JP2018513668A - Ｐ２１遺伝子調節のためのｒｎａ剤 - Google Patents

Ｐ２１遺伝子調節のためのｒｎａ剤 Download PDF

Info

Publication number
JP2018513668A
JP2018513668A JP2017534286A JP2017534286A JP2018513668A JP 2018513668 A JP2018513668 A JP 2018513668A JP 2017534286 A JP2017534286 A JP 2017534286A JP 2017534286 A JP2017534286 A JP 2017534286A JP 2018513668 A JP2018513668 A JP 2018513668A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
nucleic acid
molecule
seq
acid molecule
strand
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
JP2017534286A
Other languages
English (en)
Other versions
JP2018513668A5 (ja
JP6793649B2 (ja
Inventor
イン，ウェンビン
憲二郎 味呑
憲二郎 味呑
ハーボース，イェンス
シマ，シーマ
ツァン，コクイン
博一 高橋
博一 高橋
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Nitto Denko Corp
Original Assignee
Nitto Denko Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nitto Denko Corp filed Critical Nitto Denko Corp
Publication of JP2018513668A publication Critical patent/JP2018513668A/ja
Publication of JP2018513668A5 publication Critical patent/JP2018513668A5/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP6793649B2 publication Critical patent/JP6793649B2/ja
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
    • A61B5/00—Measuring for diagnostic purposes; Identification of persons
    • A61B5/0059—Measuring for diagnostic purposes; Identification of persons using light, e.g. diagnosis by transillumination, diascopy, fluorescence
    • A61B5/0071—Measuring for diagnostic purposes; Identification of persons using light, e.g. diagnosis by transillumination, diascopy, fluorescence by measuring fluorescence emission
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
    • A61K31/7105—Natural ribonucleic acids, i.e. containing only riboses attached to adenine, guanine, cytosine or uracil and having 3'-5' phosphodiester links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
    • A61K31/713—Double-stranded nucleic acids or oligonucleotides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K49/00—Preparations for testing in vivo
    • A61K49/001—Preparation for luminescence or biological staining
    • A61K49/0013—Luminescence
    • A61K49/0017—Fluorescence in vivo
    • A61K49/0019—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules
    • A61K49/0021—Fluorescence in vivo characterised by the fluorescent group, e.g. oligomeric, polymeric or dendritic molecules the fluorescent group being a small organic molecule
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Liposomes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B82—NANOTECHNOLOGY
    • B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
    • B82Y5/00—Nanobiotechnology or nanomedicine, e.g. protein engineering or drug delivery
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D311/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings
    • C07D311/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D311/04—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring
    • C07D311/22—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms directly attached in position 4
    • C07D311/26—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms directly attached in position 4 with aromatic rings attached in position 2 or 3
    • C07D311/28—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms directly attached in position 4 with aromatic rings attached in position 2 or 3 with aromatic rings attached in position 2 only
    • C07D311/30—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms directly attached in position 4 with aromatic rings attached in position 2 or 3 with aromatic rings attached in position 2 only not hydrogenated in the hetero ring, e.g. flavones
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic System
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/6527—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07F9/6533—Six-membered rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
    • C12N15/1135—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against oncogenes or tumor suppressor genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
    • C12N15/1137—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against enzymes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/58—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances
    • G01N33/582—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving labelled substances with fluorescent label
    • H—ELECTRICITY
    • H05—ELECTRIC TECHNIQUES NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • H05K—PRINTED CIRCUITS; CASINGS OR CONSTRUCTIONAL DETAILS OF ELECTRIC APPARATUS; MANUFACTURE OF ASSEMBLAGES OF ELECTRICAL COMPONENTS
    • H05K999/00—PRINTED CIRCUITS; CASINGS OR CONSTRUCTIONAL DETAILS OF ELECTRIC APPARATUS; MANUFACTURE OF ASSEMBLAGES OF ELECTRICAL COMPONENTS dummy group
    • H05K999/99—PRINTED CIRCUITS; CASINGS OR CONSTRUCTIONAL DETAILS OF ELECTRIC APPARATUS; MANUFACTURE OF ASSEMBLAGES OF ELECTRICAL COMPONENTS dummy group dummy group
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/10—Type of nucleic acid
    • C12N2310/14—Type of nucleic acid interfering N.A.
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
    • C12N2310/322—2'-R Modification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/34—Spatial arrangement of the modifications
    • C12N2310/344—Position-specific modifications, e.g. on every purine, at the 3'-end
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/35—Nature of the modification
    • C12N2310/351—Conjugate
    • C12N2310/3515—Lipophilic moiety, e.g. cholesterol
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/50—Physical structure
    • C12N2310/53—Physical structure partially self-complementary or closed
    • C12N2310/531—Stem-loop; Hairpin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2320/00—Applications; Uses
    • C12N2320/30—Special therapeutic applications
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2320/00—Applications; Uses
    • C12N2320/30—Special therapeutic applications
    • C12N2320/31—Combination therapy
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2320/00—Applications; Uses
    • C12N2320/30—Special therapeutic applications
    • C12N2320/32—Special delivery means, e.g. tissue-specific
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2320/00—Applications; Uses
    • C12N2320/30—Special therapeutic applications
    • C12N2320/35—Special therapeutic applications based on a specific dosage / administration regimen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2320/00—Applications; Uses
    • C12N2320/50—Methods for regulating/modulating their activity
    • C12N2320/53—Methods for regulating/modulating their activity reducing unwanted side-effects

Abstract

本発明は、RNA干渉を用いてヒトp21の発現を調節する化合物、組成物及び方法を提供する。RNA干渉分子は、悪性腫瘍などの疾患を予防又は治療するための方法に使用することができる。核酸分子は、A）ポリヌクレオチドセンス鎖及びポリヌクレオチドアンチセンス鎖; B）分子の各鎖は15〜30ヌクレオチドの長さであり; C）アンチセンス鎖の15〜30ヌクレオチドの連続領域がp21をコードするMRNAの配列に相補的であり; D）センス鎖の少なくとも一部は、アンチセンス鎖の少なくとも一部に相補的とすることができ、分子は15〜30ヌクレオチド長の二重鎖領域を有する。【選択図】図２

