PT1077943E - Inibidores heterocíclicos de p38 - Google Patents

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PT1077943E
PT1077943E PT99920427T PT99920427T PT1077943E PT 1077943 E PT1077943 E PT 1077943E PT 99920427 T PT99920427 T PT 99920427T PT 99920427 T PT99920427 T PT 99920427T PT 1077943 E PT1077943 E PT 1077943E
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Guy Bemis
Francesco Salituro
Vincent Galullo
Steven Bellon
John Cochran
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Vertex Pharma
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Description

DESCRIÇÃO INIBIDORES HETEROCÍCLICOS DE P38
DOMÍNIO TÉCNICO DA INVENÇÃO A presente invenção tem por objecto inibidores de p38, uma proteína-cinase de mamífero envolvida na proliferação das células, na morte das células e na resposta a estímulos extracelulares. A presente invenção também tem por objecto processos para a produção destes inibidores. A presente invenção também tem por objecto composições farmacêuticas que contêm os inibidores da presente invenção e processos para a utilização destas composições no tratamento e na prevenção de vários distúrbios.
ANTECEDENTES DA INVENÇÃO
As proteínas-cinases estão envolvidas em várias respostas celulares a sinais extracelulares. Recentemente descobriu-se uma família de proteínas-cinases activadas por mitogénese (PCAM). Os elementos desta família são as cinases Ser/Tre que activam os seus substratos por fosforilação [B. Stein et al., Ann. Rep. Med. Chem., 31, pp. 289-98 (1996)]. As PCAMs são elas próprias activadas por uma variedade de sinais incluindo factores de crescimento, citocinas, radiação UV e agentes que induzem stress.
Uma PCAM particularmente interessante é a p38. A p38, também conhecida como proteína de ligação de fármacos anti-inflamatórios supressores de citocina (PLSC) e RK, foi isolada de células pré-B de murino que foram transfectadas com o receptor de lipopolissacárido (LPS), CD14, e induzidas com LPS. A partir daí, a p38 tem sido isolada e sequenciada, 1 assim como o ADNc que a codifica em seres humanos e ratos. Tem-se observado a activação de p38 em células estimuladas pelo stress, tal como o tratamento com lipopolissaccáridos (LPS), UV, anisomicina ou choque osmótico e por citocinas, tal como IL-1 e FNT. A inibição da cinase p38 leva a um bloqueio da produção tanto de IL-1 como de FNT. IL-1 e FNT estimulam a produção de outras citocinas pró-inflamatórias tal como IL-6 e IL-8 e têm sido implicadas em doenças inflamatórias agudas e crónicas e na osteoporose post-menopausa [R. B. Kimble et al., Endocrinol., 136, pp. 3054-61 (1995)].
Com base nesta verificação, crê-se que p38, em conjunto com outras PCAMs, tem um papel na mediação na resposta celular a estímulos inflamatórios, tal como uma acumulação leucocitária, activação de macrófagos/monócitos, reabsorção de tecido, febre, respostas da fase aguda e neutrofilia. Além disso, as PCAMs, tal como a p38, têm sido implicadas no cancro, na agregação de plaquetas induzida por trombina, distúrbios de imunodeficiência, doenças autoimunes, morte de células, alergias, osteoporose e distúrbios neurodegenera-tivos. Os inibidores de p38 têm também sido implicados nas áreas da gestão da dor por meio da inibição da indução da prostaglandina-endoperóxido-sintase-2. Outras doenças associadas com a sobre-produção de IL-1, IL-6, IL-8 ou FNT estão estabelecidas na patente WO 96/21654. A publicação da PCT WO 97/33883 descreve compostos de pirimidina substituídos com amino para serem utilizados no tratamento de doenças mediadas por citocinas. Os pedidos das patentes europeias EP 0 337 943 e EP 0 337 944 descrevem ureias de N-fenil-N-pirimidin-2-ilo com actividade herbicida e actividade reguladora do crescimento de plantas. 2
Outras pessoas já tentaram desenvolver fármacos que inibem especificamente as PCAMs Por exemplo, a publicação da PCT WO 95/31451 descreve compostos de pirazole que inibem as PCAMs e, em particular, a p38. Contudo, a eficácia destes inibidores in vivo está ainda a ser investigada. A publicação da PCT WO 98/27098 também descreve inibidores de p38, que incluem compostos de piridina substituídos.
De acordo com isto, há ainda uma grande necessidade de desenvolver outros inibidores potentes de p38, incluindo inibidores específicos de p38, que são úteis no tratamento de vários estados clínicos associados com a activação de p38.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO A presente invenção destina-se a resolver este problema providenciando compostos que exibem uma forte inibição de p38 .
Estes compostos têm a fórmula geral: R i 1 i
Q2 (Ia) na qual Qi selecciona-se entre och3
F t / 3
I CFa H3C0 0CH3 Η31
Br t H31 CH3 ch3 o
Cl t
H2N' OCH3 och3 t
4
5 o X-OCH3 och3 nh2
Cl
Cl r
HN
Cl
Cl
Cl
f
7
r 9 r r
Cl
r 9 * 9 8
9
2-piridilo insubstituído ou fenilo insubstituído; R' selecciona-se entre hidrogénio; alquilo (C1-C3); alcenilo ou alcinilo (C2-C3) ; fenilo ou fenilo substituído com 1 a 3 substituintes seleccionados, independentemente entre halo, metoxi, ciano, nitro, amino, hidroxi, metilo ou etilo; ou um
Sistema de anel heterocíclico com 5 a 6 elementos no núcleo eventualmente substituído com 1 a 3 substituintes seleccionados, independentemente entre halo, metoxi, ciano, nitro, amino, hidroxi, metilo ou etilo; R3 selecciona-se entre sistemas de anéis carbocíclicos ou heterocíclicos não aromáticos com 5 a 8 elementos no núcleo; W selecciona-se entre N(R2)S02 N(R2)2; N (R2) S02-N (R2) (R3) ; N (R2) C (0)-0R2; N (R2) C (0) -N (R2) 2; N (R2) C (0)-N (R2) (R3) ; N (R2) C (0)-R2; N(R2)2; C(0)-R2; CH(0H)-R2; C(0)-N(R2)2; C(0)-0R2; ou alquilo (C1-C4) de cadeia linear ou ramificada eventualmente substituído com N(R')2, OR', C02R', C0N(R')2, R3, ou S02N(R2)2; ou um sistema de anel carbocíclico ou heterocíclico com 5 a 6 elementos no núcleo eventualmente substituído com N(R')2, OR', C02R', C0N(R')2, ou S02N(R2)2; desde que W não seja um alquilo em Ci substituído em R3; R2 selecciona-se entre hidrogénio; alquilo (C1-C3) ou alcenilo (C1-C3) ; cada um deles eventualmente substituído com -N(R')2, -OR', SR', -C (0) -N (R ' ) 2, -S (02) -N (R ' ) 2, - C(0)-OR'; 10 cada Y representa C, em que cada R e U ligados a Y seleccionam-se, independentemente entre hidrogénio ou metilo; Z representa CH ou N; e V representa -C(0)NH2.
Num outro enquadramento, a presente invenção tem por objecto composições farmacêuticas que compreendem os inibidores de p38 da presente invenção. Estas composições podem ser utilizadas em processos para o tratamento ou a prevenção de uma variedade de distúrbios, tais como cancro, doenças inflamatórias, doenças autoimunes, distúrbios destrutivos dos ossos, distúrbios proliferativos, doenças infecciosas, doenças virais e doenças neurodegenerativas. Estas composições são também úteis em processos para a prevenção da morte das células e hiperplasia e por isso podem ser utilizadas para tratar ou prevenir reperfusão/isquémia em acidentes vasculares, ataques do coração e hipóxia de órgãos. As composições também são úteis em processos para a prevenção da agregação de plaquetas induzida pela trombina. Cada um destes processos descritos antes faz também parte da presente invenção.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO
Estes compostos têm a fórmula geral: Q, R I 1 t
Q2 (Ia) na qual Qi selecciona-se entre: 11 och3
Η31 ch3 ch3 a ci t t
H2N' OCH3 ^
OCHS t
12
13 o ^-L^och3 och3 nh2
Cl
Cl r
HN
I
Cl
Cl
Cl
Cl' f t
14
15
F
F €H3
F
16
17
2-piridilo insubstituído ou fenilo insubstituído; R' selecciona-se entre hidrogénio; alquilo (C1-C3) ; alcenilo ou alcinilo (C2-C3) ; fenilo ou fenilo substituído com 1 a 3 substituintes seleccionados, independentemente entre halo, metoxi, ciano, nitro, amino, hidroxi, metilo ou etilo; ou um sistema de anel heterociclico com 5-6 átomos no núcleo eventualmente substituído com 1 a 3 substituintes seleccionados independentemente entre halo, metoxi, ciano, nitro, amino, hidroxi, metilo ou etilo; R3 selecciona-se entre sistemas de anéis carbociclicos ou heterociclicos não aromáticos com 5 a 8 elementos no núcleo; W selecciona-se entre N (R2) C (0) -N (R2) 2; N(R2)C(0)- N (R2) (R3) ; N (R2) C (0)-R2; N(R2)2; C(0)-R2; CH(0H)-R2; C (0)- N (R2) 2; C(0)-0R2; ou alquilo (C1-C4) de cadeia linear ou ramificada eventualmente substituído com N(R')2, OR', C02R', CON (R') 2/ R3, ou S02N (R2) 2; ou um sistema de anel carbocíclico ou heterociclico com 5 a 6 elementos no núcleo eventualmente substituído com N(R')2, OR', C02R', CON (R' ) 2, ou S02N(R2)2; desde que W não seja um alquilo em Ci substituído em R3; R2 selecciona-se entre hidrogénio; alquilo (C1-C3) ou alcenilo (C1-C3) ; cada um deles eventualmente substituído com -N(R')2, -OR', SR', -C (0) -N (R' ) 2, -S (02) -N (R' ) 2, - C(0)-OR'; 18 cada Y representa C, em que cada R e U ligados a Y se selecciona, independentemente, entre hidrogénio ou metilo; Z representa CH ou N; e V representa -C(0)NH2.
Mais preferencialmente, Qi selecciona-se entre 2-fluoro-6-trifluorometilfenilo, 2,6-difluorofenilo, 2,6-diclorofe-nilo, 2-cloro-4-hidroxifenilo,2-cloro-4-aminofenilo, 2,6-dicloro-4-aminofenil, 2,6-dicloro-3-aminofenilo, 2,6-dimetil-4-hidroxifenilo, 2-metoxi-3,5-dicloro-4-piridilo, 2-cloro-4,5-metilenodioxi-fenilo ou 2-cloro-4-(Ν-2-morfolino-acetami-do)-fenilo.
Mais preferencialmente, são compostos em que Q2 se selecciona entre fenilo, 2-isopropylphenyl, 3,4-dimetil-fenilo, 2-etilfenilo, 3-fluorofenilo, 2-metilfenilo, 3-cloro-4-fluorofenilo, 3-clorofenilo, 2-carbometoxilfenilo, 2-carboxifenilo, 2-metil-4-clorofenilo, 2-bromofenilo, 2-piridilo, 2-metileno-hidroxifenilo, 4-fluorofenilo, 2-metil-4-fluorofenilo, 2-cloro-4-fluorofenilo, 2,4-difluorofenilo, 2-hidroxi-4-fluorofenilo, 2-metileno-hidroxi-4-fluorofenilo, ou 3-cloro-2-metileno-hidroxi.
De acordo com um enquadramento ainda mais preferido, cada Y representa C, e W e/ou U não representam hidrogénio.
Nos quadros 1 a 6 que se seguem dão-se alguns enquadramentos preferidos:
Quadro 1.
19
Quadro 4.
Comp. N° Estrutura Comp. N° Estrutura VRT-041291 ox VRT-37742 ÇO.» Τίίί^γ,7 Xj HOr VRT-032884 ÇQo, “CCl y® VRT-034465 ÇO-. arS i 0TtiF 20
Quadro 6.
