MX2007004489A

MX2007004489A - Analogos de 17-hidroxiwortamina como inhibidores pi3k.

Info

Publication number: MX2007004489A
Application number: MX2007004489A
Authority: MX
Inventors: Adam Matthew Gilbert; Arie Zask; Ping Cai; Ker Yu; Matthew Gergory Bursavich; Jianxin Gu; Josh Kaplan
Original assignee: Wyeth Corp
Priority date: 2004-10-13
Filing date: 2005-10-13
Publication date: 2007-09-21
Also published as: US20060128793A1; AR051388A1; WO2006044453A1; AU2005295859A1; JP2008515984A; TW200626610A; GT200500287A; PE20060608A1; EP1799699A1; CA2582163A1; CN101039952A; BRPI0516592A; US7666901B2

Abstract

La presente invencion se relaciona con compuestos de formula I (ver formula I): En donde R1, R2, R3, y R8 se definen aqui.

Description

ANÁLOGOS DE 17-HIDROXIWORTMANINA COMO INHIBIDORES PI3K Esta solicitud reivindica la prioridad de la solicitud provisional U.S. 60/617,654, presentada en Octubre 13, 2004, la cual se incorpora aquí como referencia en su totalidad.

CAMPO DE LA INVENCIÓN Esta invención se relaciona con una serie de análogos de 17-Hidroxiwortmanina como inhibidores PI3K que tienen actividad antitumoral.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La wortmanina es un metabolito fungoso que se encontró que es un inhibidor catalítico potente de la fosfatidilinositol-3(OH)-quinasa (PI3K) y de la función quinasa TOR con sendas de transducción de señal. (Norman, Bryan H. et al. (1996) "Studies on the Mechanism of the Phosphatidylinositol 3-Kinase Inhibition by Wortmanina and Related Analogs", J. Med. Chem., 39, 1106-111 and Creemer, Lawrence C. (1996) "Synthesis and in Vitro Evaluation of New Wortmanina Esters: Potent Inhibitors of Phosphatidylinositol 3-Kinase," J. Med. Chem., 39, 5021-5024).

La clase-1a PI3K (denominada aquí como PI3K) es una enzima heterodimérica comprendida de las subunidades reguladora p85 y catalítica p110. En respuesta a la estimulación del receptor del factor de crecimiento, el PI3K cataliza la producción del segundo mensajero lípido fosfatidilinositol-3,4,5-trifosfato (PIP3) en la membrana celular. El PIP3 a su vez contribuye con la activación de un amplio rango de substratos celulares corriente abajo. Los mediadores de señalización más crítica corriente abajo del PI3K incluyen la serina/treonina quinasa AKT y el objetivo de mamífero de la rapamicina (mTOR). El AKT le confiere una señal de supervivencia dominante y promueve la proliferación por vía de fosforilación directa de la muerte celular múltiple/proteínas de apoptosis y los factores de ciclo celular. El mTOR es un regulador central del crecimiento celular por vía de controlar la traducción de la proteína celular. Así, la senda PI3K/AKT/TOR es crítica para la proliferación celular, crecimiento, supervivencia y angiogénesis. En el cáncer humano, la desregulación en la senda PI3K/AKT/TOR está entre los eventos más frecuentes que ocurren en todos los principales tumores humanos. La pérdida genética del gen supresor de tumor PTEN, una PIP3 fosfatasa y un regulador negativo de la señalización PI3K, se estima que ocurre en 30-50% de todos los cánceres humanos incluyendo pulmón, próstata, mama, cerebro, renal, melanoma, ovario, endometrio, tiroides y linfoide. Además, la elevación constitutiva de la expresión PI3K se ha asociado con los cánceres de pulmón, ovario y pancreático. Finalmente, los oncogenes de superficie celular tales como el Her-2, EGFR y el Ras originan la señalización PI3K constitutiva en los tumores de mama, próstata, colon y pulmón. Estos datos clínicos suministran un fuerte elemento racional para explorar los inhibidores PI3K como agentes anticancerígenos novedosos. (Cantley, L. and Neel, B. (1999) "New Insights into Tumor Suppression: PTEN Suppresses Tumor Formation by Restraining the Phosphoinositide 3-kinase/AKT pathway," Proc. Nati. Acad. Sci. USA, 96, 4240-4245. La quinasa Pl 3 y la quinasa TOR se han mostrado por ser activos en cáncer (Vivanco, I. and Sawyer, C. (2002) "The phosphatidylinositol 3-Kinase-AKT Pathway in Human Cáncer," Nature Reviews Cáncer, 2, 489-501), enfermedad cardiaca isquémica y reestenosis (Shiojima, I. And Walsh, K (2002) "Role of Akt Signaling in Vascular Homeostasis and Angiogenesis," Circulation Research, 90, 1243-1250 and Ruygrok P., et al. (2003) "Rapamycin in Cardiovascular Medicine," Intern Med J., 33, 103-109), inflamación (Wymann, M., et al. (2003) "Phosphoinositide 3-kinase gamma: A Key Modulator in Inflammation and Allergy," Biochem Soc Trans, 31 , 275-280 and Kwak, Yong-Geun, et al. (Abril 2003) "Involvement of PTEN in airway hyperresponsiveness and inflammation in bronchial asthma," The Journal of Clinical Investigation, 111 :7, 1083-1092), aglutinación de plaquetas (Watanabe, N., eí al. (marzo 2003) "Functional Phenotype of Phosphoinositide 3-kinase p85 (alpha) Nuil Platelets Characterized by an Impaired Response to GP VI Stimulation," Blood (epub)), esclerosis (Kenerson, H., et al. (2002) "Activated Mammalian Target of Rapamycin in the Pathogenesis of Tuberous Sclerosis Complex Renal Tumors," Cáncer Res., 62, 5645-5650), trastornos respiratorios (Kitaura, J., ef al. (2000) "AKT-dependent Cytokine Production in Mast Cells," J. Exp. Med., 192, 729-739 and Stewart A. (2001) "Airway Wall Remodeling and Hyperresponsiveness: Modeling Remodeling in vitro and in vivo," Pulm Pharmacol Ther, 14, 255-265), VIH (Francois, F. and Klotman, M. "Phosphatidylinositol 3-kinase Regulates Human Immunodeficiency Virus Type-1 Replication Following Viral Entry in Primary CD4(+) T Lymphocytes and Macrophages," J. Virol., 11, 2539-2549), y reabsorción ósea (Pilkington, M., eí al. (1998) "Wortmanina Inhibits Spreading and Chemotaxis of Rat Osteoclasts in vitro," J Bone Miner Res, 13, 688-694). El PI3K existe como un heterodímero estrechamente asociado de una subunidad reguladora de 85 kDa y una subunidad catalítica de 110 kDa, y se encuentra en complejos celulares con casi todos los receptores del factor de crecimiento activado por ligando y la proteína de encogen tirosina quinasa (Cantley, L.C., eí al., Cell, 64:281-302 (1991)). La subunidad reguladora de 85 kDa aparentemente actúa como un adaptador del PI3K para interactuar con los receptores de factor de crecimiento y las proteínas fosforiladas de tirosina (Margolis, C, Cell Growth Differ., 3:73-80 (1992)). Aunque el PI3K parece ser una enzima importante en la transducción de señal, con implicaciones particulares con relación a la mitogénesis y a la transformación maligna de células, solamente un número limitado de conjugados de polímero de droga solubles en agua se han identificado por tener actividad inhibidora contra el PI3K (ver, por ejemplo., Matter, W.F., eí al., Biochem. Biophys, Res. Commun., 186:624-631 (1992)). Contrario a la actividad de PI3K selectiva de los conjugados de polímero de droga solubles en agua utilizados en los métodos de la presente invención, los conjugados de polímero de droga soluble en agua bioflavinoide utilizado por Matter, eí al., particularmente quercetina y ciertos análogos de ésta, inhiben el PI3K y otras quinasas tales como la proteína quinasa C y la PI-4-quinasa (Id.). La Patente de los Estados Unidos Número 5,378,725, otorgada en Enero 3, 1995, suministra un método para inhibir el PI3K en mamíferos utilizando wortmanina o uno de ciertos análogos de esta. Una de las desventajas de la wortmanina es su toxicidad a las criaturas vivas. Aún en bajas dosis, la wortmanina en forma pura es a menudo sistemáticamente una dosis limitante para los animales de laboratorio. La producción biosintética de la wortmanina es bien conocida en la técnica y los derivados se sintetizan de la wortmanina. (Dewald, Beatrice, eí al. (1988) "Two Transduction Sequences Are Necessary for Neutrophil Activation by Receptor Agonists," The Journal of Biological Chemistry, Vol. 263, otorgado en Noviembre 5, pp 16179-16184; Norman, Bryan H., eí al. (1996) "Studies on the Mechanism of Phosphatidylinositol 3-Kinase Inhibition by Wortmanina and Related Analogs," J. Med. Chem., 39, pp 1106-1111 ; Varticovski, L, et al. (2001) "Water-soluble HPMA copolymer-wortmanina conjúgate retains phosphoinositide 3-kinase inhibitory activity in vitro and in vivo," Journal of Controlled Reléase, 74, pp 275-281 ), todas incorporadas aquí como referencia. Un derivado de la wortmanina, la 17ß-Hidroxiwortmanina preparada a partir de la reducción de la wortmanina con diborano, muestra un incremento de 10 veces la actividad relativa a la wortmanina y empuja el PI3K IC50 en el rango subnanomolar, con un IC50 de 0.50 nM. Sin embargo, la actividad antitumor de la 17ß-Hidroxiwortmanina en el modelo de mamífero C3H no muestra inhibición a una dosis de 0.5 (mg/kg) y toxicidad a una dosis de 1.0 mg/kg. Estos hallazgos condujeron a los autores a concluir, "la adición nucleofílica en la posición C-21 electrofílica de la wortmanina y los análogos relacionados se requieren para la potencia inhibidora y la actividad antitumoral. Desafortunadamente, este mecanismo parece estar ligado a la toxicidad observada" (Norman, Bryan H., eí al. (1996) "Studies on the Mechanism of Phosphatidylinositol 3-Kinase Inhibition by Wortmanina and Related Analogs," J. Med. Chem., 39, 1106-1111 , 1109-1110). Los derivados de wortmanina acetilada en el grupo hidroxilo C-17 mostraron una pérdida dramática en la actividad que conduce a los autores a concluir, "el sitio activo no puede acomodar lipofilicidad o masa estérica en el C-17 (Creemer, Lawrence C, et al. (1996) "Synthesis and in Vitro Evaluation of New Wortmanina Esters: Potent Inhibitors of Phosphatidylinositol 3-Kinase," J. Med. Chem., 39, 5021-5024, 5022). Esta conclusión es consistente con la estructura cristalográfica con rayos X del PI3K unido a la wortmanina subsecuentemente elucidada (Walker, Edward H., eí al. (2000) "Structural Determinants of Phosphoinositide 3-Kinase Inhibition by Wortmanina, LY294002, Quercetin, Myricetin, and Staurosporine," Molecular Cell, 6(4), 909-919). Otros derivados de wortmanina se abren en C-20. Al hacer reaccionar la wortmanina con los nucleófilos en la posición C-20, se abre el anillo de furano. Tales compuestos de anillo abierto demuestra un rango de actividades biológicas (Wipf, Peter, eí al. (2004) "Synthesis and biological evaluation of synthetic viridins derived from C(20)-heteroalkylation of the steroidal PI-3-kinase inhibitor wortmanina," Org. Biomol. Chem., 2, 1911-1920). Ver también U.S. 2003/0109572 de Powis. La unión del poli(etilenglicol) (PEG) ha sido empleada exitosamente en química medicinal para mejorar la solubilidad acuosa y la administración de las drogas. (Id.) Sin embargo, el PEG covalentemente unido no ofrece necesariamente mejora en la solubilidad del agua y disponibilidad de la droga a la cual esta está unida (Bebbington, David, eí al. (2002) "Prodrug and Covalent Linker Strategies for the Solubilization of Dual-Action Antioxidants/lron Chelators," Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 12, 3297-3300, 3299) y (Feng, Xia, eí al. (2002) "Synthesis and Evaluation of Water-Soluble Paclitaxel Prodrugs," Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 12, 3301-3303, 3302). En una revisión de las drogas PEG, ningunos conjugados de droga de molécula pequeña PEG de bajo peso molecular (<20,000), preparados durante un período de 20 años, han conducido a un producto clínicamente aprobado (Greenwaid, R.B. (2001) "PEG drugs: an overview," Journal of Controlled Reléase, 74, pp 159-171 , resumen). De hecho solamente unos pocos agentes anticancerígenos de molécula orgánica pequeña se han conjugado al PEG con enlaces permanentes, y aquellos no condujeron a conjugados de polímero de droga soluble en agua clínicamente superior (Greenwaid, R.B. eí al. (2003) "Effective Drug Delivery by PEGylated Drug Conjugates", Advanced Drug Delivery Reviews, 55, pp 217-250, 220). Utilizando PEG-CPT, la letalidad se demuestra por ser aproximadamente 50%, 10% y 0% para las construcciones de PEG-CPT 40,000, 20,000 y 8,000. Ostensiblemente, empleando el polímero Mw 5000 para conjugar las drogas se dieron especies rápidamente excretadas que tendrían poco o ningún efecto in vivo (Id., 225). Esto no es para decir que la unión del PEG 40,000 con su capacidad para acumular en los tumores permitirá automáticamente las drogas que tengan mayor actividad antitumor (Id., 235). Existe una necesidad de análogos de wortmanina con actividad antitumor mejorada y/o toxicidad baja. Los compuestos de la presente invención cumplen esta necesidad.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN En una modalidad, la presente invención suministra un compuesto de fórmula I: En donde: R1 se selecciona del grupo que consiste de NR4R5, SR6, y OR7; R2 se selecciona del grupo que consiste de hidrógeno, formilo, y acilo; R3 se selecciona del grupo que consiste de hidrógeno, hidroxi, alcoxi, alcanoiloxi, =O, aciloxi y carbonilo; R4 y R5 son independientemente seleccionados del grupo que consiste de hidrógeno, hidroxilo, alquilo, alquenilo, heterocíclico, arilo, heteroarilo, aralquilo, y PEG; y en donde R4 y R5 se unen opcionalmente para formar un anillo; R6 se selecciona del grupo que consiste de alquilo, arilo, heteroarilo, aralquilo y PEG; y R7 se selecciona del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, arilo, heteroarilo, aralquilo, y PEG; R8 se selecciona del grupo que consiste de hidroxi, aciloxi, y alcoxi; y sales, solvatos, e hidratos de éstos. En una modalidad, R1 es NR4R5. En una modalidad, R2 es hidrógeno. En otra modalidad, R2 es un grupo formilo. En aún otra modalidad, R3 es un grupo aciloxi. Preferiblemente, R3 es un grupo acetoxi. En una modalidad, R8 es un grupo hidroxi. En una modalidad, la presente invención suministra un compuesto de fórmula I, en donde: R1 se selecciona del grupo que consiste de NR4R5, SR6 y OR7; R2 se selecciona del grupo que consiste de hidrógeno y formilo; R3 se selecciona del grupo que consiste de hidrógeno, hidroxi, y aciloxi; R4 y R5 son independientemente seleccionados del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, alquenilo, heterocíclico, arilo, aralquilo, y PEG; y en donde R4 y R5 se unen opcionalmente para formar un anillo; R6 es un grupo alquilo; R7 es hidrógeno; R8 es un grupo hidroxi Y sales, solvatos, e hidratos de éstos. En una modalidad, la presente invención suministra compuestos de ejemplo de fórmula I. Un ejemplo es acetato de (1 E,4S,4a ?,5R,6aS,7S)-1-[[[3-(dimetilamino)propil](metil)amino]metileno]-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 , 2,4,4a, 5,6,6a, 7, 8, 9,9a, 10-dodecahid roindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo. La presente invención también comprende compuestos PEGilados de la fórmula I en donde los grupos R se describen como se hizo anteriormente. Ejemplos incluyen, pero no están limitados a los compuestos PEGilados en la posición R1, R2, o R3. En otra modalidad, la presente invención suministra un método para inhibir la actividad PI3K al suministrar un compuesto de la presente invención. La presente invención también suministra un método para inhibir PI3K en mamíferos, particularmente humanos, que comprende administrar un compuesto de la presente invención. La presente invención también suministra un método para tratar una condición dependiente de PI3K que comprende administrar un compuesto de la presente invención.

La presente invención también suministra métodos para inhibir la actividad TOR al suministrar un compuesto de la presente invención. La presente invención también suministra un método para inhibir TOR en mamíferos, particularmente humanos, que comprende administrar un compuesto de la presente invención. La presente invención también suministra composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de la presente invención y un portador farmacéuticamente aceptable. La presente invención suministra un método para tratar cáncer que comprende administrar una composición farmacéutica de la presente invención. La presente invención también suministra métodos que comprenden además administrar uno o más agentes que modulan la señalización del factor de crecimiento, la respuesta de la citoquina, y el control del ciclo celular.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS La Figura 1 describe un compuesto 17-Hidroxiwortmanina PEGilado. La Figura 2 describe un esquema de síntesis general para los compuestos de la presente invención. La Figura 3 describe un esquema de síntesis para los compuestos PEGilados de la presente invención. La Figura 4 describe un esquema de síntesis para la 17-Hidroxiwortmanina PEGilada.

La Figura 5 describe un esquema de síntesis para el derivado de 17-Hidroxiwortmanina PEGilada. La Figura 6 muestra una comparación de los resultados obtenidos con diferentes programas de dosificación IV (1x y 2x semanalmente) y concentraciones diferentes del compuesto 5 en glioma U87MG. La Figura 7 muestra una comparación de los resultados obtenidos con diferentes dosis del compuesto 5 en el glioma U87MG (dosificada a 2x semanalmente IV). La Figura 8 muestra una comparación de los resultados obtenidos con diferentes dosis del compuesto 5 en el NSCLC modelo A549 (dosificado a 1x semanalmente IV). La Figura 9 muestra una comparación de los resultados obtenidos con diferentes dosis del compuesto 53 en el glioma U87MG (dosificada a 2x semanalmente IV). La Figura 10 muestra una comparación de los resultados obtenidos con diferentes dosis del compuesto 53 en el NSCLC A549 (dosificada oralmente 2x semanalmente). La Figura 11 muestra una comparación de los resultados obtenidos con diferentes programas de dosificación IV (1x y 2x semanalmente) y diferentes dosis del compuesto 46 y el compuesto 5 en el glioma U87MG. La Figura 12 muestra actividad in vivo y la comparación de los compuestos 5, 46, 25 y 30 en el glioma U87MG donde los compuestos fueron dosificados 2x semanalmente, IV.

La Figura 13 muestra actividad in vivo de los compuestos 4 y 13 en el glioma U87MG a 5 mg/kg IP 5x o 2x semanalmente, o IV 2x semanalmente. La Figura 14 muestra los resultados de una terapia de combinación con el compuesto 5 o 53 y Paclitaxel en el modelo de glioma U87MG (todas dosificadas IV 1x semanalmente). La Figura 15 muestra los resultados de una terapia de combinación con el compuesto 5 y el Paclitaxel en el NSCLC modelo H460 (dosificado IV 1x semanalmente). La Figura 16A y B muestran que el compuesto 4 en combinación con los inhibidores MEK inhibieron sinérgicamente el crecimiento de las células tumorales de colon HCT116. La Figura 17A y B muestran que el compuesto 5 en combinación con los inhibidores MEK inhibieron sinérgicamente el crecimiento de las células tumorales de colon HCT116. Las Figuras 18 A-C muestran que el compuesto 4 en combinación con 2- (2-cloro-4-yodoanilino)-N-(ciclopropilmetoxi-3,4-difluobenzamida) (un inhibidor MEK) demostraron inhibición de crecimiento sinérgico en un panel de siete líneas de tumor de colon. Las Figuras 19 A y B muestran que el compuesto 4 en combinación con un inhibidor MEK 2-(2-cloro-4-yodoanilino)-N-(ciclopropilmetoxi-3,4-difluobenzamida) demuestra inhibición sinérgica de crecimiento en líneas celulares de cáncer de pulmón de célula no pequeña (NSCLC).

