DE1768512B2 - Verfahren zur herstellung von in wasser unloeslichen, chemisch oder biologisch wirksamen derivaten von biopolymeren - Google Patents
Verfahren zur herstellung von in wasser unloeslichen, chemisch oder biologisch wirksamen derivaten von biopolymerenInfo
- Publication number
- DE1768512B2 DE1768512B2 DE19681768512 DE1768512A DE1768512B2 DE 1768512 B2 DE1768512 B2 DE 1768512B2 DE 19681768512 DE19681768512 DE 19681768512 DE 1768512 A DE1768512 A DE 1768512A DE 1768512 B2 DE1768512 B2 DE 1768512B2
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- water
- insoluble
- biopolymers
- polymer
- derivatives
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
- C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
- C12N11/10—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a carbohydrate
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/804—Radioisotope, e.g. radioimmunoassay
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10S436/815—Test for named compound or class of compounds
- Y10S436/817—Steroids or hormones
- Y10S436/818—Human chorionic gonadotropin
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/81—Carrier - bound or immobilized peptides or proteins and the preparation thereof, e.g. biological cell or cell fragment as carrier
- Y10S530/812—Peptides or proteins is immobilized on, or in, an organic carrier
- Y10S530/813—Carrier is a saccharide
- Y10S530/814—Cellulose or derivatives thereof
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/81—Carrier - bound or immobilized peptides or proteins and the preparation thereof, e.g. biological cell or cell fragment as carrier
- Y10S530/812—Peptides or proteins is immobilized on, or in, an organic carrier
- Y10S530/815—Carrier is a synthetic polymer
- Y10S530/816—Attached to the carrier via a bridging agent
Description
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von in Wasser unlöslichen, chemisch oder biologisch
wirksamen Derivaten von Biopolymeren mit einer oder mehreren Gruppen -YH, wobei -YH eine primäre
oder sekundäre Aminogruppe bedeutet, durch Kupplung des Biopolymeren mittels Brücken über kovalente
Bindungen an wasserunlösliche Polymere mit einer oder mehreren Gruppen -XH, wobei -XH eine Hydroxylgruppe
oder eine primäre oder sekundäre Aminogruppe darstellt.
Sowohl die Gruppe — XH des Polymeren als auch die Gruppe -YH des Biopolymeren enthalt somit ein
reaktionsfähiges Wasserstoffatom.
Derartige Kupplungsverfahren sind bereits bekannt. Zum Beispiel wird in der dänischen Patentschrift
I 03 287 ein Kupplungsverfahren beschrieben, bei dem Enzyme an wasserunlösliche Polymere gebunden
werden. Als Mittel zum Erzielen der Bir.dung wird gemäß dieser Patentschrift Natriumnitrit verwendet,
wobei zwischen dem Protein und dem Träger eine Brücke aus einer Azogruppe gebildet wird.
Aus Chemical Abstracts 64,1966,18 360 g ist ebenfalls
ein Verfahren zur Herstellung von wasserunlöslichen Enzymen, gemäß welchem das Enzym an Bromacetylcellulose
gebunden wird, bekannt.
In einem Übersichtsartikel in Annual Review of Biochemistry Vol. 35, (1966), 873-908 wird die
Kupplung von Enzymen und anderen Proteinen an wasserunlösliche Polymere durch brückenbildende
Mittel, welche kovalente Bindungen bilden, beschrieben.
Die früher benutzten Verfahren weisen Nachteile verschiedener Art, wie eine umständliche Herstellung
des Derivates des Polymeren oder eine schlechte Ausbeute bei der Kupplung auf. Darüber hinaus haben
diese Verfahren den Nachteil, daß das Biopolymere feine spezifische Aktivität, z. B. Enzymaktivität oder
Antikörperaktivität, verliert oder daß die Verfahren nicht allgemein anwendbar, sondern hinsichtlich der
Auswahlmöglichkeit der Polymeren und/oder Biopolymeren beschränkt sind.
Die vorstehend erörterten Nachteile der bekannten Verfahren werden erfindungsgemäß dadurch beseitigt,
daß man die Kupplung mit einem Halogencyan in alkalisch-wäßrigem Medium durchführt.
Durch die Verwendung eines Halogencyans werden zahlreiche Vorteile erzielt. So erfordert das erfindungsgemäße
Verfahren keine umständliche Herstellung von komplizierten Zwischenprodukten des polymeren Trägers.
Die Herstellung des reaktionsfähigen Polymerderivats wird sehr einfach und erfolgt unter schonenden
Bedingungen. Die Egenschaften des Trägerpolymeren verändern sich nur äußerst unerheblich.
Biopolymere können dann erfindungsgemäß ohne weitere Zwischenstufe mit dem reaktionsfähigen Polymerderivat unter Erzielung einer hohen Ausbeute bei der Kupplung gekuppelt werden.
Biopolymere können dann erfindungsgemäß ohne weitere Zwischenstufe mit dem reaktionsfähigen Polymerderivat unter Erzielung einer hohen Ausbeute bei der Kupplung gekuppelt werden.
Die Kupplung von Biopolymeren an das Polymere ίο kann erfindungsgemäß unter sehr schonenden Bedingungen
vorgenommen werden, was von besonderer Bedeutung ist, wenn es sich um die Verwendung von
empfindlichen Biopolymeren handelt, welche in vielen Fällen in nur kleinen Mengen zugänglich sind.
Erfindungsgemäß wird mit nur geringen Veränderungen der chemischen und biologischen Eigenschaften des Biopolymeren gekuppelt.
Erfindungsgemäß wird mit nur geringen Veränderungen der chemischen und biologischen Eigenschaften des Biopolymeren gekuppelt.
Die Reaktion kann technisch gesehen sehr einfach durchgeführt werden. Die verwendeten Halogencyane
können, da sie wasserlöslich sind, leicht gehandhabt werden.
