DK165638B

DK165638B - 16,17-acetalsubstituerede androstan-17beta-carboxylsyreestere, fremgangsmaade til fremstilling heraf samt farmaceutisk praeparat indeholdende samme

Info

Publication number: DK165638B
Application number: DK138386A
Authority: DK
Inventors: Paul Haakan Andersson; Per Ture Andersson; Bengt Ingemar Axelsson; Bror Arne Thalen; Jan William Trofast
Original assignee: Draco Ab
Priority date: 1985-04-04
Filing date: 1986-03-25
Publication date: 1992-12-28
Also published as: JO1479B1; AU590545B2; PL148272B1; RU1779257C; FI85378C; DK138386A; LT3812B; CS232886A2; DK59693D0; UA13319A; HU199872B; ES8802392A1; PL150052B1; PL265699A1; KR860008208A; RU1795972C; KR930009444B1; LV10957B; CN86102193A; HUT40809A

Description

DK 165638B

i

Den foreliggende opfindelse angår hidtil ukendte, farmakologisk aktive 16,17-acetalsubstituerede androstan-17/3-carboxylsyreestere, fremgangsmåde til fremstilling heraf samt farmaceutisk præparat indeholdende samme.

5

Farmaceutiske præparater, der indeholder forbindelserne, kan bruges til behandling af inflammatoriske, allergiske, muskoskel etale og dermatologiske tilstande.

10 Det er kendt, at visse glucocorticosteroider (GCS), såsom de i handelen forekommende lægemidler triamcinolonacetonid, betametason-170-valerat og dexametason-21-valerat, kan bruges til lokal behandling af betændelsessygdomme på huden (eksemer, psoriasis), men de er ikke særligt egnede til behandling af allergiske eller immunologiske 15 tilstande i åndedrætsvejene (fx astma og rhinitis) eller i tarmen (ulcerativ kolitis, Morbus Crohn).

Med lokal glucocorticoidterapi opnås der imidlertid kliniske fordele i forhold til en systemisk behandling (fx med glucocorticoid-tablet-20 ter) , især med hensyn til nedsættelse af uønskede glucocorti- coid-virkninger uden for det sygdomsangrebne område. For at opnå sådanne kliniske fordele ved fx alvorlig sygdom i åndedrætsvejene må glucocorticosteroiderne have en hensigtsmæssig farmakologisk profil.

De skal således udvise høj naturlig glucocorticoid-aktivitet på 25 påføringsstedet men må tillige undergå en hurtig inaktivering ved fx hydrolyse i målorganet eller efter optagelse i det almindelige kredsløb.

De hidtil kendte glucocorticosteroider er ikke i besiddelse af nogen 30 sådan helt tilfredsstillende farmakologisk profil ved handling af sygdomme i fx luftvejene.

Eftersom en binding af GCS til glucocorticoid-receptorer er en forudsætning for, at deres antiinflammatoriske og allergiske virk-3^ ni nger kan indtræde, kan steroidernes evne til at binde sig til disse receptorer bruges til bestemmelse af den biologiske aktivitet af GCS. Der er blevet påvist en direkte korrelation mellem affiniteten af GCS til receptorerne og deres antiinflammatoriske virkninger ved anvendelse af øre-ødemprøven på rotter (Correlation between

DK 165638 B

2 chemical structure, receptor binding, and biological activity of some novel, highly active, 16a,17a-acetal substituted glucocorticoids; E. Dahlberg, A. Thaién, R. Brattsand, J-Å Gustafsson, U. Johansson, K. Roempke og T. Saaetok, Mol. Pharmacol. 25, (1984), 5 70).

Fra DK fremlæggelsesskrift nr. 153.493 kendes der ganske vist lavere alkylestere, navnlig methyl estere, af androsta-l,4-dien-17-carboxyl-syre, der angives at have antiinflammatorisk virkning i lave doser.

10 Disse kendte androstanalkyl estere har den almene formel: ch, ho J :

ohf ^-f-COOH

15 5’vwv\*

X

o ψ

. Y

20 hvori R7 betyder en fri eller med en carboxylsyre med højest 7 carbonatomer forestret hydroxylgruppe, R77 betyder en a- eller /3-stillet methylgruppe eller en methylen-25 gruppe, eller R7 sammen med R77 betyder en 16a,17a-dihydroxyacetonidgruppe med formlen: ____o XH.

30 \ / 3

C

____· CH3 R777 betyder hydrogen eller chlor, X betyder chlor eller fluor, og Y betyder hydrogen eller fluor, 35

UIV I OODOO D

3 idet X betyder chlor og Y betyder fluor, når R"' betyder hydrogen.

Det har imidlertid vist sig, at disse estere er vanskeligt hydrolyserbare af enzymer, der naturligt forekommer i biologisk væv og 5 blod. Som følge heraf vil de efter indgivelse ikke undergå nogen hurtig inaktivering ved hydrolyse i målorgånet eller efter optagelse i det almene blodkredsløb men vil være i stand til at udøve skadelige bivirkninger på andre organer i det behandlede individ. Det bemærkes i den forbindelse, at den ved hydrolysen dannede metabolit 10 - den frie 17-carboxylsyre - er uden glucocorticoid virkning.

I modsætning til ovennævnte kendte androsta-l,4-dien-17-carboxyl-syrealkylestere er det med den foreliggende opfindelse nu lykkedes at tilvejebringe hidtil ukendte androstan-17/3-carboxylsyreestere, 15 som ikke blot besidder forholdsvis høj glucocorticoidreceptor-affinitet, men som tillige forholdsvis let hydrolyseres af esterase-enzymer, der forekommer i blod og biologisk væv, hvorfor de forholdsvis hurtigt inaktiveres efter den lokale applikation. De nye forbindelser udviser derfor en mere hensigtsmæssig farmakologisk 20 profil end ovennævnte kendte androstan-17-carboxylsyreestere og er derfor mere velegnede til indgivelse i f.eks. luftvejene til behandling af allergiske og inflammatoriske sygdomme heri.

De hidtil ukendte androstan-170-carboxylsyreestere ifølge opfindel-25 Sen er 16,17-acetalsubstituerede og er ejendommelige ved, at de har den almene formel I: r3 c=o 30 ..Λ CH« I __ O ^ i 2

VN>S--o-^CR R

CH.|j [

^ I

X2 eller er en stereoisomer forbindelse deraf, i hvilken formel bindingen mellem 1,2-stillingerne er en enkelt- eller en dobbeltbinding, 35

DK 165638 B

4 X* betegner hydrogen, fluor, chlor eller brom, 2 X ^ betegner hydrogen, fluor, chlor eller brom, 5 R* betegner hydrogen eller en ligekædet eller forgrenet carbonhy-dridgruppe med 1-4 carbonatomer, 2 R betegner hydrogen eller en ligekædet eller forgrenet carbonhy-dridgruppe med 1-10 carbonatomer, 10 3 R betegner 0 0 4 5 II c 4 c II c CRVOCR0 eller CRVOCYR0 15 y betegner oxygen eller svovl, 4 R betegner hydrogen, en ligekædet eller forgrenet carbonhy-dridgruppe med 1-10 carbonatomer eller en phenylgruppe, 20 R^ betegner hydrogen eller methyl, og R® betegner hydrogen, en ligekædet eller forgrenet, mættet eller umættet carbonhydridkæde med 1-10 carbonatomer, en ligekædet eller forgrenet al kylgruppe med 1-5 carbonatomer substitueret 25 med mindst ét halogenatom, en pyrryl-, pyridyl-, pyrimidyl-, pyrazinyl-, furyl-, pyranyl-, benzofuranyl-, indolyl- eller tienylgruppe, gruppen "(CH2^mCiii'H2^n (hvor m er °> 1 eller 2, og n er tallet 2, 3, 4, 5 eller 6) eller en phenyl-eller benzyl gruppe, som eventuelt er substitueret med én eller flere substituenter udvalgt blandt ligekædet eller forgrenet al kyl med 1-5 carbonatomer, nitro, carboxyl, alkoxy med 1-5 carbonatomer i al kyldel en, halogen, cyano, carbalkoxy med 1-5 carbonatomer i al kyldelen og trifluormethyl, 35 idet dog R1 og R2 ikke begge betegner hydrogen.

De enkelte stereoisomerkomponenter, der forekommer i en blanding af et steroid med den foran viste almene formel I, kan illustreres på følgende måde: 5

DK Ίΰΰϋΰΰ B

OR3 5 H0

0 epimer S

10 x2 OR3 C = 0 1 CH3 i n R1 HO. iX----0χΓ/ y^^W'v 15 CH^J^l X1

0 HI; epimer R

* 2 20

De enkelte stereoi somere komponenter, som forekommer i en blanding af steroid-UØ-carboxylsyreestere med formlerne 25 0 0

11 4 5 II G

StC0CRV0CRo IV

eller 0 0 ολ II λ c II β

30 StCOCR^R uCYR° V

hvor St er steroiddelen, kan illustreres på følgende måde: R4 R4 0,0 0-0 35 II I II 6 » : n 6

StCOCOCR0 StCOCOCR0

: ς U

R° R°

VI VII

DK 165638 B

6 og 0 f 0 0 ? o II I II β II : II 6

StCOCOCYR0 StCOCOCYR0 5 l5 l5

Ra Rδ

VIII IX

I diastereoisomerer som II, III, VI, VII, VIII og IX afviger konfi-10 gurationen kun ved ét ud af flere asymmetriske carbonatomer. Sådanne diastereoisomerer betegnes epimerer.

Al kyl i de foran stående definitioner er lige eller forgrenede carbonhydridkæder med 1-5 carbonatomer, fortrinsvis 1-4 carbonato-15 mer.

Alkoxy i de foran stående definitioner er en al kyl-O- gruppe, hvor al kyl del en har den ovenfor angivne definition.

20 Halogen i de foran stående definitioner er fortrinsvis et chlor-, brom- eller fluoratom.

Carbalkoxy i definitionen foran er en -COO-alkyl gruppe, hvor al kyl del en har den ovenfor givne definition.

25 Særlige forbindelser ifølge opfindelsen, som foretrækkes, er: 1'-Ethoxycarbonyloxyethyl-6a,9a-di fluor-ll/J-hydroxy-16a,17α-[(1-methyl ethyl iden)-bis-(oxy)]-androsta-1,4-dien-3-on-17£-carboxylat, den 30 epimere blanding A + B samt epimer B.

