DK174125B1 - Farmaceutisk præparat til parenteral indgivelse indeholdende en somatostatinanalog, mælkesyre og en basisk forbindelse - Google Patents

Description

DK 174125 B1

Den foreliggende opfindelse angår et farmaceutisk præparat til parenteral indgivelse, der indeholder en somatostatinanalog, mælkesyre og en basisk forbindelse.

Somatostatin er et tetradecapeptid, der inkorporerer et cyclisk dodecapeptid med strukturen: 10 H-Ala-Gly-Cys-Lys-Asn-Phe-Phe- 1 2 3 4 5 6 7 -Trp-lys-Thr*Phe-Thr«$er-Cys»OH 8 9 10 11 12 13 14 15 og har de egenskaber, at det hæmmer frigivelse af væksthormon, hammer frigivelse af insulin og glucagon og reducerer mavesaftsekre-tion. Dets virkning er kort og, for at løse dette problem med kort virketid, er der blevet fremstillet somatostatinanaloge, der har 20 lang virkning. Disse forbindelser skal stadig administreres ved indsprøjtning, hvilket kan vare smertefuldt, isar ved gentagen ad· ministration.

Det har nu vist sig, at parenterale præparater af somatostatinanaloge, især octreotid og derivater deraf, udviser særligt interessante egenskaber, og fx kan tolerancen over for dem være bedre, hvis mælkesyre er til stede i det farmaceutiske præparat.

Opfindelsen angår således som nævnt et farmaceutisk præparat til parenteral indgivelse, hvilket præparat er ejendommeligt ved det i krav 1's kendetegnende del angivne. Foretrukne udførelsesformer for præparatet er angivet i krav 2-8.

30

Ved udtrykket "analog" forstås i nærværende sammenhæng ethvert li-gekædet eller cyclisk polypeptid afledt fra det naturligt forekommende tetradecapeptid somatostatin, hvori én eler flere aminosyreen-heder er blevet udeladt og/eller erstattet med én eller flere andre 35 aminoradikaler, og/eller hvori én eller flere funktionelle grupper er blevet erstattet af én eller flere andre isosteriske grupper. Udtryk- 2 DK 174125 B1 kec "analog” omfatter også de tilsvarende derivater, der barer en sukkerrest.

Generelt dækker udtrykket alle modificerede derivater af et biologisk aktivt peptid, der udviser en virkning, som kvalitativt ligner det 5 umodificerede somatostacinpeptids virkning. I det følgende betegnes disse forbindelser som forbindelser ifølge opfindelsen.

Cycliske, brocycliske og ligekædede somatostatlnanaloger er kendte forbindelser. Sådanne forbindelser og deres fremstilling er beskrevet i US 4.310.518 og VS 4.235.886, i de europæiske patentbeskrivelser 10 ΕΡ-ΑΊ295; 70.021; 113.209; 215.171; 203.031; 214.872; 143.307 og i BE-A-900.089.

Når forbindelserne ifølge opfindelsen bærer en sukkerrest, er denne fortrinsvis koblet til en N-terminal aminogruppe og/eller til mindst én aminogruppe, som er til stede i en peptidsidekæde, fortrinsvis til 15 en N-terminal aminogruppe. Sådanne forbindelser og deres fremstilling er fx beskrevet i WO 88/02756.

Foretrukne forbindelser ifølge opfindelsen er:

A. Forbindelser med formlerne I til III

Wf 3 DK 174125 B1

O Q H

Ύύ^-

XI

vÆf <, * > <iA*Y</'vs.,

XXX

5 hvor ff er S eller (CHaJs· hvor s er 0, 1 eller 2; det ene af X og Z er S, og det andet er S eller CH2; Y er S eller (0¾)t, hvor t er 0, 1 eller 2; hvert af og R2 uafhængigt af det andet er Ci.j-alkyl, benzyl, benzyl med én eller to C^.5-alkyl*, halogen-, hydroxy-, amino-, 10 nitro- og/eller C^_5-alkoxysubstituenter eller Ci_5-alkyl substitueret med en 5- eller 6-leddet heterocyclisk ring; R3 er 3-indolylmethyl, enten usubstltueret eller substitueret med Ci.5-alkyl, Cj^.5-alkoxy eller halogen; R4 er Ci.5-alkyl, Ci.5-hydroxyalkyl, benzyl, carboxy(¢1.5)alkyl, 15 amino(Ci_5-altyl) eller benzyl med en Ci_5-alkyl-, halogen-, hydroxy-, amino-, nitro- og/eller Ci.5-alkoxysubstituent; R5 er Ci.5-alkyl, benzyl eller benzyl med en Ci.5-alkyl-, halogen-, hydroxy-, amino-, nitro- og/eller Ci_5*alkoxysubstituent.

i 4 DK 174125 B1

Eksempler på .5-alkylgrupper er methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, sek.butyl og pentyl; eksempler på .5-alkoxygrupper er meth- oxy, ethoxy, propoxy, isopropoxy, butoxy, tert.butoxy og pentoxy; halogener er fluor, chlor, brom eller iod: og udtrykket "5- eller 5 6-leddec heterocyclisk ring" betegner sådanne ringe med et eller to oxygen-, nitrogen- og/eller svovlatomer, fx imidazol, furan, thiazol, pyrazol og pyridin.

I forbindelserne med formlerne I, II og III er der flere asymmetricentre, der fører til eksi-10 stensen af optiske isomerer for sådanne forbindelser. For hvert af asymmetricentrene i de forskellige aminosyrer, som udgør disse cycliske hexapeptider, er både D- og L-konfigurationeme omfattet.

