CN113645850A

CN113645850A - 调节胃肠代谢物的方法

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Publication number: CN113645850A
Application number: CN201980088318.0A
Authority: CN
Inventors: U·赫勒; G·舍恩斯; E·卡耐特-马丁内斯; L·A·拉普雷德; J·M·格雷米亚
Original assignee: DSM IP Assets BV; Midori Renewables Inc
Current assignee: DSM IP Assets BV
Priority date: 2018-11-08
Filing date: 2019-11-08
Publication date: 2021-11-12
Also published as: CA3116020A1; BR112021008712A2; EP3876747A1; JP7400171B2; AU2019375992A1; EP3876747A4; US20220125074A1; KR20210134301A; WO2020097443A1; JP2022506143A; MX2021005379A

Abstract

本公开文本涉及通过提供调节肠道微生物组的饲料添加剂来饲喂动物以改善健康、营养和生长性能的方法。本公开文本还涉及调节存在于动物的胃肠道中的代谢物的方法。这种调节包括例如调节所述代谢物的水平。

Description

调节胃肠代谢物的方法

相关申请的交叉引用

本申请要求于2018年11月8日提交的美国临时专利申请号62/757,446、于2018年11月8日提交的美国临时专利申请号62/757,471和于2018年11月8日提交的美国临时专利申请号62/757,475的权益，将其中的每一个的公开内容通过引用以其整体特此并入。

背景技术

肠道微生物区系的微生物(例如，细菌、病毒、真菌、霉菌、原生动物等)负责将动物的饮食中未经消化和未经吸收的组分转化为数千种生物活性代谢物。这些代谢物进而与动物的局部和全身生理学相互作用。

在正常情况下，微生物组的生化输出是由动物消耗的食物组成决定的。在常规饮食、特别是包含植物纤维多糖(如纤维素、木质素、半纤维素、果胶和淀粉结合蛋白)的饮食中，动物消耗的食物的一部分通过初级消化过程保持为未经消化和未经吸收的。这些未经吸收的物质到达下肠系统，在那里它们可以被微生物群加工和利用并转化为代谢物。因此，所得的代谢组的组成受其饮食中未经吸收组分的结构的影响。

肠道中产生的代谢物可以例如通过结肠或门脉循环系统吸收，并运输到动物的其他器官，在那里它们可以影响这些器官的结构和/或功能。这些生化物质进而影响不同的生物学功能，如营养物吸收、能量调节、线粒体功能、全身炎症、应激反应、肝功能、肾功能、心脏代谢功能、饱腹感、情绪和警觉性。

在一些情况下，微生物组产生的代谢物对宿主有害，或者由于它们对动物环境的影响而在其他方面是不希望的。例如，将吲哚加工成硫酸吲哚酚以及将对甲酚加工成硫酸对甲酚对动物的肝脏和肾脏产生另外的压力。硫酸吲哚酚与心血管健康下降进一步相关联。这些影响在生产动物和伴侣动物典型的高蛋白饮食中尤其相关。肉毒碱向三甲胺的微生物转化以及氨基酸向氨的微生物转化不仅增加了对肝脏和肾脏的压力，而且对生产动物和伴侣动物的幸福有负面影响。褥草中积聚的氨和三甲胺可能增加足跖疾病的患病率，并且由于这些挥发性含氮物质的强烈气味而导致较差的环境条件。因此，需要通过选择性地抑制不希望的代谢物的产生和改善动物的健康来调节肠道代谢组的定制营养组合物(包括动物饲料)。

在一些情况下，所产生的代谢物对宿主是有益的，或者在其他方面是希望的。例如，神经递质可以积极影响动物的健康和情绪。其他代谢物可以积极影响动物肉的品质，如风味和香味。因此，还需要通过选择性地促进希望的代谢物的产生和改善动物的健康来调节肠道代谢组的定制营养组合物(包括动物饲料)。

已经考虑了多种非药物饲料添加剂来改善生长性能。遗憾的是，许多此类替代性饲料添加剂很难配制成饲料并递送到动物消化系统的相关组分。例如，短链脂肪酸(SCFA)(如丁酸和丙酸)对下消化道是有益的。丁酸滋养结肠细胞并有助于减少炎症，然而由于其挥发性和令人不快的气味而很难配制成饲料。呈各种盐形式(例如，丁酸钙)或用包衣和/或油包封的丁酸制剂有助于改善稳定性，然而，尽管做出了这些努力，所得的饲料仍然表现出降低的适口性，从而表现出降低的动物消耗量。此外，丁酸在到达下消化系统之前至少部分被吸收，从而导致向肠道的靶向区域的递送受损。同样，由于许多植物油表现出抗微生物和抗病原体作用，因此已经将精油作为饲料添加剂进行了探究。然而，精油在暴露于饲料制造条件时迅速降解，并且在到达下消化系统之前也遭受吸收。因此，难以将可行剂量的精油递送到消化系统的靶向区域。因此，本领域需要将非抗生素饲料添加剂物质的活性组分递送到动物的下消化系统的方法。

发明内容

在一个方面，本文提供了调节动物的胃肠道中的代谢物的方法，所述方法包括：向动物施用包含基础营养组合物和合成寡糖制剂的营养组合物，其中所述合成寡糖制剂包含各自具有选自1至n的不同聚合度的至少n种寡糖级分(DP1至DPn级分)，其中n是大于3的整数；并且其中DP1和DP2级分中的每一种独立地包含如通过质谱法测定的按相对丰度计约0.5％至约15％的含脱水亚基寡糖，并且其中相对于在所述向所述动物施用所述营养组合物之前来自所述动物的胃肠样品中至少一种代谢物的水平，来自所述动物的胃肠样品中所述至少一种代谢物的水平增加或降低。

在一些实施方案中，相对于来自已经被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物的胃肠样品中所述至少一种代谢物的增加或降低，来自所述动物的所述胃肠样品中所述至少一种代谢物的所述增加或降低是更大的增加或降低。

在一些实施方案中，所述代谢物是短链脂肪酸(SCFA)、胆汁酸、多酚、氨基酸、神经递质(或其前体)、信号传导因子或含氮代谢物。

在一些实施方案中，所述代谢物是短链脂肪酸(SCFA)。在一些实施方案中，所述短链脂肪酸(SCFA)是乙酸、戊酸、异戊酸、异丁酸、甲酸、丙酸或丁酸或者其盐或酯。

在一些实施方案中，所述代谢物是丁酸、异丁酸、丙酸、丁酸盐/酯、丙酸盐/酯、乙酸、乳酸、戊酸、异戊酸、氨基-SCFA、硫代酸盐/酯、萜类化合物、a-萜类化合物、精油、倍他唑、乳寡糖、岩藻糖基化寡糖、2'-岩藻糖基乳糖(2FL)、唾液酸化寡糖、类固醇、胺、三甲胺、氨、吲哚、硫酸吲哚酚、促炎代谢物、组胺、脂多糖、倍他唑、γ-氨基丁酸(GABA)、芳樟醇、桉树脑、香叶醇、二肽、脂肪醇、对甲酚、硫化物、硫化氢、挥发性胺、硫醇、多巴胺、氨基吲哚、脂溶性代谢物、脂族醛、脂族酮、2-甲硫基乙醇、3-甲基-2-丁酮、3-甲基丁醛、戊醛、3-羟基-2-丁酮、(E)-2-戊烯醛、1-戊醇、(E)-2-癸烯醛、己醛、(E)-2-己烯醛、1-己醇、庚醛、苯乙烯、肟-、甲氧基-苯基-丁内酯、(E)-2-庚烯醛、苯甲醛、二甲基三硫化物、1-庚醇、辛醛、1-辛烯-3-酮、1-辛烯-3-醇、(E,E)-2,4-庚二烯醛、2-乙酰基噻唑、D-柠檬烯、4-乙基环己醇、2,4-二甲基-环己醇、(E)-2-辛烯醛、苯乙醛、1-辛醇、2-丁基-环己酮、4-(苯甲酰氧基)-(E)-2-辛烯-1-醇、1-辛醇、十八酸、乙烯酯、壬醛、(E)-2-壬烯-1-醇、3-十八炔、环辛烷甲醇、十二醛、(E)-2-壬烯醛、2,6/3,5-二甲基苯甲醛、1-壬醇、2-正庚基呋喃、顺式-4-癸烯醛、癸醛、(E,E)-2,4-壬二烯醛、1,3-己二烯、3-乙基-2-甲基-2-壬烯醛、(E)-2-十一烯醛、反式-3-壬烯-2-酮、2,5-呋喃二酮、3-十二烯基-反式-2-十一烯-1-醇或花生酸。

在一些实施方案中，所述胃肠样品是胃肠组织的活检、粪便样品、瘤胃样品或泄殖腔拭子。在一些实施方案中，所述胃肠组织是盲肠组织或回肠组织。在一些实施方案中，所述胃肠样品是瘤胃液样品。

在一些实施方案中，所述方法还包括获得所述样品。在一些实施方案中，所述方法还包括检测所述胃肠样品中所述至少一种代谢物的水平。

在一些实施方案中，所述方法还包括检测所述胃肠样品中至少2、3、4、5或6种代谢物的水平。在一些实施方案中，相对于在所述向所述动物施用所述营养组合物之前来自所述动物的胃肠样品中至少2、3、4、5或6种代谢物的水平，来自所述动物的所述胃肠样品中所述至少2、3、4、5或6种代谢物的水平增加或降低。在一些实施方案中，相对于来自已经被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的对照动物的胃肠样品中至少2、3、4、5或6种或更多种代谢物的水平，来自所述动物的胃肠样品中所述至少2、3、4、5或6种代谢物的水平增加或降低。

在一些实施方案中，相对于在所述向所述动物施用所述营养组合物之前来自所述动物的胃肠样品中至少一种代谢物的水平，所述胃肠样品中所述至少一种代谢物的所述水平增加。在一些实施方案中，相对于来自已经被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物的胃肠样品中所述至少一种代谢物的增加，来自所述动物的所述胃肠样品中所述至少一种代谢物的所述增加是更大的增加。在一些实施方案中，相对于来自已经被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物的胃肠样品中至少一种代谢物的水平，所述胃肠样品中所述至少一种代谢物的所述水平增加。

在一些实施方案中，所述代谢物对所述动物的健康是有益的。在一些实施方案中，所述代谢物对所述动物的胃肠健康是有益的。

在一些实施方案中，所述代谢物是短链脂肪酸(SCFA)、胆汁酸、多酚、氨基酸、神经递质(或其前体)或信号传导因子。在一些实施方案中，所述代谢物是短链脂肪酸(SCFA)。在一些实施方案中，所述短链脂肪酸(SCFA)是乙酸、戊酸、异戊酸、甲酸、丙酸、丁酸或异丁酸或者其盐或酯。

在一些实施方案中，所述短链脂肪酸(SCFA)是丙酸或者其盐或酯(例如，丙酸盐/酯)。

在一些实施方案中，所述合成寡糖制剂包含含有葡萄糖、半乳糖和甘露糖或由其组成的寡糖，或者由所述寡糖组成。在一些实施方案中，所述合成寡糖制剂包含含有葡萄糖、半乳糖和甘露糖的寡糖。在一些实施方案中，所述合成寡糖制剂包含含有葡萄糖和甘露糖或由其组成的寡糖，或者由所述寡糖组成。在一些实施方案中，所述合成寡糖制剂包含含有葡萄糖和甘露糖的寡糖。

在一些实施方案中，所述短链脂肪酸(SCFA)是丁酸或者其盐或酯(例如，丁酸盐/酯)。在一些实施方案中，所述合成寡糖制剂包含含有葡萄糖、蔗糖和乳糖或由其组成的寡糖，或者由所述寡糖组成。在一些实施方案中，所述合成寡糖制剂包含含有葡萄糖、蔗糖和乳糖的寡糖。在一些实施方案中，所述合成寡糖制剂包含含有蔗糖或由其组成的寡糖，或者由所述寡糖组成。在一些实施方案中，所述合成寡糖制剂包含含有蔗糖的寡糖。在一些实施方案中，所述合成寡糖制剂包含含有蔗糖和葡萄糖或由其组成的寡糖，或者由所述寡糖组成。在一些实施方案中，所述合成寡糖制剂包含含有蔗糖和葡萄糖的寡糖。在一些实施方案中，所述合成寡糖制剂包含含有葡萄糖和乳糖或由其组成的寡糖，或者由所述寡糖组成。在一些实施方案中，所述合成寡糖制剂包含含有葡萄糖和乳糖的寡糖。在一些实施方案中，所述合成寡糖制剂包含含有葡萄糖或由其组成的寡糖，或者由所述寡糖组成。在一些实施方案中，所述合成寡糖制剂包含含有葡萄糖的寡糖。

在一些实施方案中，所述代谢物是寡糖。在一些实施方案中，所述寡糖是2'-岩藻糖基乳糖(2FL)。

在一些实施方案中，所述代谢物是醇。

在一些实施方案中，所述代谢物是1-甲硫基丙醇或2-甲硫基乙醇。在一些实施方案中，所述代谢物是1-甲硫基丙烷或2-甲硫基乙烷。

在一些实施方案中，所述合成寡糖制剂包含含有葡萄糖、半乳糖和甘露糖或由其组成的寡糖，或者由所述寡糖组成。在一些实施方案中，所述合成寡糖制剂包含含有葡萄糖、半乳糖和甘露糖的寡糖。

在一些实施方案中，所述代谢物是神经递质。在一些实施方案中，所述神经递质是氨基酸、气体递质、单胺、痕量胺、肽、嘌呤或儿茶酚胺。在一些实施方案中，所述神经递质是谷氨酸、天冬氨酸、D-丝氨酸、γ-氨基丁酸(GABA)、甘氨酸、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(norepinephrine)(去甲肾上腺素(noradrenaline)；NE、NA)、肾上腺素(epinephrine)(肾上腺素(adrenaline))、组胺、5-羟色胺(SER、5-HT)、苯乙胺、N-甲基苯乙胺、酪胺、3-碘甲状腺原胺(iodothyronamine)、章鱼胺、色胺、催产素、生长抑素、三磷酸腺苷(ATP)、腺苷、乙酰胆碱(ACh)或花生四烯酸乙醇胺(anandamide)。在一些实施方案中，所述神经递质是多巴胺。在一些实施方案中，所述神经递质是γ-氨基丁酸(GABA)。

在一些实施方案中，所述代谢物是二肽、脂肪醇或萜类化合物。在一些实施方案中，所述二肽是肌肽、鹅肌肽、高鹅肌肽(homoanserine)、京都啡肽(kyotorphin)、鲸肌肽(balenine)、Val-Tyr、Ala-Gln或Gly-Tyr。在一些实施方案中，所述脂肪醇是叔丁基醇、叔戊基醇、3-甲基-3-戊醇、1-庚醇(Heptanol)(庚醇(enanthic alcohol))、1-辛醇(辛基醇(capryl alcohol))、壬醇(Pelargonic alcohol)(1-壬醇(nonanol))、1-癸醇(Decanol)(癸基醇、癸醇(capric alcohol))、十一基醇、月桂基醇、十三基醇、肉豆蔻基醇、十五基醇、鲸蜡基醇、棕榈油基醇(Palmitoleyl alcohol)、十七基醇(1-正十七醇、十七醇)、硬脂基醇(1-十八醇)、油基醇(Oleyl alcohol)(1-十八烯醇)、十九基醇(1-十九醇)、花生基醇(Arachidyl alcohol)(1-二十醇)、二十一基醇(1-二十一醇)、山嵛基醇(1-二十二醇)、瓢儿菜基醇(Erucyl alcohol)(顺式-13-二十二烯-1-醇)、木蜡基醇(1-二十四醇)、鲸蜡基醇(1-二十六醇)、1-二十七醇、蒙旦基醇(Montanyl alcohol)、1-二十九醇、蜂花基醇、1-三十二醇(虫蜡基醇(Lacceryl alcohol))或格地基醇(Geddyl alcohol)(1-三十四醇)。在一些实施方案中，所述萜类化合物是半萜类化合物(hemiterpenoids)、单萜类化合物(monoterpenoids)、倍半萜类化合物(sesquiterpenoids)、二萜类化合物(diterpenoids)、二倍半萜类化合物(sesterterpenoids)、三萜类化合物(triterpenoids)、四萜类化合物(tetraterpenoids)、多萜类化合物(polyterpenoid)。

在一些实施方案中，所述代谢物是二羟基苯甲酸。在一些实施方案中，所述二羟基苯甲酸是龙胆酸、2-焦儿茶酸、β-二羟基苯酸、γ-二羟基苯酸、原儿茶酸或α-二羟基苯酸。在一些实施方案中，所述二羟基苯甲酸是龙胆酸。

在一些实施方案中，所述代谢物是对薄荷-1-烯-4-醇以及化合物1-硝基庚烷、辛醛、2-辛酮和2,3-庚烷二酮。

在一些实施方案中，所述代谢物是脂肪酸。在一些实施方案中，所述代谢物是挥发性脂肪酸。在一些实施方案中，所述脂肪酸是乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸或异戊酸。

在一些实施方案中，所述合成寡糖制剂包含含有葡萄糖或由其组成的寡糖，或者由所述寡糖组成。在一些实施方案中，所述合成寡糖制剂包含含有葡萄糖的寡糖。

在一些实施方案中，相对于在所述向所述动物施用所述营养组合物之前来自所述动物的胃肠样品中至少一种代谢物的水平，所述胃肠样品中所述至少一种代谢物的所述水平降低。在一些实施方案中，相对于来自已经被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物的胃肠样品中所述至少一种代谢物的降低，来自所述动物的所述胃肠样品中所述至少一种代谢物的所述降低是更大的降低。在一些实施方案中，相对于来自已经被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物的胃肠样品中至少一种代谢物的水平，所述胃肠样品中所述至少一种代谢物的所述水平降低。

在一些实施方案中，所述代谢物对所述动物的健康是有害的。在一些实施方案中，所述代谢物对所述动物的胃肠健康是有害的。

在一些实施方案中，所述代谢物是促炎代谢物。在一些实施方案中，所述促炎代谢物是组胺、3-羟基犬尿氨酸(3-HK)、3-羟基邻氨基苯甲酸(3-HAA)、喹啉酸(QA)、二羟基十八碳-12-烯酸、胆酸盐/酯、丙二酸甲酯、n-乙酰胞壁酸酯、乳糖醛酸盐/酯或麦芽三糖、鸟氨酸或牛磺酸。在一些实施方案中，所述促炎代谢物是组胺。

在一些实施方案中，所述代谢物是含氮代谢物。在一些实施方案中，所述含氮代谢物是氨、三甲胺、吲哚或对甲酚。在一些实施方案中，所述含氮代谢物是氨。

在一些实施方案中，所述至少一种代谢物的水平通过色谱法与波谱法的组合来测定。在一些实施方案中，所述色谱法是气相色谱法或液相色谱法。在一些实施方案中，所述波谱法是核磁共振波谱(NMR)法。在一些实施方案中，所述其中所述核磁共振波谱(NMR)法包括¹H-NMR。

在一些实施方案中，将包含所述寡糖的所述营养组合物以足以产生所述至少一种代谢物的所述增加或降低水平的量施用给所述动物。在一些实施方案中，所述至少一种代谢物的所述水平增加或降低至少约1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、20％、30％、40％或50％。在一些实施方案中，所述至少一种代谢物的所述水平增加或降低至少约0.1倍、0.2倍、0.3倍、0.4倍、0.5倍、0.6倍、0.7倍、0.8倍、0.9倍、1倍、2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍或10倍。

在一些实施方案中，将包含所述寡糖的所述营养组合物以足以产生所述至少一种代谢物的所述增加水平的量施用给所述动物。在一些实施方案中，所述至少一种代谢物的所述水平增加至少约1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、20％、30％、40％或50％。在一些实施方案中，所述至少一种代谢物的所述水平增加至少约0.1倍、0.2倍、0.3倍、0.4倍、0.5倍、0.6倍、0.7倍、0.8倍、0.9倍、1倍、2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍或10倍。

在一些实施方案中，将包含所述寡糖的所述营养组合物以足以产生所述至少一种代谢物的所述增加水平的量施用给所述动物。在一些实施方案中，所述至少一种代谢物的所述水平降低至少约1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、20％、30％、40％或50％。在一些实施方案中，所述至少一种代谢物的所述水平降低至少约0.1倍、0.2倍、0.3倍、0.4倍、0.5倍、0.6倍、0.7倍、0.8倍、0.9倍、1倍、2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍或10倍。

在一些实施方案中，将包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物施用给所述动物至少1、7、10、14、30、45、60、90或120天。在一些实施方案中，将包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物每天至少一次、两次、三次、四次或五次施用给所述动物。在一些实施方案中，所述施用包括向所述动物提供所述营养组合物以随意摄取。在一些实施方案中，所述动物在超过至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、20、30、40、50、60、90或120个二十四小时时段内摄取所述营养组合物的至少一部分。

在一些实施方案中，所述营养组合物包含至少100ppm、200ppm、300ppm、400ppm、500ppm、600ppm、700ppm、800ppm、900ppm、1000ppm、1500ppm或2000ppm的所述合成寡糖制剂。在一些实施方案中，所述营养组合物包含约100ppm、200ppm、300ppm、400ppm、500ppm、600ppm、700ppm、800ppm、900ppm、1000ppm、1500ppm或2000ppm的所述合成寡糖制剂。在一些实施方案中，所述营养组合物包含约500ppm的所述合成寡糖制剂。在一些实施方案中，所述营养组合物包含约100ppm-2000ppm、100ppm-1500ppm、100ppm-1000ppm、100ppm-900ppm、100ppm-800ppm、100ppm-700ppm、100ppm-600ppm、100ppm-500ppm、100ppm-400ppm、100ppm-300ppm、100ppm-200ppm、200ppm-1000ppm、200ppm-800ppm、200ppm-700ppm、200ppm-600ppm、200ppm-500ppm、300ppm-1000ppm、300ppm-700ppm、300ppm-600ppm或300ppm-500ppm的所述合成寡糖制剂。在一些实施方案中，所述营养组合物包含约300ppm-600ppm的所述合成寡糖制剂。

根据任一项前述权利要求所述的方法，其中相对于在施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前所述动物的体重，所述动物具有增加的体重。在一些实施方案中，相对于在施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前所述动物的所述体重，所述动物的所述体重增加至少1％、2％、3％、4％、5％、5％、7％、8％、9％或10％。在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物，体重的所述增加是更大的增加。在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的所述可比对照动物的所述体重，所述动物的所述体重增加至少1％、2％、3％、4％、5％、5％、7％、8％、9％或10％。

在一些实施方案中，相对于在施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前所述动物的饲料效率，所述动物具有增加的饲料效率。在一些实施方案中，相对于在施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前所述动物的所述饲料效率，所述动物的所述饲料效率增加至少1％、2％、3％、4％、5％、5％、7％、8％、9％或10％。在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物，所述动物所具有的饲料效率的所述增加是更大的增加。在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的所述可比对照动物的所述体重，所述动物的饲料效率的所述增加增加至少1％、2％、3％、4％、5％、5％、7％、8％、9％或10％。

在一些实施方案中，相对于在施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前所述动物的饲料转化率(FCR)，所述动物具有降低的FCR。在一些实施方案中，相对于在施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前所述动物的饲料转化率，所述动物的所述饲料转化率降低至少1％、2％、3％、4％、5％、5％、7％、8％、9％或10％。在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物，所述动物所具有的饲料转化率的所述降低是更大的降低。在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的所述可比对照动物的饲料转化率，所述动物的所述饲料转化率降低至少1％、2％、3％、4％、5％、5％、7％、8％、9％或10％。

在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物，所述动物的预期寿命或存活率增加。

在一些实施方案中，施用导致以下中的至少一种：a)营养物吸收改善，b)线粒体功能改善，c)肝功能改善，d)肾功能改善，e)社交性改善，f)情绪改善，g)能量改善，h)饱腹感改善，以及i)警觉性改善；每一种相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的营养组合物的动物。

在一些实施方案中，施用导致以下中的至少一种：a)营养物吸收改善，b)线粒体功能改善，c)肝功能改善，d)肾功能改善，e)社交性改善，f)情绪改善，g)能量改善，h)饱腹感改善，以及i)警觉性改善；每一种相对于在施用所述合成寡糖制剂之前的所述动物。

在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的营养组合物的动物，施用导致源自所述动物的肉的品质改善。

在一些实施方案中，施用导致以下中的至少一种：a)所述动物肉的颜色增强，b)所述动物肉的风味增强，以及c)所述动物肉的嫩度增强。

在一些实施方案中，所述营养组合物是动物饲料组合物。在一些实施方案中，所述基础营养组合物是基础动物饲料。

在一些实施方案中，所述相对丰度通过LC-MS/MS来测定。

在一些实施方案中，至少5、10、20或30种DP级分中寡糖的所述相对丰度随其聚合度单调降低。在一些实施方案中，所述n种级分中的每一种中寡糖的所述相对丰度随其聚合度单调降低。

在一些实施方案中，n是至少4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99或100。

在一些实施方案中，所述DP2级分包含按相对丰度计少于12％、少于11％、少于10％、少于9％、少于8％、少于7％、少于6％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％或少于1％的含脱水亚基寡糖。

在一些实施方案中，所述DP2级分包含按相对丰度计约5％至约10％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，所述DP2级分包含按相对丰度计约1％至约10％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，所述DP2级分包含按相对丰度计约0.5％至约10％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，所述DP2级分包含按相对丰度计约2％至约12％的含脱水亚基寡糖。

在一些实施方案中，所述DP1级分包含按相对丰度计少于12％、少于11％、少于10％、少于9％、少于8％、少于7％、少于6％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％或少于1％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，所述DP1级分包含按相对丰度计约2％至约12％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，所述DP1级分包含按相对丰度计约1％至约10％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，所述DP1级分包含按相对丰度计约0.5％至约10％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，所述DP1级分包含按相对丰度计约5％至约10％的含脱水亚基寡糖。

在一些实施方案中，所述DP3级分包含按相对丰度计少于15％、少于12％、少于11％、少于10％、少于9％、少于8％、少于7％、少于6％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％或少于1％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，所述DP3级分包含按相对丰度计约2％至约12％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，所述DP3级分包含按相对丰度计约1％至约10％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，所述DP3级分包含按相对丰度计约0.5％至约10％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，所述DP3级分包含按相对丰度计约5％至约10％的含脱水亚基寡糖。

在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含按相对丰度计约2％至约12％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含按相对丰度计约0.5％至约10％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含按相对丰度计约1％至约10％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含按相对丰度计约5％至约10％的含脱水亚基寡糖。

在一些实施方案中，所述DP2级分包含按相对丰度计大于0.6％、大于0.8％、大于1.0％、大于1.5％、大于2％、大于3％、大于4％、大于5％、大于6％、大于7％、大于8％、大于9％、大于10％、大于11％或大于12％的含脱水亚基寡糖。

在一些实施方案中，所述DP1级分包含按相对丰度计大于0.6％、大于0.8％、大于1.0％、大于1.5％、大于2％、大于3％、大于4％、大于5％、大于6％、大于7％、大于8％、大于9％、大于10％、大于11％或大于12％的含脱水亚基寡糖。

在一些实施方案中，所述DP3级分包含按相对丰度计大于0.6％、大于0.8％、大于1.0％、大于1.5％、大于2％、大于3％、大于4％、大于5％、大于6％、大于7％、大于8％、大于9％、大于10％、大于11％或大于12％的含脱水亚基寡糖。

在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含按相对丰度计大于0.5％、0.6％、大于0.8％、大于1.0％、大于1.5％、大于2％、大于3％、大于4％、大于5％、大于6％、大于7％、大于8％、大于9％、大于10％、大于11％或大于12％的含脱水亚基寡糖。

在一些实施方案中，所述寡糖制剂具有如通过液相色谱法测定的按重量计约1％至约40％的DP1级分含量。

在一些实施方案中，所述寡糖制剂具有如通过液相色谱法测定的按重量计约1％至约35％的DP2级分含量。

在一些实施方案中，所述寡糖制剂具有如通过液相色谱法测定的按重量计约1％至约30％的DP3级分含量。

在一些实施方案中，所述寡糖制剂具有如通过液相色谱法测定的按重量计约0.1％至约20％的DP4级分含量。

在一些实施方案中，所述寡糖制剂具有如通过液相色谱法测定的按重量计约0.1％至约15％的DP5级分含量。

在一些实施方案中，如通过液相色谱法测定的，DP2级分与DP1级分的比率是约0.02至约0.40。

在一些实施方案中，如通过液相色谱法测定的，DP3级分与DP2级分的比率是约0.01至约0.30。

在一些实施方案中，如通过液相色谱法测定的，所述寡糖制剂中DP1和DP2级分的合计含量少于50％、少于40％或少于30％。

在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含至少103、至少104、至少105、至少106或至少109个不同的寡糖种类。

在一些实施方案中，两种或更多种独立的寡糖包含不同的脱水亚基。

在一些实施方案中，所述含脱水亚基寡糖中的每一种包含作为单糖的热脱水产物的一个或多个脱水亚基。

在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含选自以下的一个或多个脱水亚基：脱水葡萄糖、脱水半乳糖、脱水甘露糖、脱水阿洛糖、脱水阿卓糖、脱水古洛糖、脱水艾杜糖、脱水塔洛糖、脱水果糖、脱水核糖、脱水阿拉伯糖、脱水鼠李糖、脱水来苏糖和脱水木糖。

在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含一个或多个脱水葡萄糖、脱水半乳糖、脱水甘露糖或脱水果糖亚基。

在一些实施方案中，所述DP1级分包含1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖或1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖脱水亚基。在一些实施方案中，所述DP1级分包含1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖和1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖两种脱水亚基。

在一些实施方案中，在所述寡糖制剂中，1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖与1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖的比率是约10:1至1:10、约9:1至约1:10、约8:1至约1:10、约7:1至约1:10、约6:1至约1:10、约5:1至约1:10、约4:1至约1:10、约3:1至约1:10、约2:1至约1:10、约10:1至约1:9、约10:1至约1:8、约10:1至约1:7、约10:1至约1:6、约10:1至约1:5、约10:1至约1:4、约10:1至约1:3、约10:1至约1:2或约1:1至约3:1。在一些实施方案中，在所述寡糖制剂中，1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖与1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖的比率是约10:1、约9:1、约8:1、约7:1、约6:1、约5:1、约4:1、约3:1、约2:1、约1:1、约1:2、约1:3、约1:4、约1:5、约1:6、约1:7、约1:8、约1:9或约1:10。在一些实施方案中，在所述寡糖制剂中，1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖与1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖的比率是约2:1。

在一些实施方案中，所述DP2级分包含至少5个种类的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，所述DP2级分包含约5至10个种类的含脱水亚基寡糖。

在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含一种或多种糖焦糖化产物。在一些实施方案中，所述糖焦糖化产物选自：甲醇；乙醇；呋喃；甲基乙二醛；2-甲基呋喃；乙酸乙烯酯；乙醇醛；乙酸；丙酮醇；糠醛；2-呋喃甲醇；3-呋喃甲醇；2-羟基环戊-2-烯-1-酮；5-甲基糠醛；2(5H)-呋喃酮；2甲基环戊烯醇酮；左旋葡萄糖酮；环状羟基内酯；1,4,3,6-二脱水-α-D-吡喃葡萄糖；二脱水吡喃葡萄糖；和5-羟基甲基糠醛(5-hmf)。

在一些实施方案中，大于50％、60％、70％、80％、90％、95％或99％的所述含脱水亚基寡糖包含链端脱水亚基。

在一些实施方案中，所述寡糖制剂具有如通过高效液相色谱法(HPLC)测定的约300至约5000g/mol的重均分子量。在一些实施方案中，所述寡糖制剂具有如通过HPLC测定的约300至约2500g/mol的重均分子量。在一些实施方案中，所述寡糖制剂具有如通过HPLC测定的约500至约2000g/mol的重均分子量。在一些实施方案中，所述寡糖制剂具有如通过HPLC测定的约500至约1500g/mol的重均分子量。在一些实施方案中，所述寡糖制剂具有如通过HPLC测定的约300至约5000g/mol的数均分子量。在一些实施方案中，所述寡糖制剂具有如通过HPLC测定的约300至约2500g/mol的数均分子量。在一些实施方案中，所述寡糖制剂具有如通过HPLC测定的约500至约2000g/mol的数均分子量。在一些实施方案中，所述寡糖制剂具有如通过HPLC测定的约500至约1500g/mol的数均分子量。

在一些实施方案中，所述寡糖制剂具有约2000至约2800g/mol的重均分子量。在一些实施方案中，所述寡糖制剂具有约1000至约2000g/mol的数均分子量。

在一个方面，本文提供了调节动物的胃肠道中的代谢物的方法，所述方法包括：向动物施用包含基础营养组合物和合成寡糖制剂的营养组合物，其中所述合成寡糖制剂包含各自具有选自1至n的不同聚合度的至少n种寡糖级分(DP1至DPn级分)，其中n是大于3的整数；并且其中DP1和DP2级分中的每一种独立地包含如通过质谱法测定的按相对丰度计约0.5％至约15％的含脱水亚基寡糖，并且其中相对于来自已经被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物的胃肠样品中至少一种代谢物的水平，来自所述动物的胃肠样品中所述至少一种代谢物的水平增加或降低。

在一些实施方案中，所述代谢物是醇。

在一些实施方案中，所述代谢物是神经递质。在一些实施方案中，所述神经递质是氨基酸、气体递质、单胺、痕量胺、肽、嘌呤或儿茶酚胺。在一些实施方案中，所述神经递质是谷氨酸、天冬氨酸、D-丝氨酸、γ-氨基丁酸(GABA)、甘氨酸、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(norepinephrine)(去甲肾上腺素(noradrenaline)；NE、NA)、肾上腺素(epinephrine)(肾上腺素(adrenaline))、组胺、5-羟色胺(SER、5-HT)、苯乙胺、N-甲基苯乙胺、酪胺、3-碘甲状腺原胺、章鱼胺、色胺、催产素、生长抑素、三磷酸腺苷(ATP)、腺苷、乙酰胆碱(ACh)或花生四烯酸乙醇胺。在一些实施方案中，所述神经递质是多巴胺。在一些实施方案中，所述神经递质是γ-氨基丁酸(GABA)。

在一些实施方案中，所述代谢物是二肽、脂肪醇或萜类化合物。在一些实施方案中，所述二肽是肌肽、鹅肌肽、高鹅肌肽、京都啡肽、鲸肌肽、Val-Tyr、Ala-Gln或Gly-Tyr。在一些实施方案中，所述脂肪醇是叔丁基醇、叔戊基醇、3-甲基-3-戊醇、1-庚醇(Heptanol)(庚醇(enanthic alcohol))、1-辛醇(辛基醇)、壬醇(Pelargonic alcohol)(1-壬醇(nonanol))、1-癸醇(Decanol)(癸基醇、癸醇(capric alcohol))、十一基醇、月桂基醇、十三基醇、肉豆蔻基醇、十五基醇、鲸蜡基醇、棕榈油基醇、十七基醇(1-正十七醇、十七醇)、硬脂基醇(1-十八醇)、油基醇(1-十八烯醇)、十九基醇(1-十九醇)、花生基醇(1-二十醇)、二十一基醇(1-二十一醇)、山嵛基醇(1-二十二醇)、瓢儿菜基醇(顺式-13-二十二烯-1-醇)、木蜡基醇(1-二十四醇)、鲸蜡基醇(1-二十六醇)、1-二十七醇、蒙旦基醇、1-二十九醇、蜂花基醇、1-三十二醇(虫蜡基醇)或格地基醇(1-三十四醇)。在一些实施方案中，所述萜类化合物是半萜类化合物、单萜类化合物、倍半萜类化合物、二萜类化合物、二倍半萜类化合物、三萜类化合物、四萜类化合物、多萜类化合物。

在一些实施方案中，所述相对丰度通过LC-MS/MS来测定。

在一个方面，本文提供了改善动物的粪便品质的方法，所述方法包括：向所述动物施用包含基础营养组合物和合成寡糖制剂的营养组合物，其中所述合成寡糖制剂包含各自具有选自1至n的不同聚合度的至少n种寡糖级分(DP1至DPn级分)，其中n是大于3的整数；并且其中DP1和DP2级分中的每一种独立地包含如通过质谱法测定的按相对丰度计约0.5％至约15％的含脱水亚基寡糖；其中所述动物表现出来自所述动物的粪便样品的稠度改善、来自所述动物的粪便样品中一种或多种微生物物种的水平降低或来自所述动物的粪便样品的气味减小；每一种相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的营养组合物的动物。

在一些实施方案中，所述施用导致以下中的至少一种、两种或三种：来自所述动物的粪便样品的稠度改善、来自所述动物的粪便样品中一种或多种微生物物种的水平降低或来自所述动物的粪便样品的气味减小；每一种相对于在施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前的所述动物。

在一些实施方案中，相对于来自被施用缺乏所述合成寡糖制剂的营养组合物的动物的粪便样品的稠度，来自所述动物的粪便样品的稠度增加。在一些实施方案中，相对于在施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前来自所述动物的粪便样品的稠度，来自所述动物的粪便样品的稠度增加。

在一些实施方案中，相对于来自被施用缺乏所述合成寡糖制剂的营养组合物的动物的粪便样品的至少一种气味排放的水平，来自所述动物的粪便样品的至少一种气味排放的水平降低。在一些实施方案中，相对于在施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前来自所述动物的粪便样品的至少一种气味排放的水平，来自所述动物的粪便样品的至少一种气味排放的水平降低。

在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的营养组合物的动物的粪便样品中的水平，来自所述动物的粪便样品中至少一种微生物物种的水平更低。在一些实施方案中，相对于在施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前来自所述动物的粪便样品中的水平，来自所述动物的粪便样品中至少一种微生物物种的水平更低。

在一些实施方案中，所述微生物物种对所述动物是病原性的。在一些实施方案中，所述微生物物种与足跖疾病相关联。在一些实施方案中，所述足跖疾病是足跖皮炎。

在一些实施方案中，所述微生物物种降低至少约1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、20％、30％、40％或50％。在一些实施方案中，所述微生物物种降低至少约0.1倍、0.2倍、0.3倍、0.4倍、0.5倍、0.6倍、0.7倍、0.8倍、0.9倍、1倍、2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍或10倍。

在一些实施方案中，所述微生物物种属于螺杆菌属(Helicobacter)、埃希氏菌属(Escherichia)、沙门氏菌属(Salmonella)、弧菌属(Vibrio)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、肠球菌属(Enterococcus)或耶尔森氏菌属(Yersinia)。在一些实施方案中，所述微生物物种选自：幼禽螺杆菌(Helicobacter pullorum)、约氏变形菌(Proteobacteria johnsonii)、大肠杆菌(Escherichia coli)、空肠弯曲杆菌(Camplobacter jejuni)、卷曲乳杆菌(Lactobacillus crispatus)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、粪肠球菌(Enterococcus faecalis)、阿涅蒂斯葡萄球菌(Staphylococcus agnetis)、海氏肠球菌(Enterococcus hirae)、缓慢葡萄球菌(Staphylococcus lentus)或模仿葡萄球菌(Staphylococcus simulans)。

在一些实施方案中，相对于在所述向所述动物施用所述营养组合物之前来自所述动物的胃肠样品中至少一种代谢物的水平，来自所述动物的胃肠样品中所述至少一种代谢物的水平增加或降低。

在一些实施方案中，相对于来自已经被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物的胃肠样品中所述至少一种代谢物的增加或降低，来自所述动物的所述胃肠样品中所述至少一种代谢物的所述增加或降低是更大的增加或降低。在一些实施方案中，相对于来自已经被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物的胃肠样品中至少一种代谢物的水平，来自所述动物的胃肠样品中所述至少一种代谢物的水平增加或降低。

在一些实施方案中，所述方法其中相对于在所述向所述动物施用所述营养组合物之前来自所述动物的胃肠样品中至少一种代谢物的水平，所述胃肠样品中所述至少一种代谢物的所述水平降低。在一些实施方案中，相对于来自已经被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物的胃肠样品中所述至少一种代谢物的降低，来自所述动物的所述胃肠样品中所述至少一种代谢物的所述降低是更大的降低。

在一些实施方案中，相对于来自已经被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物的胃肠样品中至少一种代谢物的水平，所述胃肠样品中所述至少一种代谢物的所述水平降低。

在一些实施方案中，所述代谢物是含氮代谢物。在一些实施方案中，所述含氮代谢物是氨、三甲胺、吲哚或对甲酚。在一些实施方案中，所述代谢物是氨。在一些实施方案中，所述代谢物是挥发性胺、硫醇或硫化物。

在一些实施方案中，将包含所述寡糖的所述营养组合物以足以产生所述至少一种代谢物的所述降低水平的量施用给所述动物。在一些实施方案中，所述至少一种代谢物的所述水平降低至少约1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、20％、30％、40％或50％。在一些实施方案中，所述至少一种代谢物的所述水平降低至少约0.1倍、0.2倍、0.3倍、0.4倍、0.5倍、0.6倍、0.7倍、0.8倍、0.9倍、1倍、2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍或10倍。

在一些实施方案中，所述相对丰度通过LC-MS/MS来测定。

在一个方面，本文提供了在动物中预防足跖疾病或降低其严重程度的方法，所述方法包括：向所述动物施用包含基础营养组合物和合成寡糖制剂的营养组合物，其中所述合成寡糖制剂包含各自具有选自1至n的不同聚合度的至少n种寡糖级分(DP1至DPn级分)，其中n是大于3的整数；并且其中DP1和DP2级分中的每一种独立地包含如通过质谱法测定的按相对丰度计约0.5％至约15％的含脱水亚基寡糖，并且其中相对于在所述向所述动物施用所述营养组合物之前来自所述动物的粪便样品中与足跖疾病相关联的至少一种微生物物种的水平，来自所述动物的粪便样品中与足跖疾病相关联的所述至少一种微生物物种的水平降低。

在一些实施方案中，相对于来自已经被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物的粪便样品中所述至少一种微生物物种的降低，来自所述动物的粪便样品中所述至少一种微生物物种的所述降低是更大的降低。

在一些实施方案中，所述足跖疾病是足跖皮炎。

在一些实施方案中，所述至少一种微生物物种是古生菌、细菌、原生动物、病毒、噬菌体、寄生虫或真菌。

在一些实施方案中，所述微生物物种是细菌。在一些实施方案中，所述至少一种微生物物种是革兰氏阳性细菌。在一些实施方案中，所述革兰氏阳性细菌是球菌细菌。在一些实施方案中，所述革兰氏阳性细菌是金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、阿涅蒂斯葡萄球菌、海氏肠球菌、缓慢葡萄球菌或模仿葡萄球菌。

在一些实施方案中，将包含所述寡糖的所述营养组合物以足以产生所述至少一种微生物物种的所述降低水平的量施用给所述动物。在一些实施方案中，所述至少一种微生物物种的所述水平降低至少约1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、20％、30％、40％或50％。在一些实施方案中，所述至少一种微生物物种的所述水平降低至少约0.1倍、0.2倍、0.3倍、0.4倍、0.5倍、0.6倍、0.7倍、0.8倍、0.9倍、1倍、2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍或10倍。

在一些实施方案中，相对于来自已经被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物的胃肠样品中至少一种代谢物的水平，来自所述动物的胃肠样品中所述至少一种代谢物的水平增加或降低。在一些实施方案中，所述方法其中相对于在所述向所述动物施用所述营养组合物之前来自所述动物的胃肠样品中至少一种代谢物的水平，所述胃肠样品中所述至少一种代谢物的所述水平降低。在一些实施方案中，相对于来自已经被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物的胃肠样品中所述至少一种代谢物的降低，来自所述动物的所述胃肠样品中所述至少一种代谢物的所述降低是更大的降低。在一些实施方案中，相对于来自已经被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物的胃肠样品中至少一种代谢物的水平，所述胃肠样品中所述至少一种代谢物的所述水平降低。

在一些实施方案中，所述相对丰度通过LC-MS/MS来测定。

在一个方面，本文提供了在动物中预防足跖疾病或降低其严重程度的方法，所述方法包括：向所述动物施用包含基础营养组合物和合成寡糖制剂的营养组合物，其中所述合成寡糖制剂包含各自具有选自1至n的不同聚合度的至少n种寡糖级分(DP1至DPn级分)，其中n是大于3的整数；并且其中DP1和DP2级分中的每一种独立地包含如通过质谱法测定的按相对丰度计约0.5％至约15％的含脱水亚基寡糖，并且其中相对于来自已经被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物的粪便样品中与足跖疾病相关联的至少一种微生物物种的水平，来自所述动物的粪便样品中与足跖疾病相关联的所述至少一种微生物物种的水平降低。

在一些实施方案中，所述足跖疾病是足跖皮炎。

在一些实施方案中，所述相对丰度通过LC-MS/MS来测定。

在一个方面，本文提供了将代谢物靶向至动物的胃肠道中的靶隔室的方法，所述方法包括向动物施用包含基础营养组合物和合成寡糖制剂的营养组合物，其中所述合成寡糖制剂包含各自具有选自1至n的不同聚合度的至少n种寡糖级分(DP1至DPn级分)，其中n是大于3的整数；并且其中DP1和DP2级分中的每一种独立地包含如通过质谱法测定的按相对丰度计约0.5％至约15％的含脱水亚基寡糖，并且其中相对于在所述向所述动物施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前来自所述动物的所述靶胃肠隔室的样品中至少一种代谢物的水平，来自所述动物的所述靶胃肠隔室的样品中所述至少一种代谢物的水平增加。

在一些实施方案中，所述胃肠隔室是后肠的一部分。在一些实施方案中，后肠的所述部分是盲肠。在一些实施方案中，后肠的所述部分是下消化道。在一些实施方案中，后肠的所述部分是升结肠。

在一些实施方案中，所述代谢物是短链脂肪酸(SCFA)、胆汁酸、多酚、氨基酸、神经递质(或其前体)或信号传导因子。在一些实施方案中，所述代谢物是短链脂肪酸(SCFA)。在一些实施方案中，所述短链脂肪酸(SCFA)是乙酸、戊酸、异戊酸、甲酸、丙酸、丁酸或异丁酸或者其盐或酯。在一些实施方案中，所述短链脂肪酸(SCFA)是丙酸或者其盐或酯(例如，丙酸盐/酯)。在一些实施方案中，所述短链脂肪酸(SCFA)是丁酸或者其盐或酯(例如，丁酸盐/酯)。

在一些实施方案中，所述代谢物是醇。

在一些实施方案中，所述代谢物是二羟基苯甲酸。在一些实施方案中，所述二羟基苯甲酸是龙胆酸、2-焦儿茶酸、β-二羟基苯酸、γ-二羟基苯酸、原儿茶酸或α-二羟基苯酸。在一些实施方案中，所述二羟基苯甲酸是龙胆酸。在一些实施方案中，所述代谢物是对薄荷-1-烯-4-醇以及化合物1-硝基庚烷、辛醛、2-辛酮和2,3-庚烷二酮。

在一些实施方案中，所述动物是家禽、海鲜、绵羊、母牛、家牛、水牛、野牛、猪、猫、狗、兔、山羊、豚鼠、驴、骆驼、马、鸽子、雪貂、沙鼠、仓鼠、小鼠、大鼠、鱼或鸟。

在一些实施方案中，所述动物是家禽。在一些实施方案中，所述家禽是鸡、火鸡、鸭或鹅。在一些实施方案中，所述家禽是鸡。在一些实施方案中，所述鸡是肉鸡、蛋鸡或种鸡。

在一些实施方案中，所述动物是猪。在一些实施方案中，所述猪是保育猪、生长猪或肥育猪。

在一些实施方案中，所述动物是鱼。在一些实施方案中，所述鱼是鲑鱼、罗非鱼或热带鱼。

在一些实施方案中，所述动物是家畜动物。

在一些实施方案中，所述动物是伴侣动物。在一些实施方案中，所述伴侣动物是猫、狗、仓鼠、兔、豚鼠、雪貂、沙鼠、鸟或小鼠。

在一些实施方案中，所述相对丰度通过LC-MS/MS来测定。

在一个方面，本文提供了将代谢物靶向至动物的胃肠道中的靶隔室的方法，所述方法包括向动物施用包含基础营养组合物和合成寡糖制剂的营养组合物，其中所述合成寡糖制剂包含各自具有选自1至n的不同聚合度的至少n种寡糖级分(DP1至DPn级分)，其中n是大于3的整数；并且其中DP1和DP2级分中的每一种独立地包含如通过质谱法测定的按相对丰度计约0.5％至约15％的含脱水亚基寡糖，并且其中相对于来自被施用缺乏所述合成寡糖制剂的营养组合物的所述可比对照动物的所述靶胃肠隔室的样品中至少一种代谢物的水平，来自所述动物的所述靶胃肠隔室的样品中所述至少一种代谢物的水平增加。

在一些实施方案中，所述代谢物是醇。

在一些实施方案中，所述动物是家畜动物。

在一些实施方案中，所述相对丰度通过LC-MS/MS来测定。

在一个方面，本文提供了用于增加反刍动物的产乳量或改善乳组成特征的方法，所述方法包括：向反刍动物施用包含基础营养组合物和合成寡糖制剂的营养组合物，其中所述合成寡糖制剂包含各自具有选自1至n的不同聚合度的至少n种寡糖级分(DP1至DPn级分)，其中n是大于3的整数；并且其中DP1和DP2级分中的每一种独立地包含如通过质谱法测定的按相对丰度计约0.5％至约15％的含脱水亚基寡糖；并且其中相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照反刍动物，被施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物的所述反刍动物表现出产乳量的增加或至少一种改善的乳组成特征。

在一些实施方案中，将包含所述寡糖的所述营养组合物以足以产生所述增加的产乳量或所述至少一种改善的乳组成特征的量施用给所述动物。

在一些实施方案中，所述反刍动物在所述反刍动物的瘤胃中具有增加水平的至少一种挥发性脂肪酸。在一些实施方案中，所述至少一种挥发性脂肪酸是乙酸、丙酸或丁酸。在一些实施方案中，所述反刍动物在所述反刍动物的瘤胃中具有增加水平的乙酸、丙酸或丁酸或其任何组合。

在一些实施方案中，所述至少一种挥发性脂肪酸的所述水平增加至少约1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、20％、30％、40％或50％。在一些实施方案中，所述至少一种挥发性脂肪酸的所述水平增加至少约0.1倍、0.2倍、0.3倍、0.4倍、0.5倍、0.6倍、0.7倍、0.8倍、0.9倍、1倍、2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍或10倍。

在一些实施方案中，所述反刍动物是母牛。

在一些实施方案中，所述反刍动物还表现出：至少一种改善的表型性状：改善的饲料利用效率、改善的消化率、多糖和木质素降解的增加、瘤胃中脂肪酸浓度的增加、瘤胃中的pH平衡、甲烷排放的减少、粪产生的减少、改善的干物质摄入、改善的氮利用效率或其任何组合；每一种相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照反刍动物。

在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照反刍动物，所述反刍动物表现出产乳量的增加，从而导致乳产量的测量增加。在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照反刍动物，所述反刍动物表现出产乳量的增加，从而导致能量校正乳的测量增加。

在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照反刍动物，所述反刍动物表现出乳固体的增加。

在一些实施方案中，所述反刍动物表现出以下的改善的乳组成特征：一种或多种乳脂的增加、一种或多种乳蛋白的增加、乳中碳水化合物的增加、乳中维生素的增加、乳中矿物质的增加或其任何组合；每一种相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照反刍动物。

在一些实施方案中，所述反刍动物还表现出：至少一种改善的表型性状：改善的饲料利用效率、改善的消化率、多糖和木质素降解的增加、瘤胃中脂肪酸浓度的增加、瘤胃中的pH平衡、甲烷排放的减少、粪产生的减少、改善的干物质摄入、改善的氮利用效率或其任何组合；每一种相对于在所述施用包含合成寡糖制剂的所述营养组合物之前的所述反刍动物。

在一些实施方案中，相对于在所述施用包含合成寡糖制剂的所述营养组合物之前的所述反刍动物，所述反刍动物表现出产乳量的增加，从而导致乳产量的测量增加。

在一些实施方案中，相对于在所述施用包含合成寡糖制剂的所述营养组合物之前的所述反刍动物，所述反刍动物表现出产乳量的增加，从而导致能量校正乳的测量增加。

在一些实施方案中，相对于在所述施用包含合成寡糖制剂的所述营养组合物之前的所述反刍动物，所述反刍动物表现出乳固体的增加。

在一些实施方案中，所述反刍动物表现出以下的改善的乳组成特征：一种或多种乳脂的增加、一种或多种乳蛋白的增加、乳中碳水化合物的增加、乳中维生素的增加、乳中矿物质的增加或其任何组合；每一种相对于在所述施用包含合成寡糖制剂的所述营养组合物之前的所述反刍动物。

在一些实施方案中，所述相对丰度通过LC-MS/MS来测定。

在一个方面，本文提供了用于增加反刍动物的产乳量或改善乳组成特征的方法，所述方法包括：向反刍动物施用包含基础营养组合物和合成寡糖制剂的营养组合物，其中所述合成寡糖制剂包含各自具有选自1至n的不同聚合度的至少n种寡糖级分(DP1至DPn级分)，其中n是大于3的整数；并且其中DP1和DP2级分中的每一种独立地包含如通过质谱法测定的按相对丰度计约0.5％至约15％的含脱水亚基寡糖；并且其中与在施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前的所述反刍动物相比，被施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物的所述反刍动物表现出产乳量的增加或至少一种改善的乳组成特征。

在一些实施方案中，所述反刍动物是母牛。

在一些实施方案中，所述相对丰度通过LC-MS/MS来测定。

在一个方面，本文提供了改善动物肉的脂肪纹路的方法，所述方法包括向动物施用包含基础营养组合物和合成寡糖制剂的营养组合物，其中所述合成寡糖制剂包含各自具有选自1至n的不同聚合度的至少n种寡糖级分(DP1至DPn级分)，其中n是大于3的整数；并且其中DP1和DP2级分中的每一种独立地包含如通过质谱法测定的按相对丰度计约0.5％至约15％的含脱水亚基寡糖；其中将所述合成寡糖制剂以足以改善来自所述动物的肉的脂肪纹路的剂量施用。

在一些实施方案中，将所述合成寡糖制剂以足以改善所述动物肉的光泽、硬度和质地的量施用。

在一些实施方案中，将所述合成寡糖制剂在宰杀前长达150天的时段期间施用给所述动物。

在一些实施方案中，所述动物是家养肉牛。

在一些实施方案中，所述相对丰度通过LC-MS/MS来测定。

在一个方面，本文提供了减少来自反刍动物的气体排放的方法，所述方法包括：向反刍动物施用包含基础营养组合物和合成寡糖制剂的营养组合物，其中所述合成寡糖制剂包含各自具有选自1至n的不同聚合度的至少n种寡糖级分(DP1至DPn级分)，其中n是大于3的整数；并且其中DP1和DP2级分中的每一种独立地包含如通过质谱法测定的按相对丰度计约0.5％至约15％的含脱水亚基寡糖；其中将所述合成寡糖制剂以与被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照反刍动物相比足以减少来自所述动物的至少一种气体的排放的剂量施用。

在一些实施方案中，所述气体是氨、二氧化碳、甲烷或一氧化二氮。

在一些实施方案中，所述反刍动物是母牛、公牛、绵羊、山羊、羚羊、黑斑羚、瞪羚或鹿。

在一些实施方案中，所述减少是根据所述反刍动物的活重的磅。

在一些实施方案中，所述减少是根据所述反刍动物的温屠体重量的磅。

在一些实施方案中，所述相对丰度通过LC-MS/MS来测定。

在一些实施方案中，所述寡糖制剂的至少5、10、20或30种DP级分中寡糖的相对丰度随其聚合度单调降低。在一些实施方案中，所述寡糖制剂的n种级分中的每一种中寡糖的相对丰度随其聚合度单调降低。在一些实施方案中，n是至少4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99或100。

在一些实施方案中，所述寡糖制剂的至少一种级分包含按相对丰度计少于80％、70％、60％、50％、40％、30％、20％、19％、18％、17％、16％、15％、14％、13％、12％、11％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％或2％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含按相对丰度计少于80％、70％、60％、50％、40％、30％、20％、19％、18％、17％、16％、15％、14％、13％、12％、11％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％或2％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，所述寡糖制剂的每种级分包含按相对丰度计少于80％、70％、60％、50％、40％、30％、20％、19％、18％、17％、16％、15％、14％、13％、12％、11％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％或2％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，所述寡糖制剂的至少一种级分包含按相对丰度计少于10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％或2％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含按相对丰度计少于10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％或2％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，所述寡糖制剂的每种级分包含按相对丰度计少于10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％或2％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，所述寡糖的至少一种级分包含按相对丰度计大于2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％、30％、40％、50％、60％、70％或80％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含按相对丰度计大于2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％、30％、40％、50％、60％、70％或80％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，所述寡糖制剂的每种级分包含按相对丰度计大于2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％、30％、40％、50％、60％、70％或80％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，所述寡糖制剂的至少一种级分包含按相对丰度计大于20％、21％、22％、23％、24％或25％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含按相对丰度计大于20％、21％、22％、23％、24％或25％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，所述寡糖制剂的每种级分包含按相对丰度计大于20％、21％、22％、23％、24％或25％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，超过99％、95％、90％、85％、80％、75％、70％、65％、60％、55％、50％、45％、40％、35％或30％的所述含脱水亚基寡糖仅具有一个脱水亚基。

在一些实施方案中，所述寡糖制剂具有按相对丰度计1％至40％的DP1级分含量。在一些实施方案中，所述寡糖制剂具有按相对丰度计1％至35％的DP2级分含量。在一些实施方案中，所述寡糖制剂具有按相对丰度计1％至30％的DP3级分含量。在一些实施方案中，所述寡糖制剂具有按相对丰度计0.1％至20％的DP4级分含量。在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含按相对丰度计0.1％至15％的DP5级分含量。在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含DP2级分和DP1级分，其中所述DP2级分与所述DP1级分的比率按相对丰度计是0.02-0.40。在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含DP3级分和DP2级分，其中所述寡糖制剂中所述DP3级分与所述DP2级分的比率按相对丰度计是0.01-0.30。在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含DP1级分和DP2级分，其中所述寡糖制剂中所述DP1和所述DP2级分的合计含量按相对丰度计少于50％、30％或10％。在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含至少25、50、75、100、103、104、105、106、109、110、120、150或200个不同的寡糖种类。

在一些实施方案中，所述寡糖制剂的至少两种独立的寡糖包含不同的脱水亚基。在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含作为单糖的可逆热脱水产物的至少一个脱水亚基。在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含至少一个脱水葡萄糖、脱水半乳糖、脱水甘露糖、脱水阿洛糖、脱水阿卓糖、脱水古洛糖、脱水艾杜糖、脱水塔洛糖、脱水果糖、脱水核糖、脱水阿拉伯糖、脱水鼠李糖、脱水来苏糖或脱水木糖亚基。在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含至少一个脱水葡萄糖、脱水半乳糖、脱水甘露糖或脱水果糖亚基。

在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含至少一个1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖或1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖亚基。在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含至少一个1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖亚基和至少一个1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖脱水亚基。在一些实施方案中，在所述寡糖制剂中，1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖与1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖的比率是约10:1至1:10、9:1至1:10、8:1至1:10、7:1至1:10、6:1至1:10、5:1至1:10、4:1至1:10、3:1至1:10、2:1至1:10、10:1至1:9、10:1至1:8、10:1至1:7、10:1至1:6、10:1至1:5、10:1至1:4、10:1至1:3、10:1至1:2或1:1至3:1。在一些实施方案中，在所述寡糖制剂中，1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖与1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖的比率是约10:1、9:1、8:1、7:1、6:1、5:1、4:1、3:1、2:1、1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1:7、1:8、1:8、1:9或1:10。在一些实施方案中，在所述寡糖制剂中，1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖与1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖的比率是约2:1。在一些实施方案中，在每种级分中，1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖与1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖的比率是约10:1至1:10、9:1至1:10、8:1至1:10、7:1至1:10、6:1至1:10、5:1至1:10、4:1至1:10、3:1至1:10、2:1至1:10、10:1至1:9、10:1至1:8、10:1至1:7、10:1至1:6、10:1至1:5、10:1至1:4、10:1至1:3、10:1至1:2或1:1至3:1。在一些实施方案中，在所述寡糖制剂的每种级分中，1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖与1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖的比率是约10:1、9:1、8:1、7:1、6:1、5:1、4:1、3:1、2:1、1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1:7、1:8、1:8、1:9或1:10。在一些实施方案中，在所述寡糖制剂的每种级分中，1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖与1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖的比率是约2:1。在一些实施方案中，所述寡糖制剂中至少1％、5％、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％或90％的所述脱水亚基选自1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖和1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖。

在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含作为糖焦糖化产物的至少一个脱水亚基。在一些实施方案中，所述糖焦糖化产物选自：甲醇；乙醇；呋喃；甲基乙二醛；2-甲基呋喃；乙酸乙烯酯；乙醇醛；乙酸；丙酮醇；糠醛；2-呋喃甲醇；3-呋喃甲醇；2-羟基环戊-2-烯-1-酮；5-甲基糠醛；2(5H)-呋喃酮；2甲基环戊烯醇酮；左旋葡萄糖酮；环状羟基内酯；1,4,3,6-二脱水-α-D-吡喃葡萄糖；二脱水吡喃葡萄糖；和5-羟基甲基糠醛(5-hmf)。在一些实施方案中，所述寡糖制剂中约0.1％至5％、0.1％至2％或0.1％至1％的所述脱水亚基是焦糖化产物。

在一些实施方案中，所述寡糖制剂中至少30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％或99％的含脱水亚基寡糖包含链端脱水亚基。

在一些实施方案中，所述寡糖制剂的重均分子量是约300至5000g/mol、500至5000g/mol、700至5000g/mol、500至2000g/mol、700至2000g/mol、700至1500g/mol、300至1500g/mol、300至2000g/mol、400至1300g/mol、400至1200g/mol、400至1100g/mol、500至1300g/mol、500至1200g/mol、500至1100g/mol、600至1300g/mol、600至1200g/mol或600至1100g/mol。在一些实施方案中，所述寡糖制剂的数均分子量是约300至5000g/mol、500至5000g/mol、700至5000g/mol、500至2000g/mol、700至2000g/mol、700至1500g/mol、300至1500g/mol、300至2000g/mol、400至1000g/mol、400至900g/mol、400至800g/mol、500至900g/mol或500至800g/mol。在一些实施方案中，所述寡糖制剂的重均分子量是约2000至2800g/mol、2100至2700g/mol、2200至2600g/mol、2300至2500g/mol或2320至2420g/mol。在一些实施方案中，所述寡糖制剂的数均分子量是约1000至2000g/mol、1100至1900g/mol、1200至1800g/mol、1300至1700g/mol、1400至1600g/mol或1450至1550g/mol。

本文提供了促进或抑制动物的胃肠道中一种或多种代谢物的产生的方法，所述方法包括：向所述动物施用包含基础营养组合物和本文所述的合成寡糖制剂的营养组合物。

在一些实施方案中，所述合成寡糖制剂包含各自具有选自1至n的不同聚合度的至少n种寡糖级分(DP1至DPn级分)，其中n是大于2的整数；其中每种级分包含如通过质谱法测量的按相对丰度计1％至90％的含脱水亚基寡糖。

在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中一种或多种代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更高或更低。在一些实施方案中，相对于在施用包含所述寡糖制剂的所述营养组合物之前所述动物的胃肠道中一种或多种代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更高或更低。

在一些实施方案中，所述方法包括从所述动物获得胃肠样品。在一些实施方案中，所述样品是胃肠道组织的活检(例如，盲肠活检)或粪便样品。在一些实施方案中，所述方法包括检测所述样品中所述一种或多种代谢物的水平。在一些实施方案中，所述代谢物的水平通过色谱法(例如，气相或液相色谱法)与波谱法(例如，核磁共振波谱法(NMR)，例如1H-NMR)的组合来测定。

