FI61479C - Foerfarande foer framstaellning av spasmolytiska nya d,l-tyrosinderivat - Google Patents

Description

[B] {11)KUULUTUSjULKAISU , 7 LJ ' } UTLÄGGNI NGSSKRIFT 6 14/9 ^ w ^ (51) Kv.lk.3/lnt.CI.3 C 07 C 103/76 SUOMI FINLAND (21) P«*nttlh»k*mu» — Patantmeknlng 750255 (22) H»k*mlipllvt — AMBknlngtdtg 3 0.01.7 5 (23) Alkuptivt — Glttlghattdag 30.01.75 (41) Tullut |ulklt«kil — Bllvlt offwitllg 02.08.7 5

Patentti, ja reki.terihall itu. Nihtiviicpwn ku«U|ulk.uun Pvm. - 0U 8?

Patent· OCh registerstyrelien ' Ansdkan utltgd ech utl.skrlf»n publkarad

(32)(33)(31) Pyydetty «tuolkaui —Begird priority 01.02.7^ Italia-Italien(IT) 67286-AM

(71) Rotta Research Laboratorium S.p.A., San Fruttuoso di Monza, Milano, Italia-Italien(IT) (72) Francesco Makovec, Milano, Luigi Rovati, Milano, Paolo Senin, Milano, Italia-Italien(IT) (74) Oy Kolster Ab (5l) Menetelmä kouristuksen vastaisten uusien D,L-tyrosiinijohdannaisten valmistamiseksi - Förfarande för framställning av spasmolytiska nya D,L-tyrosinderivat

Keksinnön kohteena on menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten D,L-N-asyylityrosinamidien valmistamiseksi, joilla on kaava ^^N-Alk-O —J' CH2-CH-CO-N^^

W NH IV

R6 CO R4 K2 jossa Alk on suora tai haarautunut, 1-6 hiiliatomia sisältävä alkyyli-ryhmä, R^ ja Rg ovat samoja tai erilaisia, suoria tai haarautuneita 1-4 hiiliatomia sisältäviä alkyyliryhmiä tai muodostavat yhdessä 4-5 hiiliatomia sisältävän alkyleeniryhmän, joka muodostaa N-atomin kanssa heterosyklisen renkaan, joka sisältää mahdollisesti toisen N-atomin 2 Λ 79 (Ν'), jossa saattaa olla substltuenttina metyyli-, hydroksietyyli-tai bentsyyliryhmä, joka heterosyklinen ryhmä on edullisesti pyrroli-dino-, piperidino- tai N'-substituoitu piperatsinoryhmä, R2 on fenyyli-ryhmä, jonka orto-, meta- tai para-asemissa voi olla yksi tai kaksi substituenttia seuraavista: kloori, bromi, nitro, metoksi tai metyyli, ja ovat samoja tai erilaisia ja merkitsevät vetyä, suoraa tai haarautunutta alkyyli- tai aralkyyliryhmää, jolloin niiden yhteenlaskettu hiiliatomien luku on korkeintaan 8, tai yhdessä 4-5 hiiliatomia sisältävää alkyleeniryhmää, joka muodostaa N-atomin kanssa heterosyk-lisen ryhmän, edullisesti pyrrolidinoryhmän, sekä niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi.

Nämä tyrosiinijohdannaiset voidaan edullisesti muuttaa farmaseuttisesti hyväksyttäviksi suoloiksi, jolloin ne saadaan veteen liukeneviksi ja stabiilimmiksi. Suolanmuodostukseen voidaan käyttää epäorgaanisia happoja kuten kloorivety-, fosfori- tai rikkihappoa, tai orgaanisia happoja kuten sitruuna-, oksaali-, etikka-, maleiini-, fumaari-, salisyyli- tai nikotiinihappoa.

Keksinnön mukaiselle menetelmälle on tunnusomaista, että a) L- tai D,L-tyrosiini saatetaan moolisuhteessa 1:2 Schotten-Baumann-reaktioon 0-10°C:ssa kaavan

R2C0C1 V

mukaisen happokloridin kanssa, jossa kaavassa R2 merkitsee samaa kuin edellä, jolloin saadaan 0,N-diasyylityrosiini, jolla on kaava r9-co-o-< 7-ch9-ch-cooh

\=/ KH

• CO

K

jossa R2 merkitsee samaa kuin edellä, b) saatu kaavan I mukainen Ο,Ν-diasyylityrosiini saatetaan reagoimaan inertissä orgaanisessa liuottimessa -15 - +5°C:ssa ter-tiäärisen orgaanisen amiinin, edullisesti trietyyliamiinin, ja kloori-muurahaishapon etyyli-, propyyli- tai butyyliesterin kanssa seka-anhydridiksi, joka saatetaan reagoimaan kaavan

NH VI

R4^ 3 61 479 mukaisen amiinin kanssa, jossa kaavassa ja R4 merkitsevät samaa kuin edellä, jolloin saadaan Ο,Ν-diasyylityrosiiniamidi, jolla on kaava

R2-C0-0-r V- CH2-CH-CO-N ^ II

V=-/ NH R4

CO

jossa R2, R3 ja R4 merkitsevät samaa kuin edellä, c) kaavan II mukaisen yhdisteen O-asyyliryhmä lohkaistaan hydrolysoimalla epäorgaanisen emäksen vesi- tai vesi-alkoholiliuok-sessa 20-60°C:ssa, jolloin saadaan kaavan

f/ / III

HO —U y-CH2-CH-CO-N/ \=J NH ^ R4

CO

r2 mukainen N-asyylityrosiiniamidi, jossa kaavassa R2, R^ ja R4 merkitsevät samaa kuin edellä, d) kaavan III mukainen N-asyylityrosiiniamidi muutetaan reaktiossa natriummetallin, natriummetylaatin tai natriumamidin kanssa vedettömässä orgaanisessa liuottimessa natriumsuolaksi, joka saatetaan reagoimaan vedettömässä orgaanisessa liuottimessa korotetussa lämpötilassa, korkeintaan 120°C:ssa, halogeenialkyyliamiinin kanssa, jolla on kaava R5^

^ N-Alk-X VII

R6^ jossa R5, Rg ja Alk merkitsevät samaa kuin edellä, ja X on halogeeni, ja e) saatu kaavan IV mukainen emäs muutetaan haluttaessa farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolaksi.

4 £1479

Keksinnön mukaisesti valmistettujen yhdisteiden spasmolyytti-nen aktiivisuus ilmenee perifeerisellä sileiden lihasten tasolla vaikutusmekanismilla, joka muistuttaa, vaikkakin osittain erilaisena, perinteellisesti papaveriinityypiksi määriteltyä.

Valitsemalla vertailuaineeksi papaveriini, joka nykyään on laajalti käytössä oleva lääkeaine ihmisen spastisten oireiden hoidossa, voidaan nähdä taulukosta 1, että useimmilla tämän keksinnön mukaisesti valmistetuilla yhdisteillä on antispastinen vaikutus, joka on papave-riiniin verrattuna yhden tai kaksi kertaa suurempi aina aineesta ja käytetystä kokeesta riippuen. Tässä taulukossa (1) on lueteltu esimerkeissä kuvatut yhdisteet vastaavine sarjanumeroineen, akuutti myrkyllisyys, kahdessa kokeessa, toinen "in vivo" ja toinen "in vitro", tutkittu antispastinen aktiivisuus. Lisäksi on lueteltu kaksi terapeuttista indeksiä, joissa verrataan näiden yhdisteiden myrkyllisyyttä suhteessa niiden aktiivisuuteen "in vivo" ja "in vitro". Tarkemmin: A) Sarakkeessa 2 on DL5Q-arvot, jotka kuten tunnettua, ovat ne ainemäärät ilmaistuina mg/kg eläimen painoa, jotka pystyvät aiheuttamaan kuoleman 50 %:lle käsitellyistä kohteista.

