WO2006109405A1

WO2006109405A1 - 植物抽出物の製造法

Info

Publication number: WO2006109405A1
Application number: PCT/JP2006/305230
Authority: WO
Inventors: Takehiro Watanabe; Rumi Fujita; Motoyuki Tagashira; Tomomasa Kanda; Seiichi Higuchi; Masayuki Tanabe
Original assignee: Asahi Breweries, Ltd.
Priority date: 2005-04-07
Filing date: 2006-03-16
Publication date: 2006-10-19
Also published as: JP2006290756A; EP1867655A1; CN101155819B; AU2006233991B2; AU2006233991A1; US20090053384A1; CN101155819A; EP1867655A4

Abstract

　本発明はビール醸造の際に副産物として得られるホップ苞などから、高純度の水溶性ポリフェノールを短時間で効率よく製造する技術を開発することを目的とする。　本発明は、植物抽出物をベントナイトなどの粘土鉱物で処理し、二価陽イオンを除去することを特徴とする精製植物抽出物の製造法並びに精製植物抽出物を、カラムに通液してポリフェノール類を吸着させ、次いで溶媒を通液して水溶性ポリフェノールを溶出させることを特徴とするポリフェノール製造法と、ホップ苞抽出液にベントナイトを添加して酸性条件下で静置する工程、固－液分離を行い上清を得る工程、該上清をカラム精製し、得られたポリフェノール画分上清を冷却して静置して非水溶性成分を析出させ、固－液分離を行う工程を含むことを特徴とする水溶性ホップ苞ポリフェノールの製造法を提供する。

Description

明細書

植物抽出物の製造法

技術分野

[0001] 本発明は、植物抽出物の製造法に関し、詳しくは食品または食品成分用途として安全なベントナイトなどを用いることによる植物抽出物力の二価陽イオン除去方法、および植物抽出物の飲料'酒類用途のための水溶ィ匕方法、特にホップ苞ポリフエノールの二価陽イオンの除去を伴う製造法に関する。さらに詳しくは、ポリフエノールの精製工程を改良して、水溶性ホップ苞ポリフエノールを短時間で効率よく製造する方法に関する。

背景技術

[0002] ホップは、アサ科の多年生植物であり、その毬花 (未受精の雌花が成熟したもの）に存在するルブリン部分 (毬花の内苞の根元に形成される黄色の顆粒）は、ホップの苦味、芳香の本体であり、ビール醸造において酵母、麦芽と並んで重要なビール原料である。ホップ苞は、ホップ毬花よりルプリン部分を除いたものであり、ビール醸造の際に必要な成分ではなぐ廃棄される場合もある。

このように、ビール醸造の際に副産物として得られるホップ苞は、これまで土壌改良用の肥料や、家畜の飼料などとして用いられる他に、有効な利用法がなぐ付加価値の高い利用法の開発が求められている。

[0003] なお、ホップ苞に内在するポリフエノール類については、既に抗酸化作用、発泡麦芽飲料に対する泡安定ィ匕作用、杭う蝕作用、消臭作用、癌細胞転移抑制作用、トポイソメラーゼ阻害作用などの有用な機能を有していることが知られている。

そのため、ホップ苞の有効利用法として、ポリフエノール類を抽出する方法が注目されている。しかし、ホップ苞にはワックス、繊維分などの夾雑物が多量に含まれており、ホップ苞カものポリフエノール類の抽出、精製の工程を複雑ィ匕させる要因となっている。

[0004] また、植物からポリフノール類を抽出する方法として、熱水抽出法、超臨界抽出法、アルコール抽出法等が挙げられる。しかし、抽出法により異なる力植物由来及び有機栽培等で使用できるボルドー液の二価陽イオンがポリフエノール類と共に抽出され、植物抽出物中に存在することがある。

二価陽イオンは、食品衛生法上問題にはならないが、例えばホップ苞ゃブドウ果皮よりポリフエノール画分を精製後、特に粉末ィ匕後では二価陽イオンは数百 ppmも存在することがある。キレート榭脂により二価陽イオンの除去は可能である力同時に目的のポリフエノール成分も大幅に減少するため、安定して効率の良い、二価陽イオンの除去方法の開発が望まれていた。

