ES2332064T3 - Metodo para estimular la flora intestinal. - Google Patents

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Gunther Boehm
Bernd Stahl
Jan Knol
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Nutricia NV
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Abstract

Uso de a) por lo menos dos microorganismos diferentes; o b) por lo menos un microorganismo y por lo menos un oligosacárido indigerible; o c) por lo menos dos especies de Bifidobacterias diferentes, subespecies o cepas para la fabricación de una composición para la administración entérica a un neonato nacido por cesárea.

Description

Método para estimular la flora intestinal.
Campo de la invención
La presente invención se relaciona con métodos para alimentación y con composiciones que van a ser administradas a neonatos nacidos por cesárea.
Antecedente de la invención
Cuando se formula nutrición para neonatos, se utiliza leche materna como el estándar dorado. Los ingredientes en particular de origen no humano se combinan normalmente para imitar las características composicionales y los efectos fisiológicos de la leche materna humana.
Un aspecto importante de la leche humana es que esta proporciona energía y fluidos al neonato. A pesar de proporcionar energía, la leche materna humana contiene muchos componentes adicionales, que ayudan a mantener la salud del neonato. La leche materna humana por ejemplo contiene fibra prebiótica, que estimula el desarrollo de una flora intestinal saludable. Una flora intestinal saludable tiene numerosos efectos positivos en el neonato, tal como una incidencia reducida de infecciones y un sistema inmune fortalecido.
Varias formulas de leche para neonatos disponibles comercialmente contienen ingredientes que ayudan a estimular el desarrollo de la flora intestinal. Las fórmulas para neonatos por ejemplo pueden contener fibras prebióticas u organismos prebióticos vivos. Las fibras prebióticas pasan normalmente sin digerir a través del tubo gastrointestinal superior y estimulan selectivamente el crecimiento de bacterias benéficas en el colon. Las bacterias probióticas vivas incrementan los conteos de bacterias específicas en el intestino.
La EP 1105002 describe una mezcla de carbohidrato prebiótica que comprende uno o más oligosacáridos solubles y uno o más polisacáridos solubles, con por lo menos 80% en peso de cada prebiótico.
La WO 2005039319 describe una preparación que comprende Bifidobacterium breve y una mezcla de carbohidratos no digeribles para neonatos parcialmente alimentados con leche materna o no alimentados con leche materna así como también el uso de los mismos para el tratamiento o prevención de trastornos inmunes en neonatos alimentados parcialmente con leche materna o no alimentados con leche materna.
Resumen de la invención
Las formulas para neonatos se diseñan normalmente para imitar el desarrollo de una flora intestinal en un neonato que recibe leche materna humana, con la implicación que todos los neonatos reaccionan de forma similar a la leche materna humana y a la fórmula para neonatos. Sin embargo, los actuales inventores han encontrado que una sub-población de neonatos, a saber aquellos neonatos nacidos por cesárea, reaccionará de forma diferente debido a que su flora intestinal en el nacimiento es completamente diferente de la flora intestinal de neonatos nacidos por vía de la ruta vaginal. En particular, el perfil y contenido de las especies Bifidobacterium de neonatos nacidos por cesárea es diferente del perfil y contenido intestinal de las especies Bifidobacterium de neonatos nacidos por vía de la ruta vaginal.
Los actuales inventores han analizado la flora intestinal de recién nacidos después del parto por cesárea y recién nacidos después del parto vaginal. Se encontró sorprendentemente que existen grandes diferencias entre los dos grupos en la composición de la flora intestinal. Particularmente los neonatos nacidos por vía de la ruta vaginal contienen por lo menos aproximadamente tres especies diferentes de Bifidobacterium, mientras que los neonatos nacidos por cesárea carecen de las especies Bifidobacterium más importantes.
También se encontró que los neonatos nacidos por cesárea carecen particularmente de Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium catenulatum, Bifidobacterium adolescentis y Bifidobacterium longum. Estas especies están presentes en la flora de la mayoría de los neonatos nacidos por vía de la ruta vaginal.
Debido a que la flora intestinal juega un papel crucial en el desarrollo del neonato, en particular la estimulación del sistema inmune y resistencia contra las infecciones, es de suma importancia para estimular el desarrollo saludable de la flora intestinal de neonatos nacidos por cesárea.
Adicionalmente los recién nacidos que nacen por cesárea carecen de una biodiversidad en su flora intestinal. Solo se detectan una o dos especies diferentes de Bifidobacterias en neonatos nacidos por vía de la sección c, aunque la flora intestinal de recién nacidos que nacen por vía de la ruta vaginal normalmente contienen varias especies diferentes Bifidobacterias. Los actuales inventores consideran que estas observaciones son indicadoras de una carencia general de una variedad de especies en el tubo intestinal de neonatos nacidos por vía de la sección c. La biodiversidad es de gran importancia para el alcance de los efectos fisiológicos deseados y estimula óptimamente la salud del neonato.
El Natren® produce el producto probiótico Life Start® que se diseña específicamente para neonatos y es adecuado para neonatos nacidos por cesárea. Life Start® se hace con Bifidobacterium infantis. Debido a que el producto Life Start® contiene solo una única especie de Bifidobacterias, los beneficios para el neonato serán muy limitados.
