BRPI0617507A2 - mÉtodo para estimulaÇço da flora intestinal - Google Patents

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BRPI0617507A2
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BR
Brazil
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baby
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bifidobaeterium
bifidobacterium
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BRPI0617507-4A
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Guenther Boehm
Bernd Stahl
Jan Knol
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Nutricia Nv
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Publication date
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Abstract

<B>MÉTODO PARA ESTIMULAÇçO DA FLORA INTESTINAL<D>A presente invenção refere-se aos métodos para alimentação e as composições a serem administradas aos bebês que nascem de parto por cesariana e especificamente ao uso de a) pelo menos dois microorganismos diferentes; ou b) pelo menos um microorganismo e pelo menos um oligossa-carídeo não digerível; ou c) pelo menos duas espécies diferentes de Bifido-bacteria, subespécies ou cepas para a fabricação de uma composição para administração enteral a um bebê nascido de parto por cesariana. Pelo que, é possível estimular o desenvolvimento saudável da flora intestinal dos bebês.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "MÉTODOPARA ESTIMULAÇÃO DA FLORA INTESTINAL".Campo da Invenção
A presente invenção refere-se aos métodos para alimentação eas composições a serem administradas aos bebês que nascem do parto porcesariana.Antecedentes da Invenção
Quando se fórmula nutrição para bebês, o leite materno é usadocomo o melhor padrão. Os ingredientes, especificamente os de origem nãohumana, são normalmente combinados para mimetizar os aspectos compo-sicionais e efeitos fisiológicos do leite materno humano.
Um aspecto importante do leite humano é que ele fornece ener-gia e fluidos ao bebê. Além de fornecer energia, o leite materno humanocontém muitos componentes adicionais, que têm por objetivo manter a saú-de do bebê. O leite materno humano contém, por exemplo, fibra prebiótica,que estimula o desenvolvimento da flora intestinal saudável. Uma flora intes-tinal saudável traz inúmeros efeitos positivos ao bebê, tais como, incidênciareduzida de infecções e um sistema imune resistente.
Várias fórmulas de leite para bebês disponíveis comercialmentecontêm ingredientes que objetivam estimular o desenvolvimento da flora in-testinal. As fórmulas para bebês podem conter, por exemplo, fibras prebióti-cas ou organismos probióticos vivos. As fibras prebióticas normalmente pas-sam não digeridas através do trato gastrointestinal superior e estimulam se-letivamente o crescimento de bactérias benéficas no cólon. As bactériasprobióticas vivas aumentam as contagens bacterianas específicas no intesti-no.
A EP 1105002 descreve uma mistura de carboidrato prebióticocompreendendo um ou mais oligossacarídeos solúveis e um ou mais polis-sacarídeos solúveis com pelo menos 80% em peso de cada sendo de prebi-óticos.
O WO 2005039319 descreve uma preparação compreendendoBifidobacterium breve e uma mistura de carboidratos não digeríveis parabebês alimentados parcialmente de leite não materno e parcialmente de leitematerno, bem como o uso da mesma para o tratamento ou prevenção detranstornos imunes em bebês alimentados parcialmente de leite não maternoe parcialmente de leite materno.
Sumário da Invenção
As fórmulas para bebês são normalmente projetadas para mime-tizar o desenvolvimento de uma flora intestinal em um bebê que recebe leitematerno humano, com a implicação de que todos os bebês reagem de formasimilar ao leite materno humano e à fórmula de leite para bebês. Contudo, os presentes inventores verificaram que uma subpopulação de bebês, denomi-nados aqueles bebês que nascem de parto por cesariana, reagem de formadiferente, uma vez que sua flora intestinal no nascimento é completamentediferente da flora intestinal dos bebês que nascem de parto normal. Especifi-camente, o perfil e conteúdo das espécies da Bifidobacteria de bebês quenascem do parto por cesariana é diferente daquele perfil intestinal e teor deespécies da Bifidobacteria dos bebês que nascem através de parto normal.
Os presentes inventores analisaram a flora intestinal dos recém-nascidos após parto por cesariana e dos recém-nascidos após parto normal.Foi verificado, surpreendentemente, que existem muitas diferenças entre os dois grupos na composição da flora intestinal. Especificamente, os bebêsque nascem de parto normal contêm pelo menos cerca de três espécies dife-rentes da Bifidobacteria, considerando-se que os bebês nascidos de partopor cesariana não possuem a maior parte das espécies da Bifidobacteriaimportantes.
Foi também descoberto que os bebês nascidos através do partopor cesariana especificamente não possuem Bifidobacterium breve, Bifido-baeterium infantis, Bifidobaeterium bifidum, Bifidobaeterium eatenulatum,Bifidobaeterium adoieseentis e Bifidobaeterium iongum. Essas espécies es-tavam presentes na flora da maior parte dos bebês que nasceram através do parto normal.
Uma vez que a flora intestinal desempenha um papel importanteno desenvolvimento do bebê, especificamente na estimulação do sistemaimune e resistência contra infecções, o mais importante é estimular o desen-volvimento saudável da flora intestinal dos bebês nascidos através do partopor cesariana.
Adicionalmente, os recém-nascidos do parto por cesariana nãopossuem uma biodiversidade em sua flora intestinal. Apenas uma ou duasespécies diferentes da Bifidobacteria foram detectadas nos recém-nascidosde parto por cesariana, enquanto a flora intestinal dos recém-nascidos departo normal normalmente contém várias espécies diferentes da Bifidobacte-ria. Os presentes inventores acreditam que essas observações são indicati-vas de uma falta geral de uma variedade de espécies no trato intestinal dosrecém-nascidos de parto por cesariana. A biodiversidade é de grande impor-tância para a obtenção dos efeitos fisiológicos desejados e estimular otima-mente a saúde dos recém-nascidos.
