CN103508920B - 一种苯丙氨醇化合物的光学异构体的制备方法及其用途 - Google Patents
一种苯丙氨醇化合物的光学异构体的制备方法及其用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103508920B CN103508920B CN201210206143.9A CN201210206143A CN103508920B CN 103508920 B CN103508920 B CN 103508920B CN 201210206143 A CN201210206143 A CN 201210206143A CN 103508920 B CN103508920 B CN 103508920B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- phenylalaninol
- benzoyl
- tyrosyl
- dimethylaminoethyl
- reaction
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 title claims abstract description 38
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 31
- -1 phenylalaninol compound Chemical class 0.000 title description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 78
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 16
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 11
- OUYCCCASQSFEME-MRVPVSSYSA-N D-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-MRVPVSSYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 229930195709 D-tyrosine Natural products 0.000 claims abstract description 10
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims abstract description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 7
- 238000009833 condensation Methods 0.000 claims abstract description 6
- 230000005494 condensation Effects 0.000 claims abstract description 6
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 claims abstract description 3
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 claims abstract description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 87
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 48
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 42
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 39
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 34
- SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N N-Methylmorpholine Chemical compound CN1CCOCC1 SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 33
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- 239000010410 layer Substances 0.000 claims description 30
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 29
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 26
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 24
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 20
- XWEMGJQQCSSGPN-BDYUSTAISA-N n-[(2s)-3-[4-[2-(dimethylamino)ethoxy]phenyl]-1-[[(2s)-1-hydroxy-3-phenylpropan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]benzamide Chemical compound C1=CC(OCCN(C)C)=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@H](CO)CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)C1=CC=CC=C1 XWEMGJQQCSSGPN-BDYUSTAISA-N 0.000 claims description 20
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 18
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 17
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 17
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 16
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Substances [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 16
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 claims description 14
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 14
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 claims description 14
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 13
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 12
- STVVMTBJNDTZBF-SECBINFHSA-N (2r)-2-amino-3-phenylpropan-1-ol Chemical compound OC[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 STVVMTBJNDTZBF-SECBINFHSA-N 0.000 claims description 11
- NTHKNMPHBNQTJM-UHFFFAOYSA-N 1-chloro-n,n-dimethylethanamine;hydrochloride Chemical compound Cl.CC(Cl)N(C)C NTHKNMPHBNQTJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 10