Description

本発明は、核酸を基礎とする分子からなる生物医薬品及び治療剤の分野に関する。より詳細には、本発明は、ヒトp21の発現を調節するためのRNA干渉（RNAi）を利用する化合物及び組成物に関する。
この出願は、1,311,243バイトのサイズであるND5123458WO_SL.txtと名付けられた2015年12月23日に作成されたASCIIファイルとして電子的に提出された配列表を含み、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
p21は、CDKN1A遺伝子によってコードされ、CIP/KIPファミリーに属する細胞周期調節タンパク質である。このタンパク質は、サイクリン-CDK複合体への結合によるサイクリン-CDK複合体の効果を阻害することにより、G1期及びG2/M期において細胞周期の進行を阻害する機能を有する。具体的には、p21遺伝子は、腫瘍抑制遺伝子の1つであるp53によって活性化される。DNA損傷等によるp53の活性化により、p53がp21を活性化し、細胞周期がG1期及びG2/M期に停止することが報告されている。
p21は、前立腺癌、子宮頸癌、乳癌及び扁平上皮癌を含む様々なヒト癌において過剰発現しており、多くの場合、p21アップレギュレーションが腫瘍等級、侵襲性及び攻撃性と正に相関している（例えば、Changら、Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2000, Vol. 97, No. 8, pp. 4291-96参照）。また、p21のアップレギュレーションは、脳、前立腺、卵巣、乳房及び食道細胞癌を含む多くの形態の癌において、腫瘍原性及び予後不良と関連することが報告されている（例えば、Wintersら、Breast Cancer Research, 2003, Vol. 5, No. 6, pp. R242-R249参照）。また、その疾患は、アテローム性動脈硬化症、アルツハイマー病、アミロイドーシス及び関節炎を含む加齢性疾患であってもよい（例えばChangら、Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2000, Vol. 97, No. 8, pp. 4291-96参照）。
p21発現阻害のための治療剤には、非常に強力なsiRNA配列及び構造を必要とするであろう。
p21発現阻害のためのsiRNA配列、化合物及び構造が必要とされている。
本発明は、RNA干渉を用いてヒトp21の発現を調節するための化合物、組成物及び方法に関する。
いくつかの実施形態では、本発明は、p21をサイレンシングするRNA干渉遺伝子のための分子を提供する。
さらなる実施形態において、本発明の構造、分子及び組成物は、悪性腫瘍を含む、p21に関連する疾患を予防又は治療するための方法、若しくはp21に関連する状態又は障害の症状を改善するための方法に使用することができる。
本実施の形態は以下を包含する：
核酸分子であって、a）分子は、ポリヌクレオチドセンス鎖及びポリヌクレオチドアンチセンス鎖を有し；b）分子の各鎖は15〜30ヌクレオチドの長さであり；c）アンチセンス鎖の15〜30ヌクレオチドの連続領域は、p21をコードするmRNA配列に相補的であり；d）センス鎖の少なくとも一部はアンチセンス鎖の少なくとも一部に相補的であり、分子は15〜30ヌクレオチド長の二重鎖領域を有する。
いくつかの実施形態では、核酸分子は、p21をコードするmRNA配列に相補的な、分子の二重鎖領域に位置するアンチセンス鎖における15〜30ヌクレオチドの連続領域を有することができる。
さらなる実施形態では、核酸分子は、p21をコードするmRNA配列に相補的な、アンチセンス鎖の15〜30ヌクレオチドの連続領域を有することができ、また、配列番号１におけるヒトp21 mRNA配列から選ぶことができる。
本発明の実施形態は、p21をコードするmRNAの配列に相補的であり、ヒトp21の配列から選択される、アンチセンス鎖の15〜30ヌクレオチドの連続領域を有する核酸分子を提供する。ここで、ヒトp21の配列は、配列番号1の1位〜125位、配列番号1の126位〜620位、及び621位〜2175位から選択される。
特定の実施形態では、核酸分子は、配列番号2033〜4063から選択される配列を含むアンチセンス鎖を有することができる。さらなる実施形態では、核酸分子は、配列番号4092〜4119から選択される配列を含むアンチセンス鎖を有することができる。
本発明の核酸分子は、配列番号4066及び4094、配列番号4067及び4095、配列番号4068及び4096、配列番号4073及び4101、配列番号4075及び4103、配列番号4080及び4108、配列番号4084及び4112、配列番号4085及び4113、配列番号4088及び4116並びに配列番号4091及び4119の群から選択されるセンス鎖及びアンチセンス鎖のペアからなるものであってもよい。
さらなる態様において、本発明の核酸分子は、当該分子の各鎖を18〜22ヌクレオチド長とすることができる。核酸分子は、19ヌクレオチド長の二重鎖領域を有することができる。
特定の形態では、核酸分子は、一本鎖として連結されたポリヌクレオチドセンス鎖及びポリヌクレオチドアンチセンス鎖を有し、一端においてループで連結されることで二重鎖領域を形成することができる。
本発明の核酸分子は、平滑末端を有することができ、1つ以上の3’オーバーハングを有することができる。
本発明の核酸分子は、遺伝子サイレンシングに活性であるRNAi分子、例えば、遺伝子サイレンシングに活性であるdsRNA、siRNA、マイクロRNA又は遺伝子サイレンシングに活性なshRNA、並びにDNA指向性RNA（ddRNA）、PiWi相互作用性RNA（piRNA）及び反復関連siRNA（rasiRNA）とすることができる。
本発明は、p21の発現阻害に活性である一連の核酸分子を提供する。いくつかの実施形態では、核酸分子は、p21のノックダウンに関するIC50が100pM未満とすることができる。
本発明はさらに、1つ以上の本発明の核酸分子及び薬学的に許容される担体を含む組成物を企図する。担体は、脂質分子又はリポソームとすることができる。
さらなる態様において、本発明は、必要とする被験体に1つ以上の本発明の核酸分子を含有する組成物を投与することによって、p21発現に関連する疾患を治療する方法を含む。当該疾患は、とりわけ、p21発現に関連する癌などの疾患に存在する悪性腫瘍とすることができる。
図1は、2175ヌクレオチドの長さであるGenBankアクセッション番号NM_000389.4（CDKN1A）に開示されている例示的な標的p21 mRNAの核酸配列である、配列番号１を示している。 図2は、A549細胞においてp21 mRNAをダウンレギュレートする能力について試験したp21 siRNAを示している。トランスフェクションの24時間前にA549細胞を2000/ウェルで播種した。次いで、0.1、1及び10nMの濃度のp21 siRNAで細胞を24時間トランスフェクトした。p21発現レベルの倍率変化をqRT-PCR（n=3）を用いて測定した。
本発明は、p21の発現を調節するための核酸に基づく治療剤のための化合物、組成物及び方法に関する。
いくつかの実施形態において、本発明は、RNA干渉において活性な分子、ならびにp21の発現をサイレンシングすることができる構造及び組成物を提供する。
本開示の構造及び組成物は、悪性腫瘍などの様々な疾患の予防又は治療に使用することができる。
さらなる実施形態では、本発明は、本発明の1つ以上の治療用RNAi分子の送達及び摂取のための組成物、ならびにその使用方法を提供する。本発明のRNAに基づく組成物は、悪性腫瘍、例えば癌を予防又は治療するための方法において使用することができる。
本発明の治療用組成物は、RNA干渉において活性である核酸分子を含む。治療用核酸分子は、遺伝子サイレンシングのためにCDKN1A (p21)を標的とすることができる。
種々の実施形態において、本発明は、低分子干渉RNA（siRNA）として活性であり、p21遺伝子発現を調節又はサイレンシングすることができる一連の分子を提供する。
本発明のsiRNAは、悪性腫瘍を予防又は治療するために使用することができる。
本発明の実施形態はさらに、悪性腫瘍の予防又は治療を必要とする被験体に本発明のsiRNAを送達するためのビヒクル、製剤又は脂質ナノ粒子製剤を提供する。本発明はさらに、siRNAを治療剤として哺乳動物に投与するための方法を企図している。
本発明の治療分子及び組成物は、化合物又は組成物を必要とする被験体に投与することによって、p21関連疾患の予防又は治療を目的とするRNA干渉に使用することができる。
本発明の方法は、悪性腫瘍を予防又は治療するための本発明の化合物を利用することができる。悪性腫瘍は、様々な疾患に存在するものとすることができる。例えば、p21を高度に発現する癌、肉腫、線維肉腫、悪性線維性組織球腫、脂肪肉腫、横紋筋肉腫、平滑筋肉腫、血管肉腫、カポジ肉腫、リンパ管肉腫、滑膜肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫、癌腫、脳腫瘍、頭頸部癌、乳癌、肺癌、食道癌、胃癌、十二指腸癌、虫垂癌、大腸癌、直腸癌、肝臓癌、膵臓癌、胆嚢癌、胆管癌、肛門癌、腎臓癌、膀胱癌、前立腺癌、精巣癌、子宮癌、卵巣癌、皮膚癌、白血病、悪性リンパ腫、上皮悪性腫瘍及び非上皮性悪性腫瘍が挙げられる。
特定の実施形態において、本発明の治療用分子の組み合わせは、p21遺伝子発現をサイレンシング又は阻害するために使用することができる。
本発明は、一連のRNAi分子を提供する。ここで各分子はポリヌクレオチドセンス鎖及びポリヌクレオチドアンチセンス鎖を有し、分子の各鎖は15〜30ヌクレオチドの長さであり、アンチセンス鎖の15〜30ヌクレオチドの連続領域は、p21をコードするmRNAの配列に相補的であり、センス鎖の少なくとも一部はアンチセンス鎖の少なくとも一部に相補的であり、分子は15〜30ヌクレオチドの長さの二重鎖領域を有している。
本発明のRNAi分子は、分子の二重鎖領域に位置するp21をコードするmRNAの配列に相補的な、アンチセンス鎖の15〜30ヌクレオチドの連続領域を有することができる。
いくつかの実施形態では、RNAi分子は、p21をコードするmRNAの配列に相補的な、アンチセンス鎖の15〜30ヌクレオチドの連続領域を有することができる。
本発明の実施形態は、悪性腫瘍の1つ以上の症状を予防、治療又は改善する方法、又は悪性腫瘍を発症するリスクを低減する方法、又はそれを必要とする哺乳動物の悪性腫瘍の発症を遅延させる方法をさらに提供することができる。
P21及びRNAi分子
p21は、ヒトを含む様々な動物に存在する。ヒトCDKN1A（p21）の配列情報は、NM_000389.4, NM_078467.2, NM_001291549.1, NM_001220778.1, NM_001220777.1 (NP_001207707.1, NP_001278478.1, NP_001207706.1, NP_510867.1, NP_000380.1)で見つけられる。
図１は、GenBankアクセッション番号NM_000389.4 (CDKN1A)に開示され、長さが2175ヌクレオチドである標的ヒトp21mRNAの核酸配列の例である（配列番号１）。
当業者は、報告された配列が経時的に変化することがあり、それに応じて本明細書中の核酸分子に必要な変化を組み込むことができることを理解するであろう。
本発明の実施形態は、小さい核酸分子を用いたp21発現の遺伝子サイレンシングのための組成物及び方法を提供することができる。核酸分子の例としては、RNA干渉（RNAi分子）、短鎖干渉RNA（siRNA）、マイクロRNA（miRNA）、及び短鎖ヘアピンRNA（shRNA）分子において活性な分子、同様に、DNA指向性RNA（ddRNA）、PiWi相互作用性RNA（piRNA）及びリピート関連性siRNA（rasiRNA）において活性な分子を含む。そのような分子は、p21遺伝子発現に対するRNA干渉を媒介することができる。
本明細書に開示される組成物及び方法はまた、被験体における様々な種類の悪性腫瘍の治療において使用することができる。
本発明の核酸分子及び方法を用いて、p21をコードする遺伝子の発現をダウンレギュレートすることができる。
本発明の組成物及び方法は、独立して又は組み合わせて、p21タンパク質及び/又はp21タンパク質をコードする遺伝子、悪性腫瘍などのp21に関連する疾患、状態又は障害の維持及び/又は発症に関連するタンパク質及び/又は当該タンパク質をコードする遺伝子の発現を調節又は制御することができる１つ又は複数の核酸分子を含むことができる。
本発明の組成物及び方法は、p21の例示的な配列を参照して記載される。当業者は、本発明の様々な態様及び実施形態が、関連するp21遺伝子、配列、又はホモログ遺伝子及び転写変異体といった変異体、並びにp21遺伝子に関連する一塩基多型（SNP）を含む多型を対象とすることを理解するであろう。
いくつかの実施形態では、本発明の組成物及び方法は、GST-π遺伝子、例えばヒトCDKN1Aの発現をダウンレギュレートする二本鎖短干渉核酸（siRNA）分子を提供することができる。
本発明のRNAi分子は、p21を標的とすることができ、及び、例えば相補的配列を用いて、又は非標準塩基対、例えばミスマッチ及び/又はウォブル塩基対を組み込むことによって更なる標的配列を提供できる任意の相同配列を標的とすることができる。
ミスマッチが同定される場合、非標準的な塩基対、例えば、ミスマッチ及び/又はウォブル塩基を用いて、2つ以上の遺伝子配列を標的とする核酸分子を生成することができる。
例えば、UU及びCC塩基対などの非標準塩基対を使用して、配列相同性を有する異なるp21標的のための配列を標的にできる核酸分子を生成できる。したがって、RNAi分子は、相同遺伝子間で保存されているヌクレオチド配列を標的とすることができ、単一のRNAi分子を用いて2つ以上の遺伝子の発現を阻害することができる。
