ES2322392T5 - Método para eliminar un fluido de un recipiente que comprende una caperuza perforable - Google Patents

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Description

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DESCRIPCION
Metodo para eliminar un fluido de un recipiente que comprende una caperuza perforable
La presente invencion se refiere a un metodo para eliminar una sustancia fluida de un sistema cerrado.
En este metodo se usan caperuzas a utilizar en combinacion con recipientes para la retencion de fluidos, tales como los destinados a recibir y retener muestras biologicas para analisis clmicos, controles de pacientes o diagnostico. En particular, la caperuza es perforable por un dispositivo de transferencia de fluido utilizado para transferir fluidos hacia o desde un recipiente de retencion de fluido, en el que el recipiente y la caperuza permanecen ffsicamente asociados de forma estanca durante una transferencia de fluido.
Los dispositivos de recogida son del tipo de una combinacion de una caperuza y un recipiente habitualmente utilizados para recibir y almacenar muestras biologicas para su envm a laboratorios clmicos, en los que pueden ser analizadas las muestras para determinar la existencia o estado de una enfermedad espedfica o la presencia de un agente infeccioso determinado, tal como virus o microorganismo bacteriano. Los tipos de muestras biologicas habitualmente utilizadas y facilitadas a laboratorios clmicos para analisis incluyen sangre, orina, esputos, salivas, pus, mocos y fluidos cerebroespinales. Dado que este tipo de muestras pueden contener organismos patogenos, es importante asegurar que los dispositivos de recogida esten construidos de manera que sean sustancialmente estancos, es decir, que no permitan fugas, durante el transporte desde el lugar de la recogida hasta el lugar del analisis. Esta caractenstica de los dispositivos de recogida es especialmente importante cuando el laboratorio clmico y la instalacion de recogida estan muy alejados entre sf, incrementando la probabilidad de que el dispositivo de recogida pueda ser invertido o sacudido fuertemente durante el transporte y sometido potencialmente a sustanciales fluctuaciones de temperatura y presion.
Para impedir fugas de las muestras y posibles contaminaciones del medio circundante, se han disenado tfpicamente caperuzas de los dispositivos de recogida de manera que estas sean roscadas, montadas a presion o fijadas por friccion de otro modo o soldadas sobre el recipiente, formando de esta manera un cierre sustancialmente libre de fugas entre la caperuza y el recipiente. Ademas de impedir que la muestra de fluido escape por fugas, un cierre sustancialmente libre de fugas formado entre la caperuza y el recipiente del dispositivo de recogida puede tambien colaborar en mejorar la exposicion de la muestra a influencias contaminantes potenciales del ambiente inmediato. Este aspecto de un cierre sin fugas es importante para impedir la introduccion de contaminantes en el dispositivo de recogida que podnan alterar los resultados cualitativos o cuantitativos de un ensayo.
Si bien un cierre a prueba de fugas debe impedir fugas de la muestra durante el transporte, la eliminacion real de la caperuza del recipiente antes del analisis de la muestra presenta otra oportunidad potencial de contaminacion.
Cuando se retira la caperuza, la muestra que se puede haber acumulado en la cara inferior de la caperuza durante el transporte podna entrar en contacto con un clmico, posiblemente exponiendo a este a patogenos peligrosos presentes en la muestra del fluido. Y si la muestra es proteinacea o mucoide por su naturaleza, o si el medio de transporte contiene detergentes o tensoactivos, entonces se podnan formar una lamina o burbujas alrededor de la embocadura del recipiente durante el transporte, las cuales podnan reventar cuando la caperuza se retira del recipiente, diseminando la muestra en el medio ambiente de la prueba. Otro riesgo asociado con la eliminacion de la caperuza es el potencial de crear un aerosol contaminante que puede conducir a falsos positivos o a resultados exagerados en otras muestras que son ensayadas simultaneamente o subsiguientemente en la misma area general de trabajo por contaminacion cruzada. Tambien es posible que los residuos de la muestra de un dispositivo de recogida, que pueden haber sido transferidos de manera inadvertida a la mano con guantes de un clmico, establezca contacto con la muestra de otro dispositivo de recogida por retirada rutinaria o poco cuidadosa de caperuzas y manipulacion de los dispositivos de recogida.
Las preocupaciones de contaminacion cruzada son especialmente agudas cuando el ensayo que se lleva a cabo comporta deteccion de acido nucleico e incluye un procedimiento de amplificacion tal como la reaccion en cadena de polimerasa (PCR) bien conocida o un sistema de amplificacion basado en transcripcion tal como amplificacion mediada por transcripcion (TMA). (Un comentario de varios procedimientos de amplificacion actualmente en uso, incluyendo PCR y tMa, ha sido proporcionado en la publicacion Helen H. Lee y otros, Nucleic Acid Amplification Technologies (1997).). Dado que la amplificacion esta destinada a aumentar la sensibilidad del ensayo incrementando la cantidad de secuencias de acido nucleico objetivo presentes en una muestra, la transferencia de una cantidad incluso minuscula de una muestra portadora de un patogeno de un recipiente, o un acido nucleico objetivo de una muestra de control positivo, a otro recipiente que contiene una muestra negativa, podna resultar en un falso positivo.
Para minimizar el potencial de crear aerosoles contaminantes de la muestra y limitar el contacto directo entre muestras y humanos o el medio ambiente, es deseable tener una caperuza del dispositivo de recogida que pueda ser perforada por el dispositivo de transferencia de fluido (por ejemplo, la punta de una pipeta que puede ser utilizada con una pipeta de desplazamiento de aire) mientras la caperuza permanece asociada al recipiente de forma ffsica y con estanqueidad. El material y construccion de la parte perforable de la caperuza debe facilitar la salida de
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aire desplazado desde la zona interna del dispositivo de recogida para asegurar transferencias de fluido precisas y para impedir una liberacion rapida de aerosoles, al ser insertado el dispositivo de transferencia de fluido en el dispositivo de recogida o ser retirado del mismo. Ademas, dado que se expulsa aire del espacio interior del dispositivo de recogida despues de haber perforado la caperuza, sena especialmente interesante si se incluyeran medios para minimizar la liberacion de aerosol a traves de la caperuza, una vez que ha sido perforada por el dispositivo de transferencia de fluido. Asimismo, para limitar la cantidad de fluido potencialmente contaminante presente en el exterior de un dispositivo de transferencia de fluido despues de haber sido retirado el dispositivo de recogida, sena ventajoso que la caperuza incluyera tambien medios para la limpieza del fluido presente en el exterior del dispositivo de transferencia de fluido, o para absorber el mismo, al ser retirado de un dispositivo de recogida. Para impedir avenas en el dispositivo de transferencia de fluido que podnan afectar a su capacidad de retirar o dispensar fluidos de manera predictible y fiable, y facilitar su utilizacion en aplicaciones de pipeteado manual, la caperuza debe ser disenada tambien para limitar las fuerzas necesarias para que el dispositivo de transferencia de fluido atraviese la caperuza. De manera ideal, el dispositivo de recogida podna ser utilizado en formatos tanto manual como automatizado y sena apropiado para su utilizacion con puntas de pipeta de un solo uso realizadas en un material plastico.
Las caperuzas para dispositivos de recogida que pueden ser atravesadas por un dispositivo de transferencia de fluido tendran otras ventajas, asimismo, incluyendo el ahorro de tiempo resultante del hecho de que los clmicos no tendran que retirar manualmente las caperuzas de los recipientes antes de sacar partes de la muestra desde los dispositivos de recogida para su ensayo. Otra ventaja de las caperuzas para dispositivos de recogida perforables sena la reduccion de heridas por movimientos repetitivos sufridas por los clmicos por el desenroscado repetido de caperuzas.
Las caperuzas que pueden ser perforadas por dispositivos de transferencia de fluido son conocidas a partir de los documentos WO 00/69389, EP 0330883A1, US 5.202.093 y EP 0999146A2.
Un objetivo de la presente invencion es mejorar un metodo para eliminar una sustancia fluida de un sistema cerrado de la tecnica anterior, tal como se ha mencionado anteriormente, para evitar cualquier contaminacion potencial.
Esto se consigue por las caractensticas de la reivindicacion 1. En las reivindicaciones dependientes se describen realizaciones preferentes adicionales.