在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中2、3、4、5、6、7、8、9、10种或更多种代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平各自更高或更低。在一些实施方案中，相对于在施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前所述动物的胃肠道中2、3、4、5、6、7、8、9、10种或更多种代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平各自更高或更低。在一些实施方案中，所述方法包括检测所述样品中第2种、第3种、第4种、第5种、第6种、第7种、第8种、第9种和第10种代谢物中的至少一种的水平。在一些实施方案中，所述代谢物的水平通过色谱法(例如，气相或液相色谱法)与波谱法(例如，核磁共振波谱法(NMR)，例如1H-NMR)的组合来测定。

在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中所述代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更高。在一些实施方案中，相对于在施用包含所述寡糖制剂的所述营养组合物之前所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更高。

在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中所述代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更低。在一些实施方案中，相对于在施用包含所述寡糖制剂的所述营养组合物之前所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更低。

在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中所述代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更高，并且其中相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中第2种、第3种、第4种、第5种、第6种、第7种、第8种、第9种和第10种代谢物中的至少一种的水平，所述动物的胃肠道中的所述代谢物更低。

在一些实施方案中，相对于在施用包含所述寡糖制剂的所述营养组合物之前所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更高，并且其中相对于在施用包含所述寡糖制剂的所述营养组合物之前所述动物的胃肠道中第2种、第3种、第4种、第5种、第6种、第7种、第8种、第9种和第10种代谢物中的至少一种的水平，所述动物的胃肠道中的所述代谢物更低。

在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中所述代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更高，并且其中相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中第2种、第3种、第4种、第5种、第6种、第7种、第8种、第9种和第10种代谢物中的至少一种的水平，所述动物的胃肠道中的所述代谢物更高。

在一些实施方案中，相对于在施用包含所述寡糖制剂的所述营养组合物之前所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更高，并且其中相对于在施用包含所述寡糖制剂的所述营养组合物之前所述动物的胃肠道中第2种、第3种、第4种、第5种、第6种、第7种、第8种、第9种和第10种代谢物中的至少一种的水平，所述动物的胃肠道中的所述代谢物更高。

在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中所述代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更低，并且其中相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中第2种、第3种、第4种、第5种、第6种、第7种、第8种、第9种和第10种代谢物中的至少一种的水平，所述动物的胃肠道中的所述代谢物更低。

在一些实施方案中，相对于在施用包含所述寡糖制剂的所述营养组合物之前所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更低，并且其中相对于在施用包含所述寡糖制剂的所述营养组合物之前所述动物的胃肠道中第2种、第3种、第4种、第5种、第6种、第7种、第8种、第9种和第10种代谢物中的至少一种的水平，所述动物的胃肠道中的所述代谢物更低。

在一些实施方案中，所述代谢物是丁酸、丙酸、乙酸、乳酸、戊酸、异戊酸、氨基-SCFA、硫代酸盐/酯、萜类化合物、a-萜类化合物、精油、倍他唑、乳寡糖、岩藻糖基化寡糖、2'-岩藻糖基乳糖(2FL)、唾液酸化寡糖、类固醇、胺、三甲胺、氨、吲哚、硫酸吲哚酚、促炎代谢物、组胺、脂多糖、倍他唑、γ-氨基丁酸(GABA)、芳樟醇、桉树脑、香叶醇、二肽、脂肪醇、对甲酚、硫化物、硫化氢、挥发性胺、硫醇、多巴胺、氨基吲哚、脂溶性代谢物、脂族醛、脂族酮、2-甲硫基乙醇、3-甲基-2-丁酮、3-甲基丁醛、戊醛、3-羟基-2-丁酮、(E)-2-戊烯醛、1-戊醇、(E)-2-癸烯醛、己醛、(E)-2-己烯醛、1-己醇、庚醛、苯乙烯、肟-、甲氧基-苯基-丁内酯、(E)-2-庚烯醛、苯甲醛、二甲基三硫化物、1-庚醇、辛醛、1-辛烯-3-酮、1-辛烯-3-醇、(E,E)-2,4-庚二烯醛、2-乙酰基噻唑、D-柠檬烯、4-乙基环己醇、2,4-二甲基-环己醇、(E)-2-辛烯醛、苯乙醛、1-辛醇、2-丁基-环己酮、4-(苯甲酰氧基)-(E)-2-辛烯-1-醇、1-辛醇、十八酸、乙烯酯、壬醛、(E)-2-壬烯-1-醇、3-十八炔、环辛烷甲醇、十二醛、(E)-2-壬烯醛、2,6/3,5-二甲基苯甲醛、1-壬醇、2-正庚基呋喃、顺式-4-癸烯醛、癸醛、(E,E)-2,4-壬二烯醛、1,3-己二烯、3-乙基-2-甲基-2-壬烯醛、(E)-2-十一烯醛、反式-3-壬烯-2-酮、2,5-呋喃二酮、3-十二烯基-反式-2-十一烯-1-醇或花生酸。

在一些实施方案中，第2种、第3种、第4种、第5种、第6种、第7种、第8种、第9种和第10种代谢物中的至少一种是短链脂肪酸(SCFA)、胆汁酸、多酚、氨基酸、神经递质(或前体神经递质)、信号传导因子或含氮代谢物。

在一些实施方案中，第2种、第3种、第4种、第5种、第6种、第7种、第8种、第9种和第10种代谢物中的至少一种是丁酸、丙酸、乙酸、乳酸、戊酸、异戊酸、氨基-SCFA、硫代酸盐/酯、萜类化合物、a-萜类化合物、精油、倍他唑、乳寡糖、岩藻糖基化寡糖、2'-岩藻糖基乳糖(2FL)、唾液酸化寡糖、类固醇、胺、三甲胺、氨、吲哚、硫酸吲哚酚、促炎代谢物、组胺、脂多糖、倍他唑、γ-氨基丁酸(GABA)、芳樟醇、桉树脑、香叶醇、二肽、脂肪醇、对甲酚、硫化物、硫化氢、挥发性胺、硫醇、多巴胺、氨基吲哚、脂溶性代谢物、脂族醛、脂族酮、2-甲硫基乙醇、3-甲基-2-丁酮、3-甲基丁醛、戊醛、3-羟基-2-丁酮、(E)-2-戊烯醛、1-戊醇、(E)-2-癸烯醛、己醛、(E)-2-己烯醛、1-己醇、庚醛、苯乙烯、肟-、甲氧基-苯基-丁内酯、(E)-2-庚烯醛、苯甲醛、二甲基三硫化物、1-庚醇、辛醛、1-辛烯-3-酮、1-辛烯-3-醇、(E,E)-2,4-庚二烯醛、2-乙酰基噻唑、D-柠檬烯、4-乙基环己醇、2,4-二甲基-环己醇、(E)-2-辛烯醛、苯乙醛、1-辛醇、2-丁基-环己酮、4-(苯甲酰氧基)-(E)-2-辛烯-1-醇、1-辛醇、十八酸、乙烯酯、壬醛、(E)-2-壬烯-1-醇、3-十八炔、环辛烷甲醇、十二醛、(E)-2-壬烯醛、2,6/3,5-二甲基苯甲醛、1-壬醇、2-正庚基呋喃、顺式-4-癸烯醛、癸醛、(E,E)-2,4-壬二烯醛、1,3-己二烯、3-乙基-2-甲基-2-壬烯醛、(E)-2-十一烯醛、反式-3-壬烯-2-酮、2,5-呋喃二酮、3-十二烯基-反式-2-十一烯-1-醇或花生酸。

在一些实施方案中，所述代谢物是短链脂肪酸(SCFA)。在一些实施方案中，所述短链脂肪酸(SCFA)选自：乙酸、乳酸、异戊酸、丙酸和丁酸。在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中所述代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更高。在一些实施方案中，相对于在施用缺乏所述寡糖制剂的所述营养组合物之前所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更高。在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含由半乳糖和葡萄糖或果糖和葡萄糖组成的寡糖。

在一些实施方案中，所述代谢物是氨基-短链脂肪酸(氨基-SCFA)。在一些实施方案中，所述氨基-SCFA是γ-氨基丁酸(GABA)。在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中所述代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更高。

在一些实施方案中，所述代谢物是神经递质。在一些实施方案中，所述神经递质是多巴胺。在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中所述代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更高。

在一些实施方案中，所述代谢物是含氮代谢物。在一些实施方案中，所述含氮代谢物选自：氨、三甲胺、吲哚和对甲酚。在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述寡糖制剂的营养组合物的动物中所述含氮代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更低。在一些实施方案中，相对于在施用缺乏所述寡糖制剂的所述营养组合物之前所述动物中所述含氮代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更低。

在一些实施方案中，所述代谢物是二肽、脂肪醇或a-萜类化合物。在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中所述代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更高。在一些实施方案中，相对于在施用包含所述寡糖制剂的所述营养组合物之前所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更高。

在一些实施方案中，代谢物是芳樟醇、桉树脑或香叶醇。在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中所述代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更高。在一些实施方案中，相对于在施用包含所述寡糖制剂的所述营养组合物之前所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更高。在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含由葡萄糖；或葡萄糖和半乳糖；或葡萄糖、半乳糖和甘露糖组成的寡糖。

在一些实施方案中，所述代谢物是促炎代谢物。在一些实施方案中，所述代谢物是组胺。在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述寡糖制剂的营养组合物的动物中所述促炎代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更低。

在一些实施方案中，所述动物是家畜。在一些实施方案中，所述动物是伴侣动物。在一些实施方案中，所述动物是鱼(例如鲑鱼、罗非鱼、热带鱼)、家禽(例如鸡、火鸡)、海鲜(例如虾)、绵羊、母牛、家牛、水牛、野牛、猪(例如保育猪、生长猪/肥育猪)、猫、狗、兔、山羊、豚鼠、驴、骆驼、马、鸽子、雪貂、沙鼠、仓鼠、小鼠、大鼠、鸟或人。在一些实施方案中，所述动物是家禽。在一些实施方案中，所述动物是鸡(例如肉鸡、蛋鸡、种鸡)、火鸡、鸭或鹅。在一些实施方案中，所述动物是猪(例如保育猪、生长猪/肥育猪)。

在一些实施方案中，所述营养组合物是本文所述的动物饲料组合物。在一些实施方案中，所述基础营养组合物是本文所述的基础动物饲料。

本文提供了改善动物的生长的方法，所述方法包括：向所述动物施用包含基础营养组合物和本文所述的合成寡糖制剂的营养组合物。

在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中一种或多种代谢物的水平或相对于在施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更高或更低。

在一些实施方案中，施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物导致以下中的至少一种：a)相对于在施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前所述动物的体重更高的体重，b)相对于在施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前所述动物的饲料转化率更低的饲料转化率，和c)相对于在施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前所述动物的饲料效率更高的饲料效率。

在一些实施方案中，施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物导致以下中的至少一种：a)相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的营养组合物的动物的体重更高的体重，b)相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的营养组合物的动物的饲料转化率更低的饲料转化率，和c)相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的营养组合物的动物的饲料效率更高的饲料效率。

在一些实施方案中，所述代谢物是短链脂肪酸(SCFA)、胆汁酸、多酚、氨基酸、神经递质、信号传导因子或含氮代谢物。

在一些实施方案中，所述代谢物是含氮代谢物。在一些实施方案中，所述含氮代谢物选自：氨和吲哚。在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述寡糖制剂的营养组合物的动物中所述含氮代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更低。在一些实施方案中，相对于在施用缺乏所述寡糖制剂的所述营养组合物之前所述动物中所述含氮代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更低。

本文提供了改善动物的粪便品质的方法，所述方法包括：向所述动物施用包含基础营养组合物和合成寡糖制剂的营养组合物，其中所述合成寡糖制剂包含各自具有选自1至n的不同聚合度的至少n种寡糖级分(DP1至DPn级分)，其中n是大于2的整数；其中每种级分包含如通过质谱法测量的按相对丰度计1％至90％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，施用导致以下中的至少一种：粪便稠度改善、粪便中一种或多种病原性微生物的水平降低以及粪便气味减小；每一种相对于被施用缺乏所述寡糖制剂的营养组合物的动物或相对于在施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前的所述动物。

在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述寡糖制剂的营养组合物的动物或相对于在施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前的所述动物的粪便稠度，所述动物的粪便稠度更大。

在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述寡糖制剂的营养组合物的动物或相对于在施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前的所述动物的粪便，来自所述动物粪便的一种或多种气味排放的水平更低。

在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述寡糖制剂的营养组合物的动物或相对于在施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前的所述动物的褥草，所述动物粪便褥草中一种或多种病原体的水平更低。

在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中一种或多种代谢物的水平或相对于在施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前的所述动物，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更高或更低。

在一些实施方案中，所述方法包括从所述动物获得胃肠样品。在一些实施方案中，所述样品是胃肠道组织的活检(例如，盲肠活检)或粪便样品。在一些实施方案中，所述方法包括检测所述样品中所述代谢物的水平。在一些实施方案中，所述代谢物通过色谱法(例如，气相或液相色谱法)与波谱法(例如，核磁共振波谱法(NMR)，例如1H-NMR)的组合来检测。在一些实施方案中，所述代谢物的水平更低。在一些实施方案中，所述代谢物是含氮代谢物。在一些实施方案中，所述代谢物是挥发性胺、硫醇或硫化物。在一些实施方案中，所述代谢物是氨。

在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的营养组合物的动物的粪便，所述动物的粪便中一种或多种代谢物的水平更高或更低。在一些实施方案中，所述代谢物的水平更低。在一些实施方案中，所述代谢物是含氮代谢物。在一些实施方案中，所述代谢物是挥发性胺、硫醇或硫化物。在一些实施方案中，所述代谢物是氨。

本文提供的方法包括在动物中预防足跖疾病的方法，所述方法包括：向所述动物施用包含基础营养组合物和合成寡糖制剂的营养组合物，其中所述合成寡糖制剂包含各自具有选自1至n的不同聚合度的至少n种寡糖级分(DP1至DPn级分)，其中n是大于2的整数；其中每种级分包含如通过质谱法测量的按相对丰度计1％至90％的含脱水亚基寡糖，并且其中相对于被施用缺乏所述寡糖制剂的营养组合物的动物的褥草，所述动物粪便褥草中与足跖皮炎相关联的一种或多种病原体的水平更低。在一些实施方案中，所述疾病是足跖皮炎。

本公开文本至少部分地基于以下发现：包含一种或多种脱水亚基的寡糖选择性地促进或抑制与动物健康和幸福相关联的胃肠代谢物的水平。因此，本公开文本的特征尤其在于维持或改善动物健康的方法，所述方法包括施用本文所述的寡糖制剂。

本文提供了维持或改善动物健康的方法，所述方法包括：向所述动物施用包含基础营养组合物和合成寡糖制剂的营养组合物，其中所述合成寡糖制剂包含各自具有选自1至n的不同聚合度的至少n种寡糖级分(DP1至DPn级分)，其中n是大于2的整数；其中每种级分包含如通过质谱法测量的按相对丰度计1％至90％的含脱水亚基寡糖。

在一些实施方案中，施用导致以下中的至少一种：a)营养物吸收改善，b)线粒体功能改善，c)肝功能改善，d)肾功能改善，e)社交性改善，f)情绪改善，g)能量改善，h)饱腹感改善，以及i)警觉性改善；每一种相对于被施用缺乏所述寡糖制剂的营养组合物的动物，或相对于在施用包含所述寡糖制剂的所述营养组合物之前的所述动物。

在一些实施方案中，所述方法包括从所述动物获得胃肠样品。在一些实施方案中，所述样品是胃肠道组织的活检(例如，盲肠活检)或粪便样品。在一些实施方案中，所述方法包括检测所述样品中所述代谢物的水平。在一些实施方案中，所述代谢物通过色谱法(例如，气相或液相色谱法)与波谱法(例如，核磁共振波谱法(NMR)，例如¹H-NMR)的组合来检测。

在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中2、3、4、5、6、7、8、9、10种或更多种代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更高或更低。在一些实施方案中，相对于在施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前所述动物的胃肠道中2、3、4、5、6、7、8、9、10种或更多种代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更高或更低。在一些实施方案中，所述方法还包括检测胃肠样品中第2种、第3种、第4种、第5种、第6种、第7种、第8种、第9种和第10种代谢物中的至少一种的水平。在一些实施方案中，所述代谢物通过色谱法(例如，气相或液相色谱法)与波谱法(例如，核磁共振波谱法(NMR)，例如¹H-NMR)的组合来检测。

在一些实施方案中，所述代谢物是短链脂肪酸(SCFA)、胆汁酸、多酚、氨基酸、神经递质、信号传导因子或含氮代谢物。在一些实施方案中，所述代谢物是芳樟醇、桉树脑、香叶醇、萜类化合物、a-萜类化合物、龙胆酸、乳寡糖、岩藻糖基化寡糖、2'-岩藻糖基乳糖(2FL)、唾液酸化寡糖、氨基异丁酸、D-α-氨基丁酸、和3-氨基异丁酸、丁酸、丙酸、乙酸、乳酸、戊酸、异戊酸、氨基-SCFA、硫代酸盐/酯、精油、倍他唑、类固醇、胺、三甲胺、氨、吲哚、硫酸吲哚酚、促炎代谢物、组胺、脂多糖、倍他唑、γ-氨基丁酸(GABA)、二肽、脂肪醇、对甲酚、硫化物、硫化氢、挥发性胺、硫醇、多巴胺、氨基吲哚。

在一些实施方案中，所述代谢物是芳樟醇、桉树脑、香叶醇、萜类化合物、a-萜类化合物、龙胆酸、乳寡糖、岩藻糖基化寡糖、2'-岩藻糖基乳糖(2FL)或唾液酸化寡糖。

在一些实施方案中，所述代谢物是芳樟醇、桉树脑、香叶醇、萜类化合物、a-萜类化合物、龙胆酸。在一些实施方案中，所述合成寡糖制剂的寡糖包含葡萄糖或由其组成。

在一些实施方案中，所述代谢物是乳寡糖、岩藻糖基化寡糖、2'-岩藻糖基乳糖(2FL)或唾液酸化寡糖。在一些实施方案中，所述合成寡糖制剂的寡糖包含葡萄糖、半乳糖和甘露糖或由其组成。

在一些实施方案中，所述代谢物是γ-氨基丁酸(GABA)、氨基异丁酸、D-α-氨基丁酸或3-氨基异丁酸。在一些实施方案中，所述合成寡糖制剂的寡糖包含葡萄糖、半乳糖和甘露糖或由其组成。

在一些实施方案中，所述代谢物是多巴胺。在一些实施方案中，所述合成寡糖制剂的寡糖包含葡萄糖或由其组成。

在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更高。在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中一种或多种微生物(例如，细菌)物种的水平，所述动物的胃肠道中所述微生物(例如，细菌)物种的水平更高。在一些实施方案中，所述微生物物种产生所述代谢物，并且其中相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中所述代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更高。

在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中一种或多种微生物(例如，细菌)物种的水平，所述动物的胃肠道中所述微生物(例如，细菌)物种的水平更低。在一些实施方案中，所述微生物(例如，细菌)物种产生所述代谢物，并且其中相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中所述代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更低。

在一些实施方案中，所述微生物物种是古生菌物种。在其他实施方案中，所述微生物物种是病毒、噬菌体或原生动物物种。在一些实施方案中，所述微生物物种是细菌物种。在一些实施方案中，所述动物是家畜。在一些实施方案中，所述动物是鱼(例如鲑鱼、罗非鱼、热带鱼)、家禽(例如鸡、火鸡)、海鲜(例如虾)、绵羊、母牛、家牛、水牛、野牛、猪(例如保育猪、生长猪/肥育猪)、猫、狗、兔、山羊、豚鼠、驴、骆驼、马、鸽子、雪貂、沙鼠、仓鼠、小鼠、大鼠、鸟或人。在一些实施方案中，所述动物是家禽。在一些实施方案中，所述动物是鸡(例如肉鸡、蛋鸡、种鸡)、火鸡、鸭或鹅。

在一些实施方案中，所述动物是伴侣动物。在一些实施方案中，所述动物选自：狗、猫、仓鼠、兔、雪貂、豚鼠和小鼠。

本文提供的方法包括改善动物肉的方法，所述方法包括：向所述动物施用包含基础营养组合物和合成寡糖制剂的营养组合物，其中所述合成寡糖制剂包含各自具有选自1至n的不同聚合度的至少n种寡糖级分(DP1至DPn级分)，其中n是大于2的整数；其中每种级分包含如通过质谱法测量的按相对丰度计1％至90％的含脱水亚基寡糖，其中相对于被施用缺乏所述寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中的水平，所述动物的胃肠道中一种或多种代谢物的水平更高或更低。

在一些实施方案中，所述方法还包括从所述动物获得胃肠样品。在一些实施方案中，所述样品是胃肠道组织的活检(例如，盲肠活检)或粪便样品。在一些实施方案中，所述方法包括检测所述样品中所述代谢物的水平。在一些实施方案中，所述代谢物通过色谱法(例如，气相或液相色谱法)与波谱法(例如，核磁共振波谱法(NMR)，例如¹H-NMR)的组合来检测。

在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中2、3、4、5、6、7、8、9、10种或更多种代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更高或更低。在一些实施方案中，所述方法包括测定胃肠样品中第2种、第3种、第4种、第5种、第6种、第7种、第8种、第9种和第10种代谢物中的至少一种的水平。在一些实施方案中，所述代谢物通过色谱法(例如，气相或液相色谱法)与波谱法(例如，核磁共振波谱法(NMR)，例如¹H-NMR)的组合来测定。

在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中所述代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更高。在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中所述代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更低。

在一些实施方案中，所述代谢物是脂溶性代谢物、脂族醛、脂族酮、1-甲硫基丙烷、2-甲硫基乙醇、对薄荷-1-烯-4-醇以及化合物1-硝基庚烷、辛醛、2-辛酮、和2,3-庚烷二酮、3-甲基-2-丁酮、3-甲基丁醛、戊醛、3-羟基-2-丁酮、(E)-2-戊烯醛、1-戊醇、(E)-2-癸烯醛、己醛、(E)-2-己烯醛、1-己醇、庚醛、苯乙烯、肟-、甲氧基-苯基-丁内酯、(E)-2-庚烯醛、苯甲醛、二甲基三硫化物、1-庚醇、辛醛、1-辛烯-3-酮、1-辛烯-3-醇、(E,E)-2,4-庚二烯醛、2-乙酰基噻唑、D-柠檬烯、4-乙基环己醇、2,4-二甲基-环己醇、(E)-2-辛烯醛、苯乙醛、1-辛醇、2-丁基-环己酮、4-(苯甲酰氧基)-(E)-2-辛烯-1-醇、1-辛醇、十八酸、乙烯酯、壬醛、(E)-2-壬烯-1-醇、3-十八炔、环辛烷甲醇、十二醛、(E)-2-壬烯醛、2,6/3,5-二甲基苯甲醛、1-壬醇、2-正庚基呋喃、顺式-4-癸烯醛、癸醛、(E,E)-2,4-壬二烯醛、1,3-己二烯、3-乙基-2-甲基-2-壬烯醛、(E)-2-十一烯醛、反式-3-壬烯-2-酮、2,5-呋喃二酮、3-十二烯基-反式-2-十一烯-1-醇或花生酸。

在一些实施方案中，所述代谢物是1-甲硫基丙烷或2-甲硫基乙醇。在一些实施方案中，所述合成寡糖制剂的寡糖包含葡萄糖、半乳糖和甘露糖或由其组成。

在一些实施方案中，所述代谢物是对薄荷-1-烯-4-醇以及化合物1-硝基庚烷、辛醛、2-辛酮和2,3-庚烷二酮。在一些实施方案中，所述合成寡糖制剂的寡糖包含葡萄糖或由其组成。

在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中一种或多种微生物(例如，细菌)物种的水平，所述动物的胃肠道中所述微生物(例如，细菌)物种的水平更高。在一些实施方案中，所述微生物(例如，细菌)物种产生所述代谢物，并且其中相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中所述代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更高。

在一些实施方案中，所述微生物物种是古生菌物种。在其他实施方案中，所述微生物物种是病毒、噬菌体或原生动物物种。在一些实施方案中，所述微生物物种是细菌物种。

在一些实施方案中，所述动物是家畜。在一些实施方案中，所述动物是鱼(例如鲑鱼、罗非鱼、热带鱼)、家禽(例如鸡、火鸡)、海鲜(例如虾)、绵羊、母牛、家牛、水牛、野牛、猪(例如保育猪、生长猪/肥育猪)、猫、狗、兔、山羊、豚鼠、驴、骆驼、马、鸽子、雪貂、沙鼠、仓鼠、小鼠、大鼠、鸟或人。在一些实施方案中，所述动物是家禽。在一些实施方案中，所述动物是鸡(例如肉鸡、蛋鸡、种鸡)、火鸡、鸭或鹅。

本公开文本总体上涉及通过提供调节肠道微生物组的代谢输出的寡糖饲料添加剂来饲喂动物以改善所述动物的健康、营养和生长性能的方法。

本公开文本至少部分地基于以下发现：某些寡糖制剂调节肠道微生物组的代谢输出以直接在动物消化系统的相关隔室中合成饲料添加剂的活性组分。因此，本公开文本的特征尤其在于增加动物的盲肠微生物群的丁酸产生的方法和增加动物的微生物群的各种精油产生的方法。

在一个方面，本文提供了一种将一种或多种代谢物递送到动物的胃肠道中的隔室的方法，所述方法包括：向所述动物施用包含基础营养组合物和合成寡糖制剂的营养组合物，其中所述合成寡糖制剂包含各自具有选自1至n的不同聚合度的至少n种寡糖级分(DP1至DPn级分)，其中n是大于2的整数；其中每种级分包含如通过质谱法测量的按相对丰度计1％至90％的含脱水亚基寡糖，其中相对于被施用缺乏所述寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中所述一种或多种代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更高。

在另一个方面，本文提供了一种增加动物的胃肠道中的隔室中的一种或多种代谢物的方法，所述方法包括：向所述动物施用包含基础营养组合物和合成寡糖制剂的营养组合物，其中所述合成寡糖制剂包含各自具有选自1至n的不同聚合度的至少n种寡糖级分(DP1至DPn级分)，其中n是大于2的整数；其中每种级分包含如通过质谱法测量的按相对丰度计1％至90％的含脱水亚基寡糖，从而增加所述动物的胃肠道的所述隔室中所述一种或多种代谢物的水平。

在一个方面，本文提供了一种将一种或多种代谢物递送到动物的胃肠道中的隔室的方法，所述方法包括：向所述动物施用包含基础营养组合物和合成寡糖制剂的营养组合物，其中所述合成寡糖制剂通过如下方法来制造，所述方法包括将包含一种或多种进料糖和催化剂的水性组合物加热至足以诱导聚合并使所述水性组合物达到平衡的温度并且持续足以诱导聚合并使所述水性组合物达到平衡的时间，其中所述寡糖制剂包含各自具有选自1(DP1级分)至n(DPn级分)的不同聚合度的至少n种寡糖级分，其中n是大于2的整数，并且其中每种级分包含如通过质谱法测量的按相对丰度计1％至90％的含脱水亚基寡糖。

在另一个方面，本文提供了一种将一种或多种代谢物递送到动物的胃肠道中的隔室的方法，所述方法包括：通过如下方法制造用于在所述动物中施用的合成寡糖制剂，所述方法包括将包含一种或多种进料糖和催化剂的水性组合物加热至足以诱导聚合并使所述水性组合物达到平衡的温度并且持续足以诱导聚合并使所述水性组合物达到平衡的时间，其中所述寡糖制剂包含各自具有选自1(DP1级分)至n(DPn级分)的不同聚合度的至少n种寡糖级分，其中n是大于2的整数，并且其中每种级分包含如通过质谱法测量的按相对丰度计1％至90％的含脱水亚基寡糖。

在一些实施方案中，所述方法还包括将所述合成寡糖制剂与基础营养组合物合并以制造营养组合物。

在一些实施方案中，所述合成寡糖制剂通过如下方法来制造，所述方法包括将所述水性组合物加热足以使所述水性组合物达到平衡的时间，所述平衡如通过小于15％、10％或5％的一系列Km的相对标准偏差所确定的，并且其中

m是大于1且小于或等于n的整数，一系列Km包括至少5个Km数，[H₂O]表示摩尔水浓度，并且[DP1]、[DPm_-1]和[DPm]分别表示DP1、DPm-₁和DPm级分中寡糖的摩尔浓度。

在一些实施方案中，所述合成寡糖制剂通过如下方法来制造，所述方法包括将所述水性组合物加热足以使所述水性组合物达到平衡的时间，所述平衡如通过在1小时的时间段内小于15％的所述水性组合物的重均分子量的变化所确定的。

在一个方面，本文提供了一种将一种或多种代谢物递送到动物的胃肠道中的隔室的方法，所述方法包括：向所述动物施用包含基础营养组合物和合成寡糖制剂的营养组合物，其中所述合成寡糖制剂通过如下方法来制造，所述方法包括将包含一种或多种进料糖和催化剂的水性组合物加热至足以诱导聚合的温度并持续足以诱导聚合的时间，其中所述催化剂选自：(+)-樟脑-10-磺酸；2-吡啶磺酸；3-吡啶磺酸；8-羟基-5-喹啉磺酸水合物；α-羟基-2-吡啶甲烷磺酸；(β)-樟脑-10-磺酸；丁基膦酸；联苯基次膦酸；己基膦酸；甲基膦酸；苯基次膦酸；苯基膦酸；叔丁基膦酸；SS)-VAPOL磷酸氢酯；6-喹啉磺酸；3-(1-吡啶并)-1-丙烷磺酸盐；2-(2-吡啶基)乙烷磺酸；3-(2-吡啶基)-5,6-联苯基-1,2,4-三嗪-p,p'-二磺酸单钠盐水合物；1,1'-联萘-2,2'-二基-磷酸氢盐；双(4-甲氧基苯基)次膦酸；苯基(3,5-二甲苯基)次膦酸；L-磺基丙氨酸一水合物；聚(苯乙烯磺酸-共-二乙烯基苯)；和赖氨酸，并且其中所述寡糖制剂包含各自具有选自1(DP1级分)至n(DPn级分)的不同聚合度的至少n种寡糖级分，其中n是大于2的整数。

在另一个方面，本文提供了将一种或多种代谢物递送到动物的胃肠道中的隔室的方法，所述方法包括：通过如下方法制造用于在所述动物中施用的合成寡糖制剂，所述方法包括将包含一种或多种进料糖和催化剂的水性组合物加热至足以诱导聚合的温度并持续足以诱导聚合的时间，其中所述催化剂选自：(+)-樟脑-10-磺酸；2-吡啶磺酸；3-吡啶磺酸；8-羟基-5-喹啉磺酸水合物；α-羟基-2-吡啶甲烷磺酸；(β)-樟脑-10-磺酸；丁基膦酸；联苯基次膦酸；己基膦酸；甲基膦酸；苯基次膦酸；苯基膦酸；叔丁基膦酸；SS)-VAPOL磷酸氢酯；6-喹啉磺酸；3-(1-吡啶并)-1-丙烷磺酸盐；2-(2-吡啶基)乙烷磺酸；3-(2-吡啶基)-5,6-联苯基-1,2,4-三嗪-p,p'-二磺酸单钠盐水合物；1,1'-联萘-2,2'-二基-磷酸氢盐；双(4-甲氧基苯基)次膦酸；苯基(3,5-二甲苯基)次膦酸；L-磺基丙氨酸一水合物；聚(苯乙烯磺酸-共-二乙烯基苯)；和赖氨酸，其中所述寡糖制剂包含各自具有选自1(DP1级分)至n(DPn级分)的不同聚合度的至少n种寡糖级分，其中n是大于2的整数，并且其中每种级分包含如通过质谱法测量的按相对丰度计1％至90％的含脱水亚基寡糖。

在一些实施方案中，所述方法包括将所述合成寡糖制剂与基础营养组合物合并以制造营养组合物。

在一些实施方案中，所述合成寡糖制剂通过如下方法来制造，所述方法包括将所述水性组合物加热足以使所述水性组合物达到平衡的时间。

在一些实施方案中，平衡通过小于15％、10％或5％的一系列Km的相对标准偏差来确定，并且其中

在一些实施方案中，平衡通过在1小时的时间段内小于15％的水性组合物的重均分子量的变化来确定。

在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中一种或多种代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平更高。

在一些实施方案中，所述营养组合物的5％至30％的可发酵碳源自所述寡糖制剂。

在一些实施方案中，所述营养组合物的10％至20％的可发酵碳源自所述寡糖制剂。

在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含葡萄糖寡糖。

在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含葡萄糖-半乳糖-甘露糖寡糖。

在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含葡萄糖-果糖寡糖。

在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含葡萄糖-甘露糖寡糖。

在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含葡萄糖-半乳糖寡糖。

在一些实施方案中，相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中2、3、4、5、6、7、8、9、10种或更多种代谢物的水平，所述动物的胃肠道中所述代谢物的水平各自更高。

在一些实施方案中，所述一种或多种代谢物包括短链脂肪酸(SCFA)、胆汁酸、多酚、氨基酸、神经递质、信号传导因子、含氮代谢物或其任何组合。

在一些实施方案中，所述一种或多种代谢物包括丁酸(或丁酸盐/酯)、丙酸(或丙酸盐/酯)、乙酸、乳酸、戊酸、异戊酸、氨基-SCFA、硫代酸盐/酯、萜类化合物、a-萜类化合物、胺、氨、吲哚、丁酸、组胺、倍他唑、GABA、2FL、桉树脑、香叶醇、2-MThEtOH、3-甲基-2-丁酮、3-甲基丁醛、戊醛、3-羟基-2-丁酮、(E)-2-戊烯醛、1-戊醇、(E)-2-癸烯醛、己醛、(E)-2-己烯醛、1-己醇、庚醛、苯乙烯、肟-、甲氧基-苯基-丁内酯、(E)-2-庚烯醛、苯甲醛、二甲基三硫化物、1-庚醇、辛醛、1-辛烯-3-酮、1-辛烯-3-醇、(E,E)-2,4-庚二烯醛、2-乙酰基噻唑、D-柠檬烯、4-乙基环己醇、2,4-二甲基-环己醇、(E)-2-辛烯醛、苯乙醛、1-辛醇、2-丁基-环己酮、4-(苯甲酰氧基)-(E)-2-辛烯-1-醇、1-辛醇、十八酸、乙烯酯、壬醛、(E)-2-壬烯-1-醇、3-十八炔、环辛烷甲醇、十二醛、(E)-2-壬烯醛、2,6/3,5-二甲基苯甲醛、1-壬醇、2-正庚基呋喃、顺式-4-癸烯醛、癸醛、(E,E)-2,4-壬二烯醛、1,3-己二烯、3-乙基-2-甲基-2-壬烯醛、(E)-2-十一烯醛、反式-3-壬烯-2-酮、2,5-呋喃二酮、3-十二烯基-反式-2-十一烯-1-醇、花生酸、二肽、脂肪醇、或a-萜类化合物、芳樟醇、桉树脑或香叶醇或其任何组合。

在一些实施方案中，所述一种或多种代谢物包括短链脂肪酸(SCFA)、氨基-SCFA、硫代酸盐/酯、萜类化合物、a-萜类化合物、胺、氨、吲哚、丁酸、组胺、倍他唑、GABA、2FL、桉树脑、香叶醇或其任何组合。

在一些实施方案中，所述一种或多种代谢物包括丁酸盐/酯、丙酸盐/酯或两者。

在一些实施方案中，所述一种或多种代谢物包括精油。

在一些实施方案中，所述一种或多种代谢物包括二肽、脂肪醇或a-萜类化合物。

在一些实施方案中，所述一种或多种代谢物包括芳樟醇、桉树脑或香叶醇。

在一些实施方案中，所述一种或多种代谢物包括神经递质。

在一些实施方案中，所述一种或多种代谢物中的至少一种是挥发性的，具有强烈的令人厌恶的香味，或者相对于氧化是不稳定的。

在一些实施方案中，胃肠道中的所述隔室包括全部或部分的下消化道。

在一些实施方案中，胃肠道中的所述隔室包括小肠、大肠或两者。

在一些实施方案中，所述方法还包括从所述动物获得胃肠样品。

在一些实施方案中，所述样品是胃肠组织的活检或粪便样品。

在一些实施方案中，所述方法还包括检测所述样品中所述一种或多种代谢物中的至少一种的水平。

在一些实施方案中，所述代谢物的水平至少部分地通过液体或气相色谱法来测定。

在一些实施方案中，所述代谢物的水平至少部分地通过质谱法或NMR波谱法来测定。

在一些实施方案中，所述寡糖制剂的至少5、10、20或30种DP级分中寡糖的相对丰度随其聚合度单调降低。

在一些实施方案中，所述寡糖制剂的每种DP级分中寡糖的相对丰度随其聚合度单调降低。

在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含按相对丰度计少于80％、70％、60％、50％、40％、30％、20％、19％、18％、17％、16％、15％、14％、13％、12％、11％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％或2％的含脱水亚基寡糖。

在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含按相对丰度计少于10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％或2％的含脱水亚基寡糖。

在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含按相对丰度计大于2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％、30％、40％、50％、60％、70％或80％的含脱水亚基寡糖。

在一些实施方案中，将所述营养组合物每天施用至少1、2、3、4、5、6、7、8、9或10次。

在一些实施方案中，将所述营养组合物每天施用至多1、2、3、4、5、6、7、8、9或10次。

在一些实施方案中，将所述营养组合物每周施用至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15或20次。

在一些实施方案中，将所述营养组合物每周施用至多1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15或20次。

在一些实施方案中，将所述营养组合物每天、每隔一天、每3天、每4天、每周、每隔一周或每月施用。

在一些实施方案中，所述方法包括在早上、在下午、在晚上或其任何组合施用所述营养组合物。

在一些实施方案中，所述动物是鱼(例如鲑鱼、罗非鱼)、家禽(例如鸡、火鸡)、海鲜(例如虾)、绵羊、母牛、家牛、水牛、野牛、猪(例如保育猪、生长猪/肥育猪)、猫、狗、兔、山羊、豚鼠、驴、骆驼、马或鸽子。在一些实施方案中，所述动物是家禽。在一些实施方案中，所述动物是鸡(例如肉鸡、蛋鸡、种鸡)、火鸡、鸭或鹅。在一些实施方案中，所述动物是伴侣动物。在一些实施方案中，所述动物选自：狗、猫、仓鼠、兔、雪貂、豚鼠和小鼠。

在一些实施方案中，所述营养组合物是动物饲料组合物。

根据以下具体实施方式，本公开文本的另外的方面和优点对于本领域技术人员将容易地变得清楚，在以下具体实施方式中仅示出和描述了本公开文本的说明性实施方案。如将会理解的，本公开文本能够有其他的和不同的实施方案，并且其若干细节能够在各个明显的方面进行修改，这些都不背离本公开文本。相应地，附图和说明书应当被看作是说明性质的，而不是限制性的。

通过引用并入

本说明书中所提到的所有出版物、专利和专利申请都通过引用并入本文，并入程度如同指示每个单独出版物、专利或专利申请明确且单独地通过引用并入一般。就通过引用并入的出版物和专利或专利申请与本说明书中包含的公开文本相矛盾而言，本说明书旨在取代和/或优先于任何这种矛盾的材料。

附图说明

本发明的新颖特征在随附权利要求中具体阐述。将通过参考阐述了利用本发明原理的说明性实施方案的以下具体实施方式和附图(在本文中也称为“图(figure)”和“图(FIG.)”)获得对本发明的特征和优点的更好的理解，在所述附图中：

图1示出了寡糖制剂9.2的¹H、¹³C-HSQC NMR谱的一部分。

图2展示了来自实施例9.7的寡糖制剂的MALDI-MS谱，其证明了脱水亚基的存在。

图3示出了实施例9的寡糖制剂的脱水DP1组分的1D ¹H NMR谱。

图4示出了实施例9的寡糖制剂的脱水DP1组分的1D APT¹³C-NMR谱。

图5展示了衍生化后实施例2.9的寡糖制剂的GC-MS色谱图(TIC和XIC(m/z 229)图)的放大图。

图6展示了具有焦糖化脱水亚基的寡糖制剂的¹H、¹³C-HSQC谱。

图7示出了在不同激光能量下比较实施例9的寡糖制剂的MALDI-MS谱的一部分。

图8A展示了对水中的实施例9的寡糖制剂的脱水DP2种类(浓度为1-80μg/mL)的LC-MS/MS检测。图8B示出了由图8A的LC-MS/MS检测产生的线性校准曲线。

图9展示了对各种对照和经处理的饮食组合物的脱水DP2含量的定量。

图10展示了含脱水亚基葡萄糖寡糖样品的2D-¹H JRES NMR谱。

图11是含脱水亚基葡萄糖寡糖样品的代表性¹H、¹³C-HSQC NMR谱，其具有用于键联分布的相关共振和分配。

图12展示了三种含脱水亚基寡糖的¹H DOSY谱的叠加。

图13展示了1,6-脱水-β-D-葡萄糖(DP1-18)、1,6-脱水-β-D-纤维二糖(DP2-18)和含脱水亚基寡糖样品的比较。

图14展示了在选定的MRM下含脱水亚基寡糖(顶部)和经消化的含脱水亚基寡糖(底部)的质量色谱图。

图15示出了实施例9的寡糖的相对丰度对聚合度(DP)的图。所述图显示寡糖制剂具有单调递减的DP分布。

图16示出了实施例9的寡糖的相对丰度对聚合度的图。所述图显示寡糖制剂具有非单调递减的DP分布。

图17示出了从鸡获得的盲肠提取物的典型600MHz 1H NMR谱。与脂族区域相比，芳族区域(6.5-8.5ppm)中的谱放大了大约10倍。指示了特定代谢物的峰分配。

图18示出了来自PLS-DA分类的得分图，其示出了NMR数据的组分1与组分2。可释方差示出于括号中。

图19示出了在本文所述的各种合成寡糖制剂存在下，对盲肠微生物群对SCFA的发酵选择性表现出非线性效应的剂量反应。

图20是示出了实施例9的寡糖制剂对仔猪的功能宏基因组学的影响的图。

图21展示了两种DP1含脱水亚基寡糖和一种DP2含脱水亚基寡糖。

图22展示了含脱水亚基寡糖(聚纤维三糖(cellotriosan))。

图23A展示了来自实施例2的寡糖制剂的MALDI-MS谱，其证明了脱水亚基的存在。图23B展示了来自实施例2的寡糖制剂的MALDI-MS谱，其证明了脱水亚基的存在。

图24A展示了对实施例1的寡糖制剂的脱水DP2、脱水DP1和DP2种类的LC-MS/MS检测。图24B展示了对实施例1的寡糖制剂的脱水DP2、脱水DP1和DP2种类的LC-MS/MS检测。图24C展示了对实施例1的寡糖制剂的脱水DP2、脱水DP1和DP2种类的LC-MS/MS检测。

图25A展示了对实施例3的寡糖制剂的脱水DP2、脱水DP1和DP2种类的LC-MS/MS检测。图25B展示了对实施例3的寡糖制剂的脱水DP2、脱水DP1和DP2种类的LC-MS/MS检测。图25C展示了对实施例3的寡糖制剂的脱水DP2、脱水DP1和DP2种类的LC-MS/MS检测。

图26A展示了对实施例4的寡糖制剂的脱水DP2、脱水DP1和DP2种类的LC-MS/MS检测。图26B展示了对实施例4的寡糖制剂的脱水DP2、脱水DP1和DP2种类的LC-MS/MS检测。图26C展示了对实施例4的寡糖制剂的脱水DP2、脱水DP1和DP2种类的LC-MS/MS检测。

图27A展示了对实施例7的寡糖制剂的脱水DP2、脱水DP1和DP2种类的LC-MS/MS检测。图27B展示了对实施例7的寡糖制剂的脱水DP2、脱水DP1和DP2种类的LC-MS/MS检测。图27C展示了对实施例7的寡糖制剂的脱水DP2、脱水DP1和DP2种类的LC-MS/MS检测。

图28A展示了对实施例1的寡糖制剂的DP1、脱水DP1、DP2和脱水DP2级分的GC-MS谱检测。图28B展示了如图28A所示的DP2和脱水DP2级分的放大图。

图29A展示了对实施例3的寡糖制剂的DP1、脱水DP1、DP2和脱水DP2级分的GC-MS谱检测。图29B展示了如图29A所示的DP2和脱水DP2级分的放大图。

图30A展示了对实施例4的寡糖制剂的DP1、脱水DP1、DP2和脱水DP2级分的GC-MS谱检测。图30B展示了如图30A所示的DP2和脱水DP2级分的放大图。

图31A展示了对实施例7的寡糖制剂的DP1、脱水DP1、DP2和脱水DP2级分的GC-MS谱检测。图31B展示了如图31A所示的DP2和脱水DP2级分的放大图。

图32展示了与根据实施例2的寡糖制剂相比，反应温度、水含量和反应时间对寡糖制剂中DP2含脱水亚基寡糖含量的影响。

图33展示了1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖和1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖的NMR分配。

图34展示了与常见益生元相比时，寡糖制剂对驯养狗(家犬(Canis familiaris))中的微生物组丁酸产生有改善。

图35展示了在不同激光能量下比较来自实施例9的寡糖制剂的MALDI-MS谱。

具体实施方式

以下描述和实施例详细地说明了本公开文本的实施方案。应当理解，本公开文本不限于本文所述的特定实施方案，因为这些可以变化。本领域技术人员将认识到，存在本公开文本的许多变型和修改，其涵盖在本公开文本的范围内。

所有术语都旨在被理解为它们将被本领域技术人员理解。除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语都具有与本公开文本所涉及领域的普通技术人员通常所理解的相同的含义。

本文使用的章节标题仅用于组织目的，而不应当被解释为限制所描述的主题。

尽管本公开文本的各种特征可以在单个实施方案的上下文中描述，但所述特征也可以单独提供或以任何合适的组合提供。反过来，尽管为了清楚起见，本文可以在单独的实施方案的上下文中描述本公开文本，但本公开文本也可以在单个实施方案中实施。

以下定义补充了本领域中的定义，并且针对本申请，而不应当归于任何相关或不相关的情况，例如任何共同拥有的专利或申请。尽管在用于测试本公开文本的实践中可以使用与本文所述的那些方法和材料类似或等效的任何方法和材料，但本文描述了优选的材料和方法。因此，本文使用的术语仅用于描述特定实施方案的目的，而不旨在是限制性的。

I.定义

本文使用的术语仅用于描述特定情况的目的，而不旨在是限制性的。除非上下文另有明确指示，否则如本文所用，单数形式“一种/一个(a)”、“一种/一个(an)”和“所述(the)”旨在也包括复数形式。此外，就在具体实施方式和/或权利要求中使用术语“包括(including)”、“包括(includes)”、“具有(having)”、“具有(has)”、“具有(with)”或其变体而言，此类术语旨在以与术语“包含(comprising)”类似的方式是包含性的。

应当理解，诸如“包含(comprises)”、“包含(comprised)”、“包含(comprising)”等术语具有美国专利法中归于其的含义；即，它们意指“包括(includes)”、“包括(included)”、“包括(including)”等，并且旨在是包含性的或开放式的，并且不排除另外的未叙述的元素或方法步骤；并且诸如“基本上由……组成(consisting essentially of)”和“基本上由……组成(consists essentially of)”等术语具有美国专利法中归于其的含义；即，它们允许未明确叙述的元素，但是排除了现有技术中发现的或影响本发明的基本或新颖特征的元素。

如在本文中以诸如“A和/或B”等短语使用的术语“和/或”旨在包括A和B两者；A或B；A(单独)；以及B(单独)。同样地，如以诸如“A、B和/或C”等短语使用的术语“和/或”旨在涵盖以下实施方案中的每一个：A、B和C；A、B或C；A或B；A或C；B或C；A和B；A和C；B和C；A(单独)；B(单独)；以及C(单独)。

当本文针对物理特性(如分子量)或化学特性(如化学式)使用范围时，旨在包括范围的所有组合和子组合以及其中的具体实施方案。当提及数字或数值范围时，术语“约”意指所提及的数字或数值范围是在实验变异内(或在统计实验误差内)的近似值，并且因此，所述数字或数值范围在一些情况下将在所陈述的数字或数值范围的1％与15％之间变化。在一些实施方案中，术语“约”意指在给定值或范围的15％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.5％、0.1％或0.05％内。

如本文所用，术语“施用”包括向动物提供本文所述的合成寡糖制剂、营养组合物、液体或动物饲料组合物，使得动物可以摄取合成寡糖制剂、营养组合物、液体或动物饲料组合物。在此类实施方案中，动物摄取合成寡糖制剂、营养组合物或动物饲料组合物的某一部分。在一些实施方案中，向所述动物提供合成寡糖制剂、营养组合物、液体或动物饲料组合物，使得所述动物可以随意摄取合成寡糖制剂、营养组合物、液体或动物饲料组合物。在一些实施方案中，将合成寡糖制剂、营养组合物、液体或动物饲料组合物作为规定饮食施用给所述动物。在一些实施方案中，将合成寡糖制剂、营养组合物、液体或动物饲料组合物经由人工饲喂(例如，口服注射器饲喂、管饲喂等)施用给所述动物。在一些实施方案中，将合成寡糖制剂、营养组合物、液体或动物饲料组合物例如随意或人工地口服施用给所述动物。在一些实施方案中，动物在每24小时的时间中或每隔24小时的时间中摄取合成寡糖制剂、营养组合物、液体或动物饲料组合物的某一部分，持续至少7天、14天、21天、30天、45天、60天、75天、90天或120天。在一些实施方案中，可以将寡糖制剂溶解于水或其他液体中，并且动物通过饮用液体来摄取寡糖制剂的某一部分。在一些实施方案中，将寡糖经由其饮用水提供给动物。在一些实施方案中，寡糖制剂、营养组合物、液体或动物饲料组合物是随意消耗的。

如本文所用，术语“饲料转化率(FCR)”是指饲料质量输入(例如由动物消耗的)与动物输出的比率，其中动物输出是目标动物产品。例如，乳畜的动物输出是乳，而为肉而饲养的动物的动物输出是体重。

如本文所用，“饲料效率”是指动物输出与饲料质量输入(例如由动物消耗的)的比率，其中动物输出是目标动物产品。

如本文所用，术语“脱水亚基”是指单糖(或单糖亚基)的热脱水产物或糖焦糖化产物。例如，“脱水亚基”可以是脱水单糖，如脱水葡萄糖。作为另一个例子，“脱水亚基”可以经由糖苷键联与一个或多个常规或脱水单糖亚基连接。

术语“寡糖”是指单糖或含有通过糖苷键连接的两个或更多个单糖亚基的化合物。因此，寡糖包括常规单糖；脱水单糖；或含有两个或更多个单糖亚基的化合物，其中一个或多个单糖亚基任选地独立地被一个或多个脱水亚基替换。寡糖可以被官能化。如本文所用，术语寡糖涵盖寡糖的所有种类，其中寡糖中单糖亚基中的每一个独立地且任选地被官能化和/或被其相应的脱水单糖亚基替换。

如本文所用，术语“寡糖制剂”是指包含至少一种寡糖的制剂。

如本文所用，术语“葡萄糖寡糖”是指葡萄糖或含有通过糖苷键连接的两个或更多个葡萄糖单糖亚基的化合物。因此，葡萄糖寡糖包括葡萄糖；脱水葡萄糖；或含有通过糖苷键连接的两个或更多个葡萄糖单糖亚基的化合物，其中所述葡萄糖单糖亚基中的一个或多个各自任选地且独立地被脱水葡萄糖亚基替换。

如本文所用，术语“半乳糖寡糖”是指半乳糖或含有通过糖苷键连接的两个或更多个半乳糖单糖亚基的化合物。因此，半乳糖寡糖包括半乳糖；脱水半乳糖；或含有通过糖苷键连接的两个或更多个半乳糖单糖亚基的化合物，其中至少一个单糖亚基任选地被脱水半乳糖亚基替换。

如本文所用，术语“葡萄糖-半乳糖寡糖制剂”是指由葡萄糖和半乳糖的完全或不完全糖缩合反应产生的组合物。因此，在一些实施方案中，葡萄糖-半乳糖寡糖制剂包含葡萄糖寡糖、半乳糖寡糖、含有通过糖苷键连接的一个或多个葡萄糖单糖亚基和一个或多个半乳糖单糖亚基的化合物或其组合。在一些实施方案中，葡萄糖-半乳糖寡糖制剂包含葡萄糖寡糖和含有通过糖苷键连接的一个或多个葡萄糖单糖亚基和一个或多个半乳糖单糖亚基的化合物。在一些实施方案中，葡萄糖-半乳糖寡糖制剂包含半乳糖寡糖和含有通过糖苷键连接的一个或多个葡萄糖单糖亚基和一个或多个半乳糖单糖亚基的化合物。在一些实施方案中，葡萄糖-半乳糖寡糖制剂包含含有通过糖苷键连接的一个或多个葡萄糖单糖亚基和一个或多个半乳糖单糖亚基的化合物。

如本文所用，术语“单糖单元”和“单糖亚基”可互换地使用。“单糖亚基”是指寡糖中的单糖单体。对于具有1的聚合度的寡糖，寡糖可以被称为单糖亚基或单糖。对于具有2或更高的聚合度的寡糖，其单糖亚基经由糖苷键连接。

如本文所用，术语“常规单糖”是指不含脱水亚基的单糖。术语“常规二糖”是指不含脱水亚基的二糖。因此，术语“常规亚基”是指不是脱水亚基的亚基。

如本文所用，术语“脱水DPn寡糖”、“脱水DPn种类”或“DPn含脱水亚基寡糖”是指具有n的聚合度并且包含一个或多个脱水亚基的寡糖。因此，脱水葡萄糖是DP1含脱水亚基寡糖，并且聚纤维三糖是DP3含脱水亚基寡糖。

如本文所用，术语“相对丰度”或“丰度”是指就种类存在的常见或稀有程度而言的种类的丰度。例如，包含按相对丰度计10％的含脱水亚基寡糖的DP1级分可以是指多种DP1寡糖，其中10％的DP1寡糖是脱水单糖。可以通过合适的分析仪器(例如，质谱法和液相色谱法，如LC-MS/MS、GC-MS、HPLC-MS和MALDI-MS)来测定例如寡糖的某种DP级分的相对丰度。在一些实施方案中，相对丰度通过对对应于目的级分的色谱(例如，LC-MS/MS、GC-MS和HPLC-MS)的峰下面积进行积分来测定。在一些实施方案中，相对丰度通过峰强度(例如，MALDI-MS)来测定。在一些实施方案中，相对丰度通过分析方法的组合(如在通过液相色谱法分离后进行重量测定)来测定。

除非上下文另有明确规定，否则如本文所用，单数形式“一种/一个(a)”、“一种/一个(an)”和“所述(the)”包括复数指示物。因此，例如，提及“一种试剂”包括多种此类试剂，并且提及“所述寡糖”包括提及一种或多种寡糖(或多种寡糖)及其本领域技术人员已知的等效物，等等。

II.寡糖制剂

本文公开了适用于营养组合物的寡糖制剂。在一些实施方案中，所述寡糖制剂包含各自具有选自1至n的不同聚合度的至少n种寡糖级分(DP1至DPn级分)，其中n是大于或等于2的整数。在一些实施方案中，n是大于2的整数。在一些实施方案中，寡糖制剂中1至n级分中的每一种包含如通过质谱法测量的按相对丰度计1％至90％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，每种级分中寡糖的相对丰度随其聚合度单调降低。

在一些实施方案中，n是大于或等于3的整数。在一些实施方案中，n是1至100范围内的整数，如4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、40或50。在一些实施方案中，寡糖制剂中1至n级分中的每一种独立地包含如通过质谱法或通过LC-MS/MS或GC-MS测量的按相对丰度计0.1％至90％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，寡糖制剂中1至n级分中的每一种独立地包含约0.1％至约15％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，寡糖制剂中1至n级分中的每一种独立地包含约0.5％至约15％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，DP1和DP2级分各自独立地包含如通过质谱法(如MALDI-MS)或通过LC-MS/MS或GC-MS测量的按相对丰度计约0.1％至约15％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，DP1和DP2级分各自独立地包含约0.5％至约15％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，DP1和DP2级分各自独立地包含如通过质谱法LC-MS/MS或GC-MS测量的按相对丰度计约0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、0.8％、1％、2％或3％至约8％、9％、10％、11％、12％、13％、14％或15％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，每种级分中寡糖的相对丰度随其聚合度单调降低。

在一些实施方案中，寡糖制剂是合成寡糖制剂。在一些实施方案中，合成寡糖制剂是指通过不需要活生物体的方法产生的多种寡糖。在一些实施方案中，合成寡糖制剂是指通过不需要酶的方法产生的多种寡糖。在一些实施方案中，合成寡糖制剂是指通过化学方法产生的多种寡糖。在某些实施方案中，合成寡糖制剂是指通过糖的缩合产生的多种寡糖。

A.寡糖的益生元效用

本文公开了包含脱水糖组分和/或糖脱水产物组分的寡糖制剂，所述寡糖制剂表现出对微生物群落(如动物肠道微生物组)的复杂功能调节。寡糖制剂提供了调节微生物区系对可发酵碳的利用的效用，并将代谢通量引导到有益物质，从而提供微生物组介导的健康或营养益处。

难消化的碳水化合物可以通过向微生物群落提供可发酵碳源而充当益生元。例如，已经鉴定了富含可溶性植物纤维的饮食的滋养肠道微生物区系的能力。另外，双歧生成性益生元支持双歧杆菌(例如，双歧杆菌属(Bifidobacterium)的成员)的生长，而乳生成性益生元支持乳杆菌属(Lactobacillus)物种的生长。

益生元纤维可以发酵成有益的化学物质，如短链脂肪酸(SCFA)。益生元纤维包括：抗性淀粉；纤维素；果胶，如鼠李半乳聚糖、阿拉伯半乳聚糖、阿拉伯聚糖；半纤维素，如阿拉伯木聚糖、木葡聚糖、葡甘露聚糖、半乳甘露聚糖；木聚糖，如玉米芯寡糖；b-葡聚糖，如谷物b-葡聚糖、酵母b-葡聚糖、细菌b-葡聚糖；多聚果糖，如菊粉和果聚糖；和树胶，如藻酸盐。菊粉是一种常见的双歧生成性益生元纤维。

在其他情况下，益生元通过经由抗粘附机制(如细胞表面受体位点的竞争性结合)阻碍病原性细菌移入，从而感染宿主生物体的能力起作用。某些半乳糖寡糖提供对各种肠病原性生物体(如埃希氏菌属物种)的有效抗粘附。

益生元通常通过掺入饮食中来提供给宿主动物，在掺入饮食中后它们表现出剂量依赖性反应(至少至饱和阈值)。例如，提供更高剂量的双歧生成性益生元(如菊粉)往往提供双歧杆菌属物种群体的更大增加。更高剂量的菊粉对应于通过发酵对SCFA的更高产生。这是因为益生元提供了代谢碳源，并且更多的碳转化为更多的发酵产品。类似地，提供更高剂量的抗粘附性益生元提供竞争性结合表面受体位点的可能性。

某些包含经修饰的单体亚基的碳水化合物种类可能影响微生物系统利用其他碳水化合物(其原本可作为益生元来源由所述微生物系统使用)的方式。例如，此类碳水化合物种类可以是调节细菌淀粉利用系统(SUS)，即负责细胞表面识别、糖苷裂解和淀粉代谢物输入的蛋白质的经修饰的碳水化合物种类。

能够复杂调节动物微生物群的碳水化合物组合物具有作为经由其对动物微生物组的影响来改善动物健康和营养的饲料添加剂的效用。例如，对肠道微生物区系的丁酸产生的调节通过促进健康的肠道粘膜、屏障功能和经由抗炎作用来赋予动物健康益处。对丙酸产生的调节经由增加的糖异生影响从动物饮食中提取的代谢能。相关微生物群落包括例如家禽、猪、狗、猫、马中的回肠、空肠和盲肠和/或粪便微生物群，或家牛、母牛、绵羊的反刍微生物群，等等。其他微生物群落包括皮肤微生物区系、鼻微生物区系等。

此外，本文公开的寡糖制剂是有利的，因为由于脱水亚基的存在，它们可以在复杂的营养组合物(如完全动物饲料)中进行选择性分析和定量。它具有用于测定饲料添加剂(如寡糖制剂)的存在和/或浓度的商业效用。可以出于品质控制的目的进行这种测定，以确定添加剂是否与基础营养组合物一致地共混以提供包含预期剂量或包含水平的添加剂的最终营养组合物。

然而，营养组合物本身包含大量且多种多样的碳水化合物结构(例如，淀粉、植物纤维和果胶)。因此，将少量的基于寡糖的饲料添加剂与作为营养组合物的基础存在的浩瀚的其他碳水化合物区分开是特别具有挑战性的。因此，本文公开的寡糖制剂提供了通过脱水亚基将其自身与营养组合物中的其他碳水化合物来源区分开的手段。

B.聚合度(DP)分布

在一些实施方案中，寡糖制剂包含各自具有选自1至n的不同聚合度的至少n种寡糖级分(DP1至DPn级分)。在一些实施方案中，寡糖制剂包含各自具有选自1至n的不同聚合度的n种寡糖级分(DP1至DPn级分)。例如，在一些实施方案中，DP1级分包含一种或多种单糖和/或一种或多种脱水单糖。作为另一个例子，在一些实施方案中，DP1级分包含葡萄糖、半乳糖、果糖、1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖、1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖或其任何组合。作为又另一个例子，在一些实施方案中，DP2级分包含一种或多种常规二糖和一种或多种含脱水亚基二糖。在一些实施方案中，DP2级分包含乳糖。

在一些实施方案中，n是至少2、至少3、至少5、至少6、至少7、至少8、至少9、至少10、至少11、至少12、至少13、至少14、至少15、至少16、至少17、至少18、至少19、至少20、至少21、至少22、至少23、至少24、至少25、至少26、至少27、至少28、至少29、至少30、至少31、至少32、至少33、至少34、至少35、至少36、至少37、至少38、至少39、至少40、至少41、至少42、至少43、至少44、至少45、至少46、至少47、至少48、至少49、至少50、至少51、至少52、至少53、至少54、至少55、至少56、至少57、至少58、至少59、至少60、至少61、至少62、至少63、至少64、至少65、至少66、至少67、至少68、至少69、至少70、至少71、至少72、至少73、至少74、至少75、至少76、至少77、至少78、至少79、至少80、至少81、至少82、至少83、至少84、至少85、至少86、至少87、至少88、至少89、至少90、至少91、至少92、至少93、至少94、至少95、至少96、至少97、至少98、至少99或至少100。在一些实施方案中，n是2、3、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99或100。在一些实施方案中，n小于10、小于11、小于12、小于13、小于14、小于15、小于16、小于17、小于18、小于19、小于20、小于21、小于22、小于23、小于24、小于25、小于26、小于27、小于28、小于29、小于30、小于31、小于32、小于33、小于34、小于35、小于36、小于37、小于38、小于39、小于40、小于41、小于42、小于43、小于44、小于45、小于46、小于47、小于48、小于49、小于50、小于51、小于52、小于53、小于54、小于55、小于56、小于57、小于58、小于59、小于60、小于61、小于62、小于63、小于64、小于65、小于66、小于67、小于68、小于69、小于70、小于71、小于72、小于73、小于74、小于75、小于76、小于77、小于78、小于79、小于80、小于81、小于82、小于83、小于84、小于85、小于86、小于87、小于88、小于89、小于90、小于91、小于92、小于93、小于94、小于95、小于96、小于97、小于98、小于99或小于100。在一些实施方案中，n是2至100、5至90、10至90、10至80、10至70、10至60、10至50、10至40、10至30、15至60、15至50、15至45、15至40、15至35或15至30。