いくつかの局面では、本発明の組成物及び方法は、p21 mRNAに対して活性なRNAi分子を含み、RNAi分子は、p21配列をコードする任意のmRNAに相補的な配列を含む。
ある実施形態において、本開示のRNAi分子は、p21 RNAに対して活性を有することができる。ここで、RNAi分子は、変異体p21をコードする配列を有するRNA、例えば、悪性腫瘍に関連することが当該分野で公知である変異p21遺伝子に相補的な配列を含む。
さらなる実施形態では、本発明のRNAi分子は、p21遺伝子のヌクレオチド配列と相互作用し、p21遺伝子発現のサイレンシングを媒介することができるヌクレオチド配列を含むことができる。
p21 mRNAを標的とする本発明のRNAi分子の例を表1及び表2に示す。
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
Figure 2018513668
表1の要点：大文字のA、G、C及びUはそれぞれリボA、リボG、リボC及びリボUを指す。小文字a、g、c、tはそれぞれ2'-デオキシ-A、2'-デオキシ-G、2'-デオキシ-C及びチミジンを意味する。mUは、2’-メトキシ-Uである。
Figure 2018513668
表2の要点：大文字のA、G、C及びUはそれぞれリボA、リボG、リボC及びリボUを指す。小文字a、g、c、tはそれぞれ2'-デオキシ-A、2'-デオキシ-G、2'-デオキシ-C及びチミジンを意味する。mUは、2’-メトキシ-Uである。
例えば、本発明のsiRNAは、配列番号4103のアンチセンス鎖及び配列番号4075のセンス鎖、又はそれらの化学的に修飾された鎖を有するものであってもよい。
例えば、本発明のsiRNAは、配列番号4119のアンチセンス鎖及び配列番号4091のセンス鎖、又はそれらの化学的に修飾された鎖を有するものであってもよい。
化学修飾は、鎖中の任意の位置の任意のヌクレオチド上における2'-OMe置換基、ならびに当該分野で公知の他の修飾を含むことができる。
p21の調節方法及び悪性腫瘍の治療方法
本発明の実施形態は、p21及び/又はp21タンパク質の発現をダウンレギュレート又は阻害するために用いることができるRNAi分子を提供することができる。
いくつかの実施形態において、本発明のRNAi分子は、悪性腫瘍など疾患又は状態に関連し得るCDKN1Aハプロタイプ多型から生じるCDKN1A及び/又はp21タンパク質の発現をダウンレギュレート又は阻害するために使用することができる。
p21タンパク質又はmRNAレベルのモニタリングは、遺伝子サイレンシングを特徴づけるため、及び本発明の化合物及び組成物の有効性を決定するために使用することができる。
本開示のRNAi分子は、1つ以上の遺伝子の発現を調節するために、単独で又は他のsiRNAと組み合わせて使用することができる。
本開示のRNAi分子は、p21に関連する疾患（悪性腫瘍を含む）の予防又は治療、又は症状もしくは症状の改善のために、単独で又は組み合わせて、又は他の既知の薬物と組み合わせて使用することができる。
本発明のRNAi分子は、配列特異的様式でp21の発現を調節又は阻害するために使用することができる。
本開示のRNAi分子は、一連の連続したヌクレオチドがp21 mRNAに少なくとも部分的に相補的であるガイド鎖を含むことができる。
特定の意味において、悪性腫瘍は、本発明のRNAi分子を用いたRNA干渉によって治療されてもよい。
悪性腫瘍の治療は、適切な細胞ベースのモデル、ならびにエクスビボ又はインビボの動物モデルにおいて特徴づけることができる。
悪性腫瘍の治療は、冒された組織の細胞におけるp21 mRNAのレベル又はp21タンパク質のレベルを決定することによって特徴づけることができる。
悪性腫瘍の治療は、冒された臓器又は組織の非侵襲的な医学的走査によって特徴付けることができる。
本発明の実施形態は、それを必要とする被験体におけるp21関連疾患又は状態の症状を予防、治療又は改善するための方法を含むことができる。
いくつかの実施形態では、被験体における悪性腫瘍の症状を予防、治療又は改善するための方法は、被験体又は生物におけるCDKN1A遺伝子（p21）の発現を調節する本発明のRNAi分子を被験体に投与することを含むことができる。
いくつかの実施形態では、本発明は、細胞又は生物を本発明のRNAi分子と接触させることによって、細胞又は生物におけるCDKN1A遺伝子（p21）の発現をダウンレギュレートする方法を企図する。
RNA干渉
RNA干渉（RNAi）は、短い干渉RNA（siRNA）によって媒介される動物における配列特異的転写後遺伝子サイレンシングを意味する。例えば、Zamoreら、Cell、2000、Vol. 101、25〜33頁; Fireら、Nature、1998、Vol. 391、806811頁; Sharp、Genes＆Development、1999、Vol. 13、pp. 139-141参照。
細胞内のRNAi応答は、二本鎖RNA（dsRNA）によって誘発することができるが、メカニズムはまだ完全には理解されていない。細胞内の特定のdsRNAは、ダイサー酵素、リボヌクレアーゼIII酵素の作用を受けることができる。例えば、Zamoreら、Cell、2000、Vol. 101、25〜33頁; Hammondら、Nature、2000、Vol. 404、pp.293-296参照。ダイサーは、dsRNAをsiRNAであるdsRNAのより短い断片に加工することができる。
一般に、siRNAは、約21〜約23ヌクレオチドの長さとすることができ、約19ヌクレオチド長の塩基対二重鎖領域を含むことができる。
RNAiは、RNA誘発サイレンシング複合体（RISC）として知られているエンドヌクレアーゼ複合体に関与する。siRNAは、RISC複合体に入るアンチセンス又はガイド鎖であって、siRNA二本鎖のアンチセンス鎖に相補的な配列を有する一本鎖RNA標的の切断を媒介するアンチセンス又はガイド鎖を有する。siRNAの他方の鎖はパッセンジャー鎖である。標的RNAの切断は、siRNA二本鎖のアンチセンス鎖に相補的な領域の中央で起こる（例えば、Elbashirら、Genes＆Development、2001、Vol. 15、188〜200頁参照）。
本明細書で使用する「センス鎖」という用語は、siRNA分子の対応するアンチセンス鎖の少なくとも一部に部分的又は完全に相補的なsiRNA分子のヌクレオチド配列を指す。siRNA分子のセンス鎖は、標的核酸配列と相同性を有する核酸配列を含むことができる。
本明細書で使用される「アンチセンス鎖」という用語は、標的核酸配列の少なくとも一部に部分的又は完全に相補的なsiRNA分子のヌクレオチド配列を指す。siRNA分子のアンチセンス鎖は、siRNA分子の対応するセンス鎖の少なくとも一部に相補的な核酸配列を含むことができる。
RNAi分子は、配列特異的様式でRNA干渉を媒介することによって遺伝子発現をダウンレギュレート又はノックダウンすることができる。例えば、Zamoreら、Cell、2000、Vol. 101、25〜33頁; Elbashirら、Nature、2001、Vol. 411、494〜498頁; Kreutzerら、WO2000/044895; Zernicka-Goetzら、WO2001/36646; Fireら、WO1999/032619; Plaetinckら、WO2000/01846; Melloら、WO2001/029058参照。
本明細書中で使用される場合、遺伝子発現に関して「阻害する」、「ダウンレギュレートする」又は「縮小する」という用語は、遺伝子の発現又は1つ以上のタンパク質をコードするmRNA分子のレベル、若しくは1つ又は複数のコードされたタンパク質の活性が、本発明のRNAi分子又はsiRNAの非存在下で観察される活性よりも低下することを意味している。例えば、発現のレベル、mRNAのレベル又はコードされたタンパク質活性のレベルが、本発明のRNAi分子又はsiRNAの非存在下で観察される活性よりも、少なくとも1％、又は少なくとも10％、又は少なくとも20％、又は少なくとも50％、又は少なくとも90％、又はそれ以上で低下すれば良い。
RNAi分子はまた、ウイルス遺伝子発現をノックダウンするために使用することができ、よってウイルス複製に影響を及ぼす。
RNAi分子は、別個のポリヌクレオチド鎖：センス鎖又はパッセンジャー鎖と、アンチセンス鎖又はガイド鎖とから作製することができる。ガイド鎖とパッセンジャー鎖とは、少なくとも部分的に相補的である。ガイド鎖及びパッセンジャー鎖は、約15〜約49塩基対を有する二重鎖領域を形成することができる。
いくつかの実施形態では、siRNAの二重鎖領域は、17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48,又は49個の塩基対を含むことができる。
特定の実施形態において、RNAi分子は、RISC複合体において活性であり、RISCに対して活性な二重鎖領域の長さを有することができる。
さらなる実施形態において、RNAi分子は、RISC複合体において活性であるRNAi分子に変換されるダイサー基質として活性とすることができる。
いくつかの態様では、RNAi分子は、長い分子の対向する末端に相補的なガイドとパッセンジャー配列部分とを有することができ、その結果、分子は相補配列部分において二重鎖領域を形成することができ、各鎖はヌクレオチド又は非ヌクレオチドリンカーのいずれかによって当該二重鎖領域の一端で結合する。例えば、ヘアピン配列ステム及びループ配列である。各鎖とリンカー相互作用は、共有結合又は非共有相互作用とすることができる。
本開示のRNAi分子は、核酸のセンス領域を核酸のアンチセンス領域に結合するヌクレオチド、非ヌクレオチド又はヌクレオチド/非ヌクレオチド混合リンカーを含んでいてもよい。ヌクレオチドリンカーは、長さが2ヌクレオチド以上、例えば約3, 4, 5, 6, 7, 8, 9又は10ヌクレオチドのリンカーとすることができる。ヌクレオチドリンカーは、核酸アプタマーとしても良い。本明細書で使用する「アプタマー」又は「核酸アプタマー」は、標的分子に特異的に結合する核酸分子を意味し、ここで核酸分子はその天然の状況において標的分子によって認識される配列を含む配列を有する。あるいは、アプタマーは、標的分子に結合する核酸分子であってもよく、ここで標的分子は核酸に天然に結合しなくてよい。例えば、アプタマーは、タンパク質のリガンド結合ドメインに結合し、それにより天然に存在するリガンドとタンパク質との相互作用を防止するために使用することができる。例えば、Goldら、Annu Rev Biochem、1995、Vol. 64、763-797頁; Brodyら、J.Biotechnol., 2000、Vol. 74、5〜13頁; Hermannら、Science、2000、Vol. 287、pp. 820-825参照。
非ヌクレオチドリンカーの例は、無塩基ヌクレオチド、ポリエーテル、ポリアミン、ポリアミド、ペプチド、炭水化物、脂質、ポリ炭化水素又は他の高分子化合物、例えば2〜100個のエチレングリコール単位を有するポリエチレングリコールなどの高分子化合物を挙げることができる。いくつかの例は、Seelaら、Nucleic Acids Research、1987、Vol. 15、3113〜3129頁; Cloadら、J. Am. Chem. Soc., 1991、Vol. 113、6324-6326頁; Jaeschkeら、Tetrahedron Lett.,1993、Vol. 34、301頁; Arnoldら、WO1989/002439; Usmanら、WO1995/006731; Dudyczら、WO1995/011910; 及びFerentzら、J. Am. Chem. Soc., 1991、Vol. 113、pp. 4000-4002に記載されている。
RNAi分子は、二重鎖領域から1つ以上のオーバーハングを有することができる。オーバーハングは、塩基対形成されていない一本鎖領域であり、長さが1〜8ヌクレオチド又はそれ以上としても良い。オーバーハングは、鎖の3'末端が1〜8ヌクレオチドの一本鎖領域を有する3'末端オーバーハングとしても良い。オーバーハングは、鎖の5'末端が1〜8ヌクレオチドの一本鎖領域を有する5'末端オーバーハングとしても良い。
RNAi分子のオーバーハングは、同じ長さを有していても良いし、異なる長さとしても良い。
RNAi分子は、二重鎖領域がオーバーハングなしで終わり、鎖が二重鎖領域の末端まで塩基対合する、一つ以上の平滑末端を有するものとすることができる。
本開示のRNAi分子は、1つ以上の平滑末端を有することができ、又は1つ以上のオーバーハングを有することができ、若しくは平滑末端とオーバーハングとの組み合わせを有することができる。
RNAi分子の鎖の5'末端は、平滑末端にあってもよく又はオーバーハングにあってもよい。RNAi分子の鎖の3'末端は、平滑末端にあってもよく又はオーバーハングにあってもよい。
RNAi分子の鎖の5'末端は平滑末端にあり、3'末端はオーバーハングにあってもよい。RNAi分子鎖の3'末端は平滑末端にあり、5'末端はオーバーハングにあってもよい。
いくつかの実施形態では、RNAi分子の両端は平滑末端である。
さらなる実施形態において、RNAi分子の両端はオーバーハングを有していてもよい。
5'-及び3'-末端のオーバーハングは、異なる長さであってもよい。
特定の実施形態では、RNAi分子は、アンチセンス鎖の5'末端及びセンス鎖の3'末端がオーバーハングヌクレオチドを有さない平滑末端を有するものでもよい。
さらなる実施形態では、RNAi分子は、アンチセンス鎖の3'末端及びセンス鎖の5'末端がオーバーハングヌクレオチドを有さない平滑末端を有するものでもよい。