Die somit in waßrig-alkalischem Medium vorzunehmende Kupplung wird zweckmäßigerweise in einem
schwach alkalischen Medium durchgeführt. Die Temperatur ist variabel, d h. liegt beispielsweise im Bereich
von 0 bis 500C. Die Umsetzung beruht auf der Bildung von Brücken mit Kovaler.z-Bindungen zwischen dem
Polymeren und dem Biopolymeren. Untersuchungen haben gezeigt, daß die Brücken die Konstitution
30
30
A—X—C—Υ—Β
I!
ζ
haben, wobei A der Rest des Polymeren und B der Rest
des Biopolymeren und Z eine Iminogruppe (= NH) oder Sauerstoff (=0) ist. Die Tatsache, daß Z auch
Sauerstoff sein kann, beruht darauf, daß die Iminogruppe in bestimmten Fällen durch Hydrolyse in Sauerstoff
umgewandelt werden kann.
Gemäß der Erfindung kann die Umsetzung in einer oder mehreren Stufen, in der Regel jedoch in zwei
Stufen, durchgeführt werden. Die erste dieser Stufen wird gewöhnlich in der Weise durchgeführt, daß das in
Wasser unlösliche Polymere, welches eine oder mehrere Gruppen der Formel -XH enthält, mit einem
Halogencyan in Berührung gebracht wird, wobei das letztere in Form der reinen Substanz oder in Lösung
vorliegt. Als Halogencyan kann gewöhnlich die ]od-,
5c Chlor- oder Bromverbindung oder wahlweise ein Gemisch derselben verwendet werden. Die Umsetzung
wird unter alkalischen Bedingungen durchgeführt, was durch die Zugabe einer geeigneten alkalischen Verbindung,
beispielsweise Natriumhydroxid, gewährleistet wird. Geeignete pH-Werte sind in erster Linie Werte im
Bereich von 8 bis 13. Ist -XH eine primäre oder sekundäre Aminogruppe, so ist es möglich, in einem
schwächer alkalischen Medium zu arbeiten, als wenn -XH eine Hydroxygruppe ist. Der Fachmann kann
ho durch einfache Vorversuche leicht den entsprechenden
pH-Wert oder PH-Intervall ermitteln. Die Umsetzung kann bei verschiedenen Temperaturen, beispielsweise
im Bereich von 0 bis 5O0C, durchgeführt werden. Man
arbeitet in einer wäßrigen Lösung, wobei jedoch gewisse Verluste an Halogencyan dadurch eintreten,
daß ein Teil des letzteren durch Hydrolyse verbraucht wird. Durch die Umsetzung werden reaktionsfähige
Derivate des Polymeren erhalten, die dann unmittelbar.
wahlweise nach der Isolierung, weiter mit einem Biopolymeren umgesetzt werden können. Das reaktionsfähige Derivat kann auch unter geeigneten
Bedingungen gelagert und später mit dem Biopolymeren umgesetzt werden. Vor der Bindung an das
Biopolymere kann das reaktionsfähige Derivat, beispielsweise durch Waschen des in Wasser unlöslichen
Polymeren, gereinigt werden. Die Struktur des reaktionsfähigen Zwischenprodukts wurde nicht sicher
bestimmt Es ist jedoch nicht erforderlich, die Struktur des Zwischenprodukts zu kennen, da das endgültige
Ergebnis der Umsetzung von Interesse ist
Die zweite Verfahrensstufe wird vorzugsweise in einer schwach alkalischen Lösung bei einer Temperatur
durchgeführt, die beispielsweise im Bereich von 0 bis 500C, z. B. bei Raumtemperatur, liegen kann. Ein Vorteil
besteht darin, daß diese Stufe in wäßriger Lösung durchgeführt wird.
Durch das erfindungsgemäße Verfahren können auch empfindliche Biopolymere, die eine oder mehrere
-YH-Gruppen enthalten, beispielsweise Proteine und Peptide, an Polymere der vorstehend beschriebenen Art
gebunden werden, ohne daß das Biopolymere zerstört wird oder irgend einer unerwünschten Veränderung
unterliegt. Es ist möglich. Proteine und Peptide zu binden, ohne daß die Peptidbindungen gelöst werden.
Gemäß der Erfindung ist es also möglich, beispielsweise Enzyme an Polamere zu binden, ohne daß ein
wesentlicher Verlust der Enzymwirksamkeit eintritt, und einen Antikörper an das Polymere zu binden, ohne
daß die Fähigkeit des Antikörpers, sein Antigen zu binden, verloren geht. Das erfindungsgemäße Verfahren
stellt daher ein überraschend leichtes und einfaches Verfahren zur Bindung von Biopolymeren an Polymere
der vorstehend angegebenen Art dar.
Gemäß der vorliegenden Erfindung kann das Polymere ein in Wasser unlösliches Derivat eines
Polysaccharids sein, das Hydroxylgruppen und/oder primäre und/oder sekundäre Aminogruppen enthält.
Beispiele für Polysaccharide sind: Dextran, Zellulose, Stärke, Dextrin oder eine Hydroxylgruppe enthaltende
Derivate derartiger Polysaccharide, wie Hydroxyäthylzellulose, oder eine Aminogruppe enthaltende Derivate,
wie p-Aminophenoxyhydioxypropyldextran, sowie
Agars.
Ein anderes Beispiel eines Polymeren, das Hydroxylgruppen enthält, ist Polyvinylalkohol.
Das durchschnittliche Molekulargewicht des ausgewählten Polymeren, das eine oder mehrere -XH-Gruppen
enthält, kann innerhalb weiter Bereiche schwanken. Vorzugsweise sollte es jedoch über etwa
1 000, beispielsweise über etwa 10 000 liegen.
Gemäß der Erfindung ist das Polymere unlöslich in Wasser. Es kann jedoch in Wasser quellbar sein. In
diesem Fall kann es aus einem vernetzten dreidimensionalen,
Hydroxylgruppen enthaltenden Netzgefüge bestehen, das in Wasser unlöslich, jedoch quellbar ist. Als
Beispiel können Polymere, erhalten durch Vernetzung von Dextran mit einer bifunktionellen Verbindung, wie
Epichlorhydrin, erwähnt werden, die durch eine (10
variierende Fähigkeit, Wasser zu absorbieren, gekennzeichnet sind. Polymere anderer Polysaccharide oder
anderer Hydroxylverbindungen, welche durch Vernetzung der letztgenannten mit bifunktionellen Verbindungen
erhalten worden sind, können in Frage kommen, f>5
z. B. Polymere, welche durch Vernetzung von Saccharose
und Zuckeralkoholen, beispielsweise Sorbit, Mannit und Polyvinylalkohol erhalten worden sind. Zu derartigen Polymeren gehören auch solche, die durch primäre
oder sekundäre Aminogruppen, wie p-Aminophenoxyhydroxypropylgruppen, substituiert sind.
