DE2503992C2

DE2503992C2 - Tyrosinamide und diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel

Info

Publication number: DE2503992C2
Application number: DE2503992A
Authority: DE
Inventors: Francesco Toccona Milano Makovec; Luigi San Fruttuoso di Monza Milano Rovati; Paolo Monza Milano Senin
Original assignee: Rotta Research Laboratorium SpA
Current assignee: Rottapharm SpA
Priority date: 1974-02-01
Filing date: 1975-01-31
Publication date: 1982-01-21
Also published as: BE824995A; GB1467927A; NO750288L; SE7501115L; NO144210C; HK38979A; US4004008A; NL167683C; NO144211C; ZA75530B; SE410850B; CH605658A5; DE2503992A1; SE413094B; FI61479B; HU175156B; NL167683B; AT343632B; FI63744B; CA1047498A

Description

R¹ —O

eine unverzweigte, endständig durch eine Dimethylamine-, Diäthylamino-, Di-(n-propyl)-amino-, Pyrrolidino-, Piperidino- oder eine durch eine Methyl-, 2-Hydroxyäthyl- oder Benzylgruppe N-substituierte Piperazinogruppe substituierte Alkylengruppe mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen bedeutet,

R² für eine unsubstituierte Phenylgruppe oder eine in ortho-, meta- oder para-Stellung durch Cl, Br, NO₂, OCH₃, CH₃ oder CF₃ substituierte Phenylgruppe steht.

R³ eine unverzweigte oder verzweigtkettige Monoalkylaminogruppe mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, eine Dialkylaminogruppe mit insgesamt 2 bis 8 Kohlenstoffatomen, eine Pyrrolidino-, Piperidino- oder Morpholinogruppe bedeutet,

und deren Salze mit pharmazeutisch annehmbaren Säuren.

2. Tyrosinamide nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß R³ eine Methylamino-, Äthylamino-, n-Propylamino-, n-Butylamino-, N-Hexylamino-, Isopropylamino- oder Isobutylaminogruppe

3. Tyrosinamide nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß R³ eine Dimethylamine-, Diäthylamino-, Di-n-propylamino-, Di-n-butylamino-, Diisobutylamino- oder Methyläthylaminogruppe ist.

4. Tyrosinamide nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß R¹ eine unverzweigte, endständig durch eine Diäthylamino-Pyrrolidino- oder 4-Methylpiperazinogruppe substituierte Alkylengruppe mit 2 bis 3 Kohlenstoffatomen bedeutet, daß R² für eine unsubstituierte oder in p-Stellung durch Chlor oder Methyl substituierte Phenylgruppe steht und daß R³ eine Monoalkylaminogruppe mit 3 bis 4 Kohlenstoffatomen oder eine Dialkylaminogruppe mit insgesamt 4 bis 6 Kohlenstoffatomen bedeutet.

5.0-(2-Diäth>iaminoäthyl)-N-benzoyl-DL-tyrosin-di-(n-propyl)-amid sowie dessen Salze mit pharmazeutisch annehmbaren Säuren.

6.0-[3-(4-Methylpiperazino)-propyl]-N-(p-chlorbenzoyl)-DL-tyrosin-di-(n-propyl)-amid sowie dessen Salze mit pharmazeutisch annehmbaren Säuren.

7.O-(2-Diäthylaminoäthyl)-N-(p-chlorbenzoyl)-DL-tyrosin-di-(n-propyl)-amid sowie dessen Salze mit pharmazeutisch annehmbaren Säuren.

8.0-(3-Dimethylaminopropyl)-N-benzoyl-DL-tyrosin-di-(n-propyl)-amid sowie dessen Salze mit pharmazeutisch annehmbaren Säuren.

9.0-(2-Pyrrolidinoäthyl)-N-(p-toluoyl)-DL-tyrosin-n-butylamid sowie dessen Salze mit pharmazeutisch annehmbaren Säuren.

-CH₂-CH-CO-R³
NH
CO

eine unverzweigte, endständig durch eine Dimethylamino-, Diäthylamino-, Di-(n-propyl)-amino-, Pyrrolidino-, Piperidino- oder eine durch eine Methyl-, 2-Hydroxy-äthyl- oder Benzylgruppe N-substituierte Piperazinogruppe substituierte Alkylengruppe mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen bedeutet,

R² für eine unsubstituierte Phenylgruppe oder eine in ortho-, meta- oder para-Stellung durch Cl, Br, NO2, OCH₃, CH₃ oder CF₃ substituierte Phenylgruppe steht,

eine unverzweigte oder verzweigtkettige Monoalkylaminogruppe mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen, eine Dialkylaminogruppe mit insgesamt 2 bis 8 Kohlenstoffatomen, eine Pyrrolidino-, Piperidino- oder Morpholinogruppe bedeutet,

und deren Salze mit pharmazeutisch annehmbaren Säuren.

Diese Tyrosinamide können vorzugsweise mit pharmazeutisch annehmbaren Säuren in ihre Salze überführt werden, wodurch sie wasserlöslich und daher für die Lagerung stabiler werden. Solche Säuren können sein:

(a) anorganische Säuren, z. B. Salzsäure, Phosphorsäure oder Schwefelsäure;

(b) organische Säuren, z. B. Citronensäure, Oxalsäure, Essigsäure, Maleinsäure, Fumarsäure, Salicylsäure und Nicotinsäure.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen haben bei Tierversuchen eine hohe antispastische Aktivität gezeigt. Beim Menschen ist diese Aktivität mit einer indirekten analgetischen Aktivität kombiniert, die auf die Auflösung der spastischen Syndrome zurückzuführen ist. Weiterhin zeigen viele dieser Verbindungen eine vasodilatatorische Wirkung auf den peripheren und

bo zerebralen Kreis, was für einige dieser Verbindungen von besonderer Signifikanz ist.