また、これまでの製造法によるホップ苞ポリフエノール画分では、酒類や飲料へ添加あるいは配合する際、不溶性物質の発生や濁り等が生じるという品質面の低下が懸念されており、水溶性ポリフエノール画分の製造法の開発が望まれていた。

[0005] ホップ苞ポリフエノールの製造法が提案されて、る（特許文献 1参照） 1S この製造法における問題点として、以下のことが挙げられる。

(1)ホップ苞抽出液の珪藻土濾過工程で、濾液の濁度が十分に低下しないため、合成吸着剤によるカラム精製工程で目詰まりが発生し、ポリフエノールが損失してヽた。

(2)合成吸着剤によるカラム精製工程で得られる固形分中、水溶性ポリフエノール純度が約 50%と低いため、後の澱下げ工程に長時間を要する。

(3)酒類や飲料へ添加あるいは配合する際、不溶性物質の発生や濁り等が生じていた。

(4)二価陽イオンが精製後も粉末あたり数百 ppm存在して、た。

[0006] 特許文献 l :WO 2004Z052898号公報

発明の開示

発明が解決しょうとする課題

[0007] したがって、本発明の目的は、力かる問題点を解消して精製植物抽出物の製造法、特に高純度の水溶性ホップ苞ポリフエノールを短時間で効率よく製造する方法を開発することである。

課題を解決するための手段

[0008] 本発明者らは、上記目的を達成すべく鋭意検討を重ねた結果、ホップ苞ポリフエノールの製造方法にぉ、て、これまでの珪藻土濾過工程の前にホップ苞抽出液を酸性条件下においてベントナイト等の粘土鉱物で処理することにより、二価陽イオンの除去と清澄ィ匕を効率よく実施することができ、前記特許文献 1に記載の方法における精製工程に要する時間が大幅に短縮され、さら〖こ、二価陽イオンが顕著に除去されるだけでなぐ非水溶性成分も除去され、結果として水溶性ポリフエノールの精製が効率良く達成できることを見出し、本発明を完成するに至った。

[0009] すなわち、請求項 1に係る本発明は、植物抽出物を粘土鉱物で処理し、二価陽ィオンを除去することを特徴とする精製植物抽出物の製造法である。

[0010] また、請求項 2に係る本発明は、粘土鉱物がベントナイトである請求項 1記載の製造法である。

[0011] また、請求項 3に係る本発明は、請求項 1の精製植物抽出物を、カラムに通液してポリフエノール類を吸着させ、次ヽで溶媒を通液して水溶性ポリフエノールを溶出させることを特徴とするポリフエノール製造法である。

[0012] 請求項 4に係る本発明は、植物がホップである請求項 1〜3のいずれかに記載の製造法である。

[0013] 請求項 5に係る本発明は、ホップ苞抽出液にベントナイトを添加して酸性条件下で静置する工程、固液分離を行い上清を得る工程、該上清をカラム精製し、得られたポリフエノール画分上清を冷却して静置して非水溶性成分を析出させ、固液分離を行う工程を含むことを特徴とする水溶性ホップ苞ポリフエノールの製造法である。

[0014] 請求項 6に係る本発明は、ホップ苞抽出液にベントナイトを添加して酸性条件下で静置する工程を、 pH2.0〜4.0の酸性領域で行う請求項 5に記載のホップ苞ポリフエノールの製造法である。

[0015] 請求項 7に係る本発明は、ポリフエノール画分上清の冷却温度が 0〜10°C、静置時間が 6時間以上 900時間以内である請求項 5または 6に記載のポリフエノール製造法である。

発明の効果

[0016] 本発明によれば、以下の効果が得られる。

( 1)ポリフエノールを含有する植物抽出物、例えばホップ苞抽出液を粘土鉱物で処理することにより、二価陽イオンの除去が効率的に行われる。二価陽イオンは、酒類や清涼飲料中に高濃度に存在すると、混濁、変色および酸ィヒ等が起こることが知られている。例えば、葡萄酒においては、葡萄酒中に lOppm以上の鉄イオンが存在すると、低酸度と低温によって鉄混濁が発生することが知られて！/ヽる。

また、銅混濁は葡萄酒においては、少なくとも 0.6ppm以上存在すると発生する。したがって、植物抽出物の二価陽イオンを除去することは、該抽出物を酒類や清涼飲料に使用する際に、混濁防止等の効果が期待される。