1' - Isopropoxycarbonyl oxyethyl -6a-fl uor-1 Ιβ-hydroxy- 16a, 17a- [(1 -methyl ethyl iden) -bis- (oxy) ]-androsta-1,4-dien-3-on-17/l-carboxyl at og epimer B.

1'-Propoxycarbonyloxyethyl-6a,9a-d i f1 uor-11β-hydroxy-16a,17a-[(1-methyl ethyl iden)-bis-(oxy) ]-androsta-l,4-dien-3-on-17/5-carboxyl at og epimer B.

35 7

DK IbbbJBK

1'-Isopropoxycarbonyloxyethyl -6a,9a-di fluor-11/5-hydroxy-16α,17α-[(1-methylethyliden)-bis-(oxy)]-androsta-l,4-dien-3-on-17/J-carboxylat, de epimere blandinger A + B og epimer B.

5 1'-Acetoxyethyl-(20R)-9a-fluor-1l/5-hydroxy-16a,17a-propylmethylendi- oxyandrosta-M-dien-S-on-n^-carboxylat og epimer B.

Γ-Ethoxycarbonyl oxyethyl - (22R)-9a-fl uor-ll/5-hydroxy-16a, 17a-propyl-methylendioxyandrosta-l,4-dien-3-on-17/5-carboxylat og epimer B.

10 r-Isopropoxycarbonyloxyethyl-(20R)-9a-fluor-lljS-hydroxy-16a,17a-propylmethylendioxyandrosta-l,4-dien-3-on-17j3-carboxylat og epimer B.

15 1'-Ethoxycarbonyloxyethyl-(20R)-6a,9a-di f1 uor-llø-hydroxy-16a,17a- propylmethylendioxyandrosta-l,4-dien-3-on-17£-carboxylat, den epimere blanding A + B og epimer B.

Opfindelsen angår også en fremgangsmåde til fremstilling af de 20 hidtil ukendte forbindelser med formlen I, hvilken fremgangsmåde er ejendommelig ved det i krav 4's kendetegnende del angivne.

Endelig angår opfindelsen en anvendelse af forbindelserne med formlen I til fremstilling af eller i farmaceutiske præparater som 25 angivet i krav 3, 5, 6 og 7.

Udgangsforbindelser til fremstilling af forbindelserne ifølge opfindelsen kan fremstilles ved oxidation af en forbindelse med en af formlerne X, XI og XII til den tilsvarende 17/5-carboxyl syre: 30 35

DK 165638B

8 CH,-0R7 c-o i2>crLr2 J T T x 10 i 2 CH2-0R7 i r ~° '''oi “J . Λ_Γ (ίίΤ^Ύ\<ϊ^ ΚΙ 15 « x2 20 CH2-0R7 C=0 pi

CHJ „Q XR

_ o/ 2

0 R XII

CH^l !_ 25 1 ^ i

‘ 2 X

30 hvor den fuldt optrukne plus den brudte linie mellem C-l og C-2 1 O 1 repræsenterer en enkeltbinding eller dobbeltbinding, X , X , R og 2 7 R har de foran angivne betydninger, og R betegner et hydrogenatom eller en acylgruppe afledt af en carboxylsyre med 1-10 carbonatomer i en lige eller forgrenet kæde.

35 170-Carboxylsyrerne, som ikke udgør en del af opfindelsen, forestres derefter til dannelse af forbindelser, der er karakteriseret ved formlerne I-IX, hvor 7777 , X1, X2, R1, R2 og R3 har de foran angivne betydninger.

9

UKlbbbcSbB

Omdannelsen af en forbindelse med en af formlerne X, XI og XII til de tilsvarende 17-carboxylsyrer udføres i et passende oxygeneret carbonhydrid-opløsningsmiddel, såsom en lavtkogende alkanol. Methanol og ethanol foretrækkes, navnlig førstnævnte. Reaktions-5 mediet gøres svagt alkalisk ved tilsætning af en passende svag uorganisk base, såsom et alkalimetalcarbonat, fx natrium-, 1 i thi umel 1 er kaliumcarbonat. Sidstnævnte foretrækkes. Omdannelse af en forbindelse med formel X, XI eller XII til en 17)3-carboxylsyre, som 3 svarer til formlen I, II eller III (men hvor R * H), finder sted 10 ved stuetemperatur, dvs. 20-25’C.

Nærværelse af oxygen er nødvendig for reaktionen. Oxygen kan tilføres ved indbobl ing af en strøm af luft eller oxygen i reaktionsblandingen.

15

Den oxidative nedbrydning af 17/J-sidekæden i forbindelser med formlen X, XI og XII til de tilsvarende 17/5-carboxylsyrer kan også udføres med periodsyre, natriumhypobromat eller natriumbismutat. Reaktionen udføres i en blanding af vand og et passende oxygeneret 2° carbonhydrid-opløsningsmiddel såsom en lavtkogende ether. Dioxan og tetrahydrofuran foretrækkes, navnlig førstnævnte.

Moder-17j8-carboxylsyrerne, som svarer til formlen I, II og III (men hvor R = H), kan forestres ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen på 25 kendt måde til tilvejebringelse af 17/S-carboxylatestere ifølge opfindelsen, og denne fremgangsmåde er ejendommelig ved det i krav 4's kendetegnende del angivne. Fx kan 170-carboxylsyren omsættes med en behørig alkohol og et carbodiimid, fx dicyclohexylcarbodiimid, i et passende opløsningsmiddel, såsom diethylether, tetrahydrofuran, 3° methylenchlorid eller pyridin, og fordelagtigt ved en temperatur på 25-100*C. Man kan også omsætte et salt af 17)3-carboxylsyren med et alkalimetal, fx lithium, natrium eller kalium, et salt af en kva-ternær ammoniumforbindelse, såsom et salt af triethyl- eller tribu-tylamin, eller tetrabutylammonium, med et behørigt alkyleringsmid-del, fX et acyloxyalkyl halogenid eller halogenal kyl-alkylcarbonat, fortrinsvis i et polært opløsningsmiddel, såsom acetone, methyl-ethyl keton eller dimethyl formamid, dimethyl sul foxid, methylenchlorid eller chloroform og hensigtsmæssigt ved en temperatur i området 25-100*C. Reaktionen kan også udføres i nærværelse af en kronether.

DK 165638B

10

De dannede rå steroidesterderivater renses efter isolering ved kromatografering på et passende materiale, fx tværbundne dextran-geler af Sephadex® LH-type med passende opløsningsmidler som elueringsmidler, fx halogenerede carbonhydrider, ethere eller 5 estere, såsom ethylacetat, eller acetonitril. De enkelte epimerer, som dannes ved forestringen af 17j8-carboxylsyrerne, har praktisk talt identiske opløsel ighedsegenskaber. Det har følgeligt vist sig umuligt at adskille og isolere dem fra epimerblandingen ved konventionelle metoder til resolvering af stereoisomerer, fx fraktioneret 10 krystallisation. For at vinde de enkelte epimerer hver for sig underkastes stereoisomerblåndingerne med formlerne I, IV og V søjlekromatografering, hvorved epimererne II, III, VI, VII, VIII og IX adskilles på grundlag af deres forskellige mobiliteter på den stationære fase. Kromatograferingen kan fx udføres på tværbundne 15 dextrangeler af typen Sephadex® LH, fx Sephadex® LH-20, i kombination med et passende organisk opløsningsmiddel som elueringsmiddel. Sephadex® LH-20, fremstillet af Pharmacia Fine Chemicals AB, Uppsala, Sverige, er en perleformet hydroxypropyleret dextrangel, hvor dextrankæderne er tværbundne til frembringelse af et tredimen-20 sionelt polysaccharid-netværk. Som elueringsmiddel har man med held anvendt halogenerede kulbrinter, fx chloroform eller en blanding af heptan, chloroform og ethanol i mængdeforholdet 0-50:50-100:10-1, fortrinsvis en 20:20:1 blanding.

25 Som udgangsmaterialer for fremstilling af forbindelserne ifølge opfindelsen bruges der forbindelser med formlerne X, XI og XII. De fremstilles ved omsætning af forbindelser med formlen 30 ?H20r7

OO

HO A —-OH

ΗΟγ OH

XIII

35

o I

»

i 2 XZ

hvor den fuldt optrukne plus den brudte linie mellem C-l og C-2

DK 165638 B

11 1 9 repræsenterer en enkeltbinding eller en dobbeltbinding, og X og X og R7 har de foran angivne betydninger, med et aldehyd med formlen

H

5 /

0=C

\ 2'

T

2' hvor R betegner en ligekædet eller forgrenet carbonhydridkæde med 10 1-10 carbonatomer, eller med en keton med formlen R1' /

0=C

15 V

i / hvor R betegner en ligekædet eller forgrenet carbonhydridkæde med

V

1-4 carbonatomer, og R betegner en ligekædet eller forgrenet carbonhydridkæde med 1-10 carbonatomer.

Aldehydet er fortrinsvis acetal aldehyd, propanal, butanal, isobuta- nal, pentanal, 3-methylbutanal, 2,2-dimethyl propanal, hexanal, heptanal, octanal, nonanal og dodecanal. Reaktionen udføres ved, at 25 man sætter steroidet til en opløsning af aldehydet (eller ketonen) sammen med en sur katalysator, fx perchlorsyre, p-toluensulfonsyre eller saltsyre i ether, fortrinsvis dioxan eller et halogeneret carbonhydrid, fortrinsvis methylenchlorid eller chloroform.

30

Forbindelserne X, XI og XII kan også fremstilles ved trans-acetali-sering af de tilsvarende 16a,17a-acetonider: 35

DK 165638B

12 CH^OR7 i z C=0 H0 v^l^%fJo-CCCH3 5 IT ^CH3 e2 10 x hvor den fuldt optrukne og den brudte linie mellem C-l og C-2 1 ? 7 repræsenterer en enkeltbinding eller dobbeltbinding, og X , X og R har de foran angivne betydninger, med et aldehyd med formlen 15

H

/

0=C

\ 2'

Rr 20 2' hvor R betegner det samme som ovenfor, eller med en keton med formi en 1 ' 25 R1 /

0=C

\

V

Rå 30 i/ o7 hvor R og R betegner det samme som ovenfor.

