JP2007252374A - 組換えmvaウイルスおよびその使用 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】MVAゲノム内の天然に存在する欠損部位に挿入された外来遺伝子を含み、発現することが可能な組換えMVAウイルスヒトチロシナーゼ(hTyr)抗原または抗原決定基を含有し、発現することができる組換えMVAウイルスであって、当該hTyr遺伝子がワクシニアウイルス初期/後期プロモーターP7.5の転写制御下にある組換えMVAウイルス。
【選択図】なし
Description
ポックスウイルス科オルトポックスウイルス属の一員であるワクシニアウイルスは、ヒト痘瘡疾患に対する免疫化のための生ワクチンとして使用された。ワクシニアウイルスによる予防接種の世界的な成功により、痘瘡の原因因子である痘瘡ウイルスがついに根絶された(The global eradication of smallpox. Final report of the global commission for the certification of smallpox eradication. History of Public Health, No. 4, Geneva: World Health Organization, 1980)。そのWHOの宣言以来、ポックスウイルス感染症に対してハイリスクの人々(例えば、研究所員)を除き、一般には予防接種は中断されている。
効率的で非常に安全な発現ベクターとして使用しうる組換えMVAウイルスを提供することが本発明の目的である。
したがって、本発明は、とりわけ、以下のものを単独でまたは組み合わせて含んでなる:
MVAゲノム内の天然に存在する欠失部位に挿入された少なくとも1つの外来遺伝子を含有し、その発現能を有する組換えMVAウイルス;
MVAゲノム内の欠失II部位に挿入された少なくとも1つの外来遺伝子を含有し、その発現能を有する、前記組換えMVAウイルス;
該外来遺伝子が、マーカー、治療剤または抗原決定基をコードする、前記組換えMVAウイルス;
該外来遺伝子が、病原性ウイルス、細菌または他の微生物からの、または寄生生物または腫瘍細胞からの抗原決定基をコードする、前記組換えMVAウイルス;
該外来遺伝子が、熱帯熱マラリア原虫(Plasmodium Falciparum)、マイコバクテリア、ヘルペスウイルス、インフルエンザウイルス、肝炎またはヒト免疫不全ウイルスからの抗原決定基をコードする、前記組換えMVAウイルス;
該抗原決定基がHIV nefまたはヒトチロシナーゼである、前記組換えMVAウイルス;
MVA-LAInefまたはMVA-hTYRである、前記組換えMVAウイルス;
該外来遺伝子がT7 RNAポリメラーゼをコードする、前記組換えMVAウイルス;
MVA-T7 polである、前記組換えMVAウイルス;
該外来遺伝子が、ワクシニアウイルス初期/後期プロモーターP7.5の転写制御下にある、前記組換えMVAウイルス;
ヒト細胞中で複製可能なウイルスを実質的に含まない、前記組換えMVAウイルス;
T7 RNAポリメラーゼプロモーターの制御下でのDNA配列の転写のための、前記組換えMVAウイルスの使用;
前記のいずれかの組換えMVAウイルスに感染した真核細胞;
該外来遺伝子がT7 RNAポリメラーゼをコードする、前記組換えMVAウイルスに感染した細胞;
該外来遺伝子がT7 RNAポリメラーゼをコードする前記の組換えMVAウイルスに感染した細胞であって、T7 RNAポリメラーゼプロモーターの転写制御下の1以上の外来遺伝子を保持する1以上の発現ベクターをさらに含有する細胞;
前記外来遺伝子にコードされるポリペプチドの製造のための、前記細胞の使用であって、
a)前記細胞を適当な条件下で培養し、そして
b)前記外来遺伝子にコードされるポリペプチドを単離することを含んでなる使用;
該外来遺伝子がT7 RNAポリメラーゼをコードする前記の組換えMVAウイルスに感染した細胞であって、ウイルス遺伝子を保持する発現ベクターおよび/またはT7 RNAポリメラーゼプロモーターの転写制御下のウイルスベクターのゲノムをコードするウイルスベクターコンストラクトをさらに含有する細胞;
ウイルス粒子の製造のための、前記細胞の使用であって、
a)前記細胞を適当な条件下で培養し、そして
b)該ウイルス粒子を単離することを含んでなる使用;
該外来遺伝子がT7 RNAポリメラーゼをコードする前記の組換えMVAウイルスに感染した細胞であって、
a)標的細胞に感染する能力と、前記レトロウイルスベクターコンストラクトにより保持される1以上の外来遺伝子の標的細胞における発現を指令する能力とを有するレトロウイルスベクターコンストラクトを保持する発現ベクター、および
b)前記レトロウイルスベクターコンストラクトのゲノムがパッケージングされるのに必要なポリペプチドをコードする遺伝子をT7 RNAポリメラーゼプロモーターの転写制御下で保持する1以上の発現ベクターをさらに含有する細胞;
レトロウイルス粒子の製造のための、前記細胞の使用であって、
a)前記細胞を適当な条件下で培養し、そして
b)該レトロウイルス粒子を単離することを含んでなる使用;
生理的に許容される担体中に、該外来遺伝子が抗原決定基をコードする前記組換えMVAウイルスを含有するワクチン;
ワクチンの製造のための、該外来遺伝子が抗原決定基をコードする前記組換えMVAウイルスの使用;
動物(ヒトを含む)生体の免疫化のための、前記ワクチンの使用;
HIV感染若しくはエイズの予防または治療のための、MVA-LAInefを含有する前記ワクチンの使用;
黒色腫の予防または治療のための、MVA-hTYRを含有する前記ワクチンの使用;
該外来遺伝子がT7 RNAポリメラーゼをコードする前記組換えMVAウイルスを生理的に許容される担体中に第1成分として、そしてT7 RNAポリメラーゼプロモーターの転写制御下で抗原決定基を保持するDNA配列を生理的に許容される担体中に第2成分として含んでなり、それらの2成分が一緒にまたは別々に含有されているワクチン;
動物(ヒトを含む)生体の免疫化のための前記ワクチンの使用であって、前記動物(ヒトを含む)生体に、該ワクチンの第1成分および第2成分を同時にまたは一定の時間間隔で同じ接種部位に接種することを含んでなる使用。
宿主範囲が限定されている高度に弱毒化されたワクシニアウイルス株である修飾されたワクシニアウイルスアンカラ(MVA)は、ヒトおよび試験された他のほとんどの哺乳動物細胞系において増殖能を有さない。しかし、ウイルス遺伝子発現は、非許容細胞においては損なわれていないため、本発明の組換えMVAウイルスは、非常に安全で効率的な発現ベクターとして使用することができる。
1つの実施態様では、本発明は、外来抗原(好ましくは、病原体のもの)をコードする遺伝子を含有する組換えMVAワクシニアウイルス、および生理的に許容される形態中にそのようなウイルスを含有するワクチンに関する。本発明はまた、そのような組換えMVAワクシニアウイルスまたはワクチンの製造法、およびそのような病原体が引き起こす感染症の予防のためのこれらのワクチンの使用に関する。
本発明の組換えMVAワクシニアウイルスは、真核細胞における異種ポリペプチドの製造にも使用することができる。これには、該組換えワクシニアウイルスに感染する細胞が必要となる。外来ポリペプチドをコードする遺伝子を該細胞中で発現させ、発現された異種ポリペプチドを単離する。そのような異種ポリペプチドの製造に使用する方法は、当業者に一般に公知である(EP-A-206,920およびEP-A-205,939)。組換えMVAウイルスの助けにより製造されるポリペプチドは、MVAウイルスの特別な特性のため、ヒトおよび動物で薬物として使用するのに一層適したものである。
本発明のさらに別の実施態様では、本発明者らは、ワクシニアウイルス初期/後期プロモーターP7.5の制御下でバクテリオファージT7 RNAポリメラーゼ遺伝子の発現を可能とする組換えMVAウイルスを構築した。発現系としてのMVA-T7pol組換えウイルスの有用性は、T7 RNAポリメラーゼプロモーターの制御下で組換え遺伝子の発現を誘導する一過性トランスフェクションアッセイにおいて既に試験されている。大腸菌(E. coli)クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ(CAT)遺伝子をレポーター遺伝子として使用して、本発明者らは、MVA-T7polが、複製可能なワクシニアウイルスWR株に由来するワクシニア/T7pol組換えウイルスと同等に有効にCAT遺伝子発現を誘導することを見出した。
2)大量のウイルスタンパク質を産生するが、複製可能なウイルスを産生する能力を欠く細胞系である。この細胞系は、パッケージング細胞系として公知であり、該修飾レトロウイルスベクターのパッケージングを可能にする遺伝子(gag、polおよびenvポリペプチドをコードする遺伝子)を保持する1以上のプラスミドでトランスフェクションされた細胞系よりなる。
1.ウイルスの増殖および精製
1.1 MVAウイルスの増殖