Particularmente también es inesperada la observación que las mejoras en la salud del neonato se puedan lograr aún cuando los neonatos se alimenten con leche materna. En el caso en donde los neonatos nacen por cesárea, la leche materna es (en la mayoría de los casos) la mejor nutrición para el neonato. Sin embargo, la leche materna tampoco resulta instantáneamente en una flora similar como se obtiene por el neonato nacido por vía de parto vaginal. El presente método por lo tanto también se utiliza ventajosamente cuando el neonato recibe leche materna humana.
Por lo tanto, la presente invención particularmente ayuda en: a) incrementar la ocurrencia de especies particulares en la flora intestinal de neonatos nacidos por cesárea; b) incrementar la biodiversidad de microorganismos en la flora intestinal; y/o c) estimular el crecimiento de microorganismos benéficos, particularmente Bifidobacterias.
Por lo tanto en un aspecto la presente invención se relaciona con método para estimular el desarrollo saludable de la flora intestinal de neonatos nacidos por cesárea al administrar una composición que contiene:
- por lo menos dos microorganismos diferentes;
- por lo menos un microorganismo y por lo menos un oligosacárido indigerible; o
- por lo menos dos especies de Bifidobacterias diferentes, subespecies o cepas.
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El microorganismo incrementará la biodiversidad de flora en neonatos, aunque los oligosacáridos indigeribles estimulan el desarrollo y crecimiento inherente y administra microorganismos.
La composición a ser administrada en el presente método contiene preferiblemente múltiples especies bacterianas diferentes, preferiblemente múltiples especies Bifidobacteria. Esto resulta en la estimulación óptima de la flora intestinal de los neonatos nacidos por cesárea.
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Descripción detallada de las modalidades preferidas
La presente invención se relaciona con un método para la alimentación de neonatos, dicho método comprende administrar entéricamente una composición a un neonato nacido por cesárea, dicha composición comprende: a) por lo menos dos microorganismos diferentes; o b) por lo menos un microorganismo y por lo menos un oligosacárido indigerible; o c) por lo menos dos especies de Bifidobacterias diferentes, subespecies o cepas.
En un aspecto adicional la presente invención se relaciona con un método para estimular la salud de un neonato nacido por cesárea, que comprende administrar al neonato y dentro de las 100 horas después del nacimiento una composición que contiene microorganismos y/o oligosacáridos indigeribles.
En todavía otro aspecto adicional la presente invención proporciona un método para la fabricación de nutrición infantil adecuada para el neonatal nacido por cesárea que comprende mezclar: A) leche materna humana; y B) una composición que comprende: i) por lo menos dos microorganismos diferentes; o ii) por lo menos un microorganismo y por lo menos un oligosacárido indigerible; o iii) por lo menos dos especies de Bifidobacterias diferentes, subespecies o cepas. La presente invención también proporciona una composición nutricional que comprende entre 5 y 25% en proteína; entre 25 y 60% en grasa; entre 30 y 70% en carbohidrato; por lo menos dos especies diferentes de Bifidobacteria y por lo menos una especie de Lactobacillus.
La presente invención también proporciona un recipiente con un volumen líquido entre 0.5 y 50 ml que contiene una composición a ser administrada a un neonato que comprende por lo menos dos microorganismos diferentes; o por lo menos un microorganismo y por lo menos un oligosacárido indigerible; o por lo menos dos especies de Bifidobacterias diferentes, subespecies o cepas, en donde la composición comprende por lo menos una especie seleccionada del género Bifidobacteria.
En un aspecto adicional la presente invención se relaciona con un método para estimular el desarrollo de una flora intestinal saludable en un neonato que comprende la etapa de: A) mezclar I) un líquido nutricionalmente o farmacéuticamente aceptable; y II) una composición seca, en donde la composición seca II comprende por lo menos dos microorganismos diferentes; o por lo menos un microorganismo y por lo menos un oligosacárido indigerible; o por lo menos dos especies de Bifidobacterias diferentes, subespecies o cepas; y B) administrar la composición obtenida en la etapa a) a un neonato nacido por cesárea.
Las composiciones utilizadas en la presente invención son composiciones preferiblemente nutricionales y/o farmacéuticas y adecuadas para la administración a los neonatos.
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Cesárea
La presente invención se relaciona con la administración entérica de una composición que contiene un microorganismo a neonatos nacidos por cesárea. Una cesárea (sección c) es un procedimiento quirúrgico en donde un neonato nace a través de una incisión hecha en la pared abdominal de la madre, y luego a través de la pared del útero. Una cesárea se desarrolla usualmente cuando esta es más segura para la madre o el neonato que un parto vaginal. Otras veces, una mujer puede seleccionar tener una cesárea a diferencia de un parto vaginal.