Als Biopolymere, die eine oder mehrere Gruppen der Formel -YH enthalten, und die gemäß der vorliegenden Erfindung mit dem reaktionsfähigen Derivat
umgesetzt werden sollen, können Proteine und Peptide sowie Derivate derselben erwähnt werden. Beispiele für
derartige Biopolymere sind Enzyme oder Derivate von Enzymen, Antikörper oder Derivate von Antikörpern,
Antigene oder Derivate von Antigenen, Protein- und/oder Peptidhormone oder Antigenproteine. Zu den
Biopolymeren gehören auch Aminopolysaccharide und Nukleinsäuren. Die in Wasser unlöslichen Verfahrensprodukte sind von großem Interesse. Ein Enzym, das
erfindungsgemäß an ein unlösliches Polymeres gebun den wird, kann daher in eine Schicht eingebettet
werden, und diese Schicht kann als Reaktor für chemische Umsetzungen verwendet werden. So kann
z. B. eine Lösung eines Substrats durch die Enzymschicht geführt werden, um dieses Substrat in ein
wertvolles Produkt umzuwandeln. Die Umsetzung wird automatisch unterbrochen, wenn die Lösung die Schicht
verläßt. Das feste Enzym kann während langer Zeit in einem kontinuierlichen Verfahren verwendet werden.
Ein anderes Beispiel besteht darin, Antikörper nach dem erfindungsgemäßen Verfahren an Polymere zu
binden. Derartige Produkte können besonders mit dem entsprechenden Antigen, beispielsweise zur analytischen
Bestimmung des letzteren, vereinigt werden.
Binden von Chymotrypsin an mit Epichlorhydrin
vernetztes Dextran
vernetztes Dextran
A. Aktivierung des Polymeren durch Umsetzung
mit Bromcyan
mit Bromcyan
200 mg mit Epichlorhydrin vernetztes Dextran in Form von Teilchen eines in Wasser quellfähigen
Produktes, erhalten durch Vernetzung des Dextans in alkalischem Medium mit Epichlorhydrin, wobei die
Teilchen in nicht gequollenem Zustand einen Durchmesser von 40—120 μ hatten und imstande waren, 20 g
Wasser pro 1 g Trockensubstanz durch Quellung aufzunehmen, wurden mit 8 cm3 eir.er wäßrigen Lösung
aus 25 mg Bromcyan je cm3 Wasser gemischt. Die Umsetzung wurde bei 23°C unter Rühren durchgeführt,
und der pH-Wert des Gemisches wurde bei 11,5
gehalten wobei ein automatisches Titriergerät für die Zugabe einer 2 M Natriumhydroxidlösung verwendet
wurde. Die Reaktionszeit betrug 6 Minuten. Das Produkt wurde schnell mit kaltem Wasser durch
Absaugen auf einem Glasfilter gewaschen und für die nächste Reaktionsstufe verwendet.
B. Umsetzung mit Chymotrypsin
Das in Stufe A erhaltene aktivierte Polymere wurde mit 200 mg Chymotrypsin in 2 cm3 einer 0,1 M
Natriumhydrocarbonatlösung gemischt, woraufhin man das Gemisch unter Rühren bei 23°C während 20
Stunden reagieren ließ. Nach Absaugen des Produkts auf einem Glasfilter wurde es mit einer 0,1 M
Natriumbicarbonatlösung, ΙΟ"3 Μ Salzsäure, Wasser,
einer 0,5 M Natriumchloridlösung, Wasser und Gemischen aus Wasser und Aceton mit steigenden Acetonkonzentrationen
und schließlich mit reinem Aceton gewaschen. Das Produkt wurde dann getrocknet. Das
nach der Analyse der Aminosäure erhaltene Ergebnis
"■ar ein Gehalt von 200 mg Protein je g des
getrockneten Endprodukts.
Binden von Insulin an ein nut Epichlorhydrin
vernetzte* Dextran
vernetzte* Dextran
A. Aktivierung des vernetzten Dextrans
durch Umsetzung mit Jodcytn
durch Umsetzung mit Jodcytn
50 mg des in Beispiel I angegebenen vernetzten Dextrans wurden mit 2 cm3 einer wäßrigen Lösung aus
30 mg Jcdcyan pro cm3 Wasser gemischt Die Umsetzung fand bpi 23° C unter Rühren statt Der pH-Wert
des Gemische betrug 11 und die Reaktionszeit 25 Minuten. Im übrigen war die Stufenfolge die gleiche wie
in Beispiel 1.
B. Umsetzung mil Insulin
Das in Stufe A erhaltene aktivierte vernetzte Dextran wurde zu einer 0,5 M Natriumhydrocarbonatlösung
gegeben, und der Rückstand wurde durch Absaugen von dem Gel entfernt. Letzteres wurde dann mit 11,5 mg
Insulin (vom Schwein), dem das Zink entzogen worden war, in 150 μ! einer 0,5 M Natriumbicarbonatlösung
gemischt. Die Umsetzung wurde 5 Stunden bei 23°C durchgeführt. Das erhaltene Produkt wurde gewaschen
und auf die gleiche Weise, wie in Beispiel 1 beschrieben, getrocknet. Das durch Analyse der Aminosäuren
erhaltene Ergebnis zeigte einen Gehalt von 24 mg Insulin je g des getrockneten Reaktionsproduktes.