B) Sarakkeessa 3 on hiilimenetelmän "in vivo" tulokset (puu-hiilimenetelmä), jossa 24 tuntia paastonneille rotille annetaan oraalisesti 0,3 ml/rotta seuraavasti valmistettua seosta: 10 g puuhiiltä + 5 g arabikumia suspendoituna 100 ml H20-tilavuuteen, sekä samanaikaisesti tutkittavaa ainetta millä tahansa halutulla tavalla, yleensä laskimonsisäisesti, ihonalaisesti tai suun kautta. Kahden tunnin kuluttua eläimet tapetaan ja niitä, joilla puuhiili on saavuttanut paksun suolen ensimmäisen osan, pidetään negatiivisina ja muita positiivisina siinä mielessä, että annettu aine on hidastanut puuhiilen etenemistä suolostossa. Tässä kokeessa kaikki fysiologisella liuoksella käsitellyt eläimet (vertailut) olivat negatiivisia kahden tunnin kuluttua.

C) Sarakkeen 4 "in vitro"-menetelmä on sykkyräsuolen ontelon Magnus-menetelmä, joka on yleisesti käytetty koemenetelmä. Siinä syk-kyräsuoli poistetaan ja sijoitetaan liuokseen, joka sisältää sopivasti hapetettua elatusainetta, ja tarkkaillaan elimen, joka pysyy elossa useita tunteja 37°C lämpötilassa pidettäessä, liikkeitä. Käytettyyn perinteelliseen menetelmään perustuen kylpyyn lisätään BaCl2 kouristusten aiheuttajaksi: reaktio on elimen voimakas supistuminen. Tämä supistuminen voidaan estää lisäämällä etukäteen kouristuksia estäviä farmaseuttisia aineita, so. koeyhdisteitä.

5 61479

Taulukossa on tulokset ilmoitettu käyttäen vertailuun papave-riinin ED^Q-arvoa. (ED^q on, kuten tunnettua, se annos, joka vähentää 50 % spastisen supistuksen määrää).

D) I.T.i on antispastista aktiivisuutta "in vivo" koskeva terapeuttinen indeksi, joka on saatu DL^in (sarake 2) ja puuhiilitestin ED,-0:n (sarake 3) vertailussa.

E) I.T»2 on antispastista aktiivisuutta "in vitro" koskeva terapeuttinen indeksi, joka on annettu antispastisen aktiivisuuden "in vitro" indeksin tuotetta (sarake 4) vastaavalle DL^Q-arvolle (sarake 2).

LO o LO »— o n oi o t OI ..... . . | | | .

. ^E-· ts rr n i ro lo rj> ^ j" * »— OI CO to <— »— en ro •ri r~i

M

M S

Φ T3------- G 1

•H

. LO I

jr 1/1 * (ΝΓΜ ^ΓσιΓΟίΝίησιΓ'ίχισι j Φ tr* ··!··«···, ·*Ι f ™ * ro»— r-CNr- i-t-OCNt— o i Ή M ]

-P

P

3 __________ Φ CU o

(0 M

H -U» i Φ · -H f -P -P > tn >i i G 3 G «H i Φ > -H G Φ

Ό G Φ -P

•H φ Oi r-t -P

Tj ^30-3 LDunrNooo »- cn oo lo C CN CM r- O Cl D co co :<rj ·»···! · · | w I | * ^ m 'k! ·¥ »— O »— »— OI OO O oi

•n 01 > p I I

H -H >1 OI

O P Ή X rP I

P 3 -P * U I

-P O M >1 3 H X Φ tn CQ ! >_____; G Cn

•H X

*. \ 3 Λ Cn n ®e j

• -P

O -P -P O

> tn o to •3 (0 p Q i > > - w C cl

G Φ tn φ 2 2 I

P 'H °i22 ujinoojunojr'»-»— Lnoo'iO

x 0 m · · x.........x: 22 ro 3 tn -H ΟΟ-φνΟΙΟιΟΟ»— ΟΟΓ'ΟΟΙ 3 3 +J-HrH τ- -P r- r~ OI OI LO LO OI 4-> ή 3 tn > -h

3 tn -H -H -H

3 -H U -rl 3 · B > 3 -P 3 > H 0 Ai 3 3 X fö CU -3 -P______

X

3 G —.

Φ 3

G -P

-3 -P > 3 P* en»— Ο'ΟΟ»— -»tlo»— r--c\iro -P j P -3 ............

J2 , ^ roooTroLOOtNoiLOooocnoi 3 oi O' coiOoioi»— oirorororo»— »— o > ; οχ ! LO \ G X o>

Φ ! Q E

tn i

X

3 i_____________ 3 j o j ' tooirrrovocnr'LnocTicnoo O ocnoioi»— oiooiroo»— oo» e j G LOlOLDOOOOOOLOLOLOLDLDr^r' "5 j KKÄDiÄdiffiBJPtlKÄKfl: φ i φχ -p .p p w ^ ~ ^ 3 { Φ φ |-1|-1|-1|-Il-jl-Il-Il-Il-il-Il-|l-I O] •3 ’ -3 e Ό Tl -3 -G JC tn ϊη >t Φ

7 61 4 7 S

σ\ Γ O in O (N in t"- O r- iOinoOroOntNIN

......ι..... ........; »— ω m σι ιο o roooLnCTioor-iDTrc^r^m.— ininn- ι «— (D ΓΟίΝ.— ιηοΟΟΝ,ιη(Ν(ΤιΝ,(ΝΓ^Ν'(Ν.— (Ν' I (Nr- ] j__i ί ί m m j I t'- n· m m <— οί m r- <— ο ιο »— id id en m oo n1 cn ' ι.....I 11............I ...

j 1— m m <— 1— T~ Or—CNiNin.— CNfNt— r-r- (N τ— τ ι ί· ro ιο ί— (N σιΓ'^οοοοΓΜτ-Γ'ίησιΓηΓΜίοιηο r-r— r- ^-T-oo id1— miotnc'jLnmtnN,cric><Nmr3''3> ......I................

OOOOOO O.— O.— T-m.— r-r-(NO.— <— OOOr- ! i c c c 0 O 0

-P -P -P

iDior^mmOniO'^ m m (N σ> r-~ <n rr o <n o cm .....Λ · Λ · ..... · ·Λ···

OinotNN» (U CO (DCOt-IDID(NN<ID»— COO.— O <D O ID CM

in t— id co -p in -p t— (n (n t~ cm t— co cm co (n n1 4-1 (N (n cm m ιο^ρονοη-τ— minr-TTioroin id n ^ ^ (n * ············· · ····· tnfninr-oomoooor^^rriDfNiDnoooor'OiDiDoor^

coinmoomr'~inN'.— mcomiocM^oorom cMiD.— mmcN

r“

oor-oomiDio^rinor^i— lomr-coLniriOiN.— otj«(n COCMO’OOO.— τ— r— mOLDr— CMCMCOOCMCOt— COCMTrco r^ooior^t^-iDioiDiDcoiDr^r-r^r^r^r^r^ooiD^DiDiD

o4««o5p5os«cej«os«osoioipsffioio5a:pio<p5cc: υυυουυυυυυαυαυυυυυυυυυο-Η

H

Γη^ΓΐηϋηΐπνοΓ^1(χ»οοοοσ>οοοοτΗΜ»ΗίΗίΝΓθ^ιη·Η »"ifHfHr-fr-HfHiHiHrHiHcHiH V-l Φ c >

E (C

-rH a w a * j . __ 8 61479

Taulukosta ilmenee, että suurimmalla osalla kokeilluista yhdisteitä on ainakin yksi seuraavista eduista papaveriiniin verrattuna: 1. suurempi aktiivisuus; 2. terapeuttiset indeksit ovat edullisempia, so. papaveriiniin verrattuna nämä yhdisteet ovat aktiivisempia ja vähemmän myrkyllisiä.

Saadut, sekä "in vitro" että "in vivo" suoritetut kokeet on vahvistettu eri eläimille ja eri elimille tehdyillä kokeilla. Nämä vaikutukset ilmenevät myös käytettäessä BaC^ asemesta muita kouristusten aiheuttajia, kuten serotoniinia, histamiinia tai oksitosiinia (katso taulukko 2).

