PT2268628E - Derivados de 2-aril e de 2-heteroaril 4h-1-benzopiran-4-ona- 6-amidino para o tratamento de artrite, cancro e dores relacionadas - Google Patents

Derivados de 2-aril e de 2-heteroaril 4h-1-benzopiran-4-ona- 6-amidino para o tratamento de artrite, cancro e dores relacionadas Download PDF

Info

Publication number
PT2268628E
PT2268628E PT08717486T PT08717486T PT2268628E PT 2268628 E PT2268628 E PT 2268628E PT 08717486 T PT08717486 T PT 08717486T PT 08717486 T PT08717486 T PT 08717486T PT 2268628 E PT2268628 E PT 2268628E
Authority
PT
Portugal
Prior art keywords
group
formula
compounds
compound
benzopyran
Prior art date
Application number
PT08717486T
Other languages
English (en)
Inventor
Lucio Claudio Rovati
Roberto Artusi
Antonio Giordani
Ilario Verpilio
Sabrina Pucci
Gianfranco Elli
Marco Lanza
Laura Mennuni
Francesco Makovec
Original Assignee
Rottapharm Spa
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Rottapharm Spa filed Critical Rottapharm Spa
Publication of PT2268628E publication Critical patent/PT2268628E/pt

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D311/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings
    • C07D311/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D311/04—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring
    • C07D311/22—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms directly attached in position 4
    • C07D311/26—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms directly attached in position 4 with aromatic rings attached in position 2 or 3
    • C07D311/28—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms directly attached in position 4 with aromatic rings attached in position 2 or 3 with aromatic rings attached in position 2 only
    • C07D311/30—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring with oxygen or sulfur atoms directly attached in position 4 with aromatic rings attached in position 2 or 3 with aromatic rings attached in position 2 only not hydrogenated in the hetero ring, e.g. flavones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/10—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D407/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00
    • C07D407/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings
    • C07D407/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Pyrane Compounds (AREA)