Binden von y-Globulin (antichoriomisches
Gonadotropin) an Aminogruppen-substituiertes
(p-Aminophenoxyhydroxypropyläther)mit
Epichlorhydrin vernetztes Dextran
A. Aktivierung des p-Aminophenoxyhydroxy
propyläthers des vernetzten Dextrans
propyläthers des vernetzten Dextrans
100 mg p-Aminophenoxyhydroxypropyläther des
vernetzten Dextrans, das etwa 250 μ-Mol Aminogruppen je g des Polymeren enthielt, wurden in 3 cm3 Wasser
gequollen. 50 mg Bromcyan wurden in 3 cm3 Wasser gelöst und unter Rühren zu dem Gel gegeben. Der
pH-Wert wurde auf 8 eingestellt und auf dieser Höhe 5 Minuten durch Zugabe von 0,5 M Natriumhydroxydlösung
gehalten. Nach Abschluß der Umsetzung wurde das Gel schnell mit kaltem Wasser und einer 0,1 M
Natriumbicarbonatlösung gewaschen und unmittelbar weiterverwendet.
B. Umsetzung mit y-GlobuIin
(antichoriomisches Gonadotropin)
(antichoriomisches Gonadotropin)
Antiserum gegen choriomisches Gonadotropin beim Menschen wurde aus Kaninchen nach Injektion der
Hormone in einem Freund-Adjuvans isoliert. Die Immunoglobuline wurden durch Zugabe des halben
Volumens gesättigter Ammoniumsulfatlösung bei Raumtemperatur niedergeschlagen, was zweimal
wiederholt wurde. Der zuletzt erhaltene Niederschlag wurde in 0,1 M Natriumbicarbonatlösung gelöst und
dialysiert.
0,5 cm3 der antichoriomischen Gonadotropin-Lösung, die 0,5 cm3 Antiserum entsprechen, wurden mit dem
aktivierten Polymeren während 5 Stunden bei 23°C umgesetzt. Das Produkt wurde mit 0,1 M Natriumbicarbonatlösung,
0,5 M Natriumchloridlösung, Wasser, 104
M Salzsäure und Wasser gewaschen. Ein Teil des Produktes wurde eingeengt und für die Analyse
getrocknet Es wurde gefunden, daß es etwa 3,5 mg Protein je g des Polymeren enthielt
Der größte Teil des Produkts wurde für radioimmunologische Bestimmungen von choriomischem Gonadotropin
verwendet Das Produkt war zur Bindung des Gonadotropins ausgezeichnet geeignet
Bindung von Oxytocin an Zellulose
A. Aktivierung der Zellulose durch Umsetzung
mit Bromcyan
mit Bromcyan
Zellulose in Pulverform wurde durch Behandlung mit
17,5%iger Natriumhydroxydlösung bei O0C während 24
Stunden in einer Stickstoffatmosphäre mercerisiert. 50 mg der mercerisierten Zellulose wurden mit 2 cm3
Bromcyan-Lösung mit einem Gehalt von 25 mg BrCN
pro cm3 Wasser bei einem pH-Wert von 11 während 12
Minuten bei 23°C aktiviert. Das Produkt wurde mit kaltem Wasser gewaschen, und 0,1 M Natriumbicarbonatlösung
wurden zugegeben. Der Rückstand wurde abgesaugt.
B. Umsetzung mit Oxytocin
Die aktivierte Zellulose wurde mit 10 mg Oxytocin in
1 cm3 0.5 M Natriumbicarbonatlösung während 10 Stunden bei 23°C umgesetzt. Dis erhaltene Produkt
wurde gewaschen und nach Beispiel 1 B eingeengt. Die Analyse zeigte 75 m^ Oxytocin je g getrocknetes
Reaktionsprodukt an.
Beispiel 5
Bindung von Glucoseoxydase an Agar
Bindung von Glucoseoxydase an Agar
A. Aktivierung von Agar durch Umsetzung
mit Bromcyan
mit Bromcyan
Kugelförmige Agarteilchen, die in Wasser gequollen waren, und deren Trockengewicht 2% betrug, woöei der
Partikeldurchmesser in gequollenem Zustand 60 — 250 μ war, wurden auf einem Glasfilter abgesaugt. 3.9 g (gleich
100 mg geschrumpftes und getrocknetes Agar) wurden mit 4 cm3 einer Bromcyanlösung versetzt, die 25 mg
BrCN je cm3 Wasser enthielt. Dann wurde der Aktivierungsvorgang nach Beispiel 1 B bei einem
pH-Wert von 11 durch Zugabe von 2 M Natriumhydro-
xydlösung während 6 Minuten bei 230C unter
Verwendung eines automatischen Titriergeräts bewirkt. Das aktivierte Produkt wurde auf einem Glasfilter mit 1
Liter Eiswasser gewaschen und schließlich schnell mit 0,1 M Phosphatpuffer mit einem pH-Wert von 7.4
gewaschen.
B. Umsetzung mit Glucoseoxydase
Das aktivierte Polymere wurde mit 24 mg Glucose no oxydase (gereinigtes Material von der Firma Worthington
Biochemical Corp.) umgesetzt, die in 1 cm3 eines 0,1 M Phosphatpuffers mit einem pH-Wert von 7,4 gelöst
war. Die Umsetzung fand während 10 Stunden unter langsamer Rotation des Reaktionsgefäßes statt. Das
erhaltene Gel wurde in eine Kolonne gegeben und mit 1 Liter 0,1 M Acetatpuffer mit einem pH-Wert von 4,6,
der mittels einer Pumpe während 10 Stunden durch die Kolonne geführt wurde, gewaschen.
Ein Teil des Gels wurde abgetrennt, mit Aceton Es wurde gefunden, daß das gebundene Enzym eine
behandelt, getrocknet und auf Protein analysiert. Es beachtliche Aktivität besitzt, und die Kolonne zur
wurde dabei errechnet, daß die Menge der gebundenen Bestimmung von Glucose verwendet werden konnte. Es
Glucoseoxydase 30 mg je g des getrockneten Polymer- wurde ferner gefunden, daß die Kolonne gute
Produkts betrug. 5 chromatographische Eigenschaften besitzt.