La Figura 20 A muestra que el compuesto 4 en combinación con el inhibidor MEK 2-(2-cloro-4-yodoanilino)-N-(ciclopropilmetoxi-3,4-difluobenzamida) demuestra inhibición sinérgica del crecimiento en las células tumorales de mama MDA231. La Figura 20B muestra que el compuesto 4 en combinación con un inhibidor MEK 2-(2-cloro-4-yodoanilino)-N-(ciclopropilmetoxi-3,4-difluobenzamida) demuestra inhibición sinérgica del crecimiento en las células tumorales de próstata DU145. La Figura 21 muestra la inducción sinérgica de apoptosis en las células HCT116 mediante tratamiento de combinación del compuesto 4 con el inhibidor MEK 2-(2-cloro-4-yodoanilino)-N-(ciclopropilmetoxi-3,4-difluobenzamida). La Figura 22 suministra el análisis "Western blotting" de las células HCT116 en varios marcadores de senda molecular del PI3K, MEK y el control de ciclo celular. Las células fueron tratadas con agentes simples o de combinación durante 16 horas. La Figura 23 muestra que el inhibidor HER2/neu (E)-N-{4-[3-cloro-4-(2-piridinil metoxi)anilino]-3-ciano-7-etoxi-6-quinolinil}-4-(dimetilamino)-2-butenamida (denominada como "HKI-272") en combinación con el compuesto 4 (0.1 µg/ml) inhibe sinérgicamente el crecimiento de las células tumorales de mama MDA361-DYT2 que sobreexpresan en HER2/Neu. La Figura 24 suministra el análisis "Western blot" del MDA361-DYT2 en varios marcadores de senda molecular del PI3K, HER2/Neu, ERK y control de ciclo celular. Las células se trataron durante 16 h.

La Figura 25 muestra que el inhibidor mTOR CCI-779 en combinación con el compuesto 4 (0.1 µg/ml) inhibe sinérgicamente el crecimiento de las células de mama MDA-MB-231. La Figura 26 A y B muestran que el inhibidor mTOR CCI-779 en combinación con el compuesto 4 (0.1 µg/ml) inhibe sinérgicamente el crecimiento de las líneas celulares de tumor de colon. La Figura 27 A y B muestran que el inhibidor mTOR CCI-779 en combinación con el compuesto 4 (0.1 µg/ml) inhiben sinérgicamente el crecimiento de las líneas celulares de tumor de mama negativas PTEN. En el evento de un conflicto entre el nombre y la estructura de un compuesto, la estructura prevalece.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN En una modalidad, la presente invención suministra un compuesto de fórmula I: en donde: R1 se selecciona del grupo que consiste de NR4R5, SR6, y OR7; R2 se selecciona del grupo que consiste de hidrógeno, formilo, y acilo; R3 se selecciona del grupo que consiste de hidrógeno, hidroxi, alcoxi, alcanoiloxi, =O, aciloxi y carbonilo; R4 y R5 son independientemente seleccionados del grupo que consiste de hidrógeno, hidroxilo, alquilo, alquenilo, heterocíclico, arilo, heteroarilo, aralquilo, y PEG; y en donde R4 y R5 se unen opcionalmente para formar un anillo; R6 se selecciona del grupo que consiste de alquilo, arilo, heteroarilo, aralquilo y PEG; y R7 se selecciona del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, arilo, heteroarilo, aralquilo, y PEG; R8 se selecciona del grupo que consiste de hidroxi, aciloxi, y alcoxi; y las sales, solvatos, e hidratos de éstos, suministrados siempre y cuando el compuesto no sea un compuesto de fórmula V: en donde R es alquilo, o un conjugado droga-polímero de una fórmula no repetida única (B): B en donde R10 es -O-, -NH-, o -S-; R11 es alquilo, un cicloalquilo, o arilo; R3 es H, =O, -O-COC4H9, u OR12; R12 es H, COR13 o alquilo; R13 es alquilo, H, arilo, o -CH2-arilo; y N es 1-1000. Los grupos R de la presente invención son opcionalmente sustituidos. Opcionalmente sustituidos significa que tiene cero, uno, o más de un sustituyente. Los sustituyentes incluyen, pero no están limitados a hidrógeno, halógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, hidroxi, alcoxi, acilo, alquilamino, arilamino, arilalquilamino, amino, ciano, carbamoilo, acetamido, carboxi, carbalcoxi, sulfonilo, PEG (polietilenglicol), heterocíclico, arilo, aralquilo, heteroarilo, grupos policíclicos, ariloxi, alquiltio, y grupos ariltio. Los sustituyentes mismos también pueden ser opcionalmente sustituidos. A menos que se especifique otra cosa, los grupos alquilo, alquenilo, y alquinilo tienen 1 a 10 átomos de carbono y pueden ser rectos, ramificados, o cíclicos. Ejemplos de grupos heterocíclicos incluyen, pero no están limitados a, pirrolidina, piperidina, piperacina, oxopiperidina, morfolino, y actetidina. Ejemplos de un anillo de benceno fusionado a un anillo heterocíclico incluyen, pero no están limitados a quinolina, isoquinolina, y dihidroisoquinolina. A menos que se especifique otra cosa, los grupos heterocíclicos contienen uno o más heteroátomos seleccionados del grupo que consiste de nitrógeno, oxígeno, y azufre. Ejemplos de los grupos arilo incluyen, pero no están limitados a los grupos fenilo y naftilo. Un grupo policíclico comprende un anillo fusionado a uno o más de otros anillos. Los anillos pueden ser aromáticos o no aromáticos. Los anillos pueden ser anillos de hidrocarburo o heterocíclicos. Formilo significa el radical -C(O)H. Acilo significa un radical orgánico derivado de un ácido orgánico mediante la remoción del grupo hidroxilo; por ejemplo R C(O)- es el radical acilo de R CO OH.

Alcoxi significa un grupo -OR, en donde R es un grupo alquilo, alquenilo, o alquinilo que puede ser opcionalmente sustituido con uno o más grupos funcionales. Carbonilo significa carbono unido al oxígeno con un enlace doble, es decir, C=O. Aciloxi se refiere a los grupos alquil-C(O)O-, alquilo-C(O)O-sustituido, cicloalquilo-C(O)O-, cicloalquilo-C(O)O-sustituido, arilo-C(O)O-, heteroarilo-C(O)O-, y heterocíclico-C(O)O-. Aciloxi incluye alcanoiloxi, alquenoiloxi y aroiloxi.

Heteroarilo significa un anillo heterocíclico aromático, que incluye sistemas de anillo mono, bi y tri cíclico, en donde al menos un átomo de carbono del sistema de anillo se reemplaza con un heteroátomo independientemente seleccionado de nitrógeno, oxígeno y azufre. Aralquilo es un alquilo arilado, que es un radical en el cual un átomo H del alquilo se sustituye por un grupo arilo. PEG es polietilenglicol. En una modalidad, R1 es NR4R5. En algunas modalidades, R4 y R5 se unen para formar un anillo. Por ejemplo, modalidades incluyen, pero no están limitadas a aquellas en donde R4 y R5 están unidos de tal forma que NR R5 es pirrolidina, piperidina, piperacina, oxopiperidina, morfolino, o acetidina. El anillo NR4R5 puede ser opcionalmente sustituido como se describió anteriormente. El anillo NR4R5 también se puede fusionar a un anillo benceno tal que NR4R5 es, por ejemplo, dihidroisoquinolina.

En otra modalidad, R1 es SR6. Los ejemplos incluyen, pero no están limitados a butilxulfanilo. En otra modalidad, R1 es OR7. Los ejemplos incluyen, pero no están limitados a -OH. En la fórmula I, R1 se describe por tener una relación estructural particular con respecto a C20 del compuesto de wortmanina. Un experto en la técnica reconocerá que otras posibles geometrías del enlace doble C20 son posibles. Aunque no hay fotografía, la fórmula I y los compuestos de la presente invención incluyen geometrías alternativas del enlace doble C20. En una modalidad, R2 es hidrógeno o un grupo formilo. R3 se selecciona del grupo que consiste de hidrógeno, hidroxi, alcoxi, alcanoiloxi, =O, aciloxi y carbonilo. En una modalidad, R3 es un grupo aciloxi. Ejemplos de un grupo aciloxi incluyen, pero no están limitados a un grupo acetoxi. En una modalidad, R8 es un grupo hidroxi. En una modalidad, la presente invención suministra un compuesto de fórmula I, en donde: R1 se selecciona del grupo que consiste de NR4R5, SR6 y OR7; R2 se selecciona del grupo que consiste de hidrógeno y formilo; R3 se selecciona del grupo que consiste de hidrógeno, hidroxi, y aciloxi; R4 y R5 son independientemente seleccionados del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, alquenilo, heterocíclico, arilo, aralquilo, y PEG; y en donde R4 y R5 se unen opcionalmente para formar un anillo; R6 es un grupo alquilo; R7 es hidrógeno; R8 es un grupo hidroxi; y las sales, solvatos, e hidratos de éstos.

La tabla de adelante suministra algunos compuestos de ejemplo de la presente invención y un "número de compuesto" asignado, que se puede utilizar aquí a través de toda la especificación. La presente invención también incluye las sales, solvatos e hidratos de los compuestos.

La presente invención también comprende compuesto PEGilados de fórmula I en donde los grupos R se describen como anteriormente. Ejemplos incluyen, pero no están limitados a compuestos PEGilados en la posición R1, R2 o R3. La presencia de ciertos sustituyentes en los compuestos de la fórmula I puede posibilitar que se formen las sales de los compuestos. Las sales adecuadas incluyen sales farmacéuticamente aceptables, por ejemplo, sales de adición de ácidos derivadas de ácidos inorgánicos u orgánicos, y sales derivadas de bases inorgánicas y orgánicas. Las sales de adición de ácido incluyen clorhidratos, bromhidratos, yodohidratos, alquilsulfonatos, por ejemplo metanosulfonatos, estanosulfonatos, o isetionatos, ariisulfonatos, por ejemplo p-toluenosulfonatos, besilatos o napsilatos, fosfatos, sulfatos, hidrogensulfatos, acetatos, trifluoroacetatos, propionatos, citratos, maleatos, fumaratos, malonatos, succinatos, lactatos, oxalatos, tartratos y benzoatos.

Las sales derivadas de las bases inorgánicas u orgánicas incluyen sales de metal álcali tales como sales de sodio o potasio, sales de metal alcalino tierra tales como sales de magnesio o calcio, y sales de amina orgánica tales como morfolino, piperidina, dimetilamina, o dietilamina. Sales particularmente útiles de acuerdo con los compuestos de acuerdo con la invención incluyen sales farmacéuticamente aceptables, especialmente sales farmacéuticamente aceptables de adición de ácido.

Los compuestos de la presente invención se pueden hacer de 17-Hidroxiwortmanina , descrita anteriormente y como se describió en la solicitud anterior US. Ser. No. 10/828,474 presentada en abril 20, 2004, incorporada aquí como referencia. La 17-Hidroxiwortmanina se puede tratar con una amina para dar un compuesto abierto de anillo de furano. La 17-Hidroxiwortmanina también se puede formular en la posición 17 y tratar con una amina para dar un compuesto abierto de anillo de furano. Ver Figura 2. Los compuestos PEGilados de la presente invención se pueden hacer de un compuesto 17-Hidroxiwortmanina PEGilado en diclorometano al agregar una amina. Ver Figura 3. Los métodos para preparar derivados de 17-Hidroxiwortmanina PEGilada y wortmanina PEGilada se describen en las Figuras 4 y 5, respectivamente, y se describen en las solicitudes previas U.S. Ser. No. 10/828,474 presentada en abril 20, 2004. Por ejemplo, como se describió en la Figura 4, una solución de 60 mg de wortmanina (0.14 mmol de Aldrich) en 12 ml de tetrahidrofurano (THF) se enfría en un baño de hielo a 0°C bajo nitrógeno. Se agrega 1 M de borano en solución de THF (134 µl, 0.14 mmol de Aldrich) y la mezcla de reacción se agita a 0°C durante 3.5 horas. La reacción se apaga con 1 mL de agua. Después de calentar a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se diluye con agua y se extrae con acetato de etilo. Después de la preparación, se obtienen aproximadamente 60 mg de sólido (17-Hidroxiwortmanina 90% pura mediante HPLC). Este sólido (aproximadamente 0.126 mmol de 17- Hidroxiwortmanina ) se disuelve en 15 ml de cloruro de metileno, reacciona con ácido yodoacético (24 mg, 0.13 mmol), diciclohexilcarbodiimida (DCC) (27 mg, 0.13 mmol) y 4-N,N-dimetilaminopiridina (DMAP) (0.1 mg como catalizador). La mezcla de reacción se mantiene a temperatura ambiente durante una hora. Después de preparación, se obtiene aproximadamente 75 mg de producto crudo (sólido amarillo). 17-dihidro-17-(1-yodoacetil)-wortmanina pura se aisla mediante HPLC preparativo. Se obtiene un total de 54 mg de sólido blanco. También, como se describió en la Figura 4, 40 mg (0.067 mmol) de 17-dihidro-17-(1-yodoacetil)-wortmanina se disuelven en 15 ml de acetonitrilo y 10 ml de bicarbonato de sodio 0.1 M bajo nitrógeno. Un total de 345 mg M-PEG-SH-5000 (0.069 mmol) se agregan en 1 hora (4 tandas). Después de agitar otra hora a temperatura ambiente, la mezcla de reacción preparada se extrae con cloruro de metileno. Se obtuvieron aproximadamente 320 mg de producto crudo. Un total de 209 mg de derivados de wortmanina PEGilada droga-polímero soluble en agua se obtienen de 260 mg de producto crudo después de HPLC prep.

En otra modalidad, la presente invención suministra un método para inhibir la actividad PI3K al suministrar uno o más compuestos de la presente invención en una célula (in vivo o in vitro). Los compuestos de la presente invención se pueden ensayar para determinar la concentración mínima suficiente para inhibir el PI3K, es decir, la concentración inhibidora mínima, IC50. Ver ejemplo 66. Las tablas 1 y 2 de adelante muestran los resultados IC50 para los compuestos de ejemplo de la presente invención. A menos que se indique otra cosa el IC50 se mide en µg/ml. Un experto en la técnica apreciaría los ensayos que demostrarían la capacidad de los compuestos de la presente invención para inhibir la actividad PI3K. Por ejemplo, la patente U.S. 5,378,725 suministra un sistema de ensayo de ejemplo que uno puede utilizar para ensayar la activad de los compuestos. Un experto en la técnica apreciaría otros sistemas de ensayo. Adicionalmente, un experto en la técnica apreciaría modelos de mamífero para utilizar estudios de inhibición de la actividad PI3K. Tales modelos incluyen, pero no están limitados a modelos de xenoinjerto en ratones atímicos. De manera similar, un experto en la técnica puede utilizar estos modelos para determinar la actividad y la toxicidad de los compuestos de la presente invención. En un protocolo in vivo, ratones Balb/c nu/nu (atímicos) son enjaulados de acuerdo con los estándares de la Asociación para la Acreditación de Cuidado de Animales de Laboratorio (AALAACC) durante al menos una semana antes de su uso experimental. Los animales son enjaulados en jaulas microaisladoras y manejados solamente en una cabina de flujo laminar. Todos los alimentos y agua son sometidos a autoclave. Los ratones son inoculados en el flanco izquierdo con un volumen de 200 µl utilizando una aguja estéril calibre 25-26 y la jeringa con una suspensión de células se resuspenden en un medio de crecimiento completo y suministradas a 10 millones de células por ratón. Cuando los tumores resultantes alcanzan el tamaño apropiado para preparación, los ratones son reagrupados para producir grupos de tamaño equivalente con n=10. Una vez preparados, los ratones son dosificados en 0.2 cc iv con los compuestos. Los compuestos pueden ser resuspendidos en solución salina amortiguada con fosfato (PBS) justo antes de inyectarla al ratón. El tratamiento es típicamente 1x semanalmente o 2x semanalmente durante la duración. En pocos estudios, el tratamiento es administrado en un programa de dosificación diario x5 repetido cada 2 semanas hasta que los pulmones alcanzan 10% del peso del animal. El crecimiento del tumor sólido es monitoreado dos veces una semana durante la duración del experimento. El tamaño del tumor es cuantificado utilizando calibradores vernier deslizantes, y se calcula la masa utilizando la formula L x W dividido por 2 en mm. La conversión de mm cúbico a mg se hace asumiendo la densidad unitaria. A los tumores no se les permite crecer más del 15% del peso del ratón, en cuyo punto el ratón es sometido a eutanasia. Las Figuras 6-15 muestran los resultados de los ensayos in vivo conducidos de acuerdo con este protocolo. Los compuestos fueron disueltos en el amortiguador de fosfato. El control del vehículo es amortiguador de fosfato sin compuesto. Todas las dosis fueron medidas en mg/kg. Para los compuestos PEGilados, la cantidad de dosis se mide mediante el compuesto base sin consideración del peso de PEG. Las líneas de células A549 (cáncer de pulmón de célula no pequeña humana) y U87 (glioblastoma) fueron comprados al American Type Culture Collection (ATCC) (Rockville, MD). Los resultados de los ensayos demuestran que los compuestos de la presente invención inhibe el crecimiento del tumor. La presente invención suministra un método para inhibir PI3K en mamíferos, particularmente humanos, que comprende administrar una cantidad que inhibe el PI3K de un compuesto de la presente invención.

Una modalidad suministra el método para tratar la condición dependiente de PI3K que comprende administrar a un sujeto una cantidad que inhibe PI3K de un compuesto de la presente invención. Las condiciones dependientes de PI3K incluyen procesos bioquímicos relevantes al dolor, diabetes, inflamación, aglutinación de plaqueta, enfermedad cardiaca isquémica, esclerosis, reestenosis, trastornos respiratorios, VIH, reabsorción ósea, y particularmente cánceres tales como cáncer de pulmón de célula no pequeña y cáncer de cerebro. En razón a que el PI3K juega un papel clave en la mitogénesis y la transformación maligna de la célula, los compuestos que inhiben el PI3K han probado ser útiles como agentes antitumorales. Así, una modalidad de la presente invención suministra métodos para tratar cáncer al administrar un compuesto de la presente invención. Tratar cáncer comprende, pero no está limitado a inhibir y/o reducir la proliferación celular tumoral, el crecimiento de célula tumoral, la tumorogénesis. Un experto en la técnica apreciaría ensayos que demuestran la capacidad de los compuestos de la presente invención al reducir la proliferación de célula. Por ejemplo, las líneas de célula son cultivadas con un compuesto de la presente invención y luego se mide la proliferación celular al, o mediante, por ejemplo, un ensayo MTS o un ensayo de incorporación de timidina. Un experto en la técnica apreciaría también otros ensayos. Los ensayos de proliferación celular de ejemplo demuestran que la concentración mínima del compuesto suficiente para inhibir el crecimiento del tumor, es decir, la concentración IC50 (µg/ml). Los resultados de los ensayos de proliferación celular para compuestos de ejemplo se muestran adelante en la Tablas 1 y 2. Las líneas de células LNCaP (carcinoma de próstata humano), MDA 468 (célula de cáncer de mama humano), MDA 435 (adenocarcinoma de mama humano), y DU 145 (carcinoma de próstata humano/leucemia linfocítica) se compraron del American Type Culture Collection (ATCC)(Rockville, MD). Las células fueron cultivadas en Medio de RPMI 1640 que contenían 10% de suero bovino fetal (FBS) en un incubador a 37°C que contiene 5% de CO2. Todos los reactivos del cultivo de célula fueron comprados de Gibco-BRL (Grand Island, NY). Las células fueron puestas en placas de cultivo de 96 pozos aproximadamente 3000 células por pozo. Un día luego de la colocación en la placa, los compuestos o controles del vehículo (solamente amortiguador) fueron agregados a las células. Los ensayos de proliferación fueron desarrollados tres días post inicio del tratamiento. Para un ensayo de proliferación celular no radiactivo, las densidades de ensayo variables se determinan al medir la conversión metabólica (mediante células viables) por el tinte de tatrazolio MTS, un ensayo de proliferación celular conocido por un experto en la técnica (ensayo MTS), un ensayo de proliferación celular previamente establecido. El ensayo se desarrolla utilizando un kit de ensayo (Promega Corp., Madison, Wl). Las placas de ensayo son incubadas durante 1-2 horas, y los resultados son leídos en un lector de placa con formato de 96 pozos al medir la absorbancia a 490 nm. El efecto de cada compuesto se calcula como un porcentaje del crecimiento celular de control obtenido del crecimiento de las células tratadas con vehículo en la misma placa.

La senda PI3K/AKT/TOR es crítica para la proliferación de la célula, el crecimiento, la supervivencia, y la angiogénesis. De acuerdo con esto, los compuestos de la presente invención también pueden ser útiles para inhibir la actividad TOR. Similares ensayos in vivo e in vitro a aquellos descritos con referencia al PI3K se pueden utilizar para determinar la concentración mínima del compuesto suficiente para inhibir el TOR. Un ensayo TOR humano y un ensayo Rat1-IGF1 como se describe en el Ejemplo 67 y 68, respectivamente se desarrolla con algunas modalidades de la invención. Los resultados de estos ensayos se muestran adelante en las Tablas 1 y 2. La concentración mínima de los compuestos suficientes para inhibir el TOR, es decir, la concentración inhibidora mínima, y IC50 (µg/ml) por ejemplo los compuestos se muestran adelante en las Tablas 1 y 2.

