JP2022524217A - 植物抽出組成物を作製するための方法 - Google Patents

植物抽出組成物を作製するための方法 Download PDF

Info

Publication number
JP2022524217A
JP2022524217A JP2021558658A JP2021558658A JP2022524217A JP 2022524217 A JP2022524217 A JP 2022524217A JP 2021558658 A JP2021558658 A JP 2021558658A JP 2021558658 A JP2021558658 A JP 2021558658A JP 2022524217 A JP2022524217 A JP 2022524217A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
composition
acid
volume
quinic acid
oil
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
JP2021558658A
Other languages
English (en)
Other versions
JP7391993B2 (ja
Inventor
デーリング、スカイ
エス． ガスパード、ダン
ティー． モーテンソン、クリストファー
ティー． ザース、アダム
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Cargill Inc
Original Assignee
Cargill Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Cargill Inc filed Critical Cargill Inc
Publication of JP2022524217A publication Critical patent/JP2022524217A/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP7391993B2 publication Critical patent/JP7391993B2/ja
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/28—Asteraceae or Compositae (Aster or Sunflower family), e.g. chamomile, feverfew, yarrow or echinacea
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
    • A23L2/52—Adding ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
    • A61K31/216—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acids having aromatic rings, e.g. benactizyne, clofibrate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/10—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features
    • B01D15/12—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features relating to the preparation of the feed
    • B01D15/125—Pre-filtration
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/10—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features
    • B01D15/16—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features relating to the conditioning of the fluid carrier
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/10—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features
    • B01D15/16—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features relating to the conditioning of the fluid carrier
    • B01D15/161—Temperature conditioning
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
    • B01D15/36—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism involving ionic interaction
    • B01D15/361—Ion-exchange
    • B01D15/363—Anion-exchange
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01D—SEPARATION
    • B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
    • B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
    • B01D15/42—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the development mode, e.g. by displacement or by elution
    • B01D15/424—Elution mode
    • B01D15/426—Specific type of solvent
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C67/00—Preparation of carboxylic acid esters
    • C07C67/48—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C67/00—Preparation of carboxylic acid esters
    • C07C67/48—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
    • C07C67/56—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives by solid-liquid treatment; by chemisorption
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C67/00—Preparation of carboxylic acid esters
    • C07C67/48—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
    • C07C67/58—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives by liquid-liquid treatment
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/31—Extraction of the material involving untreated material, e.g. fruit juice or sap obtained from fresh plants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
    • A61K2236/331—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using water, e.g. cold water, infusion, tea, steam distillation, decoction
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
    • A61K2236/333—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using mixed solvents, e.g. 70% EtOH
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/37—Extraction at elevated pressure or temperature, e.g. pressurized solvent extraction [PSE], supercritical carbon dioxide extraction or subcritical water extraction
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/39—Complex extraction schemes, e.g. fractionation or repeated extraction steps
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
    • A61K2236/55—Liquid-liquid separation; Phase separation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/12—Systems containing only non-condensed rings with a six-membered ring
    • C07C2601/14—The ring being saturated

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
  • Cosmetics (AREA)

Abstract

【解決手段】 植物源からのカフェオイルキナ組成物を作製するための方法が、開示される。方法は、イオン交換固定相上でバイオマスの抽出物をクロマトグラフィー処理することと、カフェオイルキナ組成物を含む溶出液を得ることと、を含み得る。バイオマスは、例えば、ステビア又はイエルバマテであり得る。カフェオイルキナ組成物は、モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及び前述のものの塩のうちの１つ以上を含む。【選択図】図４Ｃ