MVAウイルスは、初代ニワトリ胚繊維芽細胞(CEF)培養上で長期にわたり連続継代することにより高度に弱毒化された、ワクシニアウイルス株アンカラ(CVA)由来のワクシニウイルスである。MVA株の産生の歴史、特性および使用の一般的な概説は、MayrらによりInfection 3, 6-14 [1975]において公開されている抄録を参照することができる。CEF中での弱毒化により、MVAウイルスは、このニワトリ宿主細胞中では高力価になるまで増殖する。しかしながら、哺乳動物細胞では、MVAは厳しく増殖が制限され、該ウイルスによる典型的なプラーク形成は検出不可能である。したがって、CEF細胞上でMVAウイルスを増殖させた。CEF細胞を調製するために、インキュベートされた鶏卵から11日齢の胚を単離し、肢を取り、胚を細かく刻み、0.25%トリプシンよりなる溶液中に37℃で20分間解離させた。得られた細胞懸濁液を濾過し、Sorvall RC-3B遠心機中2000rpm、室温で5分間遠心することにより細胞を沈降させ、10容量の培地A(MEM Eagle、例えば、Life Technologies GmbH, Eggenstein, Germanyから入手可能なもの)に再懸濁し、Sorvall RC-3B遠心機中2000rpm、室温で5分間遠心することにより再沈降させた。10%ウシ胎児血清(FCS)、ペニシリン(100単位/ml)、ストレプトマイシン(100mg/ml)および2mMグルタミンを含有する培地A中で該細胞ペレットを再構成して、500000細胞/mlを含有する細胞懸濁液を得た。このようにして得たCEF細胞を細胞培養皿上に広げた。それを、37℃のCO2インキュベーター中の培地A中で、所望の細胞密度に応じて1〜2日間成長させ、それを直接またはさらに1細胞継代した後、感染に使用した。初代培養の調製の詳細な説明は、R.I. Freshneyの著書(”Culture of animal cell”, Alan R. Liss Verlag, New York [1983] 第11章, 99頁以下参照)に記載されている。
宿主細胞特異的成分を含まない可能な限り純粋なウイルス調製物を得るために行なった精製工程は、Joklik(Virology 18, 9-18 [1962])により記載されているものと同様であった。−20℃で保存されている粗製ウイルスストックを融解し、PBS(該沈降物の容量の10〜20倍)に1回懸濁し、該懸濁液を前記のとおり遠心した。新たな沈降物を10倍容量のトリス緩衝液1(10mMトリス−HCl、pH9.0)に懸濁し、該懸濁液を超音波(Labsonic L, B. Braun Biotech International, Melsungen Germany;60ワットおよび室温で2×10秒)で短時間処理して、さらに細胞デブリスを分解し、該細胞物質からウイルス粒子を放出させた。該細胞核およびより大きな細胞デブリスを、後続の該懸濁液の短時間遠心分離(DuPont Co.から入手可能なSorvall GSAローターD-6353 Bad Nauheim, FRG;3000rpmおよび10℃で3分)で除去した。前記のとおり、該沈降物をトリス緩衝液1に再懸濁し、超音波処理し、遠心した。遊離ウイルス粒子を含有する集めた上清を合わせ、10mMトリス−HCl(pH9.0)中の36%ショ糖10mlのクッション上に重層し、Beckman SW27/SW28ローター中、13,500rpm、4℃で80分間遠心した。該上清を捨て、ウイルス粒子を含有する沈降物を1mMトリス−HCl(pH9.0)10ml中に取り、短時間の超音波処理(室温で2×10秒、装置は前記のとおり)によりホモジナイズし、さらに精製するために20〜40%ショ糖勾配(1mMトリス−HCl(pH9.0)中のショ糖)に適用した。該勾配をBeckman SW41ローター中、13,000rpm、4℃で50分間遠心した。遠心後、ウイルス粒子を含有する分離したバンドの収穫を、バンドを超える容量を吸引した後にピペッティングすることにより行なった。得られたショ糖溶液を3容量のPBSで希釈し、遠心(Beckman SW27/28、13,500rpm、4℃で60分)により該ウイルス粒子を再沈降させた。該ペレットは、この段階で大部分が純粋なウイルス粒子からなり、それをPBSに再懸濁し、平均1〜5×109IU/mlに対応するウイルス濃度にまで平衡化させた。精製されたウイルスストック溶液を−80℃で保存し、直接使用するか、あるいは後続の実験のためにPBSで希釈した。
均一なストックウイルス調製物を得るために、Anton Mayr博士から得たMVAウイルスを、96ウェル組織培養プレート上で培養されたCEF中で3連続継代する間に限界希釈によりクローニングした。MVAクローンF6を選択し、CEF中で増幅して、本特許出願に記載されている組換えMVAウイルスを得るため、および既に記載されている(Sutter, G.およびMoss, B. [1992] Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89, 10847-10851; Sutter, G., Wyatt, L.. Foley, P., Bennink, J.およびMoss, B. [1994] Vaccine 12, 1032-1040; Hirsch, V., Fuerst, T., Sutter, G., Carroll, M., Yang, L., Goldstein, S., Piatak, M., Elkins, W., Alvord, G., Montefiori, D., Moss, B.およびLifson, J. [1996] J. Virol. 70, 3741-3752)組換えMVAウイルスを得るための出発物質として使用するウイルスの実施ストックを得た。
2.1 ベクタープラスミドの構築
組換えMVAウイルスを産生させるために、新規ベクタープラスミドを構築した。MVAゲノム中への外来遺伝子の挿入は、MVAゲノム内の天然に存在する欠失II部位へ正確に標的化した。MVAゲノムのHindIIIN断片中の2500bpの欠失部位に隣接するMVA DNAの配列(Altenbuger, W., Suter, C.P.およびAltenburger, J. [1989], J. Arch. Virol. 105, 15-27)をPCRにより増幅し、プラスミドpUC18のマルチプルクローニング部位中にクローニングした。左側の600bpのDNAフランクのプライマーは、5’-CAG CAG GGT ACC CTC ATC GTA CAG GAC GTT CTC-3’および5’-CAG CAG CCC GGG TAT TCG ATG ATT ATT TTT AAC AAA ATA ACA-3’(制限酵素KpnIおよびSmaIの部位に下線を付している)であった。右側の550bpのDNAフランクのプライマーは、5’-CAG CAG CTG CAG GAA TCA TCC ATT CCA CTG AAT AGC-3’および5’-CAG CAG GCA TGC CGA CGA ACA AGG AAC TGT AGC AGA-3’(制限酵素PstIおよびSphIの部位に下線を付している)であった。pUC18中に挿入されたMVA DNAのこれらのフランクの間に、ワクシニアウイルス後期プロモーターP11の制御下の大腸菌(Echerichia coli)lacZ遺伝子(pIII LZから制限消化により調製された(Sutter, G.およびMoss, B. [1992] PNAS USA 89, 10847-10851))を、BamHI部位を使用することにより挿入して、MVA挿入ベクターpUCII LZ(図1)を得た。ついで、クローニング用のSmaI部位と共にワクシニアウイルス初期−後期プロモーターP7.5を含有する289bp断片(プラスミドベクターpSC11[Chakrabartiら, 1985, Molecular and Cellular Biology 5, 3403-3409]からEcoRIおよびXbaIで制限消化することにより調製した)を、pUCII LZのSmaI部位中に挿入して、MVAベクターpUCII LZ P7.5を得た(図2)。レポーター酵素β−ガラクトシダーゼの一過性合成を介して組換えMVAウイルスの単離を可能とするベクタープラスミドを構築するために、大腸菌(E. coli) LacZオープンリーディングフレームの3’末端からの330bpのDNA断片を、PCR(プライマーは5’-CAG CAG GTC GAC CCC GAC CGC CTT ACT GCC GCC-3’および5’-GGG GGG CTG CAG ATG GTA GCG ACC GGC GCT CAG-3’であった)により増幅し、pUCII LZ P7.5のSalIおよびPstI部位中にクローニングして、MVAベクターpUCII LZdel P7.5を得た(図3)。SmaI部位を用いて、このベクタープラスミドを使用して、ワクシニアウイルスプロモーターP7.5の転写制御下で外来遺伝子をコードするDNA配列をMVAゲノム中に挿入することができる。β−ガラクトシダーゼ活性の発現に関してスクリーニングすることにより所望の組換えウイルスを単離した後、該組換えウイルスをさらに増殖させて、相同的組換えにより、再操作されたP11-LacZ発現カセットの自己欠失が得られる。