- 235000015320 potassium carbonate Nutrition 0.000 claims description 10
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 238000013019 agitation Methods 0.000 claims description 9
- 239000013078 crystal Substances 0.000 claims description 9
- 239000003495 polar organic solvent Substances 0.000 claims description 9
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 9
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 9
- STVVMTBJNDTZBF-VIFPVBQESA-N L-phenylalaninol Chemical compound OC[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 STVVMTBJNDTZBF-VIFPVBQESA-N 0.000 claims description 8
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 8
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 claims description 8
- YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 2-methylpropyl carbonochloridate Chemical compound CC(C)COC(Cl)=O YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 7
- 239000002585 base Substances 0.000 claims description 7
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 claims description 7
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 7
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 7
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 6
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 6
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 claims description 6
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical group C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 239000007810 chemical reaction solvent Substances 0.000 claims description 5
- 229960001701 chloroform Drugs 0.000 claims description 5
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 5
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000003637 basic solution Substances 0.000 claims description 4
- PASDCCFISLVPSO-UHFFFAOYSA-N benzoyl chloride Chemical group ClC(=O)C1=CC=CC=C1 PASDCCFISLVPSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000007789 gas Substances 0.000 claims description 4
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 claims description 3
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 claims description 3
- SWXVUIWOUIDPGS-UHFFFAOYSA-N diacetone alcohol Natural products CC(=O)CC(C)(C)O SWXVUIWOUIDPGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000011261 inert gas Substances 0.000 claims description 3
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims description 3
- GMKZBFFLCONHDE-UHFFFAOYSA-N (4-nitrophenyl) benzoate Chemical compound C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1OC(=O)C1=CC=CC=C1 GMKZBFFLCONHDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical compound [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 claims description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 claims description 2
- GJQBHOAJJGIPRH-UHFFFAOYSA-N benzoyl cyanide Chemical compound N#CC(=O)C1=CC=CC=C1 GJQBHOAJJGIPRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 claims description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N nitrogen Substances N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 claims description 2
- 239000001117 sulphuric acid Substances 0.000 claims description 2
- 235000011149 sulphuric acid Nutrition 0.000 claims description 2
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 9
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 abstract description 9
- 238000011160 research Methods 0.000 abstract description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 3
- 238000005457 optimization Methods 0.000 abstract description 3
- 230000000452 restraining effect Effects 0.000 abstract description 3
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical group CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 12