I det følgende er vist repræsentative cycliske hexapeptidanaloge af somatostatin med 15 formlerne I, II og III: N-Me-ila-Pht-Trp Pro-Phe-Trp

Phe-Thr-Ly* Éhe-Thr.iys 20 la 114 I-Cys-Phe-Trp i f 1 25 I-Cys-Thr-Lys 11 la 30 35 5 DK 174125 B1

Foretrukne formel I-forbindelser er: 1) Cyclo-(N-Me-Ala-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Phe) 2) Cyclo-(N-Me-Ala-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe) 5 3) Cyclo-(N-Me-Ala-Phe-L-Trp-Lys-Thr-Phe) 4) Cyclo-(N-Me-Ala-Phe-D-Trp-Lys-Thr-p-Cl-Phe) 5) Cyclo-(N-Me-Ala-Phe-D-5-F-Trp-Lys-Thr-Phe) 6) Cyclo-(N-Me-Ala-Phe-L-5-F-Trp-Lys-Thr-Phe) 7) Cyclo-(N-Me-Ala-Phe-D-Trp-Lys-Ser-Phe) 10 8) Cyclo-(N-Me-Ala-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Phe) 9) Cyclo-(N-Me-Ala-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Trp) 10) Cyclo- (N-Me-Ala-Tyr-L-Trp-Lys-Val-Phe) 11) Cyclo-(Ser-Ala-N-Me-Phe-His-D-Trp-Lys)

Foretrukne formel II-forbindelser er: 15 12) Cyclo-(Pro-Tyr-D-Trp-Lys-Thr-Phe) 13) Cyclo-(Pro-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Phe) 14) Cyclo-(Pro-Phe-L-Trp-Lys-Thr-Phe) 15) Cyclo-(Pro-Phe-D-Trp-Lys-Thr-p-Cl-Phe) 20 16) Cyclo-(Pro-Phe-D-5-F-Trp-Lys-Thr-Phe) 17) Cyclo-(Pro-Phe-L-5-F-Trp-Lys-Thr-Phe) 18) Cyclo-(Pro-Phe-D-Trp-Lys-Ser-Phe)

Foretrukne formel Ill-forbindelser er: 25 _ 19) Cyclo- (Cys-Cys-Tyr-O-Trp-Lys-Thr) 20) Cyclo- (dys-^ys-Tyr-D-Trp-Lys-Val) 21) Cyclo- (éys-dys-Tyr-L-Trp-Ly*-Val) 22> Cyclo- (åys-dys-Phe-D-Trp-lys-Thr) 30 23^ Cyclo- (dys-éys-Phe-L-Trp-Lys-Thr) 24) cyclo- (åys-<^ys-Bis-S-Trp-Lys-Thf) 25^ Cyclo- (åys-£ys-His-D-Trp-Lys-Val) 26^ Cyclo- (Cys-Cys-XU-Phe-D-Trp-Lys-Thr) 35 6 DK 174125 B1

fl. Forbindelser med formlen IV

A' CHj-S-Yi Yj-S-CH2

N-CH-CO-B-C-D-E-NB-iH-F IV

5 hvor A er alkyl, C7.10-phenylalkyl eller en gruppe med formlen RCO-, 1;0 hvor i) R er hydrogen, Cl-H*alkyl, phenyl eller c7.iO'Pbenylalkyl, eller il) RCO- er •)5 a) en L- eller D-phenylalaninresC, der eventuelt er ringsubstitueret med F, Cl, Br, NO2. NH2, OH, Cj^-alkyl og/eller Cj^-alkoxy, b) resten af en naturlig α-aminosyre, der er forskellig fra den defineret under a), eller af en tilsvarende D-aminosyre, eller 20 c) en dipeptidrest, i hvilken de individuelle aminosyrerester er ens eller forskellige og er valgt fra dem, der er defineret under a) og/eller b) ovenfor, idet a-aminogruppen af aminosyreresterne a) og b) og den N-terminale aminogruppe af dipeptidresteme e) eventuelt er mono- eller di-C^.j^-alkylerede, 25 A' er hydrogen eller, når A er C^.j^-alkyl eller C^.^Q-phenylalkyl, også Ci_i2*alkyl eller Cj.^g-phenylalkyl,

Yi og Y2 representerer tilsammen en direkte binding, eller hver af Yj_ og Y2 er uafhængigt hydrogen eller en gruppe med formlerne (1) til (5) 30 R.

-C0-;-(CHj).-H -CO-CjT -C0-NHRc

Rb (cH2)n 35 (i) (2) 7 DK 174125 B1 -CO-NH-CH-COOR.

L (\\ r-V**

= V<eVr-\2jL

5 (5) I *; 9 (4) ' hvor

Ra er methyl eller ethyl,

Rb er hydrogen, methyl eller ethyl, 10 a er et helt tal fra 1 til 4, n er et helt tal fra 1 til 5,

Rc er (C^gjalkyl, R4 repræsenterer den substituent, der er knyttet til a-carbonatomet af en naturlig a-aminosyre (inklusive hydrogen), 15 Re er (C<L_5)alkyl,

Ra* og er uafhængigt hydrogen, methyl eller ethyl,

Rg og R9 er uafhængigt hydrogen, halogen, (Cj^.3)alkyl eller (Cj^.jJalkoxy, p er 0 eller 1, 20 ί er ® «Her 1, og r er 0, 1 eller 2, B er -Phe-, eventuelt ringsubstitueret aed halogen, NO2, NH2, OH, C^.3-alkyl og/eller C^_3-alkoxy, eller naphthylalanin, 25 C er (L)-Trp- eller (D)-Trp- eventuelt a-N-methyleret og eventuelt benzenringsubstitueret med halogen, NO2, NH2, OH, Cj^.3-alkyl og/eller Cj^-alkoxy, D er -Lys-, ThiaLys, 7F-Lys, iF-Lys eller Orn, eventuelt 30 a-N-methyleret, eller en 4-aminocyclohexylAla- eller 4-aminocyc- lohexyIGly-re s t, E er Thr, Ser, Val, Phe, Ile eller en aminoisosmørsyrerest, 35 F er en gruppe med formlen -COOR7, -C^OR^q, —CON^ eller 8 DK 174125 B1

Rlfi -CO-N-1— Χχ 5 hvor R7 er hydrogen eller 3-alkyl,

RlO er hydrogen eller resten af en fysiologisk acceptabel, fysiologisk hydrolyserbar ester, 10 Ril er hydrogen, Ci.3alkyl, phenyl eller C7_l0phenylalkyl,

Ri2 er hydrogen, Chalky 1 eller en gruppe med formlen -CH(Ri3)*Xi, R13 er -CH2OH, -(CH2)2-0H, -<CH2)3-OH eller -CH(CH3)OH eller repræsenterer den substituent, der er bundet til o-carbonatomet ^ af en naturlig α-aminosyre (inklusive hydrogen), og

XjL er en gruppe med formlen -COOR7, -CH2ORiq eller >< ®14 -CO-N^^ hvor 20 Ris R7 og R]_q har den ovenfor angivne betydning, R^4 er hydrogen eller Ci_3-alkyl, og

Rl5 er hydrogen, Ci.3-alkyl, phenyl eller C7.io*phenylalkyl, og 2Q Rj^S er hydrogen eller hydroxy, med det forbehold, at når Ri2 er -CH(Ri3)-X^, er R hydrogen eller methyl, hvor resterne B, D og E har L-konfigurationen, og resterne i 2- og 7-stillingen og enhver rest Y^ 4) og Y2 4) uafhængigt hver har ^ (L)- eller (D)-konfiguration.