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Diversidad
La actual composición contiene por lo menos dos microorganismos diferentes; o por lo menos un organismo microorganismo y por lo menos un oligosacárido indigerible; o por lo menos dos especies de Bifidobacterias diferentes, subespecies o cepas. Los microorganismos son preferiblemente bacterias y/o levaduras. Preferiblemente los microorganismos utilizados en la presente invención son probióticos, es decir cuando se aplican al hombre o animal, estos afectan benéficamente al anfitrión al mejorar las propiedades de la microflora endógena. Las combinaciones mencionadas anteriormente ayudan comúnmente a incrementar la diversidad y/o la cantidad de microorganismos en el intestino del neonato nacido por cesárea. Esto afecta benéficamente al neonato, proporcionando numerosos beneficios a la salud.
El término "microorganismos diferentes" como se utiliza para la presente invención se refiere a microorganismos que pertenecen a diferentes géneros y/o especies. Preferiblemente los microorganismos diferentes son diferentes bacterias. Preferiblemente, los microorganismos diferentes son diferentes especies. Por ejemplo y preferiblemente, la actual composición comprende o consiste de Bifidobacterium breve (B. breve) y Bifidobacterium catenulatum (B. catenulatum). B. breve y B. catenulatum se consideran aquí como dos diferentes especies bacterianas. Las especies bacterianas no se consideran diferentes si estas son subespecies diferentes. Por ejemplo, la subespecie Lactobacillus delbrueckii delbrueckii y subespecie Lactobacillus delbrueckii bulgaricus no se consideran dos especies diferentes. La actual composición contiene por lo menos dos microorganismos diferentes, preferiblemente por lo menos dos especies bacterianas diferentes. Preferiblemente la actual composición contiene por lo menos tres especies diferentes, más preferiblemente por lo menos cuatro especies diferentes. Preferiblemente el microorganismo o la especie bacteriana utilizados son probióticos.
En una realización la actual composición contiene por lo menos dos especies de Bifidobacterias diferentes, subespecies o cepas. La actual composición comprende preferiblemente por lo menos una, más preferiblemente por lo menos dos, aún más preferiblemente por lo menos tres, más preferiblemente por lo menos cuatro diferentes cepas Bifidobacterium. La actual composición comprende preferiblemente por lo menos una, más preferiblemente por lo menos dos, aún más preferiblemente por lo menos tres, más preferiblemente por lo menos cuatro diferentes subespecies Bifidobacterium. Por ejemplo las subespecies Bifidobacterium animalis animalis y subespecies Bifidobactrium lactis son diferentes subespecies. El B. breve M16V en B. breve R0070 son cepas diferentes.
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Microorganismos
Preferiblemente la actual composición contiene por lo menos un microorganismo seleccionado del grupo que consiste de bacterias de ácido láctico, bacilos y levaduras, preferiblemente por lo menos una bacteria de ácido láctico seleccionado del grupo que consiste de Carnobacterium, Enterococcus, Lactobacillus, Lactococcus, Leuconostoc, Oenococcus, Pediococcus, Streptococcus, Tetragenococcus, Vagococcus y Weissella y Bifidobacteria. La actual composición preferiblemente contiene por lo menos dos, más preferiblemente por lo menos tres, más preferiblemente por lo menos cuatro microorganismos diferentes.
Preferiblemente la actual composición contiene por lo menos una especie seleccionada del género Bifidobacteria, más preferiblemente por lo menos dos, aún más preferiblemente por lo menos tres, más preferiblemente por lo menos cuatro, más preferiblemente por lo menos cinco especies del género de Bifidobacterias. Las Bifidobacterias son bacterias Gram-positivas, anaeróbicas, con forma de barra. Las actuales especies Bifidobacteria tienen preferiblemente por lo menos 95% de identidad de la secuencia de rARN 16 S cuando se compara la cepa tipo de las especies Bifidobacteria respectivas, más preferiblemente por lo menos 97% de identidad identificada como se define en los manuales sobre esta matera por ejemplo Sambrook, J., Fritsch, E.F., y Maniatis, T. (1989), Molecular Cloning, A Laboratory Manual, 2nd ed., Cold Spring Harbor (N.Y.) Laboratory Press. Las Bifodobacterias utilizadas preferiblemente también se describen por Scardovi, V. Genus Bifidobacterium. p.1418-p.1434. In: Bergey's manual of systematic Bacteriology. Vol. 2. Sneath, P.H.A., N.S. Mair, M.E. Sharpe y J.G. Holt (ed.). Baltimore: Williams & Wilkins. 1986. 635 p.
La actual composición comprende preferiblemente por lo menos una, más preferiblemente por lo menos dos, aún más preferiblemente por lo menos tres, más preferiblemente por lo menos cuatro especies Bifidobacterium preferiblemente seleccionadas del grupo que consiste de Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium catenulatum, Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium thermophilum, Bifidobacterium gallicum, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium angulatum, Bifidobacterium pseudocatenulatum, Bifidobacterium thermacidophilum y Bifidobacterium longum. Más preferiblemente la actual composición, comprende preferiblemente por lo menos una, más preferiblemente por lo menos dos, aún más preferiblemente por lo menos tres, más preferiblemente por lo menos cuatro especies Bifidobacterium preferiblemente seleccionadas del grupo que consiste de Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium catenulatum, Bifidobacterium adolescentis y Bifidobacterium longum. Más preferiblemente la actual composición contiene Bifidobacterium breve y/o Bifidobacterium catenulatum.