(2)さらに、粘土鉱物による処理により、ホップ苞抽出液の清澄ィ匕が行われ、後続の合成吸着剤によるカラム精製工程において目詰まりが生起しない。

(3)合成吸着剤によるカラム精製工程で得られる水溶性ポリフエノールの純度が約 90 %に向上し、後の澱下げ工程における所要時間が大幅に短縮される。

(4)水溶性ホップ苞ポリフエノールの回収率が従来法に比べて約 18%向上する。図面の簡単な説明

[0017] [図 1]本発明のプロセスフローの概要を示したものである。前半の清澄化工程までには、二価陽イオン除去工程、植物抽出物清澄ィ匕工程を含み、後半の工程には、ポリフエノール水溶ィ匕工程を含む。

発明を実施するための最良の形態

[0018] 以下、本発明を詳細に説明する。

[0019] 本発明における原料である植物としては、ポリフノールを含有するものであればよぐ特に飲食品等の製造において副産物として得られものが好適である。例えば果汁などの製造に用いられる林檎や葡萄の抽出物、ビール醸造において副生するホップの截などがある。

ここで、ホップとは、ホップ毬花よりルブリン部分を取り除いて得られるものであり、一般に、ホップ毬花を粉砕後、ふるい分けなどによってルブリン部分を除くことによつて得られる。

ホップ苞は、ルブリン部分を除いた後、そのままの状態で原料として用いることもできるし、ペレット状にカ卩ェ形成したものを用いてもよい。その他、ホップ毬花そのものやホップ毬花の超臨界抽出残渣などのように、ホップ苞を含むものであれば、特に問題なく本発明に用いることができる。 [0020] 次に、粘土鉱物は、含水ケィ酸塩を主体とする天然の微細粒子力なり、加水により可塑性を示す土状の物質をいい、例えばカオリン鉱物、ノイロフィライト、タルク、セリサイト、モンモリロナイト、クロライト、スメクタイト、ベントナイト、酸性白土、活性白土などを挙げることができる。粘土鉱物の特徴は層状構造をとつていることであり、個々の結晶は板状もしくはフレーク状の形態をとるのが普通で、層状構造内に種々のィォンを取り込む能力を持っている。これらの中でも、ベントナイトは吸着能力に優れているばかりでなぐ食品添加物として用いられており、特に好ましい。ベントナイトは、粘土鉱物のモンモリロナイトを主成分として含んでおり、水中で膨潤する性質や陽ィォン交換能を有している。

本発明で用いるベントナイトは、天然ベントナイトから夾雑成分を取り除いた精製物が好ましぐフレーク状、粉末状などにカ卩ェしたものであってもよい。

[0021] 以下に、本発明の植物抽出物力ポリフエノールを製造する方法の例示として、ホップ苞ポリフエノールの製造法について説明する。なお、粘土鉱物の代表例としてべントナイトを用いた。図 1は、本発明のプロセスフローの概要を示したものである。まず、原料のホップ苞を抽出溶媒の含水アルコール、好ましくは 50容量％以下のァルコール水溶液で抽出することにより、ポリフエノール類を含む抽出液を得る。アルコールとしては、エタノールが好ましい。原料に対する抽出溶媒の割合は、 1:10〜20 ( 重量比)程度であればよい。また、抽出は 30〜60°Cで攪拌下、 60〜180分間行えばよい。

[0022] 抽出操作の終了後、ろ過によってポリフエノール類を含む抽出液を得る力その際必要に応じて圧搾処理を行って抽出液の回収率を高めたり、分取したホップ苞に加水して再度圧搾して抽出液を回収してもよ、。

このようにして得られたポリフエノール類を含む抽出液は、残存アルコール濃度が 2 容量％以下になるように、好ましくは固形分含量が BRIX (可溶性固形分含量：水溶液中に含まれる糖類を初めとして、塩類、蛋白質、酸類など水に溶ける物質すベて力 S屈折率に影響するが、測定した屈折率がショ糖含量にのみ依存するとして換算し得られる値)で 50〜75%に濃縮する。濃縮方法としては、加熱濃縮、減圧濃縮などの通常用いられる方法を採用すればよいが、減圧濃縮が好ましい。また濃縮後、冷蔵もしくは冷凍で保存できる。