Los problemas de contaminacion potenciales asociados con dispositivos de recogida convencionales se solucionan con una caperuza perforable para su utilizacion con un recipiente que es uno de los componentes de un dispositivo de recogida, que comprende: (i) una pared lateral cerrada que tiene una superficie interna, una superficie externa, una superficie superior y una superficie de fondo; (ii) medios de fijacion para fijar la caperuza al extremo abierto del recipiente con acoplamiento estanco; (iii) un reborde que se prolonga en direccion radial y hacia adentro desde una superficie interna de la pared lateral de la caperuza y que tiene una superficie extrema que define una abertura dimensionada para recibir un dispositivo de transferencia de fluido, de manera que la superficie interna de la pared lateral de la caperuza y una superficie superior del reborde mencionado definen un primer orificio; (iv) un cierre fracturable destinado a impedir el paso de un fluido desde un espacio interior del recipiente hacia el primer orificio cuando la caperuza esta fijada al recipiente en acoplamiento estanco, de manera que el cierre esta fijado o bien a la superficie superior o la superficie inferior de dicho reborde; (v) medios de filtrado para dificultar o impedir la liberacion de un aerosol o de burbujas desde el espacio interior del recipiente hacia la atmosfera, de manera que los medios de filtrado estan dispuestos sustancialmente dentro del primer orificio; y (vi) medios de retencion para retener los medios de filtrado dentro del primer orificio. (Una “pared lateral cerrada” es una pared que carece de superficies extremas completamente expuestas). Los medios de retencion estan preferentemente fijados a una pared superior de la caperuza. La pared lateral, la pestana y el reborde de la caperuza se pueden moldear a partir de un material plastico y preferentemente forman una pieza unitaria.
La caperuza perforable incluye un faldon que depende de la superficie inferior del reborde, de manera que una superficie interna del faldon define un segundo orificio que tiene un diametro o anchura menor al del primer orificio.
El faldon puede ser incluido, entre otros objetivos, para prevenir adicionalmente las fugas de fluido desde el interior del recipiente cuando se fija la caperuza en el recipiente en un acoplamiento estanco. (Por “acoplamiento estanco” se debe entender contacto entre superficies solidas que esta destinado a impedir o dificultar el paso de un fluido). Una superficie externa del faldon incluye preferentemente un nervio de estanqueizacion que esta en contacto de friccion con una superficie interna del recipiente. Con esta realizacion, el cierre estanco fracturable se puede fijar a la superficie superior del reborde o a la superficie inferior del faldon. La pared lateral, la pestana, el reborde y el faldon de la caperuza de esta realizacion estan moldeados a partir de un material plastico y preferentemente forman una pieza unitaria.
Los medios de retencion estan constituidos por un segundo cierre estanco fracturable. El segundo cierre estanco fracturable puede comprender el mismo material o uno distinto al cierre estanco fracturable fijado a la superficie superior o a la superficie inferior del reborde, o a la superficie inferior del faldon. Ambos cierres estancos son
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perforables por un dispositivo de transferencia de fluido con aplicacion de una fuerza manual moderada, y cada uno de los cierres estancos comprende un elemento laminar.
En una realizacion no adecuada para el metodo de la presente invencion, el medio de retencion comprende un anillo laminar que tiene un orificio situado centralmente que esta dimensionado para recibir un dispositivo de transferencia de fluido y que esta alineado de manera sustancialmente axial con el primer orificio y el segundo orificio, si existe. El diametro o anchura de este orificio es menor que el diametro o anchura de un filtro contenido dentro del primer orificio, de manera que el anillo laminar puede funcionar reteniendo el filtro dentro de la caperuza. El anillo laminar de esta realizacion puede estar fijado a la pared superior de la caperuza por medio de un adhesivo o por medio de un recubrimiento de plastico que ha sido aplicado al anillo laminar y que puede ser soldado a la superficie de la pared superior de la caperuza.
En otra realizacion adicional no adecuada para el metodo de la presente invencion, los medios de retencion comprenden un disco de material plastico que tiene un orificio formado en el mismo, dimensionado para recibir un dispositivo de transferencia de fluido y que esta alineado de manera sustancialmente axial con el primer orificio y el segundo orificio, si existe. Los medios de retencion de esta realizacion funcionan reteniendo el filtro dentro del primer orificio. El disco puede ser fijado a la pared superior de la caperuza o la pared superior puede estar adaptada para incluir un asiento para recibir el disco, por ejemplo, en un acoplamiento de friccion o a presion.
En otra realizacion adicional no adecuada para el metodo de la invencion, los medios de retencion comprenden un cierre estanco desmontable que esta disenado para limitar la exposicion de un filtro a los contaminantes ambientales, y que puede incluir una aleta para desmontaje facil antes de la perforacion de la caperuza. Dado que este cierre estanco puede ser retirado antes de la perforacion de la caperuza, no es condicion alguna que este medio espedfico de retencion este formado por un material fracturable que puede ser taladrado por un dispositivo de transferencia de fluido aplicando una fuerza manual moderada. Dado que el cierre estanco puede funcionar protegiendo el filtro contra contaminantes externos durante la expedicion, el cierre estanco desmontable puede ser aplicado, por ejemplo, al disco fijo descrito anteriormente para retener el filtro dentro del primer orificio.
La caperuza esta dispuesta como parte de un dispositivo de recogida que comprende un recipiente para contener fluidos. Cuando esta dispuesta como parte del dispositivo de recogida, la caperuza incluye preferentemente la caractenstica del faldon que se ha descrito, que esta dispuesto adyacente a una superficie interna de un extremo abierto del recipiente para dificultar el paso del fluido desde el espacio interior del recipiente al medio ambiente externo del dispositivo de recogida. Incluyendo un nervio de estanqueidad sobre la superficie externa del faldon se facilita adicionalmente este objetivo al incrementar la presion ejercida por el faldon sobre la superficie interna del recipiente. El dispositivo de recogida puede contener, por ejemplo, un material en polvo seco, granulos de reactivos qrnmicos, materiales tampon, estabilizantes o un medio de transporte para conservar una muestra mientras es enviada desde un lugar de recogida al lugar de analisis. El dispositivo de recogida puede estar dispuesto tambien en combinacion de embalaje con un dispositivo de recogida de la muestra (por ejemplo, una masa absorbente) para obtener una muestra humana, animal, de agua, del medio ambiente, industrial, de alimentos u otras fuentes. Se pueden incluir adicionalmente materiales de instruccion con el dispositivo de recogida que detallan la utilizacion apropiada del dispositivo de recogida cuando se obtiene o se transporta una muestra o tecnicas apropiadas para recuperar una muestra de fluido del dispositivo de recogida en el lugar de analisis. En el caso de combinacion de embalaje, los elementos indicados quedan dispuestos en el mismo contenedor (por ejemplo, un contenedor de correos o de envfos), pero no necesitan en sf mismos estar ffsicamente asociados entre sf en el contenedor o combinados en el mismo envase o recipiente dentro del contenedor.
La caperuza es utilizada en el metodo para recuperar una sustancia fluida del recipiente que es un componente de un dispositivo de recogida con una punta de pipeta de plastico para su utilizacion con una pipeta de desplazamiento de aire. Cuando la caperuza es perforada por la punta de la pipeta, se forman pasos de aire entre la punta de la pipeta y el cierre o cierres estancos fracturables de la caperuza, facilitando de esta manera la evacuacion del aire del interior del recipiente. Despues de que el fluido ha sido retirado del dispositivo de recogida, por lo menos una parte de la muestra de fluido puede ser expuesta a reactivos de amplificacion y condiciones que permiten la amplificacion de una secuencia de acido nucleico diana que puede estar presente en la muestra del fluido. Diferentes procesos de amplificacion, y sus reactivos y condiciones asociados, son bien conocidos por los tecnicos en la materia de diagnostico de acido nucleico.