Os enquadramentos particularmente preferidos incluem
\
ο ο 'ίν // S ΝΗ 2 Ο Ο W //
Os enquadramentos particularmente preferidos incluem: também
F 22 em que X representa NH2 ou N(CH3)2;
em que X representa OH, NH2 ou N(CH3)2; preferidos
Outros enquadramentos particularmente incluem:
23
Os enquadramentos mais preferidos incluem:
(Composto 17) (Composto 18)
(Composto 19)
De acordo com outro enquadramento, a presente invenção providencia processos de produção dos inibidores de p38 mencionados antes, de fórmula (Ia) . A seguir descrevem-se esquemas de sintese representativos para a fórmula (Ia).
Os esquemas 1-3 ilustram a preparação de compostos em que W representa, quer uma função amino, carboxilo ou 24 aldeído. Em cada caso, cada uma das partes particulares pode ser modificada através de química bem conhecida da literatura. Por exemplo os compostos finais de amino D e N (esquemas 1 e 4 respectivamente) podem ser acilados, sulfonilados ou alquilados para preparar compostos dentro do âmbito de W. Em todos os esquemas, os grupos LI e L2 nos materiais iniciais representam grupos elimináveis na posição orto em relação ao átomo de azoto num anel heterocíclico. Por exemplo, o composto A pode ser 2,6-dicloro-3-nitro-piridina.
Esquema 1
A B C
D
No esquema 1, W selecciona-se entre compostos derivados de amino tais como N (R2) S02-N (R2) 2; N (R2) S02-N (R2) (R3) ; N(R2)C (0) -0R2; N(R2)C (0)-N(R2)2; N (R2) C (0) -N (R2) (R3) ; N(R2)C(0)-R2; ou N(R2)2.
No esquema 1, introduz-se o anel Q2 utilizando uma das muitas reacções conhecidas na técnica e que resulta na produção de compostos de biarilo. Um exemplo pode ser a reacção de um composto de arilo e lítio com o produto 25 intermédio de piridina A. Alternativamente, pode-se fazer reagir um composto de arilo e um metal tal como um ácido de aril-estanano ou um ácido aril-borónico com uma porção de halogeneto de arilo (produto intermédio A) na presença de um catalisador de Pd° para formar o produto B. Na etapa seguinte, um derivado de Qi substituído tal como um derivado de fenilo e acetonitrilo pode ser tratado com uma base tal como hidreto de sódio, amida sódica, LDA, hexametildisilazida de lítio ou qualquer número de outras bases não nucleofílicas para desprotonar a posição alfa com o grupo ciano, que representa uma parte de amida simulada. Este anião contacta então com 0 produto intermédio B para formar C. 0 grupo nitrilo ou equivalente do produto intermédio C é então hidrolisado para formar a amida e 0 grupo nitro é então submetido a condições de redução para formar 0 produto intermédio D. 0 produto intermédio D é então utilizado para introduzir várias funcionalidades definidas por W através de processos químicos tais como reacções de acilação, sulfonilação ou alquilação bem conhecidas da literatura. Consoante a regio-química das duas primeiras etapas deste processo, pode ser necessário reverter as duas primeiras etapas.
Li— R U v=/i-t co2ch*-
Esquema 2: Li~4 >-C02CH3— F
.CN \ ,U1 /=X ; n—( CO2CH: v
Derivação do grupo carboxilo
Qi
NH2 Q2
Qi Y=Y
NH2 H /^— co2H Q2 26
No esquema 2, W selecciona-se entre compostos derivados de carboxilo tais como C(0)-R2; CH (OH)-R2; C (0)-N (R2)2; ou C(0)-0R2. 0 esquema 2, que se segue, descreve, de uma forma genérica, os procedimentos descritos para o esquema 1 excepto no facto de um produto intermédio de carboxilo, tal como E, ser o material inicial. As primeiras duas etapas são o espelho do esquema 1 e, tal como se mencionou para o esquema 1, podem reverter-se consoante a regio-quimica de exemplos específicos. 0 produto intermédio G forma-se a partir destas duas primeiras etapas e este material pode ser hidrolisado, tal como se mencionou, para originar o produto intermédio de carboxilo H. 0 grupo carboxilo pode então ser modificado de acordo com processos bem conhecidos a partir da literatura para preparar análogos com substituintes de W definidos tal como acilações, amidações e esterificações.
Esquema 3:
No esquema 3, W selecciona-se entre alquilo (Ci-C4) de cadeia linear ou ramificada eventualmente substituído com 27 N (R' ) 2, OR', CO2R', CON(R')2, R3, ou S02N (R2) 2; ou um sistema de anel carbocíclico ou heterocíclico com 5 a 6 elementos no núcleo eventualmente substituído com N(R')2, OR', C02R', CON(R')2, ou S02N(R2); desde que W não seja um alquilo em Ci substituído com R3.
No esquema 3 um derivado de piridina é metalizado e pára-se a reacção com um dos muitos electrófilos conhecidos que pode gerar um aldeído, para formar o produto intermédio I. 0 aldeído pode então ser ocultado para formar o acetal de dimetilo J. Este produto intermédio é então tratado tal como se descreve nos esquemas 1 e 2 para introduzir os substituintes Qi e Q2, para produzir o produto intermédio L. Tal como antes, estas duas etapas podem ser permutadas consoante a regioquímica específica. 0 aldeído oculto de L pode então ser desprotegido e utilizado para formar compostos com a substituição de W definida utilizando uma química bem conhecida tal como alquilações e aminações redutoras.
Os esquemas 4-6 são semelhantes aos esquemas 1-3 com a excepção de os compostos que se pretendem serem aqueles em que Z = azoto. As etapas para estes esquemas são paralelas de 1-3 com a excepção do facto de a alquilação que utiliza um fenil-acetonitrilo ser substituída por uma reacção com um derivado da amina Q1 tal como um derivado de anilina substituído. A porção de amida da molécula é então introduzida numa reacção de acilação por exemplo, com isocianato de clorosulfonilo. 28
Esquema 4:
2) Aciladí 1) q1-nh2
M
N
No esquema 4, W selecciona-se entre compostos derivados de amino tais como N (R2) SO2-N (R2) 2; N (R2) SO2-N (R2) (R3); N (R2) C (0)-0R2; N (R2) C (0) -N (R2) 2; N (R2) C (0)-N (R2) (R3) ; N(R2)C(0)-R2; ou N(R2)2.
No esquema 4, o produto intermédio B (do esquema 1) é tratado, por exemplo, com um derivado de anilina, na presença de uma base tal como carbonato de potássio. Adicionalmente, pode-se utilizar, se necessário, um catalisador de paládio para aumentar a capacidade de reacção deste tipo geral de reacção. 0 derivado de amina resultante é então asilado para formar o produto intermédio M. 0 grupo nitro de M é então reduzido para formar N e o grupo amina pode então ser derivado tal como descrito no esquema 1. Tal como se mencionou para os esquemas 1-3, as etapas envolvidas na introdução dos substituintes Qi e Q2 podem ser permutadas consoante a regioquimica especifica de compostos específicos. 29
Esquema 5:
E l2 \J L,—^ V-C02CH3
Acilado F 1) Q^NHs
C02CH3 nh2 q2 O
Derivação do
No esquema 5, W selecciona-se entre grupos derivados de carboxilo tais como C(0)-R2; CH (OH)-R2; C(0)-N(R2)2; ou C (0)-OR2.
Esquema 6:
R
V P Y=Y, 1 -~i N
CHO t-2 R p Wv PCH3 L1"Í\ \ PS-< i—{ Oí 1) Q1-NH2 Q1V Y=Vv pCH3 -——► HN— OCHa 2} hidrólise ^" \ OCH3 L-2
Q
¥
30
No esquema 6, W selecciona-se entre alquilo (C1-C4) de cadeia linear ou ramificada eventualmente substituído com N(R')2, OR', C02R', CON(R')2, R2, ou S02N(R2)2; ou um sistema de anel carbociclico ou heterociclico com 5-6 elementos no núcleo eventualmente substituídos com N(R')2, OR', C02R', CON(R')2, ou S02N(R2)2; desde que W não seja um alquilo em Ci substituído em R3.
Os esquemas 5 e 6 geralmente seguem-se os processos mencionados antes.
De acordo com outro enquadramento da presente invenção, a actividades dos inibidores de p38 da presente invenção podem ser analisadas in vitro, in vivo ou numa linha de células. Os ensaios in vitro incluem os ensaios que determinam a inibição quer da actividade da cinase ou a actividade de ATPase de p38 activado. Ensaios alternativos in vitro quantificam a capacidade do inibidor para se ligar a p39 e pode ser medida quer por radiomarcação do inibidor antes da ligação, isolamento do complexo de inibidor/p38 e determinação da quantidade de ligação radio-marcada ou realizando uma experiência de comparação em que se faz a incubação de novos inibidores com a ligação de p38 a radioligandos conhecidos.
Os ensaios em culturas de células do efeito inibidor dos compostos da presente invenção podem determinar as quantidades de FNT, IL-1, IL-6 ou IL-8 produzidas no sangue completo ou nas suas fracções celulares em células tratadas com inibidor, quando comparadas com as células tratadas com controlos negativos. 0 nível destas citocinas pode ser determinado através da utilização de ensaios ELISAs comercialmente disponíveis. 31
Um ensaio in vivo útil para a determinação da actividade inibidora dos inibidores de p38 da presente invenção são a supressão do edema da pata traseira em ratos com artrite induzida por Mycobacterium butyricum. Isto está descrito em J.G. Boehm et al. , J. Med. Chem., 39, pp. 3929-37 (1996), cuja descrição se incorpora aqui como referência. Os inibidores de p38 da presente invenção podem também ser analisados, em modelos de animais, de artrite, reabsorção óssea, choque de endotoxina e função imunitária, tal como descrito em A. M. Badger et al., J. Pharmacol. Experimental Therapeutics, 279, pp. 1453-61 (1996), cuja descrição se incorpora aqui como referência.
Os inibidores de p38 ou os seus sais farmacêuticos podem ser formulados em composições farmacêuticas para administração a animais ou a seres humanos. Estas composições farmacêuticas, que compreendem uma quantidade efectiva de inibidor de p38 para tratar ou prevenir um estado clinico mediado por p38 e um veiculo aceitável sob o ponto de vista farmacêutico, são outro dos enquadramentos da presente invenção. A expressão "estado clinico mediado por p38", tal como se utiliza aqui, significa qualquer doença ou outra condição danosa em que se sabe que p38 desempenha um papel. Isto inclui estados clínicos conhecidos por serem causados pela sobre-produção de IL-1, FNT, IL-6 ou IL-8. Esses estados clínicos incluem, sem limitação, doenças inflamatórias, doenças autoimunes, distúrbios destrutivos dos ossos, distúrbios proliferativos, doenças infecciosas, doenças neurodegenerativas, alergias, reperfusão/isquémia em acidentes vasculares, ataques de coração, distúrbios angiogénicos, hipóxia de orgãos, hiperplasia vascular, hipertrofia cardíaca, agregação de plaquetas induzida por 32 trombina, e condições associadas com a prostaglandina-endoperoxidase-sintase-2 .
As doenças inflamatórias que podem ser tratadas ou prevenidas pelos compostos da presente invenção incluem, mas não se limitam a pancreatite aguda, pancreatite crónica, asma, alergias e síndroma da dificuldade respiratória do adulto.
As doenças autoimunes que podem ser tratadas ou prevenidas pelos compostos da presente invenção incluem, mas não se limitam a, glomerulonefrite, artrite reumatóide, lupus eritematoso sistémico, escleroderma, tiroidite crónica, doença de Graves, gastrite autoimune, diabetes, anemia hemolítica autoimune, neutropénia autoimune, trombocitopénia, dermatites atópicas, hepatite activa crónica, miastenia gravis, esclerose múltipla, doença inflamatória do intestino, colite ulcerosa, doença de Crohn, psoríase ou doença do enxerto vs. hospedeiro.
Os distúrbios destrutivos dos ossos que podem ser tratadas ou prevenidas pelos compostos da presente invenção incluem, mas não se limitam a osteoporose, osteoartrite e distúrbios dos ossos relacionados com mieloma múltiplo.