Am meisten bevorzugt werden Verbindungen, bei denen

(a) R¹ eine unverzweigte Alkylgruppe mit 2 bis 3 Kohlenstoffatomen ist und die tertiäre Aminogruppe entweder Diäthylamino, Pyrrolidino oder 4-Methylpiperazino ist;

3 4

(b) R² eine Phenylgruppe ist, die entweder unsubstitu- mit insgesamt 4 bis 6 Kohlenstoffatomen ist iert oder in para-SteHung durch Chlor oder Methyl

substituiert ist; und Das Herstellungsverfahren für die erfindungsgemä-

(c) R³ eine Monoalkylaminogruppe mit 3 bis 4 ßen Verbindungen wird im folgenden erläutert Kohlenstoffatomen oder eine Dialkylaminogruppe 5

Schema

^CHj-CH-COOH
NH₂

Ο,Ν-Diacylierung

Tyrosin

VcH₂-CH-COOH

Verbindungen des Typs A

Arnidierung

R²-CO-oV VcH, -CH-CO-R³

Verbindungen des Typs B

Abspaltung

der O-Acylgruppe

-> HO

CH₂-CH-CO-R³ NH
CO

Verbindungen des Typs C

Veretherung

R'-O^VcHj-CH-CO-R³ NH
CO
R²

Verbindungen des Typs D

DL-Tyrosin wird nur mit 2 Mol eines geeigneten Benzoylchlorids bei Bedingungen der Schotten-Baumann-Reaktion bei Temperaturen zwischen O und 10⁰C während einer Zeit von 2 bis 12 Stunden umgesetzt, wodurch die Verbindungen des Typs A, d. h. die Ο,Ν-Diacyltyrosine, erhalten werden.

Diese Verbindungen werden dann nach der Methode der gemischten Anhydride in einem inerten Lösungsmittel, z. B. Aceton, Chloroform, Dioxan, Tetrahydrofuran, bo Äthylacetat, bei einer Temperatur zwischen —15 und + 15⁰C und über einen zwischen 2 und 24 Stunden variierenden Zeitraum amidiert, wodurch die entsprechenden Amide des Typs B erhalten werden.

Diese Ο,Ν-Diacyltyrosinamide der allgemeinen Formel B werden in einem wäßrigen oder wäßrig-alkoholischen Medium selektiv in Gegenwart von Basen, wie von Hydroxiden, Carbonaten oder Bicarbonaten von Alkalimetallen, bei Temperaturen zwischen 20 und 60⁰C

und während eines Zeitraums zwischen 2 und 24 Stunden selektiv hydrolysiert, wodurch die N-Acyltyrosinamide der Formel C erhalten werden.

Schließlich werden Verbindungen der allgemeinen Formel D durch Umsetzung der N-Acyl-tyrosinamide der allgemeinen Formel C mit endständig durch eine tertiäre Aminogruppe gemäß eier Bedeutung von R¹ substituierten Halogenalkanen in Gegenwart von Natriummetall, Natriummethylat oder Natriumamid in organischen Lösungsmitteln, wie Aceton, Benzol, ToIug!, Dimethylsulfoxid, Dimethylformamid oder Äthylenglykoldimethyläther durch 2- bis 48stündiges Erhitzen unter Rückfluß hergestellt.

Die folgenden Beispiele erläutern die Erfindung. Verbindungen der allgemeinen Formel A (O₁N-Diacyltryosine) sind in Tabelle A zusammengefaßt und werden entsprechend dem folgenden, allgemeinen Verfahren hergestellt

Zu einer Lösung von 18,: g (0,1 Mol) L-Tyros'n in 100 ecm INNaOH von 5° C gibt man während etwa 30 min gleichzeitig unter Rühren und Halter; der Reaktionsiemperatur zwischen 5 und 10° C 200 ecm 1N NaOH und 0,2 Mol eines geeigneten Benzoylchlorids.

Das Gemisch wird dann 12 h gerührt. Es wird mit 2N HCL angesäuert und filtriert. Der Rückstand wird umkristallisiert.

Tabelle A

Ο,Ν-Diacyl-tyrosine der allgemeinen Formel

R²— C-O -Vj^-CH₂-CH- COOH
O NH

CO-R²

Verbindungen R²

I-

(⁰C) umkristallisiert aus [a] ;,"

Ausbeule

(Bsp. 1)
(Bsp. 50)
(Bsp. 64)
(Bsp. 80)

(Bsp. 84)
(Bsp. 88)
(Bsp. 92)
(Bsp. 96)

F₃C

H₃CO

208-21;

176-178

207-209

177-180

210-213

205-210

187-190

171 -174

Äthanol (95 %ig) 29"

Äthanol

Methanol

23")

6")

9')

3")

Äthanol/Wasser -10")

16")

20')

88

89

87

81

80

77

79

71

") jeweils ± 2° (in Tetrahydrofuran)

Verbindungen der allgemeinen Formel B (O,N-Diacyltyrosinamide) sind in Tabelle B zusammengefaßt und werden entsprechend dem folgenden, allgemeinen Verfahren hergestellt.

0,1 Mol eines geeigneten Ο,Ν-Diacyltyrosins (vgl. Formel A) werden in 300 ml wasserfreiem Aceton gelöst. Die Lösung wird auf — 10°C gekühlt, und dazu gibt man unter Rühren 10,1 g (0,1 Mol) Triäthylamin. Dann gibt man, noch bei -10⁰C, 10,8 g (0,1 Mol) Äthylchlor-carbonat zu.

Die Temperatur wird 20 min bei - 10°C gehalten, und dann wird 0,1 Mol eines geeigneten Amins zugegeben. Das Gemisch wird 6 h gerührt. Die Temperatur wird auf Zimmertemperatur erhöht. Das Material wird eingedampft und der Rückstand wird in Äthylacetat

Tabelle B

Verbindungen entsprechend der Formel aufgenommen. Dann wird mit 2N HCI, Natriumbicarbonat und schließlich mit Wasser gewaschen und dann über wasserfreiem Na2SC>4 getrocknet. Durch Konzentrieren auf ein niedriges Volumen und Zugabe von ■") Petroläther fällt das Produkt aus.