Se da a conocer un metodo para eliminar una sustancia fluida contenida en un sistema cerrado que comprende una caperuza y un recipiente de retencion de fluido. Ademas de los componentes constituidos por la caperuza y el recipiente, se utiliza la frase “sistema cerrado” en esta descripcion para hacer referencia a una caperuza fijada a un recipiente con acoplamiento estanco para impedir que el contenido del fluido del sistema escape hacia el medio ambiente circundante. El metodo comprende la perforacion de un primer y segundo cierre estanco fracturable fijados a la caperuza con un dispositivo de transferencia de fluido, de manera que el primer cierre estanco esta alineado axialmente por debajo del segundo. La perforacion del primer y segundo cierre estanco por el dispositivo de transferencia de fluidos tiene como resultado la formacion de pasos de aire entre dichos cierres estancos y el dispositivo de transferencia de fluido que ayuda a la evacuacion de aire desde el espacio interior del sistema. El dispositivo de transferencia de fluido es una punta de pipeta de plastico a utilizar con una pipeta de desplazamiento
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de aire. En una modalidad preferente, el metodo incluye ademas el paso del dispositivo de transferencia de fluido por un filtro contenido dentro de la caperuza e interpuesto entre el primer y segundo cierre estanco.
Una vez el fluido ha sido retirado del sistema en este metodo, una parte o la totalidad de la muestra de fluido puede ser expuesta a condiciones y reactivos de amplificacion que permiten la amplificacion de una secuencia de acido nucleico objetivo que puede encontrarse presente en la muestra de fluido. Tal como se ha indicado anteriormente, una serie de procedimientos de amplificacion son bien conocidos por los tecnicos en la materia de diagnostico de acido nucleico, y se pueden determinar sin excesiva experimentacion los reactivos y condiciones apropiados a utilizar con cualquiera de estos procesos de amplificacion.
Los metodos de la presente invencion pueden ser llevados a cabo manualmente o adaptados para su utilizacion con un instrumento semi-automatizado o completamente automatizado. Se incluyen entre los ejemplos de sistemas de instrumentos que podnan ser adaptados facilmente para su utilizacion con los dispositivos de recogida u otros sistemas cerrados los comercializados bajo las marcas DTS 400 (deteccion solamente) y DTS 1600 (amplificacion y deteccion) por Gen-Probe Incorporated de San Diego, California, que representan realizaciones de sistemas de instrumentos que se dan a conocer por Acosta y otros “Assay Work Station", patente U.S.A. N° 6.254.826, y los que se dan a conocer por Ammann y otros, “Automated Process for Isolating and Amplifying a Target Nucleic Acid Sequence", patente U.S.A. N° 6.335.166, siendo ambos propiedad de la misma solicitante actual.
Estas y otras caractensticas, aspectos y ventajas de la presente invencion quedaran evidentes para los tecnicos en la materia despues de considerar la siguiente descripcion detallada, reivindicaciones adjuntas y dibujos.
Breve descripcion de los dibujos
La figura 1 es una vista en perspectiva de los componentes de caperuza y recipiente de un dispositivo de recogida preferente utilizado en la presente invencion.
La figura 2 es una vista en planta, a mayor escala, de la caperuza de nucleo de la figura 1.
La figura 3 es una vista inferior, a mayor escala, de la caperuza de nucleo de la figura 1.
La figura 4 es una vista lateral parcial en seccion, a mayor escala, del dispositivo de recogida de las figuras 1 a 3 (mostrando solamente la caperuza de nucleo), segun la lmea 4-4.
La figura 5 es una vista lateral parcial, en seccion y a mayor escala, de otro dispositivo de recogida utilizado en la presente invencion.
La figura 6 es una vista lateral en seccion, a mayor escala, de la caperuza de la figura 1.
La figura 7 es una vista en seccion, a mayor escala, de otra caperuza utilizada en la presente invencion.
La figura 8 es una vista lateral, en seccion y a mayor escala, de un cierre estanco fracturable utilizado presente invencion.
La figura 9 es una vista lateral, en seccion y a mayor escala, de otro cierre estanco fracturable utilizado presente invencion.
La figura 10 es una vista en planta superior, a mayor escala, de la caperuza de nucleo y filtro de la figura 1.
La figura 11 es una vista en planta superior de la caperuza de las figuras 6 y 7, mostrando perforaciones cierre estanco fracturable.
La figura 12 es una vista en planta superior, a mayor escala, de otra caperuza.
La figura 13 es una vista en seccion lateral, a mayor escala, de otra caperuza.
La figura 14 es una vista en planta superior de la caperuza de la figura 13.
La figura 15 es una vista en seccion lateral, a mayor escala, de otra caperuza.
La figura 16 es una vista en planta superior de la caperuza de la figura 15.
La figura 17 es una vista lateral, en seccion parcial, del dispositivo de recogida de la figura 1, despues de haber sido perforado por un dispositivo de transferencia de fluido.
La figura 18 es una vista superior, en planta, de la caperuza y dispositivo de transferencia de fluido de la figura 17.
Descripcion detallada de la invencion
Si bien la presente invencion puede ser realizada segun diferentes formas, la siguiente descripcion y dibujos adjuntos estan destinados simplemente a dar a conocer algunas de estas formas como ejemplos espedficos de la presente invencion. De acuerdo con ello, la presente invencion no esta destinada a quedar limitada a las formas o realizaciones que se han descrito e ilustrado. En vez de ello, el ambito completo de la presente invencion es el indicado en las reivindicaciones adjuntas.
Haciendo referencia a las figuras, se muestran las caperuzas preferentes 30A-B para el uso en los metodos de la presente invencion, solas o en combinacion con un recipiente 20 que puede ser utilizado para recibir y almacenar muestras de fluidos para analisis posteriores, incluyendo analisis con ensayos basados en acido nucleico o diagnostico de inmunoensayos para un organismo patogenico espedfico. Cuando la muestra deseada es un fluido biologico, la muestra puede ser, por ejemplo, sangre, orina, saliva, esputos, sustancias mucosas u otras secreciones corporales, pus, fluido amniotico, fluido cerebroespinal o fluido seminal. No obstante, la presente invencion preve tambien materiales distintos a estos fluidos biologicos espedficos, incluyendo, sin que ello sea limitativo, agua,
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productos qmmicos y reactivos de ensayo, as^ como sustancias solidas que se pueden disolver total o parcialmente en un medio fluido (por ejemplo, muestras de tejidos, heces, muestras ambientales, productos alimenticios, materiales en polvo, partmulas y granulos). El recipiente 20 es preferentemente capaz de formar un cierre estanco sustancialmente a prueba de fugas, con la caperuza 30A-E y puede tener cualquier forma o composicion, a condicion de que el recipiente este conformado para recibir y retener el material de interes (por ejemplo, una muestra fluida o reactivos de ensayo). En el caso en el que el recipiente 20 contiene una muestra a ensayar, es importante que la composicion del recipiente sea esencialmente inerte de manera que no interfiera significativamente con la realizacion o resultados del ensayo. Un recipiente preferente 20 esta formado por polipropileno y tiene una forma general cilmdrica con medidas aproximadas de 13 mm x 82 mm.
Tal como se ha mostrado en las figuras, las caperuzas particularmente preferentes 30A-B para el uso en los metodos de la presente invencion incluyen una estructura de nucleo integralmente moldeado 31A (al que se hace referencia como “caperuza de nucleo”) que comprende: (i) una pared lateral de forma general cilmdrica 35; (ii) una pestana 36 que depende de la superficie inferior 37 de la pared lateral y que tiene una superficie interna 38 adaptada para sujetar una superficie externa 21 de una pared lateral 22 de forma general cilmdrica de un recipiente de extremo abierto 20; (iii) un reborde 39 que se extiende radialmente hacia adentro desde la superficie interna 40 de la pared lateral 35 por encima de la pestana 36; y (iv) un faldon 41 de forma general cilmdrica que depende de una superficie de fondo 42 del reborde en orientacion sustancialmente paralela a la pestana. La superficie interna 40 de la pared lateral 35 y la superficie superior 43 del reborde 39 definen un primer orificio 44, tal como se ha mostrado en la figura 4, dimensionado para recibir un filtro 33, tal como se ha mostrado en las figuras 6 y 7, que puede ser montado por friccion o inmovilizado de otro modo dentro del primer orificio. En una realizacion preferente, el reborde
39 ayuda a retener el filtro 33 dentro del primer orificio 44 durante la perforacion de la caperuza 30A-E por un dispositivo de transferencia de fluido. El reborde 39 puede funcionar tambien como superficie para la fijacion de un cierre estanco fracturable 32, tal como se ha mostrado en la figura 6. Una superficie interna 45 del faldon 41 por debajo de la superficie superior 43 del reborde 39 define un segundo orificio 46 de diametro menor que el primer orificio 44 y dimensionado para permitir movimiento por el mismo de un dispositivo de transferencia de fluido. (La parte proxima del faldon 41, en la que la superficie superior 43 del reborde 39 establece contacto con la superficie interna 45 del faldon, puede estar achaflanada para desviar un dispositivo de transferencia de fluido mal alineado durante la perforacion de la caperuza 30A-E, a condicion de que exista suficiente area superficial en la parte superior del reborde para la fijacion a la misma del cierre estanco fracturable 32). Tal como se ha mostrado en la figura 7, el faldon 41 comprende una superficie inferior 47 que puede servir como localizacion alternativa para la fijacion del cierre fracturable 32.