Tabla 1: datos de ensayo (IC5o, µg/ml) Tabla 2: Datos de ensayo (ICso.µ/ml) excepto donde se note La presente invención también suministra composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de la presente invención y un vehículo farmacéuticamente aceptable. Las composiciones farmacéuticas de esta invención se pueden administrar solas o en combinación con otros compuestos o terapias terapéuticamente efectivas para el tratamiento o la prevención de una condición patológica o desorden mediado en un mamífero. De manera similar los compuestos de esta invención se pueden suministrar en un compuesto simple o en una combinación con otros compuestos. La inhibición del PI3K se puede esperar que mejore la actividad terapéutica de otros agentes que modulan la señalización del factor de crecimiento, la respuesta de la citoquina y el control de ciclo celular conocido en la técnica, tal como, pero no limitado a las citoquinas, interferon, rapamicina, los inhibidores HER2/EGFR, los inhibidores MEK, el interferón-a, los inhibidores de Crc quinasa, y los inhibidores de m Tor. El HER2 es un receptor 2 del factor de crecimiento epidémico humano y se expresa sobre la superficie en muchos tumores humanos, que incluyen los cánceres de mama. El inhibidor HER2 preferiblemente inhibe las sendas de señalización que media la proliferación celular y específicamente inhibe la tirosina quinasa HER2 y es por lo tanto también útil como un agente terapéutico para suspender el crecimiento de los cánceres que expresan HER2. Los inhibidores de HER2 son conocidos en la técnica. Un ejemplo de un inhibidor HER2 es que el (E)-N-{4-[3-cloro-4-(2-piridinil metoxi)anilino]-ciano-7-etoxi-6-quinolinil}-4- (dimetilamino -2-butenamida. El factor de crecimiento epidérmico humano ( EGF) es un polipéptido, que ejerce efectos biológicos al unirse a un receptor de factor de crecimiento epidérmico de una membrana de célula específica (EGFR/ErbB-1 ). Muchos tipos de células cancerosas despliegan expresión EGFR mejorada sobre su superficie celular. La expresión mejorada del EGFR sobre las células cancerosas ha sido asociada con la proliferación excesiva y la metástasis. Demasiado de su ligando, el EGF, se ha identificado con un crecimiento celular acelerado, que resulta en una variedad de cánceres que incluyen el colorrectal, de cabeza y cuello, de ovario, próstata, mama, y pulmón. Cuando el EGF se une al EGFR, este dispara un proceso de señalización químico que anima el crecimiento y la división. Un inhibidor de EGFR interrumpe preferiblemente la interacción del EGF con su receptor EGFR o inhibe el proceso de señalización química interno para detener la producción del químico que da el visto bueno para la división celular. Un inhibidor EGFR de ejemplo es [4-(3-cloro-4-fluoro-fenilamino)-3-ciano-7-etoxi-quinolin-6-il]-amida de ácido dimetil amino-but-2-enoico. El MEK es una familia de enzimas conocidas como quinasas MEK, que son grupos de MAP (proteína quinasa asociada a mitógeno) y quinasas Erk (reguladoras de señal extracelular). Estas son enzimas que regulan la fosforilación de los sustratos en los mamíferos. Los inhibidores MEK preferible son aquellos compuestos que inhiben las enzimas MEK 1 y MEK 2 sin la inhibición sustancial de las otras de tales enzimas. Un inhibidor MEK de ejemplo es el 4-({3-cloro-4-[(1 -metil-1 H-imidazol-2-il)tiol]fenil}amino)-6-metoxi-7-(4-pirrolidin-1-ilpiperidin-1-il)quinolina-3-carbonitrilo. Otro inhibidor MEK de ejemplo es un inhibidor de MAP quinasa conocido como UO126 o químicamente conocido como 1 ,4-diamino-2,3-diciano-1 ,4-bis[2-aminofeniltio]butadieno. El Src es una proteína tirosina quinasa (PTK) asociada con las membranas celulares y está involucrada en la traducción de señal y el crecimiento de las células de regulación. Esta transmite señales celulares al transferir gama fosfato del ATP a la cadena lateral de los residuos de tirosina sobre las proteínas del sustrato. A la fecha, nueve miembros de la familia de la tirosina quinasa de la proteína Src se han descubierto. Los miembros son Src, Yes, Fyn, Fgr, Bik, Lck, Lyn, Hck, y Yrk, Fgr, Bik, Lek, Lyn, Hck, y Yrk son expresados y primariamente activos en células hematopoyéticas. Las alteraciones de la fosforilación de los sustratos Src son eventos claves en la señalización celular. La mayoría de las células normales contienen muy bajos niveles de actividad del Src y la enzima no se requiere para el establecimiento o el mantenimiento de la viabilidad de la célula. La actividad Src es mayormente incrementada en muchos cánceres humanos. Los cambios en la actividad Src están asociados con los en el ciclo celular y las alteraciones de la regulación de la actividad Src se han asociado con neoplasia. La inhibición del Src tendría el efecto de interrumpir las sendas de traducción de señal en las cuales esta participa y reduciría de esta forma la tasa de crecimiento de las células cancerosas. Las drogas dirigidas a inhibir la familia Src pueden tener la ventaja de una toxicidad sistémica limitada o ninguna pero la alta especificidad para los tumores muestra tener actividad elevada de uno o más de los miembros de la familia Src. Los inhibidores Src de ejemplo son 4-(2,4-dicloro-5-metoxi-fenilamino)-5-metoxi-7-[3-(4-metil-piperazin-1-il)-propoxi]-quinolina-3-carbonitrilo y 4-(2,4-dicloro-5-metoxianilino)-7{5-[(4-metil-1-piperazinil)metil]-2-piridinil}-3-carbonitrilo. El CC1-779 es un éster de rapamicina y el inhibidor de blanco de mamífero de la rapamicina (mTOR) habitualmente en desarrollo clínico Fase II para el tratamiento de en pacientes con cáncer. El CC 1-779 interactúa con el mTOR e inhibe su actividad quinasa, resultando en la inhibición de los controladores traduccionales regulados mTOR P70(s6)quinasa. Los compuestos de la presente invención confieren una inhibición sinérgica del crecimiento en varios modelos tumorales cuando se combinan con inhibidores de varios moduladores de crecimiento celular o de ciclo celular, tirosina quinasas o citoquinas. Los presentes inventores han descubierto que una actividad sinérgica antitumoral se puede lograr mediante los compuestos de la presente invención cuando se combinan con los inhibidores del MEK, Her2/Neu y Mtor. Específicamente, los compuestos de la presente invención han mostrado actividad sinérgica anticancerígena mediante las inhibiciones combinadas del PI3K y el EMK en el colón (ver Figuras 16-18, 21 , 22, y 26) pulmón (ver Figura 19), próstata (ver Figura 20) y líneas celulares de cáncer de mama (ver Figuras 20, 23, 25, y 27). También ver ejemplo 69.

En respuesta al tratamiento mediante 17-Hidroxiwortmanina y los compuestos de la presente invención, los marcadores de senda PI3K son bien inhibidos en ambas células sensitiva sensible y resistente. Se nota que las proteínas del ciclo celular ciclina D1 y c-Myc son solo eficientemente inhibidas en las células sensibles. Se observa en general que los inhibidores específicos del PI3K o el MEK no se inhiben de manera cruzada los marcadores de senda el uno con el otro. Como se sugirió en literatura reciente (Mirza AM, et al., Mol Cell Biol. 2004 Dec; 24(24): 10868-81 ; Xing D, et al., Proc Nati Acad Sci USA. 2005 May 10; 102(19): 6936-41 ; Gera 25; 280(12): 10964-73). Muchas funciones celulares críticas, por ejemplo la expresión de ciclina D1 y c-Myc se han regulado mediante la trascripción y la traducción que involucran tanto las sendas de señalización cooperativa como independiente del PI3K y el Ras/MEK Los presentes inventores encontraron que la fosforilación constitutiva y la activación del ERK (un sustrato del MEK) y muchos modelos celulares se correlacionaron con una sensibilidad reducida al compuesto de la presente invención. La inhibición de la combinación del PI3K y las sendas Ras/MEK parecen por lo tanto particularmente atractivas para aplicaciones anticancerígenas amplias en razón a que ambas sendas son esenciales en el crecimiento y la supervivencia celular. Los compuestos de la presente invención también suministran actividad sinérgica anticancerígena cuando se combinan con un inhibidor HER2/Neu en una línea de cáncer de mama positiva HER2/Neu. Recientes reportes (Bianco R, et al., Oncogene. 2003 May 8; 22(18):2812-22 y Nagata Y, et al Cáncer Cell. 2004 Aug; 6(2): 117-27) indicaron que la señalización PI3K constitutiva causada por la deficiencia de PTEN confiere resistencia a un inhibidor EGFR quinasa y al anticuerpo HER2 Herceptina, y que tal resistencia en ambos casos podía solucionarse mediante la inhibición de PI3K con el inhibidor conocido LY294002. Los presentes inventores han encontrado que la línea tumoral de mama MDA361-DYT2 expresa un alto nivel de Her2/Neu pero es resistente al inhibidor Her2/Neu quinasa HKI-272 (también conocido como: (E)-N-{4-[3-cloro-4-(2-piridinil metoxi) anilino]-3-ciano-7-etoxi-6-quinolinil}-4-(dimetilamino)-2-butenamida) in vitro e in vivo. Aunque el tratamiento del MDA361-DYT2 con 0.1 µg/ml de HKI-272 inhibió completamente las formas fosforiladas del Her2/Neu y ERK, tuvo poco efecto sobre los marcadores de celda AKT que indican una activación con constitutiva de la celda PI3K/AKT. Así, la inhibición de la combinación del PI3K (con un compuesto de la presente invención) y un inhibidor Her2/Neu puede suministrar eficacia sinérgica en los tumores de mama resistentes a Herceptina y/o HKI-272. Ver Figuras 23 y 24. Los compuestos de la presente invención también suministran actividad anticancerígena sinérgica cuando se combinan con un inhibidor mTOR en líneas celulares de tumores de mama y de colon. El PI3K y el mTOR son los dos principales componentes en la celda PI3K/AKT/mTOR que es frecuentemente desregulada en cáncer. El PI3K y el mTOR son regulados mediante un conjunto diverso de traslapamiento así como también señales independientes de factores de crecimiento, nutrientes y suministro de energía. El PI3K y el mTOR desregulado pueden actuar sinérgicamente para promover el crecimiento y la supervivencia del tumor. Consistentes con esta noción, el supresor de tumor PTEN (represor celular de PI3K) y el TSC2 (supresor celular del mTOR) fueron los que se mostró que suprimían sinérgicamente la severidad de un subconjunto de tumores específicos a la perdida de cada uno de estos genes (Manning BD, et al., Genes Deev. 2005 Jul 18). En las células glioma malignas, la combinación de de la inhibición TOR mediante Rapamicina y la inhibición PI3K/AKT resultó en un efecto antitumoral sinérgico por vía de una autofagia aumentada (Takeuchi H, et al. Cáncer Res. 2005 APr 14;65(8):3336-46). En un nuevo reporte, el tratamiento de combinación mediante Rapamicina y el inhibidor PI3K LY294002 solucionó la fosforilación elF4 e inducida por Rapa en células de tumor de pulmón H157, mejorando de esta manera la actividad antitumor (Sun SY, eí al., Cáncer Res. 2005 Aug 15;65(16):7052-8). Se ha observado previamente que la eficacia antitumoral in vivo superior se logró mediante la combinación de dosis mínimas del inhibidor PI3K PEG-17-Hidroxiwortmanina y el inhibidor mTOR Peg-Rapa (Yu K, eí al., Cáncer Biol Ther. 2005 May 28;4(5):538-45). En experimentos de combinación habituales, el compuesto cuatro en combinación con el inhibidor mTOR CCI-779 consiguieron una inhibición aditiva en células tumorales negativas PTEN (sensibles a CCI-779) y la inhibición sinérgica en células de tumor de colon que fueron de otra manera menos sensibles al tratamiento del agente simple mediante CCI-779 o mediante otros análogos de 17-Hidroxiwortmanina (17-HWT). Los compuestos 4 y 5 de la presente invención en combinación con los inhibidores MEK estructural distintos UO126 (que también es conocido como 1 ,4-diamino-2,3-diciano-1 ,4-bis[2-aminofeniltio]butadieno) y (2-(2-cloro-4- yodoanilino)-N-(ciclopropilmetoxi-3,4-difluobenzamida) demostraron una inhibición sinérgica de crecimiento amplia en líneas celulares de carcinoma de colon (HCT116, HT29, SW620, SW480, LS-174T, Caco2 y Lovo), en las líneas celulares NSCLC (A549 y H157), la línea de próstata de DU145 y la línea de mama MDA231. En el modelo HCT116, la inhibición sinérgica del crecimiento mediante la combinación se logró mediante la inducción de la apoptosis. El análisis Western sobre la línea de colon HCT116 mostró la modulación de las moléculas de señalización consistentes con la actividad sinérgica antitumoral. El compuesto 4 en combinación con el inhibidor Her2/Neu HKI-272 demostró la inhibición sinérgica de crecimiento en una línea MDA361-DYT2 que sobreexpresa Her2/Neu y es resistente al HKI-272. El análisis Western mostró la modulación de los marcadores bioquímicos consistentes por la actividad sinérgica antitumoral. El compuesto 4 en combinación con el inhibidor mTOR CCI-779 demostró la inhibición del crecimiento aditiva en células de tumor de mama negativas PTEN y la inhibición sinérgica del crecimiento en las líneas celulares resistentes a tumor de mama y de colon CCI-779. Los derivados de wortmanina en sinergia con el interferón-a (Intron-A) causan la regresión del tumor y mejora la actividad anticancerígena de la rapamicina pegilada, un inhibidor especifico del mTOR quinasa. Yu, K., et al., Cáncer Biol. Ther. (2005) 28:4(5). De acuerdo con esto, la presente invención suministra un método para inhibir el crecimiento de las célula tumorales o al tratar cáncer que comprenda administrar un compuesto de la presente invención en combinación con un inhibidor una cascada de señalización de factor de crecimiento, una respuesta de citoquina, etc., incluyendo, pero no estando limitado a un inhibidor de MEK, Her2/Neu, MTor, SRc, citoquinas y el interferón-a (Intron-A). Una inhibición celular del PI3K o AKT conduce a una reducción en la supervivencia, un proceso crítico subyacente la actividad anticancerígena de muchas terapias de cáncer estándar. Sin embargo, en muchos casos, las células tumorales desarrollan rápidamente quimioresistencia. Un mecanismo celular de resistencia se relaciona con la elevación constitutiva de la senda PI3K/AKT. Así, el tratamiento de de combinación de citotóxicos (tal como, pero no limitado, irinotecan, 5-FU, taxol, cisplatina, adriamicina, oxaliplatina, y ciclofasamida) con un inhibidor de PI3K puede además aumentar la eficacia en una terapia inicial y también puede ayudar al restablecimiento de la quimio sensibilidad en terapia o recurrentes. Los derivaos de wortmanina pueden potenciar la eficacia anticancerígena del paclitaxel en cáncer de pulmón y en glioma. Las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden contener uno o más excipientes. Los excipientes agregan a la composición para una variedad de propósitos. Los diluyentes incrementan la masa de una composición farmacéutica sólida y pueden hacer una forma de dosis farmacéutica que contenga la composición más fácil para el paciente y o a encargado de cuidar la salud. Los diluyentes para las composiciones sólidas incluyen, por ejemplo, celulosa microcristalina (por ejemplo Avicel®), celulosa microfina, lactosa, almidón, almidón pregelatinizado, carbonato de calcio, sulfato de calcio, azúcar, dextrato, dextrina, dextrosa, dihidrato de fosfato calcio dibásico, fosfato de calcio tribásico, caolín, carbonato de magnesio, óxido de magnesio, maltodextrina, manitol, polimetacrilatos (por ejemplo Eudragit®), cloruro de potasio, celulosa en polvo, cloruro de sodio, sorbitol y talco. Las composiciones farmacéuticas sólidas que son compactadas en una forma de dosis, tal como una tableta, pueden incluir excipientes cuyas funciones incluyen ayudar a unir el ingrediente activo y otros excipientes juntos después de compresión. Los ligadores para la composición farmacéutica sólida incluyen acacia, ácido algínico, carbómero (ejemplo carbopol), carboxi metil celulosa de sodio, dextrina, etil celulosa, gelatina, goma guar, aceite vegetal hidrogenado, hidroxietil celulosa, hidroxipropil celulosa, (por ejemplo klucel®), hidroxipropil metil celulosa, (por ejemplo Methocel®), glucosa líquida, silicato de magnesio aluminio, maltodextrina, metilcelulosa, polimetacrilatos, povidona (por ejemplo Kollidon®, Plasdone®), almidón pegelatinizado, alginato de sodio, y almidón. La tasa de disolución de una composición farmacéutica sólida compactada en el estómago del paciente se puede incrementar mediante la adición de un desintegrante a la composición. Los desintegrantes incluyen ácido algínico, carboximetil celulosa de calcio, carboximetil celulosa de sodio (por ejemplo Ac-Di-Sol®, Primelose®), dióxido de silicio coloidal, croscarmelosa de sodio, crospovidona, (por ejemplo Kollidon®, Poliplasdone®), goma guar, silicato de magnesio aluminio, metil celulosa, celulosa microcristalina, polacrilin potasio, celulosa en polvo, almidón pregelatinizado, alginato de sodio, glicolato de almidón de sodio, (por ejemplo Explotab®) y almidón. Se pueden agregar deslizantes para mejorar la fluidez de una composición sólida no compactada y mejorada la precisión de la dosificación. Los excipientes que pueden funcionar como deslizantes incluyen dióxido de silicio coloidal, trisilicato de magnesio, celulosa en polvo, almidón, talco, y fosfato de calcio tribásico. Cuando una forma de dosis tal como una tableta se hace mediante la compactación de una composición en polvo, la composición es sometida a presión del troquel y tinte, lo que puede originar que el producto tenga corrosión y otras irreguladotes de superficie. Se puede agregar un lubricante a la composición para reducir la adhesión y facilitar la liberación del producto del colorante. Los lubricantes incluyen estearato de magnesio, estearato de calcio, gliceril monoestearato, gliceril palmitostearato, aceite de castor hidrogenado, aceite vegetal hidrogenado, aceite mineral, polietilenglicol, benzoato de sodio, lauril sulfato de sodio, estearil fumarato de sodio, ácido esteárico, talco y estearato de zinc. Los agentes saborizantes y lo mejoradores de sabor hacen la forma de dosis más degustable al paciente. Los agentes de sabor comunes y los y los mejoradores de sabor para los productos farmacéuticos que pueden estar incluidos en la composición de la presente invención incluyen maltol, vanilin, etil vanilin, mentol ácido cítrico, ácido fumárico, etil maltol y ácido tartárico.

