CN1326827C

CN1326827C - 从牛蒡叶中提取绿原酸的生产工艺

Info

Publication number: CN1326827C
Application number: CNB2005100004840A
Authority: CN
Inventors: 熊建国; 徐誉泰; 刘克斋; 付信君
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2005-01-13
Filing date: 2005-01-13
Publication date: 2007-07-18
Anticipated expiration: 2025-01-13
Also published as: CN1651398A

Abstract

本发明公开了一种从鲜牛蒡叶中提取绿原酸的生产工艺，新鲜的牛蒡叶经洗净去杂氯仿脱脂、脱色后，用酸水回流提取、过滤、减压浓缩，再用乙酸乙酯萃取、减压浓缩，然后用AB-8树脂柱吸附、乙醇洗脱、将洗脱液浓缩，再用AB-8树脂吸附、乙醇洗脱、洗脱液浓缩、重结晶而制得绿原酸纯品。本发明通过单因素优选法和正交试验，表明用酸水提取新鲜牛蒡叶，不仅具有大生产的可操作性，而且综合生产成本大大降低，所得绿原酸纯度高，提取率高，又得到了其副产物叶绿素，该叶绿素可以作为食用色素。

Description

从牛蒡叶中提取绿原酸的生产工艺

技术领域

本发明属于从植物叶中提取绿原酸的生产工艺技术领域，具体涉及一种从牛蒡叶中提取绿原酸的生产工艺。

背景技术

绿原酸(CHA)为咖啡酰奎尼酸衍生物，分子式C₁₆H₁₈O₉，分子量为354.90，熔点208℃，半水合物为针状晶体，易溶于甲醇、乙醇和丙酮，溶于水，25℃时在水中的溶解度约为4％，微溶于乙酸乙酯，难溶于氯仿和石油醚，[α]D₂₆：-35.2，K(25℃)为2.2×10^-3，在碱性或高温条件下易水解。绿原酸具有较强的药理活性，为众多药材(如金银花、茵陈、杜仲)抗菌解毒、消炎利胆的主要有效成分，同时也是某些中药制剂质量控制的重要指标。绿原酸除抗氧化能力强外，还具有抗艾滋病毒、抗致畸、抗过敏、抗肿瘤细胞株毒活性及调节与细胞色素P450连接酶的活性等功能。

牛蒡(Arctium lappa L.)属于菊科植物，在山东、江苏等地每年有35万亩地的人工栽培，牛蒡叶硕大茂盛，但目前被利用的仅仅是牛蒡根和牛蒡子，大量的新鲜牛蒡叶被废弃。近几年，山东大学生命科学院的刘世铭博士和陈靠山教授等共同研究发现，牛蒡叶中含有较高含量的绿原酸(可达3.05％)，鲜牛蒡叶绿原酸含量达0.6％以上。现有技术申请号为03111946.8，公开了“一种制备绿原酸的方法”，所用原料为干牛蒡叶，利用有机溶剂C_1～5醇类提取液进行回流提取，回流温度参照有机溶剂的沸点，如用乙醇回流温度在76～80℃。该方法存在如下缺陷：1、采用于牛蒡叶为原料，有效成分及叶绿素易散失，经实验测定绿原酸有效成分减少20～50％，叶绿素减少30％以上；2、采用有机溶剂C_1～5醇类作为提取液，生产成本高；3、回流温度参照有机溶剂的沸点，在高温下绿原酸有效成分活性降低，易水解；另外，该方法干牛蒡叶未经脱脂、脱色预处理，产品纯度低。

发明内容

本发明的目的是提供一种从鲜牛蒡叶中采用多酚类氧化酶抑制剂前处理和低温酸水提取绿原酸的生产工艺，以弥补现有技术的不足。

为实现上述目的，从鲜牛蒡叶中提取绿原酸的生产工艺步骤如下：

1.1、牛蒡鲜叶洗净去杂，用切割机切碎成长度短于5mm的小段后，置于快速捣碎机中，再加入牛蒡鲜叶重量2～3倍的氯仿和0.02～0.05％的多酚类氧化酶抑制剂，快速捣碎5min～6min成糊状，然后加入回流提取装置中，再加入牛蒡鲜叶重量10～15倍的氯仿，搅拌60～100min进行脱脂、脱色、回流提取，经减压过滤，滤液静置2小时后，取上清液氯仿层于40～50℃减压浓缩，真空干燥即得副产物叶绿素提取物；

1.2、经氯仿脱脂、脱色的上述步骤1.1所得牛蒡叶沉淀物，加入其重量1∶12倍的饮用水进行提取，用硫酸调PH3.5，温度30～40℃，回流提取2小时，然后在40～50℃减压浓缩至1∶1倍体积比，即得粗提物；

1.3、所得粗提物用15～30倍体积的乙酸乙酯萃取，用硫酸调PH值至PH2～3，分4～5次萃取，每次用3～6倍体积的乙酸乙酯，搅拌萃取2小时，静置4小时，然后40～50℃减压浓缩，要求全部除去乙酸乙酯，即得不含乙酸乙酯的浓缩液；