En una caperuza de nucleo alternativa 31B, segun la realizacion mostrada en la figura 5, el faldon 41 esta eliminado con respecto a la caperuza de nucleo 31A de la estructura mostrada en la figura 4. En esta realizacion, el cierre fracturable 32 puede ser fijado a la superficie inferior 42 o a la superficie superior 43 del reborde 39. No obstante, dado que el faldon 41 ayuda a la prevencion de fugas de fluidos de un dispositivo de recogida 10, puede ser deseable incluir un retenedor alternativo de fluido para esta realizacion de caperuza de nucleo 31B, tal como un anillo torico de neopreno (no mostrado) montado entre la superficie inferior 37 de la pared lateral 35 y una superficie anular superior 23 del recipiente 20.
Mientras que el reborde 39 de la caperuza de nucleo 31B mostrada en la figura 5 forma una estructura de pestana con superficies inferior y superior 42, 43, esta realizacion puede ser modificada de manera que la superficie interna
40 de la pared lateral 35 se extiende radialmente hacia adentro hasta que una superficie extrema 62 del reborde y la superficie interna de la pared lateral son co-extensivas. En esta forma modificada de la caperuza 31B (no mostrada), el reborde 39 esta definido por la superficie inferior 37 de la pared lateral 35, dado que se elimina la superficie superior 43 del reborde. Dado que el orificio 44 de esta realizacion esta definido unicamente por la superficie interna
40 de la pared lateral 35, el cierre estanco fracturable 32 debe ser fijado a la superficie inferior (o unica) 42 del reborde 39.
Se puede realizar una modificacion similar en la caperuza de nucleo preferente 31A, de manera que la superficie interna 40 de la pared lateral 35 se prolongue radialmente hacia adentro hasta que la superficie interna 45 del faldon
41 este enrasada con la superficie interna de la pared lateral. Esta forma modificada de la caperuza de nucleo 31A (no mostrada) elimina el reborde 39, transforma el primer y segundo orificio 44, 46 en un orificio unico, y requiere que el asiento estanco fracturable 32 este fijado a la superficie de fondo 47 del faldon 41. La desventaja de estas formas modificadas de las caperuzas de nucleo 31A, 31B es que la alteracion o eliminacion del reborde 39 hace mas diffcil mantener el filtro 33 dentro de la caperuza 30A-E cuando la caperuza es atravesada por un dispositivo de transferencia de fluido. Este problema puede ser superado por adherencia del filtro 33 a la pared lateral 35 de la caperuza 30A-E, el cierre fracturable 32 o los medios de retencion 34A-C, por ejemplo.
La caperuza de nucleo 31A-B puede estar moldeada de manera integral a partir de una serie de resinas de polfmeros y heteropolfmeros incluyendo, sin que ello sirva de limitacion, poliolefinas (por ejemplo, polietileno de alta densidad (“HDPE”), polietileno de baja densidad (“LDPE”), una mezcla de HDpE y LDPE, o polipropileno), poliestireno, poliestireno de alto impacto y policarbonato. Un material actualmente preferente para formar la caperuza de nucleo 31A-B es un material HDpE comercializado con la marca Alathon M5370 por GE Polymerland de Huntersville, Carolina del Norte. Los tecnicos en la materia apreciaran facilmente que la gama de resinas
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aceptables para la caperuza dependera, en parte, de la naturaleza de la resina utilizada para formar el recipiente, dado que las caractensticas de las resinas utilizadas para formar estos componentes afectara al grado en el que la caperuza 30A-E y los componentes del recipiente 20 de un dispositivo de recogida 10 pueden formar un cierre estanco satisfactorio y la facilidad con la que se puede roscar de manera firme la caperuza en el recipiente. Igual que con el componente de recipiente 20, el material de la caperuza de nucleo 31A-B debe ser esencialmente inerte con respecto a la sustancia del fluido (incluyendo reactivos de ensayo) contenida en el dispositivo de recogida 10, de manera que el material de la caperuza de nucleo no interfiere significativamente con la realizacion o resultados de un ensayo.
La caperuza de nucleo 31A-B es moldeada por inyeccion como pieza unitaria utilizando procedimientos bien conocidos por los tecnicos en la materia del modelo por inyeccion. Despues de que la caperuza de nucleo 31A-B ha sido formada y sometida a curado durante un penodo de tiempo suficiente, se anaden los siguientes componentes a la caperuza de nucleo de la manera que se ha indicado y en cualquier orden practicable:
(i) el cierre estanco fracturable 32 a la superficie superior 43 del reborde 39 o cualquiera de las caperuzas 31A-B,
a la superficie de fondo 42 del reborde de la caperuza de nucleo alternativo 31B, o a la superficie de fondo 47 del
faldon 41 de la caperuza de nucleo preferida 31A;
(ii) un filtro 33 dentro del primer orificio 44; y (iii) un retenedor 34A-D a la pared anular superior 48.
El cierre estanco fracturable 32 se incluye para conseguir una barrera sustancialmente contra fugas entre el contenido de fluido de un dispositivo de recogida 10 y el filtro 33 en el primer orificio 44. Por esta razon, no es cntico si el cierre estanco fracturable 32 esta fijado a una superficie 42, 43 del reborde 39 o a la superficie de fondo 47 del faldon 41. De acuerdo con una realizacion preferente de la presente invencion, la anchura de la superficie anular superior 43 del reborde 39 es aproximadamente de 0,08 pulgadas (2,03 mm), el grosor del reborde (distancia entre las superficies superior e inferior 43, 42 del reborde) es aproximadamente de 0,038 pulgadas (0,97 mm), la anchura combinada de la superficie anular de fondo 42 del reborde y la superficie de fondo expuesta 37 de la pared lateral 35 es aproximadamente de 0,115 pulgadas (2,92 mm), y la anchura de la superficie anular de fondo 47 del faldon 41 es aproximadamente de 0,025 pulgadas (0,635 mm). Las dimensiones de estas caractensticas de la caperuza de nucleo 31A-B pueden variar, desde luego, siempre que exista suficiente area superficial para fijar el cierre fracturable 32 a la caperuza de nucleo de forma que evite sustancialmente las fugas.
El cierre fracturable 32 se realiza en una lamina (por ejemplo, lamina de aluminio u otro elemento laminar que muestre baja transmision de vapor de agua), que se puede fijar a una superficie 42, 43 del reborde 39 o a la superficie inferior 47 del faldon 41 por medios bien conocidos por los tecnicos en la materia, incluyendo adhesivos.
El cierre fracturable 32 no es un componente integral de la caperuza de nucleo 31A-B. El cierre fracturable 32 puede incluir ademas un compatibilizador, tal como una delgada lamina de plastico aplicada a una o ambas superficies del elemento laminar, lo que ayudara a una fijacion sustancialmente libre de fugas del cierre fracturable a la superficie de la caperuza de nucleo 31A-B con la aplicacion de energfa termica. Se puede utilizar un dispositivo de cierre estanco termico o un dispositivo de induccion de calor para generar la energfa termica necesaria. (Para evitar los posibles efectos perjudiciales de la corrosion, se recomienda que todas las partes de un cierre fracturable metalico 32, que pueden quedar expuestas al contenido del fluido del dispositivo de recogida 10 durante la manipulacion rutinaria del mismo, esten dotadas de un recubrimiento de plastico). Es preferible una maquina de cierre termico TOSS (Packworld USA; Nazareth, Pensilvania, Modelo N° RS242) para la fijacion del cierre estanco fracturable 32 a una superficie 42, 43 del reborde 39 o a la superficie inferior 47 del faldon 41. Tambien pueden ser utiles los procedimientos de soldadura por ultrasonidos y radiofrecuencia conocidos por los tecnicos en la materia para fijar el cierre estanco fracturable 32 a la caperuza de nucleo 31A-B.