Taulukko 2

Antispastinen "in vitro"-vaikutus rotan sykkyräsuoleen ja rotan uterukseen ____

Rotan sykkyräsuoli Rotan uterus

Yhdiste BaCl2 Serotoniini Histamiini Oksitosiini CR 605 (esim. 1) 1 ,25 0,69 0,17 0,09 CR 725 (esim. 10) 3,20 1 ,2 0,24 0,18 CR 716 (esim. 10) 1 ,58 0,74 0,08 0,06

Papaveriini 1,0 1,0 (1,29-10-8) (26,607-10-9) iMetisergidi - 1,0 ! (0,49-10-9) | i jPrometatsiini - : - 1,0 I j ' (1,758)

Taulukon sisältämät arvot on esitetty tunnetun koeaineen ED5q arvolla 1 ja tutkittavan aineen ED^q välisenä vertailuna, ja siten ne ilmoittavat yhdisteiden aktiivisuuden suhteessa tunnettuihin ja hyvin aktiivisiin aineisiin.

Taulukko 2 on erittäin merkitsevä arvioitaessa tämän keksinnön kohteena olevia yhdisteitä, koska siitä saa käsityksen niiden vaikutuksesta sileiden lihasten kouristusten eri komponentteihin "in vivo".

Tämän taulukon tutkiminen tekee tosiasiassa ilmeiseksi sen, että nämä yhdisteet eivät ole aktiivisia vain papaveriini-tyyppisellä mekanismilla, vaan se osoittaa myös, kuinka ne pystyvät hillitsemään vaihte-levassa määrin serotoniinin, histamiinin ja oksitosiinin kouristusta 9 61479 aiheuttavaa aktiivisuutta. Siten esimerkiksi antiserotoniininen aktiivisuus on arvoltaan sama kuin metisergidillä (lääkeaine, joka tunnetaan yhtenä voimakkaimmin antiserotoniinisesti vaikuttavista aineista) , kun taas antihistamiinivaikutus on hiukan pienempi kuin pro-metatsiinilla (histamiinin vastaisena käytetty farmaseuttinen aine). Yksi näiden piirteiden käytännön näkökohta on siis keksinnön mukaisten yhdisteiden käyttö ihmisten tuskallisissa kouristuksissa, jotka johtuvat monista fysiologisista syistä, kuten tietyt hormonaaliset tilanteet (analogia BaC^-kouristukseen) tai muu sisäsyntyinen histamiinin tai serotoniinin kehittyminen.

Näiden yhdisteiden kouristustenvastaista aktiivisuutta kokeiltiin myös sekä "in vivo" että "in vitro" virtsaelimiin (virtsajohdin) ja virtsarakkoon.

"In vivo"-koe tehtiin nukutetun ja eläimen ruumiin lämpötilaan lämmitettyyn ympäristöön asetetun rotan virtsarakolla, jolloin rakon liikkeet rekisteröitiin siihen liitetyllä laitteistolla. Lääkeaineet annettiin eläimelle laskimonsisäisesti. "In vitro"-kokeessa rotan virtsajohdin suspendoitiin fysiologiseen suolaliuokseen, ja koesuori-tettiin Magnus-menetelmällä. Joitakin esimerkkejä tästä aktiivisuudesta on annettu taulukossa 3.

Taulukko 3

Aineet Rotan virtsarakko Rotan virtsajohdin I "in vivo" "in vitro" _ ED50 mg/kg ED50 ml CR 605 (esim. 1) 6,25 74,2 CR 725 (esim. 10) 8,32 27,3

Atropiini - tehoton

Skopolamiini-N- butyylibromidi tehoton i Papaveriini 7,59 45,2

On erityisen mielenkiintoista huomata, että etenkin "in vivo" keksinnön mukaisesti valmistetut yhdisteet ovat epäsuorasti aktiivisempia kuin papaveriini. Tämä aktiivisuus on sitäkin kiinnostavampi, kun sympaattikusta kiihdyttävät aineet kuten atropiini ja skopolamiini-N-butyylibromidi (laajalti käytettyjä kouristuksenvastaisia lääkeaineita ovat tehottomia tässä kokeessa. Toinen uusien yhdisteiden mielen- 1 o 614 7 9 kiintoinen piirre on, että ne eivät yleensä vaikuta elinten fysiologiseen rytmiin, vaan ainoastaan niiden kouristukseen.

Erittäin merkitseviä tässä suhteessa ovat taulukossa 4 esitetyt tulokset.

υ ; / y g

cH

φ -P :<0 CH m ro in σ\ oo

-μ·Η·ΗιΗ ' ^ ' 'CM

Φ (0 (0 G "H 00 00 r- 'S' - O

> > to G H l«sr<N »-Γ- <- χ g :ifl I + ++ + D # i- +) > rl p _________

•H

& & c

G (B-H C

φ COCO) mmm n (N O

φ G<1) --- -- in g λ: — oo m m oo ro ία; 4J h h n m i/i m m in

G :(0 G

•p (N TO — cn H " 1

P

G C

0 -PC

X G <D f' m id oo r- (n CO) - -- G g A! — r- σι ίο ο σο i CD +J rl rl 'S' 'S' ιη·ςτ 'S' t3 :(0 e •P r- TO —’ >1---------- X ----—- Φ

P CN

+J

•P (0 d to :(0 dl rp

G τ— I—I

W -H -P

-p dp H in :/0 -P I :(0 - cn σι o <r> X p g > r-'S'- -- - Φ Ο ή <- m τ- oo i— t- O' in d Φ G 11+ +i +

G 4-> -P

O G (0 X G

,y -p x -p g a: -p m (0 g g p g > +>

I—I O

G d (0 (0 G -n---:---------- E-ι (0 X (0

(0 X

g G C I- σι σι mm in S -h c - -- (0 GO) ro m in mm ι- το c<D m οι n com cn G A! i-ι- <— i-

1 +JHH

G :(0 6 G CN TO'-' X ------*" as cn r- cn ro cn m g G -- — -- - hg in ro i— i— r- n- in GO) oo i— ro r^m oo G GO) T- <N l- r- r- r— X GX-

G PHH

* :(0 ε -H li- τοητ--1 I __---- (0 -p as tn > CnrH A! + Cn + tn O O \ tn X Ai h g tn tn cta; \ tn'-- tn ο ω in g ε G^-- cn G Cn O -ho tn g ε G WGGom og o G >, φ -p m mo mo < mCdCN cn m <— cn . ........— —— - ..... - r—1 I—I o o

ι-H rH

0Ö .§ .§ 03 -i -p in in in in d ·η ^φ ·η φ φ -ρ φ Φ d G G ^ ^ G ^ +j O -h m -h m m -h m

in p -H o -H O (N -H CN

•h -h hj *p m m-i m γ^+ηγ-

X g G P P P

X-H O O « O OS Oi O Oi >h g « s o s u asu 12 61 4 79 Tässä taulukossa esitetyt tulokset on saatu täyttämällä fysiologisella liuoksella maha ja sappitiehyt ja ottamalla talteen ulos tuleva neste mahanportin ja Oddin sulkijalihaksen jälkeen. Voidaan huomata, että virtauksessa ensimmäisen ja toisen keräystunnin välillä ei ole merkitseviä eroja. Jos tämän keksinnön mukaiset yhdisteet annetaan laskimonsisäisesti, joista yhdisteistä joitakin on esitetty taulukossa 4, ei nesteen ulosvirtauksessa ole mitään merkitseviä eroja; jos kuitenkin annetaan morfiinia esitetyssä määrin välittömästi ensimmäisen keräystunnin jälkeen, on virtauksessa toisen tunnin aikana voimakas väheneminen, joka antaa todisteen sulkijalihaselimissä vallitsevasta kouristustilasta. Kun keksinnön mukaisia yhdisteitä annetaan samanaikaisesti morfiinin kanssa ja esitetyssä määrin, ne mitätöivät mainitun kouristuksen. Tämä piirre, ominainen näille yhdisteille, on erittäin tärkeä terapeuttiselta kannalta, koska se osoittaa, että mainitut yhdisteet ovat aktiivisia vain patologisen komponentin läsnäollessa jättäen elimen normaalin toiminnan häiritsemättä. Nämä yhdisteet ovat myös tehokkaita verenkiertoelinten sileiden lihasten kouristusten estäjiä. Jotkut yhdisteistä ovat tässä suhteessa niin aktiivisia, että niitä voidaan käyttää lääkeaineina.