1.4、所得浓缩液用饮用水稀释4～6倍后，用硫酸调PH值至PH3.0～4.0，用柱径20mm的AB-8树脂吸附，吸附流速为2.0～4.0ml/min，再分别用4～6倍浓缩液体积PH为3.0～4.0的硫酸水和30～60％的乙醇洗脱吸附柱，洗脱速度为4.0～6.0ml/min，硫酸水洗脱液作为废弃液，乙醇洗脱液在40～50℃进行减压浓缩；

1.5、上述步骤1.4所得浓缩液，依照步骤1.4所述再重复进行第二次AB-8树脂吸附、洗脱和减压浓缩，浓缩液重结晶，即得含量为99.0％以上的绿原酸(CHA)纯品。

步骤1.1所述多酚类氧化酶抑制剂可以是硫脲或二氨基二硫代甲酸钠。

其生产工艺流程如下：

真空浓缩→喷雾干燥→叶绿素

↑氯仿层

牛蒡鲜叶→洗净去杂氯仿脱脂、脱色→水回流提取→

→过滤→减压浓缩→萃取→浓缩→AB-8树脂柱吸附乙醇洗脱洗脱

→液浓缩→AB-8树脂吸附乙醇洗脱洗脱液浓缩→重结→绿

→原酸(CHA)纯品

本发明通过单因素优选法和正交试验，表明用酸水提取新鲜牛蒡叶，不仅具有大生产的可操作性，而且综合生产成本低，所得绿原酸纯度高，提取率高，又得到了其副产物叶绿素，该叶绿素可以作为食用色素。

具体实施方式

实施例1：从鲜牛蒡叶中提取绿原酸的生产工艺依次以下述步骤进行：

1.1、牛蒡鲜叶洗净去杂，用切割机切碎成长度短于5mm的小段后，置于快速捣碎机中，再加入牛蒡鲜叶重量2.5倍的氯仿和0.05％的硫脲，快速捣碎5min成糊状，然后加入回流提取装置中，再加入牛蒡鲜叶重量13倍的氯仿，搅拌80min进行脱脂、脱色、回流提取，经减压过滤，滤液静置2小时，取上清液氯仿层于45℃减压浓缩，真空干燥即得副产物叶绿素提取物；

1.2、经氯仿脱脂、脱色的上述步骤1.1所得牛蒡叶沉淀物，加入其重量1∶12倍的饮用水，用硫酸调PH3.5，温度30℃，回流提取2小时，然后在45℃减压浓缩至1∶1倍体积比，即得粗提物；

1.3、所得粗提物用20倍体积的乙酸乙酯萃取，用硫酸调PH值至2.5，分4次萃取，每次用5倍体积的乙酸乙酯，搅拌萃取2小时，静置4小时，然后45℃减压浓缩，要求全部除去乙酸乙酯，即得不含乙酸乙酯的浓缩液；

1.4、所得浓缩液用饮用水稀释6倍后，用硫酸调PH值至3.5，用柱径20mm的AB-8树脂吸附，吸附流速3.0ml/min，再分别先后用5倍浓缩液体积PH3.5的硫酸水和30％乙醇洗脱吸附柱，洗脱速度为5.0ml/min，至PH酸水洗脱液作为废弃液，乙醇洗脱液在45℃进行减压浓缩；

利用上述步骤提取绿原酸其提取率达85％，其纯度为99.0％以上，同时得到了其副产物叶绿素，该叶绿素可以作为食用色素。

实施例2：根据实施例1，步骤1.1在快速捣碎机中加入牛蒡鲜叶重量3倍的氯仿和0.02％的二氨基二硫代甲酸钠，在回流提取装置中，加入牛蒡鲜叶重量10倍的氯仿搅拌100min；步骤1.2取回流温度为35℃；步骤1.3取粗提物用30倍体积的乙酸乙酯萃取，用硫酸调PH2.5，分6次萃取，每次用5倍体积的乙酸乙酯；步骤1.4取浓缩液用饮用水稀释5倍后，调PH值至3.0，AB-8树脂吸附，吸附流速4ml/min，再分别先后用4倍浓缩液体积PH3.0的硫酸水和50％乙醇洗脱吸附柱，洗脱速度为6.0ml/min，硫酸水洗脱液作为废弃液，乙醇洗脱液在50℃进行减压浓缩。

Claims

1、一种从牛蒡叶中提取绿原酸的生产工艺，其特征是工艺步骤如下：

1.4、所得浓缩液用饮用水稀释6倍后，用硫酸调PH值至PH3.0～4.0，用柱径20mm的AB-8树脂吸附，吸附流速2.0～4.0ml/min，再分别用4～6倍浓缩液体积PH3.0～4.0的硫酸水和30～60％的乙醇洗脱吸附柱，洗脱速度为4.0～6.0ml/min，酸水洗脱液作为废弃液，乙醇洗脱液在40～50℃进行减压浓缩；

1.5、上述步骤1.4所得浓缩液，依照步骤1.4所述再重复进行第二次AB-8树脂吸附、洗脱和减压浓缩，浓缩液重结晶，即得含量为99.0％以上的绿原酸纯品。

2、根据权利要求1所述的从牛蒡叶中提取绿原酸的生产工艺，其特征是所说多酚类氧化酶抑制剂可以是硫脲或二氨基二硫代甲酸钠。