RNAi分子は、二重鎖領域における塩基対合においてミスマッチを有していてもよい。
RNAi分子のオーバーハングにおける任意のヌクレオチドは、デオキシリボヌクレオチド又はリボヌクレオチドとすることができる。
1つ以上のデオキシリボヌクレオチドは5'末端に存在してもよい、ここでRNAi分子の他方の鎖の3'末端がオーバーハングを有さなくてもよく、デオキシリボヌクレオチドオーバーハングを有さなくてもよい。
1つ以上のデオキシリボヌクレオチドは3'末端に存在してもよい、ここでRNAi分子の他の鎖の5'末端がオーバーハングを有さなくてもよく、デオキシリボヌクレオチドオーバーハングを有さなくてもよい。
いくつかの実施形態において、RNAi分子のオーバーハングヌクレオチドの1つ以上又は全てを2'-デオキシリボヌクレオチドとしてもよい。
ダイサー基質RNAi分子
いくつかの態様において、RNAi分子は、RISC活性RNAi分子を生成するようにプロセシングされるダイサー基質として適した長さにすることができる。例えば、Rossiら、US2005/0244858参照。
ダイサー基質である二本鎖RNA（dsRNA）は、活性RNAi分子を生成するためにダイサーによって処理されるのに十分な長さとすることができ、さらに以下の特性の1つ以上を含んでいてもよい：（i）ダイサー基質dsRNAは、例えば、アンチセンス鎖上に3'オーバーハングを有するような非対称とすることができ、（ii）ダイサー基質dsRNAは、ダイサー結合の配向を指示し、dsRNAを処理して活性なRNAi分子とするためにセンス鎖上に改変された3'末端を有していてもよい。
特定の実施形態では、ダイサー基質dsRNA中の最も長い鎖を24〜30ヌクレオチドの長さとすることができる。
ダイサー基質dsRNAは、対称又は非対称とすることができる。
いくつかの実施形態では、ダイサー基質dsRNAは、22〜28ヌクレオチドのセンス鎖及び24〜30ヌクレオチドのアンチセンス鎖を有することができる。
特定の実施形態では、ダイサー基質dsRNAは、アンチセンス鎖の3’末端にオーバーハングを有していてもよい。
さらなる実施形態では、ダイサー基質dsRNAは、長さが25ヌクレオチドのセンス鎖及び2塩基の3’-オーバーハングを含む長さが27ヌクレオチドのアンチセンス鎖を有することができる。オーバーハングは、1、2又は3ヌクレオチドの長さとすることができる。センス鎖はまた5’リン酸を有していてもよい。
非対称ダイサー基質dsRNAは、2つのリボヌクレオチドの代わりにセンス鎖の3’末端に2つのデオキシリボヌクレオチドを有することができる。
ダイサー基質dsRNAのセンス鎖は、約22〜約30、又は約22〜約28、又は約24〜約30、又は約25〜約30、又は約26〜約30、又は約26及び29、又は約27〜約28ヌクレオチドの長さとすることができる。
ダイサー基質dsRNAのセンス鎖は、22、23、24、25、26、27、28、29又は30ヌクレオチドの長さとすることができる。
特定の実施形態では、ダイサー基質dsRNAは、長さが少なくとも約25ヌクレオチドであり、長さが約30ヌクレオチドを超えないセンス鎖及びアンチセンス鎖を有していてもよい。
特定の実施形態では、ダイサー基質dsRNAは、26〜29ヌクレオチドの長さのセンス鎖及びアンチセンス鎖を有していてもよい。
特定の実施形態では、ダイサー基質dsRNAは、長さが27ヌクレオチドであるセンス鎖及びアンチセンス鎖を有していてもよい。
ダイサー基質dsRNAのセンス鎖及びアンチセンス鎖は、平滑末端であって同じ長さとすることができ、又はオーバーハングを有するように異なる長さであってもよく、又は平滑末端と突出とを有していてもよい。
ダイサー基質dsRNAは、長さが19、20、21、22、23、24、25、26又は27ヌクレオチドの二重鎖領域を有していてもよい。
ダイサー基質dsRNAのアンチセンス鎖は、真核細胞の細胞質内などの生物学的条件下でセンス鎖の配列の少なくとも一部にアニールする任意の配列を有することができる。
センス鎖及びアンチセンス鎖を有するダイサー基質は、リンカー基又はリンカーオリゴヌクレオチドのような第3の構造によって連結することができる。リンカーは、例えばdsRNAの2つの鎖を連結し、アニーリングの際にヘアピンを形成することができる。
ダイサー基質のセンス鎖及びアンチセンス鎖は一般に相補的であるが、塩基対形成においてミスマッチを有していてもよい。
いくつかの実施形態では、ダイサー基質dsRNAは、センス鎖が22〜28ヌクレオチドを有し、アンチセンス鎖が24〜30ヌクレオチドを有するように非対称であってもよい。
ダイサー基質dsRNAの鎖の1つ、特にアンチセンス鎖の領域は、少なくとも19ヌクレオチドの配列長を有してもよく、これらのヌクレオチドは、アンチセンス鎖の3’末端に隣接している21塩基領域内であり、標的遺伝子から産生されたRNAのヌクレオチド配列と十分に相補的となる。
ダイサー基質dsRNAのアンチセンス鎖は、22〜28ヌクレオチドの長さとなるように、5’末端に1〜9個のリボヌクレオチドを有することができる。アンチセンス鎖の長さが21ヌクレオチドである場合、1〜7個のリボヌクレオチド、又は2〜5個のリボヌクレオチド、又は4個のリボヌクレオチドを3’末端に付加することができる。付加されるリボヌクレオチドは、任意の配列とすることができる。
ダイサー基質dsRNAのセンス鎖は、24〜30ヌクレオチドを有していてもよい。センス鎖は、アンチセンス鎖と実質的に相補的であってもよく、生物学的条件下でアンチセンス鎖にアニールする。
RNAi分子の使用方法
本発明の核酸分子及びRNAi分子は、分子の直接的な適用によって、又は担体若しくは希釈剤と組み合わせた分子を用いて、細胞又は組織に送達することができる。
本発明の核酸分子及びRNAi分子は、担体又は希釈剤若しくは、ウイルス配列、ウイルス物質又は脂質若しくはリポソーム製剤などの細胞への侵入を補助又は促進するように機能する他の送達ビヒクルを用いた分子の直接的な適用によって、細胞、組織、器官又は被験体に送達又は投与することができる。
本発明の核酸分子及びRNAi分子は、カチオン性脂質と複合体を形成するか、リポソーム内にパッケージするか、或いは標的細胞又は組織に送達することができる。核酸又は核酸複合体は、直接皮膚適用、経皮適用又は注射によって生体外又は生体内の関連する組織に局所投与することができる。
送達系は、例えば、水性及び非水性ゲル、クリーム、エマルジョン、マイクロエマルジョン、リポソーム、軟膏、水性及び非水性溶液、ローション、エアロゾル、炭化水素ベース及び粉末を含んでいても良く、そして可溶化剤及び浸透増強剤等の添加物を含んでいても良い。
本開示の組成物及び方法は、核酸分子の発現を可能にするように、少なくとも1つの本発明のRNAi分子をコードする核酸配列を含む発現ベクターを含むことができる。
本発明の核酸分子及びRNAi分子は、DNA又はRNAベクターに挿入された転写単位から発現させることができる。組換えベクターは、DNAプラスミド又はウイルスベクターとすることができる。核酸分子の一過性発現を提供するウイルスベクターを使用することができる。
例えば、ベクターは、二重鎖のRNAi分子の両方の鎖をコードする配列、又は自己相補的であってRNAi分子を形成する単一の核酸分子を含んでいても良い。発現ベクターは、2つ以上の核酸分子をコードする核酸配列を含んでいても良い。
核酸分子は、真核生物のプロモーターから細胞内で発現することができる。当業者は、任意の核酸が、適切なDNA/RNAベクターから真核細胞において発現できることを理解している。
いくつかの態様では、発現コンストラクトを細胞に導入するためにウイルスコンストラクトを使用することができ、これは当該発現コンストラクトによりコードされるdsRNA構築物の転写のためである。
脂質製剤は、静脈内、筋肉内又は腹腔内注射によって、若しくは経口的に又は吸入によって、若しくは当該分野で公知の他の方法によって動物に投与することができる。
オリゴヌクレオチドを投与するための薬学的に許容される製剤は公知であり、使用することができる。
実施例１：p21 siRNAを用いたインビトロノックダウン。
図2は、A549細胞においてp21 mRNAをダウンレギュレートする能力について試験したp21 siRNAを示している。トランスフェクションの24時間前にA549細胞を2000/ウェルで播種した。次いで、0.1、1及び10nMの濃度のp21 siRNAで細胞を24時間トランスフェクトした。p21発現レベルの倍率変化をqRT-PCR（n=3）を用いて測定した。図2に示した全てのp21 siRNAにより、A549細胞におけるp21 mRNAに対する有意なノックダウンを達成することができた。
実施例２：インビトロノックダウンのためのプロトコル。
トランスフェクションの1日前に、10％FBSを含む100μlのDMEM（HyCloneカタログ番号SH30243.01）を96ウェルプレートに2×103細胞/ウェルでプレートし、5％CO2の空気中で加湿雰囲気を含む37℃インキュベーターで培養する。トランスフェクションの前に、培地を、2％FBSを含む90μlのOpti-MEM I還元血清培地（Life Technologiesカタログ番号31985-070）に変更する。0.2μlのLipofectamine RNAiMax（Life Technologies Cat。＃13778-100）を4.8μlのOpti-MEM Iと室温で5分間混合する。1μlのsiRNAと4μlのOpti-MEM Iを混合し、LF2000溶液と混合し、ボルテックスせずに静かに混合する。室温で5分間待ち、混合物を室温で10分間インキュベートし、RNA-RNAiMax複合体を形成させる。さらに、10μlのRNA-RNAiMax複合体をウェルに添加し、プレートを手で静かに振盪する。細胞を5％CO2の空気中で加湿雰囲気を含む37℃のインキュベーター中で2時間インキュベートする。2％FBSを含む培地を新鮮な-MEM I Reduced Serum Medium（Life Technologiesカタログ番号31985-070）に交換する。トランスフェクションの24時間後、細胞を氷冷PBSで1回洗浄する。室温で5〜30分間、50μlのCell-to-Ct溶解緩衝液（Life Technologiesカタログ番号4391851C）で細胞を溶解する。停止液5μlを加え、室温で2分間インキュベートする。直ちにTAQMANを用いてRT-qPCRによりmRNAレベルを測定する。あるいは、サンプルを-80℃で凍結させ、後でアッセイすることもできる。
スクリーニング測定の陽性対照は、配列番号4120及び4121（Ref. Pos.830）（Ambion、Austin）のセンス鎖及びアンチセンス鎖のペアを有する分子とした。
配列番号4120
センス：TCCTAAGAGTGCTGGGCATmUmU
配列番号4121
アンチセンス：AUGCCCAGCACUCUUAGGAmUmU
実施例３：p21を標的とする本発明のsiRNAは、インビトロにおいて遺伝子サイレンシングに活性であることが見出された。遺伝子ノックダウンのためのp21 siRNAの用量依存的活性は、約3ピコモル（pM）未満のIC50、及び1pM程度の低いIC50を示すことが判明した。
インビトロトランスフェクションをA549細胞株で行い、siRNAノックダウン効果を決定した。表3に示すように、p21 mRNAの用量依存的ノックダウンが、表1のsiRNAで観察された。
Figure 2018513668
表3に示すように、表1のp21 siRNAの活性は0.3〜10pMの範囲であり、インビボで使用される薬物剤を含む多くの用途に適している。
本明細書に記載された実施形態は限定的ではなく、当業者は、本明細書に記載の修飾の特定の組み合わせを、改善されたRNAi活性を有する核酸分子を同定するための過度の実験なしに試験することができることを容易に理解することができる。
本明細書中で具体的に言及される全ての刊行物、特許及び文献は、あらゆる目的のためにその全体が参考として援用される。
本発明は、記載された特定の方法論、プロトコル、材料、及び試薬に限定されず、これらは変化し得ることが理解される。本明細書で使用する用語は、特定の実施形態のみを説明するためのものであり、本発明の範囲を限定するものではないことも理解されたい。説明の範囲及び精神から逸脱することなく、本明細書に開示された説明に様々な置換及び変更を加えることができ、これらの実施形態はこの説明及び添付の特許請求の範囲内にあることは、当業者にとって極めて明らかである。
単数形「a」、「an」及び「the」は、文脈上他に明確に指示されていない限り、複数の言及を含むことに留意されたい。同様に、用語「a」（又は「an」）、「1つ以上」及び「少なくとも1つの」は、本明細書では交換可能に使用することができる。用語「含む（comprises）」、「含む（comprising）」、「含有する（containing）」、「含む（including）」及び「有する」は、互換的に使用することができ、広範かつ制限なしに読まれるべきである。
本明細書中の値の範囲の記載は、本明細書中に別段の指示がない限り、範囲内の各別個の値を個々に参照する簡略方法として役立つことを意図しており、それぞれの個別値は個々に記載されているかのように組み入れられる。ここで、マーカッシュグループについては、当業者は、この説明が個々のメンバーならびにマーカッシュグループのメンバーのサブグループを含むことを認識するであろう。
それ以上の詳述なしに、当業者は、上記の説明に基づいて、本発明を最大限に利用することができると考えられる。したがって、以下の特定の実施形態は、単なる例示として解釈されるものであり、決して本開示の残りの部分を限定するものではない。
本明細書に開示される特徴の全ては、任意の組み合わせで組み合わせることができる。本明細書で開示された各特徴は、同じ、等価の目的、又は同様の目的を果たす代替の特徴と置き換えることができる。