R-- C— O-

CH₂- CH- CO-R' NH

CO-R²

Vorhindiingen

	,CH	,CH,	I (⁰C)	umkrisKillisicrt aus	Ausbeute
CH
		,CH,	193-195	Äthanol 95 %ig	93
CH

(Bsp. 2)

— N

(Bsp. 19)

(Bsp. 22)

— N

CH,

CH, H

-N

237-239 Methanol 94

240-243

76

(Bsp. 26)

(Bsp. 29)

/
-N 221-224

CH:-CH,—CH;

C;H,

— N 154-157

78

(Bsp. 33)

(Bsp. 38)

-N

— N (CH;),- CH,
H

\CH,)₅— CH, 189-192

163-165

Äthanol

80

74

Fortsetzung

Ver- R-

bindungcn 1-(⁰C)

umkristallisiert Ausbeute

(Bsp. 44) (Bsp. 47) (Bsp. 51) CH;

(Bsp. 56) CH; (Bsp. 61) CH,

(Bsp. 65) Cl-(Bsp. 71) Cl-(Bsp. 74) Cl-(Bsp. 81)

CI CH,- CH,

CH₂-CH₂

CH₂-CH,
/ \

-N ^VO 229-231

CH,— CH₂

CH₂-CH₂-CH₃

-N 169-173

CHj-CH₂-CH₃

-N 190-193

(CH₂)₃ — CH₃

-N 177-180

(CH₂J₅-CH₃

CH₂-CH₂-CH₃

-N 148-151

CH₂-CH₂-CH₃

160-163 Äthanol 74

196-200

-CH₃

199-202

(CH₂)J-CH₃

(CHj)₃-CHj

Äthanol 89

Äthanol 80

Äthanol 85

Methanol 76

Äthanol 81

76

79

113-116 Äthanol 74

11

Fortsetzung

12

Ver- R²

bindungcn

(⁰C)

umkristallisiert Ausheule

ULIS .„,.

(Bsp. 85) Br

y ν

(Bsp. 89) O₂N-

(Bsp. 93) F₃C

(Bsp. 97) H₃CO

CH₂-CH₂-CH₃

— N 161-163 Methanol

CH₂-CH₂-CH₃ CH₂-CH₂-CH₃

— N 136-140 Älhaiiül

CH₂-CH₂-CH₃ CH₂-CH₂-CH₃

— N 180-184 Äthanol

CH₂-CH₂-CH₃

CH CH,- CH₃

— N 66- 72 -

CH₂—CH₂-CH₃

Verbindungen der Formel C (N-Acyl-tyrosinamide) π B) in 300 ecm Methanol gibt man unter Rühren 100 ecm

sind in Tabelle C aufgeführt und werden entsprechend IN NaOH. Das Gemisch wird 6 h gerührt, mit 500 ecm

dem folgenden, allgemeinen Verfahren hergestellt. H2O verdünnt und mit 2N HCl angesäuert. Der

Zu einer Lösung aus 0,1 Mol eines geeigneten ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und umkristalli-

O,N-(Di-acylamido)-Derivats von Tyrosin (vgl. Formel siert.

Tabelle C

Verbindungen entsprechend der Formel

HO-

CH₂-CH-CO-R³ NH CO-R²

Verbindungen

	F (⁰C)	umkristallisiert aus	Ausbeute (%)
CH2CH2CH3
CH₂CH₂CH₃	193-195	Äthanol 95%ig	93
CH₃

(Bsp. 3)

(Bsp. 20)

—N

237-239 Methanol

CH₃

Fortsetzung

R²

13

y

R¹

25

H
/

/
\

(CH₂K

03 992

I"
(⁰C)

14

Ausheule
(%)

Ver
bindungen

/
\

(CH₂),

CH₂-
/

unikristullisierl
ULIS

C

— N

\
CjII₅

H
/

/
\

200-203

91

(Bsp. 23)

\

H
/

/

\
CH₂-

Methanol

/
\

CH₂-

— N

\
CH₂-

/
\
CH₂-

4

169-171

92

(Bsp. 27)

y

C₂H,
/

CH₂-
/

Aliuinul

/
\

-CH₂-CH₃

C

— N

\
C₂Ih

\
CH,-

196-198

93

(Bsp. 30)

H

H
/

Älhanol/H₂O

/
\

C

— N

158-160

92

(Bsp. 34)

Äthanol
80%ig

-CH,

C

— N

163-165

74

(Bsp. 39)

Äthanol

-CH₃

C

^

-CH₂

200-202

88

(Bsp. 45)

-

C

— N

-CH₂

229-231

89

(Bsp. 48)

-CH₂

Methanol

CH₃

— N

\
O
/
-CH₂

193-196

91

(Bsp. 52)

-CH₂-CH₃

Äthanol

CH₃

— N

-CH₂-CH₃

174-176

91

(Bsp. 57)

Äthanol

\
(CH₂).,— CH₃

15

Fortsetzung

16

Verbindungen

(⁰C)

umkristallisiert Ausbeute (%)

(Bsp. 62) CH₃-(Bsp. 66) Cl-(Bsp. 72) Cl-(Bsp. 75) Cl

y ν

(Bsp. 82)

'Cl

(Bsp. 86) Br

(Bsp. 90) O₂N-(Bsp. 94) CF, (Bsp. 98) CH₃O

-N 162-164

(CHj)₅-CH₃

CH, — CH₂—CH₃

/
-N 202-204

CH₂-CH₂-CH₃

	CH₂-	-CH₃	CH₃	190-192
	H /
/ N \			CH₃
	(CH₂)₃—CH₃		151-153
	(CH₂X, /
/ N \
	(CH₂X,	207-210
	CH,- /
/ N \
	\ CH₂-
-CH₃

-CH,
-CH₂-

-CH₂-

CH₂-CH₂-CH₃

/
-N 193-195

CH₂-CH₂-CH₃

CH₂-CH₂-CH,

/
-N 203-206

CH₂-CH₂-CH₃

CH₂- CH,- CHj

/
-N 121-124

CH₂-CH₂-CH₃

Methanol 90

171-173 Äthanol 92

Äthanol
95 %ig

90

Äthanol 89

Methanol 88

Äthanol 90

Äthanol 87

130 263/1S

Die Verbindungen der Formel D sind in der folgenden Tabelle D angegeben und werden entsprechend dem folgsnden, allgemeinen Verfahren hergestellt