Aldehydet er fortrinsvis acetal aldehyd, propanal, butanal, isobuta- nal, pentanal, 3-methylbutanal, 2,2-dimethylpropanal, hexanal, __ heptanal, octanal, nonanal og dodecanal. Reaktionen udføres ved 3b tilsætning af steroidet til en - opløsning af aldehydet (eller ketonen) sammen med en stærk uorganisk syre som katalysator, fortrinsvis perchlorsyre eller saltsyre, i en ether, fortrinsvis dioxan eller tetrahydrofuran, et halogeneret carbonhydrid, fortrinsvis methylenchlorid eller chloroform, et aromatisk carbonhydrid, 13

DK Ί65Β38 B

fortrinsvis toluen, et alicyclisk carbonhydrid, fortrinsvis cyclohexan eller et aliphatisk carbonhydrid, fortrinsvis heptan eller isooctan, under de sidstnævnte betingelser med eliminering af kromatografitrinnet til fremstilling af epimererne III og XII.

5

Forbindelserne ifølge opfindelsen kan bruges til forskellige former for lokal anvendelse i afhængighed af betændelsesstedet, fx perku-tan, parenteral eller til lokal administration i åndedrætskanalen ved inhalation. Et vigtigt formål for udformningen af præparatet er 10 at opnå optimal biotilgængelighed af den virksomme steroidbestand-del. Til perkutane præparater opnås dette med fordel, hvis steroidet er opløst med høj termodynamisk aktivitet i bærematerialet. Dette opnås ved anvendelse af et passende system af opløsningsmidler omfattende egnede glycoler såsom propylenglycol eller 1,3-butandiol, 15 enten som sådanne eller i kombination med vand.

Det er også muligt at opløse steroidet enten fuldstændigt eller delvis i en 1 ipofi 1-fase ved hjælp af et overfladeaktivt middel som solubiliseringsmiddel. De perkutane præparater kan være en salve, en 20 olie-i-vand creme, en vand-i-olie creme eller en lotion. I emulsion s -bære væskerne kan det system, som omfatter den opløste aktive komponent, udgøre den disperse fase såvel som den kontinuerlige fase. Steroidet kan også eksistere i de ovennævnte præparater som et mikroniseret, fast stof.

25

Aerosoler med steroider under tryk er beregnet til oral eller nasal inhalation. Aerosol systemet udformes på en sådan måde, at enhver afgiven dosis indeholder 10-1000 μg, fortrinsvis 20-250 øg af det virksomme steroid. De mest virksomme steroider indgives i den nedre 3° del af det angivne dosisområde. Det mikroniserede steroid består af partikler, som er væsentligt mindre end 5 im, og de er suspenderet i en drivmiddelblanding under medvirken af et dispergeringsmiddel, såsom sorbitantrioleat, oliesyre, lecithin eller natriumsaltet af dioctyl sulforavsyre.

35

Opfindelsen skal belyses nærmere ved de efterfølgende eksempler. I

2 -1 eksemplerne bruges der en strømningshastighed på 2,5 ml/cm »h ved de præparative kromatografiske gennemløb. Molekylvægtene er i alle eksemplerne bestemt ved elektrontryk-massespektrometri,

DK 165638B

14 smeltepunkterne på et Leitz Wetzlar varmtrinsmikroskop. Alle HPLC-analyser (HPLC » højeffektive væskekromatografering) udførtes på en Waters /tBondapak C18 -kolonne (300 x 3,9 mm indvendig diameter) med en strømningshastighed på 1,0 ml/minut og med ethanol/vand i 5 forhold mellem 50:50 og 60:40 som mobil fase, medmindre andet er angivet.

Eksempel 1 10 Fremstilling af (22RS1-. (22R1- oo (22Sl-118.16ft.l7tt.21-tetrahvdro-preana-1.4-dien-3,20-dion-16tt.l7Q:-acetaler (22RS1-. (22R1- og f22S)-16a.l7ft-butv1idendioxv-6o!.9a-difluor- 118.21- dihvdroxvDreana-1.4-dien-3.20-dion 15 Til en suspension af 1,0 g 6a,9a-difluor-110,16a,17oi,21-tetrahy-droxypregna-l,4-dien-3,20-dion i 500 ml methylenchlorid sattes der 0,32 ml frisk destilleret n-butanal og 2 ml 72%s perchlorsyre. Reaktionsblandingen henstod i 24 timer ved stuetemperatur. Reaktionsblandingen vaskedes med 10%s vandig kaliumcarbonatopløsning 20 og vand, tørredes over natriumsulfat og inddampedes. Remanensen opløstes i ethyl acetat og udfældedes med petroleumsether, hvorved der vandtes 883 mg (22R$)-16a,17a-butylidendioxy-6a,9a-difluor- 110.21- dihydroxypregna-l,4-dien-3,20-dion. HPLC-analyse viste 99% renhed og forholdet 16:84 mellem 22S- og 22R-epimeren. Molekylvægt 25 466 (beregnet 466,5).

(22RS)-Epimerblandingen kromatograferedes på en Sephadex® LH-20 kolonne (76 x 6,3 cm) under anvendelse af heptan/chloroform/ethanol 20:20:1 mobil fase. Fraktionerne 12315-13425 ml (A) og 13740-15690 (B) opsamledes og inddampedes, og remanensen opløstes i methylenchl orid og udfældedes med petroleumsether. Fraktion A gav 62 mg (22S)- og fraktion B 687 mg (22R)-16a,17a-butylidendioxy-6a,9a-di-fluor-ll/3,21-dihydroxypregna-l,4-dien-3,20-dion. (22S)-epimeren havde molekylvægt 466 (beregnet 466,5) og smp. 196-200°C. (22R)-35 epimeren havde molekylvægt 466 (beregnet 466,5) og smp. 169-172°C.

L. Til en opløsning af 1,0 g 6a,9a-difluor-ll^,21-dihydroxy-16a,17a-[(l-methylethyliden)-bis-(oxy)]-pregna-l,4-dien-3,20-dion i 500 ml methylenchlorid sattes der 0,30 ml frisk destilleret n-butanal og 2 DK 165638 8 15 ml 72%s perchlorsyre. Reaktionsblandingen henstod i 24 timer ved 33*C under omrøring, ekstraheredes med vandigt kaliumcarbonat og vand, tørredes over natriumsulfat og inddampedes. Remanensen opløstes i methylenchlorid og udfældedes med petroleumsether, 5 hvorved der vandtes 848 mg (22RS)-16a,17a-butylidendioxy-6a,9a-di-fluor-lljS,21-dihydroxypregna-l,4-dien-3,20-dion. HPLC-analyse viste 93% renhed og forholdet 12/88 mellem 22S- og 22R-epimeren.

B'. Til en suspension af 4,0 g 6a,9a-difluor-ll/3,21-dihydroxy-10 16a, 17α[(1-methyl ethyl iden)-bis-(oxy)]-pregna-l,4-dien-3,20-dion i 100 ml heptan sattes der 1,2 ml frisk destilleret n-butanal og 3,8 ml 72%s perchlorsyre. Reaktionsblandingen henstod i 5 timer ved stuetemperatur under kraftig omrøring, ekstraheredes med vandigt kaliumcarbonat og vand, tørredes over natriumsulfat og inddampedes 15 til frembringelse af 4,0 g (22RS)-16a,17a-butylidendioxy-6a,9a-di- fIuor-11^,21-dihydroxypregna-1,4-dien-3,20-dion. HPLC-analyse viste 98,5% renhed og forholdet 3/97 mellem 22S- og 22R-epimeren. Efter to omkrystallisationer fra chloroform/petroleumsether vandtes der 3,1 g 22R-epimer, som kun indeholdt 1,1% af 22S-epimeren og 1,3% af andre 20 urenheder.

(λ På tilsvarende måde ved at følge den fremgangsmåde, der er beskrevet i eksemplet og ved at udskifte 6a,9<*-difluor-ll/J,16a,17a,- 21-tetrahydroxypregna-l,4-dien-3,20-dion med Uj5,16of,17a,21-tetraby-25 droxypregna-l,4-dien-3,20-dion, 9a-fluor- og 6a-fluor-ll/J,16a,17a,- 21-tetrahydroxypregna-l,4-dien-3,20-dion eller de tilsvarende 16a,17a-acetonider fremstilles der ikke-fluorerede og monofluorerede (22RS)-, (22R)- og (22S)-ll/M6ar,17a,21-tetrahydroxypregna-l,4-dien-3,20-dion-16a,17a-acetaler fra acetaldehyd, propanal, butanal, 30 isobutanal, pentanal, 3-methylbutanal, 2,2-dimethylpropanal, hexanal, heptanal, octanal, nonanal og dodecanal.

Eksempel 2 35 /L 250 mg (0,6 mmol) Prednaquinolon-16a,17a-acetonid opløstes i 75 ml CHgCl. Der tilsattes 130 mg (1,8 mmol) n-butanal og 0,025 ml 70%s perchlorsyre. Opløsningen omrørtes ved 33eC i 15 timer. Den gule opløsning vaskedes med 2 x 10 ml 10%s KgCOj og 4 x 10 ml HgO, tørredes og inddampedes. Udbytte 257 mg (97,7%). HPLC viste 91,1%

DK 165638B

16 renhed. Uomsat acetonid udgør 7,4% af urenhederne. Epimerforhold 14,6/85,4.

Bj. 0,5 g (1,1 mmol Triamquinolon-16a,17a-acetonid opløstes i 150 ml 5 CHgClg- Der tilsattes 260 mg (3,6 mmol) n-butanal og 0,22 ml 70%s perchlorsyre. Blandingen omrørtes ved 33eC i 16 timer. C^Cl^opløsningen overførtes til en skilletragt, og reaktionskolben vaskedes flere gange med henholdsvis 10 ml K2C03 og CH2C12- Opløsningen vaskedes derefter med 2 x 10 ml 10%s K2C03 og 4 x 10 ml H20, tørre-10 des og inddampedes. Udbytte 438 mg (84,9%). HPLC viste 80,2% renhed. Epimerforholdet 19/81.

L. 0,5 g (1,1 mmol) Fluoquinolon-16a,17a-acetonid opløstes i 150 ml CH2C12. Der tilsattes 260 mg (3,6 mmol) n-butanal og 0,22 ml 70%s 15 perchlorsyre. Blandingen omrørtes ved 33°C i 24 timer. CH2Cl2-fasen overførtes til en skilletragt. Reaktionskolben vaskedes flere gange med 15 ml henholdsvis 10%s K2C03 og CHgCl2. Opløsningen vaskedes med 2 x 15 ml 10%s K2C03 og 4 x 15 ml H20, tørredes og inddampedes. Udbytte 513 mg (100%). HHLC viste 97,4% renhed. Epimerforholdet 20 8,6/91,4.