I forbindelserne med formlen IV foretrækkes de følgende betydninger eller kombinationer deraf.

35 1. A er C7_£Q-phenylalkyl, især phenethyl, eller en gruppe med form len RCO. A er fortrinsvis en gruppe med formlen RCO.

9 DK 174125 B1 1.1. R er fortrinsvis C^_n-alkyl eller ^„ig-phenylalkyl, især C7. ^g-phenylalkyl, navnlig phenethyl, eller RCO har betydningerne a), b) eller c).

5 1.2. Når RCO har betydningerne a), b) eller c), er o-aoinogruppen af aminosyrerester a) og b) og N-teroinalaminogruppen af dipeptidresten c) fortrinsvis ikke-alkyleret eller aono-C^_l2'Alkyl«ret, især -C^-g-alkyleret, navnlig -methyleret. Det er mest foretrukket, at N-terminalen er ikke-alkyleret.

1.3. Når RCO har betydningen a), er denne fortrinsvis a') en L- eller D-phenylalanin eller -tyrosinrest, eventuelt mono-N-C^.i^-alkyleret. Fortrinsvis er a') en L- eller D-phenylalaninrest eller en L- eller D-N-(C^.g-alkyl)phenylalaninrest, Mest foretrukkent er a’) en D-phe- ^5 nylalanin- eller D-N-iC^gJ-alkyDphenylalaninrest, især en D-phenylalanin- eller D-(N-methyl)-phenylalaninrest.

1.4. Når RCO har betydningen b) eller c), er den definerede rest fortrinsvis lipofil. Foretrukne rester b) er således V) a-aminosyrerester, der har en carbonhydridsidekæde, fx leucin- og norleucin- 20 rester, hvilke rester har en L- eller D-konfiguration, og foretrukne rester c) er dipeptidrester, i hvilke de individuelle aminosyrerester er ens eller forskellige og udvalgt fra de under a') og b') ovenfor definerede.

25 1.5. Mest foretrukkent har RCO betydningen a) , især betydningen *'), 2. B er B', hvor B' er Phe eller Tyr, 3. C er C', hvor C er -(D)Trp-, 4. D er D', hvor D' er -Lys-, -MeLys- eller -Lys(i-Me)-, især 30 ’Lys·' 5. E er E', hvor E' er resten af en naturlig α-aminosyre forskellig fra Val, især -Thr-, 6. F er F', hvor F* er en gruppe ned formlen -CO-tl især en gruppe med formlen -C0-N 35 \ ΧΗ(Κυ)-Χ4 10 DK 174125 B1 (i hvilket tilfalde eller CH3). I sidstnævnte tilfalde har resten -CH(Rjj)-Xi fortrinsvis L-konfiguration. F' er fortrinsvis forskellig fra -ThrNH2, når E' er Thr.

5 6.1. R]^ er fortrinsvis hydrogen.

6.2. Som den substituent, der er knyttet til α-carbonatomet af en naturlig aminosyre (dvs. med formlen H^N-CH(R^)-COOH), er fortrinsvis -CH2OH, -CH(CH3)OH, isobutyl eller benzyl, eller R^3 er -((¾)2-OH eller -(CH2)3*OH. Den er isar -CH2OH eller -011((¾)OH.

6.3. X|_ er fortrinsvis en gruppe med formlen _C°-N.

XRis eller -CH2-0Rig, isar ®ed formlen -CI^-OR^g, °S r10 er fortrinsvis 15 hydrogen eller har betydningen givet under punkt 7 nedenfor. Mest foretrukket er den hydrogen.

7. Som rest af en fysiologisk acceptabel, fysiologisk hydrolyserbar ester er Ri0 fortrinsvis HCO, C2-12"alkylcarbonyl, C8.12-phenylalkyl-carbonyl eller benzoyl.

8. Resterne i 2- og 7-stillingerne har fortrinsvis L-konfiguration.

9. og Y2 reprasenterer fortrinsvis tilsammen en direkte binding.

25 Den mest foretrukne forbindelse med formlen IV er forbindelsen IVa H-( D)Phe-Cys-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-o 1 30 også kendt som octreotid.

C. Forbindelser med formlerne V til VIII

H-C^s-Phe-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Phe-Cys-OH V

35 11 DK 174125 B1 . [jfr. Vale et al.. Metabolism, 27, Supp. 1, 139, (1978)1

.Asn-Phe-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Phe-Gaba-> VI

—i 5 [jf. europæisk patentpublikation nr. 1295 og EP-ansøgning nr.

78 100 994.9]

JfeAla-Tyr-(D)Trp-Lys-Val-Phe, VII

-- — - - 10 [jf. Veber et al., Life Sciences 34, 1371-1378 (1984) og europæisk patentansøgning nr. 82106205.6 (publiceret under nr. 70 021)1 også kendt som cyclo(N-Me-Ala-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Phe) ] 15- NMePhe-His-(D)Trp-Lys-Val-Ala-j VI11 [jf. R.F. Nutt et al. Klin. Wochenschr. (1986) 64 (Suppl. VII) 71-73].

20

Der henvises specifikt til alle de ovenfor nævnte publikationers indbold,herunder de specifikke forbindelser, der er nævnt deri.

Forbindelserne ifølge opfindelsen kan fx eksistere i fri form, salt-25 form eller i form af komplexer deraf. Syreadditionssalte kan dannes med fx organiske syrer, polymere syrer og uorganiske syrer. Sådanne syreadditionssal tformer inkluderer fx hydrochlorideme og acetaterne. Komplexer dannes fx ud fra forbindelser ifølge opfindelsen ved tilsætning af uorganiske stoffer, fx uorganiske salte eller hydroxider såsom 20 calcium- og zinksalte, og/eller ved tilsætning af polymere organiske stoffer.