As doenças proliferativas que podem ser tratadas ou prevenidas pelos compostos da presente invenção incluem, mas não se limitam a leucemia mielogénica aguda, leucemia mielogénica crónica, melanoma com metástases, sarcoma de Kaposi e mieloma múltiplo.
Os distúrbios angiogénicas que podem ser tratadas ou prevenidas pelos compostos da presente invenção incluem 33 tumores sólidos, neovascularização ocular, hemangiomas infantis.
As doenças infecciosas que podem ser tratadas ou prevenidas pelos compostos da presente invenção incluem, mas não se limitam a sepsia, choque séptico e shiguelose.
As doenças virais que podem ser tratadas ou prevenidas pelos compostos da presente invenção incluem, mas não se limitam a infecção de hepatite aguda (incluindo hepatite A, hepatite B e hepatite C) , infecção por VIH e retinite por CMV.
As doenças neurodegenerativas que podem ser tratadas ou prevenidas pelos compostos da presente invenção incluem, mas não se limitam a doença de Alzheimer, doença de Parkinson, isquémias cerebrais ou doenças neurodegenerativas causadas por feridas traumáticas. "Os estados clínicos mediados por p38" também incluem reperfusão/isquémia em acidentes vasculares, ataques de coração, isquémia do miocárdio, hipóxia de orgãos, hiperplasia vascular, hipertrofia cardíaca, agregação de plaquetas induzida por trombina.
Além disso, os inibidores de p38 da presente invenção são também capazes de inibir a expressão de proteínas pró-inflamatórias indutíveis tal como sintase-2 de endoperóxido de prostaglandina (PGHS-2), também referida como ciclo-oxigenase-2 (COX-2). Assim, outros "estados clínicos mediados por p38" que podem ser tratados pelos compostos da presente invenção incluem edema, analgesia, febre e dor, tal como dor neuromuscular, dor de cabeça, dor do cancro, dor de dentes e dor artrítica. 34
As doenças que podem ser tratadas ou prevenidas pelos inibidores de p38 da presente invenção podem ser agrupadas, de uma forma convencional, por citocinas (IL-1, FNT, IL-6, IL-8) que se crê que sejam responsáveis pela doença.
Assim, uma doença ou um estado clinico mediado por IL-1 incluem artrite reumatóide, osteoartrite, acidente vascular, endotoxémia e/ou síndroma do choque tóxico, reacção inflamatória induzida por endotoxina, doença inflamatória do intestino, tuberculose, aterosclerose, degeneração muscular, caquexia, artrite psoriática, síndroma de Reiter, gota, artrite traumática, artrite da rubéola, sinovite aguda, diabetes, doença das células β pancreáticas e doença de Alzheimer.
Uma doença ou um estado clínico mediado por TNF inclui, artrite reumatóide, espondilite reumatóide, osteoartrite, artrite gotosa e outros estados clínicos artríticos, sepsia, choque séptico, choque endotóxico, sepsia gram negativa, síndroma de choque tóxico, sindroma de insuficiência respiratória do adulto, malária cerebral, doença inflamatória pulmonar crónica, silicose, sarcoidose pulmonar, doenças de reabsorção dos ossos, ferida de reperfusão, reacção do enxerto vs. hospedeiro, rejeições de alo-enxertos, febre e mialgias devidas a infecção, caquexia secundária de uma infecção, SIDA, ARC ou malignidade, formação de quelóides, formação de escaras dos tecidos, doença de Crohn, colite ulcerosa ou estado febril. As doenças mediadas por TNF também incluem infecções virais, tal como as causadas por VIH, CMV, vírus da gripe e herpes; e infecções virais veterinárias, tais como infecções por lentivírus, incluindo, mas não se limitando a vírus da anemia infecciosa de equinos, vírus da artrite de caprinos, vírus visna ou vírus maedi; ou infecções por retrovírus, incluindo vírus da imunodeficiência de 35 felinos, vírus da imunodeficiência de bovinos ou vírus da imunodeficiência de caninos.
Uma doença ou um estado clínico mediado por IL-8 inclui doenças caracterizadas por infiltração massiva de neutrófilos, tal como psoríase, doença inflamatória do intestino, asma, ferida de reperfusão cardíaca ou renal, síndroma da insuficiência respiratória do adulto, trombose e glomerulonefrite.
Além disso, os compostos da presente invenção podem ser utilizados topicamente para tratar ou prevenir estados clínicos causados ou exacerbados por IL-1 ou FNT. Esses estados clínicos incluem articulações inflamadas, eczema, psoríase, condições inflamatórias da pele tal como queimaduras do Sol, condições inflamatórias dos olhos tais como conjuntivite, estado febril, dor e outros estados clínicos associados a inflamação.
Além disso, os compostos da presente invenção, os sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico dos compostos da presente invenção podem ser utilizados em composições para tratar ou prevenir os distúrbios identificados antes.
Os sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico dos compostos da presente invenção incluem os que derivam de ácidos e bases inorgânicos e orgânicos aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico. Exemplos de sais de ácidos apropriados incluem acetato, adipato, alginato, aspartato, benzoato, benzeno-sulfonato, bisulfato, bromidrato, butirato, citrato, canforato, canforsulfonato, ciclopentanopropionato, clori-drato, digluconato, dodecilsulfato, etano-sulfonato, formato, fumarato, gluco-heptanoato, glicerofosfato, glicolato, hemisulfato, heptanoato, hexanoato, 2-hidroxietano-sulfonato, 36 iodrato, lactato, maleato, malonato, metano-sulfonato, 2-naftaleno-sulfonato, nicotinato, nitrato, oxalato, palmoato, pectinato, persulfato, 3-fenilpropionato, fosfato, picrato, pivalato, propionato, salicilato, succinato, sulfato, tartrato, tiocianato, tosilato e undecanoato. Outros ácidos, tal como o oxálico, embora por si sós não sejam aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, podem ser utilizados na preparação de sais úteis como produtos intermédios na obtenção de compostos da presente invenção assim como os seis sais de adição de ácidos aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico. Sais derivados de bases apropriadas incluem sais de metais alcalinos (por exemplo, sódio e potássio), metais alcalino-terrosos (por exemplo, magnésio), sais 4+ de amónio e N-(alquilo Cl-4) . A presente invenção também engloba a quaternização de quasiquer grupos básicos contendo azoto dos compostos aqui descritos. Por meio desta quaternização podem obter-se produtos solúveis ou que se podem dispersar em água e em óleo.
Os veículos aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico que podem ser utilizados nestas composições farmacêuticas incluem, mas não se limitam a permutadores de iões, alumina, estearato de alumínio, lecitina, proteínas do soro, tal como albumina do soro humano, substâncias tampão tal como fosfatos, glicina, ácido sórbico, sorbato de potássio, misturas parciais de glicéridos de ácidos gordos saturados de vegetais, água, sais ou electrólitos, tais como sulfato de protamina, fosfato di-sódico de hidrogénio, fosfato de hidrogénio e potássio, cloreto de sódio, sais de zinco, sílica coloidal, trisilicato de magnésio, polivinil-pirrolidona, substâncias à base de celulose, polietileno-glicol, carboximetilcelulose sódica, poliacrilatos, ceras, polímeros de blocos de polietileno-polioxipropileno, polietileno-glicol e gordura de lã. 37
As composições da presente invenção podem ser administradas oralmente, parentéricamente, por inalação de um aerossol, topicamente, rectalmente, nasalmente, bucalmente, vaginalmente ou por via de um reservatório implantado. 0 termo "parentérico" tal como se utiliza aqui inclui técnicas de injecção ou de infusão subcutâneas, intravenosas, intramusculares, intra-articulares, intra-sinoviais, intra-esternais, intra-tecais, intra-hepáticas, intralesionais e intracranianas. Preferencialmente, as composições administram-se oralmente, intraperitonealmente ou intravenosamente.
As formas injectáveis esterilizadas das composições da presente invenção podem ser suspensões aquosas ou oleaginosas. Estas suspensões podem ser formuladas de acordo com técnicas conhecidas nesta técnica utilizando agentes de dispersão ou de molhagem apropriados e agentes de suspensão. A preparação injectável esterilizada pode ser também uma suspensão ou solução injectável esterilizada no seio de um diluente ou dissolvente não tóxico, aceitável sob o ponto de vista parentérico, por exemplo uma solução em 1,3-butanodiol. Entre os veículos e dissolventes aceitáveis que podem ser utilizados estão a água, a solução de Ringer e uma solução isotónica de cloreto de sódio. Para além disso, utilizam-se convencionalmente óleos de fixação como o meio dissolvente ou de suspensão. Com esta finalidade, pode-se utilizar qualquer óleo de fixação suave incluindo mono- ou di-glicéridos sintéticos. Ácidos gordos, tais como ácido oleico e os seus derivados glicerídicos são úteis na preparação de injectáveis, tal como óleos naturais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, tais como azeite ou óleo de rícino, especialmente nas suas versões polioxietiladas. Estas soluções ou suspensões oleosas podem também conter um diluente ou dispersante alcoólico de cadeia longa, tal como celulose carboximetilada ou agentes de dispersão similares 38 que são utilizados normalmente na forma de dosagem aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico incluindo emulsões ou suspensões. Outros tensioactivos utilizados normalmente, tais como Tweens, Spans e outros agentes emulsionantes ou melhoradores da biodisponibilidade que são normalmente utilizados no fabrico de liquidos ou sólidos aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico ou outras formas de dosagem podem também ser utilizadas para os fins das presentes formulações.
As composições farmacêuticas da presente invenção podem ser administrada oralmente em qualquer forma de dosagem oral aceitável incluindo, mas não se limitando a cápsulas, comprimidos, soluções ou suspensões aquosas. No caso dos comprimidos para utilização oral, os veiculos normalmente utilizados incluem lactose e amido de milho. Adiciona-se normalmente agentes de lubrificação, tal como estearato de magnésio. Para administração oral numa forma de cápsula, os diluentes úteis incluem lactose e amido de milho anidro. Quando são necessárias suspensões para utilização oral, combina-se o ingrediente activo com agentes de emulsão e de suspensão. Se desejado, pode-se também adicionar agentes de adoçamento, aromatização e corantes.
Alternativamente, as composições farmacêuticas da presente invenção podem ser administradas sob a forma de supositórios para administração rectal. Podem ser preparadas misturando o agente com um excipiente não irritante apropriado que é sólido à temperatura ambiente mas liquido à temperatura rectal e por isso vai fundir-se no recto para libertar o fármaco. Esses materiais incluem manteiga de cacau, cera de abelha e polietileno-glicóis.
As composições farmacêuticas da presente invenção podem também ser administradas topicamente, especialmente quando o 39 alvo do tratamento inclui áreas ou órgãos facilmente acessíveis por aplicação tópica, incluindo doenças dos olhos, da pele ou do tracto intestinal inferior. As formulações tópicas apropriadas são preparadas facilmente para cada uma destas áreas ou órgãos. A aplicação tópica para o tracto intestinal inferior pode ser efectuada numa formulação de supositório rectal (ver antes) ou numa formulação de uma pomada apropriada. Também se podem utilizar pensos transdérmicos de aplicação tópica.
Para as aplicações tópicas, as composições farmacêuticas podem ser formuladas em pomadas apropriadas contendo o componente activo suspenso ou dissolvido num ou mais veículos. Os veiculos para administração tópica dos compostos da presente invenção incluem, mas não se limitam a óleo mineral, vaselina líquida, vaselina branca, compostos de propileno-glicol, polioxietileno, polioxipropileno, cera emulsionante e água. Alternativamente, as composições farmacêuticas podem ser formuladas numa loção ou num creme apropriados contendo os componentes activos suspensos ou dissolvidos em um ou mais veículos aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico. Os veículos apropriados incluem, mas não se limitam a óleo mineral, mono-estearato de sorbitano, polisorbato 60, cera de ésteres de cetilo, álcool de cetearilo, 2-octildodecanol, álcool de benzilo e água.
Para utilizações oftálmicas, as composições farmacêuticas podem ser formuladas como suspensões micronizadas em soluções salinas isotónicas, esterilizadas, com o pH ajustado ou, preferencialmente, como soluções salinas isotónicas, esterilizadas, com o pH ajustado, quer com ou sem um conservante tal como cloreto de benzilalcónio. Alternativamente, para utilizações oftálmicas, as composições 40 farmacêuticas podem ser formuladas sob a forma de pomadas tal como vaselina.