En una realización preferida adicional, la actual composición comprende por lo menos una, más preferiblemente por lo menos dos, aún más preferiblemente por lo menos tres, más preferiblemente por lo menos cuatro subespecies Bifidobacterium. En todavía una realización preferida adicional, la actual composición comprende por lo menos una, más preferiblemente por lo menos dos, aún más preferiblemente por lo menos tres, más preferiblemente por lo menos cuatro cepas Bifidobacterium.
En una realización preferida adicional, la actual composición contiene una bacteria de ácido láctico, preferiblemente por lo menos una bacteria seleccionada del grupo que consiste de Lactobacilli, Lactococci y Streptococci. Más preferiblemente la actual composición contiene por lo menos una bacteria seleccionada del grupo que consiste de Lactobacillus plantarum, Lactobacillus reuteri, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus casei, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus lactis, Streptococcus thermophilus y Lactobacillus paracasei. La biodiversidad incrementada adicional tundra un efecto estimulador en la salud del recién nacido.
La actual composición preferiblemente contiene entre 10^{1} y 10^{13} de microorganismos de unidades de que forman colonia (cfu) por gramo de peso seco de la actual composición, preferiblemente entre 10^{2} y 10^{12}, más preferiblemente entre 10^{3} y 10^{10}. Preferiblemente, la actual composición contiene entre 10^{1} y 10^{13} Bifidobacterias de unidades que forman colonia (cfu) por g de peso seco de la actual composición, más preferiblemente entre 10^{2} y 10^{12}, más preferiblemente entre 10^{3} y 10^{12}.
El actual método comprende preferiblemente la administración de una porción que contiene entre 10^{1} y 10^{13} cfu microorganismos más preferiblemente entre 10^{2} y 10^{11}, más preferiblemente entre 10^{3} y 10^{10}. El actual método comprende preferiblemente la administración de una porción que contiene entre 10^{1} y 10^{13} cfu Bifidobacteria, más preferiblemente entre 10^{2} y 10^{12}, más preferiblemente entre 10^{3} y 10^{11}.
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Oligosacáridos
El término "oligosacáridos indigeribles" como se utiliza en la presente invención se refiere a oligosacáridos/carbo-
hidratos que no o solo se digieren parcialmente en el intestino mediante la acción de ácidos o enzimas digestivas presentes en el tubo digestivo superior humano (intestino delgado y estómago) pero que se fermentan mediante la flora intestinal humana. Preferiblemente el presente oligosacárido indigerible tiene un grado de polimerización (DP) de 2 a 100, preferiblemente de DP 2 a 50. Preferiblemente el actual oligosacárido indigerible es una fibra prebiótica. El término "fibra prebiótica" se refiere a fibras no digestibles que afecta benéficamente al anfitrión al estimular selectivamente el crecimiento y/o actividad de una o un número limitado de especies bacterianas en el colon. Preferiblemente el presente oligosacárido indigerible es soluble. El término "soluble" cuando se utiliza aquí, cuando tiene referencia a un polisacárido, fibra u oligosacárido, significa que la sustancia es por lo menos 50% soluble de acuerdo con el método descrito por L. Prosky et al., J. Assoc. Off. Anal. Chem. 71,1017-1023 (1988).
Preferiblemente la actual composición contiene por lo menos un oligosacárido seleccionado del grupo que consiste de galactooligosacáridos, dextrinas indigeribles, cilooligosacáridos, arabinooligosacáridos, glucooligosacáridos, mannooligo-sacáridos, isomalto-oligosacárido y fructopolisacárido.
El término "fructopolisacárido" cuando se utiliza aquí se refiere a un carbohidrato de polisacárido que comprende una cadena de por lo menos 3 unidades de fructosa ligadas b, con un DP entre 3 y 300, preferiblemente entre 20 y 150. Preferiblemente se utiliza inulina. La inulina está disponible bajo el nombre comercial "Raftilin HP®", (Orafti): El DP promedio del fructopolisacárido es preferiblemente por lo menos 15, más preferiblemente por lo menos 20 o más, hasta 300. En la inulina las unidades de fructosa se ligan con un ligado b(2\rightarrow1).
Las polidextrinas indigeribles se refieren a (malto)dextrinas resistentes a la digestión o polidextrosa resistente a la digestión que tienen un DP de 10 a 50, preferiblemente entre 10 y 20. Las polidextrinas indigeribles comprenden uniones glucosídicas a(1\rightarrow4), a(1\rightarrow6) y ligados 1\rightarrow2 y 1\rightarrow3 de polidextrinas indigeribles por ejemplo que están bajo el nombre comercial "Fibersol 2®" de Matsutami Inductries o Litesse® de Danisco.
Los actuales inventores encontraron que los galactooligosacáridos se pueden utilizar ventajosamente en la actual composición, debido a que estos oligosacáridos son particularmente efectivos en estimular el crecimiento de Bifidobacterium. Por lo tanto, en una realización preferida la actual composición contiene galactooligosacáridos. El término "galactooligosacárido" como se utiliza aquí se refiere a un sacárido indigerible, en donde por lo menos 30% de las unidades de sacárido son unidades galactosa, preferiblemente por lo menos 50%, más preferiblemente por lo menos 60%. Preferiblemente los sacáridos del galactooligosacárido son ligados b, como es el caso de la leche humana.