0,1 Mol eines geeigneten Tyrosin-N-acylamidderivats (vergl. Formel C) wird in 350 ecm Toluol suspendiert Dann gibt man unter Rühren 5,4 g (0,1 Mol) Natriummethylat und 50 ecm einer titrierten Toluollösung des geeigneten Haloalkylamins hinzu. Die Temperatur wird auf 105° C erhöht und die Lösung wird 12 h bei dieser Temperatur unter Rühren stehengelassen. Die Toluollösung wird mit 2N HCI extrahiert Die wäßrige saure Phase wird bei niedriger Temperatur mit Natriumcarbo-

nat alkalisch gemacht und dann erneut mit Portionen von Äthylacetat extrahiert

Die vereinigten organischen Phasen werden über wasserfreiem Na2SC>4 getrocknet filtriert und zur Trockene eingedampft Man erhält einen öligen Rückstand, der nach dem Stehenlassen während einiger Stunden krümelig wird.

Die freie Base kann angesäuert werden, so daß sie wasserlöslich ist Zu diesem Zweck wird sie in Aceton gelöst und z. B. als Oxalat Citrat, Hydrochlorid ausgefällt

Tabelle D

entsprechend der Formel

R¹

R²

R³

— N

CH₂-CH₂-CH₃

F
(⁰C)

Salz

umkristallisiert
UUS

Ausbeute

vü

Oi

Verbindungen

\^CH₂— CH- CO — R³
— /

C₂H₅
N-CH₂-CH₂-
C₂H₅

O

Cri2 CH2 C H 3
— N
\
CH₂-CH₂-CH₃

65-67
181-183
159-162

(Freie
Base)
Hydro-
chlorid
Oxalat

Petroläther
Äthanol-
Aceton
Äthanol

84

)3 992

NH-CO —R²

CH₃
N-CH₂-CH₂-

O

CH₂-CH₂-CH₃
— N

169-171

Oxalat

Äthanol

84

CH₃

CH₂-CH₂-CH₃

Verbindungen

CH₃-(CH₂),
\

CH₂-CH₂-CH,

(Bsp. 4)

\
N
CH₃-(CH₂),

O

—n'
C H 2— C H 2— C H 3

128-130

Oxalat

Aceton

79

(Bsp. 5)

C₂H₅
\

CH₂-CH₂-CH₃

\
N—(CH₂)₃ —

112-114

Oxalat

Aceton

81

C₂H₅

(Bsp. 7)

(Bsp. 8)

R¹ R-

N-(CH₂),- \/~

CH,

R'

CH₂-CH₂-CH₃
/

CH₂-CH₂-CH,

F
(⁰C)

Salz

Li m kristal lisic rl
aus

Ausbeute

Ui

NJ

Verbindungen

C₂H₅

CH₂-CH,

/

CH₂-CH₂-CH,
/

O
U)

N-(CHz)₄- \/~

/
— N
\

107-110

Oxalat

Aceton-
Äther

76

to

(Bsp. 9)

C₂H₅

N-CH₂-CH₂- <T>~
/ \=/

CH₂-CH₂-CH,

\
CH₂-CH₂-CH,

K)

CH,

CH₂-CH,

CH₂-CH₂-CH,
S

CH₂-CH₂-CH,
/

CH₂-CH₂
/ \

/
~ N
\

/

120-123

Oxalat

Aceton

83

(Bsp. 10)

CH₂ N-CH₂-CH₂- ^ V-

CH₂-CH₂-CH,

\ /
CH₂-CH₂

CH₂-CHz-CH,
/

HO-CH₂ CH₂CH₂

/
— N
\

\
CH₂-CHz-CH,

185-187

Oxalat

Äthanol-
Aceton

80

(Bsp. 11)

CH₂-N N-(CH₂),- <(~\—

CH₂CH₂

/
— N

175-177

Oxalat

-

79

(Bsp. 12)

~~ CH₇CH, ~~

\

/

— N
\

193-195

Oxalal

Äthanol

78

(Bsp. 13)

/
— N

242-245

Oxalat

75

(Bsp. 14)

\

24

Cr-

U ~

I U

¹JZ

Z I

U ~

ι U

Fortsetzung

Verbindungen R¹

R-

R-'

SaI/ unikrisliillisiert Ausheule

aus

I")

CH₂-CH₂

(Bsp. 36) CH₃-N N-(CH₂),-

CH₂-CH,

C₂H₅

(Bsp. 37) N-CH₂-CH₂-

C₂H₅

— N

223-225 Oxalat

CH₃-CH₂

(CH,),-CH, H

\cH,),—CH, H

123-125 (als Base)

Aceton/ Lieroin

(Bsp. 40)

N-CH₂-CH₂-

— N

82

81

135-137 (als Base) Aceton 74

/ CH₃-CH₂ C₂H₅ (Bsp. 46) N-CH₂-CH₂- C₂H₅	O	(CHj)₅-CH, CH,— CH₂ / — Ν	170-174	Oxalat	K) 79
CH₃ \ (Bsp. 49) N-CH₂-CH₂- CH₃		CH₂-CH,
CH, \ (Bsp. 53) N — CH₂—CH,-	O	CH,- CH, / \ — N O	196-197	Hydro chloric!	80
/ CH₃		CH₂-CH₂
H₃C--^	CH₂-CH₂-CH, — N \	185-187	Oxalat	82
	\ CH,-CH,-CH,




