｒｓ，１Ｈ），３．５（ＡＢｑ，２Ｈ），２．５−２．３（ｍ，１０Ｈ），２．３（ｓ，３Ｈ），１．２（ｔ，３Ｈ）。
【０１６６】
（実施例２）
（昆虫細胞におけるｐ３８キナーゼのクローニング）
ヒトｐ３８キナーゼの２つのスプライシング改変体、ＣＳＢＰ１およびＣＳＢＰ２を同定した。特異的なオリゴヌクレオチドプライマーを使用して、ＨｅＬａ細胞ライブラリ（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ）をテンプレートとして使用するＣＳＢＰ２ｃＤＮＡのコード領域を増幅した。ポリメラーゼ連鎖反応生成物をｐＥＴ−１５ｂベクター（Ｎｏｖａｇｅｎ）にクローニングした。バキュロウイルス移入ベクターであるｐＶＬ−（Ｈｉｓ）６−ｐ３８を、ｐＥＴ１５ｂ−（Ｈｉｓ）６−ｐ３８のＸｂａＩ−ＢａｍＨＩフラグメントをプラスミドｐＶＬ１３９２（Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ）の相補的部位にサブクローニングすることにより構築した。
【０１６７】
プラスミドｐＶＬ−（Ｈｉｓ）６−ｐ３８は、ＤＮＡ配列決定および発現タンパク質のＮ−末端配列決定により確認されるように、ｐ３８のＮ−末端にインフレームで融合した２３−残基のペプチド（ＭＧＳＳＨＨＨＨＨＨＳＳＧＬＶＰＲＧＳＨＭＬＥ、ここでＬＶＰＲＧＳはトロンビン切断部位を表す）からなる組換えタンパク質の合成に関する。Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ（Ｓｆ９）昆虫細胞（ＡＴＣＣ）の単層培養を、Ｔ−フラスコ内２７℃で、１０％ウシ胎仔血清を補充したＴＮＭ−ＦＨ培地（Ｇｉｂｃｏ ＢＲＬ）中に維持した。対数期のＳｆ９細胞を、リポフェクチン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を使用して、Ａｕｔｏｇｒａｐｈａ ｃａｌｉｆｏｎｉｃａ 核多角体ウイルス（Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ）の線状ウイルスＤＮＡ、および移入ベクターｐＶＬ−（Ｈｉｓ）６−ｐ３８で同時トランスフェクトした。個々の組換えバキュロウイルスクローンを、１％低溶融アガロースを使用するプラークアッセイにより精製した。
【０１６８】
（実施例３）
（組換えｐ３８キナーゼの発現および精製）
Ｔｒｉｃｈｏｐｌｕｓｉａ ｎｉ （Ｔｎ−３６８） Ｈｉｇｈ−Ｆｉｖｅ^TM細胞（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を、振盪フラスコ内２７℃で、Ｅｘｃｅｌ−４０５タンパク質非含有培地（ＪＲＨ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）の懸濁液中、増殖させた。１．５×１０⁶細胞／ｍｌの密度の細胞を、上記の組換えバキュロウイルスで、感染多重度５で感染させた。組換えｐ３８の発現レベルを、ウサギ抗ｐ３８抗体（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）を使用する免疫ブロットにより観察した。Ｐ３８の発現レベルが最高に達した感染７２時間後に、細胞集団（ｃｅｌｌ ｍａｓｓ）を回収した。
【０１６９】
（Ｈｉｓ）₆タグ化ｐ３８を発現する細胞の冷凍細胞ペーストを、５倍容量の緩衝液Ａ（５０ｍＭのＮａＨ₂ＰＯ₄（ｐＨ ８．０）、２００ｍＭのＮａＣｌ、２ｍＭのβ−メルカプトエタノール、１０％のグリセロール、および０．２ｍＭのＰＭＳＦ）中で解凍した。細胞をマイクロフルイダイザー（ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚｅｒ）中で機械的に破壊した後、溶解物を３０，０００×ｇで３０分間遠心分離した。上清を、Ｔａｌｏｎ^TM（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）金属親和性樹脂で、２〜４ｍｇの期待されるｐ３８あたり１ｍｌの樹脂の比で、４℃で３〜５時間バッチ単位で（ｂａｔｃｈｗｉｓｅ）インキュベートした。樹脂を５００×ｇで５分間遠心分離して沈澱させ、そして緩衝液Ａでバッチ単位で穏やかに洗浄した。樹脂をスラリー状にし、そしてカラム（ほぼ２．６×５．０ｃｍ）に注ぎ入れて、緩衝液Ａ＋５ｍＭのイミダゾールで洗浄した。