Para ayudar adicionalmente a la fijacion del cierre estanco fracturable 32 a la caperuza de nucleo 31A-B, se puede modificar una superficie 42, 43 del reborde 39 o de la superficie de fondo 47 del faldon 41 durante el moldeo por inyeccion de la caperuza de nucleo para incluir un elemento de direccionado de la energfa, tal como un anillo anular o una serie de protuberancias. Al limitar el contacto entre el cierre estanco fracturable 32 y la superficie de plastico del reborde 39 o faldon 41, un elemento direccionador de la energfa permite que el asiento estanco fracturable 32 quede fijado al reborde o faldon en menos tiempo y utilizando menos energfa de lo que se requerina en caso de que no existieran dichos elementos cuando se utilizan procedimientos de soldadura por ultrasonidos. La razon de ello es que el area superficial mas reducida de los elementos de direccionado de energfa salientes se funde y forma una soldadura con el material plastico del cierre estanco fracturable 32 de manera mas rapida de lo que resulta posible con una superficie plana de plastico sin modificar. Un elemento direccionador de energfa es preferentemente un anillo con superficie continua que tiene seccion transversal triangular.
Para facilitar la salida de aire desde el interior del dispositivo de recogida 10, el asiento estanco fracturable 32 esta construido de manera que se rompe cuando el cierre estanco es perforado por un dispositivo de transferencia de fluido, formando de esta manera pasos de aire 70 entre el cierre estanco y el dispositivo de transferencia de fluido, tal como se describe en detalle mas adelante. Para conseguir esta rotura, el cierre estanco 32 incluye preferentemente una capa fragil formada por un material plastico duro, tal como un poliester. (Ver la publicacion Charles A. Harper, Handbook of Plastics, Elastomers, and Composites § 1.7.13 (1997 3a edicion) que explica las
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caractensticas de los poliesteres). Tal como se ha mostrado en la figura 8, el cierre estanco preferente 32 de la presente invencion es un co-laminado que incluye una capa laminar, una capa de cierre estanco y una capa intermedia fragil (Unipac; Ontario, Canada; Producto N° SG-75M (excluyendo el panel de pulpa y capas de cera que se incluyen tipicamente en este producto)). Con este cierre estanco preferente 32, la lamina de aluminio es una lamina de aluminio con un grosor aproximado de 0,001 pulgadas (0,0254 mm), la capa de cierre termico es una pelfcula de polietileno con un grosor aproximado de 0,0015 pulgadas (0,0381 mm), y la capa fragil es un poliester que tiene un grosor aproximado de 0,0005 pulgadas (0,0127 mm). Dado que este cierre estanco espedfico 32 tendna una superficie metalica expuesta al contenido del dispositivo de recogida 10 despues del cierre estanco, si se aplica la superficie de fondo 42 del reborde 39 o a la superficie de fondo 47 del faldon 41, es preferible que este cierre estanco 32 sea aplicado a la superficie superior 43 del reborde, tal como se muestra en las figuras 6, 13, 15 y 17. De esta manera, las caperuzas 30A, C, D y E de estas realizaciones no tendran superficies metalicas expuestas al contenido de fluido de un recipiente asociado 20. Si bien el diametro del cierre estanco 32 dependera de las dimensiones de la caperuza 30A-E, el cierre estanco preferente en este momento tiene un diametro aproximado de 0,5 pulgadas (12,70 mm).
Una realizacion alternativa del cierre estanco fracturable 32 es la que se muestra en la figura 9, que muestra una capa laminar superior con una capa de cierre inferior combinada de tipo fragil/cierre termico formada por una resina epoxi. La resina epoxi es seleccionada por su resistencia mecanica, lo que ayudara a la formacion del paso de aire deseado 70 que se ha explicado anteriormente cuando el material es perforado por un dispositivo de transferencia de fluido. Para que este cierre estanco 32 pueda ser fijado a una superficie de plastico utilizando un procedimiento de soldadura de termoplasticos habitual, la capa de epoxi incluye ademas un compatibilizador dispersado dentro de la resina epoxi, tal como se ha mostrado en la figura 9. Un compatibilizador preferente de este cierre estanco 32 es un polietileno.
Tal como se ha mostrado en las figuras, el filtro 33 esta dispuesto dentro del primer orificio 44 por encima del reborde 39 y esta incorporado de forma que retrasa o bloquea el movimiento de un escape de aerosol o de burbujas despues de que el cierre estanco ha sido taladrado por el dispositivo de transferencia de fluido. El filtro 33 puede ser construido tambien de manera que lleve a cabo una accion de limpieza del exterior del dispositivo de transferencia de fluido al ser retirado dicho dispositivo de transferencia de fluido de dicho dispositivo de recogida 10. De forma preferente, el filtro 33 funciona alejando los fluidos del exterior del dispositivo de transferencia de fluido por medio de accion capilar. Tal como se utiliza en esta descripcion, no obstante, el termino “filtro” se refiere en general a un material que lleva a cabo una funcion de limpieza para eliminar fluidos presentes en el exterior de un dispositivo de transferencia de fluido y/o una funcion de absorcion para retener o aislar de otra forma los fluidos retirados del exterior de un dispositivo de transferencia de fluido. Por las razones que se explican mas adelante, los filtros 33 de la presente invencion estan compuestos por un material o una combinacion de materiales que tienen poros o intersticios que admiten el paso de un gas. Los ejemplos de los materiales del filtro 33 que se pueden utilizar con las caperuzas 30A-E de la presente invencion incluyen, sin que ello sirva de limitacion, tejidos de pelo, material esponjoso, espumas (con o sin piel superficial), fieltros, tejidos de punto con mechas, Gore-Tex®, Lycra®, y otros materiales y mezclas, tanto naturales como sinteticos. Estos materiales pueden ser tambien tratados mecanicamente o qmmicamente para mejorar adicionalmente las funciones deseadas del filtro 33. Por ejemplo, se podna utilizar el napeado para incrementar el area superficial y, por lo tanto, la capacidad de retencion de fluido de un filtro 33. El material del filtro 33 puede ser tambien pretratado con un agente humectante, tal como un tensoactivo para reducir la tension superficial de un fluido presente en una superficie externa de un dispositivo de transferencia de fluido. Se puede utilizar un agente de union acnlico, por ejemplo, para unir realmente el agente humectante al material del filtro 33. Ademas, el filtro 33 puede incluir un polfmero superabsorbente (vease, por ejemplo, Sackmann y otros, “Pre-formed super absorbers with high swelling capacity’, patente U.S.A. N° 6.156.848), para impedir que el fluido pueda escapar del dispositivo de recogida introducido 10.
Para limitar el paso sin obstrucciones de aire dentro del dispositivo de recogida 10 hacia el medio ambiente, el filtro 33 esta realizado preferentemente en un material elastico cuya forma original se restablece, o sustancialmente se restablece, al ser retirado el dispositivo de transferencia de fluido desde el dispositivo de recogida. Esta caractenstica del filtro 33 es especialmente importante cuando el dispositivo de transferencia de fluido tiene un diametro no uniforme, tal como en el caso en la mayor parte de puntas de pipetas utilizadas con pipetas estandar de desplazamiento de aire. Por lo tanto, los materiales tales como telas de pelo, esponjas, espuma y Lycra® son preferentes por que tienden a establecer con rapidez su forma original despues de exposicion a fuerzas de compresion. La tela de pelo es particularmente preferente para el filtro 33. Un ejemplo de una tela de pelo preferente es un material acnlico que tiene un grosor aproximado de 0,375 pulgadas (9,53 mm) que se puede conseguir de la firma Roller Fabrics de Milwaukee, Wisconsin como artfculo N° ASW112. Entre otros ejemplos de tela de pelo aceptables, se incluyen las fabricadas en materiales acnlicos y de poliester, y que tienen dimensiones comprendidas aproximadamente desde 0,25 pulgadas (6,35 mm) hasta 0,3125 pulgadas (7,94 mm). Estas telas se pueden conseguir de Mount Vernon Mills, Inc. de LaFrance, Carolina del Sur como artfculos N° 0446, 0439 y 0433. El material de filtro 33 es preferentemente inerte con respecto a la sustancia fluida contenida dentro del recipiente 20.