Claims (1)
- Patentanspruch:Verfahren zur Herstellung von in Wasser unlöslichen, chemisch cder biologisch wirksamen Derivaten von Biopolymeren mit einer oder mehreren Gruppen -YH, wobei -YH eine primäre oder sekundäre Aminogruppe bedeutet, durch Kupplung des Bicpolymeren mittels Brücken über kovalente Bindungen an in Wasser unlösliche Polymere mit einer oder mehreren Gruppen -XH, wobei -XH eine Hydroxylgruppe oder eine primäre oder sekundäre Aminogruppe darstellt, dadurch gekennzeichnet, daß man die Kupplung mit einem Halogencyan in alkalisch-wäßrigem Medium durchführt
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SE07169/67A SE337223B (de) | 1967-05-23 | 1967-05-23 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DE1768512A1 DE1768512A1 (de) | 1971-10-14 |
DE1768512B2 true DE1768512B2 (de) | 1976-11-11 |
DE1768512C3 DE1768512C3 (de) | 1985-01-10 |
Family
ID=20270612
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DE1768512A Expired DE1768512C3 (de) | 1967-05-23 | 1968-05-21 | Verfahren zur Herstellung von in Wasser unlöslichen, chemisch oder biologisch wirksamen Derivaten von Proteinen, Peptiden und Derivaten derselben |
Country Status (10)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US3645852A (de) |
BE (1) | BE715523A (de) |
CH (1) | CH501695A (de) |
DE (1) | DE1768512C3 (de) |
DK (1) | DK120109B (de) |
FR (1) | FR1584535A (de) |
GB (1) | GB1223281A (de) |
IT (1) | IT1052959B (de) |
NL (1) | NL158502B (de) |
SE (1) | SE337223B (de) |
Families Citing this family (105)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE2061009A1 (de) * | 1969-12-18 | 1971-06-24 | Exploaterings Ab Tbf | Verfahren zur Fixierung von Polymeren |
US3853708A (en) * | 1970-01-23 | 1974-12-10 | Exploaterings Ab Tbf | Coupling biologically active substances to oxirane-containing polymers |
DE2028588A1 (de) * | 1970-06-10 | 1971-12-16 | Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V., 3400 Göttingen | Verfahren zur Gewinnung von Thymidin-Kinase |
GB1392181A (en) * | 1971-04-16 | 1975-04-30 | Rech Et Dapplications Soc Gen | Fixation of nitrogenous materials |
US3830699A (en) * | 1972-03-16 | 1974-08-20 | Exxon Research Engineering Co | Insolubilized enzymes |
SE361046B (de) * | 1972-04-07 | 1973-10-15 | Pharmacia Fine Chemicals Ab | |
US3925157A (en) * | 1972-07-12 | 1975-12-09 | Pfizer | Immobilized enzymes |
US3896218A (en) * | 1972-07-13 | 1975-07-22 | Research Corp | Radiommunoassay determining the hepatitis associated antigen content of blood |
US3935072A (en) * | 1972-08-10 | 1976-01-27 | Tanabe Seiyaku Co., Ltd. | Purification of coenzyme A |
DE2322552C2 (de) * | 1972-11-06 | 1986-08-28 | Pharmacia AB, Uppsala | Verfahren zum Abtrennen von Protein A aus Staphylococcus aureus aus einer Flüssigkeit |
DE2322533C2 (de) * | 1972-11-06 | 1986-08-28 | Pharmacia AB, Uppsala | Verfahren zum Binden von Immunoglobulin und Hilfsmittel zur Durchführung des Verfahrens |
DE2357794A1 (de) * | 1972-11-22 | 1974-06-06 | Brenner Max | Verfahren zur herstellung von traegerfixierten aminoverbindungen |
CS167593B1 (de) * | 1973-02-05 | 1976-04-29 | ||
US3876501A (en) * | 1973-05-17 | 1975-04-08 | Baxter Laboratories Inc | Binding enzymes to activated water-soluble carbohydrates |
FR2234311B1 (de) * | 1973-06-21 | 1976-04-30 | Air Liquide | |
US4192748A (en) * | 1973-07-05 | 1980-03-11 | Hyden Viktor H | Dialysis apparatus with selective chemical activity |
GB1479268A (en) * | 1973-07-05 | 1977-07-13 | Beecham Group Ltd | Pharmaceutical compositions |
DE2433883C2 (de) * | 1973-07-20 | 1986-03-27 | Research Corp., New York, N.Y. | Verwendung von physiologisch aktiven Polypeptiden |
US4179337A (en) * | 1973-07-20 | 1979-12-18 | Davis Frank F | Non-immunogenic polypeptides |
US4016149A (en) * | 1973-09-10 | 1977-04-05 | Research Corporation | Selective removal of albumin from blood fluid and compositions therefore |
US3949064A (en) * | 1973-10-26 | 1976-04-06 | Baxter Laboratories, Inc. | Method of detecting antigens or antibodies |
DE2360794C2 (de) * | 1973-12-06 | 1984-12-06 | Hoechst Ag, 6230 Frankfurt | Verfahren zur Herstellung von Peptiden |
CH594367A5 (de) * | 1974-05-17 | 1978-01-13 | Brenner Beat Max | |
GB1508132A (en) * | 1974-05-20 | 1978-04-19 | Technicon Instr | Analysis of biological fluids |
DE2426988C2 (de) * | 1974-06-04 | 1985-02-14 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Verfahren zur Trägerbindung biologisch aktiver Proteine |
JPS5439472B2 (de) * | 1974-06-26 | 1979-11-28 | ||
IT1008202B (it) * | 1974-07-31 | 1976-11-10 | Lostia Onofrio | Fibre inglobanti anticorpi antige ni antisieri procedimento per la loro preparazione e loro impieghi |
DE2560532C2 (de) * | 1974-11-26 | 1988-11-10 | Takeda Chemical Industries, Ltd., Osaka, Jp | |
SE388694B (sv) * | 1975-01-27 | 1976-10-11 | Kabi Ab | Sett att pavisa ett antigen exv i prov av kroppvetskor, med utnyttjande av till porost berarmaterial bundna eller adsorberande antikroppar |