【０１７０】
（Ｈｉｓ）₆−ｐ３８を、緩衝液Ａ＋１００ｍＭのイミダゾールで溶出し、続けて２リットルの緩衝液Ｂ（５０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）、２５ｍＭのβ−グリセロホスフェート、５％のグリセロール、２ｍＭのＤＴＴ）に対して、４℃で一晩透析した。（Ｈｉｓ）₆タグを、１ｍｇのｐ３８あたり１．５ユニットのトロンビン（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ）を添加し、そして２０℃で２〜３時間インキュベートすることにより除去した。トロンビンを、０．２ｍＭのＰＭＳＦを添加することによりクエンチし、次いで全サンプルを２ｍｌのベンズアミジンアガロース（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｈｅｍｉｃａｌ）カラムにロードした。
【０１７１】
フラクションを通る流れを、予め緩衝液Ｂ＋０．２ｍＭのＰＭＳＦで平衡化した２．６×５．０ｃｍのＱ−セファロース（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）カラムに、直接ロードした。ｐ３８を、緩衝液Ｂ中０．６ＭのＮａＣｌまでの２０カラム容量の直線状の勾配で溶出させた。溶出したタンパク質のピークをプールし、そして緩衝液Ｃ（５０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）、５％のグリセロール、５０ｍＭのＮａＣｌ、２ｍＭのＤＴＴ、０．２ｍＭのＰＭＳＦ）に対して、４℃で一晩透析した。
【０１７２】
透析したタンパク質を、Ｃｅｎｔｒｉｐｒｅｐ（Ａｍｉｃｏｎ）で３〜４ｍｌに濃縮し、そして２．６×１００ｃｍ Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ Ｓ−１００ＨＲ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）カラムにかけた。タンパク質を、３５ｍｌ／時間の流速で溶出した。主ピークをプールし、２０ｍＭのＤＴＴに調整し、１０〜８０ｍｇ／ｍｌに濃縮し、そして−７０℃でアリコートに冷凍するか、または直ちに使用した。
【０１７３】
（実施例４）
（ｐ３８の活性化）
ｐ３８を、緩衝液Ｂ＋１０ｍＭのＭｇＣｌ₂、２ｍＭのＡＴＰ、０．２ｍＭのＮａ₂ＶＯ₄中、２０℃で３０分間、０．５ｍｇ／ｍｌのｐ３８を０．００５ｍｇ／ｍｌのＤＤ−二重変異体ＭＫＫ６と合わせることにより、活性化した。次いで、活性化混合物を、１．０×１０ｃｍ ＭｏｎｏＱカラム（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）にロードし、そして緩衝液Ｂ中１．０ＭのＮａＣｌまでの２０カラム容量の直線状の勾配で溶出した。活性化ｐ３８は、ＡＤＰおよびＡＴＰの後から溶出した。活性化ｐ３８のピークをプールし、そして緩衝液Ｂ＋０．２ｍＭのＮａ₂ＶＯ₄に対して透析して、ＮａＣｌを除去した。透析したタンパク質を、４．０Ｍのストック溶液を添加することで１．１Ｍのリン酸カリウムに調整し、そして１．０×１０ｃｍの予め緩衝液Ｄ（１０％のグリセロール、２０ｍＭのβ−グリセロホスフェート、２．０ｍＭのＤＴＴ）＋１．１ＭのＫ₂ＨＰＯ₄で平衡化したＨＩＣ（Ｒａｉｎｉｎ Ｈｙｄｒｏｐｏｒｅ）カラムにロードした。タンパク質を、緩衝液Ｄ＋５０ｍＭのＫ₂ＨＰＯ₄に対して２０カラム容量の直線状の勾配で溶出させた。主ピークとして溶出した二重リン酸化ｐ３８をプールして、緩衝液Ｂ＋０．２ｍＭのＮａ₂ＶＯ₄に対して透析した。活性化ｐ３８を−７０℃で保存した。