Description

（関連出願の相互参照）
本出願は、２０１９年４月６日に出願され「Ｓｔｅｖｉａ Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ」と題された米国特許出願第６２／８３０，４４８号、２０１９年４月１０日に出願され「Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｆｏｒ Ｍａｋｉｎｇ Ｂｏｔａｎｉｃａｌ Ｅｘｔｒａｃｔ Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ」と題された米国特許出願第６２／８３２，２７３号、２０１９年４月４日に出願され「Ｓｔｅｖｉｏｌ Ｇｌｙｃｏｓｉｄｅ Ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ Ｅｎｈａｎｃｅｒｓ」と題され、米国特許出願公開第２０１９／０２２３４８１号として２０１９年７月２５日に公開された、米国特許出願第１６／３７３，２０６号、２０１８年１０月５日に出願され「Ｓｔｅｖｉｏｌ Ｇｌｙｃｏｓｉｄｅ Ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ Ｅｎｈａｎｃｅｒｓ」と題された国際出願ＰＣＴ／ＵＳ２０１８／０５４６９１号、２０１７年１０月６日に出願され「Ｓｔｅｖｉｏｌ Ｇｌｙｃｏｓｉｄｅ Ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ Ｅｎｈａｎｃｅｒｓ」と題された米国特許仮出願第６２／５６９，２７９号、２０１８年５月２５日に出願され「Ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ Ｍａｋｉｎｇ Ｙｅｒｂａ Ｍａｔｅ Ｅｘｔｒａｃｔ Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ」と題された米国特許仮出願第６２／６７６，７２２号、２０１８年１０月５日に出願され「Ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ Ｍａｋｉｎｇ Ｙｅｒｂａ Ｍａｔｅ Ｅｘｔｒａｃｔ Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ」と題された国際出願ＰＣＴ／ＵＳ２０１８／０５４６８８号、２０１９年４月４日に出願され「Ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ Ｍａｋｉｎｇ Ｙｅｒｂａ Ｍａｔｅ Ｅｘｔｒａｃｔ Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ」と題され、米国特許出願公開第２０１９／０２３１８３４号として２０１９年８月１日に公開された、米国特許出願第１６／３７４，８９４号の利益を主張する。これらの出願の各々の全体は、参照により本明細書に組み込まれる。
モノカフェオイルキナ酸（例えば、クロロゲン酸、ネオクロロゲン酸、及びクリプトクロロゲン酸）、及びジカフェオイルキナ酸（例えば、１，３－ジカフェオイルキナ酸、１，４－ジカフェオイルキナ酸、１，５－ジカフェオイルキナ酸、３，４－ジカフェオイルキナ酸、３，５－ジカフェオイルキナ酸、及び４，５－ジカフェオイルキナ酸）、並びにそれらの塩を含む組成物は、様々な植物源から調製され得る。モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩を含む組成物は、例えば有益な感覚特性を含む有益な特性を提供するために食用材料に組み込まれ得る。しかしながら、モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩を含む組成物の植物調製物は、これらの植物調製物の使用を限定する異味又は他の望ましくない特性を有する化合物を含み得る。
モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸及びそれらの塩を含む組成物の有益な特性のため、例えば、イエルバマテ（yerba mate）、ステビア、及びグローブアーティチョークから植物バイオマスなどの植物バイオマスからこれらの化合物を抽出するための方法における関心が、存在する。これらの化合物は、以下のモノカフェオイルキナ酸（例えば、クロロゲン酸、ネオクロロゲン酸、及びクリプトクロロゲン酸）、及びジカフェオイルキナ酸（例えば、１，３－ジカフェオイルキナ酸、１，４－ジカフェオイルキナ酸、１，５－ジカフェオイルキナ酸、３，４－ジカフェオイルキナ酸、３，５－ジカフェオイルキナ酸、及び４，５－ジカフェオイルキナ酸）、並びにそれらの塩を含むが、これらに限定されない。
Figure 2022524217000002
Figure 2022524217000003
Figure 2022524217000004
Figure 2022524217000005
化合物は、各々、高純度で単離され得る（例えば、５０％超、６０％超、７０％超、８０％超、９０％超、及び９９％超、又は約５０％～約９９％、約６０％～約９０％、約８０％～約９５％、若しくは約７０％～約９９％以上）。更に、本明細書に記載される方法によって得られたモノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物が、それらが単離される植物バイオマスに対して実質的に同じ重量量及び／又は実質的に同じ重量比のモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩を含み得るように、本明細書に記載される方法は、目的の化合物を単離するための能力を提供する。
図面は、一般に、限定の手段によらないが、例の手段によって、本明細書で考察される様々な実施形態を例示する。
図１は、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を作製するための方法の例のフロー図である。
図２は、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を作製するための方法の別の例のフロー図である。
図３は、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を作製するための方法の例のフロー図である。
図４Ａは、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を作製するための方法の別の例のフロー図である。
図４Ｂは、イエルバマテバイオマスから、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を作製するための方法の別の例のフロー図である。
図４Ｃは、イエルバマテバイオマスから、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を作製するための方法の別の例のフロー図である。
図５は、初期イエルバマテ抽出物のＵＨＰＬＣ－ＵＶクロマトグラムであり、濃縮物は、イオン交換クロマトグラフィー固定相上で調整された第２の初期抽出物をクロマトグラフィー処理することに続いて、かつ乾燥後に、本明細書に記載されるステップ（ａ）～（ｈ）に記載されるプロセスに続いて得られ、「ＤＣＱＡ」は、「ジカフェオイルキナ酸」を指す。 図６は、初期イエルバマテ抽出物のＵＨＰＬＣ－ＵＶクロマトグラムであり、濃縮物は、イオン交換クロマトグラフィー固定相上で調整された第２の初期抽出物をクロマトグラフィー処理することに続いて、かつ乾燥後に、本明細書に記載されるステップ（ａ）～（ｈ）に記載されるプロセスに続いて得られ、「ＤＣＱＡ」は、「ジカフェオイルキナ酸」を指す。 図７は、初期イエルバマテ抽出物のＵＨＰＬＣ－ＵＶクロマトグラムであり、濃縮物は、イオン交換クロマトグラフィー固定相上で調整された第２の初期抽出物をクロマトグラフィー処理することに続いて、かつ乾燥後に、本明細書に記載されるステップ（ａ）～（ｈ）に記載されるプロセスに続いて得られ、「ＤＣＱＡ」は、「ジカフェオイルキナ酸」を指す。
図８は、それぞれ、図５～図７に示されるＵＨＰＬＣ－ＵＶクロマトグラフについてのピーク名、保持時間、及び相対面積パーセントデータを表形式で示す表である。図８は、初期イエルバマテ抽出物についてのデータの表である。標的化合物の合計は、２１０ｎｍでのＵＶ吸光度で４９．７％の純度である。図９は、イオン交換クロマトグラフィー固定相上で調整された第２の初期抽出物をクロマトグラフィー処理することに続いて得られた濃縮物についてのデータの表である。標的化合物の合計は、２１０ｎｍでのＵＶ吸光度で８７．１％の純度である。図１０は、本明細書に記載されるステップ（ａ）～（ｈ）に記載されるプロセスに続く乾燥後のデータであり、「ＤＣＱＡ」は、「ジカフェオイルキナ酸」を指す。標的化合物の合計は、２１０ｎｍでのＵＶ吸光度で９３．２％の純度である。 図９は、それぞれ、図５～図７に示されるＵＨＰＬＣ－ＵＶクロマトグラフについてのピーク名、保持時間、及び相対面積パーセントデータを表形式で示す表である。図８は、初期イエルバマテ抽出物についてのデータの表である。標的化合物の合計は、２１０ｎｍでのＵＶ吸光度で４９．７％の純度である。図９は、イオン交換クロマトグラフィー固定相上で調整された第２の初期抽出物をクロマトグラフィー処理することに続いて得られた濃縮物についてのデータの表である。標的化合物の合計は、２１０ｎｍでのＵＶ吸光度で８７．１％の純度である。図１０は、本明細書に記載されるステップ（ａ）～（ｈ）に記載されるプロセスに続く乾燥後のデータであり、「ＤＣＱＡ」は、「ジカフェオイルキナ酸」を指す。標的化合物の合計は、２１０ｎｍでのＵＶ吸光度で９３．２％の純度である。 図１０は、それぞれ、図５～図７に示されるＵＨＰＬＣ－ＵＶクロマトグラフについてのピーク名、保持時間、及び相対面積パーセントデータを表形式で示す表である。図８は、初期イエルバマテ抽出物についてのデータの表である。標的化合物の合計は、２１０ｎｍでのＵＶ吸光度で４９．７％の純度である。図９は、イオン交換クロマトグラフィー固定相上で調整された第２の初期抽出物をクロマトグラフィー処理することに続いて得られた濃縮物についてのデータの表である。標的化合物の合計は、２１０ｎｍでのＵＶ吸光度で８７．１％の純度である。図１０は、本明細書に記載されるステップ（ａ）～（ｈ）に記載されるプロセスに続く乾燥後のデータであり、「ＤＣＱＡ」は、「ジカフェオイルキナ酸」を指す。標的化合物の合計は、２１０ｎｍでのＵＶ吸光度で９３．２％の純度である。
図１１は、ステビアバイオマスの調製を示す。負荷フロースルー中、洗浄（第１の溶出）、第２の溶出、及びカラム再生における、初期抽出物中のステビオール配糖体及びカフェオイルキナ酸の量が、示される。
本明細書及び図面における参照文字の繰り返し使用は、数字が図ごとに１００増加したとしても、本開示の同じ又は類似の特徴又は要素を表すように意図される（例えば、図１における乾燥操作１２０は、それぞれ、図２～４における乾燥操作２２０、３２０、及び４２０と類似しているか、又は同じである）。本開示の原理の範囲及び趣旨に含まれる多くの他の修正及び例は当業者によって考案され得ることを、理解されたい。
ここで、開示される主題のある特定の実施形態が詳細に参照され、その例は、添付の図面に部分的に例示される。開示される主題は、列挙される請求項と共に説明されるが、例示される主題は、当該請求項を開示される主題に限定することを意図するものではないことが理解されるであろう。
本開示は、一般に、植物バイオマスから、モノカフェオイルキナ酸（例えば、クロロゲン酸、ネオクロロゲン酸、及びクリプトクロロゲン酸）、及びジカフェオイルキナ酸（例えば、１，３－ジカフェオイルキナ酸、１，４－ジカフェオイルキナ酸、１，５－ジカフェオイルキナ酸、３，４－ジカフェオイルキナ酸、３，５－ジカフェオイルキナ酸、及び４，５－ジカフェオイルキナ酸）、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を作製する方法に関する。モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸は弱酸とみなされ得るため、それらは、各々、それらの共役酸形態、共役塩基形態（例えば、それらの塩形態）、及び化合物の画分（例えば、モル画分）が共役酸形態で存在し、別の画分が共役塩基形態で存在する、混合した共役酸－共役塩基形態のうちの少なくとも１つで存在できる。モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸についての共役酸形態対共役塩基形態の画分は、各化合物のｐＫａ及び組成物のｐＨを含む様々な因子に依存することになる。
モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸の塩の例は、カフェ酸、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸の四級アンモニウム、ナトリウム、カリウム、リチウム、マグネシウム、及びカルシウム塩などを含むが、これらに限定されない。
モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩を含む組成物の例示的な植物源
モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸及びそれらの塩を含む組成物は、植物は、例えば、植物の葉及び茎を含むがこれらに限定されない植物源から調製及び／又は単離され得る。表１は、モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸及びそれらの塩を含有する可能性がある植物源の例であり、モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸及びそれらの塩を含む組成物を調製するためにバイオマスとして用いられ得る植物の属を提供する。
Figure 2022524217000006
Figure 2022524217000007
Figure 2022524217000008
いくつかの態様では、モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸及びそれらの塩を含む組成物は、表１に定められるものなどの植物源から単離され得る。モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸及びそれらの塩を含む組成物からの商業的に有用な植物源の例は、単離され得、イエルバマテ（Ｉｌｅｘ ｐａｒａｇｕａｒｉｅｎｓｉｓ）、ステビア、コーヒー、茶、チコリ、及びグローブアーティチョークを含み得る。いくつかの植物源は、モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びモノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸のうちの１つ以上について富化されるそれらの塩を含む組成物を生成し得る。例えば、イエルバマテ植物から単離されたモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸及びそれらの塩を含む組成物は、ジカフェオイルキナ酸について富化され得る。他の態様では、ジカフェオイルキナ酸について富化されるイエルバマテ植物から単離されたモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸及びそれらの塩を含む組成物は、１０％以上、１５％以上、２０％以上、２５％以上、３０％以上、３５％以上、４０％以上、４５％以上、又は５０％以上、６０％以上、７０％以上、又は８０％以上、又は９０％以上の、１，３－ジカフェオイルキナ酸、１，４－ジカフェオイルキナ酸、１，５－ジカフェオイルキナ酸、３，４－ジカフェオイルキナ酸、３，５－ジカフェオイルキナ酸、及び４，５－ジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの１つ以上の組み合わせを含み得る。
モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を作製するための方法の例であって、方法が、
（ａ）イエルバマテバイオマスを水性組成物と接触させて、初期抽出物を得ることと、
（ｂ）初期抽出物から固体を除去して、第２の初期抽出物を得ることと、
（ｃ）第２の初期抽出物の体積を水性組成物で調整して、調整された第２の初期抽出物を得ることと、
（ｄ）イオン交換クロマトグラフィー固定相上で、調整された第２の初期抽出物をクロマトグラフィー処理することと、
（ｅ）イオン交換クロマトグラフィー固定相を溶出させて、溶媒を含む第１の溶出液を得ることと、
（ｆ）溶媒を除去して、濃縮物を形成することと、
（ｇ）濃縮物を濾液及び残余分のうちの少なくとも１つに対して脱色及び脱塩することのうちの少なくとも１つと、を含む、例。
モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸のうちの少なくとも１つを含む組成物を作製するための方法の例であって、方法が、
（ａ）イエルバマテバイオマスを水性組成物と接触させて、初期抽出物を得ることと、
（ｂ）初期抽出物から固体を除去して、第２の初期抽出物を得ることと、
（ｃ）第２の初期抽出物の体積を水性組成物で調整して、調整された第２の初期抽出物を得ることと、
（ｄ）イオン交換クロマトグラフィー固定相上で、調整された初期抽出物をクロマトグラフィー処理することと、
（ｅ）イオン交換固定相を溶出させて、溶媒を含む第１の溶出液を得ることと、
（ｆ）溶媒を除去して、濃縮物を形成することと、
（ｇ）濃縮物を脱色及び脱塩することのうちの少なくとも１つを行って、濾液及び残余分のうちの少なくとも１つを得ることと、
（ｈ）濾液及び残余分のうちの少なくとも１つを乾燥させて、カフェ酸、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を得ることと、を含む、例。
本明細書に記載される方法のステップ（ａ）は、イエルバマテバイオマスを水性組成物と接触させて、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩（例えば、四級アンモニウム、ナトリウム、カリウム、リチウム、マグネシウム、及びカルシウム塩）のうちの少なくとも１つを含む初期抽出物を得ることを伴う。
水性組成物は、水を含み得るが、有機溶媒などのいずれの共溶媒も含有し得ない。しかし、水性組成物は、水に加えて共溶媒を含み得る。好適な共溶媒は、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノール及び（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールの混合物などの有機溶媒を含む。（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールによって、式（Ｃ１～Ｃ４）アルキル－ＯＨのアルコールが意味され、「アルキル」は、結果として得られる（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールが、メタノール、エタノール、ｎ－プロパノール、ｎ－ブタノール、イソプロパノール、イソ－ブタノール、ｓｅｃ－ブタノール、及びｔ－ブタノールであるように、メチル、エチル、ｎ－プロピル、ｎ－ブチル、イソプロピル、イソ－ブチル、ｓｅｃ－ブチル、及びｔ－ブチルなどの１～４個の炭素原子を有する直鎖及び分岐状アルキル基を指す。（Ｃ１～Ｃ４）アルカノール又は（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールの混合物などの有機溶媒の割合は、水性組成物が、最大約３０体積％、最大約４０体積％、最大約５０体積％、最大約６０体積％、最大約７０体積％、最大約８０体積％、最大約９０体積％、若しくは最大１００体積％の有機溶媒を含み得、水性組成物が１００体積％の有機溶媒を含む場合を除き、残部は水であるか、又は約３０体積％～約１００体積％、約５０体積％～約１００体積％、約６０体積％～約９０体積％、約３０体積％～約６０体積％、約４０体積％～約６０体積％、約３０体積％～約５０体積％、約４０体積％～約５０体積％、若しくは約５０体積％であり得、残部は水であるように、任意の好適な割合であり得る。
いくつかの例では、水性組成物は、リン酸塩、クエン酸塩、アスコルビン酸塩、乳酸塩、酢酸塩などを含むがこれらに限定されない、任意の好適な緩衝系で緩衝され得る。緩衝液は、１～１０００ｍＭの陰イオンの範囲にあり得る。代替的には、塩酸、硫酸、硝酸などでｐＨ５～６に酸性化された水は、共溶媒の有無に関わらず水性組成物において有用であり得る。代替的には、水酸化ナトリウム又は水酸化カリウムなどの水酸化物でｐＨ７～１１に塩基性にされた純水は、共溶媒の有無に関わらず水性組成物において有用であり得る。更に他の例では、水性組成物の浸透ポテンシャルの平衡を保つ助けとなり得る好適な非イオン性溶質を添加することが、好適であり得る。
本明細書で使用される場合、用語「イエルバマテバイオマス」は、一般に、イエルバマテ植物の葉、茎（stalk）、茎（stem）、頂部、根などを含む、Ｉｌｅｘ ｐａｒａｇｕａｒｉｅｎｓｉｓなどのイエルバマテ植物の任意かつすべての部分を指す。イエルバマテバイオマスは、例えば、水性組成物との接触前かつ／又は接触中にイエルバマテバイオマスを切断することにより結果として得られる粉砕された形態におけるものを含む任意の好適な形態にあり得る。例えば、イエルバマテバイオマスは好適な容器において粉砕され得、水性組成物は粉砕されたイエルバマテバイオマスに添加され、したがって、イエルバマテバイオマスを「接触させる」ことができる。次いで、粉砕されたイエルバマテバイオマスは、好適な容器内で任意選択的に更に粉砕され得る。又は、イエルバマテバイオマスは、水性組成物が添加される好適な容器に配置され、したがって、イエルバマテバイオマスを「接触させる」ことができ、結果として得られる組成物は、粉砕され得る。
イエルバマテバイオマスは、とりわけ、カフェ酸、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つの抽出を最大化するために、接触前かつ／又は接触中に、撹拌、超音波処理、又は他の方法で振盪され得る。
初期抽出物は、粉砕されたイエルバマテ植物の葉、茎、頂部、根などが本明細書に記載される方法のステップ（ｂ）において除去されるなどの、現状又はバルク固体又は存在する植物固体で、ステップ（ｃ）へと遂行され得る。ステップ（ｂ）が行われる際、第２の初期抽出物を得る。
バルク固体は、遠心分離、浮遊物除去（skimming）、又は濾過を含む、任意の好適な方法によって除去され得る。例えば、初期抽出物は、フィルタが、カフェ酸、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを実質的に保持しない限り、紙フィルタ（例えば、Ｗｈａｔｍａｎ ４４又は５４低灰濾紙などの低灰濾紙）、ナイロンフィルタ、ポリエーテルスルホンフィルタ、ガラス繊維フィルタ、珪藻土のパッドなどを含む任意の好適なフィルタを通じた重力濾過又は真空濾過を含む任意の好適な濾過方法を使用して濾過され得る。
本明細書に記載される方法のステップ（ｃ）は、初期抽出物又は第２の初期抽出物の体積を、それぞれ、第１の水性組成物又は第２の水性組成物で調整して、調整された初期抽出物又は調整された第２の初期抽出物を得ることを伴う。第１及び第２の水性組成物は、異なり得るか、又は同じであり得る。調整された初期抽出物又は調整された第２の初期抽出物は、この時点で濾過され得るか、又は現状でステップ（ｄ）へと遂行され得る。初期抽出物又は第２の初期抽出物は、フィルタが、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを実質的に保持しない限り、紙フィルタ（例えば、Ｗｈａｔｍａｎ ４４又は５４低灰濾紙などの低灰濾紙）、ナイロンフィルタ、ポリエーテルスルホンフィルタ、ガラス繊維フィルタ、珪藻土のパッドなどを含む任意の好適なフィルタを通じた重力濾過又は真空濾過を含む任意の好適な濾過方法を使用して濾過され得る。
初期抽出物又は第２の初期抽出物の体積は、とりわけ、調整されていない初期抽出物又は調整されていない第２の初期抽出物に対して、本明細書に記載される方法のステップ（ｄ）で使用されるイオン交換クロマトグラフィーカラムに対する、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つの結合を増加させるために、調整された初期抽出物又は調整された第２の初期抽出物を得るために十分な量の水性組成物（例えば、水）で調整され得る。
初期抽出物又は第２の初期抽出物の体積は、とりわけ、初期抽出物又は第２の初期抽出物に存在する際、有機溶媒の量を調整するように調整され得る。初期抽出物又は第２の初期抽出物の体積は、調整された初期抽出物又は調整された第２の初期抽出物が、約６０体積％未満、約５０体積％未満、約４０体積％未満、約３０体積％未満、約２０体積％未満、約１０％体積％未満、約５体積％未満、約１体積％未満、若しくは更には約０体積％の有機溶媒を含み、残部が水であるか、又は約０体積％～約４０体積％、約０体積％～約３０体積％、約１０体積％～約４０体積％、約１０体積％～約３０体積％、約２０体積％～約４０体積％、約３０体積％～約４０体積％、若しくは約３５体積％の有機溶媒を含み、残部は水であるように、調整され得る。
本明細書に記載される方法のステップ（ｄ）は、イオン交換固定相（例えば、弱陰イオン交換固定相）上で、調整された初期抽出物又は第２の初期抽出物をクロマトグラフィー処理することを伴う。クロマトグラフィー処理は、バッチモードにおけるものを含むか、又はカラムを使用する、任意の好適な方法で実行され得る。クロマトグラフィー処理は、溶出液（例えば、約０体積％～約４０体積％、約０体積％～約３０体積％、約１０体積％～約４０体積％、約１０体積％～約３０体積％、約２０体積％～約４０体積％、約３０体積％～約４０体積％、又は約３５体積％の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含み、残部が水である、水性組成物）として水性組成物（例えば、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物）を用いて実行され得、カフェ酸、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを弱イオン交換クロマトグラフィーカラムに吸着されるようにし、一方で、カフェイン、クエルシトリン、ヒペロシド、アストラガリン、アビクラリン、ソフォリコシド、及びルチン（ルトシド、ケルセチン－３－Ｏ－ルチノシド、及びソホリンとしても知られる）
Figure 2022524217000009
 並びにそれらの異性体を含む他の化合物を溶出させる。本明細書に記載される方法のステップ（ｄ）は、カフェイン、クエルシトリン、ヒペロシド、アストラガリン、アビクラリン、ソフォリコシド、ルチン、及びルチン異性体のうちの少なくとも１つの濃度を、１質量％未満、０．５質量％未満、０．１質量％未満、０．０５質量％未満、０．０１質量％未満、又は０．００１質量％未満の濃度まで減少し得る。したがって、本開示は、０．１質量％未満の、カフェイン、クエルシトリン、ヒペロシド、アストラガリン、アビクラリン、ソフォリコシド、ルチン、及びルチン異性体のうちの少なくとも１つを含む、イエルバマテ抽出物を企図する。本開示は、０．５質量％未満の、カフェイン、クエルシトリン、ヒペロシド、アストラガリン、アビクラリン、ソフォリコシド、ルチン、及びルチン異性体のうちの各々１つと、組み合わせて約１質量％未満の、カフェイン、クエルシトリン、ヒペロシド、アストラガリン、アビクラリン、ソフォリコシド、ルチン、及びルチン異性体と、を含む、イエルバマテ抽出物も企図する。本開示は、カフェイン、クエルシトリン、ヒペロシド、アストラガリン、アビクラリン、ソフォリコシド、ルチン、及びルチン異性体のうちの少なくとも１つを効果的に含まない（例えば、カフェインを含まず、クエルシトリンを含まず、アストラガリンを含まず、アビクラリンを含まず、ソフォリコシドを含まず、ルチンを含まず、ルチン異性体を含まない、かつ／又はカフェイン、ルチン、及びルチン異性体を含まない）イエルバマテ抽出物も企図する。
イオン交換固定相は、非限定的であり、任意の好適なイオン交換クロマトグラフィー固定相であり得る。好適なイオン交換クロマトグラフィー固定相の例は、ＡＮＸ－ＳＥＰＨＡＲＯＳＥ（登録商標）高速流動樹脂、ＤＥＡＥ ＳＥＰＨＡＲＯＳＥ（登録商標）、ＤＥＡＥ ＳＥＰＨＡＤＥＸ（登録商標）Ａ２５樹脂、ＡＭＢＥＲＬＩＴＥ（登録商標）（ＦＰＡ ５３、ＦＰＡ ５５、ＣＧ－５０タイプＩ、ＩＲＣ－５０、ＩＲＣ－５０Ｓ、及びＩＲＰ－６４）、ＤＩＡＩＯＮ ＷＡ１０、及びＤＯＷＥＸ（登録商標）ＣＣＲ－３を含む。
イオン交換クロマトグラフィー固定相は、調整された初期抽出物又は調整された第２の初期抽出物のクロマトグラフィー処理前に、任意選択的に、水性組成物（例えば、約０体積％～約４０体積％、約０体積％～約３０体積％、約１０体積％～約４０体積％、約１０体積％～約３０体積％、約２０体積％～約４０体積％、約３０体積％～約４０体積％、又は約３５体積％の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含み、残部が水である、水性組成物などの水性組成物（例えば、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物）でプレコンディショニングされ得る。例えば、弱イオン交換クロマトグラフィーカラムは、約２ＢＶ／ｈの流速で、約２以上のベッド体積（ＢＶ）でプレコンディショニングされ得る。
弱イオン交換クロマトグラフィーカラムのｐＨは、任意選択的に、調整された初期抽出物又は調整された第２の初期抽出物のクロマトグラフィー処理の前に調整され得る。例えば、弱イオン交換クロマトグラフィーカラムのｐＨ（例えば、樹脂／固定相のｐＨ）が、約１０未満、約９以下、約８以下、約７以下、約６以下、約５以下、約４以下、約３以下のｐＨ、又は約２～約１０、約３～約８、約５～約９、約２～約６、約３～約４、若しくは約３～約６のｐＨであるように、弱イオン交換クロマトグラフィーカラムのｐＨは、任意の好適な酸（例えば、塩酸）を用いてクロマトグラフィー処理の前に調整され得る。弱イオン交換クロマトグラフィーカラムのｐＨは、調整された初期抽出物又は調整された第２の初期抽出物のクロマトグラフィー処理の前に、カラムが任意選択的に（Ｃ１～Ｃ４）を含む水性組成物でプレコンディショニングされる前又は後に、調整され得る。
弱イオン交換クロマトグラフィーカラムのｐＨのプレコンディショニング及び／又は調整後、調整された初期抽出物又は調整された第２の初期抽出物は、２ＢＶ／ｈ（１時間当たりのベッド体積）を超える任意の速度でカラム上に負荷され得る。調整された初期抽出物又は調整された第２の初期抽出物を負荷した後、カラムは、約２ＢＶ／ｈの速度などの任意の好適な速度で、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む任意の好適な体積の水性組成物（例えば、約１０体積％～約４０体積％、約１０体積％～約３０体積％、約２０体積％～約４０体積％、約３０体積％～約４０体積％、又は約３５体積％の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含み、残部が水である、少なくとも約２ＢＶ、少なくとも約３ＢＶ又は少なくとも約４ＢＶの水性組成物）を用いて洗浄され得る。（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物の体積は、とりわけ、カフェイン、クエルシトリン、ヒペロシド、アストラガリン、アビクラリン、ソフォリコシド、ルチン、及びルチン異性体を含有するため、廃棄され得る。
本明細書に記載される方法のステップ（ｅ）は、吸着されたモノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを、弱イオン交換クロマトグラフィーカラムから溶出させて、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む第１の溶出液を得ることを伴う。溶出させることは、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つをカラムから溶出させるのに好適な任意の条件下で実行される。
モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを溶出させるのに好適な条件の例は、塩（例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化アンモニウム、硫酸ナトリウム、硫酸カリウム、リン酸ナトリウム、リン酸カリウムなど）を含む任意の好適な体積の溶液でカラムを溶出させることを含む。塩を含む溶液の例は、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノール（例えば、約１０体積％～約６０体積％、約２０体積％～約５０体積％、約３０体積％～約５５体積％、約４０体積％～約６０体積％、又は約５０体積％の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む、少なくとも約２ＢＶ、少なくとも約３ＢＶ又は少なくとも約４ＢＶの水性組成物）を含む水性組成物に溶解した少なくとも１つの塩（例えば、約５重量％～約２５重量％、約１５重量％～約２０重量％又は約５重量％～約１０重量％の塩）を含む溶液を含む。
カラムからモノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを溶出させるための好適な条件の別の例は、酸（例えば、塩酸、硫酸、リン酸、酢酸、ギ酸など）を含む任意の好適な体積の溶液でカラムを溶出させることを含む。酸を含む溶液の例は、塩酸などを含む溶液、及び任意選択的に、約１０体積％～約６０体積％、約２０体積％～約５０体積％、約３０体積％～約５５体積％、約４０体積％～約６０体積％、又は約５０体積％の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノール）を含む水性組成物を含む酸溶液を含む。
溶出させるステップから収集された、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む第１の溶出液は、収集され、その後、カフェ酸、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む濃縮物を提供するための任意の好適な手段による、溶媒を除去すること（例えば、水及び（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを除去するための）によって濃縮され得る。溶媒除去は、不活性雰囲気下（例えば、窒素ガス雰囲気下）で達成され得る。任意の特定の理論に束縛されることを望まない一方で、不活性雰囲気下で溶媒除去を実行することは、イエルバマテバイオマス中に自然に存在するか、又は本明細書に記載されるステップのうちの１つ以上で形成するいずれかである、高度に着色した高分子物質の形成を低減できることが、考えられる。
モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む第１の溶出液は、溶媒を含む。溶媒は、乾燥するまでステップ（ｆ）において除去され得るか、又は、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物の体積が溶媒として残って（例えば、溶出液の元の全体積の約５０％、約４０％、約３０％、約２０％、約１０％又は約５％）、濃縮物を形成する点まで除去され得るが、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物を構成する成分の比は、吸着されたカフェ酸、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを溶出させるために使用された（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物を構成する成分の比とは異なっていても異なっていなくてもよい。代替的には、カフェ酸、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む溶出液中の溶媒は、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物の体積が残る点まで除去され得、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物は、約１０体積％未満、約５体積％未満、約２体積％未満又は約１体積％未満の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む。
カフェ酸、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む濃縮物を形成するための、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む溶出液から溶媒を除去するための好適な条件は、溶出液の表面上に不活性ガス（例えば、窒素ガス）を吹き込むことを含む。溶出液は、窒素ガスを吹き込む間に加熱され得るか、又は室温（例えば、２５℃）であり得る。溶出液中の溶媒を除去するための他の条件は、溶出液を含む容器に真空を適用することを含む。真空は、室温で、又は容器を加熱しながら、溶出液と共に適用され得る。溶出液中の溶媒を除去するための更に他の条件は、溶出液を薄膜蒸発器又は撹拌された撹拌薄膜蒸発器に通して流すことを含む。
濃縮物のｐＨは、ｐＨ調整された濃縮物を得るためにこの時点で調整され得るが、この時点でｐＨを調整することは、任意選択的である。例えば、濃縮物のｐＨは、カフェ酸、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つが分解から保護されるｐＨに調整され得る。好適なｐＨは、約２～約６、約２～約５、約２～約４、約３～約５のｐＨ又は約３．５のｐＨなどの、約６未満、約５未満、約４未満、約３未満又は約２未満のｐＨを含む。濃縮物のｐＨは、任意の好適な酸又は塩基を使用することによって調整され得る。酸が使用される際、酸は、塩酸などであり得る。
濃縮物又はｐＨ調整された濃縮物は、本明細書に記載される方法若しくは除去するステップ（ｆ）において現状で扱われ得るか、又は濾過され得る。濃縮物又はｐＨ調整された濃縮物は、任意の好適なフィルタ（例えば、Ｗｈａｔｍａｎ ４４又は５４低灰濾紙などの低灰濾紙）、ナイロンフィルタ、ポリエーテルスルホンフィルタ、ガラス繊維フィルタ、珪藻土のパッドなどを使用して濾過され得る。いくつかの例では、ｐＨ調整された濃縮物は、濃縮物又はｐＨ調整された濃縮物の体積に応じて、例えば、０．２μｍの孔径を有するポリエーテルスルホン（ＰＥＳ）フィルタ、又はプリーツ（平膜、真空濾過）若しくはプリーツＰＥＳ膜などの高分子膜を通して濾過され得る。
モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む濃縮物は、それが、ｐＨ調整されるか、濾過されるか、又はｐＨ調整及び濾過の両方を行われるかに関わらず、乾燥するステップ（ｈ）へと直接移され得るか、又は高度に着色し得る濃縮物のステップ（ｇ）において脱塩／脱色すること（脱塩に続いて脱色すること、脱色に続いて脱塩すること、脱色するが脱塩しないこと、又は脱塩するが脱色しないことを含むいずれかの順序で）に提供され得る。脱塩／脱色することは、不活性雰囲気下（例えば、窒素ガス雰囲気下）で達成され得る。任意の特定の理論に束縛されることを望まない一方で、不活性雰囲気下で１つ以上のステップを実行することは、イエルバマテバイオマス中に自然に存在するか、又は本明細書に記載されるステップのうちの１つ以上で形成するいずれかである、高度に着色した高分子物質の形成を低減できることが、考えられる。
濃縮物は、それが、ｐＨ調整されるか、濾過されるか、又はｐＨ調整及び濾過の両方を行われるかに関わらず、限外濾過（例えば、分子量カットオフ膜、サイズ排除クロマトグラフィー又はゲル透過を通じて濾過すること）を含む任意の好適な手段によって脱色され得る。脱色することから濾液を得る。限外濾過は、とりわけ、高度に着色し得る濃縮物の脱色を達成する。任意の特定の理論に束縛されることを望まない一方で、限外濾過は、イエルバマテバイオマス中に自然に存在するか、又は本明細書に記載されるステップのうちの１つ以上で形成するいずれかである、高度に着色した高分子物質を除去することが、考えられる。
脱色することからの濾液は、乾燥するステップ（ｈ）へと扱われるか、又はステップ（ｇ）で脱塩され得る。代替的には、濃縮物は、ｐＨ調整されるか、濾過されるか、又はｐＨ調整及び濾過の両方を行わるかに関わらず、第１の脱色なしに脱塩され得る。それにもかかわらず、脱塩することは、ナノ濾過膜及び疎水性樹脂を使用して達成され得る。当業者は、ナノ濾過膜及び疎水性樹脂を使用する際に、透過液を廃棄し残余分を維持することを、認識するであろう。一実施例では、脱塩は、約２０体積％未満の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含むｐＨ調整された濃縮物（例えば、約２未満ｐＨを有する酸性化された濃縮物）を負荷するであろう疎水性樹脂（例えば、ＳＥＰＡＢＥＡＤＳ（商標）ＳＰ７０などの多孔性ポリジビニルベンゼン／エチルビニルベンゼンマトリックス）を使用して達成され得る。次いで、樹脂は、希釈アルコール（例えば、残部が約２未満のｐＨを有する水である、約１０体積％未満の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノール）を用いて洗浄され、次いで、約７０体積％の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物で水中に溶出されて、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む脱塩された第２の溶出液を得る。