>

Fortsetzung

R¹

N-CH₂-CH₂-

CH₃-CH₂
CH₃-CH₂

R^:

— N

CH₂-CH₂-CH₃

F
(⁰C)

Salz

umkrislallisierl
aus

Ausbeule

K)

K>
Oi

K)
OO

Verbindungen

CH₃-CH₂
N-CH₂-CH₂-

\
N-(CH₂),-
CH₃-CH₂

O
OJ

CH₃-CH₂

H₃C-\/—

CH₂-CH₂-CH₃

159-161

Oxalat

Aceton/
Alkohol

77

KJ

(Bsp. 54)

C₂H₅

N—(CH₂)₂ —
CH₃-CH₂

— N

CH₂-CH₂-CH₃

N-CH₂-CH₂-
C₂H₅

C₂H₅
N-CH₂-CH₂-
C₂H₅

\
^NCH₂—CH₂-CH₃

CH₃-CH₂

H₃C^~X-

— N

H

146-149

Oxalat

-

83

(Bsp. 55)

CH₃-<^^>—

— N

(CH₂Jj-CH₃
H

161-163

Oxalat

-

80

(Bsp. 58)

(CH₂)₃—CH₃

147-150

Oxalat

-

78

(Bsp. 59)

— N

H

CH₃-/~X-

— N

(CH₂)J-CH₃

137-139

(als Base)

Aceton

74

(Bsp. 63)

CH₂-CH₂-CH₃

128-130

Oxalat

Aceton

83

(Bsp. 67)

29

30

C O

OQ

C O

O OO

I σ

On O

G- -T

X U

χ u

X U

χ u

χ υ

X U

Z Z

υ uu u

X U

χ υ

OO

-ο

31

32

< C

O OO

	£	£	U	χ	υ	G
	υ	υ		U	L	[
					£
£	£	£	X		υ	I
υ	U	υ	U	χ	χ	I X
			X	υ	U	υ
		υ	"T"
£	υ

χ υ

X U

Vj

O υ'

X CJ

X/ \Χ

U U

Die antispastische Aktivität der erfindungsgemaßen Verbindungen zeigt sich an der peripheren glatten Muskulatur mit einem papaverinähnlichen Wirkungsmechanismus.

Wenn man die erfindungsgemaßen Produkte mit dem derzeit in den Therapie des spastischen Syndroms häufig eingesetzten Papaverin vergleicht, dann wird aus Tabelle I ersichtlich, daß die meisten der erfindungsgemäßen Verbindungen eine antispastische Aktivität besitzen, die je nach der Substanz und dem betreffenden Test ein- oder zweimal größer ist als diejenige des Papaverins.

In dieser Tabelle (N. 1) werden die Verbindungen, die in den Beispielen beschrieben sind, mit ihren entsprechenden Seriennummern, die akute Toxizität, die antispastische Aktivität, die bei zwei experimentellen Tests, nämlich einem in vivo-Test und einem in vitro-Test, beobachtet wurde, angegeben. Darüber hinaus werden weiterhin zwei therapeutische Ind'zes angegeben, die die Toxizität dieser Verbindungen bezüglich der in vivo- und in vitro-Aktivität betreffen. Genauer handelt es sich um folgendes:

A) Die DL50 ist bekanntlich die Menge der Substanz, ausgedrückt in mg/kg Körpergewicht des Tieres, die bei 50% der behandelten Tiere den Tod bewirkt.

B) Die in vivo durchgeführte Holzkohlenmethode, die in der Weise durchgeführt wird, daß man Ratten, die 24 Std gefastet haben, peroral 0,3 ml/pro Ratte eines Gemisches aus 10 g Holzkohle und 5 g Gummi arabicum, suspendiert in einem Volumen von 100 ecm H2O, verabreicht und zur gleichen Zeit die zu prüfende Substanz i. v. verabreicht. Nach 2 Std werden die Tiere getötet und diejenigen werden als negativ angenommen, bei denen die Holzkohle den ersten Teil des Colons erreicht hat. Die anderen werden in dem Sinne als

positiv angesehen, daß die verabreichte Substanz den Darmdurchgang der Holzkohle verlangsamt hat

Die mit einer physiologischen Lösung behandelten Tiere (Kontrolltiere) sind alle nach 2 Std negativ.

C) Als invitro-Methode wird diejenige von Magnus mit dem Ileum von Meerschweinchen verwendet, wie es üblicherweise für alle Bewertungen der Fall ist Dabei extrahiert man das Ileum aus der Höhlung und bringt es in ein Aufnahmegefäß, das eine in geeigneter Weise mit Sauerstoff versorgte Nährflüssigkeit enthält. Es werden die Bewegungen des Organs registriert, das mehrere Std am Leben bleibt, wenn es bei einer Temperatur von 37⁰C gehalten wird. Nach der herkömmlichen Weise, der hier gefolgt wird, wird in das Bad als Spasmen erzeugendes Mittel BaCb eingegeben. Als Reaktion erfolgt eine heftige Kontraktion des Organs. Diese Kontraktion kann verhindert werden, indem man zuvor Arzneimittel zufügt, die Spasmen inhibieren. Im vorliegenden Falle werden die erfindungsgemäßen Verbindungen verwendet.

Die aufgenommenen Werte werden als Beziehung zwischen Papaverin und den EDso-Werten der erfindungsgemäßen Verbindungen ausgedrückt (bekanntlich ist die ED50 diejenige Dosis, die eine 50%ige Verminderung der spastischen Kontraktion ergibt).

D) I.T1 ist der therapeutische Index der antispastischen in vivo-Aktivität Er wird erhalten, indem man die DL50 (Spalte 2) durch die ED₅₀ des Holzkohlentests (Spalte 3) dividiert.

E) I.T.2 ist der therapeutische Index der antispastischen in vitro-Aktivität. Er wird durch das Produkt aus dem entsprechenden antispastischen in vitro-Aktivitätsindex (Spalte 4) und der entsprechenden DL50 (Spalte 2) erhalten.

