CH621770A5

CH621770A5 - Process for the preparation of novel peptide compounds

Info

Publication number: CH621770A5
Application number: CH217576A
Authority: CH
Inventors: Edmond Sandrin; Wilfried Bauer
Original assignee: Sandoz Ag
Priority date: 1976-02-23
Filing date: 1976-02-23
Publication date: 1981-02-27

Abstract

The preparation of novel somatostatin derivatives of the formula I <IMAGE> in which X, Y, Z, R<1> and B have the meanings given in Patent Claim 1, is described. The process is based on the synthesis methods customary in peptide chemistry. These compounds inhibit GH secretion and are therefore used in diabetes mellitus, in the treatment of acromegaly and angiopathy, as well as for diagnostic purposes.

Description

**WARNUNG** Anfang DESC Feld konnte Ende CLMS uberlappen **. ** WARNING ** Beginning of DESC field could overlap end of CLMS **.

PATENTANSPRÜCHE 1. Verfahren zur Herstellung von neuen Verbindungen der Formel I worin PATENT CLAIMS 1. Process for the preparation of new compounds of formula I wherein

Rt (i) H, (ii) NH2. Rt (i) H, (ii) NH2.

(iii) H-Ala-NH-; H-Tyr-NH-; H-Cys-NH-; H-Val-NH-; H-Lys-NH-; H-(a -amino-isobutyryl) -NH-; H-Phe-NH-; (iv) NH2-NH-CO-NH-; (v) C,H5 NH-CO-Gly-NH-; H-Ala-Gly-NH-; H-Val-Gly-NH-; H-a -Phenyl-Gly-NH-; (vi) R2-A-CO-NH-, worin R2 für niederes Alkyl, Phenyl oder Phenyl, das durch Halogen, Hydroxy, Amino, niederes Alkyl oder niederes Alkoxy substi tuiert ist, A für eine direkte Bindung, ein Alkylenradikal mit jeweils bis zu 6 Kohlenstoff atomen oder für -NH- stehen, (vii) R2-Ala-NH-; R2-Ala-Gly-NH-; worin R2 obige Bedeutung hat, (viii) C6H5 A1 CO-M-NH-, worin Al für ein Alkylenradikal mit bis zu 6 Kohlenstoffatomen steht und -M- -(mono oder di-Hal)-Phe-, -Gly- oder -Ala- bedeutet, (ix) T-(mono- oder di-Hal)-Phe-NH-, worin T- für H-, H-Val- oder Benzoyl- steht, (x) (CHECH zu au zu CO-L-NH, worin Al obige Bedeutung hat und -L- für -Val-, -Val-(mono- oder di-Hal)-Phe-, < - Phenyl-Gly- und n für eine ganze Zahl zwischen 4 und 10 stehen, bedeutet, B für H oder beide B für eine direkte Bindung zwischen den S-Atomen steht, X für -Lys-, -Nle- oder -Cys- und Y für -Asn-, -Gln- oder -Thr- stehen und Z für die Reste (i) H; (ii) COOH; (iii) COOR3 (wobei R3 eine niedere Alkylgruppe bedeutet); (iv) -CO-NR4Rs (wobei R4 und R5 unabhängig voneinander Wasserstoff oder eine niedere Alkylgruppe bedeuten); (v) -CON3CH2)n, (wobei n obige Bedeutung besitzt); (vi) CH2OH; (vii) -CO-Aspara cineol; -CO-Leucinol; -CO-lsoleucinol; -CO-Valinol; -CO-Norleucinol; -CO-Glutaminol; -CO-Threoninol; (viii)-CO-Leu; -COSer; -CO-Iso-Leu; CO-Val und ihre entsprechende Amide, worin der Amidteil den Rest -CO-NR4Rs oder -CO-NH2),, bedeutet (wobei n, R4 und R5 obige Bedeutung besitzen), oder (ix) -CO-ThrOR3 oder CO-SerOR3 (wobei R3 obige Bedeutung besitzt); (x) -CO-NH-(CH2)k-OH (worin k eine ganze Zahl zwischen 2 und 6 bedeutet), oder (iii) H-Ala-NH-; H-Tyr-NH-; H-Cys-NH-; H-Val-NH-; H-Lys-NH-; H- (α -amino-isobutyryl) -NH-; H-Phe-NH-; (iv) NH2-NH-CO-NH-; (v) C, H5 NH-CO-Gly-NH-; H-Ala-Gly-NH-; H-Val-Gly-NH-; H-a -phenyl-Gly-NH-; (vi) R2-A-CO-NH-, where R2 is lower alkyl, phenyl or Phenyl which is substituted by halogen, hydroxy, amino, lower alkyl or lower alkoxy, A for a direct bond Alkylene radicals each having up to 6 carbon atoms or are -NH-, (vii) R2-Ala-NH-; R2-Ala-Gly-NH-; wherein R2 has the above meaning, (viii) C6H5 A1 CO-M-NH-, wherein Al is an alkylene radical with up to 6 carbon atoms and -M- - (mono or di-Hal) -Phe-, -Gly- or -Ala- means, (ix) T- (mono- or di-Hal) -Phe-NH-, where T- for H-, H-Val- or benzoyl-, (x) (CHECH to au to CO-L-NH, where Al has the above meaning and -L- for -Val-, -Val- (mono- or di- Hal) -Phe-, <- Phenyl-Gly- and n for an integer between 4 and 10, means B stands for H or both B stands for a direct bond between the S atoms, X for -Lys-, -Nle- or -Cys- and Y stands for -Asn-, -Gln- or -Thr- and Z for the radicals (i) H; (ii) COOH; (iii) COOR3 (where R3 is a lower alkyl group); (iv) -CO-NR4Rs (where R4 and R5 are independently hydrogen or a lower alkyl group); (v) -CON3CH2) n, (where n has the above meaning); (vi) CH2OH; (vii) -CO-asparagineol; -CO-Leucinol; -CO-Isoleucinol; -CO-valinol; -CO-norleucinol; -CO-glutaminol; -CO-threoninol; (viii) -CO-Leu; -COSer; -CO-Iso-Leu; CO-Val and their corresponding amides, in which the amide part denotes the radical -CO-NR4Rs or -CO-NH2) ,, (where n, R4 and R5 have the above meanings), or (ix) -CO-ThrOR3 or CO-SerOR3 (where R3 has the above meaning); (x) -CO-NH- (CH2) k-OH (where k is an integer between 2 and 6), or

(worin 11 und 12 unabhängig voneinander eine ganze Zahl zwischen 1 und 6 bedeutet); (xi) -CO- < O; (xii) -CO-NH-R6 (worin R6 einen 5- oder 6gliedrigen gesättigten heterocyclischen Ring bedeutet, der ein Sauerstoffatom als Ringglied enthält, oder einen 5- oder 6gliedrigen Lactonring bedeutet) stehen, wobei in der Formel I die Radikale R1, X, Y und Z wie auch bei den übrigen Einheiten der Peptidsequenz wenigstens eine Einheit in der D-Form vorliegen kann, wobei, wenn X Lys und Y Asn bedeuten und alle übrigen Einheiten der Peptidsequenz 3 bis 14 in der D- oder L-Form vorliegen und wenn (i) R1 H-Ala-Gly-NH- oder H-(D)-Ala-Gly-NH- bedeuten, Z nicht für COOH, COOR3, CH2OH oder CONR4Rs stehen kann oder, wenn (ii) R1 H, NH2 oder H-(D)-Ala-Gly-NH- bedeutet, Z nicht für H, COOH, CONR4Rs oder CONzcH2h oder 5 stehen kann oder, wenn (iii) R1 H-(cc-amino-isobutyryl)-NH- oder H-(D)-Ala-NH- bedeutet, Z nicht für H oder COOH stehen kann oder, wenn (iv) R1 H-Ala-Gly-NH- bedeutet, Z nicht für H stehen kann oder, wenn (v) R1 H-Ala-NH, oder R2,-CO-NH- bedeutet, (wobei Rz' für niederes Alkyl oder unsubstituiertes Phenyl steht), Z nicht für COOH stehen kann und wobei, wenn R1 H-Cys-NH oder H-(D)-Cys-NH und/oder X-Cys- oder -(D)-Cys bedeuten, B-B nicht für eine direkte Bindung stehen kann, sowie Säureadditionssalze dieser Verbindungen, dadurch gekennzeichnet, dass man zwei Peptideinheiten, von denen jede mindestens eine Aminosäure in geschützter oder ungeschützter Form enthält, durch eine Amidbindung miteinander verknüpft, wobei die Peptidbindung in der Weise erfolgen soll, dass die in der Formel I enthaltene Aminosäuresequenz hergestellt wird und anschliessend die vorhandenen Schutzgruppen entfernt und gegebenenfalls die so erhaltenen Peptide in ihre Säureadditionssalze überführt. (wherein 11 and 12 are independently an integer between 1 and 6); (xi) -CO- <O; (xii) -CO-NH-R6 (in which R6 denotes a 5- or 6-membered saturated heterocyclic ring which contains an oxygen atom as a ring member, or denotes a 5- or 6-membered lactone ring), where in the formula I the radicals R1, X , Y and Z as well as with the other units of the peptide sequence at least one unit can be in the D-form, where, when X is Lys and Y Asn and all other units of the peptide sequence 3 to 14 are in the D- or L-form and when (i) R1 H-Ala-Gly-NH- or H- (D) -Ala-Gly-NH- mean, Z cannot stand for COOH, COOR3, CH2OH or CONR4Rs or, if (ii) R1 is H, NH2 or H- (D) -Ala-Gly-NH-, Z cannot stand for H, COOH, CONR4Rs or CONzcH2h or 5 or if (iii) R1 H- (cc-amino-isobutyryl) -NH- or H- (D) -Ala-NH- means Z cannot represent H or COOH or, if (iv) R1 denotes H-Ala-Gly-NH-, Z cannot represent H or, if (v) R1 denotes H-Ala-NH, or R2, -CO-NH-, (where Rz 'denotes lower alkyl or unsubstituted Phenyl), Z cannot stand for COOH and where, when R1 stands for H-Cys-NH or H- (D) -Cys-NH and / or X-Cys- or - (D) -Cys, BB cannot stand for a direct bond , as well as acid addition salts of these compounds, characterized in that two peptide units, each of which contains at least one amino acid in protected or unprotected form, are linked by an amide bond, the peptide bond being made in such a way that the amino acid sequence contained in formula I is prepared and then the protective groups present are removed and, if appropriate, the peptides thus obtained are converted into their acid addition salts.