Preferiblemente la actual composición contiene un galactooligosacárido seleccionado del grupo que consiste de transgalactooligosacáridos, lacto-N-tetraosa (LNT) y lacto-N-neotetraosa (neo-LNT). En una realización particularmente preferida el actual método comprende la administración de transgalactooligosacárido ([galactosa]n-glucosa; en donde n es un entero entre 1 y 60, es decir 2, 3, 4, 5, 6, ...., 59, 60; preferiblemente n se selecciona de 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, o 10). Los transgalactooligosacáridos (TOS) son por ejemplo vendidos bajo el nombre comercial Vivinal^{TM} (Borculo Domo Ingredients, Netherlands). Preferiblemente los sacáridos de los transgalactooligosacáridos son ligados a \beta.
La actual composición preferiblemente contiene 0.5 a 75 gramos de los oligosacáridos solubles indigeribles por 100 gramos de peso seco, preferiblemente entre 0.5 y 50 gramos. La actual composición comprende preferiblemente 0.1 a 95 gramos de los galactooligosacáridos por 100 gramos de peso seco, preferiblemente entre 0.1 y 50 gramos.
El actual método comprende preferiblemente la administración de una porción que contiene entre 0.05 y 25 gramos de oligosacárido indigerible, preferiblemente entre 0.1 y 5 gramos. El actual método comprende preferiblemente la administración de una porción que contiene entre 0.05 y 25 gramos de galactooligosacáridos, preferiblemente entre 0.1 y 5 gramos de galactooligosacáridos.
Los actuales inventores también han encontrado que una mezcla de una cadena larga de oligosacáridos indigeribles y cadena corta de oligosacáridos indigeribles estimulan sinérgicamente el crecimiento de una flora intestinal saludable, particularmente Bifidobacteria. Por lo tanto la actual composición preferiblemente contiene por lo menos dos oligosacáridos con diferentes grados de polimerización promedio (DP). Preferiblemente las relaciones en peso: a. (oligosacáridos indigeribles con DP 2 a 5): (oligosacáridos indigeribles con DP 6, 7, 8, y/o 9) > 1; y b. (oligosacáridos indigeribles con DP 10 a 60): (oligosacáridos indigeribles con DP 6, 7, 8, y/o 9) > 1.
Preferiblemente las relaciones en peso están por encima de 2, aún más preferiblemente por encima de 5.
Para mejoramiento adicional, el oligosacárido preferiblemente tiene un contenido relativamente alto de oligosacáridos de cadena corta, cuando estos estimulan fuertemente el crecimiento de Bifidobacterias. Por lo tanto, preferiblemente por lo menos 10% en peso de los oligosacáridos en la actual composición tiene un DP de 2 a 5 (es decir 2, 3, 4, y/o 5) y por lo menos 5% en peso tiene un DP de 10 a 60. Preferiblemente por lo menos 50% en peso, más preferiblemente por lo menos 75% en peso de los oligosacáridos tienen un DP de 2 a 9 (es decir 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, y/o 9).
Para mejorar la biodiversidad y estimular el crecimiento de múltiples organismos intestinales, la actual composición comprende preferiblemente dos oligosacáridos con una estructura diferente. La actual composición comprende por lo menos dos diferentes oligosacáridos, en donde los oligosacáridos tienen una homología en unidades de sacárido entre aproximadamente 90%, preferiblemente por debajo de 50%, aún más preferiblemente por debajo de 25%, aún más preferiblemente por debajo de 5%. El término "homología" como se utiliza en la presente invención es la acumulación del porcentaje de la misma unidad de sacárido en los diferentes oligosacáridos. Por ejemplo, el oligosacárido 1 (OL1) tiene la estructura fruc-fruct-glu-gal, y así comprende 50% fruc, 25% gal y 25% glu. El oligosacárido 2 (OL2) tiene la estructura fruc-fruc-glu, y así comprende 66% fruc, 33% glu. Los diferentes oligosacáridos así tiene una homología de 75% (50% fruc + 25% glu).
Preferiblemente la actual composición contiene galactooligosacáridos y fructopolisacáridos.
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Aplicación
La actual composición se administra preferiblemente entéricamente, más preferiblemente oralmente. La actual composición por lo tanto es preferiblemente un líquido. El término "entérico" como se utiliza aquí también abarca una administración rectal o anal.
Cuando los neonatos reciben formula de leche infantil, la actual composición con microorganismos y opcionalmente que incluye por lo menos un oligosacárido indigerible, preferiblemente se incluye en la fórmula nutricional. El probiótico y/o prebiótico se puede agregar separadamente a la fórmula neonatal. Cuando los recién nacidos reciben nutrición por vía de un tubo, los microorganismos se pueden incluir adecuadamente en la nutrición administrada por vía del tubo. La diversidad estimulante es de gran importancia, así la presente invención también proporciona una composición nutricional que comprende entre 5 y 25% en proteína; entre 25 y 60% en grasa; entre 30 y 70% en carbohidrato; por lo menos dos especies diferentes de Bifidobacterium y por lo menos una especie de Lactobacillus.