Tämä aktiivisuus määritettiin nesteeseen ripustetulla rotan häntävaltimolla, jolle aiheutettiin kouristus nesteeseen lisätyllä ergotamiinitartraatilla (350 ^g/ml) ja mittaamalla suonen sisäisen paineen vaihtelut.

Kokeiltavat aineet vastustivat kouristusta. Arvostelu tehtiin käyttäen ED^q, so. se tuotteen väkevyys täyttönesteessä ilmoitettuna pg/ml, joka pystyy pienentämään aiheutettua supistumista 50 %.

Taulukossa 5 on annettu joitakin esimerkkejä tästä aktiivisuudesta .

Taulukko 5

Yhdiste ED50 CR 651 (esim. 9) 37 CR 816 (esim. 1) 12

Toisessa kokeessa rotan häntävaltimoa ärsytettiin sähköisesti ja kylpyyn lisättiin lääkeaineita. Aktiivisuus on ilmoitettu ED^q-arvona, so. lääkeaineen konsentraationa ^ig/ml täyttönestettä, joka pienentää sähköisen ärsykkeen vaikutuksen puoleen kontrollikokeessa saadusta sähköisen ärsykkeen vaikutuksesta. Tulokset on esitetty taulukossa 6.

13 61 4 7 9

Taulukko 6

Yhdiste ED50 /u9/m·*· CR 651 (esim. 9) 19 CR 816 (esim. 1) 7 Sähköisen ärsykkeen ominaisarvot: - taajuus 20 Hz - kesto 0,02 sek

- jännite 100V

Keksinnön mukaista menetelmää voidaan esittää seuraavalla reaktiokaaviolla: HO-^ ^-CH^CH-COOH diasylointi^ v^y nh2 R2-C0-0^// 'V- CH--CH-COOH (I) amidointi \=/ NH -->

CO

*2 // \ ^ R3 / CH2~CH-CO-N hydrolyysi \=^y NH R.

CO (I1' *2 HO—/' } CH^-CH-CO-Neetteröinti.

CO

R2 P * 5\ /““Λ

N-Alk-O-T y-CH2-CH-C0-N

R6 \=/ NH \ io ? r2 14 61 479

Keksinnön mukaista menetelmää kuvataan yksityiskohtaisesti seuraavassa:

Tyrosiini ja happokloridi I^-CQ-Cl saatetaan reagoimaan stökio-metrisessä suhteessa (2 moolia kloridia tyrosiinimooleja kohti) edullisesti noin +5°C:ssa alkalimetalli- tai maa-alkalimetallihydroksidin, -karbonaatin tai -bikarbonaatin läsnäollessa, jotka toimivat sekä tyrosiinin karboksyyliryhmän suolanmuodostajina ja muodostuvan kloori-vetyhapon "akseptorina". Siksi käytetään edullisesti täsmällisesti kolme ekvivalenttia mainittua hydroksidia, karbonaattia tai bikarbo-naattia kutakin tyrosiiniekvivalenttia kohti. Happokloridi voidaan lisätä sellaisenaan tai veteen sekoittuvaan orgaaniseen liuottimeen liuotettuna, kuten dioksaaniin tai tetrahydrofuraaniin liuotettuna. Reaktio on käytännöllisesti katsoen päättynyt 12 tunnin kuluttua.

Reaktioseos tehdään happameksi edullisesti kloorivetyhapon vesiliuoksella; tällöin saadaan yhdiste (I) sakkana, joka eristetään suodattamalla ja voidaan kiteyttää haluttaessa uudelleen.

"Seosanhydridi"-menetelmä, jota tässä käytetään yhdisteen (I) amidoimiseen, on Boissonas'n kuvaama julkaisussa Helvetica Chimica Acta 34, 874 (1951). Tämän menetelmän mukaisesti yhdiste (I) liuotetaan tai suspendoidaan vedettömään, inerttiin, orgaaniseen liuottimeen, kuten asetoniin, kloroformiin, dioksaaniin, tetrahydrofuraaniin tai etyyliasetaattiin, ja muutetaan suolaksi lisäämällä stökiometrinen määrä tertiääristä amiinia, edullisesti trietyyliamiinia, saattamalla sitten reagoimaan stökiometrisessä suhteessa alkyyliklooriformiaatin kanssa (esim. etyyli-, propyyli- tai butyyliklooriformiaatti) lämpötila välillä -15°C - +5°C, edullisesti -10°C:ssa, 10-120 minuuttia edullisesti noin 30 minuuttia. Näin muodostunut seosanhydridi, jota ei eristetä reaktioseoksesta, saatetaan sitten reagoimaan 1-2 moolin (edullisesti 1,5 moolia) kanssa primaarista tai sekundaarista amiinia, jolla tässä tapauksessa on kaava R, , kuten edellä on esitetty; \nh R4 reaktiolämpötila on edullisesti 0°C. Noin 12 tunnin kuluttua reaktio on käytännöllisesti katsoen päättynyt.

Tässä vaiheessa liuotin haihdutetaan edullisesti reaktioseoksesta alennetussa paineessa ja kaavan (II) mukainen 0,N-diasyylityro-siiniamidi voidaan eristää öljymäisestä jäännöksestä sakan muodossa laimentamalla jäännös orgaanisella liuottimena, joka ei ole 0,N-dia- 15 61 479 syylityrosinamidin (II) liuotin, esim. petrolieetterillä, ligroiinil-la tai etyylieetterillä. Kuitenkin edullisesti öljymäinen jäännös liuotetaan ensin veteen sekoittumattomaan orgaaniseen liuottimeen (esim. kloroformiin, etyyliasetaattiin, bentseeniin) ja liuos pestään toistuvasti vedellä suolojen ja reagoimattomien amiinien poistamiseksi; veteen sekoittumaton liuotin haihdutetaan sitten vakuumissa ja korvataan sitten yllämainitulla ei liuottavalla liuottimena, jolloin saadaan sakka.

Kaavan (II) mukaisen yhdisteen hydrolyysi suoritetaan edullisesti vesi/alkoholiväliaineessa, koska reaktio systeemin homogeenisuudesta johtuen on nopeampi kuin vesiväliaineessa. Hydrolyysiin käytetty emäs on edullisesti alkalimetallihydroksidi, -karbonaatti tai -bikarbonaatti, jota käytetään 1-2 ekvivalenttia yhdisteeseen (II) verrattuna. Edullisesti käytetään alhaalla kiehuvia alkoholeja, kuten metyyli-, etyyli- ja isopropyylialkoholia ja käytetty määrä on edullisesti minimimäärä, joka tarvitaan yhdisteen (II) liuottamiseksi vesi/alkoholi-väliaineeseen. 6 tunnin kuluttua noin 25°C:ssa hydrolyysi on käytännöllisesti katsoen päättynyt. Diamidojohdannainen (III) voidaan eristää laimentamalla reaktioseos vedellä ja tekemällä happamaksi laimealla mineraalihapolla (esim. 2n kloorivetyhappo) käyttäen lakmusta indikaattorina; sakka saadaan talteen suodattamalla ja voidaan haluttaessa kiteyttää uudelleen.