Eksempel 3

Fremstilling af llg-hvdroxv-16a.l7a-ril-methylethvliden)-bis-(oxy)l-og (20RS1-. (20R1- og (20Sl-llg-hvdroxv-16a.l7a-alkvlmethvlendioxv-androsta-1.4-dien-3-on-17g-carboxvlsvrer og -4-en-3-on-17fl-carboxvl-svrer 6a. 9a-Di f 1 uor-1 Ιθ-hvdroxv-16a. 17α- Γ Π -meth vi eth vi i den 1 -bi s - f oxvll - androsta-1.4-dien-3-on-17g-carboxvlsvre 30 /L Til en opløsning af 1,99 g fluoquinolon-16a,17a-acetonid i 120 ml methanol sattes der 40 ml 20%s vandigt kaliumcarbonat. Der bobledes en luftstrøm gennem denne opløsning i ca. 20 timer under omrøring ved stuetemperatur. Methanol et afdampedes, og der sattes 200 ml vand ^ til remanensen. Opløsningen ekstraheredes med methylenchlorid. Den vandige fase syrnedes med tynd saltsyre. Det dannede bundfald opsamledes ved filtrering og tørredes til frembringelse af 1,34 g 6a,9a-di f 1 uor- 11β-hydroxy- 16α, 17α- [ (1 -methylethyl iden)-bi s-(oxy) ] -androsta-1,4-dien-3-on-17j5-carboxylsyre med smp. 264-268eC og

DK 165638 B

17 molekylvægt 438. Renheden bestemt' ved HPLC var 94,0%. Den vandige fase ekstraheredes med ethyl acetat. Efter tørring afdampedes opløsningsmidlet og gav en yderligere portion på 0,26 g af syren. Renhed 93,7%.

5 L. 15,1 g Periodsyre i 16,5 ml vand sattes til en opløsning af 5,0 g fluoquinolon-16a,17a-acetonid i 55 ml dioxan. Reaktionsblandingen omrørtes ved stuetemperatur i 20 timer, neutraliseredes med mættet vandigt natriumhydrogencarbonat og inddampedes. Remanensen opløstes 10 i 200 ml methylenchlorid og vaskedes med 8 x 100 ml 10%s vandigt kaliumcarbonat. Den vandige fase syrnedes med koncentreret saltsyre og ekstraheredes med 6 x 100 ml ethylacetat. Efter tørring afdampedes opløsningsmidlet. Remanensen opløstes i 400 ml ethyl acetat og udfældedes med petroleumsether, hvorved der vandtes 3,96 g 6a,9a-di-15 f 1 uor-110-hydroxy-16α, 17a- [(1 -methyl ethyl i den) -bi s- (oxy) ] -androsta- l,4-dien-3-on-170-carboxylsyre. Renheden bestemt ved HPLC var 99,5%.

L. På lignende måde og ved at følge den fremgangsmåde, der er beskrevet i eksemplet, men erstatte fluoquinolon-16a,17a-acetonid 20 med 11/1,16a,17a,21-tetrahydroxypregna-l,4-dien-3,20-dion, 6a-fluor- 11)5,16a,17a,21-tetrahydroxypregna-l,4-dien-3,20-dion henholdsvis tri amqui no1 on-16α,17α-aceton i d fremst i11edes 110-hydroxy- 16a, 17a-[ (1-methyl ethyl iden) -bis- (oxy) ] -androsta-1,4-dien-3-on-170-carboxyl -syrer. Ved at udskifte 16a,17a-acetonidgruppen med 16a,17a-acetaler 25 mellem 16a-hydroprednisolon, 6a-fluor-16a-hydroxyprednisolon, triamquinolon og fluoquinolon og acetaldehyd, propanal, butanal, isobutanal, pentanal, 3-methylbutanal, 2,2-dimethylpropanal, hexa-nal, heptanal, octanal, nonanal og dodecanal og deres 21-estere fremstilles der (20RS)-, (20R)- og (20S)-110-hydroxy-16a,17a-alkyl-30 methylendioxyandrosta-l,4-dien- og -4-en-3-on-170-carboxylsyrer.

Eksempel 4 1' -Ethoxvcarbonvl oxvethvl -6a. 9a-di fl uor- llfl-hvdroxv- 16a. 17a- Γ (1 -me-35 thvl ethvl idenl -bi s- f oxv) 1 -androsta-1.4-di en-3-on- 17fl-carboxvl at

Ai 600 mg 6a,9a-Difluor-110-hydroxy-16a,17a-[(l-methylethyliden)-bis-(oxy)]-androsta-l,4-dien-3-on-170-carboxylsyre og 684 mg kalium-hydrogencarbonat opløstes i 45 ml dimethyl formamid. Der tilsattes 2

DK 165638B

18 ml 1-bromethyl-ethylcarbonat, og reaktionsbi åndingen omrørtes ved stuetemperatur natten over. Der tilsattes 200 ml vand, og blandingen ekstraheredes med methylenchlorid. De forenede ekstrakter vaskedes med 5%s vandigt natriuhydrogencarbonat og vand, og remanensen 5 rensedes ved kromatografering på en Sephadex® LH-20 kolonne (72 x 6,3 cm) under anvendelse af chloroform som mobil fase. Fraktionen 1515-2250 ml opsamledes og inddampedes og gav 480 mg l'-ethoxycarbo-nyloxyethyl -6a, 9a-di fl uor-ll/}-hydroxy-16a,17a-[(1-methyl ethyl iden)-bis-(oxy)]-androsta-l,4-dien-3-on-17j8-carboxylat. Renheden bestemt 10 ved HPLC var 98,1%, og opimerforholdet A/B var 48:52. Smp. 218- 227eC. [a]^ = +63,2* (c = 0,214) i CHgClg. Molekylvægten var 554.

480 mg 1' -Ethoxycarbonyl oxyethyl -6a, 9a-di fl uor-ll/J-hydroxy-16a, 17a-[ (1-methyl ethyl i den) -bi s- (oxy) ] -androsta-1,4-dien-3-on-17/J-carboxy-15 lat kromatograferedes på en Sephadex® LH-20 kolonne (76 x 6,3 cm) med heptan/chloroform/ethanol 20:20:1 som mobil fase. Fraktionen 2325-2715 ml opsamledes og inddampedes, og remanensen opløstes i methylenchlorid og udfældedes med petroleumsether, hvorved der vandtes 200 mg af en forbindelse (A) med renhed 97,3% bestemt ved 20 HPLC-analyse. Smp. 246-250°C. [α]*5= +100,5° (c = 0,214 i CH2C12).

Molekylvægten var 554.

Fraktionen 4140-5100 gav 250 mg af en forbindelse (B) med renhed 99,0%. Smp. 250-255°C. [α]^5= +28,5° (c - 0,246 i CH2C12). Molekyl -25 vægten var 554. Metinsignalet fra estergruppen blev skiftet ved 0,13 ppm nede i feltet i ^H-NMR-spektret for B i sammenligning med A, mens resten af spektrene er næsten identiske. Elektrontryk-masse-spektrene af A og B er identiske bortset fra massetoppenes intensiteter. De spektroskopiske forskelle og ligheder viser, at A og B er 30 epimerer på grund af chiral-centret i estergruppen.

L. 200 mg 6a,9a-Difluor-llj3-hydroxy-16a,17a-[(l-methylethyliden)-bis-(oxy)]-androsta-l,4-dien-3-on-17j8-carboxylsyre opløstes i 25 ml dimethyl formamid. Der tilsattes 100 mg 1-chlorethyl-ethylcarbonat, 35 70 mg kaliumhydrogencarbonat og 18-kron-6-ether. Reaktionsblandingen omrørtes ved 80°C i 3 timer, afkøledes, ekstraheredes med methylen-chlorid efter tilsætning af 105 ml vand, tørredes og inddampedes.

Det rå produkt rensedes på samme måde som i fremgangsmåde A, hvorved der vandtes 207 mg 1'-ethoxycarbonyloxyethyl-6a,9a-difluor-110-hy- 19 DK Ί65638 8 droxy-16a,17α-[(1-methylethyl iden)-bis-(oxy)]-androsta-1,4-dien-3-on-170-carboxylat. Renheden (HPLC) var 98,4%, og epimerforholdet A/B var 54/46.

5 L. 200 mg 6a,9a-Difluor-llj3-hydroxy-16a,17a-[(l-methylethyliden)-bis-(oxy)]-androsta-l,4-dien-3-on-17/l-carboxylsyre og 140 mg 1,5-di-azabicyclo[5.4.0]-undecen-5 suspenderedes i 25 ml benzen og opvarmedes til til bagesvaling. Der tilsattes en opløsning af 175 mg 1-brom-ethyl-ethylcarbonat i 5 ml benzen, og blandingen til bagesvaledes i 10 2,5 timer. Efter afkøling tilsattes der 50 ml methylenchlorid, og opløsningen vaskedes med vand, tørredes og inddampedes. Råproduktet rensedes på samme måde som i fremgangsmåde A, hvorved der vandtes 207 mg 1' -ethoxycarbonyl oxyethyl -6a,9a-difl uor-1 l/J-hydroxy-16a, 17a-[(1-methylethyl iden)-bi s-(oxy)]-androsta-1,4-di en-3-on- 17/)-carboxy-15 lat. Renheden (HPLC) var 96,4%, og epimerforholdet A/B var 44:56.

]L Til en opløsning af 100 mg 6a,9a-difluor-ll/J-hydroxy-16a,17a-[(l-methylethyl iden)-bis-(oxy)]-androsta-1,4-dien-3-on-17/J-carboxylsyre i 25 ml acetone sattes der 175 mg a-bromdi ethylcarbonat og 45 mg 20 vandfrit kaliumcarbonat. Blandingen opvarmedes i 6 timer under tilbagesvaling. Den afkølede reaktionsblanding udhældtes i 150 ml vand og ekstraheredes med methylenchlorid. Ekstrakten vaskedes med vand, tørredes over natriumsulfat og inddampedes, hvorved der vandtes 65 mg fast l'-ethoxycarbonyloxyethyl-6a,9a-difluor-llj8-hy-25 droxy-16a,17a-[(1-methyl ethyl iden)-bi s-(oxy)]-androsta-1,4-dien-3- on-17/J-carboxyl at. Renheden bestemt ved HPLC var 97,6%, og epimerforholdet A/B var 49:51.