Natren® produz o produto probiótico Life Start® que é indicadoespecificamente para bebês e apropriado para bebês que nasceram de partopor cesariana. O Life Start® é fabricado com a Bifidobacterium infantis. Umavez que o produto Life Start® contém apenas uma espécie simples da Bifido-bacteria, os benefícios para o bebê serão muito limitados.
Especificamente não esperada é também a observação de queas melhoras na saúde do bebê podem ser obtidos mesmo quando os bebêssão alimentados com o leite materno. No caso em que os bebês nascem departo por cesariana, o leite materno é (na maior parte dos casos) a melhornutrição para o bebê. Contudo, o leite materno também não resulta instanta-neamente em uma flora similar àquela observada em bebês nascidos de parto normal. O presente método portanto, também é usado vantajosamentequando o bebê recebe leite materno humano.
Conseqüentemente, a presente invenção tem especificamentepor objetivo: a) aumentar a ocorrência de espécies específicas na flora intes-tinal dos bebês nascidos de parto por cesariana; b) aumentar a biodiversida-de dos microorganismos na flora intestinal; e/ou c) estimular o crescimentode microorganismos benéficos, especificamente a Bifidobacteria.Conseqüentemente, em um aspeto, a presente invenção provê um métodopara estimular o desenvolvimento saudável da flora intestinal dos bebêsnascidos de parto por cesariana, por administração de uma composição con-tendo:
- pelo menos dois microorganismos diferentes;
- pelo menos um microorganismo e pelo menos um oligossaca-rídeo não digerível; ou
- pelo menos duas espécies da Bifidobacteria diferentes, subes-pécies ou cepas.
O microorganismo aumentará a biodiversidade da flora dos be- bês, enquanto os oligossacarídeos não digeríveis estimularão o desenvolvi-mento e crescimento de microorganismos inerentes e administrados.
A composição a ser administrada no presente método contém,preferivelmente, múltiplas espécies bacterianas diferentes, preferivelmentemúltiplas espécies da Bifidobacteria. Isso resulta em estimulação otimizadada flora intestinal dos bebês que nascem do parto por cesariana.Descrição Detalhada das Concretizações Preferidas
A presente invenção provê um método para alimentação de be-bês, o dito método compreendendo administração enteral de uma composi-ção a um bebê que nasceu de parto por cesariana, a dita composição com- preendendo: a) pelo menos dois microorganismos diferentes; ou b) pelo me-nos um microorganismo e pelo menos um oligossacarídeo não digerível; ouc) pelo menos duas espécies diferentes da Bifidobacteria, subespécies oucepas.
Em um aspeto adicional, a presente invenção provê um método para estimular a saúde de um bebê que nasceu de parto por cesariana,compreendendo administração ao bebê e dentro de 100 horas após o nas-cimento, de uma composição contendo microorganismos e/ou oligossacarí-deos não digeríveis.
Ainda em um aspecto adicional, a presente invenção provê ummétodo para fabricação de nutrição para bebês, apropriada para bebê quenasceu de parto por cesariana, compreendendo mistura de: A) leite maternohumano; e B) uma composição compreendendo: i) pelo menos dois microor-ganismos diferentes; ou ii) pelo menos um microorganismo e pelo menos umoligossacarídeo não digerível; ou iii) pelo menos duas espécies diferentes deBifidobacteria, subespécies ou cepas.
Ainda em um aspecto adicional, a presente invenção provê umacomposição compreendendo pelo menos quatro espécies da Bifidobacteria,subespécies e/ou cepas selecionadas do grupo consistindo em Bifidobacte-rium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacteriumeatenulatum, Bifidobaeterium adoleseentis, Bididobaeterium thermophilum,Bididobaeterium gailicum, Bifidobaeterium animaiis, Bifidobaeterium angula-tum, Bifidobaeterium pseudocatenulatum, Bifidobaeterium thermacidophilume Bifidobaeterium longum.
A presente invenção também provê uma composição nutricionalcompreendendo entre 5 e 25% de proteína; entre 25 e 60% de gordura; en-tre 30 e 70% de carboidratos; pelo menos duas espécies diferentes da Bifi-dobaeteria e pelo menos uma espécie de Laetobaeillus.
A presente invenção também provê um recipiente com um volu-me líquido entre 0,5 e 50 mL contendo uma composição a ser administradaa um bebê compreendendo pelo menos dois microorganismos diferentes; oupelo menos um microorganismo e pelo menos um oligossacarídeo não dige-rível; ou pelo menos duas espécies diferentes da Bifidobacteria, subespéciesou cepas.
Em um aspecto adicional, a presente invenção provê um métodopara estimular o desenvolvimento de uma flora intestinal saudável em umbebê, compreendendo a etapa de: A) mistura de I) um líquido nutricional oufarmaceuticamente aceitável; e II) uma composição seca, onde a composi-ção seca Il compreende pelo menos dois microorganismos diferentes; oupelo menos um microorganismo e pelo menos um oligossacarídeo não dige-rível; ou pelo menos duas espécies de Bifidobacteria diferentes, subespéciesou cepas; e B) administração da composição obtida na etapa a) a um bebêque nasceu de parto por cesariana.