Dado que el filtro 33 esta destinado a retirar fluido desde el exterior de un dispositivo de transferencia de fluido y captar fluido en forma de aerosol o burbujas, es preferente que el material y las dimensiones del material de filtro se escojan de manera que el filtro no se sature con el fluido durante la utilizacion. Si el filtro 33 se satura, el fluido
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puede no ser limpiado adecuadamente desde el exterior del dispositivo de transferencia de fluidos y se pueden producir burbujas al pasar el dispositivo de transferencia de fluido por el filtro o al ser desplazado el aire desde el interior del dispositivo de recogida 10. Por lo tanto, es importante adaptar las dimensiones y caractensticas de adsorcion del filtro 33 a efectos de conseguir limpieza adecuada y limitacion de aerosol o burbujas. Las consideraciones cuando se selecciona el filtro 33 incluiran la configuracion de la caperuza, las dimensiones y tamano del dispositivo de transferencia de fluido, y la naturaleza y cantidad de sustancia fluida contenida en el recipiente 20, especialmente teniendo en cuenta el numero de transferencias de fluido que se preven para un determinado dispositivo de recogida 10. Al aumentar la cantidad de fluido al que quedara expuesto probablemente un filtro 33, el volumen de material de filtro o sus caractensticas de absorcion pueden requerir ser ajustadas de manera que el filtro no quede saturado durante la utilizacion.
Tambien es importante que el filtro 33 sea construido y que este dispuesto en la caperuza 30A-E de manera que el flujo de aire que sale del dispositivo de recogida 10 continue relativamente sin impedimentos al ser perforada la caperuza por el dispositivo de transferencia de fluido. En otras palabras, el material del filtro 33 y su disposicion dentro de la caperuza 30A-E debe facilitar la salida de aire desplazado del interior del dispositivo de recogida 10. Desde luego, esta caractenstica de ventilacion del filtro 33 debe ser equilibrada por la exigencia de que el material del filtro tenga suficiente densidad para retener un aerosol o burbujas que podnan escapar. Como consecuencia, los tecnicos en la materia observaran la necesidad de seleccionar o disenar los materiales del filtro 33 poseyendo matrices que sean capaces de retener un aerosol o burbujas, permitiendo simultaneamente que el aire sea ventilado desde el interior del dispositivo de recogida 10 cuando el cierre estanco 32 situado por debajo ha sido taladrado por un dispositivo de transferencia de fluido.
Tal como muestran las figuras, el filtro 33 esta dimensionado preferentemente para acoplarse dentro del primer orificio 44 por debajo del plano horizontal de la pared anular superior 48. En una caperuza 30A-E preferente segun la presente invencion, el filtro 33 descansa tambien sustancialmente o completamente por encima del reborde 39, aunque el cierre estanco 32 puede ser fijado a la superficie inferior 47 del faldon 41, tal como se ha mostrado en la figura 7. Para asegurar mejor que el filtro 33 no es desplazado sustancialmente de su posicion dentro del primer orificio 44 por contacto de friccion con un dispositivo de transferencia de fluido que atraviesa la caperuza 30A-E o que es retirado de la misma, el filtro puede estar unido a la superficie superior 43 del reborde 39 o a la superficie interna 40 de la pared lateral 35 utilizando un adhesivo inerte. No obstante, el filtro 33 es preferentemente una tela de pelo que esta acoplada mtimamente en el primer orificio 44 y retenida en dicha posicion por medio del cierre estanco 32 y el retenedor 34A-D, sin utilizacion de un adhesivo. En las realizaciones preferentes de la caperuza 30A-E, el primer orificio 44 tiene un diametro aproximadamente de 0,50 pulgadas (12,70 mm) y una altura aproximadamente de 0,31 pulgadas (7,87 mm).
El material y configuracion del filtro 33 deben ser tales que crea una interferencia por friccion minima con un dispositivo de transferencia de fluido al ser insertado o ser retirado del dispositivo de recogida 10. En el caso de una esponja o un material esponjoso, esto puede requerir, por ejemplo, el taladrado de un orificio o la creacion de una o varias ranuras en el centro del filtro 33 (no mostrado) que estan dimensionadas para minimizar la interferencia por friccion entre el filtro y un dispositivo de transferencia de fluido, mientras que al mismo tiempo proporcionan suficiente interferencia de manera que se limita la transmision del aerosol o de las burbujas y se lleva a cabo la accion de limpieza por el material de filtro. Si se utiliza una tela de pelos, tal como el filtro 33, la tela de pelos esta dispuesta preferentemente de la manera mostrada en la figura 10, de manera que los extremos libres de las fibras individuales (mostradas como pilosidades, pero no espedficamente identificadas con un numero de referencia) estan orientadas hacia adentro, hacia el eje longitudinal 80 de la caperuza 30A-E, separandose de la parte posterior 49 de la tela de pelo que esta en contacto o fijada a la superficie interna 40 de la pared lateral 35. Cuando se arrolla la tela de pelo para su insercion en el primer orificio 44, se debe tener cuidado de no arrollar la tela de pelo de manera tan apretada que cree una interferencia por friccion excesiva con un dispositivo de transferencia de fluido que penetre en la caperuza 30A-E, dificultando sustancialmente el movimiento del dispositivo de transferencia de fluido. Una tela de pelo especialmente preferente es la que se puede conseguir de la firma Mount Vernon Mills, Inc. como artfculo N° 0446, que tiene un grosor aproximado de 0,25 pulgadas (6,35 mm) y que es cortada para que tenga una longitud aproximada de 1,44 pulgadas (36,58 mm) y una anchura aproximada de 0,25 pulgadas (6,35 mm).
Para inmovilizar el filtro 33 dentro del primer orificio 44, las caperuzas 30A-E incluyen un elemento de retencion 34A- D dispuesto por encima del filtro, preferentemente sobre la pared anular superior 48. En una realizacion preferente que se ha mostrado en las figuras 6 y 7, el retenedor 34A es un cierre macizo, fracturable, de forma general circular, que puede estar realizado en el mismo material o distinto que el cierre estanco fracturable 32 dispuesto por debajo del filtro 33. Preferentemente, el elemento de retencion 34A incluye los mismos materiales que el cierre estanco preferente 32 que se ha descrito, comprendiendo una lamina de aluminio, una lamina fragil de poliester y una capa de cierre termico de polietileno (Unipac; Ontario, Canada; Producto N° SG-75M (excluyendo el panel de pulpa y las capas de cera incluidas tfpicamente en este producto)). Este elemento de retencion 34A puede ser aplicado a la pared superior anular 48 con un agente de estanqueizacion termica o de induccion termica de la misma manera que el cierre estanco 32 es aplicado a una superficie 42, 43 del reborde 39 o a la superficie de fondo 47 del faldon 41. Igual que el cierre estanco preferente 32, el retenedor preferente 34A tiene una capa laminar con grosor aproximado a 0,001 pulgadas (0,0254 mm), una capa fragil con un grosor aproximado de 0,0005 pulgadas (0,0127 mm) y una
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capa de cierre termico con un grosor aproximado de 0,0015 pulgadas (0,0381 mm). El diametro del retenedor preferente es aproximadamente de 0,625 pulgadas (15,88 mm). Desde luego, el diametro de este retenedor preferente 34A puede variar y ello dependera de las dimensiones de la pared superior anular 48.
Tal como se ha mostrado en la figura 11, el retenedor 34A puede ser adaptado para facilitar la penetracion al incluir una o varias series de perforaciones 50 que se extienden radialmente hacia afuera desde un punto central 51 del retenedor. El punto central 51 de estas perforaciones radiales 50 esta dispuesto preferentemente de manera que coincida con el punto de entrada previsto de un dispositivo de transferencia de fluido. Tambien se han previsto en la presente invencion otros tipos de adaptaciones que reducinan el esfuerzo de traccion del retenedor 34A, incluyendo arrugas, lmeas de vencimiento u otras impresiones mecanicas aplicadas al material del retenedor. Las mismas adaptaciones se pueden hacer tambien en el cierre estanco 32, siempre que el cierre estanco continue mostrando caractensticas de transmision de vapor de agua reducidas despues de que el dispositivo de recogida 10 ha sido expuesto a las condiciones normales de expedicion y almacenamiento.