ワクシニアウイルス前期/後期プロモーターP7.5の制御下でバクテリオファージT7 RNAポリメラーゼの完全な遺伝子を含有する3.1kbpのDNA断片を、プラスミドpTF7-3(Fuerst, T.R., Niles, E.G., Studier, F.W.およびMoss, B., 1986, P.N.A.S. USA 83, 8122-8126)からEcoRIで切り出し、クレノウDNAポリメラーゼと共にインキュベートすることにより修飾して平滑末端を作り、pUCII LZの唯一のSmaI制限部位中にクローニングして、プラスミド導入ベクターpUCII LZ T7polを作製した(図4)。T7 RNAポリメラーゼ遺伝子の発現用の転写調節体として、ワクシニアウイルス初期/後期プロモーターP7.5を選択した。より強力なワクシニアウイルス後期プロモーター(例えば、P11)と異なり、このプロモーター系は、標的細胞に感染した直後に組換え遺伝子を発現させる。MVAゲノムの欠失II部位中への外来遺伝子の挿入を指令するプラスミドpUC II LZ T7polを使用して、組換えウイルスMVAT7polを得た。
HIV-1 LAIの完全なnef遺伝子を含有する648bpのDNA断片を、プラスミドDNA(M.-P. Kieny, Transgene S.A., Strasbourgから贈呈されたpTG1166;PCRプライマーは、5’-CAG CAG GGA TCC ATG GGT GGC AAG TGG TCA AAA AGT AGT-3’および5’-CAG CAG GGA TCC ATG TCA GCA GTT CTT GAA GTA CTC CGG-3’であった)からPCRにより調製し、制限エンドヌクレアーゼBamHIで消化し、クレノウDNAポリメラーゼと共にインキュベートすることにより修飾して平滑末端を作り、pUCII LZdel P7.5のSmaI部位中にクローニングして、ベクターpUCII LZdel P7.5-LAInefを作製した(図8)。このプラスミドを使用して、ワクシニアウイルス初期/後期プロモーターP7.5の制御下でHIV-1 LAIのnef遺伝子を発現するMVA組換えウイルスを操作することができた。
ヒトチロシナーゼをコードする完全な遺伝子を含有する1.9kbのDNA断片[患者SK29(AV)の黒色腫細胞系SK29-MELから単離されたチロシナーゼc-DNAクローン123.B2, GenBank Acc. no. UO1873; Brichard, V., Van Pel, A., Wolfel, T., Wolfel, C., De Plaen, E., Lethe, B., Coulie, P.およびBoon, B. (1993), J. Exp. Med. 178, 489-495]を、プラスミドpcDNAI/Amp-Tyr[Wolfel, T., Van Pel, A., Brichard, V., Schneider, J., Seliger, B., Meyer zum Buschenfelde, K.およびBoon, T. (1994) Eur. J. Immunol 24, 759-764]からEcoRI消化により調製し、クレノウDNAポリメラーゼと共にインキュベートすることにより修飾して平滑末端を作り、pUCII LZdel P7.5のSmaI部位中にクローニングして、ベクターpUCII LZdel P7.5-TYRを作製した(図9)。このプラスミドを使用して、ワクシニアウイルス初期/後期プロモーターP7.5の制御下でヒトチロシナーゼ遺伝子を発現するMVA組換えウイルスを操作することができた。
Claims (28)
- MVAゲノム内の天然に存在する欠失部位に挿入された少なくとも1つの外来遺伝子を含有し、その発現能を有する組換えMVAウイルス。
- MVAゲノム内の欠失II部位に挿入された少なくとも1つの外来遺伝子を含有し、その発現能を有する、請求項1に記載の組換えMVAウイルス。
- 該外来遺伝子が、マーカー、治療剤または抗原決定基をコードする、請求項1または2に記載の組換えMVAウイルス。
- 該外来遺伝子が、病原性ウイルス、細菌または他の微生物からの、または寄生生物または腫瘍細胞からの抗原決定基をコードする、請求項3に記載の組換えMVAウイルス。
- 該外来遺伝子が、熱帯熱マラリア原虫(Plasmodium Falciparum)、マイコバクテリア、ヘルペスウイルス、インフルエンザウイルス、肝炎またはヒト免疫不全ウイルスからの抗原決定基をコードする、請求項4に記載の組換えMVAウイルス。
- 該抗原決定基がHIV nefまたはヒトチロシナーゼである、請求項4または5に記載の組換えMVAウイルス。
- MVA-LAInefまたはMVA-hTYRである、請求項6に記載の組換えMVAウイルス。
- 該外来遺伝子がT7 RNAポリメラーゼをコードする、請求項1または2に記載の組換えMVAウイルス。
- MVA-T7 polである、請求項8に記載の組換えMVAウイルス。
- 該外来遺伝子が、ワクシニアウイルス初期/後期プロモーターP7.5の転写制御下にある、請求項1〜9のいずれか1項に記載の組換えMVAウイルス。
- ヒト細胞中で複製可能なウイルスを実質的に含まない、請求項1〜10のいずれか1項に記載の組換えMVAウイルス。
- T7 RNAポリメラーゼプロモーターの転写制御下でのDNA配列の転写のための、請求項8または9に記載の組換えMVAウイルスの使用。
- 請求項1〜11のいずれか1項に記載の組換えMVAウイルスに感染した真核細胞。
- 請求項8または9に記載の組換えMVAウイルスに感染した、請求項13に記載の細胞。
- T7 RNAポリメラーゼプロモーターの転写制御下の1以上の外来遺伝子を保持する1以上の発現ベクターをさらに含有する、請求項14に記載の細胞。
- 前記外来遺伝子にコードされるポリペプチドの製造のための、請求項15に記載の細胞の使用であって、
a)前記細胞を適当な条件下で培養し、そして
b)前記外来遺伝子にコードされるポリペプチドを単離することを含んでなる使用。 - ウイルス遺伝子を保持する発現ベクターおよび/またはT7 RNAポリメラーゼプロモーターの転写制御下のウイルスベクターのゲノムをコードするウイルスベクターコンストラクトをさらに含有する、請求項14に記載の細胞。
- ウイルス粒子の製造のための、請求項17に記載の細胞の使用であって、
a)前記細胞を適当な条件下で培養し、そして
b)該ウイルス粒子を単離することを含んでなる使用。 - a)標的細胞に感染する能力と、前記レトロウイルスベクターコンストラクトにより保持される1以上の外来遺伝子の標的細胞における発現を指令する能力とを有するレトロウイルスベクターコンストラクトを保持する発現ベクター、および
b)前記レトロウイルスベクターコンストラクトのゲノムがパッケージングされるのに必要なポリペプチドをコードする遺伝子をT7 RNAポリメラーゼプロモーターの転写制御下で保持する1以上の発現ベクターをさらに含有する、請求項14に記載の細胞。 - レトロウイルス粒子の製造のための、請求項19に記載の細胞の使用であって、
a)前記細胞を適当な条件下で培養し、そして
b)該レトロウイルス粒子を単離することを含んでなる使用。 - 生理的に許容される担体中に請求項3〜7のいずれか1項に記載の組換えMVAウイルスを含有するワクチン。
- ワクチンの製造のための、請求項3〜7のいずれか1項に記載の組換えMVAウイルスの使用。
- 動物(ヒトを含む)生体の免疫化のための、請求項21に記載のワクチンの使用であって、前記動物(ヒトを含む)生体に該ワクチンを接種することを含んでなる使用。
- HIV感染またはエイズの予防または治療のための、MVA-LAInefを含有する請求項21に記載のワクチンの使用。
- 黒色腫の予防または治療のための、MVA-hTYRを含有する請求項21に記載のワクチンの使用。
- 請求項8または9に記載の組換えMVAウイルスを生理的に許容される担体中に第1成分として、そしてT7 RNAポリメラーゼプロモーターの転写制御下で抗原決定基を保持するDNA配列を生理的に許容される担体中に第2成分として含んでなり、それらの2成分が一緒にまたは別々に含有されているワクチン。
- 動物(ヒトを含む)生体の免疫化のための請求項26に記載のワクチンの使用であって、前記動物(ヒトを含む)生体に、該ワクチンの第1成分および第2成分を同時にまたは一定の時間間隔で同じ接種部位に接種することを含んでなる使用。
- 請求項26に記載のワクチンの製造のための、請求項8または9に記載の組換えMVAウイルスの使用。
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Cited By (1)