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 11
- 239000000047 product Substances 0.000 description 11
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 8
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 7
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 125000006367 bivalent amino carbonyl group Chemical group [H]N([*:1])C([*:2])=O 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 4
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 4
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- JHUUPUMBZGWODW-UHFFFAOYSA-N 3,6-dihydro-1,2-dioxine Chemical compound C1OOCC=C1 JHUUPUMBZGWODW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 244000144992 flock Species 0.000 description 3
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 3
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000011181 potassium carbonates Nutrition 0.000 description 3
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 239000007771 core particle Substances 0.000 description 2
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 2
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 2
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 2
- 238000010898 silica gel chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 108091036055 CccDNA Proteins 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 206010023126 Jaundice Diseases 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 241000701076 Macacine alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000010165 autogamy Effects 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000007902 hard capsule Substances 0.000 description 1
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000000967 suction filtration Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开了<i>N</i>-[<i>N</i>-苯甲酰基-<i>O</i>-(2-二甲氨基乙基)-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇的光学异构体的制备方法及其用途，以L-酪氨酸或D-酪氨酸为起始原料，经过酰化、缩合、水解和烷基化反应得到产物。与现有技术相比，本发明采用优化的合成路线和反应条件，所用反应原料和试剂价廉、易得，整个合成反应的条件比较温和，可控性强，操作简单；与专利2006102010164相比，本发明合成的产物收率由10%提高到30%，产物纯度由92%提高至99%；该合成工艺的重复性好，有利于进行工业化大生产。另外，生物活性研究表明：本发明制得的其中两个光学异构体对HBV？DNA有明显的抑制作用，可将其用于制备抗HBV感染的药物。
Description
技术领域
本发明涉及一种苯丙氨醇化合物的光学异构体的制备方法及其用途，尤其是N-[N-苯甲酰基-O-(2-二甲氨基乙基)-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇的光学异构体的制备方法及其用途，属于药物化学技术领域。
背景技术
N-[N-苯甲酰基-O-(2-二甲氨基乙基)-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇是一种苯丙氨酸二肽类的抗乙型肝炎病毒（HepatitisBVirus，HBV）药物，研究表明该化合物具有较强抗HBV作用，能抑制HBVDNA和cccDNA，还具有保肝、降酶退黄作用。该化合物的研究现在已经进入一类新药的临床前研究阶段。该化合物分子中含有两个手性碳原子，有两对共4个光学异构体。由于化合物的立体构型与其生物活性密切相关，一般不同的立体构型可使其生物活性的强度有所差异，或一个光学异构体有生物活性，而其他异构体则无此种生物活性，甚至一个是激动剂，而另一个是其拮抗剂。因此对N-[N-苯甲酰基-O-(2-二甲氨基乙基)-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇其它3个光学异构体的合成和抗HBV活性研究具有重要的意义。
发明内容
本发明的目的在于：提供N-[N-苯甲酰基-O-(2-二甲氨基乙基)-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇的光学异构体的制备方法及其用途。本发明采用优化的合成路线，整个合成反应的条件比较温和，可控性强，操作简单，产物收率和纯度高，其工艺重复性好，有利于工业化大生产；且活性研究表明其中两个光学异构体对HBV具有抑制作用，可将其用于制备抗HBV感染的药物。
本发明的技术方案：N-[N-苯甲酰基-O-(2-二甲氨基乙基)-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇的光学异构体的制备方法为：以L-酪氨酸或D-酪氨酸为起始原料，经过酰化、缩合、水解和烷基化反应得到产物4，即N-[N-苯甲酰基-O-(2-二甲氨基乙基)-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇的三个光学异构体，其反应路线如下：
；其中，中间体1的绝对构型为2R或2S；中间体2、中间体3、产物4的绝对构型均为(2R，2′S)、(2R，2′R)或(2S，2′R)。
具体地说，前述制备方法可分为两种：一种是以L-酪氨酸为起始原料，在碱性条件下发生酰化反应生成绝对构型为S的中间体1，中间体1与D-苯丙氨醇缩合得到绝对构型为(2S，2′R)的中间体2，中间体2在碱性条件下水解得到绝对构型为(2S，2′R)的中间体3，中间体3再与二甲氨基氯乙烷盐酸盐在碱性条件下进行烷基化反应得到绝对构型为(2S，2′R)的产物4。该方法的具体步骤如下：
（1）将L-酪氨酸、碱性试剂加入反应溶剂中，冷却至0～5℃，搅拌条件下加入酰化剂，反应5h，用浓酸调pH值为1～2，室温放置8h，过滤，得到的固体用蒸馏水洗至pH值为5～6，干燥、粉碎得绝对构型为S的中间体1；
（2）将中间体1和D-苯丙氨醇真空干燥后，在惰性气体保护下加入反应瓶中，并加入有机溶剂和缚酸剂，反应液冷却至-5～-10℃，搅拌滴入缩合剂，滴加完毕后，反应液自然升至室温，并于室温下反应8-12h，反应完毕后，过滤，得到的固体经烘干、粉碎得绝对构型为(2S，2′R)的中间体2；