Las composiciones sólidas y líquidas también pueden ser entintadas utilizando cualquier colorante farmacéuticamente aceptable para mejorar su apariencia y/o facilitar la identificación del paciente del producto y el nivel de dosis unitario. En las composiciones farmacéuticas líquidas de la presente invención, el compuesto de formula I y cualquiera otros excipientes sólidos se disuelven o suspenden en un vehículo líquido tal como agua, aceite vegetal, alcohol polietilenglicol, propilenglicol o glicerina. Las composiciones farmacéuticas líquidas pueden contener agentes emulsificantes para dispersarse uniformemente a través de la composición un ingrediente activo u otro excipiente que no sea soluble en el vehículo liquido. Los agentes emulsificantes que pueden ser útiles en las composiciones líquidas de la presente invención incluyen, por ejemplo, gelatina, yema de huevo, caseína, colesterol, acacia, tragacanto, condrus, pectina, metil celulosa, carbómero, cetostearil alcohol y cetil alcohol. Las composiciones farmacéuticas líquidas de la presente invención también pueden contener un agente que mejore la viscosidad para mejorar la sensación en la boca del producto y/o recubrir la parte interior del tacto gastrointestinal. Tales agentes incluyen acacia, bentonita de ácido algínico, carbómero, carboximetil celulosa de calcio, o sodio, cetostearil alcohol, metil celulosa, etilcelulosa, goma guar de gelatina, hidroxietil celulosa, hidroxipropil celulosa, hidroxipropil metil celulosa, maltodextrina, polivinil alcohol, povidona, propilen carbonato, propilen glicol, alginato, alginato de sodio, glicolato de almidón de sodio, tragacanto de almidón y goma xantano. Los agentes endulzantes tales como el sorbitol sacarina de sodio, sucrosa, aspartame, fructosa, manitol y azúcar invertido se pueden agregar para mejorar el sabor. Los preservativos y agentes quelantes tales como alcohol, benzoato de sodio, hidroxitolueno butilado, hidroanisol butilado, y ácido etilenodiamina tetraacético se puede agregar a niveles seguros para la digestión y mejorar la estabilidad de almacenamiento. De acuerdo con la presente invención, una composición líquida puede contener un amortiguador tal como ácido glucónico, ácido láctico, ácido cítrico o ácido acético, gluconato de sodio, lactato de sodio, citrato de sodio o acetato de sodio. La selección de los excipientes y las cantidades utilizadas puede ser fácilmente determinada por los científicos de formulación con base en la experiencia y la consideración de los procedimientos estándar y los trabajos de referencia en el campo. Las composiciones sólidas de la presente invención incluyen polvos, granulados, agregados y compasiones compactadas. Las dosis incluyen dosis adecuadas para administración oral, bucal, rectal, parenteral (incluyendo subcutánea, intramuscular, e intravenosa), inhalante y oftálmica. La administración más adecuada en cualquier caso dado dependerá de la naturaleza y la severidad de la condición a ser tratada. Las dosis se pueden presentar convenientemente en forma de dosis unitaria y preparar mediante cualquier métodos bien conocidos en las técnicas farmacéuticas. Las formas de dosis incluyen las formas de dosis sólidas como tabletas, polvos, cápsulas, supositorios, sacos, trociscos y pasillas, así como también melazas líquidas, suspensiones y elixires. La forma de dosis de la presente invención puede ser una cápsula que contiene la composición, por ejemplo, una composición sólida en polvo o granulado de la invención, en una cubierta dura o suave. La cubierta se pude hacer de gelatina y contener opcionalmente un plastificador tal como glicerina y sorbitol, y un agente opacificante o colorante. El ingrediente activo y los excipientes se pueden formular en las composiciones y las formas de dosis de acuerdo con un método conocido en la técnica. Una composición para relleno en tabletas o cápsulas se puede preparar mediante granulación en húmedo. La granulación en húmedo, algunos o todos los ingredientes activos y excipientes en forma de polvo se combinan y además se mezclan en la presencia de un líquido, típicamente agua, que origina que os polvos se apelmacen en granulos. El granulado es seleccionado y/o molido, secado y luego seleccionado y/o molido al tamaño de partícula deseado. El granulado puede ser entonces conformado en tabletas, o se pueden agregar otros excipientes antes de la formación de la tableta, tal como un deslizante y/o un lubricante.

La composición de tabletas se puede preparar convencionalmente mediante combinación en seco. Por ejemplo. La composición combinada de las actividades y los excipientes se puede compactar en una pieza bruta o en una lámina y luego reducida a granulos compactados. Los granulos compactados pueden ser subsecuentemente comprimidos en una tableta. Como una alternativa a la granulación en seco, una composición combinada se puede expresar directamente en una forma de dosis compactada que utiliza técnicas de compresión directas. La compresión directa produce una tableta más uniforma sin granulos. Los excipientes que son particularmente bien adecuados para la formación de tableta de compresión directa incluyen celulosa microcristalina, lactosa secada por rociado, dihidrato de fosfato de dicalcio y sílice coloidal. El uso adecuado de estos de esta y otros excipientes en el tableteado de compresión directa es conocido por aquellos expertos en la técnica con experiencia y habilidad en los retos de formulaciones particulares de formación de tabletas por compresión directa.} El llenado de una cápsula de la presente invención puede incluir cualquiera de las combinaciones anteriormente mencionadas y los granulos que fueron descritos con referencia a la formación de tableta, sin embargo, ellos no son sometidos a una etapa de formación de tableta final. Los métodos para administrar una composición farmacéutica comprendidos por la invención no solo no están específicamente restringidos, y se pueden administrar en varias preparaciones dependiendo de la edad, sexo y síntomas del paciente. Por ejemplo, tabletas, pildoras, soluciones, suspensiones, emulsiones, granulos y cápsulas se pueden administrar oralmente. Las preparaciones de inyección se pueden administrar individualmente o mezcladas con transfusiones de inyección tal como soluciones de glucosa y soluciones de aminoácido intravenosamente. Si en necesario, las preparaciones de inyección se administran intramuscularmente, intracutáneamente, subcutáneamente, o intraperitonealmente. Los supositorios se pueden administrar en el recto. La cantidad del compuesto 1 contenida en la composición farmacéutica de acuerdo con la presente invención no se restringe específicamente, sin embargo, una cantidad efectiva es una dosis que es suficiente para tratar, aliviar, o reducir los síntomas objetivos. La dosis de una composición farmacéutica de acuerdo con la presente invención dependerá del método de uso, la edad, sexo, y condición del paciente. Habiendo descrito la invención, la invención se ilustra adicionalmente por los siguientes ejemplos no limitantes. EJEMPLOS Ejemplo 1 : Preparación de Acetato de (1E,4S,4aR,5R,6aS,7S,9aR)-1-[(dietilamino)metileno]-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno [4,5-h]isocromen-5-ilo Se agrega a una solución de 50 mg (0.116 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 1 mL de CH2CI2 22.5 mL (0.217 mmol) de dietilamina. Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 2 horas 30 minutos y luego se concentra en vacío para dar una pasta naranja. Se disuelve el residuo en acetato de etilo (EtOAc) y se precipita con hexano. Se lava el precipitado dos veces con hexano para dar 45 mg (77%) de producto como un sólido naranja. HRMS (ESI) m/z calculado para C27H37NO8 503.25206, encontrado: 504.25747 (M+ H)+1.

Ejemplo 2: Preparación de acetato de (1E,4S,4aR,5R,6aS,7S,9aR)-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1-(Pirrolidin-1-ilmetileno)-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo Se agrega a una solución de 50 mg (0.116 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 1 mL de cloruro de metileno (CH2CI2) 12.1 mL (0.145 mmol) de pirrolidina. Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 2 horas y luego se concentra en vacío. Se disuelve el residuo en EtOAc y se precipita con hexano. Se lava el precipitado dos veces con hexano para dar 40 mg (68.7%) de producto como un sólido amarillo. HRMS (ESI) m/z calculado para C27 H35NO8 501.2364, encontrado: 502.24250 (M+ H)+1.

Ejemplo 3: Preparación de acetato de (1E,4S,4aR,5R,6aS,7S,9aR)-1-(anilinometileno) -7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo- 1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h] isocromen-5-ilo Se agrega a una solución de 50 mg (0.116 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 1 mL de CH2CI2 26.2 mL (0.287 mmol) de anilina. Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 1 semana y luego se concentra en vacío. Se disuelve el residuo en EtOAc y se tritura con hexano para dar un polvo amarillo. Se purifica el polvo amarillo por cromatografía de gel de sílice, (hexano/EtOAc) para dar un aceite. Se tritura el aceite con hexano para dar 26 mg (42.8%) de producto como un polvo naranja. HRMS (ESI) m/z calculado para C29H33N08 523.22074, encontrado: 524.22692 (M+H)+1.

Ejemplo 4: Preparación de acetato de (1E,4S,4aR,5R,6aS,7S)-1-{[terc-butil(2-hidroxietil)amino]metileno}-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a, 5, 6, 6a, 7, 8, 9, 9a, 10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo Se agrega a una solución de 50 mg (0.12 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 0.5 mL de CH2CI2 28.1 mg (0.24 mmol) 2-(terc-butilamino)-etanol. Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante la noche. Se remueve el CH2CI2 en vacío. El residuo se tritura con dietil éter (Et2O) para dar 32 mg (48.7%) de producto como un polvo naranja. MS (ESI) m/z 548.3 (M+1 ).

Ejemplo 5: Preparación de acetato de (1E,4S,4a/?,5R,6aS,7S)-1-{[[3-(dimetilamino)propil](metil)amino]metileno}-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 , 2,4,4a, 5,6,6a,7, 8,9, 9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo Se agrega a una solución de 50 mg (0.12 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 0.5 mL de CH2CI2 27.9 mg (0.24 mmol) de N,N,N'-trimetil-1 ,3-propanodiamina. Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante la noche. Se remueve el CH2CI2 en vacío. El residuo se tritura con Et2O para dar 24 mg (36.6%) de producto como un polvo naranja. MS (ESI) m/z 547.3 (M+1 ).

Ejemplo 6: Preparación de acetato de (1 E,4S,4af?,5R,6aS,7S)-7,11-dihidroxi-4- (metoximetil)-4a,6a-dimetil-1-{[metil(1-metilpirrolidin-3-il)amino]metileno}-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo Se agrega a una solución de 50 mg (0.12 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 0.5 mL de CH2CI2 27.4 mg (0.24 mmol) de N,N'-dimetil-3-aminopirrolidina. Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante la noche. Se remueve el CH2CI2 en vacío. El residuo se tritura con Et2O para dar 25 mg (38%) de producto como un polvo naranja. MS (ESI) m/z 545.25 (M+1).

Ejemplo 7: Preparación de acetato de (1 E,4S,4aR,5R,6aS,7S)-1-[(4-ciclohexilpiperazin-1-il)metileno]-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil) -4a,6a-dimetil- 2,10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo Se agrega a una solución de 50 mg (0.12 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 0.5 mL de CH2CI2 40.4 mg (0.24 mmol) de 1-ciclohexilpiperazina. Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante la noche. Se remueve el CH2CI2 en vacío. El residuo se tritura con Et2O para dar 16 mg (22%) de producto como un polvo naranja. MS (ESI) m/z 599.35 (M+1).

Ejemplo 8: Preparación de acetato de (1E,4S,4a ?,5f?,6aS,7S)-1-{[butil(metil)amino]metileno}-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10- dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo Se agrega a una solución de 50 mg (0.12 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 0.5 mL de CH2CI2 20.9 mg (0.24 mmol) de N-metilbutilamina. Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante la noche. Se remueve el CH2CI2 en vacío. El residuo se tritura con Et2O para dar 38 mg (61.2%) de producto como un polvo naranja. MS (ESI) m/z 518.25 (M+1).

Ejemplo 9: Preparación de acetato de (1E,4S,4a ?,5f?,6aS,7S)-1-{[ciclohexil(metil)amino]metileno}-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil) -4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo Se agrega a una solución de 50 mg (0.12 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 0.5 mL de CH2CI2 27.2 mg (0.24 mmol) de ciclohexil-metil-amina. Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante la noche. Se remueve el CH2CI2 en vacío. El residuo se tritura con Et2O para dar 30 mg (46 %) de producto como un polvo naranja. MS (ESI) m/z 544.25 (M+1).

Ejemplo 10: Preparación de acetato de (1E,4S,4aR,5f.,6aS,7S)-1-[(4-benzilpiperazin-1 -il)metileno]-7, 11 -dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2, 10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo Se agrega a una solución de 50 mg (0.12 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 0.5 mL de CH2CI2 42.3 mg (0.24 mmol) de 1-benzil-piperazina. Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante la noche. Se remueve el CH2CI2 en vacío. El residuo se tritura con Et2O para dar 13 mg (17.8 %) de producto como un polvo naranja. MS (ESI) m/z 607.2 (M+1).

Ejemplo 11 : Preparación de acetato de (1 ,4S,4aR,5 ?,6aS,7S)-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1-(pipehdin-1-ilmetileno)-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h] isocromen-5-ilo Se agrega a una solución de 50 mg (0.12 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 0.5 mL de CH2CI2 20.4 mg (0.24 mmol) de piperidina. Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante la noche. Se remueve el CH2CI2 en vacío. El residuo se tritura con Et2O para dar 33 mg (53.3%) de producto como un polvo naranja. MS (ESI) m/z 516.25 (M+1).

Ejemplo 12: Preparación de acetato de (1 E,4S,4af?,5R,6aS,7S)-1-(3,4-dihidroisoquinolin-2(1 /-/)-ilmetileno)-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9, 9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo Se agrega a una solución de 50 mg (0.12 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 0.5 mL de CH2CI2 32 mg (0.24 mmol) de 1 ,2,3,4-tetrahidroisoquinolina. Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante la noche. Se remueve el CH2CI2 en vacío. El residuo se tritura con Et2O para dar 9 mg (13.3%) de producto como un polvo naranja. MS (ESI) m/z 564.25 (M+1 ).

Ejemplo 13: Preparación de acetato de (1 ,4S,4aR,5R,6aS,7S)-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1-[(4-fenilpiperazin-1-il)metileno]-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno [4,5-h] isocromen-5-ilo Se agrega a una solución de 50 mg (0.12 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 0.5 mL de CH2CI2 38.9 mg (0.24 mmol) de 1-fenilpiperazina. Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante la noche. Se remueve el CH2CI2 en vacío. El residuo se tritura con Et2O para dar 16 mg (22.5%) de producto como un polvo naranja. MS (ESI) m/z 593.3 (M+1 ).

Ejemplo 14: Preparación de acetato de (1 ,4S,4a ?,5R,6aS,7S)-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-1-[(4-metilpiperazin-1-il)metileno]-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a, 5,6, 6a, 7, 8, 9, 9a, 10-dodecahidroindeno [4,5-h] isocromen-5-ilo Se agrega a una solución de 50 mg (0.12 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 0.5 mL de CH2CI2 24 mg (0.24 mmol) de 1-metilpiperazina. Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante la noche. Se remueve el CH2CI2 en vacío. El residuo se tritura con Et2O para dar 19 mg (29.8%) de producto como un polvo naranja. MS (ESI) m/z 531.2 (M+1).

Ejemplo 15: Preparación de acetato de (1 ,4S,4aR,5 ?,6aS,7S)-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1-[(4-fenilpiperidin-1-il)metileno]- 1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno [4,5-h] isocromen-5-ilo Se agrega a una solución de 50 mg (0.12 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 0.5 mL de CH2CI2 38J mg (0.24 mmol) de 4-fenilpiperidína. Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante la noche. Se remueve el CH2CI2 en vacío. El residuo se tritura con Et2Ü para dar 14 mg (19.7%) de producto como un polvo naranja. MS (ESI) m/z 592.25 (M+1).

Ejemplo 16: Preparación de acetato de (1E,4S,4af?,5/;.,6aS,7S)-7-(formiloxi)-11-hidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1-(pirrolidin-1-ilmetileno)- 1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo Se disuelve 17-formilwortmanina(150 mg, 0.33 mmol) en CH2CI2 (1.5 mL) y se trata con 0.4 mmol de pirrolidina durante 30 min. La purificación con gel sílice eluyendo con CH2Cl2-MeOH (cloruro de metileno-metanol) (15:1) produce el producto como un sólido amarillo-naranja (el rendimiento es casi cuantitativo). MS (El) análisis: 556 (M+ + 1).

Ejemplo 17: Preparación de acetato de (1E,4S,4aR,5/?,6aS,7S)-1-[(dialilamino)metileno]-7-(formiloxi)-11-hidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo Se disuelve 17-formilwortmanina (150 mg, 0.33 mmol) en CH2CI2 (1.5 mL) y se trata con 0.4 mmol de dialilamina durante 30 min. La purificación con gel sílice eluyendo con CH2CI2-MeOH (15:1) produce el producto como un sólido amarillo-naranja (el rendimiento es casi cuantitativo). MS (El) análisis: 530 (M+ + 1 ).

Ejemplo 18: Preparación de acetato de (1E,4S,4aR,5R,6aS,7S)-1-[(dietilamino)metileno]-7-(formiloxi)-11-hidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6aJ,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo Se disuelve 17-formilwortmanina (150 mg, 0.33 mmol) en CH2CI2 (1.5 mL) y se trata con 0.4 mmol de dietilamina durante 30 min. La purificación con gel sílice eluyendo con CH2CI2-MeOH (15:1) produce el producto como sólidos amarillo-naranja (el rendimiento es casi cuantitativo). MS (El): m/z 532 (M+ + 1).

Ejemplo 19: Preparación de Éster de 4-{[bis-(2-hidroxi-etil)-amino]-metileno}-6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 ,3,4,7,10,11 ,12, 13, 14, 15, 16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético Se agrega a una solución de 100 mg (0.23 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 2 mL de CH2CI2 dietanolamina (45 µL, 0.46 mmol). Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 12 horas y luego se concentra en vacío. Se disuelve el residuo en EtOAc y se precipita con hexano. Se lava el precipitado dos veces con hexano para dar el producto como un sólido amarillo. MS (ESI) m/z 537 (M+H).

Ejemplo 20: Preparación de Éster de 4-[(terc-butil-metil-amino)-metileno]-6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 , 3,4,7, 10,11 ,12, 13, 14, 15, 16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a] fenantren-11-ilo de ácido acético Se agrega a una solución de 100 mg (0.23 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 2 mL de CH2CI2 N-terc-butilmetilamina (55 µL, 0.46 mmol). Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 12 horas y luego se concentra en vacío. Se disuelve el residuo en EtOAc y se precipita con hexano. Se lava el precipitado dos veces con hexano para dar el producto como un sólido amarillo.

MS (ESI) m/z 519 (M+H).

Ejemplo 21 : Preparación de Ester de 4-{[bis-(3-dimetilamino-propil)-amino]-metileno}-6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 ,3,4,7,10,11 , 12, 13, 14,15, 16, 17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético Se agrega a una solución de 100 mg (0.23 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 2 mL de CH2CI2 3,3'-iminobis(N,N-dimetilpropilamina) (104 µL, 0.46 mmol). Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 12 horas y luego se concentra en vacío. Se disuelve el residuo en EtOAc y se precipita con hexano. Se lava el precipitado dos veces con hexano para dar el producto como un sólido amarillo. MS (ESI) m/z 619 (M+H).

Ejemplo 22: Preparación de éster de metilo de ácido 1-(11-Acetoxi-6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 , 7,10,11 ,12,13,14,15,16,17-decahidro-2-oxa-ciclopenta[a] fenantren-4-ilidenometil)-piperidina-4-carboxílico Se agrega a una solución de 100 mg (0.23 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 2 mL de CH2CI2 isonipecotato de metilo (63 µL, 0.46 mmol). Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 12 horas y luego se concentra en vacío. Se disuelve el residuo en EtOAc y se precipita con hexano. Se lava el precipitado dos veces con hexano para dar el producto como un sólido amarillo. MS (ESI) m/z 575 (M+H).

Ejemplo 23: Preparación de ácido 1-(11-Acetoxi-6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 , 7,10,11 ,12, 13,14,15,16,17-decahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-4-ilidenometil)-piperidina-4-carboxílico Se agrega a una solución de 100 mg (0.23 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina y trietilamina (65 µL, 0.46 mmol) en 2 mL de CH2CI2 ácido isonipecótico(60 mg, 0.46 mmol). Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 12 horas y luego se concentra en vacío. Se disuelve el residuo en EtOAc y se precipita con hexano. Se lava el precipitado dos veces con hexano para dar el producto como un sólido amarillo. MS (ESI) m/z 561 (M+H).

Ejemplo 24: Preparación de éster de metilo de ácido 4-[(11-Acetoxi-6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 , 7,10,11 ,12, 13, 14,15,16,17-decahidro-2-oxa-ciclopenta[a] fenantren-4-ilidenometil)-metil-amino]-2,5-dimetil-hex-2-enoico Se agrega a una solución de 100 mg (0.23 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 2 mL de CH2CI2 éster de metilo de ácido 2,5-dimetil-4-metilamino-hex-2-enoico (86 mg, 0.46 mmol). Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 12 horas y luego se concentra en vacío. Se disuelve el residuo en EtOAc y se precipita con hexano. Se lava el precipitado dos veces con hexano para dar el producto como un sólido amarillo. MS (ESI) m/z 630 (M+).

Ejemplo 25: Preparación de Éster de 6,17-dihidroxi-1-metoximetil-4-[({3-[4-(4-metoxi-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-metil-amino)-metileno]-10,13-dimetil-3,7- dioxo-1 ,3,4, 7, 10, 11 , 12, 13, 14, 15, 16, 17 -dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11 -ilo de ácido acético Se agrega a una solución de 100 mg (0.23 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina y trietilamina (65 µL, 0.46 mmol) en 2 mL de CH2CI2 clorhidrato de {3-[4-(4-metoxi-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-metil-amina (123 mg). Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 12 horas y luego se concentra en vacío. Se disuelve el residuo en EtOAc y se precipita con hexano. Se lava el precipitado dos veces con hexano para dar el producto como un sólido amarillo. MS (ESI) m/z 695 (M+H).