Ademas de proporcionar medios para mantener el filtro 33 fijado dentro del primer orificio 44 antes de la transferencia de fluido y durante dicha transferencia, un retenedor 34A del cierre estanco puede proteger el filtro situado por debajo contra contaminantes externos antes de la penetracion de la caperuza 30A. Ademas, una caperuza 30A disenada para cerrar de forma estanca y completa el filtro 33 dentro del primer orificio 44 puede ser esterilizada antes de utilizacion, por ejemplo, de rayos gamma. Ademas, el retenedor 34 de dicha caperuza 30A se podna limpiar con un desinfectante, o bien el dispositivo de recogida 10 en su conjunto podna ser sometido a irradiacion con luz ultravioleta antes de la introduccion para facilitar una transferencia de fluido esteril.
Aunque no es adecuado para su uso en un metodo de la invencion, en los casos en los que la presencia potencial de contaminantes en el filtro no fuera una preocupacion significativa, el retenedor puede comprender un anillo laminar, por ejemplo, que comprende un orificio situado centralmente, dimensionado para recibir un dispositivo de transferencia de fluido. Tal como se ha mostrado en la figura 12, una caperuza 30C que tiene un retenedor 34B con un orificio situado centralmente 52 podna ayudar en la retencion del filtro 33 dentro del primer orificio 44, mientras que, al mismo tiempo, limitana el numero de superficies que un dispositivo de transferencia de fluido tendna que taladrar a efectos de penetrar por completo en la caperuza. Para retener el filtro 33 dentro del primer orificio 44, el diametro del orificio 52 tendna que ser mas reducido que el diametro del filtro cuando el orificio y el filtro estan sustancialmente alineados axialmente.
Otra realizacion de caperuza 30D no adecuada para su uso en un metodo de la invencion, es la mostrada en las figuras 13 y 14. El retenedor 34C de esta caperuza 30D es un disco de plastico que comprende un orificio central 53 dimensionado para recibir un dispositivo de transferencia de fluido. El disco 34C puede ser fijado a la pared superior anular 48 por medio de un adhesivo o puede ser soldado termicamente por ultrasonidos u otro metodo de soldadura apropiado conocido por los tecnicos en la materia. De manera alternativa, la pared anular superior 48 puede ser modificada para comprender un asiento 54 dimensionado para recibir el disco 34C, por ejemplo, en un montaje a presion o por friccion. Si bien esta realizacion espedfica de caperuza 30D no proporciona al filtro 33 un ambiente completamente estanco, el retenedor de disco 34C puede funcionar, no obstante, reteniendo el filtro 33 dentro del primer orificio 44 durante el transporte del dispositivo de recogida 10 asf como durante la transferencia de fluido. Si es importante proteger el filtro 33 contra contaminantes potenciales antes de la utilizacion, entonces la caperuza 30D de esta realizacion podna incluir adicionalmente un cierre estanco, tal como el cierre fracturable 34A que se ha descrito anteriormente, fijado a una superficie superior 55 o a una superficie inferior 56 del disco 34C, de manera que el orificio 53 este cubierto de manera completa de forma estanca. Tal como se ha mostrado en las figuras 15 y 16, un cierre estanco de este tipo 34D podna incluir una aleta 57 para su desmontaje facil. Con este diseno, el cierre estanco 34D de una caperuza 30E podna ser eliminado justamente antes de la penetracion de la caperuza con el dispositivo de transferencia de fluido, permitiendo que el filtro 33 este protegido contra contaminantes externos inmediatamente antes de la utilizacion. Una ventaja de esta caperuza 30E sobre, por ejemplo, las realizaciones de la caperuza 30A-B mostradas en las figuras 6 y 7 es que la perforacion de la caperuza requerira menos fuerza puesto que existe solamente un cierre estanco 32, en oposicion a los dos cierres estancos 32, 34A de aquellas realizaciones, que deben ser atravesadas por el dispositivo de transferencia de fluido.
Cuando una caperuza 30A-B para el uso en metodos de la presente invencion es taladrada por un dispositivo de transferencia de fluido 90, utilizado para recuperar como mmimo una porcion de una muestra de fluido 100 contenida en un dispositivo de recogida 10, tal como se ha mostrado en la figura 17, se forman una o varias arrugas en el cierre estanco fracturable 32 y, el retenedor 34A. Tal como muestra la figura 18, estas arrugas en el cierre estanco fracturable forman pasos de aire 70 que facilitan la evacuacion de aire desplazado desde el interior del dispositivo de recogida 10 al entrar el dispositivo de transferencia de fluido 90 en el espacio interior 11 (definido como espacio situado por debajo de la caperuza 30A-E y dentro de las superficies internas 24, 25 de la pared lateral 22 y de la pared de fondo 26 del recipiente 20) del dispositivo de recogida 10. Al disponer medios para la ventilacion o escape del aire desplazado desde el interior del dispositivo de recogida 10, la exactitud volumetrica de las transferencias de fluido (por ejemplo, pipeteado) se mejorara probablemente. Si bien se pueden utilizar con la presente invencion una serie de puntas de pipetas de plastico convencionales que tienen puntas planas o achaflanadas, un dispositivo de transferencia de fluido preferente es la serie Genesis 1000 |il Tecan-Tip (con filtro), que se puede conseguir de la empresa Eppendorf-Netherler-Hinz GmbH de Hamburgo, Alemania, como artfculo N° 612-513. Los dispositivos de
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transferencia de fluido de la presente invencion son capaces de penetrar preferentemente en el cierre estanco fracturable 32 con la aplicacion de menos de 3 libras de fuerza (13,34 N), mas preferentemente menos de 2 libras de fuerza (8,90 N), incluso mas preferentemente menos de 1 libra de fuerza (4,45 N), y de modo mas preferente menos de 0,5 libras de fuerza (2,22 N).
La fuerza de insercion, que es la fuerza total o aditiva requerida para taladrar todas las superficies penetrables en una caperuza 30A-E de acuerdo con la presente invencion (es decir, el cierre estanco fracturable 32, filtro 33 y, opcionalmente, el retenedor 34A) con un dispositivo de transferencia de fluido, es preferentemente menos de unas 8 libras fuerza (35,59 N), mas preferentemente menos de unas 6,5 libras fuerza (28,91 N), incluso de manera mas preferente menos de unas 5 libras fuerza (22,24 N), y de modo mas preferente menos de unas 4,5 libras fuerza (20,02 N). La fuerza de retirada, que es la fuerza requerida para retirar por completo un dispositivo de transferencia de fluido desde el dispositivo de recogida 10 despues de que se ha perforado por completo la caperuza 30A-E, es preferentemente menor a unas 4 libras fuerza (17,79 N), mas preferentemente menos de unas 3 libras fuerza (13,34 N), incluso de manera mas preferente menos de unas 2 libras fuerza (8,90 N), y de modo mas preferente menos de 1 libra fuerza (4,45 N). Las fuerzas ejercidas en el dispositivo de transferencia de fluido al ser retirado de un dispositivo de recogida 10 se deben minimizar para evitar la extraccion del dispositivo de transferencia de fluido, por ejemplo, de la probeta de montaje o de una pipeta de vado. Las fuerzas de insercion y de retirada se pueden determinar utilizando instrumentos convencionales de medicion de fuerzas, tales como el aparato de pruebas motorizado (Modelo N° TCD 200) y galga digital de fuerza (Modelo N° DFGS-50) disponible comercialmente de la firma John Chatillon & Sons, Inc. de Greensboro, Carolina del Norte.
Una caperuza 30A-E se preve generalmente en combinacion con un recipiente de retencion de fluido 20 como componentes de un dispositivo de recogida 10. La caperuza 30A-E y el dispositivo 20 de recogida 10 se pueden unir por medio de roscas conjugadas que permiten el roscado de la caperuza, la aplicacion a presion o montaje de otro tipo a friccion sobre la superficie externa 21 de la pared lateral 22 en el extremo abierto del recipiente. Cuando la caperuza 30A-E es acoplada por friccion sobre el recipiente 20, la superficie inferior 37 de la pared lateral 35 de la caperuza se encuentra preferentemente en contacto con la superficie anular superior 23 del recipiente para proporcionar un montaje con interferencia, facilitando de esta manera el cierre estanco esencialmente libre de fugas que se ha explicado anteriormente. La caperuza 30A-E puede ser modificada para mejorar adicionalmente la resistencia de un dispositivo de recogida 10 contra las fugas, al disponer un nervio de cierre anular 58 en la superficie externa 59 del faldon 41, tal como se ha mostrado en la figura 4. Si se incluye el nervio de estanqueidad 58, se debe dimensionar de manera que quede en contacto por friccion con la superficie interna 24 de la pared lateral 22 del recipiente 2) pero que no interferira sustancialmente con la union de la caperuza 30A-E y el recipiente.