寡糖制剂的聚合度的分布可以通过任何合适的分析方法和仪器来测定，所述分析方法和仪器包括但不限于端基法、渗透压(渗透压测定法)、超速离心、粘度测量、光散射法、尺寸排阻色谱法(SEC)、SEC-MALLS、场流分级法(FFF)、非对称流场流分级法(A4F)、高效液相色谱法(HPLC)和质谱法(MS)。例如，聚合度的分布可以通过质谱法(如基质辅助激光解吸/电离(MALDI)-MS、液相色谱法(LC)-MS或气相色谱法(GC)-MS)来测定和/或检测。对于另一个例子，聚合度的分布可以通过SEC(如凝胶渗透色谱法(GPC))来测定和/或检测。作为又另一个例子，聚合度的分布可以通过HPLC、FFF或A4F来测定和/或检测。在一些实施方案中，聚合度的分布通过MALDI-MS来测定和/或检测。在一些实施方案中，聚合度的分布通过GC-MS或LC-MS来测定和/或检测。在一些实施方案中，聚合度的分布通过SEC来测定和/或检测。在一些实施方案中，聚合度的分布通过HPLC来测定和/或检测。在一些实施方案中，聚合度的分布通过分析仪器(如MALDI-MS和SEC)的组合来测定和/或检测。在一些实施方案中，寡糖制剂的聚合度可以基于其分子量和分子量分布来测定。例如，图2示出了MALDI-MS谱，其展示了各种级分的聚合度以及在所有观察到的级分中含脱水亚基寡糖(-18g/mol MW偏移峰)的存在。

在一些实施方案中，大多数的级分中寡糖的相对丰度随其聚合度单调降低。在一些实施方案中，寡糖制剂的少于6、少于5、少于4、少于3或少于2种级分的寡糖的相对丰度不随其聚合度单调降低。

在一些实施方案中，至少5、至少10、至少15、至少20、至少25、至少30、至少35、至少40、至少45或至少50种DP级分中寡糖的相对丰度随其聚合度单调降低。在一些实施方案中，至少5、至少10、至少15、至少20、至少25、至少30、至少35、至少40、至少45或至少50种连续DP级分中寡糖的相对丰度随其聚合度单调降低。在一些实施方案中，至少5、至少10、至少20或至少30种DP级分中寡糖的相对丰度随其聚合度单调降低。在一些实施方案中，至少5、至少10、至少20或至少30种连续DP级分中寡糖的相对丰度随其聚合度单调降低。

在一些实施方案中，n种级分中的每一种中寡糖的相对丰度随其聚合度单调降低。例如，图15提供了DP分布的例子，其中n种级分中的每一种中寡糖的相对丰度随其DP单调降低。例如，在一些实施方案中，只有DP3级分中寡糖的相对丰度不随其聚合度单调降低，即DP3级分中寡糖的相对丰度低于DP4级分中寡糖的相对丰度。在一些实施方案中，DP2级分中寡糖的相对丰度低于DP3级分中寡糖的相对丰度。例如，图16展示了聚合度分布，其中DP2级分中寡糖的相对丰度不随其聚合度单调降低。

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂具有按重量计或按相对丰度计约1％至约50％、约1％至约40％、约1％至约35％、约1％至约30％、约1％至约25％、约1％至约20％、约1％至约15％、约5％至约50％、约5％至约40％、约5％至约35％、约5％至约30％、约5％至约25％、约5％至约20％、约5％至约15％、约10％至约50％、约10％至约40％、约10％至约35％、约10％至约30％、约10％至约25％、约10％至约20％或约10％至约15％的DP1级分含量。在一些实施方案中，寡糖制剂具有按重量计或按相对丰度计约10％至约35％、约10％至约20％或约10％至约15％的DP1级分含量。在一些实施方案中，DP1级分的含量通过MALDI-MS来测定。在一些实施方案中，DP1级分的含量通过HPLC来测定。在一些实施方案中，DP1级分的含量通过LC-MS/MS或GC-MS来测定。

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂具有按重量计或按相对丰度计约1％至约35％、约1％至约30％、约1％至约25％、约1％至约20％、约1％至约15％、约1％至约10％、约5％至约30％、约5％至约25％、约5％至约20％、约5％至约15％或约5％至约10％的DP2级分含量。在一些实施方案中，寡糖制剂具有按重量计或按相对丰度计约5％至约25％、约5％至约20％、约5％至约15％或约5％至约10％的DP2级分含量。在一些实施方案中，DP2级分的含量通过MALDI-MS来测定。在一些实施方案中，DP2级分的含量通过HPLC来测定。在一些实施方案中，DP2级分的含量通过LC-MS/MS或GC-MS来测定。

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂具有按重量计或按相对丰度计约1％至约30％、约1％至约25％、约1％至约20％、约1％至约15％、约1％至约10％、约5％至约30％、约5％至约25％、约5％至约20％、约5％至约15％或约5％至约10％的DP3级分含量。在一些实施方案中，寡糖制剂具有按重量计或按相对丰度计约1％至约15％、约1％至约10％、约5％至约15％或约5％至约10％的DP3级分含量。在一些实施方案中，DP3级分的含量通过MALDI-MS来测定。在一些实施方案中，DP3级分的含量通过HPLC来测定。在一些实施方案中，DP3级分的含量通过LC-MS/MS或GC-MS来测定。

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂具有按重量计或按相对丰度计约0.1％至约20％、约0.1％至约15％、约0.1％至约10％、约0.1％至约5％、约1％至约20％、约1％至约15％、约1％至约10％或约1％至约5％的DP4级分含量。在一些实施方案中，寡糖制剂具有按重量计或按相对丰度计约1％至约15％、约1％至约10％或约1％至约5％的DP4级分含量。在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂具有按重量计或按相对丰度计约0.1％至约15％、约0.1％至约10％、约0.1％至约5％、约1％至约15％、约1％至约10％或约1％至约5％的DP5级分含量。在一些实施方案中，寡糖制剂具有按重量计或按相对丰度计约1％至约10％或约1％至约5％的DP5级分含量。在一些实施方案中，DP4和/或DP5级分的含量通过MALDI-MS来测定。在一些实施方案中，DP4和/或DP5级分的含量通过HPLC来测定。在一些实施方案中，DP4和/或DP5级分的含量通过LC-MS/MS或GC-MS来测定。

在一些实施方案中，寡糖制剂中DP2级分与DP1级分的比率按其重量或相对丰度计是约0.01至约0.8、约0.02至约0.7、约0.02至约0.6、约0.02至约0.5、约0.02至约0.4、约0.02至约0.3、约0.02至约0.2、约0.1至约0.6、约0.1至约0.5、约0.1至约0.4或约0.1至约0.3。在一些实施方案中，寡糖制剂中DP2级分与DP1级分的比率按其重量或相对丰度计是约0.02至约0.4。

在一些实施方案中，寡糖制剂中DP3级分与DP2级分的比率按其重量或相对丰度计是约0.01至约0.7、约0.01至约0.6、约0.01至约0.5、约0.01至约0.4、约0.01至约0.3或约0.01至约0.2。在一些实施方案中，寡糖制剂中DP3级分与DP2级分的比率按其重量或相对丰度计是约0.01至约0.3。

在一些实施方案中，寡糖制剂中DP1和DP2级分的合计含量按重量计或按相对丰度计少于70％、少于60％、少于50％、少于40％、少于30％、少于20％或少于10％。在一些实施方案中，寡糖制剂中DP1和DP2级分的合计含量按重量计或按相对丰度计少于50％、少于30％或少于10％。

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂具有在2至10范围内的平均DP值。在一些实施方案中，寡糖制剂具有约2至约8、约2至约5或约2至约4的平均DP值。在一些实施方案中，寡糖制剂具有约3.5的平均DP值。平均DP值可以通过SEC或通过元素分析来测定。

C.脱水亚基水平

在一些实施方案中，n种寡糖级分中的每一种独立地包含脱水亚基水平。例如，在一些实施方案中，DP1级分包含按相对丰度计10％的含脱水亚基寡糖，并且DP2级分包含按相对丰度计15％的含脱水亚基寡糖。对于另一个例子，在一些实施方案中，DP1、DP2和DP3级分各自分别包含按相对丰度计5％、10％和2％的含脱水亚基寡糖。在其他实施方案中，两种或更多种寡糖级分可以包含类似水平的含脱水亚基寡糖。例如，在一些实施方案中，DP1和DP3级分各自包含按相对丰度计约5％的含脱水亚基寡糖。

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂中1至n级分中的每一种独立地包含如通过质谱法LC-MS/MS或GC-MS测量的按相对丰度计约0.1％至15％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，寡糖制剂中1至n级分中的每一种独立地包含如通过质谱法LC-MS/MS或GC-MS测量的按相对丰度计约0.5％至15％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，使用LC-MS/MS来测定DP1、DP2和/或DP3级分中寡糖的相对丰度。在一些实施方案中，使用GC-MS来测定DP1、DP2和/或DP3级分中寡糖的相对丰度。在一些实施方案中，使用MALDI-MS来测定DP4级分中或更高DP级分中寡糖的相对丰度。在一些实施方案中，某种级分的相对丰度通过对被指定为对应于该级分的LC-MS/MS色谱图的峰下面积进行积分来测定。在一些实施方案中，某种级分的相对丰度通过对被指定为对应于该级分的GC-MS色谱图的峰下面积进行积分来测定。

脱水亚基的水平可以通过任何合适的分析方法(如核磁共振(NMR)波谱法、质谱法、HPLC、FFF、A4F或其任何组合)来测定。在一些实施方案中，脱水亚基的水平至少部分地通过质谱法(如MALDI-MS)来测定。在一些实施方案中，脱水亚基的水平至少部分地通过NMR来测定。在一些实施方案中，含脱水亚基寡糖的水平至少部分地通过HPLC来测定。在一些实施方案中，含脱水亚基寡糖的水平通过MALDI-MS来测定，如通过图2中的-18g/mol MW偏移峰所展示。在一些实施方案中，脱水亚基的存在和种类类型可以通过NMR来测定和/或检测，如实施例11、图3和图4所展示。在一些实施方案中，含脱水亚基寡糖的相对丰度通过MALDI-MS来测定。在一些实施方案中，含脱水亚基寡糖的相对丰度通过LC-MS/MS来测定，如图24A至图24C、图25A至图25C、图26A至图26C和图27A至图27C中所展示。在一些实施方案中，含脱水亚基寡糖的相对丰度通过GC-MS来测定，如图28A至图28B、图29A至图29B、图30A至图30B和图31A至图31B中所展示。

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂的至少一种级分包含按相对丰度计少于80％、少于70％、少于60％、少于50％、少于40％、少于30％、少于20％、少于19％、少于18％、少于17％、少于16％、少于15％、少于14％、少于13％、少于12％、少于11％、少于10％、少于9％、少于8％、少于7％、少于6％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％或少于1％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂的至少一种级分包含按相对丰度计少于10％、少于9％、少于8％、少于7％、少于6％、少于5％、少于4％、少于3％或少于2％的含脱水亚基寡糖。在其他实施方案中，本文所述的寡糖制剂的至少一种级分包含按相对丰度计大于0.5％、大于0.8％、大于1％、大于2％、大于3％、大于4％、大于5％、大于6％、大于7％、大于8％、大于9％、大于10％、大于11％、大于12％、大于13％、大于14％、大于15％、大于16％、大于17％、大于18％、大于19％、大于20％、大于30％、大于40％、大于50％、大于60％、大于70％或大于80％的含脱水亚基寡糖。在其他实施方案中，本文所述的寡糖制剂的至少一种级分包含按相对丰度计大于20％、大于21％、大于22％、大于23％、大于24％、大于25％、大于26％、大于27％、大于28％、大于29％或大于30％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，寡糖制剂的至少一种级分(如DP1、DP2和/或DP3)包含按相对丰度计约0.1％、约0.2％、约0.3％、约0.4％、约0.5％、约0.6％、约0.7％、约0.8％、约0.9％、约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约6％、约7％、约8％、约9％、约10％、约11％、约12％、约13％、约14％、约15％、约16％、约17％、约18％、约19％、约20％、约21％、约22％、约23％、约24％、约25％或约30％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，寡糖制剂的至少一种级分(如DP1、DP2和/或DP3)包含按相对丰度计约0.1％、约0.2％、约0.3％、约0.4％、约0.5％、约0.6％、约0.7％、约0.8％、约0.9％、约1％、约1.5％、约2％、约3％、约4％、约5％、约6％、约7％、约8％、约9％或约10％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，寡糖制剂的至少一种级分(如DP1、DP2和/或DP3)包含按相对丰度计约0.1％至约90％、约0.5％至约90％、约0.5％至约80％、约0.5％至约70％、约0.5％至约60％、约0.5％至约50％、约0.5％至约40％、约0.5％至约30％、约0.5％至约20％、约0.5％至约10％、约0.5％至约9％、约0.5％至约8％、约0.5％至约7％、约0.5％至约6％、约0.5％至约5％、约0.5％至约4％、约0.5％至约3％、约0.5％至约2％、约1％至约10％、约2％至约9％、约2％至约8％、约2％至约7％、约2％至约6％、约2％至约5％、约2％至约4％、约2％至约3％或约5％至约10％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，寡糖制剂的DP1和DP2级分各自独立地包含如通过质谱法LC-MS/MS或GC-MS测量的按相对丰度计在约0.1％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1％、1.1％、1.2％、1.3％、1.4％或1.5％至约8％、9％、10％、11％、12％或15％范围内的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，DP1和DP2级分各自独立地包含如通过质谱法或通过LC-MS/MS或GC-MS测量的按相对丰度计约0.5％至约15％的含脱水亚基寡糖。

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂的每种级分包含按相对丰度计少于80％、少于70％、少于60％、少于50％、少于40％、少于30％、少于20％、少于19％、少于18％、少于17％、少于16％、少于15％、少于14％、少于13％、少于12％、少于11％、少于10％、少于9％、少于8％、少于7％、少于6％、少于5％、少于4％、少于3％或少于2％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂的每种级分包含按相对丰度计少于10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％或2％的含脱水亚基寡糖。在其他实施方案中，本文所述的寡糖制剂的每种级分包含按相对丰度计大于2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％、30％、40％、50％、60％、70％或80％的含脱水亚基寡糖。在其他实施方案中，本文所述的寡糖制剂的每种级分包含按相对丰度计大于20％、21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％、29％或30％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂的每种级分包含按相对丰度计约0.1％、约0.2％、约0.3％、约0.4％、约0.5％、约0.6％、约0.7％、约0.8％、约0.9％、约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约6％、约7％、约8％、约9％、约10％、约11％、约12％、约13％、约14％、约15％、约16％、约17％、约18％、约19％、约20％、约21％、约22％、约23％、约24％、约25％或约30％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂的每种级分包含按相对丰度计约0.1％、约0.2％、约0.3％、约0.4％、约0.5％、约0.6％、约0.7％、约0,8％、约0.9％、约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约6％、约7％、约8％、约9％或约10％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂的每种级分包含按相对丰度计约0.1％至约90％、约0.1％至约15％、约0.5％至约90％、约0.5％至约80％、约0.5％至约70％、约0.5％至约60％、约0.5％至约50％、约0.5％至约40％、约0.5％至约30％、约0.5％至约20％、约0.5％至约10％、约0.5％至约9％、约0.5％至约8％、约0.5％至约7％、约0.5％至约6％、约0.5％至约5％、约0.5％至约4％、约0.5％至约3％、约0.5％至约2％、约2％至约9％、约2％至约8％、约2％至约7％、约2％至约6％、约2％至约5％、约2％至约4％、约2％至约3％或约5％至约10％的含脱水亚基寡糖。

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂包含按相对丰度计少于80％、少于70％、少于60％、少于50％、少于40％、少于30％、少于20％、少于19％、少于18％、少于17％、少于16％、少于15％、少于14％、少于13％、少于12％、少于11％、少于10％、少于9％、少于8％、少于7％、少于6％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％或少于1％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，寡糖制剂包含按相对丰度计少于10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％或2％的含脱水亚基寡糖。在其他实施方案中，寡糖制剂包含按相对丰度计大于0.5％、大于0.8％、大于1％、大于2％、大于3％、大于4％、大于5％、大于6％、大于7％、大于8％、大于9％、大于10％、大于11％、大于12％、大于13％、大于14％、大于15％、大于16％、大于17％、大于18％、大于19％、大于20％、大于30％、大于40％、大于50％、大于60％、大于70％或大于80％的含脱水亚基寡糖。在其他实施方案中，寡糖制剂包含按相对丰度计大于20％、21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％、29％或30％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，寡糖制剂包含按相对丰度计约0.1％、约0.2％、约0.3％、约0.4％、约0.5％、约0.6％、约0.7％、约0.8％、约0.9％、约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约6％、约7％、约8％、约9％、约10％、约11％、约12％、约13％、约14％、约15％、约16％、约17％、约18％、约19％、约20％、约21％、约22％、约23％、约24％、约25％或约30％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，寡糖制剂包含按相对丰度计约0.1％、约0.2％、约0.3％、约0.4％、约0.5％、约0.6％、约0.7％、约0.8％、约0.9％、约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约6％、约7％、约8％、约9％或约10％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，寡糖制剂包含按相对丰度计约0.1％至约90％、约0.1％至约15％、约0.5％至约90％、约0.5％至约80％、约0.5％至约70％、约0.5％至约60％、约0.5％至约50％、约0.5％至约40％、约0.5％至约30％、约0.5％至约20％、约0.5％至约10％、约0.5％至约9％、约0.5％至约8％、约0.5％至约7％、约0.5％至约6％、约0.5％至约5％、约0.5％至约4％、约0.5％至约3％、约0.5％至约2％、约2％至约9％、约2％至约8％、约2％至约7％、约2％至约6％、约2％至约5％、约2％至约4％、约2％至约3％或约5％至约10％的含脱水亚基寡糖。

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂的DP1级分包含按相对丰度计少于30％、少于20％、少于19％、少于18％、少于17％、少于16％、少于15％、少于14％、少于13％、少于12％、少于11％、少于10％、少于9％、少于8％、少于7％、少于6％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％或少于1％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂的DP1级分包含按相对丰度计大于0.1％、大于0.5％、大于0.8％、大于1％、大于1.5％、大于2％、大于3％、大于4％、大于5％、大于6％、大于7％、大于8％、大于9％、大于10％、大于11％、大于12％、大于13％、大于14％或大于15％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂的DP1级分包含按相对丰度计约0.5％、约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约6％、约7％、约8％、约9％、约10％、约11％、约12％、约13％、约14％、约15％、约16％、约17％、约18％、约19％或约20％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂的DP1级分包含按相对丰度计约0.1％至约15％、约0.1％至约20％、约0.5％至约20％、0.5％至约10％、约0.5％至约15％、约1％至约20％、约1％至约15％、约1％至约10％、约2％至约14％、约3％至约13％、约4％至约12％、约5％至约11％、约5％至约10％、约6％至约9％或约7％至约8％或其间的任何范围的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂的DP1级分包含按相对丰度计约0.5％至约10％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，含脱水亚基寡糖的相对丰度通过质谱法(如MALDI-MS)来测定。在一些实施方案中，含脱水亚基寡糖的相对丰度通过LC-MS/MS来测定。在一些实施方案中，含脱水亚基寡糖的相对丰度通过GC-MS来测定。

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂的DP2级分包含按相对丰度计少于30％、少于20％、少于19％、少于18％、少于17％、少于16％、少于15％、少于14％、少于13％、少于12％、少于11％、少于10％、少于9％、少于8％、少于7％、少于6％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％或少于1％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂的DP2级分包含按相对丰度计大于0.1％、大于0.5％、大于0.8％、大于1％、大于1.5％、大于2％、大于3％、大于4％、大于5％、大于6％、大于7％、大于8％、大于9％、大于10％、大于11％、大于12％、大于13％、大于14％或大于15％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂的DP2级分包含按相对丰度计约0.5％、约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约6％、约7％、约8％、约9％、约10％、约11％、约12％、约13％、约14％、约15％、约16％、约17％、约18％、约19％或约20％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂的DP2级分包含按相对丰度计约0.1％至约15％、约0.1％至约20％、约0.5％至约20％、0.5％至约10％、约0.5％至约15％、约1％至约20％、约1％至约15％、约1％至约10％、约2％至约14％、约3％至约13％、约4％至约12％、约5％至约11％、约0.5％至约10％、约6％至约9％或约7％至约8％或其间的任何范围的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂的DP2级分包含按相对丰度计约5％至约10％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，含脱水亚基寡糖的相对丰度通过质谱法(如MALDI-MS)来测定。在一些实施方案中，含脱水亚基寡糖的相对丰度通过LC-MS/MS来测定。在一些实施方案中，含脱水亚基寡糖的相对丰度通过GC-MS来测定。

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂的DP3级分包含按相对丰度计少于30％、少于20％、少于19％、少于18％、少于17％、少于16％、少于15％、少于14％、少于13％、少于12％、少于11％、少于10％、少于9％、少于8％、少于7％、少于6％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％或少于1％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂的DP3级分包含按相对丰度计大于0.1％、大于0.5％、大于0.8％、大于1％、大于1.5％、大于2％、大于3％、大于4％、大于5％、大于6％、大于7％、大于8％、大于9％、大于10％、大于11％、大于12％、大于13％、大于14％或大于15％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂的DP3级分包含按相对丰度计约0.5％、约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约6％、约7％、约8％、约9％、约10％、约11％、约12％、约13％、约14％、约15％、约16％、约17％、约18％、约19％或约20％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂的DP3级分包含按相对丰度计约0.1％至约15％、约0.1％至约20％、约0.5％至约20％、0.5％至约10％、约0.5％至约15％、约1％至约20％、约1％至约15％、约1％至约10％、约2％至约14％、约3％至约13％、约4％至约12％、约5％至约11％、约5％至约10％、约6％至约9％或约7％至约8％或其间的任何范围的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂的DP3级分包含按相对丰度计约0.5％至约10％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，含脱水亚基寡糖的相对丰度通过质谱法(如MALDI-MS)来测定。在一些实施方案中，含脱水亚基寡糖的相对丰度通过LC-MS/MS来测定。在一些实施方案中，含脱水亚基寡糖的相对丰度通过GC-MS来测定。

在一些实施方案中，含脱水亚基寡糖包含一个或多个脱水亚基。例如，DP1含脱水亚基寡糖包含一个脱水亚基。在一些实施方案中，DPn含脱水亚基寡糖可以包含1至n个脱水亚基。例如，在一些实施方案中，DP2含脱水亚基寡糖包含一个或两个脱水亚基。在一些实施方案中，寡糖制剂中的每种寡糖独立地包含零个、一个或两个脱水亚基。在一些实施方案中，超过99％、95％、90％、85％、80％、75％、70％、65％、60％、55％、50％、45％、40％、35％或30％的所述含脱水亚基寡糖仅具有一个脱水亚基。在一些实施方案中，超过99％、95％、90％、85％或80％的含脱水亚基寡糖仅具有一个脱水亚基。

在一些实施方案中，寡糖制剂中或寡糖制剂的每种级分中的一种或多种寡糖包含各自经由糖苷键连接的1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个脱水亚基，其中连接每个脱水亚基的糖苷键是独立选择的。在一些实施方案中，寡糖制剂中或寡糖制剂的每种级分中的一种或多种寡糖包含各自经由糖苷键连接的1、2或3个脱水亚基，其中连接每个脱水亚基的糖苷键是独立选择的。在一些实施方案中，寡糖制剂中或每种级分中大于50％、60％、70％、80％、90％或99％的寡糖包含各自经由糖苷键连接的1、2或3个脱水亚基，其中连接每个脱水亚基的糖苷键是独立选择的。在一些实施方案中，寡糖制剂中或每种级分中的一种或多种寡糖包含经由糖苷键连接的1个脱水亚基。在一些实施方案中，寡糖制剂中或每种级分中大于50％、大于60％、大于70％、大于80％、大于90％或大于99％的寡糖包含经由糖苷键连接的1个脱水亚基。

D.脱水亚基种类

在一些实施方案中，寡糖制剂包含不同种类的脱水亚基。在一些实施方案中，示例性的含脱水亚基寡糖展示于图33、图21和图22中。在一些实施方案中，寡糖制剂包含作为单糖的热脱水产物的一个或多个脱水亚基，即脱水单糖亚基。在一些实施方案中，寡糖制剂包含作为单糖的可逆热脱水产物的一个或多个脱水亚基。

应当理解，脱水单糖(或脱水单糖亚基)是指单糖的一个或多个种类的热脱水产物。例如，在一些实施方案中，脱水葡萄糖是指1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖(左旋葡聚糖)或1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖。在一些实施方案中，多个脱水葡萄糖是指多个1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖(左旋葡聚糖)、多个1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖、葡萄糖的多个其他热脱水产物或其任何组合。类似地，在一些实施方案中，多个脱水半乳糖是指半乳糖的多个任何热脱水产物或其任何组合。

在一些实施方案中，如本文所述的寡糖制剂包含一个或多个脱水葡萄糖、脱水半乳糖、脱水甘露糖、脱水阿洛糖、脱水阿卓糖、脱水古洛糖、脱水艾杜糖、脱水塔洛糖、脱水果糖、脱水核糖、脱水阿拉伯糖、脱水鼠李糖、脱水来苏糖、脱水木糖或这些亚基的任何组合。在一些实施方案中，寡糖制剂包含一个或多个脱水葡萄糖、脱水半乳糖、脱水甘露糖或脱水果糖亚基。在一些实施方案中，如本文所述的寡糖制剂包含以下中的一种或多种：1,6-脱水-3-O-β-D-吡喃葡糖基-β-D-吡喃葡萄糖、1,6-脱水-3-O-α-D-吡喃葡糖基-β-D-吡喃葡萄糖、1,6-脱水-2-O-β-D-吡喃葡糖基-β-D-吡喃葡萄糖、1,6-脱水-2-O-α-D-吡喃葡糖基-β-D-吡喃葡萄糖、1,6-脱水-β-D-纤维二糖(聚纤维二糖)、1,6-脱水-β-D-纤维三糖(聚纤维三糖)、1,6-脱水-β-D-纤维四糖(聚纤维四糖(cellotetraosan))、1,6-脱水-β-D-纤维五糖(聚纤维五糖(ellopentaosan))和1,6-脱水-β-D-麦芽糖(麦芽聚糖(maltosan))。

在一些实施方案中，寡糖制剂包含一个或多个1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖亚基。在一些实施方案中，寡糖制剂包含一个或多个1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖(左旋葡聚糖)亚基。例如，图33展示了两种DP1含脱水亚基寡糖(左旋葡聚糖和1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖)和一种DP2含脱水亚基寡糖(脱水纤维二糖)。

脱水亚基种类的存在和水平可以根据用于制造寡糖的进料糖而变化。例如，在一些实施方案中，葡萄糖寡糖包含脱水葡萄糖亚基，半乳糖寡糖包含脱水半乳糖亚基，并且葡萄糖-半乳糖寡糖包含脱水葡萄糖和脱水半乳糖亚基。

在一些实施方案中，寡糖制剂包含1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖和1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖两种脱水亚基。在一些实施方案中，至少0.1％、1％、5％、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或99％的脱水亚基选自1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖和1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖。在一些实施方案中，至少1％、5％、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％或90％的脱水亚基是1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖。在一些实施方案中，至少1％、5％、10％、20％、30％、40％、50％或60％的脱水亚基是1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖。

在一些实施方案中，在所述制剂中，1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖与1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖的比率是约10:1至1:10、9:1至1:10、8:1至1:10、7:1至1:10、6:1至1:10、5:1至1:10、4:1至1:10、3:1至1:10、2:1至1:10、10:1至1:9、10:1至1:8、10:1至1:7、10:1至1:6、10:1至1:5、10:1至1:4、10:1至1:3、10:1至1:2或1:1至3:1。在一些实施方案中，在所述制剂中，1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖与1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖的比率是约10:1、9:1、8:1、7:1、6:1、5:1、4:1、3:1、2:1、1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1:7、1:8、1:8、1:9或1:10。在一些实施方案中，在所述制剂中，1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖与1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖的比率是约2:1。

在一些实施方案中，在每种级分中，1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖与1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖的比率是约10:1至1:10、9:1至1:10、8:1至1:10、7:1至1:10、6:1至1:10、5:1至1:10、4:1至1:10、3:1至1:10、2:1至1:10、10:1至1:9、10:1至1:8、10:1至1:7、10:1至1:6、10:1至1:5、10:1至1:4、10:1至1:3、10:1至1:2或1:1至3:1。在一些实施方案中，在每种级分中，1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖与1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖的比率是约10:1、9:1、8:1、7:1、6:1、5:1、4:1、3:1、2:1、1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1:7、1:8、1:8、1:9或1:10。在一些实施方案中，在每种级分中，1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖与1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖的比率是约2:1。

在一些实施方案中，在至少一种级分中，1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖与1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖的比率是约10:1至1:10、9:1至1:10、8:1至1:10、7:1至1:10、6:1至1:10、5:1至1:10、4:1至1:10、3:1至1:10、2:1至1:10、10:1至1:9、10:1至1:8、10:1至1:7、10:1至1:6、10:1至1:5、10:1至1:4、10:1至1:3、10:1至1:2或1:1至3:1。在一些实施方案中，在至少一种级分中，1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖与1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖的比率是约10:1、9:1、8:1、7:1、6:1、5:1、4:1、3:1、2:1、1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1:7、1:8、1:8、1:9或1:10。在一些实施方案中，在至少一种级分中，1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖与1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖的比率是约2:1。

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂包含DP2含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，寡糖制剂包含脱水乳糖、脱水蔗糖、脱水纤维二糖或其组合。在一些实施方案中，寡糖制剂包含约2至20个、2至15个、5至20个、5至15个或5至10个种类的DP2含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂不包含聚纤维二糖或不包含可检测水平的聚纤维二糖。

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂包含作为糖焦糖化产物的一个或多个脱水亚基。在一些实施方案中，寡糖制剂包含作为选自以下的糖焦糖化产物的一个或多个脱水亚基：甲醇；乙醇；呋喃；甲基乙二醛；2-甲基呋喃；乙酸乙烯酯；乙醇醛；乙酸；丙酮醇；糠醛；2-呋喃甲醇；3-呋喃甲醇；2-羟基环戊-2-烯-1-酮；5-甲基糠醛；2(5H)-呋喃酮；2甲基环戊烯醇酮；左旋葡萄糖酮；环状羟基内酯；1,4,3,6-二脱水-α-D-吡喃葡萄糖；二脱水吡喃葡萄糖；和5-羟基甲基糠醛(5-hmf)。在一些实施方案中，寡糖制剂包含5-hmf脱水亚基。

在一些实施方案中，在寡糖制剂中或在至少一种DP级分中，作为焦糖化产物的脱水亚基比作为单糖的热脱水产物的脱水亚基的丰度更低。在一些实施方案中，在寡糖制剂中或在至少一种级分中，作为焦糖化产物的脱水亚基比作为单糖的热脱水产物的脱水亚基的丰度更高。在一些实施方案中，在寡糖制剂中或在至少一种级分中，作为焦糖化产物的脱水亚基和作为单糖的热脱水产物的脱水亚基具有类似的丰度。

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂中约0.01％至约50％、约0.01％至约40％、约0.01％至约30％、约0.01％至约20％、约0.01％至约10％、约0.01％至约5％、约0.01％至约4％、约0.01％至约3％、约0.01％至约2％、约0.01％至约1％、约0.01％至约0.5％、约0.1％至约50％、约0.1％至约40％、约0.1％至约30％、约0.1％至约20％、约0.1％至约10％、约0.1％至约5％、约0.1％至约4％、约0.1％至约3％、约0.1％至约2％、约0.1％至约1％或约0.1％至约0.5％的脱水亚基是焦糖化产物。在一些实施方案中，寡糖制剂中约0.1％至约5％、约0.1％至约2％或约0.1％至约1％的脱水亚基是焦糖化产物。在一些实施方案中，寡糖制剂中少于50％、少于40％、少于30％、少于25％、少于20％、少于15％、少于14％、少于13％、少于12％、少于11％、少于10％、少于9％、少于8％、少于7％、少于6％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％或少于1％的脱水亚基是焦糖化产物。

在一些实施方案中，本文所述的制剂的至少一种级分(例如，DP1、DP2和/或DP3)中约0.01％至约50％、约0.01％至约40％、约0.01％至约30％、约0.01％至约20％、约0.01％至约10％、约0.01％至约5％、约0.01％至约4％、约0.01％至约3％、约0.01％至约2％、约0.01％至约1％、约0.01％至约0.5％、约0.1％至约50％、约0.1％至约40％、约0.1％至约30％、约0.1％至约20％、约0.1％至约10％、约0.1％至约5％、约0.1％至约4％、约0.1％至约3％、约0.1％至约2％、约0.1％至约1％或约0.1％至约0.5％的脱水亚基是焦糖化产物。在一些实施方案中，所述制剂的至少一种级分(例如，DP1、DP2和/或DP3)中约0.1％至约5％、约0.1％至约2％或约0.1％至约1％的脱水亚基是焦糖化产物。在一些实施方案中，所述制剂的至少一种级分中少于50％、40％、30％、25％、20％、15％、14％、13％、12％、11％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％或1％的脱水亚基是焦碳化产物。在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂的DP1、DP2和/或DP3级分中少于20％、少于15％、少于14％、少于13％、少于12％、少于11％、少于10％、少于9％、少于8％、少于7％、少于6％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％或少于1％的脱水亚基是焦糖化产物。

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂的每种级分中约0.01％至约50％、约0.01％至约40％、约0.01％至约30％、约0.01％至约20％、约0.01％至约10％、约0.01％至约5％、约0.01％至约4％、约0.01％至约3％、约0.01％至约2％、约0.01％至约1％、约0.01％至约0.5％、约0.1％至约50％、约0.1％至约40％、约0.1％至约30％、约0.1％至约20％、约0.1％至约10％、约0.1％至约5％、约0.1％至约4％、约0.1％至约3％、约0.1％至约2％、约0.1％至约1％或约0.1％至约0.5％的脱水亚基是焦糖化产物。在一些实施方案中，所述制剂的每种级分中约0.1％至约5％、约0.1％至约2％或约0.1％至约1％的脱水亚基是焦糖化产物。在一些实施方案中，所述制剂的每种级分中少于50％、少于40％、少于30％、少于20％、少于25％、少于20％、少于15％、少于14％、少于13％、少于12％、少于11％、少于10％、少于9％、少于8％、少于7％、少于6％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％或少于1％的脱水亚基是焦糖化产物。

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂中的每种寡糖独立地且任选地包含脱水亚基。在一些实施方案中，两种或更多种独立的寡糖包含相同或不同的脱水亚基。在一些实施方案中，两种或更多种独立的寡糖包含不同的脱水亚基。例如，在一些实施方案中，寡糖制剂包含DP1含脱水亚基寡糖，其包含1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖亚基；和DP2含脱水亚基寡糖，其包含1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖亚基。在一些实施方案中，寡糖制剂中的一种或多种寡糖包含两个或更多个相同或不同的脱水亚基。

在一些实施方案中，在寡糖制剂的聚合度等于或大于2的任何级分(即，DP2至DPn级分)中，脱水亚基可以与一个或多个常规或脱水亚基连接。在一些实施方案中，在DP2至DPn级分中，至少一个脱水亚基与一个、两个或三个其他常规或脱水亚基连接。在一些实施方案中，在DP2至DPn级分中，至少一个脱水亚基与一个或两个常规亚基连接。在一些实施方案中，在DP2至DPn级分中，至少一个脱水亚基与一个常规亚基连接。在一些实施方案中，在DP2至DPn级分中的任一种中，超过99％、90％、80％、70％、60％、50％、40％或30％的脱水亚基与一个常规亚基连接。在一些实施方案中，在DP2至DPn级分中的每一种中，超过99％、90％、80％、70％、60％、50％、40％或30％的脱水亚基与一个常规亚基连接。

在一些实施方案中，在寡糖制剂的聚合度等于或大于2的任何级分(即，DP2至DPn级分)中，脱水亚基可以位于寡糖的链端。在一些实施方案中，在寡糖制剂的聚合度等于或大于3的任何级分(即，DP3至DPn级分)中，脱水亚基可以位于不是寡糖的链端的位置。在一些实施方案中，在DP2至DPn级分中，至少一个脱水亚基位于寡糖的链端。在一些实施方案中，DP2至DPn级分中大于99％、95％、90％、85％、80％、75％、70％、65％、60％、55％、50％、45％、40％、35％或30％的脱水亚基位于寡糖的链端。在一些实施方案中，寡糖制剂中大于95％、90％、80％、70％、60％、50％、40％、30％、20％或10％的脱水亚基位于寡糖的链端。在一些实施方案中，大于30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％或99％的含脱水亚基寡糖包含链端脱水亚基。在一些实施方案中，大于80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的含脱水亚基寡糖包含链端脱水亚基。

E.糖苷键联

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂包含多种糖苷键联。糖苷键联的类型和分布可以取决于寡糖制剂的来源和制造方法。在一些实施方案中，各种糖苷键联的类型和分布可以通过本领域已知的任何合适的方法(如NMR)来测定和/或检测。例如，在一些实施方案中，糖苷键联通过¹HNMR、¹³C NMR、2D NMR(如2D JRES、HSQC、HMBC、DOSY、COSY、ECOSY、TOCSY、NOESY或ROESY)或其任何组合来测定和/或检测。在一些实施方案中，糖苷键联至少部分地通过¹H NMR来测定和/或检测。在一些实施方案中，糖苷键联至少部分地通过¹³C NMR来测定和/或检测。在一些实施方案中，糖苷键联至少部分地通过2D ¹H、¹³C-HSQC NMR来测定和/或检测。

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂包含一个或多个α-(1,2)糖苷键联、α-(1,3)糖苷键联、α-(1,4)糖苷键联、α-(1,6)糖苷键联、β-(1,2)糖苷键联、β-(1,3)糖苷键联、β-(1,4)糖苷键联、β-(1,6)糖苷键联、α-(1,1)-α糖苷键联、α-(1,1)-β糖苷键联、β-(1,1)-β糖苷键联或其任何组合。

在一些实施方案中，寡糖制剂具有约0至约60mol％、约5％至约55mol％、约5％至约50mol％、约5％至约45mol％、约5％至约40mol％、约5％至约35mol％、约5％至约30mol％、约5％至约25mol％、约10％至约60mol％、约10％至约55mol％、约10％至约50mol％、约10％至约45mol％、约10％至约40mol％、约10％至约35mol％、约15％至约60mol％、约15％至约55mol％、约15％至约50mol％、约15％至约45mol％、约15％至约40mol％、约15％至约35mol％、约20％至约60mol％、约20％至约55mol％、约20％至约50mol％、约20％至约45mol％、约20％至约40mol％、约20％至约35mol％、约25％至约60mol％、约25％至约55mol％、约25％至约50mol％、约25％至约45mol％、约25％至约40mol％或约25％至约35mol％的α-(1,6)糖苷键联的糖苷键类型分布。

在一些实施方案中，寡糖制剂具有约0至约50mol％、约0至约40mol％、约0至约35mol％、约0至约30mol％、约0至约25mol％、约0至约20mol％、约5％至约40mol％、约5％至约35mol％、约5％至约30mol％、约5％至约25mol％、约5％至约20mol％、约10％至约40mol％、约10％至约35mol％、约10％至约20mol％、约15％至约40mol％、约15％至约35mol％、约15％至约30mol％、约15％至约25mol％或约15％至约20mol％的α-(1,3)糖苷键联的糖苷键类型分布。

在一些实施方案中，寡糖制剂具有约0至约40mol％、约0至约35mol％、约0至约30mol％、约0至约25mol％、约0至约20mol％、约0至约15mol％、约0至约10mol％、约2％至约30mol％、约2％至约25mol％、约2％至约20mol％、约2％至约15mol％、约2％至约10mol％、约3％至约30mol％、约3％至约25mol％、约3％至约20mol％、约3％至约15mol％、约3％至约10mol％、约5％至约30mol％、约5％至约25mol％、约5％至约20mol％、约5％至约15mol％或约5％至约10mol％的α-(1,2)糖苷键联的糖苷键类型分布。

在一些实施方案中，寡糖制剂具有约0至约40mol％、约0至约30mol％、约0至约25mol％、约0至约20mol％、约0至约15mol％、约0至约10mol％或约0至约5mol％的α-(1,4)糖苷键联的糖苷键类型分布。在一些实施方案中，寡糖制剂具有少于40mol％、少于30mol％、少于20mol％、少于15mol％、少于10mol％、少于9mol％、少于8mol％、少于7mol％、少于6mol％、少于5mol％、少于4mol％、少于3mol％或少于2mol％的α-(1,4)糖苷键的糖苷键类型分布。

在一些实施方案中，寡糖制剂具有约0至约40mol％、约0至约35mol％、约0至约30mol％、约0至约25mol％、约0至约20mol％、约0至约15mol％、约0至约10mol％、约2％至约30mol％、约2％至约25mol％、约2％至约20mol％、约2％至约15mol％、约2％至约10mol％、约5％至约30mol％、约5％至约25mol％、约5％至约20mol％、约5％至约15mol％、约5％至约10mol％、约8％至约30mol％、约8％至约25mol％、约8％至约20mol％、约8％至约15mol％或约10％至约15mol％的β-(1,6)糖苷键联的糖苷键类型分布。

在一些实施方案中，寡糖制剂具有约0至约40mol％、约0至约35mol％、约0至约30mol％、约0至约25mol％、约0至约20mol％、约0至约15mol％、约0至约10mol％、约2％至约30mol％、约2％至约25mol％、约2％至约20mol％、约2％至约15mol％、约2％至约10mol％、约3％至约30mol％、约3％至约25mol％、约3％至约20mol％、约3％至约15mol％、约3％至约10mol％、约5％至约30mol％、约5％至约25mol％、约5％至约20mol％、约5％至约15mol％或约5％至约10mol％的β-(1,4)糖苷键联的糖苷键类型分布。

在一些实施方案中，寡糖制剂具有约0至约40mol％、约0至约30mol％、约0至约25mol％、约0至约20mol％、约0至约15mol％、约0至约10mol％、约0至约5mol％、约1％至约20mol％、约1％至约15mol％、约1％至约10mol％、约1％至约5mol％、约2％至约20mol％、约2％至约15mol％、约2％至约10mol％或约2％至约5mol％的β-(1,2)糖苷键联的糖苷键类型分布。在一些实施方案中，寡糖制剂具有少于40mol％、少于30mol％、少于20mol％、少于15mol％、少于10mol％、少于9mol％、少于8mol％、少于7mol％、少于6mol％、少于5mol％、少于4mol％、少于3mol％或少于2mol％的β-(1,2)糖苷键的糖苷键类型分布。

在一些实施方案中，寡糖制剂具有约0至约40mol％、约0至约30mol％、约0至约25mol％、约0至约20mol％、约0至约15mol％、约0至约10mol％、约0至约5mol％、约1％至约20mol％、约1％至约15mol％、约1％至约10mol％、约1％至约5mol％、约2％至约20mol％、约2％至约15mol％、约2％至约10mol％或约2％至约5mol％的β-(1,3)糖苷键联的糖苷键类型分布。在一些实施方案中，寡糖制剂具有少于40mol％、少于30mol％、少于20mol％、少于15mol％、少于10mol％、少于9mol％、少于8mol％、少于7mol％、少于6mol％、少于5mol％、少于4mol％、少于3mol％或少于2mol％的β-(1,3)糖苷键的糖苷键类型分布。

在一些实施方案中，寡糖制剂具有不同于非合成寡糖制剂的糖苷键类型分布的糖苷键类型分布。例如，在一些实施方案中，寡糖制剂具有不同于基础营养组合物的糖苷键类型分布的糖苷键类型分布。在一些实施方案中，基础营养组合物包含天然碳水化合物来源，如淀粉和植物纤维。天然碳水化合物来源中的一些具有高百分比的α-(1,4)、α-(1,6)和/或β-(1,6)糖苷键联。因此，在一些实施方案中，寡糖制剂具有比基础营养组合物更低百分比的α-(1,4)糖苷键联。在一些实施方案中，寡糖制剂具有比基础营养组合物更低百分比的α-(1,6)糖苷键联。在其他实施方案中，寡糖制剂具有比基础营养组合物更高百分比的α-(1,6)糖苷键联。在一些实施方案中，寡糖制剂具有比基础营养组合物更低百分比的β-(1,6)糖苷键联。在一些实施方案中，寡糖制剂包含不容易能被酶消化或水解的糖苷键联。

具体地，在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂的糖苷键类型分布中的α-(1,2)、α-(1,3)、α-(1,4)、α-(1,6)、β-(1,2)、β-(1,3)、β-(1,4)和/或β-(1,6)糖苷键联比基础营养组合物低至少50mol％、至少40mol％、至少30mol％、至少20mol％、至少15mol％、至少10mol％、至少5mol％、至少2mol％或至少1mol％。在一些实施方案中，寡糖制剂的糖苷键类型分布中的α-(1,2)、α-(1,3)、α-(1,4)、α-(1,6)、β-(1,2)、β-(1,3)、β-(1,4)和/或β-(1,6)糖苷键联比基础营养组合物高至少50mol％、至少40mol％、至少30mol％、至少20mol％、至少15mol％、至少10mol％、至少5mol％、至少2mol％或至少1mol％。

本领域技术人员应该理解，某些类型的糖苷键联可能不适用于包含某些类型的单糖的寡糖。例如，在一些实施方案中，寡糖制剂包含α-(1,2)糖苷键联和α-(1,6)糖苷键联。在其他实施方案中，寡糖制剂包含α-(1,2)糖苷键联和β-(1,3)糖苷键联。在一些实施方案中，寡糖制剂包含α-(1,2)糖苷键联、α-(1,3)糖苷键联和β-(1,6)糖苷键联。在一些实施方案中，寡糖制剂包含α-(1,2)糖苷键联、α-(1,3)糖苷键联、α-(1,4)糖苷键联、α-(1,6)糖苷键联、β-(1,2)糖苷键联、β-(1,3)糖苷键联、β-(1,4)糖苷键联和β-(1,6)糖苷键联。

F.分子量

寡糖制剂的分子量和分子量分布可以通过任何合适的分析手段和仪器(如端基法、渗透压(渗透压测定法)、超速离心、粘度测量、光散射法、SEC、SEC-MALLS、FFF、A4F、HPLC和质谱法)来测定。在一些实施方案中，分子量和分子量分布通过质谱法(如MALDI-MS、LC-MS或GC-MS)来测定。在一些实施方案中，分子量和分子量分布通过尺寸排阻色谱法(SEC)(如凝胶渗透色谱法(GPC))来测定。在其他实施方案中，分子量和分子量分布通过HPLC来测定。在一些实施方案中，分子量和分子量分布通过MALDI-MS来测定。

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂具有约100至约10000g/mol、约200至约8000g/mol、约300至约5000g/mol、约500至约5000g/mol、约700至约5000g/mol、约900至约5000g/mol、约1100至约5000g/mol、约1300至约5000g/mol、约1500至约5000g/mol、约1700至约5000g/mol、约300至约4500g/mol、约500至约4500g/mol、约700至约4500g/mol、约900至约4500g/mol、约1100至约4500g/mol、约1300至约4500g/mol、约1500至约4500g/mol、约1700至约4500g/mol、约1900至约4500g/mol、约300至约4000g/mol、约500至约4000g/mol、约700至约4000g/mol、约900至约4000g/mol、约1100至约4000g/mol、约1300至约4000g/mol、约1500至约4000g/mol、约1700至约4000g/mol、约1900至约4000g/mol、约300至约3000g/mol、约500至约3000g/mol、约700至约3000g/mol、约900至约3000g/mol、约1100至约3000g/mol、约1300至约3000g/mol、约1500至约3000g/mol、约1700至约3000g/mol、约1900至约3000g/mol、约2100至约3000g/mol、约300至约2500g/mol、约500至约2500g/mol、约700至约2500g/mol、约900至约2500g/mol、约1100至约2500g/mol、约1300至约2500g/mol、约1500至约2500g/mol、约1700至约2500g/mol、约1900至约2500g/mol、约2100至约2500g/mol、约300至约1500g/mol、约500至约1500g/mol、约700至约1500g/mol、约900至约1500g/mol、约1100至约1500g/mol、约1300至约1500g/mol、约2000至约2800g/mol、约2100至约2700g/mol、约2200至约2600g/mol、约2300至约2500g/mol或约2320至约2420g/mol的重均分子量。在一些实施方案中，寡糖制剂的重均分子量是约2000至约2800g/mol、约2100至约2700g/mol、约2200至约2600g/mol、约2300至约2500g/mol或约2320至约2420g/mol。在一些实施方案中，寡糖制剂具有在从至少500g/mol、750g/mol、1000g/mol或1500g/mol至至多1750g/mol、2000g/mol、2250g/mol、2500g/mol或3000g/mol范围内的重均分子量。在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂的重均分子量根据实施例9通过HPLC来测定。

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂具有约100至约10000g/mol、约200至约8000g/mol、约300至约5000g/mol、约500至约5000g/mol、约700至约5000g/mol、约900至约5000g/mol、约1100至约5000g/mol、约1300至约5000g/mol、约1500至约5000g/mol、约1700至约5000g/mol、约300至约4500g/mol、约500至约4500g/mol、约700至约4500g/mol、约900至约4500g/mol、约1100至约4500g/mol、约1300至约4500g/mol、约1500至约4500g/mol、约1700至约4500g/mol、约1900至约4500g/mol、约300至约4000g/mol、约500至约4000g/mol、约700至约4000g/mol、约900至约4000g/mol、约1100至约4000g/mol、约1300至约4000g/mol、约1500至约4000g/mol、约1700至约4000g/mol、约1900至约4000g/mol、约300至约3000g/mol、约500至约3000g/mol、约700至约3000g/mol、约900至约3000g/mol、约1100至约3000g/mol、约1300至约3000g/mol、约1500至约3000g/mol、约1700至约3000g/mol、约1900至约3000g/mol、约2100至约3000g/mol、约300至约2500g/mol、约500至约2500g/mol、约700至约2500g/mol、约900至约2500g/mol、约1100至约2500g/mol、约1300至约2500g/mol、约1500至约2500g/mol、约1700至约2500g/mol、约1900至约2500g/mol、约2100至约2500g/mol、约300至约2000g/mol、约500至约300至2000g/mol、约700至约2000g/mol、约900至约2000g/mol、约1100至约2000g/mol、约300至约1500g/mol、约500至约1500g/mol、约700至约1500g/mol、约900至约1500g/mol、约1100至约1500g/mol、约1300至约1500g/mol、约1000至约2000g/mol、约1100至约1900g/mol、约1200至约1800g/mol、约1300至约1700g/mol、约1400至约1600g/mol或约1450至约1550g/mol的数均分子量。在一些实施方案中，寡糖制剂的数均分子量是约1000至约2000g/mol、约1100至约1900g/mol、约1200至约1800g/mol、约1300至约1700g/mol、1400至1600g/mol或1450-1550g/mol。在一些实施方案中，寡糖制剂具有在从至少500g/mol、750g/mol、1000g/mol或1500g/mol至至多1750g/mol、2000g/mol、2250g/mol、2500g/mol或3000g/mol范围内的数均分子量。在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂的数均分子量根据实施例9通过HPLC来测定。

G.寡糖的类型

存在于寡糖制剂中的寡糖的种类可以取决于所述一种或多种进料糖的类型。例如，在一些实施方案中，当进料糖包括葡萄糖时，寡糖制剂包含葡萄糖寡糖。例如，在一些实施方案中，当进料糖包括半乳糖时，寡糖制剂包含半乳糖寡糖。对于另一个例子，在一些实施方案中，当进料糖包括半乳糖和葡萄糖时，寡糖制剂包含葡萄糖-半乳糖寡糖。

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂包含一个或多个种类的单糖亚基。在一些实施方案中，寡糖制剂包含具有1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20或更多个不同种类的单糖亚基的寡糖。

在一些实施方案中，寡糖制剂包含具有1、2、3或4个不同种类的单糖亚基的寡糖。在一些实施方案中，寡糖制剂包含具有1、2或3个不同种类的单糖亚基的寡糖。在一些实施方案中，寡糖制剂包含具有3个不同种类的单糖亚基的寡糖。在一些实施方案中，寡糖制剂包含具有2个不同种类的单糖亚基的寡糖。在一些实施方案中，寡糖制剂包含一个种类的单糖亚基。

在一些实施方案中，寡糖制剂包含不同种类的寡糖，其中每个寡糖分子独立地包含1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个不同种类的单糖亚基。在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂包含10²、10³、10⁴、10⁵或更多个不同种类的寡糖。在一些实施方案中，所述制剂中的一些寡糖包含一个种类的单糖亚基，并且相同制剂中的一些其他寡糖包含两个或更多个种类的单糖亚基。例如，在一些实施方案中，当进料糖是葡萄糖和半乳糖时，寡糖制剂可以包含仅包含葡萄糖亚基的寡糖、仅包含半乳糖亚基的寡糖、包含不同比率的葡萄糖和半乳糖亚基两者的寡糖或其任何组合。

在一些实施方案中，寡糖制剂的n种级分中的任一种或全部包含不同种类的寡糖亚基，其中每种寡糖独立地包含1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个不同种类的单糖亚基。在一些实施方案中，所述制剂的级分中的一些寡糖包含一个种类的单糖亚基，并且所述制剂的相同级分中的一些其他寡糖包含两个或更多个种类的单糖亚基。

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂包含选自以下的一个或多个单糖亚基：三糖、四糖、戊糖、己糖、庚糖及其任何组合，其中所述三糖、四糖、戊糖、己糖或庚糖亚基中的每一个独立地且任选地被官能化和/或被其相应的脱水亚基之一替换。在一些实施方案中，相应的脱水亚基是单糖亚基的热脱水产物。在一些实施方案中，相应的脱水亚基是单糖亚基的焦糖化产物。

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂包含戊糖亚基、己糖亚基或其任何组合，其中所述戊糖或己糖亚基中的每一个独立地且任选地被官能化和/或被其相应的脱水亚基之一替换。在一些实施方案中，寡糖制剂包含己糖亚基，其中所述己糖亚基中的每一个独立地且任选地被其相应的脱水亚基之一替换。

如本文所用，四糖是指具有四个碳原子的单糖，如赤藓糖、苏糖和赤藓酮糖。如本文所用，戊糖是指具有五个碳原子的单糖，如阿拉伯糖、来苏糖、核糖和木糖。如本文所用，己糖是指具有六个碳原子的单糖，如阿洛糖、阿卓糖、葡萄糖、甘露糖、古洛糖、艾杜糖、半乳糖、塔洛糖、阿洛酮糖、果糖、山梨糖和塔格糖。如本文所用，庚糖是指具有七个碳原子的单糖，如景天庚酮糖和甘露庚酮糖。

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂包含葡萄糖亚基，其中至少一个葡萄糖亚基任选地被脱水葡萄糖亚基替换。在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂包含半乳糖亚基，其中至少一个半乳糖亚基任选地被脱水半乳糖亚基取代。在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂包含半乳糖和葡萄糖亚基，其中至少一个半乳糖亚基或至少一个葡萄糖亚基任选地被其相应的脱水亚基之一替换。在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂包含果糖和葡萄糖亚基，其中至少一个果糖亚基或至少一个葡萄糖亚基任选地被其相应的脱水亚基之一替换。在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂包含甘露糖和葡萄糖亚基，其中至少一个甘露糖亚基或至少一个葡萄糖亚基任选地被其相应的脱水亚基之一替换。

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂包括葡萄糖-半乳糖寡糖制剂、葡萄糖寡糖制剂、半乳糖寡糖制剂、果糖寡糖制剂、甘露糖寡糖制剂、阿拉伯糖寡糖制剂、木糖寡糖制剂、葡萄糖-果糖寡糖制剂、葡萄糖-甘露糖寡糖制剂、葡萄糖-阿拉伯糖寡糖制剂、葡萄糖-木糖寡糖制剂、半乳糖-果糖寡糖制剂、半乳糖-甘露糖寡糖制剂、半乳糖-阿拉伯糖寡糖制剂、半乳糖-木糖寡糖制剂、果糖-甘露糖寡糖制剂、果糖-阿拉伯糖寡糖制剂、果糖-木糖寡糖制剂、甘露糖-阿拉伯糖寡糖制剂、甘露糖-木糖寡糖制剂、阿拉伯糖-木糖寡糖制剂、半乳糖-阿拉伯糖-木糖寡糖制剂、果糖-半乳糖-木糖寡糖制剂、阿拉伯糖-果糖-甘露糖-木糖寡糖制剂、葡萄糖-果糖-半乳糖-阿拉伯糖寡糖制剂、果糖-葡萄糖-阿拉伯糖-甘露糖-木糖寡糖制剂、葡萄糖-半乳糖-果糖-甘露糖-阿拉伯糖-木糖寡糖制剂或其任何组合；其中所述制剂内的单糖亚基中的每一个独立地且任选地被官能化和/或被其相应的脱水亚基之一替换。

在某些实施方案中，本文所述的寡糖制剂包含按重量计超过99％的葡萄糖亚基。在一些实施方案中，寡糖制剂仅包含葡萄糖亚基。

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂包含按重量计约45％至55％的葡萄糖亚基和约55％至45％的半乳糖亚基。在一些具体实施方案中，寡糖制剂包含按重量计约50％的葡萄糖亚基和50％的半乳糖亚基。

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂包含按重量计约80％至95％的葡萄糖亚基和约20％至5％的甘露糖亚基。在一些实施方案中，寡糖制剂包含按重量计约85％至90％的葡萄糖亚基和约15％至10％的甘露糖亚基。

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂包含按重量计约80％至95％的葡萄糖亚基和约20％至5％的半乳糖亚基。在一些实施方案中，寡糖制剂包含按重量计约85％至90％的葡萄糖亚基和约15％至10％的半乳糖亚基。

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂包含按重量计约80％至95％的葡萄糖亚基、0％至8％的半乳糖亚基和5％至20％的甘露糖亚基。在一些实施方案中，寡糖制剂包含按重量计约80％至90％的葡萄糖亚基、1％至5％的半乳糖亚基和10％至15％的甘露糖亚基。

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂包含约1wt％至约100wt％、约50wt％至约100wt％、约80wt％至约98wt％或约85wt％至约95wt％或其间的任何范围的葡萄糖亚基。在一些实施方案中，半乳糖亚基以约0wt％至约90wt％、约1wt％至约50wt％、约2wt％至约20wt％或约5wt％至约15wt％或其间的任何范围的量存在于本文所述的寡糖制剂中。在一些实施方案中，甘露糖亚基以约0wt％至约90wt％、约1wt％至约50wt％、约2wt％至约20wt％或约5wt％至约15wt％或其间的任何范围的量存在于本文所述的寡糖制剂中。

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂具有如表26所示的单糖亚基的组成。

表26.寡糖制剂的示例性组成

H.D形式与L形式

在一些实施方案中，寡糖中的至少一个单糖亚基呈L形式。在一些实施方案中，寡糖中的至少一个单糖亚基呈D形式。在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂中的单糖亚基呈其天然丰富的形式，例如D-葡萄糖、D-木糖和L-阿拉伯糖。

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂包含L形式和D形式的单糖亚基的混合物。在一些实施方案中，L形式与D形式或D形式与L形式的单糖亚基比率是约1:1、约1:2、约1:3、约1:4、约1:5、约1:6、约1:7、约1:8、约1:9、约1:10、约1:12、约1:14、约1:16、约1:18、约1:20、约1:25、约1:30、约1:35、约1:40、约1:45、约1:50、约1:55、约1:60、约1:65、约1:70、约1:75、约1:80、约1:85、约1:90、约1:100或约1:150。

I.官能化寡糖

在一些实施方案中，所述制剂中的一种或多种寡糖独立地被官能化。官能化寡糖可以通过例如在催化剂存在下将一种或多种糖与一种或多种官能化化合物合并来产生。产生官能化寡糖的方法在WO 2012/118767、WO 2014/031956和WO/2016/122887中有描述，将其通过引用以其整体且关于其公开内容特此并入。

在一些实施方案中，官能化化合物包含一个或多个酸基(例如，-COOH)、羟基、或含N基团(例如，-CN、-NO₂和-N(R_a)₂，其中R_a是氢、烷基、烯基、炔基、卤代烷基、杂烷基、环烷基、芳基、杂环烷基或杂芳基)、含S基团(例如，硫醇和硫酸盐)、卤化物(例如，-Cl)、含P基团(例如，磷酸盐)或其任何组合。在一些实施方案中，官能化化合物经由醚、酯、氧-硫、胺或氧-磷键与至少一个单糖亚基连接。在一些实施方案中，一种或多种官能化化合物经由单个键联与单糖亚基连接。在一些实施方案中，至少一种官能化化合物经由两个或更多个键联与一种或两种寡糖连接。

应当理解，对于寡糖制剂中的每种寡糖，所描述的实施方案中的每一个是独立的并且可以组合，就如同每一个组合单独列出一样；因此，本公开文本涵盖了实施方案的任何组合。例如，各种实施方案可以被分成若干个类别，所述若干个类别包括但不限于(i)脱水亚基的存在或不存在；(ii)脱水亚基的数量和水平；(iii)脱水亚基的种类类型；(iv)脱水亚基的位置；(v)聚合度；(vi)分子量；(vii)任何官能团的存在或不存在；(viii)寡糖的类型；(ix)糖苷键联的类型；和(x)L形式与D形式。因此，所描述的寡糖制剂包含不同种类的多种寡糖。在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂包含至少10、10²、10³、10⁴、10⁵、10⁶、10⁷、10⁸、10⁹或10¹⁰个不同的寡糖种类。在一些实施方案中，所述制剂包含至少10³、10⁴、10⁵、10⁶或10⁹个不同的寡糖种类。在一些实施方案中，所述制剂包含至少10³个不同的寡糖种类。

III.制造寡糖制剂的方法

在一个方面，本文提供了制造寡糖制剂的方法。在一些实施方案中，本文提供了制造适用于营养组合物(如动物饲料组合物)或直接饲喂给动物的寡糖制剂的方法。在一个方面，本文提供了制造寡糖制剂的方法，所述方法包括将包含一种或多种进料糖和催化剂的水性组合物加热至足以诱导聚合的温度并持续足以诱导聚合的时间，其中催化剂选自：(+)-樟脑-10-磺酸；2-吡啶磺酸；3-吡啶磺酸；8-羟基-5-喹啉磺酸水合物；α-羟基-2-吡啶甲烷磺酸；(β)-樟脑-10-磺酸；丁基膦酸；联苯基次膦酸；己基膦酸；甲基膦酸；苯基次膦酸；苯基膦酸；叔丁基膦酸；SS)-VAPOL磷酸氢酯；6-喹啉磺酸；3-(1-吡啶并)-1-丙烷磺酸盐；2-(2-吡啶基)乙烷磺酸；3-(2-吡啶基)-5,6-联苯基-1,2,4-三嗪-p,p'-二磺酸单钠盐水合物；1,1'-联萘-2,2'-二基-磷酸氢盐；双(4-甲氧基苯基)次膦酸；苯基(3,5-二甲苯基)次膦酸；L-磺基丙氨酸一水合物；聚(苯乙烯磺酸-共-二乙烯基苯)；赖氨酸；乙烷二磺酸；乙烷磺酸；羟乙磺酸；同型磺基丙氨酸；HEPBS(N-(2-羟乙基)哌嗪-N'-(4-丁烷磺酸))；HEPES(4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙烷磺酸)；2-羟基-3-吗啉代丙烷磺酸；2-(N-吗啉代)乙烷磺酸；甲烷磺酸；甲磺烟肼；萘-1-磺酸；萘-2-磺酸；全氟丁烷磺酸；6-磺基奎诺糖；三氟甲磺酸；2-氨基乙烷磺酸；苯甲酸；氯乙酸；三氟乙酸；己酸；庚酸；辛酸；壬酸；月桂酸；棕榈酸；硬脂酸；花生酸；天冬氨酸；谷氨酸；丝氨酸；苏氨酸；谷氨酰胺；半胱氨酸；甘氨酸；脯氨酸；丙氨酸；缬氨酸；异亮氨酸；亮氨酸；甲硫氨酸；苯丙氨酸；酪氨酸；色氨酸，并且其中寡糖制剂包含各自具有选自1(DP1级分)至n(DPn级分)的不同聚合度的至少n种寡糖级分，其中n是大于2的整数。

在一些实施方案中，n是大于或等于3的整数。在一些实施方案中，n是1至100范围内的整数，如4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、40或50。在一些实施方案中，进料糖的聚合通过逐步生长聚合来实现。在一些实施方案中，进料糖的聚合通过缩聚来实现。