Description

ΕΡ2268628Β1
DESCRIÇÃO
DERIVADOS DE 2-ARIL E DE 2—HETEROARIL 4H—1—BENZOPIRAN—4—ONA— 6—AMIDINO PARA O TRATAMENTO DE ARTRITE, CANCRO E DORES
RELACIONADAS A presente invenção refere-se a novos derivados de 2-aril e 4-tehetroaril-4H-l-benzopiran-4-ona-6-amidino, aos seus sais farmaceuticamente aceitáveis, a um processo para a sua preparação, às suas composições farmacêuticas e à utilização desses compostos e às suas composições farmacêuticas para o tratamento de artrite, dor e cancro.
Antecedentes da invenção A osteoartrite (OA) é uma doença degenerativa das articulações que afecta uma grande parte da população idosa, com um impacto muito grave na sua qualidade de vida. A OA é caracterizada por alterações patológicas que ocorrem na cartilagem articular, sinóvia e osso subcondral conduzindo à dor e perda da função articular. A artrite reumatóide (RA) é uma doença inflamatória sistémica caracterizada por sinovite articular que leva à degradação da cartilagem, erosão óssea e dor. Embora as artrites (OA ou RA) sejam definidas como doenças que afectam as articulações, a primeira caracteristica é a dor crónica. Consequentemente, o mais utilizado dos tratamentos farmacológicos normalmente utilizados para a artrite está maioritariamente confinado aos analgésicos, fármacos anti-inflamatórios esteróides e não esteróides (NSAIDs). Estes agentes exercem acção sobre os sintomas da doença (principalmente a dor) em vez de atacarem o processo subjacente, além de que, embora estes fármacos tenham proporcionado um meio importante de controlo da 1 ΕΡ2268628Β1 inflamação e da dor na artrite, a sua aplicação tem sido ensombrada pelos efeitos colaterais sobre o tracto gastrointestinal quando se consideram os fármacos NSAIDs clássicos (BV Sweet et. al., Am. J. Health Syst. Pharm., 61, 18, 1917-21, 2004) e outros efeitos colaterais quando se consideram os inibidores COX-2 (Mamdani M., et. al., Lancet, 363, 1751-6, 2004). Por isso, é essencial o desenvolvimento de novos agentes terapêuticos capazes de prevenir e contra-atacar a degradação da cartilagem na artrite juntamente com a dor relacionada, dado vez que a OA e a RA afectam milhões de pessoas no mundo inteiro e espera-se que a sua incidência aumente com o aumento da idade média da população. A degradação da cartilagem que ocorre nestas doenças é o resultado da clivagem enzimática dos seus componentes estruturais. A cartilagem é constituída por condrócitos e uma matriz extra-celular que consiste em proteoglicanos (principalmente agrecano), colagénio e água. A interacção entre os proteoglicanos e colagénio proporciona propriedades estruturais e fisiológicas únicas para que a cartilagem funcione sob suporte de peso e movimento da articulação. Os proteoglicanos da cartilagem consistem num núcleo de proteína com cadeias laterais de glicosaminoglicano (GAG); os componentes GAG absorvem água e proporcionam à cartilagem a sua resistência característica ao stress mecânico e constitui uma camada protectora essencial à função da articulação. A cartilagem saudável mantém um equilíbrio dinâmico entre os processos que produzem e os processos que degradam os componentes da matriz; em condições patológicas este equilíbrio é alterado conduzindo à prevalência do processo degenerativo, que provoca a degradação da matriz, e desse modo a formação de fissuras e de rugosidade da cartilagem 2 ΕΡ2268628Β1 que, no final, pode resultar em erosão do osso subcondral e da inflamação sinovial. 0 grande proteoglicano de agregação, denominado agrecano, forma agregados que se ligam ao ácido hialurónico (HA) e, juntamente com o colagénio de tipo II, é responsável pelas propriedades biomecânicas da cartilagem. Desse modo, o agrecano que interactua numa rede complexa com HA e colagénio de tipo II, permite que o tecido aguente uma carga que resiste à compressão mecânica e dota a cartilagem das caracteristicas biomecânicas necessária para a funcionalidade da articulação. A proteína de agrecano consiste em três regiões globulares denominadas Gl, G2 e G3 (P.J. Roughley, European Cells & Material, 2006, 12, 92-101) . As regiões Gl e G2 são separadas por um domínio interglobular curto (IGD) enquanto as regiões G2 e G3 são separadas por uma longa região de ligação a GAG. 0 domínio Gl está no terminal amino da proteína e através de uma proteína auxiliar constitui a região de ligação do agrecano a HA. As moléculas de agrecano não estão isoladas na matriz extra-celular mas formam agregados compostos por um filamento HA central com até 100 moléculas de agrecano que radiam deste. A região de ligação a GAG do agrecano proporciona a densidade de carga aniónica elevada necessária para a ligação de água e conferem à cartilagem as propriedades osmóticas únicas necessárias para garantir a sua funcionalidade. A perda da integridade da cartilagem na artrite está associada à integridade prejudicada devido à clivagem proteolítica da proteína. Foram identificados dois sítios localizados no IGD do agrecano como os principais alvos do ataque de agrecano proteolítico a ligação Asn341-Phe342 demonstrou ser principalmente clivada por várias 3 074 ΕΡ2268628Β1 metaloproteases da Matriz (MMPs) e a ligação Glu -Ala que está no sítio de clivagem em condições patológicas como resultado pela análise dos fluidos sinoviais dos doentes (L.S. Lohmander et. ai., Arthritis & Rheum., 1993, 36, 1214- 1222; J.D. Sandy, J. Clin. Invest. 1992, 89, 1412. B) ou em estudos laboratoriais vastamente reportados, nos quais este sítio resultou no principal sítio de clivagem de agrecano em culturas de condrócitos estimulados por citoquinas (as citoquinas: IL-1, TNF-cx, IL-6, IL-8 estimulam os condrócitos para produzir uma quantidade aumentada de enzimas que degradam a matriz, enquanto o IL-4 inibe este processo). Duas enzimas, Agrecanase 1 e 2, que clivam agrecano na ligação Glu373-Ala374 mas não no sítio MMP, foram identificados e clonados. Ambas estas enzimas pertencem à família das ADAMTS (um domínio do tipo desintegrina e um domínio de metaloproteinase com motivos de trombospondina de tipo 1) de proteases e são denominadas ADAMTS-4 e ADAMTS-5 respectivamente. A família das ADAMTS representa um grupo de metaloproteases de zinco que pertencem à sub-família de reprolisina (relacionada com a reprolisina da toxina do veneno da cobra; C.G. Jones et. al., Arthritis Res. Ther, 2005, 7, 160-69; C.G. Jones et. al., Biochem J., 2005, 386, 15-27) .
Embora as enzimas na família das ADAMTS estejam normalmente envolvidas no processamento das proteínas e na remodelagem de tecidos, ADAMTS-4 e ADAMTS-5 são considerados fortemente responsáveis pelo catabolismo do agrecano da cartilagem observado durante o desenvolvimento de OA e RA, por isso a inibição dessas enzimas pode representar uma estratégia terapêutica para estas doenças (S .S. Glasson, Current Drug Targets, 2007 , 8,2, 367-376). Embora os 4 ΕΡ2268628Β1 inibidores de MMPs sintéticos tenham sido investigados clinicamente como um meio para bloquear a destruição do tecido em artrite e demonstraram ser mal sucedidos, deve ser salientado que estes inibidores foram dirigidos contra MMPs que clivam principalmente o colagénio e interagem numa menor extensão com o agrecano. Contrariamente, as agrecanases que clivam com elevada eficiência o agrecano no sitio IGD, dá origem à remoção de uma grande parte da proteina a partir do seu sitio de ligação a HA conduzindo assim à quebra dessa rede complexa de interações fundamentais para a integridade e funções da cartilagem.
Além disso, verificou-se que vários membros da família das ADAMTS incluindo ADAMTS-4 e ADAMTS-5 foram sobre-expressos em linhas de células tumorais. Deve ser salientado que um pré-requisito para a capacidade invasiva no cancro é a migração de células com base na expressão aumentada de proteases que digerem a matriz extra-celular, o mesmo processo de remodelação da matriz extra-celular mediada por metaloproteases é também essencial na angiogénese, o processo através do qual se formam novos vasos sanguíneos a partir da vasculatura pré-existente. Também foi identificada a angiogénese como um factor que contribui no cancro onde é um passo limitante da taxa durante a progressão do tumor. Consequentemente, além da artrite os inibidores de ADAMT-4/-5 podem ser agentes terapêuticos úteis para o tratamento do cancro. 0 núcleo de 2-fenil-4H-l-benzopiran-4-ona é bem conhecido na natureza, uma vez que os flavonóides formam uma classe de derivados de benzopiran-4-ona que são ubíquos em plantas como metabolitos secundários. Os flavonóides, tais como as flavonas e os flavonóis estão presentes numa grande 5 ΕΡ2268628Β1 variedade de alimentos, e especialmente nos frutos e nos vegetais. Entre eles, a Quercetina [2-(3,4-di-hidroxifenil)-3, 5, 7-hidroxi-4H-l-benzo-piran-4-ona) ] é o principal flavonóide que ocorre nos alimentos e está presente a um nivel médio de 10 mg/Kg (na cebola a sua concentração é de 300 mg/kg). A quercetina é um antioxidante muito eficaz parece estar activa no tratamento de várias doenças, tais como doenças cardiovasculares, neurodegenerativas e cancro. Outras investigações evidenciaram como as propriedades da estrutura 4H-l-benzopyran-4-ona também conhecida como cromenona, não estão confinadas apenas à Quercetina mas podem ser utilizadas eficientemente como apoios estruturais para conceber o fármaco. São conhecidos na literatura vários derivados de 6-amino-2-aril-4H-l-benzopiran-4-ona: 6-amino-2-fenil-4H-l-Benzopiran-4-ona (RN: 4613-53-0) foi relatada juntamente com outros 26 flavonóides como agentes anti-proliferativos que actuam no ciclo celular (Haddad, A. Q.; Prostate Câncer and Prostatic Diseases (2006), 9(1), 68-76), foi relatada actividade antiespasmódica e anti-histaminica para outro grupo de derivados de 2-aril-6-amino-cromen-4-ona (P. K Jesthi et. al., Journal of the Institution of Chemists (índia) (1981), 53(5), 234-6), a inibição de várias quinases de proteína foi relatada para um grupo de aminoflavonas (M. Cushman et al, Journal of Medicinal Chemistry (1994), 37(20), 3353-62), assim como inibição de CDKquinase para um vasto grupo de flavonóides incluindo derivados amino (PCT Int. Appl. (2000), W02000012496 Al 20000309). Os derivados N-carbamoílo de um grupo de aminoflavonas foram relatados como inibidores da esterase de acetilcolina (PCT Int. Appl. (2002), WO 2002024677 Al 20020328). Embora uma amidina de um derivado de flavonona tenha sido relatada como um análogo da 6 ΕΡ2268628Β1 furamidina (RN: 849368-08-7, 2-[4-[amino[(1-metiletil) imino] metil] fenil]-N-(1-metiletil)- 4H-l-Benzopiran-4-oxo-6-carboximidamida, H Goeker et. al., Bioorganic & Medicinal Chemistry, 2005, 13(5), 1707-1714), apresentando actividade antimicrobiana, nenhum destes amino ou derivados de amino de flavanona foi alguma vez relatado nem como inibidor da agrecanase nem como um analgésico.
Sumário da Invenção A presente invenção compreende uma nova classe de compostos, derivados de 2-aril e 2-heteroaril-4H-l-benzopiran-4-one- 6-amidino de Fórmula (I) e seus sais farmaceuticamente aceitáveis, úteis para o tratamento farmacológico de doenças, tais como lesões traumáticas da articulação, artrite, tipicamente osteoartrite, artrite reumatóide e artrite psoriática, incluindo o cancro, mas não limitado a tumores do cérebro, em particular glioblastoma, cancro do cólon, mieloma múltiplo, cancro da mama, cervical, da próstata e do pulmão. Adicionalmente, os compostos da invenção são analgésicos potentes, independentemente de a dor ser uma dor inflamatória ou dor neuropática. Consequentemente, os compostos da invenção são úteis para o tratamento de dor aguda e crónica, tais como: dor de osteoartrite e artrite reumatóide, dor do pós-operatório, dor visceral, dor associada com o cancro, neuralgia trigeminal, neuralgia herpética aguda e pós herpética, neuropatia diabética e dor crónica, dor do pós operatório, dor muscular, dor resultante de várias formas de trauma, dor visceral. 7 ΕΡ2268628Β1
Compostos de Fórmula (I):
em que: - X é seleccionado independentemente entre um grupo (-CH-) ou um átomo de azoto (-N-). Quando X é o grupo (-CH-), o grupo aromático na posição -2 do núcleo 4H-l-benzopiran-4-ona é um fenilo ou um fenilo substituído, quando X é azoto, o grupo aromático na posição -2 da unidade de 4H-l-benzopiran-4-ona é um grupo 3-piridilo; - Y é seleccionado independentemente a partir de um átomo de hidrogénio (-H), um grupo hidroxilo (-0H), um grupo alcoxilo (-0R) , em que R é uma cadeia alquilo C1-C4 linear ou ramificada, ou um grupo -OCH2OCH3 (grupo oxi-metoximetilo), ou um grupo -OCH2COOH (grupo 2-oxiacetato) ou um grupo -0-CH2COONH2, ou um grupo -0-CH2-C00R em que R é como definido acima, ou um grupo alquilo (-R) , em que R é como definido acima; - Ri e R2 são substituintes independentemente nas posições orto, meta e para do anel de fenilo ou são subst ituintes independentemente das posições: -2, -4, -5 e -6 do anel de piridina. Os substituintes Ri e R2 são seleccionados independentemente de: hidrogénio (-H), flúor (-F), cloro (-Cl) , bromo (-Br), cadeia alquilo C1-C4 linear ou ramificada (-R) , trifluorometilo (-CF3), ciano (-CN), metanossulfonilo 8 ΕΡ2268628Β1 (-S02CH3) , metanossulfonamido (-NHS02CH3) , sulfonamido (-S02NH2) , alcoxilo (-0R) em que R é como definido acima, trifluorometoxilo (-OCF3) , benziloxilo (-OCH2Ph) ; - Ri pode ser um grupo heterociclico penta-atómico, de um modo preferido seleccionado a partir de: ΙΗ-1-imidazolilo, ΙΗ-2-metil-l-imidazolilo, ΙΗ-4-metil-l-imidazolilo, 1H-5-metil-l-imidazolilo, imidazol-2-ilo, l-metil-imidazol-2-ilo, oxazol-2-ilo, ou um grupo metil-lH-imidazol-l-ilo (-CH2-1H-imidazo)-lilo). Quando o grupo Ri é um heterociclo penta-atómico como definido acima, pode estar na posição -3 ou -4 do fenilo, ou na posição -2 e -6 da unidade de piridina, R2 é como definido acima; - quando os substituintes Ri e R2 estão na posição -3 e -4 do fenilo, eles podem formar opcionalmente um anel heterociclico de 5 ou 6 membros condensados com a unidade de arilo, sendo o referido anel, de um modo preferido um dioxolano, um furano, um 2,3-di-hidrofurano ou uma unidade de 1H-3,4-tetra-hidropirano; nestes casos, o grupo aromático na posição -2 do núcleo de 4H-l-benzopirano será respectivamente um grupo 1,3-benzodiozol-5-ilo, um grupo benzofuran-5-il- ou benzofuran-6-ilo, um grupo 2,3-di-hidrobenzofuran-5-ilo ou 2,3-di-hidrobenzofuran-6-ilo, um grupo 2,3-di-hidro-l,4-benzodioxin-6-ilo; - R3 está na posição -5, -7 ou -8 do núcleo de 4H-1-benzopiran-4-ona, é seleccionado a partir de: hidrogénio (-H), flúor (—F), uma cadeia alquilo C1-C4 linear ou ramificada (-R) , hidroxilo (-0H) metoxilo (-OCH3) , trifluorometoxilo (-OCF3) , carboxilo (- COOH), carboalcoxilo (-COOR), sendo R como definido acima, carboxamido (-CONH2) , carboximetilo (-CH2COOH), carboalcoilmetilo (-CH2COOR), carboxamidometilo (- 9 ΕΡ2268628Β1 CH2CONH2) , dimetilaminometilo (-CH2NMe2) , sendo R como definido acima; — o grupo amidino: R4-C (=NH) -NH-, está na posição -6 do núcleo de 4H-l-benzopiran-4-ona, R4 é seleccionado independentemente a partir de um ciclopropilo (-C3H5) , um ciclopropilmetilo (-CH2C3H5), uma cadeia alquilo C1-C4 linear ou ramificada (-R), substituída opcionalmente com um grupo hidroxilo (-0H), um grupo metoxilo (-OCH3) , um grupo etoxilo (-OC2H5) ou um grupo dimetilamino (-NMe2) , um fenilo ou um fenilo substituído, em que para o fenilo substituído se entende um fenilo substituído com pelo menos um dos grupos seguintes: flúor (-F), cloro (-C1), bromo (-Br), metoxilo (-OCH3) e 3,4-metilendioxilo (-0-CH2-0-) ; adicionalmente, R4 pode ser um fenilo ou um fenilo substituído como definido acima ou um heterociclo tal como -2-furilo, 3-furilo, 2-tienilo, 3-tienilo, 2-oxazolilo, 3-oxazolilo, 2-tiazolilo, 3-tiazolilo.
Em compostos de Fórmula (I), a amidina substituinte para dar origem a tautómeros, o âmbito da presente invenção inclui todos os tautómeros possíveis dos compostos de Fórmula (I).
De acordo com esta invenção, os compostos de Fórmula (I) podem ser utilizados como a base livre ou como um seu sal farmaceuticamente aceitável, ou como uma forma de solvato ou hidrato desse sal.
Os sais dos compostos de Fórmula (I) são sais de adição farmaceuticamente aceitáveis com ácidos inorgânicos e orgânicos. Exemplos representativos não limitantes de sais inorgânicos são: cloridrato, bromidrato, hidrogenossulfato e sulfato. Exemplos representativos não limitantes dos sais 10 ΕΡ2268628Β1 orgânicos são: maleato, fumarato, oxalato, metanossulfonato, succinato, ascorbato, tartarato.
Noutra forma de realização esta invenção proporciona métodos para a preparação de compostos de Fórmula (I).
Numa outra forma de realização esta invenção proporciona composições farmacêuticas para os compostos de Fórmula (I), úteis para o tratamento de artrite, cancro e dor como discutido acima. Dentro do âmbito da presente invenção o termo composição farmacêutica (produto de fármaco) refere-se a qualquer forma de dosagem oral, parentérica ou tópica, adequada para o tratamento das patologias acima, que contêm uma quantidade eficaz de pelo menos um dos ingredientes farmacêuticos activos (substâncias de fármacos), compostos de Fórmula (I), seus sais ou solvatos, e um veículo, excipientes ou diluentes farmaceuticamente aceitáveis como definido abaixo, para administração oral, parentérica ou tópica.
Exemplos representativos de compostos de Fórmula (I) estão listados na Tabela 1. 11 ΕΡ2268628Β1
Tabela 1