Vaiheessa (d) diamidojohdannainen (III) liuotetaan tai sus-pendoidaan edullisesti vedettömään, orgaaniseen liuottimeen, kuten asetoniin, bentseeniin, tolueeniin, dimetyylisulfoksidiin, dimetyyli-formamidiin tai etyyliglykolidimetyylieetteriin; edullisia ovat liuottimet, jotka eivät ole veteen sekoittuvia ja ovat suhteellisen korkealla kiehuvia, kuten bentseeni tai tolueeni. Liuokseen tai suspensioon lisätään ensin stökiometrinen määrä natriummetallia, natrium-metylaattia tai natriumamidia, jolloin saadaan yhdisteen (III) natrium-suola, jonka jälkeen lisätään stökiometrinen määrä halogeenialkyyli-amiinia edullisesti kloridia. Seosta keitetään palautusjäähdyttäen lämpötilassa, joka ei ylitä 120°C, 2-48 tunnin ajan, edullisesti noin 12 tuntia.

Lopputuote (IV) otetaan reaktioseoksesta talteen edullisesti seuraavalla tavalla. Seos uutetaan epäorgaanisen hapon vesiliuoksella, ja uutteen pH säädetään välille 7-10 huoneen lämpötilassa lisäämällä uutteeseen natriumhydroksidin tai -karbonaatin vesiliuosta. Yhdiste (IV) voidaan nyt uuttaa vapaana emäksenä veteen sekoittamattomalla 16 61 4 79 orgaanisella liuottimena, kuten kloroformilla tai etyyliasetaatilla, ja eristää haihduttamalla liuotin vakuumissa.

On huomattava, että jotkut yhdisteet (IV) ovat kiinteitä aineita ja jotkut muut yhdisteet (IV) paksuja öljymäisiä aineita; siitä huolimatta ne ovat liukenemattomia tai melkein liukenemattomia veteen. Siksi on edullista, ettei niitä eristetä vapaina emäksinä, vaan mieluummin vesiliukoisina farmaseuttisesti hyväksyttävinä suoloina, kuten hydroklorideina, hydrobromideina, sulfaatteina, sitraatteina, oksa-laatteina tai maleaatteina. Tätä varten on vain tarpeen tehdä yhdisteen (IV) liuos vedettömässä orgaanisessa liuottimessa, kuten asetonissa, kloroformissa, etanolissa tai metanolissa, happameksi vastaavalla hapolla.

Esimerkki 1 a) 0,N-(di-bentsoyyli)-L-tyrosiini

Liuokseen, joka sisälsi 18,1 g (0,1 mol) L-tyrosiinia 100 mltssa ' NaOH:ta (5°C) lisättiin samanaikaisesti sekoittaen noin 30 minuuttissa ja pitäen reaktioseoksen lämpötila välillä 5-10°C 100 ml NaOH 1-n ja 28.1 g (0,2 moolia) bentosyylikloridia. Sekoittamista jatkettiin 12 tuntia, seos tehtiin happameksi 2-n HCl:llä ja suodatettiin ja kiteytettiin etanolista (95 %).

Saatu määrä 35 g. Saanto 88 %. Sp. 208-21 1°C. 29-2° (tetrahydrofuraanissa).

b) O,N-(di-bentsoyyli)-DL-tyrosyyli-di-n-propyyliamidi 38,8 g (0,1 mol) 0,N-(dibentsoyyli)-L-tyrosiinia liuotettiin 300 ml:aan vedetöntä asetonia; liuos jäähdytettiin -10°C:een ja siihen lisättiin 10,1 g (0,1 mol) trietyyliamiinia sekoittaen; sitten lisättiin 10,8 g (0,2 mol) etyyliklooriformiaattia, edelleen -10°C:ssa. Lämpötila pidettiin -10°C:ssa 20 minuutin ajan, ja sitten lisättiin 10.1 g (0,1 mol) di-n-propyyliamiinia, ja seosta sekoitettiin 6 tuntia, jolloin lämpötila sai nousta huoneen lämpötilaan; seos haihdutettiin kuiviin, ja jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin.

Liuos pestiin 2-n HCl:llä, sitten natriumbikarbonaatilla ja lopuksi vedellä, kuivattiin Na2S0^:llä ja haihdutettiin pieneen tilavuuteen. Tuote saostettiin lisäämällä petrolieetteriä.

Saatu määrä 38,2 g. Saanto 81 %. Sulamispiste 114-116°C (kiteytetty 95 % etanolista).

c) N-bentsoyyli-DL-tyrosyyli-di-n-propyyliamidi 47,2 g (0,1 mol) Ο,Ν-dibentsoyyli-DL-tyrosyyli-di-n-propyyli-amidia 300 ml:ssa metanolia sisältävään liuokseen lisättiin sekoittaen 100 ml 1-n NaOH; seosta sekoitettiin 6 tuntia, liuos laimennettiin 500 ml:11a H20 ja tehtiin happameksi 2-n HCl:llä.

17 61479

Saostunut kiinteä aine suodatettiin ja kiteytettiin uudelleen 95-%:isesta etanolista. Saatu määrä 34,2 g. Saanto 93 %. Sulamispiste 193-195°C.

d) 0-(2-dietyyliamino-etyyli)-N-bentsoyyli-DL-tyrosyyli-di-n-propyyliamidi (CR 605)_ 36,8 g (0,1 mol) N-bentsoyyli-DL-tyrosyyli-di-n-propyyliamidia suspendoitiin 350 ml:aan tolueenia; tähän lisättiin sekoittaen 5,4 g (0,1 mol) natriummetylaattia ja 50 ml (0,1 mol) 2-dietyyliamino-etyyli-kloridin titrattua liuosta tolueenissa. Lämpötila kohotettiin 105°C:seen ja seosta sekoitettiin 105°C:ssa 12 tuntia. Tolueeniliuos uutettiin 2-n HCltllä jäähtynyt vesifaasi tehtiin emäksiseksi natrium-karbonaatilla ja uutettiin sitten uudelleen perättäisillä etyyliase-taattiannoksilla. Yhdistetyt orgaaniset faasit kuivattiin vedettömällä Na2SO^:llä, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin, öljymäinen jäännös muuttui kiinteäksi muutaman tunnin kuluttua. Saatu määrä 39,2 g. Saanto 84 %. Sp. 65-67°C. (Kiteytys petrolieetteristä).

Vapaa emäs voidaan muuttaa suolaksi sen saattamiseksi veteen liukenevaksi. Tätä tarkoitusta varten se esimerkiksi liuotetaan asetoniin ja saostetaan oksalaattina lisäämällä oksaalihapon etanoli-liuosta. Se kiteytetään uudelleen etanolista. Sulamispiste (oksa-laatti): 159-162°C. Vaihtoehtoisesti vapaa emäs voidaan liuottaa asetoniin ja seostaa asetoni/HCl-liuoksella. Kiteytetään uudelleen eta-noli/asetoni-seoksesta. Sulamispiste (hydrokloridi): 180-183°C.

Analogisesti valmistettiin: 0-(2-dimetyyliamino-etyyli)-N-bentsoyyli-DL-tyrosyyli-di-n-propyyliamidi (CR 592)_

Saanto 84 %. Sulamispiste (oksalaatti): 169-171°C. (kiteytys etanolista).

0-(2-di-isopropyyliamino-etyyli)-N-bentsoyyli-DL-tyrosyyli-di-n-propyyliamidi (CR 624)_

Saanto 78 %. Sp. (oksalaatti): 154-155°C. (kiteytyy asetonista).

0-(2-di-n-propyyliamino-etyyli)-N-bentsoyyli-DL-tyrosyyli-di-n-propyyliamidi (CR 823)_

Saanto 79 %. Sulamispiste (oksalaatti): 128-130°C.

0-(3-dietyyliamino-propyyli)-N-bentsoyyli-DL-tyrosyyli-di-n-propyyliamidi (CR 816)_

Saanto 81 %. Sp. (oksalaatti): 112-114°C (kiteytys asetonista).

18 61 479 O-(4-dietyyliamino-butyyli)-N-bentsoyyli-DL-tyrosyyli-di-n- propyyliamidi (CR 829)__

Saanto 76 %. Sp. (oksalaatti): 107-110°C (kiteytys asetoni/ eetteri-seoksesta).