【０１７４】
（実施例５）
（ｐ３８阻害アッセイ）
（Ａ．ＥＧＦレセプターペプチドのリン酸化阻害）
このアッセイを、１０ｍＭのＭｇＣｌ₂、２５ｍＭのβ−グリセロホスフェート、１０％のグリセロール、および１００ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ ７．６）の存在下で行った。代表的なＩＣ₅₀測定について、ストック溶液を上記の成分全ておよび活性化ｐ３８（５ｎＭ）を含むように調製した。ストック溶液を、バイアルに等分割した。一定の容量のＤＭＳＯまたはＤＭＳＯ中のインヒビター（反応系中のＤＭＳＯの最終濃度は５％）を、各バイアルに導入し、混合して、室温で１５分間インキュベートした。ＥＧＦレセプターペプチド（ＫＲＥＬＶＥＰＬＴＰＳＧＥＡＰＮＱＡＬＬＲ、ｐ３８触媒キナーゼ反応（１）におけるホスホリルアクセプター）を、２００μＭの最終濃度で、各バイアルに添加した。キナーゼ反応を、ＡＴＰ（１００μＭ）で開始させ、そしてバイアルを３０℃でインキュベートした。３０分後、反応系を等容量の１０％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）でクエンチした。
【０１７５】
リン酸化ペプチドを、ＨＰＬＣ分析により定量した。リン酸化ペプチドの未リン酸化ペプチドからの分離は、逆相カラム（Ｄｅｌｔａｐａｋ、５μｍ、Ｃ１８ １００Ｄ、部品番号０１１７９５）で、それぞれ０．１％のＴＦＡを含有する水およびアセトニトリルの２重勾配を用いて行った。ＩＣ₅₀（５０％の阻害を得るためのインヒビター濃度）を、インヒビター濃度に対して残存する活性の％をプロットすることにより決定した。
【０１７６】
（Ｂ．ＡＴＰａｓｅ活性の阻害）
このアッセイを、１０ｍＭのＭｇＣｌ₂、２５ｍＭのβ−グリセロホスフェート、１０％のグリセロール、および１００ｍＭのＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ ７．６）の存在下で行った。代表的なＫｉ測定について、活性化ｐ３８反応のＡＴＰａｓｅ活性におけるＡＴＰについてのＫｍを、インヒビター不在および２つの濃度でのインヒビター存在下で測定した。ストック溶液を上記の成分全ておよび活性化ｐ３８（６０ｎＭ）を含むように調製した。ストック溶液を、バイアルに等分割した。一定の容量のＤＭＳＯまたはＤＭＳＯ中のインヒビター（反応系中のＤＭＳＯの最終濃度は２．５％）を、各バイアルに導入し、混合して、室温で１５分間インキュベートした。反応を、種々の濃度のＡＴＰを添加することにより開始させ、次いで３０℃でインキュベートした。３０分後、反応系を５０μｌのＥＤＴＡ（０．１Ｍ、最終濃度）、ｐＨ ８．０でクエンチした。ｐ３８ ＡＴＰａｓｅ活性の産物であるＡＤＰをＨＰＬＣ分析により定量した。
【０１７７】
ＡＤＰのＡＴＰからの分離は、逆相カラム（Ｓｕｐｅｌｃｏｓｉｌ、ＬＣ−１８、３μｍ、部品番号５−８９８５）で、以下の組成の２重溶媒勾配を用いて行った：溶媒Ａ−８ｍＭの硫酸水素テトラブチルアンモニウム（Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．、カタログ番号Ｔ−７１５８）を含有する０．１Ｍのリン酸緩衝液、溶媒Ｂ−３０％のメタノールを含む溶媒Ａ。
【０１７８】
Ｋｉを、速度データから、インヒビターおよびＡＴＰ濃度の関数として決定した。
【０１７９】
本発明のｐ３８インヒビターは、ｐ３８のＡＴＰａｓｅ活性を阻害する。
（Ｃ．ＬＰＳ刺激化ＰＢＭＣにおけるＩＬ−１、ＴＮＦ、ＩＬ−６、およびＩＬ−８産生の阻害）