Claims (22)

  1. 核酸分子であって、
    a）分子は、ポリヌクレオチドセンス鎖及びポリヌクレオチドアンチセンス鎖を有し;
    b）分子の各鎖は15〜30ヌクレオチドの長さであり;
    c）アンチセンス鎖の15〜30ヌクレオチドの連続領域は、p21をコードするmRNA配列に相補的であり;
    d）センス鎖の少なくとも一部はアンチセンス鎖の少なくとも一部に相補的であり、分子は15〜30ヌクレオチド長の二重鎖領域を有する。
  2. 上記アンチセンス鎖が配列番号4103であり、上記センス鎖が配列番号4075であり、又はこれらの鎖は化学的に修飾された鎖である、請求項１記載の核酸分子。
  3. 上記アンチセンス鎖が配列番号4119であり、上記センス鎖が配列番号4091であるか、又はこれらの鎖は化学的に修飾された鎖である、請求項１記載の核酸分子。
  4. p21をコードするmRNA配列に相補的であるアンチセンス鎖の15〜30ヌクレオチドの連続領域は、分子の二重鎖領域に位置する、請求項１記載の核酸分子。
  5. p21をコードするmRNA配列に相補的なアンチセンス鎖の15〜30ヌクレオチドの連続領域が、配列番号１のヒトp21 mRNA配列から選択される、請求項１記載の核酸分子。
  6. p21をコードするmRNA配列に相補的なアンチセンス鎖の15〜30ヌクレオチドの連続領域は、ヒトp21配列から選択され、ここでヒトp21配列は配列番号１の1位から125位、配列番号１の126位から620位、配列番号１の621位から2175位の群から選択される、請求項１記載の核酸分子。
  7. 上記アンチセンス鎖が、配列番号2033〜4063から選択される配列を含む、請求項１記載の核酸分子。
  8. 上記アンチセンス鎖が、配列番号4092〜4119から選択される配列を含む、請求項１記載の核酸分子。
  9. 上記分子が、配列番号4066及び4094、配列番号4067及び4095、配列番号4068及び4096、配列番号4073及び4101、配列番号4075及び4103、配列番号4080及び4108、配列番号4084及び4112、配列番号4085及び4113、配列番号4088及び4116並びに配列番号4091及び4119の群から選ばれるセンス鎖及びアンチセンス鎖のペアからなる、請求項１記載の核酸分子。
  10. 分子の各鎖が18〜22ヌクレオチドの長さである、請求項１記載の核酸分子。
  11. 上記二重鎖領域が19ヌクレオチド長である、請求項１記載の核酸分子。
  12. 上記ポリヌクレオチドセンス鎖及び上記ポリヌクレオチドアンチセンス鎖が一本鎖として連結され、一端においてループで連結されることで二重鎖領域を形成する、請求項１記載の核酸分子。
  13. 分子が平滑末端を有する、請求項１記載の核酸分子。
  14. 分子が1つ以上の3'オーバーハングを有する、請求項１記載の核酸分子。
  15. 分子が遺伝子サイレンシングに活性なRNAi分子である、請求項１記載の核酸分子。
  16. 分子が、siRNA、micro-RNA、shRNA、dsRNA、DNA-directed RNA (ddRNA)、Piwi-interacting RNA (piRNA)及び反復関連siRNA (rasiRNA)から選ばれる、遺伝子サイレンシングに活性な分子である、請求項１記載の核酸分子。
  17. 分子がp21の発現阻害に活性である、請求項１記載の核酸分子。
  18. 分子が、100pM未満のp21のノックダウンに関するIC50を有する、請求項１記載の核酸分子
  19. 請求項１〜１８のいずれか１項記載の１つ以上の核酸分子及び薬学的に許容される担体を含む組成物。
  20. 担体が脂質分子又はリポソームである、請求項１９記載の組成物。
  21. 請求項１９記載の組成物を必要とする被験体に投与する工程を含む、p21発現に関連する疾患の治療方法。
  22. 疾患が、p21発現に関連する癌、肉腫、線維肉腫、悪性線維性組織球腫、脂肪肉腫、横紋筋肉腫、平滑筋肉腫、血管肉腫、カポジ肉腫、リンパ管肉腫、滑膜肉腫、軟骨肉腫、骨肉腫、癌腫、脳腫瘍、頭頸部癌、乳癌、肺癌、食道癌、胃癌、十二指腸癌、大腸癌、結腸癌、肝癌、膵臓癌、胆嚢癌、胆管癌、腎癌、尿道癌、膀胱癌、前立腺癌、精巣癌、陰茎癌、子宮癌、卵巣癌、皮膚癌、骨癌、白血病、悪性リンパ腫、上皮悪性腫瘍及び非上皮性悪性腫瘍からなる群から選択される疾患に表れる悪性腫瘍である、請求項２１記載の方法。
JP2017534286A 2014-12-26 2015-12-28 Ｐ２１遺伝子調節のためのｒｎａ剤 Active JP6793649B2 (ja)