[0023] 次に、上記濃縮抽出液を、所望により希釈する。希釈率は、上記濃縮抽出液の固形分含量が BRIXで 50〜75%である場合、粘性及び比重を下げるために水で 3〜5倍に希釈した後、該抽出液の pHを食品加工用の酸を用いて pH2.0〜4.5の酸性領域、好適には pH3.0〜3.5程度に調整する。この場合、 pH調整にクェン酸などの有機酸を用いることが好ましい。

次いで、該抽出液にベントナイトを添加した後、 12〜24時間、好ましくは 15〜20時間程静置する。なお、ベントナイトは、あらかじめ 60°C以上、好ましくは 80〜90°Cの温水と混合して膨潤させ、 5〜15%水溶液、好ましくは 10%水溶液としておき、これを前記抽出液量に対するベントナイト量として 2000ppm、好ましくは 1500〜2000ppmの割合で添加する。

この操作により、抽出液中に含まれる二価陽イオンはベントナイトにより吸着、除去され（固形分含量 BRIX12当たり 20ppmから） 5ppm以下、通常は 0.5〜1.0ppmに低下する。

さらに、ベントナイトにより生じた沈殿物を、遠心分離（通常は 5,000〜10,000Gで 5〜 10分間）、ろ過 (例えば珪藻土ろ過）、その他の固液分離により、抽出液の清澄ィ匕が行われる。

また、必要であれば、上記抽出液を 10°C以下の低温で数日〜 1ヶ月間保存して十分に沈殿を生じさせた後に、当該沈殿物を除去することにより清澄ィ匕することもできる

[0024] 次、で、上記清澄ィ匕工程を経たポリフエノール類を含む抽出液を、合成吸着剤を充填したカラムに通液させることにより、合成吸着剤にポリフエノール類を吸着させる。このとき、抽出液は、 15〜30°Cの室温程度まで冷却したものを通液させることが望ましい。合成吸着剤としては、親水性ビニルポリマー、ヒドロキシプロピルィ匕デキストラン、スチレンージビュルベンゼン重合体などを挙げることができ、スチレンージビュルべンゼン重合体が好ましい。通液時間は、空間速度 SV値力 5〜10の間となるように設定するのが好ましぐ特に好ましくは SV=1である。なお、ここで言う SV値は、以下の式により定義される。 [0025] (数 1)

SV値 = (通液量 (L)) /{ (榭脂量 (L)) X (通液時間 (h)) }

[0026] 次に、溶媒をカラムに通液してポリフエノール類を吸着させた合成吸着剤を洗浄する。溶媒としては、例えば水またはエタノール水溶液が用いられ、エタノール水溶液としては 10容量％以下のエタノール水溶液が好ましい。特に、純水を用いるのが好ましい。この工程により、夾雑成分を除去し、ポリフエノール類の精製度を向上させることができる。このとき、榭脂量の 1〜5倍の溶媒をカラムに通液し、洗浄することが好ましい。

[0027] さらに、洗浄した合成吸着榭脂に対して、含水有機溶媒、例えば含水アルコール、含水アセトン、含水ァセトニトリルなどを通液することにより、ポリフエノール類を溶出させる。このとき、溶媒としては、 20容量％以上 65%未満のエタノール水溶液、特に 30 〜60%エタノール水溶液が好ましい。また、吸着榭脂量の 1〜6倍の溶媒を通液させるのが好ましい。

得られるポリフエノールを含むアルコール水溶液は、減圧濃縮機により含有アルコールを除去し、結果として固形分含量 3.5〜5.0%まで濃縮する。

[0028] 上記により得られた溶出液を減圧濃縮または加熱濃縮した後、必要があれば pHを

3.0以下に調整する。このとき、 pH調整剤としては、食品用として通常用いられているもの、例えばクェン酸などの有機酸を使用すればょ、。

[0029] 得られた濃縮液を静置することにより澱下げを行う。すなわち、夾雑物を沈殿させる

。し力る後、ろ過などの固—液分離を行う。ここで、澱下げ工程は、温度 0〜10°C、好ましくは 0〜4°Cで、 8〜24時間、好ましくは 8〜12時間行う。

[0030] 次、で、ろ過済み濃縮液につ、て、必要に応じて凍結乾燥 (フリーズドライ)や噴霧乾燥 (スプレードライ)などの通常の方法により溶媒を除去し、ホップ苞ポリフエノールを粉末として得ることができる。