（3）将中间体2溶于极性有机溶剂中，室温加入碱催化剂溶液，反应5～7h，加入浓酸调节pH值为1～2，加入有机溶剂萃取，有机层分别用碱性水溶液、氯化钠水溶液洗涤，放置5～8h，过滤，得到的固体经烘干得绝对构型为(2S，2′R)的中间体3；
（4）将中间体3与二甲氨基氯乙烷盐酸盐置于反应器中，加入极性有机溶剂，然后缓慢加入碱性催化剂，加热回流反应2～5h，TLC检测反应进程，反应完毕后，反应液冷却至40～60℃，加入有机溶剂萃取，有机层用酸碱法分离纯化，减压回收部分溶剂，析出白色晶体，静置5h后过滤，得到的晶体经干燥得绝对构型为(2S，2′R)的产物4。
另一种是以D-酪氨酸为起始原料，在碱性条件下发生酰化反应生成绝对构型为R的中间体1，中间体1与L-苯丙氨醇或D-苯丙氨醇缩合得到绝对构型为(2R，2′S)或(2R，2′R)的中间体2，中间体2在碱性条件下水解得到绝对构型为(2R，2′S)或(2R，2′R)的中间体3，中间体3再与二甲氨基氯乙烷盐酸盐在碱性条件下进行烷基化反应得到绝对构型为(2R，2′S)或(2R，2′R)的产物4。该方法的具体步骤如下：
（1）将D-酪氨酸、碱性试剂加入反应溶剂中，冷却至0～5℃，搅拌条件下加入酰化剂，反应5h，用浓酸调pH值为1～2，室温放置8h，过滤，得到的固体用蒸馏水洗至pH值为5～6，干燥、粉碎得绝对构型为R的中间体1；
（2）将中间体1与L-苯丙氨醇或D-苯丙氨醇真空干燥后，在惰性气体保护下加入反应瓶中，并加入有机溶剂和缚酸剂，反应液冷却至-5～-10℃，搅拌滴入缩合剂，滴加完毕后，反应液自然升至室温，并于室温下反应8-12h，反应完毕后，过滤，得到的固体经烘干、粉碎得绝对构型为(2R，2′S)或(2R，2′R)的中间体2；
（3）将中间体2溶于极性有机溶剂中，室温加入碱催化剂溶液，反应5～7h，加入浓酸调节pH值为1～2，加入有机溶剂萃取，有机层分别用碱性水溶液、氯化钠水溶液洗涤，放置5～8h，过滤，得到的固体经烘干得绝对构型为(2R，2′S)或(2R，2′R)的中间体3；
（4）将中间体3与二甲氨基氯乙烷盐酸盐置于反应器中，加入极性有机溶剂，然后缓慢加入碱性催化剂，加热回流反应2～5h，TLC检测反应进程，反应完毕后，反应液冷却至40～60℃，加入有机溶剂萃取，有机层用酸碱法分离纯化，减压回收部分溶剂，析出白色晶体，静置5h后过滤，得到的晶体经干燥得绝对构型为(2R，2′S)或(2R，2′R)的产物4。
前述步骤（1）中：L-酪氨酸/D-酪氨酸与碱性试剂、酰化剂的摩尔比为1:3～4:2～2.5；所述碱性试剂为氢氧化钾、氢氧化钠、碳酸钠、碳酸钾、N-甲基吗啉或三乙胺；所述酰化剂为苯甲酰氯、苯甲酰腈或苯甲酸对硝基苯酯；所述浓酸为浓盐酸或浓硫酸；所述反应溶剂为蒸馏水和/或甲醇和/或乙醇。
前述步骤（2）中：中间体1与L-苯丙氨醇/D-苯丙氨醇、缚酸剂、缩合剂的摩尔比为1:1.0～1.5:1.0～2.5:1.0～1.5；所述缚酸剂为三乙胺和/或N-甲基吗啉（NMM）；所述缩合剂为N，N’二环己基碳二亚胺（DCC）、氯甲酸异丁酯（IBCF）或1-羟基苯并三唑(HOBt)；所述惰性气体为氮气或氩气；所述有机溶剂为N,N-二甲基甲酰胺（DMF）和/或四氢呋喃（THF）和/或二甲基亚砜（DMSO）和/或1,4-二氧六环和/或二氯甲烷和/或三氯甲烷，该有机溶剂优选经过无水处理。
前述步骤（3）中：中间体2与碱催化剂的摩尔比为1:2.5～5；所述碱催化剂为氢氧化钾、氢氧化钠、碳酸钠或碳酸钾；所述极性有机溶剂为N,N-二甲基甲酰胺（DMF）和/或四氢呋喃（THF）和/或二甲基亚砜（DMSO）和/或1,4-二氧六环和/或吡啶和/或丙酮和/或甲醇和/或乙醇和/或乙腈；所述浓酸为浓盐酸或浓硫酸；萃取时所用有机溶剂为三氯甲烷、二氯甲烷或乙酸乙酯；所述碱性水溶液为碳酸氢钠、碳酸氢钾、碳酸钾或碳酸钠水溶液。
前述步骤（4）中：中间体3与二甲氨基氯乙烷盐酸盐、碱性催化剂的摩尔比为1:1～2:2～9；所述碱性催化剂为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钾、碳酸钠、N-甲基吗啉或三乙胺；所述极性有机溶剂为N,N-二甲基甲酰胺（DMF）和/或四氢呋喃（THF）和/或二甲基亚砜（DMSO）和/或1，4-二氧六环和/或吡啶和/或丙酮和/或甲醇和/或乙醇和/或乙腈；萃取时所用有机溶剂为三氯甲烷、二氯甲烷或乙酸乙酯；所述酸碱法分离纯化的具体步骤为：有机层加入0.1～1.0mol/L酸溶液，分去有机层，酸水层中加入1.0～4.0mol/L碱性溶液，析出固体，再加入有机溶剂萃取；酸碱法分离纯化时所用酸溶液为盐酸、冰醋酸或硫酸溶液，碱性溶液为碳酸钾、氢氧化钾或氢氧化钠溶液。
以上所述方法制得的绝对构型为(2S，2′R)或(2R，2′R)的N-[N-苯甲酰基-O-(2-二甲氨基乙基)-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇异构体可用于制备抗乙肝病毒感染的药物。
本发明所述中间体1-3和产物4的结构均经过旋光、1H-NMR、13C-NMR、MS、IR及高分辨质谱确证。
本发明对N-[N-苯甲酰基-O-(2-二甲氨基乙基)-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇（简写为Y101）及其光学异构体（简写为Y101-2、Y101-3、Y101-4）的理化常数及手性分离条件进行了研究，理化常数结果如表1所示。
表1Y101及其三个光学异构体的理化常数
| 化合物 | 绝对构型 | 熔点（℃） | (CH3OH) |
| Y101 | (2S，2′S) | 178.2～179.7 | -62.47 |
| Y101-2 | (2S，2′R) | 171.2～172.2 | +15.43 |
| Y101-3 | (2R，2′S) | 168.7～170.2 | -20.95 |
| Y101-4 | (2R，2′R) | 176.7～177.2 | +64.18 |
手性分离条件为：HP1100高效液相色谱仪，自动进样，VWD检测器；
分析柱：DAICELCHIRALCELOD-H4.6×250mm，5μm手性柱；
流动相：Hexane-[0.2%TEA]-Ethanol（90:10）两相混合成一相；
流速：0.8mL/min；
检测波长：226nm；
检测温度：30℃；
进样体积：10μL；
供试液的制备：约0.2mg样品用约1mL溶剂（正己烷:乙醇=1:1）溶解，即得。
本发明还对N-[N-苯甲酰基-O-(2-二甲氨基乙基)-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇（Y101）的三个光学异构体（Y101-2、Y101-3、Y101-4）的生物活性进行了测试：
实验材料：
2.2.15细胞：HBVDNA克隆转染人肝癌细胞（HepG2）2.2.15细胞系(美国MountSinai医学中心构建，解放军302医院传染病研究所病毒室引进并自行传代培养)。
试剂：DMEM培养液、胎牛血清、G418，均为Gibco公司产品；胰蛋白酶，TopBio公司（批号：9002-07-7）；二甲基亚砜（DMSO），美国Sigma公司（批号：10040214）。
实时荧光定量PCR试剂盒：核心颗粒提取试剂（自配）；HBVDNATaqMan荧光定量检测试剂盒：上海克生高技术有限公司（批号：1596795023）。
主要仪器：二氧化碳培养箱（美国Thermo公司）；细胞培养瓶（美国Coring公司）；24孔细胞培养板（美国Coring公司）；倒置显微镜（日本Olympus公司）；低温高速离心机（美国Thermo公司）；电子分析天平（上海天平仪器厂）；生物安全柜（美国Thermo公司）；超低温冰箱（海尔集团）；核酸蛋白测定仪（美国Bio-RAD公司）；普通PCR测定仪（美国ABIsystem2720）；实时荧光定量PCR仪（美国ABIsystem7300）；凝胶成像系统（美国AlphaInnotechCorporation）。
实验方法：
2.2.15细胞培养：在长满2.2.15细胞的培养瓶内加0.02%EDTA清洗细胞两遍，再加入0.25%胰蛋白酶1mL，消化5～10min，加培养液吹打，按1:1传代后加500μg/mLG418筛选，传代3～4次后可作实验用。选用对数生长期的2.2.15细胞，0.25%胰蛋白酶消化后分散成单个细胞悬液，计数板计数到3×105个/mL，接种到24孔板中，每孔0.5mL，于5%CO2、37℃培养箱培养48小时，细胞长成单层后进行实验。