IL 500 mg 6a,9a-Difluor-llj3-hydroxy-16a,17a-[(l-methylethyliden)-30 bis-(oxy)]-androsta-l,4-dien-3-on-170-carboxylsyre og 577 mg tetra-butylammonium-hydrogensulfat sattes til 3 ml 1M natriumhydroxid. Der tilsattes en opløsning af 435 mg 1-bromethyl-ethylcarbonat i 50 ml methylenchlorid. Blandingen til bagesval edes under omrøring natten over. De to lag adskiltes. Det organiske lag vaskedes med 2 x 10 ml 35 vand, tørredes og inddampedes. Råproduktet rensedes ved kromatogra-fering på en kolonne af Sephadex® LH-20 (72 x 6,3 cm) under anvendelse af chloroform som mobil fase. Fraktionen 1545-1950 ml opsamledes og inddampedés, og remanensen udfældedes fra methylen-chlorid/petroleumsether, hvorved der vandtes 341 mg

DK 165638 B

20 1' -ethoxycarbonyloxyethyl-6a,9a-di f1 uor-1l/J-hydroxy-16a,17a-[ (1 -methyl ethyl iden)-bi s-(oxy)]-androsta-1,4-dien-3-on-17£-carboxylat.

Renheden bestemt ved HPLC var 99,2%, og epimerforholdet A/B var 56:44.

5 L, 200 mg 6a,9a-Difluor-ll/Miydroxy-16a,17a-[(l-methylethyliden)-bis-(oxy)]-androsta-l,4-dien-3-on-17/i-carboxylsyre og 200 mg trica-pry1methylammoniumchlorid sattes til 5 ml mættet vandigt NaHCOj. Der tilsattes en opløsning af 100 mg 1-bromethyl-ethylcarbonat i 10 ml 10 methylenchlorid. Blandingen omrørtes ved 45eC i 20 timer, fortyndedes med 10 ml methyl enchl orid og i soleredes og rensedes på samme måde som i fremgangsmåde E, hvorved der vandtes 254 mg 1'-ethoxycarbonyl oxyethyl -6a, 9a-di f1 uor-1 ljB-hydroxy-16a, 17a- [ (1 -methyl ethyl i -den)-bis-(oxy)]-androsta-1,4-di en-3-on-17/1-carboxylat. Renheden 15 bestemt ved HPLC var 97,4, og epimerforholdet A/B var 60:40.

(L. 200 mg 6a,9a-Difluor-ll/l-hydroxy-16a,17a-[(l-methylethyliden)-bis-(oxy)]-androsta-l,4-dien-3-on-17j8-carboxylsyre, 135 mg 1-brom-ethyl-ethylcarbonat og 275 mg tri ethylamin opløstes i 20 ml dime-20 thyl formamid. Blandingen omrørtes ved 80eC i 3 timer, fortyndedes med 200 ml methylenchlorid, vaskedes med vand, tørredes og inddampedes. Det rå produkt rensedes på samme måde som i fremgangsmåde A, hvorved der vandtes 69 mg Γ-ethoxycarbonyloxyethyl-6a,9a-difluor-11/J-hydroxy-16a,17a-[(1-methylethyl i den)-bi s-(oxy)]-androsta-1,4-25 dien-3-on-17/}-carboxylat. Renheden bestemt ved HPLC var 97,8%, og epimerforholdet A/B var 48:52.

Eksempel 5 l-Åcetoxvethvl-6a.9a-difluor-llg-hvdroxv-16a.l7a-rn-methv1-ethvlidenl-bi s-(oxv)1-androsta-1.4-dien-3-on-17fl-carboxvlat 500 mg 6a,9a-Difluor-ll/J-hydroxy-16a,17a-[(l-methylethyliden)-bis-(oxy)]-androsta-1,4-dien-3-on-170-carboxylsyre og 575 mg kaliumhy-35 drogencarbonat opløstes i 40 ml dimethyl formamid. Der tilsattes 1 ml 1-chlorethyl acetat, og reaktionsblandingen omrørtes ved stuetemperatur i 40 timer. Reaktionsblandingen udhældtes i 50 ml vand og ekstraheredes med methylenchlorid. Ekstrakten vaskedes med vandigt natriumhydrogencarbonat og vand, tørredes og inddampedes·. Remanensen

DK 165638 B

21 kromatograferedes på en Sephadex® LH-20 kolonne (72 x 6,3 cm) under anvendelse af chloroform som mobil fase. Fraktionerne 1755-2025 og 2026-2325 ml opsamledes og inddampedes.

5 Det faste produkt fra fraktionen 1755-2025 ml rensedes yderligere ved kromatografering på en Sephadex® LH-20 kolonne (76 x 6,3 cm indvendig diameter) under anvendelse af en blanding af heptan/chlo-roform/ethanol 20:20:1 som mobil fase. Fraktionen 2505-2880 ml opsamledes og inddampedes. Remanensen opløstes i methylenchlorid og 10 udfældedes med petroleumsether, hvorved der vandtes 167 mg fast produkt (A). Renheden bestemt ved HPLC var 99,1% og smp. 238-259*C.

[a]p5· +94’ (c = 0,192; C^Clg)· Molekylvægten var 524.

Det faste produkt fra ovennævnte fraktion 2026-2325 ml rensedes 15 yderligere ved kromatofering på samme måde som beskrevet ovenfor. Fraktionen 5100-5670 ml opsamledes og inddampedes. Remanensen opløstes i methylenchlorid og udfældedes med petroleumsether, hvorved der vandtes 165 mg fast produkt (B). Renheden bestemt ved HPLC var 99,4%. Smp. 261-265eC. [a]p5- +34* (c = 0,262 i CHgClg).

20 Molekylvægten var 524.

*H-NMR-spektrene for A og B er næsten identiske med undtagelse af metinkvartetten fra estergruppen, der skiftes 0,16 ppm nede i feltet i forbindelsen B i sammenligning med A. Fragmenteringsmønstrene af A 25 og B i elektrontryk-massespektra er identiske bortset fra massetoppenes intensiteter. De spektriskopi ske egenskaber for A og B viser, at de er epimerer på grund af chiral centret i estergruppen.

Eksempel 6-88 30

De i tabellerne 1-3 i det følgende angivne forbindelser fremstilledes, i soleredes og rensedes på analog måde med, hvad der er beskrevet i eksempel 4 og 5.

35

DK 165638 B

22

Η Μ Η Μ 3 (TJ

wwHoioaiviGi h ** • 01 • Μ Ο ^»ίΚΒΚΜΚΚ Μ ^ S *5 ft ® S Πϊ φ <0 / ww “5λ:=3 W V-f- o rc Μ Μ \_/ \

æfflæaæaaa W \ S

)τ“8 25959292 » —/1 »-8^» .^effiECECffiCG Οϊ I *ϋΐΟ iCu OOUJWUIWCJOJ \ . ΟβΟ æ æ * « 1 Ί u υ .ft jg ι I r-^—» σι ο ο «<;σ ω ω \ / » ο\ ο / V * Ο ο » as ns σ LJ CO Ο Η* W Η tt>W>tu^tD> *2- 3 <0 Η Μ tO tO fO toco 01 \ 1 οι (Λ u λ to o* g \ / - æ to « vo H to ig Γχ II·"* λ i i — —. , \oo

Ό Ό Dj Dj Di Dj O ΓΊ \-O

-J O <0 Λ ro D o "O /.O

a« s« I —(\ »-s-» + + + + + H + + iJ35 *k 2- > * 1 !

OlCDOOiC*009-0 O CCtO *? r 1 }

% "o "o “o °o “o ”o ”o kT J, " X »„V

Λ o o æ a to U) uicncntninuiuiuiø-g;

OlChoiCltotJUltn roo

oioiææ^too HH

roro ffioioioioioiovi ώχ • *< tntnuiyiuitntntn hi<j OIOIOIOIUUUIUI Cffi

OldOOCOifckrf^coO 13lQ

an- \ /

% \-f-O

π· \ a \to m λ g tototorobotoHH Hta "2. _/1 _ o u>hcqohwoo<j\ c ro a Γ 1 :a.'ZrZ"~:o NIOlOfcOlMlool 3 ft 2 1 I Wna^*

UiOtnotnuiHm η. ® ’ n , γ ° 1 i i ι ι I I i ro s ta I *

WtOliJMUlOiOH 3ft· —. _ V.

JDUINJUIUIUIPCD tQ H- . ? S3 ^Cft ^OffiWUlOsliO ^ O \ / σ ocnmuioioino a o HHHHHHHH 3« / \ — — ^ — H| \ O O s a to u>

DK 165638B

23

D M

U) U N N l\J N ΙΟ . ΓΟ N N N N -· —i —> —< —I ^ ^ *π·π·ηη·η·η*π-π·η-π-τιχχ-π·η-ητι-π x

M

·η·π-π-η-π-π-η-η*η-τι-τι·η-π3:3;-η·τι-η κ ' ro 2222Πηοοηοηη°ηθΓ)ηη so * X sc xxxxxxxxxxxxxxx &.

Μωωωωωυωωωωωωωΐιΐωωω XXXXXXXXXXXXXXXOXX ;σ coX 01 2525000000000000¾.-¾. χ GGGG000'~%'~00ooooxs;r σ> x xxxxxxooxxxx^'··—to 52 <Γ Μ ΓΟ CT C? " — " X XU CO ^ — O O d3 -< G G G G G G oro ro ooxx z. » XXXXXXX^-^ X X CO CO m " ro N u u to N N ω u w u ° G G G G — — o o »-· «u co i ϊ x X ro ro ro x x ro ro co ro co co co co o r>— — ij x x ro ro & co co g.

ro ro © t-* M · > ^ 3)>α>σ> + ο)>α>>η>α> i n> "2. " eo 3 £ % n rt

roro—‘rorororororororororow—·—‘roro S? S

o — a>ro.s»—‘Orororococouicocococnro 3 5.

Ό·Μωσ>ιοο<η·^ΐΛΐη<ο>οοοο»θνο4^ Ό ft < · > i i i i ( i i i i O i i i · — —|roiorox.rorototocj^U)cn o Λ σι u o—‘^jcoOtnæo—'corotnu ό ro «o o q

O

+ + + + + + + + ^+ i + i <f <f <f o x x ί *—< cooorou>coiocnroocoocnoco»oo>o»«3 ro o C o«oo(ji-ocji«ooecTt~oroæu3009>oxoi n - ·—> ooooøpoooopooeeooo —» fvj O fs3 ro tn H- σ s

oieiutuiuiuioieioiuitnoiffiffiuiuiuiui (O O

^-lOUJOIWOlOlOlOOUlOlOlOlUeO) M t-1 OOOicnc0CS«(»aoOOO4»«kC»cn(7> ro ro ,S 5Ϊ.