A.进料糖

在一些实施方案中，本文所述的制造寡糖制剂的方法包括加热一种或多种类型的进料糖。在一些实施方案中，所述一种或多种类型的进料糖包括单糖、二糖、三糖、四糖或其任何混合物。

在一些实施方案中，所述一种或多种进料糖包括葡萄糖。在一些实施方案中，所述一种或多种进料糖包括葡萄糖和半乳糖。在一些实施方案中，所述一种或多种进料糖包括葡萄糖、木糖和半乳糖。在一些实施方案中，所述一种或多种进料糖包括葡萄糖和甘露糖。在一些实施方案中，所述一种或多种进料糖包括葡萄糖和果糖。在一些实施方案中，所述一种或多种进料糖包括葡萄糖、果糖和半乳糖。在一些实施方案中，所述一种或多种进料糖包括葡萄糖、半乳糖和甘露糖。

在一些实施方案中，所述一种或多种进料糖包括二糖，如乳糖、蔗糖和纤维二糖。在一些实施方案中，所述一种或多种进料糖包括三糖，如麦芽三糖或棉子糖。在某些实施方案中，所述一种或多种进料糖包括葡萄糖、甘露糖、半乳糖、木糖、麦芽糊精、阿拉伯糖或半乳糖或其任何组合。在某些实施方案中，所述一种或多种进料糖包括糖浆，如玉米糖浆。在一些实施方案中，所述一种或多种进料糖包括葡萄糖和乳糖。在一些实施方案中，所述一种或多种进料糖包括葡萄糖和蔗糖。

在一些实施方案中，进料糖的类型可以影响所得的制造的寡糖制剂。例如，在其中所述一种或多种进料糖全部为葡萄糖的一些变型中，所得的寡糖制剂包括葡萄糖寡糖制剂。在其他实施方案中，在所述一种或多种进料糖全部为甘露糖的情况下，所得的寡糖制剂包括甘露糖寡糖制剂。在一些实施方案中，其中所述一种或多种进料糖包括葡萄糖和半乳糖，所得的寡糖制剂包括葡萄糖-半乳糖寡糖制剂。在又其他实施方案中，在所述一种或多种进料糖包括木糖、葡萄糖和半乳糖的情况下，所得的寡糖制剂包括葡萄糖-半乳糖-木糖寡糖制剂。

在一些实施方案中，所述一种或多种进料糖中的每一种可以独立地呈其脱水物或水合物形式。在一些实施方案中，所述一种或多种进料糖包括葡萄糖、半乳糖、果糖、甘露糖或其任何组合，并且其中葡萄糖、半乳糖、果糖或甘露糖中的每一种独立地呈其一水合物或脱水物形式。在一些实施方案中，所述一种或多种进料糖包括单糖一水合物，如葡萄糖一水合物。在一些实施方案中，所述一种或多种进料糖包括糖二水合物，如海藻糖二水合物。在一些实施方案中，所述一种或多种进料糖包括呈其脱水物形式的至少一种糖和呈其水合物形式的至少一种糖。

在一些实施方案中，可以将所述一种或多种进料糖作为糖溶液来提供，其中将糖与水合并，并且进料到反应器中。在一些实施方案中，可以将糖以固体形式进料到反应器中，并且在所述反应器中与水合并。在一些实施方案中，在添加水之前将所述一种或多种进料糖合并并混合。在其他实施方案中，将所述一种或多种进料糖合并到水中并在其后混合。

在一些实施方案中，所述方法包括将两种或更多种进料糖与催化剂合并以产生寡糖制剂。在一些实施方案中，所述两种或更多种进料糖包括葡萄糖、半乳糖、果糖、甘露糖、乳糖或其任何组合。在一些实施方案中，所述方法包括将糖(例如，单糖、二糖和/或三糖)的混合物与催化剂合并以产生寡糖制剂。在其他实施方案中，所述方法包括将糖和糖醇的混合物与催化剂合并以产生寡糖制剂。

在一些实施方案中，所述一种或多种进料糖包括经官能化的或经修饰的糖。经官能化的或经修饰的糖可以包括氨基糖、糖酸、糖醇、糖酰胺、糖醚或其任何组合。在一些实施方案中，氨基糖是指其中羟基被胺基替换的糖分子。示例性氨基糖包括但不限于N-乙酰基-d-葡糖胺、甘露糖胺、神经氨酸、胞壁酸、N-乙酰基-神经胺(neuramin)、N-乙酰基-胞壁酸(muramic)、N-乙酰基-半乳糖胺、N-乙酰基-甘露糖胺(mannosa)、N-羟乙酰神经氨酸(N-glycolylneuram)、阿卡维西辛(acarviosin)、D-葡糖胺和D-半乳糖胺。

在实施方案中，糖酸是指具有羧基的糖。示例性糖酸包括但不限于醛糖酸(如甘油酸、木糖酸、葡糖酸和抗坏血酸)、酮糖酸(如神经氨酸和酮去氧辛酮糖酸)、糖醛酸(如葡糖醛酸、半乳糖醛酸和艾杜糖醛酸)和糖二酸(如酒石酸、粘液酸和糖质酸)。

在一些实施方案中，糖醇是指糖来源的多元醇。示例性糖醇包括但不限于乙二醇、阿拉伯糖醇、甘油、赤藓糖醇、苏糖醇、木糖醇、核糖醇、甘露糖醇、山梨糖醇、半乳糖醇、岩藻糖醇、艾杜糖醇、肌醇和倭勒米糖醇(volemitol)。

在一些实施方案中，糖酰胺是指含有-C(＝O)-N-基团的糖分子。在实施方案中，糖醚是指含有醚键的糖分子，如葡糖苷。

在一些实施方案中，经官能化的或经修饰的糖包括葡糖胺、N-乙酰基葡糖胺、葡糖醛酸、半乳糖醛酸、葡糖醇、木糖醇、甘露糖醇、山梨糖醇。在一些实施方案中，所述一种或多种进料糖包括脱氧糖，如岩藻糖、鼠李糖、脱氧核糖或墨角藻糖(fuculose)。

在一些实施方案中，本文所述的制造寡糖制剂的方法以克规模进行。在一些实施方案中，本文所述的制造寡糖制剂的方法以千克或更高规模进行。因此，在一些实施方案中，所述方法包括加热水性组合物，所述水性组合物包含超过0.5、超过1、超过2、超过3、超过4、超过5、超过6、超过7、超过9、超过10、超过100或超过1000kg的量的一种或多种进料糖。在一些实施方案中，所述方法包括加热水性组合物，所述水性组合物包含不超过0.5、1、2、3、4、5、6、7、9、10、100、1000或1500kg的量的一种或多种进料糖。在一些实施方案中，所述方法包括加热水性组合物，所述水性组合物包含超过1kg的量的一种或多种进料糖。

B.催化剂

在一些实施方案中，本文提供的催化剂包括一种或多种酸。在一些实施方案中，本文提供的催化剂包括矿物酸；羧酸；氨基酸；磺酸；硼酸；膦酸；次膦酸；硫酸；磷酸；聚(苯乙烯磺酸-共-乙烯基苄基-咪唑鎓硫酸盐-共-二乙烯基苯)；聚(苯乙烯磺酸-共-二乙烯基苯)；(+)-樟脑-10-磺酸；2-吡啶磺酸；3-吡啶磺酸；8-羟基-5-喹啉磺酸水合物；α-羟基-2-吡啶甲烷磺酸；(β)-樟脑-10-磺酸；丁基膦酸；联苯基次膦酸；己基膦酸；甲基膦酸；苯基次膦酸；苯基膦酸；叔丁基膦酸；SS)-VAPOL磷酸氢酯；6-喹啉磺酸；3-(1-吡啶并)-1-丙烷磺酸盐；2-(2-吡啶基)乙烷磺酸；3-(2-吡啶基)-5,6-联苯基-1,2,4-三嗪-p,p'-二磺酸单钠盐水合物；1,1'-联萘-2,2'-二基-磷酸氢盐；双(4-甲氧基苯基)次膦酸；苯基(3,5-二甲苯基)次膦酸；L-磺基丙氨酸一水合物；乙酸；丙酸；丁酸；谷氨酸；赖氨酸；乙烷二磺酸；乙烷磺酸；羟乙磺酸；同型磺基丙氨酸；HEPBS(N-(2-羟乙基)哌嗪-N'-(4-丁烷磺酸))；HEPES(4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙烷磺酸)；2-羟基-3-吗啉代丙烷磺酸；2-(N-吗啉代)乙烷磺酸；甲烷磺酸；甲磺烟肼；萘-1-磺酸；萘-2-磺酸；全氟丁烷磺酸；6-磺基奎诺糖；三氟甲磺酸；2-氨基乙烷磺酸；苯甲酸；氯乙酸；三氟乙酸；己酸；庚酸；辛酸；壬酸；月桂酸；棕榈酸；硬脂酸；花生酸；天冬氨酸；谷氨酸；丝氨酸；苏氨酸；谷氨酰胺；半胱氨酸；甘氨酸；脯氨酸；丙氨酸；缬氨酸；异亮氨酸；亮氨酸；甲硫氨酸；苯丙氨酸；酪氨酸；色氨酸；聚合酸；碳载酸；或其任何组合。

在一些实施方案中，本文提供的催化剂包括：(+)-樟脑-10-磺酸；2-吡啶磺酸；3-吡啶磺酸；8-羟基-5-喹啉磺酸水合物；α-羟基-2-吡啶甲烷磺酸；(β)-樟脑-10-磺酸；丁基膦酸；联苯基次膦酸；己基膦酸；甲基膦酸；苯基次膦酸；苯基膦酸；叔丁基膦酸；SS)-VAPOL磷酸氢酯；6-喹啉磺酸；3-(1-吡啶并)-1-丙烷磺酸盐；2-(2-吡啶基)乙烷磺酸；3-(2-吡啶基)-5,6-联苯基-1,2,4-三嗪-p,p'-二磺酸单钠盐水合物；1,1'-联萘-2,2'-二基-磷酸氢盐；双(4-甲氧基苯基)次膦酸；苯基(3,5-二甲苯基)次膦酸；L-磺基丙氨酸一水合物；聚(苯乙烯磺酸-共-二乙烯基苯)；赖氨酸；乙烷二磺酸；乙烷磺酸；羟乙磺酸；同型磺基丙氨酸；HEPBS(N-(2-羟乙基)哌嗪-N'-(4-丁烷磺酸))；HEPES(4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙烷磺酸)；2-羟基-3-吗啉代丙烷磺酸；2-(N-吗啉代)乙烷磺酸；甲烷磺酸；甲磺烟肼；萘-1-磺酸；萘-2-磺酸；全氟丁烷磺酸；6-磺基奎诺糖；三氟甲磺酸；2-氨基乙烷磺酸；苯甲酸；氯乙酸；三氟乙酸；己酸；庚酸；辛酸；壬酸；月桂酸；棕榈酸；硬脂酸；花生酸；天冬氨酸；谷氨酸；丝氨酸；苏氨酸；谷氨酰胺；半胱氨酸；甘氨酸；脯氨酸；丙氨酸；缬氨酸；异亮氨酸；亮氨酸；甲硫氨酸；苯丙氨酸；酪氨酸；色氨酸；或其任何组合。

在一些实施方案中，本文提供的催化剂是(+)-樟脑-10-磺酸。在一些实施方案中，本文提供的催化剂是2-吡啶磺酸。在一些实施方案中，本文提供的催化剂是3-吡啶磺酸。在一些实施方案中，本文提供的催化剂是8-羟基-5-喹啉磺酸水合物。在一些实施方案中，本文提供的催化剂是α-羟基-2-吡啶甲烷磺酸。在一些实施方案中，本文提供的催化剂是(β)-樟脑-10-磺酸。在一些实施方案中，本文提供的催化剂是丁基膦酸。在一些实施方案中，本文提供的催化剂是联苯基次膦酸。在一些实施方案中，本文提供的催化剂是己基膦酸。在一些实施方案中，本文提供的催化剂是甲基膦酸。在一些实施方案中，本文提供的催化剂是苯基次膦酸。在一些实施方案中，本文提供的催化剂是苯基膦酸。在一些实施方案中，本文提供的催化剂是叔丁基膦酸。在一些实施方案中，本文提供的催化剂是SS)-VAPOL磷酸氢酯。在一些实施方案中，本文提供的催化剂是6-喹啉磺酸。在一些实施方案中，本文提供的催化剂是3-(1-吡啶并)-1-丙烷磺酸盐。在一些实施方案中，本文提供的催化剂是2-(2-吡啶基)乙烷磺酸。在一些实施方案中，本文提供的催化剂是3-(2-吡啶基)-5,6-联苯基-1,2,4-三嗪-p,p'-二磺酸单钠盐水合物。在一些实施方案中，本文提供的催化剂是1,1'-联萘-2,2'-二基-磷酸氢盐。在一些实施方案中，本文提供的催化剂是双(4-甲氧基苯基)次膦酸。在一些实施方案中，本文提供的催化剂是苯基(3,5-二甲苯基)次膦酸。在一些实施方案中，本文提供的催化剂是L-磺基丙氨酸一水合物。在一些实施方案中，本文提供的催化剂是聚(苯乙烯磺酸-共-二乙烯基苯)。在一些实施方案中，本文提供的催化剂是赖氨酸。

在一些实施方案中，催化剂是乙烷二磺酸。在一些实施方案中，催化剂是乙烷磺酸。在一些实施方案中，催化剂是羟乙磺酸。在一些实施方案中，催化剂是同型磺基丙氨酸。在一些实施方案中，催化剂是HEPBS(N-(2-羟乙基)哌嗪-N'-(4-丁烷磺酸))。在一些实施方案中，催化剂是HEPES(4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙烷磺酸)。在一些实施方案中，催化剂是2-羟基-3-吗啉代丙烷磺酸。在一些实施方案中，催化剂是2-(N-吗啉代)乙烷磺酸。在一些实施方案中，催化剂是甲烷磺酸。在实施方案中，催化剂是萘-1-磺酸。在一些实施方案中，催化剂是一些实施方案，催化剂是甲磺烟肼。在一些萘-2-磺酸。在一些实施方案中，催化剂是全氟丁烷磺酸。在一些实施方案中，催化剂是6-磺基奎诺糖。在一些实施方案中，催化剂是三氟甲磺酸。在一些实施方案中，催化剂是2-氨基乙烷磺酸。在一些实施方案中，催化剂是苯甲酸。在一些实施方案中，催化剂是氯乙酸。在一些实施方案中，催化剂是三氟乙酸。在一些实施方案中，催化剂是己酸。在一些实施方案中，催化剂是庚酸。在一些实施方案中，催化剂是辛酸。在一些实施方案中，催化剂是壬酸。在一些实施方案中，催化剂是月桂酸。在一些实施方案中，催化剂是棕榈酸。在一些实施方案中，催化剂是硬脂酸。在一些实施方案中，催化剂是花生酸。在一些实施方案中，催化剂是天冬氨酸。在一些实施方案中，催化剂是谷氨酸。在一些实施方案中，催化剂是丝氨酸。在一些实施方案中，催化剂是苏氨酸。在一些实施方案中，催化剂是谷氨酰胺。在一些实施方案中，催化剂是半胱氨酸。在一些实施方案中，催化剂是甘氨酸。在一些实施方案中，催化剂是脯氨酸。在一些实施方案中，催化剂是丙氨酸。在一些实施方案中，催化剂是缬氨酸。在一些实施方案中，催化剂是异亮氨酸。在一些实施方案中，催化剂为亮氨酸。在一些实施方案中，催化剂是甲硫氨酸。在一些实施方案中，催化剂是苯丙氨酸。在一些实施方案中，催化剂是酪氨酸。在一些实施方案中，催化剂是色氨酸。

在一些实施方案中，本文提供的催化剂是WO 2016122887中公开的聚合催化剂或碳载催化剂，将其通过引用以其整体且关于其公开内容特此并入。

在一些实施方案中，本文提供的催化剂以按干重计为所述一种或多种进料糖的约0.01％至约5％、约0.02％至约4％、约0.03％至约3％或约0.05％至约2％的量存在。在一些实施方案中，本文提供的催化剂以按干重计为所述一种或多种进料糖的约1％至2％的量存在。在一些实施方案中，本文提供的催化剂以按干重计为所述一种或多种进料糖的约0.5％、约0.6％、约0.7％、约0.8％、约0.9％、约1.0％、约1.1％、约1.2％、约1.3％、约1.4％、约1.5％、约1.6％、约1.7％、约1.8％、约1.9％、约2.0％、约2.1％、约2.2％、约2.3％、约2.4％、约2.5％、约2.6％、约2.7％、约2.8％、约2.9％或约3.0％的量存在。

在一些实施方案中，本文提供的催化剂以按干重计为水性组合物的约0.01％至约5％、约0.02％至约4％、约0.03％至约3％或约0.05％至约2％的量存在。在一些实施方案中，本文提供的催化剂以按干重计为水性组合物的约1％至2％的量存在。在一些实施方案中，本文提供的催化剂以按干重计为水性组合物的约0.8％、约0.9％、约1.0％、约1.1％、约1.2％、约1.3％、约1.4％、约1.5％、约1.6％、约1.7％、约1.8％、约1.9％、约2.0％、约2.1％、约2.2％、约2.3％、约2.4％、约2.5％、约2.6％、约2.7％、约2.8％、约2.9％或约3.0％的量存在。

在一些实施方案中，本文提供的催化剂是两种或更多种不同催化剂的组合。在一些实施方案中，催化剂包括可回收催化剂(如树脂和聚合催化剂)和不可回收催化剂。在一些实施方案中，在催化剂包括至少两种不同的催化剂的情况下，每种催化剂以本文提供的量存在。在其他实施方案中，在催化剂包括至少两种不同的催化剂的情况下，所述至少两种不同的催化剂合计以本文提供的量存在。

在一些实施方案中，将催化剂以干燥形式添加到水性组合物中。在其他实施方案中，将催化剂以湿形式(如在水性溶液中)添加到水性组合物中。在一些实施方案中，在添加水之前将催化剂与所述一种或多种进料糖合并。在其他实施方案中，将催化剂在其与所述一种或多种进料糖合并之前溶解于水中。在一些实施方案中，本文提供的方法包括通过将呈脱水物形式的所述一种或多种进料糖和呈湿形式的催化剂(例如，作为水性溶液)合并来产生水性组合物。

C.水的添加

在一些实施方案中，制造寡糖制剂的方法包括添加水以形成水性组合物。在一些实施方案中，水性组合物中的全部或部分水作为游离水添加。在其他实施方案中，水性组合物中的全部水作为键合水(例如，在糖一水合物或二水合物中)添加。在一些实施方案中，水性组合物中的全部水作为单糖一水合物(如葡萄糖一水合物)中的键合水添加。在某些实施方案中，水性组合物中的全部或部分水随着催化剂(即，经由催化剂溶液)添加。

D.水含量

随着制造寡糖制剂的方法的进行，可以通过反应产生水。例如，在一些实施方案中，水(i)随着糖苷键的形成，(ii)随着脱水亚基的形成，或(iii)通过其他机制或来源而产生。由于糖缩合反应和脱水反应两者都涉及水，因此在一些实施方案中，水含量影响寡糖制剂的组成。

此外，在一些实施方案中，水含量影响水性组合物的粘度，这进而可能影响水性组合物的混合有效性。例如，在一些实施方案中，过于粘的水性组合物可能导致水性组合物中不期望的不均匀催化剂分布。此外，在一些实施方案中，非常低的水含量可能导致水性组合物的固化，这阻止了有效混合。另一方面，在一些其他实施方案中，极高的水含量可能阻碍糖缩合反应并降低脱水亚基的水平。因此，本公开文本描述了用于制造寡糖制剂的合适的水含量。

在一些实施方案中，本文所述的制造寡糖制剂的方法包括形成和/或加热水性组合物。在一些实施方案中，水性组合物包含按总重量计约0％至约80％、约0％至约70％、约0％至约60％、约0％至约50％、约0％至约40％、约0％至约35％、约0％至约30％、约0％至约25％、约0％至约20％、约0％至约19％、约0％至约18％、约0％至约17％、约0％至约16％、约0％至约15％、约0％至约14％、约0％至约13％、约0％至约12％、约0％至约11％、约0％至约10％、约0％至约9％、约0％至约8％、约0％至约7％、约0％至约6％、约0％至约5％、约0％至约4％、约0％至约3％、约0％至约2％或约0％至约1％的水。在一些实施方案中，水性组合物包含按总重量计约1％至约20％、约1％至约18％、约1％至约16％、约1％至约14％、约1％至约12％、约1％至约10％、约1％至约8％、约1％至约6％或约1％至约4％的水。在一些实施方案中，水性组合物包含按总重量计约3％至约16％、约3％至约14％、约3％至约12％、约3％至约10％、约3％至约8％、约3％至约6％、约5％至约16％、约5％至约14％、约5％至约12％、约5％至约10％、约7％至约16％、约7％至约14％、约7％至约12％、约7％至约10％或约8％至约10％的水。在一些实施方案中，水性组合物包含按总重量计约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约6％、约7％、约8％、约9％、约10％、约11％、约12％、约13％、约14％或约15％的水。在一些实施方案中，水性组合物包含按总重量计约9％的水。然而，应该理解，水性组合物中水的量可以基于反应条件和所使用的具体催化剂来调整。在一些实施方案中，在反应开始时(例如，在加热进料糖之前)测量如上所公开的水性组合物中的水含量。在一些实施方案中，在聚合反应或缩合反应结束时测量如上所公开的水性组合物中的水含量。在一些实施方案中，将如上所公开的水性组合物中的水含量作为反应开始和反应结束时的平均水含量来测量。

在某些实施方案中，本文所述的方法还可以包括在一段时间内监测水性组合物中存在的水的含量和/或水与糖或催化剂的比率。在一些实施方案中，所述方法还包括例如通过蒸馏除去水性组合物中的至少一部分水。可以使用本领域已知的任何方法从水性组合物中除去水，所述任何方法包括例如通过真空过滤、真空蒸馏、加热、蒸汽、热空气和/或蒸发。

在一些实施方案中，本文所述的寡糖制剂具有吸湿性。因此，在一些实施方案中，进料糖和聚合中形成的寡糖的吸湿性可能影响从水性组合物中除去水的速率。

在一些实施方案中，本文所述的方法包括除去水性组合物中的至少一部分水，使得水性组合物中的水含量是按总重量计约1％至约20％、约1％至约18％、约1％至约16％、约1％至约14％、约1％至约12％、约1％至约10％、约1％至约8％、约2％至约16％、约2％至约14％、约2％至约12％、约2％至约10％、约2％至约8％、约2％至约6％、约4％至约16％、约4％至约14％、约4％至约12％、约4％至约10％、约4％至约8％、约6％至约16％、约6％至约12％、约6％至约10％或约6％至约8％。在一些实施方案中，所述方法包括除去水性组合物中的至少一部分水，使得水性组合物中的水含量是按总重量计约2％至约10％、约2％至约8％或约4％至约8％。在一些实施方案中，所述方法包括除去水性组合物中的至少一部分水，使得水性组合物中的水含量是按总重量计约2％、约3％、约4％、约5％、约6％、约7％、约8％、约9％或约10％。在一些实施方案中，所述方法包括除去水性组合物中的至少一部分水，使得水性组合物中的水含量是按总重量计约4％至约8％。在一些实施方案中，所述方法包括除去水性组合物中的至少一部分水，使得在聚合反应和/或缩合反应结束时，水性组合物中的水含量是如上所公开的水含量。在一些实施方案中，所述方法包括除去水性组合物中的至少一部分水，使得在聚合反应和/或缩合反应开始时，水性组合物中的水含量是如上所公开的水含量。在一些实施方案中，所述方法包括除去水性组合物中的至少一部分水，使得在聚合反应和/或缩合反应开始和结束时的水性组合物中的平均水含量在如上所公开的范围内。在一些实施方案中，所述方法包括除去水性组合物中的至少一部分水，使得在整个聚合反应和/或缩合反应中，水性组合物中的水含量保持在如上所公开的范围内。

在一些实施方案中，本文所述的方法包括在水性组合物中添加至少一部分水，使得水性组合物中的水含量是按总重量计约1％至约20％、约1％至约18％、约1％至约16％、约1％至约14％、约1％至约12％、约1％至约10％、约1％至约8％、约2％至约16％、约2％至约14％、约2％至约12％、约2％至约10％、约2％至约8％、约2％至约6％、约4％至约16％、约4％至约14％、约4％至约12％、约4％至约10％、约4％至约8％、约6％至约16％、约6％至约12％、约6％至约10％或约6％至约8％。在一些实施方案中，所述方法包括在水性组合物中添加至少一部分水，使得水性组合物中的水含量是按总重量计约2％至约10％、约2％至约8％或约4％至约8％。在一些实施方案中，所述方法包括在水性组合物中添加至少一部分水，使得水性中的水含量是按总重量计约2％、约3％、约4％、约5％、约6％、约7％、约8％、约9％或约10％。在一些实施方案中，所述方法包括在水性组合物中添加至少一部分水，使得水性组合物中的水含量是按总重量计约4％至约8％。在一些实施方案中，所述方法包括在水性组合物中添加至少一部分水，使得在聚合反应和/或缩合反应结束时，水性组合物中的水含量是如上所公开的水含量。在一些实施方案中，所述方法包括在水性组合物中添加至少一部分水，使得在聚合反应和/或缩合反应开始时，水性组合物中的水含量是如上所公开的水含量。在一些实施方案中，所述方法包括在水性组合物中添加至少一部分水，使得在聚合反应和/或缩合反应开始和结束时的水性组合物中的平均水含量在如上所公开的范围内。在一些实施方案中，所述方法包括在水性组合物中添加至少一部分水，使得在整个聚合反应和/或缩合反应中，水性组合物中的水含量保持在如上所公开的范围内。

在一些实施方案中，寡糖的聚合度和/或寡糖制剂内的脱水亚基的量和类型可以通过调整或控制在整个制造过程中存在于水性组合物中的水含量来调节。例如，在一些实施方案中，通过降低水含量来增加寡糖的聚合度和脱水亚基的量。

因此，在一些实施方案中，本文所述的方法包括水含量的过程中控制(IPC)，其可以包括监测水含量、维持水含量、增加水含量、降低水含量或其任何组合。在一些实施方案中，IPC工艺包括在将水性组合物加热至本文所述的温度的同时保持水含量。在一些实施方案中，所述方法包括将水含量保持足以诱导聚合的时间。在一些实施方案中，所述方法包括通过添加水或从水性组合物中除去水或两者来将水含量保持在所公开的范围内。在一些实施方案中，所述方法包括通过蒸馏将水含量保持在所公开的范围内。在一些实施方案中，所述方法包括通过真空蒸馏将水含量保持在所公开的范围内。在一些实施方案中，所述方法包括通过在大气压下蒸馏将水含量保持在所公开的范围内。

在一些实施方案中，将水性组合物的水含量保持在按总重量计约1％至约20％、约1％至约18％、约1％至约16％、约1％至约14％、约1％至约12％、约1％至约10％、约1％至约8％、约2％至约16％、约2％至约14％、约2％至约12％、约2％至约10％、约2％至约8％、约2％至约6％、约4％至约16％、约4％至约14％、约4％至约12％、约4％至约10％、约4％至约8％、约6％至约16％、约6％至约12％、约6％至约10％或约6％至约8％的范围内。在一些实施方案中，将水性组合物的水含量保持在按总重量计约2％至约10％、约2％至约8％或约4％至约8％的范围内。在一些实施方案中，将水性组合物的水含量保持在按总重量计约2％至约8％的范围内。

水性组合物的水含量可以通过多种分析方法和仪器来测定。在一些实施方案中，水含量通过蒸发方法(例如，干燥失重技术)、蒸馏方法或化学反应方法(例如，卡尔·费歇尔滴定法)来测定。在一些实施方案中，水含量通过诸如水分分析仪等分析仪器来测定。在一些实施方案中，水含量通过卡尔·费歇尔滴定法来测定。

在一些实施方案中，在反应期间测量水性组合物的水含量，并且将其用于实施水含量的过程中控制(IPC)。在某些实施方案中，反应的水含量通过卡尔-费歇尔滴定法、IR光谱法、NIR光谱法、电导率、粘度、密度、混合扭矩或混合能来测量。在一些实施方案中，使用反应的水含量的测量来控制主动调整反应的水含量的装置，如水添加泵或流量阀。

不受理论的束缚，据信在糖聚合反应和/或缩合反应期间的水含量可以影响本文所述的寡糖制剂中脱水亚基的水平。例如，如图21中所展示，在一些实施方案中，较高的水含量与较低水平的脱水亚基相关联。在一些实施方案中，较低的反应温度可以与较低水平的脱水亚基含量相关联。

E.温度

在一些实施方案中，寡糖的聚合度和/或寡糖制剂内的脱水亚基的量和类型可以通过调整水性组合物加热达到的温度来调节。在一些实施方案中，本文所述的制造寡糖制剂的方法包括将水性组合物加热至约80℃至约250℃、约90℃至约200℃、约100℃至约200℃、约100℃至约180℃、约110℃至约170℃、约120℃至约160℃、约130℃至约150℃或约135℃至约145℃的温度。在一些实施方案中，制造寡糖制剂的方法包括将水性组合物加热至约100℃至约200℃、约100℃至约180℃、约110℃至约170℃、约120℃至约160℃、约130℃至约150℃或约135℃至约145℃的温度。在一些实施方案中，制造寡糖制剂的方法包括将水性组合物加热至约135℃至约145℃的温度。在其他实施方案中，制造寡糖制剂的方法包括将水性组合物加热至约125℃至约135℃的温度。

F.反应时间

在一些实施方案中，本文所述的制造寡糖制剂的方法包括将水性组合物加热足够的时间。在一些实施方案中，根据本文所述的方法制造的寡糖的聚合度可以通过反应时间来调节。

在一些实施方案中，足够的时间通过小时数来规定。例如，在一些实施方案中，足够的时间是至少30分钟、至少1小时、至少2小时、至少3小时、至少4小时、至少5小时、至少6小时、至少7小时、至少8小时、至少9小时或至少10小时。在一些实施方案中，足够的时间是约1至约24小时、约1至约16小时、约1至约8小时、约1至约4小时、约1至约3小时、约1至约2小时、约2至约12小时、约2至约10小时、约2至约8小时、约2至约6小时、约2至约4小时、约3至约8小时、约3至约6小时、约3至约5小时或约3至约4小时。

在一些实施方案中，足够的时间通过测量寡糖制剂的一种或多种化学或物理特性(例如，水含量、粘度、分子量、脱水亚基含量和/或聚合度的分布)来确定。

在一些实施方案中，在聚合期间监测寡糖制剂的分子量。在一些实施方案中，所述方法包括将水性组合物加热足以使所述水性组合物达到如本文所述的数均分子量或重均分子量的时间。在某些实施方案中，所述方法包括将水性组合物加热足以使所述水性组合物达到在以下范围内的数均分子量的时间：约300至约5000g/mol、约500至约5000g/mol、约700至约5000g/mol、约500至约2000g/mol、约700至约2000g/mol、约700至约1500g/mol、约300至约1500g/mol、约300至约2000g/mol、约400至约1000g/mol、约400至约900g/mol、约400至约800g/mol、约500至约900g/mol或约500至约800g/mol。在某些实施方案中，所述方法包括将水性组合物加热足以使所述水性组合物达到约500至约2000g/mol的数均分子量的时间。在某些实施方案中，所述方法包括将水性组合物加热足以使所述水性组合物达到在以下范围内的重均分子量的时间：约300至约5000g/mol、约500至约5000g/mol、约700至约5000g/mol、约500至约2000g/mol、约700至约2000g/mol、约700至约1500g/mol、约300至约1500g/mol、约300至约2000g/mol、约400至约1300g/mol、约400至约1200g/mol、约400至约1100g/mol、约500至约1300g/mol、约500至约1200g/mol、约500至约1100g/mol、约600至约1300g/mol、约600至约1200g/mol或约600至约1100g/mol。在某些实施方案中，所述方法包括将水性组合物加热足以使所述水性组合物达到约700至约3000g/mol的重均分子量的时间。

在一些实施方案中，足够的时间是水性组合物在对应的反应温度下达到反应平衡所需的时间。因此，在一些实施方案中，所述方法包括将水性组合物加热足以使所述水性组合物达到平衡的时间。例如，在一些实施方案中，平衡通过测量水性组合物的分子量、粘度或DP分布来确定。

在某些实施方案中，平衡通过测量水性组合物的数均分子量或重均分子量来确定。在一些实施方案中，平衡通过随时间推移基本上保持不变的水性组合物的数均分子量或重均分子量来确定。在一些实施方案中，平衡通过在一段时间内小于一定百分比的水性组合物的数均分子量或重均分子量的变化来确定。在一些实施方案中，水性组合物的分子量通过HPLC或SEC来测量。

在一些实施方案中，平衡通过在一段时间内小于25％、小于20％、小于15％、小于10％或小于5％的水性组合物的数均分子量或重均分子量的变化来确定。在一些实施方案中，平衡通过在3小时、2小时、1小时、30分钟、20分钟或10分钟的时间段内水性组合物的数均分子量或重均分子量的变化来确定。在一些实施方案中，平衡通过在1小时的时间段内小于15％的水性组合物的重均分子量的变化来确定。

在某些实施方案中，平衡通过测量水性组合物的粘度来确定。在一些实施方案中，平衡通过随时间推移基本上保持不变的水性组合物的粘度来确定。在一些实施方案中，平衡通过在一段时间内小于一定百分比的水性组合物的粘度的变化来确定。在一些实施方案中，水性组合物的粘度通过粘度计或流变仪来测量。

在一些实施方案中，平衡通过在一段时间内小于25％、小于20％、小于15％、小于10％或小于5％的水性组合物的粘度的变化来确定。在一些实施方案中，平衡通过在3小时、2小时、1小时、30分钟、20分钟或10分钟的时间段内水性组合物的粘度的变化来确定。在一些实施方案中，平衡通过在1小时的时间段内小于15％的水性组合物的粘度的变化来确定。

在某些实施方案中，平衡通过测量水性组合物的DP分布来确定。在一些实施方案中，平衡通过随时间推移基本上保持不变的水性组合物的DP分布来确定。在一些实施方案中，水性组合物的DP分布的变化通过计算一系列Km来测定，其中

其中[H₂O]表示摩尔水浓度(mol/L)，并且[DP1]、[DPm-₁]和[DPm]分别表示DP1、DPm-₁和DPm级分中寡糖的摩尔浓度(mol/L)。例如，根据上式，K2等于[DP2][H₂O]/[DP1][DP1]。在一些实施方案中，m是大于1且小于n的整数。在一些实施方案中，m是大于1且小于或等于n的整数。在一些实施方案中，m等于n。在一些实施方案中，m是2、3、4、5、6、7、8、9或10。

在一些实施方案中，DP1、DPm-1和DPm级分中寡糖的浓度通过SEC、HPLC、FFF、A4F、质谱法或任何其他合适的方法来测定。在一些实施方案中，DP1、DPm-1和DPm级分中寡糖的浓度通过SEC(如GPC)来测定。在一些实施方案中，DP1、DPm-1和DPm级分中寡糖的浓度通过质谱法(如GC-MS、LC-MS/MS和MALDI-MS)来测定。在一些实施方案中，DP1、DPm-1和DPm级分中寡糖的浓度通过HPLC来测定。在一些实施方案中，水浓度通过蒸发方法(例如，干燥失重技术)、蒸馏方法或通过化学反应方法(例如，卡尔·费歇尔滴定法)来测定。在一些实施方案中，水浓度通过任何合适的分析仪器(如水分分析仪)来测定。

在一些实施方案中，所述方法包括计算一系列的至少3个、至少4个、至少5个、至少6个、至少7个、至少8个、至少9个、至少10个、至少15个、至少20个、至少30个、至少40个或至少50个Km数。在一些实施方案中，所述方法包括计算一系列的至少3个、至少4个、至少5个、至少6个、至少7个、至少8个、至少9个、至少10个或至少15个Km数。在一些实施方案中，所述方法包括计算约3、4、5、6、7、8、9、10或15个Km数。在一些实施方案中，所述方法包括计算K2至K4、K2至K5、K2至K6、K2至K7、K2至K8、K2至K9、K2至K10、K2至K11、K2至K12、K2至K13、K2至K14、K2至K15、K3至K5、K3至K6、K3至K7、K3至K8、K3至K9、K3至K10、K3至K11、K3至K12、K3至K13、K3至K14或K3至K15。在某些实施方案中，所述方法包括计算K2至K4或K3至K5。

在一些实施方案中，Km的值取决于温度、水浓度和/或进料糖的量和类型。在一些实施方案中，Km是约0.1至约100、约0.1至约90、约0.1至约80、约0.1至约70、约0.1至约60、约0.1至约50、约0.1至约40、约0.1至约30、约0.1至约25、约0.1至约20或约0.1至约15。在一些实施方案中，Km是约1至约100、约1至约90、约1至约80、约1至约70、约1至约60、约1至约50、约1至约40、约1至约30、约1至约25、约1至约20、约1至约15、约1至约10、约5至约50、约5至约40、约5至约30、约5至约20、约5至约15或约5至约10。在一些具体实施方案中，Km是约1至约15或约5至约15。

在一些实施方案中，确定所计算的一系列Km的平均值、标准偏差和/或相对标准偏差。如本文所用，相对标准偏差以百分比表示，并且通过将标准偏差乘以100并将该乘积除以平均值而获得。

在一些实施方案中，平衡通过小于30％、小于25％、小于20％、小于15％、小于10％、小于9％、小于8％、小于7％、小于6％、小于5％、小于4％、小于3％、小于2％或小于1％的一系列Km的相对标准偏差来确定。在一些实施方案中，平衡通过小于15％、小于10％或小于5％的一系列Km的相对标准偏差来确定。

G.反应后步骤

在一些实施方案中，本文所述的制造寡糖制剂的方法还包括在将水性组合物在一定温度和足够的时间下加热之后的一个或多个另外的处理步骤。在一些实施方案中，另外的处理步骤包括例如分离(如色谱分离)、稀释、浓缩、干燥、过滤、脱矿质、提取、脱色或其任何组合。例如，在一些实施方案中，所述方法包括稀释步骤和脱色步骤。在一些实施方案中，所述方法包括过滤步骤和干燥步骤。

在一些实施方案中，所述方法包括稀释步骤，其中将水添加到寡糖制剂中以制备寡糖制剂的浆液。在一些实施方案中，浆液中寡糖制剂的浓度是约5％至约80％、约10％至约70％、约10％至约60％、约10％至约50％、约10％至约40％、约10％至约30％或约15％至约25％。在其他实施方案中，所述方法不包括稀释步骤，而是使寡糖制剂固化。在一些实施方案中，所述方法包括过滤步骤。在一些实施方案中，所述方法包括通过过滤使催化剂再循环。

在一些实施方案中，本文所述的方法还包括脱色步骤。在一些实施方案中，可以使用本领域已知的任何方法对寡糖制剂进行脱色步骤，所述任何方法包括例如用吸收剂活性炭处理、色谱法(例如，使用离子交换树脂)、氢化和/或过滤(例如，微滤)。

在一些实施方案中，使寡糖制剂与材料接触以除去盐、矿物质和/或其他离子物质。在某些实施方案中，使寡糖制剂流动通过阴离子/阳离子交换柱对。在一个实施方案中，阴离子交换柱含有呈氢氧化物形式的弱碱交换树脂，并且阳离子交换柱含有呈质子化形式的强酸交换树脂。

在一些实施方案中，所述方法包括浓缩步骤。在一些实施方案中，浓缩步骤产生具有增加的浓度的寡糖制剂。例如，在一些实施方案中，浓缩步骤包括蒸发(例如，真空蒸发)、干燥(例如，冷冻干燥和喷雾干燥)或其任何组合。

在一些实施方案中，所述方法包括离析步骤，其中分离寡糖制剂的至少一部分。在一些实施方案中，离析步骤包括结晶、沉淀、过滤(例如，真空过滤)和离心或其任何组合。

在一些实施方案中，所述方法包括分离步骤。在一些实施方案中，分离步骤包括将寡糖制剂的至少一部分与催化剂的至少一部分、与未反应的进料糖的至少一部分或与两者分离。在一些实施方案中，分离步骤包括过滤、色谱法、差别溶解度、沉淀、提取或离心。

H.反应器

考虑反应温度、pH、压力和其他因素，本文所述的方法可以包括使用适用于糖缩合的一个或多个反应器。在一些实施方案中，所述一个或多个合适的反应器包括分批补料搅拌反应器、分批搅拌反应器、连续流搅拌反应器、连续活塞流柱式反应器、研磨(attrition)反应器或具有由电磁场引起的搅拌的反应器。在一些实施方案中，所述一个或多个合适的反应器包括以下文献中所述的反应器：Ryu,S.K.和Lee,J.M.,Bioconversion of wastecellulose by using an attrition bioreactor,Biotechnol.Bioeng.25:53-65(1983)；Gusakov,A.V.和Sinitsyn,A.P.,Kinetics of the enzymatic hydrolysis ofcellulose:1.Amathematical model for a batch reactor process,Enz.Microb.TechnoL,7:346-352(1985)；Gusakov,A.V.,Sinitsyn,A.P.,Davydkin,I.Y.,Davydkin,V.Y.,Protas,O.V.,Enhancement of enzymatic cellulose hydrolysis usinga novel type of bioreactor with intensive stirring induced by electromagneticfield,Appl.Biochem.Biotechnol.,56:141-153(1996)；或Fernanda de CastilhosCorazza,Flavio Faria de Moraes,Gisella Maria Zanin和Ivo Neitzel,Optimalcontrol in fed-batch reactor for the cellobiose hydrolysis,ActaScientiarum.Technology,25:33-38(2003)。

在一些实施方案中，所述一个或多个合适的反应器包括用于水解和/或发酵的流化床、上流式污泥床(upflow blanket)、固定化或挤出机型反应器。在一些实施方案中，所述一个或多个合适的反应器包括开放式反应器、封闭式反应器或两者。在一些实施方案中，在所述方法包括连续过程的情况下，所述一个或多个合适的反应器可以包括连续混合器，如螺旋式混合器。

I.工艺

在一些实施方案中，本文所述的制造寡糖制剂的方法包括分批工艺、连续工艺或两者。在一些实施方案中，制造寡糖制剂的方法包括分批工艺。例如，在分批工艺的一些实施方案中，寡糖制剂的后续批次的制造直到完成当前批次才开始。在一些实施方案中，在分批工艺期间，从反应器中移除全部或大量的寡糖制剂。在一些实施方案中，在分批工艺期间，在将水性组合物加热至所描述的温度之前或在诱导聚合之前，将所有进料糖和催化剂在反应器中合并。在一些实施方案中，在分批工艺期间，在添加催化剂之前、之后或同时添加进料糖。

在一些实施方案中，分批工艺是分批补料工艺，其中不将所有进料糖同时添加到反应器中。在分批补料工艺的一些实施方案中，在聚合期间或在将水性组合物加热至所描述的温度之后，将至少一部分进料糖添加到反应器中。在分批补料工艺的一些实施方案中，在聚合期间或在将水性组合物加热至所描述的温度之后，将按重量计至少10％、20％、30％、40％、50％或60％的进料糖添加到反应器中。

在一些实施方案中，制造寡糖制剂的方法包括连续工艺。例如，在连续工艺的一些实施方案中，反应器的内容物连续地流动通过反应器。在一些实施方案中，同时进行进料糖与催化剂的合并和寡糖制剂的至少一部分的移除。

在一些实施方案中，制造寡糖制剂的方法包括单锅或多锅工艺。例如，在单锅工艺的一些实施方案中，聚合在单一反应器中进行。对于另一个例子，在多锅工艺的一些实施方案中，聚合在多于一个反应器中进行。在多锅工艺的一些实施方案中，所述方法包括2个、3个或更多个反应器。在多锅工艺的一些实施方案中，所述方法包括合并步骤，其中将来自两个或更多个反应器的聚合产物合并。

IV.包含寡糖制剂的营养组合物

本文提供了包含寡糖制剂的营养组合物。在某些实施方案中，本文提供了包含所描述的寡糖制剂的营养组合物，其中可以选择性地测定和/或检测营养组合物内寡糖制剂的存在和/或浓度。表现出对微生物群落的复杂功能调节的寡糖制剂可以是营养组合物的重要组分。因此，营养组合物内寡糖制剂的存在和/或浓度可以是在营养组合物的品质控制和制造过程中需要测量的因素之一。因此，所提供的营养组合物在品质控制和制造目的方面是有利的，因为可以选择性地测定和/或检测寡糖制剂的存在和/或浓度。例如，在一些实施方案中，寡糖制剂的存在和浓度可以通过测量与含脱水亚基寡糖相关联的信号来测定和/或检测。

在一些实施方案中，所述营养组合物是动物饲料组合物。在一些实施方案中，营养组合物包含基础营养组合物。

A.基础营养组合物

在一些实施方案中，基础营养组合物包含不同于寡糖制剂的碳水化合物来源。例如，在一些实施方案中，基础营养组合物包含天然存在的碳水化合物来源，如淀粉和植物纤维。在一些实施方案中，基础营养组合物包含淀粉。在一些实施方案中，基础营养组合物包含植物纤维。

在一些实施方案中，基础营养组合物包含来源于以下的一种或多种碳水化合物：种子、根、块茎、玉米、木薯淀粉、竹芋、小麦、稻、马铃薯、甘薯、西米、豆类(例如，蚕豆、小扁豆、绿豆、豌豆和鹰嘴豆)、玉蜀黍、木薯或其他淀粉食品(例如橡子、竹芋、秘鲁胡萝卜、香蕉、大麦、面包果、荞麦、美人蕉、芋属、猪牙花(katakuri)、野葛、黄肉芋、粟、燕麦、块茎酢浆草、波利尼西亚竹芋、高粱、黑麦、芋头、栗子、马蹄和山药)。

在一些实施方案中，基础营养组合物包含来源于以下的一种或多种碳水化合物：豆科作物(例如，豌豆、大豆、羽扇豆、青豆和其他豆类)、燕麦、黑麦、芡欧鼠尾草、大麦、水果(例如，无花果、鳄梨、李子、西梅、浆果、香蕉、苹果皮、榅桲和梨)、蔬菜(例如，西兰花、胡萝卜、花椰菜、西葫芦、芹菜、胭脂仙人掌和洋姜)、块根、根用蔬菜(例如，甘薯和洋葱)、车前籽壳、种子(例如，亚麻籽)、坚果(例如，杏仁)、全谷物食品、小麦、玉米麸、木脂素或其任何组合。在一些实施方案中，基础营养组合物包含来源于以下的一种或多种植物纤维：麦麸、甜菜渣、带毛棉籽、大豆壳或其任何组合。

在一些实施方案中，基础营养组合物包含少于500ppm、少于400ppm、少于300ppm、少于200ppm、少于100ppm、少于50ppm、少于10ppm、少于5ppm或少于1ppm的脱水亚基或含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，基础营养组合物包含少于50ppm、少于10ppm、少于5ppm或少于1ppm的脱水亚基或含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，基础营养组合物基本上不含脱水亚基。

在一些实施方案中，基础营养组合物没有可检测水平的脱水亚基。根据检测或测定的方法，低于一定阈值的脱水亚基水平可能是检测不到的。例如，在一些实施方案中，脱水亚基的可检测水平可以是指基础营养组合物中的至少1000ppm、至少500ppm、至少400ppm、至少300ppm、至少200ppm、至少100ppm、至少50ppm、至少10ppm、至少5ppm或至少1ppm的脱水亚基或含脱水亚基寡糖。

在一些实施方案中，基础营养组合物包含多种寡糖。在一些实施方案中，基础营养组合物包含不同于寡糖制剂的糖苷键类型分布。例如，在一些实施方案中，基础营养组合物包含比寡糖制剂更高百分比的α-(1,4)糖苷键联。在一些实施方案中，基础营养组合物中的糖苷键联(如α-(1,4)糖苷键联)能被一种或多种酶消化。在一些实施方案中，基础营养组合物中的糖苷键联比寡糖制剂中的糖苷键联更容易地能被消化和/或水解。

在一些实施方案中，基础营养组合物中α-(1,2)糖苷键联、α-(1,3)糖苷键联、α-(1,6)糖苷键联、β-(1,2)糖苷键联、β-(1,3)糖苷键联、β-(1,4)糖苷键联或β-(1,6)糖苷键联的水平比寡糖制剂中对应糖苷键联的水平低至少2％、至少3％、至少4％、至少5％、至少6％、至少7％、至少8％、至少9％、至少10％、至少11％、至少12％、至少13％、至少14％或至少15％。在一些实施方案中，基础营养组合物中α-(1,2)糖苷键联、α-(1,3)糖苷键联、α-(1,6)糖苷键联、β-(1,2)糖苷键联、β-(1,3)糖苷键联、β-(1,4)糖苷键联或β-(1,6)糖苷键联的水平比寡糖制剂中对应糖苷键联的水平低至少10％。

在一些实施方案中，基础营养组合物中α-(1,4)糖苷键联的水平比寡糖制剂中α-(1,4)糖苷键联的水平高至少50％、至少40％、至少35％、至少30％、至少25％、至少20％、至少15％、至少10％、至少5％或至少2％。在一些实施方案中，基础营养组合物中α-(1,4)糖苷键联的水平比寡糖制剂中α-(1,4)糖苷键联的水平高至少10％。

B.动物饲料组合物

根据动物的类型和年龄，营养组合物可以以不同的比率包含寡糖制剂和基础营养组合物。例如，可以以适合于动物的类型和年龄的各种比率将寡糖制剂与基础营养组合物合并。在一些实施方案中，寡糖制剂以下述浓度存在于营养组合物中：约1至约10000ppm、约1至约5000ppm、约1至约3000ppm、约1至约2000ppm、约1至约1500ppm、约1至约1000ppm、约1至约500ppm、约1至约250ppm、约1至约100ppm、约10至约5000ppm、约10至约3000ppm、约10至约2000ppm、约10至约1500ppm、约10至约1000ppm、约10至约500ppm、约10至约250ppm、约10至约100ppm、约50至约5000ppm、约50至约3000ppm、约50至约2000ppm、约50至约1500ppm、约50至约1000ppm、约50至约500ppm、约50至约250ppm、约50至约100ppm、约100至约5000ppm、约100至约3000ppm、约100至约2000ppm、约100至约1500ppm、约100至约1000ppm、约100至约500ppm、约100至约400ppm、约100至约300ppm、约100至约200ppm、约200至约5000ppm、约200至约3000ppm、约200至约2500ppm、约200至约2000ppm、约200至约1500ppm、约200至约1000ppm、约200至约500ppm、约500至约5000ppm、约500至约3000ppm、约500至约2500ppm、约500至约2000ppm、约500至约1500ppm或约500至约1000ppm。在一些实施方案中，寡糖制剂以下述浓度存在于营养组合物中：约1至约5000ppm、约1至约1000ppm、约1至约500ppm、约10至约5000ppm、约10至约2000ppm、约10至约1000ppm、约10至约500ppm、约10至约250ppm、约10至约100ppm、约50至约5000ppm、约50至约2000ppm、约50至约1000ppm、约50至约500ppm、约50至约250ppm或约50至约100ppm。在一些实施方案中，寡糖制剂以下述浓度存在于营养组合物中：约1至约5000ppm、约10至约1000ppm、约10至约500ppm或约50至约500ppm。

在一些实施方案中，寡糖制剂以下述浓度存在于营养组合物中：大于10ppm、大于50ppm、大于100ppm、大于200ppm、大于300ppm、大于400ppm、大于500ppm、大于600ppm、大于1000ppm或大于2000ppm。在一些实施方案中，寡糖制剂以下述浓度存在于营养组合物中：大于10ppm、大于50ppm、大于100ppm、大于200ppm或大于500ppm。

在一些实施方案中，根据动物的类型和年龄，营养组合物还可以包含蛋白质、矿物质(如铜、钙和锌)、盐、必需氨基酸、维生素和/或抗生素。

本文还提供了向动物施用包含基础营养组合物和所公开的寡糖制剂的营养组合物的方法。在一些实施方案中，动物选自牛(例如，肉牛和奶牛)、猪、水生动物和家禽。在一些实施方案中，动物是猪，如母猪、仔猪和阉猪。在其他实施方案中，动物是家禽，如鸡、鸭、火鸡、鹅、鹌鹑和母鸡。在实施方案中，家禽是肉鸡、种鸡或蛋鸡。在一些实施方案中，动物是水生动物，如鲑鱼、鲶鱼、鲈鱼、鳗鱼、罗非鱼、比目鱼、虾和螃蟹。在一些实施方案中，将营养组合物以干燥形式、液体形式、糊剂或其组合施用给动物。在一些实施方案中，施用形式、饲喂率和饲喂时间表可以根据动物的类型和年龄而变化。

C.生产营养组合物的方法

本文提供了制造营养组合物的方法，所述方法包括：将寡糖制剂与基础营养组合物合并。在一些实施方案中，寡糖制剂包含含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，寡糖制剂包含不同于基础营养组合物的糖苷键类型分布的糖苷键类型分布。

在一些实施方案中，寡糖制剂是合成寡糖制剂。在一些实施方案中，合成寡糖制剂包含各自具有选自1至n的不同聚合度的至少n种寡糖级分(DP1至DPn级分)。在一些实施方案中，n是大于或等于2的整数。在一些实施方案中，n是大于2的整数。在一些实施方案中，n是大于或等于3的整数。在一些实施方案中，n是1至100范围内的整数，如4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、40或50。在一些实施方案中，DP1至DPn级分中的每一种包含如通过质谱法测量的按相对丰度计0.1％至90％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，寡糖制剂的DP1和DP2级分各自独立地包含如通过质谱法测量的按相对丰度计约0.1％至约15％或约0.5％至约10％的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，寡糖制剂的DP1和DP2级分各自独立地包含如通过质谱法测量的按相对丰度计在约0.1％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1％、1.1％、1.2％、1.3％、1.4％或1.5％至约8％、9％、10％、11％、12％、15％或20％范围内的含脱水亚基寡糖。在一些实施方案中，n种级分中的每一种中寡糖的相对丰度随其聚合度单调降低。在一些实施方案中，至少5、10、20或30种DP级分中寡糖的相对丰度随其聚合度单调降低。

在一些实施方案中，制造营养组合物的方法包括将寡糖制剂与基础营养组合物混合。例如，在一些实施方案中，混合可以通过工业共混器和/或混合器(如转鼓式共混器、双锥共混器、带式共混器、V形共混器、剪切混合器和桨式混合器)来进行。

在一些实施方案中，制造营养组合物的方法还包括本文所述的品质控制步骤。在一些实施方案中，本文所述的品质控制步骤包括测定营养组合物的样品中信号的水平，并且基于所述信号的水平计算营养组合物中寡糖制剂的浓度。在一些实施方案中，本文所述的品质控制步骤包括通过分析仪器检测营养组合物的样品中的信号，并且基于所述信号的存在或不存在接受或拒绝营养组合物的批次。在一些实施方案中，本文所述的品质控制步骤包括通过分析仪器检测营养组合物的第一样品中的第一信号和营养组合物的第二样品中的第二信号的存在或不存在，并且将所述第一信号和所述第二信号进行比较。在一些实施方案中，所述信号、所述第一信号和/或所述第二信号(i)指示一种或多种含脱水亚基寡糖，(ii)与寡糖的聚合度(DP)分布相关联，或(iii)与寡糖的α-(1,2)糖苷键联、α-(1,3)糖苷键联、α-(1,6)糖苷键联、β-(1,2)糖苷键联、β-(1,3)糖苷键联、β-(1,4)糖苷键联或β-(1,6)糖苷键联相关联。

另外，在一些实施方案中，制造营养组合物的方法在进行品质控制步骤之后包括将寡糖制剂与基础营养组合物进一步混合、调整寡糖制剂的水平或其组合。在一些实施方案中，调整寡糖制剂的水平包括将另外的寡糖制剂添加到营养组合物中或从营养组合物中除去一部分寡糖制剂。在一些实施方案中，调整寡糖制剂的水平包括将另外的基础营养组合物添加到营养组合物中或从营养组合物中除去一部分基础营养组合物。在一些特定实施方案中，调整寡糖制剂的水平包括将另外的寡糖制剂添加到营养组合物中。

D.动物饲料预混合物

在一些实施方案中，营养组合物包含含有所描述的寡糖制剂的动物饲料预混合物。

在一些实施方案中，动物饲料预混合物包含载体材料，所述载体材料可以与寡糖制剂合并以产生动物饲料预混合物。在一些实施方案中，载体材料可以是适合于与营养组合物中的寡糖制剂合并的呈干燥或液体形式的任何材料。在一些实施方案中，载体材料包括干酒糟、粘土、蛭石、硅藻土、壳(如经研磨的稻壳和经研磨的燕麦壳)、二氧化硅(如饲料级硅胶和饲料级煅制二氧化硅)、玉米(如玉米麸质饲料、玉米麸质粉和经碾磨的玉米)或其任何组合。在一些实施方案中，载体材料是经碾磨的玉米。在其他实施方案中，载体材料是经研磨的稻壳或经研磨的燕麦壳。

在一些实施方案中，动物饲料预混合物通过将载体材料与寡糖制剂(两者均呈干燥形式)合并而产生。在一些实施方案中，动物饲料预混合物通过将载体材料与寡糖制剂(两者之一呈干燥形式)合并而产生。在一些实施方案中，动物饲料预混合物通过将载体材料与寡糖制剂(两者均呈液体形式)合并而产生。例如，在一些实施方案中，呈液体形式的寡糖制剂是指在溶液中的寡糖，例如寡糖的水性溶液，如浆液。

在一些实施方案中，动物饲料预混合物通过将载体材料与包含寡糖制剂的浆液合并而产生。在一些实施方案中，浆液中寡糖制剂的浓度是按重量计至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％或至少80％。在一些实施方案中，浆液中寡糖制剂的浓度是按重量计约40％至80％、50％至75％或60％至70％。

在一些实施方案中，动物饲料预混合物呈粉末(例如，可流动粉末)、泥浆、浆料、粒料形式或液体形式。在一些实施方案中，动物饲料预混合物具有按重量计少于40％、30％、20％、15％、10％或5％的水分含量。在一些实施方案中，动物饲料预混合物具有按重量计少于10％或5％的水分含量。在一些实施方案中，动物饲料预混合物具有按重量计高于5％、10％、15％、20％、25％或30％的水分含量。在另外的实施方案中，将动物饲料预混合物的水分含量调整至任何所描述的范围。例如，在一些实施方案中，将动物饲料预混合物干燥以将其水分含量增加到所描述的范围。

在一些实施方案中，根据具体应用，动物饲料预混合物包含不同水平的寡糖制剂。在一些实施方案中，动物饲料预混合物包含按干重计至少1％、5％、10％、15％、20％、25％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％或99％的寡糖制剂。在一些实施方案中，动物饲料预混合物包含按干重计至多50％、60％、70％、80％、90％、95％或99％的寡糖制剂。

在一些实施方案中，动物饲料预混合物或载体材料还包含其他动物营养，如矿物质、脂肪和蛋白质。在一些实施方案中，载体材料或动物饲料预混合物包含铜、锌或两者。在一些实施方案中，载体材料或动物饲料预混合物包含离子载体或其他抗球虫药。在一些实施方案中，载体材料或动物饲料预混合物包含抗生素。在一些实施方案中，载体材料包含碳水化合物来源。在一些实施方案中，载体材料中的碳水化合物来源不包含脱水亚基。在一些实施方案中，载体材料中的碳水化合物来源包含不同于寡糖制剂的糖苷键类型分布的糖苷键类型分布。

因此，在一些实施方案中，制造营养组合物的方法包括将动物饲料预混合物与基础营养组合物合并。

V.向动物提供寡糖制剂的方法

在一些实施方案中，本文所述的方法包括向动物提供寡糖制剂。在某些变型中，动物通过被饲喂或提供寡糖制剂来进行处理。在一些实施方案中，向动物提供预期的比剂量的寡糖制剂。可以将比剂量例如作为每单位时间由动物消耗的寡糖制剂质量(例如，克/天)，或作为每单位动物体重每单位时间由动物消耗的寡糖制剂质量(例如，mg寡糖/kg体重/天)来定量。在某些实施方案中，寡糖制剂的比剂量是1、5、10、15、20、25、30、40、50、60、70、80、90、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、225、250、275、300、350、400、450、500、1000、1500、2000、3000、4000、5000或10000mg/kg/天。在一些实施方案中，将寡糖制剂的质量作为基于干固体的DP1+含量来测量。在一些实施方案中，将寡糖制剂的质量作为基于干固体的DP2+含量来测量。

在一些实施方案中，经由营养组合物通过口服施用向动物提供寡糖制剂。在一些实施方案中，将营养组合物配制为含有固定包含浓度或水平的寡糖制剂。营养组合物中的寡糖包含浓度或水平可以通过例如根据最终饲料或营养组合物的总质量的寡糖制剂的质量分数来定量。在一些实施方案中，包含浓度或水平以根据基于原样的最终营养组合物的基于干固体的寡糖的百万分率(ppm)来测量。在一些实施方案中，将寡糖制剂的浓度作为基于干固体的DP1+种类的质量分数来测量。在一些实施方案中，将寡糖制剂的浓度作为基于干固体的DP2+种类的质量分数来测量。

本领域普通技术人员将知道用于测定营养组合物或最终饲料中寡糖制剂的浓度以达到预期的比剂量的各种方法和技术。例如，对于不同种类的肉鸡确立随年龄变化的平均每日饲料摄取量，并且所述平均每日饲料摄取量可以由营养师或兽医用于确定最终饲料中所需的包含水平。

在一些实施方案中，经由消耗液体通过口服施用向动物提供寡糖制剂。在一些实施方案中，经由饮用水提供寡糖制剂。在一些实施方案中，选择饮用水中寡糖制剂的浓度以向动物提供预期的比剂量的寡糖制剂。

VI.选择性地促进或抑制胃肠代谢物的产生

A.胃肠代谢物

在某些实施方案中，本文所述的方法包括选择性地促进或抑制动物中一种或多种胃肠代谢物的产生。在一些实施方案中，检测和定量代谢物中的一种或多种。代谢物包括但不限于短链脂肪酸(SCFA)、胆汁酸、多酚、氨基酸、神经递质(或神经递质前体)、信号传导因子、含氮代谢物、丁酸、丙酸、乙酸、乳酸、戊酸、异戊酸、氨基-SCFA、硫代酸盐/酯、萜类化合物、a-萜类化合物、精油、倍他唑、乳寡糖、岩藻糖基化寡糖、2'-岩藻糖基乳糖(2FL)、唾液酸化寡糖、类固醇、胺、三甲胺、氨、吲哚、硫酸吲哚酚、促炎代谢物、组胺、脂多糖、倍他唑、γ-氨基丁酸(GABA)、芳樟醇、桉树脑、香叶醇、二肽、脂肪醇、对甲酚、硫化物、硫化氢、挥发性胺、硫醇、多巴胺、氨基吲哚、脂溶性代谢物、脂族醛、脂族酮、2-甲硫基乙醇、3-甲基-2-丁酮、3-甲基丁醛、戊醛、3-羟基-2-丁酮、(E)-2-戊烯醛、1-戊醇、(E)-2-癸烯醛、己醛、(E)-2-己烯醛、1-己醇、庚醛、苯乙烯、肟-、甲氧基-苯基-丁内酯、(E)-2-庚烯醛、苯甲醛、二甲基三硫化物、1-庚醇、辛醛、1-辛烯-3-酮、1-辛烯-3-醇、(E,E)-2,4-庚二烯醛、2-乙酰基噻唑、D-柠檬烯、4-乙基环己醇、2,4-二甲基-环己醇、(E)-2-辛烯醛、苯乙醛、1-辛醇、2-丁基-环己酮、4-(苯甲酰氧基)-(E)-2-辛烯-1-醇、1-辛醇、十八酸、乙烯酯、壬醛、(E)-2-壬烯-1-醇、3-十八炔、环辛烷甲醇、十二醛、(E)-2-壬烯醛、2,6/3,5-二甲基苯甲醛、1-壬醇、2-正庚基呋喃、顺式-4-癸烯醛、癸醛、(E,E)-2,4-壬二烯醛、1,3-己二烯、3-乙基-2-甲基-2-壬烯醛、(E)-2-十一烯醛、反式-3-壬烯-2-酮、2,5-呋喃二酮、3-十二烯基-反式-2-十一烯-1-醇和花生酸。