Y101光学异构体对2.2.15细胞内HBVDNA抑制实验及计算：Y101异构体用1%DMSO的培养液配制成50、25、12.5μg/mL的药液，另设LAM(50μg/mL)和正常对照组，分别加入24孔培养板中，每孔0.5mL，每浓度2孔。加药后第4天，收集细胞，用提取病毒核心颗粒的方法提取细胞内HBVDNA，用TaqMan探针荧光定量试剂盒定量，按下列公式计算抑制百分率。
实验结果：
根据三个Y101异构体对2.2.15细胞内HBVDNA含量的测定，可以初步看出，在给药维持四天的时候，Y101-2和Y101-4对HBVDNA有一定的抑制作用，而Y101-3并没有作用，结果见表2。
表2Y101光学异构体对2.2.15细胞内HBVDNA表达量的影响（）
与现有技术相比较，本发明采用优化的合成路线和反应条件，所用反应原料和试剂价廉、易得，整个合成反应的条件比较温和，反应可控性强，操作简单；与专利2006102010164相比，本发明合成的产物收率由10%提高到30%，产物纯度由92%提高至99%；且该合成工艺经中试条件验证其重复性好，有利于进行工业化大生产。另外，生物活性研究表明：本发明制得的三个光学异构体中的两个对HBVDNA有明显的抑制作用，可将其用于制备抗HBV感染的药物。
具体实施方式
本发明的实施例1：绝对构型为(2S，2′R)的N-[N-苯甲酰基-O-(2-二甲氨基乙基)-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇（即Y101-2）的合成：
将L-酪氨酸(27.2g，0.15mol)置于2000mL三口圆底烧瓶中，加入1mol/L氢氧化钠水溶液450mL，反应液冷却至0℃，搅拌下缓慢滴加苯甲酰氯35mL(0.3mol)，滴加完毕，反应液析出固体，加入浓盐酸调pH值为1～2，室温放置8h，过滤，得到的固体用蒸馏水洗至pH值为5～6，干燥、粉碎得中间体1(54.3g，93%)，其绝对构型为S。
将中间体1(38.9g，0.1mol，S)、D-苯丙氨醇15.1g(0.1mol)分别置于1000ml、500ml圆底烧瓶中，在75℃条件下真空干燥1h，在氩气保护下，放置有中间体1的反应瓶中加入DMF(200mL)、CH2Cl2(200mL)，放置有D-苯丙氨醇的反应瓶中加入CH2Cl2(150mL)、DMF(50mL)，样品溶解完全之后将两反应瓶溶液混合，然后加入N-甲基吗啉(NMM)(16mL，0.144mol），冰盐浴冷却至-5℃，搅拌下缓慢滴加氯甲酸异丁酯(IBCF)13.2mL(0.1mol)，待滴加完毕，室温搅拌反应8～9h。反应完毕，减压回收二氯甲烷，反应液加入水1.5L、乙酸乙酯1.5L萃取，乙酸乙酯层分别用0.1mol/L盐酸水溶液、饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，有机层有固体析出，过滤，得到的固体经烘干得中间体2(30.8g，59%)，其绝对构型为(2S，2′R)。
中间体2[26.1g，0.05mol，(2S，2′R)]与250mLN,N-二甲基甲酰胺(DMF)混合于500mL的圆底烧瓶中，磁力搅拌下，缓慢滴加氢氧化钠溶液(80mL，0.2mol)。滴加完毕后，室温搅拌5h，加入浓盐酸调pH值为1～2，加入乙酸乙酯1L、水1L萃取，乙酸乙酯层用饱和碳酸氢钠水溶液、氯化钠水溶液洗涤，弃去水层，乙酸乙酯层有大量的白色固体析出，室温放置5～8h，过滤、硅胶柱层析纯化、干燥得中间体3(13g，62%)，其绝对构型为(2S，2′R)。
取中间体3[10g，0.024mol，(2S，2′R)]与二甲氨基氯乙烷盐酸盐3.45g(0.024mol)置于500mL的圆底烧瓶中，磁力搅拌下加入1,4-二氧六环0.15L，反应液温度升至45～50℃，缓慢加入无水碳酸钾(16.6g，0.12mol)，控制反应温度为84～90℃，反应2.0～5.0h，TLC检测反应进程至中间体3反应完毕后，反应液冷却至40～60℃，之后加入乙酸乙酯0.5L、水0.3L萃取，乙酸乙酯层用蒸馏水洗至pH值为8～9，再加入0.3L(0.1mol/L)盐酸水溶液反萃取，100mL蒸馏水洗涤有机层，合并酸水层及水层；酸水层加入0.5L乙酸乙酯，搅拌下加入50mL(1.0mol/L)氢氧化钠溶液调pH值为7～8，析出固体，加热溶解，萃取，乙酸乙酯层再用蒸馏水洗至pH为7～8，析出白色絮状晶体，静置5h后过滤、烘干得化合物Y101-2(8.18g，70%)，其绝对构型为(2S，2′R)。
Y101-2理化常数及波谱数据：mp171.2～172.2℃；=+15.4(C=1.04,CH3OH)；MS(ESI)m/z489.5；IR:3420,3297,2855,1660,1635,1556,1538,1512,1383,1240,1181,1028,789,701,561；1H-NMR(DMSO-d 6,400MHz)：8.38(1H,d,J=8.8Hz,NHCO),8.05(1H,d,J=8.8Hz,NHCO),7.78(2H,d,J=8.0Hz,H-3′′,7′′),7.50(1H,t,H-5′′),7.45(2H,t,H-4′′,6′′),7.25-7.17(5H,m,H-5′,9′),7.15(2H,d,J=4.8Hz,H-5,9),6.78(2H,d,J=8.4Hz,H-6,8),4.89(1H,t,OH),4.62-4.56(1H,m,H-2),3.95[2H,t,ArOCH 2CH2N(CH3)2],3.46-3.41(1H,m,H-2′),3.34-3.21(2H,m,H-1′),2.91-2.61(4H,m,H-3,3′),2.55[2H,t,ArOCH2CH2N(CH3)2],2.17[6H,s,N(CH3)2]；13C-NMR(DMSO-d 6,100MHz):171.14(C-1),166.02(C-1′′),156.96(C-7),139.19(C-4′),134.13(C-2′′),131.28(C-5′′),130.37(C-4),130.20(C-5,9),129.30(C-5′,9′),128.22(C-4′′,6′′),128.05(C-6′,8′),127.40(C-3′′,7′′),125.98(C-7′),113.94(C-6,8),65.57(ArOCH2CH2N),62.97(C-1′),57.78(ArOCH2 CH2N),55.23(C-2),52.51(C-2′),45.59[N(CH3)2],36.76(C-3′,3)。
所得化合物Y101-2在下述HPLC色谱条件下测定纯度，HPLC手性柱检测的结果显示：ee%>99%，保留时间为19.0min。
色谱条件：HP1100高效液相色谱仪，自动进样，VWD检测器；
分析柱：DAICELCHIRALCELOD-H4.6×250mm，5μm手性柱；
流动相：Hexane-[0.2%TEA]-Ethanol（90:10）两相混合成一相；
流速：0.8mL/min；
检测波长：226nm；
检测温度：30℃；
进样体积：10μL；
供试液的制备：约0.2mg样品用约1mL溶剂（正己烷:乙醇=1:1）溶解，即得。
实施例2：绝对构型为(2R，2′S)的N-[N-苯甲酰基-O-(2-二甲氨基乙基)-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇（即Y101-3）的合成：
将D-酪氨酸(54.4g，0.3mol)置于2000mL三口圆底烧瓶中，加入1mol/L氢氧化钠水溶液900mL，冰盐浴冷却，反应液冷却至0℃，搅拌下缓慢滴加苯甲酰氯70mL(0.6mol)，滴加完毕，反应液析出固体，加入浓盐酸调pH值为1～2，室温放置8h，过滤，得到的固体用蒸馏水洗至pH值为5～6，干燥、粉碎得中间体1(99.2g，85%)，其绝对构型为R。
将绝对构型为R的中间体1(54.5g，0.14mol)与L-苯丙氨醇21.2g(0.14mol)分别置于1000mL、500mL圆底烧瓶中，在75℃条件下真空干燥1h，在氩气保护下，放置有中间体1的反应瓶中加入DMF300mL、CH2Cl2200mL，放置有L-苯丙氨醇的反应瓶中加入CH2Cl2(150mL)、DMF(50mL)，样品溶解完全之后将两反应瓶溶液混合，然后加入NMM(22mL，0.20mol)，冰盐浴冷却至反应液的温度为-5℃，搅拌下缓慢滴加IBCF(18.2mL，0.14mol)，待滴加完毕，室温搅拌反应8～9h。反应完毕，减压回收二氯甲烷，反应液加入水1.5L、乙酸乙酯1.5L萃取，乙酸乙酯层分别用0.1mol/L盐酸水溶液、饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，乙酸乙酯层有固体析出，过滤，得到的固体经烘干得中间体2(42g，57%)，其绝对构型为(2R，2′S)。