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Families Citing this family (117)
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US7118754B1 (en) * | 1996-07-30 | 2006-10-10 | Transgene S.A. | Pharmaceutical composition for treating papillomavirus tumors and infection |
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US20040265324A1 (en) * | 1999-03-23 | 2004-12-30 | Cardosa Mary Jane | Recombinant MVA virus expressing dengue virus antigens, and the use thereof in vaccines |
US6682742B1 (en) | 1999-05-28 | 2004-01-27 | Gsf Forschungszentrum Fur Unwelt Und Gesundheit Gmbh | Vector for integration of heterologous sequences into poxviral genomes |
US20150231227A1 (en) * | 2000-03-02 | 2015-08-20 | Emory University | Compositions and methods for generating an immune response |
WO2001068820A1 (en) * | 2000-03-14 | 2001-09-20 | Anton Mayr | Altered strain of the modified vaccinia virus ankara (mva) |
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WO2002031168A2 (en) * | 2000-10-10 | 2002-04-18 | Genstar Therapeutics | Minimal adenoviral vector and recombinant vaccines based thereon |
US7445924B2 (en) | 2000-11-23 | 2008-11-04 | Bavarian Nordic A/S | Modified Vaccinia Ankara virus variant and cultivation method |
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DE10143490C2 (de) * | 2001-09-05 | 2003-12-11 | Gsf Forschungszentrum Umwelt | Rekombinantes MVA mit der Fähigkeit zur Expression von HCV Struktur-Antigenen |
DE10144664B4 (de) * | 2001-09-11 | 2005-06-09 | GSF-Forschungszentrum für Umwelt und Gesundheit GmbH | Vacciniavirus MVA-E3L-Knock-Out-Mutanten und Verwendung hiervon |
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NZ533586A (en) * | 2001-12-20 | 2005-02-25 | Bavarian Nordic As | Method for the recovery and purification of poxviruses from infected cells using high pressure homogenisation |
EP1839672A3 (en) * | 2002-04-19 | 2007-11-21 | Bavarian Nordic A/S | Modified vaccinia virus Ankara for the vaccination of neonates |
US7501127B2 (en) | 2002-05-16 | 2009-03-10 | Bavarian Nordic A/S | Intergenic regions as novel sites for insertion of HIV DNA sequences in the genome of Modified Vaccinia virus Ankara |
EA007811B1 (ru) | 2002-05-16 | 2007-02-27 | Бавариан Нордик А/С | Межгенные области, используемые в качестве инсерционных сайтов в геноме модифицированного вируса коровьей оспы анкара (mva) |
EA009525B1 (ru) * | 2002-05-16 | 2008-02-28 | Бавариан Нордик А/С | Рекомбинантный модифицированный вирус осповакцины ankara, содержащий ati-промотор вируса коровьей оспы, и способы применения вируса и промотора |
KR101044538B1 (ko) | 2002-09-05 | 2011-06-27 | 버베리안 노딕 에이/에스 | 무혈청 조건하에서 일차세포의 배양 및 바이러스의 증식방법 |
DE10249390A1 (de) * | 2002-10-23 | 2004-05-13 | Ruprecht-Karls-Universität Heidelberg | Rekombinante MVA-Stämme als potentielle Impfstoffe gegen P.falciparum-Malaria |
PT1567653E (pt) | 2002-11-25 | 2007-10-01 | Bavarian Nordic As | Poxvírus recombinante que compreende pelo menos dois promotores do vírus da varíola bovina ati |
ATE403005T1 (de) * | 2003-02-18 | 2008-08-15 | Helmholtz Zentrum Muenchen | Rekombinantes mva und verfahren zur erzeugung davon |
JP5052893B2 (ja) | 2003-02-20 | 2012-10-17 | アメリカ合衆国 | ポックスベクターにおける新規の挿入部位 |
US7731974B2 (en) | 2003-03-27 | 2010-06-08 | Ottawa Hospital Research Institute | Mutant vesicular stomatitis viruses and uses thereof |
MXPA05010260A (es) | 2003-03-27 | 2006-03-17 | Ottawa Health Research Inst | Virus de estomatitis vesicular mutantes y usos de los mismos. |
WO2004093905A1 (en) * | 2003-04-16 | 2004-11-04 | City Of Hope | Human cytomegalovirus antigens expressed in mva and methods of use |
GB2402391A (en) * | 2003-06-04 | 2004-12-08 | Oxxon Pharmaccines Ltd | Fowlpox recombinant genome |
ES2359473T3 (es) | 2003-07-21 | 2011-05-23 | Transgene S.A. | Citoquinas multifuncionales. |
WO2005017208A1 (en) * | 2003-07-31 | 2005-02-24 | George Mason Intellectual Properties, Inc. | Compositions and methods for treating or preventing hiv infection |