As composições farmacêuticas da presente invenção podem também ser administradas por aerossol nasal ou inalação. Essas composições são preparadas de acordo com técnicas bem conhecidas na técnica da formulação farmacêutica e podem ser preparadas como soluções numa solução salina, utilizando álcool de benzilo ou outros conservantes apropriados, promotores de absorção para aumentar a biodisponibilidade, fluorocarbonos, e/ou outros agentes convencionais de solubilização ou de dispersão. A quantidade de inibidor de p38 que se pode combinar com os materiais veiculares para produzir uma única forma de dosagem varia consoante o hospedeiro tratado e o modo particular de administração. Preferencialmente, as composições devem ser formuladas de tal modo que se possa administrar uma dose entre 0,01 - 100 mg/kg de massa corporal/dia do inibidor, a cada um dos pacientes que recebe estas composições.
Também se deve entender que uma dose especifica e um regime de tratamento para qualquer paciente em particular dependerá de uma variedade de factores, incluindo a actividade do composto especifico utilizado, a idade, o peso do corpo, o estado geral de saúde, o género, a dieta, o tempo de administração, a taxa de excreção, a combinação de fármacos e a decisão de tratamento do médico e a severidade da doença particular a ser tratada. A quantidade de inibidor também dependerá do composto particular na composição.
De acordo com outro enquadramento, um estado clinico mediado por p38 pode ser tratado ou prevenido por 41 administração, a um paciente, de uma das composições farmacêuticas descritas antes. 0 termo "paciente", tal como é usado aqui, significa um animal, preferencialmente um ser humano.
Preferencialmente, esses estados clínicos a serem tratados ou prevenidos seleccionam-se entre doenças inflamatórias, doenças auto-imunes, distúrbios destrutivos dos ossos, distúrbios proliferativos, doenças infecciosas, doenças degenerativas, alergias, doenças de reperfu-são/isquémia em acidentes vasculares, ataques de coração, distúrbios angiogénicos, hipoxia de órgãos, hiperplasia vascular, hipertrofia cardíaca e agregação de plaquetas induzida por trombina.
De acordo com outro enquadramento, os inibidores da presente invenção utilizam-se para tratar ou prevenir uma doença ou um estado clínico mediado por IL-1, IL-6, IL-8 ou FNT. Esses estados clínicos já foram descritos antes.
Consoante o estado clínico particular mediado por p38 a ser tratado ou prevenido, podem-se administrar outros fármacos que são normalmente administrados para tratar ou prevenir esse estado clínico, em conjunto com o s inibidores da presente invenção. Por exemplo, pode-se combinar agentes quimioterapêuticos ou outros agentes anti-proliferativos com os inibidores de p38 da presente invenção para tratar doenças proliferativas.
Esses agentes adicionais podem ser administrados separadamente, como parte de um regime de dosagem múltiplo, a partir da composição contendo o inibidor de p38. Alternativamente, esses agentes podem fazer parte de uma 42 única forma de dosagem, misturada em conjunto com o inibidor de p38 numa única composição.
Para que a invenção aqui descrita se possa compreender completamente, realizaram-se os exemplos que se seguem. Deve entender-se que estes exemplos têm apenas fins ilustrativos e não foram realizados, em caso algum, como limitativos da presente invenção. EXEMPLO 1 Síntese do composto 6 inibidor de p38
A uma solução de LDA (60 mmole, 40 mLs) a -78 °C, adicionou-se, gota a gota, uma solução de 2,6-dibromopiridina (40 mmole, 9,48 gms) em THF (30 mLs, anidro) . Agitou-se a mistura a -78 °C durante 20 minutos. Adicionou-se formato de etilo (400 mmole, 32,3 mLs) e continuou-se a agitação a -78 °C durante 2 horas. Adicionou-se cloreto de amónio saturado (200 mLs) e aqueceu-se a mistura até à temperatura ambiente. Diluiu-se a mistura reaccional com acetato de etilo e lavou-se a camada orgânica com ácido e base aquosa. Secou-se a camada orgânica e evaporou-se in vácuo. Purificou-se o material resultante por cromatografia à pressão em gel de sílica seguido de uma eluição com acetato de etilo a 10 % em hexano para se obter 1 (32 mmole, 8,41 gms) sob a forma de um sólido branco. 43
Rr Br
CH3 Br 1 2
Fez-se, durante a noite, o refluxo de uma solução de 1 (13,08 mmole, 3,1 gms) e ácido sulfúrico concentrado (1 mL em metanol (50 mL). Arrefece-se a mistura reaccional, neutraliza-se com uma base aquosa e extrai-se em acetato de etilo. Secagem e a evaporação da camada orgânica originou 2 (11,77 mmole, 3,63 gms) sob a forma de um óleo.
H3CCTsOCH3 3 2 A uma solução de t-butóxido (2,2 mmole, 2 mLs) , adicionou-se, gota a gota, uma solução de 2,6-dicloroanilina (1,0 mmole, 162 mgs) em THF (2 mLs, anidro). Agitou-se a mistura è temperatura ambiente durante 20 minutos. Adicionou-se uma solução de 2 (1,0 mmole, 309 mgs) em THF (5 mLs) e continuou-se a agitação durante 3 horas. Diluiu-se a mistura reaccional com acetato de etilo e lavou-se a camada orgânica com ácido e base aquosa. Secou-se a camada orgânica e evaporou-se in vacuo. Purificou-se o material resultante por cromatografia à pressão em gel de silica seguido de uma eluição com acetona a 5% em n-hexano para se obter 3 (0,33 mmole, 128 mgs) sob a forma de um sólido cor de laranja. 44
3
O^H 4
Dissolveu-se ácido o-tolilborónico (0,34 mmole, 46 mgs) e 3 (0,20 mmole, 80 mgs) numa mistura de tolueno/etanol (5/1). Adicionou-se à solução carbonato de tálio (0,5 mmole, 235 mgs) e tetraquis(trifenilfosfina)paládio (0) (10 mgs) e deixou-se a pasta em refluxo durante 30 minutos. Diluiu-se a mistura reaccional com acetato de etilo e lavou-se a camada orgânica com ácido e base aquosa. Secou-se a camada orgânica e evaporou-se in vacuo. Purificou-se o material resultante por cromatografia à pressão em gel de silica seguido de uma eluição com metanol a 5 % em cloreto de metileno para se obter 4 (0,17 mmole, 61 mgs) sob a forma de um sólido branco. £f
4 5
Agitou-se, à temperatura ambiente, durante a noite, uma solução de 4 (0,17 mmole, 61 mgs) e isocianato de cloro-sulfonilo (1 mmole, 141,5 mgs) em cloreto de metileno (5 mLs) . Diluiu-se a mistura reaccional com acetato de etilo e lavou-se a camada orgânica com ácido e base aquosos. Secou-se a camada orgânica e evaporou-se in vacuo. Purificou-se o material resultante por cromatografia à pressão em gel de 45 sílica seguido de uma eluição com acetona a 5% em n-hexano para se obter 5 (0,12 mmole, 46 mgs) sob a forma de um sólido branco.
5 6
Adicionou-se boro-hidreto de sódio (1,0 mmole, 39,8 mgs) a uma solução de 5 (0,12 mmole, 46 mgs) em metanol (10 mLs) e agitou-se a solução durante 15 minutos. Parou-se a reacção com água. Diluiu-se então a mistura reaccional com acetato de etilo e lavou-se a camada orgânica com ácido e base aquosa. Secou-se a camada orgânica e evaporou-se in vacuo. Purificou-se o material resultante por cromatografia à pressão para se obter 6 (0,08 mmole, 36 mgs) sob a forma de um sólido branco.
Os dados do espectro para o composto 6 foram: RMN do ΧΗ (500 MHz, CDC13) δ 7,90 (d, 1H) , 7,60 (d, 2H) , 7,5-7,3 (m, 5H) , 6,30 (d, 2H) , 4,5 (s, 2H) , 2,3 (s, 2H) . Síntese do composto de referência 7 inibidor de p38
HO*
F
F 46 7
Dissolveu-se o amino-álcool (500 mg, 1,43 mmole) , que foi preparado da mesma forma que no exemplo 4, em diclorometano. Adicionou-se trietilamina (433 mg, 4,29 mmol3), seguida de cloreto de acetilo (168 mg, 2,15 mmole). Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante uma hora, verteu-se em água e extraiu-se com diclorometano. Evaporou-se o extracto orgânico in vacuo e dissolveu-se o resíduo em 10,0 mL de tolueno. Adicionou-se uma solução a 20 % de fosgénio em tolueno (5,0 mL) e fez-se o refluxo da solução durante duas horas. Arrefeceu-se a solução e adicionou-se 5,0 mL de hidróxido de amónio concentrado, precipitando um sólido branco. Verteu-se a mistura em água e extraiu-se com tolueno. Secou-se o extracto orgânico (MgS04) e evaporou-se in vacuo para se obter 205 mg do acetato de ureia 7 sob a forma de um sólido branco.
Os dados do espectro para o composto de referência 7 foram: RMN do ΧΗ (500 MHz, CDC13) δ 7,80 (d, 1H) , 7, 62-7,50 (m, 2H) , 7,25-7,0 (m, 5H) , 6,59 (d, 1H) , 5,1 (s, 2H) , 2,12 (s, 3H). HRMS mostrou MH+ 434,2 como o pico principal. Síntese do composto de referência 8 inibidor de p38
47 8
Dissolveu-se a ureia-álcool (548 mg, 1,4 mmole) , que foi preparado da mesma forma que no exemplo 6, em 5,0 mL de tolueno. Adicionou-se uma solução a 20 % de fosgénio em tolueno (5,0 mL) e fez-se o refluxo da solução durante duas horas. Arrefeceu-se a solução e adicionou-se 5,0 mL de hidróxido de amónio concentrado, precipitando um sólido branco. Verteu-se a mistura em água e extraiu-se com tolueno. Secou-se o extracto orgânico (MgS04) e evaporou-se in vacuo para se obter 284 mg do carbamato 8 sob a forma de um sólido branco.
Os dados do espectro para o composto de referência 8 foram: RMN do ΧΗ (500 MHz, CDC13) δ 7,77 (d, 1H) , 7,55-7,45 (m, 2H) , 7,15-6,95 (m, 5H) , 6,50 (d, 1 H) , 5,40 (s largo, 2H) , 5,00 (s, 2H) . HRMS mostrou MH+ 435, 1 como o pico principal. EXEMPLO 2
Sintese do composto de referência 16 inibidor de p38
Dissolveu-se um equivalente de ácido 2,6-dicloro-piridino-4-carboxilico em THF. Arrefeceu-se a solução para 0 °C e adicionou-se um equivalente de complexo de sulfureto de borano e dimetilo. Agitou-se a mistura è temperatura ambiente durante doze horas. Verteu-se a mistura em água e extraiu-se 48 com éter de dietilo. Secou-se o extracto de éter e evaporou- se in vacuo para se obter 9 com um rendimento de 93
H
o O ·
9 10
Dissolveu-se um equivalente de 9 em cloreto de metileno. Adicionou-se um equivalente de éter de clorometilo e metilo, seguido da adição de um equivalente de etil-di-isopropil-amina. Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante várias horas, verteu-se em água e extraiu-se com um dissolvente imiscível em água. Secou-se o extracto e evaporou-se in vacuo para se obter 10 com um rendimento de 86 o
11 10
Adicionou-se um equivalente de t-butóxido de potássio a uma solução de um equivalente de acetonitrilo de 2,6-diclorofenilo em THF à temperatura ambiente. Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante trinta minutos e adicionou-se uma solução de dicloropiridina 10 em THF. Depois da agitação durante 1,5 horas, verteu-se a mistura em cloreto de amónio aquoso e extraiu-se com acetato de etilo. Secou-se o extracto e evaporou-se in vacuo. Purificou-se o resíduo por cromatografia à pressão para se obter 11 com um rendimento de 79 % sob a forma de um pó branco. 49
Misturou-se o acetal 11 com ácido clorídrico concentrado e agitou-se durante várias horas. Extraiu-se a mistura com um dissolvente orgânico imiscível com água. Lavou-se o extracto com NaHCO aquoso saturado, secou-se e evaporou-se in vacuo para se obter 12.