インヒビターを、２０ｍＭのストックからＤＭＳＯで連続希釈した。少なくとも６つの連続希釈物を調製した。次いで、４×インヒビターストックを、４μｌのインヒビター希釈物を１ｍｌのＲＰＭＩ１６４０培地／１０％ウシ胎仔血清に添加することにより調製した。４×インヒビターストックは、８０μＭ、３２μＭ、１２．８μＭ、５．１２μＭ、２．０４８μＭ、０．８１９μＭ、０．３２８μＭ、０．１３１μＭ、０．０５２μＭ、０．０２１μＭなどの濃度でインヒビターを含有した。４×インヒビターストックを、使用するまで３７℃で予備加温した。
【０１８０】
新鮮なヒト血液ｂｕｆｆｙ細胞を、Ｂｅｃｔｏｎ＆ＤｉｃｋｉｎｓｏｎのＶａｃｕｔａｉｎｅｒ ＣＰＴ（４ｍｌの血液およびＭｇ²⁺／Ｃａ²⁺を含まず管を満たすのに十分なＤＰＢＳを含有する）中の他の細胞から、１５００×ｇで１５分間遠心分離することにより分離した。Ｖａｃｕｔａｉｎｅｒ中の勾配の頂部に位置する末梢血単核球（ＰＢＭＣ）を除去し、そしてＲＰＭＩ１６４０培地／１０％ウシ胎仔血清で２回洗浄した。ＰＢＭＣを、５００×ｇで１０分間遠心分離することにより収集した。全細胞数を、Ｎｅｕｂａｕｅｒ Ｃｅｌｌ Ｃｈａｍｂｅｒを使用して測定し、そして細胞を、細胞培養培地（１０％ウシ胎仔血清で補充したＲＰＭＩ１６４０）中、４．８×１０⁶細胞／ｍｌの濃度に調整した。
【０１８１】
あるいは、抗凝固剤を含有する全血をアッセイに直接使用した。
【０１８２】
１００μｌの細胞懸濁液または全血を、９６−ウェルの細胞培養プレートの各ウェルに配置した。次いで、５０μｌの４×インヒビターストックを細胞に添加した。最後に、アッセイにおいて５０μｌのリポ多糖類（ＬＰＳ）作業ストック（ｗｏｒｋｉｎｇ ｓｔｏｃｋ）溶液（細胞培養培地中１６ｎｇ／ｍｌ）を添加し、４ｎｇ／ｍｌのＬＰＳ最終濃度にした。ビヒクルコントロールの全アッセイ容量もまた、５０μｌの細胞培養培地を添加することにより、２００μｌに調整した。次いで、ＰＢＭＣ細胞または全血を、加湿した雰囲気中、３７℃／５％ＣＯ₂で一晩（１２〜１５時間）インキュベートした。
【０１８３】
翌日、細胞を振盪器で３〜５分間混合してから、５００×ｇで５分間遠心分離した。細胞培養上清を回収し、そしてＩＬ−１ｂ（Ｒ ＆ Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ、Ｑｕａｎｔｉｋｉｎｅ キット、＃ＤＢＬ５０）、ＴＮＦ−α（ＢｉｏＳｏｕｒｃｅ、＃ＫＨＣ３０１２）、ＩＬ−６（Ｅｎｄｏｇｅｎ、＃ＥＨ２−ＩＬ６）およびＩＬ−８（Ｅｎｄｏｇｅｎ、＃ＥＨ２−ＩＬ８）のレベルについて、製造者の使用説明書に従いＥＬＩＳＡにより分析した。ＥＬＩＳＡデータを使用して、ＩＣ５０値が導き出される用量−応答曲線を算出した。
【０１８４】
本発明の種々のｐ３８インヒビターに対する、キナーゼアッセイ（「キナーゼ」；上記の小段落Ａ）の結果、ＬＰＳ−刺激化ＰＢＭＣ（「細胞」）におけるＩＬ−１およびＴＮＦ、ならびに全血（「ＷＢ」）におけるＩＬ−１、ＴＮＦ、およびＩＬ−６を、以下の表７に示す：
【０１８５】
【表７】
本発明の他のｐ３８インヒビターもまた、ＥＧＦレセプターペプチドのリン酸化を阻害し、そしてＬＰＳ−刺激化ＰＢＭＣにおける、または全血におけるＩＬ−１、ＴＮＦ、およびＩＬ−６、ならびにＩＬ−８の産生を阻害する。
【０１８６】
（Ｄ．ＩＬ−１刺激化ＰＢＭＣにおけるＩＬ−６およびＩＬ−８産生の阻害）
このアッセイを、５０μｌのＩＬ−１ｂ作業ストック溶液（細胞培養培地中、２ｎｇ／ｍｌ）を（ＬＰＳ）作業ストック溶液の代わりにアッセイに添加したことを除いて、上記と全く同じようにＰＢＭＣにおいて行った。
【０１８７】
細胞培養上清を上記に記載されるように回収し、そしてＩＬ−６（Ｅｎｄｏｇｅｎ、＃ＥＨ２−ＩＬ６）およびＩＬ−８（Ｅｎｄｏｇｅｎ、＃ＥＨ２−ＩＬ８）のレベルについて、製造者の使用説明書に従いＥＬＩＳＡにより分析した。ＥＬＩＳＡデータを使用して、ＩＣ５０値が導き出される用量−応答曲線を算出した。
【０１８８】
（Ｅ．ＰＢＭＣにおけるＬＰＳ−誘発プロスタグランジンエンドペルオキシドシンターゼ−２（ＰＧＨＳ−２、またはＣＯＸ−２）誘導の阻害）