Exemplo Estrutura Fórmula Molecular Peso Molecular 1 γχΑ C17H14N202 .HC1 314,8 2 1 c18h17n2o3.hci.h2o 363, 9 3 Ci7Hi3FN202 296,3 4 o~y C18H14N204 .HC1 358,7 5 o τ T T Γ WN c2oh16n4o3.hci 396, 9 6 O ^ wX C23H20N4O3.2HCl.H2O 491,4 7 0 /°ν^Νγγ^γΟΗ n wN C22H20N4O4 404,4 8 o \ /N. OH n C20H16N4O3.2HCl 396, 9 12 ΕΡ2268628Β1 9 Ο Υ ¥ Τ Υ ^«Vl iXi Γ° c18h16n2o5s.hci 408, 9 10 X X ο ο ο \ / ο=/ ο \7 ζ h* c17h14N205 .hci 362,8 11 YYY-Af Ν ΥΥΥρ, C2oH18N204 .HC1 386, 9 12 0 ν^ν^Λ/ ΟΗ Υ ]Γ^ c18h17n2o4.hci.h2o 325,4 13 ο -—^ Α. -ΟΗ -Υ- IAjC^ ? Ci8H16N205 .HC1.H20 434,4 14 ^YvNW^ /ΟΗ ί Χα JL-° ΤΙ 1 C24H2ON205 .HC1 452, 9 15 Ο V-NvTXOH Τ Υ τ τ \ίΑ-ο/ Ci9H16N204 .HC1 372,8 16 Ο Τ ΤΧΪ ν ^°Τγ°> c18h14n2o5.hci 374,8 13 ΕΡ2268628Β1 17 NnyvVoh N ^°\χ> C20H16N2O5 364,4 18 uXc°> C2iH18N205 .HCl 414, 9 19 o T T T T N C20H18N2O6 382,4 20 0 T 1 T Y O 1 C17H15N304 .HC1 361,8 21 o vNv/vVOH T i T T N c16h13n304 .hci 347,8 22 O C25H23N204 .HC1 415,5
Descrição da invenção
Preparação dos compostos da invenção
Os compostos de partir de compostos de Fórmula Fórmula (I) (II) podem ser preparados a 14 ΕΡ2268628Β1
Coapastos de Fórmila fl) Compostos de Fòrnactla (II) em que, nos compostos de Fórmula (II) os substituintes X, Ri, r2, R3, R4 possuem os mesmos significados que os anteriormente relatados para compostos de Fórmula (I) e o substituinte W adicionalmente aos significados previamente relatados para compostos de Fórmula (I) pode ser um grupo benziloxilo (-OCH2Ph) , ou um grupo sililoxilo, tipicamente um grupo trimetilsililoxilo (-0SiMe3) e tercbutildimetilsililoxilo (-OSiMe2tBut) . A conversão de um composto de Fórmula (II) num composto de Fórmula (I) em que Y é hidroxilo, pode ser obtido quando o W é um grupo benziloxilo, por exemplo por hidrogenação catalítica (J. Med. Chem., 48, 8, 2790-2804; 2005) , em que W é um grupo metoximetilo através de tratamento acídico e por tratamento com fluoreto de tetrabutilamónia em THF ou com ácido aquoso, tal como ácido clorídrico aquoso quando W é um grupo sililoxilo.
Um composto de Fórmula (II), em que Ri e/ou R2 são grupos alcoxilo, pode ser transformado num composto de Fórmula (I) em que Ri e/ou R2 são grupos hidroxilo, utilizando técnicas bem conhecidas na técnica, por exemplo através de tratamento com ácido clorídrico ou bromídrico aquoso ou tribrometo de alumínio ou tribrometo de boro (J. Org. Chem. 72, 12, 4582-4585; 2007). Um composto de Fórmula (II) em que R3 e/ou R2 são grupos benziloxilo pode ser 15 ΕΡ2268628Β1 transformado num composto de Fórmula (I) em que Ri e/ou R2 são grupos hidroxilo através de hidrogenação catalítica. Um composto de Fórmula (II) em que R3 e/ou Y é um grupo que contém o grupo carboalcoxilo pode ser transformado num composto de Fórmula (I) em que R3 e/ou Y é um grupo carboxilo. Neste caso se o grupo alcoxilo é metoxilo ou etoxilo a transformação pode ser obtida através de tratamento com hidróxido de sódio ou potássio aquoso ou alcoólico se o grupo alcoxilo for tercbutoxilo a sua remoção pode ser alcançada através de tratamento com ácido trifluoroacético num solvente adequado, tal como diclorometano. Um composto de Fórmula (II) em que R3 e/ou Y é um grupo contendo carboalcoxilo pode ser transformado num composto de Fórmula (I) em que R3 e/ou Y é um grupo carboxamido através de reacção do éster com amónia ou através de hidrólise éster, como descrito acima e depois por exemplo através de tratamento do ácido resultante com cloreto de oxalilo seguido por tratamento do cloreto de acilo resultante com amónia.
Pode ser obtido um composto de Fórmula (II) a partir de um composto de Fórmula (III) :
Coifcposto· <le Fóntreila (XX) Co-sípas to cie Wômala (TXT) em que nos compostos de Fórmula (III) os substituintes X, Ri, r2, R3, R4, e W possuem os mesmos significados que foram
anteriormente relatados para compostos de Fórmula (II) . A 16 ΕΡ2268628Β1 conversão de um composto de Fórmula (III) num composto de Fórmula (II) pode ser obtida através de tratamento com R4CN e um catalisador apropriado, num solvente inerte adequado, tal como dioxano, tetra-hidrofurano (THF), diglima, hexano ou tolueno, ou utilizando o cianeto como solvente. Catalisadores apropriados podem ser: trimetilaluminio em solventes de hidrocarboneto, tais como hexano ou tolueno, ácido clorídrico seco ou ácido metanossulfónico. Alternativamente, a conversão de um composto de Fórmula (III) num composto de Fórmula (II) pode ser obtida por tratamento com um imidato de Fórmula R4C (=N) -0R, em que R4 é como definido para compostos de Fórmula (I) e R é etilo ou metilo. A reacção é normalmente realizada num solvente adequado, tal como metanol ou etanol a uma temperatura que pode variar desde 25 °C até à temperatura de refluxo. Uma vez que o imidato está normalmente como sal de cloridrato, é também utilizada uma base orgânica, tal como trietilamina ou é também utilizada N-metilmorflina.
Um composto de Fórmula (I) pode ser obtido directamente a partir de um composto de Fórmula (III) utilizando os métodos acima desde que Y, W, R4, R2, R3, R4 sejam apropriados com o método utilizado para a conversão directa de um composto de Fórmula (III) num composto de Fórmula (I).
Pode ser obtido um composto de Fórmula (III) a partir de um composto de Fórmula (IV):
H
Ccsspost.o de Fórmula {XIX} Composto de Fórmula (XV) 17 ΕΡ2268628Β1 em que nos compostos de Fórmula (III) todos os substituintes sejam como previamente definido e PG sejam um grupo de protecção de azoto apropriado. Sendo os grupos de protecção apropriados amidas, por exemplo acetil (-COCH3) e trifluoroacetil (-COCF3) e carbamatos por exemplo BOC: tercbutoxicarbonil (-COOtBut). A conversão dos compostos de Fórmula (IV) nos compostos de Fórmula (III) é obtida de acordo com métodos bem conhecidos na arte (T.W. Green, Protective Group in Organic Synthesis, John Wiley & Sons). Um composto de Fórmula (IV) em que W é hidroxilo pode ser transformado num composto de Fórmula (IV) em que W é um grupo -0-CH2C00H (grupo de 2-oxiacetato) ou um grupo -0-CH2C00NH2, ou um grupo -OCH2- COOR em que R é como definido acima, através do tratamento do composto de Fórmula (IV) com bromoacetato de etilo ou tercbutilbromoacetato e carbonato de sódio ou potássio num solvente adequado, tal como DMF (J. Org. Chem., 71,18, 6863-6871; 2006). Pode ser obtido um composto de Fórmula (IV) em que Y é o grupo -0-CH2C00NH2 a partir de um composto de Fórmula (IV) em que Y é o grupo -0-CH2-COOR ou a grupo -0-CH2C00H de acordo com métodos bem conhecidos na arte.
Pode ser obtido um composto de Fórmula (IV) a partir de um composto de Fórmula (V) através da reacção com um composto de Fórmula (VI) em que os substituintes são como definido acima e Z é seleccionado a partir de um grupo carboxilato (-COOH) ou um grupo -CO-R5 em que R5 é uma cadeia alquilo C1-C4 linear ou ramificado, um grupo metoximetil (CH2OCH3) ou hidrogénio (-H) : 18 ΕΡ2268628Β1
Estão disponíveis comercialmente, ou podem ser preparados de acordo com vias conhecidas compostos de Fórmula (V) e compostos de Fórmula (VI). A síntese dos compostos de Fórmula (IV) a partir dos compostos de Fórmula (V), quando W é hidrogénio (-H) é obtida por esterificação do composto de Fórmula (V) com ácidos aromáticos de Fórmula (VI) substituídos (Z: COOH) para proporcionar 2- ariloxiacetofenonas, que no rearranjo de Baker-Venkataraman produziram as 1,3-dicetonas correspondentes. Os compostos de Fórmula (IV) são então obtidos por ciclodesidratação das 1,3-dicetonas. A esterificação e o rearranjo de Baker-Venkataraman podem ser obtidos utilizando piridina/POCl3 (Indian Journal of Heterocyclic Chemistry, 1997, 7, 25-30). Pode ser então realizado o fecho do anel de 4H-1- benzopiran-4-ona tratando a 1,3-dicetona obtida numa mistura de etanol e ácido clorídrico.
Alternativamente, a síntese de compostos de Fórmula (IV) a partir dos compostos de Fórmula (V) em que W é hidrogénio (-H) , alcoxilo (-OR) ou alquilo (-R) sendo R como acima definido para o substituinte Y, é obtida através da reacção dos compostos de Fórmula (VI) em que Z é um grupo -CO-R5 e um 19 ΕΡ2268628Β1 composto de Fórmula (V) como definido acima, num solvente adequado, tal como etanol aquoso na presença de hidróxido de sódio ou de potássio (J. Med. Chem. 34, 2, 736-746, 1991; J. Med. Chem., 34, 7, 2169-76; 1991). A síntese dos compostos de Fórmula (IV) a partir dos compostos de Fórmula (V), em que W é hidroxilo (-0H) é obtida através da reacção de um composto de Fórmula (V) com um composto de Fórmula (VI) em que Z é -CHO, sendo todos os outros substituintes como definido acima. Por exemplo, os intermediários de 2' ’-hidroxicalconas de Fórmula (VII) são preparados através da condensação dos compostos de Fórmula (V) (por exemplo 5-acetamido-2-hidroxiacetofenona) e correspondendo a aldeídos de arilo ou de heteroarilo de Fórmula (V) em meio alcalino. Um meio alcalino apropriado pode ser etanol ou metanol e hidróxido de sódio ou hidróxido de potássio aquoso a 10-40%. A condensação é realizada agitando a mistura de reacção a uma temperatura que pode variar de 5°C a 50°C, durante um tempo até 12 horas (R.B.
Palkar, Indian J. Chem., 2000, 39B, 141-144). O intermediário 2-hidroxicalcona pode ser isolado ou não. Para estes casos nos quais o isolamento é necessário, a mistura de reacção arrefecida é acidificada até à precipitação da 2-hidroxicalcona. Para a maioria dos casos, o isolamento não é necessário e a 2-hidroxicalcona formada é directamente convertida na 2-aril-3-hidroxi-lH-l-benzopiran 4-ona de Fórmula (VI) através da reacção de Algar-Flynn-Oyamada (Oyamada et. al., Buli. Chem. Soc. Japan, 1935, 10, 182). De acordo com este procedimento, a calcona formada é oxidada in situ adicionando peróxido de hidrogénio a baixa temperatura (N.D. Meyer et. al., J. Med. Chem., 1991, 34, 736-746). 20 ΕΡ2268628Β1
Exemplos representativos nao limitantes das preparações para compostos de Fórmula (I) são relatados acima.
Exemplo 1: cloridrato de 2-fenil-6-[(1-iminoetil)amino]-4H-1-benzopiran-4-ona
6-aminoflavona (10 g, 0,040 mol, disponível comercialmente, Aldrich) suspensa em acetonitrilo (300 mL) é arrefecida a 0°C, sob agitação. O HC1 é borbulhado lentamente através da suspensão durante 3 horas. A mistura de reacção é então agitada à temperatura ambiente durante 3 dias, depois vertida em éter de isopropilo (450 mL) e o precipitado foi lavado com éter de isopropilo-isopropanol (1: 2 v/v) . O sólido resultante é removido por filtração e cristalizado a partir de etanol. Rendimento: 69%; p.f.: 278,2-278,8 "C; Análise Elem. Ci7H14N202*HCl; teoria C:64,87 H:4,80 N:8,90; Encontrado C:64,41 H:5,10 N:8,64; IV (KBr): 3317, 2776, 1677, 21 ΕΡ2268628Β1 1639, 1481, 1368 cm1; 1H-NMR (d6-DMS0): 11,82 (s largo, 1H), 9,72 (s largo, 1H), 8,7 (s largo, 1H), 8,15 (m, 2H); 7,98 (m, 2H); 7,77 (dd, 1H); 7,60 (m, 3H); 7,13 (s, 1H) ; 2,45 (s, 3H) .
Exemplo 2: mono-hidrato de cloridrato de 2-(4-metoxifenil)-6-[(1-iminoetil)amino]-4H-l-benzopiran-4-ona o
Preparado de um modo análogo ao Exemplo 1, começando a partir de 2-(4-metoxifenil)-6-amino-4H-l-benzopiran-4-ona. Rendimento: 85%; p.f. 257,9-259,5°C; Análise Elem.
Ci8Hi6N203*HC1*H20; teoria C:59, 59 H:5,28 N:7,72; encontrado C:59,76 H: 5,09 N:8,52; TLC (85/25/2/1
Clorofórmio/Metanol/Água/ Amónia) Rf: 0,53; IV (KBr) : 3381, 3211, 3060, 1648, 1605, 1511, 1257 cirT1; 1H-NMR (d6-DMSO) : 12,0 (s largo, 1H) , 9,8 (s largo, 1H) , 8,7 (s largo, 1H) , 8,15 (d, 2H) ; 7,95 (m, 2H) ; 7,75 (m, 1H) ; 7,18 (d, 2H) ; 7,04 (s, 1H) ; 3,88 (s, 3H); 2,42 (s, 3H) . 2b) 2-(4-metoxifenil)-6-amino-4H-l-benzopiran-4-ona
O
A uma suspensão benzopiran-4-ona, 5 g de 2- (4-metoxifenil)-6-acetamido-4H-l-(0,016 mol) em etanol (solução a 80% em 22 ΕΡ2268628Β1 água) (70 mL) foi adicionado H2SO4 30% (25 mL) e a mistura foi agitada sob refluxo durante 4 horas. Após arrefecimento, foi adicionado NaOH aquoso até ao pH 10, e a mistura foi extraída com diclorometano, lavada com água, seca e evaporada. Rendimento: 97%; TLC (85/25/2/1
Clorofórmio/Metanol/Água/Amónia) Rf: 0,82. 2 c) 2-(4-metoxifenil)-6-acetamido-4H-l-benzopiran-4-ona
A uma suspensão de 2-0-(4-metoxi-benzoato)-5-acetamido-acetofenona, 18,58 g (0,0567 mol) em piridina (120 mL) foi adicionado KOH, 6,4 g (0,113 mol) e a mistura foi agitada durante 8 horas a 50°C. Após arrefecimento, foi adicionado AcOH aquoso (20%, 300 mL) e o precipitado foi removido por filtração, depois suspenso em AcOH glacial (130 mL) e H2S04 concentrado (3 mL) . A mistura de reacção foi agitada sob refluxo durante 4 horas e à temperatura ambiente durante 16 horas. Foi adicionada água, o precipitado foi filtrado, lavado com água, suspenso em metanol, agitado durante 5 minutos, filtrado e seco. Rendimento: 71%; TLC (9/1
Clorofórmio/Metanol) Rf: 0,59; 1H-NMR (d6-DMSO) 10,28 (s largo, 1H) ; 8,32 (d, 1H) ; 8,06 (d, 2H) ; 7,95 (dd, 1H) ; 7,73 (d, 1H); 7,12 (d, 2H), 6,92 (s, 1H) ; 2,93 (s, 3H) ; 2,10 (s, 3H) . 2d) 2-0-(4-metoxi-benzoate)-5-acetamido-acetofenona 23 ΕΡ2268628Β1 A uma solução de 2-hidroxi-5-acetamido-acetofenona 7,0 g (0,036 mol) (J. Org. Chem., 1995, 60, 4324-4330) em piridina (20 mL) foi adicionado cloreto de 4-metoxibenzoílo, 7,5 mL (0,054 mol), e a mistura foi agitada durante 16 horas à temperatura ambiente. Foi adicionado HC1 aquoso e a mistura foi extraída com DCM, lavada com água, seco e concentrado. O sólido obtido foi suspenso em metanol, agitado, filtrado, lavado com acetato de etilo e seco. Rendimento: 20%; TLC (9/1 Clorofórmio/Metanol) Rf: 0,52; IV (KBr) : 3361, 1722, 1692, 1605, 1532, 1259, 1169 cm-1; 1H-NMR (d6-DMSO) 8,09 (m, 3H) ; 7,86 (m, 1H) ; 7,31-7,12 (m, 3H) ; 3,90 (s, 3H) ; 2,52 (s, 3H) , 2,09 (s, 3H) .
Exemplo 3: 2-(4-fluorofenil)-6-[(1-iminoetil)amino]-4H-1- benzopiran-4-ona
Uma suspensão de 2-(4-fluorofenil)-6-amino-4H-l-benzopiran-4-ona, 4,5 g (0,017 mol) em acetonitrilo (600 mL) foi saturada com gás de HC1 e a mistura foi agitada durante 18 horas à temperatura ambiente. O solvente foi removido e o resíduo foi dissolvido em água e lavado com éter etílico; foi adicionado Na2CC>3 à solução aquosa até pH 10. A fase aquosa foi extraída com acetato de etilo, a fase orgânica foi seca e concentrada. O resíduo foi tratado com acetonitrilo a ferver (20 mL/g), o sólido resultante foi filtrado e seco. Rendimento: 61%; p.f.: 201,6-203,1°C. TLC: (85/25/2/1 Clorofórmio/ Metanol/Água/ Amónia): Rf 0,65; IV (KBr): 3458, 24 ΕΡ2268628Β1 3074, 1637, 1614, 1508, 1437; χΗ-NMR (dg-DMSO): 8,18 (m largo, 2H) , 7,6 (m largo, 1H) , 7,4 (m largo, 2H) , 7,25 (m, 2H); 6,98 (s, 1H); 6,39 (m largo, 2H); 1,85 (d, 3H). 3b) 2-(4 — fluorofenil)-6-amino-4H-l-benzopiran-4-ona
O H,N
A uma suspensão de 2-0-(4—fluoro-5-benzoato)-5-acetamido-acetofenona 27,0 g (0,0856 mol) em piridina (80 mL) foi adicionado KOH 12,0 g (0,214 mol) e a mistura foi agitada durante 3 horas a 50°C e durante 18 horas à temperatura ambiente. Foi adicionado HC1 2N (300 mL) e o sólido resultante foi recolhido e suspenso em AcOH glacial (120 mL) e H2SO4 concentrado (5 mL). A mistura foi agitada sob refluxo durante 3 horas e depois à temperatura ambiente durante 18 horas. Foi adicionada água, o precipitado foi recolhido, lavado com água e seco. 0 produto foi suspenso em etanol/água (80:20 v/v) (500 mL) , foi adicionado H2S04 a 30% (90 mL) e a mistura foi agitada sob refluxo durante 24 horas. Após arrefecimento o precipitado foi filtrado, lavado com etanol depois suspenso em NaOH a IN, filtrado e lavado com água. O resíduo foi dissolvido em DMF (30 mL), filtrado, depois o solvente foi removido sob vácuo. O resíduo foi suspenso em acetato de etilo, agitado, filtrado e seco. Rendimento: 30%; TLC (9/1 Clorofórmio/Metanol): Rf: 0,45; C:70,03 H:4,38 N: 5,41. 1H-NMR (dg-DMSO): 8,13 (m, 2H) , 7,43 (m, 3H) , 7,12 (m, 2H), 6,88 (s, 1H); 5,54 (s largo, 2H); 25 ΕΡ2268628Β1 3c) 2-0-(4—fluoro-5-benzoato)-5-acetamido-acetofenona A uma suspensão de 2-hidroxi-5-acetamido-acetofenona (0,103 mol) em THF (500 mL) e trietilamina (0,144 mol), foram adicionados cloreto de 4-fluoro benzoilo (0,134 mol) e Dimetilaminopiridina (DMAP) (0,03 mol), a mistura de reacção foi agitada durante 2h à temperatura ambiente, depois sujeita a refluxo durante 12 h. O solvente foi evaporado, foi adicionada água e a mistura foi extraída com acetato de etilo, lavado com água, seco e concentrado.
Exemplo 4: cloridrato de 2- (benzo [1,3] dioxol-5-il-6-[(1-iminoetil) amino]-4H-l-benzopiran-4-ona
O
>
Uma suspensão de 2-(benzo [1,3] dioxol-5-il)-6-amino-4H-l-benzopiran-4-ona 1,2 g (4,3 mmol) em acetonitrilo (600 mL) foi saturada com gás de HC1 e a mistura foi agitada durante 18 horas à temperatura ambiente. 0 solvente foi evaporado e o resíduo foi tratado com metanol/amónia, depois concentrado. O resíduo foi purificado por coluna de gel de sílica (eluente CHCI3/ MeOH/NH3 = 8/2/0,1) depois suspenso em metanol/HCl, agitado, filtrado e seco. Rendimento 78%; p.f.: 272,7-273, 3°C; TLC (85/25/2/1 Clorofórmio/Metanol/Água/Amónia) Rf; 0,45 Análise Elem. Ci8Hi4N204 . HC1; teoria: C:60,25 H:4,21 N: 7,8 0; encontrado C:5 8, 0 8 H:4,35 N:7,79; IV (KBr) : 3423, 3000, 1611, 1502, 1228; 1H-NMR (d6-DMSO): 9,7 (s largo, 1H), 9,1 (s largo, 1H), 8,7 (s largo, 1H), 7,93 (d, 2H); 7,75 (m, 3H); 7,15 (m, 2H); 7,05 (d, 1H); 6,18 (s, 2H) ; 2,37 (s, 3H) . 26 ΕΡ2268628Β1 4b) 2-(benzo [1,3] dioxol-5-il)- 6 -amino -4H-l-benzopiran-4-ona A uma suspensão de 2-0-([1,3]dioxol-5-benzoato)-5-acetamido-acetofenona 21 g (62,1 mmol) em piridina (60 mL) foi adicionado KOH 8,7 g (0,155 mol) e a mistura foi agitada durante 3 horas a 50°C e durante 18 horas à temperatura ambiente. Foi adicionado HC1 2N (300 mL) e o precipitado foi recolhido e ressuspenso em AcOH glacial (70 mL) e H2S04 concentrado (2,1 mL). A mistura foi agitada sob refluxo durante 4 horas depois agitada à temperatura ambiente durante 16 horas. Foi adicionado éter de etilo, o precipitado foi recolhido e levado com éter de etilo. O sólido foi dissolvido em etanol (solução a 80% em água) (60 mL) , foi adicionado H2S04 30% (9 mL) e a mistura foi agitada sob refluxo durante 18 horas. Após arrefecimento, o sólido foi filtrado, lavado com etanol depois ressuspenso em NaHC03 a 1% em água, filtrado, lavado com água. Rendimento: 25%; TLC (9/1 Clorofórmio/Acetato de Etilo) Rf: 0,31, Análise Elem. C16H11NO4; teoria: C:68,30 H:3,94 N:4,98; encontrado C:66,40 H: 4,06 N:4,89. 4c) 2-0-([1,3]dioxol-5-benzoato)-5-acetamido-acetofenona A uma suspensão de 2-hidroxi-5-acetamido-acetofenona, foram adicionados 12 g (0,062 mol), em THF (250 mL) , TEA (0,081 mol), cloreto de piperonilo (0,054 mol) e DMAP (0,03 mol) , e a mistura foi agitada durante 24 horas à temperatura ambiente. 0 solvente foi evaporado, foi adicionada água, o precipitado foi recolhido, lavado com água e seco. Rendimento quase quantitativo. TLC (9/1 Clorofórmio/Acetato de Etilo) Rf: 0,80 . 27 ΕΡ2268628Β1