As composições usadas na presente invenção são preferivel-mente as composições nutricionais e/ou farmacêuticas e apropriadas paraadministração aos bebês.Parto por cesariana
A presente invenção refere-se à administração enteral de umacomposição contendo um microorganismo aos bebês que nascem do partopor cesariana. Um parto por cesariana é um procedimento cirúrgico onde umbebê nasce através de uma incisão feita na parede abdominal da mãe, eentão através da parede do útero. Um parto por cesariana é geralmente rea-lizado quando é mais seguro para a mãe e para o bebê em comparação aoparto normal. Outras vezes, a mulher pode escolher entre ter seu bebê deum parto por cesariana ou parto normal.Diversidade
A presente composição contém pelo menos dois microorganis-mos diferentes; ou pelo menos um organismo do tipo microorganismo e pelomenos um oligossacarídeo não digerível; ou pelo menos duas espécies daBifidobacteria, subespécies ou cepas diferentes. Os microorganismos sãopreferivelmente bactérias e/ou leveduras. Preferivelmente, os microorganis-mos empregados na presente invenção são probióticos, isto é, quando apli-cados aos seres humanos ou animais, eles afetam beneficamente o hospe-deiro por melhorar as propriedades da microflora nativa. As combinaçõesmencionadas acima geralmente têm o objetivo de aumentar a diversidadee/ou quantidade dos microorganismos nos intestinos da criança que nasceude parto por cesariana. Isso afeta beneficamente o bebê, provendo váriosbenefícios saudáveis.
O termo "microorganismos diferentes" conforme usado na pre-sente invenção refere-se ao microorganismo que pertence a um gênero e/ouespécie diferente. Preferivelmente, os microorganismos diferentes são bac-térias diferentes. Preferivelmente, os microorganismos diferentes são espé-cies diferentes. Por exemplo e preferivelmente, a presente composição com-preende ou consiste em breve Bifidobacterium (B. breve) e Bifidobacteriumcatenuiatum (B. catenulatum). B. breve e B. catenulatum são consideradasaqui como duas espécies bacterianas diferentes. Espécies bacteriana nãosão consideradas diferentes se elas forem de subespécies diferentes. Porexemplo, Lactobacillus delbrueckii subespécie delbrueckki e Lactobacillusdelbrueckii subespécie bulgaricus não são considerados como duas espé-cies diferentes. A presente composição contém pelo menos dois microorga-nismos diferentes, preferivelmente pelo menos duas espécies bacterianasdiferentes. Preferivelmente, a presente composição contém pelo menos trêsespécies diferentes, mais preferivelmente pelo menos quatro espécies dife-rentes. Preferivelmente, o microorganismo ou as espécies bacterianas em-pregados são probióticas.
Em uma concretização, a presente invenção contém, pelo me-nos, duas espécies de Bifidobaeteria diferentes, subespécies ou cepas. Apresente composição compreende, preferivelmente, pelo menos um, preferi-velmente pelo menos duas, mesmo mais preferivelmente pelo menos três ea mais preferivelmente pelo menos quatro subespécies de Bifidobacteriadiferentes. Por exemplo, a Bifidobacterium animalis subespécie animalis eBifidobaeterium animalis subespécie Iaetis são subespécies diferentes.B.breve M16V e B.breve R0070 são cepas diferentes.
Microorganismos
Preferivelmente, a presente composição contém pelo menos ummicroorganismo selecionado do grupo consistindo em bactérias do ácidoláctico, bacilos e leveduras, preferivelmente pelo menos uma bactéria doácido láctico selecionada do grupo consistindo em Carnobaeterium, Entero-eoeeus, Laetobaeillus, Lactoeoceus, Leueonostoe, Oenoeoeeus, Pediocoe-eus, Streptoeoeeus, Tetragenoeoeeus, Vagoeoeeus e Weissella e Bidifobae-teria. A presente composição contém, preferivelmente, pelo menos dois,mais preferivelmente pelo menos três, mais preferivelmente pelo menos qua-tro microorganismos diferentes.
Preferivelmente, a presente composição contém pelo menosuma espécie selecionada do gênero Bifidobaeteria, mais preferivelmentepelo menos duas, mesmo mais preferivelmente pelo menos três, mais prefe-rivelmente pelo menos quatro, mais preferivelmente pelo menos cinco espé-cies do gênero da Bifidobaeteria. Bifidobaeteria são bactérias Gram positi-vas, anaeróbias, conformadas em bastão. As presentes espécies de Bifido-bacterium possuem preferivelmente pelo menos 95% de identidade da se-qüência 16 S do RNAr quando comparadas ao tipo de cepa das respectivasespécies Bifidobacterium, mais preferivelmente pelo menos 97% de identi-dade, conforme definido nos livros desse assunto, como por exemplo, Sam-brook, J., Fritsch, E.F., e Maniatis, T. (1989), Molecular Cloning, A Labora-tory manual, 2—edição, Cold Spring Harbor (N.Y.) Laboratory Press. Bifido-bacteria preferivelmente usadas são também descritas por Scardovi, V. Ge-nus Bifidobacterium. p. 1418 - ρ 1434. Em: Bergey1S manual of SystematicBacteriology. Volume 2, Sneath, P.H.A., N.S. Mair, M.E. Sharpe e J.G.Holt(ed.) Baltimore: Williams & Wilkins. 1986. 635 p.
A presente composição preferivelmente contêm, pelo menosuma, mais preferivelmente pelo menos duas, mesmo mais preferivelmentepelo menos três e mesmo mais preferivelmente pelo menos quatro espéciesBifidobacterium preferivelmente selecionadas do grupo consistindo em Bifi-dobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium bifidum, Bifido-bacterium catenulatum, Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium ther-mophiium, Bifidobacterium gallicum, Bifidobacterium animalis, Bifidobacteri-um angulatum, Bifidobacterium pseudocatenulatum, Bifidobacterium therma-cidophilum e Bifidobacterium longum. Mais preferivelmente a presente com-posição preferivelmente compreende pelo menos uma, mais preferivelmentepelo menos duas, mesmo mais preferivelmente pelo menos três e mais pre-ferivelmente pelo menos quatro espécies Bifidobacterium preferivelmenteselecionadas do grupo consistindo em Bifidobacterium breve, Bifidobacteri-um infantis, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium catenulatum, Bifidobac-teríum adolescentis e Bifidobacterium longum. Mais preferivelmente a pre-sente composição contêm Bifidobacterium breve e/ou Bifidobacterium cate-nulatum.