在一些实施方案中，代谢物中的一种或多种对动物是有益的(例如，对动物的健康是有益的)。示例性的有益代谢物包括但不限于短链脂肪酸(SCFA)、氨基-SCFA、神经递质、神经递质前体、神经化学物质、γ-氨基丁酸(GABA)、多巴胺、氨基吲哚、挥发性脂肪酸(VFA)、丁酸、丙酸、乙酸、乳酸、戊酸、异戊酸、精油、a-萜类化合物、桉树脑、香叶醇、倍他唑、乳寡糖、岩藻糖基化寡糖、唾液酸化寡糖、2-岩藻糖基乳糖和氨基吲哚。

在一些实施方案中，代谢物中的一种或多种促进动物的生长。示例性代谢物包括但不限于丁酸、丙酸、乙酸、乳酸、戊酸和异戊酸。

在一些实施方案中，代谢物中的一种或多种对动物的健康是有害的。示例性的有害或不希望的代谢物包括但不限于含氮代谢物、氨基酸降解产物、氨、三甲胺、吲哚、对甲酚、三甲胺N-氧化物(TMAO)、尿毒症溶质或胆汁酸。

在一些实施方案中，代谢物是促炎代谢物。示例性促炎代谢物包括但不限于组胺和LPS。

在一些实施方案中，代谢物与动物肉的品质相关联，所述品质包括例如动物肉的风味、颜色和质地。示例性代谢物包括但不限于2-甲硫基乙醇、3-甲基-2-丁酮、3-甲基丁醛、戊醛、3-羟基-2-丁酮、(E)-2-戊烯醛、1-戊醇、(E)-2-癸烯醛、己醛、(E)-2-己烯醛、1-己醇、庚醛、苯乙烯、肟-、甲氧基-苯基-丁内酯、(E)-2-庚烯醛、苯甲醛、二甲基三硫化物、1-庚醇、辛醛、1-辛烯-3-酮、1-辛烯-3-醇、(E,E)-2,4-庚二烯醛、2-乙酰基噻唑、D-柠檬烯、4-乙基环己醇、2,4-二甲基-环己醇、(E)-2-辛烯醛、苯乙醛、1-辛醇、2-丁基-环己酮、4-(苯甲酰氧基)-(E)-2-辛烯-1-醇、1-辛醇、十八酸、乙烯酯、壬醛、(E)-2-壬烯-1-醇、3-十八炔、环辛烷甲醇、十二醛、(E)-2-壬烯醛、2,6/3,5-二甲基苯甲醛、1-壬醇、2-正庚基呋喃、顺式-4-癸烯醛、癸醛、(E,E)-2,4-壬二烯醛、1,3-己二烯、3-乙基-2-甲基-2-壬烯醛、(E)-2-十一烯醛、反式-3-壬烯-2-酮、2,5-呋喃二酮、3-十二烯基-反式-2-十一烯-1-醇和花生酸。

在某些实施方案中，本文所述的方法包括促进或抑制动物中一种或多种胃肠代谢物的产生。在一些实施方案中，检测和定量代谢物中的一种或多种。代谢物包括但不限于短链脂肪酸(SCFA)、胆汁酸、多酚、氨基酸、神经递质(或神经递质前体)、信号传导因子、含氮代谢物、丁酸、丙酸、乙酸、乳酸、戊酸、异戊酸、氨基-SCFA、硫代酸盐/酯、萜类化合物、a-萜类化合物、精油、倍他唑、乳寡糖、岩藻糖基化寡糖、2'-岩藻糖基乳糖(2FL)、唾液酸化寡糖、类固醇、胺、三甲胺、氨、吲哚、硫酸吲哚酚、促炎代谢物、组胺、脂多糖、倍他唑、γ-氨基丁酸(GABA)、芳樟醇、桉树脑、香叶醇、二肽、脂肪醇、对甲酚、硫化物、硫化氢、挥发性胺、硫醇、多巴胺、氨基吲哚、脂溶性代谢物、脂族醛、脂族酮、2-甲硫基乙醇、3-甲基-2-丁酮、3-甲基丁醛、戊醛、3-羟基-2-丁酮、(E)-2-戊烯醛、1-戊醇、(E)-2-癸烯醛、己醛、(E)-2-己烯醛、1-己醇、庚醛、苯乙烯、肟-、甲氧基-苯基-丁内酯、(E)-2-庚烯醛、苯甲醛、二甲基三硫化物、1-庚醇、辛醛、1-辛烯-3-酮、1-辛烯-3-醇、(E,E)-2,4-庚二烯醛、2-乙酰基噻唑、D-柠檬烯、4-乙基环己醇、2,4-二甲基-环己醇、(E)-2-辛烯醛、苯乙醛、1-辛醇、2-丁基-环己酮、4-(苯甲酰氧基)-(E)-2-辛烯-1-醇、1-辛醇、十八酸、乙烯酯、壬醛、(E)-2-壬烯-1-醇、3-十八炔、环辛烷甲醇、十二醛、(E)-2-壬烯醛、2,6/3,5-二甲基苯甲醛、1-壬醇、2-正庚基呋喃、顺式-4-癸烯醛、癸醛、(E,E)-2,4-壬二烯醛、1,3-己二烯、3-乙基-2-甲基-2-壬烯醛、(E)-2-十一烯醛、反式-3-壬烯-2-酮、2,5-呋喃二酮、3-十二烯基-反式-2-十一烯-1-醇和花生酸。

在一些实施方案中，代谢物选自：芳樟醇、桉树脑、香叶醇、萜类化合物、a-萜类化合物、龙胆酸、乳寡糖、岩藻糖基化寡糖、2'-岩藻糖基乳糖(2FL)、唾液酸化寡糖、氨基异丁酸、D-α-氨基丁酸、和3-氨基异丁酸、丁酸、丙酸、乙酸、乳酸、戊酸、异戊酸、氨基-SCFA、硫代酸盐/酯、精油、倍他唑、类固醇、胺、三甲胺、氨、吲哚、硫酸吲哚酚、促炎代谢物、组胺、脂多糖、倍他唑、γ-氨基丁酸(GABA)、二肽、脂肪醇、对甲酚、硫化物、硫化氢、挥发性胺、硫醇、多巴胺和氨基吲哚。

在一些实施方案中，代谢物与动物健康相关联。示例性代谢物包括但不限于芳樟醇、桉树脑、香叶醇、萜类化合物、a-萜类化合物、龙胆酸、乳寡糖、岩藻糖基化寡糖、2'-岩藻糖基乳糖(2FL)和唾液酸化寡糖。其他示例性代谢物包括短链脂肪酸(SCFA)、氨基-SCFA、硫代酸盐/酯、萜类化合物、a-萜类化合物、胺、氨、吲哚、丁酸、组胺、倍他唑、GABA、2FL、桉树脑和香叶醇。

在一些实施方案中，代谢物与情绪相关联。示例性代谢物包括但不限于γ-氨基丁酸(GABA)、氨基异丁酸、D-α-氨基丁酸和3-氨基异丁酸。

在一些实施方案中，代谢物中的一种或多种对动物的健康是有害的。示例性代谢物包括但不限于短链脂肪酸(SCFA)、氨、三甲胺(TMA)、三甲胺N-氧化物(TMAO)、尿毒症溶质和胆汁酸。

在一些实施方案中，代谢物与动物肉的至少一种品质属性(例如，风味、颜色、香味等)相关联。示例性代谢物包括但不限于脂溶性代谢物、脂族醛、脂族酮、1-甲硫基丙烷、2-甲硫基乙醇、对薄荷-1-烯-4-醇以及化合物1-硝基庚烷、辛醛、2-辛酮、和2,3-庚烷二酮、3-甲基-2-丁酮、3-甲基丁醛、戊醛、3-羟基-2-丁酮、(E)-2-戊烯醛、1-戊醇、(E)-2-癸烯醛、己醛、(E)-2-己烯醛、1-己醇、庚醛、苯乙烯、肟-、甲氧基-苯基-丁内酯、(E)-2-庚烯醛、苯甲醛、二甲基三硫化物、1-庚醇、辛醛、1-辛烯-3-酮、1-辛烯-3-醇、(E,E)-2,4-庚二烯醛、2-乙酰基噻唑、D-柠檬烯、4-乙基环己醇、2,4-二甲基-环己醇、(E)-2-辛烯醛、苯乙醛、1-辛醇、2-丁基-环己酮、4-(苯甲酰氧基)-(E)-2-辛烯-1-醇、1-辛醇、十八酸、乙烯酯、壬醛、(E)-2-壬烯-1-醇、3-十八炔、环辛烷甲醇、十二醛、(E)-2-壬烯醛、2,6/3,5-二甲基苯甲醛、1-壬醇、2-正庚基呋喃、顺式-4-癸烯醛、癸醛、(E,E)-2,4-壬二烯醛、1,3-己二烯、3-乙基-2-甲基-2-壬烯醛、(E)-2-十一烯醛、反式-3-壬烯-2-酮、2,5-呋喃二酮、3-十二烯基-反式-2-十一烯-1-醇和花生酸。

B.取样和检测胃肠代谢物

在某些实施方案中，本文所述的方法包括检测或定量动物的胃肠道中的一种或多种代谢物。在某些实施方案中，在来自动物的胃肠样品中检测或定量代谢物。胃肠样品可以从动物以任何标准形式获得，所述标准形式反映了动物胃肠道的代谢内容物。胃肠样品包括例如通过内窥镜活检获得的胃肠组织样品。胃肠组织包括例如口腔组织、食道、胃、肠、回肠、盲肠、结肠或直肠。样品还包括粪便、唾液和胃肠腹水。获得胃肠样品的方法是标准的，并且是熟练技术人员已知的。

在一些实施方案中，样品是来自单一动物的单一样品。在一些实施方案中，样品是来自单一动物的多个样品的组合。在一些实施方案中，在分析之前从样品中纯化代谢物。在一些实施方案中，纯化来自单一样品的代谢物。在一些实施方案中，纯化来自单一动物的多个样品的代谢物，随后将其合并，之后进行分析。

存在于从动物收集的胃肠样品中或新鲜或用过的培养基中的代谢物可以使用本文所述的且熟练技术人员已知的方法来测定。此类方法包括例如色谱法(例如，气相色谱法(GC)或液相色谱法(LC))与质谱法或NMR(例如，1H-NMR)组合。可以通过使代谢物标准品运行通过同一分析系统来验证测量。

在气相色谱法-质谱法(GC-MS)或液相色谱法-质谱法(LC-MS)分析的情况下，极性代谢物和脂肪酸可以使用有机溶剂和水性样品的单相或双相系统进行提取并衍生化。极性代谢物的示例性衍生方案涉及通过以下方式形成甲肟-tBDMS衍生物：将代谢物与在吡啶中的2％甲氧胺盐酸盐一起孵育，之后添加N-叔丁基二甲基甲硅烷基-N-甲基三氟乙酰胺(MTBSTFA)与1％叔丁基二甲基氯硅烷(t-BDMCS)。非极性级分(包括三酰甘油和磷脂)可以例如通过与在甲醇中的2％H₂SO₄一起孵育或通过使用甲基-8试剂(Thermo Scientific)而皂化成游离脂肪酸并酯化形成脂肪酸甲酯。然后可以通过GC-MS，使用标准LC-MS方法，例如安装在与质谱仪(MS)连接的气相色谱(GC)上的DB-35MS柱(30m x 0.25mm i.d.x 0.25μιη，Agilent J&W Scientific)来分析衍生化样品。质量同位素异构体分布可以通过整合代谢物离子碎片来测定，并使用标准算法针对天然丰度进行校正。在液相色谱法-质谱法(LC-MS)的情况下，极性代谢物可以使用配备有诸如SeQuant ZIC-Philic聚合物柱(2.1x150mm；EMD Millipore)等柱的标准台式LC-MS/MS进行分析。用于分离的示例性流动相可以包括被调整至特定pH值的缓冲剂和有机溶剂。

在组合中或在替代方案中，可以通过¹H-核磁共振(1H-NMR)分析所提取的样品。可以将样品与诸如D2O等同位素富集的溶剂合并，任选地在缓冲溶液(例如在D2O中的Na₂HPO₄、NaH₂PO₄，pH 7.4)存在下。样品还可以补充有用于校准和化学位移测定的参考标准品(例如，5mM 2,2-二甲基-2-硅戊烷-5-磺酸钠盐(DSS-d₆，Isotec，美国))。在分析前，可以对溶液进行过滤或离心以除去任何沉降物或沉淀，然后转移到合适的NMR管或容器以进行分析(例如，5mm NMR管)。可以在配备有5mm QXI-Z C/N/P探针头的标准NMR波谱仪如Avance II+500Bruker波谱仪(500MHz)(Bruker，特拉华州)上获取¹H-NMR谱，并用谱整合软件(如Chenomx NMR套件7.1；Chenomx Inc.，阿尔伯塔省埃德蒙顿)进行分析。可替代地，可以根据本领域已知的其他公开方案进行¹H-NMR(参见例如，Chassaing等人,Lack of solublefiber drives diet-induced adiposity in mice,Am J Physiol Gastrointest LiverPhysiol,2015；Bai等人,Comparison of Storage Conditions for Human VaginalMicrobiome Studies,PLoS ONE,2012:e36934)。

C.有益微生物

在一些实施方案中，本文所述的方法包括选择性地增强或促进动物的胃肠道中一种或多种微生物(例如，细菌)物种的生长。在一些实施方案中，微生物(例如，细菌)物种对动物是有益的(例如，对健康是有益的)。在一些实施方案中，本文所述的方法包括选择性地增强或促进动物的胃肠道中一种或多种微生物(例如，细菌)物种的生长，其中所述微生物物种产生一种或多种选定代谢物。在一些实施方案中，微生物物种是古生菌物种。在其他实施方案中，微生物物种是病毒、噬菌体或原生动物物种。在一些实施方案中，微生物物种是细菌物种。

本文公开的细菌包括但不限于分类为拟杆菌属(Bacteroides)、臭味杆菌属(Odoribacter)、颤杆菌属(Oscillibacter)、罕见小球菌属(Subdoligranulum)、嗜胆菌属(Biophila)、巴恩斯氏菌属(Barnesiella)或瘤胃球菌属(Ruminococcus)的生物体。示例性细菌还包括但不限于分类为肠球菌属、乳杆菌属、丙酸杆菌属(Propionibacterium)、双歧杆菌属和链球菌属(Streptococcus)的生物体。

细菌物种包括但不限于克拉克拟杆菌(Bacteroides clarus)、多雷拟杆菌(Bacteroides dorei)、内脏臭味杆菌(Odoribacter splanchinicus)和人肠道巴恩斯氏菌(Barnesiella intestinihominis)。

在一些实施方案中，动物具有这样的胃肠微生物群，所述胃肠微生物群包含至少0.1％、1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％或10％的分类为拟杆菌属、臭味杆菌属、颤杆菌属、罕见小球菌属、嗜胆菌属、巴恩斯氏菌属或瘤胃球菌属的至少一种细菌物种(例如，如在如本文公开的胃肠样品中测量的)。在一些实施方案中，动物具有这样的胃肠微生物群，所述胃肠微生物群包含至少0.1％、1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％或10％的分类为肠球菌属、乳杆菌属、丙酸杆菌属、双歧杆菌属或链球菌属的至少一种细菌物种(例如，如在如本文公开的胃肠样品中测量的)。

在一些实施方案中，动物具有这样的胃肠微生物群，所述胃肠微生物群包含至少0.1％、1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％或10％的克拉克拟杆菌、多雷拟杆菌、内脏臭味杆菌或人肠道巴恩斯氏菌中的至少一种(例如，如在如本文公开的胃肠样品中测量的)。

在一些实施方案中，动物具有这样的胃肠微生物群，所述胃肠微生物群包含至少0.1％、1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、15％、20％、25％、30％、40％或50％的分类为拟杆菌属、臭味杆菌属、颤杆菌属、罕见小球菌属、嗜胆菌属、巴恩斯氏菌属或瘤胃球菌属的一种或多种细菌物种的组合(例如，如在如本文公开的胃肠样品中测量的)。在一些实施方案中，动物具有这样的胃肠微生物群，所述胃肠微生物群包含至少0.1％、1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、15％、20％、25％、30％、40％或50％的分类为肠球菌属、乳杆菌属、丙酸杆菌属、双歧杆菌属或链球菌属的一种或多种细菌物种的组合(例如，如在如本文公开的胃肠样品中测量的)。

在一些实施方案中，动物具有这样的胃肠微生物群，所述胃肠微生物群包含至少0.1％、1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、15％、20％、25％、30％、40％或50％的克拉克拟杆菌、多雷拟杆菌、内脏臭味杆菌或人肠道巴恩斯氏菌中的一种或多种的组合(例如，如在如本文公开的胃肠样品中测量的)。

D.病原性微生物

在某些实施方案中，本文所述的方法包括减少或抑制动物的胃肠道中一种或多种微生物(例如，细菌)物种的生长，并且在一些实施方案中定量所述一种或多种微生物(例如，细菌)物种的水平。在一些实施方案中，本文所述的方法包括减少或抑制动物的胃肠道中一种或多种微生物(例如，细菌)物种的生长，其中所述微生物(例如，细菌)产生对动物的健康有害的一种或多种代谢物。在一些实施方案中，微生物(例如，细菌)物种对动物是病原性的。在一些实施方案中，微生物(例如，细菌)物种对人是病原性的，但是对动物不是。在一些实施方案中，微生物物种是古生菌物种。在其他实施方案中，微生物物种是病毒、噬菌体或原生动物物种。在一些实施方案中，微生物物种是细菌物种。

本文公开的细菌包括但不限于变形菌门的细菌。细菌还包括但不限于分类为螺杆菌属、埃希氏菌属、沙门氏菌属、弧菌属或耶尔森氏菌属的生物体。示例性细菌还包括但不限于分类为以下属的生物体：密螺旋体属(Treponema)、链球菌属、葡萄球菌属、志贺氏菌属(Shigella)、立克次氏体属(Rickettsia)、东方体属(Orientia)、假单胞菌属(Pseudomonas)、奈瑟氏菌属(Neisseria)、支原体属(Mycoplasma)、分枝杆菌属(Mycobacterium)、李斯特菌属(Listeria)、钩端螺旋体属(Leptospira)、军团菌属(Legionella)、克雷伯氏菌属(Klebsiella)、嗜血杆菌属(Haemophilus)、弗朗西斯氏菌属(Francisella)、埃利希氏体属(Ehrlichia)、肠球菌属、柯克斯氏体属(Coxiella)、棒状杆菌属(Corynebacterium)、梭菌属(Clostridium)、衣原体属(Chlamydia)、嗜衣原体属(Chlamydophila)、弯曲杆菌属(Campylobacter)、伯克霍尔德菌属(Burkholderia)、布鲁氏菌属(Brucella)、包柔氏螺旋体属(Borrelia)、博代氏杆菌属(Bordetella)、双歧杆菌属和芽孢杆菌属(Bacillus)。细菌物种包括但不限于幼禽螺杆菌、约氏变形菌、大肠杆菌、空肠弯曲杆菌和卷曲乳杆菌。细菌物种包括但不限于嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、胎儿弯曲杆菌(Campylobacter fetus)、类志贺邻单胞菌(Plesiomonas shigelloides)、蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)、空肠弯曲杆菌、肉毒梭菌(Clostridium botulinum)、艰难梭菌(Clostridium difficile)、产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)、肠聚集性大肠杆菌、肠出血性大肠杆菌、肠侵袭性大肠杆菌、产肠毒素性大肠杆菌、幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)、肺炎克雷伯氏菌(Klebsiellia pneumonia)、单核细胞增多性李斯特菌(Lysteria monocytogenes)、类志贺邻单胞菌、沙门氏菌属物种、伤寒沙门氏菌(Salmonella typhi)、副伤寒沙门氏菌(Salmonella paratyphi)、志贺氏菌属物种、葡萄球菌属物种、金黄色葡萄球菌、耐万古霉素肠球菌属物种、弧菌属物种、霍乱弧菌(Vibriocholerae)、副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、创伤弧菌(Vibrio vulnificus)和小肠结肠炎耶尔森氏菌(Yersinia enterocolitica)。在一些实施方案中，细菌是耐单药或耐多药的。

在一些实施方案中，动物具有这样的胃肠微生物群，所述胃肠微生物群包含少于50％、40％、30％、20％、15％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％或0.1％的分类为螺杆菌属、变形菌门、埃希氏菌属、弯曲杆菌属或乳杆菌属的细菌(例如，如在如本文公开的胃肠样品中测量的)。在一些实施方案中，分类为螺杆菌属、变形菌门、埃希氏菌属、弯曲杆菌属或乳杆菌属的细菌的组合少于动物的胃肠微生物群的50％、40％、30％、20％、15％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％或0.1％(例如，如在如本文公开的胃肠样品中测量的)。

在一些实施方案中，动物具有这样的胃肠微生物群，所述胃肠微生物群包含少于50％、40％、30％、20％、15％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％或0.1％的幼禽螺杆菌、约氏变形菌、大肠杆菌、空肠弯曲杆菌或卷曲乳杆菌(例如，如在如本文公开的胃肠样品中测量的)。在一些实施方案中，幼禽螺杆菌、约氏变形菌、大肠杆菌、空肠弯曲杆菌或卷曲乳杆菌的组合少于动物的胃肠微生物群的50％、40％、30％、20％、15％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％或0.1％(例如，如在如本文公开的胃肠样品中测量的)。

E.取样和检测胃肠微生物

在某些实施方案中，本文所述的方法包括检测或定量动物的胃肠微生物群中的一种或多种微生物(例如，细菌)物种。在某些实施方案中，在来自动物的胃肠微生物群样品中检测或定量微生物(例如，细菌)物种。胃肠微生物群样品可以从动物以任何标准形式获得，所述标准形式反映了动物胃肠道的微生物内容物。胃肠微生物群样品包括例如通过内窥镜活检获得的胃肠组织样品。胃肠组织包括例如口腔组织、食道、胃、肠、回肠、盲肠、结肠或直肠。样品还包括粪便、唾液和胃肠腹水。获得胃肠微生物群样品的方法是标准的，并且是熟练技术人员已知的。

在一些实施方案中，样品是来自单一动物的单一样品。在一些实施方案中，样品是来自单一动物的多个样品的组合。在一些实施方案中，在分析之前从样品中纯化微生物(例如，细菌，例如总细菌)。在一些实施方案中，纯化来自单一样品的微生物(例如，细菌)。在一些实施方案中，纯化来自单一动物的多个样品的微生物(例如，细菌)，随后将其合并，之后进行分析。

在一些实施方案中，从样品中离析总DNA或总RNA。可以使用熟练技术人员已知的标准技术根据制造商的说明从样品中提取基因组DNA，所述标准技术包括可商购获得的试剂盒，如Mo Bio

96孔土壤DNA离析试剂盒(Mo Bio Laboratories，加利福尼亚州卡尔斯巴德)、Mo Bio

DNA离析试剂盒(Mo Bio Laboratories，加利福尼亚州卡尔斯巴德)或QIAamp DNA粪便微型试剂盒(QIAGEN，加利福尼亚州巴伦西亚)。可以使用熟练技术人员已知的标准测定从样品中提取RNA，所述标准测定包括可商购获得的试剂盒，如RNeasy Power微生物组试剂盒(QIAGEN，加利福尼亚州巴伦西亚)和RiboPure细菌RNA纯化试剂盒(Life Technologies，加利福尼亚州卡尔斯巴德)。离析微生物(例如，细菌)RNA的另一种方法可能涉及通过除去tRNA来富集经纯化的细菌RNA样品中的mRNA。可替代地，可以将RNA转化为cDNA，其可以用于使用标准方法如Nextera XT样品制备试剂盒(Illumina，加利福尼亚州圣地亚哥)生成测序文库。

样品中微生物(例如，细菌)物种的相对丰度的鉴定和测定可以通过熟练技术人员已知的标准分子生物学方法来测定，所述标准分子生物学方法包括例如遗传分析(例如DNA测序(例如，全基因组测序、全基因组鸟枪法测序(WSG))、RNA测序、PCR、定量PCR(qPCR))、血清学和抗原分析、显微镜检查、代谢物鉴定、革兰氏染色、流式细胞术、免疫学技术以及基于培养的方法(如计数菌落形成单位)。

在一些实施方案中，微生物(例如，细菌)物种的鉴定和相对丰度通过全基因组鸟枪法测序(WGS)来测定，其中将所提取的DNA片段化成各种长度(300至约40,000个核苷酸)的片，并且在不进行扩增的情况下直接进行测序。可以使用任何测序技术生成序列数据，所述测序技术包括例如但不限于Sanger、Illumina、454 Life Sciences、Ion Torrent、ABI、Pacific Biosciences和/或Oxford Nanopore。

微生物(例如，细菌)全基因组测序(WGS)的测序文库可以由微生物(例如，细菌)基因组DNA制备。对于已经从动物样品中离析的基因组DNA，可以任选地使用可商购获得的试剂盒(例如，NEBNext微生物组DNA富集试剂盒(New England Biolabs，马萨诸塞州伊普斯威奇)或其他富集试剂盒)针对微生物(例如，细菌)DNA富集DNA。测序文库也可以使用可商购获得的试剂盒根据制造商的说明从基因组DNA制备，所述试剂盒如Nextera配对样品制备试剂盒、TruSeq DNA PCR-Free或TruSeq Nano DNA或者Nextera XT样品制备试剂盒(Illumina，加利福尼亚州圣地亚哥)。

可替代地，可以使用与Illumina测序平台兼容的其他试剂盒制备文库，所述其他试剂盒如NEBNext DNA文库构建试剂盒(New England Biolabs，马萨诸塞州伊普斯威奇)。然后可以使用标准测序技术对文库进行测序，所述标准测序技术包括但不限于MiSeq、HiSeq或NextSeq测序仪(Illumina，加利福尼亚州圣地亚哥)。

可替代地，可以使用使用本领域的标准方法制备的全基因组鸟枪法片段文库。例如，可以使用GS FLX钛快速文库制备试剂盒(454 Life Sciences，康涅狄格州布兰福德)构建鸟枪法片段文库，将其使用GS FLX钛emPCR试剂盒(454 Life Sciences，康涅狄格州布兰福德)扩增，并在454测序仪(454 Life Sciences，康涅狄格州布兰福德)上按照标准454焦磷酸测序方案进行测序。

可以使用序列相似性和系统发育放置方法或两种策略的组合来分析核酸序列以定义分类学分配。可以使用类似的方法来注释蛋白质名称、蛋白质功能、转录因子名称以及核酸序列的任何其他分类方案。基于序列相似性的方法包括BLAST、BLASTx、tBLASTn、tBLASTx、RDP分类器、DNAclust、RapSearch2、DIAMOND、USEARCH以及这些算法的各种实现如QIIME或Mothur。这些方法将序列读段映射到参考数据库并选择最佳匹配。常见的数据库包括用于分类学分配的KEGG、MetaCyc、NCBI非冗余数据库、Greengenes、RDP和Silva。对于功能分配，将读段映射到各种功能数据库，如COG、KEGG、BioCyc、MetaCyc和碳水化合物活性酶(CAZy)数据库。使用包括MetaPhlAn在内的软件分配微生物进化枝。

在一些实施方案中，通过表征细菌16S小亚基核糖体RNA基因(16S rRNA基因)的DNA序列来鉴定细菌构成。16S rRNA基因的长度为大约1,500个核苷酸，并且通常在生物体之间是高度保守的，但是含有特定的可变区和高变区(V1-V9)，所述可变区和高变区具有足够的核苷酸多样性以区分大多数生物体的物种和菌株水平的分类群。细菌中的这些区分别由核苷酸69-99、137-242、433-497、576-682、822-879、986-1043、1117-1173、1243-1294和1435-1465定义，使用基于大肠杆菌命名系统的编号。

细菌群落的组成可以通过对全16S rRNA基因或该基因的VI、V2、V3、V4、V5、V6、V7、V8和V9区中的至少一个进行测序或者通过对来自该基因的可变区的任何组合(例如Vl-3或V3-5)进行测序来推测。在一个实施方案中，使用VI、V2和V3区来表征微生物群。在另一个实施方案中，使用V3、V4和V5区来表征微生物群。在另一个实施方案中，使用V4区来表征微生物群。

将彼此至少97％相同的序列分为操作分类单元(OTU)。含有具有97％相似性的序列的OTU对应于近似物种水平分类群。选择来自每个OTU的至少一个代表性序列，并将其用于通过与高度精选的16S rRNA基因序列的参考数据库(如Greengenes或SILVA数据库)进行比较来获得OTU的分类学分配。可以通过从来自每个OTU的代表性序列构建系统发育树来推断微生物群落中OTU之间的关系。使用已知的技术，为了测定全16S序列或16S序列的任何可变区的序列，从细菌样品中提取基因组DNA，使用聚合酶链反应(PCR)扩增16S rRNA(全区或特定可变区)，净化PCR产物，并描绘核苷酸序列以测定16S rRNA基因或所述基因的可变区的遗传组成。如果进行全16S测序，则所使用的测序方法可以是但不限于Sanger测序。如果使用一个或多个可变区(如V4区)，则测序可以是但不限于使用Sanger方法或使用下一代测序方法(如Illumina方法)进行。设计用于退火到16S rRNA基因的保守区的引物(例如，用于扩增V4区的515F和805R引物)可以含有独特的条形码序列，以允许同时表征多个微生物群落。

除了16S rRNA基因外，分析了一组已知为给定物种或分类学组的标记基因的选定基因，以评估微生物群落的组成。可替代地使用基于PCR的筛选策略测定这些基因。例如，使用编码热不稳定(LTI、LTIIa和LTIIb)和热稳定(STI和STII)毒素、维罗毒素类型1、2和2e(分别为VT1、VT2和VT2e)、细胞毒性坏死因子(CNF1和CNF2)、附着和脱落机构(eaeA)、肠聚集性机构(Eagg)和肠侵袭性机构(Einv)的基因来区分病原性大肠杆菌的各种菌株。用来通过使用标记基因测定微生物群落的分类学组成的最佳基因是基于序列的分类学鉴定领域的普通技术人员所熟悉的。

在一些实施方案中，微生物组成的身份的特征在于鉴定核苷酸标记或基因(特别是高度保守的基因(例如，“管家”基因))或其组合。使用所定义的方法，从细菌样品中提取的DNA将具有特定基因组区，将所述特定基因组区使用PCR扩增，并进行测序以测定扩增产物的核苷酸序列。

VII.将代谢物靶向递送到胃肠道

A.胃肠代谢物

在某些实施方案中，本文所述的方法包括在动物的胃肠道中递送或增加一种或多种胃肠代谢物。在一些实施方案中，检测和定量代谢物中的一种或多种。在一些实施方案中，代谢物包括短链脂肪酸(SCFA)、含氮代谢物、胆汁酸、多酚、氨基酸、神经递质、信号传导因子、丁酸、丙酸、乙酸、乳酸、戊酸、异戊酸、氨基-SCFA、硫代酸盐/酯、萜类化合物、a-萜类化合物、胺、氨、吲哚、丁酸、组胺、倍他唑、GABA、2FL、桉树脑、香叶醇、2-MThEtOH、3-甲基-2-丁酮、3-甲基丁醛、戊醛、3-羟基-2-丁酮、(E)-2-戊烯醛、1-戊醇、(E)-2-癸烯醛、己醛、(E)-2-己烯醛、1-己醇、庚醛、苯乙烯、肟-、甲氧基-苯基-丁内酯、(E)-2-庚烯醛、苯甲醛、二甲基三硫化物、1-庚醇、辛醛、1-辛烯-3-酮、1-辛烯-3-醇、(E,E)-2,4-庚二烯醛、2-乙酰基噻唑、D-柠檬烯、4-乙基环己醇、2,4-二甲基-环己醇、(E)-2-辛烯醛、苯乙醛、1-辛醇、2-丁基-环己酮、4-(苯甲酰氧基)-(E)-2-辛烯-1-醇、1-辛醇、十八酸、乙烯酯、壬醛、(E)-2-壬烯-1-醇、3-十八炔、环辛烷甲醇、十二醛、(E)-2-壬烯醛、2,6/3,5-二甲基苯甲醛、1-壬醇、2-正庚基呋喃、顺式-4-癸烯醛、癸醛、(E,E)-2,4-壬二烯醛、1,3-己二烯、3-乙基-2-甲基-2-壬烯醛、(E)-2-十一烯醛、反式-3-壬烯-2-酮、2,5-呋喃二酮、3-十二烯基-反式-2-十一烯-1-醇、花生酸或其任何组合。

在一些实施方案中，如本文所用，丁酸(butyric acid)和丁酸(butyrate)可互换使用。在一些实施方案中，如本文所用，丙酸(propionic acid)和丙酸(propionate)可互换使用。

在一些实施方案中，所述一种或多种代谢物包括丁酸盐/酯、丙酸盐/酯或两者。在一些实施方案中，所述一种或多种代谢物包括精油。在一些实施方案中，所述一种或多种代谢物包括二肽、脂肪醇或a-萜类化合物。

在一些实施方案中，所述一种或多种代谢物包括芳樟醇、桉树脑或香叶醇。在一些实施方案中，所述一种或多种代谢物包括神经递质。在一些实施方案中，所述一种或多种代谢物包括氨。

在一些实施方案中，代谢物中的一种或多种促进动物的生长。在一些实施方案中，代谢物中的一种或多种促进动物的生长，并且选自：丁酸、丙酸、乙酸、乳酸、戊酸和异戊酸。

在一些实施方案中，代谢物中的一种或多种对动物的健康是有害的。在一些实施方案中，代谢物中的一种或多种对动物的健康是有害的，并且选自：短链脂肪酸(SCFA)、氨、三甲胺(TMA)、三甲胺N-氧化物(TMAO)、尿毒症溶质和胆汁酸。

在一些实施方案中，代谢物与动物肉的品质相关联，所述品质包括例如动物肉的风味、颜色和质地。在一些实施方案中，所述一种或多种代谢物包括2-MThEtOH、3-甲基-2-丁酮、3-甲基丁醛、戊醛、3-羟基-2-丁酮、(E)-2-戊烯醛、1-戊醇、(E)-2-癸烯醛、己醛、(E)-2-己烯醛、1-己醇、庚醛、苯乙烯、肟-、甲氧基-苯基-丁内酯、(E)-2-庚烯醛、苯甲醛、二甲基三硫化物、1-庚醇、辛醛、1-辛烯-3-酮、1-辛烯-3-醇、(E,E)-2,4-庚二烯醛、2-乙酰基噻唑、D-柠檬烯、4-乙基环己醇、2,4-二甲基-环己醇、(E)-2-辛烯醛、苯乙醛、1-辛醇、2-丁基-环己酮、4-(苯甲酰氧基)-(E)-2-辛烯-1-醇、1-辛醇、十八酸、乙烯酯、壬醛、(E)-2-壬烯-1-醇、3-十八炔、环辛烷甲醇、十二醛、(E)-2-壬烯醛、2,6/3,5-二甲基苯甲醛、1-壬醇、2-正庚基呋喃、顺式-4-癸烯醛、癸醛、(E,E)-2,4-壬二烯醛、1,3-己二烯、3-乙基-2-甲基-2-壬烯醛、(E)-2-十一烯醛、反式-3-壬烯-2-酮、2,5-呋喃二酮、3-十二烯基-反式-2-十一烯-1-醇、花生酸或其任何组合。

在一些实施方案中，所述一种或多种代谢物中的至少一种是挥发性的，如挥发性脂肪酸。挥发性脂肪酸可以是指短链脂肪酸，如C2-C6羧酸。在一些实施方案中，所述一种或多种代谢物中的至少一种具有强烈的令人厌恶的香味。具有强烈的令人厌恶的香味的示例性物质或发出恶臭物质可以包括但不限于丁酸和丁酸酐。在一些实施方案中，所述一种或多种代谢物中的至少一种导致适口性降低和饲料摄取量的相应减少。在一些实施方案中，所述一种或多种代谢物中的至少一种相对于氧化是不稳定的。例如，可以使用碘值来测量物质对氧化的易感性，并且相对于氧化不稳定的代谢物可以根据Kaufmann方法具有高于10、20、30、40、50、60、70、80或更高的碘值。在一些实施方案中，所述一种或多种代谢物中的至少一种在商业动物饲料制造条件下相对于氧化是不稳定的。

在一些实施方案中，所述一种或多种代谢物可在动物的上消化道中吸收。在某些实施方案中，所述一种或多种代谢物的全部可在动物的上消化道中吸收。

B.取样和检测胃肠代谢物

在某些实施方案中，本文所述的方法包括检测或定量动物的胃肠道中的一种或多种代谢物。在某些实施方案中，在来自动物的胃肠样品中检测或定量代谢物。胃肠样品可以从动物以任何标准形式获得，所述标准形式反映了动物胃肠道的代谢内容物。胃肠样品包括例如通过内窥镜活检获得的胃肠组织样品。胃肠组织包括例如口腔组织、食道、胃、肠、回肠、盲肠、结肠或直肠。样品还包括粪便、唾液和胃肠腹水。在一些实施方案中，样品是胃肠组织的活检或粪便样品。获得胃肠样品的方法是标准的，并且是熟练技术人员已知的。

在一些实施方案中，样品取自动物的胃肠道的隔室。在一些实施方案中，所获取的样品代表动物的胃肠道的隔室中所述一种或多种代谢物的水平。在某些实施方案中，隔室是动物的下消化道的一部分。在某些实施方案中，隔室包括全部或部分的小肠和全部或部分的大肠。

在组合中或在替代方案中，可以通过¹H-核磁共振(¹H-NMR)分析所提取的样品。可以将样品与诸如D2O等同位素富集的溶剂合并，任选地在缓冲溶液(例如在D2O中的Na₂HPO₄、NaH₂PO₄，pH 7.4)存在下。样品还可以补充有用于校准和化学位移测定的参考标准品(例如，5mM 2,2-二甲基-2-硅戊烷-5-磺酸钠盐(DSS-d₆，Isotec，美国))。在分析前，可以对溶液进行过滤或离心以除去任何沉降物或沉淀，然后转移到合适的NMR管或容器以进行分析(例如，5mm NMR管)。可以在配备有5mm QXI-Z C/N/P探针头的标准NMR波谱仪如Avance II+500Bruker波谱仪(500MHz)(Bruker，特拉华州)上获取¹H-NMR谱，并用谱整合软件(如Chenomx NMR套件7.1；Chenomx Inc.，阿尔伯塔省埃德蒙顿)进行分析。可替代地，可以根据本领域已知的其他公开方案进行¹H-NMR(参见例如，Chassaing等人,Lack of solublefiber drives diet-induced adiposity in mice,Am J Physiol Gastrointest LiverPhysiol,2015；Bai等人,Comparison of Storage Conditions for Human VaginalMicrobiome Studies,PLoS ONE,2012:e36934)。

C.代谢物水平

在一些实施方案中，在动物的胃肠道中递送或增加一种或多种代谢物的方法包括检测样品中所述一种或多种代谢物中的至少一种的水平。在一些实施方案中，在动物的胃肠道中递送或增加一种或多种代谢物的方法包括检测样品中至少2、3、4、5、6、7、8、9或10种代谢物的水平。在一些实施方案中，代谢物的水平全部或部分通过LC或GC来测定。在一些实施方案中，代谢物的水平全部或部分通过质谱法来测定。在一些实施方案中，代谢物的水平全部或部分通过NMR来测定。

在某些实施方案中，检测动物的胃肠道中的隔室中代谢物的水平。因此，在某些实施方案中，比较同一隔室中所述一种或多种代谢物的水平。在某些实施方案中，比较不同隔室中所述一种或多种代谢物的水平。

在一些实施方案中，相对于被施用缺乏寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中一种或多种代谢物的水平，被施用包含寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中所述代谢物的水平更高。

例如，在一些具体实施方案中，相对于被施用缺乏寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中丁酸的水平，被施用包含寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中丁酸的水平更高。在一些具体实施方案中，相对于被施用缺乏寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中丙酸的水平，被施用包含寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中丙酸的水平更高。在一些具体实施方案中，相对于被施用缺乏寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中一种或多种精油的水平，被施用包含寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中一种或多种精油的水平更高。

在一些实施方案中，相对于被施用缺乏寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中2、3、4、5、6、7、8、9、10种或更多种代谢物的水平，被施用包含寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中所述代谢物的水平各自更高。

例如，在一些具体实施方案中，相对于被施用缺乏寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中丁酸、丙酸和一种或多种精油的水平，被施用包含寡糖制剂的营养组合物的动物的胃肠道中所述代谢物的水平各自更高。

在一些实施方案中，相对于在施用营养组合物之前一种或多种代谢物的水平，所描述的营养组合物的施用增加动物的胃肠道中的隔室中所述代谢物的水平。例如，在一些实施方案中，相对于在施用营养组合物之前丁酸、丙酸或一种或多种精油的水平，所描述的营养组合物的施用增加动物的胃肠道中的隔室中所述代谢物的水平。

在某些实施方案中，营养组合物对动物的胃肠道的隔室中所述一种或多种代谢物的水平的影响取决于寡糖制剂的组成和特征。例如，某些寡糖制剂增加动物的胃肠道的隔室中丁酸的水平。对于另一个例子，某些寡糖制剂增加动物的胃肠道的隔室中丁酸和丙酸的水平。对于又另一个例子，某些寡糖制剂增加动物的胃肠道的隔室中丁酸和一种或多种精油的水平，但是不增加丙酸的水平。

在一些实施方案中，所述一种或多种代谢物的水平的检测在施用营养组合物之后进行。例如，在一些实施方案中，根据动物的类型和年龄，从施用营养组合物开始至少10分钟、20分钟、30分钟、1小时、2小时、3小时、4小时、5小时、6小时、7小时、8小时、9小时、10小时、11小时、12小时、24小时、2天或3天检测所述一种或多种代谢物的水平。在某些实施方案中，从施用营养组合物开始至多10分钟、20分钟、30分钟、1小时、2小时、3小时、4小时、5小时、6小时、7小时、8小时、9小时、10小时、11小时、12小时、24小时、2天或3天检测所述一种或多种代谢物的水平。

VIII.增强动物性能的方法

A.饲料转化率

在一些实施方案中，本文所述的方法包括降低动物的饲料转化率。在一些实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饮食的动物相比，被施用如本文所述的合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的动物具有更低的饲料转化率。如本文所用，术语“饲料转化率(FCR)”是指饲料质量输入(例如由动物消耗的)与动物输出的比率，其中动物输出是目标动物产品。例如，乳畜的动物输出是乳，而为肉而饲养的动物的动物输出是体重。

在一些实施方案中，动物是为肉而饲养的，并且目标动物输出是体重。因此，在一些实施方案中，FCR是指所消耗的饲料的重量与在加工之前动物的最终体重的比率。在一些实施方案中，FCR是指所消耗的饲料的重量与在加工之前动物的最终体重增加的比率。应该理解，可以在不同的时间段内测量动物或动物群体的FCR。例如，在一些实施方案中，FCR是在动物的整个生命期内的FCR。在其他实施方案中，FCR是每日FCR、或每周FCR、或直到特定时刻(例如，特定的一天)为止测量的累积FCR。

本领域技术人员将认识到，性能目标最小FCR(最佳FCR)对于不同类型的动物可以是不同的，并且对于一种类型的动物的不同品种(例如，肉鸡的不同品种或猪的不同品种)可以是不同的。性能目标最小FCR也可以根据动物的年龄(例如，处于生长阶段的鸡或猪与肥育阶段相比)或动物的性别而是不同的。应该清楚，最佳FCR可以根据这些因素的任何组合而是不同的。

性能目标最小值通常是指在理想的生长条件、理想的动物健康状态和理想的饮食营养下，对于给定的动物和品种所观察到的最低饲料效率。本领域技术人员熟知的是，在常见的生长条件下，动物可能无法达到性能目标最小FCR。动物可能由于多种健康、营养、环境和/或群落影响而无法达到其性能目标最小FCR。动物可能当在受挑战的环境中饲养时无法达到其性能目标最小FCR，所述受挑战的环境可以包括例如环境病原应激、过度的环境温度(热应激)、过度的环境湿度、拥挤或其他群居相互作用效应(如获取饲料或饮用水困难)。在一些实施方案中，动物可能由于疾病或环境病原应激而无法达到其性能目标最小FCR。在其他实施方案中，动物可能由于过度的环境温度(热应激)或过度的环境湿度而无法达到其性能目标最小FCR。在又其他实施方案中，动物可能由于拥挤或其他群居相互作用效应(如获取饲料或饮用水困难)而无法达到其性能目标最小FCR。

在一些实施方案中，被提供不包括本文所述的合成寡糖制剂的饮食的动物具有的FCR比性能目标最小FCR高至少1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％或10％。在某些实施方案中，被提供不包括本文所述的合成寡糖制剂的饮食的动物具有的FCR比性能目标最小值高1％至10％、比性能目标最小值高2％至10％或比性能目标最小值高5％至10％。

在一些实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饮食的动物相比，被提供如本文所述的包含合成寡糖制剂的营养组合物、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的动物具有的FCR更接近于性能目标最小值。在特定实施方案中，被提供如本文所述的合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的动物具有的FCR比性能目标最小值高0至10％之间、比性能目标最小值高0至5％之间或比性能目标最小值高0至2％之间。

在一些实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饮食的动物相比，被提供如本文所述的合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的动物具有更低的饲料转化率。例如，在某些实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饮食的动物相比，被提供包含合成寡糖制剂的饮食的动物消耗更少的食物，但是具有相同的动物输出。在其他实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饮食的动物相比，被提供包含合成寡糖制剂的饮食的动物消耗相同量的食物，但是具有更高的动物输出。在又其他实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饮食的动物相比，被提供包含合成寡糖制剂的饮食的动物消耗更少的食物且具有更高的动物输出。

在一些实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饮食的动物相比，被提供如本文所述的合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的动物的FCR降低至少1％、至少2％、至少4％、至少6％、至少8％、至少10％、至少12％、1％至10％之间、4％至10％之间、1％至8％之间、4％至8％之间、1％至6％之间或4％至6％之间。在一些实施方案中，动物是家禽。在某些实施方案中，家禽的FCR在0至14日龄内、在15至28日龄内、在29至35日龄内、在35天内、在42天内、在6周内、在6.5周内、在0至35日龄内、在0至42日龄内、在0至6周龄内、在0至6.5周龄内、在15至35日龄内、在36至42日龄内、在15至39日龄内或在40至46日龄内降低。

在一个实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饮食的家禽相比，被提供如本文所述的合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽在35天内的FCR降低4％至6％之间。例如，在某个实施方案中，被提供如本文所述的描述合成寡糖制剂的营养组合物、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽在35天内的FCR是1.53，被提供没有合成寡糖制剂的饮食的家禽在35天内的FCR是1.61，并且与被提供没有合成寡糖制剂的饮食的家禽相比，被提供包含寡糖制剂的营养组合物、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽的FCR降低约5％。在一个实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饮食的家禽相比，被提供如本文所述的合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽在42天内、在6周内或在6.5周日内的FCR降低4％至6％之间。

在一些实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饮食的动物群体相比，被提供如本文所述的合成寡糖制剂、营养制剂、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的动物群体具有更低的FCR，其中将FCR针对动物群体中的死亡进行校正。

在某些实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂但包括一种或多种抗生素、一种或多种离子载体、可溶性玉米纤维、改性小麦淀粉或酵母甘露聚糖或其任何组合的饮食的动物相比，被提供合成寡糖制剂、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的动物具有更低的FCR。

本领域技术人员已知的是，当确定FCR时，可以将FCR针对死亡进行调整，以减少由于少量统计而引起的噪声。用于针对死亡调整FCR的方法是本领域技术人员熟知的。

在可以与任何前述实施方案组合的一些实施方案中，家禽是单独家禽，而在其他实施方案中，家禽是家禽群体。

在一些实施方案中，动物是家禽，并且动物饲料组合物是家禽饲料，其中与被饲喂没有合成寡糖制剂的饲料组合物的家禽相比，合成寡糖制剂、家禽营养组合物、家禽饲料预混合物或家禽饲料组合物饲料当饲喂给家禽时将饲料转化率(FCR)降低多达约10％或约5％、或者1％与10％之间、2％与10％之间、3％与10％之间、4％与10％之间、5％与10％之间、2％与5％之间、2％与6％之间、2％与7％之间、2％与8％之间、2％与9％之间或1％与5％之间。

在某些实施方案中，家禽患有疾病或障碍，或者在受挑战的环境中饲养，其中与被饲喂没有合成寡糖制剂的饲料组合物的家禽相比，合成寡糖制剂、家禽营养组合物、家禽饲料预混合物或家禽饲料组合物饲料当饲喂给家禽时将饲料转化率(FCR)降低多达约30％、约25％、约20％、约15％、约10％或约5％、或者1％与30％之间、5％与30％之间、10％与30％之间、5％与20％之间、10％与20％之间、1％与20％之间、1％与15％之间、1％与10％之间、2％与10％之间、3％与10％之间、4％与10％之间、5％与10％之间、2％与5％之间、2％与6％之间、2％与7％之间、2％与8％之间、2％与9％之间或1％与5％之间。

在一些实施方案中，动物是猪，并且动物饲料组合物是猪饲料，其中与被饲喂没有合成寡糖制剂的饲料组合物的猪相比，合成寡糖制剂、猪营养组合物、猪饲料预混合物或猪饲料组合物当饲喂给猪时将饲料转化率(FCR)降低多达约15％、约10％或约5％、或者1％与15％之间、2％与15％之间、3％与15％之间、4％与15％之间、5％与15％之间、10％与15％之间、1％与10％之间、2％与10％之间、3％与10％之间、4％与10％之间、5％与10％之间、2％与5％之间、2％与6％之间、2％与7％之间、2％与8％之间、2％与9％之间或1％与5％之间。

在某些实施方案中，猪患有疾病或障碍，或者在受挑战的环境中饲养，其中与被饲喂没有合成寡糖制剂的饲料组合物的猪相比，合成寡糖制剂、猪营养组合物、猪饲料预混合物或猪饲料组合物当饲喂给猪时将饲料转化率(FCR)降低多达约40％、约35％、约30％、约25％、约20％、约15％、约10％或约5％、或者1％与40％之间、5％与40％之间、10％与40％之间、15％与40％之间、20％与40％之间、25％与40％之间、30％与40％之间、1％与30％之间、5％与30％之间、10％与30％之间、5％与20％之间、10％与20％之间、1％与20％之间、1％与15％之间、1％与10％之间、2％与10％之间、3％与10％之间、4％与10％之间、5％与10％之间、2％与5％之间、2％与6％之间、2％与7％之间、2％与8％之间、2％与9％之间或1％与5％之间。

B.体重

在一些实施方案中，与未被饲喂本文所述的合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的对照动物相比，被饲喂所述寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的受试动物可能经历增重的增加。在某些实施方案中，受试动物和对照动物两者都消耗基于重量相同量的饲料，但是与被饲喂不包括合成寡糖制剂的饮食的对照动物相比，被提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的受试动物经历增重的增加。

动物的增重可以通过本领域已知的任何合适的方法来测定。例如，为了测定经受合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的饲喂方案的动物的增重，本领域技术人员可以在饲喂方案之前测量动物的质量，在给动物饲喂合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物之后测量动物的质量，并确定这两次测量之间的差异。

在一些实施方案中，增重可以是平均每日增重(也称为平均日增重(ADG))、平均每周增重(AWG)或最终体重增加(BWG)。

C.平均每日增重

在一些实施方案中，与被提供没有合成寡糖制剂的饲料的动物相比，向动物提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物导致增加的平均每日增重。在一些实施方案中，与被提供没有合成寡糖制剂的饲料的动物群体相比，向动物群体提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物导致增加的平均每日增重。

在一个实施方案中，动物的平均每日增重是在给定的时间段上求平均的单独动物每天增加的重量。在一些实施方案中，动物群体的平均每日增重是在群体上求平均的每只单独动物的平均每日增重；其中平均每日增重是在给定的时间段上求平均的单独动物每天增加的重量。在又其他实施方案中，动物群体的平均每日增重是在给定的时间段上求平均的除以群体中单独动物的数量的群体每天增加的总重量。应该理解，可以对每日增重或平均每日增重进一步求平均，例如以提供跨动物群体的平均每日增重。

在某些实施方案中，动物是家禽，并且被提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽具有至少20克/天、至少30克/天、至少40克/天、至少50克/天、至少60克/天、至少70克/天、至少80克/天、至少90克/天、20至100克/天之间、20至80克/天之间、30至50克/天之间、40至60克/天之间、50至70克/天之间或70至90克/天之间的平均每日增重。在一个实施方案中，动物是家禽，并且被提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽具有至少50克/天的平均每日增重。在某些实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饮食的家禽的平均每日增重相比，被提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽具有大至少1％、至少2％、至少3％、至少4％、至少5％、至少6％、至少8％、至少9％、至少10％、至少11％、至少12％、1％至10％之间、2％至8％之间或3％至5％之间的平均每日增重。

在某些实施方案中，动物是家禽，并且所述家禽在0至14日龄之间，并且平均每日增重是至少30克、至少40克或至少50克/天。

在其他实施方案中，动物是家禽，所述家禽在14至28日龄之间，并且平均每日增重是至少70克、至少80克或至少90克/天。

在仍其他实施方案中，动物是家禽，所述家禽在29至35日龄之间，并且平均每日增重是至少50克、至少60克或至少70克/天。

在可以与前述组合的一些实施方案中，动物是家禽，并且动物饲料组合物是家禽饲料，其中与被饲喂没有合成寡糖制剂的饲料组合物的家禽相比，合成寡糖制剂、家禽营养组合物、家禽饲料预混合物或家禽饲料组合物当饲喂给家禽时将家禽的平均日增重增加多达约10％或约5％、或者1％与10％之间、2％与10％之间、3％与10％之间、4％与10％之间、5％与10％之间、2％与5％之间、2％与6％之间、2％与7％之间、2％与8％之间、2％与9％之间或1％与5％之间。

在某些实施方案中，家禽患有疾病或障碍，或者在受挑战的环境中饲养，其中与被饲喂没有合成寡糖制剂的饲料组合物的家禽相比，合成寡糖制剂、家禽营养组合物、家禽饲料预混合物或家禽饲料组合物当饲喂给家禽时将家禽的平均日增重增加多达约30％、约25％、约20％、约15％、约10％或约5％、或者1％与30％之间、5％与30％之间、10％与30％之间、5％与20％之间、10％与20％之间、1％与20％之间、1％与15％之间、1％与10％之间、2％与10％之间、3％与10％之间、4％与10％之间、5％与10％之间、2％与5％之间、2％与6％之间、2％与7％之间、2％与8％之间、2％与9％之间或1％与5％之间。

在可以与前述组合的一些实施方案中，动物是猪，并且动物饲料组合物是猪饲料，其中与被饲喂没有合成寡糖制剂的饲料组合物的猪相比，合成寡糖制剂、猪营养制剂、猪饲料预混合物或猪饲料组合物当饲喂给猪时将猪的平均日增重增加多达约15％、约10％或约5％、或者1％与15％之间、2％与15％之间、3％与15％之间、4％与15％之间、5％与15％之间、10％与15％之间、1％与10％之间、2％与10％之间、3％与10％之间、4％与10％之间、5％与10％之间、2％与5％之间、2％与6％之间、2％与7％之间、2％与8％之间、2％与9％之间或1％与5％之间。

在某些实施方案中，猪患有疾病或障碍，或者在受挑战的环境中饲养，其中与被饲喂没有合成寡糖制剂的饲料组合物的猪相比，寡糖制剂、猪营养组合物、猪饲料预混合物或猪饲料组合物当饲喂给猪时将猪的平均日增重增加多达约40％、约35％、约30％、约25％、约20％、约15％、约10％或约5％、或者1％与40％之间、5％与40％之间、10％与40％之间、15％与40％之间、20％与40％之间、25％与40％之间、30％与40％之间、1％与30％之间、5％与30％之间、10％与30％之间、5％与20％之间、10％与20％之间、1％与20％之间、1％与15％之间、1％与10％之间、2％与10％之间、3％与10％之间、4％与10％之间、5％与10％之间、2％与5％之间、2％与6％之间、2％与7％之间、2％与8％之间、2％与9％之间或1％与5％之间。

在某些实施方案中，动物是猪，并且与被提供不包括合成寡糖制剂的饮食的猪的平均每日增重相比，被提供合成寡糖制剂、猪营养制剂、猪饲料预混合物或猪饲料组合物的猪具有大至少1％、至少2％、至少3％、至少4％、至少5％、至少6％、至少8％、至少9％、至少10％、至少11％、至少12％、1％至10％之间、2％至8％之间或3％至5％之间的平均每日增重。

D.平均每周增重

在一些实施方案中，与被提供没有合成寡糖制剂的饲料的动物相比，向动物提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物导致增加的平均每周增重。在一些实施方案中，与被提供没有合成寡糖制剂的饲料的动物群体相比，向动物群体提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物导致增加的平均每周增重。

在一个实施方案中，动物的平均每周增重是在给定的时间段上求平均的单独动物每周增加的重量。在一些实施方案中，动物群体的平均每周增重是在群体上求平均的每只单独动物的平均每周增重；其中平均每周增重是在给定的时间段上求平均的单独动物每周增加的重量。在又其他实施方案中，动物群体的平均每周增重是在给定的时间段上求平均的除以群体中单独动物的数量的群体每周增加的总重量。应该理解，可以对平均每周增重进一步求平均，例如以提供跨动物群体的平均每周增重。

在某些实施方案中，动物是家禽，并且被提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽具有至少100克/周、至少200克/周、至少300克/周、至少400克/周、至少500克/周、至少600克/周、至少700克/周、至少800克/周、100至800克/周之间、100至400克/周之间、300至600克/周之间、500至800克/周之间或350至550克/周之间的平均每周增重。在一个实施方案中，被提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽具有至少400克/周的平均每周增重。在某些实施方案中，与被提供不包括寡糖制剂的饮食的家禽的平均每周增重相比，被提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽具有大至少1％、至少2％、至少3％、至少4％、至少5％、至少6％、至少8％、至少9％、至少10％、至少11％、至少12％、1％至10％之间、2％至8％之间或3％至5％之间的平均每周增重。

在某些实施方案中，动物是猪，并且与被提供不包括合成寡糖制剂的饮食的猪的平均每周增重相比，被提供合成寡糖制剂、猪营养组合物、猪饲料预混合物或猪饲料组合物的猪具有大至少1％、至少2％、至少3％、至少4％、至少5％、至少6％、至少8％、至少9％、至少10％、至少11％、至少12％、1％至10％之间、2％至8％之间或3％至5％之间的平均每周增重。

E.最终体重增加

在一些实施方案中，与被提供没有合成寡糖制剂的饲料的动物相比，向动物提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物导致增加的最终体重增加。在一些实施方案中，与被提供没有合成寡糖制剂的饲料的动物群体相比，向动物群体提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物导致增加的平均最终体重增加。

在一些实施方案中，与被提供没有合成寡糖制剂的饲料的动物或动物群体相比，向动物或动物群体提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物导致更接近于性能目标最大值的最终体重增加或平均最终体重增加。性能目标最大值通常是指在理想的生长条件、理想的动物健康状态和理想的饮食营养下，对于给定类型的动物和品种所观察到的最高实际体重增加。

在一个实施方案中，最终体重增加是单独动物在一段时间内增加的重量量。例如，在一个实施方案中，总体重增加是单独动物从0日龄直到在加工动物之前获取的最终重量、或在加工动物的当天获取的最终重量增加的重量量。例如，在一个实施方案中，动物的第0天至第28天的总体重增加是单独动物从0日龄直到28日龄增加的重量量。

在另一个实施方案中，平均总体重增加是跨动物群体求平均的单独动物在一段时间内增加的重量量。例如，在一个实施方案中，平均总体重增加是跨动物求平均的单独动物从0日龄直到在加工动物之前获取的最终重量、或在加工动物的当天获取的最终重量增加的重量量。在又另一个实施方案中，平均总体重增加是除以群体中单独动物的数量的动物群体在一段时间内增加的重量量。例如，在一个实施方案中，平均总体重增加是除以群体中单独动物的数量的动物群体从0日龄直到在加工动物群体之前获取的最终重量、或在加工动物的当天获取的最终重量增加的重量量。

应该理解，可以对总体重增加和平均总体重增加的值进一步求平均。例如，可以对相同类型动物的不同群体的平均总体重增加求平均，以获得跨群体的平均总体重增加。

在某些实施方案中，动物是家禽，并且被提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽具有至少3kg、至少2.5kg、至少2kg、至少1.5kg、至少1kg、1至3kg之间或1.5至2.5kg之间的最终体重增加。在一个实施方案中，被提供合成寡糖制剂、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽具有至少2kg的最终体重增加。在某些实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饮食的家禽的最终体重增加相比，被提供合成寡糖制剂、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽具有大至少1％、至少2％、至少3％、至少4％、至少5％、至少6％、至少8％、至少9％、至少10％、至少11％、至少12％、1％至10％之间、2％至8％之间或3％至5％之间的最终体重增加。在某些实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饮食的家禽的最终体重增加相比，被提供合成寡糖制剂、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽具有大至少0.01kg、至少0.02kg、至少0.03kg、至少0.04kg、至少0.05kg、至少0.06kg、至少0.07kg、至少0.08kg、至少0.09kg、至少0.1kg、0.01至0.1kg之间、0.03至0.07kg之间或0.04至0.06kg之间的最终体重增加。

在某些实施方案中，动物是家禽，并且被提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽具有至少3kg、至少2.5kg、至少2kg、至少1.5kg、至少1kg、1至3kg之间或1.5至2.5kg之间的平均最终体重增加。在一个实施方案中，被提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽具有至少2kg的平均最终体重增加。在某些实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饮食的家禽的平均最终体重增加相比，被提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽具有大至少1％、至少2％、至少3％、至少4％、至少5％、至少6％、至少8％、至少9％、至少10％、至少11％、至少12％、1％至10％之间、2％至8％之间或3％至5％之间的平均最终体重增加。在某些实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饮食的家禽的平均最终体重增加相比，被提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽具有大至少0.01kg、至少0.02kg、至少0.03kg、至少0.04kg、至少0.05kg、至少0.06kg、至少0.07kg、至少0.08kg、至少0.09kg、至少0.1kg、0.01至0.1kg之间、0.03至0.07kg之间或0.04至0.06kg之间的平均最终体重增加。

在一些实施方案中，动物是家禽，并且所述家禽在0至14日龄之间、在15至28日龄之间、在29至35日龄之间、在0至42日龄之间、在0至6周龄之间或在0至6.5周龄之间。在一些实施方案中，开食阶段是0至14日龄，生长阶段是15至28日龄，并且肥育阶段是29至35日龄。在其他实施方案中，开食阶段是0至14日龄，生长阶段是15至35日龄，并且肥育阶段是36至42日龄。在又其他实施方案中，开食阶段是0至14日龄，生长阶段是15至39日龄，并且肥育阶段是40至46日龄。应该理解，家禽的开食阶段、生长阶段和肥育阶段的长度可以根据家禽或家禽产品的预期用途而改变。例如，在一些实施方案中，如果家禽的预期用途是作为肉鸡，则开食阶段、生长阶段和肥育阶段的长度与用于托盘包装鸡肉的加工相比可以是不同的。

在某些实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饮食的猪的最终体重增加相比，被提供合成寡糖制剂、猪营养组合物、猪饲料预混合物或猪饲料组合物的猪具有大至少1％、至少2％、至少3％、至少4％、至少5％、至少6％、至少8％、至少9％、至少10％、至少11％、至少12％、1％至10％之间、2％至8％之间或3％至5％之间的最终体重增加。

在某些实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饮食的猪的平均最终体重增加相比，被提供合成寡糖制剂、猪营养组合物、猪饲料预混合物或猪饲料组合物的猪具有大至少1％、至少2％、至少3％、至少4％、至少5％、至少6％、至少8％、至少9％、至少10％、至少11％、至少12％、1％至10％之间、2％至8％之间或3％至5％之间的平均最终体重增加。