ヒト末梢単核球（ＰＢＭＣ）を、新鮮なヒト血液軟膜からＶａｃｕｔａｉｎｅｒ ＣＰＴ（Ｂｅｃｔｏｎ ＆ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）で遠心分離することにより単離した。１５×１０⁶細胞を、１０％のウシ胎仔血清、５０Ｕ／ｍｌのペニシリン、５０μｇ／ｍｌのストレプトマイシン、および２ｍＭのＬ−グルタミンを補充したＲＰＭＩ １６４０を含有する６−ウェルの組織培養皿に播種した。化合物をＤＭＳＯ中０．２、２．０、および２０μＭの最終濃度で添加した。次いで、ＬＰＳを４ｎｇ／ｍｌの最終濃度で添加して、酵素の発現を誘導した。最終培養容量は、１０ｍｌ／ウェルであった。
【０１８９】
３７℃、５％のＣＯ₂で一晩インキュベートした後、細胞をかき集めて回収し、続いて遠心分離し、上清を除去し、そして細胞を氷冷したＤＰＢＳ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ’ｓリン酸緩衝化生理食塩水、ＢｉｏＷｈｉｔｔａｋｅｒ）で２回洗浄した。細胞を、１μｌのベンゾナーゼ（ＭｅｒｃｋのＤＮＡｓｅ）を含有する５０μｌの冷溶解緩衝液（２０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ ７．２）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、１％のＴｒｉｔｏｎ−Ｘ−１００、１％のデオキシコール酸、０．１％のＳＤＳ、１ｍＭのＥＤＴＡ、２％のアプロチニン（Ｓｉｇｍａ）、１０μｇ／ｍｌのペプスタチン、１０μｇ／ｍｌのロイペプチン、２ｍＭのＰＭＳＦ、１ｍＭのベンズアミジン、１ｍＭのＤＴＴ）中で、１０分間氷上で溶解させた。各サンプルのタンパク質濃度を、ＢＣＡアッセイ（Ｐｉｅｒｃｅ）および標準としてウシ血清アルブミンを使用して測定した。次いで、各サンプルのタンパク質濃度を、冷溶解緩衝液で１ｍｇ／ｍｌに調整した。１００μｌの溶解液に、等容量の２×ＳＤＳ ＰＡＧＥローディング緩衝液を添加し、そしてサンプルを５分間煮沸した。タンパク質（３０μｇ／レーン）を、４〜２０％ ＳＤＳ ＰＡＧＥ勾配ゲル（Ｎｏｖｅｘ）上でサイズ分画し、続いて２０％のメタノールを含むＴｏｗｂｉｎ移動緩衝液（２５ｍＭのＴｒｉｓ、１９２ｍＭのグリシン）中、１００ｍＡで２時間、電気泳動法によりニトロセルロース膜上に転写した。転写後、この膜を、ブロック化緩衝液（０．１％のＴｗｅｅｎ−２０で補充されたＤＰＢＳ中５％の無脂乾燥乳）を用いて、室温で１時間前処理し、そしてＤＰＢＳ／０．１％のＴｗｅｅｎ−２０で３回洗浄した。膜を、ブロック化緩衝液中の抗ＣＯＸ−２モノクローナル抗体（Ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）の１：２５０希釈物を用いて、４℃で一晩インキュベートした。ＤＰＢＳ／０．１％のＴｗｅｅｎ−２０で３回洗浄した後、膜を、ブロック化緩衝液中、室温で１時間、マウスＩｇに対する西洋ワサビペルオキシダーゼ結合ヒツジ抗血清（Ａｍｅｒｓｈａｍ）の１：１０００希釈物とともにインキュベートした。次いで、膜を再度ＤＰＢＳ／０．１％のＴｗｅｅｎ−２０で３回洗浄した。ＥＣＬ検出システム（ＳｕｐｅｒＳｉｇｎａｌ^TM ＣＬ−ＨＲＰ Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ Ｓｙｓｔｅｍ、Ｐｉｅｒｃｅ）を使用して、ＣＯＸ−２の発現レベルを測定した。
【０１９０】
本発明者らは、本明細書中これまで、本発明の多数の実施態様を示してきたが、本発明者らの基本的な構築が、本発明の方法を利用する他の実施態様を提供するために変更され得ることが明らかである。

Claims (17)

1. 以下の式の化合物であって：
   ここで、Ｑ_１は、
   からなる群から選択され、
   Ｑ_２は、
   からなる群から選択され、