Em uma concretização adicionalmente preferida, a presentecomposição compreende pelo menos uma, mais preferivelmente pelo menosduas, mesmo mais preferivelmente pelo menos três e mais preferivelmentepelo menos quatro subespécies Bifidobacterium. Ainda em uma concretiza-ção adicionalmente preferida, a presente composição compreende pelo me-nos uma, mais preferivelmente pelo menos duas, mesmo mais preferivel-mente pelo menos três e mesmo mais preferivelmente pelo menos quatrocepas Bifidobacterium.
Em uma concretização adicionalmente preferida, a presentecomposição contém uma bactéria do ácido láctico, preferivelmente pelo me-nos uma bactéria selecionada do grupo consistindo em Lactobacilli, Lacto-cocci e Streptococci. Mais preferivelmente, a presente composição contémpelo menos uma bactéria selecionada do grupo consistindo em Lactobacillusplantarum, Lactobacillus reuteri, LactobaciHus johnsonni, Lactobacillus casei,Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus aeidophilus, Lactobacillus fermen-tum, Lactobacillus laetis, Streptoeoceus thermophilus e Lactobacillus paraea-sei. A biodiversidade adicionalmente aumentada terá um efeito estimuladorna saúde dos recém-nascidos.
A presente composição contém preferivelmente entre 101 e 1013microorganismos de unidades de formação de colônia (cfu) por grama depeso seco da presente composição, preferivelmente entre 102 e 1012, maispreferivelmente entre 103 e 1010. Preferivelmente, a presente composiçãocontém entre 101 e 103 unidades de formação de colônia (cfu) Bifidobaeteriapor grama de peso seco da presente composição, mais preferivelmente en-tre 102 e 1012, mais preferivelmente 103 e 1012.
O presente método compreende preferivelmente a administraçãode uma porção contendo entre 101 e 1013 cfu de microorganismos, mais pre-ferivelmente entre 102 e 1011, mais preferivelmente entre 103 e 1010. O pre-sente método compreende, preferivelmente, a administração de uma porçãocontendo entre 101 e 103 cfu de Bifidobaeteria, mais preferivelmente entre102 e 1012, mais preferivelmente entre 103 e 1011.Oliaossacarídeos
O termo "oligossacarídeos não digeríveis" conforme usado napresente invenção refere-se aos oligossacarídeos/carboidratos que não sãousados ou apenas parcialmente digeridos no intestino pela ação de ácidosou enzimas digeríveis presentes no trato digestivo superior humano (intesti-no delgado e estômago) porém que são fermentadas pela flora intestinalhumana. Preferivelmente, o presente oligossacarídeo não digerido possuium grau de polimerização (DP) de 2 a 100, preferivelmente um DP de 2 a50. Preferivelmente, o presente oligossacarídeo não digerível é uma fibraprebiótica. O termo "fibra prebiótica" refere-se às fibras não digeríveis que afetam beneficamente o hospedeiro por estimulação seletiva do crescimentoe/ou atividade de um ou um número limitado de espécies bacterianas no có-lon. Preferivelmente, o presente oligossacarídeo não digerível é solúvel. Otermo "solúvel" conforme usado aqui, quando se referindo a um polissacarí-deo, fibra ou oligossacarídeo, significa que a substância é pelo menos 50%solúvel de acordo com o método descrito por L. Prosky e outros, J. Assoc.Off. Anal. Chem. 71, 1017-1023 (1988).
Preferivelmente, a presente composição contém pelo menos umoligossacarídeo selecionado do grupo consistindo em galactooligossacarí-deos, dextrinas não digeríveis, xilooligossacarídeos, arabinooligossacarí- deos, glicoligossacarídeos, manooligossacarídeos, isomalto-oligossacarídeoe frutopolissacarídeo.
O termo "frutopolissacarídeo" conforme usado aqui refere-se aum carboidrato de polissacarídeo compreendendo uma cadeia de pelo me-nos 3 unidades de frutose ligadas em β, com um DP entre 3 e 300, preferi- velmente entre 20 e 150. Preferivelmente é empregada a inulina. A inulinaestá disponível sob a marca registrada "Raftilin HP®, (Orafti). O DP médio dofrutopolissacarídeo é preferivelmente de pelo menos 15, mais preferivelmen-te pelo menos de 20 ou mais, até 300. Na inulina, as unidades de frutosesão ligadas com uma ligação de β (2 -> 1).
As polidextrinas não digeríveis refere-sem às (malto)dextrinasresistentes à digestão ou polidextrose resistente à digestão que possuem umDP de 10 a 50, preferivelmente entre 10 e 20. As polidextrinas não digeríveiscompreendem ligações α(1 4), α(1 -> 6) glicosídicas e ligações 1 ·> 2 e 1-> 3. Polidextrinas digeríveis são por exemplo disponíveis sob a marca regis- trada "Fibersol 2®" da Matsutami Industries or Litesse® de Danisco.