2. Verfahren nach Patentanspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der Formel 1, worin B für Wasserstoff steht, zu einer Verbindung der Formel I, worin B-B eine direkte Bindung bedeutet, oxidiert. 2. The method according to claim 1, characterized in that a compound of formula 1, in which B is hydrogen, is oxidized to a compound of formula I in which B-B is a direct bond.

3. Verwendung der nach dem Verfahren gemäss Patentanspruch 1 erhaltenen Polypeptide der Formel I zur Herstellung von Komplexen dieser Verbindungen, dadurch gekennzeichnet, dass man die Polypeptide der Formel I mit komplexbildenden anorganischen Metallverbindungen oder organischen höhermolekularen Verbindungen umsetzt. 3. Use of the polypeptides of the formula I obtained by the process according to claim 1 for the preparation of complexes of these compounds, characterized in that the polypeptides of the formula I are reacted with complex-forming inorganic metal compounds or organic compounds of higher molecular weight.

Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung neuer Verbindungen der Formel 1, The present invention relates to a process for the preparation of new compounds of formula 1,

worin R, (i) H. wherein R, (i) H.

(ii) NH2, (iii) H-Ala-NH-: H-Tyr-NH-: H-Cys-NH- H-Val-NH-; H-Lys-NH-; H-(a-amino-isobutyryl)-NH- H-Phe-NH-: (iv) HN2-NH-CO-NH-; (v) C6H5 NH-CO-Gly-NH-; H-Ala-Gly-NH-; H-Val-Gly-NH-: H-α-Phenyl-Gly-NH-: (vi) R2-A-CO-Nll-, worin R2 für niederes Alkyl, Phenyl oder Phenyl. das durch Halogen, Hydroxy, Amino, niederes Alkyl oder niederes Alkoxy substi tuiert ist, A für eine direkte Bindung, ein Alkylenradikal mit jeweils bis zu 6 Kohlenstoff atomen oder für -NH- stehen, (vii) R2-Ala-NH-: R2-Ala-Gly-NH-; worin R2 obige Bedeutung hat. (ii) NH2, (iii) H-Ala-NH-: H-Tyr-NH-: H-Cys-NH- H-Val-NH-; H-Lys-NH-; H- (α-amino-isobutyryl) -NH- H-Phe-NH-: (iv) HN2-NH-CO-NH-; (v) C6H5 NH-CO-Gly-NH-; H-Ala-Gly-NH-; H-Val-Gly-NH-: H-α-phenyl-Gly-NH-: (vi) R2-A-CO-NII-, where R2 is lower alkyl, phenyl or Phenyl. which is substituted by halogen, hydroxy, amino, lower alkyl or lower alkoxy, A for a direct bond Alkylene radicals each with up to 6 carbon atoms or stand for -NH-, (vii) R2-Ala-NH-: R2-Ala-Gly-NH-; where R2 has the above meaning.

(viii) C6H5 Al CO-M-NH-, worin A' für einen Alkylenradikal mit bis zu 6 Kohlenstoffatomen steht und -M- -(mono oder di-Hal)-Phe-, -Gly- oder -Ala- bedeutet, (ix) T-(mono- oder di-Hal)-Phe-NH-, worin T- für H-, H-Val- oder Benzoyl- steht, (x) (CH2)nCH Al CO-L-NH, worin Al obige Bedeutung hat und -L- für -Val-, -Val-(mono- oder di-Hal)-Phe-, -α- Phenyl-Gly- und n für eine ganze Zahl zwischen 4 und 10 stehen, bedeutet, B für H oder beide B für eine direkte Bindung zwischen den S-Atomen steht, X für -Lys-, -Nle- oder -Cys- und Y für -Asn-, -Gln- oder -Thr- stehen und Z für die Reste (i) H: (ii) COOH; (iii) COOR3 (wobei R3 eine niedere Alkylgruppe bedeutet); (iv) -CO-NR4Rs (wobei R4 und R5 unabhängig voneinander Wasserstoff oder eine niedere Alkylgruppe bedeuten); (v) -CONnCH2)n, (wobei n obige Bedeutung besitzt): (vi) CH2OH; (vii) -CO-Asparaginol: -CO-Leucinol: -CO-lsoleucinol; -CO-Valinol: -CO-Norleucinol: -CO-Glutaminol; -CO-Threoninol; (viii) WO-Leu: -CO-Ser; -CO-lso-Leu; -CO-Val und ihre entsprechende Amide, worin der Amidteil den Rest -CO-NR4Rs oder -CO-N5CH2)n, bedeutet (wobei n, R4 und R5 obige Bedeutung besitzen), oder (ix) -CO-ThrOR3 oder -CO-Ser OR3, (wobei R3 obige Bedeutung besitzt); (x) -CO-NH-(CH2)k-OH (worin k eine ganze Zahl zwischen 2 und 6 bedeutet), oder (viii) C6H5 Al CO-M-NH-, where A 'is an alkylene radical with up to 6 carbon atoms and -M- - (mono or di-Hal) -Phe-, -Gly- or -Ala- means, (ix) T- (mono- or di-Hal) -Phe-NH-, where T- represents H-, H-Val- or benzoyl-, (x) (CH2) nCH Al CO-L-NH, where Al has the above meaning and -L- stands for -Val-, -Val- (mono- or di- Hal) -Phe-, -α-phenyl-Gly- and n for an integer between 4 and 10, means B stands for H or both B stands for a direct bond between the S atoms, X for -Lys-, -Nle- or -Cys- and Y stands for -Asn-, -Gln- or -Thr- and Z for the radicals (i) H: (ii) COOH; (iii) COOR3 (where R3 is a lower alkyl group); (iv) -CO-NR4Rs (where R4 and R5 are independently hydrogen or a lower alkyl group); (v) -CONnCH2) n, (where n has the above meaning): (vi) CH2OH; (vii) -CO-Asparaginol: -CO-Leucinol: -CO-Isoleucinol; -CO-Valinol: -CO-Norleucinol: -CO-Glutaminol; -CO-threoninol; (viii) WO-Leu: -CO-Ser; -CO-Iso-Leu; -CO-Val and their corresponding amides, in which the amide part denotes the radical -CO-NR4Rs or -CO-N5CH2) n, (where n, R4 and R5 have the same meaning), or (ix) -CO-ThrOR3 or -CO -Ser OR3, (where R3 has the above meaning); (x) -CO-NH- (CH2) k-OH (where k is an integer between 2 and 6), or

(worin 11 und 12 unabhängig voneinander eine ganze Zahl zwischen 1 und 6 bedeuten); (xi) XO- O; (xii) -CO-NH-R, (worin R6 einen 5- oder 6gliedrigen gesättigten heterocyclischen Ring bedeutet, der ein Sauerstoffatom als Ringglied enthält, oder einen 5- oder 6gliedrigen Lactonring bedeutet) stehen, wobei in der Formel I die Radikale R1, X, Y und Z wie auch bei den übrigen Einheiten der Peptidsequenz wenigstens eine Einheit in der D-Form vorliegen kann, wobei wenn X Lys und Y Asn bedeuten und alle übrigen Einheiten der Peptidsequenz 3 bis 14 in der D- oder L-Form vorliegen, und wenn (i) R1 H-Ala-Gly-NH- oder H-(D)-Ala-Gly-NH- bedeu ten. (wherein 11 and 12 are independently an integer between 1 and 6); (xi) XO-O; (xii) -CO-NH-R, (in which R6 denotes a 5- or 6-membered saturated heterocyclic ring which contains an oxygen atom as a ring member, or denotes a 5- or 6-membered lactone ring), where in the formula I the radicals R1, X, Y and Z, as well as the other units of the peptide sequence, at least one unit can be in the D form, where when X is Lys and Y Asn and all other units of the peptide sequence 3 to 14 are in the D or L form , and when (i) R1 H-Ala-Gly-NH- or H- (D) -Ala-Gly-NH- mean.