脱塩することがステップ（ｇ）において脱色することに先行する場合、脱塩するステップからの透過液中の溶媒は、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物の体積が溶媒として残って（例えば、溶出液の元の全体積の約５０％、約４０％、約３０％、約２０％、約１０％又は約５％）、第１の脱塩濃縮物を形成する点まで除去され得る。代替的には、脱塩することからの透過液中の溶媒は、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物の体積が残る点まで除去されて、第２の脱塩濃縮物を得ることができ、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物は、約１０体積％未満、約５体積％未満、約２体積％未満又は約１体積％未満の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む。第１の脱塩濃縮物は、第１の脱塩濃縮物が約１０体積％未満、約５体積％未満、約２体積％未満又は約１体積％未満の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールも有するように、第２の脱塩濃縮物の属性も有し得る。
カフェ酸、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む第１／第２の脱塩濃縮物を形成するための、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む透過液から溶媒を除去するための好適な条件は、溶出液の表面上に不活性ガス（例えば、窒素ガス）を吹き込むことを含む。透過液は、窒素ガスを吹き込む間に加熱され得るか、又は室温（例えば、２５℃）であり得る。溶出液中の溶媒を除去するための他の条件は、透過液を含む容器に真空を適用することを含む。真空は、室温で、又は容器を加熱しながら、透過液と共に適用され得る。透過液中の溶媒を除去するための更に他の条件は、透過液を薄膜蒸発器又は撹拌された撹拌薄膜蒸発器に通して流すことを含む。
別の実施例では、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む濃縮物は濾紙を通して濾過されて、第１の濾液を得ることができ、第１の濾液は限外濾過されて、第２の濾液を得、第２の濾液はナノ濾過膜を使用してナノ濾過されて、第１の残余分を得るか、又は第２の濾液は疎水性樹脂を通して溶出されて、脱塩された第２の溶出液を得る。別の実施例では、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む濃縮物は濾紙を通して濾過されて、第１の濾液を得ることができ、第１の濾液はナノ濾過膜を使用してナノ濾過されて、第３の残余分を得るか、又は第１の濾液は疎水性樹脂を通して溶出されて、脱塩された第２の溶出液を得、第３の残余分又は脱塩された第２の溶出液は限外濾過されて、第３の濾液を得る。
本明細書で言及されるように、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む溶出液は、濃縮乾固され得るか、又は（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物の体積が残る点まで濃縮され得る。溶出液が濃縮乾固される場合、乾燥材料は、例えば、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物を使用して再構成され得る。次いで、再構成された材料は、本明細書に記載されるように、とりわけ、脱塩及び脱色のうちの少なくとも１つを行うために濾過され得る。
本明細書に記載される方法は、第１の残余分、脱塩された第２の溶出液又は第３の濾液を乾燥させて、カフェ酸、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を得ることを伴うステップ（ｈ）を含み得る。第１の残余分、脱塩された第２の溶出液又は第３の濾液は、凍結乾燥又は噴霧乾燥によるものを含む任意の好適な様式で乾燥され得る。
図１～図４は、例示的な植物源としてイエルバマテ及びステビアを使用するプロセスを定める。図１は、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を作製するための方法１００のフロー図である。操作１０２では、イエルバマテバイオマスは、好適な容器（例えば、ガラス瓶）中に５０％のエタノール／水を含む水性組成物と１時間接触されて（１．５Ｌの溶媒中３００ｇのイエルバマテバイオマス）、初期抽出物を得る。操作１０４では、初期抽出物は、例えば、Ｗｈａｔｍａｎ ５４低灰濾紙をガラス製の４Ｌの枝付きフラスコに入れたセラミックブフナー漏斗を使用して濾過される。操作１０６では、濾過された初期抽出物の体積は、水性組成物、この場合は水で調整されて、より低い割合のエタノール、この場合は３５体積％のエタノールを含有する調整され濾過された初期抽出物を得る。操作１０８では、調整された濾過初期抽出物は、例えば、Ｗｈａｔｍａｎ ４４低灰濾紙をガラス製の４Ｌの枝付きフラスコに入れたセラミックブフナー漏斗を使用して再濾過され得る。操作１１０では、調整され濾過された初期抽出物は、イオン交換クロマトグラフィー固定相上でクロマトグラフィー処理される。例えば、ＡＭＢＥＲＬＩＴＥ（登録商標）ＦＰＡ ５３樹脂は、ガラス製のカラムに充填される。樹脂は、３５％のエタノール（２ＢＶ／ｈで２ＢＶ）でプレコンディショニングされる。調整された濾過初期抽出物は、樹脂上に負荷され（２ＢＶ／ｈ）、負荷透過液を廃棄する。樹脂は、３５％のエタノール（２ＢＶ／ｈで４ＢＶ）を用いて洗浄され、洗浄透過液を廃棄する。カフェ酸、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つは、５０％のエタノール／水、１０％のＦＣＣ塩化ナトリウム（４ＢＶ、０．５ＢＶ／ｈ）で溶出され、透過液は維持される。カラム／樹脂は、任意選択的に、水（４ＢＶ、２ＢＶ／ｈ）で再生され得る。操作１１２では、溶出液／透過液は濃縮されて、濃縮物を形成する。この場合、窒素ガスを、体積体積が溶出液／透過液の初期体積のおよそ３分の１になり、かつ／又はエタノールが溶出液／透過液中で１％未満になるまで、溶出液／透過液の上部の上に２日間吹き込み、したがって、濃縮物を得た。操作１１４では、濃縮物は、およそ３．５のｐＨに酸性化され、次いで、ブフナー漏斗上のＷｈａｔｍａｎ ４４濾紙を通して、続いて０．２μｍのポリエーテルスルホン（ＰＥＳ）フィルタによって濾過される。操作１１６では、濾過濃縮物は、分子量カットオフ膜（ＭＷＣＯ；例えば、３ｋＤａ ＴＵＲＢＯＣＬＥＡＮ（登録商標）ＮＰ０１０などの１０ｋＤＡ超の分子量を有する材料を除去するＭＷＣＯ膜）を使用して、とりわけ、濾過濃縮物を脱色し透過液を得るために脱色される。操作１１８では、透過液はナノ濾過膜（例えば、ＴＲＩＳＥＰ（登録商標）ＸＮ４５膜）を通して濾過され、その後、残余分は操作１２０で乾燥されて、カフェ酸、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を得る。
図２は、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を作製するための方法２００のフロー図である。操作２０２では、イエルバマテバイオマスは、好適な容器（例えば、ガラス瓶）中に５０％のエタノール／水を含む水性組成物と１時間接触されて（１．５Ｌの溶媒中３００ｇのイエルバマテバイオマス）、初期抽出物を得る。操作２０４では、初期抽出物は、例えば、Ｗｈａｔｍａｎ ５４低灰濾紙をガラス製の４Ｌの枝付きフラスコに入れたセラミックブフナー漏斗を使用して濾過される。操作２０６では、濾過された初期抽出物の体積は、水性組成物、この場合は水で調整されて、より低い割合のエタノール、この場合は３５体積％のエタノールを含有する調整され濾過された初期抽出物を得る。操作２０８では、調整された濾過初期抽出物は、例えば、Ｗｈａｔｍａｎ ４４低灰濾紙をガラス製の４Ｌの枝付きフラスコに入れたセラミックブフナー漏斗を使用して再濾過され得る。操作２１０では、調整され濾過された初期抽出物は、イオン交換クロマトグラフィー固定相上でクロマトグラフィー処理される。例えば、ＡＭＢＥＲＬＩＴＥ（登録商標）ＦＰＡ ５３樹脂は、ガラス製のカラムに充填される。樹脂は、３５％のエタノール（２ＢＶ／ｈで２ＢＶ）でプレコンディショニングされる。調整された濾過初期抽出物は、樹脂上に負荷され（２ＢＶ／ｈ）、負荷透過液を廃棄する。樹脂は、３５％のエタノール（２ＢＶ／ｈで４ＢＶ）を用いて洗浄され、洗浄透過液を廃棄する。カフェ酸、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つは、５０％のエタノール／水、１０％のＦＣＣ塩化ナトリウム（４ＢＶ、０．５ＢＶ／ｈ）で溶出され、透過液は維持される。カラム／樹脂は、任意選択的に、水（４ＢＶ、２ＢＶ／ｈ）で再生され得る。操作２１２では、溶出液／透過液は濃縮されて、濃縮物を形成し、体積は溶出液／透過液の初期体積のおよそ３分の１であり、かつ／又はエタノールは溶出液／透過液中で１％未満であり、したがって、濃縮物を得る。操作２１４では、濃縮物は、およそ１のｐＨに酸性化され、次いで、ブフナー漏斗上のＷｈａｔｍａｎ ４４濾紙を通して、続いて０．２μｍのポリエーテルスルホン（ＰＥＳ）フィルタによって濾過される。操作２１８では、濃縮物は、疎水性樹脂（例えば、ＳＥＰＡＢＥＡＤＳ（商標）ＳＰ７０などの多孔性ポリジビニルベンゼン／エチルビニルベンゼンマトリックス）を使用して脱塩され、残余分中の溶媒は、操作２１７で除去される。操作２１６では、脱塩濃縮物は、分子量カットオフ膜（ＭＷＣＯ；例えば、３ｋＤａ ＴＵＲＢＯＣＬＥＡＮ（登録商標）ＮＰ０１０などの１０ｋＤＡ超の分子量を有する材料を除去するＭＷＣＯ膜）を使用して、とりわけ、濾過濃縮物を脱色し透過液を得るために脱色され、その後、操作２２０で乾燥されて、カフェ酸、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を得る。
モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸のうちの少なくとも１つを含む組成物を作製するための方法の別の例であって、方法が、
（ｉ）イエルバマテバイオマスを水性組成物と接触させて、初期抽出物を得ることと、
（ｉｉ）初期抽出物から固体を除去して、第２の初期抽出物を得ることと、
（ｉｉｉ）第２の初期抽出物を酸性化された酢酸エチルと接触させて、酸性酢酸エチル抽出物を得ることと、
（ｉｖ）酸性酢酸エチル抽出物を中和して、中和酢酸エチル及び水性抽出物を得ることと、
（ｖ）水性抽出物を脱色して、脱色された水性抽出物を得ることと、
（ｖｉ）脱色された水性抽出物を乾燥させて、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を得ることと、を含む、例。
ステップ（ｉ）、（ｉｉ）、及び（ｖｉ）は、ステップ（ａ）、（ｂ）、及び（ｈ）について本明細書に記載されるように実行される。ステップ（ｖ）は、ステップ（ｖ）が、分子量カットオフ膜を通して濾過することを含む限外濾過、サイズ排除クロマトグラフィー、及びゲル透過などの脱色プロセスのみを伴うことを除いて、濾過ステップ（ｇ）と類似している。したがって、ステップ（ａ）、（ｂ）、（ｇ）、及び（ｈ）に関する開示は、ステップ（ｉ）、（ｉｉ）、（ｖ）、及び（ｖｉ）に適用される。
本明細書に記載される方法のステップ（ｉ）は、イエルバマテバイオマスを水性組成物と接触させて、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む初期抽出物を得ることを伴う。
水性組成物は、水を含み得るが、有機溶媒などのいずれの共溶媒も含有し得ない。しかし、水性組成物は、水に加えて共溶媒を含み得る。好適な共溶媒は、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノール及び（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールの混合物などの有機溶媒を含む。（Ｃ１～Ｃ４）アルカノール又は（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールの混合物などの有機溶媒の割合は、水性組成物が、最大約３０体積％、最大約４０体積％、最大約５０体積％若しくは最大約６０体積％の有機溶媒を含み得、残部は水であるか、又は、約３０体積％～約６０体積％、約４０体積％～約６０体積％、約３０体積％～約５０体積％、約４０体積％～約５０体積％、若しくは約５０体積％の有機溶媒を含み得、残部は水であるような、任意の好適な割合である。
いくつかの例では、水性組成物は、リン酸塩、クエン酸塩、アスコルビン酸塩、乳酸塩、酢酸塩などを含むがこれらに限定されない、任意の好適な緩衝系で緩衝され得る。緩衝液は、１～１０００ｍＭの陰イオンの範囲にあり得る。代替的には、塩酸、リン酸、硫酸、硝酸などでｐＨ５～６に酸性化された水は、共溶媒の有無に関わらず水性組成物において有用であり得る。代替的には、水酸化ナトリウム又は水酸化カリウムなどの水酸化物でｐＨ７～１１に塩基性にされた純水は、共溶媒の有無に関わらず水性組成物において有用であり得る。更に他の例では、水性組成物の浸透ポテンシャルの平衡を保つ助けとなり得る好適な非イオン性溶質を添加することが、好適であり得る。
イエルバマテバイオマスは、とりわけ、カフェ酸、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つの抽出を最大化するために、ステップ（ｉ）の接触前かつ／又は接触中に、撹拌、超音波処理、又は他の方法で振盪され得る。
初期抽出物は、粉砕されたイエルバマテ植物の葉、茎、頂部、根などが本明細書に記載される方法のステップ（ｉｉ）において除去されるなどの、現状又はバルク固体又は存在する植物固体で、ステップ（ｉｉｉ）へと遂行され得る。ステップ（ｉｉ）が行われる際、第２の初期抽出物を得る。
バルク固体は、遠心分離、浮遊物除去、又は濾過を含む、任意の好適な方法によって除去され得る。例えば、初期抽出物は、フィルタが、カフェ酸、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを実質的に保持しない限り、紙フィルタ（例えば、Ｗｈａｔｍａｎ ４４又は５４低灰濾紙などの低灰濾紙）、ナイロンフィルタ、ポリエーテルスルホンフィルタ、ガラス繊維フィルタ、珪藻土のパッドなどを含む任意の好適なフィルタを通じた重力濾過又は真空濾過を含む任意の好適な濾過方法を使用して濾過され得る。
ステップ（ｉｉｉ）を実施する前に、任意選択的に、初期又は第２の初期抽出物のｐＨを好適な酸で調整できる。（例えば、塩酸など）又は好適な塩基（例えば、水酸化ナトリウム）を、約４～約７のｐＨ。次いで、ｐＨ調整された初期又は第２の初期抽出物は、本明細書に記載されるように予め酸性化されていない酢酸エチルで抽出される。任意の特定の理論に束縛されることを望まない一方で、初期又は第２の初期抽出物のｐＨが約４～約７に調整される際、水層に目的の化合物（例えば、カフェ酸、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩）を維持しながら、ある特定の不純物を酢酸エチル中に抽出することは可能であることが、考えられる。
本明細書に記載される方法のステップ（ｉｉｉ）は、第１又は第２の初期抽出物を酸性化された酢酸エチルと接触させて、酸性酢酸エチル抽出物を得ることを伴う。酸性化された酢酸エチルは、塩酸、硫酸、及び氷酢酸（例えば、０．０１～１％体積／体積）を含む任意の好適な酸を添加することによるものを含む、任意の好適な様式で調製され得る。酸性酢酸エチル抽出物は、水を用いて洗浄される（例えば、１：１体積／体積の水で３回）。これらの条件下では、カフェ酸、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸のうちの少なくとも１つは、実質的にそれらの共役酸形態にあり、酸性酢酸エチル抽出物が水で洗浄される際に形成する酸性酢酸エチル層内に実質的に存在することになる。水層は廃棄され、酸性酢酸エチル抽出物はステップ（ｉｖ）に進められる。
本明細書に記載される方法のステップ（ｉｉｉ）は、本明細書に記載されるように予め酸性化されていない酢酸エチルを使用することによるが、代わりに、初期又は第２の初期抽出物のｐＨを好適な酸で調整することによるものを含む、他の好適な方法で行われ得る。（例えば、塩酸など）、次いで、予め酸性化されていない酢酸エチルでｐＨ調整された初期又は第２の初期抽出物を抽出する。初期抽出物又は第２の初期抽出物のｐＨを調整するために使用される酸に関わらず、初期抽出物又は第２の初期抽出物のｐＨは、約４以下、３以下、約２以下、又は約１以下に調整される。水層は廃棄され、生じる酸性酢酸エチル抽出物はステップ（ｉｖ）に進められる。
本明細書に記載される方法のステップ（ｉｖ）は、酸性酢酸エチル抽出物を中和して、中和酢酸エチル及び水性抽出物を得ることを含む。このことは、酸性酢酸エチル抽出物を、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムなど、及びそれらの組み合わせなどの好適な塩基を含む水で洗浄すること（例えば、１：１体積／体積の水で３回）を含む、任意の好適な方法で達成される。これらの条件下では、カフェ酸、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸のうちの少なくとも１つは、実質的にそれらの共役塩基形態にあり、酸性酢酸エチル抽出物が好適な塩基を含む水で洗浄される際に形成する水層内に実質的に存在することになる。
ステップ（ｉｖ）に対する代替的な任意選択的ステップ（ｉｖ－ａ）では、ステップ（ｉｉｉ）から生じる酸性酢酸エチル抽出物は、任意選択的に、除去され、更に乾燥するまで除去され得る。残る任意の固体は、ｐＨ中性水（例えば、脱イオン水）で再構成され得、次いで、水のｐＨは約３～約７に調整されるか、又は残る固体は、約３～約７のｐＨを有する水で再構成されるかのいずれかであり得る。
次いで、カフェ酸、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む水性抽出物は、それらがステップ（ｉｖ）又はステップ（ｉｖ－ａ）から生じるかどうかに関わらず、ステップ（ｖ）に提供されて、とりわけ、高度に着色し得る水性抽出物の脱色を達成することができる。脱色は、限外濾過（例えば、分子量カットオフ膜、サイズ排除クロマトグラフィー、又はゲル浸透を通して濾過すること）を含む任意の好適な手段によって達成され得る。脱色することから濾液を得る。限外濾過は、とりわけ、高度に着色し得る濃縮物の脱色を達成する。任意の特定の理論に束縛されることを望まない一方で、限外濾過は、イエルバマテバイオマス中に自然に存在するか、又は本明細書に記載されるステップのうちの１つ以上で形成するいずれかである、高度に着色した高分子物質を除去することが、考えられる。
ステップ（ｉ）～（ｖｉ）（代替的な任意選択的ステップ（ｉｖ－ａ）を含むを含む本明細書に記載される方法に対する改変の別の例は、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を作製するための方法を含み、方法は、
イエルバマテバイオマスを水性組成物と接触させて、初期抽出物を得ることと、
初期抽出物から固体を除去して、第２の初期抽出物を得ることと、
第２の初期抽出物のｐＨを約４～約７のｐＨに調整して、第１のｐＨ調整された第２の初期抽出物を得ることと、
第１のｐＨ調整された第２の初期抽出物を酢酸エチルと接触させて、第１の酢酸エチル抽出物及び第２の水性抽出物を得ることと、
第２の水性抽出物のｐＨを２未満のｐＨに調整して、ｐＨ調整された第２の水性抽出物を得ることと、
ｐＨ調整された第２の水性抽出物を酢酸エチルと接触させて、第２の酢酸エチル抽出物を得ることと、
第２の酢酸エチル抽出物から酢酸エチルを除去して、精製組成物を得ることと、
粗組成物を水で再構成して、第３の水性抽出物を得ることと、
第３の水性抽出物を脱色して、脱色された水性抽出物を得ることと、を含む。
「精製組成物」は、目的の化合物（例えば、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つ）を含み、「精製組成物」は、初期抽出物及び第２の初期抽出物にある特定の不純物を含有しないが、イエルバマテバイオマス中に自然に存在するか、又は本明細書に記載されるステップのうちの１つ以上で形成するかのいずれかであり、脱色するステップで除去される、高度に着色した高分子物質を含有するという点で、少なくとも初期抽出物及び第２の初期抽出物に対して精製される。
ステップ（ｉ）～（ｖｉ）（代替的な任意選択的ステップ（ｉｖ－ａ）を含むを含む本明細書に記載される方法に対する改変の更に別の例は、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を作製するための方法を含み、方法は、
イエルバマテバイオマスを水性組成物と接触させて、初期抽出物を得ることと、
初期抽出物から固体を除去して、第２の初期抽出物を得ることと、
第２の初期抽出物のｐＨを約２未満のｐＨに調整して、第２のｐＨ調整された第２の初期抽出物を得ることと、
第２のｐＨ調整された第２の初期抽出物を酢酸エチルと接触させて、第３の酢酸エチル抽出物を得ることと、
第３の酢酸エチル抽出物を中和して、第１の中和酢酸エチル抽出物及び第３の水性抽出物を得ることと、
第３の水性抽出物を脱色して、脱色された水性抽出物を得ることと、を含む。
本明細書に記載される方法は、脱色された水性抽出物を乾燥させて、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を得ることを伴うステップ（ｖｉ）を含み得る。第１若しくは第２の残余分又は第３の濾液は、凍結乾燥又は噴霧乾燥によるものを含む任意の好適な様式で乾燥され得る。
図３は、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を作製するための方法３００のフロー図である。操作３０２では、イエルバマテバイオマスは、好適な容器（例えば、ガラス瓶）中に５０％のエタノール／水を含む水性組成物と１時間接触されて（１．５Ｌの溶媒中３００ｇのイエルバマテバイオマス）、初期抽出物を得る。操作３０４では、初期抽出物は、とりわけ、例えば、イエルバマテバイオマスから固体を除去するために、例えば、Ｗｈａｔｍａｎ ５４低灰濾紙をガラス製の４Ｌの枝付きフラスコに入れたセラミックブフナー漏斗を使用して、濾過される。操作３０４からの濾液は、酸性化された酢酸エチル抽出を用いて、操作３０６で抽出される。酸性化された酢酸エチル中へのカフェ酸、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つの抽出に続いて、酸性化された酢酸エチルは、操作３０８において水酸化ナトリウム、水酸化カリウムなどの好適な塩基を含む水で洗浄されて、中和された酢酸エチル及び水性抽出物を得る。これらの条件下では、カフェ酸、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸のうちの少なくとも１つは、実質的にそれらの共役塩基形態にあり、酸性酢酸エチル抽出物が好適な塩基を含む水で洗浄される際に形成する水層内に実質的に存在することになる。操作３１０では、水層は濾過されて、濾液を得る。操作３１６では、濾液は、３ｋＤａ分子量カットオフ膜（ＴＵＲＢＯＣＬＥＡＮ（登録商標）ＮＰ０１０；６回の透析濾過）を使用して脱色されて、とりわけ、水性抽出物を脱色し、それによって、脱色された水性抽出物を得る。操作３２０では、脱色された水性抽出物は、乾燥されて、カフェ酸、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つの組成物を得る。
図４Ａは、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を作製するための方法４００のフロー図である。操作４０２では、イエルバマテバイオマスは、好適な容器（例えば、ガラス瓶）中に５０％のエタノール／水を含む水性組成物と１時間接触されて（１．５Ｌの溶媒中３００ｇのイエルバマテバイオマス）、初期抽出物を得る。操作４０４では、初期抽出物は、とりわけ、例えば、イエルバマテバイオマスから固体を除去するために、例えば、Ｗｈａｔｍａｎ ５４低灰濾紙をガラス製の４Ｌの枝付きフラスコに入れたセラミックブフナー漏斗を使用して、濾過される。操作４０４からの濾液は約４～約７にｐＨ調整され、濾液は酢酸エチルで操作４０８において抽出され、一方で、目的の化合物は水層中に残る。操作４０６では、水層のｐＨは２未満に調整され、水層は酢酸エチルで抽出される。酢酸エチル中へのカフェ酸、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸のうちの少なくとも１つの抽出に続いて、酢酸エチルは、操作４０７において乾燥するまで除去されて、固体を得る。固体は水で再構成され、水のｐＨは約３～約７に調整される。これらの条件下では、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸のうちの少なくとも１つは、実質的にそれらの共役塩基形態にあり、水に溶解することになる。操作４１０では、水層は濾過されて、濾液を得る。操作４１６では、濾液は、３ｋＤａ分子量カットオフ膜（ＴＵＲＢＯＣＬＥＡＮ（登録商標）ＮＰ０１０；６回の透析濾過）を使用して脱色されて、とりわけ、水性抽出物を脱色し、それによって、脱色された水性抽出物を得る。操作４２０では、脱色された水性抽出物は、乾燥されて、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つの組成物を得る。
モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を作製するための方法の例であって、方法が、
（ＡＡ）植物バイオマスを水性組成物と接触させて、初期抽出物を得ることと、
（ＢＢ）初期抽出物から固体を除去して、第２の初期抽出物を得ることと、
（ＣＣ）第２の初期抽出物の体積を水性組成物で調整して、調整された第２の初期抽出物を得ることと、
（ＤＤ）イオン交換クロマトグラフィー固定相上で、調整された第２の初期抽出物をクロマトグラフィー処理することと、
（ＥＥ）イオン交換クロマトグラフィー固定相を溶出させて、溶媒を含む第１の溶出液を得ることと、
（ＦＦ）溶媒を除去して、濃縮物を形成することと、
（ＧＧ）濃縮物を濾液及び残余分のうちの少なくとも１つに対して脱色及び脱塩することのうちの少なくとも１つと、を含む、例。
モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を作製するための方法の例であって、方法が、
（ＡＡ）植物バイオマスを水性組成物と接触させて、初期抽出物を得ることと、
（ＢＢ）初期抽出物から固体を除去して、第２の初期抽出物を得ることと、
（ＣＣ）第２の初期抽出物の体積を水性組成物で調整して、調整された第２の初期抽出物を得ることと、
（ＤＤ）イオン交換クロマトグラフィー固定相上で、調整された初期抽出物をクロマトグラフィー処理することと、
（ＥＥ）イオン交換固定相を溶出させて、溶媒を含む第１の溶出液を得ることと、
（ＦＦ）溶媒を除去して、濃縮物を形成することと、
（ＧＧ）濃縮物を脱色及び脱塩することのうちの少なくとも１つを行って、濾液及び残余分のうちの少なくとも１つを得ることと、
（ＨＨ）濾液及び残余分のうちの少なくとも１つを乾燥させて、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を得ることと、を含む、例。
本明細書に記載される方法のステップ（ＡＡ）は、植物バイオマスを水性組成物と接触させて、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩（例えば、四級アンモニウム、ナトリウム、カリウム、リチウム、マグネシウム、及びカルシウム塩）のうちの少なくとも１つを含む初期抽出物を得ることを伴う。
水性組成物は、水を含み得るが、有機溶媒などのいずれの共溶媒も含有し得ない。しかし、水性組成物は、水に加えて共溶媒を含み得る。好適な共溶媒は、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノール及び（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールの混合物などの有機溶媒を含む。（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールによって、式（Ｃ１～Ｃ４）アルキル－ＯＨのアルコールが意味され、「アルキル」は、結果として得られる（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールが、メタノール、エタノール、ｎ－プロパノール、ｎ－ブタノール、イソプロパノール、イソ－ブタノール、ｓｅｃ－ブタノール、及びｔ－ブタノールであるように、メチル、エチル、ｎ－プロピル、ｎ－ブチル、イソプロピル、イソ－ブチル、ｓｅｃ－ブチル、及びｔ－ブチルなどの１～４個の炭素原子を有する直鎖及び分岐状アルキル基を指す。（Ｃ１～Ｃ４）アルカノール又は（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールの混合物などの有機溶媒の割合は、水性組成物が、最大約３０体積％、最大約４０体積％、最大約５０体積％、最大約６０体積％、最大約７０体積％、最大約８０体積％、最大約９０体積％、若しくは最大１００体積％の有機溶媒を含み得、水性組成物が１００体積％の有機溶媒を含む場合を除き、残部は水であるか、又は約３０体積％～約１００体積％、約５０体積％～約１００体積％、約６０体積％～約９０体積％、約３０体積％～約６０体積％、約４０体積％～約６０体積％、約３０体積％～約５０体積％、約４０体積％～約５０体積％、若しくは約５０体積％であり得、残部は水であるように、任意の好適な割合であり得る。
いくつかの例では、水性組成物は、リン酸塩、クエン酸塩、アスコルビン酸塩、乳酸塩、酢酸塩などを含むがこれらに限定されない、任意の好適な緩衝系で緩衝され得る。緩衝液は、１～１０００ｍＭの陰イオンの範囲にあり得る。代替的には、塩酸、硫酸、硝酸などでｐＨ５～６に酸性化された水は、共溶媒の有無に関わらず水性組成物において有用であり得る。代替的には、水酸化ナトリウム又は水酸化カリウムなどの水酸化物でｐＨ７～１１に塩基性にされた純水は、共溶媒の有無に関わらず水性組成物において有用であり得る。更に他の例では、水性組成物の浸透ポテンシャルの平衡を保つ助けとなり得る好適な非イオン性溶質を添加することが、好適であり得る。
本明細書で使用される場合、用語「植物バイオマス」は、一般に、植物源の葉、茎（stalk）、茎（stem）、頂部、根などを含む、モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの１つ以上を含む植物源の任意かつすべての部分を指す。植物バイオマスは、例えば、水性組成物との接触前かつ／又は接触中に植物バイオマスを切断することにより結果として得られる粉砕された形態におけるものを含む任意の好適な形態にあり得る。例えば、植物バイオマスは好適な容器において粉砕され得、水性組成物は粉砕された植物バイオマスに添加され、したがって、植物バイオマスを「接触させる」ことができる。次いで、粉砕された植物バイオマスは、好適な容器内で任意選択的に更に粉砕され得る。又は、植物バイオマスは、水性組成物が添加される好適な容器に配置され、したがって、植物バイオマスを「接触させる」ことができ、結果として得られる組成物は、粉砕され得る。
植物バイオマスは、とりわけ、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つの抽出を最大化するために、接触前かつ／又は接触中に、撹拌、超音波処理、又は他の方法で振盪され得る。
初期抽出物は、粉砕された植物学的植物の葉、茎、頂部、根などが本明細書に記載される方法のステップ（ＢＢ）において除去されるなどの、現状又はバルク固体又は存在する植物固体で、ステップ（ＣＣ）へと遂行され得る。ステップ（ＢＢ）が行われる際、第２の初期抽出物を得る。
バルク固体は、遠心分離、浮遊物除去、又は濾過を含む、任意の好適な方法によって除去され得る。例えば、初期抽出物は、フィルタが、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを実質的に保持しない限り、紙フィルタ（例えば、Ｗｈａｔｍａｎ ４４又は５４低灰濾紙などの低灰濾紙）、ナイロンフィルタ、ポリエーテルスルホンフィルタ、ガラス繊維フィルタ、珪藻土のパッドなどを含む任意の好適なフィルタを通じた重力濾過又は真空濾過を含む任意の好適な濾過方法を使用して濾過され得る。
本明細書に記載される方法のステップ（ＣＣ）は、初期抽出物又は第２の初期抽出物の体積を、それぞれ、第１の水性組成物又は第２の水性組成物で調整して、調整された初期抽出物又は調整された第２の初期抽出物を得ることを伴う。第１及び第２の水性組成物は、異なり得るか、又は同じであり得る。調整された初期抽出物又は調整された第２の初期抽出物は、この時点で濾過され得るか、又は現状でステップ（ＤＤ）を通じて行われ得る。初期抽出物又は第２の初期抽出物は、フィルタが、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを実質的に保持しない限り、紙フィルタ（例えば、Ｗｈａｔｍａｎ ４４又は５４低灰濾紙などの低灰濾紙）、ナイロンフィルタ、ポリエーテルスルホンフィルタ、ガラス繊維フィルタ、珪藻土のパッドなどを含む任意の好適なフィルタを通じた重力濾過又は真空濾過を含む任意の好適な濾過方法を使用して濾過され得る。
初期抽出物又は第２の初期抽出物の体積は、とりわけ、調整されていない初期抽出物又は調整されていない第２の初期抽出物に対して、本明細書に記載される方法のステップ（ＤＤ）で使用されるイオン交換クロマトグラフィーカラムに対する、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つの結合を増加させるために、調整された初期抽出物又は調整された第２の初期抽出物を得るために十分な量の水性組成物（例えば、水）で調整され得る。
初期抽出物又は第２の初期抽出物の体積は、とりわけ、初期抽出物又は第２の初期抽出物に存在する際、有機溶媒の量を調整するように調整され得る。初期抽出物又は第２の初期抽出物の体積は、調整された初期抽出物又は調整された第２の初期抽出物が、約６０体積％未満、約５０体積％未満、約４０体積％未満、約３０体積％未満、約２０体積％未満、約１０％体積％未満、約５体積％未満、約１体積％未満、若しくは更には約０体積％の有機溶媒を含み、残部が水であるか、又は約０体積％～約４０体積％、約０体積％～約３０体積％、約１０体積％～約４０体積％、約１０体積％～約３０体積％、約２０体積％～約４０体積％、約３０体積％～約４０体積％、若しくは約３５体積％の有機溶媒を含み、残部は水であるように、調整され得る。
本明細書に記載される方法のステップ（ＤＤ）は、イオン交換固定相（例えば、弱陰イオン交換固定相）上で、調整された初期抽出物又は第２の初期抽出物をクロマトグラフィー処理することを伴う。クロマトグラフィー処理は、バッチモードにおけるものを含むか、又はカラムを使用する、任意の好適な方法で実行され得る。クロマトグラフィー処理は、溶出液（例えば、約０体積％～約４０体積％、約０体積％～約３０体積％、約１０体積％～約４０体積％、約１０体積％～約３０体積％、約２０体積％～約４０体積％、約３０体積％～約４０体積％、又は約３５体積％の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含み、残部が水である、水性組成物）として水性組成物（例えば、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物）を用いて実行され得、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを弱イオン交換クロマトグラフィーカラムに吸着されるようにし、一方で、カフェイン、クエルシトリン、ヒペロシド、アストラガリン、アビクラリン、ソフォリコシド、及びルチン（ルトシド、ケルセチン－３－Ｏ－ルチノシド、及びソホリンとしても知られる）
Figure 2022524217000010
 並びにそれらの異性体を含む他の化合物を溶出させる。本明細書に記載される方法のステップ（ＤＤ）は、カフェイン、クエルシトリン、ヒペロシド、アストラガリン、アビクラリン、ソフォリコシド、ルチン、及びルチン異性体のうちの少なくとも１つの濃度を、１質量％未満、０．５質量％未満、０．１質量％未満、０．０５質量％未満、０．０１質量％未満、又は０．００１質量％未満の濃度まで減少し得る。したがって、本開示は、０．１質量％未満の、カフェイン、クエルシトリン、ヒペロシド、アストラガリン、アビクラリン、ソフォリコシド、ルチン、及びルチン異性体のうちの少なくとも１つを含む、植物抽出物を企図する。本開示は、０．５質量％未満の、カフェイン、クエルシトリン、ヒペロシド、アストラガリン、アビクラリン、ソフォリコシド、ルチン、及びルチン異性体のうちの各々１つと、組み合わせて約１質量％未満の、カフェイン、クエルシトリン、ヒペロシド、アストラガリン、アビクラリン、ソフォリコシド、ルチン、及びルチン異性体と、を含む、植物抽出物も企図する。本開示は、カフェイン、クエルシトリン、ヒペロシド、アストラガリン、アビクラリン、ソフォリコシド、ルチン、及びルチン異性体のうちの少なくとも１つを効果的に含まない（例えば、カフェインを含まず、クエルシトリンを含まず、アストラガリンを含まず、アビクラリンを含まず、ソフォリコシドを含まず、ルチンを含まず、ルチン異性体を含まない、かつ／又はカフェイン、ルチン、及びルチン異性体を含まない）植物抽出物も企図する。
イオン交換固定相は、非限定的であり、任意の好適なイオン交換クロマトグラフィー固定相であり得る。好適なイオン交換クロマトグラフィー固定相の例は、ＡＮＸ－ＳＥＰＨＡＲＯＳＥ（登録商標）高速流動樹脂、ＤＥＡＥ ＳＥＰＨＡＲＯＳＥ（登録商標）、ＤＥＡＥ ＳＥＰＨＡＤＥＸ（登録商標）Ａ２５樹脂、ＡＭＢＥＲＬＩＴＥ（登録商標）（ＦＰＡ ５３、ＦＰＡ ５５、ＣＧ－５０タイプＩ、ＩＲＣ－５０、ＩＲＣ－５０Ｓ、及びＩＲＰ－６４）、ＤＩＡＩＯＮ ＷＡ１０、及びＤＯＷＥＸ（登録商標）ＣＣＲ－３を含む。
イオン交換クロマトグラフィー固定相は、調整された初期抽出物又は調整された第２の初期抽出物のクロマトグラフィー処理前に、任意選択的に、水性組成物（例えば、約０体積％～約４０体積％、約０体積％～約３０体積％、約１０体積％～約４０体積％、約１０体積％～約３０体積％、約２０体積％～約４０体積％、約３０体積％～約４０体積％、又は約３５体積％の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含み、残部が水である、水性組成物などの水性組成物（例えば、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物）でプレコンディショニングされ得る。例えば、弱イオン交換クロマトグラフィーカラムは、約２ＢＶ／ｈの流速で、約２以上のベッド体積（ＢＶ）でプレコンディショニングされ得る。
弱イオン交換クロマトグラフィーカラムのｐＨは、任意選択的に、調整された初期抽出物又は調整された第２の初期抽出物のクロマトグラフィー処理の前に調整され得る。例えば、弱イオン交換クロマトグラフィーカラムのｐＨ（例えば、樹脂／固定相のｐＨ）が、約１０未満、約９以下、約８以下、約７以下、約６以下、約５以下、約４以下、約３以下のｐＨ、又は約２～約１０、約３～約８、約５～約９、約２～約６、約３～約４、若しくは約３～約６のｐＨであるように、弱イオン交換クロマトグラフィーカラムのｐＨは、任意の好適な酸（例えば、塩酸）を用いてクロマトグラフィー処理の前に調整され得る。弱イオン交換クロマトグラフィーカラムのｐＨは、調整された初期抽出物又は調整された第２の初期抽出物のクロマトグラフィー処理の前に、カラムが任意選択的に（Ｃ１～Ｃ４）を含む水性組成物でプレコンディショニングされる前又は後に、調整され得る。
弱イオン交換クロマトグラフィーカラムのｐＨのプレコンディショニング及び／又は調整後、調整された初期抽出物又は調整された第２の初期抽出物は、２ＢＶ／ｈ（１時間当たりのベッド体積）を超える任意の速度でカラム上に負荷され得る。調整された初期抽出物又は調整された第２の初期抽出物を負荷した後、カラムは、約２ＢＶ／ｈの速度などの任意の好適な速度で、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む任意の好適な体積の水性組成物（例えば、約１０体積％～約４０体積％、約１０体積％～約３０体積％、約２０体積％～約４０体積％、約３０体積％～約４０体積％、又は約３５体積％の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含み、残部が水である、少なくとも約２ＢＶ、少なくとも約３ＢＶ又は少なくとも約４ＢＶの水性組成物）で洗浄され得る。（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物の体積は、とりわけ、カフェイン、クエルシトリン、ヒペロシド、アストラガリン、アビクラリン、ソフォリコシド、ルチン、及びルチン異性体を含有するため、廃棄され得る。