Exemplo 5 cloridrato de 2-[(4-(imidazol-l-il)-fenil]-3-hidroxi-6-[(1-iminoetil) amino]-4H-l-benzopiran-4-ona
2-[(4-(imidazol-l-il)-fenil]-3-benziloxi-6-[(1-iminoetil) amino] -4H-l-benzopiran-4-ona (1,6 g; 3,34 mmol) foi suspenso em metanol (100 mL) , foram adicionados 3 mL de MeOH saturado com HC1 à mistura de reacção depois foi adicionado 10% Pd/C (160 mg.)· A mistura de reacção foi deixada sob hidrogénio borbulhando durante 4 horas, depois um catalisador foi removido por filtração. O solvente foi removido e o restante sólido suspenso em éter dietilico, depois filtrado. O composto do título foi obtido como um sólido amarelo, rendimento: 75%; p.f.: 311,7-312,1 °C; Análise Elem. : C2oHi6N403 . HC1, Teoria: C: 55,44, H: 4,19, N:12,93,
Encontrado: C: 56,09, H: 4,34, N: 13,22; TLC (8/2
Clorofórmio/Metanol) Rf: 0,11.; IV (KBr) : 2996, 2871, 1568, 1592 cm 1 ; 1h- -NMR (de DMSO): 11,89 (s, 1H !) ; 10,27 (s, 1H) ; 9, 81 (s, 1H) 9, 71 is, 1H) ; 8,81 (s, 1H); 8,50 (d, 2H) ; 8,4 (d, 1H) ; 8,01 (m, 4H) ; 7, 93 (d, 1H); 7,77 (dd, 1H); 2,58 (d, 2H) ; 1,28 (m, 1H) ; MS (EI) 4 01 (M+l). 5b) 2-[(4-(imidazol-l-il)-fenil]-3-benziloxi-6-[(1-imino- etil) amino] -4H-l-benzopiran-4-ona 28 ΕΡ2268628Β1
Foi suspenso 2-[(4-(imidazol-l-il)- fenil]-3- benziloxi-6-amino- 4H-l-benzo-piran-4-ona (3 g; 6,22 mmol) em acetonitrilo (50 mL) e arrefecido a 0°C. Foi borbulhado HC1 na solução após saturação. A reacção foi então agitado durante 4 horas à temperatura ambiente, após finalização, foi adicionado H20 (20 mL) e o acetonitrilo foi removido sob vácuo. A solução foi então levada para pH = 9 com NaOH a 2N, o precipitado foi removido por filtração e seco para produzir o composto do título como um sólido amarelo brilhante. Rendimento: 73% TLC: (9/1 Clorofórmio/Metanol) Rf: 0,6. 5c) 2-[(4-(imidazol-l-il)-fenil]-3-benziloxi-6-amino-4H-l- benzopiran-4-ona
Foi suspenso 2-[(4-(imidazol-l-il)-fenil]-3-benziloxi-6-acetamido-4H-l-benzopiran-4-ona (7 g; 15,5 mmol) em etanol (250 mL) , foi adicionado HC1 a 4N (16 mL; 62 mmol) e a mistura foi sujeita a refluxo durante 24 horas. Após arrefecimento, a reacção foi concentrada e o precipitado foi removido por filtração. O produto bruto foi suspenso em éter 29 ΕΡ2268628Β1 de diisopropilo, filtrado e seco para produzir o composto do titulo como um sólido amarelo claro. 1H-NMR (d5-DMSO): 9,91 (s, 1H) ; 8,44 (d, 1H) ; 8,22 (d, 2H) ; 7,90 (d, 3H) ; 7,78 (d, 2H) ; 7,33 (d, 1H) ; 7,32 (m, 6H) ; 5,16 (s, 2H) ; MS (EI) 410 (M+l), 319 (M-91). 5d) 2-[(4-imidazol-l-il)-fenil]-3-benziloxi-6-acetamido-4H-l-benzopiran-4-ona
Foi dissolvido 2-[(4- (imidazol-l-il) -fenil] -3-hidroxi-6- acetamido-4H-l-benzo-piran-4-ona (10 g; 25,14 mmol) em acetona seca (300 mL). Foram adicionados brometo de benzilo (3,6 mL; 30,16 mmol) e K2C03 anidro (5,9 g; 42,73 mmol) e a mistura foi sujeita a refluxo durante 18 horas. Após arrefecimento, a reacção foi interrompida com H20 e o precipitado foi filtrado. A lama deste último com éter de diisopropilo produziu o composto como um sólido branco. Rendimento: 92%; 1H-NMR (d6-DMSO) : 10,32 (s, 1H) ; 8,43 (s, 2H) ; 8,14 (d, 2H); 7,88 (m, 4H); 7,78 (d, 2H); 7,32 (m, 5H); 7,16 (s, 1H); 7,45 (s, 1H) ; 5,1 (s, 2H) ; 2,1 (s, 3H) . 5e) 2-[(4-(imidazol-l-il)-fenil]-3-hidroxi-6-acetamido-4H-l- benzopiran-4-ona 30 ΕΡ2268628Β1
Foi dissolvido 2-hidroxi-4-acetamido acetofenona (6 g; 31,06 mmol) em etanol (100 mL), foram então adicionados NaOH (6,2 g; 0,15 mol) e foram então adicionados benzaldeido de 4-imidazoilo (9,6 g; 55,9 mmol) (preparado de acordo com J. Med. Chem., 1993, 36(20), 2964-72) e a mistura resultante foi agitada durante 24 horas à temperatura ambiente. A reacção foi diluída com MeOH (100 mL) depois foram adicionados H202 (15 mL) seguido por H20 (15 mL) . Após 3 horas o sólido amarelo foi filtrado, suspenso em HC1 a 3N e agitado durante 1 hora à temperatura ambiente. 0 precipitado foi filtrado e seco para produzir o composto do título como um sólido amarelo, rendimento: 77%; 1H-NMR (d6- -DMSO) : 10,36 (s, i—1 9,80 (s, 1H); 8,91 (s, 1H); 8,46 (d, 1H) ; 8,38 (d, 2H) ; O 00 (s, 1H); 3H); MS 7,94 (d, 3H) 7,76 (EI) 362 (M+l). (d, 1H) ; 7,45 (s, 1H) ; i—1 CNI (s,
Exemplo 6 dicloridrato de 2-[(4-(imidazol-l-il)-fenil]-3- hidroxi-6_[ (1-iminoetil-2-_ciclopropil)_amino] -4H-1- benzopiran-4-ona mono-hidrato
O
31 ΕΡ2268628Β1
Preparado a partir de 2-[(4-(imidazol-l-il)-fenil]-3-benzil-oxi-6-[(l-imino-etil-2-ciclopropil) amino]-4H-1- benzopiran- 4-ona de um modo análogo ao exemplo 5. Sólido amarelo. Rendimento: 97%; p.f.: 249,1-251,1°C Análise Elem.: C23H20N4O3.2HC.H2O, Teoria: C: 56,26, H:4,29, N:ll,40,
Encontrado: C: 54,26, H: 4,53, N: 10,78. IV (KBr): 2996, 2871, 1568, 1592 cirt1; 1H-NMR (d6-DMSO) : 8,81 (s, 1H) ; 8,50 (d, 2H) ; 8,4 (d, 1H) ; 8,01 (m, 4H) ; 7,93 (d, 1H) ; 7,77 (dd, 1H) ; 2,58 (d, 2H) ; 1,28 (m, 1H) ; 0,6 (m, 1H) ; 0,4 (m, 1H) ; MS (EI) 401 (M+l). 6b) 2-[(4-(imidazol-l-il)-fenil]-3- benziloxi-6-[(1-imino- etil-2-ciclo-propil) amino]-4H-l-benzopiran-4-ona
Preparado de forma análoga ao exemplo 5b) excepto gue foi utilizado ciclopropilo acetonitrilo em vez de acetonitrilo. Sólido amarelo. Rendimento 79%. TLC: (9/1 Clorofórmio/Metanol) Rf: 0,48.
Exemplo 7: 2-[(4-(imidazo)-1-il-fenil] -3-hidroxi — 6 —[ (1 — iminopropil -3-metoxi) amino] -4H-l-benzopiran-4-ona 32 ΕΡ2268628Β1
Preparado de forma análoga ao exemplo 5. Sólido amarelo. Rendimento: 76%. 1H-NMR (d4-CD3OD) : 8,64 (s, 1H) ; 7,81 (d, 2H) ; 7,35 (d, 2H) ; 7,16 (d, 4H) ; 6,98 (d, 1H) ; 6,93 (d, 1H) ; 3,07 (t, 2H) ; 2,68 (s, 3H) ; 2,17 (t, 2H) . MS (EI) 405 (M+l). 2-[(4-( imidazol-l-il)- fenil]-3-benziloxi-6- [(1- imino-propil-3-metoxi) amino]- 4H-1- benzopiran-4-ona
Preparado de forma análoga ao exemplo 5b) excepto que foi utilizado o 3-metoxipropionitrilo em vez de acetonitrilo. Sólido amarelo. Rendimento 50%. TLC (9/1 Clorofórmio/Metanol) Rf 0,18.
Exemplo 8 : dicloridrato de 2-[ (3-(imidazol-l-il)-fenil]-3-hidroxi-6-[(1- iminoetil) amino] -4H-l-benzopiran-4-ona
33 ΕΡ2268628Β1
Preparado de forma análoga ao exemplo 5, começando a partir de dicloridrato de 2-[ (3-(Imidazol-l-il)- fenil] -3-benziloxi-6-[(1-iminoetil) amino] -4H-l-benzopiran-4-ona. Rendimento: 90%; p.f.: 281,0-281,5°C. TLC (80/20/2 Clorofórmio/Metanol/Amónia) Rf: 0,32; Análise Elem.: C20Hi6NaO3.2HCl, Teoria: C: 55, 44, H: 4, 19, N:12,93, Encontrado: C: 53,05, H: 4,34, N: 12,18. 1H-NMR (dê-DMSO): 11,83 (s largo , 1H), 10,30 (s, 1H) , 9,75 (m, 2H) , 8,73 (s largo, 1H) , 8, 46 (m, 2H) , 8,38 (m, 1H), 8,07-7,75 (m, 6H) , 2,41 (s, 3H) .
Dicloridrato de 2-[(3-(imidazol-l-il)- fenil]-3-benziloxi-6-[(1-imino-etil) amino] -4H-l-benzopiran-4-ona
Preparado de forma análoga ao exemplo 5b começando a partir de dicloridrato de 2-[(3-(imidazol-l-il) - fenil] -3-benziloxi-6-amino- 4H-1- benzopiran-4-ona. Rendimento: 55%; Rf (80/10/1 Clorofórmio/Metanol/Amónia): 0,27; 1H-NMR (d6- DMSO) : 11,70 (s largo, 1H) , 9,69 (s largo, 1H) , 9,51 (s, 1H) , 8,75 (s largo, 1H) , 8,32 (m, 1H) , 8,17-8,08 (m, 3H) , 8,01-7,96 (m, 2H) , 7,85-7,75 (m, 3H) , 7,46 (s largo, 1H) , 7,32-7,21 (m, 5H), 6,96 (s largo, 1H), 5,20 (s, 2H), 2,41 (s, 3H) .
Dicloridrato de 2-[(3-(imidazol-l-il)- fenil]-3- benziloxi-6-amino-4H-l- benzopiran-4-ona.
Preparado de forma análoga ao Exemplo 5c, começando a partir de 2-[ (3-(imidazol-l-il) - fenil]-3-benziloxi-6- 34 ΕΡ2268628Β1
acetamido-4H-l- benzopiran-4-ona Rendimento: 74%; TLC (90/10/1 Clorofórmio/Metanol/Amónia) Rf: 0,55; 1H-NMR (d6~ DMSO) : 9,66 (s, 1H) , 8,28 (m, 1H) , 8,21 (m, 1H) , 8,13 (dd, 1H) , 7,95 (m, 2H), 7,78 (m, 1H), 7,60 (m, 1H), 7,42 (d, 1H) , 7,35-7,2 (m, 6H), 5,16 (s, 2H) . 2-[(3-(imidazol-l-il)- fenil]-3- benziloxi-6-acetamido-4H-l-benzopiran-4-ona
Preparado de forma análoga ao exemplo 5.d, começando a partir de 2-[(3-(imidazol-l-il)- fenil]-3- hidroxi-6-acetamido-4H- l-benzopiran-4-ona. Rendimento: 55%; TLC (85/15 Clorofórmio/Metanol) Rf :0,64; 1H-NMR (d6-DMSO): 10,28 (s largo, 1H) , 8,44 (d, 1H) , 8,23-8,16 (m, 2H) , 8,04-7,9 (m, 2H) , 7,85-7, 65 (m, 4H) , 7,27(m, 4H) , 7,14 (m, 1H) , 5,17 (s, 2H) , 2,12 (s, 3H) . 2-[(3-(imidazol-l-il)- fenil]-3- hidroxi-6-acetamido-4H-l-benzopiran-4-ona.
Preparado de forma análoga ao exemplo 5.e, excepto que foi adicionado NaHCCt aquoso ao cloridrato obtido e a mistura foi extraída com acetato de etilo, lavada com água, seca, evaporada e triturada em metanol. Rendimento: 10%; 1H-NMR (d6-DMSO) : 10,29 (s largo, 1H) , 9,84 (s largo, 1H) , 8,45 (d, 1H) , 8,35 (m, 2H) , 8,24 (dd, 1H) , 7, 95-7, 68 (m, 5H) , 7,17 (m, 1H) , 2,07 (s, 3H) .
Exemplo 9: cloridrato de 2-(4-metanossulfonilfenil)-3- hidroxi-6- [(1-iminoetil) amino] -4H- l-benzopiran-4-ona 35 ΕΡ2268628Β1
2-(4-metansulfonilfenil)-3-benziloxi-6-[(1-iminoetil) amino] -4H-l-benzopiran-4-ona (0,19 g; 0,41 mmol) foi suspenso em acetonitrilo (40 mL) e arrefecido para 0°C. O HC1 foi borbulhado na solução após saturação. A reacção foi então agitada durante 24 horas à temperatura ambiente. Após a finalização, foi adicionado H20 (20 mL) e o acetonitrilo foi removido sob vácuo. A solução foi então levada para pH = 9 com NaOH a 2N. A solução foi concentrada e o precipitado foi removido por filtração e seco para produzir o composto do titulo como sólido amarelo. Rendimento: 35%. TLC (85/25/1/2 Clorofórmio/Metanol/Amónia/Água) Rf: 0,15. Análise Elem.:
Ci8H16N205S.HCl, Teoria: C: 52,88, H:4,19, N:6,85, Encontrado: C: 51,09, H: 4,08, N: 5,81. 1H-NMR (d4-CD3OD) : 8,57 (d, 2H) ; 8,12 (dd, 3H) ; 7,90 (d, 1H) ; 7,72 (dd, 1H) ; 3,18 (s, 3H) ; 2,17 (s, 3H). 2-(4-metanossulfonilfenil)-3- benziloxi -6- amino-4H-l-benzopiran-4-ona
Preparado de forma análoga ao exemplo 5c). Rendimento: 99%. 1H-NMR (de-DMSO) : 8,15 (d, 2H) ; 8,04 (d, 2H) ; 7,34-7,25 (m, 7H); 5,12 (s, 2H); 3,3 (s, 3H). TLC (9/1
Clorofórmio/Metanol) Rf: 0,7. 2-(4-metanossulfonilfenil)-3- benziloxi -6- acetamido-4H-l-benzopiran-4-ona 36 ΕΡ2268628Β1
Preparado de forma análoga ao exemplo 5d). Óleo amarelo claro. Rendimento: 23%. TLC (9/1 Clorofórmio/Acetato de Etilo) Rf: 0,25. 2-(4-metanossulfonilfenil)-3- hidroxi -6- acetamido-4H-l-benzopiran-4-ona
Preparado de forma análoga ao exemplo 5e). Sólido branco. Rendimento: 20%. 1H-NMR (d6-DMSO) : 10,29 (s, 1H) ; 10,08 (s, 1H) ; 8,45 (dd, 3H) ; 8,11 (d, 2H) ; 7,94 (d, 1H) ; 7,76 (d, 1H) ; 3,29 (s, 3H) ; 2,1 (s, 3H) . TLC (9/1
Clorofórmio/Metanol) Rf: 0,65.
Exemplo 10: cloridrato de 2-(3,4-di-hidroxifenil)-3-hidroxi-6-[(1-iminoetil) amino] -4H- l-benzopiran-4-ona
Preparado de forma análoga ao exemplo 5, mas o composto do titulo foi purificado por suspensão em éter diisopropilico. Sólido amarelo. Rendimento: 25%; p.f.: 310,1-310, 9°C 1H-NMR (d5-DMSO) : 11,53 (br s, 1H) ; 9,72 (s, 1H) ; 9,55 (s, 1H) ; 9,36 (s, 1H) ; 8,64 (s, 1H) ; 8,01 (d, 1H) , 7,90 (d, 2H) ; 7,78 (d 1H) ; 7,35 (d, 2H) ; 7,65 (dt, 2H) ; 6,93 (d, 1H); 3,35 (s, 3H). b) 2-(3,4-dibenziloxifenil) -3- hidroxi-6-[(1- iminoetil) amino] -4H- l-benzopiran-4-ona 37 ΕΡ2268628Β1 foi suspenso 2-(3,4-dibenziloxifenil) -3- hidroxi-6-amino-4H -1- benzopiran-4-ona (1,9 g; 3,78 mmol) em acetonitrilo (40 mL) e arrefecido até 0°C. Foi borbulhado HC1 numa solução após saturação. A reacção foi então agitada durante 5 dias à temperatura ambiente. Após finalização, foi adicionada H20 (20 mL) e o acetonitrilo foi removido sob vácuo. O precipitado foi removido por filtração e seco para produzir o composto do titulo como um sólido amarelo brilhante. Rendimento: 92%. TLC (9/1 Clorofórmio/Metanol) Rf: 0,2. 1H-NMR (d6-DMSO) : 11,61 (br s, 1H) ; 9,62 (s, 1H) ; 8,65 (s, 1H) ; 8,01 (d, 1H), 7,90 (d, 2H) ; 7,78 (d 1H) ; 7,35 (d, 2H) ; 7,65 (dt, 2H) ; 6,93 (d, 1H) ; 3,35 (s, 3H) c) 2-(3,4-dibenziloxifenil)_-3- hidroxi-6-amino-4H-l- benzopiran-4-ona
Preparado de forma análoga ao exemplo 5c) . Sólido verde claro. Rendimento: 84%. 1H-NMR (d6-DMSO): 9,61 (s, 1H); 7,91- 7,83 (m, 2H); 7, 69-7,24 (m, 16H); 5,26 (s, 2H) ; 5,22 (s, 2H) . MS (EI) 466 (M+l). d) N2-(3,4-dibenziloxifenil) -3- hidroxi -6- amino-4H-l-benzopiran-4-ona
Preparado de forma análoga ao exemplo 5d) mas utilizando 3,4-dibenziloxi benzaldeido. Sólido verde claro. Rendimento: 2,5 g (10%). 1H-NMR (d6-DMS0) : 10,26 (br s, 1H) ; 9,46 (br s, 1H) ; 8,41 (d, 1H) ; 7, 92-7, 84 (m, 4H) ; 7,74-7,24 (m, 15H) ; 5,25 (s, 2H), 5,22 (s, 2H); 2,1 (s, 3H).
Exemplo 11: cloridrato de 2-(4-hidroxifenil -3- hidroxi-6-[(1-iminoetil -2- ciclopropil) amino]-4H-l-benzopiran-4-ona 38 ΕΡ2268628Β1
Preparado de forma análoga ao exemplo 5, começando a partir de cloridrato de 2-(4-hidroxifenil-3-benziloxi-6-[(1-iminoetil-2-ciclopropil) amino] -4H- l-benzopiran-4-ona.
Rendimento: 90%; p.f. 281,0-281,5°C. TLC (85/25/2/1
Clorofórmio/ Metanol/Água/Amónia) Rf: 0.47; Análise Elem.: C20H18N2O4.HCI, Teoria: C: 62,10, H: 4,95, N: 7,24, Encontrado: C: 58,35, H: 5,12, N: 6,85. IV (KBr): 3327, 3114, 3066, 1676, 1599, 1553, 1486, 1274 cm_11H-NMR (d6-DMSO): 10,25 (s largo, 1H) , 9,58 (s largo, 2H) , 8,15 (d, 2H) , 8,1-7,9 (m, 2H) , 7.7 (dd, 1H); 6,98 (d, 2H); 1,26 (m, 1H), 0,7-0,4 (m, 4H). b) cloridrato_de_2- (4-hidroxifenil-3-benziloxi-6- [ (1- iminoetil-2-ciclopropil) amino] -4H- l-benzopiran-4-ona
Preparado de forma análoga ao exemplo 5b, começando a partir de cloridrato de 2-(4-hidroxifenil-3-benziloxi-6-amino-4H-l- benzopiran-4-ona, mas o produto foi purificado por suspensão em metanol. Rendimento: 50%; TLC (9/1
Clorofórmio/Metanol) Rf: 0,30. c) cloridrato de 2-(4-hidroxifenil)-3-benziloxi-6-amino-4H-l-benzopiran-4-ona
Preparado de forma análoga ao exemplo 5c, começando a partir de 2-(4-hidroxifenil)-3-benziloxi-6-acetamido-4H-l-benzopiran- 4-ona. Rendimento: 82%; TLC (9/1 Clorofórmio/Metanol) Rf: 0,71 Análise Elem. C29H23N04*HC1; 39 ΕΡ2268628Β1 teoria C: 71,68 H: 4,98 N: 2,88; encontrado C: 71 ,35 H: 4,76 N: 3,03; 1H-NMR (de-DMSO) : 8,02 (d, 2H), 7,8-7, 7 (m, 2H) , 7,55-7,25 (m, 11H), 7,18 (d, 2H) , 5,22 (s, 2H), 5, 08 (s, 2H) . d) 2-(4-hidroxifenil) -3- benziloxi-6-acetamido-4H-l-benzo-piran-4-ona.
Preparado de forma análoga ao exemplo 5d, começando a partir de 2-(4-hidroxifenil)-3-hidroxi -6- acetamido-4H-l-benzopiran- 4-ona. Rendimento: 84%; Rf (9/1
Clorofórmio/Metanol) : 0,59, 1H-NMR (d6-DMSO) : 10,38 (s largo, 1H) , 8,40 (d, 1H) , 8,1-7,9 (m, 3H) , 7,70 (d, 1H) ; 7,55-7,25 (m, 10H); 7,17 (d, 2H); 5,22 (s, 2H) , 5,07 (s, 2H) ; 2, 11 (s, 3H) .
Exemplo 12 : cloridrato de 2-(4-metoxifenil)-3-hidroxi-6-[(1-iminoetil) amino] -4H- l-benzopiran-4-ona mono-hidrato
Preparado de forma análoga ao exemplo 5 começando a partir de 2-(4-metoxifenil) -3- benziloxi-6-[(1-iminoetil) amino]- 4H-l-benzopiran-4-ona. Rendimento: 90%; p.f.: 260,1-261,1°C. Rf (85/25/2/1 Clorofórmio/Metanol/Água/Amónia): 0,39; Análise Elem. Ci8H16N204*HC1*H20; teoria C: 57, 07 H: 5,06 N: 7,39; encontrado C: 55, 80 H: 4,62 N: 7,70; 1H-NMR (d6-DMSO): 11,7 (s largo, 1H), 9,68 (m, 2H), 8,57 (s largo, 1H), 8,23 (d, 2H) , 7,98 (m, 2H) ; 7,72 (dd, 1H) ; 7,15 (d, 2H) , 3,86 (s, 3H) ; 2,50 (s, 3H) . 40 ΕΡ2268628Β1 b) 2-(4-metoxifenil)-3-benzi(oxi-6-[(1-iminoetil)amino]-4H-1-benzopiran-4-ona
Preparado de forma análoga ao exemplo 5b) começando a partir de cloridrato de 2-(4-metoxifenil)-3-benziloxi-6-amino-4H-l-benzopiran- 4-ona. Rendimento: 80%. c) cloridrato de 2-(4-metoxifenil)-3-benziloxi-6-amino-4H-l-benzopiran-4-ona 41 ΕΡ2268628Β1
Preparado de forma análoga ao exemplo 5e. Rendimento: 80%.
Exemplo 13: cloridrato de 2-(4-metoxifenil)-3-hidroxi-6-[(1-iminoetil-2-hidroxiamino]-4H-l-benzopiran-4-ona mono-hidrato
O
Preparado de forma análoga ao exemplo 5, começando a partir de 2-(4-metoxifenil)-3-benziloxi -6- [(1-iminoetil -2-hidroxi) amino] -4H-l-benzopiran-4-ona. Rendimento: 37%; TLC (85/25/2/1 Clorofórmio/Metanol/Água/Amónia) Rf: 0,33; Análise Elem. Ci9H18N205*HCl*H20; teoria C: 55, 82 H: 5,18 N: 6,85; encontrado C: 53,22 H: 4,73 N: 6,85; 1H-NMR (d6-DMSO) : 11,6 (s largo, 1H) , 9,7 (s largo, 5-1 8,8 (s largo, 1H) , 8,25 (d, 2H) , 8,0 (m, 2H); 7,70 (dd, 1H) ; 7,16 (d, 2H), 3,87 (s, 3H); 2,77 (m, 2H) . b) 2-(4-metoxifenil)-3-benziloxi-6-[(l-iminoetil-2-hidroxi) amino]-4H-l-benzopiran-4-ona.
Uma suspensão de cloridrato de 2-(4-metoxifenil)-3-benziloxi -6-amino-4H-l-benzopiran-4-ona (0,036 mol) em hidroxiaceto-nitrilo (20 mL) foi saturada com gás de HC1 e a mistura foi agitada durante 3 dias à temperatura ambiente. Foi adicionado isopropil éter-acetato de etilo e o sólido foi removido por filtração. Rendimento: 15%. 42 ΕΡ2268628Β1
Exemplo 14: cloridrato de N-[2-(4-metoxifenil)-3-hidroxi-4H-l-benzopiran-4-ona-6-il]-4-metoxibenzeno carboxiimidamida
O