Tabelle I

Antispustischc in-vivo- und in-vitro-Aklivität der Verbindungen und ihre relativen therapeutischen Indizes

Verbindung	CR 605	I)L„\| bei der	Anlispastischc	Antispastische	I. T₁:	I. T.,:
	592	Ratte	Aktivität beim	in-vitro-Aktivilät		₅„ (DL₅„CR)X
	823	mg/kg i. v.	Ratlcn-llolz-	beim Ileum einer	in vivo	( ED₅₁I Papaverin \
	816		kohlcndurch-	Höhlung durch		I IiD₅₁, CR )
	829		gangstcst: IiD₅₀	Stimulierung mit
	607		mg/kg i. v.	BaCI₂
	625			IiD₅₁, Pap./
	630			IiD₅₁, CK
Bsp. 4	609	33,9	10,6	1,25	3,2	42,5
5	619	58,1	47,5	0,25	1,2	14,0
7	738	23,0	16,2	1,48	1,4	34,1
8	608	16,0	5,5	2,00	2,9	32,0
9	821	20,1	15,2	-	1,3	-
IO	734	32,4	26,7	0,41	1,2	13,3
Il	736	32,6	21.1	0,52	1,5	16,9
12	36,1	40,1	-	0,9	-
13	138,7	50,5	0,68	2,7	94,0
14	110,2	67,8	-	1,6	-
21	85,3	50,6	0,14	1,7	11,9
24	162	104,3	-	1,5	-
28	53	15,6	0,13	3,4	6,9
31	62,2	33,4	0,52	1,8	32,3
32	102.0	39.6	0.04	2.5	4.0

Fortsetzung

36

Verbindung

L₅₁I bei der Aniispaslischc

RaHc
mg/kg i. v.

Aktivität beim
Ratlen-Ilolzkohlendurchgangstest: ED^n
mg/kg i. v.

Anlispaslische in-vitro-Aklivitäl beim Ileum einer Höhlung durch Stimulierung mit BaCI₂ F.D₅„ PapV ED₅₁₁ CR

DL_5I,/ED₅₁, (DL₅₁₁CR)X in vivo /ED-;,, Papaverin\

I, ED₅₁, CR )

35	648	35,6	10,7
36	702	81,4	62,5
37	786	38,0	34,3
40	825	42,0	14,8
46	614	58,7	53,2
49	611	108,5	59,8
53	615	48,1	inaktiv
54	650	17,5	18,4
55	807	31,5	21
58	651	34,1	16,3
59	797	20,6	12,0
63	826	41	17,0
67	716	56,4	26,5
68	725	62,6	12,2
70	733	43,5	16,7
73	714	111	inaktiv
76	705	80	31
77	729	38,6	23
78	730	50	30,2
79	812	27	21
83	731	61	39,4
87	631	60,2	40,4
91	620	116,7	inaktiv
95	635	38,7	25,6
99	644	56,4	20,2
132	804	33,5	16,1
134	831	35,0	24,4
Papaverin		27,2	'22,5

0,16 0,11 0,17

3,3	5,7
1,3	9,0
1,1	6,5
2,8 U	75,7
1,8	33.2
0,95	20,5
1,5	10,7
2,1	55,0
1,7	27,2
2,4	49,2
2,1	89,1
5,1	200
2,6	57
-	34,4
2,1	126
1,'j	94,6
',6	49,5
1,3	27,8
1,5	106,7
1,5	73,1
-	41,8
1,5	36,8
2,8	25,3
2,1	29,8
1,4	45,5
1,2	27,2

Die Betrachtung der Tabelle zeigt, daß die Hauptzahl der geprüften Verbindungen im Vergleich zu Papaverin mindestens einen der folgenden Vorteile besitzt:

1. Größere Aktivität,

2. die therapeutischen Indizes sind günstiger, d. h. im Vergleich zu Papaverin sind diese Verbindungen stärker aktiv und weniger toxisch.

Die Aktivitäten, die sowohl in vitro als auch in vivo bestimmt wurden, können bestätigt werden, wenn man verschiedene Tiere oder verschiedene Organe verwendet. Diese Aktivitäten werden weiterhin verbessert, wenn man anstelle von BaCb andere Spasmen erregende Mittel, z. B. Serotonin, Histamin und Oxytoein (vgl. Tabelle II), verwendet.

Diese breite Bewertung ist insbesondere vorgesehen, um die charakteristischen Eigenschaften der erfindungsgemäßen Verbindungen darzulegen, so daß ersichtlich wird, wie sie auf verschiedene Komponenten der Spasmen der glatten Muskulatur in vivo einwirken können.

Die Betrachtung dieser Tabelle macht ersichtlich, daß diese Verbindungen nicht nur eine papaverinartige Aktivität besitzen, sondern daß sie auch dazu imstande sind, mit variierendem Grad die Spasmen erzeugende Aktivität von Serotonin, Histamin und Oxytocin zu

bo inhibieren.

So ist z. B. die Antiserotoninaktivität ähnlich wie diejenige von Methysergid (ein anerkannt gutes Arzneimittel, das eines der wirksamsten Antiserotoninmittel ist), während die antihistaminische Wirkung

b5 etwas schlechter ist als diejenige von Prometazin (das ein als Antihistaminikum verwendetes Arzneimittel ist).

Somit ist eine Eirisatzmöglichkeit der Verbindungen

die Therapie der schmerzvollen Spasmen beim Men-

sehen, die auf verschiedene physiologische Gründe zurückzuführen sind, da manchmal hormonelle Situationen vorliegen können, (die analog sind wie die durch

BaCb hervorgerufenen Spasmen) oder eine andere endogene Freisetzung von Histamin oder Serotonin.