Z nicht für COOH, COOR3, CH2OH oder CONR4Rs stehen kann oder, wenn (ii) Rl H, NH2 oder H-(D)-Ala-Gly-NH- bedeutet, Z nicht für H, COOH, CONR4Rs oder CONCH2)4 oder 5 stehen kann oder, wenn (iii) R1 H-(c(-amino-isobutyryl)-NH- oder H;(D)-Ala-NH bedeutet, Z nicht für H oder COOH stehen kann oder, wenn (iv) Rl H-Ala-Gly-NH- bedeutet, Z nicht für H stehen kann oder, wenn (v) R1 H-Ala-NH-, oder R2'-CO-NH- bedeutet, (wobei R2' für niederes Alkyl oder unsubstituiertes Phenyl steht), Z nicht für COOH stehen kann, und wobei, wenn R1 H-Cys-NH oder H-(D)-Cys-NH und/oder X-Cys- oder -(D)-Cys bedeuten, B-B nicht für eine direkte Bindung stehen kann. Z cannot stand for COOH, COOR3, CH2OH or CONR4Rs or, if (ii) Rl is H, NH2 or H- (D) -Ala-Gly-NH-, Z cannot represent H, COOH, CONR4Rs or CONCH2) 4 or 5 or, if (iii) R1 denotes H- (c (-amino-isobutyryl) -NH- or H; (D) -Ala-NH, Z cannot stand for H or COOH or, if (iv) Rl is H-Ala-Gly-NH-, Z cannot represent H or, if (v) R1 denotes H-Ala-NH-, or R2'-CO-NH-, (where R2 'denotes lower alkyl or unsubstituted Phenyl), Z cannot stand for COOH, and where, when R1 stands for H-Cys-NH or H- (D) -Cys-NH and / or X-Cys- or - (D) -Cys, BB does not stand for a direct bond can.

Somatostatin-Derivate der Formel 1, worin X Lys und Y Asn bedeuten und R1 und Z die im obigen Disclaimer angegebenen Bedeutungen haben, wurden beansprucht in dem Schweizer Patent 601 193 und in den deutschen Offenlegungsschriften 2 416 048, 2 431 776 und 2 458 135. Somatostatin derivatives of the formula 1, in which X are Lys and Y Asn and R1 and Z have the meanings given in the above disclaimer, were claimed in Swiss Patent 601 193 and in German Offenlegungsschriften 2,416,048, 2,431,776 and 2,458,135 .

Halogen bedeutet Brom, Fluor und vorzugsweise Chlor. Halogen means bromine, fluorine and preferably chlorine.

Die Bedeutung niederes Alkyl oder niederes Alkoxy umfasst bis zu 6 Kohlenstoffatome, bedeutet aber vorzugsweise 2 oder 1 Kohlenstoffatome. The meaning lower alkyl or lower alkoxy includes up to 6 carbon atoms, but preferably means 2 or 1 carbon atoms.

Bedeutet R2 substituiertes Phenyl, so ist dieses vorzugsweise mono- oder di-substituiert, insbesondere aber monosubstituiert. Ein Substituent befindet sich vorzugsweise in der Para Stellung. If R2 is substituted phenyl, this is preferably mono- or di-substituted, but in particular monosubstituted. One substituent is preferably in the para position.

Im Falle Al oder wenn A Alkylen bedeutet, enthalten diese vorzugsweise bis zu 3 Kohlenstoffatome. In bezug auf die Bedeutung (viii) bedeutet A' vorzugsweise Trimethylen. In bezug auf die Bedeutung (x) bedeutet A vorzugsweise Methylen. In the case of Al or when A is alkylene, these preferably contain up to 3 carbon atoms. With respect to the meaning (viii), A 'is preferably trimethylene. With regard to the meaning (x), A is preferably methylene.

Beispiele von -(mono- oder di-Hal)-Phe-Teilen sind -(2Cl)Phe: -(3Cl)Phe-: -(4Cl)Phe- oder -(3,4-diCl)Phe-. n bedeutet vorzugsweise eine ganze Zahl 5 oder 4. R1 bedeutet vorzugsweise z. B. H-(mono oder di-Hal)-Phe-NH-, Phenyl-CO-NH-, H-Val-(mono- oder di-Hal)-Phe-NH-, Phenylbutyryl-NH- oder ein Rest enthaltend -(D)-Ala, Benzoyl (mono- oder di-Hal)-Phe-NH-. Cyclohexylacetyl < -phenyl- Gly-NH-, Cyclohexylacetyl-Val-(mono- oder di-Hal) Phe-NH-, Cyclohexylacetyl-Val-NH-, H-Val-NH, H, H (a-amino-isobutyryl)-NH-. H-(mono- oder di-Hal) Phe-NH-: X bedeutet vorzugsweise Lys und insbesondere Nle, Y bedeutet vorzugsweise Gln und insbesondere Asn. k bedeutet vorzugsweise 2 oder 3. Examples of - (mono- or di-Hal) -Phe parts are - (2Cl) Phe: - (3Cl) Phe-: - (4Cl) Phe- or - (3,4-diCl) Phe-. n preferably denotes an integer 5 or 4. R1 preferably denotes e.g. B. H- (mono or di-Hal) -Phe-NH-, phenyl-CO-NH-, H-Val- (mono- or di-Hal) -Phe-NH-, phenylbutyryl-NH- or containing a radical - (D) -Ala, benzoyl (mono- or di-Hal) -Phe-NH-. Cyclohexylacetyl <-phenyl- Gly-NH-, Cyclohexylacetyl-Val- (mono- or di-Hal) Phe-NH-, Cyclohexylacetyl-Val-NH-, H-Val-NH, H, H (a-amino-isobutyryl) -NH-. H- (mono- or di-Hal) Phe-NH-: X preferably denotes Lys and in particular Nle, Y preferably denotes Gln and in particular Asn. k preferably denotes 2 or 3.

Wenn Z die Bedeutung (x) oder (xii) besitzt, umfasst diese vorzugsweise eine -CO-NH-CH-CH2-O- Sequenz, und bedeutet zum Beispiel -CO.NH.CH(CH2.OH)CH2.CH2.CH2.OH; CO-NH-CH(CH2OH) CH2 CH2 . OH; If Z has the meaning (x) or (xii), this preferably comprises a -CO-NH-CH-CH2-O- sequence and means, for example, -CO.NH.CH (CH2.OH) CH2.CH2.CH2 .OH; CO-NH-CH (CH2OH) CH2 CH2. OH;

Z bedeutet vorzugsweise nicht H, CH2OH, COOH oder COOR3. Z preferably does not mean H, CH2OH, COOH or COOR3.

Bei der oben angegebenen vorzugsweisen Bedeutung liegen die Aminosäuren sowohl in der D- wie auch in der L-Form vor. In the preferred meaning given above, the amino acids are present in both the D and L form.

Die vorliegende Erfindung umfasst Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der obigen Formel. Sie können nach für die Synthese von Verbindungen dieser Art allgemein be kannten Methoden oder entsprechender chemischer Äquivalente wie folgt hergestellt werden: a) indem man mindestens eine Schutzgruppe, die in einer geschützten Verbindung mit der Formel I angegebenen Sequenz vorhanden ist, entfernt, oder b) indem man zwei Peptideinheiten, von denen jede mindestens eine Aminosäure in geschützter oder ungeschützter Form enthält, durch eine Amidbindung miteinander verknüpft, wobei die Peptidbindung in der Weise erfolgen soll, dass die in der Formel 1 enthaltene Aminosäuresequenz hergestellt wird und anschliessend gegebenenfalls die Verfahrensstufe a) ausgeführt wird, oder c) indem man eine Verbindung der Formel I, worin B für Wasserstoff steht. oxydiert, wobei eine Verbindung der Formel 1 erhalten wird, worin B-B eine direkte Bindung bedeutet. The present invention includes methods of making compounds of the above formula. They can be prepared by methods generally known for the synthesis of compounds of this type or by corresponding chemical equivalents as follows: a) by removing at least one protective group that is present in a protected compound having the formula I, or b) by linking two peptide units, each of which contains at least one amino acid in protected or unprotected form, with one another by an amide bond, the peptide bond being carried out in such a way that the amino acid sequence contained in formula 1 is produced and then, if appropriate, process step a) is carried out, or c) by adding a compound of the formula I in which B is hydrogen. oxidized to give a compound of formula 1 wherein B-B is a direct bond.

Es handelt sich hierbei um in der Peptidchemie an sich bekannten Methoden; sie können analog zu denen in den nachstehenden Beispielen beschriebenen Verfahren ausgeführt werden. These are methods known per se in peptide chemistry; they can be carried out analogously to the processes described in the examples below.