Misturou-se o nitrilo 12 com ácido sulfúrico concentrado e aqueceu-se até 100 °C durante vários minutos. Arrefeceu-se a mistura, verteu-se em gelo e filtrou-se para se obter 13.
Dissolveu-se um equivalente da cloropiridina 13 em 1,2-dimetoxietano. Adicionou-se um equivalente de ácido 3-cloro- 50 2-metilfenilboróonico. Adicionou-se uma solução de um equivalente de carbonato de sódio em água em conjunto com uma quantidade catalítica de tetraquis (trifenilfosfina)paládio (0) . Aqueceu-se a mistura para 80 °C durante várias horas. Verteu-se a mistura em água e extraiu-se com um dissolvente orgânico imiscivel com água. Secou-se o extracto, evaporou-se in vacuo e purificou-se por cromatografia à pressão para se obter 14.
15 14
Dissolveu-se um equivalente do álcool 14 em THF. Arrefeceu-se a solução para 0°C e adicionou-se um equivalente de cloreto de metano-sulfonilo seguido de um equivalente de trietilamina. Agitou-se a solução durante várias horas, verteu-se em água e extraiu-se com um dissolvente imiscivel em água. Secou-se o extracto e evaporou-se in vacuo para se obter o mesilato 15 impuro.
16
Dissolveu-se um equivalente do éster de metano-sulfonilo 15 em THF. Arrefeceu-se a solução para 0°C e adicionou-se um 51 equivalente de N-etil-piperazina seguido de um equivalente de trietilamina. Agitou-se a solução durante várias horas, verteu-se em água e extraiu-se com um dissolvente imiscivel em água. Secou-se o extracto, evaporou-se e purificou-se por cromatografia à pressão para se a amina 16 pura.
Os dados do espectro para o composto de referência 16 foram: RMN do ΧΗ (500 MHz, CDC13) δ 9,85 (s largo, 1H) , 7,97 (dd, 1H) , 7,42 (d, 1H) , 7,27 (m, 5H) , 6,75 (s, 1H) , 5,95 (s, 1H) , 5,7 (s largo, 1H) , 3,5 (ABq, 2H) , 2,5-2,3 (m, 1 OH), 2,3 (s, 3H), 1,2 (t, 3H) . EXEMPLO 2
Clonagem da cinase p38 em células de insectos
Identificaram-se duas variantes de união da cinase humana p38, CSBP1 e CSBP2. Utilizaram-se, como matrizes, iniciadores de oligonucleótidos específicos para ampliar a região de codificação do ADNc de CSBP2 utilizando uma biblioteca de células HeLa (Stratagene). Clonou-se o produto da reacção em cadeia de polimerase num vector pET-15b (Novagen). Construiu-se o vector de transferência do baculovírus, pVL-(His)6-p38 por sub-clonagem de uma fragmento de Xbal-BamEI de pET15b-(His)6-p38 em sítios complementares no plasmido pVL1392 (Pharmingen). O plasmido pVL-(His)5-p38 dirigiu a síntese de uma proteína recombinante que consiste num péptido de 23 resíduos (MGSSHHHHHHSSGLVPRGSHMLE, em que LVPRGS representa um sítio de clivagem da trombina) fundindo num quadro com a terminação N de p38, conforme se confirmou por sequenciação do ADN e 52 pela sequenciação do terminal N da proteína expressa. Manteve-se uma cultura em mono-camada de células de insectos Spodoptera frugiperda (Sf9) (ATCC) em meio TNM-FH (Gibco BRL) complementado com soro bovino fetal a 10 % num frasco em T a 27 °C. As células de Sf9 na fase log foram co-transfectadas com ADN virai linear do vírus da poliedrose nuclear de Autographa califónica (Pharmingen) e o vector de transferência pVL-(His)6-p38 utilizando Lipofectina (Invitrogen). Os clones individuais de baculovírus recombinante foram purificados por ensaio em placa utilizando 1 % de agarose de baixo ponto de fusão. EXEMPLO 3
Expressão e purificação da cinase recombinante p38
Fez-se crescer células High-Five™ de Trichoplusia ni (Tri-368) (Invitrogen) em suspensão em meio Excel-405 isento de proteínas (JRH Bioscience) num frasco com agitação a 27 °C. As células, a uma densidade de 1,5 X 106 células/ml, foram infectadas com baculovírus recombinante numa multiplicidade de 5 infecções. O nível de expressão de p38 recombinante foi controlado por imunotransferência utilizando um anticorpo anti-p38 de coelho (Santa Cruz Biotechnology). Colheu-se a massa de células 72 horas depois da infecção quando o nível de expressão de p38 atingiu o seu máximo.
Descongelou-se a pasta de células congeladas das células que expressam p38 marcado com (His) 6 em 5 volumes de tampão A (NaH2P04 50 mm pH 8,0, Naco 200 mm, 3-mercaptoetanol 2mM, glicéreo a 10 % e PMSF 0.2 mm). Depois do rompimento mecânico das células num microfluidizador, centrifugou-se o produto da lise das células a 30,000 x g durante 30 minutos. Incubou-se o sobrenadante em lotes durante 3-5 horas a 4 °C com uma 53 resina de afinidade com metal Talon™ (Clontech) à razão de 1 ml de resina por 2-4 mgs do p38 esperado. A resina assentou por centrifugação a 500 x g durante 5 minutos e lavou-se cuidadosamente em lotes com tampão A. A resina foi dissolvida e vertida numa coluna (aprox. 2,6 x 5,0 cm) e lavou-se com tampão A + imidazole 5 mM.
Eluiu-se (His)6_p38 com tampão A + imidazole 100 mM e em seguida fez-se uma diálise durante a noite a 4 °C em função de 2 litros de tampão B, (HEPES 50 mM, pH 7,5, 13-glicerofosfato 25 mM , glicerol a 5 %, DTT 2mM). Eliminou-se o marcador de His6 por adição de 1,5 unidades de trombina (Calbiochem) por mg de p38 e incubou-se a 20 °C durante 2-3 horas. A trombina foi extinta pela adição de PMSF 0,2 mM e depois carregou-se toda a amostra numa coluna de 2 ml de agarose de benzamidina (American International Chemical). 0 fluxo através da fracção foi carregado directamente numa coluna de Q-Sepharose (Pharmacia) de 2,6 x 5,0 cm previamente equilibrada em tampão B + PMSF 0,2 mM. Eluiu-se p38 com um gradiente linear com um volume de 20 colunas de NaCl 0,6M em tampão B. Juntaram-se os picos de proteinas eluidas e fez-se a respectiva diálise durante a noite a 4 °C vs. tampão C (HEPES 50 mM pH 7,5, glicerol a 5 % , NaCl 50 mM, DTT 2 mM, PMSF 0.2 mM).
Concentrou-se a proteína dialisada num Centriprep (Amicon) com 3-4 ml e aplicou-se a uma coluna Sephacryl S-100HR (Pharmacia) de 2.6 x 100 cm. Eluiu-se a proteína a uma velocidade de fluxo de 35 ml/hr. Agregou-se o pico principal, ajustou-se com DTT 20 mM, concentrou-se até 10-80 mg/ml e congelou-se em alíquotas a -70°C ou utilizou-se imediatamente. 54 EXEMPLO 4
Activação de p38
Activou-se p38 por combinação de 0,5 mg/ml de p38 com 0,005 mg/ml de um mutante duplo (DD) de MKK6 em tampão B + MgCl2 lOmM, ATP 2mM, Na2VC>4 0,2mM durante 30 minutos a 20 °C. Carregou-se então a mistura de activação numa coluna MonoQ (Pharmacia) de 1,0 x 10 cm e eluiu-se com um gradiente linear de 20 volumes de coluna com NaCl 1,0 M em tampão B. O p38 foi eluido depois de ADP e ATP. Juntaram-se os picos de p38 activados e fez-se uma diálise contra tampão B + Na2V04 0,2mM para eliminar o NaCl. Ajustou-se a proteina dialisada com fosfato de potássio 1,1 por adição de uma solução de reserva 4,0 M e carregou-se numa coluna HIC (Rainin Hydropore) 1.0 x 10 cm previamente equilibrada em tampão D (glicerol a 10 %, β-glicerofosfato 20 mM, DTT 20mM) + K2HPO4 1,1 M. Eluiu-se a proteina com um gradiente linear de 20 volumes de coluna com tampão D + K2HP04 50 mM. A p38 duplamente fosforilada foi eluida como o pico principal e agregou-se para fazer uma diálise contra tampão B + Na2V04 0,2 mM. Armazenou-se a p38 activada a -70 °C. EXEMPLO 5
Ensaios de inibição de p38
A. Inibição da fosforilação do péptido receptor de EGF
Realizou-se este ensaio na presença de MgCl2 10 mM, β-glicerofosfato 25 mM, glicerol a 10 % e tampão HEPES 100 mM a pH 7,6. Para uma determinação típica da CI50, preparou-se uma solução de reserva contendo todos os componentes anteriores e a proteína p38 activada (5 nM) . A solução de reserva foi 55 distribuída por alíquotas em frascos. Introduziu-se um volume fixado de DMSO ou de inibidor em DMSO (a concentração final de DMSO na reacção foi de 5 %) em cada frasco, misturou-se e incubou-se durante 15 minutos à temperatura ambiente. Adicionou-se a cada frasco o péptido receptor de EGF, KRELVEPLTPSGEAPNQALLR, um receptor de fosforilo na reacção (1) de cinase catalisada por p38, até a uma concentração final de 200 μΜ. A reacção da cinase iniciou-se com ATP (100 μΜ) e incubaram-se os frascos a 30 °C. Passados 30 minutos, pararam-se as reacções com um volume igual de ácido trifluoroacético (TFA) a 10 %.
Quantificou-se o péptido fosforilado por análise por CLAR. A separação do péptido fosforilado do péptido não fosforilado foi feita numa coluna de fase inversa (Deltapak, 5 pm, C18 100D, Peça no. 011795) com um gradiente binário de água e acteonitrilo, contendo cada um TFA a 0,1 %. Determinou-se a CI50 (concentração de inibidor que provoca 50 % de inibição) fazendo um gráfico da percentagem (%) de actividade remanescente em função da concentração do inibidor. B. Inibição da actividade de ATPase
Este ensaio realiza-se na presença de MgCl2 10 mM, 25 mM β-glicerofosfato 25 mM, glicerol a 10 % e tampão de HEPES 100 mM a pH 7,6. Para a determinação de uma Ki típica, determina-se Km para ATP na actividade de ATPase da reacção de p38 activada na ausência de inibidor e na presença de duas concentrações do inibidor. Prepara-se uma solução de reserva contendo todos os componentes referidos antes e p38 activada (60 nM) . Dividiu-se a solução de reserva em alíquotas e verteram-se em frascos. Introduziu-se um volume fixado de DMSO ou de inibidor em DMSO (a concentração final de DMSO na 56 reacção foi de 2,5%) em cada frasco, misturou-se e incubou-se durante 15 minutos à temperatura ambiente. A reacção inicia-se adicionando várias concentrações de ATP e depois incubou-se a 30 °C. Passados 30 minutos, pararam-se as reacções com 50 μΐ de EDTA (concentração final de 0,1 M) , pH 8,0. O produto da actividade de ATPase de p38, ADP, é quantificado por análise por CLAR.
Faz-se a separação de ADP de ATP numa coluna de fase inversa (Supelcosil, LC-18, 3ym, peça no. 5-8985) utilizando um gradiente binário de dissolvente com a seguinte composição: Solvente A - tampão de fosfato 0,1 M contendo sulfato de hidrogénio e tetrabutilamónio 8 mM (Sigma Chemical Co., no. de catálogo T-7158), Solvente B - Solvente A com metanol a 30 %.
Determina-se Ki a partir dos dados da taxa em função das concentrações de inibidor e de ATP.
Os inibidores de p38 da presente invenção inibirão a actividade de ATPase de p38.