Preparado de forma análoga ao exemplo 5, começando a partir de cloridrato de N-[2-(4-metoxifenil)-3-benziloxi-4H-l-benzopiran-4- ona-6-il]-4-metoxibenzeno carboxiimidamida. Rendimento: 77%; TLC (85/25/2/1 Clorofórmio/Metanol/Água/
Amónia) Rf: 0,71; Análise Elem. C24H2oN205*HC1; teoria C: 58,91 H: 4,53 N: 6,72; encontrado C: 58,49 H: 5,62 N: 7,24; IV (KBr) : 3388, 3166, 1646, 1605, 1251, 1180 cm'1; 1H-NMR (d6- DMSO) : 11,39 (s largo, 1H), 9,72 (s largo, 1H), 9,0 (s largo, 1H) , 8,2 (m, 1H) , 8,0-7,8 (m, 5H) ; 7,2-6,9 (m, 5H) ; 3,92-3,81 (m, 6H) . b) cloridrato de 2-(4-metoxifenil)-3- benziloxi-6-[ (1-iminoetil-2-hidroxi) amino]-4H-l- benzopiran-4-ona
Foi saturada uma suspensão de cloridrato de 2-(4-metoxifenil) -3- benziloxi -6- amino -4H- l-benzopiran-4-ona (2,44 mmol) e 4-metoxi-benzonitrilo (24,4 mmol) em dioxano (100 ml) com gás de HC1 e a mistura foi agitada durante 16 horas à temperatura ambiente. O solvente foi evaporado e o sólido resultante foi utilizado directamente no passo seguinte. 43 ΕΡ2268628Β1
Exemplo 15: cloridrato de 2-(di-hidrobenzofuran -5- il)-3- hidroxi-6-[(1-iminoetil) amino]-4H -1- benzopiran-4-ona
Preparado de forma análoga ao exemplo 5b começando a partir de cloridrato de 2-(di-hidrobenzofuran-5-il)-3-hidroxi-6-amino-4H-l-benzopiran- 4-ona. Rendimento: 54%; p.f. 291,0-292,0°C; TLC (85/25/2/1
Clorofórmio/Metanol/Água/Amónia) Rf: 0,34; Análise Elem.:
Ci9Hi6N204 .HCl, Teoria: C: 61,21, H: 4,60, N: 7,51, Encontrado: C: 59,33, H: 4,61, N: 6,99. 1H-NMR (d6-DMSO): 11,75 (s largo, 1H) , 9,68 (s largo, 2H) , 8,6 (s largo, 1H) , 8,17-7,90 (m, 4H) ; 7,70 (dd, 1H) ; 4,65 (t, 2H) ; 3,31 (t, 2H) ; 2,40 (s, 3H) . MS (EI) 337 (M+l). b) cloridrato de 2-(di-hidrobenzofuran-5-il)-3- hidroxi-6-amino-4H-l- benzopiran-4-ona
Preparado de forma análoga ao exemplo 5c) começando a partir de 2-(di-hidrobenzofuran-5-il)-3-hidroxi -6- acetamido -4H-1- benzopiran-4-ona. Rendimento: 59%; TLC (9/1 Acetato de etilo/Metanol) Rf: 0,72; IV (KBr) : 3444, 3232, 1607, 1546, 1492, 1297 cirT1; 1H-NMR (d6-DMSO) : 9,13 (s largo, 1H) , 8,10- 7,97 (m, 2H) , 7,50 (d, 1H) , 7,25 (d, 1H) , 7,15 (dd, 5H) ; 6,95 (d, 1H) ; 4,63 (t, 2H) , 3,27 (t, 2H) . 44 ΕΡ2268628Β1 c) 2-(di-hidrobenzofuran-5-il) -3- hidroxi -6- acetamido-4H- l-benzopiran-4-ona
Preparado de forma análoga ao exemplo 5d) . Rendimento: 72%; TLC (9/1 Acetato de etilo/Metanol) Rf: 0.68; IV (KBr): 3371, 1671, 1577, 1493 cm-1; 1H-NMR (d6-DMSO) : 10,24 (s largo, t—1 9,3 (s largo, 1H) , 8,40 (d, 1H) , 8,11-7,8 (m, 3H), 7,7 (d, 1H) , 6,94 (d, 1H) ; 4,63 (t, 2H) ; 3,30 (m, 2H) , 2,1 (s, 3H) .
Exemplo 16: cloridrato de 2-(benzo [1,3] dioxol-5-il)-3-hidroxi-6-[(1-iminoetil) amino]-4H-l-benzopiran-4-ona
O
Preparado de forma análoga ao exemplo 5b) começando a partir de 2-(benzo [1,3] dioxol-5-il) -3- hidroxi-6-amino-4H-l-benzo-piran-4-ona. Rendimento: 27%; p.f.: 262,3-262,9°C. TLC (5/2/2 Butanol/Ácido acético/água) Rf: 0,45. Análise
Elem. : Ci8H14N205 .HC1, Teoria: C: 57, 68, H: 4,03, N: 7,47, Encontrado: C: 58,32, H: 4,53, N: 7,17. 1H-NMR (d6-DMS0): 11,65 (s largo, 1H), 9, 82-9, 64 (m, 2H), 8,66 (s largo, 1H) , 8,02-7,73 (m, 5H) ; 7,16 (m, 2H) ; 6,16 (s, 2H) ; 2,5 (s, 3H) . b) 2-(benzo [1,3] dioxol-5-il) -3- hidroxi-6-amino-4H-l-benzopiran-4-ona
Preparado de forma análoga ao exemplo 5c) começando a partir de 2-(benzo [1,3] dioxol-5-il) -3- hidroxi -6- 45 ΕΡ2268628Β1 acetamido-4H-l- benzopiran-4-ona, a purificação do produto do titulo foi alcançada suspendendo o produto bruto em amónia aquosa, lavando com água e secando. Rendimento: 76%; TLC (5/2/2 Butanol/Ácido acético/água) Rf: 0,81; 1H-NMR (d6-DMSO): 9,21 (s largo, 1H), 7,76 (m, 2H), 7,48 (m, 1H), 7,13-6,90 (m, 3H) , 6,14 (s, 2H) ; 5,46 (s, 2H) . c) 2-(benzo [1,3] ioxol-5-il)-3- hidroxi -6- acetamido-4H-l-benzopiran-4-ona
Preparado de forma análoga ao exemplo 5d) . Rendimento: 60%; TLC (9/1 Clorofórmio/Metanol) Rf: 0,15.
Exemplo 17: cloridrato de 2-(benzo [1,3] dioxol-5-il) -3- hidroxi_-6-_[ (l-iminoetil-2-ciclopropil)_amino] -4H-1- benzopiran-4-ona
Preparado de forma análoga ao exemplo 5 começando a partir de cloridrato de 2-(benzo [1,3] dioxol-5-il) -3-benziloxi-6-[(1-iminoetil -2- ciclopropil) amino] -4H-1-benzopiran-4-ona. Rendimento: 20%; TLC (85/25/2/1
Clorofórmio/Metanol/Água/Amónia) Rf: 0,49; Análise Elem.: C20H16N2O5.HCI, Teoria: C: 60,80, H: 4,62, N: 6,75, Encontrado: C: 60,34, H: 4,30, N: 6,44. 1H-NMR (d6-DMSO) : 11,7 (s largo, 1H) , > CO -9, 6 (m, 2H) , 8,7 (s largo, 1H) , 8,0-7,96 (m, 2H) , 7,9 (dd, 1H) ; 7,81 (d, 1H); 7,78 (dd, 1H) , 7,16 (d, 1H) , 6,16 (s, 2H) , 2,57 (m, 2H), 1,26 (m, 1H) , 0, 60 (m, 2H) , 0,44 (m, 2H) . 46 ΕΡ2268628Β1 b) cloridrato de 2-(benzo [1,3] dioxol-5-il) -3- benziloxi-6-[(l-iminoetil-2-ciclopropil) amino] -4H- l-benzopiran-4-ona
Preparado de forma análoga ao exemplo 5b) começando a partir de cloridrato de 2-(benzo [1,3] dioxol-5-il)-3-benziloxi-6-amino -4H- 1-benzopiran- 4-ona. Rendimento: 10%. TLC (85/25/2/1 Clorofórmio/Metanol/água/Amónia) Rf: 0,64. c) cloridrato de 2-(benzo [1,3] dioxol-5-il) -3- benziloxi-6-amino-4H-l-benzopiran-4-ona
Preparado de forma análoga ao exemplo 5c) começando a partir de 2-(benzo [1,3] dioxol-5-il) -3- benziloxi-6-acetamido-4H-l- benzopiran-4-ona, mas a purificação foi realizada suspendendo o produto bruto em amónia aquosa, filtrando e lavando com água e depois com metanol. Rendimento: 60%; TLC (9/1 Clorofórmio/Metanol) Rf: 0,51; 1H- NMR (dg-DMSO) : 7,57 (dd, 1H) , 7,50-7,43 (m, 2H) , 7,37-7,28 (m, 5H) , 7,16-7,04 (m, 3H) , 6,13 (s, 2H) ; 5,53 (s largo, 2H) , 5,05 (s, 2H). d) 2-(benzo[l,3]dioxol-5-il)-3-benziloxi-6-acetamido-4H-l-benzopiran-4-ona
Preparado de forma análoga ao exemplo 5d) começando a partir de 2-(benzo [1,3] dioxol-5-il) -3- hidroxi-6-acetamido-4H-l- benzopiran-4-ona. Rendimento: 85%; TLC (9/1 Clorofórmio/Metanol) Rf: 0,57.
Exemplo 18: 2-(benzo [1,3] dioxol-5-il)-3-hidroxi-6-[(1-imino etil-2-ciclopropilmetil) amino] -4H- l-benzopiran-4-ona 47 ΕΡ2268628Β1 Ο
Preparado de forma análoga ao exemplo 5, começando a partir de 2-(benzo [1,3] dioxol-5-il) -3- benziloxi-6-[(1-iminoetil-2- ciclopropilmetil) amino]-4H-l-benzopiran-4-ona, excepto que a reacção é realizada sem HC1. Rendimento: 25%; TLC (85/25/2/1 Clorofórmio/Metanol/Água/Amónia) Rf: 0,33;
Análise Elem. : C21H18N2O5. HC1, Teoria: C: 65, 93, H: 4,43, N: 7, 69, Encontrado: C: 65,36, H: 4,27, N: 6,83. 1 H-NMR (d6- DMSO) : 7, 85-7,75 (m, 2H), 7, 66 (d, 1H), 7 ,39 (d, 1H) , 7,19 (dd, 1H) , 7,1 (d, 1H) ; 6,14 (d, 2H) ; 1,62 (m, 1H) , 1,98 (m, 2H) , 0,81 (m, 2H) . b) 2-(benzo [1,3] dioxol-5-il) -3- benziloxi-6-[(1-imino-etil -2- ciclopropilmetil) amino] -4H- l-benzopiran-4-ona
Preparado de forma análoga ao exemplo 5.b) começando a partir de 2- (benzo [1,3] dioxol-5-il) -3- benziloxi-6-amino]-4H-l-benzopiran- 4-ona, mas o cloridrato obtido foi tratado com NaOH aquoso, o produto foi extraído com Acetato de etilo, a camada orgânica foi lavada com água, seco, e evaporado para proporcionar o produto do título. Rendimento: 15% TLC (85/25/2/1 Clorofórmio/Metanol/Água/Amónia) Rf: 0,55.
Exemplo 19: cloridrato de 2-(benzo [1,3] dioxol-5-il)-3-hidroxi-6-[(1-iminopropil -3- metoxi) amino] -4H- 1-benzopiran-4-ona 48 ΕΡ2268628Β1
Preparado de forma análoga ao exemplo 5, começando a partir de 2-(benzo [1,3] dioxol-5-il)-3-benziloxi-6-[(1-iminopropil -3- metoxi) amino] -4H- l-benzopiran-4-ona. Rendimento: 40%; p.f.: 188,5-190,0 °C; TLC (85/25/2/1
Clorofórmio/Metanol/Água/ Amónia) Rf: 0,54; Análise Elem. C2oHi8N206*HCl; teoria C: 57,35 H: 4,57 N: 6,69; encontrado C: 56, 34 H: 4,5 N: 6,03 NMR (d6-DMSO) : 11,4 (s largo, 1H) , 9,83 (s largo, 1H) , 9,5 (s largo, 1H) , 8,75 (s largo, 1H) , 8,01-7,87 (m, 4H), 7,75 (dd, 1H); 7,16 (d, 1H); 6,17 (s, 2H), 3,78 (t, 2H), 3,35 (s, 3H) , 2,87 (t, 2H) . b) 2-(benzo[1,3]dioxol-5-il)-3-benziloxi-6-[(l-iminopropil-3-metoxi) amino] -4H- l-benzopiran-4-ona
Preparado de forma análoga ao exemplo 5b) começando a partir de 6-amino -2- (benzo [1,3] dioxol-5-il) -3-benziloxi-4H-cromen- 4-ona e cianeto de 3-metoxipropilo, mas o cloridrato obtido foi tratado com NaOH aquoso, o produto foi extraído com Acetato de etilo, a camada orgânica foi lavada com água, seca, e evaporada para proporcionar o produto do título. Rendimento: 20%. TLC (9/1
Clorofórmio/Metanol) Rf: 0,19.
Exemplo 20: 2-(6-metoxipiridin-3-il)-3-hidroxi-6-[(1- iminoetil) amino] -4H- l-benzopiran-4-ona 49 ΕΡ2268628Β1
Preparado de forma análoga ao exemplo 5, começando a partir de 2-(6-metoxipiridin-3-il) -3- benziloxi-6-[(1- iminoetil) amino]- 4H-l-benzopiran-4-ona excepto que a reacção é realizada sem HC1. Rendimento: 68%; p.f.: 104,5- 106,5°C; TLC (85/25/2/1 Clorofórmio/Metanol/Água/Amónia) Rf 0,38; XH-NMR (dg-DMSO) : 9,01 (d, 1H) , 8,48 (dd, 1H) , 7,65 (m, 1H) , 7,38-7,19 (m, 2H) , 7,04 (m, 1H) ; 6,4 (s largo, 1H) ; 3,95 (s, 3H), 1,93 (s, 3H) . b) 2-(6-metoxipiridin-3-il) -3- benziloxi-6-[(1-iminoetil) amino] -4H- l-benzopiran-4-ona
Preparado de forma análoga ao exemplo 5b) , começando a partir de 2-(6-metoxipiridin-3-il) -3- benziloxi -6- amino-
4H-l-benzopiran- 4-ona, mas o cloridrato obtido foi tratado com NaOH aquoso, o produto foi extraído com acetato de etilo, a camada orgânica foi lavada com água, seca, e evaporada para proporcionar o composto do título. Rendimento: 43%; TLC (85/25/2/1 Clorofórmio/Metanol/Água/Amónia) Rf: 0,69, 1H-NMR (d6-DMSO) : 8,81 (d, 1H) , 8,25 (m, 1H) , 7,63 (m, 1H) , 7,4-7,1 (m, 6H) ; 6,97 (d, 1H) ; 6,39 (m, 1H) ; 5,11 (s, 2H) , 3,94 (s, 3H); 1,99-1,75 (m, 3H). c) 2-(6-metoxipiridin-3-il) -3- benziloxi -6- amino-4H-l- benzopiran-4-ona 50 ΕΡ2268628Β1 A uma suspensão de 2-(6-metoxipiridin-3-il) -3- benziloxi-6-(N-tercbutoxicarbonilamino) -4H- 1-benzopiran- 4-ona (0,067 mol) em DCM (90 ml) foi adicionado ácido trifluoroacético (30 ml). A mistura foi agitada durante 1 hora à temperatura ambiente e concentrado. Foi adicionado NaHC03 aquoso e a mistura foi extraída com acetato de etilo, lavada com água, seca, e concentrada. O sólido foi suspenso em éter etílico, filtrado e seco. Rendimento: 78%; TLC (9/1 Clorofórmio/Metanol) Rf: 0,56. d) 2-(6-metoxipiridin-3-il) -3- benziloxi -6- (N-tercbutoxi- carbonilamino) -4H- l-benzopiran-4-ona
Preparado de forma análoga ao exemplo 5d) , começando a partir de 2-(6-metoxipiridin-3-il) -3- hidroxi -6- (N-terc- butoxicarbonilamino)- 4H- l-benzopiran-4-ona. Rendimento: 74%; TLC (9/1 Clorofórmio/Metanol): Rf 0,89, 1H-NMR (d6-DMSO) : 9,78 (s largo, 1H) , 8,81 (d, 1H) , 8,31 (d, 1H) , 8,25 (dd, 1H) ; 7,79 (dd, 1H) ; 7,68 (d, 1H) ; 7,30 (m, 5H) , 6,97 (d, 1H) ; 5,16 (s, 2H) , 3,94 (s, 3H) , 1,52 (s, 3H) . e) 2-(6-metoxipiridin-3-il) -3- hidroxi -6- (N-tercbutoxi carbonilamino) -4H- l-benzopiran-4-ona
Preparado de forma análoga ao exemplo 5e), (começando a partir de 2-hidroxi-5-amino-N-BOC-acetofenona) excepto que o processo foi realizado sem HC1. Rendimento: 41%; 1H-NMR (d6-DMSO): 9,63 (s largo, 1H), 9,17 (d, 1H), 8,63 (dd, 1H), 8,27 (d, 1H) ; 7,66 (m, 2H) ; 6,95 (d, 1H) ; 3,92 (s, 3H) , 1,51 (s, 3H) . f) 2-hidroxi-5-amino-N-BOC-acetofenona 51 ΕΡ2268628Β1 A uma suspensão de cloridrato de 2-hidroxi-5-amino-acetofenona (0,133 mol) em THF (450 ml), foi adicionada uma solução de NaHC03 (0,332 mol) em água (200ml). Foi adicionado ditercbutil-dicarbonato (0,2 mol) em porções a 0°C e a mistura foi agitada durante 1 hora a 0°C e durante 16 horas à temperatura ambiente. O THF foi evaporado e a mistura foi extraída com acetato de etilo, lavada com água, seca, e concentrada. O sólido obtido foi suspenso em éter de petróleo, filtrado e seco. Rendimento: 90%; TLC (2/1 Éter de petróleo/Acetato de etilo) Rf: 0,63, Análise Elem. Ci3Hi7N04; teoria C: 62,14 H: 6,82 N: 5,57; encontrado C: 61,6 H: 6,91 N: 5,30 1H-NMR (d6-DMS0) : 11,54 (s largo, 1H) , 9,28 (s largo, 1H) , 8,0 (d, 1H), 7,55 (dd, 1H) ; 6,9 (d, 1H) ; 2,59 (s, 3H) ; 1,48 (s, 9H) .
Exemplo 21: cloridrato de 2-(6-hidroxipiridin-3-il)-3-hidroxi -6- [(1-iminoetil) amino]-4H-l-benzopiran-4-ona
O
Preparado de forma análoga ao exemplo 5b) , começando a partir de cloridrato de 2-(6-hidroxipiridin-3-il)-3-hidroxi-6-[(1-iminoetil) amino]- 4H -1- benzopiran-4-ona. Rendimento: 45%; p.f.: 284,5-286,0°C. TLC (5/2/2 Butanol/Ácido acético/Água) Rf: 0,28; Análise Elem. Ci6H13N304*HC1; teoria C: 55,26 H: 4,06 N: 12,08; encontrado C: 54,58 H: 3,79 N: 11,76 ^-NMR (d6-DMSO) : 12,28 (s largo, 1H) , 11,68 (s largo, 1H) , 9,96 (s largo, 1H) , 9,65 (s largo, 1H) , 8,67 (s largo, 1H) , 8,44 (d, 1H) , 8,25 (dd, 1H) , 8,01-7,91 (m, 2H) ; 7,69 (dd, 1H); 6,55 (m, 1H), 2,39 (s, 3H). MS (EI): 312 (M+l). 52 ΕΡ2268628Β1 b) cloridrato de 2-(6-hidroxipiridin-3-il) -3- benziloxi-6- [(1-iminoetil) amino] -4H- l-benzopiran-4-ona A uma suspensão de 2-(6-metoxipiridin-3-il) -3-benziloxi-6-[ (1-iminoetil) amino]-4H-l-benzopiran-4-ona (0,6 g) em etanol (30 ml) foi adicionado HC1 6N (2 ml). A mistura foi agitada sob refluxo durante 30 horas, arrefecida e o cloridrato foi removido por filtração. Rendimento: 40%.
Exemplo 22: cloridrato de 2-[ (4-benziloxi-fenil] -3-hidroxi-6-[(1-iminoetil) amino] -4H -l-benzopiran-4-ona o
Preparado de forma análoga ao exemplo 5b) começando a partir de cloridrato de 2-[(4-benziloxi-fenil] -3- hidroxi-6-[(1-iminoetil) amino]- 4H-l-benzopiran-4-ona. Rendimento:
70%; TLC (80/20/2 Clorofórmio/Metanol/Amónia) Rf: 0,71; MS (EI) 401 (M+l); IV (KBr): 3423, 3288, 3066, 1677, 1600, 1554, 1395, 1184 cm-1; 1H-NMR (d6-DMSO) : 8,29 (d, 2H) , 8,1 (d, 1H) , 7,85 (m, 1H) , 7,69 (m, 1H) , 7,5-7,3 (m, 4H) ; 7,17 (d, 2H) , 5,18 (s, H), 2,46 (s, 3H). b) cloridrato de 2-[ (4-benziloxi-fenil] -3- hidroxi-6-amino-4H-l-benzopiran-4-ona
Preparados de forma análoga à do Exemplo 5b) começando a partir de 2-[ (4-benziloxi-fenil] -3- hidroxi -6- acetamido- 53 ΕΡ2268628Β1 4H-l-benzopiran-4-ona Rendimento: 85%; TLC (9/1 Clorofórmio/ Metanol) Rf: 0,76; Análise Elem. C22Hi7N04*HC1 ; teoria C: 66,75 H: 4,58 N: 3,54; encontrado C: 66,85 H: 4,22 N: 3,45; 1H-NMR (dg-DMSO) : 8,20 (d, 2H) , 7,8 (m, 2H) , 7, 65-7,35 (m, 6H), 7,22 (d, 2H), 5,22 (s, 2H) . c) 2-[(4-benziloxi-fenil]-3-hdroxi -6- acetamido-4H-l-benzopiran-4-ona
Preparado de forma análoga ao exemplo 5d) . Rendimento: 63%; TLC (9/1 Clorofórmio/Metanol) ; 1H-NMR (d6-DMSO) : 10,26 (s largo, 1H) , 9,43 (s largo, 1H) , 8,43 (d, 1H) , 8,20 (d, 2H) , 7,90 (dd, 1H) , 7,72 (d, 1H) , 7,6-7,3 (m, 5H) , 7,22 (d, 2H), 5,20 (s, 2H), 2,10 (s, 3H).
Avaliação Farmacológica dos compostos da invenção
As artrites (OA e RA) são caracterizadas pela destruição progressiva da cartilagem. Foi demonstrado que o agrecano é o principal alvo molecular nesta patologia uma vez que a destruição precoce deste componente de cartilagem desencadeia uma série de eventos que dá origem à perda da funcionalidade articular. A molécula de agrecano consiste em vários domínios funcionais e estruturais, entre eles o domínio globular G1 parece desempenhar um papel crucial, uma vez que o domínio G1 se liga aos polímeros de ácido hialurónico, assegurando uma conjunção apertada entre as duas macromoléculas, proporcionando desse modo um dos principais pontos de cruzamento na arquitectura complexa da cartilagem. Foi demonstrado como a clivagem proteolítica do agrecano entre os domínios globulares G1 e G2, e em particular na ligação específica Glu373-Ala374 pode destruir a consistência da rede de agrecano-ácido hialurónico, e como os fragmentos de 54 ΕΡ2268628Β1 agrecano clivados neste local podem ser detectados nos fluidos sinoviais dos doentes com artrite. Foram identificadas duas enzimas ADAMTS-4 e ADAMTS-5, que pertencem à família ADAMTS (Anner et. al., J. Biol. Chem. 1999, 274, 10, 6594; Tortorella et. al., Science, 1999, 284, 1664) como os parceiros principais na clivagem de agrecano no sítio crucial da ligação Glu373-Ala374 . Consequentemente, a inibição destas enzimas deve proporcionar um benefício terapêutico para doenças tais como: osteoartrite, lesão das articulações, artrite psoriática e artrite reumatóide.
Descobriu-se que vários membros da família ADAMTS, incluindo ADAMTS-4 e ADAMTS-5 são sobre-expressos em linhas de células tumorais e estas enzimas podem estar envolvidas na migração de células do cancro e angiogénese. Consequentemente, a inibição destas enzimas pode prevenir a capacidade invasiva do cancro e progressão tumoral e deve proporcionar o benefício terapêutico para doenças tais como: tumores cerebrais, em particular glioblastoma, cancro do cólon, mieloma múltiplo, cancro da mama, cancro cervical, da próstata e cancro do pulmão. O efeito inibidor da actividade de ADAMTS-4 e ADAMTS-5 exercida pelos compostos de Fórmula (I) e seus sais farmaceuticamente aceitáveis e seus solvatos foi avaliado como descrito abaixo. O ensaio de actividade InviLISA Agrecanase (Invitek GmbH, Berlim) foi utilizado para o rastreio e caracterização de inibidores da agrecanase. O ensaio foi realizado em dois passos, de acordo com Will et. al. (Will H, Dettloff M, Bendzko P, Svenshnikov P, A Quantitative Assay for agrecanase Activity; 2005, Journal of Biomolecular Technlques, 16 (4), 55 ΕΡ2268628Β1 459-472) . Um fragmento recombinante do domínio interglobular de agrecano humano (agrecano-IGD; T331-G458) é primeiro digerido com agrecanase. A clivagem proteolítica do substrato liberta um péptido de agrecano com a sequência N-terminal ARGSVIL (ARGSVIL-peptide) , que foi então quantificada com dois anticorpos monoclonais anti-péptido (módulo de ELISA). Para um cálculo preciso do produto, foram corridas concentrações padrão de ARGSVIL-péptido em paralelo.