US4009264A (en) | 1975-03-03 | 1977-02-22 | Meito Sangyo Kabushiki Kaisha | Complexes of polysaccharides or derivatives thereof with reduced glutathione and process for preparing said complexes |
US4033822A (en) * | 1975-11-07 | 1977-07-05 | Gregor Harry P | Enzyme-coupled ultrafiltration membranes |
US4033817A (en) * | 1975-11-07 | 1977-07-05 | Gregor Harry P | Pressure-driven enzyme-coupled membranes |
US4081246A (en) * | 1976-05-03 | 1978-03-28 | Beckman Instruments, Inc. | Solid phase column immunoassay procedure employing novel immunochemical composites |
US4081244A (en) * | 1976-05-03 | 1978-03-28 | Beckman Instruments, Inc. | Immunoassay procedure employing novel immunochemical composites |
US4081245A (en) * | 1976-05-03 | 1978-03-28 | Beckman Instruments, Inc. | Immunoassay procedure employing novel immunochemical composites |
US4225784A (en) * | 1976-06-17 | 1980-09-30 | Smith Kline Instruments, Inc. | Covalently bound biological substances to plastic materials and use in radioassay |
CA1093991A (en) * | 1977-02-17 | 1981-01-20 | Hideo Hirohara | Enzyme immobilization with pullulan gel |
GB1604249A (en) * | 1977-05-31 | 1981-12-02 | Kolehmainen S | Selective measurement of somatic and microbial cells |
DE2732301C3 (de) * | 1977-07-16 | 1980-12-11 | Roehm Gmbh, 6100 Darmstadt | Verfahren zur Herstellung von stabilisierten trägergebundenen Proteinen |
US4350763A (en) * | 1978-03-23 | 1982-09-21 | Ajinomoto Company, Inc. | Method for determining biochemical oxygen demand |
JPS5639022A (en) * | 1979-09-05 | 1981-04-14 | Hayashibara Biochem Lab Inc | Preparation of vaccine |
SE445116B (sv) * | 1979-09-12 | 1986-06-02 | Pharmacia Fine Chemicals Ab | Sett att odla celler pa mikroberare med fibronektinytskikt |
US4327073A (en) * | 1980-04-07 | 1982-04-27 | Huang Henry V | Automated method for quantitative analysis of biological fluids |
EP0056254A1 (de) * | 1981-01-14 | 1982-07-21 | David Eldon Wood | Behandlung von unlöslichen Oberflächen zur Verhinderung von nichtspezifischen Proteinbindungen |
US4722896A (en) * | 1981-01-26 | 1988-02-02 | The Beth Israel Hospital Association | Method for affinity purification of hybridoma antibodies |
US4666697A (en) * | 1982-12-08 | 1987-05-19 | Nihon Medi-Physics Co., Ltd. | Radioactive diagnostic agent |
US4474892A (en) * | 1983-02-16 | 1984-10-02 | Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Two-site immunoassays using monoclonal antibodies of different classes or subclasses and test kits for performing same |
US4486344A (en) * | 1983-03-28 | 1984-12-04 | Miles Laboratories, Inc. | Urea-linked immunogens, antibodies, and preparative method |
DE3440988A1 (de) * | 1984-11-09 | 1986-07-10 | Hoechst Ag, 6230 Frankfurt | Verfahren zur spaltung von peptiden und proteinen an der methionyl-bindung |
GB8504099D0 (en) * | 1985-02-18 | 1985-03-20 | Wellcome Found | Physiologically active substances |
DE3625378A1 (de) * | 1986-07-26 | 1988-02-04 | Hoechst Ag | Verfahren zur entfernung von halogencyanen und phosgen aus abgasen |
DE3714147A1 (de) * | 1987-04-28 | 1988-11-17 | Boehringer Mannheim Gmbh | Immunchemisches verfahren und reagenz zur bestimmung eines polyvalenten antigens in einer fluessigen probe |
EP0326111A3 (de) * | 1988-01-29 | 1989-12-27 | New York Blood Center, Inc. | Peptid-Derivate, immunogenisch gemacht bei Verabreichung zusammen mit Alaun als Zusatzmittel |
US5100668A (en) * | 1988-06-14 | 1992-03-31 | Massachusetts Institute Of Technology | Controlled release systems containing heparin and growth factors |
US5075077A (en) * | 1988-08-02 | 1991-12-24 | Abbott Laboratories | Test card for performing assays |
US5153166A (en) * | 1988-08-18 | 1992-10-06 | Trustees Of At Biochem | Chromatographic stationary supports |
US5595732A (en) * | 1991-03-25 | 1997-01-21 | Hoffmann-La Roche Inc. | Polyethylene-protein conjugates |
US6607727B1 (en) * | 1991-08-26 | 2003-08-19 | The Scripps Research Institute | Peptides for inducing cytotoxic T lymphocyte responses to hepatitus B virus |
US6235288B1 (en) * | 1992-08-26 | 2001-05-22 | The Scripps Research Institute | Peptides for inducing cytotoxic T lymphocyte responses to hepatitis B virus |
US5382657A (en) * | 1992-08-26 | 1995-01-17 | Hoffmann-La Roche Inc. | Peg-interferon conjugates |
US5558869A (en) * | 1992-12-30 | 1996-09-24 | University Of Arkansas | Major peanut allergen ara h II |
IL111609A0 (en) * | 1994-11-11 | 1995-01-24 | Univ Bar Ilan | Bioactive conjugates of polyhydroxy-polymers with amines |
CA2222629A1 (en) | 1995-06-07 | 1996-12-19 | Sudor Partners | Dermal patch without a separate absorbent material |
US20030202980A1 (en) * | 1995-12-29 | 2003-10-30 | Caplan Michael J. | Methods and reagents for decreasing clinical reaction to allergy |
US6835824B1 (en) | 1995-12-29 | 2004-12-28 | University Of Arkansas | Peanut allergens and methods |
DE69739268D1 (de) | 1996-11-08 | 2009-04-02 | Us Gov Health & Human Serv | Herstellung und reinigung von hepatitis c virus-ähnlichen partikeln |