Os presentes inventores verificaram que os galactooligossacarí-deos podem ser vantajosamente usados na presente composição, uma vezque esses oligossacarídeos se mostraram especificamente eficazes na esti-mulação do crescimento da Bifidobacteria. Conseqüentemente, em umaconcretização preferida, a presente composição contém galactooligossacarí-deos. O termo "galactooligossacarídeo" conforme usado aqui refere-se a um sacarídeo não digerível, onde pelo menos 30% das unidades de sacarídeosão unidades de galactose, preferivelmente pelo menos 50%, mais preferi-velmente pelo menos 60%. Preferivelmente os sacarídeos do oligossacarí-deo são ligados em β, como é o caso no leite materno humano.
Preferivelmente, a presente composição contém um galactooli- gossacarídeo selecionado do grupo consistindo em transgalactooligossaca-rídeos, lacto-N-tetraose (LNT) e lacto-N-neotetraose (neo-LNT). Em umaconcretização especificamente preferida, o método da presente invençãocompreende a administração do transgalactooligossacarídeo ([galactose]n-glicose; onde η é um inteiro entre 1 e 60, isto é, 2, 3, 4, 5, 6,... 59, 60; prefe- rivelmente, η é selecionado de 2,3,4,5,6,7,8,9 ou 10). Os transgalactooligos-sacarídeos (TOS) são vendidos, por exemplo, sob a marca registrada Vivi-nal® (Borculo Domo Ingredients, Países-Baixos). Preferivelmente os sacarí-deos dos transgalactooligossacarídeos são ligados em β.
A presente composição contém, preferivelmente, 0,5 a 75 gra- mas dos oligossacarídeos solúveis não digeríveis por 100 gramas de pesoseco, preferivelmente entre 0,5 e 50 gramas. A presente composição con-tém, preferivelmente, 0,1 a 95 gramas de galactooligossacarídeos por 100gramas de peso seco, preferivelmente entre 0,1 e 50 gramas.
O presente método compreende, preferivelmente, a administra- ção de uma porção contendo entre 0,05 e 25 gramas de oligossacarídeo nãodigerível, preferivelmente entre 0,1 e 5 gramas. O presente método compre-ende, preferivelmente, a administração de uma porção contendo entre 0,05 e25 gramas de galactooligosascarídeos, preferivelmente entre 0,1 e 5 gramasde galactooligossacarídeos.
Os presentes inventores também verificaram que uma misturade oligossacarídeos não digeríveis de cadeia longa e oligossacarídeos nãodigeríveis de cadeia curta estimula sinergisticamente o crescimento da floraintestinal saudável, especificamente a Bifidobacteria. Conseqüentemente, apresente invenção contém pelo menos dois oligossacarídeos com graus mé-dios diferentes de polimerização (DP). Preferivelmente as razões em peso:
a. (oligossacarídeos não digeríveis com DP de 2 a 5): (oligossa-carídeos não digeríveis com DP 6, 7, 8 e/ou 9) > 1; e
b. (oligossacarídeos não digeríveis com DP de 10 a 60): (oligos-sacarídeos não digeríveis com DP 6, 7, 8 e/ou 9) > 1
Preferivelmente, ambas as razões em peso estão acima de 2,mesmo mais preferivelmente acima de 5.
Para aperfeiçoamento adicional, o oligossacarídeo preferivel-mente possui um teor relativamente alto de oligossacarídeos de cadeia cur-ta, uma vez que esses estimulam fortemente o crescimento da Bifidobacteri-a. Conseqüentemente, preferivelmente, pelo menos 10% em peso dos oli-gossacarídeos na presente composição possuem um DP de 2 a 5 (isto é, 2,3, 4 e/ou 5) e pelo menos 5% em peso possuem um DP de 10 a 60. Preferi-velmente pelo menos 50% em peso, mais preferivelmente pelo menos 75%em peso dos oligossacarídeos possuem um DP de 2 a 9 (isto é, 2, 3, 4, 5, 6,7, 8 e/ou 9).
Para aperfeiçoar a biodiversidade e estimular o crescimento demúltiplos organismos intestinais, a presente composição compreende, prefe-rivelmente, dois oligossacarídeos com uma estrutura diferente. A presentecomposição compreende pelo menos dois oligossacarídeos diferentes, ondeos oligossacarídeos possuem uma homologia nas unidades de sacarídeoabaixo de cerca de 90%, preferivelmente abaixo de 50%, mesmo mais prefe-rivelmente abaixo de 25%, mesmo mais preferivelmente abaixo de 5%. Otermo "homologia" conforme usado na presente invenção é o cumulativo daporcentagem da mesma unidade de sacarídeo nos diferentes oligossacarí-deos. Por exemplo, o oligossacarídeo 1 (OL1) possui a estrutura fruc-fruc-glu-gal, e assim compreende 50%a fruc, 25% gal e 25% glu. O oligossacarí-deo 2 (OL2) possui a estrutura fruc-fruc-glu, e assim compreende 66% fruc,33% glu. Os oligossacarídeos diferentes assim possuem uma homologia de75% (50% fruc + 25% glu).Preferiveimente, a presente composição contém galactooligos-sacarídeos e frutopolissacarídeos.
Aplicação
A presente composição é preferiveimente aplicada enteralmente,mais preferiveimente oralmente. A presente composição é portanto preferi-veimente um líquido. O termo "enteral" usado aqui também engloba umaadministração retal ou anal.
Quando os bebês recebem fórmula de leite para bebês, a pre-sente composição com os microorganismos e opcionalmente incluindo pelomenos um oligossacarídeo não digerível, é preferiveimente incluída na fór-mula nutricional. O probiótico e/ou prebiótico podem ser separadamente adi-cionados à fórmla para bebês. Quando os recém-nascidos recebem nutriçãoatravés de um tubo, os microorganismos podem ser apropriadamente incluí-dos na nutrição administrada através do tubo. A estimulação da diversidadeé de grande importância, assim, a presente invenção também provê umacomposição nutricional compreendida entre 5 e 25% da proteína; entre 25 e60% de gordura; entre 30 e 70% de carboidratos; e pelo menos duas espé-cies diferentes de Bifidobacteria e pelo menos uma espécie de Lactobacillus.