MMMMIJlOlOlOimOlOVOtOlNMOimCI

(—1 & otcnuicncncncncncnmcncncncncnuimcn G "4 ;-oui(njioioioi(>AuiuiffioiwoJt» S * oochotoscooooacooooookokocnoi 3 &

(S

ft co —* co —i —* ro —*. —« j5k ro -jN-ooioumduinrMinuiNeuw h to NNJONgOl«)-IIOIDIOUNUOIVIN r ro ouioutw-ocnooinocnocntncnocn 5 ii

·*' i i i i i i i i i i i i i i i 3 ST

UoUMOOotOAOOlNoOlNNON Ml ©

-t»JOOtOOO^O(nO<OCO<OOOOC0 09tOCO<X> Ql D

«Oooe>owo»otnoocjiOOOio^jro a rt O o o cn o O O Ocnm,QH· oiwiISwU,NNUN-l'JNW'J‘J*1 , o g ω m i

DK 165638B

24 •3 fcd

t n ^ ω M M lO U U U U U U H

'—’ ' —' —' CO M O) W w N » W

"Ό *σ "O "Ό "O

CD· 0> &>· CD* £D* CD Φ Φ CD (D « — ·«·..·.— z5 3 3 Z3 3 ή -η -η η -π -η -η χ

(Λ (/) OO CO CO M

CO CD CD CD (O

3-3-3-3-3- *Π-η-η*ΤΙ-η-Π-η X

CD fii ft) ft) ft) fO

α α α α α

CD φ φ CD CD

® ® ® ® ® S S S S s I I * ρ- r— ι— ι_ ω ω cj u u ω ω ^

I I X I I

i ι ι I I

ro ro ro ro ro o o o o o ττχ^ττ^· o o o o o 0 o o o o O = IC 3= =C x: ^ »

3 =5 S =3 3 CJ

3 3 3 3 3 Φ ro φ φ φ OOOOOOO 70 o o r> o o o r> σ» >J M CO ffl Μ X X X Z — —. - s ι-1 μ οι m * ro ro r-o ro o o o -c - - r> r> o o xc a: -c το οι x χ oi x rn — — — cj ω co cn co o o Cl —· —- x <n ro x σι zc xc xcco co co » » ω ω u 01 O) Ul IM W — —" ---

- _ CO CO CO

W O ft Ol Λ Λ 3 3 3 3 3 v- 3 3 ^ 3 Φ Φ φ 3 O. CL 3 CL j

Π> (B _ m H

0-000.0 -O P

3-xr 3- i O! > + en > + _i. rr o -o —1 n -o w 03 3 m 3-0 0 3-0 fO il o o o o o

3 ??3 ? ro ro ro —· —* -o » H

? 3 i 3> g £ S g g 3 3 « ~ -s -ί \ I I I I I I I · 3 tn to 3 :? M W U (O SI s o o O O \ CD CD Ol Ol N U3 CD o 1 w 3 3 3- -o w rt o cd c-r w

3 3 3-0» S

o o c+ 3 — i 3 cr cr id \ + o o <+

CT —J \ ri- 1 Ό cn ro o σν ro OD

CD? CD CO o VI O tn o * ZL

—i -*) c* a, ° o o o o o —* ro o ro cd ft> 3" 3 ro tn -+>(/> C/? CD o μι, ft> CD Φ 3 —» <Λ · * o cd -J ro * o S JA . tnmtnmtncntn 5" ?

° 2 9) O U} io co CO es (DO

" ° O Ol Ol Ol M li) N HH

BT «-»-<***.* (D(D

H Ol 'J Μ M Ol Ol Ol tQS" )—· in · ·<

O H

w 3 < - o (ti

33 Dl Ul Ol Ul Ul Ol Ol Hl (S

_0 Ol to ΙΟ ΙΟ O o O) H 7+ 3 cr o en οι σι m tu n 5 ^ O w cr —1 Di ^ ffi' ? »t

Hi tn »Ct> CJ — —· —‘ww.

tn Λ N CD Ol Ol Π) Μ π » CD O M J1 O Ul Ul ifl C fl> • - oi o ui oi o cn o 3c+ 11111(1 Η» m

cj ro — cd cj —· Ξ1. IH

σι ~j -j to o —>to Si O cn co to o o ro 5 rr O O oi O «Oh

ro —1 2 —2 — ro cj oi - O

in 2

Η- I

DK 165638 B

25 a w _ ^ jj-· o ro >—· « (i) λ MO)(n«UN-<OlO · V—Λ -Ό -Ό / Vv øx p· \\ / §5 -η-πχχχ-ηχχχ x y / 0 x i-. / \ x o CO CO / \w / iO CD X - - -( x - - 4-/ §.§. "nxxxxxxxx X to \ H/ \ jo jj) K) \ / \ Q- O. \ / Φ Λ \ /

® oooooooox ] \ G

_ _ x xxxxxxxw XtJ1·

x x Γ'ί_ ίΊ_- roro fo ro \M

i i ro μ ro-”ro^ro ro ro ro /, o ro ro onnooooo _/·_ o__

O O XXXXXXXX I XioOvisJ

UIWUWWUUO) I I O jk

7C 7T DasO

°° QOOXXXXXX S3 1' i o o XXX Λ OO r-*—\ 33 O) (i) O) \ / -<70

3 3 V

ro TO OOOOOOOOO S3 ι'λ ^ Ρροο~~~χ~ cn ri co -o _ x _ x x " ο o οω o \ x S3 to ro m ro ro Q x x x x _e κι Q o o x ro to to to sj *° V y «3C 31 X G) « v w s*^ gv

Λ Λ GI Ca) CO w(j tJ ω CO

ro σι ω G

tn to w η n 3 3 · .

Φ n> \ / a. cl m \-(_o

_ _ 3» 3» 5» T3 \SC

G G + + +IIIIII o. \to = = 03 00 03 g \- r> η η Φ m /lo o O "’i -T I =·-0—S3 ο*? ro —' —< G n> “1 i nno* o o ciwotui»uiio(ri(g 3 “5 | 1 i 32 OCOUDIOANUIO TJ _ w 33 i........ · > il 'TT? £3

Coø*«otn.&inio*Jto I te

ww viotncooiosotoro n o o CT

3 3 O \/ ®

_ _ o M

s 3 j ^ o o O o ri ro ar σ- + + + + + + + x κ x sj -·-+ i ισ>α>Όαν*νΐ~0Ό ro oo ro —' —1 tOOO-tK.C.tOCOO'·.-- o o o o o o o —i ro o ro ~+> *+) ro tn o» b> — w m

φ (P

<ntntntntntnin-t»tn _ muiur.i.j.uoio y?

030fo<ncno3ocoro (DO

It H

CJlOIOIOMSOUIOl (D (D \ / tQ W )-f— o • k: \ x

I—1 \ GI

<j V— o

wtnoiuitntnui*ui t-htS -o /> S

ajoroentncoocoro Sr?· 3 i 1 —o'** O. Sil oxo

(D n I I

<+ <33 I 1 r*—I

I 1 -<S3 — _ ______ rt » O O 01 ΟίΡΜωΝΑΝ-ΐΜ g® \/

K^^roora-c»—-to 3 G X

0 o tn o o tn tn o -o h, (D ” 1 1 i 1 i i i i i λ s J "v 'WCOOUCB^Mdi vj^tnotoOÆ.cntn'Qt; w cn cn cjiooooi *· o w-fgro«·-·--- 9

M I

DK 165638B

26

viuicnwiuiuitncn^« 5 S

"Ί . 0\ Ul-CkCOrO—<0003 Γμ . o *nTi-n-nT|T|ti-na;:E x / x x x x ae a: a: x a: ae x ) V" g g to / \co / Λ (O Λ Η 7 \ xxx x S S x S ae o x ' \ / ^ ^ H \-Le ro ro ro \ x o o o Vo _ xx x y?—o ω ω w / g Λ -f 33~rw;0 o o o η o ! I I ·υιθ Ok N* S 1 g 1 I 73°° roT roT f'J*' ro- ω ' CTj? 2 ? g 5 o R«? x o . T*— 2· Z Z X \ / O) CO CO to to * o 0 O / \ 1 iSSSS1111 ^ Q o co co co co C? c? . .·< ro to" ^acxxacxararaca: » en . .

N|—fp

o? c^efePoPoP S S S S ^ ? /! I

w to co co -S ro . I I ,Γο ^ creTeToT ^ * , , 7=° . g.

> oo rr—\ ® m \/ x/^cn o > o > o s> i i i , Ti Fi ω 3 ' \ ro 30 33 1 l-> to ro—<to—irorororo—* —> en (ο·<νΐ(<ΐΝυΐ(η(οιο g oco^kcnrooici-^oiro <§

' ' · ' 1 ' ' i i i P

rj ci — toucotno>(o«j

*O en tO CO 03 ·** VO SJ O NJ

O O

o T w + —+ + + ae « , * ^£»ocooocnoow ro o o \ / ocno»wi—i U IO M s c~> ' i_L \_/ _

° ooooooooo — ro aro \ Q

™ O \co -· /T~§ q "" ' / I Ζ-0*··73 j5 WWWtnwoiwyioi rrs ro I. tnO ** é SSS8SSSSS ®o " , t< ttJ.hifcVV-e,'« » ® 05 lo ^ H V> < / » 2 O’J^cnjJ'tntncncncn rnffl _I '· £ £rorororo-c».p»oo d tb xx 03 cnooooæcorofo Drt M to a ro rt ΰ ^ _ Co —< ro —< —* —i n w i? “< X» Co VO —» VC5 CO CT, <- tv S ocjcoooi»cjiocn Si /. * * I I I t I I t Hl rt) J*J NNACJNtON-i-» J»3 g §38S5i3oSS 5 ί

^ °- ro ^o0-0^0-0-0«01- . - O

w ^ w 3 tn

Η I

DK 165638 B

27 3 tt MMMMS^OlOlOlOlOlOldlOlWffliflU! H ff WJ^WM-'OiDOsiaiuii'UN-'Oioa) . n • τι-πτί'ητη-τι-η-πχχ-τι-η-η-ηχχ-τι-η x