Forbindelserne ifølge opfindelsen kan fremstilles i overensstemmelse med konventionelle fremgangsmåder. De anvendes hensigtsmæssigt i form af et acetathydrat. Typiske peptidkoncentrationer er fra 85 til 95X.

35 12 DK 174125 B1

Ifelge opfindelsen indeholder det farmaceutiske prsparat foruden mælkesyre og forbindelsen ifølge opfindelsen også en basisk forbindelse, der er udvalgt på en sådan måde, at det farmaceutiske præparat puf res til en pH-værdi på 4 til 4,5, fortrinsvis 4,2, 5

Den basiske forbindelse udvælges fortrinsvis fra natriumhydroxid og natriumhydrogencarbonat. En sådan forbindelse tilsættes fortrinsvis i en mængde, så det resulterende farmaceutiske præparat har en pH-værdi, der er pufret som angivet ovenfor.

10

Det farmaceutiske præparat ifølge opfindelsen er fortrinsvis vandbaseret. Det kan anvendes på samme måde som kendte præparater, der fx er baseret på eddikesyre og natriumacetat. Det anvendes hensigtsmæssigt til parenteral administration, fx subcutant. Typiske doser til sub-cutan administration er fra 0,05 til 1 mg forbindelse Ifølge opfindelsen pr. ml, især 0,1 til 1 mg/ml, fortrinsvis indgivet to gange eller én gang om dagen eller ved kontinerlig infusion. Præparatet kan indgives i de samme doser og på samme måde som andre kendte præparater, der indeholder det samme aktive middel.

20

Forholdet mellem mælkesyre og forbindelsen ifølge opfindelsen er fortrinsvis fra 1:1 til 40:1, især fra 5:1 til 40:1. Mælkesyren anvendes bekvemt som et hydrat, fx 88% rent.

Det farmaceutiske præparat ifølge opfindelsen vil typisk pr. ml inde-25 holde fra 0,05 til 1 mg af en forbindelse ifølge opfindelsen, fra omkring 2 til 4 mg mælkesyre, især som et hydrat (882 rent), tilstrækkeligt natriumhydrogencarbonat eller natriumhydroxid til at opretholde en pH-værdi på 4,2 og sterilt vand.

2q Præparatet ifølge opfindelsen kan Indeholde yderligere ingredienser fx et konserveringsmiddel, fx phenol, og/eller et middel til at regulere isotonicitet, fx mannitol eller natriumchlorid. Phenol tilføres fortrinsvis til præparatet, når det er udformet som multidosis-hætteglas.

Kår mannitol anvendes til at regulere isotonicitet i det farmaceutiske præparat ifølge opfindelsen, skal mængden af mannitol helst ikke 35 13 DK 174125 B1 overstige 5,5X af præparatets vegt. Mannitol er bekvemt til stede i et forhold mannitol:m*lkesyre på fra 10:1 til 20:1.

Når natriuochlorid anvendes til at regulere isotonicitet, er det for-5 trinsvls til stede i en mengde i forhold til malkesyre på fra 1:1 til 20:1, fortrinsvis fra 2:1 til 10:1.

Praparatet ifølge opfindelsen kan fremstilles ifølge konventionelle metoder, fx ved at blande en somatostatinanalog med malkesyre og eventuelt de andre beskrevne ingredienser i den ønskede mangde. Somatosta-10 tinanalogen opløses fortrinsvis først i vand (til injektion). Præparatet ifølge opfindelsen fremstilles fordelagtigt under sterile og aseptiske betingelser; forbindelserne ifølge opfindelsen kan også fremstilles under sterile betingelser. Da praparatet ifølge opfindelsen er beregnet til parenteral indgivelse, isar til injektioner, er det hensigtsmæssigt at fylde det på ampuller eller hatteglas under aseptiske 15 betingelser. Det farmaceutiske praparat kan pakkes under carbondioxid eller en anden indifferent gas for at hindre nedbrydning, fortrinsvis under carbondioxid.

Efter injektion tåles præparatet ifølge opfindelsen meget bedre 20 - lokalt end et, der indeholder eddikesyre og natriumacetat, fx kendte praparater af forbindelsen IVa. Isar er parenteral indgift af et præparat ifølge opfindelsen, fx subcutan injektion, mindre smertefuld.

25 Foruden den forbedrede lokale tolerance efter injektion udviser praparatet ifølge opfindelsen, der grundlæggende indeholder et poly-peptid som somatostatinanalog, gode stabilitetskarakterlstika.

Det farmaceutiske praparat ifølge opfindelsen er sarlig indikeret til jq anvendelse ved behandling af brystkræft.

Brystcarcinom er den mest almindelige tumortype hos kvinder på over 40 år og er den største dødsårsag. Opfindelsen kan vare af vardi for tumorer, som er hormonafhangige, fx østrogenafhængige, eller hormon- uafhængige. Brystkræft er en sygdom, hvortil der stadig skal inve-35 steres store resurser for at finde en form for afhjælpning.

14 DK 174125 B1

Dec har vise sig, ae forbindelserne ned formel I-III, forbindelserne med formlen IV, hvor B er B', C er C, D er D', E er E', og F er F', iser forbindelsen IVa, og deres derivater, der barer en sukkerresc, isar de derivater, der kan fremstilles ved en Amadori- eller Heyns-om-5 lejring ud fra et naturligt eller syntetisk tilgængeligt mono-, dieller oligosaccharid, og forbindelserne med formlerne V-VIII, som defineret ovenfor, har en gavnlig virkning på patienter med brystkraft, fx ved at standse udviklingen af sygdommen, som antydet ved fx graden og længden af responset.

10

Foretrukne somatostatinanaloge, der bærer en sukkerrest, er dem, der er beskrevet i WO 88/02756·

En sarlig foretrukken forbindelse er N®-[a-glucosyl(l-4)-deoxyfruc-tosyl]-DPhe-Cys-Phe-DTrp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol (der betegnes forbindelse 15 IVb).

Den gavnlige virkning af somatostatinanaloge på patienter med brystkræft som nævnt ovenfor kan vises i følgende kliniske forsøg: 20 I et første klinisk forsøg blev 5 patienter, der led af metastatisk brystcarcinom, undersøgt; patienterne havde ikke modtaget tidligere systemisk behandling for metastaser (adjuvansbehandling ignoreres), og der var let adgang til deres vener. Patienterne havde PS 0 eller 1 og kunne være ude over overgangsalderen.