US6103468A (en) * | 1997-10-07 | 2000-08-15 | Labatt Brewing Company Limited | Rapid two-stage polymerase chain reaction method for detection of lactic acid bacteria in beer |
US7879977B2 (en) | 1998-01-31 | 2011-02-01 | University Of Arkansas | Methods and reagents for decreasing clinical reaction to allergy |
WO1999038978A1 (en) * | 1998-01-31 | 1999-08-05 | University Of Arkansas | Methods and reagents for decreasing allergic reactions |
ATE315789T1 (de) | 1999-11-16 | 2006-02-15 | Genentech Inc | Elisa für vegf |
US8246945B2 (en) * | 2000-04-06 | 2012-08-21 | University Of Arkansas | Methods and reagents for decreasing clinical reaction to allergy |
US8153414B2 (en) | 2000-04-06 | 2012-04-10 | Allertein Therapeutics, Llc | Microbial delivery system |
US20050063994A1 (en) * | 2000-04-06 | 2005-03-24 | Caplan Michael J. | Methods and reagents for decreasing clinical reaction to allergy |
US7604807B2 (en) * | 2000-12-01 | 2009-10-20 | Auburn University | Use of pullulan to isolate and preserve biological material |
AU2002241550A1 (en) | 2000-12-01 | 2002-06-11 | Auburn University | Use of acacia gum (arabic gum) to isolate and preserve biological material |
US7635488B2 (en) * | 2001-03-13 | 2009-12-22 | Dbv Technologies | Patches and uses thereof |
FR2822049B1 (fr) * | 2001-03-13 | 2003-08-01 | Dbv Medica 1 | Patch destine notamment a depister l'etat de sensibilisation d'un sujet a un allergene, procede de fabrication et utilisation |
WO2004112661A1 (en) * | 2003-06-20 | 2004-12-29 | Myers Thomas H | Method and apparatus for strengthening the biomechanical properties of implants |
CA2544253A1 (en) * | 2003-11-12 | 2005-05-26 | Progenics Pharmaceuticals, Inc. | Novel sequences encoding hepatitis c virus glycoproteins |
US20050112586A1 (en) * | 2003-11-24 | 2005-05-26 | Roland Janzen | Method and composition for stabilizing liquid reagents |
WO2005108989A2 (en) * | 2004-04-16 | 2005-11-17 | Genentech, Inc. | Assay for antibodies |
EP1769243A2 (de) * | 2004-05-15 | 2007-04-04 | Genentech, Inc. | Kreuzscreening-system und verfahren für den nachweis eines moleküls mit bindungsaffinität für ein zielmolekül |
CN101523220B (zh) | 2006-10-04 | 2016-09-21 | 健泰科生物技术公司 | 针对vegf的elisa |
WO2008079322A1 (en) * | 2006-12-22 | 2008-07-03 | Beckman Coulter, Inc. | Methods, kits and materials for diagnosing disease states by measuring isoforms or proforms of myeloperoxidase |
FR2921562B1 (fr) * | 2007-10-01 | 2012-06-15 | Dbv Tech | Dispositif adhesif pour application cutanee |
FR2924350B1 (fr) * | 2007-12-03 | 2010-08-13 | Dbv Tech | Procede et compositions pour la vaccination par voie cutanee |
FR2924349B1 (fr) | 2007-12-03 | 2010-01-01 | Dbv Tech | Methode de desensibilitation aux allergenes |
FR2926466B1 (fr) * | 2008-01-23 | 2010-11-12 | Dbv Tech | Procede de fabrication de patchs par electrospray |
CN102144161B (zh) | 2008-09-04 | 2016-02-17 | 贝克曼考尔特公司 | 泛激酶活化与信号通路的评估 |
KR101832510B1 (ko) * | 2009-10-26 | 2018-02-26 | 제넨테크, 인크. | 치료 항-ige 항체에 대해 특이적인 항체를 검출하기 위한 검정 및 아나필락시스에서의 이의 용도 |
WO2012030738A2 (en) | 2010-08-30 | 2012-03-08 | Beckman Coulter, Inc. | Complex phosphoprotein activation profiles |
US20140065164A1 (en) | 2011-04-29 | 2014-03-06 | Bristol-Myers Squibb Company | Ip-10 antibody dosage escalation regimens |
US8609355B2 (en) | 2011-07-26 | 2013-12-17 | Indicator Systems International, Inc. | Assays for the detection of microbes |
WO2013142796A2 (en) | 2012-03-23 | 2013-09-26 | Bristol-Myers Squibb Company | Methods of treatments using ctla4 antibodies |
MX2014011646A (es) * | 2012-03-28 | 2015-02-24 | Genentech Inc | Anticuerpos idiotipos anti citomegalovirus humano (anti-hmcv) y sus usos. |
EP2954332A1 (de) | 2013-02-06 | 2015-12-16 | Pieris AG | Neuartige lipocalinmuteintests zur messung der hepcidinkonzentration |
EP3094976B1 (de) | 2014-01-17 | 2020-03-25 | Minomic International Ltd. | Zelloberflächenprostatakrebsantigen zur diagnose |
WO2016149537A1 (en) | 2015-03-17 | 2016-09-22 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Bank vole prion protein as a broad-spectrum substrate for rt-quic-based detection and discrimination of prion strains |
EP3932953A1 (de) | 2015-08-28 | 2022-01-05 | F. Hoffmann-La Roche AG | Anti-hypusin-antikörper und verwendungen davon |
EP3391048B1 (de) | 2015-12-15 | 2021-07-07 | Case Western Reserve University | Beurteilung von oralen plattenepithelkarzinom unter verwendung von beta-defensin |
CN110167967B (zh) | 2017-01-18 | 2022-08-05 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 针对抗pd-l1抗体的独特型抗体及其用途 |
WO2020081493A1 (en) | 2018-10-16 | 2020-04-23 | Molecular Templates, Inc. | Pd-l1 binding proteins |
AU2021263767A1 (en) | 2020-04-30 | 2022-09-08 | Genentech, Inc. | KRas specific antibodies and uses thereof |
KR20230017822A (ko) | 2020-06-01 | 2023-02-06 | 제넨테크, 인크. | 세포외 소포를 만들기 위한 방법 및 이들의 용도 |
WO2022266659A1 (en) | 2021-06-17 | 2022-12-22 | Genentech, Inc. | Anti-ubiquitination antibodies and methods of use |