Insofern die Herstellung der Ausgangsprodukte nicht besonders beschrieben wird, sind diese Verbindungen bekannt oder können nach an sich bekannten Methoden hergestellt und gereinigt werden. Ebenso können diese analog zu denen in den Beispielen beschriebenen Verfahren hergestellt werden. Insofar as the preparation of the starting products is not specifically described, these compounds are known or can be prepared and purified by methods known per se. These can also be prepared analogously to the processes described in the examples.

Die Verbindungen können in Salzform oder in Form ihrer Komplexe vorliegen. The compounds can be in salt form or in the form of their complexes.

Als Säureadditionssalze sind besonders Salz von der Salzsäure und Essigsäure zu nennen. Salts of hydrochloric acid and acetic acid are particularly to be mentioned as acid addition salts.

Unter Komplexen sind die komplexartigen bekannten in der Art in ihrer Struktur noch nicht abgeklärten Verbindungen zu verstehen, die beim Zusatz gewisser anorganischer oder organischer Stoffe zu den Verbindungen der Formel I entstehen. Solche anorganische Stoffe sind Verbindungen, die sich von Metallen wie Calcium, Magnesium, Aluminium, Cobalt und insbesondere von Zink ableiten, vor allem schwerlösliche Salze, wie Phosphate, Pyrophosphate und Polyphosphate sowie Hydroxyde dieser Metalle, ferner Alkalimetallpolyphosphate. Complexes are to be understood as meaning the complex-like compounds which have not yet been clarified in terms of their structure and which are formed when certain inorganic or organic substances are added to the compounds of the formula I. Such inorganic substances are compounds which are derived from metals such as calcium, magnesium, aluminum, cobalt and, in particular, from zinc, especially sparingly soluble salts such as phosphates, pyrophosphates and polyphosphates and hydroxides of these metals, and also alkali metal polyphosphates.

Organische Stoffe sind beispielsweise nicht antigene Gelatine, z. B. Oxypolygelatine, Polyvinylpyrrolidon und Carboxyme thylcellulose, ferner Sulfonsäure- oder Phosphorsäureester von Alginsäure, Dextran. Polyphenolen und Polyalkoholen, vor allem Polyphloretinphosphat und Phytinsäure, sowie Polymerisate von Aminosäuren. z. B. Protamin, Polyglutaminsäure oder Polyasparaginsäure. Organic substances are, for example, non-antigenic gelatin, e.g. B. Oxypolygelatine, polyvinylpyrrolidone and Carboxyme thylcellulose, also sulfonic acid or phosphoric acid esters of alginic acid, dextran. Polyphenols and polyalcohols, especially polyphloretin phosphate and phytic acid, and polymers of amino acids. z. B. protamine, polyglutamic acid or polyaspartic acid.

Die Verbindungen zeichnen sich durch pharmakologische Aktivität aus. Insbesondere bewirken sie eine Hemmung der GH-Sekretion. Sie finden deshalb Verwendung beim Diabetes Mellitus. bei der Behandlung der Acromegalie, der Angiopathie sowie beim Einsatz dieser Verbindungen zu diagnostischen Zwecken. The compounds are distinguished by pharmacological activity. In particular, they inhibit GH secretion. They are therefore used in diabetes mellitus. in the treatment of acromegaly, angiopathy and in the use of these compounds for diagnostic purposes.

Die erfindungsgemäss hergestellten Verbindungen können in pharmazeutisch akzeptabler Salzform oder in Form ihrer Komplexe verabreicht werden. Solche Salz- oder Komplexformen können nach an sich bekannten Methoden aus den freien Basen oder umgekehrt hergestellt werden. Die erfindungsgemäss erhaltenen Verbindungen können als pharmazeutische Präparate enthaltend eine Verbindung der Formel I in pharmazeutisch akzeptabler Salz- oder Komplexform und in Mischung mit einem Träger oder einem Lösungsmittel verwendet werden. Solche pharmazeutische Präparate können als Tabletten oder als Injektions- oder Infusionslösungen vorlie en. Eine pharmazeutische Lösung ist vorzugsweise bei einem pH zwischen 5 und 8 gepuffert. The compounds prepared according to the invention can be administered in pharmaceutically acceptable salt form or in the form of their complexes. Such salt or complex forms can be prepared from the free bases or vice versa by methods known per se. The compounds obtained according to the invention can be used as pharmaceutical preparations containing a compound of the formula I in pharmaceutically acceptable salt or complex form and as a mixture with a carrier or a solvent. Such pharmaceutical preparations can be present as tablets or as injection or infusion solutions. A pharmaceutical solution is preferably buffered at a pH between 5 and 8.

In den nachfolgenden Beispielen erfolgen alle Temperaturangaben in Celsiusgraden und sind unkorrigiert. In the following examples, all temperatures are given in degrees Celsius and are uncorrected.

Es werden folgende Ahkürzungen verwendet: Cbo = Carl ohenzyloxy M Bzl = p-Methoxybenzyl labu = H-(a-amino-isobutyryl) (4Cl)Phe =p-Chlorophenylal = p-Chlorophenylalanyl ACOH = Essigsäure OCP = Trichlorphenylester Trp = L-Tryptophanyl OSu = O-Succinimid Alle Endverbindungen sind in Hydrochloridsalzform charakterisiert. Sofern keine anderen Angaben gemacht werden, liegen die Aminosäuren in der L-Form vor. The following abbreviations are used: Cbo = Carl ohenzyloxy M Bzl = p-methoxybenzyl labu = H- (a-amino-isobutyryl) (4Cl) Phe = p-chlorophenylal = p-chlorophenylalanyl ACOH = acetic acid OCP = trichlorophenyl ester Trp = L-tryptophanyl OSu = O-succinimide All end compounds are characterized in the hydrochloride salt form. Unless otherwise stated, the amino acids are in the L-form.

In der nachfolgenden Tabelle bezieht sich [a in20 auf ACOH l Wo v/v (c = 1), wenn nichts anderes gesagt wird. In the table below, [a in20 refers to ACOH l Wo v / v (c = 1), unless otherwise stated.

(1) bezieht sich auf ACOH 20% viv (c = 1) (2) bezieht sich auf ACOH 1% v/v (c = 0,25) (3) bezieht sich auf ACOH 30% v/v (c = 1) (4) bezieht sich auf ACOH 40% v/v (c = 1) (5) bezieht sich auf ACOH 50% v/v (c = 1) Beispiel 1 H-(4Cl)Phe-Cys-Lys-Asn-Phe-Trp-Lys-Thr-Phe- Thr-Ser-Cys-OH Man löst 480 mg Cbo-(4Cl)Phe-Cys(MBzl)-Lys(BOC) Asn-Phe-Phe-Trp-Lys(Cbo )-Thr-Phe-Thr-Ser Cys(MBzl)-OBzl, 410 mg H-Try-OH, 320 mg H-Cys OH HCI und 1,2 ml Thioanisol bei 0 C in 5 ml Trifluoressigsäure und gibt 10 ml Bortris (trifluoracetat) 2molar in Trifluoressigsäure hinzu.Man schüttelt die Mischung 1 Stunde bei Raumtemperatur, kühlt ab und versetzt mit 50 ml tert.-Butylalkohol, engt im Vakuum ein und versetzt den Rückstand mit einer Lösung von 0,01m 2-Mercapto-äthanol in Äther. Anschliessend wird zentrifugiert. Der feste Rückstand wird in wenig 10% Essigsäure gelöst und durch Chromatographie an Sephadex G 25 im System 0,01m Mercaptoäthanol in 10% Essigsäure gereinigt. Der Rückstand kann auch in 30% Essigsäure oder in einem Gemisch von n-Butanol/Eisessig/Wasser (z. B. 4:2:1) gelöst und durch Chromatographie an Sephadex G 25 im System 0,01m Mercaptoäthanol in 30% Essigsäure bzw. im Gemisch Butanol/Eisessig/Wasser gereinigt werden. (1) relates to ACOH 20% viv (c = 1) (2) relates to ACOH 1% v / v (c = 0.25) (3) relates to ACOH 30% v / v (c = 1 ) (4) relates to ACOH 40% v / v (c = 1) (5) relates to ACOH 50% v / v (c = 1) Example 1 H- (4Cl) Phe-Cys-Lys-Asn-Phe-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys-OH 480 mg of Cbo- (4Cl) Phe-Cys (MBzl) -Lys (BOC) Asn-Phe-Phe-Trp-Lys (Cbo) -Thr-Phe-Thr-Ser Cys (MBzl) -OBzl, 410 mg of H are dissolved -Try-OH, 320 mg H-Cys OH HCI and 1.2 ml thioanisole at 0 C in 5 ml trifluoroacetic acid and add 10 ml Bortris (trifluoroacetate) 2 molar in trifluoroacetic acid. The mixture is shaken for 1 hour at room temperature, cooled and 50 ml of tert-butyl alcohol are added, the mixture is concentrated in vacuo and a solution of 0.01 m 2-mercapto-ethanol in ether is added to the residue. It is then centrifuged. The solid residue is dissolved in a little 10% acetic acid and purified by chromatography on Sephadex G 25 in the system 0.01m mercaptoethanol in 10% acetic acid. The residue can also be dissolved in 30% acetic acid or in a mixture of n-butanol / glacial acetic acid / water (e.g. 4: 2: 1) and by chromatography on Sephadex G 25 in the system 0.01m mercaptoethanol in 30% acetic acid or be cleaned in a mixture of butanol / glacial acetic acid / water.