El centro anular 60 del nervio de estanqueidad preferente 58 tiene aproximadamente 0,071 pulgadas (1,80 mm) desde la superficie inferior 37 a la pared lateral 35 y se extiende radialmente hacia afuera aproximadamente en 0,0085 pulgadas (0,216 mm) desde la superficie exterior 59 del faldon 41, estando el grosor del faldon 41 por encima del nervio de estanqueidad 58 de 0,052 pulgadas (1,32 mm). El faldon 41 incluye preferentemente una base achaflanada 61 por debajo del nervio de estanqueidad 58 para facilitar la union de la caperuza 30A-E y el recipiente 20. En una realizacion preferente, el faldon 41 se extiende hacia abajo en una distancia vertical aproximada de 0,109 pulgadas (2,77 mm) desde el centro anular 60 del nervio de estanqueidad 58 a la superficie de fondo 47 del faldon y disminuye en espesor de manera uniforme desde aproximadamente 0,0605 pulgadas (1,54 mm) hasta aproximadamente 0,025 pulgadas (0,635 mm) entre el centro anular del nervio de estanqueidad y la superficie de fondo del faldon. El segundo orificio 46 de esta realizacion preferente tiene un diametro aproximado de 0,340 pulgadas (8,64 mm) y una altura aproximada de 0,218 pulgadas (5,54 mm).
Cuando se facilita como componente de un equipo, el dispositivo de recogida 10 incluye preferentemente un dispositivo de recuperacion de la muestra para obtener una muestra a analizar, de manera que el dispositivo de recogida de la muestra ha sido dimensionado preferentemente para acoplarse dentro del espacio interior 11 del dispositivo de recogida despues de que se han unido la caperuza 30A-E y el recipiente 20. Un dispositivo de recuperacion de muestra preferente es una mecha, tal como la que se da a conocer en Pestes y otros, “Cell Collection Swab”, patente U.S.A. N° 5.623.942. Esta mecha espedfica es preferente por que esta fabricada incluyendo una lmea de vencimiento dispuesta en el vastago de la mecha, permitiendo que la mecha pueda ser introducida manualmente en dos partes despues de haber obtenido una muestra, dejando la parte inferior portadora de la muestra de dicha mecha enteramente en el interior del recipiente 20 componente del dispositivo colector 10. Cuando la muestra esta siendo transportada a un laboratorio clmico, el dispositivo de recogida 10 incluye tambien preferentemente un medio de transporte para preservar la muestra antes del analisis. Los medios de transporte son bien conocidos en esta tecnica y vanan dependiendo del tipo de la muestra y de si es necesario lisis de las celulas antes del analisis.
Ademas, un equipo puede incluir instrucciones registradas de manera tangible (por ejemplo, contenidas en un soporte de papel o en un medio electronico), que explican la forma en la que se tienen que manipular los componentes del dispositivo de recogida 10 cuando se obtiene una muestra de fluido o como se tiene que asegurar la caperuza 30A-E en el recipiente 20 antes del transporte del dispositivo de recogida a un laboratorio clmico. Alternativamente, o de forma adicional, las instrucciones pueden detallar tecnicas de pipeteado apropiadas para recuperar por lo menos una parte de la muestra del dispositivo de recogida 10 antes del analisis. Estas instrucciones
pueden incluir informacion con respecto a tipos de dispositivos de transferencia de fluidos que se pueden utilizar para perforar la caperuza 30A-E, posicionado de un dispositivo de transferencia de fluido para la perforacion de la caperuza y/o la cantidad de fuerza necesaria para perforar la caperuza. Los materiales instructivos pueden tambien detallar la utilizacion apropiada del dispositivo de recogida cuando la muestra se tiene que exponer a reactivos y 5 condiciones utiles para amplificar una secuencia de acido nucleico destinada a deteccion.
La amplificacion antes de la deteccion es particularmente deseable en ensayos diagnosticos en los que la poblacion inicial de las secuencias de acido nucleico objetivo en una muestra se espera que sea relativamente pequena, haciendo mas diffcil la deteccion de las secuencias de acido nucleico buscadas. Existen muchos procedimientos 10 para amplificar los acidos nucleicos que son bien conocidos en la tecnica, incluyendo, sin que ello sirva de limitacion, la reaccion de cadena de polimerasa (PCR), (vease, por ejemplo, Mullis, “Process for Amplifying, Detecting, and/or Cloning Nucleic Acid Sequences", patente U.S.A. N° 4.683.195), amplificacion mediada por trascripcion (TMA), (vease, por ejemplo, Kacian y otros, “Nucleic Acid Sequence Amplification Methods", patente U.S.A. N° 5.399.491), reaccion de la cadena de ligasa (LCR), (vease, por ejemplo, Birkenmeyer, “Amplification of Target Nucleic Acids 15 Using Gap Filling Ligase Chain Reaction", patente U.S.A. N° 5.427.930), y amplificacion por desplazamiento de hebra (SDA), (vease, por ejemplo, Walker, “Strand Displacement Amplification”, patente U.S.A. N° 5.455.166). Los reactivos espedficos (por ejemplo, enzimas y cebadores) y las condiciones seleccionadas por los practicos variaran dependiendo de la secuencia espedfica de acido nucleico que es objetivo para deteccion y el proceso de amplificacion espedfico a seguir. Los tecnicos en la tecnica de diagnostico de acido nucleico seran capaces, no 20 obstante, de seleccionar reactivos apropiados y condiciones apropiadas para amplificar una secuencia de acido nucleico espedfica objetivo despues de un proceso de amplificacion espedfico sin tener que entrar en experimentaciones indebidas.

Claims (8)

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    REIVINDICACIONES
    1. Metodo para eliminar una sustancia fluida (100) de un sistema cerrado (10) que comprende una caperuza que tiene fijados un primer y un segundo cierre estanco fracturables (32, 34A), estando el primer cierre estanco (32) axialmente alineado con el segundo cierre estanco (34A) y posicionado por debajo del mismo, y un recipiente (20) que contiene fluido, que tiene un extremo abierto en acoplamiento de estanqueidad con la caperuza, comprendiendo el metodo las siguientes etapas: penetracion del primer y segundo cierre estanco (32, 34A) de la caperuza con un dispositivo de transferencia de fluido (90), de manera que el primer y segundo cierre estanco (32, 34A) se rompen, formando de esta manera pasos de aire (70) entre el dispositivo de transferencia de fluido (90) y el primer y segundo cierre estanco (32, 34A); arrastrando como mmimo una parte de la sustancia fluida (100) hacia adentro del dispositivo de transferencia de fluido (90); y retirando el dispositivo de transferencia de fluido (90) del sistema (10), en el que cada uno de dichos primeros y segundos cierres estancos (32, 34A) comprende un elemento laminar, y en el que el dispositivo de transferencia de fluido (90) es una punta de una pipeta de plastico, para uso con una pipeta de desplazamiento de aire.
  2. 2. El metodo de la reivindicacion 1, que comprende ademas la etapa de hacer pasar el dispositivo de transferencia de fluido (90) a traves de un filtro (33) contenido dentro de la caperuza e interpuesto entre el primer y segundo cierre estanco (32, 34A).
  3. 3. El metodo de la reivindicacion 1, en el que la fuerza total estanco (32, 34A) es menor de 35,59 N aproximadamente.
  4. 4. El metodo de la reivindicacion 1, en el que la fuerza total estanco (32, 34A) es menor de 28,91 N aproximadamente.
  5. 5. El metodo de la reivindicacion 1, en el que la fuerza total estanco (32, 34A) es menor de 22,24 N aproximadamente.
  6. 6. El metodo de la reivindicacion 1, en el que la fuerza total estanco (32, 34A) es menor de 20,02 N aproximadamente
  7. 7. El metodo de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, que comprende ademas la etapa de exponer la sustancia fluida (100) retirada del sistema cerrado (10) a reactivos y condiciones de amplificacion de acido nucleico.
  8. 8. El metodo de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en el que las etapas de penetracion del metodo son llevadas a cabo por un instrumento automatizado.
    requerida para penetrar en el primer y segundo cierre requerida para penetrar en el primer y segundo cierre requerida para penetrar en el primer y segundo cierre requerida para penetrar en el primer y segundo cierre
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