Cuando los neonatos reciben leche materna humana, la actual composición se puede mezclar adecuadamente con leche materna humana. La presente invención posteriormente también proporciona un método para la fabricación de nutrición infantil adecuada para el nacimiento neonatal nacido por cesárea que comprende mezclar: A) leche materna humana; y B) una composición que comprende: (i) por lo menos dos microorganismos diferentes; o (ii) por lo menos un microorganismo y por lo menos un oligosacárido indigerible; o (iii) por lo menos dos especies de Bifidobacterias diferentes, subespecies o cepas. Las características preferidas de la composición B) se proporcionaron aquí anteriormente.
En una realización preferida adicional la actual composición se administra al neonato en un volumen muy pequeño, por ejemplo al "inocular" el neonato. Preferiblemente, la actual composición se administra al neonato con una jeringa, pipeta o tubo, preferiblemente directamente después del nacimiento. En una realización preferida adicional, la actual composición se administra rectalmente o analmente al neonato nacido por cesárea, preferiblemente en la forma de un supositorio, píldora o comprimido. Por lo tanto, la presente invención también proporciona un supositorio, píldora o comprimido adecuado para la administración rectal a un neonato con una edad menor de un año, en donde dicho supositorio, píldora o comprimido contiene microorganismos y/o oligosacáridos indigeribles, preferiblemente la actual composición como se describió aquí anteriormente.
En una realización preferida adicional la presente invención se relaciona con un método que estimula la flora intestinal de un neonato que comprende administrar rectalmente a un neonato con una edad menor de 3 años una composición que comprende el microorganismo y/o oligosacárido indigerible. Preferiblemente el neonato tiene una edad menor de 1 año, más preferiblemente por debajo de 2 semanas. Preferiblemente el neonato nace por cesárea. Preferiblemente esta composición para administración rectal n contiene la composición descrita anteriormente.
Este procedimiento tiene la ventaja que no interfiere con la práctica de alimentación con leche materna normal y tiene alta semejanza con la inoculación vaginal, que ocurre durante el nacimiento. La presente invención también proporciona un método para estimular la salud de un neonato nacido por cesárea, que comprende administrar al neonato y dentro de 100 horas después del nacimiento, preferiblemente dentro de 72 horas después del nacimiento, más preferiblemente dentro de 48 horas después del nacimiento, una composición que contiene microorganismos y/o oligosacáridos indigeribles.
La composición es preferiblemente adecuada para la administración directamente después del nacimiento. Por lo tanto, en una realización preferida adicional, la presente invención proporciona un recipiente que comprende una composición líquida con un volumen entre 0.5 y 50 ml, que contiene la actual composición. El líquido con el actual microorganismo, combinado opcionalmente con oligosacáridos indigeribles, se puede utilizar adecuadamente en el actual método. Preferiblemente el líquido tiene un volumen entre 0.5 y 25 ml. Este volumen es preferiblemente pequeño, debido a que este de otra forma podría interferir con el apetito y comportamientos de bebida del neonato.
De forma similar y abarcado por esta invención hay un contenedor con una composición seca reconstituible que contiene la actual composición, en donde el recipiente tiene un volumen de entre 0.5 y 50 ml. Este recipiente preferiblemente se acompaña con instrucciones para reconstituir el polvo en un volumen pequeño de líquido, por ejemplo agua.
La presente invención así también se relaciona con un método para estimular el desarrollo de una flora intestinal saludable en un neonato que comprende la etapa de A: mezclar I) en particular un líquido nutricionalmente o farmacéuticamente aceptable; y II) una composición seca, en donde la composición seca II comprende por lo menos dos microorganismos diferentes; o por lo menos un microorganismo y por lo menos un oligosacárido indigerible; o por lo menos dos especies de Bifidobacterias diferentes, subespecies o cepas; y la etapa B) administrar la composición obtenida en la etapa a) a un neonato nacido por cesárea.
La actual composición se administra preferiblemente al neonato en el primer año de vida, preferiblemente dentro de dos semanas después del nacimiento, aún más preferiblemente dentro de una semana después del nacimiento, más preferiblemente dentro de 48 horas después del nacimiento.
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Ejemplos Ejemplo 1 Caracterización molecular de microbiota intestinal en neonatos nacidos por parto vaginal vs. nacidos por cesárea
En el actual estudio la influencia del modo de nacimiento (nacimiento por cesárea versus parto vaginal) en la composición microbiana intestinal en el tercer día de vida al utilizar Electrofóresis de Gel de Gradiente Desnaturalizante PCR (DGGE) y Electrofóresis de Gel de Gradiente de Temperatura PCR (TGGE). Se han utilizado análisis DGGE y TGGE, junto con las amplificaciones específicas para diez Especies Bifidobacterium.
Se han involucrado en el estudio después de consentimiento informado por escrito que se ha obtenido de los padres de veintitrés recién nacidos después del parto por cesárea y parto vaginal. Se obtienen muestras fecales al tercer día del nacimiento. Se extrae ADN microbiano y se analiza de acuerdo con Favier et al, Environ Microbiol 2002; 68:219-226 y Satokari et al, Appl Environ Microbiol 2001; 67:504-513; Satorkari et al System Appl Microbiol 2003; 26:572-584.