EP1518932A1 (en) | 2003-09-29 | 2005-03-30 | GSF-Forschungszentrum für Umwelt und Gesundheit GmbH | Modified vaccinia virus Ankara (MVA) mutant and use thereof |
DK1536015T3 (da) * | 2003-11-24 | 2008-02-18 | Bavarian Nordic As | Promotorer til ekspression i modificeret vacciniavirus Ankara |
JP4719855B2 (ja) | 2003-12-05 | 2011-07-06 | 国立大学法人北海道大学 | 高度安全性痘瘡ワクチンウイルスおよびワクシニアウイルスベクター |
EP1683870A1 (en) * | 2005-01-24 | 2006-07-26 | GSF-Forschungszentrum für Umwelt und Gesundheit GmbH | Vaccines based on the use of MVA |
WO2006113927A2 (en) * | 2005-04-20 | 2006-10-26 | University Of Washington | Immunogenic vaccinia peptides and methods of using same |
US20090060947A1 (en) * | 2006-05-19 | 2009-03-05 | Sanofi Pasteur, Inc. | Immunological compositions |
DK2029756T3 (en) * | 2006-06-20 | 2017-02-13 | Transgene Sa | PROCEDURE FOR PREPARING POXVIRA AND POXVIRUS COMPOSITIONS |
WO2008076157A2 (en) * | 2006-09-08 | 2008-06-26 | Duke University | Modified vaccinia ankara virus vaccine |
CN102026645B (zh) | 2006-09-15 | 2016-01-27 | 渥太华医院研究机构 | 溶瘤弹状病毒 |
CA2665068C (en) | 2006-10-06 | 2016-01-05 | Bn Immunotherapeutics Inc. | Methods for treating cancer with mva |
US20080241139A1 (en) * | 2006-10-31 | 2008-10-02 | Regents Of The University Of Colorado | Adjuvant combinations comprising a microbial tlr agonist, a cd40 or 4-1bb agonist, and optionally an antigen and the use thereof for inducing a synergistic enhancement in cellular immunity |
CA2676129A1 (en) * | 2007-01-26 | 2008-08-07 | The Regents Of The University Of Colorado | Methods of modulating immune function |
EP2152736B1 (en) | 2007-05-03 | 2017-07-05 | Lysomab GmbH | Complement factor h-derived short consensus repeat-antibody constructs |
US8003364B2 (en) | 2007-05-14 | 2011-08-23 | Bavarian Nordic A/S | Purification of vaccinia viruses using hydrophobic interaction chromatography |
JP2010526546A (ja) * | 2007-05-14 | 2010-08-05 | バヴァリアン・ノルディック・アクティーゼルスカブ | ワクシニアウイルス系及び組換えワクシニアウイルス系ワクチンの精製 |
US8003363B2 (en) | 2007-05-14 | 2011-08-23 | Bavarian Nordic A/S | Purification of vaccinia virus- and recombinant vaccinia virus-based vaccines |
US20100285050A1 (en) * | 2007-10-05 | 2010-11-11 | Isis Innovation Limited | Compositions and Methods |
BRPI0800485B8 (pt) * | 2008-01-17 | 2021-05-25 | Univ Minas Gerais | vetores virais recombinantes, composição vacinal para leishmaniose e método de vacinação para leishmaniose |
CN102257134B (zh) | 2008-02-12 | 2014-03-05 | 赛诺菲巴斯德有限公司 | 使用离子交换和凝胶过滤色谱进行痘病毒纯化的方法 |
US20110052627A1 (en) * | 2008-06-20 | 2011-03-03 | Paul Chaplin | Recombinant modified vaccinia virus measles vaccine |
US8691502B2 (en) | 2008-10-31 | 2014-04-08 | Tremrx, Inc. | T-cell vaccination with viral vectors via mechanical epidermal disruption |
EP2424999A1 (en) | 2009-04-30 | 2012-03-07 | Centre Hospitalier Universitaire Vaudois Lausanne (CHUV) | Modified immunization vectors |
KR20120052352A (ko) * | 2009-08-07 | 2012-05-23 | 트랜스진 에스.에이. | Hbv 감염을 치료하는 조성물 |
EP2501405A4 (en) * | 2009-11-20 | 2013-12-04 | Inviragen Inc | COMPOSITION, METHOD, AND USES OF POX VIRUS ELEMENTS IN VACCINATE CONSTRUCTS |
US9005632B2 (en) | 2009-11-20 | 2015-04-14 | Takeda Vaccines, Inc. | Compositions, methods and uses for poxvirus elements in vaccine constructs against influenza virus subtypes or strains |
EP3187585A1 (en) | 2010-03-25 | 2017-07-05 | Oregon Health&Science University | Cmv glycoproteins and recombinant vectors |
GB201006405D0 (en) * | 2010-04-16 | 2010-06-02 | Isis Innovation | Poxvirus expression system |
EP2668201A2 (en) | 2011-01-28 | 2013-12-04 | Sanofi Pasteur SA | Immunological compositions comprising hiv gp41 polypeptide derivatives |
WO2012151272A2 (en) | 2011-05-02 | 2012-11-08 | Tremrx, Inc. | T-cell vaccination with viral vectors via mechanical epidermal disruption |
PL2691530T3 (pl) | 2011-06-10 | 2019-02-28 | Oregon Health & Science University | Glikoproteiny i rekombinowane wektory CMV |