Die Fraktionen welche das gewünschte Produkt enthalten werden vereinigt, in 0,1n Salzsäure gelöst und lyophilisiert, wobei die Titelverbindung erhalten wird. The fractions containing the desired product are combined, dissolved in 0.1N hydrochloric acid and lyophilized to give the title compound.

Smp. 195 (Zers.); fr1n20 = -20,5 in AcOH (c = 1). M.p. 195 (dec.); fr1n20 = -20.5 in AcOH (c = 1).

Das Ausgangsmaterial wird wie folgt hergestellt: a) Cbo-Lys(BOC)-Asn-Phe-OMe 74,8 g Cbo-Lys(BOC)-ONP werden in einer Lösung von 51 g H-Asn-Phe-OMe HCI und 21 ml Triäthylamin in 300 ml Dimethylformamid umgesetzt. Nach Aufarbeitung entsteht die Titelverbindung. The starting material is prepared as follows: a) Cbo-Lys (BOC) -Asn-Phe-OMe 74.8 g of Cbo-Lys (BOC) -ONP are reacted in a solution of 51 g of H-Asn-Phe-OMe HCI and 21 ml of triethylamine in 300 ml of dimethylformamide. The title compound is obtained after working up.

Smp. 175 ; [am20 = -4,4" in Dimethylformamid (c = 1,0). M.p. 175; [am20 = -4.4 "in dimethylformamide (c = 1.0).

b) H-Lys(BOC)-Asn-Phe-OMe 92 g Cbo-Lys(BOC)-Asn-Phe-OMe werden in einer Lösung von 2 1 Dioxan und 400 ml Wasser suspendiert. Man versetzt mit Palladiumkohle und hydriert unter Normaldruck. b) H-Lys (BOC) -Asn-Phe-OMe 92 g of Cbo-Lys (BOC) -Asn-Phe-OMe are suspended in a solution of 2 l of dioxane and 400 ml of water. Palladium-carbon is added and the mixture is hydrogenated under normal pressure.

Nach Aufarbeitung entsteht die Titelverbindung. The title compound is obtained after working up.

Smp. 122 ; [a120 = -8,3" inDimethylformamid (c = 1,0). M.p. 122; [a120 = -8.3 "in dimethylformamide (c = 1.0).

c) Cbo-(4Cl )Phe-Cys(MBzl) -NH-NH2 20 g H-Cys(MBzl)-OMe CH3SO3H und 7 ml Triäthylamin werden in 120 ml Dimethylformamid gelöst und mit 18,2 g Cbo-(4CI)Phe-ONP versetzt. Man lässt 16 Stunden stehen und engt bei Raumtemperatur ein, wobei Cbo-(4Cl)Phe Cys(M Bzl )-OMe (Smp. 115 ) nach Aufarbeitung erhalten wird. Letzteres löst man in Methanol und gibt Hydrazinhydrat hinzu. Man lässt einen Tag bei Raumtemperatur stehen. Die Titelverbindung erhält man nach Aufarbeitung. c) Cbo- (4Cl) Phe-Cys (MBzl) -NH-NH2 20 g of H-Cys (MBzl) -OMe CH3SO3H and 7 ml of triethylamine are dissolved in 120 ml of dimethylformamide and mixed with 18.2 g of Cbo- (4CI) Phe -ONP offset. The mixture is left to stand for 16 hours and concentrated at room temperature, Cbo- (4Cl) Phe Cys (M Bzl) -OMe (melting point 115) being obtained after work-up. The latter is dissolved in methanol and hydrazine hydrate is added. It is left to stand at room temperature for a day. The title compound is obtained after work-up.

Smp. 158"; [nln20 = -990 in Dimethylformamid (c = 1). 158 "; [nln20 = -990 in dimethylformamide (c = 1).

d) Cbo-(4Cl)Phe-Cys(MBzl)-Lys(BOC)-Asn-Phe-NH-NH2 6 g Cbo-(4Cl)Phe-Cys(MBzl)-NH-NH2 werden in 80 ml Dimethylformamid gelöst, auf -20" abgekühlt, mit 6 ml 5,3n Salzsäure in Dioxan, dann mit 1,3 ml tert.-Butylnitrit versetzt und während 10 Minuten bei 200 gerührt. Nach Zugabe von 5.5 ml Triäthylamin bei 200 versetzt man mit 8,4 g H Lys(BOC)-Asn-Phe-OMe, lässt über Nacht bei 0 stehen, engt ein, versetzt mit Wasser bei 0 bis pH 2. Der Niederschlag wird abfiltriert und mit Wasser gewaschen. Das entstandene Cbo-(4Cl)Phe-Cys(MBzl)-Lys(BOC)-Asn-Phe-OMe wird aus Methanol umkristallisiert, hierauf in Dimethylformamid gelöst und mit 7 ml Hydrazin-Hydrat versetzt.Man lässt einen Tag bei Raumtemperatur stehen, engt ein und kristallisiert den Rückstand aus Methanol um, wobei die Titelverbindung erhalten wird. d) Cbo- (4Cl) -Phe-Cys (MBzl) -Lys (BOC) -Asn-Phe-NH-NH2 6 g of Cbo- (4Cl) Phe-Cys (MBzl) -NH-NH2 are dissolved in 80 ml of dimethylformamide, cooled to -20 ", with 6 ml of 5.3N hydrochloric acid in dioxane, then with 1.3 ml of tert-butyl nitrite added and stirred for 10 minutes at 200. After adding 5.5 ml of triethylamine at 200, 8.4 g of H Lys (BOC) -Asn-Phe-OMe are added, the mixture is left to stand at 0 overnight, concentrated, and water is added 0 to pH 2. The precipitate is filtered off and washed with water Cbo- (4Cl) Phe-Cys (MBzl) -Lys (BOC) -Asn-Phe-OMe becomes from Recrystallized methanol, then dissolved in dimethylformamide and treated with 7 ml of hydrazine hydrate. The mixture is left to stand at room temperature for one day, concentrated and the residue is recrystallized from methanol, the title compound being obtained.

Smp. 260 : frL]020 = -23Q in Dimethylformamid (c = 1,0). M.p. 260: frL] 020 = -23Q in dimethylformamide (c = 1.0).

e) BOC-Lys(Cbo)-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys(MBzl)-OBzl Auf analoge Weise wie in Absatz d) werden 2,3 g BOC Lys(Cbo)-Thr-Phe-Thr-Ser-NH-NH2 mit 1,86 g H Cys(MBzl)-OBzl umgesetzt; man erhält die Titelverbindung, Smp. 169 ; [a]n20 = -16 in Dimethylformamid (c = 1). e) BOC-Lys (Cbo) -Thr-Phe-Thr-Ser-Cys (MBzl) -OBzl In a manner analogous to paragraph d), 2.3 g of BOC Lys (Cbo) -Thr-Phe-Thr-Ser-NH-NH2 with 1.86 g of H. Cys (MBzl) -OBzl implemented; one obtains the title compound, M.p. 169; [a] n20 = -16 in dimethylformamide (c = 1).

f) BOC-Trp-Lys(Cbo)-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys(MBzl)-OBzl 2,3 g BOC-Lys(Cbo)-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys(MBzl)-OBzl werden in einem Gemisch von 10 ml Methylenchlorid und 6 ml Trifluoressigsäure gelöst und 25 Minuten bei Raumtem peratur stehengelassen. Anschliessend wird H-Lys(Cbo)-Thr Phe-Thr-Ser-Cys(MBzl)-OBzl Trifluoracetat mit Äther gefällt, abfiltriert und gut mit Äther ausgewaschen. Der Rückstand wird in 7 ml Dimethylformamid gelöst, mit 1,5 g BOC Trp-OCP und mit 0,3 ml Triäthylamin versetzt und über Nacht bei Raumtemperatur stehengelassen. Das Produkt wird mit Äther/Essigester (1:1) ausgefällt und filtriert. Man trocknet und erhält die Titelverbindung. f) BOC-Trp-Lys (Cbo) -Thr-Phe-Thr-Ser-Cys (MBzl) -OBzl 2.3 g of BOC-Lys (Cbo) -Thr-Phe-Thr-Ser-Cys (MBzl) -OBzl are in a mixture of 10 ml of methylene chloride and 6 ml of trifluoroacetic acid dissolved and left to stand for 25 minutes at room temperature. Then H-Lys (Cbo) -Thr Phe-Thr-Ser-Cys (MBzl) -OBzl trifluoroacetate precipitated with ether, filtered off and washed out well with ether. The residue is dissolved in 7 ml of dimethylformamide, 1.5 g of BOC Trp-OCP and 0.3 ml of triethylamine are added and the mixture is left to stand overnight at room temperature. The product is precipitated with ether / ethyl acetate (1: 1) and filtered. It is dried and the title compound is obtained.