0-(3-dimetyyliamino-propyyli)-N-bentsoyyli-DL-tyrosyyli-di-n- propyyliamidi (CR 607)_

Saanto 83 %. Sp. (oksalaatti): 120-123°C (kiteytys asetonista). 0-(2-pyrrolidyyli-N'-etyyli)-N-bentsoyyli-DL-tyrosyyli-di-n- propyyliamidi (CR 625)_

Saanto 80 %. Sp. (oksalaatti): 185-187°C (kiteytys etanoli/ asetoniseoksesta).

0-(2-piperidyyli-N'-etyyli)-N-bentsoyyli-DL-tyrosyyli-di-n- propyyliamidi (CR 630)_

Saanto 79 %. Sp. (oksalaatti): 175-177°C.

0-/3-(N"-hydroksietyyli-piperatsiini)-N1-propyyli7-N-bentsoyyli- DL-tyrosyyli-di-n-propyyliamidi (CR 609)_

Saanto 73 %. Sp. (oksalaatti): 193-195°C (kiteytys etanolista). 0-/3-(N"-bentsyyli-piperatsiini)-N'-propyyli7-N-bentsoyyli-DL- tyrosyyli-di-n-propyyliamidi (CR 619)_

Saanto 75 %. Sp. (oksalaatti): 242-245°C.

0-(3-dietyyliamino-1,2-dimetyyli-propyyli)-N-bentsoyyli-DL- tyrosyyli-di-n-propyyliamidi (CR 700)_

Saanto 69 %. Sp. (oksalaatti): 103-106°C.

Esimerkki 2 a) O,N-(di-bentsoyyli)-DL-tyrosyyli-amidi

Esimerkin 1b) menetelmällä käyttäen ammoniakin vesiliuosta di-n-propyyliamiinin asemesta saatiin otsikon yhdiste. Saanto 70 %.

Sp. 246-248°C.

b) N-bentsoyyli-DL-tyrosyyli-amidi

Valmistus esimerkin 1 c) menetelmällä. Saanto 94 %. Sp. 234-236°C.

c) 0-(2-dietyyliamino-etyyli)-N-bentsoyyli-DL-tyrosiili-amidi (CR 740)_

Valmistus esimerkin Id) menetelmällä käyttäen N-bentsoyyli-DL-tyrosyyliamidia N-bentsoyyli-DL-tyrosyyli-di-n-propyyliamidin asemesta. Saanto 77 %. Sp. (emäs): 155-158°C (kiteytys asetonista). Esimerkki 3 a) O,N-(di-bentsoyyli)-DL-tyrosyyli-di-metyyliamidi Valmistus esimerkin 1b) mukaisesti. Saanto 78 %. Sp. 212-215°C.

19 61479 b) N-bentsoyyli-DL-tyrosyyli-di-metyyliamidi Valmistus esimerkin 1c) mukaisesti. Saanto 94 %. Sp. 237-239°C (kiteytys metanolista).

0-(2-dietyyliamino-etyyli)-N-bentsoyyli-DL-tyrosyyli-di- metyyliamidi (CR 738)___________

Valmistus esimerkin 1d) mukaisesti. Saanto 80 %. Sp. (oksa-laatti).

Esimerkki 4 a) 0,N-(di-bentsoyyli)-D,L-tyrosyyli-n-propyyliamidi Valmistus esimerkin 1b) mukaisesti. Saanto 78 %. Sp. 221- 224°C.

b) N-bentsoyyli-D,L-tyrosyyli-n-propyyliamidi Valmistus esimerkin 1c) mukaisesti. Saanto 92 %. Sp. 169- 171°C (kiteytys etanolista).

c) 0-(2-pyrrolidyyli-N*-etyyli)-N-bentsoyyli-D,L-tyrosyyli- n-propyyliamldi (CR 821)_______

Valmistus esimerkin 1d) mukaisesti. Saanto 76 %. Sp. 169-172 C (kiteytys asetonista).

Esimerkki 5

a) 0,N-(dibentsoyyli)-D/L-tyrosyyli-n-butyyliamidi Valmistus esimerkin 1b) mukaisesti. Saanto 80 %. Sp. 189-192 C

(kiteytys etanolista).

b) N-bentsoyyli-D,L-tyrosyyli-n-butyyliamidi

Valmistus esimerkin 1c) mukaisesti. Saanto 92 %. Sp. 158-160 C (kiteytys etanolista 80 %).

c) 0-(2-pyrrolidyyli-N'-etyyli)-N-bentsoyyli-DL-tyrosyyli-n- butyyliamidi (CR 648)_____

Valmistus esimerkin 1d) mukaisesti. Saanto 79 %. Sp. (oksa-laatti): 182-184°C.

Analogisesti valmistettiin: 0-/.3- (N"-metyyli-piperatsino) -N'-propyyli/-N-bentsoyyli-DL- tyrosyyli-n-butyyliamidi (CR 702)__

Saanto 82 %. Sp. (oksalaatti): 223-225°C.

O-(2-dietyyliaminoetyyli)-N-bentsoyyli-DL-tyrosyyli-n-butyyli- amidi (CR 786)_

Saanto 81 %. Sp. (emäs): 123-125°C (kiteytys asetoni/logroiini-seoksesta) 61479 20

Esimerkki 6 O,N-(di-bentsoyyli)-DL-tyrosyyli-bentsyyliamidi

Valmistus esimerkin 1b) mukaisesti. Saanto 77 %. Sp. 262-265°C (kiteytys metanolista).

N-bentsoyyli-DL-tyrosyyli-bentsyyliamidi

Valmistus esimerkin 1c) mukaisesti. Saanto 90 %. Sp. 238-240°C (kiteytys metanolista).

O-(2-dimetyyliaminoetyyli)-N-bentsoyyli-DL-tyrosyyli-bentsyyli- amidi (CR 616)_

Valmistus esimerkin 1d) mukaisesti. Saanto 82 %. Sp. (hydrokloridi): 189-190°C.

Esimerkki 7 Ο,Ν-di-bentsoyyli-DL-tyrosyyli-pyrrolidyyliamidi

Valmistus esimerkin 1b) mukaisesti. Saanto 74 %. Sp. 160-163°C (kiteytys etanolista).

N-bentsoyyli-DL-tyrosyyli-pyrroliyyliamidi

Valmistus esimerkin 1c) mukaisesti. Saanto 88 %. Sp. 200-202°C.

0-(2-dietyyliamino-etyyli)-N-bentsoyyli-DL-tyrosyyli-pyrroli-dyyliamidi (CR 614)_

Valmistus esimerkin 1d) mukaisesti. Saanto 79 %. Sp. (oksa-laatti): 170-174°C.

Esimerkki 8 O,N-(ditolyyli)-L-tyrosiini

Valmistus esimerkin 1a) mukaisesti. Saanto 89 %. Sp. 176-178°C (kiteytys etanolista) . +23 - 2° (tetrahydrofuraanissa) .

O,N-(ditolyyli)-D,L-tyrosyyli-di-n-propyyliamidi

Valmistus esimerkin 1b) mukaisesti. Saanto 80 %. Sp. 169-173°C (kiteytys etanolista).

N-tolyyli-DL-tyrosyyli-di-n-propyyliamidi

Valmistus esimerkin 1c) mukaisesti. Saanto 91 %. Sp. 193-196°C (kiteytys etanolista).

O-(2-dimetyyliamino-etyyli)-N-tolyyli-DL-tyrosyyli-di-n-pro-pyyliamidi (CR 615)_

Valmistus esimerkin 1d) mukaisesti. Saanto 82 %. Sp. (oksa-laatti): 185-187°C.

Analogisesti valmistettiin: O-(2-pyrrolidyyli-N'-etyyli)-N-tolyyli-DL-tyrosyyli-di-n-propyyliamidi (CR 650)_

Saanto 77 %. Sp. (oksalaatti): 159-161°C (kiteytys asetoni/ alkoholiseoksesta).

21 614 7 9 O- (2-dietyyliamino-etyyli) -N-tolyyli-DL-tyrosyyli-di-n-pro- pyyliamidi (CR 807)_____

Saanto 83 %. Sp. (oksalaatti): 146-149°C.