Tabelle II

Antispastische in-vitro-Aktivität beim Hohlraumileum, Rattenuterus

Verbindung	Hohlraumileum	Serotonin	Histamin	Rattenulerus
	BaCl₂	0,69	0,17	Oxylocin
CR 605	1,25	1,2	0,24	0,09
CR 725	3,20	0,74	0.08	0,18
CR 716	1,58	0,87	0,09	0,06
CR 603	2,4		_	0,008
Papaverin	1 (1,29· 10 *)	1 (0,49 · 10 ")	-	1 (26,607 · 10 ")
Methysergid	-		1	-
Prometazin	_		_

(1,758)

Die in der Tabelle enthaltenen Werte werden als Vergleich zwischen der EDo₀ der Testsubstanz, die gleich 1 gesetzt wird, und der ED₅₀ der untersuchten Substanz angegeben und stellen daher die Aktivitäi der Verbindungen im Vergleich zu bekannten, sehr aktiven Substanzen dar.

Ein weiterer Aspekt der antispastischen Aktivität dieser Verbindungen ist die Aktivität, die sowohl in vivo als auch in vitro im Ureter und in der Blase erhalten werden kann.

Die in vivo-Untersuchung erfolgt mit der Harnblase einer anaesthäsierten Ratte in einer Umgebung, die auf die Körpertemperatur der Tiere erhitzt worden war. in Die Blase, die freigelegt ist, ist an ein System angeschlossen, das ihre Bewegung registriert. Die Arzneimittel wurden den Tieren durch intravenöse Zufuhr verabreicht.

Die in vitro-Untersuchung erfolgte an Rattenuretern. Ii die in einem Bad aus einer physiologischen Flüssigkeit aufgehängt waren. Die Untersuchung erfolgte nach einer ähnlichen Methode, wie die oben beschriebene Magnus-Methode.

In Tabelle III sind einige Beispiele dieser Aktivität (i angegeben.

Tabelle III	llrinriium tier	Ureter der
Verbindung	Ratte in vivo	Ratte in vitro
	IM),,, my/kg	1-:ΐ)₅₍₁ v.g/ml
	in vivo	in vilro
	6,25	74,2
CR 605	8,32	27,3
CR 725	6,90	86
CR 603	-	inaktiv
Atropin	inaktiv	-
llyoscin Bulylbromid	7,59	45,2
Papaverin

Von besonderem Interesse ist, daß die erfindungsgemäßen Verbindungen in vivo indirekt aktiver sind als das Papaverin.

Diese Aktivität ist umso mehr interessant, wenn man beachtet, daß anticholinergische Substanzen, wie Atropin und Hyoscin-N-Butylbromid (Arzneimittel, die für die Therapie von spastischen Formen im weilen Ausmaß verwendet werden) bei diesen Tests inaktiv Eine weitere interessante Eigenschaft der Verbindungen besteht darin, daß sie den physiologischen Rhythmus der Organe, auf die sie einwirken, im allgemeinen nicht stören, sondern daß sie im Gegensatz "ine gute Aktivität zeigen wenn diese Organe Spasmen unterworfen sind.

Die in Tabelle IV angegebenen Ergebnisse sind in dieser Hinsicht besonders sienifikant.

Tabelle IV

Aktivität der Verbindungen auf gastropylorische und Gallengangspasmen

Verbindung Nr.	mg/kg	Magen und	Pylorus	prozentuale	Gallengang	nach der	prozentuale
		nach der	nach der	Veränderung	nach der	2. Std.	Veränderung
		1. Std.	2. Std.	zwischen der	1. Std.		zwischen der
				1. und der		(ml)	1. und der
		(ml)	(ml)	2. Std.	(ml)	2. Std.

Vergleich

Morphin
CR 605
Morphin +
CR 605

CR 725
Morphin +
CR 725
CR 603
Morphin +
CR 603

physiologische
Lösung

250 ixg

250 ag + 5

10

250 ag + 10

12,5

250 ag+ 12,5

185,2

213,1
131,2
171,3

167,2
187,6

157,0
147,6

153,7

96,9 132,9 186,6

165,5 191,2

160,8 154,3

-17

-54,5 + 1,2 + 8,9

- 1,0

+ 1,9

+ 2,4 + 4,5 41,7

38,5

- 8,6

49,5	25,6	-48,3
46,6	56,6	+ 21,5
50,8	58,3	+ 14,9
49,7	53,2	+ 7,2
47,2	51,0	+ 10,8
50,3	48,8	- 3,0
44,0	39,5	-10,2

Die in dieser Tabelle gezeigten Ergebnisse wurden erhalten, indem der Magen bzw. die Gallengänge mit einer physiologischen Lösung getränkt wurden und indem die Flüssigkeit gesammelt wurde, die aus dem Pylorus und dem Sphinkter-Oddi heraustrat. Es wird ersichtlich, daß keine signifikanten Fließvariierungen zwischen der 1. und der 2. Sammelstunde vorliegen.

Wenn die erfindungsgemäßen Verbindungen intravenös verabreicht werden, wobei einige der Verbindungen in Tabelle IV präzis beispielhaft angegeben sind, dann treten beim Ausstrom der Flüssigkeit keine signifikanten Variierungen auf, jedoch ist, wenn unmittelbar nach der ersten Stunde des Sammelns die angegebene Morphindosis verabreicht wird, eine starke Verminderung des Flusses in der zweiten Stunde festzustellen, was ein Anzeichen für eine Spasmensituation der Gänge ist, die zu dem Sphinkter führen.

Wenn die Verbindungen zur gleichen Zeit mit Morphin und in den angegebenen Dosen verabreicht werden, dann machen sie diesen Spasmus zunichte.

Diese charakteristische Eigenschaft, die für diese Verbindungen eigentümlich ist, ist im therapeutischen Profil von spezieller Wichtigkeit, da sie darauf hinweist, daß diese Verbindungen nur in Gegenwart einer pathologischen Komponente aktiv sind und die normale Funktion des Organismus ungestört lassen.

Diese Verbindungen sind auch aktiv, umjSpasmen in der glatten Muskulatur der Blutgefäße zu vermindern. Bei wenigen dieser Verbindungen ist diese Aktivität von solchem Interesse, daß sie therapeutisch verwendet werden können.