25

Forbindelserne ifølge opfindelsen kan indgives kontinuerligt parente-ralt, fx s.c. , ved hjælp af en pumpe med en hastighed på fx 0,5 til 2 mg pr. 24 timer over mindst 3 dage.

Vækstfaktor IGF-profilen bestemmes, og det konstateres, at niveauerne ^ er reducerede.

Et andet klinisk forsøg kan gennemføres som følger: I et andet forsøg blev forbindelserne ifølge opfindelsen indgivet til 35 mindst 14 patienter med brystkræft, og graden og længden af responset blev bestemt.

15 DK 174125 B1

Der er medtaget patienter, der bar brystkræft konstateret ved histologisk biopsi (kirtelanalyse - EQA). De udviser en metastatisk sygdom og/eller locoregional lokalisering, der er målelig og kan vurderes.

Hvis det etiskes, medtages patienter, som er resistente over for anden 5 behandling, til konventionel terapi såsom kirurgi, radioterapi, anden kemoterapi og/eller hormonterapi.

Patienterne udviser mindst én parameter, der ved røntgenanalyse er målelig eller kan vurderes, som fx en primitiv metastatisk tumor, der er eutan eller subcutan. Den kan vare ganglieagtig eller visceral.

Patienterne har fortrinsvis lasioner, der har udviklet sig inden for den måned, der går forud for undersøgelsen, og har en vurderet overlevelsestid på mindst 3 måneder.

Undersøgelsen udelukker fortrinsvis: 15 -patienter, hos hvilke det eneste kriterie for at diagnosticere brystkraft er biologiske modifikationer, •patienter, der har fået et embryonisk carcinomantigenpatologi, •patienter med ascitis, en lungehinde infusion, en lungecarclnom-20 lymphangitis eller en knoglelokalisering som eneste metastatiske manifestation, •patienter behandlet på et unikt tumoralt mål med radioterapi i mindre end 8 uger, før de blev optaget i undersøgelsen (de er dog velegnede, hvis der er tegn på udvikling i denne tid), 2g -patienter med en unik lokalisering i hjernen, -patienter, der udviser en anden ondartet tumor med undtagelse af et carclnom in situ i cervix uteri eller en spino- eller basoeellular hudkraft, og -patienter, der ikke er i stand til at komme til regelmæssige konsultationer.

30

Med disse udelukkelser kan forbindelsernes virkning følges mere klart. Forbindelserne kan dog også anvendes ved opfindelsens behandlingsmetode til at behandle patienter, der falder inden for de ovenfor navnte udelukkelser.

35 16 DK 174125 B1

Forbindelserne Ifølge opfindelsen lean indgives med samme dosis som eller ved en lavere dosis end i det første forsøg, men fortrinsvis i to doser, én om morgenen og én om aftenen. Behandlingen varer mindst 3 måneder, eller til patienten er helt rask. Responset kan følges ved konventionel metodologi, fx ifølge lUCC-responsekriterier, fx udvi-5 kling, stabilisering, delvis eller fuldstændig helbredelse. Vurderingen foretages fx på dag 0, 15, 45, 60 og 90.

Et tredje klinisk forsøg kan udføres som følger: ^ Patienter med fremskredet brystkræft er inkluderet. Desuden bliver deres brystkræft analyseret med autoradiografi på tilstødende vævs-snit for deres indhold af somatostatinreceptorer ved som radioligand at anvende fx enten ^^^l-[Leu®, D-Trp^f Tyr^]-somatostatin-28 eller en *^I-Tyr^ analog af forbindelsen IVa. Patienternes sygdom er 15 fremadskridende og har målelige og/eller evaluerbare parametre ifølge IUCC kriterier (dvs. tilsynekomst af nye læsioner eller vækst af eksisterende metastatlske læsioner), der ikke responderer på primær hormonal og/eller cytotoxlsk terapi. Som i det ovenfor nævnte andet kliniske forsøg udelukker det tredje forsøg fortrinsvis også pacing enter med tidligere eller samtidige ondartede svulster på andre steder, med undtagelse af conusbiopsl in situ carcinom af cervix uteri og tilstrækkelig behandlet basal eller cellehudcarcinom.

Forbindelserne ifølge opfindelsen kan administreres i samme dosis eller i en lavere dosis end i det andet forsøg. Forbindelserne ifølge 25 opfindelsen gives fortrinsvis parenteralt, fx subeutant, især på en kontinuerlig subeutan måde ved hjælp af en transportabel sprøjtepumpe (infusionspumpe). Behandlingen foretages i mindst 2 måneder eller indtil fuldstændig bedring. Responset kan følges ved konventionel metodologi, fx Ifølge IUCC-responsekriterler. Vurderingen foretages 30 fx på dag 0, 30 og 60. Alle læsioner måles ved hver vurdering, eller et repræsentativt antal på 5 læsioner kan vælges til måling, når mange læsioner er til stede. Regression af læsionerne er summen af produkterne af diametrene af hver enkelt læsion eller af dem, der udvælges til analyse, som falder med 50Z eller mere.

35 17 DK 174125 B1

Forbindelserne ifølge opfindelsen, fx octreocid, administreres fx parenteralt, fx subcutant, eller oralt. Den rette dosis vil fx af· bange af den anvendte somatostatinanalog, vårten, administrationsmåden og sværhedsgraden af det tilfalde, der behandles. Doser kan ligge 5 i det område, der bruges til at behandle gastroenteropancreatiske endocrine tumorer (£1) såsom vipomaer, eller acromegali til 10 gange den dosis. Foretrukne områder er fx fra omkring 4 til 10 gange GI-tumor- eller agromegalidosis.

Ί q For octreotid kan GI-tumorer behandles først med 0,05 mg én eller to gange daglig ved subcutan injektion. Dosering kan forøges til 0,2 mg tre gange daglig. For acromegali kan man anvende daglige doser på fra 100 til 300 /tg s.c. Octreotid tolereres i det mindste op til 1 mg.

De ved anvendelse af opfindelsen indikerede daglige doser for octreotid er fra 0,1 til 1 mg s.c., fortrinsvis 0,2 til 1 mg s.c. Octreotid Indgives fortrinsvis parenteralt i form af en formulering, der er baseret på mælkesyre som beskrevet ovenfor. Forbindelsen IVb (octreotid med en sukkerrest) gives fortrinsvis i oral form, fx ved en dosis på 2 pg til 20 mg p.o., fortrinsvis 300 til 5000 /tg p.o. Orale en-20 hedsdoser kan indeholde fx fra 0,5 pg til 10 mg af forbindelsen IVb.