Applications Claiming Priority (7)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2014266198 2014-12-26
JP2014266198 2014-12-26
US201562184209P 2015-06-24 2015-06-24
US62/184,209 2015-06-24
US201562266668P 2015-12-13 2015-12-13
US62/266,668 2015-12-13
PCT/US2015/067556 WO2016106401A2 (en) 2014-12-26 2015-12-28 Rna agents for p21 gene modulation

Publications (3)

Publication Number Publication Date
JP2018513668A true JP2018513668A (ja) 2018-05-31
JP2018513668A5 JP2018513668A5 (ja) 2019-02-14
JP6793649B2 JP6793649B2 (ja) 2020-12-02

Family

ID=56151549

Family Applications (9)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2017534274A Pending JP2018513104A (ja) 2014-12-26 2015-12-28 Ｈｓｐ４７及びｐ２１を標的とするｒｎａｉ分子による悪性腫瘍の治療用組成物及び方法
JP2017534286A Active JP6793649B2 (ja) 2014-12-26 2015-12-28 Ｐ２１遺伝子調節のためのｒｎａ剤
JP2017534275A Pending JP2018512373A (ja) 2014-12-26 2015-12-28 Ｋｒａｓ突然変異に関連する悪性腫瘍に対する治療のための方法及び組成物
JP2017534279A Active JP6865169B2 (ja) 2014-12-26 2015-12-28 Ｐ２１遺伝子調節のためのｒｎａ干渉剤
JP2017534287A Pending JP2018513669A (ja) 2014-12-26 2015-12-28 Ｇｓｔ−ｐｉ遺伝子調節のためのｒｎａ剤
JP2017534297A Active JP6457645B2 (ja) 2014-12-26 2015-12-28 ＧＳＴ−π遺伝子を調節するためのＲＮＡ干渉剤
JP2017534294A Active JP6730285B2 (ja) 2014-12-26 2015-12-28 Ｒｎａ干渉組成物及び悪性腫瘍のための方法
JP2021183788A Active JP7307137B2 (ja) 2014-12-26 2021-11-11 ＧＳＴ－π遺伝子を調節するためのＲＮＡ干渉剤
JP2023106970A Pending JP2023123743A (ja) 2014-12-26 2023-06-29 ＧＳＴ－π遺伝子を調節するためのＲＮＡ干渉剤

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2017534274A Pending JP2018513104A (ja) 2014-12-26 2015-12-28 Ｈｓｐ４７及びｐ２１を標的とするｒｎａｉ分子による悪性腫瘍の治療用組成物及び方法

Family Applications After (7)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2017534275A Pending JP2018512373A (ja) 2014-12-26 2015-12-28 Ｋｒａｓ突然変異に関連する悪性腫瘍に対する治療のための方法及び組成物
JP2017534279A Active JP6865169B2 (ja) 2014-12-26 2015-12-28 Ｐ２１遺伝子調節のためのｒｎａ干渉剤
JP2017534287A Pending JP2018513669A (ja) 2014-12-26 2015-12-28 Ｇｓｔ−ｐｉ遺伝子調節のためのｒｎａ剤
JP2017534297A Active JP6457645B2 (ja) 2014-12-26 2015-12-28 ＧＳＴ−π遺伝子を調節するためのＲＮＡ干渉剤
JP2017534294A Active JP6730285B2 (ja) 2014-12-26 2015-12-28 Ｒｎａ干渉組成物及び悪性腫瘍のための方法
JP2021183788A Active JP7307137B2 (ja) 2014-12-26 2021-11-11 ＧＳＴ－π遺伝子を調節するためのＲＮＡ干渉剤
JP2023106970A Pending JP2023123743A (ja) 2014-12-26 2023-06-29 ＧＳＴ－π遺伝子を調節するためのＲＮＡ干渉剤

Country Status (10)

Country Link
US (14) US10264976B2 (ja)
EP (9) EP3236973A4 (ja)
JP (9) JP2018513104A (ja)
KR (4) KR20170093988A (ja)
CN (7) CN107108686B (ja)
AU (4) AU2015369598A1 (ja)
BR (2) BR112017013597B1 (ja)
CA (4) CA2971881C (ja)
RU (4) RU2017126601A (ja)
WO (7) WO2016106401A2 (ja)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2018537104A (ja) * 2015-12-13 2018-12-20 日東電工株式会社 高活性及びオフターゲット削減のためのｓｉＲＮＡ構造
WO2020116537A1 (ja) * 2018-12-05 2020-06-11 日東電工株式会社 がん処置用ＲＮＡｉ分子
WO2020196736A1 (ja) * 2019-03-28 2020-10-01 日東電工株式会社 ＲＮＡｉ分子
WO2021020412A1 (ja) * 2019-07-30 2021-02-04 塩野義製薬株式会社 Ｍｕｒｆ１を標的とする核酸医薬
WO2023210713A1 (ja) * 2022-04-27 2023-11-02 国立大学法人京都大学 心外膜細胞再生促進剤および心外膜細胞の再生促進方法

Families Citing this family (27)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20180002702A1 (en) * 2014-12-26 2018-01-04 Nitto Denko Corporation Methods and compositions for treating malignant tumors associated with kras mutation
US11045488B2 (en) * 2014-12-26 2021-06-29 Nitto Denko Corporation RNA interference agents for GST-π gene modulation
US10264976B2 (en) 2014-12-26 2019-04-23 The University Of Akron Biocompatible flavonoid compounds for organelle and cell imaging
ES2789049T3 (es) * 2014-12-26 2020-10-23 Nitto Denko Corp Agentes de interferencia de ARN para modulación génica de GST-pi
US10792299B2 (en) 2014-12-26 2020-10-06 Nitto Denko Corporation Methods and compositions for treating malignant tumors associated with kras mutation
AU2016281685B2 (en) * 2015-06-24 2021-08-12 Nitto Denko Corporation Ionizable compounds and compositions and uses thereof
WO2018151840A2 (en) * 2017-02-16 2018-08-23 Nitto Denko Corporation Methods and compositions for treating malignant tumors
WO2019090359A1 (en) * 2017-11-06 2019-05-09 Nitto Denko Corporation Fusogenic compounds for delivery of biologically active molecules
TWI816712B (zh) * 2017-11-09 2023-10-01 國立大學法人東京醫科齒科大學 癌促進因子表現抑制劑的有效成分之篩選用試藥及其篩選方法、癌之預防或治療劑的有效成分之篩選用試藥及其篩選方法、癌促進因子表現抑制劑及癌之預防或治療劑
CN109777798A (zh) * 2017-11-13 2019-05-21 深圳华大生命科学研究院 一种基于CRISPR技术治疗KRAS突变恶性肿瘤的sgRNA及其应用
JP6952594B2 (ja) * 2017-12-15 2021-10-20 洋司郎 新津 細胞増殖抑制剤及びそれを含むがんの治療若しくは予防用医薬組成物
CN108486011B (zh) * 2018-03-27 2020-05-05 山东大学 一种三联苯化合物、制备方法及其应用
JP7432929B2 (ja) 2018-05-31 2024-02-19 コリア ユニバーシティ リサーチ アンド ビジネス ファウンデーション マイクロｒｎａの非正規標的を抑制するｒｎａ干渉誘導核酸およびその用途
WO2020009189A1 (ja) * 2018-07-05 2020-01-09 洋司郎 新津 Ｂｒａｆ阻害剤によるがん細胞の逆説的増殖を抑制する薬剤
CN112739382A (zh) * 2018-08-22 2021-04-30 日东电工株式会社 使用了hsp47的抑制物质的化疗剂敏感性的增强
US20210310005A1 (en) * 2018-08-22 2021-10-07 Nitto Denko Corporation Agent using hsp47 inhibitor to suppress metastasis
PT3880212T (pt) * 2018-11-16 2024-02-08 Nitto Denko Corp Formulação e métodos de administração de rna de interferência para tumores malignos
WO2020145350A1 (ja) 2019-01-10 2020-07-16 国立大学法人大阪大学 免疫賦活用組成物
JP2019116507A (ja) * 2019-04-25 2019-07-18 有限会社オービット Ｈｓｐ４７の発現促進剤、脱毛抑制方法、Ｈｓｐ４７の発現促進剤の製造方法及び飲食物の製造方法
CN112280800B (zh) * 2020-10-19 2022-06-07 上海市东方医院（同济大学附属东方医院） 一种构建体及其在制备动物衰老细胞示踪和衰老细胞清除药物中的应用
KR20230133859A (ko) 2020-12-28 2023-09-19 1이 테라퓨틱스 엘티디. p21 mRNA 표적화 DNA자임
EP4267741A2 (en) * 2020-12-28 2023-11-01 1E Therapeutics, Ltd. P21 mrna target areas for silencing
KR20230101285A (ko) * 2021-12-29 2023-07-06 의료법인 명지의료재단 K-ras 특이적 활성화 T 세포를 포함하는 유방암의 예방 및 치료용 약제학적 조성물 및 이의 제조방법
KR20230101286A (ko) * 2021-12-29 2023-07-06 의료법인 명지의료재단 K-ras 특이적 활성화 T 세포를 포함하는 폐 선암종의 예방 및 치료용 약제학적 조성물 및 이의 제조방법
KR20230101284A (ko) * 2021-12-29 2023-07-06 의료법인 명지의료재단 K-ras 특이적 활성화 T 세포를 포함하는 대장암의 예방 및 치료용 약제학적 조성물 및 이의 제조방법
KR20230101283A (ko) * 2021-12-29 2023-07-06 의료법인 명지의료재단 K-ras 특이적 활성화 T 세포를 포함하는 폐 유두상 선암종의 예방 및 치료용 약제학적 조성물 및 이의 제조방법
KR20230101287A (ko) * 2021-12-29 2023-07-06 의료법인 명지의료재단 K-ras 특이적 활성화 T 세포를 포함하는 흑색종의 예방 및 치료용 약제학적 조성물 및 이의 제조방법

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2006507841A (ja) * 2002-11-14 2006-03-09 ダーマコン， インコーポレイテッド 機能的ｓｉＲＮＡおよび超機能的ｓｉＲＮＡ
US20140005134A1 (en) * 2012-07-02 2014-01-02 Flbrostatin S.L. GPBP-1 inhibition and its therapeutic use