本明細書に記載される方法のステップ（ＥＥ）は、吸着されたモノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを、弱イオン交換クロマトグラフィーカラムから溶出させて、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む第１の溶出液を得ることを伴う。溶出させることは、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つをカラムから溶出させるのに好適な任意の条件下で実行される。
モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを溶出させるのに好適な条件の例は、塩（例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化アンモニウム、硫酸ナトリウム、硫酸カリウム、リン酸ナトリウム、リン酸カリウムなど）を含む任意の好適な体積の溶液でカラムを溶出させることを含む。塩を含む溶液の例は、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノール（例えば、約１０体積％～約６０体積％、約２０体積％～約５０体積％、約３０体積％～約５５体積％、約４０体積％～約６０体積％、又は約５０体積％の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む、少なくとも約２ＢＶ、少なくとも約３ＢＶ又は少なくとも約４ＢＶの水性組成物）を含む水性組成物に溶解した少なくとも１つの塩（例えば、約５重量％～約２５重量％、約１５重量％～約２０重量％又は約５重量％～約１０重量％の塩）を含む溶液を含む。
カラムからモノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを溶出させるための好適な条件の別の例は、酸（例えば、塩酸、硫酸、リン酸、酢酸、ギ酸など）を含む任意の好適な体積の溶液でカラムを溶出させることを含む。酸を含む溶液の例は、塩酸などを含む溶液、及び任意選択的に、約１０体積％～約６０体積％、約２０体積％～約５０体積％、約３０体積％～約５５体積％、約４０体積％～約６０体積％、又は約５０体積％の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノール）を含む水性組成物を含む酸溶液を含む。
溶出させるステップから収集された、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む第１の溶出液は、収集され、その後、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む濃縮物を提供するための任意の好適な手段による、溶媒を除去すること（例えば、水及び（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを除去するための）によって濃縮され得る。溶媒除去は、不活性雰囲気下（例えば、窒素ガス雰囲気下）で達成され得る。任意の特定の理論に束縛されることを望まない一方で、不活性雰囲気下で溶媒除去を実行することは、植物バイオマス中に自然に存在するか、又は本明細書に記載されるステップのうちの１つ以上で形成するいずれかである、高度に着色した高分子物質の形成を低減できることが、考えられる。
モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む第１の溶出液は、溶媒を含む。溶媒は、乾燥するまでステップ（ＦＦ）において除去され得るか、又は、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物の体積が溶媒として残って（例えば、溶出液の元の全体積の約５０％、約４０％、約３０％、約２０％、約１０％又は約５％）、濃縮物を形成する点まで除去され得るが、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物を構成する成分の比率は、吸着されたモノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを溶出させるために使用された（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物を構成する成分の比とは異なっていても異なっていなくてもよい。代替的には、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む溶出液中の溶媒は、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物の体積が残る点まで除去され得、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物は、約１０体積％未満、約５体積％未満、約２体積％未満又は約１体積％未満の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む。
モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む濃縮物を形成するための、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む溶出液から溶媒を除去するための好適な条件は、溶出液の表面上に不活性ガス（例えば、窒素ガス）を吹き込むことを含む。溶出液は、窒素ガスを吹き込む間に加熱され得るか、又は室温（例えば、２５℃）であり得る。溶出液中の溶媒を除去するための他の条件は、溶出液を含む容器に真空を適用することを含む。真空は、室温で、又は容器を加熱しながら、溶出液と共に適用され得る。溶出液中の溶媒を除去するための更に他の条件は、溶出液を薄膜蒸発器又は撹拌された撹拌薄膜蒸発器に通して流すことを含む。
濃縮物のｐＨは、ｐＨ調整された濃縮物を得るためにこの時点で調整され得るが、この時点でｐＨを調整することは、任意選択的である。例えば、濃縮物のｐＨは、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つが分解から保護されるｐＨに調整され得る。好適なｐＨは、約２～約６、約２～約５、約２～約４、約３～約５のｐＨ又は約３．５のｐＨなどの、約６未満、約５未満、約４未満、約３未満又は約２未満のｐＨを含む。濃縮物のｐＨは、任意の好適な酸又は塩基を使用することによって調整され得る。酸が使用される際、酸は、塩酸などであり得る。
濃縮物又はｐＨ調整された濃縮物は、本明細書に記載される方法若しくは除去するステップ（ＦＦ）において現状で扱われ得るか、又は濾過され得る。濃縮物又はｐＨ調整された濃縮物は、任意の好適なフィルタ（例えば、Ｗｈａｔｍａｎ ４４又は５４低灰濾紙などの低灰濾紙）、ナイロンフィルタ、ポリエーテルスルホンフィルタ、ガラス繊維フィルタ、珪藻土のパッドなどを使用して濾過され得る。いくつかの例では、ｐＨ調整された濃縮物は、濃縮物又はｐＨ調整された濃縮物の体積に応じて、例えば、０．２μｍの孔径を有するポリエーテルスルホン（ＰＥＳ）フィルタ、又はプリーツ（平膜、真空濾過）若しくはプリーツＰＥＳ膜などの高分子膜を通して濾過され得る。
モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む濃縮物は、それが、ｐＨ調整されるか、濾過されるか、又はｐＨ調整及び濾過の両方を行われるかに関わらず、乾燥するステップ（ＨＨ）へと直接移され得るか、又は高度に着色し得る濃縮物のステップ（ＧＧ）において脱塩／脱色すること（脱塩に続いて脱色すること、脱色に続いて脱塩すること、脱色するが脱塩しないこと、又は脱塩するが脱色しないことを含むいずれかの順序で）に提供され得る。脱塩／脱色することは、不活性雰囲気下（例えば、窒素ガス雰囲気下）で達成され得る。任意の特定の理論に束縛されることを望まない一方で、不活性雰囲気下で１つ以上のステップを実行することは、植物バイオマス中に自然に存在するか、又は本明細書に記載されるステップのうちの１つ以上で形成するいずれかである、高度に着色した高分子物質の形成を低減できることが、考えられる。
濃縮物は、それが、ｐＨ調整されるか、濾過されるか、又はｐＨ調整及び濾過の両方を行われるかに関わらず、限外濾過（例えば、分子量カットオフ膜、サイズ排除クロマトグラフィー又はゲル透過を通じて濾過すること）を含む任意の好適な手段によって脱色され得る。脱色することから濾液を得る。限外濾過は、とりわけ、高度に着色し得る濃縮物の脱色を達成する。任意の特定の理論に束縛されることを望まない一方で、限外濾過は、植物バイオマス中に自然に存在するか、又は本明細書に記載されるステップのうちの１つ以上で形成するいずれかである、高度に着色した高分子物質を除去することが、考えられる。
脱色することからの濾液は、乾燥するステップ（ＨＨ）へと扱われるか、又はステップ（ＧＧ）で脱塩され得る。代替的には、濃縮物は、ｐＨ調整されるか、濾過されるか、又はｐＨ調整及び濾過の両方を行わるかに関わらず、第１の脱色なしに脱塩され得る。それにもかかわらず、脱塩することは、ナノ濾過膜及び疎水性樹脂を使用して達成され得る。当業者は、ナノ濾過膜及び疎水性樹脂を使用する際に、透過液を廃棄し残余分を維持することを、認識するであろう。一実施例では、脱塩は、約２０体積％未満の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含むｐＨ調整された濃縮物（例えば、約２未満ｐＨを有する酸性化された濃縮物）を負荷するであろう疎水性樹脂（例えば、ＳＥＰＡＢＥＡＤＳ（商標）ＳＰ７０などの多孔性ポリジビニルベンゼン／エチルビニルベンゼンマトリックス）を使用して達成され得る。次いで、樹脂は、希釈アルコール（例えば、残部が約２未満のｐＨを有する水である、約１０体積％未満の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノール）で洗浄され、次いで、約７０体積％の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物で水中に溶出されて、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む脱塩された第２の溶出液を得る。
脱塩することがステップ（ＧＧ）において脱色することに先行する場合、脱塩するステップからの透過液中の溶媒は、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物の体積が溶媒として残って（例えば、溶出液の元の全体積の約５０％、約４０％、約３０％、約２０％、約１０％又は約５％）、第１の脱塩濃縮物を形成する点まで除去され得る。代替的には、脱塩することからの透過液中の溶媒は、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物の体積が残る点まで除去されて、第２の脱塩濃縮物を得ることができ、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物は、約１０体積％未満、約５体積％未満、約２体積％未満又は約１体積％未満の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む。第１の脱塩濃縮物は、第１の脱塩濃縮物が約１０体積％未満、約５体積％未満、約２体積％未満又は約１体積％未満の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールも有するように、第２の脱塩濃縮物の属性も有し得る。
モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む第１／第２の脱塩濃縮物を形成するための、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む透過液から溶媒を除去するための好適な条件は、溶出液の表面上に不活性ガス（例えば、窒素ガス）を吹き込むことを含む。透過液は、窒素ガスを吹き込む間に加熱され得るか、又は室温（例えば、２５℃）であり得る。溶出液中の溶媒を除去するための他の条件は、透過液を含む容器に真空を適用することを含む。真空は、室温で、又は容器を加熱しながら、透過液と共に適用され得る。透過液中の溶媒を除去するための更に他の条件は、透過液を薄膜蒸発器又は撹拌された撹拌薄膜蒸発器に通して流すことを含む。
別の実施例では、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む濃縮物は濾紙を通して濾過されて、第１の濾液を得ることができ、第１の濾液は限外濾過されて、第２の濾液を得、第２の濾液はナノ濾過膜を使用してナノ濾過されて、第１の残余分を得るか、又は第２の濾液は疎水性樹脂を通して溶出されて、脱塩された第２の溶出液を得る。別の実施例では、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む濃縮物は濾紙を通して濾過されて、第１の濾液を得ることができ、第１の濾液はナノ濾過膜を使用してナノ濾過されて、第３の残余分を得るか、又は第１の濾液は疎水性樹脂を通して溶出されて、脱塩された第２の溶出液を得、第３の残余分又は脱塩された第２の溶出液は限外濾過されて、第３の濾液を得る。
本明細書で言及されるように、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む溶出液は、濃縮乾固され得るか、又は（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物の体積が残る点まで濃縮され得る。溶出液が濃縮乾固される場合、乾燥材料は、例えば、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物を使用して再構成され得る。次いで、再構成された材料は、本明細書に記載されるように、とりわけ、脱塩及び脱色のうちの少なくとも１つを行うために濾過され得る。
本明細書に記載される方法は、第１の残余分、脱塩された第２の溶出液又は第３の濾液を乾燥させて、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を得ることを伴うステップ（ＨＨ）を含み得る。第１の残余分、脱塩された第２の溶出液又は第３の濾液は、凍結乾燥又は噴霧乾燥によるものを含む任意の好適な様式で乾燥され得る。
モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸のうちの少なくとも１つを含む組成物を作製するための方法の別の例であって、方法が、
（１）植物バイオマスを水性組成物と接触させて、初期抽出物を得ることと、
（２）初期抽出物から固体を除去して、第２の初期抽出物を得ることと、
（３）第２の初期抽出物を酸性化された酢酸エチルと接触させて、酸性酢酸エチル抽出物を得ることと、
（４）酸性酢酸エチル抽出物を中和して、中和酢酸エチル及び水性抽出物を得ることと、
（５）水性抽出物を脱色して、脱色された水性抽出物を得ることと、
（６）脱色された水性抽出物を乾燥させて、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を得ることと、を含む、例。
ステップ（１）、（２）、及び（６）は、ステップ（ＡＡ）、（ＢＢ）、及び（ＨＨ）について本明細書に記載されるように実行される。ステップ（５）は、ステップ（５）が、分子量カットオフ膜を通して濾過することを含む限外濾過、サイズ排除クロマトグラフィー、及びゲル透過などの脱色プロセスのみを伴うことを除いて、濾過ステップ（ＧＧ）と類似している。したがって、ステップ（ＡＡ）、Ｂ（Ｂ）、（ＧＧ）、及び（ＨＨ）に関する開示は、ステップ（１）、（２）、（５）、及び（６）に適用される。
本明細書に記載される方法のステップ（１）は、植物バイオマスを水性組成物と接触させて、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む初期抽出物を得ることを伴う。
水性組成物は、水を含み得るが、有機溶媒などのいずれの共溶媒も含有し得ない。しかし、水性組成物は、水に加えて共溶媒を含み得る。好適な共溶媒は、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノール及び（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールの混合物などの有機溶媒を含む。（Ｃ１～Ｃ４）アルカノール又は（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールの混合物などの有機溶媒の割合は、水性組成物が、最大約３０体積％、最大約４０体積％、最大約５０体積％若しくは最大約６０体積％の有機溶媒を含み得、残部は水であるか、又は、約３０体積％～約６０体積％、約４０体積％～約６０体積％、約３０体積％～約５０体積％、約４０体積％～約５０体積％、若しくは約５０体積％の有機溶媒を含み得、残部は水であるような、任意の好適な割合である。
いくつかの例では、水性組成物は、リン酸塩、クエン酸塩、アスコルビン酸塩、乳酸塩、酢酸塩などを含むがこれらに限定されない、任意の好適な緩衝系で緩衝され得る。緩衝液は、１～１０００ｍＭの陰イオンの範囲にあり得る。代替的には、塩酸、リン酸、硫酸、硝酸などでｐＨ５～６に酸性化された水は、共溶媒の有無に関わらず水性組成物において有用であり得る。代替的には、水酸化ナトリウム又は水酸化カリウムなどの水酸化物でｐＨ７～１１に塩基性にされた純水は、共溶媒の有無に関わらず水性組成物において有用であり得る。更に他の例では、水性組成物の浸透ポテンシャルの平衡を保つ助けとなり得る好適な非イオン性溶質を添加することが、好適であり得る。
植物バイオマスは、とりわけ、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つの抽出を最大化するために、ステップ（１）の接触前かつ／又は接触中に、撹拌、超音波処理、又は他の方法で振盪され得る。
初期抽出物は、粉砕された植物の葉、茎、頂部、根などが本明細書に記載される方法のステップ（２）において除去されるなどの、現状又はバルク固体又は存在する植物固体で、ステップ（３）へと遂行され得る。ステップ（２）が行われる際、第２の初期抽出物を得る。
バルク固体は、遠心分離、浮遊物除去、又は濾過を含む、任意の好適な方法によって除去され得る。例えば、初期抽出物は、フィルタが、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを実質的に保持しない限り、紙フィルタ（例えば、Ｗｈａｔｍａｎ ４４又は５４低灰濾紙などの低灰濾紙）、ナイロンフィルタ、ポリエーテルスルホンフィルタ、ガラス繊維フィルタ、珪藻土のパッドなどを含む任意の好適なフィルタを通じた重力濾過又は真空濾過を含む任意の好適な濾過方法を使用して濾過され得る。
ステップ（３）を実施する前に、任意選択的に、初期又は第２の初期抽出物のｐＨを好適な酸で調整できる。（例えば、塩酸など）又は好適な塩基（例えば、水酸化ナトリウム）を、約４～約７のｐＨ。次いで、ｐＨ調整された初期又は第２の初期抽出物は、本明細書に記載されるように予め酸性化されていない酢酸エチルで抽出される。任意の特定の理論に束縛されることを望まない一方で、初期又は第２の初期抽出物のｐＨが約４～約７に調整される際、水層に目的の化合物（例えば、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩）を維持しながら、ある特定の不純物を酢酸エチル中に抽出することは可能であることが、考えられる。
本明細書に記載される方法のステップ（３）は、第１又は第２の初期抽出物を酸性化された酢酸エチルと接触させて、酸性酢酸エチル抽出物を得ることを伴う。酸性化された酢酸エチルは、塩酸、硫酸、及び氷酢酸（例えば、０．０１～１％体積／体積）を含む任意の好適な酸を添加することによるものを含む、任意の好適な様式で調製され得る。酸性酢酸エチル抽出物は、水で洗浄される（例えば、１：１体積／体積の水で３回）。これらの条件下では、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸のうちの少なくとも１つは、実質的にそれらの共役酸形態にあり、酸性酢酸エチル抽出物が水で洗浄される際に形成する酸性酢酸エチル層内に実質的に存在することになる。水層は廃棄され、酸性酢酸エチル抽出物はステップ（４）に進められる。
本明細書に記載される方法のステップ（３）は、本明細書に記載されるように予め酸性化されていない酢酸エチルを使用することによるが、代わりに、初期又は第２の初期抽出物のｐＨを好適な酸で調整することによるものを含む、他の好適な方法で行われ得る。（例えば、塩酸など）、次いで、予め酸性化されていない酢酸エチルでｐＨ調整された初期又は第２の初期抽出物を抽出する。初期抽出物又は第２の初期抽出物のｐＨを調整するために使用される酸に関わらず、初期抽出物又は第２の初期抽出物のｐＨは、約４以下、３以下、約２以下、又は約１以下に調整される。水層は廃棄され、生じる酸性酢酸エチル抽出物はステップ（４）に進められる。
本明細書に記載される方法のステップ（４）は、酸性酢酸エチル抽出物を中和して、中和酢酸エチル及び水性抽出物を得ることを含む。このことは、酸性酢酸エチル抽出物を、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムなど、及びそれらの組み合わせなどの好適な塩基を含む水で洗浄すること（例えば、１：１体積／体積の水で３回）を含む、任意の好適な方法で達成される。これらの条件下では、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸のうちの少なくとも１つは、実質的にそれらの共役塩基形態にあり、酸性酢酸エチル抽出物が好適な塩基を含む水で洗浄される際に形成する水層内に実質的に存在することになる。
ステップ（４）に対する代替的な任意選択的ステップ（４－ａ）では、ステップ（３）から生じる酸性酢酸エチル抽出物は、任意選択的に、除去され、更に乾燥するまで除去され得る。残る任意の固体は、ｐＨ中性水（例えば、脱イオン水）で再構成され得、次いで、水のｐＨは約３～約７に調整されるか、又は残る固体は、約３～約７のｐＨを有する水で再構成されるかのいずれかであり得る。
次いで、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む水性抽出物は、それらがステップ（４）又はステップ（４－ａ）から生じるかどうかに関わらず、ステップ（５）に提供されて、とりわけ、高度に着色され得る水性抽出物の脱色を達成することができる。脱色は、限外濾過（例えば、分子量カットオフ膜、サイズ排除クロマトグラフィー、又はゲル浸透を通して濾過すること）を含む任意の好適な手段によって達成され得る。脱色することから濾液を得る。限外濾過は、とりわけ、高度に着色し得る濃縮物の脱色を達成する。任意の特定の理論に束縛されることを望まない一方で、限外濾過は、植物バイオマス中に自然に存在するか、又は本明細書に記載されるステップのうちの１つ以上で形成するいずれかである、高度に着色した高分子物質を除去することが、考えられる。
ステップ（１）～（６）（代替的な任意選択的ステップ（４－ａ）を含むを含む本明細書に記載される方法に対する改変の別の例は、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を作製するための方法を含み、方法は、
植物バイオマスを水性組成物と接触させて、初期抽出物を得ることと、
初期抽出物から固体を除去して、第２の初期抽出物を得ることと、
第２の初期抽出物のｐＨを約４～約７のｐＨに調整して、第１のｐＨ調整された第２の初期抽出物を得ることと、
第１のｐＨ調整された第２の初期抽出物を酢酸エチルと接触させて、第１の酢酸エチル抽出物及び第２の水性抽出物を得ることと、
第２の水性抽出物のｐＨを２未満のｐＨに調整して、ｐＨ調整された第２の水性抽出物を得ることと、
ｐＨ調整された第２の水性抽出物を酢酸エチルと接触させて、第２の酢酸エチル抽出物を得ることと、
第２の酢酸エチル抽出物から酢酸エチルを除去して、精製組成物を得ることと、
粗組成物を水で再構成して、第３の水性抽出物を得ることと、
第３の水性抽出物を脱色して、脱色された水性抽出物を得ることと、を含む。
「精製組成物」は、目的の化合物（例えば、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つ）を含み、「精製組成物」は、初期抽出物及び第２の初期抽出物にある特定の不純物を含有しないが、植物バイオマス中に自然に存在するか、又は本明細書に記載されるステップのうちの１つ以上で形成するかのいずれかであり、脱色するステップで除去される、高度に着色した高分子物質を含有するという点で、少なくとも初期抽出物及び第２の初期抽出物に対して精製される。
ステップ（１）～（６）（代替的な任意選択的ステップ（４－ａ）を含むを含む本明細書に記載される方法に対する改変の更に別の例は、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を作製するための方法を含み、方法は、
植物バイオマスを水性組成物と接触させて、初期抽出物を得ることと、
初期抽出物から固体を除去して、第２の初期抽出物を得ることと、
第２の初期抽出物のｐＨを約２未満のｐＨに調整して、第２のｐＨ調整された第２の初期抽出物を得ることと、
第２のｐＨ調整された第２の初期抽出物を酢酸エチルと接触させて、第３の酢酸エチル抽出物を得ることと、
第３の酢酸エチル抽出物を中和して、第１の中和酢酸エチル抽出物及び第３の水性抽出物を得ることと、
第３の水性抽出物を脱色して、脱色された水性抽出物を得ることと、を含む。
本明細書に記載される方法は、脱色された水性抽出物を乾燥させて、カフェ酸、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を得ることを伴うステップ（６）を含み得る。第１若しくは第２の残余分又は第３の濾液は、凍結乾燥又は噴霧乾燥によるものを含む任意の好適な様式で乾燥され得る。
モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を作製するための方法の例であって、方法が、
（Ａ１）植物バイオマスを水性組成物と接触させて、初期抽出物を得ることと、
（Ａ２）初期抽出物の体積を調整して、第２の初期抽出物を得ることと、
（Ａ３）第２の初期抽出物を酢酸エチルと接触させて、水性画分を得ることと、
（Ａ４）水性画分を酸性化させ、酢酸エチルと接触して、酢酸エチル画分を得ることと、
（Ａ５）酢酸エチル画分を乾燥及び再構成して、脱色された画分を得ることと、
（Ａ６）イオン交換クロマトグラフィー固定相上で、脱色された画分をクロマトグラフィー処理することと、
（Ａ７）イオン交換クロマトグラフィー固定相を溶出させて、溶媒を含む第１の溶出液を得ることと、
（Ａ８）溶媒を除去して、濃縮物を形成することと、
（Ａ９）濃縮物を脱塩して、脱塩濃縮物を形成することと、
（Ａ１０）脱塩濃縮物を乾燥させて、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を得ることと、を含む、例。
本明細書に記載される方法のステップ（Ａ１）は、植物バイオマスを水性組成物と接触させて、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩（例えば、四級アンモニウム、ナトリウム、カリウム、リチウム、マグネシウム、及びカルシウム塩）のうちの少なくとも１つを含む初期抽出物を得ることを伴う。
水性組成物は、水を含み得るが、有機溶媒などのいずれの共溶媒も含有し得ない。しかし、水性組成物は、水に加えて共溶媒を含み得る。好適な共溶媒は、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノール及び（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールの混合物などの有機溶媒を含む。（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールによって、式（Ｃ１～Ｃ４）アルキル－ＯＨのアルコールが意味され、「アルキル」は、結果として得られる（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールが、メタノール、エタノール、ｎ－プロパノール、ｎ－ブタノール、イソプロパノール、イソ－ブタノール、ｓｅｃ－ブタノール、及びｔ－ブタノールであるように、メチル、エチル、ｎ－プロピル、ｎ－ブチル、イソプロピル、イソ－ブチル、ｓｅｃ－ブチル、及びｔ－ブチルなどの１～４個の炭素原子を有する直鎖及び分岐状アルキル基を指す。（Ｃ１～Ｃ４）アルカノール又は（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールの混合物などの有機溶媒の割合は、水性組成物が、最大約３０体積％、最大約４０体積％、最大約５０体積％、最大約６０体積％、最大約７０体積％、最大約８０体積％、最大約９０体積％、若しくは最大１００体積％の有機溶媒を含み得、水性組成物が１００体積％の有機溶媒を含む場合を除き、残部は水であるか、又は約３０体積％～約１００体積％、約５０体積％～約１００体積％、約６０体積％～約９０体積％、約３０体積％～約６０体積％、約４０体積％～約６０体積％、約３０体積％～約５０体積％、約４０体積％～約５０体積％、若しくは約５０体積％であり得、残部は水であるように、任意の好適な割合であり得る。
いくつかの例では、水性組成物は、リン酸塩、クエン酸塩、アスコルビン酸塩、乳酸塩、酢酸塩などを含むがこれらに限定されない、任意の好適な緩衝系で緩衝され得る。緩衝液は、１～１０００ｍＭの陰イオンの範囲にあり得る。代替的には、塩酸、硫酸、硝酸などでｐＨ５～６に酸性化された水は、共溶媒の有無に関わらず水性組成物において有用であり得る。代替的には、水酸化ナトリウム又は水酸化カリウムなどの水酸化物でｐＨ７～１１に塩基性にされた純水は、共溶媒の有無に関わらず水性組成物において有用であり得る。更に他の例では、水性組成物の浸透ポテンシャルの平衡を保つ助けとなり得る好適な非イオン性溶質を添加することが、好適であり得る。
本明細書で使用される場合、用語「植物バイオマス」は、一般に、植物源の葉、茎（stalk）、茎（stem）、頂部、根などを含む、モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの１つ以上を含む植物源の任意かつすべての部分を指す。植物バイオマスは、例えば、水性組成物との接触前かつ／又は接触中に植物バイオマスを切断することにより結果として得られる粉砕された形態におけるものを含む任意の好適な形態にあり得る。例えば、植物バイオマスは好適な容器において粉砕され得、水性組成物は粉砕された植物バイオマスに添加され、したがって、植物バイオマスを「接触させる」ことができる。次いで、粉砕された植物バイオマスは、好適な容器内で任意選択的に更に粉砕され得る。又は、植物バイオマスは、水性組成物が添加される好適な容器に配置され、したがって、植物バイオマスを「接触させる」ことができ、結果として得られる組成物は、粉砕され得る。
植物バイオマスは、とりわけ、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つの抽出を最大化するために、接触前かつ／又は接触中に、撹拌、超音波処理、又は他の方法で振盪され得る。
初期抽出物は、粉砕された植物学的植物の葉、茎、頂部、根などが本明細書に記載される方法のステップ（Ａ１）において除去されるなどの、現状又はバルク固体又は存在する植物固体で、ステップ（Ｂ１）へと遂行され得る。
バルク固体は、遠心分離、浮遊物除去、又は濾過を含む、任意の好適な方法によって除去され得る。例えば、初期抽出物は、フィルタが、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを実質的に保持しない限り、紙フィルタ（例えば、Ｗｈａｔｍａｎ ４４又は５４低灰濾紙などの低灰濾紙）、ナイロンフィルタ、ポリエーテルスルホンフィルタ、ガラス繊維フィルタ、珪藻土のパッドなどを含む任意の好適なフィルタを通じた重力濾過又は真空濾過を含む任意の好適な濾過方法を使用して濾過され得る。
本明細書に記載される方法のステップ（Ａ２）は、それぞれ、初期抽出物の体積を第１の水性組成物で調整して、第２の初期抽出物を得ることを伴う。第２の初期抽出物は、この時点で濾過され得るか、又は現状でステップ（Ｃ３）へと遂行され得る。第２の初期抽出物は、フィルタが、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを実質的に保持しない限り、紙フィルタ（例えば、Ｗｈａｔｍａｎ ４４又は５４低灰濾紙などの低灰濾紙）、ナイロンフィルタ、ポリエーテルスルホンフィルタ、ガラス繊維フィルタ、珪藻土のパッドなどを含む任意の好適なフィルタを通じた重力濾過又は真空濾過を含む任意の好適な濾過方法を使用して濾過され得る。
初期抽出物の体積は、とりわけ、第２の初期抽出物に存在する際、有機溶媒の量を調整するように調整され得る。初期抽出物の体積は、第２の初期抽出物が、約６０体積％未満、約５０体積％未満、約４０体積％未満、約３０体積％未満、約２０体積％未満、約１０％体積％未満、約５体積％未満、約１体積％未満、若しくは更には約０体積％の有機溶媒を含み、残部が水であるか、又は約０体積％～約４０体積％、約０体積％～約３０体積％、約１０体積％～約４０体積％、約１０体積％～約３０体積％、約２０体積％～約４０体積％、約３０体積％～約４０体積％、若しくは約３５体積％の有機溶媒を含み、残部は水であるように、調整され得る。
本明細書に記載される方法のステップ（Ａ３）は、第２の初期抽出物を酢酸エチルと接触させて、水性画分を得ることを伴う。第２の初期抽出物は、等量の水、続いて、等量の酢酸エチルで希釈され、振盪され、結果として得られる水性画分は、保持される。
本明細書に記載される方法のステップ（Ａ４）は、水性画分を酸性化させ、酢酸エチルと接触して、酢酸エチル画分を得ることを伴う。水性分画は酸性化され、等量の酢酸エチルは、添加され、振盪され、酢酸エチル画分は保持され、第２の水性画分は廃棄される。任意選択的に、第２の水性画分は、保持され、酢酸エチルで２回抽出されて、第２の酢酸エチル画分を得ることもできる。
本明細書に記載される方法のステップ（Ａ５）は、酢酸エチル画分を乾燥及び再構成して、脱色された画分を得ることを伴う。保持された酢酸エチル画分（及び第２の酢酸エチル画分）は、乾燥されて溶媒を除去し、次いで、水で再構成されて、脱色した画分を得る。
本明細書に記載される方法のステップ（Ａ６）は、イオン交換固定相（例えば、弱陰イオン交換固定相）上の脱色された画分をクロマトグラフィー処理することを伴う。クロマトグラフィー処理は、バッチモードにおけるものを含むか、又はカラムを使用する、任意の好適な方法で実行され得る。クロマトグラフィー処理は、溶出液（例えば、約０体積％～約４０体積％、約０体積％～約３０体積％、約１０体積％～約４０体積％、約１０体積％～約３０体積％、約２０体積％～約４０体積％、約３０体積％～約４０体積％、又は約３５体積％の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含み、残部が水である、水性組成物）として水性組成物（例えば、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物）を用いて実行され得、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを弱イオン交換クロマトグラフィーカラムに吸着されるようにし、一方で、他の化合物を溶出させる。
イオン交換固定相は、非限定的であり、任意の好適なイオン交換クロマトグラフィー固定相であり得る。好適なイオン交換クロマトグラフィー固定相の例は、ＡＮＸ－ＳＥＰＨＡＲＯＳＥ（登録商標）高速流動樹脂、ＤＥＡＥ ＳＥＰＨＡＲＯＳＥ（登録商標）、ＤＥＡＥ ＳＥＰＨＡＤＥＸ（登録商標）Ａ２５樹脂、ＡＭＢＥＲＬＩＴＥ（登録商標）（ＦＰＡ ５３、ＦＰＡ ５５、ＣＧ－５０タイプＩ、ＩＲＣ－５０、ＩＲＣ－５０Ｓ、及びＩＲＰ－６４）、ＤＩＡＩＯＮ ＷＡ１０、及びＤＯＷＥＸ（登録商標）ＣＣＲ－３を含む。
イオン交換クロマトグラフィー固定相は、調整された初期抽出物又は調整された第２の初期抽出物のクロマトグラフィー処理前に、任意選択的に、水性組成物（例えば、約０体積％～約４０体積％、約０体積％～約３０体積％、約１０体積％～約４０体積％、約１０体積％～約３０体積％、約２０体積％～約４０体積％、約３０体積％～約４０体積％、又は約３５体積％の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含み、残部が水である、水性組成物などの水性組成物（例えば、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物）でプレコンディショニングされ得る。例えば、弱イオン交換クロマトグラフィーカラムは、約２ＢＶ／ｈの流速で、約２以上のベッド体積（ＢＶ）でプレコンディショニングされ得る。
弱イオン交換クロマトグラフィーカラムのｐＨは、任意選択的に、調整された初期抽出物又は調整された第２の初期抽出物のクロマトグラフィー処理の前に調整され得る。例えば、弱イオン交換クロマトグラフィーカラムのｐＨ（例えば、樹脂／固定相のｐＨ）が、約１０未満、約９以下、約８以下、約７以下、約６以下、約５以下、約４以下、約３以下のｐＨ、又は約２～約１０、約３～約８、約５～約９、約２～約６、約３～約４、若しくは約３～約６のｐＨであるように、弱イオン交換クロマトグラフィーカラムのｐＨは、任意の好適な酸（例えば、塩酸）を用いてクロマトグラフィー処理の前に調整され得る。弱イオン交換クロマトグラフィーカラムのｐＨは、調整された初期抽出物又は調整された第２の初期抽出物のクロマトグラフィー処理の前に、カラムが任意選択的に（Ｃ１～Ｃ４）を含む水性組成物でプレコンディショニングされる前又は後に、調整され得る。
弱イオン交換クロマトグラフィーカラムのｐＨのプレコンディショニング及び／又は調整後、調整された初期抽出物又は調整された第２の初期抽出物は、２ＢＶ／ｈ（１時間当たりのベッド体積）を超える任意の速度でカラム上に負荷され得る。調整された初期抽出物又は調整された第２の初期抽出物を負荷した後、カラムは、約２ＢＶ／ｈの速度などの任意の好適な速度で、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む任意の好適な体積の水性組成物（例えば、約１０体積％～約４０体積％、約１０体積％～約３０体積％、約２０体積％～約４０体積％、約３０体積％～約４０体積％、又は約３５体積％の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含み、残部が水である、少なくとも約２ＢＶ、少なくとも約３ＢＶ又は少なくとも約４ＢＶの水性組成物）で洗浄され得る。（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物の体積は、とりわけ、カフェイン、クエルシトリン、ヒペロシド、アストラガリン、アビクラリン、ソフォリコシド、ルチン、及びルチン異性体を含有するため、廃棄され得る。
本明細書に記載される方法のステップ（Ａ７）は、吸着されたモノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを、弱イオン交換クロマトグラフィーカラムから溶出させて、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む第１の溶出液を得ることを伴う。溶出させることは、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つをカラムから溶出させるのに好適な任意の条件下で実行される。
モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを溶出させるのに好適な条件の例は、塩（例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化アンモニウム、硫酸ナトリウム、硫酸カリウム、リン酸ナトリウム、リン酸カリウムなど）を含む任意の好適な体積の溶液でカラムを溶出させることを含む。塩を含む溶液の例は、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノール（例えば、約１０体積％～約６０体積％、約２０体積％～約５０体積％、約３０体積％～約５５体積％、約４０体積％～約６０体積％、又は約５０体積％の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む、少なくとも約２ＢＶ、少なくとも約３ＢＶ又は少なくとも約４ＢＶの水性組成物）を含む水性組成物に溶解した少なくとも１つの塩（例えば、約５重量％～約２５重量％、約１５重量％～約２０重量％又は約５重量％～約１０重量％の塩）を含む溶液を含む。
カラムからモノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを溶出させるための好適な条件の別の例は、酸（例えば、塩酸、硫酸、リン酸、酢酸、ギ酸など）を含む任意の好適な体積の溶液でカラムを溶出させることを含む。酸を含む溶液の例は、塩酸などを含む溶液、及び任意選択的に、約１０体積％～約６０体積％、約２０体積％～約５０体積％、約３０体積％～約５５体積％、約４０体積％～約６０体積％、又は約５０体積％の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノール）を含む水性組成物を含む酸溶液を含む。