Der indgives også fortrinsvis en dopaminagonist ved behandlingen af brystkræft.

25 Den foretrukne dopaminagonist er bromocriptin, fortrinsvis anvendt som mesylatet.

Yderligere eksempler omfatter: 20 N,N-Diethyl-N' - [ (3a-4aa,10a£)-1,2,3,4,4a,5,10,10a-octahydro-6-hy droxy] -l-propyl-3-benzo[quinolinyl]sulfamld, også kendt som CV, fortrinsvis anvendt som hydrochloridet.

Foretrukne forbindelser er meldrøjederivater (ergotderivater) med lav molekylvagt, dvs. forbindelser, som ikke har en peptidrest 1 8-stil-35 lingen, dvs. ikke ergopeptider. De kan fx have en aminogruppe, fx en 18 DK 174125 B1 acylamino-, ureldo- eller sulfaminorest eller thiomethylrest 1 8-stillingen, som kan vare substitueret med fx én, eller oo ensket to (Ci.4)alkylgrupper. Disse kan hensigtsmæssigt have en enkeltbinding i ergolinkernens 9,10-stilling.

5

De foretrukne forbindelser er 8a-sulfaooylaminoergoliner. Disse kan være baseret på formlen: H R*

-A * J

10

JK Γ 11 I

''J MD* Φ' ‘ 15 hvor

Ria bl.a. er (Ci_4>alkyl, R2a bl.a. er H eller (¾ .4) alkyl, 2ø R3a bl.a. er -NHS02N[(C1.A)alkyl}2.

De foretrukne eksempler omfatter: a) l,6-Dimethyl-8a-(N,N-dimethylsulfamoylamino)-ergolin-I (også kendt som mesulergin, herefter kaldet forbindelse B); 25 b) 6-n-propyl-8a-(N,N-diethylsulfamoylamino)-ergolin-I (N,N-diet* hyl-N'-(6-propylergolin-8a-yl)sulfamid), fortrinsvis anvendt som hydrochloridet, også kendt som CQP, (herefter kaldet forbindelse C).

30 c) N,N-Diethyl*N' - [ (8a)-l-ethyl-6-methyl-ergolin-8-yl]sulfamid, fortrinsvis anvendt som hydrochloridet, (herefter kaldet forbindelse D) .

35 Det mest foretrukne eksempel er (b), dvs. forbindelse C, 19 DK 174125 B1

Andre foretrukne forbindelser omfatter: i) 3-(9,10-didehydro-6-mechyl-ergolin-8a-yl) -1,1-diethyl-urinstof (også kendt som lisurid, fortrinsvis anvendt som hydrogenmaleinat); 5 ii) 6-n-p ropy1-8a-methyimereap tome thyl-ergo1in-1 (også kendt som pergolid, fortrinsvis anvendt som mesylat); iii) transhydrolisurid også kendt som tergurid med det kemiske navn 3-(6-methyl-ergolin-8a-yl)-1,L-diethyl-urinstof, offentliggjort 10 fx i DE-OS 3135305 og 3124714.

iv) 6-n-propyldihydro-lisurid, også kendt som protergurid, der har det kemiske navn 3-(6-n-propyl-ergolin-8e-yl)-1,1-diethylurin-stof.

15 v) 6- og 2-substitueret, fx 6-n-propyl og/eller 2*methyl eller bromderivater af tergurid, lisurid og protergurid, fx som offentliggjort i det europaiske patentskrift nr. 21206 (A.l) og 160842 (A.l), til hvis indhold, isar eksempler og de farmakolo- 2q giske data deraf, der henvises. Eksemplerne inkluderer 2-bromer- gurid, også kendt som 2-bromlisurid, fortrinsvis anvendt i form af vi) metergolin, også kendt som (+)-N-(carboxy)-l-methyl-9,10-dihy- drolysergaminbenzylester.

25 vii) dosergosid, også kendt som N-(1S,2R,3E)-2-hydroxy-i-(hydroxymethyl) -3-heptadecanyl) -6-methylergolin-8*beta-carboxamid.

viii) FCE-21336, også kendt som l-ethyl-3-(3'-dimethylaminopropyl)-3- 30 (6-alkyl-ergolin-8'-beta-carbonyl)-urinstof, fortrinsvis anvendt som diphosphatet.

ix) GYKI-32887 også kendt som 6-methyl-8-(N-mesyl-N-2-azidoethyl)-ergolen, fortrinsvis anvendt som bimaleinatet, fx som beskrevet 35 i US 4.299.836.

20 DK 174125 B1

Grupper af forbindelser omfatter forbindelser med formlen (Γ) Η^,ΝΗ-ζΟ-^ 5 <·>

(oT

V"— 10 hvor R^* er hydrogen eller Cj__4-alkyl, R2' er hydrogen, chlor, brom eller methyl, R3' er Cj^.j-alkyl eller C3.5-alkenyl, i hvilken dobbeltbindingen ikke er ved carbonatomet ved siden af nitrogenatomet, og R4* er ¢3.7-alkyl; C3-7-cycloalkyl; adamantyl; phenyl; phenyl substitueret med én eller flere substituenter valgt fra gruppen bestående af 0^.3-alkyl, Cj^-alkoxy, Cj^-alkylthio, trifluotmet-hyl, hydroxy, nitro, amlno og mono- og di-(C3-alkyl)-amino; eller phenyl, der barer en kondenseret ikke-aromatisk, hetero- 20 cyclisk 5- eller 6-leddet ring, inklusive ét eller to heteroato-mer valgt fra gruppen bestående af oxygen og svovl, offentliggjort i GB 2.152.507 A, til hvis indhold, specielt eksemplerne og de farmakologiske data deraf, der henvises, fx 25 (5R,8S,10R)-2,6-dimethyl-8a-pivaloylamino-ergolin (herefter forbindelse E), fortrinsvis anvendt som hydrochloridet, og 2-chlorderivatet (5R, 8S, 10R) -2-chlor-6-methyl-8a-pivaloylamino-ergolin.