C. Inibição da produção de IL-1, FNT, IL-6 e IL-8 em PBMCs estimulados por LPS
Os inibidores foram diluídos em série em DMSO a partir de uma solução de reserva a 20 mM. Prepararam-se pelo menos 6 diluições em série. Depois prepararam-se 4x soluções de reserva de inibidor por meio da adição de 4 μΐ de uma diluição de inibidor até 1 ml de meio RPMI1640/soro bovino fetal a 10 %. As soluções de reserva com 4x inibidor continham inibidor em concentrações de 80 μΜ, 32 μΜ, 12,8 μΜ, 5,12 μΜ, 2,048 μΜ, 0,819 μΜ, 0,328 μΜ, 0,131 μΜ, 0,052 μΐ, 57 0,021 μΜ etc. As soluções de reserva com 4x inibidor foram pré-aquecidas a 37 °C até à sua utilização.
Separaram-se as células brancas de sangue humano fresco de outras células num Vacutainer CPT da Becton & Dickinson (contendo 4 ml de sangue e DPBS suficiente sem Mg2+/Ca2+ para encher o tubo) por centrifugação a 1500 x g durante 15 min. As células mononucleares de sangue periférico (CMSPs) , localizadas no topo do gradiente no Vacutainer, foram eliminadas e lavadas duas vezes com meio RPMI1640 /soro de bovino fetal a 10 %. Recolheram-se os CMSPs por centrifugação a 500 x g durante 10 min. O número total de células foi determinado utilizando uma câmara de células de Neubauer e ajustaram-se as células para uma concentração de 4.8 x 106 células/ml em meio de cultura de células (RPMI1640 complementado com soro bovino fetal a 10 %).
Alternativamente, utiliza-se directamente no ensaio sangue completo contendo um anticoagulante.
Colocou-se 100 μΐ da suspensão de células ou sangue completo em cada cavidade de uma placa de cultura de células de 96 cavidades. Adicionou-se então às células 4x solução de reserva de inibidor. Finalmente, adicionou-se 50 μΐ de uma solução de trabalho de lipopolisacárido (LPS) (16 ng/ml em meio de cultura de células) para se obter uma concentração final neste ensaio de 4 ng/ml de LPS. O volume total de veiculo no ensaio foi também ajustado para 200 μΐ por meio da adição de 50 μΐ de meio de cultura de células. Fez-se a incubação das células de CMSP ou do sangue completo durante a noite (durante 12-15 horas) a 37 °C/CC>2 a 5% em atmosfera húmida. 58
No dia seguinte, misturaram-se as células num frasco de agitação durante 3-5 minutos antes da centrifugação a 500 x g durante 5 minutos. Colheram-se os sobrenadantes da cultura de células e analisaram-se por ELISA quanto aos niveis de IL-lb (R & D Systems, kits Quantikine, #DBL50), FNT-α (BioSource, #KHC3012), IL-6 (Endogen, #EH2-1L6) e IL-8 (Endogen, #EH2-IL8) de acordo com as instruções do fabricante. Utilizaram-se os dados de ELISA para gerar as curvas de dose-resposta a partir das quais se derivaram os valores de CI5o.
Os resultados para o ensaio de cinase ("cinase"; subsecção A, anterior), IL-1 e FNT em CMSPs estimuladas por LPS ("célula") e IL-1, FNT e IL-β em sangue completo ("SC") para vários inibidores de p38 da presente invenção, estão ilustrados no quadro 7 que se segue:
Quadro 7.
Composto P.M. CI50 de CI50 da CI50 da CI50 de CI50 de CI50 de cinase célula IL- célula FNT IL-1 de FNT de SC IL-6 de (uM) 1 (uM) (uM) SC (uM) (uM) SC (uM) 17 402,28 0, 056 0, 021 0,14 0,42 0, 064 0,25 18 436,32 0, 002 0,02 0,05 0,118 0, 055 0,18 19 387,36 0, 027 0, 027 0,01 0,057 0,09 0, 075
Outros inibidores de p38 da presente invenção irão também inibir a fosforilação do péptido receptor de EGF e irão inibir a produção de IL-1, FNT e IL-6, assim como de IL-8, em CMSPs estimuladas por LPS ou em sangue completo. D. Inibição da produção de IL-6 e de IL-8 em CMSPs estimuladas por IL-1
Realizou-se este ensaio em CMSPs exactamente tal como antes, excepto no facto de se adicionar ao ensaio uma solução de trabalho de stock de IL-lb (2 ng/ml em meio de cultura de 59 células) em vez da solução de trabalho de stock de (LPS) . Colheram-se os sobrenadantes das culturas de células, tal como se descreveu antes e analisaram-se por ELISA quanto aos níveis de IL-6 (Endogen, #EH2-1L6) e IL-8 (Endogen, #EH2-IL8) de acordo com as instruções do fabricante. Utilizaram-se os dados de ELISA para gerar as curvas de dose-resposta a partir das quais se derivaram os valores de CI50. E. Inibição da prostaglandina-endoperóxido-sintase-2 (PGHS-2, ou COX-2) induzida por LPS. Indução em CMSPs
Isolaram-se células mononucleares de sangue periférico (CMSPs) de células brancas de sangue humano fresco por centrifugação num Vacutainer CPT (Becton & Dickinson). Semeiam-se 15 x 106 células num prato de cultura de tecidos de 6 cavidades contendo RPMI 1640 complementado com soro bovino fetal a 10 %, 50 U/ml de penicilina, 50 yg/ml de estreptomicina e L-glutamina 2 mM. Adicionam-se os compostos a concentrações finais de 0,2, 2,0 e 20 μΜ em DMSO. Adiciona-se então LPS numa concentração final de 4 ng/ml para induzir a expressão da enzima. 0 volume final de cultura é de 10 ml/cavidade.
Depois de uma incubação durante a noite a 37°C, em CO2 a 5 %, colhem-se as células por raspagem e em seguida centrifugam-se, elimina-se o sobrenadante e lavam-se as células duas vezes com SDTF (solução salina tamponada com fosfato de Dulbecco) (BioWhittaker). Faz-se a lise das células em gelo durante 10 min em 50μ1 de tampão de lise frio (Tris-HCl 20 mM, pH 7,2, NaCl 150 mM, Triton-X-100 a 1 %, ácido desoxicólico a 1 %, SDS a 0,1%, EDTA 1 mM, aprotinina a 2 % (Sigma), 10 pg/ml de pepstatina, 10 pg/ml de leupeptina, PMSF 2 mM, benzamidina 1 mM, DTT 1 mM) contendo 1 μΐ de Benzonase (ADNase da Merck). Determina-se a concentração de 60 proteína de cada amostra utilizando o ensaio de BCA (Pierce) e albumina de soro bovino como padrão. Depois ajusta-se a concentração de proteína de cada amostra para 1 mg/ml com tampão de lise frio. A 100 μΐ do produto da lise adiciona-se um volume igual de 2x tampão de carga de SDS PAGE e leva-se a amostra à ebulição durante 5 min. Fraccionam-se as proteínas por dimensão (30 pg/passagem) em géis de gradiente de 4-20 % de SDS PAGE (Novex) e em seguida transferem-se para uma membrana de nitrocelulose, por meios electroforéticos, durante 2 horas e 100 mA em tampão de transferência de Towbin (Tris 25 mM, glicine 192 mM) contendo metanol a 20 %. Depois da transferência, fez-se o pré-tratamento da membrana durante 1 hora à temperatura ambiente com tampão de bloqueio (leite anidro desnatado a 5 % em SDTF complementado com Tween-20 a 0,1 %) e lavou-se 3 vezes em SDTF/Tween-20 a 0,1%. Incubou-se a membrana durante a noite a 4 °C com uma diluição a 1:250 de anticorpo monoclonal anti-COX-2 (Transduction Laboratories) em tampão de bloqueio. Depois de 3 lavagens em SDTF/Tween-20 a 0,1 %, incubou-se a membrana com uma diluição a 1 : 1000 de anti-soro de ovelha conjugado com peroxidase de rábano com Ig de rato (Amersham) em tampão de bloqueio durante 1 h à temperatura ambiente. Depois lava-se a membrana novamente, 3 vezes, em SDTF/Tween-20 a 0,1 %. Utiliza-se um sistema de detecção ECL (Sistema do Substrato de CL-HRP SuperSignal™, Pierce) para determinar os níveis de expressão de COX-2.
Embora se tenha apresentado aqui antes um certo número de enquadramentos da presente invenção, é evidente que a construção básica dos requerentes pode ser alterada para originar outros enquadramentos que utilizam os processos da presente invenção.
Lisboa, 13 de Fevereiro de 2009 61

Claims (23)

  1. REIVINDICAÇÕES 1. Composto de fórmula: R ν'ζγ·γ*γ·N. 9’ U W Q2 (la) caracterizado pelo facto de Qi se seleccionar entre:
    1 och3
    1*0 (Γ^ν'^ΝΗ OH Cl
    2 Ci' och3 ,och3 Cl H,Cw ^CHs N Cl
    N^XJCHa Cl γ "ci f r
    3
    Qz selecciona-se entre
    5 F F CH3 F
    6
    ch3 f 7
    2-piridilo insubstituído ou fenilo insubstituído; r' seleccionar-se entre hidrogénio; alquilo (C1-C3) ; alcenilo ou alcinilo (C2-C3) ; fenilo ou fenilo substituído com 1 a 3 substituintes seleccionados, independentemente, entre halogéneo, metoxi, ciano, nitro, amino, hidroxilo, metilo ou etilo; ou um sistema de anel heterocíclico com 5-6 átomos no núcleo eventualmente substituído com 1 a 3 substituintes seleccionados independentemente entre halogéneo, metoxi, ciano, nitro, amimo, hidroxilo, metilo ou etilo; R3 seleccionar-se entre sistemas de anéis carbocíclicos ou heterocíclicos não aromáticos ou aromáticos com 5 a 8 elementos no núcleo; W seleccionar-se entre N(R2)S02 N(R2)2; N(R2) S02-N(R2) (R3) ; N (R2) C (0) -0R2; N (R2) C (0)-N (R2) 2; N (R2) C (0)-N (R2) (R3) ; N (R2) C (0) -R2; N (R2) 2; C(0)-R2; CH(0H)-R2; C(0)-N(R2)2; C(0)-OR2; ou alquilo (C1-C4) de cadeia linear ou ramificada eventualmente substituído com N(R')2, OR', C02R', C0N(R')2, R3 ou S02N (R2) 2; ou um sistema de anel carbocíclico ou heterocíclico com 5 a 6 elementos no núcleo eventualmente substituído com N(R')2, OR', C02R', C0N(R')2 ou S02N(R2)2; desde que W não seja um alquilo em C2 substituído em R3; R2 seleccionar-se entre hidrogénio; alquilo (C1-C3) ou alcenilo (C1-C3) ; cada um deles eventualmente substituído com -N (R ' ) 2, -OR', SR', -C (0) -N (R ' ) 2, -S (02)-N(R') 2, -C(0)-OR' ; 8 cada Y representar C, em que cada R e U ligados a Y se seleccionam, independentemente entre hidrogénio ou metilo; Z representar CH ou N; e V representar -C(0)NH2.
  2. 2. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de Qi se seleccionar entre 2-fluoro-6- trifluorometilfenilo, 2,β-difluorofenilo, 2,6-dicloro- fenilo, 2-cloro-4-hidroxifenilo, 2-cloro-4-aminofenilo, 2,6-dicloro-4-aminofenil, 2,6-dicloro-3-aminofenilo, 2,6- dimetil-4-hidroxifenilo, 2-metoxi-3,5-dicloro-4-piridilo, 2-cloro-4,5-metilenodioxi-fenilo ou 2-cloro-4-(Ν-2-morfo-1ino-acetamido)fenilo.