このようにして得られたホップ苞ポリフエノールは、苦味ある!/、は渋味を呈した僅かなホップ香を有する、淡褐色〜褐色の粉末である。

なお、上記の方法で得られるポリフエノール類の収率は、ホップ苞あたり 2.0〜2.1% である。この収率は、従来法と比べると、約 18%向上している。 [0031] 上記のようにして得られたホップ苞ポリフエノールなどの本発明に係るポリフエノールは、前記した様々な機能を有しており、飲食品、化粧品、医薬部外品、医薬品などに配合し、禾 IJ用することができる。

実施例

[0032] 以下に実施例を挙げて本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらによって限定されるものではない。

[0033] (実施例 1)

原料のホップ苞 800gを 50容量％のアルコール水溶液で抽出して得たポリフエノール類を含む抽出液 400gを 40°Cに加温した純水に溶解し、 1200mほでメスアップ（希釈率 3倍 v/w)した。次いで、これを 250mlメスシリンダーに 200mlずつ分注し、 5検体を準備した。

一方、 80°Cに加温した純水 100mlにベントナイト 5gを添カ卩し、 12時間以上撹拌して膨張させ、ベントナイト 5%懸濁液を調製した。この懸濁液を、表 1に示した通りに上記各検体に添加した後、すべて等量になるように純水を用いて調整した。

一晚静置させた後、遠心分離を行って上清を採取した。この上清について濁度を 1 0mm長セルを用いて分光光度計にて 650nmにおける吸光度を測定して求め、 pH値を pHメーターで測定した。さらに、上清を 0.45 mメンブレンフィルターでろ過したのち、銅 (Cu)とナトリウム (Na)の濃度および見掛けポリフノール濃度を測定した。なお、 Cu濃度と Na濃度は、原子吸光法により測定し、見掛けポリフエノール濃度は UV 280nm法により測定した。ここで、 UV280nm法について以下に説明する。

[0034] ポリフノール類は、各成分毎に特有の紫外部吸収スペクトルを有することが知られている。林檎や葡萄、ホップ苞に含まれる主なポリフエノール類は、 catechin、 proan thocyanidin等があり、これらは 280nmに吸収極大を持つ。したがって、 280nmにおける吸光度を測定することによりポリフエノール濃度を測定することができる。但し、ポリフェノール類の単位重量あたりの 280應における吸光係数が蛋白質、核酸、香気成分等、紫外部吸収のある成分に比べ、非常に大きいので、これらポリフノール以外の物質の 280應における吸光度は大きく関与しないが、その影響は完全に排除していないため、見掛けポリフエノール濃度と定義している。測定結果を表 1に示す。 [0035] [表 1]

[0036] 表 1の結果より、ベントナイトで処理した抽出液の濁度は、その濃度依存的に低下する傾向にあることがわ力つた。しかし、澱の沈降速度が遅いことから、ポリフエノール類を含む抽出液の希釈倍率や pH条件について検討を加える必要があると思われる

[0037] (実施例 2)

実施例 1と同様にして、原料のホップ苞 800gを 50容量％のアルコール水溶液で抽出して得たポリフエノール類を含む抽出液 400gを 40°Cに加温した純水に溶解し、 120 0mlまでメスアップ（希釈率 3倍 v/w)した。次いで、これを 250mlメスシリンダーに 200ml ずつ分注し、 5検体を準備した。

一方、 80°Cに加温した純水 100mlにベントナイト 5gを添カ卩し、 12時間以上撹拌して膨張させ、ベントナイト 5%懸濁液を調製した。この懸濁液を、表 2に示した通りに上記各検体に添加した後、すべて等量になるように純水を用いて調整した。次いで、各検体に無水クェン酸を添加して、表 2に示した pH値に調整した。

一晚静置させた後、遠心分離を行って上清を採取した。この上清について、実施例 1と同様の方法で処理したのち、濁度、 pH値、 Cu濃度、 Na濃度、見掛けポリフエノール濃度を測定した。測定結果を表 2に示す。

[0038] [表 2] No . ベントナイト獨度 Cu濃度 Na濃度見掛けポリフエノ処理液添力!]量（ppm) (650ιιπυ ( ppm) ( ppm) ール濃度 (%w/v ) p H 対照 0 1. 615 25. 8 8. 9 2. 5 5. 1