3Q Andre eksempler inkluderer en forbindelse med formlen I"

IC

35 ιοιγ·η ·< * l| · V-‘-»2 21 DK 174125 B1 hvor R^" er hydrogen eller 0^.4-alkyl, R2" er hydrogen, chlor, broa eller nethyl,

Rj" er C5-alkyl eller C3.5-alkenyl, 1 hvilke dobbeltbindingen Ikke g er ved carbonatornet nabostillet til nitrogenatomet, og R4* er 7-alkyl; C3 _ 7 -eyeloalkyl; adamantyl; phenyl; phenyl sub stitueret med én eller flere substituenter valgt fra gruppen bestående af <^.3-alkyl, C^.j-alkoxy, Cj^. 3-alkyl thi o, trifluor-methyl, hydroxy, nitro, amino og mono- og di-(C^_3-alkyl)-amino; eller phenyl kondenseret med en ikke-aromatisk heterocyclisk 10 ring, der har 5- eller 6-ringatomer, inklusive ét eller to he-teroatomer udvalgt fra gruppen bestående af oxygen og/eller svovl, med det forbehold, at når R2" er hydrogen, er hverken R3" eller R4" methyl, 15 fx de forbindelser, hvor Rj/ - H, R2* - Bf eller isar CH3", R3" - CH3, og R4" - tert.butyl, beskrevet i DE-patentansøgning P 3447383.1, indleveret den 24. december 1984 som GB-ansøgning nr. 8531420, nu publiceret som GB-ansøgning nr. 2169291 A og 20 også 1 andre lande, til hvis indhold inklusive alle eksemplerne der henvises.

Disse dopaminagonister kan fx anvendes i fri baseform eller i farmaceutisk acceptabel syreadditionssaltform, fx hydrochlorid, maleinat eller mesylat.

25 I det andet kliniske forsøg kan forbindelserne indgives sammen med forbindelserne ifølge opfindelsen. Forbindelserne indgives 1 daglige doser, der benyttes til at sanke prolactinniveauer. Fx gives brom- crlptin i en daglig dosis på 5 og p.o. to gange om dagen.

30

Det farmaceutiske praparat ifølge opfindelsen er isar nyttigt ved behandlingen af brystkraft, når somatostatinanalogen indgives s.c., fx ved kontinerlig infusion. Indgivelsen kan foretages kontinuerligt over 24 timer med acceptabel tolerance for patienten.

35 22 DK 174125 B1

Eksempler på præparater er som følger Somatostat inkonc entrat ioner pr. al 5 1. Aapuller

Eks. 1 Eks. 2 Eks. 3 Eks. 4 A. Octreotid* 0,05 ag 0,1 ag 0,2 ag 0,5 mg

Mannitol 45,0 ag 45,0 ag 45,0 ag 45,0 mg ^ Malkesyre (882) 3,4 mg 3,4 ag 3,4 ag 3,4 mg

Natriumhydrogen- til til til til carbonat pH 4,2 pH 4,2 pH 4,2 pH 4,2

Vand (injekti- til til til til onskvalitet) i ml 1 ml 1 al 1 ml

Carbondioxid q.s. q.s. q.s. q.s.

15

Eks. 5 B, Octreotid* 0,2 mg

NaCl 7,5 mg 20 Malkesyre (88X) 3,4 mg

Natriumhydrogen- til carbonat pH 4,2

Vand (injek- til tionskvalitet) 1 ml 2^ Carbondioxid q.s.

2. Hatteglas

Eks. 6 qn

Octreotid* 0,2 mg

Mannitol 45,0 mg

Malkesyre (882) 3,4 mg

Phenol 5,0 mg

Natriumhydrogen- til 35 carbonat pH 4,2 23 DK 174125 B1

Vand (injektions- til kvalitet) 1 ml

Carbondioxid q.s.

5 * givet soo acetatpeptidindhold 87Z.

Præparaterne fremstilles ved standardteknikker, fx i batches på 50 liter, der giver omkring 43.000 ampuller med 1 ml eller 8400 hætteglas under carbondioxidgasning. Præparaterne filtreres, (fx gennem 0,2 1Q mikrometer huller ved 0,5 bar) og hældes pi ampuller eller hxtteglas under aseptiske betingelser,

Claims (15)