  3. 3. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de Q2 se seleccionar entre fenilo, 2- isopropilfenilo, 3,4-dimetilfenilo, 2-etilfenilo, 3- fluorofenilo, 2-metilfenilo, 3-cloro-4-fluorofenilo, 3-clorofenilo, 2-carbometoxifenilo, 2-carboxifenilo, 2- metil-4-clorofenilo, 2-bromofenilo, 2-piridilo, 2- metileno-hidroxifenilo, 4-fluorofenilo, 2-metil-4-fluoro-fenilo, 2-cloro-4-fluorofenilo, 2,4-difluoro-fenilo, 2-hidroxi-4-fluorofenilo, 2-metileno-hidroxi-4-fluorofenilo, ou 3-cloro-2-metileno-hidroxi.
  4. 4. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de ser representado por
    F 9 em que X se selecciona entre H, ou
    NH 2 t
    O o o ^ // ^ S ... NH ou \ o p * //.s. N I
  5. 5. Composto de acordo com a reivindicação 1, pelo facto do composto ser representado por caracterizado
    F em que X se selecciona entre, NH2 ou N (0113)2· caracterizado
  6. 6. Composto de acordo com a reivindicação 1, pelo facto de ser representado por
    10 e por X se seleccionar entre, OH, NH2 ou N(CH3)2·
  7. 7. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de o composto ser representado por
    e em que X se selecciona entre, OH, NH2 ou N(CH3)2;
  8. 8. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de o composto ser representado por
    e X se seleccionar entre, OH, NH2 ou N(CH3)2, ou O 0 r t o
    o p it
    0« Y o o V-5Í N 11
  9. 9. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de o referido composto se seleccionar entre um qualquer de
  10. 10. Composição farmacêutica caracterizada pelo facto de compreender um composto de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 a 9 e um veiculo aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.
  11. 11. Utilização de um composto de acordo com uma qualquer das reivindicações 1-10 caracterizada por se destinar à preparação de uma composição farmacêutica para tratar ou prevenir doenças inflamatórias, doenças auto-imunes, distúrbios destrutivos dos ossos, distúrbios proliferativos, doenças infecciosas, doenças virais, doenças neuro-degenerativas, alergias, reperfusão/isquémia em acidentes vasculares ou isquémia do miocárdio, isquémia renal, ataques cardíacos, distúrbios angiogénicos, hipóxia de órgãos, hiperplasia vascular, hipertrofia cardíaca, agregação de plaquetas induzida por trombina ou estados 12 clínicos associados com prostaglandina-endoperóxido-sintase-2.
  12. 12. Composto de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 10, caracterizado pelo facto de se utilizar no tratamento ou na prevenção de doenças inflamatórias, doenças auto-imunes, distúrbios destrutivos dos ossos, distúrbios proliferativos, doenças infecciosas, doenças virais, doenças neurodegenerativas, alergias, reper-fusão/isquémia em acidentes vasculares ou isquémia do miocárdio, isquémia renal, ataques de coração, distúrbios angiogénicos, hipóxia de órgãos, hiperplasia vascular, hipertrofia cardíaca, agregação de plaquetas induzida por trombina ou estados clínicos associadas com a prostaglandina-endoperóxido-sintase-2.
  13. 13. Utilização de acordo com a reivindicação 11 ou o composto de acordo com a reivindicação 12, caracterizados pelo facto de a doença inflamatória se seleccionar entre pancreatite aguda, pancreatite crónica, asma, alergias ou síndroma de insuficiência respiratória do adulto.
  14. 14. Utilização de acordo com a reivindicação 11 ou o composto de acordo com a reivindicação 12, caracterizados pelo facto de a doença auto-imune se seleccionar entre glomerulonefrite, artrite reumatóide, lúpus eritematoso sistémico, escleroderma, tiroidite crónica, doença de Graves, gastrite auto-imune, diabetes, anemia hemolítica auto-imune, neutropénia auto-imune, trombocitopénia, dermatites atópicas, hepatite activa crónica, miastenia gravis, esclerose múltipla, doença inflamatória do intestino, colite ulcerosa, doença de Crohn, psoríase ou doença do enxerto vs. hospedeiro. 13
  15. 15. Utilização de acordo com a reivindicação 11 ou o composto de acordo com a reivindicação 12, caracterizados pelo facto de a doença destrutiva dos ossos se seleccionar entre osteoartrite, osteoporose ou distúrbio dos ossos relacionado com mieloma múltiplo.
  16. 16. Utilização de acordo com a reivindicação 11 ou o composto de acordo com a reivindicação 12, caracterizados pelo facto de a doença proliferativa se seleccionar entre leucemia mielogénica aguda, leucemia mielogénica crónica, melanoma metastásico, sarcoma de Kaposi ou mieloma múltiplo.
  17. 17. Utilização de acordo com a reivindicação 11 ou o composto de acordo com a reivindicação 12, caracterizados pelo facto de a doença infecciosa se seleccionar entre sépsia, choque séptico ou Shigelose,
  18. 18. Utilização de acordo com a reivindicação 11 ou o composto de acordo com a reivindicação 12, caracterizados pelo facto de a doença virai se seleccionar entre infecção por hepatite aguda, infecção por VIH ou retinite por CMV (citomegalovírus).
  19. 19. Utilização de acordo com a reivindicação 11 ou o composto de acordo com a reivindicação 12, caracterizados pelo facto de a doença neurodegenerativa se seleccionar entre doença de Alzheimer, doença de Parkinson, isquémia cerebral ou doença neurodegenerativa causada por feridas traumáticas.
  20. 20. Utilização de acordo com a reivindicação 11 ou o composto de acordo com a reivindicação 12, caracterizados pelo facto de se destinarem ao tratamento ou à prevenção de 14 isquémia/reperfusão em acidentes vasculares ou isquémia do miocárdio, isquémia renal, ataques do coração, hipóxia de órgãos ou agregação de plaquetas induzida por trombina.
  21. 21. Utilização de acordo com a reivindicação 11 ou o composto de acordo com a reivindicação 12, caracterizados pelo facto de o estado clinico associado com a prostaglandina-endoperóxido-sintase-2 se seleccionar entre edema, febre, analgesia ou dor.
  22. 22. Utilização ou o composto de acordo com a reivindicação 21, caracterizados pelo facto de a referida dor se seleccionar entre dor neuromuscular, dor de cabeça, dor do cancro, dor de dentes ou dor artrítica.
  23. 23. Utilização de acordo com a reivindicação 11 ou o composto de acordo com a reivindicação 12, caracterizados pelo facto de o distúrbio angiogénico se seleccionar entre tumores sólidos, neovascularização ocular ou hemangiomas infantis. Lisboa, 13 de Fevereiro de 2009 15
PT99920427T 1998-05-11 1999-05-11 Inibidores heterocíclicos de p38 PT1077943E (pt)

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WO (1) WO1999058502A1 (pt)

Families Citing this family (90)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6608060B1 (en) 1996-12-18 2003-08-19 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of p38
JP2002504909A (ja) 1997-06-13 2002-02-12 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション 新規な置換ピラゾールおよびピラゾリン化合物
WO1999012907A1 (fr) 1997-09-10 1999-03-18 Dainippon Ink And Chemicals, Inc. Derives de 2,6-dichloro-4-pyridinemethanol et produits chimiques utilises en agriculture
US6469018B1 (en) 1999-01-08 2002-10-22 Smithkline Beecham Corporation Compounds
US8124630B2 (en) 1999-01-13 2012-02-28 Bayer Healthcare Llc ω-carboxyaryl substituted diphenyl ureas as raf kinase inhibitors
EP1158985B1 (en) 1999-01-13 2011-12-28 Bayer HealthCare LLC OMEGA-CARBOXY ARYL SUBSTITUTED DIPHENYL UREAS AS p38 KINASE INHIBITORS
CN1348370A (zh) 1999-04-15 2002-05-08 布里斯托尔-迈尔斯斯奎布公司 环状蛋白酪氨酸激酶抑制剂
US7125875B2 (en) 1999-04-15 2006-10-24 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic protein tyrosine kinase inhibitors
AU5316900A (en) * 1999-06-03 2000-12-28 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of c-jun n-terminal kinases (jnk)
DE60015599T2 (de) 1999-11-23 2005-11-03 Smithkline Beecham Corp. 3,4-DIHYDRO-(1H)CHINAZOLIN-2-ON-VERBINDUNGEN ALS CSBP/p38-KINASE-INHIBITOREN
CA2401190A1 (en) * 2000-02-23 2001-08-30 Iconix Pharmaceuticals, Inc. Pyridine-amidines as modulators of p38 map kinase
TWI282334B (en) * 2000-03-22 2007-06-11 22 2001 00 00 0 A61p 17/00 200601 a i vhtw a61p 29/00 200601 a i vhtw a61p 35/00 200601 a i vhtw a61p 37/00 200601 a i vhtw
JP4993838B2 (ja) * 2000-08-11 2012-08-08 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド Ｐ３８のインヒビターとしてのピリジン誘導体
US6645990B2 (en) 2000-08-15 2003-11-11 Amgen Inc. Thiazolyl urea compounds and methods of uses
MXPA03010269A (es) 2001-05-11 2004-05-05 Vertex Pharma Derivados de 2,5-disubstituida piridina, pirimidina, piridazina y 1,2,4-triazina para usarse como inhibidores de p38.
EP1414455B1 (en) 2001-06-11 2008-11-26 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Isoquinoline inhibitors of p38
US20030139435A1 (en) * 2001-06-26 2003-07-24 Gulzar Ahmed N-heterocyclic inhibitors of TNF-alpha expression
ES2425739T3 (es) 2002-02-11 2013-10-17 Bayer Healthcare Llc Sorafenib-tosilato para el tratamiento de enfermedades caracterizadas por angiogénesis anormal
GB0214268D0 (en) * 2002-06-20 2002-07-31 Celltech R&D Ltd Chemical compounds
EP1534282B1 (en) 2002-07-09 2006-12-27 Boehringer Ingelheim Pharma GmbH & Co.KG Pharmaceutical compositions of anticholinergics and p38 kinase inhibitors in the treatment of respiratory diseases
MXPA05008450A (es) 2003-02-10 2005-10-18 Vertex Pharma Procesos para la preparacion de n-heteroaril-n-aril-aminas mediante reaccion de un ester de acido n-aril-carbamico con un halo-heteroarilo y procesos analogos.