1 2000 0. 758 23 , 3 50. 0 2. 6 4. 5

2 2000 0. 558 21. 6 50. 3 2. 6 4. 0

3 2000 0. 535 18 , 9 49. 1 2. 7 3. 5

4 2000 0. 615 1 5. 2 46. 4 2. 7 3. 0

[0039] この例では、試験区におけるベントナイト処理時の pH値が対照区と比較して低くなるにつれ、見掛けポリフエノール濃度に変化はないが、 Cu濃度が減少した。

[0040] (実施例 3)

原料のホップ苞 4kgを 50容量％のアルコール水溶液で抽出して得たポリフエノール類を含む抽出液 2kgを 40°Cに加温した純水に溶解し、 7.2Lまでメスアップ（希釈率 3.6 倍 v/w)した。次いで、これを 2Lメスシリンダーに 1.8Lずつ分注し、 4検体を準備した。尚、検体の pH調整には、クェン酸 (無水）を使用した。

一方、 80°Cに加温した純水 500mlにベントナイト 25gを添カ卩し、 12時間以上撹拌して膨張させ、ベントナイト 5%懸濁液を調製した。この懸濁液を、表 3に示した通りに上記各検体に添加した後、すべて等量 (2000ml)になるように純水を用いて調整した。

一晚静置させた後、遠心分離を行って上清を採取した。この上清について濁度を 1 0mm長セルを用いて分光光度計にて 650nmにおける吸光度を測定して求め、 pH値を pHメーターで測定した。さらに、上清を実施例 1と同様にしてろ過したのち、銅 (Cu )とナトリウム (Na)の濃度および見掛けポリフエノール濃度を実施例 1と同じ方法で測定した。測定結果を表 3に示す。

[0041] [表 3]

[0042] 表 3から明らかなように、 10倍にスケールアップした場合も、二価陽イオン除去能および濁度低下について再現性が確認された。また、ベントナイト濃度についても、 200 0〜5000ppmの範囲では二価陽イオン除去率および濁度低下に大きな差はないが、ベントナイトの添加量が増えると、ナトリウム濃度が高くなるので、ベントナイト濃度は 2 OOOppm程度が妥当である。さらに、二価陽イオン除去率は処理液の pHによる影響が大きいことがわ力つた。

したがって、ベントナイトの添加量を 2000ppm程度、処理液の pHを 3.0程度に設定するのが適当である。

[0043] (実施例 4)

原料のホップ苞 800gを 50容量％のアルコール水溶液で抽出して得たポリフエノール類を含む抽出液 400gを 40°Cに加温した純水に溶解し、 1440mほでメスアップ（希釈率 3.6倍 v/w)した。次いで、これを 1000mlメスシリンダーに 720mlずつ分注し、 2検体を準備した。実施例 3と同様に抽出液にベントナイト添加量 2000ppmを加え、クェン酸による pH調整 (3.0)を行い、純水にて希釈倍率を 4倍となるよう調整した。これを一晚静置させた後、遠心分離を行って上清を採取し、抽出液重量に対し純水にて希釈倍率を 6倍となるよう調整した。この上清を実施例 1と同様にろ過して検液 1とした。一方、対照としてポリフエノール類を含む抽出液を、ベントナイト処理せずに純水にて希釈倍率を 6倍としたものを検液 2とした。

次に、各検液 1200mlを空間速度 = 1 (3.3ml/min)にてカラム（充填剤：三菱化学社製 SP850、 196ml)に通液し、次いで純水を通液し、カラム下部 Brix.0.2で終了した。次に、 50%エタノール (液温は室温） 600mlを空間速度 = 1 (3.3ml/min)にてカラムに通液した。エタノールの通液開始後から、最終液量 850mlまで回収した (純水押し分を含む)。得られた試料 (カラム負荷検液、液量 1200ml)について、実施例 1と同様の方法で Cu濃度と Na濃度を測定し、結果を表 4に示した。また、カラム溶出液 (液量 850ml) 中の Cu濃度と Na濃度を測定し、 Cu除去率と Na除去率及びポリフエノール濃度を求め、その結果を表 5に示した。

[0044] [表 4]

試料検液量（m l ) 換算抽出液量（g) Cu含量 (mg) Na含量 ( mg) 検液 1 (試験例） 1200 200 6. 7 38. 7 検液 2 (対照例） 1 00 200 17. 8 6. 8 [0045] [表 5]