溶出させるステップから収集された、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む第１の溶出液は、収集され、その後、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む濃縮物を提供するための任意の好適な手段による、溶媒を除去すること（例えば、水及び（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを除去するための）によって濃縮され得る。溶媒除去は、不活性雰囲気下（例えば、窒素ガス雰囲気下）で達成され得る。任意の特定の理論に束縛されることを望まない一方で、不活性雰囲気下で溶媒除去を実行することは、植物バイオマス中に自然に存在するか、又は本明細書に記載されるステップのうちの１つ以上で形成するいずれかである、高度に着色した高分子物質の形成を低減できることが、考えられる。
モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む第１の溶出液は、溶媒を含む。溶媒は、乾燥するまでステップ（Ａ８）において除去され得るか、又は、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物の体積が溶媒として残って（例えば、溶出液の元の全体積の約５０％、約４０％、約３０％、約２０％、約１０％又は約５％）、濃縮物を形成する点まで除去され得るが、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物を構成する成分の比率は、吸着されたモノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを溶出させるために使用された（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物を構成する成分の比とは異なっていても異なっていなくてもよい。代替的には、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む溶出液中の溶媒は、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物の体積が残る点まで除去され得、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物は、約１０体積％未満、約５体積％未満、約２体積％未満又は約１体積％未満の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む。
モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む濃縮物を形成するための、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む溶出液から溶媒を除去するための好適な条件は、溶出液の表面上に不活性ガス（例えば、窒素ガス）を吹き込むことを含む。溶出液は、窒素ガスを吹き込む間に加熱され得るか、又は室温（例えば、２５℃）であり得る。溶出液中の溶媒を除去するための他の条件は、溶出液を含む容器に真空を適用することを含む。真空は、室温で、又は容器を加熱しながら、溶出液と共に適用され得る。溶出液中の溶媒を除去するための更に他の条件は、溶出液を薄膜蒸発器又は撹拌された撹拌薄膜蒸発器に通して流すことを含む。
モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む濃縮物は、乾燥ステップ（Ａ１０）に直接移され得るか、又はステップ（Ａ９）において脱塩するために提供され得る。
脱色することからの濾液は、乾燥するステップ（Ａ１０）へと扱われるか、又はステップ（Ａ９）で脱塩され得る。脱塩することは、疎水性樹脂を使用して達成され得る。一実施例では、脱塩することは、樹脂上に濃縮物を負荷する疎水性樹脂（例えば、Ｄｉａｉｏｎ ＳＰ７０）を使用して達成され得る。次いで、樹脂は、希釈アルコール（例えば、残部が約２未満のｐＨを有する水である、約１０体積％未満の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノール）で洗浄され、次いで、約７０体積％の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物で水中に溶出されて、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む脱塩された濃縮物を得る。
本明細書に記載される方法は、脱塩濃縮物を乾燥させて、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を得ることを伴うステップ（Ａ１０）を含み得る。脱塩濃縮物は、凍結乾燥又は噴霧乾燥によるものを含む任意の好適な様式で乾燥され得る。
単一のクロマトグラフィー処理ステップ
一態様では、モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を作製するための方法は、方法が、カフェイン、ルチン、ルチン異性体、及び例えば、以下の表２に列挙される化合物を含む下記のような他の異味化合物などの他の異味化合物の低減し好ましい含有量レベルで、モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸及び塩のうちの少なくとも１つの増加した量をもたらす場合、好ましい。一態様では、モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を作製するための方法は、方法が、カフェイン、ルチン、ルチン異性体、及び下記の表２におけるような他の異味化合物などの他の異味化合物の低減したレベルで、少なくとも１つのモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸及びそれらの塩の増加した量をもたらす場合、好ましい。一態様では、方法は、方法が異味化合物の許容可能に低減された含有量レベルを達成するようにステップの数を低減する場合、好ましい。一態様では、方法は、方法が、以下のそれぞれの許容可能なカットオフ値で下記の表２におけるような１つ以上の異味化合物を有する、モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩の組成物を達成するようにステップの数を低減する場合、好ましい。例えば、生成される異味化合物の許容可能に低減された含有量レベルを達成するようにステップの数を低減するそのような方法は、許容可能な生成物を生成するのに必要とされるコスト及び／又は時間を低減するため、商業的に有利である。一態様では、生成された異味化合物の許容可能に低減された含有量レベルを達成するようにステップの数を低減する方法の例は、単一のクロマトグラフィー処理ステップを含む。例えば、生成された異味化合物の許容可能に低減された含有量レベルを達成するようにステップの数を低減する方法は、単一のクロマトグラフィー処理ステップを含み得、生成された異味化合物の許容可能に低減された含有量レベルを依然として達成しながら、脱色及び脱塩ステップを排除できる。生成された異味化合物の許容可能に低減された含有量レベルを達成するようにステップの数を低減しながら、モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を作製するための方法の例は、
（Ｂ１）植物バイオマスを水性組成物と接触させて、初期抽出物を得ることと、
（Ｂ２）任意選択的に、初期抽出物から固体を濾過／除去することと、
（Ｂ３）イオン交換クロマトグラフィー固定相上で初期抽出物をクロマトグラフィー処理することと、
（Ｂ４）第１の溶出組成物で固定相を溶出させて、第１の溶出液を得ることと、
（Ｂ５）第２の溶出組成物で固定相を溶出させて、第２の溶出液を得ることと、
（Ｂ６）溶媒除去及び／又は乾燥と、を含む。
本明細書に記載される方法のステップ（Ｂ１）は、植物バイオマスを水性組成物と接触させて、モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩（例えば、四級アンモニウム、ナトリウム、カリウム、リチウム、マグネシウム、及びカルシウム塩）のうちの少なくとも１つを含む初期抽出物を得ることを伴う。
水性組成物は、水を含み得、水に加えて共溶媒を含み得る。好適な共溶媒は、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノール及び（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールの混合物などの有機溶媒を含む。（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールによって、式（Ｃ１～Ｃ４）アルキル－ＯＨのアルコールが意味され、「アルキル」は、結果として得られる（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールが、メタノール、エタノール、ｎ－プロパノール、ｎ－ブタノール、イソプロパノール、イソ－ブタノール、ｓｅｃ－ブタノール、及びｔ－ブタノールであるように、メチル、エチル、ｎ－プロピル、ｎ－ブチル、イソプロピル、イソ－ブチル、ｓｅｃ－ブチル、及びｔ－ブチルなどの１～４個の炭素原子を有する直鎖及び分岐状アルキル基を指す。（Ｃ１～Ｃ４）アルカノール又は（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールの混合物などの有機溶媒の割合は、水性組成物が、最大約３０体積％、最大約４０体積％、最大約５０体積％、最大約６０体積％、最大約７０体積％、最大約８０体積％、最大約９０体積％、若しくは最大１００体積％の有機溶媒を含み得、水性組成物が１００体積％の有機溶媒を含む場合を除き、残部は水であるか、又は約３０体積％～約１００体積％、約５０体積％～約１００体積％、約６０体積％～約９０体積％、約３０体積％～約６０体積％、約４０体積％～約６０体積％、約３０体積％～約５０体積％、約４０体積％～約５０体積％、若しくは約５０体積％であり得、残部は水であるように、任意の好適な割合であり得る。
いくつかの例では、水性組成物は、リン酸塩、クエン酸塩、アスコルビン酸塩、乳酸塩、酢酸塩などを含むがこれらに限定されない、任意の好適な緩衝系で緩衝され得る。緩衝液は、１～１０００ｍＭの陰イオンの範囲にあり得る。代替的には、塩酸、硫酸、硝酸などでｐＨ５～６に酸性化された水は、共溶媒の有無に関わらず水性組成物において有用であり得る。代替的には、水酸化ナトリウム又は水酸化カリウムなどの水酸化物でｐＨ７～１１に塩基性にされた純水は、共溶媒の有無に関わらず水性組成物において有用であり得る。更に他の例では、水性組成物の浸透ポテンシャルの平衡を保つ助けとなり得る好適な非イオン性溶質を添加することが、好適であり得る。
本明細書で使用される場合、用語「植物バイオマス」は、一般に、植物源の葉、茎（stalk）、茎（stem）、頂部、根などを含む、モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの１つ以上を含む植物源（例えば、表１に列挙されるような植物源）の任意かつすべての部分を指す。植物バイオマスは、例えば、水性組成物との接触前かつ／又は接触中に植物バイオマスを切断することにより結果として得られる粉砕された形態におけるものを含む任意の好適な形態にあり得る。例えば、植物バイオマスは好適な容器において粉砕され得、水性組成物は粉砕された植物バイオマスに添加され、したがって、植物バイオマスを「接触させる」ことができる。次いで、粉砕された植物バイオマスは、好適な容器内で任意選択的に更に粉砕され得る。又は、植物バイオマスは、水性組成物が添加される好適な容器に配置され、したがって、植物バイオマスを「接触させる」ことができ、結果として得られる組成物は、粉砕され得る。
植物バイオマスは、とりわけ、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つの抽出を最大化するために、接触前かつ／又は接触中に、撹拌、超音波処理、又は他の方法で振盪され得る。
初期抽出物は、粉砕された植物学的植物の葉、茎、頂部、根などが本明細書に記載される方法のステップ（Ｂ２）において除去されるなどの、現状又はバルク固体又は存在する植物固体で、ステップ（Ｂ３）へと遂行され得る。ステップ（Ｂ２）が行われる際、１つのものは、第２の初期抽出物を得る。
バルク固体は、遠心分離、浮遊物除去、又は濾過を含む、任意の好適な方法によって除去され得る。例えば、初期抽出物は、フィルタが、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを実質的に保持しない限り、紙フィルタ（例えば、Ｗｈａｔｍａｎ ４４又は５４低灰濾紙などの低灰濾紙）、ナイロンフィルタ、ポリエーテルスルホンフィルタ、ガラス繊維フィルタ、珪藻土のパッドなどを含む任意の好適なフィルタを通じた重力濾過又は真空濾過を含む任意の好適な濾過方法を使用して濾過され得る。
本明細書に記載される方法のステップ（Ｂ３）は、イオン交換固定相（例えば、弱陰イオン交換固定相）上で、初期抽出物又は第２の初期抽出物をクロマトグラフィー処理することを伴う。クロマトグラフィー処理は、バッチモードにおけるものを含むか、又はカラムを使用する、任意の好適な方法で実行され得る。クロマトグラフィー処理は、溶出液（例えば、約０体積％～約４０体積％、約０体積％～約３０体積％、約１０体積％～約４０体積％、約１０体積％～約３０体積％、約２０体積％～約４０体積％、約３０体積％～約４０体積％、又は約３５体積％の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含み、残部が水である、水性組成物）として水性組成物（例えば、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物）を用いて実行され得、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを弱イオン交換クロマトグラフィーカラムに吸着されるようにし、一方で、カフェイン、クエルシトリン、ヒペロシド、アストラガリン、アビクラリン、ソフォリコシド、及びルチン（ルトシド、ケルセチン－３－Ｏ－ルチノシド、及びソホリンとしても知られる）
Figure 2022524217000011
 並びにそれらの異性体を含む他の化合物を溶出させる。
本明細書に記載される方法のステップ（Ｂ３～Ｂ５）は、カフェイン、クエルシトリン、ヒペロシド、アストラガリン、アビクラリン、ソフォリコシド、ルチン、及びルチン異性体のうちの少なくとも１つの濃度を、１質量％未満、０．５質量％未満、０．１質量％未満、０．０５質量％未満、０．０１質量％未満、又は０．００１質量％未満の濃度まで減少し得る。したがって、本開示は、０．１質量％未満の、カフェイン、クエルシトリン、ヒペロシド、アストラガリン、アビクラリン、ソフォリコシド、ルチン、及びルチン異性体のうちの少なくとも１つを含む、植物抽出物を企図する。本開示は、０．５質量％未満の、カフェイン、クエルシトリン、ヒペロシド、アストラガリン、アビクラリン、ソフォリコシド、ルチン、及びルチン異性体のうちの各々１つと、組み合わせて約１質量％未満の、カフェイン、クエルシトリン、ヒペロシド、アストラガリン、アビクラリン、ソフォリコシド、ルチン、及びルチン異性体と、を含む、植物抽出物も企図する。本開示は、カフェイン、クエルシトリン、ヒペロシド、アストラガリン、アビクラリン、ソフォリコシド、ルチン、及びルチン異性体のうちの少なくとも１つを効果的に含まない（例えば、カフェインを含まず、クエルシトリンを含まず、アストラガリンを含まず、アビクラリンを含まず、ソフォリコシドを含まず、ルチンを含まず、ルチン異性体を含まない、かつ／又はカフェイン、ルチン、及びルチン異性体を含まない）植物抽出物も企図する。
本明細書に記載される方法のステップ（Ｂ３～Ｂ５）は、異味化合物のそれぞれの許容可能なカットオフ値未満で、下記の表２におけるような１つ以上の異味化合物を有する、モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩の組成物を達成できる。
イオン交換固定相は、非限定的であり、任意の好適なイオン交換クロマトグラフィー固定相であり得る。好適なイオン交換クロマトグラフィー固定相の例は、ＡＮＸ－ＳＥＰＨＡＲＯＳＥ（登録商標）高速流動樹脂、ＤＥＡＥ ＳＥＰＨＡＲＯＳＥ（登録商標）、ＤＥＡＥ ＳＥＰＨＡＤＥＸ（登録商標）Ａ２５樹脂、ＡＭＢＥＲＬＩＴＥ（登録商標）（ＦＰＡ ５３、ＦＰＡ ５５、ＣＧ－５０タイプＩ、ＩＲＣ－５０、ＩＲＣ－５０Ｓ、及びＩＲＰ－６４）、ＤＩＡＩＯＮ ＷＡ１０、Ｓｕｎｒｅｓｉｎ Ｔ５、及びＤＯＷＥＸ（登録商標）ＣＣＲ－３を含む。
イオン交換クロマトグラフィー固定相は、調整された初期抽出物又は調整された第２の初期抽出物のクロマトグラフィー処理前に、任意選択的に、水性組成物（例えば、約０体積％～約４０体積％、約０体積％～約３０体積％、約１０体積％～約４０体積％、約１０体積％～約３０体積％、約２０体積％～約４０体積％、約３０体積％～約４０体積％、又は約３５体積％の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含み、残部が水である、水性組成物などの水性組成物（例えば、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物）でプレコンディショニングされ得る。例えば、弱イオン交換クロマトグラフィーカラムは、約２ＢＶ／ｈの流速で、約２以上のベッド体積（ＢＶ）でプレコンディショニングされ得る。
弱イオン交換クロマトグラフィーカラムのｐＨは、任意選択的に、調整された初期抽出物又は調整された第２の初期抽出物のクロマトグラフィー処理の前に調整され得る。例えば、弱イオン交換クロマトグラフィーカラムのｐＨ（例えば、樹脂／固定相のｐＨ）が、約１０未満、約９以下、約８以下、約７以下、約６以下、約５以下、約４以下、約３以下のｐＨ、又は約２～約１０、約３～約８、約５～約９、約２～約６、約３～約４、若しくは約３～約６のｐＨであるように、弱イオン交換クロマトグラフィーカラムのｐＨは、任意の好適な酸（例えば、塩酸）を用いてクロマトグラフィー処理の前に調整され得る。弱イオン交換クロマトグラフィーカラムのｐＨは、調整された初期抽出物又は調整された第２の初期抽出物のクロマトグラフィー処理の前に、カラムが任意選択的に（Ｃ１～Ｃ４）を含む水性組成物でプレコンディショニングされる前又は後に、調整され得る。
弱イオン交換クロマトグラフィーカラムのｐＨのプレコンディショニング及び／又は調整後、調整された初期抽出物又は調整された第２の初期抽出物は、２ＢＶ／ｈ（１時間当たりのベッド体積）を超える任意の速度でカラム上に負荷され得る。調整された初期抽出物又は調整された第２の初期抽出物を負荷した後、カラムは、約２ＢＶ／ｈの速度などの任意の好適な速度で、（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む任意の好適な体積の水性組成物（例えば、約１０体積％～約４０体積％、約１０体積％～約３０体積％、約２０体積％～約４０体積％、約３０体積％～約４０体積％、又は約３５体積％の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含み、残部が水である、少なくとも約２ＢＶ、少なくとも約３ＢＶ又は少なくとも約４ＢＶの水性組成物）で洗浄され得る。（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む水性組成物の体積は、とりわけ、カフェイン、クエルシトリン、ヒペロシド、アストラガリン、アビクラリン、ソフォリコシド、ルチン、及びルチン異性体を含有するため、廃棄され得る。
本明細書に記載される方法のステップ（Ｂ４）は、第１の溶出組成物で固定相を溶出させて、第１の溶出液を得ることを伴う。この第１溶出は、イオン交換樹脂に結合した他の化合物を溶出させるが、カラムに吸着したモノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを溶出させないことに好適な任意の条件下で実行される。
これらの他の化合物をカラムから溶出させるのに好適な条件の例は、カラムを、約１０体積％～約５０体積％、約２０体積％～約５０体積％、又は約２５体積％の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノール（例えば、少なくとも約２ＢＶ、少なくとも約３ＢＶ、又は少なくとも約４ＢＶ）を含む、任意の好適な体積の第１の溶出液組成物でカラムを溶出させることを含む。好適な第１の溶出液組成物は、水中２５％のエタノールを含む。第１の溶出液は、保持され得、所望の化合物を含有できる。例えば、この方法によって処理されたステビアバイオマスは、ステビオール配糖体を含む第１の溶出液を生成する。
本明細書に記載される方法のステップ（Ｂ５）は、第２の溶出組成物で固定相を溶出させて、第２の溶出液を得ることを伴う。この第２の溶出させることは、カラムに吸着したモノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを溶出させるのに好適な任意の条件下で実行される。カラムからモノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを溶出させるための好適な条件の例は、好適な濃度（０．１～１．０％）の酸（例えば、塩酸、硫酸、リン酸、酢酸、ギ酸など）及び約５０体積％～約８０体積％、約６０体積％～約８０体積％、又は約７０体積％の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノール）を含む、任意の好適な体積の第２の溶出液組成物でカラムを溶出させることを含む。
本明細書に記載される方法のステップ（Ｂ６）は、第２の溶出液を処理して、溶媒を除去し、かつ／又は組成物を乾燥させて、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを有する組成物を得ることを伴う。一態様では、溶媒除去は、不活性雰囲気下（例えば、窒素ガス雰囲気下）で達成され得る。
モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む濃縮物を形成するための、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む第２の溶出液から溶媒を除去するための好適な条件は、溶出液の表面上に不活性ガス（例えば、窒素ガス）を吹き込むことを含む。溶出液は、窒素ガスを吹き込む間に加熱され得るか、又は室温（例えば、２５℃）であり得る。溶出液中の溶媒を除去するための他の条件は、溶出液を含む容器に真空を適用することを含む。真空は、室温で、又は容器を加熱しながら、溶出液と共に適用され得る。溶出液中の溶媒を除去するための更に他の条件は、溶出液を薄膜蒸発器又は撹拌された撹拌薄膜蒸発器に通して流すことを含む。本明細書に記載される方法は、凍結乾燥又は噴霧乾燥によるものを含む任意の好適な様式で乾燥することを含み得る。
図４Ｂは、単一のクロマトグラフィー処理ステップを使用して、イエルバマテバイオマスから、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を作製するための方法５００のフロー図である。操作５０２では、イエルバマテバイオマスは、熱交換器を介して７０℃に加熱された脱イオン水と接触する。７０℃に加熱され、イエルバマテバイオマスを充填されたステンレス鋼カラムの底部に、イエルバマテバイオマスの体積に基づいて１時間当たり２ＢＶの流速で充填される、脱イオン水。初期抽出物は、ステンレス鋼カラムの上部から収集される。初期抽出物は、イエルバマテバイオマスの体積の１０倍である体積を有する。初期抽出物の３５ｍＬの試料は、その後の分析のために収集される。初期抽出物は、４℃で保存される。
操作５１０では、初期抽出物は、単一のクロマトグラフィー処理ステップで処理される。初期抽出物は、１時間当たり２ＢＶの速度で、弱陰イオン交換固定相（Ｓｕｎｒｅｓｉｎ Ｔ５樹脂）に適用される。負荷される初期抽出物の全量は、樹脂１リットル当たり約４０ｇのカフェオイルキナ酸及びその塩である。負荷フロースルーの３５ｍＬの試料は、分析のために収集される。
次いで、固定相は、２５℃で１時間当たり２ＢＶの速度で、３ベッド体積の水中２５％のエタノールを用いて洗浄される。洗浄フロースルーの３５ｍＬの試料は、分析のために収集される。
次いで、固定相は、水中７０％のエタノールと共に０．７５重量％のリン酸を含む６ベッド体積の溶出組成物で溶出される。溶出組成物は、溶出前に熱交換器を介して５０℃に加熱される。溶出組成物は、１時間当たり１ＢＶで適用される。ベッド体積３、４、及び５が、プールされ、更に処理されるように、溶出液が収集される。ベッド体積１、２、及び６は、プールされ、同じプロセスによって再処理され得る。プールされたベッド体積３、４、及び５の３５ｍＬの試料は、分析のために収集される。
操作５２０では、プールされた溶出液は、塩含有量について調整され、乾燥粉末に処理される。カフェオイルキナ酸及びその塩含有量は計算され、次いで、約７０％のプールされた溶出液がカフェオイルキナ塩として存在するまで、水酸化ナトリウムが添加される。次いで、塩調整された試料は、蒸発器に供給され、４０℃に加熱され、５～１０％のＤＳの溶解固体含有量に達するまで、エタノール及び水を奪われる。次いで、組成物は、９５％超のＤＳに乾燥され、微粉末に粉砕される。
図４Ｃは、単一のクロマトグラフィー処理ステップを使用して、ステビアバイオマスから、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物を作製するための方法６００のフロー図である。方法６００はまた、ステビアバイオマスからステビオール配糖体組成物を単離できる。方法６００はまた、単一バッチのステビアバイオマスから別個のステビオール配糖体組成物及び別個のカフェオイルキナ組成物を単離できる。操作６０２では、ステビアバイオマスは、熱交換器を介して７０℃に加熱された脱イオン水と接触する。７０℃に加熱され、ステビアバイオマスを充填されたステンレス鋼カラムの底部に、ステビアバイオマスの体積に基づいて１時間当たり２ＢＶの流速で充填される、脱イオン水。初期抽出物は、ステンレス鋼カラムの上部から収集される。初期抽出物は、イエルバマテバイオマスの体積の１０倍である体積を有する。初期抽出物の３５ｍＬの試料は、その後の分析のために収集される。初期抽出物は、４℃で保存される。
操作６１０では、初期抽出物は、単一のクロマトグラフィー処理ステップで処理される。初期抽出物は、１時間当たり２ＢＶの速度で、弱陰イオン交換固定相（Ｓｕｎｒｅｓｉｎ Ｔ５樹脂）に適用される。負荷される初期抽出物の全量は、樹脂１リットル当たり約４０ｇのカフェオイルキナ酸及びその塩である。負荷フロースルーは、収集され、プールされ、ステビオール配糖体組成物を含有する。負荷フロースルーの３５ｍＬの試料は、分析のために収集される。
次いで、固定相は、２５℃で１時間当たり２ＢＶの速度で、３ベッド体積の第１の溶出組成物（水中２５％のエタノール）で溶出される。この第１の溶出液は、収集され、ステビオール配糖体を含有する。第１の溶出液の３５ｍＬの試料は、分析のために収集される。
次いで、固定相は、水中７０％のエタノールと共に０．７５重量％のリン酸を含む６ベッド体積の第２の溶出組成物で溶出される。第２の溶出組成物は、溶出前に熱交換器を介して４０℃に加熱される。溶出組成物は、１時間当たり１ＢＶで適用される。ベッド体積３、４、及び５が、プールされ、更に処理されるように、溶出液が収集される。ベッド体積１、２、及び６は、プールされ、同じプロセスによって再処理され得る。プールされたベッド体積３、４、及び５の３５ｍＬの試料は、分析のために収集される。
操作６２０では、プールされた第２の溶出液は、塩含有量について調整され、乾燥粉末に処理される。カフェオイルキナ酸及びその塩含有量は計算され、次いで、約７０％の第２のプールされた溶出液がカフェオイルキナ塩として存在するまで、水酸化ナトリウムが添加される。次いで、塩調整された試料は、蒸発器に供給され、４０℃に加熱され、５～１０％のＤＳの溶解固体含有量に達するまで、エタノール及び水を奪われる。次いで、組成物は、９５％超のＤＳに乾燥され、微粉末に粉砕され、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物が、得られる。同様に、負荷フロースルー及び第１の溶出液は、乾燥されて、ステビオール配糖体組成物を得ることができる。
モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩の組成物
本明細書に記載される方法に従って調製されたモノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物は、イエルバマテバイオマスに対して実質的に同じ重量量並びに／又は実質的に同じ重量比のカフェ酸、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩を含み得る。
本明細書に記載される方法に従って調製されたモノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物は、約１：１～約１０：１（例えば、約３：１～約１０：１、約３：２～約４：１、又は約３：１～約５：１）の全ジカフェオイルキナ酸対全モノカフェオイルキナ酸の質量比を含み得る。本明細書に記載される方法に従って調製されたモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物は、約１：１～約０．０１：１（例えば、約０．５：１～約０．１：１）の全ジカフェオイルキナ酸対全モノカフェオイルキナ酸の質量比を含み得る。
本明細書に記載される方法に従って調製されたモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物は、それぞれ、約０．０１（例えば、約０．００５～約０．０５）対約１（例えば、０．５～約１．５）対約１（例えば、０．５～約１．５）の、カフェ酸、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸並びにそれらの塩のうちの各々１つの質量比を含み得る。
一態様では、本明細書に記載される方法に従って調製されるモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物は、好ましくは、好ましい含有量レベルを上回る異味化合物を含まない。表２は、モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む乾燥組成物における、異味化合物、並びにそれぞれの異味化合物についての好ましい含有量レベルを示す。一態様では、モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物は、以下の表２に列挙されるように、開示されるカットオフ重量％を上回る化合物又はそれらの任意の組み合わせのうちの１つ以上を含まない。一態様では、ステップ（Ｂ１～Ｂ６）を含む方法によって調製されるモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩を含む組成物は、以下の表２に列挙されるように、開示されるカットオフ重量％を上回る化合物又はそれらの任意の組み合わせのうちの１つ以上を含まない。
Figure 2022524217000012
Figure 2022524217000013
一態様では、乾燥時に本明細書に記載される方法に従って調製されるモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物は、組成物中３重量％未満の合計のマロン酸塩、マロン酸、シュウ酸塩、シュウ酸、乳酸塩、乳酸、コハク酸塩、コハク酸、リンゴ酸塩、リンゴ酸、クエン酸塩、及びクエン酸を含む。
一態様では、乾燥時に本明細書に記載される方法に従って調製されるモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物は、組成物中０．５重量％未満の合計の酒石酸塩、酒石酸、ピルビン酸塩、ピルビン酸、フマル酸塩、フマル酸、アスコルビン酸、ソルビン酸塩、ソルビン酸、酢酸塩、及び酢酸を含む。
一態様では、乾燥時に本明細書に記載される方法に従って調製されるモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物は、組成物中１重量％未満の合計の硫酸塩、硫酸、リン酸塩、リン酸、硝酸塩、硝酸、亜硝酸塩、亜硝酸、塩化物、塩酸、アンモニア、及びアンモニウムを含む。
一態様では、乾燥時に本明細書に記載される方法に従って調製されるモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物は、５重量％未満の合計のフラボノイド、イソフラボノイド、及びネオフラボノイド（ケルセチン、ケンフェロール、ミリセチン、フィセチン、ガランギン、イソラムネチン、パキポドール、ラムナジン、ピラノフラボノール、フラノフラボノール、ルテオリン、アピゲニン、タンゲリチン、タキシフォリン（又はジヒドロケルセチン）、ジヒドロケンフェロール、ヘスペレチン、ナリンゲニン、エリオジクチオール、ホモエリオジクチオール、ゲニステイン、ダイゼイン、グリシテイニン（glyciteinin）組成物を含む。
一態様では、乾燥時に本明細書に記載される方法に従って調製されるモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物は、組成物中５重量％未満の合計のヘスペリジン、ナリンギン、ルチン、クエルシトリン、ルテオリン配糖体、及びケルセチン－キシロシドを含む。
一態様では、乾燥時に本明細書に記載される方法に従って調製されるモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物は、組成物中５重量％未満の合計のシアニジン、デルフィニジン、マルビジン、ペラルゴニジン、ペオニジン、及びペツニジンを含む。
一態様では、乾燥時に本明細書に記載される方法に従って調製されるモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物は、組成物中１重量％未満の合計のタンニン及びタンニン酸を含む。
一態様では、乾燥時に本明細書に記載される方法に従って調製されるモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物は、組成物中０．１重量％未満の合計のアラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、チロシン、及びバリンを含む。
一態様では、乾燥時に本明細書に記載される方法に従って調製されるモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物は、組成物中１重量％未満の合計のモノグリセリド、ジグリセリド、及びトリグリセリドを含む。
一態様では、乾燥時に本明細書に記載される方法に従って調製されるモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物は、組成物中１重量％未満の合計の単糖類、二糖類、多糖類、グルコース、フルクトース、スクロース、ガラクトース、リボース、トレハロース、トレハルロース、ラクトース、マルトース、イソマルトース、イソマルツロース、マンノース、タガトース、アラビノース、ラムノース、キシロース、デキストロース、エリトロース、トレオース、マルトトリオース、及びパノセイン（panosein）を含む。
一態様では、乾燥時に本明細書に記載される方法に従って調製されるモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物は、組成物中１重量％未満の合計の糖アルコール、グリセロール、ソルビトール、マンニトール、キシリトール、マルチトール、ラクチトール、エリスリトール、イソマルト、及びイノシトールを含む。
一態様では、乾燥時に本明細書に記載される方法に従って調製されるモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物は、１重量％未満の合計の食物繊維、アカシア（アラビア）ガム、寒天、アルギン－アルギン酸塩、アラビノキシラン、ベータ－グルカン、ベータマンナン、カラギーナンガム、イナゴマメ又はロカストビーンガム、フェヌグリークガム、ガラクトマンナン、ゲランガム、グルコマンナン又はコンニャクガム、グアーガム、ヘミセルロース、イヌリン、カラヤガム、ペクチン、ポリデキストロース、サイリウムハスク粘液、難消化性デンプン、タラガム、トラガカントガム、キサンタンガム、セルロース、キチン、及びキトサニン（chitosanin）組成物を含む。
一態様では、乾燥時に本明細書に記載される方法に従って調製されるモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物は、組成物中０．１重量％未満の合計のクロロフィル、フラン、フラン含有化学物質、テオブロミン、テオフィリン、及びトリゴネリンを含む。
一態様では、乾燥時に本明細書に記載される方法に従って調製されるモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物は、組成物中１重量％未満のカフェインを含む。
一態様では、乾燥時に本明細書に記載される方法に従って調製されるモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物は、組成物中１重量％未満のルチンを含む。
一態様では、乾燥時に本明細書に記載される方法に従って調製されるモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物は、組成物中０．５重量％未満の合計のグリコシル化ウルソール酸及びグリコシル化オレアノール酸を含む。
一態様では、乾燥時に本明細書に記載される方法に従って調製されるモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物は、組成物中０．５重量％未満の合計の揮発性有機化合物、テルペン、オイゲノール、ゲラニオール、ゲラニアール、アルファ－イオノン、ベータ－イオノン、エポキシ－イオノン、リモネン、リナロール、リナロール酸化物、ネロール、及びダマセノンを含む。
一態様では、乾燥時に本明細書に記載される方法に従って調製されるモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物は、組成物中０．５重量％未満の合計の脂肪酸酸化生成物、デカノン、デセナール、ノネナール、オクテナール、ヘプテナール、ヘキセナール、ペンテナール、ペンテノール、ペンテノン、ヘキセノン、ヒドロキシノネナール、及びマロンジアルデヒドを含む。
一態様では、乾燥時に本明細書に記載される方法に従って調製されるモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物は、組成物中０．０１重量％未満の合計の多環芳香族炭化水素（ＰＡＨ）（アセナフテン、アセナフチレン、アントラセン、ベンゾ（ａ）アントラセン、ベンゾ（ａ）ピレン、ベンゾ（ｂ）フルオランテン、ベンゾ（ｇｈｉ）ペリレン、ベンゾ（ｋ）フルオランテン、クリセン、ジベンゾ（ａ，ｈ）アントラセン、フルオランテン、フルオレン、インデノ（１，２，３－ｃｄ）ピレン、ナフタレン、フェナントレン、ピレン、及び他のもの）を含む。
一態様では、本明細書に記載される方法に従って、かつ乾燥時に調製されるモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物は、多環芳香族炭化水素（ＰＡＨ）（アセナフテン、アセナフチレン、アントラセン、ベンゾ（ａ）アントラセン、ベンゾ（ａ）ピレン、ベンゾ（ｂ）フルオランテン、ベンゾ（ｇｈｉ）ペリレン、ベンゾ（ｋ）フルオランテン、クリセン、ジベンゾ（ａ，ｈ）アントラセン、フルオランテン、フルオレン、インデノ（１，２，３－ｃｄ）ピレン、ナフタレン、フェナントレン、ピレン、及び他のもの）を、０．０１重量％未満まで除去する。
一態様では、乾燥時に本明細書に記載される方法に従って調製されるモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物は、組成物中０．５重量％未満の合計の脂肪酸酸化生成物、ノネナール、ヘキセナール、ヒドロキシノネナール、及びマロンジアルデヒドを含む。
一態様では、本明細書に記載される方法に従って調製されるモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物は、４３０ｎｍでの％透過率％が８０％超であるように、色を除去する。
一態様では、本明細書に記載される方法に従って調製されるモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物は、ｂ値がＣＩＥ Ｌ＊ａ＊ｂ＊色空間上で４未満であるように、色を除去する。
一態様では、本明細書に記載される方法に従って調製されるモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物は、脱色及び／又は脱塩するステップなく４３０ｎｍでの透過率％が８０％超であるように、色を除去する。
一態様では、本明細書に記載される方法に従って調製されるモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物は、脱色及び／又は脱塩するステップなくｂ値がＣＩＥ Ｌ＊ａ＊ｂ＊色空間上で４未満であるように、色を除去する。
摂取可能な組成物
本明細書に記載される方法に従って調製されたモノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む組成物は、飲料及び食品を含む任意の摂取可能な組成物に組み込まれ得る。