中间体2[42g，0.08mol，(2R，2′S)]与350mLDMF混合于500mL的圆底烧瓶中，磁力搅拌下，缓慢滴加氢氧化钠溶液80mL(0.32mol)。滴加完毕后，室温搅拌5h，加入浓盐酸调pH值为1～2，加入乙酸乙酯1.5L、水1.2L萃取，乙酸乙酯层用饱和碳酸氢钠水溶液、氯化钠水溶液洗涤，弃去水层，乙酸乙酯层有大量的白色固体析出，室温放置5～8h，过滤、硅胶柱层析纯化、干燥得中间体3(18g，54%)，其绝对构型为(2R，2′S)。
取中间体3[10g，0.024mol，(2R，2′S)]与二甲氨基氯乙烷盐酸盐(3.45g，0.024mol)置于500mL的圆底烧瓶中，磁力搅拌下加入1，4-二氧六环0.15L，反应液温度升至45～50℃，缓慢加入无水碳酸钾(18.2g，0.13mol)，控制反应温度为84～90℃，反应2.0～5.0h，TLC检测反应进程至中间体3反应完毕后，冷却反应液至40～60℃，之后加入乙酸乙酯0.5L、水0.3L萃取，乙酸乙酯层用蒸馏水洗至pH为8～9，再加入0.3L(0.1mol/L)盐酸水溶液反萃取，200mL蒸馏水洗涤有机层，合并酸水层及水层；酸水层加入0.5L乙酸乙酯，搅拌下加入50mL(1.0mol/L)氢氧化钠溶液调pH值为7～8，析出固体，加热溶解，萃取，乙酸乙酯层再用蒸馏水洗至pH值为7～8，析出白色絮状晶体，静置5h后过滤、烘干得化合物Y101-3(8.4g，72%)，其绝对构型为(2R，2′S)。
Y101-3理化常数及波谱数据：mp168.7～170.2℃；=-20.95(C=0.89,CH3OH)；MS(ESI)m/z489.5；IR:3423,3297,2825,2777,1659,1635,1556,1538,1513,1383,1240,1181,1028,789,701,561；1H-NMR(DMSO-d 6,400MHz)：8.38(1H,d,J=8.4Hz,NHCO),8.04(1H,d,J=8.8Hz,NHCO),7.78(2H,d,J=7.2Hz,H-3′′,7′′),7.49(1H,t,H-5′′),7.43(2H,t,H-4′′,6′′),7.23-7.20(5H,m,H-5′-9′),7.15(2H,d,J=8.4Hz,H-5,9),6.78(2H,d,J=8.8Hz,H-6,8),4.88(1H,t,OH),4.59-4.58(1H,m,H-2),3.95[2H,t,ArOCH 2CH2N(CH3)2],3.44-3.42(1H,m,H-2′),3.36-3.32(2H,m,H-1′),2.91-2.61(4H,m,H-3,3′),2.55[2H,t,ArOCH2CH 2N(CH3)2],2.17[6H,s,N(CH3)2]；13C-NMR(DMSO-d 6,100MHz):171.14(C-1),166.01(C-1′′),156.95(C-7),139.19(C-4′),134.13(C-2′′),131.27(C-5′′),130.36(C-4),130.20(C-5,9),129.29(C-5′,9′),128.21(C-4′′,6′′),128.05(C-6′,8′),127.39(C-3′′,7′′),125.96(C-7′),113.94(C-6,8),65.57(ArOCH2CH2N),62.96(C-1′),57.77(ArOCH2CH2N),55.22(C-2),52.50(C-2′),45.58[N(CH3)2],36.67(C-3′,3)。
所得化合物Y101-3在下述HPLC色谱条件下测定纯度，HPLC手性柱检测的结果显示：ee%>99%，保留时间为13.7min。
色谱条件：HP1100高效液相色谱仪，自动进样，VWD检测器；
分析柱：DAICELCHIRALCELOD-H4.6×250mm，5μm手性柱；
流动相：Hexane-[0.2%TEA]-Ethanol（90:10）两相混合成一相；
流速：0.8mL/min；
检测波长：226nm；
检测温度：30℃；
进样体积：10μL；
供试液的制备：约0.2mg样品用约1mL溶剂（正己烷:乙醇=1:1）溶解，即得。
实施例3：绝对构型为(2R，2′R)的N-[N-苯甲酰基-O-(2-二甲氨基乙基)-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇（即Y101-4）的合成：
绝对构型为R的中间体1的合成同实施例2。
将中间体1(19.45g，0.05mol，R)和D-苯丙氨醇(7.6g，0.05mol)置于500mL圆底烧瓶中，在75℃条件下真空干燥1h，在氩气保护下，加入CH2Cl2(250mL)、DMF(150mL)、NMM(8mL，0.072mol)，冰盐浴冷却至反应液的温度为-5℃，搅拌下缓慢滴加IBCF(6.6mL，0.05mol)，滴加完毕，室温搅拌反应8～9h。反应完毕，过滤，得到的固体经烘干、粉碎得中间体2(18.5g，71%)，其绝对构型为(2R，2′R)。
中间体2[18g，0.035mol，(2R，2′R)]与200mLDMF混合于500mL的圆底烧瓶中，磁力搅拌下，缓慢滴加氢氧化钠溶液(70mL，0.14mol)。滴加完毕后，室温搅拌5h，加入浓盐酸调pH值为1～2，加入乙酸乙酯0.6L、水0.4L萃取，乙酸乙酯层用饱和碳酸氢钠水溶液、氯化钠水溶液洗涤，弃去水层，乙酸乙酯层有大量的白色固体析出，室温放置5～8h，过滤、干燥得中间体3(10.25g，70%)，其绝对构型为(2R，2′R)。
取中间体3[10g，0.024mol，(2R，2′R)]与二甲氨基氯乙烷盐酸盐(3.44g，0.024mol)置于500mL的圆底烧瓶中，磁力搅拌下加入1,4-二氧六环0.15L，反应液温度升至45～50℃，缓慢加入无水碳酸钾(16.6g，0.12mol)，再加入1.8mL蒸馏水，控制反应温度为84～90℃，反应2.0～5.0h，TLC检测反应进程至中间体3反应完毕后，冷却反应液至40～60℃，之后加入乙酸乙酯0.5L、水0.3L萃取，乙酸乙酯层用蒸馏水洗至pH为8～9，再加入0.3L(0.1mol/L)盐酸水溶液反萃取，200mL蒸馏水洗涤有机层，合并酸水层及水层；酸水层加入0.5L乙酸乙酯，搅拌下加入50mL(1.0mol/L)氢氧化钠溶液调pH值为7～8，析出固体，加热溶解，萃取，乙酸乙酯层再用蒸馏水洗至pH值为7～8，析出白色絮状晶体，静置5h后抽滤、干燥得化合物Y101-4(8.5g，73%)，其绝对构型为(2R，2′R)。
Y101-4理化常数及波谱数据：mp176.7～177.2℃；=+64.18(C=1,CH3OH)；MS(ESI)m/z489.5；IR:3301,2930,2864,2829,1658,1635,1579,1537,1511,1465,1384,1246,1180,1078,1011,922,789,699,562；1H-NMR(DMSO-d 6,400MHz)：8.46(1H,d,J=8.8Hz,NHCO),7.88(1H,d,J=8.4Hz,NHCO),7.87(2H,d,J=7.2Hz,H-3′′,7′′),7.51(1H,t,H-5′′),7.44(2H,t,H-4′′,6′′),7.22-7.09(7H,m,H-5′,9′,H-5,9),6.79(2H,d,J=8.8Hz,H-6,8),4.81(1H,t,OH),4.64-4.58(1H,m,H-2),3.94[2H,t,ArOCH 2CH2N(CH3)2],3.90-3.86(1H,m,H-2′),3.35-3.25(2H,m,H-1′),2.97-2.63(4H,m,H-3,3′),2.55[2H,t,ArOCH2CH2N(CH3)2],2.16[6H,s,N(CH3)2]；13C-NMR(DMSO-d 6,100MHz):171.10(C-1),166.10(C-1′′),156.97(C-7),139.04(C-4′),134.11(C-2′′),131.31(C-5′′),130.28(C-4),130.22(C-5,9),129.24(C-5′,9′),128.22(C-4′′,6′′),128.11(C-6′,8′),127.46(C-3′′,7′′),125.93(C-7′),113.98(C-6,8),65.57(ArOCH2CH2N),62.22(C-1′),57.76(ArOCH2 CH2N),55.12(C-2),52.50(C-2′),45.58[N(CH3)2],36.46(C-3′,3)。
所得化合物Y101-4在下述HPLC色谱条件下测定纯度，HPLC手性柱检测的结果显示：ee%>99%，保留时间为12.2min。
色谱条件：HP1100高效液相色谱仪，自动进样，VWD检测器；