PL1636585T3 (pl) 2003-05-20 2008-10-31 Bayer Healthcare Llc Diarylowe pochodne mocznika inhibowane kinazą
KR101139557B1 (ko) 2003-07-23 2012-04-30 바이엘 파마슈티칼스 코포레이션 질환 및 상태의 치료 및 예방을 위한 플루오로 치환오메가-카르복시아릴 디페닐 우레아
AU2005233632A1 (en) 2004-04-13 2005-10-27 Icagen, Inc. Polycyclic pyridines as potassium ion channel modulators
KR100575344B1 (ko) * 2004-07-14 2006-05-03 주식회사 이큐스팜 Ｃ형 간염 예방 및 치료용 약학적 조성물
US20060035893A1 (en) 2004-08-07 2006-02-16 Boehringer Ingelheim International Gmbh Pharmaceutical compositions for treatment of respiratory and gastrointestinal disorders
WO2006021848A1 (en) * 2004-08-27 2006-03-02 Ranbaxy Laboratories Limited Anti-inflammatory agents
US8017395B2 (en) 2004-12-17 2011-09-13 Lifescan, Inc. Seeding cells on porous supports
PE20060777A1 (es) 2004-12-24 2006-10-06 Boehringer Ingelheim Int Derivados de indolinona para el tratamiento o la prevencion de enfermedades fibroticas
AU2006202209B2 (en) * 2005-05-27 2011-04-14 Lifescan, Inc. Amniotic fluid derived cells
BRPI0502016B8 (pt) * 2005-06-03 2021-05-25 Univ Federal Do Rio De Janeiro Ufrj composto ureídicos, composições farmacêuticas contendo os mesmos e seu uso no tratamento de doenças inflamatórias
EP1888123B1 (en) * 2005-06-08 2013-01-09 Janssen Biotech, Inc. A cellular therapy for ocular degeneration
US20070122448A1 (en) * 2005-11-28 2007-05-31 Alireza Rezania Compositions and methods to create a vascularized environment for cellular transplantation
ES2725601T3 (es) 2006-04-28 2019-09-25 Lifescan Inc Diferenciación de células madre embriónicas humanas
US8741643B2 (en) * 2006-04-28 2014-06-03 Lifescan, Inc. Differentiation of pluripotent stem cells to definitive endoderm lineage
CA2676044C (en) * 2007-01-30 2019-10-22 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Early mesoderm cells, a stable population of mesendoderm cells that has utility for generation of endoderm and mesoderm lineages and multipotent migratory cells (mmc)
CA2681420A1 (en) * 2007-03-20 2008-09-25 Cadila Pharmaceuticals Limited P38 inhibitors
EP1992344A1 (en) 2007-05-18 2008-11-19 Institut Curie P38 alpha as a therapeutic target in pathologies linked to FGFR3 mutation
US9080145B2 (en) 2007-07-01 2015-07-14 Lifescan Corporation Single pluripotent stem cell culture
US20100255580A1 (en) 2007-07-18 2010-10-07 Lifesccan, Inc. Differentiation of Human Embryonic Stem Cells
US9096832B2 (en) 2007-07-31 2015-08-04 Lifescan, Inc. Differentiation of human embryonic stem cells
CA2706560C (en) * 2007-11-27 2017-02-28 Lifescan, Inc. Differentiation of human embryonic stem cells to pancreatic cells
BR122017025207B1 (pt) 2008-02-21 2021-03-16 Centocor Ortho Biotech Inc superfície que faz parte de um recipiente ou matriz destinada para uso em uma cultura de células ou análises, desprovida de uma camada de células alimentadoras e desprovida de uma camada adsorvente
US8623648B2 (en) 2008-04-24 2014-01-07 Janssen Biotech, Inc. Treatment of pluripotent cells
PL2310492T3 (pl) 2008-06-30 2015-12-31 Janssen Biotech Inc Różnocowanie pluripotencjalnych komórek macierzystych
AU2009274517B2 (en) 2008-07-25 2015-03-26 The University Of Georgia Research Foundation, Inc. Compositions for Mesoderm derived ISL1+ Multipotent cells (IMPs), epicardial progenitor cells (EPCs) and multipotent CXCR4+CD56+ cells (C56Cs) and methods of use
US20110305672A1 (en) 2008-07-25 2011-12-15 University Of Georgia Research Foundation, Inc. COMPOSITIONS FOR MESODERM DERIVED ISL1+ MULTIPOTENT CELLS (IMPs), EPICARDIAL PROGENITOR CELLS (EPCs) AND MULTIPOTENT CD56C CELLS (C56Cs) AND METHODS OF PRODUCING AND USING SAME
US20100028307A1 (en) * 2008-07-31 2010-02-04 O'neil John J Pluripotent stem cell differentiation
WO2010038428A1 (ja) * 2008-09-30 2010-04-08 武田薬品工業株式会社 タキサン系抗がん剤の置き換え薬
KR101712085B1 (ko) 2008-10-31 2017-03-03 얀센 바이오테크 인코포레이티드 인간 배아 줄기 세포의 췌장 내분비 계통으로의 분화
JP2012507289A (ja) 2008-10-31 2012-03-29 ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド ヒト胚性幹細胞の膵内分泌系への分化
WO2010059775A1 (en) 2008-11-20 2010-05-27 Centocor Ortho Biotech Inc. Pluripotent stem cell culture on micro-carriers
AU2009316583B2 (en) * 2008-11-20 2016-04-21 Janssen Biotech, Inc. Methods and compositions for cell attachment and cultivation on planar substrates
US20110306606A1 (en) * 2008-12-10 2011-12-15 Jei Man Ryu Novel 2,6-substituted-3-nitropyridine derivative, method for preparing same, and pharmaceutical composition including same
BRPI0922572A2 (pt) 2008-12-17 2019-09-24 Scripps Research Inst método para cultivar células pluripotentes, cultura de células de mamífero pluripotentes, meio de cultura de célula, célula animal pluripotente isolada, e, método para aumentar a pluripotência de uma célula de mamífero.
EP2396302A2 (en) * 2009-02-13 2011-12-21 Vertex Pharmceuticals Incorporated Processes for producing phenyl-6-(1-(phenyl)ureido)nicotinamides)
GB0908317D0 (en) * 2009-05-14 2009-06-24 Argenta Discovery Ltd Pharmaceutical compounds and compositions
ES2693088T3 (es) 2009-07-20 2018-12-07 Janssen Biotech, Inc. Diferenciación de células madre embriónicas humanas
GB2485113B (en) * 2009-07-20 2016-12-28 Janssen Biotech Inc Differentiation of human embryonic stem cells into cells of the pancreatic endoderm lineage
GB2484873B (en) 2009-07-20 2014-04-30 Janssen Biotech Inc Differentiation of pancreatic endoderm cells.
WO2011059725A2 (en) 2009-10-29 2011-05-19 Centocor Ortho Biotech Inc. Pluripotent stem cells
US9150833B2 (en) 2009-12-23 2015-10-06 Janssen Biotech, Inc. Differentiation of human embryonic stem cells
WO2011079018A2 (en) * 2009-12-23 2011-06-30 Centocor Ortho Biotech Inc. Differentiation of human embryonic stem cells
CN107189979B (zh) 2010-03-01 2021-05-04 詹森生物科技公司 纯化衍生自多能干细胞的细胞的方法
ES2728900T3 (es) 2010-05-12 2019-10-29 Janssen Biotech Inc Diferenciación de células madre embrionarias humanas
BR112013003160A2 (pt) 2010-08-12 2016-06-28 Janssen Biotech Inc tratamento de diabetes com células precursoras endócrinas pancráticas
RU2620938C2 (ru) 2010-08-31 2017-05-30 Янссен Байотек, Инк. Дифференцирование эмбриональных стволовых клеток человека
RU2673946C1 (ru) 2010-08-31 2018-12-03 Янссен Байотек, Инк. Дифференцирование плюрипотентных стволовых клеток
BR112013004514A2 (pt) 2010-08-31 2016-06-07 Janssen Biotech Inc diferenciação das células-tronco embrionárias humanas
EP2646543A4 (en) 2010-12-02 2014-09-03 Technion Res & Dev Foundation METHOD FOR GENERATING CORNEAL CELLS AND CELL POPULATIONS COMPRISING THE SAME
US9404087B2 (en) 2010-12-15 2016-08-02 Kadimastem Ltd. Insulin producing cells derived from pluripotent stem cells
SG10201608914WA (en) 2011-12-22 2016-12-29 Janssen Biotech Inc Differentiation of human embryonic stem cells into single hormonal insulin positive cells
CN104160018A (zh) 2012-03-07 2014-11-19 詹森生物科技公司 用于扩增和维持多能干细胞的成分确定的培养基
EP2843049B1 (en) 2012-04-27 2018-04-11 Keio University Neuronal differentiation promoter
EP3450543A1 (en) 2012-06-08 2019-03-06 Janssen Biotech, Inc. Differentiation of human embryonic stem cells into pancreatic endodrine cells
US10370644B2 (en) 2012-12-31 2019-08-06 Janssen Biotech, Inc. Method for making human pluripotent suspension cultures and cells derived therefrom
KR20150103203A (ko) 2012-12-31 2015-09-09 얀센 바이오테크 인코포레이티드 췌장 내분비 세포 내로의 분화를 위한 인간 만능 세포의 현탁 및 클러스터링
AU2013368221B2 (en) 2012-12-31 2018-11-01 Janssen Biotech, Inc. Culturing of human embryonic stem cells at the air-liquid interface for differentiation into pancreatic endocrine cells
EP4219683A1 (en) 2012-12-31 2023-08-02 Janssen Biotech, Inc. Differentiation of human embryonic stem cells into pancreatic endocrine cells using hb9 regulators
DK3677271T3 (da) 2013-03-13 2023-05-22 Univ Miami Fremgangsmåde til isolering og oprensning af microvesikler fra cellekultur-supernatanter og biologiske fluider
US10006006B2 (en) 2014-05-16 2018-06-26 Janssen Biotech, Inc. Use of small molecules to enhance MAFA expression in pancreatic endocrine cells
US20180325947A1 (en) 2015-10-27 2018-11-15 Children's Hospital Medical Center Use of mapk inhibitors to reduce loss of hematopoietic stem cells during ex vivo culture and/or genetic manipulation
US11679133B2 (en) 2015-11-30 2023-06-20 Kadimastem Ltd. Methods for differentiating and purifying pancreatic endocrine cells
MA45479A (fr) 2016-04-14 2019-02-20 Janssen Biotech Inc Différenciation de cellules souches pluripotentes en cellules de l'endoderme de l'intestin moyen
ES2927715T3 (es) 2017-10-05 2022-11-10 Fulcrum Therapeutics Inc Inhibidores de la quinasa p38 reducen la expresión de dux4 y de los genes que le siguen para el tratamiento de la FSHD
US10342786B2 (en) 2017-10-05 2019-07-09 Fulcrum Therapeutics, Inc. P38 kinase inhibitors reduce DUX4 and downstream gene expression for the treatment of FSHD
PE20211305A1 (es) * 2018-01-05 2021-07-20 Cybrexa 1 Inc Compuestos, composiciones y metodos para tratar enfermedades que involucren tejidos con enfermedades acidas o hipoxicas
US10889548B2 (en) 2018-03-26 2021-01-12 Clear Creek Bio, Inc. Compositions and methods for inhibiting dihydroorotate dehydrogenase
MX2023001927A (es) 2020-08-21 2023-03-09 Univ Miami Composiciones y metodos de tratamiento usando microvesiculas de celulas madre mesenquimaticas derivadas de medula osea.
WO2023205158A1 (en) 2022-04-19 2023-10-26 University Of Miami Compositions comprising microvesicles for use in the prevention and treatment of graft versus host disease

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4966622A (en) * 1988-04-12 1990-10-30 Ciba-Geigy Corporation N-phenyl-N-pyrimidin-2-ylureas
US4973690A (en) * 1988-04-12 1990-11-27 Ciba-Geigy Corporation Novel ureas
US5559137A (en) 1994-05-16 1996-09-24 Smithkline Beecham Corp. Compounds
HUP0102677A3 (en) 1995-01-12 2002-09-30 Smithkline Beecham Corp Trisubstituted imidazole derivatives, process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
US6096748A (en) * 1996-03-13 2000-08-01 Smithkline Beecham Corporation Pyrimidine compounds useful in treating cytokine mediated diseases
US6147080A (en) * 1996-12-18 2000-11-14 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of p38
US6242569B1 (en) * 1997-02-05 2001-06-05 Tularik, Inc. Regulators of apoptosis
AR037061A1 (es) * 1997-05-22 2004-10-20 Searle & Co Compuesto derivado de pirazol sustituido, procesos para preparar dicho compuesto, composicion farmaceutica que lo contiene y su uso en la preparacion de medicamentos
EP1414455B1 (en) * 2001-06-11 2008-11-26 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Isoquinoline inhibitors of p38

Also Published As

Publication number Publication date
CA2331460A1 (en) 1999-11-18
NZ508653A (en) 2003-07-25
EP1077943A1 (en) 2001-02-28
JP2002514625A (ja) 2002-05-21
ATE417828T1 (de) 2009-01-15
HUP0105174A2 (hu) 2002-04-29
CZ300702B6 (cs) 2009-07-22
PL344046A1 (en) 2001-09-24
US20020019393A1 (en) 2002-02-14
IL139479A0 (en) 2001-11-25
NO20005673D0 (no) 2000-11-10
DK1077943T3 (da) 2009-03-16
AU3792399A (en) 1999-11-29
EP2062879A1 (en) 2009-05-27
PL198352B1 (pl) 2008-06-30
SK16882000A3 (sk) 2001-05-10
SK286689B6 (sk) 2009-03-05
US20070060572A1 (en) 2007-03-15
IL139479A (en) 2009-11-18
DE69940115D1 (de) 2009-01-29
HUP0105174A3 (en) 2002-06-28
GEP20032954B (en) 2003-04-25
AU764047B2 (en) 2003-08-07
JP4704560B2 (ja) 2011-06-15
KR20010043509A (ko) 2001-05-25
UA74325C2 (uk) 2005-12-15
US6632945B2 (en) 2003-10-14
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AP2000001996A0 (en) 2000-12-31

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