Die in vitro-Untersuchung dieser Aktivität erfolgte mit der kaudalen Arterie einer Ratte, die aufgehängt war, so daß die Variierung des Innendrucks registriert werden konnte, und die mit Ergotamintartrat, welches in Arterienlumen des Gefäßes mit einer Dosis von 350μ§/πι1 der Perfusionsflüssigkeit eingegeben wird, kontrahiert war.

Der Spasmus wurde mit den zu untersuchenden Verbindungen antagonisiert Die Untersuchung erfolgte anhand der ED50, d. h. einer Konzentration des Produkts in der Perfusionsflüssigkeit, ausgedrückt als μg/πlL die dazu imstande war, die auf diese Weise induzierte Kontraktion um 50% zu vermindern.

In Tabelle V sind einige wenige Beispiele dieser Aktivität angegeben.

Tabelle V

Antispastische Aktivität einiger der erfindungsgemäßen Verbindungen auf die kaudale Arterie einei Ratte, die mit Ergotamintartrat stimuliert ist. Die Werte sind als ED₅₀ ausgedrückt (vgl. Beschreibung)

60

Verbindung

40 ,Mg/ml

CR CR CR 105
37
12

45 Bei einem weiteren Versuch wurde die kaudale Arterie der Ratte elektrisch stimuliert und sodann wurden die Arzneimittel zu dem Bad gegeben. Die so Aktivität wurde als ED₅O ausgedrückt, d. h. als diejenige Menge des Arzneimittels, ausgedrückt in μg/ml, der Perfusionsflüssigkeit, die dazu imstande war, um die Hälfte die Ansprechung auf die elektrische Stimulierung im Vergleich zu den Vergleichsversuchen zu vermindern.

Tabelle VI

Antispastische Aktivität einiger der erfindungsgemäßen Verbindungen auf die elektrisch stimulierte kaudale Arterie der Ratte. Die Werte sind als ED₅₀ ausgedrückt (vgl. Beschreibung)

Verbindung

ED₅

65

CR CR CR 76
19

Charakteristische
Stimulie:

Frequenz

Dauer

Spannung

Eigenschaften

20Hz
20 msec
lOOV

der elektrischen

Die Verwendung einiger der erfindungsgemäßen Verbindungen in verschiedenen unterschiedlichen Formen ist für die Behandlung des Menschen vorgesehen. So sind z. B. orale und parenterale Arzneimittelformen vorgesehen, die aus wenigstens einer der Verbindungen zusammen mit pharmazeutisch annehmbaren Trägern und dergleichen bestehen.

Für die Verbindung CR 605 sind z. B. unter anderem die folgenden pharmazeutischen Formen möglich:

a) Ampullen für die intravenöse Verabreichung mit 5 bis 10 ml, die 50 mg der Verbindung und physiologische Lösung q. b. bzw. auf 5 oder 10 ml enthalten. Dabei können täglich 1 bis 3 Ampullen verwendet werden.

b) Ampullen für die intramuskuläre Verabreichung mit 3 ml, die 30 mg Verbindung und physiologische Lösung q. b. auf 3 ml enthalten. Die empfohlene Dosis ist die gleiche wie diejenige bei den Ampullen für die intravenöse Verabreichung.

c) Tabletten mit 100 mg der Verbindung, welche durch Verpressen des Wirkstoffs mit einem geeigneten Trägerpulver, z. B. Amidoprodukt, Laktose, Talk, Magnesiumstearat und dergleichen, erhalten werden. Die empfohlene Minimumdosis ist 3 Tabletten pro Tag. Erforderlichenfalls kann sie verdoppelt werden.

d) Suppositorien mit 200 mg Wirkstoff, der mit einem pharmazeutisch annehmbaren Träger kombiniert ist. Diese Suppositorien können als eine bis drei pro Tag verabreicht werden.

Ähnliche pharmazeutische Zubereitungsformen mit entsprechenden therapeutischen Indizes variierenden Dosen sind für die weiteren Verbindungen vorgesehen.

Untersuchungen der Toleranz bei Tieren und beim

Menschen sowie der chronischen Toxizität bei Tieren zeigen bei diesen Verbindungen keine negativen

ίο Gesichtspunkte.

Die therapeutische Verwendung der oben beschriebenen pharmazeutischen Formen gibt ausgezeichnete Ergebnisse bei folgenden pathologischen Zuständen: Nieren- und Leberkoliken, Spasmen der Gefäße, der Blase und der Harnleiter, Gastralgie, Cystitis, Colitis und allgemein pathologische spastische und schmerzvolle Syndrome der folgenden Organe und Systeme:

a) Des gastrointestinalen Systems,

b) der Gallengänge und des Gallen-Blasen-Trakts,

c) des Harn- und Blasentrakts,

d) des weiblichen Genitalsystems.

Die Aktivität wird sowohl in akuten Formen bei schmerzvollen Spasmen mit hoher Intensität, bei denen die parenteralen Zubereitungsformen besonders aktiv sind, als auch bei chronischen Formen, bei denen selektiv orale Formen vorgesehen sind, gezeigt.

Interessante Ergebnisse für jede dieser Verbindungen werden auch bei menschlichen Gefäßleiden, z. B. bei verödeten Arteriopathien von skierotischem oder diabetischem Ursprung, bei der Bürger'schen Krankheit, bei der Rayraud'schen Krankheit, bei Acrocyanose, bei nächtlichen Krämpfen, bei Parestesien und Claudicatio intermittens, beschrieben.

Claims

Patentansprüche: l.Tyrosinamide der allgemeinen Formel

worin
R

10. Antispastisches Arzneimittel, dadurch gekennzeichnet, daß es wenigstens eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 9 enthält

11. Vasodilatatorisches Arzneimittel, dadurch gekennzeichnet, daß es wenigstens eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 9 enthält

-CH₂-CH-CO-R³ NH CO R²

Die Erfindung betrifft Tyrosinamide der allgemeinen Formel