分析柱：DAICELCHIRALCELOD-H4.6×250mm，5μm手性柱；
流动相：Hexane-[0.2%TEA]-Ethanol（90:10）两相混合成一相；
流速：0.8mL/min；
检测波长：226nm；
检测温度：30℃；
进样体积：10μL；
供试液的制备：约0.2mg样品用约1mL溶剂（正己烷:乙醇=1:1）溶解，即得。
实施例4：Y101的光学异构体（Y101-2、Y101-4）的应用：
取实施例1制得的Y101-2100g与淀粉70g和乳糖30g混合，用水润湿混匀后，过筛并干燥，再过筛，加入硬脂酸镁2g，然后压制成片，即得片剂。该制剂口服，可用于抗HBV感染。
取实施例3制得的Y101-4100g与乳糖40g和硬脂酸镁2g混匀，过筛，干燥，将得到的混合物装入硬胶囊中，即得胶囊剂。该制剂口服，可用于预防或治疗HBV感染。
Claims (18)
1.N-[N-苯甲酰基-O-(2-二甲氨基乙基)-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇的光学异构体的制备方法，其特征在于：以L-酪氨酸或D-酪氨酸为起始原料，经过酰化、缩合、水解和烷基化反应得到产物4，即N-[N-苯甲酰基-O-(2-二甲氨基乙基)-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇的光学异构体，其反应路线如下：
其中，中间体1的绝对构型为2R或2S；中间体2、中间体3、产物4的绝对构型均为(2R，2′S)、(2R，2′R)或(2S，2′R)；所述方法即以L-酪氨酸或D-酪氨酸为起始原料，在碱性条件下发生酰化反应生成绝对构型为S或R的中间体1，中间体1与L-苯丙氨醇或D-苯丙氨醇缩合得到绝对构型为(2S，2′R)、(2R，2′S)或(2R，2′R)的中间体2，中间体2在碱性条件下水解得到绝对构型为(2S，2′R)、(2R，2′S)或(2R，2′R)的中间体3，中间体3再与二甲氨基氯乙烷盐酸盐在碱性条件下进行烷基化反应得到绝对构型为(2S，2′R)、(2R，2′S)或(2R，2′R)的产物4；具体步骤如下：
(1)将L-酪氨酸或D-酪氨酸与碱性试剂加入反应溶剂中，冷却至0～5℃，搅拌条件下加入酰化剂，反应5h，用浓酸调pH值为1～2，室温放置8h，过滤，得到的固体用蒸馏水洗至pH值为5～6，干燥、粉碎得绝对构型为S或R的中间体1；
(2)将中间体1和L-苯丙氨醇或D-苯丙氨醇真空干燥后，在惰性气体保护下加入反应瓶中，并加入有机溶剂和缚酸剂，反应液冷却至-5～-10℃，搅拌滴入缩合剂，滴加完毕后，反应液自然升至室温，并于室温下反应8-12h，反应完毕后，过滤，得到的固体经烘干、粉碎得绝对构型为(2S，2′R)、(2R，2′S)或(2R，2′R)的中间体2；
(3)将中间体2溶于极性有机溶剂中，室温加入碱催化剂溶液，反应5～7h，加入浓酸调节pH值为1～2，加入有机溶剂萃取，有机层分别用碱性水溶液、氯化钠水溶液洗涤，放置5～8h，过滤，得到的固体经烘干得绝对构型为(2S，2′R)、(2R，2′S)或(2R，2′R)的中间体3；
(4)将中间体3与二甲氨基氯乙烷盐酸盐置于反应器中，加入极性有机溶剂，然后缓慢加入碱性催化剂，加热回流反应2～5h，TLC检测反应进程，反应完毕后，反应液冷却至40～60℃，加入有机溶剂萃取，有机层用酸碱法分离纯化，减压回收部分溶剂，析出白色晶体，静置5h后过滤，得到的晶体经干燥得绝对构型为(2S，2′R)、(2R，2′S)或(2R，2′R)的产物4；
其中，步骤(1)、(3)所述浓酸为浓盐酸或浓硫酸。
2.根据权利要求1所述N-[N-苯甲酰基-O-(2-二甲氨基乙基)-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇的光学异构体的制备方法，其特征在于：步骤(1)中L-酪氨酸/D-酪氨酸与碱性试剂、酰化剂的摩尔比为1:3～4:2～2.5；步骤(2)中中间体1与L-苯丙氨醇/D-苯丙氨醇、缚酸剂、缩合剂的摩尔比为1:1.0～1.5:1.0～2.5:1.0～1.5；步骤(3)中中间体2与碱催化剂的摩尔比为1:2.5～5；步骤(4)中中间体3与二甲氨基氯乙烷盐酸盐、碱性催化剂的摩尔比为1:1～2:2～9。
3.根据权利要求1所述N-[N-苯甲酰基-O-(2-二甲氨基乙基)-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇的光学异构体的制备方法，其特征在于：步骤(1)所述碱性试剂为氢氧化钾、氢氧化钠、碳酸钠、碳酸钾、N-甲基吗啉或三乙胺。
4.根据权利要求1所述N-[N-苯甲酰基-O-(2-二甲氨基乙基)-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇的光学异构体的制备方法，其特征在于：步骤(1)所述酰化剂为苯甲酰氯、苯甲酰腈或苯甲酸对硝基苯酯。
5.根据权利要求1所述N-[N-苯甲酰基-O-(2-二甲氨基乙基)-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇的光学异构体的制备方法，其特征在于：步骤(1)所述反应溶剂为蒸馏水和/或甲醇和/或乙醇。
6.根据权利要求1所述N-[N-苯甲酰基-O-(2-二甲氨基乙基)-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇的光学异构体的制备方法，其特征在于：步骤(2)所述缚酸剂为三乙胺和/或N-甲基吗啉。
7.根据权利要求1所述N-[N-苯甲酰基-O-(2-二甲氨基乙基)-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇的光学异构体的制备方法，其特征在于：步骤(2)所述缩合剂为N，N’二环己基碳二亚胺、氯甲酸异丁酯或1-羟基苯并三唑。
8.根据权利要求1所述N-[N-苯甲酰基-O-(2-二甲氨基乙基)-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇的光学异构体的制备方法，其特征在于：步骤(2)所述惰性气体为氮气或氩气。
9.根据权利要求1所述N-[N-苯甲酰基-O-(2-二甲氨基乙基)-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇的光学异构体的制备方法，其特征在于：步骤(2)所述有机溶剂为N,N-二甲基甲酰胺和/或四氢呋喃和/或二甲基亚砜和/或1,4-二氧六环和/或二氯甲烷和/或三氯甲烷。
10.根据权利要求9所述N-[N-苯甲酰基-O-(2-二甲氨基乙基)-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇的光学异构体的制备方法，其特征在于：所述有机溶剂经过无水处理。
11.根据权利要求1所述N-[N-苯甲酰基-O-(2-二甲氨基乙基)-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇的光学异构体的制备方法，其特征在于：步骤(3)所述碱催化剂为氢氧化钾、氢氧化钠、碳酸钠或碳酸钾。
12.根据权利要求1所述N-[N-苯甲酰基-O-(2-二甲氨基乙基)-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇的光学异构体的制备方法，其特征在于：步骤(3)、(4)所述极性有机溶剂为N,N-二甲基甲酰胺和/或四氢呋喃和/或二甲基亚砜和/或1,4-二氧六环和/或吡啶和/或丙酮和/或甲醇和/或乙醇和/或乙腈。
13.根据权利要求1所述N-[N-苯甲酰基-O-(2-二甲氨基乙基)-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇的光学异构体的制备方法，其特征在于：步骤(3)、(4)萃取时所用有机溶剂为三氯甲烷、二氯甲烷或乙酸乙酯。
14.根据权利要求1所述N-[N-苯甲酰基-O-(2-二甲氨基乙基)-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇的光学异构体的制备方法，其特征在于：步骤(3)所述碱性水溶液为碳酸氢钠、碳酸氢钾、碳酸钾或碳酸钠水溶液。
15.根据权利要求1所述N-[N-苯甲酰基-O-(2-二甲氨基乙基)-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇的光学异构体的制备方法，其特征在于：步骤(4)所述碱性催化剂为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钾、碳酸钠、N-甲基吗啉或三乙胺。