Ejemplo 26: Preparación de Éster 6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-4-({metil-[3-(4-metil-piperazin-1-il)-propil]-amino}-metileno)-3,7-dioxo-1 ,3,4,7,10,11 , 12, 13, 14,15, 16, 17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético Se agrega a una solución de 100 mg (0.23 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 2 mL de CH2CI2 metil-[3-(4-metil-piperazina-1-il)propil]amina (80 mg, 0.46 mmol). Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 12 horas y luego se concentra en vacío. Se disuelve el residuo en EtOAc y se precipita con hexano. Se lava el precipitado dos veces con hexano para dar el producto como un sólido amarillo. MS (ESI) m/z 603 (M+H).

Ejemplo 27: Preparación de Éster de 6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-4-{[metil-(3-morfolin-4-il-propil)-amino]-metileno}-3,7-dioxo- 1 ,3,4,7,10,11 , 12, 13, 14, 15, 16, 17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético Se agrega a una solución de 100 mg (0.23 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 2 mL de CH2CI2 metil-(3-morfolin-4-il-propil)amina (74 mg, 0.46 mmol). Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 12 horas y luego se concentra en vacío. Se disuelve el residuo en EtOAc y se precipita con hexano. Se lava el precipitado dos veces con hexano para dar el producto como un sólido amarillo. MS (ESI) m/z 590 (M+H).

Ejemplo 28: Preparación de Éster de 4-{[(2-bencenosulfonil-etil)-(3-dietilamino-propil)-amino]-metileno}-6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10, 13-dimetil-3,7-dioxo-1 ,3,4,7,10,11 ,12,13,14,15,16, 17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético Se agrega a una solución de 100 mg (0.23 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 2 mL de CH2CI2 ?/'-(2-bencenosulfonil-etil)-?/,?/-dietil-propano-1 ,3-diamina (139 mg, 0.46 mmol). Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 12 horas y luego se concentra en vacío. Se disuelve el residuo en EtOAc y se precipita con hexano. Se lava el precipitado dos veces con hexano para dar el producto como un sólido amarillo. MS (ESI) m/z 730 (M+H).

Ejemplo 29: Preparación de Éster de 4-{[(1-aza-biciclo[3.3.1]non-5-ilmetil)-benzil-amino]-metileno}-6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo- 1 , 3,4,7, 10, 11 , 12, 13, 14, 15, 16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11 -ilo de ácido acético Se agrega a una solución de 100 mg (0.23 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina y trietilamina (65 µL, 0.46 mmol) en 2 mL de CH2CI2 clorhidrato de (1-aza-biciclo[3.3.1]non-5-ilmetil)-benzil-amina (114 mg). Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 12 horas y luego se concentra en vacío. Se disuelve el residuo en EtOAc y se precipita con hexano. Se lava el precipitado dos veces con hexano para dar el producto como un sólido amarillo. MS (ESI) m/z 676 (M+H).

Ejemplo 30: Preparación de Éster de 6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-4-[4-(3-morfolin-4-il-propil)-piperazin-1-ilmetileno]-3,7-dioxo- 1 ,3,4,7, 10,11 ,12, 13, 14, 15, 16, 17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético Se agrega a una solución de 100 mg (0.23 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 2 mL de CH2CI2 1-(3-morfolinopropil)piperazina (99 mg, 0.46 mmol). Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 12 horas y luego se concentra en vacío. Se disuelve el residuo en EtOAc y se precipita con hexano. Se lava el precipitado dos veces con hexano para dar el producto como un sólido amarillo. MS (ESI) m/z 645 (M+H).

Ejemplo 31 : Preparación de Éster de 4-{[(2-dimetilamino-etil)-metil-amino]-metileno}-6, 17-dihidrox¡-1 -metoximetil-10, 13-dimetil-3J-dioxo- 1 ,3,4,7,10,11 , 12, 13, 14, 15, 16, 17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético Se agrega a una solución de 100 mg (0.23 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 2 mL de CH2CI2 ?/, /,?/-trimetiletilenodiamina (47 mg, 0.46 mmol). Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 12 horas y luego se concentra en vacío. Se disuelve el residuo en EtOAc y se precipita con hexano. Se lava el precipitado dos veces con hexano para dar el producto como un sólido amarillo. MS (ESI) m/z 534 (M+H).

Ejemplo 32: Preparación de Éster de 4-[4-(3-dimetilamino-propil)-piperazin-1 -ilmetileno]-6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 ,3,4,7,10,11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético Se agrega a una solución de 100 mg (0.23 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 2 mL de CH2CI2 1-(3-dimetilaminopropil)piperazina (80 mg, 0.46 mmol). Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 12 horas y luego se concentra en vacío. Se disuelve el residuo en EtOAc y se precipita con hexano. Se lava el precipitado dos veces con hexano para dar el producto como un sólido amarillo. MS (ESI) m/z 603 (M+H).

Ejemplo 33: Preparación de Éster de 6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-4-[4-(2-morfolin-4-il-etil)-piperazin-1-ilmetileno]-3,7-dioxo- 1 ,3,4,7,10,11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético Se agrega a una solución de 100 mg (0.23 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 2 mL de CH2CI2 1-(2-morfolinoetil)piperazina (93 mg, 0.46 mmol). Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 12 horas y luego se concentra en vacío. Se disuelve el residuo en EtOAc y se precipita con hexano. Se lava el precipitado dos veces con hexano para dar el producto como un sólido amarillo. MS (ESI) m/z 631 (M+H).

Ejemplo 34: Preparación de Éster de 6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-4-[4-(1-metil-piperidin-4-il)-piperazin-1-ilmetileno]-3,7-dioxo-1 ,3,4,7,10,11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético Se agrega a una solución de 100 mg (0.23 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 2 mL de CH2CI2 1-(1-metilpiperidin-4-il)piperazina (85 mg, 0.46 mmol). Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 12 horas y luego se concentra en vacío. Se disuelve el residuo en EtOAc y se precipita con hexano. Se lava el precipitado dos veces con hexano para dar el producto como un sólido amarillo. MS (ESI) m/z 615 (M+H).

Ejemplo 35: Preparación de Éster de terc-butilo de ácido[(11-Acetoxi-6,17-dihídroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 ,7,10,11 ,12, 13, 14, 15, 16,17-decahidro-2-oxa-ciclopenta[a] fenantren-4-ilidenometil)-metil-amino]-acético Se agrega a una solución de 100 mg (0.23 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina y trietilamina (65 µL, 0.46 mmol) en 2 mL de CH2CI2 clorhidrato de éster tere butilo de sarcosina (84 mg, 0.46 mmol). Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 12 horas y luego se concentra en vacío. Se disuelve el residuo en EtOAc y se precipita con hexano. Se lava el precipitado dos veces con hexano para dar el producto como un sólido amarillo. MS (ESI) m/z 577 (M+H).

Ejemplo 36: Preparación de Éster de 4-{[(2,3-dihidroxi-propil)-metil-amino]-metileno}-6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10, 13-dimetil -3,7-dioxo- 1 ,3,4,7,10,11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético Se agrega a una solución de 100 mg (0.23 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina y trietilamina (65 µL, 0.46 mmol) en 2 mL de CH2CI2 clorhidrato de 3-metilamino-1 ,2-propanodiol (49 mg, 0.46 mmol). Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 12 horas y luego se concentra en vacío. Se disuelve el residuo en EtOAc y se precipita con hexano. Se lava el precipitado dos veces con hexano para dar el producto como un sólido amarillo. MS (ESI) m/z 537 (M+H).

Ejemplo 37: Preparación de Ácido 4-[(11-Acetoxi-6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 ,7,10,11 ,12,13,14,15,16,17-decahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-4-ilidenometil)-metil-amino]-butírico Se agrega a una solución de 100 mg (0.23 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina y trietilamina (65 µL, 0.46 mmol) en 2 mL de CH2CI2 clorhidrato de ácido 4-(metilamino)butírico (71 mg, 0.46 mmol). Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 12 horas y luego se concentra en vacío. Se disuelve el residuo en EtOAc y se precipita con hexano. Se lava el precipitado dos veces con hexano para dar el producto como un sólido amarillo. MS (ESI) m/z 549 (M+H).

Ejemplo 38: Preparación de Ácido 1-(11-Acetoxi-6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-3J-dioxo-1 ,7,10,11 ,12,13,14,15,16,17-decahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-4-ilidenometil)-azetidina-2-carboxílico Se agrega a una solución de 100 mg (0.23 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina y trietilamina (65 µL, 0.46 mmol) en 2 mL de CH2CI2 Ácido L-azetidina-2-carboxílico (47 mg, 0.46 mmol). Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 12 horas y luego se concentra en vacío. Se disuelve el residuo en EtOAc y se precipita con hexano. Se lava el precipitado dos veces con hexano para dar el producto como un sólido amarillo. MS (ESI) m/z 533 (M+H).

Ejemplo 39: Preparación de Éster de metilo de ácido 1-(11-Acetoxi-6,17-dihidroxi-1 -metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 ,7,10,11 ,12,13,14,15,16,17-decahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-4-ilidenometil)-pirrolidina-2-carboxílico Se agrega a una solución de 100 mg (0.23 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 2 mL de CH2CI2 éster de metilo L-prolina (60 mg, 0.46 mmol). Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 12 horas y luego se concentra en vacío. Se disuelve el residuo en EtOAc y se precipita con hexano. Se lava el precipitado dos veces con hexano para dar el producto como un sólido amarillo. MS (ESI) m/z 561 (M+H).

Ejemplo 40: Preparación de Éster de 4-{[benzil-(2-ciano-etil)-amino]-metileno}-6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 , 3,4, 7, 10, 11 , 12, 13, 14, 15, 16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11 -ilo de ácido acético Se agrega a una solución de 100 mg (0.23 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 2 mL de CH2CI2 3-benzilamino-propionitrilo (73 µL, 0.46 mmol). Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 12 horas y luego se concentra en vacío. Se disuelve el residuo en EtOAc y se precipita con hexano. Se lava el precipitado dos veces con hexano para dar el producto como un sólido amarillo. MS (ESI) m/z 592 (M+H).

Ejemplo 41 : Preparación de Éster de 4-{[(2-dietilamino-etil)-metil-amino]-metileno}-6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil- 10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 , 3,4, 7, 10, 11 , 12, 13, 14, 15, 16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11 -ilo de ácido acético Se agrega a una solución de 100 mg (0.23 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 2 mL de CH2CI2 N,N-Dietil-N'-metil-etano-1 ,2-diamina (45 µL, 0.28 mmol). Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 12 horas y luego se concentra en vacío. Se disuelve el residuo en EtOAc y se precipita con hexano. Se lava el precipitado dos veces con hexano para dar el producto como un sólido amarillo. MS (ESI) m/z 561 (M+H).

Ejemplo 42: Preparación de Ester de 4-{[(2-dietilamino-etil)-etil-amino]-metileno}-6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10, 13-dimetil-3,7-dioxo-1 ,3,4,7,10,11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético Se agrega a una solución de 100 mg (0.23 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 2 mL de CH2CI2 N,N-Dietil-N'-etil-etano-1 ,2-diamina (50 µL). Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 12 horas y luego se concentra en vacío. Se disuelve el residuo en EtOAc y se precipita con hexano. Se lava el precipitado dos veces con hexano para dar el producto como un sólido amarillo. MS (ESI) m/z 575 (M+H).

Ejemplo 43: Preparación de Éster de 4-{[benzil-(2-dimetilamino-etil)-amino]-metileno}-6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10,13-dimetil -3,7-dioxo- 1 ,3,4,7,10,11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético Se agrega a una solución de 100 mg (0.23 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 2 mL de CH2CI2 N,N-Dimetil-N'-benzil-etano-1 ,2-diamina (62 µL). Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 12 horas y luego se concentra en vacío. Se disuelve el residuo en EtOAc y se precipita con hexano.

Se lava el precipitado dos veces con hexano para dar el producto como un sólido amarillo. MS (ESI) m/z 609 (M+H).

Ejemplo 44: Preparación de Éster de 6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-4-(4-oxo-piperidin-1-ilmetileno)-1 ,3,4,7,10,11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético Se agregan a una solución de 17-OH wortmanina {25 mg en 2 ml THF/H2O (4:1 ), 0.058 mmol), 16 mg de carbonato de potasio (0.116 mmol) y 9.5 mg (0.06 mmol) de monohidrato de 4-piperidona (98% de pureza). Se agita esta solución de reacción a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno. Después de 1 hr, se vierte la solución en 10 mL de cloruro de metileno y se separa la capa orgánica y se lava con solución salina (3 ml). Después se evaporen los solventes bajo vacío, se disuelve el sólido residual en 4 ml de acetato de etilo y se agrega ~2 ml de hexano para dar un precipitado. Después de filtración, se lava el sólido con 2 ml de hexano, y se seca bajo vacío para dar 22 mg del compuesto del título como un polvo naranja (1). UV ?max (CH3CN/H2O): 250 nm, 320 nm, 397 nm; Positivo ESI-MS: m/z 563 [M+Na]+, 530 [M+H]+.

Ejemplo 45: Preparación de 4-{[(2-Dimetilamino-etil)-etil-amino]-metileno}-6,17-dihidroxi-1 -metoximetil-10, 13-dimetil-10,11 ,12,13, 14,15,16,17-octahidro-1 H,4H-2-oxa-ciclopenta[a]fenantreno-3,7-diona Se disuelve 11-Deacetoxi-17-OH-wortmanina (20 mg, 0.053 mmol) en 2 mL de cloruro de metileno y se agita a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno cuando se agrega N,N-dimetil-N'-etil-etilenodiamina (0.053 mmol, 8.4 µl). La reacción se torna naranja inmediatamente. Después de 30 min, se evapora el solvente y el sólido se recristaliza a partir acetato de etilo/hexano (3:1). Después de filtración, se lava el sólido con hexano y se seca bajo vacío para producir 18 mg del compuesto del título como un polvo naranja. UV ?max (CH3CN/H2O): 250 nm, 320 nm, 397 nm; Positivo ESI-MS: m/z 489 [M+Hf.

Ejemplo 46: Preparación de Éster de 4-{[(2-dimetilamino-etil)-etil-amino]-metileno}-6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10, 13-dimetil-3J-dioxo-1 ,3,4,7,10,11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético Se disuelve 17-Hidroxiwortmanina (129 mg, 0.3 mmol) en 5 mL de cloruro de metileno y se agita a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno cuando se agrega N, N-dimetil-N'-etil-etilenodiamina (0.31 mmol, 56 µl). La solución de reacción se torna naranja inmediatamente. Después de 30 min, se evapora el solvente y el sólido se recristaliza a partir de acetato de etilo/hexano (3:1). Después de filtración, se lava el sólido con hexano y se seca bajo vacío para producir 115 mg del compuesto del título como un polvo naranja. UV ?max (CH3CN/H2O): 250 nm, 320 nm, 397 nm; Positivo ESI-MS: m/z 547 [M+H]+.

Ejemplo 47: Preparación de Éster de 4-[1 ,4']bipiperidinil-1 '-ilmetileno-6, 17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 , 3,4,7, 10,11 ,12, 13, 14, 15, 16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético Se disuelve 17-Hidroxiwortmanina (30 mg, 0.069 mmol) en 2 mL de cloruro de metileno y se agita a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno cuando se agrega 4-piperidinopiperidina (0.069 mmol, 11.6 mg). La solución de reacción se torna naranja inmediatamente. Después de 30 min, se evapora el solvente y el sólido se recristaliza a partir de acetato de etilo/hexano (2:1). Después de filtración, se lava el sólido con hexano y se seca bajo vacío para producir aproximadamente 30 mg del compuesto del título como un polvo naranja. UV ?max (CH3CN/H2O): 250 nm, 320 nm, 397 nm; Positivo ESI-MS: m/z 599 [M+H]+.

Ejemplo 48: Preparación de Éster de 6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-4-morfolin-4-ilmetileno-3,7-dioxo-1 , 3,4,7,10,11 ,12,13,14, 15,16, 17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético Se disuelve 17-Hidroxiwortmanina (50 mg, 0.116 mmol) en 2 mL de cloruro de metileno y se agita a temperatura ambiente bajo atmósfera de nitrógeno cuando se agrega morfolina (0.12 mmol, 10 µl). La solución de reacción se torna naranja inmediatamente. Después de 30 min, se evapora el solvente y se lava el sólido con hexano (2 x 3 ml) y se seca bajo vacío para producir 50 mg del compuesto del título como un polvo naranja. UV ?max (CH3CN/H O): 250 nm, 320 nm, 397 nm; Positivo ESI-MS: m/z 540 [M+Naf, 518 [M+H]+.

Ejemplo 49: Preparación de Éster de 4-{[(2-dimetilamino-etil)-metil-amino]-metileno}-6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10, 13-dimetil-3,7-dioxo- 1 ,3,4,7,10,11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido propiónico Se agrega a una solución de 1-O-Desacetil-11-O-prop¡onil-17-dihidrowortmanina (que puede ser preparada de acuerdo con Creemer, L. C; Kirst, H. A.; Vlahos, C. J.; Schuitz, R. M. J Med Chem. 1996, 39, 5021-5024) (100 mg) en diclorometano (4 mL) ?/,?/,?/-trimetiletilenodiamina (32 µL). Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente y luego se concentra bajo presión reducida. El residuo se tritura con hexanos y acetato de etilo para dar una espuma naranja dura (0.12 g, 100%). MS (ES+): 547.2 (M+H)+.

Ejemplo 50: Preparación de (1 E,4S,4aR,5R,6aS,7S,9aR)-1- [(dietilamino)metileno]-5,7,11-trihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil- 4a,5,6,6a,7,8,9,9a-octahidroindeno[4,5-h]isocromeno-2,10(1 H,4H)-diona Se agrega a una solución de 17-Hidroxiwortmanina (1100 mg) en metanol (5 mL) dietilamina (0J2 mL). Después de 48 horas se concentra la mezcla de reacción bajo vacío. Se disuelve el residuo en EtOAc y se precipita con hexano. Se obtienen un polvo amarillo (0.29 mg). MS: 462.2 (M+H) +.

Ejemplo 51 : Preparación de Acetato de (1Z,4S,4aR,5R,6aS,7S)-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 -{12-OXO-16-[(3aR,4R,6aS)-2-oxohexahidro-1 H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il]-5,8-dioxa-2,11-diazahexadec-1-ilideno}-1 ,2,4,4 a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo Se agrega a una solución de 27.9 mg (0.0649 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 0.2 mL de CHCI2 y 0.2 mL de CH3CN 25.5 mg (0.0681 mmol) de ((+)-biotinil-3, 6-dioxaoctanediamina. Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 4h. Se filtra la mezcla de reacción y Se remueve el CH2CI2 en vacío para dar una espuma amarilla (19 mg, 36 %). MS (ESI) m/z 805.8 (M+1).

Ejemplo 52: Preparación de Éster de 4-butilsulfanilmetileno-6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 ,3,4,7,10,11 ,12, 13, 14, 15,16, 17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético Se agrega a una solución de 17-dihidrowortmanina (0.21 g, 0.49 mmol) en diclorometano (2 mL) de n-butanotiol (90 µL), seguido por una gota de trietilamina. Después de agitación a temperatura ambiente durante 19 horas, se agrega una gota adicional de trietilamina. Después de agitación durante tres días, se concentra la mezcla de reacción bajo presión reducida. Se purifica el residuo por cromatografía flash (acetato de etilo/hexanos) para suministrar un sólido amarillo-naranja (82 mg, 40 %). MS (ES+): 521.1 (M+H)+.

Ejemplo 53: Preparación de Acetato de di-(1 E,4S,4aR,5f?,6aS,7S)-1-{[[3-(dimetilamino)propil](metil)amino] metileno}-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a, 5,6,6a, 7, 8, 9,9a, 10-dodecahidroindeno[4, 5-h]isocromen-5-ilo 17-pegilatado Se agrega a una solución de bis 17-Hidroxiwortmanina PegdOOO (10 g, ver Figura 66, también se describe en las páginas 30 y 33 de la anterior solicitud Estadounidense. Ser. No. 10/828,474 presentada en Abril 20, 2004, incorporada aquí como referencia) en 30 mL de CH2CI2 N, N, N'-trimetil-1 ,3-propanodiamina (0.98 mL, 6.68 mmol). Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 24 horas y luego se concentra en vacío. Se trata el residuo con Et2?. Se recolecta el sólido resultante por filtración y se seca en vacío para dar un sólido amarillo (10.1 g). MS (ESI) m/z 6069 (M+) para X = (CH2OCH2)?07.