Smp. 167 : [alD20 = -17,5" in Dimethylformamid (c = 1). M.p. 167: [alD20 = -17.5 "in dimethylformamide (c = 1).

g) BOC-Phe-Trp-Lys(Cbo)-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys(MBzl) OBzl 36 g BOC-Trp-Lys(Cbo)-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys(MBzl) OBzl werden mit 20 g BOC-Phe-ONP auf analoge Weise wie in Absatz f) umgesetzt: man erhält die Titelverbindung. g) BOC-Phe-Trp-Lys (Cbo) -Thr-Phe-Thr-Ser-Cys (MBzl) OBzl 36 g BOC-Trp-Lys (Cbo) -Thr-Phe-Thr-Ser-Cys (MBzl) OBzl are reacted with 20 g of BOC-Phe-ONP in a manner analogous to that in paragraph f): the title compound is obtained.

Smp. 210 : [alD20 = 150 in Dimethylformamid (c = 1,0). M.p. 210: [alD20 = 150 in dimethylformamide (c = 1.0).

h) Cbo-(4Cl)Phe-Cys(MBzl)-Lys(BOC)-Asn-Phe-Phe-Trp Lys(Cbo)-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys(MBzl)-OBzl 1,5 gBOC-Phe-Trp-Lys g BOC-Phe-Trp-Lys(Cbo)-Thr-Phe-Thr-Ser- Cys(MBzl)-OBzl werden in 30 ml Methylenchlorid und 30 ml Trifluoressigsäure gelöst. Man lässt 25 Minuten bei Raumtemperatur stehen, dampft im Vakuum ein und fällt mit Äther. h) Cbo- (4Cl) Phe-Cys (MBzl) -Lys (BOC) -Asn-Phe-Phe-Trp Lys (Cbo) -Thr-Phe-Thr-Ser-Cys (MBzl) -OBzl 1.5 g BOC-Phe-Trp-Lys g BOC-Phe-Trp-Lys (Cbo) -Thr-Phe-Thr-Ser-Cys (MBzl) -OBzl are dissolved in 30 ml of methylene chloride and 30 ml of trifluoroacetic acid. The mixture is left to stand at room temperature for 25 minutes, evaporated in vacuo and precipitated with ether.

Nach Filtrieren, Waschen mit Äther und Trocknen erhält man H-Phe-Trp-Lys(Cbo)-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys(MBzl)-OBzl. Trifluoracetat. After filtering, washing with ether and drying, H-Phe-Trp-Lys (Cbo) -Thr-Phe-Thr-Ser-Cys (MBzl) -OBzl is obtained. Trifluoroacetate.

0,9 g Cbo-(4Cl)Phe-Cys(MBzl)-Lys(BOC)-Asn-Phe- NH-NH2 werden in 20 ml Dimethylformamid gelöst, auf -20" abgekühlt und mit 0,6 ml 5,3n Salzsäure in Dioxan, dann 0,1 ml tert.-Butylnitrit versetzt und 15 Minuten bei -20" gerührt. Man gibt 0.7 ml Triäthylamin und 1,5 g H-Phe-Trp Lys(Cbo)-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys(MBzl)-OBzl Trifluoracetat zu. 0.9 g Cbo- (4Cl) Phe-Cys (MBzl) -Lys (BOC) -Asn-Phe- NH-NH2 are dissolved in 20 ml of dimethylformamide, cooled to -20 "and then with 0.6 ml of 5.3N hydrochloric acid in dioxane 0.1 ml of tert-butyl nitrite are added and the mixture is stirred at -20 "for 15 minutes. 0.7 ml of triethylamine and 1.5 g of H-Phe-Trp are added Lys (Cbo) -Thr-Phe-Thr-Ser-Cys (MBzl) -OBzl trifluoroacetate too.

Man lässt über Nacht bei 0 stehen, dampft im Vakuum ein, verrührt mit 100 ml Wasser, filtriert, wäscht den Rück stand mit Wasser, dann mit Methanol, wärmt in Methanol, fil triert und erhält die Titelverbindung. The mixture is left to stand at 0 overnight, evaporated in vacuo, stirred with 100 ml of water, filtered, the residue is washed with water, then with methanol, warmed in methanol, filtered and the title compound is obtained.

Smp. 270 ; [alD20 = -19,30 in Dimethylformamid (c = 1). M.p. 270; [alD20 = -19.30 in dimethylformamide (c = 1).

Auf analoge Weise werden nach Aufbau der entsprechenden geschützten Verbindungen die folgenden Verbindungen der Formel A nach Abspaltung der Schutzgruppen erhalten, P-Phe-Phe-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-Q A In an analogous manner, after the corresponding protected compounds have been built up, the following compounds of the formula A are obtained after the protective groups have been split off: P-Phe-Phe-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-Q A

Beispiel P Q Smp./[cc ]n20 BeiSPieI P Q SmP /[aID Nr. Example P Q Smp./[cc] n20 AtSPieI P Q SmP / [aID No.

A1 ONH-CO-Cys-Lys-Asn Cys-OH 160"/-17.2" A2 ONH-CO-Cys-Lys-Gln Cys-OH 1500/24.60 A3 H-Tyr-Cys-Lys-Asn Cys-OH 160"/-20.0" A4 NH243CO-Cys-Lys-Asn Cys-OH 1700/L19.80 A5 (3(CH2)3-CO-Cys-Lys-Asn Cys-OH 160 /33.1 A6 (3(CH2)3-CO-Gly-Cys-Lys-Asn Cys-OH 170"/-27.7" A7-NH-CO-Gly-Cys-Lys-Asn Cys-OH 160"/-34.3" A8 H-Cys-Cys-Lys-Asn Cys-NH2 160"/-24. 5" A9 H-Cys-Cys-Asn Cys-NH2 1700/23.30 A10 H-Lys-Cys-Lys-Asn Cys-NH2 175 /-97.8 Alt H-(4Cl)Phe-Cys-Nle-Asn Cys-NH2 170"/-22.4" A 12 H-(4Cl)Phe-Cys-Lys-Asn Cys-NH2 175"/-23.2" A13 H-Iabu-Cys-Lys-Asn Cys-NH2 165 /-21.û A14 H-Iabu-Cys-Lys-Thr Cys-NH2 165"/-20.2" A15 CH2)3-CO-(4Cl)Phe- Cys-NH2 160"/-18.7" - Cys-Lys-Asn A1 ONH-CO-Cys-Lys-Asn Cys-OH 160 "/ - 17.2" A2 ONH-CO-Cys-Lys-Gln Cys-OH 1500 / 24.60 A3 H-Tyr-Cys-Lys-Asn Cys-OH 160 " /-20.0 "A4 NH243CO-Cys-Lys-Asn Cys-OH 1700 / L19.80 A5 (3 (CH2) 3-CO-Cys-Lys-Asn Cys-OH 160 /33.1 A6 (3 (CH2) 3-CO -Gly-Cys-Lys-Asn Cys-OH 170 "/ -27.7" A7-NH-CO-Gly-Cys-Lys-Asn Cys-OH 160 "/ -34.3" A8 H-Cys-Cys-Lys-Asn Cys -NH2 160 "/ - 24.5" A9 H-Cys-Cys-Asn Cys-NH2 1700 / 23.30 A10 H-Lys-Cys-Lys-Asn Cys-NH2 175 / -97.8 Alt H- (4Cl) Phe-Cys -Nle-Asn Cys-NH2 170 "/ - 22.4" A 12 H- (4Cl) Phe-Cys-Lys-Asn Cys-NH2 175 "/ - 23.2" A13 H-Iabu-Cys-Lys-Asn Cys-NH2 165 /-21.û A14 H-Iabu-Cys-Lys-Thr Cys-NH2 165 "/ - 20.2" A15 CH2) 3-CO- (4Cl) Phe- Cys-NH2 160 "/ - 18.7" - Cys-Lys- Asn

Beispiel P O Smp. ]DzoiD2 < > Nr. Example P O Smp.] DzoiD2 <> No.