Em detalhe: 1) Proteólise de agrecano-IGD por agrecanase. Agrecano-IGD foi incubado com agrecanase 1 recombinante humana convencional (ADAMTS-4 aminoácidos F213-A579 com marcador C-terminal) ou agrecanase 2 recombinante humana convencional (ADAMTS-5 aminoácidos S262_G625 com marcador C-terminal) na ausência (actividade enzimática total) ou presença (actividade enzimática modulada) dos inibidores a serem testados. As enzimas foram pré-incubadas com os inibidores ou a concentração apropriada de diluente como controlo (DMSO 0,25% concentração final na proteólise), a 4°C durante 30 min antes de ensaiar a sua actividade. Foram adicionados cinco microlitros de mistura enzima-inibidor ao substrato (concentração final 0,1 μΜ) num volume total de 100 pL e incubadas durante 15 minutos a 37°C. A reacção foi terminada com tampão contendo EDTA. Os inibidores foram testados à concentração final a 10 μΜ e compostos que alcançam um efeito inibidor >50% foram avaliados para o cálculo de IC50, num intervalo que se estende geralmente desde 0,1 até 10 μΜ de concentração final. 2) ELISA do péptido Agrecano. Péptido ARGSVIL convencional, a digestão proteolítica de Agrecano-IGD com agrecanases 56 ΕΡ2268628Β1 convencionais e amostras de teste foram incubados em poços de microtitulação pré-revestida com anticorpo anti-ARGSVIL-neoepitopo. 0 péptido ARGSVIL liga-se ao anticorpo revestido, enquanto outros componentes são removidos por lavagem e aspiração. 0 péptido ARGSVIL ligado foi detectado com um segundo anticorpo marcado com peroxidase. Qualquer excesso do conjugado foi removido por lavagem e aspiração. A quantidade de peroxidase ligada aos diferentes poços foi determinada nas reacções com substrato de peroxidase TMB. As reacções são paradas através da adição de solução de ácido sulfúrico e a absorvência é lida a 450 nm num espectrofotómetro de placas de microtitulação. A actividade inibidora das agrecanases de exemplos representativos de compostos de Fórmula (1) é apresentada na Tabela 1.
Tabela 1
Exemplo ADAMTS-4% de inibição ADAMTS-5% de inibição ou IC50 (μΜ) ou IC50 (μΜ) 1 10% 30% 2 30% 30% 3 40% 10 μΜ 4 40% 10% 5 30% 0,87 μΜ 6 1,61 μΜ 0,20 μΜ 7 31% 2,4 μΜ 8 10 μΜ 10 μΜ 9 20% 11,5 μΜ 10 0,61 μΜ 3, 5 μΜ 11 30% 40% 12 2,7 μΜ 1,12 μΜ 57 ΕΡ2268628Β1 13 0% 2, 8 μΜ 14 0% 10 μΜ 15 10% 15 μΜ 16 32% 5 μΜ 17 20% 8 μΜ 18 0% 4,3 μΜ 19 0% 8 μΜ 20 0% 2,2 μΜ 21 10 μΜ 20% 22 10 μΜ 34% A artrite (OA e RA) , além de conduzir à perda da função de articulações está associada ao aumento da dor crónica durante a progressão da doença. Muito embora a artrite não seja a única patologia que pode dar origem à dor crónica, é muito comum, e bastante representativa deste tipo de dor. A dor crónica pode ser dividida em dor inflamatória, um tipo de dor mais relacionado com a lesão de tecido periférico/inflamação, e dor neuropática. A dor neuropática refere-se clinicamente ao grupo de síndromes da dor crónica. As condições de dor neuropática são a consequência de várias doenças, por exemplo diabetes, cancro, amputações, esclerose múltipla. De forma a identificar agentes eficazes para a gestão clinica da dor, foram realizadas várias abordagens farmacológicas alternadas na última década, por exemplo inibidores de COX-2, apresentaram um boa eficácia no tratamento da dor inflamatória, mas não tinham eficácia no tratamento de dor neuropática, adicionalmente aos inibidores de COX-2 foram relatados efeitos colaterais indesejáveis que constituem uma ameaça para a vida.
Independentemente após as suas propriedades de inibição de agrecanases, os compostos de Fórmula (I) demonstraram ser 58 ΕΡ2268628Β1 analgésicos potentes em vários modelos de dor inflamatória, crónica e neuropática.
Consequentemente, os compostos da invenção são úteis para o tratamento de dor aguda e crónica, incluindo, mas não limitado a: dor do pós operatório, dor muscular, dor resultante de várias formas de trauma, assim como dor crónica, dor neuropática, dor de cancro, dor provocada por artrite e dor visceral.
Os compostos da invenção não são eficazes na inibição de enzimas de cicloxigenase (COX-1 e COX-2), uma vez que foi demonstrado que não são eficazes até à concentração de IO-5 M, em teste convencional in vitro quer para a inibição da enzima COX-1 ou COX-2. A eficácia dos compostos de Fórmula (I) para o tratamento de dor inflamatória e dor neuropática foi determinada utilizando os seguintes modelos animais in vivo. A injecção interplantar de hiperalgesia mecânica induzida por Zymosan foi utilizada como um modelo de dor inflamatória (Meller, Neuropharmacology, 1994, 33, 1471-1478). Neste modelo, tipicamente um rato macho Sprague-Dawley ou Wistar (200-250 g) recebe uma injecção interplantar de 3 mg/100 μΐ de zymosan numa pata da frente. Ocorre uma inflamação nesta para da frente. Os fármacos são administrados oralmente para avaliação da eficácia, 30 min. Antes da lesão inflamatória. A hiperalgesia induzida por administração de zymosan foi avaliada utilizando o método de Randall-Selitto (Arch. Int. Pharmacodyn., 1957, 111, 409). A quantificação do efeito analgésico é conseguida por um analgesímetro, que consiste em aplicar à pata inflamada um 59 ΕΡ2268628Β1 peso crescente (de 130-140 g até 500 g) . A diferença no limiar de dor mecânica entre o valor basal (geralmente 230-250 g) e o tolerado pelos animais tratados com o fármaco, determinado 4 horas após a exposição inflamatória, é definido como hiperalgesia mecânica. A hiperalgesia mecânica é expressa para os compostos da invenção como ED50, que é a dose dos compostos administrados capazes de aumentar o limiar da dor em 50% em comparação com o grupo de animais de controlo. A correspondente ED10o, representando a dose capaz de redução em 100% do limiar de dor, pode ser calculada para os casos em que existe uma resposta linear da relação dose-resposta. Para cada composto de teste, foram utilizadas pelo menos três doses, com 8 animais por grupo. Os compostos da invenção foram testados com 10, 20 e 40 mg/Kg. O desempenho dos compostos de Fórmula (I) representativos, no teste acima descrito, são resumidos na Tabela 2, em que a actividade dos compostos da invenção é comparada com o desempenho no mesmo teste de padrões bem conhecidos. os compostos da invenção representativos demonstraram eficácia superior ou comparável com a dos padrões. Adicionalmente, os compostos da invenção não apresentaram efeitos colaterais ulcerativos comparáveis aos apresentados por Nimesulide, mesmo nas doses superiores testadas.
Tabela 2:
Composto ED50 ED100 4 h mg/kg ; IP OS Exemplo 1 7,9 19 Exemplo 2 6,5 18 60 ΕΡ2268628Β1
Exemplo 3 12,0 24 Exemplo 4 12,0 35 Celecoxib 9,0 NC Tramadol 25,7 NC Nimesulide 5,0 NC NE: Não Calculável A actividade analgésica dos compostos de Fórmula (I) pode ser ainda avaliada num modelo animal de dor como o induzido por injecção intraplantar de capsaicina. A actividade analgésica dos compostos de Fórmula (I) pode ser ainda avaliada num modelo animal de dor crónica inflamatória. Uma vez clinicamente, a dor inflamatória é mais frequentemente associada com estados crónicos tal como artrite e cancro, em que qualquer inflamação ou alteração neuronal plástica no sistema nervoso periférico e central deve ter ocorrido ao longo do tempo, paradigmas animais crónicos em que o insulto inflamatório teve tempo para induzir alterações centralmente mediadas, podem resultar mais preditivas. Recentemente, foi mostrado como a utilização de Adjuvante Completo de Freund (CFA; Mycobacterium tuberculosis) como agente desencadeador para a resposta inflamatória em conjunto com a utilização de um protocolo apropriado pode dar origem a um modelo mais adequado. A inflamação induzida por CFA tem sido utilizada extensivamente em estudos de resposta a dor comportamental (K. Walker, Mol Med Today, 1999, 5,319-321) uma vez que foi considerado também adequado para o estudo do envolvimento de plasticidade neuronal na dor crónica (R. Sharif Naeini, Eur. J.
Neuroscience, 2005, 22, 8, 2005-2015). As experiências são realizadas como descrito na literatura (C.J. Woolf, Br. J. of Pharmacology, 1997, 121, 417-424); 8 ratos foram utilizados 61 ΕΡ2268628Β1 para cada grupo, cada produto foi testado em três doses (3, 10, 30 mg /kg), os produtos foram administrados i.p., 24 horas após a exposição interplantar, e a actividade analgésica foi medida com inicio a partir das 24 horas a após a exposição.
Na Tabela 3, resultados obtidos neste modelo CFA, para compostos de Fórmula (I) representativos são listados em comparação com Piroxicam, um padrão reconhecido. O efeito analgésico foi avaliado utilizando o mesmo equipamento como anteriormente descrito para o modelo Randall-Selitto, os resultados são reportados como o efeito de percentagem máxima (MPE) que representa a diferença (%) no limiar da dor entre os animais tratados com o fármaco e os controlos que receberam apenas o veiculo (redução do efeito nociceptivo, devido a carga na pata com o aumento de peso, em comparação com os controlos que receberam o tratamento com CFA) . A protecção a 100% significa que o animal tratado com o composto e CFA pode tolerar o mesmo estímulo (peso) que o animal controlo que não recebeu tratamento com CFA. O MPE superior a 100% significa que o animal tratado com o composto e CFA podem tolerar um estímulo (peso) superior ao dos animais de controlo, que não recebeu tratamento com CFA (hipoalgesia) . A partir dos dados de MPE à 0,5 h, as doses que produziram uma protecção de 50% (ED50) e 100% (ED100) foram calculadas.
Tabela 3: CFA
Composto Dose MPE MPE MPE MPE MPE ED50 ED10o 0,5 hrs mg/Kg; 0,5 h 1,5 h 3 h 6 h 24 h mg/kg; IP IP 3 30 50 40 NE NE 62 ΕΡ2268628Β1
Exemplo 1 10 30 62 261 39 190 NE 37 NE NE NE NE 4,86 8,06 3 91 87 32 NE NE Exemplo 2 10 193 105 42 43 38 1,56 3,15 30 254 190 146 89 45 3 25 40 NE NE NE Piroxicam 10 46 73 62 NE NE 7, 65 34,33 30 102 111 54 24 38 NE: Não Eficaz
Os compostos da invenção demonstraram também neste teste um efeito analgésico pronunciado, nas doses de 10 e 30 mg/Kg, sendo a maior dose caracterizada com um efeito hipoalgésico notável. Neste intervalo de dose, os compostos representativos são muito mais eficazes do que Piroxicam, o padrão de referência. A neuropatia diabética dolorosa é uma das complicações mais comuns da diabetes dependente de insulina no homem; em particular, a diabetes pode ser associada com dor neuropática que não consegue ser tratada por analgésicos clássicos. A diabetes induzida por estreptozotocina (STZ) no rato foi crescentemente utilizada como um modelo de neuropatia diabética dolorosa para avaliar as eficácias dos potenciais agentes analgésicos (C. Courteix, Pain 1993, 53, 81-8). Um composto da invenção representativo foi testado quanto à eficácia na redução de hiperalgesia mecânica associada com diabetes induzida por STZ no rato, de acordo com o modelo experimental como descrito na literatura. A diabetes foi produzida com a injecção de uma única dose (75 mg/Kg i.p.) de STZ. Nas quatro semanas seguintes após a indução de diabetes, os sintomas clínicos (peso, temperatura do corpo e da pele, motilidade e hiperglicemia) progressivamente desenvolvidos pelos animais, são estritamente monitorizados. 63 ΕΡ2268628Β1
Após quatro semanas, as classificações obtidas em ratos diabéticos para vários estímulos de dor (em particular estímulos mecânicos) foram superiores às dos ratos normais, indicando hiperalgesia. A hiperalgesia induzida por diabetes foi avaliada utilizando o método Randall-Selitto como acima descrito, e quantificada utilizando o analgesímetro. Também neste caso, a diferença entre o valor basal (geralmente 230-250 g) e o tolerado pelo sono pelos animais tratados com o fármaco, é definido como hiperalgesia mecânica. O composto da invenção foi administrado i.p. (solução, Tween 80, 10% em salino em diferentes doses, e a hiperalgesia mecânica foi medida no tempo referido, efeito de percentagem máxima (MPE) que representa a (%) no limiar da dor entre os animais tratados com o fármaco e os controlos que receberam apenas o veículo, em comparação com o peso desenvolvido com os controlos não diabéticos naíves. Uma protecção de 100% significa que os animais diabéticos tratados com o composto podem tolerar o mesmo estímulo (peso) como controlos não diabéticos naíves. O MPE superior a 100% significa que o animal diabético tratado com o composto pode tolerar os estímulos (peso) superiores aos dos animais controlo não diabéticos (hipoalgesia).
Na Tabela 4, o efeito de um composto de Fórmula (I) representativo, no modelo acima descrito de dor neuropática, é comparada com alguns padrões farmacológicos conhecidos utilizados para o tratamento clínico desta patologia. Em particular, a partir dos dados de MPE às 0,5 h, as doses que produziram uma protecção de 50% (ED50) e 100% (ED100) foram calculadas. 64 ΕΡ2268628Β1
Tabela 4: Dor Neuropática
Composto Dose MPE MPE MPE MPE EDso EDioo 0,5 hrs mg/Kg; 0,5 h 1,5 h 3 h 6 h mg/kg; IP IP Exemplo 1 3 74 25 NE NE 10 109 54 NE NE 0,56 10,45 30 113 39 39 31 30 39 41 NE NE Gabapentin 100 55 38 NE NE NC NC 300 47 36 NE NE 3 44 40 NE NE Amitriptilina 10 68 77 NE NE 3,76 NC 30 65 69 23 NE 3 26 53 NE NE Tramadol 10 58 48 27 NE 10,92 NC 30 54 64 23 NE 50 81 60 43 NE NE: não eficaz; NC = cancro não calculável
Exemplo 1, o composto de Fórmula I representativo demonstrou uma elevada eficácia, especialmente nas doses de 10 e 30 mg/kg (i.e. protecção superior a 100%), com valores de ED50 e EDioo inferiores a 10 mg/kg, como nos testes de Zymosan e CFA. Inversamente, todos os padrões testados exibiram uma eficácia muito menor, se existia, neste paradigma. De facto, o valor de ED50 foi calculável apenas para Tramadol e Amitript ilina enquanto o ED10o não foi calculável uma vez que nenhum padrão foi capaz de reverter completamente o efeito tipo hiperalgésico induzido por STZ.
Composições farmacêuticas
Os compostos de Fórmula (I) podem ser utilizados na preparação de uma medicação adequada para o tratamento terapêutico de artrite, cancro e dor. Consequentemente, a composição farmacêutica apropriada de compostos de Fórmula (I), os seus sais farmaceuticamente aceitáveis e seus solvatos podem ser utilizados para o tratamento de doenças que envolvem a destruição de cartilagem articular tais como 65 ΕΡ2268628Β1 lesões traumáticas de articulações, artrite incluindo osteoartrite, artrite reumatóide e artrite psoriatica. A composição farmacêutica apropriada de compostos de Fórmula (I), seus sais farmaceuticamente aceitáveis e seus solvatos podem ser utilizados para o tratamento de doenças tais como: tumores no cérebro, em particular glioblastoma, cólon, mieloma múltiplo, cancro da mama, cervical, da próstata e pulmão.
Adicionalmente, uma composição farmacêutica apropriada de compostos de Fórmula (I), os seus sais farmaceuticamente aceitáveis e seus solvatos podem ser utilizados para tratamento de dor aguda e crónica, incluindo, mas não se limitando a dor inflamatória e hiperalgesia associada e alodinia, dor de osteoartrite, dor do pós-operatório, dor visceral, dor associada com cancro, neuralgia trigeminal, neuralgia herpética aguda e pós herpética, dor neuropática, neuropatia diabética.
Os compostos da presente invenção podem ser administrados oralmente ou parentericamente, numa guantidade farmacológica eficaz. 0 termo utilizado parentericamente inclui aqui intravenosa, intramuscular, subcutânea, intradérmica e intra-articular. Para todos os métodos de tratamento aqui discutidos para os compostos de Fórmula (I), um regime de dosagem oral diária será de um modo preferido de cerca de 0,1 a cerca 20 mg/Kg de peso total do corpo. Deve também ser reconhecido por um especialista na técnica que a quantidade óptima e espaçamento das dosagens individuais de um composto de Fórmula (I) serão determinados pela natureza e extensão do estado a ser tratado. 66 ΕΡ2268628Β1
Para utilizar um composto de Fórmula (I) em terapia, este será normalmente formulados numa forma de dosagem de acordo com métodos convencionais de farmácia e directivas correntes e boas práticas de laboratório e de preparação relevantes. A via preferida administração para os compostos desta invenção é oral. Os compostos de Fórmula (I) podem ser formulados numa vasta variedade de formas de dosagem oral, tal como cápsulas, comprimidos, pílulas, pós e grânulos dispersáveis. Os veículos adequados podem ser uma ou mais substâncias que podem também actuar como diluentes, agentes aromatizantes, agentes solubilizante, lubrificantes, de suspensão, ligantes.
Os veículos adequados incluem mas não são limitados a carbonato de magnésio, estearato de magnésio, talco, lactose, pectina, dextrina, amido, metilcelulose, carboximetilcelulose de sódio, manteiga de cacau e semelhantes. As técnicas utilizadas para preparar formulações orais são mistura convencional, granulação e compressão ou enchimento de cápsulas. Outras formas adequadas para administração oral incluir emulsões, xaropes e soluções aquosas. As emulsões podem ser preparadas utilizando agentes de emulsificação por exemplo lecitina, propilenoglicol ou monooleato de sorbitano. As soluções aquosas podem ser preparadas dissolvendo o componente activo em água e adicionando corantes, aromas, agentes de estabilização adequados.
Os compostos da presente invenção podem ser formulados para administração parentérica (e.g., por injecção ou por infusão contínua) como uma composição com veículos adequados incluindo veículos soluções aquosas (i.e.: salino, dextrose) 67 ΕΡ2268628Β1 ΕΡ2268628Β1 ser em ou e/ou emulsões oleosas. 0 produto fármaco pode apresentado em formas de dose unitária, por exemplo ampolas ou seringas pré-preenchidas.
Lisboa, 21 de Junho de 2012 68