Family Cites Families (85)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1989002439A1 (en) 1987-09-21 1989-03-23 Ml Technology Ventures, L.P. Non-nucleotide linking reagents for nucleotide probes
US5204241A (en) 1990-10-22 1993-04-20 Oxi-Gene Inc. Glutathione-S-transferase mu as a measure of drug resistance
US5786336A (en) 1991-04-29 1998-07-28 Terrapin Technologies, Inc. Target-selective protocols based on mimics
US5658780A (en) 1992-12-07 1997-08-19 Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. Rel a targeted ribozymes
ATE227342T1 (de) 1993-09-02 2002-11-15 Ribozyme Pharm Inc Enzymatische nukleiksaüre die nicht-nukleotide enthaltet
ATE174600T1 (de) 1993-10-27 1999-01-15 Ribozyme Pharm Inc 2'-amido-und 2'-peptido-modifizierte oligonukleotide
AU715524B2 (en) 1995-06-07 2000-02-03 Telik, Inc. Metabolic effects of certain glutathione analogs
US5968737A (en) 1996-11-12 1999-10-19 The University Of Mississippi Method of identifying inhibitors of glutathione S-transferase (GST) gene expression
US6506559B1 (en) 1997-12-23 2003-01-14 Carnegie Institute Of Washington Genetic inhibition by double-stranded RNA
WO1999054346A1 (fr) 1998-04-16 1999-10-28 Teijin Limited Derives du glutathione et leur forme posologique
GB9827152D0 (en) 1998-07-03 1999-02-03 Devgen Nv Characterisation of gene function using double stranded rna inhibition
DE19956568A1 (de) 1999-01-30 2000-08-17 Roland Kreutzer Verfahren und Medikament zur Hemmung der Expression eines vorgegebenen Gens
CA2386270A1 (en) 1999-10-15 2001-04-26 University Of Massachusetts Rna interference pathway genes as tools for targeted genetic interference
GB9927444D0 (en) 1999-11-19 2000-01-19 Cancer Res Campaign Tech Inhibiting gene expression
US20070083945A1 (en) * 2000-03-10 2007-04-12 Byrum Joseph R Nucleic acid molecules and other molecules associated with plants
WO2001088191A1 (en) 2000-03-29 2001-11-22 The United States Of America As Represented By The Department Of Veterans Affairs A novel specific inhibitor of the cyclin kinase inhibitor p21?waf1/cip1¿
US20030165843A1 (en) * 2000-07-28 2003-09-04 Avi Shoshan Oligonucleotide library for detecting RNA transcripts and splice variants that populate a transcriptome
ES2728168T3 (es) 2000-12-01 2019-10-22 Max Planck Gesellschaft Moléculas pequeñas de ARN que median en la interferencia de ARN
CA2526831C (en) 2001-05-18 2012-07-31 Sirna Therapeutics, Inc. Rna interference mediated inhibition of gene expression using chemically modified short interfering nucleic acid (sina)
US20030099974A1 (en) 2001-07-18 2003-05-29 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Novel genes, compositions, kits and methods for identification, assessment, prevention, and therapy of breast cancer
US20040142325A1 (en) * 2001-09-14 2004-07-22 Liat Mintz Methods and systems for annotating biomolecular sequences
US20040029275A1 (en) * 2002-08-10 2004-02-12 David Brown Methods and compositions for reducing target gene expression using cocktails of siRNAs or constructs expressing siRNAs
WO2004055165A2 (en) 2002-12-13 2004-07-01 St. Jude Children's Research Hospital Glutathione-s-transferase test for susceptibility to parkinson's
AU2003224132A1 (en) 2003-04-24 2004-11-19 Galapagos Genomics N.V. Effective sirna knock-down constructs
US20050142596A1 (en) * 2003-11-14 2005-06-30 Krolewski Andrzej S. Methods of diagnosing renal and cardiovascular disease
EP2514758B2 (en) 2004-03-15 2021-06-23 City of Hope Methods and compositions for the specific inhibition of gene expression by double-stranded RNA
AU2005243410B2 (en) 2004-05-14 2010-04-22 Rosetta Genomics Ltd. Micronas and uses thereof
EP1791959A4 (en) 2004-08-26 2009-03-18 Enegenic Gene Therapy Pty Ltd DISPOSAL OF FUNCTIONAL NUCLEIC ACIDS ON MAMMALIAN CELLS OVER BACTERIA ORIGINAL INTACT MINIMIZERS
ES2784554T3 (es) 2004-12-22 2020-09-28 Nitto Denko Corp Portador de fármacos y kit de portador de fármacos para inhibir la fibrosis
US9393315B2 (en) * 2011-06-08 2016-07-19 Nitto Denko Corporation Compounds for targeting drug delivery and enhancing siRNA activity
EP1874793A4 (en) 2005-04-15 2008-12-24 Univ Texas DISTRIBUTION OF SIRNA BY NEUTRAL LIPID COMPOSITIONS
WO2007072220A2 (en) * 2005-09-12 2007-06-28 Aurelium Biopharma Inc. Focused microarray and methods of diagnosing cancer
ES2324128A1 (es) 2005-09-29 2009-07-30 Proyecto De Biomedicina Cima, S.L. Metodo para el diagnostico de carcinoma hepatocelular mediante el empleo de marcadores moleculares.
US20090220956A1 (en) * 2005-10-25 2009-09-03 Dimitry Serge Antoine Nuyten Prediction of Local Recurrence of Breast Cancer
RU2448974C2 (ru) * 2005-11-01 2012-04-27 Элнилэм Фармасьютикалз, Инк. РНКи-ИНГИБИРОВАНИЕ РЕПЛИКАЦИИ ВИРУСА ГРИППА
JP2009513716A (ja) 2005-11-01 2009-04-02 アルナイラム ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド ＲＮＡｉによるインフルエンザウイルス複製の抑制
US8101741B2 (en) 2005-11-02 2012-01-24 Protiva Biotherapeutics, Inc. Modified siRNA molecules and uses thereof
US8148086B2 (en) * 2005-11-17 2012-04-03 Children's Medical Center Corporatioin Methods to predict and prevent resistance to taxoid compounds
US7729737B2 (en) 2005-11-22 2010-06-01 Isense Corporation Method and apparatus for background current arrangements for a biosensor
US8367628B2 (en) 2005-12-01 2013-02-05 Pronai Therapeutics, Inc. Amphoteric liposome formulation
US9572886B2 (en) * 2005-12-22 2017-02-21 Nitto Denko Corporation Agent for treating myelofibrosis
JP5342834B2 (ja) * 2008-09-05 2013-11-13 日東電工株式会社 骨髄線維症処置剤
US20070258952A1 (en) * 2006-05-04 2007-11-08 Baylor Research Institute Anti-Tumor Activity of an Oncolytic Adenovirus-Delivered Oncogene siRNA
NZ572666A (en) 2006-05-11 2010-11-26 Alnylam Pharmaceuticals Inc Compositions comprising double stranded rna and methods for inhibiting expression of the pcsk9 gene
US8067390B2 (en) 2007-03-02 2011-11-29 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Therapeutic targeting of interleukins using siRNA in neutral liposomes
TWI407971B (zh) 2007-03-30 2013-09-11 Nitto Denko Corp Cancer cells and tumor-related fibroblasts
WO2008124634A1 (en) * 2007-04-04 2008-10-16 Massachusetts Institute Of Technology Polymer-encapsulated reverse micelles
AU2008270209B2 (en) 2007-07-05 2012-05-17 Arrowhead Pharmaceuticals, Inc. dsRNA for treating viral infection
CA2735167A1 (en) * 2007-08-27 2009-03-05 Boston Biomedical, Inc. Composition of asymmetric rna duplex as microrna mimetic or inhibitor
WO2009033284A1 (en) 2007-09-14 2009-03-19 Mcmaster University Inhibitors of collagen biosynthesis as anti-tumor agents
PT2268628E (pt) * 2008-03-06 2012-06-28 Rottapharm Spa Derivados de 2-aril e de 2-heteroaril 4h-1-benzopiran-4-ona- 6-amidino para o tratamento de artrite, cancro e dores relacionadas
US20110223665A1 (en) * 2008-07-25 2011-09-15 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. ENHANCEMENT OF siRNA SILENCING ACTIVITY USING UNIVERSAL BASES OR MISMATCHES IN THE SENSE STRAND
CN102159247A (zh) * 2008-07-30 2011-08-17 日东电工株式会社 药物载体
CN107028886A (zh) * 2009-11-04 2017-08-11 不列颠哥伦比亚大学 含有核酸的脂质粒子及相关的方法
CN106701758B (zh) 2009-12-09 2020-02-07 日东电工株式会社 Hsp47表达的调节
EP2539469A4 (en) 2010-02-24 2013-07-31 Bodysync Inc METHOD FOR DETERMINING GENE NUTRITIONAL INTERACTIONS
WO2011112954A1 (en) 2010-03-12 2011-09-15 The Wistar Institute Inhibition of p21 and use thereof for inducing tissue regeneration
US8372819B2 (en) * 2010-04-11 2013-02-12 Salk Institute For Biological Studies Methods and compositions for targeting skip
WO2011131472A1 (en) 2010-04-22 2011-10-27 Institut Gustave Roussy Compounds and uses thereof to induce an immunogenic cancer cell death in a subject
AU2011249406B2 (en) 2010-05-06 2015-05-14 Stem Cell Medicine Ltd. Stem cell bank for personalized medicine
JP5950428B2 (ja) * 2010-08-05 2016-07-13 日東電工株式会社 線維化組織から正常組織を再生するための組成物
CN103221055A (zh) 2010-09-30 2013-07-24 日东电工株式会社 Timp1和timp2表达的调节
WO2012064824A1 (en) 2010-11-09 2012-05-18 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Lipid formulated compositions and methods for inhibiting expression of eg5 and vegf genes
EP2998289B1 (en) 2011-06-08 2019-08-07 Nitto Denko Corporation Compounds for targeting drug delivery and enhancing sirna activity
US9011903B2 (en) * 2011-06-08 2015-04-21 Nitto Denko Corporation Cationic lipids for therapeutic agent delivery formulations
TWI658830B (zh) 2011-06-08 2019-05-11 日東電工股份有限公司 Ｈｓｐ47表現調控強化用類視色素脂質體
CN103619355A (zh) * 2011-06-21 2014-03-05 日东电工株式会社 细胞凋亡诱导剂
GB2507700A (en) * 2011-08-31 2014-05-07 Alexander A Asea Compositions and methods for treatment of metastatic cancer
US9579338B2 (en) 2011-11-04 2017-02-28 Nitto Denko Corporation Method of producing lipid nanoparticles for drug delivery
WO2013075140A1 (en) * 2011-11-17 2013-05-23 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health & Human Services Auto -recognizing therapeutic rna/dna chimeric nanoparticles (np)
AU2013262972A1 (en) * 2012-05-16 2014-12-11 Aadigen, Llc Multi-target modulation for treating fibrosis and inflammatory conditions
US20140134158A1 (en) * 2012-05-22 2014-05-15 Alberto Bardelli Kras mutations and resistance to anti-egfr treatment
ES2897216T3 (es) 2012-06-08 2022-02-28 Nitto Denko Corp Lípidos para formulaciones de suministro de agente terapéutico
US9907828B2 (en) 2012-06-22 2018-03-06 The University Of Vermont And State Agricultural College Treatments of oxidative stress conditions
US9708607B2 (en) 2012-08-03 2017-07-18 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Modified RNAi agents
JP6340162B2 (ja) * 2012-12-20 2018-06-06 日東電工株式会社 アポトーシス誘導剤
JP6352950B2 (ja) 2013-03-08 2018-07-04 ノバルティス アーゲー 活性薬物の送達のための脂質と脂質組成物
CN103695421B (zh) 2013-12-09 2016-06-15 浙江大学 一种特异抑制p21基因表达的siRNA及其应用
US20160187319A1 (en) * 2014-12-26 2016-06-30 Nitto Denko Corporation Cell death-inducing agent, cell growth-inhibiting agent, and pharmaceutical composition for treatment of disease caused by abnormal cell growth
US10792299B2 (en) * 2014-12-26 2020-10-06 Nitto Denko Corporation Methods and compositions for treating malignant tumors associated with kras mutation
US20180002702A1 (en) 2014-12-26 2018-01-04 Nitto Denko Corporation Methods and compositions for treating malignant tumors associated with kras mutation
CN113559267B (zh) * 2014-12-26 2024-01-12 日东电工株式会社 细胞死亡诱导试剂、细胞增殖抑制试剂及用于治疗由细胞增殖异常导致的疾病的医药组合物
US10264976B2 (en) * 2014-12-26 2019-04-23 The University Of Akron Biocompatible flavonoid compounds for organelle and cell imaging
CA3005937C (en) * 2015-12-13 2021-11-09 Nitto Denko Corporation Sirna structures for high activity and reduced off target
JP6899201B2 (ja) 2016-06-23 2021-07-07 日東電工株式会社 細胞死誘導剤、細胞増殖抑制剤及び細胞の増殖異常に起因する疾患の治療用医薬組成物