Los resultados de Bifidobacteria detectada en las muestras fecales de los recién nacidos después del parto por cesárea obtenidos en el tercer día de vida se dan en la Tabla 1. La Tabla 2 da la Bifidobacteria detectada en las muestra fecales de los recién nacidos después del parto vaginal obtenidas al tercer día de vida.
Se puede ver que la flora microbiana del neonato nacido por cesárea muestra fuertes diferencias con un neonato nacido por vía de la ruta vaginal. El reconocimiento de estas diferencias en el nivel de las especies permite a los actuales inventores diseñar las actuales composiciones y métodos.
Estos resultados son indicadores del uso ventajoso de la composición y método de acuerdo con la presente invención, por ejemplo un método para alimentación de bebés nacidos por cesárea, que estimula la flora intestinal saludable y posteriormente que previene la infección y estimula un sistema inmune saludable.
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1
2
Ejemplo 2 Fermentación In vitro de Galacto-oligosacárido mediante heces de neonato
Objetivo: Se evalúa la capacidad de los galactooligosacáridos (GOS) y una combinación de GOS e inulina para favorecer la actividad de bacterias en ácido láctico utilizando un sistema de fermentación en tanda semidinámico in vitro que utiliza heces de los neonatos. La cantidad de lactato se determina, ya que este es el producto de fermentación de bacterias en ácido láctico que incluyen Bifidobacteria.
Método: Se obtienen heces frescas de bebés saludablemente alimentados con biberón. El material fresco de los bebés que varía de 1 a 4 meses de edad se agrupa y se pone en un medio de conservación (amortiguado con peptona 20.0 g/l, L-Cisteína-HCl 0.5 g/l, tioglicolato de sodio 0.5 g/l, comprimido de resazurina 1/1, pH 6.7) dentro de 1 h y se almacena a 4ºC durante más de 2 h antes que se inicie el experimento de fermentación.
La solución conservada de heces se centrifuga a 13,000 rpm durante 15 min. Se remueve el sobrenadante y las heces se mezclan con medio McBain & MacFarlane (amortiguado con agua de peptona 3.0 g/l, extracto de levadura 2.5 g/l, mucina (bordes de brocha) 0.8 g/l, Triptona 3.0 g/l, L-Cisteína-HCl 0.4 g/l, sales biliares 0.05 g/l, K_{2}HPO_{4}.3H_{2}O 2.6 g/l, NaHCO_{3} 0.2 g/l, NaCl 4.5 g/l, MgSO_{4}.7H_{2}0O 0.5 g/l, CaCl_{2} 0.228 g/l, FeSO_{4} 0.005 g/l), que es representativo para el ambiente intestinal, en una relación en peso de 1:5.
En t = 0 se combina 15 ml de la suspensión fecal con 500 mg de prebiótico en un botella y se mezcla vigorosamente. Se agrega como un control no prebiótico. Se agregan prebióticos como sigue:
Medio: 1 2 3
GOS: 0 500 450
Inulina: 0 0 50 
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Como una fuente de GOS, se utiliza Vivinal GOS (Borculo Domo). Como una fuente de inulina se utiliza RaftilinHP (Orafti).
Se transfiere 15 ml en un tubo de diálisis en un botella de 250 ml llena con 250 ml de medio amortiguado (K_{2}HPO_{4}. 3H_{2}O 2.6 g/l, NaHCO_{3} 0.2 g/l, NaCl 4.5 g/l, MgSO_{4}.7H_{2}O 0.5 g/l, CaCl_{2} 0.228 g/l, FeSO_{4}.7H_{2}O 0.005 g/l, pH 6.3(?)). La botella se cierra y se incuba a 37ºC. Se toman muestras de 1 ml del tubo de diálisis y del amortiguador de diálisis con una jeringa hipodérmica después de 3 h y se almacena a -18ºC. Se desarrollan experimentos en duplicado. Se determina el lactato enzimáticamente, utilizando un equipo de detección de ácido L-lactato con D- y L-lactato-deshidrogenasa (Boehringer Mannheim, Mannheim, Alemania).
Resultados y Conclusiones: Los resultados se expresan como cantidades de lactato formado por g de prebiótico agregado. Los resultados muestran que la cantidad de lactato se incrementa cuando una microflora de neonato fermenta GOS o una mezcla de GOS e inulina. Cuando no se agrega prebiótico, no se observa producción de lactato. Con GOS solo se produce 0.1801 mmol/g de lactato prebiótico. Cuando se agrega una combinación de GOS e inulina al lactato producido es 0.2119 mmol por g de prebiótico.
Los resultados indican que los oligosacáridos estimulan el crecimiento y/o actividad de bacterias en ácido láctico en neonatos, incluyendo Bifidobacteria. Estos resultados son indicadores del uso ventajoso de los oligosacáridos indigeribles, particularmente galactooligosacáridos, en la actual composición y método de acuerdo con la presente invención, es decir en un método para la alimentación de bebés nacidos por cesárea.