Claims (15)

  1. ΕΡ2268628Β1 REIVINDICAÇÕES 1. Compostos de Fórmula (I):
    em que: - X é seleccionado independentemente entre um grupo (-CH-) ou um átomo de azoto (-N-); - Y é seleccionado independentemente de um átomo de hidrogénio (-H), um grupo hidroxilo (-0H), um grupo alcoxilo (-0R), em que R é um Cadeia de alquilo C1-C4 linear ou ramificada, ou um grupo -OCH2OCH3, ou um grupo -0-CH2C00H, ou um grupo -0-CH2C00NH2, ou um grupo -0-CH2-C00R, ou um grupo alquilo (-R) , em que R é como definido acima; - Ri e R2 são independentemente substituintes nas posições orto, meta e para do anel fenilo ou são independentemente substituintes das posições: -2, -4, -5 e -6 do anel de piridina; substituintes Rx e R2 são independentemente seleccionados a partir de: hidrogénio (-H), flúor (-F) , cloro (-C1), bromo (-Br) , cadeia alquilo C1-C4 linear ou ramificada (-R) , trifluorometilo (-CF3) , ciano (-CN), metanossulfonilo (-S02CH3) , metanossulfonamido (-NHS02CH3) , sulfonamido ( —S02NH2) , hidroxilo (-0H) , alcoxilo (-0R) , em que R 1 ΕΡ2268628Β1 é como definido acima, trifluorometoxilo (-0CF3) , benziloxilo (-OCH2Ph) ; - Ri pode ser um grupo heterocíclico penta-atómico de um modo preferido seleccionados a partir de: 1H-1-imidazolilo, ΙΗ-2-metil-l-imidazolilo, ΙΗ-4-metil-l-imidazolilo, ΙΗ-5-metil-l-imidazolilo, imidazol-2-ilo, l-metil-imidazol-2-ilo, oxazol-2-ilo, ou um grupo metil-lH-imidazol-l-il (-CH2-lH-imidazol-lil), quando o grupo Ri é um heterociclo penta-atómico como acima definido, pode ser na posição -3 ou -4 do fenilo, ou na posição -2 e -6 da unidade de piridina, R2 é como definido acima; - quando os substituintes Ri e R2 estão na posição -3 e -4 do fenilo, estes podem opcionalmente formar um anel heterocíclico de 5 ou 6 membros condensado com a unidade arilo, sendo o referido anel, de um modo preferido, um dioxolano, um furano, um 2,3-di-hidrofurano ou um 1H-3,4-tetra-hidropirano; nestes casos, o grupo aromático na posição -2 do núcleo 4H-1-benz será respectivamente um grupo 1,3-benzodiozol-5-ilo, um benzofuran-5-il- ou grupo benzofuran-6-ilo, um 2,3-di-hidrobenzofuran-5-ilo ou grupo 2,3-di-hidrobenzofuran-6-ilo, ou um grupo 2,3-di-hidro-l,4-benzodioxin-6-ilo; - R3 é na posição -5, -7 ou -8 do núcleo de 4H-1-benzopiran-4-ona, é seleccionado a partir de: hidrogénio (-H), flúor (-F), uma cadeia alquilo C1-C4 linear ou ramificada(-R), hidroxilo (-0H) metoxilo (-OCH3) , trifluorometoxilo (-OCF3) , carboxilo (-COOH), carboalcoxilo (-COOR), carboxamido (-CONH2) , 2 ΕΡ2268628Β1 carboximetilo (-CH2COOH), carboalcoximetilo (- CH2COOR) , carboxamidometilo (-CH2CONH2) , dimetilaminometilo (-CH2NMe2) , em que R é como definido acima; - o grupo amidino: R4-C(=NH)-NH-, é na posição -6 do núcleo do 4H-l-benzopiran-4-ona, R4 é seleccionado independentemente de um ciclopropilo (-C3H5) , um ciclopropilmetilo (-CH2C3H5), uma cadeia alquilo C4-C4 linear ou ramificada (-R), opcionalmente substituída com um grupo hidroxilo (-0H), um grupo metoxilo (-0CH3) , um grupo etoxilo (-OC2H5) ou um grupo dimetilamino (-NMe2) , um fenilo ou um fenilo substituído, em que para o fenilo substituído pretende-se um fenilo substituído com pelo menos um dos seguintes grupos: flúor (-F), cloro (-C1), bromo (-Br), metoxilo (-OCH3) e 3,4-metilenodioxilo (-0-CH2-0-) ; adicionalmente, R4 pode ser um fenilo ou um fenilo substituído como definido acima ou um heterociclo tal como -2-furilo, 3-furilo, 2-tienilo, 3-tienilo, 2-oxazolilo, 3-oxazolilo, 2-tiazolilo, 3-tiazolilo; e todos os possíveis tautómeros de compostos de Fórmula (I), seus sais farmaceuticamente aceitáveis, ou uma forma solvato ou hidrato dos referidos sais.
  2. 2. Compostos de Fórmula (I) de acordo com a reivindicação 1, em que o substituinte X é um átomo de carbono e Y é seleccionado independentemente de um grupo hidroxilo (-0H), um grupo alcoxilo (-0R) , um grupo -0CH20CH3, ou um grupo -0-CH2C00H, ou um grupo -0-CH2C00NH2, ou um grupo -0-CH2-C00R, em que R, R2, R3 e R4 são como definido na reivindicação 1. 3 ΕΡ2268628Β1
  3. 3. Compostos de Fórmula (I) de acordo com a reivindicação 1, em que o substituinte X é um grupo (-CH-) , Y é como definido na reivindicação 1 e Ri e R2 são independentemente substituintes nas posições orto, meta e para do anel fenilo e independentemente seleccionados a partir de: hidrogénio (-H), flúor (-F), cloro (-C1), bromo (-Br), cadeias de alquilo Ci-C4 linear ou ramificadas, trifluorometilo (-CF3) , ciano (-CN), metanossulfonilo (-S02CH3) , metanossulfonamido (- NHS02CH3) , sulfonamido (-S02 (NH2) , hidroxilo (-0H) , alcoxilo (-0R), trifluorometoxilo (-OCF3) , benziloxilo (-OCH2Ph) , em que R, R3 e R4 são como definido na reivindicação 1.
  4. 4. Compostos de Fórmula (I) de acordo com a reivindicação 1, em que o substituinte X é um grupo (-CH-) , Y é como definido na reivindicação 1, e Ri pode ser um grupo heterociclico penta-atómico, de um modo preferido, seleccionados a partir de: ΙΗ-1-imidazolilo, ΙΗ-2-metil-1-imidazolilo, ΙΗ-4-metil-l-imidazolilo, ΙΗ-5-metil-1- imidazolilo, imidazol-2-ilo, l-metil-imidazol-2-ilo, oxazol-2-ilo, ou um grupo -CH2-lH-imidazol-lilo, quando o grupo Ri é um heterociclo penta-atómico como aqui definido, pode ser na posição -3 e -4 de fenilo; em que R, R2, R3 e R4 são como definido na reivindicação 1.
  5. 5. Compostos de Fórmula (I) de acordo com a reivindicação 1 nos quais o substituinte X é um grupo (-CH-) , Y é como definido na reivindicação 1 e os substituintes Ri e R2 estão na posição -3 e -4 do fenilo, formando um anel heterociclico de 5 ou 6 membros condensado com uma unidade arilo; sendo o referido anel um dioxolano, um furano, um 2,3-di-hidrofurano ou uma unidade 1H-3,4-tetra-hidropirano; nestes casos, o grupo aromático na posição -2 do núcleo 4H-l-benzopirano será 4 ΕΡ2268628Β1 respectivamente um grupo 1,3-benzodiozol-5-ilo, um grupo benzofuran-5-il- ou benzofuran-6-ilo, um grupo 2,3-di-hidrobenzofuran-5-ilo ou 2,3- di-hidrobenzofuran-6-ilo, um grupo 2,3-di-hidro-l, 4-benzodioxin-6-ilo, em que R, R3 e R4 são como definido na reivindicação 1.
  6. 6. Compostos de Fórmula (I) de acordo com a reivindicação 1 em que o substituinte X é um átomo de azoto, Y é como definido na reivindicação 1, e Ri pode ser um grupo heterocíclico penta-atómico tal como: ΙΗ-1-imidazolilo, 1H-2-metil-l-imidazolilo, 1H-4- methyt-l-imidazolilo, ΙΗ-5-metil-1-imidazolilo, imidazol-2-ilo, l-metil-imidazol-2-ilo, oxazol-2-ilo, ou um grupo metil-lH-imidazol-l-ilo (-CH2-1H-imidazol-lilo); quando o grupo Ri é um heterociclo penta-atómico como aqui definido, pode ser na posição -6 do anel de piridina, em que R, R2, R3 e R4 são como definido na reivindicação 1.
  7. 7. Compostos de Fórmula (I) de acordo com a reivindicação 1 nos quais o substituinte X é como definido na reivindicação 1 e o grupo amidino: R4-C(=NH)-NH-, é na posição -6 do núcleo do 4H-l-benzopiran-4-ona, em que R4 é seleccionado independentemente a partir de um ciclopropilo (-C3H5) , um ciclopropilmetilo (-CH2C3H5) , uma cadeia de alquilo C4-C4 linear ou ramificada, opcionalmente substituída com um grupo hidroxilo (-0H), um grupo metoxilo (-OCH3) , um grupo etoxilo (-OC2H5) ou um grupo dimetilamino (-NMe2) , um fenilo ou um fenilo substituído, em que para 0 fenilo substituído se pretende um fenilo substituído com pelo menos um dos seguintes grupos: flúor (-F), cloro (-C1), bromo (-Br), metoxilo (-OCH3) e 3, 4-metilendioxilo (-0-CH2-0-) , em que R, Ri, R2, R3 e Y são como definido na reivindicação 1. 5 ΕΡ2268628Β1
  8. 8. Compostos de acordo com qualquer das reivindicações 1-7 na forma de sais farmaceuticamente aceitáveis seleccionados a partir de cloridrato, bromidrato, hidrogenossulfato, sulfato, maleato, fumarato, oxalato, metanossulfonato, succinato, ascorbato, tartarato.
  9. 9. Utilização de compostos de Fórmula (I) de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 8, para a preparação de um medicamento para o tratamento farmacológico de lesões traumáticas de articulações, artrite incluindo osteoartrite, artrite reumatóide e artrite psoríatica.
  10. 10. Utilização de compostos de Fórmula (I) de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 8, para a preparação de um medicamento para o tratamento farmacológico de dor aguda e crónica, tal como: dor na osteoartrite e artrite reumatóide, dor do pós operatório, dor visceral, dor associada com cancro, neuralgia trigeminal, neuralgia herpética aguda e pós herpética, dor aguda e crónica da neuropatia diabética, dor do pós operatório, dor muscular, dor resultante de várias formas de trauma, dor.
  11. 11. Composições farmacêuticas (produtos fármacos) compreendendo, como substância activa (substância fármaco), pelo menos um dos compostos de acordo com qualquer das reivindicações de 1 a 8, e compreendendo ainda ingredientes farmacêuticos inactivos seleccionados a partir do grupo que consiste em veículos, ligantes, aromatizantes, adoçantes, desagregados, conservantes, humectantes e misturas destes, ou ingredientes que facilitam a absorção transférrica ou Tran mucosa ou que permite que a libertação controlada da substância activa ao longo do tempo. 6 ΕΡ2268628Β1
  12. 12. Composições farmacêuticas (produtos fármacos) compreendendo, como substância activa (substância fármaco), pelo menos um dos compostos de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 8, para utilização parentérica (intravenosa, intramuscular, subcutânea, intradérmica, intra-articular), e compreendendo ainda ingredientes farmacêuticos inactivos seleccionados a partir do grupo que consiste em veículos incluindo solução de veículos aquosos (i.e.: salino, dextrose) e/ou emulsões de óleo.
  13. 13. Processo para a preparação de um composto de Fórmula (I) , de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 8, a partir de um composto de Fórmula (II):
    em que em compostos de Fórmula (II) os substituintes X, Ri, R2, R3, e R4 possuem os mesmos significados como previamente reportado para compostos de Fórmula (I) e o substituinte W em adição aos significados previamente reportados para Y em compostos de Fórmula (I) podem ser um grupo benziloxilo ou um grupo sililoxilo; o processo para transformação de um composto de Fórmula (II) em que W é um grupo benziloxilo ou um grupo sililoxilo num composto de Fórmula (I) em que Y é hidroxilo, é efectuado por hidrogenação catalítica quando W é benziloxilo ou por fluoreto de tetrabutilamónio ou tratamento aquoso acídico quando W é um grupo sililoxilo; um composto de Fórmula (II) em que R 3 é 7 ΕΡ2268628Β1 metoxilo (-OCH3) , carboalcoxilo (-COOR, carboalcoximetilo (-CH2COOR), sendo R como definido acima, pode ser convertido num composto de Fórmula (I) em que R3 é hidroxilo (-0H) carboxilo (-COOH), carboxamido (-CONH2), carboximetilo (-CH2C00H) , carboxamidometilo (-CH2CONH2) , dimetilaminometilo (- CH2NMe2) ; tal como uma transformação que é conseguida através de tratamento do composto de Fórmula (II) com ácido clorídrico aquoso ou ácido bromídrico, ou tribrometo de alumínio ou tribrometo de boro quando R3 é metoxilo (-OCH3) para converter R3 em hidroxilo (-0H) ou por tratamento com hidróxido de sódio ou de potássio quando R3 é carboalcoxilo (-COOR), carboalcoximetilo (-CH2COOR) e é convertido num composto de Fórmula (I) em que R3 é carboxilo (-COOH), carboximetilo (-CH2COOH); opcionalmente, o carboxilato pode ser convertido nas correspondentes amidas (-CONH2) ou derivados de carboxamidometil (-CH2CONH2) por acilcloreto ou activação mista de anidrido e reacção com amónia; opcionalmente, o carboxilato pode ser convertido no aldeído correspondente através da redução de hidreto de boro e sódio de um anidrido misto seguido por aminação redutora com dimetilamina e hidreto de sódio e cianoboro para um composto de Fórmula (I) em que R3 é dimetilaminometilo (-CH2NMe2) ; um composto de Fórmula (II) em que W é um grupo alcoxilo (-0R) , um grupo -OCH2OCH3, ou um -0-CH2-COOR em que R é como definido acima, pode ser convertido num composto de Fórmula (I) em que Y é um grupo hidroxilo (-0H), um grupo -OCH2COOH, ou um grupo -0-CH2COONH2 utilizando os mesmos métodos acima listados para conversões do grupo R3. 8 ΕΡ2268628Β1
  14. 14. Processo para a preparação de um composto de Fórmula (II), de acordo com a reivindicação 13, a partir de um composto de Fórmula (III): ΕΡ2268628Β1
    em que nos compostos de Fórmula (III) os substituintes X, Ri, R2, R3, R4, e W possuem os mesmos significados como previamente reportado para compostos de Fórmula (II) ; compreendendo o processo o tratamento de um composto de Fórmula (III) com o cianeto apropriado (R4CN) e um catalisador apropriado, num solvente inerte adequado, de um modo preferido dioxano, tetra-hidrofurano (THF), diglima, hexano ou tolueno, ou utilizando o cianeto como solvente; sendo o catalisador apropriado, de um modo preferido, seleccionados a partir de: trimetilaluminio em solventes de hidrocarboneto, de um modo preferido, seleccionados a partir de hexano, tolueno, ácido clorídrico seco e ácido metanossulfónico; alternativamente, a conversão de um composto de Fórmula (III) num composto de Fórmula (II) pode ser obtido pelo tratamento com um imidato de Fórmula R4C(=N)-OR, em que R4 é como definido para os compostos de Fórmula (I) e R é etilo ou metilo; o processo é normalmente efectuado num solvente adequado, de um modo preferido metanol ou etanol a uma temperatura que pode variar entre 25 "C até 9 ΕΡ2268628Β1 à temperatura de refluxo, na presença de uma base orgânica tal como trietilamina ou N-metilmorfolina.
  15. 15. Processo para a preparação de um composto de Fórmula (I), de acordo com qualquer das reivindicações de 1 a 8, a partir de um composto de Fórmula (III) :
    em que nos compostos de Fórmula (I) os substituintes Y, Ri, r2, R3, R4, são de acordo com a reivindicação 1 e W tem os mesmos significados previamente reportados para compostos de Fórmula (II); um composto de Fórmula (I) pode ser directamente obtidos a partir de um composto de Fórmula (III) utilizando métodos de acordo com a reivindicação 14, com a condição de que Y, W, Ri, R2, R3, R4 são apropriados com o método utilizados para a conversão directa de um composto de Fórmula (III) num composto de Fórmula (I). Lisboa, 21 de Junho de 2012 10
PT08717486T 2008-03-06 2008-03-06 Derivados de 2-aril e de 2-heteroaril 4h-1-benzopiran-4-ona- 6-amidino para o tratamento de artrite, cancro e dores relacionadas PT2268628E (pt)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/EP2008/052739 WO2009109230A1 (en) 2008-03-06 2008-03-06 2-aryl and 2 -heteroaryl 4h-1-benzopyran-4-one-6-amidino derivatives for the treatment of arthritis, cancer and related pain