Quando os bebês recebem leite materno humano, a presentecomposição pode ser apropriadamente misturada com leite materno huma-no. A presente invenção conseqüentemente também provê um método parafabricação de nutrição para bebês apropriada para bebês nascidos de partopor cesariana, compreendendo mistura: A) leite materno humano, e B) umacomposição compreendendo: (i) pelo menos dois microorganismos diferen-tes; ou (ii) pelo menos um microorganismo e pelo menos um oligossacarídeonão digerível; ou (iii) pelo menos duas espécies Bifidobacteria, subespéciesou cepas. As características preferidas da composição B) são conforme pro-vidas aqui.
Em uma concretização preferida adicional, a presente invençãoé administrada ao bebê em um volume muito pequeno, por exemplo, por"inoculação" do bebê. Preferiveimente, a presente composição é administra-da ao bebê com uma seringa, pipeta ou tubo, preferível e diretamente após onascimento. Em uma concretização adicional preferida, a presente composi-ção é administrada no reto ou ânus do bebê que nasce de parto por cesaria-na, preferivelmente na forma de um supositório, pílula ou comprimido. Con-seqüentemente, a presente invenção também provê um supositório, pílula oucomprimido apropriado para administração retal a um bebê com a idade a-baixo de um ano, onde o supositório, pílula ou comprimido contém microor-ganismos e/ou oligossacarídeos não digeríveis, preferivelmente a presentecomposição conforme descrita aqui anteriormente.
Em uma concretização adicionalmente preferida, a presente in-venção provê um método de estimulação da flora intestinal de um bebêcompreendendo administração retal à criança com a idade abaixo de 3 anos,de uma composição compreendendo microorganismo e/ou oligossacarídeonão digerível. Preferivelmente, o bebê possui idade abaixo de 1 ano, maispreferivelmente abaixo de 2 semanas. Preferivelmente, o bebê nasce de par-to por cesariana. Preferivelmente essa composição para administração retalcontém a composição descrita acima.
Esse procedimento tem a vantagem de não interferir com a prá-tica de alimentação por leite materno e lembra muito a inoculação vaginal,que ocorre durante o nascimento. A presente invenção também provê ummétodo para estimular a saúde de um bebê que nasce de parto por cesaria-na, compreendendo administração ao bebê e dentro de cem horas após onascimento, preferivelmente entre 72 horas após o nascimento, mais preferi-velmente dentro de 48 horas após o nascimento, de uma composição con-tendo microorganismos e/ou oligossacarídeos não digeríveis.
A composição é preferivelmente apropriada para administraçãodiretamente após o nascimento. Conseqüentemente, em uma concretizaçãoadicionalmente preferida, a presente invenção provê um recipiente compre-endendo uma composição líquida com um volume entre 0,5 e 50 mL, quecontém a presente composição. O líquido com o presente microorganismo,combinado opcionalmente com oligossacarídeos não digeríveis, pode serapropriadamente usado no presente método. Preferivelmente, o líquido pos-sui um volume entre 0,5 e 25 mL. Esse volume é preferivelmente pequeno,porque ele de outra forma interferiria com os comportamentos de apetite ede bebida do bebê.
De modo similar e englobado por essa invenção se encontra umrecipiente com uma composição seca reconstituível contendo a presenteinvenção, onde o recipiente contém um volume entre 0,5 e 50 mL. Esse re-cipiente é preferivelmente acompanhado por instruções de como reconstituiro pó em um volume de líquido pequeno, por exemplo, água.
A presente invenção assim provê um método para estimular odesenvolvimento da flora intestinal saudável em um bebê compreendendo aetapa A: administração I) de um líquido específico, nutricional e farmaceuti-camente aceitável; e II) uma composição seca, onde a composição seca Ilcompreende pelo menos dois microorganismos diferentes; ou pelo menosum microorganismo e pelo menos um oligossacarídeo não digerível; ou pelomenos duas espécies de Bifidobacteria diferentes, subespécies ou cepas; eetapa B) administração da composição obtida na etapa a) a um bebê quenasceu de parto por cesariana.
A presente composição é preferivelmente administrada a umbebê no primeiro ano de vida, preferivelmente entre duas semanas após onascimento, mesmo mais preferivelmente dentro de uma semana após onascimento, mais preferivelmente dentro de 48 horas após o nascimento.
Exemplos
Exemplo 1: Caracterização molecular dos micróbios intestinais em bebêsque nasceram de parto normal versus parto por cesariana
No presente estudo, a influência do modo do nascimento (partopor cesariana versus parto normal) na composição microbiana intestinal noterceiro dia de vida por emprego de PCR-EIetroforese em Gel de GradienteDesnaturante(DGGE) e PCR-EIetroforese em Gel de Gradiente de Tempera-tura (TGGE). Ambas as análises DGGE e TGGE foram utilizadas, em con-junto com ampliações específicas para dez espécies de Bifidobacterium.
Após o consentimento informado por escrito obtidos dos pais,vinte e três recém-nascidos após parto por cesariana e parto normal foramrecrutados no estudo. As amostras fecais foram obtidas no terceiro dia devida. O DNA microbiano foi extraído e analisado de acordo com Favier e ou-tros, Environ Microbiol 2002; 68:219-226 e Satokari e outros, Appl EnvironMicrobiol 2001; 67:504-513; Satorkari e outros, System Appl Microbiol 2003;26:572-584.