PL2739293T3 (pl) * | 2011-08-05 | 2020-11-16 | Sillajen Biotherapeutics, Inc. | Sposoby i kompozycje wytwarzania wirusa krowianki |
US20130189754A1 (en) | 2011-09-12 | 2013-07-25 | International Aids Vaccine Initiative | Immunoselection of recombinant vesicular stomatitis virus expressing hiv-1 proteins by broadly neutralizing antibodies |
EP2761011B1 (en) * | 2011-09-26 | 2018-05-23 | Theravectys | Use of non-subtype b gag proteins for lentiviral packaging |
US9402894B2 (en) | 2011-10-27 | 2016-08-02 | International Aids Vaccine Initiative | Viral particles derived from an enveloped virus |
EP2788021B1 (en) | 2011-12-09 | 2017-01-18 | Bavarian Nordic A/S | Poxvirus vector for the expression of bacterial antigens linked to tetanus toxin fragment c |
EP2620446A1 (en) | 2012-01-27 | 2013-07-31 | Laboratorios Del Dr. Esteve, S.A. | Immunogens for HIV vaccination |
ES2631608T3 (es) | 2012-06-27 | 2017-09-01 | International Aids Vaccine Initiative | Variante de la glicoproteína Env del VIH-1 |
WO2014009433A1 (en) | 2012-07-10 | 2014-01-16 | Transgene Sa | Mycobacterium resuscitation promoting factor for use as adjuvant |
KR20150058152A (ko) | 2012-07-10 | 2015-05-28 | 트랜스진 에스아이 | 마이코박테리아 항원 백신 |
WO2014043535A1 (en) | 2012-09-14 | 2014-03-20 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Compositions for the treatment of cancer |
EP2912069B1 (en) | 2012-10-23 | 2019-07-31 | Emory University | Gm-csf and il-4 conjugates, compositions, and methods related thereto |
US20140286981A1 (en) * | 2013-03-14 | 2014-09-25 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Broadly reactive mosaic peptide for influenza vaccine |
DE102013004595A1 (de) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Emergent Product Development Germany Gmbh | RSV-Impfstoffe |
US20150065381A1 (en) | 2013-09-05 | 2015-03-05 | International Aids Vaccine Initiative | Methods of identifying novel hiv-1 immunogens |
EP2873423B1 (en) | 2013-10-07 | 2017-05-31 | International Aids Vaccine Initiative | Soluble hiv-1 envelope glycoprotein trimers |
EP3092000A1 (en) | 2014-01-09 | 2016-11-16 | Transgene SA | Fusion of heterooligomeric mycobacterial antigens |
GB201412494D0 (en) * | 2014-07-14 | 2014-08-27 | Ospedale San Raffaele And Fond Telethon | Vector production |
RS61902B1 (sr) | 2014-09-26 | 2021-06-30 | Beth Israel Deaconess Medical Ct Inc | Metodi i kompozicije za indukovanje zaštitnog imuniteta protiv infekcije virusom humane imunodeficijencije |
WO2016115116A1 (en) | 2015-01-12 | 2016-07-21 | Geovax, Inc. | Compositions and methods for generating an immune response to a hemorrhagic fever virus |
WO2016131945A1 (en) | 2015-02-20 | 2016-08-25 | Transgene Sa | Combination product with autophagy modulator |
EP3069730A3 (en) | 2015-03-20 | 2017-03-15 | International Aids Vaccine Initiative | Soluble hiv-1 envelope glycoprotein trimers |
EP3072901A1 (en) | 2015-03-23 | 2016-09-28 | International Aids Vaccine Initiative | Soluble hiv-1 envelope glycoprotein trimers |
AU2016369326B2 (en) | 2015-12-15 | 2019-02-21 | Janssen Vaccines & Prevention B.V. | Human immunodeficiency virus antigens, vectors, compositions, and methods of use thereof |
EP3402802B1 (en) | 2016-01-08 | 2023-04-12 | Geovax, Inc. | Compositions and methods for generating an immune response to a tumor associated antigen |
BR112018015696A2 (pt) | 2016-02-03 | 2018-12-26 | Geovax Inc | composições e métodos para gerar uma resposta imune para um flavivírus |
MX2018010231A (es) * | 2016-02-25 | 2019-06-06 | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | Mva recombinante o mvadele3l que expresa el flt3l humano y uso de los mismos como agentes inmunoterapéuticos contra tumores sólidos. |
CA3023022A1 (en) | 2016-05-04 | 2017-11-09 | Transgene Sa | Combination therapy with cpg tlr9 ligand |
US10273268B2 (en) | 2016-06-16 | 2019-04-30 | Janssen Vaccines & Prevention B.V. | HIV vaccine formulation |