Publications (1)

Publication Number Publication Date
PT2268628E true PT2268628E (pt) 2012-06-28

Family

ID=39884774

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PT08717486T PT2268628E (pt) 2008-03-06 2008-03-06 Derivados de 2-aril e de 2-heteroaril 4h-1-benzopiran-4-ona- 6-amidino para o tratamento de artrite, cancro e dores relacionadas

Country Status (7)

Country Link
US (1) US8372866B2 (pt)
EP (1) EP2268628B1 (pt)
JP (1) JP2011513342A (pt)
CA (1) CA2715796C (pt)
ES (1) ES2388196T3 (pt)
PT (1) PT2268628E (pt)
WO (1) WO2009109230A1 (pt)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP6122431B2 (ja) * 2011-08-11 2017-04-26 アーマロン バイオ ピーティーワイ リミテッド フラボノイド化合物及びその使用方法
EA028382B1 (ru) * 2012-03-23 2017-11-30 ПиТиСи ТЕРАПЬЮТИКС, ИНК. Соединения для лечения спинальной мышечной атрофии
CN102993109A (zh) * 2012-12-03 2013-03-27 浙江工业大学 一种脒化合物的制备方法
AU2014214325B2 (en) 2013-02-06 2018-06-07 Merck Patent Gmbh Substituted carboxylic acid derivatives as aggrecanase inhibitors for the treatment of osteoarthritis
US10264976B2 (en) * 2014-12-26 2019-04-23 The University Of Akron Biocompatible flavonoid compounds for organelle and cell imaging
CN111388463B (zh) * 2020-04-22 2021-03-16 山东大学 朝藿素c或组合物在制备治疗肺癌制剂中的应用
CN115444840B (zh) * 2022-09-15 2023-08-25 四川大学 一种前药、两性离子水凝胶及其制备方法、应用

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2000012496A1 (en) * 1998-09-01 2000-03-09 Lg Chemical Ltd. Novel cdk inhibitors having flavone structure
WO2002024676A1 (en) * 2000-09-21 2002-03-28 Teva Pharmaceuticals Industries, Ltd. N-disubstituted carbamoyloxy flavones
ITTO20040125A1 (it) 2004-03-01 2004-06-01 Rotta Research Lab Nuove amidine eterocicliche inibitrici la produzione di ossido d'azoto (no) ad attivita' antinfiammatoria ed analgesica

Also Published As

Publication number Publication date
JP2011513342A (ja) 2011-04-28
US20110003861A1 (en) 2011-01-06
US8372866B2 (en) 2013-02-12
EP2268628B1 (en) 2012-05-16
EP2268628A1 (en) 2011-01-05
CA2715796C (en) 2015-04-28
CA2715796A1 (en) 2009-09-11
WO2009109230A1 (en) 2009-09-11
ES2388196T3 (es) 2012-10-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PT2268628E (pt) Derivados de 2-aril e de 2-heteroaril 4h-1-benzopiran-4-ona- 6-amidino para o tratamento de artrite, cancro e dores relacionadas
ES2355068T3 (es) Derivado del ácido triarilcarboxílico.
JP5933746B2 (ja) イミダゾリジンジオン系化合物およびその用途
KR20200105878A (ko) 방향족 비닐 또는 방향족 에틸계 유도체, 그의 제조방법, 중간체, 약물조성물 및 용도
WO2007081978A2 (en) Modulators of hepatocyte growth factor / c-met activity
KR20040007744A (ko) 플라스미노겐 활성화제 억제제 유형-1(ｐａｉ-1)의억제제로서의 치환된 나프틸 인돌 유도체
CN1829506A (zh) 新的香豆素酰胺衍生物及其制法和其药物组合物与用途
WO2008014822A1 (en) 6-1h-imidazo-quinazoline and quinolines derivatives, new potent analgesics and anti-inflammatory agents
CN107445896B (zh) 一种具有抗肿瘤活性的苯基异羟肟酸类化合物及其应用
JPWO2006022375A1 (ja) ２−フェニルチオフェン誘導体
MX2012001276A (es) Derivado de indol o sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
JP5584696B2 (ja) Ｍｍｐ−１３阻害剤として有用なヘテロアリールジアミド化合物
WO2019206120A1 (zh) 甲酰胺类化合物、其制备方法及其应用
CN109293537A (zh) 磺酰胺类化合物及其医药用途
CN102503932A (zh) 一类新型气体信号分子供体物及其制备方法和用途
KR102047816B1 (ko) 염증 및 암 치료에 유용한 비스아릴술폰아미드
KR100820935B1 (ko) 싸이아졸 유도체, 이의 제조 방법 및 이를 포함하는 약학적조성물
He et al. Optimization of potent, selective and orally bioavailable biphenyl scaffold as FABP4 inhibitors for anti-inflammation
KR102330072B1 (ko) 신규한 인디루빈-기반 n-히드록시벤즈아미드, n-히드록시프로펜아미드 및 n-히드록시헵탄아미드 화합물 및 이의 용도
US7968558B2 (en) Amidine derivatives of 2-heteroaryl-quinazolines and quinolines; potent analgesics and anti-inflammatory agents
Zhang et al. Synthesis and biological evaluation of 1-phenyl-tetrahydro-β-carboline-based first dual PRMT5/EGFR inhibitors as potential anticancer agents
KR101182058B1 (ko) 토포아이소머라제 (ｔｏｐｏｉｓｏｍｅｒａｓｅ) Ⅰ및 Ⅱ 활성 억제제로 유용한 신규한 2,4-디페닐-6-아릴 피리딘 계 화합물, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 조성물
CN110283165A (zh) 4-苯氧基喹啉并α-酰氧基酰胺类化合物及其制备方法和用途
KR100622667B1 (ko) 나프틸옥시아세트산 유도체
KR101964810B1 (ko) Hdac 억제제로서 신규한 퀴나졸린-4(3h)-원 기반 n-하이드록시벤즈아미드 또는 n-하이드록시프로펜아미드 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암제 조성물