   Ｗは、
   からなる群から選択され、
   Ｙは、Ｃであり、
   Ｚは、Ｎであり、
   Ｕは、水素であり、
   Ｒは、水素であり、そして
   Ｖは、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ_２である、
   化合物。
2. 前記化合物が、以下：
   であり、
   ここで、
   である、請求項１に記載の化合物。
3. 前記化合物が、以下：
   であり、
   ここで、
   である、請求項１に記載の化合物。
4. 前記化合物が、以下：
   のうちの任意の１つから選択される、請求項１に記載の化合物。
5. ｐ３８を阻害するのに有効な量の請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物および薬学的に受容可能なキャリアを含有する、薬学的組成物。
6. 炎症性疾患、自己免疫疾患、破壊性骨障害、増殖性障害、感染症、ウイルス疾患、神経変性疾患、アレルギー、発作における再灌流／虚血、心筋虚血、腎虚血、心臓発作、血管新生疾患、器官低酸素症、血管過形成、心臓肥大、またはトロンビン誘発血小板凝集を処置または予防するための医薬の調製のための、請求項１〜４に記載の化合物の使用。
7. 前記医薬が、急性膵炎、慢性膵炎、喘息、アレルギー、または成人呼吸窮迫症候群から選択される炎症性疾患を処置または予防するためのものである、請求項６に記載の使用。
8. 前記医薬が、糸球体腎炎、慢性関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、強皮症、慢性甲状腺炎、グレーヴズ病、自己免疫性胃炎、糖尿病、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性好中球減少、血小板減少症、アトピー性皮膚炎、慢性活性肝炎、重症筋無力症、多発性硬化症、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、クローン病、乾癬、または対宿主性移植片病から選択される自己免疫疾患を処置または予防するためのものである、請求項６に記載の使用。
9. 前記医薬が、変形性関節症、骨粗しょう症、または多発性骨髄腫関連骨障害から選択される破壊性骨障害を処置または予防するためのものである、請求項６に記載の使用。
10. 前記医薬が、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、転移性黒色腫、カポージ肉腫、または多発性骨髄腫から選択される増殖性疾患を処置または予防するためのものである、請求項６に記載の使用。
11. 前記医薬が、敗血症、敗血症性ショック、または細菌性赤痢から選択される感染症を処置または予防するためのものである、請求項６に記載の使用。
12. 前記医薬が、急性肝炎感染、ＨＩＶ感染、またはＣＭＶ網膜炎から選択されるウイルス性疾患を処置または予防するためのものである、請求項６に記載の使用。
13. 前記医薬が、アルツハイマー病、パーキンソン病、脳虚血、または外傷性損傷が原因の神経変性疾患から選択される神経変性疾患を処置または予防するためのものである、請求項６に記載の使用。
14. 前記医薬が、発作または心筋虚血における虚血／再灌流、腎虚血、心臓発作、器官低酸素症、あるいはトロンビン誘発血小板凝集を処置または予防するためのものである、請求項６に記載の使用。
15. 前記医薬が、浮腫、熱、痛覚脱失症、または疼痛から選択されるプロスタグランジンエンドペルオキシドシンターゼ−２に関連する状態を処置または予防するためのものである、請求項６に記載の使用。
16. 前記疼痛が、神経筋疼痛、頭痛、癌疼痛、歯痛、または関節痛から選択される、請求項１５に記載の使用。
17. 前記医薬が、固形腫瘍、眼球新血管形成、または小児血管腫から選択される血管新生障害を処置または予防するためのものである、請求項６に記載の使用。