例えば、摂取可能な組成物は、食用組成物又は非食用組成物であり得る。「食用組成物」によって、固体、ゲル、ペースト、泡状材料、半固体、液体、又はそれらの混合物を含む、ヒト又は動物によって食料として消費され得る任意の組成物が、意味される。「非食用組成物」によって、固体、ゲル、ペースト、泡状材料、半固体、液体、又はそれらの混合物を含む、食品としてではなくヒト又は動物によって消費又は使用されるように意図される任意の組成物が、意味される。非食用組成物は、治療目的のためにヒト又は動物によって使用されるように意図された非食用組成物を指す、医療組成物を含むが、これらに限定されない。「動物」によって、それは、例えば、農場動物及びペットなどの、任意の非ヒト動物を含む。
範囲形式で表される値は、範囲の限度として明示的に列挙された数値を含むだけでなく、各数値及び部分範囲が明示的に列挙されているかのように、その範囲内に包含されるすべての個々の数値又は部分範囲も含むように、柔軟に解釈されるべきである。例えば、「約０．１％～約５％」又は「約０．１％～５％」の範囲は、約０．１％～約５％だけでなく、示された範囲内の個々の値（例えば、１％、２％、３％及び４％）及び部分範囲（例えば、０．１％～０．５％、１．１％～２．２％、３．３％～４．４％）も含むと解釈されるべきである。「約Ｘ～Ｙ」という記述は、別段示されない限り、「約Ｘ～約Ｙ」と同じ意味を有する。同様に、「約Ｘ、Ｙ、又は約Ｚ」という記述は、別段示されない限り、「約Ｘ、約Ｙ、又は約Ｚ」と同じ意味を有する。
本文書では、用語「ａ」、「ａｎ」、又は「ｔｈｅ」は、文脈が別段明確に指示しない限り、１つ以上のものを含むために使用される。用語「又は」は、別段示されない限り、非排他的な「又は」を指すために使用される。更に、本明細書で用いられ、別段定義されない表現又は用語は、説明のみを目的とするものであり、限定を目的とするものではないことを理解されたい。セクション見出しの任意の使用は、文書の読解を支援するように意図されており、限定として解釈されるべきではない。セクション見出しに関連する情報は、その特定のセクション内に存在する場合もあり、当該セクション外に存在する場合もある。更に、本文書において参照されるすべての刊行物、特許、及び特許文書は、参照により個々に組み込まれるように、それらの全体の参照により本明細書に組み込まれる。この文書とこのように参照により組み込まれるそれらの文書との間で使用が一貫していない場合、組み込まれる参考文献における使用は、この文書のものを補足するものであると解釈されるべきである。相容れない矛盾の場合、この文書における使用を優先する。
本明細書に記載される方法では、ステップは、時間的又は操作的な順序が明示的に列挙されている場合を除いて、本発明の原理から逸脱することなく任意の順序で行われ得る。更に、明示的な特許請求の範囲の文言がそれらは別個に実行され得ることを列挙しない限り、特定のステップが、並行して行われ得る。例えば、Ｘを行う請求されたステップ及びＹを行う請求されたステップは、単一の操作内で同時に実施され得、結果として得られるプロセスは、請求されるプロセスの逐語的な範囲内に入ることになる。
本明細書で使用される場合、用語「約」は、例えば、指定の値の、又は範囲の指定の限度の１０％以内、５％以内、又は１％以内の値又は範囲内のばらつきの程度を許容することができる。
本明細書で使用される場合、用語「実質的に」は、少なくとも約５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．５％、９９．９％、９９．９９％、又は少なくとも約９９．９９９％若しくはそれ以上のような、大部分又はほとんどを指す。
本明細書で使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、文脈が別段明確に指示しない限り、複数の指示対象を含む。例えば、「ステビオール配糖体」への参照は、１つ以上のステビオール配糖体を意味する。
以下の実施例は、本開示を例示するために提供されるが、その範囲を限定するように意図されない。すべての部及び百分率は、別段示されない限り、重量によるものである。
実施例１：
材料及び方法
使用され得るイエルバマテバイオマスは、ＥＣＯＴＥＡＳ（商標）Ｙｅｒｂａ Ｍａｔｅ Ｕｎｓｍｏｋｅｄ Ｌｅａｆ ａｎｄ Ｓｔｅｍ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｕｔとして販売される市販製品であり、北東アルゼンチンにおけるミシオネス州において栽培されたイエルバマテ茶である。バイオマスは、既に粉砕されて得られる。粉砕したイエルバマテバイオマス（３００ｇ）の一部を、ガラス瓶中の５０％のエタノール／水（１．５Ｌ）に懸濁させ、１時間振盪した。振盪後、結果として得られる混合物を、Ｗｈａｔｍａｎ ５４低灰濾紙をガラス製の４Ｌの枝付きフラスコに入れたセラミックブフナー漏斗を使用して濾過した。濾過した材料を、水を使用して３５％のエタノールに希釈した。希釈すると、いくつかの望ましくない物質は、３５体積％のエタノールで可溶性でないため、沈殿する。したがって、希釈した材料を、Ｗｈａｔｍａｎ ４４低灰濾紙をガラス製の４Ｌの枝付きフラスコに入れたセラミックブフナー漏斗を使用して再濾過した。
ガラスカラム中のＡＭＢＥＲＬＩＴＥ（登録商標）ＦＰＡ ５３樹脂を、塩酸水溶液で樹脂を処理して樹脂中のアミンをプロトン化することによって、イオン交換クロマトグラフィーのために調製した。次いで、塩化物を、およそ１０ＢＶの水を用いてｐＨが４超になるまで洗い流す。次いで、樹脂を、負荷前に水中３５％のエタノール（２ＢＶ／ｈで２ＢＶ）を用いてプレコンディショニングする。再濾過した材料を、樹脂上に負荷した。負荷透過液を、廃棄した。次いで、樹脂を、水中３５％のエタノール（２ＢＶ／ｈで４ＢＶ）を用いて洗浄した。透過液を、廃棄した。次いで、樹脂を、１０％のＦＣＣ塩化ナトリウム（４ＢＶ、０．５ＢＶ／ｈ）を含む水中５０％のエタノールを用いて溶出させた。この最後の透過液を次のステップ移し、体積が初期体積の約１／３となり、かつ／又はエタノール濃度が溶液の１％未満になるまで、溶媒を、透過液の上部に２日間窒素ガスを吹き込むことによってゆっくりと除去した。高温、高酸素含有量、及び／又は光への高い曝露が目的の化合物を分解できるため、温度を、周囲（約２５℃）温度以下に維持した。このようなケアが取られない場合、化合物は重合して、高度に着色した疎水性ポリマーを形成することになり、それらの最も大きなもののうちのいくつかは水に不溶性である。
濃縮した材料を、ブフナー漏斗上のＷｈａｔｍａｎ ４４濾紙を通して濾過し、続いて０．２μｍのポリエーテルスルホンフィルタを通して濾過した。濾過した材料を、３ｋＤａ分子量カットオフ膜ＴＵＲＢＯＣＬＥＡＮ（登録商標）ＮＰ０１０を使用し、透過液を維持して脱色したが、ＧＥ Ｏｓｍｏｎｉｃ Ｓｅｐａ ＣＦ ＴＦ（薄膜）ＵＦ ＧＫ膜を使用できる。脱色した材料は、経時的に分解／重合することになり、酸化プロセスに起因して分解でき、このことは、系内に色を再導入することになる。したがって、１～２日以内などの脱色のすぐ後に脱塩及び乾燥することが、賢明である。次いで、脱色した材料を、ＴＲＩＳＥＰ（登録商標）ＸＮ４５ナノ濾過膜を通して濾過して、脱塩した。脱塩した材料を、ＬＡＢＣＯＮＣＯ（商標）ＦＡＳＴ－ＦＲＥＥＺＥ（商標）６００ｍＬフラスコを使用して凍結乾燥した。
凍結乾燥した材料を、Ｃ１８に基づく逆相カラムを使用するＵＨＰＬＣ－ＵＶ分析を使用して特徴付けた。移動相Ａは、水中０．０２５％のＴＦＡからなり、移動相Ｂはアセトニトリルである。５％Ｂでの初期保持後、化合物を、０．４ ｍＬ／分の流速で１．２～１５分の５％Ｂ～２５％Ｂの勾配によって上昇した温度で溶出させる。次いで、カラムを、１００％のアセトニトリルを用いて洗浄し、再平衡化する。ＵＶ検出器を、２１０及び３２４ｎｍでデータを記録するように設定する。
図５～図７は、初期イエルバマテ抽出物のＵＨＰＬＣ－ＵＶクロマトグラムであり、濃縮物は、イオン交換クロマトグラフィー固定相上で調整された第２の初期抽出物をクロマトグラフィー処理することに続いて、かつ乾燥後に、ステップ（ａ）～（ｈ）に記載されるプロセスに続いて得られ、「ＤＣＱＡ」は、「ジカフェオイルキナ酸」を指す。図５は、初期イエルバマテ抽出物が、クロロゲン酸、ネオクロロゲン酸、クリプトクロロゲン酸、カフェ酸、並びに３，４－ＤＣＱＡ及び３，５－ＤＣＱＡを含むジカフェオイルキナ酸の様々な異性体を含む、目的の化合物に加えて、カフェイン並びにルチンを含有することを示す。本明細書に記載されるように、かつ図６に示されるように、クロマトグラフィー処理は、初期のイエルバマテ抽出物中に存在する大量のカフェイン及びルチンを除去する。図５に提示される、カフェインに対応するおよそ５．６７分の保持時間での、かつルチンに対応するおよそ９．３６分でのピークは、図６に存在しない。同じことが、図７に当てはまる。ネオクロロゲン酸、クロロゲン酸、カフェ酸、クリプトクロロゲン酸、及びジカフェオイルキナ酸の様々な異性体についてのピークの相対強度は存続し、したがって、本明細書に記載される方法を使用して得られた組成物が、イエルバマテバイオマスに対して、実質的に同じ重量量又は実質的に同じ重量比の、カフェ酸、モノカフェオイルキナ酸、及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩を含むという事実に信用を与える。
図８～図１０は、それぞれ、図５～図７に示されるＵＨＰＬＣ－ＵＶクロマトグラフについてのピーク名、保持時間、及び相対面積パーセントデータを表形式で示す表である。
実施例２：
ステビア抽出
ステビアバイオマスを使用して、モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含むカフェインキナ酸（ＣＱＡ）組成物を調製した。ステビアバイオマスを、乾燥ステビア葉の形態で得た。乾燥ステビア葉バイオマスを、５０％のエタノール（ｖ／ｖ）を使用して超純水中で１時間の接触時間抽出して、初期抽出物を得た。初期抽出物の全質量は、ステビア葉バイオマスの質量の１０倍であった。初期抽出物を、２０μｍのフィルタで濾過し、保持した固体を、ステビア葉バイオマスの量の約５倍である量の５０％のエタノール抽出組成物を用いて洗浄した。
初期抽出物は、顕著なクロロフィル及び他の疎水性成分を含有した。酢酸エチル抽出を行って、クロロフィル及び他の疎水性成分の濃度を低減した。初期抽出物をガラス容器に移し、等量の超純水、続いて同じ体積の酢酸エチルを添加した。ガラス容器を振盪し、液相を分離させた。酢酸エチルを除去し、追加の体積の酢酸エチルを添加した。ガラス容器を再度振盪し、液相を分離させた。酢酸エチルを除去し、残りの水性画分を保持した。残りの水性画分をＨ２ＳＯ４で酸性化して、カフェオイルキナを塩形態から酸形態に変換した。別の体積の酢酸エチルを添加し、容器を振盪し、液相を分離させた。ここで、カフェオイルキナが酢酸エチル画分に存在するため、この第１の酢酸エチル画分を、保持し、更に処理した。任意に、酢酸エチル抽出の第２のラウンドは、第１の酢酸エチル画分と組み合わされ得る第２の酢酸エチル画分を得るために、ＣＱＡの収率を増加できる。酢酸エチル画分を窒素下で２４時間超乾燥させ、化合物を水中で再構成して、再構成画分を得た。
イオン交換クロマトグラフィー
弱陰イオン交換樹脂、Ｄｏｗｅｘ ６６は、イオン交換固定相として機能した。樹脂を、カラム中に充填し、使用前に以下の様式で再生した：樹脂を水に懸濁させてスラリーを形成し、スラリーを、ベッド体積が所望の量に達するまでカラムに負荷した。樹脂内の潜在的な空隙を除去し、チャネリングを防止するために、２ベッド体積の脱イオン水を、１時間当たり４ベッド体積の速度で底部から上部へと流した。ベッド体積の４倍に等しい水中７％のＨＣｌ及び５０％のエタノール（ｖ／ｖ）の溶液を、調製し、上部から底部までカラム中にポンプ注入した。その後、カラムの廃液が４超のｐＨに達するまで、カラムを、１時間当たり４ベッド体積の速度で脱イオン水ですすいだ。
再構成画分を調製されたイオン交換カラム上に負荷し、カラムを洗浄した。カラムを、１時間当たり２ベッド体積の速度で２５℃で負荷した。次いで、カラムを、２５℃の温度及び１時間当たり２ベッド体積の速度で、水中５０％のエタノール（ｖ／ｖ）の３ベッド体積溶液を用いて洗浄した。
樹脂を、高濃度の塩を含有する溶媒溶液を使用して溶出させた。５０％のエタノール（ｖ／ｖ）及び１０％（ｗ／ｖ）の塩化ナトリウムを含有する溶出組成物を使用して、樹脂を溶出させた。樹脂を、１時間当たり２ベッド体積の速度で、４ベッド体積の溶出組成物溶液を用いて溶出させた。溶出液を、収集した。次いで、樹脂を、上記のＨＣｌ／エタノール法を使用して再生した。
蒸発及び樹脂を脱塩
溶出液を窒素ガスを用いて蒸発させて、有機溶媒を除去した。疎水性樹脂、Ｄｉａｉｏｎ ＳＰ７０を、充填し、使用前に９５％のエタノール（ｖ／ｖ）を用いて洗浄した。次いで、疎水性樹脂を、１時間当たり４ベッド体積の速度で４ベッド体積の水を用いて洗浄した。溶出液を疎水性樹脂上に負荷し、１時間当たり２ベッド体積の流速で０．１％のＨＣｌを含有する、２ベッド体積の水中１０％のエタノール（ｖ／ｖ）を用いて洗浄した。疎水性樹脂を、１時間当たり２ベッド体積で、２ベッド体積の純水を用いて洗浄した。疎水性樹脂を、４ベッド体積の水中７０％のエタノール（ｖ／ｖ）で溶出させ、脱塩した溶出液を窒素下で乾燥させて、エタノールを除去して、脱塩画分を得た。脱塩画分を水酸化ナトリウムで調整し、ｐＨが３．０超であるが４．０未満になるまで（約５０％～８０％の塩画分に対応する）水酸化ナトリウムで調整して、カフェオイルキナ（ＣＱＡ）組成物を得た。カフェオイルキナ（ＣＱＡ）組成物を、ドライアイス／イソプロパノール浴中で急速凍結し、凍結乾燥して、最終粉末を得た。
実施例３：
イエルバマテ抽出
単一のクロマトグラフィー処理ステップを使用し、イエルバマテバイオマスを使用して、モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含むカフェインキナ酸（ＣＱＡ）組成物を調製した。イエルバマテバイオマスを、乾燥したイエルバマテルースリーフ（loose leaf）茶の形態で得た。ステンレス鋼カラムに、イエルバマテバイオマスを充填した。熱交換器を介して７０℃に加熱した脱イオン水を、ステンレス鋼カラムの底部に適用した。加熱した脱イオン水を、イエルバマテバイオマスの体積に基づいて１時間当たり２ＢＶの流速で適用した。初期抽出物を、ステンレス鋼カラムの上部から収集した。初期抽出物は、イエルバマテバイオマスの体積の１０倍である体積を有した。初期抽出物の３５ｍＬの試料を、その後の分析のために収集した。初期抽出物を、４℃で保存した。
弱陰イオン交換樹脂、Ｓｕｎｒｅｓｉｎ Ｔ５は、固定相として機能し、使用前にカラム中に充填され再生された。樹脂を脱イオン水中に懸濁して、スラリーを形成し、次いで、ベッド体積が所望の量に達するまでカラム中に負荷した。樹脂内の潜在的な空隙を除去し、チャネリングを防止するために、２ベッド体積の脱イオン水を、１時間当たり４ベッド体積の速度で底部から上部へと流した。ベッド体積の４倍に等しい水中１５％のＨＣｌ（ｗ／ｗ）及び５０％のエタノール（ｖ／ｖ）の４６．７％（ｖ／ｖ）の溶液を、調製し、カラムの上部ポートでカラムに適用した。その後、カラムの廃液が４超のｐＨに達するまで、カラムを、１時間当たり４ベッド体積の速度で脱イオン水ですすいだ。追加の脱イオン水を、１時間当たり８ベッド体積の増加した流速でカラムに流して、カラムを更に充填した。
初期抽出物を、単一のクロマトグラフィー処理ステップで処理した。初期抽出物を、１時間当たり２ＢＶの速度で充填されたカラムに適用した。負荷される初期抽出物の全量は、樹脂１リットル当たり約３３ｇのカフェオイルキナ酸及びその塩であった。負荷フロースルーの３５ｍＬの試料を、分析のために収集した。
次いで、固定相を、２５℃で１時間当たり２ＢＶの速度で、３ベッド体積の水中２５％のエタノールを用いて洗浄した。負荷フロースルーの３５ｍＬの試料を、分析のために収集した。
次いで、カラムを、７０％のエタノール（ｖ／ｖ）及び０．８８％（ｖ／ｖ）の８５重量％のリン酸を含有する６ベッド体積の溶出組成物を用いて溶出させた。溶出組成物を、溶出前に熱交換器を介して５０℃に加熱した。溶出組成物を、１時間当たり１ＢＶで適用した。ベッド体積３、４、及び５が、プールされ、更に処理されるように、溶出液を収集した。ベッド体積１、２、及び６は、プールされ、再処理され得る。プールされたベッド体積３、４、及び５の３５ｍＬの試料を、分析のために収集した。次いで、樹脂を、上記の方法を使用して再生した。
ｐＨ調整及び乾燥
プールした溶出液を、塩含有量について調整し、乾燥粉末に処理した。カフェオイルキナ酸及びその塩含有量を計算し、次いで、約７０％のプールされた溶出液がカフェオイルキナ酸として存在するまで、水酸化ナトリウムを添加した。次いで、塩調整された試料を、蒸発器に供給し、４０℃に加熱し、５～１０％のＤＳの溶解固体含有量が達成されるまで、エタノール及び水を奪った。次いで、組成物を、９５％超のＤＳに乾燥し、微粉末に粉砕した。
実施例４：
ステビア抽出
単一のクロマトグラフィー処理ステップを使用し、ステビアバイオマスを使用して、モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの少なくとも１つを含むカフェインキナ酸（ＣＱＡ）組成物を調製した。ステビアバイオマスを、乾燥したステビア葉（Ｓｔｅｖｉａ Ｏｎｅ，Ｐｅｒｕ）の形態で得た。ステンレス鋼カラムに、ステビア葉バイオマスを充填した。熱交換器を介して７０℃に加熱した脱イオン水を、ステンレス鋼カラムの底部に適用した。加熱した脱イオン水を、ステビア葉バイオマスの体積に基づいて１時間当たり２ＢＶの流速で適用した。初期抽出物を、ステンレス鋼カラムの上部から収集した。初期抽出物は、ステビア葉バイオマスの体積の１０倍である体積を有した。初期抽出物の３５ｍＬの試料を、その後の分析のために収集した。初期抽出物を、４℃で保存した。
弱陰イオン交換樹脂、Ｓｕｎｒｅｓｉｎ Ｔ５は、固定相として機能し、使用前にカラム中に充填され再生された。樹脂を脱イオン水中に懸濁して、スラリーを形成し、次いで、ベッド体積が所望の量に達するまでカラム中に負荷した。樹脂内の潜在的な空隙を除去し、チャネリングを防止するために、２ベッド体積の脱イオン水を、１時間当たり４ベッド体積の速度で底部から上部へと流した。ベッド体積の４倍に等しい水中１５％のＨＣｌ（ｗ／ｗ）及び５０％のエタノール（ｖ／ｖ）の４６．７％（ｖ／ｖ）の溶液を、調製し、カラムの上部ポートでカラムに適用した。その後、カラムの廃液が４超のｐＨに達するまで、カラムを、１時間当たり４ベッド体積の速度で脱イオン水ですすいだ。追加の脱イオン水を、１時間当たり８ベッド体積の増加した流速でカラムに流して、カラムを更に充填した。
初期抽出物を、単一のクロマトグラフィー処理ステップで処理した。初期抽出物を、１時間当たり２ＢＶの速度で充填されたカラムに適用した。負荷される初期抽出物の全量は、樹脂１リットル当たり約３３ｇのカフェオイルキナ酸及びその塩であった。負荷フロースルーの３５ｍＬの試料を、分析のために収集した。
次いで、カラムを、２５℃で１時間当たり２ＢＶの速度で、３ベッド体積の水中２５％のエタノールを用いて洗浄した。負荷フロースルーの３５ｍＬの試料を、分析のために収集した。
次いで、カラムを、７０％のエタノール（ｖ／ｖ）及び０．８８％（ｖ／ｖ）の８５重量％のリン酸を含有する６ベッド体積の溶出組成物を用いて溶出させた。溶出組成物を、溶出前に熱交換器を介して４０℃に加熱した。溶出組成物を、１時間当たり１ＢＶで適用した。ベッド体積３、４、及び５が、プールされ、更に処理されるように、溶出液を収集した。ベッド体積１、２、及び６は、プールされ、再処理され得る。プールされたベッド体積３、４、及び５の３５ｍＬの試料を、分析のために収集した。次いで、樹脂を、上記の方法を使用して再生した。
ｐＨ調整及び乾燥
プールした溶出液を、塩含有量について調整し、乾燥粉末に処理した。カフェオイルキナ酸及びその塩含有量を計算し、次いで、約７０％のプールされた溶出液がカフェオイルキナ酸として存在するまで、水酸化ナトリウムを添加した。次いで、塩調整された試料を、蒸発器に供給し、４０℃に加熱し、５～１０％のＤＳの溶解固体含有量が達成されるまで、エタノール及び水を奪った。次いで、組成物を、９５％超のＤＳに乾燥し、微粉末に粉砕した。
処理中に収集した試料を、ＵＨＰＬＣ－ＵＶ分析のために提供した。合計６つのカフェオイルキナ酸（caffeoylquinic acid、ＣＱＡ）及び７つのステビオール配糖体（steviol glycoside、ＳＧ）を定量した。結果は、ＣＱＡがこの処理方法を使用してＳＧから単離されることができることを示した（図１１を参照されたい）。ＳＧの大部分は、負荷フロースルー及びエタノール洗浄ステップ（それぞれ、８７％及び１１％の合計）に含まれた。このことは、単置換ＣＱＡ（mono-substituted CQA、ＭＣＱＡ）の８０％及び二置換ＣＱＡ（di-substituted CQA、ＤＣＱＡ）の８９％が溶出流出液内に含有されたＣＱＡとは対照的であった。イオン交換カラム上に負荷された初期抽出物は、４：１比のＳＧ対ＣＱＡ（２１．５ｇのＳＧ、４．９ｇのＣＱＡ）を含有したが、溶出溶出液は、１：３８比のＳＧ対ＣＱＡ（０．１ｇのＳＧ、３．８ｇのＣＱＡ）を含有した。これらの結果は、単一のクロマトグラフィー処理方法が、二重精製スキームを提供して、単一バッチのステビア葉バイオマスからＣＱＡ及びＳＧの両方を同時に単離するために使用され得ることを示す。
実施例５：
上記の方法によって調整されたモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩を含む組成物を分析して、組成物中に残る色を評価した。４つのロットを、イエルバマテバイオマスを使用して調製し、色について分析した。初期抽出物の試料も、分析した。４つのロットをＨｕｎｔｅｒＬａｂ Ｖｉｓｔａ分光光度計で分析して、各ロットのＬ ａ＊ｂ＊値を記録した。この器具が利用できない場合、分光光度計が、４３０ｎｍでの試料の透過率を測定するために使用され得る。
簡潔に述べると、１％（ｗｔ／ｗｔ）氷酢酸の溶液を、超純水中で約４のｐＨに調製した。各ロットからのアリコートを使用して、１％（重量／重量）の氷酢酸溶液中の個々の試験試料を調製した。試験試料を、１．０ｍｇ／ｍＬの全モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩の最終濃度に調製した。対照試料を、１％（重量／重量）の氷酢酸溶液のみを用いて調製した。各試験試料のＬ ａ＊ｂ＊値を、ＨｕｎｔｅｒＬａｂ Ｖｉｓｔａ分光光度計を使用して測定した。許容可能なカットオフ値は、ｂ＊値について３．５未満（又は４３０ｎｍで８５％超の透過率）であった。
ロット１、２、及び４を、イオン交換クロマトグラフィーを用いて調製し、疎水性カラムで脱塩し、膜濾過で脱色した。ロット３を、ステップ（Ｂ１～Ｂ６）及び実施例３における上記の方法で調製した。初期抽出物を有する試料は、参照として機能した。試験試料及び対照についてのｂ＊値が、以下の表３に示される。
Figure 2022524217000014
ロット１、２、及び４は、３．５のカットオフ値未満のｂ＊値によって証明されるように、色の許容可能な除去を示した。ロット３は、２．８７のｂ＊値（３．５カットオフ値未満）による証拠としての、色の許容可能な除去を示した。したがって、驚くべきことに、ステップ（Ｂ１～Ｂ６）及び実施例３における上記の方法に対応する試料は、単一のクロマトグラフィー処理ステップのみが使用され、別個の脱塩及び脱色ステップが使用されなかったとしても、色の許容可能な除去を示した。
実施例６：
上記の方法によって調製されたモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩を含む組成物を分析して、多環芳香族炭化水素の存在を評価した。蛍光検出を用いた液体クロマトグラフィーを利用して、多環芳香族炭化水素の存在を分析した。方法は、飲料水中のＰＡＨ含有量の分析のためのＥＰＡ法６１０において報告されたものと同様であった。試料を、アセトニトリル中に抽出し、０．２μｍのＰＴＦＥフィルタを通して濾過し、更なる洗浄なく注入した。原材料及び最終生成物を、全ＣＱＡ含有量がそれらの間で同等であるように調製した。追加の試料を、アセトニトリル希釈剤のみを含有する同じ方法で調製した。表４における結果は、初期葉に存在する蛍光材料が、ブランクに匹敵するように最終生成物から完全に除去されることを示す。
Figure 2022524217000015
 実施例７：
上記の方法によって調製されたモノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩を含む組成物を分析して、サポニンの存在を評価した。以下の表５は、アッセイされたサポニン化合物及びそれらの対応する質量を示す。
Figure 2022524217000016
組成物を、ステップ（Ｂ１～Ｂ６）及び実施例３における上記の方法を使用して、イエルバマテバイオマスから調製した。アリコートを、プロセス全体を通して採取した。以下の表６に記載される試料を、５５％メタノール／水における希釈によって調製した。試料を、高解像度Ｏｒｂｉｔｒａｐ質量分析計に注入し、７０，０００質量分解能でフルスキャンデータを収集した。サポニンの正確な質量を抽出し、面積カウントが表６に報告される。
Figure 2022524217000017
本発明は以下の実施形態を提供し、その付番は重要度のレベルを指定するものとして解釈されない。
実施形態
１． カフェオイルキナ組成物を作製するための方法であって、
バイオマスを第１の水性組成物と接触させて、初期抽出物を得ることと、
イオン交換固定相上で初期抽出物をクロマトグラフィー処理することと、
第１の水性溶出組成物で固定相を溶出させて、第１の溶出液を得ることと、
第２の水性溶出組成物で固定相を溶出させて、第２の溶出液を得ることと、を含み、
第２の溶出液が、モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及び前述のものの塩のうちの１つ以上を含む、方法。
２． バイオマスが、イエルバマテ、ステビア、及びグローブアーティチョークからなる群から選択される、実施形態１に記載の方法。
３． バイオマスが、粉砕される、実施形態１に記載の方法。
４． クロマトグラフィー処理前に初期抽出物から固体を除去することを更に含む、実施形態１に記載の方法。
５． クロマトグラフィー処理前に初期抽出物を濾過することを更に含む、実施形態１に記載の方法。
６． モノカフェオイルキナ酸が、３－Ｏ－カフェオイルキナ酸、４－Ｏ－カフェオイルキナ酸、及び５－Ｏ－カフェオイルキナ酸のうちの１つ以上を含む、実施形態１に記載の方法。
７． ジカフェオイルキナ酸が、１，３－ジカフェオイルキナ酸、１，４－ジカフェオイルキナ酸、１，５－ジカフェオイルキナ酸、３，４－ジカフェオイルキナ酸、３，５－ジカフェオイルキナ酸、４，５－ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの１つ以上を含む、実施形態１に記載の方法。
８． 固定相が、弱陰イオン交換固定相である、実施形態１に記載の方法。
９． 第１の水性組成物が水である、実施形態１に記載の方法。
１０． 第１の水性組成物が、バイオマスと接触する前に５０～７０℃に加熱される、実施形態１に記載の方法。
１１． 初期抽出物が、２０～２５℃で固定相と接触する、実施形態１に記載の方法。
１２． 初期抽出物が、１時間当たり１～２ベッド体積で固定相と接触する、実施形態１に記載の方法。
１３． 初期抽出物が、樹脂１リットル当たり最大４０ｇのカフェオイルキナ組成物の比で固定相と接触する、実施形態１に記載の方法。
１４． 初期抽出物が、固定相と接触し、固定相が、第１の水性組成物で洗浄されて、第１の洗浄組成物を得る、実施形態１に記載の方法。
１５． 第１の水性溶出組成物が、１～４０％の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む、実施形態１に記載の方法。
１６． 第１の水性溶出組成物が、２０～３０％の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む、実施形態１に記載の方法。
１７． （Ｃ１～Ｃ４）アルカノールが、エタノールである、実施形態１に記載の方法。
１８． 第１の水性溶出組成物が、２５％のエタノールを含む、実施形態１に記載の方法。
１９． 固定相が、少なくとも３ベッド体積の第１の水性溶出組成物で溶出される、実施形態１に記載の方法。
２０． 固定相が、２０～２５℃で第１の水性溶出組成物で溶出される、実施形態１に記載の方法。
２１． 固定相が、１時間当たり１～２ベッド体積の速度で、第１の水性溶出組成物で溶出される、実施形態１に記載の方法。
２２． 第２の水性溶出組成物が、５０～８０％の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む、実施形態１に記載の方法。
２３． 第２の水性溶出組成物が、５０～８０％のエタノールを含む、実施形態１に記載の方法。
２４． 第２の水性溶出組成物が、７０％のエタノールを含む、実施形態１に記載の方法。
２５． 第２の水性溶出組成物が、１～１０％の塩を含む、実施形態１に記載の方法。
２６． 第２の水性溶出組成物が、塩化ナトリウムを含む、実施形態１に記載の方法。
２７． 第２の水性溶出組成物が、酸性化される、実施形態１に記載の方法。
２８． 第２の水性溶出組成物が、リン酸で酸性化される、実施形態１に記載の方法。
２９． 第２の水性溶出組成物が、０．５～１．０％のリン酸で酸性化される、実施形態１に記載の方法。
３０． 固定相が、少なくとも２ベッド体積の第２の水性溶出組成物で溶出される、実施形態１に記載の方法。
３１． 固定相が、１時間当たり１ベッド体積の速度で、第１の水性溶出組成物で溶出される、実施形態１に記載の方法。
３２． 第２の水性溶出組成物が、固定相を溶出させる前に４０～５０℃に加熱される、実施形態１に記載の方法。
３３． 第２の溶出液が、約０．０１対約１対約１の、モノカフェオイルキナ酸及びその塩対ジカフェオイルキナ酸及びその塩の質量比を有する、実施形態１に記載の方法。
３４． 脱色するステップを更に含む、実施形態１に記載の方法。
３５． 脱塩するステップを更に含む、実施形態１に記載の方法。
３６． 第２の溶出液を疎水性樹脂固定相でクロマトグラフィー処理して、第２の溶出液を脱塩することを更に含む、実施形態１に記載の方法。
３７． 第１の溶出液を乾燥させるステップを更に含む、実施形態１に記載の方法。
３８． 第２の溶出液を乾燥させるステップを更に含む、実施形態１に記載の方法。
３９． バイオマスがイエルバマテである、実施形態１～３８のいずれか１つに記載の方法。
４０． 固定相が、弱陰イオン交換固定相である、実施形態３９に記載の方法。
４１． 第１の水性溶出組成物が、２５％のエタノールを含む、実施形態３９に記載の方法。
４２． 固定相が、２５℃で第１の水性溶出組成物で溶出される、実施形態３９に記載の方法。
４３． 固定相が、１時間当たり２ベッド体積の速度で、第１の水性溶出組成物で溶出される、実施形態３９に記載の方法。
４４． 第２の水性溶出組成物が、７０％（ｖ／ｖ）のエタノール及び０．７５％（ｗ／ｖ）のリン酸を含む、実施形態３９に記載の方法。
４５． 固定相が、１時間当たり１ベッド体積の速度で、第２の水性溶出組成物で溶出される、実施形態３９に記載の方法。
４６． バイオマスが、ステビアである、実施形態１～３８のいずれか１つに記載の方法。
４７． 固定相が、弱陰イオン交換固定相である、実施形態４６に記載の方法。
４８． 第１の水性溶出組成物が、２５％のエタノールを含む、実施形態４６に記載の方法。
４９． 固定相が、２５℃で第１の水性溶出組成物で溶出される、実施形態４６に記載の方法。
５０． 固定相が、１時間当たり２ベッド体積の速度で、第１の水性溶出組成物で溶出される、実施形態４６に記載の方法。
５１． 初期抽出物が、固定相と接触し、固定相が、第１の水性組成物で洗浄されて、ステビオール配糖体を含む第１の洗浄組成物を得る、実施形態４６に記載の方法。
５２． 第１の溶出液が、ステビオール配糖体を含む、実施形態４６に記載の方法。
５３． 第２の水性溶出組成物が、７０％（ｖ／ｖ）のエタノール及び０．８８％（ｗ／ｖ）の８５重量％のリン酸を含む、実施形態４６に記載の方法。
５４． 実施形態４６に記載の方法、第２の水性溶出組成物７０％（ｖ／ｖ）のエタノール及び０．７５％（ｗ／ｖ）のリン酸
５５． 固定相が、１時間当たり１ベッド体積の速度で第２の水性溶出組成物で溶出される、実施形態４７に記載の方法。
５６． イエルババイオマスからカフェオイルキナ組成物を単離するための方法であって、
イエルバマテバイオマスを第１の水性組成物と接触させて、初期抽出物を得ることと、
弱陰イオン交換固定相上で初期抽出物をクロマトグラフィー処理することと、
固定相を第１の水性組成物を用いて洗浄することと、
水性２５％のエタノール組成物で弱陰イオン交換固定相を溶出させて、第１の溶出液を得ることと、
水性酸性化７０％のエタノール組成物で固定相を溶出させて、モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及び前述のものの塩のうちの１つ以上を含む第２の溶出液を得ることと、を含む、方法。
５７． ステビアバイオマスからステビオール配糖体組成物及びカフェオイルキナ組成物を単離するための方法であって、
ステビアバイオマスを第１の水性組成物と接触させて、初期ステビア抽出物を得ることと、
弱陰イオン交換固定相上で初期ステビア抽出物をクロマトグラフィー処理することと、
固定相を第１の水性組成物を用いて洗浄して、ステビオール配糖体組成物を含む洗浄溶液を得ることと、
水性２５％のエタノール組成物で弱陰イオン交換固定相を溶出させて、ステビオール配糖体を含む第１の溶出液を得ることと、
水性酸性化７０％のエタノール組成物で固定相を溶出させて、モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及び前述のものの塩のうちの１つ以上を含む第２の溶出液を得ることと、を含む、方法。
５８． 乾燥時のカフェオイルキナ組成物が、組成物中３重量％未満の合計のマロン酸塩、マロン酸、シュウ酸塩、シュウ酸、乳酸塩、乳酸、コハク酸塩、コハク酸、リンゴ酸塩、リンゴ酸、クエン酸塩、及びクエン酸を含む、実施形態１～５７のいずれか１つに記載の方法。
５９． 乾燥時のカフェオイルキナ組成物が、組成物中０．５重量％未満の合計の酒石酸塩、酒石酸、ピルビン酸塩、ピルビン酸、フマル酸塩、フマル酸、アスコルビン酸、ソルビン酸塩、ソルビン酸、酢酸塩、及び酢酸を含む、実施形態１～５７のいずれか１つに記載の方法。
６０． 乾燥時のカフェオイルキナ組成物が、組成物中１重量％未満の合計の硫酸塩、硫酸、リン酸塩、リン酸、硝酸塩、硝酸、亜硝酸塩、亜硝酸、塩化物、塩酸、アンモニア、及びアンモニウムを含む、実施形態１～５７のいずれか１つに記載の方法。
６１． 乾燥時のカフェオイルキナ組成物が、５重量％未満の合計のフラボノイド、イソフラボノイド、及びネオフラボノイド（ケルセチン、ケンフェロール、ミリセチン、フィセチン、ガランギン、イソラムネチン、パキポドール、ラムナジン、ピラノフラボノール、フラノフラボノール、ルテオリン、アピゲニン、タンゲリチン、タキシフォリン（又はジヒドロケルセチン）、ジヒドロケンフェロール、ヘスペレチン、ナリンゲニン、エリオジクチオール、ホモエリオジクチオール、ゲニステイン、ダイゼイン、グリシテイニン組成物を含む、実施形態１～５７のいずれか１つに記載の方法。
６２． 乾燥時のカフェオイルキナ組成物が、組成物中５重量％未満の合計のヘスペリジン、ナリンギン、ルチン、クエルシトリン、ルテオリン配糖体、及びケルセチン－キシロシドを含む、実施形態１～５７のいずれか１つに記載の方法。
６３． 乾燥時のカフェオイルキナ組成物が、組成物中５重量％未満の合計のシアニジン、デルフィニジン、マルビジン、ペラルゴニジン、ペオニジン、及びペツニジンを含む、実施形態１～５７のいずれか１つに記載の方法。
６４． 乾燥時のカフェオイルキナ組成物が、組成物中１重量％未満の合計のタンニン及びタンニン酸を含む、実施形態１～５７のいずれか１つに記載の方法。
６５． 乾燥時のカフェオイルキナ組成物が、組成物中０．１重量％未満の合計のアラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、チロシン、及びバリンを含む、実施形態１～５７のいずれか１つに記載の方法。
６６． 乾燥時のカフェオイルキナ組成物が、組成物中１重量％未満の合計のモノグリセリド、ジグリセリド、及びトリグリセリドを含む、実施形態１～５７のいずれか１つに記載の方法。
６７． 乾燥時のカフェオイルキナ組成物が、組成物中１重量％未満の合計の単糖類、二糖類、多糖類、グルコース、フルクトース、スクロース、ガラクトース、リボース、トレハロース、トレハルロース、ラクトース、マルトース、イソマルトース、イソマルツロース、マンノース、タガトース、アラビノース、ラムノース、キシロース、デキストロース、エリトロース、トレオース、マルトトリオース、及びパノセインを含む、実施形態１～５７のいずれか１つに記載の方法。
６８． 乾燥時のカフェオイルキナ組成物が、組成物中１重量％未満の合計の糖アルコール、グリセロール、ソルビトール、マンニトール、キシリトール、マルチトール、ラクチトール、エリスリトール、イソマルト、及びイノシトールを含む、実施形態１～５７のいずれか１つに記載の方法。
６９． 乾燥時のカフェオイルキナ組成物が、１重量％未満の合計の食物繊維、アカシア（アラビア）ガム、寒天、アルギン－アルギン酸塩、アラビノキシラン、ベータ－グルカン、ベータマンナン、カラギーナンガム、イナゴマメ又はロカストビーンガム、フェヌグリークガム、ガラクトマンナン、ゲランガム、グルコマンナン又はコンニャクガム、グアーガム、ヘミセルロース、イヌリン、カラヤガム、ペクチン、ポリデキストロース、サイリウムハスク粘液、難消化性デンプン、タラガム、トラガカントガム、キサンタンガム、セルロース、キチン、及びキトサニン組成物を含む、実施形態１～５７のいずれか１つに記載の方法。
７０． 乾燥時のカフェオイルキナ組成物が、組成物中０．１重量％未満の合計のクロロフィル、フラン、フラン含有化学物質、テオブロミン、テオフィリン、及びトリゴネリンを含む、実施形態１～５７のいずれか１つに記載の方法。
７１． 乾燥時のカフェオイルキナ組成物が、組成物中１重量％未満の合計のカフェインを含む、実施形態１～５７のいずれか１つに記載の方法。
７２． 乾燥時のカフェオイルキナ組成物が、組成物中１重量％未満の合計のルチンを含む、実施形態１～５７のいずれか１つに記載の方法。
７３． 乾燥時のカフェオイルキナ組成物が、組成物中０．５重量％未満の合計のグリコシル化ウルソール酸及びグリコシル化オレアノール酸を含む、実施形態１～５７のいずれか１つに記載の方法。
７４． 乾燥時のカフェオイルキナ組成物が、組成物中０．５重量％未満の合計の揮発性有機化合物、テルペン、オイゲノール、ゲラニオール、ゲラニアール、アルファ－イオノン、ベータ－イオノン、エポキシ－イオノン、リモネン、リナロール、リナロール酸化物、ネロール、及びダマセノンを含む、実施形態１～５７のいずれか１つに記載の方法。
７５． 乾燥時のカフェオイルキナ組成物が、組成物中０．５重量％未満の合計の脂肪酸酸化生成物、デカノン、デセナール、ノネナール、オクテナール、ヘプテナール、ヘキセナール、ペンテナール、ペンテノール、ペンテノン、ヘキセノン、ヒドロキシノネナール、及びマロンジアルデヒドを含む、実施形態１～５７のいずれか１つに記載の方法。
７６． 乾燥時のカフェオイルキナ組成物が、組成物中０．０１重量％未満の合計のアセナフテン、アセナフチレン、アントラセン、ベンゾ（ａ）アントラセン、ベンゾ（ａ）ピレン、ベンゾ（ｂ）フルオランテン、ベンゾ（ｇｈｉ）ペリレン、ベンゾ（ｋ）フルオランテン、クリセン、ジベンゾ（ａ，ｈ）アントラセン、フルオランテン、フルオレン、インデノ（１，２，３－ｃｄ）ピレン、ナフタレン、フェナントレン、及びピレンなど多環芳香族炭化水素（ＰＡＨ）を含む、実施形態１～５７のいずれか１つに記載の方法。
７７． 多環芳香族炭化水素（ＰＡＨ）（アセナフテン、アセナフチレン、アントラセン、ベンゾ（ａ）アントラセン、ベンゾ（ａ）ピレン、ベンゾ（ｂ）フルオランテン、ベンゾ（ｇｈｉ）ペリレン、ベンゾ（ｋ）フルオランテン、クリセン、ジベンゾ（ａ，ｈ）アントラセン、フルオランテン、フルオレン、インデノ（１，２，３－ｃｄ）ピレン、ナフタレン、フェナントレン、ピレン、及び他のもの）が、０．０１重量％未満まで除去される、実施形態１に記載の方法。
７８． 乾燥時のカフェオイルキナ組成物が、組成物中０．５重量％未満の合計の脂肪酸酸化生成物、デカノン、デセナール、ノネナール、オクテナール、ヘプテナール、ヘキセナール、ペンテナール、ペンテノール、ペンテノン、ヘキセノン、ヒドロキシノネナール、及びマロンジアルデヒドを含む、実施形態１～５７のいずれか１つに記載の方法。
７９． ４３０ｎｍでの透過率％が８０％超であるように、色が除去される、実施形態１～５７のいずれか１つに記載の方法。
８０． ｂ値がＣＩＥ Ｌ＊ａ＊ｂ＊色空間上で４未満であるように、色が除去される、実施形態１～５７のいずれか１つに記載の方法。
８１． ４３０ｎｍでの透過率％が脱色及び／又は脱塩するステップなく８０％超であるように、色が除去される、実施形態１～３３及び３７～５７のいずれか１つに記載の方法。
８２． ｂ値が脱色及び／又は脱塩するステップなくＣＩＥ Ｌ＊ａ＊ｂ＊色空間上で４未満であるように、色が除去される、実施形態１～３３及び３７～５７のいずれか一項に記載の方法
８３． 実施形態１～８２のいずれか一項に記載の方法によって作製される、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む、組成物。
８４． 実施形態８３に記載の組成物を含む、摂取可能な組成物。
８５． 摂取可能な組成物が、飲料又は食品である、実施形態８４に記載の摂取可能な組成物。