Ejemplo 54: Preparación de acetato de (1E,4S,4aR,5R,6aS,7S,9aR)-1-[(dietilamino)metileno]-7, 11 -dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2, 10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo 17-Pegilado Se agrega a una solución de 17-Hidroxiwortmanina-17-pegilado (3 g) en 12 mL de CH2CI2 200 µL de dietilamina. Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante la noche. Se remueve el CH2CI2 en vacío. El residuo se tritura con Et2Ü para dar 2.8 g del producto como un polvo amarillo.

Ejemplo 55: Preparación del compuesto pegilado representado en la Figura 1 Etapa A: Se agrega a una solución de mPEG5000-NH2 (comprado de Nektar, 3.0 g, 0.60 mmol) en diclorometano (15 mL) di-í-butildicarbonato (0.28 mL, 1.2 mmol), seguido por trietilamina (0.4 mL). Se agita la mezcla a temperatura ambiente y luego se concentra bajo presión reducida para dar mPEG5000-NHBoc como un sólido blanco (3.0 g). Etapa B: Se agrega a una solución de 0o C de mPEG5000-NHBoc (0.60 mmol) en dimetilformamida (30 mL) yodometano (0.4 mL), seguido por hidruro de sodio (60 % de dispersión en aceite mineral, 0.12 g). Después de agitación durante la noche a temperatura ambiente, se apaga la mezcla de reacción con agua y se evapora hasta secado bajo presión reducida. Se purifica el residuo por cromatografía flash para dar mPEG5000-N(CH3)Boc como un sólido amarillo pálido. Etapa C: Se agrega a una solución de mPEG5000-N(CH3)Boc (2.4 g) en diclorometano (100 mL) ácido trifluoroacético (2.5 mL). Se agita la mezcla de reacción durante la noche a temperatura ambiente y luego se concentra bajo presión reducida para dar mPEG5000-NHCH3 como una sal TFA (trifluoroacética). Etapa D: Se agrega a una suspensión de mPEG5000-NHCH3, sal TFA (2.5 g, 0.5 mmol) en diclorometano trietilamina (0.3 mL), seguido por 17-Hidroxiwortmanina (0.13 g, 0.3 mmol). Después de agitación durante la noche, se agregan cantidades adicionales de 17-Hidroxiwortmanina (0.12 g, 0.3 mmol) y trietilamina (5 gotas). Después de agitación a temperatura ambiente, se concentra la mezcla bajo presión reducida y se purifica el residuo resultante por cromatografía flash (metanol/cloroformo) para dar el 17-Hidroxiwortmanina , mPEG5000NHCH3 aducto como hojuelas doradas (2.0 g). MS: 5321.0.

Ejemplo 56: Preparación de acetato de (1Z,4S,4aR,5R,6aS,7S)-1-{[t-butilamino]metileno}-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo Se agrega a una solución de 100 mg (0.23 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 2 mL de CH2CI2 49 µL (0.46 mmol) de tertbutilamina. Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante la noche. Se remueve el CH2CI2 en vacío. El residuo se tritura con Et2O para dar 58 mg (50 %) de producto como un polvo naranja. MS (ESI) m/z 504 (M+1).

Ejemplo 57: Preparación de acetato de (1Z,4S,4aR,5R,6aS,7S)-1-{[3-dimetilamino-propilamino]metileno}-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo Se agrega a una solución de 100 mg (0.23 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 2 mL de CH2CI2 58 µL (0.46 mmol) de N,N-dimetil-1 ,3-propanodiamina. Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante la noche. Se remueve el CH2CI2 en vacío. El residuo se tritura con Et2? para dar 74 mg (60 %) de producto como un polvo naranja. MS (ESI) m/z 533 (M+1).

Ejemplo 58: Preparación de acetato de (1Z,4S,4aR,5R,6aS,7S)-7,11-dihidroxi-1-{[(2-mercaptoetil)amino]metileno}-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10- dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo Se agrega a una solución de 100 mg (0.23 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 2 mL de CH2CI2 32 mg (0.278 mmol) de clorhidrato de 2-amino-etanotiol y trietilamina (45 µL, 0.325 mmol). Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 4h. Se agrega agua y se remueve el CH2CI2, se filtra a través de una almohadilla de tejido Kimwipe y se concentra en vacío para dar una espuma amarilla. MS (ESI) m/z 508.5 (M+1 ).

Ejemplo 59: Preparación de acetato de (1Z,4S,4aR,5R,6aSJS,9aR)-1- [(etilamino)metileno]-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo- 1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10- dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo Se agrega a una solución de 100 mg (0.23 mmol) de 17-Hidroxiwortmanina en 2 mL de CH2CI2 100 mg de clorhidrato de etilamina y 100 µL de trietilamina. Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 24h. Se agrega agua y se remueve el CH2CI2, se filtra a través de K2CO3 y se concentra en vacío. Se disuelve el residuo en EtOAc y se precipita con hexanos para dar un polvo amarillo (32 mg, 29%). MS (ESI) m/z 476.22813 (M+1).

Ejemplo 60: Preparación de (1E,4S,4aR,5R,6aS,7S)-1-{[[3-(dimetilamino)propil](metil)amino]metileno}-5,7,11-trihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-4a,5,6,6a,7,8,9,9a-octahidroindeno [4,5-h]isocromeno-2,10(1 H,4H)-diona Se agrega a una solución de 50 mg (0.13 mmol) 11-desacetil-17-Hidroxiwortmanina en 2 mL de CH2CI2 38 µL de N,N,N'-trimetilpropanodiamina (0.26 mmol). Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 24h. Se remueve el CH2CI2 en vacío. Se disuelve el residuo en EtOAc y se precipita con hexanos para dar un polvo amarillo (35 mg, 53%). MS (ESI) m/z 505.29083 (M+1 ).

Ejemplo 61 : Preparación de acetato de (1Z,4S,4aR,5R,6aS,7S,9aR)-7,11-dihidroxi-1-(hidroximetileno)-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5- h]isocromen-5-ilo Se disuelve 17-hidroxi-wortmanina (20 mg, 0.047 mmol) en 4 mL de acetonitrilo y 2 mL de agua con 0.5 mL de trietilamina. Se agita la mezcla de reacción a temperatura ambiente durante la noche. Se aisla el compuesto del título por HPLC preparativo utilizando una columna Nova-Pak HRC18, 60A, 6um, 19 x 300mm (Waters) en 254 nm UV (Fase Móvil A es 100 ml de acetonitrilo con 900 ml de agua, y 0.2 ml de ácido trifluoroacético. Fase Móvil B es 900 ml de acetonitrilo con 100 ml de agua y 0.2 ml de ácido trifluoroacético. El gradiente es 0-5 min a 20% B y 80% A, 5-35 min de 20% B a 70% B a tasa de flujo 20 mL/min). La fracción se recolecta en un pico de 12 min pico es completo y se extrae con CH2CI2. Se seca la capa orgánica sobre sulfato de sodio anhidro y se rotaevapora hasta secado. Un total de 5 mg de se obtiene un sólido amarillo por precipitación de 1 mL de CH2CI2 y 3 mL de heptano y se seca utilizando gas de nitrógeno y luego un speecdvac. LC/MS muestra [M+H] 449.31 y [M-H] 447.26.

Ejemplo 62: Preparación de Acetato de (1E,4S,4af?,5R,6aS,7S,9aR)-1-({íerc-butil[2-(dimetilamino)etil]amino}metileno)-7, 11 -dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6, 6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocrom en-5-ilo Etapa A: Se enfría una solución de í-butiletanolamina (12 g, 100 mmol) en cloroformo (100 mL) a -10°C en un baño de cloruro de sodio/hielo. Seguido por la adición de cloruro de tionilo (10 mL en 10 mL de cloroformo), se remueve el baño frío y se reemplaza con un baño de aceite. Se calienta la mezcla de reacción a reflujo durante seis horas y luego se le permite enfriar a temperatura ambiente. Se recolecta el material precipitado y se lava con acetona para dar clorhidrato de 2-(í-butilamino)etilcloruro como un sólido blanco. MS (ES+): m/z (M+H) = 136.2, 138.2. Etapa B: Se disuelve clorhidrato de 2-(í-Butilamino)etilcloruro (1.2 g, 7.0 mmol) en solución de dimetilamina acuosa (40 % en peso, 22 mL) en un tubo sellado. Se calienta la mezcla en un baño de aceite 140°C durante seis horas, se le permite enfriar a temperatura ambiente, y luego se satura con carbonato de potasio sólido. Se extrae la mezcla tres veces con acetato de etilo. Se secan los extractos combinados sobre sulfato de sodio anhidro, se decantan, y se concentran bajo presión reducida para dar ?/-í-butil,?/',?/'-dimetiletilenodiamina como un líquido café claro (0.57 g, 56 %). Se lleva el material crudo a la siguiente etapa sin purificación adicional.

MS (ES+): m/z (M+H) = 145.3. Etapa C: Se agrega en forma de gota a una solución de ?/-í-butil,?/',?/'-dimetiletilenodiamina cruda (0.57 g, 4.0 mmol) en diclorometano (20 mL) benzilcloroformoato (0.85 mL, 6.0 mmol) a temperatura ambiente. Se agita la mezcla de reacción durante la noche a temperatura ambiente. Seguido de una preparación acuosa, se purifica el producto crudo por HPLC de fase reversa semi-preparativo (emplear un gradiente de elusión de 5% de acetonitrilo/95 % de agua/0.1 % de ácido trifluoroacético a 100 % de acetonitrilo durante 40 minutos) para dar ácido ?/-benziloxicarbonil-?/-í-butil,?/', /'-dimetiletilenodiamina trifluoroacético como un aceite incoloro, claro (0.47 g, 29%). MS (ES+): m/z (M+H) = 279.15. Etapa D: Se desgasifica una solución de ácido ?/-benziloxicarbonil-?/-í-butil,?/',?/'-dimetiletilenodiamina trifluroacético (0.47 g, 1.2 mmol) en etanol (15 mL) con hielo seco. Se agrega paladio en carbono (10%, 100 mg), seguido por ácido clorhídrico concentrado (300 µL). La mezcla se agita en un hidrógenador Parr a 50 psi hidrógeno durante 20 horas, se filtra a través de una almohadilla de tierra diatomácea, y se concentra bajo presión reducida para dar diclorhidrato de N-t-butil, N'.N'-dimetiletilenodiamina como un polvo blanco (0.22 g, 85 %). MS (ES+): m/z (M+H) = 145.3. Etapa E: Se agrega a una suspensión de diclorhidrato de N-t-butil, N',N'-dimetiletilenodiamina (0.12 g, 0.55 mmol) en diclorometano (5 mL) trietilamina (220 µL, 1.7 mmol). Se agrega 17-Hidroxiwortmanina (0.12 g, 0.28 mmol) y se agita la mezcla de reacción durante la noche a temperatura ambiente y luego se concentra bajo presión reducida. Se disuelve el residuo en DMSO/acetonitrilo/agua (1 :1 :0.5) y se purifica por HPLC de fase reversa semi-preparativo (emplear un gradiente de elusión de 5 % de acetonitrilo/95% de agua a 100 % de acetonitrilo durante 40 minutos). Se tritura el material recolectado con acetato de etilo y se recolecta por filtración para dar acetato de (1 E,4S,4af.,5R,6aSJS,9af?)-1-({íerc-butil[2-(dimetilamino)etil] aminojmetileno)-7,11 -dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2, 10-dioxo- 1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocrom en-5-ilo como un polvo amarillo pálido. HRMS (ES+): m/z (M+H) = 575.33233.

Ejemplo 63: Preparación de: Éster de 4-{[(2-dimetilamino-propil)-metil-amino]-metileno}-6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10, 13-dimetil-3,7-dioxo-1 ,3,4,7,10,11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido butanóico En una manera análoga a aquella descrita en el ejemplo 48, ß- -O-desacetil-11-O-butanoil-17-dihidrowortmanina (80 mg, 0.17 mmol) en diclorometano (2 mL) se trata con ?/,?/,?/-trimetilpropilenediamina (58 µL). Se agita la mezcla de reacción durante la noche a temperatura ambiente y luego se concentra bajo presión reducida. Se purifica el residuo por HPLC de fase reversa (emplear un gradiente de elusión de 5 % de acetonitrilo/95 % de agua a 95 % de acetonitrilo durante 40 minutos) para dar el compuesto del título como una espuma naranja, dura (47 mg, 48 %). MS (ES+): m/z (M+H) = 575.4 Ejemplo 64: Preparación de Éster de 4-{[(2-dimetilamino-propil)-etil-amino]-metileno}-6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 ,3,4,7,10,11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético Se agrega clorhidrato de ?/,?/-dimetilaminopropil cloruro (1.6 g, 10 mmol) a etilamina (70 % en peso de solución acuosa, 24 mL, 300 mmol) en un vaso sellado. Se calienta la suspensión en un baño de aceite a 140 °C durante 8 horas. Después de enfriar a temperatura ambiente, se satura la mezcla con carbonato de potasio sólido y se extrae tres veces con acetato de etilo. Se lavan los extractos combinados una vez con solución de cloruro de sodio acuosa saturada, se seca sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtra, y se concentra bajo presión reducida para dar la /'-etil-?/,?/-dimetilpropano-1 ,3-diamina cruda (500 mg, 38 %). MS (ES+): m/z (M+H) = 131.3. Se trata una solución de la ?/'-etil-?/,?/-dimetilpropano-1 ,3-diamina cruda(0.50 g, 3.8 mmol) en diclorometano (20 mL) con benzilcloroformoato (0.82 mL, 5.7 mmol) y luego se le permite agitar a temperatura ambiente durante dos horas. Después de concentrar la mezcla de reacción bajo presión reducida, se purifica el residuo por HPLC de fase reversa (emplear un gradiente de elusión de 5 % de acetonitrilo/95 % de agua/0.1 % de ácido trifluoroacético a 95 % de acetonitrilo durante 45 minutos) para dar trifluoroacetato de éster de bencilo de ácido (3-dimetilaminopropil)-etil-carbámico (840 mg, 58 %) como un jarabe incoloro, claro. MS (ES+): m/z (M+H) = 265.4 Se agrega a una solución del trifluoroacetato de éster de bencílo de ácido (3-dimetilaminopropil)-etil-carbámico(0.84 g, 2.2 mmol) en etanol (30 mL) y ácido clorhídrico concentrado (0.5 mL, 6 mmol) paladio en carbono (10 %, 50 mg). Se agita la suspensión bajo 50 psi de hidrógeno. Cuando se observa que ha cesado el consumo de hidrógeno, se filtra la mezcla a través de una almohadilla de tierra diatomácea y luego se concentra bajo presión reducida para dar diclorhidrato de N'-etil-N,N-dimetilpropano-1 ,3-diamina (400 mg, 89 %) como un sólido blanco. MS (ES+): m/z (M+H) = 131.3 se agrega a una suspensión del diclorhidrato de N-etil-N,N-dimetilpropano-1 ,3-diamina (0.26 g, 1.3 mmol) en diclorometano (5 mL) trietilamina (0.51 mL, 3.9 mmol). Después de agitación durante 10 minutos, se trata la mezcla con 17-Hidroxiwortmanina (0.28 g, 0.65 mmol). Después de agitación durante la noche a temperatura ambiente, se concentra la mezcla bajo presión reducida y luego se purifica por HPLC de fase reversa (emplear un gradiente de elusión de 5 % de acetonitrilo/95 % de agua a 95 % de acetonitrilo durante 45 minutos). Se obtiene el compuesto del título como un sólido de color óxido (11.6 mg). MS (ES+): m/z (M+H) = 561.4.

Ejemplo 65: Preparación de acetato de (1 E, 4S, 4aR, 5R, 6aS, 7S, 9aR)-1-({4-[2-(2,5-dioxo-2,5-dihidro-1 H-pirrol-1-il)etil] piperazin-1-il}metileno)-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo Se agrega a una solución de trifluoroacetato de éster de bencilo de ácido (3-dimetilaminopropil)-etil-carbámico (0.84g, 2.2 mmol) en etanol (30 mL) y ácido clorhídrico concentrado (0.5 mL, 6 mmol) paladio en carbono (10%, 50 mg). Se agita la suspensión bajo 50 psi de hidrógeno. Cuando se observa que ha cesado el consumo de hidrógeno, se filtra la mezcla a través de una almohadilla de tierra diatomácea y luego se concentra bajo presión reducida para dar diclorhidrato de N'-etil-N,N-dimetilpropano-1 ,3-diamina (400 mg, 89%) como un sólido blanco. MS (ES+): m/z (M+H) = 131.3 Se agrega a una suspensión del diclorhidrato de N'-etil-N,N-dimetilpropano-1 ,3-diamina (0.26 g, 1.3 mmol) en diclorometano (5mL) trietilamina (0.51 mL, 3.9 mmol). Después de agitación durante 10 minutos, se trata la mezcla con 17-Hidroxiwortmanina (0.28 g, 0.65 mmol). Después de agitación durante la noche a temperatura ambiente, se concentra la mezcla bajo presión reducida y luego se purifica por HPLC de fase reversa (emplear un gradiente de elusión de 5% de acetonitrilo/95% de agua a 95% de acetonitrilo durante 45 minutos). Se obtiene el compuesto del título como un sólido de color óxido (11.6 mg). MS(ES+): m/z (M+H)=561.4.

Ejemplo 66: Ensayo de Polarización de Fluorescencia para PI3K Este ensayo se utiliza para determinar el IC50 de compuestos de la presente invención ya que identifica inhibidores de quinasa PI3 al medir la inhibición. Materiales Amortiguador de Reacción: 20 mM Hepes, pH 7.5, 2 mM MgC , 0.05% de CHAPS, y 0.01% de BME (agregado fresco) Amortiguador de Detención/Detección: 100 mM Hepes, pH 7.5, 4 mM EDTA, 0.05% de CHAPS ATP 20 mM en agua PIP2 (diC8, cat# P-4508) 1 mM en agua (MW=856.5) GST-GRP 1 J5 mg/mL o 1.4 mg/mL en 10% de glicerol Detector rojo (TAMRA) 2.5 µM Placa: placa de fluorescencia de polipropileno negro de 384 pozos Nunc Métodos El ensayo se desarrolla al colocar 5 µL de enzima diluida por pozo, luego se agrega 5 µL de compuesto diluido (o 9.5 µL de enzima luego 0.5 µL de compuesto en DMSO) y se mezcla. Luego, 10 µL de sustrato se agrega para iniciar la reacción. Las muestras se incuban 30-60 minutos, luego la reacción se detiene al agregar 20 µL de mezcla de detención/detector. El PI3K se diluye con amortiguador de reacción (por ejemplo, 5 µL o 7.5 µL PI3K en 620 µL de amortiguador de reacción), y 5 µL de enzima diluida se utiliza por pozo. 5 µL amortiguador de reacción o droga diluida en amortiguador (por ejemplo, 4 µL/100 para el DMSO final es 1% en reacción) se agrega a cada uno. Las muestras se mezclan al pipetear arriba y abajo. Alternativamente, la enzima se puede diluir a 1215 µL. En este caso 9.8 µL se agrega por pozo y 0.2 µL de compuesto se agrega en DMSO.

Para preparar 1 mL de solución de sustrato, 955 µL de amortiguador de reacción, 40 µL PIP2, y 2.5 µL ATP se mezclan. 10 µL de sustrato se agrega a cada pozo para iniciar la reacción. Esto resulta en 20 µM PIP2, y 25 µM ATP por reacción. Se prepara mezcla de detención/detector al mezclar 4 µL de detector Rojo y 1.6 µL o 2.0 µL de GST-GRP con 1 mL de Amortiguador de detención, que resulta en sonda de 10 nM y 70 nM GST-GRP). 20 µL de la mezcla de detención/detector se agrega a cada pozo para detener la reacción. Las placas se leen después de 30-90 minutos manteniendo las soluciones de las sondas rojas oscuras. Para el punto de tiempo cero, se agrega la mezcla de detención/detector a la enzima justo antes de agregar el sustrato. Para un control extra, la mezcla de detención/detector se agrega al amortiguador (sin enzima) y al sustrato o al amortiguador solo (sin sustrato). Preparaciones de PI3K agrupadas tienen una concentración de proteína de 0.25 mg/mL. La reacción recomendad tiene 0.06 µL por 20 µL (0.015 µg/20 µL) o 0.01125 µg/15 µL o 0.75 µg/mL. Las placas se leen sobre máquinas con filtros para Tamra. Las unidades son mP sin controles de enzima que leen unidades app 190-220 mP. La enzima completamente activa reduce la polarización de fluorescencia a 70-100 mP después de 30 minutos. Un cpd activo eleva los valores mP la mitad para controlar o para las unidades 120-150 mP. Los resultados se presentan en las Tablas 1 y 2.