Esimerkki 9 O,N-(ditolyyli)-DL-tyrosyyli-n-butyyliamidi

Valmistus esimerkin 1b) mukaisesti. Saanto 85 %. Sp. 190-193°C (kiteytys etanolista).

N-tolyyli-DL-tyrosyyli-n-butyyliamidi

Valmistus esimerkin 1c) mukaisesti. Saanto 91 %. Sp. 174-176°C (kiteytys etanolista).

0-(2-pyrrolidyyli-N'-etyyli)-N-tolyyli-DL-tyrosyyli-n-butyyli- amidi (CR 651)__

Valmistus esimerkin 1d) mukaisesti. Saanto 80 %. Sp. (oksalaatti): 161-163°C.

Esimerkki 10 Ο,Ν-di(p-klooribenbapyyli)-L-tyrosiini

Valmistus esimerkin 1a) mukaisesti. Saanto 87 %. Sp. 207-209°C (kiteytys etanolista) . L°(J7^= +6 - 2° (tetrahydrofuraanissa) .

0,N-(di-p-klooribentsoyyli)-DL-tyrosyyli-di-n-propyyliamidi Valmistus esimerkin 1b) mukaisesti. Saanto 81 %. Sp. 148-151°C (kiteytys etanolista).

N-(p-klooribentsoyyli)-DL-tyrosyyli-di-n-propyyliamidi Valmistus esimerkin 1c) mukaisesti. Saanto 90 %. Sp. 202-204°C (kiteytys metanolista).

0- (2-dietyyliamino-etyyli)-N-(p-klooribentsoyyli)-DL-tyrosyyli- di-n-propyyliamidi (CR 716)_

Valmistus esimerkin 1d) mukaisesti. Saanto 83 %. Sp. (oksalaatti): 128-130°C (kiteytys asetonista).

Analogisesti valmistettiin: 0-^3-(N"-metyylipiperatsiini)-N'-propyyli7-N-(p-klooribentso- yyli)-DL-tyrosyyli-di-n-propyyliamidl (CR 725)_

Saanto 84 %. Sp. (sitraatti): 117-119°C (kiteytys asetonista). 0-(2'-di-isopropyyliaminoetyyli)N-(p-kloori-bentsoyyli)-DL- tyrosyyli-di-n-propyyliamidi (CR 727)_

Saanto 75 %. Sp. (oksalaatti): 154-156°C.

0-/2 '-(N"-metyylipiperatsino)-N'-etyyli7-N-(p-klooribentso- yyli)-DL-tyrosyyli-di-n-propyyliamidi (CR 733)_

Saanto: 79 %. Sp. (sitraatti): 99-101°C.

22 f· ^ 4 7 9

Esimerkki 11 Ο,Ν-(di-p-klooribentsoyyli)-DL-tyrosyyli-n-butyyliamidi Valmistus esimerkin 1b) mukaisesti. Saanto 79 %. Sp. 199— 202°C.

N-(p-klooribentsoyyli)-DL-tyrosyyli-n-butyyliamidi Valmistus esimerkin 1c) mukaisesti. Saanto 90 %. Sp. 190-192°C (kiteytys 95-%:isesta etanolista).

0-43-(N"-metyylipiperatsino)-N'-propyyli7~N-(p-klooribentso- yyli)-DL-tyrosyyli-n-butyyliamidi (CR 705)_

Valmistus esimerkin 1d) mukaisesti. Saanto 73 %. Sp. 149— 151°C (kiteytys asetonista).

Analogisesti valmistettiin: 0-(2-dietyyliaminoetyyli)-N-(p-klooribentsoyyli)-DL-tyrosyyli- n-butyyliamidi (CR 729)_

Saanto 76 %. Sp. (emäs) 109-112°C (kiteytys asetonista).

0-/2-(N"-metyylipiperatsino)-N'-etyyli7~N-(p-klooribentsoyyli)- DL-tyrosyyli-n-butyyliamidi (CR 730)_

Saanto 74 %. Sp. 147-149°C (kiteytys asetonista).

0-(2'-pyrrolidyyli-N'-etyyli)-N-(p-klooribentsoyyli)-DL- tyrosyyli-n-butyyliamidi (CR 812)_

Saanto 72 %. Sp. 162-164°C (kiteytys etyyliasetaatista). =+9*2° (tetrahydrofuraanissa) .

Esimerkki 12 a) O,N-(di-p-bromlbentsoyyli)-L-tyrosiini

Valmistus esimerkin 1a) mukaisesti. Saanto 80 %. Sp. 210-213°C (kiteytys etanolista). L°{J^ = +3 - 2° (tetrahydrofuraanissa).

b) 0,N-(di-p-bromibentsoyyli)-DL-tyrosyyli-di-n-propyyliamidi Valmistus esimerkin 1b) mukaisesti. Saanto 75 %. Sp. 161-163°C

(kiteytys metanolista).

c) N-(p-bromibentsoyyli)-DL-tyrosyyli-di-n-propyyliamidi Menettely on esimerkin 3 mukainen. Saanto 88 %. Sp. 207-210°C

(kiteytyy metanolista).

d) 0-(2-dietyyliaminoetyyli)-N-(p-bromibentsoyyli)-DL-tyro- syyli-di-n-propyyliamidi (CR 631)_

Valmistus esimerkin 1d) mukaisesti. Saanto 78 %. Sp. 118-120°C (kiteytys etyyliasetaatista).

Esimerkki 13 a) 0,N-(di-p-nitro-bentsoyyli)-L-tyrosiini 23 f, Ί A 7 9

Valmistus esimerkin 1a) mukaisesti. Saanto 77 %. Sp. 205-210°C (kiteytys etanoli/vesi-seoksesta) . Z.o(_7^ = -10 - 2° (tetrahydrofu-raanissa).

b) O/N-(di-p-nitrobentsoyyli)-DL-tyrosyyli-di-n-propyyliamidi Valmistus esimerkin 1b) mukaisesti. Saanto 74 %. Sp. 136-140°C

(kiteytys etanolista).

c) N-(p-nitrobentsoyyli)-DL-tyrosyyli-di-n-propyyliamidi Valmistus esimerkin 1c) mukaisesti. Saanto 90 %. Sp. 193-195°C

(kiteytys etanolista).

d) O-(2-dimetyyliaminoetyyli)-N-(p-nitrobentsoyyli)-DL-tyro- syyli-di-n-propyyliamidi (CR 620)_

Valmistus esimerkin 1d) mukaisesti. Saanto 80 %. Sp. (oksa-laatti): 136-138°C (kiteytys asetonista).

Esimerkki 14 a) Ο,Ν-di-(p-metoksibentsoyyli)-L-tyrosiini

Valmistus esimerkin 1a) mukaisesti. Saanto 71 %. Sp. 171-174°C (kiteytys metanolista) . = +20 - 2° (tetrahydrofuraanissa) .

b) 0,N-(di-p-metoksibentsoyyli)-DL-tyrosyyli-di-n-propyyliamidi Valmistus esimerkin 1b) mukaisesti. Saanto 68 %. Sp. 66-72°C

(amorfinen aine).

c) N-(p-metoksibentsoyyli)-DL-tyrosyyli-di-n-propyyliamidi Valmistus esimerkin 1c) mukaisesti. Saanto 87 %. Sp. 121-124°C

kiteytys etanolista).

d) O-(2-dietyyliaminoetyyli)-N-(p-metoksi-bentsoyyli)-DL- tyrosyyli-di-n-propyyliamidi (CR 644)_

Valmistus esimerkin 1d) mukaisesti. Saanto 74 %. Sp. 112-115°C (kiteytys asetonista).