Os resultados da Bifidobacteria detectados nas amostras fecaisde recém-nascidos após parto por cesariana obtidos no terceiro dia de vidasão fornecidos na Tabela 1. A Tabela 2 fornece a Bifidobacteria detectadanas amostras fecais de recém-nascidos após parto normal no terceiro dia devida.
Foi verificado que a flora microbiana de um bebê nascido de par-to por cesariana mostra fortes diferenças em relação a um bebê nascido departo normal. O reconhecimento dessas diferenças nos níveis de espéciespermitiu aos presentes inventores projetar as presentes composições e mé-todos.
Esses resultados são indicativos do uso vantajoso da composi-ção e método de acordo com a presente invenção, por exemplo, um métodopara alimentar bebês nascidos do parto por cesariana, estimulando a floraintestinal saudável e conseqüentemente prevenindo infecções e estimulandoo sistema imune saudável.Tabela 1: Cesariana
<table>formula see original document page 18</column></row><table>
(-) = sem ampliacao; (+/-)=ampliacao fraca; (+)=ampliacao positiva; (++)=ampliacao forteTabela 2
<table>table see original document page 19</column></row><table>Exemplo 2: Fermentação in vitro de galacto-oligossacarídeo por fezes debebês
Objetivo: a capacidade dos galactooligossacarídeos (GOS) euma combinação de GOS e inulina de favorecer a atividade das bactérias do ácido láctico foi avaliada usando um sistema de fermentação em bateladasemidinâmico, in vitro, empregando fezes de bebês. A quantidade de Iactatofoi determinada, uma vez que é o produto de fermentação das bactérias doácido láctico incluindo a Bifidobacteria.
Método: fezes frescas foram obtidas de bebês alimentados com mamadeira saudáveis. O material de fezes fresco dos bebês variando de 1 a4 meses de idade foi agrupado e colocado em um meio de preservação(peptona tamponada 20,00 g/L, L-Cisteína-HCI 0,5 g/L, Tioglicolato de sódio0,5 g/L, comprimido de resazurina 1/1, pH 6,7) dentro de 1 hora e armaze-nados a 4°C por no máximo 2 horas antes do experimento de fermentação começar.
A solução preservada das fezes foi centrifugada a 13.000 rpmpor 15 minutos. O sobrenadante foi removido e as fezes foram misturadascom meio McBain & MacFarIane (água peptona tamponada 3,0 g/L, 2,59 g/Lextrato de levedura; 0,8 g/L de mucina (microviscosidades); 3,0 g/L de tripto- na; L-Cisteína-HCI 0,4 g/L, sais biliares 0,05 g/L, Κ2ΗΡ04.3Η20 2,6 g/L,NaHCO3 0,2 g/L, NaCI 4,5 g/L, MgS04.7H20 0,5 g/L, CaCI2 0,228 g/L, Fe-SO4 0,005 g/L), que é representativo do ambiente intestinal, em uma razãode 1:5.
Em t = 0, 15 m da suspensão fecal foram combinados com 500 mg de prebiótico em uma garrafa e misturados completamente. Como umcontrole nenhum prebiótico foi adicionado. Os prebióticos adicionados foramcomo se segue:
Meios: 12 3
GOS: 0 500 450
Inulina: 0 0 50
Como uma fonte de GOS, foi utilizado Vivinal GOS (BorculoDomo). Como uma fonte da inulina foi empregado RaftiIinHP (Orafti).15 mL foram transferidos para um tubo de diálise em uma garra-fa de 250 mL enchida com 250 mL de meio tamponado (K2HPO4-SH2O 2,6g/L, NaHCO3 0,2 g/L, NaCl 4,5 g/L, MgS04.7H20 0,5 g/L, CaCl2 0,228 g/L,FeS04.7H20 0,005 g/L, pH 6,3 (?)). A garrafa foi fechada e incubada a37°C. As amostras de 1 mL foram retiradas do tubo de diálise e do tampãode diálise com uma seringa hipodérmica após três 3 horas e armazenadas a18°C. Os experimentos foram realizados em duplicidade. O Iactato foi de-terminado enzimaticamente usando kit de detecção de ácido L-Iactato comD- e L-lactato-desidrogenase (Boehringer Mannheim, Mannheim, Alemanha).
Resultados e Conclusões: os resultados são expressos comoquantidades de lactato formado por g de prebiótico adicionado. Os resulta-dos mostram que a quantidade de lactato é aumentada quando uma micro-flora do bebê fermenta GOS ou uma mistura de GOS e inulina. Quando ne-nhum prebiótico é adicionado, a produção de lactato não é observada. ComGOS sozinho, 0,1801 mmol/g de lactato prebiótico é produzido. Quando umacombinação de GOS e inulina é adicionada, o lactato produzido é de 0,2119mmol por grama de prebiótico.
Os resultados indicam que os oligossacarídeos estimulam ocrescimento e/ou atividade da bactéria de ácido láctico nos bebês, incluindoBifidobacteria. Esses resultados são indicativos do uso vantajoso dos oligos-sacarídeos não digeríveis, especificamente galactooligossacarídeos, na pre-sente composição e o método de acordo com a presente invenção, isto é,em um método para alimentar bebês nascidos de parto por cesariana.
Exemplo 3: Método para alimentar bebês nascidos de parto por cesariana
Dentro de dois dias após o bebê nascer de parto por cesariana,uma composição nutricional é administrada contendo por 100 mL prontospara fórmula de alimentação: 1,6 g de proteína, 3,6 g de gordura, 6,4 g decarboidratos digeríveis (principalmente lactose), 0,8 g de carboidratos nãodigeríveis dos quais 0,60 g de transgalactooligossacarídeos, 0,07 g de inuli-na, 1 χ 10"9 cfu de Bifidobacterium breve, 1 χ 10"9 cfu de Bifidobacterium ca-tenulatum, 1 χ 10"9 cfu de Bifidobacterium Iongum e 1 χ 10"9 cfu de Lactobacil-lus paracasei.Exemplo 4: Composição embalada
A composição embalada, onde a embalagem indica que o produ-to é especificamente apropriado para alimentação oral de bebês nascidos departo por cesariana, a composição compreendendo Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium catenula-tum, Bifidobaeterium adoleseentis, Bifidobaeterium iongum, galactooligossa-carídeos e inulina.