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Ejemplo 3 Método para la alimentación de bebés nacidos por cesárea
Dentro de los dos días después que el neonato nace por cesárea, se administra una composición nutricional que contiene 100 ml de formula lista para alimentación: 1.6 gramos de proteína, 3.6 gramos de grasa, 6.4 gramos de carbohidratos digeribles (principalmente lactosa), 0.8 gramos de carbohidratos no digeribles de los cuales 0.60 gramos de transgalactooligosacáridos, 0.07 gramos de inulina, 1 x 10^{9} cfu Bifidobacterium breve, 1 x 10^{9} cfu Bifidobacterium catenulatum, 1 x 10^{9} cfu Bifidobacterium longum y 1 x 10^{9} cfu Lactobacillus paracasei.
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Ejemplo 4 Composición empacada
La composición empacada en donde el empaque indica que el producto es particularmente adecuado para la alimentación oral de neonatos nacidos por cesárea, dicha composición comprende Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium catenulatum, Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium longum, galactooligosacáridos y inulina.
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Ejemplo 5 Composición empacada
La composición como en el Ejemplo 4, en donde la composición tiene un volumen de 10 ml y se empaca en una jeringa.
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Ejemplo 6 Administración rectal
El P11 adecuado para administración rectal a un neonato dentro de dos semanas después del nacimiento, comprende galactooligosacáridos y Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium bifidum.

Claims (15)

1. Uso de
a)
por lo menos dos microorganismos diferentes; o
b)
por lo menos un microorganismo y por lo menos un oligosacárido indigerible; o
c)
por lo menos dos especies de Bifidobacterias diferentes, subespecies o cepas para la fabricación de una composición para la administración entérica a un neonato nacido por cesárea.
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2. Uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la composición contiene por lo menos una especie de Bifidobacteria.
3. Uso de acuerdo con la reivindicación 1 o 2, en donde la composición comprende por lo menos una Bifidobacterium seleccionada del grupo que consiste de Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium catenulatum. Bifidobacferium adolescentis Bifidobacterium thermophilum, Bifidobacterium gallicum, Bifidobacterium animalis, Bifidohacterium angulatum, Bifidobacterium pseudocatenulatum, Bifidobacterium thermacidophilum y Bifidobacterium longum.
4. Uso de acuerdo con la reivindicación 3, en donde la composición comprende por lo menos dos especies Bifidobacterium seleccionadas del grupo como se menciona en la reivindicación 3.
5. Uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde la composición comprende por lo menos un microorganismo y por lo menos un oligosacárido indigerible.
6. Uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes en donde la composición comprende un oligosacárido indigerible seleccionado del grupo que consiste de galactooligosacáridos, dextrinas indigeribles, cilooligosacáridos, arabinooligosacáridos, glucooligosacáridos, mannooligo-sacáridos, isomalto-oligosacárido y fructopolisacáridos.
7. Uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes en donde la composición comprende entre 5 y 25% en proteína, entre 25 y 60% en grasa y entre 30 y 70% en carbohidrato.
8. Uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde la composición se administra a un neonato que recibe leche materna humana.
9. Uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde la composición se administra al neonato dentro de una semana después del nacimiento.
10. Composición nutricional que comprende entre 5 y 25% en proteína; entre 25 y 60% en grasa; entre 30 y 70% en carbohidrato; por lo menos dos especies diferentes de Bifidobacterium y por lo menos una especie de Lactobacillus.
11. Método para la fabricación de una composición para nutrición infantil adecuada para nacimiento neonatal por cesárea que comprende mezclar:
a.
leche materna humana; y
b.
una composición que comprende:
i.
por lo menos dos microorganismos diferentes; o
ii.
por lo menos un microorganismo y por lo menos un oligosacárido indigerible; o
iii.
por lo menos dos especies, subespecies o cepas de Bifidobacterias diferentes.
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12. Uso de una composición obtenida al mezclar
I)
un líquido nutricionalmente o farmacéuticamente aceptable; y
II)
una composición seca, en donde la composición seca II comprende por lo menos dos microorganismos diferentes; o por lo menos un microorganismo y por lo menos un oligosacárido indigerible; o por lo menos dos especies de Bifidobacterias diferentes, subespecies o cepas para la fabricación de una composición a ser administrada a un neonato nacido por cesárea para estimular el desarrollo de una flora intestinal saludable.
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13. Uso de una composición que contiene microorganismos y oligosacáridos indigeribles para la fabricación de una composición para estimular la flora intestinal de un neonato nacido por cesárea, al administrar dicha composición al neonato y dentro de las 100 horas después del nacimiento.
14. Uso de una composición que comprende microorganismos y/o oligosacáridos indigeribles para la fabricación de una composición para estimular la flora intestinal de un neonato nacido por cesárea al administrar rectalmente dicha composición a un neonato con una edad menor de 3 años.
15. Recipiente con un volumen líquido entre 0.5 y 25 ml que contiene una composición a ser administrada a un neonato que comprende por lo menos dos microorganismos diferentes; o por lo menos un microorganismo y por lo menos un oligosacárido indigerible; o por lo menos dos especies de Bifidobacterias diferentes, subespecies o cepas en donde la composición comprende por lo menos una especie seleccionada del género Bifidobacteria.
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