AU2017318689A1 (en) | 2016-09-02 | 2019-04-11 | Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. | Methods for inducing an immune response against human immunodeficiency virus infection in subjects undergoing antiretroviral treatment |
HUE052008T2 (hu) | 2016-09-15 | 2021-04-28 | Janssen Vaccines & Prevention Bv | Trimert stabilizáló HIV-burokfehérje-mutációk |
US20190328869A1 (en) | 2016-10-10 | 2019-10-31 | Transgene Sa | Immunotherapeutic product and mdsc modulator combination therapy |
MA49397A (fr) | 2017-06-15 | 2020-04-22 | Bavarian Nordic As | Vecteurs à poxvirus codant pour des antigènes du vih, et leurs procédés d'utilisation |
EP3641803A2 (en) | 2017-06-21 | 2020-04-29 | Transgene | Personalized vaccine |
BR112020000867A2 (pt) | 2017-07-19 | 2020-07-21 | Janssen Vaccines & Prevention B.V. | mutações da proteína do envelope do hiv estabilizando o trímero |
US20190022212A1 (en) | 2017-07-21 | 2019-01-24 | Beth Israel Deaconess Medical Center, Inc. | Methods for safe induction of cross-clade immunity against human immunodeficiency virus infection in human |
WO2019055888A1 (en) | 2017-09-18 | 2019-03-21 | Janssen Vaccines & Prevention B.V. | METHODS OF INDUCING AN IMMUNE RESPONSE AGAINST HUMAN IMMUNODEFICIENCY VIRUS INFECTION IN SUBJECTS UNDER ANTIRETROVIRAL TREATMENT |
US11311612B2 (en) | 2017-09-19 | 2022-04-26 | Geovax, Inc. | Compositions and methods for generating an immune response to treat or prevent malaria |
JP7320601B2 (ja) | 2018-09-11 | 2023-08-03 | 上▲海▼市公共▲衛▼生▲臨▼床中心 | 広域スペクトルな抗インフルエンザワクチン免疫原及びその使用 |
TW202110476A (zh) | 2019-05-22 | 2021-03-16 | 荷蘭商傑森疫苗防護公司 | 於接受抗反轉錄病毒治療之個體中誘發抗人類免疫缺乏病毒感染之免疫反應的方法 |
KR20220082033A (ko) * | 2019-10-16 | 2022-06-16 | 칼리버 임뮤노쎄라퓨틱스, 인크. | 레트로바이러스의 계내 생성을 위한 생산자 바이러스 |
CA3161633A1 (en) | 2019-11-14 | 2021-05-20 | Aelix Therapeutics, S.L. | Dosage regimens for vaccines |
EP3842065A1 (en) | 2019-12-23 | 2021-06-30 | Transgene | Process for designing a recombinant poxvirus for a therapeutic vaccine |
WO2021260065A1 (en) | 2020-06-24 | 2021-12-30 | Consejo Superior De Investigaciones Científicas (Csic) | Mva-based vaccine against covid-19 expressing sars-cov-2 antigens |
EP3928789A1 (en) | 2020-06-24 | 2021-12-29 | Consejo Superior de Investigaciones Científicas (CSIC) | Mva-based vaccine against covid-19 expressing sars-cov-2 antigens |
IL308018A (en) | 2021-04-30 | 2023-12-01 | Kalivir Immunotherapeutics Inc | Oncolytic viruses for different MHC expression |
WO2022269003A1 (en) | 2021-06-23 | 2022-12-29 | Consejo Superior De Investigaciones Cientificas | MVA-BASED VACCINE EXPRESSING A PREFUSION-STABILIZED SARS-CoV-2 S PROTEIN |
EP4108257A1 (en) | 2021-06-23 | 2022-12-28 | Consejo Superior De Investigaciones Científicas | Mva-based vaccine against covid-19 expressing a prefusion-stabilized sars-cov-2 s protein |
WO2023077147A2 (en) | 2021-11-01 | 2023-05-04 | Pellis Therapeutics, Inc. | T-cell vaccines for patients with reduced humoral immunity |
WO2023213764A1 (en) | 2022-05-02 | 2023-11-09 | Transgene | Fusion polypeptide comprising an anti-pd-l1 sdab and a member of the tnfsf |
WO2023213763A1 (en) | 2022-05-02 | 2023-11-09 | Transgene | Poxvirus encoding a binding agent comprising an anti- pd-l1 sdab |
WO2023220283A1 (en) | 2022-05-12 | 2023-11-16 | Pellis Therapeutics, Inc. | Poxvirus adjuvant for t-cell vaccination |
EP4316514A1 (en) | 2022-08-03 | 2024-02-07 | Consejo Superior de Investigaciones Científicas (CSIC) | Mva-based vectors and their use as vaccine against sars-cov-2 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1994014459A1 (en) * | 1992-12-22 | 1994-07-07 | Ludwig Institute For Cancer Research | Methods for detection and treatment of individuals having abnormal cells expressing hla-a2/tyrosinase peptide antigens |
WO1994021126A1 (en) * | 1993-03-18 | 1994-09-29 | Ludwig Institute For Cancer Research | Nucleic acid coding for a tumor rejection antigen precursor |
Family Cites Families (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
BE787901A (fr) | 1971-09-11 | 1972-12-18 | Freistaat Bayern Represente Pa | Vaccin antivariolique |