在可以与任何前述实施方案组合的一些实施方案中，猪是单独猪，而在其他实施方案中，猪是猪群体。

F.动物产品产量

在某些实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饲料的动物相比，向动物提供如本文所述的合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物导致增加的动物产品产量。在一些实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饲料的动物相比，被提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的动物产生多至少1％、至少2％、至少3％、至少4％、至少5％、至少6％、至少7％、至少8％、至少9％、至少10％、1％至10％之间、4％至10％之间、6％至10％之间或2％至8％之间的动物产品。例如，在一些实施方案中，动物产品是动物的肉，并且与未被提供如本文所述的合成寡糖制剂的动物相比，被提供所述寡糖制剂的动物产生更大量的肉。在一些实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饲料的动物群体相比，向动物群体提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物导致增加的平均动物产品产量。在一些实施方案中，平均动物产品产量是跨动物群体求平均的从每只单独动物产生的动物产品量。

在一些实施方案中，动物产品是动物的肉(例如，其可以出售给消费者、被加工以产生食物产品或由人食用)。在某些实施方案中，动物是家禽，并且动物产品是家禽去脏屠体、来自家禽去脏屠体的腿肉、来自家禽去脏屠体的胸肉、来自家禽去脏屠体的鼓槌肉、来自家禽去脏屠体的脂肪、来自家禽去骨屠体的胸肉或来自家禽去骨屠体的腿肉。在其他实施方案中，动物是家禽，并且动物产品是白肉、胸肉里脊和胸肉嫩肉。在另一个实施方案中，动物是家禽，并且产品是托盘包装鸡肉。在又另一个实施方案中，动物是家禽，并且产品是无内脏整鸟(WOG)。

在一些实施方案中，动物产品产量是从单独动物获得的产量。在一些实施方案中，平均动物产品产量是跨群体求平均的从动物群体中每只单独动物获得的产量。在又另一个实施方案中，平均动物产品产量是除以动物群体中单独动物的数量的从动物群体产生的动物产品总产量。

在一些实施方案中，动物是家禽，对于被提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽，来自家禽去脏屠体的腿肉产量是活重的至少6％、至少8％、至少10％、至少12％、6％至12％之间、8％至12％之间、10％至18％之间、12％至16％之间或12％至14％之间。在某些实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饮食的家禽相比，来自被提供如本文所述的合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽的家禽去脏屠体的腿肉产量大至少1％、至少2％、至少3％、至少4％、至少5％、至少6％、至少8％、至少9％、至少10％、至少11％、至少12％、1％至10％之间、2％至8％之间或3％至5％之间。

在一些实施方案中，动物是家禽，并且对于被提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽，来自家禽去脏屠体的平均腿肉产量是活重的至少6％、至少8％、至少10％、至少12％、6％至12％之间、8％至12％之间、10％至18％之间、12％至16％之间或12％至14％之间。在某些实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饮食的家禽相比，来自被提供如本文所述的合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽的家禽去脏屠体的平均腿肉产量大至少1％、至少2％、至少3％、至少4％、至少5％、至少6％、至少8％、至少9％、至少10％、至少11％、至少12％、1％至10％之间、2％至8％之间或3％至5％之间。

在一些实施方案中，动物是家禽，并且对于被提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽，来自家禽去脏屠体的胸肉产量是活重的至少10％、至少12％、至少15％、至少16％、至少18％、至少20％、至少22％、至少24％、至少28％、10％至18％之间、12％至16％之间、18％至29％之间、20％至27％之间或20％至25％之间。在某些实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饮食的家禽相比，来自被提供如本文所述的合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽的家禽去脏屠体的胸肉产量大至少1％、至少2％、至少3％、至少4％、至少5％、至少6％、至少8％、至少9％、至少10％、至少11％、至少12％、1％至10％之间、2％至8％之间或3％至5％之间。

在一些实施方案中，动物是家禽，并且对于被提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽，来自家禽去脏屠体的平均胸肉产量是活重的至少10％、至少12％、至少15％、至少16％、至少18％、至少20％、至少22％、至少24％、至少28％、10％至18％之间、12％至16％之间、18％至29％之间、20％至27％之间或20％至25％之间。在某些实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饮食的家禽相比，来自被提供如本文所述的合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽的家禽去脏屠体的平均胸肉产量大至少1％、至少2％、至少3％、至少4％、至少5％、至少6％、至少8％、至少9％、至少10％、至少11％、至少12％、1％至10％之间、2％至8％之间或3％至5％之间。

在一些实施方案中，动物是家禽，并且对于被提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽，来自家禽去脏屠体的鼓槌肉产量是活重的至少5％、至少7％、至少8％、至少9％、至少10％、至少11％、至少12％、5％至14％之间、7％至10％之间、7％至15％之间、9％至13％之间或9％至11％之间。在某些实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饮食的家禽相比，来自被提供如本文所述的合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽的家禽去脏屠体的鼓槌肉产量大至少1％、至少2％、至少3％、至少4％、至少5％、至少6％、至少8％、至少9％、至少10％、至少11％、至少12％、1％至10％之间、2％至8％之间或3％至5％之间。

在一些实施方案中，动物是家禽，并且对于被提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽，来自家禽去脏屠体的平均鼓槌肉产量是活重的至少5％、至少7％、至少8％、至少9％、至少10％、至少11％、至少12％、5％至14％之间、7％至10％之间、7％至15％之间、9％至13％之间或9％至11％之间。在某些实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饮食的家禽相比，来自被提供如本文所述的合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽的家禽去脏屠体的平均鼓槌肉产量大至少1％、至少2％、至少3％、至少4％、至少5％、至少6％、至少8％、至少9％、至少10％、至少11％、至少12％、1％至10％之间、2％至8％之间或3％至5％之间。

在一些实施方案中，动物是家禽，并且对于被提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽，来自家禽去骨屠体的胸肉产量是活重的至少14％、至少16％、至少18％、至少20％、至少22％、至少24％、14％至16％之间、18％至30％之间、20％至28％之间或20％至26％之间。在某些实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饮食的家禽相比，来自被提供如本文所述的寡糖制剂、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽的家禽去骨屠体的胸肉产量大至少1％、至少2％、至少3％、至少4％、至少5％、至少6％、至少8％、至少9％、至少10％、至少11％、至少12％、1％至10％之间、2％至8％之间或3％至5％之间。

在一些实施方案中，动物是家禽，并且对于被提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽，来自家禽去骨屠体的平均胸肉产量是活重的至少14％、至少16％、至少18％、至少20％、至少22％、至少24％、14％至16％之间、18％至30％之间、20％至28％之间或20％至26％之间。在某些实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饮食的家禽相比，来自被提供如本文所述的合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽的家禽去骨屠体的平均胸肉产量大至少1％、至少2％、至少3％、至少4％、至少5％、至少6％、至少8％、至少9％、至少10％、至少11％、至少12％、1％至10％之间、2％至8％之间或3％至5％之间。

在一些实施方案中，动物是家禽，并且对于被提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽，来自家禽去骨屠体的腿肉产量是活重的至少6％、至少8％、至少10％、至少12％、至少14％、至少16％、至少18％、6％至18％之间、8％至16％之间、12％至21％之间、14％至19％之间或14％至17％之间。在某些实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饮食的家禽相比，来自被提供如本文所述的合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽的家禽去骨屠体的腿肉产量大至少1％、至少2％、至少3％、至少4％、至少5％、至少6％、至少8％、至少9％、至少10％、至少11％、至少12％、1％至10％之间、2％至8％之间或3％至5％之间。

在一些实施方案中，动物是家禽，并且对于被提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽，来自家禽去骨屠体的平均腿肉产量是活重的至少6％、至少8％、至少10％、至少12％、至少14％、至少16％、至少18％、6％至18％之间、8％至16％之间、12％至21％之间、14％至19％之间或14％至17％之间。在某些实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饮食的家禽相比，来自被提供如本文所述的寡糖制剂、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽的家禽去骨屠体的平均腿肉产量大至少1％、至少2％、至少3％、至少4％、至少5％、至少6％、至少8％、至少9％、至少10％、至少11％、至少12％、1％至10％之间、2％至8％之间或3％至5％之间。

在一些实施方案中，动物是家禽，并且对于被提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽，来自家禽去脏屠体的脂肪产量是活重的至少0.1％、至少0.2％、至少0.3％、至少0.4％、至少0.5％、至少0.6％、至少0.7％、至少0.8％、至少0.9％、至少1％、至少1.2％、至少1.4％、至少1.6％、0.1％至2％之间、0.2％至1％之间、0.5％至2％之间或0.3％至0.7％之间。在某些实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饮食的家禽相比，来自被提供如本文所述的合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽的家禽去脏屠体的脂肪产量大至少1％、至少2％、至少3％、至少4％、至少5％、至少6％、至少8％、至少9％、至少10％、至少11％、至少12％、1％至10％之间、2％至8％之间或3％至5％之间。

在一些实施方案中，动物是家禽，并且对于被提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽，来自家禽去脏屠体的平均脂肪产量是活重的至少0.1％、至少0.2％、至少0.3％、至少0.4％、至少0.5％、至少0.6％、至少0.7％、至少0.8％、至少0.9％、至少1％、至少1.2％、至少1.4％、至少1.6％、0.1％至2％之间、0.2％至1％之间、0.5％至2％之间或0.3％至0.7％之间。在某些实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饮食的家禽相比，来自被提供如本文所述的合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽的家禽去脏屠体的平均脂肪产量大至少1％、至少2％、至少3％、至少4％、至少5％、至少6％、至少8％、至少9％、至少10％、至少11％、至少12％、1％至10％之间、2％至8％之间或3％至5％之间。

在一些实施方案中，动物是家禽，并且对于被提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽，家禽去脏屠体产量是活重的至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、50％至95％之间、60％至85％之间或65％至75％之间。在某些实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饮食的家禽相比，来自被提供如本文所述的合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽的家禽去脏屠体产量大至少1％、至少2％、至少3％、至少4％、至少5％、至少6％、至少8％、至少9％、至少10％、至少11％、至少12％、1％至10％之间、2％至8％之间或3％至5％之间。

在一些实施方案中，动物是家禽，并且对于被提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽，平均家禽去脏屠体产量是活重的至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、50％至95％之间、60％至85％之间或65％至75％之间。在某些实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饮食的家禽相比，来自被提供如本文所述的合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的家禽的平均家禽去脏屠体产量大至少1％、至少2％、至少3％、至少4％、至少5％、至少6％、至少8％、至少9％、至少10％、至少11％、至少12％、1％至10％之间、2％至8％之间或3％至5％之间。

用于对家禽屠体进行去骨的方法是家禽加工领域的技术人员熟知的。应该理解，从家禽产生的肉可以例如作为回收肉的质量与在加工之前鸟的最终重量的比率来测量。在一些实施方案中，动物是家禽，并且所述家禽是至少35天大、至少42天大、至少6周大、至少6.5周大，之后加工所述家禽以产生家禽去脏屠体、家禽去骨屠体、白肉、胸肉里脊、和胸肉嫩肉、托盘包装鸡肉、无内脏整鸟(WOG)或如上所述的肉。

在其他实施方案中，动物是家禽，并且动物产品是蛋。在一些实施方案中，动物是猪，并且猪产品是猪的肉(例如，其可以出售给消费者、被加工以产生食物产品或由人食用)。在一些实施方案中，猪产品产量是从单独猪获得的产量。在一些实施方案中，平均猪产品产量是跨群体求平均的从猪群体中每头单独猪获得的产量。在又另一个实施方案中，平均猪产品产量是除以猪群体中单独猪的数量的从猪群体产生的猪产品总产量。

在某些实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂但包括一种或多种抗生素、一种或多种离子载体、可溶性玉米纤维、改性小麦淀粉或酵母甘露聚糖或其任何组合的饮食的动物或动物群体相比，被提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物的动物或动物群体具有更高的平均每日增重、更高的平均每周增重、更高的最终体重增加、更高的平均最终体重增加或增加的平均动物产品产量或其任何组合。

本领域技术人员将认识到，最大理论增重对于不同类型的动物可以是不同的，并且对于相同类型动物的不同品种(例如，不同类型的肉鸡或不同类型的猪)可以是不同的。

在一些实施方案中，动物是家禽。在可以与任何前述实施方案组合的一些实施方案中，家禽是单独家禽，而在其他实施方案中，家禽是家禽群体。在其他实施方案中，动物是猪。在可以与任何前述实施方案组合的一些实施方案中，猪是单独猪，而在其他实施方案中，猪是猪群体。

G.饲料摄取量

在某些实施方案中，与被提供不包括合成寡糖制剂的饲料的动物相比，向动物提供如本文所述的合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物导致增加的平均每日饲料摄取量。

平均每日饲料摄取量(ADFI)是指动物在指定时间段内消耗的平均饲料质量。在某些实施方案中，平均每日饲料摄取量通过以下方式来测量：将已知质量的饲料分配给一组固定数量的动物，从而允许组中的动物在指定的天数内自由(随意)消耗所分配的饲料，在所述时间段结束时称量未消耗的饲料的质量，并将平均每日饲料摄取量(ADFI)计算为除以组中动物的数量并且除以所述时间段内的天数的分配的饲料质量减去剩余饲料质量之间的差。在其他实施方案中，可以使用本领域技术人员已知的方法，将平均每日饲料摄取量针对死亡或从组中剔除的任何动物进行校正。

在一些实施方案中，动物是家禽，并且动物饲料组合物是家禽饲料，其中与被饲喂没有合成寡糖制剂的饲料组合物的家禽相比，合成寡糖制剂、家禽饲料预混合物或家禽饲料组合物饲料当饲喂给家禽时将平均每日饲料摄取量增加多达约10％或约5％、或者1％与10％之间、2％与10％之间、3％与10％之间、4％与10％之间、5％与10％之间、2％与5％之间、2％与6％之间、2％与7％之间、2％与8％之间、2％与9％之间或1％与5％之间。

在某些实施方案中，家禽患有疾病或者在受挑战的环境中饲养，其中与被饲喂没有合成寡糖制剂的饲料组合物的家禽相比，合成寡糖制剂、家禽营养组合物、家禽饲料预混合物或家禽饲料组合物当饲喂给家禽时将平均每日饲料摄取量增加多达约30％、约25％、约20％、约15％、约10％或约5％、或者1％与30％之间、5％与30％之间、10％与30％之间、5％与20％之间、10％与20％之间、1％与20％之间、1％与15％之间、1％与10％之间、2％与10％之间、3％与10％之间、4％与10％之间、5％与10％之间、2％与5％之间、2％与6％之间、2％与7％之间、2％与8％之间、2％与9％之间或1％与5％之间。

在可以与前述组合的一些实施方案中，动物是猪，并且动物饲料组合物是猪饲料，其中与被饲喂没有合成寡糖制剂的饲料组合物的猪相比，寡糖制剂、猪营养组合物、猪饲料预混合物或猪饲料组合物当饲喂给猪时将平均每日饲料摄取量增加多达约15％、约10％或约5％、或者1％与15％之间、2％与15％之间、3％与15％之间、4％与15％之间、5％与15％之间、10％与15％之间、1％与10％之间、2％与10％之间、3％与10％之间、4％与10％之间、5％与10％之间、2％与5％之间、2％与6％之间、2％与7％之间、2％与8％之间、2％与9％之间或1％与5％之间。

在某些实施方案中，猪患有疾病或者在受挑战的环境中饲养，其中与被饲喂没有合成寡糖制剂的饲料组合物的猪相比，合成寡糖制剂、猪营养组合物、猪饲料预混合物或猪饲料组合物当饲喂给猪时将平均每日饲料摄取量增加多达约40％、约35％、约30％、约25％、约20％、约15％、约10％或约5％、或者1％与40％之间、5％与40％之间、10％与40％之间、15％与40％之间、20％与40％之间、25％与40％之间、30％与40％之间、1％与30％之间、5％与30％之间、10％与30％之间、5％与20％之间、10％与20％之间、1％与20％之间、1％与15％之间、1％与10％之间、2％与10％之间、3％与10％之间、4％与10％之间、5％与10％之间、2％与5％之间、2％与6％之间、2％与7％之间、2％与8％之间、2％与9％之间或1％与5％之间。

本文所述的增强动物或动物群体的生长的方法包括向所述动物或动物群体提供寡糖制剂、动物饲料预混合物或动物饲料。可以使用增强动物或动物群体的生长的任何合适的饲喂时间表将寡糖制剂、动物饲料预混合物或动物饲料以任何合适的形式提供给任何合适类型的动物。

H.动物产品品质

在一些实施方案中，动物产品(如动物肉)具有提高的品质。本文所述的动物产品包括非肉产品，如乳和蛋。动物肉的品质包括例如颜色、完整性、质地、风味、口感、香味和嫩度。熟练技术人员清楚的是，动物肉的品质将取决于动物的类型。可以使用熟练技术人员已知的标准测定来评估动物肉的品质，包括例如颜色、风味、嫩度和香味。本文所述的动物肉可以使用受过训练的人小组成员进行评估。评价可以包括对产品的观察、感觉、咀嚼和品尝，以判断产品的外观、颜色、完整性、质地、风味和口感等。可以在红光下或在白光下为小组成员上样品。可以为样品分配随机的三位数，并在投票位置旋转以防止偏见。感官判断可以针对“接受性”或“喜欢程度”进行标度，或使用特殊术语。例如，可以使用字母标度(A用于优异；B用于良好；C用于较差)或数字标度(1＝不喜欢；2＝一般；3＝良好；4＝非常好；5＝优异)。可以使用量表对动物肉的总体可接受性或品质或者特定品质属性(如质地和风味)进行评定。可以鼓励小组成员在样品之间用水漱口，并给予小组成员对每个样品发表评论的机会。

I.动物粪便品质

肠道微生物组代谢物影响动物的粪便品质。例如，挥发性胺、硫醇和硫化物在建立与例如动物褥草(包括家畜和伴侣动物)相关联的气味中起重要作用。本文所述的方法包括改善动物粪便的品质的方法。品质属性包括例如气味、稠度和病原性微生物的水平。粪便品质中的每一种可以通过熟练技术人员已知的标准方法来评估。

可以使用标准方法和可商购获得的试剂盒评估粪便样品中病原性微生物的水平。在一些实施方案中，从样品中离析总DNA或总RNA。可以使用熟练技术人员已知并且包括可商购获得的试剂盒的标准方法根据制造商的说明从样品中提取基因组DNA，所述试剂盒如Mo Bio

DNA离析试剂盒(Mo Bio Laboratories，加利福尼亚州卡尔斯巴德)或QIAamp DNA粪便微型试剂盒(QIAGEN，加利福尼亚州巴伦西亚)。可以使用熟练技术人员已知的标准测定从样品中提取RNA，所述标准测定包括可商购获得的试剂盒，如RNeasy Power微生物组试剂盒(QIAGEN，加利福尼亚州巴伦西亚)和RiboPure细菌RNA纯化试剂盒(Life Technologies，加利福尼亚州卡尔斯巴德)。离析细菌RNA的另一种方法可能涉及通过除去tRNA来富集经纯化的细菌RNA样品中的mRNA。可替代地，可以将RNA转化为cDNA，其可以用于使用标准方法如Nextera XT样品制备试剂盒(Illumina，加利福尼亚州圣地亚哥)生成测序文库。

样品中病原体的相对丰度的鉴定和测定可以通过熟练技术人员已知的标准分子生物学方法来测定，所述标准分子生物学方法包括例如遗传分析(例如DNA测序(例如，全基因组测序、全基因组鸟枪法测序(WSG))、RNA测序、PCR、定量PCR(qPCR))、血清学和抗原分析、显微镜检查、代谢物鉴定、革兰氏染色、流式细胞术、免疫学技术以及基于培养的方法(如计数菌落形成单位)。

J.足跖疾病

动物褥草中的某些代谢物(例如，氨)导致水分增加和褥草pH值升高，这两者都促成足跖疾病(例如，足跖皮炎)的发展。肠道微生物组的氨产生促成褥草中存在的氨水平。在商业动物生产中连续群或饲群的放置之间的持续时间通常取决于设施必须通风以清除褥草中的氨的时间量。

本文所述的方法包括降低动物的胃肠道中氨的水平和降低褥草中氨的水平以预防足跖疾病的方法。本文所述的方法还包括减少肠道微生物区系的氨产生以减少群或饲群之间的停工时间，从而改善生产力和生产经济性的方法。足跖疾病包括例如足跖皮炎。

IX.动物

A.动物的类型

可以将合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物提供给任何合适的动物。在一些实施方案中，动物是单胃的。通常理解，单胃动物具有单室胃。在其他实施方案中，动物是反刍动物。通常理解，反刍动物具有多室胃。在一些实施方案中，动物是处于反刍前期的反刍动物。处于反刍前期的此类反刍动物的例子包括保育小牛。

在一些实施方案中，动物是鱼(例如鲑鱼、罗非鱼、热带鱼)、家禽(例如鸡、火鸡)、海鲜(例如虾)、绵羊、母牛、家牛、水牛、野牛、猪(例如保育猪、生长猪/肥育猪)、猫、狗、兔、山羊、豚鼠、驴、骆驼、马、鸽子、雪貂、沙鼠、仓鼠、小鼠、大鼠、鸟或人。

在一些实施方案中，动物是家畜。在一些实施方案中，动物是伴侣动物。在一些实施方案中，动物是家禽。家禽的例子包括鸡、鸭、火鸡、鹅、鹌鹑或童子鸡(Cornish gamehen)。在一种变型中，动物是鸡。在一些实施方案中，家禽是蛋鸡、肉鸡或火鸡。

在其他实施方案中，动物是哺乳动物，包括例如母牛、猪、山羊、绵羊、鹿、野牛、兔、羊驼、美洲驼、骡、马、驯鹿、水牛、牦牛、豚鼠、大鼠、小鼠、羊驼、狗或猫。在一种变型中，动物是母牛。在另一种变型中，动物是猪。

动物饲料组合物也可以用于水产养殖中。在一些实施方案中，动物是水生动物。水生动物的例子可以包括鳟鱼、鲑鱼、鲈鱼、罗非鱼、虾、牡蛎、贻贝、蛤蜊、龙虾或小龙虾。在一种变型中，动物是鱼。

B.动物消化系统

可以将合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物提供给具有任何类型的消化系统(如单胃、禽类、反刍动物和伪反刍动物消化系统)的动物。

在一些实施方案中，动物具有单胃消化系统。在一些实施方案中，单胃动物的胃肠道中的隔室包括食道、胃、小肠、大肠、肛门、直肠或其任何组合。在一些实施方案中，单胃动物的胃肠道中的隔室包括上消化道、下消化道或两者。

在一些实施方案中，单胃动物的胃肠道中的隔室包括下消化道。在一些实施方案中，单胃动物的胃肠道中的隔室包括小肠、大肠或两者。在一些实施方案中，单胃动物的胃肠道中的隔室包括全部或部分的小肠。在一些实施方案中，单胃动物的胃肠道中的隔室包括全部或部分的大肠。在一些实施方案中，单胃动物的胃肠道中的隔室包括胃下游的胃肠道。

在一些实施方案中，动物具有禽类消化系统。在一些实施方案中，禽类动物的胃肠道中的隔室包括食道、嗉囊、前胃、砂囊、小肠、大肠、泄殖腔或其任何组合。在一些实施方案中，禽类动物的胃肠道中的隔室包括上消化道、下消化道或两者。

在一些实施方案中，禽类动物的胃肠道中的隔室包括下消化道。在一些实施方案中，禽类动物的胃肠道中的隔室包括前胃、砂囊、小肠、大肠或其任何组合。在一些实施方案中，禽类动物的胃肠道中的隔室包括砂囊、小肠、大肠或其任何组合。

在一些实施方案中，禽类动物的胃肠道中的隔室包括全部或部分的小肠。在一些实施方案中，禽类动物的胃肠道中的隔室包括全部或部分的大肠。在一些实施方案中，单胃动物的胃肠道中的隔室包括前胃下游的胃肠道。

在一些实施方案中，动物具有反刍动物消化系统。在一些实施方案中，反刍动物的胃肠道中的隔室包括食道、瘤胃、网胃、重瓣胃、皱胃、小肠、大肠或其任何组合。在一些实施方案中，反刍动物的胃肠道中的隔室包括上消化道、下消化道或两者。

在一些实施方案中，反刍动物的胃肠道中的隔室包括下消化道。在一些实施方案中，反刍动物的胃肠道中的隔室包括瘤胃、网胃、重瓣胃、皱胃、小肠、大肠或其任何组合。在一些实施方案中，反刍动物的胃肠道中的隔室包括瘤胃、网胃、重瓣胃、皱胃、小肠或其任何组合。

在一些实施方案中，反刍动物的胃肠道中的隔室包括全部或部分的瘤胃。在一些实施方案中，反刍动物的胃肠道中的隔室包括全部或部分的网胃。在一些实施方案中，反刍动物的胃肠道中的隔室包括全部或部分的重瓣胃。在一些实施方案中，反刍动物的胃肠道中的隔室包括全部或部分的皱胃。在一些实施方案中，反刍动物的胃肠道中的隔室包括全部或部分的小肠。

在一些实施方案中，动物具有伪反刍动物消化系统。在一些实施方案中，伪反刍动物的胃肠道中的隔室包括食道、胃、小肠、大肠、盲肠、直肠、肛门或其任何组合。在一些实施方案中，伪反刍动物的胃肠道中的隔室包括上消化道、下消化道或两者。

在一些实施方案中，伪反刍动物的胃肠道中的隔室包括下消化道。在一些实施方案中，伪反刍动物的胃肠道中的隔室包括小肠、大肠、盲肠或其任何组合。在一些实施方案中，伪反刍动物的胃肠道中的隔室包括全部或部分的小肠。在一些实施方案中，伪反刍动物的胃肠道中的隔室包括全部或部分的大肠。在一些实施方案中，伪反刍动物的胃肠道中的隔室包括全部或部分的盲肠。

在一些实施方案中，动物可以具有来自前述类型中的多于一种的消化系统特征。在一些实施方案中，动物可以具有与前述类型不同的消化系统特征。在某些实施方案中，动物的胃肠道中的隔室包括动物吸收其大部分营养的一个或多个器官或部位。在某些实施方案中，动物的胃肠道中的隔室包括动物消化其大部分营养的一个或多个器官或部位。在某些实施方案中，动物的胃肠道中的隔室包括大部分营养被动物消化或吸附的器官或部位。

在一些实施方案中，动物的胃肠道中的隔室包括全部或部分的胃(或其等同物，如瘤胃、网胃、重瓣胃和皱胃)、全部或部分的小肠、全部或部分的大肠或其任何组合。在一些实施方案中，动物的胃肠道中的隔室包括全部或部分的小肠和全部或部分的大肠。

在一些实施方案中，胃肠道中的隔室包括全部或部分的下消化道。在一些实施方案中，胃肠道中的隔室是全部或部分的下消化道。在一些实施方案中，胃肠道中的隔室是胃、小肠和大肠。在一些实施方案中，胃肠道中的隔室是小肠和大肠。

X.施用

在一些实施方案中，施用包括向动物提供本文所述的合成寡糖制剂、营养组合物或动物饲料组合物，使得所述动物可以随意摄取合成寡糖制剂、营养组合物或动物饲料组合物。在此类实施方案中，动物摄取合成寡糖制剂、营养组合物或动物饲料组合物的某一部分。

可以根据任何适当的时间表将合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物提供给动物。在一些实施方案中，基于每日、基于每周、基于每月、基于每隔一天、每周中持续至少三天或每月中持续至少七天向动物提供合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物。

在一些实施方案中，将营养组合物、寡糖制剂、动物饲料预混合物或动物饲料组合物在一天中多次施用给动物。例如，在一些实施方案中，将营养组合物、寡糖制剂、动物饲料预混合物或动物饲料组合物每天至少1、2、3、4、5、6、7、8、9或10次施用给动物。在一些实施方案中，将营养组合物、寡糖制剂、动物饲料预混合物或动物饲料组合物每天至多1、2、3、4、5、6、7、8、9或10次施用给动物。

在一些实施方案中，将营养组合物、寡糖制剂、动物饲料预混合物或动物饲料组合物每周至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15或20次施用给动物。在一些实施方案中，将营养组合物、寡糖制剂、动物饲料预混合物或动物饲料组合物每周至多1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15或20次施用给动物。在一些实施方案中，将营养组合物、寡糖制剂、动物饲料预混合物或动物饲料组合物每天、每隔一天、每3天、每4天、每周、每隔一周或每月施用给动物。

在某些实施方案中，将营养组合物、寡糖制剂、动物饲料预混合物或动物饲料组合物在一天中的一定时间施用给动物。例如，在某些实施方案中，将营养组合物、寡糖制剂、动物饲料预混合物或动物饲料组合物在早上、在下午、在晚上或其任何组合施用给动物。在某些实施方案中，将营养组合物、寡糖制剂、动物饲料预混合物或动物饲料组合物在早上施用给动物。在某些实施方案中，将营养组合物、寡糖制剂、动物饲料预混合物或动物饲料组合物在下午施用给动物。在某些实施方案中，将营养组合物、寡糖制剂、动物饲料预混合物或动物饲料组合物在晚上施用给动物。

在一些实施方案中，在某些饮食阶段期间向动物提供寡糖制剂、动物饲料预混合物或动物饲料组合物。例如，在0至14日龄之间向一些动物提供开食饮食。在其他实施方案中，在15至28日龄之间、在15至35日龄之间或在15至39日龄之间向动物提供生长饮食。在仍其他实施方案中，在29至35日龄之间、在36至42日龄之间或在40至46日龄之间向动物提供肥育饮食。

在某些实施方案中，在开食饮食阶段、生长饮食阶段或肥育饮食阶段或其任何组合期间将合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物提供给动物。

在某些实施方案中，动物是家禽，并且在0至15日龄之间向所述家禽提供开食饮食，在16至28日龄之间提供生长饮食，并且在29至35日龄之间提供肥育饮食。在其他实施方案中，动物是家禽，并且在0至14日龄之间向所述家禽提供开食饮食，在15至35日龄之间提供生长饮食，并且在36至42日龄之间提供肥育饮食。在仍其他实施方案中，动物是家禽，并且在0至14日龄之间向所述家禽提供开食饮食，在15至39日龄之间提供生长饮食，并且在20至46日龄之间提供肥育饮食。

在一些实施方案中，在开食饮食阶段、生长饮食阶段或肥育饮食阶段或其任何组合期间将合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物提供给家禽。

可以将本文所述的寡糖制剂饲喂给单独动物或动物群体。例如，在动物是家禽的一种变型中，可以将寡糖制剂饲喂给单独家禽或家禽群体。

可以将合成寡糖制剂、营养组合物、动物饲料预混合物或动物饲料组合物以任何适当的形式(包括例如以固体形式、以液体形式或其组合)提供给动物。在某些实施方案中，寡糖制剂或动物饲料组合物是液体，如浆液或溶液。在其他实施方案中，寡糖制剂、动物饲料预混合物或动物饲料组合物是固体，如粒料或粉末。在又其他实施方案中，可以将寡糖制剂、动物饲料预混合物或动物饲料组合物以液体和固体两种组分(如以糊状物)饲喂给动物。

实施例

实施例1

葡萄糖-半乳糖寡糖制剂的合成

在三升反应容器中使用经选择以实现kg规模下的合适生产的催化剂负载量、反应时间和反应温度进行葡萄糖-半乳糖寡糖制剂的合成。

将D-葡萄糖一水合物(825.16g)、D-乳糖一水合物(263.48g)和2-吡啶磺酸(1.0079g，Sigma-Aldrich，美国圣路易斯)添加到具有中心29/42磨口玻璃接头和两个24/40侧磨口玻璃接头的三升三颈圆底烧瓶中。使用PTFE带将133mm特氟龙搅拌叶片附连至玻璃搅拌轴上。将搅拌棒使用特氟龙轴承适配器通过中心点固定，并且经由挠性联接器附接到顶置式高扭矩机械混合器。将烧瓶固定在半球形电加热罩的内部，所述半球形电加热罩通过温度控制单元经由通过侧面端口之一中的橡胶隔片插入的J型棒热电偶操作。将热电偶的尖端调整为驻留于反应混合物内，且在混合元件上方具有数mm间隙。还通过相同的手段插入并固定连接到辅助温度监测器的辅助温度探针。烧瓶的第二侧端口配备有回流冷凝器，所述回流冷凝器由通过再循环浴冷却器保持低于4℃的水-乙二醇混合物冷却。

在以80-100rpm的搅拌速度进行的连续混合下，将反应混合物逐渐加热至130℃。当反应混合物达到120℃时，将回流冷凝器重新定位成蒸馏配置，其中将蒸馏物收集在置于冰浴中的250mL圆底烧瓶中。在连续混合下，将混合物在130℃下保持6小时，之后将热电偶箱断电。移除蒸馏装置，并且将390g的60℃蒸馏水逐渐添加到三颈烧瓶中。将所得的混合物在40RPM下搅拌10小时。收集大约1,250g粘性浅琥珀色材料，并且通过折射率测量其具有71.6白利糖度的浓度。

通过对在反应结束时抽取的反应器内容物的代表性等分试样进行卡尔·费歇尔滴定来测量反应器产物的最终水含量。在130℃的反应温度下，测定反应产物的水含量为基于原样的5.8wt％水。

实施例2

葡萄糖寡糖制剂的合成

在三升反应容器中使用经选择以实现kg规模下的合适生产的催化剂负载量、反应时间和反应温度进行葡萄糖寡糖制剂的合成。

将D-葡萄糖一水合物(1,150g)添加到具有一个中心29/42磨口玻璃接头和两个侧24/40磨口玻璃接头的三升三颈圆底烧瓶中。使用PTFE带将133mm特氟龙搅拌叶片附连至玻璃搅拌轴上。将搅拌棒使用特氟龙轴承适配器通过烧瓶的中心端口固定，并且经由挠性联接附接到顶置式高扭矩机械混合器。将烧瓶固定在半球形电加热罩的内部，所述半球形电加热罩通过温度控制单元经由通过侧面端口之一中的橡胶隔片插入的J型棒热电偶操作。将热电偶的尖端调整为驻留于反应混合物内，且在混合元件上方具有数mm间隙。还通过相同的手段插入并固定连接到辅助温度监测器的辅助温度探针。烧瓶的第二侧端口配备有回流冷凝器，所述回流冷凝器由通过再循环浴冷却器保持低于4℃的水-乙二醇混合物冷却。

在以80-100rpm的搅拌速度进行的连续混合下，将反应混合物逐渐加热至130℃。当反应温度升高至120℃与130℃之间时，将(+)-樟脑-10-磺酸(1.16g，Sigma-Aldrich，圣路易斯)添加到三颈烧瓶中，并且将装置从回流冷凝器转换为具有置于冰浴中的圆底收集烧瓶的蒸馏配置。将该设置保持1个半小时，之后将热电偶箱断电，移除蒸馏装置，并且将390g的23℃蒸馏水逐渐添加到三颈烧瓶中。将所得的混合物在40rpm下搅拌10小时，直到收集的时刻。收集大约1300g粘性深琥珀色材料，并且测量其具有72.6白利糖度的浓度。

实施例3

葡萄糖-半乳糖-甘露糖寡糖制剂的合成

在三升反应容器中使用经选择以实现kg规模下的合适生产的催化剂负载量、反应时间和反应温度进行葡萄糖-半乳糖-甘露糖寡糖制剂的合成。

将葡萄糖-半乳糖-甘露糖寡糖制备为独立收集的在单独反应容器中合成的两种单独组分。每种合成使用不同的起始反应物，但是遵循相同的程序和方法来完成。最终的葡萄糖-半乳糖-甘露糖寡糖是由两种合成产物混合形成的均质浆液。

为了合成第一组分，将990.54g葡萄糖一水合物、105.58g乳糖一水合物和1.00g的2-吡啶磺酸添加到三升三颈圆底烧瓶中，所述三颈圆底烧瓶具有一个中心29/42磨口接头，其两侧是两个24/40磨口接头。使用PTFE带将133mm特氟龙搅拌叶片附连至440mm玻璃搅拌轴上。将搅拌棒使用特氟龙轴承适配器通过中心点固定，并且经由挠性联接器附接到顶置式高扭矩机械混合器。将烧瓶置于半球形电加热罩的内部，所述半球形电加热罩通过温度控制单元经由通过侧面端口之一中的橡胶隔片插入的J型棒热电偶操作。将热电偶的尖端调整为驻留于反应混合物内，且在混合元件上方具有数mm间隙。还通过相同的手段插入并固定连接到辅助温度监测器的辅助温度探针。烧瓶的第二侧端口配备有回流冷凝器，所述回流冷凝器由通过再循环浴冷却器保持低于4℃的水-乙二醇混合物冷却。

在以80-100rpm的搅拌速度进行的连续混合下，将反应混合物逐渐加热至130℃。一旦观察到温度控制箱读数在120℃与130℃之间，便将装置从回流冷凝器转换为具有置于冰浴中的圆底收集烧瓶的蒸馏配置。将该设置保持大约6小时10分钟，之后将加热套断电，移除蒸馏装置，并且将390g的60℃蒸馏水逐渐添加到三颈烧瓶中。将所得的混合物在40rpm下搅拌10小时，直到收集的时刻。收集大约1250g粘性浅琥珀色材料，并且通过折射率测量其具有73.1白利糖度的浓度。

为了合成第二组分，将825.04g葡萄糖一水合物、251.16g来自木材的纯甘露糖、25.10g蒸馏水和1.00g的2-吡啶磺酸添加到三升三颈圆底烧瓶中，所述三颈圆底烧瓶具有一个中心29/42磨口接头，其两侧是两个24/40磨口接头。第二组分的合成的其余部分遵循与第一组分相同的程序和方法，直到收集的时刻。收集大约1250g粘性深琥珀色材料，并且测量其具有72.3白利糖度的浓度。

将第一组分和第二组分的全部转移到适当大小的HDPE容器中，并且用手充分混合直至均匀。最终的浆液混合物是大约2.5kg、深琥珀色、粘性的，并且测量其具有大约72白利糖度的浓度。

实施例4

葡萄糖-甘露糖寡糖制剂的合成

将葡萄糖-甘露糖寡糖制备为独立收集的在单独反应容器中合成的两种单独组分。每种合成使用不同的起始反应物，但是遵循相同的程序和方法来完成。最终的葡萄糖-甘露糖寡糖是由两种合成产物混合形成的均质浆液。

为了合成第一组分，将1264.80g葡萄糖一水合物添加到三升三颈圆底烧瓶中，所述三颈圆底烧瓶具有一个中心29/42磨口接头，其两侧是两个24/40磨口接头。使用PTFE带将133mm特氟龙搅拌叶片附连至440mm玻璃搅拌轴上。将搅拌棒使用特氟龙轴承适配器通过中心点固定，并且经由挠性联接器附接到顶置式高扭矩机械混合器。将烧瓶置于半球形电加热罩的内部，所述半球形电加热罩通过温度控制单元经由通过侧面端口之一中的橡胶隔片插入的J型棒热电偶操作。将热电偶的尖端调整为驻留于反应混合物内，且在混合元件上方具有数mm间隙。还通过相同的手段插入并固定连接到辅助温度监测器的辅助温度探针。烧瓶的第二侧端口配备有回流冷凝器，所述回流冷凝器由通过再循环浴冷却器保持低于4℃的水-乙二醇混合物冷却。

在以80-100rpm的搅拌速度进行的连续混合下，将反应混合物逐渐加热至130℃。一旦观察到温度控制箱读数在120℃与130℃之间，便将1.15g的(+)-樟脑-10-磺酸添加到三颈烧瓶中，并且将装置从回流冷凝器转换为具有置于冰浴中的圆底收集烧瓶的蒸馏配置。将该设置保持大约1小时，之后将热电偶箱断电，移除蒸馏装置，并且将390g的23℃蒸馏水逐渐添加到三颈烧瓶中。将所得的混合物在40rpm下搅拌10小时，直到收集的时刻。收集大约1350g粘性浅琥珀色材料，并且测量其具有71.8白利糖度的浓度。

为了合成第二组分，将949.00g葡萄糖一水合物、288.00g来自木材的纯甘露糖、27.94g蒸馏水和1.15g的2-吡啶磺酸添加到三升三颈圆底烧瓶中，所述三颈圆底烧瓶具有一个中心29/42磨口接头，其两侧是两个24/40磨口接头。第二组分的合成的其余部分遵循与第一组分相同的程序和方法，直到收集的时刻，不同的是在将回流冷凝器转换为蒸馏配置时没有添加(+)-樟脑-10-磺酸，并且将所得的设置保持大约6小时。收集大约1350g粘性深琥珀色材料，并且测量其具有72.0白利糖度的浓度。

将第一组分和第二组分的全部转移到适当大小的HDPE容器中，并且用手充分混合直至均匀。最终的浆液混合物是大约2.7kg、深琥珀色、粘性的，并且通过折射率测量其具有大约72白利糖度的浓度。

实施例5

葡萄糖-甘露糖寡糖制剂的合成

在三升反应容器中使用发现适合于以1kg规模生产的催化剂负载量、反应时间和反应温度进行寡糖制剂的千克规模生产。

为了合成第一组分，将1261.00g葡萄糖一水合物和1.15g的2-吡啶磺酸添加到三升三颈圆底烧瓶中，所述三颈圆底烧瓶具有一个中心29/42磨口接头，其两侧是两个24/40磨口接头。使用PTFE带将133mm特氟龙搅拌叶片附连至440mm玻璃搅拌轴上。将搅拌棒使用特氟龙轴承适配器通过中心点固定，并且经由挠性联接器附接到顶置式高扭矩机械混合器。将烧瓶固定在半球形电加热罩的内部，所述半球形电加热罩通过温度控制单元经由通过侧面端口之一中的橡胶隔片插入的J型棒热电偶操作。将热电偶的尖端调整为驻留于反应混合物内，且在混合元件上方具有数mm间隙。还通过相同的手段插入并固定连接到辅助温度监测器的辅助温度探针。烧瓶的第二侧端口配备有回流冷凝器，所述回流冷凝器由通过再循环浴冷却器保持低于4℃的水-乙二醇混合物冷却。

在以80-100rpm的搅拌速度进行的连续混合下，将反应混合物逐渐加热至130℃。一旦观察到温度控制箱读数在120℃与130℃之间，便将装置从回流冷凝器转换为具有置于冰浴中的圆底收集烧瓶的蒸馏配置。将该设置保持大约6小时，之后将热电偶箱断电，移除蒸馏装置，并且将390g的23℃蒸馏水逐渐添加到三颈烧瓶中。将所得的混合物在40rpm下搅拌10小时，直到收集的时刻。收集大约1250g粘性浅琥珀色材料，并且测量其具有73.5白利糖度的浓度。

为了合成第二组分，将949.00g葡萄糖一水合物、288.00g来自木材的纯甘露糖、28.94g蒸馏水和1.15g的2-吡啶磺酸添加到三升三颈圆底烧瓶中，所述三颈圆底烧瓶具有一个中心29/42磨口接头，其两侧是两个24/40磨口接头。第二组分的合成的其余部分遵循与第一组分相同的程序和方法，直到收集的时刻。收集大约1250g粘性深琥珀色材料，并且测量其具有73.3白利糖度的浓度。

将第一组分和第二组分的全部转移到适当大小的HDPE容器中，并且用手充分混合直至均匀。最终的浆液混合物是大约2.5kg、深琥珀色、粘性的，并且测量其具有大约73白利糖度的浓度。

实施例6

葡萄糖-半乳糖寡糖制剂的合成

将3L三颈烧瓶配备有经由10mm直径的玻璃搅拌轴连接到14cm新月形混合元件的顶置式混合器。将混合元件定位成距烧瓶的壁具有大约5mm间隙。将烧瓶经由半球形电加热罩加热，所述电加热罩由温度控制单元供电，所述温度控制单元连接到插入反应烧瓶中的棒型热电偶探针。将热电偶探针放置成在混合元件上方提供5-10mm间隙。向烧瓶中装入576克食品级右旋糖一水合物和577克食品级D-半乳糖一水合物，并且加热至大约115℃，以获得熔融糖浆。一旦获得浆液，便为烧瓶配备上通过循环冷却的乙二醇/水冷却至4℃的夹套式回流冷凝器并且温度。将31克Dowex Marathon C(水分含量0.48g H2O/g树脂)添加到混合物中以形成搅拌悬浮液。将冷凝器重新定位成蒸馏配置，并且将悬浮液加热至145℃。

将大约80RPM的混合速度和145℃的温度保持3.8小时，之后将温度控制单元上的设定点降低到80℃，并且将119mL的60℃去离子水逐渐添加到烧瓶中，以获得含有残留Dowex树脂的深琥珀色浆液。将所得的悬浮液进一步稀释至60白利糖度，冷却至室温并通过0.45微米过滤器真空过滤以除去树脂。获得1,200克的60白利糖度浓度的浅琥珀色浆液。

实施例7

葡萄糖寡糖制剂的合成

将3L三颈烧瓶配备有经由10mm直径的玻璃搅拌轴连接到14cm新月形混合元件的顶置式混合器。将混合元件定位成距烧瓶的壁具有大约5mm间隙。将烧瓶经由半球形电加热罩加热，所述电加热罩由温度控制单元供电，所述温度控制单元连接到插入反应烧瓶中的棒型热电偶探针。将热电偶探针放置成在混合元件上方提供5-10mm间隙。向烧瓶中逐渐装入1,148克食品级右旋糖一水合物，并且加热至大约115℃，以获得熔融糖浆。一旦获得浆液，便为烧瓶配备上通过循环冷却的乙二醇/水冷却至4℃的夹套式蒸馏冷凝器。使反应温度逐渐升高至145℃。一旦获得所述温度并且其稳定，便将31克Dowex Marathon C(水分含量0.48g H2O/g树脂)添加到混合物中，并且将大约80RPM的混合速度和145℃的温度保持3.8小时。

3.8小时后，将温度控制单元上的设定点降低到80℃，并且将119mL的60℃去离子水逐渐添加到烧瓶中，以获得含有残留Dowex树脂的深琥珀色浆液。将所得的悬浮液进一步稀释至60白利糖度，冷却至室温并通过0.45微米过滤器真空过滤以除去树脂。获得1,113克的60白利糖度浓度的深琥珀色葡萄糖寡糖浆液。

实施例8

寡糖制剂的单锅合成

在一升反应容器中使用发现适合于单锅反应的催化剂负载量、反应时间和反应温度以300克规模展示来自实施例3的寡糖的单锅(单组分)合成。

将来自玉米的30g食品级D-葡萄糖一水合物、来自木材的37.50g食品级D-甘露糖、15.60g食品级D-乳糖一水合物、3.96g蒸馏水和0.270g的2-吡啶磺酸(Sigma-Aldrich，圣路易斯)添加到一升三颈圆底烧瓶中，所述三颈圆底烧瓶具有一个中心29/42磨口接头，其两侧是两个24/40磨口接头。使用PTFE带将特氟龙搅拌叶片附连至220mm玻璃搅拌轴上。将搅拌棒使用特氟龙轴承适配器通过中心点固定，并且经由挠性联接器附接到顶置式高扭矩机械混合器。将烧瓶固定在半球形电加热罩的内部，所述半球形电加热罩通过温度控制单元经由通过侧面端口之一中的橡胶隔片插入的J型棒热电偶操作。将热电偶的尖端调整为驻留于反应混合物内，且在混合元件上方具有数mm间隙。还通过相同的手段插入并固定连接到辅助温度监测器的辅助温度探针。烧瓶的第二侧端口配备有回流冷凝器，所述回流冷凝器由通过再循环浴冷却器保持低于4℃的水-乙二醇混合物冷却。

在以80-100rpm的搅拌速度进行的连续混合下，将反应混合物逐渐加热至130℃。一旦观察到温度控制箱读数在120℃与130℃之间，便将装置从回流冷凝器转换为具有置于冰浴中的圆底收集烧瓶的蒸馏配置。在连续搅拌下，将混合物在130℃下保持大约5小时40分钟，之后移除加热罩和蒸馏装置。将大约40g的23℃蒸馏水逐渐添加到三颈烧瓶中。将所得的混合物在40rpm下搅拌10小时，直到收集的时刻。收集大约389g粘性深琥珀色材料，并且测量其具有67.0白利糖度的浓度。通过SEC色谱法和2D ¹H、¹³C-HSQC NMR波谱法来确认与来自实施例3的寡糖制剂的一致性。

实施例9

寡糖制剂的合成和表征

使用来自实施例1-8的方法和程序来制备实施例1-7的寡糖的重复批次和共混物。将所得的材料通过HPLC尺寸排阻色谱法(SEC)进行分析以表征分子量分布，通过LC-MS/MS分析进行分析以定量DP2脱水糖含量，并且通过2D ¹H、¹³C-HSQC NMR进行分析以指纹分析相应寡糖制剂的分子结构。

实施例9.1：制备十一批来自实施例1的寡糖制剂，并且将其共混成四个单独份以产生寡糖9.1。

实施例9.2：制备七批来自实施例2的寡糖制剂，并且将其共混成两个单独份以产生寡糖9.2。

实施例9.3：制备十二批来自实施例3的寡糖制剂，并且将其共混成五个单独份以产生寡糖9.3。

实施例9.4：制备四批来自实施例4的寡糖制剂，并且将其共混成单份以产生寡糖9.4。

实施例9.5：制备四批来自实施例5的寡糖制剂，并且将其共混成单份以产生寡糖9.5。

实施例9.6：制备两批来自实施例6的寡糖制剂，并且将其共混成单份以产生寡糖9.6。

实施例9.7：制备两批来自实施例7的寡糖制剂，并且将其共混成单份以产生寡糖9.7。

通过以下方式以300克规模合成实施例1-7的寡糖制剂的其他结构变型：使用实施例1-7的方法，但是改变起始糖组成、酸、酸负载量、时间和反应温度。如下合成寡糖制剂：

实施例9.8：使300克蔗糖、3克磷酸和27克水在125℃下反应约一小时，以获得深棕色寡糖浆液，然后将其用蒸馏水稀释至60白利糖度。

实施例9.9：使270克葡萄糖、30克蔗糖、0.3克苯基膦酸和27克水在130℃下反应一与四小时之间，以获得深棕色寡糖浆液，然后将其用蒸馏水稀释至60白利糖度。

实施例9.10：使225克葡萄糖、75克乳糖、3克丁基膦酸和27克水在130℃下反应一与四小时之间，以获得深琥珀色寡糖浆液，然后将其用蒸馏水稀释至60白利糖度。

实施例9.11：使225克葡萄糖、75克乳糖、3克苯基膦酸和27克水在130℃下反应一与五小时之间，以获得深琥珀色寡糖浆液，然后将其用蒸馏水稀释至60白利糖度。

实施例9.12：使270克葡萄糖、30克乳糖、3克苯基次膦酸和27克水在130℃下反应三与五小时之间，以获得深棕色寡糖浆液，然后将其用蒸馏水稀释至60白利糖度。

实施例9.13：使300克葡萄糖、3克苯基次膦酸和27克水在130℃下反应一至三小时，以获得深琥珀色寡糖浆液，然后将其用蒸馏水稀释至60白利糖度。

实施例9.14：使300克葡萄糖、2克丙酸和27克水在130℃下反应一至四小时，以获得琥珀色寡糖浆液，然后将其用蒸馏水稀释至60白利糖度。

实施例9.15：使300克葡萄糖、0.15克8-羟基-5-喹啉磺酸水合物和27克水在130℃下反应两至四小时，以获得琥珀色寡糖浆液，然后将其用蒸馏水稀释至60白利糖度。

在上述反应中，所有质量都是指纯组分质量，并且反应物水的总质量包括由反应物糖的水分含量和/或水合水提供的任何携带水。

对寡糖制剂的表征：

将所得的材料通过HPLC尺寸排阻色谱法(SEC)进行分析以表征分子量分布，通过LC-MS/MS分析进行分析以定量DP2脱水糖含量，并且通过2D ¹H、¹³C-HSQC NMR进行分析以指纹分析相应寡糖制剂的分子结构。

通过HPLC测定的聚合物分子量：

通过HPLC测定实施例9.1-9.7的寡糖制剂的数均分子量(MWn)和重均分子量(MWw)。以0.45mL/min的蒸馏水作为流动相，使用Agilent PL aquagel-OH 20柱在40℃下在具有折射率检测的Agilent 1100系列HPLC上进行SEC分析。使用具有已知分子量的标准溶液进行保留时间对MW校准，并且使用本领域的标准方法从SEC色谱图测定各种分布特性。在多份的情况下寡糖制剂的MWn和MWw示出于下表1中。

表1.寡糖制剂9.1-9.7的MWn和MWw

通过LC-MS/MS进行的脱水DP2含量分析：

在水/乙腈35/65的等度条件下，在1mL/min的流速下，使用Capcell Pak NH2(Shiseido；250x4.6mm，5μm)柱通过LC-MS/MS测定寡糖制剂的脱水DP2含量。在MS之前，将流1:4分开，并且添加50μL 0.05％NH4OH的补充流以增强电离。对于MS检测，以阴性模式使用ESI探针，并且MRM方法允许靶向分析。

首先相对于作为参考组合物的实施例9.7的寡糖制剂的脱水DP2含量测定寡糖制剂的脱水DP2含量。然后通过HPLC-MS/MS测定实施例9.7的参考寡糖制剂的绝对脱水DP2含量为约10％，然后通过计算获得实施例9.1至9.6的寡糖制剂的脱水DP2含量。相对和绝对DP2含量测定为如表2中所述的。

表2.在多份的情况下寡糖制剂的脱水DP2含量

通过2D¹H、¹³C-HSQCNMR所得的分子指纹：

通过2D ¹H、¹³C-HSQC NMR波谱法表征实施例9的寡糖制剂的分子结构。通过以下方式来制备样品：在40℃下干燥125mg(基于干固体)寡糖制剂，并且将其再溶解于含有0.1％丙酮的D₂O中。在于400MHz的质子频率下操作的Bruker Avance NMR波谱仪上或在配备有低温冷却的5mm TCI探针的于600MHz的质子频率下操作的Bruker Avance III NMR波谱仪上在300K下采集NMR谱。图1提供了实施例9.7的寡糖制剂的说明性2D ¹H、¹³CHSQC NMR谱。

使用¹H、¹³C-HSQC谱的异头区F2(δ¹H)＝4.2-6.0ppm和F1(δ¹³C)＝90-120ppm来指纹分析寡糖制剂的键联分布。对异头区中的每个峰进行积分，并且相对于总异头区的相对丰度测定其相对丰度。对四份的寡糖制剂9.1进行2D ¹H、¹³C HSQC指纹分析。

表3.寡糖制剂9.1的F2和F1峰的相对丰度

实施例10

对寡糖制剂的脱水糖亚基的测定

在Bruker Ultraflex仪器上通过MALDI-MS测定实施例9的寡糖制剂中脱水糖亚基的相对丰度。将样品溶解于水中至10mg/ml的浓度，将来自其中的5μl与基质溶液(在比率为1:10的80％乙醇和水中的30mg/ml DHB)混合。通过将1μl分析物溶液施加到目标板来制备板，并且将其在环境空气下干燥。在一些情况下，在MS分析之前通过施加1μl乙醇使样品重新结晶。

图2提供了来自实施例9的寡糖制剂的说明性MALDI谱。清楚地观察到脱水糖亚基为偏移峰，所述偏移峰相对于其对应的主DP母体移位了-18g/mol。在DP的所有值下都观察到偏移峰，这表明在所有寡糖大小下都检测到脱水糖亚基。对于每种DP，确定脱水亚基峰的相对强度为总峰强度的约10％，由此确定总脱水亚基相对丰度为约10％。图23A和图23B展示了来自实施例2的寡糖制剂的MALDI谱。在每种DP水平下都观察到脱水糖亚基，其相对强度在5％-10％的范围内。

实施例11

对寡糖制剂的脱水亚基的表征

使用LC-MS、GC-MS、LC-MS/MS和NMR方法的组合表征实施例9的寡糖制剂的脱水糖亚基。

对脱水DP1组分的表征：

通过制备型液相色谱法离析来自实施例9的寡糖制剂的脱水DP1组分。通过以下方式来制备所离析的脱水DP1组分以用于NMR：将其于0.75mL D2O中。图3提供了从实施例9的寡糖离析的脱水DP1级分的说明性1D ¹H-NMR谱，并且图4提供了相同的所离析的脱水DP1级分的说明性APT¹³C-NMR谱。

使用表4中的以下峰分配，通过NMR测定1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖与1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖的比率为2:1。

表4.NMR峰分配

^aOv代表重叠信号

对脱水DP2组分的表征

使用LC-MS、GC-MS、LC-MS/MS和NMR方法的组合表征实施例9的寡糖制剂的脱水糖亚基。通过GC-MS和LC-MS/MS分析来测定实施例9的寡糖制剂的脱水DP2含量。使用含有HP-5MS固定相的30m x 0.25mm熔融石英柱以21.57psi恒压氦气作为载气进行气相色谱法。通过以下方式来通过乙酰化预衍生化等分试样：在60℃下将20mg样品溶解于0.5mL吡啶和0.5mL乙酸酐中，持续30分钟。在300℃下注射1uL样品，且烘箱温度程序从70℃开始并按10℃/分钟升温至315℃。在Agilent 5975C MSD上以70eV的电子能进行检测。

图5展示了寡糖制剂9.7的GC-MS色谱图的放大图。TIC和XIC(m/z 229)图证明，DP2和脱水DP2组分被清楚地解析。图28A至图28B、图29A至图29B、图30A至图30B和图31A至图31B分别展示了在实施例1、实施例3、实施例4和实施例7的寡糖制剂中如通过GC-MS检测到的DP1、脱水DP1、DP2和脱水DP2级分的存在。如图28A至图28B、图29A至图29B、图30A至图30B和图31A至图31B所示，脱水DP1和DP1级分的保留时间为约12-17分钟，并且脱水DP2和DP2级分的保留时间为约22-25分钟。

图35展示了在不同激光能量下比较来自实施例9的寡糖制剂的MALDI-MS谱。信号的相对丰度几乎没有变化，这证明不会因激光电离而引入水损失。因此，证明了寡糖制剂中脱水糖亚基的存在。

实施例12

对寡糖制剂中焦糖化亚基的观察

通过2D ¹H、¹³C HSQC NMR展示了包含5-羟甲基糠醛焦糖化亚基的寡糖制剂。将来自实施例9的125mg等分试样的寡糖制剂在40℃下干燥过夜，并且溶解于含有0.1％丙酮的1.5mL D₂O中。分析所得的2D ¹H、¹³CHSQC谱中5-hmf与葡萄糖的异头碳之间糖苷键联的存在，所述谱具有以下峰分配：¹H NMR:δ＝9.39ppm(CHO,m),7.44ppm(Ar-H,m),6.68ppm(Ar-H,m),4.60ppm(CH2,m)；和¹³C NMR:δ＝180.0,150.6,126.2,112.7,159.9,64.5。图6提供了说明性2D HSQC谱，其证明了经由糖苷键将5-hmf掺入寡糖制剂的结构中。

实施例13

比较实施例

通过MALDI-MS分析商业5kDa右旋糖酐中脱水糖亚基的存在。图7示出了从主DP峰(851.268g/mol下的Na+加合物)偏移-18g/mol的偏移峰的明显存在。相比之下，发现右旋糖酐样品基本上不含脱水糖亚基。

实施例14

通过LC-MS/MS对脱水DP组分的定量

通过液相色谱法离析寡糖制剂的DP2级分。将样品溶解于水中，并且在水/乙腈35/65的等度条件下，在1mL/min的流速下，使用Capcell Pak NH2(Shiseido；250x4.6mm,5μm)柱分离。在一些情况下，在色谱分离后，添加50μL 0.05％NH₄OH以增强电离。通过MS/MS检测来测定脱水DP2含量。对于MS检测，以阴性模式使用ESI探针，并且MRM方法允许靶向分析。图8A展示了在水中的1-80μg/mL的浓度范围上对来自实施例9的寡糖制剂的检测，且LC-MS/MS色谱图下面积对浓度的校准曲线呈线性(如图8B所示)。

图24A至图24C、图25A至图25C、图26A至图26C和图27A至图27C分别展示了在实施例1、实施例3、实施例4和实施例7的寡糖制剂中通过LC-MS/MS检测到的脱水DP2、脱水DP1和DP2种类的存在。

实施例15

包含寡糖制剂的饲料的制备

制备家禽和猪饮食以展示寡糖制剂向饮食中的掺入。如下制备表现出多种成分组成的对照饲料和通过用实施例9的寡糖制剂增补对应对照饲料而获得的相应经处理饲料：

实施例饲料15.1：使用62％玉米粉和32％大豆粉制备对照饲料15.1(CTR)。通过用500mg/kg的来自实施例9的寡糖制剂增补对照饲料15.1(CTR)来制备经处理饲料15.1(TRT)。对于经处理饮食，通过以下方式来以粉末形式提供寡糖制剂：将寡糖干燥到作为载体的经研磨的稻壳上，并且使用微量成分天平将粉末添加到混合器中，之后进行造粒。

实施例饲料15.2：使用62％玉米粉、3％大豆浓缩物和26％大豆粉制备对照饲料15.2(CTR)。通过用500mg/kg的来自实施例9的寡糖制剂增补对照饲料15.2(CTR)来制备经处理饲料15.2(TRT)。对于经处理饮食，通过以下方式来以粉末形式提供寡糖制剂：将寡糖干燥到作为载体的经研磨的稻壳上，并且使用微量成分天平将粉末添加到混合器中，之后进行造粒。

实施例饲料15.3：使用52％玉米粉、6％玉米淀粉、5％大豆浓缩物、26％大豆粉和氧化钛微量示踪剂制备对照饲料15.3(CTR)。通过用500mg/kg的寡糖制剂增补对照饲料15.3(CTR)来制备经处理饲料15.3(TRT)。对于经处理饮食，通过以下方式来以粉末形式提供寡糖制剂：将寡糖干燥到作为载体的经研磨的稻壳上，并且使用微量成分天平将粉末添加到混合器中，之后进行造粒。

实施例饲料15.4：使用55％玉米粉和39％大豆粉制备对照饲料15.4(CTR)。通过用1,000mg/kg的寡糖制剂增补对照饲料15.4(CTR)来制备经处理饲料15.4(TRT)。对于经处理饮食，通过以下方式来以粉末形式提供寡糖制剂：将寡糖干燥到作为载体的经研磨的稻壳上，并且使用微量成分天平将粉末添加到混合器中，之后进行造粒。

实施例饲料15.5：使用62％玉米粉、3％大豆浓缩物和26％大豆粉制备对照饲料15.5(CTR)。通过用500mg/kg的来自实施例9的寡糖制剂增补对照饲料15.5(CTR)来制备经处理饲料15.5(TRT)。对于经处理饮食，以粉末形式提供寡糖制剂，并且使用微量成分天平将粉末添加到混合器中，之后进行造粒。

实施例饲料15.6：对照饲料15.6(CTR)是商业美国玉米-大豆开食家禽饲料。经处理饲料15.6(TRT)是含有500ppm寡糖制剂的商业美国玉米-大豆开食家禽饲料。对于经处理饮食，以粉末形式提供寡糖制剂，并且使用微量成分天平将粉末添加到混合器中，之后进行造粒。

实施例饲料15.7：对照饲料15.7(CTR)是具有以下饮食组成的研究玉米-大豆家禽饲料：玉米粉62.39％、大豆粉31.80％、碳酸钙0.15％、磷酸氢钙2.2％、氯化钠0.15％、DL-甲硫氨酸0.15％、L-赖氨酸0.10％、大豆油2.00％、维生素-矿物质预混合物1.00％和抗球虫药0.06％。通过用1000ppm的实施例9.1的寡糖制剂补充对照饲料15.7(CTR)来获得经处理饲料15.7(TRT)。对于经处理饮食，将寡糖制剂作为在水中的60％浆液来提供，并且通过将浆液喷射在造粒后的饲料上来施加。