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2006507841A (ja) * 2002-11-14 2006-03-09 ダーマコン， インコーポレイテッド 機能的ｓｉＲＮＡおよび超機能的ｓｉＲＮＡ
US20140005134A1 (en) * 2012-07-02 2014-01-02 Flbrostatin S.L. GPBP-1 inhibition and its therapeutic use

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2018537104A (ja) * 2015-12-13 2018-12-20 日東電工株式会社 高活性及びオフターゲット削減のためのｓｉＲＮＡ構造
US10358647B2 (en) 2015-12-13 2019-07-23 Nitto Denko Corporation siRNA structures for high activity and reduced off target
US11390871B2 (en) 2015-12-13 2022-07-19 Nitto Denko Corporation SiRNA structures for high activity and reduced off target
US11926831B2 (en) 2015-12-13 2024-03-12 Nitto Denko Corporation SiRNA structures for high activity and reduced off target
WO2020116537A1 (ja) * 2018-12-05 2020-06-11 日東電工株式会社 がん処置用ＲＮＡｉ分子
WO2020196736A1 (ja) * 2019-03-28 2020-10-01 日東電工株式会社 ＲＮＡｉ分子
WO2021020412A1 (ja) * 2019-07-30 2021-02-04 塩野義製薬株式会社 Ｍｕｒｆ１を標的とする核酸医薬
WO2023210713A1 (ja) * 2022-04-27 2023-11-02 国立大学法人京都大学 心外膜細胞再生促進剤および心外膜細胞の再生促進方法

Also Published As

Publication number Publication date
RU2017126598A (ru) 2019-01-28
JP6730285B2 (ja) 2020-07-29
EP3798308A1 (en) 2021-03-31
CA2972268A1 (en) 2016-06-30
BR112017013599A2 (pt) 2018-03-06
CN107108686B (zh) 2021-07-16
CN107106591A (zh) 2017-08-29
EP3236974A2 (en) 2017-11-01
US20160376296A1 (en) 2016-12-29
US20170218365A1 (en) 2017-08-03
RU2756253C2 (ru) 2021-09-28
WO2016106400A2 (en) 2016-06-30
RU2719185C2 (ru) 2020-04-17
US20160208256A1 (en) 2016-07-21
JP7307137B2 (ja) 2023-07-11
US20220087531A1 (en) 2022-03-24
AU2015369592A1 (en) 2017-08-10
US10047110B2 (en) 2018-08-14
CN108024961A (zh) 2018-05-11
USRE48887E1 (en) 2022-01-11
EP3683309A1 (en) 2020-07-22
US20160186183A1 (en) 2016-06-30
US9695206B2 (en) 2017-07-04
CN107106591B (zh) 2020-09-01
CN107106564A (zh) 2017-08-29
EP3236974B1 (en) 2020-02-26
CN107106592B (zh) 2021-04-27
RU2017126601A (ru) 2019-01-28
EP3236976A1 (en) 2017-11-01
WO2016106406A2 (en) 2016-06-30
EP3236945A4 (en) 2018-09-12
US20160186182A1 (en) 2016-06-30
WO2016106401A3 (en) 2016-09-15
AU2015369592B2 (en) 2021-05-06
WO2016106404A3 (en) 2016-09-15
RU2017126613A3 (ja) 2019-06-05
CN108064155A (zh) 2018-05-22
JP2018512373A (ja) 2018-05-17
US10047111B2 (en) 2018-08-14
EP3240796A1 (en) 2017-11-08
EP3236945B1 (en) 2021-02-17
EP3236975A4 (en) 2018-09-12
US20160208255A1 (en) 2016-07-21
EP3236973A2 (en) 2017-11-01
AU2015369598A1 (en) 2017-07-27
KR20170098929A (ko) 2017-08-30
RU2017126613A (ru) 2019-01-28
JP2022036954A (ja) 2022-03-08
US20160215286A1 (en) 2016-07-28
KR102527430B1 (ko) 2023-05-02
CA2972265A1 (en) 2016-06-30
EP3236945A2 (en) 2017-11-01
CA2972270A1 (en) 2016-06-30
JP6457645B2 (ja) 2019-01-23
RU2017126610A (ru) 2019-01-28
EP3236974B9 (en) 2020-08-05
JP2018512110A (ja) 2018-05-17
US20160208254A1 (en) 2016-07-21
CN108064155B (zh) 2021-06-08
CA2971881C (en) 2023-04-04
CN107106592A (zh) 2017-08-29
EP3240796A4 (en) 2018-08-08
US9771582B2 (en) 2017-09-26
JP2018513104A (ja) 2018-05-24
JP6793649B2 (ja) 2020-12-02
KR20170096199A (ko) 2017-08-23
CN108064153A (zh) 2018-05-22
RU2017126610A3 (ja) 2019-07-17
KR20170100010A (ko) 2017-09-01
EP3240796B1 (en) 2020-12-16
EP3236969A4 (en) 2018-06-13
US20170298086A1 (en) 2017-10-19
JP2018512041A (ja) 2018-05-10
EP3236975A2 (en) 2017-11-01
JP6865169B2 (ja) 2021-04-28
BR112017013597A2 (pt) 2018-03-06
BR112017013597B1 (pt) 2024-01-16
US20160208265A1 (en) 2016-07-21
US10264976B2 (en) 2019-04-23
KR20170093988A (ko) 2017-08-16
CA2971881A1 (en) 2016-06-30
JP2018513669A (ja) 2018-05-31
WO2016106405A1 (en) 2016-06-30
WO2016106402A1 (en) 2016-06-30
WO2016106401A2 (en) 2016-06-30
US10023597B2 (en) 2018-07-17
AU2015369596A1 (en) 2017-07-27
USRE49431E1 (en) 2023-02-28
AU2015369595A1 (en) 2017-07-27
EP3236974A4 (en) 2018-06-13
JP2023123743A (ja) 2023-09-05
USRE49229E1 (en) 2022-10-04
US9580710B2 (en) 2017-02-28
EP3236973A4 (en) 2018-09-12
JP2018512060A (ja) 2018-05-10
WO2016106406A3 (en) 2016-11-03
CN107108686A (zh) 2017-08-29
EP3236976A4 (en) 2018-10-31
WO2016106400A3 (en) 2016-09-01
EP3236976B1 (en) 2021-07-21
WO2016106403A2 (en) 2016-06-30
EP3236969A2 (en) 2017-11-01
US10405749B2 (en) 2019-09-10
WO2016106403A3 (en) 2016-08-18
WO2016106404A2 (en) 2016-06-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP6793649B2 (ja) Ｐ２１遺伝子調節のためのｒｎａ剤
JP6457704B2 (ja) 高活性及びオフターゲット削減のためのｓｉＲＮＡ構造
JP2010537640A (ja) マイクロｒｎａ模倣剤または阻害剤としての非対称性ｒｎａ二重鎖の組成物
JP2013532973A (ja) Ｒｎａ分子およびその使用
US10590422B2 (en) Anticancer therapeutic intervention
WO2011074652A1 (ja) HIF-2αの発現を抑制する核酸
JP6978561B2 (ja) ＧＳＴ−π遺伝子を調節するためのＲＮＡ干渉剤
TW201718854A (zh) 供ｐ２１基因調控之ＲＮＡ干擾劑
JP2019508379A (ja) 悪性腫瘍に対する治療方法及び治療用組成物
TW201718853A (zh) 用於麩胱甘肽Ｓ轉移酶Ｐｉ（ＧＳＴ－π）基因調控之ＲＮＡ干擾劑

Legal Events

Date Code Title Description
AA64 Notification of invalidation of claim of internal priority (with term)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A241764

Effective date: 20171128

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20181225

A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20181225

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20200107

A601 Written request for extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601

Effective date: 20200302

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20200501

TRDD Decision of grant or rejection written
A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

Effective date: 20201013

A61 First payment of annual fees (during grant procedure)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61

Effective date: 20201110

R150 Certificate of patent or registration of utility model

Ref document number: 6793649

Country of ref document: JP

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250