[0046] 表から明らかなように、本発明によれば、二価陽イオンは 60〜85%除去される。なお、カラム精製によって除去される理由については、二価陽イオンは榭脂に吸着されないことが原因であると推測される。また、 _PH調整し酸性領域でベントナイト処理したポリフエノール含有抽出液をカラムに通液し、次いで純水の通液を行うことにより、原料に由来する銅は 1/10以下まで除去可能であると考えられる。

[0047] (実施例 5)

カラム溶出液を脱アルコール、濃縮しポリフエノール画分濃縮液を得た。これを乾燥させ、ホップ苞ポリフエノールの粉末（1) (非水溶性成分除去前のもの）を得た。次に、クェン酸で濃縮液を PH3.2に調整し、 3日間 0°Cで冷却保存を行い、沈殿を析出させた。これをろ過後、乾燥させ、水溶性ホップ苞ポリフエノールの粉末 (2) (非水溶性成分除去後のもの）を得た。これら粉末（1)、（2)の lOOppm水溶液を作成し、分析を行った結果を表 6に示す。表中のポリフノール係数は、ゲル浸透高速液体クロマトグラフィー（GPC-HPLC)で得られる分子量パターンより、ピーク面積として測定した。また、プロアントシァ-ジン係数は、 Porter法により測定した。 Porter法とは、 -量体以上のカテキンオリゴマー (縮合型タンニンまたはプロアントシァ-ジン)を酸性条件下で加熱すると、カテキン-力テキンの間の結合が切断されるとともに、アントシァ-ジン (赤色色素）が生成する現象を利用し、再現性良く試料中の総プロアントシァ-ジン量を比色定量する方法である。また、タンパク質はケルダール法により全窒素を測定し、係数 6.15を乗じてタンパク質含量を求めた。

[0048] [表 6]

ポリフノール係数 7 ° 口アントシァニン係数タンパク質含量 ( GPC-HPLCt ' -ク面積） ( Port Θ Γ値) ( % w/w)

粉末 ( 1 ) 100 , 394 0. 083 13. 2

粉末 ( 2 ) 1 14， 251 0. 088 6. 6 [0049] 表 6から、非水溶性成分除去工程により、粉末化されたホップ苞ポリフエノール画分中のポリフエノールおよびプロアントシァ-ジン含量の向上、タンパク質含量の減少により、ポリフエノール純度の向上が示された。これは、精製ポリフエノール画分に残留していた不溶性タンパク質などの非水溶性成分が、析出'沈殿ィ匕して除去されたことによるちのと推察された。

産業上の利用可能性

[0050] 本発明によれば、ポリフエノール含有植物の抽出物、例えばビール醸造の際に副産物として得られるホップ苞などから、高純度の水溶性ポリフエノールを短時間で効率よく製造する方法が提供される。

し力も、本発明によりホップ苞抽出液をベントナイトで処理することにより、不純物の二価陽イオンなどの除去を効率的に行うことができる。

Claims

請求の範囲

[1] 植物抽出物を粘土鉱物で処理し、二価陽イオンを除去することを特徴とする精製植物抽出物の製造法。

[2] 粘土鉱物がベントナイトである請求項 1記載の製造法。

[3] 請求項 1の精製植物抽出物を、カラムに通液してポリフエノール類を吸着させ、次いで溶媒を通液して水溶性ポリフエノールを溶出させることを特徴とするポリフエノール製造法。

[4] 植物がホップである請求項 1〜3の、ずれかに記載の製造法。

[5] ホップ苞抽出液にベントナイトを添加して酸性条件下で静置する工程、固—液分離を行い上清を得る工程、該上清をカラム精製し、得られたポリフエノール画分上清を冷却して静置して非水溶性成分を析出させ、固液分離を行う工程を含むことを特徴とする水溶性ホップ苞ポリフエノールの製造法。

[6] ホップ苞抽出液にベントナイトを添加して酸性条件下で静置する工程を、 pH2.0〜

4.0の酸性領域で行う請求項 5に記載のホップ苞ポリフエノールの製造法。

[7] ポリフエノール画分上清の冷却温度が 0〜10°C、静置時間が 6時間以上 900時間以内である請求項 5または 6に記載のポリフエノール製造法。