实施例饲料15.8：对照饲料15.8(CTR)是具有以下组成的研究玉米-大豆家禽饲料：小麦粉48.45％、大豆粉32.00％、黑麦12％、碳酸钙0.20％、磷酸氢钙2.00％、氯化钠0.20％、DL-甲硫氨酸0.15％、大豆油4.00％、维生素-矿物质预混合物1.00％。通过用1000ppm的实施例9.3的寡糖制剂补充对照饲料15.7(CTR)来获得经处理饲料15.7(TRT)。对于经处理饮食，将寡糖制剂作为在水中的60％浆液来提供，并且通过将浆液喷射在造粒后的饲料上来施加。

如本领域技术人员将理解的，15.1-15.6还含有行业标准水平的脂肪、维生素、矿物质、氨基酸、其他微量营养物和饲料酶。在一些情况下，饲料含有抗球虫药，但是在所有情况下都不含抗生素生长促进剂。根据标准实践，将饲料作为糊状、造粒或粉碎饮食来提供。

实施例16

饲料样品的提取

通过提取加工根据实施例15的程序制备的饮食。将饲料样品用磨机研磨。将五克所得的经碾磨饲料称重到50mL容量瓶中，并且添加热水(大约80℃)。摇荡后，将混合物在80℃下的超声波水浴中孵育30分钟。冷却后，将溶液以3000xg离心20min，并且将上清液通过1.2μm过滤器过滤，之后通过0.45μm过滤器(并且在一些情况下通过0.22μm过滤器)过滤。用旋转蒸发器将所得的过滤溶液蒸干。在一些情况下，使用在水中的50wt％乙醇作为替代性提取溶剂进行提取。在若干种情况下，使用5,000道尔顿分子量截止膜过滤器进行过滤步骤。

实施例17

饲料提取物的酶促加工

对实施例16的饲料提取物进行一个或多个酶促水解步骤以消化天然存在于饲料中的寡糖。使用α-淀粉酶和淀粉糖苷酶的混合物来消化葡萄糖寡糖和淀粉的α(1,4)键联。使用转化酶和α-半乳糖苷酶来除去蔗糖、棉子糖和其他常见的纤维糖。

如下制备酶溶液：以800U/mL在乙酸铵缓冲液(含有0.5mM MgCl2和200mM CaCl2的乙酸铵0.2M pH 5)中的淀粉葡糖苷酶(黑曲霉(A.niger))36000U/g溶液；α-淀粉酶(猪胰腺)100000U/g Megazyme：以800U/mL在乙酸铵中的溶液；来自面包酵母(酿酒酵母(S.cerevisiae))的转化酶300U/mg Sigma：以600U/mL在乙酸铵缓冲液中的溶液；来自黑曲霉的α-半乳糖苷酶Megazyme 1000U/mL。

将实施例16的干饲料提取物重悬浮于10mL乙酸铵缓冲液中。添加50μlα-淀粉酶(最终4U/mL)、50μl淀粉葡糖苷酶(最终4U/mL)、50μl转化酶(最终3U/mL)。任选地添加20μlα-半乳糖苷酶(最终2U/mL)。将溶液在60℃下孵育4小时。然后将经消化的提取物通过超滤过滤器(Vivaspin Turbo 4，5000MWCO，Sartorius)过滤，之后在氮气蒸发系统上蒸干。在酶促消化的变型中，组合使用上述酶中的一种或多种，并且消化时段在4小时至过夜消化之间变化。将酶浓度最高变化为上述负载量的两倍，并且将完整的酶促消化程序在同一饲料上依序重复多次。

表5.用于提取和消化的饲料样品列表

脱水寡聚物是指含脱水亚基寡糖。

空白饲料是指不具有添加的脱水寡聚物的营养组合物。

酶a＝淀粉葡糖苷酶(黑曲霉)36000U/g Megazyme

酶b＝α-淀粉酶(猪胰腺)100000U/g Megazyme

酶c＝来自面包酵母(酿酒酵母)的转化酶300U/mg Sigma

酶d＝来自黑曲霉的α-半乳糖苷酶620U/mg Megazyme

实施例18

对饲料中寡糖制剂的检测

测定根据实施例15的对照饮食和经处理饮食，以检测寡糖制剂的不存在或存在。在制造饮食后，从最终饲料中抽取1kg样品。使用实施例16的程序通过水提取获得饲料的可提取固体含量。根据实施例14的程序，通过LC-MS/MS分析所得的提取物中脱水DP种类的存在。

图9示出了实施例15.1(CTR)-15.6(CTR)的对照饲料中脱水DP2种类的不存在与实施例15.1(TRT)-15.6(TRT)的经处理饲料中脱水DP2种类的存在。使用对所得的LC-MS/MS色谱图的积分来确定在最终饲料中实施例9的寡糖制剂的存在。具体地，如果脱水DP2峰下面积超过检出限(或在所述方法中建立的任何其他合适的阈值)，则确定饲料含有对应的寡糖制剂。

实施例19

对饲料中寡糖制剂的定量

测定根据实施例15的对照饮食和经处理饮食，以测定最终饲料中寡糖制剂的浓度。在制造饮食后，从最终饲料中抽取1kg样品。使用实施例16的程序通过水提取获得饲料的可提取固体含量。根据实施例14的程序通过LC-MS/MS分析所得的提取物中脱水DP种类的存在，并且将脱水DP2峰的面积与标准校准曲线进行比较，以测定饲料中寡糖制剂的浓度(表6)。

表6.饲料中寡糖制剂的浓度

实施例20

对含脱水亚基寡糖的NMR表征

将包含脱水亚基的葡萄糖寡糖制剂通过以下进行表征：i)聚合度和ii)葡萄糖单元的糖苷键联分布。

通过NMR波谱法鉴定α(1,1)α、α(1,1)β、β(1,1)β、α(1,2)、β(1,2)、α(1,3)、β(1,3)、α(1,4)、β(1,4)、α(1,6)和β(1,6)键联的相对摩尔丰度。如下确定异头质子的¹H NMR化学位移：考虑区域d＝4.5-5.5ppm，且共价键合的C-2至C-6的共振聚集在约d 3.2和3.9ppm处。由于在C-2处与H原子耦合，因此异头质子显现为双峰并且轴向位置显现在比赤道位置更高的场处。糖构象根据相邻质子的耦合常数来阐明：赤道-赤道，赤道-轴向(小耦合常数)或轴向-轴向(更大的耦合常数)。

还通过¹³C NMR进行了对糖苷键联的阐明。通过质子偏共振去耦或极化转移来区分伯碳、仲碳、叔碳和季碳。与甲氧基附接的碳在比具有游离羟基的相应碳原子更低的场处共振，并且具有轴向羟基的环碳原子通常在比具有赤道羟基的相应碳更高的场处吸收。因此，遵循这些准则，并且与文献中对于类似糖的¹H和¹³C两者所报道的化学位移进行比较，分配了大多数信号。

为了测定键联分布，使用J-RES和¹H、¹³C-HSQC。对于一些样品，HSQC方法显示出优异的性能。对于每次分析，将大约50mg冷冻干燥产物溶解于D2O中并转移到5mm NMR管中。通过过滤除去任何残留的催化剂或固体。在于对应于150MHz碳拉莫尔频率的600MHz质子下操作的Bruker Avance III NMR波谱仪上进行NMR实验。所述仪器配备有低温冷却的5mm TCI探针。所有实验都在298K下进行。在氘化水(4.75ppm)中记录并校准¹H NMR谱。用丙酮(30.9ppm)校准¹³C NMR谱。使用TopSpin 3.5采集数据，并且将其用在个人计算机上运行的ACD/Labs进行处理。

图10提供了在溶剂预饱和的情况下含脱水亚基葡萄糖寡糖的样品的代表性2D-1HJRES NMR谱。根据表7进行不同糖苷键联的分配。

表7.含脱水亚基葡萄糖寡糖样品中糖苷键联的相对摩尔丰度(2D-1H JRES NMR方法)

如表7所示，对于一些样品，在通过不同实验室使用用于2D-¹HJRES NMR分析的不同仪器进行的实验之间观察到差异。

图11提供了含脱水亚基葡萄糖寡糖样品的代表性¹H、¹³C-HSQC NMR谱，其具有用于键联分布的相关共振和分配。相比之下，发现通过¹H、¹³C-HSQC NMR进行的测定在两个不同的实验室和仪器之间是一致的，如表8所示。

表8.四种含脱水亚基葡萄糖寡糖样品中糖苷键联的相对摩尔丰度(¹H、¹³C-HSQC NMR方法)

进行扩散排序NMR波谱法(DOSY)，以根据扩散系数并因此根据MW分离不同种类的NMR信号。图12中DOSY谱的上部处的信号对应于高DP种类，而较低的DP种类显现在下方。图12展示了表8中的三种含脱水亚基寡糖的¹H DOSY谱的叠加。

实施例21

DP1和DP2级分的半制备性离析

使用Waters BEH酰胺19x150mm柱通过制备型HPLC进行对DP1级分的制备性离析。作为流动相，使用水作为溶剂A并且使用乙腈作为溶剂B，各自具有0.1％氨。所应用的梯度示出于表9中。将8次分离的收集DP1级分合并，干燥并再溶解于0.75ml D₂O中以如前所述进行NMR分析。

为了表征DP2级分，进行2步纯化。第一步是在快速色谱法系统上使用ELSD(蒸发光散射检测器)进行。用1ml DMSO、0.5ml水和0.5ml乙腈稀释2ml(2.65g)寡糖制剂。将溶液混合并超声处理15min。将1ml溶液注射在使用的YMC DispoPackAT、NH2、球形、25μm、120g柱上。以40ml/min用在水中的75％乙腈运行等度梯度法来分离寡糖制剂。将含DP2的级分用氮气干燥，并且再溶解于DMSO/水(80:20，v/v)中。

对于第2个纯化步骤，在40°下使用具有YMC NH₂ 4.6x250 mm(5μm)柱的分析型UPLC系统。用等度梯度(表10)和1ml/min的流速纯化DP2级分。为了触发ELSD的收集，使用1:5柱后分流。将来自12次色谱运行的DP2级分合并，通过加热的氮气除去乙腈，并且通过冷冻干燥除去残留水。将干级分再溶解以用于随后的LC-MS/MS和NMR分析。

表9.梯度法

时间(min)	流速(ml/min)	溶剂A	溶剂B
				0	25	10	90
2.5	25	10	90
				23	25	25	75
23.1	25	10	90
				47	25	10	90

表10.等度法

时间(min)	流速(ml/min)	水(％)	ACN(％)
				0	1	25	75
15	1	25	75

实施例22

具有单调递减的DP分布的寡糖制剂的合成

将330克D-葡萄糖一水合物和0.3克(+)-樟脑-10-磺酸添加到一升三颈烧瓶中，所述三颈烧瓶具有通过柔性联接由高扭矩机械混合器提供的顶置式机械混合。将烧瓶固定在半球形电加热罩的内部，所述电加热罩由温度控制单元经由插入反应混合物中的棒热电偶操作。将热电偶的尖端调整为驻留于反应混合物内，且在混合元件上方具有数mm间隙。烧瓶配备有回流冷凝器，所述回流冷凝器由通过再循环浴冷却器保持低于4℃的水-乙二醇混合物冷却。

在以80-100rpm的搅拌速度进行的连续混合下，将反应混合物逐渐加热至130℃。当反应温度升高至在120℃与130℃之间时，将装置从回流冷凝器转换为具有置于冰浴中的圆底接收烧瓶的蒸馏配置。在120RPM混合下，将反应在130℃下保持六十分钟，并且以10分钟间隔随时间的变化记录收集在接收烧瓶中的冷凝物的质量。通过添加蒸馏水并除去加热来使反应淬灭。在将产物混合物冷却至室温后，将产物浆液的等份试样稀释至约1白利糖度，如通过折射率测定的。将经稀释的等分试样使用0.2微米注射器式过滤器进行微过滤，并且通过HPLC尺寸排阻色谱法(SEC)进行分析。以0.45mL/min的蒸馏水作为流动相，使用Agilent PL aquagel-OH 20柱在40℃下在具有折射率检测的Agilent 1100系列HPLC上进行SEC分析。使用具有已知分子量的标准溶液进行保留时间对MW校准。测定DP平衡常数为K＝3.3，并且发现DP分布是单调递减的。图15和图16示出了如通过HPLC-SEC测定的实施例9的不同寡糖制剂的DP分布的形状。

实施例23

具有非单调DP分布的寡糖制剂的合成

在以80-100rpm的搅拌速度进行的连续混合下，将反应混合物逐渐加热至135℃。当反应温度升高至130℃时，将装置从回流冷凝器转换为具有置于冰浴中的圆底接收烧瓶的蒸馏配置。在120RPM混合下，将反应在135℃下保持三十五分钟。通过添加蒸馏水并除去加热来使反应淬灭。在将产物混合物冷却至室温后，将产物浆液的等份试样稀释至约1白利糖度，如通过折射率测定的。将经稀释的等分试样使用0.2微米注射器式过滤器进行微过滤，并且通过HPLC尺寸排阻色谱法(SEC)进行分析。以0.45mL/min的蒸馏水作为流动相，使用Agilent PL aquagel-OH 20柱在40℃下在具有折射率检测的Agilent 1100系列HPLC上进行SEC分析。使用具有已知分子量的标准溶液进行保留时间对MW校准。发现DP分布是非单调递减的。图16展示出，DP3含量大于DP2含量，并且DP4和DP5含量基本上相等。

实施例24

寡糖制剂的分批补料合成

将330克D-葡萄糖一水合物和0.3克2-吡啶磺酸添加到一升三颈烧瓶中，所述三颈烧瓶具有通过柔性联接由高扭矩机械混合器提供的顶置式机械混合。将烧瓶固定在半球形电加热罩的内部，所述电加热罩由温度控制单元经由插入反应混合物中的棒热电偶操作。将热电偶的尖端调整为驻留于反应混合物内，且在混合元件上方具有数mm间隙。烧瓶配备有回流冷凝器，所述回流冷凝器由通过再循环浴冷却器保持低于4℃的水-乙二醇混合物冷却。

在以80-100rpm的搅拌速度进行的连续混合下，将反应混合物逐渐加热至130℃。当反应温度升高至在120℃与130℃之间时，将装置从回流冷凝器转换为具有置于冰浴中的圆底接收烧瓶的蒸馏配置。在120RPM下，将反应保持在130℃下，并且以20分钟间隔随时间的变化记录收集在接收烧瓶中的冷凝物的质量。210分钟后，向反应中再添加110克D-葡萄糖一水合物。420分钟后，通过添加蒸馏水并除去加热来使反应淬灭。在将产物混合物冷却至室温后，将产物浆液的等份试样稀释至约1白利糖度，如通过折射率测定的。将经稀释的等分试样使用0.2微米注射器式过滤器进行微过滤，并且通过HPLC尺寸排阻色谱法(SEC)进行分析。以0.45mL/min的蒸馏水作为流动相，使用Agilent PL aquagel-OH 20柱在40℃下在具有折射率检测的Agilent 1100系列HPLC上进行SEC分析。使用具有已知分子量的标准溶液进行保留时间对MW校准。测定DP平衡常数为K＝0.8，并且发现DP分布是单调递减的。

实施例25

被饲喂寡糖制剂的商业肉鸡的生长性能

使肉鸡接受实施例15.6的饮食而生长以确定寡糖制剂对动物的生长性能的影响。具体地，根据行业实践和三阶段饲喂程序，制造了含有干酒糟及可溶物(DDGS)、抗球虫药和标准微量营养物共混物的商业玉米-大豆粉家禽饲料。通过近似分析，饲料组成测定为如表11所示的。

表11.饲料组成

如实施例15.6中所述，针对每个阶段制备对照饮食(CTR)和经处理饮食(TRT)，其中通过使用实施例9.7的寡糖制剂以1磅/经处理短吨增补对照饮食来制备经处理饮食。总共制造了约50短吨的每种饮食。

从商业家禽孵化场获得孵化日哈伯德(Hubbard)M99×科宝(Cobb)500未鉴别小鸡，并且将其随机置于36ft×40ft围栏中，所述围栏被构造成隧道通风的泥地面禽舍。总共放置了大约30,000只鸟，每个围栏中具有相等数量的鸟。舍垫料由上面铺有新鲜木刨花的堆积褥草组成。采用标准的商业环境和照明程序。每日检查动物和舍设施，包括记录总体健康状态、饲料消耗、设施的水供应和温度。每日记录任何死亡。

向奇数围栏中的鸟饲喂经处理饮食(即，以2磅/吨包含量含有饲料添加剂)，并且使偶数围栏中的鸟接受对照饮食。从第一天到第7天，所有饮食都经由每个围栏中的自动饲喂器并在饲喂器托盘上随意提供。从奶嘴饮水管线随意提供水。

开食阶段发生于第0天至第13天，生长阶段发生于第14天到第27天，并且休药阶段发生于第28天到研究结束，即第31天。在第0天和第31天按围栏记录鸟重量。记录每个围栏的消耗饲料的总质量。然后根据标准行业实践测定每个围栏的增重和FCR。

在第31天，从每个围栏中随机选择六只雄鸟用于血液和盲肠取样。记录每只取样鸟的活重。经由翅膀穿刺将血液样品收集到vacutainer管中，并且在凝固和血清分离后冷冻。然后经由颈椎脱位法对每只取样鸟实施安乐死，之后使用标准兽医方法提取盲肠。解剖后，将盲肠内容物转移到15mL锥形管中，记录盲肠内容物的重量，并且将内容物快速冷冻至-80℃。

从取样鸟的重量来看，处理组表现出体重的11分增加，其在P<0.05下是显著的(通过ANOVA)。

实施例26

对家禽盲肠微生物群的鸟枪法测序

对于从实施例23的研究获得的总共96只取样鸟，测定所鉴定的分类群的相对丰度。对于实施例23中获得的每种微生物群样品，将盲肠内容物解冻，并且使用标准方法提取DNA。在Illumina HiSeq-X仪器上以2x150bp读段分析所提取的DNA。进行标准分析以处理原始测序数据，包括：修整(衔接子，BBDuk)、熵过滤(k＝5，窗口＝20，min＝50，BBDuk)、质量过滤(平均值Q20，BBDuk)、原鸡属(Gallus)过滤(Bowtie2)。分类学分配是相对于MetaPhlAn2(db_v20)数据库进行的。还根据标准16S rRNA管线(USEARCH和SILVA(v4)DB)，通过16SrRNA分析(以2s250 bp进行16Sv4PCR/Illumina MiSeq测序)以12,230个读段/样品的稀疏截止值评估盲肠微生物群。

实施例27

未消化饲料和寡糖制剂的微生物转化

在从实施例23的取样鸟获得的家禽盲肠微生物群中，离体评估寡糖制剂对通过未消化饲料的微生物发酵产生的代谢物概况的影响。

将待测试的寡糖制剂的等分试样在水中稀释至20wt％寡糖，通过0.22微米PES注射器式过滤器进行微过滤，并且在厌氧条件下脱气。通过以下方式制备并同时灭菌家禽饲料消化物(模拟盲肠消化物)：将商业玉米-大豆肉鸡饲料的10g样品悬浮于50mL水中，然后使其在120℃下经受两个高压灭菌循环持续5分钟，之后进行水提取和重悬浮。将所得的饲料消化物在厌氧条件下脱气。

将所提取的盲肠样品在厌氧条件下解冻，并且用于在含有15％甘油的pH 7.4磷酸盐缓冲盐水(PBS)中制备20％w/v悬浮液。对所得的盲肠浆料进行分析，以确认其系统发育组成紧密地代表了最初取样的微生物群(在实施例24中测序)的系统发育组成。根据标准16S rRNA管线(USEARCH和SILVA(v4)DB)，通过16S rRNA分析(以2s250 bp进行16Sv4 PCR/Illumina MiSeq测序)以12,230个读段/样品的稀疏截止值评估盲肠浆料。按门丰度，盲肠浆料被测定为包含大约70％厚壁菌门(Firmicutes)、20％拟杆菌门(Bacteroidetes)、7％软壁菌门(Tenericutes)，并且其余为变形菌门(Proteobacteria)、蓝细菌门(Cyanobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)和疣微菌门(Verrucomicrobia)。

在厌氧条件下工作，将悬浮液的等分试样以2,000xg离心，通过移液管除去上清液，并且将沉淀物重悬以在基本生长培养基中形成1％w/v盲肠浆料，所述基本生长培养基由以下项的无菌水性混合物组成：900mg/L氯化钠、26mg/L二水氯化钙、20mg/L六水氯化镁、10mg/L四水氯化锰、40mg/L硫酸铵、4mg/L七水硫酸铁、1mg/L六水氯化钴、300mg/L磷酸氢二钾、1.5g/L磷酸氢二钠、5g/L碳酸氢钠、0.125mg/L生物素、1mg/L吡哆醇、1m/L泛酸、75mg/L组氨酸、75mg/L甘氨酸、75mg/L色氨酸、150mg/L精氨酸、150mg/L甲硫氨酸、150mg/L苏氨酸、225mg/L缬氨酸、225mg/L异亮氨酸、300mg/L亮氨酸、400mg/L半胱氨酸和450mg/L脯氨酸。

对于实施例9中的每种寡糖制剂，将20wt％寡糖溶液的25uL等分试样、饲料消化物的225uL等分试样和250uL的1％盲肠浆料一式三份加载至96孔深孔微量滴定板(例如，Costar 3958板)中。每个板含有一组空白孔，所述空白孔通过将25uL水、225uL饲料消化物和250uL的1％盲肠浆料合并而制备。然后将经加载的板在厌氧条件下在37℃下孵育45小时。孵育后，将孔的内容物移取到1.5mL Eppendorf管中，以2000xg微离心至少5分钟，并且收集所得的上清液。

实施例28

寡糖制剂对有益SCFA的刺激

通过HPLC分析来自实施例25的上清液以测定其短链脂肪酸(SCFA)含量。通过高效液相色谱法使用Agilent 1100系列HPLC仪器、使用300x7.8mm BioRad HPC-98H柱和用0.05％三氟乙酸水溶液流动相的等度洗脱来测定乙酸、乳酸、异戊酸、丙酸和丁酸。通过在210nm处的折射率和UV吸收进行检测。实施分析程序以检测分析样品中丁酸、丙酸、乙酸、乳酸和异戊酸的总浓度，因为选择流动相使得将分析物共轭碱的盐或其他离子物质总计检测为其相应的酸。

对于每种寡糖制剂，通过以下方式确定其对SCFA产生概况的影响：将每种SCFA物质的相对浓度与在与测试寡糖制剂相同的微量滴定板上的饲料消化物对照孔中观察到的相对浓度进行比较。对于每个孔和每种物质，通过计算log2(FC)来定量效应，倍数变化(FC)的以2为底的对数测定为分析物的浓度与饲料消化物对照的浓度的比率。

观察到由于寡糖制剂而引起的丁酸和丙酸产生的显著调节。

丁酸的上调：

相对于饲料消化物对照，实施例9.9的寡糖制剂表现出丁酸产生的10倍增加(log2(FC)＝3.4)。发现所述效应跨实验的多次重复是一致的，因为在超过三分之二的测试孔中(包括跨饲料消化物培养基的多种制剂)，观察到10倍增加。对于实施例9.8、9.10和9.11的寡糖制剂也观察到丁酸产生的显著增加。

相比之下，实施例9.7的寡糖制剂仅表现出丁酸产生的少量增加，其中log2(FC)＝0.6。此外，发现通过根据实施例9的程序改变组成而获得的163种其他寡糖制剂不提供丁酸的增加(log2(FC)～0)，或提供丁酸产生的减少(log2(FC)<0)。

丙酸的上调：

相对于饲料消化物对照，实施例9.5的寡糖制剂表现出丙酸产生的超过7倍增加(log2(FC)＝2.9)。发现所述效应跨实验的多次重复是一致的，因为在多个测试孔中(包括跨饲料消化物培养基的多种制剂)，观察到7倍增加。对于实施例9.3和9.4的寡糖制剂也观察到丙酸产生的显著增加。

相比之下，实施例9.7的寡糖制剂仅表现出丙酸产生的少量增加，其中log2(FC)＝0.8。此外，发现通过根据实施例9的程序改变组成而获得的191种其他寡糖制剂不提供丙酸的增加(log2(FC)～0)，或提供丙酸产生的减少(log2(FC)<0)。

实施例29

被饲喂寡糖制剂的动物的体内代谢组学分析

使用实施例24的取样盲肠微生物群对于实施例23的肉鸡体内评估实施例9.7的寡糖制剂的效应。

对于每个盲肠样品，将内容物解冻，并且将盲肠内容物的等分试样添加到D2O中以形成0.1w/v悬浮液。通过涡旋搅拌将所得的悬浮液均化，然后以14,000rpm离心至少五分钟以粒化。提取上清液并通过1D ¹H NMR进行分析。图17提供了示例性NMR谱，其指示了若干种代谢物的峰分配，所述若干种代谢物包括各种短链脂肪酸、各种核碱基(如尿嘧啶)、氨基酸(如色氨酸)和其他微生物组相关生化物质。

将NMR谱中的分配峰的积分制表。通过将实施例24的取样鸟分为以下两个群组来进行对比分析：(1)对照组，仅包括被饲喂对照饮食的鸟；和(2)处理组，仅包括被饲喂经处理饮食的鸟。在对照组与处理组之间对比NMR数据，以确定极性代谢物的相对位移。

非靶向体内代谢组学分析与实施例26的离体SCFA发现一致，因为相对于对照组，在处理组中观察到丁酸的约1.5倍的小增加。

图18显示由MetaboAnalyst 4.0评价PLS-DA分析，其绘制了通过NMR分析的极性代谢物的形心和群集组，并且显示出处理组中的鸟的代谢组学概况与对照组中的鸟的代谢组学概况的明显分离。

实施例30

SCFA产生对寡糖制剂的剂量反应

在实施例25的微生物转化中离体改变寡糖制剂的质量与饲料消化物的质量的比率，并且测量改变寡糖比率的剂量范围。

将待测试的寡糖制剂的等分试样在水中稀释至20wt％寡糖，通过0.22微米PES注射器式过滤器进行微过滤，并且在厌氧条件下脱气。通过以下方式制备并同时灭菌家禽饲料消化物：将来自实施例23的50g对照饲料样品悬浮于50mL水中，然后使其在120℃下经受两个高压灭菌循环持续5分钟，之后进行水提取和重悬浮。将所得的饲料消化物在厌氧条件下脱气。

将实施例23的所提取的盲肠样品在厌氧条件下解冻，并且用于在含有15％甘油的pH 7.4磷酸盐缓冲盐水(PBS)中制备20％w/v悬浮液。在厌氧条件下工作，将悬浮液的等分试样以2,000g离心，通过移液管除去上清液，并且将沉淀物重悬以在以下项的无菌水性混合物中形成1％w/v盲肠浆料：900mg/L氯化钠、26mg/L二水氯化钙、20mg/L六水氯化镁、10mg/L四水氯化锰、40mg/L硫酸铵、4mg/L七水硫酸铁、1mg/L六水氯化钴、300mg/L磷酸氢二钾、1.5g/L磷酸氢二钠、5g/L碳酸氢钠、0.125mg/L生物素、1mg/L吡哆醇、1m/L泛酸、75mg/L组氨酸、75mg/L甘氨酸、75mg/L色氨酸、150mg/L精氨酸、150mg/L甲硫氨酸、150mg/L苏氨酸、225mg/L缬氨酸、225mg/L异亮氨酸、300mg/L亮氨酸、400mg/L半胱氨酸和450mg/L脯氨酸。

对于待测试的每种寡糖制剂，将20wt％寡糖溶液的等分试样与饲料消化物的等分试样在96孔深孔微量滴定板(例如，Costar 3958板)的孔中合并。然后用1％盲肠浆料的等分试样接种孔。对于每种寡糖，制备反映寡糖质量与饲料消化物质量的比率范围的一系列等分试样，如下表12所示。

表12.寡糖等分试样

剂量	uL寡糖	uL饲料消化物	uL浆料	相对于提取物的寡糖％
					水平1	0	250	250	0％
水平2	12.5	237.5	250	5％
					水平3	25	225	250	10％
水平4	50	200	250	20％
					水平5	250	0	250	100％

然后将经加载的板在厌氧条件下在37℃下孵育45小时。孵育后，根据实施例26的方法，将孔的内容物离心，并且通过HPLC分析上清液中的SCFA。图19提供了剂量反应，其测量为由寡糖制剂对比饲料消化物提供的对SCFA的摩尔％选择性与培养基中的摩尔％碳的关系。观察到明显的非线性剂量反应，这表明寡糖制剂调节微生物发酵对SCFA的选择性，这取决于提供给微生物群的寡糖制剂的选择。与实施例9.3的寡糖制剂相比，实施例9.1的寡糖制剂的调节效应特别强。

此外，在低剂量的寡糖制剂下观察到调节效应。例如，对于实施例9.1的寡糖制剂，在微生物群可利用的可发酵碳的仅10％-20％来自寡糖制剂本身(即，可发酵碳的80％-90％来自饲料消化物培养基)的包含率下，40％-50％的碳被转化为SCFA。将这与碳的100％是归于实施例9.1的寡糖制剂(即，在生长培养基中不存在饲料消化物)的情况进行比较，仅约15％的碳被转化为SCFA。

令人惊讶的是，在离体生长中观察到的SCFA的总质量超过了寡糖制剂本身的质量的理论最大值，这提供了证明寡糖起到调节生长培养基中存在的其他碳向SCFA的代谢通量的作用的确凿证据。

实施例31

尽管微生物区系组成有变化的效应一致性

使用从不同位置生长的动物获得的盲肠微生物群重复实施例25-26的离体发酵。通过16S rRNA测序进行的分析确认，系统发育组成与实施例25-26的系统发育组成显著不同。对于一个盲肠微生物群样品，厚壁菌门的丰度为约65％，并且拟杆菌门的丰度为约16％。对于另一个盲肠样品，厚壁菌门和拟杆菌门的丰度都为约25％，其中幽门螺杆菌属大于5％。

根据实施例25的程序在微量滴定板中进行使用各种盲肠微生物群的厌氧生长，并且使用实施例26的方法通过HPLC测量所得的丁酸和丙酸浓度。将每种寡糖制剂和SCFA的一致性得分确定为相应SCFA的浓度为跨给定SCFA分析物和寡糖制剂的所有孔(即，跨不同微生物群接种物)观察到的平均浓度的至少20％的孔的分数。

特别是对于实施例9.8的寡糖制剂，观察到丁酸和丙酸的高一致性，其中一致性得分在80％-90％之间。来自实施例9的其他寡糖制剂表现出高于70％的一致性得分。实施例9.14的寡糖制剂表现出低一致性，其中稠度得分低于50％。

实施例32

寡糖制剂的代谢组学评价

使用实施例24的取样盲肠微生物群对于实施例23的肉鸡进一步离体评估实施例9的寡糖制剂的代谢组学效应。

对于所分析的每种寡糖，用90uL的含有0.2％甲酸和同位素标记的内标物的乙腈/甲醇溶剂稀释大约10uL的实施例25的相应上清液。使用用梯度洗脱的反相HPLC(Waters150x2mm Atlantis HILIC柱)和使用3.5kV的电喷雾电离的飞行时间质谱法(TOF-MS)检测通过LC/MS分析所得的稀释液。处理所得的LC/MS数据以产生一系列保留时间和母体离子分子量对。相对于代谢组数据库(HMDB)搜索MW重量数据[Wishart DS,Tzur D,Knox C等人,HMDB:the Human Metabolome Database.Nucleic Acids Res.,35(Database issue),D521-6(2007)]以产生具有相应的MS峰强度(通过TIC测量)的代谢物的列表。

实施例33

与炎症相关联的代谢物的下调

实施例29的代谢组效应的对比分析通过以下方式来进行：将上清液分组至按寡糖制剂的群组中，确定每种分析物相对于对照的倍数变化(FC)和log2(FC)，然后筛选由于寡糖制剂引起的统计学上显著的降低(log2(FC)<0并且P<0.05(通过ANOVA))。

发现实施例9.3的寡糖制剂提供组胺的显著降低。实施例9.6和9.7的寡糖制剂都不减少组胺。

实施例34

微生物氨产生的下调

使用实施例25和27的方法离体评估寡糖制剂对微生物氨产生的影响。使盲肠微生物群在实施例25的培养基上厌氧生长，而不向生长中添加饲料消化物。生长后，将培养物转移到1.5mL Eppendorf管中，并且以4,000xg离心10分钟。将10微升的所得上清液转移回96孔板的孔中以用于通过酶促测定(Biovision K370-100氨测定试剂盒)进行氨分析。具体地，用测定缓冲液将每个10uL等分试样稀释至50uL。通过在涡旋混合下重悬浮于200uL的测定缓冲液中来制备测定酶混合物、显影剂和转化酶。通过添加42uL的测定缓冲液、2uL的Oxired探针、2uL的酶混合物、2uL的显影剂和2uL的转化酶来制备测定主混合物。然后将50uL的主混合物添加到每个孔中。将板用箔密封，并且在黑暗中在37℃下孵育60分钟。在570nm处读取OD，并且通过与使用已知浓度的氯化铵制备的标准曲线进行比较来测定氨浓度。对于实施例9.7的寡糖制剂观察到氨的显著减少。

实施例35

被饲喂寡糖制剂的仔猪的生长和取样

使保育猪接受实施例15的饮食而生长，以确定寡糖制剂对猪回肠、盲肠和粪便微生物组的功能宏基因组学的影响。

将一百四十四头雷东(Redon)x大白(Large-White)断奶仔猪(初始体重为8.54±1.70kg)在环境受控房间中的平盖板舍中饲养42天。将动物分配到在9个围栏(每个围栏4只动物)中的36头猪仔的4个相等组。每个围栏具有带塑料涂层的焊接钢丝地面，并且配备有两个喂水奶嘴和两个不锈钢个性化饲喂器。将房间湿度保持在50％，并且将温度最初保持在27℃并按约2℃/周每周地降低至21℃-22℃。使用表13的饮食构建根据按照NRC(2012)营养建议配制的两阶段饮食程序饲喂动物。

表13.保育猪饮食组成

成分	开食前(wt％)	开食(wt％)
			玉米	52.20	62.25
大豆粉	26.00	26.00
			玉米淀粉	6.00	-
大豆蛋白浓缩物	5.00	3.00
			碳酸钙	0.60	0.55
磷酸二钙	1.7	1.50
			碳酸氢钠	0.45	0.40
氯化钠	0.25	0.20
			L-赖氨酸	0.80	0.65
L-苏氨酸	0.30	0.25
			L-甲硫氨酸	0.20	0.20
大豆油	3.00	2.00
			维生素和矿物质预混合物	3.50	3.00

从第0天至第14天饲喂开食前饮食；并且从第15天至第42天饲喂开食饮食。所有饮食都将作为糊状饮食配制品随意提供。将猪分为根据表14的处理组。

表14：保育猪处理组

与增加494.9g/天的对照组相比，处理组中仔猪的平均每日增重(ADWG)测定为508.1g/天。发现对照组的饲料转化率为1.781kg/kg，而处理组的饲料转化率为1.748kg/kg。

实施例36

寡糖制剂对功能宏基因组学的影响

根据实施例33的一般方案，在围栏中饲养保育猪。将猪分为两个处理组：向对照组饲喂15.3(CTR)和15.5(CTR)的饮食；以及向处理组饲喂15.3(CTR)和15.5(TRT)的饮食。对于每个处理组，随机选择13只动物，对其实施安乐死，并且解剖以获得回肠、盲肠和粪便(结肠)微生物群样品。

通过SAMBO DNA提取制备69个微生物群样品，并且通过MetaQuant(MGP)进行测序。平均每个样品产生21.6M个净化读段。使用METEOR进行映射和计数。用Bowtie2(同一性95％)进行映射以除去宿主污染物(猪基因组)，并其针对含有9M个基因(回肠、盲肠和粪便微生物组)的定制基因目录对所得的序列进行谱分析。使用MetaOMineR进行生物统计学分析。获得大于2×10⁷个高质量读段。为避免由于映射速率变异性而引起的偏差，将所有样品的大小缩小为10M个映射读段，并且根据基因长度和测序深度通过FPKM对基因丰度进行归一化。

基因丰富度和功能宏基因组分析：

将样品分为根据处理组和微生物组类型(回肠、盲肠、粪便)的群组，并且进行对比分析以测定基因丰富度的统计学上显著的变化，所述基因丰富度作为不同基因的数量来测量。处理组中的动物表现出基因丰富度的2-5倍增加，对于盲肠微生物群在P<0.006下是显著的，并且对于粪便微生物群在P<0.06下是显著的(魏氏检验)。还观察到回肠基因丰富度的数值增加。

使用KEGG数据库(v82)注释基因，并且使用内部管线将所述基因根据肠道代谢模块(GMM)[Darzi,Y.等人,The ISME Journal,10,1025-1028(2015)]进行分组。对GMM丰度数据进行对比分析，以确定处理组中相对于对照组受调节的代谢途径和功能。

图20展示了寡糖制剂对仔猪微生物组的功能宏基因组学的影响。在回肠微生物区系中观察到与产乙酸作用相关联的途径的统计学上显著的增加。在盲肠中观察到尤其与果胶降解和SCFA产生相关联的途径的统计学上显著的增加。此外，在处理组的盲肠微生物群中富集产生丁酸和丙酸的SCFA途径。特别地，处理组中的动物在与氢代谢和腐胺降解相关联的盲肠微生物群的代谢途径中表现出统计学上显著的减少。与厌氧脂肪酸β氧化相关联的粪便微生物组中的途径也显著减少。

实施例37

与健康相关联的代谢物的上调

实施例31的代谢组效应的对比分析通过以下方式来进行：将上清液分组至按寡糖制剂的群组中，确定每种分析物相对于对照的倍数变化(FC)和log2(FC)，然后筛选由于寡糖制剂引起的浓度的统计学上显著的增加(P<0.05，通过ANOVA)。

发现实施例9.7的寡糖制剂提供多种靶代谢物的显著增加，所述多种靶代谢物包括龙胆酸、α-萜品醇、D-芳樟醇、桉树脑、香叶醇。相比之下，实施例9.6的寡糖制剂不提供这些代谢物的显著增加。

实施例9.3的寡糖制剂提供岩藻糖基化乳寡糖2-岩藻糖基乳糖的显著增加。相比之下，实施例9.7的寡糖制剂不提供这些代谢物的显著增加。

实施例38

与情绪相关联的代谢物的上调

实施例9.3的寡糖制剂提供神经化学物质γ-氨基丁酸(GABA)的显著增加，以及2-氨基异丁酸、D-α-氨基丁酸和3-氨基异丁酸的增加。相比之下，实施例9.6和9.7的寡糖制剂都不提供GABA的显著增加。

实施例9.7的寡糖制剂提供神经化学物质多巴胺的显著增加，而实施例9.3和9.6的寡糖制剂都不增加多巴胺。

实施例39

与风味和肉品质相关联的代谢物的上调

实施例9.3的寡糖制剂提供风味化合物1-甲硫基丙烷和2-甲硫基乙醇的显著增加。实施例9.7的寡糖制剂提供香味化合物对薄荷-1-烯-4-醇以及化合物1-硝基庚烷、辛醛、2-辛酮和2,3-庚烷二酮的显著增加。

实施例9.6的寡糖制剂未提供针对风味、香味或肉品质的任何代谢物的显著增加。

实施例40

将丁酸靶向递送到动物后肠的方法

实施例23-27的结果展示了将丁酸靶向递送到肉鸡的后肠(例如，盲肠和下消化道)的方法。将寡糖制剂(如实施例9的那些)掺入饲料中并提供给动物。在饲料本身中没有掺入含丁酸的饲料添加剂。摄入后，寡糖制剂在其他未经消化的饲料组分(例如，盲肠消化物)存在下由肠道微生物区系加工，并且转化为丁酸物质。

实施例41

将精油靶向递送到动物后肠的方法

实施例41的结果展示了将精油靶向递送到肉鸡的后肠(例如，盲肠和下消化道)的方法。将实施例9的寡糖制剂掺入饲料中并提供给动物。在饲料本身中没有掺入精油饲料添加剂。摄入后，寡糖制剂在其他未经消化的饲料组分(例如，盲肠消化物)存在下由肠道微生物区系加工，并且转化为精油，包括D-芳樟醇、桉树脑和香叶醇以及对薄荷-1-烯-4-醇。

实施例42

跨多变条件的肉鸡的活体生长性能

通过跨多个地区、一年中的时间、背景饮食类型、鸟遗传学和管理实践(包括褥草处理和球虫病控制计划)进行的一系列独立研究，在体内评估寡糖制剂对商业肉鸡的活体生长性能的影响。在每项研究中，将鸟分配到处理组，包括一个对照组和一个或多个经处理组。仅向对照组饲喂背景饮食。向经处理组饲喂补充有指定剂量的实施例9的寡糖制剂的背景饮食。在选定的研究中，包括用于养禽业的商业饲料添加剂作为比较实施例。

对于每项研究，将鸟饲养在位于典型肉鸡舍的围栏中，每个围栏中具有指定数量(Hd/Rep)的鸟。通过将围栏随机分配到处理组来实施统计重复，每种处理有指定数量(Reps/Trt)的重复。表15汇总了分析中所包括的每项研究的方案细节。

表15方案

研究结果包括鸟重量(BW)、饲料摄取量(FI)、饲料转化率(FCR)、死亡百分比(按头)和死亡重量。围栏是统计单位。在可能的情况下，实施空间阻断，并且将处理组随机分配到街区。

背景饮食：

根据当地行业实践，在饮食阶段饲喂鸟，总研究长度在35与49天之间。将开食阶段饮食通常从鸟放置到研究第15天作为粉碎物来提供。所有饮食都不含抗生素生长促进剂。

开食对照饮食构建呈现于表16中(NA＝数据无法从站点获得)。

表16.开食对照饮食

将生长阶段饮食从第16天到第24天作为粒料来提供。生长对照饮食构建呈现于表17中(NA＝数据无法从站点获得)。

表17.生长阶段饮食

将肥育阶段饮食从第16天到第24天作为粒料来提供。肥育对照饮食构建呈现于表18中(NA＝数据无法从站点获得)。

表18.肥育阶段饮食

处理组：

对于每项研究，设计处理组以比较寡糖制剂与对照饮食的效应。对于选定的研究，设计处理组以评估寡糖制剂的剂量-反应曲线。通过以下方式获得经处理饮食：共混足够量的来自实施例9的相应寡糖制剂，使得最终寡糖含量达到指定剂量(基于干固体的ppm单位)。在选定的研究中，比较实施例(Comp.Ex 36)由商业全酵母产品(Diamond V XPCOriginal)提供。如表19中呈现的分配处理。

表19处理分配

使用本领域已知的标准设备和方法来制备背景饮食和经处理饮食两者。对于经处理饮食，在背景饮食之上配制寡糖制剂和比较产品，并且在造粒前将其添加到混合器中。通过饲料中(in-feed)测定来确认寡糖包含量。

活体生长阶段和取样：

随意提供饲料和水。在每项研究中都根据相应地区的当地行业实践实施商业照明和温度程序。每日检查围栏，并且在研究日志中记录任何死亡的计数和重量。不需要兽医干预。

对于每个饮食阶段，对于每个围栏测量总围栏增重、鸟的起始数量和结束数量以及总饲料消耗量。对于每个围栏，通过将总围栏重量除以称重时围栏中的鸟数量来计算平均鸟重量(BW)。对于每个围栏，通过将间隔内的总饲料摄取量除以相应围栏的总增重来计算饲料转化率(FCR)。通过加回在此期间死亡的总重量，将FCR针对死亡进行调整(FCRma)。为了考虑围栏重量的差异，使用本领域已知的方法将FCRma针对共同体重进行校正，以获得每个围栏的经校正FCR(cFCR)。对于各种鸟遗传学，使用对于相应遗传学已公布的随生长天数变化的BW和FCR性能目标测定校正因子。

在选定的研究中，在第15天和/或在最后研究日从每个围栏中随机选择一只鸟进行取样。对于每只取样鸟，将5mL血液从翅膀静脉抽入血清vacutainer中。凝固后，通过离心回收血清，移取出，并且在干冰上冷冻以用于以后的处理。然后根据当地伦理程序对每只取样鸟实施安乐死，并且进行解剖。将盲肠内容物移取到5mL锥形管中，并且立即快速冷冻以进行微生物组全基因组测序和盲肠代谢组学。获取少量切除的回肠组织，对其进行处理以使RNA失活并冷冻以用于以后的基因表达分析。

实施例43

荟萃分析

进行实施例42的体内研究的统计荟萃分析，以相对于被饲喂对照饮食的鸟评估寡糖饲料添加剂和比较产品对鸟性能的影响。所述分析采用处理组作为固定效应和随机效应的混合线性模型用于嵌套块的研究。在R版本3.4.4(2018-03-15)中进行统计分析。将结果通过最小二乘均值与P<0.05下的统计显著性进行评估。根据Tukey方法进行成对比较，并且为其分配字母标签：a、b、c、d…。在其Tukey分组标签中没有共同字母的处理在成对比较下在P<0.05下显著不同。

饲料转化率：

cFCR的研究效应在P<0.05下是显著的。相对于对照饮食，寡糖处理在500ppm包含量下提供cFCR的至少2.7pt改善，而比较实施例在1250ppm包含量下提供cFCR的2.2pt改善。实施例9.4的寡糖在500ppm包含量下提供cFCR的6.4pt改善。cFCR的荟萃分析结果呈现于表20中。

表20.cFCR荟萃分析

相对于比较实施例Comp.Ex.42，寡糖处理组表现出更高的效应一致性。对于多项研究中所包括的每种寡糖，通过以下方式来评估其对cFCR影响的一致性：确定其中相对于对照观察到给定值的cFCR改善的研究的分数。例如，实施例9.2的寡糖在500ppm包含量下在80％研究中提供至少3pt cFCR益处，在60％研究中提供至少4pt cFCR益处，在40％研究中提供至少5pt cFCR益处，并且在40％研究中提供至少6pt cFCR益处。比较实施例在1250ppm包含量下仅在25％研究中提供3pt cFCR益处，并且未在任何研究中提供4pt cFCR益处或更高益处。结果呈现于表21中。

表21.对cFCR的处理效应的一致性

观察到cFCR与饮食中寡糖的包含率之间的明显剂量反应。对于Ex.9.2的寡糖，在100ppm包含量下观察到2.4pt cFCR益处(P>0.05)，在250ppm包含量下观察到3.7pt cFCR益处(P<0.05)，在1000ppm包含量下观察到6.4pt cFCR益处(P<0.05)。

鸟重量：

BW的研究效应在P<0.05下是显著的。相对于对照饮食，寡糖处理在500ppm包含量下提供至少48.9克增加的体重，而比较实施例在1250ppm包含量下提供39.6克增加的体重。相对于对照，实施例9.5的寡糖在500ppm包含量下提供81.8克增加的BW。BW的荟萃分析结果呈现于表22中。

表22.BW的荟萃分析

群均匀度：

相对于被饲喂对照饮食的鸟，被饲喂500ppm包含量的寡糖制剂的鸟表现出改善的群均匀度。对于每个处理组，通过以下方式来评估群均匀度：计算落在其相应研究的平均鸟重量的±5％左右范围内的鸟重量的分数。跨所有研究36.1-36.15求平均，被饲喂对照饮食的鸟中有81.7％落在平均鸟重量的±5％内，而被饲喂用Ex.9.2的寡糖处理的饮食的鸟中有91.3％落在平均鸟重量的±5％内。均匀度效应在P<0.01下是显著的，如通过非参数Ansari-Bradley检验测量的。

实施例44

瘤胃微生物组的代谢组学转变

在体外证明实施例9的寡糖制剂对奶牛瘤胃微生物组的代谢输出的调节效应。在早上饲喂之前和紧接挤奶后从商业奶牛收集瘤胃液样品。对于每只取样动物，使用胃管技术提取瘤胃液[Ramos-Morales E,A Arco-Pérez,AI Martín-García,DR

Animal Feed Science and Technology 198,57-66(2014)]并转移到热烧瓶中。在使用前过滤液体，并且在样品收集的30分钟内进行体外实验接种。

在125mL血清瓶中在39℃下进行体外分批培养物孵育持续72小时。通过以下方式来制备瓶：将500mg的50:50燕麦-干草浓缩物饮食[参见例如

DR等人AnimalFeed Science and Technology,216,1-18(2016)]添加到50mL的孵育培养物中，所述孵育培养物包含16.7ml瘤胃液和33.3ml厌氧缓冲溶液。将每个瓶的初始pH调节至大约6.2。通过省略饮食浓缩物，针对每个不同的瘤胃样品一式两份制备空白瓶。

通过在孵育开始之前向瓶中添加指定质量的寡糖来评估寡糖对孵育的影响。选择寡糖的添加质量以获得以微摩尔/升接种物为单位测量的目标剂量。在单体糖基础上测定摩尔量。对于n＝3个不同的瘤胃样品中的每一个，将每种寡糖处理一式三份进行，并且将对照(不含有添加的寡糖)一式两份进行。以6个剂量水平分析寡糖处理：0(对照)、10、50、100、250和500微摩尔/升。

接种后，将瓶置于烘箱培养箱中的托盘上，并且在39℃下保持72小时。在孵育开始后2、4、6、8、12、24、36、48和72小时记录气体发酵体积。每次气体读取后轻轻搅拌瓶。在24小时，从培养物中收集2mL液体以测量微生物组代谢物和氨型氮。使用经校准的pH探针测量pH。通过气相色谱法和火焰电离检测(AutoSystem；Perkin-Elmer Corp.，美国康涅狄格州谢尔顿)分析挥发性脂肪酸(VFA)，并且通过比色法分析氨型氮。以毫摩尔/升为单位测定总VFA浓度，并且将乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸和戊酸的摩尔比例计算为单独物质的摩尔浓度与总VFA的摩尔浓度的比率。根据所测得的乙酸和丙酸浓度计算乙酸/丙酸比。

使用包括寡糖处理组的固定效应的模型通过统计分析确定寡糖处理与对照的效应。动物是实验单位。当检测到显著效应时，使用SPSS版本21(IBM Corp.，美国纽约州阿蒙克)通过Fisher保护的最小显著差异检验来比较均值。P<0.05被认为是统计学上显著的，在P<0.10时具有差异趋势。

VFA微生物组代谢物：

对于实施例9.2的寡糖，在所有剂量水平下相对于对照观察到总VFA产生的数值增加。在250μmol/L的剂量下观察到最大VFA输出。在每个剂量水平下观察到寡糖增加乙酸产生的明显效应(P<0.01)，其中在250μM剂量水平下相对于对照具有15％增加。相对于对照，乙酸的摩尔比例也增加。类似地，相对于对照，丙酸的总摩尔浓度显著增加(P<0.05)；然而，丙酸的摩尔比例降低。所测定的VFA的详细细分呈现于表23中。

表23.VFA微生物组代谢物

观察到寡糖对微生物组的代谢组输出的催化效应。例如，在10微摩尔浓度下，Ex.9.2的寡糖将来自瘤胃微生物组的乙酸产生从48.7毫摩尔增加至53.2mM，这表明每摩尔寡糖增加450摩尔的乙酸。

pH、氨型氮和总气体产生：

相对于对照，对于寡糖处理观察到总气体产生的数值下降。在10至500微摩尔寡糖的剂量范围内，pH降低约0.1个pH单位，具有统计学趋势(P＝0.057)。未观察到氨型氮由于用寡糖制剂处理而增加，这表明暴露于实施例9.2的寡糖不会导致蛋白质脱氨的增加。

实施例45

改善乳品质的方法

向奶牛饲喂包含一种或多种实施例9.2的寡糖制剂的饮食。观察到瘤胃乙酸和丙酸产生的增加，在乙酸对丙酸瘤胃浓度上具有相对降低。与从被饲喂类似饮食但没有寡糖制剂的动物获得的乳相比，从经处理动物获得的乳含有更高百分比的乳固体。

实施例46

改善牛肉品质的方法

经由饲养场向肉牛提供包含一种或多种实施例9.2的寡糖制剂的饮食。观察到瘤胃乙酸和丙酸产生的增加，在乙酸对丙酸瘤胃浓度上具有相对降低。与从被饲喂类似饮食但没有寡糖制剂的动物获得的牛肉相比，从经处理动物获得的牛肉含有更高百分比的纹路。

实施例47

减少反刍动物的发酵性气体排放的方法

向母牛、家牛或其他反刍动物饲喂包含一种或多种实施例9.2的寡糖制剂的饮食。与被饲喂类似饮食但没有寡糖制剂的动物相比，总瘤胃发酵性气体产生和由此产生的排放减少。

实施例48

按比例放大进行制造的重复批次

将寡糖制剂的生产规模增加到720L顶置式搅拌釜反应器的生产规模。以720L规模进行使用源自实施例9.2的按比例放大程序的十二个批次反应。对照预先确定的QC接受标准表征所得的寡糖制剂，以进行批次合格性鉴定并评估工艺稳定性。

对于十二个批次，在实施例9.2的标称条件附近的范围内有意地改变诸如温度、反应时间和反应压力等工艺条件，以评估所得的产物对在典型制造环境中可能预期的工艺条件的合理变化的敏感性。对于选定的批次，使用原位粘度探针来监测反应器内容物粘度的时间依赖性。在某些批次中，反应停止时间采用基于连续粘度测量的过程中控制(IPC)。通过经由反应器和辅助釜上的负荷传感器的质量或通过体积流量和时间来测量材料量，包括反应物、蒸馏水和逐步形成的冷凝物的分配量。

通过对在反应结束时(即，在pH中和和稀释之前)抽取的反应器内容物的代表性等分试样进行卡尔·费歇尔滴定来测量反应器产物的最终水含量。在120℃的反应温度下，测定反应产物的水含量为基于原样的8wt％和9wt％水。在130℃的反应温度下，测定反应产物的水含量为在基于原样的5wt％与7wt％水之间。

通过目视检查确定所有批次的所得的寡糖浆液外观为焦糖浆液。通过卡尔-费歇尔滴定法测定总溶解固体含量，通过HPLC/GPC色谱法测定残留单体含量、MWn和MWw，通过经校准的pH计测定pH，并且通过LC-MS/MS测定脱水DP2含量。如表24所示，获得以下批次的表征数据(N/R＝“数据未报告”)：

表24.对寡糖制剂的表征

实施例49

相对于益生元改善狗中的丁酸产生

在家狗(家犬)中评价寡糖制剂对肠道微生物组代谢物的影响。与两种常见的益生元提供的比较实施例相比时，观察到改善的丁酸产生。

从六只不同品种、年龄和性别的狗获得粪便微生物组样品。将所收集的样品立即冷冻，并且使用实施例27和28的方法评价短链脂肪酸产生。离体评价微生物组样品在提供实施例9.2和9.3的寡糖制剂和两种益生元比较实施例时的有益短链脂肪酸的产生：

1.比较实施例2：短链果糖寡糖(scFOS)益生元(

Beghin Meiji)；以及

2.比较实施例3：玉米棒木糖寡糖(XOS)益生元(Longlive Bio-technology，山东)。

图34示出了对于四个处理组中的每一个获得的丁酸和丙酸浓度，证明了提供有实施例9的寡糖制剂的狗微生物群的关键有益短链脂肪酸的优异产生。进行统计分析以确认改善。例如，对于实施例9.2的寡糖制剂，增加的丁酸产生在P<0.05下是显著的，如表25所展示。

表25.狗中丁酸产生的统计分析

处理组	平均浓度	DF	成对比较(P<0.05)
				Comp.Ex.2	0.0939	5	a
Comp.Ex.3	0.1633	5	ab
				Ex.9.2	0.2961	5	c
Ex.9.3	0.2622	5	bc

实施例50

寡糖制剂的pH调整

通过以下方式一式三份测定实施例9.2的寡糖制剂在50wt％固体含量下的pH：用1.80±0.02mL去离子水稀释5.00±0.05克等分试样并通过涡旋搅拌进行混合以获得均匀浓度。用经校准的pH计(VWR，Symphony B30PCI)测量每个等分试样的pH，以获得2.4个pH单位的平均读数。

向1.2kg实施例9.2的寡糖制剂中添加6.53mL的1.0摩尔氢氧化钠水溶液。将所得的混合物剧烈混合以获得均匀的pH经调整的浆液。然后如上所述一式三份测定所得的经调整浆液在50wt％固体含量下的pH，以获得4.1个pH单位的平均值。

对于各种规模下的重复批次合成重复pH调整程序，但是在向产物寡糖组合物中提供碱的程序中具有某些变化。对于一个批次，在反应水的稀释之前，作为反应的最后步骤进行pH调整。在另一个批次中，通过首先将所需量的碱溶解于稀释水中来将pH调整与稀释步骤同时进行；因此，以单个步骤将碱和稀释水一起添加使反应淬灭，从而产生在所需pH下的最终浆液。在另一个批次中，将碱作为食品级氢氧化钠粒料来提供。在另一个批次中，在稀释和pH调整之前，将10ppm的食品级硅氧烷乳剂(Dow Xiameter AFE-0100)添加到反应中。

实施例51

寡糖制剂的玻璃粉配制品的制备

将大约50克实施例9.1的寡糖制剂分配到干燥托盘上，并且置于在60℃下的强制空气对流加热器中以产生焦糖色脆性玻璃。将玻璃从干燥托盘中移取出，并且用剪切旋转磨机研磨，以产生浅橙色的可流动粉末。通过筛分测定粉末的粒度在100与2000微米之间，其中90％的质量低于1350微米。通过氦气测比重术测定粗磨粉末的真密度为1.3063g/mL。观察到所得的粉末是可流动的。

使用锤磨机重复配制程序以获得细粉，其中90％的粉末质量表现出低于196微米的粒度。测定细磨粉末的真密度为1.5263g/mL。所得的粉末既不是稳定的也不是可流动的。

使用两个温度循环程序对粉末进行DSC测量。在第一程序中，温度以5℃/min的速率从0℃斜升到160℃，然后以-5℃/min的速率退火回到0℃，之后最后加热回到160℃。在第二程序中，温度以5℃/min的速率从-50℃斜升到50℃，以-5℃/min的速率退火到-60℃，然后以5℃/min的速率加热到60℃。观察到粉末表现出在20℃与40℃之间的玻璃化转变温度，这取决于在5wt％与10wt％水分之间的固体的残留水含量。

对于实施例9.2、实施例9.3、实施例9.4和实施例9.5的寡糖制剂中的每一种，重复碾磨配制过程。粉末容易地再溶解于水和醇-水混合物中，但是不溶于丙酮、甲醇和无水乙醇中。

实施例52

载体负载的粉末配制品的制备

在室温下将等质量的实施例9.2的寡糖制剂的70wt％水性浆液和硅藻土合并以产生稳定的可流动粉末。所得的粉末包含约35wt％的吸附寡糖(基于干固体)和约50wt％的载体。通过筛分测量粉末的粒度分布。按重量计10％的粉末表现出低于290微米的粒度，按重量计50％的粉末表现出低于511微米的粒度，并且按重量计90％的粉末表现出低于886微米的粒度。如使用标准曝气和可压缩性测试测定的，粉末对偏析和内聚而言是稳定的。通过氦气测比重术测定所得的粉末的真密度为1.8541g/mL。

使用饲料级二氧化硅重复载体负载配制以产生稳定的可流动粉末，相对于最终粉末，负载量为至少50wt％的寡糖制剂(基于干固体)。测量所得的粉末的真密度为1.5562g/mL。

实施例53

挤出固体形式的制备

通过以下方式来制备固体挤出产品：将20％的实施例9.2的寡糖制剂与粗面粉共混，并且通过夹套式双螺杆染料挤出机配制混合物，以形成粒度在0.2mm与3.0mm之间的可流动粉末，其中90％的质量低于2mm粒度。观察到所得的粉末是自由流动且稳定的。

实施例54

稳定粉末配制品的制备

评估固体配制品(包括实施例51-53的固体配制品)以测定其稳定性和吸湿性。观察到实施例52和53的粉末对偏析和附聚而言是稳定的，而观察到实施例51的粗磨粉末在偏析方面是不稳定的。

将待测试的每种粉末配制品的样品置于50％相对湿度和65％相对湿度下的密封气候室中，在25℃下进行长达两周的暴露。在所测试的形式中，若干种在暴露于湿度时表现出很少或没有质量增加，并且在两周暴露期后仍可流动。发现实施例52的细磨粉末在暴露于湿度的情况下是不稳定的。

实施例55

寡糖制剂中残留催化剂的测定

通过离子色谱法测定寡糖制剂的残留酸催化剂含量。将寡糖制剂的80与100毫克之间的粉末配制品(例如如实施例51中所述获得)溶解于恰好1.00毫升中，并且在必要时离心以除去微粒。使用配备有电导率检测的Thermo Dionex ICS-3000系统、4x250mm Ion PacAS19A柱、Ion Pac AS19G50 4x50mm前置柱和使用在水中的KOH作为洗脱液的连续再生CR-ATC阴离子捕获柱，在30℃下通过离子色谱法分析所得的溶液。在注射后的前十分钟内，在10mM KOH下进行洗脱，之后是梯度洗脱，在25分钟时线性渐增至55mM KOH，然后在26分钟时降低至10mM KOH，并且在10mM KOH下保持直到程序结束。

对于实施例9.2的寡糖制剂，通过参考使用(+)-樟脑-10-磺酸的真实样品产生的标准校准曲线来测定残留催化剂的浓度。对实施例9.2的寡糖制剂的代表性批次进行分析，并且测定残留催化剂浓度为0.62mg/g的70wt％浆液。

实施例56

针对批次接受性对残留催化剂浓度的合格性鉴定

将实施例55的残留催化剂测定与批次接受标准进行比较，以确定批次对进一步使用的适合性。将产物寡糖制剂中残留催化剂浓度的接受限预先制定为<1.0mg/g产物浆液。残留催化剂的测量值为0.62mg/g产物浆液。因此，对于所测试批次，符合接受标准，并且接受所述批次用于进一步使用。

实施例57

浆液产品的配制

根据实施例50的程序将实施例9.7的寡糖制剂用食品级氢氧化钠pH调整至4.2的pH。将所得的浆液包装到带有防篡改帽的20升大玻璃瓶中。临密封容器之前，取500克样品并对其进行品质测试。根据FCC附录X：碳水化合物(淀粉、糖和相关物质)：总固体(Carbohydrates(Starches,Sugars,and Related Substances):TOTAL SOLIDS)的方法，确认浆液的总固体含量大于70wt％。根据FCC附录X：碳水化合物(淀粉、糖和相关物质)：还原糖测定(Carbohydrates(Starches,Sugars,and Related Substances):REDUCING SUGARSASSAY)的方法，确认作为D-葡萄糖的还原糖含量基于干重小于50％。使用FCC附录II：物理测试和测定：C.其他：炽灼残渣(硫酸盐灰分)方法II(用于液体)(Physical Tests andDeterminations:C.OTHERS:RESIDUE ON IGNITION(Sulfated Ash)Method II(forLiquids))的方法，确认硫酸盐灰分基于干重小于1％。使用优化的Monier Williams方法确认二氧化硫含量低于40mg/kg。用AOAC国际官方方法2013.06的方法确认铅含量低于1mg/kg。使用CMMEF第7章的方法确认总需氧菌平板计数低于1000cfu/g。使用AACC国际认可方法42-50的方法确认总酵母和霉菌低于100cfu/g。使用FDA BAM第4章的方法确认大肠杆菌群低于10MPN/g。使用FDA BAM第4章的方法确认大肠杆菌(E.coli)低于3MPN/g。根据FDA BAM第5章的方法，确认每25克样品未检测到沙门氏菌(Salmonella)。使用FDA BAM第12章的方法确认金黄色葡萄球菌低于10cfu/g。通过目视检查确认颜色为焦糖色。将容器密封，将剩余的保留样品冷冻并储存以便将来参考，并且为所得的批次发行分析证书。

实施例58

经处理饮用水的制备

如下制备含有250ppm的实施例9.7的寡糖制剂的饮用水。将37mL实施例50的寡糖浆液和40克山梨酸钾逐渐添加到在55加仑blue-poly桶中的50加仑可饮用自来水中。在室温下使用桨叶将溶液手动混合10分钟。