Claims (63)

  1. カフェオイルキナ組成物を作製するための方法であって、
    バイオマスを第１の水性組成物と接触させて、初期抽出物を得ることと、
    イオン交換固定相上で前記初期抽出物をクロマトグラフィー処理することと、
    第１の水性溶出組成物で前記固定相を溶出させて、第１の溶出液を得ることと、
    酸性化された第２の水性溶出組成物で前記固定相を溶出させて、第２の溶出液を得ることと、を含み、
    前記第２の溶出液が、モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及び前述のものの塩のうちの１つ以上を含む、方法。
  2. 前記バイオマスが、イエルバマテ（yerba mate）、ステビア、及びグローブアーティチョークからなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
  3. クロマトグラフィー処理の前に、例えば、濾過することによって、前記初期抽出物から固体を除去することを更に含む、請求項１又は２に記載の方法。
  4. モノカフェオイルキナ酸が、３－Ｏ－カフェオイルキナ酸、４－Ｏ－カフェオイルキナ酸、及び５－Ｏ－カフェオイルキナ酸のうちの１つ以上を含む、請求項１～３のいずれか一項に記載の方法。
  5. ジカフェオイルキナ酸が、１，３－ジカフェオイルキナ酸、１，４－ジカフェオイルキナ酸、１，５－ジカフェオイルキナ酸、３，４－ジカフェオイルキナ酸、３，５－ジカフェオイルキナ酸、４，５－ジカフェオイルキナ酸、及びそれらの塩のうちの１つ以上を含む、請求項１～４のいずれか一項に記載の方法。
  6. 前記固定相が、弱陰イオン交換固定相である、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。
  7. 前記第１の水性組成物が、水である、請求項１～６のいずれか一項に記載の方法。
  8. 前記第１の水性組成物が、前記バイオマスと接触させる前に５０～７０℃に加熱される、請求項１～７のいずれか一項に記載の方法。
  9. 前記初期抽出物が、２０～２５℃で前記固定相と接触する、請求項１～８のいずれか一項に記載の方法。
  10. 前記初期抽出物が、１時間当たり１～２ベッド体積で前記固定相と接触する、請求項１～９のいずれか一項に記載の方法。
  11. 前記初期抽出物が、樹脂１リットル当たり最大４０ｇのカフェオイルキナ組成物の比で前記固定相と接触する、請求項１～１０のいずれか一項に記載の方法。
  12. 前記初期抽出物が、前記固定相と接触し、前記固定相が、前記第１の水性組成物で洗浄されて、第１の洗浄組成物を得る、請求項１～１１のいずれか一項に記載の方法。
  13. 前記第１の水性溶出組成物が、１～４０体積％、例えば、２０～３０体積％又は２５体積％の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノールを含む、請求項１～１２のいずれか一項に記載の方法。
  14. （Ｃ１～Ｃ４）アルカノールが、エタノールである、請求項１５に記載の方法。
  15. 前記固定相が、少なくとも３ベッド体積の前記第１の水性溶出組成物で溶出される、請求項１～１４のいずれか一項に記載の方法。
  16. 前記固定相が、２０～２５℃で前記第１の水性溶出組成物で溶出される、請求項１～１５のいずれか一項に記載の方法。
  17. 前記固定相が、１時間当たり１～２ベッド体積の速度で、前記第１の水性溶出組成物で溶出される、請求項１～１６のいずれか一項に記載の方法。
  18. 前記第２の水性溶出組成物が、５０～８０体積％の（Ｃ１～Ｃ４）アルカノール、例えば、５０～８０体積％のエタノールを含む、請求項１～１７のいずれか一項に記載の方法。
  19. 前記第２の水性溶出組成物が、１～１０％の塩、例えば、塩化ナトリウムを含む、請求項１～１８のいずれか一項に記載の方法。
  20. 前記第２の水性溶出組成物が、リン酸、例えば、０．５～１．０％リン酸で酸性化される、請求項１～１９のいずれか一項に記載の方法。
  21. 前記固定相が、少なくとも２ベッド体積の前記第２の水性溶出組成物で溶出される、請求項１～２０のいずれか一項に記載の方法。
  22. 前記第２の水性溶出組成物が、前記固定相を溶出させる前に４０～５０℃に加熱される、請求項１～２１のいずれか一項に記載の方法。
  23. 前記第２の溶出液が、約０．０１：１～約１：１、約０．１：１～約０．５：１、約１：１～約１０：１、約３：１～約１０：１、約３：１～約５：１、又は約３：２～約４：１の、ジカフェオイルキナ酸及びその塩に対するモノカフェオイルキナ酸及びその塩の質量比を有する、請求項１～２２のいずれか一項に記載の方法。
  24. 脱色するステップを更に含む、請求項１～２３のいずれか一項に記載の方法。
  25. 脱塩するステップを更に含む、請求項１～２４のいずれか一項に記載の方法。
  26. 前記第２の溶出液を疎水性樹脂固定相でクロマトグラフィー処理して、前記第２の溶出液を脱塩することを更に含む、請求項１～２５のいずれか一項に記載の方法。
  27. 前記第１の溶出液を乾燥させること、前記第２の溶出液を乾燥させること、又は前記第１及び第２の溶出液を乾燥させることを更に含む、請求項１～２６のいずれか一項に記載の方法。
  28. 前記バイオマスが、イエルバマテ又はステビアである、請求項１～２７のいずれか一項に記載の方法。
  29. 前記固定相が、弱陰イオン交換固定相である、請求項１～２８のいずれか一項に記載の方法。
  30. 前記バイオマスが、イエルバマテであり、前記第２の水性溶出組成物が、７０％（ｖ／ｖ）のエタノール及び０．７５％（ｗ／ｖ）のリン酸を含む、請求項１～２９のいずれか一項に記載の方法。
  31. 前記第１の溶出液が、ステビオール配糖体を含む、請求項１～３０のいずれか一項に記載の方法。
  32. 前記バイオマスが、ステビアであり、前記第２の水性溶出組成物が、７０％（ｖ／ｖ）のエタノール及び０．７５％（ｗ／ｖ）のリン酸を含む、請求項１～３１のいずれか一項に記載の方法。
  33. イエルババイオマスからカフェオイルキナ組成物を単離するための方法であって、
    イエルバマテバイオマスを第１の水性組成物と接触させて、初期抽出物を得ることと、
    弱陰イオン交換固定相上で前記初期抽出物をクロマトグラフィー処理することと、
    前記固定相を前記第１の水性組成物を用いて洗浄することと、
    水性エタノール組成物、例えば、２５体積％のエタノールで前記弱陰イオン交換固定相を溶出させて、第１の溶出液を得ることと、
    水性酸性化エタノール組成物、例えば、７０体積％のエタノールで前記固定相を溶出させて、モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及び前述のものの塩のうちの１つ以上を含む第２の溶出液を得ることと、を含む、方法。
  34. ステビアバイオマスからステビオール配糖体組成物及びカフェオイルキナ組成物を単離するための方法であって、
    ステビアバイオマスを第１の水性組成物と接触させて、初期ステビア抽出物を得ることと、
    弱陰イオン交換固定相上で前記初期ステビア抽出物をクロマトグラフィー処理することと、
    前記固定相を前記第１の水性組成物を用いて洗浄して、ステビオール配糖体組成物を含む洗浄溶液を得ることと、
    水性エタノール組成物、例えば、２５体積％のエタノールで前記弱陰イオン交換固定相を溶出させて、ステビオール配糖体組成物を含む第１の溶出液を得ることと、
    水性酸性化エタノール組成物、例えば、７０体積％のエタノールで前記固定相を溶出させて、モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及び前述のものの塩のうちの１つ以上を含む第２の溶出液を得ることと、を含む、方法。
  35. カフェオイルキナ組成物が、前記モノカフェオイルキナ酸、ジカフェオイルキナ酸、及び前述のものの塩のうちの１つ以上を含む、請求項１～３４のいずれか一項に記載の方法。
  36. 乾燥時の前記カフェオイルキナ組成物が、前記組成物中３重量％未満の合計のマロン酸塩、マロン酸、シュウ酸塩、シュウ酸、乳酸塩、乳酸、コハク酸塩、コハク酸、リンゴ酸塩、リンゴ酸、クエン酸塩、及びクエン酸を含む、請求項３５に記載の方法。
  37. 乾燥時の前記カフェオイルキナ組成物が、前記組成物中０．５重量％未満の合計の酒石酸塩、酒石酸、ピルビン酸塩、ピルビン酸、フマル酸塩、フマル酸、アスコルビン酸、ソルビン酸塩、ソルビン酸、酢酸塩、及び酢酸を含む、請求項３５に記載の方法。
  38. 乾燥時の前記カフェオイルキナ組成物が、前記組成物中１重量％未満の合計の硫酸塩、硫酸、リン酸塩、リン酸、硝酸塩、硝酸、亜硝酸塩、亜硝酸、塩化物、塩酸、アンモニア、及びアンモニウムを含む、請求項３５に記載の方法。
  39. 乾燥時の前記カフェオイルキナ組成物が、５重量％未満の合計のフラボノイド、イソフラボノイド、及びネオフラボノイド（ケルセチン、ケンフェロール、ミリセチン、フィセチン、ガランギン、イソラムネチン、パキポドール、ラムナジン、ピラノフラボノール、フラノフラボノール、ルテオリン、アピゲニン、タンゲリチン（tangeritin）、タキシフォリン（又はジヒドロケルセチン）、ジヒドロケンフェロール、ヘスペレチン、ナリンゲニン、エリオジクチオール、ホモエリオジクチオール、ゲニステイン、ダイゼイン、グリシテイニン（glyciteinin）前記組成物を含む、請求項３５に記載の方法。
  40. 乾燥時の前記カフェオイルキナ組成物が、前記組成物中５重量％未満の合計のヘスペリジン、ナリンギン、ルチン、クエルシトリン、ルテオリン配糖体、及びケルセチン－キシロシドを含む、請求項３５に記載の方法。
  41. 乾燥時の前記カフェオイルキナ組成物が、前記組成物中５重量％未満の合計のシアニジン、デルフィニジン、マルビジン、ペラルゴニジン、ペオニジン、及びペツニジンを含む、請求項３５に記載の方法。
  42. 乾燥時の前記カフェオイルキナ組成物が、前記組成物中１重量％未満の合計のタンニン及びタンニン酸を含む、請求項３５に記載の方法。
  43. 乾燥時の前記カフェオイルキナ組成物が、前記組成物中０．１重量％未満の合計のアラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リジン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、スレオニン、トリプトファン、チロシン、及びバリンを含む、請求項３５に記載の方法。
  44. 乾燥時の前記カフェオイルキナ組成物が、前記組成物中１重量％未満の合計のモノグリセリド、ジグリセリド、及びトリグリセリドを含む、請求項３５に記載の方法。
  45. 乾燥時の前記カフェオイルキナ組成物が、前記組成物中１重量％未満の合計の単糖類、二糖類、多糖類、グルコース、フルクトース、スクロース、ガラクトース、リボース、トレハロース、トレハルロース、ラクトース、マルトース、イソマルトース、イソマルツロース、マンノース、タガトース、アラビノース、ラムノース、キシロース、デキストロース、エリトロース、トレオース、マルトトリオース、及びパノセイン（panosein）を含む、請求項３５に記載の方法。
  46. 乾燥時の前記カフェオイルキナ組成物が、前記組成物中１重量％未満の合計の糖アルコール、グリセロール、ソルビトール、マンニトール、キシリトール、マルチトール、ラクチトール、エリスリトール、イソマルト、及びイノシトールを含む、請求項３５に記載の方法。
  47. 乾燥時の前記カフェオイルキナ組成物が、１重量％未満の合計の食物繊維、アカシア（アラビア）ガム、寒天、アルギン－アルギン酸塩、アラビノキシラン、ベータ－グルカン、ベータマンナン、カラギーナンガム、イナゴマメ又はロカストビーンガム、フェヌグリークガム、ガラクトマンナン、ゲランガム、グルコマンナン又はコンニャクガム、グアーガム、ヘミセルロース、イヌリン、カラヤガム、ペクチン、ポリデキストロース、サイリウムハスク粘液、難消化性デンプン、タラガム、トラガカントガム、キサンタンガム、セルロース、キチン、及びキトサニン（chitosanin）前記組成物を含む、請求項３５に記載の方法。
  48. 乾燥時の前記カフェオイルキナ組成物が、前記組成物中０．１重量％未満の合計のクロロフィル、フラン、フラン含有化学物質、テオブロミン、テオフィリン、及びトリゴネリンを含む、請求項３５に記載の方法。
  49. 乾燥時の前記カフェオイルキナ組成物が、前記組成物中１重量％未満の合計のカフェインを含む、請求項３５に記載の方法。
  50. 乾燥時の前記カフェオイルキナ組成物が、前記組成物中１重量％未満の合計のルチンを含む、請求項３５に記載の方法。
  51. 乾燥時の前記カフェオイルキナ組成物が、前記組成物中０．５重量％未満の合計のグリコシル化ウルソール酸及びグリコシル化オレアノール酸を含む、請求項３５に記載の方法。
  52. 乾燥時の前記カフェオイルキナ組成物が、前記組成物中０．５重量％未満の合計の揮発性有機化合物、テルペン、オイゲノール、ゲラニオール、ゲラニアール、アルファ－イオノン、ベータ－イオノン、エポキシ－イオノン、リモネン、リナロール、リナロール酸化物、ネロール、及びダマセノンを含む、請求項３５に記載の方法。
  53. 乾燥時の前記カフェオイルキナ組成物が、前記組成物中０．５重量％未満の合計の脂肪酸酸化生成物、デカノン、デセナール、ノネナール、オクテナール、ヘプテナール、ヘキセナール、ペンテナール、ペンテノール、ペンテノン、ヘキセノン、ヒドロキシノネナール、及びマロンジアルデヒドを含む、請求項３５に記載の方法。
  54. 乾燥時の前記カフェオイルキナ組成物が、前記組成物中０．０１重量％未満の合計の多環芳香族炭化水素（ＰＡＨ）、アセナフテン、アセナフチレン、アントラセン、ベンゾ（ａ）アントラセン、ベンゾ（ａ）ピレン、ベンゾ（ｂ）フルオランテン、ベンゾ（ｇｈｉ）ペリレン、ベンゾ（ｋ）フルオランテン、クリセン、ジベンゾ（ａ，ｈ）アントラセン、フルオランテン、フルオレン、インデノ（１，２，３－ｃｄ）ピレン、ナフタレン、フェナントレン、及びピレンを含む、請求項３５に記載の方法。
  55. 多環芳香族炭化水素（ＰＡＨ）（アセナフテン、アセナフチレン、アントラセン、ベンゾ（ａ）アントラセン、ベンゾ（ａ）ピレン、ベンゾ（ｂ）フルオランテン、ベンゾ（ｇｈｉ）ペリレン、ベンゾ（ｋ）フルオランテン、クリセン、ジベンゾ（ａ，ｈ）アントラセン、フルオランテン、フルオレン、インデノ（１，２，３－ｃｄ）ピレン、ナフタレン、フェナントレン、ピレン、及び他のもの）が、０．０１重量％未満まで除去される、請求項１～５４のいずれか一項に記載の方法。
  56. 乾燥時の前記カフェオイルキナ組成物が、前記組成物中０．５重量％未満の合計の脂肪酸酸化生成物、デカノン、デセナール、ノネナール、オクテナール、ヘプテナール、ヘキセナール、ペンテナール、ペンテノール、ペンテノン、ヘキセノン、ヒドロキシノネナール、及びマロンジアルデヒドを含む、請求項３５に記載の方法。
  57. ４３０ｎｍでの透過率％が８０％超であるように、色が除去される、請求項１～５６のいずれか一項に記載の方法。
  58. ｂ値がＣＩＥ Ｌ＊ａ＊ｂ＊色空間上で４未満であるように、色が除去される、請求項１～５７のいずれか一項に記載の方法。
  59. ４３０ｎｍでの透過率％が脱色及び／又は脱塩するステップなく８０％超であるように、色が除去される、請求項１～２３及び２７～５６のいずれか一項に記載の方法。
  60. ｂ値が脱色及び／又は脱塩するステップなくＣＩＥ Ｌ＊ａ＊ｂ＊色空間上で４未満であるように、色が除去される、請求項１～３及び２７～５６のいずれか一項に記載の方法。
  61. 請求項１～６０のいずれか一項に記載の方法によって作製される、モノカフェオイルキナ酸及びジカフェオイルキナ酸、並びにそれらの塩のうちの少なくとも１つを含む、組成物。
  62. 請求項６１に記載の組成物を含む、摂取可能な組成物。
  63. 請求項６１に記載の組成物を含む、飲料又は食品。
JP2021558658A 2019-04-06 2020-04-06 植物抽出組成物を作製するための方法 Active JP7391993B2 (ja)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201962830448P 2019-04-06 2019-04-06
US62/830,448 2019-04-06
US201962832273P 2019-04-10 2019-04-10
US62/832,273 2019-04-10
PCT/US2020/026885 WO2020210161A1 (en) 2019-04-06 2020-04-06 Methods for making botanical extract composition