Family Cites Families (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US2882250A (en) * | 1955-07-07 | 1959-04-14 | Stauffer Chemical Co | Process for preparing epoxy resin modified proteins and compositions resulting therefrom |
GB993961A (en) * | 1960-03-29 | 1965-06-02 | Secr Defence | Improvements in or relating to immunochemical polymer preparations |
US3167485A (en) * | 1960-05-27 | 1965-01-26 | Katchalski Efraim | Water insoluble modified enzymes |
US3278392A (en) * | 1962-11-12 | 1966-10-11 | Yeda Res & Dev | Water insoluble enzymes |
DE1669232A1 (de) * | 1966-08-03 | 1969-10-16 | Minnesota Mining & Mfg | Neuartiges Produkt und Verfahren |
-
1967
- 1967-05-23 SE SE07169/67A patent/SE337223B/xx unknown
-
1968
- 1968-05-17 CH CH731468A patent/CH501695A/fr not_active IP Right Cessation
- 1968-05-20 GB GB23857/68A patent/GB1223281A/en not_active Expired
- 1968-05-21 FR FR1584535D patent/FR1584535A/fr not_active Expired
- 1968-05-21 DE DE1768512A patent/DE1768512C3/de not_active Expired
- 1968-05-22 IT IT4568/68A patent/IT1052959B/it active
- 1968-05-22 NL NL6807239.A patent/NL158502B/xx not_active IP Right Cessation
- 1968-05-22 DK DK236468AA patent/DK120109B/da not_active IP Right Cessation
- 1968-05-22 BE BE715523D patent/BE715523A/xx not_active IP Right Cessation
-
1970
- 1970-03-06 US US17336A patent/US3645852A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
FR1584535A (de) | 1969-12-26 |
DK120109B (da) | 1971-04-05 |
BE715523A (de) | 1968-11-22 |
IT1052959B (it) | 1981-08-31 |
NL158502B (nl) | 1978-11-15 |
SE337223B (de) | 1971-08-02 |
US3645852A (en) | 1972-02-29 |
CH501695A (fr) | 1971-01-15 |
DE1768512A1 (de) | 1971-10-14 |
DE1768512C3 (de) | 1985-01-10 |
NL6807239A (de) | 1968-11-25 |
GB1223281A (en) | 1971-02-24 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
DE1768512C3 (de) | Verfahren zur Herstellung von in Wasser unlöslichen, chemisch oder biologisch wirksamen Derivaten von Proteinen, Peptiden und Derivaten derselben | |
DE1598945C3 (de) | Verfahren zur Bestimmung von Proteinen und Polypeptiden | |
DE2433883C2 (de) | Verwendung von physiologisch aktiven Polypeptiden | |
DE2646854A1 (de) | Substanz zur verwendung als blutersatz oder blutstrecker, makromolekulare, wasserloesliche verbindung sowie verfahren zur herstellung eines wasserloeslichen makromolekularen produkts, insbesondere als das sauerstofftransportmaterial in einem blutersatz oder blutstrecker | |
DE2840503A1 (de) | Material zur reversiblen fixierung biologischer makromolekuele, verfahren zu seiner herstellung und seine verwendung | |
DE1816712A1 (de) | Reaktive Teilchen fuer biologische Untersuchungen und Verfahren zu ihrer Herstellung | |
DE2317352C2 (de) | Perlförmige Zusammensetzung und Verfahren zu ihrer Herstellung | |
DE1768841C3 (de) | Kovalent gebundene Konjugate von sauren Polysacchariden und komplexen organischen Stoffen | |
DE2228588A1 (de) | Verfahren zur herstellung von oligoribonucleotiden | |
DE2740008A1 (de) | Verfahren zur immobilisierung biologisch aktiver proteine | |
DE2321784C2 (de) | Verfahren zur Herstellung von vernetzten Gelose- oder Agarose-Gelen sowie deren Verwendung | |
DE2616984C3 (de) | Verfahren zur Isolierung und Reinigung eines plazentenspezifischen Glycoproteins | |
DE2102514B2 (de) | Verfahren zur chemischen kupplung von biologisch wirksamen stoffen an ein hydrophiles polymer | |
DE2823573A1 (de) | Immobilisierte restrictions-endonucleasen und verfahren zum immobilisieren von restrictions-endonucleasen | |
DE2312615A1 (de) | Verfahren zum kuppeln von verbindungen mit hydroxyl- und/oder aminogruppen an polymere | |
DE2061009A1 (de) | Verfahren zur Fixierung von Polymeren | |
DE2615349A1 (de) | Verfahren zur chemischen modifikation von eiweisstoffen durch umsetzen mit chinonen | |
DE4122906C2 (de) | Impfstoffe gegen virale oder bakterielle Antigene und Verfahren zu ihrer Herstellung | |
DE2530247A1 (de) | Wasserunloesliche proteinpraeparate und deren herstellung | |
DE1908833C3 (de) | Verfahren zur Anreicherung und Reinigung von L-Asparaginase aus einem Filtrat einer Mangansalzfällung eines Extraktes von Zellen von Escherichia coli | |
CH653348A5 (de) | Sorbentien fuer saccharide und saccharide enthaltende polymerisate und verfahren zur herstellung derselben. | |
DE1617661A1 (de) | Verfahren zur Herstellung hochreiner Gonadotropine auf chromatographischem Wege | |
DE1768362A1 (de) | Dextranderivat und Verfahren zu seiner Herstellung | |
EP0306473A1 (de) | Pharmazeutische Struktur mit an Proteinträger gebundenen Wirkstoffen | |
AT214413B (de) | Verfahren zur Trennung von Stoffen verschiedener Molekülgröße |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
8281 | Inventor (new situation) |
Free format text: AXEN, ROLF ERIK AXEL WERNER, UPPLANDS BAELINGE, SE PORATH, JERKER OLOF ERNBACK, ERIK SVERKER, UPPSALA, SE |
|
C3 | Grant after two publication steps (3rd publication) | ||
8339 | Ceased/non-payment of the annual fee |