AU570940B2 (en) | 1982-11-30 | 1988-03-31 | United States of America, as represented by the Secretary, U.S. Department of Commerce, The | Process for producing poxvirus recombinants for expression offoreign genes |
US5679511A (en) * | 1986-10-06 | 1997-10-21 | Donald Guthrie Foundation For Medical Research, Inc. | CDNA clones for a regulatory protein in the melanin-production pathway |
CA1341245C (en) * | 1988-01-12 | 2001-06-05 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Recombinant vaccinia virus mva |
US5221610A (en) * | 1988-05-26 | 1993-06-22 | Institut Pasteur | Diagnostic method and composition for early detection of HIV infection |
CN1042564A (zh) * | 1988-11-11 | 1990-05-30 | 中国科学院上海生物化学研究所 | 乙肝疫苗的制备方法及其制品 |
JPH03271233A (ja) * | 1990-03-19 | 1991-12-03 | Inst Pasteur | ウイルスエンベロープ糖タンパク質及びその糖タンパク質の中和エピトープに対応するペプチドの間の相乗作用による、ウイルス性感染に対する防御の誘発 |
EP0613378A1 (en) * | 1991-10-28 | 1994-09-07 | Institut Pasteur | Induction of protection against viral infection by synergy between viral proteins and viral peptides |
CA2173138A1 (en) * | 1993-10-19 | 1995-04-27 | Masafumi Takiguchi | Peptide capable of inducing immune response against hiv and aids preventive or remedy containing the peptide |
US5676950A (en) * | 1994-10-28 | 1997-10-14 | University Of Florida | Enterically administered recombinant poxvirus vaccines |
UA68327C2 (en) * | 1995-07-04 | 2004-08-16 | Gsf Forschungszentrum Fur Unwe | A recombinant mva virus, an isolated eukaryotic cell, infected with recombinant mva virus, a method for production in vitro of polypeptides with use of said cell, a method for production in vitro of virus parts (variants), vaccine containing the recombinant mva virus, a method for immunization of animals |
-
1996
- 1996-03-07 UA UA97126424A patent/UA68327C2/uk unknown
- 1996-07-03 CN CNA2005101248556A patent/CN1782071A/zh active Pending
- 1996-07-03 ES ES03001378T patent/ES2249647T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1996-07-03 EP EP96925654A patent/EP0836648B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-07-03 DE DE69635172T patent/DE69635172T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1996-07-03 PT PT96925654T patent/PT836648E/pt unknown
- 1996-07-03 CA CA002225278A patent/CA2225278C/en not_active Expired - Lifetime
- 1996-07-03 SI SI9630623T patent/SI0836648T1/xx unknown
- 1996-07-03 DK DK96925654T patent/DK0836648T3/da active
- 1996-07-03 CZ CZ19974241A patent/CZ292460B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1996-07-03 CN CNB961952547A patent/CN1154742C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1996-07-03 IL IL12212096A patent/IL122120A/xx not_active IP Right Cessation
- 1996-07-03 UA UA20031212892A patent/UA75411C2/uk unknown
- 1996-07-03 SI SI9630719T patent/SI1312679T1/sl unknown
- 1996-07-03 ES ES96925654T patent/ES2199294T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1996-07-03 PL PL96324347A patent/PL186857B1/pl unknown
- 1996-07-03 SI SI9630718T patent/SI1312678T1/sl unknown
- 1996-07-03 AU AU66110/96A patent/AU721735B2/en not_active Expired
- 1996-07-03 EE EEP200300331A patent/EE05138B1/xx unknown
- 1996-07-03 KR KR1019970709939A patent/KR19990028617A/ko not_active Application Discontinuation
- 1996-07-03 AT AT03001378T patent/ATE304057T1/de active
- 1996-07-03 DE DE69628011T patent/DE69628011T2/de not_active Expired - Lifetime
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Patent Citations (2)
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---|---|---|---|---|
WO1994014459A1 (en) * | 1992-12-22 | 1994-07-07 | Ludwig Institute For Cancer Research | Methods for detection and treatment of individuals having abnormal cells expressing hla-a2/tyrosinase peptide antigens |
WO1994021126A1 (en) * | 1993-03-18 | 1994-09-29 | Ludwig Institute For Cancer Research | Nucleic acid coding for a tumor rejection antigen precursor |
Cited By (1)
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