Ejemplo 67: métodos de ensayo de quinasa mTOR Ensayos TOR humanos (Ver Toral-Barza, eí al. Biochem Biophys. Res. Commun. 2005 Junio 24;332(1):304-10) con enzima purificada se desarrollan en placas de 96 pozos mediante el formato DELFIA como sigue. Las enzimas se diluyen primero en amortiguador de ensayo de quinasa (10 mM Hepes (pH 7.4), 50 mM NaCI, 50 mM b-glicerofosfato, 10 mM MnCI2, 0.5 mM DTT, 0.25 mM microcistin LR, y 100 mg/mL BSA). A cada pozo, 12 mL de enzima diluida se mezcla brevemente con 0.5 mL de inhibidor de ensayo o vehículo de control dimetiisulfóxido (DMSO). La reacción quinasa se inhibe al agregar 12.5 mL de amortiguador de ensayo quinasa que contiene ATP y His6-S6K para dar un volumen de reacción final de 25 mL que contiene 800 ng/mL de FLAG-TOR, 100 mM de ATP y 1.25 mM de His6-S6K. La placa de reacción se incuba durante 2 horas (lineal en 1-6 horas) a temperatura ambiente con agitación gentil y luego terminada al agregar 25 mL de amortiguador de Detención (20 mM Hepes (pH 7.4), 20 mM EDTA, 20 mM EGTA). La detección DELFIA del His6-S6K (Thr-389) fosforilado se desarrolla a temperatura ambiente utilizando un anticuerpo anti-P(T389)-p70S6K monoclonal (1A5, Señalización Celular) etiquetada con Europio-N1-ITC (Eu) (10.4 Eu por anticuerpo, PerkinElmer). El amortiguador de Ensayo DELFIA y la solución de Mejoramiento se pueden comprar de PerkinElmer. 45 mL de mezcla de reacción de quinasa terminada se transfiere a una placa MaxiSorp (Nunc) que contiene 55 mL de PBS. El His6-S6K se le permite unirse durante 2 horas después que los pozos se aspiran y se lavan una vez con PBS. 100 mL de amortiguador de Ensayo DELFIA con 40 ng/mL Eu-P(T389)-S6K de anticuerpo se agrega. La unión de anticuerpo se continúa durante una hora con agitación gentil. Los pozos se aspiran luego y se lavan cuatro veces con PBS que contiene 0.05% Tween-20 (PBST). 100 mL de solución Mejoradora DELFIA se agrega a cada pozo y las placas se leen en un lector de placa modelo PerkinElmer Victor. Los datos obtenidos se utilizan para calcular la actividad enzimática y la inhibición de enzima mediante inhibidores potenciales.

Ejemplo 68: Métodos de ensayo Rat1-IGF1 para células Rat1 que experimentan inducción IGF-1 in vitro se coloca en placas de cultivo de 6 pozos y privadas de suero durante 24 horas. Las células privadas de suero se tratan con vehículo de control o con varias concentraciones de 17-HWT durante 2 horas, estimuladas mediante IGF-1 (100 ng/mL) durante 30 minutos. Los lisatos celulares se preparan utilizando amortiguador de muestra NuPAGE-LDS (Invitrogen), sonicado y luego clarifido por centrifugación. Cantidades iguales de proteínas se someten a análisis de inmunoblot utilizando sistema de electrofóresis NuPAGE y sondeados con phosphor-AKT (S473), anticuerpos AKT totales (Signaling Technology).

Ejemplo 69: Ensayo de crecimiento celular de tumor Células de tumor humano se obtienen todas del ATCC, y se cultivan utilizando métodos de cultivo celular estándar. Las células se colocan en placas de cultivo de 96 pozos de 1000 a 3000 células por pozo. Al siguiente día de colocar en placas, las células se colocan con varias dosis de Compuesto 4 inhibidor PI3K o Compuesto 5 solo o con una dosis baja constante de inhibidor MEK inhibitor 2-(2-cloro-4-yodoanilino)-N-(ciclopropilmetoxi-3,4-difluobenzamida) (1 µg/ml) o UO126 (5 µg/ml). El UO126 también se conoce como 1 ,4-diamino-2,3-diciano-1 ,4-bis[2-aminofeniltio]butadieno. En algunos experimentos, las células se tratan solas con varias dosis de inhibidor MEK (2-(2-cloro-4-yodoanilino)-N-(ciclopropilmetoxi-3,4-difluobenzamida)), o HKI-272 inhibidor HER2/neu, o CCI-779 inhibidor mTOR, o con una dosis baja constante del Compuesto 4 (0.1 µg/ml). En todos los ensayos de combinación, se desarrollan los tratamientos de combinación en la misma placa de 96 pozos junto con pozos de control tratados con vehículo (DMSO) o solos con la misma dosis de segunda droga incluida en la combinación. Adicionalmente, también se desarrolla una combinación de control en la misma placa de ensayo en la que la droga de baja dosis utilizada en combinaciones experimentales se combina con si misma para evaluar variabilidad de ensayo. Tres días después del tratamiento de droga, se determinan densidades celulares viables mediante conversión metabólica (por células viables) del tinte MTS, un ensayo de proliferación celular establecido. Los ensayos se desarrollan utilizando un kit de ensayo comprado de Promega Corp. (Madison, Wl) siguiendo el protocolo suministrado con el kit. Los resultados de ensayo MTS se leen en lector de placa de 96 pozos al medir la absorbancia en 490 nm. El efecto de cada tratamiento se calcula como porcentaje de crecimiento de control con relación a las células tratadas con DMSO que crecen en la misma placa de cultivo.

Análisis de datos y cálculo de sinergia Para cada experimento de inhibición de crecimiento de combinación, las curvas de respuesta de dosis de la droga sola y la combinación se generan. Para evaluar la sinergia, la curva de dosis de combinación se normaliza mediante el valor obtenido con la segunda droga sola utilizando la fórmula [% de crecimiento (combinación)/% de crecimiento (segunda droga sola)] X100 para generar una curva de dosis de combinación normalizada. Si una curva de dosis normalizada traslapa la curva de la droga única, se determina la actividad de combinación como inhibición de crecimiento. Si una curva de dosis normalizada exhibe mayor inhibición con relación al tratamiento único correspondiente, se determina la actividad de combinación como inhibición de crecimiento sinergístico. En cada experimento, los datos de combinación de control demuestran completamente curvas de inhibición de crecimiento aditivo.

Análisis Western blot Las células se colocan en placas de cultivo de 6 pozos. 24 horas después las células se tratan con agentes únicos indicados o agentes combinados durante 16 hr en medio de crecimiento completo. Los lisatos de proteína se preparan mediante análisis Western blot como se describe previamente en Yu, K., eí al., Endocr. Relat. Cáncer. 2001 Septiembre: 8(3) 249-58.

Ensayo de Apoptosis Las células se colocan en placas de 96 pozos en una densidad de 3000 células por pozo. 24 hr después las células se tratan con agente único o combinación como se indica. La apoptosis se mide en 24 hr y 48 hr post tratamiento de droga mediante kit de ensayo Caspasa-3/7 Apo-ONE (cat # G7791 , Promega Corp.) siguiendo el protocolo suministrado por el vendedor. La mezcla de ensayo se agrega a las células y se incuba a temperatura ambiente durante 3 horas con mezcla gentil utilizando un agitador de placa. La fluorescencia de cada pozo se lee utilizando un Lector de Placa Victor Wallac. Cada placa experimental contiene pozos en blanco (sin células) como fluorescencia de fondo que se sustrae de todos los pozos para obtener valores experimentales. Los datos se expresan como unidades fluorescentes relativas (RFLU) o como unidades Apo-ONE.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de fórmula I: I en donde: R1 se selecciona del grupo que consiste de NR4R5, SR6, y OR7; R2 se selecciona del grupo que consiste de hidrógeno, formilo, y acilo; R3 se selecciona del grupo que consiste de hidrógeno, hidroxi, alcoxi, alcanoiloxi, =O, aciloxi y carbonilo; R4 y R5 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de hidrógeno, hidroxilo, alquilo, alquenilo, heterocíclico, arilo, heteroarilo, aralquilo, y PEG; y en donde R4 y R5 se unen opcionalmente para formar un anillo; R6 se selecciona del grupo que consiste de alquilo, arilo, heteroarilo, aralquilo, y PEG; y R7 se selecciona del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, arilo, heteroarilo, aralquilo, y PEG; R8 se selecciona del grupo que consiste de hidroxi, aciloxi, y alcoxi; y sales, solvatos e hidratos de estos, dado que el compuesto no es un compuesto de fórmula V: en donde R9 es alquilo, o un conjugado de polímero-droga de una fórmula no repetida única (B): B en donde R10 es -O-, -NH-, o -S-; R11 es alquilo, un cicloalquilo, o arilo; R3 es H, =O, -O-COC4H9, o OR12; R12 es H, COR13 o alquilo; R13 es alquilo, H, arilo, o -CH2-arilo; y n es 1-1000.

2. El compuesto de la reivindicación 1 en donde R1 es NR4R5.

3. El compuesto de la reivindicación 2 en donde R2 es hidrógeno.

4. El compuesto de la reivindicación 2 en donde R2 es un grupo formilo.

5. El compuesto de la reivindicación 2 en donde R3 es un grupo aciloxi.

6. El compuesto de la reivindicación 5 en donde R3 es un grupo acetoxi.

7. El compuesto de la reivindicación 1 en donde R8 es un grupo hidroxi.

8. El compuesto de la reivindicación 1 en donde: R1 se selecciona del grupo que consiste de NR4R5, SR6 y OR7; R2 se selecciona del grupo que consiste de hidrógeno y formilo; R3 se selecciona del grupo que consiste de hidrógeno, hidroxi, y aciloxi; R4 y R5 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de hidrógeno, alquilo, alquenilo, heterocíclico, arilo, aralquilo, y PEG; y en donde R4 y R5 se unen opcionalmente para formar un anillo; R6 es un grupo alquilo; R7 es hidrógeno; R8 es un grupo hidroxi y sales, solvatos e hidratos de estos.

9. El compuesto de la reivindicación 1 se selecciona del grupo que consiste de: Acetato de (1E,4S,4aR,5R,6aS,7S,9aR)-1-[(dietilamino)metileno]-7,11- dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2, 10-dioxo- 1 ,2,4,4a,5,6,6aJ,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo; Acetato de (1E,4S,4aR,5R,6aS,7S,9aR)-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)- 4a,6a-dimetil-2, 10-dioxo-1 -(Pirrolidin-1 -ilmetileno)- 1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo; Acetato de (1 E,4S,4aR,5R,6aSJS,9aR)-1-(anilinometileno)-7,11- dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo- 1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h] isocromen-5-ilo; Acetato de (1 ,4S,4af?,5R,6aS,7S)-1-{[íerc-butil(2- hidroxietil)amino]metileno}-7, 11 -dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil- 2,10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5- h]isocromen-5-ilo Acetato de (1 E,4S,4aR,5R,6aS,7S)-1-{[[3- (dimetilamino)propil](metil)amino]metileno}-7, 11 -dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo; Acetato de (1E,4S,4aR,5 ?,6aS,7S -7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)- 4a,6a-dimetil-1-{[metil(1-metilpirrolidin-3-il)amino]metileno}-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo; Acetato de (1E,4S,4aR,5f.,6aS,7S/)-1-[(4-ciclohexilpiperazin-1 -il)metileno]-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo- 1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo; Acetato de (1E,4S,4aR,5R,6aS,7Sj-1-{[butil(metil)amino]metileno}-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2, 10-dioxo- 1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo; Acetato de (1E,4S,4aR,5R,6aS,7SJ-1 -{[ciciohexil (metil)amino]metileno}-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen- 5-ilo; Acetato de (1 ,4S,4aR,5 ?,6aS,7Sj-1-[(4-benzilpiperazin-1-il)metileno]-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo- 1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo; Acetato de (1 ,4S,4aR,5R,6aS,7S)-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)- 4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1-(piperidin-1-ilmetileno)- 1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h] isocromen-5-ilo; Acetato de (1 ,4S,4aR,5R,6aS,7S)-1-(3,4-dihidroisoquinolin-2(1 H)-ilmetileno)-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo- 1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h] isocromen-5-ilo; Acetato de (1 ,4S,4aR,5R,6aS,7S)-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)- 4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1-[(4-fenilpiperazin-1-il)metileno]- 1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno [4,5-h] isocromen-5-ilo; Acetato de (1 ,4S,4aR,5R,6aSJS)-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-1 -[(4-metilpiperazin-1 -il)metileno]-2, 10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno [4,5-h] isocromen-5-ilo; Acetato de (1 ,4S,4aR,5R,6aS,7S)-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimet¡l-2,10-dioxo-1-[(4-fenilpiperidin-1-il)metileno]- 1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno [4,5-h] isocromen-5-ilo; Acetato de (1 E,4S,4aR,5R,6aS,7S)-7-(formiloxi)-11-hidroxi-4- (metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1-(pirrolidin-1-ilmetileno)-1 ,2,4,4a,5,6,6aJ,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo; Acetato de (1 E,4S,4aR,5R,6aSJS)-1-[(dialilamino)metileno]-7- (formiloxi)-11-hidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo; Acetato de (1 E,4S,4aR,5R,6aS,7S)-1-[(dietilamino)metileno]-7-(formiloxi)-11-hidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6aJ,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo; Éster de 4-{[bis-(2-hidroxi-etil)-amino]-metileno}-6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 ,3,4,7,10,11 ,12,13,14, 15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; Éster de 4-[(terc-butil-metil-amino)-metileno]-6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 ,3,4,7,10,11 ,12, 13,14,15, 16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; Éster de 4-{[bis-(3-dimetilamino-propil)-amino]-metileno}-6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 , 3,4,7, 10, 11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; Éster de metilo de ácido 1-(11-Acetoxi-6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10, 13-dimetil-3,7-dioxo-1 , 7, 10,11 ,12,13, 14, 15,16,17-decahidro-2-oxa-c¡clopenta[a]fenantren-4-ilidenometil)-piperidina-4-carboxílico; Ácido 1 -(11 -Acetoxi-6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 ,7,10,11 ,12, 13,14, 15,16,17-decahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-4-ilidenometil)-piperidina-4-carboxílico; Éster de metilo de ácido 4-[(11-Acetoxi-6,17-dihidroxi-1-metoximetil- 10,13-dimetil-3J-dioxo-1 ,7,10,11 ,12,13,14,15,16,17-decahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-4-ilidenometil)-metil-amino]-2,5-dimetil-hex-2-enoico; Éster de 6,17-dihidroxi-1 -metoximetil-4-[({3-[4-(4-metoxi-fenil)-piperazin-1-il]-propil}-metil-amino)-metileno]-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 ,3,4,7, 10, 11 ,12, 13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren 11 -ilo de ácido acético; Éster 6,17-dihidroxi-1 -metoximetil-10,13-dimetil-4-({metil-[3-(4-metil-piperazin-1-il)-propil]-amino}-metileno)-3J-dioxo-1 ,3,4,7,10,11 ,12,13, 14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-il de ácido acético; Éster de 6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-4-{[metil-(3-morfolin-4-il-propil)-amino]-metileno}-3,7-dioxo-1 ,3,4,7,10,11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-il de ácido acético; Éster de 4-{[(2-bencenosulfonil-etil)-(3-dietilamino-propil)-amino]-metileno}-6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10, 13-dimetil-3J-dioxo-1 ,3,4,7,10,11 ,12, 13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11 -il ácido acético; Éster de 4-{[(1-aza-biciclo[3.3.1]non-5-ilmetil)-benzil-amino]-metileno}-6,17-dihidroxi-1 -metoximetil-10, 13-dimetil-3,7-dioxo-1 ,3,4,7,10,11 ,12, 13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; Éster de 6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-4-[4-(3-morfolin-4-il-propil)-piperazin-1-ilmetileno]-3,7-dioxo-1 ,3,4,7,10,11 ,12, 13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; Ester de 4-{[(2-dimetilamino-etil)-metil-amino]-metileno}-6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 , 3,4,7, 10, 11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; Éster de 4-[4-(3-dimetilamino-propil)-piperazin-1 -ilmetileno]-6, 17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo- 1 ,3,4,7,10,11 ,12, 13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; Éster de 6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-4-[4-(2-morfolin-4-il-etil)-piperazin-1-ilmetileno]-3,7-dioxo-1 ,3,4,7, 10,11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; Éster de 6,17-dihidroxi-1 -metoximetil-10,13-dimetil-4-[4-(1 -metil-piperidin-4-il)-piperazin-1 -ilmetileno]-3,7-dioxo-1 ,3,4,7, 10,11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11 -ilo de ácido acético; Éster de terc-butilo de ácido [(11-Acetoxi-6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-3J-dioxo-1 ,7,10,11 ,12,13,14, 15,16,17-decahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-4-ilidenometil)-metil-amino]-acético; Éster de 4-{[(2,3-dihidroxi-propil)-metil-amino]-metileno}-6, 17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 , 3,4,7,10,11 ,12,13,14,15,16, 17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; Ácido 4-[(11 -Acetoxi-6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 , 7,10,11 ,12,13,14,15, 16,17-decahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-4-ilidenometil)-metil-amino]-butírico; Ácido 1 -(11 -Acetoxi-6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 ,7,10,11 ,12, 13,14, 15,16,17-decahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-4-ilidenometil)-azetidina-2-carboxílico; Éster de metilo de ácido 1-(11-Acetoxi-6,17-dihidroxi-1-metoximetil- 10,13-dimetil-3J-dioxo-1 , 7,10,11 ,12,13,14, 15,16, 17-decahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-4-ilidenometil)-pirrolidina-2-carboxílico; Éster de 4-{[benzil-(2-ciano-etil)-amino]-metileno}-6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 ,3,4,7,10,11 ,12, 13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; Éster de 4-{[(2-dietilamino-etil)-metil-amino]-metileno}-6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 ,3,4,7,10, 11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; Ester de 4-{[(2-dietilamino-etil)-etil-amino]-metileno}-6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 , 3,4,7,10, 11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; Éster de 4-{[benzil-(2-dimetilamino-etil)-amino]-metileno}-6,17-dihidroxi- 1-metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 , 3,4,7, 10, 11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; Ester de 6,17-dihidroxi-1 -metoximetil-10, 13-dimetil-3,7-dioxo-4-(4-oxo-piperidin-1-ilmetileno)-1 ,3,4,7,10,11 ,12,13,14,15, 16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; 4-{[(2-Dimetilamino-etil)-etil-amino]-metileno}-6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10,13-dimetil-10,11 ,12,13,14,15,16,17-octahidro-1 H,4H-2-oxa-ciclopenta[a]fenantreno-3,7-diona; Éster de 4-{[(2-dimetilamino-etil)-etil-amino]-metileno}-6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 ,3,4,7,10, 11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; Éster de 4-[1 ,4']bipiperidinil-1 '-ilmetileno-6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 , 3,4,7, 10,11 ,12,13,14, 15, 16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; Ester de 6,17-dihidroxi-1 -metoximetil-10,13-dimetil-4-morfolin-4-ilmetileno-3,7-dioxo-1 ,3,4,7,10,11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; Éster de 4-{[(2-dimetilamino-etil)-metil-amino]-metileno}-6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 , 3,4,7,10, 11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido propiónico; (1 E,4S,4aR,5R,6aS,7S,9aR)-1-[(dietilamino)metileno]-5,7,11-trihidroxi- 4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-4a,5,6,6a,7,8,9,9a-octahidroindeno[4,5-h]isocromeno-2,10(1 H,4H)-diona; Éster de 4-butilsulfanilmetileno-6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 , 3,4,7, 10, 11 ,12,13,14,15,16, 17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; Acetato de di-(1E,4S,4aR,5R,6aS,7S)-1-{[[3- (dimetilamino)propil](metil)amino]metileno}-7, 11 -dihidroxi-4- (metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 , 2,4,4a, 5,6,6a,7, 8,9, 9a, 10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo 17-Pegilado; Un compuesto 17-Hidroxiwortmanina pegilado como se representa en la Figura 1 ; (1E,4S,4aR,5R,6aS,7S)-1-{[[3-(dimetilamino)prop¡l](metil) amino]metileno}-5,7,11-trihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil- 4a,5,6,6a,7,8,9,9a- octahidroindeno[4,5-h]isocromeno-2,10(1 H,4H)-diona; Acetato de (1E,4S,4aR,5R,6aS,7S,9aR)-1-({íerc-butil[2- (dimetilamino)etil]amino}metileno)-7, 11 -dihidroxi-4-(metoximetil) 4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5- h]isocrom en-5-ilo; Éster de 4-{[(2-dimetilamino-propil)-metil-amino]-metileno}-6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-3J-dioxo- 1 ,3,4,7, 10, 11 , 12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido butanoico; Éster de 4-{[(2-dimetilamino-propil)-etil-amino]-metileno}-6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 , 3,4,7,10,11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a] fenantren-11-ilo de ácido acético Acetato de (1 E, 4S, 4aR, 5R, 6aS, 7S, 9aR)-1-({4-[2-(2,5-dioxo-2,5-dihidro-1 H-pirrol-1-il)etil]piperazin-1-il}metileno)-7,11-dihidroxi-4- (metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a, 5,6, 6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo; Acetato de (1Z,4S,4aR,5R,6aS,7S)-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)- 4a,6a-dimetil-2, 10-dioxo-1 -{12-oxo-16-[(3aR,4R,6aS) -2-oxohexahidro-1 H-tieno[3,4-d]imidazol-4-il]-5,8-dioxa-2,11-diazahexadec-1-ilideno}- 1 ,2,4,4a,5,6,6aJ,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo; Acetato de (1E,4S,4aR,5R,6aS,7S,9aR)-1-[(dietilamino)metileno]-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno [4,5-h]isocromen-5-ilo 17-Pegilado; Acetato de (1Z,4S,4aR,5R,6aS,7S)-1-{[t-butilamino]metileno}-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a, 5,6, 6aJ,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo; Acetato de (1Z,4S,4aR,5R,6aS,7S)-1-{[3-dimetilamino-propilamino]metileno}-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6aJ,8,9,9a,10-dodecahidroindeno [4,5-h]isocromen-5-ilo; Acetato de (1Z,4S,4aR,5R,6aS,7S)-7,11-dihidro?i-1-{[(2- mercaptoetil)amino]metileno}-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo- 1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h] isocromen-5-ilo; Acetato de (1Z,4S,4aR,5R,6aS,7S,9aR)-1-[(etilamino)metileno]-7,11- dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2, 10-dioxo- 1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno [4,5-h]isocromen-5-ilo; y sales, solvatos e hidratos de estos.