A16(CH2)3-CO-Gly-Cys-N1e-Gln Cys-NH2 155 /-18.7 A 17 (CH2)3-CO-Cys-Lys-Asn Cys-NH2 1450/19.50 A18H-CO-Cys-Lys-Asn Cys-NH2 160"/-25.3" (1) A19H-CO-Cys-Lys-Gln Cys-NH2 135"/-29.5" A20 -N H-CO-Cys-Nle-Asn Cys-NH2 145"/-10.7" A21tNH-CO-Gly-Cys-Nle-GIn Cys-NH2 1500/L13.40 A22 NH2-NH-CO-Cys-Lys-Asn Cys-NH2 130 /-15.8 A23 (/ \ > (CH2)3-CO-(D)Ala-Cys- Cys-NH2 140 /-13.7 Lys-Asn A24 Benzoyl-Cys-Nle-Asn Cys-NH2 1600/34.4 A25 Benzoyl-Cys-Lys-Asn Cys-NH2 155 /-37.9 A26 > 0-(4Cl)Phe-Cys-Nle-Asn Cys-NH2 A27 H-(D)-Ala-Gly-Cys-Lys-Asn Cys-Val-NH2 220"/-47" (2) A28 H-Ala-Gly-Cys-Lys-Asn Cys-NJ 210 /-45 (2) A29 H-(4Cl)Phe-Cys-Nle-Asn Cys-Asparaginol 155"/-22.5" A30 H-labu-Cys-Nle-Asn Cys-Asparaginol 1 S00/M4.30 A31 H-Iabu-Cys-Lys-Asn Cys-Asparaginol 160"/-47.4" A32 H-(D)-Ala-Gly-Cys-Lys-Asn Cys-Asparaginol 150"/-52.7" A33 H-(D)-Ala-Gly-Cys-Nle-Asn Cys-Asparaginol 165"/-49.5" (1) A34 H-(D)-Val-Cys-Lys-Asn Cys-NH2 175 /-47.0 A3 5 H-(a-Phenylglycyl)-Cys-Lys-Asn Cys-NH2 1800 /33 30 A36 H-(D)-Val-(4Cl)Phe-Cys-Lys-Asn Cys-NH2 165 /-30.9 A37 H-(D)-Ala-Cys-Lys-Asn Cys-NH2 A38 H-Cys-Lys-Asn Cys-NH2 180"/-27.5" A3 9 Cyclohexylacetyl-(D)-Val-Cys-Lys- Cys-NH2 1600/19.80 (3) Asn A40 Cyclohexylacetyl-(a -Phenylglycyl)- Cys-NH2 165"/-19.6" (5) Cys-Lys-Asn A4 1 Cyclohexylacetyl-(D)-Val-(4Cl)Phe- Cys-NH2 165"/-23.7" (3) Cys-Lys-Asn A42 Benzoyl-(3,4-dichloro)Phe-Cys-Lys- Cys-NH2 180 /-22.5 (4) Asn A43 Benzoyl-(3,4-dichloro)Phe-Cys-Nle- Cys-NH2 175"/-23.5" (4) Asn A44 H-(D)-Ala-Gly-Cys-Nle-Asn Cys-NH2 160 /-23.9 (4) A45 H-(D)-Phe-Cys-Nle-Asn Cys-NH2 175 /-29.1 (3) A46 H-Phe-Cys-Nle-Asn Cys-NH2 1700/30.80 (3) A47 H-(3Cl)Phe-Cys-Nle-Asn Cys-Asparaginol 165"/-35.0" (3) A48 H-(2Cl)Phe-Cys-Nle-Asn Cys-Asparaginol 170 /29.8 (3) A49 H-(3,4diCl)Phe-Cys-Nle-Asn Cys-Asparaginol 162"/-25.5" (3) CH -C=O l 2 t A50 H-(4Cl)Phe-Cys-Nle-Asn Cy s -N ll - Cti 165"/-17.8" (3) CII A51 H-(4Cl)Phe-Cys-Nle-Asn Cys-NH-[CH2 j2-OH 135 /-38.5 A16 (CH2) 3-CO-Gly-Cys-N1e-Gln Cys-NH2 155 /-18.7 A 17 (CH2) 3-CO-Cys-Lys-Asn Cys-NH2 1450 / 19.50 A18H-CO-Cys-Lys- Asn Cys-NH2 160 "/ - 25.3" (1) A19H-CO-Cys-Lys-Gln Cys-NH2 135 "/ - 29.5" A20 -N H-CO-Cys-Nle-Asn Cys-NH2 145 "/ - 10.7 "A21tNH-CO-Gly-Cys-Nle-GIn Cys-NH2 1500 / L13.40 A22 NH2-NH-CO-Cys-Lys-Asn Cys-NH2 130 /-15.8 A23 (/ \> (CH2) 3- CO- (D) Ala-Cys-Cys-NH2 140 /-13.7 Lys-Asn A24 Benzoyl-Cys-Nle-Asn Cys-NH2 1600 / 34.4 A25 Benzoyl-Cys-Lys-Asn Cys-NH2 155 /-37.9 A26> 0- (4Cl) Phe-Cys-Nle-Asn Cys-NH2 A27 H- (D) -Ala-Gly-Cys-Lys-Asn Cys-Val-NH2 220 "/ - 47" (2) A28 H-Ala- Gly-Cys-Lys-Asn Cys-NJ 210 / -45 (2) A29 H- (4Cl) Phe-Cys-Nle-Asn Cys-Asparaginol 155 "/ -22.5" A30 H-labu-Cys-Nle-Asn Cys -Asparaginol 1 S00 / M4.30 A31 H-Iabu-Cys-Lys-Asn Cys-Asparaginol 160 "/ - 47.4" A32 H- (D) -Ala-Gly-Cys-Lys-Asn Cys-Asparaginol 150 "/ - 52.7 "A33 H- (D) -Ala-Gly-Cys-Nle-Asn Cys-Asparaginol 165" / - 49.5 "(1) A34 H- (D) -Val-Cys-Lys-Asn Cys-NH2 175 / - 47.0 A3 5 H- (a-Phenylglycyl) -Cys-Lys-Asn Cys-NH2 1800/33 30 A36 H- (D) -Val- (4Cl) Phe -Cys-Lys-Asn Cys-NH2 165 /-30.9 A37 H- (D) -Ala-Cys-Lys-Asn Cys-NH2 A38 H-Cys-Lys-Asn Cys-NH2 180 "/ - 27.5" A3 9 Cyclohexylacetyl - (D) -Val-Cys-Lys-Cys-NH2 1600 / 19.80 (3) Asn A40 cyclohexylacetyl- (α-phenylglycyl) - Cys-NH2 165 "/ - 19.6" (5) Cys-Lys-Asn A4 1 cyclohexyl acetyl - (D) -Val- (4Cl) Phe- Cys-NH2 165 "/ - 23.7" (3) Cys-Lys-Asn A42 Benzoyl- (3,4-dichloro) Phe-Cys-Lys- Cys-NH2 180 / -22.5 (4) Asn A43 Benzoyl- (3,4-dichloro) Phe-Cys-Nle- Cys-NH2 175 "/ - 23.5" (4) Asn A44 H- (D) -Ala-Gly-Cys-Nle- Asn Cys-NH2 160 /-23.9 (4) A45 H- (D) -Phe-Cys-Nle-Asn Cys-NH2 175 /-29.1 (3) A46 H-Phe-Cys-Nle-Asn Cys-NH2 1700 / 30.80 (3) A47 H- (3Cl) Phe-Cys-Nle-Asn Cys-Asparaginol 165 "/ - 35.0" (3) A48 H- (2Cl) Phe-Cys-Nle-Asn Cys-Asparaginol 170 /29.8 (3 ) A49 H- (3,4diCl) Phe-Cys-Nle-Asn Cys-Asparaginol 162 "/ - 25.5" (3) CH -C = O l 2 t A50 H- (4Cl) Phe-Cys-Nle-Asn Cy s -N ll - Cti 165 "/ - 17.8" (3) CII A51 H- (4Cl) Phe-Cys-Nle-Asn Cys-NH- [CH2 j2-OH 135 /-38.5

Beispiel P Q Smp.5 "~" Nr. Example P Q Smp. 5 "~" No.

A52 H-(4Cl)Phe-Cys-Nle-Asn Cys-NH-|CH2l3-OH 132-/-39.2 < A53 H-(4Cl)Phe-Cys-Nle-Asn Cys-Threoninol 142-/-41.5 A54 H-(4Cl)Phe-Cys-Nle-Asn Cys-Thr-O-CH3 150 /43.6 A55 H-(4Cl)Phe-Cys-Nle-Asn Cys-Ser-O-CH3 145/41.0 A56 H-(4Cl)Phe-Cys-Nle-Asn Cys-Ser-NH2 153 /4(1.2 CH2OH A57 H-(4Cl)Phe-Cys-Nle-Asn Cys-NH-CH-CH20H 138 /-3 7.7 A58 H-(4Cl)Phe-Cys-Nle-Asn Cys-Glutaminol 1539/29.59 CH2-CH2-OH A59 H-(4Cl)Phe-Cys-Nle-Asn Cys-NH-CH-CH2-OH 142-/-26.8 CH2-CH2-CH2-OH A6() H-(4Cl)Phe-Cys-Nle-Asn Cys-NH-CH-CH2-OH 135 /-27.8 A6 1 H-(4Cl)Phe-Cys-Nle-Asn oC [! 2 ~ Cii 2 153/-29.3 CE -o 2 A62 H-(D)-Phe-Cys-Nle-Asn Cys-Asparaginol 162 /-25. 5 A63 H-(D )-Val-(4Cl )Phe-Cys-Nle-Asn Cys-Asparaginol 165 /-27.4 A64 H-(D)-Ala-(4Cl)Phe-Cys-Nle-Asn Cys-Asparaginol 168 /-36.2 A52 H- (4Cl) Phe-Cys-Nle-Asn Cys-NH- | CH2l3-OH 132 - / - 39.2 <A53 H- (4Cl) Phe-Cys-Nle-Asn Cys-threoninol 142 - / - 41.5 A54 H - (4Cl) Phe-Cys-Nle-Asn Cys-Thr-O-CH3 150 /43.6 A55 H- (4Cl) Phe-Cys-Nle-Asn Cys-Ser-O-CH3 145 / 41.0 A56 H- (4Cl) Phe-Cys-Nle-Asn Cys-Ser-NH2 153 / 4(1.2 CH2OH A57 H- (4Cl) Phe-Cys-Nle-Asn Cys-NH-CH-CH20H 138 / -3 7.7 A58 H- (4Cl) Phe -Cys-Nle-Asn Cys-Glutaminol 1539 / 29.59 CH2-CH2-OH A59 H- (4Cl) Phe-Cys-Nle-Asn Cys-NH-CH-CH2-OH 142 - / - 26.8 CH2-CH2-CH2- OH A6 () H- (4Cl) Phe-Cys-Nle-Asn Cys-NH-CH-CH2-OH 135 /-27.8 A6 1 H- (4Cl) Phe-Cys-Nle-Asn oC [! 2 ~ Cii 2 153 / -29.3 CE -o 2 A62 H- (D) -Phe-Cys-Nle-Asn Cys-asparaginol 162 / -25.5 A63 H- (D) -Val- (4Cl) Phe-Cys-Nle-Asn Cys-Asparaginol 165 /-27.4 A64 H- (D) -Ala- (4Cl) Phe-Cys-Nle-Asn Cys-Asparaginol 168 /-36.2