H

χχχχχχχχχχη-τιχχχχχχ x to o o o o o

XX X XX

ro ro ro ro ro _ „

XXXX^—wXXXwXXX — x ^ x x X

ro ro ro ro ro · *_» o o o o o ^

XX x XX

CO CO CO CO CO

o o o o non o o o o oo

XXXX XXX XXX X XX

ro ro ro ro x x ro ro ro x ro ro ro x ro x ro ro 70 ro ro ro ro ro ro ro ro ro ro ro ro ro o o o o o o o o o o o oo

XXXX XXX XXX X XX

CO CO CO CO CO CO CO CO CO CO CO CO CO

1- ΟΟΟΟΟΟΟΟΟΟΧΧΧΧΧΧΦ 5Γ 70 XXXXXXXXXX p 3 «fe cocococococococococo << «< xxxxxxxxxxxxxxxxxx 70 o w . ff σ οοοοοοοοοοοοοοσο φ οοοοοοοοοοοοοοοοοο X Η ^-'--ΧΧ^^ΧΧΧΧΧΧ·^^^ — XX ΟΝ oo^-^oorororoto—^rooooococo *< ., χχοοχχηοοοοοχχχχ -< w

CO «Ο X X CO CO X X X X X X CO CO CO CO X

^ wlo CO W ^ CO COCOCOCOCOw^ww <J\ ^ CO CO ^ wCJ CO — CO CO CO CJ Ml n n ro o fl ft

CO

m fir > > xj η- 03>W>C3>CD> + + I I I I I IC3> -* V, xa w 3 Φ —I N IV) N —» ΓΟ —I —.* -rf —- ro i? cn ro a* cn —* co * cn u«ooo\sjotAuiu 5 x»coM-j-i^ro(j,cDCDc^(j-·—«oovicn Ό 1 1 I I I I I I I I I I I I I I I I ·

vi^“J|MWW«JU)'0U1N-'^NO*03* Q

tO->(n^(SS|{k(S«4NO»<j»UWIS}NO n co * * + + ++ on

+ -^+--+ + + --+--+ + + + + ++ + XII

coocjoroioco—'CoO'Ntcø'^JGnoi^oO^o ro o ·—*

-'U)iOvjvj|NJO'OUNO»ONCnU3^Uitn O -. Q

oooaoo oeooooooooo —* ro w ro σ ro w Η· 01 tninoiinuiinuitnuitnoitninviinuiuitn rr '«j'^OO'-'J'-'JCriUll^WCnUICTIOl.fk.t.OeO ϋ Λ æco-»4>cocooororocnj>J>^.cncnrjro Sr

^ ^ 1 > ' 1 « s Π H

vjvjNivj'sjsivjvjc^cTitncn^jxjNjNjvjvj ro ro m w • *<

M

_ Ml < uiuiuiuimoiuiinuiwuiuiiiuiuiuiuioi c ft NM9lOlS^UlUlUUei'UIO\Ol^>«a>n 3 in Ι»0!»«Ι9αθΟΝΝβ1««4ΐσΐΟΙΝΝ Oirt ro <+ M w c ffl PO —> — P0 PJ S r* N4>UIUAU01**U)IMUNM(J1UIM- Ξ.ΪΓ οι»ωυι»χ.«ηοοοωροΛΐπροοσιθ !72 tntncntncncntntnoointntnooooo I* 3 • < I I I I I I I I I I I I I I I I 3 ft U(II01*UlJ>ffl*4>UNWMN —<—in μ,.

—'MUNOlO'J'JOIMUIMeiONWO. Λ „ o ootntntnoomootnoooicnci-vio id O tn ui in o - g υΐΝΝΝΜΝΜΝΝΜ-<«ΑΑ-'·.·ι-' 3* tø

DK 165638B

28 _ ej fcd gO|»ODC305-COCDCONJvlNjsJ *1 Λ* OJMQCnXiCON-JOUJCOslO) · cn

W W Μ H

"O "O “O “O Ό ”Π"Π“Π"Π“Π*Τϊ·Π*τΐ*τι·η-η-Γΐ-π v ft>* ft»· ft>* ft»· ft»· »iii

Φ <t> CO Φ (D

33333 ·___ η1ΐτΐ*η·η*η·ηη·πιι1τ ^

CO OO CO OO OO KJ

Φ Φ Φ Φ Φ ^ T3 T3 T3 Ό T3 y 3* 3* 3- 3- ^ ^

ft» CU ft) 0» £li O r> O O

CL CL CL Q. O. t i —.

ΦΦΦΦΦ x s: ac x x x xro ro IC X O o »

X X X X X ^ ^ XX

® ® ® ® ® ro ro o» oj ^ O O <w !—γ“γ-γ~γ“ * rc x coco

31 IC X X X CO CO

I I I I I

ro ro ro ro ro _ _ _ ooooo ooooooo g· § § g· § = = O o X x ή1 o1 B η ^ ^ m ro ro^ro-ro-rvj- °ί-°ί- § § § § § S S S S S S S ωω g s g s g ω “ ω

2§S5i SSSSSSSSSSS2S

cn x x οι x ωοοωωωωωωωωιοωω ·&· x ro σι x σι • ** «#

ISJ £JI W M W

cji n o cn o n 3. n 3, g=c=cxxa:a:a:3:a:3:xrc » 3 3 ω υι 3 3 3 Φ Φ Φ 3 a. a. 3 a. 22200°οοοσοοο -η η s. ο ο a g- s s s s s s s s s s s § i 5» & η - Ξ -g o o 8NnNoVnN0NnN0NnN0 S » =roofDf+ ,:=a:a: = X3:a:SSS5S? ?° h ^ 2 2 Ή. w to ωωωωωωω ω ω ω ω οΓ ® Ο Ο Ο rr 3 --- '— (j *! -t) -() » S Ν Ν Ν 0 0 0 3 0 -h "S -S \ 3- 0 3 3 0 —1 Hl -s 3" Ο _ Ο 3 (Λ tn —i -s S*> rn w o O O o 1 β> + Β>»β>β>β> s. rt w 3 3 -s -h oa oo = ΪΤ o o o 3 1 3 3 3 Hi ® 2 2.

0 0 0 3 n ft 3 o“ O" “5 N. w O -J. -j. g φ ΝΝ-^Γ\)Ν·^-<·^μμμμ ,.· er —< —» \ S- 1 g* ->r Φ3- . WNtø-JS0i03vJChvosO 3 —J -h -h r+ e> * · * * * * * « * i i i *0 ft> 0» -3* 3 totoro—'NOlflsJtnwCJM ·

-h 00 W ft» o Q

e> φ φ 3 o -y

(Λ · · O 'J

φ -j ro • o , ^ o ro + + + + w+ + + +±++ G ^ ·· o 1 r\?" o o ro ·· ^W^iNJVlCD^WAUiOjS <-> ? ^ O ►«* 000o°ooooooe -JfO o ro ·· ro ci »—» to .__ O H.

o 3 3 I SSSSSggSSSSSS g· g Ξ! O' Ol O CTI O Ol Ol Ol vj SI \| {P ® 3* « *< ·

-h tn M

B) O Hl <

m’ 2222^^^^0101(110101 S.S

• SKSKSSO'O'O'O'oioioi 3*9.

ΝΓΟΓ0ΝΟ000)0003*ΛΑΛ Cl ft

(O

rt

w N M CO M S

»sssniiggsgn g ft ftUNMUWftuyuj,^: 0)3 SSSoO-^ooiiooiuu 3 r+ °Sg201O0,o,Ot,1W’OO cQ H- _, <-> w o <n *0 N-w-oiOI-OIOINNNN i 3 ~ — — w ,3« ^ 1

DK 165638 B

29

Eksempel 89

Farmaceutiske præparater 5 De følgende eksempler belyser præparater beregnet til forskellige topiske administrationsformer. Mængden af det virksomme steroid i de perkutane præparater er sædvanligvis 0,001-0,2 vægt%, fortrinsvis 0,01-0,1 vægt%.

10 Præparat 1. salve mikroniseret steroid 0,025 g flydende paraffin 10,0 g hvid blød paraffin indtil 100,0 g 15 Præparat 2. salve steroid 0,025 g propylenglycol 5,0 g sorbitan-sesquioleat 5,0 g flydende paraffin 10,0 g 20 hvid blød paraffin indtil 100,0 g

Præparat 3. olie-i-vand creme steroid 0,025 g cetanol 5,0 g 25 glycerylmonostearat 5,0 g flydende paraffin 10,0 g

Cetomakrogol® 1000 2,0 g citronsyre 0,1 g natriumcitrat 0,2 g 30 propylenglycol 35,0 g vand indtil 100,0 g

Præparat 4. olie-i-vand creme mikroniseret steroid 0,025 g 35 hvid blød paraffin 15,0 g flydende paraffin 5,0 g cetanol 5,0 g sorbimakrogolstearat 2,0 g sorbitanmonostearat 0,5 g

DK 165638B

30 sorbinsyre 0,2 g citronsyre 0,1 g natriumcitrat 0,2 g vand indtil 100,0 g 5

Præparat 5, vand-i-olie creme steroid 0,025 g hvid blød paraffin 35,0 g flydende paraffin 5,0 g 10 sorbitansesquioleat 5,0 g sorbinsyre 0,2 g citronsyre 0,1 g natriumcitrat 0,2 g vand indtil 100,0 g 15

Præparat 6, lotion steroid 0,25 mg isopropanol 0,5 ml carboxyvinyl polymer 3 mg 20 NaOH efter behov vand indtil 1,0 g

Præparat 7. suspension til in.iektion mikroniseret steroid 0,05-10 mg 25 natriumcarboxymethylcellulose 7 mg

NaCl 7 mg polyoxyethylen-(20)-sorbitan- monooleat 0,5 mg phenylcarbinol 8 mg 20 sterilt vand indtil 1,0 ml

Præparat 8. aerosol til oral og nasal inhalation mikroniseret steroid 0,1 vægt% sorbitantrioleat 0,7 vægt% 22 trichlorfluormethan 24,8 vægt% dichlortetrafluormethan 24,8 vægt% dichlordifluormethan 49,6 vægt%

DK 165638 B

31

Præparat 9. oplåsning til forstøvning steroid 7,0 mg propylenglycol 5,0 g vand indtil 10,0 g 5

Præparat 10. pulver til inhalering en gelatinekapsel fyldes med en blanding af mikroniseret steroid 0,1 mg ^ lactose 20 mg

Pulveret inhaleres ved hjælp af et inhalationsapparat.