1. 24 DK 174125 B1 . PATENTKRAV:
2. 1. Farmaceutisk præparat til parenteral indgivelse, kendetegnet ved, at det indeholder en somatostatinanalog, mælkesyre og en basisk forbindelse, idet præparatet har 5 en pH-værdi på fra 4 til 4,5.
3. 2. Præparat ifølge krav 1, kendetegnet ved, at forholdet mellem mælkesyre og somatostatinanalog ligger fra 1:1 til 40:1.
4. 3. Præparat ifølge krav 1, kendetegnet ved, at det yderligere indeholder et middel til regulering af isotonicitet.
5. 4. Præparat ifølge krav 3, kendetegnet ved, at midlet til regulering af isotonicitet er mannitol eller natriumchlorid. 15
6. 5, Præparat ifølge krav 4, kendetegnet ved, at forholdet mellem mannitol og mælkesyre ligger fra 10:1 til 20:1, og at forholdet mellem natriumchlorid og mælkesyre ligger fra 1:1 til 20:1.
7. 6. Præparat ifølge krav 1, kendetegnet ved, at det pr. ml indeholder fra 0,05 til 1 mg somatostatinanalog, 2 til 4 mg mælkesyre, tilstrækkeligt natriumhydroxid eller natrium-hydrogencarbonat til opnåelse af en pH-værdi på 4,2, et middel til regulering af isotonicitet og sterilt vand.
8. 7. Præparat ifølge krav 1,kendetegnet ved, at somatostatinanalogen er valgt fra forbindelserne med formlerne l-lll fVVf DK 174125 B1 25 fl jf 2 ? ar Q H ^N-h A/ywvv H i4 C
9. 10 II III 25 hvor V er S eller (CH2>S, hvor s er 0, 1 eller 2; en af X og Z · er S, og den anden er S eller CH2; Y er S eller (CH2>t, hvor t er 0, 1 eller 2; hver af Rj_ og Rj uafhængigt af den anden er <^.5-alkyl, benzyl, benzyl med én eller to Cj^-alkyl-, halogen-, hy- ww droxy-, aaino-, nitro- og/eller C^.s-alkoxysub-stituenter, eller C^.j-alkyl substitueret med en 5- eller 6-leddec heterocyclisk ring; R3 er 3-indolylmechyl, enten usubstitueret eller med C^.5-alkyl-, Cj^-alkoxy- eller halogensubstitu-35 tion; 26 DK 174125 B1 R^ er Cj__5-alkyl, C.5-hydroxyalky1, benzyl, carboxy-(C^_5-alkyl), aaino-(C^_5-alkyl) eller benzyl ned en C^.5-alkyl-, halogen-, hydroxy-, amino-, nitro- og/eller C _ 5 -alkoxysubstituent;
10. 5 R5 er.CjL.5-alkyl, benzyl eller benzyl med en Cj,. 5-alkyl-, halogen-, hydroxy-, amino-, nitro-og/eller C^.j-alkoxysubstituent, forbindelser med formlen IV 10 A' CHj-S-Yx Tj-S-CHj j^N-CH-CO-B-C-D-E-NH-CH-F IV A ' hvor 15. er C1.12-alkyl, Cy.^Q-phenylalkyl eller en gruppe med formlen RCO-, hvor i) R er hydrogen, -jlj.--allcyl, phenyl eller C7.*phenylalkyl, eller ii) RCO- er 20 a) en L- eller D-phenylalaninrest eventuelt ringsubstitueret med F, Cl, Br, N02, NH2, OH, C^.3-alkyl og/eller Cj^-alkoxy, b) resten af en naturlig β-aminosyre forskellig fra den, der er defineret under a) ovenfor, eller af en tilsvarende D-aminosyre, 25 „ eller c) en dipeptidrest, i hvilken de individuelle aminosyrerester er ens eller forskellige og er valgt fra dem, der er defineret under a) og/eller b) ovenfor, idet a-amino gruppen af aminosy- 30 reresteme a) og b) og den N-terminale amino gruppe af dipep- tidresteme c) eventuelt er mono- eller di-C^.^2-alkylerec, A' er hydrogen eller, når A er C^.j^-alkyl *Her c7-10'Pkenylalkyl« også Cj^.j^-alkyl eller Cy.^Q-phenylalkyl, 35 *1 °8 ^2 reprasenterer tilsammen en direkte binding, eller 27 DK 174125 B1 hver af Yj. og Y2 er uafhængigt hydrogen eller en gruppe med formlerne (1) til (5) R. -C0-C-(CH2),-H -CO^ -C0-NHRe
11. 5 X Rb _ (CHj)u (1) - (2) (3) -C0-NH-CH-C00R 10 (A , ·· Wxg, 1.V« (5> I *; i *’ Ra er mechyl eller ethyl, ^
12. 15 Rjj er hydrogen, methyl eller ethyl, m er et helt tal fra 1 til 4, n er et helt tal fra 1 til 5, Rc er (C^.gjalkyl, repræsenterer den substituent, der er knyttet til a-carbonatomet 2Q af en naturlig a-aminosyre (inklusive hydrogen), Re er (Cj^Jalkyl, Ra* og R^' er uafhængigt hydrogen, methyl eller ethyl, halogen, alkyl eller (C1_3.) alkoxy,
13. 25 Rg og Rg er uafhængigt hydrogen, halogen, (C^_3)alkyl eller (C^.jJal-koxy, p er 0 eller 1, q er 0 eller 1, og r er 0, 1 eller 2, 30 B er -Phe-, eventuelt ringsubstitueret med halogen, NO2, NH2, OH, Ct.3-alkyl og/eller C^.g-alkoxy, eller naphthylalanin, C er (L)-Trp- eller (D)*Trp- eventuelt α-N-methyleret og eventuelt beiuenringsubstitueret med halogen, NO2, NH2, OH, Ci_3-alkyl og/eller C^-alkoxy, DK 174125 B1 28 D er -Lys*, ThiaLys, 7F-Lys, iF-Lys eller Orn, eventuelt e-N-methyleret, eller en 4-aminocyclohexylAla- eller 4-aninocyc-lohexylGly-rest, 5 E er Thr, Ser, Val, Phe, Ile eller en aminoisosmørsyrerest, ^*11 F er en gruppe med formlen -COOR;, -CH2OR10, -COVT eller \rxj
14. 10 R Λ -CO-N-!- Xx hvor ^ Ry er hydrogen eller 0^.3-alkyl, R^q er hydrogen eller resten af en fysiologisk acceptabel, fysiologisk hydrolyserbar ester, er hydrogen, Cj^-alkyl, phenyl eller Cy.^Q-phenylalkyl, R«2 er hydrogen, C^.j-altyl eller en gruppe med formlen 20 -CIKR^-Xi, Rl3 er -CH20H, -(CH2)2-OH, -(CH2)3-OH eller -CH(CH3)OH eller repræsenterer substituenten bundet til α-carbonatomet af en naturlig a-aminosyre (inklusive hydrogen), og er en gruppe med formlen -COOR7, -CH2ORiq eller 25 .✓«Ri 4 -CO-N-^ hvor 30 R7 og R10 har de ovenfor angivne betydninger, R^4 er hydrogen eller 3·alkyl, R15 er hydrogen, 0^.3-alkyl, phenyl eller Cy.jg-phenylalkyl, og Rj_g er hydrogen eller hydroxy, 35 29 DK 174125 B1 med det forbehold, aC når R12 er -CH(R13)-Xi, er Ru hydrogen eller methyl, 5 hvor resterne B, D og E har L-konfiguration, og resterne i 2- og 7-stillingen og enhver rest Y^ 4) og Y2 4) uafhangigt hver har (L)- eller (D)-konfiguration, og forbindelserne med formlerne V-VIII 10 ,-n H-Cys-Phe-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Phe-Cys-OH V pAsn-Phe-Phe-fDJTrp-lys-Thr-Phe-Gaba-, VI 15 * ........ .I (HeAla-Tyr-iDJTrp-lys-Val-Phe-i VII
15. 20 WHe the -His-(D)Trp-Lys-Val-Ala VIII i fri form eller farmaceutisk acceptabel saltform eller komplexfbrm. 2g 8. Præparat ifølge krav 5, kendetegnet ved, at somatostatinanalogen er forbindelsen IVa H-(D)Phe-C^s-Phe-(D)Trp-Lys-Thr-Cjfs-Thr-ol 30 i fri form eller farmaceutisk acceptabel saltform eller komplexform. 35