Man löst (1,4 g der Verbindung von Beispiel A33 in einem Gemisch von Methanol und 0,5% Essigsäure und bringt den pH durch Zugabe von Ammoniumhydroxyd-Lösung unter Rühren auf pH 6. Man versetzt langsam unter Rühren mit (),1 m Kaliumferricyanid-Lösung, bis die gelbe Farbe bestehen bleibt. Nach weiteren 15 Minuten Rühren wird der pH mit Essigsäure auf 4-5 eingestellt.Man filtriert durch eine kurze Säule von Bio Rad AG 3/x4 (ClsForm) [= schwach basischen Anionen-Austauscherj. Das Filtrat lässt man anschliessend langsam bei () durch eine Säule mit Bio Rex 70 (-COOH Form) [= schwach saurer Kationen-Austauscher] durchfliessen. Die Säule wird darauf mit einem Essigsäure-Gradienten mit steigender Essigsäure-Konzentration oder mit einem Essigsäure-Pyridin-Gradienten eluiert. Fraktionen, die das gewünschte Produkt enthalten, werden vereinigt und lyophilisiert. Das Lyophilisat wird in wenig n-Butanol/Eisessig/Wasser (2:1:1) oder 30% Essigsäure gelöst und durch Chromatographie an Sephadex G 25 in demselben Gemisch gereinigt. Man vereinigt die Fraktionen, die das gewünschte Produkt enthalten, lyophilisiert und erhält die Titelverbindung. (1.4 g of the compound from Example A33 are dissolved in a mixture of methanol and 0.5% acetic acid, and the pH is brought to 6 by adding ammonium hydroxide solution while stirring.) (), 1 m Potassium ferricyanide solution until the yellow color persists. After stirring for a further 15 minutes, the pH is adjusted to 4-5 with acetic acid. Filter through a short column of Bio Rad AG 3 / x4 (ClsForm) [= weakly basic anion exchangerj The filtrate is then allowed to flow slowly through a column with Bio Rex 70 (-COOH form) [= weakly acidic cation exchanger] at () The column is then filled with an acetic acid gradient with increasing acetic acid concentration or with an acetic acid -Pyridine gradient eluted. Fractions containing the desired product are combined and lyophilized. The lyophilizate is dissolved in a little n-butanol / glacial acetic acid / water (2: 1: 1) or 30% acetic acid and chromatographed on Sephadex G 25 in d cleaned em the same mixture. The fractions which contain the desired product are combined, lyophilized and the title compound is obtained.

(0 20 = -36 (c = 1 in 95% Essigsäure). (0 20 = -36 (c = 1 in 95% acetic acid).

Auf analoge Weise werden aus den entsprechenden Verbindungen mit freier SH-Funktion (Beispiele 1, Al-7, AlO-32, A4-64) die entsprechenden Verbindungen mit einer S-S-Brücke hergestellt. In an analogous manner, the corresponding compounds with an S-S bridge are produced from the corresponding compounds with a free SH function (Examples 1, Al-7, AlO-32, A4-64).

Claims

PATENT CLAIMS 1. Process for the preparation of new compounds of the formula I wherein

Rt (i) H, (ii) NH2.

(iii) H-Ala-NH-; H-Tyr-NH-; H-Cys-NH-; H-Val-NH-; H-Lys-NH-; H- (α -amino-isobutyryl) -NH-; H-Phe-NH-; (iv) NH2-NH-CO-NH-; (v) C, H5 NH-CO-Gly-NH-; H-Ala-Gly-NH-; H-Val-Gly-NH-; H-a -phenyl-Gly-NH-; (vi) R2-A-CO-NH-, where R2 is lower alkyl, phenyl or Phenyl which is substituted by halogen, hydroxy, amino, lower alkyl or lower alkoxy, A for a direct bond Alkylene radicals each having up to 6 carbon atoms or are -NH-, (vii) R2-Ala-NH-; R2-Ala-Gly-NH-; wherein R2 has the above meaning, (viii) C6H5 A1 CO-M-NH-, wherein Al is an alkylene radical with up to

6 carbon atoms and -M- - (mono or di-Hal) -Phe-, -Gly- or -Ala- means, (ix) T- (mono- or di-Hal) -Phe-NH-, where T- for H-, H-Val- or benzoyl-, (x) (CHECH to au to CO-L-NH, where Al has the above meaning and -L- for -Val-, -Val- (mono- or di- Hal) -Phe-, <- Phenyl-Gly- and n for an integer between

4 and 10, means B stands for H or both B stands for a direct bond between the S atoms, X for -Lys-, -Nle- or -Cys- and Y stands for -Asn-, -Gln- or -Thr- and Z for the radicals (i) H; (ii) COOH; (iii) COOR3 (where R3 is a lower alkyl group); (iv) -CO-NR4Rs (where R4 and R5 are independently hydrogen or a lower alkyl group); (v) -CON3CH2) n, (where n has the above meaning); (vi) CH2OH; (vii) -CO-asparagineol; -CO-Leucinol; -CO-Isoleucinol; -CO-valinol; -CO-norleucinol; -CO-glutaminol; -CO-threoninol; (viii) -CO-Leu; -COSer; -CO-Iso-Leu; CO-Val and their corresponding amides, in which the amide part denotes the radical -CO-NR4Rs or -CO-NH2) ,, (where n, R4 and R5 have the above meanings), or (ix) -CO-ThrOR3 or CO-SerOR3 (where R3 has the above meaning); (x) -CO-NH- (CH2) k-OH (where k is an integer between 2 and 6), or

(wherein 11 and 12 are independently an integer between 1 and 6); (xi) -CO- <O; (xii) -CO-NH-R6 (in which R6 denotes a 5- or 6-membered saturated heterocyclic ring which contains an oxygen atom as a ring member, or denotes a 5- or 6-membered lactone ring), where in the formula I the radicals R1, X , Y and Z as well as with the other units of the peptide sequence at least one unit can be in the D-form, where, when X is Lys and Y Asn and all other units of the peptide sequence 3 to 14 are in the D- or L-form and when (i) R1 H-Ala-Gly-NH- or H- (D) -Ala-Gly-NH- mean, Z cannot stand for COOH, COOR3, CH2OH or CONR4Rs or, if (ii) R1 is H, NH2 or H- (D) -Ala-Gly-NH-, Z cannot stand for H, COOH, CONR4Rs or CONzcH2h or 5 or if (iii) R1 H- (cc-amino-isobutyryl) -NH- or H- (D) -Ala-NH- means Z cannot represent H or COOH or, if (iv) R1 denotes H-Ala-Gly-NH-, Z cannot represent H or, if (v) R1 denotes H-Ala-NH, or R2, -CO-NH-, (where Rz 'denotes lower alkyl or unsubstituted Phenyl), Z cannot stand for COOH and where, when R1 stands for H-Cys-NH or H- (D) -Cys-NH and / or X-Cys- or - (D) -Cys, BB cannot stand for a direct bond , as well as acid addition salts of these compounds, characterized in that two peptide units, each of which contains at least one amino acid in protected or unprotected form, are linked by an amide bond, the peptide bond being made in such a way that the amino acid sequence contained in formula I is prepared and then the protective groups present are removed and, if appropriate, the peptides thus obtained are converted into their acid addition salts.

2. The method according to claim 1, characterized in that a compound of formula 1, in which B is hydrogen, is oxidized to a compound of formula I in which B-B is a direct bond.

3. Use of the polypeptides of the formula I obtained by the process according to claim 1 for the preparation of complexes of these compounds, characterized in that the polypeptides of the formula I are reacted with complex-forming inorganic metal compounds or organic compounds of higher molecular weight.

The present invention relates to a process for the preparation of new compounds of formula 1,

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