Farmakologi 15

Affiniteten af de nve androstan-17fl-carboxvlsvreestere til qlucocor-ticoid-receptorer

Alle steroider ifølge den foreliggende opfindelse er fysiologisk 20 aktive forbindelser. Affiniteten af de nye androstan-17/f-carboxyl-syreestere til glucocorticoid-receptorer er blevet anvendt som model til bestemmelse af den anti-inflammatoriske styrke. Deres receptoraffiniteter er sammenlignet med budesonid ([22R,S]-16a,17ar-butyli-dend i oxy-110,21-di hydroxypregna-1,4-d i en-3,20-d i on), et højaktivt glucocorticoid med et gunstigt forhold mellem lokale og systemiske virkninger (Thaién og Brattsand, Arzneim.-Forsch. £9, 1687-1690 (1979)).

Hanrotter af stammen Sprague-Dawley med en alder på 1-2 måneder 30

brugtes under hele undersøgelsen. Thymus fjernedes og anbragtes i iskold fysiologisk saltopløsning. Vævet homogeniseredes i en Potter Elvehjem-homogenisator i 10 ml puffer indeholdende 20 mM Tris, pH

7,4, 10¾ v/r glycerol, 1 mM EDTA, 20 mM NaMoO^ og 10 mM mercapto-ethanol. Homogenisatet centrifugeredes i 15 minutter ved 20.000 x g. Portioner på 230 /il af den ved 20.000 x g ovenstående væske inkuberedes i ca. 24 timer ved 0*C med 100 /il phenyl methyl sul fonyl-fluorid (en esterase-inhibitor; slutkoncentration 0,5 mM), 20 μΐ 3 umærket konkurrent og 50 μΐ H-mærket dexamethason (slutkoncentration 3 nM). Bundet og frit steroid adskiltes ved inkubering af

DK 165638 B

32 blandingen med 60 μl 2,5%s v/r aktivt kul og 0,25% v/r dextran T70 suspension i 20 mM Tris, pH 7,4, 1 mM EDTA og 20 mM NaMoO^ i 10 minutter ved 0eC. Efter centrifugering ved 500 x g i 10 minutter taltes 230 /ti af den ovenstående væske i 10 ml "Insta-Gel" i et 5 Packard-scintillationsspektrofotometer. De ovenstående væsker blev inkuberet med a) [ H]-dexamethason alene, b) [H]-dexamethason plus et 1000 gange overskud af umærket dexamethason og c) [ H]-dexametha-son plus 0,03-300 gange "overskud" af konkurrenten. Den uspecifikke binding bestemtes, når et 1000 gange overskud af umærket dexametha-

O

10 son sattes til [H]-dexamethason.

Den radioaktivitet, som er bundet til receptoren i nærværelse af konkurrenten, divideret med den radioaktivitet, som var bundet til receptoren i fravær af konkurrent, multipliceret med 100, giver den 15 procentuelle specifikke binding af umærket konkurrent. For hver koncentration af en konkurrent stilles procenten af specifikt bundet radioaktivitet op mod logaritmen til koncentrationen af konkurrenten. Kurverne sammenlignes ved 50%s specifikt bindingsniveau og sættes i relation til budesonid, der tilskrives en relativ bindings-20 affinitet (RBA) på 1.

Tabel 4 25 Summarisk tabel over de relative bindingsaffiniteter (RBA) til glucocorticoid-receptorer af nogle af de undersøgte forbindelser.

Forbindelse ifølge

30 Eks. nr. RBA

Budesonid 1 4 epimer B 0,30 5 epimer B 0,17 35 27 0,50 38 0,04 55 0,20 · 64 0,05 67 0,04

DK 165638B

33 69 0,44 84 1,03 5 87 0,63

Yderligere afprøvede forbindelser ifølge

10 Eks. nr. RBA

14 0,58 56 0,006 59 0,02 15 71 0,22 77 0,11 79 0,12 20 25 30 35

Claims

35 R4 betegner hydrogen, en ligekædet eller forgrenet carbonhydridgruppe med 1-10 carbonatomer eller en phenylgruppe, 5 R betegner hydrogen el1 er methyl, og DK 165638B 35 g R betegner hydrogen, en ligekædet eller forgrenet, mættet eller umættet carbonhydridkæde med 1-10 carbonatomer, en ligekædet eller forgrenet al kyl gruppe med 1-5 carbonatomer substitueret med mindst ét halogenatom, en pyrryl-, pyridyl-, pyrimidyl-, 5 pyrazinyl-, furyl-, pyranyl-, benzofuranyl-, indolyl- eller tienylgruppe, gruppen ^vor m er 0, 1 eller 2, og n er tallet 2, 3, 4, 5 eller 6) eller en phenyl-eller benzyl gruppe, som eventuelt er substitueret med én eller flere substituenter udvalgt blandt ligekædet eller forgrenet 10 al kyl med 1-5 carbonatomer, nitro, carboxyl, alkoxy med 1-5 carbonatomer i al kyl del en, halogen, cyano, carbalkoxy med 1-5 carbonatomer i al kyl del en og trifluormethyl, 1 2 idet dog R og R ikke begge betegner hydrogen. 15
2. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den er 1'-ethoxycarbonyloxyethyl-6a,9a-di fl uor-1lø-hydroxy-16a,17a-[(1-me-20 thyl ethyl iden)-bi s-(oxy)]-androsta-1,4-dien-3-on-17j9-carboxylat, 1'-isopropoxycarbonyloxyethyl-6a-f1uor-11/l-hydroxy-16a,17a-[(1-methyl ethyl iden)-bi s-(oxy)]-androsta-1,4-dien-3-on-17i8-carboxylat, 25 1'-propoxycarbonyloxyethyl>6a,9a-di fluor-11)3-hydroxy-16α,17α-[(1-me thyl ethyl iden)-bi s-(oxy)]-androsta-1,4-dien-3-on-17/5-carboxylat, 1'-i sopropoxycarbonyl oxyethyl-6a,9a-difluor-U/}-hydroxy-16a,17a-[(l-methyl ethyl iden)-bi s-(oxy)]-androsta-1,4-dien-3-on-17/?-carboxylat, i 30 l/-acetoxyethyl-(20R)-9a-fluor-llj5-hydroxy-16a,17a-propylmethylendi-oxyandrosta-l,4-dien-3-on-17j8-carboxyl at, 1' -ethoxycarbonyl oxyethyl - (22R) -9a-fl uor-llj8-hydroxy-16a, 17a-propyl -35 methylendi oxyandrosta-1,4-di en-3-on-17)3-carboxylat, 1'-i sopropoxycarbonyloxyethyl-(20R)-9a-fluor-ll/l-hydroxy-16a,17a-propylmethylendioxyandrosta-1,4-dien-3-on-17/J-carboxylat el1 er DK 165638 B 36 1' -ethoxycarbonyl oxyethyl - (20R) -6a, 9a-di f 1 uor-1 l/J-hydroxy- 16a, 17a--propylmethylendioxyandrosta-l,4-dien-3-on-17/i-carboxyl at. ·*.
3. Forbindelse ifølge krav 1 til anvendelse som antiinflammatorisk 5 lægemiddel.
4. Fremgangsmåde til fremstilling af en 16,17-acetalsubstitueret androstan-17/J-carboxylsyrester med formlen I: 10 io 15 -'g^CR1!*1 2 * 1 x1 20 eller en stereoisomer forbindelse deraf, i hvilken formel bindingen mellem 1,2-stillingerne er en enkelt- eller en dobbeltbinding, 25 X* betegner hydrogen, fluor, chlor eller brom, 2 X betegner hydrogen, fluor, chlor eller brom,

30 R* betegner hydrogen eller en ligekædet eller forgrenet carbonhydridgruppe med 1-4 carbonatomer, R betegner hydrogen eller en ligekædet eller forgrenet carbonhydridgruppe med 1-10 carbonatomer, 35 2 DK 165638 B 37 Y betegner oxygen eller svovl, betegner hydrogen, en ligekædet eller forgrenet carbonhydridgruppe med 1-10 carbonatomer eller en phenylgruppe, 5 c R betegner hydrogen eller methyl, og g R betegner hydrogen, en ligekædet eller forgrenet, mættet eller umættet carbonhydridkæde med 1-10 carbonatomer, en ligekædet 10 eller forgrenet alkylgruppe med 1-5 carbonatomer substitueret med mindst ét halogenatom, en pyrryl-, pyridyl-, pyrimidyl-, pyrazinyl-, furyl-, pyranyl-, benzofuranyl-, indolyl- eller tienylgruppe, gruppen (hvor m er tallet 0, 1 eller 2, og n er tallet 2, 3, 4, 5 eller 6) eller en phenyl-15 eller benzylgruppe, som eventuelt er substitueret med én eller flere substituenter udvalgt blandt ligekædet eller forgrenet alkyl med 1-5 carbonatomer, nitro, carboxyl, alkoxy med 1-5 carbonatomer i al kyl del en, halogen, cyano, carbalkoxy med 1-5 carbonatomer i al kyldel en og trifluormethyl, 20 1 2 idet dog R og R ikke begge betegner hydrogen, kendetegnet ved, at en RS-, S- eller R-isomer af en forbindelse med formlen 25 c=o hv^--cr1r2

30 ChJ T_J x2 hvor bindingen mellem 1,2-stillingerne er en enkelt- eller en dobbeltbinding, og X , X , R og R har de ovenfor angivne betydninger, eller et salt deraf omsættes med en forbindelse med 35 DK 165638 B 38 formlen: * n4 ? 0 ? 0 I » β I 11 fi
5. Farmaceutisk præparat, kendetegnet ved, at det som virksom bestanddel indeholder en forbindelse ifølge krav 1, idet præparatet fortrinsvis er i dosisenhedsform.

5 Z-C-0-C-Rb eller Z-C-0-C-YRb

15 I5 Rb Rb 4 5 6 hvor Y, R , R og R har de ovenfor angivne betydninger, og Z betegner et halogenatom eller en funktionel ækvivalent gruppe, 10 hvorefter den således vundne forbindelse, såfremt den er en epimer blanding, og der ønskes en ren epimer, resolveres til stereoisomere komponenter.
6. Farmaceutisk præparat ifølge krav 5, kendetegnet ved, at det indeholder den virksomme bestanddel sammen med et 20 farmaceutisk acceptabelt bærestof.
7. Anvendelse af en forbindelse ifølge krav 1 eller 2 til fremstilling af et farmaceutisk præparat, der som virksom bestanddel indeholder en virksom mængde af en sådan forbindelse. 25 30 35