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JP2022524217A true JP2022524217A (ja) 2022-04-28
JP7391993B2 JP7391993B2 (ja) 2023-12-05

Family

ID=70476431

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2021558658A Active JP7391993B2 (ja) 2019-04-06 2020-04-06 植物抽出組成物を作製するための方法

Country Status (8)

Country Link
US (2) US11344596B2 (ja)
EP (1) EP3953012A1 (ja)
JP (1) JP7391993B2 (ja)
CN (1) CN113784629A (ja)
AU (1) AU2020273144A1 (ja)
BR (1) BR112021019944A2 (ja)
CA (1) CA3135584A1 (ja)
WO (1) WO2020210161A1 (ja)

Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA3078234A1 (en) 2017-10-06 2019-04-11 Cargill, Incorporated Readily dissolvable steviol glycoside compositions
CN113784629A (zh) 2019-04-06 2021-12-10 嘉吉公司 用于制备植物提取物组合物的方法
AU2021258172A1 (en) * 2020-04-20 2022-11-17 Cargill, Incorporated Steviol glycoside malonic acid esters
AU2021260579A1 (en) 2020-04-20 2022-12-01 Cargill, Incorporated Stabilized steviol glycoside malonic acid esters
BR112023018166A2 (pt) 2021-03-09 2023-10-31 Cargill Inc Composição efervescente sólida, bebida, produto de bebida, bebida em pó seca, e, método para preparar uma composição de bebida
WO2022266666A1 (en) 2021-06-18 2022-12-22 Cargill, Incorporated Sensory modifiers for bitterant composition
WO2022266669A1 (en) 2021-06-18 2022-12-22 Cargill, Incorporated Sensory modifiers for dairy substitute compositions
EP4355112A1 (en) 2021-06-18 2024-04-24 Cargill, Incorporated Sensory modifiers for protein compositions
EP4355110A1 (en) 2021-06-18 2024-04-24 Cargill, Incorporated Sensory modifiers for meat substitute compositions
CA3227274A1 (en) 2021-08-06 2023-02-09 Carlos CARTER Sensory modifiers
AU2022371647A1 (en) * 2021-10-24 2024-04-11 P.L. Thomas & Co., Inc. Borate complexes of chlorogenic acid and uses thereof
WO2023091819A1 (en) 2021-11-16 2023-05-25 Cargill, Incorporated Sensory modifiers for immune support compositions
WO2023115051A1 (en) 2021-12-17 2023-06-22 Cargill, Incorporated Sensory modifiers for reduced sugar cocoa compositions
WO2024091895A1 (en) 2022-10-24 2024-05-02 Cargill, Incorporated Sensory modifiers for whole grain compositions

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS55111768A (en) * 1979-02-20 1980-08-28 Maruzen Kasei Kk Decolorization and purification of stevia sweet component
JP2009201473A (ja) * 2008-02-29 2009-09-10 Yamaguchi Univ キナ酸および／またはカフェ酸の製造法
CN102617667A (zh) * 2012-03-05 2012-08-01 南京师范大学 一种以甜叶菊为原料同时制备总咖啡酰奎尼酸和甜菊糖的方法
CN105440091A (zh) * 2015-12-24 2016-03-30 谱赛科（江西）生物技术有限公司 一种阴离子交换树脂去除甜菊糖苷rb的方法
JP2016069324A (ja) * 2014-09-30 2016-05-09 花王株式会社 精製クロロゲン酸類含有組成物の製造方法
CN109212122A (zh) * 2018-10-31 2019-01-15 晨光生物科技集团股份有限公司 甜叶菊渣中四种黄酮类成分的检测方法

Family Cites Families (137)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS591465B2 (ja) 1982-02-09 1984-01-12 日本理化学薬品株式会社 食用天然抗酸化物質及びその製造法
DE3760463D1 (en) 1986-02-06 1989-09-28 Code Kaffee Handel Coffee and process for its production
DE3603574C1 (de) 1986-02-06 1987-07-23 Ergo Forschungsgmbh Verfahren zur Gewinnung von Chlorogensaeure
ES2046979T3 (es) 1987-07-21 1994-02-16 Roger H Giovanetto Procedimiento para la obtencion de esteviosidos a partir de material vegetal bruto.
JP3111203B2 (ja) 1987-12-26 2000-11-20 中里 隆憲 ステビア新品種に属する植物
JPH04145048A (ja) 1990-10-04 1992-05-19 T Hasegawa Co Ltd 精製クロロゲン酸の製法
CN1100894A (zh) 1994-03-11 1995-04-05 广西壮族自治区梧州地区制药厂 绿原酸保健食品
UA51613C2 (uk) 1995-03-06 2002-12-16 Еміль Флахсман Аг Спосіб вилучення небажаних ліпофільних домішок та/або залишків, що містяться в напоях або рослинних препаратах
JP2889847B2 (ja) 1995-10-02 1999-05-10 小川香料株式会社 コーヒー豆加水分解抽出物からなる呈味改善剤
JPH09266767A (ja) 1996-03-29 1997-10-14 Meiji Seika Kaisha Ltd サンザシ抽出物入り持久力向上飲食品
IT1290806B1 (it) 1997-03-21 1998-12-11 Universal Flavors S R L Estratti decaffeinati di mate'
US5972120A (en) 1997-07-19 1999-10-26 National Research Council Of Canada Extraction of sweet compounds from Stevia rebaudiana Bertoni
WO2000030464A1 (de) 1998-11-25 2000-06-02 Irma Frey Extrakt
US20010051195A1 (en) 2000-03-08 2001-12-13 Miljkovic Dusan A. Methods and compositions for increasing fermentation of a microorganism
US6337095B1 (en) 2000-03-30 2002-01-08 Council Of Scientific And Industrial Research Process for the isolation of compound scopoletin useful as nitric oxide synthesis inhibitor
DE10027564A1 (de) 2000-06-02 2001-12-06 Alcatel Sa Verfahren zur Herstellung von Drilleitern
JP3548102B2 (ja) 2000-08-07 2004-07-28 花王株式会社 高血圧症予防・治療剤
ATE540586T1 (de) 2000-11-20 2012-01-15 Applied Food Sciences Inc Verfahren zur erhöhung des gehalts an zuträglichen verbindungen nach der verarbeitung in getränken, in denen diese verbindungen natürlich vorkommen
US20020187239A1 (en) 2001-02-06 2002-12-12 Dusan Miljkovic Nutraceuticals and methods of obtaining nutraceuticals from tropical crops
JP2002363075A (ja) 2001-06-05 2002-12-18 Kao Corp 高血圧症予防・治療剤
US20030003212A1 (en) 2001-06-13 2003-01-02 Givaudan Sa Taste modifiers
CN1133591C (zh) 2001-09-25 2004-01-07 清华同方股份有限公司 利用膜分离处理大豆加工废水的方法
US7291352B2 (en) 2001-10-03 2007-11-06 Herbalscience Llc Methods and compositions for oral delivery of Areca and mate' or theobromine
AU2003244134A1 (en) 2002-06-28 2004-01-19 Kao Corporation Beverage
US7279184B2 (en) 2003-10-24 2007-10-09 Herbalscience, Llc Methods and compositions comprising Ilex
US7294353B2 (en) 2003-10-24 2007-11-13 Herbalscience, Llc Methods and compositions comprising ilex
PL1716757T3 (pl) 2004-01-30 2009-12-31 Kao Corp Kompozycja napoju kawy
US7923552B2 (en) 2004-10-18 2011-04-12 SGF Holdings, LLC High yield method of producing pure rebaudioside A
US7838044B2 (en) 2004-12-21 2010-11-23 Purecircle Sdn Bhd Extraction, separation and modification of sweet glycosides from the Stevia rebaudiana plant
CN1326827C (zh) 2005-01-13 2007-07-18 付信君 从牛蒡叶中提取绿原酸的生产工艺
EP1843734A4 (en) 2005-02-03 2008-09-10 Signum Biosciences Inc COMPOSITIONS AND METHOD FOR INTENSIFYING COGNITIVE FUNCTIONS
JP4955928B2 (ja) * 2005-03-01 2012-06-20 花王株式会社 クロロゲン酸類組成物の製造方法
US8088428B2 (en) 2005-03-16 2012-01-03 Kao Corporation Packaged coffee drink
US8293302B2 (en) 2005-10-11 2012-10-23 Purecircle Sdn Bhd Process for manufacturing a sweetener and use thereof
US7767238B2 (en) 2005-11-04 2010-08-03 Pepsico, Inc. Beverage composition and method of preventing degradation of vitamins in beverages
DK2526778T3 (en) 2005-11-23 2017-03-27 Coca Cola Co Natural High Strength Sweetener Compositions with Improved Time Profile and / or Taste Profile, Methods of Formulation thereof and Applications thereof
JP4994777B2 (ja) * 2006-10-12 2012-08-08 花王株式会社 クロロゲン酸類組成物の製造方法
EP2124633B1 (en) 2007-01-22 2012-03-07 Cargill, Incorporated Method of producing purified rebaudioside a compositions using solvent/antisolvent crystallization
US8277862B2 (en) 2007-03-14 2012-10-02 Concentrate Manufacturing Company Of Ireland Beverage products having steviol glycosides and at least one acid
US8030481B2 (en) 2007-05-21 2011-10-04 The Coca-Cola Company Stevioside polymorphic and amorphous forms, methods for their formulation, and uses
US20100204204A1 (en) 2007-06-06 2010-08-12 University Of South Florida Nutraceutical co-crystal compositions
JP5364580B2 (ja) 2007-08-22 2013-12-11 株式会社カネカ 還元型補酵素ｑ１０の製造方法、ならびに、その安定化方法
CN101808653B (zh) 2007-09-26 2014-03-05 高砂香料工业株式会社 植物提取物及其用途
JP5475945B2 (ja) 2007-11-20 2014-04-16 花王株式会社 容器詰コーヒー飲料
US8217165B2 (en) * 2008-06-17 2012-07-10 Pawan Kumar Goel Process for the extraction of furostanolic saponins from fenugreek seeds
BRPI0918142A2 (pt) 2008-09-10 2015-12-01 Biochemics Inc composição farmaclógica tópica, seu método de preparação, bem como uso da forma de ácido livre de ácido 2-(4-isobutifilfenil)prpiônico
US9358264B2 (en) 2008-10-31 2016-06-07 Naturex, S.A. Effects of a decaffeinated green coffee extract on body weight control by regulation of glucose metabolism
CN101747195B (zh) * 2008-12-17 2013-04-17 中国科学院大连化学物理研究所 菊芋中二咖啡酰奎尼酸组分的分离提纯方法
WO2010106798A1 (ja) 2009-03-18 2010-09-23 花王株式会社 エネルギー消費促進剤
KR20110043194A (ko) 2009-10-21 2011-04-27 주식회사한국신약 마테 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 주름 개선용 조성물
MY159105A (en) 2009-10-30 2016-12-15 Cj Cheiljedang Corp Process for economically manufacturing xylose from hydrolysate using electrodialysis and direct recovery method
KR101227737B1 (ko) * 2010-01-29 2013-01-29 이병일 곤달비 추출물, 이의 분획물, 또는 이로부터 분리한 화합물을 유효성분으로 함유하는 퍼옥시니트라이트 소거 활성을 갖는 조성물
JP5770426B2 (ja) 2010-02-19 2015-08-26 株式会社コーセー 一重項酸素消去剤、並びに該一重項酸素消去剤を用いた皮膚外用剤及び化粧料
US8981081B2 (en) 2010-03-12 2015-03-17 Purecircle Usa Inc. High-purity steviol glycosides
RU2567175C2 (ru) 2010-05-11 2015-11-10 Симрайз Аг Применение рубузозида для ослабления или подавления некоторых неприятных вкусовых ощущений
US8241680B2 (en) 2010-06-30 2012-08-14 Rock Creek Pharmaceuticals, Inc. Nutraceutical product containing anatabine and yerba maté
EP2658394A4 (en) 2010-07-16 2014-04-30 Justbio Inc EXTRACTION PROCESS FOR OBTAINING CERTIFIABLE ORGANIC STEVIA REBAUDIANA EXTRACT
JP5222986B2 (ja) 2010-10-05 2013-06-26 花王株式会社 コーヒー濃縮組成物
KR101074839B1 (ko) 2010-11-25 2011-10-19 주식회사 녹십자 금은화 추출물을 포함하는 역류성 식도염 치료 또는 예방용 약학조성물
BR112013014589B1 (pt) 2010-12-13 2019-04-02 Purecircle Usa Inc. Método para preparar uma composição de rebaudiosídeo d altamente solúvel
US9510611B2 (en) 2010-12-13 2016-12-06 Purecircle Sdn Bhd Stevia composition to improve sweetness and flavor profile
US10492516B2 (en) * 2010-12-13 2019-12-03 Purecircle Sdn Bhd Food ingredients from Stevia rebaudiana
CN102224933B (zh) 2011-05-13 2013-07-17 烟台新时代健康产业有限公司 辅助调节血脂的组合物、保健食品及其应用
EP2725007B1 (en) * 2011-06-21 2018-10-17 Kao Corporation Method for manufacturing refined chlorogenic acids composition
US8530527B2 (en) 2011-06-23 2013-09-10 Purecircle Sdn Bhd Food ingredients from Stevia rebaudiana
CN102381974A (zh) 2011-08-31 2012-03-21 河南科技大学 高速逆流色谱法用于忍冬中分离制备出咖啡鞣酸的方法
PL2753188T3 (pl) 2011-09-06 2019-11-29 Pepsico Inc Słodziki z rebaudiozydem D i gazowany napój typu cola słodzony rebaudiozydem D
US8586106B2 (en) 2011-12-06 2013-11-19 The Concentrate Manufacturing Company Of Ireland Fatigue-relieving herbal extracts and beverages comprising the same
CN104684414A (zh) 2011-12-19 2015-06-03 可口可乐公司 纯化甜叶菊醇糖苷的方法和其用途
WO2013181296A2 (en) 2012-05-29 2013-12-05 Unigen, Inc. Compositions and methods for managing weight
US9457009B2 (en) 2012-05-31 2016-10-04 The United States Of America As Represented By The Department Of Veterans Affairs Methods and compositions for preventing and treating auditory dysfunctions
ITMI20121749A1 (it) * 2012-10-16 2014-04-17 Indena Spa Estratti di helianthus annuus utili nel trattamento della sindrome metabolica e nella diminuzione dell'indice glicemico di alimenti e procedimento per la loro preparazione e composizioni che li contengono
CN102924544B (zh) 2012-10-30 2015-04-22 晨光生物科技集团股份有限公司 从甜菊叶中分步制备甜菊糖和绿原酸的方法
JP5972778B2 (ja) 2012-12-18 2016-08-17 サントリー食品インターナショナル株式会社 炭酸コーヒー飲料
RU2019128577A (ru) 2013-01-11 2019-10-14 Импоссибл Фудз Инк. Способы и композиции для воздействия на профиль вкуса и аромата пригодных к потреблению веществ
CN103040064A (zh) 2013-01-22 2013-04-17 重庆加多宝饮料有限公司 一种夏桑菊饮料的制备方法
CA2900849A1 (en) 2013-03-14 2014-09-25 Chromocell Corporation Compounds, compositions, and methods for modulating sweet taste
US10570164B2 (en) 2013-03-15 2020-02-25 The Coca-Cola Company Steviol glycosides, their compositions and their purification
US10798961B2 (en) 2013-03-15 2020-10-13 Altria Client Services Llc Functional food and beverage compositions with improved taste through the use of sensates
KR101500485B1 (ko) 2013-04-23 2015-03-10 한국식품연구원 마테 추출물을 유효성분으로 포함하는 통증의 완화, 예방 또는 치료용 조성물
CN103570545A (zh) * 2013-09-17 2014-02-12 南京师范大学 一种从野艾蒿中制备咖啡酰奎尼酸的方法
GB201317286D0 (en) 2013-09-30 2013-11-13 Calscience Internat Ltd Composition and Use
US10188125B2 (en) 2013-12-18 2019-01-29 Kao Corporation Coffee concentrate composition
DE102014100534A1 (de) 2014-01-17 2015-07-23 Pm-International Ag Pulverförmige Zusammensetzung zur Herstellung eines Nahrungsmittelersatzes
ES2831428T3 (es) 2014-07-30 2021-06-08 Shyam Prasad Kodimule Composiciones de ácido clorogénico y métodos para producir y usar las mismas en el tratamiento de la obesidad
DE102014016495A1 (de) * 2014-11-07 2016-05-12 Klaus Düring Verfahren zur Gewinnung von hochreiner 4,5-Dicaffeoylchinasäure (4,5-DCQA) und Verwendung derselben zur Behandlung von Infektionen mit Respiratorischem Syncytial Virus (RSV)
CN106998727B (zh) 2014-12-02 2021-03-23 花王株式会社 烘焙咖啡豆
GB201502268D0 (en) 2015-02-11 2015-04-01 Calscience Internat Ltd Dental composition and use
CN104644623A (zh) 2015-02-13 2015-05-27 四川九章生物科技有限公司 绿原酸在制备治疗红斑狼疮的药物中的用途
US20180103670A1 (en) 2015-03-04 2018-04-19 Mamajaya S.R.L. Composition, drink, method of production and use thereof
US20160296490A1 (en) 2015-04-13 2016-10-13 Kodimule Prasad Composition and method for the treatment of obesity
US20160366915A1 (en) 2015-06-22 2016-12-22 International Flavors & Fragrances Inc. Cyclohexanecarboxylic acids for selective taste masking
US11399553B2 (en) 2015-09-02 2022-08-02 Givaudan S.A. Flavor system for non-animal derived protein containing consumables
US10342777B2 (en) * 2015-10-01 2019-07-09 Macau University Of Science And Technology Caffeoylquinic acid-rich extract and preparation as well as use thereof
US9636373B1 (en) 2016-02-09 2017-05-02 Kahouokalani Akao KAVA-based beverage composition
CN105796542A (zh) 2016-03-15 2016-07-27 四川九章生物科技有限公司 绿原酸在制备治疗以lag-3为靶点的疾病的药物中的用途
EP3455233A4 (en) 2016-05-10 2020-03-11 The Coca-Cola Company METHOD FOR FREEZING DRYING COMPOSITIONS WITH REBAUDIOSIDE M AND REBAUDIOSIDE D
US10588885B2 (en) 2016-07-12 2020-03-17 Vidya Herbs, Inc. Chlorogenic acid composition and method for its use in the treatment of Alzheimer's disease
JP6763841B2 (ja) 2016-10-26 2020-09-30 花王株式会社 精製クロロゲン酸類含有組成物の製造方法
JP6389556B2 (ja) 2016-10-26 2018-09-12 花王株式会社 精製クロロゲン酸類含有組成物
WO2018095533A1 (en) 2016-11-25 2018-05-31 Symrise Ag Mixtures with stabilising properties
BR112019010614B1 (pt) 2016-11-25 2023-09-26 Unilever Ip Holdings B.V Composição alimentar e uso de uma mistura
EP3547849A4 (en) * 2016-11-29 2021-04-28 PureCircle USA Inc. FOOD INGREDIENTS FROM DESTEVIA REBAUDIANA
WO2018124508A1 (ko) 2016-12-30 2018-07-05 연세대학교 산학협력단 3,5-디카페오일퀴닉에시드 또는 국화 추출물을 함유하는 근육 질환 예방 및 치료용 또는 근 기능 개선용 조성물
CN107027930A (zh) 2017-04-18 2017-08-11 贵州医科大学 一种刺梨金银花保健速溶茶珍及其制备方法
WO2018207790A1 (ja) 2017-05-12 2018-11-15 花王株式会社 アミロイドβ分解排出促進剤
CN110602953A (zh) 2017-05-18 2019-12-20 花王株式会社 食品组合物
KR20200012970A (ko) 2017-06-01 2020-02-05 무트랄 에스에이 동물 사료 보충제
US20220104524A1 (en) 2017-06-02 2022-04-07 Givaudan, S.A. Compositions
CN107184482A (zh) 2017-06-26 2017-09-22 上海家化联合股份有限公司 马黛茶提取物及其在皮肤外用剂中的应用
IT201700096298A1 (it) 2017-08-25 2019-02-25 Penta Holding Metodo per la produzione di una composizione polifenolica a partire da malto d’orzo
WO2019040989A1 (en) 2017-08-31 2019-03-07 The Product Makers (Australia) Pty Ltd IMPROVING THE TASTE OF CONSUMER PRODUCTS
WO2019069981A1 (ja) 2017-10-03 2019-04-11 花王株式会社 ホットフラッシュ改善剤
CA3078234A1 (en) * 2017-10-06 2019-04-11 Cargill, Incorporated Readily dissolvable steviol glycoside compositions
EP3654780A1 (en) 2017-12-22 2020-05-27 Firmenich SA Sourness enhancers comprising a cyclohexanecarboxylic acid
WO2019180140A2 (en) 2018-03-22 2019-09-26 Firmenich Sa Flavored articles having a reduced ph
EP3780970B1 (en) 2018-04-16 2023-06-07 Almendra Pte. Ltd. Taste modulator composition, beverage and flavoring composition thereof
WO2019210192A1 (en) 2018-04-26 2019-10-31 Rush University Medical Center Use of methylation inhibitors for the treatment of autoimmune diseases
US20210260013A1 (en) 2018-07-11 2021-08-26 Aardvark Therapeutics lnc. Oral Pharmaceutical Formulations of Bitter Compounds for Pulmonary Hypertension
US20200023021A1 (en) 2018-07-19 2020-01-23 The Clorox Company Weight loss composition including chlorogenic acids and probiotics
EP3852542A4 (en) 2018-09-18 2022-06-01 Ohio State Innovation Foundation NEW SMALL MOLECULES THAT IMPROVE THE SAFETY QUALITIES OF COFFEE AND RELATED BEVERAGES
CN109438241A (zh) 2018-09-30 2019-03-08 晨光生物科技集团股份有限公司 一种同步制备甜叶菊绿原酸和甜菊糖苷的工业化方法
CN109293712B (zh) 2018-09-30 2022-05-27 晨光生物科技集团股份有限公司 一种甜叶菊的工业化利用方法及其甜菊糖苷和绿原酸
CN113795153A (zh) 2019-02-20 2021-12-14 格雷戈里·阿哈罗尼安 用于改善无糖可乐苏打水和其他饮料的味道的方法和组合物
WO2020202193A1 (en) 2019-03-31 2020-10-08 Jeyakodi Shankaranarayanan Synergistic combination of phytoactives
CN113784629A (zh) 2019-04-06 2021-12-10 嘉吉公司 用于制备植物提取物组合物的方法
US20220218008A1 (en) 2019-05-21 2022-07-14 Ohio State Innovation Foundation Taste modulating compounds and methods of improving the quality of foods and beverages
WO2021038832A1 (ja) 2019-08-30 2021-03-04 株式会社メニコン 家畜用飼料効率改善剤、家畜用増体促進飼料、家畜の飼育方法、及びメタン発生抑制方法
WO2021038830A1 (ja) 2019-08-30 2021-03-04 株式会社メニコン 飼養動物用尿石症予防剤、その製造方法、飼養動物用尿量増加剤、及び飼養動物の尿石症予防方法
WO2021049864A1 (ko) 2019-09-11 2021-03-18 (주) 메드빌 두릅나무 추출물을 함유하는 안구건조증 개선용 조성물
AU2020358450A1 (en) 2019-09-30 2022-08-04 Almendra Pte. Ltd Methods and compositions for improved taste quality
WO2021081417A1 (en) 2019-10-23 2021-04-29 Ohio State Innovation Foundation Taste modulating compounds and methods of improving the quality of foods and beverages
JP7400098B2 (ja) 2019-11-08 2023-12-18 シージェイ チェイルジェダン コーポレーション ポリフェノールを含む組成物
WO2021090989A1 (ko) 2019-11-08 2021-05-14 씨제이제일제당 (주) 악취 저감용 조성물
WO2021091327A1 (ko) 2019-11-08 2021-05-14 씨제이제일제당 (주) 비린내 또는 육류 잡내 저감용 조성물
JP2021095354A (ja) 2019-12-16 2021-06-24 ロレアル 特定の成分の組合せを含む安定な組成物
WO2021132439A1 (ja) 2019-12-27 2021-07-01 サントリーホールディングス株式会社 呈味が増強された緑茶飲料

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS55111768A (en) * 1979-02-20 1980-08-28 Maruzen Kasei Kk Decolorization and purification of stevia sweet component
JP2009201473A (ja) * 2008-02-29 2009-09-10 Yamaguchi Univ キナ酸および／またはカフェ酸の製造法
CN102617667A (zh) * 2012-03-05 2012-08-01 南京师范大学 一种以甜叶菊为原料同时制备总咖啡酰奎尼酸和甜菊糖的方法
JP2016069324A (ja) * 2014-09-30 2016-05-09 花王株式会社 精製クロロゲン酸類含有組成物の製造方法
CN105440091A (zh) * 2015-12-24 2016-03-30 谱赛科（江西）生物技术有限公司 一种阴离子交换树脂去除甜菊糖苷rb的方法
CN109212122A (zh) * 2018-10-31 2019-01-15 晨光生物科技集团股份有限公司 甜叶菊渣中四种黄酮类成分的检测方法

Also Published As

Publication number Publication date
US11344596B2 (en) 2022-05-31
CN113784629A (zh) 2021-12-10
WO2020210161A1 (en) 2020-10-15
EP3953012A1 (en) 2022-02-16
US11931391B2 (en) 2024-03-19
US20220249588A1 (en) 2022-08-11
AU2020273144A1 (en) 2021-11-04
BR112021019944A2 (pt) 2021-12-07
CA3135584A1 (en) 2020-10-15
US20210290717A1 (en) 2021-09-23
JP7391993B2 (ja) 2023-12-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7391993B2 (ja) 植物抽出組成物を作製するための方法
JP7277427B2 (ja) ステビオール配糖体の分離、単離及び評価のための方法
JP6430917B2 (ja) レバウディオサイド−モグロサイドｖ混合物
EP2061350B1 (en) Sweetening compositions and processes for preparing them
US8728545B2 (en) Extraction method for providing an organic certifiable Stevia rebaudiana extract
JP2023026461A (ja) ステビアレバウディアナからの食品成分
US20100041877A1 (en) Method for producing purified anthocyanin
EP3528646B1 (en) Extracts from fruits of the cucurbitaceae family, and methods of preparing thereof
JP7120921B2 (ja) 植物からサポニンを得る方法
US20220162250A1 (en) Steviol glycoside solubility enhancers
JP6850946B2 (ja) 日向夏みかん由来のアラビノガラクタン
DE60118739T2 (de) Verfahren zur isolierung eines proteins
US20230217972A1 (en) Steviol glycoside malonic acid esters
HRP20010792A2 (en) Acarbose purification process
WO2024057068A1 (en) Method to control the content of mono and bidesmosidic saponins in yucca extracts
CN113939564A (zh) 用于制备散沫花提取物的方法
AU2007293776B2 (en) Sweetening compositions and processes for preparing them
WO2020137975A1 (ja) キサントフモールを含有する組成物の製造方法
CH572011A5 (en) Recovering pure glycofrangulins - from rhamnus frangula by selective solvent extraction
KR20120108384A (ko) 파낙사디올계 진세노사이드와 파낙사트리올계 진세노사이드를 분리하는 방법
DE2208262A1 (de) Verfahren zum abtrennen des glykofrangulinkomplexes beziehungsweise der glykofrangulingruppe aus pflanzlichen rohstoffen

Legal Events

Date Code Title Description
A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20220128

A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20220128

A871 Explanation of circumstances concerning accelerated examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A871

Effective date: 20220128

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20220405

RD04 Notification of resignation of power of attorney

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424

Effective date: 20220420

RD03 Notification of appointment of power of attorney

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7423

Effective date: 20220425

A601 Written request for extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601

Effective date: 20220701

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20220905

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20221101

A601 Written request for extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601

Effective date: 20230131

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20230331

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20230418

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20230713

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20230801

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20231016

TRDD Decision of grant or rejection written
A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

Effective date: 20231031

A61 First payment of annual fees (during grant procedure)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61

Effective date: 20231122

R150 Certificate of patent or registration of utility model

Ref document number: 7391993

Country of ref document: JP

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150