10. El compuesto de la reivindicación 9 se selecciona del grupo que consiste de: Acetato de (1E,4S,4aR,5R,6aS,7S,9aR)-1-[(dietilamino)metileno]-7,11- dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo- 1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo; Acetato de (1E,4S,4aR,5R,6aS,7S,9aR)-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)- 4a,6a-dimetil-2, 10-dioxo-1 -(Pirrolidin-1 -ilmetíleno)- 1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo; Acetato de (1 E,4S,4aR,5R,6aS,7S,9aR)-1-(anilinometileno)-7,11- dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2, 10-dioxo-1 ,2,4, 4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h] isocromen-5-ilo; Acetato de (1 ,4S,4aR,5R,6aS,7S)-1-{[íerc-butil(2- hidroxietil)amino]metileno}-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil- 2, 10-dioxo-1 ,2,4,4a, 5,6,6a, 7, 8, 9,9a, 10-dodecahidroindeno [4,5- h]isocromen-5-ilo; Acetato de (1E,4S,4aR,5R,6aS,7S)-1-{[[3- (dimetilamino)propil](metil)amino]metileno}-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a, 10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo; Acetato de (1E,4S,4aR,5R,6aS,7S;-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)- 4a,6a-dimetil-1 -{[metil(1 -metilpirrolidin-3-il) amino]metileno}-2, 10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo; Acetato de (1E,4S,4aR,5R,6aS,7SJ-1-[(4-ciclohexilpiperazin-1-il)metileno]-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h] isocromen-5-ilo; Acetato de (1E,4S,4aR,5R,6aS,7S -1-{[butil(met¡l)amino]met¡leno}-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a, 6a-dimetil-2,10-dioxo- 1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo; Acetato de (1E,4S,4aR,5R,6aS,7Sj-1 -{[ciciohexil (metil)amino]metileno}-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno [4,5-h]isocromen-5-ilo; Acetato de (1 E,4S,4aR,5R,6aS,7S -1-[(4-benzilpiperazin-1-il)metileno]-7,11 -dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2, 10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h] isocromen-5-ilo; Acetato de (1 ,4S,4aR,5R,6aS,7S)-7,1 -dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1-(piperidin-1-ilmetileno) 1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h] isocromen-5-ilo; Acetato de (1 E,4S,4aR,5R,6aS,7S)-1 -(3,4-dihidroisoquinolin-2(1 H)-ilmetileno)-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h] isocromen-5-ilo; Acetato de (1 ,4S,4aR,5R,6aS,7S)-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1-[(4-fenilpiperazin-1-il)metileno]- 1 ,2,4,4a,5,6,6aJ,8,9,9a,10-dodecahidroindeno [4,5-h] isocromen-5-ilo; Acetato de (1E,4S,4aR,5R,6aS,7S)-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-1 -[(4-metilpiperazin-1 -il)metileno]-2, 10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6aJ,8,9,9a,10-dodecahidroindeno [4,5-h] isocromen-5-ilo; Acetato de (1 ,4S,4aR,5R,6aS,7S)-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)- 4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1-[(4-fenilpiperidin-1-il)metileno]-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno [4,5-h] isocromen-5-ilo; Acetato de (1 E,4S,4aR,5R,6aS,7S)-7-(formiloxi)-11-hidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1-(pirrolidin-1-ilmetileno)- 1 ,2,4,4a,5,6,6aJ,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h] isocromen-5-ilo; Acetato de (1 E,4S,4aR,5R,6aS,7S)-1-[(dialilamino)metileno]-7-(formiloxi)-11-hidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo 1 ,2,4,4a,5,6,6aJ,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo; Acetato de (1 E,4S,4aR,5R,6aS,7S)-1-[(dietilamino)metileno]-7- (formiloxi)-11-hidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo 1 ,2,4,4a,5,6,6aJ,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo; Ester de 4-{[bis-(2-hidroxi-etil)-amino]-metileno}-6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 ,3,4,7,10,11 ,12, 13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; Éster de 4-[(terc-butil-metil-amino)-metileno]-6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 ,3,4,7,10,11 ,12, 13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; Éster de 4-{[bis-(3-dimetilamino-propil)-amino]-metileno}-6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 , 3,4,7, 10, 11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; Éster de metilo de ácido 1-(11-Acetoxi-6,17-dihidroxi-1-metoximetil- 10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 ,7,10,11 ,12, 13, 14,15,16,17-decahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-4-ilidenometil)-piperidina -4-carboxílico; Ácido 1 -(11 -Acetoxi-6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 ,7,10,11 ,12,13,14,15,16,17-decahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-4-ilidenometil)-piperidina-4-carboxílico; Éster de metilo de ácido 4-[(11-Acetoxi-6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 ,7,10,11 ,12, 13,14,15,16,17-decahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-4-ilidenometil)-metil-amino]-2,5-dimetil-hex-2-enoico; Éster de 6,17-dihidroxi-1 -metoximetil-4-[({3-[4-(4-metoxi-fenil)-piperazin-1 -il]-propil}-metil-amino)-metileno]-10,13-dimetil-3J-dioxo- 1 ,3,4,7,10, 11 ,12, 13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren 11 -ilo de ácido acético; Éster 6,17-dihidroxi-1 -metoximetil-10,13-dimetil-4-({met¡l-[3-(4-metil-piperazin-1-il)-propil]-amino}-metileno)-3,7-dioxo-1 ,3,4,7,10,11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a] fenantren-11-il de ácido acético; Éster de 6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10,13-dimetil-4-{[metil-(3-morfolin-4-il-propil)-amino]-metileno}-3,7-dioxo-1 ,3, 4,7,10,11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a] fenantren-11-il de ácido acético; Éster de 4-{[(2-bencenosulfonil-etil)-(3-dietilamino-propil)-amino]-metileno}-6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10, 13-dimetil-3,7-dioxo-1 ,3,4,7, 10,11 , 12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-il ácido acético; Éster de 4-{[(1-aza-biciclo[3.3.1]non-5-ilmetil)-benzil-amino]-metileno}- 6,17-dihidroxi-1 -metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 ,3,4,7,10,11 ,12,13, 14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; Éster de 6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10,13-dimetil-4-[4-(3-morfolin-4-il-propil)-piperazin-1 -ilmetileno]-3J-dioxo-1 ,3,4,7, 10,11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11 -ilo de ácido acético; Ester de 4-{[(2-dimetilamino-etil)-metil-amino]-metileno}-6, 17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 , 3,4,7,10, 11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; Éster de 4-[4-(3-dimetilamino-propil)-piperazin-1-ilmetileno]-6,17-dihidroxi-1 -metoximetil- 10,13-dimetil-3,7-dioxo- 1 ,3,4,7,10,11 , 12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; Éster de 6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10, 13-dimetil-4-[4-(2-morfolin-4-il-etil)-piperazin-1-ilmetileno]-3,7-dioxo-1 , 3,4,7, 10, 11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; Éster de 6,17-dihidroxi-1 -metoximetil-10,13-dimetil-4-[4-(1 -metil-piperidin-4-il)-piperazin-1-ilmetileno]-3,7-dioxo-1 ,3,4,7, 10,11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; Éster de terc-butilo de ácido[(11-Acetoxi-6,17-dihidroxi-1-metoximetil- 10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 , 7,10,11 ,12, 13,14, 15,16,17-decahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-4-ilidenometil)-metil-amino]-acético; Éster de 4-{[(2,3-dihidroxi-propil)-metil-amino]-metileno}-6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 , 3,4,7, 10, 11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; Ácido 4-[(11 -Acetoxi-6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 ,7,10,11 ,12,13,14,15,16,17-decahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-4-ilidenometil)-metil-amino]-butírico; Ácido 1 -(11 -Acetoxi-6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 ,7,10,11 ,12,13,14,15,16,17-decahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-4-ilidenometil)-azetidina-2-carboxílico; Éster de metilo de ácido 1-(11-Acetoxi-6,17-dihidroxi-1-metoximetil- 10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 , 7,10,11 ,12, 13,14,15,16, 17-decahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-4-ilidenometil)-pirrolidina-2-carboxílico; Éster de 4-{[benzil-(2-ciano-etil)-amino]-metileno}-6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 , 3,4,7,10, 11 , 12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; Éster de 4-{[(2-dietilamino-etil)-metil-amino]-metileno}-6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 , 3,4,7, 10, 11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11 -ilo de ácido acético; Ester de 4-{[(2-dietilamino-etil)-etil-amino]-metileno}-6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 ,3,4,7,10, 11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; Éster de 4-{[benzil-(2-dimetilamino-etil)-amino]-metileno}-6,17-dihidroxi- 1-metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 ,3,4,7,10, 11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; Éster de 6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-4-(4-oxo-piperidin-1-ilmetileno)-1 , 3,4,7, 10, 11 ,12,13,14,15, 16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; 4-{[(2-Dimetilamino-etil)-etil-amino]-metileno}-6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-10,11 ,12,13,14,15,16,17-octahidro-1 H.4H-2-oxa-ciclopenta[a]fenantreno-3,7-diona; Éster de 4-{[(2-dimetilamino-etil)-etil-amino]-metileno}-6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 , 3,4,7, 10, 11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; Éster de 4-[1 ,4']bipiperidinil-1 '-ilmetileno-6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil- 10, 13-dimetil-3,7-dioxo-1 , 3,4,7,10,11 ,12,13,14,15, 16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; Éster de 6,17-dihidroxi-1 -metoximetil- 10,13-dimetil-4-morfolin-4-ilmetileno-3,7-dioxo-1 ,3,4,7,10,11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11 -ilo de ácido acético; Éster de 4-{[(2-dimetilamino-etil)-metil-amino]-metileno}-6,17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 , 3,4,7, 10, 11 ,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido propiónico; (1 E,4S,4aR,5R,6aS,7S,9aR)-1-[(dietilamino)metileno]-5,7,11-trihidroxi- 4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-4a,5,6,6a,7,8,9,9a-octahidroindeno[4,5-h]isocromeno-2,10(1 H,4H)-diona; Ester de 4-butilsulfanilmetileno-6, 17-dihidroxi-1 -metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 ,3,4,7,10,11 ,12,13,14,15,16, 17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético; Acetato de di-(1E,4S,4aR,5R,6aS,7S)-1-{[[3-(dimetilamino)propil](metil)amino]metileno}-7,11-dihidroxi-4- (metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 , 2,4,4a, 5,6,6a,7, 8,9, 9a, 10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo 17-Pegilado; Un compuesto 17-Hidroxiwortmanina Pegilado como se representa en la Figura 1 ; (1E,4S,4aR,5R,6aS,7S)-1-{[[3- (dimetilamino)propil](metil)amino]metileno}-5,7,11-trihidroxi-4- (metoximetil)-4a,6a-dimetil-4a,5,6,6a,7,8,9,9a-octahidroindeno[4,5-h]isocromeno-2,10(1 H,4H)-diona; Acetato de (1E,4S,4aR,5R,6aS,7S,9aR)-1-({íerc-butil[2-(dimetilamino)etil]amino}metileno)-7,11-dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6aJ,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocrom en-5-ilo; Éster de 4-{[(2-dimetilamino-propil)-metil-amino]-metileno}-6, 17-dihidroxi-1-metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 ,3,4,7,10,11 ,12, 13, 14,15,16,17-dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido butanóico; Ester de 4-{[(2-dimetilamino-propil)-etil-amino]-metileno}-6, 17-dihidroxi- 1-metoximetil-10,13-dimetil-3,7-dioxo-1 , 3,4,7,10,11 ,12, 13,14,15, 16,17- dodecahidro-2-oxa-ciclopenta[a]fenantren-11-ilo de ácido acético Acetato de (1 E, 4S, 4aR, 5R, 6aS, 7S, 9aR)-1-({4-[2-(2,5-dioxo-2,5- dihidro-1 H-pirrol-1 -il)etil]piperazin-1 -il}metileno)-7, 11 -dihidroxi-4- (metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10- dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo; y sales, solvatos e hidratos de estos.

11. El compuesto de la reivindicación 10 en donde el compuesto es acetato de (1E,4S,4aR,5R,6aS,7S)-1-{[[3- (dimetilamino)propil](metil)amino]metileno}-7, 11 -dihidroxi-4- (metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a, 5,6,6a,7, 8,9, 9a, 10- dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo.

12. El compuesto de la reivindicación 1 en donde el compuesto es Pegilado.

13. El compuesto de la reivindicación 12 en donde el compuesto es Pegilado en R1.

14. El compuesto de la reivindicación 12 en donde el compuesto es Pegilado en R2.

15. El compuesto de la reivindicación 12 en donde el compuesto es Pegilado en R3.

16. Un método para inhibir la actividad PI3K en una célula que comprende poner en contacto una célula con un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 por lo cual dicho compuesto inhibe PI3K.

17. Un método para inhibir la actividad TOR en una célula que comprende poner en contacto una célula con un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 por lo cual dicho compuesto inhibe TOR.

18. Un método para inhibir la actividad PI3K en un mamífero que comprende administrar a un mamífero una cantidad inhibidora PI3K de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1.

19. El método de la reivindicación 18 en donde el mamífero es un humano.

20. Un método para inhibir la actividad TOR en un mamífero que comprende administrar a un mamífero una cantidad inhibidora de TOR de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1.

21. Un método para tratar una condición dependiente de PI3K que comprende administrar a un sujeto una cantidad inhibidora PI3K de un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1.

22. El método de la reivindicación 21 en donde la condición dependiente de PI3K se selecciona del grupo que consiste de proliferación celular de tumor, crecimiento celular de tumor, y tumorogénesis.

23. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 y un portador farmacéuticamente aceptable.

24. Un método para tratar proliferación celular de tumor, crecimiento celular de tumor, o tumorogénesis que comprende administrar a un sujeto una composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 23.

25. El método de 19 o 24, que comprende adicionalmente administrar uno o más agentes que modulan señales de factor de crecimiento, respuesta de citoquina, y control de ciclo celular.

26. El método de la reivindicación 25, en donde el agente es interferón- a (Intron-A) o rapamicina pegilada.

27. El método de la reivindicación 25, en donde el agente es citotóxico.

28. El método de la reivindicación 24 en donde R1 es NR4R5.

29. El método de la reivindicación 24 en donde R2 es hidrógeno.

30. El método de la reivindicación 24 en donde R2 es un grupo formilo.

31. El método de la reivindicación 24 en donde R3 es un grupo aciloxi.

32. El método de la reivindicación 31 en donde R3 es un grupo acetoxi.

33. El método de la reivindicación 24 en donde R8 es un grupo hidroxi.

34. Un método para tratar proliferación celular de tumor, crecimiento celular de tumor, o tumorogénesis que comprende administrar a un sujeto una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con la reivindicación 9 y un portador farmacéuticamente aceptable.

35. Un método para tratar proliferación celular de tumor, crecimiento celular de tumor, o tumorogénesis que comprende administrar a un sujeto una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con la reivindicación 8 y un portador farmacéuticamente aceptable.

36. Un método para tratar una condición dependiente de PI3K al administrar a un sujeto una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 , reivindicación 8, o reivindicación 9 y un portador farmacéuticamente aceptable, en donde la condición dependiente de PI3K se selecciona del grupo que consiste de dolor, diabetes, inflamación, aglutinación de las plaquetas, enfermedad cardiaca isquémica, esclerosis, reestenosis, trastornos respiratorios, VIH, reabsorción ósea, cáncer, cáncer de pulmón de célula no pequeña, y cáncer de cerebro.

37. El compuesto acetato de di-(1E,4S,4aR,5R,6aSJS)-1-{[[3- (dimetilamino)propil](metil)amino]metíleno}-7,11-dihidroxi-4- (metoximetil)-4a,6a-dimetil-2,10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10- dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo 17-Pegilado.

38. El método de la reivindicación 34, en donde el compuesto está de acuerdo con la reivindicación 11 o reivindicación 37.

39. El método de la reivindicación 35, en donde el compuesto está de acuerdo con la reivindicación 11 o reivindicación 37.

40. El método de 19 o 24, comprende adicionalmente administrar taxol.

41. El método de la reivindicación 40 que administra adicionalmente uno o más agentes que modulan la señalización de factor de crecimiento, respuesta de citoquina, y control de ciclo celular.

42. El método de la reivindicación 41 , en donde el agente se selecciona del grupo que consiste de citoquinas, interferón, rapamicina, rapamicina pegilada, inhibidores de HER2/EGFR, inhibidores de MEK, interferón- a (Intron-A), y inhibidores de quinasa Src.

43. Un proceso para elaborar un compuesto de la reivindicación 1 por el método descrito en la Figura 2.

44. Un proceso para hacer un compuesto de la reivindicación 1 por el método descrito en la Figura 3.

45. El método de la reivindicación 25 en donde el agente es un inhibidor MEK.

46. El método de la reivindicación 45 en donde el inhibidor MEK es 2-(2- cloro-4-yodoanilino)-N-(ciclopropilmetoxi-3,4-difluobenzamida).

47. El método de la reivindicación 46 en donde la composición comprende el compuesto acetato de (1 E,4S,4aR,5R,6aS,7S)-1-{[íerc-butil(2- hidroxietil)amino]metileno}-7, 11 -dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil- 2, 10-dioxo-1 , 2,4,4a, 5,6,6a,7, 8,9, 9a,10-dodecahidroindeno[4,5- h]isocromen-5-ilo.

48. El método de la reivindicación 25 en donde el agente es un inhibidor Her2/neu.

49. El método de la reivindicación 48 en donde el inhibidor Her2/neu es (E)-N-{4-[3-cloro-4-(2-piridinil metoxi) anilino]-3-ciano-7-etoxi-6- quinolinil}-4-(dimetilamino)-2-butenamida.

50. El método de la reivindicación 48 en donde la composición comprende el compuesto acetato de (1E,4S,4aR,5R,6aS,7S)-1-{[íerc-butil(2- hidroxietil)amino]metileno}-7, 11 -dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetíl- 2,10-dioxo-1 ,2,4,4a,5,6,6a,7,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5- h]isocromen-5-ilo

51. El método de la reivindicación 25 en donde el agente es un inhibidor mTor.

52. El método de la reivindicación 51 en donde la composición comprende el compuesto (1 E,4S,4aR,5R,6aS,7S)-1-{[íerc-butil(2-hidroxietil)amino] metileno}- 7,11 -dihidroxi-4-(metoximetil)-4a,6a-dimetil-2, 10-dioxo- 1 ,2,4,4a,5,6,6aJ,8,9,9a,10-dodecahidroindeno[4,5-h]isocromen-5-ilo.