在不掺入山梨酸钾的情况下重复所述方法。

虽然在本文已经显示和描述了本发明的优选实施方案，但对于本领域技术人员而言将明显的是，此类实施方案仅通过举例的方式来提供。本发明并不旨在受本说明书内提供的具体实施例的限制。虽然已经参考上述说明书描述了本发明，但本文的实施方案的描述和说明并不意味着以限制的意义来解释。在不背离本发明的情况下，本领域技术人员现在将想到许多变化、改变和替换。此外，应该理解，本发明的所有方面并不限于本文所阐述的取决于多种条件和变量的具体描述、配置或相对比例。应该理解，本文所述的本发明的实施方案的各种替代方案可以用于实践本发明。因此，预期本发明还应该涵盖任何此类替代方案、修改、变型或等同方案。

Claims

1.一种调节动物的胃肠道中的代谢物的方法，所述方法包括：

向动物施用包含基础营养组合物和合成寡糖制剂的营养组合物，其中所述合成寡糖制剂包含各自具有选自1至n的不同聚合度的至少n种寡糖级分(DP1至DPn级分)，其中n是大于3的整数；并且其中DP1和DP2级分中的每一种独立地包含如通过质谱法测定的按相对丰度计约0.5％至约15％的含脱水亚基寡糖，并且

其中相对于在所述向所述动物施用所述营养组合物之前来自所述动物的胃肠样品中至少一种代谢物的水平，来自所述动物的胃肠样品中所述至少一种代谢物的水平增加或降低。

2.根据权利要求1所述的方法，其中相对于来自已经被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物的胃肠样品中所述至少一种代谢物的增加或降低，来自所述动物的所述胃肠样品中所述至少一种代谢物的所述增加或降低是更大的增加或降低。

3.一种调节动物的胃肠道中的代谢物的方法，所述方法包括：

其中相对于来自已经被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物的胃肠样品中至少一种代谢物的水平，来自所述动物的胃肠样品中所述至少一种代谢物的水平增加或降低。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述代谢物是短链脂肪酸(SCFA)、胆汁酸、多酚、氨基酸、神经递质(或其前体)、信号传导因子或含氮代谢物。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述代谢物是短链脂肪酸(SCFA)。

6.根据权利要求5所述的方法，其中所述短链脂肪酸(SCFA)是乙酸、戊酸、异戊酸、异丁酸、甲酸、丙酸或丁酸或者其盐或酯。

7.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述代谢物是丁酸、异丁酸、丙酸、丁酸盐/酯、丙酸盐/酯、乙酸、乳酸、戊酸、异戊酸、氨基-SCFA、硫代酸盐/酯、萜类化合物、a-萜类化合物、精油、倍他唑、乳寡糖、岩藻糖基化寡糖、2'-岩藻糖基乳糖(2FL)、唾液酸化寡糖、类固醇、胺、三甲胺、氨、吲哚、硫酸吲哚酚、促炎代谢物、组胺、脂多糖、倍他唑、γ-氨基丁酸(GABA)、芳樟醇、桉树脑、香叶醇、二肽、脂肪醇、对甲酚、硫化物、硫化氢、挥发性胺、硫醇、多巴胺、氨基吲哚、脂溶性代谢物、脂族醛、脂族酮、2-甲硫基乙醇、3-甲基-2-丁酮、3-甲基丁醛、戊醛、3-羟基-2-丁酮、(E)-2-戊烯醛、1-戊醇、(E)-2-癸烯醛、己醛、(E)-2-己烯醛、1-己醇、庚醛、苯乙烯、肟-、甲氧基-苯基-丁内酯、(E)-2-庚烯醛、苯甲醛、二甲基三硫化物、1-庚醇、辛醛、1-辛烯-3-酮、1-辛烯-3-醇、(E,E)-2,4-庚二烯醛、2-乙酰基噻唑、D-柠檬烯、4-乙基环己醇、2,4-二甲基-环己醇、(E)-2-辛烯醛、苯乙醛、1-辛醇、2-丁基-环己酮、4-(苯甲酰氧基)-(E)-2-辛烯-1-醇、1-辛醇、十八酸、乙烯酯、壬醛、(E)-2-壬烯-1-醇、3-十八炔、环辛烷甲醇、十二醛、(E)-2-壬烯醛、2,6/3,5-二甲基苯甲醛、1-壬醇、2-正庚基呋喃、顺式-4-癸烯醛、癸醛、(E,E)-2,4-壬二烯醛、1,3-己二烯、3-乙基-2-甲基-2-壬烯醛、(E)-2-十一烯醛、反式-3-壬烯-2-酮、2,5-呋喃二酮、3-十二烯基-反式-2-十一烯-1-醇或花生酸。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的方法，其中所述胃肠样品是胃肠组织的活检、粪便样品、瘤胃样品或泄殖腔拭子。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述胃肠组织是盲肠组织或回肠组织。

10.根据权利要求8所述的方法，其中所述胃肠样品是瘤胃液样品。

11.根据权利要求1-10中任一项所述的方法，其还包括获得所述样品。

12.根据权利要求1-11中任一项所述的方法，其还包括检测所述胃肠样品中所述至少一种代谢物的水平。

13.根据权利要求12所述的方法，所述方法还包括检测所述胃肠样品中至少2、3、4、5或6种代谢物的水平。

14.根据权利要求1-13中任一项所述的方法，其中相对于在所述向所述动物施用所述营养组合物之前来自所述动物的胃肠样品中至少2、3、4、5或6种代谢物的水平，来自所述动物的所述胃肠样品中所述至少2、3、4、5或6种代谢物的水平增加或降低。

15.根据权利要求1-14中任一项所述的方法，其中相对于来自已经被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的对照动物的胃肠样品中至少2、3、4、5或6种或更多种代谢物的水平，来自所述动物的胃肠样品中所述至少2、3、4、5或6种代谢物的水平增加或降低。

16.根据权利要求1-2或4-15中任一项所述的方法，其中相对于在所述向所述动物施用所述营养组合物之前来自所述动物的胃肠样品中至少一种代谢物的水平，所述胃肠样品中所述至少一种代谢物的所述水平增加。

17.根据权利要求16所述的方法，其中相对于来自已经被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物的胃肠样品中所述至少一种代谢物的增加，来自所述动物的所述胃肠样品中所述至少一种代谢物的所述增加是更大的增加。

18.根据权利要求3或4-17中任一项所述的方法，其中相对于来自已经被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物的胃肠样品中至少一种代谢物的水平，所述胃肠样品中所述至少一种代谢物的所述水平增加。

19.根据权利要求16-18中任一项所述的方法，其中所述代谢物对所述动物的健康是有益的。

20.根据权利要求16-19中任一项所述的方法，其中所述代谢物对所述动物的胃肠健康是有益的。

21.根据权利要求16-20中任一项所述的方法，其中所述代谢物是短链脂肪酸(SCFA)、胆汁酸、多酚、氨基酸、神经递质(或其前体)或信号传导因子。

22.根据权利要求21所述的方法，其中所述代谢物是短链脂肪酸(SCFA)。

23.根据权利要求22所述的方法，其中所述短链脂肪酸(SCFA)是乙酸、戊酸、异戊酸、甲酸、丙酸、丁酸或异丁酸或者其盐或酯。

24.根据权利要求23所述的方法，其中所述短链脂肪酸(SCFA)是丙酸或者其盐或酯(例如，丙酸盐/酯)。

25.根据权利要求24所述的方法，其中所述合成寡糖制剂包含含有葡萄糖、半乳糖和甘露糖或由其组成的寡糖，或者由所述寡糖组成。

26.根据权利要求24所述的方法，其中所述合成寡糖制剂包含含有葡萄糖、半乳糖和甘露糖的寡糖。

27.根据权利要求24所述的方法，其中所述合成寡糖制剂包含含有葡萄糖和甘露糖或由其组成的寡糖，或者由所述寡糖组成。

28.根据权利要求24所述的方法，其中所述合成寡糖制剂包含含有葡萄糖和甘露糖的寡糖。

29.根据权利要求23所述的方法，其中所述短链脂肪酸(SCFA)是丁酸或者其盐或酯(例如，丁酸盐/酯)。

30.根据权利要求29所述的方法，其中所述合成寡糖制剂包含含有葡萄糖、蔗糖和乳糖或由其组成的寡糖，或者由所述寡糖组成。

31.根据权利要求29所述的方法，其中所述合成寡糖制剂包含含有葡萄糖、蔗糖和乳糖的寡糖。

32.根据权利要求29所述的方法，其中所述合成寡糖制剂包含含有蔗糖或由其组成的寡糖，或者由所述寡糖组成。

33.根据权利要求29所述的方法，其中所述合成寡糖制剂包含含有蔗糖的寡糖。

34.根据权利要求29所述的方法，其中所述合成寡糖制剂包含含有蔗糖和葡萄糖或由其组成的寡糖，或者由所述寡糖组成。

35.根据权利要求29所述的方法，其中所述合成寡糖制剂包含含有蔗糖和葡萄糖的寡糖。

36.根据权利要求29所述的方法，其中所述合成寡糖制剂包含含有葡萄糖和乳糖或由其组成的寡糖，或者由所述寡糖组成。

37.根据权利要求29所述的方法，其中所述合成寡糖制剂包含含有葡萄糖和乳糖的寡糖。

38.根据权利要求29所述的方法，其中所述合成寡糖制剂包含含有葡萄糖或由其组成的寡糖，或者由所述寡糖组成。

39.根据权利要求29所述的方法，其中所述合成寡糖制剂包含含有葡萄糖的寡糖。

40.根据权利要求16-20中任一项所述的方法，其中所述代谢物是寡糖。

41.根据权利要求40所述的方法，其中所述寡糖是2'-岩藻糖基乳糖(2FL)。

42.根据权利要求16-20中任一项所述的方法，其中所述代谢物是醇。

43.根据权利要求42所述的方法，其中所述代谢物是1-甲硫基丙醇或2-甲硫基乙醇。

44.根据权利要求16-20中任一项所述的方法，其中所述代谢物是1-甲硫基丙烷或2-甲硫基乙烷。

45.根据权利要求40-44中任一项所述的方法，其中所述合成寡糖制剂包含含有葡萄糖、半乳糖和甘露糖或由其组成的寡糖，或者由所述寡糖组成。

46.根据权利要求40-44中任一项所述的方法，其中所述合成寡糖制剂包含含有葡萄糖、半乳糖和甘露糖的寡糖。

47.根据权利要求16-20中任一项所述的方法，其中所述代谢物是神经递质。

48.根据权利要求47所述的方法，其中所述神经递质是氨基酸、气体递质、单胺、痕量胺、肽、嘌呤或儿茶酚胺。

49.根据权利要求47所述的方法，其中所述神经递质是谷氨酸、天冬氨酸、D-丝氨酸、γ-氨基丁酸(GABA)、甘氨酸、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(norepinephrine)(去甲肾上腺素(noradrenaline)；NE、NA)、肾上腺素(epinephrine)(肾上腺素(adrenaline))、组胺、5-羟色胺(SER、5-HT)、苯乙胺、N-甲基苯乙胺、酪胺、3-碘甲状腺原胺、章鱼胺、色胺、催产素、生长抑素、三磷酸腺苷(ATP)、腺苷、乙酰胆碱(ACh)或花生四烯酸乙醇胺。

50.根据权利要求49所述的方法，其中所述神经递质是多巴胺。

51.根据权利要求49所述的方法，其中所述神经递质是γ-氨基丁酸(GABA)。

52.根据权利要求16-20中任一项所述的方法，其中所述代谢物是二肽、脂肪醇或萜类化合物。

53.根据权利要求52所述的方法，其中所述二肽是肌肽、鹅肌肽、高鹅肌肽、京都啡肽、鲸肌肽、Val-Tyr、Ala-Gln或Gly-Tyr。

54.根据权利要求52所述的方法，其中所述脂肪醇是叔丁基醇、叔戊基醇、3-甲基-3-戊醇、1-庚醇(Heptanol)(庚醇(enanthic alcohol))、1-辛醇(辛基醇)、壬醇(Pelargonicalcohol)(1-壬醇(nonanol))、1-癸醇(Decanol)(癸基醇、癸醇(capric alcohol))、十一基醇、月桂基醇、十三基醇、肉豆蔻基醇、十五基醇、鲸蜡基醇、棕榈油基醇、十七基醇(1-正十七醇、十七醇)、硬脂基醇(1-十八醇)、油基醇(1-十八烯醇)、十九基醇(1-十九醇)、花生基醇(1-二十醇)、二十一基醇(1-二十一醇)、山嵛基醇(1-二十二醇)、瓢儿菜基醇(顺式-13-二十二烯-1-醇)、木蜡基醇(1-二十四醇)、鲸蜡基醇(1-二十六醇)、1-二十七醇、蒙旦基醇、1-二十九醇、蜂花基醇、1-三十二醇(虫蜡基醇)或格地基醇(1-

三十四醇)。

55.根据权利要求52所述的方法，其中所述萜类化合物是半萜类化合物、单萜类化合物、倍半萜类化合物、二萜类化合物、二倍半萜类化合物、三萜类化合物、四萜类化合物、多萜类化合物。

56.根据权利要求16-20中任一项所述的方法，其中所述代谢物是二羟基苯甲酸。

57.根据权利要求56所述的方法，其中所述二羟基苯甲酸是龙胆酸、2-焦儿茶酸、β-二羟基苯酸、γ-二羟基苯酸、原儿茶酸或α-二羟基苯酸。

58.根据权利要求57所述的方法，其中所述二羟基苯甲酸是龙胆酸。

59.根据权利要求16-20中任一项所述的方法，其中所述代谢物是对薄荷-1-烯-4-醇以及化合物1-硝基庚烷、辛醛、2-辛酮和2,3-庚烷二酮。

60.根据权利要求16-20中任一项所述的方法，其中所述代谢物是脂肪酸。

61.根据权利要求60所述的方法，其中所述代谢物是挥发性脂肪酸。

62.根据权利要求60或61所述的方法，其中所述脂肪酸是乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸或异戊酸。

63.根据权利要求47-62中任一项所述的方法，其中所述合成寡糖制剂包含含有葡萄糖或由其组成的寡糖，或者由所述寡糖组成。

64.根据权利要求47-62中任一项所述的方法，其中所述合成寡糖制剂包含含有葡萄糖的寡糖。

65.根据权利要求1-2或4-15中任一项所述的方法，其中相对于在所述向所述动物施用所述营养组合物之前来自所述动物的胃肠样品中至少一种代谢物的水平，所述胃肠样品中所述至少一种代谢物的所述水平降低。

66.根据权利要求65所述的方法，其中相对于来自已经被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物的胃肠样品中所述至少一种代谢物的降低，来自所述动物的所述胃肠样品中所述至少一种代谢物的所述降低是更大的降低。

67.根据权利要求3或4-15中任一项所述的方法，其中相对于来自已经被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物的胃肠样品中至少一种代谢物的水平，所述胃肠样品中所述至少一种代谢物的所述水平降低。

68.根据权利要求65-67中任一项所述的方法，其中所述代谢物对所述动物的健康是有害的。

69.根据权利要求65-68中任一项所述的方法，其中所述代谢物对所述动物的胃肠健康是有害的。

70.根据权利要求65-69中任一项所述的方法，其中所述代谢物是促炎代谢物。

71.根据权利要求70所述的方法，其中所述促炎代谢物是组胺、3-羟基犬尿氨酸(3-HK)、3-羟基邻氨基苯甲酸(3-HAA)、喹啉酸(QA)、二羟基十八碳-12-烯酸、胆酸盐/酯、丙二酸甲酯、n-乙酰胞壁酸酯、乳糖醛酸盐/酯或麦芽三糖、鸟氨酸或牛磺酸。

72.根据权利要求71所述的方法，其中所述促炎代谢物是组胺。

73.根据权利要求70-72中任一项所述的方法，其中所述合成寡糖制剂包含含有葡萄糖、半乳糖和甘露糖或由其组成的寡糖，或者由所述寡糖组成。

74.根据权利要求70-72中任一项所述的方法，其中所述合成寡糖制剂包含含有葡萄糖、半乳糖和甘露糖的寡糖。

75.根据权利要求65-69中任一项所述的方法，其中所述代谢物是含氮代谢物。

76.根据权利要求75所述的方法，其中所述含氮代谢物是氨、三甲胺、吲哚或对甲酚。

77.根据权利要求76所述的方法，其中所述含氮代谢物是氨。

78.根据权利要求75-77中任一项所述的方法，其中所述合成寡糖制剂包含含有葡萄糖或由其组成的寡糖，或者由所述寡糖组成。

79.根据权利要求75-77中任一项所述的方法，其中所述合成寡糖制剂包含含有葡萄糖的寡糖。

80.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述至少一种代谢物的水平通过色谱法与波谱法的组合来测定。

81.根据权利要求80所述的方法，其中所述色谱法是气相色谱法或液相色谱法。

82.根据权利要求80或81所述的方法，其中所述波谱法是核磁共振波谱(NMR)法。

83.根据权利要求82所述的方法，其中所述其中所述核磁共振波谱(NMR)法包括¹H-NMR。

84.根据权利要求1-15中任一项所述的方法，其中将包含所述寡糖的所述营养组合物以足以产生所述至少一种代谢物的所述增加或降低水平的量施用给所述动物。

85.根据权利要求1-15或84中任一项所述的方法，其中所述至少一种代谢物的所述水平增加或降低至少约1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、20％、30％、40％或50％。

86.根据权利要求1-15或84-85中任一项所述的方法，其中所述至少一种代谢物的所述水平增加或降低至少约0.1倍、0.2倍、0.3倍、0.4倍、0.5倍、0.6倍、0.7倍、0.8倍、0.9倍、1倍、2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍或10倍。

87.根据权利要求16-64中任一项所述的方法，其中将包含所述寡糖的所述营养组合物以足以产生所述至少一种代谢物的所述增加水平的量施用给所述动物。

88.根据权利要求16-64或87中任一项所述的方法，其中所述至少一种代谢物的所述水平增加至少约1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、20％、30％、40％或50％。

89.根据权利要求16-64或86-88中任一项所述的方法，其中所述至少一种代谢物的所述水平增加至少约0.1倍、0.2倍、0.3倍、0.4倍、0.5倍、0.6倍、0.7倍、0.8倍、0.9倍、1倍、2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍或10倍。

90.根据权利要求65-79中任一项所述的方法，其中将包含所述寡糖的所述营养组合物以足以产生所述至少一种代谢物的所述增加水平的量施用给所述动物。

91.根据权利要求65-79或90中任一项所述的方法，其中所述至少一种代谢物的所述水平降低至少约1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、20％、30％、40％或50％。

92.根据权利要求65-79或90-91中任一项所述的方法，其中所述至少一种代谢物的所述水平降低至少约0.1倍、0.2倍、0.3倍、0.4倍、0.5倍、0.6倍、0.7倍、0.8倍、0.9倍、1倍、2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍或10倍。

93.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中将包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物施用给所述动物至少1、7、10、14、30、45、60、90或120天。

94.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中将包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物每天至少一次、两次、三次、四次或五次施用给所述动物。

95.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述施用包括向所述动物提供所述营养组合物以随意摄取。

96.根据权利要求95所述的方法，其中所述动物在超过至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、20、30、40、50、60、90或120个二十四小时时段内摄取所述营养组合物的至少一部分。

97.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述营养组合物包含至少100ppm、200ppm、300ppm、400ppm、500ppm、600ppm、700ppm、800ppm、900ppm、1000ppm、1500ppm或2000ppm的所述合成寡糖制剂。

98.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述营养组合物包含约100ppm、200ppm、300ppm、400ppm、500ppm、600ppm、700ppm、800ppm、900ppm、1000ppm、1500ppm或2000ppm的所述合成寡糖制剂。

99.根据权利要求98所述的方法，其中所述营养组合物包含约500ppm的所述合成寡糖制剂。

100.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述营养组合物包含约100ppm-2000ppm、100ppm-1500ppm、100ppm-1000ppm、100ppm-900ppm、100ppm-800ppm、100ppm-700ppm、100ppm-600ppm、100ppm-500ppm、100ppm-400ppm、100ppm-300ppm、100ppm-200ppm、200ppm-1000ppm、200ppm-800ppm、200ppm-700ppm、200ppm-600ppm、200ppm-500ppm、300ppm-1000ppm、300ppm-700ppm、300ppm-600ppm或300ppm-500ppm的所述合成寡糖制剂。

101.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述营养组合物包含约300ppm-600ppm的所述合成寡糖制剂。

102.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中相对于在施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前所述动物的体重，所述动物具有增加的体重。

103.根据权利要求102所述的方法，其中相对于在施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前所述动物的所述体重，所述动物的所述体重增加至少1％、2％、3％、4％、5％、5％、7％、8％、9％或10％。

104.根据权利要求102或103所述的方法，其中相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物，体重的所述增加是更大的增加。

105.根据权利要求104所述的方法，其中相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的所述可比对照动物的所述体重，所述动物的所述体重增加至少1％、2％、3％、4％、5％、5％、7％、8％、9％或10％。

106.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中相对于在施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前所述动物的饲料效率，所述动物具有增加的饲料效率。

107.根据权利要求106所述的方法，其中相对于在施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前所述动物的所述饲料效率，所述动物的所述饲料效率增加至少1％、2％、3％、4％、5％、5％、7％、8％、9％或10％。

108.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物，所述动物所具有的饲料效率的所述增加是更大的增加。

109.根据权利要求108所述的方法，其中相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的所述可比对照动物的所述体重，所述动物的饲料效率的所述增加增加至少1％、2％、3％、4％、5％、5％、7％、8％、9％或10％。

110.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中相对于在施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前所述动物的饲料转化率(FCR)，所述动物具有降低的FCR。

111.根据权利要求110所述的方法，其中相对于在施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前所述动物的饲料转化率，所述动物的所述饲料转化率降低至少1％、2％、3％、4％、5％、5％、7％、8％、9％或10％。

112.根据权利要求110所述的方法，其中相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物，所述动物所具有的饲料转化率的所述降低是更大的降低。

113.根据权利要求112所述的方法，其中相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的所述可比对照动物的饲料转化率，所述动物的所述饲料转化率降低至少1％、2％、3％、4％、5％、5％、7％、8％、9％或10％。

114.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物，所述动物的预期寿命或存活率增加。

115.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中施用导致以下中的至少一种：a)营养物吸收改善，b)线粒体功能改善，c)肝功能改善，d)肾功能改善，e)社交性改善，f)情绪改善，g)能量改善，h)饱腹感改善，以及i)警觉性改善；每一种相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的营养组合物的动物。

116.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中施用导致以下中的至少一种：a)营养物吸收改善，b)线粒体功能改善，c)肝功能改善，d)肾功能改善，e)社交性改善，f)情绪改善，g)能量改善，h)饱腹感改善，以及i)警觉性改善；每一种相对于在施用所述合成寡糖制剂之前的所述动物。

117.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的营养组合物的动物，施用导致源自所述动物的肉的品质改善。

118.根据权利要求117所述的方法，其中施用导致以下中的至少一种：a)所述动物肉的颜色增强，b)所述动物肉的风味增强，以及c)所述动物肉的嫩度增强。

119.一种改善动物的粪便品质的方法，所述方法包括：

向所述动物施用包含基础营养组合物和合成寡糖制剂的营养组合物，其中所述合成寡糖制剂包含各自具有选自1至n的不同聚合度的至少n种寡糖级分(DP1至DPn级分)，其中n是大于3的整数；并且其中DP1和DP2级分中的每一种独立地包含如通过质谱法测定的按相对丰度计约0.5％至约15％的含脱水亚基寡糖；

其中所述动物表现出来自所述动物的粪便样品的稠度改善、来自所述动物的粪便样品中一种或多种微生物物种的水平降低或来自所述动物的粪便样品的气味减小；每一种相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的营养组合物的动物。

120.根据权利要求119所述的方法，其中所述施用导致以下中的至少一种、两种或三种：来自所述动物的粪便样品的稠度改善、来自所述动物的粪便样品中一种或多种微生物物种的水平降低或来自所述动物的粪便样品的气味减小；每一种相对于在施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前的所述动物。

121.根据权利要求119-120中任一项所述的方法，其中相对于来自被施用缺乏所述合成寡糖制剂的营养组合物的动物的粪便样品的稠度，来自所述动物的粪便样品的稠度增加。

122.根据权利要求119-121中任一项所述的方法，其中相对于在施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前来自所述动物的粪便样品的稠度，来自所述动物的粪便样品的稠度增加。

123.根据权利要求119-122中任一项所述的方法，其中相对于来自被施用缺乏所述合成寡糖制剂的营养组合物的动物的粪便样品的至少一种气味排放的水平，来自所述动物的粪便样品的至少一种气味排放的水平降低。

124.根据权利要求119-123中任一项所述的方法，其中相对于在施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前来自所述动物的粪便样品的至少一种气味排放的水平，来自所述动物的粪便样品的至少一种气味排放的水平降低。

125.根据权利要求119-124中任一项所述的方法，其中相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的营养组合物的动物的粪便样品中的水平，来自所述动物的粪便样品中至少一种微生物物种的水平更低。

126.根据权利要求119-125中任一项所述的方法，其中相对于在施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前来自所述动物的粪便样品中的水平，来自所述动物的粪便样品中至少一种微生物物种的水平更低。

127.根据权利要求126所述的方法，其中所述微生物物种对所述动物是病原性的。

128.根据权利要求126或127所述的方法，其中所述微生物物种与足跖疾病相关联。

129.根据权利要求128所述的方法，其中所述足跖疾病是足跖皮炎。

130.根据权利要求126-129中任一项所述的方法，其中所述微生物物种降低至少约1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、20％、30％、40％或50％。

131.根据权利要求126-129中任一项所述的方法，其中所述微生物物种降低至少约0.1倍、0.2倍、0.3倍、0.4倍、0.5倍、0.6倍、0.7倍、0.8倍、0.9倍、1倍、2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍或10倍。

132.根据权利要求126-131中任一项所述的方法，其中所述微生物物种属于螺杆菌属(Helicobacter)、埃希氏菌属(Escherichia)、沙门氏菌属(Salmonella)、弧菌属(Vibrio)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、肠球菌属(Enterococcus)或耶尔森氏菌属(Yersinia)。

133.根据权利要求126-132中任一项所述的方法，其中所述微生物物种选自：幼禽螺杆菌(Helicobacter pullorum)、约氏变形菌(Proteobacteria johnsonii)、大肠杆菌(Escherichia coli)、空肠弯曲杆菌(Camplobacter jejuni)、卷曲乳杆菌(Lactobacilluscrispatus)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、粪肠球菌(Enterococcusfaecalis)、阿涅蒂斯葡萄球菌(Staphylococcus agnetis)、海氏肠球菌(Enterococcushirae)、缓慢葡萄球菌(Staphylococcus lentus)或模仿葡萄球菌(Staphylococcussimulans)。

134.根据权利要求126-133中任一项所述的方法，其中相对于在所述向所述动物施用所述营养组合物之前来自所述动物的胃肠样品中至少一种代谢物的水平，来自所述动物的胃肠样品中所述至少一种代谢物的水平增加或降低。

135.根据权利要求134所述的方法，其中相对于来自已经被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物的胃肠样品中所述至少一种代谢物的增加或降低，来自所述动物的所述胃肠样品中所述至少一种代谢物的所述增加或降低是更大的增加或降低。

136.根据权利要求126-135中任一项所述的方法，其中相对于来自已经被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物的胃肠样品中至少一种代谢物的水平，来自所述动物的胃肠样品中所述至少一种代谢物的水平增加或降低。

137.根据权利要求126-136中任一项所述的方法，其中所述方法其中相对于在所述向所述动物施用所述营养组合物之前来自所述动物的胃肠样品中至少一种代谢物的水平，所述胃肠样品中所述至少一种代谢物的所述水平降低。

138.根据权利要求137所述的方法，其中相对于来自已经被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物的胃肠样品中所述至少一种代谢物的降低，来自所述动物的所述胃肠样品中所述至少一种代谢物的所述降低是更大的降低。

139.根据权利要求134-138中任一项所述的方法，其中相对于来自已经被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物的胃肠样品中至少一种代谢物的水平，所述胃肠样品中所述至少一种代谢物的所述水平降低。

140.根据权利要求137-139中任一项所述的方法，其中所述代谢物是含氮代谢物。

141.根据权利要求140所述的方法，其中所述含氮代谢物是氨、三甲胺、吲哚或对甲酚。

142.根据权利要求141所述的方法，其中所述代谢物是氨。

143.根据权利要求137-139中任一项所述的方法，其中所述代谢物是挥发性胺、硫醇或硫化物。

144.根据权利要求134-136中任一项所述的方法，其中将包含所述寡糖的所述营养组合物以足以产生所述至少一种代谢物的所述增加或降低水平的量施用给所述动物。

145.根据权利要求134-136或144中任一项所述的方法，其中所述至少一种代谢物的所述水平增加或降低至少约1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、20％、30％、40％或50％。

146.根据权利要求134-136或144-145中任一项所述的方法，其中所述至少一种代谢物的所述水平增加或降低至少约0.1倍、0.2倍、0.3倍、0.4倍、0.5倍、0.6倍、0.7倍、0.8倍、0.9倍、1倍、2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍或10倍。

147.根据权利要求137-143中任一项所述的方法，其中将包含所述寡糖的所述营养组合物以足以产生所述至少一种代谢物的所述降低水平的量施用给所述动物。

148.根据权利要求137-143或147中任一项所述的方法，其中所述至少一种代谢物的所述水平降低至少约1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、20％、30％、40％或50％。

149.根据权利要求137-143或147-148中任一项所述的方法，其中所述至少一种代谢物的所述水平降低至少约0.1倍、0.2倍、0.3倍、0.4倍、0.5倍、0.6倍、0.7倍、0.8倍、0.9倍、1倍、2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍或10倍。

150.一种在动物中预防足跖疾病或降低其严重程度的方法，所述方法包括：向所述动物施用包含基础营养组合物和合成寡糖制剂的营养组合物，其中所述合成寡糖制剂包含各自具有选自1至n的不同聚合度的至少n种寡糖级分(DP1至DPn级分)，其中n是大于3的整数；并且其中DP1和DP2级分中的每一种独立地包含如通过质谱法测定的按相对丰度计约0.5％至约15％的含脱水亚基寡糖，并且

其中相对于在所述向所述动物施用所述营养组合物之前来自所述动物的粪便样品中与足跖疾病相关联的至少一种微生物物种的水平，来自所述动物的粪便样品中与足跖疾病相关联的所述至少一种微生物物种的水平降低。

151.根据权利要求150所述的方法，其中相对于来自已经被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物的粪便样品中所述至少一种微生物物种的降低，来自所述动物的粪便样品中所述至少一种微生物物种的所述降低是更大的降低。

152.一种在动物中预防足跖疾病或降低其严重程度的方法，所述方法包括：向所述动物施用包含基础营养组合物和合成寡糖制剂的营养组合物，其中所述合成寡糖制剂包含各自具有选自1至n的不同聚合度的至少n种寡糖级分(DP1至DPn级分)，其中n是大于3的整数；并且其中DP1和DP2级分中的每一种独立地包含如通过质谱法测定的按相对丰度计约0.5％至约15％的含脱水亚基寡糖，并且

其中相对于来自已经被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物的粪便样品中与足跖疾病相关联的至少一种微生物物种的水平，来自所述动物的粪便样品中与足跖疾病相关联的所述至少一种微生物物种的水平降低。

153.根据权利要求150-152中任一项所述的方法，其中所述足跖疾病是足跖皮炎。

154.根据权利要求150-153中任一项所述的方法，其中所述至少一种微生物物种是古生菌、细菌、原生动物、病毒、噬菌体、寄生虫或真菌。

155.根据权利要求154所述的方法，其中所述微生物物种是细菌。

156.根据权利要求155所述的方法，其中所述至少一种微生物物种是革兰氏阳性细菌。

157.根据权利要求156所述的方法，其中所述革兰氏阳性细菌是球菌细菌。

158.根据权利要求157所述的方法，其中所述革兰氏阳性细菌是金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、阿涅蒂斯葡萄球菌、海氏肠球菌、缓慢葡萄球菌或模仿葡萄球菌。

159.根据权利要求150-158中任一项所述的方法，其中将包含所述寡糖的所述营养组合物以足以产生所述至少一种微生物物种的所述降低水平的量施用给所述动物。

160.根据权利要求150-159中任一项所述的方法，其中所述至少一种微生物物种的所述水平降低至少约1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、20％、30％、40％或50％。

161.根据权利要求137-143或147-148中任一项所述的方法，其中所述至少一种微生物物种的所述水平降低至少约0.1倍、0.2倍、0.3倍、0.4倍、0.5倍、0.6倍、0.7倍、0.8倍、0.9倍、1倍、2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍或10倍。

162.根据权利要求150-161中任一项所述的方法，其中相对于在所述向所述动物施用所述营养组合物之前来自所述动物的胃肠样品中至少一种代谢物的水平，来自所述动物的胃肠样品中所述至少一种代谢物的水平增加或降低。

163.根据权利要求162所述的方法，其中相对于来自已经被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物的胃肠样品中所述至少一种代谢物的增加或降低，来自所述动物的所述胃肠样品中所述至少一种代谢物的所述增加或降低是更大的增加或降低。

164.根据权利要求150-163中任一项所述的方法，其中相对于来自已经被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物的胃肠样品中至少一种代谢物的水平，来自所述动物的胃肠样品中所述至少一种代谢物的水平增加或降低。

165.根据权利要求162-164中任一项所述的方法，其中所述方法其中相对于在所述向所述动物施用所述营养组合物之前来自所述动物的胃肠样品中至少一种代谢物的水平，所述胃肠样品中所述至少一种代谢物的所述水平降低。

166.根据权利要求165所述的方法，其中相对于来自已经被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物的胃肠样品中所述至少一种代谢物的降低，来自所述动物的所述胃肠样品中所述至少一种代谢物的所述降低是更大的降低。

167.根据权利要求150-166中任一项所述的方法，其中相对于来自已经被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照动物的胃肠样品中至少一种代谢物的水平，所述胃肠样品中所述至少一种代谢物的所述水平降低。

168.根据权利要求165-167中任一项所述的方法，其中所述代谢物是含氮代谢物。

169.根据权利要求168所述的方法，其中所述含氮代谢物是氨、三甲胺、吲哚或对甲酚。

170.根据权利要求169所述的方法，其中所述代谢物是氨。

171.根据权利要求165-167中任一项所述的方法，其中所述代谢物是挥发性胺、硫醇或硫化物。

172.根据权利要求162-164中任一项所述的方法，其中将包含所述寡糖的所述营养组合物以足以产生所述至少一种代谢物的所述增加或降低水平的量施用给所述动物。

173.根据权利要求162-164或172中任一项所述的方法，其中所述至少一种代谢物的所述水平增加或降低至少约1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、20％、30％、40％或50％。

174.根据权利要求162-164或172-173中任一项所述的方法，其中所述至少一种代谢物的所述水平增加或降低至少约0.1倍、0.2倍、0.3倍、0.4倍、0.5倍、0.6倍、0.7倍、0.8倍、0.9倍、1倍、2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍或10倍。

175.根据权利要求165-171中任一项所述的方法，其中将包含所述寡糖的所述营养组合物以足以产生所述至少一种代谢物的所述降低水平的量施用给所述动物。

176.根据权利要求165-171或175中任一项所述的方法，其中所述至少一种代谢物的所述水平降低至少约1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、20％、30％、40％或50％。

177.根据权利要求165-171或175-176中任一项所述的方法，其中所述至少一种代谢物的所述水平降低至少约0.1倍、0.2倍、0.3倍、0.4倍、0.5倍、0.6倍、0.7倍、0.8倍、0.9倍、1倍、2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍或10倍。

178.一种将代谢物靶向至动物的胃肠道中的靶隔室的方法，所述方法包括向动物施用包含基础营养组合物和合成寡糖制剂的营养组合物，其中所述合成寡糖制剂包含各自具有选自1至n的不同聚合度的至少n种寡糖级分(DP1至DPn级分)，其中n是大于3的整数；并且其中DP1和DP2级分中的每一种独立地包含如通过质谱法测定的按相对丰度计约0.5％至约15％的含脱水亚基寡糖，并且

其中相对于在所述向所述动物施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前来自所述动物的所述靶胃肠隔室的样品中至少一种代谢物的水平，来自所述动物的所述靶胃肠隔室的样品中所述至少一种代谢物的水平增加。

179.一种将代谢物靶向至动物的胃肠道中的靶隔室的方法，所述方法包括向动物施用包含基础营养组合物和合成寡糖制剂的营养组合物，其中所述合成寡糖制剂包含各自具有选自1至n的不同聚合度的至少n种寡糖级分(DP1至DPn级分)，其中n是大于3的整数；并且其中DP1和DP2级分中的每一种独立地包含如通过质谱法测定的按相对丰度计约0.5％至约15％的含脱水亚基寡糖，并且

其中相对于来自被施用缺乏所述合成寡糖制剂的营养组合物的所述可比对照动物的所述靶胃肠隔室的样品中至少一种代谢物的水平，来自所述动物的所述靶胃肠隔室的样品中所述至少一种代谢物的水平增加。

180.根据权利要求178或179所述的方法，其中所述胃肠隔室是后肠的一部分。

181.根据权利要求180所述的方法，其中后肠的所述部分是盲肠。

182.根据权利要求180所述的方法，其中后肠的所述部分是下消化道。

183.根据权利要求180所述的方法，其中后肠的所述部分是升结肠。

184.根据权利要求178-183中任一项所述的方法，其中所述代谢物对所述动物的健康是有益的。

185.根据权利要求178-184中任一项所述的方法，其中所述代谢物对所述动物的胃肠健康是有益的。

186.根据权利要求178-185中任一项所述的方法，其中所述代谢物是短链脂肪酸(SCFA)、胆汁酸、多酚、氨基酸、神经递质(或其前体)或信号传导因子。

187.根据权利要求186所述的方法，其中所述代谢物是短链脂肪酸(SCFA)。

188.根据权利要求187所述的方法，其中所述短链脂肪酸(SCFA)是乙酸、戊酸、异戊酸、甲酸、丙酸、丁酸或异丁酸或者其盐或酯。

189.根据权利要求188所述的方法，其中所述短链脂肪酸(SCFA)是丙酸或者其盐或酯(例如，丙酸盐/酯)。

190.根据权利要求188所述的方法，其中所述短链脂肪酸(SCFA)是丁酸或者其盐或酯(例如，丁酸盐/酯)。

191.根据权利要求178-185中任一项所述的方法，其中所述代谢物是寡糖。

192.根据权利要求191所述的方法，其中所述寡糖是2'-岩藻糖基乳糖(2FL)。

193.根据权利要求178-185中任一项所述的方法，其中所述代谢物是醇。

194.根据权利要求193所述的方法，其中所述代谢物是1-甲硫基丙醇或2-甲硫基乙醇。

195.根据权利要求178-185中任一项所述的方法，其中所述代谢物是1-甲硫基丙烷或2-甲硫基乙烷。

196.根据权利要求178-185中任一项所述的方法，其中所述代谢物是神经递质。

197.根据权利要求196所述的方法，其中所述神经递质是氨基酸、气体递质、单胺、痕量胺、肽、嘌呤或儿茶酚胺。

198.根据权利要求196所述的方法，其中所述神经递质是谷氨酸、天冬氨酸、D-丝氨酸、γ-氨基丁酸(GABA)、甘氨酸、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(norepinephrine)(去甲肾上腺素(noradrenaline)；NE、NA)、肾上腺素(epinephrine)(肾上腺素(adrenaline))、组胺、5-羟色胺(SER、5-HT)、苯乙胺、N-甲基苯乙胺、酪胺、3-碘甲状腺原胺、章鱼胺、色胺、催产素、生长抑素、三磷酸腺苷(ATP)、腺苷、乙酰胆碱(ACh)或花生四烯酸乙醇胺。

199.根据权利要求198所述的方法，其中所述神经递质是多巴胺。

200.根据权利要求198所述的方法，其中所述神经递质是γ-氨基丁酸(GABA)。

201.根据权利要求178-185中任一项所述的方法，其中所述代谢物是二肽、脂肪醇或萜类化合物。

202.根据权利要求201所述的方法，其中所述二肽是肌肽、鹅肌肽、高鹅肌肽、京都啡肽、鲸肌肽、Val-Tyr、Ala-Gln或Gly-Tyr。

203.根据权利要求201所述的方法，其中所述脂肪醇是叔丁基醇、叔戊基醇、3-甲基-3-戊醇、1-庚醇(Heptanol)(庚醇(enanthic alcohol))、1-辛醇(辛基醇)、壬醇(Pelargonicalcohol)(1-壬醇(nonanol))、1-癸醇(Decanol)(癸基醇、癸醇(capric alcohol))、十一基醇、月桂基醇、十三基醇、肉豆蔻基醇、十五基醇、鲸蜡基醇、棕榈油基醇、十七基醇(1-正十七醇、十七醇)、硬脂基醇(1-十八醇)、油基醇(1-十八烯醇)、十九基醇(1-十九醇)、花生基醇(1-二十醇)、二十一基醇(1-二十一醇)、山嵛基醇(1-二十二醇)、瓢儿菜基醇(顺式-13-二十二烯-1-醇)、木蜡基醇(1-二十四醇)、鲸蜡基醇(1-二十六醇)、1-二十七醇、蒙旦基醇、1-二十九醇、蜂花基醇、1-三十二醇(虫蜡基醇)或格地基醇(1-三十四醇)。

204.根据权利要求201所述的方法，其中所述萜类化合物是半萜类化合物、单萜类化合物、倍半萜类化合物、二萜类化合物、二倍半萜类化合物、三萜类化合物、四萜类化合物、多萜类化合物。

205.根据权利要求178-185中任一项所述的方法，其中所述代谢物是二羟基苯甲酸。

206.根据权利要求205所述的方法，其中所述二羟基苯甲酸是龙胆酸、2-焦儿茶酸、β-二羟基苯酸、γ-二羟基苯酸、原儿茶酸或α-二羟基苯酸。

207.根据权利要求206所述的方法，其中所述二羟基苯甲酸是龙胆酸。

208.根据权利要求178-185中任一项所述的方法，其中所述代谢物是对薄荷-1-烯-4-醇以及化合物1-硝基庚烷、辛醛、2-辛酮和2,3-庚烷二酮。

209.根据权利要求178-185中任一项所述的方法，其中所述代谢物是脂肪酸。

210.根据权利要求209所述的方法，其中所述代谢物是挥发性脂肪酸。

211.根据权利要求209或210所述的方法，其中所述脂肪酸是乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸或异戊酸。

212.根据权利要求178-185中任一项所述的方法，其中所述代谢物是丁酸、异丁酸、丙酸、丁酸盐/酯、丙酸盐/酯、乙酸、乳酸、戊酸、异戊酸、氨基-SCFA、硫代酸盐/酯、萜类化合物、a-萜类化合物、精油、倍他唑、乳寡糖、岩藻糖基化寡糖、2'-岩藻糖基乳糖(2FL)、唾液酸化寡糖、类固醇、胺、三甲胺、氨、吲哚、硫酸吲哚酚、促炎代谢物、组胺、脂多糖、倍他唑、γ-氨基丁酸(GABA)、芳樟醇、桉树脑、香叶醇、二肽、脂肪醇、对甲酚、硫化物、硫化氢、挥发性胺、硫醇、多巴胺、氨基吲哚、脂溶性代谢物、脂族醛、脂族酮、2-甲硫基乙醇、3-甲基-2-丁酮、3-甲基丁醛、戊醛、3-羟基-2-丁酮、(E)-2-戊烯醛、1-戊醇、(E)-2-癸烯醛、己醛、(E)-2-己烯醛、1-己醇、庚醛、苯乙烯、肟-、甲氧基-苯基-丁内酯、(E)-2-庚烯醛、苯甲醛、二甲基三硫化物、1-庚醇、辛醛、1-辛烯-3-酮、1-辛烯-3-醇、(E,E)-2,4-庚二烯醛、2-乙酰基噻唑、D-柠檬烯、4-乙基环己醇、2,4-二甲基-环己醇、(E)-2-辛烯醛、苯乙醛、1-辛醇、2-丁基-环己酮、4-(苯甲酰氧基)-(E)-2-辛烯-1-醇、1-辛醇、十八酸、乙烯酯、壬醛、(E)-2-壬烯-1-醇、3-十八炔、环辛烷甲醇、十二醛、(E)-2-壬烯醛、2,6/3,5-二甲基苯甲醛、1-壬醇、2-正庚基呋喃、顺式-4-癸烯醛、癸醛、(E,E)-2,4-壬二烯醛、1,3-己二烯、3-乙基-2-甲基-2-壬烯醛、(E)-2-十一烯醛、反式-3-壬烯-2-酮、2,5-呋喃二酮、3-十二烯基-反式-2-十一烯-1-醇或花生酸。

213.根据权利要求1-212中任一项所述的方法，其中所述动物是家禽、海鲜、绵羊、母牛、家牛、水牛、野牛、猪、猫、狗、兔、山羊、豚鼠、驴、骆驼、马、鸽子、雪貂、沙鼠、仓鼠、小鼠、大鼠、鱼或鸟。

214.根据权利要求213所述的方法，其中所述动物是家禽。

215.根据权利要求214所述的方法，其中所述家禽是鸡、火鸡、鸭或鹅。

216.根据权利要求215所述的方法，其中所述家禽是鸡。

217.根据权利要求216所述的方法，其中所述鸡是肉鸡、蛋鸡或种鸡。

218.根据权利要求213所述的方法，其中所述动物是猪。

219.根据权利要求218所述的方法，其中所述猪是保育猪、生长猪或肥育猪。

220.根据权利要求213所述的方法，其中所述动物是鱼。

221.根据权利要求220所述的方法，其中所述鱼是鲑鱼、罗非鱼或热带鱼。

222.根据权利要求1-212中任一项所述的方法，其中所述动物是家畜动物。

223.根据权利要求1-212中任一项所述的方法，其中所述动物是伴侣动物。

224.根据权利要求223所述的方法，其中所述伴侣动物是猫、狗、仓鼠、兔、豚鼠、雪貂、沙鼠、鸟或小鼠。

225.一种用于增加反刍动物的产乳量或改善乳组成特征的方法，所述方法包括：

向反刍动物施用包含基础营养组合物和合成寡糖制剂的营养组合物，其中所述合成寡糖制剂包含各自具有选自1至n的不同聚合度的至少n种寡糖级分(DP1至DPn级分)，其中n是大于3的整数；并且其中DP1和DP2级分中的每一种独立地包含如通过质谱法测定的按相对丰度计约0.5％至约15％的含脱水亚基寡糖；并且

其中相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照反刍动物，被施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物的所述反刍动物表现出产乳量的增加或至少一种改善的乳组成特征。

226.一种用于增加反刍动物的产乳量或改善乳组成特征的方法，所述方法包括：

其中与在施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物之前的所述反刍动物相比，被施用包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物的所述反刍动物表现出产乳量的增加或至少一种改善的乳组成特征。

227.根据权利要求225或226所述的方法，其中将包含所述寡糖的所述营养组合物以足以产生所述增加的产乳量或所述至少一种改善的乳组成特征的量施用给所述动物。

228.根据权利要求225-227中任一项所述的方法，其中所述反刍动物在所述反刍动物的瘤胃中具有增加水平的至少一种挥发性脂肪酸。

229.根据权利要求228所述的方法，其中所述至少一种挥发性脂肪酸是乙酸、丙酸或丁酸。

230.根据权利要求228所述的方法，其中所述反刍动物在所述反刍动物的瘤胃中具有增加水平的乙酸、丙酸或丁酸或其任何组合。

231.根据权利要求228-230中任一项所述的方法，其中所述至少一种挥发性脂肪酸的所述水平增加至少约1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、20％、30％、40％或50％。

232.根据权利要求228-231中任一项所述的方法，其中所述至少一种挥发性脂肪酸的所述水平增加至少约0.1倍、0.2倍、0.3倍、0.4倍、0.5倍、0.6倍、0.7倍、0.8倍、0.9倍、1倍、2倍、3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍、9倍或10倍。

233.根据权利要求225-232中任一项所述的方法，其中所述反刍动物是母牛。

234.根据权利要求225-233中任一项所述的方法，其中所述反刍动物还表现出：至少一种改善的表型性状：改善的饲料利用效率、改善的消化率、多糖和木质素降解的增加、瘤胃中脂肪酸浓度的增加、瘤胃中的pH平衡、甲烷排放的减少、粪产生的减少、改善的干物质摄入、改善的氮利用效率或其任何组合；每一种相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照反刍动物。

235.根据权利要求225-234中任一项所述的方法，其中相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照反刍动物，所述反刍动物表现出产乳量的增加，从而导致乳产量的测量增加。

236.根据权利要求225-235中任一项所述的方法，其中相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照反刍动物，所述反刍动物表现出产乳量的增加，从而导致能量校正乳的测量增加。

237.根据权利要求225-236中任一项所述的方法，其中相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照反刍动物，所述反刍动物表现出乳固体的增加。

238.根据权利要求225-237中任一项所述的方法，其中所述反刍动物表现出以下的改善的乳组成特征：一种或多种乳脂的增加、一种或多种乳蛋白的增加、乳中碳水化合物的增加、乳中维生素的增加、乳中矿物质的增加或其任何组合；每一种相对于被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照反刍动物。

239.根据权利要求225-238中任一项所述的方法，其中所述反刍动物还表现出：至少一种改善的表型性状：改善的饲料利用效率、改善的消化率、多糖和木质素降解的增加、瘤胃中脂肪酸浓度的增加、瘤胃中的pH平衡、甲烷排放的减少、粪产生的减少、改善的干物质摄入、改善的氮利用效率或其任何组合；每一种相对于在所述施用包含合成寡糖制剂的所述营养组合物之前的所述反刍动物。

240.根据权利要求225-239中任一项所述的方法，其中相对于在所述施用包含合成寡糖制剂的所述营养组合物之前的所述反刍动物，所述反刍动物表现出产乳量的增加，从而导致乳产量的测量增加。

241.根据权利要求225-240中任一项所述的方法，其中相对于在所述施用包含合成寡糖制剂的所述营养组合物之前的所述反刍动物，所述反刍动物表现出产乳量的增加，从而导致能量校正乳的测量增加。

242.根据权利要求225-241中任一项所述的方法，其中相对于在所述施用包含合成寡糖制剂的所述营养组合物之前的所述反刍动物，所述反刍动物表现出乳固体的增加。

243.根据权利要求225-242中任一项所述的方法，其中所述反刍动物表现出以下的改善的乳组成特征：一种或多种乳脂的增加、一种或多种乳蛋白的增加、乳中碳水化合物的增加、乳中维生素的增加、乳中矿物质的增加或其任何组合；每一种相对于在所述施用包含合成寡糖制剂的所述营养组合物之前的所述反刍动物。

244.一种改善动物肉的脂肪纹路的方法，所述方法包括向动物施用包含基础营养组合物和合成寡糖制剂的营养组合物，其中所述合成寡糖制剂包含各自具有选自1至n的不同聚合度的至少n种寡糖级分(DP1至DPn级分)，其中n是大于3的整数；并且其中DP1和DP2级分中的每一种独立地包含如通过质谱法测定的按相对丰度计约0.5％至约15％的含脱水亚基寡糖；其中将所述合成寡糖制剂以足以改善来自所述动物的肉的脂肪纹路的剂量施用。

245.根据权利要求244所述的方法，其中将所述合成寡糖制剂以足以改善所述动物肉的光泽、硬度和质地的量施用。

246.根据权利要求244或245所述的方法，其中将所述合成寡糖制剂在宰杀前长达150天的时段期间施用给所述动物。

247.根据权利要求244-246中任一项所述的方法，其中所述动物是家养肉牛。

248.一种减少来自反刍动物的气体排放的方法，所述方法包括：

向反刍动物施用包含基础营养组合物和合成寡糖制剂的营养组合物，其中所述合成寡糖制剂包含各自具有选自1至n的不同聚合度的至少n种寡糖级分(DP1至DPn级分)，其中n是大于3的整数；并且其中DP1和DP2级分中的每一种独立地包含如通过质谱法测定的按相对丰度计约0.5％至约15％的含脱水亚基寡糖；

其中将所述合成寡糖制剂以与被施用缺乏所述合成寡糖制剂的可比营养组合物的可比对照反刍动物相比足以减少来自所述动物的至少一种气体的排放的剂量施用。

249.根据权利要求248所述的方法，其中所述气体是氨、二氧化碳、甲烷或一氧化二氮。

250.根据权利要求248或249所述的方法，其中所述反刍动物是母牛、公牛、绵羊、山羊、羚羊、黑斑羚、瞪羚或鹿。

251.根据权利要求248-250中任一项所述的方法，其中所述减少是根据所述反刍动物的活重的磅。

252.根据权利要求248-251中任一项所述的方法，其中所述减少是根据所述反刍动物的温屠体重量的磅。

253.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述营养组合物是动物饲料组合物。

254.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述基础营养组合物是基础动物饲料。

255.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述相对丰度通过LC-MS/MS来测定。

256.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中至少5、10、20或30种DP级分中寡糖的所述相对丰度随其聚合度单调降低。

257.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述n种级分中的每一种中寡糖的所述相对丰度随其聚合度单调降低。

258.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中n是至少4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99或100。

259.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述DP2级分包含按相对丰度计少于12％、少于11％、少于10％、少于9％、少于8％、少于7％、少于6％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％或少于1％的含脱水亚基寡糖。

260.根据权利要求1-258中任一项所述的方法，其中所述DP2级分包含按相对丰度计约5％至约10％的含脱水亚基寡糖。

261.根据权利要求1-258中任一项所述的方法，其中所述DP2级分包含按相对丰度计约1％至约10％的含脱水亚基寡糖。

262.根据权利要求1-258中任一项所述的方法，其中所述DP2级分包含按相对丰度计约0.5％至约10％的含脱水亚基寡糖。

263.根据权利要求1-258中任一项所述的方法，其中所述DP2级分包含按相对丰度计约2％至约12％的含脱水亚基寡糖。

264.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述DP1级分包含按相对丰度计少于12％、少于11％、少于10％、少于9％、少于8％、少于7％、少于6％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％或少于1％的含脱水亚基寡糖。

265.根据权利要求1-264中任一项所述的方法，其中所述DP1级分包含按相对丰度计约2％至约12％的含脱水亚基寡糖。

266.根据权利要求1-264中任一项所述的方法，其中所述DP1级分包含按相对丰度计约1％至约10％的含脱水亚基寡糖。

267.根据权利要求1-264中任一项所述的方法，其中所述DP1级分包含按相对丰度计约0.5％至约10％的含脱水亚基寡糖。

268.根据权利要求1-264中任一项所述的方法，其中所述DP1级分包含按相对丰度计约5％至约10％的含脱水亚基寡糖。

269.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述DP3级分包含按相对丰度计少于15％、少于12％、少于11％、少于10％、少于9％、少于8％、少于7％、少于6％、少于5％、少于4％、少于3％、少于2％或少于1％的含脱水亚基寡糖。

270.根据权利要求1-269中任一项所述的方法，其中所述DP3级分包含按相对丰度计约2％至约12％的含脱水亚基寡糖。

271.根据权利要求1-269中任一项所述的方法，其中所述DP3级分包含按相对丰度计约1％至约10％的含脱水亚基寡糖。

272.根据权利要求1-269中任一项所述的方法，其中所述DP3级分包含按相对丰度计约0.5％至约10％的含脱水亚基寡糖。

273.根据权利要求1-269中任一项所述的方法，其中所述DP3级分包含按相对丰度计约5％至约10％的含脱水亚基寡糖。

274.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述寡糖制剂包含按相对丰度计约2％至约12％的含脱水亚基寡糖。

275.根据权利要求1-274中任一项所述的方法，其中所述寡糖制剂包含按相对丰度计约0.5％至约10％的含脱水亚基寡糖。

276.根据权利要求1-274中任一项所述的方法，其中所述寡糖制剂包含按相对丰度计约1％至约10％的含脱水亚基寡糖。

277.根据权利要求1-274中任一项所述的方法，其中所述寡糖制剂包含按相对丰度计约5％至约10％的含脱水亚基寡糖。

278.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述DP2级分包含按相对丰度计大于0.6％、大于0.8％、大于1.0％、大于1.5％、大于2％、大于3％、大于4％、大于5％、大于6％、大于7％、大于8％、大于9％、大于10％、大于11％或大于12％的含脱水亚基寡糖。

279.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述DP1级分包含按相对丰度计大于0.6％、大于0.8％、大于1.0％、大于1.5％、大于2％、大于3％、大于4％、大于5％、大于6％、大于7％、大于8％、大于9％、大于10％、大于11％或大于12％的含脱水亚基寡糖。

280.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述DP3级分包含按相对丰度计大于0.6％、大于0.8％、大于1.0％、大于1.5％、大于2％、大于3％、大于4％、大于5％、大于6％、大于7％、大于8％、大于9％、大于10％、大于11％或大于12％的含脱水亚基寡糖。

281.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述寡糖制剂包含按相对丰度计大于0.5％、0.6％、大于0.8％、大于1.0％、大于1.5％、大于2％、大于3％、大于4％、大于5％、大于6％、大于7％、大于8％、大于9％、大于10％、大于11％或大于12％的含脱水亚基寡糖。

282.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述寡糖制剂具有如通过液相色谱法测定的按重量计约1％至约40％的DP1级分含量。

283.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述寡糖制剂具有如通过液相色谱法测定的按重量计约1％至约35％的DP2级分含量。

284.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述寡糖制剂具有如通过液相色谱法测定的按重量计约1％至约30％的DP3级分含量。

285.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述寡糖制剂具有如通过液相色谱法测定的按重量计约0.1％至约20％的DP4级分含量。

286.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述寡糖制剂具有如通过液相色谱法测定的按重量计约0.1％至约15％的DP5级分含量。

287.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中如通过液相色谱法测定的，DP2级分与DP1级分的比率是约0.02至约0.40。

288.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中如通过液相色谱法测定的，DP3级分与DP2级分的比率是约0.01至约0.30。

289.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中如通过液相色谱法测定的，所述寡糖制剂中DP1和DP2级分的合计含量少于50％、少于40％或少于30％。

290.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述寡糖制剂包含至少103、至少104、至少105、至少106或至少109个不同的寡糖种类。

291.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中两种或更多种独立的寡糖包含不同的脱水亚基。

292.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述含脱水亚基寡糖中的每一种包含作为单糖的热脱水产物的一个或多个脱水亚基。

293.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述寡糖制剂包含选自以下的一个或多个脱水亚基：脱水葡萄糖、脱水半乳糖、脱水甘露糖、脱水阿洛糖、脱水阿卓糖、脱水古洛糖、脱水艾杜糖、脱水塔洛糖、脱水果糖、脱水核糖、脱水阿拉伯糖、脱水鼠李糖、脱水来苏糖和脱水木糖。

294.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述寡糖制剂包含一个或多个脱水葡萄糖、脱水半乳糖、脱水甘露糖或脱水果糖亚基。

295.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述DP1级分包含1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖或1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖脱水亚基。

296.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述DP1级分包含1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖和1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖两种脱水亚基。

297.根据权利要求296所述的方法，其中在所述寡糖制剂中，1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖与1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖的比率是约10:1至1:10、约9:1至约1:10、约8:1至约1:10、约7:1至约1:10、约6:1至约1:10、约5:1至约1:10、约4:1至约1:10、约3:1至约1:10、约2:1至约1:10、约10:1至约1:9、约10:1至约1:8、约10:1至约1:7、约10:1至约1:6、约10:1至约1:5、约10:1至约1:4、约10:1至约1:3、约10:1至约1:2或约1:1至约3:1。

298.根据权利要求196或197所述的方法，其中在所述寡糖制剂中，1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖与1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖的比率是约10:1、约9:1、约8:1、约7:1、约6:1、约5:1、约4:1、约3:1、约2:1、约1:1、约1:2、约1:3、约1:4、约1:5、约1:6、约1:7、约1:8、约1:9或约1:10。

299.根据权利要求296-298中任一项所述的方法，其中在所述寡糖制剂中，1,6-脱水-β-D-呋喃葡萄糖与1,6-脱水-β-D-吡喃葡萄糖的比率是约2:1。

300.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述DP2级分包含至少5个种类的含脱水亚基寡糖。

301.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述DP2级分包含约5至10个种类的含脱水亚基寡糖。

302.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述寡糖制剂包含一种或多种糖焦糖化产物。

303.根据权利要求302所述的方法，其中所述糖焦糖化产物选自：甲醇；乙醇；呋喃；甲基乙二醛；2-甲基呋喃；乙酸乙烯酯；乙醇醛；乙酸；丙酮醇；糠醛；2-呋喃甲醇；3-呋喃甲醇；2-羟基环戊-2-烯-1-酮；5-甲基糠醛；2(5H)-呋喃酮；2甲基环戊烯醇酮；左旋葡萄糖酮；环状羟基内酯；1,4,3,6-二脱水-α-D-吡喃葡萄糖；二脱水吡喃葡萄糖；和5-羟基甲基糠醛(5-hmf)。

304.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中大于50％、60％、70％、80％、90％、95％或99％的所述含脱水亚基寡糖包含链端脱水亚基。

305.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述寡糖制剂具有如通过高效液相色谱法(HPLC)测定的约300至约5000g/mol的重均分子量。

306.根据权利要求1-305中任一项所述的方法，其中所述寡糖制剂具有如通过HPLC测定的约300至约2500g/mol的重均分子量。

307.根据权利要求1-305中任一项所述的方法，其中所述寡糖制剂具有如通过HPLC测定的约500至约2000g/mol的重均分子量。

308.根据权利要求1-305中任一项所述的方法，其中所述寡糖制剂具有如通过HPLC测定的约500至约1500g/mol的重均分子量。

309.根据权利要求1-305中任一项所述的方法，其中所述寡糖制剂具有如通过HPLC测定的约300至约5000g/mol的数均分子量。

310.根据权利要求1-305中任一项所述的方法，其中所述寡糖制剂具有如通过HPLC测定的约300至约2500g/mol的数均分子量。

311.根据权利要求1-305中任一项所述的方法，其中所述寡糖制剂具有如通过HPLC测定的约500至约2000g/mol的数均分子量。

312.根据权利要求1-305中任一项所述的方法，其中所述寡糖制剂具有如通过HPLC测定的约500至约1500g/mol的数均分子量。

313.根据权利要求1-305中任一项所述的方法，其中所述寡糖制剂具有约2000至约2800g/mol的重均分子量。

314.根据权利要求1-305中任一项所述的方法，其中所述寡糖制剂具有约1000至约2000g/mol的数均分子量。

315.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中将包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物施用给所述动物至少1、7、10、14、30、45、60、90或120天。

316.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中将包含所述合成寡糖制剂的所述营养组合物每天至少一次、两次、三次、四次或五次施用给所述动物。

317.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述施用包括向所述动物提供所述营养组合物以随意摄取。

318.根据权利要求317所述的方法，其中所述动物在超过至少1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、20、30、40、50、60、90或120个二十四小时时段内摄取所述营养组合物的至少一部分。

319.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述营养组合物包含至少100ppm、200ppm、300ppm、400ppm、500ppm、600ppm、700ppm、800ppm、900ppm、1000ppm、1500ppm或2000ppm的所述合成寡糖制剂。

320.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述营养组合物包含约100ppm、200ppm、300ppm、400ppm、500ppm、600ppm、700ppm、800ppm、900ppm、1000ppm、1500ppm或2000ppm的所述合成寡糖制剂。

321.根据权利要求320所述的方法，其中所述营养组合物包含约500ppm的所述合成寡糖制剂。

322.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述营养组合物包含约100ppm-2000ppm、100ppm-1500ppm、100ppm-1000ppm、100ppm-900ppm、100ppm-800ppm、100ppm-700ppm、100ppm-600ppm、100ppm-500ppm、100ppm-400ppm、100ppm-300ppm、100ppm-200ppm、200ppm-1000ppm、200ppm-800ppm、200ppm-700ppm、200ppm-600ppm、200ppm-500ppm、300ppm-1000ppm、300ppm-700ppm、300ppm-600ppm或300ppm-500ppm的所述合成寡糖制剂。

323.根据任一项前述权利要求所述的方法，其中所述营养组合物包含约300ppm-600ppm的所述合成寡糖制剂。