Exemplo 5: Composição embalada
Composição de acordo com o Exemplo 4, onde a composição possui um volume de 10 mL e é embalada em uma seringa.
Exemplo 6: Administração retal
P11 apropriado para administração retal a um bebê dentro deduas semanas do nascimento, compreendendo galactooligossacarídeos eBifidobaeterium breve, Bifidobaeterium infantis, Bifidobaeterium bifidum.

Claims (16)

1. Uso de:a) pelo menos dois microorganismos diferentes; oub) pelo menos um microorganismo e pelo menos um oligossaca-rídeo não digerível; ouc) pelo menos duas espécies diferentes de Bifidobactería, sub-espécies ou cepas para fabricação de uma composição para administraçãoenteral a um bebê nascido de parto por cesariana.
2. Uso de acordo com a reivindicação 1, em que a composiçãocontém pelo menos uma espécie da Bifidobactería.
3. Uso de acordo com a reivindicação 1 ou 2, em que a compo-sição compreende pelo menos uma Bifidobacterium selecionada do grupoconsistindo em Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacteri-um bifidum, Bifidobaeterium eatenulatum, Bifidobaeterium adoleseentis, Bidi-funbaeterium thermophiium, Bididobaeterium gailicum, Bifidobaeterium ani-maiis, Bifidobaeterium anguiatum, Bifidobaeterium pseudocatenuiatum, Bifi-dobaeterium thermaeidophilum e Bifidobaeterium iongum.
4. Uso de acordo com a reivindicação 3, em que a composiçãocompreende pelo menos duas espécies de Bifidobaeterium selecionadas dogrupo conforme mencionado na reivindicação 3.
5. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações prece-dentes, onde a composição compreende pelo menos um microorganismo epelo menos um oligossacarídeo não digerível.
6. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações prece-dentes, em que a composição compreende um oligossacarídeo não digerí-vel, selecionado do grupo consistindo em galactooligossacarídeos, dextrinasnão digeríveis, xilooligossacarídeos, arabinooligossacarídeos, glicoligossa-carídeos, manooligossacarídeos, isomalto-oligossacarídeo e frutopolissaca-rídeo.
7. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações prece-dentes, em que a composição compreende entre 5 e 25% de proteína, entree 60% de gordura e entre 30 e 70% de carboidrato.
8. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações prece-dentes, em que a composição é administrada a um bebê que recebe leitematerno humano.
9. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações prece-dentes, em que a composição é administrada a um bebê dentro de uma se-mana após o nascimento.
10. Composição nutricional ou farmacêutica compreendendo,pelo menos, quatro espécies de Bifidobacteria, subespécies e/ou cepas se-lecionadas do grupo consistindo em Bifidobacterium breve, Bifidobacteriuminfantis, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium catenulatum, Bifidobacteri-um adoieseentis, Bifidobaeterium thermophiium, Bifidobaeterium galiieum,Bifidobaeterium animalis, Bifidobaeterium angulatum, Bifidobacterium pseu-doeatenuiatum, Bifidobaeterium thermaeidophilum e Bifidobaeterium iongum.
11. Composição nutricional compreendendo entre 5 e 25% deproteína; entre 25 e 60% de gordura; entre 30 e 70% de carboidrato; pelomenos duas espécies diferentes de Bifidobacteria e pelo menos uma espé-cie de Lactobacillus.
12. Método para fabricação de uma nutrição para bebês apropri-ada para bebês nascidos de parto por cesariana, compreendendo mistura de:a. leite materno humano; eb. uma composição compreendendo:i. pelo menos dois microorganismos diferentes; ouii.pelo menos um microorganismo e pelo menos um oligos-sacarídeo não digerível; ouiii. pelo menos duas espécies diferentes de Bifidobacteria,subespécies ou cepas.
13. Recipiente com um volume líquido entre 0,5 e 50 mL conten-do uma composição a ser administrada a um bebê compreendendo, pelomenos, dois microorganismos diferentes; ou pelo menos um microorganismoe pelo menos um oligossacarídeo não digerível; ou pelo menos duas espé-cies de Bifidobacteria diferentes, subespécies ou cepas.
14. Método para estimulação do desenvolvimento de uma floraintestinal saudável em um bebê nascido de parto por cesariana compreen-dendo as etapas de:a) mistura de I) um líquido nutricional ou farmaceuticamente a-ceitável; e II) uma composição seca, em que a composição seca II compre-ende pelo menos dois microorganismos diferentes; ou pelo menos um mi-croorganismo e pelo menos um oligossacarídeo não digerível; ou pelo me-nos duas espécies de Bifidobactería, subespécies ou cepas.b) administração da composição obtida na etapa a) ao bebê.
15. Método para estimular a flora intestinal de um bebê nascidode parto por cesariana compreendendo a administração ao bebê e dentro de-100 horas após o nascimento, de uma composição contendo microorganis-mos e/ou oligossacarídeos não digeríveis.
16. Método para estimular a flora intestinal de um bebê compre-endendo administração retal à criança com idade abaixo de 3 anos, de umacomposição compreendendo microorganismos e/ou oligossacarídeos nãodigeríveis.
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