Esimerkki 15 a) O,N-(di-3,4-di-metyylibentsoyyli)-L-tyrosiini

Valmistus esimerkin 1a) mukaisesti. Saanto 73 %. Sp. 206-209°C (kiteytys 95-%:isesta etanolista). £o{J^= 22,5 - 2° (tetrahydrofuraanissa) .

b) O,N-(di-3,4-di-metyylibentsoyyli)-DL-tyrosyyli-di-n-pro- pyyliamidi_____

Valmistus esimerkin 1b) mukaisesti. Saanto 70 %. Sp. 174-178°C.

c) N-(3,4-di-metyylibentsoyyli)-DL-tyrosyyli-di-n-propyyliamidi Valmistus esimerkin 1c) mukaisesti. Saanto 88 %. Sp. 190-192°C

(kiteytyy etanolista 95 %).

f 24 £14 7 9 d) O-(2-dietyyliaminoetyyli)-N-3,4-di-metyylibentsoyyli)-DL- tyrosyyli-di-n-propyyliamidi (CR 632)_

Valmistus esimerkin 1d) mukaisesti. Saanto 76 %. Sp. (oksa-laatti) 168-171°C (kiteytys asetonista).

Claims (1)

1. 25 61 4 79 Patenttivaatimus Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten D,L-N-asyyli-tyrosinamidien valmistamiseksi, joilla on kaava "^^N-Alk-O—r CH.-CH-CO-N'^^ IV R \=zJ NH CO 4 *2 jossa Alk on suora tai haarautunut, 1-6 hiiliatomia sisältävä alkyyli-ryhmä, R5 ja Rg ovat samoja tai erilaisia, suoria tai haarautuneita 1-4 hiiliatomia sisältäviä alkyyliryhmiä tai muodostavat yhdessä 4-5 hiiliatomia sisältävän alkyleeniryhmän, joka muodostaa N-atomin kanssa heterosyklisen renkaan, joka sisältää mahdollisesti toisen N-atomin (N1), jossa saattaa olla substituenttina metyyli-, hydroksietyyli-tai bentsyyliryhmä, joka heterosyklinen ryhmä on edullisesti pyrroli-dino-, piperidino- tai N'-substituoitu piperatsinoryhmä, R2 on fenyyli-ryhmä, jonka orto-, meta- tai para-asemissa voi olla yksi tai kaksi substituenttia seuraavista: kloori, bromi, nitro, metoksi tai metyyli, R^ ja R^ ovat samoja tai erilaisia ja merkitsevät vetyä, suoraa tai haarautunutta alkyyli- tai aralkyyliryhmää, jolloin ryhmien R3 ja R^ yhteenlaskettu hiiliatomien luku on korkeintaan 8, tai yhdessä 4-5 hiili atomia sisältävää alkyleeniryhmää, joka muodostaa N-atomin kanssa heterosyklisen ryhmän, edullisesti pyrrolidinoryhmän, sekä niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että a) L- tai D,L-tyrosiini saatetaan moolisuhteessa 1:2 Schotten-Baumann-reaktioon 0-10°C:ssa kaavan R2C0C1 V mukaisen happokloridin kanssa, jossa kaavassa R2 merkitsee samaa kuin edellä, jolloin saadaan Ο,Ν-diasyylityrosiini, jolla on kaava 26 61 4 7 9 R~—CO-O -l· CH--CH-COOH w7 nh co *2 jossa R2 merkitsee samaa kuin edellä, b) saatu kaavan I mukainen 0,N-diasyylityrosiini saatetaan reagoimaan inertissä orgaanisessa liuottimessa -15 - +5°C:ssa ter-tiäärisen orgaanisen amiinin, edullisesti trietyyliamiinin, ja kloori-muurahaishapon etyyli-, propyyli- tai butyyliesterin kanssa seka-anhydridiksi, joka saatetaan reagoimaan kaavan R3 VI R4 mukaisen amiinin kanssa, jossa kaavassa R^ ja R4 merkitsevät samaa kuin edellä, jolloin saadaan 0,N-diasyylityrosiiniamidi, jolla on kaava /T~\\ ^R3 R„-C0-0 -// xV-ch9-ch-co-n \=y NH „ CO R2 jossa R2, R3 ja R^ merkitsevät samaa kuin edellä, c) kaavan II mukaisen yhdisteen O-asyyliryhmä lohkaistaan hydrolysoimalla epäorgaanisen emäksen vesi- tai vesi-alkoholiliuok-sessa 20-60°C:ssa, jolloin saadan kaavan R3 H0_/^ CH2-CH-CO-N V— / NH 'V^R4 111 CO R2 27 61 479 mukainen N-asyylityrosiiniamidi, jossa kaavassa R2, ja R^ merkitsevät samaa kuin edellä, d) kaavan III mukainen N-asyylityrosiiniamidi muutetaan reaktiossa natriumiretallin, natriummetylaatin tai natriumamidin kanssa vedettömässä orgaanisessa liuottimessa natriumsuolaksi, joka saatetaan reagoimaan vedettömässä orgaanisessa liuottimessa korotetussa lämpötilassa, korkeintaan 120°C:ssa, halogeenialkyyliamiinin kanssa, jolla on kaava R5 ^N-Alk-X VII jossa R^, Rg ja Alk merkitsevät samaa kuin edellä, ja X on halogeeni, ja e) saatu kaavan IV mukainen emäs muutetaan haluttaessa farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolaksi. oo 614 7 9 Förfarande för framställning av nya terapeutiskt användbara D,L-N-acyltyrosinamider med formeln r5 _ R3 ''^N-Alk-O-// 'N—CH »-CH-CO-N \ / 2 ' IV R6 ?H R4 CO «2 väri Alk är en rak eller förgrejiad alkylgrupp med 1-6 kolatomer, och Rg är lika eller olika, raka eller förgrenade alkylgrupper med 1-4 kolatomer eller bildar tillsammans en alkylengrupp med 4-5 kolatomer, som med N-atomen bildar en heterocyklisk ring innehällande eventuellt en ytterligare N-atom (Ν'), vilken kan vara substituerad med en metyl-, hydroxietyl- eller bensylgrupp, vilken heterocyklisk grupp företrädesvis är en pyrrolidino-, piperidino- eller N'-substituerad piperazinogrupp, R2 är en fenylgrupp, som kan vara substituerad i orto-, meta- eller para-ställningarna med en eller tvä substituenter av följande: klor, brom, nitro, metoxi eller metyl, R^ och R^ är lika eller olika och betecknar väte, en rak eller förgrenad alkyl-, eller aralkylgrupp, varvid sammanräknade antal av kolatomer av grupperna R3 och R4 är högst 8, eller tillsammans en 4-5 kolatomer innehällande alkylengrupp, som med N-atomen bildar en heterocykliskgrupp, företrädesvis en pyrrolidinogrupp, och farmaceutiskt godtagbara salter av dessa föreningar, kännetecknat därav, att man a) omsätter L- eller D,L-tyrosin i en Schotten-Bauman-reaktion i molförhällandet 1:2 vid 0-10°C med en syraklorid med formeln R2C0C1 V väri R2 har ovan nämnda betydelse, varvid man erhäller en 0,N-diacyl-tyrosin med formeln 29 6 1 4 7 9 κ,-οο-ο-/' 7-ch?"ch~cooh \=/ NH CO «2 väri R2 har ovan nämnda betydelse, b) omsätter den erhällna Ο,Ν-diacyltyrosinen med formeln I i ett inert organiskt lösningsmedel vid -15 - +5°C med en tertiär organisk amin, företrädesvis med trietylamin, och etyl-, propyl- eller butylestern av klormyrsyran tili en blandanhydrid, vilken man omsätter med en amin med formeln R J^NH VI R4 väri R3 och R4 har ovan nämnda betydelse, varvid man erhäller en O,N-diacyItyrosinamid med formeln _.<'= W NH II CO väri R2» R3 och R4 har ovan nämnda betydelse, c) avspjälkar O-acylgruppen av föreningen med formeln II genom hydrolysering med en oorganisk bas i vatten- eller vatten-alkohol-lösning vid 20-60°C, varvid man erhäller en N-acyltyrosinamid med formeln ,_ «3 / 111 ho y—ch2-ch-co-n W/ NH R4 CO R2