16.根据权利要求1所述N-[N-苯甲酰基-O-(2-二甲氨基乙基)-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇的光学异构体的制备方法，其特征在于：步骤(4)所述酸碱法分离纯化的具体步骤为：有机层加入0.1～1.0mol/L酸溶液，分去有机层，酸水层中加入1.0～4.0mol/L碱性溶液，析出固体，再加入有机溶剂萃取。
17.根据权利要求16所述N-[N-苯甲酰基-O-(2-二甲氨基乙基)-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇的光学异构体的制备方法，其特征在于：酸碱法分离纯化时所用酸溶液为盐酸、冰醋酸或硫酸溶液，碱性溶液为碳酸钾、氢氧化钾或氢氧化钠溶液。
18.如权利要求1-17中任一项所述方法制得的绝对构型为(2S，2′R)或(2R，2′R)的N-[N-苯甲酰基-O-(2-二甲氨基乙基)-L-酪氨酰基]-L-苯丙氨醇异构体在制备抗乙肝病毒感染的药物中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201210206143.9A CN103508920B (zh) | 2012-06-21 | 2012-06-21 | 一种苯丙氨醇化合物的光学异构体的制备方法及其用途 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201210206143.9A CN103508920B (zh) | 2012-06-21 | 2012-06-21 | 一种苯丙氨醇化合物的光学异构体的制备方法及其用途 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN103508920A CN103508920A (zh) | 2014-01-15 |
| CN103508920B true CN103508920B (zh) | 2016-03-02 |
Family
ID=49892407
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201210206143.9A Active CN103508920B (zh) | 2012-06-21 | 2012-06-21 | 一种苯丙氨醇化合物的光学异构体的制备方法及其用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN103508920B (zh) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109730974A (zh) * | 2019-03-15 | 2019-05-10 | 贵州百灵企业集团制药股份有限公司 | 一种替芬泰片剂及其制备方法 |
| CN112390767A (zh) * | 2021-01-19 | 2021-02-23 | 嘉实（湖南）医药科技有限公司 | 一种盐酸乙哌立松杂质f的制备方法 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4004008A (en) * | 1974-02-01 | 1977-01-18 | Rotta Research Laboratorium S.P.A. | O-Tertiary amino-alkyl-N-benzoyl tyrosil amides |
| CN1437937A (zh) * | 2002-08-02 | 2003-08-27 | 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室 | 苯丙氨醇类化合物作为制备治疗乙肝药品的应用及其制备方法 |
| CN1935779A (zh) * | 2006-10-20 | 2007-03-28 | 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室 | N－(n－苯甲酰基－苯丙氨酰基)－苯丙氨酸二肽衍生物及其制备方法和用途 |
-
2012
- 2012-06-21 CN CN201210206143.9A patent/CN103508920B/zh active Active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4004008A (en) * | 1974-02-01 | 1977-01-18 | Rotta Research Laboratorium S.P.A. | O-Tertiary amino-alkyl-N-benzoyl tyrosil amides |
| CN1437937A (zh) * | 2002-08-02 | 2003-08-27 | 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室 | 苯丙氨醇类化合物作为制备治疗乙肝药品的应用及其制备方法 |
| CN1935779A (zh) * | 2006-10-20 | 2007-03-28 | 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室 | N－(n－苯甲酰基－苯丙氨酰基)－苯丙氨酸二肽衍生物及其制备方法和用途 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN103508920A (zh) | 2014-01-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103764637A (zh) | 卡巴他赛的固态形式及其制备方法 | |
| CN110092779B (zh) | 一种取代的苯基化合物及其应用 | |
| CN109912624A (zh) | 一种巴洛沙韦酯关键母核中间体的合成方法 | |
| JP7123417B2 (ja) | 抗不安重水素化合物及びその医薬的用途 | |
| CN105503627B (zh) | 一种新型棉酚希夫碱衍生物及其制备方法与应用 | |
| CN102614197B (zh) | 苯乙酰氟苯水杨酰胺类化合物在制备抗宫颈癌药物中的应用 | |
| CN103508920B (zh) | 一种苯丙氨醇化合物的光学异构体的制备方法及其用途 | |
| CN104163787A (zh) | 阿扎那韦及其硫酸盐的制备方法 | |
| CN106946775B (zh) | 一种化合物及其在制备抗丙肝病毒药物中的应用 | |
| CN104557891A (zh) | 槲皮素衍生物及其制备方法和应用 | |
| CN109438437A (zh) | 一类含噻唑环的抗癌化合物 | |
| CN106632275B (zh) | 一种雷迪帕韦的制备方法及制备雷迪帕韦的中间体 | |
| CN106977543A (zh) | 改进的索非布韦中间体的制备工艺 | |
| CN102526077B (zh) | 苯乙酰氟苯水杨酰胺类化合物在制备抗白血病药物中的应用 | |
| CN102633796B (zh) | 一种苦参酸类衍生物的制备方法 | |
| CN109762040A (zh) | 一种核苷类ns5b聚合酶抑制剂的制备方法 | |
| CN102600182B (zh) | 苯乙酰氟苯水杨酰胺类化合物在制备抗肺癌药物中的应用 | |
| CN111253415B (zh) | 去甲斑蝥素羧酸三氟苄酯及其合成方法和应用 | |
| CN109400595A (zh) | 一类含噻吩环的抗癌化合物 | |
| CN107286143B (zh) | 卡格列净药物杂质及其制备方法及用途 | |
| CN102614196B (zh) | 苯乙酰氟苯水杨酰胺类化合物在制备抗乳腺癌药物中的应用 | |
| CN106632004B (zh) | 吡啶酮类衍生物及其制备方法与应用 | |
| CN115650986B (zh) | 肉桂酰氨基吡唑并[3,4-d]嘧啶类化合物及其制备和应用 | |
| CN114437046B (zh) | 5-氟尿嘧啶拼接4-苯胺喹唑啉类化合物及其制备方法与应用 | |
| CN106831853A (zh) | 7‑乙基‑10‑o‑叔丁基二苯基硅基喜树碱‑20‑o‑甘氨酸盐酸盐的制备工艺 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant |